特表 2025-504040 ７－アザスピロ［４，５］デカン－６，１０－ジオン化合物の結晶形及びその調製方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2025-02-06

(54)【発明の名称】７－アザスピロ［４，５］デカン－６，１０－ジオン化合物の結晶形及びその調製方法

(51)【国際特許分類】

   C07D 221/20 20060101AFI20250130BHJP

   A61P 9/04 20060101ALI20250130BHJP

   A61P 9/00 20060101ALI20250130BHJP

   A61K 31/45 20060101ALI20250130BHJP

【ＦＩ】

C07D221/20 CSP

A61P9/04

A61P9/00

A61K31/45

【審査請求】有

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2024544999

(86)(22)【出願日】2023-01-16

(85)【翻訳文提出日】2024-09-20

(86)【国際出願番号】 CN2023072433

(87)【国際公開番号】W WO2023143205

(87)【国際公開日】2023-08-03

(31)【優先権主張番号】202210103134.0

(32)【優先日】2022-01-27

(33)【優先権主張国・地域又は機関】CN

(31)【優先権主張番号】202211017556.2

(32)【優先日】2022-08-23

(33)【優先権主張国・地域又は機関】CN

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】523320526

【氏名又は名称】ソーター・バイオファーマ・プライベイト・リミテッド

【氏名又は名称原語表記】ＳＯＴＥＲ ＢＩＯＰＨＡＲＭＡ ＰＴＥ． ＬＴＤ．

(74)【代理人】

【識別番号】100145403

【弁理士】

【氏名又は名称】山尾 憲人

(74)【代理人】

【識別番号】100162684

【弁理士】

【氏名又は名称】呉 英燦

(74)【代理人】

【識別番号】100221523

【弁理士】

【氏名又は名称】佐藤 渉

(74)【代理人】

【識別番号】100126778

【弁理士】

【氏名又は名称】品川 永敏

(72)【発明者】

【氏名】顔 小兵

(72)【発明者】

【氏名】来 巍

(72)【発明者】

【氏名】銭 文遠

【テーマコード（参考）】

4C086

【Ｆターム（参考）】

4C086AA01

4C086AA02

4C086AA03

4C086AA04

4C086BC21

4C086GA15

4C086GA16

4C086MA01

4C086MA04

4C086NA03

4C086ZA36

(57)【要約】

本発明において、７－アザスピロ［４，５］デカン－６，１０－ジオン化合物類の結晶形及びその調製方法が開示される。具体的には、式（Ｉ）の化合物及びその結晶形の調製方法、並びに前記化合物及びその結晶形の使用が開示される。

（Ｉ）

【特許請求の範囲】

【請求項1】

１８.２８３±０.２００°、１９.６６２±０.２００°、及び２２.４２０±０.２００°の角度２θにおける特徴的な回折ピークを有するＸ線粉末回析パターン(ＸＰＲＤ)で特徴づけられる、式(Ｉ)：

【化1】

（Ｉ）
の化合物の結晶形Ａ。

【請求項2】

１１.１４３±０.２００°、１８.２８３±０.２００°、１９.６６２±０.２００°、２２.４２０±０.２００°、２６.２５９±０.２００°、及び２８.０５６±０.２００°の角度２θにおける特徴的な回折ピークを有するＸ線粉末回析パターン(ＸＰＲＤ)で特徴づけられる、請求項１に記載の結晶形Ａ。

【請求項3】

１１.１４３±０.２００°、１８.２８３±０.２００°、１９.６６２±０.２００°、２２.４２０±０.２００°、２６.２５９±０.２００°、２７.２６１±０.２００°、２８.０５６±０.２００°、及び３０.２５６±０.２００°の角度２θにおける特徴的な回折ピークを有する粉末Ｘ線回折パターンで特徴づけられる、請求項２に記載の結晶形Ａ。

【請求項4】

１１.１４３±０.２００°、１６.５２２±０.２００°、１７.０５３±０.２００°、１８.２８３±０.２００°、１９.６６２±０.２００°、２２.４２０±０.２００°、２３.９０９±０.２００°、２６.２５９±０.２００°、２７.２６１±０.２００°、２８.０５６±０.２００°、３０.２５６±０.２００°、及び３３.７６１±０.２００°の角度２θにおける特徴的な回折ピークを有するＸ線粉末回析パターンで特徴づけられる、請求項３に記載の結晶形Ａ。

【請求項5】

次に示す角度：１１.１４３±０.２００°、１８.２８３±０.２００°、１９.６６２±０.２００°、２２.４２０±０.２００°、２６.２５９±０.２００°、２７.２６１±０.２００°、２８.０５６±０.２００°、及び３０.２５６±０.２００°から選択される角度２θに代表される、少なくとも５、６、７、または８個の特徴的な回折ピーク、を含むＸ線粉末回析パターンで特徴づけられる、請求項１に記載の結晶形Ａ。

【請求項6】

１１.１４３°、１３.２６０°、１４.８６０°、１６.１６３°、１６.５２２°、１７.０５３°、１７.５３７°、１８.２８３°、１９.６６２°、２２.４２０°、２３.５６８°、２３.９０９°、２６.２５９°、２６.７２６°、２７.２６１°、２８.０５６°、２９.００８°、３０.２５６°、３１.２１９°、３１.６４６°、３２.０３７°、３２.４３８°、３２.８０７°、３３.７６１°、３４.５３４°、３５.４０４°、３６.８５６°、３７.８１３°、及び３９.４５６°の角度２θにおける特徴的な回折ピークを有するＸ線粉末回析パターンで特徴づけられる、請求項５に記載の結晶形Ａ。

【請求項7】

実質的に図１に示すＸＲＰＤパターンを有する、請求項１に記載の結晶形Ａ。

【請求項8】

２４９.５３±３℃及び３０６.１２±３℃に吸熱ピークのピーク値を持つ示差走査熱量測定(ＤＳＣ)曲線を有する、請求項１～７のいずれか一項に記載の結晶形Ａ。

【請求項9】

実質的に図２に示すＤＳＣ曲線を有する、請求項１に記載の結晶形Ａ。

【請求項10】

２００±３℃において最大０.０７５％の重量減少を伴い、２５０±３℃において最大０.１６４％の重量減少を伴う熱重量分析(ＴＧＡ)曲線を有する、請求項１～７のいずれか一項に記載の結晶形Ａ。

【請求項11】

実質的に図３に示すＴＧＡ曲線を有する、請求項１に記載の結晶形Ａ。

【請求項12】

１)アルコール溶媒、酢酸エチル、ｔｅｒｔ－ブチルメチルエーテル、テトラヒドロフラン、またはジクロロメタンに、式(Ｉ)の化合物を加えること；
２)１５～１００℃で１～１６８時間攪拌すること；
３)濾過し、濾過ケークを回収し、濾過ケークを３０～４５℃で０.５～２時間真空乾燥させ、あるいは、濾過ケークを３５℃で１時間真空乾燥させること；
を含む、請求項１に記載の式(Ｉ)の化合物の結晶形Ａを調製する方法であって、ここで、前記式(Ｉ)の化合物が式（Ｉ）：

【化2】

（Ｉ）
である、方法。

【請求項13】

治療的有効量の請求項１～１１のいずれか一項に記載の式(Ｉ)の化合物または式(Ｉ)の化合物の結晶形Ａ及び薬学的に許容可能な担体を含む医薬組成物。

【請求項14】

心筋ミオシン阻害剤としての医薬の製造における、請求項１～１１のいずれか一項に記載の式(Ｉ)の化合物若しくは式(Ｉ)の化合物の結晶形Ａ、または請求項１３に記載の医薬組成物の使用。

【請求項15】

心不全及び肥大型心筋症の治療のための医薬の製造における、請求項１～１１のいずれか一項に記載の式(Ｉ)の化合物若しくは式(Ｉ)の化合物の結晶形Ａ、または請求項１３に記載の医薬組成物の使用。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本出願は；
２０２２年１月２７日に出願されたＣＮ２０２２１０１０３１３４.０；
２０２２年８月２３日に出願されたＣＮ２０２２１１０１７５５６.２
の優先権を主張する。

【0002】

本出願は、７－アザスピロ[４，５]デカン－６，１０－ジオン化合物類の結晶形及びその調製方法を開示し、具体的には、式(Ｉ)の化合物及びその結晶形の調製方法及び使用を開示する。

【背景技術】

【0003】

肥大型心筋症(ＨＣＭ)は、心筋の肥大で特徴づけられる心疾患であり、しばしば心室間隔壁を浸食し、心室腔を狭め、左心室に血液が充填することを妨げ、左心室の拡張期伸展性を低下させる。肥大型心筋症は、遺伝などに関連する可能性がある、左心室流出路の閉塞の有無によって、閉塞性肥大型心筋症と非閉塞性肥大型心筋症に分けられる。全世界におけるＨＣＭの事例は約１／５００で、ＨＣＭの臨床症状は多岐にわたる。これは無症状性であり得、あるいは動悸、労作性呼吸困難、前胸部の鈍痛、倦怠感、失神及び突然死さえ惹起し得る。末期段階では、心臓の左側に心不全の症状が見受けられる。

【0004】

現在、ＨＣＭの治療のための薬剤は限られている。ＨＣＭの治療は主に、ベータブロッカーまたはカルシウムチャネルブロッカーを介して症状を改善することであるが、原因を標的にできず、心筋肥大の進行を遅らせることもできず、予後を改善することもできない。前記治療効果は限られている。

【0005】

ミオシン及びアクチンは、心筋収縮の基盤となる物質である。ミオシンのクロスブリッジは、アクチンに周期的に結合及び解離し、筋フィラメントの滑りを駆動し、心筋収縮を惹起する。ミオシンはＡＴＰａｓｅ活性を有し、ＡＴＰ加水分解によって心筋収縮の動力を提供する。ミオシン変異はミオシンとアクチンの結合時間の延長、左心室心筋の過剰収縮及び弛緩障害をもたらし、左心室肥大及び繊維症をもたらし、ＨＣＭを誘発する。ＭＹＫ－４６１は、心筋ミオシンのアロステリック調節因子であり、リン酸の加水分解速度を減速し、ミオシンとアクチンの結合時間を短縮し、陰性変力作用をもたらし、病理変化、例えば、左心室心筋の過剰収縮によって惹起される心筋肥大を軽減する。しかしながら、前記薬剤はゆっくりと体内から排出され、体内に留まる時間があまりに長く、用量を素早く調整することが困難である。従って、より良好な活性と、より理想的な薬物動態的特性とを有するミオシン阻害剤の開発には、重大な臨床的価値と意義がある。

【0006】

さらに、心筋サルコメアの異常は、様々な心疾患及び症状、例えば、駆出率が保たれた拡張期心不全、虚血性心疾患、狭心症、及び拘束型心筋症などの駆動要因であると特定されている。ミオシンＡＴＰａｓｅ阻害剤は、心筋収縮を阻害することによって、上記疾患の病理過程を軽減することにおいて、潜在的治療効果を有する可能性もある。

【発明の概要】

【0007】

本開示は、１８．２８３±０．２００°、１９．６６２±０．２００°、及び２２．４２０±０．２００°の角度２θにおける特徴的な回折ピークを持つ、粉末Ｘ線回折パターン（ＸＲＰＤ）で特徴づけられる、式（Ｉ）;

【化1】

（Ｉ）
の化合物の結晶形Ａを提供する。

【0008】

本開示の幾つかの実施態様では、上記結晶形Ａは、１１．１４３±０．２００°、１８．２８３±０．２００°、１９．６６２±０．２００°、２２．４２０±０．２００°、２６．２５９±０．２００°、及び２８．０５６±０．２００°の角度２θにおける特徴的な回折ピークを持つ、粉末Ｘ線回折パターンを有する。

【0009】

本開示の幾つかの実施態様では、上記結晶形Ａは、１１．１４３±０．２００°、１８．２８３±０．２００°、１９．６６２±０．２００°、２２．４２０±０．２００°、２６．２５９±０．２００°、２７．２６１±０．２００°、２８．０５６±０．２００°、及び３０．２５６±０．２００°の角度２θにおける特徴的な回折ピークを持つ、粉末Ｘ線回折パターンを有する。

【0010】

本開示の幾つかの実施態様では、次に示す角度：１１．１４３±０．２００°、１８．２８３±０．２００°、１９．６６２±０．２００°、２２．４２０±０．２００°、２６．２５９±０．２００°、２７．２６１±０．２００°、２８．０５６±０．２００°、及び３０．２５６±０．２００°から選択される角度２θに代表される、少なくとも５、６、７または８個の特徴的な回折ピーク、を含む粉末Ｘ線回折パターンで特徴づけられる上記結晶形Ａが開示される。

【0011】

本開示の幾つかの実施態様では、上記結晶形Ａは、１１．１４３±０．２００°、１６．５２２±０．２００°、１７．０５３±０．２００°、１８．２８３±０．２００°、１９．６６２±０．２００°、２２．４２０±０．２００°、２３．９０９±０．２００°、２６．２５９±０．２００°、２７．２６１±０．２００°、２８．０５６±０．２００°、３０．２５６±０．２００°、及び３３．７６１±０．２００°の角度２θにおける特徴的な回折ピークを持つ、粉末Ｘ線回折パターンを有する。

【0012】

本開示の幾つかの実施態様では、次に示す角度：１１．１４３±０．２００°、１６．５２２±０．２００°、１７．０５３±０．２００°、１８．２８３±０．２００°、１９．６６２±０．２００°、２２．４２０±０．２００°、２３．９０９±０．２００°、２６．２５９±０．２００°、２７．２６１±０．２００°、２８．０５６±０．２００°、３０．２５６±０．２００°、及び３３．７６１±０．２００°から選択される角度２θに代表される、少なくとも５、６、７、８、９、１０、１１または１２個の特徴的な回折ピーク、を含む粉末Ｘ線回折パターンで特徴づけられる上記結晶形Ａが開示される。

【0013】

本開示の幾つかの実施態様では、上記結晶形Ａは、１１．１４３±０．２００°、１３．２６０±０．２００°、１６．５２２±０．２００°、１７．０５３±０．２００°、１８．２８３±０．２００°、１９．６６２±０．２００°、２２．４２０±０．２００°、２３．５６８±０．２００°、２３．９０９±０．２００°、２６．２５９±０．２００°、２７．２６１±０．２００°、２８．０５６±０．２００°、２９．００８±０．２００°、３０．２５６±０．２００°、３３．７６１±０．２００°、及び３５．４０４±０．２００°の角度２θにおける特徴的な回折ピークを持つ、粉末Ｘ線回折パターンを有する。

【0014】

本開示の幾つかの実施態様では、上記結晶形Ａは、１１．１４３±０．２００°、１３．２６０±０．２００°、１４．８６０±０．２００°、１６．１６３±０．２００°、１６．５２２±０．２００°、１７．０５３±０．２００°、１７．５３７±０．２００°、１８．２８３±０．２００°、１９．６６２±０．２００°、２２．４２０±０．２００°、２３．５６８±０．２００°、２３．９０９±０．２００°、２６．２５９±０．２００°、２６．７２６±０．２００°、２７．２６１±０．２００°、２８．０５６±０．２００°、２９．００８±０．２００°、３０．２５６±０．２００°、３１．２１９±０．２００°、３１．６４６±０．２００°、３２．０３７±０．２００°、３２．４３８±０．２００°、３２．８０７±０．２００°、３３．７６１±０．２００°、３４．５３４±０．２００°、３５．４０４±０．２００°、３６．８５６±０．２００°、３７．８１３±０．２００°、及び３９．４５６±０．２００°の角度２θにおける特徴的な回折ピークを持つ、粉末Ｘ線回折パターンを有する。

【0015】

本開示の幾つかの実施態様では、上記結晶形Ａは、１１．１４３±０．１００°、１３．２６０±０．１００°、１４．８６０±０．１００°、１６．１６３±０．１００°、１６．５２２±０．１００°、１７．０５３±０．１００°、１７．５３７±０．１００°、１８．２８３±０．１００°、１９．６６２±０．１００°、２２．４２０±０．１００°、２３．５６８±０．１００°、２３．９０９±０．１００°、２６．２５９±０．１００°、２６．７２６±０．１００°、２７．２６１±０．１００°、２８．０５６±０．１００°、２９．００８±０．１００°、３０．２５６±０．１００°、３１．２１９±０．１００°、３１．６４６±０．１００°、３２．０３７±０．１００°、３２．４３８±０．１００°、３２．８０７±０．１００°、３３．７６１±０．１００°、３４．５３４±０．１００°、３５．４０４±０．１００°、３６．８５６±０．１００°、３７．８１３±０．１００°、及び３９．４５６±０．１００°の角度２θにおける特徴的な回折ピークを持つ、粉末Ｘ線回折パターンを有する。

【0016】

本開示の幾つかの実施態様では、上記結晶形Ａは、１１．１４３°、１３．２６０°、１４．８６０°、１６．１６３°、１６．５２２°、１７．０５３°、１７．５３７°、１８．２８３°、１９．６６２°、２２．４２０°、２３．５６８°、２３．９０９°、２６．２５９°、２６．７２６°、２７．２６１°、２８．０５６°、２９．００８°、３０．２５６°、３１．２１９°、３１．６４６°、３２．０３７°、３２．４３８°、３２．８０７°、３３．７６１°、３４．５３４°、３５．４０４°、３６．８５６°、３７．８１３°、及び３９．４５６°の角度２θにおける特徴的な回折ピークを持つ、粉末Ｘ線回折パターンを有する。

【0017】

本開示の幾つかの実施態様では、上記結晶形Ａは、１８．２８３±０．２００°、１９．６６２±０．２００°、２２．４２０±０．２００°、及び／または１１．１４３±０．２００°、及び／または１３．２６０±０．２００°、及び／または１４．８６０±０．２００°、及び／または１６．１６３±０．２００°、及び／または１６．５２２±０．２００°、及び／または１７．０５３±０．２００°、及び／または１７．５３７±０．２００°、及び／または２３．５６８±０．２００°、及び／または２３．９０９±０．２００°、及び／または２６．２５９±０．２００°、及び／または２６．７２６±０．２００°、及び／または２７．２６１±０．２００°、及び／または２８．０５６±０．２００°、及び／または２９．００８±０．２００°、及び／または３０．２５６±０．２００°、及び／または３１．２１９±０．２００°、及び／または３１．６４６±０．２００°、及び／または３２．０３７±０．２００°、及び／または３２．４３８±０．２００°、及び／または３２．８０７±０．２００°、及び／または３３．７６１±０．２００°、及び／または３４．５３４±０．２００°、及び／または３５．４０４±０．２００°、及び／または３６．８５６±０．２００°、及び／または３７．８１３±０．２００°、及び／または３９．４５６±０．２００°の角度２θにおける特徴的な回折ピークを持つ、粉末Ｘ線回折パターンを有する。

【0018】

本開示の幾つかの実施態様では、上記結晶形Ａは、１８．２８３±０．１００°、１９．６６２±０．１００°、２２．４２０±０．１００°、及び／または１１．１４３±０．１００°、及び／または１３．２６０±０．１００°、及び／または１４．８６０±０．１００°、及び／または１６．１６３±０．１００°、及び／または１６．５２２±０．１００°、及び／または１７．０５３±０．１００°、及び／または１７．５３７±０．１００°、及び／または２３．５６８±０．１００°、及び／または２３．９０９±０．１００°、及び／または２６．２５９±０．１００°、及び／または２６．７２６±０．１００°、及び／または２７．２６１±０．１００°、及び／または２８．０５６±０．１００°、及び／または２９．００８±０．１００°、及び／または３０．２５６±０．１００°、及び／または３１．２１９±０．１００°、及び／または３１．６４６±０．１００°、及び／または３２．０３７±０．１００°、及び／または３２．４３８±０．１００°、及び／または３２．８０７±０．１００°、及び／または３３．７６１±０．１００°、及び／または３４．５３４±０．１００°、及び／または３５．４０４±０．１００°、及び／または３６．８５６±０．１００°、及び／または３７．８１３±０．１００°、及び／または３９．４５６±０．１００°の角度２θにおける特徴的な回折ピークを持つ、粉末Ｘ線回折パターンを有する。

【0019】

本開示の幾つかの実施態様では、上記結晶形ＡのＸＲＰＤパターンは、実質的に図１に示す通りである。

【0020】

本開示の幾つかの実施態様では、上記結晶形ＡにおけるＸＲＰＤパターンの解像度データを表１に示す。
表１ 式（Ｉ）の化合物の結晶形ＡにおけるＸＲＰＤパターンの解像度データ

【表1】

【表2】

【0021】

本開示の幾つかの実施態様では、２４９．５３±８℃及び３０６．１２±８℃に、吸熱ピークのピーク値を持つ示差走査熱量測定曲線を有する、上記結晶形Ａが開示される。

【0022】

本開示の幾つかの実施態様では、２４９．５３±３℃及び３０６．１２±３℃に、吸熱ピークのピーク値を持つ示差走査熱量測定曲線を有する、上記結晶形Ａが開示される。

【0023】

本開示の幾つかの実施態様では、実質的に図２に示すＤＳＣ曲線を有する、上記結晶形Ａが開示される。

【0024】

本開示の幾つかの実施態様では、２００±３℃において最大０．０７５％の重量減少、及び２５０±３℃において最大０．１６４％の重量減少を伴う熱重量分析曲線を有する、上記結晶形Ａが開示される。

【0025】

本開示の幾つかの実施態様では、実質的に図３に示すＴＧＡ曲線を有する、上記結晶形Ａが開示される。

【化2】

（Ｉ）

【0026】

本開示の幾つかの実施態様では、上記結晶形Ｂは、１２．８６１±０．２００°、１４．１３５±０．２００°、１７．７８８±０．２００°、１８．０９９±０．２００°、２１．６５９±０．２００°、２１．９１２±０．２００°、２２．４１０±０．２００°、及び２５．２１８±０．２００°の角度２θにおける特徴的な回折ピークを持つ粉末Ｘ線回折パターンを有する。

【0027】

本開示の幾つかの実施態様では、次に示す角度：１２．８６１±０．２００°、１４．１３５±０．２００°、１７．７８８±０．２００°、１８．０９９±０．２００°、２１．６５９±０．２００°、２１．９１２±０．２００°、２２．４１０±０．２００°、及び２５．２１８±０．２００°から選択される角度２θに代表される、少なくとも５、６、７または８個の特徴的な回折ピーク、を含む粉末Ｘ線回折パターンで特徴づけられる上記結晶形Ｂが開示される。

【0028】

本開示の幾つかの実施態様では、上記結晶形Ｂは、８．２６２±０．２００°、１２．８６１±０．２００°、１４．１３５±０．２００°、１６．３０３±０．２００°、１７．７８８±０．２００°、１８．０９９±０．２００°、１９．０５３±０．２００°、２１．６５９±０．２００°、２１．９１２±０．２００°、２２．４１０±０．２００°、２５．２１８±０．２００°、２７．２３０±０．２００°、２７．５２６±０．２００°、及び２８．１３２±０．２００°の角度２θにおける特徴的な回折ピークを持つ粉末Ｘ線回折パターンを有する。

【0029】

本開示の幾つかの実施態様では、次に示す角度：８．２６２±０．２００°、１２．８６１±０．２００°、１４．１３５±０．２００°、１６．３０３±０．２００°、１７．７８８±０．２００°、１８．０９９±０．２００°、１９．０５３±０．２００°、２１．６５９±０．２００°、２１．９１２±０．２００°、２２．４１０±０．２００°、２５．２１８±０．２００°、２７．２３０±０．２００°、２７．５２６±０．２００°、及び２８．１３２±０．２００°から選択される角度２θに代表される、少なくとも５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３または１４個の特徴的な回折ピーク、を含む粉末Ｘ線回折パターンで特徴づけられる上記結晶形Ｂが開示される。

【0030】

本開示の幾つかの実施態様では、上記結晶形Ｂは、７．２４０±０．２００°、８．２６２±０．２００°、９．１８９±０．２００°、１０．８４１±０．２００°、１２．８６１±０．２００°、１３．２６９±０．２００°、１４．１３５±０．２００°、１４．６５１±０．２００°、１５．９０７±０．２００°、１６．３０３±０．２００°、１６．７７０±０．２００°、１７．７８８±０．２００°、１８．０９９±０．２００°、１９．０５３±０．２００°、２１．６５９±０．２００°、２１．９１２±０．２００°、２２．４１０±０．２００°、２２．８２９±０．２００°、２４．４０８±０．２００°、２５．２１８±０．２００°、２６．００９±０．２００°、２７．２３０±０．２００°、２７．５２６±０．２００°、２８．１３２±０．２００°、２９．６３０±０．２００°、３２．１５０±０．２００°、３２．９６１±０．２００°、及び３３．６４５±０．２００°の角度２θにおける特徴的な回折ピークを持つ粉末Ｘ線回折パターンを有する。

【0031】

本開示の幾つかの実施態様では、上記結晶形Ｂは、７．２４０±０．１００°、８．２６２±０．１００°、９．１８９±０．１００°、１０．８４１±０．１００°、１２．８６１±０．１００°、１３．２６９±０．１００°、１４．１３５±０．１００°、１４．６５１±０．１００°、１５．９０７±０．１００°、１６．３０３±０．１００°、１６．７７０±０．１００°、１７．７８８±０．１００°、１８．０９９±０．１００°、１９．０５３±０．１００°、２１．６５９±０．１００°、２１．９１２±０．１００°、２２．４１０±０．１００°、２２．８２９±０．１００°、２４．４０８±０．１００°、２５．２１８±０．１００°、２６．００９±０．１００°、２７．２３０±０．１００°、２７．５２６±０．１００°、２８．１３２±０．１００°、２９．６３０±０．１００°、３２．１５０±０．１００°、３２．９６１±０．１００°、及び３３．６４５±０．１００°の角度２θにおける特徴的な回折ピークを持つ粉末Ｘ線回折パターンを有する。

【0032】

本開示の幾つかの実施態様では、上記結晶形Ｂは、７．２４０°、８．２６２°、９．１８９°、１０．８４１°、１２．８６１°、１３．２６９°、１４．１３５°、１４．６５１°、１５．９０７°、１６．３０３°、１６．７７０°、１７．７８８°、１８．０９９°、１９．０５３°、２１．６５９°、２１．９１２°、２２．４１０°、２２．８２９°、２４．４０８°、２５．２１８°、２６．００９°、２７．２３０°、２７．５２６°、２８．１３２°、２９．６３０°、３２．１５０°、３２．９６１°、及び３３．６４５°の角度２θにおける特徴的な回折ピークを持つ粉末Ｘ線回折パターンを有する。

【0033】

本開示の幾つかの実施態様では、上記結晶形Ｂは、１７．７８８°±０．２００°、１８．０９９±０．２００°、２１．６５９±０．２００°、及び／または２１．９１２±０．２００°、及び／または７．２４０±０．２００°、及び／または８．２６２±０．２００°、及び／または９．１８９±０．２００°、及び／または１０．８４１±０．２００°、及び／または１２．８６１±０．２００°、及び／または１３．２６９±０．２００°、及び／または１４．１３５±０．２００°、及び／または１４．６５１±０．２００°、及び／または１５．９０７±０．２００°、及び／または１６．３０３±０．２００°、及び／または１６．７７０±０．２００°、及び／または１９．０５３±０．２００°、及び／または２２．４１０±０．２００°、及び／または２２．８２９±０．２００°、及び／または２４．４０８±０．２００°、及び／または２５．２１８±０．２００°、及び／または２６．００９±０．２００°、及び／または２７．２３０±０．２００°、及び／または２７．５２６±０．２００°、及び／または２８．１３２±０．２００°、及び／または２９．６３０±０．２００°、及び／または３２．１５０±０．２００°、及び／または３２．９６１±０．２００°、及び／または３３．６４５±０．２００°の角度２θにおける特徴的な回折ピークを持つ粉末Ｘ線回折パターンを有する。

【0034】

本開示の幾つかの実施態様では、上記結晶形Ｂは、１７．７８８°±０．１００°、１８．０９９±０．１００°、２１．６５９±０．１００°、及び／または２１．９１２±０．１００°、及び／または７．２４０±０．１００°、及び／または８．２６２±０．１００°、及び／または９．１８９±０．１００°、及び／または１０．８４１±０．１００°、及び／または１２．８６１±０．１００°、及び／または１３．２６９±０．１００°、及び／または１４．１３５±０．１００°、及び／または１４．６５１±０．１００°、及び／または１５．９０７±０．１００°、及び／または１６．３０３±０．１００°、及び／または１６．７７０±０．１００°、及び／または１９．０５３±０．１００°、及び／または２２．４１０±０．１００°、及び／または２２．８２９±０．１００°、及び／または２４．４０８±０．１００°、及び／または２５．２１８±０．１００°、及び／または２６．００９±０．１００°、及び／または２７．２３０±０．１００°、及び／または２７．５２６±０．１００°、及び／または２８．１３２±０．１００°、及び／または２９．６３０±０．１００°、及び／または３２．１５０±０．１００°、及び／または３２．９６１±０．１００°、及び／または３３．６４５±０．１００°の角度２θにおける特徴的な回折ピークを持つ粉末Ｘ線回折パターンを有する。

【0035】

本開示の幾つかの実施態様では、上記結晶形ＢのＸＲＰＤパターンの解像度データが表２に示されている。
表２ 式（Ｉ）の化合物の結晶形ＢにおけるＸＲＰＤパターンの解像度データ

【表3】

【表4】

【0036】

本開示の幾つかの実施態様では、２４９．４８±８℃に、吸熱ピークのピーク値を持つ示差走査熱量測定曲線を有する、上記結晶形Ｂが開示される。

【0037】

本開示の幾つかの実施態様では、２４９．４８±３℃に、吸熱ピークのピーク値を持つ示差走査熱量測定曲線を有する、上記結晶形Ｂが開示される。

【0038】

本開示の幾つかの実施態様では、実質的に図６に示す通りのＤＳＣ曲線を有する、上記結晶形Ｂが開示される。

【0039】

本開示は：
１）式（Ｉ）の化合物を、アルコール溶媒である酢酸エチル、ｔｅｒｔ－ブチルメチルエーテル、テトラヒドロフラン、またはジクロロメタンに加えることと；
２）１５～１００℃で１～１６８時間攪拌することと；
３）濾過し、濾過ケークを回収し、前記濾過ケークを、３０～４５℃で０．５～２時間真空乾燥し、あるいは前記濾過ケークを、３５℃で１時間真空乾燥することと；
を含む、式（Ｉ）の化合物の結晶形Ａを調製する方法であって、ここで、式（Ｉ）の化合物が式（Ｉ）：

【化3】

（Ｉ）
である方法も提供する。

【0040】

本開示の幾つかの実施態様では、上記アルコール溶媒は、メタノール及びエタノールから選択される。

【0041】

本開示は、ＬＳＤ１関連疾患を治療するための医薬の製造における、上記式(Ｉ)の化合物、上記式（Ｉ）の化合物の結晶形Ａ、上記式(Ｉ)の化合物の結晶形Ｂの使用、または式(Ｉ)の化合物の結晶形Ａを調製する方法、も提供する。

【0042】

本開示は、ＬＳＤ１関連疾患を治療するための医薬の製造における、上記式(Ｉ)の化合物、上記式(Ｉ)の化合物の結晶形Ａの使用、または式(Ｉ)の化合物の結晶形Ａを調製する方法、も提供する。

【0043】

本開示は、治療的有効量の、上記式(Ｉ)の化合物、上記式(Ｉ)の化合物の結晶形Ａ、または上記式(Ｉ)の化合物の結晶形Ｂと、薬学的に許容可能な担体と、を含む医薬組成物も提供する。

【0044】

本開示は、治療的有効量の、上記式(Ｉ)の化合物または上記式(Ｉ)の化合物の結晶形Ａと、薬学的に許容可能な担体と、を含む医薬組成物も提供する。

【0045】

本開示は、心筋ミオシン阻害剤としての医薬の製造における、上記式(Ｉ)の化合物の使用、上記式(Ｉ)の化合物の結晶形Ａの使用、上記式(Ｉ)の化合物の結晶形Ｂの使用、または上記医薬組成物の使用、も提供する。

【0046】

本開示は、心筋ミオシン阻害剤としての医薬の製造における、上記式(Ｉ)の化合物の使用、上記式(Ｉ)の化合物の結晶形Ａの使用、または上記医薬組成物の使用、も提供する。

【0047】

本開示は、心不全及び肥大型心筋症を治療するための医薬の製造における、上記式(Ｉ)の化合物の使用、上記式(Ｉ)の化合物の結晶形Ａの使用、上記式(Ｉ)の化合物の結晶形Ｂの使用、または上記医薬組成物の使用、も提供する。

【0048】

本開示は、心不全及び肥大型心筋症を治療するための医薬の製造における、上記式(Ｉ)の化合物の使用、上記式(Ｉ)の化合物の結晶形Ａの使用、または上記医薬組成物の使用、も提供する。

【0049】

本開示は、治療が必要な対象の心筋ミオシン阻害剤関連疾患を治療する方法であって、有効用量の、式(Ｉ)の化合物、式(Ｉ)の化合物の結晶形Ａ、式(Ｉ)の化合物の結晶形Ｂ、または上記技術的解決手段のいずれかにおいて定義される医薬組成物、を前記対象に提供することを含む方法、も提供する。

【0050】

本開示は、治療が必要な対象の心筋ミオシン阻害剤関連疾患を治療する方法であって、有効用量の、式(Ｉ)の化合物、式(Ｉ)の化合物の結晶形Ａ、または上記技術的解決手段のいずれかにおいて定義される医薬組成物、を前記対象に提供することを含む方法、も提供する。

【0051】

本開示は、治療が必要な対象の心不全及び肥大型心筋症を治療する方法であって、有効用量の、式(Ｉ)の化合物、式(Ｉ)の化合物の結晶形Ａ、式(Ｉ)の化合物の結晶形Ｂ、または上記技術的解決手段のいずれかにおいて定義される医薬組成物、を前記対象に提供することを含む方法、も提供する。

【0052】

本開示は、治療が必要な対象の心不全及び肥大型心筋症を治療する方法であって、有効用量の、式(Ｉ)の化合物、式(Ｉ)の化合物の結晶形Ａ、または上記技術的解決手段のいずれかにおいて定義される医薬組成物、を前記対象に提供することを含む方法、も提供する。

【0053】

（技術的効果）
本開示における、式(Ｉ)の化合物の結晶形Ａは得られやすく、良好な物理的安定性及び化学的安定性、ならびに高い産業上の利用価値及び経済価値を有する。本開示の化合物は、心筋ミオシンＡＴＰａｓｅに対し良好な阻害効果を有し、優れた薬物動態的特性を有する。

【0054】

（定義及び説明）
特に断らない限り、本明細書で使用される下記の用語及び語句は、下記の意味を有するものとする。ある特定の語句または用語は、個別の定義が無いために、不明確または不明瞭であると判断されるべきではなく、慣用的な意味で理解されるべきである。本明細書で商品名が出現する場合、その対応する商品またはその活性成分を指すものとする。

【0055】

文脈上特に断らない限り、または本開示に明らかに矛盾しない限り、本明細書及び別記特許請求の範囲において使用される、本開示の内容（特に、別記特許請求の範囲の内容）中の、単数形「ａ」、「ａｎ」、「ｔｈｅ」及び類語は、単数形と複数形をどちらも含むものとして解釈されるべきであることは留意されたい。すなわち、例えば「前記化合物（ｔｈｅ ｃｏｍｐｏｕｎｄ）」への言及は１つ以上の化合物等への言及を含む。

【0056】

用語「非晶質」または「非晶質形態」は、当該物質、成分または生成物が、特徴的な結晶形状または結晶構造を持たず、例えばＸＲＰＤ（粉末Ｘ線回折）で決定する場合に、実質的に結晶ではないこと、あるいは当該物質、成分または生成物が、例えば偏光顕微鏡を用いて観察した場合に、複屈折性でも立方体でもないこと、あるいは粉末Ｘ線回折パターンにおいてシャープなピークを持たないこと、を意味するものである。特定の実施態様では、物質の非晶質形を含むサンプルは、実質的に他の非晶質形及び／または結晶形から遊離していてよい。

【0057】

本開示の結晶形の示差走査熱量測定（ＤＳＣ）には、実験誤差があり、前記サンプルの乾燥度合によって、僅かに影響を受ける。吸熱ピークの位置及びピーク値は、機械ごとに、及びサンプルごとに、僅かに異なってよい。前記実験誤差または値の違いは、１０℃以下、または９℃以下、または８℃以下、または７℃以下、または６℃以下、または５℃以下、または４℃以下、または３℃以下、または２℃以下、または１℃以下であってよい。従って、ＤＳＣ吸熱ピークのピーク位置またはピーク値を絶対的であるとみなすことはできない。

【0058】

本開示の中間体化合物は、当業者に公知である様々な合成方法によって調製され得て、下記の特定の実施態様、下記の特定の実施態様と他の化学合成法とを組み合わせて形成される実施態様、及び当業者に公知である別の同等な方法が含まれる。別の実施態様として、限定はされないが、本開示の実施例が挙げられる。

【0059】

特に断らない限り、二重結合構造、例えば、炭素－炭素二重結合、炭素－窒素二重結合及び窒素－窒素二重結合、が化合物中に存在し、前記二重結合上の各原子が２つの異なる置換基（窒素原子を含む二重結合中、窒素原子の非共有電子対は、それに結合する置換基と判断される)に結合し、前記化合物において二重結合上の原子及びその置換基が構造：

【化4】

で表される場合、これは前記化合物の（Ｚ）異性体若しくは（Ｅ）異性体、または前記２つの異性体の混合物を表す。

【0060】

本明細書で開示される化合物の構造は、当業者に公知である従来法によって決定され得る。本開示が化合物の絶対配置に関する場合、その絶対配置は当技術分野の従来技術、例えば単結晶Ｘ線回折（ＳＸＲＤ）によって決定され得る。単結晶Ｘ線回折（ＳＸＲＤ）において、育成した単結晶の回折強度データを、ＢｒｕｋｅｒのＤ８ ｖｅｎｔｕｒｅ回折計（ＣｕＫα放射線、φ／ωスキャンモード）を使用して収集し、関連データを収集後、前記結晶構造を直接法（ＳｈｅｌＸｓ９７）によって更に分析し、その絶対配置を決定する。

【0061】

本開示の特定の実施態様における化学反応は、適切な溶媒中で完了し、前記溶媒は、本開示の化学変化並びに必要な試薬及び原料にとって適切でなければならない。本開示の化合物を得るために、当業者は、既存の実施態様に基づいて、合成工程または反応スキームを、修正または選択することが必要な場合がある。

【0062】

本開示は実施例を通して、以下で詳細に記載されるが、いかなる場合でも実施例は本開示を限定するものではない。

【0063】

本開示で使用される全ての溶媒は市販されており、更に精製することなく使用され得る。

【0064】

本開示で使用される溶媒は市販されている。

【0065】

本開示において、次の略号が使用される：ＴＥＡはトリエチルアミンを表す；ＤＩＥＡはＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミンを表す；ＰＥは石油エーテルを表す；ＥｔＯＡｃは酢酸エチルを表す；ＥＡは酢酸エチルを表す；ＴＨＦはテトラヒドロフランを表す；ＭｅＯＨはメタノールを表す；ＭＴＢＥはメチルｔｅｒｔ－ブチルエーテルを表す；ＤＣＭはジクロロメタンを表す；ＥｔＯＨはエタノールを表す；ｉＰｒＯＨはイソプロピルアルコールを表す；Ｂｏｃ_２Ｏは二炭酸ジ－ｔｅｒｔ－ブチルを表す；Ｌ－ｓｅｌｅｃｔｒｉｄｅはリチウム水素化トリｓｅｃ－ブチルホウ素を表す；ＴＣＦＨはＮ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルクロロホルムアミジニウムヘキサフルオロホスフェートを表す；ＦＡはギ酸を表す；ＴＦＡはトリフルオロ酢酸を表す；ＡＣＮはアセトニトリルを表す；ＴＬＣは薄層クロマトグラフィーを表す；ＨＰＬＣは高速液体クロマトグラフィーを表す；ＬＣＭＳは液体クロマトグラフィー－マススペクトロメトリーを表す；ＤＭＳＯはジメチルスルホキシドを表す；ＤＭＦはＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドを表す；ＬＤＡはリチウムジイソプロピルアミドを表す；ＤＭＡＣはＮ，Ｎ－ジメチルアセトアミドを表す；ＰＥＧ－４００はポリエチレングリコール４００を表す；ＥＧＴＡはエチレングリコール－ビス（２－アミノエチルエーテル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラ酢酸を表す；ＤＭＳＯ－ｄ_６は重水素化ジメチルスルホキシドを表す；ＣＤＣｌ_３は重水素化クロロホルムを表す；ＢＩＤは１日に２回を表す；ＱＤは１日に１回を表す；ＰＯは経口投与を表す；ＩＶは静脈内投与を表す。

【0066】

化合物は手動で、あるいはＣｈｅｍＤｒａｗ（登録商標）ソフトウェアを使用して命名され、市販の化合物はその供給元のディレクトリ名で命名されている。

【0067】

（本開示における装置及び分析方法）
本開示における粉末Ｘ線回折（ＸＲＰＤ）法１：試験した結晶形Ａのテストパラメータを表３に示す。
表３ ＸＲＰＤのテストパラメータ

【表5】

【0068】

本開示における粉末Ｘ線回折（ＸＲＰＤ）法２：Ｂｒｕｋｅｒの装置Ｄ２ Ｐｈａｓｅｒによってデータを得た。テストパラメータを表４に示す。
表４ ＸＲＰＤのテストパラメータ

【表6】

【0069】

本開示における示差走査熱量測定（ＤＳＣ）法１：テストパラメータを表５に示す。
表５ ＤＳＣのテストパラメータ

【表7】

【0070】

本開示における示差走査熱量測定（ＤＳＣ）法２：テストパラメータを表６に示す。
表６ ＤＳＣのテストパラメータ

【表8】

【0071】

本開示における熱重量分析（ＴＧＡ）法１：テストパラメータを表７に示す。
表７ ＴＧＡのテストパラメータ

【表9】

【図面の簡単な説明】

【0072】

【図1】図１：Ｃｕ－Ｋα放射線を用いた、式（Ｉ）の化合物の結晶形ＡのＸＲＰＤパターン。

【図2】図２は、式（Ｉ）の化合物の結晶形ＡのＤＳＣ曲線を示す。

【図3】図３は、式（Ｉ）の化合物の結晶形ＡのＴＧＡ曲線を示す。

【図4】図４は、式（Ｉ）の化合物の単結晶Ｘ線回折（ＳＣ－ＸＲＤ）における、三次元構造の楕円体図面を示す。

【図5】図５は、Ｃｕ－Ｋα放射線を用いた、式（Ｉ）の化合物の結晶形ＢのＸＲＰＤパターンを示す。

【図6】図６は、式（Ｉ）の化合物の結晶形ＢのＤＳＣ曲線を示す。

【0073】

（詳細な説明）
本開示の内容をより理解するために、特定の実施例と併せて、本開示が以下で更に例示されるが、前記特定の実施例は本開示の内容を制限するものではない。

【実施例】

【0074】

式（Ｉ）：

【化5】

（Ｉ）
合成経路：

【化6】

【0075】

工程Ａ：１－２（４．６６ｇ、３８．４３ｍｍｏｌ、１．２当量）及びチタン酸テトラエチル（２１．９２ｇ、９６．０７ｍｍｏｌ、１９．９２ｍＬ、３当量）を、１－１（５ｇ、３２．０２ｍｍｏｌ、４．０７ｍＬ、１当量）のＴＨＦ（５０ｍＬ）溶液に、２０℃で加えた。前記反応溶液を６０℃で１６時間攪拌した。酢酸エチル（１００ｍＬ）を前記反応溶液に加えた。前記混合液を０℃まで冷却し、その後、水（２０ｍＬ）をゆっくりと加えた。前記混合液を０．５時間攪拌し、濾過した。前記濾液を飽和食塩水（５０ｍＬ×３）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、その後濃縮して、化合物１－３を得た。

【0076】

工程Ｂ：Ｌ－ｓｅｌｅｃｔｒｉｄｅ（１Ｍ、４１．６５ｍＬ、１．２当量）を１－３（９ｇ、３４．７１ｍｍｏｌ、１当量）のＴＨＦ（１００ｍＬ）溶液に、－７８℃で窒素条件下において、ゆっくりと滴加した。前記反応溶液を－７８℃で２時間攪拌し、その後、飽和塩化アンモニウム水溶液（１００ｍＬ）にゆっくりと加えた。前記混合液をＥＡ（１００ｍＬ×２）で抽出した。合一した有機層を飽和食塩水（１００ｍＬ×３）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、その後濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥｔＯＡｃ＝５：１～３：１）によって分離し、化合物１－４を得た。

【0077】

工程Ｃ：ＨＣｌ／ＭｅＯＨ（２００ｍｍｏｌ、５０ｍＬ、７．９２当量）を、１－４（６．６ｇ）のＭｅＯＨ（５０ｍＬ）溶液に、２０℃で加えた。前記反応溶液を１６時間攪拌し、その後濃縮し、化合物１－５の塩酸塩を得た。

【0078】

工程Ｄ：１－６（１．５１ｇ、７．７４ｍｍｏｌ、１．５当量、ＨＣｌ）及びＤＩＥＡ（４．００ｇ、３０．９６ｍｍｏｌ、５．４０ｍＬ、６当量）を、１－５の塩酸塩（１ｇ）のＥｔＯＨ（１０ｍＬ）溶液に２０℃で加えた。前記反応溶液を２０℃で１６時間攪拌し、濃縮して化合物１－７を得た。

【0079】

工程Ｅ：ＴＥＡ（２．４５ｇ、２４．２４ｍｍｏｌ、３．３７ｍＬ、３当量）を、１－７（１．５４ｇ、８．０８ｍｍｏｌ、１当量）のＤＣＭ（１５ｍＬ）溶液に、－２０℃で窒素条件下において加えた。その後、１－８（１．３９ｇ、５．１４ｍｍｏｌ、６．３７ｅ－１当量）のＤＣＭ（１５ｍＬ）溶液を加えた。前記反応溶液を、２０℃で１６時間攪拌し、その後濃縮した。残渣を、ＥＡ（３０ｍＬ）を加えて希釈し、その後飽和食塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、その後濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥｔＯＡｃ＝１０：１～５：１）によって分離し、化合物１－９を得た。

【0080】

工程Ｆ：ナトリウムメトキシド（１Ｍ、６．４３ｍｌ、１当量）を、１－９（０．６４８ｇ、１．５３ｍｍｏｌ、１当量）のＭｅＯＨ（７．６ｍＬ）溶液に、窒素条件下において加えた。前記反応溶液を２０℃で１６時間攪拌した。１Ｍの塩酸希釈液を前記反応溶液に加え、ｐＨを約５に調整し、その後、前記混合液を、ＥＡ（２０ｍＬ）を加えて抽出した。前記有機層を飽和食塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、その後濃縮して化合物１－１０を得た。

【0081】

工程Ｇ：塩酸（４Ｍ、４ｍＬ、１７．４０当量）を、１－１０（３４８ｍｇ、９１９．７４μｍｏｌ、１当量）の１，４－ジオキサン（４ｍＬ）溶液に加えた。前記反応溶液を５０℃で１６時間攪拌した。ＥＡ（３０ｍＬ）を前記反応溶液に加え、その後、１Ｍの水酸化ナトリウム水溶液を加えて、ｐＨを約８に調整した。前記層を分離した。その後、前記有機層を飽和食塩水（５０ｍＬ×２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、その後濃縮した。ＭｅＯＨ（１０ｍＬ）を前記残渣に加え、前記混合液を２０分間攪拌し、濾過した。前記濾過ケークを高真空下で乾燥させ、式（Ｉ）の化合物を得た。ＸＰＲＤ試験後、得られた式（Ｉ）の化合物は式（Ｉ）の化合物の結晶形Ａであった。¹H NMR (DMSO－d₆、400 MHz): δ ppm 9.60 － 9.47 (m、1H)、7.34 － 7.26 (m、2H)、7.25 － 7.16 (m、1H)、6.96 (br d、J = 6.0 Hz、1H)、4.82 － 4.71 (m、1H)、4.44 － 4.34 (m、1H)、1.93 － 1.81 (m、4H)、1.70 (br s、4H)、1.48 (br d、J = 6.4 Hz、3H); LCMS(ESI) m/z: 321.2(M+1)。

【実施例】

【0082】

（式(Ｉ)の化合物の結晶形Ａの調製）
式（Ｉ）の化合物（８０ｍｇ、２４９．７４μｍｏｌ）をエタノール（３ｍＬ）に加え、前記混合液を８０℃で１６時間攪拌した。前記混合液を室温まで冷却し、その後濾過した。前記固体を真空乾燥し、式（Ｉ）の化合物の結晶形Ａを得た。¹H NMR (DMSO－d₆、400 MHz): δ ppm 9.60 － 9.47 (m、1H)、7.34 － 7.26 (m、2H)、7.25 － 7.16 (m、1H)、6.96 (br d、J = 6.0 Hz、1H)、4.82 － 4.71 (m、1H)、4.44 － 4.34 (m、1H)、1.93 － 1.81 (m、4H)、1.70 (br s、4H)、1.48 (br d、J = 6.4 Hz、3H); LCMS(ESI) m/z: 321.2(M+1)。式（Ｉ）の化合物の結晶形ＡにおけるＸＲＰＤ、ＤＳＣ及びＴＧＡを、対応する方法１を用いて全て試験し、その試験結果パターン及び曲線をそれぞれ図１、２及び３に示す。

【0083】

上記溶媒エタノールをメタノール、ジクロロメタン、酢酸エチル、またはテトラヒドロフランに置き換え、式（Ｉ）の化合物の結晶形Ａを、それぞれの場合において、室温または加熱温度下において得た。前記アッセイ結果を表８に示す。
表８ 異なる溶媒中の攪拌によって得られる結晶形のアッセイ

【表10】

【実施例】

【0084】

（式(Ｉ)の化合物の結晶形Ｂの調製）
約６０ｍｇの前記結晶形Ａを秤量し、室温（２０～２５℃）から２５０℃まで、１０℃／分の速度で、ＴＧＡを用いて加熱し、その後、室温まで自然冷却（冷却過程中、冷却速度は制御しなかった）し、式（Ｉ）の化合物の結晶形Ｂを得た。¹H NMR (DMSO－d₆、400 MHz): δ ppm 9.57 (s、1H)、7.32 － 7.27 (m、2H)、7.22 － 7.15 (m、1H)、6.96 (br d、J = 6.4 Hz、1H)、4.78 － 4.72 (m、1H)、4.38 (s、1H)、1.86 － 1.82 (m、4H)、1.70 － 1.67 (m、4H)、1.47 (br d、J = 6.8 Hz、3H)。式（Ｉ）の化合物の結晶形ＢにおけるＸＲＰＤ及びＤＳＣを、対応する方法２を用いてどちらも試験し、その試験結果パターン及び曲線をそれぞれ図５及び６に示す。

【実施例】

【0085】

（式（Ｉ）の化合物の単結晶Ｘ線回折分析）
１．装置パラメータ及びデータ収集
製造者：Ｂｒｕｋｅｒ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ；
装置モデル：Ｂｒｕｋｅｒ Ｄ８ ＶＥＮＴＵＲＥ；
Ｘ線源: 高強度マイクロフォーカス回転陽極光源を使用した;
Ｃｕ回転標的:λ＝１．５４１８４Å；
電力:２．５ｋｗ;
管電圧：５０ｋＶ；
管電流：５０ｍＡ；
ゴニオメーター：４軸(Ｋａｐｐａ、ω、2θ、φ)ゴニオメーター;
検出器：大面積ｐｈｏｔｏｎＩＩ検出器、検出器の有効面積１４ｃｍ×１０ｃｍ
検出器からサンプルまでの距離:ｄ＝４５ｍｍ。

【0086】

２．結晶育成
１４．３ｍｇのサンプルを秤量し、ＭｅＯＨ（２ｍＬ）に加えた。前記サンプルは不溶性であった。その後、ＤＭＳＯ（１ｍＬ）を滴加し、完全に溶解するまで前記混合物を攪拌した。溶解したサンプルを４ｍＬの半密閉サンプルバイアルに移し、室温でゆっくりと蒸発気化した。７日後、無色のブロック結晶を得て、単結晶試験に供した。

【0087】

３．結晶データの表
表９ 式(Ｉ)の化合物の単結晶構造データ

【表11】

【0088】

４．結論
前記単結晶データは、前記単結晶が式（Ｉ）の化合物であることを示した。
式（Ｉ）の化合物の単結晶Ｘ線回折（ＳＣ－ＸＲＤ）における、三次元構造の楕円体図を図４に示す。式（Ｉ）の化合物の単結晶構造データ及びパラメータを表９に示す。

【0089】

生物学的アッセイデータ:
アッセイ実施例１：心筋ミオシンＡＴＰａｓｅ活性に対する阻害効果のアッセイ
アッセイ試薬：
心筋トロポミオシン／トロポニン複合体（Ｃｙｔｏｓｋｅｌｅｔｏｎ、Ｃａｔ．＃ＴＴ０５）
心筋ミオシンＳ１（Ｃｙｔｏｓｋｅｌｅｔｏｎ、Ｃａｔ．＃ＭＹＳ０３）
心筋アクチン（Ｃｙｔｏｓｋｅｌｅｔｏｎ、Ｃａｔ．＃ＡＤ９９－Ａ）
ＡＴＰａｓｅアッセイｂｉｏｃｈｅｍキット（Ｃｙｔｏｓｋｅｌｅｔｏｎ、Ｃａｔ．＃ＢＫ０５１）

【0090】

アッセイ工程：
１）化合物の調製
ａ）前記化合物をＥｃｈｏ中、ＤＭＳＯを用いて４倍ずつ８段階の濃度に系列希釈し、前記化合物の各濃度を、それぞれ２００ｎＬずつ９６穴プレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ－３６９６）に移した。
ｂ）前記プレートを、１０００ｒｐｍで１５秒間遠心分離し、後で使用するために密閉した。
２）Ｆアクチンの調製
ａ）５ｍＭのＰｉｐｅｓ－ＫＯＨ緩衝液（ｐＨ７．０）、５００μＭのＡＴＰ、及び５００μＭのジチオトレイトールを調製し、２．５ｍＬの前記緩衝液を加え、１ｍｇのＦアクチンを溶解し、タンパク質濃度を０．４ｍｇ／ｍＬとした。
ｂ）前記混合液を室温下に１０分間置き、タンパク質を完全に溶解した。
ｃ）２．０ｍＭのＭｇＣｌ_２及び２．０ｍＭのＥＧＴＡを加え、前記混合液を室温下に２０分間置き、タンパク質ポリマーを形成させた。
３）細いフィラメントの調製
ａ）２００μＬの氷水を加え、１ｍｇの心筋トロポミオシン／トロポニン複合体を溶解し、タンパク質濃度を５ｍｇ／ｍＬとした。
ｂ）工程１で調製した、１０００μＬのＦアクチンを加え、よく混合した。
ｃ）前記混合液を室温下に２０分間置いた。
ｄ）前記混合液を、８７Ｋ×ｇで４℃下において１，５時間遠心分離した。
ｅ）ＰＭ１２緩衝液（１２ｍＭのＰｉｐｅｓ－ＫＯＨ、ｐＨ７．０、２ｍＭのＭｇＣｌ_２）を調製し、１２００μＬの前記緩衝液を加えて、前記タンパク質を再懸濁した。
４）反応溶液の調製及びアッセイの開始
ａ）２５０μＬの氷冷ＰＭ１２緩衝液を、２５０μｇのＳ１ミオシンに加え、タンパク質濃度を１ｍｇ／ｍＬとした。
ｂ）前記試薬を次の順番で連続的に加え、混合して反応混合液を得た：
４００μＬのＰＭ１２、
４００μＬの５×ＭＳＥＧ（前記ＡＴＰａｓｅアッセイのｂｉｏｃｈｅｍキットより）、
１２００μＬのアクチン／心筋トロポミオシン／トロポニン複合体、
４０μＬのミオシンＳ１、
４０μＬの１００×ＰＮＰ（前記ＡＴＰａｓｅアッセイのｂｉｏｃｈｅｍキットより）、
１０．４μＬの１００ｍＭ ＡＴＰ。
ｃ）１０μＬの４４０μＭ ＣａＣｌ_２溶液を、前記９６穴プレートに加え、前記プレートを、３７℃のインキュベーターに移して予熱を加えた。
ｄ）１００μＬの前記反応混合液を、前記９６穴プレートに加え、前記プレートを１０００ｒｐｍで１０秒間遠心分離した。
ｅ）前記プレートを、装置温度３７℃及び波長３６０ｎｍのＳｐｅｃｔｒａＭａｘ３４０ＰＣで、３０秒間隔で１０分間読み取り続けた。

【0091】

データ分析：
Ｐｒｉｓｍを用いてデータを分析し、前記アッセイ結果を表１０に示す。
表１０ アッセイ結果：本開示の化合物の、心筋ミオシンＡＴＰａｓｅ活性に対する阻害効果であるＩＣ_５０値

【表12】

結論：本開示の化合物は、心筋ミオシンＡＴＰａｓｅに対する良好な阻害活性を有する。

【0092】

アッセイ実施例２：ラットにおける薬物動態評価
アッセイの目的：
ラットにおける、本開示の化合物の薬物動態パラメータを測定した。
アッセイスキーム:
１）アッセイ薬剤：本開示の化合物；
２）アッセイ動物：４匹のオスＳＤラット（７～９週齢）を、各群に２匹のラットを含むように無作為に２群に分けた；
３）薬剤調製：適切な量の前記薬剤を秤量し、混合溶媒（ＤＭＡＣ：ＰＥＧ－４００：２－ＨＰ－β－ＣＤ（３０％）＝５：２５：７０で０．２ｍｇ／ｍＬに調製）に溶解した；
アッセイ手順:
群１の動物に、尾静脈注射１回につき０．２ｍｇ／ｋｇの用量で、０．２ｍｇ／ｍＬの濃度で、薬剤を投与した。群２の動物に、強制給餌によって、１ｍｇ／ｋｇの用量で、０．２ｍｇ／ｍＬの濃度で、前記化合物を投与した。投与から０．０８３３（尾静脈注射群のみ）、０．２５、０．５、１、２、４、６、８、及び２４時間後に、血漿サンプルを前記動物から回収した。
データ分析：
血漿サンプル中の薬剤濃度を、ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ法を用いて決定した。前記アッセイ薬剤の、得られた薬物動態アッセイ結果を表１１に示す。
表１１ 本開示の化合物の薬物動態アッセイ結果

【表13】

－－はデータが無いことを示す。
結論：本開示の化合物はラットにおいて、良好な薬物動態的特性を有する。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【手続補正書】

【提出日】2024-09-27

【手続補正1】

【補正対象書類名】特許請求の範囲

【補正対象項目名】全文

【補正方法】変更

【補正の内容】

【特許請求の範囲】

【請求項1】

１８.２８３±０.２００°、１９.６６２±０.２００°、及び２２.４２０±０.２００°の角度２θにおける特徴的な回折ピークを有するＸ線粉末回析パターン(ＸＰＲＤ)で特徴づけられる、式(Ｉ)：

【化1】

（Ｉ）
の化合物の結晶形Ａ。

【請求項2】

１１.１４３±０.２００°、１８.２８３±０.２００°、１９.６６２±０.２００°、２２.４２０±０.２００°、２６.２５９±０.２００°、及び２８.０５６±０.２００°の角度２θにおける特徴的な回折ピークを有するＸ線粉末回析パターン(ＸＰＲＤ)で特徴づけられる；
あるいは、１１.１４３±０.２００°、１８.２８３±０.２００°、１９.６６２±０.２００°、２２.４２０±０.２００°、２６.２５９±０.２００°、２７.２６１±０.２００°、２８.０５６±０.２００°、及び３０.２５６±０.２００°の角度２θにおける特徴的な回折ピークを有する粉末Ｘ線回折パターンで特徴づけられる；
あるいは、１１.１４３±０.２００°、１６.５２２±０.２００°、１７.０５３±０.２００°、１８.２８３±０.２００°、１９.６６２±０.２００°、２２.４２０±０.２００°、２３.９０９±０.２００°、２６.２５９±０.２００°、２７.２６１±０.２００°、２８.０５６±０.２００°、３０.２５６±０.２００°、及び３３.７６１±０.２００°の角度２θにおける特徴的な回折ピークを有するＸ線粉末回析パターンで特徴づけられる；
あるいは、次に示す角度：１１.１４３±０.２００°、１８.２８３±０.２００°、１９.６６２±０.２００°、２２.４２０±０.２００°、２６.２５９±０.２００°、２７.２６１±０.２００°、２８.０５６±０.２００°、及び３０.２５６±０.２００°から選択される角度２θに代表される、少なくとも５、６、７、または８個の特徴的な回折ピーク、を含むＸ線粉末回析パターンで特徴づけられる；
あるいは、次に示す角度：１１.１４３±０.２００°、１８.２８３±０.２００°、１９.６６２±０.２００°、２２.４２０±０.２００°、２６.２５９±０.２００°、２７.２６１±０.２００°、２８.０５６±０.２００°、及び３０.２５６±０.２００°から選択される角度２θに代表される、少なくとも５、６、７、または８個の特徴的な回折ピーク、を含むＸ線粉末回析パターンで特徴づけられ、及び１１.１４３°、１３.２６０°、１４.８６０°、１６.１６３°、１６.５２２°、１７.０５３°、１７.５３７°、１８.２８３°、１９.６６２°、２２.４２０°、２３.５６８°、２３.９０９°、２６.２５９°、２６.７２６°、２７.２６１°、２８.０５６°、２９.００８°、３０.２５６°、３１.２１９°、３１.６４６°、３２.０３７°、３２.４３８°、３２.８０７°、３３.７６１°、３４.５３４°、３５.４０４°、３６.８５６°、３７.８１３°、及び３９.４５６°の角度２θにおける特徴的な回折ピークを有するＸ線粉末回析パターンで特徴づけられる；
あるいは、実質的に図１に示すＸＲＰＤパターンを有する、
請求項１に記載の結晶形Ａ。

【請求項3】

２４９.５３±８℃及び３０６.１２±８℃に吸熱ピークのピーク値を持つ示差走査熱量測定(ＤＳＣ)曲線を有する；
あるいは、２４９.５３±３℃及び３０６.１２±３℃に吸熱ピークのピーク値を持つ示差走査熱量測定(ＤＳＣ)曲線を有する；
あるいは、実質的に図２に示すＤＳＣ曲線を有する、
請求項１に記載の結晶形Ａ。

【請求項4】

２００±３℃において最大０.０７５％の重量減少を伴い、２５０±３℃において最大０.１６４％の重量減少を伴う熱重量分析(ＴＧＡ)曲線を有する；
あるいは、実質的に図３に示すＴＧＡ曲線を有する、
請求項１に記載の結晶形Ａ。

【請求項5】

２００±３℃において最大０.０７５％の重量減少を伴い、２５０±３℃において最大０.１６４％の重量減少を伴う熱重量分析(ＴＧＡ)曲線を有する；
あるいは、実質的に図３に示すＴＧＡ曲線を有する、
請求項３に記載の結晶形Ａ。

【請求項6】

１)アルコール溶媒、酢酸エチル、ｔｅｒｔ－ブチルメチルエーテル、テトラヒドロフラン、またはジクロロメタンに、式(Ｉ)の化合物を加えること；ここで、前記アルコール溶媒は適宜、メタノール及びエタノールから選択される；
２)１５～１００℃で１～１６８時間攪拌すること；
３)濾過し、濾過ケークを回収し、濾過ケークを３０～４５℃で０.５～２時間真空乾燥させ、あるいは、濾過ケークを３５℃で１時間真空乾燥させること；
を含む、請求項１に記載の式(Ｉ)の化合物の結晶形Ａを調製する方法であって、ここで、前記式(Ｉ)の化合物が式（Ｉ）：

【化2】

（Ｉ）
である、方法。

【請求項7】

治療的有効量の請求項１～５のいずれか一項に記載の式(Ｉ)の化合物または式(Ｉ)の化合物の結晶形Ａ、及び薬学的に許容可能な担体、を含む医薬組成物。

【請求項8】

請求項１～５のいずれか一項に記載の式(Ｉ)の化合物または式(Ｉ)の化合物の結晶形Ａを含む、心筋ミオシン阻害剤として使用するための医薬組成物。

【請求項9】

請求項１～５のいずれか一項に記載の式(Ｉ)の化合物または式(Ｉ)の化合物の結晶形Ａを含む、心不全または肥大型心筋症を治療するための医薬組成物。

【国際調査報告】