特開 2019-90111 修飾金属ナノ粒子及び医薬組成物

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公開特許公報(A)

(11)【公開番号】特開2019-90111(P2019-90111A)

(43)【公開日】2019年6月13日

(54)【発明の名称】修飾金属ナノ粒子及び医薬組成物

(51)【国際特許分類】

   B22F 1/02 20060101AFI20190524BHJP

   A61K 47/10 20060101ALI20190524BHJP

   A61K 9/14 20060101ALI20190524BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20190524BHJP

   A61K 33/38 20060101ALI20190524BHJP

   A61K 33/24 20190101ALI20190524BHJP

   A61K 41/00 20060101ALI20190524BHJP

   A61K 49/12 20060101ALI20190524BHJP

   A61K 49/18 20060101ALI20190524BHJP

   B82Y 5/00 20110101ALI20190524BHJP

【ＦＩ】

   B22F1/02 B

   A61K47/10

   A61K9/14

   A61P35/00

   A61K33/38

   A61K33/24

   A61K41/00

   A61K49/12

   A61K49/18

   B82Y5/00

【審査請求】未請求

【請求項の数】9

【出願形態】ＯＬ

【全頁数】12

(21)【出願番号】特願2018-213201(P2018-213201)

(22)【出願日】2018年11月13日

(31)【優先権主張番号】特願2017-218620(P2017-218620)

(32)【優先日】2017年11月13日

(33)【優先権主張国】JP

【新規性喪失の例外の表示】新規性喪失の例外適用申請有り

(71)【出願人】

【識別番号】504173471

【氏名又は名称】国立大学法人北海道大学

(74)【代理人】

【識別番号】100088155

【弁理士】

【氏名又は名称】長谷川 芳樹

(74)【代理人】

【識別番号】100124800

【弁理士】

【氏名又は名称】諏澤 勇司

(72)【発明者】

【氏名】山本 拓矢

(72)【発明者】

【氏名】キンサート ホセ エンリコ

【テーマコード（参考）】

4C076

4C084

4C085

4C086

4K018

【Ｆターム（参考）】

4C076AA16

4C076AA30

4C076CC27

4C076EE23

4C076EE23Q

4C076FF63

4C084AA11

4C084MA05

4C084NA03

4C084ZB261

4C085HH07

4C085JJ11

4C085KA26

4C085KA32

4C085KB07

4C085KB74

4C085LL18

4C086AA01

4C086AA02

4C086HA01

4C086MA02

4C086MA05

4C086MA43

4C086NA03

4C086ZB26

4K018BA01

4K018BB04

4K018BB05

4K018BC29

4K018BC30

4K018KA70

(57)【要約】

【課題】耐塩性に優れ、医薬組成物として好適に利用可能な修飾金属ナノ粒子を提供すること。
【解決手段】金属ナノ粒子と、前記金属ナノ粒子を修飾する環状ポリエーテルと、を含む、修飾金属ナノ粒子。
【選択図】なし

【特許請求の範囲】

【請求項1】

金属ナノ粒子と、前記金属ナノ粒子を修飾する環状ポリエーテルと、を含む、修飾金属ナノ粒子。

【請求項2】

前記金属ナノ粒子が金ナノ粒子又は銀ナノ粒子である、請求項１に記載の修飾金属ナノ粒子。

【請求項3】

前記金属ナノ粒子の平均粒径が１〜１０００ｎｍである、請求項１又は２に記載の修飾金属ナノ粒子。

【請求項4】

前記環状ポリエーテルが環状ポリエチレンオキシドである、請求項１〜３のいずれか一項に記載の修飾金属ナノ粒子。

【請求項5】

前記環状ポリエーテルの数平均分子量が５００〜２００００である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の修飾金属ナノ粒子。

【請求項6】

前記金属ナノ粒子が金ナノ粒子であり、
前記金ナノ粒子に対する前記環状ポリエーテルの質量比が、５０〜１５００である、請求項１〜５のいずれか一項に記載の修飾金属ナノ粒子。

【請求項7】

前記金属ナノ粒子が銀ナノ粒子であり、
前記銀ナノ粒子に対する前記環状ポリエーテルの質量比が、０．１〜５０である、請求項１〜５のいずれか一項に記載の修飾金属ナノ粒子。

【請求項8】

請求項１〜７のいずれか一項に記載の修飾金属ナノ粒子を含む、医薬組成物。

【請求項9】

放射線増感剤、フォトサーマル治療剤又はＭＲＩ造影剤である、請求項８に記載の医薬組成物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、修飾金属ナノ粒子及びそれを含む医薬組成物に関する。

【背景技術】

【0002】

従来から、金属ナノ粒子は、バイオセンサー、細胞内プローブ、薬物送達物質、光学造影物質等の用途に応用されている。例えば、特許文献１には、放射線治療に用いる医薬組成物として、金属ナノ粒子を用いることが開示されている。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0003】

【特許文献1】特表２０１２−５３２８４７号公報

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0004】

しかし、従来の金属ナノ粒子は、耐塩性が必ずしも十分ではなく、生体内で変質又は劣化して十分な効果が得られなくなるおそれがあった。

【0005】

本発明は、耐塩性に優れ、医薬組成物として好適に利用可能な修飾金属ナノ粒子を提供することを目的とする。また、本発明は、上記修飾金属ナノ粒子を含む医薬組成物を提供することを目的とする。

【課題を解決するための手段】

【0006】

本発明の一側面は、金属ナノ粒子と、上記金属ナノ粒子を修飾する環状ポリエーテルと、を含む、修飾金属ナノ粒子に関する。

【0007】

このような修飾金属ナノ粒子は、耐塩性に優れ、医薬組成物として好適に利用できる。また、上記修飾金属ナノ粒子は、耐熱性にも優れるため、例えばフォトサーマル効果を利用した治療剤等の耐熱性が求められる用途に特に好適に用いることができる。

【0008】

一態様において、上記金属ナノ粒子は金ナノ粒子又は銀ナノ粒子であってよい。

【0009】

一態様において、上記金属ナノ粒子の平均粒径は１〜１０００ｎｍであってよい。

【0010】

一態様において、上記環状ポリエーテルが環状ポリエチレンオキシドであってよい。

【0011】

一態様において、上記環状ポリエーテルの数平均分子量は５００〜２００００であってよい。

【0012】

一態様において、上記金属ナノ粒子は金ナノ粒子であってよく、上記金ナノ粒子に対する上記環状ポリエーテルの質量比は５０〜１５００であってよい。

【0013】

一態様において、上記金属ナノ粒子が銀ナノ粒子であってよく、上記銀ナノ粒子に対する上記環状ポリエーテルの質量比は０．１〜５０であってよい。

【0014】

本発明の他の一側面は、上記修飾金属ナノ粒子を含む、医薬組成物に関する。

【0015】

一態様に係る医薬組成物は、放射線増感剤、フォトサーマル治療剤又はＭＲＩ造影剤であってよい。

【発明の効果】

【0016】

本発明によれば、耐塩性に優れ、医薬組成物として好適に利用可能な修飾金属ナノ粒子が提供される。また、本発明によれば、上記修飾金属ナノ粒子を含む医薬組成物が提供される。

【図面の簡単な説明】

【0017】

【図1】修飾銀ナノ粒子の耐塩性評価試験の結果を示す図である。

【図2】実施例Ｃ−１〜Ｃ−６の修飾金ナノ粒子の耐塩性評価試験の結果を示す図である。

【図3】実施例Ｄ−１〜Ｄ−３の修飾金ナノ粒子の耐塩性評価試験の結果を示す図である。

【発明を実施するための形態】

【0018】

以下、本発明の好適な実施形態について説明する。

【0019】

本実施形態に係る修飾金属ナノ粒子は、金属ナノ粒子と、金属ナノ粒子を修飾する環状ポリエーテルとを含む。本実施形態に係る修飾金属ナノ粒子は、環状ポリエーテルで修飾された金属ナノ粒子ということもできる。

【0020】

本実施形態に係る修飾金属ナノ粒子は、高い耐塩性を有するため、生体内での安定性に優れ、医薬組成物として好適に利用することができる。また、本実施形態に係る修飾金属ナノ粒子は、耐熱性にも優れるため、例えばフォトサーマル効果を利用した治療剤（フォトサーマル治療剤）等の耐熱性が求められる用途に特に好適に用いることができる。

【0021】

ところで、近年、がん細胞が正常細胞に比べて熱に弱く、４１℃以上で壊死し始めることが確認されている。本実施形態に係る修飾金属ナノ粒子（特に、修飾金（Ａｕ）ナノ粒子）は、４１℃以上の温度に対する耐熱性を有するため、がん細胞及びそれに起因する腫瘍の除去を目的としたフォトサーマル治療剤として、好適に用いることができる。

【0022】

金属ナノ粒子は、ナノサイズ（１〜１０００ｎｍ）の金属粒子である。金属ナノ粒子は、一種の金属で構成されていてよく、二種以上の金属を含んでいてもよい。金属ナノ粒子は、例えば、金、銀、酸化鉄、酸化チタン又はこれらの複合体から構成されていてよい。上述の効果が顕著に得られる観点から、金属ナノ粒子は、金ナノ粒子又は銀ナノ粒子であることが好ましく、金ナノ粒子であることがより好ましい。

【0023】

例えば、金ナノ粒子は、金を主成分とするナノ粒子を示し、金で構成されたナノ粒子であってよく、金と他の金属とを含むナノ粒子であってもよい。ここで他の金属は、例えば、銀、酸化鉄、酸化チタン等であってよい。金ナノ粒子における金の含有量は、好ましくは８０質量％以上、より好ましくは９０質量％以上、更に好ましくは９５質量％以上であり、９９質量％以上であってもよく、１００質量％であってもよい。

【0024】

また、銀ナノ粒子は、銀を主成分とするナノ粒子を示し、銀で構成されたナノ粒子であってよく、銀と他の金属とを含むナノ粒子であってもよい。ここで他の金属は、例えば、金、酸化鉄、酸化チタン等であってよい。銀ナノ粒子における銀の含有量は、好ましくは８０質量％以上、より好ましくは９０質量％以上、更に好ましくは９５質量％以上であり、９９質量％以上であってもよく、１００質量％であってもよい。

【0025】

金属ナノ粒子の平均粒径は、例えば１ｎｍ以上であってよく、好ましくは３ｎｍ以上、より好ましくは１０ｎｍ以上であり、１４ｎｍ以上であってもよい。また、金属ナノ粒子の平均粒径は、例えば１０００ｎｍ以下であってよく、好ましくは５００ｎｍ以下、より好ましくは２００ｎｍ以下、更に好ましくは１００ｎｍ以下であり、５２ｎｍ以下であってもよい。金属ナノ粒子の平均粒径が上記範囲であると、修飾金属ナノ粒子を医療組成物としてより好適に利用することができる。なお、本明細書中、金属ナノ粒子の平均粒径は、光散乱法で測定される値を示す。

【0026】

環状ポリエーテルとしては、環状ポリアルキレンオキシドが好ましい。環状ポリアルキレンオキシドとしては、例えば、環状ポリエチレンオキシド、環状プロピレンレンオキシド、環状ポリエチレンオキシド−プロピレンレンオキシドブロック共重合体等が挙げられ、こられのうち上述の効果がより顕著に奏される観点から、環状ポリエチレンオキシドが好ましい。

【0027】

環状ポリエーテルは分子量分布を有していてよい。環状ポリエーテルの数平均分子量Ｍｎは、例えば５００以上であってよく、好ましくは１０００以上、より好ましくは２０００以上である。また、環状ポリエーテルの数平均分子量Ｍｎは、例えば２００００以下であってよく、好ましくは１００００以下、より好ましくは６０００以下である。

【0028】

環状ポリエーテルの分子量分布（数平均分子量に対する重量平均分子量の比、Ｍｗ／Ｍｎ）は、例えば２以下であってよく、好ましくは１．５以下、より好ましくは１．１以下である。分子量分布の下限は１であり、本実施形態において環状ポリエーテル分子量分布は１であってもよい。

【0029】

本実施形態に係る修飾金属ナノ粒子において、金属ナノ粒子に対する環状ポリエーテルの質量比（環状ポリエーテル／金属ナノ粒子）は特に限定されず、金属ナノ粒子の種類及び要求される特性に応じて適宜変更してよい。

【0030】

好適な一形態において、金属ナノ粒子は金ナノ粒子である。このとき、金ナノ粒子に対する環状ポリエーテルの質量比（環状ポリエーテル／金ナノ粒子）は、例えば５０以上であってよく、好ましくは１００以上、より好ましくは１５０以上である。また、上記質量比は、例えば１５００以下であってよく、好ましくは１０００以下、より好ましくは７００以下である。このような質量比であると上述の効果がより顕著に奏される。金属ナノ粒子が金ナノ粒子であるとき、金ナノ粒子の平均粒径は、耐塩性がより顕著に得られる観点から、好ましくは５０ｎｍ以下であり、より好ましくは４０ｎｍ以下であり、更に好ましくは３０ｎｍ以下である。

【0031】

好適な他の一形態において、金属ナノ粒子は銀ナノ粒子である。このとき、銀ナノ粒子に対する環状ポリエーテルの質量比（環状ポリエーテル／銀ナノ粒子）は、例えば０．１以上であってよく、好ましくは０．５以上、より好ましくは０．９以上である。また、上記質量比は、例えば５０以下であってよく、好ましくは３０以下、より好ましくは２０以下である。このような質量比であると、上述の効果がより顕著に奏される。

【0032】

本実施形態に係る修飾金属ナノ粒子は、分散媒中に分散されて分散液を形成していてよい。分散媒は、修飾金属ナノ粒子を分散可能な分散媒であればよく、例えば、水、生理食塩水、アルコール等であってよい。

【0033】

修飾金属ナノ粒子の製造方法は特に限定されない。修飾金属ナノ粒子の製造方法としては、例えば、以下の製造方法Ａ及びＢが挙げられる。

【0034】

（製造方法Ａ）
製造方法Ａは、反応液中で金属化合物を還元して、金属ナノ粒子が分散した第一の分散液を得る第一の工程と、前記第一の分散液に環状ポリエーテルを添加して、修飾金属ナノ粒子が分散した第二の分散液を得る第二の工程と、を備える方法である。

【0035】

第一の工程では、金属ナノ粒子を構成する金属の供給源となる金属化合物を、反応液中で還元する。金属化合物は、還元により金属ナノ粒子を形成できる化合物であれば特に限定されない。例えば、金属ナノ粒子として金ナノ粒子を製造する場合、金化合物としては四塩化金酸等を好適に用いることができる。また、金属ナノ粒子として銀ナノ粒子を製造する場合、銀化合物としては硝酸銀、塩化銀等を好適に用いることができる。

【0036】

反応液の溶媒は、金属化合物の還元反応を阻害しない溶媒であれば特に限定されず、例えば、水、ジメチルホルムアミド、エチレングリコール、トルエン等であってよく、水が好ましい。

【0037】

還元剤は、金属化合物を還元できる還元剤であれば特に限定されない。還元剤としては、例えば、マルトース、クエン酸ナトリウム、アスコルビン酸、水素化ホウ素ナトリウム、グルコース等が挙げられる。

【0038】

第一の工程では、還元反応により生じた金属がナノ粒子を形成するように、分散剤が反応液に添加されていてよい。分散剤としては、例えば、ポリエーテル、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、クエン酸ナトリウム、アルカンチオール等が挙げられる。

【0039】

第二の工程では、第一の分散液に環状ポリエーテルを添加することで、金属ナノ粒子を環状ポリエーテルが修飾し、修飾金属ナノ粒子が形成される。添加方法は特に限定されず、所定量を一度に反応液に加えてよく、少量ずつ添加してもよい。

【0040】

（製造方法Ｂ）
製造方法Ｂは、環状ポリエーテルを含む反応液中で金属化合物を還元して、修飾金属ナノ粒子が分散した分散液を得る工程を備える方法である。

【0041】

この製造方法では、金属ナノ粒子を構成する金属の供給源となる金属化合物を、環状ポリエーテルを含む反応液中で還元することで、１段階で修飾金属ナノ粒子が形成される。

【0042】

製造方法Ｂで用いられる金属化合物、溶媒及び還元剤としては、製造方法Ａで用いられる金属化合物、溶媒及び還元剤と同じ化合物が例示できる。

【0043】

製造方法Ｂでは、製造方法Ａで例示した分散剤が、反応液に添加されていてもよい。

【0044】

本実施形態に係る修飾金属ナノ粒子は、医薬組成物として好適に用いることができる。修飾金属ナノ粒子を含む医薬組成物としては、例えば、放射線増感剤、フォトサーマル治療剤、ＭＲＩ造影剤等が挙げられる。また、修飾金属ナノ粒子は、上記以外に、触媒、センサー、導電材料等の用途にも用いることができる。

【0045】

以上、本発明の好適な実施形態について説明したが、本発明は上記実施形態に限定されるものではない。

【実施例】

【0046】

以下、実施例により本発明をより具体的に説明するが、本発明は実施例に限定されるものではない。

【0047】

＜環状ポリエーテルの合成＞
（合成例１）
ＴＨＦ（７５ｍＬ）及びｎ−ヘプタン（２５ｍＬ）の混合溶媒にＫＯＨ（３．３ｇ）を分散させた分散液に対し、両末端にヒドロキシ基を有する直鎖状ポリエーテル（数平均分子量Ｍｎ：２０００Ｄａ）（５．０ｇ）及びトシルクロリド（０．６４ｇ）の乾燥ＴＨＦ溶液（１００ｍＬ）をゆっくりと滴下し、４０℃で６日間反応することにより、合成例１の環状ポリエーテル（ＰＥＯ（１））を得た。得られた環状ポリエーテルのサイズ排除クロマトグラフィーより求めたピークトップ分子量Ｍｐは２０００Ｄａ、Ｍｗ／Ｍｎは１．１０であった。

【0048】

（合成例２）
ＴＨＦ（７５ｍＬ）及びｎ−ヘプタン（２５ｍＬ）の混合溶媒にＫＯＨ（３．３ｇ）を分散させた分散液に対し、両末端にヒドロキシ基を有する直鎖状ポリエーテル（数平均分子量Ｍｎ：３０００Ｄａ）（２．５ｇ）及びトシルクロリド（０．２４ｇ）の乾燥ＴＨＦ溶液（５０ｍＬ）をゆっくりと滴下し、４０℃で６日間反応することにより、合成例２の環状ポリエーテル（ＰＥＯ（２））を得た。得られた環状ポリエーテルのサイズ排除クロマトグラフィーより求めたピークトップ分子量Ｍｐは３２００Ｄａ、Ｍｗ／Ｍｎは１．０６であった。

【0049】

（合成例３）
ＴＨＦ（７５ｍＬ）及びｎ−ヘプタン（２５ｍＬ）の混合溶媒にＫＯＨ（３．３ｇ）を分散させた分散液に対し、両末端にヒドロキシ基を有する直鎖状ポリエーテル（数平均分子量Ｍｎ：１００００Ｄａ）（５．０ｇ）及びトシルクロリド（０．２１ｇ）の乾燥ＴＨＦ溶液（１００ｍＬ）をゆっくりと滴下し、４０℃で６日間反応することにより、合成例３の環状ポリエーテル（ＰＥＯ（３））を得た。得られた環状ポリエーテルのサイズ排除クロマトグラフィーより求めたピークトップ分子量Ｍｐは１０５００Ｄａ、Ｍｗ／Ｍｎは１．０３であった。

【0050】

＜修飾金属ナノ粒子の調製＞
（実施例Ａ−１：修飾銀ナノ粒子（Ａ−１）の調製）
合成例１で合成したＰＥＯ（１）を用いて、修飾銀ナノ粒子（Ａ−１）を調製した。
具体的には、ＰＥＯ（１）（５０ｍｇ）、硝酸銀（１７．４ｍｇ）、アンモニア水溶液（３４μＬ）、ＮａＯＨ（４０ｍｇ）、及びマルトース一水和物（３６０ｍｇ）を水（１００ｍＬ）中、２５℃で１２時間反応させることにより、修飾銀ナノ粒子（Ａ−１）を得た。修飾銀ナノ粒子（Ａ−１）の平均粒径は４５ｎｍであった。

【0051】

（実施例Ａ−２：修飾銀ナノ粒子（Ａ−２）の調製）
合成例２で合成したＰＥＯ（２）を用いて、修飾銀ナノ粒子（Ａ−２）を調製した。
具体的には、ＰＥＯ（２）（５０ｍｇ）、硝酸銀（１７．４ｍｇ）、アンモニア水溶液（３４μＬ）、ＮａＯＨ（４０ｍｇ）、及びマルトース一水和物（３６０ｍｇ）を水（１００ｍＬ）中、２５℃で１２時間反応させることにより、修飾銀ナノ粒子（Ａ−２）を得た。修飾銀ナノ粒子（Ａ−２）の平均粒径は３１ｎｍであった。

【0052】

（実施例Ａ−３：修飾銀ナノ粒子（Ａ−３）の調製）
合成例３で合成したＰＥＯ（３）を用いて、修飾銀ナノ粒子（Ａ−３）を調製した。
具体的には、ＰＥＯ（３）（５０ｍｇ）、硝酸銀（１７．４ｍｇ）、アンモニア水溶液（３４μＬ）、ＮａＯＨ（４０ｍｇ）、及びマルトース一水和物（３６０ｍｇ）を水（１００ｍＬ）中、２５℃で１２時間反応させることにより、修飾銀ナノ粒子（Ａ−３）を得た。修飾銀ナノ粒子（Ａ−３）の平均粒径は３５ｎｍであった。

【0053】

（比較例Ｘ−１：修飾銀ナノ粒子（Ｘ−１）の調製）
直鎖のポリエチレンオキシドを用いて、修飾銀ナノ粒子（Ｘ−１）を調製した。
具体的には、数平均分子量Ｍｎが約４０００Ｄａの直鎖ポリエチレンオキシド（５０ｍｇ）、硝酸銀（１７．４ｍｇ）、アンモニア水溶液（３４μＬ）、ＮａＯＨ（４０ｍｇ）、及びマルトース一水和物（３６０ｍｇ）を、水（１００ｍＬ）中、２５℃で１２時間反応させることにより、修飾銀ナノ粒子（Ｘ−１）を得た。修飾銀ナノ粒子（Ｘ−１）の平均粒径は３６ｎｍであった。

【0054】

（比較例Ｘ−３：修飾銀ナノ粒子（Ｘ−２）の調製）
直鎖のポリエチレンオキシドジメチルエーテルを用いて、修飾銀ナノ粒子（Ｘ−２）を調製した。
具体的には、数平均分子量Ｍｎは約４０００Ｄａの直鎖ポリエチレンオキシドジメチルエーテル（５０ｍｇ）、硝酸銀（１７．４ｍｇ）、アンモニア水溶液（３４μＬ）、ＮａＯＨ（４０ｍｇ）、マルトース一水和物（３６０ｍｇ）を、水（１００ｍＬ）中、２５℃で１２時間反応させることにより、修飾銀ナノ粒子（Ｘ−２）を得た。修飾銀ナノ粒子（Ｘ−２）の平均粒径は４４ｎｍであった。

【0055】

実施例Ａ−２、比較例Ｘ−１及び比較例Ｘ−２で得られた修飾銀ナノ粒子について、以下の方法で耐塩性を評価した。

【0056】

（耐塩性評価試験）
修飾銀ナノ粒子を、種々の濃度のＮａＣｌ溶液（２５ｍＭ、３７．５ｍＭ、４４ｍＭ、５０ｍＭ、及び７５ｍＭ）中に加えて試験サンプルを作成した。３時間経過後及び１週間経過後の試験サンプルについて、紫外可視分光法によって最大吸収波長を測定した。最大吸収波長における吸収の減少率（初期の吸収を１００％としたときの吸収）を算出し、グラフ化した。結果を図１に示す。

【0057】

（実施例Ｂ−１：修飾金ナノ粒子（Ｂ−１）の調製）
合成例１で合成したＰＥＯ（１）を用いて、修飾金ナノ粒子（Ｂ−１）を調製した。
具体的には、ＨＡｕＣｌ_４水溶液（１．０ｍＭ、４０ｍＬ）とクエン酸ナトリウム水溶液（４．０ｍＭ、３９ｍＬ）とを混合し、１０分間還流させて、金ナノ粒子を合成した。次いで、金ナノ粒子溶液（４００μＬ）に対し、水（１００μＬ）、ＰＥＯ（１）（１２．５ｍｇ）を添加し、２５℃で１０分反応させることにより、修飾金ナノ粒子（Ｂ−１）を得た。修飾金ナノ粒子（Ｂ−１）の平均粒径は１４ｎｍであった。

【0058】

（実施例Ｂ−２：修飾金ナノ粒子（Ｂ−２）の調製）
合成例２で合成したＰＥＯ（２）を用いて、修飾金ナノ粒子（Ｂ−２）を調製した。
具体的には、ＨＡｕＣｌ_４水溶液（１．０ｍＭ、４０ｍＬ）とクエン酸ナトリウム水溶液（４．０ｍＭ，３９ｍＬ）とを混合し、１０分間還流させて、金ナノ粒子を合成した。次いで、金ナノ粒子溶液（４００μＬ）に対し、水（１００μＬ）、ＰＥＯ（２）（１２．５ｍｇ）を添加し、２５℃で１０分反応させることにより、修飾金ナノ粒子（Ｂ−２）を得た。修飾金ナノ粒子（Ｂ−３）の平均粒径は１４ｎｍであった。

【0059】

（実施例Ｂ−３：修飾金ナノ粒子（Ｂ−３）の調製）
合成例３で合成したＰＥＯ（３）を用いて、修飾金ナノ粒子（Ｂ−３）を調製した。
具体的には、ＨＡｕＣｌ_４水溶液（１．０ｍＭ、４０ｍＬ）とクエン酸ナトリウム水溶液（４．０ｍＭ，３９ｍＬ）とを混合し、１０分間還流させて、金ナノ粒子を合成した。次いで、金ナノ粒子溶液（４００μＬ）に対し、水（１００μＬ）、ＰＥＯ（３）（１２．５ｍｇ）を添加し、２５℃で１０分反応させることにより、修飾金ナノ粒子（Ｂ−３）を得た。修飾金ナノ粒子（Ｂ−４）の平均粒径は１４ｎｍであった。

【0060】

（比較例Ｙ−１：修飾金ナノ粒子（Ｙ−１）の調製）
直鎖のポリエチレンオキシドを用いて、修飾金ナノ粒子（Ｙ−１）を調製した。
具体的には、ＨＡｕＣｌ_４水溶液（１．０ｍＭ、４０ｍＬ）とクエン酸ナトリウム水溶液（４．０ｍＭ，３９ｍＬ）とを混合し、１０分間還流させて、金ナノ粒子を合成した。次いで、金ナノ粒子溶液（４００μＬ）に対し、水（１００μＬ）、数平均分子量Ｍｎが２０００Ｄａの直鎖ポリエチレンオキシド（１２．５ｍｇ）を添加し、２５℃で１０分反応させることにより、修飾金ナノ粒子（Ｙ−１）を得た。修飾金ナノ粒子（Ｙ−１）の平均粒径は１４ｎｍであった。

【0061】

（比較例Ｙ−２：修飾金ナノ粒子（Ｙ−２）の調製）
直鎖のポリエチレンオキシドを用いて、修飾金ナノ粒子（Ｙ−２）を調製した。
具体的には、ＨＡｕＣｌ_４水溶液（１．０ｍＭ、４０ｍＬ）とクエン酸ナトリウム水溶液（４．０ｍＭ，３９ｍＬ）とを混合し、１０分間還流させて、金ナノ粒子を合成した。次いで、金ナノ粒子溶液（４００μＬ）に対し、水（１００μＬ）、数平均分子量Ｍｎが４０００Ｄａの直鎖ポリエチレンオキシド（１２．５ｍｇ）を添加し、２５℃で１０分反応させることにより、修飾金ナノ粒子（Ｙ−２）を得た。修飾金ナノ粒子（Ｙ−２）の平均粒径は１４ｎｍであった。

【0062】

（比較例Ｙ−３：修飾金ナノ粒子（Ｙ−３）の調製）
直鎖のポリエチレンオキシドを用いて、修飾金ナノ粒子（Ｙ−３）を調製した。
具体的には、ＨＡｕＣｌ_４水溶液（１．０ｍＭ、４０ｍＬ）とクエン酸ナトリウム水溶液（４．０ｍＭ，３９ｍＬ）とを混合し、１０分間還流させて、金ナノ粒子を合成した。次いで、金ナノ粒子溶液（４００μＬ）に対し、水（１００μＬ）、数平均分子量Ｍｎが６０００Ｄａの直鎖ポリエチレンオキシド（１２．５ｍｇ）を添加し、２５℃で１０分反応させることにより、修飾金ナノ粒子（Ｙ−３）を得た。修飾金ナノ粒子（Ｙ−３）の平均粒径は１４ｎｍであった。

【0063】

実施例及び比較例で得られた修飾金ナノ粒子について、以下の方法で耐塩性を評価した。

【0064】

（耐塩性評価試験）
修飾金ナノ粒子を、種々の濃度のＮａＣｌ溶液（４５ｍＭ、９０ｍＭ、１２０ｍＭ、及び１８０ｍＭ）中に加えて試験サンプルを作製した。３時間経過後の試験サンプルについて、紫外可視分光法によって最大吸収波長を測定した。測定された最大吸収波長が初期の最大吸収波長からほとんど変化しなかった（５ｎｍ未満）場合をＡ、１５ｎｍ未満の変化であった場合をＢ、１５ｎｍ以上変化した場合をＣ、ピークが幅広となり最大吸収波長の測定が困難となった場合をＤとして評価した。結果を表１に示す。なお、評価結果がＢ及びＣの場合は、表１中の括弧内に変化量を示した。

【0065】

【表1】

【0066】

（実施例Ｃ−１：修飾金ナノ粒子（Ｃ−１）の調製）
平均粒径１０ｎｍの金ナノ粒子と合成例２で合成したＰＥＯ（２）とを用いて、修飾金ナノ粒子（Ｃ−１）を調製した。
具体的には、金ナノ粒子の水分散液（金ナノ粒子の含有量０．０５ｍｇ／ｍＬ、金ナノ粒子の平均粒径１０ｎｍ、ｎａｎｏＣｏｍｐｏｓｉｘ社製）を０．５４ｍＬ準備し、この水分散液に、１．５ｍｇのＰＥＯ（２）を溶解させ、２５℃で１０分反応させることにより、修飾金ナノ粒子（Ｃ−１）を含む水分散液を得た。

【0067】

（実施例Ｃ−２〜Ｃ−６：修飾金ナノ粒子（Ｃ−２）〜（Ｃ−６）の調製）
金ナノ粒子の平均粒径を１５ｎｍ（実施例Ｃ−２）、２０ｎｍ（実施例Ｃ−３）、３０ｎｍ（実施例Ｃ−４）、４０ｎｍ（実施例Ｃ−５）又は５０ｎｍ（実施例Ｃ−６）に変更したこと以外は、実施例Ｃ−１と同様にして修飾金ナノ粒子を調製した。

【0068】

実施例Ｃ−１〜Ｃ−６の修飾金ナノ粒子（Ｃ−１）〜（Ｃ−６）について、以下の方法で耐塩性を評価した。

【0069】

（耐塩性評価試験）
修飾金ナノ粒子を含む水分散液に対して、０．０６ｍＬのリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ、ｐＨ７．４、ＮａＣｌ濃度：１５００ｍＭ）を加えて試験サンプルを作製した。試験サンプルについて、日本分光株式会社製紫外可視近赤外分光光度計を用い、３７℃の条件で、時間経過による吸光度の変化を測定した。測定開始時の吸光度に対する相対吸光度を縦軸、経過時間を横軸に取ったグラフは、図２に示すとおりとなった。

【0070】

（実施例Ｄ−１：修飾金ナノ粒子（Ｄ−１）の調製）
平均粒径１０ｎｍの金ナノ粒子と合成例１で合成したＰＥＯ（１）とを用いて、修飾金ナノ粒子（Ｄ−１）を調製した。
具体的には、金ナノ粒子の水分散液（金ナノ粒子の含有量０．０５ｍｇ／ｍＬ、金ナノ粒子の平均粒径１０ｎｍ、ｎａｎｏＣｏｍｐｏｓｉｘ社製）を０．５４ｍＬ準備し、この水分散液に、１．５ｍｇのＰＥＯ（１）を溶解させ、２５℃で１０分反応させることにより、修飾金ナノ粒子（Ｄ−１）を含む水分散液を得た。

【0071】

（実施例Ｄ−２及びＤ−３：修飾金ナノ粒子（Ｄ−２）及び（Ｄ−３）の調製）
金ナノ粒子の平均粒径を３０ｎｍ（実施例Ｄ−２）又は５０ｎｍ（実施例Ｄ−３）に変更したこと以外は、実施例Ｄ−１と同様にして修飾金ナノ粒子を調製した。

【0072】

実施例Ｄ−１〜Ｄ−３の修飾ナノ粒子（Ｄ−１）〜（Ｄ−３）について、以下の方法で耐塩性を評価した。

【0073】

（耐塩性評価試験）
修飾金ナノ粒子を含む水分散液に対して、０．０６ｍＬのリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ、ｐＨ７．４、ＮａＣｌ濃度：１５００ｍＭ）を加えて試験サンプルを作製した。試験サンプルについて、日本分光株式会社製紫外可視近赤外分光光度計を用い、４５℃の条件で、時間経過による吸光度の変化を測定した。測定開始時の吸光度に対する相対吸光度を縦軸、経過時間を横軸に取ったグラフは、図３に示すとおりとなった。

【図1】

【図2】

【図3】