特表 2025-506566 アシル－ＣｏＡ結合タンパク質の中和がもたらすオートファジー依存性臓器保護

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2025-03-11

(54)【発明の名称】アシル－ＣｏＡ結合タンパク質の中和がもたらすオートファジー依存性臓器保護

(51)【国際特許分類】

   A61K 45/00 20060101AFI20250304BHJP

   C12N 15/115 20100101ALI20250304BHJP

   C07K 16/18 20060101ALI20250304BHJP

   C12N 15/113 20100101ALI20250304BHJP

   C12N 9/22 20060101ALI20250304BHJP

   A61K 39/395 20060101ALI20250304BHJP

   A61K 31/7088 20060101ALI20250304BHJP

   A61K 31/713 20060101ALI20250304BHJP

   A61K 38/46 20060101ALI20250304BHJP

   A61K 31/7105 20060101ALI20250304BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20250304BHJP

   A61P 39/02 20060101ALI20250304BHJP

   A61P 9/10 20060101ALI20250304BHJP

   A61P 13/12 20060101ALI20250304BHJP

   A61P 17/00 20060101ALI20250304BHJP

   A61P 9/00 20060101ALI20250304BHJP

   A61P 1/16 20060101ALI20250304BHJP

   A61P 11/00 20060101ALI20250304BHJP

【ＦＩ】

A61K45/00

C12N15/115 Z ZNA

C07K16/18

C12N15/113 Z

C12N9/22

A61K39/395 D

A61K39/395 N

A61K31/7088

A61K31/713

A61K38/46

A61K31/7105

A61P43/00 107

A61P43/00 111

A61P39/02

A61P9/10

A61P13/12

A61P17/00

A61P9/00

A61P1/16

A61P11/00

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2024568655

(86)(22)【出願日】2023-02-07

(85)【翻訳文提出日】2024-08-21

(86)【国際出願番号】 IB2023051086

(87)【国際公開番号】W WO2023152637

(87)【国際公開日】2023-08-17

(31)【優先権主張番号】22305137

(32)【優先日】2022-02-08

(33)【優先権主張国・地域又は機関】EP

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】591100596

【氏名又は名称】アンスティチュ ナショナル ドゥ ラ サンテ エ ドゥ ラ ルシェルシュ メディカル

(71)【出願人】

【識別番号】507416908

【氏名又は名称】ソルボンヌ・ユニヴェルシテ

(71)【出願人】

【識別番号】500257447

【氏名又は名称】アシスタンス ピュブリック－オピト ド パリ

【氏名又は名称原語表記】ＡＳＳＩＳＴＡＮＣＥ ＰＵＢＬＩＱＵＥ－ＨＯＰＩＴＡＵＸ ＤＥ ＰＡＲＩＳ

(71)【出願人】

【識別番号】520053762

【氏名又は名称】ユニヴェルシテ・パリ・シテ

【氏名又は名称原語表記】ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＥ ＰＡＲＩＳ ＣＩＴＥ

(74)【代理人】

【識別番号】100078282

【弁理士】

【氏名又は名称】山本 秀策

(74)【代理人】

【識別番号】100113413

【弁理士】

【氏名又は名称】森下 夏樹

(74)【代理人】

【識別番号】100181674

【弁理士】

【氏名又は名称】飯田 貴敏

(74)【代理人】

【識別番号】100181641

【弁理士】

【氏名又は名称】石川 大輔

(74)【代理人】

【識別番号】230113332

【弁護士】

【氏名又は名称】山本 健策

(72)【発明者】

【氏名】クレーマー， グイド

(72)【発明者】

【氏名】モンティーニョ ガルシア－ミゲル， オマル

【テーマコード（参考）】

4C084

4C085

4C086

4H045

【Ｆターム（参考）】

4C084AA02

4C084AA17

4C084BA44

4C084DC22

4C084NA14

4C084ZA36

4C084ZA59

4C084ZA75

4C084ZA81

4C084ZA89

4C084ZB22

4C084ZC19

4C084ZC37

4C085AA03

4C085AA13

4C085AA14

4C085AA16

4C085BB11

4C085CC23

4C085EE01

4C086AA01

4C086AA02

4C086EA16

4C086MA01

4C086MA04

4C086NA14

4C086ZA36

4C086ZA59

4C086ZA75

4C086ZA81

4C086ZA89

4C086ZB22

4C086ZC19

4C086ZC37

4H045AA11

4H045AA20

4H045AA30

4H045BA10

4H045DA76

4H045EA20

4H045FA74

(57)【要約】

重要な臓器に対する損傷は、深刻で生命すら脅かす結果をもたらす。臓器損傷には様々な病因があり、典型的には薬物、毒物、及び虚血性損傷が挙げられる。アシル－ＣｏＡ結合タンパク質（ＡＣＢＰ）は、ジアゼパム結合阻害剤（ＤＢＩ）としても知られ、オートファジーの細胞外フィードバック制御物質である。本明細書において、発明者らは、ＡＣＢＰ／ＤＢＩ（α－ＤＢＩ）を中和するモノクローナル抗体の注射により、マウスの肝臓が、虚血／再灌流損傷、アセトアミノフェン及びコンカナバリンＡによる急性中毒、ならびに胆管結紮または四塩化炭素により誘発される肝線維化から保護されることを報告する。注目すべきことに、この結果は、α－ＤＢＩが複数の損傷に対する広範な臓器保護効果を媒介するという主張を支持するものである。

【特許請求の範囲】

【請求項1】

対象の臓器における化学的傷害、物理的傷害、または虚血性傷害により引き起こされる組織損傷の治療に使用するための組成物であって、ジアゼパム結合阻害剤（ＤＢＩ）の活性または発現を阻害する薬剤を含み、前記薬剤が、前記対象に投与されたときに、前記対象の前記臓器における化学的傷害、物理的傷害、または虚血性傷害により引き起こされる前記組織損傷を治療するのに十分な量である、前記組成物。

【請求項2】

前記薬剤が細胞外ＤＢＩの活性を阻害する、請求項１に記載の組成物。

【請求項3】

アルコール、２，２’，４，４’，５，５’－ヘキサクロロビフェニル（ＰＣＢ－１５３）、２，３，７，８－テトラクロロジベンゾ－ｐ－ジオキシン（ＴＣＤＤ）、２－ブロモエチルアミン（ＢＥＡ）、３－メチルコラントレン、４－アミノフェノール（ＰＡＰ）、アセトアミノフェン、アドリアマイシン、アリルアルコール、アミオダロン、アムホテリシンＢ、アロクロール１２５４、アロクロール１２６０、ヒ素、アスピリン、アステミゾール、ベンゼン、カドミウム、カルバメジピン、四塩化炭素（ＣＣｌ４）、シプロフィブラート（シプロ）、クロフィブラート、塩化コバルト、コルバスタチン、シクロスポリンＡ、ジエチルニトロサミン、ジメチルホルムアミド、ジメチルヒドラジン（ＤＭＨ）、ジクワット、エトスクシミド、エトポシド、ファモチジン、フルコナゾール、ゲムフィブロジル、ガンシクロビル、ヘキサクロロ－１，３－ブテジエン（ＨＣＢＤ）、ＨＩＶプロテアーゼ阻害剤、ヒドラジン、インドメタシン、ケトコナゾール、酢酸鉛（ＰｂＡｃ）、リポ多糖（ＬＰＳ）、塩化水銀（ＩＩ）（ＨｇＣｌ２）、メタノール、メタピリレン、メトトレキサート、メトロニダゾール、ミコナゾール、モノクロタリン、一酸化窒素、オンダンセトロン、ペンタミジン、フェノバルビタール、フェニルヒドラジン（ｐｈｅｎｙｌｈｙｒｚｎ）、フェニトイン、プラバスタチン、プロプルシド、ピューロマイシンアミノヌクレオシド（ＰＡＮ）、キノロン、シンバスタチン、フッ化ナトリウム（ＮａＦ）、スタチン、チオアセトアミド、トカイニジン、三環系抗うつ薬、トログリタゾン、腫瘍壊死因子α（ＴＮＦα）、硝酸ウラニル、バルプロ酸、ビンクリスチン、Ｗｙ－１６，４６３、ジドブジン（ＡＺＴ）、α－ナフチルイソチオシアネート（ＡＮＩＴ）、β－ナフトフラボン（ＢＮＦ）、アスベスト、ラドン、タバコの煙、接着剤、ダイオキシン、ニッケル、ヒ素、水銀、セメント（クロム）、ポリ塩化ビフェニル（ＰＣＢ）、四塩化炭素、塩化メチレン、塩化ビニル、水銀、塩素化炭化水素溶媒、二硫化炭素、カドミウム、オゾン、タバコの煙、硝酸塩、塩化メチレン、二臭化エチレン、及びポリ塩化ビフェニルからなる群より選択される毒物により誘導される化学的傷害により引き起こされる組織損傷の治療に使用するための、請求項１に記載の組成物。

【請求項4】

化学療法剤により引き起こされる組織損傷の治療に使用するための、請求項１に記載の組成物。

【請求項5】

前記化学療法剤が、ダウノルビシン、ドキソルビシン、エピルビシン、ファルモルビシン、イダルビシン、ミトキサントロン、ピキサントロン、及びこれらの医薬的に許容される塩からなる群より選択されるアントラサイクリンである、請求項４に記載の組成物。

【請求項6】

ＤＢＩの活性または発現を阻害する前記薬剤が、アセトアミノフェン誘導性肝毒性、アミオダロン誘導性肺毒性、ドキソルビシン誘導性心毒性、塩化カドミウム誘導性腎毒性、ジメチルニトロサミン誘導性脾毒性、及びＯ－エチル－Ｓ，Ｓ－ジプロピルホスホロジチオエート（ＭＯＣＡＰ）誘導性神経毒性を治療するのに十分な量で存在する、請求項１に記載の組成物。

【請求項7】

虚血性傷害の治療に使用するための、請求項１に記載の組成物。

【請求項8】

前記虚血性傷害が心筋梗塞である、請求項７に記載の組成物。

【請求項9】

前記対象が虚血再灌流傷害を患っている、請求項１に記載の組成物。

【請求項10】

ＤＢＩの活性または発現を阻害する前記薬剤が、急性腎傷害（ＡＫＩ）から慢性腎疾患（ＣＫＤ）への進行を低減または遅延するのに十分な量で存在する、請求項１に記載の組成物。

【請求項11】

単離された臓器における傷害の重症度の低減に使用するための組成物であって、ジアゼパム結合阻害剤（ＤＢＩ）の活性または発現を阻害する薬剤を、前記単離された臓器に接触させたときに前記単離された臓器における前記傷害の重症度を低減するのに十分な量で含む、前記組成物。

【請求項12】

前記単離された臓器が移植可能な臓器である、請求項１１に記載の組成物。

【請求項13】

臓器傷害に関連する線維化の低減を、それを必要とする対象において行うのに使用するための組成物であって、ジアゼパム結合阻害剤（ＤＢＩ）の活性または発現を阻害する薬剤を含み、前記薬剤が、投与時に、前記対象の臓器における前記臓器傷害に関連する線維化の量を、前記投与の不在下での前記臓器における線維化の量と比較して低減するのに十分な量である、前記組成物。

【請求項14】

前記薬剤が細胞外ＤＢＩの活性を阻害する、請求項１３に記載の組成物。

【請求項15】

前記線維化が、皮膚、心臓、肝臓、肺、及び腎臓からなる群より選択される臓器で生じる、請求項１４に記載の組成物。

【請求項16】

前記臓器が肝臓である、請求項１５に記載の組成物。

【請求項17】

ＤＢＩの活性または発現を阻害する前記薬剤が、投与されたときに、前記対象におけるトランスアミナーゼのレベルを、前記投与前の前記対象における前記トランスアミナーゼのレベルと比較して低減するのに十分な量で存在する、請求項１６に記載の組成物。

【請求項18】

前記トランスアミナーゼが、アスパラギン酸トランスアミナーゼ（ＡＳＴ）またはアラニントランスアミナーゼ（ＡＬＴ）である、請求項１７に記載の組成物。

【請求項19】

ＤＢＩの活性または発現を阻害する前記薬剤が、線維化スコアを、前記投与前の前記線維化スコアに対し少なくとも１／３だけ低減するのに十分な量で存在する、請求項１６に記載の組成物。

【請求項20】

ＤＢＩの活性または発現を阻害する前記薬剤が、投与されたときに、前記対象におけるヒドロキシプロリンのレベルを、前記投与前の前記対象におけるヒドロキシプロリンのレベルと比較して低減するのに十分な量で存在する、請求項１６に記載の組成物。

【請求項21】

前記線維化が非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）に関連する、請求項１６～２０のいずれか１項に記載の組成物。

【請求項22】

ＤＢＩの活性または発現を阻害する前記薬剤が、投与されたときに、前記対象におけるＮＡＦＬＤスコアを、前記投与前のＮＡＦＬＤスコアに対し低減するのに十分な量で存在する、請求項２１に記載の組成物。

【請求項23】

ＤＢＩの活性を阻害する前記薬剤が、ＤＢＩを対象とする抗体またはアプタマーである、請求項１～２２のいずれか１項に記載の組成物。

【請求項24】

前記抗体が、配列番号１の４３位～５０位のアミノ酸配列を含むＤＢＩのポリペプチドフラグメントを対象とする、請求項２３に記載の組成物。

【請求項25】

前記抗体が、モノクローナルキメラ抗体、モノクローナルヒト化抗体、またはモノクローナルヒト抗体である、請求項２３に記載の組成物。

【請求項26】

ＤＢＩの発現を阻害する前記薬剤が、ｓｉＲＮＡ、エンドヌクレアーゼ、アンチセンスオリゴヌクレオチド、及びリボザイムからなる群より選択される発現阻害剤である、請求項１～２２のいずれか１項に記載の組成物。

【請求項27】

ＤＢＩの活性を阻害する前記薬剤が、前記対象に投与されたときに、ＤＢＩに対する中和自己抗体を誘発するのに適したワクチン組成物として存在する、請求項１～２２のいずれか１項に記載の組成物。

【請求項28】

前記ワクチン組成物が、ｉ）配列番号１に対し少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列、ｉｉ）配列番号１の１７位～５０位のアミノ酸配列に対し少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列、ｉｉｉ）配列番号１の３３位～５０位のアミノ酸配列に対し少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列、またはｉｖ）配列番号１の４３位～５０位のアミノ酸配列に対し少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む抗原を含む、請求項２７に記載の組成物。

【請求項29】

化学的傷害、物理的傷害、または虚血性傷害により引き起こされる組織損傷の治療を、それを必要とする対象の肝臓において行う方法であって、ジアゼパム結合阻害剤（ＤＢＩ）の活性または発現を阻害する薬剤の治療有効量を前記対象に投与することを含み、前記投与することが、前記化学的傷害、前記物理的傷害、または前記虚血性傷害により引き起こされる前記対象の前記肝臓における組織損傷を治療するのに十分である、前記方法。

【請求項30】

化学的傷害、物理的傷害、または虚血性傷害により引き起こされる組織損傷の治療を、それを必要とする対象の心臓において行う方法であって、ジアゼパム結合阻害剤（ＤＢＩ）の活性または発現を阻害する薬剤の治療有効量を前記対象に投与することを含み、前記投与することが、前記化学的傷害、前記物理的傷害、または前記虚血性傷害により引き起こされる前記対象の前記心臓における組織損傷を治療するのに十分である、前記方法。

【請求項31】

ジアゼパム結合阻害剤（ＤＢＩ）の活性または発現を阻害する薬剤を含む組成物であって、対象に投与されたときに、化学的傷害、物理的傷害、または虚血性傷害により引き起こされる前記対象の肝臓における組織損傷を治療するのに十分な量の前記薬剤を含む、前記組成物。

【請求項32】

ジアゼパム結合阻害剤（ＤＢＩ）の活性または発現を阻害する薬剤を含む組成物であって、対象に投与されたときに、化学的傷害、物理的傷害、または虚血性傷害により引き起こされる前記対象の心臓における組織損傷を治療するのに十分な量の前記薬剤を含む、前記組成物。

【請求項33】

ジアゼパム結合阻害剤（ＤＢＩ）の活性または発現を阻害する薬剤を含む組成物であって、投与されると、対象における臓器傷害に関連する線維化の量を、前記投与の不在下での線維化の量と比較して低減するのに十分な量の前記薬剤を含む、前記組成物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

相互参照
本出願は、欧州出願第ＥＰ２２３０５１３７号（２０２２年２月８日出願）の優先権を主張し、その開示内容を参照により全体として本明細書に援用する。

【0002】

本発明は医学、詳細には生理学の分野に属する。

【背景技術】

【0003】

重要な臓器（例えば、心臓、脳、肺、腎臓、胃腸管、または肝臓）に対する損傷は、深刻で生命すら脅かす結果をもたらす。臓器損傷には様々な病因があり、典型的には薬物、毒物、及び虚血性損傷が挙げられる。例えば、急性心筋梗塞における虚血性傷害の細胞病態生理学の研究では、組織損傷のかなりの部分が再灌流中（約１０分超の虚血期間の後に血流が回復する期間）に発生することが一貫して示されている。この傷害が、再灌流期間終了後の逆説的な臓器死及び組織傷害の原因となっている。ＩＲＩはほとんど全ての臓器系で示され得る。ＩＲＩに関与する機序としては、組織虚血後数時間の高エネルギーリン酸（ＡＴＰ）レベルの低減、炎症性細胞（好中球）媒介性の細胞及び微小血管の傷害、ノーリフロー現象（不十分な再灌流）、再灌流期間中の不十分な組織灌流による血小板プラグ及び内皮損傷による微小血管の機能不全、ならびにカルシウム過剰負荷媒介性の再灌流傷害が挙げられる。

【0004】

臓器損傷の一般的な転帰は線維化である。線維化とは、実際には、傷害に応答して線維性の結合組織が形成されることである。これは、損傷部位における細胞外マトリックス成分、特にコラーゲンの蓄積により特徴付けられる。線維化は、創傷治癒及び組織修復に不可欠な成分である適応応答である。しかし、その活性化の継続は非常に有害であり、神経、腎臓、心血管、肝臓、及び呼吸器の疾患を含む多数の病態に共通する最終経路となっている。

【0005】

したがって、臓器を傷害から保護し、ひいては線維化を予防するための療法が依然として必要とされている。

【0006】

マクロオートファジー（以下、オートファジーと称する）とは、細胞質の一部がオートファゴソームに封じ込められ、続いてオートファゴソームがリソソームと融合して、オートファジーカーゴの酵素的加水分解を行うプロセスである（Ｍｏｒｉｓｈｉｔａ ａｎｄ Ｍｉｚｕｓｈｉｍａ，２０１９）。オートファジーは、しばしば細胞死との関連で観察されるが、圧倒的に細胞保護機能に役立っている。したがって、過剰なオートファジーが細胞消滅（「オートファジー細胞死」または「オートシス」）につながることは稀な現象である。むしろ多くの場合において、細胞ストレス誘導性オートファジーは、細胞の適応を促進することにより、細胞死の遅延または回避を行っている（Ｋｒｏｅｍｅｒ ａｎｄ Ｌｅｖｉｎｅ，２００８；Ｌｏｐｅｚ－Ｏｔｉｎ ａｎｄ Ｋｒｏｅｍｅｒ，２０２１；Ｓｃｈｗａｒｔｚ，２０２１）。オートファジーのこのストレス適応機能は、諸因子の組み合わせに起因するものであり、このような因子には、限定されるものではないが、（ｉ）エネルギー豊富な代謝産物及び同化反応のためのビルディングブロックを生成するためのタンパク質、ｍＲＮＡ、脂質、及びグリコーゲンを含む巨大分子の動員、ならびに（ｉｉ）ミスフォールドしたタンパク質の凝集体、結合していないまたは透過性のミトコンドリア、及び他の機能不全オルガネラを含む損傷した細胞構造の選択的除去が含まれる（Ｇａｌｌｕｚｚｉ ｅｔ ａｌ．，２０１４；Ｌｏｐｅｚ－Ｏｔｉｎ ａｎｄ Ｋｒｏｅｍｅｒ，２０２１；Ｍｉｚｕｓｈｉｍａ ａｎｄ Ｋｌｉｏｎｓｋｙ，２００７）。その結果、細胞の適応度は細胞自律的様式で改善する。さらに、炎症促進性経路の活性化は、内在性パターン認識受容体を活性化し得る分子（例えば、細胞質ＤＮＡまたは活性酸素種）の除去、及びこのような受容体から発出される下流シグナルの下方調節に起因して、オートファジーにより鈍化する（Ｄｅｒｅｔｉｃ，２０２１；Ｇａｌｌｕｚｚｉ ｅｔ ａｌ．，２０１８；Ｓｃｈｗａｒｔｚ，２０２１）。オートファジーの広範な効果に鑑みて、その誘導は疾患と戦うための一般的な戦略として提唱されている。
最近では、オートファジーの細胞外フィードバックループについて説明され、これはジアゼパム結合阻害剤（ＤＢＩ）により呼び出されるタンパク質アシルコエンザイムＡ結合タンパク質（ＡＣＢＰ）を伴う（Ｂｒａｖｏ－Ｓａｎ Ｐｅｄｒｏ ｅｔ ａｌ．，２０１９ａ）。実際に、オートファジーは、主に有核細胞の細胞質に存在するこのリーダーレスタンパク質の非定型分泌と結びついている（Ｂｒａｖｏ－Ｓａｎ Ｐｅｄｒｏ ｅｔ ａｌ．，２０１９ａ；Ｌｏｏｍｉｓ ｅｔ ａｌ．，２０１０）。ひとたび細胞外空間に放出されると、ＡＣＢＰ／ＤＢＩは次にガンマアミノ酪酸（ＧＡＢＡ）受容体に作用して、オートクリン、パラクリン、及び神経内分泌経路を介しオートファジーを阻害する（Ｂｒａｖｏ－Ｓａｎ Ｐｅｄｒｏ ｅｔ ａｌ．，２０１９ａ；Ｊｏｓｅｐｈ ｅｔ ａｌ．，２０２０）。腹腔内または静脈内注射を行うと、ＡＣＢＰ／ＤＢＩ（α－ＤＢＩと呼ぶ）に対するモノクローナル抗体（ｍＡｂ）は、高脂肪食により誘導される脂肪症、糖尿病、及び脂肪肝を顕著に低減し、一方でオートファジー、脂肪分解、及びβ－酸化を促進し、同時に食欲を低減した（Ｂｒａｖｏ－Ｓａｎ Ｐｅｄｒｏ ｅｔ ａｌ．，２０１９ａ；Ｊｏｓｅｐｈ ｅｔ ａｌ．，２０２０，２０２１）。これらの効果は、ＡＣＢＰ／ＤＢＩの誘導性全身ノックアウトにより模倣することができるため、オンターゲットであるものと考えられた（Ｂｒａｖｏ－Ｓａｎ Ｐｅｄｒｏ ｅｔ ａｌ．２０１９ａ）。したがって、ＤＢＩの活性または発現の調節に基づいてオートファジーを調節するための方法及び医薬組成物が開示された（ＷＯ２０１９０５７７４２）。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0007】

【特許文献1】国際公開第２０１９／０５７７４２号

【発明の概要】

【課題を解決するための手段】

【0008】

本発明は、特許請求の範囲により定義される。詳細には、本発明は、臓器を傷害から保護する（すなわち、傷害による組織損傷を治療または低減する）方法及び医薬組成物であって、アシル－ＣｏＡ結合タンパク質の中和を含む、方法及び医薬組成物に関する。

【発明を実施するための形態】

【0009】

アシル－ＣｏＡ結合タンパク質（ＡＣＢＰ）は、ジアゼパム結合阻害剤（ＤＢＩ）としても知られ、オートファジーの細胞外フィードバック制御物質である。本明細書において、発明者らは、ＡＣＢＰ／ＤＢＩ（α－ＤＢＩ）（いくつかの実施形態では細胞外ＤＢＩ）を中和するモノクローナル抗体を注射することで、マウスの肝臓を虚血／再灌流損傷、アセトアミノフェン及びコンカナバリンＡによる急性中毒、ならびに胆管結紮または四塩化炭素により誘導される肝線維化から保護する（すなわち、それを治療するまたはその発生率を減少させる）ことを報告する。α－ＤＢＩ投与は、炎症性遺伝子及び線維化促進遺伝子を下方調節し、肝臓における抗酸化防御及び脂肪酸酸化を上方調節した。注目すべきことに、この結果は、α－ＤＢＩが複数の損傷に対する広範な臓器保護効果を媒介するという主張を支持するものである。

【0010】

主な定義：
本明細書で使用する場合、「対象」、「個体」、または「患者」という用語は互換的に使用され、診断、治療、または療法が所望される任意の対象、特にヒトを指す。他の対象としては、ウシ、イヌ、ネコ、モルモット、ウサギ、ラット、マウス、ウマなどを挙げることができる。いくつかの好ましい実施形態において、対象はヒトである。

【0011】

本明細書で使用する場合、「臓器」という用語は、生物の体内で特定の機能または機能群を遂行する固体の血管化された臓器を指す。臓器という用語は、限定されるものではないが、心臓、肺、腎臓、肝臓、膵臓、皮膚、子宮、骨、軟骨、小腸または大腸、膀胱、脳、乳房、血管、食道、卵管、胆嚢、卵巣、膵臓、前立腺、胎盤、脊髄、四肢（上肢及び下肢を含む）、脾臓、胃、精巣、胸腺、甲状腺、気管、尿管、尿道、子宮を含む。

【0012】

本明細書で使用する場合、「臓器機能不全」という用語は、臓器の物理的構造または機能の低減または障害を意味し、またそれを含む。

【0013】

本明細書で使用する場合、「実質臓器移植」という用語及びそのバリエーションは、実質臓器（移植片とも呼ばれる）をレシピエントに挿入することを指し、移植が同系移植（ドナー及びレシピエントが遺伝的に同一である場合）か、同種異系移植（ドナー及びレシピエントの遺伝的起源は異なるが同種である場合）かは問わない。

【0014】

本明細書で使用する場合、「損傷」または「傷害」という用語は、正常な機能に直接的または間接的に影響を及ぼす任意の損傷を指す。損傷には、限定されるものではないが、生理学的傷害、化学的傷害、または物理的傷害を含む様々な原因があり得る。この用語は、急性及び慢性の傷害を包含する。本明細書で使用する場合、「急性傷害」という用語は、最近発生した傷害を含む。例えば、急性傷害は、ごく最近発生した場合もあれば、１時間以内に発生した場合もあれば、１日以内に発生した場合もあれば、１週間以内に発生した場合もあれば、２週間以内に発生した場合もある。本明細書で使用する場合、「慢性傷害」という用語は、一定期間持続する傷害のことである。例えば、慢性傷害は、２週間超前に発生した場合もあれば、３週間超前に発生した場合もあれば、２か月超前に発生した場合もあれば、３か月超前に発生した場合もある。

【0015】

本明細書で使用する場合、「虚血」という用語は、臓器の損傷または機能不全をもたらす血液供給の制限を指す。低酸素症（酸素不足（通常は、呼吸する空気中に酸素が不足した結果）を表すより一般的な用語）とは異なり、虚血は、臓器への血液供給の絶対的または相対的な不足、すなわち、酸素、グルコース、及び他の血液由来成分の不足である。相対的不足とは、血液供給（酸素／燃料供給）及び組織の十分な代謝のための血液要求のミスマッチを意味する。本明細書で使用する場合、「温虚血」という用語は、当技術分野における一般的な意味を有し、正常体温条件下での細胞及び組織の虚血を表すために使用される。本明細書で使用する場合、「冷虚血」という用語は、当技術分野における一般的な意味を有し、血液灌流の減少中または血液供給の不在下における臓器冷却を指す。

【0016】

本明細書で使用する場合、「再灌流」という用語は、当技術分野における一般的な意味を有し、虚血後の組織に対する血流の回復を指す。したがって、本明細書で使用する場合、「虚血再灌流」または「Ｉ／Ｒ」という用語は、虚血エピソードの次に再灌流エピソードが生じるイベントを包含することが意図されている。

【0017】

本明細書で使用する場合、「虚血再灌流傷害」または「Ｉ／Ｒ傷害」という用語は、虚血再灌流イベントにより引き起こされる組織損傷を指す。虚血期間中に血液からの酸素及び栄養素が不在となることで、循環が回復した結果、正常な機能が回復するのではなく（またはその回復とともに）酸化ストレスが誘発されることにより、炎症及び酸化的損傷が生じる条件が生まれる。本明細書で使用する場合、「虚血再灌流傷害重症度」または「Ｉ／Ｒ傷害重症度」という用語は、傷害の程度の尺度を指す。

【0018】

本明細書で使用する場合、「線維化」という用語は、臓器または組織の正常な構成要素としてではなく、修復的または反応的プロセスとして線維性組織が形成されることを指す。線維化は、任意の特定の組織における筋線維芽細胞の蓄積及び正常な沈着を超えるコラーゲン沈着により特徴付けられる。

【0019】

本明細書で使用する場合、「ポリペプチド」、「ペプチド」、及び「タンパク質」という用語は、本明細書では互換的に使用され、任意の長さのアミノ酸の多量体を指す。また、これらの用語は、修飾されたアミノ酸多量体、例えば、ジスルフィド結合形成、グリコシル化、脂質付加、リン酸化、または標識構成成分との結合体化も包含する。遺伝子療法の文脈で考察される際のポリペプチドは、それぞれのインタクトなポリペプチド、またはインタクトなタンパク質の所望の生化学的機能を保持するその任意のフラグメントもしくは遺伝子操作された誘導体を指す。

【0020】

本明細書で使用する場合、「ポリヌクレオチド」という用語は、任意の長さのヌクレオチドの多量体形態を指し、これにはデオキシリボヌクレオチドもしくはリボヌクレオチド、またはこれらのアナログが含まれる。ポリヌクレオチドは、メチル化ヌクレオチド及びヌクレオチドアナログのような修飾ヌクレオチドを含むことができ、また非ヌクレオチド成分により遮断され得る。存在する場合、ヌクレオチド構造に対する修飾は、多量体の集成の前に付与されても後に付与されてもよい。本明細書で使用する場合、ポリヌクレオチドという用語は、二本鎖及び一本鎖の分子を互換的に指す。別段の指定または要求がない限り、本明細書に記載の本発明の任意の実施形態（ポリヌクレオチド）は、二本鎖形態、及び二本鎖形態を形成することが知られているまたは予測される２つの相補的な一本鎖形態の各々の両方を包含する。

【0021】

本明細書で使用する場合、「コードする」という用語は、例えば、遺伝子、ｃＤＮＡ、またはｍＲＮＡなどのポリヌクレオチド内の特定のヌクレオチド配列が、生物学的プロセスにおいて、定義されたヌクレオチド配列（例えば、ｒＲＮＡ、ｔＲＮＡ、及びｍＲＮＡ）または定義されたアミノ酸配列のいずれかを有する他の多量体及び巨大分子の合成のための鋳型として機能する固有の特性、ならびにそれから生じる生物学的特性を指す。したがって、遺伝子、ｃＤＮＡ、またはＲＮＡは、その遺伝子に対応するｍＲＮＡの転写及び翻訳が細胞または他の生物系においてタンパク質をもたらす場合、タンパク質をコードする。コード鎖（そのヌクレオチド配列がｍＲＮＡ配列と同一であり、通常、配列表で示される）及び非コード鎖（遺伝子またはｃＤＮＡの転写のための鋳型として使用される）はいずれも、その遺伝子またはｃＤＮＡのタンパク質または他の産物をコードすると称することができる。別段の明記がない限り、「アミノ酸配列をコードするポリヌクレオチド配列」には、互いの縮重バージョンであり、同じアミノ酸配列をコードする全てのヌクレオチド配列が含まれる。「タンパク質またはＲＮＡをコードするポリヌクレオチド配列」という表現は、タンパク質をコードするヌクレオチド配列が何らかのバージョンでイントロン（複数可）を含み得る範囲内で、イントロンも含むことができる。

【0022】

本明細書で使用する場合、「発現阻害剤」という用語は、ポリヌクレオチドの発現を阻害する生物学的効果を有する天然または合成の化合物を指す。

【0023】

本明細書で使用する場合、「ＤＢＩ」という用語は、当技術分野における一般的な意味を有し、ＤＢＩ遺伝子（遺伝子ＩＤ：１６２２）によりコードされるジアゼパム結合阻害剤、アシル－ＣｏＡ結合タンパク質を指す。この用語は、ＥＰ、ＡＣＢＰ、ＡＣＢＤ１、及びＣＣＫ－ＲＰの別名でも知られている。ＤＢＩの例示的なアミノ酸配列は、配列番号１により表される。
配列番号１＞ｓｐ｜Ｐ０７１０８｜ＡＣＢＰ＿ＨＵＭＡＮ Ａｃｙｌ－ＣｏＡ－ｂｉｎｄｉｎｇ ｐｒｏｔｅｉｎ ＯＳ＝Ｈｏｍｏ ｓａｐｉｅｎｓ ＯＸ＝９６０６ ＧＮ＝ＤＢＩ ＰＥ＝１ ＳＶ＝２
ＭＳＱＡＥＦＥＫＡＡＥＥＶＲＨＬＫＴＫＰＳＤＥＥＭＬＦＩＹＧＨＹＫＱＡＴＶＧＤＩＮＴＥＲＰＧＭＬＤＦＴＧＫＡＫＷＤＡＷＮ
ＥＬＫＧＴＳＫＥＤＡＭＫＡＹＩＮＫＶＥＥＬＫＫＫＹＧＩ

【0024】

本明細書で使用する場合、「抗体」及び「免疫グロブリン」という用語は同じ意味を有し、本発明でも同様に使用される。本明細書で使用する場合、「抗体」という用語は、免疫グロブリン分子及び免疫グロブリン分子の免疫学的活性部分、すなわち抗原に免疫特異的に結合する抗原結合部位を含む分子を指す。そのため、抗体という用語には、抗体分子全体だけでなく、抗体フラグメント、ならびに抗体及び抗体フラグメントのバリアント（誘導体を含む）も含まれる。天然の抗体の場合、２つの重鎖がジスルフィド結合により互いに結合し、各重鎖はジスルフィド結合により軽鎖に結合している。２つのタイプの軽鎖、ラムダ（ｌ）及びカッパ（ｋ）が存在する。抗体分子の機能的活性を決定する５つの主な重鎖クラス（またはアイソタイプ）：ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＧ、ＩｇＡ、及びＩｇＥが存在する。各鎖は異なる配列ドメインを含む。軽鎖は、２つのドメイン、可変ドメイン（ＶＬ）及び定常ドメイン（ＣＬ）を含む。重鎖には、３つ（α、β、γ）～５つ（μ、ε）のドメインと、可変ドメイン（ＶＨ）と、３つ～４つの定常ドメイン（ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３、及びＣＨ４；総称してＣＨと称される）とが含まれる。軽鎖（ＶＬ）及び重鎖（ＶＨ）の両方の可変領域は、抗原に対する結合認識及び特異性を決定する。軽鎖（ＣＬ）及び重鎖（ＣＨ）の定常領域ドメインは、重要な生物学的特性（例えば、抗体鎖の会合、分泌、経胎盤移動性、補体結合、及びＦｃ受容体（ＦｃＲ）との結合）を付与する。Ｆｖフラグメントは、免疫グロブリンのＦａｂフラグメントのＮ末端部分であり、１つの軽鎖及び１つの重鎖の可変部分からなる。抗体の特異性は、抗体結合部位と抗原決定基との間の構造的相補性に存在する。抗体結合部位は、主に超可変領域または相補性決定領域（ＣＤＲ）に由来する残基から構成されている。場合によっては、非超可変領域またはフレームワーク領域（ＦＲ）由来の残基が抗体結合部位に関与することもあれば、ドメイン全体の構造、ひいては結合部位に影響を及ぼすこともある。ＣＤＲとは、ネイティブの免疫グロブリン結合部位の天然Ｆｖ領域の結合親和性及び特異性を定義するアミノ酸配列を指す。免疫グロブリンの軽鎖及び重鎖は各々３つのＣＤＲを有し、それぞれＬ－ＣＤＲ１、Ｌ－ＣＤＲ２、Ｌ－ＣＤＲ３、及びＨ－ＣＤＲ１、Ｈ－ＣＤＲ２、Ｈ－ＣＤＲ３と呼ばれている。そのため典型的には、抗原結合部位は、重鎖及び軽鎖の各Ｖ領域からのＣＤＲセットを含む６つのＣＤＲを含む。フレームワーク領域（ＦＲ）とは、ＣＤＲ間に挟まれたアミノ酸配列を指す。抗体可変ドメインの残基は、Ｋａｂａｔらにより考案されたシステムに従って慣例的にナンバリングされている。このシステムは、Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，１９８７（Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，ＵＳ Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，ＮＩＨ，ＵＳＡ）（以下、「Ｋａｂａｔら」）に記載されている。本明細書では、このナンバリングシステムを使用する。Ｋａｂａｔ残基の名称は、必ずしも配列番号順でアミノ酸残基の直線的ナンバリングに直接対応しているわけではない。実際の直線的アミノ酸配列は、基本的な可変ドメイン構造における構造的成分（フレームワークであっても相補性決定領域（ＣＤＲ）であっても）の短縮またはそれへの挿入に対応して、厳密なＫａｂａｔナンバリングよりも少ないアミノ酸またはさらなるアミノ酸を含む可能性がある。残基の正確なＫａｂａｔナンバリングは、抗体の配列中の相同的な残基を「標準的な」Ｋａｂａｔナンバリング配列とアラインメントすることにより、所与の抗体に対し決定することができる。重鎖可変ドメインのＣＤＲは、Ｋａｂａｔナンバリングシステムに従って、残基３１－３５Ｂ（Ｈ－ＣＤＲ１）、残基５０－６５（Ｈ－ＣＤＲ２）、及び残基９５－１０２（Ｈ－ＣＤＲ３）に存在する。軽鎖可変ドメインのＣＤＲは、Ｋａｂａｔナンバリングシステムに従って、残基２４－３４（Ｌ－ＣＤＲ１）、残基５０－５６（Ｌ－ＣＤＲ２）、及び残基８９－９７（Ｌ－ＣＤＲ３）に存在する。

【0025】

本明細書で使用する場合、「モノクローナル抗体」、「モノクローナルＡｂ」、「モノクローナル抗体組成物」、「ｍＡｂ」などの用語は、単一分子組成の抗体分子の調製物を指す。モノクローナル抗体は、実質的に均質な抗体の集団から得られる。すなわち、集団に含まれる個々の抗体は、微量で存在し得る考えられる天然の変異を除いて同一である。

【0026】

本明細書で使用する場合、「キメラ抗体」という用語は、非ヒト抗体のＶＨドメイン及びＶＬドメインと、ヒト抗体のＣＨドメイン及びＣＬドメインとを含む抗体を指す。いくつかの実施形態において、「キメラ抗体」は、（ａ）定常領域（すなわち、重鎖及び／または軽鎖）あるいはその一部が改変、置き換え、または交換されて、抗原結合部位（可変領域）が、異なるまたは改変されたクラス、エフェクター機能、及び／または種の定常領域に、あるいは新たな特性をそのキメラ抗体に付与する全く異なる分子（例えば、酵素、毒素、ホルモン、成長因子、薬物など）に結合している、あるいは（ｂ）可変領域またはその一部が、異なるまたは改変された抗原特異性を有する可変領域により改変、置換、または交換されている抗体分子のことである。キメラ抗体には、霊長類化抗体、詳細にはヒト化抗体も含まれる。さらに、キメラ抗体には、レシピエント抗体にもドナー抗体にも見られない残基を含むことができる。このような修飾は、抗体性能をさらに精緻化するために行われる。詳細はＪｏｎｅｓ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３２１：５２２－５２５（１９８６）；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３３２：３２３－３２９（１９８８）；及びＰｒｅｓｔａ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．２：５９３－５９６（１９９２）を参照（米国特許第４，８１６，５６７号；及びＭｏｒｒｉｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８１：６８５１－６８５５（１９８４）を参照）。

【0027】

本明細書で使用する場合、「ヒト化抗体」とは、ヒト抗体の可変領域フレームワーク及び定常領域を有し、ただし以前の非ヒト抗体のＣＤＲを保持する抗体を指す。いくつかの実施形態において、ヒト化抗体は、非ヒト免疫グロブリンに由来する最小限の配列を含む。ほとんどの部分において、ヒト化抗体及びその抗体フラグメントは、レシピエントの相補的決定領域（ＣＤＲ）由来の残基が、所望の特異性、親和性、及び能力を有する非ヒト種（例えば、マウス、ラット、またはウサギ）（ドナー抗体）のＣＤＲ由来の残基により置き換えられているヒト免疫グロブリン（レシピエント抗体または抗体フラグメント）であり得る。いくつかの場合において、ヒト免疫グロブリンのＦｖフレームワーク領域（ＦＲ）残基は、対応する非ヒト残基により置き換えられる。さらに、ヒト化抗体／抗体フラグメントは、レシピエント抗体にも移入されたＣＤＲまたはフレームワーク配列にも見られない残基を含むことができる。このような抗体は、結合領域が由来する非ヒト抗体の結合特異性を維持するように、ただし非ヒト抗体に対する免疫反応を回避するように設計されている。これらの修飾は、抗体または抗体フラグメントの性能をさらに精緻化及び最適化することができる。概して、ヒト化抗体またはその抗体フラグメントは、ＣＤＲ領域の全てまたは実質的に全てが非ヒト免疫グロブリンのＣＤＲ領域に対応し、ＦＲ領域の全てまたはかなりの部分がヒト免疫グロブリン配列のものである、少なくとも１つの、典型的には２つの可変ドメインの実質的に全てを含むことになる。また、ヒト化抗体または抗体フラグメントは、免疫グロブリン定常領域（Ｆｃ）の少なくとも一部、典型的にはヒト免疫グロブリンの一部も含むことができる。詳細はＪｏｎｅｓ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３２１：５２２－５２５，１９８６；Ｒｅｉｃｈｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３３２：３２３－３２９，１９８８；Ｐｒｅｓｔａ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．，２：５９３－５９６，１９９２を参照。

【0028】

本明細書で使用する場合、「ヒト抗体」という用語は、ヒト免疫グロブリン配列に由来する可変領域及び定常領域を有する抗体を含むことが意図されている。本発明のヒト抗体は、ヒト免疫グロブリン配列によりコードされていないアミノ酸残基（例えば、ｉｎ ｖｉｔｒｏでのランダムもしくは部位特異的変異誘発により、またはｉｎ ｖｉｖｏでの体細胞変異により導入された変異）を含むことができる。ただし、本明細書で使用する場合、「ヒト抗体」という用語は、マウスなどの別の哺乳類種の生殖系列に由来するＣＤＲ配列がヒトフレームワーク配列に移植された抗体を含むことは意図されていない。

【0029】

本明細書で使用する場合、「抗体フラグメント」という用語は、（例えば、結合、立体障害、安定化／不安定化、空間分布により）抗原のエピトープと特異的に相互作用する能力を保持する、インタクトな抗体の少なくとも１つの部分、好ましくはインタクトな抗体の抗原結合領域または可変領域を指す。「フラグメント」は、インタクトな抗体の一部、概して抗原結合部位または可変領域を含む。抗体フラグメントの例としては、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆａｂ’－ＳＨ、Ｆ（ａｂ’）２、及びＦｖフラグメント；ダイアボディ；連続したアミノ酸残基の１つの中断されない配列からなる一次構造を有するポリペプチドである任意の抗体フラグメント（本明細書では、「一本鎖抗体フラグメント」または「一本鎖ポリペプチド」と称される）（限定されるものではないが、（１）一本鎖Ｆｖ分子、（２）関連する重鎖部分なしで、１つの軽鎖可変ドメインのみを含む一本鎖ポリペプチド、または軽鎖可変ドメインの３つのＣＤＲを含むそのフラグメント、及び（３）関連する軽鎖部分なしで、１つの重鎖可変領域のみを含む一本鎖ポリペプチド、または重鎖可変領域の３つのＣＤＲを含むそのフラグメントを含む）；ならびに抗体フラグメントから形成された多重特異的抗体が挙げられる。本発明の抗体のフラグメントは、標準的な方法を用いて得ることができる。

【0030】

本明細書で使用する場合、「特異性」という用語は、抗体が標的分子（例えば抗原上に提示されたエピトープ）に検出可能に結合し、その一方で他の標的分子との検出可能な反応性を相対的にほとんど有しない能力を指す。特異性は、本明細書の他の箇所に記載のように、例えば、Ｂｉａｃｏｒｅ装置を用いた結合アッセイまたは競合結合アッセイにより、相対的に決定することができる。特異性は、他の無関係な分子との非特異的結合に対する特異的抗原との結合における親和性／アビディティーの比が、例えば、約１０：１、約２０：１、約５０：１、約１００：１、１０．０００：１、またはそれ以上であることにより示すことができる。

【0031】

本明細書で使用する場合、「親和性」という用語は、抗体と標的分子（エピトープなど）との結合の強度を意味する。結合タンパク質の親和性は、解離定数Ｋｄにより与えられる。抗体の場合、前述のＫｄは［Ａｂ］×［Ａｇ］／［Ａｂ－Ａｇ］として定義され、式中、［Ａｂ－Ａｇ］は抗体－抗原複合体のモル濃度であり、［Ａｂ］は非結合抗体のモル濃度であり、［Ａｇ］は非結合抗原のモル濃度である。親和定数Ｋａは、１／Ｋｄにより定義される。結合タンパク質の親和性を決定するための好ましい方法は、Ｈａｒｌｏｗ，ｅｔ ａｌ．，Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．，１９８８）；Ｃｏｌｉｇａｎ ｅｔ ａｌ．，ｅｄｓ．，Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，Ｇｒｅｅｎｅ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ａｓｓｏｃ．ａｎｄ Ｗｉｌｅｙ Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ，Ｎ．Ｙ．，（１９９２，１９９３）；及びＭｕｌｌｅｒ，Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚｙｍｏｌ．９２：５８９－６０１（１９８３）で見出すことができ、これらの参考文献は、参照により全体として本明細書に援用される。当技術分野で周知されている、結合タンパク質の親和性を決定するための１つの好ましい標準的な方法は、Ｂｉａｃｏｒｅ装置の使用である。

【0032】

本明細書で使用する場合、「結合」という用語は、例えば、共有結合、静電結合、疎水結合、及びイオン結合、及び／または水素結合の相互作用（塩橋及び水橋などの相互作用を含む）による、２つの分子間の直接的な結合を指す。詳細には、本明細書で使用する場合、抗体と所定の標的分子（例えば抗原またはエピトープ）との結合の文脈における「結合」という用語は、典型的には、約１０^－７Ｍ以下、例えば、約１０^－８Ｍ以下、例えば、約１０^－９Ｍ以下、約１０^－１０Ｍ以下、または約１０^－１１Ｍ以下、またはさらにそれ以下のＫ_Ｄに対応する親和性を有する結合のことである。

【0033】

本明細書で使用する場合、「中和抗ＤＢＩモノクローナル抗体」という用語は、ＤＢＩに対する特異性を有し、ＤＢＩ（例えば、細胞外ＤＢＩ）の活性を阻害する、低減する、または完全に、モノクローナル抗体に対する抗体を指す。抗体が中和抗体であるかどうかは、実施例に記載するｉｎ ｖｉｔｒｏアッセイにより決定することができる。典型的には、本発明の中和抗体は、ＤＢＩの活性を少なくとも５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９９％、または１００％阻害する。

【0034】

本明細書で使用する場合、「治療」または「治療する」という用語は、予防的（ｐｒｏｐｈｙｌａｃｔｉｃ）または予防的（ｐｒｅｖｅｎｔｉｖｅ）治療、ならびに治癒的または疾患修飾的治療の両方（疾患に罹患するリスクのある患者または疾患に罹患した疑いのある患者、ならびに病気の患者または疾患もしくは医学的状態に罹患していると診断された患者の治療を含む）を含み、また臨床的再発の抑制を含む。治療は、医学的障害を有する患者、または最終的に障害に罹患する可能性のある患者に、障害もしくは再発する障害の１つ以上の症状の予防、治癒、発症遅延、重症度低減、もしくは緩和を行うために、または患者の生存期間をこのような治療の不在下で予想される生存期間を超えて延長するために、実施することができる。「治療レジメン」とは、病気の治療パターン、例えば、療法中に使用される投与パターンを意味する。治療レジメンは、導入レジメン及び維持レジメンを含むことができる。「導入レジメン」または「導入期間」という表現は、疾患の初期治療に使用される治療レジメン（または治療レジメンの一部）を指す。導入レジメンの全般的目的は、治療レジメンの初期期間中に高レベルの薬物を患者に提供することである。導入レジメンは、（部分的または全体的に）「ローディングレジメン」を用いることがあり、これは、医師が維持レジメン中に投与するよりも多くの用量の薬物を投与すること、医師が維持レジメン中に投与するよりも高頻度に薬物を投与すること、またはその両方を含み得る。「維持レジメン」または「維持期間」という表現は、病気の治療中の患者の維持のため、例えば、患者を長期間（数か月または数年）寛解状態に保つために使用される治療レジメン（または治療レジメンの一部）を指す。維持レジメンは、継続的な療法（定期的な間隔で（例えば、毎週、毎月、毎年など）薬物を投与すること）、または間欠的な療法（例えば、治療の中断、間欠的な治療、再発時の治療、もしくは特定の所定の基準［例えば、疼痛、疾患の発現など］を達成した際の治療）を用いることができる。

【0035】

本明細書で使用する場合、「医薬組成物」という用語は、担体及び／または賦形剤などの他の薬剤を伴った本明細書に記載の組成物またはその医薬的に許容される塩を指す。本明細書で提供する医薬組成物は、典型的には、医薬的に許容される担体を含む。

【0036】

本明細書で使用する場合、組成物に関して「～から本質的になる」とは、本明細書の上記の本発明の少なくとも１つの抗体が、当該組成物内で１つのみの治療剤または生物学的活性を有する薬剤であることを意味する。

【0037】

本明細書で使用する場合、「医薬的に許容される担体」という用語は、所望される特定の剤形に適したあらゆる溶媒、希釈剤、または他の液体ビヒクル、分散または懸濁助剤、表面活性剤、等張剤、増粘または乳化剤、防腐剤、固体結合剤、滑沢剤などを含む。Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ－Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｓｉｘｔｅｅｎｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｅ．Ｗ．Ｍａｒｔｉｎ（Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐａ．，１９８０）は、医薬組成物の製剤化に使用される様々な担体及びその調製に関する既知の技法を開示している。

【0038】

本明細書で使用する場合、「治療有効量」という用語は、所望の治療結果を得るために必要な投与量及び期間において有効な量を指す。活性薬剤の治療有効量は、個体の疾患状態、年齢、性別、及び体重、ならびに個体において所望の応答を誘発するための活性薬剤の能力などの因子に応じ変化し得る。また、治療有効量は、治療上有益な作用が薬物の任意の毒性または有害作用を上回る量でもある。活性薬剤の効率的な投与量及び投与レジメンは、治療される疾患または状態に依存し、当業者が決定することができる。当該技術分野における通常の技術を有する医師であれば、必要な医薬組成物の有効量を容易に決定し、処方することができる。例えば、医師は、医薬組成物に用いられる活性薬剤の投与を、所望の治療効果を達成するのに要するレベルよりも低いレベルで開始し、所望の効果が達成されるまで投与量を徐々に増加させることができる。概して、本発明の組成物の好適な用量は、特定の投与レジメンに従って治療効果をもたらすのに有効な最低用量である化合物の量である。このような有効用量は、概して上述の因子に依存する。例えば、治療使用のための治療有効量は、疾患の進行を安定化させるその能力により測定することができる。当業者であれば、患者のサイズ、患者の症状の重症度、選択された特定の組成物または投与経路などの因子に基づき、このような量を決定することができるであろう。本発明の薬物の治療有効量における例示的で非限定的な範囲は、約０．１～１００ｍｇ／ｋｇ、例えば約０．１～５０ｍｇ／ｋｇ、例えば約０．１～２０ｍｇ／ｋｇ、例えば約０．１～１０ｍｇ／ｋｇ、例えば約０．５、例えば約０．３、約１、約３ｍｇ／ｋｇ、約５ｍｇ／ｋｇまたは約８ｍｇ／ｋｇである。本発明の薬物の治療有効量における例示的で非限定的な範囲は、０．０２～１００ｍｇ／ｋｇ、例えば、約０．０２～３０ｍｇ／ｋｇ、例えば、約０．０５～１０ｍｇ／ｋｇまたは０．１～３ｍｇ／ｋｇ、例えば、約０．５～２ｍｇ／ｋｇである。

【0039】

臓器保護を付与する方法：
本発明の第１の目的は、臓器保護（すなわち、傷害により引き起こされる組織損傷の治療または低減）の付与を、それを必要とする対象において行う方法であって、ＤＢＩ（例えば、循環または細胞外ＤＢＩ）の活性または発現を阻害する薬剤の治療有効量を対象に投与することを含む、方法に関する。そのため、本明細書では、対象の臓器における本明細書に記載の傷害により引き起こされる組織損傷の治療または低減に使用するための組成物であって、ジアゼパム結合阻害剤（ＤＢＩ）の活性または発現を阻害する薬剤の量を含み、当該量が、対象に投与されたときに、対象の臓器に対する傷害により引き起こされる組織損傷を治療または低減するのに十分である、組成物を開示する。

【0040】

本発明の方法及び組成物は、臓器機能不全の予防に特に適している。

【0041】

本発明の方法及び組成物は、任意の種類の傷害に対する臓器保護を付与するのに特に適している。いくつかの実施形態において、本発明の方法または組成物は、化学的傷害に対する臓器保護を付与する（化学的傷害により引き起こされる組織損傷を治療または低減する）ために特に適している。いくつかの実施形態において、本発明の方法または組成物は、物理的傷害に対する臓器保護を付与する（物理的傷害により引き起こされる組織損傷を治療または低減する）ために特に適している。いくつかの実施形態において、本発明の方法または組成物は、虚血性傷害に対する臓器保護を付与する（虚血性傷害により引き起こされる組織損傷を治療または低減する）ために特に適している。

【0042】

詳細には、本発明の方法または組成物は、アルコール、２，２’，４，４’，５，５’－ヘキサクロロビフェニル（ＰＣＢ－１５３）、２，３，７，８－テトラクロロジベンゾ－ｐ－ジオキシン（ＴＣＤＤ）、２－ブロモエチルアミン（ＢＥＡ）、３－メチルコラントレン、４－アミノフェノール（ＰＡＰ）、アセトアミノフェン、アドリアマイシン、アリルアルコール、アミオダロン、アムホテリシンＢ、アロクロール１２５４、アロクロール１２６０、ヒ素、アスピリン、アステミゾール、ベンゼン、カドミウム、カルバメジピン、四塩化炭素（ＣＣｌ４）、シプロフィブラート（シプロ）、クロフィブラート、塩化コバルト、コルバスタチン、シクロスポリンＡ、ジエチルニトロサミン、ジメチルホルムアミド、ジメチルヒドラジン（ＤＭＨ）、ジクワット、エトスクシミド、エトポシド、ファモチジン、フルコナゾール、ゲムフィブロジル、ガンシクロビル、ヘキサクロロ－１，３－ブテジエン（ＨＣＢＤ）、ＨＩＶプロテアーゼ阻害剤、ヒドラジン、インドメタシン、ケトコナゾール、酢酸鉛（ＰｂＡｃ）、リポ多糖（ＬＰＳ）、塩化水銀（ＩＩ）（ＨｇＣｌ２）、メタノール、メタピリレン、メトトレキサート、メトロニダゾール、ミコナゾール、モノクロタリン、一酸化窒素、オンダンセトロン、ペンタミジン、フェノバルビタール、フェニルヒドラジン（ｐｈｅｎｙｌｈｙｒｚｎ）、フェニトイン、プラバスタチン、プロプルシド、ピューロマイシンアミノヌクレオシド（ＰＡＮ）、キノロン、シンバスタチン、フッ化ナトリウム（ＮａＦ）、スタチン、チオアセトアミド、トカイニジン、三環系抗うつ薬、トログリタゾン、腫瘍壊死因子α（ＴＮＦα）、硝酸ウラニル、バルプロ酸、ビンクリスチン、Ｗｙ－１６，４６３、ジドブジン（ＡＺＴ）、α－ナフチルイソチオシアネート（ＡＮＩＴ）、β－ナフトフラボン（ＢＮＦ）、アスベスト、ラドン、タバコの煙、接着剤、ダイオキシン、ニッケル、ヒ素、水銀、セメント（クロム）、ポリ塩化ビフェニル（ＰＣＢ）、四塩化炭素、塩化メチレン、塩化ビニル、水銀、塩素化炭化水素溶媒、二硫化炭素、カドミウム、オゾン、タバコの煙、硝酸塩、塩化メチレン、二臭化エチレン、及びポリ塩化ビフェニルからなる群より選択される毒物により誘導される化学的傷害に対する臓器保護を付与する（化学的傷害により引き起こされる組織損傷を治療または低減する）ために特に適している。

【0043】

いくつかの実施形態において、本発明の方法または組成物は、化学療法剤に対する臓器保護を付与する（化学療法剤により引き起こされる組織損傷を治療または低減する）ために特に適している。化学療法剤としては、限定されるものではないが、チオテパ及びシクロホスファミドなどのアルキル化剤；ブスルファン、インプロスルファン及びピポスルファンなどのアルキルスルホネート；ベンゾドパ、カルボクオン、メツレドパ、及びウレドパなどのアジリジン；アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホルアミド、トリエチレンエチオホスホルアミド、及びトリメチロールメラミンを含むエチレンイミン及びメチルアメラミン（ｍｅｔｈｙｌａｍｅｌａｍｉｎｅ）；アセトゲニン類（特にブラタシン及びブラタシノン）；カンプトテシン（合成アナログのトポテカンを含む）；ブリオスタチン；カリスタチン；ＣＣ－１０６５（そのアドゼレシン、カルゼレシン、及びビゼレシン合成アナログを含む）；クリプトフィシン（特に、クリプトフィシン１及びクリプトフィシン８）；ドラスタチン；デュオカルマイシン（合成アナログ、ＫＷ－２１８９及びＣＢ１－ＴＭ１を含む）；エレウテロビン；パンクラチスタチン；サルコジクチン；スポンジスタチン；クロラムブシル、クロルナファジン、コロホスファミド、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、メクロレタミンオキシド塩酸塩、メルファラン、ノベムビチン、フェネステリン、プレドニムスチン、トロホスファミド、ウラシルマスタードなどのナイトロジェンマスタード；カルムスチン、クロロゾトシン、ホテムスチン、ロムスチン、ニムスチン、及びラニムスチンなどのニトロソウレア；エネジイン抗生物質などの抗生物質（例えば、カリケアミシン、特にカリケアミシンガモール（ｃａｌｉｃｈｅａｍｉｃｉｎ ｇａｍｍａｌｌ）及びカリケアミシンオメガール（ｃａｌｉｃｈｅａｍｉｃｉｎ ｏｍｅｇａｌｌ））；ダイネミシン（ダイネミシンＡを含む）；クロドロネートなどのビスホスホネート；エスペラマイシン；ならびにネオカルジノスタチンクロモフォア及び関連するクロモプロテインエネジイン抗生物質クロモフォア、アクラシノミシン、アクチノマイシン、アウトラルナイシン（ａｕｔｈｒａｒｎｙｃｉｎ）、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カラビシン、カミノマイシン、カルジノフィリン、クロモマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン、６－ジアゾ－５－オキソ－Ｌ－ノルロイシン、ドキソルビシン（モルホリノ－ドキソルビシン、シアノモルホリノ－ドキソルビシン、２－ピロリノ－ドキソルビシン、及びデオキシドキソルビシンを含む）、エピルビシン、エソルビシン、イダルビシン、マルセロマイシン、マイトマイシンＣなどのマイトマイシン類、ミコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン、ペプロマイシン、ポトフィロマイシン、ピューロマイシン、ケラマイシン、ロドルビシン、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメクス、ジノスタチン、ゾルビシン；メトトレキサート及び５－フルオロウラシル（５－ＦＵ）などの代謝拮抗剤；デノプテリン、メトトレキサート、プテロプテリン、トリメトレキサートなどの葉酸アナログ；フルダラビン、６－メルカプトプリン、チアミプリン、チオグアニンなどのプリンアナログ；アンシタビン、アザシチジン、６－アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロクスウリジンなどのピリミジンアナログ；カルステロン、ドロモスタノロンプロピオネート、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトンなどのアンドロゲン；アミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタンなどの抗副腎皮質物質；フロリン酸などの葉酸補充物；アセグラトン；アルドホスファミドグリコシド；アミノレブリン酸；エニルウラシル；アムサクリン；ベストラブシル；ビサントレン；エダトラキサート；デフォファミン；デメコルシン；ジアジクオン；エルホルミチン；エリプチニウムアセテート；エポチロン；エトグルシド；硝酸ガリウム；ヒドロキシウレア；レンチナン；ロニダイニン；マイタンシン及びアンサミトシンなどのマイタンシノイド；ミトグアゾン；ミトキサントロン；モピダンモール；ニトラエリン；ペントスタチン；フェナメット；ピラルビシン；ロソキサントロン；ポドフィリン酸；２－エチルヒドラジド；プロカルバジン；ＰＳＫ多糖複合体）；ラゾキサン；リゾキシン；シゾフラン；スピロゲルマニウム；テヌアゾン酸；トリアジクオン；２，２’，２”－トリクロロトリエチルアミン；トリコテセン（特に、Ｔ－２毒素、ベラクリンＡ、ロリジンＡ、及びアングイジン）；ウレタン；ビンデシン；ダカルバジン；マンノムスチン；ミトブロニトール；ミトラクトール；ピポブロマン；ガシトシン；アラビノシド（「Ａｒａ－Ｃ」）；シクロホスファミド；チオテパ；タキソイド、例えば、パクリタキセル及びドキセタキセル；クロラムブシル；ゲムシタビン；６－チオグアニン；メルカプトプリン；メトトレキサート；シスプラチン、オキサリプラチン、及びカルボプラチンなどの白金配位錯体；ビンブラスチン；白金；エトポシド（ＶＰ－１６）；イホスファミド；ミトキサントロン；ビンクリスチン；ビノレルビン；ノバントロン；テニポシド；エダトレキセート；ダウノマイシン；アミノプテリン；ゼローダ；イバンドロネート；イリノテカン（例えば、ＣＰＴ－１ １）；トポイソメラーゼ阻害剤ＲＦＳ ２０００；ジフルオロメチルオミチン（ＤＭＦＯ）；レチノイン酸などのレチノイド；カペシタビン；ならびに上記のいずれかの医薬的に許容される塩、酸、または誘導体が挙げられる。

【0044】

いくつかの実施形態において、本発明の方法は、ダウノルビシン、ドキソルビシン、エピルビシン、ファルモルビシン、イダルビシン、ミトキサントロン、ピキサントロン、及びこれらの医薬的に許容される塩からなるリストより選択されるアントラサイクリンにより誘導される薬物誘導性傷害に対する臓器保護を付与する（薬物誘導性傷害により引き起こされる組織損傷を治療または低減する）ために特に適している。

【0045】

いくつかの実施形態において、本発明の方法または組成物は、アセトアミノフェン誘導性肝毒性、アミオダロン誘導性肺毒性、ドキソルビシン誘導性心毒性、塩化カドミウム誘導性腎毒性、ジメチルニトロサミン誘導性脾毒性、及びＯ－エチル－Ｓ，Ｓ－ジプロピルホスホロジチオエート（ＭＯＣＡＰ）誘導性神経毒性の治療に特に適している。

【0046】

本発明の方法または組成物は、任意の虚血性損傷またはイベントに適用することができる。虚血イベントに対し特に感受性である組織としては、心筋、血管、及び神経細胞の組織（特に脳組織）が挙げられる。虚血に対し感受性である他の組織としては、消化管、肝臓、腎臓、及び眼の組織が挙げられる。例えば、心臓保護の必要性は、ある特定の生理的障害（例えば、不安定狭心症）により、外傷時、または心停止期間中に生じ得る。さらに、脳卒中、一過性脳虚血発作、または切迫脳卒中（一過性黒内障（ａｍａｒｏｓｉｓ ｆｕｇａｘ））などの障害は、本発明の方法を用いた治療における候補状態である。二次的な脳卒中のリスクを生じる脳卒中が発生した場合、または数時間もしくは数日以内に脳卒中のリスクを生じる別の状態が発生した場合、この方法はそのようなリスクを減弱するために適用することができる。当業者は、他の虚血性組織傷害のリスク増加に関連する状況を認識するであろう。このような疾患状態としては、腸間膜動脈不全、腎動脈狭窄症、肝静脈血栓症、末梢血管不全、多発性外傷、敗血症、及び多臓器不全が挙げられる。他の虚血イベントとしては、部分的冠動脈閉塞の血管造影学的エビデンス、心筋損傷の心エコー学的エビデンス、または将来もしくは追加の虚血イベント（例えば、心筋梗塞（ＭＩ）などの心筋虚血イベント、もしくは脳血管障害ＣＶＡなどの神経血管虚血）のリスクの任意の他のエビデンスが挙げられる。虚血／再灌流は、心筋以外の組織を損傷することがある。本明細書で提供する方法または組成物は、脳、肝臓、腸（ｇｕｔ）、腎臓、腸（ｂｏｗｅｌ）の組織、または他の任意の組織で発生し得る虚血再灌流傷害の低減に特に適している。さらなる用途としては、内臓臓器への血流の遮断をもたらす鈍的または貫通外傷（銃創、刺創、あるいは減速傷害及び／または自動車事故に続発する貫通創または鈍的腹部外傷に起因する腹部に対する貫通創から生じるものを含む）が挙げられる。他の好ましい用途としては、内臓臓器への血流を途絶または減少させる全身性低血圧をもたらす疾患または手順（失血による出血性ショック、心筋梗塞もしくは心不全による心原性ショック、神経原性ショック、またはアナフィラキシーを含む）が挙げられる。

【0047】

いくつかの実施形態において、本発明の方法または組成物の使用は、臓器への血液供給の停止及びそれに続く再灌流を必要とする外科処置中の臓器保護を改善することができる。虚血再灌流傷害のリスクを生じる外科的手順の例としては、肝臓切除；心筋梗塞後の血管再生（例えば、血栓溶解療法、ステント留置、もしくは外科的修復によるもの）；脳卒中後の血管再生（例えば、血栓溶解療法もしくは外科的修復によるもの）；または血管傷害後の血管再生（虚血性傷害後の四肢の修復もしくは再結合または動脈瘤の外科的修復を含む）が挙げられる。他の例としては、腹腔鏡手術を含む上部または下部胃腸管の手術、人工心肺装置ありまたはなしの直視下心臓手術、鼻及び喉の手術、血管手術、神経学的（脳）手術、移植（肝臓、心臓、肺、腎臓、腸）、肝臓の手術、及び帝王切開がある。いくつかの実施形態において、外科的手順は冠動脈バイパス手術（冠動脈バイパス移植（ＣＡＢＧ）手術または心臓バイパス手術または単にバイパス手術の別名でも知られる）であり、これは、狭心症を緩和し、冠動脈疾患による死亡リスクを低減するために実施される外科的手順である。患者の体の他の場所から動脈または静脈を冠動脈に移植して、アテローム性動脈硬化症の狭窄をバイパスし、心筋（心臓の筋肉）に供給する冠動脈循環への血液供給を改善する。この手術は、通常は心臓停止状態で実施されるため、心肺バイパスを使用する必要があるが、動いている心臓にＣＡＢＧを実施するいわゆる「オフポンプ」手術の技法も利用可能である。いくつかの実施形態において、本発明の方法は、臓器への血液供給のクランプを必要とする任意の外科的手順に使用することができる。詳細には、本発明の方法は、２つの血管の接続を伴う全ての外科的手順（例えば、冠動脈バイパス、末梢バイパス、血液透析アクセス（瘻孔の作成）、及びフリーフラップ手術（乳房及び顔の再建手術））に適用される。より詳細には、本発明の方法または組成物は、吻合を必要とする任意の外科的手順に適用することができる。本明細書で使用する場合、「吻合」という用語は、血管などの管状構造間の外科的接続を指す。

【0048】

典型的には、ＤＢＩ（例えば細胞外ＤＢＩ）の活性または発現を阻害する薬剤の有効量は、再灌流の前、最中、または後に患者に投与することができる。詳細には、ＤＢＩの活性または発現を阻害する薬剤の有効量は、臓器の再灌流中に患者に投与される。

【0049】

いくつかの実施形態において、本発明の方法または組成物は、急性腎傷害（ＡＫＩ）後の慢性腎疾患（ＣＫＤ）への進行の予防に特に適している。本明細書で使用する場合、「慢性腎疾患」（ＣＫＤ）という用語は、数か月～数年の期間にわたる進行性の腎機能喪失を指す。ＣＫＤは、当技術分野で一般的な意味を有し、腎臓に影響を及ぼす多数の状態、腎実質の破壊、及び機能的ネフロンまたは糸球体の喪失を分類するために使用される。ＣＫＤは種々の原因に起因するが、最終的な経路は腎線維化のままであることにさらに留意されたい。「急性腎傷害」または「急性腎不全」という用語は、典型的には、体内の窒素性老廃物の蓄積をもたらすのに十分な腎機能の急速な悪化により識別される（例えば、Ａｎｄｅｒｓｏｎ ａｎｄ Ｓｃｈｒｉｅｒ（１９９４）（Ｈａｒｒｉｓｏｎ’ｓ Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ｏｆ Ｉｎｔｅｒｎａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，１３ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ）；Ｉｓｓｅｌｂａｃｈｅｒ ｅｔ ａｌ，ｅｄｓ．，ＭｃＧｒａｗ Ｈｉｌｌ Ｔｅｘｔ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋを参照）。ＢＵＮの増加率が少なくとも４～８ｍｍｏｌ／Ｌ／日（１０～２０ｍｇ／ｄＬ／日）であること、及び血清クレアチニンの増加率が少なくとも４０～８０μｍｏｌ／Ｌ／日（０．５～１．０ｍｇ／ｄＬ／日）であることは、急性腎不全で典型的である。急性腎傷害を患う患者の場合、尿試料が尿細管傷害の残留物を含むことがある。異化（または異化亢進）が見られる対象では、ＢＵＮの増加率が１００／ｍｇ／ｄＬ／日を超えることがある。ＢＵＮまたは血清クレアチニンの増加率は、連続的な血液検査により定量することができ、好ましくは少なくとも２回の血液検査を６～７２時間、より好ましくは１２～２４時間の期間にわたって行う。場合により、「急性」腎不全（数日の期間にわたる悪化）は、「急速進行性」腎不全（数週間の期間にわたる悪化）と区別される。しかし、本明細書で使用する場合、「急性腎傷害」という表現は、両方の症候群を包含することが意図されている。急性腎傷害は、上記で述べたように臨床医により定期的に識別されている。ＡＫＩは、脈管構造の異常、例えば、血管収縮性疾患（例えば、悪性高血圧症、強皮症、溶血性尿毒症症候群、血栓性血小板減少性紫斑病）及び血管炎（例えば、結節性多発動脈炎、過敏性血管炎、血清病、ウェゲナー肉芽腫症、巨細胞性動脈炎、混合クリオグロブリン血症、ヘノッホ－シェーンライン紫斑病、全身性エリテマトーデス）に起因し得る。また、ＡＫＩは、糸球体の異常、例えば、感染後（例えば、溶連菌感染後、肺炎球菌感染後、淋菌感染後、ブドウ球菌感染後、腸球菌感染後、ウイルス［例えば、Ｂ型及びＣ型肝炎、流行性耳下腺炎、麻疹、エプスタイン－バー］感染後、マラリア感染後の異常、またはブルセラ症、レジオネラ菌、リステリア菌、シャント腎炎、ハンセン病、レプトスピラ症、もしくは内臓膿瘍に関連する異常）、及び非感染性の異常（例えば、急速進行性糸球体腎炎、膜増殖性糸球体腎炎、グッドパスチャー症候群、全身性エリテマトーデス、ウェゲナー肉芽腫症）にも起因し得る。いくつかの実施形態において、ＡＫＩは、薬物関連の原因（例えば、ペニシリン、スルホンアミド、カルベニシリン、セファロスポリン、エリスロマイシン、ナフシリン、オキサシリン、非ステロイド性抗炎症剤、利尿剤（フロセミド、エタクリン酸、チアジド、スピロノラクトン、水銀剤）、フェニトイン、フェノバルビタール、プロベニシド、アロプリノール、シメチジン）、感染関連の原因（例えば、急性腎盂腎炎、連鎖球菌性、ブドウ球菌性、レプトスピラ症、マラリア、サルモネラ症）、腎乳頭壊死（例えば、糖尿病、鎌状赤血球疾患、鎮痛薬乱用、アルコール中毒症に伴うもの）、及び他の種々の原因（例えば、サルコイドーシス、白血病、リンパ腫）に起因する急性間質性腎炎によって生じ得る。いくつかの実施形態において、ＡＫＩは、結晶沈着（例えば、尿酸、シュウ酸塩、メトトレキサート）または多発性骨髄腫及び軽鎖疾患による尿細管内閉塞に起因し得る。いくつかの実施形態において、ＡＫＩは、ネフロトキシン（例えば、アミノグリコシド、テトラサイクリン、アムホテリシン、ポリミキシン、セファロスポリンなどの抗微生物剤）、重金属（例えば、水銀、鉛、ヒ素、金塩、バリウム）、及び他の様々な化学剤（例えば、シスプラチン、ドキソルビシン、ストレプトゾシン、メトキシフルラン、ハロタン、エチレングリコール、四塩化炭素）、虚血（例えば、出血、低血圧、敗血症、熱傷、腎梗塞、腎動脈解離、横紋筋融解症、外傷）、または他の様々な原因（例えば、造影剤、輸血反応、ミオグロビン血症、熱中症、ヘビ及びクモによる咬傷）に起因する急性尿細管壊死に起因し得る。

【0050】

本発明の方法または組成物は、臓器における傷害の予防、その重症度の低減、またはそのリスクの低減に特に適している。いくつかの実施形態において、臓器は単離される。いくつかの実施形態において、臓器は移植片または移植可能な臓器である。

【0051】

いくつかの実施形態において、本発明の方法または組成物は、ＤＢＩ（例えば細胞外ＤＢＩ）の活性または発現を阻害する薬剤の有効量を単離された（移植された）臓器に投与することにより、臓器移植を改善することができる。したがって、いくつかの実施形態において、臓器は、レシピエントに移植されることになる。したがって、この方法は、単離された臓器においてｅｘ ｖｉｖｏで行われる。

【0052】

いくつかの実施形態において、移植臓器は死体臓器であり、臓器が死体ドナーから得られた場合、ＤＢＩの活性または発現を阻害する薬剤は、死体臓器または摘出臓器のいずれかに投与することができる。いくつかの実施形態において、移植臓器は生体臓器が供与されたものであり、このような場合、ＤＢＩの活性または発現を阻害する薬剤を摘出臓器に投与することができる。

【0053】

いくつかの実施形態において、臓器は単離され、ＤＢＩ（例えば細胞外ＤＢＩ）の活性または発現を阻害する薬剤の有効量で灌流される。

【0054】

いくつかの実施形態において、移植臓器は温虚血及び／または冷虚血の対象である。

【0055】

いくつかの実施形態において、ＤＢＩ（例えば細胞外ＤＢＩ）の活性または発現を阻害する薬剤の有効量は、冷虚血時間中に投与される。本明細書で使用する場合、「冷虚血時間」または「ＣＩＴ」という用語は、当技術分野における一般的な意味を有し、回復臓器の低温保存の開始から移植後の温循環の回復までに及ぶ時間を指す。受け入れる外科医／施設によって、またドナーおよびレシピエントの特徴によってばらつきがある。直感的には、短いＣＩＴの方がよい。腎移植の場合、ＣＩＴは２４時間未満であるべきであり、膵移植の場合、ＣＩＴは１８時間未満、肝移植の場合、ＣＩＴは８時間未満であるべきである（Ｂｅｒｎａｔ ＪＬ，Ｄ’Ａｌｅｓｓａｎｄｒｏ ＡＭ，Ｐｏｒｔ ＦＫ，Ｂｌｅｃｋ ＴＰ，Ｈｅａｒｄ ＳＯ，Ｍｅｄｉｎａ Ｊ，ｅｔ ａｌ．Ｒｅｐｏｒｔ ｏｆ ａ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ ｏｎ Ｄｏｎａｔｉｏｎ ａｆｔｅｒ ｃａｒｄｉａｃ ｄｅａｔｈ．Ａｍ Ｊ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ．２００６；６：２８１－９１）。

【0056】

線維化を予防する方法：
また、本発明の方法または組成物は、臓器傷害に関連する、またはその後に発生する線維化の予防または低減にも特に適している。

【0057】

いくつかの実施形態において、線維化は、皮膚、心臓、肝臓、肺、または腎臓からなる群より選択される少なくとも１つの臓器に影響を及ぼす。線維化の例としては、限定されるものではないが、皮膚瘢痕形成、ケロイド、肝線維化、肺線維化、腎線維化、糸球体硬化症、肺線維化（例えば、特発性肺線維化）、肝線維化、腎線維化、腸線維化、間質性線維化、膵臓及び肺の線維化、注射線維化、心内膜心筋線維化、縦隔線維化、骨髄線維化、後腹膜線維化、進行性巨大線維化、腎性全身性線維化などが挙げられる。いくつかの実施形態において、線維化は、人工臓器の外科的移植により引き起こされる。

【0058】

例えば、肝臓（肝）線維化は、慢性肝傷害の創傷治癒応答の一部として起こる。このような損傷は、ウイルス活動（例えば、Ｂ型もしくはＣ型慢性肝炎）または他の感染症（例えば、寄生虫、細菌）、化学物質（例えば、医薬品、アルコール、汚染物質）、免疫プロセス（例えば、自己免疫性肝炎）、代謝障害（例えば、脂質、グリコーゲン、もしくは金属貯蔵障害）、あるいはがん成長の結果であり得る。肝線維化は、正常な肝臓とは質的に区別することができる細胞外マトリックスの蓄積により特徴付けられる。肝線維化を確認せずに放置すると、肝硬変（被包性の小結節の存在により定義される）、肝不全、そして死亡まで進行する。本明細書に記載の方法または組成物は、投与されたときに、対象におけるトランスアミナーゼのレベルを、投与前の対象におけるトランスアミナーゼのレベルと比較して低減するのに十分な量で提供され得る。いくつかの実施形態において、トランスアミナーゼは、アスパラギン酸トランスアミナーゼ（ＡＳＴ）またはアラニントランスアミナーゼ（ＡＬＴ）である。本明細書に記載の方法または組成物は、線維化スコアを、投与前の線維化スコアに対して少なくとも１／３だけ低減するのに十分な量で提供され得る。本明細書に記載の方法または組成物は、投与されたときに、対象におけるヒドロキシプロリンのレベルを、投与前の対象におけるヒドロキシプロリンのレベルと比較して低減するのに十分な量で提供され得る。本明細書に記載の方法または組成物は、投与されたときに、対象におけるＮＡＦＬＤスコアを、投与前のＮＡＦＬＤスコアと比較して低減するのに十分な量で提供され得る。

【0059】

腎臓の線維性障害としては、限定されるものではないが、糸球体腎炎（膜増殖性、びまん性増殖性、急速進行性、感染後、及び慢性形態を含む）、糖尿病性糸球体硬化症、巣状糸球体硬化症、糖尿病性腎症、ループス腎炎、尿細管間質線維症、膜性腎症、アミロイドーシス（他の組織の中でも腎臓に影響を及ぼす）、腎動脈硬化症、ネフローゼ症候群、腎間質性線維症、シクロスポリン投与患者における腎線維化、及びＨＩＶ関連腎症が挙げられる。糸球体は、免疫学的（例えば、免疫複合体またはＴ細胞媒介性）、血行力学的（全身性または腎性高血圧）、代謝学的（例えば、糖尿病）、「アテローム性動脈硬化」（糸球体における脂質の蓄積）、浸潤性（例えば、アミロイド）、及び毒物（例えば、ヘビの毒液）を含む多くのタイプの腎傷害の主要な標的となっている。糖尿病性腎症の患者の腎構造変化には、糸球体の肥大、糸球体膜及び尿細管膜の肥厚（マトリックスの蓄積に起因）、ならびにメサンギウム及び尿細管間質におけるマトリックス量の増加が含まれる。糖尿病における腎臓内血行力学の変化に起因する糸球体性高血圧は、糖尿病性腎症の進行に寄与し得る。また、自己免疫性腎炎もメサンギウム細胞成長応答の改変をもたらし得る。また、Ｃ型肝炎ウイルスによる感染も、特発性膜増殖性糸球体腎炎をもたらし得る。

【0060】

肺の線維性障害としては、限定されるものではないが、珪肺症、石綿肺、特発性肺線維化、閉塞性細気管支炎性器質化肺炎、高用量化学療法に伴う肺線維化、特発性肺線維化、及び肺高血圧症が挙げられる。これらの疾患は、細胞増殖、ならびにコラーゲン、エラスチン、フィブロネクチン、及びテネイシン－Ｃなどの細胞外マトリックス成分の産生増加により特徴付けられる。本発明の方法は、喘息及び気道リモデリングに関連する他の肺状態を有する対象の治療にも利用することができる。

【0061】

膵線維化は慢性膵炎で発生する。この状態は、管石灰化及び膵実質の線維化により特徴付けられる。肝硬変と同様に、慢性膵炎もアルコール乱用に関連する。

【0062】

本発明の方法は、腸線維化、特に炎症性腸疾患（例えば、クローン病及び潰瘍性大腸炎）に伴う線維化の治療にも適している。

【0063】

本発明の方法により治療され得る皮膚線維化状態としては、限定されるものではないが、強皮症、モルフェア、ケロイド、肥厚性瘢痕、家族性皮膚性コラーゲノーマ、及びコラーゲンタイプの結合組織母斑が挙げられる。さらに、本発明の方法は、ケロイドまたは肥厚性瘢痕を形成することが知られている患者における瘢痕の過剰産生の阻害、外科的切開、外科的腹部創傷、及び外傷性裂傷を含む様々なタイプの創傷の治癒中の瘢痕または瘢痕の過剰産生の阻害または予防、冠動脈血管形成術後の動脈の瘢痕及び再閉路の予防または阻害、ならびに梗塞後及び過敏性血管症における心臓線維化に関連する過剰な瘢痕または線維性組織形成の予防または阻害に適している。

【0064】

眼の線維性状態としては、糖尿病性網膜症、手術後瘢痕（例えば、緑内障フィルター手術後及び内斜視手術後）、及び増殖性硝子体網膜症などの状態が挙げられる。

【0065】

骨の線維増殖性障害は、異常な異所性骨形成により特徴付けられ、一般的に、骨形成に関与する主要な細胞タイプの活発な増殖、及びそれらの細胞による複雑な骨マトリックスの合成として見られる。このような骨障害の例示としては、前立腺腫瘍の軸骨格への転移とともに発生する線維化がある。前立腺腫瘍関連の海綿骨の成長において、前立腺癌細胞は、骨芽細胞と相互に作用して、骨に沈着すると腫瘍成長及び骨芽細胞作用の強化をもたらす場合がある。骨格それ自体から生じる骨の線維増殖性応答としては、大理石骨病及び過骨症が挙げられる。骨芽細胞の分化及び機能における欠陥は、大理石骨病の主な原因であると考えられている。大理石骨病は、骨吸収低減に起因する骨硬化、骨髄腔が発達しないことによる髄外造血、ならびに視神経萎縮、デアフィブロネイクチネス（ｄｅａｆｉｂｒｏｎｅｃｔｉｎｅｓｓ）、及び精神遅滞を伴う重度の血液学的異常が生じることにより特徴付けられる遺伝性疾患である。変形性関節症においては、骨の変化が発生することが知られており、変形性関節症の大腿骨頭内では骨コラーゲン代謝が増加する。最も大きな変化は軟骨下領域で生じ、疾患組織内で類骨の割合を高く維持している。

【0066】

血管系の線維増殖性障害としては、例えば、心臓移植の慢性拒絶反応の主な原因である移植血管障害が挙げられる。移植血管障害は、古典的な線維増殖性疾患である、冠動脈のびまん性閉塞を伴うアテローム性動脈硬化プラーク形成の促進により特徴付けられる。

【0067】

本発明の方法により治療され得るさらなる線維性状態としては、関節リウマチ、長期の関節痛及び関節悪化に関連する疾患、進行性全身性硬化症、多発性筋炎、皮膚筋炎、好酸球性筋膜炎、モルフェア、レイノー症候群、及び鼻ポリープ症が挙げられる。

【0068】

いくつかの実施形態において、本発明の方法は炎症誘導性線維化の治療に特に適している。本明細書で使用する場合、「炎症誘導性線維化」という表現は、炎症性疾患、すなわち、（組織傷害、病原体感染、または毒剤により引き起こされる）急性または慢性の炎症に関連する、またはその結果としての疾患の際に発症する線維化に関する。

【0069】

いくつかの実施形態において、本発明の方法は、肝線維化の治療に特に適している。

【0070】

本発明の薬剤：
いくつかの実施形態において、ＤＢＩ（例えば細胞外ＤＢＩ）の活性を阻害する薬剤は、ＤＢＩを対象とする抗体である。

【0071】

いくつかの実施形態において、抗体は、配列番号１の４３位のアミノ酸残基から５０位のアミノ酸残基にわたるアミノ酸配列に存在するフラグメント（すなわち、オクタペプチドまたはＯＰ）を対象とする。

【0072】

いくつかの実施形態において、本発明の抗体はキメラ抗体であり、典型的にはマウス／ヒトキメラ抗体である。

【0073】

いくつかの実施形態において、抗体はヒト化抗体である。

【0074】

いくつかの実施形態において、抗体はヒト抗体である。完全ヒトモノクローナル抗体は、ヒト免疫グロブリン重鎖及び軽鎖の遺伝子座の大部分がトランスジェニックのマウスを免疫することにより調製することもできる。例えば、米国特許第５，５９１，６６９号、同第５，５９８，３６９号、同第５，５４５，８０６号、同第５，５４５，８０７号、同第６，１５０，５８４号、及びこれらに引用された参考文献を参照されたい（これらの内容は、参照により本明細書に援用される）。

【0075】

いくつかの実施形態において、抗体は中和抗体である。

【0076】

いくつかの実施形態において、本発明の中和抗体は、抗体依存性細胞媒介細胞傷害性を媒介しないため、抗体依存性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）を誘導するＦｃ部分を含まない。いくつかの実施形態において、中和抗体は、ＦｃｇＲＩＩＩＡ（ＣＤ１６）ポリペプチドに実質的に結合可能なＦｃドメインを含まない。いくつかの実施形態において、中和抗体は、Ｆｃドメインが欠如している（例えば、ＣＨ２及び／またはＣＨ３ドメインが欠如している）、あるいはＩｇＧ２またはＩｇＧ４アイソタイプのＦｃドメインを含む。いくつかの実施形態において、中和抗体は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆａｂ’－ＳＨ、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、ダイアボディ、一本鎖抗体フラグメント、または複数の異なる抗体フラグメントを含む多重特異性抗体からなる、またはこれらを含む。いくつかの実施形態において、中和抗体は毒性部分に結合していない。いくつかの実施形態において、アミノ酸残基から選択される１つ以上のアミノ酸は、抗体が、Ｃ２ｑ結合が改変するように及び／または補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）が低減もしくは消失するように、異なるアミノ酸残基で置き換えることができる。このアプローチは、ｌｄｕｓｏｇｉｅらによる米国特許第６，１９４，５５１号にさらに詳しく記載されている。

【0077】

ＤＢＩ（例えば細胞外ＤＢＩ）の活性を阻害するいくつかの抗ＤＢＩ抗体は、本明細書に記載の方法及び組成物に使用するのに適している。このような抗ＤＢＩ抗体は市販されており、文献にも記載されている。例えば、ＤＢＩの活性を阻害する抗体（例えば、細胞外ＤＢＩ）は、ａｂ２３１９１０（ウサギポリクローナル；ａｂｃａｍ）、ａｂ２３２７６０（ウサギポリクローナル；ａｂｃａｍ）、ａｂ１６８７１（ウサギポリクローナル；ａｂｃａｍ）、ｓｃ－３０１９０（ウサギポリクローナル；Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）、ＦＮａｂ０２２５６（ウサギポリクローナル；Ｗｕｈａｎ Ｆｉｎｅ Ｂｉｏｔｅｃｈ Ｃｏ）、ＰＡ５－８９１３９（ウサギポリクローナル；Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）、ＯＴＩ４Ａ８（マウスモノクローナル；ＯｒｉＧｅｎｅ）、ＯＴＩ６Ｅ１２（マウスモノクローナル；ＯｒｉＧｅｎｅ）、またはｍＡｂ ７Ａ（マウスモノクローナル；Ｆｒｅｄ Ｈｕｔｃｈ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）からなる群より選択される抗体のポリペプチド配列に対し少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％の配列同一性を有する。

【0078】

いくつかの実施形態において、ＤＢＩ（例えば細胞外ＤＢＩ）の活性を阻害する薬剤は、ＤＢＩを対象とするアプタマーである。アプタマーは、分子認識の観点で抗体の代替物に相当する分子のクラスである。アプタマーは、事実上任意のクラスの標的分子を高い親和性及び特異性で認識する能力を有するオリゴヌクレオチド配列である。このようなリガンドは、ランダム配列ライブラリーのＳｙｓｔｅｍａｔｉｃ Ｅｖｏｌｕｔｉｏｎ ｏｆ Ｌｉｇａｎｄｓ ｂｙ ＥＸｐｏｎｅｎｔｉａｌ ｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔ（ＳＥＬＥＸ）により単離することができる。ランダム配列ライブラリーは、ＤＮＡのコンビナトリアル化学合成により入手できる。このライブラリーにおいて、各メンバーはユニークな配列の直鎖オリゴマーであり、最終的には化学修飾される。ペプチドアプタマーは、２つのハイブリッド方法によりコンビナトリアルライブラリーから選択される、Ｅ．ｃｏｌｉチオレドキシンＡなどのプラットフォームタンパク質により表示される立体構造的に制約された抗体可変領域からなる（Ｃｏｌａｓ ｅｔ ａｌ．，１９９６）。

【0079】

いくつかの実施形態において、ＤＢＩの発現を阻害する薬剤は発現阻害剤である。本発明の好ましい実施形態において、当該遺伝子発現阻害剤は、ｓｉＲＮＡ、エンドヌクレアーゼ、アンチセンスオリゴヌクレオチド、またはリボザイムである。

【0080】

いくつかの実施形態において、ＤＢＩ（例えば細胞外ＤＢＩ）の活性を阻害する薬剤は、対象に投与されたときにＤＢＩに対する中和自己抗体を誘発するのに適したワクチン組成物に存在する。本発明の目的において、「ワクチン組成物」という用語は、免疫系応答を誘導するためにヒトまたは動物に投与することができる組成物を意味することが意図されており、この免疫系応答は、ＤＢＩに対する抗体の産生をもたらし得る。典型的には、ワクチン組成物は、ＤＢＩに由来する少なくとも１つの抗原を含む。本明細書で使用する場合、「抗原」という用語は、ＭＨＣ分子によって処理及び提示された場合に、抗体またはＴ細胞受容体（ＴＣＲ）により特異的に結合可能な分子を指す。本明細書で使用する場合、「抗原」という用語はＴ細胞エピトープも包含する。抗原はさらに、免疫系によって認識され、及び／またはＢ－及び／またはＴ－リンパ球の活性化につながる液性免疫応答及び／または細胞性免疫応答を誘導することが可能である。抗原は、１つ以上のエピトープまたは抗原部位（Ｂ－及びＴ－エピトープ）を有することができる。いくつかの実施形態において、抗原は、配列番号１の配列またはそのフラグメント（例えばエピトープ）に対し少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドに存在する。いくつかの実施形態において、抗原は、ｉ）配列番号１に対し少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列、またはｉｉ）配列番号１の１７位のアミノ酸残基から５０位のアミノ酸残基にわたるアミノ酸配列に対し少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列、またはｉｉｉ）配列番号１の３３位のアミノ酸残基から５０位のアミノ酸残基にわたるアミノ酸配列に対し少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列、またはｉｖ）配列番号１の４３位のアミノ酸残基から５０位のアミノ酸残基にわたるアミノ酸配列に対し少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドに存在する。いくつかの実施形態において、このポリペプチドは、ワクチンに対する強力な免疫応答を誘発するために概して十分に外来性の担体タンパク質と結合体化している。例示する担体タンパク質は、本質的に免疫原性が高い。ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）及びアオガイヘモシアニン（ＫＬＨ）は、動物を用いた実験をする際に、結合体ワクチンの開発における担体として一般的に使用されており、本明細書ではこれらを担体タンパク質として企図している。治療用結合体ワクチンの調製に使用されてきたタンパク質としては、限定されるものではないが、病原性細菌の複数の毒素及びそれらのトキソイドが挙げられる。好適な担体分子は多数存在し、限定されるものではないが、細菌毒素または産物、例えば、コレラ毒素Ｂ－（ＣＴＢ）、ジフテリア毒素、破傷風トキソイド、及び百日咳毒素、ならびに糸状菌ヘマグルチニン、志賀毒素、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ外毒素；レクチン、例えば、リシンＢサブユニット、アブリン、及びスイートピーレクチン；サブウイルス、例えば、レトロウイルス核タンパク質（レトロＮＰ）、狂犬病リボ核タンパク質（狂犬病ＲＮＰ）、植物ウイルス（例えば、ＴＭＶ、ササゲ、及びカリフラワーモザイクウイルス）、水疱性口内炎ウイルス－ヌクレオカプシドタンパク質（ＶＳＶ－Ｎ）、ポックスウイルスベクター、及びセムリキ森林ウイルスベクター；人工ビヒクル、例えば、多抗原性ペプチド（ＭＡＰ）、ミクロスフェア；酵母ウイルス様粒子（ＶＬＰ）；マラリアタンパク質抗原；その他、例えば、タンパク質及びペプチドならびに上記の任意の修飾物、誘導体、またはアナログが挙げられる。他の有用な担体としては、粘膜応答を強化する能力を有する担体、より詳細には、細菌毒素のＬＴＢファミリー、レトロウイルス核タンパク質（レトロＮＰ）、狂犬病リボ核タンパク質（狂犬病ＲＮＰ）、水疱性口内炎ウイルス－ヌクレオカプシドタンパク質（ＶＳＶ－Ｎ）、及び組換えポックスウイルスサブユニットが挙げられる。

【0081】

医薬組成物：
典型的には、ＤＢＩ（例えば細胞外ＤＢＩ）の活性または発現を阻害する薬剤は、医薬的に許容される担体を含む医薬組成物の形態で患者に投与される。このような組成物で使用することができる医薬的に許容される担体としては、限定されるものではないが、イオン交換体、アルミナ、ステアリン酸アルミニウム、レシチン、血清タンパク質、例えば、ヒト血清アルブミン、緩衝物質、例えば、リン酸塩、グリシン、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、飽和植物脂肪酸の部分グリセリド混合物、水、塩、または電解質、例えば、プロタミン硫酸塩、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素カリウム、塩化ナトリウム、亜鉛塩、コロイダルシリカ、三ケイ酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、セルロースベース物質、ポリエチレングリコール、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリアクリレート、ワックス、ポリエチレン－ポリオキシプロピレン－ブロック多量体、ポリエチレングリコール、及び羊毛脂が挙げられる。患者への投与に使用する場合、組成物は患者への投与用に製剤化される。本発明の組成物は、経口、非経口、吸入スプレー、局所、経直腸、経鼻、頬側、経膣、または植込み型リザーバーにより投与することができる。本明細書で使用されるものとしては、皮下、静脈内、筋肉内、関節内、滑液内、胸骨内、髄腔内、肝臓内、病巣内、及び頭蓋内の注射または点滴技法が挙げられる。本発明の組成物の無菌注射用形態は、水性または油性の懸濁液であり得る。このような懸濁液は、当技術分野で知られている技法に従って、好適な分散剤または湿潤剤及び懸濁化剤を用いて製剤化することができる。また、無菌注射用調製物は、無毒の非経口的に許容される希釈剤または溶媒中の（例えば、１，３－ブタンジオール中溶液としての）無菌注射用の溶液または懸濁液であってもよい。用いることが許容されるビヒクル及び溶媒に含まれるものとして、水、リンゲル液、及び等張塩化ナトリウム溶液がある。加えて、無菌の固定油は、従来から溶媒または懸濁媒体として用いられている。この目的において、合成のモノグリセリドまたはジグリセリドを含む任意の無刺激の固定油を用いることができる。脂肪酸、例えば、オレイン酸及びそのグリセリド誘導体は、特にそのポリオキシエチレン化バージョンにおいて、天然の医薬的に許容される油（例えば、オリーブ油またはヒマシ油）のように、注射液の調製に有用である。また、これらの油の溶液または懸濁液は、長鎖アルコールの希釈剤または分散剤（例えば、カルボキシメチルセルロース、または乳剤及び懸濁液を含めた医薬的に許容される剤形の製剤化に一般的に使用されている同様の分散剤）を含んでもよい。他の一般的に使用されている界面活性剤、例えば、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）、Ｓｐａｎ（登録商標）、及び医薬的に許容される固体、液体、または他の剤形の製造で一般的に使用されている他の乳化剤または生体利用能増強剤も、製剤化の目的で使用することができる。本発明の組成物は、限定されるものではないが、カプセル、錠剤、水性の懸濁液または溶液を含む任意の経口的に許容される剤形で、経口投与することができる。経口使用向けの錠剤の場合、一般的に使用されている担体としては、ラクトース及びトウモロコシデンプンが挙げられる。ステアリン酸マグネシウムなどの滑沢剤も典型的に加えられる。カプセル形態で経口投与する場合、有用な希釈剤としては、例えばラクトースが挙げられる。経口使用向けに水性懸濁液が必要である場合、ＤＢＩの活性または発現を阻害する薬剤は、乳化剤及び懸濁化剤と組み合わされる。所望に応じて、ある特定の甘味剤、香味剤、または着色剤を加えてもよい。代替形態として、本発明の組成物は、経直腸投与用の坐薬の形態で投与することができる。このような坐薬は、薬剤と、室温では固体だが直腸温で液体となるため直腸内で融解して薬物を放出する好適な非刺激性の賦形剤と混合することにより、調製することができる。このような材料としては、カカオバター、ミツロウ、及びポリエチレングリコールが挙げられる。本発明の組成物は、特に治療の標的が局所適用により容易にアクセス可能な部位または臓器（眼、皮膚、または下部腸管の疾患を含む）を含む場合は、局所投与してもよい。好適な局所用製剤は、これらの部位または臓器の各々のために容易に調製される。局所適用の場合、組成物は、１つ以上の担体中に懸濁または溶解した活性成分を含む好適な軟膏に製剤化することができる。本発明の化合物の局所投与用の担体としては、限定されるものではないが、鉱油、流動ワセリン、白色ワセリン、プロピレングリコール、ポリオキシエチレン、ポリオキシプロピレン化合物、乳化ロウ及び水が挙げられる。代替形態として、組成物は、１つ以上の医薬的に許容される担体中に懸濁または溶解した活性成分を含む好適なローションまたはクリームに製剤化してもよい。好適な担体としては、限定されるものではないが、鉱油、モノステアリン酸ソルビタン、ポリソルベート６０、セチルエステルワックス、セテアリルアルコール、２－オクチルドデカノール、ベンジルアルコール、及び水が挙げられる。下部腸管に対する局所適用は、経直腸用坐薬製剤（上記参照）または好適な浣腸製剤で行うことができる。パッチを使用してもよい。本発明の組成物は、経鼻エアロゾルまたは吸入により投与することもできる。このような組成物は、医薬製剤の分野で周知されている技法に従って調製され、ベンジルアルコールもしくは他の好適な防腐剤、生体利用能を増強するための吸収促進剤、フルオロカーボン、及び／または他の従来的な可溶化剤もしくは分散剤を用いて、食塩水溶液として調製することができる。

【0082】

いくつかの実施形態において、本発明のＤＢＩ（例えば、細胞外ＤＢＩ）の活性または発現を阻害する薬剤は、注射、ポンプデバイス、及び／または任意の機械（例えば、バイパス機械）を用いて、対象または単離された臓器に直接投与される。いくつかの実施形態において、移植に適した単離された臓器は、ＤＢＩの活性または発現を阻害する薬剤の有効量を含む保存溶液により灌流される。本明細書で使用する場合、「保存溶液」または「臓器保存溶液」という用語は、ｐＨが６．５～７．５で、塩、好ましくは塩化物、硫酸塩、ナトリウム、カルシウム、マグネシウム、及びカリウム；糖、好ましくはマンニトール、ラフィノース、スクロース、グルコース、フルクトース、ラクトビオン酸塩（耐水性）、またはグルコン酸塩；抗酸化剤、例えば、グルタチオン；活性薬剤、例えば、アロプリノールなどのキサンチンオキシダーゼ阻害剤、乳酸塩、ヒスチジン、グルタミン酸（またはグルタミン酸塩）、トリプトファンなどのアミノ酸；及び任意選択で、ヒドロキシエチルデンプン、ポリエチレングリコール、またはデキストランなどのコロイドを含む水溶液を指す。いくつかの実施形態において、臓器を保存するためのデバイスが使用され、当該デバイスは、保存溶液で満たされた臓器容器を含み、当該デバイスはさらに、１つ以上の化合物（例えば、ＤＢＩの活性または発現を阻害する薬剤）を臓器容器に注入するための１つ以上の手段を含むことを特徴とする。

【0083】

本発明を、以下の図面及び実施例によりさらに例示する。ただし、これらの実施例及び図面は、いかなる形においても本発明の範囲を限定するものとして解釈されるべきではない。

【図面の簡単な説明】

【0084】

【図1A】ＡＣＢＰ／ＤＢＩの中和は、ｉｎ ｖｉｖｏでオートファジーフラックスを活性化し臓器損傷を減弱する。Ａ～Ｃ：９０分／４時間の虚血／再灌流（ＩＲ）により生じた肝傷害。マウスを、α－ＤＢＩまたはＩｇＧ（２．５μｇ／ｇ）及びＨＣＱ（５０ｍｇ／ｋｇ）の４時間及びＩＲ直前の腹腔内注射により前処置した。肝傷害（Ａ）を組織学的検査により評価した。血漿中のＡＬＴ（Ｂ）及びＡＳＴトランスアミナーゼ活性（Ｃ）を比色分析アッセイにより分析した（群当たりｎ＝５～１１頭のマウス）。

【図1B】ＡＣＢＰ／ＤＢＩの中和は、ｉｎ ｖｉｖｏでオートファジーフラックスを活性化し臓器損傷を減弱する。Ａ～Ｃ：９０分／４時間の虚血／再灌流（ＩＲ）により生じた肝傷害。マウスを、α－ＤＢＩまたはＩｇＧ（２．５μｇ／ｇ）及びＨＣＱ（５０ｍｇ／ｋｇ）の４時間及びＩＲ直前の腹腔内注射により前処置した。肝傷害（Ａ）を組織学的検査により評価した。血漿中のＡＬＴ（Ｂ）及びＡＳＴトランスアミナーゼ活性（Ｃ）を比色分析アッセイにより分析した（群当たりｎ＝５～１１頭のマウス）。

【図1C】ＡＣＢＰ／ＤＢＩの中和は、ｉｎ ｖｉｖｏでオートファジーフラックスを活性化し臓器損傷を減弱する。Ａ～Ｃ：９０分／４時間の虚血／再灌流（ＩＲ）により生じた肝傷害。マウスを、α－ＤＢＩまたはＩｇＧ（２．５μｇ／ｇ）及びＨＣＱ（５０ｍｇ／ｋｇ）の４時間及びＩＲ直前の腹腔内注射により前処置した。肝傷害（Ａ）を組織学的検査により評価した。血漿中のＡＬＴ（Ｂ）及びＡＳＴトランスアミナーゼ活性（Ｃ）を比色分析アッセイにより分析した（群当たりｎ＝５～１１頭のマウス）。

【図2A】α－ＤＢＩは、マウスにおいてアセトアミノフェン及びコンカナバリンＡによる臓器毒性を軽減する。肝傷害前４時間にわたる及び肝傷害の直前のα－ＤＢＩまたはＩｇＧ（２．５μｇ／ｇ）及びＨＣＱ（５０ｍｇ／ｋｇ）の腹腔内注射により前処置したマウスにおいて、アセトアミノフェン（ＡＰＡＰ、腹腔内３００ｍｇ／ｋｇ、１６時間）またはコンカナバリンＡ（ＣｏｎＡ、静脈内１２ｍｇ／ｋｇ、４時間）により損傷を誘発した。Ａ～Ｃ．ＡＰＡＰ中毒後のＤＢＩ中和による肝保護効果。肝傷害（Ａ）を、中心静脈周辺の細胞死、変性（風船様腫大）、及び炎症の面積を考慮して組織学的検査により測定した。血漿マウスからのＡＬＴ及びＡＳＴトランスアミナーゼ活性（Ｂ及びＣ）（群当たりｎ＝４～１１頭のマウス）。Ｄ～Ｆ．ＤＢＩ中和によるＣｏｎＡ損傷からの肝臓保護。浸潤及び肝細胞壊死のグレードを用いて、肝傷害（Ｄ）をスコア化した。血漿中のＡＬＴ及びＡＳＴトランスアミナーゼの活性（Ｅ及びＦ）（群当たりｎ＝３～１１頭のマウス）。

【図2B】α－ＤＢＩは、マウスにおいてアセトアミノフェン及びコンカナバリンＡによる臓器毒性を軽減する。肝傷害前４時間にわたる及び肝傷害の直前のα－ＤＢＩまたはＩｇＧ（２．５μｇ／ｇ）及びＨＣＱ（５０ｍｇ／ｋｇ）の腹腔内注射により前処置したマウスにおいて、アセトアミノフェン（ＡＰＡＰ、腹腔内３００ｍｇ／ｋｇ、１６時間）またはコンカナバリンＡ（ＣｏｎＡ、静脈内１２ｍｇ／ｋｇ、４時間）により損傷を誘発した。Ａ～Ｃ．ＡＰＡＰ中毒後のＤＢＩ中和による肝保護効果。肝傷害（Ａ）を、中心静脈周辺の細胞死、変性（風船様腫大）、及び炎症の面積を考慮して組織学的検査により測定した。血漿マウスからのＡＬＴ及びＡＳＴトランスアミナーゼ活性（Ｂ及びＣ）（群当たりｎ＝４～１１頭のマウス）。Ｄ～Ｆ．ＤＢＩ中和によるＣｏｎＡ損傷からの肝臓保護。浸潤及び肝細胞壊死のグレードを用いて、肝傷害（Ｄ）をスコア化した。血漿中のＡＬＴ及びＡＳＴトランスアミナーゼの活性（Ｅ及びＦ）（群当たりｎ＝３～１１頭のマウス）。

【図2C】α－ＤＢＩは、マウスにおいてアセトアミノフェン及びコンカナバリンＡによる臓器毒性を軽減する。肝傷害前４時間にわたる及び肝傷害の直前のα－ＤＢＩまたはＩｇＧ（２．５μｇ／ｇ）及びＨＣＱ（５０ｍｇ／ｋｇ）の腹腔内注射により前処置したマウスにおいて、アセトアミノフェン（ＡＰＡＰ、腹腔内３００ｍｇ／ｋｇ、１６時間）またはコンカナバリンＡ（ＣｏｎＡ、静脈内１２ｍｇ／ｋｇ、４時間）により損傷を誘発した。Ａ～Ｃ．ＡＰＡＰ中毒後のＤＢＩ中和による肝保護効果。肝傷害（Ａ）を、中心静脈周辺の細胞死、変性（風船様腫大）、及び炎症の面積を考慮して組織学的検査により測定した。血漿マウスからのＡＬＴ及びＡＳＴトランスアミナーゼ活性（Ｂ及びＣ）（群当たりｎ＝４～１１頭のマウス）。Ｄ～Ｆ．ＤＢＩ中和によるＣｏｎＡ損傷からの肝臓保護。浸潤及び肝細胞壊死のグレードを用いて、肝傷害（Ｄ）をスコア化した。血漿中のＡＬＴ及びＡＳＴトランスアミナーゼの活性（Ｅ及びＦ）（群当たりｎ＝３～１１頭のマウス）。

【図2D】α－ＤＢＩは、マウスにおいてアセトアミノフェン及びコンカナバリンＡによる臓器毒性を軽減する。肝傷害前４時間にわたる及び肝傷害の直前のα－ＤＢＩまたはＩｇＧ（２．５μｇ／ｇ）及びＨＣＱ（５０ｍｇ／ｋｇ）の腹腔内注射により前処置したマウスにおいて、アセトアミノフェン（ＡＰＡＰ、腹腔内３００ｍｇ／ｋｇ、１６時間）またはコンカナバリンＡ（ＣｏｎＡ、静脈内１２ｍｇ／ｋｇ、４時間）により損傷を誘発した。Ａ～Ｃ．ＡＰＡＰ中毒後のＤＢＩ中和による肝保護効果。肝傷害（Ａ）を、中心静脈周辺の細胞死、変性（風船様腫大）、及び炎症の面積を考慮して組織学的検査により測定した。血漿マウスからのＡＬＴ及びＡＳＴトランスアミナーゼ活性（Ｂ及びＣ）（群当たりｎ＝４～１１頭のマウス）。Ｄ～Ｆ．ＤＢＩ中和によるＣｏｎＡ損傷からの肝臓保護。浸潤及び肝細胞壊死のグレードを用いて、肝傷害（Ｄ）をスコア化した。血漿中のＡＬＴ及びＡＳＴトランスアミナーゼの活性（Ｅ及びＦ）（群当たりｎ＝３～１１頭のマウス）。

【図2E】α－ＤＢＩは、マウスにおいてアセトアミノフェン及びコンカナバリンＡによる臓器毒性を軽減する。肝傷害前４時間にわたる及び肝傷害の直前のα－ＤＢＩまたはＩｇＧ（２．５μｇ／ｇ）及びＨＣＱ（５０ｍｇ／ｋｇ）の腹腔内注射により前処置したマウスにおいて、アセトアミノフェン（ＡＰＡＰ、腹腔内３００ｍｇ／ｋｇ、１６時間）またはコンカナバリンＡ（ＣｏｎＡ、静脈内１２ｍｇ／ｋｇ、４時間）により損傷を誘発した。Ａ～Ｃ．ＡＰＡＰ中毒後のＤＢＩ中和による肝保護効果。肝傷害（Ａ）を、中心静脈周辺の細胞死、変性（風船様腫大）、及び炎症の面積を考慮して組織学的検査により測定した。血漿マウスからのＡＬＴ及びＡＳＴトランスアミナーゼ活性（Ｂ及びＣ）（群当たりｎ＝４～１１頭のマウス）。Ｄ～Ｆ．ＤＢＩ中和によるＣｏｎＡ損傷からの肝臓保護。浸潤及び肝細胞壊死のグレードを用いて、肝傷害（Ｄ）をスコア化した。血漿中のＡＬＴ及びＡＳＴトランスアミナーゼの活性（Ｅ及びＦ）（群当たりｎ＝３～１１頭のマウス）。

【図2F】α－ＤＢＩは、マウスにおいてアセトアミノフェン及びコンカナバリンＡによる臓器毒性を軽減する。肝傷害前４時間にわたる及び肝傷害の直前のα－ＤＢＩまたはＩｇＧ（２．５μｇ／ｇ）及びＨＣＱ（５０ｍｇ／ｋｇ）の腹腔内注射により前処置したマウスにおいて、アセトアミノフェン（ＡＰＡＰ、腹腔内３００ｍｇ／ｋｇ、１６時間）またはコンカナバリンＡ（ＣｏｎＡ、静脈内１２ｍｇ／ｋｇ、４時間）により損傷を誘発した。Ａ～Ｃ．ＡＰＡＰ中毒後のＤＢＩ中和による肝保護効果。肝傷害（Ａ）を、中心静脈周辺の細胞死、変性（風船様腫大）、及び炎症の面積を考慮して組織学的検査により測定した。血漿マウスからのＡＬＴ及びＡＳＴトランスアミナーゼ活性（Ｂ及びＣ）（群当たりｎ＝４～１１頭のマウス）。Ｄ～Ｆ．ＤＢＩ中和によるＣｏｎＡ損傷からの肝臓保護。浸潤及び肝細胞壊死のグレードを用いて、肝傷害（Ｄ）をスコア化した。血漿中のＡＬＴ及びＡＳＴトランスアミナーゼの活性（Ｅ及びＦ）（群当たりｎ＝３～１１頭のマウス）。

【図3A】ＡＣＢＰ／ＤＢＩ中和は慢性傷害により誘導される線維化を減弱する。Ａ～Ｃ．Ｃ５７ＢＬ／６マウスを２週間の胆管結紮（ＢＤＬ）に供した。ＢＤＬの４時間前及び１時間前に、マウスに２．５μｇ／ｇのＩｇＧまたはα－ＤＢＩを腹腔内注射し、ＢＤＬ中は週に２回、線維化スコア（Ａ）、ＡＬＴ活性（Ｂ）、及びビリルビンレベル（Ｃ）を測定した（群当たりｎ＝５～１０頭のマウス）。Ｄ～Ｅ．Ｃ５７ＢＬ／６マウスに、２．５μｇ／ｇのα－ＤＢＩまたはＩｇＧを週に１回、１．６ｍｌ／ｋｇのＣＣｌ_４を週２回、９週間腹腔内注射した。追加群は、ＣＣｌ_４の最終４週間、５０ｍｇ／ｋｇ／日のＨＣＱで処置した。線維化ステージ（Ｄ）及び血漿ＡＬＴ（Ｅ）の定量を示す（群当たりｎ＝５～１４頭のマウス）。

【図3B】ＡＣＢＰ／ＤＢＩ中和は慢性傷害により誘導される線維化を減弱する。Ａ～Ｃ．Ｃ５７ＢＬ／６マウスを２週間の胆管結紮（ＢＤＬ）に供した。ＢＤＬの４時間前及び１時間前に、マウスに２．５μｇ／ｇのＩｇＧまたはα－ＤＢＩを腹腔内注射し、ＢＤＬ中は週に２回、線維化スコア（Ａ）、ＡＬＴ活性（Ｂ）、及びビリルビンレベル（Ｃ）を測定した（群当たりｎ＝５～１０頭のマウス）。Ｄ～Ｅ．Ｃ５７ＢＬ／６マウスに、２．５μｇ／ｇのα－ＤＢＩまたはＩｇＧを週に１回、１．６ｍｌ／ｋｇのＣＣｌ_４を週２回、９週間腹腔内注射した。追加群は、ＣＣｌ_４の最終４週間、５０ｍｇ／ｋｇ／日のＨＣＱで処置した。線維化ステージ（Ｄ）及び血漿ＡＬＴ（Ｅ）の定量を示す（群当たりｎ＝５～１４頭のマウス）。

【図3C】ＡＣＢＰ／ＤＢＩ中和は慢性傷害により誘導される線維化を減弱する。Ａ～Ｃ．Ｃ５７ＢＬ／６マウスを２週間の胆管結紮（ＢＤＬ）に供した。ＢＤＬの４時間前及び１時間前に、マウスに２．５μｇ／ｇのＩｇＧまたはα－ＤＢＩを腹腔内注射し、ＢＤＬ中は週に２回、線維化スコア（Ａ）、ＡＬＴ活性（Ｂ）、及びビリルビンレベル（Ｃ）を測定した（群当たりｎ＝５～１０頭のマウス）。Ｄ～Ｅ．Ｃ５７ＢＬ／６マウスに、２．５μｇ／ｇのα－ＤＢＩまたはＩｇＧを週に１回、１．６ｍｌ／ｋｇのＣＣｌ_４を週２回、９週間腹腔内注射した。追加群は、ＣＣｌ_４の最終４週間、５０ｍｇ／ｋｇ／日のＨＣＱで処置した。線維化ステージ（Ｄ）及び血漿ＡＬＴ（Ｅ）の定量を示す（群当たりｎ＝５～１４頭のマウス）。

【図3D】ＡＣＢＰ／ＤＢＩ中和は慢性傷害により誘導される線維化を減弱する。Ａ～Ｃ．Ｃ５７ＢＬ／６マウスを２週間の胆管結紮（ＢＤＬ）に供した。ＢＤＬの４時間前及び１時間前に、マウスに２．５μｇ／ｇのＩｇＧまたはα－ＤＢＩを腹腔内注射し、ＢＤＬ中は週に２回、線維化スコア（Ａ）、ＡＬＴ活性（Ｂ）、及びビリルビンレベル（Ｃ）を測定した（群当たりｎ＝５～１０頭のマウス）。Ｄ～Ｅ．Ｃ５７ＢＬ／６マウスに、２．５μｇ／ｇのα－ＤＢＩまたはＩｇＧを週に１回、１．６ｍｌ／ｋｇのＣＣｌ_４を週２回、９週間腹腔内注射した。追加群は、ＣＣｌ_４の最終４週間、５０ｍｇ／ｋｇ／日のＨＣＱで処置した。線維化ステージ（Ｄ）及び血漿ＡＬＴ（Ｅ）の定量を示す（群当たりｎ＝５～１４頭のマウス）。

【図3E】ＡＣＢＰ／ＤＢＩ中和は慢性傷害により誘導される線維化を減弱する。Ａ～Ｃ．Ｃ５７ＢＬ／６マウスを２週間の胆管結紮（ＢＤＬ）に供した。ＢＤＬの４時間前及び１時間前に、マウスに２．５μｇ／ｇのＩｇＧまたはα－ＤＢＩを腹腔内注射し、ＢＤＬ中は週に２回、線維化スコア（Ａ）、ＡＬＴ活性（Ｂ）、及びビリルビンレベル（Ｃ）を測定した（群当たりｎ＝５～１０頭のマウス）。Ｄ～Ｅ．Ｃ５７ＢＬ／６マウスに、２．５μｇ／ｇのα－ＤＢＩまたはＩｇＧを週に１回、１．６ｍｌ／ｋｇのＣＣｌ_４を週２回、９週間腹腔内注射した。追加群は、ＣＣｌ_４の最終４週間、５０ｍｇ／ｋｇ／日のＨＣＱで処置した。線維化ステージ（Ｄ）及び血漿ＡＬＴ（Ｅ）の定量を示す（群当たりｎ＝５～１４頭のマウス）。

【図4A】ＡＣＢＰ／ＤＢＩの中和は、メチオニンコリン欠乏飼料により誘導される脂肪肝を減弱する。Ａ～Ｄ．月齢２～３か月の雄マウスに、普通飼料（ＲＣＤ）またはメチオニンコリン欠乏飼料（ＭＣＤ）を４週間与えた。肝Ｆ４／８０マクロファージ（Ａ）、ＮＡＦＬＤ活性スコア（Ｂ）、ＡＬＴ及びＡＳＴ活性（Ｃ）、ならびにｐ６２レベル（Ｄ）を測定した。

【図4B】ＡＣＢＰ／ＤＢＩの中和は、メチオニンコリン欠乏飼料により誘導される脂肪肝を減弱する。Ａ～Ｄ．月齢２～３か月の雄マウスに、普通飼料（ＲＣＤ）またはメチオニンコリン欠乏飼料（ＭＣＤ）を４週間与えた。肝Ｆ４／８０マクロファージ（Ａ）、ＮＡＦＬＤ活性スコア（Ｂ）、ＡＬＴ及びＡＳＴ活性（Ｃ）、ならびにｐ６２レベル（Ｄ）を測定した。

【図4C】ＡＣＢＰ／ＤＢＩの中和は、メチオニンコリン欠乏飼料により誘導される脂肪肝を減弱する。Ａ～Ｄ．月齢２～３か月の雄マウスに、普通飼料（ＲＣＤ）またはメチオニンコリン欠乏飼料（ＭＣＤ）を４週間与えた。肝Ｆ４／８０マクロファージ（Ａ）、ＮＡＦＬＤ活性スコア（Ｂ）、ＡＬＴ及びＡＳＴ活性（Ｃ）、ならびにｐ６２レベル（Ｄ）を測定した。

【図4D】ＡＣＢＰ／ＤＢＩの中和は、メチオニンコリン欠乏飼料により誘導される脂肪肝を減弱する。Ａ～Ｄ．月齢２～３か月の雄マウスに、普通飼料（ＲＣＤ）またはメチオニンコリン欠乏飼料（ＭＣＤ）を４週間与えた。肝Ｆ４／８０マクロファージ（Ａ）、ＮＡＦＬＤ活性スコア（Ｂ）、ＡＬＴ及びＡＳＴ活性（Ｃ）、ならびにｐ６２レベル（Ｄ）を測定した。

【図5A】ＡＣＢＰ／ＤＢＩの中和は、西洋飼料により誘導される脂肪肝を減弱する。Ａ～Ｂ．月齢２～３か月の雄マウスに、普通飼料（ＲＣＤ）または高脂肪西洋飼料＋糖を４週間与えた。ＮＡＦＬＤ活性スコア（Ａ）、ならびにＡＬＴ及びＡＳＴ活性（Ｂ）を測定した。

【図5B】ＡＣＢＰ／ＤＢＩの中和は、西洋飼料により誘導される脂肪肝を減弱する。Ａ～Ｂ．月齢２～３か月の雄マウスに、普通飼料（ＲＣＤ）または高脂肪西洋飼料＋糖を４週間与えた。ＮＡＦＬＤ活性スコア（Ａ）、ならびにＡＬＴ及びＡＳＴ活性（Ｂ）を測定した。

【図6A】ＡＣＢＰ／ＤＢＩの中和は、西洋飼料及びＣＣｌ_４により誘導される脂肪肝を減弱する。Ａ～Ｂ．月齢２～３か月の雄マウスに、普通飼料（ＲＣＤ）または高脂肪西洋飼料＋糖＋ＣＣｌ_４を４週間与えた。ＮＡＦＬＤ活性スコア（Ａ）、ならびにＡＬＴ及びＡＳＴ活性（Ｂ）を測定した。

【図6B】ＡＣＢＰ／ＤＢＩの中和は、西洋飼料及びＣＣｌ_４により誘導される脂肪肝を減弱する。Ａ～Ｂ．月齢２～３か月の雄マウスに、普通飼料（ＲＣＤ）または高脂肪西洋飼料＋糖＋ＣＣｌ_４を４週間与えた。ＮＡＦＬＤ活性スコア（Ａ）、ならびにＡＬＴ及びＡＳＴ活性（Ｂ）を測定した。

【図7】ＡＣＢＰ／ＤＢＩの中和は、西洋飼料及びＣＣｌ_４により誘導される線維化を減弱する。Ｃ５７ＢＬ／６マウスに普通飼料（ＲＣＤ）または高脂肪西洋飼料＋糖＋ＣＣｌ_４を４週間与えた。マウスに、２．５μｇ／ｇのα－ＤＢＩまたはＩｇＧを週に１回、１．６ｍｌ／ｋｇのＣＣｌ_４を週２回、９週間腹腔内注射した。線維化スコアの定量を示す（群当たりｎ＝５～１４頭のマウス）。

【図8A】ＡＣＢＰ／ＤＢＩ中和はＣＣｌ_４により誘導される線維化を回復させる。マウスにＣＣｌ_４を９週間投与し、次いでビヒクル（油）で処置して４週間回復させた（Ｒ）。２．５μｇ／ｇのＩｇＧまたはα－ＤＢＩを回復の１日前及びＲの間は週に１回腹腔内注射した。線維化ステージ（Ａ）、血漿ＡＬＴ活性（Ｂ）、及びヒドロキシプロリンレベル（Ｃ）の定量を測定した（群当たりｎ＝４～１２頭のマウス）。

【図8B】ＡＣＢＰ／ＤＢＩ中和はＣＣｌ_４により誘導される線維化を回復させる。マウスにＣＣｌ_４を９週間投与し、次いでビヒクル（油）で処置して４週間回復させた（Ｒ）。２．５μｇ／ｇのＩｇＧまたはα－ＤＢＩを回復の１日前及びＲの間は週に１回腹腔内注射した。線維化ステージ（Ａ）、血漿ＡＬＴ活性（Ｂ）、及びヒドロキシプロリンレベル（Ｃ）の定量を測定した（群当たりｎ＝４～１２頭のマウス）。

【図8C】ＡＣＢＰ／ＤＢＩ中和はＣＣｌ_４により誘導される線維化を回復させる。マウスにＣＣｌ_４を９週間投与し、次いでビヒクル（油）で処置して４週間回復させた（Ｒ）。２．５μｇ／ｇのＩｇＧまたはα－ＤＢＩを回復の１日前及びＲの間は週に１回腹腔内注射した。線維化ステージ（Ａ）、血漿ＡＬＴ活性（Ｂ）、及びヒドロキシプロリンレベル（Ｃ）の定量を測定した（群当たりｎ＝４～１２頭のマウス）。

【実施例】

【0085】

実施例１：材料及び方法
化学物質及び試薬
試薬をＡｘｏｎ Ｍｅｄｃｈｅｍ ＢＶ（Ｇｒｏｎｉｎｇｅｎ，Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ）、Ｑｉａｇｅｎ（Ｈｉｌｄｅｎ，Ｇｅｒｍａｎｙ）、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ（ＭＡ，ＵＳＡ）、Ｒａｎｄｏｘ（Ａｎｔｒｉｍ，ＵＫ）、Ｒｏｃｈｅ Ａｐｐｌｉｅｄ Ｓｃｉｅｎｃｅ（Ｕｐｐｅｒ Ｂａｖａｒｉａ，Ｇｅｒｍａｎｙ）、及びＳｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ（ＭＯ，ＵＳＡ）から入手した。電気泳動用の試薬をＴｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ（ＭＡ，ＵＳＡ）及びＢｉｏＲａｄ（ＣＡ，ＵＳＡ）から入手した。抗体をＡｂｃａｍ（ＴＸ，ＵＳＡ）、Ａｂｎｏｖａ（Ｔａｉｐｅｉ，Ｔａｉｗａｎ）、Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ（ＭＡ，ＵＳＡ）、及びＳｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈから入手した。

【0086】

動物実験
野生型（Ｗｔ）Ｃ５７ＢＬ／６マウス（Ｅｎｖｉｇｏ，Ｇａｎｎａｔ，Ｆｒａｎｃｅ）、ホモ接合性Ａｔｇ４ｂ^－／－マウス（Ｄｒ．Ｃａｒｌｏｓ Ｌｏｐｅｚ－Ｏｔｉｎの寄贈；Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｏｖｉｅｄｏ， Ｓｐａｉｎ）、タモキシフェン誘導性全身ノックアウトｆｌｏｘｅｄ Ａｃｂｐ／Ｄｂｉ^－／－マウス（ＵＢＣ－ｃｒｅ／ＥＲＴ２：：Ａｃｂｐ／Ｄｂｉ^{ｆｌ／ｆｌ}、対照：Ａｃｂｐ／Ｄｂｉ^{ｆｌ／ｆｌ}（ＣＲＥなし））（Ｂｒａｖｏ－Ｓａｎ Ｐｅｄｒｏ ｅｔ ａｌ．，２０１９ａ）、ホモ接合性Ｇａｂｒｇ２^{ｍｕｔ／ｍｕｔ}マウス（ガンマ－アミノ酪酸Ａ受容体γ２サブユニットのＡＣＢＰ／ＤＢＩの結合部位内に点変異Ｆ７７Ｉを保有）（Ｗｕｌｆｆ ｅｔ ａｌ．，２００７）、及び緑色蛍光タンパク質に結合体化したＬＣ３を発現するトランスジェニックマウス（ＧＦＰ－ＬＣ３－Ｔｇ）（Ｍｉｚｕｓｈｉｍａ ｅｔ ａｌ．，２００４）を、ＦＥＬＡＳＡガイドライン及びＡｎｉｍａｌ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｅｔｈｉｃｓ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅからのローカルガイドラインに従って飼育及び維持した（パーミッション番号２５０００、３１４１１、３４５３７、３４５３８、及び３４５３９）。マウスを１２時間明／暗サイクルにて温度制御された環境下で飼育し、飼料及び水を自由に摂取させた。全ての動物を屠殺し、臓器を液体窒素中で瞬間凍結し、－８０℃で保存するか、または４℃の４％緩衝パラホルムアルデヒド中で一晩固定しパラフィンに包埋した。血漿を心臓穿刺により得た。

【0087】

受動免疫または能動免疫によるＤＢＩの中和
ＤＢＩに対するモノクローナル抗体（受動免疫）またはアイソタイプＩｇＧ（Ｂｉｏｘｃｅｌｌ，ＮＨ，ＵＳＡ）をｉｎ ｖｉｖｏで（２．５μｇ／ｇ体重（Ｂ．Ｗ．）、腹腔内（ｉ．ｐ．）、２００μＬ中）単回または複数回用量で使用した。一部の実験では、実験終了の２時間前にロイペプチン（Ｌｅｕ、３０ｍｇ／ｋｇ体重）を腹腔内注射した。

【0088】

自己抗体の産生（能動免疫）を、Ｍｏｎｔｅｇｕｔらが説明したように、アオガイヘモシアニン（ＫＬＨ；Ｔｈｅｒｍｏ製）及びマウスｒｅｃＡＣＢＰ（ＫＬＨ－ＤＢＩ）の結合体化により誘導した（Ｍｏｎｔｅｇｕｔ ｅｔ ａｌ．，２０２２）。簡潔に説明すると、ＫＬＨ及びＤＢＩを１：２０のモル比で混合し、徐々に調整して０．２５％（ｖ／ｖ）のグルタルアルデヒドとした。その後、グリシン溶液を加えて反応を終了させ、１００ＫＤａメンブレン（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）を用いて限外濾過した。ホルムアルデヒド溶液を加えて０．２％（ｖ／ｖ）の最終濃度とし、グリシン溶液を加え、次に７０ｍＭ ｐＨ７．８リン酸緩衝液で限外濾過することにより反応をクエンチした。８週齢の雄Ｃ５７ＢＬ／６マウスに、アジュバント乳剤（１：１）として３０、３０、３０、１０μｇのＫＬＨ－ＤＢＩまたはＫＬＨ単独を、Ｍｏｎｔａｎｉｄｅ ＩＳＡ－５１ｖｇ（Ｓｅｐｐｉｃ，Ｐａｒｉｓ，Ｆｒａｎｃｅ）とともにそれぞれ０、７、１４、及び２１日目に腹腔内注射を行うことにより免疫した。

【0089】

マウスにおける急性肝障害
肝虚血再灌流傷害を誘導するため、１２週齢の雄Ｃ５７ＢＬ／６マウスを２％イソフルオランで麻酔し、セグメント（７０％）温肝Ｉ／Ｒプロトコルのモデルを評価した（Ｍｏｔｉｎｏ ｅｔ ａｌ．，２０１９）。簡潔に説明すると、肝虚血を９０分間誘導し、クランプを４時間除去することにより再灌流を開始した。肝毒性を誘導するため、１２週齢の雄Ｃ５７ＢＬ／６マウスを、１２ｍｇ／ｋｇのコンカナバリンＡ（ＣｏｎＡ；Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ）または３００ｍｇ／ｋｇのアセトアミノフェン（ＡＰＡＰ；Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ）でそれぞれ４時間または１６時間処置した。オートファジーフラックスを阻害するため、肝損傷の４時間前及びその直前に、動物に５０ｍｇ／ｋｇのヒドロキシクロロキン（ＨＣＱ、ＰＢＳ中；Ａｘｏｎ Ｍｅｄｃｈｅｍ ＢＶ）の２回用量を腹腔内注射した。

【0090】

ｉｎ ｖｉｖｏの肝線維化モデル
肝臓の線維化を誘導するため、ＣＣｌ_４（Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ）を月齢２か月の雄Ｃ５７ＢＬ／６マウスに１．６ｍｌ／ｋｇの用量で週に２回９週間腹腔内投与した（Ｍｏｔｉｎｏ ｅｔ ａｌ．，２０１６）。対照動物にビヒクルのオリーブ油（Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ）を腹腔内注射した。追加群には、ＣＣｌ_４の最後の４週間、５０ｍｇ／ｋｇのＨＣＱを毎日腹腔内投与した。肝線維化を誘導する別のアプローチは、２週間の胆管結紮（ＢＤＬ）を伴う（Ｔａｇ ｅｔ ａｌ．，２０１５）。

【0091】

生化学的アッセイ
比色分析キット（Ｒａｎｄｏｘ）を製造業者の指示に従って用いて、血清ＡＬＴ及びＡＳＴ活性を定量した。コラーゲンを定量化するため、肝ヒドロキシプロリン含量を市販のキット（Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ）によりアッセイした。

【0092】

病理組織学的検査
パラフィン包埋切片（５μｍ）をヘマトキシリン－エオシン－サフラニン（ＨＥＳ）またはＳｉｒｉｕｓ Ｒｅｄで染色し、動物群の特徴を盲検化された経験豊富な病理学者が評価した。全てのスライドをＡｘｉｏＳｃａｎ Ｚ１（Ｃａｒｌ Ｚｅｉｓｓ，Ｊｅｎａ，Ｇｅｒｍａｎｙ）でスキャンした。Ｌｉａｎｇらにより検証されたマウスモデル用のＮＡＦＬＤスコアリングシステムを用いて、ＮＡＦＬＤ活性スコアを評価した（Ｌｉａｎｇ ｅｔ ａｌ．，２０１４）。簡潔に説明すると、脂肪症のグレードを以下のように分類した。グレード０：脂肪症肝細胞５％未満；グレード１：５～３３％；グレード２：３３～６６％；グレード３：６６％超。小葉炎症を以下のようにスコア化した。０：病巣なし；１：病巣２個未満；２：病巣２～４個；３：病巣４個超。風船様腫大を０：なし、１：少数の風船様細胞、２：多数の風船様細胞に分類した。ＮＡＦＬＤ活性スコアを、各肝生検について脂肪症、炎症、及び風船様腫大のスコアの合計に基づいて算出した。さらに、肝線維化ステージ分類（Ｍｅｔａｖｉｒスコア）を、０：なし、１：類洞周囲及び／または中心周囲、２：不完全な中心部／中心部架橋線維化、３：完全な中心部／中心部架橋線維化、ならびに４：明白な肝硬変として定義した（Ｂｅｄｏｓｓａ ａｎｄ Ｐｏｙａｒｄ，１９９６）。肝ＩＲの重症度を、Ｓｕｚｕｋｉの基準に従って０～４までのスケールで類別した。壊死、うっ血、または中心－小葉風船様腫大については、なし（０％）、最小限（１０％）、軽度（１１～３０％）、中等度（３０～６０％）、及び高度（６０％超）をそれぞれグレード０、１、２、３、及び４に割り当てた（Ｓｕｚｕｋｉ ｅｔ ａｌ．，１９９３）。ＡＰＡＰの肝毒性を測定するため、細胞死領域、風船様腫大、及び中心静脈周囲の炎症を考慮して、肝試料をなし（０：０％）、軽度（１：２０％未満）、中等度（２：２０～７０％）、重度（３：肝小葉の７０％超）に分類した（Ｎａｉｋｉ－Ｉｔｏ ｅｔ ａｌ．，２０１０）。以下のようなグレードを用いて、ＣｏｎＡにより誘導した肝傷害をスコア化した。０：壊死浸潤なし、１：肝細胞間の小さな壊死細胞巣または個々の肝細胞を取り囲む壊死細胞巣、２：１００個の壊死細胞または３０個の肝細胞を含む大きな壊死細胞巣、３：肝断面の１０％を含む、及び４：肝断面の３０％を含む（Ｚｈａｏ ｅｔ ａｌ．，２０２０）。また、肝マクロファージ及びクッパー細胞の存在量を定量するため、抗マウスＦ４／８０を用いて、固定パラフィンブロックの肝臓切片を、標準的な手順に従って免疫組織化学的に染色した。

【0093】

肝臓抽出物
タンパク質またはＲＮＡ抽出のため、組織をそれぞれ、１５０ｍＭのＮａＣｌ、１％のＴｒｉｔｏｎ（登録商標）Ｘ－１００、１０ｍＭのＥＤＴＡ及びＣｏｍｐｌｅｔｅ（登録商標）プロテアーゼ阻害剤カクテル（Ｒｏｃｈｅ Ａｐｐｌｉｅｄ Ｓｃｉｅｎｃｅ）、またはＱＩＡｚｏｌ（Ｑｉａｇｅｎ）を含む２０ｍＭのＴｒｉｓ緩衝液（ｐＨ７．４）中で、Ｐｒｅｃｅｌｌｙｓ ２４ ｔｉｓｓｕｅ ｈｏｍｏｇｅｎａｔｏｒ（Ｂｅｒｔｉｎ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｍｏｎｔｉｇｎｙ－ｌｅ－Ｂｒｅｔｏｎｎｅｕｘ，Ｆｒａｎｃｅ）を用いて、５，５００ｒｐｍで２０秒間、２サイクルでホモジナイズした。その後、タンパク質抽出物を１２，０００ｇ（４℃）で１５分間遠心分離し、上清を収集した。上清中のタンパク質濃度をビシンコニン酸技法（ＢＣＡ ｐｒｏｔｅｉｎ ａｓｓａｙ ｋｉｔ；Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）により評価した。ＲＮｅａｓｙ Ｍｉｎｉ Ｋｉｔ（Ｑｉａｇｅｎ）を製造業者の指示に従って用いて、ホモジネートＲＮＡを精製した。ＲＮＡの純度及び濃度をＮａｎｏＤｒｏｐ（商標）（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）により測定した。

【0094】

データ分析
データを平均±ＳＥＭとして表現する。統計分析については、最初に、結果の正規分布をＤ’Ａｇｏｓｔｉｎｏ ＆ Ｐｅａｒｓｏｎ正規性検定及びＳｈａｐｉｒｏ－Ｗｉｌｋ正規性により評価した。統計学的有意性は、Ｓｔｕｄｅｎｔの対応のない両側ｔ検定または対応のない両側Ｍａｎｎ－Ｗｈｉｔｎｅｙ検定を用いて分析して、単一遺伝子型内及び遺伝子型間における処置マウス及び無処置マウスの差を評価した。分析は統計ソフトＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ ５を使用することにより実施した。全トランスクリプトームシークエンシング及びＧＥＯデータセットの統計解析を、Ｆｉｓｈｅｒの正確確率検定により試験した。メタボロミックの統計解析については、Ｍａｎｎ－Ｗｈｉｔｎｅｙ検定によりｐ値を算出した。全ての標的処理データを、専用のＲ（バージョン３．４）パッケージ（＠Ｇｉｔｈｕｂ／Ｋｒｏｅｍｅｒｌａｂ／ＧＲＭｅｔａ）によりマージ及びクリーニングした。ｐ＜０．０５を統計的に有意とみなした。

【0095】

実施例２：ＡＣＢＰ／ＤＢＩ中和の急性損傷に対する臓器保護効果。
ＡＣＢＰ／ＤＢＩ（α－ＤＢＩ）を中和するモノクローナル抗体（ｍＡｂ）（２．５μｇ／ｇ、腹腔内（ｉ．ｐ．）、屠殺の６時間及び２時間前）を注射することにより、オートファジーのマーカーである微小管関連タンパク質１Ａ／１Ｂ軽鎖３Ｂ（以下、ＬＣ３Ｂと称する）の肝脂質化が強化され、電気泳動的により移動性の高いＬＣ３－ＩＩ形態が生じる（データは示さず）（Ｍｉｚｕｓｈｉｍａ ｅｔ ａｌ．，２００４）。この効果は、リソソームプロテアーゼ阻害剤ロイペプチン（屠殺の２時間前に３０ｍｇ／ｋｇ、腹腔内）を注射することによりさらに強化され、オートファジーフラックスの上昇が確証された（Ｈａｓｐｅｌ ｅｔ ａｌ．，２０１１）（データは示さず）。これに対応して、α－ＤＢＩ（屠殺の４時間前に２．５μｇ／ｇ、腹腔内）を１回注射することにより、緑色蛍光タンパク質（ＧＦＰ）－ＬＣ３融合タンパク質をコードする導入遺伝子を発現するマウス（Ｍｉｚｕｓｈｉｍａ ｅｔ ａｌ．，２００４）の肝細胞において、オートファジー斑点の形成が誘導された（データは示さず）。またα－ＤＢＩの２回注射により、肝臓の虚血／再灌流の組織学的徴候（Ｓｕｚｕｋｉスコアでまとめたうっ血、風船様腫大、壊死）（Ｓｕｚｕｋｉ ｅｔ ａｌ．，１９９３）（図１Ａ）が低減され、さらにアラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ）及びアスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ（ＡＳＴ）の２つのトランスアミナーゼの血漿濃度の増加も低減された（図１Ｂ、Ｃ）。α－ＤＢＩ注射を、ｉｎ ｖｉｖｏでオートファジーを阻害するリソソーム作用剤（ｌｙｓｏｍｏｔｒｏｐｉｃ ａｇｅｎｔ）のヒドロキシクロロキン（５０ｍｇ／ｋｇ）（Ｃｏｏｋ ｅｔ ａｌ．，２０１４）と組み合わせたところ、ＡＣＢＰ／ＤＢＩ中和が虚血／再灌流に及ぼす肝保護効果が喪失した（図１Ａ～Ｃ）。α－ＤＢＩと同様のヒドロキシクロロキン阻害性肝保護効果が、アセトアミノフェン（ＡＰＡＰ、商品名パラセタモール）及びレクチンコンカナバリンＡ（ＣｏｎＡ）により引き起こされた薬理学的肝毒性の２つのモデルでも得られた（図２）。いずれのモデルにおいても、α－ＤＢＩは、肝傷害の組織学的徴候及び循環トランスアミナーゼレベルを低減した（図２）。

【0096】

実施例３：ＡＣＢＰ／ＤＢＩ中和は線維化を抑制する。
肝線維化が胆管結紮（ＢＬＤ）により誘導されるモデルを使用した（Ｂｒｅａ ｅｔ ａｌ．，２０１８）。ＢＬＤの２週間後、アイソタイプ対照抗体で処置したマウスでは肝損傷及び線維化が顕著であったが、α－ＤＢＩを隔週で注射した後はかなり減弱した（図３Ａ～Ｃ）。同様の結果が、十分に確立された四塩化炭素（ＣＣｌ_４）誘導性肝線維化のモデルでも得られた。これは、α－ＤＢＩ（もしくはアイソタイプＩｇＧ対照を９週間）を週に１回投与し、及び／またはヒドロキシクロロキンを毎日注射する（もしくはビヒクル対照を実験の最後の４週間）ことにより調節された。このモデルにおいて、α－ＤＢＩは、体重減少、Ｓｉｒｉｕｓ Ｒｅｄ染色により検出可能な線維化の徴候（図３Ｄ）、またはコラーゲンリッチアミノ酸のヒドロキシプロリンの定量化により検出可能な線維化の徴候（データは示さず）、さらにトランスアミナーゼ活性により反映される肝損傷（図３Ｅ）、及び線維化促進マーカーのコラーゲン１Ａ１及びα－平滑筋アクチン（α－ＳＭＡ）の免疫ブロット検出により反映される肝損傷（データは示さず）を減弱した。α－ＤＢＩが肝臓損傷及び線維化に及ぼす有益な効果は、オートファジーがヒドロキシクロロキンにより阻害されると喪失した（図３Ｄ、Ｅ）。ｐ６２及びＬＣ３－ＩＩにおけるＣＣｌ_４誘導性改変は、α－ＤＢＩにより回復したが、ヒドロキシクロロキンの不在下の場合に限られ、その存在下では回復しなかった（データは示さず）。また、α－ＤＢＩは、ＣＣｌ_４誘導性循環トランスアミナーゼ上昇も、やはりヒドロキシクロロキンの不在下の場合に限って回復した（図３Ｅ）。さらにα－ＤＢＩは、慢性ＣＣｌ_４中毒の転写効果を、全てではないとしてもほとんど回復して、線維化促進性、炎症促進性、マクロファージ関連、またはトランスフォーミング成長因子－β（ＴＧＦ－β）関連の遺伝子の発現を低減したが、抗酸化酵素の発現を強化した。α－ＤＢＩのこれらの転写効果は、ヒドロキシクロロキンを同時投与したときには消失した（データは示さず）。さらに一連の実験において、ＣＣｌ_４誘導性肝線維化が、ＣＣｌ_４の休薬を週に１回のα－ＤＢＩ注射と４週間組み合わせた場合により効率的に回復し得るかについて判定した（データは示さず）。この治癒的設定においてもまた、α－ＤＢＩは肝線維化の徴候を低減した（データは示さず）。総合すると、これらのデータは、ＡＣＢＰ／ＤＢＩ中和は肝線維化に有益な効果を及ぼし、この効果がオートファジーに大きく依存することを示すものである。

【0097】

実施例４：ＡＣＢＰ／ＤＢＩは、飼料により誘導される脂肪肝を減弱する。
食事誘導性脂肪肝を使用して、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）の治療をモデル化した。最初は、メチオニンコリン欠乏飼料（ＭＣＤ）（対照：普通飼料（ＲＣＤ））の結果として体重減少との関連で発生するＮＡＳＨモデルに及ぼすＡＣＢＰ／ＤＢＩ中和の効果である。α－ＤＢＩ（対照：アイソタイプ免疫グロブリンＧ［ＩｇＧ］ｍＡｂ）を週に１回注射したマウスにおいて、ＭＣＤを４週間の過程で投与した後に、ＮＡＳＨの特徴を評価した。α－ＤＢＩは、肝臓内のＦ４／８０マクロファージの低減により測定されたように、ＮＡＳＨに関連する炎症を低減し（図４Ａ）、ＭＣＤにより誘導されるＮＡＳＨの組織学的徴候（脂肪症、炎症、及び風船様腫大の合計として測定されるＮＡＦＬＤ活性スコアによる定量：図４Ｂ）ならびに酵素学的徴候（ＡＬＴ及びＡＳＴ）をほとんど予防した（図４Ｃ）。さらに、α－ＤＢＩは、ＮＡＳＨに関連するオートファジーフラックスの抑制を回復した。これは、α－ＤＢＩを投与したマウスでは、オートファジー基質ｐ６２が対照と比較して低減されていることから証明される。

【0098】

次に、ＡＣＢＰ／ＤＢＩ中和が、高脂肪西洋飼料を消費する対象に発生するＮＡＳＨモデルに及ぼす効果について定量した。ＮＡＳＨの特徴を、α－ＤＢＩ（対照：アイソタイプ免疫グロブリンＧ［ＩｇＧ］ｍＡｂ）を週に１回注射を投与したマウスにおいて、西洋飼料の４週間過程の後に評価した。さらに、西洋飼料を与えていた別のマウス群に、線維化を誘導するためにＣＣｌ_４を腹腔内投与した。ＭＣＤ誘導性ＮＡＳＨと同様に、α－ＤＢＩは、西洋飼料により誘導されるＮＡＳＨの組織学的徴候（ＮＡＦＬＤ活性スコアによる定量：図５Ａ）及び酵素学的徴候（ＡＬＴ及びＡＳＴ）をほとんど予防した（図５Ｂ）。さらに、α－ＤＢＩの投与により、西洋飼料を与えＣＣｌ_４を投与したマウスのＮＡＦＬＤ活性スコア（図６Ａ）及びＮＡＳＨの酵素学的徴候（ＡＬＴ及びＡＳＴ：図６Ｂ）が低減された。さらに、α－ＤＢＩの投与は、線維化スコアの低減により証明されるように、西洋飼料を与えたマウスにおいて、ＣＣｌ_４投与に伴う線維化を低減した（図７）。

【0099】

最後に、α－ＤＢＩが、ＣＣｌ_４により誘導される肝線維化に回復をもたらす能力について判定した。肝臓の線維化を誘導するため、ＣＣｌ_４（Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ）を月齢２か月の雄のＣ５７ＢＬ／６マウスに１．６ｍｌ／ｋｇの用量で週に２回９週間腹腔内投与し、次いでビヒクル（油）で処置して４週間回復させた（Ｒ）。２．５μｇ／ｇのＩｇＧまたはα－ＤＢＩを回復の１日前及びＲの間は週に１回腹腔内注射した。対照動物にはビヒクルのオリーブ油（Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ）を腹腔内注射した。この治癒的設定においてもまた、α－ＤＢＩは、線維化スコア（図８Ａ）、ＡＬＴ活性（図８Ｂ）、及びヒドロキシプロリン含量（図８Ｃ）の低減により判定されたように、肝線維化の損傷徴候を低減した。

【0100】

まとめると、α－ＤＢＩによるＡＣＢＰ／ＤＢＩ中和は、様々なモデルにおいて、ＮＡＳＨに関連する脂肪肝及び肝臓の線維化を低減し、さらに形成後の肝臓の線維化を回復することさえでき、よってα－ＤＢＩによるＡＣＢＰ／ＤＢＩ中和の治療可能性をさらに実証している。

【0101】

参考文献：
本出願全体において、様々な参考文献が、本発明が関連する最新技術を説明している。これらの参考文献の開示内容は、参照により本開示に援用される。
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Ｈａｚａｒｉ，Ｙ．，Ｂｒａｖｏ－Ｓａｎ Ｐｅｄｒｏ，Ｊ．Ｍ．，Ｈｅｔｚ，Ｃ．，Ｇａｌｌｕｚｚｉ，Ｌ．，ａｎｄ Ｋｒｏｅｍｅｒ，Ｇ．（２０２０）．Ａｕｔｏｐｈａｇｙ ｉｎ ｈｅｐａｔｉｃ ａｄａｐｔａｔｉｏｎ ｔｏ ｓｔｒｅｓｓ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ ７２，１８３－１９６．
Ｊｏｓｅｐｈ，Ａ．，Ｍｏｒｉｃｅａｕ，Ｓ．，Ｓｉｃａ，Ｖ．，Ａｎａｇｎｏｓｔｏｐｏｕｌｏｓ，Ｇ．，Ｐｏｌ，Ｊ．，Ｍａｒｔｉｎｓ，Ｉ．，Ｌａｆａｒｇｅ，Ａ．，Ｍａｉｕｒｉ，Ｍ．Ｃ．，Ｌｅｂｏｙｅｒ，Ｍ．，Ｌｏｆｔｕｓ，Ｊ．，ｅｔ ａｌ．（２０２０）．Ｍｅｔａｂｏｌｉｃ ａｎｄ ｐｓｙｃｈｉａｔｒｉｃ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ａｃｙｌ ｃｏｅｎｚｙｍｅ Ａ ｂｉｎｄｉｎｇ ｐｒｏｔｅｉｎ（ＡＣＢＰ）／ｄｉａｚｅｐａｍ ｂｉｎｄｉｎｇ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ（ＤＢＩ）．Ｃｅｌｌ Ｄｅａｔｈ ＆ Ｄｉｓｅａｓｅ １１．
Ｊｏｓｅｐｈ，Ａ．，Ｃｈｅｎ，Ｈ．，Ａｎａｇｎｏｓｔｏｐｏｕｌｏｓ，Ｇ．，Ｍｏｎｔｅｇｕｔ，Ｌ．，Ｌａｆａｒｇｅ，Ａ．，Ｍｏｔｉｎｏ，Ｏ．，Ｃａｓｔｅｄｏ，Ｍ．，Ｍａｉｕｒｉ，Ｍ．Ｃ．，Ｃｌｅｍｅｎｔ，Ｋ．，Ｔｅｒｒｉｓｓｅ，Ｓ．，ｅｔ ａｌ．（２０２１）．Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ａｃｙｌ－ｃｏｅｎｚｙｍｅ Ａ ｂｉｎｄｉｎｇ ｐｒｏｔｅｉｎ（ＡＣＢＰ）／ｄｉａｚｅｐａｍ－ｂｉｎｄｉｎｇ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ（ＤＢＩ）ｏｎ ｂｏｄｙ ｍａｓｓ ｉｎｄｅｘ．Ｃｅｌｌ Ｄｅａｔｈ ＆ Ｄｉｓｅａｓｅ １２．
Ｋｉｍ，Ｄ．，Ｐａｇｇｉ，Ｊ．Ｍ．，Ｐａｒｋ，Ｃ．，Ｂｅｎｎｅｔｔ，Ｃ．，ａｎｄ Ｓａｌｚｂｅｒｇ，Ｓ．Ｌ．（２０１９）．Ｇｒａｐｈ－ｂａｓｅｄ ｇｅｎｏｍｅ ａｌｉｇｎｍｅｎｔ ａｎｄ ｇｅｎｏｔｙｐｉｎｇ ｗｉｔｈ ＨＩＳＡＴ２ ａｎｄ ＨＩＳＡＴ－ｇｅｎｏｔｙｐｅ．Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ３７，９０７－９１５．
Ｋｉｍ，Ｓ．Ｎ．，Ｌｅｅ，Ｊ．，Ｙａｎｇ，Ｈ．Ｓ．，Ｃｈｏ，Ｊ．Ｗ．，Ｋｗｏｎ，Ｓ．，Ｋｉｍ，Ｙ．Ｂ．，Ｈｅｒ，Ｊ．Ｄ．，Ｃｈｏ，Ｋ．Ｈ．，Ｓｏｎｇ，Ｃ．Ｗ．，ａｎｄ Ｌｅｅ，Ｋ．（２０１０）．Ｄｏｓｅ－ｒｅｓｐｏｎｓｅ Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ Ｂｌｅｏｍｙｃｉｎ ｏｎ Ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｐｕｌｍｏｎａｒｙ Ｆｉｂｒｏｓｉｓ ｉｎ Ｍｉｃｅ．Ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ２６，２１７．
Ｋｉｔａｄａ，Ｍ．，ａｎｄ Ｋｏｙａ，Ｄ．（２０２１）．Ａｕｔｏｐｈａｇｙ ｉｎ ｍｅｔａｂｏｌｉｃ ｄｉｓｅａｓｅ ａｎｄ ａｇｅｉｎｇ．Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖｉｅｗｓ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ １７，６４７－６６１．
Ｋｌｉｏｎｓｋｙ，Ｄ．Ｊ．，Ｐｅｔｒｏｎｉ，Ｇ．，Ａｍａｒａｖａｄｉ，Ｒ．Ｋ．，Ｂａｅｈｒｅｃｋｅ，Ｅ．Ｈ．，Ｂａｌｌａｂｉｏ，Ａ．，Ｂｏｙａ，Ｐ．，Ｂｒａｖｏ‐Ｓａｎ Ｐｅｄｒｏ，Ｊ．Ｍ．，Ｃａｄｗｅｌｌ，Ｋ．，Ｃｅｃｃｏｎｉ，Ｆ．，Ｃｈｏｉ，Ａ．Ｍ．Ｋ．，ｅｔ ａｌ．（２０２１）．Ａｕｔｏｐｈａｇｙ ｉｎ ｍａｊｏｒ ｈｕｍａｎ ｄｉｓｅａｓｅｓ．Ｔｈｅ ＥＭＢＯ Ｊｏｕｒｎａｌ ４０．
Ｋｒｏｅｍｅｒ，Ｇ．，ａｎｄ Ｌｅｖｉｎｅ，Ｂ．（２００８）．Ａｕｔｏｐｈａｇｉｃ ｃｅｌｌ ｄｅａｔｈ：ｔｈｅ ｓｔｏｒｙ ｏｆ ａ ｍｉｓｎｏｍｅｒ．Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖｉｅｗｓ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ ９，１００４－１０１０．
Ｌｅｖｉｎｅ，Ｂ．，ａｎｄ Ｋｒｏｅｍｅｒ，Ｇ．（２０１９）．Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ ｏｆ Ａｕｔｏｐｈａｇｙ Ｇｅｎｅｓ：Ａ Ｄｉｓｅａｓｅ Ｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅ．Ｃｅｌｌ １７６，１１－４２．
Ｌｉａｎｇ，Ｗ．，Ｍｅｎｋｅ，Ａ．Ｌ．，Ｄｒｉｅｓｓｅｎ，Ａ．，Ｋｏｅｋ，Ｇ．Ｈ．，Ｌｉｎｄｅｍａｎ，Ｊ．Ｈ．，Ｓｔｏｏｐ，Ｒ．，Ｈａｖｅｋｅｓ，Ｌ．Ｍ．，Ｋｌｅｅｍａｎｎ．，Ｒ．，ａｎｄ ｖａｎ ｄｅｎ Ｈｏｅｋ，Ａ．Ｍ．（２０１４）．Ｅｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔ ｏｆ ａ ｇｅｎｅｒａｌ ＮＡＦＬＤ ｓｃｏｒｉｎｇ ｓｙｓｔｅｍ ｆｏｒ ｒｏｄｅｎｔ ｍｏｄｅｌｓ ａｎｄ ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｔｏ ｈｕｍａｎ ｌｉｖｅｒ ｐａｔｈｏｌｏｇｙ．ＰｌｏＳ Ｏｎｅ ９．
Ｌｉｎ，Ｚ．，Ｗｕ，Ｆ．，Ｌｉｎ，Ｓ．，Ｐａｎ，Ｘ．，Ｊｉｎ，Ｌ．，Ｌｕ，Ｔ．，Ｓｈｉ，Ｌ．，Ｗａｎｇ，Ｙ．，Ｘｕ，Ａ．，ａｎｄ Ｌｉ，Ｘ．（２０１４）．Ａｄｉｐｏｎｅｃｔｉｎ ｐｒｏｔｅｃｔｓ ａｇａｉｎｓｔ ａｃｅｔａｍｉｎｏｐｈｅｎ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ ａｎｄ ａｃｕｔｅ ｌｉｖｅｒ ｉｎｊｕｒｙ ｂｙ ｐｒｏｍｏｔｉｎｇ ａｕｔｏｐｈａｇｙ ｉｎ ｍｉｃｅ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ ６１，８２５－８３１．
Ｌｏｏｍｉｓ，Ｗ．Ｆ．，Ｂｅｈｒｅｎｓ，Ｍ．Ｍ．，Ｗｉｌｌｉａｍｓ，Ｍ．Ｅ．，ａｎｄ Ａｎｊａｒｄ，Ｃ．（２０１０）．Ｐｒｅｇｎｅｎｏｌｏｎｅ ｓｕｌｆａｔｅ ａｎｄ ｃｏｒｔｉｓｏｌ ｉｎｄｕｃｅ ｓｅｃｒｅｔｉｏｎ ｏｆ ａｃｙｌ－ＣｏＡ－ｂｉｎｄｉｎｇ ｐｒｏｔｅｉｎ ａｎｄ ｉｔｓ ｃｏｎｖｅｒｓｉｏｎ ｉｎｔｏ ｅｎｄｏｚｅｐｉｎｅｓ ｆｒｏｍ ａｓｔｒｏｃｙｔｅｓ．Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ２８５，２１３５９－２１３６５．
Ｌｏｐｅｚ－Ｏｔｉｎ，Ｃ．，ａｎｄ Ｋｒｏｅｍｅｒ，Ｇ．（２０２１）．Ｈａｌｌｍａｒｋｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ．Ｃｅｌｌ １８４，３３－６３．
Ｌｏｖｅ，Ｍ．Ｉ．，Ｈｕｂｅｒ，Ｗ．，ａｎｄ Ａｎｄｅｒｓ，Ｓ．（２０１４）．Ｍｏｄｅｒａｔｅｄ ｅｓｔｉｍａｔｉｏｎ ｏｆ ｆｏｌｄ ｃｈａｎｇｅ ａｎｄ ｄｉｓｐｅｒｓｉｏｎ ｆｏｒ ＲＮＡ－ｓｅｑ ｄａｔａ ｗｉｔｈ ＤＥＳｅｑ２．Ｇｅｎｏｍｅ Ｂｉｏｌｏｇｙ １５．
Ｌｕ，Ｙ．Ｘ．，Ｒｅｇａｎ，Ｊ．Ｃ．，Ｅｓｓｅｒ，Ｊ．，Ｄｒｅｗｓ，Ｌ．Ｆ．，Ｗｅｉｎｓｅｉｓ，Ｔ．，Ｓｔｉｎｎ，Ｊ．，Ｈａｈｎ，Ｏ．，Ｍｉｌｌｅｒ，Ｒ．Ａ．，Ｇｒｏｎｋｅ，Ｓ．，ａｎｄ Ｐａｒｔｒｉｄｇｅ，Ｌ．（２０２１）．Ａ ＴＯＲＣ１－ｈｉｓｔｏｎｅ ａｘｉｓ ｒｅｇｕｌａｔｅｓ ｃｈｒｏｍａｔｉｎ ｏｒｇａｎｉｓａｔｉｏｎ ａｎｄ ｎｏｎ－ｃａｎｏｎｉｃａｌ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ａｕｔｏｐｈａｇｙ ｔｏ ａｍｅｌｉｏｒａｔｅ ａｇｅｉｎｇ．ＥＬｉｆｅ １０．
Ｍａｄｅｏ，Ｆ．，Ｃａｒｍｏｎａ－Ｇｕｔｉｅｒｒｅｚ，Ｄ．，Ｈｏｆｅｒ，Ｓ．Ｊ．，ａｎｄ Ｋｒｏｅｍｅｒ，Ｇ．（２０１９）．Ｃａｌｏｒｉｃ Ｒｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎ Ｍｉｍｅｔｉｃｓ ａｇａｉｎｓｔ Ａｇｅ－Ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ Ｄｉｓｅａｓｅ：Ｔａｒｇｅｔｓ，Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ，ａｎｄ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ Ｐｏｔｅｎｔｉａｌ．Ｃｅｌｌ Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ ２９，５９２－６１０．
Ｍｅｌｅｎｄｅｚ，Ａ．，Ｔａｌｌｏｃｚｙ，Ｚ．，Ｓｅａｍａｎ，Ｍ．，Ｅｓｋｅｌｉｎｅｎ，Ｅ．Ｌ．，Ｈａｌｌ，Ｄ．Ｈ．，ａｎｄ Ｌｅｖｉｎｅ，Ｂ．（２００３）．Ａｕｔｏｐｈａｇｙ ｇｅｎｅｓ ａｒｅ ｅｓｓｅｎｔｉａｌ ｆｏｒ ｄａｕｅｒ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ａｎｄ ｌｉｆｅ－ｓｐａｎ ｅｘｔｅｎｓｉｏｎ ｉｎ Ｃ．ｅｌｅｇａｎｓ．Ｓｃｉｅｎｃｅ（Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．）３０１，１３８７－１３９１．
Ｍｉｚｕｓｈｉｍａ，Ｎ．，ａｎｄ Ｋｌｉｏｎｓｋｙ，Ｄ．Ｊ．（２００７）．Ｐｒｏｔｅｉｎ ｔｕｒｎｏｖｅｒ ｖｉａ ａｕｔｏｐｈａｇｙ：ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ．Ａｎｎｕａｌ Ｒｅｖｉｅｗ ｏｆ Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ ２７，１９－４０．
Ｍｉｚｕｓｈｉｍａ，Ｎ．，Ｙａｍａｍｏｔｏ，Ａ．，Ｍａｔｓｕｉ，Ｍ．，Ｙｏｓｈｉｍｏｒｉ，Ｔ．，ａｎｄ Ｏｈｓｕｍｉ，Ｙ．（２００４）．Ｉｎ ｖｉｖｏ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ａｕｔｏｐｈａｇｙ ｉｎ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｔｏ ｎｕｔｒｉｅｎｔ ｓｔａｒｖａｔｉｏｎ ｕｓｉｎｇ ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ ｍｉｃｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇ ａ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ ａｕｔｏｐｈａｇｏｓｏｍｅ ｍａｒｋｅｒ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ ｏｆ ｔｈｅ Ｃｅｌｌ １５，１１０１－１１１１．
Ｍｏｎｔａｇｎｅｒ，Ａ．，Ｐｏｌｉｚｚｉ，Ａ．，Ｆｏｕｃｈｅ，Ｅ．，Ｄｕｃｈｅｉｘ，Ｓ．，Ｌｉｐｐｉ，Ｙ．，Ｌａｓｓｅｒｒｅ，Ｆ．，Ｂａｒｑｕｉｓｓａｕ，Ｖ．，Ｒｅｇｎｉｅｒ，Ｍ．，Ｌｕｋｏｗｉｃｚ，Ｃ．，Ｂｅｎｈａｍｅｄ，Ｆ．，ｅｔ ａｌ．（２０１６）．Ｌｉｖｅｒ ＰＰＡＲα ｉｓ ｃｒｕｃｉａｌ ｆｏｒ ｗｈｏｌｅ－ｂｏｄｙ ｆａｔｔｙ ａｃｉｄ ｈｏｍｅｏｓｔａｓｉｓ ａｎｄ ｉｓ ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ ａｇａｉｎｓｔ ＮＡＦＬＤ．Ｇｕｔ ６５，１２０２－１２１４．
Ｍｏｎｔｅｇｕｔ，Ｌ．，Ｃｈｅｎ，Ｈ．，Ｂｒａｖｏ－Ｓａｎ Ｐｅｄｒｏ，Ｊ．Ｍ．，Ｍｏｔｉｎｏ，Ｏ．，Ｍａｒｔｉｎｓ，Ｉ．，ａｎｄ Ｋｒｏｅｍｅｒ，Ｇ．（２０２２）．Ｉｍｍｕｎｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｍｉｃｅ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｓｅｌｆ－ｐｅｐｔｉｄｅ ＡＣＢＰ ｃｏｕｐｌｅｄ ｔｏ ｋｅｙｈｏｌｅ ｌｉｍｐｅｔ ｈｅｍｏｃｙａｎｉｎ．ＳＴＡＲ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ３，１０１０９５．
Ｍｏｒｉｓｈｉｔａ，Ｈ．，ａｎｄ Ｍｉｚｕｓｈｉｍａ，Ｎ．（２０１９）．Ｄｉｖｅｒｓｅ Ｃｅｌｌｕｌａｒ Ｒｏｌｅｓ ｏｆ Ａｕｔｏｐｈａｇｙ．Ａｎｎｕａｌ Ｒｅｖｉｅｗ ｏｆ Ｃｅｌｌ ａｎｄ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ ３５，４５３－４７５．
Ｍｏｔｉｎｏ，Ｏ．，Ａｇｒａ，Ｎ．，Ｂｒｅａ Ｃｏｎｔｒｅｒａｓ，Ｒ．，Ｄｏｍｉｎｇｕｅｚ－Ｍｏｒｅｎｏ，Ｍ．，Ｇａｒｃｉａ－Ｍｏｎｚｏｎ，Ｃ．，Ｖａｒｇａｓ－Ｃａｓｔｒｉｌｌｏｎ，Ｊ．，Ｃａｒｎｏｖａｌｅ，Ｃ．Ｅ．，Ｂｏｓｃａ，Ｌ．，Ｃａｓａｄｏ，Ｍ．，Ｍａｙｏｒａｌ，Ｒ．，ｅｔ ａｌ．（２０１６）．Ｃｙｃｌｏｏｘｙｇｅｎａｓｅ－２ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｓ ａｔｔｅｎｕａｔｅｓ ｎｏｎ－ａｌｃｏｈｏｌｉｃ ｓｔｅａｔｏｈｅｐａｔｉｔｉｓ ａｎｄ ｌｉｖｅｒ ｆｉｂｒｏｓｉｓ ｉｎ ｍｉｃｅ．Ｂｉｏｃｈｉｍｉｃａ ｅｔ Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａ Ａｃｔａ － Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂａｓｉｓ ｏｆ Ｄｉｓｅａｓｅ １８６２．
Ｍｏｔｉｎｏ，Ｏ．，Ｆｒａｎｃｅｓ，Ｄ．Ｅ．，Ｃａｓａｎｏｖａ，Ｎ．，Ｆｕｅｒｔｅｓ－Ａｇｕｄｏ，Ｍ．，Ｃｕｃａｒｅｌｌａ，Ｃ．，Ｆｌｏｒｅｓ，Ｊ．Ｍ．，Ｖａｌｌｅｊｏ－Ｃｒｅｍａｄｅｓ，Ｍ．Ｔ．，Ｏｌｍｅｄｉｌｌａ，Ｌ．，Ｐｅｒｅｚ Ｐｅｎａ，Ｊ．，Ｂａｎａｒｅｓ，Ｒ．，ｅｔ ａｌ．（２０１９）．Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｒｏｌｅ ｏｆ Ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅ Ｃｙｃｌｏｏｘｙｇｅｎａｓｅ－２ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ Ａｇａｉｎｓｔ Ｌｉｖｅｒ Ｉｓｃｈｅｍｉａ－Ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ Ｉｎｊｕｒｙ ｉｎ Ｍｉｃｅ．Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ ７０．
Ｎａｉｋｉ－Ｉｔｏ，Ａ．，Ａｓａｍｏｔｏ，Ｍ．，Ｎａｉｋｉ，Ｔ．，Ｏｇａｗａ，Ｋ．，Ｔａｋａｈａｓｈｉ，Ｓ．，Ｓａｔｏ，Ｓ．，ａｎｄ Ｓｈｉｒａｉ，Ｔ．（２０１０）．Ｇａｐ ｊｕｎｃｔｉｏｎ ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ ｒｅｄｕｃｅｓ ａｃｅｔａｍｉｎｏｐｈｅｎ ｈｅｐａｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ ｗｉｔｈ ｉｍｐａｃｔ ｏｎ ａｐｏｐｔｏｔｉｃ ｓｉｇｎａｌｉｎｇ ａｎｄ ｃｏｎｎｅｘｉｎ ４３ ｐｒｏｔｅｉｎ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｉｎ ｒａｔ．Ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｉｃ Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ ３８，２８０－２８６．
Ｎａｋａｄｅ，Ｙ．，Ｓａｋａｍｏｔｏ，Ｋ．，Ｙａｍａｕｃｈｉ，Ｔ．，Ｉｎｏｕｅ，Ｔ．，Ｋｏｂａｙａｓｈｉ，Ｙ．，Ｙａｍａｍｏｔｏ，Ｔ．，Ｉｓｈｉｉ，Ｎ．，Ｏｈａｓｈｉ，Ｔ．，Ｓｕｍｉｄａ，Ｙ．，Ｉｔｏ，Ｋ．，ｅｔ ａｌ．（２０１７）．Ｃｏｎｏｐｈｙｌｌｉｎｅ ｉｎｈｉｂｉｔｓ ｎｏｎ－ａｌｃｏｈｏｌｉｃ ｓｔｅａｔｏｈｅｐａｔｉｔｉｓ ｉｎ ｍｉｃｅ．ＰｌｏＳ Ｏｎｅ １２．
Ｎｅｅｓｓ，Ｄ．，Ｂｅｋ，Ｓ．，Ｅｎｇｅｌｓｂｙ，Ｈ．，Ｇａｌｌｅｇｏ，Ｓ．Ｆ．，ａｎｄ Ｆａｅｒｇｅｍａｎ，Ｎ．Ｊ．（２０１５）．Ｌｏｎｇ－ｃｈａｉｎ ａｃｙｌ－ＣｏＡ ｅｓｔｅｒｓ ｉｎ ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ ａｎｄ ｓｉｇｎａｌｉｎｇ：Ｒｏｌｅ ｏｆ ａｃｙｌ－ＣｏＡ ｂｉｎｄｉｎｇ ｐｒｏｔｅｉｎｓ．Ｐｒｏｇｒｅｓｓ ｉｎ Ｌｉｐｉｄ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ５９，１－２５．
Ｎｅｅｓｓ，Ｄ．，Ｋｒｕｓｅ，Ｖ．，Ｍａｒｃｈｅｒ，Ａ．Ｂ．，Ｗａｅｄｅ，Ｍ．Ｒ．，Ｖｉｓｔｉｓｅｎ，Ｊ．，Ｍｏｌｌｅｒ，Ｐ．Ｍ．，Ｐｅｔｅｒｓｅｎ，Ｒ．，Ｂｒｅｗｅｒ，Ｊ．Ｒ．，Ｍａ，Ｔ．，Ｃｏｌｌｅｌｕｏｒｉ，Ｇ．，ｅｔ ａｌ．（２０２１）．Ｅｐｉｄｅｒｍａｌ Ａｃｙｌ－ＣｏＡ－ｂｉｎｄｉｎｇ ｐｒｏｔｅｉｎ ｉｓ ｉｎｄｉｓｐｅｎｓａｂｌｅ ｆｏｒ ｓｙｓｔｅｍｉｃ ｅｎｅｒｇｙ ｈｏｍｅｏｓｔａｓｉｓ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ ４４．
Ｐｏｗｅｌｌ，Ｅ．Ｅ．，Ｗｏｎｇ，Ｖ．Ｗ．Ｓ．，ａｎｄ Ｒｉｎｅｌｌａ，Ｍ．（２０２１）．Ｎｏｎ－ａｌｃｏｈｏｌｉｃ ｆａｔｔｙ ｌｉｖｅｒ ｄｉｓｅａｓｅ．Ｌａｎｃｅｔ（Ｌｏｎｄｏｎ，Ｅｎｇｌａｎｄ）３９７，２２１２－２２２４．
Ｐｙｏ，Ｊ．Ｏ．，Ｙｏｏ，Ｓ．Ｍ．，Ａｈｎ，Ｈ．Ｈ．，Ｎａｈ，Ｊ．，Ｈｏｎｇ，Ｓ．Ｈ．，Ｋａｍ，Ｔ．Ｉ．，Ｊｕｎｇ，Ｓ．，ａｎｄ Ｊｕｎｇ，Ｙ．Ｋ．（２０１３）．Ｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ａｔｇ５ ｉｎ ｍｉｃｅ ａｃｔｉｖａｔｅｓ ａｕｔｏｐｈａｇｙ ａｎｄ ｅｘｔｅｎｄｓ ｌｉｆｅｓｐａｎ．Ｎａｔｕｒｅ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ ４．
Ｒａｃａｎｅｌｌｉ，Ａ．Ｃ．，Ｃｈｏｉ，Ａ．Ｍ．Ｋ．，ａｎｄ Ｃｈｏｉ，Ｍ．Ｅ．（２０２０）．Ａｕｔｏｐｈａｇｙ ｉｎ ｃｈｒｏｎｉｃ ｌｕｎｇ ｄｉｓｅａｓｅ．Ｐｒｏｇｒｅｓｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ １７２，１３５－１５６．
Ｓｃｈｌａｅｐｆｅｒ，Ｉ．Ｒ．，ａｎｄ Ｊｏｓｈｉ，Ｍ．（２０２０）．ＣＰＴ１Ａ－ｍｅｄｉａｔｅｄ Ｆａｔ Ｏｘｉｄａｔｉｏｎ，Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ，ａｎｄ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ Ｐｏｔｅｎｔｉａｌ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ １６１．
Ｓｃｈｗａｒｔｚ，Ｌ．Ｍ．（２０２１）．Ａｕｔｏｐｈａｇｉｃ Ｃｅｌｌ Ｄｅａｔｈ Ｄｕｒｉｎｇ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ － Ａｎｃｉｅｎｔ ａｎｄ Ｍｙｓｔｅｒｉｏｕｓ．Ｆｒｏｎｔｉｅｒｓ ｉｎ Ｃｅｌｌ ａｎｄ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ ９．
Ｓｃｉａｒｒｅｔｔａ，Ｓ．，Ｍａｅｊｉｍａ，Ｙ．，Ｚａｂｌｏｃｋｉ，Ｄ．，ａｎｄ Ｓａｄｏｓｈｉｍａ，Ｊ．（２０１８ａ）．Ｔｈｅ Ｒｏｌｅ ｏｆ Ａｕｔｏｐｈａｇｙ ｉｎ ｔｈｅ Ｈｅａｒｔ．Ａｎｎｕａｌ Ｒｅｖｉｅｗ ｏｆ Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ ８０，１－２６．
Ｓｃｉａｒｒｅｔｔａ，Ｓ．，Ｙｅｅ，Ｄ．，Ｎａｇａｒａｊａｎ，Ｎ．，Ｂｉａｎｃｈｉ，Ｆ．，Ｓａｉｔｏ，Ｔ．，Ｖａｌｅｎｔｉ，Ｖ．，Ｔｏｎｇ，Ｍ．，ｄｅｌ Ｒｅ，Ｄ．Ｐ．，Ｖｅｃｃｈｉｏｎｅ，Ｃ．，Ｓｃｈｉｒｏｎｅ，Ｌ．，ｅｔ ａｌ．（２０１８ｂ）．Ｔｒｅｈａｌｏｓｅ－Ｉｎｄｕｃｅｄ Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｏｆ Ａｕｔｏｐｈａｇｙ Ｉｍｐｒｏｖｅｓ Ｃａｒｄｉａｃ Ｒｅｍｏｄｅｌｉｎｇ Ａｆｔｅｒ Ｍｙｏｃａｒｄｉａｌ Ｉｎｆａｒｃｔｉｏｎ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｔｈｅ Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｃａｒｄｉｏｌｏｇｙ ７１，１９９９－２０１０．
Ｓｅｒｖｉｄｄｉｏ，Ｇ．，Ｇｉｕｄｅｔｔｉ，Ａ．Ｍ．，Ｂｅｌｌａｎｔｉ，Ｆ．，Ｐｒｉｏｒｅ，Ｐ．，Ｒｏｌｌｏ，Ｔ．，Ｔａｍｂｏｒｒａ，Ｒ．，Ｓｉｃｕｌｅｌｌａ，Ｌ．，Ｖｅｎｄｅｍｉａｌｅ，Ｇ．，Ａｌｔｏｍａｒｅ，Ｅ．，ａｎｄ Ｇｎｏｎｉ，Ｇ．ｖ．（２０１１）．Ｏｘｉｄａｔｉｏｎ ｏｆ Ｈｅｐａｔｉｃ Ｃａｒｎｉｔｉｎｅ Ｐａｌｍｉｔｏｙｌ Ｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ－Ｉ（ＣＰＴ－Ｉ）Ｉｍｐａｉｒｓ Ｆａｔｔｙ Ａｃｉｄ Ｂｅｔａ－Ｏｘｉｄａｔｉｏｎ ｉｎ Ｒａｔｓ Ｆｅｄ ａ Ｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ－Ｃｈｏｌｉｎｅ Ｄｅｆｉｃｉｅｎｔ Ｄｉｅｔ．ＰＬｏＳ ＯＮＥ ６，２４０８４．
Ｓｈａｍａｌｎａｓａｂ，Ｍ．，Ｄｈａｏｕｉ，Ｍ．，Ｔｈｏｎｄａｍａｌ，Ｍ．，Ｈａｒｖａｌｄ，Ｅ．Ｂ．，Ｆａｅｒｇｅｍａｎ，Ｎ．Ｊ．，Ａｇｕｉｌａｎｉｕ，Ｈ．，ａｎｄ Ｆａｂｒｉｚｉｏ，Ｐ．（２０１７）．ＨＩＦ－１－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｌｉｆｅｓｐａｎ ｉｎ Ｃａｅｎｏｒｈａｂｄｉｔｉｓ ｅｌｅｇａｎｓ ｂｙ ｔｈｅ ａｃｙｌ－ＣｏＡ－ｂｉｎｄｉｎｇ ｐｒｏｔｅｉｎ ＭＡＡ－１．Ａｇｉｎｇ ９，１７４５－１７６９．
Ｓｈａｒｍａ，Ｐ．，ａｎｄ Ａｌｌｉｓｏｎ，Ｊ．Ｐ．（２０１５）．Ｉｍｍｕｎｅ ｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔ ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ｉｎ ｃａｎｃｅｒ ｔｈｅｒａｐｙ：ｔｏｗａｒｄ ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ ｗｉｔｈ ｃｕｒａｔｉｖｅ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ．Ｃｅｌｌ １６１，２０５－２１４．
Ｓｈｅｎ，Ｙ．，Ｍａｌｉｋ，Ｓ．Ａ．，Ａｍｉｒ，Ｍ．，Ｋｕｍａｒ，Ｐ．，Ｃｉｎｇｏｌａｎｉ，Ｆ．，Ｗｅｎ，Ｊ．，Ｌｉｕ，Ｙ．，Ｚｈａｏ，Ｅ．，Ｆａｒｒｉｓ，Ａ．Ｂ．，Ｒａｅｍａｎ，Ｒ．，ｅｔ ａｌ．（２０２０）．Ｄｅｃｒｅａｓｅｄ Ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅ Ａｕｔｏｐｈａｇｙ Ｌｅａｄｓ ｔｏ Ｓｙｎｅｒｇｉｓｔｉｃ ＩＬ－１β ａｎｄ ＴＮＦ Ｍｏｕｓｅ Ｌｉｖｅｒ Ｉｎｊｕｒｙ ａｎｄ Ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ．Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ（Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ，Ｍｄ．）７２，５９５－６０８．
Ｓｈｉｒａｋａｂｅ，Ａ．，Ｆｒｉｔｚｋｙ，Ｌ．，Ｓａｉｔｏ，Ｔ．，Ｚｈａｉ，Ｐ．，Ｍｉｙａｍｏｔｏ，Ｓ．，Ｇｕｓｔａｆｓｓｏｎ，Ａ．Ｂ．，Ｋｉｔｓｉｓ，Ｒ．Ｎ．，ａｎｄ Ｓａｄｏｓｈｉｍａ，Ｊ．（２０１６）．Ｅｖａｌｕａｔｉｎｇ ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ ａｕｔｏｐｈａｇｙ ｉｎ ｔｈｅ ｍｏｕｓｅ ｈｅａｒｔ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ａｎｄ Ｃｅｌｌｕｌａｒ Ｃａｒｄｉｏｌｏｇｙ ９２，１３４－１３９．
Ｓｕｚｕｋｉ，Ｓ．，Ｔｏｌｅｄｏ－Ｐｅｒｅｙｒａ，Ｌ．Ｈ．，Ｒｏｄｒｉｇｕｅｚ，Ｆ．Ｊ．，ａｎｄ Ｃｅｊａｌｖｏ，Ｄ．（１９９３）．Ｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌ ｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ ａｓ ａｎ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｆａｃｔｏｒ ｉｎ ｌｉｖｅｒ ｉｓｃｈｅｍｉａ ａｎｄ ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ ｉｎｊｕｒｙ．Ｍｏｄｕｌａｔｉｎｇ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ＦＫ５０６ ａｎｄ ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎｅ．Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ ５５，１２６５－１２７１．
Ｔａｇ，Ｃ．Ｇ．，Ｓａｕｅｒ－Ｌｅｈｎｅｎ，Ｓ．，Ｗｅｉｓｋｉｒｃｈｅｎ，Ｓ．，Ｂｏｒｋｈａｍ－Ｋａｍｐｈｏｒｓｔ，Ｅ．，Ｔｏｌｂａ，Ｒ．Ｈ．，Ｔａｃｋｅ，Ｆ．，ａｎｄ Ｗｅｉｓｋｉｒｃｈｅｎ，Ｒ．（２０１５）．Ｂｉｌｅ Ｄｕｃｔ Ｌｉｇａｔｉｏｎ ｉｎ Ｍｉｃｅ：Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ Ｌｉｖｅｒ Ｉｎｊｕｒｙ ａｎｄ Ｆｉｂｒｏｓｉｓ ｂｙ Ｏｂｓｔｒｕｃｔｉｖｅ Ｃｈｏｌｅｓｔａｓｉｓ．ＪｏＶＥ（Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｖｉｓｕａｌｉｚｅｄ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ）９６，ｅ５２４３８．
Ｔａｖｅｒｎａｒａｋｉｓ，Ｎ．，Ｐａｓｐａｒａｋｉ，Ａ．，Ｔａｓｄｅｍｉｒ，Ｅ．，Ｍａｉｕｒｉ，Ｍ．Ｃ．，ａｎｄ Ｋｒｏｅｍｅｒ，Ｇ．（２００８）．Ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｐ５３ ｏｎ ｗｈｏｌｅ ｏｒｇａｎｉｓｍ ｌｏｎｇｅｖｉｔｙ ａｒｅ ｍｅｄｉａｔｅｄ ｂｙ ａｕｔｏｐｈａｇｙ．Ａｕｔｏｐｈａｇｙ ４，８７０－８７３．
Ｔｈｏｍａｓ，Ａ．Ｍ．，Ａｓｎｉｃａｒ，Ｆ．，Ｋｒｏｅｍｅｒ，Ｇ．，ａｎｄ Ｓｅｇａｔａ，Ｎ．（２０２１）．Ｇｅｎｅｓ Ｅｎｃｏｄｉｎｇ Ｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ａｃｙｌ Ｃｏｅｎｚｙｍｅ Ａ Ｂｉｎｄｉｎｇ Ｐｒｏｔｅｉｎ／Ｄｉａｚｅｐａｍ－Ｂｉｎｄｉｎｇ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ Ｏｒｔｈｏｌｏｇｓ Ａｒｅ Ｒａｒｅ ｉｎ ｔｈｅ Ｈｕｍａｎ Ｇｕｔ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｍｅ ａｎｄ Ｓｈｏｗ Ｎｏ Ｌｉｎｋｓ ｔｏ Ｏｂｅｓｉｔｙ．Ａｐｐｌｉｅｄ ａｎｄ Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ ８７，１－１１．
Ｔｏｎｇ，Ｍ．，Ｓａｉｔｏ，Ｔ．，Ｚｈａｉ，Ｐ．，Ｏｋａ，Ｓ．Ｉ．，Ｍｉｚｕｓｈｉｍａ，Ｗ．，Ｎａｋａｍｕｒａ，Ｍ．，Ｉｋｅｄａ，Ｓ．，Ｓｈｉｒａｋａｂｅ，Ａ．，ａｎｄ Ｓａｄｏｓｈｉｍａ，Ｊ．（２０１９）．Ｍｉｔｏｐｈａｇｙ Ｉｓ Ｅｓｓｅｎｔｉａｌ ｆｏｒ Ｍａｉｎｔａｉｎｉｎｇ Ｃａｒｄｉａｃ Ｆｕｎｃｔｉｏｎ Ｄｕｒｉｎｇ Ｈｉｇｈ Ｆａｔ Ｄｉｅｔ－Ｉｎｄｕｃｅｄ Ｄｉａｂｅｔｉｃ Ｃａｒｄｉｏｍｙｏｐａｔｈｙ．Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ Ｒｅｓｅａｒｃｈ １２４，１３６０－１３７１．
Ｖｅｎｋａｔｅｓｈ，Ｓ．，Ｌｉ，Ｍ．，Ｓａｉｔｏ，Ｔ．，Ｔｏｎｇ，Ｍ．，Ｒａｓｈｅｄ，Ｅ．，Ｍａｒｅｅｄｕ，Ｓ．，Ｚｈａｉ，Ｐ．，Ｂａｒｃｅｎａ，Ｃ．，Ｌｏｐｅｚ－Ｏｔｉｎ，Ｃ．，Ｙｅｈｉａ，Ｇ．，ｅｔ ａｌ．（２０１９）．Ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ ＬｏｎＰ１ ｐｒｏｔｅｃｔｓ ｃａｒｄｉｏｍｙｏｃｙｔｅｓ ｆｒｏｍ ｉｓｃｈｅｍｉａ／ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ ｉｎｊｕｒｙ ｉｎ ｖｉｖｏ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ａｎｄ Ｃｅｌｌｕｌａｒ Ｃａｒｄｉｏｌｏｇｙ １２８，３８－５０．
Ｗａｎｇ，Ｊ．，Ｖａｓａｉｋａｒ，Ｓ．，Ｓｈｉ，Ｚ．，Ｇｒｅｅｒ，Ｍ．，ａｎｄ Ｚｈａｎｇ，Ｂ．（２０１７）．ＷｅｂＧｅｓｔａｌｔ ２０１７：ａ ｍｏｒｅ ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ，ｐｏｗｅｒｆｕｌ，ｆｌｅｘｉｂｌｅ ａｎｄ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｖｅ ｇｅｎｅ ｓｅｔ ｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔ ａｎａｌｙｓｉｓ ｔｏｏｌｋｉｔ．Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ４５，Ｗ１３０－Ｗ１３７．
Ｗｕｌｆｆ，Ｐ．，Ｇｏｅｔｚ，Ｔ．，Ｌｅｐｐａ，Ｅ．，Ｌｉｎｄｅｎ，Ａ．Ｍ．，Ｒｅｎｚｉ，Ｍ．，Ｓｗｉｎｎｙ，Ｊ．Ｄ．，Ｖｅｋｏｖｉｓｃｈｅｖａ，Ｏ．Ｙ．，Ｓｉｅｇｈａｒｔ，Ｗ．，Ｓｏｍｏｇｙｉ，Ｐ．，Ｋｏｒｐｉ，Ｅ．Ｒ．，ｅｔ ａｌ．（２００７）．Ｆｒｏｍ ｓｙｎａｐｓｅ ｔｏ ｂｅｈａｖｉｏｒ：ｒａｐｉｄ ｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｄｅｆｉｎｅｄ ｎｅｕｒｏｎａｌ ｔｙｐｅｓ ｗｉｔｈ ｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄ ＧＡＢＡＡ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ．Ｎａｔｕｒｅ Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ １０，９２３－９２９．
Ｘｉａｏ，Ｓ．，ａｎｄ Ｃｈｙｅ，Ｍ．Ｌ．（２０１０）．Ｔｈｅ Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ ｔｈａｌｉａｎａ ＡＣＢＰ３ ｒｅｇｕｌａｔｅｓ ｌｅａｆ ｓｅｎｅｓｃｅｎｃｅ ｂｙ ｍｏｄｕｌａｔｉｎｇ ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｉｄ ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ ａｎｄ ＡＴＧ８ ｓｔａｂｉｌｉｔｙ．Ａｕｔｏｐｈａｇｙ ６．
Ｚｈａｏ，Ｊ．，Ｐａｒｋ，Ｓ．，Ｋｉｍ，Ｊ．Ｗ．，Ｑｉ，Ｊ．，Ｚｈｏｕ，Ｚ．，Ｌｉｍ，Ｃ．Ｗ．，ａｎｄ Ｋｉｍ，Ｂ．（２０２０）．Ｎｉｃｏｔｉｎｅ ａｔｔｅｎｕａｔｅｓ ｃｏｎｃａｎａｖａｌｉｎ Ａ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｌｉｖｅｒ ｉｎｊｕｒｙ ｉｎ ｍｉｃｅ ｂｙ ｒｅｇｕｌａｔｉｎｇ ｔｈｅ α７－ｎｉｃｏｔｉｎｉｃ ａｃｅｔｙｌｃｈｏｌｉｎｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｉｎ Ｋｕｐｆｆｅｒ ｃｅｌｌｓ．Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｍｍｕｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ７８．

【図1A】

【図1B】

【図1C】

【図2A】

【図2B】

【図2C】

【図2D】

【図2E】

【図2F】

【図3A】

【図3B】

【図3C】

【図3D】

【図3E】

【図4A】

【図4B】

【図4C】

【図4D】

【図5A】

【図5B】

【図6A】

【図6B】

【図7】

【図8A】

【図8B】

【図8C】

【国際調査報告】