特表 2021-536464 ポリオキシエチレン１，４−ソルビタン脂肪酸エステルを調製するための方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】特表2021-536464(P2021-536464A)

(43)【公表日】2021年12月27日

(54)【発明の名称】ポリオキシエチレン１，４−ソルビタン脂肪酸エステルを調製するための方法

(51)【国際特許分類】

   C07D 307/20 20060101AFI20211129BHJP

   A61K 47/22 20060101ALI20211129BHJP

   C08G 65/331 20060101ALI20211129BHJP

【ＦＩ】

   C07D307/20

   A61K47/22

   C08G65/331

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

【全頁数】62

(21)【出願番号】特願2021-512487(P2021-512487)

(86)(22)【出願日】2019年9月4日

(85)【翻訳文提出日】2021年4月28日

(86)【国際出願番号】EP2019073509

(87)【国際公開番号】WO2020049010

(87)【国際公開日】20200312

(31)【優先権主張番号】PCT/CN2018/104219

(32)【優先日】2018年9月5日

(33)【優先権主張国】CN

(31)【優先権主張番号】62/745,676

(32)【優先日】2018年10月15日

(33)【優先権主張国】US

(31)【優先権主張番号】18200298.0

(32)【優先日】2018年10月15日

(33)【優先権主張国】EP

(31)【優先権主張番号】19157032.4

(32)【優先日】2019年2月13日

(33)【優先権主張国】EP

(31)【優先権主張番号】19157068.8

(32)【優先日】2019年2月14日

(33)【優先権主張国】EP

(31)【優先権主張番号】19157297.3

(32)【優先日】2019年2月14日

(33)【優先権主張国】EP

(31)【優先権主張番号】19194776.1

(32)【優先日】2019年8月30日

(33)【優先権主張国】EP

(31)【優先権主張番号】19195046.8

(32)【優先日】2019年9月3日

(33)【優先権主張国】EP

(81)【指定国】 AP(BW,GH,GM,KE,LR,LS,MW,MZ,NA,RW,SD,SL,ST,SZ,TZ,UG,ZM,ZW),EA(AM,AZ,BY,KG,KZ,RU,TJ,TM),EP(AL,AT,BE,BG,CH,CY,CZ,DE,DK,EE,ES,FI,FR,GB,GR,HR,HU,IE,IS,IT,LT,LU,LV,MC,MK,MT,NL,NO,PL,PT,RO,RS,SE,SI,SK,SM,TR),OA(BF,BJ,CF,CG,CI,CM,GA,GN,GQ,GW,KM,ML,MR,NE,SN,TD,TG),AE,AG,AL,AM,AO,AT,AU,AZ,BA,BB,BG,BH,BN,BR,BW,BY,BZ,CA,CH,CL,CN,CO,CR,CU,CZ,DE,DJ,DK,DM,DO,DZ,EC,EE,EG,ES,FI,GB,GD,GE,GH,GM,GT,HN,HR,HU,ID,IL,IN,IR,IS,JO,JP,KE,KG,KH,KN,KP,KR,KW,KZ,LA,LC,LK,LR,LS,LU,LY,MA,MD,ME,MG,MK,MN,MW,MX,MY,MZ,NA,NG,NI,NO,NZ,OM,PA,PE,PG,PH,PL,PT,QA,RO,RS,RU,RW,SA,SC,SD,SE,SG,SK,SL,SM,ST,SV,SY,TH,TJ,TM,TN,TR,TT

【公序良俗違反の表示】

（特許庁注：以下のものは登録商標）

１．ＴＷＥＥＮ

(71)【出願人】

【識別番号】521313854

【氏名又は名称】ロンザ・グワンジョウ・ファーマシューティカル・リミテッド

(71)【出願人】

【識別番号】502336151

【氏名又は名称】ロンザ・リミテッド

(74)【代理人】

【識別番号】110001173

【氏名又は名称】特許業務法人川口國際特許事務所

(72)【発明者】

【氏名】シェラー，ディーター

(72)【発明者】

【氏名】ワイラー，ベンジャミン

(72)【発明者】

【氏名】ウェイ，ジエピン

(72)【発明者】

【氏名】ヤン，ヤンリン

(72)【発明者】

【氏名】シャン，ダニエル

(72)【発明者】

【氏名】ジュウ，レタ

(72)【発明者】

【氏名】ハンゼルマン，パウル

(72)【発明者】

【氏名】リンド，タニア・ケアロップ

(72)【発明者】

【氏名】ニルソン，エメリ・ヨセフィーナ

(72)【発明者】

【氏名】コチェルビトフ，ビタリー

(72)【発明者】

【氏名】エングブロム，ヨーアン

【テーマコード（参考）】

4C037

4C076

4J005

【Ｆターム（参考）】

4C037DA07

4C076AA36

4C076DD59

4C076EE23

4C076FF36

4J005AA04

4J005BD02

(57)【要約】

本発明は、ポリオキシエチレン１，４−ソルビタンと脂肪酸塩化物との反応によって、ポリオキシエチレン１，４−ソルビタン脂肪酸エステル、例えば、Ｐｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ ８０を調製するための方法、およびこの方法によって得ることができるポリオキシエチレン１，４−ソルビタン脂肪酸エステルを開示する。

【特許請求の範囲】

【請求項1】

ポリオキシエチレン１，４−ソルビタンと酸塩化物ＡＣＩＤＣＨＬＯＲとの反応ＲＥＡＣ−Ａによる、ポリオキシエチレン１，４−ソルビタン脂肪酸エステルを調製するための方法であって、
ＡＣＩＤＣＨＬＯＲが、式（Ｉ）の化合物であり、

【化1】

Ｒ１が、直鎖もしくは分枝鎖Ｃ_{１０−２２}アルキル、または直鎖もしくは分枝鎖Ｃ_{１０−２２}アルケニルである、方法。

【請求項2】

Ｒ１が、直鎖Ｃ_{１０−２２}アルキルまたは直鎖Ｃ_{１０−２２}アルケニルである、請求項１に記載の方法。

【請求項3】

前記ポリオキシエチレン１，４−ソルビタンのポリオキシエチレンは、平均で１０〜３０を有する、請求項１または２に記載の方法。

【請求項4】

ＲＥＡＣ−Ａは温度ＴＥＭＰ−Ａで行われ、ＴＥＭＰ−Ａは０〜７０℃である、請求項１〜３のうちの一項以上に記載の方法。

【請求項5】

ＲＥＡＣ−Ａのために溶媒が使用されない、請求項１〜４のうちの一項以上に記載の方法。

【請求項6】

ＲＥＡＣ−Ａのために水が使用されない、請求項１〜５のうちの一項以上に記載の方法。

【請求項7】

ＲＥＡＣ−Ａのために触媒が使用されない、請求項１〜６のうちの一項以上に記載の方法。

【請求項8】

ＲＥＡＣ−Ａが無希釈で行われる、請求項１〜７のうちの一項以上に記載の方法。

【請求項9】

１，４−ソルビタンをエチレンオキシドと反応させる、反応ＲＥＡＣ−Ｂによって、前記ポリオキシエチレン１，４−ソルビタンが調製される、
請求項１〜８のうちの一項以上に記載の方法。

【請求項10】

前記１，４−ソルビタンが、４つの連続工程ＳＴＥＰ１、ＳＴＥＰ２、ＳＴＥＰ３およびＳＴＥＰ４を含む方法ＳＯＲＢＩＤによって調製され、
ＳＴＥＰ１において、Ｄ−ソルビトールが、ｐ−トルエンスルホン酸およびテトラブチルアンモニウムブロミドの存在下で、脱水反応ＤＥＨＹＤＲＥＡＣで脱水され、ＳＴＥＰ１が混合物ＭＩＸ１を提供し、
ＳＴＥＰ２において、エタノールをＭＩＸ１と混合し、ＳＴＥＰ２が混合物ＭＩＸ２を提供し、
ＳＴＥＰ３において、イソプロパノールをＭＩＸ２と混合し、ＳＴＥＰ３が混合物ＭＩＸ３を提供し、
ＳＴＥＰ４において、１，４−ソルビタンがＭＩＸ３から単離される、請求項９に記載の方法。

【請求項11】

前記ｐ−トルエンスルホン酸が、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物の形態で使用される、請求項１０に記載の方法。

【請求項12】

ＤＥＨＹＤＲＥＡＣのために溶媒が使用されない、請求項１０または１１に記載の方法。

【請求項13】

ＤＥＨＹＤＲＥＡＣのために水が投入されない、請求項１０〜１２のうちの一項以上に記載の方法。

【請求項14】

ＤＥＨＹＤＲＥＡＣが無希釈で行われる、請求項１０〜１３のうちの一項以上に記載の方法。

【請求項15】

ＳＴＥＰ２が、６０〜９０℃の温度ＴＥＭＰ２で行われる、請求項１０〜１４のうちの一項以上に記載の方法。

【請求項16】

ＳＴＥＰ３が、１０〜３０℃の温度ＴＥＭＰ３−１で行われる、請求項１０〜１５のうちの一項以上に記載の方法。

【請求項17】

前記イソプロパノールの混合の後、ＳＴＥＰ３が、ＭＩＸ３を−５〜５℃の温度ＴＥＭＰ３−２まで冷却するＣＯＯＬ３を含む、請求項１０〜１６のうちの一項以上に記載の方法。

【請求項18】

ＳＴＥＰ３が、ＭＩＸ３を撹拌するＳＴＩＲＲ３を含み、ＳＴＩＲＲ３は、時間ＴＩＭＥ３−２の間行われ、ＴＩＭＥ３−２は１〜１２時間である、請求項１０〜１７のうちの一項以上に記載の方法。

【請求項19】

ＳＴＩＲＲ３が、ＣＯＯＬ３の後に行われ、ＣＯＯＬ３が請求項１７に定義される通りである、請求項１８に記載の方法。

【請求項20】

ＳＴＩＲＲ３が、ＴＥＭＰ３−２で行われ、ＴＥＭＰ３−２が請求項１７に定義される通りである、請求項１８または１９に記載の方法。

【請求項21】

ＳＴＥＰ１、ＳＴＥＰ２およびＳＴＥＰ３が、１つの同じ反応器内で連続して行われる、請求項１０〜２０のうちの一項以上に記載の方法。

【請求項22】

前記１，４−ソルビタンが、３つの連続工程ＳＴＥＰ１ＡＱＵ、ＳＴＥＰ２ＡＱＵおよびＳＴＥＰ３ＡＱＵで１，４−ソルビタンを調製するための方法ＳＯＲＢＩＤＡＱＵによって調製され、
ＳＴＥＰ１ＡＱＵにおいて、Ｄ−ソルビトールが、ｐ−トルエンスルホン酸およびテトラブチルアンモニウムブロミドの存在下で、脱水反応ＤＥＨＹＤＲＥＡＣＡＱＵで脱水され、ＳＴＥＰ１ＡＱＵが混合物ＭＩＸ１ＡＱＵを提供し、
ＳＴＥＰ２ＡＱＵにおいて、エタノールをＭＩＸ１ＡＱＵと混合し、ＳＴＥＰ２ＡＱＵが混合物ＭＩＸ２ＡＱＵを提供し、
ＳＴＥＰ３ＡＱＵにおいて、イソプロパノールをＭＩＸ２ＡＱＵと混合し、ＳＴＥＰ３ＡＱＵが混合物ＭＩＸ３ＡＱＵを提供し、
Ｄ−ソルビトールが、Ｄ−ソルビトールと水との混合物の形態でＳＴＥＰ１ＡＱＵに使用される、請求項９に記載の方法。

【請求項23】

反応ＲＥＡＣ−Ａによってポリオキシエチレン１，４−ソルビタン脂肪酸エステルを調製するための方法によって得ることができ、前記方法およびＲＥＡＣ−Ａが請求項１〜２１に定義される通りである、ポリオキシエチレン１，４−ソルビタン脂肪酸エステル。

【請求項24】

前記ポリオキシエチレン１，４−ソルビタン脂肪酸エステル中のＰＥＯ１，４−ソルビタンモノエステル種のＥＯ単位の平均数が１９〜２３である、請求項２３に記載のポリオキシエチレン１，４−ソルビタン脂肪酸エステル。

【請求項25】

イソソルビド種を含まないポリオキシエチレン１，４−ソルビタン脂肪酸エステル。

【請求項26】

ソルビトール種を含まないポリオキシエチレン１，４−ソルビタン脂肪酸エステル。

【請求項27】

ＭＡＬＤＩスペクトルにおいて、ただ１つの最大値を有するシグナル分布を示す、ポリオキシエチレン１，４−ソルビタン脂肪酸エステル。

【請求項28】

ポリオキシエチレン１，４−ソルビタン脂肪酸エステルであって、前記ポリオキシエチレン１，４−ソルビタン脂肪酸エステルのＭＡＬＤＩスペクトルが、ＭＷが３５００を超える物質のシグナルであって、シグナルの高さが前記ＭＡＬＤＩスペクトル中の全分布の最大値に対して５％を超えるシグナルを示さない、ポリオキシエチレン１，４−ソルビタン脂肪酸エステル。

【請求項29】

ＤＳＣにおいて−１３℃以下の温度でシグナルの最大値を有する吸熱シグナルを示す、ポリオキシエチレン１，４−ソルビタン脂肪酸エステル。

【請求項30】

ＤＳＣにおいてΔＨが３５Ｊ／ｇ以下である吸熱シグナルを示す、ポリオキシエチレン１，４−ソルビタン脂肪酸エステル。

【請求項31】

ＤＳＣにおいて−１３℃を超える温度でシグナルの最大値を有する吸熱シグナルを示さない、ポリオキシエチレン１，４−ソルビタン脂肪酸エステル。

【請求項32】

ＤＳＣにおいてΔＨが３５Ｊ／ｇを超える吸熱シグナルを示さない、ポリオキシエチレン１，４−ソルビタン脂肪酸エステル。

【請求項33】

ＤＳＣにおいてΔＨが３０Ｊ／ｇを超える発熱シグナルを示さない、ポリオキシエチレン１，４−ソルビタン脂肪酸エステル。

【請求項34】

ＤＳＣにおいて−５０℃以上の温度でシグナルの最大値を有する発熱シグナルを示さない、ポリオキシエチレン１，４−ソルビタン脂肪酸エステル。

【請求項35】

薬物製剤の製剤中の賦形剤としての、請求項２３〜３４のうちの一項以上に記載のポリオキシエチレン１，４−ソルビタン脂肪酸エステルの使用。

【請求項36】

１０重量％以下のＰＥＯイソソルビドモノオレエートを含有するポリオキシエチレン１，４−ソルビタン脂肪酸エステルであって、前記重量％が、ＰＥＯイソソルビドモノオレエートの含有量について分析される前記ポリオキシエチレン１，４−ソルビタン脂肪酸エステルの試料の重量に基づく、ポリオキシエチレン１，４−ソルビタン脂肪酸エステル。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、ポリオキシエチレン１，４−ソルビタンと脂肪酸塩化物との反応によって、ポリオキシエチレン１，４−ソルビタン脂肪酸エステル、例えば、Ｐｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ ８０を調製するための方法、およびこの方法によって得ることができるポリオキシエチレン１，４−ソルビタン脂肪酸エステルを開示する。

【背景技術】

【0002】

Ｐｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ ８０は、親水性非イオン性界面活性剤である。良好なハイドロトロープ効果に起因して、Ｐｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ ８０は、通常、注射などの非経口適用のためのＡＰＩまたは薬物の製剤の調製中に、共溶媒として、乳化剤として、および安定剤として機能する。

【0003】

Ｃｈａｎｇ Ｌｉ ｅｔ ａｌ．，Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｎａｎｏｍｅｄｉｃｉｎｅ，２０１４，９，２０８９−２１００（以下で「Ｌｉ ｅｔ ａｌ．」とも略される）は、ＰＮＳ（ポリオキシエチレン非イオン性界面活性剤）の一種としてのポリソルベート、例えば、Ｐｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ ８０、および特に、錠剤、エマルション、特定的には、注射液の調製における用途を有するナノ担体系としてのそれらの使用を記載している。これは、薬物、特定的には、疎水性薬物、例えば、疎水性抗がん薬物の標的組織への送達を改善するための促進剤として使用される。しかしながら、ポリソルベートを得るために異なる製造業者によって使用される異なる合成プロセスに起因して、ポリソルベートの構造および組成は、バッチごとに同一ではない。例えば、Ｕｎｉｔｅｄ Ｓｔａｔｅｓ Ｐｈａｒｍａｃｏｐｅｉａ ３５−Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｆｏｒｍｕｌａｒｙ ３０において、Ｐｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ ８０は、脂肪酸、主にオレイン酸の部分エステルと、ソルビトールおよび各モルのソルビトールについて約２０モルのエチレンオキシドでエトキシル化されたソルビトールの無水物、ならびにソルビトール無水物の混合物として定義された。Ｐｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ ８０を調製するための１つの方法は、まず、ソルビトールを脱水し、脱水誘導体とし、オレイン酸でエステル化して、ソルビタン脂肪酸エステルを提供し、次いで、エチレンオキシドとソルビタン脂肪酸エステルとの重合反応を伴う。

【0004】

別の方法は、まず、エチレンオキシドとソルビタンの脱水誘導体との重合反応、続いてエステル化を行うことである。

【0005】

Ｐｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ ８０の広く許容される構造は、ｗ＋ｘ＋ｙ＋ｚ＝２０、すなわち、ＥＯ（エチレンオキシド）単位の平均含有量が２０である式（ＰＳ８０）の化合物である。

【0006】

【化1】

【0007】

様々な理由から、Ｐｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ ８０は、多くの化合物の混合物である。多様性の１つの由来は、Ｐｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ ８０の場合にはオレイン酸である、脂肪酸部分である。しかしながら、オレイン酸は、天然源由来の天然産物として使用され、ミリスチン酸、パルミチン酸、パルミトレイン酸、ステアリン酸、リノール酸、またはリノレン酸等の他の脂肪酸を含む。したがって、上述の産物Ｐｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ ８０は、オレイン酸に由来するだけでなく、天然産物オレイン酸中に存在する他の脂肪酸に由来する脂肪酸エステルを含む。

【0008】

多様性のさらなる由来として、Ｌｉ ｅｔ ａｌ．は、ポリソルベートの合成における第１工程が通常、ソルビトールからソルビタンへの脱水であることを指摘し、このことは、最終生成物が、式（ＳＯＲＢＩＴＯＬ）の化合物の一般式を有するソルビトールと、異なる構造を有するソルビトール由来の環状エーテル、例えば、
式（１，４）の化合物の一般式を有する、１，４−ソルビタン、
式（１，５）の化合物の一般式を有する、１，５−ソルビタン、
式（２，５）の化合物の一般式を有する、２，５−ソルビタン、および
式（１，４：３，６）の化合物の一般式を有する、１，４：３，６イソソルビドとの混合物であることを示唆している。

【0009】

【化2】

【0010】

１，４−ソルビタン、１，５−ソルビタン、および２，５−ソルビタンは、別途明示されていない本発明の意味において、互いに異性体である。

【0011】

脱水反応のさらなる副生成物は、ソルビトールポリマーであり得る。

【0012】

したがって、ソルビトールの脱水によって提供される脱水生成物は、すでに異なる化合物の混合物であり、次いで、この混合物をオレイン酸およびエチレンオキシドを用いてＰｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ ８０に変換すると、明らかに、Ｐｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ ８０と呼ばれる生成物は、ソルビトールの脱水によって提供される混合物中に見出される化合物のいずれかに由来する化合物を含む。

【0013】

明らかに、エチレンオキシドの重合反応も、エチレンオキシドがソルビトールの脱水反応からの生成物の各ヒドロキシル残基と反応し、それによってヒドロキシル残基上にポリオキシエチレン鎖を構築することができるため、さらに多様性をもたらすであろう。また、様々な数のエチレンオキシド単位が、様々なヒドロキシル残基に基づいて構築される様々なポリオキシエチレン鎖に導入され得る。

【0014】

Ｌｉ ｅｔ ａｌ．はさらに、ＰＮＳが偽アレルギーを引き起こす可能性が周知であることを指摘している。偽アレルギー（Ｐｓｅｕｄｏ ａｌｌｅｒｇｙ）は、Ｗｏｒｌｄ Ａｌｌｅｒｇｙ Ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎが使用する公式用語である。偽アレルギーは、原因薬物の最初の投与後に観察される免疫アレルギー反応と同様の反応である。一般的なアレルギーとは異なり、偽アレルギー反応は、肥満細胞からのヒスタミンの放出を直接誘導し、既に存在する免疫グロブリンＥ抗体によって開始または媒介されない、エイコサノイドの異常な合成およびブラジキニン分解の阻害を伴い、補体系を活性化することができる。ＰＮＳに応答する偽アレルギーの正確な機構はまだ不明であるが、補体系の活性化および肥満細胞の脱顆粒は、偽アレルギーを引き起こす反応を開始し、すなわち、偽アレルギー反応の最初の工程が鍵となる工程であると考えられる。

【先行技術文献】

【非特許文献】

【0015】

【非特許文献1】Ｃｈａｎｇ Ｌｉ ｅｔ ａｌ．，Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｎａｎｏｍｅｄｉｃｉｎｅ，２０１４，９，２０８９−２１００

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0016】

既知の製品よりも高い品質およびより良い性能を有するポリソルベート、特定的には、Ｐｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ ８０が常に必要とされている。

【課題を解決するための手段】

【0017】

本発明の方法で調製することができるポリソルベート、すなわち、ポリオキシエチレン１，４−ソルビタン脂肪酸エステルは、高純度を示し、
●ソルビトール、ソルビタン、１，４：３，６イソソルビド、ソルビトールポリマー、およびそれらの異性体のいずれかの含有量が低く、
●ポリエチレングリコールの含有量が低く、
●ＰＥＯイソソルビド、ＰＥＯソルビタン、およびそれらの異性体のいずれか、例えば、ＰＥＯ１，４−ソルビタンの含有量が低く、
●オレイン酸等の脂肪酸の含有量が低く、
●イソソルビド脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステルおよびそれらの異性体のいずれか、例えば、１，４−ソルビタン脂肪酸エステル、特に例えば１，４−ソルビタンオレエートおよびイソソルビドモノオレエート、ジオレエートまたはトリオレエートの含有量が低く、
●ＰＥＯ脂肪酸エステル、例えば、ＰＥＯモノオレエート、ジオレエートまたはトリオレエートの含有量が低く、
●ＰＥＯイソソルビド脂肪酸エステル、例えば、ＰＥＯイソソルビドモノオレエート、ジオレエートまたはトリオレエートの含有量が低く、
ＰＥＯ１，４−ソルビタン脂肪酸エステル、例えば、ＰＥＯ１，４−ソルビタンモノエステル、ＰＥＯ１，４−ソルビタンモノオレエートの含有量が高く、
ポリソルベートは、低い着色を示し、エチレンオキシド単位の数の分布が狭く、良好な乳化特性および可溶化特性を示す。

【0018】

本発明の方法を用いて調製することができるポリソルベート、すなわち、ポリオキシエチレン１，４−ソルビタン脂肪酸エステルを、薬物製剤の製剤中の賦形剤、例えば、非経口で適用される薬物製剤中の賦形剤として使用することができる。ポリソルベートを使用して、生物製剤およびワクチンを安定化する。特定的には、非経口で適用される薬物製品における粒子形成は、減らすことができるか、またはさらにはなくすことができる。貯蔵寿命が延長され、例えば、粒子形成の低減に起因するバッチの損失。粒子形成は、ＤＬＳ（動的光散乱）またはラマン分光法等のいくつかの方法で測定することができる。

【0019】

さらなる使用は、界面活性剤、湿潤剤、乳化剤および可溶化剤としての使用である。乳化剤として、ポリソルベートは、エマルションを作製するために使用され、局所的使用および経口使用のためのクリームおよびエマルション、ならびに眼用、鼻用および耳用の製剤、または吸入される製剤であってもよい。可溶化剤として、ポリソルベートは、例えば、注射液、点眼薬等の非経口で適用される難溶性薬物と共に使用される。生物製剤の安定剤として、凝集を防止し、界面応力を低減するために、ポリソルベートを、製造中、ならびに静脈内、皮下および筋肉内注射に使用する。ポリソルベートは、例えば、既知のポリソルベートと比較して、より低いＣＭＣ（臨界ミセル濃度）を示し、このことは、例えば、エマルションを調製するために必要な量が、既知のポリソルベートの場合には、より少なく、または言い換えると、例えばＺ電位の測定によって示すことができるように、同じ量でエマルションがより安定になることを意味する。ＣＭＣは、例えば、特に、液滴容積の引張計による測定によって測定することができる。ポリソルベートは、例えば、ゴニオメータ測定によって決定することができるように、より低い界面張力を示す。また、その表面（界面）特性に関して既知の製品と比較して、エトポリソルベート（ｅｔｈ ｐｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ）のより良い性能の特性決定のために、エリプソメトリも使用することができる。ポリソルベートは、タンパク質の安定化において、より良好な性能を示す。これは、特に、ＳＷＡＸＤ（小角および広角Ｘ線回折）、シンクロトン−ＳＡＸＳ（シンクロトロン小角Ｘ線散乱）、ＱＣＭ−Ｄ（吸着、散逸監視付きの水晶振動子マイクロバランス）、中性子反射率測定またはＺ電位によって決定することができる。また、ｌＴＣ（等温滴定カロリメトリー）は、タンパク質との相互作用における既知のポリソルベートと比較して、ポリソルベートのより良い性能を示すための別の方法である。

【0020】

別の重要な態様は、免疫反応である。ポリソルベートが非経口で適用される場合、例えば、抗がん薬、生物製剤およびタンパク質製剤との異なる種類の免疫反応が顕著である。タキソールのような化合物は、難溶性であり、ポリソルベートのような可溶化剤を必要とする。その結果が致命的なものとなる場合があるため、ポリソルベートに起因して、免疫反応のために治療を中止することが必要になる場合がある。Ｌｉ ｅｔ ａｌ．から、副産物の純度および低い含有量が、免疫反応のリスクを低減することができることが知られている。

【0021】

本発明の方法の技術的特徴は、エステル化反応のための遊離脂肪酸の代わりに脂肪酸塩化物を使用することである。

【発明を実施するための形態】

【0022】

略語およびその他のデータ。
以下の用語および略語は、特に明示的に示されていない場合、本明細書全体で使用される。

【0023】

【表1】

【0024】

本発明の対象は、ポリオキシエチレン１，４−ソルビタンと酸塩化物ＡＣＩＤＣＨＬＯＲとの反応ＲＥＡＣ−Ａによる、ポリオキシエチレン１，４−ソルビタン脂肪酸エステルを調製するための方法であって、
ＡＣＩＤＣＨＬＯＲが、式（Ｉ）の化合物であり、

【0025】

【化3】

【0026】

Ｒ１が、直鎖もしくは分枝鎖Ｃ_{１０−２２}アルキル、または直鎖もしくは分枝鎖Ｃ_{１０−２２}アルケニルである、方法である。

【0027】

好ましくは、Ｒ１は、直鎖Ｃ_{１０−２２}アルキルまたは直鎖Ｃ_{１０−２２}アルケニルである。

【0028】

好ましくは、ＡＣＩＤＣＨＬＯＲは、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、アラキジン酸、オレイン酸塩化物、およびそれらの混合物からなる群から選択され、
より好ましくは、ＡＣＩＤＣＨＬＯＲは、ラウリン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、オレイン酸塩化物、およびそれらの混合物からなる群から選択され、
さらにより好ましくは、ＡＣＩＤＣＨＬＯＲは、オレイン酸塩化物である。

【0029】

好ましくは、ポリオキシエチレン１，４−ソルビタンのポリオキシエチレンは、平均で１０〜３０、より好ましくは１２〜２８、さらにより好ましくは１４〜２６、特に１６〜２６、より特定的には１８〜２４、さらにより特定的には１８〜２３、特に１９〜２３のＥＯ単位、さらに特に、１９〜２２のＥＯ単位、さらにより特に、２０〜２２のＥＯ単位を有する。

【0030】

一実施形態において、ポリオキシエチレン１，４−ソルビタンは、平均で２１〜２２のＥＯ単位を有する。

【0031】

別の実施形態において、ポリオキシエチレン１，４−ソルビタンは、平均で２０または２２のＥＯ単位を有する。

【0032】

好ましくは、ＲＥＡＣ−Ａ中のＡＣＩＤＣＨＬＯＲのモル当量は、ポリオキシエチレン１，４−ソルビタンのモル当量の０．２〜４倍、より好ましくは０．４〜２倍、さらにより好ましくは０．６〜２倍、特定的には０．８〜２倍、より特定的には０．９〜２倍、さらにより特定的には０．９〜１．８倍、特に１〜１．８倍である。

【0033】

好ましくは、ＲＥＡＣ−Ａは温度ＴＥＭＰ−Ａで行われ、ＴＥＭＰ−Ａは、０〜７０℃、より好ましくは０〜６０℃、さらにより好ましくは０〜５０℃、特定的には１０〜５０℃、より特定的には１０〜４０℃、さらにより特定的には１０〜３０℃、特に１５〜２５℃、さらに特に１７．５〜２５℃である。

【0034】

好ましくは、ＲＥＡＣ−Ａの反応時間ＴＩＭＥ−Ａは、１分〜４時間、より好ましくは１分〜２時間、さらにより好ましくは１分〜１時間、特定的には２〜４５分、より特定的には５〜３０分、さらにより特定的には１０分〜２０分である。

【0035】

ＲＥＡＣ−Ａは、大気圧または大気圧を超える圧力で行うことができる。

【0036】

好ましくは、ＲＥＡＣ−Ａは大気圧で行われる。

【0037】

好ましくは、ＲＥＡＣ−Ａ中に溶媒が存在しないか、ＲＥＡＣ−Ａのために溶媒が投入されないか、またはＲＥＡＣ−Ａのために溶媒が使用されない。

【0038】

好ましくは、ＲＥＡＣ−Ａのために水が投入されないか、またはＲＥＡＣ−Ａのために水が使用されない。

【0039】

好ましくは、ＲＥＡＣ−Ａのために触媒が投入されないか、またはＲＥＡＣ−Ａのために触媒が使用されない。

【0040】

好ましくは、ＲＥＡＣ−Ａが無希釈で行われ、すなわち、ＲＥＡＣ−Ａのために使用されるか、または投入される唯一の物質が、ポリオキシエチレン１，４−ソルビタンおよびＡＣＩＤＣＨＬＯＲである。

【0041】

ＲＥＡＣ−Ａの後、ポリオキシエチレン１，４−ソルビタン脂肪酸エステルは、当業者に知られている標準的な方法によって単離することができる。蒸気蒸留は、ＲＥＡＣ−Ａの後に行うことができる。

【0042】

好ましくは、１，４−ソルビタンがエチレンオキシドと反応する反応ＲＥＡＣ−Ｂにより、ポリオキシエチレン１，４−ソルビタンが、調製される。

【0043】

好ましくは、ＲＥＡＣ−Ｂ酸中のエチレンオキシドのモル当量は、１，４−ソルビタンのモル当量の１０〜３０倍、より好ましくは１２〜２８倍、さらにより好ましくは１４〜２６倍、特定的には１６〜２６倍、より特定的には１８〜２４倍、さらにより特定的には１８〜２３倍、特に１８〜２２倍または１９〜２３倍、さらに特に１９〜２２倍、さらにより特に２０〜２２倍、特定的には特に２０〜２１倍である。

【0044】

好ましくは、ＲＥＡＣ−Ｂは、塩基ＢＡＳＥ−Ｂの存在下で行われる。

【0045】

好ましくは、ＢＡＳＥ−Ｂは、アルカリ金属Ｃ_１−４アルコキシドおよびアルカリ金属水酸化物からなる群から選択される。

【0046】

好ましくは、アルカリ金属Ｃ_１−４アルコキシドのアルカリ金属はＮａまたはＫであり、
好ましくは、Ｃ_１−４アルコキシドは、メトキシド、エトキシド、ｎ−プロポキシド、イソプロポキシド、ｎ−ブトキシドまたはｔｅｒｔ−ブトキシドである。

【0047】

好ましくは、アルキル金属水酸化物は、好ましくは、ＮａＯＨまたはＫＯＨである。
より好ましくは、ＢＡＳＥ−Ｂは、カリウムメトキシドのナトリウム、カリウムエトキシドのナトリウム、カリウム ｎ−プロポキシドのナトリウム、カリウムイソプロポキシドのナトリウム、カリウム ｎ−ブトキシドのナトリウム、カリウム ｔｅｒｔ−ブトキシドのナトリウム、ＮａＯＨおよびＫＯＨからなる群から選択され、
さらにより好ましくは、ＢＡＳＥ−Ｂは、カリウムメトキシドのナトリウム、カリウムエトキシドのナトリウム、カリウム ｎ−ブトキシドのナトリウム、カリウム ｔｅｒｔ−ブトキシドのナトリウム、ＮａＯＨおよびＫＯＨからなる群から選択され、
特定的には、ＢＡＳＥ−Ｂは、ナトリウムメトキシド、ナトリウム ｔｅｒｔ−ブトキシド、ＮａＯＨおよびＫＯＨからなる群から選択され、
より特定的には、ＢＡＳＥ−Ｂは、ナトリウムメトキシド、ＮａＯＨおよびＫＯＨからなる群から選択され、
さらにより特定的には、ＢＡＳＥ−Ｂは、ＮａＯＨまたはＫＯＨであり、
特に、ＢＡＳＥ−Ｂは、ＫＯＨである。

【0048】

好ましくは、ＲＥＡＣ−Ｂ中のＢＡＳＥ−Ｂのモル当量は、０．５〜３％、より好ましくは０．７５〜２．５、さらにより好ましくは１〜２．２５％、特定的には１．２５〜２．２５％、より特定的には１．５〜２％であり、％は、１，４−ソルビタンのモル量に基づく。

【0049】

好ましくは、ＲＥＡＣ−Ｂは、溶媒ＳＯＬＶ−Ｂ中で行われ、ＳＯＬＶ−Ｂは、好ましくは、アルキル化石油、例えば、ナフサ（石油）、ヘビーアルキレートである。

【0050】

好ましくは、ＳＯＬＶ−Ｂの重量は、１，４−ソルビタンの重量の１〜１０倍、より好ましくは１〜５倍、さらにより好ましくは１〜４倍、特定的には１〜３倍である。

【0051】

好ましくは、ＲＥＡＣ−Ｂは温度ＴＥＭＰ−Ｂで行われ、ＴＥＭＰ−Ｂは、１００〜２００℃、より好ましくは１１０〜１９０℃、さらにより好ましくは特定的には１２０〜１８０℃、特定的には１３０〜１７０℃、より特定的には１４０〜１６５℃である。

【0052】

好ましくは、ＲＥＡＣ−Ｂの反応時間ＴＩＭＥ−Ｂは、１〜２０時間、より好ましくは２〜１５時間、さらにより好ましくは３〜１０時間、特定的には４〜８時間である。

【0053】

ＲＥＡＣ−Ｂは、大気圧または大気圧を超える圧力で行うことができる。

【0054】

好ましくは、ＲＥＡＣ−Ａは、大気圧を超える圧力で行われる。好ましくは、ＴＥＭＰ−Ｂが選択され、圧力は、特定的にはＳＯＬＶ−Ｂが存在する場合、選択された温度から生じるＲＥＡＣ−Ｂの反応混合物の蒸気圧力から生じる。

【0055】

好ましくは、ＲＥＡＣ−Ｂは、窒素またはアルゴン雰囲気等の不活性雰囲気下で行われる。

【0056】

ＲＥＡＣ−Ｂの後、ＰＥＯソルビタンは、当業者に知られている標準的な方法によって単離することができる。任意のＳＯＬＶ−Ｂは、例えば、相分離、蒸気蒸留等によって除去することができ、好ましくは、蒸気蒸留は、ＲＥＡＣ−Ｂの後に行われる。

【0057】

一実施形態において、１，４−ソルビタンは、４つの連続工程ＳＴＥＰ１、ＳＴＥＰ２、ＳＴＥＰ３およびＳＴＥＰ４を含む方法ＳＯＲＢＩＤによって調製され、
ＳＴＥＰ１において、Ｄ−ソルビトールが、ｐ−トルエンスルホン酸およびテトラブチルアンモニウムブロミドの存在下で脱水反応ＤＥＨＹＤＲＥＡＣで脱水され、ＳＴＥＰ１が混合物ＭＩＸ１を提供し、
ＳＴＥＰ２において、エタノールをＭＩＸ１と混合し、ＳＴＥＰ２が混合物ＭＩＸ２を提供し、
ＳＴＥＰ３において、イソプロパノールをＭＩＸ２と混合し、ＳＴＥＰ３が混合物ＭＩＸ３を提供し、
ＳＴＥＰ４において、１，４−ソルビタンがＭＩＸ３から単離される。

【0058】

方法ＳＯＲＢＩＴは、高収率、高純度、低含有量のイソソルビド、低含有量のＤ−ソルビトールを含む１，４−ソルビタンを提供し、方法ＳＯＲＢＩＤは、経済的であり、濾過等の少ない数の工程を有し、少数の異なる化学物質を使用する。方法ＳＯＲＢＩＤは、１つの反応器で行うことができる。

【0059】

好ましくは、ｐ−トルエンスルホン酸が、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物の形態で使用されるため、ｐ−トルエンスルホン酸が言及される任意の実施形態において、好ましい実施形態は、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物である。

【0060】

好ましくは、ＤＥＨＹＤＲＥＡＣ中に溶媒が存在しないか、またはＤＥＨＹＤＲＥＡＣのために溶媒が使用されない。

【0061】

好ましくは、ＤＥＨＹＤＲＥＡＣのために水が投入されない。

【0062】

好ましくは、ＤＥＨＹＤＲＥＡＣは無希釈で行われ、すなわち、Ｄ−ソルビトール、ｐ−トルエンスルホン酸およびテトラブチルアンモニウムブロミドといった３つの構成要素のみがＤＥＨＹＤＲＥＡＣのために使用され、ＤＥＨＹＤＲＥＡＣのために投入される。

【0063】

好ましくは、ＤＥＨＹＤＲＥＡＣ酸中のｐ−トルエンスルホン酸のモル当量は、Ｄ−ソルビトールのモル当量の０．２〜１．６％、より好ましくは０．４〜１．４％、さらにより好ましくは０．６〜１．２％、特定的には０．６〜１．０％である。

【0064】

好ましくは、ＤＥＨＹＤＲＥＡＣ酸中のテトラブチルアンモニウムブロミドのモル当量は、Ｄ−ソルビトールのモル当量の１．０〜３．６％、より好ましくは１．２〜３．２％、さらにより好ましくは１．４〜２．８％、特定的には１．６〜２．４％、より特定的には１．６〜２．０％である。

【0065】

好ましくは、ＳＴＥＰ２において混合されるエタノールの重量は、Ｄ−ソルビトールの重量の０．２〜５倍、より好ましくは０．２〜２倍、さらにより好ましくは０．２〜１倍、特定的には０．２〜０．８倍、より特定的には０．２〜０．６倍、さらにより特定的には０．３〜０．５倍である。

【0066】

好ましくは、ＳＴＥＰ２において混合されるイソプロパノールの重量は、Ｄ−ソルビトールの重量の０．２〜５倍、より好ましくは０．２〜２倍、さらにより好ましくは０．２〜１倍、特定的には０．２〜０．８倍、より特定的には０．２〜０．６倍、さらにより特定的には０．３〜０．５倍である。

【0067】

好ましくは、ＤＥＨＹＤＲＥＡＣは、温度ＴＥＭＰ１で行われ、ＴＥＭＰ１は、９５〜１２０℃、より好ましくは１００〜１１５℃、さらにより好ましくは１０５〜１１５℃である。

【0068】

好ましくは、ＤＥＨＹＤＲＥＡＣの反応時間ＴＩＭＥ１−１は、４〜１２時間、より好ましくは６〜１０時間、さらにより好ましくは７〜９時間である。

【0069】

好ましくは、ＤＥＨＹＤＲＥＡＣは、５０ｍｂａｒ未満、より好ましくは２５ｍｂａｒ未満、さらにより好ましくは１５ｍｂａｒ未満の圧力ＰＲＥＳＳ１で行われる。

【0070】

別の実施形態において、ＤＥＨＹＤＲＥＡＣは、０．００１〜５０ｍｂａｒ、より好ましくは０．０１〜２５ｍｂａｒ、さらにより好ましくは０．１〜１５ｍｂａｒ、特定的には１〜１５ｍｂａｒ、より特定的には１〜１２．５ｍｂａｒのＰＲＥＳＳ１で行われる。

【0071】

好ましくは、ＳＴＥＰ２、ＳＴＥＰ３およびＳＴＥＰ４は、大気圧で行われる。

【0072】

反応が脱水であり、１当量の水を除去するため、ＤＥＨＹＤＲＥＡＣによって水が形成される。ｐ−トルエンスルホン酸が、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物の形態で使用される場合、これがＤＥＨＹＤＲＥＡＣ中の水供給源でもあり得る。

【0073】

好ましくは、水は、ＤＥＨＹＤＲＥＡＣ中に除去される。

【0074】

好ましくは、ＳＴＥＰ２は、６０〜９０℃、より好ましくは６０〜８５℃、さらにより好ましくは６５〜８０℃の温度ＴＥＭＰ２で行われる。

【0075】

好ましくは、ＳＴＥＰ１は、ＤＥＨＹＤＲＥＡＣの後に冷却することＣＯＯＬ１を含み、ＭＩＸ１は、ＴＥＭＰ１からＴＥＭＰ２まで冷却される。

【0076】

好ましくは、ＣＯＯＬ１は、時間ＴＩＭＥ１−２で行われ、ＴＩＭＥ１−２は、１０分〜１０時間、より好ましくは１５分〜５時間、さらにより好ましくは１５分〜２時間、特定的には２０分〜１時間である。

【0077】

好ましくは、ＤＥＨＹＤＲＥＡＣはＰＲＥＳＳ１で行われた場合、ＤＥＨＹＤＲＥＡＣの後、圧力は、ＰＲＥＳＳ１から大気圧まで戻され得る。ＳＴＥＰ１がＣＯＯＬ１を含み、ＤＥＨＹＤＲＥＡＣがＰＲＥＳＳ１で行われた場合、圧力は、ＣＯＯＬ１の前、最中または後に、ＰＲＥＳＳ１から大気圧まで戻され得る。

【0078】

好ましくは、エタノールの混合後、ＳＴＥＰ２は、時間ＴＩＭＥ２−１の間、ＭＩＸ２を撹拌することＳＴＩＲＲ２を含み、ＴＩＭＥ２−１は、３０分〜１０時間、より好ましくは１〜８時間、さらにより好ましくは１〜６時間、特定的には１〜４時間、より特定的には１．５〜３時間である。

【0079】

好ましくは、ＳＴＩＲＲ２は、ＴＥＭＰ２で行われる。

【0080】

好ましくは、ＳＴＥＰ３は、１０〜３０℃、より好ましくは１５〜２５℃、さらにより好ましくは１７．５〜２２．５℃の温度ＴＥＭＰ３−１で行われる。

【0081】

好ましくは、ＳＴＥＰ２は、冷却することＣＯＯＬ２を含み、ＭＩＸ２は、ＴＥＭＰ１またはＴＥＭＰ２からＴＥＭＰ３まで冷却される。

【0082】

好ましくは、ＣＯＯＬ２は、ＳＴＩＲＲ２の後に行われる。

【0083】

好ましくは、ＣＯＯＬ２は、ＴＥＭＰ２〜ＴＥＭＰ３で行われる。

【0084】

好ましくは、ＳＴＥＰ２は、ＳＴＩＲＲ２およびＣＯＯＬ２を含み、ＣＯＯＬ２は、ＳＴＩＲＲ２の後に行われる。

【0085】

好ましくは、ＣＯＯＬ２は、時間ＴＩＭＥ２−２で行われ、ＴＩＭＥ２−２は、１〜１０時間、より好ましくは１〜８時間、さらにより好ましくは１〜６時間、特定的には１〜４時間、より特定的には２〜４時間である。

【0086】

好ましくは、イソプロパノールの混合後、ＳＴＥＰ３は、−５〜５℃、より好ましくは−２．５〜２．５℃、さらにより好ましくは−１〜２℃の温度ＴＥＭＰ３−２までＭＩＸ３を冷却することＣＯＯＬ３を含む。

【0087】

好ましくは、ＣＯＯＬ３は、時間ＴＩＭＥ３−１で行われ、ＴＩＭＥ３−１は、３０分〜１０時間、より好ましくは３０分〜８時間、さらにより好ましくは３０分〜６時間、特定的には３０分〜４時間、より特定的には３０分〜２時間である。

【0088】

好ましくは、ＳＴＥＰ３は、ＭＩＸ３を撹拌することＳＴＩＲＲ３を含み、ＳＴＩＲＲ３は、時間ＴＩＭＥ３−２の間行われ、ＴＩＭＥ３−２は、１〜１２時間、より好ましくは１〜１０時間、さらにより好ましくは２〜８時間、特定的には２〜６時間、より特定的には３〜５時間である。

【0089】

好ましくは、ＳＴＩＲＲ３は、ＣＯＯＬ３の後に行われる。

【0090】

好ましくは、ＳＴＩＲＲ３は、ＴＥＭＰ３−２で行われる。

【0091】

より好ましくは、ＳＴＩＲＲ３は、ＣＯＯＬ３の後に行われ、ＳＴＩＲＲ３は、ＴＥＭＰ３−２で行われる。

【0092】

好ましくは、ＭＩＸ３からの１，４−ソルビタンの工程４中の単離は、当業者に既知の任意の手段、例えば、ＭＩＸ３中の任意の液体の蒸発、濾過、遠心分離、乾燥、またはそれらの組み合わせによって行うことができ、好ましくは、単離は、濾過によって行われる。

【0093】

好ましくは、濾過によってプレスケーキを提供し、続いて、プレスケーキをイソプロパノールで洗浄し、続いて、洗浄されたプレスケーキを乾燥させることによって、１，４−ソルビタンが、ＳＴＥＰ４においてＭＩＸ３から単離される。

【0094】

一実施形態において、
ＳＴＥＰ１は、連続してＤＥＨＹＤＲＥＡＣおよびＣＯＯＬ１を含み、
ＳＴＥＰ２は、エタノールを混合した後、連続してＳＴＩＲＲ２およびＣＯＯＬ２を含み、
ＳＴＥＰ３は、イソプロパノールを混合した後、連続してＣＯＯＬ３およびＳＴＩＲＲ３を含み、
ＳＴＥＰ４は、ＭＩＸ３の濾過による１，４−ソルビタンの単離、好ましくは、その後の洗浄および乾燥を含む。

【0095】

好ましくは、ＳＴＥＰ２において、エタノールがＭＩＸ１に投入され、ＭＩＸ２を提供する。

【0096】

好ましくは、ＳＴＥＰ３において、イソプロパノールがＭＩＸ２に投入され、ＭＩＸ３を提供する。

【0097】

好ましくは、ＳＴＥＰ１、ＳＴＥＰ２およびＳＴＥＰ３は、１つの同じ反応器内で連続して行われる。

【0098】

別の実施形態において、１，４−ソルビタンは、３つの連続工程ＳＴＥＰ１ＡＱＵ、ＳＴＥＰ２ＡＱＵおよびＳＴＥＰ３ＡＱＵで１，４−ソルビタンを調製するための方法ＳＯＲＢＩＤＡＱＵによって調製され、
ＳＴＥＰ１ＡＱＵにおいて、Ｄ−ソルビトールが、ｐ−トルエンスルホン酸およびテトラブチルアンモニウムブロミドの存在下で脱水反応ＤＥＨＹＤＲＥＡＣＡＱＵで脱水され、ＳＴＥＰ１ＡＱＵが混合物ＭＩＸ１ＡＱＵを提供し、
ＳＴＥＰ２ＡＱＵにおいて、エタノールをＭＩＸ１ＡＱＵと混合し、ＳＴＥＰ２ＡＱＵが混合物ＭＩＸ２ＡＱＵを提供し、
ＳＴＥＰ３ＡＱＵにおいて、イソプロパノールをＭＩＸ２ＡＱＵと混合し、ＳＴＥＰ３ＡＱＵが混合物ＭＩＸ３ＡＱＵを提供し、
Ｄ−ソルビトールが、Ｄ−ソルビトールと水との混合物の形態でＳＴＥＰ１ＡＱＵに使用される。

【0099】

好ましくは、Ｄ−ソルビトールが、Ｄ−ソルビトールと水との混合物の形態でＳＴＥＰ１ＡＱＵに使用され、投入される。

【0100】

ＳＴＥＰ１ＡＱＵに使用されるＤ−ソルビトールと水との混合物は、溶液またはＤ−ソルビトールの水中懸濁液であってもよい。

【0101】

好ましくは、Ｄ−ソルビトールは、Ｄ−ソルビトールと水との混合物としてＳＴＥＰ１ＡＱＵに使用され、Ｄ−ソルビトールの含有量は、Ｄ−ソルビトールの２０〜８０重量％、より好ましくは４０〜８０重量％、さらにより好ましくは６０〜８０重量％、特定的には６５〜７５重量％、特に７０重量％であり、重量％は、Ｄ−ソルビトールと水との混合物の合計重量に基づく。

【0102】

好ましくは、ＴＢＡＢは、ＴＢＡＢと水との混合物としてＳＴＥＰ１ＡＱＵに使用され、
より好ましくは、ＴＢＡＢは、ＴＢＡＢと水との混合物としてＳＴＥＰ１ＡＱＵに使用され、投入される。

【0103】

ＴＢＡＢと水との混合物は、溶液またはＴＢＡＢの水中懸濁液であってもよい。

【0104】

より好ましくは、ＴＢＡＢは、ＴＢＡＢと水との混合物としてＳＴＥＰ１ＡＱＵに使用され、ＴＢＡＢの含有量は、ＴＢＡＢの２０〜８０重量％、さらにより好ましくは４０〜８０重量％、特定的には６０〜８０重量％、より特定的には６０〜７５重量％、さらにより特定的には６０〜７０重量％、特に６５重量％であり、重量％は、ＴＢＡＢと水との混合物の合計重量に基づく。

【0105】

好ましくは、ＳＴＥＰ１ＡＱＵは、ＳＴＥＰ１ＡＱＵＡ、ＳＴＥＰ１ＡＱＵＢ、およびＳＴＥＰ１ＡＱＵＣの３つの工程を含む。

【0106】

ＳＴＥＰ１ＡＱＵＡにおいて、Ｄ−ソルビトールと水、ＴＢＡＢおよびｐ−トルエンスルホン酸の混合物が混合され、混合物ＭＩＸ１ＡＱＵＡを提供し、
ＳＴＥＰ１ＡＱＵＢにおいて、蒸留ＤＩＳＴ１ＡにおいてＭＩＸ１ＡＱＵＡから水が留去され、混合物ＭＩＸ１ＡＱＵＢを提供し、
ＳＴＥＰ１ＡＱＵＣにおいて、ＭＩＸ１ＡＱＵＢを撹拌し、ＭＩＸ１ＡＱＵを提供する。

【0107】

ＭＩＸ１ＡＱＵＡは、Ｄ−ソルビトール、ＴＢＡＢおよび水を含む。

【0108】

好ましくは、ＤＩＳＴ１Ａは、４０〜１００℃、より好ましくは５０〜９０℃、さらにより好ましくは５５〜８５℃、特に６０〜８０℃の温度ＴＥＭＰ１Ａで行われる。

【0109】

好ましくは、ＤＩＳＴ１Ａは、減圧ＰＲＥＳＳ１Ａで行われ、ＰＲＥＳＳ１Ａは、ＤＩＳＴ１ＡがＴＥＭＰ１Ａで行われるような様式で調整される。

【0110】

好ましくは、全ての水は、ＳＴＥＰ１ＡＱＵＡにおいて、ＭＩＸ１ＡＱＵＡから留去される。

【0111】

好ましくは、ＤＩＳＴ１Ａは、全ての水がＭＩＸ１ＡＱＵＡから留去されるまで、そのような期間行われる。

【0112】

好ましくは、ＳＴＥＰ１ＡＱＵＣにおいて、ＭＩＸ１ＡＱＵＢの撹拌は、温度ＴＥＭＰ１Ｃで行われ、ＴＥＭＰ１Ｃは、８０〜１２０℃である。

【0113】

好ましくは、ＴＥＭＰ１Ｃは、９０〜１１０℃、より好ましくは１００〜１１０℃、特に１０５℃である。

【0114】

好ましくは、ＳＴＥＰ１ＡＱＵＣにおいて、ＭＩＸ１ＡＱＵＢの撹拌は、時間ＴＩＭＥ１Ｃで行われ、ＭＩＸ１ＡＱＵを提供し、ＴＩＭＥ１Ｃは２〜１０時間である。

【0115】

好ましくは、ＴＩＭＥ１Ｃは、４〜８時間、より好ましくは５〜７時間、特に６時間である。

【0116】

好ましくは、ＴＩＭＥ１Ｃ中の撹拌は、減圧ＰＲＥＳＳ１Ｃ下で行われ、一実施形態において、ＰＲＥＳＳ１Ｃは、選択されたＴＥＭＰ１Ｃで、撹拌することが還流条件下で撹拌が行われるように調整され、別の実施形態において、ＰＲＥＳＳ１Ｃは、４０〜１００ｍｂａｒ、より好ましくは４０〜６０ｍｂａｒ、特に５０ｍｂａｒである。

【0117】

好ましくは、ＴＩＭＥ１Ｃの後、圧力は、窒素の挿入によってＰＲＥＳＳ１Ｃから大気圧に戻される。

【0118】

好ましくは、ＳＴＥＰ２ＡＱＵおよびＳＴＥＰ３ＡＱＵは、大気圧で行われる。

【0119】

好ましくは、ｐ−トルエンスルホン酸が、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物の形態で使用されるため、ｐ−トルエンスルホン酸が言及される任意の実施形態において、好ましい実施形態は、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物である。

【0120】

ＤＥＨＹＤＲＥＡＣＡＱＵは、ＳＴＥＰ１ＡＱＵＢ、ＳＴＥＰ１ＡＱＵＣ、または両方で行われる。

【0121】

好ましくは、ＤＥＨＹＤＲＥＡＣＡＱＵは、ＳＴＥＰ１ＡＱＵＢにおいて行われ、ＳＴＥＰ１ＡＱＵＣに延長することもできる。

【0122】

好ましくは、有機溶媒、より好ましくは水以外の溶媒が、ＤＥＨＹＤＲＥＡＣＡＱＵ中に存在しないか、またはＤＥＨＹＤＲＥＡＣＡＱＵのために使用されない。

【0123】

好ましくは、有機溶媒、より好ましくは水以外の溶媒が、ＳＴＥＰ１ＡＱＵ中に存在しないか、またはＳＴＥＰ１ＡＱＵのために使用されない。

【0124】

好ましくは、ＤＥＨＹＤＲＥＡＣＡＱＵにおいて、Ｄ−ソルビトール、ｐ−トルエンスルホン酸およびテトラブチルアンモニウムブロミドといった３つの構成要素のみが、ＤＥＨＹＤＲＥＡＣＱＵのために使用され、ＤＥＨＹＤＲＥＡＣＱＵのために投入され、Ｄ−ソルビトールが、Ｄ−ソルビトールと水との混合物の形態で使用され、投入され、より好ましくは、ＴＢＡＢも、ＴＢＡＢと水との混合物の形態で使用され、投入される。

【0125】

好ましくは、ＤＥＨＹＤＲＥＡＣＡＱＵ酸中のｐ−トルエンスルホン酸のモル当量は、Ｄ−ソルビトールのモル当量の０．２〜１．６％、より好ましくは０．４〜１．４％、さらにより好ましくは０．６〜１．２％、特定的には０．６〜１．０％、より特定的には０．８〜１．０％、特に０．９％である。

【0126】

好ましくは、ＤＥＨＹＤＲＥＡＣＡＱＵ酸中のテトラブチルアンモニウムブロミドのモル当量は、Ｄ−ソルビトールのモル当量の１〜３％、より好ましくは１．２〜２．５％、さらにより好ましくは１．４〜２％、特定的には１．６〜１．８％、特に１．７％である。

【0127】

好ましくは、ＳＴＥＰ２ＡＱＵにおいて混合されるエタノールの重量は、Ｄ−ソルビトールの重量の０．２〜５倍、より好ましくは０．２〜２倍、さらにより好ましくは０．２〜１倍、特定的には０．２〜０．８倍、より特定的には０．２〜０．６倍、さらにより特定的には０．３〜０．５倍、特に０．４倍である。

【0128】

好ましくは、ＳＴＥＰ２ＡＱＵにおいて混合されるイソプロパノールの重量は、Ｄ−ソルビトールの重量の０．２〜５倍、より好ましくは０．２〜２倍、さらにより好ましくは０．２〜１倍、特定的には０．２〜０．８倍、より特定的には０．２〜０．６倍、さらにより特定的には０．３〜０．５倍、特に０．４倍である。

【0129】

好ましくは、ＳＴＥＰ２ＡＱＵは、６０〜９０℃、より好ましくは６０〜８５℃、さらにより好ましくは６５〜８０℃、特に７０〜７５℃の温度ＴＥＭＰ２ＡＱＵで行われる。

【0130】

好ましくは、ＳＴＥＰ１ＡＱＵは、ＤＥＨＹＤＲＥＡＣＡＱＵの後、好ましくはＳＴＥＰ１ＡＱＵＣの後に冷却することＣＯＯＬ１ＡＱＵを含み、ＭＩＸ１ＡＱＵは、ＴＥＭＰ１ＣからＴＥＭＰ２ＡＱＵまで冷却される。

【0131】

好ましくは、ＣＯＯＬ１ＡＱＵは、時間ＴＩＭＥ１−２ＡＱＵの間行われ、ＴＩＭＥ１−２ＡＱＵは、１０分〜１０時間、より好ましくは１５分〜５時間、さらにより好ましくは１５分〜２時間、特定的には２０分〜１．５時間、より特定的には３０分〜６０分、特に４５分である。

【0132】

ＳＴＥＰ１ＡＱＵがＣＯＯＬ１ＡＱＵを含み、ＳＥＴＰ１ＣがＰＲＥＳＳ１Ｃで行われた場合、圧力は、ＣＯＯＬ１ＡＱＵの前、最中または後に、ＰＲＥＳＳ１Ｃから大気圧まで戻され得る。

【0133】

好ましくは、エタノールとＭＩＸ１ＡＱＵとを混合した後、ＳＴＥＰ２ＡＱＵは、時間ＴＩＭＥ２−１ＡＱＵの間、ＭＩＸ２ＡＱＵを撹拌することＳＴＩＲＲ２ＡＱＵを含み、ＴＩＭＥ２−１ＡＱＵは、３０分〜１０時間、より好ましくは１〜８時間、さらにより好ましくは１〜６時間、特定的には１〜４時間、より特定的には１．５〜３時間、特に２時間である。

【0134】

好ましくは、ＳＴＩＲＲ２ＡＱＵは、ＴＥＭＰ２ＡＱＵで行われる。

【0135】

好ましくは、１，４−ソルビタンの結晶種をＭＩＸ２ＡＱＵに添加し、
好ましくは、０．１〜２重量％、より好ましくは０．２〜１．５重量％、さらにより好ましくは０．３〜１重量％、特定的には０．４〜０．７重量％、特に０．５重量％の１，４−ソルビタンの結晶種を添加し、重量％は、Ｄ−ソルビトールの重量に基づき、
好ましくは、ＳＴＩＲＲ２ＡＱＵの後に１，４−ソルビタンの結晶種をＭＩＸ２ＡＱＵに添加する。

【0136】

好ましくは、ＭＩＸ２ＡＱＵは、透明溶液であり、
より好ましくは、ＭＩＸ２ＡＱＵは、１，４−ソルビタンの結晶種を添加する前に透明溶液であり、
より好ましくは、ＳＴＩＲＲ２ＡＱＵの後のＭＩＸ２ＡＱＵは、透明溶液であり、
さらにより好ましくは、ＳＴＩＲＲ２ＡＱＵの後、かつ１，４−ソルビタンの結晶種をＭＩＸ２ＡＱＵに添加する前に、ＭＩＸ２ＡＱＵは、透明溶液である。

【0137】

好ましくは、ＳＴＥＰ３ＡＱＵにおけるイソプロパノールとＭＩＸ２ＡＱＵとの混合は、２０〜７０℃、より好ましくは３０〜６０℃、さらにより好ましくは４０〜５５℃、特に４５〜５０℃の温度ＴＥＭＰ３−１ＡＱＵで行われる。

【0138】

好ましくは、エタノールとＭＩＸ１ＡＱＵとの混合後、ＳＴＥＰ２ＡＱＵは、冷却することＣＯＯＬ２ＡＱＵを含み、ＭＩＸ２ＡＱＵは、ＴＥＭＰ１ＣまたはＴＥＭＰ２ＡＱＵからＴＥＭＰ３−１ＡＱＵまで冷却される。
好ましくは、ＣＯＯＬ２ＡＱＵは、ＳＴＩＲＲ２ＡＱＵの後に行われる。

【0139】

より好ましくは、ＣＯＯＬ２ＡＱＵは、１，４−ソルビタンの結晶種をＭＩＸ２ＡＱＵに添加した後に行われる。
好ましくは、ＣＯＯＬ２ＡＱＵは、ＴＥＭＰ２ＡＱＵ〜ＴＥＭＰ３−１ＡＱＵで行われる。

【0140】

好ましくは、ＳＴＥＰ２ＡＱＵは、ＳＴＩＲＲ２ＡＱＵと、ＭＩＸ２ＡＱＵへの１，４−ソルビタンの結晶種の添加と、ＣＯＯＬ２ＡＱＵと、を含み、ＣＯＯＬ２ＡＱＵは、１，４−ソルビタンの結晶種をＭＩＸ２ＡＱＵに添加した後に行われる。

【0141】

好ましくは、ＣＯＯＬ２ＡＱＵは、時間ＴＩＭＥ２−２ＡＱＵで行われ、ＴＩＭＥ２−２ＡＱＵは、１〜１０時間、より好ましくは１〜８時間、さらにより好ましくは１〜６時間、特定的には１〜４時間、より特定的には１〜３時間、特に２時間である。

【0142】

好ましくは、１，４−ソルビタンの結晶種を、ＳＴＩＲＲ２ＡＱＵの後、かつＣＯＯＬ２ＡＱＵの前に、ＭＩＸ２ＡＱＵに添加される。

【0143】

好ましくは、ＳＴＥＰ２ＡＱＵで使用されるエタノールの量は、エタノールとＭＩＸ１ＡＱＵとを混合した後に、１，４−ソルビタンのエタノール透明溶液が、好ましくはＴＥＭＰ２ＡＱＵで得られるような量である。

【0144】

好ましくは、エタノールの量は、上述の透明溶液が、ＴＥＭＰ２ＡＱＵでは１，４−ソルビタンのエタノール透明溶液であり、ＴＥＭＰ２ＡＱＵより下の温度で、好ましくは、例えば、ＴＥＭＰ３−２ＡＱＵでは１，４−ソルビタンのエタノール過飽和溶液であるような量であり、ＴＥＭＰ３−２ＡＱＵは、本明細書に定義される通りであり、より好ましくは、例えば、ＴＥＭＰ３−１ＡＱＵであり、
より好ましくは、エタノールの量は、上述の透明溶液が、ＴＥＭＰ２ＡＱＵで１，４−ソルビタンのエタノール過飽和溶液であるような量である。

【0145】

好ましくは、上述の透明溶液は、ＳＴＩＲＲ２ＡＱＵの後、より好ましくは、ＳＴＩＲＲ２ＡＱＵの後、かつ１，４−ソルビタンの結晶種をＭＩＸ２ＡＱＵに添加する前に得られる。

【0146】

好ましくは、エタノールの量は、ＣＯＯＬ２ＡＱＵ中に結晶化が開始するような量であり、
より好ましくは、エタノールの量は、
●エタノールとＭＩＸ１ＡＱＵとを混合した後、１，４−ソルビタンのエタノール透明溶液が、好ましくはＴＥＭＰ２ＡＱＵで得られ、
●ＣＯＯＬ２ＡＱＵ中に結晶化が開始するような量であり、
さらにより好ましくは、エタノールの量は、
●エタノールとＭＩＸ１ＡＱＵとを混合した後、１，４−ソルビタンのエタノール透明溶液が、好ましくはＴＥＭＰ２ＡＱＵで得られ、
●上述の透明溶液が、ＴＥＭＰ２ＡＱＵでは１，４−ソルビタンのエタノール透明溶液であり、ＴＥＭＰ２ＡＱＵより下の温度で、好ましくは、例えばＴＥＭＰ３−２ＡＱＵ、より好ましくは例えばＴＥＭＰ３−１ＡＱＵでは１，４−ソルビタンのエタノール過飽和溶液であり、
●ＣＯＯＬ２ＡＱＵ中に結晶化が開始するような量である。

【0147】

好ましくは、ＣＯＯＬ２ＡＱＵの後のＭＩＸ２ＡＱＵは懸濁液である。

【0148】

好ましくは、イソプロパノールとＭＩＸ２ＡＱＵとを混合した後、ＳＴＥＰ３ＡＱＵは、−５〜１０℃、より好ましくは−２．５〜７．５℃、さらにより好ましくは−１〜６℃、特に０〜５℃の温度ＴＥＭＰ３−２ＡＱＵまで、ＭＩＸ３ＡＱＵを冷却することＣＯＯＬ３ＡＱＵを含む。

【0149】

好ましくは、ＣＯＯＬ３ＡＱＵは、時間ＴＩＭＥ３−１ＡＱＵで行われ、ＴＩＭＥ３−１ＡＱＵは、１〜１０時間、より好ましくは１〜８時間、さらにより好ましくは１〜６時間、特定的には２〜６時間、より特定的には２〜４時間、特に３時間である。

【0150】

好ましくは、イソプロパノールとＭＩＸ２ＡＱＵとを混合した後、ＳＴＥＰ３ＡＱＵは、ＭＩＸ３ＡＱＵを撹拌することＳＴＩＲＲ３ＡＱＵを含む。

【0151】

好ましくは、ＳＴＩＲＲ３ＡＱＵは、ＴＥＭＰ３−２ＡＱＵで行われる。

【0152】

好ましくは、ＳＴＩＲＲ３ＡＱＵは、時間ＴＩＭＥ３−２ＡＱＵで行われ、ＴＩＭＥ３−２ＡＱＵは、１〜１２時間、より好ましくは１〜１０時間、さらにより好ましくは１〜８時間、特定的には２〜６時間、より特定的には３〜５時間、特に４時間である。

【0153】

好ましくは、ＳＴＩＲＲ３ＡＱＵは、ＣＯＯＬ３ＡＱＵの後に行われる。

【0154】

より好ましくは、ＳＴＩＲＲ３ＡＱＵは、ＣＯＯＬ３ＡＱＵの後に行われ、ＳＴＩＲＲ３ＡＱＵは、ＴＥＭＰ３−２ＡＱＵで行われる。

【0155】

好ましくは、ＭＩＸ３ＡＱＵは懸濁液である。

【0156】

好ましくは、本方法は、ＳＴＥＰ４ＡＱＵを含み、ＳＴＥＰ４ＡＱＵは、ＳＴＥＰ３ＡＱＵの後に行われ、ＳＴＥＰ４ＡＱＵにおいて、１，４−ソルビタンは、ＭＩＸ３ＡＱＵから単離される。

【0157】

ＭＩＸ３ＡＱＵからの１，４−ソルビタンのＳＴＥＰ４ＡＱＵ中の単離は、当業者に既知の任意の手段、例えば、ＭＩＸ３ＡＱＵ中の任意の液体の蒸発、濾過、遠心分離、乾燥、またはそれらの組み合わせによって行うことができ、好ましくは、単離は、濾過によって行われる。

【0158】

好ましくは、１，４−ソルビタンは、ＳＴＥＰ４ＡＱＵにおいて濾過によってＭＩＸ３ＡＱＵから単離され、プレスケーキを提供し、好ましくは、続いて、プレスケーキをイソプロパノールで洗浄し、好ましくは、続いて、洗浄されたプレスケーキを乾燥させ、好ましくは、乾燥は、３０〜７０℃、より好ましくは３５〜６５℃、さらにより好ましくは４０〜６０℃、特に４５〜５５℃の温度で行う。

【0159】

一実施形態において、
ＳＴＥＰ１ＡＱＵは、連続してＤＥＨＹＤＲＥＡＣＡＱＵおよびＣＯＯＬ１ＡＱＵを含み、
ＳＴＥＰ２ＡＱＵは、エタノールを混合した後、連続してＳＴＩＲＲ２ＡＱＵおよびＣＯＯＬ２ＡＱＵを含み、
ＳＴＥＰ３ＡＱＵは、イソプロパノールを混合した後、連続してＣＯＯＬ３ＡＱＵおよびＳＴＩＲＲ３ＡＱＵを含み、
好ましくは、
ＳＴＥＰ１ＡＱＵは、連続してＳＴＥＰ１ＡＱＵＡ、ＳＴＥＰ１ＡＱＵＢ、ＳＴＥＰ１ＡＱＵＣおよびＣＯＯＬ１ＡＱＵを含み、
ＳＴＥＰ２ＡＱＵは、エタノールを混合した後、連続してＳＴＩＲＲ２ＡＱＵおよびＣＯＯＬ２ＡＱＵを含み、
ＳＴＥＰ３ＡＱＵは、イソプロパノールを混合した後、連続してＣＯＯＬ３ＡＱＵおよびＳＴＩＲＲ３ＡＱＵを含む。

【0160】

より好ましくは、
ＳＴＥＰ１ＡＱＵは、連続してＳＴＥＰ１ＡＱＵＡ、ＳＴＥＰ１ＡＱＵＢ、ＳＴＥＰ１ＡＱＵＣおよびＣＯＯＬ１ＡＱＵを含み、
ＳＴＥＰ２ＡＱＵは、エタノールを混合した後、連続して、ＳＴＩＲＲ２ＡＱＵ、ＭＩＸ２ＡＱＵへの１，４−ソルビタンの結晶種の添加、およびＣＯＯＬ２ＡＱＵを含み、
ＳＴＥＰ３ＡＱＵは、イソプロパノールを混合した後、連続してＣＯＯＬ３ＡＱＵおよびＳＴＩＲＲ３ＡＱＵを含む。

【0161】

好ましくは、ＳＴＥＰ１ＡＱＵ、ＳＴＥＰ２ＡＱＵおよびＳＴＥＰ３ＡＱＵは、１つの同じ反応器内で連続して行われる。

【0162】

好ましくは、ＡＣＩＤＣＨＬＯＲは、式（ＩＩ）の化合物のＲＥＡＣ−Ｄと塩化チオニルとの反応ＲＥＡＣ−Ｄによって調製され、

【0163】

【化4】

式中、ＡＣＩＤＣＨＬＯＲおよびＲ１は、全てのそれらの実施形態と共に、本明細書で定義される。

【0164】

好ましくは、ＲＥＡＣ−Ｄ中に溶媒が存在しないか、またはＲＥＡＣ−Ｄのために溶媒が使用されない。

【0165】

好ましくは、ＲＥＡＣ−Ｄのために水が投入されないか、またはＲＥＡＣ−Ｄのために水が使用されない。

【0166】

好ましくは、ＲＥＡＣ−Ｄのために触媒が投入されないか、またはＲＥＡＣ−Ｄのために触媒が使用されない。

【0167】

好ましくは、ＲＥＡＣ−Ｄが無希釈で行われ、すなわち、ＲＥＡＣ−Ｄのために使用されるか、または投入される唯一の物質が、式（ＩＩ）の化合物および塩化チオニルである。

【0168】

好ましくは、ＲＥＡＣ−Ｄ酸中の塩化チオニルのモル当量は、式（ＩＩ）の化合物のモル当量の１〜１０倍、より好ましくは２〜８倍、さらにより好ましくは３〜６倍である。

【0169】

好ましくは、ＲＥＡＣ−Ｄは、温度ＴＥＭＰ−Ｄで行われ、ＴＥＭＰ−Ｄは、０〜１００℃、より好ましくは１０〜８０℃、さらにより好ましくは２０〜８０℃、特定的には３０〜８０℃、より特定的には３０〜７５℃である。

【0170】

好ましくは、ＲＥＡＣ−Ｄの反応時間ＴＩＭＥ−Ｄは、３０分〜１０時間、より好ましくは３０分〜５時間、さらにより好ましくは４０〜２．５時間である。

【0171】

ＲＥＡＣ−Ｄは、大気圧または大気圧を超える圧力で行うことができる。

【0172】

好ましくは、ＲＥＡＣ−Ｄは大気圧で行われる。好ましくは、ＴＥＭＰ−Ｄが選択され、圧力は、選択された温度から生じるＲＥＡＣ−Ｄの反応混合物の蒸気圧力から生じる。

【0173】

好ましくは、ＲＥＡＣ−Ｄは、窒素またはアルゴン雰囲気等の不活性雰囲気下で行われる。

【0174】

ＲＥＡＣ−Ｄの後、ＡＣＣＤＩＣＨＬＯＲは、当業者に知られている標準的な方法によって単離することができる。任意の残留塩化チオニルは、例えば、蒸発等によって除去することができる。生成物は、真空下で乾燥する等の従来の方法で死滅させることができる。

【0175】

本発明の別の対象は、反応ＲＥＡＣ−Ａによってポリオキシエチレン１，４−ソルビタン脂肪酸エステルを調製するための方法によって得ることができ、この方法およびＲＥＡＣ−Ａが、全てのその実施形態と共に、本明細書で定義される通りである、ポリオキシエチレン１，４−ソルビタン脂肪酸エステルである。

【0176】

好ましくは、反応ＲＥＡＣ−Ａによってポリオキシエチレン１，４−ソルビタン脂肪酸エステルを調製するための方法によって得ることができる、上述のポリオキシエチレン１，４−ソルビタン脂肪酸エステルにおけるＰＥＯ１，４−ソルビタンモノエステル種のＥＯ単位の平均数は、１９〜２３、好ましくは２０〜２２、より好ましくは２０または２２であり、本方法およびＲＥＡＣ−Ａは、全てのその実施形態と共に、本明細書で定義される通りである。

【0177】

上述のＰＥＯ１，４−ソルビタンモノエステル種のＥＯ単位の平均数は、実施例９に記載されるように決定される。

【0178】

本発明の別の対象は、イソソルビド種（例えば、ＰＥＯイソソルビドおよび／または例えばＰＥＯイソソルビド脂肪酸エステル）を含まないポリオキシエチレン１，４−ソルビタン脂肪酸エステルであり、
好ましくは、分析は、ＭＡＬＤＩおよび／または^１３Ｃ ＮＭＲおよび／またはＨＰＬＣによって行われ、
好ましくは、ポリオキシエチレン１，４−ソルビタン脂肪酸エステルは、１９〜２３、好ましくは２０〜２２、より好ましくは２０または２２のエチレンオキシド単位の平均含有量を有する。

【0179】

本発明の別の対象は、ソルビトール種（例えば、ソルビトールエステルエトキシレート）を含まないポリオキシエチレン１，４−ソルビタン脂肪酸エステルであり、
好ましくは、分析は、ＭＡＬＤＩによって行われ、
好ましくは、ポリオキシエチレン１，４−ソルビタン脂肪酸エステルは、１９〜２３、好ましくは２０〜２２、より好ましくは２０または２２のエチレンオキシド単位の平均含有量を有する。

【0180】

本発明の別の対象は、ＭＡＬＤＩスペクトルにおいて、ただ１つの最大値を有するシグナル分布を示す、ポリオキシエチレン１，４−ソルビタン脂肪酸エステルであり、
好ましくは、ポリオキシエチレン１，４−ソルビタン脂肪酸エステルは、１９〜２３、好ましくは２０〜２２、より好ましくは２０または２２のエチレンオキシド単位の平均含有量を有する。

【0181】

ポリオキシエチレン１，４−ソルビタン脂肪酸エステルであって、上述のポリオキシエチレン１，４−ソルビタン脂肪酸エステルのＭＡＬＤＩスペクトルが、
●ＭＷが３５００を超える物質のシグナルであって、シグナルの高さがＭＡＬＤＩスペクトル中の全分布の最大値に対して５％を超える、好ましくは４％を超える、より好ましくは３％を超える、さらにより好ましくは２％を超える、特定的には１％を超えるようなシグナルを示さず、
●好ましくは、ＭＷが３４００を超える物質のシグナルであって、シグナルの高さがＭＡＬＤＩスペクトル中の全分布の最大値に対して５％を超える、好ましくは４％を超える、より好ましくは３％を超える、さらにより好ましくは２％を超える、特定的には１％を超えるようなシグナルを示さず、
●より好ましくは、ＭＷが３３００を超える物質のシグナルであって、シグナルの高さがＭＡＬＤＩスペクトル中の全分布の最大値に対して５％を超える、好ましくは４％を超える、より好ましくは３％を超える、さらにより好ましくは２％を超える、特定的には１％を超えるようなシグナルを示さず、
●さらにより好ましくは、ＭＷが３２００を超える物質のシグナルであって、シグナルの高さがＭＡＬＤＩスペクトル中の全分布の最大値に対して５％を超える、好ましくは４％を超える、より好ましくは３％を超える、さらにより好ましくは２％を超える、特定的には１％を超えるようなシグナルを示さず、
●特定的には、ＭＷが３１００を超える物質のシグナルであって、シグナルの高さがＭＡＬＤＩスペクトル中の全分布の最大値に対して５％を超える、好ましくは４％を超える、より好ましくは３％を超える、さらにより好ましくは２％を超える、特定的には１％を超えるようなシグナルを示さず、
好ましくは、上述のポリオキシエチレン１，４−ソルビタン脂肪酸エステルは、１９〜２３、好ましくは２０〜２２、より好ましくは２０または２２のエチレンオキシド単位の平均含有量を有する。

【0182】

本発明の別の対象は、ＭＷが３５００を超え、好ましくは３４００を超え、より好ましくは３３００を超え、さらにより好ましくは３２００を超え、特定的には３１００を超える物質を含まないポリオキシエチレン１，４−ソルビタン脂肪酸エステルであり、
物質のＭＷは、好ましくは、ＭＡＬＤＩによって決定され、
好ましくは、ポリオキシエチレン１，４−ソルビタン脂肪酸エステルは、１９〜２３、好ましくは２０〜２２、より好ましくは２０または２２のエチレンオキシド単位の平均含有量を有する。

【0183】

本発明の別の対象は、ＤＳＣにおいて−１３℃以下、好ましくは−１５℃以下、より好ましくは−２０℃以下、さらにより好ましくは−２５℃以下、特定的には−２７．５℃以下の温度でシグナルの最大値を有する吸熱シグナルを示す、ポリオキシエチレン１，４−ソルビタン脂肪酸エステルであり、
ＤＳＣにおける吸熱シグナルは、ΔＨが、好ましくは３５Ｊ／ｇ以下、より好ましくは３０Ｊ／ｇ以下、さらにより好ましくは２５Ｊ／ｇ以下、特定的には２０Ｊ／ｇ以下、より特定的には１５Ｊ／ｇ以下、さらにより特定的には１０Ｊ／ｇ以下、特に５Ｊ／ｇ以下、さらに特に１Ｊ／ｇ以下であり、
吸熱シグナルは、好ましくは、ＤＳＣの加熱サイクル中にあり、より好ましくは、ＤＳＣの第１の加熱サイクル中の吸熱シグナルであり、
好ましくは、ポリオキシエチレン１，４−ソルビタン脂肪酸エステルは、１９〜２３、好ましくは２０〜２２、より好ましくは２０または２２のエチレンオキシド単位の平均含有量を有する。

【0184】

本発明の別の対象は、ＤＳＣにおいて、ΔＨが、３５Ｊ／ｇ以下、好ましくは３０Ｊ／ｇ以下、より好ましくは２５Ｊ／ｇ以下、さらにより好ましくは２０Ｊ／ｇ以下、特定的には１５Ｊ／ｇ以下、より特定的には１０Ｊ／ｇ以下、さらにより特定的には５Ｊ／ｇ以下、特に１Ｊ／ｇ以下である吸熱シグナルを示すポリオキシエチレン１，４−ソルビタン脂肪酸エステルである。

【0185】

ＤＳＣにおける吸熱シグナルは、好ましくは−１３℃以下、好ましくは−１５℃以下、より好ましくは−２０℃以下、さらにより好ましくは−２５℃以下、特定的には−２７．５℃以下の温度でシグナルの最大値を有し、
吸熱シグナルは、好ましくは、ＤＳＣの加熱サイクル中にあり、より好ましくは、ＤＳＣの第１の加熱サイクル中の吸熱シグナルであり、
好ましくは、ポリオキシエチレン１，４−ソルビタン脂肪酸エステルは、１９〜２３、好ましくは２０〜２２、より好ましくは２０または２２のエチレンオキシド単位の平均含有量を有する。

【0186】

本発明の別の対象は、ＤＳＣにおいて、−１３℃を超える、好ましくは−１５℃を超える、より好ましくは−２０℃を超える、さらにより好ましくは−２５℃を超える、特定的には−２７．５℃を超える温度でシグナルの最大値を有する吸熱シグナルを示さないポリオキシエチレン１，４−ソルビタン脂肪酸エステルである。

【0187】

ＤＳＣにおける吸熱シグナルは、ΔＨが、好ましくは３５Ｊ／ｇを超え、より好ましくは３０Ｊ／ｇを超え、さらにより好ましくは２５Ｊ／ｇを超え、特定的には２０Ｊ／ｇを超え、より特定的には１５Ｊ／ｇを超え、さらにより特定的には１０Ｊ／ｇを超え、特に５Ｊ／ｇを超え、さらに特に１Ｊ／ｇを超え、
吸熱シグナルは、好ましくは、ＤＳＣの加熱サイクル中にあり、より好ましくは、ＤＳＣの第１の加熱サイクル中にあり、
好ましくは、ポリオキシエチレン１，４−ソルビタン脂肪酸エステルは、１９〜２３、好ましくは２０〜２２、より好ましくは２０または２２のエチレンオキシド単位の平均含有量を有する。

【0188】

本発明の別の対象は、ＤＳＣにおいて、ΔＨが、３５Ｊ／ｇを超え、好ましくは３０Ｊ／ｇを超え、より好ましくは２５Ｊ／ｇを超え、さらにより好ましくは２０Ｊ／ｇを超え、特定的には１５Ｊ／ｇを超え、より特定的には１０Ｊ／ｇを超え、さらにより特定的には５Ｊ／ｇを超え、特に１Ｊ／ｇを超える吸熱シグナルを示さないポリオキシエチレン１，４−ソルビタン脂肪酸エステルである。

【0189】

ＤＳＣにおける吸熱シグナルは、好ましくは−１３℃より高い、より好ましくは−１５℃より高い、さらにより好ましくは−２０℃より高い、特定的には−２５℃より高い、より特定的には−２７．５℃より高い温度でのシグナルの最大値を有し、
吸熱シグナルは、好ましくは、ＤＳＣの加熱サイクル中にあり、より好ましくは、ＤＳＣの第１の加熱サイクル中にあり、
好ましくは、ポリオキシエチレン１，４−ソルビタン脂肪酸エステルは、１９〜２３、好ましくは２０〜２２、より好ましくは２０または２２のエチレンオキシド単位の平均含有量を有する。

【0190】

本発明の別の対象は、ＤＳＣにおいて、ΔＨが、３０Ｊ／ｇを超え、好ましくは２５Ｊ／ｇを超え、より好ましくは２０Ｊ／ｇを超え、さらにより好ましくは１５Ｊ／ｇを超え、特定的には１０Ｊ／ｇを超え、より特定的には５Ｊ／ｇを超え、さらにより特定的には１Ｊ／ｇを超える発熱シグナルを示さないポリオキシエチレン１，４−ソルビタン脂肪酸エステルである。

【0191】

ＤＳＣにおける発熱シグナルは、好ましくは−５０℃以上、より好ましくは−５５℃以上、さらにより好ましくは−６０℃以上、特定的には−７０℃以上、より特定的には−８０℃以上の温度でシグナルの最大値を有し、
好ましくは、ポリオキシエチレン１，４−ソルビタン脂肪酸エステルは、１９〜２３、好ましくは２０〜２２、より好ましくは２０または２２のエチレンオキシド単位の平均含有量を有する。

【0192】

本発明の別の対象は、ＤＳＣにおいて−５０℃以上、好ましくは−５５℃以上、より好ましくは−６０℃以上、さらにより好ましくは−７０℃以上、特定的には−８０℃以上の温度でシグナルの最大値を有する発熱シグナルを示さないポリオキシエチレン１，４−ソルビタン脂肪酸エステルであり、
ＤＳＣにおける吸熱シグナルは、ΔＨが、好ましくは３０Ｊ／ｇを超え、より好ましくは２５Ｊ／ｇを超え、さらにより好ましくは２０Ｊ／ｇを超え、特定的には１５Ｊ／ｇを超え、より特定的には１０Ｊ／ｇを超え、さらにより特定的には５Ｊ／ｇを超え、特に１Ｊ／ｇを超え、
好ましくは、ポリオキシエチレン１，４−ソルビタン脂肪酸エステルは、１９〜２３、好ましくは２０〜２２、より好ましくは２０または２２のエチレンオキシド単位の平均含有量を有する。

【0193】

本発明の別の対象は、薬物製剤の製剤中の賦形剤としての、反応ＲＥＡＣ−Ａによってポリオキシエチレン１，４−ソルビタン脂肪酸エステルを調製するための方法によって得ることができる、ポリオキシエチレン１，４−ソルビタン脂肪酸エステルの使用であり、
この方法およびＲＥＡＣ−Ａが、全てのその実施形態と共に、本明細書で定義される通りである。

【0194】

好ましくは、ポリオキシエチレン１，４−ソルビタン脂肪酸エステルが賦形剤として使用される薬物製剤は、非経口で適用される薬物製剤である。

【0195】

本発明の別の対象は、１０重量％以下、好ましくは８重量％以下、より好ましくは６重量％以下、さらにより好ましくは４重量％以下、特定的には３重量％以下、より特定的には２重量％以下、さらにより特定的には１．５重量％以下のＰＥＯイソソルビドモノオレイン酸エステルを含有するポリオキシエチレン１，４−ソルビタン脂肪酸エステルであり、重量％は、ＰＥＯイソソルビドモノオレエートの含有量について分析されるポリオキシエチレン１，４−ソルビタン脂肪酸エステルの試料の重量に基づく。

【0196】

図の説明は、特に明記されていない場合、以下を意味する。

【0197】

【表2】

【図面の簡単な説明】

【0198】

【図1】実施例２のＤＳＣ測定、第１の加熱サイクル

【図2】実施例４のＤＳＣ測定、第１の加熱サイクル

【図3】実施例５のＤＳＣ測定、第１の加熱サイクル

【図4】実施例６のＤＳＣ測定、第１の加熱サイクル

【図5】Ｃｒｏｄａ ＨＰのＤＳＣ測定、第１の加熱サイクル

【図6】ＮＯＦのＤＳＣ測定、第１の加熱サイクル

【図7】実施例５のＤＳＣ測定、第１の冷却サイクル（実線）および第２の冷却サイクル（破線）

【図8】Ｃｒｏｄａ ＨＰのＤＳＣ測定、第１の冷却サイクル（実線）および第２の冷却サイクル（破線）

【図9】ＮＯＦのＤＳＣ測定、第１の冷却サイクル（実線）および第２の冷却サイクル（破線）

【図10】実施例１０のＭＡＬＤＩスペクトル

【図11】実施例２のＭＡＬＤＩスペクトル

【図12】実施例４のＭＡＬＤＩスペクトル

【図13】実施例５のＭＡＬＤＩスペクトル

【図14】実施例６のＭＡＬＤＩスペクトル

【図15】ガウス分布関数の曲線と重ね合わされた実施例１０のＭＡＬＤＩスペクトル

【図16】実施例５の分取ＨＰＬＣのＨＰＬＣクロマトグラム、ＵＶ吸収（実線）および重量分布（破線）の重ね合わせ

【図17】Ｃｒｏｄａ ＨＰの分取ＨＰＬＣのＨＰＬＣクロマトグラム、ＵＶ吸収（実線）および重量分布（破線）の重ね合わせ

【図18】分取ＨＰＬＣのＨＰＬＣ ＵＶクロマトグラム、実施例５（実線）およびＣｒｏｄａ ＨＰ（破線）の重ね合わせ

【図19】分取ＨＰＬＣのＨＰＬＣ重量クロマトグラム、実施例５（実線）およびＣｒｏｄａ ＨＰ（破線）の重ね合わせ

【図20】実施例５のＤＳＣ測定、第１の加熱サイクル（実線）および第２の加熱サイクル（破線）における吸熱性の谷の面積の分析の図、ｙ軸のスケーリングは、０Ｗ／ｇの位置を与えることなく、正規化された状態で寸法を示す。

【図21】Ｃｒｏｄａ ＨＰの分取ＨＰＬＣのＨＰＣＬ ＵＶクロマトグラム

【図22a】ＭＡＬＤＩスペクトル：（Ａ）実施例５、（Ｂ）ＮＯＦ、（Ｃ）Ｃｒｏｄａ ＨＰ（図２２ａ）および（Ｄ）Ｃｒｏｄａ ＳＲ（図２２ｂ）の比較

【図22b】ＭＡＬＤＩスペクトル：（Ａ）実施例５、（Ｂ）ＮＯＦ、（Ｃ）Ｃｒｏｄａ ＨＰ（図２２ａ）および（Ｄ）Ｃｒｏｄａ ＳＲ（図２２ｂ）の比較

【図23】Ｃｒｏｄａのポリソルベート合成

【図24】Ｃｒｏｄａのポリソルベートの２つの生成物範囲の原料

【図25】Ｃｒｏｄａ ＨＰおよびＣｒｏｄａ ＳＲのプロセス差

【図26】Ｃｒｏｄａ ＨＰおよびＣｒｏｄａ ＳＲの色差

【図27】Ｃｒｏｄａ ＳＲのＭＡＬＤＩスペクトル

【図28】Ｃｒｏｄａ ＳＲのＤＳＣ測定、第１の加熱サイクル

【図29】Ｃｒｏｄａ ＳＲのＤＳＣ測定、第１の冷却サイクル（実線）および第２の冷却サイクル（破線）

【図30a】ガウス分布関数は、（Ａ）実施例５、（Ｂ）ＮＯＦ（図３０ａ）、（Ｃ）Ｃｒｏｄａ ＨＰおよび（Ｄ）Ｃｒｏｄａ ＳＲ（図３０ｂ）の質量分布の左側にフィッティングする。

【図30b】ガウス分布関数は、（Ａ）実施例５、（Ｂ）ＮＯＦ（図３０ａ）、（Ｃ）Ｃｒｏｄａ ＨＰおよび（Ｄ）Ｃｒｏｄａ ＳＲ（図３０ｂ）の質量分布の左側にフィッティングする。

【図31a】（Ｂ）ＮＯＦ（図３１ａ）、（Ｃ）Ｃｒｏｄａ ＨＰおよび（Ｄ）Ｃｒｏｄａ ＳＲ（図３１ｂ）のＭＡＬＤＩスペクトルの３つのピークにそれぞれフィッティングした３つのガウス曲線、ならびに実施例５（図３１ａ）のＭＡＬＤＩスペクトルにおける１つのピークにフィッティングした１つのガウス曲線。

【図31b】（Ｂ）ＮＯＦ（図３１ａ）、（Ｃ）Ｃｒｏｄａ ＨＰおよび（Ｄ）Ｃｒｏｄａ ＳＲ（図３１ｂ）のＭＡＬＤＩスペクトルの３つのピークにそれぞれフィッティングした３つのガウス曲線、ならびに実施例５（図３１ａ）のＭＡＬＤＩスペクトルにおける１つのピークにフィッティングした１つのガウス曲線。

【図32a】（Ｂ）ＮＯＦ（図３２ａ）、（Ｃ）Ｃｒｏｄａ ＨＰおよび（Ｄ）Ｃｒｏｄａ ＳＲ（図３２ｂ）のＭＡＬＤＩスペクトルの全てのシグナルにフィッティングした１つのガウス曲線、ならびに実施例５（図３２ａ）のＭＡＬＤＩスペクトルにおける全てのシグナルにフィッティングした１つのガウス曲線。

【図32b】（Ｂ）ＮＯＦ（図３２ａ）、（Ｃ）Ｃｒｏｄａ ＨＰおよび（Ｄ）Ｃｒｏｄａ ＳＲ（図３２ｂ）のＭＡＬＤＩスペクトルの全てのシグナルにフィッティングした１つのガウス曲線、ならびに実施例５（図３２ａ）のＭＡＬＤＩスペクトルにおける全てのシグナルにフィッティングした１つのガウス曲線。

【図33】ＰＥＯイソソルビドオレエートの３つの溶液を用いて調製した較正曲線（濃度０．００１、０．００２、および０．００６ｍｇ／ｍｌ）

【実施例】

【0199】

材料
以下の材料は、特に明記されていない場合、以下の通りであった。

【0200】

【表3】

【0201】

塩化チオニルの密度：１．６８３ｋｇ／Ｌ

【0202】

【表4】

【0203】

【表5】

【0204】

方法：
（Ａ）ＨＰＬＣ−ＥＬＳＤ
ＨＰＬＣ−ＥＬＳＤは、蒸発光散乱検出を使用した逆相ＨＰＬＣである。
カラム：Ａｇｉｌｅｎｔ Ｚｏｒｂａｘ Ｅｃｌｉｐｓｅ ＸＤＢ−Ｃ１８（１５０ｍｍ×３ｍｍ；３．５マイクロメートル）
ポンプ：
最小圧力：５ｂａｒ
可能な圧力：４００ｂａｒ
最大流量勾配：１００ｍＬ／分^２
溶出液Ａ：超純Ｈ_２Ｏ
溶出液Ｂ：イソプロパノール
勾配：

【0205】

【表6】

注入：
注入容積１０マイクロリットル
オートインジェクタ
シリンジ容積１００マイクロリットル
注入モード 針洗浄を伴う注入／洗浄液：アセトニトリル
検出器
検出器ＥＬＳＤ型
温度６０℃
圧力（気体）３．５ｂａｒ
ゲイン１０
フィルタ８ｓ
カラムオーブン
温度２０℃
ＳＡＴ／ＩＮ
単位ｍＶ
ディスプリクションＥＬＳＤ
スケールファクター１０００
サンプリング率１０
典型的な積分パラメータ
ピーク幅２５０
しきい値２０
積分停止４２〜５６分
試料調製：
５０ｍｇ±５ｍｇの試料を５０ｍｌのアセトニトリル中に溶解させた。

【0206】

ＨＰＬＣクロマトグラムによって決定される百分率は、それぞれのシグナルの面積百分率である。

【0207】

信号対雑音比が３のＬＯＤ（検出限界）は、０．０６面積％であった。

【0208】

信号対雑音比が１０のＬＯＱ（定量限界）は、０．２０面積％であった。
●ＨＰＬＣクロマトグラム中、面積％が０．０６以上のシグナルがないことは、イソソルビドが検出可能ではないことを意味する。
●ＨＰＬＣクロマトグラム中、面積％が０．０６〜０．２０のシグナルは、イソソルビドが検出可能であるが、定量可能ではないことを意味する。
●ＨＰＬＣクロマトグラム中、面積％が０．２０以上のシグナルは、イソソルビドが定量可能であることを意味する。

【0209】

（Ｂ）ＤＳＣ
全ての測定値を同一の方法で測定し、特に明記されていない場合、試料をそのまま使用し、様々な生成物について試料重量は２〜１２ｍｇの範囲であった。特に明記されていない場合、試料を真空ピストル中、室温で一晩乾燥させ、次いで、大気からの湿度の取り込みを回避し、最小限に抑えるために、直ちにグローブバッグ内でピン付きの４０マイクロリットルアルミニウム製パン（Ｍｅｔｔｌｅｒ Ｔｏｌｅｄｏ）中に密封し、次いで、このパンについて、Ｍｅｔｔｌｅｒ Ｔｏｌｅｄｏ製のＤＳＣ １ ＳＴＡＲｅシステムを用いてＤＣＳ測定を行った。試料を２５℃から−８０℃まで試行し、−８０℃で５分間かけて平衡化し、次いで−８０℃から＋８０℃まで加熱し、＋８０℃で５分間かけて平衡化した（第１サイクルを示す）。次いで、この熱サイクルを繰り返し（＋８０℃から−８０℃まで、−８０℃で平衡化、−８０℃から＋８０℃まで、＋８０℃で平衡化、次いで２５℃まで戻す）、全ての加熱および冷却セグメントは、１０℃／分で行った。特に明記されていない場合、この第１の熱サイクルからの加熱セグメントが示される。他に何も報告されない場合、第２の加熱サイクルの測定は、第１の加熱サイクルの測定と同じシグナルを生成し、それによって、この試料が、熱履歴を示さないことが確認された。

【0210】

（Ｃ）分取ＨＰＬＣおよび非分画試料由来のＭＡＬＤＩおよびＤＳＣ
（Ｃ１）試料調製および分取ＨＰＬＣ
特に明記されていない場合、全ての試料をそのまま使用した。試料をＡＣＮに溶解して、濃度３００ｍｇ／ｍｌの溶液を得た。この溶液を３００マイクロリットル注入し（Ｗａｔｅｒｓ ｓａｍｐｌｅ ｍａｎａｇｅｒ ２７００）、Ｃ１８カラム（Ｘｔｅｒｒａ Ｐｒｅｐ ＭＳ Ｃ１８ ＯＢＤ、５マイクロメートル、１９×１００ｍｍ、Ｗａｔｅｒｓ）に充填した。ポリソルベート種を、４５％ＡＣＮから開始して、３０分間で１００％まで増加するＡＣＮ：Ｈ_２Ｏ勾配を使用して、流速１０ｍｌ／分、カラム温度５０℃で分離した（Ｔｈｅｒｍｏｓｔａｔｅｄ ｃｏｌｕｍｎ ｃｏｍｐａｒｔｍｅｎｔ ＴＣＣ−１００、Ｄｉｏｎｅｘ）。分離は、１２０分に達するまで１００％ＡＣＮで継続し、これ以上の種を検出することができなかった。この種を、ＵＶ検出器（Ｗａｔｅｒｓ ２４８７二重吸光度検出器）を用い、１９５ｎｍ（オレイン酸中に存在するＣ＝Ｃ結合について、エプシロン＝１１０００を有するラムダ最大）で検出した。ＭａｓｓＬｙｎｘ Ｖ４．０ソフトウェアをデータ獲得に使用した。１０ｍｌの画分を、２０ｍｌのガラスチューブに手動で収集した。各チューブから、ＭＡＬＤＩ分析のために１０マイクロリットルを取り出した後、真空下で乾燥するまで蒸発させた（ＧｅｎｅＶａｃ遠心エバポレータＥＺ−２、ＳＰ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）。次いで、蒸発した画分をＤＳＣ分析に使用した。

【0211】

（Ｃ２）分取ＨＰＬＣ（Ｃ１）由来の試料および非分画試料のＭＡＬＤＩ
２．５−ジヒドロキシ安息香酸（ｓｕｐｅｒ−ＤＨＢ＞＝９９．０％、Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ）をマトリックスとして使用し、ナトリウム塩化付加物を排他的に検出するために、１０ｍＭのＮａＣｌを添加した５ｍｇ／ｍｌのＥｔＯＨ溶液として調製した。使用前に、溶液を得るために、マトリックスを浴中で１０分間、超音波処理した。非分画試料をエタノールに溶解して、５ｍｇ／ｍｌの濃度の溶液を得て、ＨＰＬＣ画分について、１０マイクロリットルの試料をさらなる調製を行わずに使用した。全ての試料を、マトリックスと１：１（体積：体積）で混合し、ボルテックス混合した後、各試料１マイクロリットルを標的プレート（ＭＰＴ３８４研磨鋼、Ｂｒｕｋｅｒ）に、各３個スポッティングした。全ての試料スポットを乾燥させ、プレート上で結晶化させた後、ＭＡＬＤＩ測定を行った。陽イオンＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ質量分析を、反射モードで、周波数５Ｈｚで操作される３３７ｎｍ Ｎ_２レーザを取り付けたＵｌｔｒａｆｌｅｘ ＴＯＦ／ＴＯＦ，Ｂｒｕｋｅｒ Ｄａｌｔｏｎｉｃｓ機器で行った。スペクトルを、加速電圧２５ｋＶで、４５０Ｄａまでのマトリックス抑制で記録し、１回の測定につき、合計１０００獲得した。レーザの出力は、最適なピーク分解能を得るために、検出しきい値（通常は約４０％）をわずかに上回る状態に維持した。全ての質量スペクトルを、ＦｌｅｘＣｏｎｔｒｏｌ ３．４を用いて取得し、ＦｌｅｘＡｎａｌｙｓｉｓ ３．４ソフトウェアを用いて分析した。

【0212】

（Ｃ３）分取ＨＰＬＣ（Ｃ１）由来の試料のＤＳＣ
分取ＨＰＬＣ分離から蒸発させた試料を、アセトンに溶解することによって２０ｍｌチューブから抽出し、０．１ｍｌのマイクロインサート（Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ）を取り付けた１．５ｍｌのガラスバイアルに（３回の洗浄で）移した。次いで、試料を真空下で乾燥するまで蒸発させた（ＧｅｎｅＶａｃ遠心エバポレータＥＺ−２、ＳＰ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）。その後、全ての試料を真空ピストル中で一晩乾燥させた後、ＤＳＣパン（４０マイクロリットル、ピン付きのアルミニウム製パン、Ｍｅｔｔｌｅｒ Ｔｏｌｅｄｏ）を移し、湿度を制御した状態（約７％以下）で真空バッグに密封し、大気からの湿度の取り込みを避けた。
ＤＳＣ測定は、方法の説明（Ｂ）のＤＣＳに基づいて記載される通りに行われた。

【0213】

（Ｄ）ＧＣ（１，４−ソルビタン）
機器パラメータ

【0214】

【表7】

【0215】

試料調製
試料原液
スクリューキャップボトル（２５ｍＬ）中の５ｍｌのピリジンおよび１０ｍｌの無水酢酸に、２ｇの試料を加え、撹拌下で１２０℃まで２時間かけて加熱する。
試料溶液
０．５ｍｌの試料原液を、１ｍｌのジクロロメタンを含むオートサンプラバイアルに添加し、混合する。
１，４−ソルビタンは、約１２．３分で検出される。

【0216】

（Ｅ）^１Ｈ ＮＭＲ
^１Ｈ ＮＭＲは、当業者にとって日常的な分析方法であるため、以下に使用され得るパラメータの例示的なセットのみが与えられる。
溶媒：ＤＭＳＯ−ｄ６
５〜１０ｍｇの試料を０．６ｍｌのＤＭＳＯ−ｄ６に溶解し、混合する。

【0217】

（Ｆ）^１３Ｃ ＮＭＲ
^１３Ｃ ＮＭＲは、当業者にとって日常的な分析方法であるため、以下に使用され得るパラメータの例示的なセットのみが与えられる。
溶媒：ＤＭＳＯ−ｄ６
２０〜５０ｍｇの試料を０．６ｍｌのＤＭＳＯ−ｄ６に溶解し、十分に混合する。

【0218】

（Ｇ）光学回転法（１，４−ソルビタン）
機器パラメータ

【0219】

【表8】

試料調製
ブランク
純水
試料溶液
３００±３ｍｇの１，４−ソルビタンを１００ｍｌのメスフラスコに添加し、次いで水で溶解し、所定容積になるまで希釈した。

【0220】

（Ｈ）イソソルビド種が存在するかどうかを検証するための^１３Ｃ ＮＭＲ法
測定前に、試料を重水素化クロロホルム中に溶解した。約９０〜１２０ｍｇの材料を０．５５ｍＬのｄ１−クロロホルムと混合した。０．５ｍｌの溶液を５ｍｍのＮＭＲチューブに充填した。^１Ｈデカップル^１３Ｃ−ＮＭＲ、^１３Ｃ（１Ｈ）−ＮＭＲを、プロトンでカップリングおよび核オーバーハウザー効果（ＮＯＥ）を用いて行った。測定は、２５℃で、４００ＭＨｚ分光計、共振周波数１００．６１ＭＨｚで行われた。試料を、１４．５マイクロ秒のパルス長（９０°）、２０Ｈｚスピン、取得時間１．３０１秒、および待ち時間５秒を用い、８１９２スキャンで試行した。２５１８８．９Ｈｚ（２５０ｐｐｍ）のスペクトル幅を用い、３２７６８の複雑なデータ点を集めた。全てのスペクトルを、１Ｈｚのライン幅でフーリエ変換し、１２８ｋのデータ点までを０で埋めた。スペクトルを、位相およびベースライン補正し、^１３Ｃ−ＮＭＲについて、ＴＭＳに対して７７．２３ｐｐｍであると決定したクロロホルムピークを参照ピークとして使用した。

【0221】

実施例１−塩化チオニルを用いた、塩化オレオイル
撹拌棒を備えた２口丸底フラスコにオレイン酸（１２．６２ｇ、４０．９ｍｍｏｌ、１．０当量）を投入し、このフラスコをＮ_２でパージした。４０℃まで加熱した後、塩化チオニル（１２．５ｍｌ、１７２．０ｍｍｏｌ、４．２当量）を撹拌しながら滴下漏斗によって１０分間にわたって滴下し、気体の発生を観察した。次いで、温度を６５℃まで上昇させ、反応混合物を１時間撹拌した。次いで、反応混合物を室温まで冷却した。過剰なＳＯＣｌ_２をロータリーエバポレータによって除去し、続いて真空下で乾燥させ、塩化オレオイルを得た。塩化オレオイルの収率は、１００％であると仮定した。

【0222】

実施例２−塩化チオニル由来の１．０当量の塩化オレオイルを用いた、Ｐｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ ８０
実施例１０に従って調製したＰＥＯソルビタン（４７．１ｇ、４２．９ｍｍｏｌ、１．０当量）を１口丸底フラスコ内に秤量し、フラスコ中の雰囲気をＮ_２と交換した。実施例１に従って調製した全量の塩化オレオイルを室温で添加し、反応混合物を室温で１５分間撹拌した。

【0223】

この混合物を、約８０ｍｂａｒの減圧下で約１０分間蒸気蒸留した。この蒸気蒸留によりｐＨが約１．５から約４．５に上がった。

【0224】

蒸気蒸留からの生成物を、分析のためにそのまま使用した。

【0225】

（Ｈ）^１３Ｃ ＮＭＲ法：イソソルビド種、例えばＰＥＯ−イソソルビドまたはＰＥＯ−イソソルビド−脂肪酸エステルは、検出可能ではなかった。

【0226】

（Ａ）ＨＰＬＣ−ＥＬＳＤ法：イソソルビド種、例えばＰＥＯ−イソソルビドまたはＰＥＯ−イソソルビド−脂肪酸エステルは、検出可能ではなかった。

【0227】

実施例３−塩化チオニルを用いた、塩化オレオイル
撹拌棒を備えた２口丸底フラスコにオレイン酸（３０．０ｇ、９７．３ｍｍｏｌ、１．０当量）を投入し、このフラスコをＮ_２でパージした。４０℃まで加熱した後、塩化チオニル（３０ｍｌ、４１３．０ｍｍｏｌ、４．２当量）を撹拌しながら滴下漏斗によって１０分間にわたって滴下し、気体の発生を観察した。次いで、温度を６５℃まで上昇させ、反応混合物を１時間撹拌した。次いで、反応混合物を室温まで冷却した。過剰なＳＯＣｌ_２をロータリーエバポレータによって除去し、続いて真空下で乾燥させ、塩化オレオイルを得た。塩化オレオイルの収率は、１００％であると仮定した。

【0228】

実施例４−塩化チオニル由来の１．２当量の塩化オレオイルを用いた、Ｐｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ ８０
実施例１０に従って調製したＰＥＯソルビタン（２２．４ｇ、２１．４ｍｍｏｌ、１．０当量）を１口丸底フラスコ内に秤量し、フラスコ中の雰囲気をＮ_２と交換した。塩化オレオイル（７．７４ｇ、２５．７ｍｍｏｌ、１．２当量、実施例３に従って調製）を室温で添加し、反応混合物を室温で１５分間撹拌した。

【0229】

この混合物を、約８０ｍｂａｒの減圧下で約１０分間蒸気蒸留した。この蒸気蒸留によりｐＨが約１．５から約４．５に上がった。

【0230】

蒸気蒸留からの生成物を、分析のためにそのまま使用した。

【0231】

（Ｈ）^１３Ｃ ＮＭＲ法：イソソルビド種、例えばＰＥＯ−イソソルビドまたはＰＥＯ−イソソルビド−脂肪酸エステルは、検出可能ではなかった。

【0232】

（Ａ）ＨＰＬＣ−ＥＬＳＤ法：イソソルビド種、例えばＰＥＯ−イソソルビドまたはＰＥＯ−イソソルビド−脂肪酸エステルは、検出可能ではなかった。

【0233】

実施例５−塩化チオニル由来の１．４当量の塩化オレオイルを用いた、Ｐｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ ８０
実施例４を、１．２当量の代わりに１．４当量の塩化オレオイルを添加したという点だけ変えて繰り返した。

【0234】

（Ｈ）^１３Ｃ ＮＭＲ法：イソソルビド種、例えばＰＥＯ−イソソルビドまたはＰＥＯ−イソソルビド−脂肪酸エステルは、検出可能ではなかった。

【0235】

（Ａ）ＨＰＬＣ−ＥＬＳＤ法：イソソルビド種、例えばＰＥＯ−イソソルビドまたはＰＥＯ−イソソルビド−脂肪酸エステルは、検出可能ではなかった。

【0236】

実施例６−塩化チオニル由来の１．６当量の塩化オレオイルを用いた、Ｐｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ ８０
実施例４を、１．２当量の代わりに１．６当量の塩化オレオイルを添加したという点だけ変えて繰り返した。

【0237】

（Ｈ）^１３Ｃ ＮＭＲ法：イソソルビド種、例えばＰＥＯ−イソソルビドまたはＰＥＯ−イソソルビド−脂肪酸エステルは、検出可能ではなかった。

【0238】

（Ａ）ＨＰＬＣ−ＥＬＳＤ法：イソソルビド種、例えばＰＥＯ−イソソルビドまたはＰＥＯ−イソソルビド−脂肪酸エステルは、検出可能ではなかった。

【0239】

実施例７−塩化オキサリルを用いた、塩化オレオイル
撹拌棒を備えた２口丸底フラスコにオレイン酸（２．０ｇ、７．１ｍｍｏｌ、１．０当量）を投入し、このフラスコをＮ_２でパージした。ＤＣＭ（６．５ｍＬ）を添加し、透明溶液が生成した。次いで、塩化オキサリル（１．２１ｍｌ、１４．２ｍｍｏｌ、２．０当量）を撹拌しながら滴下漏斗によって１０分間にわたって室温で滴下し、次いで、反応混合物を室温で２時間撹拌した。ＤＣＭおよび過剰な塩化オキサリルをロータリーエバポレータで除去し、続いて真空下で乾燥させた。塩化オレオイルの収率は、１００％であると仮定した。

【0240】

実施例８−塩化オキサリル由来の１．０当量の塩化オレオイルを用いた、Ｐｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ ８０
実施例１０に従って調製したＰＥＯソルビタン（７．４ｇ、７．１ｍｍｏｌ、１．０当量）を１口丸底フラスコ内に秤量し、フラスコ中の雰囲気をＮ_２と交換した。実施例７に従って調製した全量の塩化オレオイルを室温で添加し、反応混合物を室温で１５分間撹拌した。

【0241】

この生成物を、分析のためにそのまま使用した。

【0242】

（Ｈ）^１３Ｃ ＮＭＲ法：イソソルビド種、例えばＰＥＯ−イソソルビドまたはＰＥＯ−イソソルビド−脂肪酸エステルは、検出可能ではなかった。

【0243】

（Ａ）ＨＰＬＣ−ＥＬＳＤ法：イソソルビド種、例えばＰＥＯ−イソソルビドまたはＰＥＯ−イソソルビド−脂肪酸エステルは、検出可能ではなかった。

【0244】

実施例９−１．０当量の市販の塩化オレオイルを用いた、Ｐｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ ８０
実施例１０に従って調製したＰＥＯソルビタン（５．９６ｇ、５．７ｍｍｏｌ、１．０当量）を１口丸底フラスコ内に秤量し、フラスコ中の雰囲気をＮ_２と交換した。塩化オレオイル（１．８８５ｍＬ、５．７ｍｍｏｌ、１．０当量、Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ）を室温で添加し、この温度で１５分間撹拌した。

【0245】

この生成物を、分析のためにそのまま使用した。

【0246】

（Ｈ）^１３Ｃ ＮＭＲ法：イソソルビド種、例えばＰＥＯ−イソソルビドまたはＰＥＯ−イソソルビド−脂肪酸エステルは、検出可能ではなかった。

【0247】

（Ａ）ＨＰＬＣ−ＥＬＳＤ法：イソソルビド種、例えばＰＥＯ−イソソルビドまたはＰＥＯ−イソソルビド−脂肪酸エステルは、検出可能ではなかった。

【0248】

（Ａ）ＨＰＬＣ−ＥＬＳＤの結果
表１は、実施例１、４、５、６、８、および９のＨＰＬＣ−ＥＬＳＤ結果を示し、報告されているのは、それぞれのＨＰＬＣクロマトグラムにおけるモノエステル、ジエステルおよびトリエステルの溶出ピークの面積％であり（表１では「モノ」、「ジ」および「トリ」で示される）、第１の値は、クロマトグラムの総ピーク面積に基づく、それぞれのピークの面積の絶対的な百分率であり（「ａｂｓ％」）、第２の値は、この３つのピークの面積の合計に基づく、それぞれのピークの面積の百分率である（「ｒｅｌ」）。
溶出ピークの最大値が観察される。
●モノエステルの場合、２７．４分〜２７．７分
●ジエステルの場合、４０．３〜４０．６分
●トリエステルの場合、４７．２分〜４７．３分
この３つのエステルの溶出ピークは、互いに良好に分離される。

【0249】

【表9】

【0250】

（Ｂ）ＤＳＣの結果
表２は、ＤＳＣ結果を示し、Ｔ（ピーク）およびΔＨの値は、Ｃｒｏｄａ ＨＰおよびＮＯＦの場合の試料当たり３つのＤＣＳ分析の平均であり、一方、それらは、実施例２、４、５および６の場合の１つのＤＳＣ分析の値である。

【0251】

【表10】

【0252】

加熱サイクルの曲線の考察：
Ｃｒｏｄａ ＨＰは、加熱サイクルにおいて明らかな吸熱ピークを示し、このピークは、溶融ピークであると解釈され、ΔＨは、約−１２℃で約４８Ｊ／ｇである（図５）。
ＮＯＦは、加熱サイクルにおいて、以下の２つの明らかなピークを示す。

【0253】

吸熱ピーク、このピークは、溶融ピークであると解釈され、ΔＨは、約−７℃で約４２Ｊ／ｇであり、
発熱ピーク、このピークは、溶融ピークであると解釈され、ΔＨは、約−４６℃で約３６Ｊ／ｇである（図６）。

【0254】

Ｃｒｏｄａ ＳＲは、加熱サイクルにおいて明らかな吸熱ピークを示し、このピークは、溶融ピークであると解釈され、ΔＨは、約−７．４℃で約４６．３Ｊ／ｇである（図２８）。

【0255】

４つの実施例２、４、５および６のＤＳＣは、約−３０℃から−４０℃の間に、小さく、明らかではなく、十分に定義されず、かなり広い吸熱谷を示し、ΔＨは、０．１〜０．５Ｊ／ｇであり（図１〜４）、これは、Ｃｒｏｄａ ＨＰおよびＮＯＦの溶融ピークのΔＨと比較して、約１００分の１小さい。ＤＳＣ機器のプログラムによる、このわずかな吸熱谷の面積の決定は、図２０に示されている。

【0256】

この曲線において、直前に（すなわち、わずかに低い温度で）発熱性の隆起部が現れ、上述のわずかな吸熱谷（図１〜４）は、１０℃／分のかなり速い加熱速度に起因して、また、その非常に小さいサイズに起因して、単なるベースラインの不規則性である可能性があるため、明確に解釈することができない。その面積は、既に示したわずかな吸熱谷の面積のわずか３分の１であり、これはさらに重要ではない。

【0257】

実施例８、９および１３のＤＳＣは、４つの実施例２、４、５および６のＤＳＣに類似しているように見える。

【0258】

したがって、実施例２、４、５、６、８、９および１３は、結晶化挙動の溶融が全く示されていないか、または少なくとも明確ではない。

【0259】

冷却サイクルの曲線の考察：
Ｃｒｏｄａ ＨＰは、第１冷却サイクルにおいて、約−３５℃でΔＨが約４２Ｊ／ｇの明らかな発熱ピークを示し、第２冷却サイクルにおいて、約−３５℃でΔＨが約４１の明らかな発熱ピークが存在し、約−３０℃に明らかなショルダー部を示し、そのショルダー部に起因して、第１冷却サイクルにおけるピークとは明らかに異なる形状を有する（図８）。

【0260】

Ｃｒｏｄａ ＳＲは、第１および第２冷却サイクルにおいて、約−４１．５℃でΔＨが約３２．４Ｊ／ｇのほぼ同じ明らかな発熱ピークを示す（図２９）。

【0261】

ＮＯＦも、実施例２、４、５、６、８、９および１３も、２つの冷却サイクルのいずれかにおいてピークを示さない（図７（実施例２、４、５、６、８、９および１３について例示的）、および図９）。

【0262】

分取ＨＰＬＣからの（Ｃ）ＭＡＬＤＩおよびＤＳＣの結果
試料をＭＡＬＤＩによって試験した。実施例５およびＣｒｏｄａ ＨＰを分取ＨＰＬＣでの分離、１００個の個々の画分に分画することによって詳細に試験し、これらを０〜１００分間、連続して収集したため、各画分を１分間（１０ｍｌ画分）収集し、これをＭＡＬＤＩによって分析した。全ての画分の実際の重量を決定し、重量分布を作成し、ＵＶクロマトグラムと重ね合わせた。
図１６および１７：それぞれ、実施例５およびＣｒｏｄａ ＨＰのＵＶ吸収（実線）および重量分布（破線）の重ね合わせを伴う、分取ＨＰＬＣのＨＰＬＣクロマトグラム
図１８および１９：それぞれ、実施例５（実線）およびＣｒｏｄａ ＨＰ（破線）のＵＶ吸収および重量分布の重ね合わせの分取ＨＰＬＣのＨＰＬＣクロマトグラム

【0263】

この分離から、ＰＥＯソルビタンモノオレエートの純粋画分をＤＳＣによって試験した。

【0264】

実施例５の分画により、純粋なＰＥＯソルビタンモノエステル画分が得られ、これはまた、ＤＳＣ分析においていかなる溶融ピークも示さなかった。

【0265】

ＭＡＬＤＩ質量スペクトルにおいて、全てのエトキシル化分布は、１つのＥＯ単位に等しい４４Ｄａによって分離される。質量分布の平均ＥＯ含有量を計算するために、質量ピークリストをエクスポートし、ガウス分布関数にフィッティングさせた。

【0266】

【数1】

【0267】

ａが、ガウス分布関数の高さである場合、ｂは、ガウス分布関数の中心位置であり、ｃは、中心質量周辺のガウス分布関数のＥＯ拡散または分散の推定値として使用することができる。したがって、ガウス分布関数の中心位置は、混合物中に存在する分子の質量を示し、最も高いＭＡＬＤＩピークを与える。

【0268】

実施例１０のＰＥＯソルビタンの場合、この値は、１１４６Ｄａに対応していた。２１ＥＯ単位を有するナトリウム塩化ＰＥＯソルビタンは、１１１２Ｄａの分子質量を有し、２２ＥＯ単位を有するナトリウム塩化ＰＥＯソルビタンは、１１５６Ｄａの質量を有する。したがって、このガウス分布関数の平均整数ＥＯ数は２２であると推定される（図１０および１５：ガウス分布関数の曲線と重ね合わせていないもの、および重ね合わせた実施例１０）。

【0269】

純粋なＰＥＯソルビタンモノオレエート画分の分析には、同じ方法論を使用することができる。しかしながら、非分画生成物は、ＰＥＯソルビタンのモノエステル、ジエステルおよびトリエステルを含有し、２６４Ｄａを有する１つのオレエートが６ＥＯ単位を有する等しい重量であるという事実に起因して、重なり合う分布を有する。２０ＥＯ単位を有するナトリウム塩化ＰＥＯソルビタンモノオレエートの質量ピークは、１３３２Ｄａを有し、したがって、１４ＥＯ単位を有するＰＥＯソルビタンジエステルと８ＥＯ単位を有するＰＥＯソルビタントリエステルの上に重なる。したがって、ＨＰＬＣ画分の重量の知識があったとしても、非分画試料のＭＡＬＤＩ質量スペクトルのみから平均ＥＯ含有量を計算することは不可能である。しかしながら、分画試料から得られた知識を用いて、非分画試料の平均ＥＯ含有量を推定することができる。

【0270】

イソソルビド系の種およびＰＥＯエステル：
図１８は、実施例５（実線）およびＣｒｏｄａ ＨＰ（破線）のＵＶ吸収の重ね合わせを示す。ＵＶ吸収は、約１６〜２７分の間に主要シグナルを示している。一般に、ＨＰＬＣカラムは、使用された勾配（極性から非極性まで）に関連して、極性に従って分離し、極性が高い種ほど、極性が低い種よりも早く溶出するため、モノエステルが最初に溶出し、次いでジエステルが、それより後に、２つより多いエステル残基を有する種が溶出する。分取ＨＰＬＣ試料に基づくＭＡＬＤＩを使用して、モノエステル種を、その分子量の分布についてさらに分析した。同様に、約３０〜４６分の間の主要シグナルが同定され、ジエステル種に割り当てられた。

【0271】

モノエステル種の場合、約１６〜２７分の間で溶出し、
●実施例５の主要シグナルは、様々な数のＥＯ単位を有するＰＥＯソルビタンモノエステル種に割り当てられ、
●Ｃｒｏｄａ ＨＰの主要シグナルは、
・様々な数のＥＯ単位を有するＰＥＯソルビタンモノエステル種、
・様々な数のＥＯ単位を有するＰＥＯイソソルビドモノエステル種、および
・様々な数のＥＯ単位を有するＰＥＯモノエステル、すなわち、ポリオキシエチル化脂肪酸エステルに割り当てられた。
ジエステル種の場合、約３０〜４６分の間で溶出し、
●実施例５の主要シグナルは、様々な数のＥＯ単位を有するＰＥＯソルビタンジエステル種に割り当てられ、
●Ｃｒｏｄａ ＨＰの主要シグナルは、
・様々な数のＥＯ単位を有するＰＥＯソルビタンジエステル種、および
・様々な数のＥＯ単位を有するＰＥＯイソソルビドジエステル種、
・様々な数のＥＯ単位を有するＰＥＯジエステル、すなわち、両側に脂肪酸エステルを有するＰＥＧに割り当てられた。

【0272】

イソソルビド系の種およびＰＥＯエステル種は、ソルビタン種よりも顕著に遅く溶出し、これは、ＥＯ単位数の分布によって引き起こされる分子量の分布による重なり合いがあるにもかかわらず、モノエステル種およびジエステル種の場合両方にあてはまる。

【0273】

イソソルビド系の種とＰＥＯエステル種は、実際には、多かれ少なかれ、共に溶出する。図２１は、Ｃｒｏｄａ ＨＰの場合に種々の種が溶出する時間範囲を示す。
Ａ：ＰＥＯソルビタンモノエステル種のピーク
Ｂ：ＰＥＯイソソルビドモノエステルおよびＰＥＯモノエステル種のピーク
Ｃ：ＰＥＯソルビタンジエステル種のピーク
Ｄ：ＰＥＯイソソルビドジエステルおよびＰＥＯジエステル種のピーク

【0274】

また、実施例５の場合、ＰＥＯエステルも観察されたが、ＰＥＯソルビタンエステルの主要ピークと比較して微量または少量のみであった。

【0275】

実施例１０の場合、ＰＥＯイソソルビドも観察されたが、ＰＥＯソルビタンの主要ピークと比較して、ノイズレベルをちょうど上回る微量のみであった。

【0276】

イソソルビド種は、実施例５において観察されていない。

【0277】

実施例５、ＮＯＦ、Ｃｒｏｄａ ＨＰおよびＣｒｏｄａ ＳＲにおけるＰＥＯ１，４−ソルビタンモノエステル種のＥＯ単位の平均数の推定：
概して、実施例５のエトキシル化種のいずれかは、Ｃｒｏｄａ ＨＰおよびＣｒｏｄａ ＳＲにおけるそれぞれの種と比較して、より少ない数のＥＯ単位を示し、その差は、常におよそ５〜１０のＥＯ単位である。図２２ａおよび図２２ｂは、ＥＯ単位の平均数のこのシフトが、ＭＡＬＤＩスペクトルのｍ／ｚ分布にどのように影響するかを示す。
Ａ：実施例５
Ｂ：ＮＯＦ
Ｃ：Ｃｒｏｄａ ＨＰ
Ｄ：Ｃｒｏｄａ ＳＲ
明らかに、実施例５の場合のＭＡＬＤＩピークは、ＮＯＦ、Ｃｒｏｄａ ＨＰおよびＣｒｏｄａ ＳＲと比較して、低いｍ／ｚ値にシフトしている。

【0278】

純粋な１，４−ソルビタンモノエステル画分のＭＡＬＤＩ質量分布は、ガウス分布関数によくフィッティングする。非分画材料、すなわち実施例５、ＮＯＦ、Ｃｒｏｄａ ＨＰおよびＣｒｏｄａ ＳＲの場合、主要質量分布は、全てが等しい重量の分子であるＰＥＯソルビタンモノオレエート、ジオレエートおよびトリオレエートの存在に起因して、重なり合う質量分布を含有する。ポリエステル種は、モノエステルよりも少ない量で存在するが、質量スペクトル全体がわずかに高質量側にシフトする。したがって、非分画試料からのＭＡＬＤＩ質量分布は、ガウス分布関数から逸脱するであろう。しかしながら、図３０ａおよび図３０ｂに示すように質量分布の左側にガウス分布関数がフィッティングされる場合、中心質量ピーク（ｂ、ガウス分布関数中心の位置）は、１，４−ソルビタンモノエステル種のＥＯ単位の平均数の良好な推定である。この推定を試験し、３つの試料（実施例５、ＮＯＦ、Ｃｒｏｄａ ＨＰおよびＣｒｏｄａ ＳＲ）について検証し、そのうち２つの試料である実施例５およびＣｒｏｄａ ＨＰについて、分画および詳細な分析を行い、結果を表３に示す。

【0279】

【表11】

【0280】

実施例２、４、５、６、８、９、１３のＭＡＬＤＩは、イソソルビド種またはソルビトール種の非存在を示す。
ＭＡＬＤＩを用い、実施例２、４、５、６、８、９および１３において、イソソルビド種、例えばＰＥＯ−イソソルビドまたはＰＥＯ−イソソルビド−脂肪酸エステルが検出可能であった。

【0281】

ＭＡＬＤＩを用い、実施例２、４、５、６、８、９および１３において、ソルビトール種、例えば、ソルビトールエステルエトキシレートが検出可能であった。

【0282】

分布の幅および最大値の数の分析のための実施例５、ＮＯＦ、Ｃｒｏｄａ ＨＰおよびＣｒｏｄａ ＳＲのＭＡＬＤＩ：
実施例５のＭＡＬＤＩは、１つの最大値のみを有するシグナル分布を示し、一方、ＮＯＦ、Ｃｒｏｄａ ＨＰおよびＣｒｏｄｅ ＳＲのＭＡＬＤＩは、シグナル分布において、主要最大値に加えて２つのさらなる最大値を示し、さらなる最大値の１つは、主要最大値のｂ値に対して、より低いｍ／ｚ値でｂ値を有し、もう一方のさらなる最大値は、主要最大値のｂ値に対して、より高いｍ／ｚ値でｂ値を有する。両方のさらなる最大値は、主要最大値よりも低い強度を有する。

【0283】

表４は、それぞれの最大値に対してフィッティングした３つのガウス曲線のｂ値と、実施例５のＭＡＬＤＩスペクトル中の１つの最大値にフィッティングしたガウス曲線のｂ値を示す。これらのフィッティングした曲線を図３１ａおよび図３１ｂに示す。

【0284】

【表12】

【0285】

実施例２、４、５、６、８、９および１３のＭＡＬＤＩスペクトルは、１つの最大値のみを有するシグナル分布を示す。

【0286】

本発明の生成物と既知のポリソルベート製品とのこの差は、ＭＡＬＤＩスペクトルの全てのシグナルに対して、すなわち、全分布に対して、１つのガウス曲線のみがフィッティングされる場合にも、示すことができる。ガウス分布関数のｃ値は、シグナルのｍ／ｚ値の拡散の概算値として使用することができ、すなわち、ｂ値によって表される、ガウス分布関数の中心ｍ／ｚ値の周囲のガウス分布関数の分散の概算値として使用することができる。表５は、実施例５、ＮＯＦ、Ｃｒｏｄａ ＨＰおよびＣＲＯＤＡ ＳＲについてのこれらのｃ値を示す。

【0287】

ＭＡＬＤＩスペクトル中の全てのシグナルに対する１つのガウス曲線のこのフィッティングを、図３２ａおよび図３２ｂに示す。

【0288】

【表13】

【0289】

実施例１０−２０ＥＯを使用した１，４−ソルビタンからのＰＥＯソルビタン
２００ｇのナフサ（石油）、ヘビーアルキレート、ＣＡＳ ６４７４１−６５−７、１００ｇ（０．６１ｍｏｌ、１当量）１，４−ソルビタン（実施例１１にしたがって調製した）および０．６ｇのＫＯＨを４Ｌオートクレーブに投入した。オートクレーブを、最初に排気し、その後、Ｎ_２で０．５ｂａｒの圧力を印加することによって不活性化し、これを合計４回行った。

【0290】

混合物を１５０℃まで加熱し、５５３ｇ（１２．６ｍｏｌ、２０．７当量）のエチレンオキシドを、温度が１６０℃を超えて上昇せず、圧力が３．８ｂａｒを超えて上昇しないような速度で添加し、添加を４時間で行った。次いで、混合物を１５０℃で２時間撹拌した。

【0291】

６０℃まで冷却した後、２．３ｇのＡｃＯＨを添加した。２つの相が形成され、一方は溶媒を含み、もう一方は生成物を含み、これらを分離した。残留溶媒をロータリーエバキュエータで蒸気蒸留することによって除去した。６２５ｇの生成物を得た。

【0292】

収率：平均２０ＥＯを有するＰＥＯソルビタンが得られたという仮定に基づいて、９５％。この仮定は、この生成物をさらなる反応で使用したときにも適用された。

【0293】

^１Ｈ−ＮＭＲおよび^１３Ｃ−ＮＭＲによって構造を確認した。

【0294】

ＤＳＣ分析は、両方の加熱サイクルにおいても、両方の冷却サイクルにおいても、結晶化または融解の兆候を示さなかった。

【0295】

実施例１１−１，４−ソルビタン
Ｄ−ソルビトール（３００ｇ、１．６４７ｍｏｌ、１当量）を１．５Ｌの反応器に投入した。ｐ−トルエンスルホン酸一水和物（２．６６５ｇ、０．０１４ｍｏｌ、０．００８５（０．８５％）当量）を投入し、その後、ＴＢＡＢ（９．６ｇ、０．０３ｍｏｌ、０．０１８２（１．８１％）当量）を投入した。反応器に４〜６ｍｂａｒの真空を適用した。次いで、混合物を１１０℃まで加熱し（混合物は約９０℃で溶融した）、１１０℃で６時間撹拌した。混合物を３０分間で７０〜７５℃まで冷却した。エタノール（１５０ｍＬ）を投入した。得られた混合物を７０〜７５℃で２時間撹拌し、透明な溶液を生成した。次いで、溶液を３時間で２０℃まで冷却した。黄色の懸濁液を生成した。イソプロパノール（１５０ｍＬ）を投入した。混合物を１時間で０℃まで冷却した。混合物を０℃で４時間かけてスラリー化した。混合物を濾過し、ケーキをイソプロパノール（１５０ｍＬ）で洗浄した。ケーキを真空下、５０℃で１６時間乾燥させて、白色固体として１４２．２ｇの生成物を得た。
収率５２．６％。

【0296】

^１Ｈ−ＮＭＲおよび^１３Ｃ−ＮＭＲによって構造を確認した。
ＧＣ面積％

【表14】

比旋光度−２２．２６°、ｃ＝３．１（水）

【0297】

比較例１
２０１８年１１月４日から７日まで、Ｗａｌｔｅｒ Ｅ Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ Ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎ Ｃｅｎｔｅｒ（ワシントンＤＣ）で、会議「ａａｐｓ ２０１８ ＰｈａｒｍＳｃｉ ３６０」が２０１８年の１１月２日金曜日にＭｏｖｅ−Ｉｎで開催され、Ｐｒｅ−Ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ Ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓは２０１８年１１月３日土曜日に開催された。

【0298】

これらのＰｒｅ−Ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ Ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓの午前９時から午後５時まで、ＷｏｒｋｓｈｏｐおよびＳｈｏｒｔ Ｃｏｕｒｓｅが行われた。これらのＷｏｒｋｓｈｏｐのうちの１つは、午前９時４５分から午前１０時１５分まで行われ、タイトルは、「ＳＣ１−Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ａｎｄ Ｃｏｎｔｒｏｌ ｏｆ Ｐｏｌｙｓｏｂａｔｅｓ ｆｏｒ Ｂｉｏｕｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｅｌ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ」であり、ＣＲＯＤＡ社（ｗｗｗ．ｃｒｏｄａｈｅａｌｔｈｃａｒｅ．ｃｏｍ、Ｃｒｏｄａ，Ｉｎｃ．、Ｅｄｉｓｏｎ、Ｎｅｗ Ｊｅｒｓｅｙ、ＵＳＡ）を代表するＳｒｅｅｊｉｔ Ｒ．Ｍｅｎｏｎによって開催された。

【0299】

このプレゼンテーションは、スライド１２のＰｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｆ Ｃｒｏｄａ（図２３を参照）で示しており、
ソルビトール−（脱水）→ソルビタン−（脂肪酸でエステル化）→ソルビタン脂肪酸エステル−（エトキシル化）→ポリソルベート−（仕上げ）→高品質のポリソルベートのシーケンスを示している。

【0300】

このシーケンスに従って、Ｃｒｏｄｅは、２つの製品範囲を作成する。
●Ｃｒｏｄａ ＨＰ、Ｔｗｅｅｎ ８０ ＨＰとも呼ばれ、略語「ＨＰ」は、「高純度（ｈｉｇｈ ｐｕｒｉｔｙ）」を意味する
●Ｃｒｏｄａ ＳＲ、略語「ＳＲ」は、「超精製（ｓｕｐｅｒ ｒｅｆｉｎｅｄ）」を意味し、「ＳＲ ＰＳ ８０」とも呼ばれる（超精製ポリソルベート８０を意味する）、Ｓｕｐｅｒ Ｒｅｆｉｎｅｄ Ｐｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ」

【0301】

スライド１１（図２４を参照）には、これら２つの製品群の原材料が列挙されている。

【0302】

スライド１７（図２５を参照）には、Ｃｒｏｄａ ＨＰとＣｒｏｄａ ＳＲの違い：
１．ＳＲグレードとＨＰグレードのプロセス差は、以下の通りである。
●高純度の出発物質（脂肪酸およびソルビトール）
●より穏やかな条件下で製造し、カラメル化を防ぐ
●工程毎にプロセスを制御した
２．色の違い：ＨＰグレードは、黄色がかった色を有し、一方、ＳＲグレードは、ほぼ無色であり、これはスライド１６に示されている（図２６を参照）。元のプレゼンテーションは、白黒ではなくカラーであったが、グレースケールの再現は、依然として、Ｃｒｏｄａ ＳＲの試料と比較して、より濃い色合いの形態で、Ｃｒｏｄａ ＨＰの黄色がかった色を示している。

【0303】

スライド１５（図２７を参照）において、ＳＲグレードのＭＡＬＤＩスペクトルが示される。３つの優勢なピーク領域は、以下のこれらのピーク領域を生じる化学種によって特徴付けられる。
１．イソソルビドエステルエトキシレートおよびＰＥＧ
２．ソルビタンエステルエトキシレート
３．ソルビトールエステルエトキシレート
明らかに、ＭＡＬＤＩスペクトルは、市販されている最も純度の高いグレードであるＳＲグレードについても、ソルビタンエステルエトキシレートの１つの所望のピーク領域だけでなく、ＳＲグレードに存在するイソソルビドおよびソルビトール誘導体の存在によって生じる有意なピーク領域も示している。

【0304】

実施例１２−塩化オレオイル
２口丸底フラスコにオレイン酸（４６９．３ｇ、１．６４ｍｏｌ、１．０当量）を投入し、このフラスコをＮ_２でパージした。ジクロロメタン（ＤＣＭ）（１５２０ｍＬ）を添加し、透明な無色溶液が生成した。次いで、塩化オキサリル（２８８ｍｌ、３．３ｍｏｌ、２．０当量）を撹拌しながら５０分間にわたって室温で滴下し、次いで、反応混合物を室温で２時間撹拌した。ＤＣＭおよび過剰な塩化オキサリルをロータリーエバポレータで約３５℃および約４５０〜８ｍｂａｒで除去し、その後、真空下で乾燥させた。塩化オレオイルの収率は、１００％であると仮定した。

【0305】

実施例１３−Ｐｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ ８０
ＰＥＯソルビタン（１００１．９ｇ、０．９６ｍｏｌ、１．０当量、実施例１０に従って調製した）を２Ｌ反応器内に秤量し、フラスコ中の雰囲気をＮ_２と交換した。塩化オレオイル（４３５．５ｇ、１．３４ｍｏｌ、１．４当量、実施例１２に従って調製した）を、約４０分間、室温で添加し、反応混合物を室温で１時間撹拌した。次いで、反応混合物を６０℃まで加熱し、１日間撹拌（２００ｍｂａｒ）しながら真空を適用した。
生成したＨＣｌを除去し、ｐＨを５．９まで上げた。ｐＨを測定し、試料の含有量が５重量％である、生成物の試料水溶液を調製した。

【0306】

（Ｈ）^１３Ｃ ＮＭＲ法：イソソルビド種、例えばＰＥＯ−イソソルビドまたはＰＥＯ−イソソルビド−脂肪酸エステルは、検出可能ではなかった。

【0307】

（Ａ）ＨＰＬＣ−ＥＬＳＤ法：イソソルビド種、例えばＰＥＯ−イソソルビドまたはＰＥＯ−イソソルビド−脂肪酸エステルは、検出可能ではなかった。

【0308】

実施例１４−ＰＥＯイソソルビドモノオレエートの定量
較正材料の調製
（Ｃ１）試料調製および分取ＨＰＬＣに記載される分取ＨＰＬＣ法（最後の文の「次いで、蒸発した画分をＤＳＣ分析に使用した」を除く）を使用して、実施例１５に従って調製したＰＥＯイソソルビドオレエートを分離した。この材料は、第２のピークと同様の時間で、ＰＳ８０の分離プロセスにおいてピークＢ（例として図２１を参照）で溶出した。３つの綺麗な画分を抽出し、これを組み合わせて広いＰＥＯ分布および大量の材料を得た。この材料は、ＭＡＬＤＩ（ＨＰＬＣ画分の（Ｃ２）に記載される方法）を用い、ＰＥＯイソソルビドモノオレエートとして同定された。

【0309】

標準化目的に必要な、平均で１２ＥＯ単位を有するＰＥＯイソソルビドオレエートは、既知の手順に従って合成することができ、この実施例では、実施例１５に従って調製されたＰＥＯイソソルビドオレエートを使用した。

【0310】

ＬＣ−ＭＳ（ＥＳＩ）
実施例１５に従って調製したイソソルビド較正材料であるＰＥＯイソソルビドオレエートを、０．００１ｍｇ／ｍｌ、０．００２ｍｇ／ｍｌ、０．００６ｍｇ／ｍｌの３つの別個の溶液に溶解した。この３つの溶液の各々１０マイクロリットルをＬＣ（Ｗａｔｅｒ ２７９５ Ａｌｌｉａｎｃｅ ＨＴ、Ｗａｔｅｒｓ ＡＧ、５４０５ Ｂａｄｅｎ−Ｄａｔｔｗｉｌ、スイス）に注入し、Ｃ１８カラム（Ｌｕｎａ Ｃ１８（２）、３マイクロメートル、７５×４．６ｍｍ、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ、６３７４１ Ａｓｃｈａｆｆｅｎｂｕｒｇ、ドイツ）に充填した。分析物である種を、缶（アセトニトリル）を用いて分離した。４５体積％のＡＣＮで開始し、４５分間で１００体積％のＡＣＮまで増加するＨ_２Ｏ勾配、流速０．８ｍｌ／分、カラム温度５０℃。分離は、６０分に達するまで、１００％のＡＣＮで継続した。この種を、エレクトロスプレーイオン化源（ＥＳＩ）を取り付けた質量分析器（Ｗａｔｅｒｓ Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ Ｑｕａｔｔｒｏ ｍｉｃｒｏＴＭ）で検出した。ＭａｓｓＬｙｎｘ Ｖ４．０ソフトウェアをデータ獲得に使用した。全走査質量スペクトルをｍ／ｚ ２００〜２０００の間で、１秒当たり１回の走査速度で取得した。ＭＳ走査のパラメータは以下の通りであった：脱溶解ガス温度３００℃、イオン源温度１００℃、窒素ガス流量５００Ｌ／時間、噴霧（Ｎ_２）ガス圧力は６ｂａｒ、キャピラリー電圧は３０００Ｖ、コーン電圧は３０Ｖであった。

【0311】

ＰＥＯイソソルビドモノオレエートの較正曲線
質量スペクトルを収集し、ＭａｓｓＬｙｎｘ Ｖ４．０ソフトウェアを用い、目的のピークにわたって組み合わせた。質量スペクトルを、ＰＥＯイソソルビドモノオレエート種が検出された時間からの範囲で組み合わせた（試料に応じて、２８〜３４分の溶出時間）。各較正濃度は、較正曲線に使用される１つの質量スペクトルに対応する。４つの異なる分布が各スペクトルで検出され、これらは、４つの異なる付加物Ｎａ＋、Ｋ＋、Ｈ＋およびＨ_２Ｏに対応している。各付加物の分布は、１つのＥＯ単位に対応する４４Ｄａで区切られたピークの範囲を示した。各分布の全てのピークの強度を一緒に加え、各付加物に１つずつ、４つの強度（図を参照、丸：全付加物の合計、四角：Ｈ_２Ｏ付加物、三角：Ｈ＋付加物、星形：Ｎａ＋付加物、ひし形（図３３では三角の近傍に見える）：Ｋ＋付加物）および較正濃度が与えられた。０．００１〜０．００６ｍｇ／ｍｌの範囲にわたって、各付加物について（標準の線形回帰を使用して）較正曲線を計算した（図１を参照）。図３３は、この曲線を示す。

【0312】

これらのピークがポリソルベート試料中のＰＥＯモノオレエートと重ならないため、２つの較正曲線、１つはＨ_２Ｏ付加物についてのもの（破線）および１つはＫ＋付加物についてのもの（連続線）が使用され、ＰＥＯイソソルビド含有量を決定した。

【0313】

Ｐｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ ８０製品中のＰＥＯイソソルビドモノオレエートの量の決定
Ｃｒｏｄａ ＨＰと実施例１３に従って調製したポリソルベートの２つのポリソルベート試料をＨ_２Ｏに溶解し、０．０５ｍｇ／ｍｌの濃度の溶液を得た。２８〜３４分の間に溶出するピーク（試料に依存する）について、イソソルビド較正材料であるＰＥＯイソソルビドオレエートと同じ方法を用い、各試料について１つの組み合わせた質量スペクトルを収集した。各付加物の分布についての強度を計算し、較正曲線を使用して、各試料についてのＰＥＯイソソルビドモノオレエート種の量を計算した（試料の重量に基づく重量％で）。実施例１７に従って調製したポリソルベートは、１重量％のＰＥＯイソソルビドモノオレエートを含有していた。Ｃｒｏｄａ ＨＰは、１２重量％を超えるＰＥＯイソソルビドモノオレエートを含有しており、これが較正範囲外であったため、具体的な濃度は決定することができなかった。

【0314】

重量％は、それぞれのポリソルベート試料（Ｃｒｏｄａ ＨＰおよび実施例１７に従って調製したポリソルベート）の重量に基づく。

【0315】

検出限界：
検出器の飽和は、０．００６ｍｇ／ｍｌを超える濃度を有するＰＥＯイソソルビドオレエート溶液１０マイクロリットルで生じ、より具体的には、０．００６ｍｇ／ｍｌ〜０．０１ｍｇ／ｍｌが注入され、これは、０．０６μｇ〜０．１μｇのＰＥＯイソソルビドオレエートの量に等しい。０．０５ｍｇ／ｍｌの濃度の試料溶液１０マイクロリットルが注入されるので、この注入は、注入された試料材料０．５マイクログラムの量に等しい。したがって、検出限界は、１２重量％〜２０重量％である。

【0316】

実施例１５−ＰＥＯイソソルビドモノオレエート
オレイン酸（２０４．１ｇ）およびＤＣＭ（６６０ｍｌ）を混合し、塩化オキサリル（１８５ｇ）を４０分間、２０℃で加え、２０℃で２時間撹拌した後、反応混合物を３３℃、４５０〜２２ｍｂａｒで濃縮し、黄色の透明な液体（２１６．６ｇ）を得た。
ＰＥＯイソソルビド（２５４．５ｇ、実施例１６に従って調製した）を２Ｌの反応器内に秤量し、フラスコ中の雰囲気をＮ_２と交換した。塩化オレオイル（２１６．６ｇのうちの１６０．９ｇ）を３０分間、室温で添加し、反応混合物を室温で４０分間撹拌した。次いで、反応混合物を６０℃まで加熱し、１．５日間撹拌（２００ｍｂａｒ）しながら真空を適用した。

【0317】

生成したＨＣｌを除去し、ｐＨを３．８まで上げた。ｐＨを測定し、試料の含有量が５重量％である、生成物の試料水溶液を調製した。

【0318】

実施例１６−１２ＥＯを使用した１，４−ソルビタンからのＰＥＯイソソルビド
２００ｇのナフサ（石油）、ヘビーアルキレート、ＣＡＳ６４７４１−６５−７、８９．１ｇ（０．６１ｍｏｌ、１当量）イソソルビド（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）および０．６ｇのＫＯＨを４Ｌオートクレーブに投入した。オートクレーブを、最初に排気し、その後、Ｎ_２で０．５ｂａｒの圧力を印加することによって不活性化し、これを合計４回行った。

【0319】

混合物を１５０℃まで加熱し、３３３ｇ（７．６ｍｏｌ、１２．４当量）のエチレンオキシドを、温度が１６０℃を超えて上昇せず、圧力が３．８ｂａｒを超えて上昇しないような速度で添加し、添加を４時間で行った。次いで、混合物を１５０℃で２時間撹拌した。

【0320】

６０℃まで冷却した後、１．４ｇのＡｃＯＨを添加した。２つの相が形成され、一方は溶媒を含み、もう一方は生成物を含み、これらを分離した。残留溶媒をロータリーエバキュエータで蒸気蒸留することによって除去し、約３７６ｇの生成物を得た。

【0321】

収率：平均１２０ＥＯを有するＰＥＯソルビタンが得られたという仮定に基づいて、９５％。この仮定は、この生成物をさらなる反応で使用したときにも適用された。

【0322】

^１Ｈ−ＮＭＲおよび^１３Ｃ−ＮＭＲによって構造を確認した。

【0323】

ＤＳＣ分析は、両方の加熱サイクルにおいても、両方の冷却サイクルにおいても、結晶化または融解の兆候を示さなかった。

【0324】

実施例１７−２２ＥＯを有するＰｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ ８０
ＰＥＯソルビタン（５０２、０．４４ｍｏｌ、１．０当量、実施例１８に従って調製した）を２Ｌ反応器内に秤量し、フラスコ中の雰囲気をＮ_２と交換した。塩化オレオイル（２１５．８ｇ、０．７ｍｏｌ、１．５当量、実施例１２に従って調製した）を、約４０分間、室温で添加し、反応混合物を室温で１時間撹拌した。次いで、反応混合物を６０℃まで加熱し、３日間撹拌（２００ｍｂａｒ）しながら真空を適用した。

【0325】

生成したＨＣｌを除去し、ｐＨを６．９まで上げた。ｐＨを測定し、試料の含有量が５重量％である、生成物の試料水溶液を調製した。

【0326】

実施例１８−２２ＥＯを使用した１，４−ソルビタンからのＰＥＯソルビタン
２００ｇのナフサ（石油）、ヘビーアルキレート、ＣＡＳ６４７４１−６５−７、１００ｇ（０．６１ｍｏｌ、１当量）１，４−ソルビタン（実施例１１にしたがって調製した）および０．６ｇのＫＯＨを４Ｌオートクレーブに投入した。オートクレーブを、最初に排気し、その後、Ｎ_２で０．５ｂａｒの圧力を印加することによって不活性化し、これを合計４回行った。

【0327】

混合物を１５０℃まで加熱し、６１２ｇ（１３．９２．６ｍｏｌ、２２．８当量）のエチレンオキシドを、温度が１６０℃を超えて上昇せず、圧力が３．８ｂａｒを超えて上昇しないような速度で添加し、添加を４時間で行った。次いで、混合物を１５０℃で２時間撹拌した。

【0328】

６０℃まで冷却した後、２．５ｇのＡｃＯＨを添加した。２つの相が形成され、一方は溶媒を含み、もう一方は生成物を含み、これらを分離した。残留溶媒をロータリーエバキュエータで蒸気蒸留することによって除去した。６８８ｇの生成物を得た。

【0329】

収率：平均２２ＥＯを有するＰＥＯソルビタンが得られたという仮定に基づいて、９５％。この仮定は、この生成物をさらなる反応で使用したときにも適用された。

【0330】

^１Ｈ−ＮＭＲおよび^１３Ｃ−ＮＭＲによって構造を確認した。

【0331】

ＤＳＣ分析は、両方の加熱サイクルにおいても、両方の冷却サイクルにおいても、結晶化または融解の兆候を示さなかった。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9】

【図10】

【図11】

【図12】

【図13】

【図14】

【図15】

【図16】

【図17】

【図18】

【図19】

【図20】

【図21】

【図22a】

【図22b】

【図23】

【図24】

【図25】

【図26】

【図27】

【図28】

【図29】

【図30a】

【図30b】

【図31a】

【図31b】

【図32a】

【図32b】

【図33】

【国際調査報告】