特表 2025-505673 ＣＯＶＩＤ感染症を処置するための方法および組成物

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2025-02-28

(54)【発明の名称】ＣＯＶＩＤ感染症を処置するための方法および組成物

(51)【国際特許分類】

   C07K 14/165 20060101AFI20250220BHJP

   A61K 47/64 20170101ALI20250220BHJP

   A61K 47/65 20170101ALI20250220BHJP

   A61K 45/00 20060101ALI20250220BHJP

   A61K 9/72 20060101ALI20250220BHJP

   A61P 31/12 20060101ALI20250220BHJP

   A61P 31/14 20060101ALI20250220BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20250220BHJP

【ＦＩ】

C07K14/165 ZNA

A61K47/64

A61K47/65

A61K45/00

A61K9/72

A61P31/12

A61P31/14

A61P43/00 121

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2024547086

(86)(22)【出願日】2023-02-07

(85)【翻訳文提出日】2024-09-30

(86)【国際出願番号】 US2023012488

(87)【国際公開番号】W WO2023150375

(87)【国際公開日】2023-08-10

(31)【優先権主張番号】17/870,158

(32)【優先日】2022-07-21

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(31)【優先権主張番号】17/870,174

(32)【優先日】2022-07-21

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(31)【優先権主張番号】63/307,371

(32)【優先日】2022-02-07

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】524295722

【氏名又は名称】デコイ セラピューティクス、インコーポレイテッド

(74)【代理人】

【識別番号】110000855

【氏名又は名称】弁理士法人浅村特許事務所

(72)【発明者】

【氏名】ペンテルート、ブラッドリー

(72)【発明者】

【氏名】ヒブナー、バーバラ、エル．

【テーマコード（参考）】

4C076

4C084

4H045

【Ｆターム（参考）】

4C076AA93

4C076AA95

4C076BB25

4C076CC35

4C076EE41

4C076EE59

4C076FF68

4C084AA19

4C084MA02

4C084MA59

4C084NA05

4C084NA10

4C084NA13

4C084ZB332

4C084ZC751

4C084ZC752

4H045BA19

4H045BA55

4H045BA71

4H045CA01

4H045EA29

4H045FA51

(57)【要約】

本発明は、式：（ペプチド－リンカー）_ｎ－Ｂ－疎水性部分［式中、各ペプチドは独立してＨＲＣペプチドまたは標的化ペプチドであり、ただし、少なくとも１つのペプチドはＨＲＣペプチドであるものとし、各リンカーは独立して二価の連結部分であり、Ｂは、システイン、Ｘ、および任意選択的にＹ、および／または任意選択的にＺを含む多価部分であり、ここで、Ｘ、ＹおよびＺは本明細書において定義され、ｎは１、２、３またはそれ以上から選択される整数である］を有する化合物、およびそれを使って、ウイル感染症の処置または防止を必要としている対象におけるウイルス感染症を処置または防止する方法を提供する。

【特許請求の範囲】

【請求項1】

式：
（ペプチド－リンカー）_ｎ－Ｂ－疎水性部分
［式中、各ペプチドは独立してＨＲＣペプチドまたは標的化ペプチドであり、ただし、少なくとも１つのペプチドはＨＲＣペプチドであり、各リンカーは独立して二価の連結部分であり、Ｂは、システイン、Ｘ、および任意選択的にＹ、および／または任意選択的にＺを含む多価部分であり、ここで、Ｘ、ＹおよびＺは本明細書において定義され、ｎは１、２、３またはそれ以上から選択される整数である］
を有する化合物。

【請求項2】

標的化ペプチドと１つまたは複数のＨＲＣペプチドとを含む、請求項１に記載の化合物。

【請求項3】

前記標的化ペプチドがＡＣＥ２標的化ペプチドまたは受容体結合ドメインペプチドである、請求項１または２に記載の化合物。

【請求項4】

前記疎水性部分がコレステロールである、請求項１～３のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項5】

前記Ｚが式（Ｉ）：

【化1】

の構造を含まない、請求項１～４のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項6】

以下の構造

【化2】

［式中、ペプチド－リンカーは、ＤＩＳＧＩＮＡＳＶＶＮＩＱＫＥＩＤＲＬＮＥＶＡＫＮＬＮＥＳＬＩＤＬＱＥＬ－ＧＳＧＳＧ－である］
を有する、請求項１～４のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項7】

以下の構造

【化3】

［式中、ペプチド－リンカーは、ＤＩＳＧＩＮＡＳＶＶＮＩＱＫＥＩＤＲＬＮＥＶＡＫＮＬＮＥＳＬＩＤＬＱＥＬ－ＧＳＧＳＧ－である］
を有する、請求項１～４のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項8】

請求項１～７のいずれか一項に記載の化合物と、薬学的に許容される担体とを含む、医薬組成物。

【請求項9】

ＳＡＲ－Ｃｏｖ－２変異株に関連する呼吸器感染症の処置を必要とする対象において同呼吸器感染症を処置する方法であって、有効量の式：
（ペプチド－リンカー）_ｎ－Ｂ－疎水性部分
［式中、各ペプチドは独立してＨＲＣペプチドまたは標的化ペプチドであり、ただし、少なくとも１つのペプチドはＨＲＣペプチドであり、各リンカーは独立して二価の連結部分であり、Ｂは、システイン、およびＸ、および任意選択的にＹ、および／または任意選択的にＺを含む多価部分であり、ここで、Ｘ、ＹおよびＺは本明細書において定義され、ｎは１、２、３またはそれ以上から選択される整数である］
を有する化合物を前記対象に投与することを含み、
ここで、前記変異株は少なくとも５つの変異を含み、前記少なくとも５つの変異は、独立して、スパイクタンパク質Ｓ１サブユニットもしくはＳ２サブユニットまたはそれらの組合せ中にある、
方法。

【請求項10】

前記化合物が標的化ペプチドと１つまたは複数のＨＲＣペプチドとを含む、請求項９に記載の方法。

【請求項11】

前記標的化ペプチドがＡＣＥ２標的化ペプチドまたは受容体結合ドメインペプチドである、請求項９または１０に記載の方法。

【請求項12】

前記疎水性部分がコレステロールである、請求項９～１１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項13】

前記少なくとも５つの変異が、独立して、Ｎ末端ドメイン（ＮＴＤ）、受容体結合ドメイン（ＲＢＤ）、融合ペプチド（ＦＰ）ドメイン、ヘプタドリピート１（ＨＲ１）ドメイン、またはそれらの組合せの中にある、請求項９～１２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項14】

前記少なくとも５つの変異が、図４に列挙した変異から独立して選択される、請求項９～１３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項15】

前記少なくとも５つの変異が、
（ｉ）ＳＡＲ－Ｃｏｖ－２アルファ変異株由来の少なくとも５つの変異、
（ｉｉ）ＳＡＲ－Ｃｏｖ－２ベータ変異株由来の少なくとも５つの変異、
（ｉｉｉ）ＳＡＲ－Ｃｏｖ－２デルタ変異株由来の少なくとも５つの変異、および
（ｉｖ）ＳＡＲ－Ｃｏｖ－２オミクロン変異株由来の少なくとも５つの変異
からなる群より独立して選択される、請求項１４に記載の方法。

【請求項16】

前記変異株が少なくとも１０個の変異を含む、請求項１３～１５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項17】

前記変異株が少なくとも１５個の変異を含む、請求項１３～１５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項18】

前記変異株が少なくとも２０個の変異を含む、請求項１３～１５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項19】

前記ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２が、Ｂ．１．１．７（アルファ）、Ｂ．１．３５１（ベータ）、Ｐ．１（ガンマ）、Ｂ．１．６１７．２（デルタ）、Ｂ．１．４２９／Ｂ．１．４２７（イプシロン）、Ｂ．１．６１７．１（カッパ）、Ｂ．１．５２５（イータ）、Ｂ．１．５２６（イオタ）、Ｐ．３（シータ）、Ｐ．２（ゼータ）、およびＢ．１．１．５２９（オミクロン）から選択される少なくとも１つの変異株を含む、請求項９に記載の方法。

【請求項20】

前記ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２が、Ａ．１～Ａ．６、Ｂ．３～Ｂ．７、Ｂ．９、Ｂ．１０、Ｂ．１３～Ｂ．１６、Ｂ．２、Ｂ．１系統、Ｐ．１、Ｐ．２、Ｐ．３、およびＲ．１から選択される少なくとも１つの変異株を含む、請求項１９に記載の方法。

【請求項21】

前記Ｂ．１系統が、限定するわけではないが、Ｂ．１、Ｂ．１．１、Ｂ．１．１．７、Ｅ４８４Ｋを持つＢ．１．１．７、Ｂ．１．２、Ｂ．１．５～Ｂ．１．７２、Ｂ．１．９、Ｂ．１．１３、Ｂ．１．２２、Ｂ．１．２６、Ｂ．１．３７、Ｂ．１．３～Ｂ．１．６６、Ｂ．１．１７７、Ｂ．１．２４３、Ｂ．１．３１３、Ｂ．１．３５１、Ｂ．１．４２７、Ｂ．１．４２９、Ｂ．１．５２５、Ｂ．１．５２６、Ｂ．１．５２６．１、Ｂ．１．５２６．２、Ｂ．１．６１７、Ｂ．１．６１７．１、Ｂ．１．６１７．２、Ｂ．１．６１７．３、Ｂ．１．６１９、Ｂ．１．６２０、およびＢ．１．６２１のうちの少なくとも１つを含む、請求項２０に記載の方法。

【請求項22】

前記投与が、鼻腔内スプレー、吸入器またはネブライザーを使って達成される、請求項９～２１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項23】

前記化合物が少なくとも１つの他の抗ウイルス活性剤または抗ウイルス治療と組み合わせて投与される、請求項９～２２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項24】

前記化合物が、以下の構造

【化4】

［式中、ペプチド－リンカーは、ＤＩＳＧＩＮＡＳＶＶＮＩＱＫＥＩＤＲＬＮＥＶＡＫＮＬＮＥＳＬＩＤＬＱＥＬ－ＧＳＧＳＧ－である］
を有する、請求項９～２３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項25】

前記化合物が、以下の構造

【化5】

［式中、ペプチド－リンカーは、ＤＩＳＧＩＮＡＳＶＶＮＩＱＫＥＩＤＲＬＮＥＶＡＫＮＬＮＥＳＬＩＤＬＱＥＬ－ＧＳＧＳＧ－である］
を有する、請求項９～２３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項26】

前記化合物が、以下の構造

【化6】

［式中、ペプチド－リンカーは、ＤＩＳＧＩＮＡＳＶＶＮＩＱＫＥＩＤＲＬＮＥＶＡＫＮＬＮＥＳＬＩＤＬＱＥＬ－ＧＳＧＳＧ－である］
を有する、請求項９～２３のいずれか一項に記載の方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本出願は、米国特許出願第１７／８７０，１５８号および米国特許出願第１７／８７０，１７４号（どちらも２０２２年７月２１日に出願された）の一部継続出願である。本出願は、２０２２年２月７日に出願された米国仮出願第６３／３０７，３７１号に基づく優先権も主張する。上記出願の全教示は、参照により本明細書に組み込まれる。

【背景技術】

【0002】

様々なウイルスがヒトにおいて呼吸器感染症を引き起こすことが知られており、その結果、典型的にはそれぞれの臨床像に応じて分類される、例えば普通感冒、インフルエンザ、細気管支炎、クループまたは肺炎などの疾病が生じる。そのような感染症は一般的には自然治癒するが、一定の患者、特に高齢者、乳幼児、および免疫系が損なわれている人々では、肺炎を含む、より重篤で生命にかかわりかねない疾患につながる場合もある。これらの疾患に処方される薬物治療の大半は症状の軽減を与えるにすぎず、これらの疾患のいずれについても、その経過を改変する薬物は、利用可能なものがほとんどない。さらに、２００２年に同定された重症急性呼吸器症候群コロナウイルス（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ）、２０１２年に同定された中東呼吸器症候群コロナウイルス（ＭＥＲＳ－ＣｏＶ）、そして直近では、２０１９年１２月に初めて記載されたウイルスであって、ＣＯＶＩＤ－１９と呼ばれる疾患を引き起こす、重症急性呼吸器症候群コロナウイルス－２（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２）など、近年、人畜共通感染症ウイルスが引き起こす新しい呼吸器疾患が出現している。ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスは依然として世界的脅威である。ＳＡＲＳ－ＣｏＶとＭＥＲＳ－ＣｏＶは、現在のところヒト集団にとっての脅威ではないが、病原体保有動物に存在し得るので、将来的にはヒトを脅かす可能性がある。

【0003】

さらに、コロナウイルスは急速に変異しているので、既存の治療を回避することができる新型のウイルスが生じて、新しい治療薬を急いで開発することが必要になるという懸念が高まっている。

【0004】

当技術分野ではウイルス呼吸器感染症を処置または防止する方法が依然として必要とされている。

【発明の概要】

【0005】

本発明は、クリックケミストリーを使ってコロナウイルススパイクタンパク質および他の競合リガンドを脂質分子、例えばコレステロールまたはトコフェロールにコンジュゲートすることによって、新しい抗ウイルスコンジュゲートをオンデマンド合成することができるという発見に基づいている。本方法は、強力な抗ウイルス材料をオンデマンド合成するためのプログラム可能な迅速応答プラットフォームを提供する。本プラットフォームは、ウイルス融合ペプチド阻害物質、膜固定ユニット（脂質分子など）、ＡＣＥ２標的化ペプチド、およびスパイク結合ペプチドという、４つのモジュールを含む。少なくとも１つのモジュールとの共有結合による組合せには、もう一つのモジュールにコンジュゲートされて有効な抗コロナウイルス材料をもたらす融合ペプチド阻害物質が含まれる。モジュールは、少なくとも１つの硫黄または窒素アリール連結部からなる共有結合フレームワークを介して接続することができる。他のモジュールは、トリアゾール、アミド、または硫黄－ｓｐ３炭素結合で構成される接続部からなる。これらの接続部はクリックケミストリーを使って迅速に作成することができる。

【0006】

本発明は、感染症を処置または防止するための化合物、組成物およびそれらの使用方法、例えば前記プラットフォームによって特定される化合物も提供する。

【0007】

一実施形態において、本発明は、任意選択のリンカーを介して膜固定部分（疎水性部分など）にコンジュゲートされたウイルススパイクペプチド（融合ペプチドとも呼ばれる）のＨＲＣ配列を１つ、２つ、３つまたはそれ以上含む化合物を提供する。疎水性部分は、コレステロール、スフィンゴ脂質、糖脂質、グリセロリン脂質などの、膜統合性リガンドであることができる。ウイルススパイクペプチドは好ましくはコロナウイルススパイクタンパク質である。本発明のペプチドはウイルスの融合を阻害する。

【0008】

本発明には、本発明化合物の送達、例えば肺送達または経鼻送達のための組成物が含まれる。本発明は、例えばＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２（ＣＯＶＩＤ－１９）感染症をはじめとするウイルス感染症の処置または防止を必要とする対象における前記ウイルス感染症を処置または防止する方法であって、有効量の本発明化合物を投与することを含む方法を提供する。本発明は、本発明の組成物を製造する方法を、さらに提供する。

【0009】

複数の実施形態において、コロナウイルスを処置するのに役立つ抗ウイルス化合物には、図１Ｇ、図１Ｈまたは図１Ｉに示す式を有する本発明の化合物が含まれる。

【0010】

本発明は、分子ライブラリーの効率のよい作製を提供することも意図している。作製することができるプラットフォームおよびライブラリーにより、変異株を調べることで、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ２およびその変異、例えば限定するわけではないがアルファ、ベータ、ガンマ、デルタおよびオミクロン変異株に対して改良された抗ウイルス活性を持つリンカー、スペーサー、配列、および標的化部分を、特定することが可能になる。

【0011】

本特許ファイルまたは出願ファイルはカラーで作成された図を少なくとも１つは含んでいる。カラー図面付きのこの特許または特許出願公報の写しは、必要な手数料が支払われた場合に、請求に応じて、米国特許商標庁により提供される。

【0012】

本発明の前述の、そして他の目的、特徴および利点は、添付の図面に図解される本発明の好ましい実施形態に関する、以下のより詳細な説明から明らかになるだろう。添付の図面では、図が異なっても、同様の参照符号は同じ部分を指す。図面は必ずしも縮尺通りではなく、その代わりに、本発明の原理を図解することに重点が置かれている。

【図面の簡単な説明】

【0013】

【図1A】本発明の例示的な化合物を表す図である。

【図1B】本発明の例示的な化合物を表す図である。

【図1C】本発明の例示的な化合物を表す図である。

【図1D】本発明の例示的な化合物を表す図である。

【図1E】本発明の例示的な化合物を表す図である。

【図1F】本発明の例示的な化合物を表す図である。

【図1G】本発明の例示的な化合物を表す図である。

【図1H】本発明の例示的な化合物を表す図である。

【図2】シュードタイプ化ウイルス中和アッセイの概略を表す図である。

【図3】様々なＳＡＲＳ－ＣｏＶ２変異株と、それらの変異を見いだすことができる領域を示す図である。

【図4】Ｄｕｑｕｅｒｒｏｙ ｅｔ ａｌ，Ｖｉｒｏｌｏｇｙ（２００５）３３５：２７６－２８５に記載のコロナウイルス由来のＨＲＣペプチドのモデルである。

【図5】Ｓタンパク質三量体の断面図である。

【図6】アミノ酸側鎖中の様々な原子の原子順位を図解する図である。

【図7】例２の試験計画の概略図である。

【図8】平均体重変化百分率（ｙ軸）を表す図であり、ｘ軸は－１および－２（ベースライン）から７日目までの期間に対応する。

【図9】体重変化百分率（ｙ軸）を表す図であり、ｘ軸は処置群に対応する。通常の一元配置ＡＮＯＶＡと対照群１に対する多重比較。有意差が存在する場合はアスタリスクで示されている。Ｐ＞０．０５ ＊ Ｐ≦０．０５ ＊＊ Ｐ≦０．０１ ＊＊＊ Ｐ≦０．００１ ＊＊＊＊ Ｐ≦０．０００１。

【図10】１日目から７日目まで（ｘ軸）のＲＴ－ｑＰＣＲによるゲノムコピー数による口腔スワブウイルス量の推定（ｙ軸はＬｏｇ_１０で正規化されている）を表す図である。１日目から２日目までのＧ１は、偶発的死亡により、ｎ＝６だった。Ｇ２からＧ５までの群はいずれも、この期間中は、ｎ＝８だった。３日目から７日目までは、Ｇ１はｎ＝３であり、一方、Ｇ２～Ｇ５はｎ＝４匹だった。

【図11】１日ごとのＲＴ－ｑＰＣＲによる中咽頭スワブ中のゲノムコピー数によるウイルス量の推定（ｙ軸はＬｏｇ_１０で正規化されている）を表す図であり、ｘ軸は処置群に対応する。通常の一元配置ＡＮＯＶＡと対照群１に対する多重比較。有意差が存在する場合はアスタリスクで示されている。ｎｓ Ｐ＞０．０５ ＊ Ｐ≦０．０５ ＊＊ Ｐ≦０．０１ ＊＊＊ Ｐ≦０．００１ ＊＊＊＊ Ｐ≦０．０００１。

【図12】２日目（ｎ＝４）および７日目（ｎ＝４）に収集された肺におけるＲＴ－ｑＰＣＲによるゲノムコピー数によるウイルス量の推定（ｙ軸はＬｏｇ_１０で正規化されている）を表す図であり、ｘ軸は処置群に対応する。通常の一元配置ＡＮＯＶＡと対照群１に対する多重比較。有意差が存在する場合はアスタリスクで示されている。ｎｓ Ｐ＞０．０５、＊ Ｐ≦０．０５、＊＊ Ｐ≦０．０１、＊＊＊ Ｐ≦０．００１、または＊＊＊＊ Ｐ≦０．０００１。

【図13】試験２日目および７日目の肺における生ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２タイトレーションアッセイを表す図である。ｙ軸上のＴＣＩＤ_５０／ｍｇ肺組織はＬｏｇ_１０を使って正規化した。グラフは、群（ｘ軸）ごとに、すべての動物個体の肺力価と平均とを示している。ＴＣＩＤ_５０によって対照群１と比較した場合、群（２、３、４および５）では、２日目に、ウイルス量が有意に低減していた。 （＊＊、Ｐ＜０．０１、または有意でない場合は表示なし）。

【図14】２日目および７日目の鼻甲介における生ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２タイトレーションアッセイを表す図である。ＴＣＩＤ_５０／ｍｇ鼻甲介組織をｙ軸に示す。グラフは、群（ｘ軸）ごとに、すべての動物個体の肺力価と平均とを示している。ＴＣＩＤ_５０によって対照群１と比較した場合、群（２、３、４および５）では、２日目に、ウイルス量が有意に低減していた（＊＊、Ｐ＜０．０１、または有意でない場合は表示なし）。

【図15】例３の試験計画の概略図である。

【図16】平均体重変化百分率（ｙ軸）を表す図であり、ｘ軸は試験の－１および－２日目（ベースライン）から７日目までに対応する。

【図17】体重変化百分率（ｙ軸）を表す図であり、ｘ軸は処置群に対応する。通常の一元配置ＡＮＯＶＡと対照群１に対する多重比較。有意差が存在する場合はアスタリスクで示されている。Ｐ＞０．０５ ＊ Ｐ≦０．０５ ＊＊ Ｐ≦０．０１ ＊＊＊ Ｐ≦０．００１ ＊＊＊＊ Ｐ≦０．０００１。

【図18】１日目から７日目まで（ｘ軸）のＲＴ－ｑＰＣＲによるゲノムコピー数による口腔スワブウイルス量の推定（ｙ軸はＬｏｇ_１０で正規化されている）を表す図である。

【図19】１日ごとのＲＴ－ｑＰＣＲによる中咽頭スワブ中のゲノムコピー数によるウイルス量の推定（ｙ軸はＬｏｇ_１０で正規化されている）を表す図であり、ｘ軸は処置群に対応する。通常の一元配置ＡＮＯＶＡと対照群１に対する多重比較。有意差が存在する場合はアスタリスクで示されている。ｎｓ Ｐ＞０．０５ ＊ Ｐ≦０．０５ ＊＊ Ｐ≦０．０１ ＊＊＊ Ｐ≦０．００１ ＊＊＊＊ Ｐ≦０．０００１。

【図20】２日目（ｎ＝６）および７日目（ｎ＝６）に収集された肺におけるＲＴ－ｑＰＣＲによるゲノムコピー数によるウイルス量の推定（ｙ軸はＬｏｇ_１０で正規化されている）を表す図であり、ｘ軸は処置群に対応する。通常の一元配置ＡＮＯＶＡと対照群１に対する多重比較。有意差が存在する場合はアスタリスクで示されている。ｎｓ Ｐ＞０．０５、＊ Ｐ≦０．０５、＊＊ Ｐ≦０．０１、＊＊＊ Ｐ≦０．００１、または＊＊＊＊ Ｐ≦０．０００１。

【図21】２日目（ｎ＝６）および７日目（ｎ＝６）に収集された肺におけるＴＣＩＤ_５０によるウイルス量の推定（ｙ軸はＬｏｇ_１０で正規化されている）を表す図であり、ｘ軸は処置群に対応する。通常の一元配置ＡＮＯＶＡと対照群１に対する多重比較。有意差が存在する場合はアスタリスクで示されている。ｎ．ｓ．は有意差なしである。Ｐ＞０．０５、＊ Ｐ≦０．０５、＊＊ Ｐ≦０．０１、＊＊＊ Ｐ≦０．００１、または＊＊＊＊ Ｐ≦０．０００１。

【図22】ＷＡ１株に対する本発明の抗ウイルス治療化合物の効力を示す図である。

【図23】デルタ株に対する本発明の抗ウイルス治療化合物の効力を示す図である。

【図24】オミクロン株に対する本発明の抗ウイルス治療化合物の効力を示す図である。

【図25】Ｐ１株に対する本発明の抗ウイルス治療化合物の効力を示す図である。

【図26】ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－１株に対する本発明の抗ウイルス治療化合物の効力を示す図である。

【図27】ＭＥＲＳ－ＣｏＶ株に対する本発明の抗ウイルス治療化合物の効力を示す図である。

【図28】ＯＣ４３株に対する本発明の抗ウイルス治療化合物の効力を示す図である。

【発明を実施するための形態】

【0014】

コロナウイルスは、宿主細胞上のヒトアンジオテンシン変換酵素２（ｈＡＣＥ２）受容体に付着するスパイクタンパク質結合ドメイン（ＲＢＤ）を介して、ヒト細胞を標的とする。コロナウイルススパイク（Ｓ）糖タンパク質は、ビリオンの外層膜上のクラスＩウイルス融合タンパク質であり、宿主細胞受容体を認識し、ウイルス膜と細胞膜の融合を媒介することによって、ウイルス感染において決定的な役割を果たす。宿主細胞へのコロナウイルスの侵入は、ウイルス表面から突き出したホモ三量体を形成する膜貫通スパイク（Ｓ）糖タンパク質によって媒介される。Ｓは、宿主細胞受容体への結合（Ｓ１サブユニット）およびウイルス膜と細胞膜との融合（Ｓ２サブユニット）を担う２つの機能的サブユニットを含む。

【0015】

Ｓ１は受容体結合という機能を果たし、Ｎ末端のシグナルペプチド（ＳＰ）、Ｎ末端ドメイン（ＮＴＤ）および受容体結合ドメイン（ＲＢＤ）を含む。Ｓ２は、膜融合において機能して細胞への進入を容易にし、融合ペプチド（ＦＰ）ドメイン、内部融合ペプチド（ＩＦＰ）、２つのヘプタドリピートドメイン（ＨＲ１およびＨＲ２）、膜貫通ドメイン、およびＣ末端ドメインを含んでいる。

【0016】

結合後、スパイクタンパク質は、宿主細胞の膜貫通プロテアーゼ／セリンサブファミリーメンバー２（ＴＭＰＲＳＳ２）によって活性化され、その結果として、ウイルスは、細胞への進入のためにエンドソーム膜との融合を起こす。コロナウイルス中のスパイクタンパク質の膜融合ドメインは高度に保存されているので、膜融合を標的にすれば、耐久性のある持続的な治療薬がもたらされ得る。

【0017】

本発明は、強力な抗コロナウイルス材料をオンデマンド合成するためのプログラム可能な迅速応答プラットフォームを提供する。本プラットフォームは、好ましくは、コロナウイルス融合ペプチド阻害物質、膜固定部分、および前記ペプチドを前記膜固定部分に共有結合で連結する多量体コア（Ｂ）を含む。本プラットフォームはスパイク結合ペプチドをさらに含んでもよい。本プラットフォームは、ＡＣＥ２標的化ペプチドまたは受容体結合ドメイン標的化ペプチドなどの標的化ペプチドをさらに含んでもよい。

【0018】

本発明の化合物は以下の一般式：
（ペプチド－リンカー）_ｎ－Ｂ－疎水性部分
［式中、リンカーは任意選択であり、Ｂは、各ペプチド部分を疎水性部分に共有結合で連結する多量体コアであって、システイン、Ｘ、および任意選択的にＹ、および／または任意選択的にＺを含み、Ｘ、ＹおよびＺは本明細書において定義され、ｎは１、２、３またはそれ以上から選択される整数である］
によって特徴づけることができる。好ましい実施形態において、化合物は、各モジュールを別々のビルディングブロックとして化学的にコンジュゲートすることによって製造される。コンジュゲーションにはクリックケミストリーが好ましく使用される。

【0019】

各ペプチドは、独立して、コロナウイルススパイクタンパク質由来のＨＲＣペプチドおよび／または標的化ペプチドである。ただし、コロナウイルススパイクタンパク質由来のＨＲＣペプチドが少なくとも１つは存在するものとする。本発明の好ましい実施形態では天然ペプチドまたは野生型ペプチドを利用するが、非天然ペプチドも同様に使用することができる。１つまたは複数の変異（例えばオミクロン変異）中に見いだされるアミノ酸を、他のウイルス（例えばデルタウイルス）の天然配列と組み合わせることができる。コロナウイルススパイクタンパク質のいわゆるＨＲＣペプチドまたはＨＲＣ領域は好ましい。ＨＲＣペプチドは、感染過程における重要な初期段階であるウイルス融合を阻害する。野生型ＨＲＣペプチドは、コロナウイルス全体にわたる、スパイクタンパク質、すなわちＳタンパク質の保存された領域である。クラスＩエンベロープウイルスの融合領域（ＨＲＣ／ＨＲＮ）および融合機序は保存された性質を持つので、これは、汎コロナウイルス阻害物質を開発するための理想的標的になる。

【0020】

好ましい野生型ＨＲＣペプチドは、
Ａｃ_ｎ－ＤＩＳＧＩＮＡＳＶＶＮＩＱＫＥＩＤＲＬＮＥＶＡＫＮＬＮＥＳＬＩＤＬＱＥＬ（配列番号１）
［ここで、ｎは０または１である］
という配列およびその結合フラグメントを含む。

【0021】

配列番号１中のＨＲＣペプチドに関して、従来のアミノ酸ナンバリングは、Ｄの１１５０で始まる。１１５１Ｉ、１１５４Ｉおよび１１５８Ｖは融合前の疎水性界面にあり、１１５９Ｖは露出している。これらのアミノ酸はヘリックスを安定化する。コンフォメーション変化（例えばプロテアーゼクリッピングによるＦＰの遊離）が起こると、１１５８Ｖは露出し、１１５９ＶはＨＲＮ三量体と相互作用する疎水性表面中に存在することになる。１１５５Ｎと１１７６Ｎは、コロナウイルスにおいて保存されているＮ結合型グリコシル化に関係づけられている。最初の７アミノ酸はＨＲＮ結合に関係づけられている。「Ｎ－キャップ」領域は１１５９Ｖと１１７１Ｖにまたがる。１１７１Ｖはコロナウイルスにおいて保存された疎水性残基であり、ＨＲＣハイドロコア（ｈｙｄｒｏ－ｃｏｒｅ）を安定化し、ＨＲＮ相互作用に関与する。

【0022】

疎水性コアは１１６１Ｉと１１７５Ｌにまたがり、融合前も融合後もヘリックスである。これらのイソロイシン、ロイシンおよびアラニンはコイルドコイルの折り畳みと安定性に重要である。Ｃ－キャップ領域は１１７６Ｎと１１８５Ｌにまたがる。１１７９Ｌ、１１８２Ｌおよび１１８５Ｌは、融合前の疎水性界面にあり、１１８０Ｉは露出している。これらのアミノ酸は前記ヘリックスを安定化する。１１８５Ｙは、三量体コイルドコイル中の３つのポリペプチド鎖間の疎水性パッキングに関係づけられ得る。コンフォメーション変化（例えばプロテアーゼクリッピングによるＦＰの遊離）が起こると、１１７９Ｌは露出し、１１８０ＩはＨＲＮ三量体と相互作用する疎水性表面中に存在することになる。１１６４Ｅと１１８４ＥはＨＲＣとＨＲＮの間に塩橋を形成する。さらに、１１５９Ｖ、１１６０Ｎ、１１７１Ｖおよび１１８０Ｉは、結晶構造においてＨＲＮと相互作用することが示されている。図５にＳタンパク質三量体の断面図を示す。

【0023】

一定の実施形態において、ペプチドは、
Ａｃ_ｎ－ＤＩＳＧＩＮＡＳＶＶＮＩＱＫＥＩＤＲＬＮＥＶＡＫＮＬＮＥＳＬＩＤＬＱＥＬ（配列番号１）
［ここで、ｎは０または１である］
という配列およびその結合フラグメントを含む野生型ＨＲＣペプチドの変異株から選択される。

【0024】

タンパク質変異株との関連において、「変異株」という用語は、野生型配列、例えば配列番号１または本明細書記載の他の天然配列と比較して、少なくとも１つのアミノ酸の欠失、付加または置換を有するペプチドと定義される。変異株は好ましくは野生型配列のコグネイトリガンドに結合する。例えば、配列番号１のうちの１、２、３、４または５つのアミノ酸が置換されているペプチドを使用することができる。そのような置換アミノ酸は、好ましくは、上に示したような配列アラインメントによって異なるコロナウイルス株において特定される１つまたは複数の対応するアミノ酸から選択することができる。例えば、前掲のアラインメントに記載するように、下線付きのイソロイシンの一方または両方を、ロイシンおよび／またはメチオニンで置換することができる。下線付きのアラニンを、バリン、ロイシンまたはイソロイシンで置換することができる。下線付きのロイシンの一方または両方を、独立して、イソロイシン、チロシン、アラニンまたはバリンで置換することができる。他の保存的または非保存的置換（リジンとグルタミンまたはアスパラギン酸とグルタミン酸）も、例えば上記の配列アラインメントに示されるように、同様に選択することができる。複数の実施形態において、２、３、４、５またはそれ以上のコロナウイルス（例えばコウモリから分離されたコロナウイルスまたはＳＡＲＳ－ＣｏＶ２の変異体もしくは変異株）の間で保存されているアミノ酸は、非天然ＨＲＣペプチドでも保存されたままである。

【0025】

例えば、野生型ＨＲＣ配列は、Ｓタンパク質にとって天然である１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０個またはそれ以上の追加アミノ酸を、Ｎ末端および／またはＣ末端に含むことができる。例えばＮ末端にグリシンを付加することができる。さらに、野生型ＨＲＣペプチドフラグメントは、Ｎ末端および／またはＣ末端の１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０個のアミノ酸が欠失していても、感染を阻害することができる。典型的には、全体として、合計１０個以下のアミノ酸を欠失させる。例えば、Ｃ末端のそれら１０個のアミノ酸を欠失させても、阻害活性は保持されると予想することができる。

【0026】

一定の実施形態では、野生型配列への改変が望ましい。例えば１つまたは複数のＤアミノ酸が、ペプチドの薬物動態および半減期を改良する場合がある。したがって一定の実施形態において、本発明は、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０個またはそれ以上のＤ－アミノ酸を特徴とするペプチドを包含する。Ｄ－アミノ酸は好ましくは野生型配列の対応するＬ－アミノ酸であることができる。一定の実施形態において、Ｄ－アミノ酸は、プロテアーゼ分解部位またはその近く（例えば１、２または３アミノ酸以内）に位置するアミノ酸である。一定の実施形態において、Ｄ－アミノ酸は、ＨＲＮペプチドとの結合に、好ましくは対応する野生型配列よりも高い親和性で、参加する疎水性アミノ酸である。上記に代えて、または上記に加えて、Ｄ－アミノ酸は親水性アミノ酸、例えばリジン、アスパラギン酸、グルタミン酸またはアルギニンである。上記に代えて、または上記に加えて、Ｄ－アミノ酸は、配列番号１のＮ末端にある７つのアミノ酸から選択することができる。Ｄ－アミノ酸を組み込むことによって改良されたペプチドは、２０２１年１月２２日に出願された米国特許出願第６３／１４０，３８７号に記載されており、この特許出願は、参照により、その全体が本明細書に組み込まれる。

【0027】

しかし、１つまたは複数のＤ－アミノ酸を対応するＬ－アミノ酸と取り換えると、ペプチドのトポロジーが変化して、機能に影響が及ぶ場合がある。したがって、好ましい非天然ＨＲＣペプチドは、レトロインバージョンＨＲＣペプチド、すなわち「ＲＩ ＨＲＣペプチド」である。レトロインバージョンＨＲＣペプチドは、好ましくは、そのコグネイトリガンドに対して標準的結合アッセイにおいて野生型ＨＲＣペプチドの少なくとも約５０％である結合親和性と、哺乳動物プロテアーゼ分解に対する感受性の減少とを特徴とする。レトロインバージョンとは、ヘリカルペプチドのＤ－ペプチド配列を逆にし、すなわち両端を「反転」（ｆｌｉｐ）させ、それによって、結合リガンドまたは標的への側鎖の提示を回復させることと定義される。Ｋｉｍ ｅｔ ａｌ，Ｍｅｔｈｏｄ ｔｏ ｇｅｎｅｒａｔｅ ｈｉｇｈｌｙ ｓｔａｂｌｅ Ｄ－ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ ａｎａｌｏｇｓ ｏｆ ｂｉｏａｃｔｉｖｅ ｈｅｌｉｃａｌ ｐｅｐｔｉｄｅｓ ｕｓｉｎｇ ａ ｍｉｒｒｏｒ ｉｍａｇｅ ｏｆ ｔｈｅ ｅｎｔｉｒｅ ＰＢＳ，ＰＮＡＳ，Ｆｅｂｒｕａｒｙ １３，２０１８，１１５（７）１５０５－１５１０を参照されたい。この文献は、参照により、その全体が本明細書に組み込まれる。したがって、本発明の非天然ペプチドは、アミノ酸、例えばある領域内のアミノ酸が、Ｎ末端がＣ末端になるように反転させたＤ－アミノ酸である、配列番号１の配列を有するペプチドを含むことができる。例えば、配列番号２に示すようにＮ末端をレトロインバージョンに付すことができ、配列番号２では各Ｄアミノ酸の前に「ｄ」が付されている：
ｄＩｄＧｄＳｄＩｄＤ ＮＡＳＶＶＮＩＱＫＥＩＤＲＬＮＥＶＡＫＮＬＮＥＳＬＩＤＬＱＥＬ（配列番号２）。

【0028】

この例は５アミノ酸の単一ＲＩ領域を与える。しかし、アミノ酸を２つだけ選択することもできる（例えば２つのＮ末端アミノ酸）。例えばＲＩ領域は、疎水性コア、１１６０Ｎ～１１７６Ｎ、またはＣ－キャップ領域もしくはその一部分にまたがり得る。あるいは、ペプチド全体がＲＩペプチドであることもできる。さらに、２つ、３つまたはそれ以上のＲＩ領域を含めることもできる。例えば、Ｌ－アミノ酸による疎水性コアを保ったまま、Ｎ末端領域とＣ－キャップ領域の両方をＲＩ領域とすることができる。

【0029】

例えば、鏡像ファージディスプレイを使ってＨＲＣ変異株のスクリーニングを行う場合、第１のＤ－ペプチドは、ＨＲＮコロナウイルスペプチド、または第１のＬ－ペプチドから合成することができる。第１のＬペプチドは天然に存在するＬ－ペプチドであるか、またはペプチドのキメラであることができる。本方法は、第１のＤ－ペプチドに特異的に結合するＨＲＣペプチドまたは第２のＬ－ペプチドのスクリーニングを行うことをさらに含むことができ、次に、第２のＬ－ペプチドの鏡像である第２のＤ－ペプチドを合成することができる。本明細書に記載のＤ－ペプチドスクリーニング法の一態様では、Ｎ－三量体標的をまずＤ－アミノ酸で合成して、天然のＬ－Ｎ－三量体標的の鏡像を作り出すことができる。Ｄ－Ｎ－三量体標的は、Ｄ－Ｎ－三量体に結合するＬ－ペプチドを同定するための標準的なペプチドベースのスクリーニング、例えばファージディスプレイ、リボソームディスプレイ、および／またはＣＩＳディスプレイにおいて使用することができる。次に、特定されたＬ－ペプチドをＤ－アミノ酸で合成することができる。対称性の法則により、その結果得られるＤ－ペプチドは天然のＬ－Ｎ－三量体に結合し、したがってコロナウイルスＨＲＮ中間体のＮ－三量体領域を標的とし、それによって感染を阻害することになるだろう。このスクリーニング方法は、Ｓｃｈｕｍａｃｈｅｒ，ｅｔ ａｌ．，Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ Ｄ－ｐｅｐｔｉｄｅ ｌｉｇａｎｄｓ ｔｈｒｏｕｇｈ ｍｉｒｒｏｒ－ｉｍａｇｅ ｐｈａｇｅ ｄｉｓｐｌａｙ，Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９９６ Ｍａｒ ２９；２７１（５２５７）：１８５４－７にも記載されており、この文献は、この参照により、その全体が本明細書に組み込まれる。

【0030】

ＨＲＣペプチドのホットスポット残基は、ＨＲＣペプチドの結晶構造またはＮＭＲ溶液構造によって特定することができる。例えば、１１５０Ｄ、１１５１Ｉ、１１５４Ｉ、１１５５Ｎ、１１５８Ｖ、１１５９Ｖ、１１６１Ｉ、１１６４Ｅ、１１７１Ｖ、１１７５Ｌ、１１７６Ｌ、１１７９Ｌ、１１８０Ｉ、１１８２Ｌ、１１８４Ｅおよび／または１１８５Ｙから選択される１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０個またはそれ以上のアミノ酸、例えば配列番号１の１１５９Ｖ、１１６０Ｎ、１１６３Ｅ、１１７１Ｖ、１１８０Ｉ、１１８４Ｅおよび／または１１８５Ｌから選択される１つまたは複数のアミノ酸を、ホットスポット残基と指定することができる。

【0031】

複数の実施形態において、ペプチドは細胞標的化ペプチドを含む。複数の実施形態において、標的化ペプチドは、限定するわけではないがＡＣＥ２標的化ペプチドまたは受容体結合ドメイン標的化ペプチドから選択される。複数の実施形態において、標的化ペプチドはＡＣＥ２標的化ペプチドである。複数の実施形態において、標的化ペプチドは受容体結合ドメイン標的化ペプチドである。

【0032】

化合物がペプチドを１つだけ含む実施形態では、ペプチドはコロナウイルススパイクタンパク質由来のＨＲＣペプチドである。化合物が２つ以上のペプチドを含む実施形態において、各ペプチドはコロナウイルススパイクタンパク質由来のＨＲＣペプチドであることができる。化合物が２つ以上のペプチドを含む実施形態では、ペプチドを、コロナウイルススパイクタンパク質由来のＨＲＣペプチドおよび／または標的化ペプチドから選択することができる。ただし、コロナウイルススパイクタンパク質由来のＨＲＣペプチドは、少なくとも１つは存在するものとする。好ましくは、ペプチドのうちの１つだけが標的化ペプチドであり、他の１つまたは複数のペプチドはコロナウイルススパイクタンパク質由来のＨＲＣペプチドである。

【0033】

一定の実施形態において、任意選択の「リンカー」は、ペプチドに（好ましくはそのＣ末端またはＮ末端で）共有結合すると共に、Ｂにも共有結合する、二価の部分または二価の基と定義される。複数の実施形態において、リンカーは、１、２、３、４、５個またはそれ以上のサブユニットまたはセグメントを有することができる。複数の実施形態において、リンカーは、１つまたは複数のアミノ酸によるサブユニットを含む。アミノ酸は、天然に存在するものであっても、合成物であってもよい。したがってリンカーは、（Ｇｌｙ）_ｎ＋１、（ＧｌｙＳｅｒＧｌｙ）_ｎまたは（Ｇｌｙ－Ｐｒｏ）_ｎ（ここで、ｎは１以上、例えば１～１２、１～６または１～４である）を含み得る。ＧｌｙＳｅｒＧｌｙは、リンカーまたはリンカーの一部を形成し得るアミノ酸の配列の一例である。

【0034】

一定の実施形態において、リンカーは非アミノ酸サブユニットを含み得る。いくつかの実施形態において、リンカーの非アミノ酸サブユニットの例は－（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｍ－であり、ここで、ｍは１～１５、例えば２～１０、２～６または４である。（ポリ）エチレングリコール基の導入は水性媒質における溶解性を助ける。いくつかの実施形態において、リンカーの非アミノ酸部分の例は－ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）－および－ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ_２ＣＨ_２（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_４Ｃ（Ｏ）－である。

【0035】

例えば３つのサブユニットを持つリンカーを使用することが有利な場合がある。第１の任意選択のサブユニットは、フレキシブルなペプチド、例えば－（Ｇ）_ｍ－または－（ＧＳ）_ｍＧ－を含み、ここで、ｍは１、２、３、４、５またはそれ以上の整数、例えば２である。第２のサブユニットは、化学反応（クリックケミストリー反応など）の残基、例えば第１のサブユニットのＮ末端、Ｃ末端または側鎖が関与するペプチド結合、エステル、エーテルまたはチオエーテルであることができる。残基は、カルボジイミドまたはスルフヒドリルマレイミドで形成されたものなど、切断不可能であることができる。第３の任意選択のサブユニットは親水性スペーサー、例えばポリエチレングリコール、ポリエチレンアミン、ポリアセタールポリマー、ポリ（１－ヒドロキシメチルエチレンヒドロキシメチル－ホルマール）（ＰＨＦ）または炭水化物であることができる。親水性スペーサーは、一般に、ポリマーであって、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０個またはそれ以上のモノマーを含むことができる。４つのモノマーによるポリエチレングリコール（ＰＥＧ４）で十分である。親水性スペーサーの長さは、ＨＲＮドメインに結合するためのペプチドの配向が容易になるように、Ｓタンパク質ギャップの全長に対応することができる。ＰＥＧは、凝集を低減し、溶解性を改良することもできる。もう一つのサブユニットは、Ｂとリンカーまたはそのサブユニットとの間の化学反応（クリックケミストリー反応など）の残基であることができる。

【0036】

Ｂは、１つまたは複数のペプチド－リンカー部分を疎水性部分に共有結合で連結するフレームワークを提供する多量体コアであることができる。Ｂは、１つまたは複数のシステイン、１つまたは複数のＸ、および任意選択的にＹ、および／または任意選択的にＺを含むことができ、Ｘ、ＹおよびＺは本明細書において定義される。複数の実施形態において、前記１つまたは複数のシステインは、１つまたは複数のペプチド－リンカー部分をＢの他の構成要素に結合する。

【0037】

細胞にとって無毒性であり、生物学的条件下では速い速度で起こることができる、微調整可能かつ単純な化学反応を使って、ペプチドをＢに共有結合で連結することができる必要がある。本発明はこの必要に対処する。広い態様において、本開示は、クリックケミストリーによって反応する、「クリックケミストリーハンドル」とも呼ばれるクリックケミストリー適合性官能基を提供する。

【0038】

本明細書において利用される場合、「クリックケミストリー適合性」の構造、官能基、モノマー、オリゴマーなどは、クリックケミストリー反応への参加に適した１つまたは複数の化学部分を含むことを構造上の特徴とする、化合物、材料などを指すと理解すべきである。

【0039】

クリックケミストリーハンドルは、クリックケミストリー反応に加わることができる反応基を与える化学部分である。クリックケミストリー反応およびクリックケミストリー反応のための適切な化学基は当業者には周知であり、これには、末端アルキン、アジド、歪みアルキン、ジエン、ジエノフィル、アルコキシアミン、カルボニル、ホスフィン、ヒドラジド、チオール、およびアルケンが含まれるが、それらに限定されない。例えば、いくつかの実施形態では、アジドとアルキンとがクリックケミストリー反応において使用される。

【0040】

本発明のいくつかの態様は、改変されたペプチド、例えばＣ末端またはＮ末端クリックケミストリーハンドルを含むタンパク質を提供する。その場合、そのようなペプチドは、タンパク質のクリックケミストリーハンドルと反応することができる部分を含むＢに、共有結合でコンジュゲートすることができる。

【0041】

銅触媒アジド－アルキン付加環化（ＣｕＡＡＣ）が本明細書に開示される材料を官能化するために使用されるクリックケミストリーである実施形態では、「クリックケミストリー適合性」化合物は、末端アルキンおよび／または末端アジド官能基を含む。

【0042】

例示的なクリックケミストリーはＣｕＡＡＣであるが、本明細書に記載の発明概念の範囲から逸脱することなく、ＣｕＡＡＣと等価であると理解されるであろう他のクリックケミストリー適合性反応を使用し得ることは、当業者には理解されるだろう。例えば様々な実施形態において、クリックケミストリー適合性反応には、ＣｕＡＡＣ、歪み促進型アジド－アルキン環化付加（ＳＰＡＡＣ）、歪み促進型アルキン－ニトロン環化付加（ＳＰＡＮＣ）、アルケン－アジド環化付加などの歪みアルケン反応が含まれ得る。また、本開示を読めば当業者には理解されるであろうとおり、クリックケミストリー適合性反応には、アルケン－テトラジン逆要請型ディールス－アルダー（Ｄｉｅｒｓ－Ａｌｄｅｒ）反応、アルケン－テトラゾール光クリック反応、チオールのマイケル付加、チオールのアミンによる求核置換、ならびにＢｅｃｅｒ，ｅｔ ａｌ．「Ｃｌｉｃｋ ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｂｅｙｏｎｄ ｍｅｔａｌ－ｃａｔａｌｙｚｅｄ ｃｙｃｌｏａｄｄｉｔｉｏｎ．」Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．２００９，４８：ｐ．４９００－４９０８によって開示されているような一定のディールス－アルダー反応およびそれらの均等物も含まれるとみなし得る。

【0043】

したがって、様々な実施形態において、クリックケミストリー適合性の基、化合物などは、前述の例示的クリックケミストリーの任意の組合せに参加する能力を伝達する１つまたは複数の適切な化学部分を含むと理解されるべきである。

【0044】

Ｂは、１つまたは複数のペプチド－リンカー部分を疎水性部分に共有結合で連結するフレームワークを提供する多量体コアである。Ｂは、１つまたは複数のシステイン、１つまたは複数のＸ、および任意選択的にＹ、および／または任意選択的にＺを含み、Ｘ、ＹおよびＺは本明細書において定義される。

【0045】

前記１つまたは複数のシステイン残基、１つまたは複数のＸ、任意選択のＹおよび任意選択のＺは、任意の順序であることができ、ここでは、最初に挙げられたＢの構成要素がペプチド－リンカーに結合していて、最後に挙げられた構成要素が疎水性部分に結合している。例えばＢが、順に、１つまたは複数のシステイン残基、１つまたは複数のＸ、およびＺを含む場合、ぺプチド－リンカーは前記１つまたは複数のシステインに結合していて、Ｚは疎水性部分に結合している。複数の実施形態において、Ｂは、順に、１つまたは複数のシステインと１つまたは複数のＸとを含む。複数の実施形態において、ＢはシステインとＸとを含む。

【0046】

複数の実施形態において、Ｂは、１つまたは複数のシステインと、１つまたは複数のＸと、Ｚとを含む。複数の実施形態において、ＢはＺと、１つまたは複数のシステインと、１つまたは複数のＸとを含む。

【0047】

複数の実施形態において、Ｂは、Ｙと、１つまたは複数のシステインと、１つまたは複数のＸとを含む。複数の実施形態において、Ｂは、Ｙと、１つまたは複数のシステインと、１つまたは複数のＸと、Ｚとを含む。

【0048】

複数の実施形態において、前記１つまたは複数のシステインは、前記１つまたは複数のペプチド－リンカー部分を、Ｂの他の構成要素に結合する。複数の実施形態において、前記１つまたは複数のシステインは、前記１つまたは複数のＸに、チオエーテル結合を介して取り付けられる。複数の実施形態において、前記１つまたは複数のシステインは、以下の構造：

【化1】

［式中、Ｒ_４はＯＨまたはＮＨ_２である］
を有する。

【0049】

複数の実施形態において、Ｘは、１つまたは複数の硫黄アリール連結部、窒素アリール連結部、または他の連結部、例えばトリアゾール、アミド、硫黄－ｓｐ３炭素結合、もしくは親水性リンカーを含む。複数の実施形態において、親水性リンカーは、例えばポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリエチレンイミン、ポリアセタールポリマー、ポリ（１－ヒドロキシメチルエチレンヒドロキシメチル－ホルマール）（ＰＨＦ）または炭水化物から選択される。複数の実施形態において、親水性リンカーはポリマーであって、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０個またはそれ以上のモノマーを含むことができる。複数の実施形態において、親水性リンカーはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）である。複数の実施形態において、親水性リンカーは、４つのモノマーによるポリエチレングリコール（ＰＥＧ４）である。一実施形態において、Ｘは１つまたは複数の硫黄アリール連結部を含む。一実施形態において、Ｘは１つまたは複数の窒素アリール連結部を含む。一実施形態において、Ｘは１つまたは複数の硫黄－ｓｐ３炭素結合を含む。

【0050】

複数の実施形態において、前記１つまたは複数のＸは、チオエーテル結合によって、疎水性部分に直接取り付けられる。複数の実施形態において、前記１つまたは複数のＸは、Ｚが存在する場合には、Ｚに取り付けられ、次にそのＺが疎水性部分に取り付けられる。

【0051】

一定の実施形態において、ＢはさらにＹを含む。複数の実施形態において、Ｙが存在する場合、Ｙは、前記１つまたは複数のペプチド－リンカー部分と前記１つまたは複数のシステインとの間に入り、前記１つまたは複数のペプチド－リンカー部分を前記１つまたは複数のシステインに結合し、次にそのシステインがＢの他の構成要素に結合する。

【0052】

複数の実施形態において、Ｙは１つまたは複数のアミノ酸を含む。アミノ酸は、天然に存在するものであっても、合成物であってもよい。Ｙは、１つまたは複数の、例えば１～１２、１～６または１～４個のアミノ酸を含み得る。前記１つまたは複数のアミノ酸は段階的にリンカーに付加することができる。例えば、第１のアミノ酸をＢのシステインに付加し、次に第２のアミノ酸の付加に先立って、ペプチド－リンカーを第１のアミノ酸に取り付ける。ペプチド－リンカーを第１のアミノ酸に取り付けた後、次のアミノ酸を先のアミノ酸に取り付けて、さらなるペプチド－リンカーの取り付けを可能にするなどである。いくつかの実施形態において、リンカーのアミノ酸は１つまたは複数のリジンである。

【0053】

複数の実施形態において、Ｚが存在する場合、ＺはＸと疎水性部分との間に入り、Ｂを疎水性部分に結合する。

【0054】

複数の実施形態において、Ｚが存在する場合、Ｚは、式（Ｉ）：

【化2】

の構造を有する部分を含み、
式中、Ｒ_１およびＲ_２のそれぞれは
（ｉ）Ｒ_３
（ｉｉ）式（ＩＩ）：

【化3】

の構造、
および
（ｉｉｉ）式（ＩＩＩ）：

【化4】

の構造
からなる群より独立して選択され、
式中、
Ｗは、いずれの場合も、－Ｈ－Ｃ（Ｏ）－Ｏ－、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－Ｈ－、－Ｃ（Ｏ）－Ｏ－、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－、－（ＣＨ_２）_ｍ－、－Ｈ－Ｃ（Ｏ）－、－Ｃ（Ｏ）－Ｈ－、－Ｈ－、および－Ｃ（Ｘ）－から独立して選択され、最も好ましくはＷは－Ｃ（Ｏ）－Ｈ－であり、
Ｖは、いずれの場合も、－（ＣＨ_２）_ｍ－、－（ＣＨ_２）_ｍ－Ｃ（Ｘ）－Ｈ－、－Ｈ－Ｃ（Ｘ）－（ＣＨ_２）_ｍ－、－（ＣＨ_２）_ｍ－Ｈ－Ｃ（Ｏ）－Ｏ－、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－Ｈ－（ＣＨ_２）_ｍ－、－（ＣＨ_２）_ｍ－Ｃ（Ｏ）－Ｏ－、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ_２）_ｍ－、－Ｈ－Ｃ（Ｘ）－、－Ｃ（Ｘ）－Ｈ－、－Ｈ－Ｃ（Ｏ）－Ｏ－、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－Ｈ－、－Ｃ（Ｏ）－Ｏ－、および－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－から独立して選択され、最も好ましくは
Ｖは－ＣＨ_２ＣＨ_２－Ｃ（Ｏ）－Ｈ－であり、
Ｄは、いずれの場合も、Ｏ、ＳまたはＨのいずれかであり、
Ａは、いずれの場合も、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ_２－、－ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）－、－ＨＣＨ_２－、－ＣＨ_２Ｈ－、－ＨＣ（Ｏ）－、－Ｃ（Ｏ）Ｈ－、－Ｈ－、－ＣＨ_２－、－ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）Ｈ－および－ＨＣ（Ｏ）ＣＨ_２－から独立して選択され、最も好ましくはＹは－ＨＣＨ_２－であり、
Ｑは、いずれの場合も、－ＣＨ_２－、－Ｈ－、－Ｏ－、－ＣＨ_２Ｏ－、－ＨＣＨ_２－および－ＯＣＨ_２－から独立して選択され、最も好ましくはＺは－Ｏ－であり、
Ｒ_３は、いずれの場合も、前記ポリペプチドのいずれかから独立して選択され、それらは同じであっても異なってもよく、
ｍは、いずれの場合も、０～５の整数、すなわち０、１、２、３、４、または５、好ましくは０～３から独立して選択され，好ましくはｍはいずれの場合も同じであり、；
ｎは、いずれの場合も、０～４０の整数、すなわち０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、または４０、好ましくは３～１０から独立して選択され、好ましくはｎはいずれの場合も同じであり、
ｏは、いずれの場合も、０～５の整数、すなわち０、１、２、３、４、または５から独立して選択され、好ましくは２であり、好ましくはｏはいずれの場合も同じであり、
ｐは、いずれの場合も、０～５の整数、すなわち０、１、２、３、４、または５、好ましくは０～３から独立して選択され、好ましくはｐはいずれの場合も同じであり、
ｑは、いずれの場合も、０～５の整数、すなわち０、１、２、３、４、または５、好ましくは０～３から独立して選択され、好ましくはｑはいずれの場合も同じであり、および／または好ましくはｑ＜ｐであり、
Ｍは前記疎水性部分であり、
式中、＊は、構造（ＩＩ～ＩＩＩ）が構造（Ｉ）に連結される場所を表す。

【0055】

複数の実施形態において、Ｚが存在する場合、Ｚは、
式（Ｉ）：

【化5】

の構造を有する部分を含まない。

【0056】

複数の実施形態において、Ｚが存在する場合、Ｚは、式（ＩＶ）：

【化6】

の構造を有する部分を含み、
式中、Ｒ_５は、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリエチレンイミン、ポリアセタールポリマー、ポリ（１－ヒドロキシメチルエチレンヒドロキシメチル－ホルマール）（ＰＨＦ）または炭水化物などから選択される親水性リンカーから選択され、
Ｗは、いずれの場合も、直接結合、またはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリエチレンイミン、ポリアセタールポリマー、ポリ（１－ヒドロキシメチルエチレンヒドロキシメチル－ホルマール）（ＰＨＦ）もしくは炭水化物などから選択される親水性リンカーから独立して選択される。

【0057】

複数の実施形態において、Ｒ_５の親水性リンカーはポリマーであって、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０個またはそれ以上のモノマーを含むことができる。複数の実施形態において、Ｒ_５の親水性リンカーはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）である。複数の実施形態において、Ｒ_５の親水性リンカーは、４つのモノマーによるポリエチレングリコール（ＰＥＧ４）である。

【0058】

複数の実施形態において、Ｗの親水性リンカーは、いずれの場合も独立してポリマーであって、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０個またはそれ以上のモノマーを含むことができる。複数の実施形態において、親水性リンカーはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）である。複数の実施形態において、Ｗの親水性リンカーは、いずれの場合も独立して、４つのモノマーによるポリエチレングリコール（ＰＥＧ４）であることができる。

【0059】

疎水性部分は膜統合性脂質、例えばコレステロール、スフィンゴ脂質、スフィンゴミエリン、糖脂質、グリセロリン脂質（ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミンおよびホスファチジルセリンなど）、エルゴステロール、７－ジヒドロコレステロールおよびスチグマステロールであることができる。好ましくはコレステロールである。典型的には、Ｂは、コレステロールのヒドロキシル基、例えば３－ＯＨに、直接的または間接的に連結される。疎水性部分は、細胞膜への本発明化合物の挿入を容易にし、ウイルスの進入を阻害することができる。

【0060】

Ｂは、疎水性部分上の任意の好都合な位置に接続され得る。いくつかの実施形態において、接続は疎水性部分のヒドロキシ基を介して行われ得る。例えば、疎水性部分がコレステロールである場合、Ｂは、基－Ｃ（Ｏ）－または－Ｃ_１～４アルキレンＣ（Ｏ）－、例えば－ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）－によって、コレステロールに接続され得る。

【0061】

リン脂質には、卵ホスファチジルコリン（ＥＰＣ）、卵ホスファチジルグリセロール（ＥＰＧ）、卵ホスファチジルイノシトール（ＥＰＩ）、卵ホスファチジルセリン（ＥＰＳ）、ホスファチジルエタノールアミン（ＥＰＥ）、およびホスファチジン酸（ＥＰＡ）などの脂質、大豆由来のそれらの脂質、大豆ホスファチジルコリン（ＳＰＣ）、ＳＰＧ、ＳＰＳ、ＳＰＩ、ＳＰＥおよびＳＰＡ、水素添加された卵由来および大豆由来のそれらの脂質（例えばＨＥＰＣ、ＨＳＰＣ）、グリセロールの２位および３位にある炭素原子数１２～２６の鎖を含有する脂肪酸のエステル結合と、グリセロールの１位にあるコリン、グリセロール、イノシトール、セリン、エタノールアミンを含む様々な頭部基とで構成された、他のリン脂質、ならびに対応するホスファチジン酸が含まれる。これらの脂肪酸上の鎖は飽和鎖または不飽和鎖であることができ、リン脂質は様々な鎖長および様々な不飽和度の脂肪酸で構成され得る。特に、本製剤の組成物は、天然に存在する肺サーファクタントの主成分であるジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）を含むことができる。他の例としては、ジミリストイルホスファチジルコリン（ＤＭＰＣ）およびジミリストイルホスファチジルグリセロール（ＤＭＰＧ）ジパルミトイルホスファチドホリン（ｄｉｐａｌｍｉｔｏｙｌｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｅｈｏｌｉｎｅ）（ＤＰＰＱ）およびジパルミトイルホスファチジルグリセロール（ＤＰＰＧ）ジステアロイルホスファチジルコリン（ＤＳＰＱ）およびジステアロイルホスファチジルグリセロール（ＤＳＰＧ）、ジオレイルホスファチジル－エタノールアミン（ＤＯＰＥ）、ならびにパルミトイルステアロイルホスファチジル－コリン（ＰＳＰＣ）およびパルミトイルステアロールホスファチジルグリセロール（ｐａｌｍｉｔｏｙｌｓｔｅａｒｏｌｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｇｌｙｃｅｒｏｌ）（ＰＳＰＧ）のような混合リン脂質、ならびにモノオレオイルホスファチジルエタノールアミン（ＭＯＰＥ）のような単一アシル化リン脂質が挙げられる。

【0062】

コレステロール類としては、コレステロール、コレステロールのエステル、例えばコレステロールヘミコハク酸、コレステロールの塩、例えばコレステロール硫酸水素塩、エルゴステロール、エルゴステロールのエステル、例えばエルゴステロールヘミコハク酸、エルゴステロールの塩、例えばエルゴステロール硫酸水素塩およびエルゴステロール硫酸塩、ラノステロール、ラノステロールのエステル、例えばラノステロールヘミコハク酸、ラノステロールの塩、例えばラノステロール硫酸水素塩およびラノステロール硫酸塩を挙げることができる。トコフェロール類としては、トコフェロール、トコフェロールのエステル、例えばトコフェロールヘミコハク酸、トコフェロールの塩、例えばトコフェロール硫酸水素塩およびトコフェロール硫酸塩を挙げることができる。

【0063】

複数の実施形態において、本発明の化合物は図１Ｈに示す構造を有する（「デコイ（Ｄｅｃｏｙ）１０１」または「ＤＣＯＹ１０１」ともいう）。

【0064】

複数の実施形態において、本発明の化合物は図１Ｉに示す構造を有する（「デコイ（Ｄｅｃｏｙ）１０２」または「ＤＣＯＹ１０２」ともいう）。

【0065】

複数の実施形態において、本発明の化合物は図１Ｇに示す構造を有する（「デコイ（Ｄｅｃｏｙ）１０３」または「ＤＣＯＹ１０３」ともいう）。

【0066】

ＤＣＯＹ１０２およびＤＣＯＹ１０３のリンカーは、新しいリンカーであり、ＤＣＯＹ１０１よりも改良された安定性を与える。さらに、ＤＣＯＹ１０２およびＤＣＯＹ１０３は、ＰＢＳ緩衝液中で、以下に示すように、改良された溶解性を示す：デコイ（Ｄｅｃｏｙ）１０１：約０．０４ｍｇ／ｍＬ＝０．００４ｍＭ；デコイ（Ｄｅｃｏｙ）１０２：約０．３５ｍｇ／ｍＬ＝０．０３５ｍＭ、デコイ（Ｄｅｃｏｙ）１０３：約０．１９ｍｇ／ｍＬ＝０．０１８ｍＭ。

【0067】

本発明の組成物は、本明細書記載の化合物と薬学的に許容される担体とを含む。例えば、本組成物は全身性にまたは局所性に投与することができる。本組成物は、例えば、経口、静脈内、筋肉内、直腸、皮膚、皮下、局所、経皮、舌下、鼻腔、吸入、または膣送達のために投与することができる。したがって本組成物は、例えば錠剤、カプセル剤、丸剤、粉末剤、顆粒剤、懸濁剤、乳剤、溶液剤、ヒドロゲルを含むゲル、ペースト剤、軟膏、クリーム剤、硬膏、水薬、浸透圧送達デバイス、坐剤、浣腸剤、注射剤、植込剤、噴霧剤、またはエアロゾルなどの形態をとり得る。本組成物は、従来の製薬実務に従って製剤化され得る（例えばＲｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，２２^ｎｄ ｅｄｉｔｉｏｎ，２０１３，ｅｄ．Ｌ．Ｖ．Ａｌｌｅｎ，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｐｒｅｓｓ，ＰｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａおよびＥｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，４^ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，ｅｄ．Ｊ．Ｓｗａｒｂｒｉｃｋ，２０１３，ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋを参照されたい）。

【0068】

化合物は、当技術分野において知られる様々な方法で製剤化され得る。例えば、１つまたは複数の本発明化合物と、本明細書において定義される生物学的に活性な何らかの追加作用物質が存在するのであれば、その追加作用物質とは、一緒に製剤化されても、別々に製剤化されてもよい。

【0069】

本発明の各化合物は、単独で、または本明細書記載の１つもしくは複数の活性作用物質と組み合わせて、米国特許出願公開第２００３／０１５２６３７号および同第２００５／００２５７６５号に記載されているように、制御放出（例えば持続または計量）投与用に製剤化することができ、前記文献は参照により本明細書に組み込まれる。例えば、本発明の化合物は、単独で、または本明細書記載の生物学的に活性な作用物質のうちの１つもしくは複数と組み合わせて、患者に投与されるカプセル剤または錠剤に組み込むことができる。

【0070】

当技術分野において知られる制御放出製剤には、外科的に挿入するための、または植込み、挿入、注入もしくは注射用の持続放出性微粒子、例えばマイクロスフェアまたはマイクロカプセルとしての、特別なコーティングが施されたペレット、ポリマー製剤またはポリマーマトリックスが含まれ、ここでは、活性医薬の徐放が、マトリックスからの持続的な拡散もしくは制御された拡散および／または調製物のコーティングの選択的分解もしくはポリマーマトリックスの選択的分解によって、もたらされる。患者の好ましい限局的部位に作用物質を制御送達、持続的送達または即時送達するための他の製剤または媒体としては、例えば懸濁液、乳液、ゲル、リポソーム、および皮下または筋肉内投与に許容される、他の任意の適切な当技術分野で知られる他の任意の適切な送達媒体または製剤が挙げられる。

【0071】

適切な生体適合性ポリマーを制御放出材料として利用することができる。ポリマー材料は、生体適合性生分解性ポリマーを含んでよく、一定の好ましい実施形態では、好ましくは乳酸とグリコール酸とのコポリマーである。本発明の製剤に役立つ好ましい制御放出材料としては、ポリ無水物、ポリエステル、乳酸とグリコール酸とのコポリマー（この場合、乳酸とグリコール酸との重量比は好ましくは４：１以下、すなわち重量で８０％以下の乳酸対２０％以上のグリコール酸である）、および触媒または分解促進化合物を含有する、例えば少なくとも１重量％の無水物触媒、例えば無水マレイン酸を含有する、ポリオルトエステルが挙げられる。ポリエステルの例には、ポリ乳酸、ポリグリコール酸およびポリ乳酸－ポリグリコール酸コポリマーがある。他の有用なポリマーとしては、タンパク質ポリマー、例えばコラーゲン、ゼラチン、フィブリンおよびフィブリノゲンや、多糖、例えばヒアルロン酸が挙げられる。

【0072】

さらなる実施形態において、事実上、本発明化合物のための担体として作用する制御放出材料は、生体接着性ポリマー、例えばペクチン（ポリガラクツロン酸）、ムコ多糖（ヒアルロン酸、ムチン）または非毒性レクチンなどを、さらに含むことができ、あるいはポリマー自体が生体接着剤、例えばポリ無水物または多糖、例えばキトサンであってもよい。生分解性ポリマーがゲルを含む実施形態では、そのような有用なポリマーの一つは、熱ゲル化ポリマー、例えばポリエチレンオキシド、ポリプロピレンオキシド（ＰＥＯ－ＰＰＯ）ブロックコポリマー、例えばＢＡＳＦワイアンドット社（ＢＡＳＦ Ｗｙａｎｄｏｔｔｅ）のプルロニック（登録商標）（ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標））Ｆ１２７である。

【0073】

経口使用のための製剤としては、非毒性の薬学的に許容される賦形剤との混合物として１つまたは複数の活性成分を含有する錠剤が挙げられる。これらの賦形剤は、例えば不活性な希釈剤または充填剤（例えばスクロース、ソルビトール、砂糖、マンニトール、微結晶セルロース、デンプン、例えばバレイショデンプン、炭酸カルシウム、塩化ナトリウム、ラクトース、リン酸カルシウム、硫酸カルシウム、またはリン酸ナトリウム）、造粒および崩壊剤（例えばセルロース誘導体、例えば微結晶セルロース、デンプン、例えばバレイショデンプン、クロスカルメロースナトリウム、アルギナート、またはアルギン酸）、結合剤（例えばスクロース、グルコース、ソルビトール、アラビアガム、アルギン酸、アルギン酸ナトリウム、ゼラチン、デンプン、アルファ化デンプン、微結晶セルロース、ケイ酸マグネシウムアルミニウム、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、エチルセルロース、ポリビニルピロリドン、またはポリエチレングリコール）、および潤滑剤、流動促進剤、および付着防止剤（例えばステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸亜鉛、ステアリン酸、シリカ、硬化植物油、またはタルク）であり得る。薬学的に許容される賦形剤としては、他にも、着色剤、着香剤、可塑剤、保水剤、緩衝剤、矯味剤（例えばヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース）などを挙げることができる。

【0074】

１つまたは複数の本発明化合物は、錠剤、カプセル剤または他の媒体中で一つに混合してもよいし、分配してもよい。一例では、生物学的に活性な作用物質のかなりの部分が本発明化合物の放出に先立って放出されるように、本発明の化合物は錠剤の内側に含有され、生物学的に活性な作用物質は錠剤の外側にある。

【0075】

経口使用のための製剤は、チュアブル錠として、または１つもしくは複数の活性成分が不活性な固形希釈剤（例えばバレイショデンプン、ラクトース、微結晶セルロース、炭酸カルシウム、リン酸カルシウムまたはカオリン）と混合されている硬ゼラチンカプセル剤として、または活性成分が水または油媒体、例えばラッカセイ油、流動パラフィン、またはオリーブ油などと混合されている軟ゼラチンカプセル剤としても提供され得る。粉末剤、顆粒剤およびペレット剤は、錠剤およびカプセル剤の項で上に言及した成分を使用し、例えば混合機、流動床装置または噴霧乾燥設備を用いる従来の方法で、調製され得る。口への製剤は、洗口剤、口腔用スプレー、含嗽溶液、または口腔用軟膏剤、または口腔用ゲル剤としても提供され得る。

【0076】

溶解または拡散制御放出は、化合物の錠剤、カプセル剤、ペレット剤または顆粒製剤の適当なコーティングによって、または適当なマトリックス中に化合物を組み込むことによって、達成することができる。制御放出コーティングは、上で言及したコーティング物質および／または例えばシェラック、ミツロウ、グリコワックス（ｇｌｙｃｏｗａｘ）、キャストール・ワックス（ｃａｓｔｏｒ ｗａｘ）、カルナウバワックス、ステアリルアルコール、モノステアリン酸グリセリン、ジステアリン酸グリセリル、グリセロールパルミトステリン酸エステル、エチルセルロース、アクリル系樹脂、ｄｌ－ポリ乳酸、酢酸酪酸セルロース、ポリ塩化ビニル、ポリ酢酸ビニル、ビニルピロリドン、ポリエチレン、ポリメタクリラート、メチルメタクリラート、２－ヒドロキシメタクリラート、メタクリラートヒドロゲルル、１，３－ブチレングリコール、エチレングリコールメタクリラート、および／またはポリエチレングリコールのうちの１つまたは複数を含み得る。制御放出マトリックス製剤では、マトリックス材料は、例えば水和メチルセルロース、カルナウバワックスおよびステアリルアルコール、カーボポール（ｃａｒｂｏｐｏｌ）９３４、シリコーン、トリステアリン酸グリセリル、アクリル酸メチル－メタクリル酸メチル、ポリ塩化ビニル、ポリエチレン、および／またはハロゲン化フルオロカーボンも含み得る。

【0077】

経口投与のために本発明の化合物および組成物を組み込むことができる液状の形態には、水溶液、適切に風味付けされたシロップ、水性または油性懸濁液、および綿実油、ゴマ油、ヤシ油、またはラッカセイ油などの食用油を使った風味付き乳液、ならびにエリキシル剤および同様の医薬用媒体が含まれる。

【0078】

非経口投与（例えば注射によるもの）に適した製剤としては、化合物が溶解され、懸濁され、または他の形で（例えばリポソームまたは他の微粒子に入れて）提供される、水性または非水性の等張性パイロジェンフリー滅菌液体（例えば溶液、懸濁液）が挙げられる。そのような液体は、他の薬学的に許容される成分、例えば酸化防止剤、緩衝剤、保存剤、安定化剤、静細菌剤、懸濁化剤、増稠剤、および製剤を意図したレシピエントの血液（または他の関連する体液）と等張にする溶質を、さらに含有し得る。賦形剤の例としては、例えば水、アルコール、ポリオール、グリセロール、植物油などが挙げられる。そのような製剤において使用するための適切な等張性担体の例としては、塩化ナトリウム注射液、リンゲル液または乳酸加リンゲル注射液が挙げられる。典型的には、液体中の化合物の濃度は、約１ｎｇ／ｍｌ～約１０μｇ／ｍｌ、例えば約１０ｎｇ／ｍｌ～約１μｇ／ｍｌである。製剤は、単位用量型または多用量型の密閉容器、例えばアンプルおよびバイアルに入れて提示され得ると共に、使用直前に滅菌液状担体、例えば注射用水を添加するだけでよいフリーズドライ（凍結乾燥）状態で貯蔵され得る。即時注射溶液および即時注射懸濁液は、滅菌状態の粉末、顆粒および錠剤から調製され得る。

【0079】

本発明の組成物は経鼻投与に適した液状媒体を含むことができる。媒体は好ましくは水溶液である。より好ましくは、媒体は、増粘剤と、任意選択的に１つまたは複数の追加賦形剤、例えば製剤の安定性および／または投与時の快適性を改良するものとを含む、水溶液である。

【0080】

当技術分野では様々な増粘剤が知られている。増粘剤には、親水性ポリマー、例えば多糖、多糖誘導体、タンパク質および合成ポリマーが含まれる。例として、アラビアガム、トラガカントゴム、アルギン酸、カラギーナン、ローカストビーンガム、グアーガム、ゼラチン、ヒアルロン酸、ポリアクリラート、ポリアクリラート／アルキルアクリラートコポリマー、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、デンプン、アルギン酸ポリプロピレングリコール、マルトデキストリン、ならびにセルロースエーテル誘導体、例えばメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、およびカルボキシメチルセルロースが挙げられるが、これらに限定されない。可能である場合は、上記物質のいずれかの塩型が好ましい。好ましい増粘剤としては、ヒアルロン酸、例えばヒアルロン酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロース、例えばカルボキシメチルセルロースナトリウムおよびカルボキシメチルセルロースカルシウム、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ならびにヒドロキシプロピルセルロースが挙げられる。

【0081】

本組成物は、任意選択的に、１つまたは複数の追加賦形剤、例えば投与の容易さ、対象の快適さ、または組成物の安定性を高めるものを含む。適切な追加賦形剤としては、張性調節剤、例えば塩化ナトリウムおよびデキストロース、酸化防止剤、例えばブチル化ヒドロキシアニソール、緩衝剤、例えば重炭酸ナトリウム、クエン酸ナトリウムおよびリン酸ナトリウム、保存剤、例えば塩化ベンザルコニウム、エタノール、プロピレングリコール、ベンゾイルアルコール、フェネチルアルコール、クロロブタノールまたはメチルパラベン、ｐＨ調整剤、例えば塩酸、硫酸、水酸化ナトリウム、界面活性剤、例えばポリソルベート８０、ポリソルベート２０およびポリオキシル４００ステアラート（ｐｏｌｙｏｘｙｌ ４００ ｓｔｅａｒａｔｅ）、キレート剤、例えばＥＤＴＡ二ナトリウム、酸化防止剤、共溶媒、例えばエタノール、ＰＥＧ４００およびプロピレングリコール、浸透促進剤、例えばオレイン酸、および保水剤、例えばグリセリンが挙げられるが、これらに限定されない（Ｓ．Ｔｈｏｒａｔ，Ｓｃｈ．Ｊ．Ａｐｐ．Ｍｅｄ．Ｓｃｉ．２０１６，４（８Ｄ）：２９７６－２９８５、Ｄ．Ｍａｒｘ ｅｔ ａｌ．，ＩｎｔｅｃｈＯｐｅｎ，ＤＯＩ：１０．５７７２／５９４６８を参照されたい。これは、ｉｎｔｅｃｈｏｐｅｎ．ｃｏｍ／ｂｏｏｋｓ／ｄｒｕｇ－ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ－ａｎｄ－ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ－ｆｒｏｍ－ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ－ｔｏ－ｍｅｄｉｃｉｎｅ／ｉｎｔｒａｎａｓａｌ－ｄｒｕｇ－ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ－ａｎ－ａｔｔｒａｃｔｉｖｅ－ｄｅｌｉｖｅｒｙ－ｒｏｕｔｅ－ｆｏｒ－ｓｏｍｅ－ｄｒｕｇｓから入手可能である）。

【0082】

一実施形態において、媒体は、ヒアルロン酸ナトリウム、アロエベラ、アラントイン、塩化ナトリウム、重炭酸ナトリウム、グリセリン、プロピレングリコール、プロピレングリコール、塩化ベンザルコニウムおよびＵＳＰグレードの精製水からなる。適切な媒体は、ニールメッド（ＮＥＩＬＭＥＤ（商標））により、ナソジェル（ＮＡＳＯＧＥＬ（商標））という商標で販売されている。

【0083】

組成物中の活性作用物質の量は、例えば約０．５重量％から約２５重量％まで、変動することができる。

【0084】

製剤のｐＨは鼻腔内で許容され、好ましくは少なくとも約８．０である。本組成物において使用することができる緩衝剤としては、リン酸塩、トリス、［トリス（ヒドロキシメチル）メチルアミノ］プロパンスルホン酸、２－（ビス（２－ヒドロキシエチル）アミノ）酢酸、およびＮ－［トリス（ヒドロキシメチル）メチル］グリシン、およびアルカリ性バッファー（Ａｌｋａｌｉｎｅ Ｂｕｆｆｅｒ）（シーケム（Ｓｅａｃｈｅｍ））が挙げられるが、これらに限定されない。

【0085】

プロピレングリコール、グリセリン、ポリエチレングリコール、およびそれらの組合せからなる群より選択される水溶性溶媒を含む経鼻投与または肺投与に適した医薬組成物。本組成物は、多糖ガム、非イオン性界面活性剤、および保存剤のうちの１つまたは複数を、さらに含むことができる。例示的多糖ガムは菌核ガムである。例示的界面活性剤は、限定するわけではないがポロキサマー１８８などの、ポロキサマーである。保存剤は例えば塩化ベンザルコニウムであることができる。

【0086】

組成物は乾燥粉末であって、噴射剤に懸濁されて、乾燥粉末吸入器によって送達するか、または水性懸濁液もしくは水性溶液として、ネブライザーによって送達することができる。

【0087】

例えば活性作用物質と肺用賦形剤、例えばラクトースとの溶液または懸濁液を噴霧乾燥することで、肺または上部呼吸器系に送達するのに十分な微粒子画分を有する粒子を形成させることができる。あるいは、水性の溶液または懸濁液を超音波処理し、それによって、その溶液／懸濁液を、例えばネブライザーなどによって吸入することができる小滴サイズにエアロゾル化することができる。

【0088】

賦形剤には、炭水化物、例えば単糖、二糖および多糖が含まれる。例えば、デキストロース（無水物および一水和物）、ガラクトース、マンニトール、Ｄ－マンノース、ソルビトール、ソルボースなどの単糖、ラクトース、マルトース、スクロース、トレハロースなどの二糖、ラフィノースなどの三糖、デンプン（ヒドロキシエチルデンプン）、シクロデキストリンおよびマルトデキストリンなどの他の炭水化物。本発明での使用に適した他の賦形剤は、アミノ酸を含めて、ＷＯ９５／３１４７９、ＷＯ９６／３２０９６およびＷＯ９６／３２１４９に開示されているものなど、当技術分野では知られている。さらに、炭水化物とアミノ酸との混合物も、本発明の範囲内である。無機（例えば塩化ナトリウムなど）、有機の酸およびそれらの塩（例えばカルボン酸とそれらの塩、例えばクエン酸ナトリウム、アスコルビン酸ナトリウム、グルコン酸マグネシウム、グルコン酸ナトリウム、塩酸トロメタミンなど）と緩衝剤との両方を含めることも想定される。

【0089】

組成物は、乾燥粉末の形態でも、非水相を含む安定化分散系の形態でも使用され得る。したがって本発明の分散系または粉末は、効果的な薬物送達に備えるために、定量吸入器（ＭＤＩ）、乾燥粉末吸入器（ＤＰＩ）、噴霧器、ネブライザーまたは液体用量滴下注入（ｌｉｑｕｉｄ ｄｏｓｅ ｉｎｓｔｉｌｌａｔｉｏｎ）（ＬＤＩ）技法と一緒に使用され得る。吸入治療に関して、本発明の中空および多孔性微粒子がＤＰＩにおいて特に有用であることは、当業者には理解されるだろう。従来のＤＰＩは、粉末製剤と、予め決められた用量の医薬が、単独で、またはラクトース担体粒子と配合されて、乾燥粉末のエアロゾルとして、吸入のために送達されるデバイスとを含む。

【0090】

医薬は、ばらばらの粒子へと容易に分散して、粉末の空気力学的質量中央径が特徴的に約０．５～１０、好ましくは約０．５～５．０ミクロンＭＭＡＤの範囲になるような形で製剤化される。

【0091】

上で論じたように、本明細書に開示される安定化分散系は，エアロゾル化により、例えば定量吸入器を使って、患者の鼻腔または肺の気道に投与することもできる。ＭＤＩは当技術分野において周知であり、本願に係る分散系の投与に、過度の実験を行うことなく、容易に使用できるだろう。呼吸作動式ＭＤＩも、既に開発されたまたは今後開発される他のタイプの改良を含むものと共に、安定化分散系および本発明に適合するので、その範囲内にあると想定される。ただし、好ましい実施形態では、安定化分散系がＭＤＩにより、例えば限定するわけではないが局所、経鼻、肺または経口などといったいくつかの異なる経路を使って、投与され得ることは、強調しておきたい。そのような経路が周知であること、そして本発明の安定化分散系のために投薬および投与手順を容易に見いだし得ることは、当業者には理解されるだろう。

【0092】

上述の実施形態と共に、本発明の安定化分散系は、それを必要とする患者の肺気道に投与し得るエアロゾル化医薬を提供するために、ＰＣＴ ＷＯ９９／１６４２０に開示されているネブライザーと一緒に使用してもよく、前記国際公開の開示は、参照により、その全体が本明細書に組み込まれる。ネブライザーは当技術分野において周知であり、本願に係る分散系の投与に、過度の実験を行うことなく、容易に使用できるだろう。呼吸作動式ネブライザーも、既に開発されたまたは今後開発される他のタイプの改良を含むものと共に、安定化分散系および本発明に適合し、その範囲内にあると想定される。

【0093】

ＤＰＩ、ＭＤＩおよびネブライザーと共に、本発明の安定化分散系が、例えば参照によりその全体が本明細書に組み込まれるＷＯ９９／１６４２１に開示されている液体用量滴下注入技法、すなわちＬＤＩ技法と一緒に使用され得ることは、理解されるだろう。液体用量滴下注入では安定化分散系が肺に直接投与される。この点において、生物活性化合物の直接的肺投与は、とりわけ肺の疾患部分の血管循環不良が静脈内薬物送達の有効性を低減する障害の処置においては、特に有効である。ＬＤＩに関して、安定化分散系は、好ましくは、部分液体換気または全液体換気と併せて使用される。さらにまた、本発明は、治療上有益な量の生理学的に許容されるガス（一酸化窒素または酸素など）を、投与前、投与中または投与後に、薬学的マイクロ分散系に導入することを、さらに含み得る。

【0094】

使用方法
本発明には、感染症の処置または防止を必要とする対象において感染症を処置または防止するために本発明の組成物を使用する方法も含まれる。本方法は有効量の組成物を対象に投与する工程を含む。感染症は、消化管または上気道もしくは下気道の感染症、例えば普通感冒、インフルエンザ、呼吸器合胞体ウイルス感染症、重症急性呼吸器症候群、中東呼吸器症候群、ＣＯＶＩＤ－１９、または他の新興人畜共通感染症ウイルス、例えば人畜共通コロナウイルスによって引き起こされる疾患であることができる。特定の態様において、本発明の方法は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２（ＣＯＶＩＤ－１９）呼吸器感染症などのウイルス呼吸器感染症を処置する。

【0095】

一実施形態において、本発明は、ＳＡＲ－Ｃｏｖ－２変異株が引き起こす呼吸器感染症の処置を必要とする対象における同感染症を処置するための方法を提供する。複数の実施形態において、本方法は、有効量の式：（ペプチド－リンカー）_ｎ－Ｂ－疎水性部分［式中、各ペプチドは独立してＨＲＣペプチドまたは標的化ペプチドであり、ただし、少なくとも１つのペプチドはＨＲＣペプチドであるものとし、各リンカーは独立して二価の連結部分であり、Ｂは、システイン、Ｘ、および任意選択的にＹ、および／または任意選択的にＺを含む多価部分であり、ここで、Ｘ、ＹおよびＺは本明細書において定義され、ｎは１、２、３またはそれ以上から選択される整数である］を有する化合物を対象に投与することを含み、ここで、前記変異株は少なくとも５つの変異を含み、前記少なくとも５つの変異は、独立して、スパイクタンパク質Ｓ１サブユニットもしくはＳ２サブユニットまたはそれらの組合せ中にある。

【0096】

複数の実施形態において、化合物は、標的化ペプチドと１つ以上のＨＲＣペプチドとを含む。複数の実施形態において、標的化ペプチドはＡＣＥ２標的化ペプチドまたは受容体結合ドメインペプチドである。複数の実施形態において、疎水性部分はコレステロールである。

【0097】

複数の実施形態において、前記少なくとも５つの変異は、独立して、Ｎ末端ドメイン（ＮＴＤ）、受容体結合ドメイン（ＲＢＤ）、融合ペプチド（ＦＰ）ドメイン、７アミノ酸リピート１（ＨＲ１）ドメイン、またはそれらの組合せの中にある。複数の実施形態において、前記少なくとも５つの変異は、図３に列挙した変異から独立して選択される。

【0098】

複数の実施形態において、前記少なくとも５つの変異は、ＳＡＲ－Ｃｏｖ－２アルファ変異株由来の少なくとも５つの変異、ＳＡＲ－Ｃｏｖ－２ベータ変異株由来の少なくとも５つの変異、ＳＡＲ－Ｃｏｖ－２デルタ変異株由来の少なくとも５つの変異、またはＳＡＲ－Ｃｏｖ－２オミクロン変異株由来の少なくとも５つの変異から独立して選択される。複数の実施形態において、前記少なくとも５つの変異は、ＳＡＲ－Ｃｏｖ－２アルファ変異株由来の少なくとも５つの変異から独立して選択される。複数の実施形態において、前記少なくとも５つの変異は、ＳＡＲ－Ｃｏｖ－２ベータ変異株由来の少なくとも５つの変異から独立して選択される。複数の実施形態において、前記少なくとも５つの変異は、ＳＡＲ－Ｃｏｖ－２デルタ変異株由来の少なくとも５つの変異から独立して選択される。複数の実施形態において、前記少なくとも５つの変異は、ＳＡＲ－Ｃｏｖ－２オミクロン変異株由来の少なくとも５つの変異から独立して選択される。

【0099】

複数の実施形態において、変異株は少なくとも１０個の変異を含む。複数の実施形態において、変異株は少なくとも１５個の変異を含む。複数の実施形態において、変異株は少なくとも２０個の変異を含む。

【0100】

複数の実施形態において、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２変異株は、Ｂ．１．１．７（アルファ）、Ｂ．１．３５１（ベータ）、Ｐ．１（ガンマ）、Ｂ．１．６１７．２（デルタ）、Ｂ．１．４２９／Ｂ．１．４２７（イプシロン）、Ｂ．１．６１７．１（カッパ）、Ｂ．１．５２５（イータ）、Ｂ．１．５２６（イオタ）、Ｐ．３（シータ）、Ｐ．２（ゼータ）、およびＢ．１．１．５２９（オミクロン）から選択される少なくとも１つの変異株を含む。

【0101】

複数の実施形態において、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２変異株は、Ａ．１～Ａ．６、Ｂ．３～Ｂ．７、Ｂ．９、Ｂ．１０、Ｂ．１３～Ｂ．１６、Ｂ．２、Ｂ．１系統、Ｐ．１、Ｐ．２、Ｐ．３、およびＲ．１から選択される少なくとも１つの変異株を含む。

【0102】

複数の実施形態において、Ｂ．１系統は、限定するわけではないが、例えばＢ．１、Ｂ．１．１、Ｂ．１．１．７、Ｅ４８４Ｋを持つＢ．１．１．７、Ｂ．１．２、Ｂ．１．５～Ｂ．１．７２、Ｂ．１．９、Ｂ．１．１３、Ｂ．１．２２、Ｂ．１．２６、Ｂ．１．３７、Ｂ．１．３～Ｂ．１．６６、Ｂ．１．１７７、Ｂ．１．２４３、Ｂ．１．３１３、Ｂ．１．３５１、Ｂ．１．４２７、Ｂ．１．４２９、Ｂ．１．５２５、Ｂ．１．５２６、Ｂ．１．５２６．１、Ｂ．１．５２６．２、Ｂ．１．６１７、Ｂ．１．６１７．１、Ｂ．１．６１７．２、Ｂ．１．６１７．３、Ｂ．１．６１９、Ｂ．１．６２０、およびＢ．１．６２１のうちの少なくとも１つを含む。

【0103】

複数の実施形態において、投与は、鼻腔内スプレー、吸入器またはネブライザーを使って達成される。

【0104】

複数の実施形態において、化合物は、少なくとも１つの他の抗ウイルス活性剤または抗ウイルス治療と組み合わせて投与される。

【0105】

対象、好ましくはヒトは、感染症と診断された個体であることができ、症候性、前症候性、もしくは無症候性のいずれかであるか、または感染症を発症するリスクがある。例えば、対象は、ウイルス（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２またはその変異体）への直接的または間接的な曝露またはばく露の可能性ゆえに、例えば感染個体またはウイルス汚染媒介物へのばく露によって、ウイルス呼吸器感染症を発症するリスクがあり得る。対象は、ウイルス呼吸器感染症が特定された地域の住人または訪問者であることができ、例えば対象は感染者の家族であることができ、または対象は感染者の医療にあたる医療の場で働く人であることができる。一定の実施形態において、感染のリスクがある対象は無症候性であり、治療の開始前にウイルスの存在について陰性と判定されている。具体的実施形態において、対象には、例えば感染者の呼吸器飛沫またはエアロゾルからの、および／または汚染媒介物との接触による、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスへのばく露ゆえに、ＣＯＶＩＤ－１９を発症するリスクがあり得る。さらなる態様において、対象は、軽度、中等度または重度のＣＯＶＩＤ－１９を患っている対象を含めて、ＣＯＶＩＤ－１９を患っている。

【0106】

本発明方法の一定の実施形態において、対象は、感染症によって悪化し得る慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）または潰瘍性大腸炎などの別の疾患または状態を患っている。

【0107】

組成物は、好ましくは、対象が症候性になる前（例えば前症候性）に、または症状の発生時に、対象に投与される。組成物は、様々な投薬スケジュールで投与することができる。例えば組成物は、１回または複数回、１日または数日にわたって投与することができる。一定の実施形態において、組成物は、１～１０日にわたって、１日あたり１回または複数回投与される。一定の実施形態において、組成物は、対象が無症候性になるまで、および／またはウイルス検査が陰性になるまで、１日あたりに１回または複数回、投与される。

【0108】

組成物は、日常的な方法およびデバイスを使って、鼻道に投与することができる（Ｄ．Ｍａｒｘ ｅｔ ａｌ．，ＩｎｔｅｃｈＯｐｅｎ，ＤＯＩ：１０．５７７２／５９４６８参照。これはｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ｉｎｔｅｃｈｏｐｅｎ．ｃｏｍ／ｂｏｏｋｓ／ｄｒｕｇ－ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ－ａｎｄ－ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ－ｆｒｏｍ－ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ－ｔｏ－ｍｅｄｉｃｉｎｅ／ｉｎｔｒａｎａｓａｌ－ｄｒｕｇ－ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ－ａｎ－ａｔｔｒａｃｔｉｖｅ－ｄｅｌｉｖｅｒｙ－ｒｏｕｔｅ－ｆｏｒ－ｓｏｍｅ－ｄｒｕｇｓから入手可能である）。例えば組成物は、均一な計量された用量を提供することができるエアロゾルボトルまたは多用量型スプレーポンプなどを使って、液滴としてまたはエアロゾルスプレーとして、鼻道に投与することができる。投薬１回あたりの体積は様々であるが、典型的には約５０～約１５０μｌである。望ましい体積は、活性作用物質の望ましい用量と、組成物における活性作用物質の濃度とに依存するだろう。

【0109】

肺系または肺への送達が望まれる場合、活性作用物質の低濃度溶液を長時間にわたって、例えば一晩、エアロゾル化することが有効であり得る。

【0110】

併用治療
本明細書記載の化合物または組成物は、他の活性作用物質および治療と同時投与することができる。

【0111】

複数の実施形態において、前記他の活性作用物質には、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に対する抗体が含まれるが、それに限定されない。適切な抗体は、例えばＵＳ２０２２／００１７６０４、ＵＳ２０２２／００１７６１４、ＵＳ２０２１／０４０３５５０、ＵＳ２０２１／０３９５３４５、ＵＳ２０２１／０４０３５３７、ＵＳ２０２１／０３８８０６６、ＵＳ２０２１／０３８８０６５、ＵＳ２０２１／０３４７８５９またはＵＳ２０２１／０３０９７３３に記載されており、これらの文献は参照により本明細書に組み込まれる。複数の実施形態において、抗体は、モノクローナル抗体、例えばカシリビマブ、イムデビマブ、バムラニビマブまたはエテセビマブである。複数の実施形態において、抗体はモノクローナル抗体治療、例えばカシリビマブ＋イムデビマブ、バムラニビマブ、またはバムラニビマブ＋エテセビマブである。

【0112】

本発明の活性作用物質および組成物は、ウイルス感染症を持つ患者に提供される一般的医療、例えば非経口的流体（デキストロース生理食塩水および乳酸リンゲル液）および栄養、抗生物質（メトロニダゾールおよびセファロスポリン系抗生物質、例えばセフトリアキソンおよびセフロキシムを含む）ならびに／または抗ウイルス予防、解熱薬（例えばアセトアミノフェン）および鎮痛薬、制吐剤（メトクロプラミドなど）および／または止瀉薬、ビタミンおよびミネラルサプリメント（例えばビタミンＫおよび硫酸亜鉛）、抗炎症剤（イブプロフェンなど）、鎮痛薬、ならびに患者集団における他の一般的疾患のための薬物治療、例えばアルテメテル、アルテスナート－ルメファントリン併用治療、キノロン系抗生物質、例えばシプロフロキサシン、マクロライド系抗生物質、例えばアジスロマイシン、セファロスポリン系抗生物質、例えばセフトリアキソン、もしくはアミノペニシリン、例えばアンピシリン、または細菌性赤痢のための薬物治療と共に使用することも意図されている。

【0113】

併用治療は同時レジメンまたは逐次的レジメンとして投与され得る。逐次的に投与される場合、その組合せは２回以上の投与で投与され得る。

【0114】

本発明の化合物と１つまたは複数の他の活性治療剤との共投与とは、一般に、治療有効量の本発明化合物と１つまたは複数の他の活性治療剤とがどちらも患者の体内に存在することになるような形での、本発明の化合物と１つまたは複数の他の活性治療剤との同時投与または逐次投与を指す。

【0115】

共投与には、単位投薬量の１つまたは複数の他の活性治療剤を投与する前または投与した後の、単位投薬量の本発明化合物の投与、例えば１つまたは複数の他の活性治療剤の投与から数秒、数分または数時間以内の、本発明化合物の投与、および／または同じ処置レジメンの一部としての、単位投薬量の本発明化合物の投与が含まれる。例えば、単位用量の本発明化合物をまず投与し、続いて、数秒または数分または数日以内に、単位用量の１つまたは複数の他の活性治療剤の投与を行うことができる。あるいは、単位用量の１つまたは複数の他の治療剤をまず投与し、続いて、数秒または数分または数日以内に、単位用量の本発明化合物の投与を行うこともできる。いくつかの例では、単位用量の本発明化合物をまず投与し、次に、数時間（例えば１～１２時間）後に、単位用量の１つまたは複数の他の活性治療剤を投与することが望ましいだろう。別の例では、単位用量の１つまたは複数の他の活性治療剤をまず投与し、次に、数時間（例えば１～１２時間）後に、単位用量の本発明化合物を投与することが望ましいだろう。

【0116】

併用治療は「相乗作用」または「相乗効果」を与え得る。すなわち、活性成分を一緒に使用した場合に達成される効果は、それらの化合物を別々に使用した場合に得られる効果の和よりも大きい。

【0117】

本明細書において使用される場合、「ａ」および「ａｎ」という単語は、別段の指定がある場合を除き、１つまたは複数を包含するものとする。例えば「作用物質」（ａｎ ａｇｅｎｔ）という用語は、単一の作用物質および２つ以上の作用物質の組合せを包含する。

【0118】

本明細書において使用される「処置する」または「処置」という用語は、関心対象の疾患または状態（例えば呼吸器感染症）を有する哺乳動物、好ましくはヒトにおける前記関心対象の疾患または状態の処置に適用され、例えば、前記疾患または状態の発生が哺乳動物において起こるのを防止しまたは遅延させること、特にそのような哺乳動物が、前記疾患を発症するリスクを有するものの、まだ症候性にはなっていない場合および／またはまだその疾患を有するとは診断されていない場合；前記疾患または状態を阻害すること、すなわちその発症を停止させること；前記疾患または状態を軽減すること、すなわち前記疾患または状態の後退を引き起こすこと；および／または前記疾患または状態を安定化することが含まれる。処置には、疾患もしくは状態の症状の改善もしくは重症度の緩和、および／またはそれらの症状のさらなる進行もしくは悪化の阻害が含まれる。また、処置には、疾患または状態の時間経過および／または重症度を、その疾患の予想されるまたは過去の時間経過および／または重症度と比較して、短縮することも含まれる。

【0119】

本明細書において使用される場合、「防止する」という用語は、疾患または状態の臨床症状を発症させないことを意味し、ウイルス感染症にさらされる可能性またはウイルス感染症を起こしやすい可能性はあるが、その感染症の症状をまだ経験も呈示もしていない対象におけるウイルス感染症の発生を阻害することを含む。

【0120】

本明細書記載の化合物または組成物の「有効量」または「治療有効量」とは、特定の効果または結果を達成するのに十分な化合物の量、ならびに／または疾患もしくは状態および／もしくは症状を防止しもしくは処置し、その結果、例えばその障害もしくは状態に関連する症状を全体的もしくは部分的に緩和し、またはそれらの症状のさらなる進行もしくは悪化を止めもしくは遅くし、またはその障害もしくは状態を防止しもしくは予防を提供する化合物の量を指す。「有効量」および「治療有効量」には、具体的には、（単独での、または他の活性作用物質と組み合わされた）本発明化合物または本明細書記載の組成物の抗ウイルス量が含まれる。

【0121】

本発明は、その好ましい実施形態を参照して具体的に示され説明されてきたが、添付の特許請求の範囲によって包含される本発明の範囲から逸脱することなく、形態および詳細における様々な変更がなされ得ることは、当業者には理解されるだろう。

【0122】

本明細書において言及される特許および科学文献は、当業者に利用可能な知識を明らかにする。本明細書において引用される米国特許および公開または未公開の米国特許出願はすべて、参照により、本明細書に組み込まれる。本明細書において引用される公開された外国特許および外国特許出願はすべて、参照により、本明細書に組み込まれる。本明細書において引用される他の公開された参考文献、文書、原稿および科学文献はすべて、参照により、本明細書に組み込まれる。本明細書において引用されるすべての特許、公開された出願および参考文献の関連する教示は、参照により、その全体が本明細書に組み込まれる。

【0123】

例１
最適化されたＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２シュードタイプ化ウイルス中和アッセイ（ＰＮＡ）を使って、化合物を試験した。このシュードタイプ化ウイルス中和アッセイは、中和抗体の力価またはＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に対する分子の最大半量阻害濃度（ＩＣ５０）を定量するために使用される（図２）。シュードタイプ化ウイルス粒子は、糖タンパク質Ｇが除去された遺伝子改変水疱性口内炎ウイルス（ＶＳＶΔＧ）を使って作製される。様々なＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２コロナウイルス株（ＷＴ（武漢）、アルファ（Ｂ．１．１．７、英国）、ベータ（Ｂ．１．３５１、南アフリカ）またはガンマ（Ｐ．１、ブラジル）株）のスパイク糖タンパク質であって、その細胞質テールの最後の１９アミノ酸が除去されているもの（ΔＣＴ）が前もってトランスフェクトされているＨＥＫ２９３Ｔ細胞に、ＶＳＶΔＧウイルスが形質導入される。生成するシュード粒子（ＶＳＶΔＧ－スパイクΔＣＴ）は、相対ルミネセンス単位（ＲＬＵ）で定量することができるルシフェラーゼレポーターを含有する。

【0124】

２９３Ｔ／ＡＣＥ２標的細胞における一ラウンド感染アッセイを使って、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２シュードウイルスに対する中和活性を測定した。コドン最適化ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２完全長スパイク（６１４番目にＧを含有するもの）をコードするプラスミド、パッケージングプラスミドｐＣＭＶΔＲ８．２、およびルシフェラーゼレポータープラスミドｐＨＲ’ＣＭＶ－Ｌｕｃの共トランスフェクションにより、２９３Ｔ／１７細胞（ＡＴＣＣ）中で、シュードタイプ化ウイルス粒子を産生させた。野生型およびＢ．１．１．５２９（オミクロン）変異株のスパイクプラスミド、パッケージングプラスミドおよびルシフェラーゼプラスミドは、バーニー・グラハム（Ｂａｒｎｅｙ Ｇｒａｈａｍ）博士（ＮＩＨ、ワクチン研究センター）の厚意により提供された。Ｂ．１．３５１（ベータ）変異株およびＢ．１．６１７．２（デルタ）変異株のスパイクプラスミドは、ビン・チェン（Ｂｉｎｇ Ｃｈｅｎ）博士（チルドレンズ・ホスピタル（Ｃｈｉｌｄｒｅｎ’ｓ Ｈｏｓｐｉｔａｌ）、マサチューセッツ州ボストン）によって提供された。ヒトＡＣＥ２細胞表面受容体タンパク質を安定に過剰発現する２９３Ｔ細胞株は、マイケル・ファーザン（Ｍｉｃｈａｅｌ Ｆａｒｚａｎ）博士およびフィフィ・マ（Ｈｕｉｈｕｉ Ｍａ）博士（スクリプス研究所（Ｓｃｒｉｐｐｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ））の厚意により提供された。中和アッセイのために、ペプチドの段階希釈を２連で行い、次にシュードウイルスを添加した。回復期ＣＯＶＩＤ－１９患者由来のプール血清試料またはＰＢＳ／１０％ＤＭＳＯ希釈緩衝液を、それぞれ陽性対照および陰性対照として使用した。プレートを３７℃で１時間インキュベートしてから、２９３／ＡＣＥ２標的細胞（１×１０^４／ウェル）を加えた。細胞＋シュードウイルス（試料なし）を含有するウェル、または細胞だけを含有するウェルを、それぞれ陽性感染対照および陰性感染対照とした。プロメガ・ブライトグロー（Ｐｒｏｍｅｇａ ＢｒｉｇｈｔＧｌｏ）ルシフェラーゼ試薬を使って３日目にアッセイを回収し、プロメガ・グローマックス（Ｐｒｏｍｅｇａ ＧｌｏＭａｘ）ルミノメーターを使ってルミネセンスを検出した。力価は、５０％または８０％のウイルス感染を阻害したペプチドの濃度（それぞれＩＣ_５０力価およびＩＣ_８０力価）として報告されている。中和実験はすべて２回繰り返し、類似する結果を得た。

【0125】

シュードタイプ化ウイルス中和アッセイを使って、４つのＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２株（ＷＴ、アルファ、ベータおよびガンマ）に対する本発明化合物の阻害能を評価した。化合物を５μＭの出発濃度で試験し、９６ウェルプレートで、３つの異なる段階希釈スキーム、すなわち１０倍、５倍および３倍希釈に従って段階希釈した。化合物は最初にＤＭＳＯに再懸濁したので、アッセイに対する化合物の希釈剤効果に対処するために、ＤＭＳＯ溶液の３倍段階希釈（出発濃度０．０５２％ＤＭＳＯ）も、同じ株を使ったＰＮＡで試験した。予め決定された量の各シュードタイプ化ウイルス（およそ１，２００，０００ＲＬＵ／ウェルに相当）をプレートに適用し、希釈された化合物と共にインキュベートすることで、化合物をシュードタイプ化ウイルスに結合させた。アッセイの陽性対照も各プレートに含め、４つのスパイクシュードタイプ化ウイルス株すべてで試験した。この対照は、ＰＮＡ試験において日常的に使用される、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２スパイクタンパク質に対する中和抗体を含むヒト血清からなる。

【0126】

化合物／血清－シュードタイプ化ウイルス複合体のインキュベーション後に、Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞の９６ウェルプレートから培地を除去し、化合物－シュードタイプ化ウイルス複合体を細胞上に移した。試験プレートを３７℃、５％ＣＯ_２で終夜インキュベートした。インキュベーション後に、ルシフェラーゼ基質をＶｅｒｏＥ６細胞に加え、ルミネセンスを検出するプレートリーダーを使ってプレートを読み取った。放出される光の強度は、化合物の中和能のレベルに反比例する。次に、試験した武漢株およびスパイク変異株のすべての希釈液について、標準的な４パラメータロジスティックモデルを使って、化合物ＩＣ５０を計算した。１０倍段階希釈液について計算された最大半量阻害濃度（ＩＣ５０）および対応するＲ二乗値を表１に示す。ＷＴ、オミクロン、デルタ、およびベータに対するＥＫ１陽性対照のＩＣ５０は、それぞれ０．６２２μＭ、０．２４１μＭ、０．２４４μＭ、および０．５２７μＭだった（データ省略）。

【表1】

【表2-1】

【表2-2】

【0127】

例２－ハムスターにおけるＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に対する抗ウイルス治療薬候補の効力
この試験の目的は、ハムスターモデルにおいてＣＯＶＩＤ－１９の原因病原体であるＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に対する抗ウイルス治療薬候補としてのＤＣＯＹ１０１のインビボ効力を試験することであった。被験物質（ＴＡ）、すなわちＤＣＯＹ１０１、溶液および投薬を表３に規定する。バルク被験物質は、使用するまで、およそ－２０±５℃で保存し、光から保護した。被験物の投薬用製剤は投薬の開始時に調製し、小分けし、－２０±５℃で保存した。

【表3】

【0128】

実験計画（図７）に従い、表２に詳述するように、媒体または被験物質の投薬用製剤を、９日間（試験－２日目から６日目まで）にわたって、１日１回（Ｑ．ｄ．）、ハムスターに鼻腔内投与した。試験０日目には、以下の実験計画（図７）に従い、表２に詳述するように、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＢ．１．６１７．２を、５×１０^４ＴＣＩＤ_５０／匹を目標として、ハムスターに鼻腔内投与し、４±２時間後に、ＴＡで処置した。

【表4】

【0129】

実験エンドポイントは、瀕死／死亡の観察、体重および体重変化、臨床兆候の決定、肉眼的剖検、ＲＴ－ｑＰＣＲによる口腔スワブでのウイルス排出、ＴＣＩＤ_５０ウイルス力価による肺組織および鼻甲介におけるウイルス負荷、およびＲＴ－ｑＰＣＲによる肺におけるウイルスゲノムコピー数、および肺の組織病理分析からなった。

【0130】

いずれの死亡例もＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２疾患関連ではなかった。しかし、対照群の動物２匹が、投薬中に偶発的に死亡した。

【0131】

媒体に指定された対照群１の動物が平均－１０．５％の体重減少を呈したのに対して、処置群はすべて、試験の間は、最大でも群３で－１．１％であり、群２では＋３．４％の体重増加さえあった。図８。具体的には、－２日目には、どの群間にも差は認められなかった。－１日目に、１０ｍｇ／ｋｇという高用量の群２は、媒体対照群１と比較して、有意な（Ｐ≦０．０１８７、＊）体重減少を呈する（図９）。０日目に、ＤＣＯＹの用量が２番目に高い５ｍｇ／ｋｇである群３は、媒体対照群１と比較して、有意な（Ｐ≦０．０３１５、＊）体重減少を呈する（図９）。１日目は、高用量でのＴＡの投与に対して、どの群でも有意差は観察されなかった。２日目から４日目までの期間中は、低用量の群、Ｇ４－ＤＣＯＹ－２．５ｍｇ／ｋｇとＧ５－ＤＣＯＹ－１ｍｇ／ｋｇにおいて、わずかな差（＊）が一貫して示された。試験５日目～７日目の間は、従来にない薬物応答濃度において、強い有意差が観察された。媒体対照群１（平均体重変化は－１０．５％だった）と比較すると、高用量ＤＣＯＹ１０ｍｇ／ｋｇの群２（平均体重変化は＋３．４％だった）と低用量群ＤＣＯＹ１ｍｇ／ｋｇ（平均体重変化は＋０．９％だった）とが、最大の体重増加（＊＊＊、＊＊）を有する（図９）。

【0132】

１日目から７日目まで、ＲＴ－ｑＰＣＲによって分析したウイルスゲノムコピー数として、口腔スワブへのウイルス排出を推定した。排出プロファイルの要約を図１０に示す。１、４、５、６または７日目にはどの群にも統計学的差異がない。しかし２日目と３日目には有意な低減がある。対照群１と比較した場合、２日目に、群２は＊＊＊ Ｐ≦０．００１、群３は＊＊＊＊ Ｐ≦０．０００１、群４は＊＊＊ Ｐ≦０．００１および群５は＊＊＊＊ Ｐ≦０．０００１の低減を示した。３日目では、群３、群４および群５では低減は顕著でなかったが、群２は＊＊＊ Ｐ≦０．００１のままだった。（図１１）。

【0133】

肺試料からのＲＴ－ｑＰＣＲ力価は各群内で広く一貫した結果を示し、体重変化との逆相関に従う。左肺組織試料および口腔スワブから単離されたＲＮＡを使ってワンステップＲＴ－ｑＰＣＲを行うことで、ウイルスコピー数を推定した。簡単に述べると、Ｑｕｉｃｋ－ＲＮＡウイルスキット（Ｚｙｍｏ Ｒｅｓｅａｒｃｈ）を使って肺組織試料または口腔スワブ上清からＲＮＡを抽出し、ＲＮＡ／ＤＮＡシールド（ＲＮＡ／ＤＮＡ Ｓｈｉｅｌｄ）中で保存した。製造者のプロトコールに従い、ＢｌａｚｅＴａｑ Ｐｒｏｂｅ Ｏｎｅ－Ｓｔｅｐ ＲＴ－ｑＰＣＲキット（ＧｅｎｅＣｏｐｏｅｉａ、メリーランド州ロックビル）を使用し、単離されたＲＮＡをテンプレートとして、ＲＴ－ｑＰＣＲ分析を行った。以下のＲＴ－ｑＰＣＲサイクル条件を使用した：５０℃で１５分（ＲＴ）、９５℃で２分（変性）、次に、９５℃で１０秒に続いて６２℃で４５秒（伸長）を４０サイクル。ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の検出には以下のプライマーおよびプローブを使用した。

【表5】

【0134】

ウイルスコピー数を推定するために、試料を合成ＲＮＡによる標準曲線と比較した。７日目より２日目の方がウイルス量にばらつきがある。しかし図１２に示すように、収集した肺組織では、媒体対照群１と比較して、２日目と７日目はどちらにおいても、群２、３、４および５に有意差を伴う減少がある（ｎｓ Ｐ＞０．０５、＊ Ｐ≦０．０５、＊＊ Ｐ≦０．０１、＊＊＊ Ｐ≦０．００１）。

【0135】

２日目および７日目に、ＴＣＩＤ_５０アッセイによって、肺におけるウイルス量を推定した。２日目に、群２、３、４および５の動物は、群１（媒体対照）と比較した場合に、肺におけるウイルス量の蓄積に有意な低減を示したが（＊＊ Ｐ≦０．０１）、明らかな用量応答は示さなかった。これらの結果はＲＴ－ｑＰＣＲによって読み出された情報と合致する（図１３）。７日目には、群１、２、３、４または５のいずれにおいても、ＴＣＩＤ_５０アッセイでは感染性ウイルスはもはや検出されなかったが、ＲＴ－ｑＰＣＲでは残存ウイルスゲノムが少量ながら依然として検出されている。

【0136】

上気道の鼻甲介におけるウイルス量はＴＣＩＤ_５０によって評価した。この分析の結果は、２日目の力価が媒体対照群１では群２、３、４または５よりも高いことを示したが、この差は統計学的に有意ではなかった。７日目には、群１、２、３、４または５のいずれにおいても、ＴＣＩＤ_５０アッセイでは、感染性ウイルスが検出されなかった（図１４）。

【0137】

利用した用量とは無関係にＤＣ１０１で処置された動物の肺におけるウイルス量の顕著な低減と合致する体重減少の低減があったことに基づいて、この試験に関するデータは、ＤＣＯＹ１０１が、試験した条件下でハムスターモデルにおいて、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２関連表現型を低減し、疾患のピーク時に肺におけるウイルス力価を低減し、排出されるウイルス量を低減することを示唆している。

【0138】

例３－シリアンハムスターモデルにおけるＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に対するＤＣＯＹ１０１のばく露前予防（ＰｒＥＰ）効力とばく露後予防（ＰｅＰ）効力
この試験の目的は、ハムスターモデルにおいて、感染前または感染後の様々な時点において処置を開始した場合の、ＣＯＶＩＤ－１９の原因病原体であるＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に対する、ＤＣＯＹ１０１の効力を試験することであった。被験物質（ＴＡ）、すなわちＤＣＯＹ１０１、溶液および投薬を表６に規定する。バルク被験物質はスポンサーによって供給され、使用するまで、およそ－２０±５℃で保存され、光から保護された。被験物の投薬用製剤は投薬の開始時に調製し、小分けし、－２０±５℃で保存した。

【表6】

【0139】

実験計画（図１５）に従い、表５に詳述するように、媒体または被験物質の投薬用製剤を、９日間にわたって、１日１回（Ｑ．ｄ．）、ハムスターに鼻腔内投与した。試験０日目には、以下の実験計画（図１５）に従い、表５に詳述するように、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＢ．１．６１７．２を、５×１０^４ＴＣＩＤ_５０／匹を目標として、ハムスターに鼻腔内投与し、４±２時間後に、ＴＡで処置した。

【表7】

【0140】

実験エンドポイントは、瀕死／死亡の観察、体重および体重変化、臨床兆候の決定、肉眼的剖検、ＲＴ－ｑＰＣＲによる口腔スワブでのウイルス排出、ＴＣＩＤ_５０ウイルス力価による肺組織におけるウイルス負荷、およびＲＴ－ｑＰＣＲによる肺におけるウイルスゲノムコピー数、および肺の組織病理分析からなった。

【0141】

いずれの死亡例もＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２疾患関連ではなかった。

【0142】

媒体に指定された対照群１の動物が平均－１０．８４％の体重減少を呈したのに対して、処置群はすべて、最大でも群６に見られた－１．３９％のＢＷＬだった。群２（＋３．３１％）、３（＋２．０９％）および４（＋１．０２％）はいずれも試験の間に体重が増加した（図１６）。－２日目および－１日目は、どの群間でも差を示さなかった。１日目に、群２（Ｐ≦０．０２７２、＊）３（Ｐ≦０．００３８、＊＊）、４（Ｐ≦０．００７６、＊＊）、および６（Ｐ≦０．００１５、＊＊）はいずれも、媒体対照群１と比較して有意な体重減少を呈した（図１７）。２日目から４日目までは、５ｍｇ／ｋｇのＤＣＯＹ１０１をチャレンジの４８時間前に開始して６日目まで鼻腔内予防的抗ウイルス薬として投与した群２には、有意差（Ｐ≦０．００２９、＊＊；Ｐ≦０．０００３、＊＊＊；Ｐ＜０．０００１ ＊＊＊＊）が一貫して示された。試験５日目～７日目の間は、ばく露後群（群３～６）において、規範的な時間－応答曲線と合致する強い有意差が観察された。簡単に述べると、群２（前処置－４８時間）の平均体重増加は＋３．３１％だったのに対し、群６（後処置＋３６時間）の平均体重変化は－１．３９％だった。

【0143】

１日目から６日目まで、ＲＴ－ｑＰＣＲによって分析したウイルスゲノムコピー数として、口腔スワブへのウイルス排出を推定した。７日目のデータは、信頼性の欠如ゆえに、分析から除外した。排出プロファイルの要約を図１８に示す。対照群１については、とりわけ３日目に、多少の数値差はあるものの、１、２、３、４または６日目は、どの群にも統計学的差異は見いだされなかった。ただし、５日目は例外であり、この日は群４（ばく露前＋３６時間）が、対照群１と比較した場合に、有意な増加を示した（＊＊ Ｐ≦０．００３０）。１日ごとのＲＴ－ｑＰＣＲによる口腔スワブに関する詳しい情報を図１９に示す。

【0144】

簡単に述べると、肺試料からのＲＴ－ｑＰＣＲ（上記表４のプライマーを使用）力価は、とりわけばく露前処置（ＰｒＥＰ）では、多少の数値差を示したが、ここでも、有意差は見られなかった。ただし、図２０に示すように、７日目には、収集された肺組織に、媒体対照群１と比較して、群２（ＰｒＥＰ）、３（ＰＥＰ＋２）および５（ＰＥＰ＋２４）において、有意差を伴う減少がある（Ｐ≦０．００２８、＊＊；Ｐ≦０．００１７、＊＊およびＰ≦０．００１９、＊＊）。

【0145】

２日目および７日目に、ＴＣＩＤ_５０アッセイによって、肺におけるウイルス量を推定した。２日目には、多少の数値差があり、群２（ＰｒＥＰ）の動物の大部分（ｎ＝５／６）は検出限界未満の力価を示すが、１匹が他の値から異常な距離を有することで、群１（媒体対照）と比較した場合に、肺におけるウイルス量の蓄積に全体として有意でない低減をもたらした（図２１）。群４、５および６では、同じ現象が観察されて、６匹中２匹は、抗ウイルス効力と合致する低い力価を呈したが、すべての動物が同じ一貫性に従うわけではない。これらの結果はＲＴ－ｑＰＣＲによって読み出された情報と合致する。７日目には、どの群においても、ＴＣＩＤ_５０アッセイでは感染性ウイルスは検出されなかったが（図２１）、ＲＴ－ｑＰＣＲでは少量の残存ＲＮＡウイルスゲノムまたは断片が依然として検出されている（図２０）。

【0146】

体重減少の顕著な低減に基づいて、この試験におけるデータは、ばく露前またはチャレンジ後３６時間までのばく露後に、５ｍｇ／ｋｇで、５０μｌのＤＣＯＹ１０１を、６日間にわたって１日１回、ハムスターに鼻腔内投与することにより、媒体対照群Ｇ７と比較した場合の、２日目におけるＴＣＩＤ_５０による肺でのウイルス負荷の低減および７日目の肺におけるウイルスゲノムコピー数の低減によって示されるように、またそれほどではないが、３日目の口腔スワブ中のウイルスコピー数の低さによって示されるように、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のＢ．１．６１７．２変異株に対する部分的保護が付与されたことを示唆している。

【0147】

ＤＣＯＹ１０１は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２疾患の病理発生を低減するようであるが、試験した条件下では、ハムスターモデルにおいて、肺中のウイルス量に影響を及ぼすことも、ウイルス排出を低減することもないようである。

【0148】

例４－ベータココロナウイルス属（Ｂｅｔａｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ）に対する抗ウイルス化合物候補のインビトロでの効力
この試験の目的は、β－ＣｏＶであるＳＡＲＳ－ＣｏＶ－１、ＭＥＲＳ－ＣｏＶ、ＷＡ１、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のデルタおよびオミクロン変異株に対する、抗ウイルス治療薬候補としてのＤＣＯＹ１０１のインビトロ効力を試験することである。

【0149】

表７において被験物（ＴＡ）を識別する。

【表8】

【0150】

被験物を凍結乾燥粉末として用意し、表８のスキームに従って、ＤＭＳＯ中の１０ｍｇ／ｍｌ（または９６７．４９μＭ）保存濃度で希釈した。希釈後の被験物は１×培地（２％ＦＢＳを含む１×ＤＥＭＥ）に入れる。

【表9】

【0151】

用量依存的抗ウイルス効果を０．００５ＴＣＩＤ_５０／細胞の標的ＭＯＩで試験した。表９に列挙するように、アフリカミドリザル腎臓（Ｖｅｒｏ Ｅ６）細胞、ヒト上皮細胞（Ｃａｌｕ－３）、ヒト線維芽細胞（ＭＲＣ－５）、マカカ・ムラッタ（Ｍａｃａｃａ ｍｕｌａｔｔａ）アカゲザル腎臓細胞（ＬＬＣ－ＭＫ２）、または結腸直腸上皮腺癌ヒト細胞（Ｃａｃｏ－２）において、ウイルスを成長させ、力価を測定した。細胞は、１０％ウシ胎児血清と抗生物質とを含むダルベッコ最小必須培地中で維持した。効力アッセイでは、ＦＢＳを２％に低減させた。

【表10】

【0152】

各被験物について、前後処置レジメンを使って、抗ウイルス活性を決定した。コンフルエントなＶｅｒｏ Ｅ６細胞の単層に三連で加える前に、ＴＡをウイルスと混合して、６０±１０分間インキュベートした。次に、ＴＡ：ウイルスを前記細胞単層に加えて、６０～９０分間、ウイルスを吸着させた。この吸着に続いて、細胞を１×ＰＢＳまたは培地で洗浄し、ＴＡを含む１×培地で細胞の上を置き換えた。陽性対照化合物としてレムデシビル遊離塩基を並行して評価した。陰性対照としてＤＭＳＯを加えた細胞を並行して評価した。結果を図２２～２８に示す。

【0153】

本発明は、その好ましい実施形態を参照して具体的に示され説明されてきたが、添付の特許請求の範囲によって包含される本発明の範囲から逸脱することなく、形態および詳細における様々な変更がなされ得ることは、当業者には理解されるだろう。

【0154】

本明細書において言及される特許および科学文献は、当業者に利用可能な知識を明らかにする。本明細書において引用される米国特許および公開または未公開の米国特許出願はすべて、参照により、本明細書に組み込まれる。本明細書において引用される公開された外国特許および外国特許出願はすべて、参照により、本明細書に組み込まれる。本明細書において引用される他の公開された参考文献、文書、原稿および科学文献はすべて、参照により、本明細書に組み込まれる。本明細書において引用されるすべての特許、公開された出願および参考文献の関連する教示は、参照により、その全体が本明細書に組み込まれる。

【図1A】

【図1B】

【図1C】

【図1D】

【図1E】

【図1F】

【図1G】

【図1H】

【図1I】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9】

【図10】

【図11】

【図12】

【図13】

【図14】

【図15】

【図16】

【図17】

【図18】

【図19】

【図20】

【図21】

【図22】

【図23】

【図24】

【図25】

【図26】

【図27】

【図28】

【国際調査報告】