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特表2025-506506Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターと組み合わせたＣＡＲ細胞を用いた処置方法
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2025-03-11
(54)【発明の名称】Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターと組み合わせたＣＡＲ細胞を用いた処置方法
(51)【国際特許分類】
A61K 35/17 20250101AFI20250304BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20250304BHJP
A61K 45/00 20060101ALI20250304BHJP
A61P 35/00 20060101ALI20250304BHJP
A61P 35/02 20060101ALI20250304BHJP
A61K 47/68 20170101ALI20250304BHJP
A61K 39/395 20060101ALI20250304BHJP
A61K 31/137 20060101ALI20250304BHJP
A61K 31/661 20060101ALI20250304BHJP
C12N 5/0783 20100101ALI20250304BHJP
C12N 5/10 20060101ALN20250304BHJP
C07K 14/705 20060101ALN20250304BHJP
C07K 16/30 20060101ALN20250304BHJP
C07K 19/00 20060101ALN20250304BHJP
【ＦＩ】
A61K35/17
A61P43/00 121
A61K45/00
A61P35/00
A61P35/02
A61K47/68
A61K39/395 T
A61K31/137
A61K31/661
C12N5/0783
C12N5/10
C07K14/705
C07K16/30
C07K19/00
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2024547697
(86)(22)【出願日】2023-02-16
(85)【翻訳文提出日】2024-10-09
(86)【国際出願番号】 EP2023053857
(87)【国際公開番号】W WO2023156506
(87)【国際公開日】2023-08-24
(31)【優先権主張番号】22305171.5
(32)【優先日】2022-02-16
(33)【優先権主張国・地域又は機関】EP
(31)【優先権主張番号】22305781.1
(32)【優先日】2022-05-27
(33)【優先権主張国・地域又は機関】EP
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】523281412
【氏名又は名称】プリオセラ エスエーエス
(74)【代理人】
【識別番号】100092783
【弁理士】
【氏名又は名称】小林 浩
(74)【代理人】
【識別番号】100120134
【弁理士】
【氏名又は名称】大森 規雄
(74)【代理人】
【識別番号】100141195
【弁理士】
【氏名又は名称】西澤 恵美子
(72)【発明者】
【氏名】ダートスチニグ，シモーヌ
(72)【発明者】
【氏名】ブソー，フィリップ
(72)【発明者】
【氏名】ボウルチ，モルガーヌ
(72)【発明者】
【氏名】オーヘン，ステファン
【テーマコード（参考）】
4B065
4C076
4C084
4C085
4C086
4C087
4C206
4H045
【Ｆターム（参考）】
4B065AA90X
4B065AB01
4B065BA02
4B065CA24
4B065CA44
4C076AA95
4C076BB13
4C076CC27
4C076CC41
4C076EE59
4C084AA19
4C084NA05
4C084ZB261
4C084ZB271
4C084ZC412
4C084ZC751
4C085AA16
4C085BB01
4C085CC03
4C085CC31
4C085DD62
4C085EE03
4C085GG02
4C086AA01
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4C086DA34
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4C086MA04
4C086MA66
4C086NA05
4C086ZB02
4C086ZB26
4C086ZB27
4C086ZC75
4C087AA01
4C087AA02
4C087AA03
4C087BB37
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4C087CA16
4C087MA02
4C087MA66
4C087NA05
4C087ZB02
4C087ZB26
4C087ZB27
4C087ZC75
4C206AA01
4C206AA02
4C206FA08
4C206JA49
4C206KA01
4C206MA02
4C206MA04
4C206MA86
4C206NA05
4C206ZB02
4C206ZB26
4C206ZB27
4C206ZC75
4H045BA10
4H045BA41
4H045CA40
4H045DA75
4H045EA20
4H045FA74
(57)【要約】
本発明は、それを必要としている対象において、血液悪性腫瘍の処置において使用するためのＣＡＲ細胞組成物であって、前記ＣＡＲ細胞が、がん関連抗原と結合するキメラ抗原受容体分子を発現する免疫細胞であり、治療上有効な量のＣＡＲ細胞組成物を、治療上有効な量のＳ１Ｐ受容体モジュレーター、または薬学的に許容されるその塩もしくはそのリン酸誘導体と組み合わせて投与する、ＣＡＲ細胞組成物に関する。
【特許請求の範囲】
【請求項1】
それを必要としている対象において、血液悪性腫瘍の処置において使用するためのＣＡＲ細胞組成物であって、前記ＣＡＲ細胞が、がん関連抗原と結合するキメラ抗原受容体分子を発現する免疫細胞、好ましくは免疫Ｔ細胞であり、治療上有効な量の前記ＣＡＲ細胞組成物を、治療上有効な量のＳ１Ｐ受容体モジュレーターと組み合わせて投与する、ＣＡＲ細胞組成物。
【請求項2】
前記がん関連抗原が、ＣＤ１９、ＣＤ１２３、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ３８、ＬｅＹ、ＲＯＲ１、ＣＬＬ－１、ＢＣＭＡ、およびその組合せからなる群、好ましくはＣＤ１９から選択される、請求項１に記載の使用のための、ＣＡＲ細胞組成物。
【請求項3】
前記Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターが、モクラビモド、シポニモド、フィンゴリモド、オザニモド、ポネシモド、エトラシモド、ＡＫＰ－１１、セネリモド、アミセリモド、ＣＢＰ－３０７、ＯＰＬ－３０７、ＯＰＬ－００２、ＢＭＳ－９８６１６６、ＳＣＤ－０４４、ＢＯＳ－１７３７１７、ＣＰ－１０５０、好ましくはモクラビモドから選択される、請求項１または２に記載の使用のための、ＣＡＲ細胞組成物。
【請求項4】
前記Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターがＳ１Ｐ受容体アゴニストである、請求項３に記載の使用のための、ＣＡＲ細胞組成物。
【請求項5】
前記Ｓ１Ｐ受容体アゴニストが、以下の式（Ｉ）または（ＩＩ）または（ＩＩａ）または（ＩＩｂ）のもの：【化1】
Ｒ２は、Ｈ、ハロゲン、トリハロメチル、Ｃ１～４アルコキシ、Ｃ１～７アルキル、フェネチル、もしくはベンジルオキシであり、
Ｒ３は、Ｈ、ハロゲン、ＣＦ３、ＯＨ、Ｃ１～７アルキル、Ｃ１～４アルコキシ、ベンジルオキシ、フェニル、もしくはＣ１～４アルコキシメチルであり、
Ｒ４およびＲ５のそれぞれは、独立して、Ｈもしくは式（ａ）の残基：
【化2】
ｎは１～４の整数である］であり、
Ｒ６は、水素、ハロゲン、Ｃ１～７アルキル、Ｃ１～４アルコキシ、もしくはトリフルオロメチルである］、
または、
【化3】
または、
【化4】
【請求項6】
前記Ｓ１Ｐ受容体アゴニストが、モクラビモド、または薬学的に許容されるその塩もしくはそのリン酸誘導体である、請求項１から５のいずれか一項に記載の使用のための、ＣＡＲ細胞組成物。
【請求項7】
前記血液悪性腫瘍が、好ましくは、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）、縦隔原発Ｂ細胞性大細胞型リンパ腫（ＰＭＢＣＬ）、または多発性骨髄腫、より好ましくはＡＬＬ、ＤＬＢＣＬ、ＰＭＢＣＬ、およびＭＣＬ、さらにより好ましくはＤＬＢＣＬからなる群から選択される白血病および／またはリンパ腫である、請求項１から６のいずれか一項に記載の使用のための、ＣＡＲ細胞組成物。
【請求項8】
効率的な量のＣＡＲ細胞、好ましくはＣＡＲ－Ｔ細胞を、０．１×１０６～６×１０８個のＣＡＲ陽性生免疫細胞／体重１ｋｇの投薬量で投与する、請求項１から７のいずれか一項に記載の使用のための、ＣＡＲ細胞組成物。
【請求項9】
前記ＣＡＲ細胞、好ましくはＣＡＲ－Ｔ細胞を、リンパ枯渇化学療法の完了の２～１４日後に投与する、請求項１から８のいずれか一項に記載の使用のための、ＣＡＲ細胞組成物。
【請求項10】
前記Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターを、１日あたり０．０５ｍｇ～４０ｍｇ、好ましくは０．１ｍｇ～３５ｍｇ、より好ましくは０．５ｍｇ～３０ｍｇ、さらにより好ましくは１ｍｇ～１５ｍｇ、さらにより好ましくは１．５ｍｇ～７ｍｇ、さらにより好ましくは２ｍｇ～５ｍｇ、さらにより好ましくは約３ｍｇまたは約１ｍｇの投薬量で投与する、請求項１から９のいずれか一項に記載の使用のための、ＣＡＲ細胞組成物。
【請求項11】
前記Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターを、好ましくはＣＡＲ細胞を含む前記組成物を投与する１～２０日前、より好ましくはＣＡＲ細胞投与の１１日前の開始日から、少なくとも１、２、もしくは３カ月間、またはそれより長くの間、毎日投与する、請求項１から１０のいずれか一項に記載の使用のための、ＣＡＲ細胞組成物。
【請求項12】
前記Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターを、ＣＡＲ細胞が骨髄を去ることを防止する、ならびに／またはＣＡＲ細胞の生着および持続を促進する、ならびに／またはＣＡＲ細胞療法の有効性を増加させるために十分な量で投与する、請求項１から１１のいずれか一項に記載の使用のための、ＣＡＲ細胞組成物。
【請求項13】
使用するための前記Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターを、好ましくは自己または同系のＣＡＲ細胞を受けている対象において、サイトカイン放出症候群、特に全身性サイトカイン放出症候群の危険性を低下させるために十分な量で投与する、請求項１から１２のいずれか一項に記載の使用のための、ＣＡＲ細胞組成物。
【請求項14】
それを必要としている対象において、ＣＡＲ細胞療法（たとえば抗ＣＤ１９療法）でのサイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）および／またはマクロファージ活性化症候群（ＭＡＳ）および／または免疫エフェクター細胞関連神経毒性症候群（ＩＣＡＮＳ）の防止において使用するための、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターであって、前記使用が、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーター（たとえばモクラビモド）、または薬学的に許容されるその塩もしくはそのリン酸誘導体を、前記ＣＡＲ細胞療法と組み合わせて、前記対象に投与し、それによって、前記対象においてＣＲＳおよび／またはＭＡＳおよび／またはＩＣＡＮＳを防止することを含む、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーター。
【請求項15】
前記ＣＡＲ細胞療法が、ＣＡＲ－Ｔ細胞療法、好ましくは抗ＣＤ１９ＣＡＲ－Ｔ細胞療法である、請求項１４に記載のＳ１Ｐ受容体モジュレーター。【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、細胞免疫療法の分野に関し、より詳細には、それを必要としている対象において、血液悪性腫瘍の処置において、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターとの組合せ療法において使用するための、がん関連抗原と結合するキメラ抗原受容体分子を発現するＣＡＲ細胞を含む組成物に関する。
【背景技術】
【0002】
血液悪性腫瘍を有する多くの患者は、標準療法では不治である。さらに、従来の処置の選択肢は、しばしば重篤な副作用を有する。がん免疫療法を用いた試みがなされているが、いくつかの障壁により、これは、臨床的有効性を達成するために非常に困難な目的となっている。数百個のいわゆる腫瘍抗原が同定されているが、これらは一般に自己に由来しており、したがって免疫原性が乏しい。
【0003】
天然に存在する腫瘍反応性Ｔ細胞の存在は、がん患者の末梢血中および腫瘍内において十分に報告されている。しかし、Ｔ細胞は新生細胞を認識するが、その存在は多くの場合、臨床的腫瘍退縮を媒介するには不十分である。腫瘍は、免疫攻撃、特にＴ細胞媒介性応答を中和するまたは逃れるために、無数の機構を用いる。これらの機構としては、とりわけ、ＭＨＣ分子の発現の下方制御、または抗原のプロセシングおよび提示の装置の破壊が挙げられる。
【0004】
キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現するようにｅｘ ｖｉｖｏで改変させた自己免疫細胞の養子移入が、これらの障壁のうちの一部を回避するための新規治療ツールとして出現している。そのような手法は、そのような免疫エフェクター細胞を、血液悪性腫瘍などのがん細胞上の適切な細胞表面分子に向け直すことに依存する。たとえば、最近の臨床治験では、ＣＤ１９分子を標的とするＣＡＲ－Ｔ細胞が、Ｂ細胞白血病およびＢ細胞リンパ腫の処置において顕著な活性を示している（Maude et al., 2014; Neelapu et al., 2017; Schuster et al., 2017; Park et al., 2018）。これらの有望な結果にもかかわらず、循環腫瘍細胞は、骨髄へのＣＡＲ－Ｔ細胞輸送を強力に防止し、したがって、標的腫瘍細胞のＣＡＲ－Ｔ細胞媒介性の排除およびＣＡＲ細胞の持続の相当な障害物を表すことが見出されている（M. Cazaux et al.; J Exp Med 6 May 2019; 216 (5): 1038-1049. doi: https://doi.org/10.1084/jem.20182375）。したがって、遺伝子改変した免疫エフェクター細胞上のキメラ抗原受容体の、標的細胞を認識して破壊する能力以外に、成功した治療免疫エフェクター細胞療法は、白血病の再発を調査するために、増殖する、持続する、機能的に活性のまま保たれる、および時間とともに骨髄へと輸送される能力を有する必要がある。
【0005】
残念ながら、ＣＡＲ－Ｔ細胞療法は、様々な臓器に影響を与え、治療の成功を制限する、重篤な毒性を引き起こす場合もある（Brudno and Kochenderfer, Blood 127, 3321-3330 (2016)）。ＣＡＲ－Ｔ細胞は、腫瘍抗原認識の際に高度に活性化されており、これがサイトカイン放出を始動させる。この局所的サイトカインストームは、傍観者免疫細胞をさらに活性化させる場合があり、これはより多くの炎症性サイトカインを放出させ、高い全身性サイトカインレベルによって特徴づけられるサイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）病理学に寄与する。活性化された免疫細胞は末梢部位へと遊走し、組織において全身性炎症反応を引き起こす（Lee et al. Blood 2014 124(2):188-195）。
【0006】
最も劇的な応答率を有する臨床治験においてさえも、重篤な、生命を危うくする事象が患者において起こっている。具体的には、ＣＡＲ－Ｔ細胞療法で処置した急性リンパ芽球性白血病／リンパ腫（ＡＬＬ／ＬＢＬ）患者の事例では、ほぼすべての患者が、少なくともある程度の、重篤度がより低い毒性徴候を有する一方で、患者の２０～５０％が、重篤な超生理的なサイトカイン産生および大量のｉｎ－ｖｉｖｏ Ｔ細胞拡大を示した。一部の患者における、全身性サイトカイン放出および重篤な免疫細胞交差活性化のこれらの毒性があるレベルは、以下の毒性をもたらす：（１）超生理的なサイトカイン産生および大量のｉｎ ｖｉｖｏ Ｔ細胞拡大に関連する、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）、（２）ＣＲＳ、ならびに血清フェリチンの上昇と血球貪食、腎不全、肝酵素、脾腫大、肺水腫、および／またはＮＫ細胞活性の非存在との組合せによって特徴づけられる、重篤な過剰炎症症候群として定義される、血球貪食性リンパ組織球症および／またはマクロファージ活性化症候群（ＭＡＳ）、ならびに（３）脳脊髄液サイトカインレベルの上昇および血液脳関門の破壊によって特徴づけられる免疫エフェクター細胞関連神経毒性症候群（ＩＣＡＮＳ）（Sheth, V.S., Gauthier, J. Taming the beast: CRS and ICANS after CAR T-cell therapy for ALL. Bone Marrow Transplant 56, 552-566 (2021)）。
【0007】
ＣＡＲ－Ｔ細胞療法における別の課題は、たとえば、がん細胞悪性腫瘍における阻害および耐性、抗原逃避、限定的なＣＡＲ持続、乏しいＣＡＲ輸送、および腫瘍浸潤、ならびに免疫抑制性微小環境によって引き起こされた、血液がんに対する有効性の喪失である。たとえば、再発性および／または不応性ＡＬＬ患者の７０～９０％が、ＣＤ１９を標的としたＣＡＲ－Ｔ細胞療法に対して耐久性のある応答を示すが、最近の経過観察データは、処置後に再発性疾患を有する患者の３０～７０％におけるＣＤ１９抗原の下方制御／喪失を含む、共通の疾患耐性機構の発生を示唆している（Sterner, R.C., Sterner, R.M. CAR-T cell therapy: current limitations and potential strategies. Blood Cancer J. 11, 69 (2021)）。
【0008】
したがって、血液悪性腫瘍を標的とする改善された戦略の継続中の必要性が存在し、特に、ＣＡＲ療法を改善させるための新規組成物および方法が非常に望ましい。
【発明の概要】
【0009】
骨髄および／またはリンパ節などのリンパ組織内へのＣＡＲ－Ｔ細胞の隔離を促進することは、適切な微小環境下においてＣＡＲ－Ｔ細胞調節およびＣＡＲ－Ｔ機能的活性化を維持することの結果として、臨床上の利点を提供し得る。正常なＴ細胞では（Zinkernagel RM, Ehl S, Aichele P, Oehen S, Kundig T, Hengartner H. Antigen localisation regulates immune responses in a dose- and time-dependent fashion: a geographical view of immune reactivity. Immunol Rev. 1997 Apr;156:199-209.）、そのようなリンパ微小環境は、ＣＡＲ－Ｔ活性化、したがってＣＡＲ持続を拡張させるが、ＣＲＳおよびＩＣＡＮＳをもたらす場合がある免疫応答のオーバーシュートも調節すると予想される。さらに、末梢からのＣＡＲ－Ｔの隔離は、有害事象に関連する末梢組織の活性化および損傷を縮小させると予想される。ＦＴＹ７２０は、アロジェネイックＴボディの持続を増強させることが示されている（Marcus et al., Blood 2011;118(4):975-983）。さらに、ＣＡＲ細胞の隔離を促進することは、アロジェネイックＣＡＲ細胞療法におけるＧＶＨＤ発生の危険性を低下させ得る（Depil et al., Nature Reviews Drug Discovery 19, 185-199(2020)）。
【0010】
本発明を任意の特定の機構に限定せずに、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターと組み合わせたＣＡＲ細胞を含む組成物の記載した組合せは、ＣＡＲ細胞がリンパ組織を去ることを防止することによって、および／または殺滅モードのＣＡＲ細胞をさらに活性化させることによって、および／またはさらにがん細胞を直接殺滅することによって、相乗的な治療効果を提供し、その結果、ＣＡＲ細胞とＳ１Ｐ受容体モジュレーターとの組合せを与えた血液悪性腫瘍患者の、抗腫瘍有効性を改善させる、および／または再発を防止するはずであるため、本明細書中に記載した本発明はこの必要性を満たす。Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターによる、リンパ組織におけるＣＡＲ細胞の隔離は、自己細胞療法のすべてにおいて臨床的に観察される、ＣＡＲ細胞療法またはＩＣＡＮＳなどの他の有害事象の後に、ＣＲＳおよび／またはＭＡＳを制限する潜在性も有する。
【0011】
したがって、本開示は、少なくとも部分的に、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）分子を発現する免疫エフェクター細胞（たとえば、Ｔ細胞またはナチュラルキラー細胞（ＮＫ細胞））（たとえば、Ｂ細胞抗原、たとえばＣＤ１９と結合するＣＡＲ－）を使用して、がん（たとえば血液がんまたは他のＢ細胞悪性腫瘍）などの障害を処置する組成物および方法を提供する。
【0012】
本方法は、ＣＡＲ（たとえばＢ細胞を標的とするＣＡＲ）を発現する免疫エフェクター細胞（たとえばＴ細胞またはＮＫ細胞）を、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターと組み合わせて投与することを含む。一部の実施形態では、組合せは、どちらの療法単独と比較しても、ＣＡＲ－Ｔ機能的活性を維持する、より良好な臨床的有効性を有する、および／またはより低い毒性を有する（たとえばＣＲＳの防止が原因）。一部の実施形態では、対象は、ＣＲＳおよび／もしくはＭＡＳの危険性にあるもしくはそれを有する、または、対象は、ＣＲＳおよび／もしくはＭＡＳを発生する危険性を有するもしくは危険性にあると同定されている。一部の実施形態では、組合せは、ＣＡＲ細胞療法、特に血液悪性腫瘍を処置するためのＣＡＲ細胞療法の抗腫瘍有効性を改善または軽快させる。
【0013】
本開示は、前記がん関連抗原の前記発現に関連する血液がんを処置するために、がん関連抗原（たとえば本明細書中に記載のがん関連抗原、たとえばＣＤ１９）と結合するＣＡＲ分子を発現させるための操作した細胞、たとえば免疫エフェクター細胞（たとえばＴ細胞またはＮＫ細胞）の、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーター（たとえばモクラビモド）と組み合わせた使用にさらに関する。
【0014】
また、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーター（たとえばモクラビモド）とＣＡＲ発現細胞（たとえばＢ細胞を標的とするＣＡＲ発現細胞、たとえば抗ＣＤ１９ＣＡＲ細胞）との組合せを使用することによって、対象においてＣＲＳおよび／またはＭＡＳを防止するための組成物および方法も、本明細書中に提供される。
【0015】
また、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターとＣＡＲ発現細胞（たとえば、Ｂ細胞を標的とするＣＡＲ発現細胞、たとえばＣＤ１９ＣＡＲ発現細胞）との組合せを使用することによって、対象においてＣＲＳおよび／またはＭＡＳを防止するための組成物および方法も提供され、たとえば、対象は、ＣＲＳおよび／もしくはＭＡＳの危険性にあるもしくはそれを有する、または、対象は、ＣＲＳおよび／もしくはＭＡＳを発生する危険性を有するまたは危険性にあると同定されている。一態様では、抗原、たとえば本明細書中に記載のがん関連抗原の発現に関連する疾患を有する対象、たとえばヒトを処置する方法が、本明細書中に提供される。本方法は、対象に、有効量の、がん関連抗原（たとえば、本明細書中に記載のがん関連抗原、たとえばＣＤ１９）と結合するＣＡＲ分子を発現する細胞、たとえば免疫エフェクター細胞（たとえばＴ細胞またはＮＫ細胞）を、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーター、たとえばモクラビモドと組み合わせて投与することを含む。
【0016】
別の態様では、抗腫瘍免疫を、抗原、たとえばがん関連抗原、たとえば、本明細書中に記載のがん関連抗原の発現に関連する疾患を有する対象、たとえばヒトに提供する方法が、本明細書中に提供される。本方法は、対象に、有効量の、抗原（たとえば本明細書中に記載のがん関連抗原、たとえばＣＤ１９）と結合するＣＡＲ分子を発現する細胞、たとえば免疫エフェクター細胞（たとえばＴ細胞またはＮＫ細胞）を、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーター、たとえばモクラビモドと組み合わせて投与することを含む。
【0017】
別の態様では、それを必要としている対象において、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）、たとえば、ＣＡＲ療法（たとえば本明細書中に記載のＣＡＲ発現細胞）および／またはマクロファージ活性化症候群（ＭＡＳ）に関連するＣＲＳを処置および／または防止する方法であってＳ１Ｐ受容体モジュレーター（たとえばモクラビモド）を、ＣＡＲ細胞療法と組み合わせて、対象に投与し、それによって、対象においてＣＲＳおよび／またはＭＡＳを処置および／または防止することを含む方法が、本明細書中に提供される。
【0018】
別の態様では、それを必要としている対象において、ＣＡＲ療法（たとえば本明細書中に記載のＣＡＲ発現細胞）の有効性を増加させる方法であって、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーター（たとえばモクラビモド）を、ＣＡＲ細胞療法と組み合わせて、対象に投与し、それによって、殺滅モードのＣＡＲ発現細胞を活性化させ、および／またはがん細胞を直接殺滅し、したがって抗腫瘍効果を増加させることを含む方法が、本明細書中に提供される。
【0019】
実施形態では、対象は、ＣＲＳおよび／またはＭＡＳを発生する危険性にある、有する、または診断されている。実施形態では、対象は、ＣＡＲ細胞療法、たとえば本明細書中に記載のＣＡＲ発現細胞を投与されていた、投与されている、または投与される。
【0020】
実施形態では、本方法は、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターの投与のために対象を選択することを含む。実施形態では、対象は、（ｉ）そのＣＲＳおよび／もしくはＭＡＳを発生する危険性、（ｉｉ）そのＣＲＳおよび／もしくはＭＡＳの診断、ならびに／または（ｉｉｉ）対象がＣＡＲ細胞療法（たとえば本明細書中に記載のＣＡＲ細胞療法、たとえば抗ＣＤ１９ＣＡＲ細胞療法）を投与されていたか、投与されているか、または投与されるかどうかに基づいて選択する。
【0021】
実施形態では、対象が、ＣＲＳおよび／またはＭＡＳ、たとえば重篤（グレード３もしくは４）または重篤でないＣＲＳおよび／またはＭＡＳを診断された場合に、対象をＳ１Ｐ受容体モジュレーターの投与のために選択する。実施形態では、対象が、ＣＲＳおよび／またはＭＡＳを発生する危険性にある（たとえば危険性にあると同定された）場合に、対象をＳ１Ｐ受容体モジュレーターの投与のために選択する。実施形態では、対象が、ＣＡＲ細胞療法（たとえば本明細書中に記載のＣＡＲ細胞療法、たとえば抗ＣＤ１９ＣＡＲ細胞療法）を投与されていた、投与されている、または投与される場合に、対象をＳ１Ｐ受容体モジュレーターの投与のために選択する。
【0022】
したがって、一態様では、本開示は、それを必要としている対象において、血液悪性腫瘍の処置において使用するためのＣＡＲ細胞組成物を提供し、前記ＣＡＲ細胞は、がん関連抗原と結合するキメラ抗原受容体分子を発現する免疫細胞、好ましくはＴ細胞であり、治療上有効な量のＣＡＲ細胞組成物を、治療上有効な量のＳ１Ｐ受容体モジュレーターと組み合わせて投与する。
【0023】
別の態様では、本開示は、それを必要としている対象において、固形腫瘍がんからの転移性腫瘍、好ましくはリンパ器官転移、より好ましくはリンパ節転移の処置において使用するためのＣＡＲ細胞組成物を提供し、前記ＣＡＲ細胞は、がん関連抗原と結合するキメラ抗原受容体分子を発現する免疫細胞、好ましくはＴ細胞であり、治療上有効な量のＣＡＲ細胞組成物を、治療上有効な量のＳ１Ｐ受容体モジュレーターと組み合わせて投与する。
【0024】
別の態様では、治療上有効な量のＳ１Ｐ受容体モジュレーターは、治療上有効な量のＣＡＲ細胞組成物の投与の前または投与時に、投与する。
【0025】
別の態様では、ＣＡＲ細胞は、その投与の前に、有効量のＳ１Ｐ受容体モジュレーターまたはそのリン酸誘導体を用いて、ｅｘ ｖｉｖｏまたはｉｎ ｖｉｔｒｏで処理する。したがって、本開示はまた、それを必要としている対象において、血液悪性腫瘍の処置において使用するための、活性ＣＡＲ細胞組成物も提供し、前記ＣＡＲ細胞は、がん関連抗原と結合するキメラ抗原受容体分子を発現する免疫細胞、好ましくはＴ細胞であり、治療上有効な量の活性ＣＡＲ細胞組成物を前記対象に投与し、前記ＣＡＲ細胞は、有効量のＳ１Ｐ受容体モジュレーターまたはそのリン酸誘導体、たとえばモクラビモドを用いて、ｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｅｘ ｖｉｖｏで処理されている。
【0026】
別の態様では、本開示は、それを必要としている対象において、血液悪性腫瘍を処置するための医薬品の製造のための、ＣＡＲ細胞組成物の使用を提供し、前記ＣＡＲ細胞は、がん関連抗原と結合するキメラ抗原受容体分子を発現する免疫細胞、好ましくはＴ細胞であり、治療上有効な量のＣＡＲ細胞組成物を、治療上有効な量のＳ１Ｐ受容体モジュレーターと組み合わせて投与する。
【0027】
別の態様では、本開示は、血液悪性腫瘍を処置する方法であって、治療上有効な量のＣＡＲ細胞組成物を、治療上有効な量のＳ１Ｐ受容体モジュレーターと組み合わせて投与することを含む方法を提供し、前記ＣＡＲ細胞は、がん関連抗原と結合するキメラ抗原受容体分子（たとえばＣＤ１９）を発現する免疫細胞、好ましくは免疫Ｔ細胞である。
【0028】
一組の実施形態では、本方法は、
１）白血球除去を実施することによって、免疫細胞、たとえば免疫Ｔ細胞を、それを必要としているドナー対象から収集するステップ、
２）ドナー対象の免疫細胞を、がん関連抗原（たとえばＣＤ１９）と結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）分子を発現するように、ｅｘ ｖｉｖｏで遺伝子改変させ、それによってＣＡＲ細胞組成物を得るステップ、
３）たとえば、前記レシピエント対象を有効量のリンパ枯渇（lymphodepleting）化学療法剤で処置すること、または全身照射を行うことによって、前記レシピエント対象をコンディショニングするステップ、
４）治療上効率的な量のステップ２）で得られた前記ＣＡＲ細胞を含む組成物を、前記レシピエント対象に投与するステップ、
５）たとえばステップ４）の前または後に、レシピエント対象に、有効量のＳ１Ｐ受容体モジュレーター、好ましくは式ＩＩのモクラビモド、または式ＩＩａもしくはＩＩｂなどの薬学的に許容されるその塩もしくはそのリン酸誘導体を、好ましくはステップ４）の前に投与するステップ、
６）任意選択で、レシピエント対象に、有効量の１つまたは複数の免疫抑制剤を投与するステップ
を含む。
１）白血球除去を実施することによって、免疫細胞、たとえば免疫Ｔ細胞を、それを必要としているドナー対象から収集するステップ、
２）ドナー対象の免疫細胞を、がん関連抗原（たとえばＣＤ１９）と結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）分子を発現するように、ｅｘ ｖｉｖｏで遺伝子改変させ、それによってＣＡＲ細胞組成物を得るステップ、
３）たとえば、前記レシピエント対象を有効量のリンパ枯渇（lymphodepleting）化学療法剤で処置すること、または全身照射を行うことによって、前記レシピエント対象をコンディショニングするステップ、
４）治療上効率的な量のステップ２）で得られた前記ＣＡＲ細胞を含む組成物を、前記レシピエント対象に投与するステップ、
５）たとえばステップ４）の前または後に、レシピエント対象に、有効量のＳ１Ｐ受容体モジュレーター、好ましくは式ＩＩのモクラビモド、または式ＩＩａもしくはＩＩｂなどの薬学的に許容されるその塩もしくはそのリン酸誘導体を、好ましくはステップ４）の前に投与するステップ、
６）任意選択で、レシピエント対象に、有効量の１つまたは複数の免疫抑制剤を投与するステップ
を含む。
【0029】
別の態様では、本開示は、それを必要としている対象において、ＣＡＲ細胞療法（たとえば抗ＣＤ１９ＣＡＲ－Ｔ細胞療法）でのサイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）および／またはマクロファージ活性化症候群（ＭＡＳ）を防止するまたは低下させる方法であって、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーター（たとえばモクラビモド）、または薬学的に許容されるその塩もしくはそのリン酸誘導体を、ＣＡＲ細胞療法と組み合わせて、対象に投与し、それによって、対象においてＣＲＳおよび／またはＭＡＳを防止することを含む方法を提供する。
【0030】
別の態様では、本開示は、それを必要としている対象において、ＣＡＲ細胞療法（たとえば抗ＣＤ１９ＣＡＲ－Ｔ細胞療法）でのサイトカイン放出症候群の防止において使用するための、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターであって、使用が、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーター（たとえばモクラビモド）、または薬学的に許容されるその塩もしくはそのリン酸誘導体を、ＣＡＲ細胞療法と組み合わせて、対象に投与し、それによって、対象においてＣＲＳおよび／またはＭＡＳを防止することを含む、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターを提供する。
【0031】
別の態様では、本開示は、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーター（たとえばモクラビモド）、または薬学的に許容されるその塩もしくはそのリン酸誘導体を、ＣＡＲ細胞療法と組み合わせて、対象に投与し、それによって、対象においてＣＲＳおよび／またはマクロファージ活性化症候群を防止することを含む、それを必要としている対象において、ＣＡＲ細胞療法（たとえば抗ＣＤ１９ＣＡＲ－Ｔ細胞療法）でのサイトカイン放出症候群および／またはマクロファージ活性化症候群を防止するための医薬品の製造のための、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターの使用を提供する。
【0032】
本開示を、以下に概要を示す様々な態様において提供する。
【0033】
１．それを必要としている対象において、血液悪性腫瘍の処置において使用するためのＣＡＲ細胞組成物であって、前記ＣＡＲ細胞が、がん関連抗原と結合するキメラ抗原受容体分子を発現する免疫細胞、好ましくは免疫Ｔ細胞であり、治療上有効な量の前記ＣＡＲ細胞組成物を、治療上有効な量のＳ１Ｐ受容体モジュレーターと組み合わせて投与する、ＣＡＲ細胞組成物。
【0034】
２．前記がん関連抗原が、ＣＤ１９、ＣＤ１２３、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ３８、ＬｅＹ、ＲＯＲ１、ＣＬＬ－１、ＢＣＭＡ、およびその組合せからなる群、好ましくはＣＤ１９から選択される、実施形態１に記載の使用のための、ＣＡＲ細胞組成物。
【0035】
３．前記Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターが、モクラビモド、シポニモド、フィンゴリモド、オザニモド、ポネシモド、エトラシモド、ＡＫＰ－１１、セネリモド、アミセリモド、ＣＢＰ－３０７、ＯＰＬ－３０７、ＯＰＬ－００２、ＢＭＳ－９８６１６６、ＳＣＤ－０４４、ＢＯＳ－１７３７１７、ＣＰ－１０５０、好ましくはモクラビモドから選択される、実施形態１または２に記載の使用のための、ＣＡＲ細胞組成物。
【0036】
４．前記Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターがＳ１Ｐ受容体アゴニストである、実施形態３に記載の使用のための、ＣＡＲ細胞組成物。
【0037】
５．Ｓ１Ｐ受容体アゴニストが、以下の式（Ｉ）または（ＩＩ）または（ＩＩａ）または（ＩＩｂ）のもの：
【0038】
【化1】
Ｒ２は、Ｈ、ハロゲン、トリハロメチル、Ｃ１～４アルコキシ、Ｃ１～７アルキル、フェネチル、もしくはベンジルオキシであり、
Ｒ３は、Ｈ、ハロゲン、ＣＦ３、ＯＨ、Ｃ１～７アルキル、Ｃ１～４アルコキシ、ベンジルオキシ、フェニル、もしくはＣ１～４アルコキシメチルであり、
Ｒ４およびＲ５のそれぞれは、独立して、Ｈもしくは式（ａ）の残基：
【0039】
【化2】
ｎは１～４の整数である］であり、
Ｒ６は、水素、ハロゲン、Ｃ１～７アルキル、Ｃ１～４アルコキシ、もしくはトリフルオロメチルである］、
または、
【0040】
【化3】
または、
【0041】
【化4】
【0042】
６．Ｓ１Ｐ受容体アゴニストが、モクラビモド、または薬学的に許容されるその塩もしくはそのリン酸誘導体である、実施形態１から５のいずれか一項に記載の使用のための、ＣＡＲ細胞組成物。
【0043】
７．前記血液悪性腫瘍が白血病および／またはリンパ腫である、実施形態１から６のいずれか一項に記載の使用のための、ＣＡＲ細胞組成物。
【0044】
８．前記血液悪性腫瘍が、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）、縦隔原発Ｂ細胞性大細胞型リンパ腫（ＰＭＢＣＬ）、または多発性骨髄腫、好ましくはＡＬＬ、ＤＬＢＣＬ、ＰＭＢＣＬ、およびＭＣＬ、より好ましくはＤＬＢＣＬからなる群から選択される、実施形態１から７のいずれか一項に記載の使用のための、ＣＡＲ細胞組成物。
【0045】
９．効率的な量のＣＡＲ細胞、好ましくはＣＡＲ－Ｔ細胞を、０．１×１０６～６×１０８個のＣＡＲ陽性生（viable）免疫細胞／体重１ｋｇの投薬量（dosage）で投与する、実施形態１から８のいずれか一項に記載の使用のための、ＣＡＲ細胞組成物。
【0046】
１０．前記ＣＡＲ細胞、好ましくはＣＡＲ－Ｔ細胞を、リンパ枯渇化学療法の完了の２～１４日後に投与する、実施形態１から９のいずれか一項に記載の使用のための、ＣＡＲ細胞組成物。
【0047】
１１．前記Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターを、１日あたり０．０５ｍｇ～４０ｍｇ、好ましくは０．１ｍｇ～３５ｍｇ、より好ましくは０．５ｍｇ～３０ｍｇ、さらにより好ましくは１ｍｇ～１５ｍｇ、さらにより好ましくは１．５ｍｇ～７ｍｇ、さらにより好ましくは２ｍｇ～５ｍｇ、さらにより好ましくは約３ｍｇまたは約１ｍｇの投薬量で投与する、実施形態１から１０のいずれか一項に記載の使用のための、ＣＡＲ細胞組成物。
【0048】
１２．前記Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターを、好ましくはＣＡＲ細胞を含む前記組成物を投与する１～２０日前、より好ましくはＣＡＲ細胞投与の１１日前の開始日から、少なくとも１、２、もしくは３カ月間、またはそれより長くの間、毎日投与する、実施形態１から１１のいずれか一項に記載の使用のための、ＣＡＲ細胞組成物。
【0049】
１３．前記Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターを、ＣＡＲ細胞が骨髄を去ること（leaving）を防止する、ならびに／またはＣＡＲ細胞の生着（engraftment）および持続（persistence）を促進する、ならびに／またはＣＡＲ細胞療法の有効性を増加させるために十分な量で投与する、実施形態１から１２のいずれか一項に記載の使用のための、ＣＡＲ細胞組成物。
【0050】
１４．治療上有効な量のＣＡＲ細胞組成物、好ましくは自己（autologous）または同系（syngeneic）のＣＡＲ細胞を、治療上有効な量のＳ１Ｐ受容体モジュレーターと組み合わせて投与することを含み、前記ＣＡＲ細胞が、がん関連抗原と結合するキメラ抗原受容体分子を発現する免疫細胞である、それを必要としている対象において、血液悪性腫瘍を処置する方法。
【0051】
１５．前記ＣＡＲ細胞が、ＣＡＲ－Ｔ細胞、好ましくは抗ＣＤ１９ＣＡＲ－Ｔ細胞である、実施形態１４に記載の方法。
【0052】
１６．対象の末梢血中のＣＡＲ細胞の数が、７、好ましくは１４日間のＳ１Ｐ受容体モジュレーター処置の後に、フローサイトメトリーによって測定して、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーター処置なしで測定した数と比較して、約１％～約４０％、好ましくは約１０％～約３０％低下している、実施形態１４または１５に記載の方法。
【0053】
１７．
１）白血球除去を実施することによって、免疫細胞、たとえば免疫Ｔ細胞をドナー対象から収集するステップ、
２）ドナー対象の免疫細胞を、がん関連抗原と結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）分子を発現するように、ｅｘ ｖｉｖｏで遺伝子改変させ、それによってＣＡＲ細胞組成物を得るステップ、
３）たとえば、前記レシピエント対象を有効量のリンパ枯渇化学療法剤で処置することによって、または全身照射を行うことによって、前記レシピエント対象をコンディショニングするステップ、
４）治療上効率的な量のステップ２）で得られた前記ＣＡＲ細胞を含む組成物を、前記レシピエント対象に投与するステップ、
５）レシピエント対象に、有効量のＳ１Ｐ受容体モジュレーター、好ましくはモクラビモド、または薬学的に許容されるその塩もしくはそのリン酸誘導体を投与するステップ、
６）任意選択で、レシピエント対象に、有効量の１つまたは複数の免疫抑制剤を投与するステップ
を含む、実施形態１４から１６のいずれか一項に記載の方法。
１）白血球除去を実施することによって、免疫細胞、たとえば免疫Ｔ細胞をドナー対象から収集するステップ、
２）ドナー対象の免疫細胞を、がん関連抗原と結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）分子を発現するように、ｅｘ ｖｉｖｏで遺伝子改変させ、それによってＣＡＲ細胞組成物を得るステップ、
３）たとえば、前記レシピエント対象を有効量のリンパ枯渇化学療法剤で処置することによって、または全身照射を行うことによって、前記レシピエント対象をコンディショニングするステップ、
４）治療上効率的な量のステップ２）で得られた前記ＣＡＲ細胞を含む組成物を、前記レシピエント対象に投与するステップ、
５）レシピエント対象に、有効量のＳ１Ｐ受容体モジュレーター、好ましくはモクラビモド、または薬学的に許容されるその塩もしくはそのリン酸誘導体を投与するステップ、
６）任意選択で、レシピエント対象に、有効量の１つまたは複数の免疫抑制剤を投与するステップ
を含む、実施形態１４から１６のいずれか一項に記載の方法。
【0054】
１８．前記リンパ枯渇化学療法剤が、メルファラン、シタラビン、エトポシド、ブスルファン、ベンダムスチン、シクロホスファミド、フルダラビン、デキサメタゾン、およびアレムツズマブ、ならびにフルダラビン／シクロホスファミド、シタラビン／エトポシドの組合せ投与などのその組合せからなる群から選択される、実施形態１７に記載の方法。
【0055】
１９．ステップ３）のコンディショニングレジメンが、
－フルダラビンおよびシクロホスファミドの投与、または
－シタラビンおよびエトポシドの投与、または
－ベンダムスチンの投与
からなる、実施形態１６に記載の方法。
－フルダラビンおよびシクロホスファミドの投与、または
－シタラビンおよびエトポシドの投与、または
－ベンダムスチンの投与
からなる、実施形態１６に記載の方法。
【0056】
２０．ＣＡＲ細胞、好ましくはＣＡＲ－Ｔ細胞、より好ましくは抗ＣＤ１９ＣＡＲ－Ｔ細胞を、０．１×１０６～６×１０８個のＣＡＲ陽性生免疫細胞／体重１ｋｇの投薬量で投与する、実施形態１４から１９のいずれか一項に記載の方法。
【0057】
２１．ＣＡＲ細胞、好ましくはＣＡＲ－Ｔ細胞、より好ましくは抗ＣＤ１９ＣＡＲ－Ｔ細胞を、リンパ枯渇化学療法の完了の２～１４日後に投与する、実施形態１４から２０のいずれか一項に記載の方法。
【0058】
２２．前記がん関連抗原が、ＣＤ１９、ＣＤ１２３、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ３８、ＬｅＹ、ＲＯＲ１、ＣＬＬ－１、ＢＣＭＡ、好ましくはＣＤ１９からなる群から選択される、実施形態１４から２１のいずれか一項に記載の方法。
【0059】
２３．前記Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターが、モクラビモド、シポニモド、フィンゴリモド、オザニモド、ポネシモド、エトラシモド、ＡＫＰ－１１、セネリモド、アミセリモド、ＣＢＰ－３０７、ＯＰＬ－３０７、ＯＰＬ－００２、ＢＭＳ－９８６１６６、ＳＣＤ－０４４、ＢＯＳ－１７３７１７、ＣＰ－１０５０、好ましくはモクラビモドから選択される、実施形態１４から２２のいずれか一項に記載の方法。
【0060】
２４．前記Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターがＳ１Ｐ受容体アゴニストである、実施形態２３に記載の方法。
２５．Ｓ１Ｐ受容体アゴニストが、以下の式（Ｉ）または（ＩＩ）または（ＩＩａ）または（ＩＩｂ）のもの：
２５．Ｓ１Ｐ受容体アゴニストが、以下の式（Ｉ）または（ＩＩ）または（ＩＩａ）または（ＩＩｂ）のもの：
【0061】
【化5】
Ｒ２は、Ｈ、ハロゲン、トリハロメチル、Ｃ１～４アルコキシ、Ｃ１～７アルキル、フェネチル、もしくはベンジルオキシであり、
Ｒ３は、Ｈ、ハロゲン、ＣＦ３、ＯＨ、Ｃ１～７アルキル、Ｃ１～４アルコキシ、ベンジルオキシ、フェニル、もしくはＣ１～４アルコキシメチルであり、
Ｒ４およびＲ５のそれぞれは、独立して、Ｈもしくは式（ａ）の残基：
【0062】
【化6】
ｎは１～４の整数である］であり、
Ｒ６は、水素、ハロゲン、Ｃ１～７アルキル、Ｃ１～４アルコキシ、もしくはトリフルオロメチルである］、
または、
【0063】
【化7】
または、
【0064】
【化8】
【0065】
２６．Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターが、モクラビモド、または薬学的に許容されるその塩もしくはそのリン酸誘導体である、実施形態１４から２５のいずれか一項に記載の方法。
【0066】
２７．前記Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターを、１日あたり０．０５ｍｇ～４０ｍｇ、好ましくは０．１ｍｇ～３５ｍｇ、より好ましくは０．５ｍｇ～３０ｍｇ、さらにより好ましくは１ｍｇ～１５ｍｇ、さらにより好ましくは１．５ｍｇ～７ｍｇ、さらにより好ましくは２ｍｇ～５ｍｇ、さらにより好ましくは約３ｍｇまたは約１ｍｇの投薬量で投与する、実施形態１４から２６のいずれか一項に記載の方法。
【0067】
２８．前記Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターが、モクラビモド、または薬学的に許容されるその塩もしくはそのリン酸誘導体であり、前記モクラビモドが固体剤形として配合され、前記固体剤形が、
－１ｍｇ／単位のモクラビモド、または薬学的に許容されるその塩もしくはそのリン酸誘導体、
－好ましくは４８～８８ｍｇ／単位の含有量、より好ましくは５８～７８ｍｇ／単位、さらにより好ましくは約６８ｍｇ／単位の含有量のマンニトール、
－好ましくは５～４５ｍｇ／単位の含有量、より好ましくは１５～３５ｍｇ／単位、さらにより好ましくは約２５ｍｇ／単位の含有量の微結晶セルロース、
－好ましくは１～８ｍｇ／単位の含有量、より好ましくは２～６ｍｇ／単位、さらにより好ましくは約４ｍｇ／単位の含有量のデンプングリコール酸ナトリウム、
－好ましくは０．０２５～４ｍｇ／単位の含有量、より好ましくは０．５～２ｍｇ／単位、さらにより好ましくは約１ｍｇ／単位の含有量のステアリン酸マグネシウム、および
－好ましくは０．１２５～２ｍｇ／単位の含有量、より好ましくは０．２５～１ｍｇ／単位、さらにより好ましくは約０．５ｍｇ／単位の含有量のコロイド状二酸化ケイ素
を含む、実施形態１４から２７のいずれか一項に記載の方法。
－１ｍｇ／単位のモクラビモド、または薬学的に許容されるその塩もしくはそのリン酸誘導体、
－好ましくは４８～８８ｍｇ／単位の含有量、より好ましくは５８～７８ｍｇ／単位、さらにより好ましくは約６８ｍｇ／単位の含有量のマンニトール、
－好ましくは５～４５ｍｇ／単位の含有量、より好ましくは１５～３５ｍｇ／単位、さらにより好ましくは約２５ｍｇ／単位の含有量の微結晶セルロース、
－好ましくは１～８ｍｇ／単位の含有量、より好ましくは２～６ｍｇ／単位、さらにより好ましくは約４ｍｇ／単位の含有量のデンプングリコール酸ナトリウム、
－好ましくは０．０２５～４ｍｇ／単位の含有量、より好ましくは０．５～２ｍｇ／単位、さらにより好ましくは約１ｍｇ／単位の含有量のステアリン酸マグネシウム、および
－好ましくは０．１２５～２ｍｇ／単位の含有量、より好ましくは０．２５～１ｍｇ／単位、さらにより好ましくは約０．５ｍｇ／単位の含有量のコロイド状二酸化ケイ素
を含む、実施形態１４から２７のいずれか一項に記載の方法。
【0068】
２９．前記Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターを、好ましくはＣＡＲ細胞を含む前記組成物を投与する１～２０日前、より好ましくは前記免疫細胞を投与する１１日前の開始日から、少なくとも１、２、３カ月間、またはそれより長く、毎日投与する、実施形態１４から２８のいずれか一項に記載の方法。
【0069】
３０．前記血液悪性腫瘍が白血病および／またはリンパ腫である、実施形態１４から２９のいずれか一項に記載の方法。
【0070】
３１．前記血液悪性腫瘍が、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、急性リンパ性白血病ＡＬＬ、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）、縦隔原発Ｂ細胞性大細胞型リンパ腫（ＰＭＢＣＬ）、または多発性骨髄腫、好ましくはＡＬＬ、ＤＬＢＣＬ、ＰＭＢＣＬ、およびＭＣＬ、より好ましくはＤＬＢＣＬからなる群から選択される、実施形態１４から３０のいずれか一項に記載の方法。
【0071】
３２．前記１つまたは複数の免疫抑制剤が、シクロスポリンＡ、シロリムス、タクロリムス、メトトレキサート、およびミコフェノレート（mycophenolate）、好ましくはシクロスポリンＡ、またはシクロスポリンＡとメトトレキサートとの組合せからなる群から選択される、実施形態１４から３１のいずれか一項に記載の方法。
【0072】
３３．前記Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターを、ＣＡＲ細胞が髄を去ることを防止する、ならびに／またはＣＡＲ細胞の生着および持続を促進する、ならびに／またはＣＡＲ細胞療法の有効性を増加させるために十分な量で投与する、実施形態１４から３２のいずれか一項に記載の方法。
【0073】
３４．前記Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターを、ＣＡＲ細胞を受けている対象において、サイトカイン放出症候群、特に全身性サイトカイン放出症候群の危険性を低下させるために十分な量で投与する、実施形態１４から３３のいずれか一項に記載の方法。
【0074】
３５．前記ＣＡＲ細胞のドナー対象がレシピエント対象である、実施形態１４から３４のいずれか一項に記載の方法。
【0075】
３６．前記ＣＡＲ細胞のドナー対象がレシピエント対象ではない、実施形態１４から３４のいずれか一項に記載の方法。
【0076】
３７．前記Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターを、ＧＶＨＤの危険性を低下させるために十分な量で投与する、実施形態３６に記載の方法。
【0077】
３８．Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターを、神経炎症、たとえば免疫エフェクター細胞関連神経毒性症候群（ＩＣＡＮＳ）の危険性を低下させるために十分な量で投与する、実施形態１４から３６のいずれか一項に記載の方法。
【0078】
３９．それを必要としている対象において、ＣＡＲ細胞療法（たとえば抗ＣＤ１９療法）でのサイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）および／またはマクロファージ活性化症候群（ＭＡＳ）および／または免疫エフェクター細胞関連神経毒性症候群（ＩＣＡＮＳ）を防止する方法であって、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーター（たとえばモクラビモド）を、ＣＡＲ細胞療法と組み合わせて、対象に投与し、それによって、対象においてＣＲＳおよび／またはＭＡＳおよび／またはＩＣＡＮＳを防止することを含む方法。
【0079】
４０．それを必要としている対象において、ＣＡＲ療法（たとえば抗ＣＤ１９療法）の抗腫瘍有効性を増加させる方法であって、有効量のＳ１Ｐ受容体モジュレーター（たとえばモクラビモド）を、ＣＡＲ細胞療法と組み合わせて、対象に投与し、それによってＣＡＲ発現細胞を活性化させるおよび／またはがん細胞を直接殺滅し、したがって、前記ＣＡＲ療法の抗腫瘍有効性を増加させることを含む方法。
【0080】
４１．前記ＣＡＲ細胞療法が、ＣＡＲ－Ｔ細胞療法、好ましくは抗ＣＤ１９ＣＡＲ－Ｔ細胞療法である、実施形態３９または４０に記載の方法。
【0081】
４２．
１）白血球除去を実施することによって、免疫細胞、たとえば免疫Ｔ細胞をドナー対象から収集するステップ、
２）ドナー対象の免疫細胞を、がん関連抗原と結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）分子を発現するように、ｅｘ ｖｉｖｏで遺伝子改変させ、それによってＣＡＲ細胞組成物を得るステップ、
３）たとえば、前記レシピエント対象を有効量のリンパ枯渇化学療法剤で処置することによって、または全身照射を行うことによって、前記レシピエント対象をコンディショニングするステップ、
４）治療上効率的な量のステップ２）で得られた前記ＣＡＲ細胞を含む組成物を、前記レシピエント対象に投与するステップ、
５）レシピエント対象に、有効量のＳ１Ｐ受容体モジュレーター、好ましくはモクラビモド、または薬学的に許容されるその塩もしくはそのリン酸誘導体を投与するステップ、
６）任意選択で、レシピエント対象に、有効量の１つまたは複数の免疫抑制剤を投与するステップ
を含む、実施形態３９から４１のいずれか一項に記載の方法。
１）白血球除去を実施することによって、免疫細胞、たとえば免疫Ｔ細胞をドナー対象から収集するステップ、
２）ドナー対象の免疫細胞を、がん関連抗原と結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）分子を発現するように、ｅｘ ｖｉｖｏで遺伝子改変させ、それによってＣＡＲ細胞組成物を得るステップ、
３）たとえば、前記レシピエント対象を有効量のリンパ枯渇化学療法剤で処置することによって、または全身照射を行うことによって、前記レシピエント対象をコンディショニングするステップ、
４）治療上効率的な量のステップ２）で得られた前記ＣＡＲ細胞を含む組成物を、前記レシピエント対象に投与するステップ、
５）レシピエント対象に、有効量のＳ１Ｐ受容体モジュレーター、好ましくはモクラビモド、または薬学的に許容されるその塩もしくはそのリン酸誘導体を投与するステップ、
６）任意選択で、レシピエント対象に、有効量の１つまたは複数の免疫抑制剤を投与するステップ
を含む、実施形態３９から４１のいずれか一項に記載の方法。
【0082】
４３．前記リンパ枯渇化学療法剤が、メルファラン、シタラビン、エトポシド、ブスルファン、ベンダムスチン、シクロホスファミド、フルダラビン、デキサメタゾン、およびアレムツズマブ、ならびにフルダラビン／シクロホスファミド、シタラビン／エトポシドの組合せ投与などのその組合せからなる群から選択される、実施形態４２に記載の方法。
【0083】
４４．ステップ３）のコンディショニングレジメンが、
－フルダラビンおよびシクロホスファミドの投与、または
－シタラビンおよびエトポシドの投与、または
－ベンダムスチンの投与
からなる、実施形態４２に記載の方法。
－フルダラビンおよびシクロホスファミドの投与、または
－シタラビンおよびエトポシドの投与、または
－ベンダムスチンの投与
からなる、実施形態４２に記載の方法。
【0084】
４５．前記Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターが、モクラビモド、シポニモド、フィンゴリモド、オザニモド、ポネシモド、エトラシモド、ＡＫＰ－１１、セネリモド、アミセリモド、ＣＢＰ－３０７、ＯＰＬ－３０７、ＯＰＬ－００２、ＢＭＳ－９８６１６６、ＳＣＤ－０４４、ＢＯＳ－１７３７１７、ＣＰ－１０５０、好ましくはモクラビモドから選択される、実施形態３９から４４のいずれか一項に記載の方法。
【0085】
４６．前記Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターがＳ１Ｐ受容体アゴニストである、実施形態４５に記載の方法。
【0086】
４７．Ｓ１Ｐ受容体アゴニストが、以下の式（Ｉ）または（ＩＩ）または（ＩＩａ）または（ＩＩｂ）のもの：
【0087】
【化9】
Ｒ２は、Ｈ、ハロゲン、トリハロメチル、Ｃ１～４アルコキシ、Ｃ１～７アルキル、フェネチル、もしくはベンジルオキシであり、
Ｒ３は、Ｈ、ハロゲン、ＣＦ３、ＯＨ、Ｃ１～７アルキル、Ｃ１～４アルコキシ、ベンジルオキシ、フェニル、もしくはＣ１～４アルコキシメチルであり、
Ｒ４およびＲ５のそれぞれは、独立して、Ｈもしくは式（ａ）の残基：
【0088】
【化10】
ｎは１～４の整数である］であり、
Ｒ６は、水素、ハロゲン、Ｃ１～７アルキル、Ｃ１～４アルコキシ、もしくはトリフルオロメチルである］、
または、
【0089】
【化11】
または、
【0090】
【化12】
【0091】
４８．Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターが、モクラビモド、または薬学的に許容されるその塩もしくはそのリン酸誘導体である、実施形態３９から４７のいずれか一項に記載の方法。
【0092】
４９．前記Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターを、１日あたり０．０５ｍｇ～４０ｍｇ、好ましくは０．１ｍｇ～３５ｍｇ、より好ましくは０．５ｍｇ～３０ｍｇ、さらにより好ましくは１ｍｇ～１５ｍｇ、さらにより好ましくは１．５ｍｇ～７ｍｇ、さらにより好ましくは２ｍｇ～５ｍｇ、さらにより好ましくは約３ｍｇまたは約１ｍｇの投薬量で投与する、実施形態３９から４８のいずれか一項に記載の方法。
【0093】
５０．前記Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターが、モクラビモド、または薬学的に許容されるその塩もしくはそのリン酸誘導体であり、前記モクラビモドが固体剤形として配合され、前記固体剤形が、
－好ましくは４８～８８ｍｇ／単位の含有量、より好ましくは５８～７８ｍｇ／単位、さらにより好ましくは約６８ｍｇ／単位の含有量のマンニトール、
－好ましくは５～４５ｍｇ／単位の含有量、より好ましくは１５～３５ｍｇ／単位、さらにより好ましくは約２５ｍｇ／単位の含有量の微結晶セルロース、
－好ましくは１～８ｍｇ／単位の含有量、より好ましくは２～６ｍｇ／単位、さらにより好ましくは約４ｍｇ／単位の含有量のデンプングリコール酸ナトリウム、
－好ましくは０．０２５～４ｍｇ／単位の含有量、より好ましくは０．５～２ｍｇ／単位、さらにより好ましくは約１ｍｇ／単位の含有量のステアリン酸マグネシウム、および
－好ましくは０．１２５～２ｍｇ／単位の含有量、より好ましくは０．２５～１ｍｇ／単位、さらにより好ましくは約０．５ｍｇ／単位の含有量のコロイド状二酸化ケイ素
を含む、実施形態３９から４９のいずれか一項に記載の方法。
－好ましくは４８～８８ｍｇ／単位の含有量、より好ましくは５８～７８ｍｇ／単位、さらにより好ましくは約６８ｍｇ／単位の含有量のマンニトール、
－好ましくは５～４５ｍｇ／単位の含有量、より好ましくは１５～３５ｍｇ／単位、さらにより好ましくは約２５ｍｇ／単位の含有量の微結晶セルロース、
－好ましくは１～８ｍｇ／単位の含有量、より好ましくは２～６ｍｇ／単位、さらにより好ましくは約４ｍｇ／単位の含有量のデンプングリコール酸ナトリウム、
－好ましくは０．０２５～４ｍｇ／単位の含有量、より好ましくは０．５～２ｍｇ／単位、さらにより好ましくは約１ｍｇ／単位の含有量のステアリン酸マグネシウム、および
－好ましくは０．１２５～２ｍｇ／単位の含有量、より好ましくは０．２５～１ｍｇ／単位、さらにより好ましくは約０．５ｍｇ／単位の含有量のコロイド状二酸化ケイ素
を含む、実施形態３９から４９のいずれか一項に記載の方法。
【0094】
５１．前記Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターを、好ましくはＣＡＲ細胞を含む前記組成物を投与する１～２０日前、より好ましくは前記免疫細胞を投与する１１日前の開始日から、少なくとも１、２、３カ月間、またはそれより長く、毎日投与する、実施形態３９から５０のいずれか一項に記載の方法。
【0095】
５２．ＣＡＲ細胞、好ましくはＣＡＲ－Ｔ細胞、より好ましくは抗ＣＤ１９ＣＡＲ－Ｔ細胞を、０．１×１０６～６×１０８個のＣＡＲ陽性生免疫細胞／体重１ｋｇの投薬量で投与する、実施形態３９から５１のいずれか一項に記載の方法。
【0096】
５３．ＣＡＲ細胞、好ましくはＣＡＲ－Ｔ細胞、より好ましくは抗ＣＤ１９ＣＡＲ－Ｔ細胞を、リンパ枯渇化学療法の完了の２～１４日後に投与する、実施形態３９から５２のいずれか一項に記載の方法。
【0097】
５４．前記がん関連抗原が、ＣＤ１９、ＣＤ１２３、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ３８、ＬｅＹ、ＲＯＲ１、ＣＬＬ－１、ＢＣＭＡからなる群から選択される、実施形態３９から５３のいずれか一項に記載の方法。
【0098】
５５．ＣＡＲ細胞療法を必要としている前記対象が血液悪性腫瘍を患っている対象であり、血液悪性腫瘍が、白血病および／またはリンパ腫、たとえば、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、急性リンパ性白血病ＡＬＬ、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）、縦隔原発Ｂ細胞性大細胞型リンパ腫（ＰＭＢＣＬ）、または多発性骨髄腫、好ましくはＡＬＬ、ＤＬＢＣＬ、ＰＭＢＣＬ、およびＭＣＬ、より好ましくはＤＬＢＣＬからなる群から選択される血液悪性腫瘍である、実施形態３９から５４のいずれか一項に記載の方法。
【0099】
５６．それを必要としている対象において、ＣＡＲ細胞療法（たとえば抗ＣＤ１９療法）でのサイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）および／またはマクロファージ活性化症候群（ＭＡＳ）および／または免疫エフェクター細胞関連神経毒性症候群（ＩＣＡＮＳ）の防止において使用するための、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターであって、使用が、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーター（たとえばモクラビモド）を、ＣＡＲ細胞療法と組み合わせて、対象に投与し、それによって、対象においてＣＲＳおよび／またはＭＡＳおよび／またはＩＣＡＮＳを防止することを含む、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーター。
【0100】
５７．それを必要としている対象において、ＣＡＲ細胞療法（たとえば抗ＣＤ１９療法）の有効性を増加させることにおいて使用するための、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターであって、使用が、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーター（たとえばモクラビモド）を、ＣＡＲ細胞療法と組み合わせて、対象に投与し、それによって、ＣＡＲ細胞を活性化させるおよび／またはがん細胞を直接殺滅し、したがって抗腫瘍効果を増加させることを含む、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーター。
【0101】
５８．前記ＣＡＲ細胞が、がん関連抗原と結合するキメラ抗原受容体分子を発現する免疫細胞、好ましくはＴ細胞であり、治療上有効な量のＣＡＲ細胞組成物を、治療上有効な量のＳ１Ｐ受容体モジュレーターと組み合わせて投与するそれを必要としている対象において、血液悪性腫瘍を処置するための医薬品の製造のための、ＣＡＲ細胞組成物の使用。
【0102】
５９．前記がん関連抗原が、ＣＤ１９、ＣＤ１２３、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ３８、ＬｅＹ、ＲＯＲ１、ＣＬＬ－１、ＢＣＭＡ、およびその組合せからなる群、好ましくはＣＤ１９から選択される、実施形態５８に記載の使用。
【0103】
６０．前記Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターが、モクラビモド、シポニモド、フィンゴリモド、オザニモド、ポネシモド、エトラシモド、ＡＫＰ－１１、セネリモド、アミセリモド、ＣＢＰ－３０７、ＯＰＬ－３０７、ＯＰＬ－００２、ＢＭＳ－９８６１６６、ＳＣＤ－０４４、ＢＯＳ－１７３７１７、ＣＰ－１０５０、好ましくはモクラビモドから選択される、実施形態５８または５９に記載の使用。
【0104】
６１．前記Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターがＳ１Ｐ受容体アゴニストである、実施形態６０に記載の使用。
【0105】
６２．Ｓ１Ｐ受容体アゴニストが、以下の式（Ｉ）または（ＩＩ）または（ＩＩａ）または（ＩＩｂ）のもの：
【0106】
【化13】
Ｒ２は、Ｈ、ハロゲン、トリハロメチル、Ｃ１～４アルコキシ、Ｃ１～７アルキル、フェネチル、もしくはベンジルオキシであり、
Ｒ３は、Ｈ、ハロゲン、ＣＦ３、ＯＨ、Ｃ１～７アルキル、Ｃ１～４アルコキシ、ベンジルオキシ、フェニル、もしくはＣ１～４アルコキシメチルであり、
Ｒ４およびＲ５のそれぞれは、独立して、Ｈもしくは式（ａ）の残基：
【0107】
【化14】
ｎは１～４の整数である］であり、
Ｒ６は、水素、ハロゲン、Ｃ１～７アルキル、Ｃ１～４アルコキシ、もしくはトリフルオロメチルである］、
または、
【0108】
【化15】
または、
【0109】
【化16】
【0110】
６３．Ｓ１Ｐ受容体アゴニストが、モクラビモド、または薬学的に許容されるその塩もしくはそのリン酸誘導体である、実施形態５８から６２のいずれか一項に記載の使用。
【0111】
６４．前記血液悪性腫瘍が白血病および／またはリンパ腫である、実施形態５８から６３のいずれか一項に記載の使用。
【0112】
６５．前記血液悪性腫瘍が、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）、縦隔原発Ｂ細胞性大細胞型リンパ腫（ＰＭＢＣＬ）、または多発性骨髄腫、好ましくはＡＬＬ、ＤＬＢＣＬ、ＰＭＢＣＬ、およびＭＣＬ、より好ましくはＤＬＢＣＬからなる群から選択される、実施形態５８から６４のいずれか一項に記載の使用。
【0113】
６６．効率的な量のＣＡＲ細胞、好ましくはＣＡＲ－Ｔ細胞を、０．１×１０６～６×１０８個のＣＡＲ陽性生免疫細胞／体重１ｋｇの投薬量で投与する、実施形態５８から６５のいずれか一項に記載の使用。
【0114】
６７．前記ＣＡＲ細胞、好ましくはＣＡＲ－Ｔ細胞を、リンパ枯渇化学療法の完了の２～１４日後に投与する、実施形態５８から６６のいずれか一項に記載の使用。
【0115】
６８．前記Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターを、１日あたり０．０５ｍｇ～４０ｍｇ、好ましくは０．１ｍｇ～３５ｍｇ、より好ましくは０．５ｍｇ～３０ｍｇ、さらにより好ましくは１ｍｇ～１５ｍｇ、さらにより好ましくは１．５ｍｇ～７ｍｇ、さらにより好ましくは２ｍｇ～５ｍｇ、さらにより好ましくは約３ｍｇまたは約１ｍｇの投薬量で投与する、実施形態５８から６７のいずれか一項に記載の使用。
【0116】
６９．前記Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターを、好ましくはＣＡＲ細胞を含む前記組成物を投与する１～２０日前、より好ましくはＣＡＲ細胞投与の１１日前の開始日から、少なくとも１、２、もしくは３カ月間、またはそれより長くの間、毎日投与する、実施形態５８から６８のいずれか一項に記載の使用。
【0117】
７０．前記Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターを、ＣＡＲ細胞が骨髄を去ることを防止する、ならびに／またはＣＡＲ細胞の生着および持続を促進する、ならびに／またはＣＡＲ細胞療法の有効性を増加させるために十分な量で投与する、実施形態５８から６９のいずれか一項に記載の使用。
【0118】
７１．Ｓ１Ｐ受容体モジュレーター（たとえばモクラビモド）、または薬学的に許容されるその塩もしくはそのリン酸誘導体を、ＣＡＲ細胞療法と組み合わせて、対象に投与し、それによって、対象においてＣＲＳおよび／またはＭＡＳおよび／またはＩＣＡＮＳを防止することを含む、それを必要としている対象において、ＣＡＲ細胞療法（たとえば抗ＣＤ１９ＣＡＲ－Ｔ細胞療法）、好ましくは自己または同系のＣＡＲ細胞療法でのサイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）および／またはマクロファージ活性化症候群（ＭＡＳ）および／または免疫エフェクター細胞関連神経毒性症候群（ＩＣＡＮＳ）を防止するための医薬品の製造のための、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターの使用。
【0119】
７２．ＣＡＲ細胞療法が自己またはアロジェネイックＣＡＲ－Ｔ細胞療法である、実施形態７２に記載の使用。
【発明を実施するための形態】
【0120】
詳細な説明
本開示は、それを必要としている対象において、血液悪性腫瘍を処置する方法であって、前記対象に、治療上有効な量のＣＡＲ細胞組成物を、治療上有効な量のＳ１Ｐ受容体モジュレーターと組み合わせて投与することを含む、方法を含む。
本開示は、それを必要としている対象において、血液悪性腫瘍を処置する方法であって、前記対象に、治療上有効な量のＣＡＲ細胞組成物を、治療上有効な量のＳ１Ｐ受容体モジュレーターと組み合わせて投与することを含む、方法を含む。
【0121】
本開示は、それを必要としている対象において、血液悪性腫瘍の処置において使用するためのＣＡＲ細胞組成物であって、前記ＣＡＲ細胞が、がん関連抗原（たとえばＣＤ１９）と結合するキメラ抗原受容体分子を発現する免疫細胞、たとえばＴ細胞であり、治療上有効な量のＣＡＲ細胞組成物を、治療上有効な量のＳ１Ｐ受容体モジュレーターと組み合わせて投与する、ＣＡＲ細胞組成物に関する。
【0122】
本開示はまた、治療上有効な量のＣＡＲ細胞組成物を、治療上有効な量のＳ１Ｐ受容体モジュレーターと組み合わせて投与する、それを必要としている対象において血液悪性腫瘍を処置するための医薬品の製造のための、ＣＡＲ細胞組成物の使用にも関する。
【0123】
本開示はまた、治療上有効な量のＣＡＲ細胞組成物を、治療上有効な量のＳ１Ｐ受容体モジュレーターと組み合わせて投与する、それを必要としている対象において、血液悪性腫瘍を処置するための医薬組成物の調製における、ＣＡＲ細胞組成物の使用にも関する。
【0124】
一般定義
別段に定義しない限りは、本明細書中で使用するすべての技術用語および科学用語は、本発明の属する分野の技術者によって一般的に理解されるものと同じ意味を有する。
別段に定義しない限りは、本明細書中で使用するすべての技術用語および科学用語は、本発明の属する分野の技術者によって一般的に理解されるものと同じ意味を有する。
【0125】
本明細書中で使用する「モジュレーター」とは、対象に投与した場合に、化合物が受容体自体に直接作用することによって、または化合物の代謝物が受容体に作用することによってのいずれかで、標的受容体との所望の相互作用をもたらす化合物である。対象に投与した際、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーター、好ましくはモクラビモド（ＫＲＰ２０３とも呼ばれる）は、受容体を活性化または阻害または下方変調することのいずれかによってＳ１Ｐ受容体と相互作用し、破壊されたシグナル伝達をもたらす。
【0126】
本明細書中で使用する「Ｓ１Ｐアゴニスト」とは、Ｓ１Ｐ受容体と組み合わせた場合に生理的応答を開始する化合物をいう。好ましくは、開始される生理的応答は、Ｓ１Ｐ受容体のアゴニスト誘導性の内部移行（internalization）である。細胞膜からのアゴニスト誘導性内部移行の動力学、および前記化合物脱粒後の、Ｓ１Ｐ受容体の細胞膜への再循環は、化合物に依存する。そのようなＳ１Ｐ受容体アゴニストは、機能的アンタゴニストとも呼び得る。内部移行の持続は、アゴニストの「機能的アンタゴニズム」特性をコンディショニングする。
【0127】
用語「薬学的に許容されるその塩」は、酸および塩基付加塩をどちらも含む。薬学的に許容される酸付加塩の非限定的な例としては、塩化物、塩酸塩、臭化物、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩、スルホン酸塩、メタンスルホン酸塩、ギ酸塩、酒石酸塩、マレイン酸塩、クエン酸塩、安息香酸塩、サリチル酸塩、およびアスコルビン酸塩が挙げられる。薬学的に許容される塩基付加塩の非限定的な例としては、ナトリウム、カリウム、リチウム、アンモニウム（置換および非置換）、カルシウム、マグネシウム、鉄、亜鉛、銅、マンガン、およびアルミニウム塩が挙げられる。薬学的に許容される塩は、たとえば、製薬分野において周知の標準手順を使用して得られ得る。モクラビモドはそれ自体が塩基であるため、モクラビモドでは、薬学的に許容される塩は典型的には酸付加塩となるであろう。好ましくは、薬学的に許容されるその塩は塩酸塩である。
【0128】
用語「そのリン酸誘導体」は、式ＩＩａまたはＩＩｂなどのリン酸エステルを含む。
【0129】
本明細書中で使用する用語「賦形剤」とは、原薬と共に加え、配合混合物の一部である、不活性物質をいう。薬学的に許容される賦形剤は、たとえば、充填剤、溶媒、希釈剤、担体、補助剤、分配剤および感覚剤（sensing agent）、送達剤、たとえば、保存料、崩壊剤、湿潤剤、乳化剤、懸濁剤、増粘剤、甘味料、香味料、着香剤、抗菌剤、殺真菌剤、潤滑剤、および持続性送達制御剤、抗酸化剤、流動促進剤である。それらの選択および適切な割合は、投与の性質および方法ならびに投薬量に依存する。
【0130】
本明細書中において「平均粒径」とは、粒子の５０％が示した値以下の大きさを有するという意味のＤ５０をいう。たとえば、８μｍ以下の平均粒径とは、８μｍのＤ５０をいい、すなわち、粒子の５０％が８μｍ以下の粒径を有する。用語Ｄ９０とは、粒子の９０％が示した値以下の粒径を有することを意味する。たとえば、２５μｍ以下のＤ９０とは、粒子の９０％が２５μｍ以下の粒径を有することを意味する。Ｄ５０およびＤ９０は、液体経路を使用したレーザー光回折によって、たとえば、その小体積分散モジュール（液体経路）を備えたＢＥＣＫＭＡＮ－ＣＯＵＬＴＥＲレーザー回折粒径分析器ＬＳ２３０上で、技術マニュアルおよび製造者の指示に従って決定する。
【0131】
用語「サイトカイン放出症候群」（ＣＲＳ）とは、ＣＡＲ細胞療法に関連する顕著な合併症をいい、これは、臨床症状の範囲および相当であるが一過性の血清サイトカインの上昇を特徴とする急性炎症プロセスである。ほとんどの患者では、ＣＲＳはＣＡＲ－Ｔ細胞輸液の１～１４日後に起こり、輸液の１７日後より後ではめったに発生しない。データは、ＣＡＲ－Ｔ細胞関連ＣＲＳが、Ｔ細胞と標的抗原との結合、続いて増殖および機能的応答に依存することを示唆している。ＣＲＳに影響を与える他の要因としては、疾患の種類、性質、およびリンパ球枯渇の度合、ならびに場合によってはＣＡＲの設計を挙げ得る。ＣＲＳはＴ細胞と標的抗原との結合と関連しているため、これは抗ＣＤ１９療法のみに限定されない。ＣＲＳは、ＣＤ２２標的化ＣＡＲ－Ｔ細胞を受けた、ｒ／ｒ ＡＬＬを有する評価可能な小児または若年成人患者の７人のうち４人（５７％）で観察された。さらに、ＣＲＳは、ＣＤ１９を標的とするＣＡＲ－Ｔ細胞またはＢ細胞成熟抗原（ＢＣＭＡ）を受けた、多発性骨髄腫（ＭＭ）を有する患者において観察されている。ペンシルバニア大学によって開発されたＣＲＳグレード付けスケールが好ましい（D. Porter et al., J Hematol Oncol. 2018; 11: 35）。
【0132】
用語「重篤でないＣＲＳ」と対比した用語「重篤なＣＲＳ」とは、グレード３または４のＣＲＳをいう。重篤なグレード３のＣＲＳとは、ＣＲＳに関連するグレード４のＬＦＴまたはグレード３のクレアチニンを含み、他のどの状態にも起因しない、臓器不全に関連する症状の管理に必要な入院をいい、これは、静脈内輸液（血圧支持のための複数の輸液ボーラスとして定義される）または低用量昇圧剤で処置する低血圧、新鮮凍結血漿または寒冷沈降物またはフィブリノーゲン濃縮物を必要とする凝血異常、および酸素供給（経鼻カニューレ酸素、高流量酸素、ＣＰＡＰ、またはＢｉＰＡＰ）を必要とする低酸素症を含む。重篤なグレード４のＣＲＳは、高用量昇圧剤を必要とする低血圧、人工呼吸を必要とする低酸素症などの、生命を危うくする合併症をカバーする。
【0133】
用語「マクロファージ活性化症候群」（ＭＡＳ）とは、生命を危うくする場合がある、ＣＡＲ細胞で処置した患者において観察されるＭＡＳ様症状をいう。ＭＡＳは、時折、続発性血球貪食性リンパ組織球症（ＨＬＨ）と同義であり、リウマチ専門家によって、全身性若年性特発性関節炎（ｓＪＩＡ）およびその成人相当である成人発症スチル病において最も一般的に見られる、全身性炎症性障害の生命を危うくする合併症を説明するために使用される用語である。従来のＭＡＳの定義は、リンパ球枯渇およびＣＲＳとの重複する兆候および症状が原因で、ＣＡＲ－Ｔ細胞を受けている患者に適用するには問題があった。しかし、発熱およびＣ反応性タンパク質（ＣＲＰ）の上昇によって特徴づけられるＣＲＳ症状が最初に発生し、その後、フィブリノーゲンの減少、フェリチンおよび乳酸脱水素酵素の迅速な上昇によって特徴づけられるＭＡＳ（またはＭＡＳ様症状）がＣＲＳの後に発生し得る。
【0134】
用語「キメラ抗原受容体」あるいは「ＣＡＲ」とは、人工細胞受容体、たとえば、Ｔボディ受容体、単鎖免疫受容体、キメラＴ細胞受容体、またはキメラ免疫受容体をいい、人工特異性を特定の免疫エフェクター細胞上に移植する、操作した受容体を包含する。ＣＡＲは、モノクローナル抗体の特異性をＴ細胞に与え、それによって、たとえば養子細胞療法において使用するための、多数の特異的なＴ細胞を作製することを可能にするために用い得る。具体的な実施形態では、ＣＡＲは、細胞の特異性を、たとえば腫瘍関連抗原に向かわせる。一部の実施形態では、ＣＡＲは、細胞内活性化ドメイン（標的化部分の、標的腫瘍細胞などの標的細胞との結合の際に、Ｔ細胞を活性化することを可能にする）、膜貫通ドメイン、および、長さが様々であり、疾患または障害関連のたとえば腫瘍－抗原結合領域を含む、細胞外ドメインを含む。特定の態様では、ＣＡＲは、ＣＤ３－ゼータ、膜貫通ドメイン、および内部ドメインと融合した、モノクローナル抗体に由来する単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）の融合体を含む。他のＣＡＲ設計の特異性は、受容体（たとえばペプチド）のリガンド、またはデクチンなどのパターン認識受容体に由来し得る。特定の事例では、抗原認識ドメインの間隔を改変して、活性化誘導性細胞死を減らすことができる。特定の事例では、ＣＡＲは、ＣＤ３ζ、ＦｃＲ、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ１３７、ＤＡＰ１０／１２、および／またはＯＸ４０、ＩＣＯＳ、ＴＬＲ（たとえばＴＬＲ２）などの、追加の共刺激シグナル伝達のドメインを含む。一部の事例では、共刺激分子、イメージング用（たとえば陽電子放射断層撮影用）のレポーター遺伝子、プロドラッグを添加した際にＴ細胞を条件的に切断する遺伝子産物、ホーミング受容体、ケモカイン、ケモカイン受容体、サイトカイン、およびサイトカイン受容体を含む分子を、ＣＡＲと同時発現させることができる。さらに、当業者は、共刺激ドメインは、遺伝子の完全長ヌクレオチド配列のみによってコードされている必要はないことを理解されよう。本発明が、それだけには限定されないが、複数の遺伝子の部分的ヌクレオチド配列の使用を含み、これらのヌクレオチド配列が様々な組合せで配置されて所望の免疫応答を誘発することは、容易に明らかである。
【0135】
本明細書中で使用する用語「抗腫瘍効果」とは、腫瘍体積の減少、腫瘍細胞数の減少、転移の数の減少、平均余命の増加、またはがん性状態に関連する様々な生理的症状の軽快によって顕在化し得る生物学的効果をいう。
【0136】
用語「抗原」または「Ａｇ」とは、免疫応答を誘発する分子をいう。この免疫応答は、抗体の産生もしくは特異的な免疫学的にコンピテントな細胞の活性化のいずれか、または両方に関与し得る。当業者は、事実上すべてのタンパク質またはペプチドを含む任意の高分子が抗原として役割を果たすことができることを、理解されよう。
【0137】
用語「がん関連抗原」または「腫瘍抗原」または「増殖性障害抗原」または「増殖性障害に関連する抗原」とは、互換性があるように、がん細胞の表面上に、全体でまたは断片（たとえばＭＨＣ／ペプチド）としてのどちらかで発現され、薬理学的剤をがん細胞に標的化するために有用である分子（典型的にはタンパク質、炭水化物、または脂質）をいう。一部の実施形態では、抗原腫瘍は、がん細胞のみ上で見つかり、健康な細胞上では見つからない腫瘍特異的抗原（ＴＳＡ）、または、腫瘍細胞上で上昇したレベルを有するが、健康な細胞上でもより低いレベルで発現される腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）である。興味深いＴＳＡは、特異的な新規がん突然変異であるネオアンチゲンである。他の興味深いＴＡＡは、ＭＨＣ系（ＭＨＣペプチド抗原）によって細胞表面上に露出される細胞内標的であり、血液学的がんに関連するそのような細胞内ＴＡＡは、たとえば、ＷＴ１、ＭＡＧＥ－４、チロシナーゼ、ＰＲＡＭＥ、およびサバイビンである。
【0138】
一部の実施形態では、腫瘍抗原は、正常細胞およびにがん細胞のどちらによっても発現されるマーカーであり、たとえば、系統マーカー、たとえばＢ細胞上のＣＤ１９である。特定の態様では、本発明の腫瘍抗原は、それだけには限定されないが、白血病、リンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、急性リンパ性白血病ＡＬＬ、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）、縦隔原発Ｂ細胞性大細胞型リンパ腫（ＰＭＢＣＬ）、または多発性骨髄腫、好ましくはＡＬＬ、ＤＬＢＣＬ、ＰＭＢＣＬ、およびＭＣＬを含むがんに由来する。
【0139】
一部の実施形態では、腫瘍抗原とは、特定の増殖性障害に共通する抗原である。
【0140】
一部の実施形態では、がん関連抗原とは、正常細胞と比較してがん細胞中で過剰発現される、たとえば、正常細胞と比較して１倍過剰発現、２倍過剰発現、３倍過剰発現、またはより多い、細胞表面分子である。
【0141】
一部の実施形態では、がん関連抗原とは、がん細胞中で不適切に合成される細胞表面分子、たとえば、正常細胞上で発現される分子と比較して欠失、付加、または突然変異を含有する分子である。一部の実施形態では、がん関連抗原は、がん細胞の細胞表面上に、全体でまたは断片（たとえばＭＨＣ／ペプチド）として排他的に発現され、正常細胞の表面上では合成または発現されない。一部の実施形態では、本開示のＣＡＲは、ＭＨＣを提示したペプチドと結合する抗原結合ドメイン（たとえば抗体または抗体断片）を含むＴＣＲ様ＣＡＲを含む。通常、内在性タンパク質に由来するペプチドは、主要組織適合複合体（ＭＨＣ）クラスＩ分子のポケットを満たし、ＣＤ８＋Ｔリンパ球上のＴ細胞受容体（ＴＣＲ）によって認識される。ＭＨＣクラスＩ複合体は、すべての有核細胞によって構成的に発現される。がんでは、ウイルスに特異的および／または腫瘍に特異的なペプチド／ＭＨＣ複合体が、免疫療法のためのユニークな細胞表面標的のクラスを表す。
【0142】
典型的にはｓｃＦｖまたは操作したＴ細胞受容体を介して、ＣＡＲによって標的とすることができる好ましいがん関連抗原またはがん関連抗原の組合せの例としては、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ７、ＣＤ１９、ＣＤ１９／ＣＤ２０、ＣＤ１９／ＣＤ２２；ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ２０／ＣＤ２２、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ３８、ＣＤ３９、ＣＤ７０；ＣＤ１２３、ＣＤ４４ｖ６（アイソフォーム変異体６）、ＣＤ１２３／ＣＬＬ１、ＢＣＭＡ ＣＤ３８／ＢＣＭＡ、ＣＤ１９／ＢＣＭＡ、ＣＤ５６、ＣＤ１３８、ＬｅＹ、ＲＯＲ１、ＳＬＡＭＦ７、ｎＦＬＴ３、ＬＭＰ１、ＢＣＭＡ／ＴＡＣＩ、ＣＳ１、ＧＰＲＣ５Ｄ、ＣＳ１／ＢＣＭＡ、ＮＫＧ２Ｄ、ＣＬＬ－１、ＧＤ２、ＭＣＳＰ、ＣＤ５、ＮＫＧ２Ｄリガンド、ＭＨＣペプチド抗原が挙げられる。より好ましくは、前記がん関連抗原またはがん関連抗原の組合せは、ＣＤ１９、ＣＤ１２３、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ３８、ＬｅＹ、ＲＯＲ１、ＣＬＬ－１、ＢＣＭＡ、ＧＤ２、ＭＣＳＰ、ＣＤ５、ＮＫＧ２Ｄ、ＭＨＣペプチド抗原、またはその組合せ、好ましくはＣＤ１９からなる群から選択される。
【0143】
本明細書中で使用する「ＣＡＲ細胞」とは、ＣＡＲを発現する細胞をいい、ＣＡＲ細胞組成物とは、ＣＡＲ細胞またはＣＡＲ細胞の集団を含む組成物をいう。一部の実施形態では、ＣＡＲを発現する細胞は、Ｔ細胞、Ｂ細胞、マクロファージ細胞、樹状細胞、またはＮＫ細胞であり得る。治療上効率的な量のＣＡＲ細胞組成物を投与することを含む治療は、本明細書中でＣＡＲ細胞療法と呼ぶ。用語「刺激」とは、刺激分子（たとえばＴＣＲ／ＣＤ３複合体またはＣＡＲ）とその同族リガンド（または、ＣＡＲの場合は腫瘍抗原）との結合によって誘導され、それによって、シグナル伝達事象、たとえば、それだけには限定されないが、ＴＣＲ／ＣＤ３複合体を介したシグナル伝達、または適切なＮＫ受容体もしくはＣＡＲのシグナル伝達ドメインを介したシグナル伝達を媒介する、一次応答をいう。刺激は、特定の分子の発現の改変を媒介することができる。
【0144】
本明細書中で使用する「ＣＡＲ細胞活性化」とは、ＣＡＲ細胞における１つまたは複数の活性化マーカーの細胞または細胞内発現の有意な増加によって検出される、ＣＡＲ細胞の活性化をいい、これは一般に、ＣＡＲ細胞の殺滅活性の増加をもたらす。ＣＡＲ－Ｔ細胞活性化は、たとえば、以下のマーカー、すなわち、表面ＰＤ１、細胞内グランザイムＢ、および表面ＣＤ６９のうちの１つまたは複数の有意に増加した発現によって検出し得る。
【0145】
用語「Ｔ細胞」（または「Ｔ－細胞」もしくは「免疫Ｔ細胞」）とは、胸腺中で成熟するリンパ球の一種をいう。Ｔ細胞は、細胞媒介性免疫において重要な役割を果たし、細胞表面上のＴ細胞受容体の存在によってＢ細胞などの他のリンパ球とは区別される。Ｔ細胞は、単離するか、または商業的供給者から得るかのどちらかであり得る。「Ｔ細胞」としては、Ｔ－ヘルパー細胞（ＣＤ４＋細胞）、細胞毒性があるＴ細胞（ＣＤ８＋細胞）、ナチュラルキラーＴ細胞、Ｔ－調節細胞（Ｔｒｅｇ）、およびガンマ－デルタＴ細胞を含む、ＣＤ３を発現するすべての種類の免疫細胞が挙げられる。「細胞毒性がある細胞」としては、ＣＤ８＋Ｔ細胞、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、および好中球が挙げられ、これらの細胞は細胞毒性応答を媒介することができる。市販されているＴ細胞系の非限定的な例としては、ＢＣＬ２（ＡＡＡ）ジャーカット（ＡＴＣＣ（登録商標）ＣＲＬ－２９０２（商標））、ＢＣＬ２（Ｓ７０Ａ）ジャーカット（ＡＴＣＣ（登録商標）ＣＲＬ－２９００（商標））、ＢＣＬ２（Ｓ８７Ａ）ジャーカット（ＡＴＣＣ（登録商標）ＣＲＬ－２９０１（商標））、ＢＣＬ２ジャーカット（ＡＴＣＣ（登録商標）ＣＲＬ－２８９９（商標））、ネオジャーカット（ＡＴＣＣ（登録商標）ＣＲＬ－２８９８（商標））、ＴＡＬＬ－１０４細胞毒性ヒトＴ細胞系（ＡＴＣＣ＃ＣＲＬ－１１３８６）の系統が挙げられる。さらなる例としては、それだけには限定されないが、成熟Ｔ細胞系、たとえば、Ｄｅｇｌｉｓ、ＥＢＴ－８、ＨＰＢ－ＭＬｐ－Ｗ、ＨＵＴ ７８、ＨＵＴ １０２、Ｋａｒｐａｓ ３８４、Ｋｉ ２２５、Ｍｙ－Ｌａ、Ｓｅ－Ａｘ、ＳＫＷ－３、ＳＭＺ－１およびＴ３４；ならびに未成熟Ｔ細胞系、たとえば、ＡＬＬ－ＳＩＬ、Ｂｅ１３、ＣＣＲＦ－ＣＥＭ、ＣＭＬ－Ｔ１、ＤＮＤ－４１、ＤＵ．５２８、ＥＵ－９、ＨＤ－Ｍａｒ、ＨＰＢ－ＡＬＬ、Ｈ－ＳＢ２、ＨＴ－１、ＪＫ－Ｔ１、ジャーカット、Ｋａｒｐａｓ ４５、ＫＥ－３７、ＫＯＰＴ－Ｋ１、Ｋ－Ｔｌ、Ｌ－ＫＡＷ、Ｌｏｕｃｙ、ＭＡＴ、ＭＯＬＴ－１、ＭＯＬＴ ３、ＭＯＬＴ－４、ＭＯＬＴ １３、ＭＯＬＴ－ １６、ＭＴ－１、ＭＴ－ＡＬＬ，Ｐ１２／Ｉｃｈｉｋａｗａ、Ｐｅｅｒ、ＰＥＲ０１１７、ＰＥＲ－２５５、ＰＦ－３８２、ＰＦＩ－２８５、ＲＰＭＩ－８４０２、ＳＴ－４、ＳＵＰ－Ｔ１～Ｔ１４、ＴＡＬＬ－１、Ｔ ＡＬＬ－１０１、ＴＡＬＬ－１０３／２、ＴＡＬＬ－１０４、ＴＡＬＬ－１０５、ＴＡＬＬ－１０６、ＴＡＬＬ－１０７、Ｔ ＡＬＬ－１９７、ＴＫ－６、ＴＬＢＲ－１、－２、－３、および－４、ＣＣＲＦ－ＨＳＢ－２（ＣＣＬ－１２０．１）、Ｊ．ＲＴ３－Ｔ３．５（ＡＴＣＣ ＴＩＢ－１５３）、Ｊ４５．０１（ＡＴＣＣ ＣＲＬ－１９９０）、Ｊ．ＣａＭｌ．６（ＡＴＣＣ ＣＲＬ－２０６３）、ＲＳ４；１１（ＡＴＣＣ ＣＲＬ－ １８７３）、ＣＣＲＦ－ＣＥＭ（ＡＴＣＣ ＣＲＭ－ＣＣＬ－１１９）；ならびに皮膚Ｔ細胞リンパ腫系、たとえば、ＨｕＴ７８（ＡＴＣＣ ＣＲＭ－ＴＩＢ－１６１）、ＭＪ［Ｇ１１］（ＡＴＣＣ ＣＲＬ－８２９４）、ＨｕＴ１０２（ＡＴＣＣ ＴＩＢ－１６２）などが挙げられる。それだけには限定されないが、ＲＥＨ、ＮＡＬＬ－１、ＫＭ－３、Ｌ９２－２２１を含むヌル白血病細胞系は、免疫細胞の別の商業的供給者であり、他の白血病およびリンパ腫に由来する細胞系、たとえば、Ｋ５６２赤白血病、ＴＨＰ－１単球性白血病、Ｕ９３７リンパ腫、ＨＥＬ赤白血病、ＨＬ６０白血病、ＨＭＣ－１白血病、ＫＧ－１白血病、Ｕ２６６骨髄腫もそうである。そのような市販されている細胞系の非限定的な例示的な供給源としては、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅが挙げられる。
【0146】
用語「Ｔ－ｒｅｇ」または「Ｔｒｅｇ」とは、免疫抑制機能を有するＴ細胞をいう。本明細書中で使用するＴ細胞とは、任意の種類のＴ細胞、たとえば、アルファベータＴ細胞（たとえばＣＤ８またはＣＤ４＋）、ガンマデルタＴ細胞、メモリーＴ細胞、Ｔｒｅｇ細胞などを含むリンパ球である。適切には、免疫抑制機能とは、病原体、同種抗原、または自己抗原などの刺激に応答して免疫系によって亢進される、いくつかの生理的および細胞性効果のうちの１つまたは複数を低下させるまたは阻害する、Ｔｒｅｇの能力をいい得る。そのような効果の例としては、慣用Ｔ細胞（Ｔｃｏｎｖ）の増殖および炎症誘発性サイトカインの分泌の増加が挙げられる。任意のそのような効果を免疫応答の強度の指標として使用し得る。Ｔｒｅｇの存在における、Ｔｃｏｎｖによる比較的より弱い免疫応答が、免疫応答を抑制するＴｒｅｇの能力を示すであろう。たとえば、サイトカイン分泌の相対的な減少が、より弱い免疫応答を示す、したがって免疫応答を抑制するＴｒｅｇの能力を示すであろう。Ｔｒｅｇはまた、Ｂ細胞、樹状細胞、およびマクロファージなどの抗原提示細胞（ＡＰＣ）上での共刺激分子の発現を変調することによって、免疫応答を抑制することもできる。ＣＤ８０およびＣＤ８６の発現レベルを使用して、同時培養後のｉｎ ｖｉｔｒｏの活性化したＴｒｅｇの抑制効力を評価することができる。
【0147】
用語「ガンマデルタＴ細胞」とは、１本のγ鎖および１本のδ鎖から構成される、明確なＴ細胞受容体（ＴＣＲ）、すなわちγδＴＣＲをその表面上に発現する、Ｔ細胞の部分組をいう。用語「ガンマ－デルタＴ細胞」は、それだけには限定されないが、Ｖδ１およびＶδ２、Ｖδ３γδＴ細胞、ならびにナイーブ、エフェクターメモリー、セントラルメモリー、および高分化γδＴ細胞を含む、ガンマ－デルタＴ細胞のすべて部分組を具体的に含む。操作したおよび操作していないγδＴ細胞ならびに／またはそのサブタイプを作製および使用するための組成物および方法としては、それだけには限定されないが、操作したおよび操作していないγδＴ細胞ならびに／またはそのサブタイプを作製および使用するための前記組成物および方法を含む、すべての目的のためにそのそれぞれの内容が参考として組み込まれている、米国特許出願公開第２０１６／０１７５３５８号、国際公開第２０１７／１９７３４７号パンフレット、米国特許第９，４９９，７８８号、米国特許出願公開第２０１８／０１６９１４７号、米国特許第９，９０７，８２０号、米国特許出願公開第２０１８／０１２５８８９号、および米国特許出願公開第２０１７／０１９６９１０号中に記載のものが挙げられる。本出願は、１本のγ鎖または１本のδ鎖を、任意選択で第２のポリペプチドと組み合わせて発現して、機能的ＴＣＲを形成する、Ｔ細胞、または他の操作した白血球もしくはリンパ球をさらに企図する。１本のγ鎖または１本のδ鎖を発現するそのような操作した白血球またはリンパ球は、方法において使用し得る、または本明細書中に記載の組成物中に存在し得る。
【0148】
本明細書中で使用する用語「ＮＫ細胞」は、ナチュラルキラー細胞としても知られ、骨髄を起源とし、先天性免疫系において重要な役割を果たすリンパ球の種類をいう。ＮＫ細胞は、細胞表面上の抗体および主要組織適合複合体の非存在下においても、ウイルスに感染した細胞、腫瘍細胞、または他のストレスを受けた細胞に対して迅速な免疫応答を提供する。ＮＫ細胞は、単離するか、商業的供給者から得るかのどちらかであり得る。市販のＮＫ細胞系の非限定的な例としては、ＮＫ－９２（ＡＴＣＣ（登録商標）ＣＲＬ－２４０７（商標））、ＮＫ－９２ＭＩ（ＡＴＣＣ（登録商標）ＣＲＬ－２４０８（商標））の系が挙げられる。さらなる例としては、それだけには限定されないが、ＮＫ系であるＨＡＮＫ１、ＫＨＹＧ－１、ＮＫＬ、ＮＫ－ＹＳ、ＮＯＩ－９０、およびＹＴが挙げられる。そのような市販されている細胞系の非限定的な例示的な供給源としては、アメリカ培養細胞系統保存機関（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ）、またはＡＴＣＣ（ｗｗｗ．ａｔｃｃ．ｏｒｇ／）およびドイツ微生物細胞培養コレクション（Ｇｅｒｍａｎ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｍｓ ａｎｄ Ｃｅｌｌ Ｃｕｌｔｕｒｅｓ）（ｗｗｗ．ｄｓｍｚ．ｄｅ／）が挙げられる。
【0149】
本明細書中で使用する用語「Ｂ細胞」または「Ｂリンパ球または当分野において一般的に使用される任意の用語は、骨髄内で成熟して、適応免疫系の液性免疫構成成分において機能するリンパ球へと発達する、リンパ球の一種をいう。Ｂ細胞は膜結合した抗体分子を生成し、これらの抗体を分泌しない。Ｂ細胞は、他の２つのクラスのリンパ球、Ｔ細胞およびナチュラルキラー細胞とは異なり、Ｂ細胞受容体（ＢＣＲ）をその細胞膜上に発現する。ＢＣＲは、Ｂ細胞が抗原と結合することを可能にし、これは、それに対する抗体応答を開始する。ナイーブまたはメモリーＢ細胞は、抗原に応じてＴ細胞の助けありまたは助けなしで、抗原によって活性化され、増殖し、形質芽細胞または形質細胞として知られる抗体分泌エフェクター細胞へと分化する。さらに、Ｂ細胞は抗原を提示し、したがってプロフェッショナル抗原提示細胞（ＡＰＣ）と呼ばれ、サイトカインを分泌し、それによって免疫応答を変調する。これらは、腫瘍流入領域リンパ節、腫瘍関連三次リンパ系構造、および腫瘍微小環境において、抗腫瘍応答を促進するための活動的参加者として見出されているが、特異的な部分組は腫瘍促進効果が分極化されている。その一般的な性質はいくつかの利点を付与し、Ｂ細胞を、抗原特異的活性化、ｉｎ ｖｉｖｏ持続、メモリープール形成、およびタンパク質を大量に分泌する潜在性などの治療細胞プラットフォームとして魅力的にしている。ＣＡＲを形質導入した白血病性Ｂ細胞が報告されており、たとえば、クラスター化された規則的な間隔の短い回文リピート（ＣＲＩＳＰＲ）およびＣＲＩＳＰＲ関連タンパク質９（Ｃａｓ９）誘導性のホモログに指示される修復を使用して、ＣＡＲ－発現カセットをＢ細胞内に導入することが成功している。活性化のためのＢ細胞受容体（ＢＣＲ）複合体の構成成分であるＣＤ７９βシグナル伝達ドメインを備えたＣＡＲ、一次ネズミＢ細胞中で操作して、内在性ＢＣＲに依存せずに頑強な表面発現および抗原認識を誘導することができる。したがって、Ｂ細胞は、内在性ＢＣＲシグナル伝達を活用することによって、ＣＡＲに基づく治療の実現可能な担体である。ＣＡＲ－Ｂ細胞は、特定のＴＡＡを標的化することによって、腫瘍部位でのモノクローナル抗体の局所的送達を駆動するために使用することができる。これは、ＣＡＲ－Ｂ細胞の、全身投与において重篤な毒性を付与する有効な治療抗体を放出するための安全かつ制御可能なビヒクルとしての可能性を導入する。あるいは、ＣＡＲ－Ｂ細胞は、自己免疫疾患および予防的ワクチンの新規プラットフォームであり得る。
【0150】
本明細書中で使用する用語「マクロファージ細胞」とは、適応免疫系の恒常性を編成することができるプロフェッショナル食細胞である先天性骨髄細胞をいう。多くの固形腫瘍におけるその高い豊富さを考えると、腫瘍関連マクロファージ（ＴＡＭ）はＴＭＥにおいて特別なニッチを占有し、多くの媒介因子がその表現型をあつらえることができる。［免疫抑制性ＴＡＭ（Ｍ２）は、Ｔ細胞応答の勢いを弱め、腫瘍の進行を促進する場合がある。対照的に、Ｍ１の分極化は、炎症誘発性表現型を包含し、抗腫瘍活性を保有し、それによって、免疫監視を支援するためにがんにおいてマクロファージを操作することの大きな興味をもたらしている。ＣＡＲは、マクロファージに、腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）に対する応答の特異性を、腫瘍に対するエフェクター機能の増強と平行して与える。たとえば、食作用シグナル伝達を模倣するために、マクロファージを、Ｍｅｇｆ１０またはＦｃＲγのサイトゾルドメインを取り込んだＣＤ１９－ＣＡＲを用いて操作することができる。その結果、これは、リンパ腫細胞の抗原特異的貪食およびトロゴサイトーシスを始動した。ＣＤ３ζ－ＣＡＲマクロファージはまた、ＦｃＲγ－ＣＡＲに匹敵する活性貪食も示す。したがって、向け直した抗原特異的貪食は、がん細胞の排除における空間的な制御および精度を与え、最終的には治療効果に寄与する。さらに、マクロファージは、アデノウイルスベクターを介して慣用のＣＡＲを用いて形質導入してよく、炎症誘発性Ｍ１表現型および刺激されたＴ細胞応答に向けて分極化され、著しい腫瘍退縮および生存延長をもたらす。
【0151】
本明細書中で使用する用語「樹状細胞」（ＤＣ）とは、ナイーブＴ細胞をプライミングし、メモリー応答を再活性化する、プロフェッショナル抗原提示細胞の異種部分組をいう。がんでは、ＤＣは、リンパ器官または腫瘍微小環境において環境キューを感受し、危険シグナルの感受はＤＣの成熟を誘導し、免疫寛容または腫瘍特異的応答のいずれかをもたらす。重要なことに、細胞毒性があるＣＤ８＋Ｔ細胞は、より強力な抗腫瘍応答を促進するためのＴＡＡまたはネオアンチゲンの交差提示を通じて、ＤＣによって活性化させることができる。これらはがん免疫療法において主要な意味あいを有しており、ＣＡＲは、腫瘍に対する有効な応答のためにＤＣを操作するための新興戦略となる。
【0152】
本明細書中で使用する用語「白血球除去」とは、ドナーまたは患者の血液をドナーまたは患者から取り出すこと、および、白血球などの選択された特定の構成成分を分離して取り出し、残りをドナーまたは患者の循環に、たとえば再帰輸血によって戻す機器に通すことによる、当分野で認識される体外プロセスをいう。
【0153】
用語「有効量」または「治療上有効な量」とは、研究者、獣医師、医師、または他の臨床家によって探求されている、細胞、組織、系、または対象の生物学的または医学的応答を誘発する組成物の量をいう。たとえば、組成物は、単一用量としてまたは一連の用量の一部としてのいずれかで対象に投与した場合に、少なくとも１つの治療効果を生じるために有効な、たとえば、処置している障害または疾患（たとえば血液がん）の兆候または症状のうちの１つまたは複数の発生を防止する、またはそれをある程度まで軽減させるために十分な、有効量のＣＡＲ細胞、好ましくは抗ＣＤ－１９ＣＡＲ－Ｔ細胞および／またはモクラビモドを含む。有効量は、当業者によって理解されるように、たとえば、投与経路、賦形剤の使用、および他の活性薬剤との同時使用に応じて変動する。特定の疾患または状態の処置の事例では、所望の治療効果は疾患の進行を阻害することである。これは、疾患の進行を一時的に遅くすることのみに関与し得るが、より好ましくは、これは疾患の進行を永久に停止させることを含む。これは、ルーチン的方法によってモニタリングすることができる、または、本明細書中に記述した診断方法に従ってモニタリングすることができる。疾患または状態の処置に対する所望の応答は、発症を遅延させること、または疾患もしくは状態の発症を防止することでさえあることもできる。投与するＣＡＲ細胞を含む組成物の正確な量は、医師によって、年齢、体重、腫瘍の大きさ、感染症または転移の程度、および患者（対象）の状態の個々の相違を考慮して決定することができる。他の実施形態では、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターに言及する場合、有効量のＳ１Ｐ受容体モジュレーター（モクラビモドなど）とは、ｉｎ ｖｉｖｏ、ｉｎ ｖｉｔｒｏ、もしくはｅｘ ｖｉｖｏで、本明細書中で定義するＣＡＲ細胞組成物を活性化するため、および／または、それを必要としている対象において有効量のＣＡＲ細胞組成物と組み合わせて投与した場合に相乗的な治療反応を生じるために十分な量をいい得る。
【0154】
本明細書中において用語「約」とは、続く値が±２０％、好ましくは±１０％、より好ましくは±５％、さらにより好ましくは±２％、さらにより好ましくは±１％変動し得るという意味を有する。
【0155】
用語「患者」、「対象」、「個体」などは、本明細書中で互換性があるように使用され、哺乳動物、好ましくはヒトをいう。一部の実施形態では、処置を必要としている患者、対象、または個体は、疾患、状態、または障害、たとえば血液悪性腫瘍を既に有する者を含む。
【0156】
本明細書中で使用する用語「組み合わせて」または「組合せ療法において」とは、対象が障害を患っている過程において、２つ（以上）の異なる処置を対象に送達すること、たとえば、対象が障害を診断された後、かつ障害が治癒するもしくは排除される、または他の理由で処置が終わる前に、２つ以上の処置を送達することを意味する。一部の実施形態では、１つの処置の送達は、第２の処置の送達が始まる際に依然として行われているため、投与に関して重複がある。これは、本明細書中で時折、「同時」または「同時発生的送達」と呼ぶ。他の実施形態では、一方の処置の送達は、他方の処置の送達を開始する前に終わる。いずれの場合でも一部の実施形態では、組合せ投与が理由で、処置はより有効である。たとえば、第２の処置がより有効である、たとえば等価な効果が少ない第２の処置で見られる、または第２の処置が、第１の処置の非存在下で第２の処置を投与した場合に見られるよりも、症状をより高い程度まで低下させる、または類似の状況が第１の処置でみられる。一部の実施形態では、送達は、症状、または障害に関連する他のパラメータの低下が、一方の処置を、他方の非存在下で送達した場合に観察されるであろうものよりも高くなるようなものである。２つの処置の効果は、部分的に相加的、完全に相加的、または相加的より高い場合がある。送達は、送達した第１の処置の効果が、第２を送達した際に依然として検出可能であるようなものである。一実施形態では、がん関連抗原と結合するＣＡＲ分子を発現するＣＡＲ細胞を本明細書中に記載の用量および／または投薬スケジュールで投与し、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターを本明細書中に記載の用量および／または投薬スケジュールで投与する。一部の実施形態では、「～と組み合わせて」とは、ＣＡＲ細胞療法とＳ１Ｐ受容体モジュレーター（たとえばモクラビモド、ＫＲＰ２０３）とを同時に投与しなければならないおよび／または一緒に送達するため配合しなければならないことを暗示することを意図しないが、これらの送達方法は本開示の範囲内にある。ＣＡＲ細胞療法は、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーター、たとえばモクラビモドの用量と同時発生的に、その前（たとえば、５分間、１５分間、３０分間、４５分間、１時間、２時間、４時間、６時間、１２時間、２４時間、４８時間、７２時間、９６時間、１週間、２週間、３週間、４週間、５週間、６週間、８週間、１２週間、もしくは１６週間前）、または、好ましくは、その後（たとえば、５分間、１５分間、３０分間、４５分間、１時間、２時間、４時間、６時間、１２時間、２４時間、４８時間、７２時間、９６時間、１週間、２週間、３週間、４週間、５週間、６週間、８週間、１２週間、もしくは１６週間後）に、投与することができる。ある特定の実施形態では、それぞれの薬剤は、その特定の薬剤のために決定された用量および／または時間スケジュールで投与する。
【0157】
本明細書中で使用する、別段に指定しない限りは、用語「処置すること」または「処置」とは、そのような用語が適用される障害もしくは状態を好転させる、軽減させる、その進行を阻害する、もしくは防止すること、またはそのような用語が適用される障害もしくは状態の１つもしくは複数の症状を好転させる、軽減させる、その進行を阻害する、もしくは防止することを示す。
【0158】
本明細書中で使用する用語「～に由来する」とは、第１と第２の分子との間の関係性を示す。これは、一般に、第１の分子と第２の分子との間構造的類似度をいい、第２の分子に由来する第１の分子に対するプロセスまたは供給源の制限を暗示または含むことをしない。たとえば、ＣＤ３ゼータ分子に由来する細胞内シグナル伝達ドメインの場合、細胞内シグナル伝達ドメインは、必要な機能、すなわち、適切な条件下でシグナルを生じる能力を有するように、十分なＣＤ３ゼータ構造を保持する。これは、細胞内シグナル伝達ドメインを生じる特定のプロセスに対する制限を暗示または含むことをせず、たとえば、細胞内シグナル伝達ドメインを提供するために、ＣＤ３ゼータ配列から開始して望まない配列を欠失させる、または突然変異を強要して、細胞内シグナル伝達ドメインに達しなければならないことを意味しない。
【0159】
本明細書中で使用する用語「シグナル伝達ドメイン」とは、二次メッセンジャーを生成すること、またはそのようなメッセンジャーに応答することによってエフェクターとして機能することによって、細胞内で情報を伝達して定義されたシグナル伝達経路を介して細胞活性を調節することによって作用する、タンパク質の機能的部分をいう。
【0160】
用語「遺伝子操作した」または「遺伝子改変した」とは、細胞のゲノムを改変する方法をいい、それだけには限定されないが、コードもしくは非コード領域またはその一部分を欠失させること、あるいはコード領域またはその一部分を挿入することが挙げられる。一部の実施形態では、改変された細胞は、免疫エフェクター細胞、たとえばリンパ球、たとえば、Ｔ細胞、Ｂ細胞、またはＮＫ細胞であり、これは患者またはドナーのどちらかから得ることができる。細胞は、細胞のゲノム内に取り込まれた、たとえばキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）などの外因性構築体を発現するように改変することができる。
【0161】
本明細書中で使用する用語「ＣＤ１９」とは、表面抗原分類１９タンパク質をいい、これは、すべてのＢ系統細胞において発現され、白血病前駆細胞上で検出可能である、抗原決定基である。ヒトおよびネズミのアミノ酸および核酸配列は、ＧｅｎＢａｎｋ、ＵｎｉＰｒｏｔ、およびＳｗｉｓｓ－Ｐｒｏｔなどの公開データベース中に見つけることができる。たとえば、ヒトＣＤ１９のアミノ酸配列は、ＵｎｉＰｒｏｔ／Ｓｗｉｓｓ－Ｐｒｏｔ受託番号Ｐ１５３９１として見つけることができ、ヒトＣＤ１９をコードしているヌクレオチド配列は、受託番号ＮＭ＿００ｌ １７８０９８で見つけることができる。本明細書中で使用する「ＣＤ１９」は、完全長野生型ＣＤ１９の突然変異、たとえば、点突然変異、断片、挿入、欠失、およびスプライス変異を含むタンパク質を含む。ＣＤ１９は、たとえば、急性リンパ芽球性白血病、慢性リンパ球白血病、および非ホジキンリンパ腫を含む、ほどんどのＢ系統がん上で発現される。ＣＤ１９の発現に関連する他の疾患は、それだけには限定されないが、血液がん、たとえば、白血病、リンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、急性リンパ性白血病ＡＬＬ、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）、縦隔原発Ｂ細胞性大細胞型リンパ腫（ＰＭＢＣＬ）、または多発性骨髄腫、好ましくはＡＬＬ、ＤＬＢＣＬ、ＰＭＢＣＬ、およびＭＣＬ、より好ましくはＤＬＢＬＣである。これはＢ細胞前駆体の初期マーカーでもある。たとえばNicholson et al. Mol. Immun. 34 (16-17): 1157-1165 (1997)を参照されたい。一態様では、ＣＡＲＴの抗原結合部分は、ＣＤ１９タンパク質の細胞外ドメイン内の抗原を認識して結合する。一態様では、ＣＤ１９タンパク質はがん細胞上で発現される。
【0162】
本明細書中で使用する用語「ＣＤ２０」とは、Ｂ細胞上で検出可能であることが知られている抗原決定基をいう。ヒトＣＤ２０は、膜貫通４－ドメイン、サブファミリーＡ、メンバー１（ＭＳ４Ａ１）とも呼ばれる。ヒトおよびネズミのアミノ酸および核酸配列は、ＧｅｎＢａｎｋ、ＵｎｉＰｒｏｔ、およびＳｗｉｓｓ－Ｐｒｏｔなどの公開データベース中に見つけることができる。たとえば、ヒトＣＤ２０のアミノ酸配列は、受託番号ＮＰ＿６９０６０５．１およびＮＰ＿０６８７６９．２で見つけることができ、ヒトＣＤ２０の転写変異体１および３をコードしているヌクレオチド配列は、それぞれ受託番号ＮＭ＿１５２８６６．２およびＮＭ＿０２１９５０．３で見つけることができる。一態様では、ＣＡＲの抗原結合部分は、ＣＤ２０タンパク質の細胞外ドメイン内の抗原を認識して結合する。一態様では、ＣＤ２０タンパク質はがん細胞上で発現される。
【0163】
本明細書中で使用する用語「ＣＤ２２」とは、白血病前駆細胞上で検出可能であることが知られている抗原決定基をいう。ヒトおよびネズミのアミノ酸および核酸配列は、ＧｅｎＢａｎｋ、ＵｎｉＰｒｏｔ、およびＳｗｉｓｓ－Ｐｒｏｔなどの公開データベース中に見つけることができる。たとえば、アイソフォーム１～５ヒトＣＤ２２のアミノ酸配列は、それぞれ受託番号ＮＰ ００１７６２．２、ＮＰ ００１１７２０２８．１、ＮＰ ００１１７２０２９．１、ＮＰ ００１１７２０３０．１、およびＮＰ ００１２６５３４６．１で見つけることができ、ヒトＣＤ２２の変異体１～５をコードしているヌクレオチド配列は、それぞれ受託番号ＮＭ ００１７７１．３、ＮＭ ００１１８５０９９．１、ＮＭ ００１１８５１００．１、ＮＭ ００１１８５１０１．１、およびＮＭ ００１２７８４１７．１で見つけることができる。一態様では、ＣＡＲの抗原結合部分は、ＣＤ２２タンパク質の細胞外ドメイン内の抗原を認識して結合する。一態様では、ＣＤ２２タンパク質はがん細胞上で発現される。
【0164】
本明細書中で使用する用語「ＩＬ－３受容体のアルファサブユニット」、「ＩＬ３Ｒａ」、「ＣＤ１２３」、「ＩＬ３Ｒａ鎖」、および「ＩＬ３Ｒａサブユニット」とは、互換性があるように、白血病前駆細胞上で検出可能であることが知られている抗原決定基をいう。ヒトおよびネズミのアミノ酸および核酸配列は、ＧｅｎＢａｎｋ、ＵｎｉＰｒｏｔ、およびＳｗｉｓｓ－Ｐｒｏｔなどの公開データベース中に見つけることができる。たとえば、ヒトＩＬ３Ｒａのアミノ酸配列は、受託番号ＮＰ ００２１７４で見つけることができ、ヒトＩＬ３Ｒａをコードしているヌクレオチド配列は、受託番号ＮＭ ００５１９１で見つけることができる。一態様では、ＣＡＲの抗原結合部分は、ＣＤ１２３タンパク質の細胞外ドメイン内のエピトープを認識して結合する。一態様では、ＣＤ１２３タンパク質はがん細胞上で発現される。本明細書中で使用する「ＣＤ１２３」は、完全長野生型ＣＤ１２３の突然変異、たとえば、点突然変異、断片、挿入、欠失、およびスプライス変異を含むタンパク質を含む。
【0165】
本明細書中で使用する用語「ＲＯＲ１」とは、白血病前駆細胞上で検出可能であることが知られている抗原決定基をいう。ヒトおよびネズミのアミノ酸および核酸配列は、ＧｅｎＢａｎｋ、ＵｎｉＰｒｏｔ、およびＳｗｉｓｓ－Ｐｒｏｔなどの公開データベース中に見つけることができる。たとえば、ヒトＲＯＲ１のアイソフォーム１および２前駆体のアミノ酸配列は、それぞれ受託番号ＮＰ＿００５００３．２およびＮＰ＿００１０７７０６１．１で見つけることができ、それらをコードしているｍＲＮＡ配列は、それぞれ受託番号ＮＭ＿００５０１２．３およびＮＭ＿００１０８３５９２．１で見つけることができる。一態様では、ＣＡＲの抗原結合部分は、ＲＯＲ１タンパク質の細胞外ドメイン内の抗原を認識して結合する。一態様では、ＲＯＲ１タンパク質はがん細胞上で発現される。
【0166】
本明細書中で使用する用語「ＣＤ３３」とは、表面抗原分類３３タンパク質をいい、これは、白血病細胞および骨髄系統の正常な前駆細胞上で検出可能な抗原決定基である。ヒトおよびネズミのアミノ酸および核酸配列は、ＧｅｎＢａｎｋ、ＵｎｉＰｒｏｔ、およびＳｗｉｓｓ－Ｐｒｏｔなどの公開データベース中に見つけることができる。たとえば、ヒトＣＤ３３のアミノ酸配列は、ＵｎｉＰｒｏｔ／Ｓｗｉｓｓ－Ｐｒｏｔ受託番号Ｐ２０１３８で見つけることができ、ヒトＣＤ３３をコードしているヌクレオチド配列は、受託番号ＮＭ＿００１７７２．３で見つけることができる。一態様では、ＣＡＲの抗原結合部分は、ＣＤ３３タンパク質またはその断片の細胞外ドメイン内のエピトープを認識して結合する。一態様では、ＣＤ３３タンパク質はがん細胞上で発現される。本明細書中で使用する「ＣＤ３３」は、完全長野生型ＣＤ３３の突然変異、たとえば、点突然変異、断片、挿入、欠失、およびスプライス変異を含むタンパク質を含む。
【0167】
本明細書中で使用する用語「ＣＤ３８」とは、表面抗原分類３８タンパク質をいい、これは、白血病細胞および骨髄系統の正常な前駆細胞上で検出可能な抗原決定基である。ヒトおよびネズミのアミノ酸および核酸配列は、ＧｅｎＢａｎｋ、ＵｎｉＰｒｏｔ、およびＳｗｉｓｓ－Ｐｒｏｔなどの公開データベース中に見つけることができる。たとえば、ヒトＣＤ３８のアミノ酸配列は、ＵｎｉＰｒｏｔ／Ｓｗｉｓｓ－Ｐｒｏｔ受託番号Ｐ２８９０７として見つけることができ、ヒトＣＤ３８をコードしているヌクレオチド配列は、受託番号ＮＭ＿００１７７５で見つけることができる。一態様では、ＣＡＲの抗原結合部分は、ＣＤ３８タンパク質またはその断片の細胞外ドメイン内のエピトープを認識して結合する。一態様では、ＣＤ３８タンパク質はがん細胞上で発現される。本明細書中で使用する「ＣＤ３８」は、完全長野生型ＣＤ３８の突然変異、たとえば、点突然変異、断片、挿入、欠失、およびスプライス変異を含むタンパク質を含む。
【0168】
本明細書中で使用する用語「ＣＬＬ－１」とは、ヒトＣ型レクチン様分子－１（ＣＬＬ－１）をいい、これはＩＩ型膜貫通糖タンパク質であり、その発現は、骨髄細胞および大多数のＡＭＬ芽細胞に限定される。さらに、ＣＬＬ－１は、白血病幹細胞（ＬＳＣ）中で発現されるが、造血幹細胞（ＨＳＣ）中には存在せず、これはＡＭＬ処置の潜在的な治療標的を提供し得る（Wang, J., Chen, S., Xiao, W. et al. CAR-T cells targeting CLL-1 as an approach to treat acute myeloid leukemia. J Hematol Oncol 11, 7 (2018)）。
【0169】
本明細書中で使用する用語「ＢＣＭＡ」とは、Ｂ細胞成熟抗原をいう。ＢＣＭＡ（ＴＮＦＲＳＦ１７、ＢＣＭ、またはＣＤ２６９としても知られる）は、腫瘍壊死因子受容体（ＴＮＦＲ）ファミリーのメンバーであり、高分化Ｂ細胞、たとえばメモリーＢ細胞、および形質細胞上で主に発現される。そのリガンドは、ＴＮＦファミリーのＢ細胞活性化因子（ＢＡＦＦ）および増殖誘導リガンド（ＡＰＲＩＬ）と呼ばれる。ＢＣＭＡは、長期的な液性免疫を維持するために形質細胞の生存を媒介することに関与している。ＢＣＭＡの遺伝子は染色体１６上にコードされており、１８４個のアミノ酸のタンパク質（ＮＰ＿００１１８３．２）をコードしている、９９４個のヌクレオチドの長さの一次ｍＲＮＡ転写物（ＮＣＢＩ受託ＮＭ＿００１１９２．２）を生じる。ＢＣＭＡ座位に由来する第２のアンチセンス転写物が記載されており、これはＢＣＭＡ発現の調節において役割を果たし得る。（Laabi Y. et al., Nucleic Acids Res., 1994, 22: 1147-1154）。
【0170】
用語「ＧＤ２」とは、ＮＢＬ、黒色腫、および肉腫上に見つかるＴＡＡであるジシアロガングリオシドをいう。
【0171】
用語「ＭＣＳＰ」とは、黒色腫において見つかる別のＴＡＡである黒色腫関連コンドロイチン硫酸プロテオグリカンをいう。
【0172】
用語「ＣＤ５」とは、Ｔ細胞の表面上およびＢ－１ａとして知られるネズミＢ細胞の部分組において発現される、受容体ＣＤ５をいう。ＣＤ５は、Ｂ－１細胞が、非常に強力な刺激（細菌タンパク質など）のみによって活性化させることができ、正常組織タンパク質によって活性化されないように、ＢＣＲからの活性化シグナルを緩和させる役割を果たす。
【0173】
用語「ＮＫＧ２Ｄ」とは、宿主を感染症およびがんから保護することにおいて重要な役割を果たす、ナチュラルキラーグループ２Ｄ（ＮＫＧ２Ｄ）受容体をいう。感染細胞または腫瘍細胞上で誘導されたリガンドを認識することによって、ＮＫＧ２Ｄは、リンパ球活性化を変調し、免疫を促進して、リガンド発現細胞を排除する。
【0174】
用語「ｓｃＦｖ」とは、軽鎖の可変領域を含む少なくとも１つの抗体断片と重鎖の可変領域を含む少なくとも１つの抗体断片とを含む融合タンパク質をいい、軽鎖および重鎖可変領域は、短い柔軟なポリペプチドリンカーを介して隣接して連結されており、単鎖ポリペプチドとして発現されることができ、ｓｃＦｖは、それが由来するインタクトな抗体の特異性を保持する。指定しない限りは、本明細書中で使用するｓｃＦｖは、ＶＬおよびＶＨ可変領域を、たとえばポリペプチドのＮ末端およびＣ末端に関していずれかの順序で有しよく、ｓｃＦｖは、ＶＬ－リンカー－ＶＨを含み得る、またはＶＨ－リンカー－ＶＬを含み得る。
【0175】
本明細書中で使用する用語「再発」または「再発性」は、当分野におけるその通常の意味を有し、処置による完全寛解の期間（たとえば初回完全寛解）後の、血液悪性腫瘍または血液悪性腫瘍の兆候および症状が戻ることをいう。
【0176】
本明細書中で使用する用語「寛解」は、当分野におけるその通常の意味を有し、がんの兆候および症状の減少または消失をいう。部分的寛解では、すべてではないが一部のがんの兆候および症状が消失している。完全寛解（ＣＲ）では、がんのすべての兆候および症状が消失しているが、がんは依然として身体内にある場合がある。
【0177】
本明細書中で使用する用語「コンディショニングすること」とは、免疫エフェクター細胞療法を必要としている患者を、適切な条件のために準備することを示す。本明細書中で使用する、コンディショニングすることは、免疫エフェクター細胞療法の前に、それだけには限定されないが、内在性リンパ球の数を減らすこと、サイトカインシンクを除去すること、１つもしくは複数の恒常性サイトカインもしくは炎症誘発因子の血清レベルを増加させること、コンディショニング後に投与するＴ細胞のエフェクター機能を増強させること、抗原提示細胞の活性化および／もしくは利用可能性を増強させること、またはその任意の組合せを含む。一実施形態では、「コンディショニングすること」は、患者をリンパ枯渇させることを含む。
【0178】
用語「自己」とは、後に個体内に再導入する者と同じ個体に由来する任意の材料をいう。たとえば、本明細書中に記載の細胞療法方法は、リンパ球を患者から収集し、その後、これを操作して、たとえばＣＡＲ構築体を発現させ、その後、同じ患者に投与して戻すことを含む。
【0179】
用語「同系」とは、後に個体内に再導入する者と遺伝学的に同一である個体、たとえば同じ個体または一卵性双生児に由来する任意の材料をいう。
【0180】
用語「アロジェネイック」とは、材料を導入する個体と同じ種（たとえばヒト種）の異なる動物に由来する任意の材料をいう。２体以上の個体は、１つまたは複数の座位での遺伝子が同一でない場合に、互いにアロジェネイックであると言われる。一部の態様では、同じ種の個体からのアロジェネイック材料は、抗原的に相互作用するために十分に遺伝学的に異なっている場合がある。
【0181】
キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）細胞
本明細書中で使用するＣＡＲ細胞組成物とは、１つまたは複数のキメラ抗原受容体分子を発現するように遺伝子改変された、細胞または細胞集団を含む組成物（compositing）である。
本明細書中で使用するＣＡＲ細胞組成物とは、１つまたは複数のキメラ抗原受容体分子を発現するように遺伝子改変された、細胞または細胞集団を含む組成物（compositing）である。
【0182】
具体的な実施形態では、ＣＡＲ細胞は、ヒト免疫エフェクター細胞または細胞集団（たとえば、慣用Ｔ細胞もしくは制御性Ｔ細胞などのヒトＴ細胞またはヒトＮＫ細胞、たとえば、本明細書中に記載のヒトＴ細胞または本明細書中に記載のヒトＮＫ細胞）である。一実施形態では、ヒトＴ細胞はＣＤ８＋Ｔ細胞である。一実施形態では、細胞は自己または同系のＴ細胞である。一実施形態では、細胞はアロジェネイックＴ細胞である。用語「細胞」に言及する本明細書中に開示した組成物および方法は、１つまたは複数の細胞、たとえば細胞集団を含む組成物および方法を包含することを理解されたい。
【0183】
ＣＡＲ－Ｔ細胞を生成するための方法は、たとえばFeins et al. Am J Hematol. 2019;94:S3-S9中に記載されている。ＣＡＲ ＮＫ細胞を生成する方法は、たとえばXie et al. EBiomedicine 59 (2020) 102975中に記載されている。ＣＡＲ Ｔｒｅｇ細胞を生成する方法は、たとえばEnrico Fritsche et al., Therapeutic Biomanufacturing, volume 38, issue 10, P1099-1112, October 2020中に記載されている。
【0184】
本発明に従った使用のためのＣＡＲ細胞を生成するための免疫細胞は、他の遺伝子修飾（ＣＡＲ分子の発現に必要なものに加えて）、特にアロジェネイック使用のためのものをさらに含み得る、すなわち、ＣＡＲ細胞は、レシピエント対象とは異なるドナー対象免疫細胞から作製する。
【0185】
具体的な実施形態では、ＣＡＲ構築体は、ＣＤ２８、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８α、およびＣＤ１６からなる群から選択される膜貫通ドメインを含む。
【0186】
具体的な実施形態では、ＣＡＲ構築体は、ＣＤ２８、４－１ＢＢ、ＩＣＯＳ、およびＣＤ２７からなる群から選択される細胞質シグナル伝達ドメインを含む。
【0187】
本明細書中で使用する用語、ＣＡＲは、特に腫瘍回避を回避するおよび／または毒性を緩和させるための、複数のがん関連抗原、典型的には２つの明確ながん関連抗原（たとえばＣＤ２０／ＣＤ２２）を認識する、キメラ抗原受容体分子またはキメラ抗原受容体分子の組合せを、さらに包含する。複数のがん関連抗原を認識するそのようなＣＡＲは、それだけには限定されないが、二重ＣＡＲ、タンデムＣＡＲ、ループタンデムＣＡＲ、コンビナトリアルＣＡＲを包含し、これらはたとえばGuedan et al 2019, Molecular Therapy: Methods & Clinical Development Vol. 12, pp 145-156中に開示されている。
【0188】
ＣＡＲは、細胞質シグナル伝達ドメインに適合するモジュールに従って分類されている。第一世代ＣＡＲは、１つのシグナル伝達モジュールがＴＣＲ／ＣＤ３複合体のζ鎖に由来する、細胞質シグナル伝達ドメインを示す。第二および第三世代は、それぞれＣＤ３ζ鎖に付随する１つまたは複数の共刺激領域を含むように設計されている。ＯＸ４０、ＣＤ２７、およびＩＣＯＳを含む様々な共刺激分子が、前臨床研究において評価されているが、ＣＤ２８および４－１ＢＢが臨床治験において最も一般的に使用されている。
【0189】
第一世代ＣＡＲ－Ｔ細胞は、ｉｎ ｖｉｔｒｏで細胞毒性がある活性を示したが、ｉｎ ｖｉｖｏで最適以下の持続を示し、その治療可能性が制限されている。実際に、第二世代ＣＡＲは、第一世代ＣＡＲと比較して、輸液後により良好なＴ細胞持続を示していた。しかし、４－１ＢＢ含有ＣＡＲは、ＣＤ２８ドメインを保有するものと比較して、ｉｎ ｖｉｖｏ、異種移植片モデル、および患者において大きな持続を示すことが報告されている。ＣＤ２８に基づくＣＡＲ－Ｔ細胞は、構成的増殖、エフェクターメモリーの分化、および消耗し易さを示した一方で、４－１ＢＢに基づくＣＡＲ－Ｔ細胞は、生存および消耗阻害が増強されたセントラルメモリー特長を示すことが報告された。共刺激ドメインはＣＡＲ－Ｔ細胞機能、生存、および持続を改善させたため、２つの共刺激ドメインを組み合わせる第三世代ＣＡＲが作製された。モノクローナル抗体のエピトープ特異性を特異的Ｔ細胞の殺滅能力と連結することによって、ＣＡＲは、ＭＨＣ分子による抗原提示の要件を迂回する。さらに、ＣＡＲ－Ｔ細胞はまた、脂質および炭水化物などの非古典的ＴＣＲ標的を認識することもでき、ＣＡＲ－Ｔ細胞に、より広範囲の標的抗原を認識する能力を与える。ＴＣＲ－トランスジェニックＴ細胞とは異なり、ＣＡＲ－Ｔ細胞は抗原プロセシングを必要とせず、ＨＬＡ制限されておらず、これにより、この治療がより大きな患者部分組に達することを可能にする。さらに、ＣＡＲ－Ｔ細胞輸液生成物は末梢血から得られるため、切除不可能な腫瘍（no resectable）または腫瘍内への低Ｔ細胞浸潤（ＴＩＬ治療に不適格）を有する患者がＣＡＲ療法の恩恵を受けることができる。
【0190】
したがって、好ましい一実施形態では、本開示によるＣＡＲ細胞は、ＣＡＲを発現するＴ細胞（すなわちＣＡＲ－Ｔ細胞）であり、前記ＣＡＲは、少なくとも：
（ｉ）抗原結合ドメイン、典型的にはがん関連抗原（たとえばＣＤ１９）に対する結合特異性を有する単鎖可変断片を含む細胞外ドメインと、
（ｉｉ）膜貫通ドメインと、
（ｉｉｉ）好ましくはＴＣＲ／ＣＤ３複合体のζ鎖に由来する、１つのシグナル伝達モジュールと、任意選択で１つまたは複数の共刺激ドメイン、典型的にはＣＤ２８または４－１ＢＢ共刺激ドメインとを含む、細胞質シグナル伝達ドメインと
を含む。
（ｉ）抗原結合ドメイン、典型的にはがん関連抗原（たとえばＣＤ１９）に対する結合特異性を有する単鎖可変断片を含む細胞外ドメインと、
（ｉｉ）膜貫通ドメインと、
（ｉｉｉ）好ましくはＴＣＲ／ＣＤ３複合体のζ鎖に由来する、１つのシグナル伝達モジュールと、任意選択で１つまたは複数の共刺激ドメイン、典型的にはＣＤ２８または４－１ＢＢ共刺激ドメインとを含む、細胞質シグナル伝達ドメインと
を含む。
【0191】
ＣＡＲ－Ｔ細胞の養子移入はＢ細胞由来の悪性腫瘍の処置において見事な結果を示している。その結果、米国食品薬品局（ＦＤＡ）は、２０１７年に、ＣＡＲ－Ｔ細胞に基づいた、Ｂ細胞悪性腫瘍のための、最初の２つの遺伝子療法を認可している。Ｋｙｍｒｉａｈ（チサゲンレクユーセル）は、ＣＤ１９を標的とする第二世代ＣＡＲであり、４－１ＢＢ由来の同時刺激ドメインを含有し、小児急性Ｂ細胞リンパ芽球性白血病の処置のために認可されている。Ｙｅｓｃａｒｔａ（アキシカブタゲンシロルユーセル）は、やはりＣＤ１９抗原を標的とし、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫を有する患者に適応される。Ｋｙｍｒｉａｈとは異なり、ＹｅｓｃａｒｔａはＣＤ２８由来の共刺激モジュールを含有する。２０２０年７月に、ＦＤＡは、やはりＣＤ１９抗原を標的とするＴｅｃａｒｔｕｓ（ブレクスカブタゲンオートルユーセル）を、他の処置に応答しないまたは再発したマントル細胞リンパ腫を有する患者のために認可した。２０２１年２月に、ＦＤＡは、ＣＤ１９抗原を標的とするＢｒｅｙａｎｚｉ（リソカブタゲンマラルユーセル）を、再発性または不応性の大Ｂ細胞リンパ腫を有する患者のために認可した。２０２１年３月に、ＦＤＡは、多発性骨髄腫を有する成人患者を処置するための、ＢＣＭＡを標的とする最初のＣＡＲ－Ｔ細胞標的として、Ａｂｅｃｍａ（イデカブタゲンビクルユーセル）を認可した。
【0192】
本開示において使用するＣＡＲ細胞は、がん関連抗原と特異的に結合する抗原結合ドメインを含む細胞外ドメインを含むＣＡＲをコードしている核酸を含む。
【0193】
具体的な実施形態では、前記がん関連抗原は、造血細胞、好ましくは免疫細胞、たとえばＢまたはＴ細胞の細胞表面マーカーからなる群から選択される。
【0194】
１つの特定の実施形態では、本開示において使用するためのＣＡＲ細胞は、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ７、ＣＤ１９、ＣＤ１９／ＣＤ２０、ＣＤ１９／ＣＤ２２；ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ２０／ＣＤ２２、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ３８、ＣＤ３９、ＣＤ７０；ＣＤ１２３、ＣＤ４４ｖ６（アイソフォーム変異体６）、ＣＤ１２３／ＣＬＬ１、ＢＣＭＡ ＣＤ３８／ＢＣＭＡ、ＣＤ１９／ＢＣＭＡ、ＣＤ５６、ＣＤ１３８、ＬｅＹ、ＲＯＲ１、ＳＬＡＭＦ７、ｎＦＬＴ３、ＬＭＰ１、ＢＣＭＡ／ＴＡＣＩ、ＣＳ１、ＧＰＲＣ５Ｄ、ＣＳ１／ＢＣＭＡ、ＮＫＧ２Ｄ、ＣＬＬ－１リガンドからなる群から選択されるがん関連抗原と特異的に結合する抗原結合ドメインを含む細胞外ドメインを有するＣＡＲを含む。より好ましくは、前記がん関連抗原またはがん関連抗原の組合せは、ＣＤ１９、ＣＤ１２３、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ３８、ＬｅＹ、ＲＯＲ１、ＣＬＬ－１、ＧＤ２、ＭＣＳＰ、ＣＤ５、ＮＫＧ２Ｄ、ＭＨＣペプチド抗原、ＢＣＭＡ、およびその組合せ、好ましくはＣＤ１９からなる群から選択される。他の具体的な実施形態では、前記がん関連抗原は、血液悪性腫瘍に典型的ながん関連抗原、または、固形腫瘍がん、特に乳がん、典型的にはＨＥＲ２もしくはＨＥＲ３からのものであり得る、リンパ器官転移、好ましくはリンパ節転移のがん関連抗原から選択される。前記がん関連抗原は、転移がんの表面上に発現される抗原、または主要組織適合複合体分子のコンテキストにおいて転移がんの表面上に発現される抗原を含む。
【0195】
好ましい実施形態では、前記好ましいがん関連抗原は、ＣＤ１９、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ１２３、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ３８、ＬｅＹ、ＲＯＲ１、ＣＬＬ－１、ＧＤ２、ＭＣＳＰ、ＣＤ５、ＮＫＧ２Ｄ、ＭＨＣペプチド抗原、ＢＣＭＡ、好ましくはＣＤ１９からなる群から選択される。
【0196】
具体的な実施形態では、本開示による使用のための前記ＣＡＲ細胞は、細胞外抗原結合ドメインとして、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ７、ＣＤ１９、ＣＤ１９／ＣＤ２０、ＣＤ１９／ＣＤ２２；ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ２０／ＣＤ２２、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ３８、ＣＤ３９、ＣＤ７０；ＣＤ１２３、ＣＤ４４ｖ６（アイソフォーム変異体６）、ＣＤ１２３／ＣＬＬ１、ＢＣＭＡ ＣＤ３８／ＢＣＭＡ、ＣＤ１９／ＢＣＭＡ、ＣＤ５６、ＣＤ１３８、ＬｅＹ、ＲＯＲ１、ＳＬＡＭＦ７、ｎＦＬＴ３、ＬＭＰ１、ＢＣＭＡ／ＴＡＣＩ、ＣＳ１、ＧＰＲＣ５Ｄ、ＣＳ１／ＢＣＭＡ、ＮＫＧ２Ｄリガンドからなる群から選択され、より好ましくは、ＣＤ１９、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ１２３、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ３８、ＬｅＹ、ＲＯＲ１、ＣＬＬ－１、ＧＤ２、ＭＣＳＰ、ＣＤ５、ＮＫＧ２Ｄ、ＭＨＣペプチド抗原、ＢＣＭＡ、好ましくはＣＤ１９からなる群から選択される細胞表面マーカーと特異的に結合する単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）を含む、ＣＡＲを発現する。
【0197】
本明細書中に記載のようにがん関連抗原と結合するＣＡＲ構築体の例は、国際公開第２０１９２２７００３号パンフレット（その全体で本明細書中に参考として組み込まれている）中に記載されている。
【0198】
他の例示的なＣＡＲ構築体は、以下のＣＡＲ－Ｔの市販または開発製品中に使用されるものである：Ｋｙｍｒｉａｈ（チサゲンレクユーセル）、Ｙｅｓｃａｒｔａ（アキシカブタゲンシロルユーセル）、Ｔｅｃａｒｔｕｓ（ブレクスカブタゲンオートルユーセル）、Ｂｒｅｙａｎｚｉ（リソカブタゲンマラルユーセル）、Ａｂｅｃｍａ（イデカブタゲンビクルユーセル）。
【0199】
本明細書中に記載のＣＡＲ細胞を含む組成物は、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターと組み合わせて使用する。
【0200】
Ｓ１Ｐ受容体モジュレーター
Ｓ１Ｐ受容体を、多種多様な組織において発現され、様々な細胞特異性を示す、５つのサブタイプ関連Ｇ結合タンパク質受容体（すなわち、Ｓ１Ｐ１、Ｓ１Ｐ２、Ｓ１Ｐ３、Ｓ１Ｐ４、およびＳ１Ｐ５）へと分類する。
Ｓ１Ｐ受容体を、多種多様な組織において発現され、様々な細胞特異性を示す、５つのサブタイプ関連Ｇ結合タンパク質受容体（すなわち、Ｓ１Ｐ１、Ｓ１Ｐ２、Ｓ１Ｐ３、Ｓ１Ｐ４、およびＳ１Ｐ５）へと分類する。
【0201】
ある特定の実施形態では、本開示の本方法に従った使用のためのＳ１Ｐ受容体のモジュレーターは、シグナル伝達のために受容体を活性化または内部移行または阻害することによって、５つのＳ１Ｐ受容体型１～５（Ｓ１ＰＲ１～５）のうちの１つまたは複数を変調する、化合物である。そのような化合物は、本明細書中でそれぞれ「Ｓ１Ｐアゴニスト」および「Ｓ１Ｐ阻害剤」とも呼ぶ。
【0202】
具体的な実施形態では、本開示の処置方法において使用するための前記Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターは、ＫＲＰ２０３（モクラビモド）、ＦＴＹ７２０（フィンゴリモド、Ｇｉｌｅｎｙａ（商標））、ＢＡＦ３１２（シポニモド、Ｍａｙｚｅｎｔ（登録商標））、オザニモド（Ｚｅｐｏｓｉａ（登録商標））、ポネシモド、エトラシモド、ＡＫＰ－１１、セネリモド、アミセリモド、ＣＢＰ－３０７、ＯＰＬ－３０７、ＯＰＬ－００２、ＢＭＳ－９８６１６６、ＳＣＤ－０４４、ＢＯＳ－１７３７１７、ＣＰ－１０５０から選択される。好ましくは、本開示の処置方法において使用するための前記Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターは、ＫＲＰ２０３（モクラビモド）、ＦＴＹ７２０（フィンゴリモド）、およびＭａｙｚｅｎｔ（登録商標）（シポニモド）、最も好ましくはモクラビモドから選択される。
【0203】
一実施形態では、本開示の処置方法において使用するための前記Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターはＳ１Ｐアゴニストである。そのようなＳ１Ｐアゴニストの例は、ＫＲＰ２０３（モクラビモド）、Ｓ１ＰＲ１選択的アゴニストもしくはＦＴＹ７２０（フィンゴリモド）、Ｓ１ＰＲ１、３～５のマルチＳ１ＰＲアゴニストもしくはシポニモド、Ｓ１ＰＲ３アゴニスト、またはその薬学的に許容される塩もしくはそのリン酸誘導体のうちの任意のものである。好ましくは、ある特定の実施形態では、前記Ｓ１Ｐアゴニストは、Ｓ１ＰＲ１を選択的に活性化させるＳ１Ｐアゴニストものから選択される。
【0204】
好ましい実施形態では、本開示による使用のためのＳ１Ｐ受容体モジュレーターは、式（Ｉ）の化合物：
【0205】
【化17】
Ｒ２は、Ｈ、ハロゲン、トリハロメチル、Ｃ１～４アルコキシ、Ｃ１～７アルキル、フェネチル、もしくはベンジルオキシであり、
Ｒ３は、Ｈ、ハロゲン、ＣＦ３、ＯＨ、Ｃ１～７アルキル、Ｃ１～４アルコキシ、ベンジルオキシ、フェニル、もしくはＣ１～４アルコキシメチルであり、
Ｒ４およびＲ５のそれぞれは、独立して、Ｈもしくは式（ａ）の残基：
【0206】
【化18】
ｎは１～４の整数である］であり、
Ｒ６は、水素、ハロゲン、Ｃ１～７アルキル、Ｃ１～４アルコキシ、またはトリフルオロメチルである］
である。
【0207】
具体的な実施形態では、前記式（Ｉ）の化合物（compoud）は、Ｓ１Ｐアゴニスト、好ましくはＳ１ＰＲ１選択的アゴニストである。典型的には、好ましい実施形態では、Ｒ３は塩素である。より好ましくは、Ｒ２はＨであり、Ｒ３は塩素であり、Ｒ６は水素である。たとえば、Ｒ２はＨであり、Ｒ３は塩素であり、Ｒ６は水素であり、Ｒ３およびＲ５のそれぞれは、独立してＨである。
【0208】
より好ましい実施形態では、本開示による使用のためのＳ１Ｐ受容体モジュレーター、好ましくはＳ１Ｐアゴニスト、好ましくはＳ１ＰＲ１選択的アゴニストは、式（ＩＩ）の２－アミノ－２－［４－（３－ベンジルオキシフェニルチオ）－２－クロロフェニル］エチル－プロパン－１，３－ジオール（モクラビモドまたはＫＲＰ２０３とも呼ばれる）：
【0209】
【化19】
【0210】
本開示による使用のための他のＳ１Ｐ受容体モジュレーター、好ましくはＳ１ＰＲ１選択的アゴニストは、以下の式のリン酸誘導体：
【0211】
【化20】
【0212】
前記化合物およびその合成方法は、国際公開第０３／０２９２０５号パンフレット、国際公開第２００４／０７４２９７号パンフレット、国際公開第２００６／００９０９２号パンフレット、国際公開第２００６／０４１０１９号パンフレット、および国際公開第２０１４１２８６１１Ａ１号パンフレット（その開示は本明細書中に参考として組み込まれている）中にも開示されている。
【0213】
モクラビモド、または薬学的に許容されるその塩もしくはそのリン酸誘導体が、特に好ましい。実際に、健康なボランティアにおいて確立されたモクラビモド、ＦＴＹ７２０、およびＢＡＦ３１２などの様々なＳ１Ｐモジュレーターの薬力学的効果を比較することで、リンパ球隔離の有効性の相違が明らかとなる。作用機構の維持、すなわち二次リンパ器官および骨髄中のリンパ球の隔離を決定する測定可能なパラメータは、末梢リンパ球計数の低下である。単一の１ｍｇ用量のＦＴＹ７２０、ＢＡＦ３１２の２８日間の複数用量の施用、または単一の３ｍｇ用量のＫＲＰ２０３後の、絶対的リンパ球計数の正常計数の８０％までの回復は、それぞれ８、７、および１０より長い日数の後に達成された。したがって、ＫＲＰ２０３のリンパ球回復時間は、ＢＡＦ３１２およびＦＴＹ７２０よりも有意に長かった。
【0214】
Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターの粒径
製薬業界では、粉末材料の粒子の特徴づけは、薬物製品の開発および固形経口剤形の品質管理において重大な側面のうちの１つとなっている。原薬の粒径分布は、最終薬物製品の性能（たとえば、溶解、生体利用能、含有量の均一性、安定性など）に対して顕著な効果を有し得る。さらに、原薬の粒径分布は、流動性、混和均一性、成形性などの薬物製品の製造可能性に影響を与える場合があり、事前混合／混合、顆粒化、乾燥、ミリング、混和、コーティング、カプセル封入、および圧縮を含む固形経口剤形の製造プロセスのほぼすべてのステップに対して著名な影響を与える。したがって、原薬の粒径は、最終的に薬物製品の安全性、有効性、および品質に影響を与える。
製薬業界では、粉末材料の粒子の特徴づけは、薬物製品の開発および固形経口剤形の品質管理において重大な側面のうちの１つとなっている。原薬の粒径分布は、最終薬物製品の性能（たとえば、溶解、生体利用能、含有量の均一性、安定性など）に対して顕著な効果を有し得る。さらに、原薬の粒径分布は、流動性、混和均一性、成形性などの薬物製品の製造可能性に影響を与える場合があり、事前混合／混合、顆粒化、乾燥、ミリング、混和、コーティング、カプセル封入、および圧縮を含む固形経口剤形の製造プロセスのほぼすべてのステップに対して著名な影響を与える。したがって、原薬の粒径は、最終的に薬物製品の安全性、有効性、および品質に影響を与える。
【0215】
一実施形態では、本開示のＳ１Ｐ受容体モジュレーターは、８μｍ以下、好ましくは６μｍ、より好ましくは５μｍの平均粒径（Ｄ５０）を有する。別の実施形態では、本開示のＳ１Ｐ受容体モジュレーターは、２５μｍ以下、好ましくは２２μｍ、より好ましくは１９μｍのＤ９０を有する。実際に、発明者によって、８μｍより大きい、好ましくは６μｍより大きい、より好ましくは５μｍより大きい平均粒径（Ｄ５０）および／または２５μｍより大きい、好ましくは２２μｍより大きい、より好ましくは１９μｍより大きいＤ９０が、溶媒との表面接触を減少させ、生体利用能およびｉｎ ｖｉｖｏ性能の低下をもたらすことによって、薬物の溶解を損なわせることが見出された。
【0216】
Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターを含む医薬組成物
本開示はまた、特に開示した処置方法におけるその使用のための、上述の前記Ｓ１Ｐ受容体モジュレーター、好ましくはモクラビモドまたは薬学的に許容されるその塩もしくはそのリン酸誘導体の医薬組成物にも関する。
本開示はまた、特に開示した処置方法におけるその使用のための、上述の前記Ｓ１Ｐ受容体モジュレーター、好ましくはモクラビモドまたは薬学的に許容されるその塩もしくはそのリン酸誘導体の医薬組成物にも関する。
【0217】
一実施形態では、本開示の医薬組成物は、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーター、好ましくはモクラビモドまたは薬学的に許容されるその塩もしくはそのリン酸誘導体と、１つまたは複数の薬学的に許容される賦形剤とを含む。
【0218】
医薬組成物において使用するための、当業者に知られている任意の適切な賦形剤を、本明細書中に記載の組成物中で用い得る。
【0219】
医薬組成物は、医学分野の技術者によって決定された、処置する疾患または障害に適した任意の様式で投与し得る。適切な用量ならびに投与の適切な期間および頻度は、患者の状態、患者の疾患の種類および重篤度、活性成分の特定の形態、ならびに投与方法を含む、本明細書中に記述したものなどの要因によって決定される。一般に、適切な用量（または有効用量）および治療レジメンは、医薬組成物を、治療効果、たとえば、より頻繁な完全もしくは部分的寛解、またはより長い疾患のない生存および／もしくは全生存、または症状の重篤度の軽減、または本明細書中に詳述する他の利点などの、改善された臨床成績をもたらすために十分な量で、提供する。
【0220】
本明細書中に記載の医薬組成物は、有効量の化合物を有効に送達することができるいくつかの経路のうちの任意のものによって、それを必要としている対象に投与し得る。医薬組成物は、経口、直腸、非経口、大槽内、膣内、腹腔内、局所、頬側でまたは、経口もしくは鼻腔スプレーとして投与し得る。好ましい実施形態では、医薬組成物は、経口投与するために適している。
【0221】
別の実施形態では、医薬組成物は、経口投与に適した固体剤形であり得る。経口投与用の固体剤形としては、カプセル、錠剤、丸薬、粉末、および顆粒が挙げられる。好ましい実施形態では、医薬組成物はカプセルまたは錠剤である。カプセルは、軟または硬ゼラチンカプセル、好ましくは硬ゼラチンカプセルであり得る。たとえば、カプセルは、ＨＧＣクラッシュ（Crushed）またはＨＰＭＣカプセルクラッシュである。
【0222】
一実施形態では、カプセルまたは錠剤の内容物の放出は、即時または遅延、標的、もしくは延長などの改変であり得る。好ましい実施形態では、固体剤形は即時放出剤形である。
【0223】
一実施形態では、医薬組成物は、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーター、好ましくはモクラビモドと、１つまたは複数の薬学的に許容される賦形剤、特に、少なくとも１つの充填剤およびその混合物、崩壊剤、潤滑剤、ならびに流動促進剤とを含む。
【0224】
充填剤
充填剤（希釈剤（diluent）、希釈剤（dilutant）、または薄め剤とも呼ぶ）とは、原薬を経口投与に適したもの（たとえば、カプセル、錠剤）にするためにそれに加える、物質である。充填剤自体は人間に対していかなる薬理学的効果も生じるべきではない。充填剤の例としては、マンニトール、微結晶セルロース、ラクトース一水和物、無水ラクトース、コーンスターチ、キシリトール、ソルビトール、スクロース、リン酸二カルシウム、マルトデキストリン、およびゼラチンが挙げられる。本開示の医薬組成物は、マンニトール、微結晶セルロース、およびその混合物から選択される少なくとも１つの充填剤を含む。好ましい実施形態では、本開示の医薬組成物は、マンニトールおよび微結晶セルロースの混合物を含む。
充填剤（希釈剤（diluent）、希釈剤（dilutant）、または薄め剤とも呼ぶ）とは、原薬を経口投与に適したもの（たとえば、カプセル、錠剤）にするためにそれに加える、物質である。充填剤自体は人間に対していかなる薬理学的効果も生じるべきではない。充填剤の例としては、マンニトール、微結晶セルロース、ラクトース一水和物、無水ラクトース、コーンスターチ、キシリトール、ソルビトール、スクロース、リン酸二カルシウム、マルトデキストリン、およびゼラチンが挙げられる。本開示の医薬組成物は、マンニトール、微結晶セルロース、およびその混合物から選択される少なくとも１つの充填剤を含む。好ましい実施形態では、本開示の医薬組成物は、マンニトールおよび微結晶セルロースの混合物を含む。
【0225】
崩壊剤
崩壊剤は、経口固体剤形の脱凝集を助けるためにそれに加える。崩壊剤は、水分と接触した際に固形剤形の迅速な分解を引き起こすように配合されている。崩壊は、典型的には溶解プロセスの最初のステップとして見られる。崩壊剤の例としては、デンプングリコール酸ナトリウム、カルボキシメチルナトリウムデンプン、およびアルファ化デンプンなどの加工デンプン、架橋結合ポリビニルピロリドン（クロスポビドン）または架橋結合カルボキシメチルセルロースナトリウム（クロスカルメロースナトリウム）などの架橋結合ポリマー、およびケイ酸カルシウムが挙げられる。本開示の医薬組成物はデンプングリコール酸ナトリウムを崩壊剤として含む。
崩壊剤は、経口固体剤形の脱凝集を助けるためにそれに加える。崩壊剤は、水分と接触した際に固形剤形の迅速な分解を引き起こすように配合されている。崩壊は、典型的には溶解プロセスの最初のステップとして見られる。崩壊剤の例としては、デンプングリコール酸ナトリウム、カルボキシメチルナトリウムデンプン、およびアルファ化デンプンなどの加工デンプン、架橋結合ポリビニルピロリドン（クロスポビドン）または架橋結合カルボキシメチルセルロースナトリウム（クロスカルメロースナトリウム）などの架橋結合ポリマー、およびケイ酸カルシウムが挙げられる。本開示の医薬組成物はデンプングリコール酸ナトリウムを崩壊剤として含む。
【0226】
潤滑剤
潤滑剤とは、摩擦を減らすために本発明者らが錠剤およびカプセル配合物中で使用する物質である。潤滑剤は、マトリックスからの錠剤の押出成形を容易にし、したがって、その表面上の擦り傷の形成を防止することができる。性質として、潤滑剤は２つの群、すなわち、ａ）脂肪および脂肪様物質、ｂ）粉末状物質に分けることができる。脂肪用物質は錠剤の溶解度および化学的安定性に影響を与えるため、粉末状物質は脂肪様のものよりも施用性が高い。粉末状潤滑剤は顆粒の粉末化によって導入される。これらは、原薬投薬量の正確さおよび定常性を保証する、ホッパーからマトリックスへの錠剤化のための、質量の一定速度の流出を提供する。
潤滑剤とは、摩擦を減らすために本発明者らが錠剤およびカプセル配合物中で使用する物質である。潤滑剤は、マトリックスからの錠剤の押出成形を容易にし、したがって、その表面上の擦り傷の形成を防止することができる。性質として、潤滑剤は２つの群、すなわち、ａ）脂肪および脂肪様物質、ｂ）粉末状物質に分けることができる。脂肪用物質は錠剤の溶解度および化学的安定性に影響を与えるため、粉末状物質は脂肪様のものよりも施用性が高い。粉末状潤滑剤は顆粒の粉末化によって導入される。これらは、原薬投薬量の正確さおよび定常性を保証する、ホッパーからマトリックスへの錠剤化のための、質量の一定速度の流出を提供する。
【0227】
潤滑剤の例としては、ステアリン酸マグネシウム、水素化ヒマシ油、ベヘン酸グリセリル、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸亜鉛、鉱物油、シリコーン溶液、ラウリル硫酸ナトリウム、Ｌ－ロイシン、およびステアリルフマル酸ナトリウムが挙げられる。本開示の医薬組成物はステアリン酸マグネシウムを潤滑剤として含む。
【0228】
流動促進剤
流動促進剤は、錠剤コアブレンド材料の流動特性を増強させるために配合物と混和する。圧縮の初期の間、流動促進剤を錠剤粉末ブレンドの粒子配置内で混合して、錠剤プレスの金型空洞内での流動性および均一性を改善させる。流動促進剤は、粒子間の摩擦を減少させることによって、錠剤顆粒化の流れを奨励する。顆粒の流れに対する流動促進剤の効果は、顆粒の粒子の大きさおよび形状ならびに流動促進剤に依存する。一定の濃度を超えると、流動促進剤はむしろ流動性を阻害するように機能する。錠剤の製造において、流動促進剤は、通常は圧縮の直前に加える。流動促進剤の例としては、コロイド状二酸化ケイ素、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、およびタルクが挙げられる。本開示の医薬組成物はコロイド状二酸化ケイ素を潤滑剤として含む。
流動促進剤は、錠剤コアブレンド材料の流動特性を増強させるために配合物と混和する。圧縮の初期の間、流動促進剤を錠剤粉末ブレンドの粒子配置内で混合して、錠剤プレスの金型空洞内での流動性および均一性を改善させる。流動促進剤は、粒子間の摩擦を減少させることによって、錠剤顆粒化の流れを奨励する。顆粒の流れに対する流動促進剤の効果は、顆粒の粒子の大きさおよび形状ならびに流動促進剤に依存する。一定の濃度を超えると、流動促進剤はむしろ流動性を阻害するように機能する。錠剤の製造において、流動促進剤は、通常は圧縮の直前に加える。流動促進剤の例としては、コロイド状二酸化ケイ素、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、およびタルクが挙げられる。本開示の医薬組成物はコロイド状二酸化ケイ素を潤滑剤として含む。
【0229】
本開示の医薬組成物は、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターと、マンニトール、微結晶セルロース、およびその混合物から選択される少なくとも１つの充填剤と、崩壊剤としてのデンプングリコール酸ナトリウムと、潤滑剤としてのステアリン酸マグネシウムと、流動促進剤としてのコロイド状二酸化ケイ素とを含む。
【0230】
医薬組成物の分野の技術者に知られている任意の適切な賦形剤を、本明細書中に記載の組成物中でさらに用い得る。
【0231】
一実施形態では、固形剤形のＳ１Ｐ受容体モジュレーター、好ましくは式（Ｉ）の塩酸塩または式ＩＩａもしくはＩＩｂのリン酸誘導体の投薬量の強度は、０．０５ｍｇ～１５ｍｇ／単位、好ましくは０．１ｍｇ～１０ｍｇ／単位、たとえば約０．１ｍｇ／単位、または約０．４ｍｇ／単位、または約１ｍｇ／単位、または約１０ｍｇ／単位、より好ましくは約１ｍｇ／単位である。
【0232】
より詳細には、本開示の医薬組成物、特にモクラビモドまたは薬学的に許容されるその塩もしくはそのリン酸誘導体を１ｍｇ／単位で含むものは、以下の成分：
－好ましくは４８～８８ｍｇ／単位の含有量、より好ましくは５８～７８ｍｇ／単位、さらにより好ましくは約６８ｍｇ／単位の含有量のマンニトール、
－好ましくは５～４５ｍｇ／単位の含有量、より好ましくは１５～３５ｍｇ／単位、さらにより好ましくは約２５ｍｇ／単位の含有量の微結晶セルロース、
－好ましくは１～８ｍｇ／単位の含有量、より好ましくは２～６ｍｇ／単位、さらにより好ましくは約４ｍｇ／単位の含有量のデンプングリコール酸ナトリウム、
－好ましくは０．０２５～４ｍｇ／単位の含有量、より好ましくは０．５～２ｍｇ／単位、さらにより好ましくは約１ｍｇ／単位の含有量のステアリン酸マグネシウム、および
－好ましくは０．１２５～２ｍｇ／単位の含有量、より好ましくは０．２５～１ｍｇ／単位、さらにより好ましくは約０．５ｍｇ／単位の含有量のコロイド状二酸化ケイ素
をさらに含む。
－好ましくは４８～８８ｍｇ／単位の含有量、より好ましくは５８～７８ｍｇ／単位、さらにより好ましくは約６８ｍｇ／単位の含有量のマンニトール、
－好ましくは５～４５ｍｇ／単位の含有量、より好ましくは１５～３５ｍｇ／単位、さらにより好ましくは約２５ｍｇ／単位の含有量の微結晶セルロース、
－好ましくは１～８ｍｇ／単位の含有量、より好ましくは２～６ｍｇ／単位、さらにより好ましくは約４ｍｇ／単位の含有量のデンプングリコール酸ナトリウム、
－好ましくは０．０２５～４ｍｇ／単位の含有量、より好ましくは０．５～２ｍｇ／単位、さらにより好ましくは約１ｍｇ／単位の含有量のステアリン酸マグネシウム、および
－好ましくは０．１２５～２ｍｇ／単位の含有量、より好ましくは０．２５～１ｍｇ／単位、さらにより好ましくは約０．５ｍｇ／単位の含有量のコロイド状二酸化ケイ素
をさらに含む。
【0233】
別の実施形態では、本開示の医薬組成物は以下の成分：
－好ましくはモクラビモド、または薬学的に許容されるその塩もしくはそのリン酸誘導体、好ましくは０．０５％～１５％、より好ましくは０．１％～１０％ｍｇ／単位の含有量、さらにより好ましくは約０．１％または０．４％または１％または１０％の含有量のＳ１Ｐ受容体モジュレーター、
－好ましくは４８％～８８％、より好ましくは５８％～７８％、さらにより好ましくは約６８％の含有量のマンニトール、
－好ましくは５％～４５％、より好ましくは１５％～３５％、さらにより好ましくは約２５％の含有量の微結晶セルロース、
－好ましくは１％～８％、より好ましくは２％～６％、さらにより好ましくは約４％の含有量のデンプングリコール酸ナトリウム、
－好ましくは０．０２５％～４％、より好ましくは０．５％～２％、さらにより好ましくは約１％の含有量のステアリン酸マグネシウム、
－好ましくは０．１２５～２ｍｇ／単位の含有量、より好ましくは０．２５～１ｍｇ／単位、さらにより好ましくは約０．５ｍｇ／単位の含有量のコロイド状二酸化ケイ素
を含み、百分率は、全組成物の乾重量のｍｇ／ｍｇとして表す。
－好ましくはモクラビモド、または薬学的に許容されるその塩もしくはそのリン酸誘導体、好ましくは０．０５％～１５％、より好ましくは０．１％～１０％ｍｇ／単位の含有量、さらにより好ましくは約０．１％または０．４％または１％または１０％の含有量のＳ１Ｐ受容体モジュレーター、
－好ましくは４８％～８８％、より好ましくは５８％～７８％、さらにより好ましくは約６８％の含有量のマンニトール、
－好ましくは５％～４５％、より好ましくは１５％～３５％、さらにより好ましくは約２５％の含有量の微結晶セルロース、
－好ましくは１％～８％、より好ましくは２％～６％、さらにより好ましくは約４％の含有量のデンプングリコール酸ナトリウム、
－好ましくは０．０２５％～４％、より好ましくは０．５％～２％、さらにより好ましくは約１％の含有量のステアリン酸マグネシウム、
－好ましくは０．１２５～２ｍｇ／単位の含有量、より好ましくは０．２５～１ｍｇ／単位、さらにより好ましくは約０．５ｍｇ／単位の含有量のコロイド状二酸化ケイ素
を含み、百分率は、全組成物の乾重量のｍｇ／ｍｇとして表す。
【0234】
一実施形態では、本開示の医薬組成物は、少なくとも１カ月間、５０℃で、好ましくは２カ月間、５０℃で安定である。
【0235】
別の実施形態では、本開示の医薬組成物は、少なくとも２４カ月間、５℃で安定である。
【0236】
別の実施形態では、本開示の医薬組成物は、少なくとも２４カ月間、２５℃／６０％の相対湿度で安定である。
【0237】
本明細書中で使用する、組成物の安定性は、以下の方法、すなわち、当分野で広く知られている高圧液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）に従って測定する。不純物の和が［９８～１０２］％の信頼区間で０．７％以下である場合に、組成物は安定である。
【0238】
医薬組成物を調製するプロセス
本開示の別の態様は、上述の医薬組成物を調製するプロセスであって、
ａ．Ｓ１Ｐ受容体モジュレーター、または薬学的に許容されるその塩もしくはそのリン酸誘導体を、微結晶セルロース、コロイド状二酸化ケイ素と、好ましくは２２ｒｐｍで１８分間、混和するステップ、
ｂ．マンニトールを加え、生じた混合物を、好ましくは２２ｒｐｍで９分間、混和するステップ、
ｃ．デンプングリコール酸ナトリウムを加え、生じた混合物を、好ましくは２２ｒｐｍで５分間、混和するステップ、
ｄ．ステアリン酸マグネシウムを加え、生じた医薬組成物を、好ましくは２２ｒｐｍで５分間、混和するステップ、
ｅ．本開示の医薬組成物を回収するステップ
を含むプロセスに関する。
本開示の別の態様は、上述の医薬組成物を調製するプロセスであって、
ａ．Ｓ１Ｐ受容体モジュレーター、または薬学的に許容されるその塩もしくはそのリン酸誘導体を、微結晶セルロース、コロイド状二酸化ケイ素と、好ましくは２２ｒｐｍで１８分間、混和するステップ、
ｂ．マンニトールを加え、生じた混合物を、好ましくは２２ｒｐｍで９分間、混和するステップ、
ｃ．デンプングリコール酸ナトリウムを加え、生じた混合物を、好ましくは２２ｒｐｍで５分間、混和するステップ、
ｄ．ステアリン酸マグネシウムを加え、生じた医薬組成物を、好ましくは２２ｒｐｍで５分間、混和するステップ、
ｅ．本開示の医薬組成物を回収するステップ
を含むプロセスに関する。
【0239】
好ましい実施形態では、プロセスは、
ｆ．生じた医薬組成物をカプセル内に満たすステップ、
ｇ．医薬組成物を満たした生じたカプセルを回収するステップ
をさらに含む。
ｆ．生じた医薬組成物をカプセル内に満たすステップ、
ｇ．医薬組成物を満たした生じたカプセルを回収するステップ
をさらに含む。
【0240】
組合せ療法によって好ましく標的とされる患者集団
本明細書中に開示した処置方法は、血液悪性腫瘍またはリンパ器官転移、好ましくはリンパ節転移を有する患者に適している。血液悪性腫瘍は、血液、骨髄、およびリンパ系に影響を与える、白血病、リンパ腫、および悪性リンパ球増殖性状態などの種類のがんである。リンパ器官転移、好ましくはリンパ節転移は、固形腫瘍がん、特に乳がんからのものであり得る。
本明細書中に開示した処置方法は、血液悪性腫瘍またはリンパ器官転移、好ましくはリンパ節転移を有する患者に適している。血液悪性腫瘍は、血液、骨髄、およびリンパ系に影響を与える、白血病、リンパ腫、および悪性リンパ球増殖性状態などの種類のがんである。リンパ器官転移、好ましくはリンパ節転移は、固形腫瘍がん、特に乳がんからのものであり得る。
【0241】
一実施形態では、血液悪性腫瘍は白血病である。白血病は、急性白血病および慢性白血病に分類することができる。急性白血病は、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）および急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）にさらに分類することができる。慢性白血病は、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）および慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）を含む。他の関連する状態としては、骨髄血液細胞の無効な生成（または異形成）およびＡＭＬへの悪性化の危険性によって結ばれた、血液学的状態の多様なコレクションである、脊髄形成異常症候群（ＭＤＳ、以前は「前白血病」として知られていた）が挙げられる。
【0242】
他の実施形態では、血液悪性腫瘍はリンパ腫である。リンパ腫は、リンパ球から発生する、血液細胞腫瘍の群である。例示的なリンパ腫としては非ホジキンリンパ腫およびホジキンリンパ腫が挙げられる。
【0243】
非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）は、ＢまたはＴ細胞のいずれかから形成される、リンパ球のがんの群である。ＮＨＬは任意の年齢で起こり、しばしば、通常よりも大きいリンパ節、体重減少、および発熱によって特徴づけられる。様々な種類のＮＨＬが侵襲性（成長が早い）および無痛性（成長が遅い）の種類として分類される。Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫としては、バーキットリンパ腫、慢性リンパ性白血病／小リンパ球性リンパ腫（ＣＬＬ／ＳＬＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、濾胞性リンパ腫、免疫芽細胞性大細胞リンパ腫、前駆体Ｂリンパ芽球性リンパ腫、およびマントル細胞リンパ腫が挙げられる。Ｔ細胞非ホジキンリンパ腫の例としては、菌状息肉腫、未分化大細胞リンパ腫、および前駆体Ｔリンパ芽球性リンパ腫が挙げられる。骨髄または幹細胞移植後に起こるリンパ腫は、典型的にはＢ細胞非ホジキンリンパ腫である。たとえば、Maloney. NEJM. 366.21(2012):2008-16を参照されたい。びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）は、Ｂ細胞から発生するＮＨＬの一形態である。
【0244】
急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）
急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）とは、骨髄（morrow）、血液、リンパ節、および脾臓における、新生物の細胞増殖および蓄積によって特徴づけられるＢ細胞悪性腫瘍である。ＡＬＬは、成人または小児の集団において生じる場合があり、迅速に進行する場合があり、未処置のまま放置すると致命的な場合がある。ＡＬＬは、再発性および／または不応性ＡＬＬ（ｒ／ｒ ＡＬＬ）を含む。再発性および／または不応性ＡＬＬでは、処置の選択肢としては、高用量化学療法および続くアロジェネイック幹細胞移植（ＳＣＴ）、標準の化学免疫療法、小分子経路阻害剤を用いた標的化処置、または非治癒的な対症目標を有する支持療法が挙げられる。アロジェネイックＳＣＴは、ｒ／ｒ小児ＡＬＬでは治癒的な潜在性を有する唯一の選択肢であるが、結果は最適以下である。３回目以降の寛解でアロジェネイックＳＣＴを受けた、活動性疾患でアロジェネイックＳＣＴを受けた、または以前のアロジェネイックＳＣＴからの再発後にアロジェネイックＳＣＴを受けた、再発性および／または不応性小児ＡＬＬ患者のうち、１年全生存（ＯＳ）率は２５～５５％であり、５年ＯＳ率は一般に２０～４５％である。
急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）とは、骨髄（morrow）、血液、リンパ節、および脾臓における、新生物の細胞増殖および蓄積によって特徴づけられるＢ細胞悪性腫瘍である。ＡＬＬは、成人または小児の集団において生じる場合があり、迅速に進行する場合があり、未処置のまま放置すると致命的な場合がある。ＡＬＬは、再発性および／または不応性ＡＬＬ（ｒ／ｒ ＡＬＬ）を含む。再発性および／または不応性ＡＬＬでは、処置の選択肢としては、高用量化学療法および続くアロジェネイック幹細胞移植（ＳＣＴ）、標準の化学免疫療法、小分子経路阻害剤を用いた標的化処置、または非治癒的な対症目標を有する支持療法が挙げられる。アロジェネイックＳＣＴは、ｒ／ｒ小児ＡＬＬでは治癒的な潜在性を有する唯一の選択肢であるが、結果は最適以下である。３回目以降の寛解でアロジェネイックＳＣＴを受けた、活動性疾患でアロジェネイックＳＣＴを受けた、または以前のアロジェネイックＳＣＴからの再発後にアロジェネイックＳＣＴを受けた、再発性および／または不応性小児ＡＬＬ患者のうち、１年全生存（ＯＳ）率は２５～５５％であり、５年ＯＳ率は一般に２０～４５％である。
【0245】
フィラデルフィア染色体に陽性（Ｐｈ＋）であるＡＬＬ患者について、ダサチニブ（Ｓｐｒｙｃｅｌ）が、２００６年に、以前の治療に対して耐性または不耐容を有する成人患者の処置のために認可された。ポナチニブ（Ｉｃｌｕｓｉｇ）は、２０１３年に、ダサチニブに対して耐性または不耐容であるＰｈ＋ ＡＬＬを有する成人患者の処置のために認可された。Ｂｌｉｎｃｙｔｏ（ブリナツモマブ）、二重特異性抗ＣＤ３／ＣＤ１９モノクローナル抗体は、Ｐｈ－再発性または不応性Ｂ－前駆体ＡＬＬを有する成人の処置のために認可されている。現在の処置様式にもかかわらず、再発性ＡＬＬ患者において寛解を維持することは困難であり、患者は長期間、乏しい生活の質で入院している。再発性および／または不応性疾患を有する患者の予後診断は依然として乏しいままである。
【0246】
びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）
ＤＬＢＣＬとは、リンパ節中またはリンパ系の外、たとえば、胃腸管、精巣、甲状腺、皮膚、乳房、骨、または脳において生じる場合がある、侵襲性リンパ腫である。３つの細胞形態学の変異体がＤＬＢＣＬにおいて一般的に観察される：中心芽細胞、免疫芽細胞、および未分化。中心芽細胞の形態学が最も一般的であり、最小限の細胞質を有する、中等度から大サイズのリンパ球の外見を有する。ＤＬＢＣＬのいくつかのサブタイプが存在する。ＤＬＢＣＬを有するほとんどの患者は成人であるが、この疾患は、小児においても時折起こる。ＤＬＢＣＬの処置は、化学療法（たとえば、シクロホスファミド、ドキソルビシン、ビンクリスチン、プレドニゾン、エトポシド）、抗体（たとえばＲｉｔｕｘａｎ）、放射線照射、または自己幹細胞移植（ＡＳＣＴ）を含む。しかし、第一線療法に対して再発性および／または不応性である患者の約半数が、高齢および／または併存症が理由でＡＳＣＴに適格でない。さらに、高用量療法および自己幹細胞移植（ＨＤ－ＡＳＣＴ）に適した患者のうち、約半数のみが、ＨＤ－ＡＳＣＴに進むために十分な、救済療法に対する応答を有する。さらに、ＨＤ－ＡＳＣＴに進む者のうち、患者の６０％が移植後に再発する。臨床的研究、対症化学療法、および稀な事例では第２のＨＤ－ＡＳＣＴまたはアロジェネイック幹細胞移植（ＡｌｌｏＳＣＴ）が、これらの患者が利用可能な選択肢の一部である。
ＤＬＢＣＬとは、リンパ節中またはリンパ系の外、たとえば、胃腸管、精巣、甲状腺、皮膚、乳房、骨、または脳において生じる場合がある、侵襲性リンパ腫である。３つの細胞形態学の変異体がＤＬＢＣＬにおいて一般的に観察される：中心芽細胞、免疫芽細胞、および未分化。中心芽細胞の形態学が最も一般的であり、最小限の細胞質を有する、中等度から大サイズのリンパ球の外見を有する。ＤＬＢＣＬのいくつかのサブタイプが存在する。ＤＬＢＣＬを有するほとんどの患者は成人であるが、この疾患は、小児においても時折起こる。ＤＬＢＣＬの処置は、化学療法（たとえば、シクロホスファミド、ドキソルビシン、ビンクリスチン、プレドニゾン、エトポシド）、抗体（たとえばＲｉｔｕｘａｎ）、放射線照射、または自己幹細胞移植（ＡＳＣＴ）を含む。しかし、第一線療法に対して再発性および／または不応性である患者の約半数が、高齢および／または併存症が理由でＡＳＣＴに適格でない。さらに、高用量療法および自己幹細胞移植（ＨＤ－ＡＳＣＴ）に適した患者のうち、約半数のみが、ＨＤ－ＡＳＣＴに進むために十分な、救済療法に対する応答を有する。さらに、ＨＤ－ＡＳＣＴに進む者のうち、患者の６０％が移植後に再発する。臨床的研究、対症化学療法、および稀な事例では第２のＨＤ－ＡＳＣＴまたはアロジェネイック幹細胞移植（ＡｌｌｏＳＣＴ）が、これらの患者が利用可能な選択肢の一部である。
【0247】
縦隔原発Ｂ細胞性大細胞型リンパ腫（ＰＭＢＣＬ）
縦隔原発Ｂ細胞性大細胞型リンパ腫（ＰＭＢＣＬ）は、ＤＬＢＣＬと比較して明確に異なる臨床的、病理学的、および分子学的特徴を有する。ＰＭＢＣＬは、胸腺（延髄）のＢ細胞から生じると考えられており、ＤＬＢＣＬを診断された患者のおよそ３％を表す。ＰＭＢＣＬは、典型的には４０代のより若年の成人集団において同定されており、わずかに雌優位である。遺伝子発現プロファイリングは、ホジキンリンパ腫とのＰＭＢＣＬ重複における、調節解除された経路を示唆する。ＰＭＢＣＬの初期療法としては、一般に、浸潤野の放射線療法を用いたまたは用いない、アントラサイクリンを含有するレジメンおよびリツキシマブ、たとえば、輸液用量調節したエトポシド、ドキソルビシン、およびシクロホスファミドならびにビンクリスチン、プレドニゾン、およびリツキシマブ（ＤＡ－ＥＰＯＣＨ－Ｒ）が挙げられる。再発性／不応性ＰＭＢＣＬの処置の選択肢は、ＤＬＢＣＬにおけるものと同様である。化学療法不応性疾患を有する患者は、不応性ＤＬＢＣＬを有する者と同様またはそれより悪い予後診断を有する。
縦隔原発Ｂ細胞性大細胞型リンパ腫（ＰＭＢＣＬ）は、ＤＬＢＣＬと比較して明確に異なる臨床的、病理学的、および分子学的特徴を有する。ＰＭＢＣＬは、胸腺（延髄）のＢ細胞から生じると考えられており、ＤＬＢＣＬを診断された患者のおよそ３％を表す。ＰＭＢＣＬは、典型的には４０代のより若年の成人集団において同定されており、わずかに雌優位である。遺伝子発現プロファイリングは、ホジキンリンパ腫とのＰＭＢＣＬ重複における、調節解除された経路を示唆する。ＰＭＢＣＬの初期療法としては、一般に、浸潤野の放射線療法を用いたまたは用いない、アントラサイクリンを含有するレジメンおよびリツキシマブ、たとえば、輸液用量調節したエトポシド、ドキソルビシン、およびシクロホスファミドならびにビンクリスチン、プレドニゾン、およびリツキシマブ（ＤＡ－ＥＰＯＣＨ－Ｒ）が挙げられる。再発性／不応性ＰＭＢＣＬの処置の選択肢は、ＤＬＢＣＬにおけるものと同様である。化学療法不応性疾患を有する患者は、不応性ＤＬＢＣＬを有する者と同様またはそれより悪い予後診断を有する。
【0248】
マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）
ＭＣＬは、現在利用可能な治療に対する応答性が乏しい、すなわち本質的に不治である、侵襲性がんである。マントル細胞リンパ腫は、白血球の一種であるＢ細胞において生じる。一般に、これらの患者は予後不良を有しており、最終的に疾患が致命的となるまで、寛解および再発のサイクルを繰り返している。マントル細胞リンパ腫は、疾患は非常に侵襲性である場合があり、化学療法は治癒を提供しないため、歴史的に、あらゆるＢ細胞リンパ腫のうちで最も悪い予後診断のうちの１つを有している。
ＭＣＬは、現在利用可能な治療に対する応答性が乏しい、すなわち本質的に不治である、侵襲性がんである。マントル細胞リンパ腫は、白血球の一種であるＢ細胞において生じる。一般に、これらの患者は予後不良を有しており、最終的に疾患が致命的となるまで、寛解および再発のサイクルを繰り返している。マントル細胞リンパ腫は、疾患は非常に侵襲性である場合があり、化学療法は治癒を提供しないため、歴史的に、あらゆるＢ細胞リンパ腫のうちで最も悪い予後診断のうちの１つを有している。
【0249】
一実施形態では、本明細書中に開示した処置方法は、固形腫瘍がんからの転移性腫瘍を有する患者に適切である。固形腫瘍は、乳がん、トリプルネガティブ乳がん細胞、ＥＲ陽性乳がん、ＥＲ＋およびＥＲ－乳がん、ＥＲ＋乳がん、前立腺がん、膵がん、尿路上皮がん、非筋肉浸潤性尿路上皮癌細胞、卵巣がん、低酸素卵巣がん、膀胱がん、黒色腫、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬ）などの肺がん、結腸直腸がん、ウィルムス腫瘍などの腎芽細胞腫、甲状腺癌、甲状腺がん、肝細胞癌、胆管癌神経芽細胞腫、または多形成膠芽細胞腫であり得る。実際に、これらの種類の固形腫瘍は、転移がそのようなリンパ器官、好ましくはリンパ節中に見つけることができるような様式、リンパ器官、好ましくはリンパ節中に排出され得る。したがって、本明細書中に開示した処置方法は、リンパ器官転移、好ましくはリンパ節転移を有する患者に適している。典型的には、開示した処置方法は、リンパ器官、特にリンパ節中に見つかる転移を排除することを助けるであろう。一部の実施形態では、血液悪性腫瘍は、白血病、リンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、ホジキンリンパ腫（ＨＬ）、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）、縦隔原発Ｂ細胞性大細胞型リンパ腫（ＰＭＢＣＬ）、または多発性骨髄腫からなる群から選択される。
【0250】
したがって、本開示の方法は、ＡＬＬ、ＤＬＢＣＬ、ＰＭＢＣＬ、およびＭＣＬを有する対象に特に適している。
【0251】
好ましい実施形態では、血液悪性腫瘍は、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）である。
【0252】
具体的な実施形態では、前記対象は、血液学的障害を処置するためのＣＡＲ細胞療法に適格な対象である。典型的には、対象は、ＣＡＲ細胞療法、たとえば本明細書中に記載のＣＡＲ細胞療法を投与されていた、投与されている、または投与される。実施形態では、対象は、抗ＣＤ１９ＣＡＲ細胞療法を投与されていた、投与されている、または投与される。
【0253】
具体的な実施形態では、前記対象は、ＣＡＲ細胞療法、たとえばＣＡＲ－Ｔ細胞療法、たとえば抗ＣＤ１９ＣＡＲ－Ｔ細胞療法後に、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）および／またはマクロファージ活性化症候群（ＭＡＳ）および／または免疫エフェクター細胞関連神経毒性症候群（ＩＣＡＮＳ）を発生する危険性にある。
【0254】
具体的な実施形態では、前記対象は、ＣＡＲ細胞療法、たとえばＣＡＲ－Ｔ細胞療法、たとえば抗ＣＤ１９ＣＡＲ－Ｔ細胞療法後に、ＣＲＳおよび／もしくはＭＡＳおよび／もしくはＩＣＡＮＳを有する、またはＣＲＳおよび／もしくはＭＡＳおよび／もしくはＩＣＡＮＳを診断されている。
【0255】
具体的な実施形態では、前記対象は、アロジェネイックＣＡＲ細胞療法後に、ＧＶＨＤの危険性にある。
【0256】
組合せ療法
本明細書中に記載のようにＳ１Ｐ受容体モジュレーターとの組合せ療法において使用するための、ＣＡＲ細胞を含む組成物は、それを必要としている対象において、血液悪性腫瘍を処置するための方法、より詳細には上記定義した患者集団および疾患適応症における薬物として、有用である。
本明細書中に記載のようにＳ１Ｐ受容体モジュレーターとの組合せ療法において使用するための、ＣＡＲ細胞を含む組成物は、それを必要としている対象において、血液悪性腫瘍を処置するための方法、より詳細には上記定義した患者集団および疾患適応症における薬物として、有用である。
【0257】
一実施形態では、前記ＣＡＲ細胞、好ましくはＣＡＲ－Ｔ細胞、より好ましくはＣＤ１９抗原を標的とするＣＡＲ－Ｔ細胞を、０．１×１０６～６×１０８個のＣＡＲ陽性生細胞／体重１ｋｇの投薬量で投与する。別の実施形態では、前記ＣＡＲ細胞、好ましくはＣＡＲ－Ｔ細胞、より好ましくはＣＤ１９抗原を標的とするＣＡＲ－Ｔ細胞を、リンパ枯渇化学療法の完了の２～１４日後に投与する。
【0258】
一実施形態では、対象の末梢血中のＣＡＲ細胞の数は、７、好ましくは１４日間のＳ１Ｐ受容体モジュレーター処置の後に、フローサイトメトリーによって測定して、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーター処置なしで測定した数と比較して、約１％～約４０％、好ましくは約１０％～約３０％低下している。
【0259】
別の実施形態では、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターの量は、１日あたり固定量で投与することができる。好ましくは前記固定１日投薬量は、１日あたり０．０５ｍｇ～４０ｍｇ、好ましくは１日あたり０．１ｍｇ～３５ｍｇ、より好ましくは０．５ｍｇ～３０ｍｇ、さらにより好ましくは１ｍｇ～１５ｍｇ、さらにより好ましくは１日あたり１．５ｍｇ～７ｍｇ、さらにより好ましくは２ｍｇ～５ｍｇ、さらにより好ましくは約３ｍｇ、または１日あたり約１ｍｇである。
【0260】
たとえば、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターはモクラビモドであり得、前記モクラビモドは、１日あたり約１ｍｇの１日用量で投与し得る。あるいは、モクラビモドは、１日あたり約３ｍｇの用量で、好ましくは３つの約１ｍｇの固体剤形としてまたは１つの約３ｍｇの固体剤形として投与し得る。あるいは、モクラビモドは、１日あたり約２ｍｇの用量で、好ましくは２つの約１ｍｇの固体剤形としてまたは１つの約２ｍｇの固体剤形として投与し得る。
【0261】
一部の実施形態では、前記Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターは、好ましくはＣＡＲ細胞を含む前記組成物の１～２０日前、より好ましくは前記Ｔ細胞療法の１１日前の開始日から、少なくとも１、２、もしくは３カ月間、またはそれより長くの間、毎日投与する。
【0262】
本明細書中に記載のようにＳ１Ｐ受容体モジュレーターとの組合せ療法において使用するための、がん関連抗原と結合するキメラ抗原受容体分子を発現するＣＡＲ細胞、好ましくはＣＡＲ－Ｔ細胞、より好ましくはＣＤ１９抗原を標的とするＣＡＲ－Ｔ細胞（ＣＤ１９ＣＡＲ－Ｔ細胞）を含む組成物、より好ましくはモクラビモドは、ＣＡＲ細胞が骨髄を去ることを防止する、ならびに／またはＣＡＲ細胞の生着および持続を促進し、それによってＣＡＲ細胞療法を改善させるために特に有用である。
【0263】
そのような方法の詳細な実施形態を、本明細書中以下に開示する。
【0264】
具体的な実施形態では、本開示の方法は、以下のステップ：
１）白血球除去を実施することによって、免疫細胞、たとえば免疫Ｔ細胞を、それを必要としているドナー対象から収集するステップ、
２）ドナー対象の免疫細胞を、がん関連抗原と結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）分子を発現するように、ｅｘ ｖｉｖｏで遺伝子改変させ、それによってＣＡＲ細胞組成物を得るステップ、
３）たとえば前記レシピエント対象を有効量のリンパ枯渇化学療法剤で処置することによって、または身体照射を行うことによって、前記レシピエント対象をコンディショニングするステップ、
４）治療上効率的な量のステップ２）で得られた前記ＣＡＲ細胞を含む組成物を、前記レシピエント対象に投与するステップ、
５）レシピエント対象に、有効量のＳ１Ｐ受容体モジュレーター、好ましくはモクラビモド、または薬学的に許容されるその塩もしくはそのリン酸誘導体を投与するステップ、
６）任意選択で、レシピエント対象に、有効量の１つまたは複数の免疫抑制剤を投与するステップ
を含む。
１）白血球除去を実施することによって、免疫細胞、たとえば免疫Ｔ細胞を、それを必要としているドナー対象から収集するステップ、
２）ドナー対象の免疫細胞を、がん関連抗原と結合するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）分子を発現するように、ｅｘ ｖｉｖｏで遺伝子改変させ、それによってＣＡＲ細胞組成物を得るステップ、
３）たとえば前記レシピエント対象を有効量のリンパ枯渇化学療法剤で処置することによって、または身体照射を行うことによって、前記レシピエント対象をコンディショニングするステップ、
４）治療上効率的な量のステップ２）で得られた前記ＣＡＲ細胞を含む組成物を、前記レシピエント対象に投与するステップ、
５）レシピエント対象に、有効量のＳ１Ｐ受容体モジュレーター、好ましくはモクラビモド、または薬学的に許容されるその塩もしくはそのリン酸誘導体を投与するステップ、
６）任意選択で、レシピエント対象に、有効量の１つまたは複数の免疫抑制剤を投与するステップ
を含む。
【0265】
それぞれのステップの詳細な実施形態を、本明細書中以下に開示する。
【0266】
白血球除去によって免疫細胞をドナー対象から収集するステップ（１）
本明細書中に開示した処置方法を行うために、ドナー対象からの免疫細胞を白血球除去によって収集し、白血球をｅｘ ｖｉｖｏで収集、富化、または枯渇させて、目的の細胞、たとえばＴ細胞を選択および／または単離する。医師は、対象の静脈内に配置したカテーテルを使用することによって、対象の血液を採取する。対象の白血球の一部を患者の血液から分離し、患者の血液の残りを患者の静脈に戻す。この手順は３～６時間かかる場合があり、ステップ２）を行うために十分な白血球を得るために繰り返す必要があり得る。その後、白血球を凍結し、遺伝子修飾を行うために送り出す。
本明細書中に開示した処置方法を行うために、ドナー対象からの免疫細胞を白血球除去によって収集し、白血球をｅｘ ｖｉｖｏで収集、富化、または枯渇させて、目的の細胞、たとえばＴ細胞を選択および／または単離する。医師は、対象の静脈内に配置したカテーテルを使用することによって、対象の血液を採取する。対象の白血球の一部を患者の血液から分離し、患者の血液の残りを患者の静脈に戻す。この手順は３～６時間かかる場合があり、ステップ２）を行うために十分な白血球を得るために繰り返す必要があり得る。その後、白血球を凍結し、遺伝子修飾を行うために送り出す。
【0267】
好ましい実施形態では、前記ドナー対象は、処置を必要としているレシピエント対象と同じである、すなわち、ステップ４）で投与するＣＡＲ細胞を含む前記組成物は自己または同系のＣＡＲ細胞を含む。
【0268】
他の実施形態では、前記ドナー対象は、処置を必要としているレシピエント対象と同じではない、すなわち、ステップ４）で投与するＣＡＲ細胞を含む前記組成物はアロジェネイックＣＡＲ細胞を含む。
【0269】
好ましい実施形態では、前記免疫細胞は、リンパ球Ｔ細胞またはナチュラルキラー細胞、より好ましくはリンパ球Ｔ細胞からなる群から選択される免疫エフェクター細胞である。
【0270】
特定の態様では、免疫細胞、たとえばＴ細胞は、１０ｃｃ～４００ｃｃの採血液から得ることができる。特定の態様では、免疫細胞、たとえばＴ細胞は、２０ｃｃ、３０ｃｃ、４０ｃｃ、５０ｃｃ、６０ｃｃ、７０ｃｃ、８０ｃｃ、９０ｃｃ、または１００ｃｃの採血液から得られる。
【0271】
遺伝子改変させるステップ（２）
具体的な実施形態では、凍結した白血球を解凍してよく、細胞を、目的の免疫細胞、たとえばＴリンパ球またはＮＫ細胞を優先的にとるように選別してよい。これらの免疫細胞は、単離した後、当分野で知られている方法によって拡大し、１つまたは複数のＣＡＲ構築体が導入され得るように処理し得る。
具体的な実施形態では、凍結した白血球を解凍してよく、細胞を、目的の免疫細胞、たとえばＴリンパ球またはＮＫ細胞を優先的にとるように選別してよい。これらの免疫細胞は、単離した後、当分野で知られている方法によって拡大し、１つまたは複数のＣＡＲ構築体が導入され得るように処理し得る。
【0272】
免疫細胞は、上記開示したようにがん関連抗原と結合するＣＡＲ分子を発現するように、遺伝子改変する。好ましい実施形態では、前記がん関連抗原は、ＣＤ１９、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ１２３、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ３８、ＬｅＹ、ＲＯＲ１、ＣＬＬ－１、ＢＣＭＡ、ＧＤ２、ＭＣＳＰ、ＣＤ５、ＮＫＧ２Ｄ、ＭＨＣペプチド抗原、より好ましくはＣＤ１９からなる群から選択される。
【0273】
この手順は、少なくともおよそ２週間かかる場合がある。
【0274】
リンパ枯渇のステップ（３）
患者の身体をＣＡＲ細胞療法のために準備するために、輸液の１週間前以内の患者の白血球数が１，０００個の細胞／μＬ以下でない限りは、患者のコンディショニングまたはコンディショニングレジメンを行う。コンディショニングは、本明細書中に記載の前記治療の投与の前、後、またはそれと同時発生的な、有効量のリンパ枯渇化学療法剤を用いた前記患者の処置を含む。
患者の身体をＣＡＲ細胞療法のために準備するために、輸液の１週間前以内の患者の白血球数が１，０００個の細胞／μＬ以下でない限りは、患者のコンディショニングまたはコンディショニングレジメンを行う。コンディショニングは、本明細書中に記載の前記治療の投与の前、後、またはそれと同時発生的な、有効量のリンパ枯渇化学療法剤を用いた前記患者の処置を含む。
【0275】
本明細書中で使用するリンパ枯渇化学療法は、リンパ球枯渇、リンパ枯渇治療、またはリンパ枯渇レジメンとも呼ばれる。
【0276】
一部の実施形態では、リンパ枯渇化学療法を、対象に、本明細書中に記載のＣＡＲ細胞療法、たとえばＣＡＲ－Ｔ細胞療法を投与する前に、たとえばＳ１Ｐ受容体モジュレーターと組み合わせて行う。実施形態では、リンパ球枯渇は、メルファラン、シタラビン、エトポシド、ブスルファン、ベンダムスチン、シクロホスファミド、フルダラビン、デキサメタゾン、およびアレムツズマブ、好ましくはシクロホスファミド、フルダラビン、デキサメタゾン、およびアレムツズマブのうちの１つまたは複数（たとえばすべて）を投与することを含む。
【0277】
一部の実施形態では、対象に、リンパ枯渇化学療法を、本明細書中に記載のＣＡＲ細胞療法、たとえばＣＡＲ－Ｔ細胞療法を投与した後に、たとえばＳ１Ｐ受容体モジュレーターと組み合わせて、投与する。これは、たとえば、ＣＡＲ細胞療法をさらに１回または複数回行わなければならない場合に、特にそうである。
【0278】
具体的な実施形態では、ステップ３）とステップ４）との間の遅延が４週間よりも長く、患者の白血球数が１，０００個の細胞／μＬより多い場合、ステップ３）は、ステップ４）を行う前に１回または複数回行い得る。
【0279】
一実施形態では、前記リンパ枯渇化学療法剤は、シクロホスファミド、シタラビン、エトポシド、ベンダムスチン、ブスルファン、メルファラン、フルダラビン、およびフルダラビン／シクロホスファミド、シタラビン／エトポシドの組合せ投与などのその組合せからなる群から選択される。
【0280】
別の態様では、ステップ３）の前記コンディショニングレジメンは、以下からなる：
－フルダラビンおよびシクロホスファミドの投与、または
－シタラビンおよびエトポシドの投与、または
－ベンダムスチンの投与。
－フルダラビンおよびシクロホスファミドの投与、または
－シタラビンおよびエトポシドの投与、または
－ベンダムスチンの投与。
【0281】
一実施形態では、フルダラビンは、２５～３０ｍｇ／ｍ２の投薬量で毎日、３または４日間の間、静脈内投与し、シクロホスファミドは、フルダラビンの第１の用量から開始して、２５０～５００ｍｇ／ｍ２の投薬量で毎日、２または３日間の間、静脈内投与する。
【0282】
別の実施形態では、シタラビンは、５００ｍｇ／ｍ２の投薬量で毎日、２日間の間、静脈内投与し、エトポシドは、シタラビンの第１の用量から開始して、１５０ｍｇ／ｍ２の投薬量で毎日、３日間の間静脈内投与する。
【0283】
別の実施形態では、ベンダムスチンは、９０ｍｇ／ｍ２の投薬量で毎日、２日間の間、静脈内投与する。
【0284】
ＣＡＲ細胞を含む組成物を投与するステップ（４）
本明細書中に開示した処置方法を行うために、ステップ（２）で得られた前記ＣＡＲ細胞を含む有効量の組成物を、本明細書中に記載のそのような処置を必要としている対象に投与する。
本明細書中に開示した処置方法を行うために、ステップ（２）で得られた前記ＣＡＲ細胞を含む有効量の組成物を、本明細書中に記載のそのような処置を必要としている対象に投与する。
【0285】
具体的な実施形態では、ステップ（２）で得られた前記ＣＡＲ細胞、好ましくはＣＡＲ－Ｔ細胞を、有効量のＳ１Ｐ受容体モジュレーターによって、ｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｅｘ ｖｉｖｏで活性化させ得る。したがって、本開示の一態様はまた、特に本明細書中に記載の処置方法において使用するための、ＣＡＲ細胞、好ましくはＣＡＲ－Ｔ細胞を活性化または前処置する方法にも関する。特定の方法では、方法は、（ｉ）ＣＡＲ細胞を、ｅｘ ｖｉｖｏまたはｉｎ ｖｉｔｒｏで、そのようなＣＡＲ細胞（好ましくはＣＡＲ－Ｔ細胞）を活性化させるための有効量のＳ１Ｐ受容体モジュレーターを用いて前処置し、それによって、活性ＣＡＲ細胞（好ましくは活性ＣＡＲ－Ｔ細胞）を得ることと、その後、（ｉｉ）治療上有効な量の得られた活性ＣＡＲ細胞を、本明細書中に記載のそのような処置を必要としている対象に投与することとを含む。後者の方法の具体的な実施形態では、（場合によってはＣＡＲ細胞組成物を（ｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｅｘ ｖｉｖｏ）で活性化させるために使用した微量のＳ１Ｐ受容体モジュレーター以外は、）Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターを活性ＣＡＲ細胞組成物と組み合わせて対象に直接投与することはしない。
【0286】
前記ＣＡＲ細胞を含む医薬組成物は、処置（または防止）する疾患に適切な様式で投与し得る。投与の量および頻度は、患者の状態、ならびに患者の疾患の種類および重篤度などの要因によって決定するが、適切な投薬量は、臨床治験によって決定し得る。
【0287】
好ましい実施形態では、投与するステップ３）のＣＡＲ細胞は、ＣＡＲ－Ｔ細胞、たとえば抗ＣＤ１９ＣＡＲ－Ｔ細胞である。
【0288】
前記ＣＡＲ細胞を含む組成物は、１つまたは複数の薬学的または生理的に許容される担体、希釈剤、または賦形剤をさらに含み得る。そのような組成物は、中性緩衝生理食塩水、リン酸緩衝生理食塩水などの緩衝液；グルコース、マンノース、スクロース、またはデキストラン、マンニトールなどの炭水化物；タンパク質；ポリペプチドまたはグリシンなどのアミノ酸；抗酸化剤；ＥＤＴＡまたはグルタチオンなどのキレート化剤；アジュバント（たとえば水酸化アルミニウム）；および保存料を含み得る。一態様では、本発明の組成物は、静脈内投与用、好ましくは輸液用に配合する。細胞は、免疫療法において一般的に知られている輸液技法を使用することによって投与することができる（たとえばRosenberg et al., New Eng. J. of Med. 319: 1676, 1988を参照）。
【0289】
一実施形態では、医薬組成物は、たとえば、内毒素、マイコプラズマ、複製可能レンチウイルス（ＲＣＬ）、ｐ２４、ＶＳＶ－Ｇ核酸、ＨＩＶ ｇａｇ、残留抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８コーティングビーズ、マウス抗体、プールしたヒト血清、ウシ血清アルブミン、ウシ血清、培養培地構成成分、ベクターパッケージング細胞またはプラスミド構成成分、細菌、および真菌からなる群から選択される、汚染物質を、実質的に含まない、たとえば検出可能なレベルが存在しない。一実施形態では、細菌は、アルカリ糞便菌（Alcaligenes faecalis）、カンジダ・アルビカンス（Candida albicans）、大腸菌（Escherichia coli）、インフルエンザ菌（Haemophilus influenza）、髄膜炎菌（Neisseria meningitides）、緑膿菌（Pseudomonas aeruginosa）、黄色ブドウ球菌（Staphylococcus aureus）、肺炎球菌（Streptococcus pneumonia）、および化膿性連鎖球菌Ａ群（Streptococcus pyogenes group A）からなる群から選択される少なくとも１つである。
【0290】
一実施形態では、ステップ３）のＣＡＲ細胞、たとえばＣＡＲ－Ｔ細胞、特に抗ＣＤ１９ＣＡＲ－Ｔ細胞は、０．１×１０６～６×１０８、０．５×１０６～５．０×１０８、１．０×１０６～４．０×１０８、２．０×１０６～３．０×１０８、３．０×１０６～２．０×１０８、３．０×１０６～１．０×１０８、４．０×１０６～９．０×１０７、５．０×１０６～８．０×１０７、６．０×１０６～７．０×１０７、７．０×１０６～６．０×１０７、８．０×１０６～５．０×１０７、９．０×１０６～４．０×１０７、１．０×１０７～３．０×１０７個のＣＡＲ陽性生Ｔ細胞／体重１ｋｇの投薬量で投与する。好ましい実施形態では、ステップ３）のＣＡＲ細胞（たとえばＣＡＲ－Ｔ細胞、特に抗ＣＤ１９ＣＡＲ－Ｔ細胞）の用量は、１．２×１０６～６×１０８個のＣＡＲ陽性生免疫細胞／体重１ｋｇのものである。別の実施形態では、ステップ３）のＣＡＲ細胞の用量は、０．４×１０８～２×１０８個のＣＡＲ陽性生免疫細胞／体重１ｋｇのものである。
【0291】
別の実施形態では、ステップ３）のＣＡＲ細胞（たとえばＣＡＲ－Ｔ細胞、特に抗ＣＤ１９ＣＡＲ－Ｔ細胞）は、リンパ枯渇化学療法の完了の２～１４日または３～１４日後に投与する。
【0292】
ＣＡＲ細胞を含む組成物の投与は、エアロゾル吸入、注射、摂取、輸注、植込、または移植によるものを含む、任意の好都合な様式で実施し得る。本明細書中に記載の組成物は、患者に、経動脈、皮下、皮内、腫瘍内、結節内、髄内、筋肉内で、静脈内（ｉ．ｖ．）注射によって、または腹腔内に投与し得る。一態様では、ＣＡＲ細胞を含む組成物は、患者に、皮内または皮下注射によって投与する。好ましい一態様では、本発明のＴ細胞組成物は静脈内注射によって投与する。本発明の組成物は、リンパ節内、または感染部位に直接注射し得る。
【0293】
一実施形態では、ＣＡＲをステップ２）に従って免疫細胞内に導入し、対象はＣＡＲ細胞の初回投与、および最終的にはＣＡＲ細胞の１つまたは複数の続く投与を受け、１つまたは複数の続く投与は、以前の投与の１５日未満、たとえば、１４、１３、１２、１１、１０、９、８、７、６、５、４、３、または２日後に投与する。
【0294】
一実施形態では、ＣＡＲ細胞の１週間あたり複数回の投与を対象に投与する、たとえば、１週間あたり２、３、または４回の本発明のＣＡＲ細胞の投与を投与する。一実施形態では、対象は、ＣＡＲ細胞の１週間あたり複数回の投与（たとえば、１週間あたり２、３、または４回の投与）（本明細書中でサイクルとも呼ぶ）を受け、続いて１週間ＣＡＲ細胞の投与がなく、その後、ＣＡＲ細胞の１つまたは複数の追加の投与（たとえばＣＡＲ細胞の１週間あたり複数回の投与）を対象に投与する。
【0295】
別の実施形態では、対象は複数のサイクルのＣＡＲ細胞を受け、それぞれのサイクルの間の時間は、１０、９、８、７、６、５、４、または３日間未満である。一実施形態では、ＣＡＲ細胞は、隔日で、１週間あたり３回の投与で投与する。一実施形態では、本発明のＣＡＲ細胞は、少なくとも２、３、４、５、６、７、８週間、またはそれより長い間投与する。
【0296】
ＣＡＲ細胞を使用して（特にＣＡＲを保有するネズミｓｃＦｖを用いて）処置している患者において生じる可能性がある潜在的な問題は、複数回処置の後のアナフィラキシーである。この理論に束縛されずに、そのようなアナフィラキシー応答は、患者が液性抗ＣＡＲ応答を発生すること、すなわち、抗ＣＡＲ抗体が抗ＩｇＥアイソタイプを有することによって引き起こされ得ると考えられている。抗原への曝露に１０～１４日間の中断がある場合に、患者の抗体産生細胞が、（アナフィラキシーを引き起こさない）ＩｇＧアイソタイプからＩｇＥアイソタイプへのクラススイッチを経験すると考えられている。患者が、一過性ＣＡＲ療法（ＲＮＡ形質導入によって生成されるものなど）の経過中に抗ＣＡＲ抗体応答を生じる危険性が高い場合、ＣＡＲ－Ｔ細胞輸液の中断は、１０～１４日間より長くは続かない可能性がある。
【0297】
特定の態様では、ＣＡＲ細胞を対象に投与し、その後、続いて血液を再採血し（またはアフェレーシスを行い）、ステップ（１）に従って収集した免疫細胞を遺伝子改変させ、患者にこれらのＣＡＲ細胞を再注入することが望ましい場合がある。このプロセスは、数週間毎に複数回実施することができる。
【0298】
Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターを投与するステップ（５）
本明細書中に開示した処置方法を行うために、本明細書中に記載の有効量のＳ１Ｐ受容体モジュレーター、好ましくはモクラビモドを、そのような処置を必要としている対象に投与する。
本明細書中に開示した処置方法を行うために、本明細書中に記載の有効量のＳ１Ｐ受容体モジュレーター、好ましくはモクラビモドを、そのような処置を必要としている対象に投与する。
【0299】
一部の実施形態では、１日あたり投与するＳ１Ｐ受容体モジュレーター、好ましくはモクラビモド、または薬学的に許容されるその塩もしくはそのリン酸誘導体の量は、固定量である。一部の実施形態では、固定１日投薬量は、１日あたり０．０５ｍｇ～４０ｍｇ、好ましくは１日あたり０．１ｍｇ～３５ｍｇ、より好ましくは０．５ｍｇ～３０ｍｇ、さらにより好ましくは１ｍｇ～１５ｍｇ、さらにより好ましくは１日あたり１．５ｍｇ～７ｍｇ、さらにより好ましくは２ｍｇ～５ｍｇ、さらにより好ましくは約３ｍｇ、または１日あたり約１ｍｇである。
【0300】
たとえば、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターはモクラビモドであり得、前記モクラビモドは、１日あたり約１ｍｇの１日用量で投与し得る。あるいは、モクラビモドは、１日あたり約３ｍｇの用量で、好ましくは３つの約１ｍｇの固体剤形としてまたは１つの約３ｍｇの固体剤形として投与し得る。あるいは、モクラビモドは、１日あたり約２ｍｇの用量で、好ましくは２つの約１ｍｇの固体剤形としてまたは１つの約２ｍｇの固体剤形として投与し得る。
【0301】
本明細書中で使用する、モクラビモドの薬学的に許容される塩またはリン酸誘導体の量は、モクラビモドベースの量をいう。
【0302】
本明細書中に記載のＣＡＲ細胞を含む組成物および／またはＳ１Ｐ受容体モジュレーターは、同時に、同じもしくは別々の組成物中で、または逐次的に投与することができる。
【0303】
逐次的な投与には、一実施形態では、本明細書中に記載のＣＡＲ細胞を含む組成物を最初に投与することができ、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターを二番目に投与することができる。逐次的な投与の別の具体的な実施形態では、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターの投与（典型的には１日投薬量として）は、ＣＡＲ細胞組成物の最初の投与より前に開始する。
【0304】
一実施形態では、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターは、ＣＡＲ細胞を含む組成物の投与の前に投与する。実施形態では、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターは、ＣＡＲ細胞組成物の投与の開始の少なくとも１日、２日、３日、４日、５日、６日、７日、８日、９日、１０日、１１日、１２日、１３日、１４日、１５日、２０日前、好ましくはＣＡＲ細胞組成物の投与の開始の１１日前に投与する。
【0305】
一部の実施形態では、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターはモクラビモドであり、前記モクラビモドは、好ましくはＣＡＲ細胞を含む前記組成物（ＣＡＲ細胞療法）の最初の投与の１～２０日前の開始日、より好ましくはＣＡＲ細胞療法の開始の１１日前から、１、２、３カ月間、またはそれより長く、毎日投与する。
【0306】
Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターの１日投薬量は、１日あたり１回の用量、または単一日中の複数用量として投与し得る。好ましい実施形態では、１日投薬量は１日１回投与する。一部の実施形態では、用量は、１日数回、好ましくは１日３回投与する。一部の実施形態では、有効な治療を提供するために十分である最小用量を使用し得る。
【0307】
別の実施形態では、前記Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターはモクラビモドであり、前記モクラビモドは、３ｍｇの１日用量、たとえば１日に３つの１ｍｇの固体剤形で投与する。実際に、間隔を空けた様式で投与する３つの１ｍｇの固体剤形、たとえばカプセルまたは錠剤は、単一の３ｍｇの固体剤形よりも飲み込みやすい。
【0308】
一部の実施形態では、ＣＡＲ細胞療法は、本明細書中に記載のように血液悪性腫瘍を有する対象に投与する。ＣＡＲ細胞療法は、継続し得る（たとえば、一部のがん関連抗原発現がん細胞が依然として対象において検出可能である場合）または中断し得る（たとえば、リスク便益分析が治療の中断を支持する場合）。
【0309】
ＣＡＲ細胞を含む組成物の複数回の投与が望ましいＣＡＲ細胞療法では、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターレジメンは、ＣＡＲ細胞を含む組成物の投与の前に開始または完了する。
【0310】
一部の実施形態では、１つまたは複数の免疫抑制剤を患者にさらに投与する。１つまたは複数の免疫抑制剤としては、それだけには限定されないが、以下の薬剤のうちの任意の１つまたはすべてが挙げられる：シクロスポリンＡ、シロリムス、タクロリムス、メトトレキサート、およびミコフェノレート、好ましくはシクロスポリンＡ、またはシクロスポリンＡとメトトレキサートとの組合せ。
【0311】
本開示の方法の好ましい実施形態では、前記Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターは、ＣＡＲ細胞（典型的にはＣＡＲ－Ｔ細胞）が骨髄および／もしくはリンパ節を去ることを防止する、ならびに／またはＣＡＲ細胞（典型的にはＣＡＲ－Ｔ細胞）の生着および持続を促進する、ならびに／またはＣＡＲ細胞療法活性化（典型的にはＣＡＲ－Ｔ細胞）の有効性を増加させるために十分な量で投与する。実際に、ＣＡＲ細胞療法の有効性を増加させることは、そのようなＣＡＲ細胞を活性化することを意味し、これは、それを必要としている対象において、腫瘍細胞を殺滅し、したがって血液悪性腫瘍をより良好に処置するＣＡＲ細胞の能力を改善させる、すなわち抗腫瘍効果を増加させることを可能にする。
【0312】
別の実施形態では、前記Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターは、ＣＡＲ細胞を受けている対象において、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）、特に全身性サイトカイン放出症候群および／またはマクロファージ活性化症候群（ＭＡＳ）および／または免疫エフェクター細胞関連神経毒性症候群（ＩＣＡＮＳ）の危険性を低下させるために十分な量で投与する。実際に、サイトカイン放出症候群および／またはマクロファージ活性化症候群および／または免疫エフェクター細胞関連神経毒性症候群の危険性を低下させることは、ＣＡＲ細胞処置に対する患者の応答を改善させることを可能にする。ＣＲＳは、投与したＣＡＲ細胞、特にＣＡＲ－Ｔ細胞が大規模に活性化され、大量のＩＦＮ－γ、ＴＮＦ－α、ＩＬ－２、ＩＬ－４、ＩＬ－６、ＩＬ－１０、およびＩＬ－１７Ａなどのサイトカインの放出をもたらす結果であり、サイトカイン放出を防止することは、ＣＲＳを防止することを助け、したがって、ＣＡＲ細胞処置に対する患者の応答を改善させるである。ＭＡＳは、ＣＲＳ、ならびに血清フェリチンの上昇と血球貪食、腎不全、肝酵素、脾腫大、肺水腫、および／またはＮＫ細胞活性の非存在との組合せによって特徴づけられる重篤な過剰炎症症候群であり、サイトカイン、血清フェリチン、肝酵素の放出を防止することは、ＭＡＳを防止することを助け、したがって、ＣＡＲ細胞処置に対する患者の応答を改善させるであろう。
【0313】
ＩＣＡＮＳは、脳脊髄液サイトカインレベルの上昇および血液脳関門の破壊によって特徴づけられ、脳脊髄液におけるサイトカインの放出を防止することは、ＩＣＡＮＳを防止することを助け、したがって、ＣＡＲ細胞処置に対する患者の応答を改善させるであろう。
【0314】
その結果、それを必要としている対象における、血液悪性腫瘍、特にびまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）の処置は、改善される。
【0315】
一実施形態では、前記Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターは、アロジェネイックＣＡＲ細胞を受けている対象において、サイトカイン放出症候群、特に全身性サイトカイン放出症候群の危険性を低下させるために十分な量で投与する。
【0316】
好ましい実施形態では、前記Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターは、自己または同系のＣＡＲ細胞を受けている対象において、サイトカイン放出症候群、特に全身性サイトカイン放出症候群の危険性を低下させるために十分な量で投与する。
【0317】
したがって、本開示はまた、それを必要としている、ＣＡＲ細胞療法を受けている、典型的には上記開示したＣＡＲ細胞療法を受けている対象において、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）、特に全身性サイトカイン放出症候群および／またはマクロファージ活性化症候群（ＭＡＳ）および／または免疫エフェクター細胞関連神経毒性症候群（ＩＣＡＮＳ）を防止するまたはその危険性を低下させることにおいて使用するための、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターにも関する。
【0318】
レシピエントがＣＡＲ細胞のドナーではない、たとえば、ＣＡＲ細胞がアロジェネイックまたはユニバーサルＣＡＲ細胞である方法の具体的な実施形態では、前記Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターは、ＧＶＨＤの危険性を低下させるために十分な量で投与する。
【図面の簡単な説明】
【0319】
【図1】実施例１の実験スキームを示す図である。Ｃ５７ＢＩ／６マウスにおける－７日目の致死量以下の照射（４Ｇｙ）および０．５×１０６の白血病注射ＩＶ。ＫＲＰ２０３の３ｍ／ｋｇの注射またはＰＢＳ注射を、注射の日に応じて黒い矢印によって表す。＋および－は、０日目のＣＡＲ Ｔ細胞の投与または非投与を示す。
【図2】リンパ節、脾臓、骨髄、および血液から回収した腫瘍細胞の百分率を示す要約のグラフを示す図である。それぞれの点は１匹のマウスを表す。左から右に、薄灰色はＣＡＲ８＋ＰＢＳ群を表し、中灰色はＣＡＲ８＋ＫＲＰ２０３ －１日目群を表し、濃灰色はＣＡＲ８＋ＫＲＰ２０３ ＋２日目群を表す。
【図3】リンパ節、脾臓、骨髄、および血液内の、ＣＡＲ－Ｔ細胞における表面ＣＤ６９、細胞内グランザイムＢ、および表面ＰＤ－１の発現の定量を示す図である。それぞれの点は１匹のマウスを表す。
【図4】実施例２の実験スキームを示す図である。
【図5】モクラビモド（濃灰色）およびフィンゴリモド（中灰色）が、ＣＡＲ－Ｔ細胞注射によって誘導されたＩＦＮ－γのレベルを減少させたことを示す図である。（Ａ）ＩＮＦ－γのレベルを、ＣＡＲ－Ｔ注射の５日後に血漿中で測定した。個体値および平均＋／－ＳＥＭを示す。ｎ＝６～８匹のマウス／群。一元配置ＡＮＯＶＡ、続いてダネット事後検定（ｐｏｓｔ－ｔｅｓｔ）を使用して、すべての処置した群間を比較した。＊＊＊ｐ＜０．００１。
【図6】モクラビモド（黒色）が、ＣＡＲ－Ｔ細胞注射によって誘導されたＩＦＮ－γ、ＴＮＦ－α、およびＩＬ－２のレベルを減少させたことを示す図である。ＩＮＦ－ｇ、ＴＮＦ－ａ、およびＩＬ－２のレベルを、ＣＡＲ－Ｔ注射の５日後に血漿中で測定した。平均＋／－ＳＤを示す。ｎ＝５匹のマウス／群。対応なしｔ検定を使用して、それぞれの時点のビヒクルおよびモクラビモド群を比較した。＊＊ｐ＜０．００５、＊＊＊ｐ＜０．００１、＊＊＊＊ｐ＜０．０００１
【図7】モクラビモドが、血液中のＣＡＲ－Ｔ細胞の絶対数を減少させたことを示す図である。ＣＡＲ－Ｔ細胞の絶対数を、ＣＡＲ－Ｔ注射の１～５日後に血漿中で測定した。平均＋／－ＳＤを示す。ｎ＝５匹のマウス／群。対応なしｔ検定を使用して、５日目にモクラビモドをビヒクル群と比較した。＊ｐ＜０．０５。
【図8】モクラビモドが、未処置のアームと比較して、骨髄中のＣＡＲ－Ｔ細胞の百分率を増加させたことを示す図である。ＣＡＲ－Ｔ細胞を、ＣＡＲ－Ｔ注射の４日後に骨髄中で測定した。個体値および平均＋／－ＳＥＭを示す。ｎ＝３匹のマウス／群。対応なしｔ検定を使用して、モクラビモドを対照と比較した。＊ｐ＜０．０５。
【図9】モクラビモドがｉｎ ｖｉｔｒｏで腫瘍細胞を殺滅することを示す図である。対応なしｔ検定を使用して、モクラビモドなしを７．５μＭのモクラビモドと比較した。＊＊ｐ＜０．００５、＊＊＊ｐ＜０．００１、＊＊＊＊ｐ＜０．０００１。
【図10】ＣＡＲ－Ｔ細胞単独および未処置と比較した、ＣＡＲ－Ｔ細胞と組み合わせたモクラビモドの延命効果を示す図である。＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１、＊＊＊ｐ＜０．００１
【図11】ＣＡＲ－Ｔ細胞と組み合わせたモクラビモドが腫瘍排除を増加させることを示す図である。
【実施例】
【0320】
[実施例１]
Ｓ１ＰモジュレーターがＣＡＲ－Ｔの活性化を増加させる
材料および方法
マウスおよび細胞系
６～８週齢のＣ５７ＢＬ／６Ｊ雄マウスをＥｎｖｉｇｏから入手した。Ｕｂｉ－ＧＦＰ ＲＡＧ１－／－ＯＴ－Ｉ ＴＣＲマウスを繁殖させ、本発明者らの動物施設内、特定病原体除去条件下で交雑させた。すべての実験は、Ｉｎｓｔｉｔｕｔ Ｐａｓｔｅｕｒの安全性委員会によって、フランスおよび欧州指針（ＣＥＴＥＡ２０１７－００３８）に従って認可された。不死化ｐｒｏ－Ｂ細胞を、ウイルスアベルソンキナーゼ（ｖ－ａｂｌ）をコードしているレトロウイルスを用いて骨髄細胞を感染させることによって作製した。その後、この腫瘍細胞系をレトロウイルスによって形質導入して、カスパーゼ３活性のための蛍光共鳴エネルギー移動（ＦＲＥＴ）に基づくレポーターを発現させた。マウスを毎日検査し、虚脱、乱れ毛、衰弱、または結節腫瘍塊＞１ｃｍの場合は屠殺した。細胞を、１０％の熱失活ウシ胎児血清、５０Ｕ．ｍＬ－１のペニシリン、５０μｇ．ｍＬ－１のストレプトマイシン、１ｍＭのピルビン酸ナトリウム、１０ｍＭのＨＥＰＥＳ、および５０μＭの２－メルカプトエタノールを添加したＲＰＭＩ培地１６４０－ＧｌｕｔａＭＡＸＴＭ中で培養し、３７℃および５％のＣＯ２で維持した。細胞を、マイコプラズマ属（Mycoplasma）汚染の非存在についてルーチン的に試験した（Ｖｅｎｏｒ－ＧｅＭ Ａｄｖａｎｃｅマイコプラズマ検出キット、Ｍｉｎｅｒｖａ Ｂｉｏｌａｂｓ）。
Ｓ１ＰモジュレーターがＣＡＲ－Ｔの活性化を増加させる
材料および方法
マウスおよび細胞系
６～８週齢のＣ５７ＢＬ／６Ｊ雄マウスをＥｎｖｉｇｏから入手した。Ｕｂｉ－ＧＦＰ ＲＡＧ１－／－ＯＴ－Ｉ ＴＣＲマウスを繁殖させ、本発明者らの動物施設内、特定病原体除去条件下で交雑させた。すべての実験は、Ｉｎｓｔｉｔｕｔ Ｐａｓｔｅｕｒの安全性委員会によって、フランスおよび欧州指針（ＣＥＴＥＡ２０１７－００３８）に従って認可された。不死化ｐｒｏ－Ｂ細胞を、ウイルスアベルソンキナーゼ（ｖ－ａｂｌ）をコードしているレトロウイルスを用いて骨髄細胞を感染させることによって作製した。その後、この腫瘍細胞系をレトロウイルスによって形質導入して、カスパーゼ３活性のための蛍光共鳴エネルギー移動（ＦＲＥＴ）に基づくレポーターを発現させた。マウスを毎日検査し、虚脱、乱れ毛、衰弱、または結節腫瘍塊＞１ｃｍの場合は屠殺した。細胞を、１０％の熱失活ウシ胎児血清、５０Ｕ．ｍＬ－１のペニシリン、５０μｇ．ｍＬ－１のストレプトマイシン、１ｍＭのピルビン酸ナトリウム、１０ｍＭのＨＥＰＥＳ、および５０μＭの２－メルカプトエタノールを添加したＲＰＭＩ培地１６４０－ＧｌｕｔａＭＡＸＴＭ中で培養し、３７℃および５％のＣＯ２で維持した。細胞を、マイコプラズマ属（Mycoplasma）汚染の非存在についてルーチン的に試験した（Ｖｅｎｏｒ－ＧｅＭ Ａｄｖａｎｃｅマイコプラズマ検出キット、Ｍｉｎｅｒｖａ Ｂｉｏｌａｂｓ）。
【0321】
ＣＡＲ－Ｔ細胞の生成および養子移入
抗ＣＤ１９ＣＡＲをコードしているｔＣＤ３４．２Ａ．ａｍＣＤ１９．ＣＤ２８ＩＥＶζレトロウイルスベクターは、１Ｄ３ラットハイブリドーマに由来する抗ネズミＣＤ１９単鎖断片可変ドメイン、ＣＤ２８の膜貫通および細胞内ドメイン、ならびにＣＤ３ｚ細胞内ドメインから構成される。このレトロウイルスベクターは、また、ＣＡＲ－Ｔ細胞の同定および精製に使用される、切断されたヒトＣＤ３４分子もコードしている。ＣＤ８＋Ｔ細胞を、Ｕｂｉ－ＧＦＰ ＲＡＧ１－／－ＯＴ－Ｉ ＴＣＲマウスのリンパ節から単離した。Ｔ細胞を、２．５μｇ．ｍｌ－１の抗ＣＤ３ ｍＡｂ（クローン１７．Ａ２、ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ）をコーティングしたプレート中、２．５μｇ．ｍｌ－１の可溶性抗ＣＤ２８ ｍＡｂ（クローン３７．５１、ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ）および１０ｎｇ．ｍｌ－１のネズミＩＬ－１２（Ｉ８５２３、Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ）の存在下で活性化させた。２ラウンドのスピン－感染を、Ｔ細胞活性化の２４および４８時間後に、８μｇ．ｍｌ－１のポリブレン（Ｍｅｒｃｋ）を添加したレトロウイルス粒子を使用して行った。Ｔ細胞をさらに４日間、１０ｎｇ．ｍｌ－１のｈＩＬ－２（２０２－ＩＬ、Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）の存在下で培養した。ＣＡＲ形質導入の有効性は典型的には＞８０％であった。それより低い場合は、形質導入した細胞の精製を、ｈＣＤ３４陽性選択キット（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ Ｂｉｏｔｅｃ）を使用して行った。Ｂ細胞腫瘍は、致死量以下の照射（４Ｇｙ）の後に、０．５×１０６個の形質転換させたｐｒｏ－Ｂ細胞をマウス内に注射することによって確立し、ＣＡＲ－Ｔ細胞生着のコンディショニングレジメンとして使用した。腫瘍は主に骨髄中で発生し、７日目までに血液中で検出可能となり、この時点で、ＣＡＲ－Ｔ細胞（５×１０６個の細胞）を静脈内（ｉ．ｖ．）で注射した。
抗ＣＤ１９ＣＡＲをコードしているｔＣＤ３４．２Ａ．ａｍＣＤ１９．ＣＤ２８ＩＥＶζレトロウイルスベクターは、１Ｄ３ラットハイブリドーマに由来する抗ネズミＣＤ１９単鎖断片可変ドメイン、ＣＤ２８の膜貫通および細胞内ドメイン、ならびにＣＤ３ｚ細胞内ドメインから構成される。このレトロウイルスベクターは、また、ＣＡＲ－Ｔ細胞の同定および精製に使用される、切断されたヒトＣＤ３４分子もコードしている。ＣＤ８＋Ｔ細胞を、Ｕｂｉ－ＧＦＰ ＲＡＧ１－／－ＯＴ－Ｉ ＴＣＲマウスのリンパ節から単離した。Ｔ細胞を、２．５μｇ．ｍｌ－１の抗ＣＤ３ ｍＡｂ（クローン１７．Ａ２、ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ）をコーティングしたプレート中、２．５μｇ．ｍｌ－１の可溶性抗ＣＤ２８ ｍＡｂ（クローン３７．５１、ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ）および１０ｎｇ．ｍｌ－１のネズミＩＬ－１２（Ｉ８５２３、Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ）の存在下で活性化させた。２ラウンドのスピン－感染を、Ｔ細胞活性化の２４および４８時間後に、８μｇ．ｍｌ－１のポリブレン（Ｍｅｒｃｋ）を添加したレトロウイルス粒子を使用して行った。Ｔ細胞をさらに４日間、１０ｎｇ．ｍｌ－１のｈＩＬ－２（２０２－ＩＬ、Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）の存在下で培養した。ＣＡＲ形質導入の有効性は典型的には＞８０％であった。それより低い場合は、形質導入した細胞の精製を、ｈＣＤ３４陽性選択キット（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ Ｂｉｏｔｅｃ）を使用して行った。Ｂ細胞腫瘍は、致死量以下の照射（４Ｇｙ）の後に、０．５×１０６個の形質転換させたｐｒｏ－Ｂ細胞をマウス内に注射することによって確立し、ＣＡＲ－Ｔ細胞生着のコンディショニングレジメンとして使用した。腫瘍は主に骨髄中で発生し、７日目までに血液中で検出可能となり、この時点で、ＣＡＲ－Ｔ細胞（５×１０６個の細胞）を静脈内（ｉ．ｖ．）で注射した。
【0322】
ＫＲＰ２０３処置
マウスは、連続的なＫＲＰ２０３（３ｍｇ．ｋｇ－１体重）を腹腔内で２日毎に受けた。ＫＲＰ２０３処置は、ＣＡＲ－Ｔ細胞の注射の１日前または２日後のいずれかに開始した。対照動物はＰＢＳを腹腔内で受けた。実験スキームを図１中に表す。
マウスは、連続的なＫＲＰ２０３（３ｍｇ．ｋｇ－１体重）を腹腔内で２日毎に受けた。ＫＲＰ２０３処置は、ＣＡＲ－Ｔ細胞の注射の１日前または２日後のいずれかに開始した。対照動物はＰＢＳを腹腔内で受けた。実験スキームを図１中に表す。
【0323】
フローサイトメトリーおよび抗体
ｅｘ ｖｉｖｏ分析には、骨髄細胞は、大腿骨および脛骨を腫瘍保有マウスからフラッシュし、続いて７０μｍの細胞濾過器を通して濾過することによって単離した。脾臓およびリンパ節からの単個細胞懸濁液は、細胞を７０μｍの細胞濾過器を通して濾過することによって調製した。マウスの屠殺後に心穿刺によって血液を収集し、赤血球溶解緩衝液（ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を使用して赤血球を除去した。抗ＣＤ１６／３２ ｍＡｂ（クローン９３、ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ）および正常ネズミ血清１％を使用して単個細胞懸濁液をＦｃ遮断した。以下のｍＡｂを用いて染色を行った：ｈＣＤ３４－Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ ６４７（クローン５６１、ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ）、ＣＤ６９－ＢＵＶ７３７（クローンＨ１．２Ｆ３、ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）、ＣＤ８ａ－ＢＵＶ３９５（クローン５３－６．７、ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）、ＣＤ１９－ＡＰＣ－ｆｉｒｅ７５０（クローン６Ｄ５、ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ）、およびＰＤ－１－ＰＥ／Ｃｙ７（クローン２９Ｆ．１Ａ１２、ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ）。細胞内染色は、Ｃｙｔｏｆｉｘ／Ｃｙｔｏｐｅｒｍキット（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を製造者の指針に従って、およびＰＥコンジュゲート抗グランザイムＢ ｍＡｂ（クローンＱＡ１８Ａ２８、ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ）を使用して行った。分析はＣｙｔｏｆｌｅｘ ＬＸ（Ｂｅｃｋｍａｎ Ｃｏｕｌｔｅｒ）フローサイトメーターを使用して行い、ＦｌｏｗＪｏバージョン１０．８．０（ＢＤ）を用いて分析した。
ｅｘ ｖｉｖｏ分析には、骨髄細胞は、大腿骨および脛骨を腫瘍保有マウスからフラッシュし、続いて７０μｍの細胞濾過器を通して濾過することによって単離した。脾臓およびリンパ節からの単個細胞懸濁液は、細胞を７０μｍの細胞濾過器を通して濾過することによって調製した。マウスの屠殺後に心穿刺によって血液を収集し、赤血球溶解緩衝液（ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を使用して赤血球を除去した。抗ＣＤ１６／３２ ｍＡｂ（クローン９３、ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ）および正常ネズミ血清１％を使用して単個細胞懸濁液をＦｃ遮断した。以下のｍＡｂを用いて染色を行った：ｈＣＤ３４－Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ ６４７（クローン５６１、ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ）、ＣＤ６９－ＢＵＶ７３７（クローンＨ１．２Ｆ３、ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）、ＣＤ８ａ－ＢＵＶ３９５（クローン５３－６．７、ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）、ＣＤ１９－ＡＰＣ－ｆｉｒｅ７５０（クローン６Ｄ５、ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ）、およびＰＤ－１－ＰＥ／Ｃｙ７（クローン２９Ｆ．１Ａ１２、ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ）。細胞内染色は、Ｃｙｔｏｆｉｘ／Ｃｙｔｏｐｅｒｍキット（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を製造者の指針に従って、およびＰＥコンジュゲート抗グランザイムＢ ｍＡｂ（クローンＱＡ１８Ａ２８、ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ）を使用して行った。分析はＣｙｔｏｆｌｅｘ ＬＸ（Ｂｅｃｋｍａｎ Ｃｏｕｌｔｅｒ）フローサイトメーターを使用して行い、ＦｌｏｗＪｏバージョン１０．８．０（ＢＤ）を用いて分析した。
【0324】
統計分析
すべての統計的検定は、Ｐｒｉｓｍバージョン９．２．０（ＧｒａｐｈＰａｄ）を使用して行った。データは平均±ＳＥＭとして表す。一元配置分散分析（ＡＮＯＶＡ）および二元配置ＡＮＯＶＡ試験を多重比較補正に使用した。すべての統計的検定は、０．０５の有意水準の両側性であった。ｎｓ、非有意、＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１、＊＊＊ｐ＜０．００１。
すべての統計的検定は、Ｐｒｉｓｍバージョン９．２．０（ＧｒａｐｈＰａｄ）を使用して行った。データは平均±ＳＥＭとして表す。一元配置分散分析（ＡＮＯＶＡ）および二元配置ＡＮＯＶＡ試験を多重比較補正に使用した。すべての統計的検定は、０．０５の有意水準の両側性であった。ｎｓ、非有意、＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１、＊＊＊ｐ＜０．００１。
【0325】
結果
明確なリンパ器官中における白血病腫瘍細胞を評価した。結果を図２中に表す。リンパ節中の、腫瘍細胞の絶対数で測定した腫瘍量は、腫瘍細胞のみを受けているマウス（未処置群）に対して、ＣＡＲ８＋ＰＢＳを受けているマウスにおいて低下していた。ＣＡＲ－Ｔ細胞およびＫＲＰ２０３を－１日目または＋２日目に投与する場合、リンパ節中の絶対的腫瘍数は、対照（ＣＡＲ８＋ＰＢＳ）および未処置のアームと比較して有意にさらに減少することが実証されている。これは、ＫＲＰ２０３をＣＡＲ－Ｔ細胞と組み合わせて白血病マウスに投与する場合、リンパ節中の絶対的腫瘍数の低下を達成することができることを意味する。リンパ節中の絶対的腫瘍数は、２日目のみのＫＲＰ２０３の投与と比較して、ＫＲＰ２０３の投与が－１日目、１日目、および３日目である場合に、さらに低下する。
明確なリンパ器官中における白血病腫瘍細胞を評価した。結果を図２中に表す。リンパ節中の、腫瘍細胞の絶対数で測定した腫瘍量は、腫瘍細胞のみを受けているマウス（未処置群）に対して、ＣＡＲ８＋ＰＢＳを受けているマウスにおいて低下していた。ＣＡＲ－Ｔ細胞およびＫＲＰ２０３を－１日目または＋２日目に投与する場合、リンパ節中の絶対的腫瘍数は、対照（ＣＡＲ８＋ＰＢＳ）および未処置のアームと比較して有意にさらに減少することが実証されている。これは、ＫＲＰ２０３をＣＡＲ－Ｔ細胞と組み合わせて白血病マウスに投与する場合、リンパ節中の絶対的腫瘍数の低下を達成することができることを意味する。リンパ節中の絶対的腫瘍数は、２日目のみのＫＲＰ２０３の投与と比較して、ＫＲＰ２０３の投与が－１日目、１日目、および３日目である場合に、さらに低下する。
【0326】
ＣＡＲ－Ｔ細胞の活性化および排除を評価した。結果を図３中に表す。結果は図２と一致しており、リンパ節中の腫瘍量が低下している。実際に、ＫＲＰ２０３処置と組み合わせた場合に、より高い割合のＣＡＲ－Ｔ細胞が活性化マーカー（ＣＤ６９、ＧｒＢ、ＰＤ－１）を発現することが実証されている。リンパ節では、ＫＲＰ２０３を－１日目から投与した場合、ＣＡＲ－Ｔ細胞の活性化百分率は、対照と比較して２～３倍有意に増加する。＋２日目に投与した場合、対照と比較してやはりＣＡＲ－Ｔ細胞の活性化の増加の傾向があるが、－１日目の投与と比較してより低い程度である。活性化マーカー（ＣＤ６９、ＰＤ－１）の増加は、ＣＡＲ－Ｔ細胞が腫瘍細胞に対してより応答性であることを示し、グランザイムＢ（ＧｒＢ）含有量の増加は、ＣＡＲ－Ｔ細胞ががん細胞を殺滅する能力が増強していることを示す。さらに、Ｓ１Ｐモジュレーターを用いてＣＡＲ－Ｔ細胞をリンパ節内に隔離することは、そのようなＣＡＲ－Ｔ細胞がより長く生存することをもたらし得る。
【0327】
さらに、マウスの生存、およびそれがＣＡＲ Ｔ細胞と組み合わせたＫＲＰ２０３の投与によってどのように影響を受けるかを、調査した。ＣＡＲ Ｔ細胞とＫＲＰ２０３との組合せによって処置したマウスは、未処置のまま、またはＣＡＲ Ｔ細胞を単独で受けたマウスと比較して、統計的に有意な延命効果を示した。（図１０）
【0328】
[実施例２]
Ｓ１ＰモジュレーターとＣＡＲ－Ｔ細胞との組合せがＣＲＳを防止する
材料および方法
動物
本研究は、雌ＮＯＤ／ＳＣＩＤ／ＩＬ－２Ｒγヌル免疫不全マウス株（ＮＣＧ）を用いて実施した。本研究中に記載したすべての手順は、現地の倫理委員会（ＣＥＬＥＡＧ）によって検討および認可された。マウスは、２／６匹の個体の群で、ＴＣＳ ＢＳＬ－２動物施設内に宿した。それぞれのマウスをユニークに同定した。
Ｓ１ＰモジュレーターとＣＡＲ－Ｔ細胞との組合せがＣＲＳを防止する
材料および方法
動物
本研究は、雌ＮＯＤ／ＳＣＩＤ／ＩＬ－２Ｒγヌル免疫不全マウス株（ＮＣＧ）を用いて実施した。本研究中に記載したすべての手順は、現地の倫理委員会（ＣＥＬＥＡＧ）によって検討および認可された。マウスは、２／６匹の個体の群で、ＴＣＳ ＢＳＬ－２動物施設内に宿した。それぞれのマウスをユニークに同定した。
【0329】
腫瘍細胞生着
ＪＥＫＯ－１－ｌｕｃ－ＧＦＰ腫瘍細胞を、ＡＴＣＣの推奨に従ってｉｎ ｖｉｔｒｏで拡大させた。５×１０６個の腫瘍細胞を、１０％のＳＶＦおよび１％のペニシリン／ストレプトマイシンを含むＲＰＭＩ－１６４０中、３７℃、水飽和および無菌的な雰囲気および５％のＣＯ２下で成長させた。生存度の確認後、対数増殖期中の腫瘍細胞を選択した動物内に注射した。
ＪＥＫＯ－１－ｌｕｃ－ＧＦＰ腫瘍細胞を、ＡＴＣＣの推奨に従ってｉｎ ｖｉｔｒｏで拡大させた。５×１０６個の腫瘍細胞を、１０％のＳＶＦおよび１％のペニシリン／ストレプトマイシンを含むＲＰＭＩ－１６４０中、３７℃、水飽和および無菌的な雰囲気および５％のＣＯ２下で成長させた。生存度の確認後、対数増殖期中の腫瘍細胞を選択した動物内に注射した。
【0330】
ＪＥＫＯ－１－ｌｕｃ－ＧＦＰ腫瘍細胞を、５０×１０６個の細胞／ｍＬの濃度でＰＢＳ中に懸濁させた。
【0331】
腫瘍細胞を、２４匹の免疫不全マウス内に、１００μＬの細胞懸濁液（５．１０６個のＪＥＫＯ－１／マウス）を用いて静脈内に注射した。腫瘍生着を０日目として定義した。
【0332】
ランダム化、群、および処置
マウスをその体重に応じて４つの群にわたって分配し、以下のように処置した：＃１ ビヒクル－ビヒクル、＃２ ＣＡＲ－Ｔ－ビヒクル、＃３ ＣＡＲ－Ｔ－モクラビモド、および＃４ ＣＡＲ－Ｔ－フィンゴリモド。
マウスをその体重に応じて４つの群にわたって分配し、以下のように処置した：＃１ ビヒクル－ビヒクル、＃２ ＣＡＲ－Ｔ－ビヒクル、＃３ ＣＡＲ－Ｔ－モクラビモド、および＃４ ＣＡＲ－Ｔ－フィンゴリモド。
【0333】
モクラビモドおよびフィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）は、３ｍｇ／ｋｇの用量で腹腔内注射によって投与した。モクラビモドおよびビヒクル群（＃１、＃２、および＃３群）は２日毎に処置した一方で、フィンゴリモド群（＃４）は６日目に開始して毎日処置した。ＣＡＲ－Ｔ細胞は、７日目に１回、０．７５×１０６個の細胞／マウスの用量で投与した（以下の表を参照）。
【0334】
【表1】
【0335】
実験スキームを図４中に表す。
【0336】
出血および臓器の収集
血液を、血漿単離およびＣＢＡアッセイのために１２日目に、ならびに安楽死日である２５日目にフローサイトメトリー分析のために、眼窩後方から収集した。
血液を、血漿単離およびＣＢＡアッセイのために１２日目に、ならびに安楽死日である２５日目にフローサイトメトリー分析のために、眼窩後方から収集した。
【0337】
脾臓および骨髄も収穫し、ＴｒａｎｓＣｕｒｅ ｂｉｏＳｅｒｖｉｃｅｓ標準操作手順（ＳＯＰ）に従って機械的に分解し、ＲＢＣ溶解緩衝液を用いて室温で１分間赤血球溶解を行った後、内部ＴｒａｎｓＣｕｒｅ ｂｉｏＳｅｒｖｉｃｅｓプロトコルに従ってフローサイトメトリー分析を行った。分解の前に、さらなるＩＨＣ分析のために、脾臓の小部分を４％のＰＦＡ中で固定し、パラフィン包埋した。
【0338】
得られた単離細胞を、内部ＴｒａｎｓＣｕｒｅ ｂｉｏＳｅｒｖｉｃｅｓプロトコルに従って、フローサイトメトリーによる免疫表現型決定のために染色した。
【0339】
サイトカインアッセイ
サイトカイン（ＴＮＦ－α、ＩＮＦ－γ、ＩＬ－１０、ＩＬ－６、ＩＬ－４、ＩＬ－２、およびＩＬ－１７ａ）を、カスタマイズした細胞数測定ビーズアレイ（ＣＢＡ）キットによって、製造者の指示（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）およびＴｒａｎｓＣｕｒｅ標準手順に従って、血漿試料（２５μＬ）に対して分析した。
サイトカイン（ＴＮＦ－α、ＩＮＦ－γ、ＩＬ－１０、ＩＬ－６、ＩＬ－４、ＩＬ－２、およびＩＬ－１７ａ）を、カスタマイズした細胞数測定ビーズアレイ（ＣＢＡ）キットによって、製造者の指示（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）およびＴｒａｎｓＣｕｒｅ標準手順に従って、血漿試料（２５μＬ）に対して分析した。
【0340】
いくつかのヒトサイトカイン（ＩＦＮ－γ、ＴＮＦ－α、ＩＬ－２、ＩＬ－４、ＩＬ－６、ＩＬ－１０、およびＩＬ－１７Ａ）のレベルを、１２日目（ＣＡＲ－Ｔ細胞注射の５日後）に、細胞数測定ビーズアレイ（ＣＢＡ）アッセイによって測定した（図５）。処置群にかかわらず、マウスの血液中で、ＩＬ－２、ＩＬ４、ＩＬ－６、ＩＬ－１０、ＩＬ－１７Ａ、またはＴＮＦ－αは検出されなかった、または非常に低いレベルで検出された。
【0341】
ＣＡＲ－Ｔ細胞投与の５日後の血液中におけるサイトカインプロファイル分析は、ＩＦＮ－γが、ＣＡＲ－Ｔ細胞で処置したマウスでのみ検出されたことを示した。中間レベルのＩＦＮ－γがＣＡＲ－Ｔ－モクラビモドおよびＣＡＲ－Ｔ－フィンゴリモド処置群において見つかり（１０ｐｇ／ｍＬ未満）、ビヒクル－ビヒクル群と比較して有意に高いレベルがＣＡＲ－Ｔ－ビヒクル群中で見つかった（図５）。さらに、ＩＦＮ－γのレベルは、ＣＡＲ－Ｔ－ビヒクル処置群と比較して、ＣＡＲ－Ｔ－モクラビモドおよびＣＡＲ－Ｔ－フィンゴリモド群において有意に低かった。
【0342】
結論
ＣＡＲ－Ｔ細胞は炎症誘発性ＩＦＮ－γ放出を誘導し、これはモクラビモドまたはフィンゴリモド処置の際に有意に低下した。これらの結果は、Ｓ１Ｐモジュレーター処置が、ＣＡＲ－Ｔ細胞療法によって誘導されるサイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）を防止するために有用であろうことを示唆している。
ＣＡＲ－Ｔ細胞は炎症誘発性ＩＦＮ－γ放出を誘導し、これはモクラビモドまたはフィンゴリモド処置の際に有意に低下した。これらの結果は、Ｓ１Ｐモジュレーター処置が、ＣＡＲ－Ｔ細胞療法によって誘導されるサイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）を防止するために有用であろうことを示唆している。
【0343】
[実施例３]
Ｓ１ＰモジュレーターとＣＡＲ－Ｔ細胞との組合せがＣＲＳを防止する
材料および方法
サイトカインアッセイ
ＣＡＲ Ｔ細胞と組み合わせて投与した場合の、サイトカイン分泌の動力学を決定し、循環サイトカインのレベルを低下させることにおけるモクラビモドの有効性を評価するために、ＮＯＤ ＣＲＩＳＰＲ Ｐｒｋｄｃ Ｉｌ２ｒガンマ（ＮＣＧ）マウスに、５×１０６個のＪＥＫＯ－１－ｌｕｃ－ＧＦＰ腫瘍細胞を静脈内注射した。モクラビモドまたはビヒクルのいずれかを用いた処置は、腫瘍細胞生着の６日後に開始した。モクラビモド（３ｍｇ／ｋｇ）を２日毎に投与した。０．７５×１０６個のＣＡＲ Ｔ細胞を、腫瘍細胞生着の７日後に静脈内注射した。マウスをＣＡＲ Ｔ細胞注射の２４時間、４８時間、７２時間、９６時間、および１２０時間後に出血させ、血漿を収集した。インターフェロン－ｇ（ＩＦＮ－ｇ）、腫瘍壊死因子－ａ（ＴＮＦ－ａ）、およびインターロイキン－２（ＩＬ－２）を、血漿試料中で、ＢＤ ＣＢＡヒトＴｈ１／Ｔｈ２／Ｔｈ１７サイトカインアッセイを使用して分析した。ＣＡＲ Ｔ細胞を表現型決定し、血液中で数えた。
Ｓ１ＰモジュレーターとＣＡＲ－Ｔ細胞との組合せがＣＲＳを防止する
材料および方法
サイトカインアッセイ
ＣＡＲ Ｔ細胞と組み合わせて投与した場合の、サイトカイン分泌の動力学を決定し、循環サイトカインのレベルを低下させることにおけるモクラビモドの有効性を評価するために、ＮＯＤ ＣＲＩＳＰＲ Ｐｒｋｄｃ Ｉｌ２ｒガンマ（ＮＣＧ）マウスに、５×１０６個のＪＥＫＯ－１－ｌｕｃ－ＧＦＰ腫瘍細胞を静脈内注射した。モクラビモドまたはビヒクルのいずれかを用いた処置は、腫瘍細胞生着の６日後に開始した。モクラビモド（３ｍｇ／ｋｇ）を２日毎に投与した。０．７５×１０６個のＣＡＲ Ｔ細胞を、腫瘍細胞生着の７日後に静脈内注射した。マウスをＣＡＲ Ｔ細胞注射の２４時間、４８時間、７２時間、９６時間、および１２０時間後に出血させ、血漿を収集した。インターフェロン－ｇ（ＩＦＮ－ｇ）、腫瘍壊死因子－ａ（ＴＮＦ－ａ）、およびインターロイキン－２（ＩＬ－２）を、血漿試料中で、ＢＤ ＣＢＡヒトＴｈ１／Ｔｈ２／Ｔｈ１７サイトカインアッセイを使用して分析した。ＣＡＲ Ｔ細胞を表現型決定し、血液中で数えた。
【0344】
ＣＡＲ－Ｔ細胞投与の５日後の血液中におけるサイトカインプロファイル分析は、ＩＦＮ－ｇ、ＴＮＦａ、およびＩＬ－２のレベルが、ＣＡＲ－Ｔ－ビヒクル群（それぞれ約２５０ｐｇ／ｍＬ、約６ｐｇ／ｍＬ、約３ｐｇ／ｍＬ）と比較して、ＣＡＲ－Ｔ－モクラビモド処置群（それぞれ約１００ｐｇ／ｍＬ、約０ｐｇ／ｍＬ、および約２ｐｇ／ｍＬ）において有意に低かったことを示した（図６）。
【0345】
ＣＡＲ－Ｔ細胞の生着
骨髄中のＣＡＲ－Ｔ細胞を分析する方法には実施例１と同じプロトコルを実施し、血液中のＣＡＲ－Ｔ細胞を分析する方法にはサイトカインアッセイと同じプロトコルを実施した。
骨髄中のＣＡＲ－Ｔ細胞を分析する方法には実施例１と同じプロトコルを実施し、血液中のＣＡＲ－Ｔ細胞を分析する方法にはサイトカインアッセイと同じプロトコルを実施した。
【0346】
ＣＡＲ－Ｔ細胞注射の前の－１日目にモクラビモドの投与を開始する際、血液中のＣＡＲ－Ｔ細胞の絶対数は、５日目に対照（ビヒクル）と比較して有意に減少することが実証されている（図７）。モクラビモドとＣＡＲ－Ｔ細胞との組合せを対照と比較すると、１日目の血液中のＣＡＲ－Ｔ細胞の絶対数は同じであった（約５００個）。しかし、血液中のＣＡＲ－Ｔ細胞の絶対数は、対照では３日目から５日目で増加する傾向にある一方で（約５００個から約１５００個まで）、血液中のＣＡＲ－Ｔ細胞の絶対数は、モクラビモドとＣＡＲ－Ｔ細胞との組合せでは減少する傾向にある（約５００個から約１００個まで）。
【0347】
これらの結果は、４日目の骨髄中のＣＡＲ－Ｔ細胞の百分率と一致している。モクラビモドをＣＡＲ－Ｔ細胞と共に投与した場合、骨髄中のＣＡＲ－Ｔ細胞の百分率は対照（ＣＡＲ－Ｔ＋ＰＢＳ）と比較して有意に増加した（図８）。この結果は、モクラビモドとＣＡＲ－Ｔ細胞との組合せにおける、血液中のＣＡＲ－Ｔ細胞の枯渇および骨髄中のＣＡＲ－Ｔ細胞の増加を示し、これはＣＡＲ Ｔ細胞のリンパ器官への隔離を示す。したがって、モクラビモドとＣＡＲ－Ｔ細胞との組合せは、細胞が骨髄を去ることを防止し、ＣＡＲ－Ｔ細胞の生着を促進し、ＣＡＲ－Ｔ細胞療法の有効性を増加させる。
【0348】
結論
ＣＡＲ－Ｔ細胞は炎症誘発性サイトカインＩＦＮ－γ、ＴＮＦ－α、およびＩＬ－２を分泌し、これらはモクラビモド処置の際に有意に低下した。これらの結果は、Ｓ１Ｐモジュレーター処置、より好ましくはモクラビモドが、ＣＡＲ－Ｔ細胞療法によって誘導されるサイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）を防止することに有用であるだろうことを裏付けている。
ＣＡＲ－Ｔ細胞は炎症誘発性サイトカインＩＦＮ－γ、ＴＮＦ－α、およびＩＬ－２を分泌し、これらはモクラビモド処置の際に有意に低下した。これらの結果は、Ｓ１Ｐモジュレーター処置、より好ましくはモクラビモドが、ＣＡＲ－Ｔ細胞療法によって誘導されるサイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）を防止することに有用であるだろうことを裏付けている。
【0349】
ＣＡＲ－Ｔ細胞は、骨髄を去り、血液中で見つかる傾向にある。これらの結果は、Ｓ１Ｐモジュレーター処置が、ＣＡＲ－Ｔ細胞が骨髄を去ることを防止する、ＣＡＲ細胞の生着および持続を促進し、したがって、ＣＡＲ－Ｔ細胞療法の有効性を増加させることに有用であるだろうことを裏付けている。
【0350】
[実施例４]
Ｓ１Ｐモジュレーターがアポトーシスを誘導する
材料および方法
様々な血液がん細胞系に対するモクラビモドの細胞毒性（細胞死の誘導）を調査するために、細胞系を拡大し、７．５μＭのモクラビモドの存在下で２および２４時間インキュベートした。以下の細胞系を使用した：ＭＯＬＭ－１３、ＴＨＰ－１、Ｋａｓｕｍｉ－１、ジャーカット、Ｒａｊｉ、ＪＥＫＯ－１、およびＭＶ－４－１１。１０５個の腫瘍細胞／ウェルを９６ウェルプレート中に播種した。３７℃、５％のＣＯ２でのインキュベーションの２および２４時間後、細胞死を評価するために細胞をアネキシンＶおよびＤＡＰＩで染色した。
Ｓ１Ｐモジュレーターがアポトーシスを誘導する
材料および方法
様々な血液がん細胞系に対するモクラビモドの細胞毒性（細胞死の誘導）を調査するために、細胞系を拡大し、７．５μＭのモクラビモドの存在下で２および２４時間インキュベートした。以下の細胞系を使用した：ＭＯＬＭ－１３、ＴＨＰ－１、Ｋａｓｕｍｉ－１、ジャーカット、Ｒａｊｉ、ＪＥＫＯ－１、およびＭＶ－４－１１。１０５個の腫瘍細胞／ウェルを９６ウェルプレート中に播種した。３７℃、５％のＣＯ２でのインキュベーションの２および２４時間後、細胞死を評価するために細胞をアネキシンＶおよびＤＡＰＩで染色した。
【0351】
結果
それぞれの腫瘍細胞系、ＭＯＬＭ－１３（ＡＭＬ）、ＴＨＰ－１（ＡＭＬ）、Ｋａｓｕｍｉ－１（ＡＭＬ）、ジャーカット（ＡＬＬ）、Ｒａｊｉ（Ｂ細胞リンパ腫）、ＪＥＫＯ－１（マントル細胞リンパ腫）、およびＭＶ－４－１１（ＡＭＬ）の死細胞の百分率は、対照の未処置のアームと比較して、処置アームでモクラビモドを投与した場合に高かった（図９）。したがって、モクラビモドは、すべてのＭＯＬＭ－１３、ＴＨＰ－１、Ｋａｓｕｍｉ－１、ジャーカット、Ｒａｊｉ、ＪＥＫＯ－１、およびＭＶ－４－１１細胞系において腫瘍細胞のアポトーシスを誘導する。したがって、ＣＡＲ－Ｔ細胞と組み合わせたモクラビモドの投与は、血液悪性腫瘍を殺滅することの有効性を増加させることを可能にする。
それぞれの腫瘍細胞系、ＭＯＬＭ－１３（ＡＭＬ）、ＴＨＰ－１（ＡＭＬ）、Ｋａｓｕｍｉ－１（ＡＭＬ）、ジャーカット（ＡＬＬ）、Ｒａｊｉ（Ｂ細胞リンパ腫）、ＪＥＫＯ－１（マントル細胞リンパ腫）、およびＭＶ－４－１１（ＡＭＬ）の死細胞の百分率は、対照の未処置のアームと比較して、処置アームでモクラビモドを投与した場合に高かった（図９）。したがって、モクラビモドは、すべてのＭＯＬＭ－１３、ＴＨＰ－１、Ｋａｓｕｍｉ－１、ジャーカット、Ｒａｊｉ、ＪＥＫＯ－１、およびＭＶ－４－１１細胞系において腫瘍細胞のアポトーシスを誘導する。したがって、ＣＡＲ－Ｔ細胞と組み合わせたモクラビモドの投与は、血液悪性腫瘍を殺滅することの有効性を増加させることを可能にする。
【0352】
[実施例５]
モクラビモドとＣＡＲ Ｔ細胞との組合せが腫瘍排除を増加させる
材料および方法
Ｓｃｉｄ－ベージュマウスに、０．５×１０６個のＮａｌｍ６－ＧＦＰ＋腫瘍細胞を、尾静脈を介して注射した（０日目）。腫瘍細胞はｉｎ ｖｉｔｒｏで事前に拡大させた。一部のマウスは未処置のままであった一方、一部のマウスは、腫瘍注射の２週間後（１４日目）に１×１０７個のＣＡＲ Ｔ細胞および１×１０６個の末梢血単核球（ＰＢＭＣ）を受けた。ＣＡＲ Ｔ細胞を受けたマウスの半数をモクラビモドで処置した一方で、残りの半数はビヒクル（ＤＭＳＯ）を受けた。モクラビモド処置は、ＣＡＲ Ｔ細胞注射の３日前に、３ｍｇ／ｋｇの用量で開始し、実験の終わりまで２日毎に投与し続けた。腫瘍細胞をＣＡＲ Ｔ細胞投与の４日後（１８日目）に骨髄（ＢＭ）中で分析した。
モクラビモドとＣＡＲ Ｔ細胞との組合せが腫瘍排除を増加させる
材料および方法
Ｓｃｉｄ－ベージュマウスに、０．５×１０６個のＮａｌｍ６－ＧＦＰ＋腫瘍細胞を、尾静脈を介して注射した（０日目）。腫瘍細胞はｉｎ ｖｉｔｒｏで事前に拡大させた。一部のマウスは未処置のままであった一方、一部のマウスは、腫瘍注射の２週間後（１４日目）に１×１０７個のＣＡＲ Ｔ細胞および１×１０６個の末梢血単核球（ＰＢＭＣ）を受けた。ＣＡＲ Ｔ細胞を受けたマウスの半数をモクラビモドで処置した一方で、残りの半数はビヒクル（ＤＭＳＯ）を受けた。モクラビモド処置は、ＣＡＲ Ｔ細胞注射の３日前に、３ｍｇ／ｋｇの用量で開始し、実験の終わりまで２日毎に投与し続けた。腫瘍細胞をＣＡＲ Ｔ細胞投与の４日後（１８日目）に骨髄（ＢＭ）中で分析した。
【0353】
結果
すべての群において、Ｎａｌｍ６－ＧＦＰ＋腫瘍細胞をＢＭ中で評価した。ＣＡＲ Ｔ細胞処置を受けなかったマウスが最も高い腫瘍量を示した（図１１）。腫瘍細胞はＣＡＲ Ｔ細胞投与によって効率的に低下した。さらに、ＫＲＰ２０３をＣＡＲ Ｔ細胞と組み合わせて投与した場合は、腫瘍細胞はさらに低下した。したがって、ＣＡＲ－Ｔ細胞と組み合わせたモクラビモドの投与は、腫瘍排除を増加させることを可能にする。
すべての群において、Ｎａｌｍ６－ＧＦＰ＋腫瘍細胞をＢＭ中で評価した。ＣＡＲ Ｔ細胞処置を受けなかったマウスが最も高い腫瘍量を示した（図１１）。腫瘍細胞はＣＡＲ Ｔ細胞投与によって効率的に低下した。さらに、ＫＲＰ２０３をＣＡＲ Ｔ細胞と組み合わせて投与した場合は、腫瘍細胞はさらに低下した。したがって、ＣＡＲ－Ｔ細胞と組み合わせたモクラビモドの投与は、腫瘍排除を増加させることを可能にする。
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】
【図7】
【図8】
【図9】
【図10】
【図11】
【国際調査報告】