特開 2022-127020 高純度月桃抽出物及びその製造方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公開特許公報(A)

(11)【公開番号】P2022127020

(43)【公開日】2022-08-31

(54)【発明の名称】高純度月桃抽出物及びその製造方法

(51)【国際特許分類】

   C07D 309/38 20060101AFI20220824BHJP

   A61K 36/9062 20060101ALI20220824BHJP

   A61K 8/9794 20170101ALI20220824BHJP

   A61K 31/366 20060101ALI20220824BHJP

   B01D 11/02 20060101ALI20220824BHJP

   B01D 9/02 20060101ALI20220824BHJP

   A61Q 19/00 20060101ALN20220824BHJP

   A61P 17/00 20060101ALN20220824BHJP

   A61K 8/49 20060101ALN20220824BHJP

   A23L 33/105 20160101ALN20220824BHJP

   A23L 33/10 20160101ALN20220824BHJP

   A61K 133/00 20060101ALN20220824BHJP

【ＦＩ】

C07D309/38

A61K36/9062

A61K8/9794

A61K31/366

B01D11/02 A

B01D9/02 601K

B01D9/02 606

B01D9/02 619Z

B01D9/02 602E

A61Q19/00

A61P17/00

A61K8/49

A23L33/105

A23L33/10

A61K133:00

【審査請求】未請求

【請求項の数】11

【出願形態】ＯＬ

(21)【出願番号】P 2021024930

(22)【出願日】2021-02-19

(71)【出願人】

【識別番号】521062240

【氏名又は名称】合同会社天然資源研究開発センター

(71)【出願人】

【識別番号】504145308

【氏名又は名称】国立大学法人 琉球大学

(74)【代理人】

【識別番号】100149032

【弁理士】

【氏名又は名称】森本 敏明

(72)【発明者】

【氏名】禹 済泰

(72)【発明者】

【氏名】山野 亜紀

(72)【発明者】

【氏名】照屋 俊明

【テーマコード（参考）】

4B018

4C083

4C086

4C088

4D056

【Ｆターム（参考）】

4B018MD07

4B018MD61

4B018ME14

4B018MF01

4B018MF14

4C083AA111

4C083AA112

4C083AC841

4C083AC842

4C083CC02

4C086AA04

4C086BA17

4C086MA02

4C086MA04

4C086ZA89

4C088AB81

4C088AC03

4C088BA10

4C088BA32

4C088CA08

4C088CA11

4C088CA12

4C088CA16

4C088CA23

4C088ZA89

4D056AB19

4D056AC06

4D056CA01

4D056CA14

4D056CA17

4D056CA18

4D056CA26

4D056CA31

4D056CA39

(57)【要約】

【課題】
本発明の目的は、従来技術と比較して、α－ピロン類の純度が高い月桃抽出物の製造方法を提供することにある。
【解決手段】
上記目的は、月桃乾燥物を、デヒドロカワイン可溶性溶媒を用いた抽出処理に供することにより、月桃粗抽出物を得る工程と、月桃粗抽出物を、加水処理及びアルカリ処理又は加水処理、アルカリ処理及び塩析に供することにより、月桃抽出物を得る工程とを含む、月桃抽出物の製造方法などにより解決される。
【選択図】図１

【特許請求の範囲】

【請求項1】

月桃乾燥物を、デヒドロカワイン可溶性溶媒を用いた抽出処理に供することにより、月桃粗抽出物を得る工程と、
月桃粗抽出物を、加水処理及びアルカリ処理に供することにより、月桃抽出物を得る工程と
を含む、月桃抽出物の製造方法。

【請求項2】

月桃乾燥物を、デヒドロカワイン可溶性溶媒を用いた抽出処理に供することにより、月桃粗抽出物を得る工程と、
月桃粗抽出物を、加水処理、アルカリ処理及び塩析に供することにより、月桃抽出物を得る工程と
を含む、月桃抽出物の製造方法。

【請求項3】

前記月桃粗抽出物は、前記抽出処理により得られた抽出液を固液分離処理及び／又は濃縮処理に供して得られる月桃粗抽出物である、請求項１～２のいずれか１項に記載の方法。

【請求項4】

前記塩析が、グルコース、スクロース及びマルトースからなる群から選ばれる少なくとも１種の糖類を用いた塩析である、請求項２～３のいずれか１項に記載の方法。

【請求項5】

前記デヒドロカワイン可溶性溶媒は、３０％（ｖ／ｖ）～９０％（ｖ／ｖ）の含水エタノールである、請求項１～４のいずれか１項に記載の方法。

【請求項6】

前記アルカリ処理は、最終濃度が０．５％（ｗ／ｖ）～６％（ｗ／ｖ）である水酸化ナトリウムを用いたアルカリ処理である、請求項１～５のいずれか１項に記載の方法。

【請求項7】

前記月桃抽出物は、ジヒドロ－５，６－デヒドロカワイン及び５，６－デヒドロカワインの合計含有量が８０％（ｗ／ｗ）以上である、請求項１～６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項8】

前記月桃抽出物は、ジヒドロ－５，６－デヒドロカワインの含有量が７０％（ｗ／ｗ）以上であり、及び／又は５，６－デヒドロカワインの含有量が１０％（ｗ／ｗ）以上である、請求項１～７のいずれか１項に記載の方法。

【請求項9】

前記月桃抽出物は、固形状の月桃抽出物である、請求項１～８のいずれか１項に記載の方法。

【請求項10】

ジヒドロ－５，６－デヒドロカワイン及び５，６－デヒドロカワインの合計含有量が８０％（ｗ／ｗ）以上であり、かつジヒドロ－５，６－デヒドロカワイン及び５，６－デヒドロカワインは月桃に由来する、月桃抽出物。

【請求項11】

前記月桃抽出物は、ジヒドロ－５，６－デヒドロカワインの含有量が８０％（ｗ／ｗ）以上であり、及び／又は５，６－デヒドロカワインの含有量が１０％（ｗ／ｗ）以上である、請求項１０に記載の月桃抽出物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、高純度月桃抽出物及びその製造方法に関する。

【背景技術】

【0002】

機能性表示食品における機能性関与成分の一つとして月桃葉抽出物が知られている。月桃葉抽出物の機能性は、肌が乾燥しがちな者の肌のうるおいに役立つという美肌効果であるとされている。

【0003】

月桃葉抽出物において、指標成分は、ジヒドロ－５，６－デヒドロカワイン及び５，６－デヒドロカワインの２種類のα－ピロン類である。月桃葉抽出物は、これらのα－ピロン類を含むことにより、線維芽細胞増殖促進作用、コラーゲン産生促進作用、コラーゲン分解酵素活性阻害作用を通じて、美肌効果を発揮すると考えられている。

【0004】

月桃葉抽出物の製造方法としては、月桃葉を含水エタノールに加えるエタノール抽出処理に供する方法、月桃葉を水に加えて加熱する熱水抽出処理に供する方法などが知られている（例えば、特許文献１を参照）。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0005】

【特許文献1】特開２００２－３０２４５３号公報

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0006】

しかし、特許文献１に記載の月桃葉をエタノール抽出処理又は熱水抽出処理に供する方法では、得られる抽出物においてはα－ピロン類の他に糖類、フラボノイドなどが含まれ、α－ピロン類の純度が低いという問題がある。

【0007】

そこで、本発明は、特許文献１に記載の方法に比べて、α－ピロン類の純度が高い月桃抽出物の製造方法を提供することを発明が解決しようとする課題とする。

【課題を解決するための手段】

【0008】

本発明者らは、上記課題を解決するために鋭意検討した結果、抽出処理に用いる月桃の状態及び抽出処理後のさらなる処理について着眼するに至った。そして、種々の状態の月桃を用いること、抽出処理物に対して種々の工程を適用することなどの試行錯誤を繰り返すことにより、驚くべきことに、月桃の乾燥物を用いて溶媒抽出処理を行った後、得られる溶媒抽出処理物を加水処理及びアルカリ処理に供することにより、α－ピロン類を高純度で含有する月桃抽出物が得られることを見出した。結果として、本発明者らは、月桃から、高純度のα－ピロン類を含有する月桃抽出物を製造する方法を創作することに成功した。本発明はこのような知見や成功例に基づいて完成された発明である。

【0009】

したがって、本発明によれば、以下の各態様の方法及び月桃抽出物が提供される。
［１］月桃乾燥物を、デヒドロカワイン可溶性溶媒を用いた抽出処理に供することにより、月桃粗抽出物を得る工程と、
月桃粗抽出物を、加水処理及びアルカリ処理に供することにより、月桃抽出物を得る工程と
を含む、月桃抽出物の製造方法。
［２］月桃乾燥物を、デヒドロカワイン可溶性溶媒を用いた抽出処理に供することにより、月桃粗抽出物を得る工程と、
月桃粗抽出物を、加水処理、アルカリ処理及び塩析に供することにより、月桃抽出物を得る工程と
を含む、月桃抽出物の製造方法。
［３］前記月桃粗抽出物は、前記抽出処理により得られた抽出液を固液分離処理及び／又は濃縮処理に供して得られる月桃粗抽出物である、［１］～［２］のいずれか１項に記載の方法。
［４］前記塩析が、グルコース、スクロース及びマルトースからなる群から選ばれる少なくとも１種の糖類を用いた塩析である、［２］～［３］のいずれか１項に記載の方法。
［５］前記デヒドロカワイン可溶性溶媒は、３０％（ｖ／ｖ）～９０％（ｖ／ｖ）の含水エタノールである、［１］～［４］のいずれか１項に記載の方法。
［６］前記アルカリ処理は、最終濃度が０．５％（ｗ／ｖ）～６％（ｗ／ｖ）である水酸化ナトリウムを用いたアルカリ処理である、［１］～［５］のいずれか１項に記載の方法。
［７］前記月桃抽出物は、ジヒドロ－５，６－デヒドロカワイン及び５，６－デヒドロカワインの合計含有量が８０％（ｗ／ｗ）以上である、［１］～［６］のいずれか１項に記載の方法。
［８］前記月桃抽出物は、ジヒドロ－５，６－デヒドロカワインの含有量が７０％（ｗ／ｗ）以上であり、及び／又は５，６－デヒドロカワインの含有量が１０％（ｗ／ｗ）以上である、［１］～［７］のいずれか１項に記載の方法。
［９］前記月桃抽出物は、固形状の月桃抽出物である、［１］～［８］のいずれか１項に記載の方法。
［１０］ジヒドロ－５，６－デヒドロカワイン及び５，６－デヒドロカワインの合計含有量が８０％（ｗ／ｗ）以上であり、かつジヒドロ－５，６－デヒドロカワイン及び５，６－デヒドロカワインは月桃に由来する、月桃抽出物。
［１１］前記月桃抽出物は、ジヒドロ－５，６－デヒドロカワインの含有量が８０％（ｗ／ｗ）以上であり、及び／又は５，６－デヒドロカワインの含有量が１０％（ｗ／ｗ）以上である、［１０］に記載の月桃抽出物。

【発明の効果】

【0010】

本発明の一態様の方法によれば、月桃を原料として、ジヒドロ－５，６－デヒドロカワイン、５，６－デヒドロカワインといったα－ピロン類を高純度で含有する月桃抽出物を製造することができる。また、本発明の方法で採用する処理操作は簡便かつ安全であることから、本発明の一態様の方法によれば、月桃抽出物を工業的規模で大量に製造することが可能である。したがって、本発明の一態様の方法は、工業的実用性、迅速性、安全性かつ経済性に優れた、高純度月桃抽出物を製造する方法である。

【0011】

本発明の一態様の方法によって得られる月桃抽出物は、固形状であり得ることから、多様な剤形に加工することができ、種々の飲食品及び化粧品に添加することができ、さらに保存性に優れたものであることから広く流通することが可能なものである。

【図面の簡単な説明】

【0012】

【図1】図１は、後述する実施例に記載されているとおりの、例１に係る月桃花を原料とする高純度月桃抽出物の製造方法の概要を示したフロー図である。

【図2】図２は、後述する実施例に記載されているとおりの、例２に係る月桃花を原料とする高純度月桃抽出物の製造方法の概要を示したフロー図である。

【図3】図３は、後述する実施例に記載されているとおりの、例３に係る月桃花を原料とする高純度月桃抽出物の製造方法の概要を示したフロー図である。

【図4】図４は、後述する実施例に記載されているとおりの、例４に係る月桃葉を原料とする高純度月桃抽出物の製造方法の概要を示したフロー図である。

【発明を実施するための形態】

【0013】

以下、本発明の各態様について詳細に説明するが、本発明はその目的を達成する限りにおいて種々の態様をとり得る。

【0014】

本明細書における各用語は、別段の定めがない限り、食品分野、化粧品分野などの当業者により通常用いられている意味で使用され、不当に限定的な意味を有するものとして解釈されるべきではない。また、本明細書においてなされている推測及び理論は、本発明者らのこれまでの知見及び経験によってなされたものであることから、本発明はこのような推測及び理論のみによって拘泥されるものではない。

【0015】

「及び／又は」との用語は、列記した複数の関連項目のいずれか１つ、又は２つ以上の任意の組み合わせ若しくは全ての組み合わせを意味する。
「含有量」は、濃度及び使用量（加えた量）と同義であり、月桃抽出物の全体量に対する成分の量の割合を意味する。ただし、成分の含有量の総量は、１００％を超えることはない。なお、「純度」は含有量と同義で使用される。すなわち、高純度の成分とは、月桃抽出物において高い割合を占める成分を意味する。
単位の「ｖｏｌ％」は「％（ｖ／ｖ）」及び「体積％」と同義である。単位の「ｗｔ％」は「％（ｗ／ｗ）」及び「質量％」と同義である。単位の「％（ｗ／ｖ）」は「質量体積％」と同義である。
数値範囲の「～」は、その前後の数値を含む範囲であり、例えば、「０％～１００％」は、０％以上であり、かつ、１００％以下である範囲を意味する。「超過」及び「未満」は、その前の数値を含まずに、それぞれ下限及び上限を意味し、例えば、「１超過」は１より大きい数値であり、「１００未満」は１００より小さい数値を意味する。
「含む」は、含まれるものとして明示されている要素以外の要素を付加できることを意味する（「少なくとも含む」と同義である）が、「からなる」及び「から本質的になる」を包含する。すなわち、「含む」は、明示されている要素及び任意の１種若しくは２種以上の要素を含み、明示されている要素からなり、又は明示されている要素から本質的になることを意味し得る。要素としては、成分、工程、条件、パラメーター等の制限事項等が挙げられる。

【0016】

整数値の桁数と有効数字の桁数とは一致する。例えば、１の有効数字は１桁であり、１０の有効数字は２桁である。また、小数値は小数点以降の桁数と有効数字の桁数は一致する。例えば、０．１の有効数字は１桁であり、０．１０の有効数字は２桁である。

【0017】

本明細書では、ジヒドロ－５，６－デヒドロカワインを「ＤＤＫ」とよび、５，６－デヒドロカワインを「ＤＫ」とよぶ場合がある。また、「デヒドロカワイン」は、ＤＤＫ及びＤＫのいずれか一方、又はＤＤＫ及びＤＫの組合せの総称である。なお、ＤＤＫ及びＤＫは以下の構造からなる化合物である。

【化1】

【0018】

本発明の一態様の方法は、デヒドロカワインを高純度で含有する月桃抽出物を製造する方法である。本発明の一態様の方法は、原料である月桃を、溶媒抽出処理、加水処理及びアルカリ処理又は溶媒抽出処理、加水処理、アルカリ処理及び塩析に供することにより、月桃抽出物として、デヒドロカワイン含有物を得ることを特徴とする。

【0019】

本発明の方法の第１の態様は、以下の工程（１）及び（２）を含む。
（１）月桃乾燥物を、デヒドロカワイン可溶性溶媒を用いた抽出処理に供することにより、月桃粗抽出物を得る工程
（２）月桃粗抽出物を、加水処理及びアルカリ処理に供することにより、月桃抽出物を得る工程

【0020】

本発明の方法の第２の態様は、以下の工程（１）及び（２）’を含む。
（１）月桃乾燥物を、デヒドロカワイン可溶性溶媒を用いた抽出処理に供することにより、月桃粗抽出物を得る工程
（２）’ 月桃粗抽出物を、加水処理、アルカリ処理及び塩析に供することにより、月桃抽出物を得る工程

【0021】

工程（１）では、月桃乾燥物を、デヒドロカワイン可溶性溶媒を用いた抽出処理に供することにより、月桃粗抽出物を得る。

【0022】

月桃（Ａｌｐｉｎｉａ ｚｅｒｕｍｂｅｔ）は、ゲットウともよばれており、九州南端から沖縄県、台湾から中国南部、東南アジア及びインドにかけて自生することで知られている常緑多年草の植物である。月桃は、線維芽細胞増殖促進作用、コラーゲン産生促進作用、コラーゲン分解酵素活性阻害作用があることが知られており、これらを通じた美肌効果を期待して摂取されている。また、月桃は、長期にわたりヒトに摂取されてきた実績のある天然植物であって安全性が高い。

【0023】

月桃の使用部位は、デヒドロカワインを含む部位であれば特に限定されず、例えば、葉、花、根、茎、果実、種子などが挙げられるが、好ましくはデヒドロカワインを多く含む葉、花及び根である。月桃は、葉、花、根などの１種の単独の部位であってもよいし、これらの２種以上の部位の組み合わせであってもよい。

【0024】

月桃は、採取したままの状態のものである場合、抽出処理の効率が低下する傾向にある。そこで、月桃としては、月桃を乾燥処理に供した月桃乾燥物を用いる。乾燥処理は特に限定されず、例えば、月桃の乾燥後の質量（乾燥質量）が、乾燥前の質量（湿質量）に対して１／１００～９／１０程度になるように乾燥する処理などが挙げられる。乾燥処理は、例えば、熱風乾燥、真空乾燥、低温真空乾燥、高圧蒸気乾燥、電磁波乾燥、凍結乾燥、風乾などの当業者に公知の任意の方法により行えばよい。月桃乾燥物の含水率は特に限定されないが、例えば、２０％以下であることが好ましく、１０％以下であることがより好ましい。

【0025】

月桃は、溶媒との接触面積を上げて抽出処理を効率的に行うという観点からは、細断、破砕、粉砕又はすり潰した状態のものであることが好ましい。月桃の細断、破砕、粉砕又はすり潰しの方法は特に限定されないが、例えば、カッター、スライサー、裁断機、クラッシャー、ブレンダー、ミキサー、ミル、グラインダー、ニーダー、乳鉢、石臼などを用いる方法などを挙げることができる。

【0026】

工程（１）で用いる月桃乾燥物は、月桃として根、茎、種子などを用いる場合、抽出処理の効率をより良くするために、粉末状の月桃乾燥物であることが好ましい。粉末状の月桃乾燥物を得るに際して、乾燥処理と粉砕処理とは同時に行ってもよく、又はいずれか一方の処理を先に行ってから、他方の処理を行ってもよいが、作業の簡便性から乾燥処理を先に行った後に粉砕処理を行うことが好ましい。

【0027】

デヒドロカワイン可溶性溶媒は、デヒドロカワインを溶解することができる溶媒であれば特に限定されず、例えば、デヒドロカワインに易溶性の溶媒、具体的には水；メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、ブタノールなどの低級アルコール；酢酸エチル、酢酸メチルなどの低級エステル；ジメチルスルホキシド、アセトニトリル、アセトン、ヘキサン、グリセリン、プロピレングリコールなどが挙げられる。デヒドロカワイン可溶性溶媒は、これらの１種の単独であってもよいし、これらの２種以上の組合せであってもよい。

【0028】

デヒドロカワイン可溶性溶媒は、抽出効率、安全性及び工業化の観点から、水及び低級アルコールが好ましく、水、エタノール及びメタノールがより好ましく、水及びエタノールがさらに好ましく、水及びエタノールの混合溶媒である含水エタノールであることがなおさらに好ましい。

【0029】

デヒドロカワイン可溶性溶媒として含水エタノールを用いる場合、エタノールの含有量は２０ｖｏｌ％～１００ｖｏｌ％が好ましく、良好な抽出効率、安全性及び工業化の観点から、３０ｖｏｌ％～９０ｖｏｌ％がより好ましく、４０ｖｏｌ％～８０ｖｏｌ％がさらに好ましく、５０ｖｏｌ％～７０ｖｏｌ％がなおさらに好ましい。ただし、含水エタノール中におけるエタノールの含有量が２０ｖｏｌ％未満の場合、デヒドロカワインを効率的に抽出することが困難になるおそれがある。

【0030】

抽出条件としては、月桃乾燥物中のデヒドロカワインが溶媒に溶解するのに適した条件であれば特に限定されず、月桃乾燥物の状態（例えば、含水率）及び使用量に応じて、デヒドロカワイン可溶性溶媒の種類及び使用量を適宜設定できるが、例えば、月桃乾燥物に対して１倍容量～２０倍容量の、好ましくは２倍容量～１５倍容量の、より好ましくは３倍容量～１０倍容量のデヒドロカワイン可溶性溶媒中に月桃乾燥物を所定時間浸漬させることなどが挙げられる。こうした抽出操作においては、抽出効率を高めるべく、必要に応じて撹拌操作、加温などを行ってもよい。

【0031】

抽出処理の具体的な条件としては、容器内に月桃乾燥物及び月桃乾燥物に対して３倍容量～１０倍容量の５０ｖｏｌ％～７０ｖｏｌ％の含水エタノールを入れて、１０℃～４０℃、好ましくは室温（２０℃～３０℃）で、数時間～数日間、好ましくは１２時間～１０日間の条件で、静置又は撹拌することにより実施できるが、これに限定されない。

【0032】

月桃乾燥物を、上記した抽出処理に供することにより、抽出液及び抽出残渣を得ることができる。抽出処理の後に固液分離処理を行うことで、抽出液と抽出残渣とを効率良く分離することができる。固液分離手段は特に限定されないが、例えば、ろ過、遠心分離などの公知の固液分離手段を利用することができる。

【0033】

デヒドロカワイン可溶性溶媒として有機溶媒を用いた場合は、有機溶媒を揮散することなどを目的として、抽出液を濃縮処理に供することが好ましい。濃縮処理は、有機溶媒を除去し、さらに液体を減容化する通常知られる処理であれば特に限定されず、例えば、減圧下で常温に置くこと、低温真空下におくこと、加熱すること、凍結乾燥することなどが挙げられる。濃縮の程度は特に限定されないが、例えば、１／１，０００～１／１０程度、好ましくは１／１００～１／１０にまで減容化すればよく、乾固状態になるまで液体成分を揮散させてもよい。

【0034】

抽出処理は１回であってもよいが、ＤＤＫ及び／又はＤＫの回収率を高めるに、抽出処理は２回又はそれ以上であることが好ましく、作業負荷及び経済性の観点から抽出処理は２回であることがより好ましい。例えば、月桃乾燥物を１回目の抽出処理に供して、第１の抽出液及び第１の抽出残渣を得て、次いで得られた第１の抽出残渣を２回目の抽出処理に供して、第２の抽出液及び第２の抽出残渣を得ることを、工程（１）として実施してもよい。

【0035】

抽出処理を２回以上行う場合、各抽出処理は互いに同じ条件で行ってもよいし、違う条件で行ってもよい。各抽出処理で得られた抽出液は、まとめて次の工程に一つの月桃粗抽出物として用いることができる。抽出液を固液分離処理及び／又は濃縮処理に供する場合は、各抽出液を固液分離処理及び／又は濃縮処理に供してもよいし、各抽出液をまとめたものを固液分離処理及び／又は濃縮処理に供してもよい。

【0036】

以上のように、月桃乾燥物を抽出処理に供することにより、好ましくは２回以上の抽出処理に供することにより、より好ましくは２回の抽出処理の後に各抽出液を固液分離処理及び濃縮処理に供してまとめることにより、月桃粗抽出物を得る。

【0037】

月桃粗抽出物におけるデヒドロカワインの含有量は特に限定されないが、例えば、０．１質量％以上であることが好ましく、０．５質量％以上であることがより好ましく、１．０質量％以上であることがさらに好ましく、２．０質量％以上であることがなおさらに好ましい。

【0038】

工程（２）では、工程（１）によって得られた月桃粗抽出物を、加水処理及びアルカリ処理に供することにより、月桃抽出物を得る。月桃粗抽出物を加水処理及びアルカリ処理に供することにより、月桃粗抽出物中の水溶性成分及び脂肪酸などの夾雑物成分を除去し、不溶解物（沈殿物）としてデヒドロカワインを高濃度で含有する月桃抽出物を得ることができる。

【0039】

加水処理は、月桃粗抽出物に水を加える条件であれば特に限定されず、例えば、月桃粗抽出物に対して１倍容量～２０倍容量の水、好ましくは２倍容量～１５倍容量の水、より好ましくは４倍容量～１０倍容量の水、さらに好ましくは６倍容量～８倍容量の水と月桃粗抽出物とを接触させることにより実施できる。この際の温度及び時間は特に限定されず、例えば、１０℃～３０℃で、数秒間～数分間～数時間にて実施すればよい。

【0040】

アルカリ処理は、月桃粗抽出物中の夾雑物を分解し、さらにデヒドロカワインを不溶性成分として析出し得る条件で実施すれば特に限定されず、例えば、月桃粗抽出物とアルカリ成分とを含む水溶液を、１０℃～３０℃、好ましくは室温で、数時間～数日間、撹拌及び／又は静置することにより実施できる。

【0041】

アルカリ処理で使用するアルカリ成分は、月桃粗抽出物中の夾雑物を分解し、かつ、デヒドロカワインを溶解しないものであれば特に限定されず、例えば、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウムなどが挙げられるが、強アルカリであり、かつ経済性が良いことから水酸化ナトリウムが好ましい。

【0042】

アルカリ処理によるアルカリ成分の使用量は、デヒドロカワインを析出し得る量であれば特に限定されないが、例えば、アルカリ成分が水酸化ナトリウムであれば、最終濃度が０．１％（ｗ／ｖ）～１０％（ｗ／ｖ）、好ましくは０．５％（ｗ／ｖ）～８％（ｗ／ｖ）、より好ましくは０．５％（ｗ／ｖ）～６％（ｗ／ｖ）になるような量である。アルカリ処理によるアルカリ成分の使用量は、ｐＨを指標として、ｐＨがアルカリ側、好ましくは１２～１４、より好ましくは１４付近になるような量であることが好ましい。

【0043】

工程（２）では、加水処理及びアルカリ処理を、アルカリ水溶液を使用することにより、同時的に実施してもよい。例えば、水に水酸化ナトリウムを溶解した水溶液に月桃粗抽出物を加えた後、さらに水の量が月桃粗抽出物に対して５倍容量～１０倍容量になるように調整して、１０℃～３０℃、好ましくは室温で、数時間～数日間撹拌し、好ましくは１時間～２４時間撹拌し、次いで数時間～数日間静置し、好ましくは１０時間～７日間静置することにより、工程（２）を実施することができる。。

【0044】

工程（２）’では、加水処理及びアルカリ処理に加えて、塩析を実施する。塩析をすることにより、効率的にデヒドロカワインを析出することができる。塩析は、デヒドロカワインを析出し得る条件で実施すれば特に限定されず、例えば、月桃粗抽出物と塩類とを含む水溶液を、１０℃～３０℃、好ましくは室温で、数時間～数日間、撹拌及び／又は静置することにより実施できる。

【0045】

塩析で使用する塩類は、デヒドロカワインよりも水和力の高い水溶性の物質であれば特に限定されないが、例えば、有機塩及び無機塩などが挙げられ、腐食性及び安全性の観点からグルコース、スクロース、マルトースなどの糖類であることが好ましく、グルコースであることがより好ましい。

【0046】

塩析で使用する塩類の使用量は、デヒドロカワインが固形分として析出し得る量であれば特に限定されないが、例えば、塩類がグルコースであれば、最終濃度が０．１％（ｗ／ｖ）～１０％（ｗ／ｖ）、好ましくは０．５％（ｗ／ｖ）～５％（ｗ／ｖ）、より好ましくは０．５％（ｗ／ｖ）～２％（ｗ／ｖ）になるような量である。

【0047】

工程（２）’は、加水処理、アルカリ処理及び塩析を順次実施してもよく、これらの２種又は３種の処理を同時に実施してもよい。例えば、水に水酸化ナトリウム及び塩類を溶解した水溶液に月桃粗抽出物を加えた後、さらに水の量が月桃粗抽出物に対して５倍容量～１０倍容量になるように調整して、１０℃～３０℃、好ましくは室温で、数時間～数日間撹拌し、好ましくは１時間～２４時間撹拌し、次いで数時間～数日間静置し、好ましくは１０時間～７日間静置することにより、工程（２）’を実施することができる。

【0048】

工程（２）及び工程（２）’は、複数回の実施がなくとも、１回の実施により、高純度のデヒドロカワインを含有する月桃抽出物が得られ得るが、複数回実施してもよい。月桃抽出物は、沈殿物として、固形状で、具体的には粉末状で得られ得る。得られた粉末状の月桃抽出物を含む水溶液を、固液分離処理及び／又は乾燥処理に供することにより、効率良く粉末状の月桃抽出物を回収することができる。月桃抽出物は、例えば、経口用組成物又は外用組成物の原料として使用する場合には、水などで洗浄することが好ましい。

【0049】

本発明の一態様の方法によって得られる月桃抽出物におけるデヒドロカワインの含有量は特に限定されないが、例えば、月桃抽出物の乾燥質量あたり７０ｗｔ％以上であることが好ましく、８０ｗｔ％以上であることがより好ましく、９０ｗｔ％以上であることがさらに好ましく、９５ｗｔ％以上であることがなおさらに好ましい。また、月桃抽出物におけるデヒドロカワインの回収率は、例えば、月桃粗抽出物中のデヒドロカワインの含有量に対して３０％以上であることが好ましく、４０％以上であることがより好ましく、８０％以上であることがさらに好ましく、９０％以上であることがなおさらに好ましい。なお、これらの上限は特に限定されないが、典型的にはそれぞれ１００ｗｔ％及び１００％である。

【0050】

月桃の部位によってＤＤＫ及びＤＫの含有量は異なる。月桃の花を用いた場合はＤＤＫ及びＤＫの両方を含む月桃抽出物が得られ、月桃の葉を用いた場合はＤＤＫを含む月桃抽出物が得られる傾向にある。

【0051】

月桃の花を用いた場合は、月桃抽出物におけるＤＤＫの含有量は、例えば、月桃抽出物の乾燥質量あたり、６０ｗｔ％以上であることが好ましく、７０ｗｔ％以上であることがより好ましく、８０ｗｔ％以上であることがさらに好ましい。また、この場合の月桃抽出物におけるＤＤＫの回収率は、例えば、月桃粗抽出物中のＤＤＫの含有量に対して３０％以上であることが好ましく、４０％以上であることがより好ましく、８０％以上であることがさらに好ましく、９０％以上であることがなおさらに好ましい。なお、これらの上限は特に限定されないが、典型的にはそれぞれ１００ｗｔ％及び１００％である。

【0052】

月桃の花を用いた場合は、月桃抽出物におけるＤＫの含有量は、例えば、月桃抽出物の乾燥質量あたり、５ｗｔ％以上であることが好ましく、１０ｗｔ％以上であることがより好ましく、１２ｗｔ％以上であることがさらに好ましい。また、この場合の月桃抽出物におけるＤＫの回収率は、例えば、月桃粗抽出物中のＤＫの含有量に対して１０％以上であることが好ましく、２０％以上であることがより好ましく、４０％以上であることがさらに好ましく、６０％以上であることがなおさらに好ましい。なお、これらの上限は特に限定されないが、典型的にはそれぞれ１００ｗｔ％及び１００％である。

【0053】

月桃の葉を用いた場合は、月桃抽出物におけるＤＤＫの含有量は、例えば、月桃抽出物の乾燥質量あたり、６０ｗｔ％以上であることが好ましく、７０ｗｔ％以上であることがより好ましく、８０ｗｔ％以上であることがさらに好ましく、９０ｗｔ％以上であることがなおさらに好ましい。また、この場合の月桃抽出物におけるＤＤＫの回収率は、例えば、月桃粗抽出物中のＤＤＫの含有量に対して３０％以上であることが好ましく、４０％以上であることがより好ましく、８０％以上であることがさらに好ましく、９０％以上であることがなおさらに好ましい。なお、これらの上限は特に限定されないが、典型的にはそれぞれ１００ｗｔ％及び１００％である。また、この場合の月桃抽出物におけるＤＫの含有量は、１ｗｔ％以下である。

【0054】

月桃抽出物中に含まれるデヒドロカワインの確認及び定量は、後述する実施例に記載の高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）により行うことができる。

【0055】

本発明の一態様の方法は、本発明の課題を解決し得る限り、上記した工程の前段若しくは後段又は工程中に、種々の工程や操作を加入することができる。

【0056】

以下に、本発明の具体的態様として、月桃の花の乾燥物を原料として、デヒドロカワインを含有する月桃抽出物を製造する方法を説明するが、本発明の一態様の方法は以下のものに限定されない。

【0057】

開花した頃（５月～７月）に採取した月桃の花を、低温真空乾燥処理に供して含水率が１０％以下になるように乾燥させる。月桃花乾燥物の所定量を、月桃花乾燥物に対して３倍容量～１０倍容量の５０ｖｏｌ％～７０ｖｏｌ％の含水エタノールを加えて、室温で１２時間～１０日間静置して、抽出処理を実施し、得られた抽出液についてろ過して月桃残渣を取り除いた後、得られたろ液を減圧濃縮に供することによって、第１の月桃粗抽出物を得る。また、月桃残渣について同様の抽出処理を実施して、第２の月桃粗抽出物を得る。第１の月桃粗抽出物と第２の月桃粗抽出物とを混合して、以下の工程に用いる。

【0058】

次いで、得られた月桃粗抽出物に、水酸化ナトリウム及びグルコースを溶解した水溶液を加え、さらに月桃粗抽出物に対して５倍容量～１０倍容量になるように水を加える。得られた水溶液の水酸化ナトリウムの最終濃度は０．５％（ｗ／ｖ）～６％（ｗ／ｖ）であり、グルコースの最終濃度は０．５％（ｗ／ｖ）～２％（ｗ／ｖ）である。次いで、得られた水溶液を、室温で、１時間～２４時間撹拌し、次いで１０時間～５日間静置することにより、沈殿物として月桃抽出物を得る。得られた月桃抽出物をろ過処理及び凍結乾燥処理に供することにより、粉末状の月桃抽出物を得る。得られた月桃抽出物のデヒドロカワインの含有量は、月桃抽出物の乾燥質量あたり９０ｗｔ％以上にすることが可能である。

【0059】

本発明の一態様の方法で製造される月桃抽出物は、別の態様として、本発明に包含され得る。本発明の月桃抽出物は、ＤＤＫ及び／又はＤＫの含有量の合計が所定の量であり、かつ、含有するＤＤＫ及び／又はＤＫが原料である月桃に由来することに特徴がある。

【0060】

本発明の一態様の月桃抽出物は、ＤＤＫ及びＤＫの含有量の合計は、例えば、８０ｗｔ％以上であり、好ましくは９０ｗｔ％以上であり、より好ましくは９５ｗｔ％以上である。該含有量の上限は特に限定されず、典型的には１００ｗｔ％である。

【0061】

本発明の一態様の月桃抽出物は、ＤＤＫの含有量が、月桃抽出物の乾燥質量あたり、７０ｗｔ％以上であることが好ましく、８０ｗｔ％以上であることがより好ましく、９０ｗｔ％以上であることがさらに好ましい。本発明の一態様の月桃抽出物は、ＤＫの含有量が、月桃抽出物の乾燥質量あたり、５ｗｔ％以上であることが好ましく、１０ｗｔ％以上であることがより好ましく、１２ｗｔ％以上であることがさらに好ましい。ただし、本発明の一態様の月桃抽出物は、ＤＤＫ及びＤＫの両方を含んでいることが好ましいが、ＤＤＫ及びＤＫのいずれか一方を含んでいればよい。

【0062】

本発明の一態様の月桃抽出物が含有するＤＤＫ及びＤＫは、その両方が原料である月桃に由来することに特徴がある。換言すれば、本発明の一態様の月桃抽出物は、月桃以外の天然物の抽出又は合成により得られたＤＤＫ及びＤＫを含まないことに特徴がある。

【0063】

本発明の一態様の月桃抽出物の用途は特に限定されず、例えば、デヒドロカワインが有する薬理作用を期待して、飲食品、医薬品といった経口用組成物、化粧品といった外用組成物などの各組成物の原料又は該組成物そのものとして利用され得る。

【0064】

以下、本発明を実施例によりさらに詳細に説明するが、本発明はこれら実施例に限定されるものではなく、本発明の課題を解決し得る限り、本発明は種々の態様をとることができる。

【実施例0065】

［月桃抽出物の定量］
ジヒドロ－５，６－デヒドロカワイン（ＤＤＫ）及び５，６－デヒドロカワイン（ＤＫ）の含有量（ｍｇ）は、ＨＰＬＣ法により、カラムとしてＣＯＳＭＯＳＩＬ ５Ｃ１８－ＡＲ－２カラムを用い、及び移動相としてＭｅＯＨ：Ｈ_２Ｏ＝６０：４０～１００：０を用いて、流速を１ｍｌ／ｍｉｎとし、ＤＤＫを測定波長２７８．０ｎｍに設定して約１２分、ＤＫを測定波長３１８ｎｍに設定して約１７分のリテンション・タイムを有するピークとして検量線法により測定した。

【0066】

［例１．月桃花を原料とする高純度月桃抽出物の製造（１）］
例１として、１００ｇスケール、水酸化ナトリウム ４％（ｗ／ｖ）、グルコース １％（ｗ／ｖ）の系で実施した、月桃花を原料とする高純度月桃抽出物の製造方法の概要を示したフロー図を図１に示す。

【0067】

月桃花を、４０℃、５時間の条件にて低温真空乾燥処理に供して、乾燥花（含水率 ３％～８％）を得た。乾燥花 １００．０ｇを、６０％（ｖ／ｖ）含水エタノール ５００ｍＬに入れて、室温で、１日間静置するエタノール抽出処理に供し、次いでフィルター（孔径５μｍ）を用いたろ過処理に供することにより、ろ液（１） ２２４．１ｇ及びろ過残渣（１） ３２５．９ｇを得た。ろ液（１）の全量を減圧濃縮処理に供して、１回目抽出物として粗抽出物（１） ７ｇを得た。粗抽出物（１）におけるＤＤＫは４４８．６ｍｇであり、及びＤＫは１２０．３ｍｇであった。

【0068】

また、ろ過残渣（１）を、６０％（ｖ／ｖ）含水エタノール ５００ｍＬに入れて、室温で、１日間静置するエタノール抽出処理に供し、次いでフィルター（孔径５μｍ）を用いたろ過処理に供することにより、ろ液（２） ４６７．１ｇを得た。ろ液（２）の全量を減圧濃縮処理に供して、２回目抽出物として粗抽出物（２） ６ｇを得た。粗抽出物（２）におけるＤＤＫは３７５．５ｍｇであり、及びＤＫは１０５．４ｍｇであった。

【0069】

得られた粗抽出物（１）及び粗抽出物（２）を合わせた粗抽出物（１＋２）に、水酸化ナトリウム ４．０ｇ及びグルコース １．０ｇを加えた水溶液を加え、さらに水を加えて全量を１００ｍＬとした水溶液（ｐＨ １４）を、室温で、５時間撹拌（１５０ｒｐｍ）し、次いで１９時間静置するアルカリ処理及び塩析に供し、次いで遠心分離処理（２６００×ｇ、４，０００ｒｐｍ、１分間）に供し、得られた沈殿物を凍結乾燥処理に供することにより、粉末状の月桃抽出物 １，０１２．６ｍｇを得た。

【0070】

得られた月桃抽出物は、ＤＤＫ ８４３．５ｍｇ（純度８３．３％）及びＤＫ １５５．３ｍｇ（純度１５．３％）を含むものであった。また、粗抽出物（１＋２）に含まれるＤＤＫ及びＤＫの量を基準にすると、月桃抽出物におけるＤＤＫの回収率は１０３％であり、ＤＫの回収率は７０％であった。

【0071】

［例２．月桃花を原料とする高純度月桃抽出物の製造（２）］
例２として、３８．０ｋｇスケール、水酸化ナトリウム ４％（ｗ／ｖ）、グルコース １％（ｗ／ｖ）の系で実施した、月桃花を原料とする高純度月桃抽出物の製造方法の概要を示したフロー図を図２に示す。

【0072】

月桃花を、４０℃、５時間の条件の低温真空乾燥処理に供して、乾燥花（含水率 ３％～８％）を得た。乾燥花 ３８．０ｋｇを、６０％（ｖ／ｖ）含水エタノール １８０Ｌに入れて、室温で、７日間静置するエタノール抽出処理に供し、次いでフィルター（孔径２０μｍ）を用いたろ過処理に供することにより、ろ液（１） 約１２０Ｌ及びろ過残渣（１）を得た。ろ液（１）の全量を、４０℃、５時間の条件にて低温真空乾燥処理に供して、１回目抽出物として粗抽出物（１）を得た。粗抽出物（１）におけるＤＤＫは２００ｇであり、及びＤＫは６２ｇであった。

【0073】

また、ろ過残渣（１）を、６０％（ｖ／ｖ）含水エタノール １８０Ｌに入れて、室温で、７日間静置するエタノール抽出処理に供し、次いでフィルター（孔径２０μｍ）を用いたろ過処理に供することにより、ろ液（２） 約１５０Ｌを得た。ろ液（２）の全量を、４０℃、６時間の条件の低温真空乾燥処理に供して、２回目抽出物として粗抽出物（２）を得た。粗抽出物（２）におけるＤＤＫは８７ｇであり、及びＤＫは２７ｇであった。

【0074】

粗抽出物（１）及び粗抽出物（２）の全量を合わせた粗抽出物（１＋２）を低温真空乾燥処理に供した。

【0075】

抽出物（１＋２）に、水酸化ナトリウム １．５ｋｇ及びグルコース ３５０ｇを入れた水溶液を加え、さらに水を加えて全量を３８Ｌとした水溶液（ｐＨ １４）を、室温で、１５時間撹拌（１５０ｒｐｍ）し、次いで３日間静置するアルカリ処理に供し、次いで遠心分離処理（２６００×ｇ、４，０００ｒｐｍ、１０分間）に供し、得られた沈殿物を凍結乾燥処理に供することにより、粉末状の月桃抽出物 １８９．５ｇを得た。

【0076】

得られた月桃抽出物は、ＤＤＫ １３４．５ｇ（純度７１．０％）及びＤＫ ２５．９ｇ（純度１３．７％）を含むものであった。また、粗抽出物（１＋２）に含まれるＤＤＫ及びＤＫの量を基準にすると、月桃抽出物におけるＤＤＫの回収率は４７％であり、ＤＫの回収率は２９％であった。

【0077】

［例３．月桃花を原料とする高純度月桃抽出物の製造（３）］
例３として、１００ｇスケール、水酸化ナトリウム １％（ｗ／ｖ）、グルコース未使用の系で実施した、月桃花を原料とする高純度月桃抽出物の製造方法の概要を示したフロー図を図３に示す。

【0078】

月桃花を、４０℃、５時間の条件にて低温真空乾燥処理に供して、乾燥花（含水率 ３％～８％）を得た。乾燥花 １００．０ｇを、６０％（ｖ／ｖ）含水エタノール ５００ｍＬに入れて、室温で、１日間静置するエタノール抽出処理に供し、次いでフィルター（孔径５μｍ）を用いたろ過処理に供することにより、ろ液（１）及びろ過残渣（１）を得た。

【0079】

ろ過残渣（１）を、６０％（ｖ／ｖ）含水エタノール ５００ｍＬに入れて、室温で、１日間静置するエタノール抽出処理に供し、次いでフィルター（孔径５μｍ）を用いたろ過処理に供することにより、ろ液（２）を得た。

【0080】

ろ液（１）及びろ液（２）を合わせたろ液（１＋２） ７１４．９ｇを減圧濃縮処理に供して、粗抽出物（１＋２） １３ｇを得た。粗抽出物（１＋２）におけるＤＤＫは８３８．９ｍｇであり、及びＤＫは２５２．３ｍｇであった。

【0081】

得られた粗抽出物（１＋２）に、水酸化ナトリウム １．０ｇを加えた水溶液を加え、さらに水を加えて全量を１００ｍＬとした水溶液（ｐＨ １０）を、室温で、５時間撹拌（１５０ｒｐｍ）し、次いで１９時間静置するアルカリ処理に供し、次いで遠心分離処理（２６００×ｇ、４，０００ｒｐｍ、１分間）に供し、得られた沈殿物を凍結乾燥処理に供することにより、粉末状の月桃抽出物 １２６５．９ｍｇを得た。

【0082】

得られた月桃抽出物は、ＤＤＫ ９３９．７ｍｇ（純度７４．２％）及びＤＫ １９０．９ｍｇ（純度１５．１％）を含むものであった。また、粗抽出物（１＋２）に含まれるＤＤＫ及びＤＫの量を基準にすると、月桃抽出物におけるＤＤＫの回収率は１１２％であり、ＤＫの回収率は７６％であった。

【0083】

［例４．月桃葉を原料とする高純度月桃抽出物の製造］
例４として、１００ｇスケール、水酸化ナトリウム ４％（ｗ／ｖ）、グルコース １％（ｗ／ｖ）の系で実施した、月桃葉を原料とする高純度月桃抽出物の製造方法の概要を示したフロー図を図４に示す。

【0084】

月桃葉を、熱乾燥処理に供して、乾燥葉を得た。乾燥葉 １００．０ｇを、６０％（ｖ／ｖ）含水エタノール ６００ｍＬに入れて、室温で、４日間静置するエタノール抽出処理に供し、次いでフィルター（孔径５μｍ）を用いたろ過処理に供することにより、ろ液（１） ２８２．７ｇ及びろ過残渣（１） ３５７．３ｇを得た。ろ液（１）の全量を減圧濃縮処理に供して、１回目抽出物として粗抽出物（１）を得た。粗抽出物（１）におけるＤＤＫは２２７．５ｍｇであったが、ＤＫは検出下限未満であった。

【0085】

また、ろ過残渣（１）を、６０％（ｖ／ｖ）含水エタノール ６００ｍＬに入れて、室温で、３日間静置するエタノール抽出処理に供し、次いでフィルター（孔径５μｍ）を用いたろ過処理に供することにより、ろ液（２） ４４８．６ｇを得た。ろ液（２）の全量を減圧濃縮処理に供して、２回目抽出物として粗抽出物（２）を得た。粗抽出物（２）におけるＤＤＫは１５０．８ｍｇであったが、ＤＫは検出下限未満であった。

【0086】

粗抽出物（１）及び粗抽出物（２）の全量を合わせた抽出物（１＋２）に、水酸化ナトリウム ４．０ｇ及びグルコース １．０ｇを溶解した水溶液を加え、さらに全量が１００ｍＬになるように水を加えて得られた水溶液（ｐＨ １４）を、室温で、５時間撹拌（１５０ｒｐｍ）し、次いで１９時間静置するアルカリ処理に供し、次いで遠心分離処理（２６００×ｇ、４，０００ｒｐｍ、１分間）に供し、得られた沈殿物を凍結乾燥処理に供することにより、粉末状の月桃抽出物 ３５２．８ｍｇを得た。

【0087】

得られた月桃抽出物は、ＤＤＫ ３４９．３ｍｇ（純度９９．０％）を含むものであった。また、粗抽出物（１＋２）に含まれるＤＤＫの量を基準にすると、月桃抽出物におけるＤＤＫの回収率は８２％であった。

【産業上の利用可能性】

【0088】

本発明の一態様の方法によって製造される月桃抽出物は、ジヒドロ－５，６－デヒドロカワイン及び５，６－デヒドロカワインを高純度で含有することにより、これらの薬理作用を期待して、飲食品、化粧品、医薬品、医薬部外品などに利用でき、特に経口剤、外用剤、注射剤、化粧水などとして、及びこれらに配合できる点で有用である。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】