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特開2022-12264ＰＰＡＲγ２産生活性化剤、アディポネクチン産生活性化剤、及びＭＣＰ－１産生抑制剤
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公開特許公報(A)
(11)【公開番号】P2022012264
(43)【公開日】2022-01-17
(54)【発明の名称】ＰＰＡＲγ２産生活性化剤、アディポネクチン産生活性化剤、及びＭＣＰ－１産生抑制剤
(51)【国際特許分類】
A61K 36/906 20060101AFI20220107BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20220107BHJP
A61P 3/06 20060101ALI20220107BHJP
A61P 3/10 20060101ALI20220107BHJP
A23L 33/105 20160101ALI20220107BHJP
【ＦＩ】
A61K36/906
A61P43/00 111
A61P3/06
A61P3/10
A23L33/105 ZNA
【審査請求】未請求
【請求項の数】9
【出願形態】ＯＬ
(21)【出願番号】P 2020113973
(22)【出願日】2020-07-01
(71)【出願人】
【識別番号】000116297
【氏名又は名称】ヱスビー食品株式会社
(74)【代理人】
【識別番号】100139594
【弁理士】
【氏名又は名称】山口 健次郎
(74)【代理人】
【識別番号】100090251
【弁理士】
【氏名又は名称】森田 憲一
(72)【発明者】
【氏名】恩田 浩幸
(72)【発明者】
【氏名】吉野 七海
(72)【発明者】
【氏名】菅原 卓也
(72)【発明者】
【氏名】西 甲介
(72)【発明者】
【氏名】石田 萌子
【テーマコード（参考）】
4B018
4C088
【Ｆターム（参考）】
4B018MD61
4B018ME14
4B018MF01
4B018MF06
4B018MF07
4C088AB81
4C088BA07
4C088BA10
4C088CA06
4C088MA52
4C088MA55
4C088NA14
4C088ZC33
4C088ZC35
4C088ZC41
(57)【要約】
【課題】本発明の目的は、安全性に優れ、日常的かつ長期的な摂取が可能なＰＰＡＲγ産生活性化剤を提供することである。
【解決手段】前記課題は、本発明のカルダモンの粉砕物又は抽出物を有効成分として含む、ＰＰＡＲγ２産生活性化剤、又は前記ＰＰＡＲγ２産生活性化剤及び食品材料を含む、ＰＰＡＲγ２産生活性化用食品組成物によって解決することができる。
【選択図】なし
【解決手段】前記課題は、本発明のカルダモンの粉砕物又は抽出物を有効成分として含む、ＰＰＡＲγ２産生活性化剤、又は前記ＰＰＡＲγ２産生活性化剤及び食品材料を含む、ＰＰＡＲγ２産生活性化用食品組成物によって解決することができる。
【選択図】なし
【特許請求の範囲】
【請求項1】
カルダモンの粉砕物又は抽出物を有効成分として含む、ＰＰＡＲγ２産生活性化剤。
【請求項2】
前記抽出物が、アルコール抽出物である、請求項１に記載のＰＰＡＲγ２産生活性化剤。
【請求項3】
前記請求項１又は２に記載のＰＰＡＲγ２産生活性化剤及び食品材料を含む、ＰＰＡＲγ２産生活性化用食品組成物。
【請求項4】
カルダモンの粉砕物又は抽出物を有効成分として含む、アディポネクチン産生活性化剤。
【請求項5】
前記抽出物が、アルコール抽出物である、請求項４に記載のアディポネクチン産生活性化剤。
【請求項6】
前記請求項４又は５に記載のアディポネクチン産生活性化剤及び食品材料を含む、アディポネクチン産生活性化用食品組成物。
【請求項7】
カルダモンの粉砕物又は抽出物を有効成分として含む、ＭＣＰ－１産生抑制剤。
【請求項8】
前記抽出物が、アルコール抽出物である、請求項７に記載のＭＣＰ－１産生抑制剤。
【請求項9】
前記請求項７又は８に記載のＭＣＰ－１産生抑制剤及び食品材料を含む、ＭＣＰ－１産生抑制用食品組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、ＰＰＡＲγ２産生活性化剤、アディポネクチン産生活性化剤、及びＭＣＰ－１産生抑制剤に関する。
【背景技術】
【0002】
ペルオキシソーム増殖剤活性化レセプター（peroxisome proliferator-activated receptor；ＰＰＡＲ）は、核内レセプタースーパーファミリーのメンバーであり、ＰＰＡＲα、ＰＰＡＲγ、及びＰＰＡＲδの３つのサブタイプが知られている。炭化水素、脂質、タンパク質等の細胞内代謝と細胞の分化に関与している転写因子群であると考えられている。
前記ＰＰＡＲγには、３つのアイソフォームが知られており、ＰＰＡＲγ１は、心臓、筋肉、及び結腸などの多くの組織に発現している。ＰＰＡＲγ２は、ＰＰＡＲγ１よりも３０アミノ酸残基長いポリペプチドであり、主として脂肪組織に発現している。また、ＰＰＡＲγ３はマクロファージ、大腸、白色脂肪組織で発現している。
ＰＰＡＲ活性化剤として、ウコンに含まれるクルクミン及びグローブ抽出物等（特許文献１）、トマトに含まれるアポリコペノイド（特許文献２）、トケイソウ抽出物（特許文献３）、又はシークワーサー抽出物（特許文献４）が、ＰＰＡＲγを活性化することが開示されている。
前記ＰＰＡＲγには、３つのアイソフォームが知られており、ＰＰＡＲγ１は、心臓、筋肉、及び結腸などの多くの組織に発現している。ＰＰＡＲγ２は、ＰＰＡＲγ１よりも３０アミノ酸残基長いポリペプチドであり、主として脂肪組織に発現している。また、ＰＰＡＲγ３はマクロファージ、大腸、白色脂肪組織で発現している。
ＰＰＡＲ活性化剤として、ウコンに含まれるクルクミン及びグローブ抽出物等（特許文献１）、トマトに含まれるアポリコペノイド（特許文献２）、トケイソウ抽出物（特許文献３）、又はシークワーサー抽出物（特許文献４）が、ＰＰＡＲγを活性化することが開示されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【0003】
【特許文献1】特開２０１６－０２７０１４号公報
【特許文献2】特開２０２０－１９７５８号公報
【特許文献3】特開２０１８－４８１０３号公報
【特許文献4】特開２０１９－２３１７６号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0004】
本発明の目的は、安全性に優れ、日常的かつ長期的な摂取が可能なＰＰＡＲγ産生活性化剤を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【0005】
本発明者は、安全性に優れ、日常的かつ長期的な摂取が可能なＰＰＡＲγ産生活性化剤について、鋭意研究した結果、驚くべきことに、カルダモンの粉砕物又は抽出物がＰＰＡＲγ２、及びアディポネクチン産生を活性化する作用を有することを見出した。また、カルダモンの粉砕物又は抽出物が、ＭＣＰ－１産生を抑制する作用を有することを見出した。
本発明は、こうした知見に基づくものである。
従って、本発明は、
［１］カルダモンの粉砕物又は抽出物を有効成分として含む、ＰＰＡＲγ２産生活性化剤、
［２］前記抽出物が、アルコール抽出物である、［１］に記載のＰＰＡＲγ２産生活性化剤、
［３］前記［１］又は［２］に記載のＰＰＡＲγ２産生活性化剤及び食品材料を含む、ＰＰＡＲγ２産生活性化用食品組成物、
［４］カルダモンの粉砕物又は抽出物を有効成分として含む、アディポネクチン産生活性化剤、
［５］前記抽出物が、アルコール抽出物である、［４］に記載のアディポネクチン産生活性化剤、
［６］前記［４］又は［５］に記載のアディポネクチン産生活性化剤及び食品材料を含む、アディポネクチン産生活性化用食品組成物、
［７］カルダモンの粉砕物又は抽出物を有効成分として含む、ＭＣＰ－１産生抑制剤、
［８］前記抽出物が、アルコール抽出物である、［７］に記載のＭＣＰ－１産生抑制剤、及び
［９］前記［７］又は［８］に記載のＭＣＰ－１産生抑制剤及び食品材料を含む、ＭＣＰ－１産生抑制用食品組成物、
に関する。
本発明は、こうした知見に基づくものである。
従って、本発明は、
［１］カルダモンの粉砕物又は抽出物を有効成分として含む、ＰＰＡＲγ２産生活性化剤、
［２］前記抽出物が、アルコール抽出物である、［１］に記載のＰＰＡＲγ２産生活性化剤、
［３］前記［１］又は［２］に記載のＰＰＡＲγ２産生活性化剤及び食品材料を含む、ＰＰＡＲγ２産生活性化用食品組成物、
［４］カルダモンの粉砕物又は抽出物を有効成分として含む、アディポネクチン産生活性化剤、
［５］前記抽出物が、アルコール抽出物である、［４］に記載のアディポネクチン産生活性化剤、
［６］前記［４］又は［５］に記載のアディポネクチン産生活性化剤及び食品材料を含む、アディポネクチン産生活性化用食品組成物、
［７］カルダモンの粉砕物又は抽出物を有効成分として含む、ＭＣＰ－１産生抑制剤、
［８］前記抽出物が、アルコール抽出物である、［７］に記載のＭＣＰ－１産生抑制剤、及び
［９］前記［７］又は［８］に記載のＭＣＰ－１産生抑制剤及び食品材料を含む、ＭＣＰ－１産生抑制用食品組成物、
に関する。
【発明の効果】
【0006】
本発明のＰＰＡＲγ２産生活性化剤によれば、脂肪細胞を分化させ、そして小型化することができる。本発明のアディポネクチン産生活性化剤によれば、動脈硬化を改善することができる。本発明のＭＣＰ－１産生抑制剤によれば、炎症を抑制することができる。
【図面の簡単な説明】
【0007】
【図1】マウス由来３Ｔ３－Ｌ１前駆脂肪細胞にカルダモン抽出物を添加する２つのスキームを示した図である。
【図2】カルダモン抽出物のスキーム１（Ａ）及びスキーム２（Ｂ）における、ＭＣＰ－１産生に対する影響を示したグラフである。
【図3】カルダモン抽出物のスキーム１（Ａ）及びスキーム２（Ｂ）における、ＭＣＰ－１遺伝子発現に対する影響を示したグラフである。
【図4】カルダモン抽出物のスキーム１（Ａ）及びスキーム２（Ｂ）における、アディポネクチン遺伝子発現に対する影響を示したグラフである。
【図5】カルダモン抽出物のスキーム１（Ａ）及びスキーム２（Ｂ）における、ＰＰＡＲγ遺伝子発現に対する影響を示したグラフである。
【発明を実施するための形態】
【0008】
本発明のＰＰＡＲγ２産生活性化剤、アディポネクチン産生活性化剤、又はＭＣＰ－１産生抑制剤は、カルダモンの粉砕物又は抽出物を有効成分として含む。
【0009】
《カルダモン》
カルダモンには、グリーンカルダモンと、ブラックカルダモンとがある。本発明で用いるカルダモンは、グリーンカルダモン（Elettaria cardamomum）の果実から得られる香辛料である。グリーンカルダモンは、インド、スリランカ、及びマレー半島を原産とするショウガ科のショウズク属の多年草であり、ショウズク（小荳▲く▼）とも称される。成長すると草丈２～５ｍとなり、葉は長さ４０ｃｍ程度、幅７～１０ｃｍ程度であり、葉の基部は鞘状になっている。地面の近くに薄緑の白に赤紫の入った花をつけ、成熟すると１～２ｃｍの卵型の実をつける。実の内部は３室に分かれ、暗褐色ないし黒褐色の種子が入っている。ショウズクの緑色の果実は、種子を含んだまま乾燥され、そのまま、又は挽いて粉にして、香辛料として使用される。
カルダモンには、グリーンカルダモンと、ブラックカルダモンとがある。本発明で用いるカルダモンは、グリーンカルダモン（Elettaria cardamomum）の果実から得られる香辛料である。グリーンカルダモンは、インド、スリランカ、及びマレー半島を原産とするショウガ科のショウズク属の多年草であり、ショウズク（小荳▲く▼）とも称される。成長すると草丈２～５ｍとなり、葉は長さ４０ｃｍ程度、幅７～１０ｃｍ程度であり、葉の基部は鞘状になっている。地面の近くに薄緑の白に赤紫の入った花をつけ、成熟すると１～２ｃｍの卵型の実をつける。実の内部は３室に分かれ、暗褐色ないし黒褐色の種子が入っている。ショウズクの緑色の果実は、種子を含んだまま乾燥され、そのまま、又は挽いて粉にして、香辛料として使用される。
【0010】
《粉砕物》
本発明において、粉砕物とは、カルダモンが粉砕された状態のものであればよく、例えば粉末状、粒状、又はペースト状であることができる。粉砕物は、好ましくは粉末である。また、粉末状にしたものを、例えばキューブ状、ブロック状、又は顆粒状に成型又は造粒したものも好ましく使用できる。粉砕物又は粉末に加工するための処理は、特に限定されないが、例えばクラッシャー、ミル、ブレンダー、ミキサー、及び石臼などの粉砕用の機器又は器具を用いて、当業者が通常使用する任意の方法により植物体を粉砕する処理が挙げられる。粉砕前に、植物体を乾燥してもよい。
本発明において、粉砕物とは、カルダモンが粉砕された状態のものであればよく、例えば粉末状、粒状、又はペースト状であることができる。粉砕物は、好ましくは粉末である。また、粉末状にしたものを、例えばキューブ状、ブロック状、又は顆粒状に成型又は造粒したものも好ましく使用できる。粉砕物又は粉末に加工するための処理は、特に限定されないが、例えばクラッシャー、ミル、ブレンダー、ミキサー、及び石臼などの粉砕用の機器又は器具を用いて、当業者が通常使用する任意の方法により植物体を粉砕する処理が挙げられる。粉砕前に、植物体を乾燥してもよい。
【0011】
本発明のＰＰＡＲγ２産生活性化剤等に含まれるカルダモンが粉砕物である場合、限定されるものではないが、例えばカルダモンの粉砕物の平均最長径が、０．０１～４ｍｍ、好ましくは、０．０２～１ｍｍ、より好ましくは０．０２～０．５ｍｍのものを使用することができる。また、カルダモンの粉砕物の９０重量％以上が、０．０１～４ｍｍ、好ましくは、０．０２～１ｍｍ、より好ましくは０．０２～０．５ｍｍの最長径を有するものを使用することができる。また、カルダモンの粉砕物の９０重量％以上が、ＪＩＳ試験篩いメッシュ換算表において、４．７メッシュ（４ｍｍ）１６メッシュ（１ｍｍ）、又は３０メッシュ（０．５ｍｍ）、を通過するものを使用することができる。カルダモンの粉砕物の最長径が１ｍｍ以下であると、本発明のＰＰＡＲγ２発現が向上することから、最長径４ｍｍ以下のものを使用することが好ましい。
カルダモンの平均最長径の計測は、粒径を計測するための公知の機器を使用して行うことができる。また、カルダモンの粉砕物の中から任意で１００個を選択して、それらの最長径を、実体顕微鏡を用いて測定し、それらの平均を計算することで算出することもできる。
カルダモンの平均最長径の計測は、粒径を計測するための公知の機器を使用して行うことができる。また、カルダモンの粉砕物の中から任意で１００個を選択して、それらの最長径を、実体顕微鏡を用いて測定し、それらの平均を計算することで算出することもできる。
【0012】
《抽出物》
本発明のＰＰＡＲγ２産生活性化剤等は、カルダモンの抽出物を含むことができる。本発明のＰＰＡＲγ２産生活性化剤等は、カルダモンの粉砕物と抽出物との両方を含むこともできる。本発明のＰＰＡＲγ２産生活性化剤等の有効成分の抽出に用いるカルダモンは、果実を生のまま用いてもよく、又は乾燥させたものを用いてもよい。また、抽出効率が向上するように、破砕物又は粉体の状態に加工してもよい。
本発明のＰＰＡＲγ２産生活性化剤等は、カルダモンの抽出物を含むことができる。本発明のＰＰＡＲγ２産生活性化剤等は、カルダモンの粉砕物と抽出物との両方を含むこともできる。本発明のＰＰＡＲγ２産生活性化剤等の有効成分の抽出に用いるカルダモンは、果実を生のまま用いてもよく、又は乾燥させたものを用いてもよい。また、抽出効率が向上するように、破砕物又は粉体の状態に加工してもよい。
【0013】
有効成分の抽出には、植物に由来する成分の抽出に用いられる通常の抽出方法、例えばこれらに限定されるものではないが、水蒸気蒸留法、溶剤抽出法、圧搾法（直接、高温、若しくは低温）、又は超臨界抽出法を用いることができる。これらの抽出法の組み合わせ、例えば圧搾した後に溶剤抽出する方法を用いてもよい。
【0014】
溶剤抽出法で抽出する場合に用いられる抽出溶媒は、抽出液中に有効成分が充分に抽出されることができる限りにおいては限定されないが、例えば有機溶媒、水性溶媒、又は有機溶媒及び水性溶媒の混合物を使用することができる。
【0015】
本発明のＰＰＡＲγ２産生活性化剤等に含まれるカルダモンの抽出物は、有機溶媒、例えばアルコール、アセトン、ベンゼン、エステル、酢酸エチル、ヘキサン、クロロホルム、及びジエチルエーテルなどにより抽出されることができる。アルコールとしては、抽出液中に有効成分が充分に抽出されることができる限りにおいては限定されないが、例えばメタノール、エタノール、プロピルアルコール、イソプロピルアルコール、及びブチルアルコール等の炭素数１～５の一価アルコールを使用することができる。１，３－ブチレングリコール、プロピレングリコール、ジプロピレングリコール、及びグリセリン等の炭素数２～５の多価アルコールを使用することもできる。好ましいアルコールは、炭素数１～５の一価アルコールであり、より好ましいアルコールは、メタノール及びエタノールであり、最も好ましいアルコールは、エタノールである。
【0016】
本発明のＰＰＡＲγ２産生活性化剤等に含まれるカルダモンの抽出物は、水性溶媒により抽出することができる。水性溶媒としては、水を含んでいる限りにおいて限定されるものではなく、例えば水、生理食塩水、又は緩衝液などを使用することができる。緩衝液としては、リン酸緩衝液、リン酸ナトリウム緩衝液、炭酸ナトリウム緩衝液、クエン酸緩衝液、クエン酸リン酸緩衝液、酢酸緩衝液、及びトリス緩衝液などが挙げられる。前記水性溶媒のｐＨは、特に制限されない。
【0017】
本発明のＰＰＡＲγ２産生活性化剤等に含まれるカルダモンの抽出物は、有機溶媒と水性溶媒との混合物により抽出されることができる。抽出溶媒中に含まれる水性溶媒の量は、抽出液中に有効成分が充分に抽出されることができる限りにおいては限定されないが、抽出溶媒の全体量に対して、例えば５０重量％以上、７０重量％以上、又は９０重量％以上であることができる。
【0018】
本発明のＰＰＡＲγ２産生活性化剤等に含まれるカルダモンの抽出物を溶剤抽出法で抽出する場合、抽出温度は、抽出液中に有効成分が充分に抽出されることのできる温度である限り、特に限定されるものではないが、－５０℃～１００℃であることが好ましく、０℃～１００℃であることがより好ましく、５℃～１００℃であることが最も好ましい。
【0019】
本発明のＰＰＡＲγ２産生活性化剤等に含まれるカルダモンの抽出物の抽出時間は、例えばカルダモンの状態、すなわち、生若しくは乾燥物であるか、又は破砕物若しくは粉体の状態に加工した場合にはその加工状態に応じて適宜決定することができる。更に、抽出時間は、例えば抽出液の温度、又は撹拌若しくは振盪の有無などの抽出条件に応じて適宜決定することができる。抽出時間は、５秒～１週間であることが好ましく、５秒～１日であることが更に好ましく、５秒～３時間であることが最も好ましい。また、本発明のＰＰＡＲγ２産生活性化剤等に含まれるカルダモンの抽出物を溶剤抽出法で抽出する場合、抽出効率が向上するように、撹拌又は振盪しながら実施することが好ましい。
【0020】
圧搾法とは、カルダモンに物理的に圧力をかけて、カルダモンの抽出物を抽出する方法である。常温で行う直接圧搾法、高温で行う高温圧搾法、及び低温で行う低温圧搾法がある。本発明の苦味抑制用組成物に含まれる抽出物は、いずれの圧搾法を用いても抽出可能である。
【0021】
本発明のＰＰＡＲγ２産生活性化剤等に含まれる抽出物は、超臨界抽出法を用いて抽出可能である。超臨界抽出法とは、超臨界状態にある物質を用いて特定の植物から抽出物を抽出する方法である。超臨界状態にある物質としては、例えば二酸化炭素は、強力な溶解力を有するため、コーヒーの脱カフェイン、又は植物などの天然原料からの香料及び医薬品成分抽出に一般に用いられている。
【0022】
《ＰＰＡＲγ２》
ペルオキシソーム増殖剤活性化レセプターγ２（ＰＰＡＲγ２）は、核内レセプタースーパーファミリーであるＰＰＡＲの３つのサブタイプ（ＰＰＡＲα、ＰＰＡＲγ、及びＰＰＡＲδ）の１つである。また、ＰＰＡＲγには３つのアイソフォーム（ＰＰＡＲγ１、ＰＰＡＲγ２、ＰＰＡＲγ３）が知られており、ＰＰＡＲγ２は主に脂肪組織に発現している。ＰＰＡＲγ２の発現が増加することにより、アディポネクチンの発現が向上すると考えられている。また、ＰＰＡＲγ２の発現が増加することにより、ａＰ２及びＰＰＡＲαの発現が向上することが報告されている。
本発明のＰＰＡＲγ２産生活性化剤は、ＰＰＡＲγ２の発現を増加させ、ＰＰＡＲγ２の作用を活性化することができる。
ペルオキシソーム増殖剤活性化レセプターγ２（ＰＰＡＲγ２）は、核内レセプタースーパーファミリーであるＰＰＡＲの３つのサブタイプ（ＰＰＡＲα、ＰＰＡＲγ、及びＰＰＡＲδ）の１つである。また、ＰＰＡＲγには３つのアイソフォーム（ＰＰＡＲγ１、ＰＰＡＲγ２、ＰＰＡＲγ３）が知られており、ＰＰＡＲγ２は主に脂肪組織に発現している。ＰＰＡＲγ２の発現が増加することにより、アディポネクチンの発現が向上すると考えられている。また、ＰＰＡＲγ２の発現が増加することにより、ａＰ２及びＰＰＡＲαの発現が向上することが報告されている。
本発明のＰＰＡＲγ２産生活性化剤は、ＰＰＡＲγ２の発現を増加させ、ＰＰＡＲγ２の作用を活性化することができる。
【0023】
《アディポネクチン》
アディポネクチンは、脂肪細胞から分泌されるタンパク質である。
本発明のアディポネクチン産生活性化剤は、アディポネクチンの発現を増加させ、アディポネクチンの作用を活性化することができる。
アディポネクチンは、脂肪細胞から分泌されるタンパク質である。
本発明のアディポネクチン産生活性化剤は、アディポネクチンの発現を増加させ、アディポネクチンの作用を活性化することができる。
【0024】
《ＭＣＰ－１》
ＭＣＰ－１（Monocyte chemotactic protein 1）は、ＣＣＬ２とも呼ばれるケモカインであり、単球に対する走化性亢進作用、活性酸素やリソゾーム酵素の産生放出増加作用、又は腫瘍に対する増殖抑制活性示すことが報告されている。また、好塩基球に対する脱顆粒作用、ヒスタミンやロイコトリエンＣ４産生放出活性、骨髄由来マスト細胞の遊走性の亢進作用も報告されている。
本発明のＭＣＰ－１産生抑制剤は、ＭＣＰ－１の発現を減少させ、ＭＣＰ－１の作用を抑制することができる。
ＭＣＰ－１（Monocyte chemotactic protein 1）は、ＣＣＬ２とも呼ばれるケモカインであり、単球に対する走化性亢進作用、活性酸素やリソゾーム酵素の産生放出増加作用、又は腫瘍に対する増殖抑制活性示すことが報告されている。また、好塩基球に対する脱顆粒作用、ヒスタミンやロイコトリエンＣ４産生放出活性、骨髄由来マスト細胞の遊走性の亢進作用も報告されている。
本発明のＭＣＰ－１産生抑制剤は、ＭＣＰ－１の発現を減少させ、ＭＣＰ－１の作用を抑制することができる。
【0025】
本発明における有効成分である、カルダモンの粉砕物又は抽出物は、それ単独で、あるいは、好ましくは薬剤学的又は獣医学的に許容することのできる通常の担体又は希釈剤と共に、対象［動物、好ましくは哺乳動物（特にはヒト）］に有効量で投与することができる。また、ヒト以外の動物には、飼料として飲食物の形で与えることも可能である。
【0026】
本発明のＰＰＡＲγ２産生活性化剤等は、カルダモンの粉砕物又は抽出物から成るものでもよく、また、カルダモンの粉砕物又は抽出物を含むものでもよい。本発明のＰＰＡＲγ２産生活性化剤等が、カルダモンの粉砕物又は抽出物を含むものである場合、他の添加剤を含むことができる。
【0027】
本発明のＰＰＡＲγ２産生活性化剤等の投与剤型としては、特には限定がなく、散剤、細粒剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤、懸濁液、エマルジョン剤、シロップ剤、エキス剤、若しくは丸剤等の経口剤、又は非経口剤を挙げることができる。
【0028】
前記経口剤は、例えばゼラチン、アルギン酸ナトリウム、澱粉、コーンスターチ、白糖、乳糖、ぶどう糖、マンニット、カルボキシメチルセルロース、デキストリン、ポリビニルピロリドン、結晶セルロース、大豆レシチン、ショ糖、脂肪酸エステル、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ポリエチレングリコール、ケイ酸マグネシウム、無水ケイ酸、又は合成ケイ酸アルミニウムなどの賦形剤、結合剤、崩壊剤、界面活性剤、滑沢剤、流動性促進剤、希釈剤、保存剤、着色剤、香料、矯味剤、安定化剤、保湿剤、防腐剤、又は酸化防止剤等を用いて、常法に従って製造することができる。
【0029】
非経口剤としては、例えば注射剤を挙げることができる。注射剤の調製においては、有効成分の他に、例えば生理食塩水若しくはリンゲル液等の水溶性溶剤、植物油若しくは脂肪酸エステル等の非水溶性溶剤、ブドウ糖若しくは塩化ナトリウム等の等張化剤、溶解補助剤、安定化剤、防腐剤、懸濁化剤、又は乳化剤などを任意に用いることができる。
【0030】
本発明のＰＰＡＲγ２産生活性化剤等は、限定されるものではないが、例えばカルダモンのエタノール抽出物を濾過及び乾燥することにより得られた乾固物として、例えば０．０１～５００ｍｇ／ｍＬ、好ましくは、０．１～４００ｍｇ／ｍＬ、より好ましくは０．５～３００ｍｇ／ｍＬ、更に好ましくは１～２００ｍｇ／ｍＬ、更に好ましくは２～１５０ｍｇ／ｍＬ、最も好ましくは１～１００ｍｇ／ｍＬで含有することができる。
【0031】
本発明のＰＰＡＲγ２産生活性化剤等の投与量は、適宜決定することができるが、例えばエタノール抽出物を濾過及び乾燥することにより得られた乾固物として、１～３０００ｍｇ／ｋｇ体重／日、好ましくは、５～２０００ｍｇ／ｋｇ体重／日、より好ましくは１０～１５００ｍｇ／ｋｇ体重／日、更に好ましくは１５～１０００ｍｇ／ｋｇ体重／日、更に好ましくは２０～８００ｍｇ／ｋｇ体重／日、最も好ましくは２５～４００ｍｇ／ｋｇ体重／日であることができる。
【0032】
また、本発明のＰＰＡＲγ２産生活性化剤等を用いる場合の投与量は、水性溶媒により得られた抽出物の凍結乾燥粉末として、０．１～１０００ｍｇ／ｋｇ体重／日、好ましくは０．５～５００ｍｇ／ｋｇ体重／日、より好ましくは１～２５０ｍｇ／ｋｇ体重／日、更に好ましくは３～１００ｍｇ／ｋｇ体重／日、更に好ましくは５～５０ｍｇ／ｋｇ体重／日、又は最も好ましくは８～３０ｍｇ／ｋｇ体重／日であることができる。
【0033】
もちろん、上記の投与法は一例であり、他の投与法であってもよい。ヒトへのＰＰＡＲγ２産生活性化剤等の投与方法、投与量、投与期間、及び投与間隔等は、管理された臨床治験によって決定されることが望ましい。
【0034】
本発明のＰＰＡＲγ２産生活性化剤等は、ヒトに対して投与することができるが、投与対象はヒト以外の動物であってもよく、イヌ、ネコ、ウサギ、ハムスター、モルモット、及びリス等のペット；牛及び豚等の家畜；マウス、ラット等の実験動物；並びに、動物園等で飼育されている動物等が挙げられる。
【0035】
本明細書における食品組成物の１つの態様としては、本発明のＰＰＡＲγ２産生活性化剤と、食品材料とを含むＰＰＡＲγ２産生活性化用食品組成物を意味する。
本明細書において、食品組成物別の態様としては、本発明のアディポネクチン産生活性化剤と、食品材料とを含むアディポネクチン産生活性化用食品組成物を意味する。
本明細書において、食品組成物の別の態様としては、本発明のＭＣＰ－１産生抑制剤と、食品材料とを含むＭＣＰ－１産生抑制用食品組成物を意味する。
本明細書において、食品材料とは、カレー又はビールなどの完成した食品又は飲料、カレー又はビールなどの原料となるスパイス、又は味噌又は日本酒などのそのままでも食品又は飲料として食することが可能であり、且つ料理の原料としても用いることのできるものを含む。
本明細書において、食品組成物別の態様としては、本発明のアディポネクチン産生活性化剤と、食品材料とを含むアディポネクチン産生活性化用食品組成物を意味する。
本明細書において、食品組成物の別の態様としては、本発明のＭＣＰ－１産生抑制剤と、食品材料とを含むＭＣＰ－１産生抑制用食品組成物を意味する。
本明細書において、食品材料とは、カレー又はビールなどの完成した食品又は飲料、カレー又はビールなどの原料となるスパイス、又は味噌又は日本酒などのそのままでも食品又は飲料として食することが可能であり、且つ料理の原料としても用いることのできるものを含む。
【0036】
食品としては、具体的には、サラダなどの生鮮調理品；コロッケ、白身魚フライ、ピザ、ハンバーグなどの加熱調理品；野菜炒めなどの炒め調理品；トマト、ピーマン、セロリ、ニガウリ、ニンジン、ジャガイモ、及びアスパラガスなどの野菜及びこれら野菜を加工した調理品；クッキー、パン、ビスケット、乾パン、ケーキ、煎餅、羊羹、プリン、ゼリー、アイスクリーム類、チューインガム、クラッカー、チップス、チョコレート及び飴等の菓子類；うどん、パスタ、及びそば等の麺類；かまぼこ、ハム、及び魚肉ソーセージ等の魚肉練り製品；チーズ、クリーム、及びバターなどの乳製品；みそ、しょう油、ソース、ドレッシング、ケチャップ、マヨネーズ、スープの素、麺つゆ、カレー粉、塩こしょう、ごま塩、みりん、おでんの素、ルウ、シーズニングスパイス等の調味料類；豆腐などの大豆食品；こんにゃく；並びにサプリメントなどを挙げることができる。食品は、好ましくは、ソース（例えばカレー用、シチュー用、グラタン用、若しくはパスタ用のもと）ルウ（例えばカレー用若しくはシチュー用のもの）、ミックススパイス、シーズニングスパイス、又はサプリメントである。更に、食品には、例えばカルダモン抽出物を噴霧したスパイスなども含まれる。
【0037】
飲料としては、例えばコーヒー飲料；ココア飲料；前記の野菜から得られる野菜ジュース；グレープフルーツジュース、オレンジジュース、ブドウジュース、及びレモンジュース等の果汁飲料；緑茶、紅茶、煎茶、及びウーロン茶等の茶飲料；ビール、ワイン（赤ワイン、白ワイン、又はスパークリングワインなど）、清酒、梅酒、発泡酒、ウィスキー、ブランデー、焼酎、ラム、ジン、及びリキュール類等のアルコール飲料；乳飲料；豆乳飲料；流動食；並びにスポーツ飲料などを挙げることができる。飲料は、好ましくは、スパイスティー（例えばハーブティー又はチャイ）である。
【0038】
本発明の食品組成物は、例えば粉末状、顆粒状、固形状、液状、カプセル状、ペースト状、ゲル状、又は錠剤状であることができる。
【0039】
これらの食品又は飲料には、所望により、酸化防止剤、香料、酸味料、着色料、乳化剤、保存料、調味料、甘味料、香辛料、ｐＨ調整剤、安定剤、酸化防止剤、植物油、動物油、糖及び糖アルコール類、ビタミン、有機酸、果汁エキス類、野菜エキス類、穀類、豆類、野菜類、肉類、魚介類等の食品添加物及び食品素材を単独で又は２種以上組み合わせて配合することができる。これらの食品素材及び食品添加物の配合量は、本発明の目的を損なわない範囲内で適宜決定することができる。
【0040】
これらの食品又は飲料は、例えばレトルト及びオートクレーブなどの加熱加圧滅菌、バッチ式殺菌、プレート殺菌、通電加熱殺菌、マイクロ波加熱殺菌、並びに、インジェクション及びインフュージョンなどのスチーム殺菌などの一般的な殺菌処理を行うことができる。
【0041】
食品及び飲料には、機能性食品（飲料）及び健康食品（飲料）が含まれる。本明細書において「健康食品（飲料）」とは、健康に何らかの効果を与えるか、あるいは、効果を期待することができる食品又は飲料を意味し、「機能性食品（飲料）」とは、前記「健康食品（飲料）」の中でも、生体調節機能（すなわち、免疫賦活機能）を充分に発現することができるように設計及び加工された食品又は飲料を意味する。機能性食品及び健康食品は、顆粒状、固形状、液状、カプセル状、ゲル状、又は錠剤状であることができる。
【0042】
食品又は飲料には、動物に対する飼料が含まれる。対象となる動物は、例えばヒトなどの霊長類、ウシ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、ウマ、イヌ、ネコ、ウサギ、ラット、又はマウス等が挙げられる。
【実施例0043】
以下、実施例によって本発明を具体的に説明するが、これらは本発明の範囲を限定するものではない。
【0044】
《実施例１》
本実施例では、カルダモンからエタノール抽出物を調製した。
カルダモンの種子の粉末を１００ｍｇ／ｍＬとなるように１００％エタノールに懸濁し、１時間の超音波処理を２回行うことにより抽出を行った。抽出後遠心により上清を回収した。エバポレーターで溶媒を乾固し、残留物の重量を測定した後に、１００ｍｇ／ｍＬとなるようにジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）に溶解し、試験サンプルを得た。
本実施例では、カルダモンからエタノール抽出物を調製した。
カルダモンの種子の粉末を１００ｍｇ／ｍＬとなるように１００％エタノールに懸濁し、１時間の超音波処理を２回行うことにより抽出を行った。抽出後遠心により上清を回収した。エバポレーターで溶媒を乾固し、残留物の重量を測定した後に、１００ｍｇ／ｍＬとなるようにジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）に溶解し、試験サンプルを得た。
【0045】
《実施例２》
本実施例では、マウス細胞を用いて、カルダモンのエタノール抽出物のＭＣＰ－１産生に対する作用を検討した。
マウス由来３Ｔ３－Ｌ１前駆脂肪細胞を用い、図１のスキーム１に示すように、脂肪細胞への分化誘導剤処理開始と同時にカルダモン抽出物を５０μｇ／ｍＬの濃度で添加し、８日後に細胞を回収した。分化誘導処理は、誘導開始０～２日目までは、ＭＤＩ分化誘導剤として、３－イソブチル－１－メチルキサンチン（５００μＭ）、デキサメタゾン（０．２５μＭ）、インスリン（５μｇ／ｍＬ）を、２日目以降はインスリン５μｇ／ｍＬ）のみを添加することによって行った。コントロール（比較例）には、カルダモン抽出物を添加しなかった。
また、成熟脂肪細胞への効果を評価するため、図１のスキーム２に示すように、脂肪細胞に分化した３Ｔ３－Ｌ１脂肪細胞（分化誘導後６日目）に、カルダモン抽出物を５０μｇ／ｍＬの濃度で添加し、２日後に細胞と培養液を回収した。コントロール（比較例）には、カルダモン抽出物を添加しなかった。
本実施例では、マウス細胞を用いて、カルダモンのエタノール抽出物のＭＣＰ－１産生に対する作用を検討した。
マウス由来３Ｔ３－Ｌ１前駆脂肪細胞を用い、図１のスキーム１に示すように、脂肪細胞への分化誘導剤処理開始と同時にカルダモン抽出物を５０μｇ／ｍＬの濃度で添加し、８日後に細胞を回収した。分化誘導処理は、誘導開始０～２日目までは、ＭＤＩ分化誘導剤として、３－イソブチル－１－メチルキサンチン（５００μＭ）、デキサメタゾン（０．２５μＭ）、インスリン（５μｇ／ｍＬ）を、２日目以降はインスリン５μｇ／ｍＬ）のみを添加することによって行った。コントロール（比較例）には、カルダモン抽出物を添加しなかった。
また、成熟脂肪細胞への効果を評価するため、図１のスキーム２に示すように、脂肪細胞に分化した３Ｔ３－Ｌ１脂肪細胞（分化誘導後６日目）に、カルダモン抽出物を５０μｇ／ｍＬの濃度で添加し、２日後に細胞と培養液を回収した。コントロール（比較例）には、カルダモン抽出物を添加しなかった。
【0046】
回収した細胞の培養上清中のＭＣＰ－１産生を、MCP-1/CCL2 Mouse Uncoated ELISA Kit（インビトロジェン社）を用いて、添付のプロトコールに従って、測定した。
１次抗体溶液をＥＬＩＳＡ用９６ｗｅｌｌプレート（サーモフィッシャー社）に１００μＬ／ｗｅｌｌで分注し、４℃で一晩インキュベートした。１次抗体溶液を除去し、プレートをＴ－ＰＢＳ（－）で３回洗浄した。洗浄後、ＥＬＩＳＡ／ＥＬＩＳＰＯＴ液を２００μＬ／ｗｅｌｌで分注し、室温で１時間インキュベートした。
ＭＣＰ－１標準液をＥＬＩＳＡ／ＥＬＩＳＰＯＴ液で２段階希釈により、計８点の検量線溶液を作製した。細胞上清をＥＬＩＳＡ／ＥＬＩＳＰＯＴ液で５０倍希釈し、サンプル溶液を作製した。プレートをＴ－ＰＢＳ（－）で３回洗浄した。洗浄後、検量線溶液、サンプル溶液を１００μＬ／ｗｅｌｌで分注し、室温で２時間インキュベートした。
プレートをＴ－ＰＢＳ（－）で３回洗浄し、２次抗体溶液を１００μＬ／ｗｅｌｌで分注し、室温で１時間インキュベートした。プレートをＴ－ＰＢＳ（－）で３回洗浄し、Ａｖｉｄｉｎ－ＨＲＰ溶液を１００μＬ／ｗｅｌｌで分注し、室温で３０分間インキュベートした。
プレートをＴ－ＰＢＳ（－）で４回洗浄し、ＴＭＢ液を１００μＬ／ｗｅｌｌで分注し、十分に発色させた後に、０．５ＮのＨ２ＳＯ４を５０μＬ／ｗｅｌｌで分注し、発色反応を止めた。波長４５０ｎｍの吸光度を測定した（Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ：５９５ｎｍ）。
図２に示すように、脂肪細胞の分化誘導前及び分化誘導後のいずれにおいても、カルダモンは、ＭＣＰ－１産生を顕著に抑制した。
１次抗体溶液をＥＬＩＳＡ用９６ｗｅｌｌプレート（サーモフィッシャー社）に１００μＬ／ｗｅｌｌで分注し、４℃で一晩インキュベートした。１次抗体溶液を除去し、プレートをＴ－ＰＢＳ（－）で３回洗浄した。洗浄後、ＥＬＩＳＡ／ＥＬＩＳＰＯＴ液を２００μＬ／ｗｅｌｌで分注し、室温で１時間インキュベートした。
ＭＣＰ－１標準液をＥＬＩＳＡ／ＥＬＩＳＰＯＴ液で２段階希釈により、計８点の検量線溶液を作製した。細胞上清をＥＬＩＳＡ／ＥＬＩＳＰＯＴ液で５０倍希釈し、サンプル溶液を作製した。プレートをＴ－ＰＢＳ（－）で３回洗浄した。洗浄後、検量線溶液、サンプル溶液を１００μＬ／ｗｅｌｌで分注し、室温で２時間インキュベートした。
プレートをＴ－ＰＢＳ（－）で３回洗浄し、２次抗体溶液を１００μＬ／ｗｅｌｌで分注し、室温で１時間インキュベートした。プレートをＴ－ＰＢＳ（－）で３回洗浄し、Ａｖｉｄｉｎ－ＨＲＰ溶液を１００μＬ／ｗｅｌｌで分注し、室温で３０分間インキュベートした。
プレートをＴ－ＰＢＳ（－）で４回洗浄し、ＴＭＢ液を１００μＬ／ｗｅｌｌで分注し、十分に発色させた後に、０．５ＮのＨ２ＳＯ４を５０μＬ／ｗｅｌｌで分注し、発色反応を止めた。波長４５０ｎｍの吸光度を測定した（Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ：５９５ｎｍ）。
図２に示すように、脂肪細胞の分化誘導前及び分化誘導後のいずれにおいても、カルダモンは、ＭＣＰ－１産生を顕著に抑制した。
【0047】
更に、回収した細胞中のＭＣＰ－１遺伝子の発現を、Ｒｅａｌ－ｔｉｍｅ ＲＴ ＰＣＲによって測定した。
前培養した細胞上清を除去し、細胞表面をＰＢＳ（－）で洗浄した。細胞にSepasol RAN I Super G（ナカライテスク）を１ｍＬ加えてピッペッティングにより回収した。更にクロロホルムを２００μＬ加えて２分間激しく転倒混和した。混和後、１２，０００×ｇで１５分間遠心した。遠心後、水溶液層を４９８μＬ回収した。
回収した水溶液層に等量のプロパノールを加え、転倒混和した後１０分間氷上で静置した。その後１２，０００×ｇで１０分間遠心した。遠心後、上清を除去し、７５％エタノールを加えて転倒混和し、１２，０００×ｇで５分間遠心した。遠心後に上清を除去し、自然乾燥させた後に超純水を添加して氷上で１５分間静置した。分光光度計（BioSpec-nano, SHIMADZU）でｍＲＮＡ液の吸光度を測定し、液中ｍＲＮＡの濃度を求めた。
マイクロチューブに１００ｎｇのＲＮＡを含んだＲＮＡ水溶液を滅菌超純水で１３．５μＬにフィルアップし、０．５μＬのオリゴｄＴプライマーを添加した。ｍＲＮＡとオリゴｄＴプライマーの混合液を７０℃で５分間加熱後に４℃で冷却した。更に５μＬのｄＮＴＰと５μＬの５×逆転写反応緩衝液、０．５μＬのＲＮａｓｅインヒビター（インビトロジェン社）、０．２μＬの逆転写酵素（ニッポンジーン社）、０．３μＬの超純水を加えて４２℃で６０分間加熱した。その後、４℃で冷却した。反応終了後、超純水で４０倍に希釈した。
ＰＣＲ９６ｗｅｌｌプレートに、ｃＤＮＡを１μＬ、ＭＣＰ－１のフォワードプライマー（５’－ＣＣＡＣＴＣＡＣＣＴＧＣＴＧＣＴＡＣＴＣＡＴ－３’；配列番号１）とリバースプライマー（５’－ＴＧＣＴＧＡＴＣＣＴＣＴＧＴＡＧＣＴＣＴＣＣ－３’；配列番号２）をそれぞれ１μＬ、超純水を３μＬ、ＤＮＡ検出溶液を５μＬ加え、９５℃－１分、（９５℃－３秒、６０℃－３０秒）×４０サイクルの条件で反応させた。解析は比較Ｃｔ法を用いた。β－ａｃｔｉｎを内在性コントロールとして用い、目的遺伝子発現の補正に使用した。装置は、StepOne Plus（ライフテクノロジーズ社製）を用いた。
図３に示すように、脂肪細胞の分化誘導前及び分化誘導後のいずれにおいても、カルダモンは、ＭＣＰ－１遺伝子の発現を顕著に抑制した。
前培養した細胞上清を除去し、細胞表面をＰＢＳ（－）で洗浄した。細胞にSepasol RAN I Super G（ナカライテスク）を１ｍＬ加えてピッペッティングにより回収した。更にクロロホルムを２００μＬ加えて２分間激しく転倒混和した。混和後、１２，０００×ｇで１５分間遠心した。遠心後、水溶液層を４９８μＬ回収した。
回収した水溶液層に等量のプロパノールを加え、転倒混和した後１０分間氷上で静置した。その後１２，０００×ｇで１０分間遠心した。遠心後、上清を除去し、７５％エタノールを加えて転倒混和し、１２，０００×ｇで５分間遠心した。遠心後に上清を除去し、自然乾燥させた後に超純水を添加して氷上で１５分間静置した。分光光度計（BioSpec-nano, SHIMADZU）でｍＲＮＡ液の吸光度を測定し、液中ｍＲＮＡの濃度を求めた。
マイクロチューブに１００ｎｇのＲＮＡを含んだＲＮＡ水溶液を滅菌超純水で１３．５μＬにフィルアップし、０．５μＬのオリゴｄＴプライマーを添加した。ｍＲＮＡとオリゴｄＴプライマーの混合液を７０℃で５分間加熱後に４℃で冷却した。更に５μＬのｄＮＴＰと５μＬの５×逆転写反応緩衝液、０．５μＬのＲＮａｓｅインヒビター（インビトロジェン社）、０．２μＬの逆転写酵素（ニッポンジーン社）、０．３μＬの超純水を加えて４２℃で６０分間加熱した。その後、４℃で冷却した。反応終了後、超純水で４０倍に希釈した。
ＰＣＲ９６ｗｅｌｌプレートに、ｃＤＮＡを１μＬ、ＭＣＰ－１のフォワードプライマー（５’－ＣＣＡＣＴＣＡＣＣＴＧＣＴＧＣＴＡＣＴＣＡＴ－３’；配列番号１）とリバースプライマー（５’－ＴＧＣＴＧＡＴＣＣＴＣＴＧＴＡＧＣＴＣＴＣＣ－３’；配列番号２）をそれぞれ１μＬ、超純水を３μＬ、ＤＮＡ検出溶液を５μＬ加え、９５℃－１分、（９５℃－３秒、６０℃－３０秒）×４０サイクルの条件で反応させた。解析は比較Ｃｔ法を用いた。β－ａｃｔｉｎを内在性コントロールとして用い、目的遺伝子発現の補正に使用した。装置は、StepOne Plus（ライフテクノロジーズ社製）を用いた。
図３に示すように、脂肪細胞の分化誘導前及び分化誘導後のいずれにおいても、カルダモンは、ＭＣＰ－１遺伝子の発現を顕著に抑制した。
【0048】
《実施例３》
本実施例では、マウス細胞を用いて、カルダモンのエタノール抽出物のアディポネクチンに対する作用を検討した。
ＭＣＰ－１遺伝子用のプライマーに代えて、以下のアディポネクチン用のフォワードプライマー（５’－ＡＡＡＧＧＡＧＡＧＣＣＴＧＧＡＧＡＡＧＣ－３’；配列番号３）及びリバースプライマー（５’－ＣＧＡＡＴＧＧＧＴＡＣＡＴＴＧＧＧＡＡＣ－３’；配列番号４）を用いたことを除いては、実施例２のＭＣＰ－１遺伝子の検出の操作を繰り返した。
図４に示すように、脂肪細胞の分化誘導前及び分化誘導後のいずれにおいても、カルダモンは、アディポネクチン遺伝子の発現を顕著に増加させた。
本実施例では、マウス細胞を用いて、カルダモンのエタノール抽出物のアディポネクチンに対する作用を検討した。
ＭＣＰ－１遺伝子用のプライマーに代えて、以下のアディポネクチン用のフォワードプライマー（５’－ＡＡＡＧＧＡＧＡＧＣＣＴＧＧＡＧＡＡＧＣ－３’；配列番号３）及びリバースプライマー（５’－ＣＧＡＡＴＧＧＧＴＡＣＡＴＴＧＧＧＡＡＣ－３’；配列番号４）を用いたことを除いては、実施例２のＭＣＰ－１遺伝子の検出の操作を繰り返した。
図４に示すように、脂肪細胞の分化誘導前及び分化誘導後のいずれにおいても、カルダモンは、アディポネクチン遺伝子の発現を顕著に増加させた。
【0049】
《実施例４》
本実施例では、マウス細胞を用いて、カルダモンのエタノール抽出物のＰＰＡＲγに対する作用を検討した。
ＭＣＰ－１遺伝子用のプライマーに代えて、以下のＰＰＡＲγ用のフォワードプライマー（５’－ＡＡＣＴＣＴＧＧＧＡＧＡＴＴＣＴＣＣＴＧＴＴＧＡ－３’；配列番号５）及びリバースプライマー（５’－ＧＡＡＧＴＧＣＴＣＡＴＡＧＧＣＡＧＴＧＣＡＴ－３’；配列番号６）を用いたことを除いては、実施例２のＭＣＰ－１遺伝子の検出の操作を繰り返した。
図５に示すように、脂肪細胞の分化誘導前及び分化誘導後のいずれにおいても、カルダモンは、ＰＰＡＲγ遺伝子の発現を顕著に増加させた。
本実施例では、マウス細胞を用いて、カルダモンのエタノール抽出物のＰＰＡＲγに対する作用を検討した。
ＭＣＰ－１遺伝子用のプライマーに代えて、以下のＰＰＡＲγ用のフォワードプライマー（５’－ＡＡＣＴＣＴＧＧＧＡＧＡＴＴＣＴＣＣＴＧＴＴＧＡ－３’；配列番号５）及びリバースプライマー（５’－ＧＡＡＧＴＧＣＴＣＡＴＡＧＧＣＡＧＴＧＣＡＴ－３’；配列番号６）を用いたことを除いては、実施例２のＭＣＰ－１遺伝子の検出の操作を繰り返した。
図５に示すように、脂肪細胞の分化誘導前及び分化誘導後のいずれにおいても、カルダモンは、ＰＰＡＲγ遺伝子の発現を顕著に増加させた。
【産業上の利用可能性】
【0050】
本発明のＰＰＡＲγ２産生活性化剤はＰＰＡＲγの発現を増加させることができる、本発明のアディポネクチン産生活性化剤は、アディポネクチンの発現を増加させることができる。本発明のＭＣＰ－１産生抑制剤は、ＭＣＰ－１の発現を抑制することができる。
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【配列表】