特表 2020-520902 新規ＰＳＭＡ結合剤及びその使用

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】特表2020-520902(P2020-520902A)

(43)【公表日】2020年7月16日

(54)【発明の名称】新規ＰＳＭＡ結合剤及びその使用

(51)【国際特許分類】

   C07K 5/02 20060101AFI20200619BHJP

   A61K 51/04 20060101ALI20200619BHJP

   A61K 47/64 20170101ALI20200619BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20200619BHJP

   A61P 35/04 20060101ALI20200619BHJP

【ＦＩ】

   C07K5/02

   A61K51/04 100

   A61K51/04 200

   A61K47/64

   A61P35/00

   A61P35/04

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

【全頁数】144

(21)【出願番号】特願2019-562312(P2019-562312)

(86)(22)【出願日】2018年5月24日

(85)【翻訳文提出日】2019年11月11日

(86)【国際出願番号】EP2018063734

(87)【国際公開番号】WO2018215627

(87)【国際公開日】20181129

(31)【優先権主張番号】17000891.6

(32)【優先日】2017年5月24日

(33)【優先権主張国】EP

(31)【優先権主張番号】PCT/EP2017/000717

(32)【優先日】2017年6月20日

(33)【優先権主張国】EP

(81)【指定国】 AP(BW,GH,GM,KE,LR,LS,MW,MZ,NA,RW,SD,SL,ST,SZ,TZ,UG,ZM,ZW),EA(AM,AZ,BY,KG,KZ,RU,TJ,TM),EP(AL,AT,BE,BG,CH,CY,CZ,DE,DK,EE,ES,FI,FR,GB,GR,HR,HU,IE,IS,IT,LT,LU,LV,MC,MK,MT,NL,NO,PL,PT,RO,RS,SE,SI,SK,SM,TR),OA(BF,BJ,CF,CG,CI,CM,GA,GN,GQ,GW,KM,ML,MR,NE,SN,TD,TG),AE,AG,AL,AM,AO,AT,AU,AZ,BA,BB,BG,BH,BN,BR,BW,BY,BZ,CA,CH,CL,CN,CO,CR,CU,CZ,DE,DJ,DK,DM,DO,DZ,EC,EE,EG,ES,FI,GB,GD,GE,GH,GM,GT,HN,HR,HU,ID,IL,IN,IR,IS,JO,JP,KE,KG,KH,KN,KP,KR,KW,KZ,LA,LC,LK,LR,LS,LU,LY,MA,MD,ME,MG,MK,MN,MW,MX,MY,MZ,NA,NG,NI,NO,NZ,OM,PA,PE,PG,PH,PL,PT,QA,RO,RS,RU,RW,SA,SC,SD,SE,SG,SK,SL,SM,ST,SV,SY,TH,TJ,TM,TN,TR,TT

(71)【出願人】

【識別番号】511228698

【氏名又は名称】イーテーエム イゾトーペン テクノロジエン ミュンヘン アーゲー

(71)【出願人】

【識別番号】501494414

【氏名又は名称】パウル・シェラー・インスティトゥート

(74)【代理人】

【識別番号】100107515

【弁理士】

【氏名又は名称】廣田 浩一

(74)【代理人】

【識別番号】100107733

【弁理士】

【氏名又は名称】流 良広

(74)【代理人】

【識別番号】100115347

【弁理士】

【氏名又は名称】松田 奈緒子

(72)【発明者】

【氏名】マルティナ・ベネソヴァ

(72)【発明者】

【氏名】クリスティーナ・ミュラー

(72)【発明者】

【氏名】クリストフ・アンブリット

(72)【発明者】

【氏名】ロジャー・シブリ

(72)【発明者】

【氏名】コンスタンティン・ツェルノゼコフ

【テーマコード（参考）】

4C076

4C084

4C085

4H045

【Ｆターム（参考）】

4C076AA95

4C076CC41

4C076EE41

4C076EE59

4C076FF70

4C084AA12

4C084NA13

4C084ZB26

4C085HH03

4C085KA09

4C085KA29

4C085KB07

4C085KB09

4C085KB12

4C085KB56

4C085KB82

4C085LL18

4H045AA10

4H045AA20

4H045AA30

4H045BA11

4H045BA70

4H045BA71

4H045EA50

4H045FA10

(57)【要約】

本発明は、放射性医薬、造影剤として有用であり、及び癌の治療に有用な新規化合物を提供する。
【選択図】なし

【特許請求の範囲】

【請求項1】

一般式（１）（ｉ）又は（１）（ｉｉ）：

【化1】

（式中、
Ａｂｍは、アルブミン結合体であり、
Ｐｂｍは、ＰＳＭＡ結合体であり、
Ｄは、キレーターであり、好ましくは１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸（ＤＯＴＡ）、Ｎ，Ｎ”−ビス［２−ヒドロキシ−５−（カルボキシエチル）−ベンジル］エチレンジアミン−Ｎ、Ｎ”−二酢酸（ＨＢＥＤ−ＣＣ）、１，４，７−トリアザシクロノナン−１，４，７−三酢酸（ＮＯＴＡ）、２−（４，７−ビス（カルボキシメチル）−１，４，７−トリアゾナン−１−イル）ペンタン二酸（ＮＯＤＡＧＡ）、２−（４，７，１０−トリス（カルボキシメチル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１−イル）−ペンタン二酸（ＤＯＴＡＧＡ）、１，４，７−トリアザシクロノナンホスフィン酸（ＴＲＡＰ）、１，４，７−トリアザシクロノナン−１−［メチル（２−カルボキシエチル）−ホスフィン酸］−４，７−ビス［メチル（２−ヒドロキシメチル）ホスフィン酸］（ＮＯＰＯ）、３，６，９，１５−テトラアザビシクロ［９，３，１］ペンタデカ−１（１５），１１，１３−トリエン−３，６，９−三酢酸（ＰＣＴＡ）、Ｎ’−｛５−［アセチル（ヒドロキシ）アミノ］ペンチル｝−Ｎ−［５−（｛４−［（５−アミノペンチル）（ヒドロキシ）アミノ］−４−オキソブタノイル｝アミノ）ペンチル］−Ｎ−ヒドロキシスクシンアミド（ＤＦＯ）、及びジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）、又はそれらの誘導体から選択され、
Ｘは、それぞれ独立して、Ｏ、Ｎ、Ｓ、又はＰから選択され、
Ｒ^１及びＲ^２は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、分岐状、非分岐状、又は環状のＣ_１−Ｃ_１２ヒドロカルビル、Ｃ_２−Ｃ_１２アルケニル、Ｃ_２−Ｃ_１２アルキニル、ＯＲ^６、ＯＣＯＲ^６、ＣＨＯ、ＣＯＲ^６、ＣＨ_２ＯＲ^６、ＮＲ^６Ｒ^７、ＣＯＮＲ^６Ｒ^７、ＣＯＯＲ^６、ＣＨ_２ＮＲ^６Ｒ^７、ＳＲ^６、＝Ｏ、＝Ｓ、又は＝ＮＨから選択される、又はＲ^１とＲ^２が結合して、分岐状、非分岐状、又は環状のＣ_１−Ｃ_１０ヒドロカルビル基を含む環状構造を形成し、前記ヒドロカルビル基は、最大２個のヘテロ原子が介在していてもよく、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＲ^６、ＯＣＯＲ^６、ＣＯＯＲ^６、ＣＨＯ、ＣＯＲ^６、ＣＨ_２ＯＲ^６、ＮＲ^６Ｒ^７、ＣＨ_２ＮＲ^６Ｒ^７、及びＳＲ^７、＝Ｏ、＝Ｓ、及び＝ＮＨから独立して選択される最大３個の基で置換されていてもよく、
Ｙは、単結合、又は線状、分岐状、又は環状の任意に置換された、最大２個のヘテロ原子が介在していてもよいＣ_１−Ｃ_１２アルキル、ＯＲ^６、ＯＣＯＲ^６、ＣＨＯ、ＣＯＲ^６、ＣＨ_２ＯＲ^６、ＮＲ^６Ｒ^７、ＣＯＯＲ^６、ＣＨ_２ＮＲ^６Ｒ^７、ＳＲ^６、＝Ｏ、＝Ｓ、又は＝ＮＨから選択され、非隣接ＣＨ_２基の１以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ^６−、−ＮＲ^６−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ^６−、−ＮＲ^６−ＣＯＯ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ^６−、−ＮＲ^６−ＣＯ−ＮＲ^６−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｏ−ＣＯ−Ｏ−、ＳＲ^６−、ＳＯ_３Ｒ^６−で置き換えられていてもよく、
Ｒ^６及びＲ^７は、それぞれ独立して、Ｈ又は分岐状、非分岐状、又は環状のＣ_１−１２ヒドロカルビルから選択され、
Ｒ^３、Ｒ^４、及びＲ^５は、それぞれ独立して、−ＣＯＨ、−ＣＯ_２Ｈ、−ＳＯ_２Ｈ、−ＳＯ_３Ｈ、−ＳＯ_４Ｈ、−ＰＯ_２Ｈ、−ＰＯ_３Ｈ、−ＰＯ_４Ｈ_２、−Ｃ（Ｏ）−（Ｃ_１−Ｃ_１０）アルキル、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ（Ｃ_１−Ｃ_１０）アルキル、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨＲ^８、又は−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ^８Ｒ^９から選択され、Ｒ^８及びＲ^９は、それぞれ独立して、Ｈ、結合、（Ｃ_１−Ｃ_１０）アルキレン、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｃ（Ｏ）、Ｃ（Ｓ）、−Ｃ（Ｓ）−ＮＨ−ベンジル−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ベンジル、−Ｃ（Ｏ）−（Ｃ_１−Ｃ_１０）アルキレン、−（ＣＨ_２）_ｐ−ＮＨ、−（ＣＨ_２）_ｐ−（Ｃ_１−Ｃ_１０）アルキレン、−（ＣＨ_２）_ｐ−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ_２）_ｑ、−（ＣＨ_ｒＣＨ_２）_ｔ−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ_２）_ｐ、−（ＣＨ_２）_ｐ−ＣＯ−ＣＯＨ、−（ＣＨ_２）_ｐ−ＣＯ−ＣＯ_２Ｈ、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−Ｃ［（ＣＨ_２）_ｑ−ＣＯＨ］_３、−Ｃ［（ＣＨ_２）_ｐ−ＣＯＨ］_３、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−Ｃ［（ＣＨ_２）_ｑ−ＣＯ_２Ｈ］_３、−Ｃ［（ＣＨ_２）_ｐ−ＣＯ_２Ｈ］_３、又は−（ＣＨ_２）_ｐ−（Ｃ_５−Ｃ_１４）ヘテロアリールから選択され、
スペーサーは、少なくとも１つのＣ−Ｎ結合を含み、
リンカーは、本明細書で定義される一般式（６）で特徴付けられ、
ａ、ｂ、ｐ、ｑ、ｒ、ｔは、それぞれ独立して、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０から選択される整数である。）
で表されることを特徴とする化合物、又はその薬学的に許容される塩、エステル、溶媒和物、若しくは放射標識錯体。

【請求項2】

一般式（１ａ）：

【化2】

（式中、
Ｄは、キレーターであり、好ましくは１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸（ＤＯＴＡ）、Ｎ，Ｎ”−ビス［２−ヒドロキシ−５−（カルボキシエチル）ベンジル］エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ”−二酢酸（ＨＢＥＤ−ＣＣ）、１，４，７−トリアザシクロノナン−１，４，７−三酢酸（ＮＯＴＡ）、２−（４，７−ビス（カルボキシメチル）−１，４，７−トリアゾナン−１−イル）ペンタン二酸（ＮＯＤＡＧＡ）、２−（４，７，１０−トリス（カルボキシメチル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１−イル）ペンタン二酸（ＤＯＴＡＧＡ）、１，４，７−トリアザシクロノナンホスフィン酸（ＴＲＡＰ）、１，４，７−トリアザシクロノナン−１−［メチル（２−カルボキシエチル）−ホスフィン酸］−４，７−ビス［メチル（２−ヒドロキシメチル）ホスフィン酸］（ＮＯＰＯ）、３，６，９，１５−テトラアザビシクロ［９，３，１．］ペンタデカ−１（１５），１１，１３−トリエン−３，６，９−三酢酸（ＰＣＴＡ）、Ｎ’−｛５−［アセチル（ヒドロキシ）アミノ］ペンチル｝−Ｎ−［５−（｛４−［（５−アミノペンチル）（ヒドロキシ）アミノ］−４−オキソブタノイル｝アミノ）ペンチル］−Ｎ−ヒドロキシスクシンアミド（ＤＦＯ）、及びジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）、又はそれらの誘導体から選択され、
Ｘは、それぞれ独立して、Ｏ、Ｎ、Ｓ、又はＰから選択され、
Ｒ^１及びＲ^２は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、分岐状、非分岐状、又は環状の任意に置換されたＣ_１−Ｃ_１２ヒドロカルビル、Ｃ_２−Ｃ_１２アルケニル、Ｃ_２−Ｃ_１２アルキニル、ＯＲ^６、ＯＣＯＲ^６、ＣＨＯ、ＣＯＲ^６、ＣＨ_２ＯＲ^６、ＮＲ^６Ｒ^７、ＣＯＮＲ^６Ｒ^７、ＣＯＯＲ^６、ＣＨ_２ＮＲ^６Ｒ^７、ＳＲ^６、＝Ｏ、＝Ｓ、又は＝ＮＨから選択される、又はＲ^１とＲ^２が結合して、分岐状、非分岐状、又は環状のＣ_１−Ｃ_１０ヒドロカルビル基を含む環状構造を形成し、前記ヒドロカルビル基は、最大２個のヘテロ原子が介在していてもよく、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＲ^６、ＯＣＯＲ^６、ＣＯＯＲ^６、ＣＨＯ、ＣＯＲ^６、ＣＨ_２ＯＲ^６、ＮＲ^６Ｒ^７、ＣＨ_２ＮＲ^６Ｒ^７、及びＳＲ^７、＝Ｏ、＝Ｓ、及び＝ＮＨから独立して選択される最大３個の基で置換されていてもよく、
Ｙは、単結合、又は線状、分岐状、又は環状の任意に置換された、最大２個のヘテロ原子が介在していてもよいＣ_１−Ｃ_１２アルキル、ＯＲ^６、ＯＣＯＲ^６、ＣＨＯ、ＣＯＲ^６、ＣＨ_２ＯＲ^６、ＮＲ^６Ｒ^７、ＣＯＯＲ^６、ＣＨ_２ＮＲ^６Ｒ^７、ＳＲ^６、＝Ｏ、＝Ｓ、又は＝ＮＨから選択され、非隣接ＣＨ_２基の１以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ^６−、−ＮＲ^６−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ^６−、−ＮＲ^６−ＣＯＯ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ^６−、−ＮＲ^６−ＣＯ−ＮＲ^６−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｏ−ＣＯ−Ｏ−、ＳＲ^６−、ＳＯ_３Ｒ^６−で置き換えられていてもよく、
Ｒ^６及びＲ^７は、それぞれ独立して、Ｈ又は分岐状、非分岐状、又は環状のＣ_１−１２ヒドロカルビルから選択され、
Ｒ^３、Ｒ^４、及びＲ^５は、それぞれ独立して、−ＣＯＨ、−ＣＯ_２Ｈ、−ＳＯ_２Ｈ、−ＳＯ_３Ｈ、−ＳＯ_４Ｈ、−ＰＯ_２Ｈ、−ＰＯ_３Ｈ、−ＰＯ_４Ｈ_２、−Ｃ（Ｏ）−（Ｃ_１−Ｃ_１０）アルキル、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ（Ｃ_１−Ｃ_１０）アルキル、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨＲ^８、又は−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ^８Ｒ^９から選択され、Ｒ^８及びＲ^９は、それぞれ独立して、Ｈ、結合、（Ｃ_１−Ｃ_１０）アルキレン、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｃ（Ｏ）、Ｃ（Ｓ）、−Ｃ（Ｓ）−ＮＨ−ベンジル−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ベンジル、−Ｃ（Ｏ）−（Ｃ_１−Ｃ_１０）アルキレン、−（ＣＨ_２）_ｐ−ＮＨ、−（ＣＨ_２）_ｐ−（Ｃ_１−Ｃ_１０）アルキレン、−（ＣＨ_２）_ｐ−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ_２）_ｑ、−（ＣＨ_ｒＣＨ_２）_ｔ−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ_２）_ｐ、−（ＣＨ_２）_ｐ−ＣＯ−ＣＯＨ、−（ＣＨ_２）_ｐ−ＣＯ−ＣＯ_２Ｈ、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−Ｃ［（ＣＨ_２）_ｑ−ＣＯＨ］_３、−Ｃ［（ＣＨ_２）_ｐ−ＣＯＨ］_３、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−Ｃ［（ＣＨ_２）_ｑ−ＣＯ_２Ｈ］_３、−Ｃ［（ＣＨ_２）_ｐ−ＣＯ_２Ｈ］_３、又は−（ＣＨ_２）_ｐ−（Ｃ_５−Ｃ_１４）ヘテロアリールから選択され、
スペーサーは、少なくとも１つのＣ−Ｎ結合を含み、
リンカーは、一般式（６）：

【化3】

（式中、
Ｘは、それぞれ独立して、Ｏ、Ｎ、Ｓ、又はＰから選択され、
Ｑは、置換又は非置換のアルキル、アルキルアリール、及びシクロアルキルから選択され、好ましくは置換又は非置換のＣ_５−Ｃ_１４アリール、Ｃ_５−Ｃ_１４アルキルアリール、又はＣ_５−Ｃ_１４シクロアルキルから選択され、
Ｗは、−（ＣＨ_２）_ｃ−アリール又は−（ＣＨ_２）_ｃ−ヘテロアリールから選択され、ｃは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１から選択される整数である。）で特徴付けられ、
ａ、ｂ、ｐ、ｑ、ｒ、ｔは、それぞれ独立して、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０から選択される整数である。）
で特徴付けられる請求項１に記載の化合物、又はその薬学的に許容される塩、エステル、溶媒和物、若しくは放射標識錯体。

【請求項3】

一般式（１１）：

【化4】

（式中、
Ｄは、キレーターであり、好ましくは１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸（ＤＯＴＡ）、Ｎ，Ｎ”−ビス［２−ヒドロキシ−５−（カルボキシエチル）ベンジル］エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ”−二酢酸（ＨＢＥＤ−ＣＣ）、１，４，７−トリアザシクロノナン−１，４，７−三酢酸（ＮＯＴＡ）、２−（４，７−ビス（カルボキシメチル）−１，４，７−トリアゾナン−１−イル）ペンタン二酸（ＮＯＤＡＧＡ）、２−（４，７，１０−トリス（カルボキシメチル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１−イル）−ペンタン二酸（ＤＯＴＡＧＡ）、１，４，７−トリアザシクロノナンホスフィン酸（ＴＲＡＰ）、１，４，７−トリアザシクロノナン−１−［メチル（２−カルボキシエチル）ホスフィン酸］−４，７−ビス［メチル（２−ヒドロキシメチル）ホスフィン酸］（ＮＯＰＯ）、３，６，９，１５−テトラアザビシクロ［９，３，１．］ペンタデカ−１（１５），１１，１３−トリエン−３，６，９−三酢酸（ＰＣＴＡ）、Ｎ’−｛５−［アセチル（ヒドロキシ）アミノ］ペンチル｝−Ｎ−［５−（｛４−［（５−アミノペンチル）（ヒドロキシ）アミノ］−４−オキソブタノイル｝アミノ）ペンチル］−Ｎ−ヒドロキシスクシンアミド（ＤＦＯ）、及びジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）、又はそれらの誘導体から選択され、
Ｘは、それぞれ独立して、Ｏ、Ｎ、Ｓ、又はＰから選択され、
Ｒ^１及びＲ^２は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、分岐状、非分岐状、又は環状の任意に置換されたＣ_１−Ｃ_１２ヒドロカルビル、Ｃ_２−Ｃ_１２アルケニル、Ｃ_２−Ｃ_１２アルキニル、ＯＲ^６、ＯＣＯＲ^６、ＣＨＯ、ＣＯＲ^６、ＣＨ_２ＯＲ^６、ＮＲ^６Ｒ^７、ＣＯＮＲ^６Ｒ^７、ＣＯＯＲ^６、ＣＨ_２ＮＲ^６Ｒ^７、ＳＲ^６、＝Ｏ、＝Ｓ、又は＝ＮＨから選択される、又はＲ^１とＲ^２が結合して、分岐状、非分岐状、又は環状のＣ_１−Ｃ_１０ヒドロカルビル基を含む環状構造を形成し、前記ヒドロカルビル基は、最大２個のヘテロ原子が介在していてもよく、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＲ^６、ＯＣＯＲ^６、ＣＯＯＲ^６、ＣＨＯ、ＣＯＲ^６、ＣＨ_２ＯＲ^６、ＮＲ^６Ｒ^７、ＣＨ_２ＮＲ^６Ｒ^７、及びＳＲ^７、＝Ｏ、＝Ｓ、及び＝ＮＨから独立して選択される最大３個の基で置換されていてもよく、
Ｙは、単結合、又は線状、分岐状、又は環状の任意に置換された、最大２個のヘテロ原子が介在していてもよいＣ_１−Ｃ_１２アルキル、ＯＲ^６、ＯＣＯＲ^６、ＣＨＯ、ＣＯＲ^６、ＣＨ_２ＯＲ^６、ＮＲ^６Ｒ^７、ＣＯＯＲ^６、ＣＨ_２ＮＲ^６Ｒ^７、ＳＲ^６、＝Ｏ、＝Ｓ、又は＝ＮＨから選択され、非隣接ＣＨ_２基の１以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ^６−、−ＮＲ^６−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ^６−、−ＮＲ^６−ＣＯＯ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ^６−、−ＮＲ^６−ＣＯ−ＮＲ^６−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｏ−ＣＯ−Ｏ−、ＳＲ^６−、ＳＯ_３Ｒ^６−で置き換えられていてもよく、
Ｒ^６及びＲ^７は、それぞれ独立して、Ｈ又は分岐状、非分岐状、又は環状のＣ_１−１２ヒドロカルビルから選択され、
Ｒ^３、Ｒ^４、及びＲ^５は、それぞれ独立して、−ＣＯＨ、−ＣＯ_２Ｈ、−ＳＯ_２Ｈ、−ＳＯ_３Ｈ、−ＳＯ_４Ｈ、−ＰＯ_２Ｈ、−ＰＯ_３Ｈ、−ＰＯ_４Ｈ_２、−Ｃ（Ｏ）−（Ｃ_１−Ｃ_１０）アルキル、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ（Ｃ_１−Ｃ_１０）アルキル、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨＲ^８、又は−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ^８Ｒ^９から選択され、Ｒ^８及びＲ^９は、それぞれ独立して、Ｈ、結合、（Ｃ_１−Ｃ_１０）アルキレン、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｃ（Ｏ）、Ｃ（Ｓ）、−Ｃ（Ｓ）−ＮＨ−ベンジル−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ベンジル、−Ｃ（Ｏ）−（Ｃ_１−Ｃ_１０）アルキレン、−（ＣＨ_２）_ｐ−ＮＨ、−（ＣＨ_２）_ｐ−（Ｃ_１−Ｃ_１０）アルキレン、−（ＣＨ_２）_ｐ−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ_２）_ｑ、−（ＣＨ_ｒＣＨ_２）_ｔ−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ_２）_ｐ、−（ＣＨ_２）_ｐ−ＣＯ−ＣＯＨ、−（ＣＨ_２）_ｐ−ＣＯ−ＣＯ_２Ｈ、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−Ｃ［（ＣＨ_２）_ｑ−ＣＯＨ］_３、−Ｃ［（ＣＨ_２）_ｐ−ＣＯＨ］_３、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−Ｃ［（ＣＨ_２）_ｑ−ＣＯ_２Ｈ］_３、−Ｃ［（ＣＨ_２）_ｐ−ＣＯ_２Ｈ］_３、又は−（ＣＨ_２）_ｐ−（Ｃ_５−Ｃ_１４）ヘテロアリールから選択され、
スペーサーは、少なくとも１つのＣ−Ｎ結合を含み、
リンカーは、一般式（６）：

【化5】

（式中、
Ｘは、それぞれ独立して、Ｏ、Ｎ、Ｓ、又はＰから選択され、
Ｑは、置換又は非置換のアルキル、アルキルアリール、及びシクロアルキルから選択され、好ましくは置換又は非置換のＣ_５−Ｃ_１４アリール、Ｃ_５−Ｃ_１４アルキルアリール、又はＣ_５−Ｃ_１４シクロアルキルから選択され、
Ｗは、−（ＣＨ_２）_ｃ−アリール又は−（ＣＨ_２）_ｃ−ヘテロアリールから選択され、ｃは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１から選択される整数である。）で特徴付けられ、
ａ、ｂ、ｐ、ｑ、ｒ、ｔは、それぞれ独立して、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０から選択される整数である。）
で特徴付けられる請求項１から２のいずれかに記載の化合物、又はその薬学的に許容される塩、エステル、溶媒和物、若しくは放射標識錯体。

【請求項4】

前記Ｄが、ＤＯＴＡ、ＤＯＴＡ、ＨＢＥＤ−ＣＣ、ＮＯＴＡ、ＮＯＤＡＧＡ、ＤＯＴＡＧＡ、ＴＲＡＰ、ＮＯＰＯ、ＰＣＴＡ、ＤＦＯ、ＤＴＰＡ、又はそれらの誘導体から選択され、最も好ましくは、ＤＯＴＡ、ＮＯＤＡＧＡ、ＤＯ３ＡＰ、ＤＯ３ＡＰ^ＰｒＡ、又はＤＯ３ＡＰ^ＡＢｎから選択される請求項１から３のいずれかに記載の化合物。

【請求項5】

各Ｘが、Ｏである請求項１から４のいずれかに記載の化合物。

【請求項6】

Ｙが、線状又は分岐状の任意に置換されたＣ_１−Ｃ_１２ヒドロカルビル、より好ましくは線状又は分岐状の任意に置換されたＣ_１−Ｃ_１０ヒドロカルビル、更により好ましくは線状又は分岐状の任意に置換されたＣ_１−Ｃ_６ヒドロカルビル、更により好ましくは線状又は分岐状の任意に置換されたＣ_１−Ｃ_３ヒドロカルビルである請求項１から５のいずれかに記載の化合物。

【請求項7】

Ｙが、線状のＣ_１−Ｃ_３ヒドロカルビルである請求項６に記載の化合物。

【請求項8】

Ｒ^１及びＲ^２は、それぞれ独立して、Ｈ、ハロゲン、好ましくはヨウ素又は臭素、及びＣ_１−６アルキル、好ましくはＣ_１−３アルキル、更により好ましくはメチルから選択される請求項１から７のいずれかに記載の化合物。

【請求項9】

一般式（１）において、以下の基：

【化6】

が、構造式（２ａ）、（２ｂ）、又は（２ｃ）：

【化7】

のいずれかで特徴付けられる請求項８に記載の化合物。

【請求項10】

Ｒ^３、Ｒ^４、及びＲ^５が、それぞれ独立して、−ＣＯＨ、−ＣＯ_２Ｈ、−ＳＯ_２Ｈ、−ＳＯ_３Ｈ、−ＳＯ_４Ｈ、−ＰＯ_２Ｈ、−ＰＯ_３Ｈ、−ＰＯ_４Ｈ_２から選択される請求項１から９のいずれかに記載の化合物。

【請求項11】

Ｒ^３、Ｒ^４、及びＲ^５が、それぞれ−ＣＯ_２Ｈから選択される請求項１０に記載の化合物。

【請求項12】

一般式（１１．１）〜（１１．３）：

のいずれかで特徴付けられる請求項３から１１のいずれかに記載の化合物。

【請求項13】

前記スペーサーが、線状又は分岐状の任意に置換されたＣ_１−Ｃ_２０ヒドロカルビル、より好ましくはＣ_１−Ｃ_１２ヒドロカルビル、更により好ましくはＣ_２−Ｃ_６ヒドロカルビル、更により好ましくはＣ_２−Ｃ_４ヒドロカルビルを含み、前記ヒドロカルビルが、好ましくはＮから選択される少なくとも１個、任意に最大４個のヘテロ原子を含む請求項１から１２のいずれかに記載の化合物。

【請求項14】

前記スペーサーが、−［ＣＨＲ^１０］_ｕ−ＮＲ^１１−（式中、Ｒ^１０及びＲ^１１は、それぞれ独立して、Ｈ及び分岐状、非分岐状、又は環状Ｃ_１−Ｃ_１２ヒドロカルビルから選択され、ｕは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０から選択される整数である。）を含む請求項１３に記載の化合物。

【請求項15】

一般式（１２．１）〜（１２．４）又は（１３．１）〜（１３．４）：

【化8】

【化9】

【化10】

（式中、Ｄ、スペーサー、リンカー、Ｘ、Ｒ^１〜Ｒ^５、ａ、ｂ、ｍ、ｎは、請求項３で定義した通りであり、ｄは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０から選択される整数であり、より好ましくは、
Ｄは、キレーターであり、好ましくは１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸（ＤＯＴＡ）、Ｎ，Ｎ”−ビス［２−ヒドロキシ−５−（カルボキシエチル）−ベンジル］エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ”−二酢酸（ＨＢＥＤ−ＣＣ）、１，４，７−トリアザシクロノナン−１，４，７−三酢酸（ＮＯＴＡ）、２−（４，７−ビス（カルボキシメチル）−１，４，７−トリアゾナン−１−イル）ペンタン二酸（ＮＯＤＡＧＡ）、２−（４，７，１０−トリス（カルボキシメチル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１−イル）−ペンタン二酸（ＤＯＴＡＧＡ）、１，４，７−トリアザシクロノナンホスフィン酸（ＴＲＡＰ）、１，４，７−トリアザシクロノナン−１−［メチル（２−カルボキシエチル）−ホスフィン酸］−４，７−ビス［メチル（２−ヒドロキシメチル）ホスフィン酸］（ＮＯＰＯ）、３，６，９，１５−テトラアザビシクロ［９，３，１．］ペンタデカ−１（１５），１１，１３−トリエン−３，６，９−三酢酸（ＰＣＴＡ）、Ｎ’−｛５−［アセチル（ヒドロキシ）アミノ］ペンチル｝−Ｎ−［５−（｛４−［（５−アミノペンチル）（ヒドロキシ）アミノ］−４−オキソブタノイル｝アミノ）ペンチル］−Ｎ−ヒドロキシスクシンアミド（ＤＦＯ）、及びジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）、又はそれらの誘導体から選択され、
Ｒ^１及びＲ^２は、それぞれ独立して、好ましくはＨ、ハロゲン、好ましくはヨウ素又は臭素、及びＣ_１−６アルキル、好ましくはＣ_１−３アルキル、更により好ましくはメチルから選択され、
リンカーは、上に定義される一般式（６）で特徴付けられ、より好ましくは、リンカーは、上に定義される一般式（６ａ）で特徴付けられ、
ａ、ｂ、ｄ、ｍ、ｎは、それぞれ独立して、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０から選択される整数であり、より好ましくは、ａ及びｂは、それぞれ独立して、０、１、２、３、４、５、又は６から選択される整数であり、ｂ、ｄ、及びｍは、それぞれ独立して、１、２、３、４、５、又は６から選択される整数である。）のいずれかで特徴付けられる請求項３から１４のいずれかに記載の化合物、又はその薬学的に許容される塩、エステル、溶媒和物、若しくは放射標識錯体。

【請求項16】

Ｑが、Ｃ_５−Ｃ_７シクロアルキルから選択される請求項１から１５のいずれかに記載の化合物。

【請求項17】

Ｑが、シクロヘキシルである請求項１６に記載の化合物。

【請求項18】

Ｗが、−（ＣＨ_２）_ｃ−ナフチル、−（ＣＨ_２）_ｃ−フェニル、−（ＣＨ_２）_ｃ−ビフェニル、−（ＣＨ_２）_ｃ−インドリル、−（ＣＨ_２）_ｃ−ベンゾチアゾリルから選択され、ｃは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０から選択される整数である請求項１から１７のいずれかに記載の化合物。

【請求項19】

Ｗが、−（ＣＨ_２）_ｃ−ナフチルである請求項１８に記載の化合物。

【請求項20】

前記リンカーが、一般式（６ａ）：

【化11】

で特徴付けられる請求項１から１９のいずれかに記載の化合物。

【請求項21】

一般式（１ｃ）：

【化12】

で特徴付けられる請求項２０に記載の化合物、又はその薬学的に許容される塩、エステル、溶媒和物、若しくは放射標識錯体。

【請求項22】

一般式（７ａ）：

【化13】

で特徴付けられる請求項２１に記載の化合物、又はその薬学的に許容される塩、エステル、溶媒和物、若しくは放射標識錯体。

【請求項23】

構造式（７ａ）（ｉ）、（７ａ）（ｉｉ）、又は（７ａ）（ｉｉｉ）：

【化14】

【化15】

又は（７ａ）（ｉ）、（７ａ）（ｉｉ）、又は（７ａ）（ｉｉｉ）の薬学的に許容される塩、エステル、溶媒和物、若しくは放射標識錯体で特徴付けられる請求項２２に記載の化合物。

【請求項24】

前記スペーサーが、少なくとも１つのアミノ酸残基を含む請求項１から２０のいずれかに記載の化合物。

【請求項25】

一般式（７ｂ）：

【化16】

（式中、
Ａは、アミノ酸残基であり、
Ｖは、単結合、Ｎ、又は最大３個のヘテロ原子を含む任意に置換されたＣ_１−Ｃ_１２ヒドロカルビルから選択され、前記ヘテロ原子は、好ましくはＮから選択され、
ｎは、１、２、３、４、又は５から選択される整数である。）
又はその薬学的に許容される塩、エステル、溶媒和物、若しくは放射標識錯体で特徴付けられる請求項２４に記載の化合物。

【請求項26】

前記アミノ酸残基が、（Ｄ−／Ｌ−）アスパラギン酸、グルタミン酸、又はリジンから選択される請求項２４から２５のいずれかに記載の化合物。

【請求項27】

前記スペーサーが、式（３ｂ）又は式（３ｃ）：

【化17】

（式中、ｍは、１又は２から選択される整数であり、ｎは、１、２、３、４、又は５、好ましくは１、２、又は３から選択される整数である。）；

【化18】

（式中、ｏは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０から選択される整数である。）で特徴付けられる請求項２６に記載の化合物。

【請求項28】

構造式（７ｂ）（ｉ）、（７ｂ）（ｉｉ）、又は（７ｂ）（ｉｉｉ）：

【化19】

【化20】

で特徴付けられる請求項２５から２７のいずれかに記載の化合物、又は（７ｂ）（ｉ）、（７ｂ）（ｉｉ）、又は（７ｂ）（ｉｉｉ）の薬学的に許容される塩、エステル、溶媒和物、若しくは放射標識錯体。

【請求項29】

放射標識錯体の調製のための、請求項１から２８のいずれかに記載の化合物の使用。

【請求項30】

放射性核種と、請求項１から２９のいずれかに記載の化合物とを含むことを特徴とする放射標識錯体。

【請求項31】

金属が、^９４Ｔｃ、^９９ｍＴｃ、^９０Ｉｎ、^１１１Ｉｎ、^６７Ｇａ、^６８Ｇａ、^８６Ｙ、^９０Ｙ、^１７７Ｌｕ、^１５１Ｔｂ、^１８６Ｒｅ、^１８８Ｒｅ、^６４Ｃｕ、^６７Ｃｕ、^５５Ｃｏ、^５７Ｃｏ、^４３Ｓｃ、^４４Ｓｃ、^４７Ｓｃ、^２２５Ａｃ、^２１３Ｂｉ、^２１２Ｂｉ、^２１２Ｐｂ、^２２７Ｔｈ、^１５３Ｓｍ、^１６６Ｈｏ、^１５２Ｇｄ、^１５３Ｇｄ、^１５７Ｇｄ、又は^１６６Ｄｙからなる群から選択される請求項３０に記載の放射標識錯体。

【請求項32】

請求項１から２８のいずれかに記載の化合物又は請求項２９から３０のいずれかに記載の放射標識錯体と、薬学的に許容される担体及び／又は賦形剤とを含むことを特徴とする医薬組成物。

【請求項33】

請求項１から２８のいずれかに記載の化合物又はその薬学的に許容される塩、エステル、溶媒和物、又は放射標識錯体、請求項３０から３１のいずれかに記載の放射標識錯体、又は請求項３２に記載の医薬組成物を含むことを特徴とするキット。

【請求項34】

医薬及び／又は診断薬における使用のための、請求項１から２８のいずれかに記載の化合物、請求項３０から３１のいずれかに記載の放射標識錯体、請求項３２に記載の医薬組成物、又は請求項３３に記載のキット。

【請求項35】

前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）を発現する細胞及び／又は組織の存在を検出する方法における使用のための、請求項１から２８のいずれかに記載の化合物、請求項３０から３１のいずれかに記載の放射標識錯体、請求項３２に記載の医薬組成物、又は請求項３３に記載のキット。

【請求項36】

前立腺癌、膵臓癌、腎癌、又は膀胱癌を診断、治療、及び／又は予防する方法における使用のための、請求項１から２８のいずれかに記載の化合物、請求項３０から３１のいずれかに記載の放射標識錯体、請求項３２ ２９に記載の医薬組成物、又は請求項３３に記載のキット。

【請求項37】

請求項３４から３６のいずれかに記載の使用のための化合物、放射標識錯体、医薬組成物、又はキットにおいて、前記使用が、
（ａ）前記化合物、放射標識錯体、又は医薬組成物を患者に投与することと、
（ｂ）前記患者から放射線画像を取得することとを含む化合物、放射標識錯体、医薬組成物、又はキット。

【請求項38】

前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）を発現する細胞及び／又は組織の存在を検出するｉｎ ｖｉｔｒｏ法であって、
（ａ）前記ＰＳＭＡ発現細胞及び／又は組織を、請求項１から３７のいずれかに記載の化合物、放射標識錯体、医薬組成物、又はキットと接触させることと、
（ｂ）検出手段、任意に放射線イメージングを適用し、前記細胞及び／又は組織を検出することとを含むことを特徴とするｉｎ ｖｉｔｒｏ法。

【請求項39】

請求項３４から３６のいずれかに記載の使用のための化合物、放射標識錯体、医薬組成物、若しくはキット、又は請求項３８に記載の方法において、放射線イメージングが、陽電子放出断層撮影（ＰＥＴ）又は単一光子放出コンピュータ断層撮影（ＳＰＥＣＴ）を含む化合物、放射標識錯体、医薬組成物、キット、又は方法。

【請求項40】

請求項３４から３６又は３９のいずれかに記載の使用のための化合物、放射標識錯体、若しくは医薬組成物、又は請求項３８に記載の方法において、前記１以上の細胞又は組織が、（任意に癌性の）前立腺細胞又は組織、（任意に癌性の）脾臓細胞又は組織、又は（任意に癌性の）腎臓細胞又は組織を含む化合物、放射標識錯体、若しくは医薬組成物、又は方法。

【請求項41】

請求項３４から３６又は３９のいずれかに記載の使用のための化合物、放射標識錯体、若しくは医薬組成物、又は請求項３８から４０のいずれかに記載の方法において、ＰＳＭＡ発現細胞又は組織の存在が、前立腺腫瘍（細胞）、転移した前立腺腫瘍（細胞）、腎腫瘍（細胞）、膵臓腫瘍（細胞）、膀胱腫瘍（細胞）、及びそれらの組合せの指標である化合物、放射標識錯体、若しくは医薬組成物、又は方法。

【請求項42】

構造式（１４）、（１５）、又は（１６）：

【化21】

のいずれかで特徴付けられることを特徴とする化合物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、診断用及び／又は治療用の放射性医薬としての使用が想定される、適切なリンカー及びスペーサーを介して結合されたキレーター、ＰＳＭＡ結合体、及びアルブミン結合体を含む新規化合物及び放射標識錯体（ｒａｄｉｏｌａｂｅｌｅｄ ｃｏｍｐｌｅｘｅｓ）に関する。具体的には、本発明の化合物及び錯体は、ＰＳＭＡ発現標的細胞及び組織を検出し、癌を治療及び診断するための（治療用）トレーサー、造影剤、及び治療剤として役立つ。

【0002】

前立腺癌（ＰＣａ）は、欧米人にとって主要な癌である。西半球の少なくとも１００〜２００万人の男性が前立腺癌に罹患し、５５〜８５歳までの男性の６人に１人がこの病気に罹患すると推定されている。米国癌協会によれば、米国では毎年約１６１，０００もの前立腺癌の新たな症例が診断されている。ステージＩＶの転移性前立腺癌患者の５年生存率は、僅か約２９％である。

【0003】

転移性ＰＣａがホルモン不応性になると、残された治療オプションはごく僅かであり、臨床的成功がやや劣る場合が多い。現在の医療ガイドラインによれば、通常、ドセタキセルによる有糸分裂阻害化学療法が推奨されている。しかし、治療はしばしば重篤な副作用を伴い、生存率は、ごく僅かに改善されるに留まる。したがって、潜在的な再発の早期診断と綿密なモニタリングが重要である。前立腺癌の診断は、前立腺からの組織病理学的又は細胞学的試料の検査に基づく。進行性又は再発性前立腺癌の治療モニタリングのための既存のイメージング技術としては、コンピュータ断層撮影（ＣＴ）、磁気共鳴（ＭＲ）イメージング、及び超音波が挙げられるが、疾患の効果的なモニタリングと管理には不十分な場合が多い。その結果、ＰＣａの早期診断と治療の両方のためのより効果的なツールに対する臨床的需要が高い。

【0004】

腫瘍細胞は、変異により改変された構造を示す独特なタンパク質を発現する可能性があること、又は、非悪性細胞で通常ごく少量産生される正常な（即ち、変異していない）タンパク質を過剰発現する可能性があることがよく知られている。腫瘍抗原は、その発現パターンに基づいて、２つのカテゴリーに大きく分類することができる。即ち、腫瘍細胞にのみ存在し、非悪性細胞には存在しない腫瘍特異的抗原（ＴＳＡ）と、一部の腫瘍細胞及び非悪性細胞にも存在する腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）に分類できる。ＴＳＡは、通常、プロトオンコジーンと腫瘍抑制因子の変異の結果として出現し、異常なタンパク質産生を引き起こし、一方、ＴＡＡ発現は、一般に、腫瘍形成に関係のない他の遺伝子の変異によって引き起こさる。

【0005】

腫瘍細胞の表面でのそのようなタンパク質の発現は、そのような腫瘍マーカーを検出することにより、疾患を診断及び特徴付ける機会を提供する。可視化可能なラベルを担持し且つそのような腫瘍マーカーを特異的に認識する低分子薬又はタンパク質性結合剤は、非侵襲的条件下で癌を診断及びイメージングするために通常使用される。

【0006】

有望な新たなシリーズの低分子量イメージング剤は、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）を標的とする。ＰＳＭＡは、葉酸ヒドロラーゼＩ（ＦＯＬＨ１）としても知られ、膜貫通型の７５０アミノ酸のＩＩ型糖タンパク質である。ＰＳＭＡ遺伝子は、１１番染色体の短腕に位置し、葉酸ヒドロラーゼとニューロペプチダーゼの両方として機能する。これは、「脳ＰＳＭＡ」と呼ばれるグルタミン酸カルボキシペプチダーゼＩＩ（ＧＣＰＩＩ）と等価なニューロペプチダーゼ機能を有し、Ｎ−アセチル−アスパルチル−グルタマート（ＮＡＡＧ）をＮ−アセチルアスパルタート（ＮＡＡ）とグルタミン酸に切断することにより、グルタミン酸作動性伝達を調節することができる（非特許文献１）。
ＤＦ

【0007】

ＰＳＭＡは、（ｉ）主に前立腺に限定される（ただし、膀胱、膵臓、肺、腎臓の癌など他の多くの固形腫瘍の新生血管系でも少量検出されるが、正常な血管系では検出されない）、（ｉｉ）前立腺癌の全てステージでタンパク質として大量に発現する（癌細胞当たり最大１０^６個のＰＳＭＡ分子で）、（ｉｉｉ）細胞表面に提示されるが循環には流入しない、及び（ｉｖ）酵素活性又はシグナル伝達活性に関連する。更に、ＰＳＭＡの発現は、低分化性且つアンドロゲン非感受性又は転移性の癌で更にアップレギュレートされ、その発現は、通常疾患の進行と相関する。

【0008】

ＰＳＭＡの特徴的な発現により、ＰＳＭＡは、前立腺癌（及び他の幾つかの癌においても）の重要なマーカーとなる。更に、ＰＳＭＡはイメージング剤の大きな細胞外標的となる。ＰＳＭＡはリガンド結合後に内在化されるので、（粒子放出放射性核種を使用する）標的放射性核種治療だけでなく、免疫毒素の腫瘍細胞特異的送達、免疫細胞の再標的化、プロドラッグの活性化、ＰＳＭＡワクチン、プラスミドＤＮＡ、及びアデノウイルス免疫感作などの他の治療戦略の優れた標的である。健常組織では発現レベルが低いので、ＰＳＭＡは、副作用が最小限に抑えられた高用量療法の可能性も有する。

【0009】

これまでに、治療用又は診断用の部分を運ぶ幾つかのＰＳＭＡ標的化剤が開発された。ＰＲＯＳＴＡＳＣＩＮＴ（登録商標）として知られる、ＦＤＡが承認した抗ＰＳＭＡモノクローナル抗体（ｍＡｂ）７Ｅ１１の放射性免疫コンジュゲートが、前立腺癌の転移と再発の診断に使用されている。この放射性医薬品の成功は、この抗体がＰＳＭＡの細胞内ドメインに結合する、したがって、死細胞のみを標的とすることができるという事実ために制限される。更に、モノクローナル抗体及び抗体断片のイメージング剤としての使用は、それらの緩慢な腎クリアランス、不均一な分布、低い腫瘍浸透性及び免疫原性の可能性のためにしばしば制限される。これらの問題を克服するために、ＰＳＭＡの細胞外ドメインに結合できる様々な低分子ＰＳＭＡ標的剤がＰＥＴ／ＣＴ及びＳＰＥＣＴ／ＣＴイメージング用に開発され、例えば、放射標識Ｎ−［Ｎ−［（Ｓ）−１，３ジカルボキシプロピル］カルバモイル］−Ｓ−［１１Ｃ］メチル−１−システイン（ＤＣＦＢＣ）及び幾つかのウレアベースのペプチド模倣ＰＳＭＡ阻害剤（非特許文献２）、例えば、ＭＩＰ−１０９５（非特許文献３）、現在臨床評価段階にあるＰＳＭＡリガンド、及びＢｅｎｅｓｏｖａらによって開発されたＤＯＴＡコンジュゲートＰＳＭＡ阻害剤ＰＳＭＡ−６１７（非特許文献４及び特許文献１）（これは、全身に分布し、血液から急速に排出される（非特許文献５）。しかし、迅速且つ全身的なアクセスが腫瘍の標的化及び浸透を有利に促進するものの、現在利用可能なＰＳＭＡ標的化剤は、標的を発現する正常組織における非特異的な「オフターゲット」相互作用を媒介するリスク、及び排泄器官（腎臓など）における放射性医薬の蓄積のリスクを伴う。それにより、非腫瘍組織は、最終的に不可逆的な組織損傷につながる放射線量に曝露される可能性がある。特にアルファ線放射性核種と組み合わせて使用すると、異なる放射標識低分子ＰＳＭＡ標的化剤（ＰＳＭＡ−６１７など）が患者の涙腺及び唾液腺に蓄積し、腺組織に損傷を引き起こす可能性があることが実証された（非特許文献６及び非特許文献７）。その問題に対する１つの可能な解決策は、ＰＳＭＡに対して高い親和性を有するＰＳＭＡ結合剤の使用を伴う（非特許文献８及び非特許文献９）。

【0010】

近年、Ｋｅｌｌｙら（非特許文献１０）は、ＰＳＭＡ及びヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）の両方に対して親和性を示す剤を評価した。Ｋｅｌｌｙらによって開発されたリガンドは、ＨＳＡ結合のためのｐ−（ヨードフェニル）酪酸物及びウレアベースのＰＳＭＡ結合体を含む。Ｋｅｌｌｙらによって開発された化合物では、放射線治療用ヨウ素（^１３１Ｉ）がＨＳＡ結合部分に共有結合し、これがヒドロカルビル鎖を介してＰＳＭＡ結合体に直接結合される。しかし、評価された化合物は、適用された放射性核種（ヨウ素に限定）に関してかなり限定されている。更に、評価された化合物について、標的細胞における内在化／取り込みの改善は示されなかった。

【0011】

別のアプローチが、Ｃｈｏｙら（非特許文献１１）によって行われ、Ｃｈｏｙらは、アルブミン結合体を有する^１７７Ｌｕ標識ホスホロアミデートベースのＰＳＭＡ阻害剤を評価した。^１７７Ｌｕ放射性核種と錯体を形成するＤＯＴＡキレーターを、不可逆的ＰＳＭＡ阻害剤ＣＴＴ１２９８（特許文献２）にエーテル結合させた。しかし、ホスホロアミデートベースＰＳＭＡ結合モチーフ（ｍｏｔｉｖｅ）は、特に高温で安定性が低い（高酸性条件下での高温は、ホスホロアミデートＰ−Ｎ結合の加水分解につながる）。高温は、ＤＯＴＡなどのキレーターを介した配位放射標識反応に必要である。したがって、直接放射標識反応を適用することができず、多段階のプレ標識化アプローチを使用する必要がある。そのため、前駆体としての^１７７Ｌｕ−ＤＯＴＡ−アジドを調製する必要があり、その後、前駆体をジベンゾシクロオクチン誘導体化ＰＳＭＡモチーフに結合させる必要がある。最後に、結合させた化合物の入念なＨＰＬＣ精製を行う必要があり、ＨＰＬＣ溶離液の蒸発（Ｎ_２雰囲気下）による再製剤化及び生理学的媒体への溶解を行う必要がある。この手続は、生成されている活性が高いときは、臨床用途では実施できない可能性がある。前臨床体内分布データによれば、特に１を大きく超えなかった腫瘍対腎臓比に関し、放射標識剤の性能が低いことを示す。

【0012】

長年に亘る進歩にもかかわらず、前立腺癌の診断と管理は依然として困難なままである。ＰＣａの早期発見と処置を可能にするために、ＰＣａ腫瘍細胞を高度に選択的に標的可能とし且つ迅速で非侵襲的な腫瘍の可視化と治療に有利な薬物動態特性を示すことができる新しい診断薬又はイメージング剤が必要とされている。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0013】

【特許文献1】ＥＰ ２８６２ ８５７ Ａ１

【特許文献2】ＥＰ ２９７０３４５ Ａ１

【非特許文献】

【0014】

【非特許文献1】Ｎａｎ，Ｆ．；ｅｔ ａｌ．Ｊ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ ２０００，４３，７７２−７７４

【非特許文献2】Ｂｏｕｃｈｅｌｏｕｃｈｅ ｅｔ ａｌ． Ｄｉｓｃｏｖ Ｍｅｄ． ２０１０ Ｊａｎ； ９（４４）：５５−６１

【非特許文献3】Ｈｉｌｌｉｅｒ ｅｔ ａｌ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ． ２００９ Ｓｅｐ １；６９（１７）：６９３２−４０

【非特許文献4】ＪＮＭ ２０１５， ５６：９１４−９２０

【非特許文献5】Ｊ Ｎｕｃｌ Ｍｅｄ． ２０１５；５６（１１）：１６９７−７０５

【非特許文献6】Ｚｅｃｈｍａｎｎ ｅｔ ａｌ． Ｅｕｒ Ｊ Ｎｕｃｌ Ｍｅｄ Ｍｏｌ Ｉｍａｇｉｎｇ． ２０１４；４１（７）：１２８０−９２

【非特許文献7】Ｋｒａｔｏｃｈｗｉｌ ｅｔ ａｌ． Ｊ Ｎｕｃｌ Ｍｅｄ． ２０１７ Ａｐｒ １３． ｐｉｉ： ｊｎｕｍｅｄ．１１７．１９１３９５． ｄｏｉ： １０．２９６７／ｊｎｕｍｅｄ．１１７．１９１３９５ ［Ｅｐｕｂ］

【非特許文献8】Ｋｒａｔｏｃｈｗｉｌ ｅｔ ａｌ． Ｊ Ｎｕｃｌ Ｍｅｄ． ２０１５； ２９３−２９８

【非特許文献9】Ｃｈａｔａｌｉｃ ｅｔ ａｌ． Ｔｈｅｒａｇｎｏｓｔｉｃｓ． ２０１６； ６： ８４９−８６１

【非特許文献10】Ｊ Ｎｕｃｌ Ｍｅｄ． ２０１７ ｐｉｉ： ｊｎｕｍｅｄ．１１６．１８８７２２． ｄｏｉ： １０．２９６７／ｊｎｕｍｅｄ．１１６．１８８７２２． ［Ｅｐｕｂ ａｈｅａｄ ｏｆ ｐｒｉｎｔ］

【非特許文献11】Ｃｈｏｙ ｅｔ ａｌ． Ｔｈｅｒａｎｏｓｔｉｃｓ ２０１７； ７（７）：１９２８−１９３９

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0015】

したがって、本発明の目的は、先行技術の欠点を克服し、当該技術分野における必要を満たすことである。

【0016】

この目的は、本明細書に開示される主題、より具体的には特許請求の範囲に示される主題によって解決される。

【0017】

概論
以下、本発明を詳細に説明するが、本発明は、本明細書に記載の特定の方法、プロトコル、及び試薬に、これらは変わる可能性があるので、限定されないことを理解されたい。また、本明細書で使用する用語は、添付の特許請求の範囲によってのみ限定される本発明の範囲を限定するものではないことを理解されたい。特段の断りがない限り、本明細書で使用される全ての技術用語及び科学用語は、当業者によって通常理解されるのと同じ意味を有する。

【0018】

以下に、本発明の要素について説明する。これら要素は、具体的な実施形態と共に列挙されるが、これらを任意の方式で任意の数組み合わせて更なる実施形態を生み出すことができることを理解すべきである。様々に記載される実施例及び好ましい実施形態は、本発明を明示的に記載される実施形態に限定することを意図するものではない。この記載は、明示的に記載された実施形態を任意の数の開示された及び／又は好ましい要素と組み合わせる実施形態をサポート及び包含すると理解すべきである。更に、特に指定しない限り、本願における全ての記載された要素の任意の入れ換え及び組合せが本願の記載によって開示されるとみなすべきである。

【0019】

本明細書及びその後に続く特許請求の範囲全体を通して、特に必要としない限り、用語「含む」並びに「含み」及び「含んでいる」等の変形は、指定されている部材、整数、又は工程を含むが、任意の他の指定されていない部材、整数、又は工程を除外するものではないことを意味すると理解される。用語「からなる」は、任意の他の指定されていない部材、整数、又は工程が除外される、用語「含む」の具体的な実施形態である。本発明において、用語「含む」は、用語「からなる」を包含する。したがって、用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」は、「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」及び「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ）」を包含し、例えば、Ｘを「含む」組成物は、Ｘのみからなっていてもよく、追加の何かを含んでいてもよい（例えば、Ｘ＋Ｙ）。

【0020】

用語「ａ」及び「ａｎ」及び「ｔｈｅ」、並びに本発明の説明（特に、特許請求の範囲）において使用される同様の参照は、本明細書に指定されているか又は文脈上明示的に否定されていない限り、単数及び複数の両方を網羅すると解釈すべきである。本明細書における値の範囲の列挙は、単に、範囲内の各別個の値を個別に参照する簡易的な方法として機能することを意図する。本明細書において特に指定しない限り、各個別の値は、本明細書に個々に列挙されているかのように明細書に組み込まれる。明細書中のいずれの言語も、本発明の実施に必須の任意の請求されていない要素を示すと解釈されるべきではない。

【0021】

用語「実質的に」は、「完全に」を除外するものではなく、例えば、Ｙを「実質的に含まない」組成物は、Ｙを完全に含んでいなくてもよい。必要な場合、用語「実質的に」は、本発明の定義から省略されることもある。

【0022】

数値ｘに関連する用語「約」は、ｘ±１０％を意味する。

【0023】

本発明では、特段の断りがない限り、代替物及び実施形態の各種特徴を互いに組み合わせてもよい。

【0024】

明確さ及び読み易さのために、以下の定義を提供する。これらの定義について言及された技術的特徴は、本発明の全ての実施形態について読むことができる。追加の定義及び説明は、これらの実施形態の文脈で具体的に提供され得る。

【0025】

定義
用語「ヒドロカルビル」は、炭化水素基の残基、即ち、炭化水素鎖基を意味し、好ましくは、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、及びアラルキルの群から独立して選択される。

【0026】

用語「アルキル」は、１〜３０個の炭素原子、好ましくは１〜２０個、１〜１５個、１〜１０個、１〜８個、１〜６個、１〜４個、１〜３個、又は１〜２個の炭素原子を有する線状（「直鎖」）、分岐状、及び環状鎖基を含む。例えば、用語「Ｃ_１−１２アルキル」は、その炭素鎖が直鎖又は分岐状又は環状であり、１〜１２個の炭素原子を含む炭化水素基を意味する。アルキル残基の具体例は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、オクチル、デシル、ウンデシル、ドデシル、トリデシル、テトラデシル、ペンタデシル、ヘキサデシル、ヘプタデシル、オクタデシル、ノナデシル、イコシル、ヘニコシル、ドコシル、トリコシル、テトラコシル、ペンタコシル、ヘキサコシル、ヘプタコシル、オクタコシル、ノナコシル、又はトリアコシルであり、それらの様々な分岐鎖及び／又は環状異性体、例えば、ｔｅｒｔ．−ブチル又はイソペンチルなどを含む。環状アルキル異性体は、本明細書では「シクロアルキル」とも呼ばれ、３個の環炭素原子を含む飽和脂環式炭化水素を意味する。「置換された」線状、分岐状、及び環状アルキル基も、一般にこの用語に含まれる。この用語は、炭素鎖の１以上のＣ原子がヘテロ原子（例えば、Ｎ、Ｏ、及びＳが挙げられるが、これらに限定されない）で置き換えられたアルキル基を意味する「ヘテロアルキル」を更に含む。したがって、この用語は、３個以上の環員を含む非芳香族環化合物であって、その１個以上の環炭素原子がヘテロ原子（例えば、Ｎ、Ｏ、及びＳが挙げられるが、これらに限定されない）で置き換えられたものを意味する「ヘテロシクリル」又は「ヘテロシクロアルキル」を更に含む。ヘテロシクリル基は、例えば、イミダゾリル、イミダゾリニル、及びイミダゾリジニル基などの不飽和、部分飽和、及び飽和環系を包含する。ヘテロシクリル基としては、限定するものではないが、アジリジニル、アゼチジニル、ピロリジニル、イミダゾリジニル、ピラゾリジニル、チアゾリジニル、テトラヒドロチオフェニル、テトラヒドロフラニル、ジオキソリル、フラニル、チオフェニル、ピロリル、ピロリニル、イミダゾリル、イミダゾリニル、ピラゾリル、ピラゾリニル、トリアゾリル、テトラゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリル、チアゾリニル、イソチアゾリル、チアジアゾリル、オキサジアゾリル、ピペリジル、ピペラジニル、モルホリニル、チオモルホリニル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロチオピラニル、オキサチアン、ジオキシル、ジチアニル、ピラニル、ピリジル、ピリミジニル、ピリダジニル、ピラジニル、トリアジニル、ジヒドロピリジル、ジヒドロジチイニル（ｄｉｈｙｄｒｏｄｉｔｈｉｉｎｙｌ）、ジヒドロジチオニル（ｄｉｈｙｄｒｏｄｉｔｈｉｏｎｙｌ）、ホモピペラジニル、キヌクリジル、インドリル、インドリニル、イソインドリル、アザインドリル（ピロロピリジル）、インダゾリル、インドリジニル、ベンゾトリアゾリル、ベンズイミダゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾチオフェニル、ベンゾチアゾリル、ベンゾオキサジアゾリル、ベンゾオキサジニル、ベンゾジチイニル（ｂｅｎｚｏｄｉｔｈｉｉｎｙｌ）、ベンゾキサチイニル（ｂｅｎｚｏｘａｔｈｉｉｎｙｌ）、ベンゾチアジニル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾチアジアゾリル、ベンゾ［１，３］ジオキソリル、ピラゾロピリジル、イミダゾピリジル（アザベンズイミダゾリル）、トリアゾロピリジル、イソオキサゾロピリジル、プリニル、キサンチニル、アデニニル、グアニニル、キノリニル、イソキノリニル、キノリジニル、キノキサリニル、キナゾリニル、シンノリニル、フタラジニル、ナフチリジニル、プテリジニル、チアナフタレニル、ジヒドロベンゾチアジニル、ジヒドロベンゾフラニル、ジヒドロインドリル、ジヒドロベンゾジオキシニル、テトラヒドロインドリル、テトラヒドロイミダゾリル、テトラヒドロベンズイミダゾリル、テトラヒドロベンゾトリアゾリル、テトラヒドロピロロピリジル、テトラヒドロピラゾロピリジル、テトラヒドロイミダゾピリジル、テトラヒドロトリアゾロピリジル、及びテトラヒドロキノリニル基が挙げられる。ヘテロシクリル基は、置換又は非置換のいずれであってもよい。代表的な置換ヘテロシクリル基は、一置換又は複数置換されていてもよく、例えば、限定するものではないが、２−、３−、４−、５−、又は６−置換された、又は上に列挙した置換基などの様々な置換基で二置換されたピリジル又はモルホリニル基などが挙げられる。

【0027】

用語「環状」は、複数の環構造を有する構造を意味する用語「多環式」を含む。特に、用語「環状」は、２つ以上の環が１つの原子を共有するスピロ環構造、及び２つ以上の環が少なくとも２つの原子を共有する５縮合多環構造（５ ｆｕｓｅｄ ｐｏｌｙｃｙｃｌｉｃ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ）も意味する。

【0028】

本明細書で使用される用語「アルケニル」は、２〜３０個の炭素原子、好ましくは２〜２０個、２〜１５個、２〜１０個、２〜８個、２〜６個、２〜４個、又は２〜３個の炭素原子を有する、少なくとも１つの炭素−炭素二重結合を含む線状、分岐状、及び環状鎖１０基を含む。「アルケニル」基の具体例は、アルキル基に関して例示したものの各種アルケン性不飽和等価物であり、炭素−炭素二重結合の数及び位置に応じて、当業者に知られた慣習により命名される（例えば、ブタンジイリデン、１−プロパニル−３−イリデンなど）。「アルケニル」基は、好ましくは少なくとも１個、より好ましくは少なくとも２、３、４、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、又は１６個の二重結合を含み、二重結合は、ヒドロカルビル鎖の位置１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、又は２９に位置することが好ましい。アルケニル基は、置換又は非置換のいずれであってもよい。

【0029】

本明細書で使用される用語「アルキニル」は、２〜３０個の炭素原子、好ましくは２〜２０個、２〜１５個、２〜１０個、２〜８個、２〜６個、２〜４個、又は２〜３個の炭素原子を有する、少なくとも１つの炭素−炭素三重結合を含む直鎖、分岐状、及び環状鎖基を含む。「アルキニル」基の具体例は、アルキル及びアルケニル基に関して例示したものの各種アルキン性不飽和等価物であり、炭素−炭素三重結合の数及び位置に応じて、当業者に知られた慣習により命名される。「アルキニル」基は、好ましくは少なくとも１個、より好ましくは少なくとも２、３、４、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、又は１６個の三重結合を含み、二重三重結合は、ヒドロカルビル鎖の位置１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１２、１３、１４、１５、１６、１７、３０ １８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、又は２９に位置することが好ましい。アルキニル基は、置換又は非置換のいずれであってもよい。

【0030】

用語「アリール」は、単環式若しくは多環式又は縮合多環式芳香族環系を意味する。この用語は、環系の少なくとも１つの炭素原子がヘテロ原子で置換された単環式若しくは多環式又は縮合多環式芳香族「ヘテロアリール」環系を含む。通常、用語「アリール」及び「ヘテロアリール」は、３〜３０個の炭素原子、例えば、３〜１０個、特に２〜６個の炭素原子を有する基を意味する。

【0031】

用語「アリールアルキル」又は「アラルキル」は、本明細書中で相互変換可能に使用され、本明細書で定義される少なくとも１つのアルキル基及び少なくとも１つのアリール基を含む基を意味する。本明細書で定義されるアラルキル基では、アラルキル基は、ベンジル基で例示されるアルキル基を介して、本発明の化合物又はコンジュゲートの別の部分に結合される。

【0032】

本明細書に使用される用語「ハロゲン」又は「ハロ」は、フルオロ（Ｆ）、クロロ（Ｃｌ）、ブロモ（Ｂｒ）、ヨード（Ｉ）を含む。

【0033】

用語「ヘテロ原子」は、Ｎ、Ｏ、Ｓ、及びＰ、好ましくはＮ及びＯを含む。

【0034】

用語「置換された」は、本明細書に定義されるヒドロカルビル基（例えば、アルキル又はアルケニル基）であって、そこに含まれる水素原子に対する１以上の結合が非水素又は非炭素原子に対する結合で置き換えられたものを意味する。置換された基は、炭素又は水素原子に対する１以上の結合が、ヘテロ原子に対する１以上の結合（二重結合又は三重結合を含む）で置き換えられた基も含む。したがって、「置換された」基は、特段の断りがない限り、１以上の置換基で置換される。幾つかの実施形態では、置換された基は、１、２、３、４、５、又は６個の置換基で置換されている。置換基の例としては、ハロゲン（即ち、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、及びＩ）；ヒドロキシル；アルコキシ、アルケノキシ、アルキノキシ、アリールオキシ、アラルキルオキシ、ヘテロシクリルオキシ、及びヘテロシクリルアルコキシ基；カルボニル（オキソ）；カルボキシル；エステル；ウレタン；オキシム；ヒドロキシルアミン；アルコキシアミン；アラルコキシアミン；チオール；硫化物；スルホキシド；スルホン；スルホニル；スルホンアミド；アミン；Ｎ−オキシド；ヒドラジン；ヒドラジド；ヒドラゾン；アジド；アミド；ウレア；アミジン；グアニジン；エナミン；イミド；イソシアネナート；イソチオシアナート；シアナート；チオシアナート；イミン；ニトロ基；ニトリル（即ち、ＣＮ）、ハロアルキル、アミノアルキル、ヒドロキシアルキル、シクロアルキルなどが挙げられる。

【0035】

コンジュゲート
本発明は、改善された腫瘍標的特性及び好ましい薬物動態プロファイルを有する新規な血漿タンパク質結合ＰＳＭＡリガンドを提供する。本明細書で使用するとき、用語「薬物動態」は、好ましくは、被験体における治療薬又は診断薬の安定性、バイオアベイラビリティ、吸収、体内分布、生物学的半減期、及び／又はクリアランスを含む。本発明者らは、一方で治療／診断放射性核種と、他方でヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）結合体と複合化することができるキレーターに、ＰＳＭＡペプチド模倣ウレアベース結合体を、適切なスペーサー及びリンカーを介して共有結合させることにより、新規コンジュゲートを提供した。結合体とキレーターとを結合するスペーサー及びリンカー基は、得られるコンジュゲートの標的及びと薬物動態特性に重要であることが分かった。新規コンジュゲートは、優れた特異的な細胞取り込み及び内在化特性を示すことが好ましい。本発明者らは、ＨＳＡ結合体が、（１）血中のコンジュゲートの区画化（ｃｏｍｐａｒｔｍｅｎｔａｌｉｚａｔｉｏｎ）（腫瘍血管系へのアクセスを損なうことなしに、健常組織でのオフターゲット効果が制限される）、（２）血液クリアランスの延長、及び（３）腫瘍の取り込みと保持の増大（腫瘍床を通過する回数を増やすことによる）を有利にもたらしたことを示した。ＨＳＡ結合体の導入により、本発明の化合物の体内分布、及び最終的には治療効果が有利に改善される。

【0036】

特に、本明細書で提供されるコンジュゲートは、有利なことに、当技術分野で知られた他のＰＳＭＡリガンドと比較して腫瘍取り込みの増加を示す。コンジュゲートの好ましい腫瘍取り込み特性により、特に、治療効果又はイメージング（診断）を可能にする十分な取り込みのための望ましい用量を達成するための被投与活性を低下させることができる。そのため、コンジュゲートは、通常、治療用及び／又は診断用放射性核種（多くの場合、金属同位体）と錯体化するキレーターを有する放射標識錯体の形態で提供される。新規コンジュゲート（及び特にそれらの放射標識（金属）錯体）の必要量の低下は、特に以下の利点を有する：（１）必要な放射性核種（放射能）がより少量で済む（製造コストがより低くなり、利用性がより良好となり（これらはいずれも、製造困難で高コストの^２２５Ａｃなどのアルファ放射体の場合に特に重要である）、好ましくは、一般に放射標識錯体の分解（即ち、放射線分解）をもたらす自己照射の減少により、貯蔵寿命がより長くなる）；（２）患者が受ける総吸収照射線量がより低くなる（好ましくは、通院治療が可能となり、環境負荷がより低くなる）。

【0037】

したがって、本発明のコンジュゲートは、核イメージング及び放射線治療の両方にとって最適な特性を備えた有望な治療診断剤である。

【0038】

一般に、本発明に係る新規ＰＳＭＡリガンド（本明細書では「コンジュゲート」又は「化合物」とも呼ばれる）は、適切なリンカー又はスペーサーを介して互いに共有結合（ｃｏｖａｌｅｎｔｌｙ ｃｏｎｎｅｃｔｅｄ ｏｒ ｌｉｎｋｅｄ）された第１末端基（キレーター）、第２末端基（アルブミン結合体）、及び第３末端基（ＰＳＭＡ結合体）を含む。

【0039】

第１の態様では、本発明は、一般式（１）：

【化1】

（式中、
Ｄは、キレーターであり、好ましくは本明細書に定義され、
Ａｂｍは、アルブミン結合体であり、好ましくは本明細書に定義され、
Ｐｂｍは、ＰＳＭＡ結合体であり、好ましくは本明細書に定義され、
スペーサーは、少なくとも１つのＣ−Ｎ結合を含み、
リンカーは、本明細書に定義される一般式（６）で特徴付けられ、
ａは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０から選択される整数であり、
一般式（１）の−ＣＨ−基は、ＰＳＭＡ結合体（Ｐｂｍ）とアルブミン結合体（Ａｂｍ）を接続する「分岐点」である。）
の化合物、又はその薬学的に許容される塩、エステル、溶媒和物、若しくは放射標識錯体に関する。

【0040】

Ｄ、Ａｂｍ、Ｐｂｍ、リンカー、及びスペーサーは、好ましくは、本明細書に記載されるように定義される。

【0041】

具体的には、本発明は、一般式（１）（ｉ）又は（１）（ｉｉ）：

【化2】

（式中、
Ａｂｍは、アルブミン結合体であり、好ましくは本明細書に定義され、
Ｐｂｍは、ＰＳＭＡ結合体であり、好ましくは本明細書に定義され、
Ｄは、キレーターであり、好ましくは１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸（ＤＯＴＡ）、Ｎ，Ｎ”−ビス［２−ヒドロキシ−５−（カルボキシエチル）−ベンジル］エチレンジアミン−Ｎ、Ｎ”−二酢酸（ＨＢＥＤ−ＣＣ）、１，４，７−トリアザシクロノナン−１，４，７−三酢酸（ＮＯＴＡ）、２−（４，７−ビス（カルボキシメチル）−１，４，７−トリアゾナン−１−イル）ペンタン二酸（ＮＯＤＡＧＡ）、２−（４，７，１０−トリス（カルボキシメチル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１−イル）−ペンタン二酸（ＤＯＴＡＧＡ）、１，４，７−トリアザシクロノナンホスフィン酸（ＴＲＡＰ）、１，４，７−トリアザシクロノナン−１−［メチル（２−カルボキシエチル）−ホスフィン酸］−４，７−ビス［メチル（２−ヒドロキシメチル）ホスフィン酸］（ＮＯＰＯ）、３，６，９，１５−テトラアザビシクロ［９，３，１］ペンタデカ−１（１５），１１，１３−トリエン−３，６，９−三酢酸（ＰＣＴＡ）、Ｎ’−｛５−［アセチル（ヒドロキシ）アミノ］ペンチル｝−Ｎ−［５−（｛４−［（５−アミノペンチル）（ヒドロキシ）アミノ］−４−オキソブタノイル｝アミノ）ペンチル］−Ｎ−ヒドロキシスクシンアミド（ＤＦＯ）、及びジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）、又はそれらの誘導体から選択され、
Ｘは、それぞれ独立して、Ｏ、Ｎ、Ｓ、又はＰから選択され、
Ｒ^１及びＲ^２は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、分岐状、非分岐状、又は環状のＣ_１−Ｃ_１２ヒドロカルビル、Ｃ_２−Ｃ_１２アルケニル、Ｃ_２−Ｃ_１２アルキニル、ＯＲ^６、ＯＣＯＲ^６、ＣＨＯ、ＣＯＲ^６、ＣＨ_２ＯＲ^６、ＮＲ^６Ｒ^７、ＣＯＮＲ^６Ｒ^７、ＣＯＯＲ^６、ＣＨ_２ＮＲ^６Ｒ^７、ＳＲ^６、＝Ｏ、＝Ｓ、又は＝ＮＨから選択される、又はＲ^１とＲ^２が結合して、分岐状、非分岐状、又は環状のＣ_１−Ｃ_１０ヒドロカルビル基を含む環状構造を形成し、前記ヒドロカルビル基は、最大２個のヘテロ原子が介在していてもよく、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＲ^６、ＯＣＯＲ^６、ＣＯＯＲ^６、ＣＨＯ、ＣＯＲ^６、ＣＨ_２ＯＲ^６、ＮＲ^６Ｒ^７、ＣＨ_２ＮＲ^６Ｒ^７、及びＳＲ^７、＝Ｏ、＝Ｓ、及び＝ＮＨから独立して選択される最大３個の基で置換されていてもよく、
Ｙは、単結合、又は線状、分岐状、又は環状の任意に置換された、最大２個のヘテロ原子が介在していてもよいＣ_１−Ｃ_１２アルキル、ＯＲ^６、ＯＣＯＲ^６、ＣＨＯ、ＣＯＲ^６、ＣＨ_２ＯＲ^６、ＮＲ^６Ｒ^７、ＣＯＯＲ^６、ＣＨ_２ＮＲ^６Ｒ^７、ＳＲ^６、＝Ｏ、＝Ｓ、又は＝ＮＨから選択され、非隣接ＣＨ_２基の１以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ^６−、−ＮＲ^６−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ^６−、−ＮＲ^６−ＣＯＯ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ^６−、−ＮＲ^６−ＣＯ−ＮＲ^６−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｏ−ＣＯ−Ｏ−、ＳＲ^６−、ＳＯ_３Ｒ^６−で置き換えられていてもよく、
Ｒ^６及びＲ^７は、それぞれ独立して、Ｈ又は分岐状、非分岐状、又は環状のＣ_１−１２ヒドロカルビルから選択され、
Ｒ^３、Ｒ^４、及びＲ^５は、それぞれ独立して、−ＣＯＨ、−ＣＯ_２Ｈ、−ＳＯ_２Ｈ、−ＳＯ_３Ｈ、−ＳＯ_４Ｈ、−ＰＯ_２Ｈ、−ＰＯ_３Ｈ、−ＰＯ_４Ｈ_２、−Ｃ（Ｏ）−（Ｃ_１−Ｃ_１０）アルキル、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ（Ｃ_１−Ｃ_１０）アルキル、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨＲ^８、又は−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ^８Ｒ^９から選択され、Ｒ^８及びＲ^９は、それぞれ独立して、Ｈ、結合、（Ｃ_１−Ｃ_１０）アルキレン、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｃ（Ｏ）、Ｃ（Ｓ）、−Ｃ（Ｓ）−ＮＨ−ベンジル−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ベンジル、−Ｃ（Ｏ）−（Ｃ_１−Ｃ_１０）アルキレン、−（ＣＨ_２）_ｐ−ＮＨ、−（ＣＨ_２）_ｐ−（Ｃ_１−Ｃ_１０）アルキレン、−（ＣＨ_２）_ｐ−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ_２）_ｑ、−（ＣＨ_ｒＣＨ_２）_ｔ−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ_２）_ｐ、−（ＣＨ_２）_ｐ−ＣＯ−ＣＯＨ、−（ＣＨ_２）_ｐ−ＣＯ−ＣＯ_２Ｈ、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−Ｃ［（ＣＨ_２）_ｑ−ＣＯＨ］_３、−Ｃ［（ＣＨ_２）_ｐ−ＣＯＨ］_３、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−Ｃ［（ＣＨ_２）_ｑ−ＣＯ_２Ｈ］_３、−Ｃ［（ＣＨ_２）_ｐ−ＣＯ_２Ｈ］_３、又は−（ＣＨ_２）_ｐ−（Ｃ_５−Ｃ_１４）ヘテロアリールから選択され、
スペーサーは、少なくとも１つのＣ−Ｎ結合を含み、
リンカーは、本明細書で定義される一般式（６）で特徴付けられ、
ａ、ｂ、ｐ、ｑ、ｒ、ｔは、それぞれ独立して、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０から選択される整数である。）
で表される化合物、又はその薬学的に許容される塩、エステル、溶媒和物、若しくは放射標識錯体を提供する。

【0042】

以下の式（１）において強調されている構造は、少なくとも１つのペプチド結合を含むことが特に想定される。

【化3】

【0043】

本発明のコンジュゲートは、ＰＳＭＡ及びＨＳＡの両方に対する親和性を示すリガンドである。本明細書で使用される用語「リガンド」は、標的（ここではＰＳＭＡ又はＨＳＡ）と相互作用（標的化、結合）することができる化合物を意味する。本発明のコンジュゲートはまた、「ＰＳＭＡ標的化剤」として機能的に定義され得る。好ましくは、「リガンド」は、それらの標的に選択的に結合することができる。用語「選択的に結合する」は、化合物が、その意図された標的に、別の非標的体に結合するよりも、高い親和性で結合することを意味する。

【0044】

「結合親和性」は、リガンド（例えば、有機低分子、タンパク質、又は核酸）とその標的／結合パートナーとの間の結合相互作用の強度である。結合親和性は、通常、平衡解離定数（Ｋ_Ｄ）、「オフレート」（ｋＯ_ｆｆ）及び「オンレート」（ｋＯ_ｎ）の比で測定及び報告され、これは、生体分子相互作用の次元強度を評価及びランク付けするために使用される。「オンレート」（ＫＯ_ｎ）は、リガンドがその標的に結合する速さを特徴付け、「オフレート」（ＫＯ_ｆｆ）は、リガンドがその標的から解離する速さを特徴付ける。Ｋ_Ｄ（ＫＯ_ｆｆ／ＫＯ_ｎ）と結合親和性は反比例する。したがって、用語「選択的に結合する」は、好ましくは、リガンドが、その意図された標的に、別の非標的体に対する結合のＫ_Ｄよりも低いＫ_Ｄで結合することを意味する。ＥＬＩＳＡ、ゲルシフトアッセイ、プルダウンアッセイ、平衡透析、分析的超遠心分離、表面プラズモン共鳴、分光分析など、結合親和性と解離定数を測定する多くの方法がある。

【0045】

本発明の文脈において、ＰＳＭＡ結合体（ＨＳＡ結合体）の非標的体に対する結合のＫ_Ｄは、ヒトＰＳＭＡ（ＨＳＡ）に対する前記コンジュゲート又は部分の結合のＫ_Ｄの少なくとも１．５倍、好ましくは少なくとも２、３、５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、６０、７０、８０、９０、１００、２００、３００、４００、５００、７５０、又は１０００倍であり得る。

【0046】

本発明の文脈において、コンジュゲートは、ナノモル（ｎＭ）範囲のＫ_Ｄ値の高結合親和性でＰＳＭＡに結合し、且つマイクロモル範囲（μＭ（マイクロモル））の中程度の親和性でＨＳＡに結合することが更に好ましい場合がある。

【0047】

具体的には、ＰＳＭＡとＨＳＡの結合親和性のバランスを取り、腫瘍の取り込みと保持を上昇させ、血液クリアランスを延長すると同時に、潜在的に有害なオフターゲット効果を低減することが好ましい場合がある。特に、本発明のコンジュゲートは、ＨＳＡに対するよりもＰＳＭＡに対してより高い結合親和性を示し得る。

【0048】

特に、本発明は、一般式（１）（ｉ）：

【化4】

（式中、
Ａｂｍは、アルブミン結合体であり、
Ｄは、キレーターであり、好ましくは１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸（ＤＯＴＡ）、Ｎ，Ｎ”−ビス［２−ヒドロキシ−５−（カルボキシエチル）−ベンジル］エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ”−二酢酸（ＨＢＥＤ−ＣＣ）、１，４，７−トリアザシクロノナン−１，４，７−三酢酸（ＮＯＴＡ）、２−（４，７−ビス（カルボキシメチル）−１，４，７−トリアゾナン−１−イル）ペンタン二酸（ＮＯＤＡＧＡ）、２−（４，７，１０−トリス（カルボキシメチル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１−イル）−ペンタン二酸（ＤＯＴＡＧＡ）、１，４，７−トリアザシクロノナンホスフィン酸（ＴＲＡＰ）、１，４，７−トリアザシクロノナン−１−［メチル（２−カルボキシエチル）−ホスフィン酸］−４，７−ビス［メチル（２−ヒドロキシメチル）ホスフィン酸］（ＮＯＰＯ）、３，６，９，１５−テトラアザビシクロ［９，３，１．］ペンタデカ−１（１５），１１，１３−トリエン−３，６，９−三酢酸（ＰＣＴＡ）、Ｎ’−｛５−［アセチル（ヒドロキシ）アミノ］ペンチル｝−Ｎ−［５−（｛４−［（５−アミノペンチル）（ヒドロキシ）アミノ］−４−オキソブタノイル｝アミノ）ペンチル］−Ｎ−ヒドロキシスクシンアミド（ＤＦＯ）、及びジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）、又はそれらの誘導体から選択され、
Ｘは、Ｏ、Ｎ、Ｓ、又はＰから選択され、
Ｒ^３、Ｒ^４、及びＲ^５は、それぞれ独立して、−ＣＯＨ、−ＣＯ_２Ｈ、−ＳＯ_２Ｈ、−ＳＯ_３Ｈ、−ＳＯ_４Ｈ、−ＰＯ_２Ｈ、−ＰＯ_３Ｈ、−ＰＯ_４Ｈ_２、−Ｃ（Ｏ）−（Ｃ_１−Ｃ_１０）アルキル、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ（Ｃ_１−Ｃ_１０）アルキル、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨＲ^８、又は−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ^８Ｒ^９から選択され、Ｒ^８及びＲ^９は、それぞれ独立して、Ｈ、結合、（Ｃ_１−Ｃ_１０）アルキレン、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｃ（Ｏ）、Ｃ（Ｓ）、−Ｃ（Ｓ）−ＮＨ−ベンジル−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ベンジル、−Ｃ（Ｏ）−（Ｃ_１−Ｃ_１０）アルキレン、−（ＣＨ_２）_ｐ−ＮＨ、−（ＣＨ_２）_ｐ−（Ｃ_１−Ｃ_１０）アルキレン、−（ＣＨ_２）_ｐ−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ_２）_ｑ、−（ＣＨ_ｒＣＨ_２）_ｔ−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ_２）_ｐ、−（ＣＨ_２）_ｐ−ＣＯ−ＣＯＨ、−（ＣＨ_２）_ｐ−ＣＯ−ＣＯ_２Ｈ、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−Ｃ［（ＣＨ_２）_ｑ−ＣＯＨ］_３、−Ｃ［（ＣＨ_２）_ｐ−ＣＯＨ］_３、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−Ｃ［（ＣＨ_２）_ｑ−ＣＯ_２Ｈ］_３、−Ｃ［（ＣＨ_２）_ｐ−ＣＯ_２Ｈ］_３、又は−（ＣＨ_２）_ｐ−（Ｃ_５−Ｃ_１４）ヘテロアリールから選択され、
スペーサーは、少なくとも１つのＣ−Ｎ結合を含み、
リンカーは、本明細書で定義される一般式（６）で特徴付けられ、
ａ、ｂ、ｐ、ｑ、ｒ、ｔは、それぞれ独立して、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０から選択される整数である。）
で表される化合物、又はその薬学的に許容される塩、エステル、溶媒和物、若しくは放射標識錯体を提供する。

【0049】

より具体的には、本発明は、一般式（１１）：

【化5】

（式中、
Ｄは、キレーターであり、好ましくは１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸（ＤＯＴＡ）、Ｎ，Ｎ”−ビス［２−ヒドロキシ−５−（カルボキシエチル）−ベンジル］エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ”−二酢酸（ＨＢＥＤ−ＣＣ）、１，４，７−トリアザシクロノナン−１，４，７−三酢酸（ＮＯＴＡ）、２−（４，７−ビス（カルボキシメチル）−１，４，７−トリアゾナン−１−イル）ペンタン二酸（ＮＯＤＡＧＡ）、２−（４，７，１０−トリス（カルボキシメチル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１−イル）−ペンタン二酸（ＤＯＴＡＧＡ）、１，４，７−トリアザシクロノナンホスフィン酸（ＴＲＡＰ）、１，４，７−トリアザシクロノナン−１−［メチル（２−カルボキシエチル）−ホスフィン酸］−４，７−ビス［メチル（２−ヒドロキシメチル）ホスフィン酸］（ＮＯＰＯ）、３，６，９，１５−テトラアザビシクロ［９，３，１．］ペンタデカ−１（１５），１１，１３−トリエン−３，６，９−三酢酸（ＰＣＴＡ）、Ｎ’−｛５−［アセチル（ヒドロキシ）アミノ］ペンチル｝−Ｎ−［５−（｛４−［（５−アミノペンチル）（ヒドロキシ）アミノ］−４−オキソブタノイル｝アミノ）ペンチル］−Ｎ−ヒドロキシスクシンアミド（ＤＦＯ）、及びジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）、又はそれらの誘導体から選択され、
Ｘは、それぞれ独立して、Ｏ、Ｎ、Ｓ、又はＰから選択され、
Ｒ^１及びＲ^２は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、分岐状、非分岐状、又は環状の任意に置換されたＣ_１−Ｃ_１２ヒドロカルビル、Ｃ_２−Ｃ_１２アルケニル、Ｃ_２−Ｃ_１２アルキニル、ＯＲ^６、ＯＣＯＲ^６、ＣＨＯ、ＣＯＲ^６、ＣＨ_２ＯＲ^６、ＮＲ^６Ｒ^７、ＣＯＮＲ^６Ｒ^７、ＣＯＯＲ^６、ＣＨ_２ＮＲ^６Ｒ^７、ＳＲ^６、＝Ｏ、＝Ｓ、又は＝ＮＨから選択される、又はＲ^１とＲ^２が結合して、分岐状、非分岐状、又は環状のＣ_１−Ｃ_１０ヒドロカルビル基を含む環状構造を形成し、前記ヒドロカルビル基は、最大２個のヘテロ原子が介在していてもよく、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＲ^６、ＯＣＯＲ^６、ＣＯＯＲ^６、ＣＨＯ、ＣＯＲ^６、ＣＨ_２ＯＲ^６、ＮＲ^６Ｒ^７、ＣＨ_２ＮＲ^６Ｒ^７、及びＳＲ^７、＝Ｏ、＝Ｓ、及び＝ＮＨから独立して選択される最大３個の基で置換されていてもよく、
Ｙは、単結合、又は線状、分岐状、又は環状の任意に置換された、最大２個のヘテロ原子が介在していてもよいＣ_１−Ｃ_１２アルキル、ＯＲ^６、ＯＣＯＲ^６、ＣＨＯ、ＣＯＲ^６、ＣＨ_２ＯＲ^６、ＮＲ^６Ｒ^７、ＣＯＯＲ^６、ＣＨ_２ＮＲ^６Ｒ^７、ＳＲ^６、＝Ｏ、＝Ｓ、又は＝ＮＨから選択され、非隣接ＣＨ_２基の１以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ^６−、−ＮＲ^６−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ^６−、−ＮＲ^６−ＣＯＯ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ^６−、−ＮＲ^６−ＣＯ−ＮＲ^６−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｏ−ＣＯ−Ｏ−、ＳＲ^６−、ＳＯ_３Ｒ^６−で置き換えられていてもよく、
Ｒ^６及びＲ^７は、それぞれ独立して、Ｈ又は分岐状、非分岐状、又は環状のＣ_１−１２ヒドロカルビルから選択され、
Ｒ^３、Ｒ^４、及びＲ^５は、それぞれ独立して、−ＣＯＨ、−ＣＯ_２Ｈ、−ＳＯ_２Ｈ、−ＳＯ_３Ｈ、−ＳＯ_４Ｈ、−ＰＯ_２Ｈ、−ＰＯ_３Ｈ、−ＰＯ_４Ｈ_２、−Ｃ（Ｏ）−（Ｃ_１−Ｃ_１０）アルキル、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ（Ｃ_１−Ｃ_１０）アルキル、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨＲ^８、又は−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ^８Ｒ^９から選択され、Ｒ^８及びＲ^９は、それぞれ独立して、Ｈ、結合、（Ｃ_１−Ｃ_１０）アルキレン、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｃ（Ｏ）、Ｃ（Ｓ）、−Ｃ（Ｓ）−ＮＨ−ベンジル−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ベンジル、−Ｃ（Ｏ）−（Ｃ_１−Ｃ_１０）アルキレン、−（ＣＨ_２）_ｐ−ＮＨ、−（ＣＨ_２）_ｐ−（Ｃ_１−Ｃ_１０）アルキレン、−（ＣＨ_２）_ｐ−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ_２）_ｑ、−（ＣＨ_ｒＣＨ_２）_ｔ−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ_２）_ｐ、−（ＣＨ_２）_ｐ−ＣＯ−ＣＯＨ、−（ＣＨ_２）_ｐ−ＣＯ−ＣＯ_２Ｈ、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−Ｃ［（ＣＨ_２）_ｑ−ＣＯＨ］_３、−Ｃ［（ＣＨ_２）_ｐ−ＣＯＨ］_３、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−Ｃ［（ＣＨ_２）_ｑ−ＣＯ_２Ｈ］_３、−Ｃ［（ＣＨ_２）_ｐ−ＣＯ_２Ｈ］_３、又は−（ＣＨ_２）_ｐ−（Ｃ_５−Ｃ_１４）ヘテロアリールから選択され、
スペーサーは、少なくとも１つのＣ−Ｎ結合を含み、
リンカーは、一般式（６）：

【化6】

（式中、
Ｘは、それぞれ独立して、Ｏ、Ｎ、Ｓ、又はＰから選択され、
Ｑは、置換又は非置換のアルキル、アルキルアリール、及びシクロアルキルから選択され、好ましくは置換又は非置換のＣ_５−Ｃ_１４アリール、Ｃ_５−Ｃ_１４アルキルアリール、又はＣ_５−Ｃ_１４シクロアルキルから選択され、
Ｗは、−（ＣＨ_２）_ｃ−アリール又は−（ＣＨ_２）_ｃ−ヘテロアリールから選択され、ｃは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１から選択される整数である。）で特徴付けられ、
ａ、ｂ、ｐ、ｑ、ｒ、ｔは、それぞれ独立して、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０から選択される整数である。）
で特徴付けられる特に好ましいコンジュゲート、又はその薬学的に許容される塩、エステル、溶媒和物、若しくは放射標識錯体を提供する。

【0050】

アルブミン結合体
本発明のコンジュゲートは、本明細書に記載の（知られたＰＳＭＡリガンドと比較して追加の）アルブミン結合体（「アルブミン結合部分」とも呼ぶ）を含み、好ましくはヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）に選択的に結合することができる。用語「選択的に結合する」は、上に定義されている。

【0051】

アルブミン結合体（Ａｂｍ）は、任意のアルブミン結合体であり得る。特に好ましいアルブミン結合体は、本明細書中、以下に記載される。好ましくは、アルブミン結合体は、血清アルブミン、好ましくはＨＳＡに、典型的には約１００μＭ（マイクロモル）未満の結合親和性、例えば、約３μＭ（マイクロモル）〜５０μＭ（マイクロモル）で非共有結合し得る。

【0052】

ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）は、ヒト血漿中の最も豊富なタンパク質であり、血清タンパク質の約半分を構成する。本明細書で使用される用語「ヒト血清アルブミン」又は「ＨＳＡ」は、好ましくは、ヒトＡＬＢ遺伝子によってコードされる血清アルブミンタンパク質を意味する。より好ましくは、この用語は、ＵｎｉＰｒｏｔ Ａｃｃ．Ｎｏ．Ｐ０２７６８（エントリーバージョン２４０、最終変更日：２０１７年５月１０日）、又はその機能的変異体、アイソフォーム、断片、若しくは（翻訳後又は他の修飾をされた）誘導体を意味する。

【0053】

特定の理論に拘束されることを望むものではないが、本発明コンジュゲートのアルブミン結合体（Ａｂｍ）は、好ましくは、コンジュゲートの循環半減期を延ばし、血液中の本発明コンジュゲートの区画化をもたらし、ＰＳＭＡ−発現（腫瘍）標的細胞又は組織への送達を改善し、ＰＳＭＡを発現する正常な（非腫瘍性）臓器（腎臓、涙腺、唾液腺など）での非標的の腫瘍に対する比を上昇させると仮定される。したがって、アルブミン結合体は、好ましくはキレーター及びＰＳＭＡ結合体の所望の機能を妨害（低減又は停止）することなしに、改善された薬物動態特性を本発明コンジュゲートに付与すると想定される。

【0054】

構造に関しては、本発明にしたがう典型的なアルブミン結合体は、好ましくは、１〜４０個の炭素原子を含む線状及び分岐状親油性基と、遠位酸性基とを含むことができる。適切なアルブミン結合体は、特に、ＵＳ２０１０／１７２８４４ Ａ１、ＷＯ２０１３／０２４０３５ Ａ１、及びＷＯ２００８／０５３３６０ Ａ２に記載されており、これらの全体を参照により本明細書に援用する。

【0055】

前記によれば、本発明のコンジュゲートにおいて、アルブミン結合体は、好ましくは、一般式（２）で特徴付けられる。

【化7】

（式中、
Ｒ^１及びＲ^２は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、分岐状、非分岐状、又は環状のＣ_１−Ｃ_１２ヒドロカルビル、Ｃ_２−Ｃ_１２アルケニル、Ｃ_２−Ｃ_１２アルキニル、ＯＲ^６、ＯＣＯＲ^６、ＣＨＯ、ＣＯＲ^６、ＣＨ_２ＯＲ^６、ＮＲ^６Ｒ^７、ＣＯＮＲ^６Ｒ^７、ＣＯＯＲ^６、ＣＨ_２ＮＲ^６Ｒ^７、ＳＲ^６、＝Ｏ、＝Ｓ、又は＝ＮＨから選択される、又はＲ^１とＲ^２が結合して、分岐状、非分岐状、又は環状のＣ_１−Ｃ_１０ヒドロカルビル基を含む環状構造を形成し、前記ヒドロカルビル基は、最大２個のヘテロ原子が介在していてもよく、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＲ^６、ＯＣＯＲ^６、ＣＯＯＲ^６、ＣＨＯ、ＣＯＲ^６、ＣＨ_２ＯＲ^６、ＮＲ^６Ｒ^７、ＣＨ_２ＮＲ^６Ｒ^７、及びＳＲ^７、＝Ｏ、＝Ｓ、及び＝ＮＨから独立して選択される最大３個の基で置換されていてもよい。
Ｙは、単結合、又は線状、分岐状、又は環状の任意に置換された、最大２個のヘテロ原子が介在していてもよいＣ_１−Ｃ_１２アルキル、ＯＲ^６、ＯＣＯＲ^６、ＣＨＯ、ＣＯＲ^６、ＣＨ_２ＯＲ^６、ＮＲ^６Ｒ^７、ＣＯＯＲ^６、ＣＨ_２ＮＲ^６Ｒ^７、ＳＲ^６、＝Ｏ、＝Ｓ、又は＝ＮＨから選択され、非隣接ＣＨ_２基の１以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ^６−、−ＮＲ^６−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ^６−、−ＮＲ^６−ＣＯＯ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ^６−、−ＮＲ^６−ＣＯ−ＮＲ^６−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｏ−ＣＯ−Ｏ−、ＳＲ^６−、ＳＯ_３Ｒ^６−で置き換えられていてもよく、
Ｒ^６及びＲ^７は、それぞれ独立して、Ｈ又は分岐状、非分岐状、又は環状のＣ_１−１２ヒドロカルビルから選択され、
Ｘは、Ｏ、Ｎ、Ｓ、又はＰから選択され、
Ｒ^１及びＲ^２は、オルト、メタ、又はパラ位であり得る。）

【0056】

Ｒ^１及びＲ^２が互いに結合して環状構造を形成する場合、前記環状構造は、好ましくは、フェニル環に対して２つの位置で結合される（即ち、前記フェニル環に対して２つの結合を形成する、例えば、前記フェニル環に縮合した環状構造を形成する）３〜１２個、より好ましくは３〜１０個、更により好ましくは３〜９個、３〜８個、３〜７個、３〜６個、３〜５個、３〜４個、又は４個の炭素原子の線状又は分岐状ヒドロカルビル鎖である。具体的には、前記環状構造は、（置換又は非置換）アダマンチルから選択することができる。好ましくは、前記２つの結合は、前記フェニル環のメタ（３−）及びパラ（４−）位、オルト（２−）及びメタ位、又はオルト及びパラ位に位置することが好ましい。前記環状構造には、任意に、最大２個、好ましくは１個又は０個のヘテロ原子が介在する。好ましくは、前記環状構造は、その１−及び４−原子により前記フェニル環に結合して、好ましくは前記フェニル環のメタ及びパラ位で縮合した６員環を形成する（即ち、好ましくはメタ及びパラ縮合６員環を形成する）Ｃ_４鎖断片（１，４−ジラジカル）であり得る。

【0057】

好ましくは、Ｒ^１及びＲ^２は、それぞれ独立して、Ｈ、ハロゲン、好ましくはヨウ素又は臭素、及びＣ_１−６アルキル、好ましくはＣ_１−３アルキル、更により好ましくはメチルから選択され得る。より好ましくは、Ｒ^１はＨであり、Ｒ^２は、ハロゲン、好ましくはヨウ素又は臭素、及びＣ_１−６アルキル、好ましくはＣ_１−３アルキル、更により好ましくはメチルから選択される。更により好ましくは、Ｒ^１はＨであり、Ｒ^２はＨである、又はパラ位にあり、ヨウ素、臭素、及びメチルから選択される。

【0058】

好ましくは、Ｙは、線状又は分岐状の任意に置換されたＣ_１−Ｃ_１２ヒドロカルビル、より好ましくは線状又は分岐状の任意に置換されたＣ_１−Ｃ_１０ヒドロカルビル、更により好ましくは線状又は分岐状の任意に置換されたＣ_１−Ｃ_６ヒドロカルビル、更により好ましくは線状又は分岐状の任意に置換されたＣ_１−Ｃ_３ヒドロカルビルであり得る。

【0059】

最も好ましくは、Ｙは、−（ＣＨ_２）_３−であり得る。

【0060】

好ましくは、Ｘは、Ｏであり得る。

【0061】

したがって、式（２）で表されるアルブミン結合体は、好ましくは、式（２ａ）〜（２ｃ）のいずれかを含む又はからなることができる。

【化8】

【0062】

他の可能な（より好ましくない可能性がある）アルブミン結合体は、特に、ＵＳ２０１０／０１７２８４４ Ａ１に開示されている。

【0063】

好ましい実施形態においては、本発明に係る化合物は、一般式（１１．１）〜（１１．３）のいずれかにより特徴付けられ得る。

（式中、Ｄ、スペーサー、リンカー、Ｘ、Ｒ_１〜Ｒ_５、ａ、及びｂは、一般式（１１）について定義された通りである。）

【0064】

スペーサー
本発明コンジュゲートにおいて、アルブミン結合体は、「スペーサー」を介して−ＣＨ−「分岐点」にコンジュゲート（即ち、共有結合又は連結）される。本明細書において、用語「スペーサー」は、具体的には、アルブミン結合体と−ＣＨ−「分岐点」とを接続して、その距離に亘る、及び／又はこれらの基をコンジュゲートの残りの基／エンティティから「離間」する基を意味するために使用される。

【0065】

スペーサーは、好ましくは、アルブミン結合体と本発明コンジュゲートの他の基又はエンティティとの間の立体障害を避け、十分な可動性及び柔軟性を確保することができる。更に、スペーサーは、好ましくは、十分なＨＳＡ結合、高親和性ＰＳＭＡ結合、及びＰＳＭＡコンジュゲート複合体の内在化によるＰＳＭＡ陽性細胞の迅速かつ任意に選択的な浸透をもたらす、支持する、及び／又は可能にするように設計され得る。

【0066】

本発明者らは、スペーサーが少なくとも１つのＣ−Ｎ結合を含むことが好ましいと判断した。適切なスペーサーは、ｉｎ ｖｉｖｏで安定なことが好ましい。スペーサーの設計は、通常、コンジュゲート全体に依存する場合があり、残りのコンジュゲートの機能性（例えば、ＰＳＭＡ結合、ＨＳＡ結合、内在化など）を促進するように選択されることが好ましい。したがって、スペーサーは、例えば、剛性又は可撓性であることができ、コンジュゲート全体の親油性又は親水性などに影響を及ぼす。

【0067】

好ましくは、スペーサーは、最大５個のヘテロ原子を含む線状又は分岐状の任意に置換されたＣ_１−Ｃ_２０ヒドロカルビル、より好ましくはＣ_１−Ｃ_１２ヒドロカルビル、更により好ましくはＣ_２−Ｃ_６ヒドロカルビル、更により好ましくはＣ_２−Ｃ_４ヒドロカルビルを含み得る。ヒドロカルビルは、好ましくはＮから選択される少なくとも１個、任意に最大４個のヘテロ原子を好ましくは含み得る。

【0068】

好ましくは、スペーサーは、−［ＣＨＲ^１０］_ｕ−ＮＲ^１１−であることができ、式中、Ｒ^１０及びＲ^１１は、それぞれ独立して、Ｈ及び分岐状、非分岐状、又は環状Ｃ_１−Ｃ_１２ヒドロカルビルから選択することができ、ｕは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０から選択される整数であることができる。より好ましくは、Ｒ^１０及びＲ^１１がＨであり、ｕが２、３、又は４から選択される整数であることができる。最も好ましくは、Ｒ^１０及びＲ^１１がＨであり、ｕが４であることができる。

【0069】

したがって、本発明コンジュゲートは、好ましくは、式（３ａ）のスペーサーを含むことができる。

【化9】

【0070】

したがって、本発明に係る好ましいコンジュゲート（例えば、実施例において評価されるＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０３及びＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６）は、式（３ａ）のスペーサーを介して「分岐点」に接続された式（２ａ）〜（２ｃ）のアルブミン結合体を含む。

【0071】

これに代えて又はこれに加えて、スペーサーは、少なくとも１つのアミノ酸残基を含むことができる。本明細書に使用される用語「アミノ酸残基」は、スペーサー内の部分としての特定のアミノ酸モノマーを意味する。

【0072】

「アミノ酸」は、酸性（通常は、カルボキシ（−ＣＯＯＨ））及びアミン（−ＮＨ_２）官能基の両方を含む有機分子である。前記基の一方又は両方は、誘導体化されていてもよい。アミノ基及び酸性基は、互いに対して任意の位置にあることができるが、アミノ酸は、通常、２−アミノカルボン酸、３−アミノカルボン酸、４−アミノカルボン酸などを含む。アミン基は、アミノ酸の１番目、２番目、３番目、４番目、５番目、６番目、７番目、８番目、９番目、１０番目（など）から最大２０番目の炭素原子に結合することができる。換言すれば、アミノ酸は、アルファ、ベータ、ガンマ、デルタ、イプシロン（など）からオメガアミノ酸までであり得る。好ましくは、酸性基は、カルボキシ（−ＣＯＯＨ）基である。ただし、−ＯＰＯ_３Ｈ、−ＰＯ_３Ｈ、−ＯＳＯ_３Ｈ、又は−ＳＯ_３Ｈから選択される他の酸性基も考えられる。

【0073】

好ましくは、アミノ酸残基は、天然に存在するアミノ酸又はそれらの誘導体に由来する。アミノ酸残基は、アルファ（α−）アミノ酸に由来することが更に好ましく、アミノ酸は、（ａ）Ｄ−又はＬ−アミノ酸であり得る。

【0074】

より好ましくは、前記アミノ酸は、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、ロイシン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、スレオニン、トリプトファン、チロシン、及び／又はバリンの群から選択されるアミノ酸のＤ−又はＬ−エナンチオマーである。

【0075】

最も好ましくは、前記アミノ酸は、（Ｄ−／Ｌ−）アスパラギン酸、グルタミン酸、又はリジンである。スペーサーは、１、２、３、４、又は５個のアミノ酸残基、特にＤ−アスパラギン酸、Ｄ−グルタミン酸、又はＬ−リジン残基を含んでもよい。Ｄ−エナンチオマーを含むコンジュゲートでは、Ｄ−エナンチオマーの使用が、代謝の速度の更なる低減、したがって血流からのクリアランスを更に低減するという有益な効果をもたらし得る。好ましくは、スペーサーは、２〜３個のそのようなアミノ酸残基、特にＤ−アスパラギン酸又はＤ−グルタミン酸残基を含み得る。換言すれば、スペーサーは、好ましくは２〜５個のアミノ酸、より好ましくは２〜３個のアミノ酸からなるペプチドを含んでもよい。或いは、スペーサーは、Ｌ−リジンから選択される１〜２個のアミノ酸を含んでもよい。

【0076】

したがって、本発明コンジュゲートは、式（３ｂ）のスペーサーを含むことができる。

【化10】

（式中、
ｍは、１又は２から選択される整数であり、
ｎは、１、２、３、４、又は５、好ましくは２又は３から選択される整数である。）

【0077】

或いは、スペーサーは、少なくとも１つのＮヘテロ原子を含む線状又は分岐状の任意に置換されたＣ_１−Ｃ_２０ヒドロカルビル基を介して「分岐点」に接続されたアミノ酸残基を含むことができる。

【0078】

したがって、本発明コンジュゲートは、式（３ｃ）のスペーサーを含むことができる。

【化11】

（式中、
ｏは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０から選択される整数である。好ましくは、ｏは、５であることができる。）

【0079】

したがって、好ましい実施形態においては、本発明コンジュゲートは、一般式（１２．１）〜（１２．４）又は（１３．１）〜（１３．４）のいずれかで特徴付けることができる。

【化12】

【化13】

【化14】

一般式（１２．１）〜（１２．４）及び（１３．１）〜（１３．４）において、Ｄ、スペーサー、リンカー、Ｘ、Ｒ^１〜Ｒ^５、ａ、ｂ、ｍ、ｎは、一般式（１）及び（１１）で定義した通りであり、ｄは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０、より好ましくは１、２、３、４、５、又は６から選択される整数である。

【0080】

キレーター
本発明コンジュゲートは、キレーターを更に含む。

【0081】

用語「キレーター」又は「キレート部分」は、本明細書において相互変換可能に使用され、２つ以上の別々の配位結合を中心（金属）イオンと形成（配位）できる多座（多重結合）リガンドを意味する。具体的には、そのような分子又は１つの電子対を共有する分子は、「ルイス塩基」とも呼ばれる。中心（金属）イオンは、通常、２つ以上の電子対によってキレーターに配位される。用語「二座キレーター」、「三座キレーター」、及び「四座キレーター」は、当技術分野で認識されており、キレーターによって配位される金属イオンへの同時供与のために容易に利用可能な、それぞれ２、３、及び４電子対を有するキレーターを意味する。通常、キレーターの電子対は、単一の中心（金属）イオンと配位結合を形成するが、特定の例では、キレーターは複数の金属イオンと配位結合を形成し、様々な結合様式が可能である。

【0082】

用語「配位する」及び「配位」は、１つの多電子対ドナーが１つの中心（金属）イオンと配位結合する、即ち、２つ以上の非共有電子対を共有する（「配位される」）相互作用を意味する。

【0083】

キレート剤は、好ましくは、所望の中心（金属）イオン、通常は本明細書に記載される放射性核種と配位する能力に基づき選択される。

【0084】

したがって、キレーターＤは、以下の式（４ａ）〜（４ｊｊ）のうちの１つで特徴付けられ得る。

【化15】

【化16】

【化17】

【0085】

好ましくは、キレーターは、ＤＯＴＡ（１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸（式（４ａ）で特徴付けられ得る））、ＮＯＤＡＧＡ（２−（４，７−ビス（カルボキシメチル）−１，４，７−トリアゾナン−１−イル）−ペンタン二酸（式（４ｃ）で特徴付けられ得る））、又はそれらの誘導体であることができる。

【0086】

幾つかの好ましい実施形態では、キレーターは、ＤＯＴＡであることができる。幾つかの好ましい実施形態では、キレーターは、ＮＯＤＡＧＡであることができる。

【0087】

有利なことに、ＤＯＴＡは、診断用（例えば、^６８Ｇａ）及び治療用（例えば、^９０Ｙ又は^１７７Ｌｕ）放射性核種と効果的に錯体を形成するので、イメージングと治療の両方の目的で、即ち、治療診断剤として同一コンジュゲートの使用を可能にする。ＤＯ３ＡＰ（式（４ｈｈ）で特徴付けられ得る）、ＤＯ３ＡＰ^ＰｒＡ（式（４ｉｉ）で特徴付けられ得る）、又はＤＯ３ＡＰ^ＡＢｎ（式（４ｊｊ）で特徴付けられ得る）などの、スカンジウム放射性核種（^４３Ｓｃ、^４４Ｓｃ、^４７Ｓｃ）を錯化できるＤＯＴＡ誘導体が好ましい場合もあり、Ｋｅｒｄｊｏｕｄｊ ｅｔ ａｌ．Ｄａｌｔｏｎ Ｔｒａｎｓ．，２０１６，４５，１３９８−１４０９に記載されている。

【0088】

本発明の文脈における他の好ましいキレーターとしては、Ｎ，Ｎ”−ビス［２−ヒドロキシ−５−（カルボキシエチル）ベンジル］エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ”−二酢酸（ＨＢＥＤ−ＣＣ）、１，４，７−トリアザシクロノナン−１，４，７−三酢酸（ＮＯＴＡ）、２−（４，７，１０−トリス（カルボキシメチル）−１，４，７，１０−テトラ−アザシクロドデカン−１−イル）−ペンタン二酸（ＤＯＴＡＧＡ）、１，４，７−トリアザシクロノナンホスフィン酸（ＴＲＡＰ）、１，４，７−トリアザシド−ノナン−１−［メチル（２−カルボキシエチル）−ホスフィン酸］−４，７−ビス−［メチル（２−ヒドロキシメチル）−ホスフィン酸］（ＮＯＰＯ）、３，６，９，１５−テトラ−アザビシクロ［９，３，１］−ペンタデカ−１（１５）、１１，１３−トリエン−３，６，９−三酢酸（ＰＣＴＡ）、Ｎ’−｛５−［アセチル（ヒドロキシ）アミノ］−ペンチル｝−Ｎ−［５−（｛４−［（５−アミノペンチル）（ヒドロキシ）アミノ］−４−オキソブタノイル｝−アミノ）ペンチル］−Ｎ−ヒドロキシスクシンアミド（ＤＦＯ）、及びジエチレン−トリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）が挙げられる。

【0089】

キレーター基、例えば、ＤＯＴＡ基は、中心（金属）イオン、特に本明細書に定義される放射性核種と錯体化され得る。或いは、キレーター基、例えばＤＯＴＡは、中心（金属）イオン、特に本明細書に定義される放射性核種と錯体を形成しなくてもよく、非錯体の形態で存在してもよい。キレーター（例えば、ＤＯＴＡ）が前記金属イオンと錯体を形成しない場合、キレーターのカルボン酸基は遊離酸の形態又は塩の形態であり得る。

【0090】

ＰＳＭＡ結合体
本発明コンジュゲートは、本明細書のＰＳＭＡ結合体（「ＰＳＭＡ結合部分」とも呼ばれる）を含み、これは好ましくはヒトＰＳＭＡに選択的に結合することができる。用語「選択的に結合する」は、上に定義される。

【0091】

特に、本発明は、一般式（１）（ｉｉ）：

【化18】

（式中、
Ｐｂｍは、ＰＳＭＡ結合体であり、
Ｄは、キレーターであり、好ましくは１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸（ＤＯＴＡ）、Ｎ，Ｎ”−ビス［２−ヒドロキシ−５−（カルボキシエチル）−ベンジル］エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ”−二酢酸（ＨＢＥＤ−ＣＣ）、１，４，７−トリアザシクロノナン−１，４，７−三酢酸（ＮＯＴＡ）、２−（４，７−ビス（カルボキシメチル）−１，４，７−トリアゾナン−１−イル）ペンタン二酸（ＮＯＤＡＧＡ）、２−（４，７，１０−トリス（カルボキシメチル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１−イル）−ペンタン二酸（ＤＯＴＡＧＡ）、１，４，７−トリアザシクロノナンホスフィン酸（ＴＲＡＰ）、１，４，７−トリアザシクロノナン−１−［メチル（２−カルボキシエチル）−ホスフィン酸］−４，７−ビス［メチル（２−ヒドロキシメチル）ホスフィン酸］（ＮＯＰＯ）、３，６，９，１５−テトラアザビシクロ［９，３，１．］ペンタデカ−１（１５），１１，１３−トリエン−３，６，９−三酢酸（ＰＣＴＡ）、Ｎ’−｛５−［アセチル（ヒドロキシ）アミノ］ペンチル｝−Ｎ−［５−（｛４−［（５−アミノペンチル）（ヒドロキシ）アミノ］−４−オキソブタノイル｝アミノ）ペンチル］−Ｎ−ヒドロキシスクシンアミド（ＤＦＯ）、及びジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）、又はそれらの誘導体から選択され、
Ｘは、Ｏ、Ｎ、Ｓ、又はＰから選択され、
Ｒ^１及びＲ^２は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、分岐状、非分岐状、又は環状のＣ_１−Ｃ_１２ヒドロカルビル、Ｃ_２−Ｃ_１２アルケニル、Ｃ_２−Ｃ_１２アルキニル、ＯＲ^６、ＯＣＯＲ^６、ＣＨＯ、ＣＯＲ^６、ＣＨ_２ＯＲ^６、ＮＲ^６Ｒ^７、ＣＯＮＲ^６Ｒ^７、ＣＯＯＲ^６、ＣＨ_２ＮＲ^６Ｒ^７、ＳＲ^６、＝Ｏ、＝Ｓ、又は＝ＮＨから選択される、又はＲ^１とＲ^２が結合して、分岐状、非分岐状、又は環状のＣ_１−Ｃ_１０ヒドロカルビル基を含む環状構造を形成し、前記ヒドロカルビル基は、最大２個のヘテロ原子が介在していてもよく、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＲ^６、ＯＣＯＲ^６、ＣＯＯＲ^６、ＣＨＯ、ＣＯＲ^６、ＣＨ_２ＯＲ^６、ＮＲ^６Ｒ^７、ＣＨ_２ＮＲ^６Ｒ^７、及びＳＲ^７、＝Ｏ、＝Ｓ、及び＝ＮＨから独立して選択される最大３個の基で置換されていてもよく、
Ｙは、単結合、又は線状、分岐状、又は環状の任意に置換された、最大２個のヘテロ原子が介在していてもよいＣ_１−Ｃ_１２アルキル、ＯＲ^６、ＯＣＯＲ^６、ＣＨＯ、ＣＯＲ^６、ＣＨ_２ＯＲ^６、ＮＲ^６Ｒ^７、ＣＯＯＲ^６、ＣＨ_２ＮＲ^６Ｒ^７、ＳＲ^６、＝Ｏ、＝Ｓ、又は＝ＮＨから選択され、非隣接ＣＨ_２基の１以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ^６−、−ＮＲ^６−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ^６−、−ＮＲ^６−ＣＯＯ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ^６−、−ＮＲ^６−ＣＯ−ＮＲ^６−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｏ−ＣＯ−Ｏ−、ＳＲ^６−、ＳＯ_３Ｒ^６−で置き換えられていてもよく、
Ｒ^６及びＲ^７は、それぞれ独立して、Ｈ又は分岐状、非分岐状、又は環状のＣ_１−１２ヒドロカルビルから選択され、
スペーサーは、少なくとも１つのＣ−Ｎ結合を含み、
リンカーは、本明細書で定義される一般式（６）で特徴付けられ、
ａ、ｂ、ｐ、ｑ、ｒ、ｔは、それぞれ独立して、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０から選択される整数である。）
で表される化合物、又はその薬学的に許容される塩、エステル、溶媒和物、若しくは放射標識錯体を提供する。

【0092】

ＰＳＭＡ結合体は、典型的には約１００μＭ（マイクロモル）未満の結合親和性で、ＰＳＭＡに可逆的又は不可逆的に結合し得る。

【0093】

ヒト前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）（グルタミン酸カルボキシペプチダーゼＩＩ（ＧＣＰＩＩ）、葉酸ヒドロラーゼ１、フォリポリ−ガンマ−グルタミン酸カルボキシペプチダーゼ（ＦＧＣＰ）、及びＮ−アセチル化アルファ結合酸性ジペプチダーゼＩ（ＮＡＡＬＡＤａｓｅ Ｉ）とも呼ばれる）は、神経系、前立腺、腎臓、及び小腸で最も高度に発現されるＩＩ型膜貫通型亜鉛メタロペプチダーゼである。これは、前立腺癌の腫瘍マーカーと考えられている。本明細書に使用される用語「ヒト前立腺特異的膜抗原」又は「ＰＳＭＡ」は、好ましくは、ヒトＦＯＬＨ１遺伝子によってコードされるタンパク質を意味する。より好ましくは、この用語は、ＵｎｉＰｒｏｔ Ａｃｃ．Ｑ０４６０９（エントリーバージョン１８６、最終変更日２０１７年５月１０日）、又はその機能的変異体、アイソフォーム、断片、若しくは（翻訳後又は他の修飾をされた）誘導体として特徴付けられるタンパク質を意味する。

【0094】

ＰＳＭＡ結合体は、一般に、（ヒト）前立腺特異的膜抗原に選択的に（及び任意に不可逆的に）結合することができる結合体であり得る（Ｃｈａｎｇ Ｒｅｖ Ｕｒｏｌ．２００４；６（Ｓｕｐｐｌ １０）：Ｓ１３−Ｓ１８参照）。

【0095】

ＰＳＭＡ結合体は、好ましくは、ＰＳＭＡに対する選択的親和性を付与する能力により選択される。好ましいＰＳＭＡ結合部分は、ＷＯ２０１３／０２２７９７ Ａ１、ＷＯ２０１５／０５５３１８ Ａ１、及びＥＰ２８６２８５７ Ａ１に記載されており、これらの全体を参照により本明細書に援用する。

【0096】

したがって、本発明のコンジュゲートにおいて、好ましくは、ＰＳＭＡ結合体は、一般式（５）で特徴付けることができる。

【化19】

（式中、
Ｘは、Ｏ、Ｎ、Ｓ、又はＰから選択され、
Ｒ^３、Ｒ^４、及びＲ^５は、それぞれ独立して、−ＣＯＨ、−ＣＯ_２Ｈ、−ＳＯ_２Ｈ、−ＳＯ_３Ｈ、−ＳＯ_４Ｈ、−ＰＯ_２Ｈ、−ＰＯ_３Ｈ、−ＰＯ_４Ｈ_２、−Ｃ（Ｏ）−（Ｃ_１−Ｃ_１０）アルキル、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ（Ｃ_１−Ｃ_１０）アルキル、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨＲ^８、又は−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ^８Ｒ^９から選択され、Ｒ^８及びＲ^９は、それぞれ独立して、Ｈ、結合、（Ｃ_１−Ｃ_１０）アルキレン、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｃ（Ｏ）、Ｃ（Ｓ）、−Ｃ（Ｓ）−ＮＨ−ベンジル−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ベンジル、−Ｃ（Ｏ）−（Ｃ_１−Ｃ_１０）アルキレン、−（ＣＨ_２）_ｐ−ＮＨ、−（ＣＨ_２）_ｐ−（Ｃ_１−Ｃ_１０）アルキレン、−（ＣＨ_２）_ｐ−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ_２）_ｑ、−（ＣＨ_ｒＣＨ_２）_ｔ−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ_２）_ｐ、−（ＣＨ_２）_ｐ−ＣＯ−ＣＯＨ、−（ＣＨ_２）_ｐ−ＣＯ−ＣＯ_２Ｈ、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−Ｃ［（ＣＨ_２）_ｑ−ＣＯＨ］_３、−Ｃ［（ＣＨ_２）_ｐ−ＣＯＨ］_３、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−Ｃ［（ＣＨ_２）_ｑ−ＣＯ_２Ｈ］_３、−Ｃ［（ＣＨ_２）_ｐ−ＣＯ_２Ｈ］_３、又は−（ＣＨ_２）_ｐ−（Ｃ_５−Ｃ_１４）ヘテロアリールから選択され、
ｂ、ｐ、ｑ、ｒ、ｔは、それぞれ独立して、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０から選択される整数である。）
好ましいＰＳＭＡ結合体では、ｂは、１、２、３、４、又は５から選択される整数であることができ、Ｒ^３、Ｒ^４、及びＲ^５は、それぞれＣＯ_２Ｈであることができ、Ｘは、Ｏであることができる。

【0097】

リンカー
本発明コンジュゲートにおいて、ＰＳＭＡ結合体は、適切なリンカーを介して−ＣＨ−「分岐点」に結合／接続される。本明細書で使用される用語「リンカー」は、具体的には、ＰＳＭＡ結合体と−ＣＨ−「分岐点」とを接続又は結合して、その距離に亘る、及び／又はＰＳＭＡ結合体を残りのコンジュゲートから「離間」する基を意味するために使用される。

【0098】

リンカーは、好ましくは、ＰＳＭＡ結合体と本発明コンジュゲートの他の基又はエンティティとの間の立体障害を避け、十分な可動性及び柔軟性を確保することができる。更に、リンカーは、好ましくは、十分なＨＳＡ結合、高親和性ＰＳＭＡ結合、及びＰＳＭＡコンジュゲート複合体の内在化によるＰＳＭＡ陽性細胞の迅速かつ任意に選択的な浸透をもたらす、支持する、及び／又は可能にするように設計され得る。

【0099】

ＰＳＭＡ結合体、特に一般式（５）の特に好ましいＰＳＭＡ結合体は、好ましくは、例えばＥＰ２８６２８５７ Ａ１に記載される適切なリンカーを介して本発明コンジュゲートに連結され得る。前記リンカーは、好ましくは、最適化された親油性を本発明コンジュゲートに付与して、ＰＳＭＡ結合並びに細胞取り込み及び内在化を増加させ得る。リンカーは、好ましくは、少なくとも１つの環状基及び少なくとも１つの芳香族基（特に、基Ｑ及びＷ）を含むことができる。

【0100】

したがって、本発明コンジュゲートにおいて、好ましいリンカーは、一般式（６）で特徴付けられ得る。

【化20】

（式中、
Ｘは、それぞれ独立して、Ｏ、Ｎ、Ｓ、又はＰから選択され、
Ｑは、置換又は非置換のアリール、アルキルアリール、及びシクロアルキルから選択され、好ましくは置換又は非置換のＣ_５−Ｃ_１４アリール、Ｃ_５−Ｃ_１４アルキルアリール、又はＣ_５−Ｃ_１４シクロアルキルから選択され、
Ｗは、−（ＣＨ_２）_ｃ−アリール又は−（ＣＨ_２）_ｃ−ヘテロアリールから選択され、ｃは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１から選択される整数である。）

【0101】

特定の理論に拘束されることを望むものではないが、リンカー（特に、Ｑ、Ｗ）内の親水性又は極性官能基又はリンカーからのペンダントが、本発明コンジュゲートのＰＳＭＡ結合特性を有利に向上させ得ると考えられる。

【0102】

Ｑが、置換されたアリール、アルキルアリール、又はシクロアルキルである場合、例示的な置換基は、前記「定義」セクションに列挙されており、限定するものではないが、ハロゲン（即ち、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、及びＩ）；ヒドロキシル；アルコキシ、アルケノキシ、アルキノキシ、アリールオキシ、アラルキルオキシ、ヘテロシクリルオキシ、及びヘテロシクリルアルコキシ基；カルボニル（オキソ）；カルボキシル；エステル；ウレタン；オキシム；ヒドロキシルアミン；アルコキシアミン；アラルコキシアミン；チオール；硫化物；スルホキシド；スルホン；スルホニル；スルホンアミド；アミン；Ｎ−オキシド；ヒドラジン；ヒドラジド；ヒドラゾン；アジド；アミド；尿素；アミジン；グアニジン；エナミン；イミド；イソシアナート；イソチオシアナート；シアン酸塩；チオシアン酸塩；イミン；ニトロ基；ニトリル（即ち、ＣＮ）、ハロアルキル、アミノアルキル、ヒドロキシアルキル、シクロアルキルが挙げられる。

【0103】

好ましくは、Ｑは、置換又は非置換のＣ_５−Ｃ_７シクロアルキルから選択され得る。

【0104】

好ましくは、Ｗは、−（ＣＨ_２）_ｃ−ナフチル、−（ＣＨ_２）_ｃ−フェニル、−（ＣＨ_２）_ｃ−ビフェニル、−（ＣＨ_２）_ｃ−インドリル、−（ＣＨ_２）_ｃ−ベンゾチアゾリルから選択され、ｃは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０から選択される整数である。より好ましくは、Ｗは、−（ＣＨ_２）−ナフチル、−（ＣＨ_２）−フェニル、−（ＣＨ_２）−ビフェニル、−（ＣＨ_２）−インドリル、又は−（ＣＨ_２）−ベンゾチアゾリルから選択することができる。

【0105】

好ましくは、各Ｘは、Ｏであり得る。

【0106】

したがって、ＰＳＭＡ結合体を本発明コンジュゲートに接続する特に好ましいリンカーは、以下の構造式（６ａ）で特徴付けられ得る。

【化21】

【0107】

本明細書に示される構造式のいずれかで特徴付けられる本発明に係るコンジュゲートにおいて、プレースホルダーによって特定される置換基又は基は、（該当する場合）以下のように定義され得る。

【0108】

Ｄは、好ましくは、１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸（ＤＯＴＡ）、Ｎ，Ｎ”−ビス［２−ヒドロキシ−５−（カルボキシエチル）−ベンジル］エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ”−二酢酸（ＨＢＥＤ−ＣＣ）、１，４，７−トリアザシクロノナン−１，４，７−三酢酸（ＮＯＴＡ）、２−（４，７−ビス（カルボキシメチル）−１，４，７−トリアゾナン−１−イル）ペンタン二酸（ＮＯＤＡＧＡ）、２−（４，７，１０−トリス（カルボキシメチル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１−イル）−ペンタン二酸（ＤＯＴＡＧＡ）、１，４，７−トリアザシクロノナンホスフィン酸（ＴＲＡＰ）、１，４，７−トリアザシクロノナン−１−［メチル（２−カルボキシエチル）−ホスフィン酸］−４，７−ビス［メチル（２−ヒドロキシメチル）ホスフィン酸］（ＮＯＰＯ）、３，６，９，１５−テトラアザビシクロ［９，３，１．］ペンタデカ−１（１５），１１，１３−トリエン−３，６，９−三酢酸（ＰＣＴＡ）、Ｎ’−｛５−［アセチル（ヒドロキシ）アミノ］ペンチル｝−Ｎ−［５−（｛４−［（５−アミノペンチル）（ヒドロキシ）アミノ］−４−オキソブタノイル｝アミノ）ペンチル］−Ｎ−ヒドロキシスクシンアミド（ＤＦＯ）、及びジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）、又はそれらの誘導体から選択され得る。より好ましくは、Ｄは、ＤＯＴＡ、ＮＯＤＡＧＡ、又はそれらの誘導体から選択され得る。

【0109】

Ｘは、好ましくは、それぞれ独立して、Ｏ、Ｎ、Ｓ、又はＰから選択され得る。より好ましくは、各ＸがＯであり得る。

【0110】

Ｒ^１及びＲ^２は、好ましくは、それぞれ独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、分岐状、非分岐状、又は環状のＣ_１−Ｃ_１２ヒドロカルビル、Ｃ_２−Ｃ_１２アルケニル、Ｃ_２−Ｃ_１２アルキニル、ＯＲ^６、ＯＣＯＲ^６、ＣＨＯ、ＣＯＲ^６、ＣＨ_２ＯＲ^６、ＮＲ^６Ｒ^７、ＣＯＮＲ^６Ｒ^７、ＣＯＯＲ^６、ＣＨ_２ＮＲ^６Ｒ^７、ＳＲ^６、＝Ｏ、＝Ｓ、又は＝ＮＨから選択され得る、又はＲ^１とＲ^２が結合して、分岐状、非分岐状、又は環状のＣ_１−Ｃ_１０ヒドロカルビル基を含む環状構造を形成し、前記ヒドロカルビル基は、最大２個のヘテロ原子が介在していてもよく、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＲ^６、ＯＣＯＲ^６、ＣＯＯＲ^６、ＣＨＯ、ＣＯＲ^６、ＣＨ_２ＯＲ^６、ＮＲ^６Ｒ^７、ＣＨ_２ＮＲ^６Ｒ^７、及びＳＲ^７、＝Ｏ、＝Ｓ、及び＝ＮＨから独立して選択される最大３個の基で置換されていてもよく、Ｒ^６及びＲ^７は、それぞれ独立して、Ｈ又は分岐状、非分岐状、又は環状のＣ_１−１２ヒドロカルビルから選択される。より好ましくは、Ｒ^１は、Ｈであることができ、Ｒ^２は、ハロゲン（好ましくは、ヨウ素又は臭素）、及びＣ_１−６アルキル、好ましくはＣ_１−３アルキル、更により好ましくはメチルから選択され得る。更により好ましくは、Ｒ^１は、Ｈであることができ、Ｒ^２は、Ｈであることができる、又はパラ位にあることができ、ヨウ素、臭素、及びメチルから選択され得る。

【0111】

Ｙは、好ましくは、単結合又は線状、分岐状、又は環状の、任意に最大２個のヘテロ原子が介在していてもよく、且つ少なくとも１つのハロゲン、分岐状、非分岐状、又は環状のＣ_１−Ｃ_１０ヒドロカルビル、ＯＲ^６、ＯＣＯＲ^６、ＣＨＯ、ＣＯＲ^６、ＣＨ_２ＯＲ^６、ＮＲ^６Ｒ^７、ＣＯＯＲ^６、ＣＨ_２ＮＲ^６Ｒ^７、ＳＲ^６、＝Ｏ、＝Ｓ、又は＝ＮＨによって置換されていてもよいＣ_１−Ｃ_１２アルキルから選択することができ、ここで、非隣接ＣＨ_２基の１以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ^６−、−ＮＲ^６−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ^６−、−ＮＲ^６−ＣＯＯ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ^６−、−ＮＲ^６−ＣＯ−ＮＲ^６−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｏ−ＣＯ−Ｏ−、ＳＲ^６−、ＳＯ_３Ｒ^６−（Ｒ^６及びＲ^７は、それぞれ独立して、Ｈ又は分岐状、非分岐状、又は環状のＣ_１−１２ヒドロカルビルから選択される）で置き換えられることができる。より好ましくは、Ｙは、線状又は分岐状の任意に置換されたＣ_１−Ｃ_１２ヒドロカルビル、より好ましくは線状又は分岐状、任意に置換されたＣ_１−Ｃ_１０ヒドロカルビル、更により好ましくは線状又は分岐状、任意に置換されたＣ_１−Ｃ_６ヒドロカルビル、更により好ましくは、線状又は分岐状、任意に置換されたＣ_１−Ｃ_３ヒドロカルビルであることができる。最も好ましくは、Ｙは、−（ＣＨ_２）_３−であることができる。

【0112】

Ｒ^３、Ｒ^４、及びＲ^５は、好ましくは、それぞれ独立して、−ＣＯＨ、−ＣＯ_２Ｈ、−ＳＯ_２Ｈ、−ＳＯ_３Ｈ、−ＳＯ_４Ｈ、−ＰＯ_２Ｈ、−ＰＯ_３Ｈ、−ＰＯ_４Ｈ_２、−Ｃ（Ｏ）−（Ｃ_１−Ｃ_１０）アルキル、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ（Ｃ_１−Ｃ_１０）アルキル、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨＲ^８、又は−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ^８Ｒ^９から選択することができ、Ｒ^８及びＲ^９は、それぞれ独立して、Ｈ、結合、（Ｃ_１−Ｃ_１０）アルキレン、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｃ（Ｏ）、Ｃ（Ｓ）、−Ｃ（Ｓ）−ＮＨ−ベンジル−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ベンジル、−Ｃ（Ｏ）−（Ｃ_１−Ｃ_１０）アルキレン、−（ＣＨ_２）_ｐ−ＮＨ、−（ＣＨ_２）_ｐ−（Ｃ_１−Ｃ_１０）アルキレン、−（ＣＨ_２）_ｐ−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ_２）_ｑ、−（ＣＨ_ｒＣＨ_２）_ｔ−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ_２）_ｐ、−（ＣＨ_２）_ｐ−ＣＯ−ＣＯＨ、−（ＣＨ_２）_ｐ−ＣＯ−ＣＯ_２Ｈ、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−Ｃ［（ＣＨ_２）_ｑ−ＣＯＨ］_３、−Ｃ［（ＣＨ_２）_ｐ−ＣＯＨ］_３、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−Ｃ［（ＣＨ_２）_ｑ−ＣＯ_２Ｈ］_３、−Ｃ［（ＣＨ_２）_ｐ−ＣＯ_２Ｈ］_３、又は−（ＣＨ_２）_ｐ−（Ｃ_５−Ｃ_１４）ヘテロアリールから選択される。より好ましくは、Ｒ^３、Ｒ^４、及びＲ^５は、−ＣＯ_２Ｈであることができる。

【0113】

スペーサーは、好ましくは、少なくとも１つのＣ−Ｎ結合を含むことができる。より好ましくは、スペーサーは、本明細書に定義される式（３ａ）、（３ｂ）、又は（３ｃ）で特徴付けられ得る。

【0114】

リンカーは、好ましくは、本明細書に定義される一般式（６）で特徴付けられ得る。より好ましくは、リンカーは、本明細書に定義される一般式（６ａ）で特徴付けられ得る。

【0115】

Ｑは、好ましくは、置換又は非置換のアリール、アルキルアリール、又はシクロアルキルから選択することができ、好ましくは、置換又は非置換のＣ_５−Ｃ_１４アリール、Ｃ_５−Ｃ_１４アルキルアリール、又はＣ_５−Ｃ_１４シクロアルキルから選択することができる。

【0116】

Ｗは、好ましくは、−（ＣＨ_２）_ｃ−アリール又は−（ＣＨ_２）_ｃ−ヘテロアリールから選択することができ、ｃは、好ましくは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１から選択される整数である。

【0117】

Ａは、好ましくは、アミノ酸残基であり得る。より好ましくは、Ａは、（Ｄ−）アスパラギン酸、（Ｄ−）グルタミン酸、又は（Ｌ−リジン）から選択され得る。

【0118】

Ｖは、好ましくは、単結合、Ｎ、又は最大３個のヘテロ原子を含む任意に置換されたＣ_１−Ｃ_１２ヒドロカルビルから選択することができ、前記ヘテロ原子は、好ましくはＮから選択される。

【0119】

ｎは、好ましくは、１、２、３、４、又は５、好ましくは１、２、又は３から選択される整数であることができる。
ｍは、好ましくは、０又は１であることができる。

【0120】

ａ、ｂ、ｐ、ｑ、ｒ、ｔは、好ましくは、それぞれ独立して、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０から選択される整数であることができる。

【0121】

前記にしたがって、本発明に係る好ましいコンジュゲートは、一般式（１ａ）で特徴付けることができる。

【化22】

（式中、
Ｄは、キレーターであり、好ましくは１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸（ＤＯＴＡ）、Ｎ，Ｎ”−ビス［２−ヒドロキシ−５−（カルボキシエチル）−ベンジル］エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ”−二酢酸（ＨＢＥＤ−ＣＣ）、１，４，７−トリアザシクロノナン−１，４，７−三酢酸（ＮＯＴＡ）、２−（４，７−ビス（カルボキシメチル）−１，４，７−トリアゾナン−１−イル）ペンタン二酸（ＮＯＤＡＧＡ）、２−（４，７，１０−トリス（カルボキシメチル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１−イル）−ペンタン二酸（ＤＯＴＡＧＡ）、１，４，７−トリアザシクロノナンホスフィン酸（ＴＲＡＰ）、１，４，７−トリアザシクロノナン−１−［メチル（２−カルボキシエチル）−ホスフィン酸］−４，７−ビス［メチル（２−ヒドロキシメチル）ホスフィン酸］（ＮＯＰＯ）、３，６，９，１５−テトラアザビシクロ［９，３，１．］ペンタデカ−１（１５），１１，１３−トリエン−３，６，９−三酢酸（ＰＣＴＡ）、Ｎ’−｛５−［アセチル（ヒドロキシ）アミノ］ペンチル｝−Ｎ−［５−（｛４−［（５−アミノペンチル）（ヒドロキシ）アミノ］−４−オキソブタノイル｝アミノ）ペンチル］−Ｎ−ヒドロキシスクシンアミド（ＤＦＯ）、及びジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）、又はそれらの誘導体から選択され、
Ｘは、それぞれ独立して、Ｏ、Ｎ、Ｓ、又はＰから選択され、
Ｒ^１及びＲ^２は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、分岐状、非分岐状、又は環状のＣ_１−Ｃ_１２ヒドロカルビル、Ｃ_２−Ｃ_１２アルケニル、Ｃ_２−Ｃ_１２アルキニル、ＯＲ^６、ＯＣＯＲ^６、ＣＨＯ、ＣＯＲ^６、ＣＨ_２ＯＲ^６、ＮＲ^６Ｒ^７、ＣＯＮＲ^６Ｒ^７、ＣＯＯＲ^６、ＣＨ_２ＮＲ^６Ｒ^７、ＳＲ^６、＝Ｏ、＝Ｓ、又は＝ＮＨから選択される、又はＲ^１とＲ^２が結合して、分岐状、非分岐状、又は環状のＣ_１−Ｃ_１０ヒドロカルビル基を含む環状構造を形成し、前記ヒドロカルビル基は、最大２個のヘテロ原子が介在していてもよく、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＲ^６、ＯＣＯＲ^６、ＣＯＯＲ^６、ＣＨＯ、ＣＯＲ^６、ＣＨ_２ＯＲ^６、ＮＲ^６Ｒ^７、ＣＨ_２ＮＲ^６Ｒ^７、及びＳＲ^７、＝Ｏ、＝Ｓ、及び＝ＮＨから独立して選択される最大３個の基で置換されていてもよく、
Ｙは、単結合、又は線状、分岐状、又は環状の任意に置換された、最大２個のヘテロ原子が介在していてもよいＣ_１−Ｃ_１２アルキル、ＯＲ^６、ＯＣＯＲ^６、ＣＨＯ、ＣＯＲ^６、ＣＨ_２ＯＲ^６、ＮＲ^６Ｒ^７、ＣＯＯＲ^６、ＣＨ_２ＮＲ^６Ｒ^７、ＳＲ^６、＝Ｏ、＝Ｓ、又は＝ＮＨから選択され、非隣接ＣＨ_２基の１以上は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ^６−、−ＮＲ^６−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ^６−、−ＮＲ^６−ＣＯＯ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ^６−、−ＮＲ^６−ＣＯ−ＮＲ^６−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｏ−ＣＯ−Ｏ−、ＳＲ^６−、ＳＯ_３Ｒ^６−で置き換えられていてもよく、
Ｒ^６及びＲ^７は、それぞれ独立して、Ｈ又は分岐状、非分岐状、又は環状のＣ_１−１２ヒドロカルビルから選択され、
Ｒ^３、Ｒ^４、及びＲ^５は、それぞれ独立して、−ＣＯＨ、−ＣＯ_２Ｈ、−ＳＯ_２Ｈ、−ＳＯ_３Ｈ、−ＳＯ_４Ｈ、−ＰＯ_２Ｈ、−ＰＯ_３Ｈ、−ＰＯ_４Ｈ_２、−Ｃ（Ｏ）−（Ｃ_１−Ｃ_１０）アルキル、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ（Ｃ_１−Ｃ_１０）アルキル、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨＲ^８、又は−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ^８Ｒ^９から選択され、Ｒ^８及びＲ^９は、それぞれ独立して、Ｈ、結合、（Ｃ_１−Ｃ_１０）アルキレン、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｃ（Ｏ）、Ｃ（Ｓ）、−Ｃ（Ｓ）−ＮＨ−ベンジル−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ベンジル、−Ｃ（Ｏ）−（Ｃ_１−Ｃ_１０）アルキレン、−（ＣＨ_２）_ｐ−ＮＨ、−（ＣＨ_２）_ｐ−（Ｃ_１−Ｃ_１０）アルキレン、−（ＣＨ_２）_ｐ−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ_２）_ｑ、−（ＣＨ_ｒＣＨ_２）_ｔ−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ_２）_ｐ、−（ＣＨ_２）_ｐ−ＣＯ−ＣＯＨ、−（ＣＨ_２）_ｐ−ＣＯ−ＣＯ_２Ｈ、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−Ｃ［（ＣＨ_２）_ｑ−ＣＯＨ］_３、−Ｃ［（ＣＨ_２）_ｐ−ＣＯＨ］_３、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−Ｃ［（ＣＨ_２）_ｑ−ＣＯ_２Ｈ］_３、−Ｃ［（ＣＨ_２）_ｐ−ＣＯ_２Ｈ］_３、又は−（ＣＨ_２）_ｐ−（Ｃ_５−Ｃ_１４）ヘテロアリールから選択され、
スペーサーは、少なくとも１つのＣ−Ｎ結合を含み、
リンカーは、本明細書に定義される一般式（６）で特徴付けられ、
ａ、ｂ、ｐ、ｑ、ｒ、ｔは、それぞれ独立して、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０から選択される整数である。）
又はその薬学的に許容される塩、エステル、溶媒和物、若しくは放射標識錯体。

【0122】

より好ましくは、本発明コンジュゲートは、一般式（１２．４）又は（１３．４）で特徴付けることができる。

【化23】

（式中、
Ｄは、キレーターであり、好ましくは１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸（ＤＯＴＡ）、Ｎ，Ｎ”−ビス［２−ヒドロキシ−５−（カルボキシエチル）−ベンジル］エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ”−二酢酸（ＨＢＥＤ−ＣＣ）、１，４，７−トリアザシクロノナン−１，４，７−三酢酸（ＮＯＴＡ）、２−（４，７−ビス（カルボキシメチル）−１，４，７−トリアゾナン−１−イル）ペンタン二酸（ＮＯＤＡＧＡ）、２−（４，７，１０−トリス（カルボキシメチル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１−イル）−ペンタン二酸（ＤＯＴＡＧＡ）、１，４，７−トリアザシクロノナンホスフィン酸（ＴＲＡＰ）、１，４，７−トリアザシクロノナン−１−［メチル（２−カルボキシエチル）−ホスフィン酸］−４，７−ビス［メチル（２−ヒドロキシメチル）ホスフィン酸］（ＮＯＰＯ）、３，６，９，１５−テトラアザビシクロ［９，３，１．］ペンタデカ−１（１５），１１，１３−トリエン−３，６，９−三酢酸（ＰＣＴＡ）、Ｎ’−｛５−［アセチル（ヒドロキシ）アミノ］ペンチル｝−Ｎ−［５−（｛４−［（５−アミノペンチル）（ヒドロキシ）アミノ］−４−オキソブタノイル｝アミノ）ペンチル］−Ｎ−ヒドロキシスクシンアミド（ＤＦＯ）、及びジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）、又はそれらの誘導体から選択され、
Ｒ^１及びＲ^２は、好ましくは、それぞれ独立して、ハロゲン（好ましくは、ヨウ素又は臭素）、及びＣ_１−６アルキル、好ましくはＣ_１−３アルキル、更により好ましくはメチルから選択され、
リンカーは、上に定義される一般式（６）で特徴付けられ、より好ましくは、上に定義される一般式（６ａ）で特徴付けられ、
ａ、ｂ、ｄ、ｍ、ｎは、それぞれ独立して、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０から選択される整数であり、より好ましくは、ａ及びｂは、それぞれ独立して、０、１、２、３、４、５、又は６から選択される整数であり、ｂ、ｄ、及びｍは、１、２、３、４、５、又は６から選択される整数である。）

【0123】

より好ましくは、本発明コンジュゲートは、一般式（１ｂ）で特徴付けることができる。

【化24】

（式中、
Ｄは、キレーターであり、好ましくは１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸（ＤＯＴＡ）、Ｎ，Ｎ”−ビス［２−ヒドロキシ−５−（カルボキシエチル）−ベンジル］エチレンジアミン−Ｎ，Ｎ”−二酢酸（ＨＢＥＤ−ＣＣ）、１，４，７−トリアザシクロノナン−１，４，７−三酢酸（ＮＯＴＡ）、２−（４，７−ビス（カルボキシメチル）−１，４，７−トリアゾナン−１−イル）ペンタン二酸（ＮＯＤＡＧＡ）、２−（４，７，１０−トリス（カルボキシメチル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１−イル）−ペンタン二酸（ＤＯＴＡＧＡ）、１，４，７−トリアザシクロノナンホスフィン酸（ＴＲＡＰ）、１，４，７−トリアザシクロノナン−１−［メチル（２−カルボキシエチル）−ホスフィン酸］−４，７−ビス［メチル（２−ヒドロキシメチル）ホスフィン酸］（ＮＯＰＯ）、３，６，９，１５−テトラアザビシクロ［９，３，１．］ペンタデカ−１（１５），１１，１３−トリエン−３，６，９−三酢酸（ＰＣＴＡ）、Ｎ’−｛５−［アセチル（ヒドロキシ）アミノ］ペンチル｝−Ｎ−［５−（｛４−［（５−アミノペンチル）（ヒドロキシ）アミノ］−４−オキソブタノイル｝アミノ）ペンチル］−Ｎ−ヒドロキシスクシンアミド（ＤＦＯ）、及びジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）、又はそれらの誘導体から選択され、
Ｑは、置換又は非置換のアリール、アルキルアリール、及びシクロアルキルから選択され、
Ｗは、−（ＣＨ_２）_ｄ−アリール又は−（ＣＨ_２）_ｄ−ヘテロアリールから選択され、
Ｒ^１及びＲ^２は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、分岐状、線状、又は環状のＣ_１−Ｃ_１２ヒドロカルビルから選択され、前記ヒドロカルビルは、最大２個のヘテロ原子が介在していてもよく、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、分岐状、非分岐状、又は環状のＣ_１−Ｃ_１２ヒドロカルビル、ＯＲ^７、ＯＣＯＲ^７、ＣＯＯＲ^７、ＣＨＯ、ＣＯＲ^７ ＣＨ_２ＯＲ^７、ＮＲ^７Ｒ^８、ＣＨ_２ＮＲ^７Ｒ^８、及びＳＲ^８、＝Ｏ、＝Ｓ、及び＝ＮＨから独立して選択される最大３個の基で置換されていてもよく、Ｒ^７及びＲ^８は、それぞれ独立して、Ｈ又は分岐状、非分岐状、又は環状のＣ_１−１２ヒドロカルビルから選択され、好ましくは、Ｒ^１及びＲ^２は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｂｒ、Ｉ、及び線状Ｃ_１−Ｃ_１２アルキルから選択され、
Ｒ^３、Ｒ^４、及びＲ^５は、それぞれ独立して、−ＣＯＨ、−ＣＯ_２Ｈ、−ＳＯ_２Ｈ、−ＳＯ_３Ｈ、−ＳＯ_４Ｈ、−ＰＯ_２Ｈ、−ＰＯ_３Ｈ、−ＰＯ_４Ｈ_２、−Ｃ（Ｏ）−（Ｃ_１−Ｃ_１０）アルキル、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ（Ｃ_１−Ｃ_１０）アルキル、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨＲ^８、又は−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ^８Ｒ^９から選択され、Ｒ^８及びＲ^９は、それぞれ独立して、Ｈ、結合、（Ｃ_１−Ｃ_１０）アルキレン、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｃ（Ｏ）、Ｃ（Ｓ）、−Ｃ（Ｓ）−ＮＨ−ベンジル−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ベンジル、−Ｃ（Ｏ）−（Ｃ_１−Ｃ_１０）アルキレン、−（ＣＨ_２）_ｐ−ＮＨ、−（ＣＨ_２）_ｐ−（Ｃ_１−Ｃ_１０）アルキレン、−（ＣＨ_２）_ｐ−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ_２）_ｑ、−（ＣＨ_ｒＣＨ_２）_ｔ−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ_２）_ｐ、−（ＣＨ_２）_ｐ−ＣＯ−ＣＯＨ、−（ＣＨ_２）_ｐ−ＣＯ−ＣＯ_２Ｈ、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−Ｃ［（ＣＨ_２）_ｑ−ＣＯＨ］_３、−Ｃ［（ＣＨ_２）_ｐ−ＣＯＨ］_３、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−Ｃ［（ＣＨ_２）_ｑ−ＣＯ_２Ｈ］_３、−Ｃ［（ＣＨ_２）_ｐ−ＣＯ_２Ｈ］_３、又は−（ＣＨ_２）_ｐ−（Ｃ_５−Ｃ_１４）ヘテロアリールから選択され、
ａ、ｂ、ｄ、ｐ、ｑ、ｒ、ｓ、及びｔは、それぞれ独立して、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０から選択される整数であり、
スペーサーは、少なくとも１つのＣ−Ｎ結合を含む。）
又はその薬学的に許容される塩、エステル、溶媒和物、若しくは放射標識錯体。

【0124】

一般式（１ｂ）で表される本発明の好ましいコンジュゲートにおいては、以下の定義のいずれか１つ、好ましくは以下の定義の少なくとも２つ、より好ましくは少なくとも３つ、より好ましくは少なくとも４つ、又は最も好ましくは全てが、「Ｄ」、「Ｑ」、「Ｗ」、「ａ」、「ｂ」、「Ｒ^１」、「Ｒ^２」、Ｒ^３」、「Ｒ^４」、及び／又は「Ｒ^５」に適用され得る。

【0125】

Ｄは、任意のキレーター（例えば、本明細書に定義されるもの）から選択することができ、より好ましくは、Ｄは、ＤＯＴＡ、ＤＯＴＡ、ＨＢＥＤ−ＣＣ、ＮＯＴＡ、ＮＯＤＡＧＡ、ＤＯＴＡＧＡ、ＴＲＡＰ、ＮＯＰＯ、ＰＣＴＡ、ＤＦＯ、ＤＴＰＡ、又はそれらの誘導体から選択することができ、最も好ましくは、Ｄは、ＤＯＴＡ、ＮＯＤＡＧＡ、ＤＯ３ＡＰ、ＤＯ３ＡＰ^ＰｒＡ、又はＤＯ３ＡＰ^ＡＢｎから選択することができる。

【0126】

Ｑは、置換又は非置換のＣ_５−Ｃ_７シクロアルキルから選択することができる。Ｗは、−（ＣＨ_２）−ナフチル、−（ＣＨ_２）−フェニル、−（ＣＨ_２）−ビフェニル、−（ＣＨ_２）−インドリル、又は−（ＣＨ_２）−ベンゾチアゾリルから選択でき、より好ましくは、Ｗは、−（ＣＨ_２）−ナフチルであることができる。

【0127】

ａ、ｂは、それぞれ独立して、０、１、２、３、４、５、又は６から選択される整数であることができる。

【0128】

Ｒ^１及びＲ^２は、それぞれ独立して、Ｈ、ヨウ素、及びＣ_１−Ｃ_３アルキルから選択することができ、Ｒ^３、Ｒ^４、及びＲ^５は、それぞれＣＯ_２Ｈであることができる。

【0129】

そのような好ましいコンジュゲートは、一般式（１ｃ）で特徴付けることができる。

【化25】

（式中、
以下の定義のいずれか１つ、好ましくは少なくとも２つ、より好ましくは少なくとも３つ、又は最も好ましくは全てが、「Ｄ」、「ａ」、「Ｒ^１」、及び／又は「Ｒ^２」に適用することができ、
Ｄは、ＤＯＴＡ、ＤＯＴＡ、ＨＢＥＤ−ＣＣ、ＮＯＴＡ、ＮＯＤＡＧＡ、ＤＯＴＡＧＡ、ＴＲＡＰ、ＮＯＰＯ、ＰＣＴＡ、ＤＦＯ、ＤＴＰＡ、又はそれらの誘導体から選択することができる。最も好ましくは、Ｄは、ＤＯＴＡ、ＮＯＤＡＧＡ、ＤＯ３ＡＰ、ＤＯ３ＡＰ^ＰｒＡ、又はＤＯ３ＡＰ^ＡＢｎから選択することができる、
ａは、０、１、２、３、４、５、又は６から選択される整数であることができる。
Ｒ^１及びＲ^２は、それぞれ独立して、Ｈ、ヨウ素、又はＣ_１−Ｃ_３アルキルから選択され、
スペーサーは、少なくとも１つのＣ−Ｎ結合を含む。）
又はその薬学的に許容される塩、エステル、溶媒和物、若しくは放射標識錯体。

【0130】

一般式（１ｃ）の好ましいコンジュゲートにおいては、
ａは、０であることができ、
スペーサーは、−［ＣＨＲ^１０］_ｕ−ＮＲ^１１−であることができ、
ここで、Ｒ^１０とＲ^１１は、それぞれ独立して、Ｈ及び分岐状、非分岐状、又は環状のＣ_１−Ｃ_１２ヒドロカルビルから選択でき、ｕは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０から選択される整数であることができる。一般式（１ａ）の好ましいコンジュゲートにおいては、スペーサーは、式（３ａ）で特徴付けられる。したがって、そのような好ましいコンジュゲートは、一般式（７ａ）で特徴付けることができる。

【化26】

（式中、
Ｄは、ＤＯＴＡ、ＤＯＴＡ、ＨＢＥＤ−ＣＣ、ＮＯＴＡ、ＮＯＤＡＧＡ、ＤＯＴＡＧＡ、ＴＲＡＰ、ＮＯＰＯ、ＰＣＴＡ、ＤＦＯ、ＤＴＰＡ、又はそれらの誘導体から選択することができ、最も好ましくは、Ｄは、ＤＯＴＡ、ＮＯＤＡＧＡ、ＤＯ３ＡＰ、ＤＯ３ＡＰ^ＰｒＡ、又はＤＯ３ＡＰ^ＡＢｎから選択することができ、
Ｒ^１及びＲ^２は、それぞれ独立して、Ｈ、ヨウ素、又はＣ_１−Ｃ_３アルキルから選択することができる。）
又はその薬学的に許容される塩、エステル、溶媒和物、若しくは放射標識錯体。

【0131】

具体的には、本発明に係る好ましいコンジュゲートは、式（７ａ）（ｉ）、（７ａ）（ｉｉ）、又は（７ａ）（ｉｉｉ）で特徴付けることができる。

【化27】

【化28】

又はその薬学的に許容される塩、エステル、溶媒和物、若しくは放射標識錯体。

【0132】

式（７ａ）（ｉ）で特徴付けられるコンジュゲートは、本明細書では「ＰＳＭＡ−０６」又は「ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６」とも呼ばれる。

【0133】

式（７ａ）（ｉｉ）で特徴付けられるコンジュゲートは、本明細書では「ＰＳＭＡ−０３」又は「ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０３」とも呼ばれる。式（７ａ）（ｉｉｉ）で特徴付けられるコンジュゲートは、本明細書では「ＰＳＭＡ−８９」又は「ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−８９」とも呼ばれる。

【0134】

一般式（１ｃ）の代替の好ましいコンジュゲートにおいては、スペーサーは、好ましくは（Ｄ−／Ｌ−）アスパラギン酸、グルタミン酸、又はリジンから選択される少なくとも１つのアミノ酸残基を含む。好ましくは、スペーサーは、好ましくは（Ｄ−／Ｌ−）アスパラギン酸、グルタミン酸、又はリジンアミノ酸残基から独立して選択される、少なくとも１、２、３、４、又は最大５つのアミノ酸残基を含むことができる。

【0135】

そのようなコンジュゲートは、好ましくは、一般式（３ｂ）又は（３ｃ）で表されるスペーサーを含むことができる。したがって、そのような好ましいコンジュゲートは、一般式（７ｂ）で特徴付けることができる。

【化29】

（式中、
Ｄは、ＤＯＴＡ、ＤＯＴＡ、ＨＢＥＤ−ＣＣ、ＮＯＴＡ、ＮＯＤＡＧＡ、ＤＯＴＡＧＡ、ＴＲＡＰ、ＮＯＰＯ、ＰＣＴＡ、ＤＦＯ、ＤＴＰＡ、又はそれらの誘導体から選択することができ、最も好ましくは、Ｄは、ＤＯＴＡ、ＮＯＤＡＧＡ、ＤＯ３ＡＰ、ＤＯ３ＡＰ^ＰｒＡ、又はＤＯ３ＡＰ^ＡＢｎから選択することができ、
Ｒ^１及びＲ^２は、それぞれ独立して、Ｈ、ヨウ素、及びＣ_１−Ｃ_３アルキルから選択され、
Ａは、好ましくは（Ｄ−）アスパラギン酸、（Ｄ−）グルタミン酸、又は（Ｌ−リジン）から選択されるアミノ酸残基であり、
Ｖは、単結合、Ｎ、又は最大３個のヘテロ原子を含む任意に置換されたＣ_１−Ｃ_１２ヒドロカルビルから選択され、前記ヘテロ原子は、好ましくはＮから選択され、
ｎは、１、２、３、４、又は５、好ましくは１、２、又は３から選択される整数であり、
ａは、１、２、３、４、５、又は６から選択される整数である。）
又はその薬学的に許容される塩、エステル、溶媒和物、若しくは放射標識錯体。

【0136】

具体的には、そのようなコンジュゲートは、式（７ｂ）（ｉ）、（７ｂ）（ｉｉ）、又は（７ｂ）（ｉｉｉ）で特徴付けることができる。

【化30】

又はその薬学的に許容される塩、エステル、溶媒和物、若しくは放射標識錯体。

【0137】

式（７ｂ）（ｉ）で特徴付けられるコンジュゲートは、本明細書ではＰＳＭＡ−０５又は「ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０５」とも呼ばれる。

【化31】

又はその薬学的に許容される塩、エステル、溶媒和物、若しくは放射標識錯体。

【0138】

式（７ｂ）（ｉｉ）で特徴付けられるコンジュゲートは、本明細書では「ＰＳＭＡ−０７」又は「ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０７」とも呼ばれる。

【化32】

又はその薬学的に許容される塩、エステル、溶媒和物、若しくは放射標識錯体。

【0139】

式（７ｂ）（ｉｉｉ）で特徴付けられるコンジュゲートは、本明細書では「ＰＳＭＡ−０８」又は「ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０８」とも呼ばれる。

【化33】

又はその薬学的に許容される塩、エステル、溶媒和物、若しくは放射標識錯体。

【0140】

式（７ｂ）（ｉｖ）で特徴付けられるコンジュゲートは、本明細書では「ＰＳＭＡ−０４」又は「ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０４」とも呼ばれる。

【0141】

本発明は、更に、構造式（１４）、（１５）、及び（１６）で特徴付けられるコンジュゲートを提供する。

【化34】

【化35】

【0142】

薬学的に許容される塩
本発明は、更に、本明細書に記載されるコンジュゲートの薬学的に許容される塩を包含する。

【0143】

医薬組成物の調製は、当業者によく知られている。本発明のコンジュゲートの薬学的に許容される塩は、本発明に係るコンジュゲートの任意の遊離塩基及び／又は酸を少なくとも化学量論量の所望の塩形成酸又は塩基とそれぞれ反応させるなどの従来の手続によって調製することができる。

【0144】

本発明の薬学的に許容される塩としては、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、亜鉛、及びアンモニウムなどの無機カチオンとの塩、及び有機塩基との塩が挙げられる。適切な有機塩基としては、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン、アルギン（ａｒｇｍｍｅ）、ベンザチン、ジオールアミン、オラミン、プロカム、及びトロメタミンが挙げられる。本発明に係る薬学的に許容される塩としては、また、有機酸又は無機酸に由来する塩が挙げられる。適切なアニオンとしては、酢酸塩、アジピン酸塩、ベシラート、臭化物、カムシラート、塩化物、クエン酸塩、エジシラート、エストラート、フマル酸塩、グルセプト酸塩、グルコン酸塩、グルクロン酸塩、馬尿酸塩、ヒクラート、臭化水素酸塩、塩酸塩、ヨウ化物、イセチオナート、乳酸塩、ラクトビオン酸塩、マレイン酸塩、メシラート、臭化メチル、硫酸メチル、ナプシル酸塩、硝酸塩、オレイン酸塩、パモ酸塩、リン酸塩、ポリガラクツロン酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、スルホサリチル酸塩、タンニン酸塩、酒石酸塩、テレフタラート、トシラート、及びトリエチオダイドが挙げられる。

【0145】

錯体化／非錯体化形態
本発明は、更に、キレーターＤが金属イオン（放射性核種など）と錯体化されていても錯体化されていなくてもよい、本明細書に記載のコンジュゲートを包含する。

【0146】

用語「放射性核種」（又は「放射性同位体」）は、粒子（ｃｏｒｐｕｓｃｕｌａｒ）（即ち、陽子（アルファ線）又は電子（ベータ線）又は電磁気放射（ガンマ線）の放出を伴って崩壊する不安定な中性子対陽子比を有する天然又は人工の同位体を意味する。換言すれば、放射性核種は放射性崩壊を受ける。キレーターＤは、知られた放射性核種と錯体を形成することができる。好ましくは癌のイメージング又は治療に有用な放射性核種が好適である。そのような放射性核種としては、限定するものではないが、^９４Ｔｃ、^９９ｍＴｃ、^９０Ｉｎ、^１１１Ｉｎ、^６７Ｇａ、^６８Ｇａ、^８６Ｙ、^９０Ｙ、^１７７Ｌｕ、^１５１Ｔｂ、^１８６Ｒｅ、^１８８Ｒｅ、^６４Ｃｕ、^６７Ｃｕ、^５５Ｃｏ、^５７Ｃｏ、^４３Ｓｃ、^４４Ｓｃ、^４７Ｓｃ、^２２５Ａｃ、^２１３Ｂｉ、^２１２Ｂｉ、^２１２Ｐｂ、^２２７Ｔｈ、^１５３Ｓｍ、^１６６Ｈｏ、^１５２Ｇｄ、^１５３Ｇｄ、^１５７Ｇｄ、又は^１６６Ｄｙが挙げられる。適切な放射性核種の選択は、特に、キレーターＤの化学構造とキレート化能力、及び結果として得られる（錯体化）コンジュゲートの用途（診断対治療など）に依存する。例えば、^９０Ｙ、^１３１Ｉ、^１６１Ｔｂ、^１７７Ｌｕなどのベータ放射体は、同時全身放射性核種治療に使用できる。キレーターとしてＤＯＴＡを用いると、放射性核種として^６８Ｇａ、^{４３、４４、４７}Ｓｃ、^１７７Ｌｕ、^１６１Ｔｂ、^２２５Ａｃ、^２１３Ｂｉ、^２１２Ｂｉ、^２１２Ｐｂのいずれかの使用が有利に可能にすることができる。

【0147】

幾つかの好ましい実施形態では、放射性核種は、^１７７Ｌｕであることができる。幾つかの好ましい実施形態では、放射性核種は、^４４Ｓｃであることができる。幾つかの好ましい実施形態では、放射性核種は、^６４Ｃｕであることができる。幾つかの好ましい実施形態では、放射性核種は、^６８Ｇａであることができる。

【0148】

コンジュゲートと放射性核種の適切な組合せを選択することは、当業者の技能と知識の範囲内である。例えば、幾つかの好ましい実施形態では、キレーターはＤＯＴＡであることができ、放射性核種は^１７７Ｌｕであることができる。他の好ましい実施形態では、キレーターはＤＯＴＡであることができ、放射性核種は^６８Ｇａであることができる。他の好ましい実施形態では、キレーターはＤＯＴＡであることができ、放射性核種は^４４Ｓｃであることができる。更に好ましい実施形態では、キレーターはＤＯＴＡであることができ、放射性核種は^６４Ｃｕであることができる。他の好ましい実施形態では、キレーターはＮＯＤＡＧＡであることができ、放射性核種は^６４Ｃｕであることができる。

【0149】

エステルとプロドラッグ
本発明は、更に、特に遊離カルボン酸基がエステル化されている、それらのエステル化形態の本発明コンジュゲートを包含する。そのようなエステル化化合物は、本発明コンジュゲートの製品形態であり得る。適切なエステルプロドラッグは、飽和及び不飽和Ｃ_８−Ｃ_１８脂肪酸を含む様々なアルキルエステルを含む。

【0150】

エナンチオマー
本明細書に開示されるコンジュゲートは、特定の幾何学的形態又は立体異性形態で存在し得る。更に、化合物は光学的に活性であってもよい。本発明コンジュゲートは、シス及びトランス異性体、Ｒ−及びＳ−エナンチオマー、ジアステレオマー、（Ｄ）−異性体、（Ｌ）−異性体、それらのラセミ混合物、及びそれらの他の混合物も含み得る。更なる不斉炭素原子が、アルキル基などの置換基に存在していてもよい。例えば、基又はコンジュゲートの特定のエナンチオマーが望ましい場合、不斉合成によって、又はキラル助剤による誘導体化によって調製することができ、得られるジアステレオマー混合物を分離し、補助基を切断して純粋な所望のエナンチオマーがもたらされる。或いは、基又はコンジュゲートがアミノなどの塩基性官能基、又はカルボキシルなどの酸性官能基を含む場合、適切な光学活性酸又は塩基でジアステレオマー塩を形成した後、形成されたジアステレオマーを、当技術分野でよく知られた分別結晶化又はクロマトグラフィー手段により分割し、続いて純粋なエナンチオマーを回収する。

【0151】

「立体異性体」は、その化合物の他の立体異性体を実質的に含まない化合物の１つの立体異性体である。したがって、１つのキラル中心を有する立体異性的に純粋な化合物は、その化合物の反対のエナンチオマーを実質的に含まない。２つのキラル中心を有する立体異性的に純粋な化合物は、その化合物の他のジアステレオマーを実質的に含まない。典型的な立体異性的に純粋な化合物は、約８０重量％を超えるその化合物の１つの立体異性体及び約２０重量％未満のその化合物の他の立体異性体を含み、例えば、約９０重量％を超えるその化合物の１つの立体異性体及び約１０重量％未満のその化合物の他の立体異性体を含む、又は約９５重量％を超えるその化合物の１つの立体異性体及び約５重量％未満のその化合物の他の立体異性体を含む、又は約９７重量％を超えるその化合物の１つの立体異性体及び約３重量％未満のその化合物の他の立体異性体を含む。

【0152】

したがって、本明細書に開示される式はいずれも、そのエナンチオマー及び／又は立体異性体を含む。

【0153】

放射標識錯体
更なる態様によれば、本発明は、放射標識錯体の調製のための本発明コンジュゲートの使用に関する。そのような放射標識錯体は、好ましくは、本発明に係るコンジュゲートと放射性核種を含む。キレーターＤは、好ましくは、放射性核種に配位し、放射標識錯体を形成する。適切な放射性核種は、治療診断用金属同位体から選択でき、限定するものではないが、^９４Ｔｃ、^９９ｍＴｃ、^９０Ｉｎ、^１１１Ｉｎ、^６７Ｇａ、^６８Ｇａ、^８６Ｙ、^９０Ｙ、^１７７Ｌｕ、^１５１Ｔｂ、^１８６Ｒｅ、^１８８Ｒｅ、^６４Ｃｕ、^６７Ｃｕ、^５５Ｃｏ、^５７Ｃｏ、^４３Ｓｃ、^４４Ｓｃ、^４７Ｓｃ、^２２５Ａｃ、^２１３Ｂｉ、^２１２Ｂｉ、^２１２Ｐｂ、^２２７Ｔｈ、^１５３Ｓｍ、^１６６Ｈｏ、^１５２Ｇｄ、^１５３Ｇｄ、^１５７Ｇｄ、又は^１６６Ｄｙを含む。

【0154】

更なる態様によれば、本発明は、更に、放射性核種（好ましくは上記の群から選択される）及び本発明に係るコンジュゲートを含む錯体を提供する。

【0155】

医薬組成物
更なる態様によれば、本発明は、更に、本発明コンジュゲート（本明細書に記載の薬学的に許容される塩、エステル、溶媒和物、又は放射標識錯体を含む）、及び薬学的に許容される担体及び／又は賦形剤を含む医薬組成物を提供する。

【0156】

用語「薬学的に許容される」は、本発明コンジュゲートと適合性があり、その診断又は治療活性を妨害及び／又は実質的に低下させない化合物又は剤を意味する。薬学的に許容される担体は、治療される被験体への投与に適したものとするために、十分に高い純度と十分に低い毒性を有することが好ましい。

【0157】

配合物、担体、及び賦形剤
薬学的に許容される賦形剤は、様々な機能的役割を発揮することができ、限定するものではないが、希釈剤、充填剤、増量剤、担体、崩壊剤、結合剤、潤滑剤、流動促進剤、コーティング、溶媒及び共溶媒、緩衝剤、防腐剤、アジュバント、抗酸化剤、湿潤剤、消泡剤、増粘剤、甘味剤、香料、及び保湿剤を含む。

【0158】

適切な薬学的に許容される賦形剤は、典型的には、（医薬）組成物の配合に基づき選択される。

【0159】

液体形態の（医薬）組成物の場合、一般に、有用な薬学的に許容される賦形剤としては、溶媒、（パイロジェンフリー）水などの希釈剤又は担体、リン酸又はクエン酸緩衝食塩水などの（等張）食塩水、固定油、植物油（例えば、落花生油、綿実油、ゴマ油、オリーブ油、トウモロコシ油、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコールなど）；レシチン；界面活性剤；ベンジルアルコール、パラベン、クロロブタノール、フェノール、アスコルビン酸、チメロサールなどの保存剤；糖、マンニトール、ソルビトールなどの多価アルコール、又は塩化ナトリウムなどの等張剤；モノステアリン酸アルミニウム又はゼラチン；アスコルビン酸又は亜硫酸水素ナトリウムなどの酸化防止剤；エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）などのキレーター；酢酸塩、クエン酸塩、又はリン酸塩などの緩衝剤、及び塩化ナトリウム又はデキストロースなどの張度調整剤が挙げられる。ｐＨは、塩酸又は水酸化ナトリウムなどの酸又は塩基で調整することができる。緩衝剤は、特定の参照媒体に関して高張性、等張性、又は低張性であり得る、即ち、緩衝剤は、特定の参照媒体に関してより高い、同一、又はより低い塩含量を有することができ、前記塩を、浸透又は他の濃度の影響による細胞の損傷をもたらさないそのような濃度で使用することができることが好ましい。参照媒体は、例えば、血液、リンパ液、サイトゾル液、又は他の体液などのｉｎ ｖｉｖｏ法で生じる液体、又は一般的な緩衝液又は液体などのｉｎ ｖｉｔｒｏ法で参照媒体として使用され得る液体である。そのような一般的な緩衝液又は液体は当業者に知られている。

【0160】

注射（特に、ｉ．ｖ．注射）により投与される液体（医薬）組成物は、好ましくは、製造及び保存の条件下で無菌且つ安定であるべきである。そのような組成物は、典型的には、パイロジェンフリーであり、適切なｐＨを有し、等張性であり、活性成分の安定性を維持する、非経口的に許容される水溶液として処方される。

【0161】

液体医薬組成物の場合、適切な薬学的に許容される賦形剤及び担体としては、水、典型的にはパイロジェンフリー水；等張食塩水又は緩衝（水）溶液、例えば、リン酸塩、クエン酸塩などの緩衝溶液が挙げられる。特に、本発明の（医薬）組成物の注射のためには、水又は好ましくは緩衝液、より好ましくは水性緩衝液を使用することができ、これは、ナトリウム塩、例えば少なくとも５０ｍＭのナトリウム塩、カルシウム塩、例えば少なくとも０，０１ｍＭのカルシウム塩、及び任意にカリウム塩、例えば少なくとも３ｍＭのカリウム塩を含有し得る。

【0162】

ナトリウム塩、カルシウム塩、及び任意にカリウム塩は、それらのハロゲン化物の形態（例えば、塩化物、ヨウ化物、又は臭化物）、それらの水酸化物、炭酸塩、炭酸水素塩、又は硫酸塩などで存在してもよい。限定するものではないが、ナトリウム塩の例としては、例えば、ＮａＣｌ、ＮａＩ、ＮａＢｒ、Ｎａ_２ＣＯ_３、ＮａＨＣＯ_３、Ｎａ_２ＳＯ_４が挙げられ、任意のカリウム塩の例としては、例えば、ＫＣｌ、ＫＩ、ＫＢｒ、Ｋ_２ＣＯ_３、ＫＨＣＯ_３、Ｋ_２ＳＯ_４が挙げられ、カルシム塩の例としては、例えば、ＣａＣｌ_２、ＣａＩ_２、ＣａＢｒ_２、ＣａＣＯ_３、ＣａＳＯ_４、Ｃａ（ＯＨ）_２が挙げられる。更に、前記カチオンの有機アニオンも緩衝剤中に含有されてもよい。

【0163】

上に定義される注射目的に適した緩衝剤は、塩化ナトリウム（ＮａＣｌ）、塩化カルシウム（ＣａＣｌ_２）、及び任意に塩化カリウム（ＫＣｌ）から選択される塩を含むことができ、前記塩化物に加えて更なるアニオンが存在してもよい。ＣａＣｌ_２はまた、ＫＣｌのような他の塩で置き換えることができる。典型的には、注射緩衝液中の塩は、少なくとも５０ｍＭの塩化ナトリウム（ＮａＣｌ）、少なくとも３ｍＭの塩化カリウム（ＫＣｌ）、及び少なくとも０．０１ｍＭの塩化カルシウム（ＣａＣｌ_２）の濃度で存在する。注射緩衝液は、特定の参照媒体に関して高張性、等張性、又は低張性であり得る、即ち、緩衝剤は、特定の参照媒体に関してより高い、同一、又はより低い塩含量を有し得る。前記塩を、浸透又は他の濃度の影響による細胞の損傷をもたらさないそのような濃度で使用することができることが好ましい。

【0164】

（半）固体形態の（医薬）組成物の場合、適切な薬学的に許容される賦形剤及び担体としては、微結晶セルロース、トラガカントガム、又はゼラチンなどの結合剤；デンプン又はラクトース；例えば、ラクトース、グルコース、及びスクロースなどの糖；例えば、コーンスターチ又はポテトスターチなどのデンプン；セルロース及びその誘導体、例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロース、酢酸セルロースなど；アルギン酸などの崩壊剤；ステアリン酸マグネシウムなどの潤滑剤；ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウムなどの滑剤；硫酸カルシウム、コロイド状二酸化ケイ素など；スクロース又はサッカリンなどの甘味剤；ペパーミント、サリチル酸メチル、又はオレンジ香味料などの香味剤などが挙げられる。

【0165】

一般に、局所投与用の（医薬）組成物は、クリーム、軟膏、ゲル、ペースト、又は散剤として処方することができる。経口投与用の（医薬）組成物は、錠剤、カプセル剤、液剤、散剤として、又は持続放出形式で処方することができる。しかし、好ましい実施形態によれば、本発明の（医薬）組成物は、特に静脈内又は腫瘍内注射を介して非経口的に投与され、したがって、本明細書の他の箇所で記載されるように非経口投与用に液体形態又は凍結乾燥形態で処方される。非経口製剤は、典型的にはバイアル、ＩＶバッグ、アンプル、カートリッジ、又はプレフィルドシリンジに保管され、注射剤、吸入剤、又はエアロゾルとして投与することができるが、注射剤が好ましい。

【0166】

（医薬）組成物は、凍結乾燥形態で提供することができる。凍結乾燥（医薬）組成物は、投与前に、有利には水性担体に基づく、適切な緩衝液中で再構成される。

【0167】

（医薬）組成物は、好ましくは、安全かつ有効な量の本発明コンジュゲート又は放射標識錯体を含む。

【0168】

本明細書に使用される場合、「安全且つ有効な量」は、治療されるべき疾患の診断を可能にする及び／又は積極的な変化を有意に誘発するのに十分な活性剤の量を意味する。しかし、同時に、「安全且つ有効な量」は、深刻な副作用を回避するのに十分、即ち、利益とリスクの間に良好なな関係をもたらすのに十分小さい。「安全且つ有効な量」は更に、診断又は治療されるべき特定の状態に関連して、また、治療対象患者の年齢及び体調、状態の重症度、治療期間、付随する治療の性質、使用される特定の薬学的に許容される賦形剤又は担体の性質、及び類似の要因にも関連して変化する。

【0169】

本発明コンジュゲートはまた、好ましくは癌の治療、特に前立腺癌、膵臓癌、腎癌、又は膀胱癌の治療及び/又は予防のための医薬の調製における使用のために提供される。

【0170】

キット
更なる態様によれば、本発明は、本発明コンジュゲート（その薬学的に許容される塩、エステル、溶媒和物、又は放射標識錯体を含む）及び／又は本発明の医薬組成物を含むキットに関する。

【0171】

任意に、キットは、放射性核種、抗菌剤、可溶化剤などの、医薬組成物の文脈において本明細書に定義される少なくとも１つの更なる剤を含み得る。

【0172】

キットは、上に例示した成分を適切な容器中に含む２つ以上のパーツを含むキットであることができる。例えば、容器が成分の適時前の混合を好ましくは防止する限り、各容器は、バイアル、ボトル、スクイーズボトル、ジャー、密封スリーブ、エンベロープ若しくはポーチ、チューブ若しくはブリスターパッケージ、又は他の好適な形態であり得る。異なる成分はそれぞれ、別々に提供されてもよく、又は異なる構成要素の幾つかは、一緒に（即ち同じ容器内に）提供されてもよい。

【0173】

薬剤師又は医師による意図的な混合の前に、１つの区画の内容物が別の区画の内容物と物理的に関連することができないという限り、容器は、バイアル、チューブ、ジャー、又はエンベロープ、又はスリーブ、又はブリスターパッケージ、又はボトル内の区画又はチャンバーでもあり得る。

【0174】

キット又はキットオブパーツは、その成分のいずれかの投与及び投与量に関する情報を含む技術的な説明書を更に含み得る。

【0175】

治療及び診断方法並びに使用
更なる態様によれば、本発明は、医薬及び／又は診断薬における使用のための本発明コンジュゲート（その薬学的に許容される塩、エステル、溶媒和物、及び放射標識錯体を含む）、医薬組成物、又はキットに関する。好ましくは、前記本発明コンジュゲート、医薬組成物、又はキットは、ヒトの医療目的に使用される。したがって、本発明は、更に、医薬として使用するための、これらの本発明コンジュゲート、医薬組成物、又はキットを包含する。

【0176】

本発明コンジュゲートは、好ましくは、選択的に前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）を標的とすることができる。したがって、特定の態様によれば、本発明は、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）を発現する細胞及び／又は組織の存在を検出する方法における使用のための本発明コンジュゲート、医薬組成物、又はキットを提供する。

【0177】

ＰＳＭＡは、特に、悪性癌細胞上で発現する。本明細書で使用される用語「癌」は、周囲組織に浸潤し且つ遠位の身体部位に転移する傾向がある細胞の制御されていない通常速い増殖を特徴とする新生物を意味する。この用語は、良性及び悪性の新生をが含む。癌の悪性度は、通常、退形成、浸潤性、及び転移性で特徴付けられる一方、良性の悪性度は、通常、これらの特性は有しない。この用語は、腫瘍の成長を特徴とする新生物と血液及びリンパ系の癌を含む。

【0178】

具体的には、ＰＳＭＡは、前立腺癌細胞、膵臓癌細胞、腎癌細胞、又は膀胱癌細胞において、任意に多量に発現され得る。

【0179】

更なる特定の態様によれば、本発明は、前立腺癌、膵臓癌、腎癌、又は膀胱癌を診断、治療、及び／又は予防する方法における使用のための、本発明コンジュゲート（その薬学的に許容される塩、エステル、溶媒和物、及び放射標識錯体を含む）、医薬組成物、又はキットを提供する。

【0180】

用語「診断」又は「診断する」は、その徴候及び症状から疾患を識別する行為、及び／又は本件の場合、疾患を示す生物学的マーカー（例えば、遺伝子又はタンパク質）の分析を意味する。

【0181】

疾患の「治療」又は「治療すること」という用語は、その疾患を予防又はそれに対し防御すること（即ち、臨床症状が発症しないようにすること）；疾患を阻害すること（即ち、臨床症状の発症を阻止又は抑制すること、及び／又は疾患を軽減すること（即ち、臨床症状の後退を引き起こすこと）を含む。理解されるように、最終的な１つ又は複数の誘発事象は未知又は潜在的であり得るので、疾患又は障害を「予防する」ことと「抑制すること」とを区別することは常に可能という訳ではない。したがって、用語「予防」は、「予防すること」及び「抑制すること」の両方を包含する一種の「治療」を構成すると理解される。したがって、用語「治療」は「予防」を含む。

【0182】

本明細書で使用される「被験体」、「患者」、又は「個体」という用語は、一般に、ヒト及び非ヒト動物、好ましくは哺乳動物（例えば、マーモセット、タマリン、クモザル、フクロウザル、ベルベットサル、リスザル、ヒヒ、マカク、チンパンジー、オランウータン、ゴリラ；ウシ；ウマ；ヒツジ；ブタ；トリ；ネコ；イヌ；マウス；ラット；ウサギ；モルモットなどの非ヒト霊長類）、例えば、キメラ及びトランスジェニック動物並びに疾患モデルを含む。本発明の文脈において、「被験体」という用語は、好ましくは非ヒト霊長類又はヒト、最も好ましくはヒトを意味する。

【0183】

本明細書に記載され、癌、特に前立腺癌、膵臓癌、腎癌、又は膀胱癌の診断、治療、又は予防に関する使用及び方法は、好ましくは、（ａ）本発明コンジュゲート（その薬学的に許容される塩、エステル、溶媒和物、及び放射標識錯体を含む）、医薬組成物、又はキットを患者に投与する工程と、（ｂ）前記患者から放射線画像を取得する工程を含むことができる。

【0184】

本発明コンジュゲート、医薬組成物、又はキットは、典型的には、非経口投与される。投与は、好ましくは全身的に、例えば静脈内（ｉ．ｖ．）、皮下、筋肉内、又は皮内注射により達成することができる。或いは、投与は、例えば腫瘍内注射により局所的に達成することができる。

【0185】

本発明コンジュゲート、医薬組成物、又はキットは、それを必要とする被験体に１日数回、１日間に１回ずつ、１日間おきに１回ずつ、１週間に１回ずつ、又は１ヶ月間に１回ずつ投与することができる。好ましくは、治療、診断、又は予防は、本発明コンジュゲート、医薬組成物、又はキットの有効用量で行われる。

【0186】

本発明コンジュゲートの有効用量は、通常の実験、例えば、動物モデルを使用して決定することができる。そのようなモデルとしては、限定するものではないが、ウサギ、ヒツジ、マウス、ラット、イヌ、及び非ヒト霊長類モデルが挙げられる。本発明コンジュゲート又は放射標識錯体の治療効果及び毒性は、例えば、ＬＤ５０（集団の５０％致死量）及びＥＤ５０（集団の５０％に治療的に有効な用量）を決定するための、細胞培養又は実験動物における標準的な医薬手続によって決定できる。毒性効果と治療効果との間の用量比が治療指数であり、比ＬＤ５０／ＥＤ５０として表すことができる。細胞培養アッセイ及び動物実験から得られたデータは、ヒトにおける使用のための用量範囲を決定するのに使用することができる。前記コンジュゲートの用量は、好ましくは、毒性が殆どない又は全くないＥＤ５０を含む血中濃度の範囲内にある。

【0187】

例えば、本発明コンジュゲートの治療又は診断有効用量は、投与単位当たり約０．００１ｍｇ〜１０ｍｇ、好ましくは約０．０１ｍｇ〜５ｍｇ、より好ましくは約０．１ｍｇ〜２ｍｇ、又は投与単位当たり約０．０１ｎｍｏｌ〜１ｍｍｏｌ、特に、投与単位当たり１ｎｍｏｌ〜１ｍｍｏｌ、好ましくは投与単位当たり１μｍｏｌ〜１ｍｍｏｌである。本発明コンジュゲートの治療又は診断有効用量は、（体重１ｋｇ当たり）約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜１０ｇ／ｋｇ、好ましくは約０．０５ｍｇ／ｋｇ〜５ｇ／ｋｇ、より好ましくは約０．１ｍｇ／ｋｇ〜２．５ｇ／ｋｇの範囲であり得ることもまた想定される。有利なことに、それらの好ましい薬物動態特性のために、本発明コンジュゲートは、好ましくは、他のＰＳＭＡリガンドよりも低用量で投与することができる。

【0188】

上で確立したように、本発明コンジュゲートは、特に、ＰＳＭＡ発現細胞の標的化を含む治療診断用途に役立つ。本明細書で使用される用語「治療診断薬」は、「治療のみ」、「診断のみ」、及び「治療及び診断」の用途を含む。更なる態様において、本発明は、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）を発現する細胞及び／又は組織の存在を検出するｉｎ ｖｉｔｒｏ法であって、（ａ）前記ＰＳＭＡ発現細胞及び／又は組織を本発明コンジュゲート（その薬学的に許容される塩、エステル、溶媒和物、及び放射標識錯体を含む）、医薬組成物、又はキットと接触させることと、（ｂ）検出手段、任意に放射線イメージングを適用し、前記細胞及び／又は組織を検出することとを含むｉｎ ｖｉｔｒｏ法に関する。

【0189】

本発明のｉｎ ｖｉｖｏ及びｉｎ ｖｉｔｒｏでの使用及び方法において、放射線イメージングは、当技術分野で知られた任意の手段及び方法を使用して達成することができる。好ましくは、放射線イメージングは、陽電子放出断層撮影（ＰＥＴ）又は単一光子放出コンピュータ断層撮影（ＳＰＥＣＴ）を含み得る。本発明コンジュゲートの放射線イメージングによって検出される標的細胞又は組織は、好ましくは（任意に癌性の）前立腺細胞又は組織、（任意に癌性の）脾臓細胞又は組織、又は（任意に癌性の）腎臓細胞又は組織を含み得る。

【0190】

本発明のｉｎ ｖｉｖｏ及びｉｎ ｖｉｔｒｏでの使用及び方法において、ＰＳＭＡ発現細胞又は組織の存在は、前立腺腫瘍（細胞）、転移した前立腺腫瘍（細胞）、腎腫瘍（細胞）、膵臓腫瘍（細胞）、膀胱腫瘍（細胞）、及びそれらの組合せの指標となり得る。したがって、本発明コンジュゲート（その薬学的に許容される塩、エステル、溶媒和物、及び放射標識錯体を含む）、医薬組成物、及びキットは、前立腺癌、腎癌、膵臓癌、又は膀胱癌の診断（及び任意で治療）に特に使用することができる。

【図面の簡単な説明】

【0191】

【図1-1】図１−１は、５０ＭＢｑ／ｎｍｏｌで標識された（Ａ）^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０１、（Ｂ）^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０３、（Ｃ）^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０４、及び（Ｄ）^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０５のＨＰＬＣベースの品質管理のクロマトグラムを示す。

【図1-2】図１−２は、５０ＭＢｑ／ｎｍｏｌで標識された（Ｅ）^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６、（Ｆ）^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０７、及び（Ｇ）^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０８のＨＰＬＣベースの品質管理のクロマトグラムを示す。

【図2】図２は、参照化合物^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−６１７（ｎ＝３）と比較した^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０１（ｎ＝３）、^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０３（ｎ＝３）、^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０４（ｎ＝１）、^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０５（ｎ＝１）、^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６（ｎ＝１）、^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０７（ｎ＝１）、^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０８（ｎ＝１）のｎ−オクタノール／ＰＢＳ分配係数を示す。

【図3】図３は、参照化合物^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−６１７（ｎ＝２）と比較した^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０１（ｎ＝２）、^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０３（ｎ＝２）、^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０４（ｎ＝１）、^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０５（ｎ＝１）、^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６（ｎ＝２）、^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０７（ｎ＝２）、^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０８（ｎ＝２）の限外ろ過アッセイのデータを示す。

【図4】図４は、参照化合物^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−６１７（ｎ＝３）と比較した^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０１（ｎ＝２）、^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０３（ｎ＝２）、^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０４（ｎ＝１）、^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０５（ｎ＝１）、^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６（ｎ＝２）、^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０７（ｎ＝２）、^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０８（ｎ＝２）の取り込みと内在化を示す。ＡとＣは、ＰＳＭＡｐｏｓ ＰＣ−３ ＰＩＰ細胞で得られたデータを示し、ＢとＤは、ＰＳＭＡｎｅｇ ＰＣ−３ ｆｌｕ細胞で得られたデータを示す。

【図5-1】図５−１は、^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０１及び^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０３（Ａ）で処理したＰＣ−３ ＰＩＰ／ｆｌｕ担腫瘍マウスの体内分布データを示す。

【図5-2】図５−２は、^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０４及び^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０５（Ｂ）で処理したＰＣ−３ ＰＩＰ／ｆｌｕ担腫瘍マウスの体内分布データを示す。

【図5-3】図５−３は、^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６、^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０７、及び^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０８（Ｃ）で処理したＰＣ−３ ＰＩＰ／ｆｌｕ担腫瘍マウスの体内分布データを示す。

【図6-1】図６−１は、^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０１〜０８の（Ａ）腫瘍の取り込みの最終的な選定（ｃｏｎｃｌｕｓｉｖｅ ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ）を示す。

【図6-2】図６−２は、^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０１〜０８の（Ｂ）腫瘍／血液比の最終的な選定を示す。

【図6-3】図６−３は、^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０１〜０８の（Ｃ）腫瘍／腎臓比の最終的な選定を示す。

【図6-4】図６−４は、^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０１〜０８の（Ｄ）腫瘍／肝臓比の最終的な選定を示す。

【図7】図７は、様々な時点（ｐ．ｉ）でのシンチグラフィ画像を示す。

【図8】図８は、様々な領域でのＳＰＥＣＴ−ＣＴ融合スキャンを示す。

【図9】図９は、ガリウム６８放射標識ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６化合物によるｐ．ｉ後１時間及び３時間のＰＥＴ画像を示す。

【図10】図１０は、（Ａ）^４４Ｓｃ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６の注射後１時間、４時間、及び６時間（！）で、ＰＣ−３ ＰＩＰ／ｆｌｕ担腫瘍マウスで得られた体内分布データを示す。（Ｂ）^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６の注射後１時間、４時間、及び２４時間で、ＰＣ−３ ＰＩＰ／ｆｌｕ担腫瘍マウスで得られた体内分布データを示す。

【図11】図１１は、全ての時点で同じスケールで最大値投影（ＭＩＰ）として示されたＰＣ−３ ＰＩＰ／ｆｌｕ担腫瘍マウスのＰＥＴ／ＣＴ画像を示す。（Ａ）^４４Ｓｃ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６の注射後１時間で得られたＰＥＴ／ＣＴスキャン。（Ｂ）^４４Ｓｃ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６の注射後４時間で得られたＰＥＴ／ＣＴスキャン。（Ｃ）^４４Ｓｃ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６の注射後２０時間で得られたＰＥＴ／ＣＴスキャン。

【図12】図１２は、同一時点で異なるスケールで最大値投影（ＭＩＰ）として示されたＰＣ−３ ＰＩＰ／ｆｌｕ担腫瘍マウスのＰＥＴ／ＣＴ画像を示す。（Ａ／Ｂ）^４４Ｓｃ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６の注射後１時間で得られたＰＥＴ／ＣＴスキャン。

【図13】図１３は、同一時点で異なるスケールで最大値投影（ＭＩＰ）として示されたＰＣ−３ ＰＩＰ／ｆｌｕ担腫瘍マウスのＰＥＴ／ＣＴ画像を示す。（Ａ／Ｂ）^４４Ｓｃ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６の注射後２０時間で得られたＰＥＴ／ＣＴスキャン。

【図14】図１４は、各種濃度のヒト血漿でインキュベーションした後の^６４Ｃｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６（Ｂ_５０＝７７０）及び^６４Ｃｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−８９（Ｂ_５０＝４５４）のＢ_５０値を計算するための限外ろ過データの片対数プロット（平均±ＳＤ、ｎ≧３）。

【図15】図１５は、（Ａ）ＰＳＭＡ陽性ＰＣ−３ ＰＩＰ細胞及び（Ｂ）ＰＳＭＡ陰性ＰＣ−３ ｆｌｕ細胞における^６４Ｃｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−８９及び^６４Ｃｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６の細胞取り込み及び内在化（平均±ＳＤ、ｎ＝３）を示す。

【図16】図１６は、１ｈ、４ｈ、及び２４ｈｐ．ｉ．でのＰＣ−３ ＰＩＰ及びＰＣ−３ ｆｌｕ腫瘍異種移植片を有するＢａｌｂ／ｃヌードマウスで得られた^６４Ｃｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−８９の組織分布プロファイルを示す。値は、ｎ＝３〜６マウスから得られた値の平均±ＳＤを表す。

【図17】図１７は、最大値投影として示されたＰＥＴ／ＣＴ画像を示す。（Ａ〜Ｄ）^６４Ｃｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−８９の注射後１時間、４時間、１６時間、及び２４時間のマウスのＰＥＴ／ＣＴ画像。スケールは、腫瘍、腎臓、及び肝臓をより見やすくするために、バックグラウンドの２％をカットすることにより調整されている。（ＰＳＭＡ＋＝ＰＣ−３ ＰＩＰ腫瘍異種移植片；ＰＳＭＡ−＝ＰＣ−３ｆｌｕ腫瘍異種移植片；Ｋｉ＝腎臓；Ｌｉ＝肝臓；Ｂｌ＝膀胱）。

【図18】図１８は、ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０２／−０５／−０７の合成に使用されるＰＳＭＡ標的前駆体を示す。

【図19】図１９は、（Ａ）ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０２、（Ｂ）ｐＳＭＡ−ＡＬＢ−０５、及び（Ｃ）ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０７の化学構造を示す。

【図20】図２０は、Ｌ−アスコルビン酸の（Ａ）不存在下及び（Ｂ）存在下での^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０２、^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０５、^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０７、及び^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−６１７の２４時間に亘る安定性を表すグラフを示す。３つの独立した実験の平均値±ＳＤを表す。

【図21】図２１は、^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−６１７と比較した^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０２、^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０５、及び^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０７の取り込みと内在化を示す。（Ａ）ＰＳＭＡ陽性ＰＣ−３ ＰＩＰ細胞で得られたデータ。バーは、３連で行った３つの独立した実験の平均値±ＳＤを表す。（Ｂ）ＰＳＭＡ陰性ＰＣ−３ｆｌｕ細胞で得られたデータ。バーは、３連で行った１つの実験の平均値±ＳＤを表す。

【図22】図２２は、３つの全てのアルブミン結合^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡリガンド及び^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−６１７で得られた１９２ｈｐ．ｉ．までの生体分布データ（減衰補正済み）を示す。（Ａ）^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０２、（Ｂ）^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０５、（Ｃ）^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０７、及び（Ｄ）^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−６１７の体内分布データ。マウスの各群（ｎ＝３〜６）から得られた平均値±ＳＤ。

【図23】図２３は、（Ａ）^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０２、（Ｂ）^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０５、及び（Ｃ）^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０７の１９２ｈｐ．ｉまでの減衰補正されていない生体分布データを表すグラフを示す。各データポイントは、マウスの群の平均±ＳＤ（ｎ＝３〜６）を表す。

【図24】図２４は、（Ａ）^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡＡＬＢ−０２、（Ｂ）^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０５、及び（Ｃ）^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０７の注射後２４時間のＰＣ−３ ＰＩＰ／ｆｌｕ担腫瘍マウスの最大値投影（ＭＩＰ）としてのＳＰＥＣＴ／ＣＴ画像を示す。ＰＳＭＡ^＋＝ＰＳＭＡ陽性ＰＣ−３ ＰＩＰ腫瘍；ＰＳＭＡ⁻＝ＰＳＭＡ陰性ＰＣ−３ ｆｌｕ腫瘍；Ｋｉ＝腎臓；Ｂｌ＝膀胱；Ｌｉ＝肝臓。

【図25】図２５は、（Ａ／Ｂ／Ｃ）^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０２の注射後４時間（Ａ）、２４時間（Ｂ）、及び７２時間（Ｃ）のＰＣ−３ ＰＩＰ／ｆｌｕ担腫瘍マウスの最大値投影（ＭＩＰ）としてのＳＰＥＣＴ／ＣＴ画像を示す。（Ｄ／Ｅ／Ｆ）^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−６１７の注射後４時間（Ｄ）、２４時間（Ｅ）、及び７２時間（Ｆ）のＰＣ−３ ＰＩＰ／ｆｌｕ担腫瘍マウスの最大値投影（ＭＩＰ）としてのＳＰＥＣＴ／ＣＴ画像を示す。ＰＳＭＡ＋＝ＰＳＭＡ陽性ＰＣ−３ ＰＩＰ腫瘍；ＰＳＭＡ−＝ＰＳＭＡ陰性ＰＣ−３ ｆｌｕ腫瘍；Ｋｉ＝腎臓；Ｂｌ＝膀胱；Ｌｉ＝肝臓。

【図26】図２６は、^１７７Ｌｕ−ＡＬＢ−０３及び^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６の注射後の様々な時点でのＰＣ−３ ＰＩＰ／ｆｌｕ担腫瘍マウスの最大値投影（ＭＩＰ）としてのＳＰＥＣＴ／ＣＴ画像を示す（Ａ〜Ｃ）。^１７７Ｌｕ−ＡＬＢ−０３（２５ＭＢｑ、１ｎｍｏｌ）の注射後（Ａ）４時間、（Ｂ）２４時間、及び（Ｃ）７２時間のマウスのＭＩＰ。（Ｄ〜Ｆ）^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６（２５ＭＢｑ、１ｎｍｏｌ）の注射後（Ｄ）２４時間、（Ｅ）２４時間、及び（Ｆ）７２時間のマウスのＭＩＰ。ＰＳＭＡ＋＝ＰＳＭＡ陽性ＰＣ−３ ＰＩＰ腫瘍；ＰＳＭＡ−＝ＰＳＭＡ陰性ＰＣ−３ ｆｌｕ腫瘍；Ｋｉ＝腎臓；Ｂｌ＝膀胱。

【図27】図２７は、ＰＣ−３ ＰＩＰ担腫瘍マウスにおける^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６及び^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−６１７による治療試験。（Ａ）生理食塩水を投与したマウス（群Ａ）、２ＭＢｑの^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−６１７（群Ｂ）、５ＭＢｑの^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−６１７（群Ｃ）、２ＭＢｑの^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６（群Ｄ）、及び５ＭＢｑの^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６（群Ｅ）で処理したマウスの、０日目（１に設定）の腫瘍体積に対する腫瘍成長曲線を示す。各群の最初のマウスがエンドポイントに達するまでデータが示される。（Ｂ）群Ａ〜Ｅのカプラン・マイヤープロット。（Ｃ）群Ａ〜Ｅの相対体重。

【0192】

実施例
実施例１：ＤＯＴＡ官能化アルブミン結合ＰＳＭＡリガンドの設計及びｉｎ ｖｉｔｒｏ評価
１．１ 材料及び方法
１．１．１ 新規ＰＳＭＡリガンド（概要）：
ポータブルアルブミン結合部分を有する７種の提案されたＰＳＭＡリガンドはいずれも、固相プラットフォームにより合成した。固相プラットフォームは、前記したアルブミン−アフィンＰＳＭＡリガンドの開発に非常に有用であることが示された。

【0193】

マルチステップ合成（ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０１では１９ステップ、ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０３では１７ステップ、ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０４及びＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０５では２０ステップ、ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６では１７ステップ、ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０７及びＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０８では２３ステップ）により、これらの化合物を２６〜４９％の単離後全体収率で得た。粗生成物をセミ分取ＲＰ−ＨＰＬＣで精製し、純度＞９８％の最終生成物とした。前記化合物の特性評価は、それぞれ分析ＲＰ−ＨＰＬＣ及びＭＡＬＤＩ−ＭＳ又はＥＳＩ−ＭＳで行った。分析データを表１．１に示す。

【表1.1】

【0194】

ＰＳＭＡのペプチド模倣ファーマコフォア（Ｌ−Ｇｌｕ−ＮＨ−ＣＯ−ＮＨ−Ｌ−Ｌｙｓ結合体；ステップ１〜６）を、Ｅｄｅｒ ｅｔ ａｌ．Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇ．Ｃｈｅｍ．２０１２，２３：６８８−６９７に記載と同様にして合成した。リンカー部分（２−ナフチル−Ｌ−Ａｌａ−ＮＨ−ＣＯ−トランス−ＣＨＸ−Ｎ３又は２−ナフチル−Ｌ−Ａｌａ−ＮＨ−ＣＯ−トランス−ＣＨＸ−Ｍｅ−ＮＨ_２；ステップ７〜１０）は、Ｂｅｎｅｓｏｖａ ｅｔ ａｌ．ＪＮＭ ２０１５，５６：９１４−９２０によって以前に提案された標準的なＦｍｏｃ（９−フルオレニルメチルオキシカルボニル）プロトコルにしたがって調整した。ＰＳＭＡリガンド前駆体を提供するこれらの２つの合成中間段階は、４つの化合物全てに同様に適用した（ステップ１〜８）。ただし、ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０３／０４／０５／０６／０７／０８の場合は、ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０１のリンカー領域のビルディングブロック［トランス−４−アジドシクロヘキサンカルボン酸；ステップ９〜１０］を、トランス−４−（Ｆｍｏｃ−アミノメチル）シクロヘキサン−カルボン酸（ステップ９〜１０）に変更した。

【0195】

ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０１
ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０１の合成では、遊離アジド基を有する精製済みＰＳＭＡ前駆体とプロパルギル−Ｇｌｙを有する精製済みアルブミン結合部分［４−（ｐ−ヨードフェニル）酪酸−Ｌ−Ｌｙｓ］との高時間効率「ヘッド−ツー−テール」クリックカップリング（“ｈｅａｄ−ｔｏ−ｔａｉｌ” ｃｌｉｃｋ ｃｏｕｐｌｉｎｇ）（ステップ１１〜１７）を用いた。トリアゾール環を介したこれら２つの前駆体の効率的なカップリング（ステップ１８）の後、更なる精製を行って過剰のＣｕＳＯ_４・５Ｈ_２Ｏを除去した。最後に、ＤＯＴＡキレーターをその活性エステルの形態でコンジュゲートすること（ＤＯＴＡ−ＮＨＳエステル；ステップ１９）によりＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０１を得た。

【0196】

ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０１の構造式を以下に示す。

【化36】

【0197】

ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０３
ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０３の調製では、樹脂支持体上でのストレートワンウェイ合成（ｓｔｒａｉｇｈｔ ｏｎｅ−ｗａｙ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ）を用いた。ＰＳＭＡ前駆体へのＦｍｏｃ−Ｌ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−ＯＨカップリングの後、Ｆｍｏｃ脱保護、ＤＯＴＡトリス（ｔＢｕ）−エステルコンジュゲーション、Ａｌｌｏｃ脱保護、及び４−（ｐ−ヨードフェニル）酪酸コンジュゲーションを行った（ステップ１１〜１６）。最後に、ＴＦＡ：ＴＩＰＳ：Ｈ_２Ｏ混合物と攪拌し、樹脂から切断することにより、ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０３を得た（ステップ１７）。

【0198】

ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０３の構造式を以下に示す。

【化37】

【0199】

ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０４
ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０４の合成では、ＤＯＴＡコンジュゲートＬ−Ｌｙｓを有する樹脂被覆ＰＳＭＡ前駆体と精製済みアルブミン結合部分［４−（ｐ−ヨードフェニル）酪酸−Ｌ−Ｌｙｓ］との、２つの第二級アミンの直接コンジュゲーションによる高時間効率「ヘッド−ツー−テール」カップリング（ステップ１１〜１８）を用いた。スベリン酸ビス（Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド）エステルを使用したこれらの２つの前駆体の効率的なカップリング（ステップ１９）の後、ＴＦＡ：ＴＩＰＳ：Ｈ_２Ｏ混合物と攪拌し、樹脂から切断することにより、ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０４を得た（ステップ２０）。

【0200】

ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０４の構造式を以下に示す。

【化38】

【0201】

ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０５
ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０５の調製では、樹脂支持体上でのストレートワンウェイ合成を用いた。ＰＳＭＡ前駆体へのＦｍｏｃ−Ｌ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−ＯＨのカップリングの後、Ｆｍｏｃ脱保護、Ｆｍｏｃ−Ｄ−Ａｓｐ−ＯｔＢｕコンジュゲーション、Ｆｍｏｃ脱保護、第２のＦｍｏｃ−Ｄ−Ａｓｐ−ＯｔＢｕコンジュゲーション、Ｆｍｏｃ脱保護、４−（ｐ−ヨードフェニル）酪酸コンジュゲーション、Ａｌｌｏｃ脱保護、ＤＯＴＡトリス（ｔＢｕ）−エステルコンジュゲーションを行った（ステップ１１〜１９）。ＴＦＡ：ＴＩＰＳ：Ｈ_２Ｏ混合物と攪拌し、樹脂から切断することにより、ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０５を得た（ステップ２０）。

【0202】

ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０５の構造式を以下に示す。

【化39】

【0203】

ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６
ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６の合成では、樹脂支持体上でのストレートワンウェイ合成を用いた。ＰＳＭＡ前駆体へのＦｍｏｃ−Ｌ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−ＯＨのカップリングの後、Ｆｍｏｃ脱保護、ＤＯＴＡトリス（ｔＢｕ）−エステルコンジュゲーション、Ａｌｌｏｃ脱保護、及びｐ−（トリル）酪酸コンジュゲーションを行った（ステップ１１〜１６）。最後に、ＴＦＡ：ＴＩＰＳ：Ｈ_２Ｏ混合物と攪拌し、樹脂から切断することにより、ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６を得た（ステップ１７）。

【0204】

ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６の構造式を以下に示す。

【化40】

【0205】

ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０７
ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０７の調製では、樹脂支持体上でのストレートワンウェイ合成を用いた。ＰＳＭＡ前駆体へのＦｍｏｃ−Ｌ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−ＯＨのカップリングの後、Ｆｍｏｃ脱保護、Ｆｍｏｃ−Ｄ−Ａｓｐ−ＯｔＢｕコンジュゲーション、Ｆｍｏｃ脱保護、第２のＦｍｏｃ−Ｄ−Ａｓｐ−ＯｔＢｕコンジュゲーション、Ｆｍｏｃ脱保護、第３のＦｍｏｃ−Ｄ−Ａｓｐ−ＯｔＢｕコンジュゲーション、Ｆｍｏｃ脱保護、４−（ｐ−ヨードフェニル）酪酸コンジュゲーション、Ａｌｌｏｃ脱保護、ＤＯＴＡトリス（ｔＢｕ）−エステルコンジュゲーションを行った（ステップ１１〜２２）。ＴＦＡ：ＴＩＰＳ：Ｈ_２Ｏ混合物と攪拌し、樹脂から切断することにより、ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０７を得た（ステップ２３）。

【0206】

ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０７の構造式を以下に示す。

【化41】

【0207】

ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０８
ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０８の調製では、樹脂支持体上でのストレートワンウェイ合成を用いた。ＰＳＭＡ前駆体へのＦｍｏｃ−Ｌ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−ＯＨのカップリングの後、Ｆｍｏｃ脱保護、Ｆｍｏｃ−Ｄ−Ａｓｐ−ＯｔＢｕコンジュゲーション、Ｆｍｏｃ脱保護、第２のＦｍｏｃ−Ｄ−Ａｓｐ−ＯｔＢｕコンジュゲーション、Ｆｍｏｃ脱保護、第３のＦｍｏｃ−Ｄ−Ａｓｐ−ＯｔＢｕコンジュゲーション、Ｆｍｏｃ脱保護、ｐ−（トリル）酪酸コンジュゲーション、Ａｌｌｏｃ脱保護、ＤＯＴＡトリス（ｔＢｕ）−エステルコンジュゲーションを行った（ステップ１１〜２２）。ＴＦＡ：ＴＩＰＳ：Ｈ_２Ｏ混合物と攪拌し、樹脂から切断することにより、ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０８を得た（ステップ２３）。

【0208】

ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０８の構造式を以下に示す。

【化42】

【0209】

１．１．２ ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０３−０８の合成（詳細）
ａ）グルタミン酸−ウレア−リジン結合体の合成
フィルターとコンビストッパー（ｃｏｍｂｉ ｓｔｏｐｐｅｒ）を備えた５ｍＬシリンジ中の２−クロロトリチルクロリド樹脂｛（２−ＣＴ−Ｒｅｓｉｎ；Ｍｅｒｃｋ；カタログ番号８５５０１７０００５）、０．３０ｍｍｏｌ、置換容量１．６３ｍｍｏｌ／ｇ、１００〜２００ＭＥＳＨ、１％ＤＶＢ、ＣＨ_２Ｃｌ_２での合計膨潤体積＞４．２ｍＬ／ｇ、［１８４ｍｇ］｝を、まず、無水ジクロロメタン（ＤＣＭ）中で４５分間攪拌した。

【0210】

次に、２−ＣＴ−樹脂を無水ＤＣＭで３回洗浄した後、３ｍＬの無水ＤＣＭ中の１．２当量のＡｌｌｏｃ（Ｎ−アリルオキシカルボニル）及びＦｍｏｃ（Ｎ−フルオレニルメトキシカルボニル）保護Ｌ−リジン｛（Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−ＯＨ；Ｍｅｒｃｋ；カタログ番号８５２１２４０００５）、０．３６ｍｍｏｌ、４５２．５０ｇ／ｍｏｌ、［１６３ｍｇ］、（１）｝及び４．８当量のＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン｛（ＤＩＰＥＡ）、１．４４ｍｍｏｌ、１２９．２４ｇ／ｍｏｌ、０．７４２ｇ／ｍｌ、［２５１μＬ］｝と反応させた。樹脂（２）上の最初の保護されたアミノ酸のカップリングは、穏やかに攪拌しながら１６時間に亘って進行した。Ｌ−リジン固定化樹脂（２）をＤＣＭ１で３回、ＤＣＭ２で３回洗浄した。樹脂に残っている未反応のクロロトリチル基を、ＤＣＭ、メタノール（ＭｅＯＨ）、及びＤＩＰＥＡの１７：２：１の混合物（２０ｍＬ）で５回洗浄した。

【0211】

その後、Ａｌｌｏｃ及びＦｍｏｃ保護Ｌ−リジンを含む樹脂をＤＣＭ１で３回、ＤＣＭ２で３回、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ１）で３回、最後にＤＭＦ２で３回洗浄した。Ｆｍｏｃ保護基の選択的除去は、ＤＭＦとピペリジンの１：１混合物で２分間１回洗浄後、５分間、更に１回洗浄することによって行い、生成物（３）を得た。次いで、Ａｌｌｏｃ保護Ｌ−リジンをＤＭＦ１で３回、ＤＭＦ２で３回、ＤＣＭ１で３回、最後にＤＣＭ２で３回洗浄した。

【0212】

次のステップでは、１０当量のｔＢｕ保護Ｌ−グルタマート塩酸塩｛（Ｈ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−ＯｔＢｕ・ＨＣｌ；Ｍｅｒｃｋ；カタログ番号８５４０９６０００５）、３．０ｍｍｏｌ、２９５．８ｇ／ｍｏｌ、［８８７ｍｇ］、ｉ｝を、グルタミル部分ｉｉｉのイソシアナートの生成に使用した。適切な量のｔＢｕ保護Ｌ−グルタミン酸を１５０ｍＬのＤＣＭ２に溶解し、その後、直ちに、３ｍＬのＤＩＰＥＡを添加した。

【0213】

この溶液を、乾燥ＤＣＭ５ｍＬ中の、１ｍｍｏｌの氷冷したビス（トリクロロメチル）炭酸塩｛（ＢＴＣ；Ｓｉｇｍａ；カタログ番号１５２１７−１０Ｇ）、２９６．７５ｇ／ｍｏｌ、［２９７ｍｇ］、ｉｉ｝を含むフラスコに４時間かけて滴下した。

【0214】

１つの遊離ＮＨ_２基を有するＬ−リジン固定化樹脂（３）を、その後、グルタミル部分ｉｉｉのイソシアナートの溶液に一度に添加し、１６時間攪拌し、樹脂固定化ビス（ｔＢｕ）−Ｇｌｕ−ウレア−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）（４）を得た。

【0215】

樹脂上に被覆された得られた生成物（４）を濾別し、ＤＣＭ１で３回、ＤＣＭ２で３回洗浄した。Ａｌｌｏｃ−保護基の切断は、無水ＤＣＭ３ｍＬ中、１５当量のモルホリン｛４．５ｍｍｏｌ、８７．１２ｇ／ｍｏｌ、０．９９９ｇ／ｍＬ、［３９２μＬ］｝の存在下で、０．１５当量のＴＰＰ Ｐｄ｛［テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）；Ｓｉｇｍａ；カタログ番号２１６６６６−１Ｇ］、０．０４５ｍｍｏｌ、１１５５．５６ｇ／ｍｏｌ、［１０５ｍｇ］｝との反応により行った。Ｐｄ及びモルホリンの量を２つの部分に分け、それぞれ１時間振とうすることにより連続的に反応させた。アルミニウム箔を使用して、暗所で反応を行った。

【0216】

次いで、樹脂をＤＣＭ１で３回、ＤＣＭ２で３回、ＤＭＦ１で３回、最後にＤＭＦ２で３回洗浄した。パラジウムの残留物を除去するために、樹脂を更に、ＤＭＦ中の１％ＤＩＰＥＡ（３０ｍＬのＤＭＦ２中の３００μＬのＤＩＰＥＡ）で１０回洗浄し、続いて、濃度１５ｍｇ／ｍＬでＤＭＦ２中のキュープラル溶液（｛ジエチルジチオカルバミン酸ナトリウム三水和物；Ｓｉｇｍａ；カタログ番号Ｄ３５０６−１００Ｇ）、２２５．３１ｇ／ｍｏｌ｝（３０ｍＬのＤＭＦ２中の４５０ｍｇのキュープラル）で５分間１０回洗浄した。

【0217】

次いで、樹脂固定化及びビス（ｔＢｕ）保護Ｇｌｕ−ウレア−Ｌｙｓ（５）をＤＭＦ１で３回、ＤＭＦ２で３回、ＤＣＭ１で３回、ＤＣＭ２で３回、最後にジエチルエーテル（Ｅｔ_２Ｏ）で３回洗浄し、真空下で乾燥させた。

【0218】

そのような調製した前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）結合体（５）を、７種の化合物全て（ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０１／０３／０４／０５／０６／０７／０８）を合成するために次反応に使用した。

【0219】

ビス（ｔＢｕ）保護Ｇｌｕ−ウレア−Ｌｙｓファーマコフォアのこれまでの合成全体の概要を、スキーム１．１にまとめる。

【化43】

【0220】

樹脂固定化及びビス（ｔＢｕ）保護結合体（５）を、まず、無水ＤＣＭ中で４５分間撹拌した。予め膨潤させたファーマコフォアをＤＣＭ２で３回、ＤＭＦ１で３回、ＤＭＦ２で３回洗浄した。

【0221】

ｂ）リンカー領域の合成
樹脂に対して（０．１ｍｍｏｌ）、リンカー領域の第１のビルディングブロックに対応する４当量のＦｍｏｃ保護２−ナフチル−Ｌ−アラニン｛（Ｆｍｏｃ−２Ｎａｌ−ＯＨ；Ｂａｃｈｅｍ；カタログ番号Ｂ−２１００）、０．４０ｍｍｏｌ、４３７．５０ｇ／ｍｏｌ、［１７５．０ｍｇ］｝を、無水ＤＭＦ中、４当量のＤＩＰＥＡ｛０．４０ｍｍｏｌ、１２９．２４ｇ／ｍｏｌ、０．７４２ｇ／ｍＬ、［７１μＬ］｝の存在下にて、３．９６当量のＨＢＴＵ｛（Ｏ−（ベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルホスファート；Ｓｉｇｍａ；カタログ番号１２８０４−２５Ｇ−Ｆ）、０．３９ｍｍｏｌ、３７９．２４ｇ／ｍｏｌ、［１４７．９ｍｇ］｝で活性化させた。

【0222】

ＤＩＰＥＡの添加２分間後、溶液を、ＤＭＦで予め膨潤させた固定化ビス（ｔＢｕ）保護ファーマコフォア（５）に添加し、１時間攪拌した。

【0223】

続いて、ビス（ｔＢｕ）保護Ｇｌｕ−ウレア−Ｌｙｓ及びＦｍｏｃ保護２−ナフチル−Ｌ−アラニン（６）を含む樹脂をＤＭＦ１で３回、ＤＭＦ２で３回洗浄した。化合物（６）からのＦｍｏｃ保護基の選択的除去は、ＤＭＦとピペリジンの１：１混合物で２分間１回洗浄後、５分間、更に１回洗浄することによって行い、生成物（７）を得た。

【0224】

次のステップにおいて、ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０１の場合には、アジドシクロヘキサンカルボン酸｛（Ｎ３−１，４−トランス−ＣＨＣ−ＯＨ；Ｉｒｉｓ Ｂｉｏｔｅｃｈ；カタログ番号ＨＡＡ２２３５．０００１）、０．４０ｍｍｏｌ、１６９．１８ｇ／ｍｏｌ、［６７．７ｍｇ］｝に対応する４当量の第２のビルディングブロック、又はＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０３／０４／０５／０６／０７／０８の場合には、Ｆｍｏｃ保護トラネキサム酸｛（トランス−４−（Ｆｍｏｃ−アミノメチル）シクロヘキサン−カルボン酸；Ｓｉｇｍａ；カタログ番号５８４４６−５Ｇ−Ｆ）、０．４０ｍｍｏｌ、３７９．４５ｇ／ｍｏｌ［１５１．８ｍｇ］｝を、無水ＤＭＦ中、４当量のＤＩＰＥＡ｛０．４０ｍｍｏｌ、１２９．２４ｇ／ｍｏｌ、０．７４２ｇ／ｍＬ、［７１μＬ］｝存在下で、３．９６当量のＨＢＴＵ｛（Ｓｉｇｍａ；カタログ番号１２８０４−２５Ｇ−Ｆ）、０．３９ｍｍｏｌ、３７９．２４ｇ／ｍｏｌ、［１４７．９ｍｇ］｝で活性化させた。ＤＩＰＥＡの添加２分間後、溶液を、ＤＭＦで予め膨潤させた化合物（７）に添加し、１時間撹拌した。

【0225】

続いて、ビス（ｔＢｕ）保護Ｇｌｕ−ウレア−Ｌｙｓ−２−ナフチル−Ｌ−アラニン及びアジドシクロヘキサンカルボン酸（８Ａ）を含む樹脂を、ＤＭＦ１で３回、ＤＭＦ２で３回、ＤＣＭ１で３回、ＤＣＭ２で３回、最後にＥｔ_２Ｏで３回洗浄し、真空下で乾燥させた。最終のＰＳＭＡ前駆体（９Ａ）を、９５：２．５：２．５の比のトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）、トリイソプロピルシラン（ＴＩＰＳ）、及びＨ_２Ｏからなる混合物と共に、２時間以下攪拌して、樹脂から切断することにより得た。ＴＦＡを蒸発させ、粗生成物を１：１の比のアセトニトリル（ＡＣＮ）と水に溶解させ、ＲＰ−ＨＰＬＣで精製した。

【0226】

更に、ビス（ｔＢｕ）保護Ｇｌｕ−ウレア−Ｌｙｓ−２−ナフチル−Ｌ−アラニン及びＦｍｏｃ保護トラネキサム酸（８Ｂ）を含む樹脂を、ＤＭＦ１で３回、ＤＭＦ２で３回洗浄した。化合物（８Ｂ）からのＦｍｏｃ保護基の選択的除去は、ＤＭＦとピペリジンの１：１混合物で１回２分間洗浄後、５分間、更に１回洗浄することによって行い、生成物（９Ｂ）を得た。

【0227】

リンカー領域のこれまでの合成全体の概要を、スキーム１．２にまとめる。

【化44】

【0228】

ｃ）ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０３の合成
リジン被覆ＰＳＭＡ前駆体（９Ｂ）に対して、４当量のＦｍｏｃ及びＡｌｌｏｃ保護Ｌ−リジン｛（Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−ＯＨ；Ｍｅｒｃｋ；カタログ番号８５２１２４０００５）、０．４０ｍｍｏｌ、４５２．５０ｇ／ｍｏｌ、［１８１ｍｇ］｝を、無水ＤＭＦ中、４当量のＤＩＰＥＡ｛０．４０ｍｍｏｌ、１２９．２４ｇ／ｍｏｌ、０．７４２ｇ／ｍＬ、［７０μＬ］｝の存在下で、３．９６当量のＨＢＴＵ｛（Ｓｉｇｍａ；カタログ番号１２８０４−２５Ｇ−Ｆ）、０．３９６ｍｍｏｌ、３７９．２４ｇ／ｍｏｌ、［１４９ｍｇ］｝で活性化させた。ＤＩＰＥＡの添加２分間後、溶液を、ＤＭＦで予め膨潤させた固定化ビス（ｔＢｕ）保護ＰＳＭＡ前駆体（９Ｂ）に添加し、１時間攪拌した。

【0229】

得られた化合物（１０Ｂ）からのＦｍｏｃ保護基の選択的除去は、ＤＭＦとピペリジンの１：１混合物で２分間１回洗浄後、５分間、更に１回洗浄することによって行い、生成物（１１Ｂ）を得た。

【0230】

キレーターと樹脂固定化化合物（１１Ｂ）のコンジュゲーションを、２当量のＤＯＴＡ−トリス（ｔ−Ｂｕ）エステル｛（［２−（４，７，１０−トリス（２−（ｔ−ブトキシ）−２−オキソエチル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１−イル）酢酸］；ＣｈｅＭａｔｅｃｈ；カタログ番号１３７０７６−５４−１）、０．２０ｍｍｏｌ、５７２．７３ｇ／ｍｏｌ［１１５ｍｇ］｝で行った。キレーターのビルディングブロックは、無水ＤＭＦ中、４当量のＤＩＰＥＡ｛０．４０ｍｍｏｌ、１２９．２４ｇ／ｍｏｌ、０．７４２ｇ／ｍＬ、［７０μＬ］｝の存在下で、１．９８当量のＨＢＴＵ｛（Ｓｉｇｍａ；カタログ番号１２８０４−２５Ｇ−Ｆ）、０．１９８ｍｍｏｌ、３７９．２４ｇ／ｍｏｌ、［７５ｍｇ］｝で活性化させた。ＤＩＰＥＡの添加２分間後、溶液を、樹脂固定化され且つＤＭＦで予め膨潤させた化合物（１１Ｂ）に添加した。ＤＯＴＡキレーターのカップリングは、穏やかに攪拌しながら２時間に亘って進行した。次に、得られた化合物（１２Ｂ）を、ＤＭＦ１で３回、ＤＭＦ２で３回、ＤＣＭ１で３回、最後にＤＣＭ２で３回洗浄した。

【0231】

化合物（１２Ｂ）からのＡｌｌｏｃ保護基の切断は、３ｍＬの無水ＤＣＭ中、３０当量のモルホリン｛３．０ｍｍｏｌ、８７．１２ｇ／ｍｏｌ、０．９９９ｇ／ｍＬ、［２６２μＬ］｝の存在下で、０．０３当量のＴＰＰ Ｐｄ｛（Ｓｉｇｍａ；カタログ番号２１６６６６−１Ｇ）、０．０３ｍｍｏｌ、１１５５．５６ｇ／ｍｏｌ、［３５ｍｇ］｝と反応させることにより行った。反応は、アルミホイル箔を使用して、暗所で２時間行った。

【0232】

次いで、樹脂を、ＤＣＭ１で３回、ＤＣＭ２で３回、ＤＭＦ１で３回、最後にＤＭＦ２で３回洗浄した。パラジウムの残留物を除去するために、ＤＭＦ中の１％ＤＩＰＥＡ（３０ｍＬのＤＭＦ２中の３００μＬのＤＩＰＥＡ）で、樹脂を更に１０回洗浄し、続いて、濃度１５ｍｇ／ｍＬでＤＭＦ２中のキュープラル溶液（Ｓｉｇｍａ；カタログ番号Ｄ３５０６−１００Ｇ）、２２５．３１ｇ／ｍｏｌ｝（３０ｍＬのＤＭＦ２中の４５０ｍｇのキュープラル）で５分間１０回洗浄した。次に、得られた化合物（１３Ｂ）を、ＤＭＦ１で３回、ＤＭＦ２で３回洗浄した。

【0233】

最後に、アルブミン結合部分のカップリングのために、４当量のヨードフェニル酪酸｛（［４−（ｐ−ヨードフェニル）酪酸］；Ｓｉｇｍａ；Ｉ５６３４−５Ｇ）、０．４０ｍｍｏｌ、２９０．１０ｇ／ｍｏｌ、［１１６ｍｇ］｝を、無水ＤＭＦ中、４当量のＤＩＰＥＡ｛０．４０ｍｍｏｌ、１２９．２４ｇ／ｍｏｌ、０．７４２ｇ／ｍＬ、［７０μＬ］｝の存在下で、３．９６当量のＨＢＴＵ｛（Ｓｉｇｍａ；カタログ番号１２８０４−２５Ｇ−Ｆ）、０．３９６ｍｍｏｌ、３７９．２４ｇ／ｍｏｌ、［１４９ｍｇ］｝で活性化させた。ＤＩＰＥＡ添加２分間後、溶液を、樹脂固定化され且つＤＭＦで予め膨潤させた生成物（１３Ｂ）に添加し、１時間攪拌した。

【0234】

次に、得られた化合物（１４Ｂ）を、ＤＭＦ１で３回、ＤＭＦ２で３回、ＤＣＭ１で３回、ＤＣＭ２で３回、最後にＥｔ_２Ｏで３回洗浄し、真空下で乾燥させた。

【0235】

最終化合物ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０３は、９５：２．５：２．５の比のＴＦＡ、ＴＩＰＳ、及びＨ_２Ｏからなる混合物と共に２時間以下撹拌して、樹脂から切断することによって得た。ＴＦＡを蒸発させ、粗生成物を１：１の比のＡＣＮと水に溶解させ、ＲＰ−ＨＰＬＣで精製した。

【0236】

前記した合成の概要を、スキーム１．３にまとめる。

【化45】

【0237】

ｄ）ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０４の合成
リジン被覆ＰＳＭＡ前駆体（９Ｂ）に対して、４当量のＤｄｅ及びＦｍｏｃ保護Ｌ−リジン｛（Ｄｄｅ−Ｌｙｓ（Ｆｍｏｃ）−ＯＨ；Ｍｅｒｃｋ；カタログ番号８５４００００００１）、０．４０ｍｍｏｌ、５３２．６３ｇ／ｍｏｌ、［２１３ｍｇ］｝を、無水ＤＭＦ中、４当量のＤＩＰＥＡ｛０．４０ｍｍｏｌ、１２９．２４ｇ／ｍｏｌ、０．７４２ｇ／ｍＬ、［７０μＬ］｝の存在下で、３．９６当量のＨＢＴＵ｛（Ｓｉｇｍａ；カタログ番号１２８０４−２５Ｇ−Ｆ）、０．３９６ｍｍｏｌ、３７９．２４ｇ／ｍｏｌ、［１４９ｍｇ］｝で活性化させた。ＤＩＰＥＡの添加２分間後、溶液を、ＤＭＦで事前に膨潤させた固定化ビス（ｔＢｕ）保護ＰＳＭＡ前駆体（９Ｂ）に添加し、１時間攪拌した。

【0238】

次に、得られた化合物（１０Ｂ）をＤＭＦ１で３回、ＤＭＦ２で３回洗浄した。得られた化合物（１０Ｂ）からのＦｍｏｃ保護基の選択的除去は、ＤＭＦとピペリジンの１：１混合物で２分間１回洗浄後、５分間、更に１回洗浄することによって行い、生成物（１１Ｂ）を得た。

【0239】

キレーターと樹脂固定化化合物（１１Ｂ）のコンジュゲーションは、３当量のＤＯＴＡ−トリス（ｔ−Ｂｕ）エステル｛（［２−（４，７，１０−トリス（２−（ｔ−ブトキシ）−２−オキソエチル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１−イル）酢酸］；ＣｈｅＭａｔｅｃｈ；カタログ番号１３７０７６−５４−１）、０．３０ｍｍｏｌ、５７２．７３ｇ／ｍｏｌ［１７１ｍｇ］｝で行った。キレータービルディングブロックは、無水ＤＭＦ中、４当量のＤＩＰＥＡ｛０．４０ｍｍｏｌ、１２９．２４ｇ／ｍｏｌ、０．７４２ｇ／ｍＬ、［７０μＬ］｝の存在下で、２．９７当量のＨＢＴＵ｛（Ｓｉｇｍａ；カタログ番号１２８０４−２５Ｇ−Ｆ）、０．２９７ｍｍｏｌ、３７９．２４ｇ／ｍｏｌ、［１１２ｍｇ］｝で活性化させた。ＤＩＰＥＡの添加２分間後、溶液を、樹脂固定化され且つＤＭＦで予め膨潤させた化合物（１１Ｂ）に添加した。ＤＯＴＡキレーターのカップリングは、穏やかに攪拌しながら２時間に亘って進行した。

【0240】

次に、得られた化合物（１２Ｂ）をＤＭＦ１で３回、ＤＭＦ２で３回洗浄した。得られた化合物（１２Ｂ）からのＤｄｅ保護基の選択的除去は、ＤＭＦ中の２％ヒドラジンの混合物で５分間２回、次いで、１０分間、更に１回洗浄することによって行い、生成物（１３Ｂ）を得た。

【0241】

樹脂被覆生成物（１３Ｂ）に対して、２当量のスベリン酸ジスクシンイミジル｛（［スベリン酸ビス（Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル）］；Ｓｉｇｍａ；６８５２８−８０−３）、０．２０ｍｍｏｌ、３６８．３４ｇ／ｍｏｌ、［７４ｍｇ］｝を、無水ＤＭＦ中、４当量のＤＩＰＥＡ｛０．４０ｍｍｏｌ、１２９．２４ｇ／ｍｏｌ、０．７４２ｇ／ｍＬ、［７０μＬ］｝の存在下で、１．９８当量のＨＢＴＵ｛（Ｓｉｇｍａ；カタログ番号１２８０４−２５Ｇ−Ｆ）、０．１９８ｍｍｏｌ、３７９．２４ｇ／ｍｏｌ、［７３ｍｇ］｝で活性化させた。ＤＩＰＥＡの添加２分間後、溶液を、樹脂固定化され且つＤＭＦで予め膨潤させた生成物（１３Ｂ）に添加し、１時間攪拌した。

【0242】

次に、得られた化合物（１４Ｂ）をＤＭＦ１で３回、ＤＭＦ２で３回洗浄した。

【0243】

前記した合成の概要を、スキーム１．４にまとめる。

【化46】

【0244】

合成は、まず、無水ジクロロメタン（ＤＣＭ）中で４５分間攪拌される、フィルターとコンビストッパーを備えた５ｍＬシリンジ中の２−クロロトリチルクロリド樹脂｛（２−ＣＴ−Ｒｅｓｉｎ；Ｍｅｒｃｋ；カタログ番号８５５０１７０００５）、０．２０ｍｍｏｌ、置換容量１．６３ｍｍｏｌ／ｇ、１００〜２００ＭＥＳＨ、１％ＤＶＢ、ＣＨ_２Ｃｌ_２での合計膨潤体積＞４．２ｍＬ／ｇ、［１２３ｍｇ］｝をから出発するアルブミン結合前駆体を並行して調製しながら行った。

【0245】

次に、２−ＣＴ樹脂を無水ＤＣＭで３回洗浄し、続いて、３ｍＬの無水ＤＣＭ中、１．２当量のＤｄｅ及びＦｍｏｃ保護Ｌ−リジン｛（Ｄｄｅ−Ｌｙｓ（Ｆｍｏｃ）−ＯＨ；Ｂａｃｈｅｍ；カタログ番号Ｅ−３３８５．０００１）、０．２４ｍｍｏｌ、５３２．６４ｇ／ｍｏｌ、［１２８ｍｇ］（１５Ｂ）｝及び４．８当量のＤＩＰＥＡ｛０．９６ｍｍｏｌ、１２９．２４ｇ／ｍｏｌ、０．７４２ｇ／ｍＬ、［１６７μＬ］｝と反応させた。

【0246】

樹脂（１６Ｂ）上の最初に保護したアミノ酸のカップリングは、穏やかに攪拌しながら１６時間に亘って進行した。

【0247】

Ｌ−リジン固定化樹脂（１６Ｂ）をＤＣＭ１で３回、ＤＣＭ２で３回洗浄した。樹脂上に残っている未反応のクロロトリチル基を、１７：２：１の比のＤＣＭ、ＭｅＯＨ、及びＤＩＰＥＡの混合物（２０ｍＬ）で５回洗浄した。

【0248】

続いて、Ｄｄｅ及びＦｍｏｃ保護Ｌ−リジンを含む樹脂をＤＣＭ１で３回、ＤＣＭ２で３回、ＤＭＦ１で３回、最後にＤＭＦ２で３回洗浄した。Ｆｍｏｃ保護基の選択的除去は、ＤＭＦとピペリジンの１：１混合物で２分間１回洗浄後、５分間、更に１回洗浄することによって、生成物（１７Ｂ）を得た。

【0249】

次に、Ｄｄｅ保護Ｌ−リジンをＤＭＦ１で３回、ＤＭＦ２で３回、ＤＣＭ１で３回、ＤＣＭ２で３回、最後にＥｔ_２Ｏで３回洗浄し、真空下で乾燥させた。

【0250】

そのように調製した樹脂被覆Ｄｄｅ保護Ｌ−リジン（１７Ｂ）を２つの部分に分け、そのうちの１つを次の反応に使用した。この樹脂被覆生成物を無水ＤＣＭ中で４５分間撹拌し、続いてＤＭＦで３回、ＤＭＦ２で３回洗浄した。

【0251】

リジン被覆樹脂に対して、４当量のヨードフェニル酪酸｛（［４−（ｐ−ヨードフェニル）酪酸］；Ｓｉｇｍａ；Ｉ５６３４−５Ｇ）、０．４０ｍｍｏｌ、２９０．１０ｇ／ｍｏｌ、［１１６ｍｇ］｝を、無水ＤＭＦ中、４当量のＤＩＰＥＡ｛０．４０ｍｍｏｌ、１２９．２４ｇ／ｍｏｌ、０．７４２ｇ／ｍＬ、［７０μＬ］｝の存在下で、３．９６当量のＨＢＴＵ｛（Ｓｉｇｍａ；カタログ番号１２８０４−２５Ｇ−Ｆ）、０．３９６ｍｍｏｌ、３７９．２４ｇ／ｍｏｌ、［１４９ｍｇ］｝で活性化させた。ＤＩＰＥＡの添加２分間後、溶液を、樹脂固定化されＤＭＦで予め膨潤させた生成物（１７Ｂ）に添加し、１時間攪拌した。

【0252】

Ｄｄｅ保護Ｌ−リジンとヨードフェニル酪酸（１８Ｂ）を含む樹脂をＤＭＦ１で３回、ＤＭＦ２で３回洗浄した。得られた化合物（１８Ｂ）からのＤｄｅ保護基の選択的除去は、ＤＭＦ中の２％ヒドラジンの混合物で５分間２回、次いで、１０分間、更に１回洗浄することによって行い、生成物（１９Ｂ）を得た。

【0253】

アルブミン標的化部分（２０Ｂ）は、ＤＣＭ中の５％ＴＦＡからなる混合物を用いて２時間以下撹拌し、樹脂から切断することにより得た。生成物からの溶媒混合物を蒸発させ、粗生成物を、１：１の比のＡＣＮと水に溶解させ、ＲＰ−ＨＰＬＣで精製した。

【0254】

前記した合成の概要を、スキーム１．５にまとめる。

【化47】

【0255】

最後に、３当量の精製済みアルブミン標的化部分（２０Ｂ）の樹脂固定化生成物（１４Ｂ）へのコンジュゲーションを行った。生成物（２０Ｂ）を乾燥ＤＭＦに溶解させ、１００μＬのＤＩＰＥＡを添加した。ＤＩＰＥＡの添加２分間後、溶液（２０Ｂ）を、樹脂固定化され且つＤＭＦで予め膨潤させた生成物（１４Ｂ）に添加し、１時間撹拌した。

【0256】

次に、得られた化合物（２１Ｂ）をＤＭＦ１で３回、ＤＭＦ２で３回、ＤＣＭ１で３回、ＤＣＭ２で３回、最後にＥｔ_２Ｏで３回洗浄し、真空下で乾燥させた。

【0257】

最終化合物ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０４は、９５：２．５：２．５の比のＴＦＡ、ＴＩＰＳ、及びＨ_２Ｏからなる混合物を用いて２時間以下撹拌し、樹脂から切断することによって得た。ＴＦＡを蒸発させ、粗生成物を、１：１の比のＡＣＮと水に溶解させ、ＲＰ−ＨＰＬＣで精製した。

【0258】

前記した合成の概要を、スキーム１．６にまとめる。

【化48】

【0259】

ｅ）ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０５の合成
リジン被覆ＰＳＭＡ前駆体（９Ｂ）に対して、４当量のＦｍｏｃ及びＡｌｌｏｃ保護Ｌ−リジン｛（Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−ＯＨ；Ｍｅｒｃｋ；カタログ番号８５２１２４０００５）、０．４０ｍｍｏｌ、４５２．５０ｇ／ｍｏｌ、［１８１ｍｇ］｝を、無水ＤＭＦ中、４当量のＤＩＰＥＡ｛０．４０ｍｍｏｌ、１２９．２４ｇ／ｍｏｌ、０．７４２ｇ／ｍＬ、［７０μＬ］｝の存在下で、３．９６当量のＨＢＴＵ｛（Ｓｉｇｍａ；カタログ番号１２８０４−２５Ｇ−Ｆ）、０．３９６ｍｍｏｌ、３７９．２４ｇ／ｍｏｌ、［１４９ｍｇ］｝で活性化された。ＤＩＰＥＡの添加２分間後、溶液を、ＤＭＦで予め膨潤させた固定化ビス（ｔＢｕ）保護ＰＳＭＡ前駆体（９Ｂ）に添加し、１時間攪拌した。

【0260】

次に、得られた化合物（１０Ｂ）をＤＭＦ１で３回、ＤＭＦ２で３回洗浄した。得られた化合物（１０Ｂ）からのＦｍｏｃ保護基の選択的除去は、ＤＭＦとピペリジンの１：１混合物で、２分間１回洗浄後、５分間、更に１回洗浄することによって、生成物（１１Ｂ）を得た。

【0261】

リジン被覆ＰＳＭＡ前駆体（１１Ｂ）に対して、３当量のＦｍｏｃ及びｔＢｕ保護Ｄ−アスパラギン酸塩｛（Ｆｍｏｃ−Ｄ−Ａｓｐ−ＯｔＢｕ；Ｍｅｒｃｋ；カタログ番号８５２１４４０００１）、０．３０ｍｍｏｌ、４１１．４５ｇ／ｍｏｌ、［１２３ｍｇ］｝を、無水ＤＭＦ中、４当量のＤＩＰＥＡ｛０．４０ｍｍｏｌ、１２９．２４ｇ／ｍｏｌ、０．７４２ｇ／ｍＬ、［７０μＬ］｝の存在下で、２．９７当量のＨＢＴＵ｛（Ｓｉｇｍａ；カタログ番号１２８０４−２５Ｇ−Ｆ）、０．２９７ｍｍｏｌ、３７９．２４ｇ／ｍｏｌ、［１１２ｍｇ］｝で活性化させた。ＤＩＰＥＡの添加２分間後、溶液を、ＤＭＦで予め膨潤させた固定化ビス（ｔＢｕ）保護ＰＳＭＡ前駆体（１１Ｂ）に添加し、１時間攪拌した。

【0262】

次に、得られた化合物（１２Ｂ）をＤＭＦ１で３回、ＤＭＦ２で３回洗浄した。得られた化合物（１２Ｂ）からのＦｍｏｃ保護基の選択的除去は、ＤＭＦとピペリジンの１：１混合物で２分間１回洗浄後、５分間、更に１回洗浄することによって行い、生成物（１３Ｂ）を得た。

【0263】

リジン及びアスパラギン酸塩被覆ＰＳＭＡ前駆体（１３Ｂ）に対して、３当量のＦｍｏｃ及びｔＢｕ保護Ｄ−アスパラギン酸塩｛（Ｆｍｏｃ−Ｄ−Ａｓｐ−ＯｔＢｕ；Ｍｅｒｃｋ；カタログ番号８５２１４４０００１）、０．３０ｍｍｏｌ、４１１．４５ｇ／ｍｏｌ、［１２３ｍｇ］｝を、無水ＤＭＦ中、４当量のＤＩＰＥＡ｛０．４０ｍｍｏｌ、１２９．２４ｇ／ｍｏｌ、０．７４２ｇ／ｍＬ、［７０μＬ］｝の存在下で、２．９７当量のＨＢＴＵ｛（Ｓｉｇｍａ；カタログ番号１２８０４−２５Ｇ−Ｆ）、０．２９７ｍｍｏｌ、３７９．２４ｇ／ｍｏｌ、［１１２ｍｇ］｝で活性化させた。ＤＩＰＥＡの添加２分間後、溶液を、ＤＭＦで予め膨潤させた固定化ビス（ｔＢｕ）保護ＰＳＭＡ前駆体（１３Ｂ）に添加し、１時間撹拌した。

【0264】

次に、得られた化合物（１４Ｂ）をＤＭＦ１で３回、ＤＭＦ２で３回洗浄した。得られた化合物（１４Ｂ）からのＦｍｏｃ保護基の選択的除去は、ＤＭＦとピペリジンの１：１混合物で２分間１回洗浄後、５分間、更に１回洗浄することによって行い、生成物（１５Ｂ）を得た。

【0265】

樹脂被覆生成物（１５Ｂ）に対して、４当量のヨードフェニル酪酸｛（［４−（ｐ−ヨードフェニル）酪酸］；Ｓｉｇｍａ；Ｉ５６３４−５Ｇ）、０．４０ｍｍｏｌ、２９０．１０ｇ／ｍｏｌ、［１１６ｍｇ］｝を、無水ＤＭＦ中、４当量のＤＩＰＥＡ｛０．４０ｍｍｏｌ、１２９．２４ｇ／ｍｏｌ、０．７４２ｇ／ｍＬ、［７０μＬ］｝の存在下で、３．９６当量のＨＢＴＵ｛（Ｓｉｇｍａ；カタログ番号１２８０４−２５Ｇ−Ｆ）、０．３９６ｍｍｏｌ、３７９．２４ｇ／ｍｏｌ、［１４９ｍｇ］｝で活性化させた。ＤＩＰＥＡの添加２分間後、溶液を、樹脂固定化されＤＭＦで予め膨潤させた生成物（１５Ｂ）に添加し、１時間攪拌した。

【0266】

次に、得られた化合物（１６Ｂ）をＤＭＦ１で３回、ＤＭＦ２で３回、ＤＣＭ１で３回、最後にＤＣＭ２で３回洗浄した。

【0267】

化合物（１６Ｂ）からのＡｌｌｏｃ保護基の切断は、３ｍＬの無水ＤＣＭ中、３０当量のモルホリン｛３．０ｍｍｏｌ、８７．１２ｇ／ｍｏｌ、０．９９９ｇ／ｍＬ、［２６２μＬ］｝の存在下で、０．０３当量のＴＰＰ Ｐｄ｛（Ｓｉｇｍａ；カタログ番号２１６６６６−１Ｇ）、０．０３ｍｍｏｌ、１１５５．５６ｇ／ｍｏｌ、［３５ｍｇ］｝と反応させることによって行った。アルミホイルを使用して、暗所で２時間反応を行った。

【0268】

次いで、樹脂をＤＣＭ１で３回、ＤＣＭ２で３回、ＤＭＦ１で３回、最後にＤＭＦ２で３回洗浄した。パラジウムの残留物を除去するために、ＤＭＦ中の１％ＤＩＰＥＡ（３０ｍＬのＤＭＦ２中の３００μＬのＤＩＰＥＡ）で樹脂を更に１０回洗浄し、続いて、濃度１５ｍｇ／ｍＬでＤＭＦ２中のキュープラル溶液（｛（Ｓｉｇｍａ；カタログ番号Ｄ３５０６−１００Ｇ）、２２５．３１ｇ／ｍｏｌ｝（３０ｍＬのＤＭＦ２中の４５０ｍｇのキュープラル）で５分間１０回洗浄した。次に、得られた化合物（１７Ｂ）をＤＭＦ１で３回、ＤＭＦ２で３回洗浄した。

【0269】

キレーターと樹脂固定化化合物（１７Ｂ）のコンジュゲーションは、３当量のＤＯＴＡ−トリス（ｔ−Ｂｕ）エステル｛（［２−（４，７，１０−トリス（２−（ｔ−ブトキシ）−２−オキソエチル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１−イル）酢酸］；ＣｈｅＭａｔｅｃｈ；カタログ番号１３７０７６−５４−１）、０．３０ｍｍｏｌ、５７２．７３ｇ／ｍｏｌ［１７１ｍｇ］｝で行った。キレータービルディングブロックは、無水ＤＭＦ中、４当量のＤＩＰＥＡ｛０．４０ｍｍｏｌ、１２９．２４ｇ／ｍｏｌ、０．７４２ｇ／ｍＬ、［７０μＬ］｝の存在下で、２．９７当量のＨＢＴＵ｛（Ｓｉｇｍａ；カタログ番号１２８０４−２５Ｇ−Ｆ）、０．２９７ｍｍｏｌ、３７９．２４ｇ／ｍｏｌ、［１１２ｍｇ］｝で活性化させた。ＤＩＰＥＡの添加２分間後、溶液を、樹脂固定化されＤＭＦで予め膨潤させた化合物（１７Ｂ）に添加した。ＤＯＴＡキレーターのカップリングは、穏やかに攪拌しながら２時間に亘って進行した。

【0270】

そのような生成物（１８Ｂ）を、ＤＭＦ１で３回、ＤＭＦ２で３回、ＤＣＭ１で３回、ＤＣＭ２で３回、最後にＥｔ_２Ｏで３回洗浄し、真空下で乾燥させた。

【0271】

最終化合物ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０５は、９５：２．５：２．５の比のＴＦＡ、ＴＩＰＳ、及びＨ_２Ｏからなる混合物と２時間以下攪拌し、樹脂から切断することによって得た。ＴＦＡを蒸発させ、粗生成物を、１：１の比のＡＣＮと水に溶解させ、ＲＰ−ＨＰＬＣで精製した。

【0272】

前記した合成の概要を、スキーム１．７にまとめる。

【化49】

【化50】

【0273】

リジン被覆ＰＳＭＡ前駆体（９）に対して、４当量のＦｍｏｃ及びＡｌｌｏｃ保護Ｌ−リジン｛（Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−ＯＨ；Ｍｅｒｃｋ；カタログ番号８５２１２４０００５）、０．４０ｍｍｏｌ、４５２．５０ｇ／ｍｏｌ、［１８１ｍｇ］｝を、無水ＤＭＦ中、４当量のＤＩＰＥＡ｛０．４０ｍｍｏｌ、１２９．２４ｇ／ｍｏｌ、０．７４２ｇ／ｍＬ、［７０μＬ］｝の存在下で、３．９６当量のＨＢＴＵ｛（Ｓｉｇｍａ；カタログ番号１２８０４−２５Ｇ−Ｆ）、０．３９６ｍｍｏｌ、３７９．２４ｇ／ｍｏｌ、［１４９ｍｇ］｝で活性化させた。ＤＩＰＥＡの添加２分間後、溶液を、ＤＭＦで予め膨潤させた固定化ビス（ｔＢｕ）保護ＰＳＭＡ前駆体（９）に添加し、１時間攪拌した。

【0274】

得られた化合物（１０）からのＦｍｏｃ保護基の選択的除去は、ＤＭＦとピペリジンの１：１混合物で２分間１回洗浄後、５分間、更に１回洗浄することによって行い、生成物（１１）を得た。

【0275】

キレーターと樹脂固定化化合物（１１）のコンジュゲーションは、２当量のＤＯＴＡ−トリス（ｔ−Ｂｕ）エステル｛（［２−（４，７，１０−トリス（２−（ｔ−ブトキシ））−２−オキソエチル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１−イル）酢酸］；ＣｈｅＭａｔｅｃｈ；カタログ番号１３７０７６−５４−１）、０．２０ｍｍｏｌ、５７２．７３ｇ／ｍｏｌ［１１５ｍｇ］｝で行った。キレータービルディングブロックを、無水ＤＭＦ中、４当量のＤＩＰＥＡ｛０．４０ｍｍｏｌ、１２９．２４ｇ／ｍｏｌ、０．７４２ｇ／ｍＬ、［７０μＬ］｝の存在下で、１．９８当量のＨＢＴＵ｛（Ｓｉｇｍａ；カタログ番号１２８０４−２５Ｇ−Ｆ）、０．１９８ｍｍｏｌ、３７９．２４ｇ／ｍｏｌ、［７５ｍｇ］｝で活性化させた。ＤＩＰＥＡの添加２分間後、溶液を、樹脂固定化されＤＭＦで予め膨潤させた化合物（１１）に添加した。ＤＯＴＡキレーターのカップリングは、穏やかに攪拌しながら２時間に亘って進行した。次に、得られた化合物（１２）をＤＭＦ１で３回、ＤＭＦ２で３回、ＤＣＭ１で３回、最後にＤＣＭ２で３回洗浄した。

【0276】

化合物（１２）からのＡｌｌｏｃ保護基の切断は、３ｍＬの無水ＤＣＭ中、３０当量のモルホリン｛３．０ｍｍｏｌ、８７．１２ｇ／ｍｏｌ、０．９９９ｇ／ｍＬ、［２６２μＬ］｝の存在下で、０．０３当量のＴＰＰ Ｐｄ｛（Ｓｉｇｍａ；カタログ番号２１６６６６−１Ｇ）、０．０３ｍｍｏｌ、１１５５．５６ｇ／ｍｏｌ、［３５ｍｇ］｝との反応によって行った。アルミホイルを使用して、暗所で２時間反応を行った。

【0277】

次いで、樹脂を、ＤＣＭ１で３回、ＤＣＭ２で３回、ＤＭＦ１で３回、最後にＤＭＦ２で３回洗浄した。パラジウムの残留物を除去するために、ＤＭＦ中の１％ＤＩＰＥＡ（３０ｍＬのＤＭＦ２中の３００μＬのＤＩＰＥＡ）で、樹脂を更に１０回洗浄し、続いて、濃度１５ｍｇ／ｍＬでＤＭＦ２中のキュープラル溶液（Ｓｉｇｍａ；カタログ番号Ｄ３５０６−１００Ｇ）、２２５．３１ｇ／ｍｏｌ｝（３０ｍＬのＤＭＦ２中の４５０ｍｇのキュープラル）で５分間１０回洗浄した。次に、得られた化合物（１３）を、ＤＭＦ１で３回、ＤＭＦ２で３回洗浄した。

【0278】

最後に、アルブミン結合部分のカップリングのために、４当量のトリル酪酸｛（［４−（ｐ−トリル）酪酸］；ＡＢＣＲ；ＡＢ１１９２１２）、０．４０ｍｍｏｌ、１７８．２３ｇ／ｍｏｌ、［７１ｍｇ］｝を、無水ＤＭＦ中、４当量のＤＩＰＥＡ｛０．４０ｍｍｏｌ、１２９．２４ｇ／ｍｏｌ、０．７４２ｇ／ｍＬ、［７０μＬ］｝の存在下で、３．９６当量のＨＢＴＵ｛（Ｓｉｇｍａ；カタログ番号１２８０４−２５Ｇ−Ｆ）、０．３９６ｍｍｏｌ、３７９．２４ｇ／ｍｏｌ、［１４９ｍｇ］｝で活性化させた。ＤＩＰＥＡの添加２分間後、溶液を、樹脂固定化されＤＭＦで予め膨潤させた生成物（１３）に添加し、１時間撹拌した。

【0279】

次に、得られた化合物（１４）をＤＭＦ１で３回、ＤＭＦ２で３回、ＤＣＭ１で３回、ＤＣＭ２で３回、最後にＥｔ_２Ｏで３回洗浄し、真空下で乾燥させた。

【0280】

最終化合物ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６は、９５：２．５：２．５の比のＴＦＡ、ＴＩＰＳ、及びＨ_２Ｏからなる混合物と共に２時間以下撹拌し、続いて樹脂から切断することにより得た。ＴＦＡを蒸発させ、粗生成物を、１：１の比のＡＣＮと水に溶解させ、ＲＰ−ＨＰＬＣで精製した。

【0281】

前記した合成の概要を、スキーム１．８にまとめる。

【化51】

【0282】

ｆ）ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０７の合成
リジン被覆ＰＳＭＡ前駆体（９Ｂ）に対して、４当量のＦｍｏｃ及びＡｌｌｏｃ保護Ｌ−リジン｛（Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−ＯＨ；Ｍｅｒｃｋ；カタログ番号８５２１２４０００５）、０．４０ｍｍｏｌ、４５２．５０ｇ／ｍｏｌ、［１８１ｍｇ］｝を、無水ＤＭＦ中、４当量のＤＩＰＥＡ｛０．４０ｍｍｏｌ、１２９．２４ｇ／ｍｏｌ、０．７４２ｇ／ｍＬ、［７０μＬ］｝の存在下で、３．９６当量のＨＢＴＵ｛（Ｓｉｇｍａ；カタログ番号１２８０４−２５Ｇ−Ｆ）、０．３９６ｍｍｏｌ、３７９．２４ｇ／ｍｏｌ、［１４９ｍｇ］｝で活性化させた。ＤＩＰＥＡの添加２分間後、溶液を、ＤＭＦで予め膨潤させた固定化ビス（ｔＢｕ）保護ＰＳＭＡ前駆体（９Ｂ）に添加し、１時間攪拌した。

【0283】

次に、得られた化合物（１０Ｂ）をＤＭＦ１で３回、ＤＭＦ２で３回洗浄した。得られた化合物（１０Ｂ）からのＦｍｏｃ保護基の選択的除去は、ＤＭＦとピペリジンの１：１混合物で２分間１回洗浄後、５分間、更に１回洗浄することによって行い、生成物（１１Ｂ）を得た。

【0284】

リジン被覆ＰＳＭＡ前駆体（１１Ｂ）に対して、３当量のＦｍｏｃ及びｔＢｕ保護Ｄ−アスパラギン酸塩｛（Ｆｍｏｃ−Ｄ−Ａｓｐ−ＯｔＢｕ；Ｍｅｒｃｋ；カタログ番号８５２１４４０００１）、０．３０ｍｍｏｌ、４１１．４５ｇ／ｍｏｌ、［１２３ｍｇ］｝を、無水ＤＭＦ中、４当量のＤＩＰＥＡ｛０．４０ｍｍｏｌ、１２９．２４ｇ／ｍｏｌ、０．７４２ｇ／ｍＬ、［７０μＬ］｝の存在下で、２．９７当量のＨＢＴＵ｛（Ｓｉｇｍａ；カタログ番号１２８０４−２５Ｇ−Ｆ）、０．２９７ｍｍｏｌ、３７９．２４ｇ／ｍｏｌ、［１１２ｍｇ］｝で活性化させた。ＤＩＰＥＡの添加２分間後、溶液を、ＤＭＦで予め膨潤させた固定化ビス（ｔＢｕ）保護ＰＳＭＡ前駆体（１１Ｂ）に添加し、１時間攪拌した。

【0285】

次に、得られた化合物（１２Ｂ）をＤＭＦ１で３回、ＤＭＦ２で３回洗浄した。得られた化合物（１２Ｂ）からのＦｍｏｃ保護基の選択的除去は、ＤＭＦとピペリジンの１：１混合物で２分間１回洗浄後、５分間、更に１回洗浄することによって行い、生成物（１３Ｂ）を得た。

【0286】

リジン及びアスパラギン酸塩被覆ＰＳＭＡ前駆体（１３Ｂ）に対して、３当量のＦｍｏｃ及びｔＢｕ保護Ｄ−アスパラギン酸塩｛（Ｆｍｏｃ−Ｄ−Ａｓｐ−ＯｔＢｕ；Ｍｅｒｃｋ；カタログ番号８５２１４４０００１）、０．３０ｍｍｏｌ、４１１．４５ｇ／ｍｏｌ、［１２３ｍｇ］｝を、無水ＤＭＦ中、４当量のＤＩＰＥＡ｛０．４０ｍｍｏｌ、１２９．２４ｇ／ｍｏｌ、０．７４２ｇ／ｍＬ、［７０μＬ］｝の存在下で、２．９７当量のＨＢＴＵ｛（Ｓｉｇｍａ；カタログ番号１２８０４−２５Ｇ−Ｆ）、０．２９７ｍｍｏｌ、３７９．２４ｇ／ｍｏｌ、［１１２ｍｇ］｝で活性化させた。ＤＩＰＥＡの添加２分間後、溶液を、ＤＭＦで予め膨潤させた固定化ビス（ｔＢｕ）保護ＰＳＭＡ前駆体（１３Ｂ）に添加し、１時間撹拌した。

【0287】

次に、得られた化合物（１４Ｂ）をＤＭＦ１で３回、ＤＭＦ２で３回洗浄した。得られた化合物（１４Ｂ）からのＦｍｏｃ保護基の選択的除去は、ＤＭＦとピペリジンの１：１混合物で２分間１回洗浄後、５分間、更に１回洗浄することによって行い、生成物（１５Ｂ）を得た。

【0288】

リジン及び２種のアスパラギン酸塩被覆ＰＳＭＡ前駆体（１５Ｂ）に対して、３当量のＦｍｏｃ及びｔＢｕ保護Ｄ−アスパラギン酸塩｛（Ｆｍｏｃ−Ｄ−Ａｓｐ−ＯｔＢｕ；Ｍｅｒｃｋ；カタログ番号８５２１４４０００１）、０．３０ｍｍｏｌ、４１１．４５ｇ／ｍｏｌ、［１２３ｍｇ］｝を、無水ＤＭＦ中、４当量のＤＩＰＥＡ｛０．４０ｍｍｏｌ、１２９．２４ｇ／ｍｏｌ、０．７４２ｇ／ｍＬ、［７０μＬ］｝の存在下で、２．９７当量のＨＢＴＵ｛（Ｓｉｇｍａ；カタログ番号１２８０４−２５Ｇ−Ｆ）、０．２９７ｍｍｏｌ、３７９．２４ｇ／ｍｏｌ、［１１２ｍｇ］｝で活性化させた。ＤＩＰＥＡの添加２分間後、溶液を、ＤＭＦで予め膨潤させた固定化ビス（ｔＢｕ）保護ＰＳＭＡ前駆体（１５Ｂ）に添加し、１時間攪拌した。

【0289】

次に、得られた化合物（１６Ｂ）をＤＭＦ１で３回、ＤＭＦ２で３回洗浄した。得られた化合物（１４Ｂ）からのＦｍｏｃ保護基の選択的除去は、ＤＭＦとピペリジンの１：１混合物で２分間１回洗浄後、５分間、更に１回洗浄することによって行い、生成物（１７Ｂ）を得た。

【0290】

樹脂被覆生成物（１７Ｂ）に対して、４当量のヨードフェニル酪酸｛（［４−（ｐ−ヨードフェニル）酪酸］；Ｓｉｇｍａ；Ｉ５６３４−５Ｇ）、０．４０ｍｍｏｌ、２９０．１０ｇ／ｍｏｌ、［１１６ｍｇ］｝を、無水ＤＭＦ中、４当量のＤＩＰＥＡ｛０．４０ｍｍｏｌ、１２９．２４ｇ／ｍｏｌ、０．７４２ｇ／ｍＬ、［７０μＬ］｝の存在下で、３．９６当量のＨＢＴＵ｛（Ｓｉｇｍａ；カタログ番号１２８０４−２５Ｇ−Ｆ）、０．３９６ｍｍｏｌ、３７９．２４ｇ／ｍｏｌ、［１４９ｍｇ］｝で活性化させた。ＤＩＰＥＡの添加２分間後、溶液を、ＤＭＦで予め膨潤させた固定化ビス（ｔＢｕ）保護ＰＳＭＡ前駆体（１７Ｂ）に添加し、１時間撹拌した。

【0291】

次に、得られた化合物（１８Ｂ）をＤＭＦ１で３回、ＤＭＦ２で３回、ＤＣＭ１で３回、最後にＤＣＭ２で３回洗浄した。

【0292】

化合物（１８Ｂ）からのＡｌｌｏｃ保護基の切断は、３ｍＬの無水ＤＣＭ中、３０当量のモルホリン｛３．０ｍｍｏｌ、８７．１２ｇ／ｍｏｌ、０．９９９ｇ／ｍＬ、［２６２μＬ］｝の存在下で、０．０３当量のＴＰＰ Ｐｄ｛（Ｓｉｇｍａ；カタログ番号２１６６６６−１Ｇ）、０．０３ｍｍｏｌ、１１５５．５６ｇ／ｍｏｌ、［３５ｍｇ］｝との反応により行った。アルミホイルを使用して、暗所で２時間反応を行った。

【0293】

次いで、樹脂を、ＤＣＭ１で３回、ＤＣＭ２で３回、ＤＭＦ１で３回、最後にＤＭＦ２で３回洗浄した。パラジウムの残留物を除去するために、ＤＭＦ中の１％ＤＩＰＥＡ（３０ｍＬのＤＭＦ２中の３００μＬのＤＩＰＥＡ）で、樹脂を更に１０回洗浄し、続いて、濃度１５ｍｇ／ｍＬでＤＭＦ２中のキュープラル溶液（Ｓｉｇｍａ；カタログ番号Ｄ３５０６−１００Ｇ）、２２５．３１ｇ／ｍｏｌ｝（３０ｍＬのＤＭＦ２中の４５０ｍｇのキュープラル）で５分間１０回洗浄した。次に、得られた化合物（１９Ｂ）を、ＤＭＦ１で３回、ＤＭＦ２で３回洗浄した。

【0294】

キレーターと樹脂固定化化合物（１９Ｂ）のコンジュゲーションは、３当量のＤＯＴＡ−トリス（ｔ−Ｂｕ）エステル｛（［２−（４，７，１０−トリス（２−（ｔ−ブトキシ）−２−オキソエチル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１−イル）酢酸］；ＣｈｅＭａｔｅｃｈ；カタログ番号１３７０７６−５４−１）、０．３０ｍｍｏｌ、５７２．７３ｇ／ｍｏｌ［１７１ｍｇ］｝で行った。キレータービルディングブロックは、無水ＤＭＦ中、４当量のＤＩＰＥＡ｛０．４０ｍｍｏｌ、１２９．２４ｇ／ｍｏｌ、０．７４２ｇ／ｍＬ、［７０μＬ］｝の存在下で、２．９７当量のＨＢＴＵ｛（Ｓｉｇｍａ；カタログ番号１２８０４−２５Ｇ−Ｆ）、０．２９７ｍｍｏｌ、３７９．２４ｇ／ｍｏｌ、［１１２ｍｇ］｝で活性化させた。ＤＩＰＥＡの添加２分間後、溶液を、樹脂固定化されＤＭＦで予め膨潤させた化合物（１７Ｂ）に添加した。ＤＯＴＡキレーターのカップリングは、穏やかに攪拌しながら２時間に亘って進行した。

【0295】

そのような生成物（２０Ｂ）を、ＤＭＦ１で３回、ＤＭＦ２で３回、ＤＣＭ１で３回、ＤＣＭ２で３回、最後にＥｔ_２Ｏで３回洗浄し、真空下で乾燥させた。

【0296】

最終化合物ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０７は、９５：２．５：２．５の比のＴＦＡ、ＴＩＰＳ、及びＨ_２Ｏからなる混合物と共に２時間以下撹拌し、続いて樹脂から切断することにより得た。ＴＦＡを蒸発させ、粗生成物を、１：１の比のＡＣＮと水に溶解させ、ＲＰ−ＨＰＬＣで精製した。前記した合成の概要を、スキーム１．９の２つの部分にまとめる。

【化52】

【化53】

【0297】

ｇ）ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０８の合成
リジン被覆ＰＳＭＡ前駆体（９Ｂ）に対して、４当量のＦｍｏｃ及びＡｌｌｏｃ保護Ｌ−リジン｛（Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−ＯＨ；Ｍｅｒｃｋ；カタログ番号８５２１２４０００５）、０．４０ｍｍｏｌ、４５２．５０ｇ／ｍｏｌ、［１８１ｍｇ］｝を、無水ＤＭＦ中、４当量のＤＩＰＥＡ｛０．４０ｍｍｏｌ、１２９．２４ｇ／ｍｏｌ、０．７４２ｇ／ｍＬ、［７０μＬ］｝の存在下で、３．９６当量のＨＢＴＵ｛（Ｓｉｇｍａ；カタログ番号１２８０４−２５Ｇ−Ｆ）、０．３９６ｍｍｏｌ、３７９．２４ｇ／ｍｏｌ、［１４９ｍｇ］｝で活性化させた。ＤＩＰＥＡの添加２分間後、溶液を、ＤＭＦで予め膨潤させた固定化ビス（ｔＢｕ）保護ＰＳＭＡ前駆体（９Ｂ）に添加し、１時間攪拌した。

【0298】

次に、得られた化合物（１０Ｂ）をＤＭＦ１で３回、ＤＭＦ２で３回洗浄した。得られた化合物（１０Ｂ）からのＦｍｏｃ保護基の選択的除去は、ＤＭＦとピペリジンの１：１混合物で２分間１回洗浄後、５分間、更に１回洗浄することによって行い、生成物（１１Ｂ）を得た。

【0299】

リジン被覆ＰＳＭＡ前駆体（１１Ｂ）に対して、３当量のＦｍｏｃ及びｔＢｕ保護Ｄ−アスパラギン酸塩｛（Ｆｍｏｃ−Ｄ−Ａｓｐ−ＯｔＢｕ；Ｍｅｒｃｋ；カタログ番号８５２１４４０００１）、０．３０ｍｍｏｌ、４１１．４５ｇ／ｍｏｌ、［１２３ｍｇ］｝を、無水ＤＭＦ中、４当量のＤＩＰＥＡ｛０．４０ｍｍｏｌ、１２９．２４ｇ／ｍｏｌ、０．７４２ｇ／ｍＬ、［７０μＬ］｝の存在下で、２．９７当量のＨＢＴＵ｛（Ｓｉｇｍａ；カタログ番号１２８０４−２５Ｇ−Ｆ）、０．２９７ｍｍｏｌ、３７９．２４ｇ／ｍｏｌ、［１１２ｍｇ］｝で活性化させた。ＤＩＰＥＡの添加２分間後、溶液を、ＤＭＦで予め膨潤させた固定化ビス（ｔＢｕ）保護ＰＳＭＡ前駆体（１１Ｂ）に添加し、１時間攪拌した。

【0300】

次に、得られた化合物（１２Ｂ）をＤＭＦ１で３回、ＤＭＦ２で３回洗浄した。得られた化合物（１２Ｂ）からのＦｍｏｃ保護基の選択的除去は、ＤＭＦとピペリジンの１：１混合物で２分間１回洗浄後、５分間、更に１回洗浄することによって行い、生成物（１３Ｂ）を得た。

【0301】

リジン及びアスパラギン酸塩被覆ＰＳＭＡ前駆体（１３Ｂ）に対して、３当量のＦｍｏｃ及びｔＢｕ保護Ｄ−アスパラギン酸塩｛（Ｆｍｏｃ−Ｄ−Ａｓｐ−ＯｔＢｕ；Ｍｅｒｃｋ；カタログ番号８５２１４４０００１）、０．３０ｍｍｏｌ、４１１．４５ｇ／ｍｏｌ、［１２３ｍｇ］｝を、無水ＤＭＦ中、４当量のＤＩＰＥＡ｛０．４０ｍｍｏｌ、１２９．２４ｇ／ｍｏｌ、０．７４２ｇ／ｍＬ、［７０μＬ］｝の存在下で、２．９７当量のＨＢＴＵ｛（Ｓｉｇｍａ；カタログ番号１２８０４−２５Ｇ−Ｆ）、０．２９７ｍｍｏｌ、３７９．２４ｇ／ｍｏｌ、［１１２ｍｇ］｝で活性化させた。ＤＩＰＥＡの添加２分間後、溶液を、ＤＭＦで予め膨潤させた固定化ビス（ｔＢｕ）保護ＰＳＭＡ前駆体（１３Ｂ）に添加し、１時間撹拌した。

【0302】

次に、得られた化合物（１４Ｂ）をＤＭＦ１で３回、ＤＭＦ２で３回洗浄した。得られた化合物（１４Ｂ）からのＦｍｏｃ保護基の選択的除去は、ＤＭＦとピペリジンの１：１混合物で２分間１回洗浄後、５分間、更に１回洗浄することによって行い、生成物（１５Ｂ）を得た。

【0303】

リジン及び２種のアスパラギン酸塩被覆ＰＳＭＡ前駆体（１５Ｂ）に対して、３当量のＦｍｏｃ及びｔＢｕ保護Ｄ−アスパラギン酸塩｛（Ｆｍｏｃ−Ｄ−Ａｓｐ−ＯｔＢｕ；Ｍｅｒｃｋ；カタログ番号８５２１４４０００１）、０．３０ｍｍｏｌ、４１１．４５ｇ／ｍｏｌ、［１２３ｍｇ］｝を、無水ＤＭＦ中、４当量のＤＩＰＥＡ｛０．４０ｍｍｏｌ、１２９．２４ｇ／ｍｏｌ、０．７４２ｇ／ｍＬ、［７０μＬ］｝の存在下で、２．９７当量のＨＢＴＵ｛（Ｓｉｇｍａ；カタログ番号１２８０４−２５Ｇ−Ｆ）、０．２９７ｍｍｏｌ、３７９．２４ｇ／ｍｏｌ、［１１２ｍｇ］｝で活性化させた。ＤＩＰＥＡの添加２分間後、溶液を、ＤＭＦで予め膨潤させた固定化ビス（ｔＢｕ）保護ＰＳＭＡ前駆体（１５Ｂ）に添加し、１時間攪拌した。

【0304】

次に、得られた化合物（１６Ｂ）をＤＭＦ１で３回、ＤＭＦ２で３回洗浄した。得られた化合物（１４Ｂ）からのＦｍｏｃ保護基の選択的除去は、ＤＭＦとピペリジンの１：１混合物で２分間１回洗浄後、５分間、更に１回度洗浄することによって行い、生成物（１７Ｂ）を得た。

【0305】

樹脂被覆生成物（１７Ｂ）に対して、４当量のトリル酪酸（０．４０ｍｍｏｌ）を、無水ＤＭＦ中、４当量のＤＩＰＥＡ｛０．４０ｍｍｏｌ、１２９．２４ｇ／ｍｏｌ、０．７４２ｇ／ｍＬ、［７０μＬ］｝の存在下で、３．９６当量のＨＢＴＵ｛（Ｓｉｇｍａ；カタログ番号１２８０４−２５Ｇ−Ｆ）、０．３９６ｍｍｏｌ、３７９．２４ｇ／ｍｏｌ［１４９ｍｇ］｝で活性化させた。ＤＩＰＥＡの添加２分間後、溶液を、樹脂固定化されＤＭＦで予め膨潤させた生成物（１７Ｂ）に添加し、１時間撹拌した。

【0306】

次に、得られた化合物（１８Ｂ）をＤＭＦ１で３回、ＤＭＦ２で３回、ＤＣＭ１で３回、最後にＤＣＭ２で３回洗浄した。

【0307】

化合物（１８Ｂ）からのＡｌｌｏｃ保護基の切断は、３ｍＬの無水ＤＣＭ中、３０当量のモルホリン｛３．０ｍｍｏｌ、８７．１２ｇ／ｍｏｌ、０．９９９ｇ／ｍＬ、［２６２μＬ］｝の存在下で、０．０３当量のＴＰＰ Ｐｄ｛（Ｓｉｇｍａ；カタログ番号２１６６６６−１Ｇ）、０．０３ｍｍｏｌ、１１５５．５６ｇ／ｍｏｌ、［３５ｍｇ］｝との反応により行った。アルミホイルを使用して、暗所で２時間反応を行った。

【0308】

次いで、樹脂を、ＤＣＭ１で３回、ＤＣＭ２で３回、ＤＭＦ１で３回、最後にＤＭＦ２で３回洗浄した。パラジウムの残留物を除去するために、ＤＭＦ中の１％ＤＩＰＥＡ（３０ｍＬのＤＭＦ２中の３００μＬのＤＩＰＥＡ）で、樹脂を更に１０回洗浄し、続いて、濃度１５ｍｇ／ｍＬでＤＭＦ２中のキュープラル溶液（Ｓｉｇｍａ；カタログ番号Ｄ３５０６−１００Ｇ）、２２５．３１ｇ／ｍｏｌ｝（３０ｍＬのＤＭＦ２中の４５０ｍｇのキュープラル）で５分間１０回洗浄した。次に、得られた化合物（１９Ｂ）を、ＤＭＦ１で３回、ＤＭＦ２で３回洗浄した。

【0309】

キレーターと樹脂固定化化合物（１９Ｂ）のコンジュゲーションは、３当量のＤＯＴＡ−トリス（ｔ−Ｂｕ）エステル｛（［２−（４，７，１０−トリス（２−（ｔ−ブトキシ）−２−オキソエチル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１−イル）酢酸］；ＣｈｅＭａｔｅｃｈ；カタログ番号１３７０７６−５４−１）、０．３０ｍｍｏｌ、５７２．７３ｇ／ｍｏｌ［１７１ｍｇ］｝で行った。キレータービルディングブロックは、無水ＤＭＦ中、４当量のＤＩＰＥＡ｛０．４０ｍｍｏｌ、１２９．２４ｇ／ｍｏｌ、０．７４２ｇ／ｍＬ、［７０μＬ］｝の存在下で、２．９７当量のＨＢＴＵ｛（Ｓｉｇｍａ；カタログ番号１２８０４−２５Ｇ−Ｆ）、０．２９７ｍｍｏｌ、３７９．２４ｇ／ｍｏｌ、［１１２ｍｇ］｝で活性化させた。ＤＩＰＥＡの添加２分間後、溶液を、樹脂固定化されＤＭＦで予め膨潤させた化合物（１７Ｂ）に添加した。ＤＯＴＡキレーターのカップリングは、穏やかに攪拌しながら２時間に亘って進行した。

【0310】

そのような生成物（２０Ｂ）を、ＤＭＦ１で３回、ＤＭＦ２で３回、ＤＣＭ１で３回、ＤＣＭ２で３回、最後にＥｔ_２Ｏで３回洗浄し、真空下で乾燥させた。

【0311】

最終化合物ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０７は、９５：２．５：２．５の比のＴＦＡ、ＴＩＰＳ、及びＨ_２Ｏからなる混合物と２時間以下攪拌し、続いて樹脂から切断することによって得た。ＴＦＡを蒸発させ、粗生成物を、１：１の比のＡＣＮと水に溶解させ、ＲＰ−ＨＰＬＣで精製した。

【0312】

前記した合成の概要を、スキーム１．１０の２つの部分にまとめる。

【化54】

【化55】

【0313】

１．１．３：ＰＳＭＡリガンドの^１７７Ｌｕ標識及びｉｎ ｖｉｔｒｏ評価
^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０１／−０３／−０４／−０５／−０６／−０７／−０８を使用して、ｉｎ ｖｉｔｒｏ試験を行った。これは、標識効率、ｎ−オクタノール／ＰＢＳ分配係数、及び血清タンパク質結合試験の予備的評価を含んだ。更に、取り込み及び内在化実験を、ＰＳＭＡをトランスフェクトしたＰＳＭＡｐｏｓ ＰＣ−３ ＰＩＰ細胞株（ポジティブコントロール）及びモックをトランスフェクトしたＰＳＭＡｎｅｇ ＰＣ−３ ｆｌｕ細胞株（ネガティブコントロール）を使用して行った。

【0314】

ａ）ＰＳＭＡリガンド及び放射性核種
ＰＳＭＡリガンド^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０１／−０３／−０４／−０５／−０６／−０７／−０８は、前記したように合成した。参照化合物（ＰＳＭＡ−６１７）は、Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏｍｐｏｕｎｄ（ＡＢＸ ＧｍｂＨ、Ｒａｄｅｂｅｒｇ、ドイツ）から購入した。０．０５Ｍ ＨＣｌ中の担体無添加（Ｎｏ−ｃａｒｒｉｅｒ ａｄｄｅｄ）^１７７Ｌｕは、Ｉｓｏｔｏｐｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ Ｇａｒｃｈｉｎｇ（ＩＴＧ ＧｍｂＨ、ドイツ）から得た。

【0315】

ｂ）放射標識
ＰＳＭＡ−６１７のストック溶液は、ＭｉｌｌｉＱ水に最終濃度１ｍＭに希釈することにより調製した。^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０１／−０３／−０４／−０５／−０６／−０７／−０８を、ＭｉｌｌｉＱ水／ＤＭＳＯに希釈して、最終濃度１ｍＭにした。いずれの化合物も、ｐＨ３．５〜４．５の酢酸ナトリウム（０．５Ｍ、ｐＨ８）とＨＣｌ（０．０５Ｍ、ｐＨ〜１）の１：５混合物中にて^１７７Ｌｕで標識した。実験条件に応じて、化合物を、５〜５０ＭＢｑ／ｎｍｏｌの比放射能にて^１７７Ｌｕで標識した。反応混合物を９５℃で１５分間インキュベートした後、Ｃ−１８逆相カラム（ＸｔｅｒｒａＴＭ ＭＳ、Ｃ１８、５μｍ、１５０×４．６ｍｍ；Ｗａｔｅｒｓ）を用いる高速液体クロマトグラフィーを使用した品質管理を行った。移動相は、０．１％トリフルオロ酢酸（Ａ）及びアセトニトリル（Ｂ）を含むＭｉｌｌｉＱ水からなり、９５％Ａ及び５％Ｂ〜２０％Ａ及び８０％Ｂの勾配で、１．０ｍＬ／分の流量で１５分間行った。ＨＰＬＣに注入する前に、放射性リガンドをＮａ−ＤＴＰＡ（５０μＭ（マイクロモル））を含むＭｉｌｌｉＱ水に希釈した。

【0316】

ｃ）ｎ−オクタノール／ＰＢＳ分配係数の決定
^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０１／−０３／−０４／−０５／−０６／−０７／−０８及びＰＳＭＡ−６１７を、５０ＭＢｑ／ｎｍｏｌの比活性にて^１７７Ｌｕで標識した。次に、放射性リガンド（０．５ＭＢｑ；１０ｐｍｏｌ、２５μＬ）を、１４７５μＬのＰＢＳ（ｐＨ７．４）と１５００μＬのｎ−オクタノールを含む試薬チューブに添加した。バイアルを激しくボルテックスした後、相分離のための遠心分離ステップを行った。最後に、規定量のＰＢＳとｎ−オクタノールの放射能をガンマカウンター（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ、Ｗａｌｌａｃ Ｗｉｚａｒｄ １４８０）で測定し、ｎ−オクタノール相中で測定された１分間当たりのカウント（ｃｐｍ）のＰＢＳ相中のｃｐｍ測定値に対する比の対数として表される分布係数を計算した。

【0317】

ｄ）フィルターアッセイ
^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０１／−０３／−０４／−０５／−０６／−０７／−０８及び^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−６１７の血漿結合を、限外ろ過アッセイを使用して決定した。

【0318】

したがって、化合物を、５０ＭＢｑ／ｎｍｏｌの比活性にて^１７７Ｌｕで標識し、ヒト血漿サンプル又はＰＢＳ中で室温にてインキュベートした。遊離及び血漿結合画分を、遠心分離限外ろ過装置（４１０４遠心分離フィルターユニット［Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ］；３００００Ｄａ公称分子量限界、メチルセルロースマイクロパーティションメンブレン）を使用して分離した。インキュベートした溶液を限外濾過装置に充填し、２０℃で４０分間２５００ｒｐｍにて遠心分離しました。ろ液からサンプルを採取し、ガンマカウンターで放射能を分析した。血漿結合化合物の量は、対応する充填溶液（１００％に設定）に対するろ液で測定された放射能の割合として計算した。

【0319】

ｅ）細胞内在化アッセイ
ＰＳＭＡをトランスフェクトしたＰＳＭＡ^ｐｏｓ ＰＣ−３ ＰＩＰ細胞及びモックをトランスフェクトしたＰＳＭＡ^ｎｅｇ ＰＣ−３ ｆｌｕ細胞を用いて、^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０１／−０３／−０４／−０５／−０６／−０７／−０８及び参照化合物^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−６１７で、細胞取り込み及び内在化実験を行い、新規化合物の特異性を調べた。

【0320】

１０％ウシ胎児血清、Ｌ−グルタミン、抗生物質、ピューロマイシン（２μｇ／ｍＬ）を添加したＲＰＭＩ細胞培養培地で、３７℃、５％ＣＯ_２（標準条件）で細胞を増殖させた。細胞を洗うためのＰＢＳ／ＥＤＴＡ（２ｍＭ）及び細胞を剥離するためのトリプシンを使用して、常法による細胞培養を１週間に２回行った。細胞を１２ウェルプレートに播種し（１ウェル当たり、ＲＰＭＩ培地２ｍＬ中〜３×１０^５個の細胞）、標準的な条件で一晩接着及び増殖させた。上清を除去し、細胞をＰＢＳ（ｐＨ７．４）で洗ってから、添加剤を含有しないＲＰＭＩ培地（９７５μＬ／ウェル）を添加した。化合物を、５ＭＢｑ／ｎｍｏｌの比活性にて^１７７Ｌｕで標識し、０．０５％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）／０．９％ＮａＣｌ溶液中に１．５ＭＢｑ／ｍＬに希釈して、プラスチック容器への接着を防止した。細胞を、２５μＬ（〜３７．５ｋＢｑ）／ウェルの放射標識ＰＳＭＡリガンドと共に、それぞれ標準的な条件で２時間及び４時間インキュベートした。インキュベーション後、細胞を氷冷ＰＢＳで３回洗浄し、放射性リガンドの合計取り込み量を決定した（表面上のＰＳＭＡ結合画分及び内在化画分）。内在化放射性リガンドの画分を、氷冷ＰＢＳで洗浄した細胞で評価し、続いてストリッピングバッファー（１００ｍＭのＮａＣｌ中０．０５Ｍグリシンストリッピングバッファー、ｐＨ２．８）で１０分間インキュベートし、氷冷ＰＢＳで更なる洗浄ステップを行った。ＮａＯＨ（１Ｍ、１ｍＬ）を各ウェルに添加することにより、細胞サンプルを溶解させた。細胞懸濁液のサンプルは、γカウンター（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ、Ｗａｌｌａｃ Ｗｉｚａｒｄ １４８０）で測定した。細胞懸濁液をホモジナイズした後、Ｍｉｃｒｏ ＢＣＡ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａｓｓａｙキット（Ｐｉｅｒｃｅ、Ｔｈｅｒｍａ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を使用して、各サンプルのタンパク質濃度を決定した。結果を、１５０μｇ／ｍＬタンパク質当たりの合計付加放射能の割合として表した。

【0321】

１．２ 結果
１．２．１ 標識化効率
ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０１及び−０３は、最大１００ＭＢｑ／ｎｍｏｌの比活性で、＞９８％の優れた放射化学収率にて^１７７Ｌｕで成功裏に標識化された。ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０４、−０５、−０６、−０７、及び−０８は、予備試験において、最大５０ＭＢｑ／ｎｍｏｌの比活性で、＞９７％の優れた放射化学収率にて^１７７Ｌｕで標識化された。実験に使用した比活性は（特段の断りがない限り）５０ＭＢｑ／ｎｍｏｌであった。ｉｎ ｖｉｔｒｏ及びｉｎ ｖｉｖｏの試験に使用される化合物の放射化学的純度は、常に＞９７％であった（図１）。

【0322】

１．２．２ ｎ−オクタノール／ＰＢＳ分配係数
^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０１、−０３、−０４、及び−０６は、同様のｎ−オクタノール／ＰＢＳ分配係数（ＬｏｇＤ値）を示したが、^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０５、−０７、及び−０８の係数は、僅かにより親水性の化合物であることを示した。一般に、データは、アルブミン結合体の導入により、参照化合物^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−６１７と比較して親水性を低下させることを示したが、化合物はいずれも依然として親水性であり、ｌｏｇＤ値は＞２．７である（図２）。

【0323】

１．２．３ アルブミン結合特性
^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０１、−０３、−０４、−０５、−０６、−０７の限外ろ過実験では、ヒト血漿中でインキュベートしたときに９４％を超える化合物がフィルターを浸透せず、高い血清タンパク質結合能が明らかとなった。タンパク質が存在しないＰＢＳで化合物をインキュベートすると、化合物をろ過し易い可能性が示された（図３）。新たに設計された化合物はいずれも、アルブミン結合画分が僅か約４４％であった^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−６１７と比較して血清タンパク質結合能の増加を示した（図３）。

【0324】

１．２．４ 内在化
ＰＳＭＡリガンド^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０１、−０３、−０４、−０５、−０６、−０７、及び−０８の細胞取り込みと内在化を調べ、ＰＣ−３ ＰＩＰ／ｆｌｕ細胞を使用して参照化合物^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−６１７と比較した（図４）。ＰＣ−３ ＰＩＰ細胞（ＰＳＭＡ^ｐｏｓ）への化合物の取り込みはいずれも、それぞれ２時間又は４時間で^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−６１７に同等であった。興味深いことに、ＰＳＭＡリガンドの内在化された割合は、２時間及び４時間の時点で^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−６１７の場合よりも高かった。^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６と^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０８の内在化率は、^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−６１７と同等であった。ＰＣ−３ ｆｌｕ細胞（ＰＳＭＡ^ｎｅｇ）中における放射性リガンドの取り込みはいずれも、＜０．５％であり、全ての化合物においてＰＳＭＡ特異的な取り込み／内在化が高いことが示された。

【0325】

実施例２：腫瘍マウスモデルにおけるＰＳＭＡリガンドのｉｎ ｖｉｖｏ評価
^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０１、−０３、−０４、−０５、−０６、−０７、及び−０８を、ｉｎ ｖｉｖｏで特性評価した。そのため、免疫不全Ｂａｌｂ／ｃヌードマウスにＰＳＭＡｐｏｓ ＰＣ−３ ＰＩＰ細胞及びＰＳＭＡｎｅｇ ＰＣ−３ ｆｌｕ細胞を接種した。リガンドの静脈内（ｉ．ｖ．）適用後、広範な体内分布及びＳＰＥＣＴ／ＣＴ試験を行った。^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０１−０８の腫瘍の取り込み、腫瘍／血液比、腫瘍／腎臓比、及び腫瘍／肝臓比を、図５及び図６にまとめる。

【0326】

２．１ 材料及び方法
２．１．１ 腫瘍マウスモデル
マウスは、Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（ズルツフェルト、ドイツ）から５〜６週齢で入手した。雌の無胸腺ヌードＢａｌｂ／ｃマウスの右肩部にＰＣ−３ ＰＩＰ細胞（Ｃａ^２＋／Ｍｇ^２＋を含む１００μＬハンクス平衡塩溶液（ＨＢＳＳ）中の６×１０^６個の細胞）を、左肩部にＰＣ−３ ｆｌｕ細胞（Ｃａ^２＋／Ｍｇ^２＋を含む１００μＬのＨＢＳＳ中の５×１０^６個の細胞）に皮下接種した。２週間後、腫瘍は、体内分布とイメージング試験の実施に適した約２００〜３００ｍｍ^３のサイズに達した。

【0327】

２．１．２ 生体分布試験
ＰＳＭＡリガンドの注射の２週間前に腫瘍細胞を接種したＰＣ−３ ＰＩＰ／ｆｌｕ担腫瘍マウスを使用して、体内分布試験を行った。放射性リガンドを０．９％ＮａＣｌに希釈し、１００〜２００μＬの容量でｉ．ｖ．注射した。マウスを、放射性リガンドの注射後（ｐ．ｉ．）の様々な時点で安楽死させた。選択した組織と臓器を収集し、重量を測定し、ガンマカウンターを使用して測定を行った。結果を減衰補正し、組織質量１グラム当たりの注入された活性の割合（％ＩＡ／ｇ）として記載した。

【0328】

２．１．３ ＳＰＥＣＴ／ＣＴイメージング試験
ＳＰＥＣＴ／ＣＴ実験は、専用の小型動物ＳＰＥＣＴ／ＣＴカメラ（ＮａｎｏＳＰＥＣＴ／ＣＴＴＭ、Ｍｅｄｉｓｏ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｉｍａｇｉｎｇ Ｓｙｓｔｅｍｓ、ブダペスト、ハンガリー）を使用して行った。ＰＳＭＡリガンドは、２５ＭＢｑ／ｎｍｏｌの比活性で標識し、０．０５％ＢＳＡを含む生理食塩水で希釈した。スキャンは、放射性リガンド（２５ＭＢｑ、１ｎｍｏｌ、１００μＬ）の注射後４時間、２４時間、及び７２時間に取得した。ＮａｎｏＳＰＥＣＴ／ＣＴＴＭソフトウェアを使用してデータを再構成し、ＶｉｖｏＱｕａｎｔ（バージョン３．０、ｉｎｖｉＣＲＯ Ｉｍａｇｉｎｇ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ ａｎｄ Ｓｏｆｔｗａｒｅ、ボストン、米国）を使用して後処理した。ガウスポスト再構成フィルター（ＦＷＨＭ＝１ｍｍ）を適用し、放射能のスケールが画像上に表示されるように設定した（最小値＝０．０９５Ｂｑ／ボクセル（ｖｏｘｅｌ）〜最大値＝９５Ｂｑ／ボクセル）。

【0329】

２．１．４ マウスモデルの治療
統計的に類似した体重と腫瘍体積を有するマウスの５つの群（群Ａ〜Ｅ、ｎ＝６）に、ビヒクルのみ（ＢＳＡ ０．０５％を含む生理食塩水、群Ａ）、^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−６１７（群Ｂ及びＣ）、及び^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６（群Ｄ及びＥ）を、治療試験の０日目にそれぞれ注射した（表２．１）。群Ｂ及びＤのマウスには、２ＭＢｑの放射性リガンド（１ｎｍｏｌ／マウス）を投与し、群Ｃ及びＥのマウスには、５ＭＢｑの放射性リガンド（１ｎｍｏｌ／マウス）を投与した。体重と腫瘍サイズを１２週間に亘って１日間おきに測定することにより、マウスをモニターした。定義したエンドポイント基準に達したとき、又は８４日目に試験が終了したときに、マウスを安楽死させた。相対体重（ＲＢＷ）を［ＢＷ_ｘ／ＢＷ_０］と定義し、ここで、ＢＷ_ｘは、ｘ日目の体重（グラム）であり、ＢＷ_０は、０日目の体重（グラム）である。腫瘍の大きさは、デジタルノギスで最長の腫瘍軸（Ｌ）とその垂直軸（Ｗ）を測定することにより決定した。腫瘍体積（Ｖ）は、式［Ｖ＝０．５^＊（Ｌ^＊Ｗ２）］にしたがって計算した。相対腫瘍体積（ＲＴＶ）は、［ＴＶ_ｘ／ＴＶ_０］と定義し、ここで、ＴＶ_ｘは、所定のｘ日目の腫瘍体積（ｍｍ３）であり、ＴＶ_０は、０日目の腫瘍体積（ｍｍ３）である。

【表2.1】

【0330】

放射性核種療法の有効性は、腫瘍成長遅延（ＴＧＤ_ｘ）として表した。これは、腫瘍体積が０日目の初期体積のｘ倍に増大するのに必要な時間として計算した。腫瘍成長遅延指数［ＴＧＤＩ_ｘ＝ＴＧＤ_ｘ（Ｔ）／ＴＧＤ_ｘ（Ｃ）］は、初期腫瘍体積の２倍（ｘ＝２、ＴＧＤ２）及び５倍（ｘ＝５、ＴＧＤ５）の増大における、コントロールマウス（Ｃ）に対する処理マウス（Ｔ）のＴＧＤ_ｘ比として計算した。望ましくない副作用を同定するための手段として、最初のコントロールマウスを安楽死させる必要があった日に体重を比較した。安楽死後、腎臓、肝臓、及び脳を回収し、計量した。臓器の比率（腎臓対脳、肝臓対脳）を、安楽死させた日に得られた臓器質量を使用して計算した。

【0331】

ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍソフトウェア（バージョン７）を使用したＴｕｋｅｙの多重比較ポストテストで一元配置ＡＮＯＶＡを使用して、結果の部に示されているように、データの有意性を分析した。ｐ＜０．０５の値は、統計的に有意とみなした。生存分析は、カプラン・マイヤー曲線とログランク検定（Ｍａｎｔｅｌ Ｃｏｘ）を使用して行った。

【0332】

２．２ 結果
２．２．１ ^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０１、^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０３の体内分布
^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０１及び^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０３の組織分布を８日間に亘って調べた。化合物^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０１及び^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０３は、非常に類似した組織分布プロファイルを示した（図５Ａ）。

【0333】

高い放射能レベルが、初期の時点で既に血液プールで観察することができ、ゆっくりとではあるが着実に経時で除去された。ＰＳＭＡｐｏｓ ＰＣ−３ ＰＩＰ腫瘍におけるいずれの放射性リガンドの取り込みも、プラトーに達するまで増加し続け、試験終了まで実質的に低下しなかった。ＰＣ−３ ｆｌｕ腫瘍における取り込みは、明らかに血中レベルを下回っており、ｉｎ ｖｉｖｏにおける高度なＰＳＭＡ特異的結合と取り込みを示す（図５Ａ）。^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０１及び−０３の体内分布データを、以下の表２．２及び表２．３に示す。

【表2.2】

【表2.3】

【0334】

２．２．２ ^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０４及び^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０５の体内分布
^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０４及び^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０５の組織分布を８日間に亘って調べた（図５Ｂ）。

【0335】

^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０４を注射した動物の血液活性レベルは、初期の時点で非常に高く、最も高いレベルを維持した。高いＰＳＭＡ^ｐｏｓ ＰＣ−３ ＰＩＰ腫瘍蓄積が観察され、試験終了に向けて僅かに減少した。ＰＳＭＡ^ｎｅｇ ＰＣ−３ ｆｌｕ腫瘍及びその他の非標的臓器に蓄積された活性は明らかに血中レベルを下回っており、ｉｎ ｖｉｖｏでの高度なＰＳＭＡ特異的結合と取り込みを示す。

【0336】

^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０５を注射した動物の血液プールの高レベルは急速に減少し、試験終了まで低レベルで安定した状態であった。^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０５を注射したマウスのＰＳＭＡ^ｐｏｓ ＰＣ−３ ＰＩＰ腫瘍では、放射能の取り込みが最大であることが観察され、その後、腫瘍組織からの安定したウォッシュアウトが続いた。ＰＣ−３ ｆｌｕ腫瘍及びその他の組織への取り込みは明らかに血中レベルを下回っており、ｉｎ ｖｉｖｏでのＰＳＭＡ特異的結合と取り込みを示す。^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０４及び−０５の体内分布データを、以下の表２．４及び表２．５に示す。

【表2.4】

【表2.5】

【0337】

２．２．３ ^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６、^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０７、^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０８の体内分布
^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６、−０７、及び−０８の組織分布を、注射後３日間まで調べた（図５Ｃ）。

【0338】

いずれの化合物の血中活性レベルも急速に低下し、試験全体を通して同等であった。最も高いＰＳＭＡｐｏｓ ＰＣ−３ ＰＩＰ腫瘍の蓄積は、化合物^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６で観察され、試験終了に向かって僅かに減少した。ＰＳＭＡｎｅｇ ＰＣ−３ ｆｌｕ腫瘍及びその他の非標的臓器に蓄積された活性は、血中濃度を下回り、被験化合物のいずれについても、ｉｎ ｖｉｖｏでのＰＳＭＡ特異的結合及び取り込みが示された。^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６、−０７、及び−０８の体内分布データを、以下の表２．６、表２．７、及び表２．８に示す。

【表2.6】

【表2.7】

【表2.8】

【0339】

２．２．４ ＳＰＥＣＴ／ＣＴイメージング試験
ＰＣ−３ ＰＩＰ／ｆｌｕ担腫瘍マウスのＳＰＥＣＴ／ＣＴ画像を、^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０３及び^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６の注入後の様々な時点で行った。^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０３及び^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６の正確な注入活性は、それぞれ２５ＭＢｑ及び２３ＭＢｑであった。^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０３及び^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６の好ましいｉｎ ｖｉｖｏ挙動を図２６に示す。

【0340】

２．２．５ マウスモデルでの治療
コントロールマウス（群Ａ）は、経時で一定の腫瘍成長を示した。これは、低活性の^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−６１７で処理したマウス（群Ｂ：２ＭＢｑ／マウス）の腫瘍成長と同等であった。したがって、群Ｂのマウスの腫瘍成長遅延指数（ＴＧＤＩ_２＝０．８、ＴＧＤＩ_５＝１．４、表２．９）は、ＴＧＤＩを１と定義したコントロール動物の値と同様であった。最初のコントロールマウスが１６日目にエンドポイントに達した一方で、群Ｂでは、１２日目に既に１頭のマウスを安楽死させる必要があった（表２．９）。より高活性の^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−６１７（群Ｃ：５ＭＢｑ／マウス）又はより低活性の^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６（群Ｄ：２ＭＢｑ／マウス）を使用したときに、マウスは効果的に治療された。ＴＧＤＩ_２とＴＧＤＩ_５は、両群（群ＣとＤ）のマウスで類似しており、その結果、同じ時間範囲でマウスを安楽死させる必要があった（群Ｃ：２６日目〜４０日目、群Ｄ：２８日目〜４４日目、データは示さず）。より高活性の^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６（群Ｅ：５ＭＢｑ／マウス）で処理したマウスでは、腫瘍の成長が効果的に阻害された。群Ｅの４頭のマウスでは、腫瘍が完全に消失し、８４日目の試験終了まで再成長が観察されなかった。

【表2.9】

【0341】

より高活性の^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−６１７又はより低活性の^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６を投与したマウスは、生存率のメジアンの有意な上昇を示した（群Ｃ：３２日目、群Ｄ：３６日目、表２．９、図２７）。８４日目の試験終了時に、より高活性の^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６で処理された４頭のマウス（群Ｅ）は依然として生存していたので、この群の生存時間のメジアンは未定義とした。

【0342】

実施例３：ＰＳＭＡリガンドの臨床評価
３．１：ケース１
治療用放射性核種であるルテチウム１７７で放射標識した化合物ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６は、広範な両葉肝転移、播種性骨芽細胞転移（骨盤領域）、及び多発性の膨大なリンパ節転移を伴う軽度に分化した前立腺癌患者の個々の治療試験の範囲で使用した。放射能標識化合物ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６の体内分布と生体内挙動の評価は、ＳＰＥＣＴ−ＣＴ測定によって行った。

【0343】

ＳＰＥＣＴ−ＣＴ視覚化を、注射（ｐ．ｉ．）後４６時間までの様々な時点で行った。放射標識化合物ＰＳＭＡ−ＡＢＬ−０６は、血液循環の延長とバイオアベイラビリティの向上を示した（図７）。血液クリアランスは、最初の数時間以内に完了する一方で、健常な臓器（特に、肝臓、唾液腺、腎臓）の非特異的取り込みは、経時で中程度に留まる。ＳＰＥＣＴ−ＣＴは、悪性組織における放射標識化合物の実質的な特異的取り込みを示す（図８）。

【0344】

これらの最初の非ヒトでの結果は、ＰＳＭＡ陽性腫瘍の治療の可能性を示す、化合物の薬物動態特性の改善に関する前臨床的所見を裏付ける。

【0345】

３．２ ケース２：
ポジトロン放出放射性核種ガリウム６８で放射標識された化合物ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６を、ＰＥＴ−ＣＴの診断薬として、転移性去勢抵抗性前立腺癌患者の個々の治療試験で使用した。悪性組織は、特異性の高いＰＥＴによって視覚化できたが、標的ではない健常臓器のバックグラウンド放射能は中程度に留まっている（図９）。画像の高コントラストは、注射後、経時間で上昇し、腫瘍における長期の血液クリアランスと高い特異的取り込みを裏付ける。

【0346】

実施例４：ＰＥＴイメージングのための^４４Ｓｃと組み合わせたＰＳＭＡリガンドの試験
４．１ ^４４Ｓｃ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢの体内分布データ
^４４Ｓｃは、以前に報告されたように^２、ＰＳＩのインジェクター２施設で製造した。ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６の放射標識は、臨床的に確立されたＰＳＭＡ−６１７リガンドを使用して、本発明者らのグループが以前報告したように行った^５。ＰＳＭＡ陽性ＰＣ−３ ＰＩＰ腫瘍細胞（右肩部）とＰＳＭＡ陰性ＰＣ−３ ｆｌｕ腫瘍（左肩部）を有する雌Ｂａｌｂ／ｃヌードマウスで体内分布試験を行った。この目的のために、放射性リガンドの注射の１２〜１４日間前にマウスに腫瘍細胞を接種した。マウスを安楽死させ、注射後（ｐ．ｉ．）１時間、４時間、及び６時間で解剖した（図１０Ａ、表４．１）。Ｃａｖｅ：^４４Ｓｃ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６を６時間に亘って調べ、データは、^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６について２４ｈｐ．ｉ．の期間に亘って利用可能である（図１０Ｂ）。

【表4.1】

【0347】

４．２ ３．^４４Ｓｃ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６を注射したマウスのＰＥＴ／ＣＴイメージング
ＰＥＴ／ＣＴ実験を、小型動物ＰＥＴ／ＣＴカメラ（Ｇ８、Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ、ＵＳ）を使用して、本発明者らのグループが以前報告したように行った^５。画像は、５ＭＢｑの^４４Ｓｃ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６の注射後１時間、４時間、及び２０時間に撮影した。図１１は、同一スケールで得たスキャンを示す。更なる画像を、臓器と組織ができるだけ見えるように調整したスケールで作成した。図１２は、放射能が主に血中を循環しており、ＰＳＭＡ陽性腫瘍に特異的に蓄積していない１時間後のスキャンを示す。

【0348】

図１３は、スケールを調整した２０ｈｐ．ｉ．スキャンを示す。したがって、バックグラウンド活性が主に排出されている間、腫瘍をよく見えるようにすることが可能である。

【0349】

４．３ 結論
ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６の標識化は、少なくとも５ＭＢｑ／ｎｍｏｌの比活性にて^４４Ｓｃで成功裏に行った。得られた体内分布試験とＰＥＴイメージング結果は、^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６で以前に決定されたように、^４４Ｓｃ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６の類似の特性を示す。^４４Ｓｃ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６の高い腫瘍取り込みのため、この放射性リガンドは、バックグラウンド活性が排出された後期の時点（＞４ｈｐ．ｉ．）で、小さな病変でもイメージングするのに役立つツールであると考えられる。このアプローチの臨床的トランスレーションは最も有望であり、提案されたコンセプトの可能性を確認するための次のステップの１つとなろう。

【0350】

実施例５：ＮＯＤＡＧＡ官能化アルブミン結合ＰＳＭＡリガンドの設計及び前臨床評価
銅の安定した錯体形成に適した長期循環ＰＳＭＡ標的化剤を設計した。これは、延長された時点での前立腺癌のＰＥＴイメージングを可能にする。したがって、ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６のＤＯＴＡキレーターに代えて、ＮＯＤＡＧＡキレーターを用いＰＳＭＡ−ＡＬＢ−８９を得た。ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−８９及びＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６を^６４Ｃｕで標識し、放射線分解安定性、血清アルブミンへの結合、及びＰＳＭＡ陽性ＰＣ−３ ＰＩＰ腫瘍細胞及びＰＳＭＡ陰性ＰＣ−３ｆｌｕ腫瘍細胞への取り込みについて試験した。体内分布及びＰＥＴ／ＣＴイメージング試験を、ＰＣ−３ ＰＩＰ／ｆｌｕ担腫瘍マウスで行った。

【0351】

ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−８９の構造式を以下に示す。

【化56】

【0352】

５．１ 材料及び方法
ＰＳＭＡリガンドの固相合成。ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−８９と呼ばれるＮＯＤＡＧＡ官能化ＰＳＭＡリガンドを、ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６について報告された固相プラットフォームを使用して合成した（実施例１を参照）。唯一の相違点は、合成の最終ステップでのキレーターのコンジュゲーションに関連した（スキーム５．１）。コンジュゲーションは、無水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）中、４当量のＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ）の存在下で、２．９７当量のＯ−（ベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスファート（ＨＢＴＵ）で活性化した３当量のＮＯＤＡＧＡ−トリス（ｔ−Ｂｕ）エステル［４−（４，７−ビス（２−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−２−オキソエチル）−１，４，７−トリアザシクロノナン−１−イル）−５（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−５−オキソペンタン酸］で行った。ＮＯＤＡＧＡキレーターのカップリングは、穏やかに攪拌しながら３時間に亘って進行した。最終生成物を樹脂から切断し、続いて、９５：２．５：２．５（ｖ／ｖ）の比のトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）、トリイソプロピルシラン（ＴＩＰＳ）、及びＨ_２Ｏからなる混合物を使用して２時間以内脱保護した。
スキーム５．１：ＮＯＤＡＧＡ官能化ＰＳＭＡリガンドの合成

【化57】

【0353】

放射標識及び安定性。^６４Ｃｕを、ＰＳＩの研究用サイクロトロンインジェクター２施設で、^６４Ｎｉ（ｐ，ｎ）^６４Ｃｕ核反応によって製造した^２８。ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−８９及びＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６を、最大５．５％の酢酸ナトリウム（０．５Ｍ、ｐＨ８）を含むＭｉｌｌｉＱ水に溶解させ、１ｍＭストック溶液を調製した。ＰＳＭＡリガンドを、５〜５０ＭＢｑ／ｎｍｏｌの比活性にて、ｐＨ５で酢酸ナトリウム（０．５Ｍ）とＨＣｌ（０．０５Ｍ）の混合物中にて^６４Ｃｕで標識した。反応混合物を９５℃で１５分間インキュベートした。ＲＰ−ＨＰＬＣを使用して放射性リガンドの品質管理を行った。放射性リガンドは、更なる精製ステップを行うことなしに、ｉｎ ｖｉｔｒｏ及びｉｎ ｖｉｖｏ実験に使用した。

【0354】

^６４Ｃｕ標識ＰＳＭＡリガンド（１２０μＬ中で２５０ＭＢｑ；５０ＭＢｑ／ｎｍｏｌ）の品質管理を、ＲＰ−ＨＰＬＣを使用して調製直後（ｔ＝０ｈ）に決定した。反応混合物を生理食塩水で２５０ＭＢｑ／５００μＬの活性濃度に希釈し、室温でインキュベートした。化合物の完全性を１日間に亘って調べた（それぞれ、ｔ＝１時間、４時間、及び２４時間）。インタクトな放射性リガンドの量は、未知の構造の分解生成物及び放出された微量の^６４Ｃｕ全ての放射性ピークの合計（これを１００％に設定した）に対するＨＰＬＣクロマトグラムの生成物ピークの積分によって定量化した。

【0355】

ｎ−オクタノール／ＰＢＳ分配係数（ＬｏｇＤ値）の決定。^６４Ｃｕ標識放射性リガンド（５０ＭＢｑ／ｎｍｏｌ）の分配係数（ｌｏｇＤ値）を、以前に報告したように、液液抽出とそれに続く相分離を使用する振とうフラスコ法で決定した。これらの実験を、放射性リガンドごとに５回繰り返した。データの統計的有意性（ｐ＜０．０５）は、対応のないｔ検定（ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍソフトウェア、バージョン７）を使用して評価した。

【0356】

アルブミン結合特性の決定。放射性リガンドのヒト血漿タンパク質への結合は、限外ろ過アッセイにより決定した。^６４Ｃｕ標識ＰＳＭＡリガンド（５〜５０ＭＢｑ、０．０１ｎｍｏｌ）を、以前に報告した通り、ヒト血漿（Ｓｔｉｆｔｕｎｇ Ｂｌｕｔｓｐｅｎｄｅ ＳＲＫ Ａａｒｇａｕ−Ｓｏｌｏｔｈｕｒｎ、スイス）の異なる希釈液又は対照実験としてのＰＢＳで希釈した。３つの独立した実験を、両方の放射性リガンドを使用して二連で行い、データを半対数プロット（非線形回帰、１サイト、特異的結合）に適合させ、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍソフトウェア（バージョン７）で最大結合半量（ｈａｌｆ ｍａｘｉｍｕｍ ｂｉｎｄｉｎｇ）（Ｂ_５０）を得た。

【0357】

細胞の取り込みと内在化。ＰＳＭＡ陽性ＰＣ−３ ＰＩＰ細胞及びＰＳＭＡ陰性ＰＣ−３ ｆｌｕ細胞を使用して、細胞取り込み（表面結合及び内在化画分の合計）及び放射性リガンドの内在化（５ＭＢｑ／ｎｍｏｌ）を決定した。

【0358】

ｉｎ ｖｉｖｏ試験。ｉｎ ｖｉｖｏ試験が、地元の獣医部門によって承認され、動物保護のスイス国法にしたがって行った。マウスはいずれも、Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（ズルツフェルト、ドイツ）から５〜６週齢で入手した。雌の無胸腺Ｂａｌｂ／ｃヌードマウスの右肩部にＰＣ−３ ＰＩＰ細胞（Ｃａ^２＋／Ｍｇ^２＋を含む１００μＬハンクス平衡塩溶液（ＨＢＳＳ）中の６×１０^６個の細胞）を、左肩部にＰＣ−３ ｆｌｕ細胞（Ｃａ^２＋／Ｍｇ^２＋を含む１００μＬのＨＢＳＳ中の５×１０^６個の細胞）を、実験開始の１２〜１４日間前に皮下接種した。

【0359】

体内分布試験。０．０５％ＢＳＡを含む生理食塩水で希釈した各放射性リガンド（５ＭＢｑ、１ｎｍｏｌ、１００μＬ）をマウスの外側尾静脈に注射した。マウスを注射後（ｐ．ｉ．）１時間、４時間、及び２４時間に屠殺し、選択した組織及び臓器を回収し、重量を測定し、γカウンターを使用して測定した。各時点で、４〜６頭のマウスの群を使用した。結果を減衰補正し、組織質量１グラム当たりの注入された活性の割合（％ＩＡ／ｇ）として記載した。データは、平均±標準偏差（ＳＤ）として提示した。ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍソフトウェア（バージョン７）を使用したＢｏｎｆｅｒｒｏｎｉの多重比較ポストテストで一元ＡＮＯＶＡを使用して、データセットの有意性を分析した。＜０．０５のｐ値は、統計的に有意とみなした。

【0360】

ＰＥＴ／ＣＴイメージング試験。ＰＥＴ／ＣＴ実験を、放射性リガンド（５ＭＢｑ／１ｎｍｏｌ）の注射後１時間、４時間、及び２４時間で行った。０．０５％ＢＳＡを含む生理食塩水で希釈した各放射性リガンド（５ＭＢｑ、１ｎｍｏｌ、１００μＬ）をマウスの外側尾静脈に注射した。以前に報告されているように、小型動物のＰＥＴ／ＣＴスキャナー（Ｇ８、パーキンエルマー、マサチューセッツ、米国）を使用して、ＰＥＴ／ＣＴスキャンを行った。ＰＥＴスキャンを１０分間継続させた後、１．５分間のＣＴスキャンを行った。ｉｎ ｖｉｖｏスキャン中、マウスは、イソフルランと酸素の混合物で麻酔した。取得したデータの再構成は、Ｇ８スキャナーのプロバイダーのソフトウェアを使用して行った。画像はいずれも、ＶｉｖｏＱｕａｎｔ後処理ソフトウェア（バージョン３．０、ｉｎｖｉＣＲＯ Ｉｍａｇｉｎｇ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ ａｎｄ Ｓｏｆｔｗａｒｅ、ボストン、米国）を使用して得た。画像は、腫瘍、肝臓、腎臓が最もよく見えるように、下側のスケールの２％を切って作成した。

【0361】

５．２ 結果
ＰＳＭＡリガンドの合成。ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−８９を、ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６の合成（実施例１）と同様に、固相支持体を使用して合成した。ＤＯＴＡキレーターをコンジュゲートする代わりに、ＮＯＤＡＧＡキレーターを使用した（スキーム５．１）。このマルチステップ合成（１７ステップ）により、セミ分取ＨＰＬＣ精製後に、８．７％の全体収率で高純度化合物（＞９８％）を得た。

【0362】

^６４Ｃｕ標識ＰＳＭＡリガンドの放射標識、安定性、及びｉｎ ｖｉｔｒｏ特性。ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−８９及びＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６は、最大５０ＭＢｑ／ｎｍｏｌの比活性にて^６４Ｃｕで標識した。放射性リガンドは、高い放射化学的純度（＞９８％）及び同様の保持時間（〜１１分間）を示した。^６４Ｃｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−８９及び^６４Ｃｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６は、少なくとも４時間に亘って安定（＞９２％）であった。^６４Ｃｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−８９のｎ−オクタノール／ＰＢＳ分配係数（ｌｏｇＤ値）（−２．３±０．７）は、^６４Ｃｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６のｌｏｇＤ値（−３．１±０．１）よりも僅かに高かったが、有意ではなかった（ｐ＞０．０５）。

【0363】

アルブミン結合特性。^６４Ｃｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−８９及び^６４Ｃｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６は、ヒト血漿でインキュベートすると、血漿タンパク質に対して同様の結合（＞９２％）を示した。^６４Ｃｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−８９の最大結合半量（Ｂ_５０）は、［ＨＳＡ］対［放射性リガンド］比が４５４のときに到達した。これは、^６４Ｃｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−８９と比較したときに、僅かに上昇した結合を示し、［ＨＳＡ］対［放射性リガンド］比が７７０のときに最大結合半量に到達した（図１４）。

【0364】

細胞取り込みと内在化。ＰＣ−３ ＰＩＰ細胞への^６４Ｃｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−８９の細胞取り込みは〜４６％であり、内在化画分は、３７℃で２時間のインキュベーション後に〜１４％であった。細胞内取り込みは、４時間のインキュベーション後に僅かに増加し（〜５２％）、内在化画分は変化しなかった（〜１４％）。^６４Ｃｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６についても同様の値が決定された（図１５Ａ）。ＰＣ−３ ｆｌｕ細胞における取り込みは、両方の放射性リガンドで０．５％未満であり、ＰＳＭＡ特異的な細胞取り込みを示した（図１５Ｂ）。

【0365】

体内分布試験。^６４Ｃｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−８９の組織分布プロファイルを、担腫瘍マウスで２４時間に亘って評価した（図１６、表５．１）。血液プール活性の急速な減少が経時で観察された（２４ｈｐ．ｉ．でそれぞれ＜３．２％ＩＡ／ｇ及び＜１．４％ＩＡ／ｇ）。ＰＣ−３ ＰＩＰ腫瘍における^６４Ｃｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−８９の蓄積は、注射直後に既に高く（１ｈｐ．ｉ．で２５．９±３．４１％ＩＡ／ｇ）、試験終了に向かって上昇した（２４ｈｐ．ｉ．で９７．１±７．０１％ＩＡ／ｇ）。ＰＳＭＡを発現しないＰＣ−３ ｆｌｕ腫瘍における放射能の蓄積は、概ね血中濃度を下回った。^６４Ｃｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−８９の肝臓取り込みパターンは、血液活性レベル以下の範囲の放射能レベルであることが分かった（図１７）。

【0366】

腫瘍対腎臓比は経時で増加しが、^６４Ｃｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−８９の注射後、値は、幾分低かった。^６４Ｃｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−８９の腫瘍対肝臓比は高かった。腫瘍対筋肉比は、２４ｈｐ．ｉ．で２００±３８．２まで経時で増加した。

【表5.1】

【0367】

ＰＥＣＴ／ＣＴイメージング試験。^６４Ｃｕ標識放射性リガンドの注射後の様々な時点で、ＰＣ−３ ＰＩＰ／ｆｌｕ担腫瘍マウスで、ＰＥＴ／ＣＴスキャンを２４時間に亘って行った（図１７）。^６４Ｃｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−８９は、ＰＳＭＡ陽性腫瘍異種移植片（ＰＣ−３ ＰＩＰ腫瘍）にかなりの程度蓄積したが、ＰＳＭＡ陰性腫瘍（ＰＣ−３ ｆｌｕ腫瘍）では取り込みは観察されなかった。目視検査により、注射の１６時間後、蓄積された放射性リガンドの腫瘍対腎臓比が明らかに１を超え、経時で更に増加したことが示された。血液中の放射能に起因する臓器及び組織のバックグラウンドシグナルは、１ｈｐ．ｉ．で撮影した画像で十分に見ることができた。

【0368】

５．３ 議論
ここでは、放射性リガンドの適用後１日間後でもＰＥＴを可能とするために、^６４Ｃｕで標識化した長期循環ＰＳＭＡリガンドを合成した。ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−８９は、ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６について前述したように合成したが、ＤＯＴＡキレーターを結合させることに代えて、他の標的剤について本発明者らのグループにおいて行ったようにＮＯＤＡＧＡキレーターを使用した。

【0369】

ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−８９は、高い比活性と放射化学的純度（５０ＭＢｑ／ｎｍｏｌ；＞９５％）にて^６４Ｃｕで再現可能に放射標識され、合成リガンドの高品質と、ＰＳＩにて内部で製造した^６４Ｃｕの優れた放射化学的純度が示唆された。ｉｎ ｖｉｔｒｏにおいて、^６４Ｃｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−８９及び^６４Ｃｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６は、いずれも室温で数時間のインキュベーション後に安定であり、２４時間後に検出可能な分解は、ごく限定的であった。これらの結果は、ＮＯＤＡＧＡ及びＤＯＴＡキレーターがいずれも、ｉｎ ｖｉｔｒｏで^６４Ｃｕと安定した錯体を形成していることを示唆する。

【0370】

^６４Ｃｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−８９のアルブミン結合特性は、ｉｎ ｖｉｔｒｏで試験したときの^６４Ｃｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６と同じ範囲であった。ＰＳＭＡへの結合特異性は、^６４Ｃｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−８９及び^６４Ｃｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６でｉｎ ｖｉｔｒｏで観察された類似の細胞結合及び内在化画分によって証明されるように、キレーターの相違に影響されなかった。

【0371】

ＰＳＭＡ陽性及びＰＳＭＡ陰性腫瘍を使用して、十分に確立された異種移植マウスモデルで得られた体内分布データは、^６４Ｃｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−８９の腫瘍取り込みが、試験した全ての時点で、恐らく、より長い血液循環時間の結果として、有意に増加したことを示した。^６４Ｃｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−８９の最大腫瘍取り込みは、試験終了時点（２４ｈｐ．ｉ．）で初めて到達した。ＰＥＴ／ＣＴ画像は、肝臓での高い腫瘍取り込みと蓄積の減少に関して、^６４Ｃｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−８９の好ましい組織分布プロファイルを裏付けた。前立腺癌は肝臓転移を引き起こす可能性があり、非特異的な放射能蓄積によって隠蔽され得るので、肝臓への取り込みが低いことが重要である。

【0372】

５．４ 結論
この実施例では、ＰＥＴイメージングのための^６４Ｃｕの安定した配位を可能にするために、ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０６のＤＯＴＡキレーターに代えて、ＮＯＤＡＧＡキレーターを用いた。^６４Ｃｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−８９は、ｉｎ ｖｉｖｏでの安定性向上を示し、これは、腫瘍蓄積の増加と^６４Ｃｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−８９の肝臓保持の低下とによって明らかとされた。

【0373】

実施例６：更なるＤＯＴＡ官能化ＰＳＭＡ結合リガンドの設計及び評価
６．１ 材料及び方法
アルブミン結合ＰＳＭＡリガンドの固相合成。それぞれＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０２、ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０５、及びＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０７と呼ばれるＰＳＭＡリガンドを、固相プラットフォームを使用して設計、合成した。ＰＳＭＡ標的ウレアベースファーマコフォア（Ｌ−Ｇｌｕ−ＮＨ−ＣＯ−ＮＨ−Ｌ−Ｌｙｓ）を、Ｅｄｅｒら（２０１２）によって記載された方法と同様に、塩化２−クロロトリチル（２−ＣＴ）樹脂上で調製した。２−ナフチル−Ｌ−Ａｌａとトランス−シクロヘキシル部分からなるリンカー領域を、実施例１に記載したように合成した。そのような樹脂固定化及びビス（ｔ−Ｂｕ）保護前駆体（Ｌ−Ｇｌｕ−ＮＨ−ＣＯ−ＮＨ−Ｌ−Ｌｙｓ−２−Ｎａｌ−Ｌ−Ａｌａ−ＮＨ_２−Ｍｅ−１，４−トランス−ＣＨＸ）（化合物１と呼ばれる）を、３種類全てのアルブミン結合ＰＳＭＡリガンドの合成の基礎として使用した（図１８）。

【0374】

リジンベースのビルディングブロックのコンジュゲーション及びＮα−Ｆｍｏｃ保護基の選択的切断を含む合成の次のステップを、３種類全ての化合物に対して同様に行った。樹脂固定化及びビス（ｔ−Ｂｕ）保護前駆体（０．３ｍｍｏｌ；化合物（１））に対して、４当量のＮα−Ｆｍｏｃ−及びＮε−Ａｌｌｏｃ保護Ｌ−リジン（Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−ＯＨ）を、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）中の４当量のＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ）の存在下で、３．９６当量のＯ−（ベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスファート（ＨＢＴＵ）で活性化させ、１時間攪拌した。続いて、Ｎα−Ｆｍｏｃ保護基の選択的除去を、ＤＭＦとピペリジンの１：１（ｖ／ｖ）混合物で行った。次に、得られた前駆体（２）を、各具体化合物固有の後続の合成に使用した。

【0375】

ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０２。ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０２の合成は、ＤＭＦ中、４当量のＤＩＰＥＡの存在下で、穏やかに撹拌しながら１時間に亘って、３．９６当量のＨＢＴＵで活性化させた４当量の４−（ｐ−ヨードフェニル）酪酸を使用して、アルブミン結合部分を樹脂固定化前駆体（０．１ｍｍｏｌ；化合物（２））にカップリングさせることによって行った。その後、化合物（３）からのＮε−Ａｌｌｏｃ保護基の切断を、ジクロロメタン（ＤＣＭ）中、３０当量のモルホリンの存在下で、暗所にて２時間以下、０．０３当量のテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（ＴＰＰ Ｐｄ）で行った。パラジウムの残留物を除去するために、ＤＭＦ中の１％ＤＩＰＥＡで樹脂を更に洗浄し、その後、ＤＭＦ中のジエチルジチオカルバミン酸ナトリウムの溶液（ｃ＝１５ｍｇ／ｍＬ）で洗浄した。最後に、キレーターと樹脂固定化化合物のコンジュゲートを、ＤＭＦ中の４当量のＤＩＰＥＡの存在下で、１．９８当量のＨＢＴＵで活性化させた２当量のＤＯＴＡ−トリス（ｔ−Ｂｕ）エステル［２−（４，７，１０−トリス（２−（ｔ−ブトキシ）−２−オキソエチル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロ−ドデカン−１−イル）酢酸］で行った。ＤＯＴＡキレーターのカップリングは、穏やかに攪拌しながら２時間に亘って進行した。得られた化合物（４）をＤＭＦ、ＤＣＭで洗浄し、最後にＥｔ_２Ｏで洗浄した後、真空下で乾燥させた。生成物を樹脂から切断し、続いて、９５：２．５：２．５（ｖ／ｖ）の比のトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）、トリイソプロピルシラン（ＴＩＰＳ）、及びＨ_２Ｏからなる混合物を用いて２時間以下脱保護した。ＴＦＡを蒸発させ、粗化合物を１：１（ｖ／ｖ）の比のＡＣＮとＨ_２Ｏに溶解させ、セミ分取カラム（サポート情報）を使用して逆相高速液体クロマトグラフィー（ＲＰ−ＨＰＬＣ）で精製した。ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０２の特性評価は、それぞれ分析ＲＰ−ＨＰＬＣ（サポート情報）とマトリックス支援レーザー脱離／イオン化質量分析（ＭＡＬＤＩ−ＭＳ）又はエレクトロスプレーイオン化質量分析（ＥＳＩ−ＭＳ）によって行った。上で概説した合成をスキーム６．１にまとめる。

【化58】

【0376】

ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０５及びＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０７。ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０５の合成は、ＤＭＦ中、４当量のＤＩＰＥＡの存在下で、穏やかに撹拌しながら１時間に亘って、２．９７当量のＨＢＴＵで活性化させた３当量のＮ−Ｆｍｏｃ−及びＯ_β−ｔ−Ｂｕ保護Ｄアスパラギン酸（Ｆｍｏｃ−Ｄ−Ａｓｐ−Ｏｔ−Ｂｕ）を使用して、Ｄアスパラギン酸ベースのビルディングブロックを樹脂固定化前駆体（０．１ｍｍｏｌ；化合物（２））にカップリングすることによって行った。得られた化合物からのＮ−Ｆｍｏｃ保護基の選択的除去は、前記したように行った。１回の更なるＦｍｏｃ−Ｄ−Ａｓｐ−Ｏ−ｔ−Ｂｕの類似のカップリング及びその後のＮ−Ｆｍｏｃ切断を繰り返し、化合物（５）を生成した。次のステップで、４当量の４−（ｐ−ヨードフェニル）酪酸を、ＤＭＦ中の４当量のＤＩＰＥＡの存在下で３．９６当量のＨＢＴＵで活性化させ、１時間撹拌した。生成物（６）からのＮε−Ａｌｌｏｃ保護基の選択的除去は、前記したように行った。キレーターの樹脂固定化化合物へのコンジュゲーションは、ＤＭＦ中の４当量ＤＩＰＥＡの存在下で、穏やかに撹拌しながら２時間に亘って、１．９８当量のＨＢＴＵで活性化させた２当量のＤＯＴＡ−トリス（ｔ−Ｂｕ）エステルで行った。得られた化合物（７）を、ＤＭＦ、ＤＣＭで洗浄し、最後にＥｔ_２Ｏで洗浄した後、真空下で乾燥させた。生成物を樹脂から切断し、続いて、９５：２．５：２．５（ｖ／ｖ）の比のＴＦＡ、ＴＩＰＳ、及びＨ_２Ｏの混合物を使用して２時間以下脱保護した。ＴＦＡを蒸発させ、粗化合物を、１：１（ｖ／ｖ）の比のＡＣＮとＨ_２Ｏに溶解させ、ＲＰ−ＨＰＬＣ（サポート情報）で精製した。ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０５の特性評価は、それぞれ分析ＲＰ−ＨＰＬＣ（サポート情報）及びＭＡＬＤＩ−ＭＳ又はＥＳＩ−ＭＳによって行った。

【0377】

ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０７の合成及び精製は、第３のＦｍｏｃ−Ｄ−Ａｓｐ−Ｏ−ｔ−Ｂｕの更なるカップリング及びその後のＮ−Ｆｍｏｃの切断により、ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０５と同様に行った（８）。次のステップは、４−（ｐ−ヨードフェニル）酪酸のコンジュゲーション（９）と、それに続くＮε−Ａｌｌｏｃ保護基の選択的除去とＤＯＴＡ−トリス（ｔ−Ｂｕ）エステルのコンジュゲーション（１０）を含んだ。樹脂からの切断後、化合物を脱保護し、ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０５（サポート情報）に記載されているように精製／特性評価した。ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０５及びＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０７の合成をスキーム２にまとめる。凍結乾燥粉末の形態の各ＰＳＭＡリガンドの安定性は、冷凍庫（−１８℃）での長期保存（それぞれ２ヶ月間及び４ヶ月間）後、分析ＲＰ−ＨＰＬＣ及びＭＡＬＤＩ−ＭＳを用いて試験した。

【化59】

【0378】

放射標識と安定性。新たなＰＳＭＡリガンド（それぞれＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０２、ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０５、及びＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０７）とＰＳＭＡ−６１７（Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ、ＡＢＸ ＧｍｂＨ、Ｒａｄｅｂｅｒｇ、ドイツ）を、１０〜１５％酢酸ナトリウム溶液（０．５Ｍ、ｐＨ８）を含むＭｉｌｌｉＱ水に溶解させ、放射標識用の１ｍＭストック溶液を調製した。ＰＳＭＡリガンドを、ｐＨ４にて、５〜５０ＭＢｑ／ｎｍｏｌの比活性で酢酸ナトリウム（０．５Ｍ、ｐＨ８）とＨＣｌ（０．０５Ｍ）の混合物中、^１７７Ｌｕ（０．０４Ｍ ＨＣｌ中の担体無添加^１７７ＬｕＣｌ_３、Ｉｓｏｔｏｐｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ Ｇａｒｃｈｉｎｇ （ＩＴＧ ＧｍｂＨ、ドイツ）より提供）で標識した。反応混合物を９５℃で１０分間インキュベートした。放射性リガンドの品質管理は、ＲＰ−ＨＰＬＣ（サポート情報）を使用して行った。放射性リガンド溶液は、更なる精製ステップなしで、ｉｎ ｖｉｔｒｏ及びｉｎ ｖｉｖｏ実験に使用した。

【0379】

放射性リガンドの安定性は、ＲＰ−ＨＰＬＣを使用して経時で決定した。ＰＳＭＡリガンドは、Ｌ−アスコルビン酸（０．５Ｍ、３ｍｇ）の添加あり及び添加なしで、５０ＭＢｑ／ｎｍｏｌの比活性にて^１７７Ｌｕ（２５０ＭＢｑ）で放射標識し、その後、生理食塩水で２５０ＭＢｑ／５００μＬの活性濃度に希釈した。リガンドの放射標識効率は、調製直後（ｔ＝０ｈ）に決定し、室温で様々な期間（それぞれｔ＝１時間、４時間、及び２４時間）のインキュベーションの後に、化合物の完全性を調べた。インタクトな化合物の量は、未知の構造の分解生成物及び微量の遊離^１７７Ｌｕ全ての放射性ピークの合計（これを１００％に設定した）に対するＨＰＬＣクロマトグラムの生成物ピークの積分によって定量化した。

【0380】

ｎ−オクタノール／ＰＢＳ分配係数（ＬｏｇＤ値）の決定。^１７７Ｌｕ標識放射性リガンドの分配係数（ｌｏｇＤ値）は、以前に報告されたように、液液抽出とそれに続く相分離を使用する振とうフラスコ法によって決定した。簡単に説明すると、ＰＳＭＡリガンドを、５０ＭＢｑ／ｎｍｏｌの比活性にて^１７７Ｌｕで放射標識した。放射性リガンドのサンプルをリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）及びｎ−オクタノールと混合した後、激しくボルテックスした。相分離のための遠心分離後、各層の活性濃度をγカウンター（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ、Ｗａｌｌａｃ Ｗｉｚａｒｄ １４８０）で測定した。３つの実験を、各化合物について５回繰り返して行った。

【0381】

フィルターアッセイ。マウス及びヒト血漿タンパク質への放射性リガンドの結合能力は、以前に記載したように（実施例１）、限外ろ過アッセイにより決定した。^１７７Ｌｕ標識ＰＳＭＡリガンド（５０ＭＢｑ／ｎｍｏｌ）を、それぞれマウス血漿（ロックランド、米国）及びヒト血漿（Ｓｔｉｆｔｕｎｇ Ｂｌｕｔｓｐｅｎｄｅ ＳＲＫ Ａａｒｇａｕ−Ｓｏｌｏｔｈｕｒｎ、スイス）で希釈し、室温で１５分間インキュベートした。更に、対照実験として放射性リガンドをＰＢＳ（タンパク質を含まない緩衝溶液）で希釈した。溶液のアリコートを限外ろ過装置に充填し、遠心分離した。濾過後の活性を、γカウンターで測定し、血漿タンパク質結合活性（フィルター膜に保持されている）を総付加活性の割合として計算するために使用した。３つの独立した実験を、各放射性リガンドを用いて２連で行った（それぞれ^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０２、^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０５、^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０７）。２つの更なる実験を、^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−６１７を用いて２連で行った。ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍソフトウェア、バージョン７を使用して、統計分析（Ｂｏｎｆｅｒｒｏｎｉの多重比較ポストテストによる一元ＡＮＯＶＡ）を行った。＜０．０５のｐ値を、統計的に有意であるとみなした。

【0382】

細胞取り込みと内在化。細胞表面上のＰＳＭＡ結合画分と内在化画分（細胞取り込みと呼ぶ）の合計及び放射性リガンドの内在化画分を、以前に記載したように（実施例１）、ＰＳＭＡ陽性ＰＣ−３ ＰＩＰ細胞とＰＳＭＡ陰性ＰＣ−３ ｆｌｕ細胞を用いて、５ＭＢｑ／ｎｍｏｌの比活性で決定した。放射標識溶液は、０．０５％（ｗ／ｖ）ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）を含む生理食塩水で希釈して、実験室バイアル及びチューブへの付着を防止した。放射性リガンド溶液を細胞培養培地で更に希釈し、最終ＢＳＡ濃度（０．００１２５％）とし、これは、放射性リガンドの細胞取り込みと内在化に関して無視できる程度であり、何ら影響を及ぼさなかった。新規放射性リガンドを用いた各実験と並行して、^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−６１７を用いた対照実験も行った。実験は３連で行い、各放射性リガンドについて３回繰り返した。

【0383】

ｉｎ ｖｉｖｏ試験。ｉｎ ｖｉｖｏ実験を行った。５〜６週齢の雌の無胸腺Ｂａｌｂ／ｃヌードマウス（Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、ズルツフェルト、ドイツ）をこれらの試験に用いた。マウスの右肩部にＰＣ−３ ＰＩＰ細胞（Ｃａ^２＋／Ｍｇ^２＋を含む１００μＬハンクス平衡塩溶液（ＨＢＳＳ）中の６×１０^６個の細胞）を、左肩部にＰＣ−３ ｆｌｕ細胞（１００μＬのＨＢＳＳ中の５×１０^６個の細胞）を、実験開始の１２〜１４日間前に皮下接種した。

【0384】

体内分布試験。体内分布実験は、５ＭＢｑ／ｎｍｏｌの比活性で標識された放射性リガンドの注射後、１時間、４時間、２４時間、４８時間、９６時間、及び１９２時間で行った。放射性リガンド注入時の腫瘍質量は、１５０±４０ｍｇであり、これは約１５０ｍｍ^３の平均腫瘍体積に相当する。マウスの外側尾静脈に、生理食塩水で希釈したそれぞれの放射性リガンド（５ＭＢｑ、１ｎｍｏｌ、１００μＬ）を注射した。バイアル及びシリンジへの放射性リガンドの吸着を防ぐために、ＢＳＡ（０．０５％）を生理食塩水に添加した。注射後（ｐ．ｉ．）の様々な時点でマウスを屠殺し、選択した組織及び臓器を回収し、重量を測定し、γカウンターを使用して測定した。各時点で３〜６頭のマウスの群を使用した。更に、生理食塩水で希釈した２−（ホスホノメチル）−ペンタン二酸（２−ＰＭＰＡ、５００ｎｍｏｌ、１００μＬ）の注射によりブロッキング試験を行った。２−ＰＭＰＡ溶液を^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０２の投与の１５分前に注射し、マウスをそれぞれ１ｈｐ．ｉ．と４ｈｐ．ｉ．で屠殺した。結果を減衰補正し、組織質量１グラム当たりの注入された活性の割合（％ＩＡ／ｇ）として記載した。ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍソフトウェア、バージョン７を使用して、腫瘍、腎臓、及び血液の生体分布データから取得した非崩壊補正データから、３種類全てのアルブミン結合ＰＳＭＡリガンド及び^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−６１７について曲線下面積（ＡＵＣ）を決定した。

【0385】

ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍソフトウェア（バージョン７）を使用したＢｏｎｆｅｒｒｏｎｉの多重比較ポストテストで一元ＡＮＯＶＡを使用して、体内分布データセットから取得した曲線下面積（ＡＵＣ）を比較する統計分析を行った。＜０．０５のｐ値を統計的に有意とみなした。

【0386】

ＳＰＥＣＴ／ＣＴイメージング試験。ＳＰＥＣＴ／ＣＴ実験を、放射性リガンドの注入後４時間、２４時間、及び７２時間に行った。マウスの外側尾静脈に、０．０５％ＢＳＡを含む生理食塩水で希釈したそれぞれの放射性リガンド（２５ＭＢｑ、１ｎｍｏｌ、１００μＬ）を注射した。更に、ＰＳＭＡをブロックするために放射性リガンド注入の１５分間前に非放射性ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０２（１００ｎｍｏｌ、１００μＬ）又は２−ＰＭＰＡ（５００ｎｍｏｌ、１００μＬ）を投与したマウスに^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０２を注射し、その後１時間、４時間、及び２４時間でＳＰＥＣＴ／ＣＴスキャンを行った。ＳＰＥＣＴ／ＣＴスキャンは、小型動物ＳＰＥＣＴ／ＣＴスキャナー（ＮａｎｏＳＰＥＣＴ／ＣＴ^ＴＭ、Ｍｅｄｉｓｏ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｉｍａｇｉｎｇ Ｓｙｓｔｅｍｓ、ブダペスト、ハンガリー）を使用して行った。ＳＰＥＣＴスキャンを４５分間継続させ、７．５分間のＣＴスキャンを行った。ｉｎ ｖｉｖｏスキャン中、マウスを、イソフルランと酸素の混合物で麻酔した。取得したデータの再構成は、ＮａｎｏＳＰＥＣＴ／ＣＴ^ＴＭのソフトウェアを使用して行った。画像はいずれも、ＶｉｖｏＱｕａｎｔ後処理ソフトウェア（バージョン３．０、ｉｎｖｉＣＲＯ Ｉｍａｇｉｎｇ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ ａｎｄ Ｓｏｆｔｗａｒｅ、ボストン、米国）を使用して作成した。ガウスポスト再構成フィルター（ＦＷＨＭ＝１ｍｍ）をＳＰＥＣＴ画像に適用し、放射能のスケールを、画像に示されるように設定した（最小値＝０．９５Ｂｑ／ボクセル〜最大値＝９５Ｂｑ／ボクセル）。

【0387】

６．２ 結果
ＰＳＭＡリガンドの合成。アルブミン結合部分を有するＰＳＭＡリガンドは、標準的なＦｍｏｃ（９−フルオレニルメチルオキシカルボニル）プロトコルを使用した固相プラットフォームを介して合成した（図１９）。合成は、最初のアミノ酸のＣ末端から２−ＣＴ樹脂への固定化から始め、Ｃ→Ｎ方向に組み立てた。最後のステップとして、化合物を樹脂から切断した後、完全に脱保護した。これらはいずれも酸性条件下で行った。このＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０２（１７ステップ）、ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０５（２０ステップ）、及びＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０７（２２ステップ）のマルステップ合成により、セミ分取ＨＰＬＣ精製後に１２．９〜２１．２％の総収率で高純度（＞９８％）の化合物を得た（表６．１）。３種類全てＰＳＭＡリガンドを、凍結乾燥粉末として−１８℃で少なくとも４ヶ月間安定であることが分かった。

【表6.1】

【0388】

^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡリガンドの放射標識、安定性、及びｉｎ ｖｉｔｒｏ特性。ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０２、ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０５、及びＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０７は、最大５０ＭＢｑ／ｎｍｏｌの比活性にて^１７７Ｌｕで容易に標識された。放射性リガンドは、＞９８％の高い放射化学的純度を示した。Ｌ−アスコルビン酸の添加により、２４時間後に〜９７％のインタクトな^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０２、〜９６％のインタクトな^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０５、及び〜８９％のインタクトな^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０７が得られた（図２０Ｂ）。^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−６１７は安定性が低く、４時間後に〜８６％のインタクトな化合物が得られたが、２４時間後に完全な分解（＜２％のインタクトな化合物）が観察された（図２０Ａ）。Ｌ−アスコルビン酸の存在が放射線分解を完全に防ぎ、２４時間後でも９８％を超えるインタクトな^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−６１７をもたらした（図２０Ｂ）。^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０２のｎ−オクタノール／ＰＢＳ分配係数（ｌｏｇＤ値）（−２．８±０．０９）が最高であった。^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−６１７に場合に、最も低いｌｏｇＤ値が得られた（−４．４±０．１５）。

【0389】

細胞取り込み及びアルブミンへの結合のｉｎ ｖｉｔｒｏ試験。^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０２、^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０５、及び^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０７のＰＣ−３ ＰＩＰ細胞への取り込みは５２〜５７％の範囲であったが、３７℃で２時間のインキュベーション後の内在化画分は１８〜２４％であった（図２１Ａ）。４時間のインキュベーション後、細胞取り込みと内在化は、それぞれ６０〜６３％と２０〜２６％に僅かに増加した。^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−６１７は、細胞取り込みについて同様の値（５８％）を示したが、４時間のインキュベーション後、放射性リガンドの内在化は僅か１２％であった。ＰＣ−３ ｆｌｕ細胞における取り込みは、全てのアルブミン結合放射性リガンド及び^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−６１７の場合で０．５％未満であった（図２１Ｂ）。

【0390】

限外ろ過アッセイの結果は、^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０２、^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０５、及び^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０７の有意な血漿タンパク質結合能を示し、マウス血漿とインキュベートした場合、それぞれ８７±１．０％、７７±２．１％、及び６４±２．１％であり、ヒト血漿では、それぞれ９５±１．２％、９５±０．６、及び９５±０．１％であった。これらの値は、^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−６１７の場合よりも有意に高く（ｐ＜０．０５）、マウス血漿タンパク質への非常に低い結合（９．３±１．１％）を示し、ヒト血漿タンパク質への結合（５７±２．３％）を示した。ＰＢＳで行った対照実験では、恐らくフィルターデバイスへの非特異的吸着により、フィルター上の放射性リガンドの保持が５％未満であることが分かった（データは示さず）。

【0391】

体内分布試験。^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０２、^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０５、及び^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０７の組織分布は、それぞれ右肩部と左肩部にＰＣ−３ ＰＩＰ腫瘍及びＰＣ−３ ｆｌｕ腫瘍を有するマウスで１９２時間に亘って評価した（図２２）。

【0392】

いずれのＰＳＭＡ放射性リガンドのＰＣ−３ ＰＩＰ腫瘍への取り込みも、同様の動態プロファイルを示した。^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０２は、４ｈｐ．ｉ．で既に７８．４±１２．８％ＩＡ／ｇに達した速い腫瘍蓄積を示し、このレベルで２４ｈｐ．ｉ．超維持された（７６．４±２．４９％ＩＡ／ｇ）。いずれの新規化合物も、特に^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０２で高い血液活性レベル（１８〜２１％ＩＡ／ｇ）、血液からの放射能の速いクリアランス、及び速い腎クリアランスを示した。^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−６１７は、４ｈｐ．ｉ．で既に最大腫瘍取り込み量が〜５６％ＩＡ／ｇに達し、これは１９２時間後に〜２０％ＩＡ／ｇに減少した。これは、血液から迅速に除去され、１時間後に＜１％ＩＡ／ｇとなり、腎臓からの着実なウォッシュアウトを示し、１ｈｐ．ｉの〜１０％ＩＡ／ｇから２４ｈｐ．ｉに＜１％ＩＡ／ｇになった。他のいずれの組織の放射能レベルも血中レベルを下回り、経時で持続的に減少した。

【0393】

腫瘍対血液、腫瘍対腎臓、及び腫瘍対肝臓の比は、いずれの新規化合物においても、特に^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０２で高かった。早い腎クリアランスのため、^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−６１７は腫瘍対バックグラウンド比の増加を示した。

【表6.2】

【0394】

ＰＳＭＡをブロックするために、^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０２を注射する前に２−ＰＭＰＡを投与することにより更なる試験を行った。ＰＣ−３ ＰＩＰ腫瘍では、１ｈｐ．ｉ．及び４ｈｐ．ｉ．でのそれぞれの取り込みが、同じ時点でのブロックされていない取り込みと比較したときに、６４％（１７．６±３．２４％ＩＡ／ｇ）及び４１％（４６．０±７．２９％ＩＡ／ｇ）減少した。腎臓に蓄積された放射能は、放射性リガンド注入後１時間と４時間でそれぞれ８１％と５９％減少した。他のいずれの臓器及び組織においても、顕著ではないが僅かな放射能蓄積の減少が観察された（データは示さず）。

【0395】

体内分布試験の非減衰補正データを使用して、血液プール、腫瘍、腎臓、肝臓における放射性リガンドの蓄積の曲線下面積（ＡＵＣ）を計算した（図２３、表６．３）。

【表6.3】

【0396】

いずれの新規放射性リガンドも、ＰＣ−３ ＰＩＰ腫瘍取り込みについて同等のＡＵＣを示し、これは、^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−６１７で得られたＡＵＣ（ｐ＜０．０５）のほぼ２倍であった。いずれの放射性リガンドも、ＡＵＣの高い腫瘍対血液、腫瘍対腎臓、及び腫瘍対肝臓比を示した。ＡＵＣの高い腫瘍対バックグラウンド値が^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−６１７で得られたが、これは、この放射性リガンドの速い血液及び腎臓クリアランスによるものである（表６．２）。

【0397】

ＳＰＥＣＴ／ＣＴイメージング試験。ＳＰＥＣＴ／ＣＴスキャンは、新たな放射性リガンド及び^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−６１７の注入後４時間、２４時間、及び７２時間でＰＣ−３ ＰＩＰ／ｆｌｕ担腫瘍マウスで行った（図２４及び図２５）。ＰＣ−３ ＰＩＰ腫瘍異種移植片におけるアルブミン結合放射性リガンドの蓄積はいずれも、２４ｈｐ．ｉ．で類似していた。腎取り込みは、特に^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０２では低かった。^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０２で得られた時間依存性ＳＰＥＣＴ／ＣＴ画像は、経時で腫瘍対バックグラウンドコントラストの上昇を示した。^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−６１７と比較して、^１７７Ｌｕ−ＰＳＭＡ−ＡＬＢ−０２の腫瘍内取り込みは、試験期間全体で有意に上昇し、腎臓への蓄積についても同様であった（図２５）。ＰＳＭＡ陰性のＰＣ−３ ｆｌｕ腫瘍では、活性の蓄積は検出されなかった。

【図1-1】

【図1-2】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5-1】

【図5-2】

【図5-3】

【図6-1】

【図6-2】

【図6-3】

【図6-4】

【図7】

【図8】

【図9】

【図10】

【図11】

【図12】

【図13】

【図14】

【図15】

【図16】

【図17】

【図18】

【図19】

【図20】

【図21】

【図22】

【図23】

【図24】

【図25】

【図26】

【図27】

【国際調査報告】