特表 2017-505789 リンパ脈管筋腫症の治療のためのラパマイシン

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】特表2017-505789(P2017-505789A)

(43)【公表日】2017年2月23日

(54)【発明の名称】リンパ脈管筋腫症の治療のためのラパマイシン

(51)【国際特許分類】

   A61K 31/436 20060101AFI20170203BHJP

   A61K 9/12 20060101ALI20170203BHJP

   A61K 9/14 20060101ALI20170203BHJP

   A61K 47/26 20060101ALI20170203BHJP

   A61K 47/36 20060101ALI20170203BHJP

   A61K 47/10 20060101ALI20170203BHJP

   A61K 47/50 20170101ALI20170203BHJP

   A61K 47/24 20060101ALI20170203BHJP

   A61K 47/34 20170101ALI20170203BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20170203BHJP

   A61K 9/50 20060101ALI20170203BHJP

   A61K 45/00 20060101ALI20170203BHJP

   A61P 11/00 20060101ALI20170203BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20170203BHJP

   A61K 31/4196 20060101ALI20170203BHJP

   A61K 31/138 20060101ALI20170203BHJP

   A61K 31/366 20060101ALI20170203BHJP

   A61K 31/506 20060101ALI20170203BHJP

   A61K 31/517 20060101ALI20170203BHJP

   A61K 47/12 20060101ALI20170203BHJP

【ＦＩ】

   A61K31/436

   A61K9/12

   A61K9/14

   A61K47/26

   A61K47/36

   A61K47/10

   A61K47/48

   A61K47/24

   A61K47/34

   A61P43/00 111

   A61K9/50

   A61K45/00

   A61P11/00

   A61P35/00

   A61K31/4196

   A61K31/138

   A61K31/366

   A61K31/506

   A61P43/00 121

   A61K31/517

   A61K47/12

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

【全頁数】64

(21)【出願番号】特願2016-551215(P2016-551215)

(86)(22)【出願日】2015年2月10日

(85)【翻訳文提出日】2016年10月7日

(86)【国際出願番号】US2015015266

(87)【国際公開番号】WO2015123219

(87)【国際公開日】20150820

(31)【優先権主張番号】61/938,282

(32)【優先日】2014年2月11日

(33)【優先権主張国】US

(31)【優先権主張番号】62/060,970

(32)【優先日】2014年10月7日

(33)【優先権主張国】US

(81)【指定国】 AP(BW,GH,GM,KE,LR,LS,MW,MZ,NA,RW,SD,SL,ST,SZ,TZ,UG,ZM,ZW),EA(AM,AZ,BY,KG,KZ,RU,TJ,TM),EP(AL,AT,BE,BG,CH,CY,CZ,DE,DK,EE,ES,FI,FR,GB,GR,HR,HU,IE,IS,IT,LT,LU,LV,MC,MK,MT,NL,NO,PL,PT,RO,RS,SE,SI,SK,SM,TR),OA(BF,BJ,CF,CG,CI,CM,GA,GN,GQ,GW,KM,ML,MR,NE,SN,TD,TG),AE,AG,AL,AM,AO,AT,AU,AZ,BA,BB,BG,BH,BN,BR,BW,BY,BZ,CA,CH,CL,CN,CO,CR,CU,CZ,DE,DK,DM,DO,DZ,EC,EE,EG,ES,FI,GB,GD,GE,GH,GM,GT,HN,HR,HU,ID,IL,IN,IR,IS,JP,KE,KG,KN,KP,KR,KZ,LA,LC,LK,LR,LS,LU,LY,MA,MD,ME,MG,MK,MN,MW,MX,MY,MZ,NA,NG,NI,NO,NZ,OM,PA,PE,PG,PH,PL,PT,QA,RO,RS,RU,RW,SA,SC,SD,SE,SG,SK,SL,SM,ST,SV,SY,TH,TJ,TM,TN,TR,TT,TZ,UA,UG,US

(71)【出願人】

【識別番号】516104157

【氏名又は名称】ラム・セラピューティクス，インコーポレーテッド

(74)【代理人】

【識別番号】100140109

【弁理士】

【氏名又は名称】小野 新次郎

(74)【代理人】

【識別番号】100075270

【弁理士】

【氏名又は名称】小林 泰

(74)【代理人】

【識別番号】100101373

【弁理士】

【氏名又は名称】竹内 茂雄

(74)【代理人】

【識別番号】100118902

【弁理士】

【氏名又は名称】山本 修

(74)【代理人】

【識別番号】100128750

【弁理士】

【氏名又は名称】廣瀬 しのぶ

(72)【発明者】

【氏名】アーマー，トーマス

(72)【発明者】

【氏名】メルヴィン，ローレンス・エス

(72)【発明者】

【氏名】ロスバーグ，ジョナサン・エム

(72)【発明者】

【氏名】リチェンステイン，ヘンリ

【テーマコード（参考）】

4C076

4C084

4C086

4C206

【Ｆターム（参考）】

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4C206ZC75

(57)【要約】

本発明は、リンパ脈管筋腫症の治療を必要とするヒト対象におけるリンパ脈管筋腫症を治療するための方法および組成物に関する。この方法は、対象に吸入を介してラパマイシンまたはそのプロドラッグもしくは誘導体（類似物を含む）を含むエアロゾル組成物を投与する工程を含む。
【選択図】なし

【特許請求の範囲】

【請求項1】

肺送達のための乾燥粉末の形態の医薬エアロゾル配合物であって、一定量のラパマイシン組成物のマイクロ粒子、担体の粒子、および１種または複数の任意選択の賦形剤を含み、ここで当該配合物は治療量のラパマイシン組成物を肺に送達するのに有効である、前記医薬エアロゾル配合物。

【請求項2】

治療量が送達後少なくとも１２または２４時間持続する、請求項１に記載のエアロゾル配合物。

【請求項3】

送達の１２または２４時間後のラパマイシン組成物の肺対血中濃度比が、少なくとも１００、少なくとも２５０、または少なくとも５００である、請求項２に記載のエアロゾル配合物。

【請求項4】

配合物中のラパマイシン組成物の量が、５から５００マイクログラム、１０から２５０マイクログラム、１５から１５０マイクログラム、または２０から１００マイクログラムである、請求項１から３のいずれか一項に記載のエアロゾル配合物。

【請求項5】

エアロゾル配合物中のラパマイシン組成物の量が、組成物の総重量に対して約０．１％から２０％（ｗ／ｗ）または約０．２５％から２％（ｗ／ｗ）である、請求項１から３のいずれか一項に記載のエアロゾル配合物。

【請求項6】

エアロゾル配合物中のラパマイシン組成物の量が、１ｎｇ／ｇから１マイクログラム（μｇ）／ｇの肺組織中薬物濃度をもたらすのに有効な量である、請求項１から５のいずれか一項に記載のエアロゾル配合物。

【請求項7】

肺組織中薬物濃度が、約５ｎｇ／ｇ、約１０ｎｇ／ｇ、約１５ｎｇ／ｇ、約２０ｎｇ／ｇ、約２５ｎｇ／ｇ、約５０ｎｇ／ｇ、約１００ｎｇ／ｇ、または約２００ｎｇ／ｇである、請求項６に記載のエアロゾル配合物。

【請求項8】

エアロゾル配合物中のラパマイシン組成物の量が、対象において、５ｎｇ／ｍｌ未満、２ｎｇ／ｍｌ未満、１ｎｇ／ｍｌ未満、０．５ｎｇ／ｍｌ未満、または０．２５ｎｇ／ｍｌ未満の血中トラフレベルをもたらす量である、請求項１から７のいずれか一項に記載のエアロゾル配合物。

【請求項9】

マイクロ粒子が、０．１から１０ミクロンの直径および１から５ミクロンの平均直径を有する粒子からなる、請求項１から８のいずれか一項に記載のエアロゾル配合物。

【請求項10】

粒子が、１．５から４ミクロン、１．５から３．５ミクロン、または２から３ミクロンの平均直径を有する、請求項９に記載のエアロゾル配合物。

【請求項11】

担体が、アラビノース、グルコース、フルクトース、リボース、マンノース、スクロース、トレハロース、ラクトース、マルトース、デンプン、デキストラン、マンニトール、リジン、ロイシン、イソロイシン、ジパルミトイル（dipalmityl）ホスファチジルコリン、レシチン、ポリ乳酸、ポリ（乳酸−ｃｏ−グルタミン酸）、およびキシリトール、または前述のいずれかの混合物からなる群から選択される、請求項１から１０のいずれか一項に記載のエアロゾル配合物。

【請求項12】

担体の粒子が、１から２００ミクロン、３０から１００ミクロン、または１０ミクロン未満の範囲の直径を有する、請求項１から１１のいずれか一項に記載のエアロゾル配合物。

【請求項13】

担体が、２種の異なる担体、第１の担体および第２の担体のブレンドを含むか、またはそれからなる、請求項１から１２のいずれか一項に記載のエアロゾル配合物。

【請求項14】

担体が、２種の異なるラクトース担体のブレンドからなる、請求項１３に記載のエアロゾル配合物。

【請求項15】

第１の担体が、約３０〜１００ミクロンの範囲の直径を有する粒子からなり、第２の担体が、１０ミクロン未満の直径を有する粒子からなる、請求項１３または１４に記載のエアロゾル配合物。

【請求項16】

２種の異なる担体の比が、９５〜９８から２〜５の範囲である、請求項１５に記載のエアロゾル配合物。

【請求項17】

粉末中の薬物対担体比が、０．５％から２％（ｗ／ｗ）である、請求項１から１６のいずれか一項に記載のエアロゾル配合物。

【請求項18】

粉末中の薬物対担体比が１％（ｗ／ｗ）である、請求項１７に記載のエアロゾル配合物。

【請求項19】

１種または複数の任意選択の賦形剤が存在し、リン脂質および脂肪酸の金属塩から選択される、請求項１から１８のいずれか一項に記載のエアロゾル配合物。

【請求項20】

リン脂質が、ジパルミトイル（dipalmityl）ホスファチジルコリンおよびレシチンから選択される、請求項１９に記載のエアロゾル配合物。

【請求項21】

脂肪酸の金属塩が、ステアリン酸マグネシウムである、請求項２０に記載のエアロゾル配合物。

【請求項22】

任意選択の１種または複数の賦形剤が、０．０１％から０．５％の範囲の賦形剤対大きな担体粒子の重量比で担体粒子上にコーティングされる、請求項１９から２１のいずれか一項に記載のエアロゾル配合物。

【請求項23】

薬物の量が、ｍＴＯＲＣ１の生物学的活性を阻害するのに有効な量である、請求項１から２２のいずれか一項に記載のエアロゾル配合物。

【請求項24】

薬物の量が、Ｓ６タンパク質のリン酸化を阻害するのに有効な量である、請求項１から２２のいずれか一項に記載のエアロゾル配合物。

【請求項25】

薬物の量が、対象におけるリンパ脈管筋腫症（ＬＡＭ）を治療するのに有効な量である、請求項１から２２のいずれか一項に記載のエアロゾル配合物。

【請求項26】

薬物の量が、肺に送達される５から５００マイクログラムの呼吸用量を達成するのに有効な量である、請求項１から２５のいずれか一項に記載のエアロゾル配合物。

【請求項27】

呼吸用量が、約５、約２０、約５０、約１００または約２５０マイクログラムである、請求項２６に記載のエアロゾル配合物。

【請求項28】

組成物が、２０％を超える微粒子画分（ＦＰＦ）を有し、対応する微粒子用量（ＦＰＤ）が、１から１２ヶ月または１から３６ヶ月保存後に５マイクログラムから２ミリグラムの範囲、好ましくは０．５ミリグラム未満である、請求項１から２７のいずれか一項に記載のエアロゾル配合物。

【請求項29】

ラパマイシン組成物がシロリムスである、請求項１から２８のいずれか一項に記載のエアロゾル配合物。

【請求項30】

１種または複数の追加の治療剤をさらに含む、請求項１から２９のいずれか一項に記載のエアロゾル配合物。

【請求項31】

１種または複数の追加の治療剤が、エストロゲンアンタゴニスト、スタチン、ｓｒｃ阻害剤、およびＶＥＧＦ−Ｒ阻害剤から選択される、請求項３０に記載のエアロゾル配合物。

【請求項32】

１種または複数の追加の治療剤が、レトロゾール、タモキシフェン、シンバスタチン、サラカチニブ、パゾパニブ、イマチニブ、およびそれらの組合せからなる群から選択される、請求項３１に記載のエアロゾル配合物。

【請求項33】

組成物が、努力肺活量（ＦＶＣ）および努力呼気肺活量（ＦＥＶ１）により測定される対象の肺機能を改善するのに有効な薬物の量を送達する、請求項１から３２のいずれか一項に記載のエアロゾル配合物。

【請求項34】

組成物が、放射線検査により検出可能な胸水のサイズまたは量を低減するのに有効な薬物の量を送達する、請求項１から３３のいずれか一項に記載のエアロゾル配合物。

【請求項35】

組成物が１日１回の投与の適する、請求項１から３４のいずれか一項に記載のエアロゾル配合物。

【請求項36】

薬物の水性懸濁液を調製する工程と、薬物懸濁液をマイクロ流動化にかける工程と、得られた粒子を噴霧乾燥して乾燥粉末を形成する工程とを含む、湿式研磨プロセスにより製造される、請求項１から３５のいずれか一項に記載のエアロゾル配合物。

【請求項37】

請求項１から３６のいずれか一項に記載のエアロゾル配合物を含むリンパ脈管筋腫症を治療するための単位剤形であって、ラパマイシン組成物の量が、約５から２５００マイクログラム、２０から５００マイクログラム、または５０から１５０マイクログラムである、前記単位剤形。

【請求項38】

薬物の量が約２０から１００マイクログラムである、請求項３７に記載の単位剤形。

【請求項39】

乾燥粉末吸入器デバイスにおける使用に好適なカプセル剤である、請求項３７または３８に記載の単位剤形。

【請求項40】

カプセル剤が１ｍｇから１００ｍｇの粉末を含有する、請求項３７から３９のいずれか一項に記載の単位剤形。

【請求項41】

カプセル剤が１０ｍｇから４０ｍｇの粉末を含有する、請求項４０に記載の単位剤形。

【請求項42】

カプセル剤が、ゼラチン、プラスチック、ポリマーもしくはセルロースカプセル剤であるか、またはホイル／ホイルもしくはホイル／プラスチックブリスター剤の形態である、請求項３７から４１のいずれか一項に記載の単位剤形。

【請求項43】

請求項１から３６のいずれか一項に記載のエアロゾル配合物または請求項３７から４２のいずれか一項に記載の単位剤形と、使用説明書とを含む医薬パッケージまたはキット。

【請求項44】

請求項１から３６のいずれか一項に記載のエアロゾル配合物または請求項３７から４２のいずれか一項に記載の単位剤形を含有するリザーバーを含む乾燥粉末送達デバイス。

【請求項45】

リザーバーが、デバイス内の一体型チャンバー、カプセル剤、またはブリスター剤である、請求項４４に記載の乾燥粉末送達デバイス。

【請求項46】

Ｐｌａｓｔｉａｐｅ（登録商標） ＲＳ０１ Ｍｏｄｅｌ ７、Ｐｌａｓｔｉａｐｅ（登録商標） ＲＳ００ Ｍｏｄｅｌ ８、ＸＣａｐｓ（登録商標）、Ｈａｎｄｉｈａｌｅｒ（登録商標）、Ｆｌｏｗｃａｐｓ（登録商標） ＴｗｉｎＣａｐｓ（登録商標）、およびＡｅｒｏｌｉｚｅｒ（登録商標）から選択される、請求項４４または４５に記載の乾燥粉末送達デバイス。

【請求項47】

リンパ脈管筋腫症の治療を必要とするヒト対象においてリンパ脈管筋腫症を治療するための方法であって、対象に吸入を介して請求項１から３６のいずれか一項に記載のエアロゾル配合物または請求項３７から４２のいずれか一項に記載の単位剤形を投与する工程を含む、方法。

【請求項48】

治療レジメンまたは併用療法において単位剤形のエアロゾル配合物とともに少なくとも１種の追加の薬剤を投与する工程をさらに含む、請求項４７に記載の方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

[01]本発明は、リンパ脈管筋腫症の予防および治療のための、好ましくは吸入による肺送達のためのラパマイシンを含む方法および医薬組成物に関する。

【背景技術】

【0002】

[02]リンパ脈管筋腫症（ＬＡＭ）は、結節性硬化症（ＴＳＣ）に罹患した女性の３０〜４０％が発症する多臓器疾患であり、肺に異常増殖する異常平滑筋様細胞の広範な増殖を特徴とする致死性の高い疾患である。これらの細胞（ＬＡＭ細胞と呼ばれる）の増殖は、肺における嚢胞および体軸リンパ管（ａｘｉａｌ ｌｙｍｐｈａｔｉｃｓ）における液で満たされた嚢胞構造（リンパ脈管筋腫症と呼ばれる）の形成をもたらす。結果は、肺実質の進行性嚢胞性破壊、リンパ管、気道の閉塞、および進行性呼吸不全である。加えて、ＬＡＭ細胞は腫瘍を形成しうる。これらは一般に、血管筋脂肪腫と呼ばれる緩慢に成長する過誤腫である。腎血管筋脂肪腫は、ＬＡＭ患者において腎不全をもたらしうる。ＬＡＭ細胞の異常増殖は、結節性硬化症腫瘍抑制遺伝子、ＴＳＣ１またはＴＳＣ２のうちの１つにおける不活性化変異により、少なくとも部分的に引き起こされる。ＴＳＣ遺伝子は、ラパマイシンの哺乳類標的（ｍＴＯＲ）の負の調節因子である。ｍＴＯＲ経路は、細胞増殖、代謝、および細胞生存にとって重要な制御点である。ＴＳＣ遺伝子の不活性化の結果として、ＬＡＭ細胞は、ｍＴＯＲおよびｍＴＯＲ経路における多くの他のキナーゼ、たとえばＡｋｔ、およびＳ６Ｋの構成的活性化を示す。

【0003】

[03]ＬＡＭは一般に、出産年齢の女性に発症するが、男性にも発症する。それは、ＴＳＣを有する女性において最もよく見られる一方で、ＴＳＣの臨床症状を有しない人にも、ＴＳＣ１またはＴＳＣ２腫瘍抑制遺伝子における生殖細胞系列変異を有しない人と並んで発症する。これらの症例は、散発性ＬＡＭと呼ばれる。したがって、ＬＡＭは、散発性、非遺伝性の形態として、結節性硬化症と関連するものと並んで発症しうる。

【0004】

[04]ＬＡＭは緩徐に進行しうるとはいえ、それは最終的には、呼吸不全および死をもたらす。症状の発症１０年後に、患者の５５％が息切れをし、２０％が酸素吸入し、１０％が死亡している。たとえば、Ｊｏｈｎｓｏｎ ら ２００４ Ｔｈｏｒａｘ． Ｓｕｒｖｉｖａｌ ａｎｄ ｄｉｓｅａｓｅ ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ＵＫ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｌｙｍｐｈａｎｇｉｏｌｅｉｏｍｙｏｍａｔｏｓｉｓを参照のこと。現在認可されているＬＡＭの治療または予防のための薬物は存在しない。主要な治療の選択肢には、経口ラパマイシン（シロリムス、臓器拒絶反応の予防および腎移植用にＦＤＡに認可されている、下を参照のこと）の適応外使用、または経口エベロリムスの適応外使用が含まれる。

【0005】

[05]ラパマイシンは、ストレプトマイセス・ハイグロスコピクス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｈｙｇｒｏｓｃｏｐｉｃｕｓ）により生成される大環状トリエン抗生物質である。たとえば、米国特許第３，９２９，９９２号を参照のこと。ラパマイシンは、ｍＴＯＲの阻害剤である。ラパマイシンの免疫抑制および抗炎症特性は、最初は、移植分野および自己免疫疾患の治療におけるその使用が示唆された。たとえば、それは、アルブミンアレルギー誘発に反応する液性（ＩｇＥ様）抗体の形成を防止し、マウスＴ細胞活性化を阻害し、組織不適合性げっ歯類動物における臓器移植片の生存期間を延長することが示された。自己免疫疾患のげっ歯類動物モデルにおいて、それは、全身性エリテマトーデス、コラーゲン誘導関節炎、自己免疫性Ｉ型糖尿病、自己免疫性心筋炎、実験的アレルギー性脳脊髄炎、移植片対宿主病、および自己免疫性網膜ぶどう膜炎に伴う免疫媒介性事象を抑制する。

【0006】

[06]ラパマイシンはまた、そのジェネリック医薬品名で、シロリムスとも呼ばれる（たとえば、ＡＮＤＡ ＃２０１５７８、Ｄｒ． Ｒｅｄｄｙｓ Ｌａｂｓ Ｌｔｄ．による、２０１３年５月２８日認可を参照のこと）。シロリムスは、臓器拒絶反応の予防および腎移植用にＦＤＡに認可され、Ｗｙｅｔｈ（Ｐｆｉｚｅｒ）によりＲＡＰＡＭＵＮＥの商品名で米国で市販されている。それは、経口液剤（１ｍｇ／ｍｌ）または錠剤（複数の強度）の形態である。Ｗｙｅｔｈ（Ｐｆｉｚｅｒ）はまた、ＴＯＲＩＳＥＬ（テムシロリムス）の商品名で、進行性腎細胞癌の治療用の誘導体を市販し、これは静脈内投与される。テムシロリムスは、シロリムスの水溶性プロドラッグである。Ｊｏｈｎｓｏｎ＆Ｊｏｈｎｓｏｎの一部門であるＣｏｒｄｉｓは、シロリムス溶出冠動脈ステントをＣＹＰＨＥＲの商品名で市販する。この文脈において、シロリムスの抗増殖性効果は、バルーン血管形成後の冠動脈における再狭窄を防止する。Ｂｅｒｇ ら（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）のＵＳ ２０１０／０３０５１５０は、神経皮膚疾患、たとえば結節性硬化症を含むＴＳＣにより媒介されるもの、ならびに神経線維腫症１型（ＮＦ−１）により媒介されるものを治療および予防するためのラパマイシン誘導体を記載する。ラパマイシンおよびその誘導体は、Ｎｉｓｈｉｍｕｒａ，Ｔ． ら （２００１） Ａｍ． Ｊ． Ｒｅｓｐｉｒ． Ｃｒｉｔ． Ｃａｒｅ Ｍｅｄ． １６３：４９８−５０２ならびに米国特許第６，３８４，０４６号および第６，２５８，８２３号にさらに記載されている。

【0007】

[07]臨床的に認可された文脈におけるラパマイシンの使用は、複数の既知の副作用、たとえば肺毒性（ＲＡＰＡＭＵＮＥのラベルは、それが肺移植患者に適応されないと警告する）、癌リスクの増加、および糖尿病様症状を有する。ラパマイシンは、通常は間質肺炎の形態の肺毒性の発症と関連するが、肺胞タンパク症もまた記述されてきた。たとえば、Ｎｏｃｅｒａ ら、Ｓｉｒｏｌｉｍｕｓ Ｔｈｅｒａｐｙ ｉｎ Ｌｉｖｅｒ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ Ｐａｔｉｅｎｔｓ： Ａｎ Ｉｎｉｔｉａｌ Ｅｘｐｅｒｉｅｎｃｅ ａｔ ａ Ｓｉｎｇｌｅ Ｃｅｎｔｅｒ，Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ （２００８），４０（６），１９５０−１９５２；Ｐｅｒｅｚ ら、Ｉｎｔｅｒｓｔｉｔｉａｌ Ｐｎｅｕｍｏｎｉｔｉｓ Ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ Ｗｉｔｈ Ｓｉｒｏｌｉｍｕｓ ｉｎ Ｌｉｖｅｒ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ： Ａ Ｃａｓｅ Ｒｅｐｏｒｔ，Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ （２００７），３９（１０），３４９８−３４９９；Ｈａｓｈｅｍｉ−Ｓａｄｒａｅｉ ら、Ｓｉｒｏｌｉｍｕｓ−ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｄｉｆｆｕｓｅ ａｌｖｅｏｌａｒ ｈｅｍｏｒｒｈａｇｅ ｉｎ ａ ｒｅｎａｌ ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ ｒｅｃｉｐｉｅｎｔ ｏｎ ｌｏｎｇ−ｔｅｒｍ ａｎｔｉｃｏａｇｕｌａｔｉｏｎ，Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｎｅｐｈｒｏｌｏｇｙ （２００７），６８（４），２３８−２４４；Ｐｅｄｒｏｓｏ ら、Ｐｕｌｍｏｎａｒｙ ａｌｖｅｏｌａｒ ｐｒｏｔｅｉｎｏｓｉｓ − ａ ｒａｒｅ ｐｕｌｍｏｎａｒｙ ｔｏｘｉｃｉｔｙ ｏｆ ｓｉｒｏｌｉｍｕｓ，Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ （２００７），２０（３），２９１−２９６．を参照のこと。ラパマイシン誘導性肺毒性の原因は知られていない。

【0008】

[08]重症の呼吸有害事象もまた、シロリムスの使用と関連づけられてきた。なぜなら、長期投与下の抗癌療法は、１ナノグラム／ｍＬを超える範囲の循環血中濃度をもたらすからである。たとえば、シロリムスプロドラッグの肺毒性が、２００９年の報告において記述され、これは、「間質性肺疾患は、腎臓癌患者におけるテムシロリムス治療のまれな副作用である」と述べている。Ａｐａｒｉｃｉｏ ら、Ｃｌｉｎｉｃａｌ ＆ Ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ （２００９），１１（８），４９９−５１０；Ｖａｈｉｄ ら、Ｐｕｌｍｏｎａｒｙ ｃｏｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｏｆ ｎｏｖｅｌ ａｎｔｉｎｅｏｐｌａｓｔｉｃ ａｇｅｎｔｓ ｆｏｒ ｓｏｌｉｄ ｔｕｍｏｒｓ，Ｃｈｅｓｔ （２００８） １３３：５２８−５３８。加えて、２０１２年のメタアナリシスは、テムシロリムスまたはエベロリムスを投与された癌患者の１０％が、生活の質の悪化、いくつかの場合には治療の中断を伴う、軽度の毒性を経験しうると結論づけた。Ｉａｃｏｖｅｌｌｉ ら、Ｉｎｃｉｄｅｎｃｅ ａｎｄ ｒｉｓｋ ｏｆ ｐｕｌｍｏｎａｒｙ ｔｏｘｉｃｉｔｙ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｔｒｅａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｍＴＯＲ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ｆｏｒ ｍａｌｉｇｎａｎｃｙ． Ａ ｍｅｔａ−ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｐｕｂｌｉｓｈｅｄ ｔｒｉａｌｓ，Ａｃｔａ ｏｎｃｏｌｏｇｉｃａ （２０１２），５１（７），８７３−８７９を参照のこと。さらに、テムシロリムスを投与されたラットにおいて実施された安全性薬理学研究は、呼吸数の減少を、肺胞マクロファージ浸潤および肺における炎症とともに示した（ＵＳ ＦＤＡウェブサイトから入手可能なテムシロリムスについてのＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ Ｒｅｖｉｅｗ ＮＤＡ ２２０８８を参照のこと）。これらの副作用は、全身投与の結果として循環血液量中の薬物濃度が相対的に高い条件下で観察された。

【0009】

[09]その肺に対する潜在的な毒性にもかかわらず、経口投与されるラパマイシンは、潜在的ＬＡＭ治療法として予備的な有望さを示してきた。Ｎｅｗ Ｅｎｇ． Ｊ． Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ３６４：１５９５−１６０６ （２０１１） ａｎｄ ｒｅｖｉｅｗ ｂｙ Ｈａｍｍｅｓ ａｎｄ Ｋｒｙｍｓｋａｙａ， Ｈｏｒｍ． Ｃａｎｃｅｒ ４（２）：７０−７ （２０１３）を参照のこと；Ａｎｄｏ ら Ｒｅｓｐｉｒ Ｉｎｖｅｓｔｉｇ． ５１（３）：１７５−８ （２０１３） “Ｔｈｅ ｅｆｆｉｃａｃｙ ａｎｄ ｓａｆｅｔｙ ｏｆ ｌｏｗ−ｄｏｓｅ ｓｉｒｏｌｉｍｕｓ ｆｏｒ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｌｙｍｐｈａｎｇｉｏｌｅｉｏｍｙｏｍａｔｏｓｉｓ”もまた参照のこと。だが、臨床的証拠はまた、この文脈におけるラパマイシンの限界ならびにＬＡＭの治療のための改善された治療法および治療レジメンの必要性を示す。ラパマイシンの主な限界は、薬物の長期使用を必要とすることであり、最も重要なのは、ラパマイシンが（潜在的肺毒性に加えて）他の有害事象と関連づけられることである。たとえば、２０人の患者において完了した２４ヶ月の非ランダム化非盲検治験において、経口投与されたシロリムスを、ＴＳＣまたは散発性ＬＡＭに罹患した患者に腎不全をもたらしうる緩やかに成長する過誤腫である、血管筋脂肪腫を低減するその能力について試験した。Ｂｉｓｓｌｅｒ ら （２００８） Ｓｉｒｏｌｉｍｕｓ ｆｏｒ ａｎｇｉｏｍｙｏｌｉｐｏｍａ ｉｎ ｔｕｂｅｒｏｕｓ ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ ｃｏｍｐｌｅｘ ｏｒ ｌｙｍｐｈａｎｇｉｏｌｅｉｏｍｙｏｍａｔｏｓｉｓ． Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ ３５８（２）：１４０−１５１。その研究において、血管筋脂肪腫は、治療期間中に「やや」退縮したが、治療停止後に増加する傾向にあった。シロリムスと関連づけられる重症の有害事象には、下痢、肺炎、腎盂腎炎、蜂巣炎（動物咬傷による）、口内炎、および腎血管筋脂肪腫の出血が含まれる。投薬は、腎移植患者における拒絶反応を予防すると考えられる血清標的レベルに基づいており、１から１５ｎｇ／ｍｌの範囲だった（血中シロリムスレベル）。別の同様の研究（フェーズ２、非ランダム化非盲検治験）において、ＴＳＣまたは散発性ＬＡＭに罹患した１６人の患者を、経口シロリムスで２年までの間治療した。Ｄａｖｉｅｓ ら （２０１１） Ｓｉｒｏｌｉｍｕｓ ｔｈｅｒａｐｙ ｆｏｒ ａｎｇｉｏｍｙｏｌｉｐｏｍａ ｉｎ ｔｕｂｅｒｏｕｓ ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ ａｎｄ ｓｐｏｒａｄｉｃ ｌｙｍｐｈａｎｇｉｏｌｅｉｏｍｙｏｍａｔｏｓｉｓ： ａ ｐｈａｓｅ ２ ｔｒｉａｌ． Ｃｌｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ １７（１２）：４０７１−４０８１。その研究において、シロリムスの定常状態血中レベルは３〜１０ｎｇ／ｍｌであり、患者の半数超が３〜６ｎｇ／ｍｌの維持レベルに維持された。シロリムス治療は、腎血管筋脂肪腫の持続的な退縮を示した。しかしながら、腫瘍反応は治療の継続とともに維持された一方で、治療の第２年中にさらなる縮小はほとんど生じなかった。シロリムスと関連づけられる有害事象には、口腔粘膜炎、呼吸器感染、およびタンパク尿が含まれた。進行が記録された１０人のＬＡＭ患者の別の研究において、重症再発性下気道感染またはシロリムス誘導性肺炎のため、シロリムスは３人の患者において中止された。Ｎｅｕｒｏｈｒ ら、Ｉｓ ｓｉｒｏｌｉｍｕｓ ａ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｏｐｔｉｏｎ ｆｏｒ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｖｅ ｐｕｌｍｏｎａｒｙ ｌｙｍｐｈａｎｇｉｏｌｅｉｏｍｙｏｍａｔｏｓｉｓ？ Ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ Ｒｅｓｅａｒｃｈ （２０１１），１２：６６。その研究は、「シロリムスは、急速に衰弱するＬＡＭ患者における治療の選択肢と考えられるかもしれない」と結論づけたが、その「投与は、何人かの患者において治療中止を必要とする重症呼吸器有害事象と関連づけられるかもしれない」のであり、「シロリムスの中止は肺移植の前には必須である」と指摘した。最後に、１２ヶ月のランダム化された、二重盲検の８９人の患者の臨床治験が実施され、４６人の患者がＬＡＭに罹患しており、その後１２ヶ月の観察期間が置かれた。ＭｃＣｏｒｍａｃｋ ら （２０１１） Ｅｆｆｉｃａｃｙ ａｎｄ ｓａｆｅｔｙ ｏｆ ｓｉｒｏｌｉｍｕｓ ｉｎ ｌｙｍｐｈａｎｇｉｏｌｅｉｏｍｙｏｍａｔｏｓｉｓ． Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ ３６４：１５９５−１６０６。患者を５〜１５ｎｇ／ｍｌのシロリムス血中レベルに維持した。この研究において、シロリムス治療は肺機能を安定化し、血清中ＶＥＧＦ−Ｄレベルを減少させ、症状の減少および生活の質の改善と関連づけられた。だが、肺機能の安定化は、継続的な治療を必要とした。重要なことに、これら臨床研究のすべてが、シロリムスの経口配合物を利用した。これはなぜなら、肺への直接送達のためのラパマイシンのエアロゾル配合物は、上で引用した論文により例示されるとおり、ラパマイシンのよく知られている肺毒性を鑑みると、成功する見込みがかなり低いと考えられるからである。

【0010】

[10]２０１３年に公開されたＬｅｈｒｅｒによる米国特許出願は、「ラパマイシン（シロリムス）は、そのよく記述されている肺毒性、間質肺炎ゆえに、安全に吸入できない」という見解を反映する。Ｃｈｈａｊｅｄ ら （２００６） ７３：３６７−３７４を引用するＵＳ ２０１３０００４４３６を参照のこと。Ｌｅｈｒｅｒの特許出願は、肺癌およびリンパ脈管筋腫症を治療および予防するための組成物および方法に関する。いくつかの以前の刊行物、たとえば米国特許第５，０８０，８９９号（１９９１年２月出願）および米国特許第５，６３５，１６１号（１９９５年６月出願）は、吸入による送達のために配合されたラパマイシンについての何らかの包括的記載を含むとはいえ、かかる包括的記載は、いかなる証拠によってもサポートされておらず、上で論じた報告により明らかなとおり、移植の文脈における免疫抑制剤および抗癌の文脈における細胞増殖の阻害剤としてのラパマイシンのより広範な採用後に現れた、多くのラパマイシン誘導性肺毒性の発生報告前になされた。

【0011】

[11]ＷＯ ２０１１／１６３６００は、ラパマイシンと同様にマクロライドラクトンであるタクロリムスのエアロゾル配合物を記載する。だが、タクロリムスは、シロリムスとは区別される化学物質であり、タクロリムスの分子標的は、ｍＴＯＲではなくカルシニューリンであり、ラパマイシンとは異なり、タクロリムスは肺毒性を示さなかったのであり、実際に、肺移植後の拒絶反応の予防に適応される。

【0012】

[12]ラパマイシン誘導性肺毒性の潜在的可能性が広範に認識されていたことを鑑みると、ＬＡＭの治療における肺送達のためのラパマイシンを含む医薬組成物は、ヒトにおいて実行可能な治療の選択肢であるとは考えられなかった。

【0013】

[13]吸入による薬物の肺への送達は、嚢胞性線維症、肺炎、気管支喘息および慢性閉塞性肺疾患のような一般的な局所性病態、ホルモン置換、疼痛管理、免疫不全、赤血球生成、糖尿病、肺癌等を含むいくつかの全身性病態を含む、様々な病態の治療の重要な手段である。Ｙｉ ら Ｊ． Ａｅｒｏｓｏｌ Ｍｅｄ． Ｐｕｌｍ． Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖ． ２３：１８１−７ （２０１０）による概説を参照のこと。吸入による肺癌の治療に適応される薬剤には、シスプラチン、カルボプラチン、タキサン、およびアントラサイクリンが含まれる。たとえば、米国特許第６，４１９，９００号；第６，４１９，９０１号；第６，４５１，７８４号；第６，７９３，９１２号；ならびに米国特許出願公開番号ＵＳ ２００３／００５９３７５およびＵＳ ２００４／００３９０４７を参照のこと。加えて、吸入により投与されるドキソルビシンおよびテモゾロマイドが、肺転移の治療のために提案されてきた。たとえば、米国特許第７，２８８，２４３号および米国特許出願公開第２００８／０００８６６２号を参照のこと。

【発明の概要】

【課題を解決するための手段】

【0014】

[22]本発明は、部分的に、動物研究において肺に直接送達されたときの、ラパマイシンの驚くべき薬物動態の発見に基づく。以下に論じる結果は、吸入によるラパマイシンの肺への送達が、顕著に高い肺組織中薬物濃度を、先行研究から予測可能なよりも予想外に高い量で、代替投与経路、たとえば経口または静脈内投与により達成されうるよりも有意に高い肺対血液比とともに生じさせたことを示す。ここに記載される結果は、吸入を介した肺へのラパマイシンの投与が、薬物に対するきわめて低い全身曝露と組み合わされた、肺における治療有効量の薬物を達成するのに必要とされる低用量のラパマイシンを提供し、ラパマイシンについて顕著に改善した治療指数をもたらすことを実証する。

【0015】

[23]一態様において、本発明は、肺の疾患および障害の有効な局所治療および予防を提供するために、好ましくは吸入により、肺に直接送達されるラパマイシンの医薬配合物、そのプロドラッグ、誘導体および類似体の必要性に対処する。一態様において、疾患または障害は、ｍＴＯＲシグナル伝達経路の不適切な活性により増強されたものである。かかる局所治療は、毒性および有害事象、たとえば薬物の全身送達により生じる血中ラパマイシン濃度の上昇と関連づけられるものを減少または除去する。

【0016】

[24]本発明は、肺への直接送達のためのラパマイシン組成物を提供する。本明細書において使用される「ラパマイシン組成物」という用語は、好ましくはシロリムスと記述されるアモルファス形態の、ラパマイシン自体、またはそのプロドラッグ、もしくは誘導体を指してもよい。一実施形態において、本発明のラパマイシン組成物は、肺組織に対して低毒性でまたは毒性なしに、同時に約１ｎｇ／ｍｌ未満であるラパマイシンの血中レベルを伴う、肺におけるｍＴＯＲシグナル伝達を阻害するのに有効な量のラパマイシンを提供する。一実施形態において、本発明のラパマイシン組成物は、高い治療指数により明らかなとおり、とりわけその長期または持続的使用に関して、ラパマイシンの他の剤形、たとえば経口または静脈内投与剤形と比較して、改善した安全性プロファイルを提供する。

【0017】

[25]一実施形態において、本発明は、それを必要とする対象に、ラパマイシン組成物を含む医薬エアロゾル配合物を、治療血中レベル未満の組成物と組み合わされた、肺における治療レベルの組成物を達成するのに有効な量で投与することによる、ＬＡＭの治療および予防のための組成物および方法を提供する。一実施形態において、対象は、ＬＡＭの治療を必要とするヒト対象である。本発明の組成物は、単独で、またはＬＡＭの治療のための１つもしくは複数の追加の治療法または治療レジメンと組み合わせて使用できる。加えて、本明細書において提供される組成物は、ラパマイシン、またはそのプロドラッグもしくは誘導体を、組成物中の唯一の治療剤として含んでいてもよく、または、ラパマイシンは、単一の剤形において１種または複数の追加の治療剤とともに配合できる。

【0018】

[26]一実施形態において、本発明は、ラパマイシン組成物を含む医薬エアロゾル配合物を、治療血中レベル未満の組成物と組み合わされた、肺における治療レベルの組成物を達成するのに有効な量で提供する。この文脈において、「エアロゾル配合物」という用語は、以下により詳細に記載のとおり、水性組成物、乾燥粉末組成物、または噴霧剤ベース組成物を指してもよい。エアロゾル配合物は、様々な仕方で、たとえば経鼻的または経口的に、たとえば吸入により、対象に送達できる。一実施形態において、治療レベルは、送達の１２または２４時間後、好ましくは送達の２４時間後に決定される。一実施形態において、肺における治療レベルは、少なくとも送達後２４時間持続する。一実施形態において、送達の２４時間後の組成物の肺対血中濃度比は、少なくとも１００、少なくとも２５０、または少なくとも５００である。一実施形態において、送達の２４時間後の組成物の肺対血中濃度比は、約１００から２５０、２５０から５００、５００から７５０、または７５０から１０００である。一実施形態において、送達の２４時間後の組成物の肺対血中濃度比は、少なくとも５、少なくとも１０、少なくとも２０、少なくとも３０、少なくとも５０、少なくとも６０、少なくとも７０、少なくとも８０、または少なくとも１００である。

【0019】

[27]一実施形態において、エアロゾル配合物中のラパマイシン組成物の量は、５から５００マイクログラム、１０から２５０マイクログラム、１５から１５０マイクログラム、または２０から１００マイクログラムである。一実施形態において、エアロゾル配合物中のラパマイシン組成物の量は、２０マイクログラムである。一実施形態において、エアロゾル配合物中のラパマイシン組成物の量は、４０マイクログラムである。一実施形態において、エアロゾル配合物中のラパマイシン組成物の量は、５０マイクログラムである。一実施形態において、エアロゾル配合物中のラパマイシン組成物の量は、１００マイクログラムである。一実施形態において、エアロゾル配合物中のラパマイシン組成物の量は、１２５マイクログラムである。一実施形態において、エアロゾル配合物中のラパマイシン組成物の量は、２５０マイクログラムである。

【0020】

[28]一実施形態において、ラパマイシン組成物は、シロリムスである。一実施形態において、ラパマイシン組成物は、エベロリムス、テムシロリムス、リダフォロリムス、ウミロリムス、およびゾタロリムスからなる群から選択される。

【0021】

[29]一実施形態において、エアロゾル配合物は、吸入による送達に好適な乾燥粉末組成物である。一実施形態において、乾燥粉末は、マイクロ粒子、担体の粒子、および１種または複数の任意選択の賦形剤の形態で、ラパマイシン組成物を含む。一実施形態において、マイクロ粒子は、約０．１から１０ミクロンまたは約１から５ミクロンの平均直径を有する薬物の粒子からなる。一実施形態において、粒子は、約１．５から４ミクロン、約１．５から３．５ミクロン、または約２から３ミクロンの平均直径を有する。担体は、アラビノース、グルコース、フルクトース、リボース、マンノース、スクロース、トレハロース、ラクトース、マルトース、デンプン、デキストラン、マンニトール、リジン、ロイシン、イソロイシン、ジパルミトイル（ｄｉｐａｌｍｉｔｙｌ）ホスファチジルコリン、レシチン、ポリ乳酸、ポリ（乳酸−ｃｏ−グルタミン酸）、およびキシリトール、ならびに前述のいずれかの混合物からなる群から選択されてもよい。一実施形態において、担体は、２種の異なる担体のブレンドを含むか、またはそれからなる。担体の粒子は、２００ミクロンまで、３０から１００ミクロン、または１０ミクロン未満の範囲の直径を有してもよい。担体が２種の異なる担体のブレンドからなる場合、各担体は、平均粒径として測定される異なるサイズ範囲の粒子からなる。一実施形態において、担体は、２種の異なる担体、第１の担体および第２の担体のブレンドからなる。第１の担体は、約３０〜１００ミクロンの範囲の直径を有する粒子からなり、第２の担体は、１０ミクロン未満の直径を有する粒子からなる。２種の異なる担体の比は、３：９７から９７：３の範囲である。一実施形態において、２種の異なる担体の比は、９７：３または９５〜９８：２〜５の範囲である。一実施形態において、担体は、２種の異なるラクトース担体のブレンドからなる。粉末中の薬物対担体比は、０．５％から２％（ｗ／ｗ）であってもよい。一実施形態において、粉末中の薬物対担体比は１％（ｗ／ｗ）である。

【0022】

[30]エアロゾル配合物中のラパマイシン組成物の量は、組成物の総重量に対して約０．１％から２０％（ｗ／ｗ）である。一実施形態において、量は、約０．２５％から２％（ｗ／ｗ）である。

【0023】

[31]一実施形態において、１種または複数の任意選択の賦形剤が組成物中に存在し、それは、リン脂質および脂肪酸の金属塩、ならびに前述のものの混合物から選択される。一実施形態において、リン脂質は、ジパルミトイルホスファチジルコリンおよびレシチンから選択される。一実施形態において、脂肪酸の金属塩は、ステアリン酸マグネシウムである。一実施形態において、１種または複数の賦形剤は、０．０１％から０．５％の範囲の賦形剤対大きな担体粒子の重量比で担体粒子上にコーティングされる。

【0024】

[32]一実施形態において、エアロゾル配合物中のラパマイシン組成物の量は、ｍＴＯＲＣ１の生物学的活性を阻害するのに有効な量である。一実施形態において、量は、Ｓ６Ｋタンパク質のリン酸化を阻害するのに有効な量である。

【0025】

[33]一実施形態において、エアロゾル配合物中のラパマイシン組成物の量は、肺に送達される５から５００マイクログラムの呼吸用量を達成するのに有効な量である。一実施形態において、呼吸用量は、約５、約２０、約５０、約１００または約２５０マイクログラムである。一実施形態において、呼吸用量は、約２０マイクログラム、約５０マイクログラム、または約１００マイクログラムである。一実施形態において、量は、１ｎｇ／ｇから１マイクログラム（μｇ）／ｇの肺組織中ラパマイシン組成物濃度をもたらすのに有効な量である。一実施形態において、ラパマイシン組成物の肺組織中濃度は、約５から３０ｎｇ／ｇである。一実施形態において、肺組織中濃度は、約５ｎｇ／ｇ、約１０ｎｇ／ｇ、約１５ｎｇ／ｇ、約２０ｎｇ／ｇ、約２５ｎｇ／ｇ、約３０ｎｇ／ｇ、約５０ｎｇ／ｇ、約６０ｎｇ／ｇ、約１００ｎｇ／ｇ、または約２００ｎｇ／ｇである。前述の実施形態によれば、同時に、ラパマイシン組成物の血中トラフレベルは、５ｎｇ／ｍｌ未満、２ｎｇ／ｍｌ未満、１ｎｇ／ｍｌ未満、０．５ｎｇ／ｍｌ未満、または０．２５ｎｇ／ｍｌ未満である。一実施形態において、血中トラフレベルは、１ｎｇ／ｍｌ未満、０．５ｎｇ／ｍｌ未満、または０．２５ｎｇ／ｍｌ未満である。

【0026】

[34]一実施形態において、ラパマイシン組成物は、約１ｎｇ／ｇ、約５ｎｇ／ｇ、約１０ｎｇ／ｇ、約１５ｎｇ／ｇ、約２０ｎｇ／ｇ、約２５ｎｇ／ｇ、約５０ｎｇ／ｇ、または約１００ｎｇ／ｇの治療レベルで、投与後一定期間、好ましくはヒト対象に対して、肺において持続し、一定期間は、約６から１０時間、約６から１４時間、約６から２４時間、および約６から７２時間から選択される。一実施形態において、一定期間は、約１２時間、約１４時間、約２４時間、および約７２時間から選択される。

【0027】

[35]一実施形態において、ラパマイシン組成物は、約５から１００ｎｇ／ｇまたは約５から３０ｎｇ／ｇの治療レベルで、約１２または２４時間である一定期間、肺において持続する。一実施形態において、ラパマイシン組成物は、約５ｎｇ／ｇ、約１０ｎｇ／ｇ、約２０ｎｇ／ｇ、約３０ｎｇ／ｇ、約５０ｎｇ／ｇ、約６０ｎｇ／ｇ、約７０ｎｇ／ｇ、約８０ｎｇ／ｇ、または約９０ｎｇ／ｇの治療レベルで、肺において持続する。一実施形態において、ラパマイシン組成物は、少なくとも５ｎｇ／ｇ、少なくとも２０ｎｇ／ｇ、または少なくとも３０ｎｇ／ｇの治療レベルで、肺において持続する。一実施形態において、ラパマイシン組成物は、約２０ｎｇ／ｇから約３０ｎｇ／ｇまたは約５０ｎｇ／ｇから約８０ｎｇ／ｇの治療レベルで、肺において持続する。

【0028】

[36]一実施形態において、配合物は、２０％を超える微粒子画分（ＦＰＦ）を有し、対応する微粒子用量（ＦＰＤ）は、１から１２ヶ月または１から３６ヶ月保存後に５マイクログラムから２ミリグラムの範囲、好ましくは０．５ミリグラム未満である。一実施形態において、送達用量（ＤＤ）または放出用量（ＥＤ）とも呼ばれる、肺に送達される用量である呼吸用量は、１０マイクログラムから２．５ミリグラムの範囲、好ましくは０．５ミリグラム未満である。一実施形態において、送達用量は、約２０から１００マイクログラム、約１０から２５マイクログラムまたは約３０から６０マイクログラムである。一実施形態において、送達用量は、２０または５０マイクログラムである。一実施形態において、送達用量は、１００マイクログラムである。

【0029】

[37]一実施形態において、ラパマイシン組成物の呼吸用量は、約２０マイクログラムであり、肺組織中薬物濃度は、約５から２５ｎｇ／ｇであり、血中Ｃｍａｘは、１．０ｎｇ／ｍｌ未満、または約０．５０ｎｇ／ｍｌから１．０ｎｇ／ｍｌ、または約０．５０ｎｇ／ｍｌから０．９０ｎｇ／ｍｌであり、投薬２４時間後の薬物の血中トラフ濃度は、約０．２０ｎｇ／ｍｌ未満であり、投薬１４日後の血中の薬物の安定状態濃度は、約０．９０ｎｇ／ｍｌ未満、または約０．８０ｎｇ／ｍｌ未満である。

【0030】

[38]一実施形態において、ラパマイシン組成物の呼吸用量は、約５０マイクログラムであり、肺組織中薬物濃度は、約２から１５ｎｇ／ｇであり、血中Ｃｍａｘは、２．０ｎｇ／ｍｌ未満、または約０．２５ｎｇ／ｍｌから０．１ｎｇ／ｍｌ、または約０．１０ｎｇ／ｍｌから０．５ｎｇ／ｍｌであり、単回投薬２４時間後の薬物の血中トラフ濃度は、約０．１０ｎｇ／ｍｌ未満であり、１日１回の反復投薬５日後の血中の薬物のトラフ濃度は、約１．０ｎｇ／ｍｌ未満、または約０．５０ｎｇ／ｍｌ未満である。

【0031】

[39]一実施形態において、配合物は、１種または複数の追加の治療剤をさらに含む。１種または複数の追加の治療剤は、エストロゲンアンタゴニスト（たとえば、レトロゾール、タモキシフェン）、スタチン（たとえば、シンバスタチン）、ｓｒｃ阻害剤（たとえば、サラカチニブ）、およびＶＥＧＦ受容体阻害剤（たとえば、パゾパニブ）から選択されてもよい。一実施形態において、１種または複数の追加の治療剤は、レトロゾール、タモキシフェン、シンバスタチン、サラカチニブ、パゾパニブ、およびイマチニブから選択される。

【0032】

[40]一実施形態において、本明細書に記載のラパマイシン組成物を含む医薬エアロゾル配合物は、治療レジメンまたは併用療法の一部として、少なくとも１種の追加の治療剤とともに投与される。少なくとも１種の追加の治療剤は、エアロゾル配合物と同じまたは異なる投与経路により投与できる。一実施形態において、少なくとも１種の追加の治療剤は、経口的に、たとえば経口投与剤形、たとえば錠剤またはカプセル剤の形態で投与される。１種または複数の追加の治療剤は、エストロゲンアンタゴニスト（たとえば、レトロゾール、タモキシフェン）、スタチン（たとえば、シンバスタチン）、ｓｒｃ阻害剤（たとえば、サラカチニブ）、およびＶＥＧＦ受容体阻害剤（たとえば、パゾパニブ）から選択されてもよい。一実施形態において、１種または複数の追加の治療剤は、レトロゾール、タモキシフェン、シンバスタチン、サラカチニブ、パゾパニブ、およびイマチニブから選択される。

【0033】

[41]一実施形態において、配合物は、努力肺活量（ＦＶＣ）および努力呼気肺活量（ＦＥＶ１）により測定される対象の肺機能を改善するのに有効な量のラパマイシン組成物を送達する。一実施形態において、配合物は、放射線検査により検出可能な胸水のサイズまたは量を低減するのに有効な量のラパマイシン組成物を送達する。

【0034】

[42]一実施形態において、配合物は、１日１回の投与に適する。
[43]一実施形態において、配合物は、薬物の水性懸濁液を調製する工程と、薬物懸濁液をマイクロ流動化（ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｚａｔｉｏｎ）にかける工程と、得られた粒子を噴霧乾燥して乾燥粉末を形成する工程とを含む湿式研磨プロセスにより製造される。

【0035】

[44]一実施形態において、ラパマイシン組成物はシロリムスであり、担体は、２種の異なるラクトース担体のブレンドからなり、第１の担体は、約３０〜１００ミクロンの範囲の平均直径を有する粒子からなり、第２の担体は、１０ミクロン未満の平均直径を有する粒子からなり、２種の異なる担体の比は、約９７：３から３：９７であり、ラパマイシンの量は、２５から１４００マイクログラムである。

【0036】

[45]本発明はまた、本明細書に記載のラパマイシン組成物を含むエアロゾル配合物を含む、ＬＡＭを治療するための単位剤形であって、ラパマイシン組成物の量が、約５から２５００マイクログラム、２０から５００マイクログラム、または５０から２５０マイクログラムである、単位剤形を提供する。一実施形態において、ラパマイシン組成物の量は、約５０から１２５マイクログラムである。一実施形態において、ラパマイシン組成物の量は、約４０、約５０、約１００、約１２５、または約２５０マイクログラムである。一実施形態において、ラパマイシン組成物の量は、約２５０マイクログラムである。

【0037】

[46]一実施形態において、単位剤形は、乾燥粉末吸入器デバイスにおける使用に好適なカプセル剤である。一実施形態において、カプセル剤は、１ｍｇから１００ｍｇの粉末（総量、ラパマイシン組成物、担体、および任意選択の賦形剤を含む）または１０ｍｇまたは４０ｍｇの粉末を含有する。カプセル剤は、ＤＰＩデバイスにおける使用に好適なゼラチン、プラスチック、もしくはセルロースカプセル剤、またはホイル／ホイルもしくはホイル／プラスチックブリスター剤の形態であってもよい。

【0038】

[47]本発明はまた、本明細書に記載の組成物もしくは単位剤形と、使用説明書とを含む医薬パッケージまたはキットを提供する。
[48]本発明はまた、本明細書に記載の組成物または単位剤形を含有するリザーバーを含む乾燥粉末送達デバイスを提供する。リザーバーは、デバイス内の一体型チャンバー、カプセル剤、またはブリスター剤であってよい。一実施形態において、デバイスは、Ｐｌａｓｔｉａｐｅ（登録商標） ＲＳ０１ Ｍｏｄｅｌ ７、Ｐｌａｓｔｉａｐｅ（登録商標） ＲＳ００ Ｍｏｄｅｌ ８、ＸＣａｐｓ（登録商標）、Ｈａｎｄｉｈａｌｅｒ（登録商標）、Ｆｌｏｗｃａｐｓ（登録商標） ＴｗｉｎＣａｐｓ（登録商標）、およびＡｅｒｏｌｉｚｅｒ（登録商標）から選択される。一実施形態において、デバイスは、Ｐｌａｓｔｉａｐｅ（登録商標） ＲＳ０１ Ｍｏｄｅｌ ７またはＰｌａｓｔｉａｐｅ（登録商標） ＲＳ００ Ｍｏｄｅｌ ８から選択される。一実施形態において、デバイスは、Ｐｌａｓｔｉａｐｅ（登録商標） ＲＳ００ Ｍｏｄｅｌ ８である。

【0039】

[49]本発明はまた、ＬＡＭの治療を必要とするヒト対象においてＬＡＭを治療するための方法であって、対象に吸入を介して本明細書に記載の組成物または単位剤形を投与する工程を含む、方法を提供する。

【図面の簡単な説明】

【0040】

【図1】[14]マウス血中の１０．６ｎｇ／ｍＬのラパマイシン（上）および内部標準（下）のＬＣ−ＭＳ／ＭＳクロマトグラムの図である。

【図2】[15]マウス肺ホモジネートにおける１０．６ｎｇ／ｍＬのラパマイシン（上）および内部標準（下）の代表クロマトグラムの図である。

【図3】[16]マウス血中のラパマイシンについての較正曲線の図である。

【図4】[17]マウス肺ホモジネートにおけるラパマイシンについての較正曲線の図である。

【図5】[18]ＯＰＡによりラパマイシンを投与されたマウス２−０７からの血液中のラパマイシン（上）および内部標準（下）の代表クロマトグラムの図である。

【図6】[19]ＯＰＡによりラパマイシンを投与されたマウス２−０７からの肺ホモジネートにおけるラパマイシン（上）および内部標準（下）の代表クロマトグラムの図である。

【図7】[20]ラパマイシンのＯＰＡおよび経口投与後のマウス肺におけるＳ６リン酸化の図である。

【図8】[21]１日１度で反復された肺内投与について予測されたラパマイシン血中濃度の図である。

【発明を実施するための形態】

【0041】

[50]本発明は、ＬＡＭの治療を必要とするヒト対象におけるＬＡＭの治療および予防のための方法および組成物を提供する。ＬＡＭの治療を必要とするヒト対象は、ＬＡＭと診断されたヒト対象である。一実施形態において、ヒト対象は、女性である。一実施形態において、ヒト対象は、男性である。一実施形態において、ヒト対象は、結節性硬化症と診断されている。一実施形態において、ヒト対象は、散発性ＬＡＭと診断されている。一実施形態において、この方法は、対象に吸入を介して好適な担体中のラパマイシン、および任意選択で１種または複数の添加剤を含む組成物を投与する工程を含む。「ラパマイシン」という用語は、本開示を通じて、シロリムスとも呼ばれるラパマイシン自体、ならびにそのプロドラッグ（たとえばテムシロリムス）および誘導体を指すために、包括的に使用される。ラパマイシンの誘導体には、ラパマイシンと構造的に類似する化合物、同じ化学的分類の化合物、ラパマイシン類似体である化合物、またはラパマイシンの薬学的に許容される塩もしくはその誘導体である化合物が含まれる。ラパマイシン、そのプロドラッグ、および誘導体のさらなる説明および例は、以下の節に提供される。

【0042】

[51]本明細書に記載の組成物は、「エアロゾル配合物」と呼ばれ、ラパマイシン組成物を含有する呼吸用の粒子または液滴をもたらすのに好適なエアロゾル化可能な組成物を記述することが意図されており、このラパマイシン組成物は上述のとおり、好ましくはシロリムスと記述されるアモルファス形態の、ラパマイシン自体、またはそのプロドラッグ、もしくは誘導体を指す。一実施形態において、ラパマイシン組成物は、シロリムス、エベロリムス、およびテムシロリムスから選択される。一実施形態において、ラパマイシン組成物は、シロリムスである。本明細書に記載のエアロゾル配合物は、ラパマイシン組成物、担体、および任意選択で１種または複数の添加剤を含んでもよい。エアロゾル配合物は、「吸入のための組成物」と題された下の節に詳細に記載するとおり、水性溶液、乾燥粉末、または１種または複数の薬学的に許容される噴射剤と担体との混合物の形態であってもよい。

【0043】

[52]本発明はまた、ＬＡＭの治療を必要とするヒト対象におけるＬＡＭの治療および予防のための方法であって、本発明のエアロゾル配合物を対象に肺内投与する工程を含む、方法を提供する。一実施形態において、ラパマイシン組成物の投与用量は、肺組織におけるラパマイシンの治療レベルを達成するのに十分である一方で、対象における低い血中レベル、または血中トラフレベルを維持する。たとえば、ラパマイシン組成物の治療レベルは、約１ｎｇ／ｇ、約５ｎｇ／ｇ、約１０ｎｇ／ｇ、約１５ｎｇ／ｇ、約２０ｎｇ／ｇ、約２５ｎｇ／ｇ、約５０ｎｇ／ｇであってもよく、血中トラフレベルは、０．０１から０．１５ｎｇ／ｍｌ、０．０７５から０．３５０ｎｇ／ｍｌ、０．１５０から０．７５０ｎｇ／ｍｌ、０．７５０から１．５ｎｇ／ｍｌ、または１．５から５ｎｇ／ｍｌである。一実施形態において、投与用量は、約５ｎｇ／ｇから５０ｎｇ／ｇ、または約５ｎｇ／ｇから２０ｎｇ／ｇの肺における薬物の治療レベル、ならびに、５ｎｇ／ｍｌ未満、２ｎｇ／ｍｌ未満、１ｎｇ／ｍｌ未満、または０．５ｎｇ／ｍｌ未満の薬物の血中トラフレベルを達成するのに十分である。一実施形態において、送達の２４時間後のラパマイシン組成物の肺対血中濃度比は、少なくとも１００、少なくとも２５０、または少なくとも５００である。一実施形態において、送達の２４時間後のラパマイシン組成物の肺対血中濃度比は、約１００から２５０、２５０から５００、５００から７５０、または７５０から１０００である。

【0044】

[53]好ましくは、前述の治療レベルは、本明細書に記載のエアロゾル配合物を１日１回投与することにより達成される。一実施形態において、ラパマイシン組成物の１日総用量は、５から１００マイクログラム、２０から２５０マイクログラム、５０から５００マイクログラム（０．０５から０．５ミリグラム）、２５０から１０００マイクログラム（０．２５から１ミリグラム）または５００から２０００マイクログラム（０．５から２ミリグラム）の範囲である。一実施形態において、１日総用量は、５００マイクログラム未満、１００マイクログラム未満、５０マイクログラム未満、２０マイクログラム未満、または１０マイクログラム未満である。一実施形態において、１日総用量は、５００マイクログラム未満、２５０マイクログラム未満、１００マイクログラム未満、５０マイクログラム未満、または１０マイクログラム未満である。一実施形態において、対象に投与される１日総用量は、１日当たり０．５ｍｇ未満または０．２５ｍｇ未満である。併用療法を含む、肺送達および用量決定のさらなる態様は、「肺内投与および用量決定」と題された下の節に記載される。

【0045】

[54]本発明の方法および組成物は、ＬＡＭの治療を必要とする対象、好ましくはヒト対象において、ＬＡＭを治療するのに有効である。ＬＡＭを治療するのに有効な薬物の量（「有効量」または「治療有効量」）は、ＬＡＭもしくはＬＡＭの１つもしくは複数の症状の進行、重症度、および／もしくは持続期間を低減もしくは改善するか、ＬＡＭの進行を防止するか、ＬＡＭの退縮を引き起こすか、または、ＬＡＭと関連する１つもしくは複数の症状の発達もしくは発症を防止するか、または、ＬＡＭの１つもしくは複数の症状の重症度もしくは発症に関して、もしくは、ＬＡＭの発達もしくは進行に関して、他の治療法（たとえば、予防剤または治療剤）の予防的もしくは治療的効果を増強もしくは改善するのに、十分な薬物（たとえば、ラパマイシン）の量を指す。特定の実施形態において、ＬＡＭの治療に関して、治療有効量は、ＬＡＭ細胞の増殖を阻害もしくは低減するか、ＬＡＭ細胞の拡散（転移）を阻害もしくは低減するか、または、腫瘍のサイズを低減するか、または、ＦＶＣもしくはＦＥＶ１を改善するか、または、放射線検査により検出可能な胸水の量を低減する治療法（たとえば、治療剤）の量を指す。好ましい一実施形態において、治療有効量の治療法（たとえば、治療剤）は、ＬＡＭ細胞の増殖または腫瘍サイズを、対照（たとえば、リン酸緩衝生理食塩水（「ＰＢＳ」））に対して少なくとも５％、好ましくは少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％低減する。したがって、本発明の方法の文脈において、「治療する」、「治療」、および「治療すること」という用語は、ＬＡＭまたはＬＡＭと関連する１つもしくは複数の症状の重症度、持続期間、または進行の低減を指す。特定の実施形態において、これらの用語は、ＬＡＭ細胞の増殖における増殖の阻害もしくは低減、ＬＡＭ細胞の拡散（転移）もしくはＬＡＭ関連癌の発達もしくは進行における阻害もしくは低減、またはＬＡＭ関連腫瘍のサイズの低減、またはリンパ管の低減もしくは関与を指してもよい。

【0046】

[55]本発明の方法の一実施形態において、ラパマイシンは、努力肺活量（ＦＶＣ）および努力呼気肺活量（ＦＥＶ１）により測定される対象の肺機能を改善するのに有効な用量で投与される。別の一実施形態において、ラパマイシンは、放射線検査により検出可能な、対象における胸水のサイズまたは量を低減するのに有効な用量で投与される。一実施形態において、ラパマイシンは、以下のうちの１つまたは複数を改善するのに有効な用量で投与される。すなわち、機能的残気量、血清ＶＥＧＦ−Ｄ、生活および機能的遂行の質、６分間歩行距離、ならびに一酸化炭素について肺の拡散能力。一実施形態において、肺経路を介して送達されるラパマイシンは、肺および肺から離れた部位におけるＬＡＭ関連腫瘍の成長を制限するのに有効なラパマイシン血中レベルを達成する。一実施形態において、ラパマイシンの投与用量の効力は、前述のもののうちの任意の１つまたは複数により測定される。

【0047】

[56]いくつかの実施形態において、本発明の方法は、ＬＡＭを有する対象におけるＬＡＭを管理するのに有効である。この文脈において、「管理する」、「管理すること」、および「管理」という用語は、治癒をもたらさない、治療法から対象が引き出す有益な効果を指す。一実施形態において、ＬＡＭは、本発明の方法によるラパマイシンでの治療中にその進行が遅延または停止される場合、対象において管理されている。別の一実施形態において、ＬＡＭは、ＬＡＭと関連する１つまたは複数の症状が改善または安定化される（すなわち、症状が治療のコース中に悪化しない）場合、対象において管理されている。

【0048】

[57]一実施形態において、本発明の方法は、ＬＡＭのための現在利用可能な治療法に「非反応性」または「不応性」である対象に関する。この文脈において、「非反応性」および「不応性」という用語は、ＬＡＭと関連する１つまたは複数の症状を軽減するのに臨床的に適切でない、治療法に対する対象の反応を指す。「対象」および「患者」という用語は、本発明の開示において互換的に使用される。これらの用語は、動物、好ましくは哺乳動物、たとえば非霊長類（たとえば、ウシ、ブタ、ウマ、ネコ、イヌ、ラット、およびマウス）および霊長類（たとえば、チンパンジー、サル、たとえばカニクイザルおよびヒト）、より好ましくはヒトを指す。好ましい一実施形態において、対象はヒトである。

【0049】

[58]「防止する」、「防止すること」および「防止」という用語は、本発明の方法により同定される１種もしくは複数の化合物の投与、または、かかる化合物および疾患または障害のための既知の治療法の組合せの投与からもたらされるＬＡＭの１つまたは複数の症状の再発、発達、進行または発症の防止を指す。

【0050】

[59]本発明の医薬組成物の文脈において、「担体」は、たとえば、ラパマイシンが送達のために一緒に配合される液体または固体物質、たとえば溶剤、希釈剤、安定剤、アジュバント、賦形剤、助剤、噴霧剤、またはビヒクルを指す。本発明の組成物における使用のための薬学的に許容される担体の例には、乾燥粉末担体、たとえばラクトース、マンノース、アミノ酸、シクロデキストリン、ジパルミトイルホスファチジルコリン、炭化水素およびフルオロカーボン噴射剤、圧縮気体、無菌液体、水、緩衝生理食塩水、エタノール、ポリオール（たとえば、グリセロール、プロピレングリコール、液体ポリエチレングリコール等）、油、洗剤、懸濁化剤、炭水化物（たとえば、グルコース、ラクトース、スクロースまたはデキストラン）、抗酸化剤（たとえば、アスコルビン酸またはグルタチオン）、キレート剤、低分子量タンパク質、または好適なそれらの混合物が含まれるが、これに限定されない。好ましくは、ラパマイシンの乾燥粉末エアロゾル配合物の文脈において、担体は、存在する場合、サッカライドおよび糖アルコールからなる群から選択される。一実施形態において、担体は、存在する場合、ラクトースである。

【0051】

[60]「薬学的に許容される」という用語は、動物、より具体的にはヒトにおける使用のための、連邦もしくは州政府の規制機関による認可、または、米国薬局方もしくは他の一般的に認められている薬局方、たとえば欧州薬局方への記載を指す。水溶性または非水溶性の薬物を可溶化するための一方法は、薬物の塩を形成すること、または、それ自体より可溶性であるか、もしくはプロドラッグの水溶性の塩を形成するために使用できるプロドラッグを調製することである。塩および薬学的に許容される塩形態を形成するための方法は、当技術分野において知られており、目的の薬物またはプロドラッグに存在しうる酸性基または塩基性基の塩を含むが、これに限定されない。自然界において塩基性である化合物は、様々な無機酸および有機酸で多様な塩を形成可能である。かかる塩基性化合物の薬理学的に許容される酸付加塩を調製するために使用できる酸は、無毒性酸付加塩、すなわち薬学的に許容されるアニオンを含有する塩を形成するものであり、これら塩は、硫酸塩、クエン酸塩、マレイン酸塩、酢酸塩、シュウ酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、硝酸塩、硫酸塩、重硫酸塩、リン酸塩、酸性リン酸塩、イソニコチン酸塩、酢酸塩、乳酸塩、サリチル酸塩、クエン酸塩、酸性クエン酸塩、酒石酸塩、オレイン酸塩、タンニン酸塩、パントテン酸塩、重酒石酸塩、アスコルビン酸塩、コハク酸塩、マレイン酸塩、ゲンチシン酸塩、フマル酸塩、グルコン酸塩、グルカロン酸塩（ｇｌｕｃａｒｏｎａｔｅ）、糖酸塩、ギ酸塩、安息香酸塩、グルタミン酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩およびパモ酸塩（すなわち、１，１’−メチレン−ビス−（２−ヒドロキシ−３−ナフトエ酸塩））を含むが、これに限定されない。自然界において酸性である化合物は、様々な薬理学的に許容されるカチオンで塩基性塩を形成可能である。かかる塩の例には、アルカリ金属またはアルカリ土類金属塩、特にカルシウム塩、マグネシウム塩、ナトリウム塩、リチウム塩、亜鉛塩、カリウム塩、および鉄塩が含まれる。

【0052】

[61]一実施形態において、本発明の方法および組成物は、ラパマイシンの水溶性プロドラッグまたは誘導体、好ましくはテムシロリムスまたは関連化合物を利用する。一実施形態において、本発明の方法および組成物は、ラパマイシン（シロリムス）を利用する。

【0053】

ラパマイシン
[62]ラパマイシンは、ストレプトマイセス・ハイグロスコピクスにより生成される大環状ラクトンであり、その化学（ＩＵＰＡＣ）名は、（３Ｓ，６Ｒ，７Ｅ，９Ｒ，１０Ｒ，１２Ｒ，１４Ｓ，１５Ｅ，１７Ｅ，１９Ｅ，２１Ｓ，２３Ｓ，２６Ｒ，２７Ｒ，３４ａＳ）−９，１０，１２，１３，−１４，２１，２２，２３，２４，２５，２６，２７，３２，３３，３４，３４ａ−ヘキサデカヒドロ−９，２７−ジヒドロキシ−３−［（１Ｒ）−２−［（１Ｓ，３Ｒ，４Ｒ）−４−ヒドロキシ−３−メトキシシクロヘキシル］−１−メチルエチル］−１０，２１−ジメトキシ（ｄｉｍｅｔｈｏｘ−ｙ）−６，８，１２，１４，２０，２６−ヘキサメチル−２３，２７−エポキシ−３Ｈ−ピリド［２，１−ｃ］［１，４］オキサアザシクロヘントリアコンチン（ｔｒｉａｃｏｎｔｉｎｅ）−１，５，１１，２８，２９（４Ｈ，６Ｈ，３１Ｈ）−ペントンである。

【0054】

[63]その分子式はＣ_５１Ｈ_７９ＮＯ_１３であり、その分子量は９１４．１７２ｇ／ｍｏｌである。その構造を下に示す。

【0055】

【化1】

【0056】

[64]ラパマイシンは、白色から灰白色の粉末であり、水に不溶性であると考えられており、２．６μｇ／ｍｌに過ぎない非常に低い溶解性を有する。それは、ベンジルアルコール、クロロホルム、アセトン、およびアセトニトリル中に溶解しやすい。ラパマイシンの非水溶性は、その配合について特殊な技術的な問題を提示する。経口投与剤形としてのその配合の文脈において、それは、固体分散体の形態の経口液剤（ＷＯ ９７／０３６５４）およびナノサイズ（４００ｎｍ未満）粒子を含有する錠剤（米国特許第５，９８９，５９１号）として調製されてきた。だが、これらの手順は、活性物質の溶解、したがってその生物学的利用能における実質的変動という弱点を有する。別の配合方法は、結晶性粉末を利用する。技術分野において認められている方法によれば、低溶解性薬物の結晶形態のそのアモルファス形態への変換は、その溶解性を有意に増加させうる。これはまたラパマイシンにも当てはまる一方で、アモルファス形態はきわめて化学的に不安定である。アモルファスラパマイシン（シロリムス）を含む医薬剤形は、ＷＯ ０６／０３９２３７およびＷＯ ０６／０９４５０７（シロリムスおよびモノステアリン酸グリセリンを４９．２５％の濃度で含む放出調節配合物）に記載されている。ラパマイシンの改良安定経口投与剤形は、米国特許第８，０５３，４４４号に記載されている。この剤形は、シロリムスの安定性をその放出速度に悪影響を与えることなく増加させるため、組成物中に脂肪酸エステルおよびポリマー（たとえば、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、ヒドロキシプロピルセルロース（ＨＰＣ）、またはヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ））を用いる。米国特許第８，０５３，４４４号によれば、１０％ ｗ／ｗを超える脂肪酸エステル濃度は、配合物からのシロリムスの放出速度を抑制するので、回避されるべきである。なぜなら、それは、胃腸管からの不十分な吸収をもたらしうるからである。好ましい脂肪酸エステル（グリセロールエステル）の濃度は、１％から５％または５％から９％である。一実施形態において、本発明のエアロゾルラパマイシン組成物は、ポリマーと組み合わせた脂肪酸エステルを含有しない。一実施形態において、本発明のエアロゾルラパマイシン組成物は、組成物の１０％重量または１２重量％を超える濃度で脂肪酸エステルを含有する。

【0057】

[65]本発明の方法および組成物における使用に好適なラパマイシンならびにその誘導体（類似体を含む）およびプロドラッグには、ｍＴＯＲ細胞シグナル伝達経路の阻害剤、好ましくはｍＴＯＲ自体の阻害剤である、ラパマイシン（シロリムス）およびそのプロドラッグまたは誘導体が含まれる。一実施形態において、ラパマイシン誘導体またはプロドラッグは、エベロリムス（Ａｆｆｉｎｉｔｏｒ、ＲＡＤ００１）、テムシロリムス（ＣＣＩ−７７９）、リダフォロリムス（以前はデフォロリムスとして知られていた、ＡＰ２３５７３）、ウミロリムス（Ｂｉｏｌｉｍｕｓ Ａ９）、ゾタロリムス（ＡＢＴ−５７８）、ノボリムス、マイオリムス、ＡＰ２３８４１、ＫＵ−００６３７９４、ＩＮＫ−１２８、ＥＸ２０４４、ＥＸ３８５５、ＥＸ７５１８、ＡＺＤ０８０５５およびＯＳＩ０２７からなる群から選択されるｍＴＯＲ阻害剤である。さらなる誘導体が当業者に知られており、たとえば、シロリムスのシクロへキシル環上のヒドロキシル基が−ＯＲ_１（式中、Ｒ_１は、任意選択で置換アルキル、アシルアミノアルキル、またはアミノアルキルである）により置き換えられたＯ−置換誘導体が含まれる。

【0058】

[66]一実施形態において、本発明のエアロゾル配合物および方法における使用のための化合物は、エベロリムス、テムシロリムス、リダフォロリムス、ウミロリムス、およびゾタロリムスからなる群から選択されるラパマイシン誘導体である。エベロリムス、テムシロリムス、リダフォロリムス、ウミロリムスおよびゾタロリムスの化学構造を下に示す。

【0059】

【化2】

【0060】

[67]一実施形態において、本発明のエアロゾル配合物および方法における使用のための化合物は、ＫＵ−００６３７９４、ＡＺＤ８０５５、ＩＮＫ１２８、およびＯＳＩ−０２７からなる群から選択されるｍＴＯＲ阻害剤である。ｍＴＯＲ阻害剤ＫＵ−００６３７９４、ＡＺＤ８０５５、ＩＮＫ１２８、およびＯＳＩ−０２７の化学構造を下に示す。

【0061】

【化3】

【0062】

[68]本発明の方法および組成物における使用のために特に好ましいのは、シロリムス、テムシロリムス、およびエベロリムスである。一実施形態において、本発明のエアロゾル配合物および方法における使用のための化合物は、シロリムス、テムシロリムス、およびエベロリムスからなる群から選択される。一実施形態において、化合物は、シロリムスまたはエベロリムスである。

【0063】

吸入のための組成物
[69]本発明は、ラパマイシン、またはそのプロドラッグもしくは誘導体を含む、水性溶液、乾燥粉末、または１種または複数の薬学的に許容される噴射剤と担体との混合物の形態の、吸入による投与に適する医薬組成物を提供する。一実施形態において、ラパマイシンは、薬学的に許容される化合物、材料、またはマトリクス中に被包される。一実施形態において、ラパマイシンは、リポソーム配合物または非リポソーム配合物に被包される。

【0064】

[70]本発明の組成物は、ヒト対象における吸入による肺薬物送達に好適な、ラパマイシンのエアロゾル化可能な配合物である。「エアロゾル」という用語は、この文脈において、分散相が固体または液体粒子から構成され、分散媒が気体であるコロイド系を意味するよう使用される。一実施形態において、気体は空気であり、配合物は、ネブライザーを介した投与に好適な溶液配合物または乾燥粉末吸入器デバイスを介した投与に好適な乾燥粉末配合物である。一般に、呼吸用粒子または液滴は、０．１０から１０ミクロンの範囲の平均直径を有すると考えられる。粒子または液滴のサイズは、肺自体（すなわち、肺が標的組織である場合）または全身（肺が全身投与のための代替経路として利用される場合）のいずれかに対する標的化送達を最大化するよう選択される。サイズは、好ましくは、肺自体が治療標的である場合に約０．５から５ミクロンの範囲、または肺を介した全身送達について３ミクロン未満であると考えられる。サイズは、当技術分野において知られている方法により測定され、たとえば米国薬局方第９０５章および６０１章に記載されている。たとえば、それは、空気動力学的中央粒子径（ＭＭＡＤ：Ｍａｓｓ Ｍｅｄｉａｎ Ａｅｒｏｄｙｎａｍｉｃ Ｄｉａｍｅｔｅｒ）として測定される。一実施形態において、本明細書に記載の組成物を含む粒子の平均（ａｖｅｒａｇｅ ｏｒ ｍｅａｎ）直径は、ＭＭＡＤとして測定される。

【0065】

[71]一実施形態において、エアロゾルの分散相は、液体粒子または液滴から構成される。この文脈において、「液体粒子」および「液滴」という用語は互換的に使用される。この実施形態において、本発明の配合物は、溶液配合物である。一実施形態において、エアロゾルの分散相は、固体粒子から構成される。この実施形態において、本発明の配合物は、乾燥粉末配合物である。このサイズの微粉化粒子は、当技術分野において知られている方法、たとえば機械的粉砕（ミル粉砕）、亜臨界もしくは超臨界溶液からの沈殿、噴霧乾燥、フリーズドライ、または凍結乾燥により製造できる。

【0066】

[72]一般に、吸入粒子は、２つの機構：より大きい粒子について通常支配的である固着（ｉｍｐａｃｔｉｏｎ）、およびより小さい粒子について優勢である沈降（ｓｅｄｉｍｅｎｔａｔｉｏｎ）のうちの１つにより沈着されやすい。すなわち、である。固着は、吸入粒子の運動量が十分に大きく、粒子が気流に従わないで生理学的表面に遭遇するときに生じる。対照的に沈降は、吸入気流とともに移動してきた非常に小さい粒子が、気流内のランダムな拡散の結果として生理学的表面に遭遇するときに、肺の深部において主に生じる。本発明のエアロゾル配合物は、好ましくは、所望の治療有効性を達成するために、固着（上気道内）または沈降（肺胞内）によるそれらの沈着を最大化するよう適合されている。

【0067】

[73]送達デバイス、たとえばネブライザー、ｐＭＤＩまたはＤＰＩデバイスから患者に送達される薬物の量を、送達用量と呼ぶ。それは、シミュレートされた吸入操作において送達デバイスから放出される薬物の量を決定することにより、インビトロで推定できる。これは放出用量（ＥＤ）と呼ばれ、当技術分野において知られている方法、たとえば、米国および欧州薬局方、たとえばＵＳＰの第６０１章および第９０５章に記載のものにより測定される。したがって、「放出用量」は、送達用量と等しいものと考えられる。

【0068】

[74]送達デバイスから患者の肺に送達される薬物の量は、呼吸用量と呼ばれる。それは、当技術分野において知られている方法、たとえば米国および欧州薬局方、たとえばＵＳＰの第６０１章および第９０５章に記載のものにより、カスケードインパクター、たとえばＮｅｘｔ Ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ Ｉｍｐａｃｔｏｒ（ＮＧＩ）を使用して測定される微粒子用量（ＦＰＤ）を決定することによりインビトロで推定できる。

【0069】

[75]送達デバイスから微細で吸入可能な粒子で放出される薬物の量は、配合物の微粒子画分（ＦＰＦ）と呼ばれる。ＦＰＦは、潜在的に呼吸可能な送達用量における薬物の画分である。したがって、ＦＰＦは、ＦＰＤのＥＤ（放出、または送達用量）に対する比である。配合物のこれらの特性は、当技術分野において知られている方法、たとえば、米国および欧州薬局方、たとえばＵＳＰの第６０１章およびＰｈａｒｍ Ｅｕｒｏｐａのモノグラフ２．９．１８に記載のものにより測定される。

【0070】

[76]一実施形態において、本発明のエアロゾル化可能なラパマイシン配合物は、長期保存後であっても、たとえば、１から１２ヶ月保存後または１から３６ヶ月保存後であっても、１０マイクログラムから２ミリグラムの範囲、好ましくは０．５ミリグラム未満の対応するＦＰＤを有する、２０％を超えるＦＰＦを有する。一実施形態において、患者に送達される用量、送達用量（ＤＤ）または放出用量（ＥＤ）は、２５マイクログラムから２．５ミリグラムの範囲、好ましくは０．５ミリグラム未満である。

【0071】

[77]いくつかの実施形態において、ラパマイシンは、薬学的に許容される化合物、材料、またはマトリクス中に被包される。一実施形態において、ラパマイシンは、リポソーム配合物または非リポソーム配合物に被包される。

【0072】

水性溶液組成物
[78]一実施形態において、エアロゾル化可能な本発明の組成物は、ネブライザー、たとえばジェット、振動メッシュ、静的メッシュまたはオリフィスネブライザーを介した肺送達に適するラパマイシンの水性溶液配合物である。したがって、溶液配合物は、上述のとおり、約０．１から１０ミクロンの直径の呼吸用の範囲のエアロゾル液滴形成を可能にするよう適合される。一実施形態において、組成物は、水、エタノール、および低分子量ポリオール中に溶解された、ラパマイシン（シロリムス）またはそのプロドラッグもしくは誘導体からなる噴霧吸入可能な水性溶液配合物であり、任意選択で界面活性剤を含む。一実施形態において、水性溶液配合物は、２０ｍＰａ・ｓ未満、１０ｍＰａ・ｓ未満、または５ｍＰａ・ｓ未満の粘度、ならびに少なくとも４５ｄｙｎｅ／ｃｍ、好ましくは６０ｄｙｎｅ／ｃｍ超の表面張力を有する。好ましくは、配合物は、５ｍＰａ・ｓ未満の粘度、および４５ｄｙｎｅ／ｃｍ超の表面張力を有する。一実施形態において、組成物は、２０ｍＰａ・ｓ未満の粘度、１０ｍＰａ・ｓ未満の粘度、または５ｍＰａ・ｓ未満の粘度ならびに少なくとも４５ｄｙｎｅ／ｃｍ、好ましくは６０ｄｙｎｅ／ｃｍ超の表面張力を有する。

【0073】

[79]一実施形態において、水性溶液配合物は、ラパマイシン、水、エタノール、ならびにグリセロールおよびプロピレングリコールから選択される低分子量ポリオールからなる。一実施形態において、水性溶液配合物は、ラパマイシン、水、ならびにグリセロールおよびプロピレングリコールから選択される低分子量ポリオールからなり、エタノールは任意選択である。配合物はまた、任意選択で、非イオン性界面活性剤、好ましくはＰＥＧ １００、またはポリソルベート、好ましくはＰｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ ８０（「ＰＳ８０」）、リン脂質、好ましくは天然リン脂質、たとえばレシチン、好ましくは水添ソーヤレシチン、および抗酸化剤または安定剤、好ましくはＥＤＴＡ二ナトリウムを含有しうる。一実施形態において、非イオン性界面活性剤は、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）ＰＥＧ １００、ＰＥＧ １０００、およびＰｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ ８０（Ｔｗｅｅｎ（商標）８０、モノオレイン酸ソルビタン、またはオレイン酸ポリオキシエチレンソルビタンとも呼ばれる）、およびそれらの混合物からなる群から選択される。

【0074】

[80]水性溶液中のラパマイシンの量は、溶液の総重量に対して約０．００１重量％から０．０１重量％（％ｗｔまたは％ｗ／ｗ）である。一実施形態において、ラパマイシンは溶液中に、約０．０１ｍｇ／ｍｌから約０．１ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する。一実施形態において、ラパマイシンの量は、溶液の総重量に対して０．００１％から０．０１％ｗ／ｗである。

【0075】

[81]一実施形態において、溶液中のラパマイシンの濃度は、約０．０１から．１ｍｇ／ｍｌであり、低分子量ポリオールの量は、５から３５％ｗ／ｗであり、エタノールの量は、５〜２０％ｗ／ｗの量で存在し、非イオン性界面活性剤の量は、１から２００百万分率（ｐｐｍ）ｗ／ｗである。好ましくは、非イオン性界面活性剤の量は、１００ｐｐｍ（ｗ／ｗ）未満である。任意選択の抗酸化剤／安定剤の量は、ゼロから０．０１％ｗ／ｗ未満である。

【0076】

[82]一実施形態において、本発明の水性溶液配合物は、ポリエチレングリコール、レシチン、ＥＤＴＡ、ブロックコポリマー、およびシクロデキストリンからなる群から選択される１種または複数の添加剤または賦形剤を含有しない。

【0077】

[83]水性溶液配合物は、ラパマイシンが完全に溶解している単相水性溶液である。配合物中の主たる共溶剤は、エタノール、ならびにグリセロールおよびプロピレングリコールから選択される低分子量ポリオールである。ラパマイシンは、懸濁液またはエマルション中になく、溶液をコロイド溶液または分散液として記述することもできない。本発明の水性溶液配合物は、コロイド構造、たとえばミセルまたはリポソームを欠く。リン脂質の量は、存在する場合、リポソームを形成したりラパマイシンが沈殿したりするには少量過ぎる。また、リン脂質および非イオン性界面活性剤の総量は、表面張力を改変するには少量過ぎる。結果として、リン脂質も非イオン性界面活性剤も、従来の意味での界面活性剤として作用するのに十分な量では存在しない。この文脈において、界面活性剤という用語は、溶液の表面張力または溶液中の液体と任意の固体薬物粒子との間の界面張力を低下させるよう作用する薬剤を指し、結果として界面活性剤は、洗剤、湿潤剤、乳化剤または分散剤として作用する。代わりに、本発明の溶液配合物中の非イオン性界面活性剤は、最終産物がパッケージされるポリエチレン容器への薬物の吸着を遮断するよう役立ち、そのことにより、容器への吸着を介した薬効の損失を防止する。

【0078】

[84]したがって、一実施形態において、水性溶液配合物は、ラパマイシンが完全に溶解している単相水性溶液であり、溶液は、ミセルまたはリポソームを欠き、溶液は、エマルション、分散液、または懸濁液ではない。

【0079】

[85]一実施形態において、溶液配合物は無菌である。一実施形態において、溶液配合物は、０．２ミクロンフィルターで濾過され無菌である。一実施形態において、溶液配合物は加熱、たとえば高圧蒸気殺菌、または放射線により滅菌されていない。

【0080】

[86]一実施形態において、本発明は、無菌水性溶液配合物で満たされた１つまたは複数の容器またはバイアル（これらの用語は、互換的に使用される）を含有するパッケージを提供する。好ましくは、容器は、単位用量容器である。一実施形態において、容器は、ポリマーバイアル、好ましくはポリエチレンバイアルである。一実施形態において、本発明の無菌水性溶液配合物で充填された容器またはバイアルは、ブロー成形によりバイアルを形成し、その直後にバイアルを無菌条件下で本発明の無菌濾過配合物で充填し、続いてバイアルが充填された直後にヒートシールする工程を含む方法により製造される。

【0081】

[87]一実施形態において、本発明の水性エアロゾル配合物は、
約０．００１％から０．０１％ｗ／ｗのラパマイシン（またはそのプロドラッグもしくは誘導体）、
約５％から３５％ｗ／ｗのプロピレングリコール、
約５％から２０％ｗ／ｗのエタノール、
約１から２００ｐｐｍ ｗ／ｗのＰｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ ８０、
約１から１００ｐｐｍ ｗ／ｗのレシチン、および
水、
を含むか、またはこれらからなり、
水の量は、０．０１から０．１ミリグラム／ミリリットルの間のラパマイシンの濃度を達成するのに十分である。任意選択で、安定性強化剤、たとえばＥＤＴＡ二ナトリウムを０．０１％ｗｔ／ｗｔ未満のレベルで添加できる。

【0082】

[88]水性および他の非加圧液体系について、様々なネブライザー（少量ネブライザーを含む）を、配合物をエアロゾル化するために利用可能である。コンプレッサー駆動ネブライザーは、ジェット技術を組み込み、液体エアロゾルを生成するために圧縮空気を使用する。かかるデバイスは、たとえば、Ｈｅａｌｔｈｄｙｎｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｉｎｃ．、Ｉｎｖａｃａｒｅ，Ｉｎｃ．、Ｍｏｕｎｔａｉｎ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｅｑｕｉｐｍｅｎｔ，Ｉｎｃ．、Ｐａｒｉ Ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ，Ｉｎｃ．、Ｍａｄａ Ｍｅｄｉｃａｌ，Ｉｎｃ．、Ｐｕｒｉｔａｎ−Ｂｅｎｎｅｔ、Ｓｃｈｕｃｏ，Ｉｎｃ．、ＤｅＶｉｌｂｉｓｓ Ｈｅａｌｔｈ Ｃａｒｅ，Ｉｎｃ．、およびＨｏｓｐｉｔａｋ，Ｉｎｃ．から市販されている。超音波ネブライザーは、呼吸用液滴を生成するために圧電結晶の振動の形態の力学的エネルギーに依存し、たとえば、Ｏｍｒｏｎ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ，Ｉｎｃ．およびＤｅＶｉｌｂｉｓｓ Ｈｅａｌｔｈ Ｃａｒｅ，Ｉｎｃ．から市販されている。

【0083】

[89]一実施形態において、本発明の水性エアロゾル配合物は、Ａｅｒｏｇｅｎ、Ｐａｒｉ、Ｐｈｉｌｉｐｓ、またはＯｍｒｏｎから入手可能な振動ネブライザーを介して送達される。一実施形態において、本発明の水性エアロゾル配合物は、振動メッシュネブライザー、たとえば、Ａｅｒｏｎｅｂ（登録商標）Ｇｏ（Ａｅｒｏｇｅｎ、Ｐｈｉｌｉｐｓ Ｒｅｓｐｉｒｏｎｉｃｓにより販売）、Ｉ−Ｎｅｂ（登録商標）（Ｐｈｉｌｉｐｓ）またはＥ−Ｆｌｏｗ（登録商標）（Ｐａｒｉ）、または類似のネブライザーとの使用に好適な容器内にパッケージされている。一実施形態において、本発明の水性エアロゾル配合物は、オリフィスネブライザー、たとえばＢｏｅｒｉｎｇｈｅｒ−Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ製Ｒｅｓｐｉｍａｔ（登録商標）を介して送達される。

【0084】

[90]したがって、一実施形態において、本発明は、吸入によるヒト対象への投与に好適な、噴霧吸入可能な水性溶液の形態の医薬組成物を提供し、水性溶液は、好ましくはシロリムス、エベロリムス、およびテムシロリムスから選択されるラパマイシン、またはそのプロドラッグもしくは誘導体、水、エタノール、ならびに低分子量ポリオールからなる。一実施形態において、低分子量ポリオールは、グリセロールまたはプロピレングリコール、またはそれらの混合物である。一実施形態において、組成物は、ＰＥＧ １００、ＰＥＧ １０００、およびポリソルベート８０、およびこれらの混合物からなる群から選択される非イオン性界面活性剤をさらに含む。一実施形態において、配合物中の非イオン性界面活性剤の量は、配合物の重量に対して１から２００ｐｐｍ ｗ／ｗ、好ましくは１００ｐｐｍ ｗ／ｗ未満である。一実施形態において、組成物は、リン脂質、抗酸化剤または化学安定剤をさらに含む。一実施形態において、配合物中の抗酸化剤または化学安定剤の量は、配合物の重量に対して０．０１％ ｗ／ｗ未満である。一実施形態において、抗酸化剤または化学安定剤はＥＤＴＡである。一実施形態において、配合物中のラパマイシンの量は、配合物の重量に対して０．００１から０．０１％ｗ／ｗである。

【0085】

[91]一実施形態において、組成物は、ポリエチレングリコール、レシチン、ＥＤＴＡ、ブロックコポリマー、およびシクロデキストリンからなる群から選択される１種または複数の添加剤または賦形剤を含有しない。

【0086】

[92]一実施形態において、組成物は、ミセルおよびリポソームから選択されるコロイド構造を欠く。
[93]一実施形態において、組成物は、ジェットネブライザー、振動メッシュネブライザー、静的メッシュネブライザー、およびオリフィスネブライザーのうちの任意の１つを介した投与に好適である。

【0087】

[94]一実施形態において、組成物は、２０ｍＰａ・ｓ未満、好ましくは１０ｍＰａ・ｓ未満、最も好ましくは５ｍＰａ・ｓ未満の粘度、および少なくとも４５ｄｙｎｅ／ｃｍ、好ましくは少なくとも５０ｄｙｎｅ／ｃｍの表面張力を有する。

【0088】

[95]本発明はまた、噴霧吸入可能な水性溶液の形態の本発明の医薬組成物の製造方法であって、０．２ミクロン以下の細孔サイズを有するフィルターを通して溶液を無菌濾過する工程と、無菌濾物を無菌条件下の回収容器中に回収する工程とを含む、方法を提供する。一実施形態において、製造方法は、無菌濾物を無菌条件下の密閉容器へと移す工程をさらに含む。一実施形態において、密閉容器は、単位用量ポリエチレンバイアルである。一実施形態において、バイアルは、無菌濾物がバイアルに移される直前にブロー成形により製造される。一実施形態において、この方法は、無菌濾物がバイアルに移される直後にバイアルをヒートシールする工程をさらに含む。

【0089】

乾燥粉末組成物
[96]一実施形態において、本発明のエアロゾル化可能な組成物は、ラパマイシン、またはそのプロドラッグもしくは誘導体の微粉化粒子を、治療剤（「薬物」とも呼ばれる）として含む乾燥粉末であり、粒子は、０．１から１０ミクロンの直径および約０．５から４．５ミクロン、約１から４ミクロン、約１から３．５ミクロン、約１．５から３．５ミクロン、または約２から３ミクロンの間の平均直径を有する。乾燥粉末配合物は、乾燥粉末吸入器デバイス（ＤＰＩ）または加圧計量用量吸入器（ｐＭＤＩ）における使用に好適である。乾燥粉末中のラパマイシンの量は、粉末の総重量に対して約０．５から２０％（ｗ／ｗ）である。一実施形態において、ラパマイシンの量は、約１％または２％（ｗ／ｗ）である。

【0090】

[97]一実施形態において、微粉化ラパマイシンは、下に記載の湿式研磨またはジェットミル粉砕により製造され、約０．５から４．５ミクロン、約１から４ミクロン、または約２から３ミクロンの範囲の直径を生成し、ラパマイシン粒子は、ラクトース担体粒子上に０．５〜２％ｗ／ｗの薬物／担体比でブレンドされ、好ましい比は１％である。

【0091】

[98]一実施形態において、薬物粒子は、送達デバイス（乾燥粉末吸入器）内に含有される壊れやすいマトリクス内に軽度に圧縮される。作動時に送達デバイスは、薬物粒子の一部をマトリクスから削り落とし、薬物粒子を気道へと送達する吸息中に分散させる。あるいは、薬物粒子は、送達デバイス（乾燥粉末吸入器）のリザーバー内に含有される自由に流動する粉末であってもよい。リザーバーは、デバイス内の一体型チャンバー、または作動前にデバイス内に挿入される、カプセル剤、ブリスター剤もしくは類似の前もって形成されたリザーバーでありうる。作動時にデバイスは、薬物粒子の一部をリザーバーから分散させ、薬物粒子を気道へと送達する吸息中に分散させる。

【0092】

[99]一実施形態において、乾燥粉末組成物は、薬物粒子ならびに、アラビノース、グルコース、フルクトース、リボース、マンノース、スクロース、トレハロース、ラクトース、マルトース、デンプン、デキストラン、マンニトール、ロイシン、リジン、イソロイシン、ジパルミトイルホスファチジルコリン、レシチン、ポリ乳酸、ポリ（乳酸−ｃｏ−グルタミン酸）、およびキシリトール、または前述のいずれかの混合物からなる群から選択される担体からなる。一実施形態において、担体はラクトースであり、特に一水和物の形態である。一実施形態において、乾燥粉末組成物は、２種以上の担体のブレンドを含む。

【0093】

[100]一実施形態において、乾燥粉末組成物は、薬物および少なくとも２種の異なる担体のブレンドを含む。一実施形態において、薬物対担体比は、約０．５から２０％（ｗ／ｗ）の範囲である。一実施形態において、薬物粒子は、０．１から１０ミクロンの範囲の直径を、約１から４、１から３．５、または約１．５から３．５、または２から３ミクロンの平均直径とともに有する。担体粒子は、２から２００ミクロンの範囲の直径を有してもよい。

【0094】

[101]一実施形態において、組成物は、ＤＰＩデバイスのブリスターパックまたはリザーバー内に含有される。一実施形態において、乾燥粉末組成物は、ＤＰＩデバイスにおける使用に好適なゼラチン、デンプン、セルロース、もしくはポリマーカプセル剤、またはホイル／ホイルもしくはホイル／プラスチックブリスター剤内に前もってロードされている。各カプセル剤またはブリスター剤は、１から１００ミリグラムの乾燥粉末組成物を含有してもよい。カプセル剤またはブリスター剤は、乾燥粉末吸入器（ＤＰＩ）デバイス、たとえばＡｅｒｏｌｉｚｅｒ（登録商標）、Ｐｌａｓｔｉａｐｅ（登録商標） ＲＳ０１ Ｍｏｄｅｌ ７、およびＰｌａｓｔｉａｐｅ（登録商標） ＲＳ００ Ｍｏｄｅｌ ８、ＸＣａｐｓ（登録商標）、ＦｌｏｗＣａｐｓ（登録商標）、Ａｒｃｕｓ（登録商標）、Ｄｉｓｋｈａｌｅｒ（登録商標）またはＭｉｃｒｏｄｏｓｅ（登録商標）内に挿入されてもよい。作動時にＤＰＩデバイスは、カプセル剤またはブリスター剤を破裂させ、粉末が吸息中に分散し、薬物を気道に送達する。

【0095】

[102]一実施形態において、乾燥粉末組成物は、Ａｃｃｕｈａｌｅｒ（登録商標）、Ｃｏｎｉｘ（商標）、Ｒｏｔａｈａｌｅｒ（登録商標）、ＴｗｉｎＣａｐｓ（登録商標）、ＸＣａｐｓ（登録商標）、ＦｌｏｗＣａｐｓ（登録商標）、Ｔｕｒｂｕｈａｌｅｒ（登録商標）、ＮｅｘｔＨａｌｅｒ（登録商標）、ＣｙｃｌｏＨａｌｅｒ（登録商標）、Ｒｅｖｏｌｉｚｅｒ（商標）、Ｄｉｓｋｈａｌｅｒ（登録商標）、Ｄｉｓｋｕｓ（登録商標）、Ｓｐｉｎｈａｌｅｒ、Ｈａｎｄｉｈａｌｅｒ（登録商標）、Ｍｉｃｒｏｄｏｓｅ Ｉｎｈａｌｅｒ、ＧｙｒｏＨａｌｅｒ（登録商標）、ＯｍｎｉＨａｌｅｒ（登録商標）、Ｃｌｉｃｋｈａｌｅｒ（登録商標）、Ｄｕｏｈａｌｅｒ（登録商標）（Ｖｅｃｔｕｒａ）、およびＡＲＣＵＳ（登録商標）吸入器（Ｃｉｖｉｔａｓ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）から選択される乾燥粉末吸入器（ＤＰＩ）デバイス内に含有される。一実施形態において、本発明は、本明細書に記載の乾燥粉末組成物を含有するＤＰＩデバイスを提供する。一実施形態において、デバイスは、ＸＣａｐｓ、ＦｌｏｗＣａｐｓ、Ｈａｎｄｉｈａｌｅｒ、ＴｗｉｎＣａｐｓ、Ａｅｒｏｌｉｚｅｒ（登録商標）、Ｐｌａｓｔｉａｐｅ（登録商標） ＲＳ０１ Ｍｏｄｅｌ ７、およびＰｌａｓｔｉａｐｅ（登録商標） ＲＳ００ Ｍｏｄｅｌ ８からなる群から選択される。一実施形態において、組成物を含有するデバイスは、ＧｙｒｏＨａｌｅｒ（登録商標）、ＯｍｎｉＨａｌｅｒ（登録商標）、Ｃｌｉｃｋｈａｌｅｒ（登録商標）、Ｄｕｏｈａｌｅｒ（登録商標）、およびＡＲＣＵＳ（登録商標）吸入器からなる群から選択される。

【0096】

[103]担体粒子は、肺深部における担体材料の沈着を回避するために、好ましくは、より大きなサイズ（５ミクロン超）のものである。一実施形態において、担体粒子は、１から２００ミクロン、３０から１００ミクロン、または１０ミクロン未満の範囲の直径を有する。一実施形態において、担体粒子は、一方は約３０〜１００ミクロンの粒子を有し、他方は１０ミクロン未満の粒子を有する、２種の担体のブレンドである。２種の異なる担体の比は、３：９７から９７：３の範囲である。一実施形態において、乾燥粉末組成物は、０．５〜２０％（ｗ／ｗ）の薬物対担体比からなり、薬物粒子は、０．１から１０ミクロンの直径を有し、平均直径は３．５ミクロン未満である。一実施形態において、担体材料は、結晶性担体材料である。好ましくは、結晶性担体材料は、少なくとも９０％、好ましくは９５％超結晶性のものであり、８０％以下の相対湿度の条件下で室温では、水は担体により吸収されないか、または実質的に吸収されない。かかる結晶性担体の例は、ラクトース一水和物およびグルコース一水和物である。担体の量は、粉末の乾燥重量で配合物の１から９９．０％以上、好ましくは５から９９％、１０から９９％、２０から９９％、３０から９９％、４０から９９％、または５０から９９％である。

【0097】

[104]一実施形態において、乾燥粉末組成物は、送達デバイス（乾燥粉末吸入器）のリザーバー内に含有される。リザーバーは、デバイス内の一体型チャンバー、または作動前にデバイス内に挿入される、カプセル剤、ブリスター剤もしくは類似の前もって形成されたリザーバーでありうる。作動時にデバイスは、薬物粒子の一部をリザーバーから分散させ、薬物粒子を気道へと送達する吸息中に分散させる。

【0098】

[105]一実施形態において、薬物は、薬学的に許容される担体とともに細かい粉末として存在する。この文脈において、「細かい」という用語は、上で論じたとおり、吸入可能な範囲の粒子サイズを指す。好ましくは、薬物は、粒子が１０ミクロン以下の範囲の平均直径を有するように微粉化されている。一実施形態において、本明細書に記載の乾燥粉末組成物中のラパマイシン（またはそのプロドラッグもしくは誘導体）の粒子の平均直径（ＭＭＡＤまたはＤｖ５０）は、０．５から１０ミクロン、０．５から６ミクロン、１から５ミクロン、１から４ミクロン、１から３ミクロン、または２から３ミクロンである。ＭＭＡＤまたはＤｖ５０値は、それ未満で集団の体積の５０％が生じる粒子サイズである。

【0099】

[106]一実施形態において、ラパマイシンの乾燥粉末配合物は、下に記載する添加剤から選択される１種または複数の添加剤をさらに含む。一実施形態において、１種または複数の添加剤は、ステアリン酸マグネシウムを含むか、またはそれからなる。この実施形態の一態様において、ステアリン酸マグネシウムは、粉末の乾燥重量で０．００１から１０％の量、好ましくは０．０１から５％または０．０１から２％の量で存在する。別の一実施形態において、添加剤は、粉末の乾燥重量で０．１％から１％、好ましくは０．２％から０．６％の量のリン脂質、たとえばレシチン（ホスファチジルコリンの混合物）を含むか、またはそれからなる。この実施形態の一態様において、添加剤は、担体をラパマイシンの粒子とブレンドする工程の前に、またはそれと同時に、担体材料上にコーティングされる。これは、たとえば、担体を添加剤でコーティングする高エネルギー混合工程、または長期間の低エネルギー混合、またはコーティングされた担体材料の所望のレベルを達成するための低エネルギー混合と高エネルギー混合との組合せを利用することにより達成できる。乾燥粉末を混合してブレンドを形成するための低エネルギーデバイスは、当技術分野において知られており、たとえば、Ｖ−ブレンダー、二重円錐形ブレンダー、傾斜円錐形ブレンダー、キューブブレンダー、ビンブレンダー、水平または垂直ドラムブレンダー、静的連続ブレンダー、および動的連続ブレンダーを含む。他の、より高エネルギーのデバイスには、当業者に知られている高剪断ミキサーが含まれる。

【0100】

[107]いくつかの実施形態において、乾燥粉末は、カプセル剤中に含有される。一実施形態において、カプセル剤は、ゼラチンカプセル剤、プラスチックカプセル剤、もしくはセルロースカプセル剤であるか、またはホイル／ホイルもしくはホイル／プラスチックブリスター剤の形態である。各例において、カプセル剤またはブリスター剤は、好ましくは各カプセル剤の粉末の総重量を１ｍｇから１００ｍｇとする量の担体を伴う用量単位での、ＤＰＩデバイスにおける使用に好適である。あるいは、乾燥粉末は、複数用量ＤＰＩデバイスのリザーバー内に含有されてもよい。

【0101】

[108]ラパマイシンの粒子サイズは、従来の方法により、たとえばエアジェットミル、ボールミルまたは振動ミル内で粉砕することにより、湿式研磨、微量沈降、噴霧乾燥、凍結乾燥または亜臨界もしくは超臨界溶液からの再結晶により、所望のマイクロ粒子レベルまで低減できる。この文脈におけるジェットミル粉砕または粉砕は、機械的手段による乾燥薬物粒子の微粒化を指す。微粒化技術は、薬物の溶液、スラリー、または懸濁液を作ることを必要としない。代わりに、薬物粒子は、機械的にサイズを低減させられる。微粒化により用いられる相対的に高いエネルギーゆえに、いくつかの実施形態において、ラパマイシンとの共微粒化混合物中に担体材料を含めることが所望される。この文脈において、担体材料は、微粒化のエネルギーの一部を吸収し、さもなければ微粒化はラパマイシンの構造に悪影響を与えうる。一実施形態において、１から４または２から３ミクロンの範囲のサイズのラパマイシン粒子が、ジェットミル粉砕法により製造される。

【0102】

[109]ＵＳ２０１３／０２０３７１７に記載の湿式研磨は、懸濁液またはスラリー中の薬物粒子の粒子サイズを低減するために高剪断力を使用することを伴う。湿式研磨は、薬物粒子のみまたはミル粉砕媒体と呼ばれる追加の粒子状物質を含みうる。一実施形態において、ラパマイシンの粒子サイズは、特に上昇させた圧力での空洞形成による湿式ミル粉砕を含む湿式研磨法を使用して所望のレベルまで低減でき、ラパマイシンは、それが不溶性である水または他の溶剤中に懸濁させられ、続いて懸濁液を噴霧乾燥してラパマイシンが乾燥粉末として得られる。一実施形態において、１から４または２から３ミクロンの範囲のサイズのラパマイシン粒子が、ラパマイシンの懸濁液を調整する工程と、懸濁液をマイクロ流動化にかける工程と、得られた粒子を噴霧乾燥して乾燥粉末を形成する工程とを含む湿式研磨法により製造される。ラパマイシンは、プロピルまたはブチルアルコール、水、および酢酸エチルからなる群から選択される逆溶剤中に懸濁できる。一実施形態において、懸濁液は水性懸濁液である。

【0103】

[110]噴霧乾燥は一般に、薬物の溶液、スラリー、または懸濁液を作ること、溶液、スラリー、または懸濁液を噴霧化して粒子を形成すること、および次に溶液、スラリー、または懸濁液媒体を蒸発させて粒子を形成することを伴う。溶液、スラリーまたは懸濁液は、亜臨界または超臨界条件下で形成できる。蒸発工程は、雰囲気の温度を噴霧化が生じる温度へと上昇させること、または圧力を減少させること、または両方の組合せにより達成できる。一実施形態において、ラパマイシンを含む粉末配合物は、ラパマイシンの水性分散液を噴霧乾燥して、上述のとおり肺送達に好適なサイズを有するラパマイシンの凝集粒子からなる乾燥粉末を形成することにより作られる。凝集粒子サイズは、肺深部または上気道部位、たとえば上部気管支領域もしくは鼻粘膜のいずれかを標的とするよう調整（増加または減少）できる。これは、たとえば、噴霧乾燥分散液中のラパマイシンの濃度を増加させること、または噴霧乾燥器により生成される液滴サイズを増加させることにより達成できる。

【0104】

[111]あるいは、乾燥粉末は、水性薬物溶液、分散液、またはエマルションをフリーズドライ（凍結乾燥）すること、または噴霧乾燥とフリーズドライとの組合せにより製造できる。

【0105】

[112]一実施形態において、乾燥粉末配合物は、ラパマイシン、および１種または複数の任意選択の添加剤の水性分散液をフリーズドライすることにより作られる。一実施形態において、粉末は、ラパマイシンおよび存在する場合には添加剤の凝集体を含有し、凝集体は、上述の呼吸用サイズ範囲内である。

【0106】

[113]一実施形態において、ラパマイシンおよび１種または複数の任意選択の添加剤の水性分散液は、溶解希釈剤、たとえばラクトースまたはマンニトールをさらに含み、結果として分散液がフリーズドライされるとき、それぞれが少なくとも１つの埋め込まれた薬物粒子および存在する場合には添加剤粒子を含有する、呼吸用希釈剤粒子が形成される。

【0107】

[114]一実施形態において、乾燥粉末は、ラパマイシンがロードされたリポソームを含む。薬物がロードされたリポソームは、当技術分野において知られている方法により、たとえば、Ｍ． Ｃｈｏｕｇａｌｅら Ｉｎｔ． Ｊ． Ｎａｎｏｍｅｄｉｃｉｎｅ ２：６２５−６８８ （２００７）にタクロリムスについて記載の技術を使用して製造できる。簡潔に述べると、ラパマイシン、水添ホスファチジルコリン（ＨＳＰＣ）、およびコレステロールを、メタノールおよびクロロホルムの混合物中に溶解させ、次に、たとえばＲｏｔａｅｖａｐｏｒａｔｏｒ内で、乾燥薄膜形成にかける。リポソームを水和し、リポソーム分散液をサイズ低減のため高圧ホモジナイザーに通す。得られたペレットを、ベシクルサイズおよびパーセント薬物封入について特徴づけ、次に、ラパマイシンの所望の量と等しいペレットを、好適な媒体中に分散させ、噴霧乾燥にかけ、吸入のための所望のサイズの粒子を得る。噴霧乾燥粉末は、投与のためのカプセル剤、キャニスター、またはブリスターパック内に充填できる。

【0108】

[115]一実施形態において、乾燥粉末粒子は、亜臨界または超臨界溶液からの沈降により製造できる。
[116]乾燥粉末組成物は、好適な乾燥粉末吸入器デバイス内、またはかかるデバイスにおける使用のためのカプセル剤もしくはブリスター剤内に含有されてもよい。かかるデバイスの例は上に記載され、Ａｃｃｕｈａｌｅｒ（登録商標）、Ａｅｒｏｌｉｚｅｒ（登録商標）、Ｐｌａｓｔｉａｐｅ（登録商標） ＲＳ０１ Ｍｏｄｅｌ ７、Ｐｌａｓｔｉａｐｅ（登録商標） ＲＳ００ Ｍｏｄｅｌ ８Ｃｏｎｉｘ（商標）、Ｒｏｔａｈａｌｅｒ（登録商標）、ＴｗｉｎＣａｐｓ（登録商標）、ＸＣａｐｓ（登録商標）、ＦｌｏｗＣａｐｓ（登録商標）、Ｔｕｒｂｕｈａｌｅｒ（登録商標）、ＮｅｘｔＨａｌｅｒ（登録商標）、ＣｙｃｌｏＨａｌｅｒ（登録商標）、Ｒｅｖｏｌｉｚｅｒ（商標）、Ｄｉｓｋｈａｌｅｒ（登録商標）、Ｄｉｓｋｕｓ（登録商標）、Ｓｐｉｎｈａｌｅｒ、Ｈａｎｄｉｈａｌｅｒ（登録商標）、Ｍｉｃｒｏｄｏｓｅ Ｉｎｈａｌｅｒ、ＧｙｒｏＨａｌｅｒ（登録商標）、ＯｍｎｉＨａｌｅｒ（登録商標）、Ｃｌｉｃｋｈａｌｅｒ（登録商標）、またはＤｕｏｈａｌｅｒ（登録商標）（Ｖｅｃｔｕｒａ）、または呼気作動ＡＲＣＵＳ（登録商標）吸入器（Ｃｉｖｉｔａｓ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）を含む。一実施形態において、本発明は、本明細書に記載の乾燥粉末組成物を含有するＤＰＩデバイスを提供する。一実施形態において、デバイスは、ＸＣａｐｓ、ＦｌｏｗＣａｐｓ、Ｈａｎｄｉｈａｌｅｒ、ＴｗｉｎＣａｐｓ、Ａｅｒｏｌｉｚｅｒ（登録商標）、Ｐｌａｓｔｉａｐｅ（登録商標） ＲＳ０１ Ｍｏｄｅｌ ７、およびＰｌａｓｔｉａｐｅ（登録商標） ＲＳ００ Ｍｏｄｅｌ ８からなる群から選択される。

【0109】

噴霧剤ベース配合物
[117]本発明の別の一実施形態において、ラパマイシンは、本明細書において包括的に「ｐＭＤＩ配合物」とも呼ばれることがある噴霧剤ベース配合物中に配合される。ｐＭＤＩ配合物は、デバイス、たとえば加圧計量用量吸入器（ｐＭＤＩ）による送達に好適である。一実施形態において、組成物は、ラパマイシン、噴霧剤、および植物油または植物油の薬学的に許容される誘導体を含む。噴霧剤は、好ましくは、１，１，１，２−テトラフルオロエタン（ＨＦＡ１３４ａ）および１，１，１，２，３，３，３−ヘプタフルオロプロパン（ＨＦＡ２２７）、またはそれらの混合物から選択される。一実施形態において、植物油は、オリーブ油、サフラワー油、およびダイズ油から選択される。ラパマイシンは、溶液中にあってもまたは噴霧剤中に懸濁状態であってもよい。この文脈において、「懸濁状態」は、ラパマイシンが噴霧剤中に分散される粒子形態で存在する場合を指す。一実施形態において、ラパマイシンは、微粉化され、噴霧剤中に懸濁状態で存在する。一実施形態において、配合物は、湿潤剤または共溶剤、たとえばエタノールをさらに含む。一実施形態において、配合物は、ポリヒドロキシアルコール、たとえばプロピレングリコールをさらに含む。

【0110】

[118]好適な噴霧剤が当技術分野において知られており、たとえば、ハロゲン置換炭化水素、たとえば、フッ素置換メタン、エタン、プロパン、ブタン、シクロプロパンまたはシクロブタン、特に１，１，１，２−テトラフルオロエタン（ＨＦＡ１３４ａ）および１，１，１，２，３，３，３−ヘプタフルオロプロパン（ＨＦＡ２２７）、またはそれらの混合物が含まれる。

【0111】

[119]一実施形態において、配合物は、微粉化ラパマイシン、エタノール、好適な噴霧剤、たとえばＨＦＡ １３４ａ、ＨＦＡ ２２７、または好適な噴霧剤の混合物、および任意選択で１種または複数の界面活性剤を含む。一実施形態において、配合物は、潤滑剤をさらに含む。

【0112】

[120]一実施形態において、配合物は、ラパマイシン、噴霧剤、および植物油を含む。一態様において、配合物は、添加剤または界面活性剤を含まない。たとえば、配合物は、エタノール、ポリヒドロキシアルコール（たとえばプロピレングリコール）、または界面活性剤（たとえば、トリオレイン酸ソルビタン、モノオレイン酸ソルビタン、またはオレイン酸）を含まない。

【0113】

[121]一実施形態において、噴霧剤ベース配合物は、圧縮空気、二酸化炭素、窒素または、ｎ−プロパン、ｎ−ブタン、イソブタンもしくはこれらの混合物、もしくは１，１，１，２−テトラフルオロエタン（ＨＦＡ１３４ａ）および１，１，１，２，３，３，３−ヘプタフルオロプロパン（ＨＦＡ２２７）、もしくはそれらの混合物からなる群から選択される液化噴霧剤を、アルコール等の極性共溶剤ありまたはなしで含む。組成物は、溶液または懸濁液でありうる。懸濁液については、薬物粒子は、０．１から１０ミクロンの直径を有し、平均直径は３．５ミクロン未満である。

【0114】

[122]噴霧剤ベース配合物は、当技術分野において知られている方法、たとえば、粗いラパマイシン、および任意選択の添加剤を、液体噴霧剤中で、周囲圧力または高圧条件下のいずれかで、湿式ミル粉砕することにより調製される。いくつかの実施形態において、添加剤は、凝集（固化または結晶化）を防止し、均一な用量決定を促進し、（あるいは代わりに）好ましい微粒子画分（ＦＰＦ）を提供するのに役立つ界面活性剤である。一態様において、界面活性剤は、トリオレイン酸ソルビタン、モノオレイン酸ソルビタン、またはオレイン酸から選択される。代わりに、薬物粒子を含有する乾燥粉末は、上で論じたとおり、薬物粒子の水性分散液を噴霧乾燥またはフリーズドライすることにより調製され、得られた粉末は、従来の加圧計量用量吸入器（ｐＭＤＩ）における使用に好適な噴霧剤中に分散される。一実施形態において、吸入デバイスは、Ｒｅｓｐｉｍａｔ（商標）である。

【0115】

[123]一実施形態において、本発明の噴霧剤ベースエアロゾルラパマイシン配合物は、長期的なラパマイシンの粒子サイズ成長または結晶形態変化に対して安定的である。
滅菌単位剤形を製造するための方法
[124]一実施形態において、本発明の組成物は、滅菌組成物である。一実施形態において、滅菌組成物は、滅菌単位剤形である。一実施形態において、滅菌単位剤形は、ネブライザーデバイスにおける使用に好適なカプセル剤である。

【0116】

[125]一実施形態において、最終組成物は、その密閉容器内で、加熱、たとえば高圧蒸気殺菌により、または放射線により滅菌される。一実施形態において、組成物の成分は、液体成分のための滅菌濾過および固体または液体のための放射線もしくは高圧蒸気殺菌を含む好適な方法によりまず滅菌され、この方法は、密封容器内にパッケージすること、混合容器内で適切な割合で成分を組み合わせること、および得られた産物を密閉容器内に充填することを、すべて無菌スイートにおいて実施することにより、滅菌成分の無菌性を維持する工程をさらに含む。このプロセスは、高価で、困難な無菌操作技術を要するという欠点を有する。したがって、それは、滅菌のためのサブミクロンフィルターを通過させることができない粒子懸濁液またはコロイド分散液、リポソーム配合物、またはエマルションを処理するのに主に使用される。最後に、一実施形態において、最終組成物は、サブミクロンフィルター、好ましくは０．２ミクロンのフィルターを通して滅菌濾過されている。一実施形態において、本発明の組成物は、濾過滅菌プロセスを介して滅菌された単相水性溶液である。対照的に、エマルションおよびリポソーム配合物は、典型的には、濾過滅菌プロセスの高剪断条件下で十分に安定ではなく、それゆえこのプロセスには好ましくない。

【0117】

[126]一実施形態において、本発明の組成物は、密閉容器、たとえば、ポリマー、好ましくはポリエチレンで形成されたバイアル、または代わりにガラスバイアル内に充填された単相水性溶液である。高圧蒸気殺菌および放射線は、バイアルがポリマーバイアルである場合には、薬物および／または配合物賦形剤において、容器においてと同様に、化学的不安定性を生み出す高い可能性ゆえに、また望ましくない不純物の生成ゆえに、好適ではない。一実施形態において、本発明の組成物は、加熱（高圧蒸気殺菌）または放射線を含まず、代わりに濾過滅菌プロセスを含むプロセスにより滅菌される。好ましくは、この実施形態によれば、ラパマイシンの単相水性溶液は、０．２ミクロン以下の細孔サイズを有するフィルターを通した濾過により滅菌される。一実施形態において、無菌濾物は、無菌スイート内に位置する回収容器内に回収される。一実施形態において、無菌濾物は、無菌スイートにおいて回収容器から密閉容器へと移される。好ましくは、密閉容器は、ポリマーバイアル、好ましくは単位用量バイアル、最も好ましくはポリエチレン単位用量バイアルである。一実施形態において、ポリマーバイアルは、それが充填される直前にブロー成形により形成され、次に充填の直後にヒートシールされる。この技術はまた、「形成−充填−シール」または「ブロー−充填」と呼ばれてもよい。この技術は、ラパマイシンの単相水性溶液である本発明の組成物の文脈において特に有利である。なぜなら、このプロセスは、加熱または放射線を要しないからであり、これらの両方が、薬物自体、配合物賦形剤、または密閉容器のいずれかを劣化させうる。

【0118】

肺内投与および用量決定
[127]本発明は、吸入により、ラパマイシンを気道、好ましくは肺に投与することによるＬＡＭの治療および予防のための組成物および方法を提供する。肺送達は、好ましくは、口および喉を通じた肺内へのエアロゾルの吸入により達成されるが、鼻を通じたエアロゾルの吸入により達成されてもよい。したがって、一実施形態において、エアロゾルは、鼻腔内送達される。別の一実施形態において、エアロゾルは、経口送達される。

【0119】

[128]本発明の組成物および方法は、有利には、治療有効量のラパマイシンの肺への標的化送達を提供する一方で、同時に、非常に低いまたは検出不能なレベルまで、血中のラパマイシンの量を低減し、全身に利用可能である。一実施形態において、本明細書に記載の乾燥粉末組成物の単一用量におけるラパマイシンの量は、約５から５００マイクログラムまたは約１００から３００マイクログラム、または約５０から２５０マイクログラムである。低用量ラパマイシンの肺への直接の標的化送達は、全身曝露を最小化する一方で、経口投与剤形と比較して治療指数の改善を提供する。

【0120】

[129]一実施形態において、本発明の方法による吸入によるラパマイシンの投与は、ラパマイシンの治療指数を増加させる。この文脈において、ヒト対象に適用されるものとして、治療指数は、集団の５０％において治療効果（ＥＤ_５０）をもたらす用量を、毒性（ＴＤ_５０）をもたらす用量に対して比較する比である。比は、ＴＤ_５０／ＥＤ_５０として表される。一実施形態において、本発明の方法による吸入によるラパマイシンの投与は、経口投与されるラパマイシンと関連する１つまたは複数の毒性を低減し、そのことにより、ラパマイシンの治療指数を増加させる。

【0121】

[130]本発明は、溶液および粉末の形態のエアロゾル化可能な配合物を含む。したがって、ラパマイシンは、水性エアロゾル、乾燥粉末エアロゾル、または噴霧剤ベースエアロゾルの形態で、本発明の方法により投与できる。

【0122】

[131]一実施形態において、ラパマイシンの投与用量は、対象において、０．０１から０．１５ｎｇ／ｍｌ、０．０７５から０．３５０ｎｇ／ｍｌ、０．１５０から０．７５０ｎｇ／ｍｌ、０．７５０から１．５ｎｇ／ｍｌまたは１．５から５ｎｇ／ｍｌの血中トラフレベルをもたらす。一実施形態において、ラパマイシンの投与用量は、対象において、５ｎｇ／ｍｌ未満、２ｎｇ／ｍｌ未満、１ｎｇ／ｍｌ未満、または０．５ｎｇ／ｍｌ未満の血中トラフレベルをもたらす。

【0123】

[132]一実施形態において、ラパマイシンの投与用量は、肺組織において、１ｎｇ／ｇから１μｇ／ｇ、好ましくは約５ｎｇ／ｇから１００ｎｇ／ｇ、約５ｎｇ／ｇから約２０ｎｇ／ｇ、または約５ｎｇ／ｇから約３０ｎｇ／ｇの範囲のラパマイシン濃度をもたらすのに十分である。

【0124】

[133]一実施形態において、ラパマイシンの投与用量は、５から１００マイクログラム、２０から１００マイクログラム、２０から２５０マイクログラム、５０から５００マイクログラム（０．０５から０．５ミリグラム）、２５０から１０００マイクログラム（０．２５から１ミリグラム）または５００から２０００マイクログラム（０．５から２ミリグラム）の範囲である。一実施形態において、投与されるラパマイシンの量は、５００マイクログラム未満、１００マイクログラム未満、５０マイクログラム未満、２０マイクログラム未満、または１０マイクログラム未満である。好ましくは、投与されるラパマイシンの量は、０．５ミリグラム未満または０．２５ミリグラム未満である。

【0125】

[134]一実施形態において、ラパマイシンは、１日１度投与される。
[135]一実施形態において、ラパマイシンの１日総用量は、５から１００マイクログラム、２０から２５０マイクログラム、５０から５００マイクログラム（０．０５から０．５ミリグラム）、２５０から１０００マイクログラム（０．５から１ミリグラム）または５００から２０００マイクログラム（０．５から２ミリグラム）の範囲である。一実施形態において、ラパマイシンの１日総用量は、５００マイクログラム未満、１００マイクログラム未満、５０マイクログラム未満、２０マイクログラム未満、または１０マイクログラム未満である。一実施形態において、対象に投与されるラパマイシンの１日総用量は、１日当たり０．５ミリグラム未満または０．２５ミリグラム未満である。

【0126】

[136]一実施形態において、本発明の組成物は、１日１度対象に投与される。一実施形態において、本発明の組成物は、１日２度または３度投与される。好ましくは、組成物は、１日１度もしくは２度、または１日１度未満で投与される。

【0127】

[137]一実施形態において、本発明の方法は、スタチン、プロゲストロン、タモキシフェン、ゴナドトロピン放出ホルモン（ＧｎＲＨ）アゴニスト、ドキシサイクリン、ｓｒｃ阻害剤、自食作用阻害剤（たとえば、ヒドロキシクロロキン）、ＶＥＧＦ−ＣまたはＤ阻害剤、およびＶＥＧＦ受容体阻害剤からなる群から選択される１種または複数の追加の治療剤と組み合わせて、肺経路を介してラパマイシンを投与する工程を含む。一実施形態において、１種または複数の追加の治療剤は、スタチン、プロゲステロン、タモキシフェン、およびゴナドトロピン放出ホルモン（ＧｎＲＨ）アゴニストから選択される。一実施形態において、１種または複数の追加の治療剤は、エストロゲンアンタゴニスト、スタチン、ｓｒｃ阻害剤、およびＶＥＧＦ−Ｒ阻害剤から選択される。一実施形態において、１種または複数の追加の治療剤は、レトロゾール、タモキシフェン、シンバスタチン、サラカチニブ、パゾパニブ、イマチニブ、およびそれらの組合せからなる群から選択される。１つまたは複数の追加の薬剤は、ラパマイシンと同じまたは異なる投与経路により投与できる。たとえば、薬剤は、吸入、鼻腔内投与、経口投与または静脈内投与により投与できる。

【0128】

[138]一実施形態において、本発明の方法は、１つまたは複数の追加の治療法と組み合わせて、肺経路を介してラパマイシンを投与する工程を含む。一実施形態において、１つまたは複数の追加の治療法は、抗エストロゲン療法、ホルモン療法、抗癌化学療法、および放射線療法から選択される。一実施形態において、本発明の方法は、抗エストロゲン療法またはホルモン療法と組み合わせて、肺経路を介してラパマイシンを投与する工程を含む。

【0129】

[139]いくつかの実施形態において、これらの方法は、一次療法としての本発明の組成物の肺内投与を含む。他の実施形態において、本発明の組成物の投与は、アジュバント療法である。いずれの場合にも、本発明の方法は、疾患または障害の治療のための１つまたは複数の追加の治療法と組み合わせた、本発明の組成物の投与を考慮する。「治療法（ｔｈｅｒａｐｙ）」および「治療法（ｔｈｅｒａｐｉｅｓ）」という用語は、疾患もしくは障害、またはそれらの１つもしくは複数の症状の防止、治療、管理または改善において使用できる任意の方法、プロトコルおよび／または薬剤を指す。いくつかの実施形態において、治療法は、化学療法、放射線療法、ホルモン療法、および抗エストロゲン療法から選択される。

【0130】

[140]好ましくは、１つまたは複数の追加の治療法と組み合わせた、本発明の方法によるラパマイシンまたはそのプロドラッグもしくは誘導体を含む医薬組成物の投与は、ＬＡＭを有する対象において相乗反応を提供する。この文脈において、「相乗」という用語は、組合せの効果が、いずれか単一の治療法のみの効果を足し合わせた効果よりも効果的であることを指す。一実施形態において、本発明による組合せラパマイシン療法の相乗効果は、その組合せにおける少なくとも１つの治療法の、組合せ外でのその用量および／または頻度と比較した、より低用量および／またはより頻度の低い投与の使用を可能にする。別の一実施形態において、相乗効果は、その組合せにおけるいずれかの治療法のみの使用と関連する有害または望ましくない副作用の回避または低減において現れる。

【0131】

ネブライザー送達
[141]一実施形態において、ラパマイシンは、噴霧療法に好適な水性溶液として配合され、ネブライザーを介して送達される。水性および他の非加圧液体系について、様々なネブライザー（少量ネブライザーを含む）を、配合物をエアロゾル化するために利用可能である。コンプレッサー駆動ネブライザーは、ジェット技術を組み込み、液体エアロゾルを生成するために圧縮空気を使用する。かかるデバイスは、たとえば、Ｈｅａｌｔｈｄｙｎｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｉｎｃ．、Ｉｎｖａｃａｒｅ，Ｉｎｃ．、Ｍｏｕｎｔａｉｎ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｅｑｕｉｐｍｅｎｔ，Ｉｎｃ．、Ｐａｒｉ Ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ，Ｉｎｃ．、Ｍａｄａ Ｍｅｄｉｃａｌ，Ｉｎｃ．、Ｐｕｒｉｔａｎ−Ｂｅｎｎｅｔ、Ｓｃｈｕｃｏ，Ｉｎｃ．、ＤｅＶｉｌｂｉｓｓ Ｈｅａｌｔｈ Ｃａｒｅ，Ｉｎｃ．、およびＨｏｓｐｉｔａｋ，Ｉｎｃ．から市販されている。超音波ネブライザーは、呼吸用液滴を生成するために圧電結晶の振動の形態の力学的エネルギーに依存し、たとえば、Ｏｍｒｏｎ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ，Ｉｎｃ．およびＤｅＶｉｌｂｉｓｓ Ｈｅａｌｔｈ Ｃａｒｅ，Ｉｎｃ．から市販されている。ネブライザーは、たとえば、従来の空気ネブライザー、たとえばエアジェットネブライザー、または超音波ネブライザーであってもよく、これらは、１から５０ｍｌ、一般に１から１０ｍｌの溶液配合物を含有してもよい。

【0132】

[142]一実施形態において、本発明の水性溶液配合物は、振動または固定メッシュを含むネブライザーでの投与に適する。たとえば、デバイス、たとえば、ＡＥＲｘ（登録商標）（Ａｒａｄｉｇｍ）、ＲＥＳＰＩＭＡＴ（登録商標）（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ）、Ｉ−Ｎｅｂ（登録商標）（Ｐｈｉｌｉｐｓ）、またはＭｉｃｒｏＡｉｒｅ（登録商標）（Ｏｍｒｏｎ）では、薬物溶液がピストンもしくは空気圧で、またはオリフィスもしくはメッシュを通じて圧電結晶で押される。代わりに、溶液は、振動メッシュネブライザー、たとえばＥ−Ｆｌｏｗ（登録商標）（Ｐａｒｉ）またはＡｅｒｏｎｅｂ（登録商標）Ｇｏ（Ａｅｒｏｇｅｎ）を通じて噴出されうる。これらのデバイスは、従来のネブライザーよりもはるかに小さな噴霧化体積、たとえば１０から１００μｌ、および高い送達効率を可能にする。

【0133】

乾燥粉末送達
[143]一実施形態において、本発明の乾燥粉末組成物は、非噴霧剤ベース乾燥粉末吸入器（ＤＰＩ）デバイスにより送達される。一実施形態において、粉末は、ＤＰＩデバイスにおける使用に好適な、ゼラチンもしくはプラスチックのカプセル剤、またはブリスター剤中に含有される。一実施形態において、粉末は、単位剤形で、１カプセル剤当たり５ｍｇから１００ｍｇの粉末の用量単位で供給される。別の一実施形態において、乾燥粉末は、複数用量乾燥粉末吸入デバイスのリザーバー内に含有される。一実施形態において、吸入器デバイスは、組成物の計量用量、たとえば１０から１００μｌ、たとえば２５から５０μｌを送達するよう適合されたバルブを備えるエアロゾルバイアルを含み、すなわち、計量用量吸入器として知られているデバイスである。

【0134】

[144]一実施形態において、ＤＰＩデバイスは、ブリスターベースデバイス、たとえば、ＧｙｒｏＨａｌｅｒ（登録商標）またはＯｍｎｉＨａｌｅｒ（登録商標）（両方がＶｅｃｔｕｒａ製）、リザーバーベースデバイス、たとえばＣｌｉｃｋｈａｌｅｒ（登録商標）またはＤｕｏｈａｌｅｒ（登録商標）（Ｖｅｃｔｕｒａ）、およびＡＲＣＵＳ（登録商標）吸入器（Ｃｉｖｉｔａｓ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）である。一実施形態において、ＤＰＩデバイスは、Ｐｕｌｍａｔｒｉｘ（商標）、およびＨｏｖｉｏｎｅ ＴｗｉｎｃａｐｓおよびＸＣａｐｓ（商標）から選択される。一実施形態において、デバイスは、ＸＣａｐｓ、Ｐｌａｓｔｉａｐｅ（登録商標） ＲＳ０１ Ｍｏｄｅｌ ７、およびＰｌａｓｔｉａｐｅ（登録商標） ＲＳ００ Ｍｏｄｅｌ ８からなる群から選択される。

【0135】

[145]一実施形態において、ＤＰＩデバイスは、Ａｃｃｕｈａｌｅｒ（登録商標）、Ａｅｒｏｌｉｚｅｒ（登録商標）、Ｐｌａｓｔｉａｐｅ（登録商標） ＲＳ０１ Ｍｏｄｅｌ ７、Ｐｌａｓｔｉａｐｅ（登録商標） ＲＳ００ Ｍｏｄｅｌ ８、Ｃｏｎｉｘ（商標）、Ｒｏｔａｈａｌｅｒ（登録商標）、ＴｗｉｎＣａｐｓ（登録商標）、ＸＣａｐｓ（登録商標）、ＦｌｏｗＣａｐｓ（登録商標）、Ｔｕｒｂｕｈａｌｅｒ（登録商標）、ＮｅｘｔＨａｌｅｒ（登録商標）、ＣｙｃｌｏＨａｌｅｒ（登録商標）、Ｒｅｖｏｌｉｚｅｒ（商標）、Ｄｉｓｋｈａｌｅｒ（登録商標）、Ｄｉｓｋｕｓ（登録商標）、Ｓｐｉｎｈａｌｅｒ、Ｈａｎｄｉｈａｌｅｒ（登録商標）、Ｍｉｃｒｏｄｏｓｅ Ｉｎｈａｌｅｒ、ＧｙｒｏＨａｌｅｒ（登録商標）、ＯｍｎｉＨａｌｅｒ（登録商標）、Ｃｌｉｃｋｈａｌｅｒ（登録商標）、またはＤｕｏｈａｌｅｒ（登録商標）（Ｖｅｃｔｕｒａ）、または呼気作動ＡＲＣＵＳ（登録商標）吸入器（Ｃｉｖｉｔａｓ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）からなる群から選択される。

【0136】

[146]一実施形態において、ＤＰＩデバイスは、Ａｒｃｕｓ（商標）、Ａｓｐｉｒａｉｒ（商標）、Ａｘａｈａｌｅｒ（商標）、Ｂｒｅｅｚｈａｌｅｒ（商標）、Ｃｌｉｃｋｈａｌｅｒ（商標）、Ｃｏｎｉｘ Ｄｒｙ（商標）、Ｃｒｉｃｋｅｔ（商標）、Ｄｒｅａｍｂｏａｔ（商標）、Ｇｅｎｕａｉｒ（商標）、Ｇｅｍｉｎｉ（商標）、Ｉｎｓｐｉｒｏｍａｔｉｃ（商標）、ｉＳＰＥＲＳＥ（商標）、ＭｉｃｒｏＤｏｓｅ（商標）、Ｎｅｘｔ ＤＰＩ（商標）、Ｐｒｏｈａｌｅｒ（商標）、Ｐｕｌｍｏｊｅｔ（商標）、Ｐｕｌｖｉｎａｌ（商標）、Ｓｏｌｉｓ（商標）、Ｔａｉｆｕｎ（商標）、Ｔａｐｅｒ Ｄｒｙ（商標）、Ｔｒｉｖａｉ（商標）、Ｎｏｖｏｌｉｚｅｒ（商標）、Ｐｏｄｈａｌｅｒ（商標）、Ｓｋｙｅｈａｌｅｒ（商標）、Ｓｐｉｒｏｍａｘ（商標）、Ｔｗｉｎｃａｐｓ／Ｆｌｏｗｃａｐｓ（商標）、およびＴｕｒｂｕｈａｌｅｒ（商標）からなる群から選択される。一実施形態において、ＤＰＩデバイスは、乾燥粉末の用量単位を含有するカプセル剤またはブリスター剤から乾燥粉末を送達するよう適合されているか、または、たとえば１回の作動ごとに５〜２５ｍｇの乾燥粉末を送達するよう適合されている、複数用量乾燥粉末吸入デバイスである。

【0137】

ｐＭＤＩ送達
[147]別の一実施形態において、ラパマイシンは、噴霧剤ベース配合物に関して上述の好適な噴霧剤を含有する加圧容器またはディスペンサーからのエアロゾル化粒子の形態で送達される。一実施形態において、吸入器は、噴霧剤駆動吸入器、たとえばｐＭＤＩデバイスであり、これは、作動ごとに計量用量のラパマイシンを放出する。典型的なｐＭＤＩデバイスは、薬物を含有するキャニスター、薬物計量バルブ、およびマウスピースを含む。この実施形態の一態様において、ラパマイシンは、噴霧剤中の懸濁として配合される。この実施形態の文脈において、ラパマイシンは、液化噴霧剤または噴霧剤ブレンド中に懸濁される細かい粉末にされる。次に、懸濁液は、噴霧剤を液体形態に維持するのに十分な与圧下で、密封キャニスター中に保存される。別の一実施形態において、ラパマイシンは、溶液として配合される。この実施形態の文脈において、ラパマイシンは、液化噴霧剤または噴霧剤ブレンド中に可溶化される。一実施形態において、配合物は、配合物の撹拌後にラパマイシンの再現性のある用量決定を可能にするのに十分な時間、沈殿、クリーミングまたは綿状沈殿に対して配合物を安定化するのに好適な量の安定剤をさらに含む。安定剤は、エアロゾル配合物の１００万総重量部に対して、約１０重量部から約５０００重量部の量で過量で存在してもよい。一実施形態において、流体担体は、１，１，１，２−テトラフルオロエタン、１，１，１，２，３，３，３−ヘプタフルオロプロパンまたはそれらの混合物である。別の一実施形態において、流体担体は、炭化水素（たとえば、ｎ−ブタン、プロパン、イソペンタン、またはそれらの混合物）である。組成物は、共溶剤（たとえば、エタノールまたは他の好適な共溶剤）をさらに含んでもよい。

【0138】

[148]本発明の方法の一実施形態において、ラパマイシンを含むエアロゾル配合物は、追加の薬物をさらに含む。この実施形態の一態様において、追加の薬物は、コルチコステロイド、エストロゲン受容体アンタゴニスト、抗コリン薬、ベータ刺激薬、非ステロイド系抗炎症薬、マクロライド抗生物質、気管支拡張剤、ロイコトリエン受容体阻害剤、ムスカリンアンタゴニスト、硫酸クロモリン、およびそれらの組合せからなる群から選択される。

【0139】

添加剤
[149]本発明のエアロゾル組成物は、配合物中に存在する任意の担体または希釈剤（たとえばラクトースまたはマンニトール）に加えて、１種または複数の添加剤を含有していてもよい。一実施形態において、１種または複数の添加剤は、１種または複数の界面活性剤を含むか、またはそれらからなる。界面活性剤は、典型的には、薬物貫通および吸収を増強するために細胞の脂質構造内に直接挿入されることを可能にする１つまたは複数の脂肪族長鎖、たとえば脂肪酸を有する。界面活性剤の相対親水性および疎水性を特徴づけるために一般に使用される経験的パラメータは、親水性−親油性バランス（「ＨＬＢ」値）である。より低いＨＬＢ値を有する界面活性剤は、より疎水性であり、油中でのより高い溶解性を有する一方で、より高いＨＬＢ値を有する界面活性剤は、より親水性であり、水性溶液中でのより高い溶解性を有する。したがって、親水性界面活性剤は、一般に、約１０より大きいＨＬＢ値を有する化合物であると考えられ、疎水性界面活性剤は、一般に、約１０未満のＨＬＢ値を有するものである。しかしながら、これらのＨＬＢ値は、指針に過ぎない。なぜなら、多くの界面活性剤について、ＨＬＢ値を決定するために選択される経験的方法に応じて、ＨＬＢ値は約８ＨＬＢ単位も異なりうるからである。

【0140】

[150]本発明のエアロゾル組成物における使用のための界面活性剤のなかには、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）−脂肪酸ならびにＰＥＧ−脂肪酸モノおよびジエステル、ＰＥＧグリセロールエステル、アルコール−油エステル交換反応産物、ポリグリセリル脂肪酸、プロピレングリコール脂肪酸エステル、ステロールおよびステロール誘導体、ポリエチレングリコールソルビタン脂肪酸エステル、ポリエチレングリコールアルキルエーテル、糖およびその誘導体、ポリエチレングリコールアルキルフェノール、ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレン（ＰＯＥ−ＰＯＰ）ブロックコポリマー、ソルビタン脂肪酸エステル、イオン性界面活性剤、脂溶性ビタミンおよびそれらの塩、水溶性ビタミンおよびそれらの両親媒性誘導体、アミノ酸およびそれらの塩、ならびに有機酸およびそれらのエステルおよび無水物がある。これらのそれぞれが、下でより詳細に記載される。

【0141】

ＰＥＧ脂肪酸エステル
[151]ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）自体は界面活性剤として機能しないとはいえ、様々なＰＥＧ−脂肪酸エステルが、有用な界面活性剤特性を有する。ＰＥＧ−脂肪酸モノエステルのなかでも、ラウリン酸、オレイン酸、およびステアリン酸のエステルが、本発明の実施形態において最も有用である。好ましい親水性界面活性剤には、ラウリン酸ＰＥＧ−８、オレイン酸ＰＥＧ−８、ステアリン酸ＰＥＧ−８、オレイン酸ＰＥＧ−９、ラウリン酸ＰＥＧ−１０、オレイン酸ＰＥＧ−１０、ラウリン酸ＰＥＧ−１２、オレイン酸ＰＥＧ−１２、オレイン酸ＰＥＧ−１５、ラウリン酸ＰＥＧ−２０およびオレイン酸ＰＥＧ−２０が含まれる。ＨＬＢ値は、４〜２０の範囲である。

【0142】

[152]ポリエチレングリコール脂肪酸ジエステルもまた、本発明の実施形態の組成物における界面活性剤としての使用に好適である。最も好ましい親水性界面活性剤には、ジラウリン酸ＰＥＧ−２０、ジオレイン酸ＰＥＧ−２０、ジステアリン酸ＰＥＧ−２０、ジラウリン酸ＰＥＧ−３２およびジオレイン酸ＰＥＧ−３２が含まれる。ＨＬＢ値は、５〜１５の範囲である。

【0143】

[153]一般に、界面活性剤の混合物もまた、本発明の実施形態において有用であり、２種以上の市販の界面活性剤の混合物が、界面活性剤と別の１種または複数の添加剤との混合物とともに含まれる。複数のＰＥＧ−脂肪酸エステルが、混合物またはモノ−およびジエステルとして市販されている。

【0144】

ポリエチレングリコールグリセロール脂肪酸エステル
[154]好ましい親水性界面活性剤は、ラウリン酸ＰＥＧ−２０グリセリル、ラウリン酸ＰＥＧ−３０グリセリル、ラウリン酸ＰＥＧ−４０グリセリル、オレイン酸ＰＥＧ−２０グリセリル、およびオレイン酸ＰＥＧ−３０グリセリルである。

【0145】

アルコール−油エステル交換反応産物
[155]異なる度合いの疎水性および親水性を有する多数の界面活性剤を、アルコールまたは多価アルコールと様々な天然および／または水添油との反応により調製できる。最も一般的には、使用される油は、ヒマシ油もしくは水添ヒマシ油、または食用植物油、たとえばトウモロコシ油、オリーブ油、落花生油、パーム核油、杏仁油、またはアーモンド油である。好ましいアルコールには、グリセロール、プロピレングリコール、エチレングリコール、ポリエチレングリコール、ソルビトール、およびペンタエリトリトールが含まれる。これらのアルコール−油エステル交換界面活性剤のなかでも、好ましい親水性界面活性剤は、ＰＥＧ−３５ヒマシ油（Ｉｎｃｒｏｃａｓ−３５）、ＰＥＧ−４０水添ヒマシ油、（Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ ＲＨ ４０）、トリオレイン酸ＰＥＧ−２５（ＴＡＧＡＴ．ＲＴＭ． ＴＯ）、ＰＥＧ−６０トウモロコシグリセリド（Ｃｒｏｖｏｌ Ｍ７０）、ＰＥＧ−６０アーモンド油（Ｃｒｏｖｏｌ Ａ７０）、ＰＥＧ−４０パーム核油（Ｃｒｏｖｏｌ ＰＫ７０）、ＰＥＧ−５０ヒマシ油（Ｅｍａｌｅｘ Ｃ−５０）、ＰＥＧ−５０水添ヒマシ油（Ｅｍａｌｅｘ ＨＣ−５０）、ＰＥＧ−８カプリル酸／カプリン酸グリセリド（Ｌａｂｒａｓｏｌ）、およびＰＥＧ−６カプリル酸／カプリン酸グリセリド（Ｓｏｆｔｉｇｅｎ ７６７）である。このクラスの好ましい疎水性界面活性剤には、ＰＥＧ−５水添ヒマシ油、ＰＥＧ−７ 水添ヒマシ油、ＰＥＧ−９水添ヒマシ油、ＰＥＧ−６トウモロコシ油（Ｌａｂｒａｆｉｌ．ＲＴＭ． Ｍ ２１２５ ＣＳ）、ＰＥＧ−６アーモンド油（Ｌａｂｒａｆｉｌ．ＲＴＭ． Ｍ １９６６ ＣＳ）、ＰＥＧ−６杏仁油（Ｌａｂｒａｆｉｌ．ＲＴＭ． Ｍ １９４４ ＣＳ）、ＰＥＧ−６オリーブ油（Ｌａｂｒａｆｉｌ．ＲＴＭ． Ｍ １９８０ ＣＳ）、ＰＥＧ−６落花生油（Ｌａｂｒａｆｉｌ．ＲＴＭ． Ｍ １９６９ ＣＳ）、ＰＥＧ−６ 水添パーム核油（Ｌａｂｒａｆｉｌ．ＲＴＭ． Ｍ ２１３０ ＢＳ）、ＰＥＧ−６パーム核油（Ｌａｂｒａｆｉｌ．ＲＴＭ． Ｍ ２１３０ ＣＳ）、ＰＥＧ−６トリオレイン（Ｌａｂｒａｆｉｌ．ＲＴＭ．ｂ Ｍ ２７３５ ＣＳ）、ＰＥＧ−８トウモロコシ油（Ｌａｂｒａｆｉｌ．ＲＴＭ． ＷＬ ２６０９ ＢＳ）、ＰＥＧ−２０トウモロコシグリセリド（Ｃｒｏｖｏｌ Ｍ４０）、およびＰＥＧ−２０アーモンドグリセリド（Ｃｒｏｖｏｌ Ａ４０）が含まれる。

【0146】

ポリグリセリル脂肪酸
[156]脂肪酸のポリグリセロールエステルもまた、本発明の実施形態における使用に好適な界面活性剤である。ポリグリセリル脂肪酸エステルのなかでも、好ましい疎水性界面活性剤には、オレイン酸ポリグリセリル（Ｐｌｕｒｏｌ Ｏｌｅｉｑｕｅ）、ジオレイン酸ポリグリセリル−２（Ｎｉｋｋｏｌ ＤＧＤＯ）、トリオレイン酸ポリグリセリル−１０、ステアリン酸ポリグリセリル、ラウリン酸ポリグリセリル、ミリスチン酸ポリグリセリル、パルミチン酸ポリグリセリル、およびリノール酸ポリグリセリルが含まれる。好ましい親水性界面活性剤には、ラウリン酸ポリグリセリル−１０（Ｎｉｋｋｏｌ Ｄｅｃａｇｌｙｎ １−Ｌ）、オレイン酸ポリグリセリル−１０（Ｎｉｋｋｏｌ Ｄｅｃａｇｌｙｎ １−０）、およびモノ、ジオレイン酸ポリグリセリル−１０（Ｃａｐｒｏｌ．ＲＴＭ． ＰＥＧ ８６０）、ステアリン酸ポリグリセリル−１０、ラウリン酸ポリグリセリル−１０、ミリスチン酸ポリグリセリル−１０、パルミチン酸ポリグリセリル−１０、リノール酸ポリグリセリル−１０、ステアリン酸ポリグリセリル−６、ラウリン酸ポリグリセリル−６、ミリスチン酸ポリグリセリル−６、パルミチン酸ポリグリセリル−６、およびリノール酸ポリグリセリル−６が含まれる。ポリリシノール酸ポリグリセリル（Ｐｏｌｙｍｕｌｓ）もまた、好ましい界面活性剤である。

【0147】

プロピレングリコール脂肪酸エステル
[157]プロピレングリコールと脂肪酸とのエステルは、本発明の実施形態における使用に好適な界面活性剤である。この界面活性剤クラスにおいて、好ましい疎水性界面活性剤には、モノラウリン酸プロピレングリコール（Ｌａｕｒｏｇｌｙｃｏｌ ＦＣＣ）、リシノール酸プロピレングリコール（Ｐｒｏｐｙｍｕｌｓ）、モノオレイン酸プロピレングリコール（Ｍｙｖｅｒｏｌ Ｐ−０６）、ジカプリル酸／ジカプリン酸プロピレングリコール（Ｃａｐｔｅｘ．ＲＴＭ． ２００）、およびジオクタン酸プロピレングリコール（Ｃａｐｔｅｘ．ＲＴＭ． ８００）が含まれる。

【0148】

ステロールおよびステロール誘導体
[158]ステロールおよびステロールの誘導体は、本発明の実施形態における使用のために好適な界面活性剤である。好ましい誘導体には、ポリエチレングリコール誘導体が含まれる。このクラスの好ましい界面活性剤は、ＰＥＧ−２４コレステロールエーテル（Ｓｏｌｕｌａｎ Ｃ−２４）である。

【0149】

ポリエチレングリコールソルビタン脂肪酸エステル
[159]様々なＰＥＧ−ソルビタン脂肪酸エステルが利用可能であり、本発明の実施形態における界面活性剤としての使用に好適である。ＰＥＧ−ソルビタン脂肪酸エステルのなかでも、好ましい界面活性剤には、モノラウリン酸ＰＥＧ−２０ソルビタン（Ｔｗｅｅｎ−２０）、モノパルミチン酸ＰＥＧ−２０ソルビタン（Ｔｗｅｅｎ−４０）、モノイソステアリン酸ＰＥＧ−２０ソルビタン（Ｔｗｅｅｎ−６０）、およびモノオレイン酸ＰＥＧ−２０ソルビタン（Ｔｗｅｅｎ−８０）が含まれる。

【0150】

ポリエチレングリコールアルキルエーテル
[160]ポリエチレングリコールとアルキルアルコールとのエステルは、本発明の実施形態における使用に好適な界面活性剤である。好ましいエーテルには、ＰＥＧ−３オレイルエーテル（Ｖｏｌｐｏ ３）およびＰＥＧ−４ラウリルエーテル（Ｂｒｉｊ ３０）が含まれる。

【0151】

糖およびその誘導体
[161]糖誘導体は、本発明の実施形態における使用に好適な界面活性剤である。このクラスにおける好ましい界面活性剤には、モノパルチミン酸スクロース、モノラウリン酸スクロース、デカノイル−Ｎ−メチルグルカミド、ｎ−デシル−β−Ｄ−グルコピラノシド、ｎ−デシル−β−Ｄ−マルトピラノシド、ｎ−ドデシル−β−Ｄ−グルコピラノシド、ｎ−ドデシル−β−Ｄ−マルトシド、ヘプタノイル−Ｎ−メチルグルカミド、ｎ−ヘプタイル−β−Ｄ−グルコピラノシド、ｎ−ヘプタイル−β−Ｄ−チオグルコシド、ｎ−ヘキシル−β−Ｄ−グルコピラノシド、ノナノイル−Ｎ−メチルグルカミド、ｎ−ノニル−β−Ｄ−グルコピラノシド、オクタノイル−Ｎ−メチルグルカミド、ｎ−オクチル−β−Ｄ−グルコピラノシド、およびオクチル−β−Ｄ−チオグルコピラノシドが含まれる。

【0152】

ポリエチレングリコールアルキルフェノール
[162]複数のＰＥＧ−アルキルフェノール界面活性剤、たとえばＰＥＧ−１０−１００ノニルフェノールおよびＰＥＧ−１５−１００オクチルフェノールエーテル、チロキサポール、オクトキシノール、ノノキシノールが利用可能であり、本発明の実施形態における使用に好適である。

【0153】

ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレン（ＰＯＥ−ＰＯＰ）ブロックコポリマー
[163]ＰＯＥ−ＰＯＰブロックコポリマーが、ポリマー性界面活性剤の固有のクラスである。親水性ＰＯＥおよび疎水性ＰＯＰ部分をよく定義された比および位置で有する界面活性剤の固有構造は、本発明の実施形態における使用に好適な、広範な界面活性剤を提供する。これらの界面活性剤は、Ｓｙｎｐｅｒｏｎｉｃ ＰＥ シリーズ（ＩＣＩ）、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ．ＲＴＭ．シリーズ（ＢＡＳＦ）、Ｅｍｋａｌｙｘ、Ｌｕｔｒｏｌ（ＢＡＳＦ）、Ｓｕｐｒｏｎｉｃ、Ｍｏｎｏｌａｎ、Ｐｌｕｒａｃａｒｅ、およびＰｌｕｒｏｄａｃを含む様々な商品名で利用可能である。これらのポリマーの包括的用語は、「ポロキサマー」（ＣＡＳ ９００３−１１−６）である。これらのポリマーは、式：ＨＯ（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ａ（Ｃ３Ｈ６Ｏ）ｂ（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ａＨを有し、式中、「ａ」および「ｂ」はそれぞれ、ポリオキシエチレンおよびポリオキシプロピレン単位の数を意味する。

【0154】

[164]このクラスの好ましい親水性界面活性剤には、ポロキサマー１０８、１８８、２１７、２３８、２８８、３３８、および４０７が含まれる。このクラスにおける好ましい疎水性界面活性剤には、ポロキサマー１２４、１８２、１８３、２１２、３３１、および３３５が含まれる。

【0155】

ソルビタン脂肪酸エステル
[165]脂肪酸のソルビタンエステルは、本発明の実施形態における使用に好適な界面活性剤である。これらのエステルのなかでも、好ましい疎水性界面活性剤には、モノラウリン酸ソルビタン（Ａｒｌａｃｅｌ ２０）、モノパルミチン酸ソルビタン（Ｓｐａｎ−４０）、モノオレイン酸ソルビタン（Ｓｐａｎ−８０）、モノステアリン酸ソルビタンが含まれる。

【0156】

[166]ビタミンＣの両親媒性誘導体であるモノパルミチン酸ソルビタン（ビタミンＣ活性を有する）は、可溶化系において２つの重要な機能を果たしうる。第１に、それは、微細環境を調節できる効果的な極性基を有する。これらの極性基は、ビタミンＣ自体（アスコルビン酸）を最も水溶性の高い有機個体化合物にするのと同じ基である。アスコルビン酸は、水中で約３０ｗｔ／ｗｔ％まで可溶性である（たとえば、塩化ナトリウムの溶解性に非常に近い）。そして第２に、ｐＨが増加するとき、パルミチン酸アスコルビルの画分を、より可溶性の高い塩、たとえばパルミチン酸アスコルビルナトリウムへと変換する。

【0157】

イオン性界面活性剤
[167]カチオン性、アニオン性、および双性イオン性界面活性剤を含むイオン性界面活性剤は、本発明の実施形態における使用のために好適な親水性界面活性剤である。好ましいイオン性界面活性剤には、第四級アンモニウム塩、脂肪酸塩および胆汁酸塩が含まれる。具体的には、好ましいイオン性界面活性剤には、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、塩化セチルピリジニウム、ドセシル（ｄｏｃｅｙｌ）トリメチルアンモニウムブロミド、ドセシル硫酸ナトリウム、塩化ジアルキルメチルベンジルアンモニウム、塩化エドロホニウム、臭化ドミフェン、スルホコハク酸ナトリウムのジアルキルエステル、スルホコハク酸ジオクチルナトリウム、コール酸ナトリウム、およびタウロコール酸ナトリウムが含まれる。これらの第四級アンモニウム塩は、好ましい添加剤である。これらは、有機溶剤（たとえば、エタノール、アセトン、およびトルエン）中および水中の両方に溶解されうる。これは、医療デバイスコーティングに特に有用である。なぜならそれは、調製およびコーティングプロセスを単純化し、良好な粘着特性を有するからである。非水溶性薬物は、一般に、有機溶剤中に溶解する。

【0158】

脂溶性ビタミンおよびそれらの塩
[168]ビタミンＡ、Ｄ、ＥおよびＫは、それらの様々な形態およびプロビタミン形態の多くにおいて、脂溶性ビタミンとして考えられ、これらに加えて、数多くの他のビタミンおよびビタミン源または近い関係物質がまた脂溶性であり、極性基、および相対的に高いオクタノール−水分配係数を有する。明らかに、かかる化合物のクラス全般は、安全な使用および高い利益対リスク比の歴史を有しており、これらの化合物を、本発明の実施形態における添加剤として有用なものとする。

【0159】

[169]脂溶性ビタミン誘導体および／または源の以下の例もまた、添加剤として有用である。すなわち、アルファ−トコフェロール、ベータ−トコフェロール、ガンマ−トコフェロール、デルタ−トコフェロール、酢酸トコフェロール、エルゴステロール、１−アルファ−ヒドロキシコレカルシフェロール（ｃｏｌｅｃａｌ−ｃｉｆｅｒｏｌ）、ビタミンＤ２、ビタミンＤ３、アルファ−カロチン、ベータ−カロチン、ガンマ−カロチン、ビタミンＡ、フルスルチアミン、メチロールリボフラビン、オクトチアミン、プロスルチアミン、リボフラビン、ビンチアモール、ジヒドロビタミンＫ１、二酢酸メナジオール、二酪酸メナジオール、二硫酸メナジオール、メナジオール、ビタミンＫ１、ビタミンＫ１オキシド、ビタミンＫ２、およびビタミンＫ−Ｓ（ＩＩ）。葉酸もまたこのタイプであり、それは生理的ｐＨで水溶性であるとはいえ、遊離酸形態で配合されうる。本発明の実施形態において有用な脂溶性ビタミンの他の誘導体は、親水性分子とのよく知られている化学反応を介して容易に得られる。

【0160】

水溶性ビタミンおよびそれらの両親媒性誘導体
[170]ビタミンＢ、Ｃ、Ｕ、パントテン酸、葉酸、およびメナジオン関連ビタミン／プロビタミンのいくつかは、それらの様々な形態の多くにおいて、水溶性ビタミンであると考えられる。これらは、疎水性部分または多価イオンとコンジュゲートまたは錯体形成され、相対的に高いオクタノール−水分配係数および極性基を有する両親媒性形態となってもよい。やはり、かかる化合物は低毒性で高い利益対リスク比であり、これらの化合物を、本発明の実施形態における添加剤として有用でありうる。これらの塩もまた、本発明における添加剤として有用でありうる。水溶性ビタミンおよび誘導体の例には、アセチアミン、ベンフォチアミン、パントテン酸、セトチアミン、シクロチアミン、デクスパンテノール、ナイアシンアミド、ニコチン酸アミド、ピリドキサル−５−リン酸、アスコルビン酸ニコチンアミド、リボフラビン、リン酸リボフラビン、チアミン、葉酸、二リン酸メナジオール、メナジオン亜硫酸水素ナトリウム、メナドキシム、ビタミンＢ１２、ビタミンＫ５、ビタミンＫ６、およびビタミンＵが含まれるが、これに限定されない。また上述のとおり、葉酸は、生理的ｐＨを含む広範なｐＨ範囲にわたって、塩として水溶性である。

【0161】

[171]アミノ基または他の塩基性基が存在する化合物は、疎水性基含有酸、たとえば脂肪酸（特に、ラウリン酸、オレイン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、または２−エチルヘキサン酸）、低溶解性アミノ酸、安息香酸、サリチル酸、または酸性脂溶性ビタミン（たとえばリボフラビン）との単純な酸−塩基反応により容易に修飾されうる。他の化合物は、かかる酸を、ビタミン上の別の基、たとえばヒドロキシル基と反応させ、結合、たとえばエステル結合等を形成することにより得られるかもしれない。酸性基を含有する水溶性ビタミンの誘導体は、疎水性基含有反応物、たとえばステアリルアミンまたはリボフラビンとの反応において生成され、たとえば本発明の実施形態において有用な化合物を生み出しうる。パルミチン酸鎖のビタミンＣへの結合は、パルミチン酸アスコルビルをもたらす。

【0162】

アミノ酸およびそれらの塩
[172]アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、シスチン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、プロリン、イソロイシン、ロイシン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシン、バリン、およびそれらの誘導体が、本発明の実施形態における他の有用な添加剤である。

【0163】

[173]いくつかのアミノ酸は、一価または多価イオンを有するそれらの双性イオン性形態および／または塩形態において、極性基、相対的に高いオクタノール−水分配係数を有し、本発明の実施形態において有用である。本開示の文脈において、本発明者らは、「低溶解性アミノ酸」を、緩衝されていない水中で約４％未満の溶解性（４０ｍｇ／ｍｌ）を有するアミノ酸を意味するものとして解釈する。これらには、シスチン、チロシン、トリプトファン、ロイシン、イソロイシン、フェニルアラニン、アスパラギン、アスパラギン酸、グルタミン酸、およびメチオニンが含まれる。

【0164】

有機酸およびそれらのエステルおよび無水物
[174]例は、酢酸および酢酸無水物、安息香酸および安息香酸無水物、アセチルサリチル酸、ジフルニサル、サリチル酸２−ヒドロキシエチル、ジエチレントリアミンペンタ酢酸二無水物、エチレンジアミン四酢酸二無水物、マレイン酸およびマレイン酸無水物、コハク酸およびコハク酸無水物、ジグリコール酸無水物、グルタル酸無水物、アスコルビン酸、クエン酸、酒石酸、乳酸、シュウ酸、アスパラギン酸、ニコチン酸、２−ピロリドン−５−カルボン酸、および２−ピロリドンである。

【0165】

[175]これらのエステルおよび無水物は、有機溶剤、たとえばエタノール、アセトン、メチルエチルケトン、酢酸エチルに溶解性である。水溶性薬物は、これらのエステルおよび無水物とともに有機溶媒中に溶解でき、次に、医療デバイス上に容易にコーティングでき、次に高ｐＨ条件下で加水分解できる。加水分解無水物またはエステルは、酸またはアルコールであり、これらは水溶性で、効果的に薬物をデバイスから容器壁内へと運ぶことができる。

【実施例】

【0166】

[176]本発明を、以下の実施例においてさらに説明するが、これは特許請求の範囲に記載の本発明の範囲を限定するものではない。

【実施例1】

【0167】

水性エアロゾル配合物
以下の成分を使用して、ラパマイシンの例示的水性配合物を調製した。

【0168】

【表1-1】

【0169】

[177]ブレンド手順：１０００ｍｌアンバーメスフラスコ内で、２５０プロピレングリコールを２５０エタノールと均一になるまでブレンドする。次に、まず１００ｍｇのラパマイシン、次に２０ｍｇのポリソルベート８０をプロピレングリコールおよびエタノール溶液中に連続的に溶解する。水を添加して容積を１０００ｍｌとし、均一になってすべてのラパマイシンが溶解するまで撹拌または超音波処理する。管理された温度で暗中保存する。

【実施例2】

【0170】

乾燥粉末配合物
[178]バッチ０６ＲＰ６８．ＨＱ００００８および０６ＲＰ６８．ＨＱ００００９。これら２つの配合物はそれぞれ、ラクトース担体粒子の表面上に分散された微粉化薬物（ラパマイシン）粒子のブレンドである。各バッチの最終組成物はそれぞれ、約２．６０ミクロンおよび３．００ミクロンの平均直径を有する１％（ｗ／ｗ）薬物粒子を含む。好適なサイズ範囲を有する薬物粒子は、下に記載のとおり、湿式研磨（０６ＲＰ６８．ＨＱ００００８）またはジェットミル粉砕（０６ＲＰ６８．ＨＱ００００９）により作られる。この実施例が１％（ｗ／ｗ）ラパマイシンを使用した一方で、０．５から２０％の範囲が実施可能である。担体粒子は、２種の担体、９５．５％（ｗ／ｗ）で存在し、約３０から１００ミクロン（等価球径）の粒子サイズを有するＲｅｓｐｉｔｏｓｅ（登録商標） ＳＶ００３、および５．５％（ｗ／ｗ）で存在し、１０ミクロン未満（等価球径）の粒子サイズを有するＲｅｓｐｉｔｏｓｅ（登録商標） ＬＨ３００ （Ｌａｃｔｏｈａｌｅ ３００）のブレンドからなる。ブレンド後、均質性および１％の薬物含有量を確認するためブレンドをアッセイした。

【0171】

[179]薬物粒子凝集を低減し、薬物粒子のエアロゾル化を補助するため、複数の他の賦形剤を任意選択で含める。任意選択の賦形剤は、リン脂質、たとえばジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）およびレシチン、ならびに金属脂肪酸塩、たとえばステアリン酸マグネシウムを含む。これらは、０．０１％から０．５％の範囲の賦形剤対大きな担体粒子の重量比で担体粒子上にコーティングされうる。

【0172】

[180]カプセル充填：バッチ０６ＲＰ６８．ＨＱ００００８およびバッチ０６ＲＰ６８．ＨＱ００００９からの２０ミリグラムの粉末ブレンドを、＃３ ＨＰＭＣカプセル内にロードし、薬物製品を製造した。これらのブレンドについて、５から３５ミリグラムの薬物を＃３サイズカプセルへロードし、毎分６０から１００リットルの範囲の流量でのＰｌａｓｔｉａｐｅ（登録商標） ＲＳ０１ Ｍｏｄｅｌ ７またはＰｌａｓｔｉａｐｅ（登録商標） ＲＳ００ Ｍｏｄｅｌ ８デバイスにおける作動時に、９５％超のロードされたブレンドを、カプセルから出すことが可能である。

【実施例3】

【0173】

Ｃ５７ＢＬ６マウスに対する口咽頭吸入（ＯＰＡ：ｏｒｏｐｈａｒｙｎｇｅａｌ ａｓｐｉｒａｔｉｏｎ）および経口強制飼養による投与後の肺および血液におけるラパマイシンの決定
[181]この研究は、強制飼養および口咽頭吸入（ＯＰＡ）による１ｍｇ／ｋｇの非常に高い標的用量でのラパマイシン投与後の雄Ｃ５７ＢＬ／６マウスにおけるラパマイシン濃度を評価するために実施した。マウス血液および肺ホモジネートにおけるラパマイシンの解析のための方法を、液体クロマトグラフィーをタンデム質量分析検出とともに使用して開発した（ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ）。三重反復濃度を使用したラパマイシンの較正曲線を、マウス血中で１ｎｇ／ｍＬから２０００ｎｇ／ｍＬの間、およびマウス肺ホモジネートにおいて２ｎｇ／ｍＬから２０，０００ｎｇ／ｍＬの間で解析した。正確度、精度および直線性は、予測された範囲内だった。

【0174】

[182]パイロット研究において、マウス１匹当たり５０μＬの容量での口咽頭吸入を介した肺へのビヒクル送達の効率を、エバンスブルー色素の投与により評価した。青色色素が肺にのみ存在することが視覚的に確証され、胃における青色色素の比存在は、使用された手法において胃への送達が回避されたことを実証した。

【0175】

[183]ラパマイシンは、雄Ｃ５７ＢＬ／６マウス（Ｎ＝６）に、強制飼養により、１．０ｍｇ／ｋｇの用量で、経口でまたはＯＰＡを介してのいずれかで投与された。経口用量は、医薬経口液体配合物Ｒａｐａｍｕｎｅ Ｏｒａｌ（登録商標）（Ｐｆｉｚｅｒ）を使用して配合された。ＯＰＡのためのラパマイシンは、被験物質を適切な用量のエタノールに溶解させることにより調製され、次に、適切な用量の水を添加して、１ｍｇラパマイシン／ｍＬの濃度の１０％エタノール溶液を調製した。ラパマイシンを、６匹の雄Ｃ５７ＢＬ／６マウスの２つの群に、ＯＰＡにより、イソフルラン麻酔下で投与した。追加の６匹のマウスの群は、ビヒクルのみ（水中の１０％エタノール）を受けた。投与１時間後に、経口およびＯＰＡラパマイシンを受けた６匹のマウスの群を安楽死させ、血液を心穿刺により得て、肺を除去した。ＯＰＡによりラパマイシンまたはビヒクルを投与された各群の残りのマウスを、さらに３日間観察した。７２時間での剖検で、血液を心穿刺により得て、肺を除去した。投与後７２時間のラパマイシンまたはビヒクル処置マウスにおいて、有害作用は観察されなかった。

【0176】

[184]ラパマイシンの濃度を、ＬＣ−ＭＳ／ＭＳにより回収血液および肺ホモジネートにおいて決定した。ラパマイシンのＯＰＡ１時間後に、ラパマイシンの濃度は、肺組織（３７９４±１２５９ｎｇ／ｇ組織）において血中（６４１±２２０ｎｇ／ｍｌ）よりも約６倍高かった。同等の用量のラパマイシンの経口投与後、１時間でのラパマイシンの肺および血中濃度はそれぞれ、７１±４３ｎｇ／ｇおよび２３±１６ｎｇ／ｍＬだった。ＯＰＡ後の肺ホモジネート濃度は、同じ高用量（１ｍｇ／ｋｇ）のラパマイシンの経口投与後に測定されたものよりも５３倍高かった。データは、より低い用量のラパマイシンの肺への送達（系を飽和させない用量レベル）が、経口投与により達成できる肺におけるラパマイシンレベルをもたらすが、経口投与で生じるよりも有意に低い血中ラパマイシンを伴うことを示唆する。

【0177】

材料と方法
[185]試験物質：シロリムス（Ｒａｐａｍｕｎｅ、ラパマイシン）ＭＷ ９１４．１７２、Ｃ５１Ｎ７９ＮＯ１２、ＣＡＳ番号：５３１２３−８８−９。ソース（経口強制飼養用）：経口投与用Ｒａｐａｍｕｎｅ Ｏｒａｌ（登録商標）（Ｐｆｉｚｅｒ）、ロット番号：ＭＷＧＴ、有効期限：２０１６年７月。ソース（ＯＰＡ用）：ラパマイシン（シロリムス）固体、ＬＣ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、Ｗｏｂｕｒｎ ＭＡ、ロット番号：ＡＳＷ−１２７、有効期限：２０２３年１２月。

【0178】

[186]動物：雄Ｃ５７ＢＬ／６マウス、およそ８週齢、Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ， Ｉｎｃ、Ｒａｌｅｉｇｈ、ＮＣ製。動物にＣｅｒｔｉｆｉｅｄ Ｐｕｒｉｎａ Ｒｏｄｅｎｔ Ｃｈｏｗ ＃５００２を給餌し、適宜水道水を供給した。栄養レベルおよび汚染物質の可能性について、各食餌バッチの解析を供給者が実施し、研究責任者が検査し、研究記録に記載した。食餌は、およそ６０〜７０°Ｆで保存し、使用期間は製粉日から６ヶ月を超えなかった。マウスを、水ボトルを収納する、ステンレス鋼棒のふたを有するポリカーボネートケージ（１ケージ当たり１匹）に収めた。ケージサイズは、マウス用のおよそ２９．２１ｃｍ（１１．５”）×１９．０５ｃｍ（７．５”）×高さ１２．７ｃｍ（５”）（床面積４５１．６１２平方センチメートル（７０平方インチ））である。接触ベッディング（Ｃｏｎｔａｃｔ ｂｅｄｄｉｎｇ）は、Ｓａｎｉ−Ｃｈｉｐｓ硬材チップ（Ｐ． Ｊ． Ｍｕｒｐｈｙ Ｆｏｒｅｓｔ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ Ｃｏ．、Ｍｏｎｔｖｉｌｌｅ、ＮＪ）だった。マウスを、研究での使用前に５日間隔離した。獣医または有資格被指名者が、隔離からの解放前に動物を検査した。ＲＴＩ動物室の温度および相対湿度を、自動システム（Ｒｅｖｉｓｉｏｎ ４．４．１ ｆｏｒ Ｓｉｇｎａｌ（登録商標）ソフトウェアを備えるＳｉｅｂｅ／Ｂａｒｂｅｒ−Ｃｏｌｍａｎ Ｎｅｔｗｏｒｋ ８０００ Ｓｙｓｔｅｍ［Ｓｉｅｂｅ Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ Ｃｏｎｔｒｏｌｓ（ＳＥＣ）／Ｂａｒｂｅｒ−Ｃｏｌｍａｎ Ｃｏｍｐａｎｙ、Ｌｏｖｅｓ Ｐａｒｋ、ＩＬ］）を使用して、継続的にモニタリングし、制御し、記録した。標的環境範囲は、温度が１８℃〜２６℃（６４〜７９°Ｆ）、相対湿度が３０〜７０％であり、１日当たり１２時間の光サイクルを伴った。生存フェーズの最後に、二酸化炭素への曝露過多によりマウスを安楽死させた。

【0179】

[187]試験化学物質調製：エバンスブルーを、滅菌蒸留水中に０．５％ｗ／ｖで調製した。経口投与用に供給されているＲａｐａｍｕｎｅ Ｏｒａｌ（登録商標）を投与した。ラパマイシン（固体）を、エタノール中に溶解させ、滅菌蒸留水で希釈し、１０％エタノール中０．５ｍｇ／ｍＬの最終濃度を提供した。

【0180】

[188]投薬：投与される用量の量を決定するため、投薬前に各動物の体重を測定した。単一強制飼養用量を、ボール端２０−Ｇステンレス鋼を強制飼養投薬針（Ｐｏｐｐｅｒ ＆ Ｓｏｎｓ Ｉｎｃ．、Ｎｅｗ Ｈｙｄｅ Ｐａｒｋ、ＮＹ）を装着された１００μＬガラスシリンジ（Ｈａｍｉｌｔｏｎ、Ｒｅｎｏ、ＮＶ）を使用して投与した。各動物に投与される用量を、（完全充填されたシリンジの重量）−（空のシリンジの重量）から決定した。投薬時間を記録した。動物の投薬は、適切な時点での血液回収を可能にするよう間隔を空けた。各群に投与された用量配合物を下に示す。

【0181】

[189]口咽頭吸入群動物について、単一用量のラパマイシン（５０μＬ）を、ボール端２４−Ｇステンレス鋼を強制飼養投薬針（Ｐｏｐｐｅｒ ＆ Ｓｏｎｓ Ｉｎｃ．、Ｎｅｗ Ｈｙｄｅ Ｐａｒｋ、ＮＹ）を装着された１００μＬガラスシリンジ（Ｈａｍｉｌｔｏｎ、Ｒｅｎｏ、ＮＶ）を使用して、イソフルラン麻酔下の各マウスに投与した。投薬前にマウスの体重を測定し、投与されるラパマイシンの用量を重量で記録した。各マウスはイソフルランで麻酔し、口を開くよう拘束した。舌を鉗子で口の一方に保持し、用量を口腔の遠位部分内に緩徐に注入した。鼻孔を指で２呼吸の間覆い、吸入を確保した（Ｒａｏら、２００３）。

【0182】

【表1-2】

【0183】

[190]血液および肺試料の回収：研究終了時（投薬１または７２時間後）に、マウスをＣＯ２に曝露して安楽死させ、心穿刺により血液を回収し、二カリウムＥＤＴＡを抗凝固剤として用いた。肺組織を切除し、右および左肺へと分割した。左肺を解析のために使用し、右肺を液体窒素中で急速冷凍し、さらなる解析のために−７０℃で保存した。

【0184】

[191]ＬＣ−ＭＳ／ＭＳによるラパマイシンについての試料の解析：肺および血液におけるラパマイシンの解析のためのＬＣ−ＭＳ／ＭＳ法を、Ｗｕら（２０１２）の公開された方法に基づいて準備した。血液および肺ホモジネートの体積を、公開された方法から実質的に低減した。トリアムシノロンを内部標準として使用した。

【0185】

[192]ＳＰＥＸ ＳａｍｐｌｅＰｒｅｐ ２０１０ Ｇｅｎｏ／Ｇｒｉｎｄｅｒにおける組織＋脱イオン水（１：３ｗ／ｖ）での、ホモジナイザーにおける２．８ｍｍボールベアリングでの秤量肺試料の均質化により、肺ホモジネートを調製した。

【0186】

[193]標準の濃度を、各標準が代替ストック標準（ａｌｔｅｒｎａｔｅ ｓｔｏｃｋ ｓｔａｎｄａｒｄ）に由来するよう構成した。それぞれが三重反復で作成された６点較正曲線を解析物定量に用いた。重みづけありまたはなしの単純直線回帰モデルをカーブフィッティングに用いた。決定された濃度範囲は、血中で１〜２０００ｎｇ／ｍＬ、肺ホモジネートにおいて２〜２０００ｎｇ／ｍＬだった。

【0187】

[194]以下の方法性能パラメータが、許容可能だと考えられた。濃度反応関係について≧０．９８の決定係数、ｒ２；ノミナル値の≦±１５％（ＬＯＱを超える濃度について）または≦±２０％（ＬＯＱの濃度について）の正確度。ｒ^２は、すべての解析において０．９９９を超えていた。

【0188】

[195]３０μＬのマトリクス、３０μＬの添加溶液（ブランクおよび試料についてメタノール）、１０μＬの内部標準溶液（ＭｅＯＨ中）および９０μＬのＭｅＯＨを、微量遠心管内にピペットし、短時間ボルテックスし、次に、６分間、１０，０００ＲＰＭ、約４℃で遠心した。上清のアリコート（９０μＬ）を、ＬＣバイアルインサートに移し、次に、ＬＣ−ＭＳ／ＭＳにより解析した（表２）。

【0189】

【表2】

【0190】

[196]データ収集およびレポート：Ｄｅｂｒａ（商標）システムバージョン５．５．１０．７２（Ｌａｂｌｏｇｉｃ Ｓｙｓｔｅｍｓ Ｌｔｄ．、Ｓｈｅｆｆｉｅｌｄ、Ｅｎｇｌａｎｄ）において、研究データを収集し、レポートした。これには、動物体重、投与用量、投薬時間、および試料回収時間についてのデータが含まれる。投与用量および試料回収時間の計算を、Ｄｅｂｒａ（商標）システムでレポートした。

【0191】

結果
[197]ラパマイシン解析：ラパマイシンの解析を、３０μＬの血液および肺ホモジネートの試料体積でセットアップした。例示的クロマトグラムを、血液および肺におけるラパマイシンおよび内部標準について示す（図１および図２）。研究試料の生成前に、方法性能を検証するため、肺および血液について３重反復較正曲線を生成した。較正範囲は、血液について１．０〜２０００ｎｇ／ｍｌ、肺ホモジネートについて１〜２０，０００ｎｇ／ｍＬだった。３体積の水で均質化された１ｇの肺組織で肺ホモジネートを調製し、１：４ホモジネートを得た。較正曲線を、血液、肺ホモジネート、および溶剤について図３および図４に示す。

【0192】

[198]口咽頭吸入：口咽頭吸入によるラパマイシンの投与前に、ＯＰＡが肺に用量を送達することを検証するために、エバンスブルーの投与を使用した。マウスをイソフルランで麻酔し、平滑末端針を備えるシリンジを使用して、ＯＰＡによりエバンスブルーを投与した。ＯＰＡの直後にマウスを安楽死させ、肺および胃を視覚的に検査し、エバンスブルー色素が肺に送達されたが、胃に送達されなかったことを確認した。４匹のマウスにエバンスブルーを投与することに成功し、すべての色素が肺に位置し、胃には存在しなかった。

【0193】

[199]ラパマイシン投与：投与用量溶液の重量を、投薬前の用量溶液で充填されたシリンジの重量を測定し、投薬後の重量を測定することにより決定した。投与用量溶液の重量を、投与ラパマイシンの量を計算するために使用した。投薬の時間を０として記録した。群２および群３の動物を、投薬１時間後に安楽死させた。群４および群５の動物を、投薬後７２時間観察した。有意な臨床兆候は、いずれの群においても観察されなかった。

【0194】

[200]血液および肺におけるラパマイシン解析：回収されたすべての試料において、マウス血液および左肺ホモジネートにおけるラパマイシンを解析した（図６および図７）。各動物からの右肺の試料は、さらなる解析の可能性のために保存した。試料のデータ概要を表３に記載する。

【0195】

【表3】

【0196】

[201]すべての試料セットについて、標準セット、試料反復試験１、標準セット、試料反復試験試料（ｓａｍｐｌｅ ｒｅｐｌｉｃａｔｅ ｓａｍｐｌｅ）２、標準セットの順序で３重反復較正曲線を解析した。ラパマイシンのＯＰＡ１時間後に、ラパマイシンの濃度は、肺組織（３７９４±１２５９ｎｇ／ｇ組織）において血中（６４１±２２０ｎｇ／ｍｌ）よりも約６倍高かった。同等の用量のラパマイシンの経口投与後、１時間でのラパマイシンの肺および血中濃度はそれぞれ、７１±４３ｎｇ／ｇおよび２３±１６ｎｇ／ｍＬだった。ＯＰＡ後の肺ホモジネート濃度は、同じ高用量（１ｍｇ／ｋｇ）のラパマイシンの経口投与後に測定されたものよりも５３倍高かった。

【0197】

考察
[202]本研究は、市販の経口配合物中で強制飼養による、および、１０％水性エタノール中に調製された懸濁液としての口咽頭投与（ＯＰＡ）による、ラパマイシンの投与後の血液および肺組織中のラパマイシンの濃度を研究した。ＯＰＡを介した投薬７２時間後まで、ラパマイシンまたはビヒクル処置マウスにおいて、有害作用は観察されなかった。ラパマイシンの投与前、解析方法を開発し、ＯＰＡによる肺への色素の投与を検証した。ＯＰＡ後の肺におけるラパマイシンの濃度は、血中よりも６倍高かった。ＯＰＡ７２時間後、ラパマイシンは、血中の定量限界未満だったが、肺においては検出可能だった。この研究は、肺内投与後にラパマイシンが全身で利用可能であり、肺への送達後の早い時点および遅い時点で肺組織濃度が血液の濃度を大きく超えることを示した。

【0198】

[203]これらの結果はさらに、肺へ直接送達されたラパマイシンが、予想外にも、血液と比較して肺組織において高い局所薬物濃度を達成することを実証する。この結果は、ラパマイシンは身体組織全体にわたり均一に分布することが知られており、その高い親油性ゆえに肺から急速に除去されるはずであることから、肺組織および血液においてほぼ等しい薬物濃度を予測する、ラパマイシンの薬理に関して知られていることからは、完全に予想外だった。したがって、これらの結果は、ラパマイシンの肺への直接投与が、治療有効性のために十分に高い送達用量を達成可能である一方で、同時に、ほぼ検出不能な全身利用能を達成し、そのことにより、薬物への全身曝露による経口投与関連毒性を排除するはずだと示す。以前の研究を鑑みると、肺自体への毒性もまた懸念される一方で、ここでの結果は、さらに予想外なことに、相対的に多量のラパマイシンが肺組織に対して急性毒性でなかったことを示唆する。

【0199】

【化4】

【実施例4】

【0200】

ラパマイシンの経口およびＯＰＡ投与後のマウス肺におけるＳ６リン酸化
[204]上で論じたとおり、経口投与およびＯＰＡ後の肺および血液におけるラパマイシンの組織分布を示す本発明者らの実験は、ラパマイシンの肺への直接投与が、治療有効性のために十分に高い送達用量を達成可能である一方で、同時に、薬物に対する非常に低い全身曝露を達成し、そのことにより、同時に治療有効性を改善し、ラパマイシンの経口投与と関連する多くの毒性を排除するはずであることを実証した。このアプローチを検証するため、本発明者らは、マウス肺組織におけるリン酸化Ｓ６タンパク質の存在を、ｍＴＯＲ活性のバイオマーカーとして使用した。使用されたマウス株（Ｃ５７ｂｌ／６）において、マウス気道および肺胞上皮細胞は、構成的に活性な（リン酸化、「ｐ」）Ｓ６タンパク質を有する。Ｓ６タンパク質は、典型的には、ｍＴＯＲＣ１の下流であるＳ６Ｋによりリン酸化され、たとえば、成長因子、たとえば上皮成長因子（ＥＧＦ）、ＡＫＴ、ＥＲＫ、およびＲＳＫの下流で活性化される。ｍＴＯＲＣ１は、同化作用プロセス、たとえば脂質、タンパク質、および細胞小器官の生合成を刺激し、異化作用プロセス、たとえば自食作用を抑制することにより細胞成長および増殖を促進する。ｍＴＯＲＣ１経路は、広範なプロセス、たとえばタンパク質および脂質合成ならびに自食作用を調節するために、成長因子、酸素、アミノ酸、およびエネルギー状態を含む細胞内および細胞外シグナルを感知および統合する。ｍＴＯＲＣ１は、ラパマイシンに対して感受性が非常に高い。

【0201】

[205]本研究においては、肺組織が、上で論じたとおり、ビヒクル（ｎ＝６）、またはＯＰＡ（ｎ＝６）もしくは経口強制飼養（ｎ＝６）を介して投与される１ｍｇ／ｋｇラパマイシンのいずれかで処置されたＣ５７ｂｌ／６マウスから、投薬後２つの時点、１時間および７２時間で採取された。上で論じたとおり、ＯＰＡ後１時間で、ラパマイシンは、血中で６４１ｎｇ／ｍｌ、肺において３７９４ｎｇ／ｇ組織で検出され、７２時間で、肺において依然として１２．５ｎｇ／ｇで検出可能であった一方で、この時点では血中では検出不能だった。逆に、経口（強制飼養）投与後、１時間で、ラパマイシンは、血中で２３ｎｇ／ｍｌ、肺において７１ｎｇ／ｇ組織で検出され、７２時間では、肺または血液のいずれにおいても検出不能だった。図１および図２のデータにより示されるとおり、リン酸化Ｓ６（ｐＳ６）のレベルは、ＯＰＡおよび経口投与ラパマイシンの両方により１時間で実質的に低減し、７２時間でＯＰＡについて抑制され続けた。ｐＳ６は、ビヒクル対照において最も高かった。なぜなら、これらのマウスは、構成的に活性なｍＴＯＲシグナル伝達を有するからである。これらのデータは、肺において約７０ｎｇ／ｇを達成するのに十分なラパマイシンの送達用量が、肺組織においてｐＳ６タンパク質により測定されるｍＴＯＲシグナル伝達を実質的に抑止し、ｍＴＯＲシグナル伝達が、１２．５ｎｇ／ｇまでの低いレベルに抑制され続けるであることを示す。これらの結果は、吸入ラパマイシンが経口投与ラパマイシンよりもはるかに低い用量で送達されうると同時に、高い治療有効性および非常に低い毒性を達成することを実証することにより、異常に高いｍＴＯＲ経路活性により特徴づけられるＬＡＭ等の疾患および障害の治療のために吸入ラパマイシンを利用する、本発明者らのアプローチを確証する。

【実施例5】

【0202】

吸入を介して投与されるラパマイシンは、予想外の生体内分布を示す
[206]ラパマイシンは、高い経口またはＩＶ用量後に肺に集中することが、文献において報告されてきた（Ｙａｎｅｚ，Ｊ．ら、Ｐｈａｒｍａｃｏｍｅｔｒｉｃｓ ａｎｄ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ ｏｆ Ｎｏｖｅｌ Ｎａｎｏｆｏｒｍｕｌａｔｅｄ ＰＥＧ−ｂ−ｐｏｌｙ（ε−ｃａｐｒｏｌａｃｔｏｎｅ） Ｍｉｃｅｌｌｅｓ ｏｆ Ｒａｐａｍｙｃｉｎ、Ｃａｎｃｅｒ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ ａｎｄ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ、６１ （１）、１３３−１４４ ２００７）。ある研究は、単一用量の１０．０ミリグラム／キログラムをＳＤラットに投与後、組織区画全体への分布のための時間（２４時間）を置いた後の肺におけるラパマイシンの量が、７２１ナノグラム／グラム、血中の濃度のおよそ１９倍であることを報告した（表４）。

【0203】

【表4】

【0204】

[207]より早期の別の研究（Ｎａｐｏｌｉ，Ｋ．ら、Ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ ｏｆ Ｓｉｒｏｌｉｍｕｓ ｉｎ Ｒａｔ Ｔｉｓｓｕｅ、Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、３０（２）：１３５−１４２、１９９７）において、ＳＤラットに対して一定範囲のラパマイシン用量が、経口およびＩＶ投与経路により毎日投与された。ＩＶ投与の１４日後、肺組織中ラパマイシン濃度は、用量に比例して、２００から９００ナノグラム／グラムの範囲であり、血中の濃度よりもおよそ２３から４４倍高かった。だが、経口投与については、同じ用量で肺に蓄積したラパマイシンの量ははるかに低かったが、とはいえ、肺の血液に対するラパマイシン濃度の比は、ほぼ同じだった（表５）。

【0205】

【表5】

【0206】

[208]本研究において、ラパマイシンは、１日について（１）１．０ミリグラム／ｋｇ／日および（２）０．０３６０ｍｇ／ｋｇ／日の２つの用量で、吸入によりＳＣラットに投与された。組織区画への分布のために１２時間を置いた後、高用量について肺におけるラパマイシントラフ濃度は１４，８００ナノグラム／グラムであり、肺におけるラパマイシン濃度は、血中よりもおよそ８００倍高かった（表６）。低用量については、肺における濃度は、血中の濃度よりも９５倍高かった（表６）。表７は、前の実験において使用された同じ２つの用量、すなわち１．０ｍｇ／ｋｇ／日および０．０３６０ｍｇ／ｋｇ／日で５日間反復された１日１度の投薬後のトラフ肺濃度、最大およびトラフ血中濃度、ならびに算出された相当ヒト用量を示す。表６および表７において、影付き行は、上２つの行における試験結果に基づく挿入値である。「１日当たりのヒト用量相当量」は、基準変数である。

【0207】

【表6】

【0208】

【表7】

【0209】

[209]これらの結果は、吸入による肺へのラパマイシンの送達が、代替投与経路、たとえばＹａｎｅｚおよびＮａｐｏｌｉの先行研究による経口またはＩＶにより達成されうるよりも、顕著に高い肺組織中薬物濃度を、顕著に高い肺対血液比とともにもたらしたことを示す。さらに、吸入による送達後の肺における高量のラパマイシンは、ＹａｎｅｚおよびＮａｐｏｌｉから予想されたものに対して、予想外に高かった。ＩＶおよび吸入投与経路の両方が、ラパマイシンの高い生物学的利用能を有するので、吸入される１ｍｇ／ｋｇ用量は、Ｎａｐｏｌｉの０．４ｍｇ／ｋｇ／日のＩＶ用量により観察されたものの約２．５倍の肺濃度を達成すると予想された。代わりに、肺におけるラパマイシンのレベルは、吸入経路を介して、およそ１７倍高かった。同様に、Ｙａｎｅｚにより投与された１０ｍｇ／ｋｇのＩＶ用量は、１ｍｇ／ｋｇ吸入用量により達成されるものよりも１０倍高いラパマイシンの肺濃度を達成すると予想された。代わりに、ＩＶ用量は、吸入用量のおよそ２０分の１の肺濃度を達成した。これは、肺における低い代謝活性および肺組織区画から全身循環へのラパマイシンの緩徐な受動または能動輸送からもたらされうる。正確な機序にかかわらず、これらの結果は、ラパマイシンの肺への送達が、持続的に高い局所濃度をもたらす一方で、循環濃度が低いことを示す。

【0210】

[210]とりわけ、ここで提示された結果に基づいて、５から３０ナノグラム／グラムの範囲の肺におけるラパマイシンの治療有効用量が、吸入により肺に２０から１００マイクログラムを投与することにより達成されうる。対照的に、Ｙａｎｅｚによる経口送達により同等の肺濃度を達成するには、４から１６ミリグラムを必要とすると考えられる。ＮａｐｏｌｉによるＩＶ送達により同等の肺濃度を達成するには、６０から６００マイクログラムを必要とすると考えられる。

【0211】

[211]加えて、本研究の結果に基づいて、肺における５から３０ナノグラム／グラムの治療範囲は、ラパマイシンが吸入により送達されるとき、８００：１の肺対血液分配率で達成されうる。これは、ラパマイシンが肺組織において治療範囲内である一方で、２０から３００ピコグラム／ｍｌの最大濃度のラパマイシンのみが血中に循環すると考えられることを意味する。ラパマイシンに対するこのきわめて低い全身曝露は、経口またはＩＶ投与からもたらされるラパマイシンに対するはるかに高い全身曝露と関連する毒性および有害薬物事象を劇的に低減するはずである。

【0212】

[212]要約すれば、ここに記載される結果は、有利には、吸入を介した肺へのラパマイシンの投与が、薬物に対するきわめて低い全身曝露と組み合わされた、５から３０ナノグラム／グラムの範囲の肺における治療有効用量の薬物を達成するのに必要とされる低用量のラパマイシンを提供し、ラパマイシンについて顕著に改善した治療指数をもたらすことを実証する。

【実施例6】

【0213】

吸入組成物についてのラパマイシンのサイズ低減
[213]ラパマイシンの粒子サイズを、湿式研磨プロセスまたはジェットミル粉砕プロセスのいずれかを使用して、２．０μｍ＜Ｄｖ５０＜３．０μｍの標的範囲まで低減した。ジェットミル粉砕については、Ｊｅｔｐｈａｒｍａ製の実験室規模のＭＣＯｎｅユニットを、以下の操作条件で使用した。すなわち、ベンチュリ圧２〜４バール、ミル粉砕圧３〜５バール、フィード速度９０ｇ／ｈ。湿式研磨については、精製水を使用してフィード懸濁液を調製した。マイクロ流体高圧ホモジナイザーを、サイズ低減工程のために使用し、得られた懸濁液を噴霧乾燥した。湿式研磨法の詳細を下に記載する。

【0214】

[214]湿式研磨法のサイズ低減工程のために使用された高圧ホモジナイザーは、補助処理モジュール（２００ミクロン）を備えたパイロット規模のマイクロ流体高圧ホモジナイザーであり、１００ミクロン相互作用チャンバーを使用した。ユニットを、約４５５バール（増圧モジュール水圧において約３０バール）で操作した。マイクロ流動化後に、噴霧乾燥により流体を除去し、乾燥粉末を生成した。実験室規模の噴霧乾燥器、ＳＤ４５（ＢＵＣＨＩ、ｍｏｄｅｌ Ｂ−２９０ Ａｄｖａｎｃｅｄ）は、２つの流体ノズル（キャップおよび直径はそれぞれ、１．４および０．７ｍｍだった）を備えていた。連続する２つのサイクロンを使用し（第１のものは、標準的なＢｕｃｈｉサイクロンであり、第２のものは、高性能Ｂｕｃｈｉサイクロン）、乾燥生成物を回収した。窒素を用いて単流モードで、すなわち乾燥窒素の再循環なしに、噴霧乾燥ユニットを動作させた。窒素をブローするアスピレーターは、その性能の１００％に設定した（最大性能での流量は、およそ４０ｋｇ／ｈ）。噴霧化窒素の流量を、４０±５ｍｍのロータメーターの値に調整した。生成物懸濁液をフィードする前に、噴霧乾燥器を精製水で安定化させ、この間、流量は６ｍｌ／ｍｉｎに調整した（蠕動ポンプでの２０％）。入口温度を、標的出口温度（４５℃）を達成するように調整した。温度の安定化後、噴霧乾燥器のフィードを精製水から生成物懸濁液へと交換し（安定化中に使用されたのと同じ流量を維持する）、標的出口温度を達成するために入口温度を再び調整した。ストック懸濁液の終わりに、フィードラインをすすぎ、制御された閉鎖を実施するために、フィードを再び精製水に交換した。両方のサイクロン下の回収フラスコ中の乾燥生成物の重量を測定し、収量が、高圧ホモジナイザーにフィードされた懸濁液中の総固体に対する乾燥生成物の重量パーセントとして算出された。

【0215】

[215]粒子サイズ分布を、レーザー回折により解析した。固体状態特性解析（多形形態および純度について）を、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、Ｘ線粉末回折（ＸＲＰＤ）、および示差走査熱量測定（ｍＤＳＣ）により実施した。含水量を、カールフィッシャー法により決定した。

【0216】

[216]ジェットミル粉砕は、下の表８に示すとおり、１．５ミクロンのＤｖ１０、２．７ミクロンのＤｖ５０および４．９ミクロンのＤｖ９０を有する単分散粒子サイズ分布を有する結晶性ラパマイシン粉末をもたらした。

【0217】

[217]湿式研磨は、表９に示すとおり、１．０ミクロンのＤｖ１０、２．４ミクロンのＤｖ５０および５．０ミクロンのＤｖ９０を有する単分散粒子サイズ分布を有する結晶性ラパマイシン粉末をもたらした。

【0218】

[218]両方の方法が、標的範囲内のラパマイシンの粒子をもたらし、いずれのプロセスも、ラパマイシンの多形形態または純度に対する影響を示さなかった。下の表は、ジェットミル粉砕および湿式研磨プロセスについて、プロセス中の制御データを示す。データは、両方のプロセスが、ＡＰＩ純度または多形形態に影響することなしに標的範囲内のＡＰＩ粒子サイズをもたらすことが可能だったことを示す。

【0219】

【表8】

【0220】

【表9】

【実施例7】

【0221】

乾燥粉末組成物のエアロゾル性能試験
[219]上の実施例において製造されたカプセル剤を、下の表に示すデバイス内に入れ、作動させた。バッチ０６ＲＰ６８．ＨＱ００００８およびバッチ０６ＲＰ６８．ＨＱ００００９からのブレンドを含有するデバイス／カプセル剤から送達されるエアロゾル性能を、ＵＳＰの第９０５章および第６０１章に記載の方法により次世代インパクター（ＮＧＩ）を使用して特徴づけた。６０および１００リットル毎分（ＬＰＭ）の流量でエアロゾルを試験した。微粒子用量（ＦＰＤ）および微粒子画分（ＦＰＦ）を下の表に示す。空気動力学的中央粒子径（ＭＭＡＤ）および幾何標準偏差（ＧＳＤ）もまた示す。

【0222】

【表10】

【0223】

【表11】

【0224】

【表12】

【0225】

【表13】

【0226】

[220]これらのエアロゾル性能データに基づき、湿式研磨薬物粒子が好ましい。それらは、より高い微粒子用量、より高い微粒子画分、中央および末梢肺領域内の両方への貫通を示し、より少ない経口沈着を示すと考えられる粒子サイズ分布をもたらした。

【実施例8】

【0227】

ラパマイシンの薬物動態モデリング
[221]上に示す０６ＲＰ６８．ＨＱ００００８（湿式研磨）＋Ｐｌａｓｉｔａｐｅ ＲＳ０１ Ｍｏｄｅｌのエアロゾル性能および実施例３の動物実験結果に基づいて、ヒトにおける吸入ラパマイシンの肺への直接送達が同様に、治療的に有効であるのに十分に高い持続的な肺濃度を、低い全身曝露（低血中濃度）とともにもたらし、それゆえ効果的に全身曝露による副作用を最小化することが予想できる。２つのコンパートメントの薬物動態モデルを開発し、表９の配合物およびＤＰＩ吸入器を使用した反復ＱＤ投薬後のヒトの血液および肺における濃度を予測した。薬物動態モデルについて、Ｒａｐａｍｕｎｅ（登録商標）（ＮＤＡ ２１−１１０、およびＮＤＡ ２１−０８３）医薬品承認審査概要からのヒトＰＫパラメータを使用した。すなわち、分布容積は７８０リットルと想定し、クリアランスは０．０００３／分、排出半減期は４２．３時間だった（ラパマイシンＩＶ投薬との同等性を想定）。肺からのラパマイシンの吸収半減期は、およそ０．５時間と推定され、これは他の高度に親油性の化合物、たとえば肺吸収データを利用可能なプロピオン酸フルチカゾンと類似した。肺に沈着するラパマイシンの生物学的利用能を、およそ１００％と想定した。口咽頭沈着または粘膜毛様体クリアランスによる上気道からの除去を通じたＧＩ経路により吸収されるラパマイシンの生物学的利用能は、Ｒａｐａｍｕｎｅ（登録商標）医薬品承認審査概要において報告されているとおり、１４％と想定した。６０リットル毎分の流量での典型的なヒト吸気操作について、表９に示すとおり、微粒子用量は５７マイクログラムであり、微粒子画分は４０％だった。

【0228】

[222]モデルは、図８に示すとおり、１１日後に平均安定状態濃度を達成することを予想する。図から、肺に送達された５７マイクログラムの１日１度の反復投薬が、およそ５０ピコグラム／ｍｌのトラフ血中濃度、および２００ピコグラム／ｍｌ未満、実質的にＭｃＣｏｒｍａｃｋら（２０１１）Ｅｆｆｉｃａｃｙ ａｎｄ ｓａｆｅｔｙ ｏｆ ｓｉｒｏｌｉｍｕｓ ｉｎ ｌｙｍｐｈａｎｇｉｏｌｅｉｏｍｙｏｍａｔｏｓｉｓ． Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ ３６４：１５９５−１６０６において報告された５〜１５ｎｇ／ｍｌの濃度未満の最大濃度をもたらすことがわかる。８５０グラムの肺組織重量、肺における代謝なし、および３０分の肺吸収半減期を想定して、肺に送達される５７マイクログラムのラパマイシンが、肺組織における治療レベルを、およそ１４ｎｇ／グラムほどの高さのラパマイシンの局所肺濃度とともにもたらすと考えられる。

【0229】

等価物
[223]当業者は、常法を超えない実験を使用して、本明細書に記載の発明の具体的な実施形態の多くの等価物を認識するか、またはそれを確認可能であると考えられる。かかる等価物は、以下の特許請求の範囲に包含されることが意図される。

【0230】

[224]本明細書において引用した参考文献は、それらの全体がすべての目的のために、それぞれ個別の刊行物または特許または特許出願が具体的且つ個別にその全体がすべての目的のために参照により本明細書に組み込まれると示されている場合と同程度に、参照により本明細書に組み込まれる。

【0231】

[225]本発明は、本明細書に記載の具体的な実施形態により範囲が限定されるものではない。実際に、本発明の様々な改変が、本明細書に記載のものに加えて、前述の説明および添付の図面から当業者に明らかになると考えられる。かかる改変は、添付の特許請求の範囲内に収まることが意図される。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【国際調査報告】