特表 2022-502380 抗ＣＤ１５４抗体の安全な投与を提供する方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】特表2022-502380(P2022-502380A)

(43)【公表日】2022年1月11日

(54)【発明の名称】抗ＣＤ１５４抗体の安全な投与を提供する方法

(51)【国際特許分類】

   A61K 39/395 20060101AFI20211217BHJP

   A61P 37/06 20060101ALI20211217BHJP

   A61P 29/00 20060101ALI20211217BHJP

   A61P 19/02 20060101ALI20211217BHJP

   A61K 9/08 20060101ALI20211217BHJP

   A61K 47/22 20060101ALI20211217BHJP

   A61K 47/26 20060101ALI20211217BHJP

   A61K 47/18 20060101ALI20211217BHJP

   A61K 47/34 20170101ALI20211217BHJP

【ＦＩ】

   A61K39/395 N

   A61P37/06

   A61P29/00 101

   A61P19/02

   A61K9/08

   A61K47/22

   A61K47/26

   A61K47/18

   A61K47/34

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

【全頁数】42

(21)【出願番号】特願2021-516643(P2021-516643)

(86)(22)【出願日】2019年9月24日

(85)【翻訳文提出日】2021年5月11日

(86)【国際出願番号】US2019052558

(87)【国際公開番号】WO2020068723

(87)【国際公開日】20200402

(31)【優先権主張番号】62/735,529

(32)【優先日】2018年9月24日

(33)【優先権主張国】US

(31)【優先権主張番号】62/826,131

(32)【優先日】2019年3月29日

(33)【優先権主張国】US

(81)【指定国】 AP(BW,GH,GM,KE,LR,LS,MW,MZ,NA,RW,SD,SL,ST,SZ,TZ,UG,ZM,ZW),EA(AM,AZ,BY,KG,KZ,RU,TJ,TM),EP(AL,AT,BE,BG,CH,CY,CZ,DE,DK,EE,ES,FI,FR,GB,GR,HR,HU,IE,IS,IT,LT,LU,LV,MC,MK,MT,NL,NO,PL,PT,RO,RS,SE,SI,SK,SM,TR),OA(BF,BJ,CF,CG,CI,CM,GA,GN,GQ,GW,KM,ML,MR,NE,SN,TD,TG),AE,AG,AL,AM,AO,AT,AU,AZ,BA,BB,BG,BH,BN,BR,BW,BY,BZ,CA,CH,CL,CN,CO,CR,CU,CZ,DE,DJ,DK,DM,DO,DZ,EC,EE,EG,ES,FI,GB,GD,GE,GH,GM,GT,HN,HR,HU,ID,IL,IN,IR,IS,JO,JP,KE,KG,KH,KN,KP,KR,KW,KZ,LA,LC,LK,LR,LS,LU,LY,MA,MD,ME,MG,MK,MN,MW,MX,MY,MZ,NA,NG,NI,NO,NZ,OM,PA,PE,PG,PH,PL,PT,QA,RO,RS,RU,RW,SA,SC,SD,SE,SG,SK,SL,SM,ST,SV,SY,TH,TJ,TM,TN,TR,TT

(71)【出願人】

【識別番号】509087759

【氏名又は名称】ヤンセン バイオテツク，インコーポレーテツド

(74)【代理人】

【識別番号】100092783

【弁理士】

【氏名又は名称】小林 浩

(74)【代理人】

【識別番号】100095360

【弁理士】

【氏名又は名称】片山 英二

(74)【代理人】

【識別番号】100093676

【弁理士】

【氏名又は名称】小林 純子

(74)【代理人】

【識別番号】100120134

【弁理士】

【氏名又は名称】大森 規雄

(74)【代理人】

【識別番号】100149010

【弁理士】

【氏名又は名称】星川 亮

(74)【代理人】

【識別番号】100104282

【弁理士】

【氏名又は名称】鈴木 康仁

(72)【発明者】

【氏名】リグビー，マーク

(72)【発明者】

【氏名】レブレ，ドナルド

(72)【発明者】

【氏名】パイアントーン，アレクサ

(72)【発明者】

【氏名】レウ，ジョセリン

(72)【発明者】

【氏名】サビンス，ニナ，チ

【テーマコード（参考）】

4C076

4C085

【Ｆターム（参考）】

4C076AA12

4C076BB11

4C076CC07

4C076DD60

4C076DD67

4C076EE23

4C076FF68

4C085AA14

4C085AA15

4C085CC23

4C085EE01

(57)【要約】

皮下投与又は静脈内投与による抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントの臨床的に証明された安全な投与のための方法が提供される。また、抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントの皮下投与又は静脈内投与による、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、及びシェーグレン症候群などの自己免疫疾患の臨床的に証明された安全な治療のための方法も提供される。

【特許請求の範囲】

【請求項1】

それぞれ配列番号３、４、及び５の重鎖相補性決定領域（ＣＤＲ）ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３と、それぞれ配列番号６、７、及び８の軽鎖ＣＤＲ ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３と、を含む、抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントの臨床的に証明された安全な投与を、前記投与を必要とするヒト対象に提供する方法であって、前記抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントと、薬学的に許容される担体と、を含む、医薬組成物を前記対象に皮下投与又は静脈内投与することを含み、投与される前記抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントの総投与量は、１回の投与当たり０．３ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇ前記対象体重である、方法。

【請求項2】

投与される前記抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントの前記総投与量が、０．３ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、３０ｍｇ／ｋｇ又は５０ｍｇ／ｋｇ、又はこれらの間の任意の用量である、請求項１に記載の方法。

【請求項3】

前記医薬組成物が皮下投与される、請求項１又は請求項２に記載の方法。

【請求項4】

前記抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントの前記総投与量が、１回の投与当たり１、２、３、又は４つの皮下注射で投与される、請求項３に記載の方法。

【請求項5】

前記医薬組成物が静脈内投与される、請求項１又は請求項２に記載の方法。

【請求項6】

前記抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントの前記臨床的に証明された安全な投与が、エプスタイン−バーウイルス（ＥＢＶ）及びサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）からなる群から選択される少なくとも１種のウイルスのウイルスＤＮＡが前記対象由来のサンプル１ｍＬ当たり＜１０，０００コピーのウイルス血症を含む、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項7】

前記抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントの前記臨床的に証明された安全な投与が、リコール応答及び一次応答のうちの少なくとも１つを含む免疫応答、好ましくは、破傷風トキソイドに対するリコール応答とキーホールリンペットヘモシアニン（ＫＬＨ）に対する一次応答とを含む免疫応答を含む、請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項8】

前記抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントの前記投与が、前記対象においていずれの臨床的に明らかな血栓塞栓（ＴＥ）イベントをもたらさない、請求項１〜７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項9】

前記抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントの前記投与が、血小板の活性化をもたらさない、請求項１〜８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項10】

自己免疫疾患の臨床的に証明された安全な治療を、前記治療を必要とするヒト対象に提供する方法であって、それぞれ配列番号３、４、及び５の重鎖相補性決定領域（ＣＤＲ）ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３と、それぞれ配列番号６、７、及び８の軽鎖ＣＤＲ ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３と、を含む、抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントと、薬学的に許容される担体と、を含む、医薬組成物を前記対象に皮下投与又は静脈内投与することを含み、投与される前記抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントの総投与量は、１回の投与当たり０．３ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇ前記対象体重である、方法。

【請求項11】

投与される前記抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントの前記総投与量が、０．３ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、３０ｍｇ／ｋｇ又は５０ｍｇ／ｋｇ、又はこれらの間の任意の用量である、請求項１０に記載の方法。

【請求項12】

前記医薬組成物が皮下投与される、請求項１０又は請求項１１に記載の方法。

【請求項13】

前記抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントの前記総投与量が、１回の投与当たり１、２、３、又は４つの皮下注射で投与される、請求項１２に記載の方法。

【請求項14】

前記医薬組成物が静脈内投与される、請求項１０又は請求項１１に記載の方法。

【請求項15】

前記自己免疫疾患が、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、又はシェーグレン症候群である、請求項１０〜１４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項16】

前記抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントの前記臨床的に証明された安全な処置が、エプスタイン−バーウイルス（ＥＢＶ）及びサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）からなる群から選択される少なくとも１種のウイルスのウイルスＤＮＡが前記対象由来のサンプル１ｍＬ当たり＜１０，０００コピーのウイルス血症を含む、請求項１０〜１５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項17】

前記抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントの前記臨床的に証明された安全な処置が、リコール応答及び一次応答のうちの少なくとも１つを含む免疫応答、好ましくは、破傷風トキソイドに対するリコール応答とキーホールリンペットヘモシアニン（ＫＬＨ）に対する一次応答とを含む免疫応答を含む、請求項１０〜１６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項18】

前記抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントの前記投与が、前記対象においていずれの臨床的に明らかな血栓塞栓（ＴＥ）イベントをもたらさない、請求項１０〜１７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項19】

前記抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントの前記投与が、血小板の活性化をもたらさない、請求項１０〜１８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項20】

前記医薬組成物が、ｐＨ５．０〜６．０で、４０ｍｇ／ｍＬ〜６０ｍｇ／ｍＬの前記抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントと、１ｍＭ〜２０ｍＭのヒスチジンと、５％〜１０％（ｗ／ｖ）のスクロースと、０．０１％〜０．１０％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０（ＰＳ２０）と、１０μｇ／ｍＬ〜３０μｇ／ｍＬのＥＤＴＡと、を含む、請求項１〜１９のいずれか一項に記載の方法。

【請求項21】

前記医薬組成物が、ｐＨ５．０〜６．０で、４０ｍｇ／ｍＬ〜６０ｍｇ／ｍＬの前記抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントと、１ｍＭ〜２０ｍＭのアルギニンと、５％〜１０％（ｗ／ｖ）のラクトースと、０．０１％〜０．１０％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）と、１０μｇ／ｍＬ〜３０μｇ／ｍＬのＥＤＤＳと、を含む、請求項１〜１９のいずれか一項に記載の方法。

【請求項22】

前記医薬組成物が、ｐＨ５．０〜６．０で、４０ｍｇ／ｍＬ〜６０ｍｇ／ｍＬの前記抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントと、１ｍＭ〜２０ｍＭのグリシンと、５％〜１０％（ｗ／ｖ）のマルトースと、０．０１％〜０．１０％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）と、１０μｇ／ｍＬ〜３０μｇ／ｍＬのＥＤＴＡと、を含む、請求項１〜１９に記載の方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

（関連出願の相互参照）
本出願は、米国特許法第１１９条（ｅ）の下で、２０１８年９月２４日に出願された米国特許仮出願第６２／７３５，５２９号及び２０１９年３月２９日に出願された米国特許仮出願第６２／８２６，１３１号の優先権を主張するものであり、これらの開示は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。

【0002】

（電子的に提出された配列表の参照）
本出願は、２０１９年９月１３日付で作成された「６８８０９７＿５２５＿Ｓｅｑｕｅｎｃｅ Ｌｉｓｔｉｎｇ」というファイル名のＡＳＣＩＩ形式の配列表としてＥＦＳ−Ｗｅｂを介して電子的に提出され、１２．８ｋｂのサイズを有する配列表を含む。ＥＦＳ−Ｗｅｂを介して提出された配列表は、本明細書の一部であり、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。

【0003】

（発明の分野）
本発明は、抗ＣＤ１５４抗体の臨床的に証明された安全な皮下投与及び静脈内投与を提供する方法、並びに、抗ＣＤ１５４抗体の皮下投与又は静脈内投与による自己免疫疾患の臨床的に証明された安全な治療を提供する方法に関する。

【背景技術】

【0004】

ＣＤ４０リガンド（ＣＤ４０Ｌ）、ｇｐ３９、ＴＮＦ関連活性化タンパク質（ＴＲＡＰ）、又は抗Ｔ細胞／Ｂ細胞活性化分子（Ｔ−ＢＡＭ）としても既知であるＣＤ１５４は、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）スーパーファミリーの三量体膜貫通タンパク質である。ヒトＣＤ１５４は、細胞膜上ではＩＩ型膜タンパク質として、血漿中では可溶型としても、両方の存在が確認されている。ＣＤ１５４は、ＣＤ４^＋Ｔ細胞表面で、活性化に応じ時間に制限のある様式で発現される。ＣＤ１５４は、ＣＤ８^＋Ｔ細胞、好塩基球、肥満細胞、好酸球、ナチュラルキラー細胞、Ｂ細胞、マクロファージ、樹状細胞、及び血小板のセブセットでも活性化により発現される。ＣＤ１５４は、血中に可溶型としても存在する。

【0005】

ＣＤ１５４は、抗原提示細胞（ＡＰＣ）上のＣＤ４０に結合し、標的とする細胞の種類に応じ様々な応答を引き起こす。ＣＤ４０−ＣＤ１５４相互作用は、共刺激の増大、Ｔ細胞プライミング、サイトカイン産生、抗体のクラススイッチ及び親和性成熟、並びに抗体及び自己抗体の産生などといった、Ｔ細胞とＢ細胞との正常な相互作用に必須である。

【0006】

ＣＤ１５４阻害によるＣＤ４０／ＣＤ１５４経路の遮断は、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、関節リウマチ（ＲＡ）、多発性硬化症（ＭＳ）、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、Ｉ型糖尿病（Ｔ１Ｄ）、及び同種移植片拒絶などといった自己免疫疾患においてその有効性が示されている。ヒトでは、ＣＤ４０又はＣＤ１５４のいずれかにおける変異により、ＩｇＧ又はＩｇＡのアイソタイプの欠損を特徴とする高ＩｇＭ症候群が生じる（Ａｒｕｆｆｏ ｅｔ ａｌ．，Ｃｅｌｌ ７２：２９１，１９９３）。

【0007】

抗ＣＤ１５４抗体は、例えば、国際公開第１９９３／０８２０７号、同第１９９４／１０３０８号、同第１９９６／４０９１８号、同第１９９３／００９８１２号、同第１９９９／０５１２５８号、同第１９９５／００６４８０号、同第１９９５／００６４８１号、同第１９９５／００６６６６号、同第２００１／００２０５７号、同第１９９７／０１７４４６号、同第１９９９／０１２５６６号、同第２００１／０６８８６０号、同第２００５／００３１７５号、同第２００６／０３３７０２号、同第２００６／０３０２２０号、同第２００８／１１８３５６号、同第２０１２／０５２２０５号、同第２０１２／１３８７６８号、同第２０１２／１３８７６８号、同第２０１３／０５５７４５号、同第２０１３／０５６０６８号、及び同第２０１７／０２４１４６号に記載されている。

【0008】

抗ＣＤ１５４抗体は、ヒトにおける自己免疫疾患の治療において有効であることが示されている。しかしながら、治療時に観察される、血小板の活性化による血栓塞栓症により、臨床開発の継続が阻まれていた。血小板上のＦｃγＲＩＩａの関与が、抗ＣＤ１５４抗体５ｃ８による血小板活性化の原因となることが示されている（Ｘｉｅｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ １９２：４０８３−４０９２，２０１４）。更に、これまでの抗ＣＤ１５４抗体の製剤の初期臨床試験の結果、かかる抗体を投与した対象において、心筋梗塞（ＭＩ）、肺塞栓症（ＰＥ）、及び深部静脈血栓症（ＤＶＴ）などの予期せぬ血栓塞栓イベント（ＴＥ）がもたらされた。

【0009】

例えば、１９９０年代後半及び２０００年代前半には、抗ＣＤ１５４ ｍＡｂは、ＳＬＥ、免疫性血小板減少性紫斑病、クローン病、及び腎移植などのヒト自己免疫及び同種免疫について調べられた（例えば、Ｂｏｕｍｐａｓ ｅｔ ａｌ．Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ Ｒｈｅｕｍ．４８（３）：７１９−７２７，２００３；Ｃｏｕｚｉｎ，Ｓｃｉｅｎｃｅ ３０７；１７１２−１７１５，２００５；Ｄａｖｉｓ ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ｒｈｅｕｍａｔ．２８：９５−１０１，２００１；Ｄｕｍｏｎｔ，Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｏｐｉｎｉｏｎ ｉｎ Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎａｌ Ｄｒｕｇｓ，３（５）：７２５−７３４，２００２；Ｅｌｇｕｅｔａ ｅｔ ａｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｒｅｖｉｅｗｓ，２２９（１）：１５２−１７２，２００９；Ｋａｌｕｎｉａｎ ｅｔ ａｌ．Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ ａｎｄ Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ，４６（１２）：３２５１−３２５８，２００２；Ｋｕｗａｎａ ｅｔ ａｌ．Ｂｌｏｏｄ，１０３（４）：１２２９−１２３６，２００４；Ｐａｔｅｌ ｅｔ ａｌ．ＢＪＨ，１４１：５４５−５４８，２００７；Ｙａｚｄａｎｙ，Ｌｕｐｕｓ，１２：３７７−３８０，２００４）。一部の対象において血栓塞栓イベントが予想外にも観察されたことに起因して開発は中止されたが、薬物投与との血栓塞栓イベントのタイミングの関係性、並びに投与量及び投与レジメンなどの、これらのイベントの詳細に関するデータは限られている。これらのＴＥイベントは、血小板上に見られるＦｃ受容体であるＦｃγＲＩＩａに結合している、ｍＡｂ：ＣＤ１５４複合体の二次的な症状である、血小板活性化の結果であると考えられている。

【0010】

したがって、この後の抗ＣＤ１５４抗体は、血小板上のＦｃγＲＩＩａとの抗体の相互作用を防止するように遺伝子操作されている。例えば、国際公開第２０１７／０２４１４６号を参照されたい。

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0011】

しかしながら、関節リウマチ（ＲＡ）、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、又はシェーグレン症候群などの自己免疫疾患の安全な治療のために、これらの疾患を有すると診断された又は疑いのある対象に、特に皮下又は静脈内経路によって、安全に投与可能なかかる抗ＣＤ１５４抗体の投与量を決定する必要がある。

【課題を解決するための手段】

【0012】

本発明は、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、又はシェーグレン症候群などの対象における自己免疫疾患の臨床的に証明された安全な治療を含む、対象への抗ＣＤ１５４抗体の臨床的に証明された安全な投与に関する。

【0013】

１つの一般的な態様では、本発明は、それぞれ配列番号３、４、及び５の重鎖相補性決定領域（ＣＤＲ）ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３と、それぞれ配列番号６、７、及び８の軽鎖ＣＤＲ ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３と、を含む、抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントの臨床的に証明された安全な投与を、かかる投与を必要とするヒト対象に提供する方法であって、抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントと、薬学的に許容される担体と、を含む、医薬組成物を対象に皮下投与又は静脈内投与することを含み、投与される抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントの総投与量は、１回の投与当たり０．３ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇ対象体重である、方法に関する。

【0014】

別の一般的な態様では、本発明は、自己免疫疾患の臨床的に証明された安全な治療を、かかる治療を必要とするヒト対象に提供する方法であって、それぞれ配列番号３、４、及び５の重鎖相補性決定領域（ＣＤＲ）ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３と、それぞれ配列番号６、７、及び８の軽鎖ＣＤＲ ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３と、を含む、抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントと、薬学的に許容される担体と、を含む、医薬組成物を対象に皮下投与又は静脈内投与することを含み、１回の投与当たりの投与される抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントの総投与量は、０．３ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇ対象体重である、方法に関する。好ましくは、自己免疫疾患は、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、及びシェーグレン症候群から選択される。

【0015】

一実施形態では、１回の投与当たりの投与される抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントの総投与量は、０．３ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、３０ｍｇ／ｋｇ、又は５０ｍｇ／ｋｇ対象体重である。

【0016】

一実施形態において、医薬組成物は皮下投与される。かかる実施形態では、抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントの総投与量は、１回の投与当たり１、２、３、又は４つの皮下注射で投与される。

【0017】

一実施形態において、医薬組成物は静脈内投与される。

【0018】

一実施形態では、抗ＣＤ１５４抗体若しくはその抗原結合フラグメントの臨床的に証明された安全な投与、及び／又は自己免疫疾患の臨床的に証明された安全な治療は、エプスタイン−バーウイルス（ＥＢＶ）及びサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）からなる群から選択される少なくとも１種のウイルスのウイルスＤＮＡが対象由来のサンプル、好ましくは血液、血清、又は血漿１ｍＬ当たり＜１０，０００コピーのウイルス血症を含む。

【0019】

一実施形態では、抗ＣＤ１５４抗体若しくはその抗原結合フラグメントの臨床的に証明された安全な投与、及び／又は自己免疫疾患の臨床的に証明された安全な治療は、リコール応答及び一次応答のうちの少なくとも１つを含む免疫応答、好ましくは、破傷風トキソイドに対するリコール応答とキーホールリンペットヘモシアニン（ＫＬＨ）に対する一次応答とを含む免疫応答を含む。

【0020】

一実施形態では、抗ＣＤ１５４抗体若しくはその抗原結合フラグメントの臨床的に証明された安全な投与、及び／又は自己免疫疾患の臨床的に証明された安全な治療は、対象においていずれの臨床的に明らかな血栓塞栓（ＴＥ）イベントをもたらさない。

【0021】

一実施形態では、抗ＣＤ１５４抗体若しくはその抗原結合フラグメントの臨床的に証明された安全な投与、及び／又は自己免疫疾患の臨床的に証明された安全な治療は、血小板の活性化をもたらさない。

【0022】

別の実施形態では、医薬組成物は、ｐＨ５．０〜６．０で、４０ｍｇ／ｍＬ〜６０ｍｇ／ｍＬの抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントと、１ｍＭ〜２０ｍＭのヒスチジンと、５％〜１０％（ｗ／ｖ）のスクロースと、０．０１％〜０．１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０（ＰＳ２０）と、１０μｇ／ｍＬ〜３０μｇ／ｍＬのＥＤＴＡと、を含む。

【0023】

別の実施形態では、医薬組成物は、ｐＨ５．０〜６．０で、４０ｍｇ／ｍＬ〜６０ｍｇ／ｍＬの抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントと、１ｍＭ〜２０ｍＭのアルギニンと、５％〜１０％（ｗ／ｖ）のラクトースと、０．０１％〜０．１０％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）と、１０μｇ／ｍＬ〜３０μｇ／ｍＬのＥＤＤＳと、を含む。

【0024】

別の実施形態では、医薬組成物は、ｐＨ５．０〜６．０で、４０ｍｇ／ｍＬ〜６０ｍｇ／ｍＬの抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントと、１ｍＭ〜２０ｍＭのグリシンと、５％〜１０％（ｗ／ｖ）のマルトースと、０．０１％〜０．１０％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）と、１０μｇ／ｍＬ〜３０μｇ／ｍＬのＥＤＴＡと、を含む。

【0025】

本発明の１つ又は２つ以上の実施形態の詳細は、下記の発明を実施するための形態に述べられている。他の特徴及び利点は、以下の詳細な説明、図面、及び添付の特許請求の範囲から明らかとなるであろう。

【図面の簡単な説明】

【0026】

【図1A】実施例１に記載のＣ４ＬＢ２３１を用いた８週間及び３ヶ月間投与試験のアカゲザルにおける、平均血漿中総可溶型ＣＤ１５４（ｓＣＤ１５４）及び遊離ｓＣＤ１５４の濃度を示す。Ｃ４ＬＢ２３１処置群について、８週間投与試験の血漿中遊離ｓＣＤ１５４及び総ｓＣＤ１５４の濃度をそれぞれ示す。

【図1B】実施例１に記載のＣ４ＬＢ２３１を用いた８週間及び３ヶ月間投与試験のアカゲザルにおける、平均血漿中総可溶型ＣＤ１５４（ｓＣＤ１５４）及び遊離ｓＣＤ１５４の濃度を示す。Ｃ４ＬＢ２３１処置群について、８週間投与試験の血漿中遊離ｓＣＤ１５４及び総ｓＣＤ１５４の濃度をそれぞれ示す。

【図1C】実施例１に記載のＣ４ＬＢ２３１を用いた８週間及び３ヶ月間投与試験のアカゲザルにおける、平均血漿中総可溶型ＣＤ１５４（ｓＣＤ１５４）及び遊離ｓＣＤ１５４の濃度を示す。Ｃ４ＬＢ２３１処置群について、３ヶ月間投与試験の血漿中遊離ｓＣＤ１５４及び総ｓＣＤ１５４の濃度をそれぞれ示す。

【図1D】実施例１に記載のＣ４ＬＢ２３１を用いた８週間及び３ヶ月間投与試験のアカゲザルにおける、平均血漿中総可溶型ＣＤ１５４（ｓＣＤ１５４）及び遊離ｓＣＤ１５４の濃度を示す。Ｃ４ＬＢ２３１処置群について、３ヶ月間投与試験の血漿中遊離ｓＣＤ１５４及び総ｓＣＤ１５４の濃度をそれぞれ示す。

【図2A】実施例１に記載のＣ４ＬＢ２３１を用いた８週間及び３ヶ月間投与試験のアカゲザルにおける、抗ＫＬＨ ＩｇＧ及びＩｇＭ力価を示す。矢印は、ＫＬＨ抗原投与のタイミングを示す。８週間投与試験の抗ＫＬＨ ＩｇＧ及びＩｇＭ力価をそれぞれ示す。

【図2B】実施例１に記載のＣ４ＬＢ２３１を用いた８週間及び３ヶ月間投与試験のアカゲザルにおける、抗ＫＬＨ ＩｇＧ及びＩｇＭ力価を示す。矢印は、ＫＬＨ抗原投与のタイミングを示す。８週間投与試験の抗ＫＬＨ ＩｇＧ及びＩｇＭ力価をそれぞれ示す。

【図2C】実施例１に記載のＣ４ＬＢ２３１を用いた８週間及び３ヶ月間投与試験のアカゲザルにおける、抗ＫＬＨ ＩｇＧ及びＩｇＭ力価を示す。矢印は、ＫＬＨ抗原投与のタイミングを示す。３ヶ月間投与試験の抗ＫＬＨ ＩｇＧ及びＩｇＭ力価をそれぞれ示す。

【図2D】実施例１に記載のＣ４ＬＢ２３１を用いた８週間及び３ヶ月間投与試験のアカゲザルにおける、抗ＫＬＨ ＩｇＧ及びＩｇＭ力価を示す。矢印は、ＫＬＨ抗原投与のタイミングを示す。３ヶ月間投与試験の抗ＫＬＨ ＩｇＧ及びＩｇＭ力価をそれぞれ示す。

【図3A】実施例２に記載のヒトにおける臨床試験の予備的薬物動態解析を示す。Ｃ４ＢＬ２３１を投与したコホートのそれぞれについて、経時的なＣ４ＢＬ２３１の血漿中濃度を示す。

【図3B】実施例２に記載のヒトにおける臨床試験の予備的薬物動態解析を示す。３ｍｇ／ｋｇ用量での静脈内（ＩＶ）投与対皮下（ＳＣ）投与におけるＣ４ＢＬ２３１の生物学的利用率の比較を示す。

【図3C】実施例２に記載のヒトにおける臨床試験の予備的薬物動態解析を示す。各コホート中の個体について、用量で補正したＣ_ｍａｘを示す。

【図3D】実施例２に記載のヒトにおける臨床試験の予備的薬物動態解析を示す。各コホート中の個体について、用量で補正したＡＵＣを示す。

【図4A】実施例２に記載のヒトにおける臨床試験の一次抗ＫＬＨ ＩｇＧ応答及び二次抗破傷風トキソイド（抗ＴＴ）応答を示す。抗ＫＬＨ ＩｇＧ力価を示す。

【図4B】実施例２に記載のヒトにおける臨床試験の一次抗ＫＬＨ ＩｇＧ応答及び二次抗破傷風トキソイド（抗ＴＴ）応答を示す。抗破傷風トキソイドＩｇＧ力価を示す。

【図4C】実施例２に記載のヒトにおける臨床試験の一次抗ＫＬＨ ＩｇＧ応答及び二次抗破傷風トキソイド（抗ＴＴ）応答を示す。各コホートのベースライン及び２９日目（Ｄ２９）における抗ＫＬＨ ＩｇＧ濃度の比較を示す。

【図4D】実施例２に記載のヒトにおける臨床試験の一次抗ＫＬＨ ＩｇＧ応答及び二次抗破傷風トキソイド（抗ＴＴ）応答を示す。各コホートのベースライン及び１５日目（Ｄ１５）における抗破傷風トキソイドＩｇＧ濃度の比較を示す。

【図5A】実施例２に記載の臨床試験のヒトにおける、平均血漿中遊離可溶型ＣＤ１５４（ｓＣＤ１５４）及び総ｓＣＤ１５４濃度を示す。標的の抑制を示している、投与後１４日まで検出不能のままであった遊離ｓＣＤ１５４濃度を示す。

【図5B】実施例２に記載の臨床試験のヒトにおける、平均血漿中遊離可溶型ＣＤ１５４（ｓＣＤ１５４）及び総ｓＣＤ１５４濃度を示す。ピーク値に達するまで対応して増加し、その後経時的に減少した総ｓＣＤ１５４濃度を示す。

【図6A】実施例７に記載の血小板活性化試験の結果を示す。Ｆｃサイレント及びＦｃ野生型尾部を有するＣ４ＢＬ２３１による血小板活性化を示す。「Ｂｇ９５８８」（５ｃ８ＩｇＧ１）は、ＢｉｏｇｅｎのＢＧ９５８８ αＣＤ１５４と同様のＩｇＧ１コンストラクトであり、「Ｃ４ＢＬ２３１（Ｆｃサイレント）」は、Ｃ４ＢＬ２３１ＩｇＧ１σ抗体を指し、「Ｃ４ＢＬ２３１（ＦｃＷＴ）」は、野生型ＩｇＧ１尾部を有するＣ４ＬＢ２３１を指し、「＋可溶型ＣＤ１５４」は、ｓＣＤ１５４及び抗体の予形成複合体との血液のインキュベーションを指し、「−可溶型ＣＤ１５４」は、ｓＣＤ１５４の非存在下における抗体単独との血液のインキュベーションを指す。

【図6B】実施例７に記載の血小板活性化試験の結果を示す。他の抗ＣＤ１５４抗体コンストラクトによる血小板活性化を示す。示されるデータは、Ｎ＝４の血液ドナーの結果である。ＡＤＰを陽性活性化対照として使用した。ｓＣＤ４０Ｌ＝ｓＣＤ１５４、以下の抗体は、Ｃ４ＬＢ２３１：Ｃ４ＬＢ８９（ＩｇＧ２σ）、Ｃ４ＬＢ２３１（ＩｇＧ１σ）、Ｃ４ＬＢ２３２（ＩｇＧ１σ−ＹＴＥ）、及びＣ４ＬＢ２３７（ＩｇＧ１）の可変領域である同じ可変領域を有する。血小板活性化は、ｓＣＤ１５４−５ｃ８ＩｇＧ１複合体によって（ただし、ｓＣＤ１５４−５ｃ８ＩｇＧ２σではない）誘導され、Ｆｃ依存性血小板活性化が確認された。様々なＦｃドメイン上のＣ４ＬＢ２３１可変領域単独、又はｓＣＤ１５４との複合体では血小板活性化は見られず、血小板活性化における可変領域の更なる関与が示唆された。

【発明を実施するための形態】

【0027】

背景技術において、また、本明細書全体を通じて各種刊行物、論文及び特許を引用又は記載する。これら参照文献のそれぞれはその全容が参照により本明細書に組み込まれる。本明細書に含まれる文書、操作、材料、デバイス、物品などの考察は、本発明のコンテキストを与えるためのものである。かかる考察は、これらの事物のいずれか又は全てが、開示又は特許請求されるいかなる発明に対しても先行技術の一部を構成することを容認するものではない。

【0028】

特に規定のない限り、本明細書で使用される全ての技術用語及び科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者に一般的に理解されるのと同じ意味を有する。そうでない場合、本明細書で使用される特定の用語は、本明細書に記載される意味を有するものである。本明細書に引用する全ての特許、公開された特許出願及び刊行物は、参照によって恰もその全体が本明細書に記載されているものと同様にして組み込まれる。本明細書及び添付の特許請求の範囲で使用される単数形「ａ」、「ａｎ」及び「ｔｈｅ」は、特に文脈上明らかでない限り、複数の指示対象物を含むことに留意すべきである。

【0029】

特に断らない限り、本明細書に記載される濃度又は濃度範囲などのあらゆる数値は、全ての場合において、「約」なる語によって修飾されているものとして理解されるべきである。したがって、数値は、典型的には、記載される値の±１０％を含む。例えば、１０ｍｇ／ｋｇの用量は、９ｍｇ／ｋｇ〜１１ｍｇ／ｋｇを含む。本明細書で使用するとき、数値範囲の使用は、文脈上そうでない旨が明確に示されない限り、その範囲内の整数及び値の分数を含む、全ての可能な部分範囲、その範囲内の全ての個々の数値を明示的に含む。

【0030】

本明細書及び以下の特許請求の範囲を通して、文脈上必要としない限り、用語「含む（comprise）」並びに「含む（comprises）」及び「含む（comprising）」などの変形は、指定の整数若しくはステップ又は整数若しくはステップの群を含むが、任意の他の整数若しくはステップ又は整数若しくはステップの群を除外するものではないことを意味すると理解されるであろう。本明細書で使用するとき、用語「含む」は、用語「含有する」又は「含む（including）」に置き換えることができ、又はときに本明細書で使用するとき、用語「有する」に置き換えることもできる。

【0031】

本明細書で使用するとき、「からなる」は、特許請求の範囲の要素において指定されていない任意の要素、ステップ、又は成分を除外する。本明細書で使用するとき、「から本質的になる」は、特許請求の範囲の基本的かつ新規の特徴に実質的に影響を及ぼさない材料又はステップは除外しない。本発明の態様又は実施形態に関連して本明細書で使用するとき、本開示の範囲を変化させるために、「含む（comprising）」、「含有する」、「含む（including）」、及び「有する」という上記用語のいずれかを、用語「からなる」又は「から本質的になる」に置き換えることができる。

【0032】

本明細書で使用するとき、複数の列挙された要素間の接続的な用語「及び／又は」は、個々の及び組み合わされた選択肢の両方を包含するものとして理解される。例えば、２つの要素が「及び／又は」によって接続される場合、第１の選択肢は、第２の要素なしに第１の要素が適用可能であることを指す。第２の選択肢は、第１の要素なしの第２の要素が適用可能であることを指す。第３の選択肢は、第１及び第２の要素が一緒に適用可能であることを指す。これらの選択肢のうちのいずれか１つは、本明細書で使用される用語「及び／又は」の要件を満たすことが理解される。選択肢のうちの２つ以上の同時適用性もまた、意味に含まれることが理解され、したがって、用語「及び／又は」の要件を満たす。

【0033】

本明細書で使用するとき、用語「対象」は、本発明の方法による抗ＣＤ１５４抗体を投与される予定か、又は投与されている、自己免疫疾患と診断された又は疑いがある、哺乳類対象、好ましくはヒトを指す。自己免疫疾患の診断は、臨床的診断検査、対象の理学的検査、又は特定の自己免疫疾患を有する対象を診断するための任意の他の認められた方法に従って行うことができる。本明細書で使用するとき、「自己免疫疾患の疑いがある対象」は、臨床医及び／又は対象が識別可能な自己免疫疾患を示す徴候又は症状を呈しているが、その疑いがある診断が、臨床的診断検査、被検者の理学的検査、又は疑われる自己免疫疾患を有する対象を診断するための他の認められた方法によって確認されていない対象である。

【0034】

「ＣＤ１５４」は、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）スーパーファミリーに属するヒトＣＤ１５４（ｈＣＤ１５４）（例えば、ヒトＣＤ４０Ｌ）タンパク質を指す。ヒトＣＤ１５４の完全長のタンパク質のアミノ酸配列を配列番号１に示す。ヒトＣＤ１５４は、細胞膜上ではＩＩ型膜タンパク質として、血漿中では可溶型として、両方の存在が確認されている。膜結合型のＣＤ１５４は、残基２３〜４６の間に位置する膜貫通ドメインと、残基４７〜２６１に及ぶ細胞外ドメインと、を有する、配列番号１の残基１〜２６１を含む。可溶型のヒトＣＤ１５４（ｓｈＣＤ１５４）は、膜結合型がタンパク質分解によるプロセシングを受けることにより形成されるものであり、配列番号１の残基１１３〜２６１を含む（ｓｈＣＤ１５４アミノ酸配列を配列番号２に示す）。膜結合型及び可溶型ＣＤ１５４はいずれも生理活性を有する三量体を形成する。「ＣＤ１５４」は、単量体、二量体、三量体、膜結合型、及び可溶型、並びにヒトＣＤ１５４の天然に生じる変異体を含む、ＣＤ１５４の様々な形態を包含する。可溶型ヒトＣＤ１５４三量体（ｓｈＣＤ１５４三量体）は、それぞれが配列番号２のアミノ酸配列を有する３つのポリペプチド鎖から構成される。

【0035】

ＣＤ１５４は、Ｔ細胞上、特に活性化Ｔ細胞の表面上で三量体型で主に発現されている。しかしながら、Ｔ細胞上及び可溶型での発現に加えて、ＣＤ１５４は血小板内及び血小板上に存在する。血小板上のＦｃγＲＩＩａ受容体は、抗ＣＤ１５４介在性血栓塞栓イベント（ＴＥ）に関与することが示されている。具体的には、抗ＣＤ１５４抗体の血小板上にあるＦｃ受容体（ＦｃγＲＩＩａ）への結合に起因して、抗ＣＤ１５４抗体とｓｈＣＤ１５４三量体との間の高次複合体、例えば、抗体とｓｈＣＤ１５４三量体複合体の予想される３：１の比よりも大きい複合体が形成されると、血小板活性化、すなわちＴＥイベントに寄与することが示されている。抗ＣＤ１５４抗体による血小板活性化は、抗体のＦｃドメインをサイレンシングし、Ｆｃエフェクター機能を低減又は排除することによって低減されている。しかしながら、サイレントＦｃドメインを有するいくつかの抗ＣＤ１５４抗体は、血小板活性化を媒介することが示されている。更に、ＣＤ１５４結合特異性を有するいくつかの対の可変ドメイン（すなわち、ＶＨ／ＶＬドメイン対）が同定され、これにより、Ｆｃサイレント又は野生型ＩｇＧ骨格のいずれにおいても血小板活性化が媒介されなかった。これは、血小板活性化がエピトープ依存性でもあり、ＶＨ／ＶＬドメイン（例えば、抗体が結合するエピトープ）及び高次複合体形成の両方が抗ＣＤ１５４抗体による血小板活性化に寄与していることを示す（例えば、国際公開第２０１７／０２４１４６号を参照されたい）。血小板の活性化は、滑らかで非接着性の血小板を、生物学的に活性な物質を放出及び発現して血漿タンパク質のフィブリノーゲンに対する結合能を獲得する、粘着性で突起を形成した粒子へと変換する、よく知られているプロセスである。活性化は、重症動脈狭窄部位で見られるような、高流体せん断ストレスによる物理的刺激の結果としても生じ得る（Ｑｕｉｎｎ ｅｔ ａｌ．，２００５，Ｐｌａｔｅｌｅｔ Ｆｕｎｃｔｉｏｎ：ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ，ｄｉａｇｎｏｓｉｓ，ａｎｄ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ，Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ，ｐｐ．３−２０）。

【0036】

本明細書で使用するとき、「抗ＣＤ１５４抗体」は、ＣＤ１５４に結合し、ＣＤ１５４とＣＤ４０との相互作用を遮断する、ＩｇＧ１σサブタイプのヒトモノクローナル抗体（ｍＡｂ）、又はその抗原結合フラグメントを指し、抗体又はその抗原結合フラグメントは、それぞれ配列番号３、４、及び５の重鎖相補性決定領域（ＣＤＲ）ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３と、それぞれ配列番号６、７、及び８の軽鎖ＣＤＲ ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３とを含む。一実施形態では、抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントは、それぞれ配列番号９及び１０のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域（ＶＨ）及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。好ましくは、抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントは、配列番号１１のアミノ酸配列を有する重鎖と、配列番号１２のアミノ酸配列を有する軽鎖とを含む。好ましい実施形態では、抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントのＩｇＧ１σ骨格は、抗体のＦｃドメインをサイレンシングしてＦｃエフェクター機能を低減又は排除するために、野生型ＩｇＧ１ｍＡｂと比較して、７つのアミノ酸突然変異（Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａ、Ｐ２３８Ｓ、Ｈ２６８Ａ、Ａ３３０Ｓ、及びＰ３３１Ｓ）を含む。したがって、一実施形態では、抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントは、ＦｃγＲＩＩａ、ＦｃγＲＩＩｂ、又はＦｃγＲＩＩＩａに結合せず、好ましくは抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントは、血小板上のＦｃγＲＩＩａ受容体に結合しない。より好ましくは、抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントは、ヒト血小板を活性化しない。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントによる血小板活性化の低減は、サイレンシングしたＦｃドメインの結果生じ、したがって、抗体のＦｃエフェクター機能及び／又は特定のＶＨ／ＶＬ領域を低減又は排除することによって、エピトープ依存性血小板活性化を低減又は排除する。

【0037】

特定の実施形態では、抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントは、参照により本明細書に組み込まれる国際公開第２０１７／０２４１４６号に記載されるＣ４ＬＢ２３１である。

【0038】

抗ＣＤ１５４抗体は、ハイブリドーマ産生を含むがこれらに限定されない、モノクローナル抗体を調製するための、本開示を考慮して当該技術分野において既知の任意の方法によって調製することができる。例えば、抗ＣＤ１５４抗体は、組み換えＤＮＡ技術を使用して、哺乳類細胞株（例えば、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞株）中で産生させることができる。具体的には、Ｃ４ＬＢ２３１及びＣ４ＬＢ２３１の産生方法は、例えば、参照により本明細書に組み込まれる国際公開第２０１７／０２４１４６号に更に記載されている。

【0039】

「安全」という用語は、抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントによる用量、投与レジメン、治療又は方法に関連するとき、Ｆｅｄｅｒａｌ Ｆｏｏｄ，Ｄｒｕｇ，ａｎｄ Ｃｏｓｍｅｔｉｃ Ａｃｔ（改訂された場合はその改訂版）（ｓｅｃｓ．２０１−９０２，５２ Ｓｔａｔ．１０４０以下（改訂された場合はその改訂版）；２１ Ｕ．Ｓ．Ｃ．§§３２１−３９２）に従って、標準治療又は別の比較薬と比較して、治療下で発現した有害事象（ＡＥ又はＴＥＡＥと称される）の許容可能な頻度及び／又は許容可能な重篤度を伴う、優れたリスク対効果比を指す。特に、安全とは、本明細書に記載される抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントによる用量、投与レジメン又は治療に関連するとき、その原因が抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントの使用による可能性がある、可能性が高い、又は非常に高いと考えられる場合、抗体の投与に関連する有害事象の許容可能な頻度及び／又は許容可能な重篤度を指す。安全性は、多くの場合、所望の効果を得るのに必要な、活性医薬成分の最大認容用量又は最適用量を決定する、毒性試験によって測定される。安全性を調べる試験はまた、薬物への暴露がもたらし得る、任意の潜在的な有害な影響の特定を求めるものである。

【0040】

本明細書で使用される場合、特に断りがない限り、用語「臨床的に証明された」（独立して、又は用語「安全」を修飾するために使用される）は、臨床試験によって証明されており、臨床試験が、米国食品医薬品局、欧州医薬品審査庁（ＥＭＥＡ）、又は対応する国家規制機関の承認基準を満たしていることを意味するものとする。本明細書に記載される実施形態によると、臨床試験は、対象への投与及び対象における自己免疫疾患の治療のための、薬剤、すなわち、抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントの安全性を臨床的に証明するための、第１相無作為化二重盲検プラセボ対照単回投与用量漸増試験である。

【0041】

本明細書で使用するとき、語句「有害事象」、「治療下で発現した有害事象」、及び「有害反応」は、医薬組成物又は治療薬の投与に関連する又はこれらに起因する、あらゆる悪影響がある、好ましくない、意図しない、又は望ましくない徴候又は結果を意味する。しかしながら、異常値又は観察結果は、治験責任医師によって臨床的に重要であるとみなされない限り、有害事象として報告されない。本明細書で使用するとき、有害事象を指す場合、「臨床的に明らかな」とは、当業者にとって標準的で許容可能な方法を使用して、医師又は治験責任医師によって決定される臨床的に重要であることを意味する。有害事象の悪影響がある又は望ましくない結果がこのような重篤度レベルに達すると、規制当局は、この医薬組成物又は治療薬が提案される用途に対して許容されないと判断する場合がある。抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントの皮下又は静脈内投与の文脈において使用される場合、許容されない有害事象又は反応の例としては、臨床的に明らかな、心筋梗塞（ＭＩ）、肺塞栓症（ＰＥ）、及び深部静脈血栓症（ＤＶＴ）などの血栓塞栓（ＴＥ）イベント；重度の全身注射関連反応；血中のウイルス、例えば、エプスタイン−バーウイルス及び／又はサイトメガロウイルスの増加；並びに、抗体リコール応答（例えば、破傷風トキソイドに対する抗体リコール応答によって測定される）及び一次免疫応答（例えば、ＫＬＨに対する一次免疫応答によって測定される）などの免疫応答の阻害が挙げられるが、これらに限定されない。

【0042】

本明細書で使用するとき、「治療」又は「治療する」は、治癒を目的とした処置を指す。治療を必要としている個体としては、障害又は障害の兆候を有するとして診断された対象が挙げられる。治療され得る対象としては、障害を有する傾向があるもの又は障害に対し感受性を有するもののうち、かかる障害が予防され得るものも挙げることができる。有益な又は所望の臨床結果としては、検出可能であろうと又は検出不可能であろうと、症状の緩和、疾患の程度の軽減、安定した（すなわち、悪化しない）疾患状態、疾患の進行の遅延又は鈍化、疾患状態の改善又は緩和、及び寛解（部分的であろうと又は全体的であろうと）が挙げられる。有益な臨床結果としては、治療を受けた対象における、例えば、Ｂ細胞又は樹状細胞の増殖の低減、炎症性サイトカイン、接着分子、プロテアーゼ、免疫グロブリン（例えば、ＣＤ４０を担持する細胞はＢ細胞である場合）、これらの組み合わせの減少、抗炎症性タンパク質の産生増大、自己反応性細胞数の低減、免疫寛容の増強、自己反応性細胞の生存阻害、及び／又はＣＤ４０を発現している細胞がＣＤ１５４による刺激を受けることで介在される１種以上の症状の低減が挙げられる。臨床応答は、磁気共鳴画像（ＭＲＩ）スキャン、Ｘ線透視撮影、コンピューター断層撮影（ＣＴ）スキャン、フローサイトメトリー、又は蛍光標示式細胞分取器（ＦＡＣＳ）分析、組織診断、肉眼所見、及びＥＬＩＳＡ、ＲＩＡ、及びクロマトグラフィーなどにより検出可能な変化を含むがこれらに限定されない血液化学法などといった、スクリーニング技術を使用して、評価され得る。

【0043】

本明細書で使用するとき、「ｍｇ／ｋｇ」で表す抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントの投与量は、抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントが投与される対象の体重１キログラム当たりの抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントのミリグラム量を指す。

【0044】

１つの一般的な態様では、本発明は、抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントの、それを必要とする対象、好ましくはヒト対象への、臨床的に証明された安全な皮下投与及び／又は静脈内投与を提供する方法に関する。好ましくは、対象は、自己免疫疾患、例えば、Ｔ細胞が疾患の開始及び／又は進行に関与する全身性自己免疫疾患である自己免疫疾患と診断されるか、又はその疑いがある。本発明の方法に従って、抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントが投与される患者が診断され得る、又はその疑いがあるとされ得る自己免疫疾患の例として、関節炎、関節リウマチ、乾癬性関節炎、強直性脊椎炎、潰瘍性大腸炎、尋常性乾癬、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、クローン病、及びシェーグレン症候群が挙げられるが、これらに限定されない。

【0045】

１つの好ましい実施形態では、自己免疫疾患は関節リウマチである。関節リウマチは、慢性の全身性自己炎症性疾患であり、特に手及び足の関節の滑膜表層の炎症及び破壊（滑膜炎）を引き起こす。関節に加えて、関節リウマチは、最終的に皮膚、心臓、肺、及び眼に影響を及ぼし得る。Ｔ細胞は、関節リウマチの開始及び進行の両方に関与しているように思われ、ＣＤ１５４もまた、関節リウマチの原因に関与しているように思われる。

【0046】

別の好ましい実施形態では、自己免疫疾患はＳＬＥである。ＳＬＥは、皮膚、血管、筋肉、腎臓、及び肺を含む多くの器官及び組織を標的とする。非臨床データ及び臨床データによって、ＳＬＥの開始及び進行におけるＣＤ１５４及びＣＤ１５４発現Ｔ細胞の役割が支持されている。

【0047】

別の実施形態では、自己免疫疾患はシェーグレン症候群である。シェーグレン症候群は、免疫系が涙及び唾液を作る腺を攻撃する自己免疫疾患であり、口渇症及びドライアイ、並びに鼻、喉、及び皮膚などの水分を必要とする体の他の部分の乾燥を引き起こす。シェーグレン症候群はまた、関節、肺、腎臓、血管、消化器官、及び神経を含む体の他の部分に影響を及ぼし得る。

【0048】

別の一般的な態様では、本発明は、自己免疫疾患の臨床的に証明された安全な治療を、かかる治療を必要とする対象、好ましくはヒト対象に提供する方法に関し、この方法は、抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントと、薬学的に許容される担体と、を含む、医薬組成物を対象に皮下投与又は静脈内投与することを含み、投与される抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントの総投与量は、１回の投与当たり０．３ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇである。抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントの臨床的に証明された安全な投与のための本明細書に記載の方法のいずれも、自己免疫疾患の臨床的に証明された安全な治療を提供するために使用され得る。

【0049】

本発明の実施形態によると、任意の自己免疫疾患を、本明細書に記載の方法によって治療することができる。好ましくは、自己免疫疾患は、ＣＤ１５４を標的とする治療薬による治療に応答する。好ましくは、自己免疫疾患は、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、又はシェーグレン症候群である。

【0050】

一実施形態では、抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントの臨床的に証明された安全な投与を対象に、及び／又は、対象、好ましくはヒト対象における自己免疫疾患、好ましくは、関節リウマチ、ＳＬＥ、又はシェーグレン症候群の臨床的に証明された安全な治療を提供する方法は、抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントと、薬学的に許容される担体と、を含む、医薬組成物を対象に皮下投与又は静脈内投与することを含み、投与される抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントの総投与量は、１回の投与当たり０．３ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇ対象体重である。

【0051】

一実施形態において、医薬組成物は皮下投与される。皮下投与とは皮膚の下への投与を指し、薬物又は治療薬は、皮膚と筋肉との間の組織層に注入される。皮下投与を介して投与される薬剤は、通常、静脈内に注入される場合よりもゆっくりと吸収される。抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントの投与が皮下注射による場合、１回の投与当たり対象に投与される抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントの総投与量を、単回皮下注射、又は複数回、例えば１、２、３、４、５、若しくはそれ以上の皮下注射で投与してよい。

【0052】

別の実施形態において、医薬組成物は静脈内投与される。静脈内投与とは、静脈内に直接投与することを指す。静脈内投与は、注射によって（例えば、より高圧で注射器を用いて）、又は点滴によって（例えば、重力による圧力を使用して）行うことができる。静脈内投与は、典型的には、薬物又は治療薬が血液循環によって運ばれるため、体中に薬物又は治療薬を送達するための最も迅速な方法である。抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントの投与が静脈内投与による場合、投与は静脈内注射又は点滴によって行うことができ、好ましくは点滴によるものである。例えば、１回の投与当たり対象に投与される抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントの総投与量を、約３０分〜１８０分、好ましくは６０分〜１２０分、例えば３０分、６０分、９０分、１２０分、１５０分、又は１８０分の時間をかけて静脈内に点滴によって投与してよい。

【0053】

１回の投与当たりの抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントの総投与量は、臨床試験において決定される皮下又は静脈内投与による安全な投与及び／又は安全な治療を提供するように選択される。本発明の実施形態によると、１回の投与あたり投与される抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントの総投与量は、例えば、０．３ｍｇ／ｋｇ、０．５ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、２ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、４ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ、６ｍｇ／ｋｇ、７ｍｇ／ｋｇ、８ｍｇ／ｋｇ、９ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇ、２０ｍｇ／ｋｇ、２５ｍｇ／ｋｇ、３０ｍｇ／ｋｇ、３５ｍｇ／ｋｇ、４０ｍｇ／ｋｇ、４５ｍｇ／ｋｇ、若しくは５０ｍｇ／ｋｇ、又はこれらの間の任意の投与量である。抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントの総投与量を、１日間、１週間、１ヶ月間、６ヶ月間、１年間、２年間又はそれ以上の期間にわたって、１日１回、週に１回、２週間毎に１回、３週間毎に１回、月に１回、６ヶ月毎に１回などで投与してよい。例えば、０．３ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントの総投与量を、実質的に同時に、すなわち、０分〜１時間の時間、例えば、５分、１０分、１５分、２０分、２５分、３０分、３５分、４０分、４５分、５０分、５５分、又は１時間かけて、単回皮下注射、又は複数回皮下注射（例えば、２〜５回の注射）によって、１回の投与当たりで（例えば、１日１回少なくとも１日間）投与してよい。あるいは、０．３ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントの総投与量を、約３０分〜３時間、好ましくは６０分〜１２０分の時間をかけて静脈内点滴によって、１回の投与当たりで（例えば、１日１回少なくとも１日間）投与してよい。抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントの、それぞれが０．３ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの総投与量である複数回投与を、それを必要とする対象に投与してよい。

【0054】

本発明の方法で使用するのに好適な医薬組成物は、皮下投与又は静脈内投与用に製剤化される。皮下及び／又は静脈内投与に好適な製剤の例としては、溶液、懸濁液、エマルション、及び注射又は点滴用に薬学的に許容される担体内に溶解又は懸濁され得る乾燥製品が挙げられるが、これらに限定されない。好ましい実施形態では、本発明の方法で使用するための抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントを含む医薬組成物は、溶液として製剤化される。

【0055】

本発明で使用される医薬組成物に含まれる抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントの濃度は、可変であり得る。典型的には、抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントの濃度は、１ｍｇ／ｍＬ〜１００ｍｇ／ｍＬ、例えば１ｍｇ／ｍＬ、１０ｍｇ／ｍＬ、２０ｍｇ／ｍＬ、３０ｍｇ／ｍＬ、４０ｍｇ／ｍＬ、５０ｍｇ／ｍＬ、６０ｍｇ／ｍＬ、７０ｍｇ／ｍＬ、８０ｍｇ／ｍＬ、９０ｍｇ／ｍＬ、又は１００ｍｇ／ｍＬ、又はこれらの間の任意の濃度である。好ましくは、抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントの濃度は、４０ｍｇ／ｍＬ〜６０ｍｇ／ｍＬ、例えば、５０ｍｇ／ｍＬである。このような濃度で抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントを含む医薬組成物は、対象に直接投与することができ、又は、特に組成物が静脈内点滴により投与されるとき、このような組成物を好適な希釈剤（例えば、滅菌１％〜１０％グルコース溶液、例えば５％グルコース溶液）で適切な投与量まで希釈することができる。例えば、４０ｍｇ／ｍＬ〜６０ｍｇ／ｍＬの濃度の抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントを含有する医薬組成物を希釈剤中で、約６０分〜１２０分間かけて静脈内点滴により投与される総量２００ｍＬ〜３００ｍＬ、例えば２５０ｍＬに希釈することができる。

【0056】

本発明で使用するための医薬組成物は、１種以上の薬学的に許容される担体、例えば、医薬品製造、特に抗体医薬品製造の分野で広く用いられているものを更に含む。本明細書で使用するとき、用語「担体」は、任意の賦形剤、希釈剤、緩衝剤、安定化剤、又は医薬製剤に関する当該技術分野で周知の他の材料を指す。特に、薬学的に許容される担体は非毒性であり、活性成分の有効性を干渉すべきではない。薬学的に許容される担体としては、当該技術分野において既知である医薬組成物での使用に好適な賦形剤及び／又は添加剤が挙げられ、例えば、「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ＆Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ」１９ｔｈ ｅｄ．，Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｉｌｌｉａｍｓ，（１９９５）及び「Ｐｈｙｓｉｃｉａｎ’ｓ Ｄｅｓｋ Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ」５２ｎｄ ｅｄ．，Ｍｅｄｉｃａｌ Ｅｃｏｎｏｍｉｃｓ，Ｍｏｎｔｖａｌｅ，Ｎ．Ｊ．（１９９８）に記載されており、これらの開示は参照によって全体が本明細書に組み込まれる。

【0057】

本発明の実施形態によると、本発明で使用するための医薬組成物は、抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントと、薬学的に許容される担体と、を含む。いくつかの実施形態では、薬学的に許容される担体は、アルギニン、グリシン、ヒスチジン及び／又はメチオニンなどの１種以上のアミノ酸、ラクトース、マルトース、スクロースなどの１種以上の炭水化物、ポリソルベート２０、ポリソルベート８０などの１種以上の界面活性剤、及びエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、及びエチレンジアミン−Ｎ，Ｎ’−二コハク酸（ＥＤＤＳ）などの１種以上のキレート剤を含む。好ましくは、医薬組成物は、５〜６のｐＨ、例えば、５．０、５．１、５．２、５．３、５．４、５．５、５．６、５．７、５．８、５．９、又は６．０、又はこれらの間の任意の値のｐＨを有する。

【0058】

いくつかの実施形態では、本発明で使用するための医薬組成物は、１ｍＭ〜５０ｍＭ、５ｍＭ〜５０ｍＭ、５ｍＭ〜３０ｍＭ、５ｍＭ〜２０ｍＭ、５ｍＭ〜１５ｍＭ、又は５ｍＭ〜１０ｍＭの濃度のヒスチジン、アルギニン、及び／又はグリシンを含む。例えば、ヒスチジン、アルギニン、及び／又はグリシンの濃度は、１ｍＭ、２ｍＭ、３ｍＭ、４ｍＭ、５ｍＭ、６ｍＭ、７ｍＭ、８ｍＭ、９ｍＭ、１０ｍＭ、１１ｍＭ、１２ｍＭ、１３ｍＭ、１４ｍＭ、１５ｍＭ、１６ｍＭ、１７ｍＭ、１８ｍＭ、１９ｍＭ、２０ｍＭ、２１ｍＭ、２２ｍＭ、２３ｍＭ、２４ｍＭ、２５ｍＭ、２６ｍＭ、２７ｍＭ、２８ｍＭ、２９ｍＭ、３０ｍＭ、３１ｍＭ、３２ｍＭ、３３ｍＭ、３４ｍＭ、３５ｍＭ、３６ｍＭ、３７ｍＭ、３８ｍＭ、３９ｍＭ、４０ｍＭ、４１ｍＭ、４２ｍＭ、４３ｍＭ、４４ｍＭ、４５ｍＭ、４６ｍＭ、４７ｍＭ、４８ｍＭ、４９ｍＭ、又は５０ｍＭ、又はこれらの間の任意の濃度であってよい。

【0059】

いくつかの実施形態では、本発明で使用するための医薬組成物は、１％〜１０％（重量／体積、ｗ／ｖ）、５％〜１０％（ｗ／ｖ）、又は７％〜９％（ｗ／ｖ）の濃度のスクロース、ラクトース、及び／又はマルトースを含む。例えば、スクロース、ラクトース、及び／又はマルトースの濃度は、１％（ｗ／ｖ）、１．５％（ｗ／ｖ）、２％（ｗ／ｖ）、２．５％（ｗ／ｖ）、３％（ｗ／ｖ）、３．５％（ｗ／ｖ）、４％（ｗ／ｖ）、４．５％（ｗ／ｖ）、５％（ｗ／ｖ）、５．５％（ｗ／ｖ）、６％（ｗ／ｖ）、６．５％（ｗ／ｖ）、７％（ｗ／ｖ）、７．５％（ｗ／ｖ）、８％（ｗ／ｖ）、８．５％（ｗ／ｖ）、９％（ｗ／ｖ）、９．５％（ｗ／ｖ）、又は１０％（ｗ／ｖ）、又はこれらの間の任意の濃度であってよい。

【0060】

いくつかの実施形態では、本発明で使用するための医薬組成物は、０．０１％（ｗ／ｖ）〜０．１％（ｗ／ｖ）、０．０１％（ｗ／ｖ）〜０．０８％（ｗ／ｖ）、又は０．０２％（ｗ／ｖ）〜０．０５％（ｗ／ｖ）の濃度のポリソルベート２０（ＰＳ２０）及び／又はポリソルベート８０（ＰＳ８０）を含む。例えば、ポリソルベート２０及び／又はポリソルベート８０の濃度は、０．０１％、０．０２％、０．０３％、０．０４％、０．０５％、０．０６％、０．０７％、０．０８％、０．０９％、又は０．１％（ｗ／ｖ）、又はそれらの間の任意の濃度であってよい。

【0061】

いくつかの実施形態では、本発明で使用するための医薬組成物は、１μｇ／ｍＬ〜５０μｇ／ｍＬ、１μｇ／ｍＬ〜３０μｇ／ｍＬ又は１０μｇ／ｍＬ〜３０μｇ／ｍＬの濃度のエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）及び／又はエチレンジアミン−Ｎ，Ｎ’−二コハク酸（ＥＤＤＳ）を含む。例えば、ＥＤＴＡ及び／又はＥＤＤＳの濃度は、１μｇ／ｍＬ、５μｇ／ｍＬ、１０μｇ／ｍＬ、１５μｇ／ｍＬ、２０μｇ／ｍＬ、２５μｇ／ｍＬ、３０μｇ／ｍＬ、３５μｇ／ｍＬ、４０μｇ／ｍＬ、４０μｇ／ｍＬ、４５μｇ／ｍＬ、又は５０μｇ／ｍＬ、又はこれらの間の任意の濃度であってよい。

【0062】

本発明で使用するための抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントを含む医薬組成物は、本開示を考慮して当該技術分野において既知の任意の方法によって調製することができる。例えば、抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントを、１種以上の薬学的に許容される担体と混合して、溶液を得ることができる。溶液は、対象に投与されるまで、−４０℃±１０℃〜−７０℃±２０℃の範囲の制御された温度で、かつ、適切なバイアル瓶中での遮光下で、凍結液体として保存することができる。

【0063】

本発明の実施形態によると、本明細書に記載のものなどの臨床試験によって、様々な因子を分析し、抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントの特定の投与量が安全な皮下及び／又は静脈内投与を提供するかについて判定することができる。例えば、特定の投与量の皮下及び／又は静脈内投与された抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントの安全性を、免疫原性試験（例えば、抗ＣＤ１５４抗体、例えば、抗Ｃ４ＬＢ２３１抗体に対する抗体の産生を測定する）、タンパク質プロファイリングによる血清タンパク質などの血中バイオマーカー（例えば、サイトカイン、ケモカイン、及び炎症性タンパク質）に対する影響の判定、ウイルス反応の測定（例えば、エプスタイン−バーウイルス及び／又はサイトメガロウイルスのウイルス再活性化又はウイルス量）、血小板活性化のレベルの判定、一次及びリコール抗原負荷試験、並びに、可溶型ＣＤ１５４（ｓＣＤ１５４）の総血漿中濃度及び遊離血漿中濃度の測定によって、評価することができる。皮下及び／又は静脈内投与された抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントの安全性はまた、対象の理学的検査；局所注射部位反応、全身注射関連反応、及び他のアレルギー反応の観察；心電図；臨床検査室試験；バイタルサイン；並びに、血栓塞栓イベントなどの他の有害事象の監視によって、監視することができる。

【0064】

いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１５４抗体若しくはその抗原結合フラグメントの臨床的に証明された安全な投与、及び／又は自己免疫疾患の臨床的に証明された安全な治療は、血小板活性化の測定によって判定される。血小板の活性化は、細胞内シグナル伝達経路の活性化をもたらし、その結果、血小板表面のＰ−セレクチンの発現が上方制御され、フィブリノーゲンのインテグリン受容体αＩＩｂβ３に対する結合親和性が増大する。したがって、血小板活性化は、Ｐ−セレクチンの表面発現の増大、又はプローブリガンド、例えば、ＰＡＣ−１の、血小板上αＩＩｂβ３インテグリンに対する結合を、例えばフローサイトメトリーを用い測定することにより測定され得る。したがって、血小板活性化は、凝固マーカー（例えば、Ｐ−セレクチン）を発現する細胞のフローサイトメトリーによって、又は血小板の計数のための本開示を考慮して当該技術分野において既知の他の方法によって、測定及び／又は定量化することができる。一実施形態では、血小板活性化は、血小板上のＰ−セレクチン表面発現を測定することによって決定される。別の実施形態では、血小板活性化は、血小板上のαＩＩｂβ３インテグリンに対するプローブリガンドの結合を測定することによって決定される。

【0065】

いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１５４抗体若しくはその抗原結合フラグメントの臨床的に証明された安全な投与、及び／又は自己免疫疾患の臨床的に証明された安全な治療は、抗原に対する一次及び／又はリコール免疫応答の測定によって判定される。免疫調節剤による治療の有効性及び安全性を評価するために、一次及びリコール（又はメモリー）Ｔ細胞依存性応答を使用することができる。一次及びリコールＴ細胞依存性応答は、このような免疫応答に対する抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントの投与の影響を評価するために、好ましくは抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントの投与後に、対象に抗原を投与することによって測定できる。例えば、抗原は、抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントが対象に投与された、１日、２日、３日、４日、５日、６日、７日、８日、９日、１０日、１ヶ月、６ヶ月、又は１年、又はそれ以上後に、投与され得る。好ましくは、抗原は、抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントが投与された、１〜１０日後、より好ましくは２〜４日後、例えば３日後に投与される。抗原は、例えば、筋肉内又は皮下注射によって、本開示を考慮して当該技術分野において既知の任意の方法によって投与することができる。抗原は、好ましくは、抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントの投与部位とは異なる解剖学的位置で対象に投与される。

【0066】

一次免疫応答を評価する目的で対象に投与され得る抗原としては、ヒトにおいて免疫学的曝露の証拠がほとんど示されない抗原（例えば、キーホールリンペットヘモシアニン）が挙げられる。リコール免疫応答を評価する目的で対象に投与され得る抗原としては、例えば、ワクチン接種によって、ほとんどのヒトがこれまで曝露されている抗原（例えば、破傷風トキソイド）が挙げられる。

【0067】

一実施形態では、キーホールリンペットヘモシアニン（ＫＬＨ）に対する一次免疫応答が測定される。ＫＬＨは、Ｔ細胞依存性免疫応答を評価するために使用される抗原である。ＫＬＨは、非食用軟体動物であるキーホールカサガイ（Megathura crenulate）に由来する。ヒトは、ＫＬＨへの免疫学的曝露の証拠、例えば、ＫＬＨに対する抗免疫グロブリンＧ（ＩｇＧ）又はＩｇＭ抗体をほとんど示さない。したがって、ＫＬＨ負荷を使用して、特定の一次抗原応答に対する免疫調節因子の影響を評価することができる。

【0068】

一実施形態では、破傷風トキソイド（ＴＴ）に対するリコール（又はメモリー）免疫応答が測定される。ペプチド抗原を含む破傷風トキソイドワクチンは、一般に、小児期又は青年期早期中に、青年期後期及び成人期では多くの場合追加免疫と共に、ワクチン接種として投与される。したがって、破傷風トキソイドの負荷に対する抗体応答は、多くの場合、リコール、又はメモリーＴ細胞依存性応答であると考えられる。このようなリコール応答は、典型的には、調節に対してより高い閾値を有し、リコール応答に対する免疫調節剤の影響を評価することにより、薬剤の安全性を知る手掛かりとなり得る。投与された抗原に対する一次及びリコール免疫応答は、細胞性及び／又は液性免疫応答を評価するための、本開示を考慮して、当該技術分野において既知の任意の方法によって測定することができる。細胞性免疫の測定は、活性化されたエフェクター細胞によって分泌されるサイトカインプロファイルの測定によって（例えば、酵素結合免疫スポット（ＥＬＩＳｐｏｔ）アッセイによって）、免疫エフェクター細胞の活性化状態の測定によって（例えば、Ｔ細胞増殖アッセイ）、及び／又は、感作した対象における抗原特異的Ｔリンパ球のアッセイによって（例えば、細胞毒性アッセイにおけるペプチド特異的溶解）、行うことができる。液性応答を刺激する能力は、抗体結合及び／又は結合における競合によって決定することができる。例えば、抗原の投与に応答して産生される抗体の力価は、酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）によって測定することができる。ＥＬＩＳｐｏｔをまた、液性免疫応答を評価するために使用して、抗原の投与に応答して産生された抗体を分泌する細胞を同定し、かつその数を計測することもできる。

【0069】

本発明のいくつかの実施形態では、ＫＬＨ及び／又は破傷風トキソイド投与に応答して産生される抗体を調べて、一次及び／又はリコール免疫応答に対する抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントの投与の効果を評価する。例えば、抗原（例えば、ＫＬＨ及び／又は破傷風トキソイド）の投与後に、対象から血清サンプルを採取することができる。血清サンプルを、例えば、ＥＬＩＳＡによって、投与された抗原に対する抗体について分析することができる。一実施形態では、ＫＬＨに対する抗体（例えば、抗ＫＬＨ ＩｇＧ及びＩｇＭ抗体）が検出される。別の実施形態では、破傷風トキソイドに対する抗体（例えば、抗破傷風ＩｇＧ抗体）が検出される。

【0070】

本発明の実施形態によると、可能性がある抗体リコール応答の臨床的に有意な阻害として、例えば、防御抗体レベルが予め存在する個体において、破傷風トキソイド負荷前と比較して、抗破傷風ＩｇＧ抗体レベルの少なくとも２倍の増加誘導ができないことが挙げられる。他の実施形態では、可能性がある一次免疫応答の臨床的に有意な阻害として、例えば、いかなる検出レベルの抗ＫＬＨ抗体の誘導ができないことが挙げられる。

【0071】

いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１５４抗体若しくはその抗原結合フラグメントの臨床的に証明された安全な投与、及び／又は自己免疫疾患の臨床的に証明された安全な治療は、ウイルス血によって、例えば、ウイルス量又はウイルス血によって判定される。臨床的に重要なレベル未満のウイルス血（すなわち、血液中のウイルスの存在）は、安全な投与及び／又は安全な治療を示す。ウイルス血、つまりウイルス量評価は、血液サンプル中のウイルスのウイルスＤＮＡコピー数を測定することによって決定することができる。ウイルス血又はウイルス量に関して本明細書で使用するとき、「臨床的に重要なレベル」とは、≧１０，０００コピー／ｍＬ血液のウイルスＤＮＡコピー数を意味する。本発明の実施形態によると、抗ＣＤ１５４抗体若しくはその抗原結合フラグメントの臨床的に証明された安全な投与、及び／又は自己免疫疾患の臨床的に証明された安全な治療は、ウイルス量評価、つまり、臨床的に重要なレベル未満、すなわち、対象のサンプル１ｍＬ当たり＜１０，０００コピーのウイルスＤＮＡのウイルス血を含む。サンプルは、血液、血清、又は血漿であってよい。ウイルス量又はウイルス血は、ウイルスＤＮＡに特異的なプライマーを使用する、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）又は定量的リアルタイムＰＣＴ（ｑＲＴ−ＰＣＲ）を含むが、これらに限定されない、本開示を考慮して、当該技術分野において既知の任意の方法によって測定することができる。例えば、その内容が本明細書に参照により組み込まれる、Ｒｏｓｅｎｚｗｅｉｇ ｅｔ ａｌ．，Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ａ ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ ａｓｓａｙ ｔｏ ｍｅａｓｕｒｅ ＥＢＶ ｖｉｒａｌ ｌｏａｄ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ ｔｙｐｅ １ ｄｉａｂｅｔｅｓ ａｎｄ ｈｅａｌｔｈｙ ｓｕｂｊｅｃｔｓ，Ｊ ｏｆ Ｖｉｒｏｌｏｇｉｃａｌ Ｍｅｔｈｏｄｓ．２０１０；１６４：１１１−１１５；Ｖｅｒｋｒｕｙｓｅ ｅｔ ａｌ．，Ｏｎｃｅ ｄａｉｌｙ ｇａｎｃｉｃｌｏｖｉｒ ａｓ ｉｎｉｔｉａｌ ｐｒｅ−ｅｍｐｔｉｖｅ ｔｈｅｒａｐｙ ｄｅｌａｙｅｄ ｕｎｔｉｌ ｔｈｒｅｓｈｏｌｄ ＣＭＶ ｌｏａｄ Ｘ１００００ ｃｏｐｉｅｓ／ｍｌ：ａ ｓａｆｅ ａｎｄ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ｓｔｒａｔｅｇｙ ｆｏｒ ａｌｌｏｇｅｎｅｉｃ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌ ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ ｐａｔｉｅｎｔｓ．Ｂｏｎｅ Ｍａｒｒｏｗ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ．２００６；３７：５１−５６を参照されたい。ウイルス量又はウイルス血は、エプスタイン−バーウイルス（ＥＢＶ）及びサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）が挙げられるが、これらに限定されないウイルスについて、決定することができる。

【0072】

いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１５４抗体若しくはその抗原結合フラグメントの臨床的に証明された安全な投与、及び／又は自己免疫疾患の臨床的に証明された安全な治療は、対象における任意の血栓塞栓イベントの発生に基づいて判定される。血栓塞栓イベントとしては、心筋梗塞（ＭＩ）、肺塞栓症（ＰＥ）、及び深部静脈血栓症（ＤＶＴ）が挙げられるが、これらに限定されない。血栓塞栓イベントの発生はまた、血栓症及び／又は凝固障害を示唆する血液凝固因子の変化に基づいて判定され得る。このような血栓塞栓イベントを示唆する、又は徴候である血液凝固因子の変化としては、血小板数、ヘモグロビン、ハプトグロビン、又はフィブリノーゲンレベルの減少；Ｄ−ダイマー値、プロトロンビン時間（ＰＴ）、部分トロンボプラスチン時間（ＰＴＴ）又は国際標準比（ＩＮＲ）の増加；及び、血栓症又は塞栓症と一致する赤血球（ＲＢＣ）の形態変化が挙げられるが、これらに限定されない。

【0073】

いくつかの実施形態では、抗ＣＤ１５４抗体若しくはその抗原結合フラグメントの臨床的に証明された安全な投与、及び／又は自己免疫疾患の臨床的に証明された安全な治療は、対象から得たサンプル中の可溶型ＣＤ１５４（ｓＣＤ１５４）の量を測定することにより判定される。ｓＣＤ１５４の量は、本開示を考慮して当該技術分野において既知の任意の方法、例えば、ＥＬＩＳＡ、電気化学発光イムノアッセイ（ＥＣＬＩＡ）などによって測定することができる。

【0074】

抗ＣＤ１５４抗体若しくはその抗原結合フラグメントの臨床的に証明された安全な皮下投与、及び／又はＣＤ１５４抗体若しくはその抗原結合フラグメントによる自己免疫疾患の臨床的に証明された安全な治療を提供する１つの例示的なレジメンでは、対象に、５０ｍｇ／ｍＬの抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントを含む医薬組成物を皮下投与する。投与される組成物の総体積は、単回皮下注射、複数回皮下注射、又は静脈内点滴において、抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントの標的投与量、すなわち、０．３ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇ対象体重を提供するように適切に調節される。

【0075】

（実施形態）
実施形態１は、抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントの臨床的に証明された安全な投与を、その投与を必要とする対象に提供する方法であって、この方法は、抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントと、薬学的に許容される担体と、を含む、医薬組成物を対象に皮下投与又は静脈内投与することを含み、投与される抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントの総投与量は、１回の投与当たり０．３ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇ対象体重である。

【0076】

実施形態１ａは、抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントが、それぞれ配列番号３、４、及び５の重鎖相補性決定領域（ＣＤＲ）ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３と、それぞれ配列番号６、７、及び８の軽鎖ＣＤＲ ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３とを含む、実施形態１に記載の方法である。

【0077】

実施形態１ｂは、抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントが、それぞれ配列番号９及び１０のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域（ＶＨ）及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む、実施形態１に記載の方法である。

【0078】

実施形態１ｃは、抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントが、野生型ＩｇＧ骨格と比較して、アミノ酸突然変異Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａ、Ｐ２３８Ｓ、Ｈ２６８Ａ、Ａ３３０Ｓ、及びＰ３３１Ｓを有するＩｇＧ１σ骨格を含む、実施形態１に記載の方法である。

【0079】

実施形態１ｄは、抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントが、配列番号１１のアミノ酸配列を有する重鎖と、配列番号１２のアミノ酸配列を有する軽鎖とを含む、実施形態１に記載の方法である。

【0080】

実施形態２は、自己免疫疾患の臨床的に証明された安全な治療を、その治療を必要とするヒト対象に提供する方法であって、この方法は、抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントと、薬学的に許容される担体と、を含む、医薬組成物を対象に皮下投与又は静脈内投与することを含み、投与される抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントの総投与量は、１回の投与当たり０．３ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇ対象体重である。

【0081】

実施形態２ａは、抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントが、それぞれ配列番号３、４、及び５の重鎖相補性決定領域（ＣＤＲ）ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３と、それぞれ配列番号６、７、及び８の軽鎖ＣＤＲ ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３とを含む、実施形態２に記載の方法である。

【0082】

実施形態２ｂは、抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントが、それぞれ配列番号９及び１０のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域（ＶＨ）及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む、実施形態２に記載の方法である。

【0083】

実施形態２ｃは、抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントが、野生型ＩｇＧ骨格と比較して、アミノ酸突然変異Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａ、Ｐ２３８Ｓ、Ｈ２６８Ａ、Ａ３３０Ｓ、及びＰ３３１Ｓを有するＩｇＧ１σ骨格を含む、実施形態２に記載の方法である。

【0084】

実施形態２ｄは、抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントが、配列番号１１のアミノ酸配列を有する重鎖と、配列番号１２のアミノ酸配列を含む軽鎖とを含む、実施形態１に記載の方法である。

【0085】

実施形態３は、自己免疫疾患が、Ｔ細胞が疾患の開始及び／又は進行に関与する全身性自己免疫疾患である、実施形態２〜２ｄのいずれか１つに記載の方法である。

【0086】

実施形態４は、自己免疫疾患が、関節炎、関節リウマチ、乾癬性関節炎、強直性脊椎炎、潰瘍性大腸炎、尋常性乾癬、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、クローン病、及びシェーグレン症候群からなる群から選択される、実施形態２〜２ｄのいずれか１つに記載の方法である。

【0087】

実施形態５は、自己免疫疾患が関節リウマチである、実施形態２〜２ｄのいずれか１つに記載の方法である。

【0088】

実施形態６は、自己免疫疾患が全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）である、実施形態２〜２ｄのいずれか１つに記載の方法である。

【0089】

実施形態７は、投与される抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントの総投与量が、０．３ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、３０ｍｇ／ｋｇ又は５０ｍｇ／ｋｇ、又はこれらの間の任意の用量である、実施形態１〜６のいずれか１つに記載の方法である。

【0090】

実施形態８は、医薬組成物が皮下投与される、実施形態１〜７のいずれか１つに記載の方法である。

【0091】

実施形態９は、抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントの総投与量が、１回の投与当たり１、２、３、又は４つの皮下注射で投与される、実施形態８に記載の方法である。

【0092】

実施形態１０は、医薬組成物が静脈内投与される、実施形態１〜７のいずれか１つに記載の方法である。

【0093】

実施形態１１は、抗ＣＤ１５４抗体若しくはその抗原結合フラグメントの臨床的に証明された安全な投与、及び／又は自己免疫疾患の臨床的に証明された安全な治療が、少なくとも１種のウイルスのウイルスＤＮＡが対象由来のサンプル、好ましくは対象由来の血液、血清、又は血漿１ｍＬ当たり＜１０，０００コピーのウイルス血症を含む、実施形態１〜１０のいずれか１つに記載の方法である。

【0094】

実施形態１２は、ウイルスが、エプスタイン−バーウイルス（ＥＢＶ）及びサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）からなる群から選択される少なくとも１種である、実施形態１１に記載の方法である。

【0095】

実施形態１３は、ウイルスＤＮＡがＰＣＲによって判定される、実施形態１１又は１２に記載の方法である。

【0096】

実施形態１４は、抗ＣＤ１５４抗体若しくはその抗原結合フラグメントの臨床的に証明された安全な投与、及び／又は自己免疫疾患の臨床的に証明された安全な治療が、リコール応答、例えば破傷風トキソイドに対するリコール応答を含む免疫応答を含む、実施形態１〜１３のいずれか１つに記載の方法である。

【0097】

実施形態１５は、リコール応答が、破傷風トキソイドの追加免疫と共に投与された対象における抗破傷風抗体を検出することによって測定される、実施形態１４に記載の方法である。

【0098】

実施形態１５ａは、抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントの投与後に破傷風トキソイドの追加免疫を対象に投与することと、対象の血清中の抗破傷風抗体を検出し、それによって破傷風トキソイドに対するリコール応答を判定することと、を更に含む、実施形態１５に記載の方法である。

【0099】

実施形態１６は、抗ＣＤ１５４抗体若しくはその抗原結合フラグメントの臨床的に証明された安全な投与、及び／又は自己免疫疾患の臨床的に証明された安全な治療が、一次応答、例えばＫＬＨに対する一次応答を含む免疫応答を含む、実施形態１〜１５のいずれか１つに記載の方法である。

【0100】

実施形態１７は、一次応答が、ＫＬＨの一次免疫と共に投与された対象における抗ＫＬＨ抗体を検出することによって測定される、実施形態１６に記載の方法である。

【0101】

実施形態１７ａは、抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントの投与後にＫＬＨの一次免疫を対象に投与することと、対象の血清中の抗ＫＬＨ抗体を検出し、それによってＫＬＨに対する一次応答を判定することと、を更に含む、実施形態１７に記載の方法である。

【0102】

実施形態１８は、抗ＣＤ１５４抗体若しくはその抗原結合フラグメントの臨床的に証明された安全な投与、及び／又は自己免疫疾患の臨床的に証明された安全な治療が、対象においていずれの臨床的に明らかな血栓塞栓（ＴＥ）イベントをもたらさない、実施形態１〜１７ａのいずれか１つに記載の方法である。

【0103】

実施形態１９は、ＴＥイベントが、心筋梗塞（ＭＩ）、肺塞栓症（ＰＥ）、及び深部静脈血栓症（ＤＶＴ）のうちの少なくとも１つを含む、実施形態１８に記載の方法である。

【0104】

実施形態２０は、ＴＥイベントの発生が血液凝固因子の変化に基づいて判定される、実施形態１８に記載の方法である。

【0105】

実施形態２１は、抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントの投与が、血小板の活性化をもたらさない、実施形態１〜２０のいずれか１つに記載の方法である。

【0106】

実施形態２２は、血小板活性化が、血小板上のＰ−セレクチン表面発現を測定することによって決定される、実施形態２１に記載の方法である。

【0107】

実施形態２３は、血小板活性化が、血小板上のαＩＩｂβ３インテグリンに対するプローブリガンドの結合を測定することによって決定される、実施形態２１に記載の方法である。

【0108】

実施形態２４は、医薬組成物が、１ｍｇ／ｍＬ〜１００ｍｇ／ｍＬの濃度の抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントを含む、実施形態１〜２３のいずれか１つに記載の方法である。

【0109】

実施形態２５は、抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントの濃度が、１ｍｇ／ｍＬ、１０ｍｇ／ｍＬ、２０ｍｇ／ｍＬ、３０ｍｇ／ｍＬ、４０ｍｇ／ｍＬ、５０ｍｇ／ｍＬ、６０ｍｇ／ｍＬ、７０ｍｇ／ｍＬ、８０ｍｇ／ｍＬ、９０ｍｇ／ｍＬ、又は１００ｍｇ／ｍＬ、又はこれらの間の任意の濃度である、実施形態２４に記載の方法である。

【0110】

実施形態２６は、医薬品が、ｐＨ５．０〜６．０で、４０ｍｇ／ｍＬ〜６０ｍｇ／ｍＬの抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントと、１ｍＭ〜２０ｍＭのアルギニンと、５％〜１０％（ｗ／ｖ）のラクトースと、０．０１％〜０．１０％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）と、１０μｇ／ｍＬ〜３０μｇ／ｍＬのＥＤＤＳと、を含む、実施形態１〜２５のいずれか１つに記載の方法である。

【0111】

実施形態２６ａは、医薬組成物が、ｐＨ５．６で、５０ｍｇ／ｍＬの抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントと、１０ｍＭのアルギニンと、８．５％（ｗ／ｖ）のラクトースと、０．０４％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）と、２０μｇ／ｍＬのＥＤＤＳと、を含む、実施形態２６に記載の方法である。

【0112】

実施形態２７は、医薬品が、ｐＨ５．０〜６．０で、４０ｍｇ／ｍＬ〜６０ｍｇ／ｍＬの抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントと、１ｍＭ〜２０ｍＭのヒスチジンと、５％〜１０％（ｗ／ｖ）のスクロースと、０．０１％〜０．１０％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０（ＰＳ２０）と、１０μｇ／ｍＬ〜３０μｇ／ｍＬのＥＤＴＡと、を含む、実施形態１〜２５のいずれか１つに記載の方法である。

【0113】

実施形態２７ａは、医薬組成物が、ｐＨ５．６で、５０ｍｇ／ｍＬの抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントと、１０ｍＭのヒスチジンと、８．５％（ｗ／ｖ）のスクロースと、０．０４％（ｗ／ｖ）のポリソルベート２０（ＰＳ２０）と、２０μｇ／ｍＬのエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）と、を含む、実施形態２７に記載の方法である。

【0114】

実施形態２８は、医薬品が、ｐＨ５．０〜６．０で、４０ｍｇ／ｍＬ〜６０ｍｇ／ｍＬの抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントと、１ｍＭ〜２０ｍＭのグリシンと、５％〜１０％（ｗ／ｖ）のマルトースと、０．０１％〜０．１０％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）と、１０μｇ／ｍＬ〜３０μｇ／ｍＬのＥＤＴＡと、を含む、実施形態１〜２５のいずれか１つに記載の方法である。

【0115】

実施形態２８ａは、医薬組成物が、ｐＨ５．６で、５０ｍｇ／ｍＬの抗ＣＤ１５４抗体又はその抗原結合フラグメントと、１０ｍＭのグリシンと、８．５％（ｗ／ｖ）のマルトースと、０．０４％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）と、２０μｇ／ｍＬのエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）と、を含む、実施形態２８に記載の方法である。

【0116】

実施形態２９は、対象がヒトである、実施形態１〜２８のいずれか１つに記載の方法である。

【0117】

実施形態３０は、対象が自己免疫疾患と診断されるか、又はその疑いがある、実施形態１〜２９のいずれか１つに記載の方法である。

【0118】

以下の本発明の実施例は、本発明の本質を更に説明するためのものである。以下の実施例は本発明を限定するものではなく、本発明の範囲は添付の請求項によって定められる点を理解されたい。

【実施例】

【0119】

実施例１：非経口投与された抗ＣＤ１５４抗体の毒性を評価するためのアカゲザルにおけるｉｎ ｖｉｖｏ反復投与試験
静脈内（ＩＶ）又は皮下（ＳＣ）投与した抗ＣＤ１５４抗体のアカゲザルにおける忍容性及び潜在的な血栓塞栓症リスクを評価した。ヒトにおいて血栓塞栓症を誘発することが知られている抗ＣＤ１５４ ＩｇＧ１抗体の投与は、アカゲザルにおいて肺血栓塞栓症の発症を起こすが、投与を受けていないカニクイザルでは起こさないため、標的抗ＣＤ１５４抗体の非臨床安全性評価においてより感受性の高い種として、両種とも薬理学的に適切ではあるものの、カニクイザルよりもアカゲザルを選択した。

【0120】

より具体的には、カニクイザルにおける薬物動態（ＰＫ）／薬力学（ＰＤ）試験では、２２例のサルに、ＩＶ投与によって０．０５ｍｇ／ｋｇ〜５ｍｇ／ｋｇの範囲の単回用量のＣ４ＬＢ２３１を、又は皮下投与によって５ｍｇ／ｋｇの単回用量のＣ４ＬＢ２３１を投与した。Ｃ４ＬＢ２３１のピーク血清中濃度（Ｃ_ｍａｘ）の用量に比例した増加が観察された。しかしながら、Ｃ４ＬＢ２３１のＣ_ｍａｘ血清中濃度は、恐らくは抗薬物抗体（ＡＤＡ）の高い発生率によって、急速に減少した。Ｃ４ＬＢ２３１処理された２２例のサルのうち、Ｃ４ＬＢ２３１投与を受けた１０例のサルに、２日目に単一用量のＫＬＨ負荷を行った。これらのＫＬＨ負荷動物におけるＣ４ＬＢ２３１のＰＫは、ＫＬＨ負荷なしの同用量のＣ４ＬＢ２３１投与を受けた動物と同等であった。

【0121】

したがって、カニクイザルもまた薬理学的に適切である（ＰＫ／ＰＤ）が、血栓塞栓症の潜在的リスクを評価するための標的抗ＣＤ１５４抗体の毒性試験には、アカゲザルがより感受性の高い種であると考えられる。

【0122】

Ｉ．８週間投与試験
アカゲザルに、１週間１回、８週間にわたり、抗ＣＤ１５４抗体Ｃ４ＬＢ２３１を静脈内（ＩＶ）又は皮下（ＳＣ）に投与した。試験の実験デザインを以下の表１に示す。これまでの臨床試験中の観察結果に基づき血栓塞栓症を誘発することが知られている抗ＣＤ１５４ １ｇＧ１抗体５ｃ８（Ｂｉｏｇｅｎ）を、陽性対照として使用した。対照ビヒクルは、１０ｍＭヒスチジン、８．５％スクロース、０．０４％ ＰＳ２０、２０μｇ／ｍＬ ＥＤＴＡ、ｐＨ５．６とした。計１６例のサルに抗ＣＤ１５４抗体Ｃ４ＬＢ２３１を投与し、８例のサルに陽性対照抗体を投与し、４例のサルに対照ビヒクルを投与した。

【0123】

【表1】

^１ＩＶ＝静脈内低速ボーラス注射；ＳＣ＝皮下注射

【0124】

群１〜４には、対照ビヒクル、陽性対照抗体、又は試験抗体Ｃ４ＬＢ２３１を、低速のボーラスＩＶ注射により末梢静脈内に投与し、群５は、週１回、１、８、１５、２２、２９、３６、４３、及び５０日目に計８回、肩甲骨部にＳＣ注射により試験抗体Ｃ４ＬＢ２３１を投与した。血液サンプルを動物から採取し、以下のように評価した。

【0125】

結果
肺組織病理学的評価によって判定したとき、３０ｍｇ／ｋｇ ＩＶ、１５０ｍｇ／ｋｇ ＩＶ、及び１００ｍｇ／ｋｇ ＳＣのＣ４ＬＢ２３１処置により、ＩＶ又はＳＣ投与動物のいずれにおいても血栓症は生じなかった。凝固パネル（プロトロンビン時間（ＰＴ）、活性化部分トロンボプラスチン時間（ａＰＴＴ）、フィブリノーゲン（ｆｉｂ）及びＤ−ダイマー（フィブリン分解産物））に影響はなく、血小板数及び形態学的パラメータ（平均体積、成分、及び分布幅）の変化は、高用量群（１５０ｍｇ／ｋｇ／ｗｋ ＩＶ）において観察されなかった。臨床病理学的パラメータにおけるＣ４ＬＢ２３１に関連する変化は、５６日目に１５０ｍｇ／ｋｇ ＩＶ投与の雌個体における中等度のリンパ球減少に限定された。Ｃ４ＬＢ２３１に関連する注射又は注射部位反応は観察されなかった。１５０ｍｇ／ｋｇまでのＣ４ＬＢ２３１用量について、他の有害事象は観察されなかった。

【0126】

採取した血液サンプル由来の血清を分析し、Ｃ４ＬＢ２３１の血清中濃度を測定した。各抗体投与群において測定したＣ４ＬＢ２３１の平均血清中濃度を、以下の表２に示す。Ｃ４ＬＢ２３１を投与された全ての動物は、週１回のＩＶ又はＳＣ投与後のサンプル採取期間（１日目〜５７日目）を通して定量化可能な抗体濃度を有した。陽性対照抗体を投与された全ての動物もまた、週１回のＩＶ投与後のサンプル採取期間を通して定量化可能な血清中濃度を有した。高用量（１５０ｍｇ／ｋｇ）でのＣ４ＬＢ２３１曝露量は、５０ｍｇ／ｋｇの陽性対照抗体を上回った。

【0127】

【表2】

^１投与からの経過時間
^２個々の比の平均

【0128】

平均遊離及び総ｓＣＤ１５４濃度を、電気化学発光イムノアッセイ（ＥＣＬＩＡ）によって、乏血小板血漿サンプル中で測定した。血小板は、ＣＤ１５４を低下させてｓＣＤ１５４濃度の測定を困難にするため、乏血小板血漿サンプルを使用した。平均遊離及び総ｓＣＤ１５４濃度を図１Ａ及び１Ｂに示す。平均遊離ｓＣＤ１５４濃度は、初回投与後、定量化可能な最低濃度以下まで直ちに抑制され、定量化可能な最低限度よりも低い遊離ｓＣＤ１５４ベースライン濃度であった１例の動物を除いて、５０ｍｇ／ｋｇの陽性対照抗体又は１５０ｍｇ／ｋｇのＣ４ＬＢ２３１の週１回ＩＶ投与後、最終抗体投与の７日後に最後のサンプルが採取されるまでこの濃度で維持された。

【0129】

３０ｍｇ／ｋｇ Ｃ４ＬＢ２３１の１日目及び５０日目の投与後、投与１時間後の平均遊離ｓＣＤ１５４濃度は定量化可能な最低濃度以下であり、平均ｓＣＤ１５４濃度は、各投与間隔終了時にベースラインより少なくとも５０％低いままであった。１００ｍｇ／ｋｇ Ｃ４ＬＢ２３１の１日目及び５０日目のＳＣ投与後、投与６時間後の平均遊離ｓＣＤ１５４濃度は定量化可能な最低濃度未満に抑制され、平均ｓＣＤ１５４濃度は、サンプリング期間を通して定量化可能な最低濃度レベルのままであった。

【0130】

群１では、ほとんどのサンプル中の全血漿ｓＣＤ１５４濃度は、定量化可能な最低濃度以下であった。Ｃ４ＬＢ２３１の３０及び１５０ｍｇ／ｋｇの週１回ＩＶ投与、又は１００ｍｇ／ｋｇの週１回ＳＣ投与、並びに陽性対照抗体の５０ｍｇ／ｋｇの週１回ＩＶ投与後、総ｓＣＤ１５４濃度はすぐに増加し、２２日目より前にプラトーに達した。陽性対照抗体群における総ｓＣＤ１５４濃度は、Ｃ４ＬＢ２３１投与群よりも早くプラトーに達した。Ｃ４ＬＢ２３１の１５０ｍｇ／ｋｇ ＩＶ投与群における平均プラトー濃度は、Ｃ４ＬＢ２３１の１００ｍｇ／ｋｇ ＳＣ投与群における平均プラトー濃度と同様であった。Ｃ４ＬＢ２３１の３０ｍｇ／ｋｇ ＩＶ投与群における平均プラトー濃度は、Ｃ４ＬＢ２３１の１５０ｍｇ／ｋｇ ＩＶ又は１００ｍｇ／ｋｇ ＳＣ投与群よりわずかに低かった。陽性対照抗体の５０ｍｇ／ｋｇ ＩＶ投与群における平均プラトー濃度は、有意に低かった。

【0131】

抗ＫＬＨ抗原負荷試験
１５日目及び３６日目に免疫化した後の抗キーホールリンペットヘモシアニン（ＫＬＨ）抗体の検出によって、一次及び二次液性免疫応答を評価した。左大腿部後面への筋肉内注射によって、投与量１ｍｇのＫＬＨで動物を免疫した。血液サンプルを採取し、比色酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）を用いて抗ＫＬＨ ＩｇＧ及びＩｇＭ抗体分析を行った。結果を図２Ａ及び２Ｂに示す。

【0132】

一次免疫７、１４、及び２１日後の全ての対照群の動物について力価中央（ＣＰＴ）値の存在によって示されるとき、対照群の全ての動物は、安定した／顕著な一次抗ＫＬＨ ＩｇＭ及びＩｇＧ抗体応答を引き起こし（ＩｇＭ及びＩｇＧ ＣＰＴは、それぞれ約３００及び１４００の群平均値に達した）、３６日目のＫＬＨによる二次免疫化後に群平均値は上昇した（ＩｇＭ及びＩｇＧについて、それぞれ最大約６００及び３６００のＣＰＴ群平均値）。試験抗体Ｃ４ＬＢ２３１及び陽性対照抗体を投与した動物において、抗ＫＬＨ ＩｇＭ及びＩｇＧ一次及び二次応答における用量依存的減少が存在していた。これらの抗ＫＬＨ抗体応答の減少は、両抗体の投与に対する予想された薬理学的効果であった。要するに、ＫＬＨ負荷は、対照動物において安定した応答を示したが、予想されたように、Ｃ４ＬＢ２３１処置群における応答の用量依存的抑制を示した。

【0133】

ＩＩ．３ヶ月間投与試験
アカゲザルに、１週間１回、１３週間にわたり、抗ＣＤ１５４抗体Ｃ４ＬＢ２３１を静脈内（ＩＶ）又は皮下（ＳＣ）に投与した。試験の実験デザインを以下の表３に示す。対照ビヒクルは、０．９％滅菌生理食塩水（ＮａＣｌ）とした。８週間試験について先に記載したように、１、８、１５、２２、２９、３６、４３、５０、５７、６４、７１、７８、及び８５日目に合計１３回、動物にＩＶ又はＳＣ注射によって投与した。２９、５７、及び１５５日目（回復試験の動物のみ）に、動物は、ＫＬＨ抗原負荷試験のため、１ｍｇ量のＫＬＨ抗原を左大腿部に筋肉内注射を受けた。血液サンプルを動物から採取し、以下のように評価した。

【0134】

【表3】

^１ＩＶ＝静脈内低速ボーラス注射；ＳＣ＝皮下注射
^２主要試験の動物は９２日目に剖検を行った；回復試験の動物は１８５日目に剖検を行った

【0135】

結果
１３週間の処置期間にわたり、ＩＶ又はＳＣ注射による最大１５０ｍｇ／ｋｇ／ｗｋまでのＣ４ＬＢ２３１投与により、有害事象は観察されなかった。肺組織病理学的評価によって判定される血栓症、及び凝固パラメータに対する影響は、８週間投与試験で観察された結果と同様に、治療群において観察されなかった。

【0136】

採取した血液サンプル由来の血清を分析し、抗体の血清中濃度を測定した。アカゲザルへの週１回ＩＶ投与後の平均血清Ｃ４ＢＬ２３１トキシコキネティクス（ＴＫ）パラメータの推定値を、以下の表４にまとめる。Ｃ４ＢＬ２３１で処置された全ての動物は、週１回のＩＶ又はＳＣ投与後のサンプル採取期間を通して定量化可能な血清中Ｃ４ＢＬ２３１濃度を有した。曝露量は、１日目の初回ＩＶ投与後にほぼ用量比例的に、８５日目のＩＶ投与後に用量比例的よりもわずかに大きく増加した。血清中濃度は、９２日目に定常状態に達した。血清中濃度は、回復期間全体にわたって定量化できた。血清中Ｃ４ＢＬ２３１濃度は、対照群（群１）の全ての動物においてサンプリング期間を通して、定量化可能な最低限界未満であった。Ｃ４ＬＢ２３１で処置した３０例の動物のうち５例は、抗Ｃ４ＢＬ２３１抗体に対して陽性であった（すなわち、抗薬物抗体（ＡＤＡ）陽性）。ＡＤＡ陰性の回復動物で推定される平均Ｔ_１／２値は、異なる用量群で類似しており、雄動物と雌動物との間に明らかな差はなかった。

【0137】

【表4】

^１投与からの経過時間
^２個々の比の平均
^３ＡＤＡ陰性回復動物のみ［群２ Ｎ＝３；群３ Ｎ＝４；群４ Ｎ＝３］

【0138】

遊離及び総可溶型ＣＤ１５４（ｓＣＤ１５４）を乏血小板血漿サンプル中で評価した。データを図１Ｃ及び１Ｄに示す。遊離ｓＣＤ１５４濃度は、Ｃ４ＢＬ２３１のＩＶ又はＳＣ投与後に直ちに減少した。減少の程度は、より高い用量レベルでより大きかった。遊離ｓＣＤ１５４の用量依存的減少は、総ｓＣＤ１５４の用量依存的増加と共に、血漿中の良好な標的係合を示した。

【0139】

抗ＫＬＨ ＩｇＭ及びＩｇＧ抗体の産生における、Ｃ４ＢＬ２３１に関連する用量依存的変化は、対照（群１）に対して、１５０ｍｇ／ｋｇ／投与群（ＩＶ及びＳＣ）の両方において、一次免疫化１４日後に始まり、全ての群（２０ｍｇ／ｋｇ／投与群：群２を含む）では、ＫＬＨによる二次免疫化後の全ての時点で観察された。この変化は、ＫＬＨによる二次免疫化後の応答においてより明確であった。この抗ＫＬＨ ＩｇＭ及びＩｇＧ抗体の減少はまた、２０ｍｇ／ｋｇ（群２）の雌動物の一部の個体、並びに、回復期間中の１５５日目の三次免疫後の１５０ｍｇ／ｋｇ（群３及び４）の雄及び雌動物の一部の個体についても見られ、同じ個体動物における定量化可能な血清中Ｃ４ＬＢ２３１濃度と相関していた。これらの結果を考慮すると、３ヶ月間の回復期間は、Ｃ４ＢＬ２３１投与後の完全なＫＬＨ抗体応答の回復には十分ではなかった。一次及び二次抗ＫＬＨ ＩｇＭ及びＩｇＧ抗体応答の減少は、Ｃ４ＢＬ２３１投与の予想される薬理学的効果であった。

【0140】

要するに、週１回のＩＶ又はＳＣ注射によるＣ４ＢＬ２３１の投与は、最大１５０ｍｇ／ｋｇ（ＳＣ及びＩＶ）のレベルで３ヶ月間アカゲザルにおいて十分に忍容された。いくつかの処置関連所見が、１５０ｍｇ／ｋｇ ＩＶ又はＳＣの高用量群で観察された（例えば、リンパ球及び単球の減少；脾臓、下顎及び腸間膜リンパ節のリンパ濾胞胚中心の数及びサイズの減少；並びに、Ｔ細胞依存性抗体応答（ＴＤＡＲ）の明らかな抑制）。しかしながら、かかる治療関連所見は、ＣＤ１５４拮抗作用の意図される薬理作用の結果である可能性が高い。これらの結果に基づいて、無毒性量（ＮＯＡＥＬ）は、１５０ｍｇ／ｋｇ／週のＩＶ及びＳＣと考えられ、それぞれＩＶ及びＳＣ投与において、５１７２．６及び２８０９．８μｇ／ｍＬのＣ_ｍａｘ、並びに、それぞれＩＶ及びＳＣ投与において、２１２０３．５及び１６９５１．９日＊μｇ／ｍＬのＡＵＣ_{８５〜９２日目}に対応していた。

【0141】

ＩＩＩ．６ヶ月間投与試験
アカゲザルに、１週間１回、６ヶ月間にわたり、抗ＣＤ１５４抗体Ｃ４ＬＢ２３１を皮下（ＳＣ）に投与する。試験の実験デザインを以下の表５に示す。対照ビヒクルは、０．９％滅菌生理食塩水（ＮａＣｌ）である。１、８、１５、２２、２９、３６、４３、５０、５７、６４、７１、７８、８５、９２、９９、１０６、１１３、１２０、１２７、１３４、１４１、１４８、１５５、１６２、１６９、及び１７６日目に合計２６回、動物に投与する。

【0142】

【表5】

^１ＳＣ＝皮下注射

【0143】

血液サンプルを採取し、Ｃ４ＢＬ２３１及び抗Ｃ４ＢＬ２３１抗体（すなわち、抗薬物抗体（ＡＤＡ））分析のため血清中濃度を測定する。他の分析（例えば、ｓＣＤ１５４濃度の測定）を行ってもよく、動物の他の試験（例えば、ＫＬＨ抗原負荷試験）を行って、Ｃ４ＢＬ２３１投与の安全性を更に評価してもよい。

【0144】

この試験は進行中である。これまでに、３０ｍｇ／ｋｇ又は１５０ｍｇ／ｋｇ処置群のいずれにも、注目すべき臨床的所見は見られていない。

【0145】

実施例２：非経口投与された抗ＣＤ１５４抗体の安全性及び忍容性を評価するための臨床試験
１８〜５５歳齢の健康な男性及び女性の参加者において、無作為化二重盲検プラセボ対照試験を実施した。５６例の登録済み参加者を、それぞれ８例の参加者の７つのコホートに無作為に分割した。コホートのうち５つに、０．３ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、又は３０ｍｇ／ｋｇの用量で抗ＣＤ１５４抗体Ｃ４ＬＢ２３１を静脈内投与し、１つのコホートには、３ｍｇ／ｋｇの用量でＣ４ＬＢ２３１を皮下投与した。最初は、６番目のコホートは、５０ｍｇ／ｋｇの用量で抗ＣＤ１５４抗体を静脈内投与するために予定されていた。しかしながら、３０ｍｇ／ｋｇ抗体を投与されたコホートについて十分な薬力学的効果が観察されたため、試験において５０ｍｇ／ｋｇコホートまで増加させないことを決定した（以下の実施例３参照）。各コホート内において、６例の参加者は、Ｃ４ＬＢ２３１抗体を投与されるように無作為化され、２例の参加者は、プラセボを投与されるように無作為化された。各コホートにおいてセンチネル投与を実施した。すなわち、各コホートにおいて最初の２例の被験者（１例は活性物質及び１例はプラセボ）を、他の被験者への投与の少なくとも２４時間前に投与した。低用量群（０．３ｍｇ／ｋｇ〜３ｍｇ／ｋｇ）は、シリンジポンプを使用して点滴投与されたが、高用量群（１０ｍｇ／ｋｇ〜３０ｍｇ／ｋｇ）では、ＩＶバッグと輸液ポンプを使用した。

【0146】

静脈内コホートにおける試験参加者には、最大２５０ｍＬの体積に希釈した抗体の静脈内点滴によって、総投与量０．３ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、又は３０ｍｇ／ｋｇを約６０分〜１２０分かけて投与した。皮下コホートにおける試験参加者には、総投与量３ｍｇ／ｋｇ抗体を投与した。総投与量を、腹部への最大４回の皮下注射（体重に応じる）で投与した。静脈内コホートは漸増投与法で投与され、これは、０．３ｍｇ／ｋｇコホートが最初に投与され、薬物動態及び薬力学データ、抗原負荷試験のデータ（例えば、破傷風トキソイド及びＫＬＨ）、ウイルスレベル（例えば、ＥＢＶ及びＣＭＶ）などを含む、これまでに投与されたコホートの臨床データ及び検査データの安全評価後に、次に高い用量の投与に進む決定を行ったことを意味する。試験期間は約２０週間であり、スクリーニング期間と、４週間後の試験製剤の投与期間、及び１６週間のフォローアップ期間を含む。この試験は進行中である。

【0147】

Ｃ４ＬＢ２３１の安全性及び忍容性を、理学的検査、バイタルサインの評価（例えば、体温、脈拍／心拍数、呼吸数、血圧など）、心電図、心電図テレメトリー、臨床検査、血栓症検査による評価、早期検出活動性結核（ＴＢ）評価、併用薬、並びに、注入及びアレルギー反応及び注射部位反応を含む有害事象及び重篤な有害事象報告によって監視した。

【0148】

以下の実施例で論じられるように、薬物動態（ＰＫ）、薬力学（ＰＤ）、及び免疫原性評価のために参加者から血液サンプルを採取した。血液サンプルは、炎症性サイトカイン（血清中）の評価、リンパ球サブセットの免疫表現型、並びに末梢血単核球（ＰＢＭＣ）のＴ細胞及びＢ細胞機能分析などの、追加のバイオマーカー分析のためにも採取した。試験が進行中であるため、サンプルは今も試験参加者から採取され、分析されている。これまでに得られたデータは、Ｃ４ＢＬ２３１の投与に対する安全性の懸念を示していない（例えば、重度の有害効果（ＳＡＥ）はなく、凝固安全性パラメータにおける血栓塞栓効果又は傾向はなく、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）又はエプスタイン−バーウイルス（ＥＢＶ）再活性化はない）。

【0149】

実施例３：薬物動態評価
実施例２に記載の試験に従ってＣ４ＬＢ２３１投与後の様々な時点で、試験の被験者から血漿サンプルを得た。続いて、Ｃ４ＬＢ２３１の薬物動態パラメータを、Ｃ４ＬＢ２３１投与後の被験者における経時的な血漿中濃度から決定した。決定された薬物動態パラメータとしては、Ｃ_ｍａｘ（観察された最大血漿中濃度）、Ｔ_ｍａｘ（観察された最大血漿中濃度に達するまでの時間）；ＡＵＣ_ｉｎｆ（終末相を外挿した時間ゼロから無限大までの血漿中濃度対時間曲線下面積）；ＡＵＣ_ｌａｓ（時間ゼロから最後の定量化可能な濃度に対応する時間までの血漿中濃度対時間曲線下面積）；Ｔ_１／２（終末相半減期）；ＣＬ（ＩＶ投与における、総全身クリアランス）；ＣＬ／Ｆ（ＳＣ投与における、血管外投与後の見かけの総全身クリアランス）；Ｖ_ｚ（ＩＶ投与における、終末相に基づく分布容積）；Ｖ_ｚ／Ｆ（ＳＣのみにおける、血管外投与後の終末相に基づく見かけの分布容積）；及び、Ｆ（％）（（ＡＵＣ_{ｉｎｆ，ＳＣ}／平均ＡＵＣ_{ｉｎｆ，ＩＶ}）×１００によって算出される絶対ＳＣ生物学的利用率）が挙げられる。

【0150】

予備薬物動態解析を図３Ａ〜３Ｄに示す。データは、０．３ｍｇ／ｋｇから３０ｍｇ／ｋｇまでのＣ_ｍａｘの用量比例的増加と、０．３ｍｇ／ｋｇから１０ｍｇ／ｋｇまでのＡＵＣのほぼ用量比例的増加を示す。１０ｍｇ／ｋｇ〜３０ｍｇ／ｋｇのＡＵＣでは、用量比例を超える増加が観察された。Ｃ４ＢＬ２３１の半減期（ｔ_１／２）は、約７〜１１日と予備的に決定されている（現時点で、３０ｍｇ／ｋｇコホートのｔ_１／２の決定に十分なデータが入手されていない、後日更新される）。現在入手できるデータに基づくと、ＳＣ投与における生物学的利用率（Ｆ％）は、７１％であると判定されている。

【0151】

これまでのＣ_ｍａｘデータに基づくと、５０ｍｇ／ｋｇの投与量まで上昇させても、十分な安全マージンが予測される。最も保守的なＡＵＣ安全マージン（実施例１で上述したアカゲザルにおける３ヶ月間投与毒性試験の１回の投与間隔にわたるＡＵＣ）に基づくと、実施例２に記載の試験におけるＡＵＣはより高かった。しかしながら、実施例１に記載されたアカゲザルにおける３ヶ月間投与毒性試験の累積ＡＵＣを使用する、ＡＵＣ安全マージンを判定する別の許容可能な方法に基づくと、十分な安全マージンもあった。しかしながら、十分な薬力学（ＰＤ）効果（例えば、以下に記載される可溶型ＣＤ１５４、抗ＫＬＨ及び抗破傷風応答）が観察されたため、このことによって、３０ｍｇ／ｋｇコホートでの中止が正当化された。したがって、試験中に５０ｍｇ／ｋｇコホートに増加させないことを決定した。

【0152】

実施例４：抗原負荷に対する一次免疫応答及びリコール免疫応答を評価するための臨床試験
実施例２に記載の臨床試験の参加者に、キーホールリペットヘモシアニン（ＫＬＨ）抗原を投与して一次免疫応答を評価し、破傷風トキソイド（ＴＴ）を投与してリコール（メモリー）免疫応答を評価した。

【0153】

ＫＬＨ抗原の負荷
実施例２に記載の臨床試験の参加者に、Ｃ４ＬＢ２３１投与の約３日後、水酸化アルミニウム系アジュバント（Ｉｍｍｕｎｃｏｔｈｅｌ（登録商標））で溶解したキーホールリンペットヘモシアニン（ＫＬＨ）を単回筋肉内注射によって投与した。投与された再溶解ＫＬＨの総用量は３ｍｇであった。筋肉内注射は、三角筋又は大腿中央部外側のいずれかに投与される。

【0154】

破傷風トキソイド抗原の負荷
試験への参加者として選択される前に、破傷風に対する防御免疫が予め存在する血清学的証拠を示した実施例２に記載の臨床試験の参加者に、Ｃ４ＬＢ２３１投与の約３日後、市販の破傷風トキソイド（０．５単位）を単回筋肉内注射によって投与した。筋肉内注射は、三角筋又は大腿中央部外側のいずれかに投与されたが、１ヶ所あたりの注射は１回のみで投与された（すなわち、三角筋にＫＬＨ抗原と大腿部に破傷風トキソイド中、又はその逆）。

【0155】

抗ＫＬＨ ＩｇＧ、抗ＫＬＨ ＩｇＭ、及び抗破傷風ＩｇＧレベルを含むＫＬＨ及び破傷風トキソイドに対する免疫応答の分析のために、参加者から血清サンプルを採取した。血清／血漿中のヒト抗ＫＬＨ抗体を、Ａａｒｎｔｚｅｎ ｅｔ．ａｌ．Ｃａｎｃｅｒ Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．（２０１２）６１（１１）：２００３−１１に記載のＥＬＩＳＡ法を用いて測定した。予備データを図４Ａ〜４Ｄに示す。Ｃ４ＬＢ２３１による処置により、≧３ｍｇ／ｋｇ ＩＶの用量で抗ＫＬＨ応答（一次応答）をほぼ完全に阻害した。Ｃ４ＬＢ２３１による処置により、≧１０ｍｇ／ｋｇ ＩＶの用量で抗破傷風トキソイド応答（二次又はリコール応答）を阻害した。これらのデータは、３ｍｇ／ｋｇ ＩＶのＣ４ＢＬ２３１投与は、ＫＬＨ抗原に対する一次抗体応答を阻害するが、破傷風トキソイドに対するリコール応答に影響を及ぼすには、≧１０ｍｇ／ｋｇ ＩＶのＣ４ＢＬ２３１投与が必要であり得ることを示す。これは、二次（リコール）免疫応答は、一次免疫応答を阻害するために必要とされる用量よりも高い用量を必要とし得、ＣＤ１５４を遮断することは、Ｔ細胞：Ｂ細胞相互作用の減少をもたらし、その結果、抗原刺激に対する液性応答が低下することを示唆している。

【0156】

実施例５：免疫原性評価
実施例１に記載の試験に従ってＣ４ＬＢ２３１が投与された参加者から採取された血清サンプル中の、Ｃ４ＬＢ２３１に対する抗体を評価する。Ｃ４ＬＢ２３１が投与された被験者由来のサンプルを、Ｃ４ＬＢ２３１に結合する抗体についてスクリーニングし、陽性であれば、抗Ｃ４ＬＢ２３１抗体について陽性であるサンプルの特異性及び力価が決定される。参加者は、処置後のいずれかのサンプルが抗Ｃ４ＬＢ２３１抗体に対して陽性であった場合、Ｃ４ＬＢ２３１に対する抗体について陽性であると分類され、参加者は、全ての処置後サンプルにおいて抗Ｃ４ＬＢ２３１抗体が検出されなかった場合、Ｃ４ＬＢ２３１に対する抗体について陰性であると類される。実施例３に記載され、図２Ａ及び２Ｂに示される個々の被験者の薬物動態プロファイルに基づくと、Ｃ４ＬＢ２３１投与被験者から得られたサンプル中に抗Ｃ４ＬＢ２３１抗体の明白な証拠は存在せず、サンプル分析は進行中である。

【0157】

実施例６：総及び遊離血漿中可溶型ＣＤ１５４の評価
実施例２に記載の試験に従ってＣ４ＬＢ２３１が投与された参加者から得られた乏血小板血漿サンプル中の、平均遊離及び総可溶型ＣＤ１５４（ｓＣＤ１５４）濃度をＥＬＩＳＡによって測定した。これまで得られた予備的データを図５Ａ〜５Ｂに示す。遊離ｓＣＤ１５４濃度は、投与後１４日まで検出できなかったが、これは、Ｃ４ＢＬ２３１の標的の抑制を示している。総ｓＣＤ１５４濃度は、ピーク値に達するまで対応して増加し、その後経時的に減少した。

【0158】

実施例７：血小板活性化試験
抗ＣＤ１５４抗体による血小板活性化の機構を更に評価するために、血小板活性化試験を実施した。健康なヒトドナーから血液を採取した。血小板の活性化は、有効性が確認されている血小板活性化マーカーＰＡＣ−１（活性化ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａ）及びＣＤ６２ｐ（Ｐ−セレクチン）を用い、フローサイトメトリーにより評価した。簡潔に述べると、全血（ＷＢ）を緩衝液に添加し、この混合液に、抗ＰＡＣ１及び抗ＣＤ６２ｐ抗体を、抗ＦｃγＲＩＩａ抗体の存在下又は非存在下で添加し、２５分間インキュベートした。ＣＤ１５４：抗ＣＤ１５４のモル比３：１のｓＣＤ１５４及び抗体の予形成複合体を混合液に添加し、又は抗体のみを混合液に添加し、更に２０分間インキュベートした。血小板を１％ホルマリンで固定した後、ＦＡＣＳ解析を行った。結果を図６Ａ及び６Ｂに示す。

【0159】

結果は、血小板活性化がｓＣＤ１５４−「ＢＧ９５８８」（ｓＣＤ１５４−５ｃ８ＩｇＧ１）によって誘導されたことを示す。対照的に、ＦｃサイレントＣ４ＢＬ２３１又は野生型Ｆｃ尾部（血小板Ｆｃ結合能がある）活性化血小板のいずれかと組み合わせると、ｓＣＤ１５４による血小板活性化は誘導されなかった。単独で血小板を活性化させた抗体はなかった（「可溶型ＣＤ１５４なし」）。様々なＦｃ上にＣ４ＬＢ２３１可変領域を有する追加のコンストラクト（ＩｇＧ１を含む）単独、又はｓＣＤ１５４との複合体もまた、血小板活性化を誘導しなかった（図６Ｂ）。これは、活性Ｆｃドメインが、抗ＣＤ１５４抗体による血小板活性化の唯一の決定因子でない場合があることを示唆する。それよりも、このデータは、サイレントＦｃを有するいくつかの抗体による血小板活性化が可能であることを示し、可変ドメインとより高次の抗体／ｓＣＤ１５４複合体形成との両方が血小板活性化に寄与するという結論をもたらす。

【0160】

当業者は、広い発明概念から逸脱することなく前述の実施形態に変更を行うことができることを理解するであろう。したがって、本発明は、開示された特定の実施形態に制限されず、添付の特許請求の範囲によって定義されるような本発明の趣旨及び範囲内の修正をも包含することを意図するものと理解される。

【0161】

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３３． Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ Ｆｏｏｄ ａｎｄ Ｄｒｕｇ Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ Ｃｅｎｔｅｒ ｆｏｒ Ｄｒｕｇ Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｒｅｓｅａｒｃｈ（ＣＤＥＲ）．Ｇｕｉｄａｎｃｅ ｆｏｒ Ｉｎｄｕｓｔｒｙ Ｅｓｔｉｍａｔｉｎｇ ｔｈｅ Ｍａｘｉｍｕｍ Ｓａｆｅ Ｓｔａｒｔｉｎｇ Ｄｏｓｅ ｉｎ Ｉｎｉｔｉａｌ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｔｒｉａｌｓ ｆｏｒ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ ｉｎ Ａｄｕｌｔ Ｈｅａｌｔｈｙ Ｖｏｌｕｎｔｅｅｒｓ．Ｊｕｌｙ ２００５；Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙ：１−２７．
３４． Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ Ｆｏｏｄ ａｎｄ Ｄｒｕｇ Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ Ｃｅｎｔｅｒ ｆｏｒ Ｄｒｕｇ Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｒｅｓｅａｒｃｈ（ＣＤＥＲ）．Ｇｕｉｄａｎｃｅ ｆｏｒ Ｉｎｄｕｓｔｒｙ Ｔｏｘｉｃｉｔｙ Ｇｒａｄｉｎｇ Ｓｃａｌｅ ｆｏｒ Ｈｅａｌｔｈｙ Ａｄｕｌｔ ａｎｄ Ａｄｏｌｅｓｃｅｎｔ Ｖｏｌｕｎｔｅｅｒｓ Ｅｎｒｏｌｌｅｄ ｉｎ Ｐｒｅｖｅｎｔｉｖｅ Ｖａｃｃｉｎｅ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｔｒｉａｌｓ．Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ ２００７；Ｃｅｎｔｅｒ ｆｏｒ Ｂｉｏｌｏｇｉｃｓ Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｒｅｓｅａｒｃｈ：１−８．
３５． Ｖｅｒｋｒｕｙｓｅ ＬＡ，Ｓｔｏｒｃｈ ＧＡ，Ｄｅｖｉｎｅ ＳＭ，ｅｔ ａｌ．Ｏｎｃｅ ｄａｉｌｙ ｇａｎｃｉｃｌｏｖｉｒ ａｓ ｉｎｉｔｉａｌ ｐｒｅ−ｅｍｐｔｉｖｅ ｔｈｅｒａｐｙ ｄｅｌａｙｅｄ ｕｎｔｉｌ ｔｈｒｅｓｈｏｌｄ ＣＭＶ ｌｏａｄ Ｘ１００００ ｃｏｐｉｅｓ／ｍｌ：ａ ｓａｆｅ ａｎｄ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ｓｔｒａｔｅｇｙ ｆｏｒ ａｌｌｏｇｅｎｅｉｃ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌ ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ ｐａｔｉｅｎｔｓ．Ｂｏｎｅ Ｍａｒｒｏｗ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ．２００６；３７：５１−５６．
３６． Ｗｅｉｎｂｅｒｇ Ａ，Ｂｏｕｌｗａｒｅ Ｄ，Ｄｉｇｈｅｒｏ Ｂ，ｅｔ ａｌ．Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ａｂａｔａｃｅｐｔ ｏｎ ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｉｃｉｔｙ ｏｆ ｖａｃｃｉｎｅｓ ｉｎ ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｓ ｗｉｔｈ ｔｙｐｅ １ ｄｉａｂｅｔｅｓ．Ｖａｃｉｎｅ．２０１３；３１（４２）：４７９１−４７９４．
３７． Ｙａｚｄａｎｙ Ｊ，Ｄａｖｉｓ Ｊ．Ｔｈｅ ｒｏｌｅ ｏｆ ＣＤ４０ ｌｉｇａｎｄ ｉｎ ｓｙｓｔｅｍｉｃ ｌｕｐｕｓ ｅｒｙｔｈｅｍａｔｏｓｕｓ．Ｌｕｐｕｓ．２００４；１３：３７７−３８０．
３８． Ｂａｒｎｅｓ ＰＦ．Ｄｉａｇｎｏｓｉｎｇ ｌａｔｅｎｔ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ：Ｔｕｒｎｉｎｇ ｇｌｉｔｔｅｒ ｔｏ ｇｏｌｄ ［ｅｄｉｔｏｒｉａｌ］．Ａｍｅｒ Ｊ Ｒｅｓｐｉｒ Ｃｒｉｔ Ｃａｒｅ Ｍｅｄ．２００４；１７０：５−６．
３９． Ｂｒｏｃｋ Ｉ，Ｗｅｌｄｉｎｇｈ Ｋ，Ｌｉｌｌｅｂａｅｋ Ｔ，ｅｔ ａｌ．Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ ｔｕｂｅｒｃｕｌｉｎ ｓｋｉｎ ｔｅｓｔ ａｎｄ ｎｅｗ ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｂｌｏｏｄ ｔｅｓｔ ｉｎ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ ｃｏｎｔａｃｔｓ．Ａｍ Ｊ Ｒｅｓｐｉｒ Ｃｒｉｔ Ｃａｒｅ Ｍｅｄ．２００４；１７０：６５−６９．
４０． Ｃｅｌｌｅｓｔｉｓ．ＱｕａｎｔｉＦＥＲＯＮ−ＴＢ Ｇｏｌｄ ｃｌｉｎｉｃｉａｎｓ ｇｕｉｄｅ ａｎｄ ＱｕａｎｔｉＦＥＲＯＮ−ＴＢ Ｇｏｌｄ Ｉｎ−Ｔｕｂｅ Ｍｅｔｈｏｄ ｐａｃｋａｇｅ ｉｎｓｅｒｔ．ｗｗｗ．ｃｅｌｌｅｓｔｉｓ．ｃｏｍより２００９年２月にダウンロード。
４１． Ｄｉｅｌ Ｒ，Ｌｏｄｄｅｎｋｅｍｐｅｒ Ｒ，Ｍｅｙｗａｌｄ−Ｗａｌｔｅｒ Ｋ，Ｎｉｅｍａｎｎ Ｓ，Ｎｉｅｎｈａｕｓ Ａ．Ｐｒｅｄｉｃｔｉｖｅ ｖａｌｕｅ ｏｆ ａ ｗｈｏｌｅ ｂｌｏｏｄ ＩＦＮ−γ ａｓｓａｙ ｆｏｒ ｔｈｅ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ａｃｔｉｖｅ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ ｄｉｓｅａｓｅ ａｆｔｅｒ ｒｅｃｅｎｔ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ．Ａｍ Ｊ Ｒｅｓｐｉｒ Ｃｒｉｔ Ｃａｒｅ Ｍｅｄ．２００８；１７７：１１６４−１１７０．
４２． Ｅｗｅｒ Ｋ，Ｄｅｅｋｓ Ｊ，Ａｌｖａｒｅｚ Ｌ，ｅｔ ａｌ．Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ Ｔ−ｃｅｌｌ−ｂａｓｅｄ ａｓｓａｙ ｗｉｔｈ ｔｕｂｅｒｃｕｌｉｎ ｓｋｉｎ ｔｅｓｔ ｆｏｒ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ｏｆ Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｉｎ ａ ｓｃｈｏｏｌ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ ｏｕｔｂｒｅａｋ．Ｌａｎｃｅｔ．２００３；３６１：１１６８−７３．
４３． Ｆｅｒｒａｒａ Ｇ，Ｌｏｓｉ Ｍ，Ｍｅａｃｃｉ Ｍ，ｅｔ ａｌ．Ｒｏｕｔｉｎｅ ｈｏｓｐｉｔａｌ ｕｓｅ ｏｆ ａ ｎｅｗ ｃｏｍｍｅｒｃｉａｌ ｗｈｏｌｅ ｂｌｏｏｄ ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ−γ ａｓｓａｙ ｆｏｒ ｔｈｅ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ｏｆ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ．Ａｍ Ｊ Ｒｅｓｐｉｒ Ｃｒｉｔ Ｃａｒｅ Ｍｅｄ．２００５；１７２：６３１−６３５．
４４． Ｈｉｇｕｃｈｉ Ｋ，Ｎｏｂｕｙｕｋｉ Ｈ，Ｍｏｒｉ Ｔ，Ｓｅｋｉｙａ Ｙ．Ｕｓｅ ｏｆ ＱｕａｎｔｉＦＥＲＯＮ−ＴＢ Ｇｏｌｄ ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ ｃｏｎｔａｃｔｓ ｉｎ ａ ｈｉｇｈ ｓｃｈｏｏｌ．Ｒｅｓｐｉｒｏｌｏｇｙ．２００７；１２：８８−９２．
４５． Ｋｏｂａｓｈｉ Ｙ，Ｍｏｕｒｉ Ｋ，Ｏｂａｓｅ Ｙ，ｅｔ ａｌ．Ｃｌｉｎｉｃａｌ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ＱｕａｎｔｉＦＥＲＯＮ−ＴＢ−２Ｇ ｔｅｓｔ ｆｏｒ ｉｍｍｕｎｏｃｏｍｐｒｏｍｉｓｅｄ ｐａｔｉｅｎｔｓ．Ｅｕｒ Ｒｅｓｐｉｒ Ｊ．２００７；３０：９４５−９５０．
４６． Ｍａｔｕｌｉｓ Ｇ，Ｊｕｎｉ Ｐ，Ｖｉｌｌｉｇｅｒ ＰＭ，Ｇａｄｏｌａ ＳＤ．Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｌａｔｅｎｔ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ ｉｎ ｉｍｍｕｎｏｓｕｐｐｒｅｓｓｅｄ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ ｄｉｓｅａｓｅｓ：ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｏｆ ａ Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ ａｎｔｉｇｅｎ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ γ ａｓｓａｙ．Ａｎｎ Ｒｈｅｕｍ Ｄｉｓ．２００８；６７：８４−９０
４７． Ｍｏｒｉ Ｔ，Ｓａｋａｔａｎｉ Ｍ，Ｙａｍａｇｉｓｈｉ Ｆ，ｅｔ ａｌ．Ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ：Ａｎ ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ−γ−ｂａｓｅｄ ａｓｓａｙ ｕｓｉｎｇ ｎｅｗ ａｎｔｉｇｅｎｓ．Ａｍ Ｊ Ｒｅｓｐｉｒ Ｃｒｉｔ Ｃａｒｅ Ｍｅｄ．２００４；１７０：５９−６４．

【図1A】

【図1B】

【図1C】

【図1D】

【図2A】

【図2B】

【図2C】

【図2D】

【図3A】

【図3B】

【図3C】

【図3D】

【図4A】

【図4B】

【図4C】

【図4D】

【図5A】

【図5B】

【図6A】

【図6B】

【配列表】

2022502380000001.app

【国際調査報告】