特開2023-15419IP Force 特許公報全文掲載

技術分野

TBK1/IKKe阻害剤を利用した核酸導入に関する技術が開示される。

要約特許出願時に添付された[要約書]

【課題】細胞内への核酸導入を効率的に行う手段を提供すること。
【解決手段】細胞を少なくとも2種類のTBK1/IKKe阻害剤で処理することを含む、方法。
【選択図】なし

発明が解決しようとする課題[発明の詳細な説明]から抜粋

細胞内への核酸導入を効率的に行う手段を提供することが1つの課題である。

課題を解決するための手段[発明の詳細な説明]から抜粋

項1. 細胞を少なくとも2種類のTBK1/IKKe阻害剤で処理することを含む、方法(但し、核酸認識Toll様受容体阻害剤で細胞を処理することを含まない)。 項2. 細胞への核酸導入効率を向上させるため、又は核酸導入前に細胞を前処理するための、項1に記載の方法。 項3. 該少なくとも2種類のTBK1/IKKe阻害剤がアザキサントン誘導体であるTBK1/IKKe阻害剤及びピリミジン誘導体・・・ 続きを知財ポータルサイト IP Force にログインして見る

発明の効果[発明の詳細な説明]から抜粋

効率的な遺伝子導入を可能にする。

この発明についての権利主張の範囲[特許請求の範囲]

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この特許公報に記載されている図面[図面の簡単な説明]から抜粋

【図1】 野生型マウス線維芽細胞(MEF)、p62遺伝子欠損マウス線維芽細胞(p62KO MEF)、p62タンパクを発現させたp62遺伝子欠損マウス線維芽細胞(p62KO MEF +p62WT) 、S405がリン酸化されない変異型p62タンパクを発現させたp62遺伝子欠損マウス線維芽細胞(p62KO MEF +SA) 、にLuciferase発現ベクターを0~200ngで導入し、28時間後にLuciferase活性を測定した結果を示す。縦軸は相対的Luciferase活性(luc/RT)を示す。
【図2】 野生型マウス線維芽細胞(MEF)およびp62遺伝子欠損マウス線維芽細胞(p62KO MEF)にBX795 1μMを添加したのちLuciferase発現ベクターを0または100ngで導入し、28時間後にLuciferase活性を測定した結果を示す。縦軸はBX795添加時の活性を100%とした相対的Luciferase活性(luc/RT)を示す。 DMSO(溶媒)は阻害剤未添加のコントロールとして用いた。
【図3】 野生型マウス線維芽細胞(MEF) にTBK1阻害剤(BX795、Amlexanox、BX795 とAmlexanoxの混合剤)をそれぞれ添加したのちLuciferase発現ベクターを導入し、28時間後にLuciferase活性を測定した結果を示す。DMSO(溶媒)は阻害剤未添加のコントロールとして用いた。縦軸は阻害剤未添加時の相対的Luciferase活性(luc/RT)を1としたときの相対的活性値を示す。
【図4】 野生型マウス線維芽細胞(MEF) にTBK1 阻害剤を一剤または二剤添加したのちLuciferase発現ベクター100ngを導入し、28時間後にLuciferase活性を測定した結果を示す。DMSO(溶媒)は阻害剤未添加のコントロールとして用いた。縦軸は阻害剤未添加時の相対的Luciferase活性(luc/RT)を1としたときの相対的活性値を示す。
【図5】 ヒト子宮頸がん由来細胞株(HeLa)、ヒト前立腺癌由来株(LNCaP)、ヒトT細胞白血病由来細胞株(Jurkat)、ヒト急性単球白血病由来細胞株(THP-1)にTBK1阻害剤(BX795、Amlexanox、BX795とAmlexanoxの混合剤)を添加したのちLuciferase発現ベクターを導入し、28時間後にLuciferase活性を測定した結果を示す。DMSO(溶媒)は阻害剤未添加のコントロールとして用いた。縦軸は阻害剤未添加時の相対的Luciferase活性(luc/RT)を1としたときの相対的活性値を示す。
【図6】 野生型マウス線維芽細胞(MEF)にTBK1阻害剤(BX795、Amlexanox、BX795とAmlexanoxの混合剤)を一剤または二剤添加したのちGFP発現ベクター2μgを導入し、30時間後にGFPの発現を蛍光顕微鏡にて観察した。DMSO(溶媒)は阻害剤未添加のコントロールとして用いた。
【図7】 野生型マウス線維芽細胞(MEF)に表記のTBK1阻害剤(BX795、Amlexanox、BX795とAmlexanoxの混合剤)を一剤または二剤添加したのちGFP発現ベクター2μgを導入し、30時間後にGFPの発現を蛍光顕微鏡にて観察した。DMSO(溶媒)は阻害剤未添加のコントロールとして用いた。

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