特開 2022-82369 デスモグレイン減少剤

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公開特許公報(A)

(11)【公開番号】P2022082369

(43)【公開日】2022-06-01

(54)【発明の名称】デスモグレイン減少剤

(51)【国際特許分類】

   A61K 8/37 20060101AFI20220525BHJP

   A61Q 1/00 20060101ALI20220525BHJP

   A61Q 19/00 20060101ALI20220525BHJP

   A61K 31/222 20060101ALI20220525BHJP

   A61P 17/00 20060101ALI20220525BHJP

   A61K 47/14 20060101ALI20220525BHJP

【ＦＩ】

A61K8/37

A61Q1/00

A61Q19/00

A61K31/222

A61P17/00

A61K47/14

【審査請求】未請求

【請求項の数】11

【出願形態】ＯＬ

(21)【出願番号】P 2020193880

(22)【出願日】2020-11-20

【公序良俗違反の表示】

（特許庁注：以下のものは登録商標）

１．ＴＲＩＴＯＮ

(71)【出願人】

【識別番号】000113470

【氏名又は名称】ポーラ化成工業株式会社

(71)【出願人】

【識別番号】591082421

【氏名又は名称】丸善製薬株式会社

(74)【代理人】

【識別番号】100137338

【弁理士】

【氏名又は名称】辻田 朋子

(72)【発明者】

【氏名】多田 明弘

(72)【発明者】

【氏名】中原 千尋

(72)【発明者】

【氏名】岩崎 大剛

(72)【発明者】

【氏名】佐藤 日向子

【テーマコード（参考）】

4C076

4C083

4C206

【Ｆターム（参考）】

4C076BB31

4C076CC18

4C076DD45

4C076FF34

4C083AC341

4C083CC03

4C083EE12

4C206AA01

4C206AA02

4C206DB15

4C206DB54

4C206MA01

4C206MA04

4C206MA83

4C206NA14

4C206ZA89

(57)【要約】

【課題】新規なデスモグレイン減少剤を提供すること。
【解決手段】サルビアノリン酸Ａを有効成分とする、デスモグレイン減少剤。
【選択図】図３

【特許請求の範囲】

【請求項1】

サルビアノリン酸Ａを有効成分とする、デスモグレイン減少剤。

【請求項2】

ヒト表皮角化細胞の細胞間接着抑制のための、請求項１に記載のデスモグレイン減少剤。

【請求項3】

減少対象がデスモグレイン１である、請求項１又は２に記載のデスモグレイン減少剤。

【請求項4】

敏感肌の改善及び／又は予防のための、請求項１～３の何れか一項に記載のデスモグレイン減少剤。

【請求項5】

肌の明度改善のための、請求項１～３の何れか一項に記載のデスモグレイン減少剤。

【請求項6】

肌の透明感向上のための、請求項１～３の何れか一項に記載のデスモグレイン減少剤。

【請求項7】

肌の軟化のための、請求項１～３の何れか一項に記載のデスモグレイン減少剤。

【請求項8】

肌への薬効成分浸透補助のための、請求項１～３の何れか一項に記載のデスモグレイン減少剤。

【請求項9】

角層重層剥離の改善及び／又は予防のための、請求項１～３の何れか一項に記載のデスモグレイン減少剤。

【請求項10】

請求項１～９の何れか一項に記載のデスモグレイン減少剤を含む、組成物。

【請求項11】

化粧料又は医薬品である、請求項１０に記載の組成物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、デスモグレイン減少剤、及びデスモグレイン減少剤を含む皮膚外用剤に関する。

【背景技術】

【0002】

肌荒れ、日焼けや乾燥により生じる角層の落屑等の肌状態の悪化に関し、デスモゾーム蛋白質の増加が原因の一つとして知られている。
デスモゾーム蛋白質の量をコントロールする方法として、角層に蓄積したデスモゾーム蛋白質をプロテアーゼにより分解し、ニキビ、フケ、落屑を改善する方法がこれまでに報告されている（特許文献１）。

【0003】

ここで、デスモゾーム蛋白質のうち、特に、デスモグレインが表皮細胞間及び角質細胞間の接着に関与していることが知られている（特許文献２－４）。

【0004】

従来技術として、特許文献２では、アスタキサンチンを含有する角層細胞におけるデスモグレイン減少剤が報告されている。
また、特許文献４では、甘草エキスを有効成分とする皮膚における細胞間接着抑制用経口投与剤が報告されている。

【0005】

ところで、特許文献５－７には、ヨウシュイブキジャコウソウ（Ｗｉｌｄ Ｔｈｙｍｅ，Ｔｈｙｍｕｓ ｓｅｒｐｙｌｌｕｍ、以下ワイルドタイムという）の抽出物やシソ科イブキジャコウソウ属（Ｔｈｙｍｕｓ）植物の抽出物が水分保持機能の向上効果、抗炎症効果、皮膚老化防止効果、紫外線防御効果を有することが報告されている。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0006】

【特許文献1】特表平７－５０５３８３号公報

【特許文献2】特開２０１６－３７５０１号公報

【特許文献3】特許第４００２６３５号

【特許文献4】特許第４１９７１９４号

【特許文献5】特開２００１－１２２７２９号公報

【特許文献6】特開２００６－１６３３７号公報

【特許文献7】特開２００９－２５６２７０号公報

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0007】

前述の先行技術のあるところ、本発明は、デスモグレインを減少させる新規な技術を提供することを課題とする。

【0008】

本発明者らは、鋭意研究の結果、サルビアノリン酸Ａに、デスモグレイン減少作用があることを見出し、本発明を完成させた。

【課題を解決するための手段】

【0009】

上記課題を解決する本発明は、サルビアノリン酸Aを有効成分とする、デスモグレイン減少剤である。
なお、本明細書において、「デスモグレイン減少」の概念は、デスモグレインの減少、デスモグレインの増加抑制の何れも含む。

【0010】

本発明の好ましい形態では、前記デスモグレイン減少剤は、ヒト表皮角化細胞の細胞間接着抑制のために用いられる。

【0011】

本発明の好ましい形態では、前記デスモグレイン減少剤は、デスモグレイン１の減少のために用いられる。

【0012】

本発明の好ましい形態では、前記デスモグレイン減少剤は、敏感肌の予防又は改善のために用いられる。

【0013】

本発明の好ましい形態では、前記デスモグレイン減少剤は、肌の明度改善のために用いられる。

【0014】

本発明の好ましい形態では、前記デスモグレイン減少剤は、肌の透明感向上のために用いられる。

【0015】

本発明の好ましい形態では、前記デスモグレイン減少剤は、肌の軟化のために用いられる。

【0016】

本発明の好ましい形態では、前記デスモグレイン減少剤は、肌への薬効成分浸透補助のために用いられる。

【0017】

本発明の好ましい形態では、前記デスモグレイン減少剤は、角層重層剥離の改善及び／又は予防のために用いられる。

【0018】

前記課題を解決する本発明は、前記デスモグレイン減少剤を含む、組成物である。

【0019】

本発明の好ましい形態では、前記組成物は、化粧料又は医薬品である。

【発明の効果】

【0020】

本発明によれば、ヒト皮膚上に存在するデスモグレインを減少させることができる。

【図面の簡単な説明】

【0021】

【図1】デスモグレイン減少能確認試験の実験結果（コントロール、ワイルドタイムの８０％エタノール抽出物、及び６０％メタノール溶出部）を示す図である。

【図2】デスモグレイン減少能確認試験の実験結果（単離成分１～３）を示す図である。

【図3】デスモグレイン減少能確認試験の実験結果（単離成分４～６、成分７）を示す図である。

【発明を実施するための形態】

【0022】

（１）サルビアノリン酸Ａ
本発明のデスモグレイン減少剤は、サルビアノリン酸Ａを有効成分とする。

【0023】

サルビアノリン酸Ａ（Ｓａｌｖｉａｎｏｌｉｃ ａｃｉｄ Ａ、サルビアノール酸Ａ）の構造を化２に示す。

【0024】

【化1】

【0025】

サルビアノリン酸Ａは、植物の抽出物から単離したものであってもよく、合成したものであってもよい。また、サルビアノリン酸Ａとして、市販のものを用いることができる。

【0026】

サルビアノリン酸Ａは、丹参（Ｓａｌｖｉａ ｍｉｌｔｉｏｒｒｈｉｚａ）又はワイルドタイムの抽出物から単離することができる。
植物体又はその乾燥物１質量部に対して、溶媒を１～２５０質量部加え、室温であれば数日間、沸点付近の温度であれば数時間浸漬する。浸漬後、シリカゲル、合成吸着材、オクタデシルシリル化シリカゲル、イオン交換樹脂等を充填したカラムクロマトグラフィ－などで分画精製することで、サルビアノリン酸Aを得ることができる。

【0027】

抽出溶媒としては、極性溶媒が好ましく、水、エタノ－ル、イソプロピルアルコ－ル、ブタノ－ルなどのアルコ－ル類、１，３－ブチレングリコール、ポリプロピレングリコ－ルなどの多価アルコ－ル類、アセトン、メチルエチルケトンなどのケトン類、ジエチルエ－テル、テトラヒドロフランなどのエ－テル類から選択される１種乃至は２種以上が好適に例示できる。
中でも、抽出溶媒としてエタノール、並びに水及びエタノールの混合溶媒を好ましく挙げることができる。

【0028】

（２）デスモグレイン減少剤
本発明のデスモグレイン減少剤は、デスモグレイン１を減少対象とすることが好ましい。

【0029】

本発明のデスモグレイン減少剤は、敏感肌の改善及び／又は予防のために用いられることが好ましい。
ここで、本明細書における「敏感肌」は、外部刺激（乾燥、紫外線、化合物の塗布）抵抗性が低下（皮膚刺激閾値が低下）した肌質をいう。

【0030】

より具体的には、本明細書における「敏感肌」は、（Ｉ）及び／又は（ＩＩ）で提起される肌質をいう。

【0031】

（Ｉ）「医薬品外用剤、化粧品、植物、紫外線、金属などの物質に反応し、皮膚トラブルを起こしやすい肌。また、アレルギー性物質（花粉、香料など）や刺激性物質（アルコールなど）に過敏な肌」
（ＩＩ）「睡眠不足、過労、生理、季節の変わり目、精神的なストレスなどの状況下で、刺激物に対して一時的に皮膚トラブルを起こしやすくなる肌。」

【0032】

また、本明細書における「敏感肌の改善及び／又は予防のため」は、外部刺激抵抗性が低下（皮膚刺激閾値が低下）した肌質の改善、及び／又は、肌質における外部刺激抵抗性の低下（皮膚刺激閾値の低下）の予防を指す。

【0033】

また、本発明のデスモグレイン減少剤は、ヒト表皮角化細胞の細胞間接着抑制のために用いられることが好ましい。
なお、本明細書において、「細胞間接着」の語は、デスモゾーム蛋白質（デスモグレインを含むたんぱく質群）の増加による角層接着機能異常（細胞接着性の亢進により角層の重層化が進むこと）をいう（要すれば、特許４１９７１９４号、特許第４００２６３５号 参照）。
また、本明細書において、「細胞間接着抑制」の概念は、細胞間接着の予防又は改善の何れも含む。

【0034】

ここで、ヒト表皮角化細胞の細胞間接着が抑制されることで、角層の重層化が抑制され、角層重層剥離を抑制する作用を得ることができる。
すなわち、本願発明のデスモグレイン減少剤は、角層重層剥離の予防、又は改善のために用いることができる。
なお、本明細書において、「角層重層剥離」とは、角層が複数枚重なった状態で皮膚表面から剥がれ落ちることをいう。皮膚が角層重層剥離する状態か否かは、テープストリッピング法により角層を採取し、採取した角層を染色して観察することで確認することができる。

【0035】

また、肌の明度の低い箇所では、デスモグレイン１が多く存在する。ここで、肌の明度の低下は、角層の重層化によるものと考えられる。
上記知見に鑑みると、本発明の有効成分によりデスモグレインを減少させることで、肌の明度改善作用を得ることができる。
すなわち、本発明の有効成分は、肌の明度改善剤としても、使用することができる。
ここで、本明細書において、「肌の明度改善」は、正常状態の肌とデスモグレインの過剰存在により明度の低下した肌との間における、明度の差が少なくなることを指す。

【0036】

また、本発明のデスモグレイン減少剤によれば、より透明感のある肌状態を得ることができる。すなわち、本発明の有効成分は、肌の透明感向上剤としても使用できる。

【0037】

また、肌の硬度が高い箇所では、デスモグレイン１が多く存在する。ここで、肌の硬さの要因は、角層の重層化によるものと考えられる。
上記知見に基づくと、デスモグレインを減少させることにより、肌が柔らかくなる。
つまり、本発明の有効成分によりデスモグレインを減少させることで、肌が柔らかくなる効果を得られる。すなわち、本発明の有効成分は、肌の軟化剤としても、使用できる。

【0038】

ここで、肌が柔らかくなることにより、他の薬剤成分の浸透をより効率的に行うことができる。そのため、本発明の有効成分によりデスモグレインを減少させることで、美白剤といった薬効成分をより効率よく肌に浸透させる効果を得られる。
すなわち、本発明の有効成分は、肌への薬効成分浸透補助剤としても、使用できる。

【0039】

特に、本発明の有効成分は、美白剤と併用するための、美白成分浸透補助剤として使用することが好ましい。

【0040】

（３）組成物
また、本発明は、前述したデスモグレイン減少剤を含む組成物に関する。
中でも、皮膚外用組成物又は経口用組成物の形態とすることが好ましい。

【0041】

皮膚外用組成物としては化粧料、医薬品などが好適に例示できる。

【0042】

中でも、継続的に使用できる化粧料の形態とすることが好ましく、例えば化粧水、乳液、美容液、クリーム、ジェル、サンケア品等の形態とすることができる。

【0043】

皮膚外用組成物全量に対するサルビアノリン酸Ａの濃度は、好ましくは３μｇ／μＬ以上であり、より好ましくは５μｇ／μＬ以上であり、さらに好ましくは８μｇ／μＬ以上であり、特に好ましくは１０μｇ／μＬ以上である。

【0044】

経口組成物とする場合、本発明の有効成分を含む食品用組成物とすることが好ましい。
具体的には、一般食品、錠剤、顆粒剤、ドリンク剤等の剤形を有するサプリメントの形態とすることができる。

【0045】

経口用組成物全体に対するサルビアノリン酸Ａの濃度は、好ましくは３μｇ／μＬ以上であり、より好ましくは５μｇ／μＬ以上であり、さらに好ましくは８μｇ／μＬ以上であり、特に好ましくは１０μｇ／μＬ以上である。

【実施例0046】

［試験例１］ワイルドタイム８０％エタノール抽出物中の成分の精製
ワイルドタイム原料（１．０ｋｇ）を８０％エタノールに浸漬させ、ワイルドタイムの８０％エタノール抽出物を調製した。
調製したワイルドタイムの８０％エタノール抽出物を、ダイヤイオンＨＰ２０カラムを用いて、未吸着／水溶出部、６０％メタノール溶出部、メタノール溶出部、及びアセトン溶出部を得た。
６０％溶出部より、各種クロマトグラフィーを用いることで、ルテオリン７－Ｏ－グルクロニド（ｌｕｔｅｏｌｉｎ ７－Ｏ－ｇｌｕｃｕｒｏｎｉｄｅ、単離成分１、８７ ｍｇ）、アピゲニン７－Ｏ－グルクロニド（ａｐｉｇｅｎｉｎ ７－Ｏ－ｇｌｕｃｕｒｏｎｉｄｅ、単離成分２、２７８ ｍｇ）、エリトリキン（ｅｒｉｔｒｉｃｈｉｎ、単離成分３、４４ ｍｇ）、サルビアノリン酸Ａ（ｓａｌｖｉａｎｏｌｉｃ ａｃｉｄ Ａ、単離成分４、１３ ｍｇ）、ルテオリン５－Ｏ－グルコシド（ｌｕｔｅｏｌｉｎ ５－Ｏ－ｇｌｕｃｏｓｉｄｅ、単離成分５、６０７ ｍｇ）、ジオスメチン５－Ｏ－グルコシド（ｄｉｏｓｍｅｔｉｎ ５－Ｏ－ｇｌｕｃｏｓｉｄｅ、単離成分６、１２４ ｍｇ）を単離した。

【0047】

［試験例２］ワイルドタイム分画物のデスモグレイン減少能確認試験
＜被験試料及びコントロール試料の調製＞
ワイルドタイム原料より調製した８０％エタノール抽出物、６０％メタノール溶出部、単離された６種の成分及びロスマリン酸（ｒｏｓｍａｒｉｎｉｃ ａｃｉｄ、和光純薬株式会社製、成分７）を被験試料とした。

【0048】

ワイルドタイム８０％エタノール抽出物及びワイルドタイム６０％メタノール溶出部については、濃度が６μｇ／μＬとなるようにＤＭＳＯで調製した。調製したものを、５０ｍＬチューブに分注した２０ｍＬのＰＢＳに１００μＬ（終濃度３０μｇ／ｍＬ）添加した後ボルテックスで撹拌し、被験試料を得た。
単離成分１～６及び成分７については、濃度が２μｇ／μＬになるようにＤＭＳＯで調製した。調製したものを、５０ｍＬチューブに分注した２０ｍＬのＰＢＳに１０μＬ（終濃度１μｇ／ｍＬ、低濃度試料）または１００μＬ（終濃度１０μｇ／ｍＬ、高濃度試料）添加し、ボルテックスで撹拌した。
低濃度試料については、９０μＬのＤＭＳＯを添加し、これを被験試料とした。
また、コントロール試料として、１００μＬのＤＭＳＯ（終濃度０．５％）を用意した。

【0049】

＜角層細胞試料の調製工程＞
テープストリッピング法によりヒト前腕外側の角層４層目を採取し、角層が付着したセロハンテープを約４ｍｍの四方に切り取り、スライドガラスに貼り付けた。スライドガラスをキシレンに一晩浸漬させた後、キシレンへの１０分間浸漬を２回繰り返し、スライドガラス上の水滴がなくなるまで風乾させた。

【0050】

＜免疫染色試験＞
風乾後、コントロール試料含有ＰＢＳ又は被験試料含有ＰＢＳにスライドガラスを２４時間浸漬させた。２４時間後、スライドガラスをＰＢＳで濯ぎ、４％ＰＦＡに１５分間浸漬させ、角層細胞を固定した。
次いで、スライドガラスをＰＢＳで濯ぎ、０．５％Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ－１００／ＰＢＳに５分間室温で浸漬させ、透過処理を行った。さらに、ＰＢＳで濯いだ後、２０％ブロックエース（ケー・エー・シー）により、１時間室温でブロッキングを行った。その後、一次抗体（ａｎｔｉ－Ｄｅｓｍｏｇｌｅｉｎ １ ｍｏｕｓｅ ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ， ＤＳＧ１－Ｐ２３；ＰＲＯＧＥＮ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｉｋ ＧｍｂＨ）による反応を室温で２時間行った。

【0051】

ＰＢＳへの５分間浸漬を３回繰り返した後、遮光した状態で二次抗体（Ｇｏａｔ ａｎｔｉ－Ｍｏｕｓｅ ＩｇＧ（Ｈ＋Ｌ）Ｃｒｏｓｓ－Ａｄｓｏｒｂｅｄ Ｓｅｃｏｎｄａｒｙ Ａｎｔｉｂｏｄｙ， Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ ４８８； Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）による反応を室温で１時間行った。ＰＢＳへの５分間浸漬を３回繰り返した後、蒸留水で２回すすぎ、サンプルを封入した。

【0052】

その後、測定用試料をオールインワン蛍光顕微鏡ＢＺ－Ｘ８１０（ＫＥＹＥＮＣＥ）を用いて、それぞれの試料について４つの解析用画像を撮影した。４つの解析用画像について、解析領域全体の面積を１００％として、蛍光部分（染色されたデスモグレイン１）の面積を算出し、蛍光部分の面積の平均値を算出した。結果を図１、図２及び図３に示す。

【0053】

また、コントロール試料に対する各被験試料のデスモグレイン１量減少率（Ｄｓｇ－１減少率）を、以下の式により算出した。結果を表１に示す。

【0054】

（デスモグレイン１量減少率の計算式）
デスモグレイン１量減少率（％）＝（１－Ａ／Ｂ）×１００
Ａ：被験試料添加時の解析用画像全体の面積当たりのＤｓｇ－１量（％）
Ｂ：コントロール試料の解析用画像全体の面積当たりのＤｓｇ－１量（％）

【0055】

【表1】

【0056】

ワイルドタイム８０％エタノール抽出物及びワイルドタイム６０％メタノール溶出部、並びに単離成分３（エリトリキン）及び単離成分４（サルビアノリン酸Ａ）に、有意なＤｓｇ－１減少作用が認められた。

【産業上の利用可能性】

【0057】

本発明は、様々な肌状態を改善する化粧品、及び医薬品に応用することができる。

【図1】

【図2】

【図3】