特表 2021-519808 ホルムアミド類化合物、その調製方法及び応用

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】特表2021-519808(P2021-519808A)

(43)【公表日】2021年8月12日

(54)【発明の名称】ホルムアミド類化合物、その調製方法及び応用

(51)【国際特許分類】

   C07D 249/08 20060101AFI20210716BHJP

   C07D 401/04 20060101ALI20210716BHJP

   C07D 417/04 20060101ALI20210716BHJP

   C07D 401/14 20060101ALI20210716BHJP

   A61K 31/4439 20060101ALI20210716BHJP

   A61K 31/444 20060101ALI20210716BHJP

   A61K 31/4196 20060101ALI20210716BHJP

   A61K 31/427 20060101ALI20210716BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20210716BHJP

   A61P 29/00 20060101ALI20210716BHJP

   A61P 3/00 20060101ALI20210716BHJP

   A61P 37/06 20060101ALI20210716BHJP

   A61P 9/00 20060101ALI20210716BHJP

   A61P 25/28 20060101ALI20210716BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20210716BHJP

【ＦＩ】

   C07D249/08 535

   C07D401/04CSP

   C07D417/04

   C07D401/14

   A61K31/4439

   A61K31/444

   A61K31/4196

   A61K31/427

   A61P43/00 123

   A61P43/00 111

   A61P29/00

   A61P3/00

   A61P37/06

   A61P9/00

   A61P25/28

   A61P35/00

【審査請求】有

【予備審査請求】未請求

【全頁数】56

(21)【出願番号】特願2020-559445(P2020-559445)

(86)(22)【出願日】2019年4月23日

(85)【翻訳文提出日】2020年10月23日

(86)【国際出願番号】CN2019083829

(87)【国際公開番号】WO2019206120

(87)【国際公開日】20191031

(31)【優先権主張番号】201810404758.X

(32)【優先日】2018年4月28日

(33)【優先権主張国】CN

(81)【指定国】 AP(BW,GH,GM,KE,LR,LS,MW,MZ,NA,RW,SD,SL,ST,SZ,TZ,UG,ZM,ZW),EA(AM,AZ,BY,KG,KZ,RU,TJ,TM),EP(AL,AT,BE,BG,CH,CY,CZ,DE,DK,EE,ES,FI,FR,GB,GR,HR,HU,IE,IS,IT,LT,LU,LV,MC,MK,MT,NL,NO,PL,PT,RO,RS,SE,SI,SK,SM,TR),OA(BF,BJ,CF,CG,CI,CM,GA,GN,GQ,GW,KM,ML,MR,NE,SN,TD,TG),AE,AG,AL,AM,AO,AT,AU,AZ,BA,BB,BG,BH,BN,BR,BW,BY,BZ,CA,CH,CL,CN,CO,CR,CU,CZ,DE,DJ,DK,DM,DO,DZ,EC,EE,EG,ES,FI,GB,GD,GE,GH,GM,GT,HN,HR,HU,ID,IL,IN,IR,IS,JO,JP,KE,KG,KH,KN,KP,KR,KW,KZ,LA,LC,LK,LR,LS,LU,LY,MA,MD,ME,MG,MK,MN,MW,MX,MY,MZ,NA,NG,NI,NO,NZ,OM,PA,PE,PG,PH,PL,PT,QA,RO,RS,RU,RW,SA,SC,SD,SE,SG,SK,SL,SM,ST,SV,SY,TH,TJ,TM,TN,TR,TT

(71)【出願人】

【識別番号】519108051

【氏名又は名称】シンセン チップスクリーン バイオサイエンセズ カンパニー リミテッド

(74)【代理人】

【識別番号】110000729

【氏名又は名称】特許業務法人 ユニアス国際特許事務所

(72)【発明者】

【氏名】ヤン、チエンチアオ

(72)【発明者】

【氏名】ルー、シエンピン

(72)【発明者】

【氏名】リー、チーピン

(72)【発明者】

【氏名】パン、トースー

(72)【発明者】

【氏名】シャン、ソン

(72)【発明者】

【氏名】ワン、シアオリャン

(72)【発明者】

【氏名】ソン、ヨンリエン

(72)【発明者】

【氏名】チャン、クン

【テーマコード（参考）】

4C063

4C086

【Ｆターム（参考）】

4C063AA01

4C063AA03

4C063BB01

4C063CC41

4C063CC62

4C063DD12

4C063DD41

4C063EE01

4C086AA01

4C086AA02

4C086AA03

4C086AA04

4C086BC60

4C086BC82

4C086GA07

4C086GA08

4C086GA10

4C086MA01

4C086MA04

4C086NA14

4C086NA15

4C086ZA15

4C086ZA36

4C086ZB08

4C086ZB11

4C086ZB26

4C086ZC20

4C086ZC21

(57)【要約】

本発明は、ホルムアミド類化合物、その調製方法及び応用に関する。前記化合物の構造は、式（Ｉ）で示され、式中の各変数の定義は、本説明書に記載される。前記化合物は、ＡＳＫ１キナーゼの活性を阻害することができる。本発明の化合物は、ＡＳＫ１キナーゼ関連疾患、例えば、炎症性疾患、代謝性疾患、自己免疫性疾患、心血管疾患、神経変性疾患、癌及び他の疾患を治療／予防するのに使用されることができる。
【化１】

【選択図】なし

【特許請求の範囲】

【請求項1】

式Ｉで示される化合物であって、そのプロドラッグ、立体異性体、薬学的に許容される塩、水和物又は他の溶媒和物を含む化合物。

【化1】

（式中、
Ｒ^１は、１つ又は複数の置換基であり、独立して同一または異なり、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基、Ｃ_１−Ｃ_４ハロアルキル基、ＮＨ_２、ＣＯＯＨ、Ｃ_１−Ｃ_４アルキルアミノ基、Ｃ_１−Ｃ_４アルキルオキシ基及びＡｒ^１から選ばれ、
ここで、Ａｒ^１は、ベンゼン環及びピリジン環から選ばれ、且つ前記ベンゼン環及びピリジン環は、１つ又は複数の置換基で置換されてもよく、前記置換基は、独立して同一または異なり、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基、Ｃ_１−Ｃ_４ハロアルキル基、ＮＨ_２、Ｃ_１−Ｃ_４アルキルアミノ基及びＣ_１−Ｃ_４アルキルオキシ基から選ばれ、
Ｒ^２は、１つ又は複数の置換基であり、独立して同一または異なり、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基及びＣ_１−Ｃ_４ハロアルキル基から選ばれ、
Ｒ^３は、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基、Ｃ_３−Ｃ_６シクロアルキル基、Ｃ_１−Ｃ_４ハロアルキル基、ハロゲン化Ｃ_３−Ｃ_６シクロアルキル基、シアノ置換Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基、Ｃ_３−Ｃ_６ヘテロシクロアルキル基、ヒドロキシ置換Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基又はＣ_１−Ｃ_４アルコキシ置換Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基であり、
Ｘは、Ｃ及びＮから選ばれ、
Ａは、Ｃ_３−Ｃ_７シクロアルキル基及びＣ_３−Ｃ_７ヘテロシクロアルキル基から選ばれ、
Ｂは、芳香環であり、好ましくは、ベンゼン環、ピリジン環、チアゾール環、フラン環、チオフェン環、ピロール環、ピラゾール環、オキサゾール環、イソキサゾール環及びキノリン環から選ばれ、前記芳香環は、１つ又は複数の置換基で置換されてもよく、前記置換基は、独立して同一または異なり、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基、Ｃ_１−Ｃ_４ハロアルキル基、ＮＨ_２、Ｃ_１−Ｃ_４アルキルアミノ基及びＣ_１−Ｃ_４アルキルオキシ基から選ばれ、
ｍは、１から５までの整数であり、
ｎは、１から４までの整数である。）

【請求項2】

Ｒ^１は、１つ又は複数の置換基であり、独立して同一または異なり、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基、Ｃ_１−Ｃ_４ハロアルキル基、ＮＨ_２、ＣＯＯＨ、Ｃ_１−Ｃ_４アルキルアミノ基、Ｃ_１−Ｃ_４アルキルオキシ基及びＡｒ^１、から選ばれ、
ここで、Ａｒ^１は、ベンゼン環及びピリジン環から選ばれ、且つ前記ベンゼン環及びピリジン環は、１つ又は複数の置換基で置換されてもよく、前記置換基は、独立して同一または異なり、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基、Ｃ_１−Ｃ_４ハロアルキル基、ＮＨ_２、Ｃ_１−Ｃ_４アルキルアミノ基及びＣ_１−Ｃ_４アルキルオキシ基から選ばれ、
Ｒ^２は、１つ又は複数の置換基であり、独立して同一または異なり、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ及びＣ_１−Ｃ_４アルキル基から選ばれ、
Ｒ^３は、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基、Ｃ_３−Ｃ_６シクロアルキル基、Ｃ_１−Ｃ_４ハロアルキル基、ハロゲン化Ｃ_３−Ｃ_６シクロアルキル基、シアノ置換Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基、Ｃ_３−Ｃ_６ヘテロシクロアルキル基、ヒドロキシ置換Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基又はＣ_１−Ｃ_４アルコキシ置換Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基であり、
Ｘは、Ｃ及びＮから選ばれ、
Ａは、Ｃ_３−Ｃ_７シクロアルキル基及びＣ_３−Ｃ_７ヘテロシクロアルキル基から選ばれ、
Ｂは、芳香環であり、好ましくは、ベンゼン環、ピリジン環、チアゾール環、フラン環、チオフェン環、ピロール環、ピラゾール環、オキサゾール環、イソキサゾール環及びキノリン環から選ばれ、前記芳香環は、１つ又は複数の置換基で置換されてもよく、前記置換基は、独立して同一または異なり、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基、Ｃ_１−Ｃ_４ハロアルキル基、ＮＨ_２、Ｃ_１−Ｃ_４アルキルアミノ基及びＣ_１−Ｃ_４アルキルオキシ基から選ばれ、
ｍは、１から５までの整数であり、
ｎは、１から４までの整数である、請求項１に記載の式Ｉで示される化合物。

【請求項3】

Ｒ^１は、１つ又は複数の置換基であり、独立して同一または異なり、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基、Ｃ_１−Ｃ_４ハロアルキル基、ＮＨ_２、ＣＯＯＨ、Ｃ_１−Ｃ_４アルキルアミノ基及びＣ_１−Ｃ_４アルキルオキシ基から選ばれ、
Ｒ^２は、１つ又は複数の置換基であり、独立して同一または異なり、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ及びＣ_１−Ｃ_４アルキル基から選ばれ、
Ｒ^３は、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基、Ｃ_３−Ｃ_６シクロアルキル基、Ｃ_１−Ｃ_４ハロアルキル基、ハロゲン化Ｃ_３−Ｃ_６シクロアルキル基、シアノ置換Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基、Ｃ_３−Ｃ_６ヘテロシクロアルキル基、ヒドロキシ置換Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基又はＣ_１−Ｃ_４アルコキシ置換Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基であり、
Ｘは、Ｃ及びＮから選ばれ、
Ａは、Ｃ_３−Ｃ_７シクロアルキル基及びＣ_３−Ｃ_７ヘテロシクロアルキル基から選ばれ、
Ｂは、芳香環であり、好ましくは、ベンゼン環、ピリジン環、チアゾール環、フラン環、チオフェン環、ピロール環、ピラゾール環、オキサゾール環、イソキサゾール環及びキノリン環から選ばれ、前記芳香環は、１つ又は複数の置換基で置換されてもよく、前記置換基は、独立して同一または異なり、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基、Ｃ_１−Ｃ_４ハロアルキル基、ＮＨ_２、Ｃ_１−Ｃ_４アルキルアミノ基及びＣ_１−Ｃ_４アルキルオキシ基から選ばれ、
ｍは、１から５までの整数であり、
ｎは、１から４までの整数である、請求項１に記載の式Ｉで示される化合物。

【請求項4】

Ｒ^１は、１つ又は複数の置換基であり、独立して同一または異なり、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基、Ｃ_１−Ｃ_４ハロアルキル基、ＮＨ_２、ＣＯＯＨ、Ｃ_１−Ｃ_４アルキルアミノ基及びＣ_１−Ｃ_４アルキルオキシ基から選ばれ、
Ｒ^２は、１つ又は複数の置換基であり、独立して同一または異なり、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ及びＣ_１−Ｃ_４アルキル基から選ばれ、
Ｒ^３は、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基、Ｃ_３−Ｃ_６シクロアルキル基、Ｃ_１−Ｃ_４ハロアルキル基、ハロゲン化Ｃ_３−Ｃ_６シクロアルキル基又はシアノ置換Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基であり、
Ｘは、Ｃ及びＮから選ばれ、
Ａは、Ｃ_３−Ｃ_７シクロアルキル基及びＣ_３−Ｃ_７ヘテロシクロアルキル基から選ばれ、
Ｂは、芳香環であり、好ましくは、ベンゼン環、ピリジン環、チアゾール環、フラン環、チオフェン環、ピロール環、ピラゾール環、オキサゾール環、イソキサゾール環及びキノリン環から選ばれ、前記芳香環は、１つ又は複数の置換基で置換されてもよく、前記置換基は、独立して同一または異なり、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基、Ｃ_１−Ｃ_４ハロアルキル基、ＮＨ_２、Ｃ_１−Ｃ_４アルキルアミノ基及びＣ_１−Ｃ_４アルキルオキシ基から選ばれ、
ｍは、１から５までの整数であり、
ｎは、１から４までの整数である、請求項１に記載の式Ｉで示される化合物。

【請求項5】

Ｒ^１は、１つ又は複数の置換基であり、独立して同一または異なり、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基、Ｃ_１−Ｃ_４ハロアルキル基、ＮＨ_２、ＣＯＯＨ、Ｃ_１−Ｃ_４アルキルアミノ基及びＣ_１−Ｃ_４アルキルオキシ基から選ばれ、
Ｒ^２は、１つ又は複数の置換基であり、独立して同一または異なり、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ及びＣ_１−Ｃ_４アルキル基から選ばれ、
Ｒ^３は、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基、Ｃ_３−Ｃ_６シクロアルキル基、Ｃ_１−Ｃ_４ハロアルキル基、ハロゲン化Ｃ_３−Ｃ_６シクロアルキル基又はシアノ置換Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基であり、
Ｘは、Ｃ及びＮから選ばれ、
Ａは、Ｃ_３−Ｃ_５シクロアルキル基及びＣ_３−Ｃ_５ヘテロシクロアルキル基から選ばれ、
Ｂは、芳香環であり、好ましくは、ベンゼン環、ピリジン環及びチアゾール環から選ばれ、前記芳香環は、１つ又は複数の置換基で置換されてもよく、前記置換基は、独立して同一または異なり、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基、Ｃ_１−Ｃ_４ハロアルキル基、ＮＨ_２、Ｃ_１−Ｃ_４アルキルアミノ基及びＣ_１−Ｃ_４アルキルオキシ基から選ばれ、
ｍは、１から５までの整数であり、
ｎは、１から４までの整数である、請求項１に記載の式Ｉで示される化合物。

【請求項6】

Ｒ^１は、１つ又は複数の置換基であり、独立して同一または異なり、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ及びＣ_１−Ｃ_４アルキル基から選ばれ、
Ｒ^２は、１つ又は複数の置換基であり、独立して同一または異なり、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ及びメチル基から選ばれ、
Ｒ^３は、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基、Ｃ_３−Ｃ_６シクロアルキル基、Ｃ_１−Ｃ_４ハロアルキル基、ハロゲン化Ｃ_３−Ｃ_６シクロアルキル基又はシアノ置換Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基であり、
Ｘは、Ｃ及びＮから選ばれ、
Ａは、Ｃ_３−Ｃ_４シクロアルキル基及びＣ_３−Ｃ_４ヘテロシクロアルキル基から選ばれ、
Ｂは、芳香環であり、好ましくは、ベンゼン環、ピリジン環及びチアゾール環から選ばれ、前記芳香環は、１つ又は複数の置換基で置換されてもよく、前記置換基は、独立して同一または異なり、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基及びＣ_１−Ｃ_４ハロアルキル基から選ばれ、
ｍは、１から５までの整数であり、
ｎは、１から４までの整数である、請求項１に記載の式Ｉで示される化合物。

【請求項7】

Ｒ^１は、１つ又は複数の置換基であり、独立して同一または異なり、Ｈ、ハロゲン及びＣＮから選ばれ、
Ｒ^２は、１つ又は複数の置換基であり、独立して同一または異なり、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、ＣＮ及びメチル基から選ばれ、
Ｒ^３は、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基、Ｃ_３−Ｃ_６シクロアルキル基、Ｃ_１−Ｃ_４ハロアルキル基、ハロゲン化Ｃ_３−Ｃ_６シクロアルキル基又はシアノ置換Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基であり、
Ｘは、Ｃ及びＮから選ばれ、
Ａは、Ｃ_３−Ｃ_４シクロアルキル基及びＣ_３−Ｃ_４ヘテロシクロアルキル基から選ばれ、
Ｂは、芳香環であり、好ましくは、ベンゼン環、ピリジン環及びチアゾール環から選ばれ、前記芳香環は、１つ又は複数の置換基で置換されてもよく、前記置換基は、独立して同一または異なり、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、メチル基及びＣＦ_３から選ばれ、
ｍは、１から５までの整数であり、
ｎは、１から４までの整数である、請求項１に記載の式Ｉで示される化合物。

【請求項8】

Ｒ^１は、Ｈであり、
Ｒ^２は、１つ又は複数の置換基であり、独立して同一または異なり、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、ＣＮ及びメチル基から選ばれ、
Ｒ^３は、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基、Ｃ_３−Ｃ_６シクロアルキル基、Ｃ_１−Ｃ_４ハロアルキル基、ハロゲン化Ｃ_３−Ｃ_６シクロアルキル基及びシアノ置換Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基であり、
Ｘは、Ｃ及びＮから選ばれ、
Ａは、Ｃ_３−Ｃ_４シクロアルキル基から選ばれ、
Ｂは、芳香環であり、好ましくは、ベンゼン環、ピリジン環及びチアゾール環から選ばれ、前記芳香環は、１つ又は複数の置換基で置換されてもよく、前記置換基は、独立して同一または異なり、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、メチル基及びＣＦ_３から選ばれ、
ｍは、１であり、
ｎは、１から３までの整数である、請求項１に記載の式Ｉで示される化合物、。

【請求項9】

Ｒ^１は、Ｈであり、
Ｒ^２は、１つ又は複数の置換基であり、独立して同一または異なり、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、ＣＮ及びメチル基から選ばれ、
Ｒ^３は、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基、Ｃ_３−Ｃ_６シクロアルキル基、Ｃ_１−Ｃ_４ハロアルキル基、ハロゲン化Ｃ_３−Ｃ_６シクロアルキル基又はシアノ置換Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基であり、
Ｘは、Ｃ及びＮから選ばれ、
Ａは、Ｃ_３−Ｃ_４シクロアルキル基から選ばれ、
Ｂは、芳香環であり、好ましくは、ベンゼン環、ピリジン環及びチアゾール環から選ばれ、前記芳香環は、１つ又は複数の置換基で置換されてもよく、前記置換基は、独立して同一または異なり、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、メチル基及びＣＦ_３から選ばれ、
ｍは、１であり、
ｎは、１から２までの整数である、請求項１に記載の式Ｉで示される化合物。

【請求項10】

前記化合物は、
５−（シクロプロピルカルボニルアミノ）−２−フルオロ−４−メチル−Ｎ−（６−（４−イソプロピル−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）ピリジン−２−イル）ベンズアミド、
５−（シクロプロピルカルボニルアミノ）−２−フルオロ−４−メチル−Ｎ−（６−（４−シクロプロピル−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）ピリジン−２−イル）ベンズアミド、
（Ｓ）−５−（シクロプロピルカルボニルアミノ）−２−フルオロ−４−メチル−Ｎ−（６−（４−（１，１，１−トリフルオロプロピル−２−イル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）ピリジン−２−イル）ベンズアミド、
５−（シクロプロピルカルボニルアミノ）−２−フルオロ−４−メチル−Ｎ−（６−（４−（２，２，２−トリフルオロエチル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）ピリジン−２−イル）ベンズアミド、
（Ｒ）−５−（シクロプロピルカルボニルアミノ）−２−フルオロ−４−メチル−Ｎ−（６−（４−（１，１，１−トリフルオロプロピル−２−イル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）ピリジン−２−イル）ベンズアミド、
（Ｒ）−５−（シクロプロピルカルボニルアミノ）−２−フルオロ−Ｎ−６−（４−（１−メトキシプロピル−２−イル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）ピリジン−２−イル）−４−メチルベンズアミド、
（Ｒ）−５−（シクロプロピルカルボニルアミノ）−２−フルオロ−Ｎ−６−（４−（１−ヒドロキシプロピル−２−イル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）ピリジン−２−イル）−４−メチルベンズアミド、
（Ｓ）−５−（シクロプロピルカルボニルアミノ）−２−フルオロ−４−メチル−Ｎ−２−（４−（１，１，１−トリフルオロプロピル−２−イル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）チアゾール−４−イル）ベンズアミド、
（Ｓ）−４−クロロ−５−（シクロプロピルカルボニルアミノ）−２−フルオロ−Ｎ−（６−（４−（１，１，１−トリフルオロプロピル−２−イル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）ピリジン−２−イル）ベンズアミド、
（Ｓ）−４−（シクロプロピルカルボニルアミノ）−Ｎ−（６−（４−（１，１，１−トリフルオロプロピル−２−イル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）ピリジン−２−イル）ピリジン−２−カルボキサミド、
（Ｓ）−４−（シクロプロピルカルボニルアミノ）−５−フルオロ−Ｎ−（６−（４−（１，１，１−トリフルオロプロピル−２−イル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）ピリジン−２−イル）ピリジン−２−カルボキサミド、
（Ｓ）−５−（シクロプロピルカルボニルアミノ）−２−フルオロ−４−メチル−Ｎ−（３−（４−（１，１，１−トリフルオロプロピル−２−イル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）フェニル）ベンズアミド、
２−フルオロ−５−（２−（４−フルオロフェニル）シクロプロピル−１−カルボニルアミノ）−Ｎ−（６−（４−イソプロピル−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）ピリジン−２−イル）−４−メチルベンズアミド、
５−（シクロブチルカルボニルアミノ）−２−フルオロ−Ｎ−（６−（４−イソプロピル−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）ピリジン−２−イル）−４−メチルベンズアミド、
２−フルオロ−Ｎ−（６−（４−イソプロピル−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）ピリジン−２−イル）−４−メチル−５−（１−（トリフルオロメチル）シクロプロピル−１−カルボニルアミノ）ベンズアミド、
２−フルオロ−Ｎ−（６−（４−イソプロピル−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）ピリジン−２−イル）−４−メチル−５−（１−（フルオロ）シクロプロピル−１−カルボニルアミノ）ベンズアミド、
２−フルオロ−５−（（１Ｒ，２Ｒ）−２−フルオロシクロプロピル−１−カルボニルアミノ）−Ｎ−（６−（４−イソプロピル−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）ピリジン−２−イル）−４−メチルベンズアミド、
２−フルオロ−５−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フルオロシクロプロピル−１−カルボニルアミノ）−Ｎ−（６−（４−イソプロピル−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）ピリジン−２−イル）−４−メチルベンズアミド、
（Ｓ）−５−（シクロペンチルカルボニルアミノ）−２−フルオロ−４−メチル−Ｎ−（６−（４−（１，１，１−トリフルオロプロピル−２−イル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）ピリジン−２−イル）ベンズアミド、及び
（Ｓ）−５−（シクロヘプチルカルボニルアミノ）−２−フルオロ−４−メチル−Ｎ−（６−（４−（１，１，１−トリフルオロプロピル−２−イル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）ピリジン−２−イル）ベンズアミドから選ばれる、請求項１に記載の式Ｉで示される化合物。

【請求項11】

式ＩＩで示される化合物又はそのカルボン酸塩化物と式ＩＩＩで示される化合物とを塩基触媒作用下で縮合反応させることを含む、請求項１に記載の式Ｉで示される化合物の調製方法。

【化2】

（ここで、各変数は、請求項１で定義されるようになる。）

【請求項12】

式ＩＩで示される化合物及びＩＶ−１で示される化合物を出発物質として、下式に示される反応ステップにより調製されることを含む、請求項１に記載の式Ｉで示される化合物の調製方法。

【化3】

（ここで、各変数は、請求項１で定義されるようになる）。

【請求項13】

式Ｖで示される化合物と式ＩＩ−４で示される化合物とを塩基触媒作用下で縮合反応させることを含む、請求項１に記載の式Ｉで示される化合物の調製方法。

【化4】

（ここで、Ｒ’はＯＨ又はＣｌ、他の各変数は、請求項１で定義されるようになる。）

【請求項14】

前記塩基触媒剤は、ＴＥＡ、ＤＩＰＥＡ及びＰｙから選ばれる、請求項１１又は請求項１３に記載の調製方法。

【請求項15】

前記縮合反応は、縮合剤の存在下で行い、前記縮合剤は、ＨＡＴＵ、ＨＯＢｔ、ＰｙＢＯＰ及びＴ_３Ｐから選ばれる、請求項１３に記載の調製方法。

【請求項16】

前記式ＩＩで示される化合物は、以下の合成経路により調製される、請求項１１に記載の調製方法。

【化5】

（ここで、Ｒ’は、ＯＨ又はＣｌであり、Ｒ^４は、アルキル基であり、他の各変数は、請求項１で定義されるようになる。）

【請求項17】

前記式ＩＩＩで示される化合物は、以下の合成経路により調製される、請求項１１又は１２に記載の調製方法。

【化6】

（ここで、各変数は、請求項１で定義されるようになる。）

【請求項18】

請求項１〜１０のいずれか１項に記載の式Ｉで示される化合物及び任意に選択されてもよい医薬的に許容できる担体、添加剤又は希釈剤を含む、医薬組成物。

【請求項19】

請求項１〜１０のいずれか１項に記載の化合物の、ＡＳＫ１キナーゼ関連疾患を治療又は予防するための医薬品の調製における応用。

【請求項20】

前記ＡＳＫ１キナーゼ関連疾患は、炎症性疾患、代謝性疾患、自己免疫性疾患、心血管疾患、神経変性疾患及び癌から選ばれる、請求項１９に記載の応用。

【請求項21】

請求項１８に記載的医薬組成物の、ＡＳＫ１標的に関連する疾患を治療又は予防するための医薬品の調製における応用。

【請求項22】

前記ＡＳＫ１標的に関連する疾患は、炎症性疾患、代謝性疾患、自己免疫性疾患、心血管疾患、神経変性疾患、癌及び他の疾患から選ばれる、請求項２１に記載の応用。

【発明の詳細な説明】

【相互参照】

【0001】

本出願は、２０１８年４月２８日に中国特許庁へ提出された、発明の名称が「ホルムアミド類化合物、その調製方法及び応用」である中国特許出願２０１８１０４０４７５８．Ｘに基づき優先権を主張し、その全内容は、援用により本明細書に組み込まれる。

【技術分野】

【0002】

本発明は、医薬技術の分野に属し、ＡＳＫ１キナーゼを阻害できる活性を有するホルムアミド類化合物に関し、さらに、前記化合物の調製方法、前記化合物を有効成分として含む医薬組成物、及びその医薬用途に関する。本発明の化合物は、ＡＳＫ１キナーゼを標的とする阻害剤として、その標的に関連する疾患、例えば、炎症性疾患、代謝性疾患、自己免疫性疾患、心血管疾患、神経変性疾患、癌及び他の疾患を治療／予防するために使用される。

【背景技術】

【0003】

分裂促進因子活性化タンパク質キナーゼ（ｍｉｔｏｇｅｎ−ａｃｔｉｖａｔｅｄ ｐｒｏｔｅｉｎ ｋｉｎａｓｅｓ、 ＭＡＰＫｓ）は、細胞質に広く分布するＳｅｒ／Ｔｈｒプロテインキナーゼであって、細胞表面から核にシグナルを伝達するための重要な伝達物質である。ＭＡＰＫｓシグナル伝達経路は、ＭＥＫキナーゼ（ＭＡＰ３Ｋ）、ＭＡＰＫキナーゼ（ＭＡＰ２Ｋ）、ＭＡＰキナーゼ（ＭＡＰＫ）を含むシグナル伝達モジュールであり、その経路は、サイトカイン、細胞ストレス、神経伝達物質などのさまざまな細胞外刺激についてＭＡＰ３Ｋ→ＭＡＰ２Ｋ→ＭＡＰＫといったキナーゼ・カスケードの活性化を開始し、異なる反応基質に作用することにより、異なるＭＡＰＫｓシグナル伝達経路を活性化することで、遺伝子発現、細胞増殖、分化、アポトーシス、代謝を調節し、炎症反応などのさまざまな病理学的および生理学的プロセスに関与する（Ｃａｒｇｎｅｌｌｏ Ｍ．、 Ｒｏｕｘ Ｐ． Ｐ．、 ２０１１、 Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ． Ｒｅｖ．、 ７５： ５０−８３）。
アポトーシスシグナル調節キナーゼ１（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｓｉｇｎａｌ−ｒｅｇｕｌａｔｉｎｇ ｋｉｎａｓｅ １、 ＡＳＫ１）は、ＭＡＰ３Ｋファミリーメンバーの１つであり、ＡＳＫ１は、酸化ストレス、活性酸素種（ＲＯＳ）、リポ多糖（ＬＰＳ）、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ−α）、小胞体（ＥＲ）ストレス、浸透圧、炎症などのさまざまな刺激によって最初に活性化され、さらにＭＡＰ２Ｋを活性化し、ＭＡＰ２Ｋがリン酸化した後、ＭＡＰＫを活性化し、例えば、ｃ−Ｊｕｎ Ｎ末端プロテインキナーゼ（ｃ−ＪｕｎＮ−ｔｅｒｍｉｎａｌ ｐｒｏｔｅｉｎ ｋｉｎａｓｅ、 ＪＮＫ）及びｐ３８ ＭＡＰＫがある。これにより、ＡＳＫ１は、アポトーシス、分化及び炎症などを含む複数の細胞生物学的プロセスにおいて重要な役割を果たすことを示す（Ｓｏｇａ Ｍ．、 Ｍａｔｓｕｚａｗａ Ａ．、 Ｉｃｈｉｊｏ Ｈ．、 ２０１２、 Ｉｎｔ． Ｊ． Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ．、 ２０１２： １−５）。

【0004】

報告によると、ＡＳＫ１の活性化は、複数の疾患、例えば、炎症性疾患、代謝性疾患、自己免疫性疾患、心血管疾患、神経変性疾患、癌及び他の疾患において重要な役割を果たす（Ｓｏｇａ Ｍ．、 Ｍａｔｓｕｚａｗａ Ａ．、 Ｉｃｈｉｊｏ Ｈ．、 ２０１２、 Ｉｎｔ． Ｊ． Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ．、 ２０１２： １−５； Ｈａｙａｋａｗａ Ｒ．、 Ｈａｙａｋａｗａ Ｔ．、 Ｔａｋｅｄａ Ｋ．、 ｅｔ ａｌ、 ２０１２、Ｐｒｏｃ．Ｊｐｎ．Ａｃａｄ．Ｓｅｒ．ＢＰｈｙｓ．Ｂｉｏｌ．Ｓｃｉ．、 ８８： ４３４−４５３）。従って、ＡＳＫ１阻害活性を有する薬学的活性分子は上記疾患の患者に大きな利益をもたらすことを発見する。
これまでに公開されたＡＳＫ１阻害剤の特許出願は、トリアゾロピリジン系（ＷＯ２００９０２７２８３を参照）、ピラゾロ［１，５−Ａ］ピリミジン類（ＷＯ２０１１０４１２９３を参照）、芳香環／芳香族複素環アミン類（ＷＯ２０１１００８７０９を参照）、複素環アミン類（ＵＳ２０１２０００４２６７を参照）及びチアゾラミド類（ＵＳ２０１７０１７３０３１を参照）などを含む。前述のように、ＡＳＫ１の活性化は複数の疾患に関連しているため、その阻害剤は、医薬品として医薬分野で重要な臨床的価値及び良好な応用の見通しを持っているが、現在世界で承認された市販の医薬品はない。従って、満たされていない臨床ニーズを満たすために、新規なＡＳＫ１阻害剤の開発を期待している。
本発明は、新規なシクロアルキル基ホルムアミド類ＡＳＫ１阻害剤であって、その標的に関連する疾患、例えば、炎症性疾患、代謝性疾患、自己免疫性疾患、心血管疾患、神経変性疾患、癌及び他の疾患を治療／予防するために使用される新規なシクロアルキル基ホルムアミド類ＡＳＫ１阻害剤を提供する。同時に、これらの化合物又はそれらを有効成分として含む医薬組成物などは安全な治療濃度域でこれらの疾患の臨床的治療効果を最大化することができる。

【発明の概要】

【0005】

本発明の一側面では、ＡＳＫ１キナーゼ活性を阻害できる以下の式Ｉで示されるシクロアルキル基ホルムアミド類化合物に関し、その薬学的に許容される塩、水和物、他の溶媒和物、立体異性体及びプロドラッグなどの誘導体を含む。
本発明の他の側面では、本明細書に記載の化合物の調製方法に関する。
本発明の更に他の側面では、本発明化合物を有効成分として含む医薬組成物、ＡＳＫ１キナーゼ関連疾患を治療／予防するための本発明化合物又は医薬組成物の臨床的応用、及びＡＳＫ１キナーゼ関連疾患を治療及び／又は予防するための医薬品の調製における本発明化合物又は医薬組成物の応用に関する。それに対応して、本発明は、さらに、ＡＳＫ１キナーゼ関連疾患を治療及び／又は予防する方法であって、それを必要とする対象に本発明の化合物又は医薬組成物を投与することを含む方法に関する。

【0006】

本発明は、式Ｉで示される化合物に関し、そのプロドラッグ、立体異性体、薬学的に許容される塩、水和物又は他の溶媒和物を含む。

【化1】

式中、
Ｒ^１は、１つ又は複数の置換基であり、独立して同一または異なり、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基、Ｃ_１−Ｃ_４ハロアルキル基、ＮＨ_２、ＣＯＯＨ、Ｃ_１−Ｃ_４アルキルアミノ基、Ｃ_１−Ｃ_４アルキルオキシ基及びＡｒ^１から選ばれ、
ここで、Ａｒ^１は、ベンゼン環及びピリジン環から選ばれ、且つ前記ベンゼン環及びピリジン環は、１つ又は複数の置換基で置換されてもよく、前記置換基は、独立して同一または異なり、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基、Ｃ_１−Ｃ_４ハロアルキル基、ＮＨ_２、Ｃ_１−Ｃ_４アルキルアミノ基及びＣ_１−Ｃ_４アルキルオキシ基から選ばれ、
Ｒ^２は、１つ又は複数の置換基であり、独立して同一または異なり、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基及びＣ_１−Ｃ_４ハロアルキル基から選ばれ、
Ｒ^３は、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基、Ｃ_３−Ｃ_６シクロアルキル基、Ｃ_１−Ｃ_４ハロアルキル基、ハロゲン化Ｃ_３−Ｃ_６シクロアルキル基、シアノ置換Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基、Ｃ_３−Ｃ_６ヘテロシクロアルキル基、ヒドロキシ置換Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基又はＣ_１−Ｃ_４アルコキシ置換Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基であり、
Ｘは、Ｃ及びＮから選ばれ、
Ａは、Ｃ_３−Ｃ_７シクロアルキル基及びＣ_３−Ｃ_７ヘテロシクロアルキル基から選ばれ、
Ｂは、芳香環であり、好ましくは、ベンゼン環、ピリジン環、チアゾール環、フラン環、チオフェン環、ピロール環、ピラゾール環、オキサゾール環、イソキサゾール環及びキノリン環から選ばれ、前記芳香環は、１つ又は複数の置換基で置換されてもよく、前記置換基は、独立して同一または異なり、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基、Ｃ_１−Ｃ_４ハロアルキル基、ＮＨ_２、Ｃ_１−Ｃ_４アルキルアミノ基及びＣ_１−Ｃ_４アルキルオキシ基から選ばれ、
ｍは、１から５までの整数であり、
ｎは、１から４までの整数である。

【0007】

好ましい側面では、本発明は、式Ｉで示される化合物であって、そのプロドラッグ、立体異性体、薬学的に許容される塩、水和物又は他の溶媒和物を含む化合物に関し、ここで、
Ｒ^１は、１つ又は複数の置換基であり、独立して同一または異なり、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基、Ｃ_１−Ｃ_４ハロアルキル基、ＮＨ_２、ＣＯＯＨ、Ｃ_１−Ｃ_４アルキルアミノ基、Ｃ_１−Ｃ_４アルキルオキシ基及びＡｒ^１から選ばれ、
ここで、Ａｒ^１は、ベンゼン環及びピリジン環から選ばれ、且つ前記ベンゼン環及びピリジン環は、１つ又は複数の置換基で置換されてもよく、前記置換基は、独立して同一または異なり、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基、Ｃ_１−Ｃ_４ハロアルキル基、ＮＨ_２、Ｃ_１−Ｃ_４アルキルアミノ基及びＣ_１−Ｃ_４アルキルオキシ基から選ばれ、
Ｒ^２は、１つ又は複数の置換基であり、独立して同一または異なり、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ及びＣ_１−Ｃ_４アルキル基から選ばれ、
Ｒ^３は、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基、Ｃ_３−Ｃ_６シクロアルキル基、Ｃ_１−Ｃ_４ハロアルキル基、ハロゲン化Ｃ_３−Ｃ_６シクロアルキル基、シアノ置換Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基、Ｃ_３−Ｃ_６ヘテロシクロアルキル基、ヒドロキシ置換Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基及びＣ_１−Ｃ_４アルコキシ置換Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基であり、
Ｘは、Ｃ及びＮから選ばれ、
Ａは、Ｃ_３−Ｃ_７シクロアルキル基及びＣ_３−Ｃ_７ヘテロシクロアルキル基から選ばれ、
Ｂは、芳香環であり、好ましくは、ベンゼン環、ピリジン環、チアゾール環、フラン環、チオフェン環、ピロール環、ピラゾール環、オキサゾール環、イソキサゾール環及びキノリン環から選ばれ、前記芳香環は、１つ又は複数の置換基で置換されてもよく、前記置換基は、独立して同一または異なり、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基、Ｃ_１−Ｃ_４ハロアルキル基、ＮＨ_２、Ｃ_１−Ｃ_４アルキルアミノ基及びＣ_１−Ｃ_４アルキルオキシ基から選ばれ、
ｍは、１から５までの整数であり、
ｎは、１から４までの整数である。

【0008】

より好ましい側面では、本発明は、式Ｉで示される化合物であって、そのプロドラッグ、立体異性体、薬学的に許容される塩、水和物又は他の溶媒和物を含む化合物に関し、ここで、
Ｒ^１は、１つ又は複数の置換基であり、独立して同一または異なり、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基、Ｃ_１−Ｃ_４ハロアルキル基、ＮＨ_２、ＣＯＯＨ、Ｃ_１−Ｃ_４アルキルアミノ基及びＣ_１−Ｃ_４アルキルオキシ基から選ばれ、
Ｒ^２は、１つ又は複数の置換基であり、独立して同一または異なり、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ及びＣ_１−Ｃ_４アルキル基から選ばれ、
Ｒ^３は、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基、Ｃ_３−Ｃ_６シクロアルキル基、Ｃ_１−Ｃ_４ハロアルキル基、ハロゲン化Ｃ_３−Ｃ_６シクロアルキル基、シアノ置換Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基、Ｃ_３−Ｃ_６ヘテロシクロアルキル基、ヒドロキシ置換Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基及びＣ_１−Ｃ_４アルコキシ置換Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基であり、
Ｘは、Ｃ及びＮから選ばれ、
Ａは、Ｃ_３−Ｃ_７シクロアルキル基及びＣ_３−Ｃ_７ヘテロシクロアルキル基から選ばれ、
Ｂは、芳香環であり、好ましくは、ベンゼン環、ピリジン環、チアゾール環、フラン環、チオフェン環、ピロール環、ピラゾール環、オキサゾール環、イソキサゾール環及びキノリン環から選ばれ、前記芳香環は、１つ又は複数の置換基で置換されてもよく、前記置換基は、独立して同一または異なり、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基、Ｃ_１−Ｃ_４ハロアルキル基、ＮＨ_２、Ｃ_１−Ｃ_４アルキルアミノ基及びＣ_１−Ｃ_４アルキルオキシ基から選ばれ、
ｍは、１から５までの整数であり、
ｎは、１から４までの整数である。
別の更に好ましい側面では、本発明は、式Ｉで示される化合物であって、そのプロドラッグ、立体異性体、薬学的に許容される塩、水和物又は他の溶媒和物を含む化合物に関し、ここで、
Ｒ^１は、１つ又は複数の置換基であり、独立して同一または異なり、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基、Ｃ_１−Ｃ_４ハロアルキル基、ＮＨ_２、ＣＯＯＨ、Ｃ_１−Ｃ_４アルキルアミノ基及びＣ_１−Ｃ_４アルキルオキシ基から選ばれ、
Ｒ^２は、１つ又は複数の置換基であり、独立して同一または異なり、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ及びＣ_１−Ｃ_４アルキル基から選ばれ、
Ｒ^３は、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基、Ｃ_３−Ｃ_６シクロアルキル基、Ｃ_１−Ｃ_４ハロアルキル基、ハロゲン化Ｃ_３−Ｃ_６シクロアルキル基及びシアノ置換的Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基であり、
Ｘは、Ｃ及びＮから選ばれ、
Ａは、Ｃ_３−Ｃ_７シクロアルキル基及びＣ_３−Ｃ_７ヘテロシクロアルキル基から選ばれ、
Ｂは、芳香環であり、好ましくは、ベンゼン環、ピリジン環、チアゾール環、フラン環、チオフェン環、ピロール環、ピラゾール環、オキサゾール環、イソキサゾール環及びキノリン環から選ばれ、前記芳香環は、１つ又は複数の置換基で置換されてもよく、前記置換基は、独立して同一または異なり、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基、Ｃ_１−Ｃ_４ハロアルキル基、ＮＨ_２、Ｃ_１−Ｃ_４アルキルアミノ基及びＣ_１−Ｃ_４アルキルオキシ基から選ばれ、
ｍは、１から５までの整数であり、
ｎは、１から４までの整数である。

【0009】

他の更に好ましい側面では、本発明は、式Ｉで示される化合物であって、そのプロドラッグ、立体異性体、薬学的に許容される塩、水和物又は他の溶媒和物を含む化合物に関し、ここで、
Ｒ^１は、１つ又は複数の置換基であり、独立して同一または異なり、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基、Ｃ_１−Ｃ_４ハロアルキル基、ＮＨ_２、ＣＯＯＨ、Ｃ_１−Ｃ_４アルキルアミノ基及びＣ_１−Ｃ_４アルキルオキシ基から選ばれ、
Ｒ^２は、１つ又は複数の置換基であり、独立して同一または異なり、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ及びＣ_１−Ｃ_４アルキル基から選ばれ、
Ｒ^３は、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基、Ｃ_３−Ｃ_６シクロアルキル基、Ｃ_１−Ｃ_４ハロアルキル基、ハロゲン化Ｃ_３−Ｃ_６シクロアルキル基及びシアノ置換Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基であり、
Ｘは、Ｃ及びＮから選ばれ、
Ａは、Ｃ_３−Ｃ_５シクロアルキル基及びＣ_３−Ｃ_５ヘテロシクロアルキル基から選ばれ、
Ｂは、芳香環であり、好ましくは、ベンゼン環、ピリジン環及びチアゾール環から選ばれ、前記芳香環は、１つ又は複数の置換基で置換されてもよく、前記置換基は、独立して同一または異なり、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基、Ｃ_１−Ｃ_４ハロアルキル基、ＮＨ_２、Ｃ_１−Ｃ_４アルキルアミノ基及びＣ_１−Ｃ_４アルキルオキシ基から選ばれ、
ｍは、１から５までの整数であり、
ｎは、１から４までの整数である。
他の更により好ましい側面では、本発明は、式Ｉで示される化合物であって、そのプロドラッグ、立体異性体、薬学的に許容される塩、水和物又は他の溶媒和物を含む化合物に関し、ここで、
Ｒ^１は、１つ又は複数の置換基であり、独立して同一または異なり、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ及びＣ_１−Ｃ_４アルキル基から選ばれ、
Ｒ^２は、１つ又は複数の置換基であり、独立して同一または異なり、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ及びメチル基から選ばれ、
Ｒ^３は、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基、Ｃ_３−Ｃ_６シクロアルキル基、Ｃ_１−Ｃ_４ハロアルキル基、ハロゲン化Ｃ_３−Ｃ_６シクロアルキル基又はシアノ置換Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基であり、
Ｘは、Ｃ及びＮから選ばれ、
Ａは、Ｃ_３−Ｃ_４シクロアルキル基及びＣ_３−Ｃ_４ヘテロシクロアルキル基から選ばれ、
Ｂは、芳香環であり、好ましくは、ベンゼン環、ピリジン環及びチアゾール環から選ばれ、前記芳香環は、１つ又は複数の置換基で置換されてもよく、前記置換基は、独立して同一または異なり、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基及びＣ_１−Ｃ_４ハロアルキル基から選ばれ、
ｍは、１から５までの整数であり、
ｎは、１から４までの整数である。

【0010】

他の更に好ましい側面では、本発明は、式Ｉで示される化合物であって、そのプロドラッグ、立体異性体、薬学的に許容される塩、水和物又は他の溶媒和物を含む化合物に関し、ここで、
Ｒ^１は、１つ又は複数の置換基であり、独立して、から選ばれ同一または異なり、Ｈ、ハロゲン及びＣＮ；
Ｒ^２は、１つ又は複数の置換基であり、独立して同一または異なり、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、ＣＮ及びメチル基から選ばれ、
Ｒ^３は、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基、Ｃ_３−Ｃ_６シクロアルキル基、Ｃ_１−Ｃ_４ハロアルキル基、ハロゲン化Ｃ_３−Ｃ_６シクロアルキル基又はシアノ置換Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基であり、
Ｘは、Ｃ及びＮから選ばれ、
Ａは、Ｃ_３−Ｃ_４シクロアルキル基及びＣ_３−Ｃ_４ヘテロシクロアルキル基から選ばれ、
Ｂは、芳香環であり、好ましくは、ベンゼン環、ピリジン環及びチアゾール環から選ばれ、前記芳香環は、１つ又は複数の置換基で置換されてもよく、前記置換基は、独立して同一または異なり、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、メチル基及びＣＦ_３から選ばれ、
ｍは、１から５までの整数であり、
ｎは、１から４までの整数である。
更により好ましい側面では、本発明は、式Ｉで示される化合物であって、そのプロドラッグ、立体異性体、薬学的に許容される塩、水和物又は他の溶媒和物を含む化合物に関し、ここで、
Ｒ^１は、Ｈであり、
Ｒ^２は、１つ又は複数の置換基であり、独立して同一または異なり、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、ＣＮ及びメチル基から選ばれ、
Ｒ^３は、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基、Ｃ_３−Ｃ_６シクロアルキル基、Ｃ_１−Ｃ_４ハロアルキル基、ハロゲン化Ｃ_３−Ｃ_６シクロアルキル基又はシアノ置換Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基であり、
Ｘは、Ｃ及びＮから選ばれ、
Ａは、Ｃ_３−Ｃ_４シクロアルキル基から選ばれ、
Ｂは、芳香環であり、好ましくは、ベンゼン環、ピリジン環及びチアゾール環から選ばれ、前記芳香環は、１つ又は複数の置換基で置換されてもよく、前記置換基は、独立して同一または異なり、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、メチル基及びＣＦ_３から選ばれ、
ｍは、１であり、
ｎは、１から３までの整数である。

【0011】

特に好ましい側面では、本発明は、式Ｉで示される化合物であって、そのプロドラッグ、立体異性体、薬学的に許容される塩、水和物又は他の溶媒和物を含む化合物に関し、ここで、
Ｒ^１は、Ｈであり、
Ｒ^２は、１つ又は複数の置換基であり、独立して同一または異なり、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、ＣＮ及びメチル基から選ばれ、
Ｒ^３は、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基、Ｃ_３−Ｃ_６シクロアルキル基、Ｃ_１−Ｃ_４ハロアルキル基、ハロゲン化Ｃ_３−Ｃ_６シクロアルキル基又はシアノ置換Ｃ_１−Ｃ_４アルキル基であり、
Ｘは、Ｃ及びＮから選ばれ、
Ａは、Ｃ_３−Ｃ_４シクロアルキル基から選ばれ、
Ｂは、芳香環であり、好ましくは、ベンゼン環、ピリジン環及びチアゾール環から選ばれ、前記芳香環は、１つ又は複数の置換基で置換されてもよく、前記置換基は、独立して同一または異なり、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、メチル基及びＣＦ_３から選ばれ、
ｍは、１であり、
ｎは、１から２までの整数である。

【発明を実施するための形態】

【0012】

本発明に記載の「ハロゲン」は、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素であり、好ましくは、フルオロ又は塩素である。
本発明に記載の「アルキル基」は、直鎖または分枝鎖のアルキル基を含む。本発明に記載のＣ_１−Ｃ_４アルキル基とは、炭素数１〜４のアルキル基を意味し、好ましくは、メチル基、エチル基、プロピル基又はイソプロピル基、ｎ−ブチル基、イソブチル基又はｔｅｒｔ−ブチル基である。本発明の化合物におけるアルキル基は、置換又は非置換のものであってもよく、置換基は、アルキル基、ハロゲン、アルコキシ基、ハロアルキル基、シアノ基、ヒドロキシル基などを含むことができる。本発明のアルキル基の例は、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル、ｎ−ブチル基、イソブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基などを含む。
本発明に記載の「シクロアルキル基」は、３〜７員のシクロアルキル基を含み、好ましくは、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロヘキシル基である。本発明の化合物におけるシクロアルキル基は、置換又は非置換のものであってもよく、置換基は、アルキル基、ハロゲン、アルコキシ基、ヒドロカルビル基、ヒドロキシル基などを含むことができる。

【0013】

本発明に記載の「ヘテロシクロアルキル基」は、３〜７員のヘテロシクロアルキル基を含む。本発明の化合物におけるヘテロシクロアルキル基は、置換又は非置換のものであってもよく、置換基は、アルキル基、ハロゲン、アルコキシ基、ハロアルキル基、シアノ基、ヒドロキシル基などを含むことができる。
本発明に記載の「アルコキシ基」とは、上記アルキル基を酸素原子に連結して形成された基を指し、ここで、酸素原子は、自由に化学結合を形成する能力を有し、例えば、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシ、イソプロポキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ、シクロプロポキシなどである。
本発明に記載の「アルキルアミノ基」とは、上記アルキル基をアミノに連結して形成された基を指し、例えば、メチルアミノ基、エチルアミノ基、４−ジメチルアミノなどを意味する。
本明細書に記載の「１つ又は複数の置換基で置換されている」とは、１つ又はそれ以上の置換基で置換され、例えば、１つ、２つ、３つ又は４つの置換基で置換され、好ましくは、１つ、２つ又は３つの置換基で置換されている。

【0014】

本明細書に記載の「他の溶媒和物」とは、水を除く他の溶媒と形成された溶媒和物を意味する。
本発明に記載の「医薬的に許容できる」又は「薬学的に許容される」は、合理的な医学的範囲内でのヒトおよび動物の使用に適し、許容可能で、毒性、アレルギー反応、刺激および合併症などを含む副作用なしことを理解すべきである。
本発明は、前記上記式Ｉで示される化合物を含有する医薬組成物であって、そのプロドラッグ、立体異性体、薬学的に許容される塩、水和物又は他の溶媒和物を有効成分としてを含む医薬組成物に関する。
本発明に記載の化合物は、他の１つ又は複数の有効成分と併用してもよく、それぞれの用量及び比率は、具体的な病状、患者の具体的な状態、及び臨床的必要性に従って当業者によって調整することができる。

【0015】

本発明で提供される実施例及び製造例は、本発明に記載の化合物及びその調製方法をさらに例示して説明している。以下の製造例及び実施例は、本発明の範囲に何も限定をしないことを理解すべきである。
以下の合成経路は、本発明の式Ｉで示される化合物の調製方法を説明しており、以下の合成概略図で使用される原料、試薬、触媒、溶媒などは、いずれも有機化学分野で当業者に周知の方法によって調製されるか、または市販されることができる。本発明のすべての最終誘導体は、概略図に記載の方法又はそれに類似する方法により調製されることができ、これらの方法は、いずれも機化学分野で当業者に周知のものである。これらの概略図で使用される変数は、以下の定義又は特許請求の範囲に従って定義される。

【0016】

調製方法：以下の各変数の定義は、前記の通りであるが、新たな変数の定義は、このセクションで説明されているとおりである。また、式Ｉで示される化合物及び関連する中間体は、いずれも通常の分離方法、例えば、抽出、再結晶及びシリカゲルカラムクロマトグラフィーなどにより精製されることができる。使用される２００〜３００メッシュのシリカゲル及び薄層クロマトグラフィー用シリカゲルプレートは、いずれも青島海洋化工場により製造される。使用される化学試薬は、一般用試薬の分析用規格又は化学用規格の市販製品であり、さらに精製することなく使用される。
（ａ）重要な中間体ＩＩは、以下の例示的な合成方法によって調製されることができる。
市販のＩＩ−１をカルボン酸クロリド／メタノール（ＣＨ_３ＯＨ）又はエタノール（Ｃ_２Ｈ_５ＯＨ）、硫酸／ＣＨ_３ＯＨ又はＣ_２Ｈ_５ＯＨなどの一般的な方法でメチルエステル化又はエチルエステル化することによりＩＩ−２を得る。一般的な還元剤（鉄粉／塩化アンモニウム（Ｆｅ／ＮＨ_４Ｃｌ）又は鉄粉／塩酸などを含むが、これらに限定されない）の作用下で、ＩＩ−２をＣＨ_３ＯＨ又はＣ_２Ｈ_５ＯＨと水との混合溶媒に溶解させ、７０〜１００℃の条件下で約２〜４ｈ反応させてＩＩ−３を得る。将ＩＩ−３（自家製又は市販）を通常の溶媒（ジクロロメタン（ＣＨ_２Ｃｌ_２）、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、Ｎ，Ｎ’−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）又はピリジン（Ｐｙ）などを含むが、これらに限定されない）に溶解させ、一般的な塩基（例えば、トリエチルアミン（ＴＥＡ）及びＮ，Ｎ’−ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ）など）の触媒作用下で、カルボン酸クロリドＩＩ−４を前記溶液に滴下し、カルボン酸ＩＩ−４を一般的な縮合剤の作用下で前記溶液に滴下しＩＩ−５を得る。室温の条件下で、ＩＩ−５をＣＨ_３ＯＨ、Ｃ_２Ｈ_５ＯＨ又はＴＨＦなどと水との混合溶媒に溶解させ、例えば、水酸化リチウム（ＬｉＯＨ）、水酸化ナトリウム（ＮａＯＨ）などの無機塩基でカルボン酸エステルの加水分解を行い、通常、一晩反応させて重要な中間体ＩＩを得る。本経路に記載の一般的な縮合剤は、例えば、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスファート（ＨＡＴＵ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）、１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスファート（ＰｙＢＯＰ）及１−プロピルホスホン酸無水物（Ｔ_３Ｐ）などが挙げられるが、これらに限定されない。

【化2】

ここで、Ｒ’は、ＯＨ又はＣｌであり、Ｒ^４は、アルキル基であり、他の各変数は、前記の定義と同様である。

【0017】

スキーム１ 重要な中間体ＩＩの合成経路
（ｂ）参考文献ＵＳ２０１１０００９４１０に基づいて研究によると、本発明はアミノ基に保護基を使用せずに中間体ＩＩＩを得ることができることが見出されている。文献ＵＳ２０１１０００９４１０で報告されている方法と比較しては、本発明の方法は、反応ステップを短縮し、時間及びコストを節約し、且つ合計収率は文献で報告されている２５％程度から本方法でのほとんどの化合物で３０％〜６６％程度である。重要な中間体ＩＩＩは、以下の例示的な合成方法によって調製されることができる。
還流の条件下で、市販のＩＩＩ−１をヒドラジン水和物と適合なプロトン性溶媒中で約１〜３ｈ反応させてＩＩＩ−２を得、還流の条件下で、ＩＩＩ−２をＮ，Ｎ’−ジメチルホルムアミドジメチルアセタール（ＤＭＦ−ＤＭＡ）と約３〜１０ｈ反応させてＩＩＩ−３を得、還流の条件下で、ＩＩＩ−３を市販のアミンＩＩＩ−４とアセトニトリル／氷酢酸（ＣＨ_３ＣＮ／ＡｃＯＨ）中で少なくとも２４ｈ反応させて重要な中間体ＩＩＩを得る。本経路に記載のプロトン性溶媒は、ＣＨ_３ＯＨ、Ｃ_２Ｈ_５ＯＨなどであってもよいが、これらに限定されない。

【化3】

【0018】

スキーム２ 重要な中間体ＩＩＩの合成経路
（ｃ）重要な中間体ＩＩＩは、以下の例示的な他の合成方法によって調製されることができる。
Ｎ_２保護下で、市販のＩＩＩ’−１をＴＨＦ又は１，４−ジオキサン中に溶解させ、−７０℃の低温下で、その内のハロゲンがｎ−ブチルリチウム（ｎ−ＢｕＬｉ）及びＣＯ_２でカルボキシル基に変換され、約１〜３ｈ反応させてＩＩＩ’−２を得る。室温の条件下で、ＩＩＩ’−２と市販のアミンＩＩＩ−４をＣＨ_２Ｃｌ_２、ＴＨＦ又はＤＭＦなどの溶媒に溶解させ、一般的な縮合剤及び塩基の触媒作用下で、約３〜５ｈ反応させてＩＩＩ’−３を得る。Ｌａｗｅｓｓｏｎ’ｓ Ｒｅａｇｅｎｔの作用下で、反応温度として室温から１２０℃まで昇温し一晩反応させ、オキソＩＩＩ’−３をチオＩＩＩ’−４に変換する。還流の条件下で、ＩＩＩ’−４をヒドラジン水和物と約１〜３ｈ反応させてＩＩＩ’−５を得る。室温の条件下で、ＩＩＩ’−５をＣ_２Ｈ_５ＯＨ中に溶解させ、オルトギ酸トリエチル（ＣＨ（ＯＣ_２Ｈ_５）_３）を加えて硫酸の触媒作用下で閉環反応を実現し、約１〜５ｈ反応させた後、ＩＩＩ’−６を得る。Ｎ_２保護下で、ＩＩＩ’−６を１，４−ジオキサンと水との混合溶媒に溶解させ、ベンゾフェノンイミンを加え、パラジウム、通常の配位子及び塩基の触媒作用下でＣ−Ｎクロスカップリング反応を完了し、還流の条件下で一晩反応させてＩＩＩ’−７を得る。室温の条件下で、ＩＩＩ’−７を希塩酸で約２４ｈ加水分解して重要な中間体ＩＩＩを得る。本経路に記載の一般的な縮合剤は、例えば、ＨＡＴＵ、ＨＯＢｔ、ＰｙＢＯＰ及Ｔ_３Ｐなどであるが、これらに限定されなく、前記塩基は、ＴＥＡ、ＤＩＰＥＡ、炭酸カリウム（Ｋ_２ＣＯ_３）、炭酸セシウム（Ｃｓ_２ＣＯ_３）及びナトリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（ｔ−ＢｕＯＮａ）などであるが、これらに限定されなく、前記パラジウム試薬はトリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（Ｐｄ_２（ｄｂａ）_３）、Ｐｄ_２（ｄｂａ）_３のジクロロメタン付加体及び酢酸パラジウム(II)（Ｐｄ（ＯＡｃ）_２）などであるが、これらに限定されなく、前記配位子は、４，５−ビス(ジフェニルホスフィノ)−９，９−ジメチルキサンテン（Ｘａｎｔｐｈｏｓ）、２−ジシクロヘキシルホスフィノ−２’，６’−ジメトキシビフェニル（Ｓｐｈｏｓ）及び２、２’−ビス（ジフェニルホスフィノ）−１、１’−ビナフチル（ＢＩＮＡＰ）などであるが、これらに限定されない。

【化4】

【0019】

スキーム３ 重要な中間体ＩＩＩの他の合成経路
（ｄ）本発明式Ｉで示される化合物は、以下の例示的な合成方法によって調製されることができる。
重要な中間体ＩＩは、塩化チオニル（ＳＯＣｌ_２）、塩化オキサリル（（ＣＯＣｌ）_２）、三塩化リン（ＰＣｌ_３）又は五塩化リン（ＰＣｌ_５）でカルボン酸クロリドに調製され、次いで該活性中間体と重要な中間体ＩＩＩとを超脱水溶媒、例えばＣＨ_２Ｃｌ_２、ＴＨＦ、ＤＭＦ又はＰｙなどに溶解させ、通常の塩基性触媒を加えて式Ｉで示される化合物を得る。また、一般的な縮合剤、例えば、ＨＡＴＵ、ＨＯＢｔ、ＰｙＢＯＰ及Ｔ_３Ｐなどを使用することにより式Ｉで示される化合物を得ることもできるが、これらに限定されなく、本経路に記載の塩基性触媒は、例えば、ＴＥＡ、ＤＩＰＥＡ及びＫ_２ＣＯ_３などであるが、これらに限定されない。

【化5】

【0020】

スキーム４ 式Ｉで示される化合物の合成経路
（ｅ）本発明に記載の構造式Ｉで示される化合物は、出発物質としてのＩＩ及びＩＶ−１から、スキーム２に類似する合成方法により得られることもでき、以下のスキーム５を参照し、また、式Ｉで示される化合物は、式Ｖで示される化合物と式ＩＩ−４で示される化合物が塩基の触媒作用下で縮合反応を行うことにより得られることもできる。

【化6】

【0021】

スキーム５ 式Ｉで示される化合物の他の合成経路

【化7】

ここで、Ｒ’は、ＯＨ又はＣｌであり、Ｒ^４は、アルキル基であり、他の各変数は、前記の定義と同様である。
ＬＣ−ＭＳの分析方法
質量分析条件：機器：Ｔｈｅｒｍｏ ＭＳＱ Ｐｌｕｓ、イオン源：ＥＳＩ（ＥＡ＋ ＥＡ−）、コーン電圧：３０Ｖ、キャピラリー電圧：３．００ＫＶ、ソース温度：３５０℃、
クロマトグラフィー測定条件：機器：Ｔｈｅｒｍｏ Ｕ３０００、検出器：ＤＡＤ−３０００ （ＲＳ）（ダイオードアレイ検出器）、カラム：島津社製Ｉｎｅｒｔｓｉｌ ＯＤＳ−ＨＬＨＰ ３μｍ３．０×１００ ｍｍ、流速：０．４ ｍＬ／ｍｉｎ、カラム温度：３０℃、移動相：ＣＨ_３ＯＨ／Ｈ_２Ｏ／ＨＣＯＯＨ（７５／２５／０．５）。
ＨＰＬＣ分析方法（一）：
機器：Ｔｈｅｒｍｏ Ｕ３０００、検出器：ＶＷＤ−３×００ （ＲＳ）（紫外可視検出器）、カラム：島津社製Ｓｈｉｍ−ｐａｃｋ ＶＰ−ＯＤＳ ５ μｍ ４．６×１５０ ｍｍ、流速：０．７ ｍＬ／ｍｉｎ、カラム温度：３０℃、移動相Ａ：ＣＨ_３ＯＨ／Ｈ_２Ｏ／ＡｃＯＨ／ＴＥＡ（６５／３５／０．１／０．２）、移動相Ｂ：ＣＨ_３ＯＨ／Ｈ_２Ｏ／ＡｃＯＨ／ＴＥＡ（７０／３０／０．１／０．２）、移動相Ｃ：ＣＨ_３ＯＨ／Ｈ_２Ｏ／ＡｃＯＨ／ＴＥＡ（５０／５０／０．１／０．２）。
ＨＰＬＣ分析方法（二）：
機器：Ｔｈｅｒｍｏ Ｕ３０００、検出器：ＶＷＤ−３×００ （ＲＳ）（紫外可視検出器）、カラム：島津社製Ｓｈｉｍ−ｐａｃｋ ＶＰ−ＯＤＳ ５ μｍ ４．６×１５０ ｍｍ、流速：０．６ ｍＬ／ｍｉｎ、カラム温度：２５℃、移動相Ｄ：ＣＨ_３ＣＮ／Ｈ_２Ｏ／ＨＣＯＯＨ（６５／３５／０．３）。
^１Ｈ−ＮＭＲ分析方法：
^１Ｈ−ＮＭＲは、室温でＢＲＵＫＥＲＡＶＡＮＣＥ−４００ＭＨｚ又はＢＲＵＫＥＲ ＦＯＵＲＩＥＲ−３００ ＭＨｚの核磁気共鳴装置を使用してＤＭＳＯ−ｄ_６及びＣＤＣｌ_３などでＴＭＳを内部標準として測定し、シグナルピークとしてｓ（シングレット）、ｄ（ダブレット）、ｔ（トリプレット）、ｑ（カルテット）、ｍ（マルチプレット）、ｄｄ（ダブルダブレット）で表される。カップリング定数（Ｊ）の単位はヘルツ（Ｈｚ）である。
上記の方法に従って、本発明では、代表的な化合物Ｉ−１〜Ｉ−２０（表１に示す）を調製した。

【0022】

【表1】

以下、具体的な例により本発明をさらに説明しているが、本発明の保護範囲はこれらの例に限定されない。本発明に記載のパーセントは、特に指定がない限り、いずれも重量パーセントを指す。本明細書に記載の数値範囲、例えば、計測単位、反応条件、化合物の物理的状態又はパーセントは、すべて書面による明確な参照を提供するのためである。当業者は、本発明を実施する時に、その範囲以外又は単一の数値と異なる温度、濃度、数量、炭素数などを使用しても期待される結果を得る可能性もある。

【実施例】

【0023】

実施例１ 中間体：２−フルオロ−４−メチル−５−ニトロ安息香酸メチルＩＩａ−２の調製

【化8】

市販のＩＩａ−１（１．００ｇ，５．０ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）及びＳＯＣｌ_２（１５ｍＬ）を丸底フラスコに入れ、８５℃に加熱して２ｈ還流させ、濃縮して得られた黄色油状の粗生成物であるカルボン酸クロリドを次の反応に直接使用した。その粗生成物（１７．６０ｇ，５０．２ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）のＣＨ_２Ｃｌ_２（５０ｍＬ）溶液をＣＨ_３ＯＨ（５０ｍＬ）にゆっくり滴下し、得られた溶液を周囲温度で３０ｍｉｎ撹拌し、濃縮して得られた淡黄色固体の粗生成物としてＩＩａ−２ ２４．６０ｇを次の反応に直接使用した。
実施例２中間体：５−アミノ−２−フルオロ−４−メチル安息香酸メチルＩＩａ−３の調製

【化9】

ＩＩａ−２の粗生成物（２４．６０ｇ，５０．２ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）をＣＨ_３ＯＨ（２００ｍＬ）に溶解させ、水（４０ｍＬ）、ＮＨ_４Ｃｌ（１３．４３ｇ，２５１．０ｍｍｏｌ，５．０ｅｑ）、Ｆｅ粉末（１１．２４ｇ，２００．８ｍｍｏｌ，４．０ｅｑ）を加えた。得られた混合物を７５℃で２ｈ撹拌し、反応が完了するまでＬＣ−ＭＳでモニタリングした。周囲温度まで冷却し、ろ過した。ろ液を濃縮し、粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＣＨ_３ＯＨ＝１２／１）にかけて分離し、淡黄色固体としてＩＩａ−３ ８．０５ｇ（収率８７．７％）を得た。ＬＣ−ＭＳ ＭＳ−ＥＳＩ （ｍ／ｚ） １８４．１ ［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0024】

実施例３中間体：５−（シクロプロピルカルボニルアミノ）−２−フルオロ−４−メチル安息香酸メチルＩＩａ−５の調製

【化10】

ＩＩａ−３（８．０５ｇ，４４．０ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）をＣＨ_２Ｃｌ_２（８０ｍＬ）に溶解させ、ＴＥＡ（１７．７８ｇ，１７６．０ｍｍｏｌ，４．０ｅｑ）を加え、氷／塩浴で０℃に冷却した後、市販のＩＩａ−４（５．５ｇ，５２．８ｍｍｏｌ，１．２ｅｑ）を滴下した。得られた溶液を周囲温度で３ｈ撹拌し、反応が完了するまでＬＣ−ＭＳでモニタリングした。ＣＨ_２Ｃｌ_２（１５０ｍＬ）を加えて反応液を希釈し、水で１回洗浄した。さらに水相をＣＨ_２Ｃｌ_２で２回抽出し、有機相を合わせて濃縮し、淡黄色固体の粗生成物としてＩＩａ−５ １１．５０ｇを得た。ＬＣ−ＭＳ ＭＳ−ＥＳＩ （ｍ／ｚ） ２５２．１ ［Ｍ＋Ｈ］^＋。
実施例４ 中間体：５−（シクロプロピルカルボニルアミノ）−２−フルオロ−４−メチル安息香酸ＩＩａの調製

【化11】

ＩＩａ−５の粗生成物（１１．５０ｇ，４４．０ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）をＴＨＦ（１００ｍＬ）に溶解させ、水（２０ｍＬ）及びＬｉＯＨ・Ｈ_２Ｏ（１８．６５ｇ，４４４．０ｍｍｏｌ，１０．０ｅｑ）を加えた。得られた混合液を周囲温度で１６ｈ撹拌した。反応が完了するまでＴＬＣでモニタリングした。溶媒を濃縮し、水（１００ｍＬ）を加えて希釈し、１Ｎの希塩酸でｐＨ３〜４に調整した。固体をろ過して収集し、ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＣＨ_３ＯＨ（１０／１、１００ｍＬ）でスラリー化して１回洗浄し、加熱乾燥させて白色固体としてＩＩａ ９．０２ｇ（収率８６．７％）を得た。ＬＣ−ＭＳ ＭＳ−ＥＳＩ （ｍ／ｚ） ２３８．１ ［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0025】

実施例５ 中間体：４−クロロ−２−フルオロ−５−ニトロ安息香酸メチルＩＩｂ−２の調製

【化12】

市販のＩＩｂ−１（２．２０ｇ，１０．０ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）及びＳＯＣｌ_２（２５ｍＬ）を丸底フラスコに入れ、８５℃に加熱して２ｈ還流させ、濃縮して得られた黄色油状の粗生成物であるカルボン酸クロリドを次の反応に直接使用した。その粗生成物（２．４０ｇ，１０．０ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）のＣＨ_２Ｃｌ_２（５０ｍＬ）溶液をＣＨ_３ＯＨ（２０ｍＬ）にゆっくり滴下し、得られた溶液を周囲温度で３０ｍｉｎ撹拌し、濃縮して得られた淡黄色固体の粗生成物であるＩＩｂ−２ ２．３４ｇを次の反応に直接使用した。
実施例６中間体：５−アミノ−４−クロロ−２−フルオロ安息香酸メチルＩＩｂ−３の調製

【化13】

ＩＩｂ−２の粗生成物（２．３４ｇ，１０．０ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）をＣＨ_３ＯＨ（２０ｍＬ）に溶解させ、水（５ｍＬ）、ＮＨ_４Ｃｌ（２．６７ｇ，５０．０ｍｍｏｌ，５．０ｅｑ）、Ｆｅ粉末（２．２４ｇ，４０．０ｍｍｏｌ，４．０ｅｑ）を加えた。得られた混合物を７５℃で２ｈ撹拌し、反応が完了するまでＴＬＣでモニタリングした。周囲温度まで冷却し、ろ過した、ケーキをＣＨ_３ＯＨで５回洗浄し、ろ液を濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ（酢酸エチル／ＰＥ（石油エーテル）＝１／２）にかけて分離し、黄色固体としてＩＩｂ−３ １．３３ｇ（収率６５．５％）を得た。ＬＣ−ＭＳ ＭＳ−ＥＳＩ（ｍ／ｚ）２０４．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0026】

実施例７中間体：４−クロロ−５−（シクロプロピルカルボニルアミノ）−２−フルオロ安息香酸メチルＩＩｂ−５の調製

【化14】

ＩＩｂ−３（１．３３ｇ，６．５ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）をＣＨ_２Ｃｌ_２（２０ｍＬ）に溶解させ、ＴＥＡ（２．６４ｇ，２６．２ｍｍｏｌ，４．０ｅｑ）を加え、氷／塩浴で０℃に冷却した後、市販のＩＩａ−４（１．０２ｇ，９．７ｍｍｏｌ，１．５ｅｑ）を滴下した。得られた溶液を周囲温度で１６ｈ撹拌し、反応が完了するまでＴＬＣでモニタリングした。反応液を濃縮し、粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ＰＥ＝１／２）にかけて分離し、黄色固体としてＩＩｂ−５ ５６２．０ｍｇ（収率３１．９％）を得た。ＬＣ−ＭＳ ＭＳ−ＥＳＩ（ｍ／ｚ）２７２．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。
実施例８中間体：４−クロロ−５−（シクロプロピルカルボニルアミノ）−２−フルオロ安息香酸ＩＩｂの調製

【化15】

ＩＩｂ−５の粗生成物（５６２．０ｍｇ，２．１ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）をＴＨＦ（１００ｍＬ）に溶解させ、水（１ｍＬ）及びＬｉＯＨ・Ｈ_２Ｏ（８６８．０ｍｇ，２１．０ｍｍｏｌ，１０．０ｅｑ）を加えた。得られた混合液を周囲温度で１６ｈ撹拌した。反応が完了するまでＴＬＣでモニタリングした。溶媒を濃縮し、水（２０ｍＬ）を加えて希釈し、１Ｎの希塩酸でｐＨ３〜４に調整した。固体をろ過して収集し、ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＣＨ_３ＯＨ（１０／１、１００ｍＬ）でスラリー化して１回洗浄し、加熱乾燥させて白色固体としてＩＩｂ ３５１．２ｍｇ（収率６６．０％）を得た。ＬＣ−ＭＳ ＭＳ−ＥＳＩ（ｍ／ｚ）２５８．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0027】

実施例９ 中間体：４−（シクロプロピルカルボニルアミノ）−ピリジン−２−カルボン酸メチルＩＩｃ−５の調製

【化16】

市販のＩＩｃ−３（１．５２ｇ，１０．０ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）をＣＨ_２Ｃｌ_２（２０ｍＬ）に溶解させ、ＴＥＡ（４．０４ｇ，４０．０ｍｍｏｌ，４．０ｅｑ）を加え、氷／塩浴で０℃に冷却し、市販のＩＩａ−４（１．５６ｇ，１５．０ｍｍｏｌ，１．５ｅｑ）を滴下し、得られた溶液を周囲温度で１６ｈ撹拌した。反応が完了するまでＴＬＣでモニタリングした。反応液を濃縮し、粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ＰＥ＝１／２）にかけて分離し、黄色固体としてＩＩｃ−５ １．５６ｇ（収率７０．９％）を得た。ＬＣ−ＭＳ ＭＳ−ＥＳＩ（ｍ／ｚ）２２１．４［Ｍ＋Ｈ］^＋。
実施例１０ 中間体：４−（シクロプロピルカルボニルアミノ）−ピリジン−２−カルボン酸ＩＩｃの調製

【化17】

ＩＩｃ−５（１．５６ｇ，７．１ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）をＴＨＦ（２０ｍＬ）に溶解させ、水（２ｍＬ）及びＬｉＯＨ・Ｈ_２Ｏ（２．９８ｇ，７０．９ｍｍｏｌ，１０．０ｅｑ）を加え、得られた混合液を周囲温度で１６ｈ撹拌した。反応液を濃縮し、水（２０ｍＬ）を加えて希釈し、１Ｎの希塩酸でｐＨ３〜４に調整し、大量の固体が析出するまでに濃縮し、固体をろ過して収集し、加熱乾燥させて白色固体としてＩＩｃ １．３５ｇ（収率９２．５％）を得た。ＬＣ−ＭＳ ＭＳ−ＥＳＩ（ｍ／ｚ）２０７．４［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0028】

実施例１１ 中間体：４−（シクロプロピルカルボニルアミノ）−５−フルオロピリジン−２−カルボン酸メチルＩＩｄ−５の調製

【化18】

市販のＩＩｄ−３（１．８４ｇ，１０．０ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）をＣＨ_２Ｃｌ_２（２０ｍＬ）に溶解させ、ＴＥＡ（４．０４ｇ，４０．０ｍｍｏｌ，４．０ｅｑ）を加え、氷／塩浴で０℃に冷却し、ＩＩａ−４（１．５６ｇ，１５．０ｍｍｏｌ，１．５ｅｑ）を加え、得られた溶液を周囲温度で１６ｈ撹拌し、生成物が発生することをＴＬＣでモニタリングした。反応液を濃縮し、粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ＰＥ＝１／１）にかけて分離し、淡黄色固体としてジシクロプロピルカルボニルアミノ中間体 ９４１．０ｍｇ（収率 ２９．４％）を得た。ＬＣ−ＭＳ ＭＳ−ＥＳＩ（ｍ／ｚ）３２１．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。該中間体（９４１．０ｍｇ，２．９ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）を７ＭのＮＨ_３のメタノール溶液（１０ｍＬ）に溶解させ、得られた溶液を周囲温度で１ｈ撹拌し、反応が完了するまでＬＣ−ＭＳでモニタリングした。反応液を濃縮し、淡黄色固体の粗生成物としてＩＩｄ−５ １．２７ｇを得た。ＬＣ−ＭＳ ＭＳ−ＥＳＩ（ｍ／ｚ）２５３．３［Ｍ＋Ｈ］^＋。
実施例１２ 中間体：４−（シクロプロピルカルボニルアミノ）−５−フルオロピリジン−２−カルボン酸ＩＩｄの調製

【化19】

ＩＩｄ−５粗生成物（１．２７ｇ，２．９ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）をＴＨＦ（１５ｍＬ）に溶解させ、水（３ｍＬ）及びＬｉＯＨ・Ｈ_２Ｏ（１．２２ｇ，２．９ｍｍｏｌ，１０．０ｅｑ）を加えた。得られた混合物を周囲温度で２ｈ撹拌し、反応が完了するまでＴＬＣでモニタリングした。反応液を濃縮し、水（１５ｍＬ）を加えて希釈し、１Ｎの希塩酸でｐＨ３〜４に調整し、固体をろ過して収集し、加熱乾燥させて白色固体としてＩＩｄ ４９４．０ｍｇ（収率７６．１％）を得た。ＬＣ−ＭＳ ＭＳ−ＥＳＩ（ｍ／ｚ）２２５．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0029】

実施例１３ 中間体：６−アミノ−２−ピリジンカルボキサミドＩＩＩａ−２の調製

【化20】

市販のＩＩＩａ−１（１０．００ｇ，６６．０ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）をそれぞれ採取し、メタノール（２００ｍＬ）、ヒドラジン水和物（６６．０７ｇ，１３２．０ｍｍｏｌ，２．０ｅｑ）を順次に加え、２ｈ加熱して還流させ、反応が完了するまでＴＬＣでモニタリングした。反応液の大部分の溶媒を濃縮し、吸引ろ過し、ＥｔＯＡｃで洗浄し、加熱乾燥させた。白色固体としてＩＩＩａ−２ １０．２０ｇを得た。ＬＣ−ＭＳ ＭＳ−ＥＳＩ（ｍ／ｚ）１５２．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。
実施例１４ 中間体：（Ｅ）−Ｎ’−（６−（２−（（Ｅ）−（ジメチルアミノ）メチレン）ヒドラジン−１−カルボニル）ピリジン−２−イル）−Ｎ，Ｎ’−ジメチルホルムイミドＩＩＩａ−３の調製

【化21】

ＩＩＩａ−２（１０．２０ｇ，６６．０ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）をそれぞれ採取し、市販のＤＭＦ−ＤＭＡ（１００ｍＬ）を加え、８ｈ加熱還流し、反応が完了するまでＴＬＣでモニタリングした、室温まで冷却し、反応液を濃縮し、吸引ろ過し、ＥｔＯＡｃで洗浄し、加熱乾燥させた。黄色固体としてＩＩＩａ−３ １４．００ｇ（収率８２．０％）を得た。ＬＣ−ＭＳ ＭＳ−ＥＳＩ（ｍ／ｚ）２６２．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0030】

実施例１５中間体：６−（４−イソプロピル−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）ピリジン−２−アミンＩＩＩａの調製

【化22】

ＩＩＩａ−３（１．００ｇ，３．８ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）及びＩＩＩａ−４（１．３ｍＬ、１５．３ｍｍｏｌ，４．０ｅｑ）をそれぞれ採取してＣＨ_３ＣＮ／ＡｃＯＨ（２／１、３０ｍＬ）に溶解させ、９５℃に加熱し、２４ｈ反応させ、反応が完了するまでＬＣ−ＭＳでモニタリングし、溶媒を濃縮し、粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＣＨ_３ＯＨ＝１０／１）にかけて分離し、粘稠固体としてＩＩＩａ ４９０．０ｍｇ（収率６３．３％）を得た。ＬＣ−ＭＳ ＭＳ−ＥＳＩ（ｍ／ｚ）２０４．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。
実施例１６中間体：６−（４−シクロプロピル−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）ピリジン−２−アミンＩＩＩｂの調製

【化23】

ＩＩＩａ−３（１．００ｇ，３．８ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）及びＩＩＩｂ−４（１．１ｍＬ、１５．３ｍｍｏｌ，４．０ｅｑ）をそれぞれ採取してＣＨ_３ＣＮ／ＡｃＯＨ（２／１、３０ｍＬ）に溶解させ、９５℃に加熱し、２４ｈ反応させ、反応が完了するまでＬＣ−ＭＳでモニタリングし、溶媒を濃縮し、粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＣＨ_３ＯＨ＝１０／１）にかけて分離し、粘稠固体としてＩＩＩｂ ６２０．０ｍｇ（収率８０．８％）を得た。ＬＣ−ＭＳ ＭＳ−ＥＳＩ（ｍ／ｚ）２０２．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0031】

実施例１７ 中間体：（Ｓ）−６−（４−（１，１，１−トリフルオロプロピル−２−イル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）ピリジン−２−アミンＩＩＩｃの調製

【化24】

ＩＩＩａ−３（１．００ｇ，３．８ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）及びＩＩＩｃ−４（２．２７ｇ，１５．３ｍｍｏｌ，４．０ｅｑ）をそれぞれ採取してＣＨ_３ＣＮ／ＡｃＯＨ（２／１、３０ｍＬ）に溶解させ、９５℃に加熱し、２４ｈ反応させ、反応が完了するまでＬＣ−ＭＳでモニタリングし、溶媒を濃縮し、粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＣＨ_３ＯＨ＝１０／１）にかけて分離し、粘稠固体としてＩＩＩｃ ７００．０ｍｇ（収率７１．５％）を得た。ＬＣ−ＭＳ ＭＳ−ＥＳＩ（ｍ／ｚ）２５８．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。
実施例１８ 中間体：６−（４−（２，２，２−トリフルオロエチル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）ピリジン−２−アミンＩＩＩｄの調製

【化25】

ＩＩＩａ−３（１．００ｇ，３．８ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）及びＩＩＩｄ−４（２．０６ｇ，１５．３ｍｍｏｌ，４．０ｅｑ）をそれぞれ採取してＣＨ_３ＣＮ／ＡｃＯＨ（２／１、３０ｍＬ）に溶解させ、９５℃に加熱し、２４ｈ反応させ、反応が完了するまでＬＣ−ＭＳでモニタリングし、溶媒を濃縮し、粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＣＨ_３ＯＨ＝１０／１）にかけて分離し、粘稠固体としてＩＩＩｄ ５００．０ｍｇ（収率５４．０％）を得た。ＬＣ−ＭＳ ＭＳ−ＥＳＩ（ｍ／ｚ）２４４．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0032】

実施例１９ 中間体：（Ｒ）−６−（４−（１，１，１−トリフルオロプロピル−２−イル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）ピリジン−２−アミンＩＩＩｅの調製

【化26】

ＩＩＩａ−３（１．００ｇ，３．８ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）及びＩＩＩｅ−４（２．２７ｇ，１５．３ｍｍｏｌ，４．０ｅｑ）をそれぞれ採取してＣＨ_３ＣＮ／ＡｃＯＨ（２／１、３０ｍＬ）に溶解させ、９５℃に加熱し、２４ｈ反応させ、反応が完了するまでＬＣ−ＭＳでモニタリングし、溶媒を濃縮し、粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＣＨ_３ＯＨ＝１０／１）にかけて分離し、粘稠固体としてＩＩＩｅ ７００．０ｍｇ（収率７１．５％）を得た。ＬＣ−ＭＳ ＭＳ−ＥＳＩ（ｍ／ｚ）２５８．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。
実施例２０ 中間体：（Ｒ）−６−（４−（１−メトキシプロピル−２−イル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）ピリジン−２−アミンＩＩＩｆの調製

【化27】

ＩＩＩａ−３（２６０．０ｍｇ，１．０ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）及びＩＩＩｆ−４（４４５．５ｍｇ，５．０ｍｍｏｌ，５．０ｅｑ）をそれぞれ採取してＣＨ_３ＣＮ／ＡｃＯＨ（４／１、２５ｍＬ）に溶解させ、２４ｈ加熱還流し、反応液を濃縮し、水を加えて抽出し、１Ｎ ＮａＯＨ溶液でｐＨ１０に調整し、ＥｔＯＡｃで３回抽出し、無水ＭｇＳＯ_４で乾燥させ、有機相を濃縮し、黄色固体としてＩＩＩｆ １８０．０ｍｇ（収率３８．０％）を得た。ＬＣ−ＭＳ ＭＳ−ＥＳＩ（ｍ／ｚ）２３３．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0033】

実施例２１ 中間体：６−（４−（（２Ｒ）−１−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキサ）プロパン−２−イル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）ピリジン−２−アミンＩＩＩｇの調製

【化28】

ＩＩＩａ−３（３．００ｇ，１１．５ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）及び市販のＩＩＩｇ−４（３．４３ｇ，４５．８ｍｍｏｌ，４．０ｅｑ）をそれぞれ採取してＣＨ_３ＣＮ／ＡｃＯＨ（４／１，３７．５ｍＬ）に溶解させ、得られた溶液を９２℃で２４ｈ撹拌しながら還流し、反応が完了するまでＴＬＣでモニタリングし、周囲温度まで冷却し、濃縮した。水を加えて希釈し、１Ｎ ＮａＯＨ溶液でｐＨ８に調整し、濃縮した。得られた固体をＣＨ_２Ｃｌ_２／ＣＨ_３ＯＨ（１０／１，１００ｍＬ）でスラリー化し、ろ過したろ液を濃縮し、淡黄色粘稠固体として粗生成物ＩＩＩｇ’ ７．４０ｇを得た。ＬＣ−ＭＳ ＭＳ−ＥＳＩ（ｍ／ｚ）２２０．４［Ｍ＋Ｈ］^＋。ＩＩＩｇ’（１．１０ｇ，５．０ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）をＣＨ_２Ｃｌ_２（３０ｍＬ）に溶解させ、市販のジヒドロピラン（８４０．０ｍｇ，１０．０ｍｍｏｌ，２．０ｅｑ）及びｐ−トルエンスルホン酸（ＴｓＯＨ）（１７２．０ｍｇ，１．０ｍｍｏｌ，０．２ｅｑ）を加えた。得られた混合溶液を周囲温度で１６ｈ撹拌し、反応が完了するまでＬＣ−ＭＳでモニタリングした。ＣＨ_２Ｃｌ_２（１５０ｍＬ）を加えて希釈し、飽和ＮａＨＣＯ_３溶液（１５０ｍＬ）で１回洗浄した。さらに水相をＣＨ_２Ｃｌ_２／ＣＨ_３ＯＨ（１０／１、１００ｍＬ）で７回抽出した。有機相を合わせて濃縮し、粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＣＨ_３ＯＨ＝１２／１，６／１，４／１）にかけて分離し、白色固体としてＩＩＩｇ ２８１．２ｍｇ（収率１８．５％）を得た。ＬＣ−ＭＳ ＭＳ−ＥＳＩ（ｍ／ｚ）３０３．９［Ｍ＋Ｈ］^＋。
実施例２２ 化合物：５−（シクロプロピルカルボニルアミノ）−２−フルオロ−４−メチル−Ｎ−（６−（４−イソプロピル−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）ピリジン−２−イル）ベンズアミドＩ−１の調製

【化29】

ＩＩａ（２３７．０ｍｇ，１．０ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）をＳＯＣｌ_２（５ｍＬ）に懸濁させ、６０℃に加熱し、すべての原料が溶解するまで１５ｍｉｎ反応させ、濃縮し、黄色固体としてカルボン酸クロリドを得、次の反応に直接使用した。カルボン酸クロリドを超脱水ＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶解させ、ＴＥＡ（０．５ｍＬ）及びＩＩＩａ（１０２．０ｍｇ，０．５ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）を加え、得られた溶液を６５℃で３ｈ撹拌し、反応が完了するまでＬＣ−ＭＳでモニタリングした。周囲温度まで冷却し、濃縮し、粗生成物を分取ＴＬＣ（ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＣＨ_３ＯＨ＝１５／１）にかけて分離し、淡黄色固体としてＩ−１ １５．０ｍｇ（収率７．１％）を得た。ＬＣ−ＭＳ ＭＳ−ＥＳＩ（ｍ／ｚ）４２３．０［Ｍ＋Ｈ］。^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ｐｐｍ １０．７（ｓ，１Ｈ）、９．６７（ｓ，１Ｈ）、８．８５（ｓ，１Ｈ）、８．１８（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）、８．０２（ｔ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．８８（ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，１Ｈ）、７．７６（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．２７（ｄ，Ｊ＝１１．０Ｈｚ，１Ｈ）、５．６３−５．６６（ｍ，１Ｈ）、２．２９（ｓ，３Ｈ）、１．８８−１．９１（ｍ，１Ｈ）、１．４３（ｄ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，６Ｈ）、０．８０−０．８６（ｍ，４Ｈ）。

【0034】

実施例２３ 化合物：５−（シクロプロピルカルボニルアミノ）−２−フルオロ−４−メチル−Ｎ−（６−（４−シクロプロピル−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）ピリジン−２−イル）ベンズアミドＩ−２の調製

【化30】

ＩＩａ（２３７．０ｍｇ，１．０ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）をＳＯＣｌ_２（５ｍＬ）に懸濁させ、６０℃に加熱し、すべての原料が溶解するまで１５ｍｉｎ反応させ、濃縮し、黄色固体としてカルボン酸クロリドを得、次の反応に直接使用した。カルボン酸クロリドを超脱水ＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶解させ、ＴＥＡ（０．５ｍＬ）及びＩＩＩｂ（１００．０ｍｇ，０．５ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）を加え、得られた溶液を６５℃で３ｈ撹拌し、反応が完了するまでＬＣ−ＭＳでモニタリングした。周囲温度まで冷却し、濃縮し、粗生成物を分取ＴＬＣ（ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＣＨ_３ＯＨ＝１５／１）にかけて分離し、類白色固体としてＩ−２ ５．５ｍｇ（収率２．６％）を得た。ＬＣ−ＭＳ ＭＳ−ＥＳＩ（ｍ／ｚ）４２１．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ｐｐｍ １０．７（ｓ，１Ｈ）、９．９０（ｓ，１Ｈ）、８．６３（ｓ，１Ｈ）、８．２２（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ）、８．０２（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．８４（ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，１Ｈ）、７．６７（ｓ，１Ｈ）、７．２４（ｄ，Ｊ＝１０．８Ｈｚ，１Ｈ）、４．１７−４．１８（ｍ，１Ｈ）、２．２９（ｓ，３Ｈ）、１．９８（ｍ，１Ｈ）、１．３４−１．３８（ｍ，４Ｈ）、１．０８−１．１３（ｍ，４Ｈ）。
実施例２４ 化合物：（Ｓ）−５−（シクロプロピルカルボニルアミノ）−２−フルオロ−４−メチル−Ｎ−（６−（４−（１，１，１−トリフルオロプロピル−２−イル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）ピリジン−２−イル）ベンズアミドＩ−３の調製

【化31】

ＩＩａ（２３７．０ｍｇ，１．０ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）をＳＯＣｌ_２（５ｍＬ）に懸濁させ、６０℃に加熱し、すべての原料が溶解するまで１５ｍｉｎ反応させ、濃縮し、黄色固体としてカルボン酸クロリドを得、次の反応に直接使用した。カルボン酸クロリドを超脱水ＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶解させ、ＴＥＡ（０．５ｍＬ）及びＩＩＩｃ（１３０．０ｍｇ，０．５ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）を加え、得られた溶液を６５℃で３ｈ撹拌し、反応が完了するまでＬＣ−ＭＳでモニタリングした。周囲温度まで冷却し、濃縮し、粗生成物を分取ＴＬＣ（ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＣＨ_３ＯＨ＝２０／１）にかけて分離し、類白色固体としてＩ−３ ３９．４ｍｇ（収率１６．５％）を得た。ＬＣ−ＭＳ ＭＳ−ＥＳＩ（ｍ／ｚ）４７７．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ｐｐｍ １０．９（ｓ，１Ｈ）、９．６８（ｓ，１Ｈ）、９．１１（ｓ，１Ｈ）、８．１３（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ）、８．０４（ｔ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．９８（ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，１Ｈ）、７．７５（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．２９（ｄ，Ｊ＝１０．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．１１−７．１４（ｍ，１Ｈ）、２．２９（ｓ，３Ｈ）、１．８５−１．８９（ｍ，１Ｈ）、１．８０（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，３Ｈ）、０．７９−０．８１（ｍ，４Ｈ）。

【0035】

実施例２５ 化合物：５−（シクロプロピルカルボニルアミノ）−２−フルオロ−４−メチル−Ｎ−（６−（４−（２，２，２−トリフルオロエチル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）ピリジン−２−イル）ベンズアミドＩ−４の調製

【化32】

ＩＩａ（２３７．０ｍｇ，１．０ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）をＳＯＣｌ_２（５ｍＬ）に懸濁させ、６０℃に加熱し、すべての原料が溶解するまで１５ｍｉｎ反応させ、濃縮し、黄色固体としてカルボン酸クロリドを得、次の反応に直接使用した。カルボン酸クロリドを超脱水ＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶解させ、ＴＥＡ（０．５ｍＬ）及びＩＩＩｄ（１２１．０ｍｇ，０．５ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）を加え、得られた溶液を６５℃で３ｈ撹拌し、反応が完了するまでＬＣ−ＭＳでモニタリングした。周囲温度まで冷却し、濃縮し、粗生成物を分取ＴＬＣ（ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＣＨ_３ＯＨ＝１５／１）にかけて分離し、淡黄色固体としてＩ−４５．０ｍｇ（収率２．１％）を得た。ＬＣ−ＭＳ ＭＳ−ＥＳＩ（ｍ／ｚ）４６３．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ｐｐｍ １１．０（ｓ，１Ｈ）、９．７０（ｓ，１Ｈ）、８．７７（ｓ，１Ｈ）、８．１７（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）、８．０６（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ）、７．９５（ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，１Ｈ）、７．７５（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．２８−７．３０（ｍ，１Ｈ）、５．９４−５．９７（ｍ、２Ｈ）、２．３０（ｓ，３Ｈ）、１．８８−１．９１（ｍ，１Ｈ）、０．８０−０．８２（ｍ，４Ｈ）。
実施例２６ 化合物：（Ｒ）−５−（シクロプロピルカルボニルアミノ）−２−フルオロ−４−メチル−Ｎ−（６−（４−（１，１，１−トリフルオロプロピル−２−イル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）ピリジン−２−イル）ベンズアミドＩ−５の調製

【化33】

ＩＩａ（２３７．０ｍｇ，１．０ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）及びＳＯＣｌ_２（１０ｍＬ）を６０℃に加熱し、すべての原料が溶解するまで１５ｍｉｎ反応させ、濃縮し、黄色固体としてカルボン酸クロリドを得、次の反応に直接使用した。カルボン酸クロリドを超脱水ＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶解させ、ＴＥＡ（１ｍＬ）及びＩＩＩｅ（２５７．１ｍｇ，１．０ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）を加え、得られた溶液を６５℃で２ｈ撹拌し、反応が完了するまでＬＣ−ＭＳでモニタリングした。周囲温度まで冷却し、濃縮し、粗生成物を分取ＴＬＣ（ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＣＨ_３ＯＨ＝１２／１、ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＣＨ_３ＯＨ／ＨＣＯＯＨ＝１２／１／１）にかけて２回分離し、白色固体としてＩ−５ ４８．９ｍｇ（収率１０．３％）を得た。ＬＣ−ＭＳ ＭＳ−ＥＳＩ（ｍ／ｚ）４７７．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ｐｐｍ １０．９（ｓ，１Ｈ）、９．７４（ｓ，１Ｈ）、９．１４（ｓ，１Ｈ）、８．１５（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ）、８．０５（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ）、７．９８（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ）、７．７５（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．３０（ｄ，Ｊ＝１０．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．１２−７．１６（ｍ，１Ｈ）、２．３０（ｓ，３Ｈ）、１．９０−１．９３（ｍ，１Ｈ）、１．８１（ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，３Ｈ）、０．８０−０．８２（ｍ，４Ｈ）。

【0036】

実施例２７化合物：（Ｒ）−５−（シクロプロピルカルボニルアミノ）−２−フルオロ−Ｎ−６−（４−（１−メトキシプロピル−２−イル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）ピリジン−２−イル）−４−メチルベンズアミドＩ−６の調製

【化34】

ＩＩａ（２００．０ｍｇ，０．８４ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）及びＳＯＣｌ_２（３ｍＬ）を６０℃に加熱し、すべての固体が溶解するまで反応させ、濃縮し、黄色固体としてカルボン酸クロリドを得、次の反応に直接使用した。カルボン酸クロリドを超脱水ＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶解させ、ＴＥＡ（１ｍＬ）及びＩＩＩｆ（１９６．０ｍｇ，０．８４ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）を加え、得られた溶液を６５℃で２ｈ撹拌し、反応が完了するまでＬＣ−ＭＳでモニタリングした。周囲温度まで冷却し、濃縮し、粗生成物を分取ＴＬＣ（ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＣＨ_３ＯＨ＝１２／１）にかけて分離し、白色固体としてＩ−６ ２０．０ｍｇ（収率５．０％）を得た。ＬＣ−ＭＳ ＭＳ−ＥＳＩ（ｍ／ｚ）４５３．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ｐｐｍ １０．７（ｓ，１Ｈ）、９．６８（ｓ，１Ｈ）、８．８２（ｓ，１Ｈ）、８．１７（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）、８．０２（ｔ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ）、７．８９（ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ）、７．７６（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，１Ｈ）、７．２７（ｄ，Ｊ＝１１．０Ｈｚ，１Ｈ）、５．８２−５．８６（ｍ，１Ｈ）、３．６３−３．６８（ｍ，１Ｈ）、３．５１−３．５５（ｍ，１Ｈ）、３．１６（ｓ，３Ｈ）、２．２９（ｓ，３Ｈ）、１．９０（ｍ，１Ｈ）、１．４３（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）、０．８０−０．８５（ｍ，４Ｈ）。
実施例２８化合物：（Ｒ）−５−（シクロプロピルカルボニルアミノ）−２−フルオロ−Ｎ−６−（４−（１−ヒドロキシプロピル−２−イル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）ピリジン−２−イル）−４−メチルベンズアミドＩ−７の調製

【化35】

ＩＩａ（２０３．０ｍｇ，０．８６ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）とＳＯＣｌ_２（１０ｍＬ）との混合物をすべての固体が溶解するまで加熱し、濃縮し、黄色固体としてカルボン酸クロリドを得、次の反応に直接使用した。カルボン酸クロリドを超脱水ＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶解させ、ＴＥＡ（１ｍＬ）及びＩＩＩｇ（２８０．０ｍｇ，０．９３ｍｍｏｌ，１．１ｅｑ）を加え、得られた溶液を６５℃で２．５ｈ撹拌し、反応が完了するまでＬＣ−ＭＳでモニタリングした。周囲温度まで冷却し、濃縮し、粗生成物を分取ＴＬＣ（ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＣＨ_３ＯＨ＝１２／１）にかけて分離し、オレンジ色の化合物としてＩ−７’３２０．０ｍｇ（収率７１．７％）を得た。ＬＣ−ＭＳ ＭＳ−ＥＳＩ（ｍ／ｚ）５２３．３［Ｍ＋Ｈ］^＋。
Ｉ−７’（１５６．６ｍｇ，０．３０ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）をＣＨ_３ＯＨ（５ｍＬ）に溶解させ、ＴｓＯＨ（１０３．２ｍｇ，０．６０ｍｍｏｌ，２．０ｅｑ）を加えた。得られた溶液を周囲温度で１６ｈ撹拌し、反応が完了するまでＬＣ−ＭＳでモニタリングした。反応液を濃縮し、粗生成物を分取ＴＬＣ（ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＣＨ_３ＯＨ＝１２／１）にかけて分離し、淡黄色固体としてＩ−７３４．０ｍｇ（収率２５．９％）を得た。ＬＣ−ＭＳ ＭＳ−ＥＳＩ（ｍ／ｚ）４３９．３［Ｍ＋Ｈ］^＋。^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ｐｐｍ ９．６３（ｓ，１Ｈ）、８．７６（ｓ，１Ｈ）、７．７６（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，１Ｈ）、７．２６（ｄ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，１Ｈ）、７．２０（ｓ，１Ｈ）、７．１４−７．１７（ｍ，１Ｈ）、６．４８（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）、６．１１（ｓ、２Ｈ）、５．８９−５．９３（ｍ，１Ｈ）、４．５８（ｄ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，２Ｈ）、２．２５（ｓ，３Ｈ）、１．８７（ｔ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，１Ｈ）、１．５７（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ）、０．８１−０．８５（ｍ，４Ｈ）。

【0037】

実施例２９中間体：（Ｓ）−２−（４−（１，１，１−トリフルオロプロピル−２−イル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）チアゾール−４−アミンＩＩＩｈの調製

【化36】

−７０℃、Ｎ_２保護下で、ｎ−ＢｕＬｉのＴＨＦ（２．５Ｍ、２７．５ｍｍｏｌ，１１ｍＬ、１．１ｅｑ）溶液を市販のＩＩＩ’−１（６．００ｇ，２４．７ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）に滴下し、反応液を−７０℃に保持しながら１ｈ撹拌した後、ＣＯ_２を導入し、その低温の条件下で１ｈ撹拌し続け、次に反応液に水を加え、ジエチルエーテル（Ｅｔ_２Ｏ）で抽出し、水層を２Ｎ 希塩酸でｐＨ２に調整し、さらにＥｔＯＡｃで抽出し、有機層を合わせ、乾燥させ、濃縮して白色固体としてＩＩＩ’−２ ４．５０ｇ（収率８７．５％）を得た。ＬＣ−ＭＳ ＭＳ−ＥＳＩ（ｍ／ｚ）２０７．０［Ｍ−Ｈ］⁻。^１Ｈ−ＮＭＲ（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δｐｐｍ ８．２２（ｓ，１Ｈ）。
ＩＩＩ’−２（８．３５ｇ，４０．１ｍｍｏｌ，１．２ｅｑ）をＣＨ_２Ｃｌ_２（１００ｍＬ）に溶解させ、それに周囲温度でＨＡＴＵ（１２．７ｇ，３３．４ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）、市販のＩＩＩｃ−４（５．００ｇ，３３．４ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）及びＴＥＡ（１０．１０ｇ，１００．０ｍｍｏｌ，３．０ｅｑ）を加え、３ｈ撹拌し続け、反応が完了するまでＴＬＣでモニタリングした。反応液を濃縮し、粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝１５／１）にかけて分離し、白色固体としてＩＩＩ’−３９．６０ｇ（収率９４．８％）を得た。ＬＣ−ＭＳ ＭＳ−ＥＳＩ（ｍ／ｚ）３０２．０［Ｍ−Ｈ］⁻。^１Ｈ−ＮＭＲ（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δｐｐｍ７．５５（ｓ，１Ｈ）、４．８８−４．８０（ｍ，１Ｈ）、１．４８（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ）。
ＩＩＩ’−３（９．６０ｇ，３１．７ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）をトルエンに溶解させ、Ｌａｗｅｓｓｏｎ’ｓ Ｒｅａｇｅｎｔ（１９．２０ｇ，４７．５ｍｍｏｌ，１．５ｅｑ）を室温で加えた。その混合物を１２０℃に加熱して一晩反応させ、反応が完了するまでＴＬＣでモニタリングした。反応液を濃縮し、粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝１５／１−１０／１）にかけて分離し、黄色油状物としてＩＩＩ’−４９．９６ｇ（収率９８．０％）を得た。ＬＣ−ＭＳ ＭＳ−ＥＳＩ（ｍ／ｚ）３１８．０［Ｍ−Ｈ］⁻。^１Ｈ−ＮＭＲ（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δｐｐｍ８．８８−８．８５（ｍ，１Ｈ）、７．５３（ｓ，１Ｈ）、５．５０−５．４２（ｍ，１Ｈ）、１．５５（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，３Ｈ）。

【0038】

ＩＩＩ’−４（９．９６ｇ，３１．２ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）をヒドラジン水和物（５１．５ｇ，１．０３ ｍｏｌ，３３．０ｅｑ）に溶解させ、その混合物を１２５℃に加熱して１．５ｈ反応させ、反応が完了するまでＴＬＣでモニタリングした。反応液を濃縮し、粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝１０／１−３／１）にかけて分離し、黄色油状物としてＩＩＩ’−５４．９５ｇ（収率５０．０％）を得た。ＬＣ−ＭＳ ＭＳ−ＥＳＩ（ｍ／ｚ）３１６．１［Ｍ−Ｈ］⁻。
ＩＩＩ’−５（４．９５ｇ，１５．６ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）をＣ_２Ｈ_５ＯＨ（５０ｍＬ）に溶解させ、ＣＨ（ＯＣ_２Ｈ_５）_３（１１．６ｇ，７８．０ｍｍｏｌ，５．０ｅｑ）及び触媒量の濃硫酸（０．０５ｍＬ）を室温で加えた。その混合物を室温で保持しながら２ｈ反応させ、反応が完了するまでＴＬＣでモニタリングした。反応液を濃縮し、粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝１５／１−３／１）にかけて分離し、黄色油状物としてＩＩＩ’−６５．００ｇ（収率９８．０％）を得た。ＬＣ−ＭＳ ＭＳ−ＥＳＩ（ｍ／ｚ）３２８．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。^１Ｈ−ＮＭＲ（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δｐｐｍ８．４５（ｓ，１Ｈ）、７．４１（ｓ，１Ｈ）、６．５４−６．４５（ｍ，１Ｈ）、１．８２（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ）。
ＩＩＩ’−６（５．００ｇ，１５．３ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）を１，４−ジオキサン及び水（４／１，７５ｍＬ）に溶解させ、Ｎ_２の保護下で、それにベンゾフェノンイミン（５．５４ｇ，３０．６ｍｍｏｌ，２．０ｅｑ）、Ｋ_２ＣＯ_３（４．２２ｇ，３０．６ｍｍｏｌ，２．０ｅｑ）、Ｐｄ_２（ｄｂａ）_３（１．４０ｇ，１．５４ｍｍｏｌ，０．１ｅｑ）及びＸａｎｔｐｈｏｓ（３．２４ｇ，７．６４ｍｍｏｌ，０．５ｅｑ）を加えた。その混合物を１００℃に加熱して一晩反応させ、反応が完了するまでＴＬＣでモニタリングした。水（３０ｍＬ）で反応液を希釈し、ＥｔＯＡｃで３回抽出し、有機相を合わせて粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝１０／１−１／３）にかけて分離し、得黄色油状物としてＩＩＩ’−７３．００ｇ（収率４６．０％）を得た。ＬＣ−ＭＳ ＭＳ−ＥＳＩ（ｍ／ｚ）４２８．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。^１Ｈ−ＮＭＲ（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δｐｐｍ８．３４（ｓ，１Ｈ）、７．８０−７．７８（ｍ、２Ｈ）、７．５３（ｄ，Ｊ＝０．６Ｈｚ，１Ｈ）、７．４７−７．４４（ｍ、２Ｈ）、７．３８−７．２８（ｍ、３Ｈ）、７．２１−７．１８（ｍ、２Ｈ）、６．６８（ｓ，１Ｈ）、６．０５−５．９７（ｍ，１Ｈ）、１．６０（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ）。
ＩＩＩ’−７（３．００ｇ，３．８ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）を２Ｎ 希塩酸及びＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）に溶解させ、その混合物を室温で撹拌しながら一晩反応させ、反応が完了するまでＴＬＣでモニタリングした。反応液を濃縮し、粗生成物を分取ＨＰＬＣにかけて分離し、黄色固体としてＩＩＩｈ０．４５ｇ（収率３５．０％）を得た。ＬＣ−ＭＳ ＭＳ−ＥＳＩ（ｍ／ｚ）２６４．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。^１Ｈ−ＮＭＲ（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δｐｐｍ９．２７（ｓ，１Ｈ）、７．２０（ｓ，１Ｈ）、６．４８−６．４１（ｍ，１Ｈ）、１．８３（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ）。

【0039】

実施例３０ 化合物：（Ｓ）−５−（シクロプロピルカルボニルアミノ）−２−フルオロ−４−メチル−Ｎ−２−（４−（１，１，１−トリフルオロプロピル−２−イル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）チアゾール−４−イル）ベンズアミドＩ−８の調製

【化37】

ＩＩａ（１００．０ｍｇ，０．４２ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）とＳＯＣｌ_２（６ｍＬ）との混合物を固体が完全に溶解するまで加熱し、濃縮し、黄色固体としてカルボン酸クロリドを得、次の反応に直接使用した。カルボン酸クロリドを超脱水ＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶解させ、ＴＥＡ（１ｍＬ）及び自製のＩＩＩｈ塩酸塩（５０．０ｍｇ，０．１７ｍｍｏｌ，０．４ｅｑ）を加え、得られた溶液を６５℃で２ｈ撹拌し、反応が完了するまでＬＣ−ＭＳでモニタリングした。周囲温度まで冷却し、濃縮し、粗生成物を分取ＴＬＣ（ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＣＨ_３ＯＨ＝１２／１、ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＣＨ_３ＯＨ／ＨＣＯＯＨ＝１２／１／１、ＥｔＯＡｃ／ＰＥ＝２／１）にかけて３回分離し、白色固体としてＩ−８１８．５ｍｇ（収率９．２％）を得た。ＬＣ−ＭＳ ＭＳ−ＥＳＩ（ｍ／ｚ）４８２．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ｐｐｍ １１．４（ｓ，１Ｈ）、９．６７（ｓ，１Ｈ）、９．２２（ｓ，１Ｈ）、７．９５（ｓ，１Ｈ）、７．７３（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，１Ｈ）、７．２６（ｄ，Ｊ＝１１．０Ｈｚ，１Ｈ）、６．６２（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ）、２．２７（ｓ，３Ｈ）、１．８８−１．９１（ｍ，１Ｈ）、１．８３（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ）、０．８０（ｄ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，４Ｈ）。
実施例３１ 化合物：（Ｓ）−４−クロロ−５−（シクロプロピルカルボニルアミノ）−２−フルオロ−Ｎ−（６−（４−（１，１，１−トリフルオロプロピル−２−イル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）ピリジン−２−イル）ベンズアミドＩ−９の調製

【化38】

ＩＩｂ（１３０．０ｍｇ，０．５ｍｍｏｌ，２．０ｅｑ）とＳＯＣｌ_２（６ｍＬ）との混合物を固体が完全に溶解するまで加熱し、濃縮し、黄色固体としてカルボン酸クロリドを得、次の反応に直接使用した。カルボン酸クロリドを超脱水ＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶解させ、ＴＥＡ（１ｍＬ）及びＩＩＩｃ（６５．０ｍｇ，０．３ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）を加え、得られた溶液を６５℃で３ｈ撹拌し、反応が完了するまでＬＣ−ＭＳでモニタリングした。濃縮し、粗生成物を分取ＴＬＣ（ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＣＨ_３ＯＨ＝２０／１）にかけて分離し、淡黄色固体としてＩ−９６．０ｍｇ（収率４．８％）を得た。ＬＣ−ＭＳ ＭＳ−ＥＳＩ（ｍ／ｚ）４９７．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0040】

実施例３２ 化合物：（Ｓ）−４−（シクロプロピルカルボニルアミノ）−Ｎ−（６−（４−（１，１，１−トリフルオロプロピル−２−イル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）ピリジン−２−イル）ピリジン−２−カルボキサミドＩ−１０の調製

【化39】

ＩＩｃ（１５４．５ｍｇ，０．８ｍｍｏｌ，１．５ｅｑ）を超脱水ＤＭＦ（５ｍＬ）に溶解させ、ＨＡＴＵ（４０６．２ｍｇ，１．３ｍｍｏｌ，２．５ｅｑ）、ＤＩＰＥＡ（２５８．０ｍｇ，２．０ｍｍｏｌ，４．０ｅｑ）及びＩＩＩｃ（１２８．５ｍｇ，０．５ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）を加え、得られた溶液を周囲温度で１６ｈ撹拌した。水（５０ｍＬ）を加えて反応をクエンチし、ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で３回抽出した。有機相を合わせ、飽和食塩水（１００ｍＬ）で３回洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濃縮した。粗生成物を分取ＴＬＣ（ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＣＨ_３ＯＨ＝１２／１、ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＣＨ_３ＯＨ／ＨＣＯＯＨ＝２４／１／１）にかけて２回分離し、白色固体としてＩ−１０ １０．９ｍｇ（収率４．９％）を得た。ＬＣ−ＭＳ ＭＳ−ＥＳＩ（ｍ／ｚ）４４６．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ｐｐｍ １１．０（ｓ，１Ｈ）、１０．９３（ｓ，１Ｈ）、９．１４（ｓ，１Ｈ）、８．６１（ｄ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，１Ｈ）、８．３９（ｓ，１Ｈ）、８．２３（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）、８．０８（ｔ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．９７（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ）、７．９２（ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，１Ｈ）、７．０１−７．０８（ｍ，１Ｈ）、１．８３（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ）、１．２４（ｓ，１Ｈ）、０．８１−０．９３（ｍ，４Ｈ）。
実施例３３ 化合物：（Ｓ）−４−（シクロプロピルカルボニルアミノ）−５−フルオロ−Ｎ−（６−（４−（１，１，１−トリフルオロプロピル−２−イル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）ピリジン−２−イル）ピリジン−２−カルボキサミドＩ−１１の調製

【化40】

ＩＩｄ（３３．６ｍｇ，０．３ｍｍｏｌ，１．５ｅｑ）及びＩＩＩｃ（５２．０ｍｇ，０．２ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）をそれぞれ採取してＥｔＯＡｃ／Ｐｙ（２／１、１２ｍＬに溶解させ）、反応液を氷水浴で５℃以下まで降温し、それにＴ_３Ｐの５０％ＥｔＯＡｃ溶液（２５０．０ｍｇ，０．４ｍｍｏｌ，２．０ｅｑ）を滴下した後、室温で３ｈ撹拌し続け、反応が完了するまでＴＬＣでモニタリングした。反応液に水を加えて（５０ｍＬ）希釈し、ＥｔＯＡｃを加えて２回抽出し、有機相を合わせ、飽和炭酸水素ナトリウムで１回洗浄し、さらに飽和食塩水で１回洗浄し、有機相を乾燥させて濃縮し、粗生成物を分取ＴＬＣ（ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＣＨ_３ＯＨ＝１５／１）にかけて分離し、白色固体としてＩ−１１７．０ｍｇ（収率７．５％）を得た。ＬＣ−ＭＳ ＭＳ−ＥＳＩ（ｍ／ｚ）４６４．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ｐｐｍ １０．９（ｓ，１Ｈ）、１０．７３（ｓ，１Ｈ）、９．１４（ｓ，１Ｈ）、９．０９（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，１Ｈ）、８．７３（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ）、８．２２（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）、８．０８（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ）、７．９７（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ）、７．００−７．０７（ｍ，１Ｈ）、２．１８−２．２３（ｍ，１Ｈ）、１．８３（ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，３Ｈ）、０．９１−０．９３（ｍ，４Ｈ）。

【0041】

実施例３４ 中間体：３−（５−（シクロプロピルカルボニルアミノ）−２−フルオロ−４−メチルベンズアミド）安息香酸メチルＩＶａ−２の調製

【化41】

ＩＩａ（９４８．０ｍｇ，４．０ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）及び市販のＩＶａ−１（６０４．０ｍｇ，４．０ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）をそれぞれ採取してＤＭＦ（２０ｍＬ）に溶解させ、ＤＩＰＥＡ（２．６Ｍ，１６．０ｍｍｏｌ，４．０ｅｑ）を加え、次にＨＡＴＵ（２．２８ｇ，６．０ｍｍｏｌ，１．５ｅｑ）を一度に加え、その反応液を室温で撹拌しながら一晩反応させ、反応が完了するまでＬＣ−ＭＳでモニタリングした。反応液にＥｔＯＡｃ（６０ｍＬ）を加え、３回水洗し、飽和食塩水で１回洗浄し、有機相を乾燥させて濃縮し、粗生成物をカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ＰＥ＝１／１）にかけて分離し、白色固体としてＩＶａ−２４５０．０ｍｇ（収率３０．４％）を得た。ＬＣ−ＭＳ ＭＳ−ＥＳＩ（ｍ／ｚ）３７１．３［Ｍ＋Ｈ］^＋、７４１．３［２Ｍ＋Ｈ］^＋。
実施例３５ 中間体：３−（５−（シクロプロピルカルボニルアミノ）−２−フルオロ−４−メチルベンズアミド）ベンゾイルヒドラジドＩＶａ−３の調製

【化42】

ＩＶａ−２（４５０．０ｍｇ，１．２ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）をＣ_２Ｈ_５ＯＨ（１５ｍＬ）に溶解させ、ヒドラジン水和物（４．１２ｇ，８２．２ｍｍｏｌ，６８．０ｅｑ）を加え、８５℃に加熱し、３ｈ反応させ、白色固体が析出し、反応液を室温まで冷却し、吸引ろ過し、ケーキをＥｔＯＡｃで洗浄し、加熱乾燥させて、白色固体としてＩＶａ−３ ３２０．０ｍｇ（収率７１．１％）を得た。ＬＣ−ＭＳ ＭＳ−ＥＳＩ（ｍ／ｚ）３７１．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0042】

実施例３６ 中間体：（Ｅ）−５−（シクロプロピルカルボニルアミノ）−Ｎ−（３−（２−（（ジメチルアミノ）メチレン）ヒドラジン−１−カルボニル）フェニル）−２−フルオロ−４−メチルベンズアミドＩＶａ−４の調製

【化43】

ＩＶａ−３（３２０．０ｍｇ，０．８６ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）をＤＭＦ−ＤＭＡ（１０ｍＬ）に懸濁させ、１００℃に加熱し、３ｈ反応させ、反応が完了するまでＴＬＣでモニタリングした、白色固体が析出し、吸引ろ過し、ケーキをＥｔＯＡｃで洗浄し、加熱乾燥させて、白色固体としてＩＶａ−４ ３５０．０ｍｇ（収率９５．５％）を得た。ＬＣ−ＭＳ ＭＳ−ＥＳＩ（ｍ／ｚ）４２６．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。
実施例３７ 化合物：（Ｓ）−５−（シクロプロピルカルボニルアミノ）−２−フルオロ−４−メチル−Ｎ−（３−（４−（１，１，１−トリフルオロプロピル−２−イル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）フェニル）ベンズアミドＩ−１２の調製

【化44】

ＩＶａ−４（１０６．０ｍｇ，０．３ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）及びＩＩＩｃ−４（１５０．０ｍｇ，１．０ｍｍｏｌ，３．３ｅｑ）それぞれ採取してトルエン（１５ｍＬ）に懸濁させ、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）（２滴）を滴下し、１１０℃に加熱し、１２ｈ反応させ、反応が完了するまでＬＣ−ＭＳでモニタリングした。反応液を濃縮し、ＥｔＯＡｃ（６０ｍＬ）で溶解させ、０．１Ｎ 希塩酸で２回洗浄し、飽和食塩水で１回洗浄し、有機相を乾燥濃縮し、粗生成物を分取ＴＬＣ（ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＣＨ_３ＯＨ＝１５／１）にかけて分離し、白色固体Ｉ−１２９．０ｍｇ（収率７．５％）を得た。ＬＣ−ＭＳ ＭＳ−ＥＳＩ（ｍ／ｚ）４７６．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ｐｐｍ １０．５（ｓ，１Ｈ）、９．６９（ｓ，１Ｈ）、９．０７（ｓ，１Ｈ）、７．９７（ｓ，１Ｈ）、７．９０（ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ）、７．７２（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，１Ｈ）、７．５６（ｔ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ）、７．３４（ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，１Ｈ）、７．２６（ｄ，Ｊ＝１０．５Ｈｚ，１Ｈ）、５．１８−５．２１（ｍ，１Ｈ）、２．２８（ｓ，３Ｈ）、１．８９（ｓ，１Ｈ）、１．７８（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ）、０．７９−０．８０（ｍ，４Ｈ）。

【0043】

実施例３８ 中間体：２−フルオロ−Ｎ−（６−（４−イソプロピル−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）ピリジン−２−イル）−４−メチル−５−ニトロベンズアミドＶａ−１の調製

【化45】

市販のＩＩａ−１（１．００ｇ，５．０ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）及びＳＯＣｌ_２（１５ｍＬ）を丸底フラスコに入れ、８５℃に加熱して２ｈ還流させ、濃縮して得られた黄色油状の粗生成物であるカルボン酸クロリドを次の反応に直接使用した。（収率１００％で計算される）。その粗生成物（１．７２ｇ，５．０ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）を超脱水ＴＨＦ（２０ｍＬ）に溶解させ、ＴＥＡ（２．０３ｇ，２０．１ｍｍｏｌ，４．０ｅｑ）及びＩＩＩａ（１．０２ｇ，５．０ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）を加え、得られた混合物を６５℃で３ｈ撹拌し、反応が完了するまでＬＣ−ＭＳでモニタリングした。周囲温度まで冷却し、ろ過し、固体を収集し、ＥｔＯＡｃ（１５ｍＬ）でスラリー化して１回洗浄し、加熱乾燥させて、類白色固体としてＶａ−１１．１８ｇ（収率６２．０％）を得た。ＬＣ−ＭＳ ＭＳ−ＥＳＩ（ｍ／ｚ）３８５．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。
実施例３９ 中間体：５−アミノ−２−フルオロ−Ｎ−（６−（４−イソプロピル−４Ｈ−１、２ 、４−トリアゾール−３−イル）ピリジン−２−イル）−４−メチルベンズアミドＶａの調製

【化46】

Ｖａ−１（１．１８ｇ，３．１ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）をＣＨ_３ＯＨ（２０ｍＬ）及び水（４ｍＬ）に溶解させ、ＮＨ_４Ｃｌ（８１９．０ｍｇ，１５．３ｍｍｏｌ，５．０ｅｑ）及びＦｅ粉末（６８５．０ｍｇ，１２．２ｍｍｏｌ，４．０ｅｑ）を加え、得られた混合物を７５℃で３ｈ撹拌し、反応が完了するまでＬＣ−ＭＳでモニタリングした。周囲温度まで冷却し、ろ過した、ろ液を濃縮した。得られた固体をＣＨ_２Ｃｌ_２（１５ｍＬ）でスラリー化して１回洗浄し、加熱乾燥させて、灰色固体としてＶａ１．０３ｇ（収率９５．３％）を得た。ＬＣ−ＭＳ ＭＳ−ＥＳＩ（ｍ／ｚ）３５５．３［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0044】

実施例４０ 中間体：（Ｓ）−２−フルオロ−４−メチル−５−ニトロ−Ｎ−（６−（４−（１，１，１−トリフルオロプロピル−２−イル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）ピリジン−２−イル）ベンズアミドＶｂ−１の調製

【化47】

市販のＩＩａ−１（１．９９ｇ，１０．０ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）をＳＯＣｌ_２（２０ｍＬ）に加え、得られた溶液を８５℃で２ｈ還流し、濃縮した。超脱水ＴＨＦ（２０ｍＬ）を加えてさらに濃縮し、カルボン酸クロリド中間体を得た。カルボン酸クロリドを超脱水ＴＨＦ（２０ｍＬ）に溶解させ、ＴＥＡ（２．５ｍＬ）及びＩＩＩｃ（１．１２ｇ，４．４ｍｍｏｌ，０．４ｅｑ）を加え、得られた溶液を６５℃で２ｈ撹拌し、反応が完了するまでＬＣ−ＭＳでモニタリングした。周囲温度まで冷却し、濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＣＨ_３ＯＨ＝１２／１）にかけて分離し、黄色粘稠固体としてＶｂ−１ ６６２．０ｍｇ（収率３４．４％）を得た。ＬＣ−ＭＳ ＭＳ−ＥＳＩ（ｍ／ｚ）４３９．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。
実施例４１ 中間体：（Ｓ）−５−アミノ−２−フルオロ−４−メチル−Ｎ−（６−（４−（１，１，１−トリフルオロプロピル−２−イル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）ピリジン−２−イル）ベンズアミドＶｂの調製

【化48】

Ｖｂ−１（６６２．０ｍｇ，１．５ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）をＣＨ_３ＯＨ（１５ｍＬ）に溶解させ、水（３ｍＬ）、ＮＨ_４Ｃｌ（４０４．０ｍｇ，７．６ｍｍｏｌ，５．０ｅｑ）及びＦｅ粉末（３３８．２ｍｇ，６．０ｍｍｏｌ，４．０ｅｑ）を加え、得られた混合液を７５℃で２ｈ撹拌し、反応が完了するまでＬＣ−ＭＳでモニタリングした。ろ過し、ケーキをＣＨ_３ＯＨで５回洗浄し、ろ液を濃縮し。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＣＨ_３ＯＨ＝１２／１）にかけて分離し、黄色固体としてＶｂ ３４２．０ｍｇ（収率５５．５％）を得た。ＬＣ−ＭＳ ＭＳ−ＥＳＩ（ｍ／ｚ）４０９．３［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0045】

実施例４２ 化合物：２−フルオロ−５−（２−（４−フルオロフェニル）シクロプロピル−１−カルボニルアミノ）−Ｎ−（６−（４−イソプロピル−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）ピリジン−２−イル）−４−メチルベンズアミドＩ−１３の調製

【化49】

市販のＩＩｂ−４（７２．０ｍｇ，０．４ｍｍｏｌ，２．０ｅｑ）及びＶａ（７２．０ｍｇ，０．２ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）をＥｔＯＡｃ（８ｍＬ）及びＰｙ（４ｍＬ）に溶解させ、氷／塩浴で０℃まで冷却し、Ｔ_３Ｐの５０％ＥｔＯＡｃ溶液（０．３ｍＬ）を滴下し、得られた溶液を周囲温度で５ｈ撹拌し、反応が完了するまでＬＣ−ＭＳでモニタリングした。ＥｔＯＡｃ（４０ｍＬ）で反応液を希釈し、１Ｎ 希塩酸で１回洗浄し、さらに水相をＥｔＯＡｃで２回抽出し、有機相を合わせ、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、有機相を濃縮した。粗生成物を分取ＴＬＣ（ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＣＨ_３ＯＨ＝６／１）にかけて分離し、白色固体としてＩ−１３１６．０ｍｇ（収率１５．５％）を得た。ＬＣ−ＭＳ ＭＳ−ＥＳＩ（ｍ／ｚ）５１７．３［Ｍ＋Ｈ］^＋。^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ｐｐｍ １０．７（ｓ，１Ｈ）、９．７１（ｓ，１Ｈ）、８．８５（ｓ，１Ｈ）、８．１８（ｄ，Ｊ＝ ８．２Ｈｚ，１Ｈ）、８．０４（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ）、７．８５−７．９０（ｍ、２Ｈ）、７．２３−７．２８（ｍ、３Ｈ）、７．１３（ｔ，Ｊ＝ ８．７Ｈｚ，２Ｈ）、５．６１−５．６６（ｍ，１Ｈ）、２．３９−２．４３（ｍ，１Ｈ）、２．２９（ｓ，３Ｈ）、２．１９−２．２１（ｍ，１Ｈ）、１．４６−１．５０（ｍ，１Ｈ）、１．４４（ｄ，Ｊ＝ ６．６Ｈｚ，６Ｈ）、１．３３−１．３７（ｍ，１Ｈ）。
実施例４３ 化合物：５−（シクロブチルカルボニルアミノ）−２−フルオロ−Ｎ−（６−（４−イソプロピル−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）ピリジン−２−イル）−４−メチルベンズアミドＩ−１４の調製

【化50】

市販のＩＩｃ−４（３０．０ｍｇ，０．３ｍｍｏｌ，１．５ｅｑ）及びＶａ（７２．０ｍｇ，０．２ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）をＥｔＯＡｃ（１２ｍＬ）及びＰｙ（６ｍＬ）に溶解させ、氷／塩浴で０℃まで冷却し、Ｔ_３Ｐの５０％ ＥｔＯＡｃ溶液（０．３ｍＬ）を滴下し、得られた溶液を周囲温度で５ｈ撹拌し、反応が完了するまでＬＣ−ＭＳでモニタリングした。ＣＨ_２Ｃｌ_２（５０ｍＬ）で反応液を希釈し、１Ｎ 希塩酸で１回洗浄し、さらに水相をＣＨ_２Ｃｌ_２／ＣＨ_３ＯＨ（１０／１）で７回抽出し、有機相を合わせ、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、有機相を濃縮した。粗生成物を分取ＴＬＣ（ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＣＨ_３ＯＨ＝１２／１）にかけて分離し、類白色固体としてＩ−１４３６．０ｍｇ（収率３４．９％）を得た。ＬＣ−ＭＳ ＭＳ−ＥＳＩ（ｍ／ｚ）４３７．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ｐｐｍ １０．７（ｓ，１Ｈ）、９．２５（ｓ，１Ｈ）、８．８５（ｓ，１Ｈ）、８．１８（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）、８．０２（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．８８（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ）、７．７０（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．２６（ｄ，Ｊ＝１１．０Ｈｚ，１Ｈ）、５．６３−５．６６（ｍ，１Ｈ）、２．２４（ｓ，３Ｈ）、２．１９−２．２１（ｍ、２Ｈ）、２．１３−２．１５（ｍ、２Ｈ）、１．９４−１．９６（ｍ、２Ｈ）、１．８１−１．８４（ｍ，１Ｈ）、１．４４（ｄ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，６Ｈ）。

【0046】

実施例４４ 化合物：２−フルオロ−Ｎ−（６−（４−イソプロピル−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）ピリジン−２−イル）−４−メチル−５−（１−（トリフルオロメチル）シクロプロピル−１−カルボニルアミノ）ベンズアミドＩ−１５の調製

【化51】

市販のＩＩｄ−４（４７．０ｍｇ，０．３ｍｍｏｌ，１．５ｅｑ）及びＶａ（７２．０ｍｇ，０．２ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）をＥｔＯＡｃ（１２ｍＬ）及びＰｙ（６ｍＬ）に溶解させ、氷／塩浴で０℃まで冷却し、Ｔ_３Ｐの５０％ ＥｔＯＡｃ溶液（０．３ｍＬ）を滴下し、得られた溶液を周囲温度で５ｈ撹拌し、反応が完了するまでＬＣ−ＭＳでモニタリングした。ＣＨ_２Ｃｌ_２（５０ｍＬ）で反応液を希釈し、１Ｎ 希塩酸で１回洗浄し、さらに水相をＣＨ_２Ｃｌ_２／ＣＨ_３ＯＨ（１０／１）で７回抽出し、有機相を合わせ、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、有機相を濃縮した。粗生成物を分取ＴＬＣ（ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＣＨ_３ＯＨ＝１２／１）にかけて分離し、類白色固体としてＩ−１５１４．０ｍｇ（収率１３．６％）を得た。ＬＣ−ＭＳ ＭＳ−ＥＳＩ（ｍ／ｚ）４９１．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ｐｐｍ １０．７（ｓ，１Ｈ）、９．４２（ｓ，１Ｈ）、８．８５（ｓ，１Ｈ）、８．１８（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ）、８．０２（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，１Ｈ）、７．８９（ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，１Ｈ）、７．５２（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，１Ｈ）、７．３１（ｄ，Ｊ＝１０．９Ｈｚ，１Ｈ）、５．６６−５．６３（ｍ，１Ｈ）、２．２２（ｓ，３Ｈ）、１．５２−１．５０（ｍ、２Ｈ）、１．４４（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，６Ｈ）、１．３５−１．３３（ｍ、２Ｈ）。
実施例４５ 化合物：２−フルオロ−Ｎ−（６−（４−イソプロピル−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）ピリジン−２−イル）−４−メチル−５−（１−（フルオロ）シクロプロピル−１−カルボニルアミノ）ベンズアミドＩ−１６の調製

【化52】

市販のＩＩｅ−４（４４ｍｇ，０．４ｍｍｏｌ，１．５ｅｑ）及びＶａ（８８．１ｍｇ，０．２ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）のそれぞれを無水ＤＭＦ／Ｐｙ（２／１、６ｍＬ）に溶解させ、氷水浴の条件下で、Ｔ_３Ｐの５０％ ＥｔＯＡｃ溶液（０．３ｍＬ）を滴下し、反応が完了するまでＴＬＣでモニタリングした。ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＣＨ_３ＯＨ（１０／１、２０ｍＬ）で反応液を希釈し、水を加えて抽出し、有機相を合わせ、水洗し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＣＨ_３ＯＨ＝２０／１）にかけて分離し、黄色粘稠状固体としてＩ−１６ １５．０ｍｇを得た。ＬＣ−ＭＳ ＭＳ−ＥＳＩ（ｍ／ｚ）４４１．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ｐｐｍ １０．８（ｓ，１Ｈ）、１０．０１（ｓ，１Ｈ）、８．８６（ｓ，１Ｈ）、８．１９（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ）、８．０２（ｔ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ）、７．８８（ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１Ｈ）、７．６０（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．３２（ｄ，Ｊ＝１１．１Ｈｚ，１Ｈ）、５．６４−５．６７（ｍ，１Ｈ）、２．２７（ｓ，３Ｈ）、１．４４（ｄ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，６Ｈ）、１．３９−１．４１（ｍ、２Ｈ）、１．２７−１．３３（ｍ、２Ｈ）。

【0047】

実施例４６ 化合物：２−フルオロ−５−（（１Ｒ、２Ｒ）−２−フルオロシクロプロピル−１−カルボニルアミノ）−Ｎ−（６−（４−イソプロピル−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）ピリジン−２−イル）−４−メチルベンズアミドＩ−１７の調製

【化53】

市販のＩＩｆ−４（３１．２ｍｇ，０．３ｍｍｏｌ，１．５ｅｑ）及びＶａ（７１．０ｍｇ，０．２ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）をＥｔＯＡｃ（８ｍＬ）及びＰｙ（４ｍＬ）に溶解させ、氷水浴で５℃以下まで冷却し、Ｔ_３Ｐ ５０％ ＥｔＯＡｃ溶液（０．３ｍＬ）を滴下し、得られた溶液を周囲温度で３ｈ撹拌し、反応が完了するまでＬＣ−ＭＳでモニタリングした。水（５０ｍＬ）で反応液を希釈し、さらに水相をＥｔＯＡｃで２回抽出し、有機相を合わせ、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、有機相を濃縮し。粗生成物を分取ＴＬＣ（ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＣＨ_３ＯＨ＝１５／１）にかけて分離し、類白色固体としてＩ−１７１９．０ｍｇ（収率２１．５％）を得た。ＬＣ−ＭＳ ＭＳ−ＥＳＩ（ｍ／ｚ）４４１．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ｐｐｍ １０．７（ｓ，１Ｈ）、９．９３（ｓ，１Ｈ）、８．８６（ｓ，１Ｈ）、８．１８（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）、８．０２（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ）、７．８８（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ）、７．７７（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．２８（ｄ，Ｊ＝１１．０Ｈｚ，１Ｈ）、５．６３−５．６６（ｍ，１Ｈ）、４．７９−４．９６（ｍ，１Ｈ）、２．３０（ｓ，３Ｈ）、１．４８−１．５４（ｍ，１Ｈ）、１．４５（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，６Ｈ）、１．２０−１．２５（ｍ、２Ｈ）。
実施例４７ 化合物：２−フルオロ−５−（（１Ｒ、２Ｓ）−２−フルオロシクロプロピル−１−カルボニルアミノ）−Ｎ−（６−（４−イソプロピル−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）ピリジン−２−イル）−４−メチルベンズアミドＩ−１８の調製

【化54】

市販のＩＩｇ−４（３１．２ｍｇ，０．３ｍｍｏｌ，１．５ｅｑ）及びＶａ（７１．０ｍｇ，０．２ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）をＥｔＯＡｃ（８ｍＬ）及びＰｙ（４ｍＬ）に溶解させ、氷水浴で５℃以下まで冷却し、Ｔ_３Ｐの５０％ ＥｔＯＡｃ溶液（０．３ｍＬ）を滴下し、得られた溶液を周囲温度で３ｈ撹拌し、反応が完了するまでＬＣ−ＭＳでモニタリングした。水（５０ｍＬ）で反応液を希釈し、さらに水相をＥｔＯＡｃで２回抽出し、有機相を合わせ、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、有機相を濃縮し。粗生成物を分取ＴＬＣ（ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＣＨ_３ＯＨ＝１５／１）にかけて分離し、類白色固体としてＩ−１８１８．０ｍｇ（収率２０．４％）を得た。ＬＣ−ＭＳ ＭＳ−ＥＳＩ（ｍ／ｚ）４４１．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ｐｐｍ １０．７（ｓ，１Ｈ）、９．９４（ｓ，１Ｈ）、８．８５（ｓ，１Ｈ）、８．１８（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）、８．０２（ｔ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．８８（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ）、７．７２（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．２７（ｄ，Ｊ＝１１．０Ｈｚ，１Ｈ）、５．６１−５．６８（ｍ，１Ｈ）、４．８５−５．０２（ｍ，１Ｈ）、２．２８（ｓ，３Ｈ）、１．５７−１．６５（ｍ，１Ｈ）、１．４３（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，６Ｈ）、１．０７−１．２３（ｍ、２Ｈ）。

【0048】

実施例４８ 化合物：（Ｓ）−５−（シクロペンチルカルボニルアミノ）−２−フルオロ−４−メチル−Ｎ−（６−（４−（１，１，１−トリフルオロプロピル−２−イル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）ピリジン−２−イル）ベンズアミドＩ−１９の調製

【化55】

Ｖｂ（１７０．０ｍｇ，０．４ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）をＣＨ_２Ｃｌ_２（１０ｍＬ）に溶解させ、ＴＥＡ（１ｍＬ）を加え、氷／塩浴で０℃まで冷却し、市販のＩＩｈ−４（８３．２ｍｇ，０．６ｍｍｏｌ，１．５ｅｑ）を加え、得られた溶液を周囲温度で４ｈ撹拌し、反応が完了するまでＬＣ−ＭＳでモニタリングした。反応液を濃縮し、粗生成物を分取ＴＬＣ（ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＣＨ_３ＯＨ＝１２／１、ＥｔＯＡｃ／ＣＨ_３ＯＨ＝６／１）にかけて２回分離し、白色固体としてＩ−１９ ５０．２ｍｇ（収率２３．７％）を得た。ＬＣ−ＭＳ ＭＳ−ＥＳＩ（ｍ／ｚ）５０５．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ｐｐｍ １０．９（ｓ，１Ｈ）、９．４０（ｓ，１Ｈ）、９．１２（ｓ，１Ｈ）、８．１４（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）、８．０５（ｔ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．９９（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ）、７．６８（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．３０（ｄ，Ｊ＝１０．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．１２−７．１５（ｍ，１Ｈ）、２．８４−２．８８（ｍ，１Ｈ）、２．２６（ｓ，３Ｈ）、１．８７−１．８９（ｍ、２Ｈ）、１．８１（ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，３Ｈ）、１．６７−１．７５（ｍ，４Ｈ）、１．５５−１．６６（ｍ、２Ｈ）。
実施例４９ 化合物：（Ｓ）−５−（シクロヘプチルカルボニルアミノ）−２−フルオロ−４−メチル−Ｎ−（６−（４−（１，１，１−トリフルオロプロピル−２−イル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）ピリジン−２−イル）ベンズアミドＩ−２０の調製

【化56】

市販のＩＩｉ−４（１６０．１ｍｇ，１．０ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）をＳＯＣｌ_２（５ｍＬ）に加え、得られた混合液を８５℃で１ｈ撹拌還流し、濃縮した。超脱水ＴＨＦ（１０ｍＬ）を加えてさらに濃縮して得られた黄色油状物は、カルボン酸クロリド中間体である。Ｖｂ（８０．０ｍｇ，０．２ｍｍｏｌ，０．２ｅｑ）をＣＨ_２Ｃｌ_２（１０ｍＬ）に溶解させ、ＴＥＡ（０．５ｍＬ）を加え、氷／塩浴で０℃まで冷却し、カルボン酸クロリド中間体を加えた。得られた溶液を周囲温度で４ｈ撹拌した。反応液を濃縮し、粗生成物を分取ＴＬＣ（ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＣＨ_３ＯＨ＝１０／１、ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＣＨ_３ＯＨ／ＨＣＯＯＨ＝２４／１／１）にかけて２回分離し、淡黄色固体としてＩ−２０３．８ｍｇ（収率３．６％）を得た。ＬＣ−ＭＳ ＭＳ−ＥＳＩ（ｍ／ｚ）５３３．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ｐｐｍ １０．９（ｓ，１Ｈ）、９．３４（ｓ，１Ｈ）、９．１２（ｓ，１Ｈ）、８．１４（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ）、８．０５（ｔ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．９８（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ）、７．６４（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．２９（ｄ，Ｊ＝１０．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．１２−７．１５（ｍ，１Ｈ）、２．５４−２．６０（ｍ，１Ｈ）、２．２５（ｓ，３Ｈ）、１．８６−１．９１（ｍ、２Ｈ）、１．８１（ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，３Ｈ）、１．４６−１．７５（ｍ，１２Ｈ）。

【0049】

インビトロ生物学的評価
この検出方法は、本発明に係る化合物のｉｎ ｖｉｔｒｏ タンパク質結合阻害活性を評価するために使用された。
この検出は、ＡＳＫ１キナーゼ阻害活性に対する異なる化合物の影響を総合的に評価することを目的とする。
実施例Ａ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ＡＳＫ１酵素阻害剤スクリーニング法
この検出では、ホモジニアス時間分解蛍光法（Ｈｏｍｏｇｅｎｅｏｕｓ ｔｉｍｅ ｒｅｓｏｌｖｅｄ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ、ＨＴＲＦ）によりｉｎ ｖｉｔｒｏで組換えヒトＡＳＫ１の酵素活性に対する化合物の阻害レベルを評価した。

【0050】

実験の主な原理
インビトロ酵素活性検出の基本原理は、末端ビオチン標識特異的基質がキナーゼの作用下でリン酸化された反応生成物と、リン酸化部位を認識するＥＵ^３＋−クリプテート標識抗体およびＸＬ６６５標識ストレプタビジンとを混合し、２つの蛍光分子が同時に基質に結合すると、Ｅｕは外部励起光（３２０ｎｍ）の刺激下で６２０ｎｍの蛍光を発生するとともに、ＸＬ６６５はエネルギー伝達によって励起されて６６５ｎｍの蛍光を発生する。２つの波長の蛍光（６２０ｎｍ及び６６５ｎｍ）の変化を比較することにより、基質のリン酸化を評価する。異なる被験化合物を加えると、キナーゼ活性の阻害が基質のリン酸化の程度に反映され、異なる蛍光シグナル比（６６５／６２０）を示し、これに基づいて化合物のキナーゼに対する阻害活性が計算される。基本的な検出原理は、先行技術で知られている（Ｃｉｓｂｉｏ、Ｎａｔｕｒｅ Ｍｅｔｈｏｄ ２００６、Ｊｕｎｅ ２３、ＤＯＩ：１０．１０３８／ＮＭＥＴＨ８８３）。
主な実験手順
ヒト組換えＡＳＫ１（ＭＡＰ３Ｋ５）キナーゼ、２Ｘキナーゼ反応用バッファー、ＡＴＰ（１０ｍＭ）は、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ（カタログ番号：ＰＲ７３４９Ｂ）から購入され、ＨＴＲＦ検出キットＨＴＲＦ ＫｉｎＥＡＳＥ ＳＴＫ ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ ｋｉｔは、Ｃｉｓｂｉｏ（カタログ番号：６２ＳＴ０ＰＥＢ）から購入された。
実験手順は、検出キットの取扱説明書で規定されているプロトコールに従って行った（ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ｃｉｓｂｉｏ．ｃｏｍ／ｓｉｔｅｓ／ｄｅｆａｕｌｔ／ｆｉｌｅｓ／ｒｅｓｓｏｕｒｃｅｓ／ｃｉｓｂｉｏ＿ｄｄ＿ｐｉ＿６２ＳＴ０ＰＥＢ．ｐｄｆ）。具体的には、以下の通りである。
（１）実験の準備：必要に応じてキナーゼ反応用バッファー（動作液）を調製し、キナーゼ反応用バッファーで被験化合物を異なる濃度勾配（化合物の最高濃度は、４μＭ）に希釈した。
（２）酵素反応系１０μＬ（被験化合物２．５μＬ、キナーゼ反応用バッファー５μＬ及びＡＴＰ溶液２．５μＬ（キットに付属）を含む）を均一に混合して室温で１ｈ反応させ、酵素反応は９６ウェルプレートで行った。

【0051】

（３）ＥＵ３＋−Ｃｒｙｐｔａｔｅ標識抗体及びＸＬ６６５標識ストレプタビジンを反応停止液で適切な比率で希釈し、各ウェルあたり２つの希釈検出溶液のそれぞれを５μＬ加え、室温で２ｈ反応させた。
（４）反応には、被験化合物を添加しない陽性対照及びＡＳＫ１キナーゼを添加しない陰性対照を含む対照反応が同時に設けられた。全ての検出は、ダブレットのように行った。
（５）反応終了後、蛍光検出器（ＴｅｃａｎＳＰＡＲＫ １０Ｍ）を使用して各ウェルの蛍光シグナルを検出し、励起波長は３２０ｎｍであり、検出された発光波長はそれぞれ６２０ｎｍ及び６６５ｎｍである。
（６）各ウェルの６６５／６２０の比をそれぞれ計算し、陽性対照ウェルから陰性対照ウェルを差し引いたものを基質リン酸化のベースレベルとして、被験化合物の酵素阻害率計算式：阻害率（％）＝１−（検出ウェルの比−陰性ウェルの比）／基質リン酸化のベースレベルの値である。異なる濃度勾配の被験化合物については、それぞれリン酸化阻害率を計算した後、ＩＣ_５０計算機を使用して酵素学的な半数阻害濃度（ＩＣ_５０）を計算した。本発明に記載の代表的な化合物の一括データは、以下の通りである（表２を参照する）。

【0052】

【表2】

上記の結果から、本発明に係る代表的な化合物は、ＡＳＫ１キナーゼへの良好なｉｎ ｖｉｔｒｏ阻害活性を有することが明らかになる。

【国際調査報告】