特表 2017-513823 酸化ストレスを軽減させる局所用組成物及び方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】特表2017-513823(P2017-513823A)

(43)【公表日】2017年6月1日

(54)【発明の名称】酸化ストレスを軽減させる局所用組成物及び方法

(51)【国際特許分類】

   A61K 8/97 20170101AFI20170428BHJP

   A61Q 19/00 20060101ALI20170428BHJP

   A61K 31/4525 20060101ALI20170428BHJP

   A61K 31/121 20060101ALI20170428BHJP

   A61P 17/00 20060101ALI20170428BHJP

   A61K 8/35 20060101ALI20170428BHJP

   A61K 8/49 20060101ALI20170428BHJP

   A61K 8/60 20060101ALI20170428BHJP

   A61K 8/63 20060101ALI20170428BHJP

   A61K 36/80 20060101ALI20170428BHJP

   A61K 36/28 20060101ALI20170428BHJP

   A61K 36/82 20060101ALI20170428BHJP

   A61K 36/9066 20060101ALI20170428BHJP

   A61P 39/06 20060101ALI20170428BHJP

   A61K 31/381 20060101ALI20170428BHJP

   A61Q 17/00 20060101ALI20170428BHJP

   A61Q 17/04 20060101ALI20170428BHJP

   A61K 31/357 20060101ALI20170428BHJP

   A61K 31/7048 20060101ALI20170428BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20170428BHJP

【ＦＩ】

   A61K8/97

   A61Q19/00

   A61K31/4525

   A61K31/121

   A61P17/00

   A61K8/35

   A61K8/49

   A61K8/60

   A61K8/63

   A61K36/80

   A61K36/28

   A61K36/82

   A61K36/9066

   A61P39/06

   A61K31/381

   A61Q17/00

   A61Q17/04

   A61K31/357

   A61K31/7048

   A61P43/00 121

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

【全頁数】41

(21)【出願番号】特願2016-558376(P2016-558376)

(86)(22)【出願日】2015年4月22日

(85)【翻訳文提出日】2016年11月15日

(86)【国際出願番号】US2015027094

(87)【国際公開番号】WO2015164504

(87)【国際公開日】20151029

(31)【優先権主張番号】14/260,149

(32)【優先日】2014年4月23日

(33)【優先権主張国】US

(81)【指定国】 AP(BW,GH,GM,KE,LR,LS,MW,MZ,NA,RW,SD,SL,ST,SZ,TZ,UG,ZM,ZW),EA(AM,AZ,BY,KG,KZ,RU,TJ,TM),EP(AL,AT,BE,BG,CH,CY,CZ,DE,DK,EE,ES,FI,FR,GB,GR,HR,HU,IE,IS,IT,LT,LU,LV,MC,MK,MT,NL,NO,PL,PT,RO,RS,SE,SI,SK,SM,TR),OA(BF,BJ,CF,CG,CI,CM,GA,GN,GQ,GW,KM,ML,MR,NE,SN,TD,TG),AE,AG,AL,AM,AO,AT,AU,AZ,BA,BB,BG,BH,BN,BR,BW,BY,BZ,CA,CH,CL,CN,CO,CR,CU,CZ,DE,DK,DM,DO,DZ,EC,EE,EG,ES,FI,GB,GD,GE,GH,GM,GT,HN,HR,HU,ID,IL,IN,IR,IS,JP,KE,KG,KN,KP,KR,KZ,LA,LC,LK,LR,LS,LU,LY,MA,MD,ME,MG,MK,MN,MW,MX,MY,MZ,NA,NG,NI,NO,NZ,OM,PA,PE,PG,PH,PL,PT,QA,RO,RS,RU,RW,SA,SC,SD,SE,SG,SK,SL,SM,ST,SV,SY,TH,TJ,TM,TN,TR,TT,TZ,UA,UG,US

(71)【出願人】

【識別番号】516281056

【氏名又は名称】ライフライン ニュートラシューティカルズ コーポレイション

【氏名又は名称原語表記】Ｌｉｆｅｌｉｎｅ Ｎｕｔｒａｃｅｕｔｉｃａｌｓ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ

(74)【代理人】

【識別番号】100147485

【弁理士】

【氏名又は名称】杉村 憲司

(74)【代理人】

【識別番号】100174001

【弁理士】

【氏名又は名称】結城 仁美

(74)【代理人】

【識別番号】100175477

【弁理士】

【氏名又は名称】高橋 林太郎

(72)【発明者】

【氏名】ナタリー シェブロー

【テーマコード（参考）】

4C083

4C086

4C088

4C206

【Ｆターム（参考）】

4C083AA111

4C083AA112

4C083AC471

4C083AC841

4C083AC851

4C083AC861

4C083AD531

4C083CC02

4C083EE12

4C086AA01

4C086AA02

4C086BB02

4C086BC21

4C086EA08

4C086EA11

4C086GA02

4C086GA12

4C086MA03

4C086MA05

4C086MA63

4C086NA14

4C086ZA89

4C086ZC21

4C086ZC75

4C088AB26

4C088AB37

4C088AB45

4C088AB81

4C088BA08

4C088MA08

4C088NA14

4C088ZA89

4C088ZC21

4C088ZC75

4C206AA01

4C206AA02

4C206CB14

4C206KA01

4C206MA03

4C206MA05

4C206NA14

4C206ZA89

4C206ZC21

4C206ZC75

(57)【要約】

哺乳類皮膚に局所適用する組成物は、ブラシカ・ユンセアエキス、ブラシカ・オレラセア・イタリカエキス、ブラシカ・オレラセア・カピタータエキス、ブラシカ・オレラセア・ボトリティスエキス及びブラシカ・オレラセア・アセファラエキスから成る群より選択された一つ又は複数のブラシカ属植物エキスを含む。組成物は更に、クルクマ・ロンガエキス、クルクミノイド、テトラヒドロクルクミノイド、クルクミノイド又はテトラヒドロクルクミノイドの代謝産物、及びクルクミノイド又はテトラヒドロクルクミノイドの誘導体の内の一つ又は複数を含む。組成物は更に、カメリア・オレイフェラエキス、カメリア・シネンシスエキス、緑茶エキス及び白茶エキスの内の一つ又は複数と、ワサビア・ジャポニカエキスと、バコパ・モンニエリエキスと、シリブム・マリアナムエキスと、ピペル・ニグルムエキス又はテトラヒドロピペリンの内の一つ又は両方とを更に含む。
【選択図】図１

【特許請求の範囲】

【請求項1】

組成物であって、
ブラシカ・ユンセア（Brassica juncea）エキス、ブラシカ・オレラセア・イタリカ（Brassica oleracea italica）エキス、ブラシカ・オレラセア・カピタータ（Brassica oleracea capitata）エキス、ブラシカ・オレラセア・ボトリティス（Brassica oleracea botrytis）エキス及びブラシカ・オレラセア・アセファラ（Brassica oleracea acephala）エキスから成る群より選択された一つ又は複数のブラシカ（Brassica）属植物エキスと、
クルクマ・ロンガ（Curcuma longa）エキス、クルクミノイド、テトラヒドロクルクミノイド、クルクミノイド又はテトラヒドロクルクミノイドの代謝産物、及びクルクミノイド又はテトラヒドロクルクミノイドの誘導体から成る群より選択された一つ又は複数のものと、
カメリア・オレイフェラ（Camellia oleifera）エキス、カメリア・シネンシス（Camellia sinensis）エキス、緑茶エキス及び白茶エキスから成る群より選択された一つ又は複数のものと、
ワサビア・ジャポニカ（Wasabia japonica）エキスと、
バコパ・モンニエリ（Bacopa monnieri）エキスと、
シリブム・マリアナム（Silybum marianum）エキスと、
ピペル・ニグルム（Piper nigrum）エキス又はテトラヒドロピペリンの内の一つもしくは両方とを含む組成物。

【請求項2】

請求項１に記載の組成物において、前記一つ又は複数のブラシカ（Brassica）属植物エキスは、ブラシカ・ユンセア（Brassica juncea）エキス、ブラシカ・オレラケア・イタリカ（Brassica oleracea italica）エキス、ブラシカ・オレラセア・カピタータ（Brassica oleracea capitata）エキス、ブラシカ・オレラセア・ボトリティス（Brassica oleracea botrytis）エキス、及びブラシカ・オレラセア・アセファラ（Brassica oleracea acephala）エキスを含む組成物。

【請求項3】

請求項１に記載の組成物において、プランターゴ・ランセオラータ（Plantago lanceolata）エキスを更に含む組成物。

【請求項4】

請求項１に記載の組成物において、前記テトラヒドロクルクミノイドの誘導体は、テトラヒドロジフェルロイルメタン、テトラヒドロメトキシジフェルロイルメタン及びテトラヒドロビスデメトキシジフェルロイルメタンから成る群より選択された一つ又は複数のものである組成物。

【請求項5】

請求項１に記載の組成物において、前記組成物は、バコパ・モンニエリ（Bacopa monnieri）エキス、シリブム・マリアナム（Silybum marianum）エキス、テトラヒドロピペリン及びテトラヒドロクルクミノイドを含む組成物。

【請求項6】

請求項６に記載の組成物において、バコパ・モンニエリ（Bacopa monnieri）エキス、シリブム・マリアナム（Silybum marianum）エキス、テトラヒドロピペリン及びテトラヒドロクルクミノイドは、少なくとも２：２：１：１の量の比率でそれぞれ存在する組成物。

【請求項7】

哺乳類被験体の皮膚を処理する方法であって、請求項１の組成物を、前記被験体の皮膚本来の防御を刺激する量で前記哺乳類被験体の前記皮膚に適用するステップを含む方法。

【請求項8】

請求項７に記載の方法において、前記皮膚本来の防御は、
（ａ）Ｎｒｆ２標的遺伝子の転写及びＮｒｆ２調節経路を制御して、哺乳類被験体の望ましい細胞酸化還元バランスを回復又は維持するステップと、
（ｂ）Ｎｒｆ２標的遺伝子をアップレギュレーションするステップと、
（ｃ）哺乳類被験体において望ましい内因性 Ｎｒｆ２細胞レベルを回復又は維持するステップと、
（ｄ）ホスホチジリノシトール３−キナーゼ触媒サブユニットα（ＰＩＫ３ＣＡ）によるＮｒｆ２の細胞質リン酸化、及びＮｒｆ２調節遺伝子の永久誘導を防ぐ核複合体Ｎｒｆ２−プロサイモシンα（ＰＴＭＡ）の形成により、Ｎｒｆ２活性化を調節するステップと；
（ｅ）前記哺乳類被験体のカタラーゼの量及び活性化を増加させるステップと
（ｆ）表皮細胞アポトーシスと表皮細胞過剰増殖との間のバランスを維持するステップと；
（ｇ）ＵＶ−Ａ及びＵＶ−Ｂ照射への曝露後、チミン二量体の生成を抑制するステップと；
（ｈ）二本鎖ＤＮＡ切断を修復し、細胞周期の進行を調整してＤＮＡ修復を可能にするステップと；
（ｉ）皮膚の厚さ、表皮突起の起伏（relief）及び／又は乳頭状の真皮内のコラーゲン網の密度を増大させるステップとから成る群より選択された一つ又は複数のステップを含む方法。

【請求項9】

請求項８に記載の方法において、前記Ｎｒｆ２標的遺伝子は、カタラーゼ（ＣＡＴ）、活性化転写因子３（ＡＴＦ３）及びペルオキシレドキシン３（ＰＲＤＸ３）遺伝子から成る群より選択された一つ又は複数のものである方法。

【請求項10】

請求項８に記載の方法において、（ｈ）二本鎖ＤＮＡ切断を修復し、細胞周期の進行を調整してＤＮＡ修復を可能にするステップは、ＢＣＬＡＦ１，ＢＲＣＣ３，ＧＨＲ，ＩＭＭＴ，ＳＥＮＰ７，ＳＭＣ１Ａ，ＰＴＰＮ１１，ＳＭＡＲＣＥ１，ＳＲＲＴ，ＳＵＭＯ１及びＴＮＦＳＦ１０から成る群より選択された遺伝子の内の一つ又は複数のアップレギュレーションによってトリガされる方法。

【請求項11】

組成物であって、
クルクマ・ロンガ（Curcuma longa）エキス、クルクミノイド、テトラヒドロクルクミノイド並びにクルクミノイド及び／又はテトラヒドロクルクミノイドの代謝産物及び／又は誘導体から成る群より選択された一つ又は複数のものと、
カメリア・オレイフェラ（Camellia oleifera）エキス、カメリア・シネンシス（Camellia sinensis）エキス、緑茶エキス及び白茶エキスから成る群より選択された、一つ又は複数のものと、
バコパ・モンニエリ（Bacopa monnieri）エキスと、
シリブム・マリアナム（Silybum marianum）エキスと、
ピペル・ニグルム（Piper nigrum）エキス又はテトラヒドロピペリンの内の一つ又は両方とを含む組成物。

【請求項12】

請求項１１に記載の組成物において、該組成物は、バコパ・モンニエリ（Bacopa monnieri）、シリブム・マリアナム（Silybum marianum）、白茶エキス、テトラヒドロピペリン及びクルクマ・ロンガ（Curcuma longa）エキスを含む組成物。

【請求項13】

請求項１２に記載の組成物 において、バコパ・モンニエリ（Bacopa monnieri）、シリブム・マリアナム（Silybum marianum）、白茶エキス、テトラヒドロピペリン及びクルクマ・ロンガ（Curcuma longa）エキスは、少なくとも７：７：７：２：１の量の比率でそれぞれ存在する組成物。

【請求項14】

哺乳類被験体の皮膚を処理する方法であって、請求項１１の組成物を前記哺乳類被験体の皮膚に、該被験体内の皮膚本来の防御を刺激するのに有効な量で適用するステップを含む方法。

【請求項15】

請求項１４に記載の方法において、前記皮膚本来の防御は、
（ａ）Ｎｒｆ２標的遺伝子の転写及びＮｒｆ２調節経路を制御して、哺乳類被験体の望ましい細胞酸化還元バランスを回復又は維持するステップと、
（ｂ）Ｎｒｆ２標的遺伝子をアップレギュレーションするステップと、
（ｃ）哺乳類被験体において望ましい内因性 Ｎｒｆ２細胞レベルを回復又は維持するステップと、
（ｄ）ホスホチジリノシトール３−キナーゼ触媒サブユニットα（ＰＩＫ３ＣＡ）によるＮｒｆ２の細胞質リン酸化、及びＮｒｆ２調節遺伝子の永久誘導を防ぐ核複合体Ｎｒｆ２−プロサイモシンα（ＰＴＭＡ）の形成により、Ｎｒｆ２活性化を調節するステップと；
（ｅ）前記哺乳類被験体のカタラーゼの量及び活性化を増加させるステップと
（ｆ）表皮細胞アポトーシスと表皮細胞過剰増殖との間のバランスを維持するステップと；
（ｇ）ＵＶ−Ａ及びＵＶ−Ｂ照射への曝露後、チミン二量体の生成を抑制するステップと；
（ｈ）二本鎖ＤＮＡ切断を修復し、細胞周期の進行を調整してＤＮＡ修復を可能にするステップと；
（ｉ）皮膚の厚さ、表皮突起の起伏（relief）及び／又は乳頭状の真皮内のコラーゲン網の密度を増大させるステップとから成る群より選択されたものの中の任意の一つ又は組み合わせである方法。

【請求項16】

請求項１５に記載の方法において、前記Ｎｒｆ２標的遺伝子は、カタラーゼ（ＣＡＴ）、活性化転写因子３（ＡＴＦ３）及びペルオキシレドキシン３（ＰＲＤＸ３）遺伝子から成る群より選択された一つ又は複数のものである方法。

【請求項17】

請求項１５に記載の方法において、ｈ）二本鎖ＤＮＡ切断を修復し、細胞周期の進行を調整してＤＮＡ修復を可能にするステップは以下の遺伝子、すなわち、ＢＣＬＡＦ１，ＢＲＣＣ３，ＧＨＲ，ＩＭＭＴ，ＳＥＮＰ７，ＳＭＣ１Ａ，ＰＴＰＮ１１，ＳＭＡＲＣＥ１，ＳＲＲＴ，ＳＵＭＯ１及びＴＮＦＳＦ１０から成る群より選択された遺伝子の中の任意の一つ又は複数のアップレギュレーションによってトリガされる方法。

【請求項18】

組成物であって、
一つ又は複数のイソチオシアネートと、
クルクマ・ロンガ（Curcuma longa）エキス、クルクミノイド、テトラヒドロクルクミノイド、クルクミノイド又はテトラヒドロクルクミノイドの代謝産物及びクルクミノイド又はテトラヒドロクルクミノイドの誘導体から成る群より選択された一つ又は複数のものと、
一つ又は複数のフェニルプロパノイドと、
テトラヒドロピペリンとを含む組成物。

【請求項19】

請求項１８に記載の組成物において、前記一つ又は複数のイソチオシアネートは５００〜１，５００ｐｐｍの量で前記組成物に存在する組成物。

【請求項20】

請求項１８に記載の組成物において、前記一つ又は複数のイソチオシアネートはスルフォラファンを含む組成物。

【請求項21】

請求項１８に記載の組成物において、前記一つ又は複数のフェニルプロパノイドはプランタマジョシドである組成物。

【請求項22】

請求項２１に記載の組成物 において、前記プランタマジョシドは５００〜１，５００ｐｐｍの量で前記組成物に存在する組成物。

【請求項23】

請求項１８に記載の組成物において、カメリア・オレイフェラ（Camellia oleifera）エキス、カメリア・シネンシス（Camellia sinensis）エキス及び白茶エキスから成る群より選択された一つ又は複数のものを更に含む組成物。

【請求項24】

請求項１８に記載の組成物において、一つ又は複数のバコサイドを更に含む組成物。

【請求項25】

請求項２４に記載の組成物 において、前記一つ又は複数のバコサイドはバコサイドＡを含む組成物。

【請求項26】

請求項１８に記載の組成物において、一つ又は複数のフラボノリグナンを更に含む組成物。

【請求項27】

請求項２６に記載の組成物において、前記一つ又は複数のフラボノリグナンは、シリマリン、シリビニン、シリクリスチン、シリヂアニン、デヒドロシリビン、デオキシシリシスチン、デオキシシリジアニン、シランドリン、シリビノム、シリヘルミン及びネオシリヘルミンから成る群より選択された一つ又は複数のものを更に含む組成物。

【請求項28】

請求項２６に記載の組成物 において、テトラヒドロピペリンを更に含む組成物。

【請求項29】

哺乳類被験体の皮膚を処理する方法において、請求項１８の組成物を哺乳類被験体の皮膚に、該被験体内の皮膚本来の防御を刺激するのに有効な量で適用するステップを含む方法。

【請求項30】

請求項２９に記載の方法において、前記皮膚本来の防御は、
（ａ）Ｎｒｆ２標的遺伝子の転写及びＮｒｆ２調節経路を制御して、哺乳類被験体の望ましい細胞酸化還元バランスを回復又は維持するステップと、
（ｂ）Ｎｒｆ２標的遺伝子をアップレギュレーションするステップと、
（ｃ）哺乳類被験体において望ましい内因性Ｎｒｆ２細胞レベルを回復又は維持するステップと、
（ｄ）ホスホチジリノシトール３−キナーゼ触媒サブユニットα（ＰＩＫ３ＣＡ）によるＮｒｆ２の細胞質リン酸化及びＮｒｆ２調節遺伝子の永久誘導を防ぐ核複合体Ｎｒｆ２−プロサイモシンα（ＰＴＭＡ）の形成により、Ｎｒｆ２活性化を調節するステップと；
（ｅ）前記哺乳類被験体のカタラーゼの量及び活性化を増加させるステップと
（ｆ）表皮細胞アポトーシスと表皮細胞過剰増殖との間のバランスを維持するステップと；
（ｇ）ＵＶ−Ａ及びＵＶ−Ｂ照射への曝露後、チミン二量体の生成を抑制するステップと；
（ｈ）二本鎖ＤＮＡ切断を修復し、細胞周期の進行を調整してＤＮＡ修復を可能にするステップと；
（ｉ）皮膚の厚さ、表皮突起の起伏（relief）及び／又は乳頭状の真皮内のコラーゲン網の密度を増大させるステップとから成る群より選択されたものの中の任意の一つ又は組み合わせである方法。

【請求項31】

請求項３０に記載の方法において、前記Ｎｒｆ２標的遺伝子は、カタラーゼ（ＣＡＴ）、活性化転写因子３（ＡＴＦ３）及びペルオキシレドキシン３（ＰＲＤＸ３）遺伝子から成る群より選択された一つ又は複数のものである方法。

【請求項32】

請求項３０に記載の方法において、（ｈ）二本鎖ＤＮＡ切断を修復し、細胞周期の進行を調整してＤＮＡ修復を可能にするステップは以下の遺伝子、すなわち、ＢＣＬＡＦ１，ＢＲＣＣ３，ＧＨＲ，ＩＭＭＴ，ＳＥＮＰ７，ＳＭＣ１Ａ，ＰＴＰＮ１１，ＳＭＡＲＣＥ１，ＳＲＲＴ，ＳＵＭＯ１及びＴＮＦＳＦ１０から成る群より選択された遺伝子の中の任意の一つ又は複数のアップレギュレーションによってトリガされる方法。

【発明の詳細な説明】

【関連出願の相互参照】

【0001】

本願は、２０１４年４月２３日に出願された、米国特許出願第１４／２６０，１４９号の優先権を主張するものであり、その内容を、本明細書中に参考として援用する。

【技術分野】

【0002】

本発明は一般にスキンケア組成物に関し、より具体的には、哺乳類被験体の肌の酸化ストレスを軽減させる局所用組成物及び方法に関する。

【背景技術】

【0003】

皮膚の老化の主な原因の一つは酸化ストレスである。酸化ストレスは、フリーラジカルや過酸化物などの活性酸素種生成の増加、又は、身体における抗酸化防御力の著しい減少と関連している。処理しないでおくと、酸化ストレスにより、皮膚には、皺、色むら、皮膚の厚み及び弾力性の喪失、並びに肌老化のその他の兆しが現れる。また、酸化ストレスはＤＮＡ損傷の中でもより深刻な、二本鎖ＤＮＡ切断を引き起こす。

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0004】

大きな需要があるにもかかわらず、多くのアンチエイジングスキンケア商品及び処理は、望まれる好ましい効果を示すことが証明されていない。最も優秀なクリームでさえも、肌の外観に僅かな短い期間の改善を提供するにすぎないことが多い。現在市場に出ているアンチエイジングクリームには、多様性に満ちた有効成分とそれらの組み合わせが見られる。皮膚に有効なアンチエイジング効果をもたらすと考えられている有効成分の多くは知られているだろうが、これらの成分とその他の成分との、アンチエイジングにおける相乗的な効果をもたらす最適な組み合わせは未だに知られていない。

【課題を解決するための手段】

【0005】

本明細書に記載する組成物は、好適には、哺乳類被験体の皮膚、髪、爪又はその他の外表面のためのものである。これらの組成物は、皮膚本来の防御メカニズムを刺激し、皮膚の外観及び全体的な健康を改善すると考えられる。これらの組成物の局所適用は、いくつかのＮｆｒ２標的遺伝子を刺激して酸化ストレスを軽減させることが実証されている。特に、カタラーゼの発現は高発現であり、これは酸化ストレスに対する身体の防御において鍵となる抗酸化酵素である。また、これらの組成物の局所適用は、細胞のアポトーシスと過剰増殖との間の恒常性の維持に貢献する、ＤＮＡの修復応答を刺激する。また、これらの組成物の局所投与は、皮膚の厚みの増加、表皮突起の起伏（relief）の増加及び／又は真皮内におけるコラーゲン網密度の増加による皮膚の外観の改善を実証してきた。これらの組成物は、化粧品、医薬組成物、日焼け止め剤、ローション、クリーム、美容液、化粧水及びクレンザーなどの局所適用に適した種々の形態で提供することができる。また、これらの組成物は、クレンザー、ローション、目元専用美容液及びアンチエイジングクリームを含むキットでも提供することができる。

【0006】

一実施形態において、哺乳類被験体の皮膚へ局所適用する組成物について説明する。組成物は、ブラシカ・ユンセア（Brassica juncea）エキス、ブラシカ・オレラセア・イタリカ（Brassica oleracea italica）エキス、ブラシカ・オレラセア・カピタータ（Brassica oleracea capitata）エキス、ブラシカ・オレラセア・ボトリティス（Brassica oleracea botrytis）エキス及びブラシカ・オレラセア・アセファラ（Brassica oleracea acephala）エキスから成る群より選択された一つ又は複数のブラシカ（Brassica）属植物エキスを含み得る。これらの組成物は更に、クルクマ・ロンガ（Curcuma longa）エキス、クルクミノイド、テトラヒドロクルクミノイド、クルクミノイド又はテトラヒドロクルクミノイドの代謝産物、及びクルクミノイド又はテトラヒドロクルクミノイドの誘導体から成る群より選択された一つ又は複数のものを含む。組成物は更に、カメリア・オレイフェラ（Camellia oleifera）エキス、カメリア・シネンシス（Camellia sinensis）エキス、緑茶エキス及び白茶エキスから成る群より選択された一つ又は複数のものを含み得る。組成物は更にワサビア・ジャポニカ（Wasabia japonica）エキス、バコパ・モンニエリ（Bacopa monnieri）エキス、シリブム・マリアナム（Silybum marianum）エキス、及びピペル・ニグルム（Piper nigrum）エキス又はテトラヒドロピペリンの内の一つまたは両方から成る群より選択された一つ又は複数のものを含み得る。

【0007】

第１の態様によれば、一つ又は複数のブラシカ（Brassica）属植物エキスは、ブラシカ・ユンセア（Brassica juncea）エキス、ブラシカ・オレラケア・イタリカ（Brassica oleracea italica）エキス、ブラシカ・オレラセア・カピタータ（Brassica oleracea capitata）エキス、ブラシカ・オレラセア・ボトリティス（Brassica oleracea botrytis）エキス、及びブラシカ・オレラセア・アセファラ（Brassica oleracea acephala）エキスを含む。

【0008】

第２の態様によれば、組成物は更にプランターゴ・ランセオラータ（Plantago lanceolata）エキスを含む。

【0009】

第３の態様によれば、テトラヒドロクルクミノイドの誘導体は、テトラヒドロジフェルロイルメタン、テトラヒドロデメトキシジフェルロイルメタン及びテトラヒドロビスデメトキシジフェルロイルメタンから成る群より選択された、一つ又は複数のものである。

【0010】

第４の態様によれば、バコパ・モンニエリ（Bacopa monnieri）エキス、シリブム・マリアナム（Silybum marianum）エキス、テトラヒドロピペリン及びテトラヒドロクルクミノイドは、組成物中に、少なくとも２：２：１：１の量の比率でそれぞれ存在する。

【0011】

別の実施形態では、哺乳類被験体の皮膚へ局所適用する組成物について説明する。これらの組成物は、クルクマ・ロンガ（Curcuma longa）エキス、クルクミノイド、テトラヒドロクルクミノイド並びにクルクミノイド及び／又はテトラヒドロクルクミノイドの代謝産物及び／又は誘導体から成る群より選択された一つ又は複数のものを含み得る。これらの組成物は更に、カメリア・オレイフェラ（Camellia oleifera）エキス、カメリア・シネンシス（Camellia sinensis）エキス、緑茶エキス及び白茶エキスから成る群より選択された一つ又は複数のものを含み得る。これらの組成物は更に、バコパ・モンニエリエキス、シリブム・マリアナムエキス及びピペル・ニグルム（Piper nigrum）エキス又はテトラヒドロピペリンの内の一つ又は両方を含み得る。

【0012】

第１の態様によれば、バコパ・モンニエリ、シリブム・マリアナム、白茶エキス、テトラヒドロピペリン及びクルクマ・ロンガエキスは、少なくとも４：４：１：１の量の比率でそれぞれ組成物中に存在する。

【0013】

第２の態様によれば、バコパ・モンニエリ、シリブム・マリアナム、白茶エキス、テトラヒドロピペリン及びクルクマ・ロンガエキスは、少なくとも７：７：７：２：１の量の比率でそれぞれ組成物中に存在する。

【0014】

更なる実施形態において、哺乳類被験体の皮膚へ局所適用する組成物について説明する。組成物は一つ又は複数のイソチオシアネート、クルクマ・ロンガエキス、クルクミノイド、テトラヒドロクルクミノイド、クルクミノイド又はテトラヒドロクルクミノイドの代謝産物及びクルクミノイド又はテトラヒドロクルクミノイドの誘導体から成る群より選択された一つ又は複数のもの、一つ又は複数のフェニルプロパノイド及びテトラヒドロピペリンを含み得る。

【0015】

第１の態様によれば、一つ又は複数のイソチオシアネートは組成物中に５００〜１５００ｐｐｍの量で存在する。

【0016】

第２の態様によれば、一つ又は複数のイソチオシアネートはスルフォラファンを含む。

【0017】

第３の態様によれば、一つ又は複数のフェニルプロパノイドはプランタマジョシドである。プランタマジョシドは組成物中に１００〜２，５００ｐｐｍ、好適には２５０〜２，０００ｐｐｍ、最も好適には５００〜１，５００ｐｐｍの量で存在し得る。

【0018】

第３の態様によれば、組成物は更に、カメリア・オレイフェラエキス、カメリア・シネンシスエキス、緑茶エキス及び白茶エキスから成る群より選択された一つ又は複数のものを含む。

【0019】

第４の態様によれば、組成物は更に一つ又は複数のバコサイドを含む。好適には、一つ又は複数のバコサイドはバコサイドＡを含む。

【0020】

第５の態様によれば、組成物は更に一つ又は複数のフラボノリグナンを含む。好適には、フラボノリグナンは、シリマリン、シリビニン、シリクリスチン、シリジアニン、デヒドロシリビン、デオキシシリシスチン、デオキシシリジアニン、シランドリン、シリビノム、シリヘルミン及びネオシリヘルミンから成る群より選択された一つ又は複数のものである。

【0021】

第６の態様によれば、組成物は更にテトラヒドロピペリンを含む。

【0022】

また更なる実施形態では、哺乳類被験体の皮膚を処理する方法を説明する。該方法は、哺乳類被験体の皮膚に、上述の組成物の内のいずれかを、被験体の皮膚本来の防御を刺激するのに効果的な量で適用するステップを含む。

【0023】

第１の態様によれば、皮膚本来の防御は、哺乳類被験体において望ましい細胞酸化還元バランスを回復、又は維持するための、赤血球特異的転写因子２関連因子２（Ｎｒｆ２：Nuclear factor erythroid 2-related factor 2）標的遺伝子及びＮｒｆ２調節経路の転写制御である。

【0024】

第２の態様によれば、皮膚本来の防御はＮｒｆ２標的遺伝子の上方制御である。

【0025】

Ｎｒｆ２標的遺伝子は、カタラーゼ（ＣＡＴ：catalase）、活性化転写因子３（ＡＴＦ３：activating transcription factor 3）及びペルオキシレドキシン３（ＰＲＤＸ３：peroxiredoxin 3）遺伝子から成る群より選択された一つ又は複数のものであり得る。

【0026】

第３の態様によれば、皮膚の防御は、哺乳類被験体において望ましい内因性Ｎｒｆ２細胞レベルを回復又は維持する。

【0027】

第４の態様によれば、皮膚の防御は、ホスホチジリノシトール３−キナーゼ触媒サブユニットα（ＰＩＫ３ＣＡ：phosphotidylinositol 3-kinase catalytic subunit alpha）によるＮｒｆ２の細胞質リン酸、及びＮｒｆ２−調節遺伝子の永久誘導を防ぐ核複合体Ｎｒｆ２‐プロサイモシンα（ＰＴＭＡ：prothymosin, alpha）の形成による、Ｎｒｆ２活性化の調節である。

【0028】

第５の態様によれば、皮膚の防御は、哺乳類被験体におけるカタラーゼの量及び活性化の増加である。

【0029】

第６の態様によれば、皮膚の防御は、表皮細胞のアポトーシスと表皮細胞の過剰増殖との間のバランスの維持である。

【0030】

第７の態様によれば、皮膚の防御は、ＵＶ−Ａ及びＵＶ−Ｂ照射への曝露後のチミン二量体生成の抑制である。

【0031】

第８の態様によれば、皮膚の防御は、ＤＮＡ二本鎖の切断を修復し、細胞周期の進行を調節して、ＤＮＡの修復を可能にすることである。修復及び調節は以下の遺伝子、すなわち、ＢＣＬＡＦ１，ＢＲＣＣ３，ＧＨＲ，ＩＭＭＴ，ＳＥＮＰ７，ＳＭＣ１Ａ，ＰＴＰＮ１１，ＳＭＡＲＣＥ１，ＳＲＲＴ，ＳＵＭＯ１及びＴＮＦＳＦ１０の内の任意の一つ又は複数のアップレギュレーションによってトリガされ得る。

【0032】

第９の態様によれば、皮膚の防御は、皮膚の厚み、表皮突起の起伏（relief）及び／又は乳頭状の真皮におけるコラーゲン網の密度の増加である。

【0033】

下記の発明を実施するための形態より、当業者には記載した特定の実施形態のその他の目的、特徴及び利点が明らかになるだろう。しかしながら発明を実施するための形態及び特定の実施例は、本発明の特定の実施形態を示す一方で説明のために提供されるものであり、制限するものではないと理解されよう。本発明の趣旨から逸脱することなく、その範囲内で多くの修正及び変更を行うことができ、そのような変更は全て本発明に含まれる。

【0034】

本開示の例示的実施形態を、以下の添付図面を参照して説明する。

【図面の簡単な説明】

【0035】

【図1】試験クリーム（Ｐ）又はベースクリーム（Ｅ）のいずれか片方で７日間処理した、皮膚外植片試料上で免疫染色によって検出したカタラーゼの量を示す図である。０日目、コントロール外植片（Ｂ０：処理なし）を免疫染色し、３日目と７日目に皮膚外植片試料を試験クリーム（ＰＪ３，ＰＪ７）又はベースクリーム（ＥＤ３，ＥＪ７）で処理した。

【図2】０日目及び６日目（Ｂ０及びＢＤ６）に、処理していないコントロール皮膚の外植片試料の免疫染色によって検出したＮｒｆ２の量を示す図である。試験クリーム（Ｐ）又はベースクリーム（Ｅ）で５日間処理した皮膚外植片試料を６日目にＵＶＡ−Ｂ照射に曝露し、試験クリーム（ＰＵＶＤ６）又はベースクリーム（ＥＵＶＤ６）で処理した外植片を６時間ＵＶに曝露した後、Ｎｆｒ２免疫染色を行った。

【図3】ＵＶ照射後、チミン二量体に対して陽性だった表面の割合を比較したものである。ＢＵＶＤ６は、６日目にＵＶ照射を受けた、処理していない皮膚外植片である。ＰＵＶＤ６は、５日間試験クリームで処理し、６日目にＵＶ照射に曝露し、６時間後にチミン二量体の解析を行った皮膚外植片である。ＥＵＶＤ６は、５日間ベースクリームで処理し、６日目にＵＶ照射に曝露し、６時間後にチミン二量体の解析を行った皮膚外植片である。

【発明を実施するための形態】

【0036】

本発明の特定の非限定的実施形態を、図面を参照して以下に説明する。尚、このような実施形態は、本発明の範囲内の少数の実施形態を除き、単に例示的なものである。本発明に関係する当業者にとって明らかな種々の修正及び変更は、添付の請求項に更に定める本発明の趣旨、範囲及び意図の範囲内であると考えられる。

【0037】

ブラシカ（Brassica）属植物エキス：ブラシカ（Brassica）属は、非公式にはアブラナ科の野菜、キャベツ又はカラシナとして知られるアブラナ科の植物の属を指す。一つの特定の実施形態において、組成物は、ブラシカ・ラパ（Brassica rapa）、ブラシカ・ニグラ（Brassica nigra）、ブラシカ・アルバ（Brassica alba）、ブラシカ・カリナタ（Brassica carinata）及びブラシカ・オレラセア（Brassica oleracea）の中の一つ又は組み合わせを含む。特定の実施形態において、組成物は、ブラシカ・ユンセア、ケール及びコラードの若葉（ブラシカ・オレラセア・アセファラ）、カリフラワー、ロマネスコブロッコリー及びブロッコフラワー（ブラシカ・オレラセア・ボトリティス）、キャベツ（ブラシカ・オレラセア・カピタータ）、ブロッコリー（ブラシカ・オレラケア・イタリカ）、中国ブロッコリー（ブラシカ・オレラケア・アルボグラブラ（Brassica oleracea alboglabra））、ブラッスルスプラウト（ブラシカ・オレラケア・ゲミフェラ（Brassica oleracea gemmifera））及びコールラビ（ブラシカ・オレラケア・ゴングロデス（Brassica oleracea Gongylodes））のブラシカ（Brassica）属植物エキスの中の一つ又は組み合わせを含む。具体的な特定の実施形態において、組成物は下記のブラシカ属植物エキス、すなわち、ブラシカ・ユンセア、ブラシカ・オレラセア・アセファラ、ブラシカ・オレラセア・ボトリティス、ブラシカ・オレラセア・カピタータ及びブラシカ・オレラケア・イタリカを全て含む。

【0038】

ブラシカ属植物エキスは、自然発生する生物活性化合物であるイソチオシアネート（ＩＴＣ：isothiocyanate）「R - N = C = S」を含む。１００を超えるＩＴＣが植物エキス内で確認されており、その内の多くにおいて細胞培養、動物及び人体研究における強い生物活性が実証されている。

【0039】

ＩＴＣはＵＶ光による炎症を抑制すると信じられている。また、ＩＴＣは、前発がん物質を活性化するシトクロムＰ４５０のような第１相酵素の生成を下方調節することにより、前発がん物質の発がん物質への転換を抑制すると信じられている。また、ＩＴＣはグルタチオンＳ−トランスフェラーゼ、グルタチオン・ペルオキシターゼ及びグルタチオン還元酵素などの第２相酵素及び抗酸化酵素を活性化すると信じられている。これらの第２相酵素が特定の化合物によって「スイッチオン（switched on）」されると、身体は第１相酵素によって生成された発がん物質をより多く解毒することができるようになる。第２相酵素は発がん物質を直接攻撃するか、又は不活性にすることができる。また、第２相酵素は活性酸素種を不活性化して酸化ストレスを減少させると信じられている。

【0040】

ＩＴＣは非常に低いレベルで抗炎症作用及び抗酸化作用を提供すると信じられている。４５ｐｐｍという僅かなＩＴＣでの著しい抗炎症作用が観察されている。特定の実施形態において、本明細書に記載する組成物は、少なくとも４５ｐｐｍのＩＴＣ、好適には４５〜２，５００ｐｐｍ、より好適には１００〜２，０００ｐｐｍ、そして最も好適には５００〜１，５００ｐｐｍのＩＴＣを含む。

【0041】

特定の実施形態において、ＩＴＣはスルフォラファン：

【化1】

を含む。
自然発生するイソチオシアネート（ＩＴＣ）の一つであるスルフォラファン（ＳＦＮ：Sulforaphane）には優れた発がん予防能力がある。これは、細胞死、細胞周期、血管新生、発がん物質に対する感受性、浸潤及び転移を調節し、抗酸化活性を有している。これは、種々の方法により、第１相酵素の阻害剤及び第２相解毒酵素の誘導因子としても機能する。Ｎｒｆ２及びマイトジェン活性化タンパク質キナーゼ（ＭＡＰＫ：mitogen-activated protein kinase）はＳＦＮによって調節される。

【0042】

ワサビア・ジャポニカ（Wasabia japonica）エキス: ワサビア・ジャポニカはキャベツ、ホースラディッシュ及びマスタードを含むブラシカ属の一つである。ワサビア・ジャポニカに含まれる、最初の辛味を与える化学物質は揮発アリルイソチオシアネートであり、これは自然の地下茎のチオグルコシド（ブドウ糖と含硫有機化合物との複合体）の加水分解によって生成される。加水分解反応は、ミロシナーゼによって触媒されるが、例えばすりおろし（grating）による植物の地下茎の解離に伴い生じる細胞破壊の際に、酵素（ミロシナーゼ）が放出されるときに生じる。

【0043】

ワサビア・ジャポニカは、６−メチルチオヘキシルイソチオシアネート、７−メチルチオヘプチルイソチオシアネート及び８−メチルチオオクチルイソチオシアネートなどのメチルチオアルキルイソチオシアネートを含むので、ＩＴＣの追加ソースとなり得る。研究によると、このようなイソチオシアネートは、おそらく腐敗から食品を保護し、口腔内細菌の増殖を抑制する意味合いで、細菌の増殖を抑制する。従って、ワサビア・ジャポニカ根エキスをブラシカ属エキスと組み合わせて、上述の望ましいＩＴＣレベルを提供することができる。

【0044】

ターメリック（クルクマ・ロンガ）エキス：ターメリックはショウガ科の、根茎を持つ多年生草木である。ターメリックの最も重要な化学成分はクルクミノイドと称される化合物群であり、これはクルクミン（ジフェルロイルメタン）、デメトキシクルクミン及びビスデメトキシクルクミンを含む。最も研究されている化合物はクルクミンであり、ウコン粉末の３．１４％（平均で）を構成する。更に、ツルメロン、アトラントン及びジンギベレンなどの、その他の重要な揮発油がある。一般成分には砂糖、タンパク質、樹脂がある。

【0045】

クルクミノイドはその分子構造により、強力な抗酸化剤及びがんを化学予防する化合物であると報告されている。また、クルクミノイドの特定の代謝産物及び誘導体も、テトラヒドロクルクミノイド（ＴＨＣ）のような抗酸化活性を示している。ＴＨＣはクルクミノイドから生じた水素化合物であり、効率的な抗酸化化合物として機能すると信じられている。テトラヒドロクルクミノイドの誘導体には、テトラヒドロジフェルロイルメタン、テトラヒドロデメトキシジフェルロイルメタン及びテトラヒドロビスデメトキシジフェルロイルメタンがある。

【0046】

プランターゴ・ランセオラータ（Plantago lanceolata）エキス：プランターゴ・ランセオラータは、通称、リブワート・プランテン（ribwort plantain）、イングリッシュ・プランテン（English plantain）、バックホーン・プランテン（buckhorn plantain）、ナローリーフ・プランテン（narrowleaf plantain）、リブ葉及び子羊の舌（lamb's tongue）として知られるオオバコ属の種である。プランターゴ・ランセオラータは、フェニルエタノイド、フェニルプロパノイド、アクテオシド、シスタノシドＦ、lavanulifolioside、プランタマジョシド及びイソアクテオシドを含む。また、これはイリドイド配糖体アウクビン及びカタポールを含む。

【0047】

フェニルプロパノイドは有機化合物の多様なファミリーであり、ＵＶ光に対する保護を提供すると信じられている。特定の実施形態において、組成物内に存在するフェニルプロパノイドはプランタマジョシドである。特定の実施形態において、組成物はプランターゴ・ランセオラータエキスを含む。別の特定の実施形態において、組成物は一つ又は複数のフェニルプロパノイドを含む。更に特定の実施形態において、組成物はプランタマジョシドを含む。プランタマジョシドは組成物中に１００〜２，５００ｐｐｍ、好適には２５０〜２，０００ｐｐｍ、最も好適には５００〜１，５００ｐｐｍの量で存在し得る。

【0048】

クロコショウ（ピペル・ニグルム）エキス：ピペル・ニグルムは、通常、乾燥させてスパイスや香味料として使用される実を栽培するコショウ科の花をつける植物である。

【0049】

テトラヒドロピペリンはコショウの実の誘導体であり、クロコショウ及びヒハツに見られるアルカロイドである。アルキルテトラヒドロピペリン、ジアルキルテトラヒドロピペリン、アルコキシル化テトラヒドロピペリン、ヒドロキシル化テトラヒドロピペリン、ハロゲン化テトラヒドロピペリン、アルキルジヒドロピペリン、ジアルキルジヒドロピペリン、アルコキシル化ジヒドロピペリン及びハロゲン化ジヒドロピペリンなどのテトラヒドロピペリンの誘導体は、抗炎症化合物、天然調整剤、駆虫薬、殺虫剤及び実薬の処方に使用することができる。「栄養物の生物学的利用率を増やす方法、及びテトラヒドロピペリンとその類似体及び誘導体とを使用した医薬剤」と題される、米国特許第６，８４９，６４５号の全体を、その全体が本明細書に記載されているかのように、本明細書に参考として援用する。

【0050】

特定の実施形態において、組成物はクロコショウ（ピペル・ニグルム）エキスを含む。別の特定の実施形態において、組成物はピペリン、テトラヒドロピペリン及び／又はピペリン及び／又はテトラヒドロピペリンの誘導体及び／又は類似体を含む。

【0051】

バコパ（ブラーミ）・モンニエリ（Bacopa (Brahmi) monnieri）エキス：バコパ・モンニエリは南インド、オーストラリア、ヨーロッパ、アフリカ、アジア及び南北アメリカの湿地帯原産の、多年生ほふくハーブである。バコパ・モンニエリは抗酸化作用及び細胞保護作用を示すと信じられている。また、アセチルコリンエステラーゼ、活性コリンアセチルトランスフェラーゼを抑制し、脳血流を増加させると信じられている。

【0052】

バコパ・モンニエリの中で最もよく特徴がわかっている化合物は、バコサイドとして知られる、ジュジュボゲニン又は擬似ジュジュボゲニンをアグリコン単位として持つ、ダンマラン系のトリテルペノイドサポニンである。バコサイドは１２の既知の類似体のファミリーを含む。バコパサイドＩ〜ＸＩＩと称される新しいサポニンは、最近になって同定されたものである。アルカノイドブラーミン、ニコチン及びherpestineは、Ｄ‐マンニトール、アピゲニン、偽スベリヒユサポニン（hersaponin）、monnierasides I-III、ククルビタシン及びプランタイノシドＢと共に分類されてきた。

【0053】

バコパ・モンニエリはバコサイドＡを含み、これはバコサイドＡ３、バコパサイドＩＩ、バコパサポニンＣ及びバコパサポニンＣのジュジュボゲニン異性体を混合したものと信じられている。バコサイドＡは抗酸化を高め、スーパーオキシド・ディスムターゼ、カタラーゼ及びグルタチオンペルオキシダーゼ活性を増やすと考えられている。

【0054】

特定の実施形態において、組成物はバコパ・モンニエリエキスを含む。別の特定の実施形態において、組成物は一つ又は複数のバコサイドを含む。更に特定の実施形態では、バコサイドはバコサイドＡを含む。

【0055】

マリアアザミ（シリブム・マリアナム）エキス：マリアアザミはキク科の一年生又は二年生植物である。この大変典型的なアザミは赤から紫にかけての花と白い葉脈を持つ、光沢ある淡緑色の葉を有している。原産は南ヨーロッパからアジアにかけてだが、現在は世界中で見られる。

【0056】

マリアアザミの種子から抽出することのできるフラボノイド複合体であるシリマリンは、３つの異性体で構成される。標準的なマリアアザミエキスはシリマリン、シリビニン、シリクリスチン、シリジアニン、dehydrosilyin、デオキシシリシスチン、デオキシシリジアニン、siladrin、シリビノム、シリヘルミン及びネオシリヘルミンなどのフラボノリグナンの混合物を含む。その他の構成要素には、デヒドロシリビン、デゾキシ−シリジアニン及びsilybinomerがある。

【0057】

マリアアザミエキスは抗菌作用及び抗がん作用を持つことが実証されている。局所的に適用されたシリマリンは、ＵＶＢ及び化学的に誘導された発がん現象を低減させると信じられている。

【0058】

特定の実施形態において、組成物はマリアアザミ（シリブム・マリアナム）エキスを含む。別の特定の実施形態において、組成物は一つ又は複数のフラボノリグナンを含む。更に特定の実施形態において、組成物はシリマリン、シリビニン、シリクリスチン、シリジアニン、dehydrosilyin、デオキシシリシスチン、デオキシシリジアニン、siladrin、シリビノム、シリヘルミン及びネオシリヘルミンから成る群より選択された、一つ又は複数の フラボノリグナンを含む。

【0059】

茶エキス：組成物に種々の茶葉エキスを加えることができる。好適には、茶エキスはカメリア・オレイフェラエキス、緑茶エキス及び白茶エキスの中の一つ又は組み合わせから生成される。茶エキスは多くの有益な抗酸化化合物を含むと信じられている。

【0060】

緑茶エキス内の主要な抗酸化成分は緑茶カテキン（ＧＴＣ：green tea catechins）であり、これは４つの主要なエピカテキン誘導体、すなわち、エピカテキン（ＥＣ： epicatechin）、エピガロカテキン（ＥＧＣ：epigallocatechin）、没食子酸エピカテキン（ＥＣＧ：epicatechin gallate）及び没食子酸エピガロカテキン（ＥＧＣＧ：epigallocatechin gallate）を含む。

【0061】

その他の成分には、ケンペロール、ケルセチン及びミリセチンとして知られる３種類のフラボノイドがある。他の植物よりも著しく高い含有量のミリセチンは、お茶とそのエキスから検出され、この高濃度のミリセチンは、お茶及びそのエキスの生物活性と何らかの関係を持つ可能性がある。

【0062】

追加薬剤：本明細書に記載する組成物の特定の実施形態は、追加成分の任意の一つ又は組み合わせを含み得る。追加成分の非限定的な例には、日焼け止め剤、保湿剤、抗酸化剤、構造化剤、乳化剤、シリコーン含有剤、増粘剤及び／又は医薬剤並びに植物油がある。

【0063】

化粧剤：本明細書に記載した組成物は、化粧剤の任意の一つ又は組み合わせを更に含み得る。ＣＩＦＡ国際化粧品成分辞書及びハンドブック（２００８）の第１２版には、本明細書に記載した組成物に使用することのできる非限定的な化粧品成分が記載されている。これらの成分分類の例として、香料（人工及び天然）、染料及び色成分（例えば、青色１号、青色１号レーク、赤色４０号、酸化チタン、Ｄ＆Ｃ青色４号、Ｄ＆Ｃ緑色５号、Ｄ＆Ｃ橙色４号、Ｄ＆Ｃ赤色１７号、Ｄ＆Ｃ赤色３３号、Ｄ＆Ｃ紫色２号、Ｄ＆Ｃ黄色１０号及びＤ＆Ｃ黄色１１号）、吸着剤、乳化剤、安定剤、潤滑剤、溶剤（例えばイソペンチルジオールを含む）、保湿剤（例えば、軟化剤、湿潤剤、塗膜形成要素、閉塞剤及び皮膚の自然保湿メカニズムに影響を与える薬剤を含む）、撥水剤、紫外線吸収剤（パラアミノ安息香酸（ＰＡＢＡ：paraminobenzoic acid）及び対応するＰＡＢＡ誘導体などの物理的、化学的吸収剤、二酸化チタン、酸化亜鉛など）、植物油、ビタミン（例えば、Ａ，Ｂ，Ｃ，Ｄ，Ｅ及びＫ）、微量金属（例えば、亜鉛、カルシウム及びセレン）、抗刺激剤（例えば、ステロイド及び非ステロイド抗炎症剤）、植物エキス（例えば、アロエベラ、カモミール、ハチマエキス、イチョウ、朝鮮人参及びローズマリー）、抗菌剤、抗酸化（例えばＢＨＴ及びトコフェノール）、キレート剤（例えば、ニナトリウムＥＤＴＡ及び四ナトリウムＥＤＴＡ）、防腐剤（例えば、メチルパラベン及びプロピルパラベン）、ｐＨ調整剤（例えば、水酸化ナトリウム及びクエン酸）、吸収剤（例えば、アルミニウムデンプンオクテニルコハク酸、カオリン、コーンスターチ、オートスターチ、シクロデキストリン、タルク及びゼオライト）、皮膚脱色剤及び皮膚美白剤（例えば、ヒドロキノン及びナイアシンアミド乳酸（niacinamide lactate）、保水剤（例えば、グリセリン、プロピレングリコール、ブチレングリコール、ペンチレングリコール、ソルビトール、尿素及びマンニトール）、スクラブ剤（例えば、乳酸、グリコール酸及びサリチル酸などのα−ヒドロキシ酸及びβ−ヒドロキシ酸、並びにその塩類）、防水剤（例えば、ステアリン酸水酸化マグネシウム／アルミニウム）、皮膚保護剤（例えば、アロエエキス、アラントイン、ビサボロール、セラミド、ジメチコン、ヒアルロン酸、パルミトイルペプチド、タンパク質加水分解物及びグリシルリジン酸ニカリウム）、増粘剤（例えば、カルボン酸ポリマー、架橋ポリアクリレートポリマー、ポリアクリルアミドポリマー、多糖及びゴムなどの、組成物の粘度を増大させ得る物質）及びシリコーン含有化合物（例えばシリコーンアブラ及びポリオルガノシロキサン）が含まれる。

【0064】

日焼け防止剤：本明細書に記載した組成物は更に、化学的及び物理的な日焼け止めクリームを含む日焼け止め剤の任意の一つ又は組み合わせを更に含み得る。使用され得る化学的日焼け止めクリームの非限定的な例には、パラアミノ安息香酸（ＰＡＢＡ）、ＰＡＢＡエステル類（グリセリルＰＡＢＡ、アミルジメチルＰＡＢＡ及びオクチルジメチルＰＡＢＡ）、ブチルＰＡＢＡ、エチルＰＡＢＡ、エチルジヒドロキシプロピルＰＡＢＡ、ベンゾフェノン類（オキシベンゼン、スリソベンゼン、ベンゾフェノン及びベンゾフェノン１〜１２）、ケイ皮酸エステル（オクチルメトキシケイ皮酸エステル、イソアミル−ｐ−メトキシケイ皮酸エステル、メトキシケイ皮酸オクチル、シノキセート、ジイソプロピルケイ皮酸メチル、ＤＥＡ−メトキシオキシケイ皮酸、エチルジイソプロピルケイ皮酸、グリセリルオクタノアートジメトキシケイ皮酸及びエチルメトキシケイ皮酸）、ケイ皮酸エステル、サリチル酸塩（ホモメチルサリチル酸塩、ベンジルサリチル酸塩、グリコールサリチル酸塩、イソプロピルベンジルサリチル酸塩など）、アントラニル酸塩、ウロカニン酸エチル、ホモサレート、オクチサレート、ジメンゾイルメタン誘導体（例えばアヴォベンゾン）、オクトクリレン、オクチルトリアゾン、トリオレイン酸ジガロイル、グリセリルアミノ安息香酸、ジヒドロキシアセトンを含むラウソン（lawsone with dihydroxyacetone）、エチルヘキシルトリアゾン、ジオクチルブタアミドトリアゾン、ベンジリデンマロネートポリシロキサン、テレフタリリデンジカンフルスルホン酸、フェニルジベンズイミダゾールテトラスルホン酸２Ｎａ、ジエチルアミノヒドロキシベンゾイル安息香酸ヘキシル、ビスジエチルアミノヒドロキシベンゾイル安息香酸、ビスベンゾキサゾイルフェニルエチルヘキシルイミノトリアジン、ドロメトリゾールトリシロキサン、メチレンビスベンゾトリアゾリルテトラメチルブチルフェノール、及びビスエチルヘキシルオキシフェノールメトキシフェニルトリアジン、４−メチルベンジリデンカンファー及びイソペンチル４−メトキシケイ皮酸がある。物理的な日焼け止めクリームの非限定的な例には、カオリン、タルク、ワセリン及び金属酸化物（例えば、二酸化チタン及び酸化亜鉛）がある。本明細書に記載した組成物は、ＵＶ−Ａ及びＵＶ−Ｂの吸収特性を有し得る。これらの組成物は２，３，４，５６，７，８，９，１０，１１，１２，１３，１４，１５，２０，２５，３０，３５，４０，４５，５０，５５，６０，７０，８０，９０又はそれ以上の日焼け防止指数（ＳＰＦ）若しくは任意の整数、又はその中の導関数を有し得る。

【0065】

保湿剤：本明細書に記載した組成物は更に保湿剤の任意の一つ又は組み合わせを含み得る。本明細書に記載した保湿剤で使用することのできる保湿剤の非限定的な例には、アミノ酸、コンドロイチン硫酸、ジグリセリン、エリトリトール、フルクトース、グルコース、グリセリン、グリセロールポリマー、グリコール、１，２，６−ヘキサントリオール、ハチミツ、ヒアルロン酸、還元ハチミツ、水添デンプンの加水分解物、イノシトール、ラクチトール、マルチトール、マルトース、天然保湿因子、ＰＥＧ−１５ブタンジオール、ポリグリセリルソルビトール、ピロリドンカルボン酸の塩、ＰＣＡカリウム、プロピレングリコール、グルクロン酸ナトリウム、ＰＣＡナトリウム、ソルビトール、スクロース、トレハロース、尿素及びキシリトールがある。

【0066】

その他の例には、アセチル化ラノリン、アセチル化ラノリンアルコール、アクリレート／Ｃ１０−３０アクリル酸アルキルクロスポリマー、アクリレートコポリマー、アラニン、藻類エキス、アロエバルバデンシスエキス又はゲル、アルテア・オフィシナリス（althea officinalis）エキス、オクテニルコハク酸デンプンアルミニウム、ステアリン酸アルミニウム、アプリコット（プルナス・アルメニアカ（prunus armeniaca））カーネル油、アルギニン、アスパラギン酸アルギニン、アルニカ・モンタナ（arnica montana）エキス、アスコルビン酸、パルミチン酸アスコルビル、アスパラギン酸、アボカド（パーシア・グラティッシマ（persea gratissima））油、硫酸バリウム、バリア（barrier）スフィンゴ脂質、ブチルアルコール、蜜蝋、ベヘニルアルコール、β−シトステロール、ＢＨＴ、カバノキ（ベチュラ・アルバ（betula alba））樹皮エキス、ルリヂサ（ボラゴ・オフィシナリス（borago officinalis））エキス、２−ブロモ−２−ニトロプロパン−１，３−ジオール、ナギイカダ（ルスカス・アキュレアツス（ruscus aculeatus））エキス、ブチレングリコール、マリーゴールド（カレンデュラ・オフィシナリス（calendula officinalis））エキス、マリーゴールド油、キンセンカ（ユーホルビア・セリフェラ（euphorbia cerifera））ワックス、キャノーラ油、カプリル酸／カプリン酸トリグリセリル、カルダモン（エレッタリア・カルダモムム（elettaria cardamomum））油、カルナバ（コペルニシア・セリフェラ（copernicia cerifera））ワックス、カラゲナン（コンドラス・クリスパス（chondrus crispus））、ニンジン（ダウカス・キャロッタ・サティバ（daucus carota sativa））油、ヒマシ（リシナス・コミュニス（ricinus communis））油、セラミド、セレシン、セテアレス−５、セテアレス−１２、セテアレス−２０、オクタン酸セテアリル、セテス−２０、セテス−２４、酢酸セチル、オクタン酸セチル、パルミチン酸セチル、カモミール（アンテミス・ノビリス（anthemis nobilis））油、コレステロール、コレステロールエステル、ヒドロキシステアリン酸コレステリル、クエン酸、サルビア（サルビア・スクラレア（salvia sclarea））油、ココア（テオブロマカカオ（theobroma cacao））バター、ココ−カプリル酸／カプリン酸、ココナツ（ココス・ヌシフェラ（cocos nucifera））油、コラーゲン、コラーゲンアミノ酸、コーン（ズィー・メイス（zea mays））油、脂肪酸、オレイン酸デシル、デキストリン、ジアゾリニリル尿素、ジメチコーンコポリオール、ジメチコノール、アジピン酸ジオクチル、コハク酸ジオクチル、ヘキサカプリル酸／ヘキサカプリン酸ジペンタエリスリチル、ＤＭＤＭヒダントイン、ＤＮＡ、エリトリトール、エトキシジグリコール、リノール酸エチル、ユーカリ・グロブルス（eucalyptus globulus）油、月見草（オエノセラ・ビエンニス（oenothera biennis））油、脂肪酸、果糖（tructose）、ゼラチン、ゼラニウム（ゼラニウム・マクラツム（geranium maculatum））油、グルコサミン、グルタミン酸グルコース、グルタミン酸、グリセレス−２６、グリセリン、グリセロール、ジステアリン酸グリセリル、ヒドロキシステアリン酸グリセリル、ラウリン酸グリセリル、リノール酸グリセリル、ミリスチン酸グリセリル、オレイン酸グリセリル、ステアリン酸グリセリル、ステアリン酸グリセリルＳＥ、グリシン、ステアリン酸グリコール、ステアリン酸グリコールＳＥ、グリコサミノグリカン、ブドウ（ヴィティス・ヴィニヘラ（vitis vinifera））種子油、ヘーゼル（コリラス・アメリカーナ（corylus americana））ナッツ油、ヘーゼル（コリラス・アベラナ（corylus avellana））ナッツ油、ヘキシレングリコール、ハチミツ、ヒアルロン酸、ハイブリッドベニバナ（カーサマス・ティンクトリアス（carthamus tinctorius））油、水素化ヒマシ油、水素化ココ-グリセリド、水素化ココナツ油、水素化ラノリン、水素化レシチン、水素化パームグリセリド、硬化パームカーネル油、硬化ダイズ油、硬化獣脂グリセリド、硬化植物油、加水分解コラーゲン、加水分解エラスチン、加水分解グリコサミノグリカン、加水分解ケラチン、加水分解大豆タンパク質、ヒドロキシル化ラノリン、ヒドロキシプロリン、イミダゾリジニル尿素、ヨードプロピニルブチルカルバメート、ステアリン酸イソセチル、ステアロイルステアリン酸イソセチル、オレイン酸イソデシル、イソステアリン酸イソプロピル、ラノリン酸イソプロピル、ミリスチン酸イソプロピル、パルミチン酸イソプロピル、ステアリン酸イソプロピル、イソステアラミドＤＥＡ、イソステアリン酸、乳酸イソステアリル、ネオペンタン酸イソステアリル、ジャスミン（ジャスミナム・オフィシナレ（jasminum officinale））油、ホホバ（バクサス・チネンシス（buxus chinensis））油、海藻、ククイ（アレウリテス・モルカナ（aleurites moluccana））ナッツ油、ラクタミドMEA、ラネス-16、酢酸ラネス-10、ラノリン、ラノリン酸、ラノリンアルコール、ラノリン油、ラノリンワックス、ラベンダー（ラバンデュラ・アンガスティフォリア（lavandula angustifolia））油、レシチン、レモン（シトラス・メディカ・リモナム（citrus medica limonum））油、リノール酸、リノレン酸、マカダミア・テルニフォリア（macadamia ternifolia）ナッツ油、ステアリン酸マグネシウム、硫酸マグネシウム、マルチトール、カツミレ（カモミラ・レキュチタ）油、セスキステアリン酸メチルグルコース、メチルシラノールＰＣＡ、微晶質ワックス、鉱油、ミンクオイル、モルティエレラ油、乳酸ミリスチル、ミリスチン酸ミリスチル、プロピオン酸ミリスチル、ジカプリル酸／ジカプリン酸ネオペンチルグリコール、オクチルドデカノール、ミリスチン酸オクチルドデシル、ステアロイルステアリン酸オクチルドデシル、ヒドロキシステアリン酸オクチル、パルミチン酸オクチル、サリチル酸オクチル、ステアリン酸オクチル、オレイン酸、オリーブ（オレア・ユーロパエア（olea europaea））油、オレンジ（シトラス・アウランチウム・デュルシス（citrus aurantium dulcis））油、ヤシ（エラエイス・グィネエンシス（elaeis guineensis））油、パルミチン酸、パンテチン、パンテノール、パンテノールエチルエーテル、パラフィン、ＰＣＡ、モモ（プルーナス・ペルシカ（prunus persica））カーネル油、ピーナツ（アラキス・ヒポガエ（arachis hypogaea））油、ＰＥＧ−８Ｃ１２１８エステル、ＰＥＧ−１５コカミン、ＰＥＧ−１５０ジステアリン酸、イソステアリン酸ＰＥＧ−６０グリセリル、ステアリン酸ＰＥＧ−５グリセリル、ステアリン酸ＰＥＧ−３０グリセリル、ＰＥＧ−７水添ヒマシ油、ＰＥＧ−４０水添ヒマシ油、ＰＥＧ−６０水添ヒマシ油、セスキステアリン酸ＰＥＧ−２０メチルグルコース、ＰＥＧ−４０ペルオレイン酸ソルビタン、ＰＥＧ−５大豆ステロール、ＰＥＧ−１０大豆ステロール、ステアリン酸ＰＥＧ−２、ステアリン酸ＰＥＧ−８、ステアリン酸ＰＥＧ−２０、ステアリン酸ＰＥＧ−３２、ステアリン酸ＰＥＧ−４０、ステアリン酸ＰＥＧ−５０、ステアリン酸ＰＥＧ−１００、ステアリン酸ＰＥＧ−１５０、ペンタデカラクトン、ペパーミント（メンタ・ピペリタ（mentha piperita））油、ワセリン、リン脂質、ポリアミノ糖縮合体、ジイソステアリン酸ポリグリセリル−３、ポリクオタニウム−２４、ポリソルベート２０、ポリソルベート４０、ポリソルベート６０、ポリソルベート８０、ポリソルベート８５、ミリスチン酸カリウム、パルミチン酸カリウム、ソルビン酸カリウム、ステアリン酸カリウム、プロピレングリコール、ジカプリル酸／ジカプリン酸プロピレングリコール、ジオクタン酸プロピレングリコール、プロピレングリコールジペラルゴナート、ラウリン酸プロピレングリコール、ステアリン酸プロピレングリコール、ステアリン酸ＳＥプロピレングリコール、ＰＶＰ、ジパルミチン酸ピリドキシン、クオタニウム−１５、クオタニウム−１８ヘクトライト、クオタニウム−２２、レチノール、パルミチン酸レチニル、米（オリザ・サティバ（oryza sativa））ヌカ油、ＲＮＡ、ローズマリー（ロスマリヌス・オフィシナリス（rosmarinus officinalis））油、バラ油、ベニバナ（カーサマス・ティンクトリアス）油、セージ（サルビア・オフィシナリス（salvia officinalis））油、サリチル酸、白檀（サンタラム・アルバム（santalum album））油、セリン、血清タンパク質、ゴマ（セサマム・インディカム（sesamum indicum））油、シアバター（ブチロスパーマム・パーキー（butyrospermum parkii））、シルクパウダー、コンドロイチン硫酸ナトリウム、ヒアルロン酸ナトリウム、乳酸ナトリウム、パルミチン酸ナトリウム、ナトリウムＰＣＡ、ポリグルタミン酸ナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、水溶性コラーゲン、ソルビン酸、ラウリン酸ソルビタン、オレイン酸ソルビタン、パルミチン酸ソルビタン、セスキオレイン酸ソルビタン、ステアリン酸ソルビタン、ソルビトール、大豆（グリシンソヤ）油、スフィンゴ脂質、スクワラン、スクアレン、ステアリン酸ステアラミドＭＥＡ、ステアリン酸、ステアロキシジメチコーン、ステアロキシトリメチルシラン、ステアリルアルコール、グリチルレチン酸ステアリル、ヘプタン酸ステアリル、ステアリン酸ステアリル、ヒマワリ（ヘリアンサス・アナス（helianthus annuus））種子油、スイートアーモンド（プルーナス・アミグダラス・デュルシス（prunus amygdalus dulcis）油、合成蜜蝋、トコフェロール、酢酸トコフェリル、リノレイン酸トコフェリル、トリベヘニン、ネオペンタン酸トリデシル、ステアリン酸トリデシル、トリエタノールアミン、トリステアリン、尿素、植物油、水、ワックス、小麦（トリチカム・ブルガレ（triticum vulgare））胚芽油、及びイランイラン（カナンガ・オドラータ（cananga odorata））油があるが、これらに限定されるものではない。

【0067】

抗酸化薬剤：本明細書に記載した組成物は更に抗酸化薬剤の任意の一つ又は組み合わせを含み、これらには、アセチルシステイン、アスコルビン酸ポリペプチド、ジパルミチン酸アスコルビン、ペクチン酸アスコルビルメチルシラノール、パルミチン酸アスコルビル、ステアリン酸アスコルビル、ＢＨＡ，ＢＨＴ，t-ブチルヒドロキノン、システイン、システインＨＣＩ、ジアミルヒドロキノン、ジ−ｔ−ブチルヒドロキノン、チオジプロピオン酸ジセチル、ジオレイルトコフェリルメチルシラノール、硫酸アスコルビル二ナトリウム、チオジプロピオン酸ジステアリル、チオジプロピオン酸ジトリデシル、没食子酸ドデシル、エリソルビン酸、アスコルビン酸エステル、フェルラ酸エチル、フェルラ酸、没食子酸エステル、ヒドロキノン、チオグリコール酸イソオクチル、コウジ酸、アスコルビン酸マグネシウム、リン酸アスコルビルマグネシウム、アスコルビン酸メチルシラノール、緑茶又はブドウ種子エキスなどの天然植物抗酸化剤、ノルジヒドログアイアレト酸、没食子酸オクチル、フェニルチオグリコール酸、リン酸トコフェリルアスコルビルカリウム、亜硫酸カリウム、没食子酸プロピル、キノン、ロスマリン酸、アスコルビン酸ナトリウム、亜硫酸水素ナトリウム、エリソルビン酸ナトリウム、メタ重亜硫酸ナトリウム、亜硫酸ナトリウム、活性酸素分解酵素、チオグリコール酸ナトリウム、ソルビチルフルフラール、チオジグリコール、チオジグリコールアミド、チオジグリコール酸、チオ乳酸、チオサリチル酸、トコフェレス−５、トコフェレス−１０、トコフェレス−１２、トコフェレス−１８、トコフェレス−５０、トコフェロール、トコフェルソラン、酢酸トコフェリル、リノール酸トコフェリル、ニコチン酸トコフェリル、コハク酸エステルトコフェリル及び亜リン酸トリス（ノニルフェニル）がある。

【0068】

構造化剤：本明細書に記載した組成物は更に構造化剤の任意の一つ又は組み合わせを含む。特定の態様において、構造化剤は、組成物の安定性に寄与するレオロジー特性の組成物への提供を補助する。その他の態様において、構造化剤は、乳化剤又は界面活性剤としても機能し得る。構造化剤の非限定的な例には、ステアリン酸、パルミチン酸、ステアリルアルコール、セチルアルコール、ベヘニルアルコール、ステアリン酸、パルミチン酸、平均約１〜約２１のエチレンオキシド単位を有するステアリルアルコールのポリエチレングリコールエーテル、平均約１〜約５のエチレンオキシド単位を有するセチルアルコールのポリエチレングリコールエーテル及びこれらの混合物がある。

【0069】

乳化剤：本明細書に記載した組成物は更に乳化剤の任意の一つ又は組み合わせを含む。乳化剤は相間の界面張力を軽減させ、乳剤の処方及び安定性を向上させ得る。乳化剤は非イオン、陽イオン、陰イオン、及び両性イオンであり得る。非限定的な例には、グリセリンエステル、プロピレングリコールエステル、ポリエチレングリコール脂肪酸エステル、ポリプロピレングリコール脂肪酸エステル、ソルビトールエステル、無水ソルビタンエステル、カルボン酸共重合体、グルコースエステル及びエーテル、エトキシル化エーテル、エトキシル化アルコール、アルキルリン酸、ポリオキシエチレン脂肪エーテルリン酸塩、脂肪酸アミド、アシルラクチレート、石鹸、ＴＥＡステアリン酸、ＤＥＡオレト?３リン酸塩、ポリエチレングリコール２０ソルビタンモノラウレート（ポリソルベート２０）、ポリエチレングリコール５ダイズステロール、ステアレト?２、ステアレト?２０、ステアレト?２１、セテアレト?２０、ＰＰＧ?２メチルグルコースエーテルジステアレート、セテス?１０、ポリソルベート８０、セチルリン酸塩、セチルリン酸カリウム、ジエタノールアミンセチルリン酸塩、ポリソルベート６０、グリセリルステアレート、ＰＥＧ?１００ステアレート及びその混合物がある。

【0070】

シリコーン含有剤：本明細書に記載した組成物は更にシリコーン含有剤の任意の一つ又は組み合わせを含む。非限定的な態様において、シリコーン含有化合物には、その分子主鎖が、シリコン原子及び酸素原子を、シリコン原子に結合した側基と変えることによって構成された高分子生成物のファミリーの任意のメンバーを含む。Ｓｉ−Ｏ鎖長、側基及び架橋結合を変えることにより、シリコーンは多種の材料に合成され得る。シリコーンは液体からジェル、そして固体へと一貫して変化し得る。

【0071】

本明細書に記載した組成物で使用することのできるシリコーン含有化合物は、本明細書に記載するもの、又は当業者に既知のものを含む。非限定的な例として、シリコーン油（例えば、揮発性及び不揮発性油）、ジェル及び固体がある。特定の態様において、シリコーン含有化合物にはポリオルガノシロキサンなどのシリコーン油がある。ポリオルガノシロキサンの非限定的な例には、ジメチコン、シクロメチコン、ポリシリコーン‐１１、フェニルトリメチコーン、トリメチルシリルアモジメチコーン、ステアロキシトリメチルシラン又はこれらの混合物、並びに（例えば、皮膚、髪、目などの特定の部分への）意図される適用に応じた望ましい一貫性及び適用特性を達成するための任意の特定の比率の、その他のオルガノシロキサン材がある。「揮発性油」には、低い気化熱、すなわち、通常、シリコーン油のグラム当たりのカロリーが約５０未満であるシリコーンがある。揮発性シリコーン油の非限定的な例には、ダウコーニング３４４フルイド、ダウコーニング３４５フルイド、ダウコーニング２４４フルイド、ダウコーニング２４５フルイドなどのシクロメチコン、及びコネチカット州ダンベリーのユニオンカーバイト社のボラタイルシリコーン７２０７、低粘度のジメチコン、すなわち約５０ｃｓｔ以下の粘度を有するジメチコン（例えば、ダウコーニング２００?０．５ｃｓｔフルイド）等のジメチコンがある。ダウコーニング・フルイドは、ミシガン州ミッドランドのダウコーニング社より販売されている。シクロメチコン及びジメチコンは、ＣＴＦＡ化粧用成分辞典第３版に、それぞれ環式ジメチルポリシロキサン化合物と、完全メチル化直鎖シロキサンポリマーで末端をトリメチルシロキシ基で阻止したものとの混合物として記載されている。本明細書に記載した組成物で使用することのできるその他の非限定的なシリコーン含有化合物には、ニューヨーク州ウォーターフォードのジェネラルエレクトリック社シリコーン製品事業部及びミシガン州エイドリアンのスタウファーケミカル社のＳＷＳシリコーン事業部より販売されているものがある。

【0072】

植物油：本明細書に記載した組成物は更に植物油の内の任意の一つ又は組み合わせを含み得る。植物油には、ハーブ、花、木及びその他の植物から得られる油がある。このような油は、典型的には、植物細胞の間に小さな液滴として存在し、当業者に知られるいくつかの方法（例えば、水蒸気蒸留、アンフルラージュ（すなわち、脂肪を使った抽出）、浸軟、溶媒抽出又は機械的圧縮）によって抽出することができる。これらの種類の油は空気に曝露されると蒸発しやすい（すなわち揮発性油）。従って、多くの植物油は無色であるが、時が経つと酸化し、暗い色合いになるものもある。植物油は水に溶けず、アルコール、エーテル、固定油（植物）及びその他の有機溶媒に溶ける。植物油の典型的な物理的特徴として、約１６０℃〜２４０℃で変化する沸点及び約０．７５９〜約１．０９６の範囲の密度がある。

【0073】

植物油には、典型的に、その油が見つかる植物の名前が付けられる。例えば、バラ油又はペパーミント油はバラ又はペパーミント植物からそれぞれ得られる。本明細書に記載した組成物に使用することのできる植物油の非限定的な例には、ゴマ油、マカデミアナッツ油、ティーツリー油、イブニングプリムローズ油、スパニッシュセージ油、スパニッシュローズマリー油、コリアンダー油、タイム油、ピメントベリー油、バラ油、アニス油、バルサム油、ベルガモット油、シタン油、シダー油、カモミール油、セージ油、クラリーセージ油、クローブ油、ヒノキ油、ユーカリ油、ウイキョウ油、アッケシソウ油、フランキンセンス油、ゼラニウム油、ショウガ油、グレープフルーツ油、ジャスミン油、杜松油、ラベンダー油、レモン油、レモングラス油、ライム油、マンダリン油、マジョラム油、ミルラ油、橙花油、オレンジ油、パチョリ油、コショウ油、クロコショウ油、プチグレン油、マツ油、ローズオット油、ローズマリー油、ビャクダン油、スペアミント油、カンショウ油、ベチベル油、ウィンターグリーン油又はイランイラン油がある。当業者に知られるその他の植物油も、本明細書に記載した組成物で処方する際には有益であると思われる。

【0074】

増粘剤：本明細書に記載した組成物は更に増粘剤の内の任意の一つ又は組み合わせを含み得る。濃厚剤又はゲル化剤を含む増粘剤は、組成物の粘度を増大させる物質を含む。増粘剤は、組成物内の有効成分の有効性を大幅に変えることなく組成物の粘度を増大させるものを含んでいる。また、増粘剤は本明細書に記載した組成物の安定性を高める。

【0075】

本明細書に記載した組成物に使用され得る更なる増粘剤の非限定的な例には、カルボン酸重合体、架橋ポリアクリレート重合体、ポリアクリルアミド重合体、多糖類及びゴムがある。カルボン酸重合体の例には、アクリル酸、置換アクリル酸から得られる一つ又は複数のモノマーを含む架橋化合物並びにこれらのアクリル酸及び置換アクリル酸の塩及びエステルがあり、架橋剤は２つ以上の炭素−炭素二重結合を含み、多価アルコールから得られる（米国特許第５，０８７，４４５号、第４，５０９，９４９号及び２，７９８，０５３号；ＣＴＦＡ国際化粧品成分辞書第４版、１９９１、１２〜８０ページ参照）。市販されているカルボン酸重合体の例には、スクロース又はペンタエリトリトール（例えば、ＢＦグッドリッチ社のＣａｒｂｏｐｏｌ（登録商標）９００シリーズ）のアリルエーテルと架橋したアクリル酸のホモポリマーであるカルボマーがある。

【0076】

架橋ポリアクリレート重合体の非限定的な例には、カチオン性及び非イオン性ポリマーがある。これらの例は、米国特許第５，１００，６６０号、第４，８４９，４８４号、第４，８３５，２０６号、第４，６２８，０７８号及び第４，５９９，３７９号に記載されている。

【0077】

ポリアクリルアミド重合体（置換分岐又は非分岐ポリマーを含む非イオン性ポリアクリルアミド重合体を含む）の非限定的な例には、ポリアクリルアミド、イソパラフィン及びラウレス‐７、アクリルアミド及び置換アクリルアミドとアクリル酸及び置換アクリル酸とのマルチブロック共重合体がある。

【0078】

多糖類の非限定的な例には、セルロース、カルボキシメチルヒドロキシエチルセルロース、セルロースアセテートプロピオネートカルボン酸塩、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシエチルエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルヒドロキシエチルセルロース、微結晶セルロース、セルロース硫酸ナトリウム及びこれらの混合物がある。別の例として、アルキル置換セルロースがあり、これは、セルロース高分子のヒドロキシ基がヒドロキシアルキル化（好適には、ヒドロキシエチレート化又はヒドロキシプロピレート化）されてヒドロキシアルキレートセルロースが形成され、これは、エーテル結合により、Ｃ１０〜Ｃ３０直鎖又は分岐鎖アルキル基によって更に修飾される。これらのポリマーの代表的なものは、Ｃ１０〜Ｃ３０の直鎖または分岐鎖アルコールとヒドロキシアルキルセルロースエーテルである。その他の有用な多糖類としては（１〜３）結合グルコースの直鎖があり、これは、３単位毎に（１〜６）の結合グルコースを有する。

【0079】

本明細書に記載した組成物で使用されるゴムの非限定的な例には、アカシア、寒天、アルギン、アルギン酸、アルギン酸アンモニウム、アミロペクチン、アルギン酸カルシウム、カラギーナンカルシウム、カルニチン、カラギーナン、デキストリン、ゼラチン、ジェランゴム、グアーゴム、グアーヒドロキシプロピルトリモニウムクロリド、ヘクトライト、ヒアルロン酸、水酸化ケイ素、ヒドロキシプロピルキトサン、ヒドロキシプロピルグアー、カラヤゴム、ケルプ、イナゴマメゴム、納豆ゴム、アルギン酸カリウム、カラギーナンカリウム、プロピレングリコールアルギネート、スクレロチウムゴム、カルボキシメチルデキストランナトリウム、カラギーナンナトリウム、トラガカントゴム、キサンタンゴム、及びこれらの混合物がある。

【0080】

医薬剤：本明細書に記載した組成物は更に医薬剤の内の任意の一つ又は組み合わせを含み得る。医薬剤成分の非限定的な例には、抗ニキビ剤、酒さ治療に使用される薬剤、鎮痛剤、麻酔、肛門直腸剤（anorectals）、抗ヒスタミン剤、非ステロイド抗炎症薬を含む抗炎症薬、抗生物質、抗真菌剤、抗ウィルス剤、抗菌剤、抗がん活性、抗疥癬薬、シラミ駆除剤、抗腫瘍剤、制汗剤、かゆみ止め、抗乾せん剤、抗脂漏剤、生物学的活性タンパク質及びペプチド、火傷治療薬、焼灼薬、脱色剤、脱毛剤、おむつかぶれ治療薬、酵素、育毛剤、ＤＦＭＯ及びその塩並びに類似体を含む発毛剤、止血剤、角質溶解薬、口唇潰瘍薬、ヘルペス薬、歯科用作用物質、唾液作用物質、光感作性薬、皮膚保護剤、ホルモン及びコルチコステロイドを含むステロイド、日焼け治療薬、日焼け止め剤、経皮作用物質、鼻作用物質、膣作用物質、イボ治療薬、創傷治療薬、創傷治癒薬などがある。

【実施例】

【0081】

（実施例１）組成物セット
組成物はクレンザー、スキンローション、アイセラム及びクリームとして処方することができ、これらは別個に、又はセットとして共に提供され得る。

【0082】

クレンザー：例示的実施形態において、クレンザーは、バコパ・モンニエリ（ブラーミ） エキス、シリブム・マリアナムエキス、ピペル・ニグルム種子エキス、カメリア・オレイフェラ葉エキス及びクルクマ・ロンガ（ウコン）根エキスを含む。これらの成分の量の比率は、好適には、バコパ・モンニエリエキス、シリブム・マリアナムエキス、カメリア・オレイフェラ葉エキス、クルクマ・ロンガ根エキス及びピペル・ニグルム種子エキスにおいて、それぞれ少なくとも５：５：５：１：１である。

【0083】

クレンザーは更に、水、アクリル共重合体、ココイルイセチオン酸ナトリウム、ココイルメチルタウリンナトリウム、アミノメチルプロパノール、ヒドロキシルグアヒドロキシプロピルトリモニウムクロリド、グルタミン酸ジ酢酸４Ｎａ、パンテノール、セテアリルアルコール、セテアレス‐２０、フェニルトリメチコン、シクロメチコン、水添レシチン、フェノキシエタノール、カプリリルグリコール、エチルヘキシルグリセリン、ヘキシレングリコール、α‐グルカンオリゴサッカリド、キシリチルグルコシド、アンヒドロキシリトール、アロエ・バルバデンシス（Aloe barbadensis)葉汁、藻エキス及びフェノキシエタノールを含む追加成分の内の一つ又は組み合わせを含み得る。

【0084】

スキンローション：例示的実施形態において、スキンローションは、ブラシカ・ユンセアエキス、ブラシカ・オレラケア・イタリカスプラウトエキス、ブラシカ・オレラセア・カピタータ葉エキス、ブラシカ・オレラセア・ボトリティスエキス、ブラシカ・オレラセア・アセファラ葉エキス、ワサビア・ジャポニカ根エキス、バコパ・モンニエリ（ブラーミ）エキス、シリブム・マリアナム（マリアアザミ）水アルコールエキス（種子）、ピペル・ニグルム種子エキス、カメリア・オレイフェラ（緑茶）水アルコールエキス（葉）及びクルクマ・ロンガ（ウコン）水アルコールエキス（根）を含む。

【0085】

スキンローションは更に、水、グリセリン、アストラガルスメンブラナセウス（Astragalus membranaceus ）根エキス、Atractyloides macrocephala根エキス、Bupleurum Falcatum根エキス、フェノキシエタノール、キシリチルグルコシド、アンヒドロキシリトール、キシリトール、イソセテス‐２０、グルタミン酸二酢酸４Ｎａ、水酸化ナトリウム、フェノキシエタノール、エチルヘキシルグリセリン、キサンタンゴム及びマラカイトを含む追加成分の内の一つ又は組み合わせを含み得る。

【0086】

アイセラム：例示的実施形態において、アイセラムは、ブラシカ・ユンセアエキス、ブラシカ・オレラケア・イタリカスプラウトエキス、ブラシカ・オレラセア・カピタータ葉エキス、ブラシカ・オレラセア・ボトリティスエキス、ブラシカ・オレラセア・アセファラ葉エキス、ワサビア・ジャポニカ根エキス、プランターゴ・ランセオラータ葉エキス、バコパ・モンニエリ（ブラーミ）エキス、シリブム・マリアナム（マリアアザミ）水アルコールエキス（種子）、ピペル・ニグルム種子エキス、カメリア・オレイフェラ（緑茶）水アルコールエキス（葉）及びクルクマ・ロンガ（ウコン）水アルコールエキス（根）を含む。

【0087】

アイセラムは更に、水、グリセリン、フェノキシエタノール、カプリリルグリコール、カルボナー、アクリレーツ／アクリル酸アルキル（Ｃ１０−３０）クロスポリマー、アルビジア・ジュリブリシン（Albizia julibrissin）樹皮エキス、ダルトシド、アロエ・バルバデンシス葉汁、藻エキス、アラントイン、パンテノール、パルミチン酸エチルヘキシル、ポリソルベート２０、トコフェリル酢酸、α‐グルカンオリゴサッカリド、キサンタンゴム、クエン酸、水酸化ナトリウム、エチルヘキシルグリセリン、ヘキシレングリコール及びグルタミン酸二酢酸４Ｎａを含む追加成分の中の一つ又は組み合わせを含み得る。

【0088】

アンチエイジングクリーム：例示的実施形態において、クリームは、ブラシカ・ユンセアエキス、ブラシカ・オレラケア・イタリカ（ブロッコリー）スプラウトエキス、ブラシカ・オレラセア・カピタータ（キャベツ）葉エキス、ブラシカ・オレラセア・ボトリティス（カリフラワー）エキス、ブラシカ・オレラセア・アセファラ葉（コラードの若葉）エキス、ワサビア・ジャポニカ根エキス、バコパ・モンニエリ（ブラーミ）エキス、シリブム・マリアナム（マリアアザミ）エキス、クロコショウエキス（テトラヒドロピペリン）、ウコンエキス（テトラヒドロクルクミノイド）、プランターゴ・ランセオラータ葉エキス及びカメリア・オレイフェラ又はシネンシスエキスを含む。

【0089】

アンチエイジングクリームは更に、グリセリン、水、ブチレングリコール、カルボナー、ポリソルベート２０、パルミトイルオリゴペプチド、パルミトイルテトラペプチド−７、フェノキシエタノール、ステアリン酸グリセリル、セテリアルアルコール、ステアロイル乳酸Ｎａ、ペンチレングリコール、ヒドロキシメチオニンＣａ、３−アミノプロパンスルホン酸、ポリソルベート２０、ヒドロキシエチルセルロース、イソペンチルジオール、ジメチコーン、ベタイン、ＳＤアルコール４０−Ｂ、キサンタンゴム、クエン酸、糖脂質、ダイズフィトステロールズ、ヒアルロン酸ナトリウム、海水、カラギナン、ビャクダン（サンタルム・アルブム（Santalum album））エキス、フェロデンドロン・アミュレンス（Phellodendron amurense）樹皮エキス、大麦の実（ホルデウム・ジスチチョン（Hordeum distichon））エキス、オリーブ（オレア・ユーロパエア（Olea europaea））果実不鹸化物、カプリリルグリコール、エチルヘキシルグリセリン、eexylene glycol、ＭＰＣ−乳ペプチド複合体／ホエイプロテイン、アスコルビン酸テトラヘキシルデシル、ＥＤＴＡテトラナトリウム、トコフェリル酢酸、トコフェロール、アロエ・バルバデンシス葉汁及びトリ酢酸パンテニルを含む追加成分の内の一つ又は組み合わせを含み得る。

【0090】

（実施例２）局所用組成物の抗酸化能力
（１２）の酸化ストレス還元剤を含む試験抗酸化クリーム（「試験クリーム」）の局所適用を、中年の女性ドナーのヒト皮膚外植片に、一日１回７日間行った。試験クリームに含まれる（１２）の酸化ストレス還元剤は、（５）のブラシカ属植物エキス、すなわち、ブラシカ・ユンセア、ブラシカ・オレラセア・アセファラ、ブラシカ・オレラセア・ボトリティス、ブラシカ・オレラセア・カピタータ及びブラシカ・オレラケア・イタリカと、ワサビア・ジャポニカと、テトラヒドロクルクミノイドと、クロテトラヒドロピペリンと、 カメリア・オレイフェラ葉エキスと、 プランターゴ・ランセオラータ葉エキスと、 バコパ・モンニエリエキスと、シリブム・マリアナムエキスとを含む。同様に、これら（１２）の酸化ストレス還元剤を除く、試験クリームと同じ基礎成分を有するベースクリームで、同じドナーの皮膚外植片を同じ条件下で処理した。試験クリーム又はベースクリームで処理していないコントロール外植片も用意した。
遺伝子発現結果

【0091】

アジレント・テクノロジー（Agilent technology）のマイクロアレイを用いて、遺伝子発現プロフィールの実験を行った。これは、国立生物工学情報センター（ＮＣＢＩ：National Center for Biotechnology Information）リファレンス配列から得られた、コントロールのない６２，９７６を超えるプローブを標的とする。これらのマイクロアレイは、種々の培養時間（３，９，２４時間）において、試験クリーム、ベースクリームで一日処理した、又は処理しなかった、ヒト皮膚外植片から抽出した全ＲＮＡを使って合成したＣｙ３−ｃＲＮＡにハイブリダイズさせた。目的は、試験クリーム内の１２の酸化ストレス緩和剤及びＤＮＡ修復剤の局所適用によって上方又は下方調節された遺伝子を同定することだった。遺伝子は倍率変化（fold change）法によって選択した。調節した遺伝子を正に活性化するには、ベースクリームで処理した試料と試験クリームで処理した試料との間で、倍率変化が少なくとも１．５倍でなくてはならず、負に活性化するためには、コントロール試料と処理したサンプルとの間の倍率変化が０．５５未満でなくてはならなかった。

【0092】

Ｎｒｆ２標的遺伝子の中で、カタラーゼ（ＣＡＴ）の著しい過剰発現が３時点（３，９，２４時間）の全てにおいて見られ、一方で、活性化転写因子３（ＡＴＦ３）及びペルオキシレドキシン３（ＰＲＤＸ３）の僅かなアップレギュレーションが９時間の時点で見られた。

【0093】

カタラーゼ（ＣＡＴ）は酸化ストレスに対する生体防御において鍵となる抗酸化酵素である。ＣＡＴはほぼ全ての好気性細胞のペルオキシソームに存在するヘム酵素である。カタラーゼは活性酸素種過酸化水素を水と酸素に変換して、過酸化水素の毒作用を緩和させる。特に皮膚における広範囲な細胞型において、ＣＡＴは過酸化水素の除去及び解毒によって、ゲノムの完全性及びＲＯＳ（活性酸素種）恒常性の維持に貢献する。

【0094】

次に、下記の基準に従って、試験クリームに応答する発現の著しかった遺伝子の選択を行った。

【0095】

（アジレント基準による）背景以下の強度値を、試験クリームで処理した全ての条件で取り除いた。

【0096】

試験クリームで処理した条件の強度値対ベースクリームで処理した条件の強度値から比率を推定した。これらの比率を全ての組み合わせ（各時点に関する３通りの試験とコントロール条件）に関して計算した。これらの比率を全ての組み合わせについて計算し、各時点に関して９つの比率を導き出した。

【0097】

１．２５以上の倍率変化を示す遺伝子の中で、少なくとも一つの時点（３，９又は２４）において、９つの比率の内の少なくとも７つで１．４５以上の倍率変化を示すものを、PredictSearch（登録商標）解析に提出する対象とした。このような基準によって２８２の注釈付き遺伝子を選択した。

【0098】

このセットの遺伝子内の上位１０のアップレギュレーション遺伝子の中で、PredictSearchを使ってＣＡＴで共引用したものの解析を行った。５つの遺伝子が生成物に応答して大きく誘導されたることがわかった。これらはアルファベット順に、ＡＢＬ２／ＡＲＧ（ｃ−ａｂｌがん遺伝子２、非受容体型チロシンキナーゼ）、ＧＨＲ（成長ホルモン受容体）、ＩＭＭＴ（ミトコンドリア内膜タンパク質）、ＰＩＫ３ＣＡ（ホスファチジルイノシトール−４，５−ビスリン酸３−キナーゼ触媒サブユニットα）及びＲＡＬＢＰ１（ｒａｌＡ結合タンパク質１1）である。ＡＢＬ２／ＡＲＧはＣＡＴとの直接機能リンクを示すと信じられている。

【0099】

選択した遺伝子をPredictSearch解析に提出して、これらの遺伝子が関連する機能ネットワーク内でインテグレートするか否かを決定した。PredictSearchは、数百万の科学出版物を通して、遺伝子と生物学的過程又は疾患との間の相関関係を調査、検索する強力なデータ及びテキストマイニングソフトウェアである。フィッシャー検定に基づく機能的相関関係により、遺伝子、生物学的過程及び概念、代謝産物、疾患と組織／細胞／器官との関係を定めるための注釈付きキーワードの統計的な共引用解析が可能となる。

【0100】

確かに最近の研究では、ＣＡＴ活性が、ｃ−Ａｂｌ（ｃ−ａｂｌがん遺伝子１タンパク質）に非常に類似した非受容体型チロシンタンパク質キナーゼのアベルソンファミリーのメンバーであるＡＢＬ２／ＡＲＧにより、刺激されることがわかっている。ＣＡＴ活性の刺激に加え、ｃ−Ａｂｌ及びＡＢＬ２／ＡＲＧは酸化ストレスに応答してＣＡＴの分解を促進させることが実証されている。更に、Ｈ_２Ｏ_２は、ｃ−Ａｂｌ及びＡＢＬ２／ＡＲＧのＣＡＴへの結合に作用して促進させる。相互作用の機能的重要性は、ｃ−Ａｂｌ及びＡＢＬ２／ＡＲＧの両方において、細胞の欠乏がＨ_２Ｏ_２レベルの著しい上昇を示すことを実証することによって支持された。更に、ｃ−ａｂｌ−／−ＡＢＬ２／ＡＲＧ−／−細胞は、どちらか片方のキナーゼが不在している場合と比較して、Ｈ_２Ｏ_２‐誘導アポトーシスの著しい増加を呈した。これらの発見は、ｃ−Ａｂｌ及びＡＢＬ２／ＡＲＧがカタラーゼを調節し、このシグナル経路が酸化ストレスに応答したアポトーシスにとって重要であることを示している。

【0101】

ＡＢＬ２／ＡＲＧは、細胞骨格再構成において、Ｃ−末端Ｆ−アクチン及び微小管結合配列を通してその役割を果たす。ＵＶ−Ａ及びＵＶ−Ｂに応答する通常ヒト表皮角化細胞（ＮＨＥＫ：normal human epidermal keratinocytes）におけるタンパク質チロシンキナーゼ（ＰＴＫ:protein tyrosine kinase）の発現プロフィールを調べると、ＡＢＬ２／ＡＲＧは最も罹患率の高いＰＴＫ（全ＰＴＫの３０％）であることがわかった。ＵＶ−Ａは更にＡＢＬ２／ＡＲＧ発現を導き、照射後１７時間でｍＲＮＡ基準発現の９倍に達した。ＵＶ−Ｂの後に最初の下方調節を行ない、次にＡＢＬ２／ＡＲＧｍＲＮＡを増加させたところ、２４時間後に基準レベルの５倍に達した。これらの調査によれば、ＡＢＬ２／ＡＲＧは角化細胞のＵＶへの応答において主要な役割を持っている可能性があるということがわかった。

【0102】

一方で、ＡＢＬ２／ＡＲＧはプロアポトーシスＳｉｖａ−１タンパク質と関係していると信じられている。ＡＢＬ２／ＡＲＧ−Ｓｉｖａ−１相互作用の機能的重要性は、ＡＢＬ２／ＡＲＧが酸化ストレスによっても活性化されること、及びこの応答には、ＡＢＬ２／ＡＲＧによるＳｉｖａ−１のＴｙｒ（４８）へのリン酸化が含まれるという発見によって支持される。Ｓｉｖａ−１のプロアポトーシス効果はＡＢＬ２／ＡＲＧを発現させる細胞の安定性において強調され、ＡＢＬ２／ＡＲＧ欠乏細胞では抑制される。Ｓｉｖａ−１のこれらのプロアポトーシス効果は、Ｔｙｒ（４８）部位の変異によって抑止され、酸化ストレスへのアポトーシス応答はＡＢＬ２／ＡＲＧ欠乏細胞内で弱まり、欠陥はＡＢＬ２／ＡＲＧの発現を再構成することによって修正される。これらの発見は、ＡＢＬ２／ＡＲＧの酸化ストレスによる活性化がＳｉｖａ−１依存メカニズムによってアポトーシスを引き起こすモデルを支持する。

【0103】

ＡＢＬ２／ＡＲＧと相互作用すると信じられているもう一つの因子は、ＲＡＤ５１である。ＲＡＤ５１は二本鎖ＤＮＡ切断（ＤＳＢ：double strand breaks）の修復において重要な役割を演じる。電離放射（ＩＲ：ionizing radiation）誘導ＲＡＤ５１フォーカス形成は、標的破壊によって培養Ｂ細胞株から生成されたＡＢＬ２／ＡＲＧ欠乏細胞内で減少すると報告されている。これはＡＢＬ２／ＡＲＧ欠乏細胞がＩＲに対する過敏さを示し、ＩＲ誘導染色体異常の頻度を上げ、目標とするインテグレーション頻度を減少させるという発見と一致する。ＤＮＡの損傷修復におけるこれらの異常は全て、毛細血管拡張性小脳失調症変異遺伝子（ＡＴＭ：ataxia telangiectasia mutated）における不完全細胞にも見られる。ＡＴＭは、ＤＮＡＤＳＢ修復に含まれるタンパク質であり、ＲＡＤ５１と相互作用し、リン酸化することで知られている。ＤＮＡの損傷に応答して、ＡＢＬ２／ＡＲＧはＲＡＤ５１のリン酸化によって相同組換え（ＨＲ：homologous recombination）ＤＮＡの修復を促す。

【0104】

これらの発見は、生成物がＵＶ又は酸化ストレスの効果を模倣し、結果的にこれらのストレスに対して皮膚本来の防御（すなわち、角化細胞、線維芽細胞など）を促すことを示している。保護効果は、ＣＡＴと相互作用して酸化欠陥を減少させる、又はＲＡＤ５１と相互作用してＤＮＡ修復プロセスを促すＡＢＬ２／ＡＲＧに依存し得る。

【0105】

生成物によってトリガされるこのような作用は、ＢＣＬＡＦ１，ＢＲＣＣ３，ＧＨＲ，ＩＭＭＴ，ＳＥＮＰ７，ＳＭＣ１Ａなどのアップレギュレーション遺伝子によってコード化されたいくつかのタンパク質のＤＮＡ ＤＳＢ修復／ゲノム安定性において果たす役割によって支持される。

【0106】

ＢＣＬＡＦ１，ＢＣＬ２関連転写因子１は、タンパク質のＢＣＬ２ファミリーのいくつかのメンバーと相互作用する転写リプレッサーをコード化する。このタンパク質の過剰発現はアポトーシスを誘導し、これはＢＣＬ２タンパク質の共発現によって抑制することができる。ＢＣＬＡＦ１は、高用量照射においてのみ、二本鎖ＤＮＡ切断に対する細胞応答において鍵となる役割を持つ、ヒストンＨ２Ａ変異体であるＨ２ＡＸのリン酸化体、γＨ２ＡＸとの関連を高めたことを示す。激しく照射された細胞において、ＢＣＬＡＦ１は、カスパーゼ／サイクリンＥ依存、ミトコンドリア媒体経路のｐ２１媒体抑制を阻害することによって、回復不能細胞のアポトーシスを促進させる。一方で、ＢＣＬＡＦ１により、生き残った細胞内の非相同末端結合（ＮＨＥＪ）ベースのＤＮＡ ＤＳＢ修復が容易になる。

【0107】

ＳＥＮＰ７（Ｓｕｍｏｌ／セントリン特異的ペプチターゼ７）は、相同組換え修復及びＤＮＡ損傷剤に対する細胞抵抗性のため、ＤＮＡ損傷に応じたクロマチンの緩和に必要であると信じられている。ＳＥＮＰ７は、タンパク質翻訳後の可逆的な修飾であるＳＵＭＯ化に関わるＳＵＭＯ１として、ＳＵＭＯ前駆体を処理する。小さなユビキチン様ＳＵＭＯタンパク質の添加によるＳＵＭＯ化は、多くの細胞過程に必要であり、ＳＵＭＯ結合は、哺乳類の細胞における二本鎖ＤＮＡ切断に応答して生じるものとして知られている。

【0108】

構造維持染色体１ＡであるＳＭＣ１Ａは、姉妹染色分体の接着に必要なコヒーシン多タンパク質複合体の一部である。姉妹染色分体の適切なコヒーシンは、細胞分裂中の染色体の適切な分離において、必須条件である。この複合体の一部は、２つの染色体構造維持（ＳＭＣ：structural maintenance of chromosomes）タンパク質、ＳＭＣ３及びＳＭＣ１Ｂ又はＳＭＣ１Ａのいずれかで構成される。ＤＮＡの損傷後、コヒーシンは蓄積され、ＤＮＡ ＤＳＢの修復が促される。

【0109】

ここ数年の研究で、ＤＮＡ ＤＳＢはコヒーシンの損傷部位への動員を誘導し、その部位でのコヒーシンの新規の構成を生じさせることがわかっている。哺乳類細胞では、タンパク質キナーゼＡＴＭによるコヒーシンサブユニットＳＭＣ１Ａのリン酸化がＤＮＡの修復に重要であることがわかっている。ＳＭＣ１Ａタンパク質は、ＡＴＭキナーゼの特に重要な標的であり、損傷後のＤＮＡ複製フォーク及びＤＮＡ修復の制御において重要な役割を持っているようである。

【0110】

更に、ＳＭＣ１Ａは機能的動原体の重要な部分であると考えられており、ＢＲＣＣ３と結合することのできるＢＲＣＡ１と相互作用する。後者により、ＢＲＣＡ１のＤＮＡ ＤＢＳ部位への蓄積が可能となる。

【0111】

ＮＢＳ１及びＢＲＣＡ１タンパク質の主な役割は、活性化ＡＴＭキナーゼ分子をＤＮＡ切断部位に動員して、ＡＴＭがＳＭＣ１Ａをリン酸化できるようにすることであるようだ。ＮＢＳ１のＡＴＭによるリン酸化は、ＳＭＣ１Ａのリン酸化に必要であり、ＮＢＳ１の、ＡＴＭ／ＮＢＳ１／ＳＭＣ１Ａ経路における接着体としての役割を確立させる。確かに、ＮＢＳ１はＤＳＢへの細胞応答を調整する中心的な役割を果たすＭｒｅ１１／ＲＡＤ５０３／ＮＢＳ１複合体の一部である。この複合体内において、ＡＴＭによってリン酸化されたＲＡＤ５０３は、特定のＡＴＭ依存の下流シグナル伝達の接着体として鍵となる調節の役割を演じることがわかっている。

【0112】

更に、ＳＭＣ１Ａサブユニットのリン酸化は、ＤＮＡ損傷によって誘導された細胞周期チェックポイントの調節に貢献する。ＳＭＣ１Ａ及びＳＭＣ３のＡＴＭ依存のリン酸化は、 Ｈ２ＡＸ，５３ＢＰ１及びＭＤＣ１によって媒介され、ＳＭＣ１Ａのリン酸化は、Ｇ２相細胞におけるＤＮＡ損傷後に増加した可動性にとって必要であり、ＡＴＭ依存リン酸化によってＤＮＡ損傷後のコヒーシン複合体の可動が容易になることを示唆している。

【0113】

ＢＲＣＣ３／ＢＲＣＣ３６，ＢＲＣＡ１／ＢＲＣＡ２含有複合体であるサブユニット３は、Ｅ３ユビキチンリガーゼであるＢＲＣＡ１−ＢＲＣＡ２含有複合体（ＢＲＣＣ）のサブユニットをコード化する。この複合体はＤＮＡ損傷応答において役割を果たし、その際、ＤＮＡ切断部位においてＢＲＣＡ１を安定して蓄積できるようにする。この遺伝子によってコード化された成分は、特にＬｙｓ６３結合型ポリユビキチン鎖を開裂することができ、クロマチンにおけるこれらのポリユビキチン鎖の存在量を調節する。クロマチンに隣接するＤＮＡ ＤＳＢ上のＲＮＦ８−Ｕｂｃ１３依存ユビキチン化事象を逆転させるために必要な脱ユビキチン化酵素複合体として、ＲＡＰ８０−ＢＲＣＣ３／ＢＲＣＣ３６を含む経路が同定されている。

【0114】

成長ホルモン受容体であるＧＨＲは、成長ホルモンの膜貫通受容体であるＩ型サイトカイン受容体ファミリーのメンバーをコード化する。成長ホルモンの受容体への結合は、受容体の二量化並びに細胞間及び細胞内のシグナル変換経路の活性化をもたらし、成長をもたらす。放射線照射及び成長ホルモンによって誘導されるブレオマイシン治療に応じる生存の増加は、細胞の損傷ＤＮＡ修復能力の向上と関連性があると説明されている。老齢動物のように、ＩＧＦ−１受容体及びＧＨＲの発現が減衰し、ＩＧＦ−１に対する細胞抵抗性がもたらされる。

【0115】

生物の生涯にわたる確率的（stochastic）ＤＮＡ損傷の蓄積は、老化に寄与すると考えられる。逆に、老化は表現型的に再生可能であり、体成長軸の中心的な媒介物である、インスリン様成長因子−１（ＩＧＦ−１）及び成長ホルモン（ＧＨ）受容体などの遺伝子経路によって調節されるようである。マウスの初代細胞で持続するＤＮＡの損傷により、自然に老化した動物の種々の器官で発生するものと類似した、グローバル遺伝子発現が生じると報告されている。

【0116】

ミトコンドリア／ミトフィリン内膜タンパク質であるＩＭＭＴ（inner membrane protein, mitochondrial/mitofilin）は、細胞生理学及び病理学において、ＤＮＡ安定性の維持から転写の調節まで数多くの機能を実行する、主に核の酵素である、ポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼー１（ＰＡＲＰ−１）と相互作用する。ＩＭＭＴはＰＡＲＰ−１ミトコンドリアの局在化を促進し、これに必要とされる。酵素のミトコンドリア局在化を抑止するＰＡＲＰ−１又はミトフィリンのいずれかの枯渇は、ｍｔＤＮＡ損傷（１９７６２４７２）の蓄積をもたらす。

【0117】

この時点において、結果により、試験クリームが、ＵＶ又は酸化ストレスなどのストレスによってトリガされるものと類似した効果を模倣していることが確認された。しかしながら、上位１０の調節遺伝子に基づき、主な効果は、ＤＮＡ損傷、特にＳＥＮＰ７及びＳＵＭＯ１によって説明した様な、二本鎖ＤＮＡ切断に対する細胞固有の保護応答に関係するものと思われる。上流シグナル伝達は、ＡＢＬ２／ＡＲＧ及びＲＡＤ５０３に関わるＡＴＭ又はＡＴＭ様活性化に依存するようである。興味深いことに、ＡＢＬ２／ＡＲＧに非常に類似しているｃ−ＡＢＬ及びＡＴＭは、どちらもこれらの効果をトリガするためにＰＫＣを必要とするが、ＤＮＡ損傷及び酸化ストレスへの細胞応答に別々に関係づけられる。これらの経路は、ＡＴＭ／ＮＢＳ１依存Ｓ相チェックポイント経路においてエフェクターとして機能するＤＮＡ損傷応答ネットワークの成分であるＳＭＣ１Ａを標的とする、強いＤＮＡ修復応答の活性化をもたらす。例えば、ｃ−ＡＢＬ及びＡＴＭの欠乏により、細胞死及びＮＲＦ２への明確な影響を介して、酸化ストレスへの細胞応答が特異的に変化した。

【0118】

高度にアップレギュレーションされた第２ランク遺伝子の中で、ＷＤ反復ドメイン３であるＷＤＲ３のみがＤＮＡ修復に関係すると信じられている。

【0119】

ＤＮＡ損傷応答は、チェックポイントの活性化及び損傷したＤＮＡ修復の調整によるゲノム完全性の維持及びがんの防止に極めて重要である。ＤＮＡ損傷応答の中心となるのは上述の２つのチェックポイントキナーゼＡＴＭ及び広範囲の基質をリン酸化するＡＴＲである。先ず、ＲＩＮＧフィンガー及びＷＤ反復ドメイン３（ＲＦＷＤ３）を、プロテオミックスクリーンからＡＴＭ／ＡＴＲの基質として同定した。続く研究で、ＲＦＷＤ３は、ＤＮＡ損傷に応答してｐ５３をインビトロでユビキチン化し、ｐ５３レベルを正に調節するＥ４ユビキチンリガーゼであることがわかった。ＲＦＷＤ３は、ＤＮＡの複製、組換え及び修復において重要な役割を果たす一本鎖ＤＮＡ結合タンパク質である複製タンパク質 Ａ（ＲＰＡ）と結合する。ＲＰＡの、ＤＮＡの損傷及び修復によって生成される一本鎖ＤＮＡ（ｓｓＤＮＡ）への結合は、ＤＮＡ修復因子の損傷部位への動員及びチェックポイントシグナル伝達の活性化にとって重要である。ＲＦＷＤ３はＲＰＡと物理的に結合し、ＲＰＡに依存してＤＮＡ損傷部位に局在化する。更に、ＲＰＡ及びＲＦＷＤ３のＤＮＡ損傷誘導リン酸化は相互に依存する。従って、ＲＦＷＤ３の喪失は、ＤＮＡ損傷マーカーγＨ２ＡＸ及び修復タンパク質Ｒａｄ５１の損傷細胞における残留位点をもたらす。これらの発見は、ＲＦＷＤ３がＤＮＡ損傷部位に動員され、ＲＰＡ媒介ＤＮＡ損傷シグナル伝達及び修復を容易にすることを示唆している。

【0120】

本発明者らの研究において、ＲＦＷＤ３の調節は見られなかったが、関連メンバー、ＷＤＲ３，ＷＤ反復ドメイン３のアップレギュレーションが検出された。ＷＤＲ３は、１０ＷＤ反復ドメインを含む核タンパク質をコード化する。ＷＤ反復ドメインは、大抵、Ｃ末端にｔｒｐ−ａｓｐを含むいくつかの保存残基を含む、およそ３０〜４０のアミノ酸ドメインである。ＷＤ反復ドメインファミリーに属するタンパク質は、細胞周期の進行、シグナル伝達、アポトーシス及び遺伝子調節を含む種々の細胞過程に関わる。

【0121】

インスリン様成長因子−Ｉ（ＩＧＦ−Ｉ）シグナル伝達は、細胞の成長と強く関連し、リボゾーム生合成の第１の、そして主要な段階である、ｒＲＮＡ前駆体の合成速度を調節する。ＩＧＦ−Ｉは形質転換細胞においてＷＤＲ３の発現を誘導する。ＷＤＲ３は、４０Ｓリボゾームサブユニットの合成、及びガン細胞における細胞周期の進行のｐ５３媒介調節へのリボゾームのストレスシグナル伝達において重要な機能を有している。

【0122】

上位１０のアップレギュレーション遺伝子に存在するその他の２つの遺伝子は、酸化ストレスに関係している。ＰＩＫ３ＣＡ（ホスファチジルイノシトール３−キナーゼ）は、酸化ストレスへの応答に関わり、ＮＲＦ２カスケード応答の上流で作用することが知られている。ＰＩＫ３ＣＡは、８５ｋＤａ調節サブユニット及び１１０ｋＤａ触媒サブユニットで構成される。ＰＩＫ３ＣＡによってコード化されたタンパク質は、ＡＴＰを使ってＰｔｄＩｎｓ，ＰｔｄＩｎｓ４Ｐ及びＰｔｄＩｎｓ（４，５）Ｐ２をリン酸化する触媒サブユニットを表している。ＰＩＫ３ＣＡは発がん性のあることがわかっており、子宮頸がんに関係している。

【0123】

赤血球系転写因子２関連転写因子２（Ｎｒｆ２）は、多数の細胞保護遺伝子の発現を調節する酸化還元感受性の転写因子である。抗がん剤であるアピゲニンは、ＰＩＫ３ＣＡ／Ａｋｔ経路の下方調節により、伝令ＲＮＡとタンパク質レベルとの両方においてＮｒｆ２の発現を大幅に減少させ、Ｎｒｆ２下流遺伝子の減少をもたらす。

【0124】

ＲＯＳ及び求電子媒体傷害に対抗するために、細胞は、第２相解毒酵素及び抗酸化タンパク質をコード化する多くの遺伝子を誘導することができる。抗酸化応答エレメント（ＡＲＥ）又は求電子応答エレメント（ＥｐＲＥ：electrophile response element）と指定されるシス活性転写調節エレメントは、ヘムオキシゲナーゼ−１、γ―グルタミルシステイン合成酵素、チオレドキシンレダクターゼ、グルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼ及びＮＡＤ（Ｐ）Ｈ：キノンオキシドレダクターゼなどの遺伝子の転写活性を媒介する。その他の、スーパーオキシドディスムターゼ及びカタラーゼなどの抗酸化酵素、並びにグルタチオンなどの非酵素的捕捉剤も、ＲＯＳの捕捉に関係する。Ｎｒｆ２はＡＲＥ媒介による抗酸化遺伝子発現において重要な役割を果たす。ケルヒ様ＥＣＨ結合タンパク質１（Ｋｅａｐ１）は、通常、アクチン細胞骨格と関係して細胞質内のＮｒｆ２を捕捉するが、システイン残基の酸化時に、Ｎｒｆ２はＫｅａｐ１から解離され、細胞核へと移行してＡＲＥ配列に結合し、抗酸化及び第２相解毒遺伝子の転写活性化をもたらす。タンパク質キナーゼＣ（ＰＫＣ）、マイトジェン活性タンパク質キナーゼ（ＭＡＰＫ）及びＰＩＫ３ＣＡは、Ｎｒｆ２／ＡＲＥシグナル伝達、及び長く続く酸化ストレスに対するその保護活性化の調節に関与してきた。

【0125】

ＲＡＬＢＰ１／ＲＬＩＰ７６（ｒａｌＡ１結合タンパク質１）は、受容体媒介エンドサイトーシスにおいて役割を果たし、小さなＧＴＰ結合タンパク質ＲＡＬの下流エフェクターである。ＲＡＬなどの小さなＧタンパク質は、ＧＤＰ結合不活性型及びＧＤＰ結合活性型形態を有し、これはＲＡＬＧＤＳの作用によって不活性から活性状態へとシフトし、ＲＡＳによって活性化される。ＲＡＬＢＰ１は、重要な解毒メカニズムの一部である還元グルタチオン（ＧＳＨ）抱合体を細胞から抽出する際に触媒作用を及ぼす、細胞表面タンパク質である。更に、ＲＡＬＢＰ１は、その喪失がエネルギー生成の低下を含むミトコンドリア機能不全に関わるミトコンドリア分裂に関係している（ミトコンドリアの姉妹細胞への適切な分配を確実にする）ことがわかった。

【0126】

選択した基準による、全ての時点における処理時の８２の誘導遺伝子の中の、残りの６１の遺伝子の中で、「ＤＮＡ修復」及び／又は「酸化ストレス」で共引用された遺伝子を解析した。

【0127】

ＣＣＮＧ２（サイクリンＧ２）は、成長の抑制に関連する非通常のサイクリン相同体であるサイクリンＧ２（ＣｙｃＧ２）をコード化する。その発現はマイトジェンによって抑圧されるが、抗増殖性シグナルへの細胞周期応答の停止中にアップレギュレーションされる。ＣＣＮＧ２の過剰発現は、ＨＣＴ１１６細胞におけるｐ５３依存Ｇ（１）／Ｓ相細胞周期停止を誘導し、この応答停止はＤＤＲチェックポイントタンパク質キナーゼＣｈｋ２を必要とする。この発見と一致して、ＣＣＮＧ２発現はスレオニン６８上におけるＣｈｋ２のリン酸化を増やす。更に、二本鎖ＤＮＡ切断誘導化学療法剤はＣＣＮＧ２の発現を刺激し、そのアップレギュレーションを、チェックポイント誘導細胞周期停止及び毛細血管拡張性運動失調（ＡＴＭ：ataxia telangiectasia mutated）、並びにＲａｄ３−関連（ＡＴＲ）シグナル伝達経路におけるタンパク質のリン酸修飾と相互に関連付ける。

【0128】

ＣＥＮＰＣ１（セントロメアタンパク質Ｃ１）は、セントロメア自己抗原及び内部内動原体プレートの成分である。このタンパク質は適切な動原体サイズの維持及び後期へのタイムリーな推移に必要とされる。

【0129】

ＰＩＫ３ＣＡ／ＡＫＴ経路を不活性化する脂質リン酸をコード化するＰＴＥＮ内の広域な変異スペクトラムは、原発腫瘍と関係していることがわかった。染色体完全性の制御におけるＰＴＥＮの核機能が報告されている。ＰＴＥＮの分裂は広範囲に及ぶセントロメアの切断及び染色体の転座をもたらす。ＰＴＥＮはセントロメアに局在して見られ、ＣＥＮＰＣ１と物理的に結合する。ＰＴＥＮはクロマチンに作用し、ＲＡＤ５１の発現を調節し、自発的ＤＳＢの発生を減少させる。これらの結果は、ＰＴＥＮがセントロメアとの物理的相互作用による染色体安定性の維持及びＤＮＡ修復の制御において、基本的な役割を果たすことを実証している。ＰＴＥＮをゲノムの完全性を保護するものとして作用させることが提案されている。

【0130】

ＤＨＸ４０／ＰＡＤ／ＤＤＸ４０は、ｐｒｅ−ｍＲＮＡスプライシング、リボゾーム生合成など、ＲＮＡ代謝において重要な役割を持つＡＴＰ依存ＲＮＡヘリカーゼのＤＥｘＨ／Ｄボックスファミリーのメンバーをコード化する。これは、ＤＥＡＨ（Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ｈｉｓ）配列モチーフ及びその他の保存モチーフを含む。このファミリーの近いメンバーであるＤＥＡＨボックスポリペプチド３０アイソフォーム１は、ＤＮＡの修復に関わるＰＡＲＰ、すなわちポリ（ＡＤＰ‐リボース）ポリメラーゼ１と共に、放射線照射後、Ｈ２ＡＸと一時的に相互作用することがわかった。

【0131】

ＮＡＭＰＴ（ニコチンアミドホスホリボシルトランスフェラーゼ）は、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドの生合成における一つのステップである、ニコチンアミドモノヌクレオチドを生成する、ニコチンアミドの５−ホスホリボシル−１−ピロホスファートとの凝縮に触媒作用を及ぼすタンパク質をコード化する。このタンパク質はニコチン酸リボースリン酸転移酵素（ＮＡＰＲＴａｓｅ）ファミリーに属し、代謝、ストレス応答及び老化を含む多くの重要な生物学的過程に関わると考えられている。

【0132】

ＤＮＡ ＤＳＢはＤＮＡ損傷の最も重度な形態であり、主に忠実度の高い相同組換え（ＨＲ：homologous recombination）又は誤りがちな非相同末端結合（ＮＨＥＪ：error-prone non-homologous end joining）によって修復される。ＤＮＡ損傷応答の欠陥はゲノムの不安定化をもたらし、最終的には器官ががんになりやすくする。ＮＡＭＰＴは、ＨＲ及びＮＨＥＪのそれぞれにおいて鍵となる因子である、ＣｔＩＰ及びＤＮＡ−ＰＫｃｓ／Ｋｕ８０と物理的に結合する。小さな干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）によるＮＡＭＰＴの枯渇により、不完全なＮＨＥＪ媒介によるＤＳＢ修復がもたらされ、ＨＲ媒介による修復が増進される。従って、ＮＡＭＰＴはＨＲ媒介によるＤＳＢ修復のサプレッサーであり、そしてＮＨＥＪ媒介によるＤＳＢ修復のエンハンサーであり、細胞老化の加速に貢献することが示唆されている。

【0133】

ＮＣＯＲ１（核受容体コリプレッサー１）は、クロマチ凝縮を促進させ、転写装置のアクセスを防ぐことによって、甲状腺ホルモン及びレチノイン酸受容体の非リガンド依存の転写抑制を媒介するタンパク質をコード化する。これは複合体の一部であり、Ｈｄａｃ３などのヒストンデアセチラーゼ及びイーストタンパク質Ｓｉｎ３ｐに類似した転写制御因子も含んでいる。

【0134】

Ｈｄａｃ３は、効率的なＤＮＡ複製及びＤＮＡ損傷の制御に必須である。Ｈｄａｃ３の欠失によってＤＮＡ修復が損なわれ、クロマチンの凝縮及びヘテロクロマチンの含有量が大幅に減少する。これらの欠陥は、細胞周期の後期Ｓ相におけるヒストンＨ３Ｋ９，Ｋ１４ａｃ，Ｈ４Ｋ５ａｃ及びＨ４Ｋ１２ａｃの増加に対応する。ＨＤＡＣ３の発現がごく一部のヒト肝臓がんで下方調節されたのに対し、ＨＤＡＣ３共同因子ＮＣＯＲ１のｍＲＮＡレベルはこれらのケースの３分の１に減少した。ＮＣＯＲ１及びＳＭＲＴ（ＮＣＯＲ２）のｓｉＲＮＡ標的はＨ４Ｋ５ａｃを増やし、ＤＮＡ損傷を生じさせ、ＨＤＡＣ３／ＮＣＯＲ／ＳＭＲＴ軸がクロマチン構造とゲノム安定性を維持する上で重要であることを示している。

【0135】

細胞老化は変異細胞の広がりを抑える鍵となる戦略の中の一つである。老化は遺伝毒性及び酸化ストレスに応答して誘導される。酸化ストレス誘導遺伝子を抑制する転写因子Ｂａｃｈ１（ＢＴＢ及びＣＮＣの相同性１、塩基性ロイシンジッパー転写因子１）は、酸化ストレス誘導細胞老化の重要な負調節因子であることがわかっている。Ｂａｃｈ１欠損マウス胎芽線維芽細胞は、酸化ストレスに応答する、コントロールの野生型細胞よりも早くて重度のｐ５３依存早期老化を被る傾向にあることが示された。Ｂａｃｈ１は、ｐ５３、ヒストンデアセチラーゼ１及びＮＣＯＲ１を含む複合体を形成した。Ｂａｃｈ１は、ｐ５３標的遺伝子のサブセットに組み込まれ、ヒストンの脱アセチル化を促進させることによってｐ５３の作用を遅らせた。Ｂａｃｈ１は酸化ストレス及びヘムによって調節されるので、Ｂａｃｈ１は、酸素代謝及び細胞老化をｐ５３の負調節因子として結び付ける（connect）可能性がある。

【0136】

尚、上述の遺伝子とは対照的に、ＨＮＲＮＰＡ２Ｂ１は、その機能がＤＮＡの修復を阻止するように作用するタンパク質をコード化する。

【0137】

ＨＮＲＮＰＡ２Ｂ１は、普遍的に発現したヘテロ核リボヌクレオタンパク質（ｈｎＲＮＰ）のＡ／Ｂサブファミリーに属する。ｈｎＲＮＰはＲＮＡ結合タンパク質であり、これらはヘテロ核ＲＮＡ（ｈｎＲＮＡ）と複合体を形成する。これらのタンパク質は核内でｐｒｅ−ｍＲＮＡｓと結合し、ｐｒｅ−ｍＲＮＡ過程並びにｍＲＮＡの代謝及び輸送のその他の態様に影響を与えるようである。ｈｎＲＮＰは全て核内に存在するが、核と細胞質との間を行き来するようだ。

【0138】

ＤＮＡ ＤＳＢのゲノムワイドマッピングによれば、ＤＳＢホットスポットは染色体に沿って散在し、保護された５０−２５０ｋｂのＤＮＡドメインを画定していることが明らかとなった。ドメイン（フォーラムメイン）の約３０％は協調的に発現した遺伝子を持ち、ＰＡＲＰ１及びＨＮＲＮＰＡ２Ｂ１はフォーラムドメインの末端において、ＤＮＡ配列に特異的に結合していることがわかった。

【0139】

乳ガン感受性遺伝子１（ＢＲＣＡ１）の不活性化は、家族性乳ガン及び卵巣ガンのサブセットの発生において重要な役割を果たすが、散在性腫瘍における役割を示す証拠が増えている。ＢＲＣＡ１は、ＤＮＡ修復、細胞周期、転写及びクロマチンリモデリングを含む、多くの核細胞過程の調節に関わる多機能核タンパク質である。ＢＲＣＡ１ネットワークに参加するタンパク質の同定によって、ＢＲＣＡ１喪失に応じてその発現が増加するＨＮＲＮＰＡ２Ｂ１及びＫＨＳＲＰの発見につながる。更に、ＨＮＲＮＰＡ２Ｂ１用ｓｉＲＮＡで処理されたＨＮＲＮＰＡ２Ｂ１の減少により、ＤＮＡの修復が一層早くなる。これらの結果を考慮すると、発がん現象の早い段階で発生するＨＮＲＮＰＡ２Ｂ１の過剰発現によってＤＮＡ−ＰＫ活性化が抑制され、その結果、二本鎖ＤＮＡ切断の誤った再結合が蓄積され、腫瘍が進行することとなる。

【0140】

これらの遺伝子によれば、ＤＮＡ修復応答は、明らかとなった重要な過程である。予想通り、この応答は成長停止をもたらすシグナル並びに増殖及び老化を調節する因子と関連している。これらの活動は全てＰＴＰＮ１１，ＳＭＡＲＣＥ１，ＳＲＲＴ，ＳＵＭＯ１及びＴＮＦＳＦ１０遺伝子によって確認された。

【0141】

これらの遺伝子の中で、ＴＮＦＳＦ１０／ＴＲＡＩＬ誘導はｐ５３依存ＤＮＡの損傷応答における細胞死に貢献する。この遺伝子の発現は、最初に生成物がＤＮＡ損傷応答を誘導する信号を出し（initiates）、それによってＲＯＳ生成物が生成され、酸化ストレスがもたらされることを示唆している。これに付随して、ＤＮＡ修復及び抗酸化活性を含む保護応答が刺激される。

【0142】

以下に説明する遺伝子の持続的なアップレギュレーションにより、この処理によって強い二本鎖ＤＮＡ切断応答及び抗酸化作用が生じるが、これらはＤＮＡ損傷シグナルによってＲＯＳの生成へと導かれることが確認された。尚、３，９及び２４時間でアップレギュレーションされた残りの遺伝子は、「ＤＮＡ修復」及び／又は「酸化ストレス」及び共有機能に関連付けられなかった。

【0143】

従って、３時間でアップレギュレーションされた遺伝子を同定することにより、この応答がどのようにして開始されるかを調べることが重要だった。

【0144】

このように、３時間のみで、全てのコンバインド・レシオ（combined ratio）におけるその調整が１．４５以上の倍率変化を示す遺伝子のフィルタリングに基づき、より極端な選択を適用した。

【0145】

これらの基準に従って選択した６５の遺伝子の中で、ＲＡＤ５０，ＳＭＣ６，ＴＤＧ，ＴＨＯＣ２，ＵＰＦ２及びＵＳＰ４７の６つの遺伝子を「ＤＮＡ修復」で有意に共引用し、この過程が処理への応答において早い段階で発生することを再度支持した。

【0146】

特に９及び２４時間の処理に応答してアップレギュレーションされた遺伝子の中で、コハク酸デヒドロゲナーゼ複合体サブユニットＤ（ＳＤＨＤ：succinate dehydrogenase complex, subunit D、内在性膜タンパク質）及び転写因子Ａミトコンドリア（ＴＦＡＭ:transcription factor A, mitchondrial）の誘導が観察された。これらの遺伝子は、ミトコンドリアＤＮＡ修復及びミトコンドリア生合成に関わるタンパク質をコード化する。

【0147】

ＳＤＨＣは、コハク酸エステルの酸化を行う呼吸鎖の複合体ＩＩのメンバーをコード化する。コード化されたタンパク質は、複合体をミトコンドリア内膜のマトリクス側に固定する２つの内在性膜タンパク質の中の一つである。３時間で観察されたＳＤＨＣの発現は、ＧＡＢＰＡ（ＧＡ結合タンパク質転写因子、αサブユニット６０ｋＤａ）によって正調節を行った。

【0148】

ＧＡＢＰＡは、ＤＮＡ結合サブユニットとして機能する３つのＧＡ結合タンパク質転写因子サブユニットの中の一つをコード化する。このサブユニットは核呼吸因子２遺伝子をコード化するサブユニットとアイデンティティを共有するので、シトクロム酸化酵素発現の活性化及びミトコンドリア機能の核制御に関わる可能性がある。

【0149】

ＳＤＨＣと同様に、９及び２４時間で観察されたＴＦＡＭの発現は、ＧＡＢＰＡ又はＰＰＡＲＧＣ１Ａ／ＰＧＣ−１（ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体γ、コアクチベーター１α）によって誘導することができる。

【0150】

ＴＦＡＭは、２つの高移動度群モチーフを含む、鍵となるミトコンドリア転写因子をコード化する。また、ＴＦＡＭは、ミトコンドリアＤＮＡの複製及び修復において機能する。更に、ＴＦＡＭは、ＡＭＰＫＡのＡＴＭ依存リン酸化によって活性化させることができる。ＡＴＭは、細胞内のＡＭＰ／ＡＴＰ比率を感知し、上流キナーゼによって活性化させることのできる、ＡＭＰ活性化タンパク質キナーゼ（ＡＭＰＫ：AMP-activated protein kinase）のαサブユニットをリン酸化すると報告されている。確かに、二本鎖ＤＮＡ切断（ＤＳＢ）を感知すると、ＡＴＭは自動リン酸化によって活性化され、ＤＮＡ修復、細胞周期の調節及びアポトーシスの多くの基質をリン酸化する。（ＤＳＢ）のようなＤＮＡ損傷は、ミトコンドリア生合成を刺激すると言われている。このレポートのＩに記載した様に、ＤＳＢの応答における主要プレーヤーは毛細血管拡張性小脳失調症変異遺伝子（ＡＴＭ）である。

【0151】

尚、ミトコンドリアは自身のゲノムを持ち、これは、細胞内のＡＴＰ生成の大部分に必要とされる適切な酸化的リン酸化にとって必須である。ミトコンドリアＤＮＡ（ｍｔＤＮＡ）は酸化ストレスの影響をかなり受けやすく、ｍｔＤＮＡ損傷はミトコンドリアの機能不全をもたらす。

【0152】

同様に、ＭＲＥ１１Ａの誘導は、９及び２４時間で観察された。減数分裂組換え１１相同体Ａ（ＭＲＥ１１Ａ：meiotic recombination 11 homolog A）は、ＡＴＭの二本鎖切断センサーとして作用し、切断されたＤＮＡ分子へＡＴＭを動員するＲＡＤ５０／ＮＢＳ１と複合体を形成する。不活性ＡＴＭ二量体は、この複合体の存在下でＤＮＡとインビトロで活性化し、下流細胞標的ｐ５３及びＣｈｋ２のリン酸化をもたらす。ＭＲＥ１１Ａは相同組換え、二本鎖ＤＮＡ切断の修復及びテロメア長の維持に関わる核タンパク質をコード化する。

【0153】

ＢＲＤ３（ブロモドメイン含有３）も９及び２４時間で誘導された。これは、ＲＩＮＧ３タンパク質であるセリン／スレオニンキナーゼをコード化する遺伝子への、その相同性に基づいて同定された。ブロモメインタンパク質Ｂｒｄ２及びＢＲＤ３（後者は９及び２４時間で誘導）は、転写遺伝子の全長に沿って過剰アセチル化したクロマチンと、インビボで結合することが好ましい。Ｂｒｄ２及びＢＲＤ３結合クロマチンは、アセチル化Ｈ４Ｋ５，Ｈ４Ｋ１２及びＨ３Ｋ１４が非常に豊富で、ジメチル化Ｈ３Ｋ９を比較的少ない量で含んでいる。Ｂｒｄ２及びＢＲＤ３はどちらも、定められた転写系においてＲＮＡポリメラーゼＩＩがヌクレーソームによって転写されるようにする。

【0154】

このネットワークと関連して、ＳＭＡＲＣＡ２／ＢＲＭ１（クロマチンのＳＷＩ／ＳＮＦ関連、マトリクス結合、アクチン依存性調節遺伝子、サブファミリーａ、メンバー２）によってコード化されたクロマチンの別の調節遺伝子は、９及び２４時間において、処理に応じて誘導された。このファミリーのメンバーはヘリカーゼ及びＡＴＰａｓｅ活性を有し、これらの遺伝子の周囲のクロマチン構造を変化させることによって特定の遺伝子の転写を調節すると考えられている。コード化されたタンパク質は、通常クロマチンによって抑制される転写活性化に必要とされる、大きなＡＴＰ依存クロマチンリモデリング複合体ＳＮＦ／ＳＷＩの一部である。また、生存細胞は、この複合体の不活性化によって減少する。

【0155】

サイクリンＤ結合ｍｙｂ様転写因子１（ＤＭＴＦ：cyclin D binding myb-like transcription factor 1）は、９及び２４時間で誘導された。これはＮ及びＣの末端に１つのサイクリンＤ結合ドメイン、３つの中心Ｍｙｂ様反復、及び２つの隣接する酸性トランス活性化ドメインを含む転写因子である。ＤＭＴＦは発がん性Ｒａｓシグナル伝達経路によって誘導され、ＡＲＦ及びＡＲＦｐ５３経路の転写を活性化することによって腫瘍サプレッサーとして機能し、細胞の成長を停止させる、又はアポトーシスを誘導する。ＤＭＴＦ１及びｐ５３は、ｐ５３のカルボキシル末端及びＤＭＴＦ１のＤＮＡ結合ドメインを介して、哺乳類細胞内で直接相互作用することがわかった。ＤＭＴＦ１の発現は、Ｍｄｍ２によってｐ５３のユビキチン化を弱め、ｐ５３の核局在化を促進させる。ＤＭＴＦ１−ｐ５３結合は、ＤＭＴＦ１のＤＮＡ結合活性とは関係なく、ｐ５３のレベルを著しく高める。

【0156】

腫瘍サプレッサータンパク質ｐ５３の活性化は、種々のストレス刺激及びＭｙｃ，Ｒａｓ，Ｅ２Ｆ及びβカテニンなどの成長促進タンパク質の不適切な活性に対する重要な細胞応答である。タンパク質の安定化及びｐ５３の転写活性は、タンパク質−タンパク質相互作用及びアセチル化を含む翻訳後修飾によって調整される。

【0157】

試験クリームによる処理後、９及び２４時間で誘導されたもう一つの遺伝子であるＰＴＭＡ（プロサイモシンα）は、ｐ５３応答レポーター遺伝子の転写を刺激することができる。その結果、ＲＮＡ干渉手法による内因性ＰＴＭＡの下方調節は、レポーター遺伝子アッセイにおいてｐ５３腫瘍サプレッサーの転写活性を抑制する。ＰＴＭＡは複数の生体機能を持つ１２−ｋＤａ酸性タンパク質である。その機能の内の一つは、Ｋｅａｐ１タンパク質との相互作用によって細胞の抗酸化防御システムを高める能力である。Ｋｅａｐ１は防御タンパク質をコード化する遺伝子の活性化を行う転写因子である、ＮＦＥ２Ｌ２／ＮＲＦ２のリプレッサーである。ＮＦＥ２Ｌ２／ＮＲＦ２に結合する一方で、Ｋｅａｐ１は核から細胞質へとＮＦＥ２Ｌ２／ＮＲＦ２を運び出し、ユビキチンリガーゼの接着体タンパク質として、ＮＲＦ２のユビキチン化及びその後の２６Ｓプロテアソームによるその分解を促す。ＰＴＭＡ及びＮＲＦ２はＫｅａｐ１との相互作用で競合し、よって、ＰＴＭＡは、Ｋｅａｐ１と共に形成された複合体からＮＲＦ２を解放することができ、そのため、ＮＲＦ２依存転写に貢献する。更に、ＰＴＭＡは核内のＮＦＥ２Ｌ２／ＮＲＦ２レベルを下げるために、Ｋｅａｐ１／Ｃｕｌ３−Ｒｂｘ１の核の運び入れを媒介することにより、ＮＦＥ２Ｌ２／ＮＲＦ２シグナル伝達経路においてフィードバックの役割を果たし、細胞が通常の状態に戻れるようにする。核内において、ＰＴＭＡが一旦Ｋｅａｐ１／Ｃｕｌ３−Ｒｂｘ１複合体から解離されると、分解のため、ＮＦＥ２Ｌ２／ＮＲＦ２は複合体に結合することができるようになる。このようにして、ＰＴＭＡはＮＲＦ２からＫｅａｐ１を解離する、又はＮＲＦ２を分解することによってＮＲＦ２活性の厳しい制御をトリガし、保護的活性の正確な恒常性を維持するために必要なＮＲＦ２下流遺伝子発現の活性化をスイッチを切る。

【0158】

転写因子ＮＦＥ２Ｌ２／ＮＲＦ２は、全ての組織において連続的に発現され、器官によってレベルは異なるが、主要な解毒器官（腎臓及び肝臓）では最大レベルを呈する。ＮＦＥ２Ｌ２／ＮＲＦ２は内因性活性酸素種又は外因性求電子を含む細胞ストレス因子によって更に誘導され得る。ＮＦＥ２Ｌ２／ＮＲＦ２シグナル伝達経路は、細胞保護作用の複数の道を、薬物及び毒素の代謝、酸化ストレス及び炎症に対する保護において重要な２００以上の遺伝子の転写を活性化することにより、また、タンパク質の安定化及びプロテアソームの分解又は自食作用を介した損傷タンパク質の除去において必要不可欠な役割を果たすことによって媒体する。ＮＦＥ２Ｌ２／ＮＲＦ２は、腫瘍サプレッサータンパク質５３（ｐ５３）及び核因子ｋβ（ＮＦ−ｋＢ）などのその他の重要な細胞調節遺伝子と相互作用し、それらのヘルススパンの保護との相互作用によって、がん及び神経変性を含む多くの老化関連疾患から保護する。

【0159】

ｐ５３調節と関連して、ＺＥＢ１／ＤＥＬＴＡＥＦ１は、角化細胞分化中、ｐ５３ファミリーメンバーの転写調節において役割を果たすことがわかった。

【0160】

ＤＮＡ修復の誘導に合わせて、いくつかの抑制遺伝子は試験クリームの処理に応答して成長の停止に関わり、処理が増殖を抑制するという事実を支持し、ＤＮＡの修復を誘導する。これらの抑制遺伝子を下記に挙げる。

【0161】

抑制遺伝子の中で、インスリン様成長因子２（ＩＧＦ２：insulin-like growth factor 2）は３時間で抑制された。これは、成長及び細胞増殖に関わる、ポリペプチド成長因子のインスリンファミリーのメンバーである。ＩＧＦ２はＫＲＴ１９の発現を誘導する。その結果、本発明者らの実験では、ＫＲＴ１９も９時間で抑制された。ＫＲＴ１９は上皮細胞の構造的完全性に関与するケラチン中間径フィラメントタンパク質をコード化し、サイトケラチンとヘアケラチンに細分される。Ｉ型サイトケラチンは、複数のヘテロタイプなケラチン鎖に配置される酸性タンパク質より成る。ＫＲＴ１９は、形成中の表皮を包む一時的な浅層である周皮に特異的に発現する。過剰発現すると、ＩＧＦ２は、細胞の過剰増殖中、マトリクスメタロプロテアーゼ７（ＭＭＰ７：Matrix Metalloproteinase 7）の誘導と関連付けられる。ＩＧＦ２、ＫＲＴ１９及びＭＭＰ７の抑制は、細胞過剰増殖減少の可能性を支持する。

【0162】

白血病阻止因子（ＬＩＦ；leukemia inhibitory factor）は、強いチロシンのリン酸化及びＧ１からＳ相への細胞周期移行に必要な転写因子であるＳＴＡＴ３の特異的ＤＮＡ結合活性を導き、これによって細胞増殖と関連することで知られている。この場合、ＬＩＦは３時間で抑制された。

【0163】

同様に、ＳＥＲＴＡＤ３は、短いｍＲＮＡ半減期を持つ２つの転写変異体を持ち、変異体の内の一つは細胞周期のＧ１及びＳ相にわたって密接に調節される。ＳＥＲＴＡＤ３の過剰発現はインビトロで細胞形質転換を、そしてマウスで腫瘍形成を誘導し、一方で、小さな干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）によるＳＥＲＴＡＤ３の抑制は、細胞成長速度の減少をもたらした。ここで、ＳＥＲＴＡＤ３は９及び２４時間で抑制された。

【0164】

Ｓ１００Ａ３によってコード化されたＳ１００カルシウム結合タンパク質Ａ３は、２ＥＦハンドカルシウム結合モチーフを含有するタンパク質のＳ１００ファミリーのメンバーである。Ｓ１００Ａ３は広範囲の細胞の細胞質及び／又は核に局在化され、細胞周期の進行及び分化など、多くの細胞過程の調節に関わる。Ｓ１００Ａ３は２４時間で抑制された。

【0165】

Ｓ１００Ａ３の様に、トリコヒアリン（ＴＣＨＨ：trichohhyalin）は、表皮構造タンパク質及びカルシウム結合タンパク質をコード化し、これらはどちらも染色体遺伝子座１ｑ２１に局在化される。遺伝子座１ｑ２１は表皮分化複合体と称される遺伝子複合体を構成する。ＴＣＨＨは２４時間で抑制された。

【0166】

最後に、ＴＡＧＬＮ遺伝子によってコード化されるトランスゲリンは、線維芽細胞及び平滑筋に見られる形質転換及び形状変化に感受性のあるアクチン架橋／ゲル化タンパク質である。その発現は多くの細胞株内で下方調節され、本発明者らの実験では３時間で下方調節された。この下方調節は、形質転換の開始においては、初期マーカー及び感受性マーカーでもよい。

【0167】

このトランスクリプトーム実験は、試験クリームが酸化ストレス及び更にはＤＮＡ損傷に対して皮膚（すなわち、角化細胞、線維芽細胞など）の本来の防御を刺激することを示唆している。重要な上流因子であるＡＢＬ２／ＡＲＧを同定し、これは、これら２つの過程間のリンクであると考えることができる。確かに、保護作用はＡＢＬ２／ＡＲＧのＣＡＴと相互作用する能力、酸化欠陥を減少させる能力、並びにＲＡＤ５１と相互作用してＤＮＡの修復応答を刺激する能力に依存すると信じられている。このＤＮＡの修復応答は、この特定の過程に関連するタンパク質をコード化する多数の遺伝子によって説明してきたように、主に二本鎖ＤＮＡ切断の修復を目標としている。

【0168】

試験クリームに応答して刺激される上流シグナル伝達は、ＡＢＬ２／ＡＲＧ及びＲＡＤ５０に関わるＡＴＭ（毛細血管拡張性小脳失調症変異遺伝子）経路の活性化に依存すると信じられている。尚、応答の恒常性を維持するためのＮｒｆ２活性の厳しい制御は、プロサイモシンα（ＰＴＭＡ）のアップレギュレーションされた発現によって保証される。更に、抗酸化及びＤＮＡ修復応答は成長停止を導くシグナルと関連させて、修復過程が完了する前の不健康な細胞の増殖を回避することができる。

【0169】

タンパク質発現結果
試験クリーム、ベースクリームで７日間処理した、及び処理していない皮膚外植片の断面を、３日目と７日目にカタラーゼ免疫染色に曝した。具体的には、外植片の断面を抗カタラーゼ抗体と反応させてカタラーゼの存在を可視化した。

【0170】

図１は皮膚外植片試料の呈するＣＡＴ免疫染色を、３７℃、湿気のある、５％ＣＯ_２雰囲気下のＢＥＭ培地で２４時間生存させて維持した、クリームで処理されていない外植片を表すＢ０；１日２回、３日間ベースクリーム１ｍｇで処理された外植片を表すＥＤ３；１日２回、３日間試験クリーム１ｍｇで処理された外植片を表すＰＪ３；１日２回、７日間ベースクリーム１ｍｇで処理した外植片を示すＥＪ７；及び１日２回、７日間試験クリーム１ｍｇで処理された外植片を表すＰＪ７を比較したチャートである。
図１は、皮膚外植片試料の呈するＣＡＴ免疫染色に関して、３７℃、湿気のある、５％ＣＯ_２雰囲気下のＢＥＭ培地で２４時間生存させて維持した、クリームで処理していない外植片を表すＢ０、１日２回、３日間ベースクリーム１ｍｇで処理した外植片を表すＥＤ３、１日２回、３日間試験クリーム１ｍｇで処理した外植片を表すＰＪ３、１日２回、７日間ベースクリーム１ｍｇで処理した外植片を表すＥＪ７、及び１日２回、７日間試験クリーム１ｍｇで処理した外植片を表すＰＪ７を比較したチャートである。

【0171】

図１は、１日２回７日間試験クリームで処理した外植片を表すＰＪ７の角質層内の免疫染色が一番強いことを示している。

【0172】

形態上の結果
皮膚層の形態を示すために、コントロール皮膚外植片の断面と、試験クリーム及びベースクリームで処理した皮膚外植片の断面とを組織学的解析のために処理し、サンプルの断面をマッソントリクローム、ゴールドナー変異体によって染色した。ライカＤＭＬＢ又はオリンパスＢＸ４３顕微鏡を使ってサンプルを観察した。オリンパスＤＰ７２カメラ及びＣｅｌｌ＾Ｄデータ記憶ソフトウェアを使って画像をデジタル化した。老化した皮膚及びこの皮膚の種々の層又は成分の質の向上に対する試験クリームのメリットを記録し、ベースクリームで処理したサンプルと処理していないサンプルとを比較した。

【0173】

全ての外植片断面に関して、０日目の慨形は、表面及び、明らかにその基部において、厚く、適度に層を成し、適度に角化した角質層を示した。表皮は良好な形態の４〜５層の細胞層を示した。真皮表皮接合部の起伏（relief）は明らかだった。乳頭状の真皮は、極めて高密度のネットワークを形成する厚いコラーゲン束を示した。これは良好に細胞化されていた。３，９，２４時間において、処理に関係なく、慨形は不変であった。

【0174】

３日目、コントロール皮膚外植片及びベースクリームで処理した皮膚外植片は、０日目に観察されたものと類似した慨形を呈した。試験クリームで処理した皮膚外植片は、表皮突起の明らかな増加を呈した。

【0175】

７日目、コントロール皮膚外植片及びベースクリームで処理した皮膚外植片は、０日目に観察されたものと類似した慨形を再び呈した。試験クリームで処理された皮膚外植片は、乳頭状の真皮が僅かに緻密化した細胞層数（６〜７層）の適度な増加を呈した。

【0176】

全体的に、試験クリームは、（４〜５の細胞層から６〜７の細胞層への）表皮厚さの適度な増加によって特徴付けられる、適度な表皮刺激を誘導した。また、試験クリームは表皮突起の起伏（relief）を増加させ、乳頭状の真皮中におけるコラーゲン網の密度を増加させた。これとは対照的に、コントロールの皮膚外植片及びベースクリーム外植片は、注目すべき変化を皮膚に示さなかった。

【0177】

（実施例３）ＵＶ照射からの損傷に対する保護作用
ＵＶ−Ａ及びＵＶ−Ｂに曝露された皮膚外植片に対する試験クリームの保護作用を、Ｎｒｆ２免疫染色及びチミン二量体免疫染色によって皮膚外植片を染色した後に、慨形の観察によって調べた。

【0178】

４７才の女性ドナーから皮膚外植片を採取し、処理する前に３７℃、湿気のある、５％ＣＯ_２雰囲気下で２４時間培養した。０，１，２及び５日目に、試験クリーム及びベースクリームを外植片の表面に局所的に適用し（朝１ｍｇ、夜１ｍｇ）、へらで延ばした。

【0179】

６日目、皮膚外植片を、Ｖｉｌｂｅｒｔ Ｌｏｕｒｍａｔ ＵＶ ｓｉｍｕｌａｔｏｒ ＲＭＸ ３Ｗを使用して、９Ｊ／ｃｍ２ＵＶ−Ａ（２ＤＥＭ）及び０．３Ｊ／ｃｍ２ＵＶ−Ｂ（２ＤＥＭ）の投与量で照射した、又は照射しなかった。照射前、外植片をＨＢＳＳ媒体で培養した。照射していないバッチは暗所に置いたままにした。照射後、外植片を全てＢＥＭで培養した。各外植片のサンプルを照射６時間後に取り出し、免疫染色した。

【0180】

Ｎｒｆ２免疫染色
１／１００で２時間、室温で、パラフィン化された切片に、マウスポリクロナール抗ヒトＮｒｆ２（Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ ｒｅｆ．Ｓｃ−７２２）を使ってＮｒｆ２免疫染色を行った。ＶｅｃｔｏｒのＶｅｃｔａｓｔａｉｎ Ｋｉｔ及びＶｅｃｔｏｒのＶＩＰペルオキシターゼ基質を使い、アビジン／ビオチン増幅システムによって染色を明らかにした。

【0181】

Ｎｒｆ２は酸化ストレスへの細胞応答において鍵となる転写因子である。ヒトＮｒｆ２は６６ｋＤａの予測分子量を持ち、広範囲の組織及び細胞型で普遍的に発現する。ＵＶ照射を含む酸化ストレス下において、Ｎｒｆ２はリン酸化によって活性化され、細胞質から核に転座する。これまでのところ、タンパク質キナーゼＣ（ＰＫＣ）、ホスファチジルイノシトール３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）、マイトジェン活性化タンパク質キナーゼ（ＭＡＰＫ）及びＥＲ局在化膵臓小胞体キナーゼ（ＰＥＲＫ）を含む種々の細胞質キナーゼは、Ｎｒｆ２を修飾し、Ｎｒｆ２の、その阻害剤であるＫｅａｐ１からの解離に関わる可能性があることがわかっている。核内でＮｒｆ２は一度、全抗酸化系のマスター調節遺伝子である、ｈＡＲＥ（ヒト抗酸化応答エレメント）とも称される抗酸化応答エレメント（ＡＲＥ）の場所にＤＮＡを結合させる。

【0182】

図２は、皮膚外植片試料の呈するＮｒｆ２免疫染色を、３７℃、湿気のある、５％ＣＯ_２雰囲気下のＢＥＭ培地で２４時間生存させて維持した、クリームで処理していない外植片を表すＢ０、３７℃、湿気のある、５％ＣＯ_２雰囲気下のＢＥＭ培地で６日間生存させて維持した、クリームで処理していない外植片を表すＢＤ６、３７℃、湿気のある、５％ＣＯ_２雰囲気下のＢＥＭ培地で６日間生存させて維持し、６日目にＵＶ照射した、クリームで処理していない外植片を表すＢＵＶＤ６、１ｍｇのベースクリームで１日２回３日間処理し、６日目にＵＶ照射したＥＵＶＤ６、及び１ｍｇの試験クリームで１日２回３日間処理し、６日目にＵＶ照射したＰＵＶＤ６を比較したチャートである。全サンプルに対してＵＶ照射後６時間で免疫染色を行った。

【0183】

２４時間後（Ｂ０）及びより明らかには６日後（ＢＤ６）の、クリームで処理していない皮膚外植片に、Ｎｒｆ２が明らかに存在した。これは、Ｎｆｒ２遺伝子の基本的な間欠的発現を示している。ＵＶ照射後、クリームで処理していない外植片（ＢＵＶＤ６）及びベースクリームで処理した外植片（ＥＵＶＤ６）は、Ｎｒｆ２濃度の著しい低下を呈し、一方で、試験クリームで処理した外植片（ＰＵＶＤ６）は、ＢＵＶＤ６及びＥＵＶＤ６と比較して、Ｎｒｆ２の減少は少なかった。このことは試験クリームがＵＶ−Ａ及びＵＶ−Ｂの表皮への悪影響を、Ｎｆｒ２遺伝子の発現を高め、より多くのＮｆｒ２を保護酵素の転座及び翻訳に利用できるようにすることにより、部分的に抑制することを示唆している。

【0184】

チミン二量体免疫染色
パラフィン化した切片において、マウスモノクロナール抗ヒトチミン二量体 Ｋａｍｉｙａ（ｒｅｆ．ＭＣ−０６２）,Ｃｌｏｎｅ ＫＴＭ５３を用いて、チミン二量体免疫染色を１／１０００で１時間、室温で行った。ＶｅｃｔｏｒのＶｅｃｔａｓｔａｉｎ Ｋｉｔ及びＶｅｃｔｏｒのＶＩＰペルオキシターゼ基質を用い、アビジン／ビオチン増幅システムによって染色を明らかにした。免疫染色を、顕微鏡による観察及びＣｅｌｌ＾Ｄソフトウェアを使った画像解析によって評価した。

【0185】

紫外線は、ＤＮＡ内のチミン塩基及びシトシン塩基内における二重結合によって吸収される。この追加されたエネルギーによって結合が開き、隣接する塩基との反応が可能になる。隣接する塩基が別のチミン又はシトシン塩基であるならば、２つの塩基間に共有結合を形成することができる。これらの二量体は扱いにくく、ＤＮＡに硬い瘤を形成する。よって、このような事象の影響は、細胞がそのＤＮＡを複製する必要がある場合には有害である。ＤＮＡポリメラーゼは、活性部位でスムーズに適応しないため、二量体を読み取ることは困難である。

【0186】

図３はチミン二量体に対して陽性の（positive for）表面の割合を示している。ＵＶで処理した皮膚外植片のチミン二量体の発現を画像解析によって定量化した。これらのバッチに関して、表皮においてチミン二量体によって標識付けされた表面の割合を下記の表３にまとめた。

【0187】

【表1】

【0188】

ＵＶ−Ａ及びＵＶ−Ｂで照射された皮膚外植片（ＢＵＶＤ６）では、表面の７．７％がチミン二量体免疫染色に対して陽性であることがわかった。対照的に、試験クリームで処理し、ＵＶ−Ａ及びＵＶ−Ｂを照射した皮膚外植片（ＰＵＶＤ６）では、表面の５．５％のみがチミン二量体免疫染色に対して陽性であることがわかり、ＵＶ−Ａ及びＵＶ−Ｂ照射後、チミン二量体の形成が２９％減少したことを示している。ベースクリームで処理した皮膚外植片（ＥＵＶＤ６）では、表面の８．６％がチミン二量体免疫染色に対して陽性であることがわかった。

【0189】

本明細書に記載する発明は、本明細書に開示する特定の実施形態による範囲に限定されるものではない、というのもこれらの実施形態は、本発明のいくつかの態様を説明することを意図したものであるからである。本明細書に示し、記載したものに加え、本明細書の上述の記載からの種々の変更が当業者にとって明らかになるだろう。そのような変更は、添付の請求項の範囲に該当すると意図されている。

【図1】

【図2】

【図3】

【手続補正書】

【提出日】2016年11月17日

【手続補正1】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】００６９

【補正方法】変更

【補正の内容】

【0069】

乳化剤：本明細書に記載した組成物は更に乳化剤の任意の一つ又は組み合わせを含む。乳化剤は相間の界面張力を軽減させ、乳剤の処方及び安定性を向上させ得る。乳化剤は非イオン、陽イオン、陰イオン、及び両性イオンであり得る。非限定的な例には、グリセリンエステル、プロピレングリコールエステル、ポリエチレングリコール脂肪酸エステル、ポリプロピレングリコール脂肪酸エステル、ソルビトールエステル、無水ソルビタンエステル、カルボン酸共重合体、グルコースエステル及びエーテル、エトキシル化エーテル、エトキシル化アルコール、アルキルリン酸、ポリオキシエチレン脂肪エーテルリン酸塩、脂肪酸アミド、アシルラクチレート、石鹸、ＴＥＡステアリン酸、ＤＥＡオレト‐３リン酸塩、ポリエチレングリコール２０ソルビタンモノラウレート（ポリソルベート２０）、ポリエチレングリコール５ダイズステロール、ステアレト‐２、ステアレト‐２０、ステアレト‐２１、セテアレト‐２０、ＰＰＧ‐２メチルグルコースエーテルジステアレート、セテス‐１０、ポリソルベート８０、セチルリン酸塩、セチルリン酸カリウム、ジエタノールアミンセチルリン酸塩、ポリソルベート６０、グリセリルステアレート、ＰＥＧ‐１００ステアレート及びその混合物がある。

【手続補正2】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】００７１

【補正方法】変更

【補正の内容】

【0071】

本明細書に記載した組成物で使用することのできるシリコーン含有化合物は、本明細書に記載するもの、又は当業者に既知のものを含む。非限定的な例として、シリコーン油（例えば、揮発性及び不揮発性油）、ジェル及び固体がある。特定の態様において、シリコーン含有化合物にはポリオルガノシロキサンなどのシリコーン油がある。ポリオルガノシロキサンの非限定的な例には、ジメチコン、シクロメチコン、ポリシリコーン‐１１、フェニルトリメチコーン、トリメチルシリルアモジメチコーン、ステアロキシトリメチルシラン又はこれらの混合物、並びに（例えば、皮膚、髪、目などの特定の部分への）意図される適用に応じた望ましい一貫性及び適用特性を達成するための任意の特定の比率の、その他のオルガノシロキサン材がある。「揮発性油」には、低い気化熱、すなわち、通常、シリコーン油のグラム当たりのカロリーが約５０未満であるシリコーンがある。揮発性シリコーン油の非限定的な例には、ダウコーニング３４４フルイド、ダウコーニング３４５フルイド、ダウコーニング２４４フルイド、ダウコーニング２４５フルイドなどのシクロメチコン、及びコネチカット州ダンベリーのユニオンカーバイト社のボラタイルシリコーン７２０７、低粘度のジメチコン、すなわち約５０ｃｓｔ以下の粘度を有するジメチコン（例えば、ダウコーニング２００‐０．５ｃｓｔフルイド）等のジメチコンがある。ダウコーニング・フルイドは、ミシガン州ミッドランドのダウコーニング社より販売されている。シクロメチコン及びジメチコンは、ＣＴＦＡ化粧用成分辞典第３版に、それぞれ環式ジメチルポリシロキサン化合物と、完全メチル化直鎖シロキサンポリマーで末端をトリメチルシロキシ基で阻止したものとの混合物として記載されている。本明細書に記載した組成物で使用することのできるその他の非限定的なシリコーン含有化合物には、ニューヨーク州ウォーターフォードのジェネラルエレクトリック社シリコーン製品事業部及びミシガン州エイドリアンのスタウファーケミカル社のＳＷＳシリコーン事業部より販売されているものがある。

【国際調査報告】