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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公開特許公報(A)
(11)【公開番号】P2022184627
(43)【公開日】2022-12-13
(54)【発明の名称】セリシン含有粉末、及びその製造方法
(51)【国際特許分類】
C08J 3/12 20060101AFI20221206BHJP
A61K 38/17 20060101ALI20221206BHJP
A61P 19/02 20060101ALI20221206BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20221206BHJP
C07K 1/02 20060101ALI20221206BHJP
A61K 8/64 20060101ALN20221206BHJP
【ＦＩ】
C08J3/12 Z
A61K38/17
A61P19/02
A61P43/00 111
C07K1/02
A61K8/64
【審査請求】未請求
【請求項の数】7
【出願形態】ＯＬ
(21)【出願番号】P 2021092578
(22)【出願日】2021-06-01
(71)【出願人】
【識別番号】501203344
【氏名又は名称】国立研究開発法人農業・食品産業技術総合研究機構
(71)【出願人】
【識別番号】000004628
【氏名又は名称】株式会社日本触媒
(74)【代理人】
【識別番号】110002837
【氏名又は名称】弁理士法人アスフィ国際特許事務所
(72)【発明者】
【氏名】寺本 英敏
(72)【発明者】
【氏名】亀田 恒徳
(72)【発明者】
【氏名】虫賀 澄人
(72)【発明者】
【氏名】中之庄 正弘
【テーマコード（参考）】
4C083
4C084
4F070
4H045
【Ｆターム（参考）】
4C083AD411
4C083AD451
4C083EE16
4C084BA44
4C084CA43
4C084DC50
4C084ZC20
4F070AA62
4F070AB22
4F070DA33
4F070DC11
4H045AA10
4H045AA20
4H045BA10
4H045CA50
4H045GA01
4H045HA31
(57)【要約】
【課題】高分子量のセリシンを含有し、且つ含有されるセリシンの溶解性が良好なセリシン含有粉末、及びその製造方法を提供する。
【解決手段】ＳＤＳ－ＰＡＧＥ法により１５０ｋＤａ以上の分子量に対応する範囲に少なくとも１つのバンドが検出されるセリシンを含有し、含有されるセリシンの温度８０℃の水に対する溶解度が０．４５ｇ／水溶液１００ｇ以上であるセリシン含有粉末。
【選択図】なし
【解決手段】ＳＤＳ－ＰＡＧＥ法により１５０ｋＤａ以上の分子量に対応する範囲に少なくとも１つのバンドが検出されるセリシンを含有し、含有されるセリシンの温度８０℃の水に対する溶解度が０．４５ｇ／水溶液１００ｇ以上であるセリシン含有粉末。
【選択図】なし
【特許請求の範囲】
【請求項1】
ＳＤＳ－ＰＡＧＥ法により１５０ｋＤａ以上の分子量に対応する範囲に少なくとも１つのバンドが検出されるセリシンを含有し、含有されるセリシンの温度８０℃の水に対する溶解度が０．４５ｇ／水溶液１００ｇ以上であるセリシン含有粉末。
【請求項2】
アニオン性界面活性剤及び尿素から選ばれる少なくとも１種を含む請求項１に記載のセリシン含有粉末。
【請求項3】
前記アニオン性界面活性剤が、アルキル硫酸塩、アルケニル硫酸塩、アルキルエーテル硫酸塩、アルケニルエーテル硫酸塩、ポリオキシアルキレンアルキルエーテル硫酸塩、ポリオキシアルキレンアルケニルエーテル硫酸塩、アルキルスルホン酸塩、アルキルエーテルスルホン酸塩、及びＮ－アシルアミノ酸塩から選ばれる少なくとも１種である請求項１又は２に記載のセリシン含有粉末。
【請求項4】
前記アルキル硫酸塩、アルケニル硫酸塩、アルキルエーテル硫酸塩、アルケニルエーテル硫酸塩、ポリオキシアルキレンアルキルエーテル硫酸塩、及びポリオキシアルキレンアルケニルエーテル硫酸塩から選ばれる少なくとも１種が式（１）で表される化合物であり、前記Ｎ－アシルアミノ酸塩が式（２）で表される化合物である請求項３に記載のセリシン含有粉末。
（式中、Ｒ1は炭素数１～３のアルキレン基を示し、Ｒ2は炭素数８～２０のアルキル基又はアルケニル基を示す。ｎは０以上の整数を示し、Ｘ+は１価のカチオンを示す。
Ｒ3は炭素数８～２０のアルキル基を示し、Ｒ4は炭素数１～３のアルキル基を示す。ｍは０～３の整数を示し、Ｙ+は１価のカチオンを示す。）
【化1】
Ｒ3は炭素数８～２０のアルキル基を示し、Ｒ4は炭素数１～３のアルキル基を示す。ｍは０～３の整数を示し、Ｙ+は１価のカチオンを示す。）
【請求項5】
繭及び水を接触することによって得られるセリシン抽出液とアニオン性界面活性剤及び尿素から選ばれる少なくとも１種とを混合し、得られる混合物を乾燥するセリシン含有粉末の製造方法。
【請求項6】
アニオン性界面活性剤の存在下で繭と水とを接触させるセリシン抽出液の製造方法。
【請求項7】
尿素の存在下で繭と水とを接触させて得られるセリシン抽出液、又は請求項６に記載のセリシン抽出液を乾燥するセリシン含有粉末の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、セリシン含有粉末、及びその製造方法に関する。より詳しくは、本発明は、高分子量のセリシンを含有し、含有されるセリシンの溶解性に優れたセリシン含有粉末、及びその製造方法に関する。
【背景技術】
【0002】
蚕等が吐糸する繭糸は、セリシンとフィブロインという２種類のタンパク質から主に構成されている。このうち、フィブロインは繭の繊維を構成するタンパク質であり、セリシンはフィブロインが形成する繊維の外側を層状に覆い、その接着などに関わるタンパク質である。
【0003】
繭に含まれるセリシンは、例えば、絹糸の精練工程において繭をアルカリ性の熱水で煮てフィブロインを取り出す際に可溶化する。従って、通常、セリシンは、この精練工程の廃液から得られるが、加水分解によって低分子量化している。
【0004】
一方、低分子量化されたセリシンよりも高分子量のセリシンを含む方が、優れたチロシナーゼ阻害活性を示したり（引用文献１）、コラゲナーゼ阻害作用に優れたり（引用文献２）、エラスターゼ阻害作用に優れたり（引用文献３）することが知られている。
【0005】
また高分子量のセリシンを得る方法としては、１００℃を超える温度において尿素水溶液で抽出し、該抽出液から分子ふるいクロマトを用いる方法等でセリシンを分離する方法が知られている（引用文献４）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【0006】
【特許文献1】特開２０２０－４０９０５号公報
【特許文献2】特開２０２０－１３２５３９号公報
【特許文献3】特開２０２０－１３２５４０号公報
【特許文献4】特開平１１－９２５６４号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0007】
しかし一般的に、高分子量のセリシンは溶解性が悪いため、特に高分子量のセリシンが粉末状である場合には化粧品剤形等への配合が困難という課題があった。また高分子量のセリシンを水溶液で取得した場合も、経時的にゲル化してしまうため、安定な状態での取得や化粧品剤型等への配合が困難という課題があった。
本発明は、上記のような事情に着目してなされたものであって、その目的は、高分子量のセリシンを含有し、且つ含有されるセリシンの溶解性が良好なセリシン含有粉末、及びその製造方法を提供することにある。
本発明は、上記のような事情に着目してなされたものであって、その目的は、高分子量のセリシンを含有し、且つ含有されるセリシンの溶解性が良好なセリシン含有粉末、及びその製造方法を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【0008】
本発明の要旨は、以下の通りである。
［１］ ＳＤＳ－ＰＡＧＥ法により１５０ｋＤａ以上の分子量に対応する範囲に少なくとも１つのバンドが検出されるセリシンを含有し、含有されるセリシンの温度８０℃の水に対する溶解度が０．４５ｇ／水溶液１００ｇ以上であるセリシン含有粉末。
［２］ アニオン性界面活性剤及び尿素から選ばれる少なくとも１種を含む［１］に記載のセリシン含有粉末。
［３］ 前記アニオン性界面活性剤が、アルキル硫酸塩、アルケニル硫酸塩、アルキルエーテル硫酸塩、アルケニルエーテル硫酸塩、ポリオキシアルキレンアルキルエーテル硫酸塩、ポリオキシアルキレンアルケニルエーテル硫酸塩、アルキルスルホン酸塩、アルキルエーテルスルホン酸塩、及びＮ－アシルアミノ酸塩から選ばれる少なくとも１種である［１］又は［２］に記載のセリシン含有粉末。
［４］ 前記アルキル硫酸塩、アルケニル硫酸塩、アルキルエーテル硫酸塩、アルケニルエーテル硫酸塩、ポリオキシアルキレンアルキルエーテル硫酸塩、及びポリオキシアルキレンアルケニルエーテル硫酸塩から選ばれる少なくとも１種が式（１）で表される化合物であり、前記Ｎ－アシルアミノ酸塩が式（２）で表される化合物である［３］に記載のセリシン含有粉末。
（式中、Ｒ1は炭素数１～３のアルキレン基を示し、Ｒ2は炭素数８～２０のアルキル基又はアルケニル基を示す。ｎは０以上の整数を示し、Ｘ+は１価のカチオンを示す。
Ｒ3は炭素数８～２０のアルキル基を示し、Ｒ4は炭素数１～３のアルキル基を示す。ｍは０～３の整数を示し、Ｙ+は１価のカチオンを示す。）
［５］ 繭及び水を接触することによって得られるセリシン抽出液とアニオン性界面活性剤及び尿素から選ばれる少なくとも１種とを混合し、得られる混合物を乾燥するセリシン含有粉末の製造方法。
［６］ アニオン性界面活性剤の存在下で繭と水とを接触させるセリシン抽出液の製造方法。
［７］ 尿素の存在下で繭と水とを接触させて得られるセリシン抽出液、又は［６］に記載のセリシン抽出液を乾燥するセリシン含有粉末の製造方法。
［１］ ＳＤＳ－ＰＡＧＥ法により１５０ｋＤａ以上の分子量に対応する範囲に少なくとも１つのバンドが検出されるセリシンを含有し、含有されるセリシンの温度８０℃の水に対する溶解度が０．４５ｇ／水溶液１００ｇ以上であるセリシン含有粉末。
［２］ アニオン性界面活性剤及び尿素から選ばれる少なくとも１種を含む［１］に記載のセリシン含有粉末。
［３］ 前記アニオン性界面活性剤が、アルキル硫酸塩、アルケニル硫酸塩、アルキルエーテル硫酸塩、アルケニルエーテル硫酸塩、ポリオキシアルキレンアルキルエーテル硫酸塩、ポリオキシアルキレンアルケニルエーテル硫酸塩、アルキルスルホン酸塩、アルキルエーテルスルホン酸塩、及びＮ－アシルアミノ酸塩から選ばれる少なくとも１種である［１］又は［２］に記載のセリシン含有粉末。
［４］ 前記アルキル硫酸塩、アルケニル硫酸塩、アルキルエーテル硫酸塩、アルケニルエーテル硫酸塩、ポリオキシアルキレンアルキルエーテル硫酸塩、及びポリオキシアルキレンアルケニルエーテル硫酸塩から選ばれる少なくとも１種が式（１）で表される化合物であり、前記Ｎ－アシルアミノ酸塩が式（２）で表される化合物である［３］に記載のセリシン含有粉末。
【化1】
Ｒ3は炭素数８～２０のアルキル基を示し、Ｒ4は炭素数１～３のアルキル基を示す。ｍは０～３の整数を示し、Ｙ+は１価のカチオンを示す。）
［５］ 繭及び水を接触することによって得られるセリシン抽出液とアニオン性界面活性剤及び尿素から選ばれる少なくとも１種とを混合し、得られる混合物を乾燥するセリシン含有粉末の製造方法。
［６］ アニオン性界面活性剤の存在下で繭と水とを接触させるセリシン抽出液の製造方法。
［７］ 尿素の存在下で繭と水とを接触させて得られるセリシン抽出液、又は［６］に記載のセリシン抽出液を乾燥するセリシン含有粉末の製造方法。
【発明の効果】
【0009】
本発明によれば、高分子量のセリシンを含有しながらも、含有されるセリシンの溶解性（特に水に対する溶解性）が良好なセリシン含有粉末、及びその製造方法を提供することができる。本発明のセリシン含有粉末は含有されるセリシンの溶解性が良好であるため、化粧品剤形等への配合性が高く扱い易い。またセリシンを溶液の状態で保存すると、保存時等にセリシンの加水分解や、特に高分子量の場合は望まないゲル化が起きるおそれがあるが、本発明ではセリシンを粉末状としているため、保存時の安定性が高い。
【図面の簡単な説明】
【0010】
【発明を実施するための形態】
【0011】
（セリシン含有粉末）
本発明のセリシン含有粉末に含有されるセリシンは、ＳＤＳ－ポリアクリルアミドゲル電気泳動（ＰＡＧＥ）法において、バンドが確認できなかったり、スメアになるのではなく、明確なバンドが検出されるものである。具体的には、１５０ｋＤａ以上の分子量に対応する範囲において、少なくとも１つのバンドが検出されるものである。前記バンドとしては、１５０ｋＤａ以上の分子量に対応する範囲に検出されればよいが、好ましくは１６０ｋＤａ以上、より好ましくは１８０ｋＤａ以上の分子量に対応する範囲に検出されることが望ましい。また前記の範囲に検出されるバンド数は、１以上であればよく、上限は特に制限されないが、前記の範囲に検出されるバンド数としては、１～５本が好ましく、２～５本がより好ましい。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ法により２５０ｋＤａ付近に明確なバンドが検出されるセリシンを含有するセリシン含有粉末が特に好ましい。またＳＤＳ－ＰＡＧＥ法により３１５ｋＤａ付近に明確なバンドが検出されるセリシンを含有するセリシン含有粉末も好ましい。これらのバンドが検出されるようなセリシンを含有するセリシン含有粉末であれば、含有されるセリシンは低分子量化されておらず、高分子量のセリシン特有の性状を示す。
なおＳＤＳ－ＰＡＧＥ法において検出されるバンドに対応する分子量は、マーカータンパク質（例えば、プレシジョン Ｐｌｕｓ プロテインTM２色スタンダード；ＢＩＯ－ＲＡＤ製、製品番号１６１０３７４等）の分子量画分のバンドとの対比により決定することができる。またバンドの濃さからバンドの構成比率を算出することができるが、本発明のセリシン含有粉末に含有されるセリシンは、１５０ｋＤａ以上の分子量に対応する範囲において、少なくとも１つのバンドが検出されるような高分子量であればよく、その構成は特に制限されない。
本発明のセリシン含有粉末に含有されるセリシンは、ＳＤＳ－ポリアクリルアミドゲル電気泳動（ＰＡＧＥ）法において、バンドが確認できなかったり、スメアになるのではなく、明確なバンドが検出されるものである。具体的には、１５０ｋＤａ以上の分子量に対応する範囲において、少なくとも１つのバンドが検出されるものである。前記バンドとしては、１５０ｋＤａ以上の分子量に対応する範囲に検出されればよいが、好ましくは１６０ｋＤａ以上、より好ましくは１８０ｋＤａ以上の分子量に対応する範囲に検出されることが望ましい。また前記の範囲に検出されるバンド数は、１以上であればよく、上限は特に制限されないが、前記の範囲に検出されるバンド数としては、１～５本が好ましく、２～５本がより好ましい。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ法により２５０ｋＤａ付近に明確なバンドが検出されるセリシンを含有するセリシン含有粉末が特に好ましい。またＳＤＳ－ＰＡＧＥ法により３１５ｋＤａ付近に明確なバンドが検出されるセリシンを含有するセリシン含有粉末も好ましい。これらのバンドが検出されるようなセリシンを含有するセリシン含有粉末であれば、含有されるセリシンは低分子量化されておらず、高分子量のセリシン特有の性状を示す。
なおＳＤＳ－ＰＡＧＥ法において検出されるバンドに対応する分子量は、マーカータンパク質（例えば、プレシジョン Ｐｌｕｓ プロテインTM２色スタンダード；ＢＩＯ－ＲＡＤ製、製品番号１６１０３７４等）の分子量画分のバンドとの対比により決定することができる。またバンドの濃さからバンドの構成比率を算出することができるが、本発明のセリシン含有粉末に含有されるセリシンは、１５０ｋＤａ以上の分子量に対応する範囲において、少なくとも１つのバンドが検出されるような高分子量であればよく、その構成は特に制限されない。
【0012】
本発明のセリシン含有粉末に含有されるセリシンは、溶解性に優れる。前記溶解性に優れるとは、具体的には、水に対する溶解度が高いことが好ましく、例えば、セリシン含有粉末に含有されるセリシンの温度８０℃の水に対する溶解度が０．４５ｇ／水溶液１００ｇ以上であることがより好ましい。セリシン含有粉末に含有されるセリシンの溶解度は、下記の方法で求めることができる。
セリシン濃度が１質量％となるように、純水にセリシン含有粉末を添加し、８０℃で３０分間溶解する。溶解後、９，５００×ｇの加速度で５分間遠心分離し、上澄みを回収して得られた水溶液におけるセリシン濃度を、Ｂｒａｄｆｏｒｄ法又は２８０ｎｍの吸光度から算出する。該算出したセリシン濃度から溶解したセリシンの質量を求める。なお吸光度からのセリシン濃度算出は、検量線を作成することにより行う。そして溶解したセリシンの質量と、はじめに添加したセリシンの質量から、下記式にて溶解率を算出し、該溶解率を用いて溶解度を求める。
セリシンの溶解率（ｗｔ％）＝（溶解したセリシンの質量／添加したセリシンの質量）×１００
セリシンの溶解度（ｇ／水溶液１００ｇ）＝１００（ｇ）×１（ｗｔ％）×セリシンの溶解率（ｗｔ％）
セリシン濃度が１質量％となるように、純水にセリシン含有粉末を添加し、８０℃で３０分間溶解する。溶解後、９，５００×ｇの加速度で５分間遠心分離し、上澄みを回収して得られた水溶液におけるセリシン濃度を、Ｂｒａｄｆｏｒｄ法又は２８０ｎｍの吸光度から算出する。該算出したセリシン濃度から溶解したセリシンの質量を求める。なお吸光度からのセリシン濃度算出は、検量線を作成することにより行う。そして溶解したセリシンの質量と、はじめに添加したセリシンの質量から、下記式にて溶解率を算出し、該溶解率を用いて溶解度を求める。
セリシンの溶解率（ｗｔ％）＝（溶解したセリシンの質量／添加したセリシンの質量）×１００
セリシンの溶解度（ｇ／水溶液１００ｇ）＝１００（ｇ）×１（ｗｔ％）×セリシンの溶解率（ｗｔ％）
【0013】
セリシン含有粉末に含有されるセリシンの温度８０℃の水に対する溶解度は、０．４５ｇ／水溶液１００ｇ以上であればよいが、０．５０ｇ／水溶液１００ｇ以上が好ましく、０．６０ｇ／水溶液１００ｇ以上がより好ましく、０．７０ｇ／水溶液１００ｇ以上がさらに好ましい。またセリシン含有粉末に含有されるセリシンの溶解度は、前記測定法の上限値（１．００ｇ／水溶液１００ｇ）であってもよい。セリシン含有粉末は、含有されるセリシンが前記のような溶解度を有することにより、化粧品剤形等への配合が容易となる。
【0014】
セリシン含有粉末としては、溶解性に優れることが好ましく、特に水に対する溶解度が高いことが好ましい。セリシン含有粉末としては、例えば、温度８０℃の水に対する溶解度が０．５０ｇ／水溶液１００ｇ以上であることが好ましい。セリシン含有粉末の溶解度は、下記の方法で求めることができる。
純水に濃度が１質量％となるようにセリシン含有粉末を添加し、８０℃で３０分間溶解する。溶解後、９，５００×ｇの加速度で５分間遠心分離し、上澄みを回収して得られた水溶液を加熱乾燥させて得られた固形分濃度をセリシン含有粉末の濃度とする。該セリシン含有粉末の濃度から溶解したセリシン含有粉末の質量を求める。そして溶解したセリシン含有粉末の質量と、はじめに添加したセリシン含有粉末の質量から、下記式にて溶解率を算出し、該溶解率を用いて溶解度を求める。
セリシン含有粉末の溶解率（ｗｔ％）＝（溶解したセリシン含有粉末の質量／添加したセリシン含有粉末の質量）×１００
セリシン含有粉末の溶解度（ｇ／水溶液１００ｇ）＝１００（ｇ）×１（ｗｔ％）×セリシン含有粉末の溶解率（ｗｔ％）
純水に濃度が１質量％となるようにセリシン含有粉末を添加し、８０℃で３０分間溶解する。溶解後、９，５００×ｇの加速度で５分間遠心分離し、上澄みを回収して得られた水溶液を加熱乾燥させて得られた固形分濃度をセリシン含有粉末の濃度とする。該セリシン含有粉末の濃度から溶解したセリシン含有粉末の質量を求める。そして溶解したセリシン含有粉末の質量と、はじめに添加したセリシン含有粉末の質量から、下記式にて溶解率を算出し、該溶解率を用いて溶解度を求める。
セリシン含有粉末の溶解率（ｗｔ％）＝（溶解したセリシン含有粉末の質量／添加したセリシン含有粉末の質量）×１００
セリシン含有粉末の溶解度（ｇ／水溶液１００ｇ）＝１００（ｇ）×１（ｗｔ％）×セリシン含有粉末の溶解率（ｗｔ％）
【0015】
セリシン含有粉末の温度８０℃の水に対する溶解度は、０．５５ｇ／水溶液１００ｇ以上であることがより好ましく、０．６０ｇ／水溶液１００ｇ以上がより好ましく、０．７０ｇ／水溶液１００ｇ以上がさらに好ましい。またセリシン含有粉末の溶解度は、前記測定法の上限値（１．００ｇ／水溶液１００ｇ）であってもよい。
【0016】
本発明のセリシン含有粉末は、アニオン性界面活性剤及び尿素から選ばれる少なくとも１種を含む粉末であることが好ましい。
【0017】
前記アニオン性界面活性剤としては、特に制限はされないが、例えば、アルキル硫酸塩、アルケニル硫酸塩、アルキルエーテル硫酸塩、アルケニルエーテル硫酸塩、アルキルアリールエーテル硫酸塩、ポリオキシアルキレンアルキルエーテル硫酸塩、ポリオキシアルキレンアルケニルエーテル硫酸塩等の硫酸系アニオン界面活性剤；アルキルスルホン酸塩、α－オレフィンスルホン酸塩、アルキルエーテルスルホン酸塩、アルキルベンゼンスルホン酸塩、アルキルナフタレンスルホン酸塩、アルキルジフェニルエーテルジスルホン酸塩、アルキルグリシジルエーテルスルホン酸塩、α－スルホ脂肪酸エステル塩、アシルイセチオン酸塩、アルキルスルホコハク酸塩、アルキルスルホ酢酸塩、Ｎ－アシルメチルタウリン塩等のスルホン酸系アニオン界面活性剤；ポリカルボン酸塩、脂肪族カルボン酸塩、アルキルエーテルカルボン酸塩、アルケニルコハク酸塩、Ｎ－アシルアミノ酸塩、アミドエーテルカルボン酸塩、アシル乳酸塩等のカルボン酸系アニオン界面活性剤；アルキルリン酸塩、ポリオキシアルキレンアルキルエーテルリン酸塩、アルキルアリールエーテルリン酸塩等のリン酸系アニオン界面活性剤等が挙げられる。アニオン性界面活性剤としては、硫酸系アニオン界面活性剤、スルホン酸系アニオン界面活性剤、カルボン酸系アニオン界面活性剤が好ましく、アルキル硫酸塩、アルケニル硫酸塩、アルキルエーテル硫酸塩、アルケニルエーテル硫酸塩、ポリオキシアルキレンアルキルエーテル硫酸塩、ポリオキシアルキレンアルケニルエーテル硫酸塩、アルキルスルホン酸塩、アルキルエーテルスルホン酸塩、Ｎ－アシルアミノ酸塩がより好ましく、アルキル硫酸塩、アルケニル硫酸塩、アルキルエーテル硫酸塩、アルケニルエーテル硫酸塩、ポリオキシアルキレンアルキルエーテル硫酸塩、ポリオキシアルキレンアルケニルエーテル硫酸塩、Ｎ－アシルアミノ酸塩がさらに好ましい。
なお前記「塩」としては、リチウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩等のアルカリ金属塩；マグネシウム塩、カルシウム塩等のアルカリ土類金属塩；アミン塩；アンモニウム塩等が挙げられ、アルカリ金属塩、アンモニウム塩が好ましい。
なお前記「塩」としては、リチウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩等のアルカリ金属塩；マグネシウム塩、カルシウム塩等のアルカリ土類金属塩；アミン塩；アンモニウム塩等が挙げられ、アルカリ金属塩、アンモニウム塩が好ましい。
【0018】
セリシン含有粉末がアニオン性界面活性剤を含む場合、アニオン性界面活性剤は、１種のみでもよく、２種以上を含んでいてもよく、上限は特に限定されないが、５種以下が好ましく、３種以下がより好ましい。
【0019】
前記アルキル硫酸塩、アルケニル硫酸塩、アルキルエーテル硫酸塩、アルケニルエーテル硫酸塩、ポリオキシアルキレンアルキルエーテル硫酸塩、及びポリオキシアルキレンアルケニルエーテル硫酸塩から選ばれる少なくとも１種としては、下記式（１）で表される化合物が好ましい。
【0020】
【化2】
【0021】
Ｒ1で示される炭素数１～３のアルキレン基としては、メチレン基、エタンジイル基、プロパンジイル基が挙げられ、メチレン基、エタン－１，２－ジイル基、プロパン－１，３－ジイル基が好ましく、エタン－１，２－ジイル基がより好ましい。なおｎが２以上の整数の場合、複数のＲ1は同一であっても異なっていてもよく、同一であることが好ましい。
【0022】
Ｒ2で示される炭素数８～２０のアルキル基としては、直鎖状、分岐鎖状のいずれであってもよく、例えば、オクチル基、ノニル基、デシル基、ウンデシル基、ドデシル基、トリデシル基、テトラデシル基、ペンタデシル基、ヘキサデシル基、ヘプタデシル基、オクタデシル基、ノナデシル基、イコシル基、（２－メチル）ヘプチル基、（２－エチル）ヘプチル基、（３－エチル）ヘプチル基、（１－ヘキシル）ヘプチル基、（２－メチル）オクチル基、（２－エチル）オクチル基、（１－ヘプチル）オクチル基、（２－エチル）ノニル基、（１－オクチル）ノニル基等が挙げられる。Ｒ2で示される炭素数８～２０のアルキル基としては、直鎖アルキル基が好ましい。またＲ2で示されるアルキル基の炭素数としては、８～１５が好ましく、１０～１３がより好ましい。
【0023】
Ｒ2で示される炭素数８～２０のアルケニル基としては、直鎖状、分岐鎖状のいずれであってもよく、例えば、オクテニル基、ノネニル基、デセニル基、ウンデセニル基、ドデセニル基、トリデセニル基、テトラデセニル基、ペンタデシニル基、ヘキサデセニル基、ヘプタデセニル基、オクタデセニル基、ノナデセニル基、イコセニル基、１，１－ジメチル－２－オクテニル基、１－エチル－２－オクテニル基、１，２－ジメチル－１－オクテニル基等が挙げられる。Ｒ2で示される炭素数８～２０のアルケニル基としては、直鎖アルケニル基が好ましい。またＲ2で示されるアルケニル基の炭素数としては、８～１６が好ましく、１０～１４がより好ましい。
【0024】
ｎで示される０以上の整数としては、０～５０の整数が好ましく、０～２５の整数がより好ましく、０～１５の整数がさらに好ましく、０～１０の整数がよりさらに好ましく、０であることがいっそう好ましい。
【0025】
Ｘ+で示される１価のカチオンとしては、例えば、リチウムイオン、ナトリウムイオン、カリウムイオン、セシウムイオン等のアルカリ金属のイオン；マグネシウムイオン、カルシウムイオン等のアルカリ土類金属のイオン；アンモニウムイオン（ＮＨ4+）、第１級アンモニウムイオン、第２級アンモニウムイオン、第３級アンモニウムイオン、第４級アンモニウムイオン等のオニウムイオン等が挙げられる。Ｘ+で示される１価のカチオンとしては、アルカリ金属のイオン、オニウムイオンが好ましく、アルカリ金属のイオン、アンモニウムイオン（ＮＨ4+）、トリエタノールアンモニウムイオンがより好ましく、ナトリウムイオン、アンモニウムイオン（ＮＨ4+）がさらに好ましい。
【0026】
式（１）で表される化合物としては、例えば、ラウリル硫酸ナトリウム、ミリスチル硫酸ナトリウム、ラウレス硫酸ナトリウム、ラウリル硫酸アンモニウム等が挙げられる。
【0027】
前記Ｎ－アシルアミノ酸塩としては、下記式（２）で表される化合物が好ましい。
【0028】
【化3】
【0029】
Ｒ3で示される炭素数８～２０のアルキル基としては、直鎖状、分岐鎖状のいずれであってもよく、例えば、オクチル基、ノニル基、デシル基、ウンデシル基、ドデシル基、トリデシル基、テトラデシル基、ペンタデシル基、ヘキサデシル基、ヘプタデシル基、オクタデシル基、ノナデシル基、イコシル基、（２－メチル）ヘプチル基、（２－エチル）ヘプチル基、（３－エチル）ヘプチル基、（１－ヘキシル）ヘプチル基、（２－メチル）オクチル基、（２－エチル）オクチル基、（１－ヘプチル）オクチル基、（２－エチル）ノニル基、（１－オクチル）ノニル基等が挙げられる。Ｒ3で示される炭素数８～２０のアルキル基としては、直鎖アルキル基が好ましい。またＲ3で示されるアルキル基の炭素数としては、８～１６が好ましく、１０～１４がより好ましい。
【0030】
Ｒ4で示される炭素数１～３のアルキル基としては、直鎖状、分岐鎖状のいずれであってもよく、例えば、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基が挙げられる。Ｒ4で示される炭素数１～３のアルキル基としては、直鎖アルキル基が好ましい。またＲ4で示されるアルキル基の炭素数としては、１～２が好ましく、１がより好ましい。
【0031】
ｍで示される０～３の整数としては、０～２の整数が好ましく、１がより好ましい。
【0032】
Ｙ+で示される１価のカチオンとしては、例えば、リチウムイオン、ナトリウムイオン、カリウムイオン、セシウムイオン等のアルカリ金属のイオン；マグネシウムイオン、カルシウムイオン等のアルカリ土類金属のイオン；アンモニウムイオン（ＮＨ4+）、第１級アンモニウムイオン、第２級アンモニウムイオン、第３級アンモニウムイオン、第４級アンモニウムイオン等のオニウムイオン等が挙げられる。Ｙ+で示される１価のカチオンとしては、アルカリ金属のイオン、オニウムイオンが好ましく、アルカリ金属のイオン、アンモニウムイオン（ＮＨ4+）、トリエタノールアンモニウムイオンがより好ましく、アルカリ金属のイオンがさらに好ましく、ナトリウムイオンがよりさらに好ましい。
【0033】
式（２）で表される化合物としては、例えば、カプロイルメチルβアラニンナトリウム、ラウロイルメチルβアラニンナトリウム、ミリストイルメチルβアラニンナトリウム等が挙げられる。
【0034】
前記アニオン性界面活性剤及び／又は尿素のセリシン含有粉末における含有率は、セリシン含有粉末の溶解度向上の観点から、セリシン含有粉末の総量中、１０質量％以上が好ましく、１５質量％以上がより好ましく、２０質量％以上がさらに好ましく、また９０質量％以下が好ましく、７０質量％以下がより好ましく、５０質量％以下がさらに好ましい。
なおセリシン含有粉末に、アニオン性界面活性剤及び尿素から選ばれる２種以上を含む場合には、それらの合計含有率が前記含有率の範囲内であることが好ましい。
なおセリシン含有粉末に、アニオン性界面活性剤及び尿素から選ばれる２種以上を含む場合には、それらの合計含有率が前記含有率の範囲内であることが好ましい。
【0035】
セリシン含有粉末中のアニオン性界面活性剤及び／又は尿素の含有量は、抽出液の上澄みを回収して得られた水溶液におけるセリシン濃度を、Ｂｒａｄｆｏｒｄ法又は２８０ｎｍの吸光度から算出し、上澄みを回収して得られた水溶液を加熱乾燥させて得られた固形分濃度から減ずることで得られる。またガスクロマトグラフィーや液体クロマトグラフィー等の周知の分析手段を用いてセリシン含有粉末から目的化合物（アニオン性界面活性剤又は尿素）を分離し、標準物質を用いて検量線を作成することにより測定することができる。また尿素を公知の方法で誘導化した後にクロマトグラフィーで分析してもよい。
【0036】
本発明のセリシン含有粉末におけるセリシンの含有率は、セリシンが有するチロシナーゼ阻害作用、コラゲナーゼ阻害作用、エラスターゼ阻害作用等の機能を十分に発揮する観点から、１０質量％以上が好ましく、２０質量％以上がより好ましく、３０質量％以上がさらに好ましく、５０質量％以上がよりさらに好ましく、６０質量％以上がいっそう好ましく、またセリシン含有粉末の溶解度の観点から、９０質量％以下が好ましく、８５質量％以下がより好ましく、８０質量％以下がさらに好ましい。
本発明のセリシン含有粉末は、高分子量のセリシンを含有する点、及び含有されるセリシンが良好な溶解性を有する点を損なわない限りは、セリシン、アニオン性界面活性剤及び尿素以外のその他の成分を含んでいてもよいが、その含有率はセリシン含有粉末の総量中、３０質量％以下が好ましく、１０質量％以下がより好ましく、セリシン含有粉末は前記その他の成分を含んでいないことが特に好ましい。
本発明のセリシン含有粉末は、高分子量のセリシンを含有する点、及び含有されるセリシンが良好な溶解性を有する点を損なわない限りは、セリシン、アニオン性界面活性剤及び尿素以外のその他の成分を含んでいてもよいが、その含有率はセリシン含有粉末の総量中、３０質量％以下が好ましく、１０質量％以下がより好ましく、セリシン含有粉末は前記その他の成分を含んでいないことが特に好ましい。
【0037】
（セリシン含有粉末の製造方法）
従来、セリシンは、繭、該繭を構成する繭糸や生糸に対して、酸加水分解、アルカリ加水分解、酵素分解等の加水分解法により加水分解し、溶出して得られていた。しかしながら、本発明のセリシン含有粉末は、例えば、繭、繭糸、生糸等から前記した加水分解法を経ずにセリシンを抽出して、該抽出液を乾燥することにより得られる。よって本発明のセリシン含有粉末は、加水分解されていないセリシンを含有する。なお本発明のセリシン含有粉末は、高分子量のセリシン（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ法により１５０ｋＤａ以上の分子量に対応する範囲にバンドを有するセリシン）が含有されるならば、前記抽出の際に加水分解されたセリシンが含まれることになってもよい。また本発明のセリシン含有粉末は、フィブロインを含んでいてもよい。
従来、セリシンは、繭、該繭を構成する繭糸や生糸に対して、酸加水分解、アルカリ加水分解、酵素分解等の加水分解法により加水分解し、溶出して得られていた。しかしながら、本発明のセリシン含有粉末は、例えば、繭、繭糸、生糸等から前記した加水分解法を経ずにセリシンを抽出して、該抽出液を乾燥することにより得られる。よって本発明のセリシン含有粉末は、加水分解されていないセリシンを含有する。なお本発明のセリシン含有粉末は、高分子量のセリシン（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ法により１５０ｋＤａ以上の分子量に対応する範囲にバンドを有するセリシン）が含有されるならば、前記抽出の際に加水分解されたセリシンが含まれることになってもよい。また本発明のセリシン含有粉末は、フィブロインを含んでいてもよい。
【0038】
前記繭、繭糸及び生糸は、蚕等の絹糸虫類から産生されたものであれば特に限定されず、クワコ、ウスバクワコといったカイコガ科の野蚕、テンサン（天蚕）、サクサン（柞蚕）、タサールサンといったヤママユガ科の野蚕、ミツバチ、スズメバチ、クモ、トビケラ等の昆虫から産生された絹糸を用いてもよく、産地も特に限定されない。また蚕としては、天然のものであっても、突然変異や品種改良、遺伝子操作を行ったものであってもよい。例えば、高分子量のセリシンを効率よく抽出できる傾向にあることから、フィブロインの産生能が劣る蚕を用いることができ、具体的には、突然変異や品種改良によりフィブロインの産生能が低下した蚕（例えば、セリシンホープ（セリシンＣ）、セリシンＮ、Ｎｄ蚕、Ｎｄ－ｓ蚕、ＭＮＳ３００、ＭＣＳ３００等）を用いることができる。
【0039】
蚕の繭は、蚕の幼虫が蛹化の際に絹糸腺内の絹タンパクを分泌して作る構造体であり、繭から蛹を分離することにより得られる。また、蚕の生糸とは、前記繭から取り出した繭糸（絹繊維）を何本か合一させて糸状にすることにより得られる。
【0040】
セリシン含有粉末の製造において、繭はそのままの状態で用いてもよく、裁断や破砕、乾燥等の加工した繭を用いてもよい。
【0041】
本発明のセリシン含有粉末を製造する方法としては、例えば、下記製造方法Ａ及び製造方法Ｂが挙げられる。
【0042】
（（製造方法Ａ））
製造方法Ａは、繭（前記繭糸や生糸であってもよい）及び水を接触することによって得られるセリシン抽出液とアニオン性界面活性剤及び尿素から選ばれる少なくとも１種とを混合し、得られる混合物を乾燥する方法である。
製造方法Ａは、繭（前記繭糸や生糸であってもよい）及び水を接触することによって得られるセリシン抽出液とアニオン性界面活性剤及び尿素から選ばれる少なくとも１種とを混合し、得られる混合物を乾燥する方法である。
【0043】
製造方法Ａにおいてセリシン抽出時、水以外にも有機溶媒を抽出溶媒として用いてもよい。前記有機溶媒としては、例えば、メタノール、エタノール、イソプロパノール等の炭素数が４以下の低級アルコール；プロピレングリコール、ジエチレングリコール等のグリコール；ジメチルスルホキシド、ジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミド、Ｎ－メチルモルホリン－Ｎ－オキシド等の非プロトン性溶媒等が挙げられる。抽出溶媒は１種のみを用いてもよく、２種以上を混合して用いてもよい。抽出溶媒としては、好ましくは水単独である。
【0044】
また高分子量のセリシンを抽出する観点から、前記抽出溶媒に無機塩を含有させることが好ましい。前記無機塩としては、特に限定されず、例えば、アルカリ金属やアルカリ土類金属の塩を用いることができ（特に、アルカリ金属ハロゲン化物が好ましい）、具体的には、臭化リチウム、臭化カリウム、臭化カルシウム、塩化リチウム、塩化カリウム、塩化カルシウム、チオシアン酸リチウム、チオシアン酸カリウム等が挙げられ、１種のみを用いてもよく、２種以上を混合して用いてもよい。
【0045】
無機塩を含有する抽出溶媒としては、例えば、臭化リチウム水溶液、臭化カリウム水溶液、塩化リチウム水溶液、塩化カリウム水溶液、チオシアン酸リチウム水溶液、チオシアン酸カリウム水溶液、塩化カルシウム水溶液、塩化カルシウム／エタノール溶液、強電解水、硝酸カルシウム／メタノール溶液等が挙げられ、１種のみを用いてもよく、２種以上を混合して用いてもよい。無機塩を含有する抽出溶媒としては、臭化リチウム水溶液が好ましい。
【0046】
水等の抽出溶媒が無機塩を含有する場合、無機塩の濃度としては、セリシンを効率的に抽出でき、またセリシンが加水分解を受けない又は受け難い限りは特に限定されずに適宜設定できるが、例えば、３ｍｏｌＬ-1以上が好ましく、４ｍｏｌＬ-1以上がより好ましく、５ｍｏｌＬ-1以上がさらに好ましく、６ｍｏｌＬ-1以上がよりさらに好ましく、７ｍｏｌＬ-1以上がいっそう好ましく、８ｍｏｌＬ-1以上がよりいっそう好ましく、また２０ｍｏｌＬ-1以下が好ましく、１５ｍｏｌＬ-1以下がより好ましい。
【0047】
製造方法Ａにおける抽出溶媒の使用量としては、適宜設定できるが、例えば、繭に対して質量比で１０～６０倍量であることが好ましく、１５～５０倍量であることがより好ましい。
【0048】
製造方法Ａにおける抽出温度としては、例えば、１００℃以下であればよいが、加水分解を抑制する観点から、５０℃以下が好ましく、４０℃以下がより好ましく、また抽出効率の観点から、０℃以上が好ましい。
【0049】
製造方法Ａにおける抽出時間としては、抽出に供する原料等の使用量や装置に応じて適宜設定できるが、例えば、４８時間以下が好ましく、２４時間以下がより好ましく、１２時間以下がさらに好ましく、６時間以下がよりさらに好ましく、また抽出効率の観点から、０．５時間以上が好ましい。
【0050】
製造方法Ａにおいて、繭及び水等の抽出溶媒を接触することによって得られるセリシン抽出液には、ろ過、遠心分離、精製、濃縮、限外ろ過、透析及び分画からなる群から選ばれる１種又は２種以上の処理を、公知の方法に従って行ってもよく、遠心分離及び／又は透析を行うことが好ましい。また必要により、常圧下又は減圧下で前記処理を行ってもよい。前記処理により、例えば、抽出時に用いた無機塩等の不溶物等を除去することができる。例えば、臭化リチウム水溶液を用いて抽出した場合には、透析等の処理を行って臭化リチウムを除去することが好ましい。また得られた抽出液に、例えば、Ｇｌｙ－ＮａＯＨ（ｐＨ９程度）等を加えて、液性を調整することも好ましい。
【0051】
抽出液におけるセリシンの濃度は、抽出条件に応じて適宜設定できるが、例えば、０．０００１～５０質量％が好ましく、０．００１～２０質量％がより好ましい。
【0052】
製造方法Ａにおけるアニオン性界面活性剤としては、上述したアニオン性界面活性剤と同じ例が挙げられ、その好ましい態様も同じであり、アルキル硫酸塩、アルケニル硫酸塩、アルキルエーテル硫酸塩、アルケニルエーテル硫酸塩、ポリオキシアルキレンアルキルエーテル硫酸塩、ポリオキシアルキレンアルケニルエーテル硫酸塩がいっそう好ましく、上記式（１）で表される化合物が特に好ましい。
【0053】
アニオン性界面活性剤の使用量としては、用いる種類により適宜設定できるが、得られるセリシン含有粉末に含有されるセリシンの溶解度向上の観点から、例えば、抽出液と混合した際の濃度が、０．０５～５．０質量％となるような量を添加するのが好ましい。前記抽出液と混合した際の濃度としては、０．１０～４．０質量％がより好ましく、０．１５～３．５質量％がさらに好ましい。なおアニオン性界面活性を２種以上使用する場合には、それらの合計量が、前記抽出液と混合した際の濃度範囲内となる量であることが好ましい。
【0054】
またアニオン性界面活性剤の使用量としては、得られるセリシン含有粉末に含有されるセリシンの溶解度向上の観点から、例えば、抽出液中のセリシンに対して質量比で０．０５～５．０倍量であることが好ましく、０．１０～４．０倍量であることがより好ましく、０．１５～３．５倍量であることがさらに好ましい。なおアニオン性界面活性を２種以上使用する場合には、それらの合計量が、前記質量比の範囲内となる量であることが好ましい。
【0055】
尿素の使用量としては、得られるセリシン含有粉末に含有されるセリシンの溶解度向上の観点から、例えば、抽出液と混合した際の濃度が、０．０１～２．０ｍｏｌＬ-1となるような量を添加するのが好ましい。前記抽出液と混合した際の濃度としては、０．０３～１．５ｍｏｌＬ-1がより好ましく、０．０５～１．２ｍｏｌＬ-1がさらに好ましく、０．０８～１．０ｍｏｌＬ-1がよりさらに好ましい。
【0056】
また尿素の使用量としては、得られるセリシン含有粉末に含有されるセリシンの溶解度向上の観点から、例えば、抽出液中のセリシンに対して質量比で０．１～１０倍量であることが好ましく、０．２～８．０倍量であることがより好ましく、０．３～６．０倍量であることがさらに好ましく、０．４～５．０倍量であることがよりさらに好ましい。
【0057】
セリシン抽出液とアニオン性界面活性剤及び尿素から選ばれる少なくとも１種との混合としては、特に制限はされず、両者が十分に混合される方法を適宜選択することができ、例えば、公知の混合装置を用いて撹拌することにより混合してもよい。
【0058】
製造方法Ａにおいてセリシン含有粉末は、セリシン抽出液とアニオン性界面活性剤及び尿素から選ばれる少なくとも１種とを混合することにより得られる混合物を乾燥することにより得られる。
【0059】
セリシン抽出液とアニオン性界面活性剤及び尿素から選ばれる少なくとも１種とを混合することにより得られる混合物を乾燥する方法としては、特に限定はされないが、例えば、凍結乾燥法、減圧（真空、低真空）乾燥法、噴霧乾燥法等が挙げられ、凍結乾燥法、噴霧乾燥法が好ましく、凍結乾燥法がより好ましい。これらの乾燥方法は、いずれも公知の乾燥装置を用いて行えばよく、乾燥温度や乾燥時間等の乾燥条件は、各乾燥方法に応じて適宜設定すればよい。
【0060】
（（製造方法Ｂ））
製造方法Ｂは、アニオン性界面活性剤及び尿素から選ばれる少なくとも１種の存在下で繭（前記繭糸や生糸であってもよい）と水とを接触させることによりセリシン抽出液を得て、該セリシン抽出液を乾燥する方法である。
製造方法Ｂは、アニオン性界面活性剤及び尿素から選ばれる少なくとも１種の存在下で繭（前記繭糸や生糸であってもよい）と水とを接触させることによりセリシン抽出液を得て、該セリシン抽出液を乾燥する方法である。
【0061】
製造方法Ｂにおけるアニオン性界面活性剤としては、上述したアニオン性界面活性剤と同じ例が挙げられ、その好ましい態様も同じであり、上記式（１）で表される化合物、上記式（２）で表される化合物が特に好ましい。
【0062】
アニオン性界面活性剤の使用量としては、用いる種類により適宜設定できるが、得られるセリシン含有粉末に含有されるセリシンの溶解度向上及び抽出効率の観点から、例えば、抽出溶媒と混合した際の濃度が、０．１０～８．０質量％となるような量が好ましい。前記抽出溶媒と混合した際の濃度としては、０．２０～５．０質量％がより好ましく、０．２３～４．０質量％がさらに好ましく、０．２５～３．５質量％がよりさらに好ましい。なおアニオン性界面活性を２種以上使用する場合には、それらの合計量が、前記抽出液と混合した際の濃度範囲内となる量であることが好ましい。
【0063】
またアニオン性界面活性剤の使用量としては、得られるセリシン含有粉末に含有されるセリシンの溶解度向上及び抽出効率の観点から、例えば、抽出に使用する繭（又は繭糸或いは生糸）に対して質量比で０．０１～３．５倍量であることが好ましく、０．０５～３．０倍量であることがより好ましく、０．１０～２．５倍量であることがさらに好ましく、０．１３～２．０倍量であることがよりさらに好ましい。なおアニオン性界面活性を２種以上使用する場合には、それらの合計量が、前記質量比の範囲内となる量であることが好ましい。
【0064】
アニオン性界面活性剤の存在下で繭と水とを接触させてセリシン抽出液を製造する方法によれば、高分子量のセリシンを抽出することが可能である。そして該製造方法により得られるセリシン抽出液を用いれば、高分子量のセリシンを含有し、且つ含有されるセリシンの溶解性に優れるセリシン含有粉末を製造することができる。
【0065】
尿素の使用量としては、得られるセリシン含有粉末に含有されるセリシンの溶解度向上及び抽出効率の観点から、例えば、抽出溶媒と混合した際の濃度が、０．１０～１０ｍｏｌＬ-1となるような量を添加するのが好ましい。前記抽出液と混合した際の濃度としては、０．２０～８．０ｍｏｌＬ-1がより好ましく、０．３０～６．０ｍｏｌＬ-1がさらに好ましく、０．４０～５．０ｍｏｌＬ-1がよりさらに好ましい。
【0066】
また尿素の使用量としては、得られるセリシン含有粉末に含有されるセリシンの溶解度向上及び抽出効率の観点から、例えば、抽出に使用する繭（又は繭糸或いは生糸）に対して質量比で０．１～１２倍量であることが好ましく、０．２～１０倍量であることがより好ましく、０．３～８．０倍量であることがさらに好ましく、０．４～６．０倍量であることがよりさらに好ましい。
【0067】
製造方法Ｂにおいて、アニオン性界面活性剤及び／又は尿素存在下での繭と水との接触時、つまりセリシン抽出時、水以外にも有機溶媒を抽出溶媒として用いてもよい。前記有機溶媒としては、例えば、メタノール、エタノール、イソプロパノール等の低級アルコール；プロピレングリコール、ジエチレングリコール等のグリコール；ジメチルスルホキシド、ジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミド、Ｎ－メチルモルホリン－Ｎ－オキシド等の非プロトン性溶媒等が挙げられる。抽出溶媒は１種のみを用いてもよく、２種以上を混合して用いてもよい。抽出溶媒としては、好ましくは水単独である。
【0068】
製造方法Ｂにおける抽出溶媒の使用量としては、適宜設定できるが、例えば、繭に対して質量比で１０～１５０倍量であることが好ましく、１５～１３０倍量であることがより好ましい。
【0069】
製造方法Ｂにおける抽出温度としては、例えば、１５０℃以下であればよいが、高分子量のセリシンを抽出する観点から、１３０℃以下が好ましく、１２０℃以下がより好ましく、１１０℃以下がさらに好ましく、また抽出効率の観点から、３０℃以上が好ましく、５０℃以上がより好ましく、８０℃以上がさらに好ましい。
【0070】
製造方法Ｂにおける抽出時間としては、抽出に供する原料等の使用量や装置に応じて適宜設定できるが、高分子量のセリシンを抽出する観点から、１０時間以下が好ましく、５時間以下がより好ましく、４時間以下がさらに好ましく、３時間以下がよりさらに好ましく、また抽出効率の観点から、０．１時間以上が好ましい。抽出中、アニオン性界面活性剤及び／又は尿素を含有する繭と水との混合物は、公知の混合装置を用いて撹拌することにより混合してもよい。
【0071】
製造方法Ｂにおけるセリシンの抽出率としては、２０質量％以上が好ましく、２５質量％以上がより好ましく、２７質量％以上がさらに好ましく、また上限は特に限定されずに１００質量％であってもよいが、９５質量％以下であってもよい。前記セリシンの抽出率は、下記方法で求めることができる。
まずセリシン抽出液におけるセリシン濃度を、Ｂｒａｄｆｏｒｄ法又は２８０ｎｍの吸光度から算出し、算出したセリシン濃度から抽出により得られたセリシンの質量を求める。なお吸光度からのセリシン濃度算出は、検量線を作成することにより行う。そして抽出により得られたセリシンの質量と、セリシンの抽出に使用した繭（又は繭糸或いは生糸）の質量から、下記式にて抽出率を算出する。
抽出率（ｗｔ％）＝（抽出により得られたセリシンの質量／セリシンの抽出に使用した繭の質量）×１００
まずセリシン抽出液におけるセリシン濃度を、Ｂｒａｄｆｏｒｄ法又は２８０ｎｍの吸光度から算出し、算出したセリシン濃度から抽出により得られたセリシンの質量を求める。なお吸光度からのセリシン濃度算出は、検量線を作成することにより行う。そして抽出により得られたセリシンの質量と、セリシンの抽出に使用した繭（又は繭糸或いは生糸）の質量から、下記式にて抽出率を算出する。
抽出率（ｗｔ％）＝（抽出により得られたセリシンの質量／セリシンの抽出に使用した繭の質量）×１００
【0072】
製造方法Ｂにおいて得られるセリシン抽出液には、乾燥を行う前に、ろ過、遠心分離及び濃縮からなる群から選ばれる１種又は２種以上の処理を、公知の方法に従って行ってもよく、ろ過及び／又は遠心分離を行うことで抽出液から不溶物を除去することが好ましい。また必要により、常圧下又は減圧下で前記処理を行ってもよい。
【0073】
製造方法Ｂにおいてセリシン含有粉末は、前記セリシン抽出液を乾燥することにより得られる。
【0074】
セリシン抽出液を乾燥する方法としては、特に限定はされないが、例えば、凍結乾燥法、減圧（真空、低真空）乾燥法、噴霧乾燥法等が挙げられ、凍結乾燥法、噴霧乾燥法が好ましく、凍結乾燥法がより好ましい。これらの乾燥方法は、いずれも公知の乾燥装置を用いて行えばよく、乾燥温度や乾燥時間等の乾燥条件は、各乾燥方法に応じて適宜設定すればよい。
【0075】
上述した製造方法により得られるセリシン含有粉末は、高分子量のセリシンを含有し、且つ含有されるセリシンの溶解性に優れる粉末である。該セリシン含有粉末に含有されるセリシンが溶解性に優れるため、化粧品剤形等への配合性が高く扱い易い。また高分子量セリシンを含有するが粉末状であるため、溶液状の場合と比して、溶液のゲル化やセリシンの加水分解といった不安定化が起こり難い。
【実施例0076】
以下、実施例を挙げて本発明をより具体的に説明するが、本発明はもとより下記実施例によって制限を受けるものではなく、前・後記の趣旨に適合し得る範囲で適当に変更を加えて実施することも勿論可能であり、それらはいずれも本発明の技術的範囲に包含される。
【0077】
なお実施例及び比較例における測定は、下記の方法にて行った。
（１）セリシンの抽出率
まずセリシン抽出液におけるセリシン濃度を、Ｂｒａｄｆｏｒｄ法又は２８０ｎｍの吸光度から算出し、算出したセリシン濃度から抽出により得られたセリシンの質量を求めた。なお吸光度からのセリシン濃度算出は、検量線を作成することにより行った。
そして抽出により得られたセリシンの質量と、セリシンの抽出に使用したセリシンホープ繭の質量から、下記式にて抽出率を算出した。
抽出率（ｗｔ％）＝（抽出により得られたセリシンの質量／セリシンの抽出に使用したセリシンホープ繭の質量）×１００
（２）セリシンの分子量
ＳＤＳ－ＰＡＧＥ法により測定した。なおゲルにはマルチゲルＩＩミニ グラジェントゲル２－１５％ １７ウェル（コスモ・バイオ株式会社製）、又は４－１５％ミニプロティアンＴＧＸ Ｓｔａｉｎ－Ｆｒｅｅゲル（ＢＩＯ－ＲＡＤ製）を用い、分子量マーカーにはプレシジョン Ｐｌｕｓ プロテインTM２色スタンダード（ＢＩＯ－ＲＡＤ製、製品番号１６１０３７４）、Ｍｕｌｔｉｃｏｌｏｒ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｌａｄｄｅｒ（１０～３５０ｋＰａ）（ニッポン・ジーン製）、又はＨｉＭａｒｋTM Ｕｎｓｔａｉｎｅｄ（ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ製）を使用した。
測定した結果、１５０ｋＤａ以上の分子量に対応する範囲に少なくとも１つのバンドが検出されたセリシンの分子量評価を○、１５０ｋＤａ以上の分子量に対応する範囲にバンドが１つも検出されなかったセリシンの分子量評価を×と判定した。
（３）セリシンの溶解度
セリシン濃度が１質量％となるように、純水にセリシン含有粉末を添加し、８０℃で３０分間溶解した。溶解後、９，５００×ｇの加速度で５分間遠心分離し、上澄みを回収して得られた水溶液におけるセリシン濃度を、Ｂｒａｄｆｏｒｄ法又は２８０ｎｍの吸光度から算出した。算出したセリシン濃度から溶解したセリシンの質量を求めた。なお吸光度からのセリシン濃度算出は、検量線を作成することにより行った。
そして溶解したセリシンの質量と、はじめに添加したセリシンの質量から、下記式にて溶解率を算出し、溶解度を求めた。
セリシンの溶解率（ｗｔ％）＝（溶解したセリシンの質量／添加したセリシンの質量）×１００
セリシンの溶解度（ｇ／水溶液１００ｇ）＝１００（ｇ）×１（ｗｔ％）×セリシンの溶解率（ｗｔ％）
（１）セリシンの抽出率
まずセリシン抽出液におけるセリシン濃度を、Ｂｒａｄｆｏｒｄ法又は２８０ｎｍの吸光度から算出し、算出したセリシン濃度から抽出により得られたセリシンの質量を求めた。なお吸光度からのセリシン濃度算出は、検量線を作成することにより行った。
そして抽出により得られたセリシンの質量と、セリシンの抽出に使用したセリシンホープ繭の質量から、下記式にて抽出率を算出した。
抽出率（ｗｔ％）＝（抽出により得られたセリシンの質量／セリシンの抽出に使用したセリシンホープ繭の質量）×１００
（２）セリシンの分子量
ＳＤＳ－ＰＡＧＥ法により測定した。なおゲルにはマルチゲルＩＩミニ グラジェントゲル２－１５％ １７ウェル（コスモ・バイオ株式会社製）、又は４－１５％ミニプロティアンＴＧＸ Ｓｔａｉｎ－Ｆｒｅｅゲル（ＢＩＯ－ＲＡＤ製）を用い、分子量マーカーにはプレシジョン Ｐｌｕｓ プロテインTM２色スタンダード（ＢＩＯ－ＲＡＤ製、製品番号１６１０３７４）、Ｍｕｌｔｉｃｏｌｏｒ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｌａｄｄｅｒ（１０～３５０ｋＰａ）（ニッポン・ジーン製）、又はＨｉＭａｒｋTM Ｕｎｓｔａｉｎｅｄ（ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ製）を使用した。
測定した結果、１５０ｋＤａ以上の分子量に対応する範囲に少なくとも１つのバンドが検出されたセリシンの分子量評価を○、１５０ｋＤａ以上の分子量に対応する範囲にバンドが１つも検出されなかったセリシンの分子量評価を×と判定した。
（３）セリシンの溶解度
セリシン濃度が１質量％となるように、純水にセリシン含有粉末を添加し、８０℃で３０分間溶解した。溶解後、９，５００×ｇの加速度で５分間遠心分離し、上澄みを回収して得られた水溶液におけるセリシン濃度を、Ｂｒａｄｆｏｒｄ法又は２８０ｎｍの吸光度から算出した。算出したセリシン濃度から溶解したセリシンの質量を求めた。なお吸光度からのセリシン濃度算出は、検量線を作成することにより行った。
そして溶解したセリシンの質量と、はじめに添加したセリシンの質量から、下記式にて溶解率を算出し、溶解度を求めた。
セリシンの溶解率（ｗｔ％）＝（溶解したセリシンの質量／添加したセリシンの質量）×１００
セリシンの溶解度（ｇ／水溶液１００ｇ）＝１００（ｇ）×１（ｗｔ％）×セリシンの溶解率（ｗｔ％）
【0078】
（実施例１）
フラスコに、品種改良によって作出された蚕から得られるセリシンホープ繭１ｇ、８Ｍ ＬｉＢｒ（富士フイルム和光純薬株式会社製）水溶液を２０ｍＬ仕込み、３５℃で５時間撹拌した。得られた溶液を遠沈管に移し、フラスコ内をＧｌｙ－ＮａＯＨ緩衝液（ｐＨ９）５ｍＬで洗浄し遠沈管に合一した。４℃、９，５００×ｇの加速度で５分間遠心分離し、透析膜（Ｓｐｅｃｔｒａ／Ｐｏｒ ４）へ流し入れ透析を開始した。外液にはまずイオン交換水を用い、２．５時間、５．５時間経過時に外液を交換した。次に０．１ｍＭ炭酸バッファーを用い翌日朝、翌日夕方、翌々日朝に外液を交換した。合計４８時間経過後、透析を停止し、遠沈管に移し替え、溶液を４℃、９，５００×ｇの加速度で１時間遠心分離した。上澄みを回収し、得られた水溶液を加熱乾燥し、固形分をセリシン濃度とした結果、１．０質量％であった。
前記セリシン濃度１．０質量％の水溶液に、添加後の濃度が０．１５質量％となるように、ラウリル硫酸ナトリウム（花王株式会社製、商品名；エマール０Ｓ）を添加して、凍結乾燥し、セリシン含有粉末を得た。得られたセリシン含有粉末を用いて、含有されるセリシンの分子量及び溶解度を測定した。測定結果を表１に示す。なおセリシンの分子量は、溶解度測定における溶解、遠心分離後に回収して得られる水溶液を用いて測定を行った。またＳＤＳ－ＰＡＧＥの結果を図１に示す。なおゲルにはマルチゲルＩＩミニ グラジェントゲル２－１５％ １７ウェル（コスモ・バイオ株式会社製）を使用した。図１中のレーン１が分子量マーカー（プレシジョン Ｐｌｕｓ プロテインTM２色スタンダード；ＢＩＯ－ＲＡＤ製；製品番号１６１０３７４）、レーン３が実施例１の結果である。
フラスコに、品種改良によって作出された蚕から得られるセリシンホープ繭１ｇ、８Ｍ ＬｉＢｒ（富士フイルム和光純薬株式会社製）水溶液を２０ｍＬ仕込み、３５℃で５時間撹拌した。得られた溶液を遠沈管に移し、フラスコ内をＧｌｙ－ＮａＯＨ緩衝液（ｐＨ９）５ｍＬで洗浄し遠沈管に合一した。４℃、９，５００×ｇの加速度で５分間遠心分離し、透析膜（Ｓｐｅｃｔｒａ／Ｐｏｒ ４）へ流し入れ透析を開始した。外液にはまずイオン交換水を用い、２．５時間、５．５時間経過時に外液を交換した。次に０．１ｍＭ炭酸バッファーを用い翌日朝、翌日夕方、翌々日朝に外液を交換した。合計４８時間経過後、透析を停止し、遠沈管に移し替え、溶液を４℃、９，５００×ｇの加速度で１時間遠心分離した。上澄みを回収し、得られた水溶液を加熱乾燥し、固形分をセリシン濃度とした結果、１．０質量％であった。
前記セリシン濃度１．０質量％の水溶液に、添加後の濃度が０．１５質量％となるように、ラウリル硫酸ナトリウム（花王株式会社製、商品名；エマール０Ｓ）を添加して、凍結乾燥し、セリシン含有粉末を得た。得られたセリシン含有粉末を用いて、含有されるセリシンの分子量及び溶解度を測定した。測定結果を表１に示す。なおセリシンの分子量は、溶解度測定における溶解、遠心分離後に回収して得られる水溶液を用いて測定を行った。またＳＤＳ－ＰＡＧＥの結果を図１に示す。なおゲルにはマルチゲルＩＩミニ グラジェントゲル２－１５％ １７ウェル（コスモ・バイオ株式会社製）を使用した。図１中のレーン１が分子量マーカー（プレシジョン Ｐｌｕｓ プロテインTM２色スタンダード；ＢＩＯ－ＲＡＤ製；製品番号１６１０３７４）、レーン３が実施例１の結果である。
【0079】
（実施例２～９）
ラウリル硫酸ナトリウムの添加量を、添加後の水溶液中の濃度が表１に示す濃度となるように変更する以外は、実施例１と同様にしてセリシン含有粉末を得た。得られたセリシン含有粉末を用いて測定した、含有されるセリシンの分子量及び溶解度の結果を表１に示す。なおセリシンの分子量は、溶解度測定における溶解、遠心分離後に回収して得られる水溶液を用いて測定を行った。またＳＤＳ－ＰＡＧＥの結果を図１に示す。なおゲルにはマルチゲルＩＩミニ グラジェントゲル２－１５％ １７ウェル（コスモ・バイオ株式会社製）を使用した。図１中のレーン１が分子量マーカー（プレシジョン Ｐｌｕｓ プロテインTM２色スタンダード；ＢＩＯ－ＲＡＤ製；製品番号１６１０３７４）、レーン４が実施例２、レーン５が実施例３、レーン６が実施例４、レーン７が実施例５、レーン８が実施例６、レーン９が実施例７、レーン１０が実施例８、レーン１１が実施例９の結果である。
ラウリル硫酸ナトリウムの添加量を、添加後の水溶液中の濃度が表１に示す濃度となるように変更する以外は、実施例１と同様にしてセリシン含有粉末を得た。得られたセリシン含有粉末を用いて測定した、含有されるセリシンの分子量及び溶解度の結果を表１に示す。なおセリシンの分子量は、溶解度測定における溶解、遠心分離後に回収して得られる水溶液を用いて測定を行った。またＳＤＳ－ＰＡＧＥの結果を図１に示す。なおゲルにはマルチゲルＩＩミニ グラジェントゲル２－１５％ １７ウェル（コスモ・バイオ株式会社製）を使用した。図１中のレーン１が分子量マーカー（プレシジョン Ｐｌｕｓ プロテインTM２色スタンダード；ＢＩＯ－ＲＡＤ製；製品番号１６１０３７４）、レーン４が実施例２、レーン５が実施例３、レーン６が実施例４、レーン７が実施例５、レーン８が実施例６、レーン９が実施例７、レーン１０が実施例８、レーン１１が実施例９の結果である。
【0080】
（実施例１０～１３）
添加する化合物をラウリル硫酸ナトリウムからポリオキシエチレン（２）ラウリルエーテル硫酸ナトリウム（花王株式会社製、商品名；エマールＥ－２７Ｃ）に、その添加量を、添加後の水溶液中の濃度が表１に示す濃度となるように変更する以外は、実施例１と同様にしてセリシン含有粉末を得た。得られたセリシン含有粉末を用いて測定した、含有されるセリシンの分子量及び溶解度の結果を表１に示す。なおセリシンの分子量は、溶解度測定における溶解、遠心分離後に回収して得られる水溶液を用いて測定を行った。またＳＤＳ－ＰＡＧＥの結果を図２に示す。なおゲルにはマルチゲルＩＩミニ グラジェントゲル２－１５％ １７ウェル（コスモ・バイオ株式会社製）を使用した。図２中のレーン１が分子量マーカー（プレシジョン Ｐｌｕｓ プロテインTM２色スタンダード；ＢＩＯ－ＲＡＤ製；製品番号１６１０３７４）、レーン３が実施例１０、レーン４が実施例１１、レーン５が実施例１２、レーン６が実施例１３の結果である。
添加する化合物をラウリル硫酸ナトリウムからポリオキシエチレン（２）ラウリルエーテル硫酸ナトリウム（花王株式会社製、商品名；エマールＥ－２７Ｃ）に、その添加量を、添加後の水溶液中の濃度が表１に示す濃度となるように変更する以外は、実施例１と同様にしてセリシン含有粉末を得た。得られたセリシン含有粉末を用いて測定した、含有されるセリシンの分子量及び溶解度の結果を表１に示す。なおセリシンの分子量は、溶解度測定における溶解、遠心分離後に回収して得られる水溶液を用いて測定を行った。またＳＤＳ－ＰＡＧＥの結果を図２に示す。なおゲルにはマルチゲルＩＩミニ グラジェントゲル２－１５％ １７ウェル（コスモ・バイオ株式会社製）を使用した。図２中のレーン１が分子量マーカー（プレシジョン Ｐｌｕｓ プロテインTM２色スタンダード；ＢＩＯ－ＲＡＤ製；製品番号１６１０３７４）、レーン３が実施例１０、レーン４が実施例１１、レーン５が実施例１２、レーン６が実施例１３の結果である。
【0081】
（実施例１４～１７）
添加する化合物をラウリル硫酸ナトリウムからラウリル硫酸アンモニウム（花王株式会社製、商品名；エマールＡＤ－２５Ｒ）に、その添加量を、添加後の水溶液中の濃度が表１に示す濃度となるように変更する以外は、実施例１と同様にしてセリシン含有粉末を得た。得られたセリシン含有粉末を用いて測定した、含有されるセリシンの分子量及び溶解度の結果を表１に示す。なおセリシンの分子量は、溶解度測定における溶解、遠心分離後に回収して得られる水溶液を用いて測定を行った。またＳＤＳ－ＰＡＧＥの結果を図２に示す。なおゲルにはマルチゲルＩＩミニ グラジェントゲル２－１５％ １７ウェル（コスモ・バイオ株式会社製）を使用した。図２中のレーン１が分子量マーカー（プレシジョン Ｐｌｕｓ プロテインTM２色スタンダード；ＢＩＯ－ＲＡＤ製；製品番号１６１０３７４）、レーン７が実施例１４、レーン８が実施例１５、レーン９が実施例１６、レーン１０が実施例１７の結果である。
添加する化合物をラウリル硫酸ナトリウムからラウリル硫酸アンモニウム（花王株式会社製、商品名；エマールＡＤ－２５Ｒ）に、その添加量を、添加後の水溶液中の濃度が表１に示す濃度となるように変更する以外は、実施例１と同様にしてセリシン含有粉末を得た。得られたセリシン含有粉末を用いて測定した、含有されるセリシンの分子量及び溶解度の結果を表１に示す。なおセリシンの分子量は、溶解度測定における溶解、遠心分離後に回収して得られる水溶液を用いて測定を行った。またＳＤＳ－ＰＡＧＥの結果を図２に示す。なおゲルにはマルチゲルＩＩミニ グラジェントゲル２－１５％ １７ウェル（コスモ・バイオ株式会社製）を使用した。図２中のレーン１が分子量マーカー（プレシジョン Ｐｌｕｓ プロテインTM２色スタンダード；ＢＩＯ－ＲＡＤ製；製品番号１６１０３７４）、レーン７が実施例１４、レーン８が実施例１５、レーン９が実施例１６、レーン１０が実施例１７の結果である。
【0082】
（実施例１８～２１）
添加する化合物をラウリル硫酸ナトリウムから尿素に、その添加量を、添加後の水溶液中の濃度が表１に示す濃度となるように変更する以外は、実施例１と同様にしてセリシン含有粉末を得た。得られたセリシン含有粉末を用いて測定した、含有されるセリシンの分子量及び溶解度の結果を表１に示す。なおセリシンの分子量は、溶解度測定における溶解、遠心分離後に回収して得られる水溶液を用いて測定を行った。またＳＤＳ－ＰＡＧＥの結果を図３に示す。なおゲルにはマルチゲルＩＩミニ グラジェントゲル２－１５％ １７ウェル（コスモ・バイオ株式会社製）を使用した。図３中のレーン１が分子量マーカー（プレシジョン Ｐｌｕｓ プロテインTM２色スタンダード；ＢＩＯ－ＲＡＤ製；製品番号１６１０３７４）、レーン３が実施例２０の結果である。なお図３中のレーン２は、実施例１における透析液の遠心分離後の上澄み液を用いてＳＤＳ－ＰＡＧＥを行った結果である。
添加する化合物をラウリル硫酸ナトリウムから尿素に、その添加量を、添加後の水溶液中の濃度が表１に示す濃度となるように変更する以外は、実施例１と同様にしてセリシン含有粉末を得た。得られたセリシン含有粉末を用いて測定した、含有されるセリシンの分子量及び溶解度の結果を表１に示す。なおセリシンの分子量は、溶解度測定における溶解、遠心分離後に回収して得られる水溶液を用いて測定を行った。またＳＤＳ－ＰＡＧＥの結果を図３に示す。なおゲルにはマルチゲルＩＩミニ グラジェントゲル２－１５％ １７ウェル（コスモ・バイオ株式会社製）を使用した。図３中のレーン１が分子量マーカー（プレシジョン Ｐｌｕｓ プロテインTM２色スタンダード；ＢＩＯ－ＲＡＤ製；製品番号１６１０３７４）、レーン３が実施例２０の結果である。なお図３中のレーン２は、実施例１における透析液の遠心分離後の上澄み液を用いてＳＤＳ－ＰＡＧＥを行った結果である。
【0083】
（比較例１）
ラウリル硫酸ナトリウムを添加しない以外は、実施例１と同様にしてセリシン含有粉末を得た。得られたセリシン含有粉末を用いて測定した、含有されるセリシンの分子量及び溶解度の結果を表１に示す。なおセリシンの分子量は、溶解度測定における溶解、遠心分離後に回収して得られる水溶液を用いて測定を行った。またＳＤＳ－ＰＡＧＥの結果を図１及び２に示す。なおゲルにはマルチゲルＩＩミニ グラジェントゲル２－１５％ １７ウェル（コスモ・バイオ株式会社製）を使用した。図１のレーン２及び図２のレーン２が比較例１の結果である。
ラウリル硫酸ナトリウムを添加しない以外は、実施例１と同様にしてセリシン含有粉末を得た。得られたセリシン含有粉末を用いて測定した、含有されるセリシンの分子量及び溶解度の結果を表１に示す。なおセリシンの分子量は、溶解度測定における溶解、遠心分離後に回収して得られる水溶液を用いて測定を行った。またＳＤＳ－ＰＡＧＥの結果を図１及び２に示す。なおゲルにはマルチゲルＩＩミニ グラジェントゲル２－１５％ １７ウェル（コスモ・バイオ株式会社製）を使用した。図１のレーン２及び図２のレーン２が比較例１の結果である。
【0084】
（実施例２２）
試験管に、品種改良によって作出された蚕から得られるセリシンホープ繭の添加濃度が１質量％となるように、セリシンホープ繭と０．２５質量％のラウリル硫酸ナトリウム（花王株式会社製、商品名；エマール０Ｓ）水溶液とを添加して、９５℃で３０分間セリシンを抽出した。抽出後、遠心分離で不溶分を除去し、上清のセリシンの濃度からセリシンの抽出率を求め、また該上清を用いてセリシンの分子量を測定した。測定結果を下記表２に示す。またＳＤＳ－ＰＡＧＥの結果を図４に示す。なおゲルにはマルチゲルＩＩミニ グラジェントゲル２－１５％ １７ウェル（コスモ・バイオ株式会社製）を使用した。図４中のレーン１が分子量マーカー（プレシジョン Ｐｌｕｓ プロテインTM２色スタンダード；ＢＩＯ－ＲＡＤ製；製品番号１６１０３７４）、レーン２が実施例２２の結果である。
次に前記上清を凍結乾燥し、セリシン含有粉末を得た。得られたセリシン含有粉末を用いて、含有されるセリシンの溶解度を測定した。測定結果を表３に示す。
試験管に、品種改良によって作出された蚕から得られるセリシンホープ繭の添加濃度が１質量％となるように、セリシンホープ繭と０．２５質量％のラウリル硫酸ナトリウム（花王株式会社製、商品名；エマール０Ｓ）水溶液とを添加して、９５℃で３０分間セリシンを抽出した。抽出後、遠心分離で不溶分を除去し、上清のセリシンの濃度からセリシンの抽出率を求め、また該上清を用いてセリシンの分子量を測定した。測定結果を下記表２に示す。またＳＤＳ－ＰＡＧＥの結果を図４に示す。なおゲルにはマルチゲルＩＩミニ グラジェントゲル２－１５％ １７ウェル（コスモ・バイオ株式会社製）を使用した。図４中のレーン１が分子量マーカー（プレシジョン Ｐｌｕｓ プロテインTM２色スタンダード；ＢＩＯ－ＲＡＤ製；製品番号１６１０３７４）、レーン２が実施例２２の結果である。
次に前記上清を凍結乾燥し、セリシン含有粉末を得た。得られたセリシン含有粉末を用いて、含有されるセリシンの溶解度を測定した。測定結果を表３に示す。
【0085】
（実施例２３～３１）
セリシンホープ繭の添加濃度、ラウリル硫酸ナトリウム水溶液の濃度、セリシン抽出条件（抽出温度、抽出時間）、及び乾燥方法を表２に示すように変更する以外は、実施例２２と同様にしてセリシン含有粉末を得た。各実施例におけるセリシンの抽出率、セリシンの分子量及びセリシンの溶解度の測定結果を表３に示す。またＳＤＳ－ＰＡＧＥの結果を図４～７に示す。なおゲルには、実施例２３～２７ではマルチゲルＩＩミニ グラジェントゲル２－１５％ １７ウェル（コスモ・バイオ株式会社製）を、実施例２８～３１では４－１５％ミニプロティアンＴＧＸ Ｓｔａｉｎ－Ｆｒｅｅゲル（ＢＩＯ－ＲＡＤ製）を使用した。図４中のレーン１が分子量マーカー（プレシジョン Ｐｌｕｓ プロテインTM２色スタンダード；ＢＩＯ－ＲＡＤ製；製品番号１６１０３７４）、レーン３が実施例２４、レーン４が実施例２６、レーン５が実施例２３、レーン６が実施例２５、レーン７が実施例２７の結果である。図５中のレーン１が分子量マーカー（Ｍｕｌｔｉｃｏｌｏｒ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｌａｄｄｅｒ（１０～３５０ｋＰａ）；ニッポン・ジーン製）、レーン２が実施例２８の結果である。図６中のレーン１が分子量マーカー（Ｍｕｌｔｉｃｏｌｏｒ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｌａｄｄｅｒ（１０～３５０ｋＰａ）；ニッポン・ジーン製）、レーン２が実施例２９、レーン３が実施例３０の結果である。図７中のレーン１が分子量マーカー（ＨｉＭａｒｋTM Ｕｎｓｔａｉｎｅｄ；ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ製）、レーン２が実施例３１、レーン３が分子量マーカー（Ｍｕｌｔｉｃｏｌｏｒ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｌａｄｄｅｒ（１０～３５０ｋＰａ）；ニッポン・ジーン製）の結果である。
セリシンホープ繭の添加濃度、ラウリル硫酸ナトリウム水溶液の濃度、セリシン抽出条件（抽出温度、抽出時間）、及び乾燥方法を表２に示すように変更する以外は、実施例２２と同様にしてセリシン含有粉末を得た。各実施例におけるセリシンの抽出率、セリシンの分子量及びセリシンの溶解度の測定結果を表３に示す。またＳＤＳ－ＰＡＧＥの結果を図４～７に示す。なおゲルには、実施例２３～２７ではマルチゲルＩＩミニ グラジェントゲル２－１５％ １７ウェル（コスモ・バイオ株式会社製）を、実施例２８～３１では４－１５％ミニプロティアンＴＧＸ Ｓｔａｉｎ－Ｆｒｅｅゲル（ＢＩＯ－ＲＡＤ製）を使用した。図４中のレーン１が分子量マーカー（プレシジョン Ｐｌｕｓ プロテインTM２色スタンダード；ＢＩＯ－ＲＡＤ製；製品番号１６１０３７４）、レーン３が実施例２４、レーン４が実施例２６、レーン５が実施例２３、レーン６が実施例２５、レーン７が実施例２７の結果である。図５中のレーン１が分子量マーカー（Ｍｕｌｔｉｃｏｌｏｒ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｌａｄｄｅｒ（１０～３５０ｋＰａ）；ニッポン・ジーン製）、レーン２が実施例２８の結果である。図６中のレーン１が分子量マーカー（Ｍｕｌｔｉｃｏｌｏｒ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｌａｄｄｅｒ（１０～３５０ｋＰａ）；ニッポン・ジーン製）、レーン２が実施例２９、レーン３が実施例３０の結果である。図７中のレーン１が分子量マーカー（ＨｉＭａｒｋTM Ｕｎｓｔａｉｎｅｄ；ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ製）、レーン２が実施例３１、レーン３が分子量マーカー（Ｍｕｌｔｉｃｏｌｏｒ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｌａｄｄｅｒ（１０～３５０ｋＰａ）；ニッポン・ジーン製）の結果である。
【0086】
（実施例３２～３５）
ラウリル硫酸ナトリウム水溶液をラウロイルメチルβアラニンナトリウム水溶液に変更（つまり添加する化合物をラウリル硫酸ナトリウムからラウロイルメチルβアラニンナトリウムに変更）し、セリシンホープ繭の添加濃度、前記ラウロイルメチルβアラニンナトリウム水溶液の濃度及びセリシン抽出条件（抽出時間）を表２に示すように変更する以外は、実施例２２と同様にしてセリシン含有粉末を得た。各実施例におけるセリシンの抽出率、セリシンの分子量及びセリシンの溶解度の測定結果を表３に示す。またＳＤＳ－ＰＡＧＥの結果を図８に示す。なおゲルにはマルチゲルＩＩミニ グラジェントゲル２－１５％ １７ウェル（コスモ・バイオ株式会社製）を使用した。図８中のレーン１が分子量マーカー（プレシジョン Ｐｌｕｓ プロテインTM２色スタンダード；ＢＩＯ－ＲＡＤ製；製品番号１６１０３７４）、レーン３が実施例３２、レーン４が実施例３３、レーン５が実施例３４、レーン６が実施例３５の結果である。なお図８中のレーン２は、実施例１における透析液の遠心分離後の上澄み液を用いてＳＤＳ－ＰＡＧＥを行った結果である。
ラウリル硫酸ナトリウム水溶液をラウロイルメチルβアラニンナトリウム水溶液に変更（つまり添加する化合物をラウリル硫酸ナトリウムからラウロイルメチルβアラニンナトリウムに変更）し、セリシンホープ繭の添加濃度、前記ラウロイルメチルβアラニンナトリウム水溶液の濃度及びセリシン抽出条件（抽出時間）を表２に示すように変更する以外は、実施例２２と同様にしてセリシン含有粉末を得た。各実施例におけるセリシンの抽出率、セリシンの分子量及びセリシンの溶解度の測定結果を表３に示す。またＳＤＳ－ＰＡＧＥの結果を図８に示す。なおゲルにはマルチゲルＩＩミニ グラジェントゲル２－１５％ １７ウェル（コスモ・バイオ株式会社製）を使用した。図８中のレーン１が分子量マーカー（プレシジョン Ｐｌｕｓ プロテインTM２色スタンダード；ＢＩＯ－ＲＡＤ製；製品番号１６１０３７４）、レーン３が実施例３２、レーン４が実施例３３、レーン５が実施例３４、レーン６が実施例３５の結果である。なお図８中のレーン２は、実施例１における透析液の遠心分離後の上澄み液を用いてＳＤＳ－ＰＡＧＥを行った結果である。
【0087】
（実施例３６～３９）
ラウリル硫酸ナトリウム水溶液を尿素水溶液に変更（つまり添加する化合物をラウリル硫酸ナトリウムから尿素に変更）し、セリシンホープ繭の添加濃度、前記尿素水溶液の濃度及びセリシン抽出条件（抽出時間）を表２に示すように変更する以外は、実施例２２と同様にしてセリシン含有粉末を得た。各実施例におけるセリシンの抽出率、セリシンの分子量及びセリシンの溶解度の測定結果を表３に示す。またＳＤＳ－ＰＡＧＥの結果を図９に示す。なおゲルにはマルチゲルＩＩミニ グラジェントゲル２－１５％ １７ウェル（コスモ・バイオ株式会社製）を使用した。図９中のレーン１が分子量マーカー（プレシジョン Ｐｌｕｓ プロテインTM２色スタンダード；ＢＩＯ－ＲＡＤ製；製品番号１６１０３７４）、レーン３が実施例３６、レーン４が実施例３７、レーン５が実施例３８、レーン６が実施例３９の結果である。
ラウリル硫酸ナトリウム水溶液を尿素水溶液に変更（つまり添加する化合物をラウリル硫酸ナトリウムから尿素に変更）し、セリシンホープ繭の添加濃度、前記尿素水溶液の濃度及びセリシン抽出条件（抽出時間）を表２に示すように変更する以外は、実施例２２と同様にしてセリシン含有粉末を得た。各実施例におけるセリシンの抽出率、セリシンの分子量及びセリシンの溶解度の測定結果を表３に示す。またＳＤＳ－ＰＡＧＥの結果を図９に示す。なおゲルにはマルチゲルＩＩミニ グラジェントゲル２－１５％ １７ウェル（コスモ・バイオ株式会社製）を使用した。図９中のレーン１が分子量マーカー（プレシジョン Ｐｌｕｓ プロテインTM２色スタンダード；ＢＩＯ－ＲＡＤ製；製品番号１６１０３７４）、レーン３が実施例３６、レーン４が実施例３７、レーン５が実施例３８、レーン６が実施例３９の結果である。
【0088】
（比較例２、３）
ラウリル硫酸ナトリウム水溶液を純水に変更し、セリシンホープ繭の添加濃度及びセリシン抽出条件（抽出温度、抽出時間）を表２に示すように変更する以外は、実施例２２と同様にしてセリシン含有粉末を得た。各比較例におけるセリシンの抽出率、セリシンの分子量及びセリシンの溶解度の測定結果を表３に示す。またＳＤＳ－ＰＡＧＥの結果を図９に示す。なおゲルにはマルチゲルＩＩミニ グラジェントゲル２－１５％ １７ウェル（コスモ・バイオ株式会社製）を使用した。図９中のレーン１が分子量マーカー（プレシジョン Ｐｌｕｓ プロテインTM２色スタンダード；ＢＩＯ－ＲＡＤ製；製品番号１６１０３７４）、レーン２が比較例２の結果である。
ラウリル硫酸ナトリウム水溶液を純水に変更し、セリシンホープ繭の添加濃度及びセリシン抽出条件（抽出温度、抽出時間）を表２に示すように変更する以外は、実施例２２と同様にしてセリシン含有粉末を得た。各比較例におけるセリシンの抽出率、セリシンの分子量及びセリシンの溶解度の測定結果を表３に示す。またＳＤＳ－ＰＡＧＥの結果を図９に示す。なおゲルにはマルチゲルＩＩミニ グラジェントゲル２－１５％ １７ウェル（コスモ・バイオ株式会社製）を使用した。図９中のレーン１が分子量マーカー（プレシジョン Ｐｌｕｓ プロテインTM２色スタンダード；ＢＩＯ－ＲＡＤ製；製品番号１６１０３７４）、レーン２が比較例２の結果である。
【0089】
【表1】
【0090】
【表2】
【0091】
【表3】
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】
【図7】
【図8】
【図9】
