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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公開特許公報(A)
(11)【公開番号】P2024022496
(43)【公開日】2024-02-16
(54)【発明の名称】抗菌組成物
(51)【国際特許分類】
A61K 31/19 20060101AFI20240208BHJP
C07C 67/30 20060101ALI20240208BHJP
C07C 57/56 20060101ALI20240208BHJP
C07C 69/65 20060101ALI20240208BHJP
C07C 69/734 20060101ALI20240208BHJP
C07C 69/732 20060101ALI20240208BHJP
A61P 31/04 20060101ALI20240208BHJP
A61K 31/4406 20060101ALI20240208BHJP
【ＦＩ】
A61K31/19
C07C67/30 CSP
C07C57/56
C07C69/65
C07C69/734 Z
C07C69/732 Z
A61P31/04
A61K31/4406
【審査請求】未請求
【請求項の数】8
【出願形態】ＯＬ
(21)【出願番号】P 2023112375
(22)【出願日】2023-07-07
(31)【優先権主張番号】P 2022124162
(32)【優先日】2022-08-03
(33)【優先権主張国・地域又は機関】JP
(71)【出願人】
【識別番号】000125370
【氏名又は名称】学校法人東京理科大学
(74)【代理人】
【識別番号】100106002
【弁理士】
【氏名又は名称】正林 真之
(74)【代理人】
【識別番号】100136939
【弁理士】
【氏名又は名称】岸武 弘樹
(72)【発明者】
【氏名】椎名 勇
(72)【発明者】
【氏名】村田 貴嗣
【テーマコード（参考）】
4C086
4C206
4H006
【Ｆターム（参考）】
4C086AA01
4C086AA02
4C086BC17
4C086MA01
4C086MA04
4C086NA14
4C086ZB35
4C206AA01
4C206AA02
4C206DA12
4C206KA04
4C206MA01
4C206MA04
4C206NA14
4C206ZB35
4H006AA01
4H006AA02
4H006AA03
4H006AB29
4H006AC22
4H006AC41
4H006AC80
4H006BJ30
4H006BM10
4H006BM72
4H006BM73
4H006BN10
4H006BP10
4H006BS10
4H006KA31
4H006KC14
4H006KF20
(57)【要約】 （修正有）
【課題】タンザワ酸Ｂ類縁体を有効成分として含有する新規な抗菌組成物を提供する。
【解決手段】本発明に係る抗菌組成物は、下記式（１）で表される化合物（但し、タンザワ酸Ｂを除く。）と、薬学的に許容される担体とを含有する。
【選択図】なし
【解決手段】本発明に係る抗菌組成物は、下記式（１）で表される化合物（但し、タンザワ酸Ｂを除く。）と、薬学的に許容される担体とを含有する。
【選択図】なし
【特許請求の範囲】
【請求項1】
下記式（１）で表される化合物（但し、タンザワ酸Ｂを除く。）と、薬学的に許容される担体とを含有する抗菌組成物。
［式中、Ｒ１、Ｒ３～Ｒ８は、それぞれ独立に水素原子又はアルキル基を示す。Ｒ２は、水素原子、又は－ＯＲａ若しくは－ＮＲｂＲｃで表される基を示す。Ｒ９は、－ＣＨ２ＯＲｄ、－Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、－Ｃ（Ｏ）Ｒｄ、－ＣＨ２ＮＲｅＲｆ、又は－Ｃ（Ｏ）ＮＲｅＲｆで表される基を示す。Ｒａ～Ｒｆは、それぞれ独立に水素原子、置換基を有していてもよいアルキル基、置換基を有していてもよいアリール基、置換基を有していてもよいヘテロアリール基、置換基を有していてもよいアリールアルキル基、又は置換基を有していてもよいヘテロアリールアルキル基を示す。Ｒ１０は、水素原子、アルキル基、臭素原子、又は塩素原子を示す。］
【化1】
【請求項2】
前記式（１）中、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ６がそれぞれ独立にアルキル基であり、Ｒ２が水素原子又は－ＯＲａで表される基であり、Ｒａが水素原子又はアルコキシアルキル基であり、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ７、Ｒ８が水素原子であり、Ｒ９が－Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ又は－Ｃ（Ｏ）ＮＲｅＲｆで表される基であり、Ｒｄが水素原子又はヘテロアリールアルキル基であり、Ｒｅが水素原子であり、Ｒｆがヘテロアリールアルキル基である、請求項１に記載の抗菌組成物。
【請求項3】
細菌感染症の予防又は治療に用いられる、請求項１又は２に記載の抗菌組成物。
【請求項4】
前記細菌感染症が、黄色ブドウ球菌、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌（ＭＲＳＡ）、腸球菌、バンコマイシン耐性腸球菌（ＶＲＥ）、又は枯草菌によって引き起こされる感染症である、請求項３に記載の抗菌組成物。
【請求項5】
下記式（１Ｃ）で表される化合物。
［式中、Ｒ１、Ｒ３～Ｒ８は、それぞれ独立に水素原子又はアルキル基を示す。Ｒ２は、水素原子、又は－ＯＲａ若しくは－ＮＲｂＲｃで表される基を示す。Ｒ９は、－ＣＨ２ＯＲｄ、－Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、－Ｃ（Ｏ）Ｒｄ、－ＣＨ２ＮＲｅＲｆ、又は－Ｃ（Ｏ）ＮＲｅＲｆで表される基を示す。Ｒａ～Ｒｆは、それぞれ独立に水素原子、置換基を有していてもよいアルキル基、置換基を有していてもよいアリール基、置換基を有していてもよいヘテロアリール基、置換基を有していてもよいアリールアルキル基、又は置換基を有していてもよいヘテロアリールアルキル基を示す。］
【化2】
【請求項6】
前記式（１Ｃ）中、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ６がそれぞれ独立にアルキル基であり、Ｒ２が水素原子又は－ＯＲａで表される基であり、Ｒａが水素原子又はアルコキシアルキル基であり、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ７、Ｒ８が水素原子であり、Ｒ９が－Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ又は－Ｃ（Ｏ）ＮＲｅＲｆで表される基であり、Ｒｄが水素原子又はヘテロアリールアルキル基であり、Ｒｅが水素原子であり、Ｒｆがヘテロアリールアルキル基である、請求項５に記載の化合物。
【請求項7】
下記式（１Ｃ）で表される化合物を製造する製造方法であって、下記式（４Ｃ）で表される化合物から下記式（１Ｃ）で表される化合物を製造することを含む製造方法。
［式中、Ｒ１、Ｒ３～Ｒ８は、それぞれ独立に水素原子又はアルキル基を示す。Ｒ２は、水素原子、又は－ＯＲａ若しくは－ＮＲｂＲｃで表される基を示す。Ｒ９は、－ＣＨ２ＯＲｄ、－Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、－Ｃ（Ｏ）Ｒｄ、－ＣＨ２ＮＲｅＲｆ、又は－Ｃ（Ｏ）ＮＲｅＲｆで表される基を示す。Ｒａ～Ｒｆは、それぞれ独立に水素原子、置換基を有していてもよいアルキル基、置換基を有していてもよいアリール基、置換基を有していてもよいヘテロアリール基、置換基を有していてもよいアリールアルキル基、又は置換基を有していてもよいヘテロアリールアルキル基を示す。］
［式中、Ｒ１、Ｒ３～Ｒ８は、前記と同義である。Ｒ１１は、アルキル基を示す。Ｚは、ヒドロキシ基の保護基を示す。］
【化3】
【化4】
【請求項8】
下記式（６）で表される化合物と下記式（５Ｃ）で表される化合物とをホーナー・ワズワース・エモンス反応に付して前記式（４Ｃ）で表される化合物を製造することを含む、請求項７に記載の製造方法。
［式中、Ｒ１、Ｒ３～Ｒ８、Ｚは、前記と同義である。］
［式中、Ｒ１１は、前記と同義である。Ｒ１２は、それぞれ独立にアルキル基を示す。］
【化5】
【化6】
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、抗菌組成物に関する。
【背景技術】
【0002】
タンザワ酸Ｂは、真菌ペニシリウム・シトリヌムより単離された以下の構造を有する化合物であり、抗菌作用を有することが知られている（例えば、特許文献１参照）。
【0003】
【化1】
【先行技術文献】
【特許文献】
【0004】
【特許文献1】特開平７－１７９３９１号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0005】
上記のとおり、タンザワ酸Ｂは、抗菌作用を有するものであるが、より抗菌活性の高い化合物を得るためには、タンザワ酸Ｂをリード化合物とした新たな類縁体の開発も望まれる。
【0006】
そこで、本発明は、タンザワ酸Ｂ類縁体を有効成分として含有する新規な抗菌組成物を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【0007】
上記課題を解決するための具体的な手段には、以下の実施態様が含まれる。
＜１＞ 下記式（１）で表される化合物（但し、タンザワ酸Ｂを除く。）と、薬学的に許容される担体とを含有する抗菌組成物。
［式中、Ｒ１、Ｒ３～Ｒ８は、それぞれ独立に水素原子又はアルキル基を示す。Ｒ２は、水素原子、又は－ＯＲａ若しくは－ＮＲｂＲｃで表される基を示す。Ｒ９は、－ＣＨ２ＯＲｄ、－Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、－Ｃ（Ｏ）Ｒｄ、－ＣＨ２ＮＲｅＲｆ、又は－Ｃ（Ｏ）ＮＲｅＲｆで表される基を示す。Ｒａ～Ｒｆは、それぞれ独立に水素原子、置換基を有していてもよいアルキル基、置換基を有していてもよいアリール基、置換基を有していてもよいヘテロアリール基、置換基を有していてもよいアリールアルキル基、又は置換基を有していてもよいヘテロアリールアルキル基を示す。Ｒ１０は、水素原子、アルキル基、臭素原子、又は塩素原子を示す。］
＜１＞ 下記式（１）で表される化合物（但し、タンザワ酸Ｂを除く。）と、薬学的に許容される担体とを含有する抗菌組成物。
【化2】
【0008】
＜２＞ 前記式（１）中、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ６がそれぞれ独立にアルキル基であり、Ｒ２が水素原子又は－ＯＲａで表される基であり、Ｒａが水素原子又はアルコキシアルキル基であり、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ７、Ｒ８が水素原子であり、Ｒ９が－Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ又は－Ｃ（Ｏ）ＮＲｅＲｆで表される基であり、Ｒｄが水素原子又はヘテロアリールアルキル基であり、Ｒｅが水素原子であり、Ｒｆがヘテロアリールアルキル基である、＜１＞に記載の抗菌組成物。
【0009】
＜３＞ 細菌感染症の予防又は治療に用いられる、＜１＞又は＜２＞に記載の抗菌組成物。
【0010】
＜４＞ 前記細菌感染症が、黄色ブドウ球菌、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌（ＭＲＳＡ）、腸球菌、バンコマイシン耐性腸球菌（ＶＲＥ）、又は枯草菌によって引き起こされる感染症である、＜３＞に記載の抗菌組成物。
【0011】
＜５＞ 下記式（１Ｃ）で表される化合物。
［式中、Ｒ１、Ｒ３～Ｒ８は、それぞれ独立に水素原子又はアルキル基を示す。Ｒ２は、水素原子、又は－ＯＲａ若しくは－ＮＲｂＲｃで表される基を示す。Ｒ９は、－ＣＨ２ＯＲｄ、－Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、－Ｃ（Ｏ）Ｒｄ、－ＣＨ２ＮＲｅＲｆ、又は－Ｃ（Ｏ）ＮＲｅＲｆで表される基を示す。Ｒａ～Ｒｆは、それぞれ独立に水素原子、置換基を有していてもよいアルキル基、置換基を有していてもよいアリール基、置換基を有していてもよいヘテロアリール基、置換基を有していてもよいアリールアルキル基、又は置換基を有していてもよいヘテロアリールアルキル基を示す。］
【化3】
【0012】
＜６＞ 前記式（１Ｃ）中、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ６がそれぞれ独立にアルキル基であり、Ｒ２が水素原子又は－ＯＲａで表される基であり、Ｒａが水素原子又はアルコキシアルキル基であり、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ７、Ｒ８が水素原子であり、Ｒ９が－Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ又は－Ｃ（Ｏ）ＮＲｅＲｆで表される基であり、Ｒｄが水素原子又はヘテロアリールアルキル基であり、Ｒｅが水素原子であり、Ｒｆがヘテロアリールアルキル基である、＜５＞に記載の化合物。
【0013】
＜７＞ 下記式（１Ｃ）で表される化合物を製造する製造方法であって、下記式（４Ｃ）で表される化合物から下記式（１Ｃ）で表される化合物を製造することを含む製造方法。
［式中、Ｒ１、Ｒ３～Ｒ８は、それぞれ独立に水素原子又はアルキル基を示す。Ｒ２は、水素原子、又は－ＯＲａ若しくは－ＮＲｂＲｃで表される基を示す。Ｒ９は、－ＣＨ２ＯＲｄ、－Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、－Ｃ（Ｏ）Ｒｄ、－ＣＨ２ＮＲｅＲｆ、又は－Ｃ（Ｏ）ＮＲｅＲｆで表される基を示す。Ｒａ～Ｒｆは、それぞれ独立に水素原子、置換基を有していてもよいアルキル基、置換基を有していてもよいアリール基、置換基を有していてもよいヘテロアリール基、置換基を有していてもよいアリールアルキル基、又は置換基を有していてもよいヘテロアリールアルキル基を示す。］
［式中、Ｒ１、Ｒ３～Ｒ８は、前記と同義である。Ｒ１１は、アルキル基を示す。Ｚは、ヒドロキシ基の保護基を示す。］
【化4】
【化5】
【0014】
＜８＞ 下記式（６）で表される化合物と下記式（５Ｃ）で表される化合物とをホーナー・ワズワース・エモンス反応に付して前記式（４Ｃ）で表される化合物を製造することを含む、＜７＞に記載の製造方法。
［式中、Ｒ１、Ｒ３～Ｒ８、Ｚは、前記と同義である。］
［式中、Ｒ１１は、前記と同義である。Ｒ１２は、それぞれ独立にアルキル基を示す。］
【化6】
【化7】
【発明の効果】
【0015】
本発明によれば、タンザワ酸Ｂ類縁体を有効成分として含有する新規な抗菌組成物を提供することができる。
【発明を実施するための形態】
【0016】
＜抗菌組成物＞
本実施形態に係る抗菌組成物は、下記式（１）で表される化合物（但し、タンザワ酸Ｂを除く。）と、薬学的に許容される担体とを含有する。
本実施形態に係る抗菌組成物は、下記式（１）で表される化合物（但し、タンザワ酸Ｂを除く。）と、薬学的に許容される担体とを含有する。
【0017】
【化8】
【0018】
上記式（１）中、Ｒ１、Ｒ３～Ｒ８は、それぞれ独立に水素原子又はアルキル基を示す。Ｒ２は、水素原子、又は－ＯＲａ若しくは－ＮＲｂＲｃで表される基を示す。Ｒ９は、－ＣＨ２ＯＲｄ、－Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、－Ｃ（Ｏ）Ｒｄ、－ＣＨ２ＮＲｅＲｆ、又は－Ｃ（Ｏ）ＮＲｅＲｆで表される基を示す。Ｒａ～Ｒｆは、それぞれ独立に水素原子、置換基を有していてもよいアルキル基、置換基を有していてもよいアリール基、置換基を有していてもよいヘテロアリール基、置換基を有していてもよいアリールアルキル基、又は置換基を有していてもよいヘテロアリールアルキル基を示す。Ｒ１０は、水素原子、アルキル基、臭素原子、又は塩素原子を示す。
【0019】
Ｒ１、Ｒ３～Ｒ８のアルキル基としては、炭素数１～２０のアルキル基が好ましく、炭素数１～６のアルキル基がより好ましく、炭素数１～４のアルキル基がさらに好ましい。アルキル基は、直鎖状、分岐鎖状、及び環状のいずれであってもよい。アルキル基の具体例としては、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、ｓｅｃ－ブチル基、イソブチル基、ｔｅｒｔ－ブチル基、ペンチル基、イソペンチル基、シクロペンチル基、ヘキシル基、シクロヘキシル基等が挙げられる。
【0020】
Ｒ１、Ｒ６としては、それぞれ独立にアルキル基（特には炭素数１～４のアルキル基）が好ましく、Ｒ３としては、水素原子又はアルキル基（特には炭素数１～４のアルキル基）が好ましく、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ７、Ｒ８としては、水素原子が好ましい。
【0021】
Ｒａ～Ｒｆのアルキル基としては、炭素数１～２０のアルキル基が好ましく、炭素数１～６のアルキル基がより好ましく、炭素数１～４のアルキル基がさらに好ましい。アルキル基は、直鎖状、分岐鎖状、及び環状のいずれであってもよい。アルキル基の具体例としては、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、ｓｅｃ－ブチル基、イソブチル基、ｔｅｒｔ－ブチル基、ペンチル基、イソペンチル基、シクロペンチル基、ヘキシル基、シクロヘキシル基等が挙げられる。
【0022】
Ｒａ～Ｒｆのアリール基としては、炭素数６～２０の単環式又は多環式芳香族炭化水素基が好ましく、炭素数６～１２の単環式又は多環式芳香族炭化水素基がより好ましい。アリール基の具体例としては、フェニル基、ナフチル基、アントリル基、フェナントリル基、ピレニル基等が挙げられる。
【0023】
Ｒａ～Ｒｆのヘテロアリール基としては、酸素原子、硫黄原子、及び窒素原子から選ばれるヘテロ原子を１～４個含む、環構成炭素数２～９の単環式又は多環式芳香族複素環基が好ましく、環構成炭素数３～５の単環式芳香族複素環基がより好ましい。ヘテロアリール基の具体例としては、ピロリル基、ピリジル基、イミダゾリル基、ピラゾリル基、ピラジニル基、ピリダジニル基、ピリミジニル基、トリアゾリル基、テトラゾリル基、フラニル基、チエニル基、オキサゾリル基、イソオキサゾリル基、オキサジアゾリル基、チアゾリル基、イソチアゾリル基、チアジアゾリル基、インドリル基、イソインドリル基、ベンズイミダゾリル基、インダゾリル基、ベンゾトリアゾリル基、テトラヒドロキノリル基、キノリル基、テトラヒドロイソキノリル基、イソキノリル基、キノリジニル基、シンノリニル基、フタラジニル基、キナゾリニル基、キノキサリニル基、ナフチリジニル基、ピロロピリジル基、イミダゾピリジル基、ピラゾロピリジル基、ピリドピラジル基、プリニル基、プテリジニル基、ベンゾフラニル基、イソベンゾフラニル基、ベンゾチエニル基、ベンゾオキサゾリル基、ベンゾイソオキサゾリル基、ベンゾオキサジアゾリル基、ベンゾチアゾリル基、ベンゾイソチアゾリル基、ベンゾチアジアゾリル基、チアゾロピリジル基等が挙げられる。
【0024】
Ｒａ～Ｒｆのアリールアルキル基としては、上記のアリール基で置換された炭素数１～６のアルキル基が好ましく、上記のアリール基で置換された炭素数１～４のアルキル基がより好ましい。アリールアルキル基の具体例としては、ベンジル基、フェネチル基、３－フェニルプロピル基、４－フェニルブチル基、１－フェニルエチル基、２－フェニルプロパン－２－イル基等が挙げられる。
【0025】
Ｒａ～Ｒｆのヘテロアリールアルキル基としては、上記のヘテロアリール基で置換された炭素数１～６のアルキル基が好ましく、上記のヘテロアリール基で置換された炭素数１～４のアルキル基がより好ましい。ヘテロアリールアルキル基の具体例としては、ピリジルメチル基、ピリジルエチル基、イミダゾリルメチル基、イミダゾリルエチル基、ピラゾリルメチル基、ピラゾリルエチル基、ピラジニルメチル基、ピラジニルエチル基、ピリダジニルメチル基、ピリダジニルエチル基、ピリミジニルメチル基、ピリミジニルエチル基、オキサゾリルメチル基、オキサゾリルエチル基、チアゾリルメチル基、チアゾリルエチル基等が挙げられる。
【0026】
上記のアルキル基、アリール基、ヘテロアリール基、アリールアルキル基、又はヘテロアリールアルキル基が有していてもよい置換基としては、ヒドロキシ基、アルコキシ基、ヒドロキシアルキル基、アミノ基、モノ又はジアルキルアミノ基、アルコキシカルボニル基、ハロゲン原子等が挙げられる。置換基としてのアルコキシ基、ヒドロキシアルキル基、モノ又はジアルキルアミノ基、及びアルコキシカルボニル基は、アルキル部の炭素数が１～４であることが好ましい。置換基の具体例としては、ヒドロキシ基、メトキシ基、エトキシ基、ヒドロキシメチル基、ヒドロキシエチル基、アミノ基、モノメチルアミノ基、ジメチルアミノ基、メトキシカルボニル基、エトキシカルボニル基、塩素原子、フッ素原子等が挙げられる。
【0027】
Ｒ２としては、水素原子又は－ＯＲａで表される基が好ましく、このときのＲａとしては、水素原子、アルキル基、又はアルコキシアルキル基が好ましい。好ましいＲ２としては、水素原子、ヒドロキシ基、メトキシ基、エトキシ基、メトキシメトキシ基等が挙げられる。
【0028】
Ｒ９としては、－ＣＨ２ＯＲｄ、－Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、又は－Ｃ（Ｏ）ＮＲｅＲｆで表される基が好ましく、－Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ又は－Ｃ（Ｏ）ＮＲｅＲｆで表される基がより好ましい。Ｒ９が－ＣＨ２ＯＲｄで表される基である場合、Ｒｄとしては、水素原子又は炭素数１～６のアルキル基（特には炭素数１～４のアルキル基）が好ましい。この場合のＲｄの具体例としては、水素原子、メチル基等が挙げられる。Ｒ９が－Ｃ（Ｏ）ＯＲｄで表される基である場合、Ｒｄとしては、水素原子、炭素数１～４のアルキル基、アリールアルキル基、又はヘテロアリールアルキル基が好ましい。この場合のＲｄの具体例としては、水素原子、メチル基、ピリジン－３－イルメチル基、ピリジン－４－イルメチル基、オキサゾール－４－イルメチル基、オキサゾール－５－イルメチル基、チアゾール－２－イルメチル基、チアゾール－５－イルメチル基等が挙げられる。Ｒ９が－Ｃ（Ｏ）ＮＲｅＲｆで表される基である場合、Ｒｅとしては、水素原子が好ましく、Ｒｆとしては、アリールアルキル基又はヘテロアリールアルキル基が好ましい。この場合のＲｆの具体例としては、ピリジン－２－イルメチル基、ピリジン－３－イルメチル基、オキサゾール－４－イルメチル基、オキサゾール－５－イルメチル基、チアゾール－２－イルメチル基、チアゾール－５－イルメチル基等が挙げられる。
【0029】
Ｒ１０のアルキル基としては、炭素数１～２０のアルキル基が好ましく、炭素数１～６のアルキル基がより好ましく、炭素数１～４のアルキル基がさらに好ましい。アルキル基は、直鎖状、分岐鎖状、及び環状のいずれであってもよい。アルキル基の具体例としては、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、ｓｅｃ－ブチル基、イソブチル基、ｔｅｒｔ－ブチル基、ペンチル基、イソペンチル基、シクロペンチル基、ヘキシル基、シクロヘキシル基等が挙げられる。
【0030】
上記式（１）で表される化合物のうち好ましいものとしては、例えば、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ６がそれぞれ独立にアルキル基であり、Ｒ２が水素原子又は－ＯＲａで表される基であり、Ｒａが水素原子又はアルコキシアルキル基であり、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ７、Ｒ８が水素原子であり、Ｒ９が－Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ又は－Ｃ（Ｏ）ＮＲｅＲｆで表される基であり、Ｒｄが水素原子又はヘテロアリールアルキル基であり、Ｒｅが水素原子であり、Ｒｆがヘテロアリールアルキル基であるものが挙げられる。アルキル基等の好ましい例示は上記のとおりである。
【0031】
以下、上記式（１）で表される化合物の具体例を挙げるが、これらの例に限定されるものではない。なお、これらの例の中にタンザワ酸Ｂは含まれないものとする。式中のＲ１０は、上記と同義である。
【0032】
【化9】
【0033】
上記式（１）で表される化合物が酸性官能基又は塩基性官能基を有する場合、当該化合物は、塩の形態であってもよい。例えば、上記式（１）で表される化合物が酸性官能基を有する場合、当該化合物は、アルカリ金属塩（ナトリウム塩、カリウム塩等）、アルカリ土類金属塩（カルシウム塩、マグネシウム塩等）、アンモニウム塩などの形態であってもよい。また、上記式（１）で表される化合物が塩基性官能基を有する場合、当該化合物は、塩酸、リン酸等の無機酸との塩の形態であってもよく、酢酸、フマル酸、メタンスルホン酸等の有機酸との塩の形態であってもよい。
【0034】
薬学的に許容される担体としては、製剤素材として慣用の有機又は無機の担体が挙げられる。この担体は、固形製剤においては、賦形剤、滑沢剤、結合剤、崩壊剤等として、液状製剤においては、溶剤、溶解補助剤、懸濁化剤、等張化剤、緩衝剤等として配合される。
【0035】
なお、本実施形態に係る抗菌組成物は、防腐剤、抗酸化剤、着色剤等の製剤添加物をさらに含有していてもよい。
【0036】
本実施形態に係る抗菌組成物の剤形は特に制限されない。抗菌組成物の剤形としては、錠剤、カプセル剤、乳剤、懸濁剤等の経口剤；注射剤、点滴剤、外用剤等の非経口剤；などが挙げられる。
【0037】
上記式（１）で表される化合物は、種々の細菌に対して抗菌作用を示す。このため、本実施形態に係る抗菌組成物は、細菌感染症の予防又は治療に好適に使用することができる。細菌感染症としては、グラム陽性菌、グラム陰性菌等によって引き起こされる局所性感染症又は全身性感染症が挙げられる。中でも、黄色ブドウ球菌、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌（ＭＲＳＡ）、腸球菌、バンコマイシン耐性腸球菌（ＶＲＥ）、枯草菌等のグラム陽性菌によって引き起こされる細菌感染症の予防又は治療に好適に使用することができる。なお、「治療」には、細菌感染症の症状を消失又は軽減させることのほか、症状の進行の度合いを抑制することも含まれる。
【0038】
細菌感染症を予防又は治療する際には、本実施形態に係る抗菌組成物の有効量を、それを必要とする対象に投与すればよい。言い換えれば、本実施形態に係る抗菌組成物の有効量を、それを必要とする対象に投与することにより、細菌感染症を予防又は治療することができる。ここで、「有効量」とは、細菌感染症の発症を防止する、症状を消失又は軽減させる等の所望の生物学的結果をもたらす量を意味する。投与対象は特に制限されず、ヒト等の哺乳動物が挙げられる。
【0039】
＜式（１）で表される化合物の製造方法＞
上記式（１）で表される化合物は、例えば、以下の（Ａ）～（Ｌ）の各工程を経て製造することができる。
（Ａ）不斉アルキル化による式（２０）で表される化合物の製造
（Ｂ）還元による式（１９）で表される化合物の製造
（Ｃ）酸化、及びエヴァンス不斉補助基を用いた向山アルドール反応による式（１６）で表される化合物の製造
（Ｄ）式（１６）で表される化合物から式（１５）で表される化合物（ワインレブアミド）の製造
（Ｅ）ヒドロキシ基保護による式（１４）で表される化合物の製造
（Ｆ）還元及びウィティッヒ反応による式（１１）で表される化合物の製造
（Ｇ）還元による式（１０）で表される化合物の製造
（Ｈ）ウィティッヒ反応による式（８）で表される化合物の製造
（Ｉ）還元による式（７）で表される化合物の製造
（Ｊ）分子内ディールス・アルダー反応による式（６）で表される化合物の製造
（Ｋ）ホーナー・ワズワース・エモンス反応及び加水分解による式（３）で表される化合物の製造
（Ｌ）式（３）で表される化合物から式（１）で表される化合物の製造
上記式（１）で表される化合物は、例えば、以下の（Ａ）～（Ｌ）の各工程を経て製造することができる。
（Ａ）不斉アルキル化による式（２０）で表される化合物の製造
（Ｂ）還元による式（１９）で表される化合物の製造
（Ｃ）酸化、及びエヴァンス不斉補助基を用いた向山アルドール反応による式（１６）で表される化合物の製造
（Ｄ）式（１６）で表される化合物から式（１５）で表される化合物（ワインレブアミド）の製造
（Ｅ）ヒドロキシ基保護による式（１４）で表される化合物の製造
（Ｆ）還元及びウィティッヒ反応による式（１１）で表される化合物の製造
（Ｇ）還元による式（１０）で表される化合物の製造
（Ｈ）ウィティッヒ反応による式（８）で表される化合物の製造
（Ｉ）還元による式（７）で表される化合物の製造
（Ｊ）分子内ディールス・アルダー反応による式（６）で表される化合物の製造
（Ｋ）ホーナー・ワズワース・エモンス反応及び加水分解による式（３）で表される化合物の製造
（Ｌ）式（３）で表される化合物から式（１）で表される化合物の製造
【0040】
以下、本実施形態に係る製造方法の各工程について詳細に説明する。なお、式中のＲ１～Ｒ１０、Ｒａ～Ｒｆは、上記と同義である。
【0041】
［（Ａ）不斉アルキル化による式（２０）で表される化合物の製造］
【化10】
【0042】
上記式（２２）中、Ｒ１３は、アルキル基、アリール基、又はアリールアルキル基を示す。Ｒ１３のアルキル基としては、炭素数１～６のアルキル基が好ましく、炭素数１～４のアルキル基がより好ましい。アルキル基は、直鎖状、分岐鎖状、環状のいずれであってもよい。アルキル基の具体例としては、メチル基、エチル基、イソプロピル基、イソブチル基、シクロヘキシル基等が挙げられる。また、Ｒ１３のアリール基としては、炭素数６～２０の単環式又は多環式芳香族炭化水素基が好ましく、炭素数６～１２の単環式又は多環式芳香族炭化水素基がより好ましい。アリール基の具体例としては、フェニル基、ナフチル基、アントリル基、フェナントリル基、ピレニル基等が挙げられる。また、Ｒ１３のアリールアルキル基としては、上記のアリール基で置換された炭素数１～６のアルキル基が好ましく、上記のアリール基で置換された炭素数１～４のアルキル基がより好ましい。アリールアルキル基の具体例としては、ベンジル基、フェネチル基、３－フェニルプロピル基、４－フェニルブチル基、１－フェニルエチル基、２－フェニルプロパン－２－イル基等が挙げられる。これらの中でも、Ｒ１３としては、特にベンジル基、フェニル基、イソプロピル基が好ましい。
【0043】
上記式（２１）中、Ｘは、ハロゲン原子（フッ素原子、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子等）を示す。
【0044】
上記式（２２）で表される化合物に塩基を作用させてエノラートを生成し、これに式（２１）で表される化合物（ハロゲン化物）をアルキル化剤として反応させると、上記式（２０）で表される化合物（光学活性イソオキサゾリジン誘導体）を製造することができる。塩基としては、リチウムジイソプロピルアミド、リチウムビス（トリメチルシリル）アミド、ナトリウムビス（トリメチルシリル）アミド、カリウムビス（トリメチルシリル）アミド等を用いることができる。さらに、触媒としてテトラブチルアンモニウムヨージドを添加してもよい。反応は、テトラヒドロフラン、エーテル等の有機溶媒中で行われる。反応温度は、－７８℃～室温程度が好ましい。反応後、目的物を回収し、カラムクロマトグラフィ等で精製する。
【0045】
なお、上記式（２０）で表される化合物中のＲ３の立体配置は、上記式（２２）で表される化合物中のＲ１３の立体配置によって決定される。
【0046】
［（Ｂ）還元による式（１９）で表される化合物の製造］
【化11】
【0047】
上記式（２０）で表される化合物（光学活性イソオキサゾリジン誘導体）は、還元剤で処理することにより、光学純度を損なうことなく上記式（１９）で表される化合物（アルコール）に変換することができる。還元剤としては、ＬｉＡｌＨ４、ＬｉＢＨ４－ＥｔＯＨ、ＮａＨ２Ａｌ（ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＭｅ）２等を用いることができる。反応は、テトラヒドロフラン、エーテル等の有機溶媒中で行われる。反応温度は、０℃～室温程度が好ましい。反応後、目的物を回収し、カラムクロマトグラフィ等で精製する。
【0048】
［（Ｃ）酸化、及びエヴァンス不斉補助基を用いた向山アルドール反応による式（１６）で表される化合物の製造］
【化12】
【0049】
まず、上記式（１９）で表される化合物（アルコール）を酸化して上記式（１８）で表される化合物（アルデヒド）を製造する。酸化反応には、ジメチルスルホキシド、過ルテニウム酸テトラプロピルアンモニウム、デス・マーチン・ペルヨージナン等の弱い酸化剤を用いることができる。反応は、塩化メチレン等の有機溶媒中で行われる。反応温度は、０℃～室温程度が好ましい。得られた上記式（１８）で表される化合物は、単離せずにそのまま次の反応に用いてもよい。
【0050】
次いで、ボロントリフラート及びアミンの存在下で、上記式（１８）で表される化合物と上記式（１７）で表される化合物を向山アルドール反応に付すことにより、上記式（１６）で表される化合物を製造することができる。上記式（１７）中、Ｒ１３は、上記式（２２）と同義である。アミンとしては、トリエチルアミン、２，６－ルチジン等を用いることができる。反応は、塩化メチレン、テトラヒドロフラン、１，２－ジメトキシエタン等の有機溶媒中で行われる。反応温度は、－７８℃～０℃程度が好ましい。反応後、目的物を回収し、カラムクロマトグラフィ等で精製する。
【0051】
［（Ｄ）式（１６）で表される化合物から式（１５）で表される化合物（ワインレブアミド）の製造］
【化13】
【0052】
上記式（１６）で表される化合物をＮ，Ｏ－ジメチルヒドロキシルアミンと反応させることにより、上記式（１５）で表される化合物（ワインレブアミド）へと容易に変換することができる。上記式（１５）中、Ｍｅは、メチル基を示す。反応は、テトラヒドロフラン等の有機溶媒中で行われる。反応温度は、０℃程度が好ましい。反応後、目的物を回収し、カラムクロマトグラフィ等で精製する。
【0053】
［（Ｅ）ヒドロキシ基保護による式（１４）で表される化合物の製造］
【化14】
【0054】
上記式（１４）中、Ｚは、ヒドロキシ基の保護基を示す。Ｚとしては、温和な条件でヒドロキシ基を保護することができ、且つ、アルカリ条件下で安定な保護基が好ましい。好ましい保護基としては、トリメチルシリル基、トリエチルシリル基、ｔ－ブチルジメチルシリル基等のトリアルキルシリル基が挙げられる。
【0055】
ヒドロキシ基の保護は、塩化メチレン等の有機溶媒中、弱塩基である２，６－ルチジン等を触媒として用い、トリアルキルシリルトリフラート等を反応させることにより行うことが好ましい。反応温度は、０℃程度が好ましい。反応後、目的物を回収し、カラムクロマトグラフィ等で精製する。
【0056】
［（Ｆ）還元及びウィティッヒ反応による式（１１）で表される化合物の製造］
【化15】
【0057】
まず、上記式（１４）で表される化合物（アミド）を還元して上記式（１３）で表される化合物（アルデヒド）を製造する。その際、水素化ジイソブチルアルミニウムを還元剤として用いることが、アルデヒドで還元を止めることができる点から好ましい。反応は、テトラヒドロフラン、トルエン、ヘキサン、塩化メチレン等の有機溶媒中で行われる。反応温度は、－７８℃～０℃程度が好ましい。反応後、目的物を回収する。
【0058】
次いで、上記式（１３）で表される化合物（アルデヒド）と上記式（１２）で表される化合物（ウィティッヒ試薬）とをウィティッヒ反応に付すことにより、上記式（１１）で表される化合物を製造することができる。反応は、塩化メチレン等の有機溶媒中で行われる。反応温度は、３５℃程度が好ましい。反応後、目的物を回収し、カラムクロマトグラフィ等で精製する。
【0059】
［（Ｇ）還元による式（１０）で表される化合物の製造］
【化16】
【0060】
上記工程（Ｆ）と同様に、上記式（１１）で表される化合物（アミド）を還元することにより、上記式（１０）で表される化合物（アルデヒド）を製造することができる。反応条件等は上記工程（Ｆ）と同様でよい。
【0061】
［（Ｈ）ウィティッヒ反応による式（８）で表される化合物の製造］
【化17】
【0062】
上記工程（Ｆ）と同様に、上記式（１０）で表される化合物（アルデヒド）と上記式（９）で表される化合物（ウィティッヒ試薬）とをウィティッヒ反応に付すことにより、上記式（８）で表される化合物を製造することができる。反応条件等は上記工程（Ｆ）と同様でよい。
【0063】
［（Ｉ）還元による式（７）で表される化合物の製造］
【化18】
【0064】
上記工程（Ｇ）と同様に、上記式（８）で表される化合物（アミド）を還元することにより、上記式（７）で表される化合物（アルデヒド）を製造することができる。反応条件等は上記工程（Ｇ）と同様でよい。
【0065】
［（Ｊ）分子内ディールス・アルダー反応による式（６）で表される化合物の製造］
【化19】
【0066】
分子内ディールス・アルダー反応は、鎖状構造分子中の８π系が、より安定な環状構造分子中の４π＋４σ系に変換される駆動力によって促進される。反応には、ジエチルアルミニウムクロリド等の触媒を用いることが好ましい。反応は、塩化メチレン等の有機溶媒中で行われる。反応温度は、－７８℃～室温程度が好ましい。粗生成物には上記式（６）で表される化合物のほかに立体構造の異なる化合物が含まれるため、粗生成物を薄層クロマトグラフィ等で精製し、目的物を回収する。
【0067】
［（Ｋ）ホーナー・ワズワース・エモンス反応及び加水分解による式（３）で表される化合物の製造］
【化20】
【0068】
上記式（５）中、Ｒ１１、Ｒ１２は、それぞれ独立にアルキル基を示す。Ｒ１１、Ｒ１２のアルキル基としては、炭素数１～６のアルキル基が好ましく、炭素数１～４のアルキル基がより好ましい。アルキル基は、直鎖状、分岐鎖状、環状のいずれであってもよい。アルキル基の具体例としては、メチル基、エチル基、イソプロピル基、イソブチル基、シクロヘキシル基等が挙げられ、メチル基、エチル基が好ましい。
【0069】
まず、上記式（６）で表される化合物と上記式（５）で表される化合物とをホーナー・ワズワース・エモンス反応に付し、上記式（４）で表される化合物を製造する。具体的には、上記式（５）で表される化合物（アルキルホスホン酸エステル）に塩基を作用させてカルボアニオンを発生させ、これを上記式（６）で表される化合物（アルデヒド）と反応させ、上記式（４）で表される化合物（アルケン）を製造する。塩基としては、リチウムビス（トリメチルシリル）アミド、リチウムジイソプロピルアミド等を用いることが好ましい。反応は、テトラヒドロフラン、塩化メチレン等の有機溶媒中で行われる。反応温度は、－７８℃～室温程度が好ましい。粗生成物には上記式（４）で表される化合物のほかに立体構造の異なる化合物が含まれるため、粗生成物を薄層クロマトグラフィ等で精製し、目的物を回収する。
【0070】
次いで、上記式（４）で表される化合物を加水分解することにより、上記式（３）で表される化合物を製造することができる。ヒドロキシ基を保護したまま加水分解を行うには、水酸化ナトリウム、水酸化リチウム等の塩基触媒下で加水分解を行えばよい。
【0071】
［（Ｌ）式（３）で表される化合物から式（１）で表される化合物の製造］
【化21】
【0072】
上記式（３）で表される化合物のカルボキシ基をＲ９へと変換して上記式（２）で表される化合物を製造した後、上記式（２）で表される化合物の－ＯＺをＲ２へと変換することにより、上記式（１）で表される化合物を製造することができる。
【0073】
上記式（３）で表される化合物から上記式（２）で表される化合物への変換は、通常の有機合成で用いられる方法により行えばよく、例えば、エステル化、アミド化、ハロゲン化、酸無水物化、エーテル化、アミノ化、酸化、還元、カップリング反応、保護、脱保護等を種々組み合わせて行えばよい。反応例を以下に示す。
【0074】
【化22】
【0075】
上記式（３）で表される化合物のカルボキシ基を水素化アルミニウムリチウム等の還元剤を用いて還元し、ＲｄＸで表されるハロゲン化アルキルと反応させるウィリアムソン合成を行えば、Ｒ９が－ＣＨ２ＯＲｄである化合物を得ることができる。また、上記式（３）で表される化合物のカルボキシ基をＮＨＲｅＲｆで表されるアミンと脱水縮合反応させれば、Ｒ９が－Ｃ（Ｏ）ＮＲｅＲｆである化合物を得ることができる。また、Ｒ９が－Ｃ（Ｏ）ＮＲｅＲｆである化合物を水素化アルミニウムリチウム等の還元剤を用いて還元すれば、Ｒ９が－ＣＨ２ＮＲｅＲｆである化合物を得ることができる。また、上記式（３）で表される化合物のカルボキシ基をＲｄＯＨで表されるアルコールと脱水縮合反応させれば、Ｒ９が－Ｃ（Ｏ）ＯＲｄである化合物を得ることができる。また、上記式（３）で表される化合物のカルボキシ基を還元してヒドロキシメチル基にした後、酸化してホルミル基とし、ＲｄＭｇＸで表されるグリニャール試薬と反応させれば、Ｒ９が－ＣＨ（ＯＨ）Ｒｄである化合物を得ることができる。そして、Ｒ９が－ＣＨ（ＯＨ）Ｒｄである化合物を酸化すれば、Ｒ９が－ＣＯＲｄである化合物を得ることができる。
【0076】
上記式（２）で表される化合物から上記式（１）で表される化合物への変換は、通常の有機合成で用いられる方法により行えばよく、例えば、エステル化、エーテル化、ハロゲン化、アミノ化、酸化、還元、保護、脱保護等を種々組み合わせて行えばよい。変換する中間体として、Ｒ９にヒドロキシ基、カルボキシ基、アミノ基等が導入された場合、その後に行う反応において必要があれば、これらの基の保護、脱保護を行えばよい。反応例を以下に示す。
【0077】
【化23】
【0078】
まず、上記式（２）で表される化合物の－ＯＺから保護基Ｚを脱離させ、ヒドロキシ基とした後、種々の基へと変換する。例えば、ヒドロキシ基をＲａＸで表されるハロゲン化アルキルと反応させるウィリアムソン合成を行えば、Ｒ２が－ＯＲａである化合物を得ることができる。また、ヒドロキシ基をＲａＣＯＯＨで表されるカルボン酸と脱水縮合反応させれば、Ｒ２が－Ｏ（ＣＯ）Ｒａである化合物を得ることができる。また、ヒドロキシ基を有するアルコールを酸化してケトンとし、これを水素化ジイソブチルアルミニウム等の還元剤を用いて還元すると、Ｒ１及びＲ３の置換基の向きの反対側からヒドリド攻撃が進行するため、立体が反転したアルコールが得られる。このアルコールのヒドロキシ基を、アゾジカルボン酸ジエチル及びトリフェニルホスフィンで活性化させ、ＲｂＲｃＮＨと反応させる光延反応を行えば、再度立体が反転したアミノ基が導入され、Ｒ２が－ＮＲｃＲｄである化合物を得ることができる。また、ヒドロキシ基を１，１’－チオカルボニルジイミダゾールと反応させてチオカルバマートとした後、水素化トリブチルスズ及びアゾビスイソブチロニトリルを用いてラジカル還元を行うと、Ｒ２が水素原子である化合物を得ることができる。
【0079】
なお、上記の例では、上記式（４）で表される化合物を加水分解して上記式（３）で表される化合物を製造した後、上記式（３）で表される化合物から上記式（１）で表される化合物を製造するものとして説明したが、この例に限定されるものではない。例えば、上記式（１）で表される化合物のうちＲ９がカルボキシ基である化合物を製造する場合には、上記式（４）で表される化合物を下記式（２３）で表される化合物に変換した後、下記式（２３）で表される化合物を加水分解して上記式（１）で表される化合物を製造するようにしても構わない。上記式（４）で表される化合物から下記式（２３）で表される化合物への変換方法は、上記式（２）で表される化合物から上記式（１）で表される化合物への変換方法と同様である。
【0080】
【化24】
【0081】
上記式（１）で表される化合物は、Ｒ１０の種類に応じて、Ｒ１０がアルキル基である下記式（１Ａ）で表される化合物と、Ｒ１０が臭素原子である下記式（１Ｂ）で表される化合物と、Ｒ１０が塩素原子である下記式（１Ｃ）で表される化合物と、Ｒ１０が水素原子である下記式（１Ｄ）で表される化合物とに大別される。下記式（１Ａ）中、Ｒ１４は、アルキル基を示す。
【0082】
【化25】
【0083】
上記式（１Ａ）で表される化合物を製造する場合には、上記式（２）～（５）を式（２Ａ）～（５Ａ）と読み替えることができる。同様に、上記式（１Ｂ）で表される化合物を製造する場合には、上記式（２）～（５）を式（２Ｂ）～（５Ｂ）と読み替えることができ、上記式（１Ｃ）で表される化合物を製造する場合には、上記式（２）～（５）を式（２Ｃ）～（５Ｃ）と読み替えることができ、上記式（１Ｄ）で表される化合物を製造する場合には、上記式（２）～（５）を式（２Ｄ）～（５Ｄ）と読み替えることができる。
【実施例0084】
以下、本発明の実施例を説明するが、本発明の範囲はこれらの実施例に限定されるものではない。
【0085】
＜合成例１：２－クロロタンザワ酸Ｂの合成＞
【化26】
【0086】
［ホーナー・ワズワース・エモンス反応］
【化27】
【0087】
ジエチルホスホノクロロ酢酸エチル（化合物２）（７０２ｍｇ，２．７１ｍｍｏｌ）を含むテトラヒドロフラン溶液（２６．０ｍＬ）に対し、－７８℃でリチウムビス（トリメチルシリル）アミドのテトラヒドロフラン溶液（１．０Ｍ，２．５３ｍＬ，２．５３ｍｍｏｌ）を滴下した。反応混合液を－７８℃で３０分間撹拌した後、化合物Ｔｒａｎｓ－ｔｒａｎｓ－１（３２８ｍｇ，０．９０５ｍｍｏｌ）を含むテトラヒドロフラン溶液（４．０ｍＬ）を加え、室温まで昇温して１２時間撹拌した。反応系に飽和塩化アンモニウム水溶液を０℃で加えて反応を停止し、酢酸エチルを加えて有機層を分取した後、水層を酢酸エチルで抽出した。有機層を合わせて、無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、濾過及び減圧濃縮して粗生成物を得た。得られた粗生成物を薄層クロマトグラフィ（展開溶媒：ヘキサン／酢酸エチル＝４／１）で粗精製を行った後、分取薄層クロマトグラフィ（展開溶媒：ヘキサン／ジエチルエーテル＝８／１）で精製し、エチル（２Ｚ，４Ｅ）－２－クロロ－５－（（１’Ｓ，２’Ｓ，４’ａＲ，６’Ｒ，７’Ｓ，８’Ｓ，８’ａＳ）－７’－（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）－２’，６’，８’－トリメチル－１’，２’，４’ａ，５’，６’，７’，８’，８’ａ－オクタヒドロナフタレン－１’－イル）ペンタ－２，４－ジエノエート（化合物Ｔｒａｎｓ－ｔｒａｎｓ－ｔｒａｎｓ－３）（１９３ｍｇ，４６％）、及びエチル（２Ｅ，４Ｅ）－２－ブロモ－５－（（１’Ｓ，２’Ｓ，４’ａＲ，６’Ｒ，７’Ｓ，８’Ｓ，８’ａＳ）－７’－（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）－２’，６’，８’－トリメチル－１’，２’，４’ａ，５’，６’，７’，８’，８’ａ－オクタヒドロナフタレン－１’－イル）ペンタ－２，４－ジエノエート（Ｔｒａｎｓ－ｔｒａｎｓ－ｃｉｓ－３）（８６．６ｍｇ，２０％）を得た。化合物の物性値は以下のとおりである。
【0088】
エチル（２Ｚ，４Ｅ）－２－クロロ－５－（（１’Ｓ，２’Ｓ，４’ａＲ，６’Ｒ，７’Ｓ，８’Ｓ，８’ａＳ）－７’－（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）－２’，６’，８’－トリメチル－１’，２’，４’ａ，５’，６’，７’，８’，８’ａ－オクタヒドロナフタレン－１’－イル）ペンタ－２，４－ジエノエート（化合物Ｔｒａｎｓ－ｔｒａｎｓ－ｔｒａｎｓ－３）：
１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ ７．４３（ｄ，Ｊ＝１０．２Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－３），６．４２（ｄｄ，Ｊ＝１５．３，１０．２Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－３），６．２８（ｄｄ，Ｊ＝１５．３，１０．２Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－３），５．６２－５．５３（ｍ，１Ｈ，Ｈ－４’），５．５３－５．４３（ｍ，１Ｈ，Ｈ－４’），４．２９（ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ，ＯＥｔ），２．８５（ｄｄ，Ｊ＝９．６，９．３Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－７’），２．５２（ｄｄｄ，Ｊ＝１０．２，９．０，５．４Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－１’），２．３９－２．１１（ｍ，１Ｈ，Ｈ－２’），１．９３－１．８０（ｍ，１Ｈ，Ｈ－４’ａ），１．７９－１．７０（ｍ，１Ｈ，Ｈ－５’），１．６２－１．４４（ｍ，３Ｈ，Ｈ－８’，Ｈ－６’，Ｈ－５’），１．４６－１．３６（ｍ，１Ｈ，Ｈ－８’ａ），１．３４（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ，ＯＥｔ），０．９９（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ，２’－Ｍｅ），０．９７（ｄ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，３Ｈ，８’－Ｍｅ），０．９５（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，３Ｈ，６’－Ｍｅ），０．９０（ｓ，９Ｈ，ＴＢＳ），０．０６（ｓ，６Ｈ，ＴＢＳ）．
１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ ７．４３（ｄ，Ｊ＝１０．２Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－３），６．４２（ｄｄ，Ｊ＝１５．３，１０．２Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－３），６．２８（ｄｄ，Ｊ＝１５．３，１０．２Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－３），５．６２－５．５３（ｍ，１Ｈ，Ｈ－４’），５．５３－５．４３（ｍ，１Ｈ，Ｈ－４’），４．２９（ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ，ＯＥｔ），２．８５（ｄｄ，Ｊ＝９．６，９．３Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－７’），２．５２（ｄｄｄ，Ｊ＝１０．２，９．０，５．４Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－１’），２．３９－２．１１（ｍ，１Ｈ，Ｈ－２’），１．９３－１．８０（ｍ，１Ｈ，Ｈ－４’ａ），１．７９－１．７０（ｍ，１Ｈ，Ｈ－５’），１．６２－１．４４（ｍ，３Ｈ，Ｈ－８’，Ｈ－６’，Ｈ－５’），１．４６－１．３６（ｍ，１Ｈ，Ｈ－８’ａ），１．３４（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ，ＯＥｔ），０．９９（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ，２’－Ｍｅ），０．９７（ｄ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，３Ｈ，８’－Ｍｅ），０．９５（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，３Ｈ，６’－Ｍｅ），０．９０（ｓ，９Ｈ，ＴＢＳ），０．０６（ｓ，６Ｈ，ＴＢＳ）．
【0089】
エチル（２Ｅ，４Ｅ）－２－クロロ－５－（（１’Ｓ，２’Ｓ，４’ａＲ，６’Ｒ，７’Ｓ，８’Ｓ，８’ａＳ）－７’－（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）－２’，６’，８’－トリメチル－１’，２’，４’ａ，５’，６’，７’，８’，８’ａ－オクタヒドロナフタレン－１’－イル）ペンタ－２，４－ジエノエート（化合物Ｔｒａｎｓ－ｔｒａｎｓ－ｃｉｓ－３）：
１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ ７．０２（ｄｄ，Ｊ＝１４．７，１１．４Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－４），６．８７（ｄ，Ｊ＝１１．４Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－３），６．０７（ｄｄ，Ｊ＝１４．７，１０．５Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－５），５．６２－５．５３（ｍ，１Ｈ，Ｈ－４’），５．５２－５．４５（ｍ，１Ｈ，Ｈ－３’），４．３０（ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ，ＯＥｔ），２．８４（ｄｄ，Ｊ＝９．３，９．３Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－７’），２．４８（ｄｄ，Ｊ＝１０．５，８．７，５．７Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－１’），２．３１－２．１５（ｍ，１Ｈ，Ｈ－２’），１．９２－１．７６（ｍ，１Ｈ，Ｈ－４’ａ），１．８１－１．７０（ｍ，１Ｈ，Ｈ－５’），１．６０－１．４５（ｍ，３Ｈ，Ｈ－５’，Ｈ－６’，Ｈ－８’），１．４０－１．２８（ｍ，１Ｈ，Ｈ－８’ａ），１．３６（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ，ＯＥｔ），０．９９（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，３Ｈ，２’－Ｍｅ），０．９６（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，３Ｈ，８’－Ｍｅ），０．９４（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ，６’－Ｍｅ），０．９０（ｓ，９Ｈ，ＴＢＳ），０．０６（ｓ，６Ｈ，ＴＢＳ）．
１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ ７．０２（ｄｄ，Ｊ＝１４．７，１１．４Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－４），６．８７（ｄ，Ｊ＝１１．４Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－３），６．０７（ｄｄ，Ｊ＝１４．７，１０．５Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－５），５．６２－５．５３（ｍ，１Ｈ，Ｈ－４’），５．５２－５．４５（ｍ，１Ｈ，Ｈ－３’），４．３０（ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ，ＯＥｔ），２．８４（ｄｄ，Ｊ＝９．３，９．３Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－７’），２．４８（ｄｄ，Ｊ＝１０．５，８．７，５．７Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－１’），２．３１－２．１５（ｍ，１Ｈ，Ｈ－２’），１．９２－１．７６（ｍ，１Ｈ，Ｈ－４’ａ），１．８１－１．７０（ｍ，１Ｈ，Ｈ－５’），１．６０－１．４５（ｍ，３Ｈ，Ｈ－５’，Ｈ－６’，Ｈ－８’），１．４０－１．２８（ｍ，１Ｈ，Ｈ－８’ａ），１．３６（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ，ＯＥｔ），０．９９（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，３Ｈ，２’－Ｍｅ），０．９６（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，３Ｈ，８’－Ｍｅ），０．９４（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ，６’－Ｍｅ），０．９０（ｓ，９Ｈ，ＴＢＳ），０．０６（ｓ，６Ｈ，ＴＢＳ）．
【0090】
［脱保護］
【化28】
【0091】
エチル（２Ｚ，４Ｅ）－２－クロロ－５－（（１’Ｓ，２’Ｓ，４’ａＲ，６’Ｒ，７’Ｓ，８’Ｓ，８’ａＳ）－７’－（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル）オキシ）－２’，６’，８’－トリメチル－１’，２’，４’ａ，５’，６’，７’，８’，８’ａ－オクタヒドロナフタレン－１’－イル）ペンタ－２，４－ジエノエート（化合物Ｔｒａｎｓ－ｔｒａｎｓ－ｔｒａｎｓ－３）（１９３ｍｇ，０．４１３ｍｍｏｌ）を含むメタノール（１．０ｍＬ）及びテトラヒドロフラン（１．０ｍＬ）の混合溶液に対し、０℃で１２Ｍ 塩酸（０．２ｍＬ，２．４ｍｍｏｌ）を加え、室温まで昇温して１２時間撹拌した。反応系に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を０℃で加えて反応を停止し、酢酸エチルを加えて有機層を分取した後、水層を酢酸エチルで抽出した。有機層を合わせて、無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、濾過及び減圧濃縮して粗生成物を得た。得られた粗生成物を薄層クロマトグラフィ（展開溶媒：ヘキサン／酢酸エチル＝８／１、５回展開）で精製し、エチル（２Ｚ，２Ｅ）－２－クロロ－５－（（１’Ｓ，２’Ｓ，４’ａＲ，６’Ｒ，７’Ｓ，８’Ｓ，８’ａＳ）－７－ヒドロキシ－２’，６’，８’－トリメチル－１’，２’，４’ａ，５’，６’，７’，８’，８’ａ－オクタヒドロナフタレン－１－イル）ペンタ－２，４－ジエノエート（９１．５ｍｇ，６３％）（化合物Ｔｒａｎｓ－ｔｒａｎｓ－ｔｒａｎｓ－４）を得た。化合物の物性値は以下のとおりである。
【0092】
エチル（２Ｚ，２Ｅ）－２－クロロ－５－（（１’Ｓ，２’Ｓ，４’ａＲ，６’Ｒ，７’Ｓ，８’Ｓ，８’ａＳ）－７－ヒドロキシ－２’，６’，８’－トリメチル－１’，２’，４’ａ，５’，６’，７’，８’，８’ａ－オクタヒドロナフタレン－１－イル）ペンタ－２，４－ジエノエート（化合物Ｔｒａｎｓ－ｔｒａｎｓ－ｔｒａｎｓ－４）：
１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ ７．４５（ｄ，Ｊ＝９．９Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－３），６．４５（ｄｄ，Ｊ＝１５．３，９．９Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－４），６．３３（ｄｄ，Ｊ＝１５．３，９．９Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－５），５．５９（ｄｄｄ，Ｊ＝９．６，４．２，３．３Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－４’），５．４６（ｄｄｄ，Ｊ＝９．６，１．８，１．８Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－３’），４．２９（ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ，ＯＥｔ），２．７３（ｄｄ，Ｊ＝９．６，９．６Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－７’），２．５４（ｄｄｄ，Ｊ＝９．６，５．７，５．４Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－１’），２．３５－２．１０（ｍ，１Ｈ，Ｈ－２’），１．９６－１．７９（ｍ，１Ｈ，Ｈ－４’ａ），１．８２－１．６２（ｍ，３Ｈ，Ｈ－５’，Ｈ－８’，Ｈ－６’），１．５９－１．３３（ｍ，１Ｈ，Ｈ－８’ａ），１．３５（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ，ＯＥｔ），１．０７（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，３Ｈ，８’－Ｍｅ），１．０４（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，３Ｈ，６’－Ｍｅ），０．９６（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ，２’－Ｍｅ）．
１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ ７．４５（ｄ，Ｊ＝９．９Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－３），６．４５（ｄｄ，Ｊ＝１５．３，９．９Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－４），６．３３（ｄｄ，Ｊ＝１５．３，９．９Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－５），５．５９（ｄｄｄ，Ｊ＝９．６，４．２，３．３Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－４’），５．４６（ｄｄｄ，Ｊ＝９．６，１．８，１．８Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－３’），４．２９（ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ，ＯＥｔ），２．７３（ｄｄ，Ｊ＝９．６，９．６Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－７’），２．５４（ｄｄｄ，Ｊ＝９．６，５．７，５．４Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－１’），２．３５－２．１０（ｍ，１Ｈ，Ｈ－２’），１．９６－１．７９（ｍ，１Ｈ，Ｈ－４’ａ），１．８２－１．６２（ｍ，３Ｈ，Ｈ－５’，Ｈ－８’，Ｈ－６’），１．５９－１．３３（ｍ，１Ｈ，Ｈ－８’ａ），１．３５（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ，ＯＥｔ），１．０７（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，３Ｈ，８’－Ｍｅ），１．０４（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，３Ｈ，６’－Ｍｅ），０．９６（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ，２’－Ｍｅ）．
【0093】
［チオ炭酸エステル化］
【化29】
【0094】
エチル（２Ｚ，２Ｅ）－２－クロロ－５－（（１’Ｓ，２’Ｓ，４’ａＲ，６’Ｒ，７’Ｓ，８’Ｓ，８’ａＳ）－７－ヒドロキシ－２’，６’，８’－トリメチル－１’，２’，４’ａ，５’，６’，７’，８’，８’ａ－オクタヒドロナフタレン－１－イル）ペンタ－２，４－ジエノエート（６７．９ｍｇ，０．１９２ｍｍｏｌ）（化合物Ｔｒａｎｓ－ｔｒａｎｓ－ｔｒａｎｓ－４）を含むテトラヒドロフラン（６．４ｍＬ，０．０３Ｍ）溶液に対し、１，１’－チオカルボジイミダゾール（５１４ｍｇ，２．８９ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合液を６５℃で１２時間撹拌した後、反応混合液をシリカゲルカラムクロマトグラフィ（展開溶媒：ヘキサン／酢酸エチル＝１／１）にて精製した。得られた混合液を濃縮した後、分取薄層クロマトグラフィ（展開溶媒：ヘキサン／酢酸エチル＝３／１、２回展開）にて精製し、エチル（２Ｚ，２Ｅ）－５－（（１’Ｓ，２’Ｓ，４’ａＲ，６’Ｒ，７’Ｓ，８’Ｓ，８’ａＳ）－７－（（１Ｈ－イミダゾール－１’’－カルボノチオイル）オキシ）－２’，６’，８’－トリメチル－１’，２’，４’ａ，５’，６’，７’，８’，８’ａ－オクタヒドロナフタレン－１－イル）ペンタ－２，４－ジエノエート（６８．５ｍｇ，７７％）（化合物Ｔｒａｎｓ－ｔｒａｎｓ－ｔｒａｎｓ－５）を得た。化合物の物性値は以下のとおりである。
【0095】
エチル（２Ｚ，２Ｅ）－５－（（１’Ｓ，２’Ｓ，４’ａＲ，６’Ｒ，７’Ｓ，８’Ｓ，８’ａＳ）－７－（（１Ｈ－イミダゾール－１’’－カルボノチオイル）オキシ）－２’，６’，８’－トリメチル－１’，２’，４’ａ，５’，６’，７’，８’，８’ａ－オクタヒドロナフタレン－１－イル）ペンタ－２，４－ジエノエート（化合物Ｔｒａｎｓ－ｔｒａｎｓ－ｔｒａｎｓ－５）：
１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ ８．５４（ｓ，１Ｈ，Ｈ－２’’），７．６５（ｄ，Ｊ＝０．６Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－５’’’），７．４３（ｄ，Ｊ＝１０．２Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－３），７．０４（ｄ，Ｊ＝０．６Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－４’’’），６．４６（ｄｄ，Ｊ＝１５．３，１０．２Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－４），６．３１（ｄｄ，Ｊ＝１５．３，１０．２Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－５），５．６５（ｄｄｄ，Ｊ＝９．６，３．６，２．７Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－４’），５．５４－５．４４（ｍ，１Ｈ，Ｈ－３’），５．３２（ｄｄ，Ｊ＝１０．５，９．９Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－７’），４．２８（ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ，ＯＥｔ），２．６１（ｄｄｄ，Ｊ＝９．６，５．４，５．４Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－１’），２．３９－２．１５（ｍ，１Ｈ，Ｈ－２’），２．０８－１．７２（ｍ，４Ｈ，Ｈ－５’，Ｈ－６’，Ｈ－８’），１．３６－１．２３（ｍ，１Ｈ，Ｈ－８’ａ），１．３３（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ，ＯＥｔ），０．９９（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，３Ｈ，２’－Ｍｅ），０．９７（ｄ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，３Ｈ，８’－Ｍｅ），０．９７（ｄ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，３Ｈ，６’－Ｍｅ）．
１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ ８．５４（ｓ，１Ｈ，Ｈ－２’’），７．６５（ｄ，Ｊ＝０．６Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－５’’’），７．４３（ｄ，Ｊ＝１０．２Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－３），７．０４（ｄ，Ｊ＝０．６Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－４’’’），６．４６（ｄｄ，Ｊ＝１５．３，１０．２Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－４），６．３１（ｄｄ，Ｊ＝１５．３，１０．２Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－５），５．６５（ｄｄｄ，Ｊ＝９．６，３．６，２．７Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－４’），５．５４－５．４４（ｍ，１Ｈ，Ｈ－３’），５．３２（ｄｄ，Ｊ＝１０．５，９．９Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－７’），４．２８（ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ，ＯＥｔ），２．６１（ｄｄｄ，Ｊ＝９．６，５．４，５．４Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－１’），２．３９－２．１５（ｍ，１Ｈ，Ｈ－２’），２．０８－１．７２（ｍ，４Ｈ，Ｈ－５’，Ｈ－６’，Ｈ－８’），１．３６－１．２３（ｍ，１Ｈ，Ｈ－８’ａ），１．３３（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ，ＯＥｔ），０．９９（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，３Ｈ，２’－Ｍｅ），０．９７（ｄ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，３Ｈ，８’－Ｍｅ），０．９７（ｄ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，３Ｈ，６’－Ｍｅ）．
【0096】
［脱官能基化］
【化30】
【0097】
エチル（２Ｚ，２Ｅ）－５－（（１’Ｓ，２’Ｓ，４’ａＲ，６’Ｒ，７’Ｓ，８’Ｓ，８’ａＳ）－７－（（１Ｈ－イミダゾール－１’’－カルボノチオイル）オキシ）－２’，６’，８’－トリメチル－１’，２’，４’ａ，５’，６’，７’，８’，８’ａ－オクタヒドロナフタレン－１－イル）ペンタ－２，４－ジエノエート（７９．７ｍｇ，０．１７２ｍｍｏｌ）（化合物Ｔｒａｎｓ－ｔｒａｎｓ－ｔｒａｎｓ－５）を含むトルエン（６．０ｍＬ）溶液に対し、水素化トリブチルスズ（０．１ｍＬ，０．３７１ｍｍｏｌ）及びアゾビス（イソブチロニトリル）（２．８ｍｇ，０．０１７２ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合液を１１０℃で５分間撹拌した後、反応混合液をシリカゲルカラムクロマトグラフィ（展開溶媒：ヘキサン／酢酸エチル＝２／１）にて精製した。得られた混合液を濃縮した後、分取薄層クロマトグラフィ（展開溶媒：ヘキサン／酢酸エチル＝２／１、その後展開溶媒：ジクロロメタン／四塩化炭素＝１／１で２回展開）にて精製し、エチル（２Ｚ，２Ｅ）－２－クロロ－５－（（１’Ｓ，２’Ｓ，４’ａＲ，６’Ｒ，７’Ｓ，８’Ｓ，８’ａＳ）－２’，６’，８’－トリメチル－１’，２’，４’ａ，５’，６’，７’，８’，８’ａ－オクタヒドロナフタレン－１－イル）ペンタ－２，４－ジエノエート（３４．１ｍｇ，５９％）（化合物Ｔｒａｎｓ－ｔｒａｎｓ－ｔｒａｎｓ－６）を得た。化合物の物性値は以下のとおりである。
【0098】
エチル（２Ｚ，２Ｅ）－２－クロロ－５－（（１’Ｓ，２’Ｓ，４’ａＲ，６’Ｒ，７’Ｓ，８’Ｓ，８’ａＳ）－２’，６’，８’－トリメチル－１’，２’，４’ａ，５’，６’，７’，８’，８’ａ－オクタヒドロナフタレン－１－イル）ペンタ－２，４－ジエノエート（化合物Ｔｒａｎｓ－ｔｒａｎｓ－ｔｒａｎｓ－６）：
１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ ７．４５（ｄ，Ｊ＝９．９Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－３），６．５０－６．３０（ｍ，２Ｈ，Ｈ－４，Ｈ－５），５．５８（ｄｄｄ，Ｊ＝９．６，４．２，２．７Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－４’），５．４４（ｄｄｄ，Ｊ＝９．６，１．５，１．５Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－３’），４．２９（ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ，ＯＥｔ），２．５０（ｄｄｄ，Ｊ＝９．６，９．６，５．４Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－１’），２．３０－２．１０（ｍ，１Ｈ，Ｈ－２’），１．９０－１．７４（ｍ，１Ｈ，Ｈ－４’ａ），１．７８－１．５８（ｍ，２Ｈ，Ｈ－５’，Ｈ－７’），１．６２－１．４２（ｍ，１Ｈ，Ｈ－８’ａ），１．４８－１．１８（ｍ，２Ｈ，Ｈ－５’，Ｈ－７’），１．３４（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ，ＯＥｔ），０．９５（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ，２’－Ｍｅ），０．９３－０．６６（ｍ，２Ｈ，Ｈ－６’，Ｈ－８’），０．９０（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，３Ｈ，６’－Ｍｅ），０．８８（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，３Ｈ，８’－Ｍｅ）．
１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ ７．４５（ｄ，Ｊ＝９．９Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－３），６．５０－６．３０（ｍ，２Ｈ，Ｈ－４，Ｈ－５），５．５８（ｄｄｄ，Ｊ＝９．６，４．２，２．７Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－４’），５．４４（ｄｄｄ，Ｊ＝９．６，１．５，１．５Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－３’），４．２９（ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ，ＯＥｔ），２．５０（ｄｄｄ，Ｊ＝９．６，９．６，５．４Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－１’），２．３０－２．１０（ｍ，１Ｈ，Ｈ－２’），１．９０－１．７４（ｍ，１Ｈ，Ｈ－４’ａ），１．７８－１．５８（ｍ，２Ｈ，Ｈ－５’，Ｈ－７’），１．６２－１．４２（ｍ，１Ｈ，Ｈ－８’ａ），１．４８－１．１８（ｍ，２Ｈ，Ｈ－５’，Ｈ－７’），１．３４（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ，ＯＥｔ），０．９５（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ，２’－Ｍｅ），０．９３－０．６６（ｍ，２Ｈ，Ｈ－６’，Ｈ－８’），０．９０（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，３Ｈ，６’－Ｍｅ），０．８８（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，３Ｈ，８’－Ｍｅ）．
【0099】
［加水分解］
【化31】
【0100】
エチル（２Ｚ，２Ｅ）－２－クロロ－５－（（１’Ｓ，２’Ｓ，４’ａＲ，６’Ｒ，７’Ｓ，８’Ｓ，８’ａＳ）－２’，６’，８’－トリメチル－１’，２’，４’ａ，５’，６’，７’，８’，８’ａ－オクタヒドロナフタレン－１－イル）ペンタ－２，４－ジエノエート（化合物Ｔｒａｎｓ－ｔｒａｎｓ－ｔｒａｎｓ－６）（２５．９ｍｇ，０．０７６９ｍｍｏｌ）を含むメタノール（１．０ｍＬ）及びテトラヒドロフラン（２．０ｍＬ）の混合溶液に対し、０℃で４．０Ｍ 水酸化リチウム水溶液（１．０ｍＬ，４．００ｍｍｏｌ）を加え、室温まで昇温して１２時間撹拌した。反応系に１．０Ｍ 塩酸を０℃で加えて反応を停止し、酢酸エチルを加えて有機層を分取した後、水層を酢酸エチルで抽出した。有機層を合わせて、無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、濾過及び減圧濃縮して、２－クロロタンザワ酸Ｂ（２３．７ｍｇ，ｑｕａｎｔ．）を得た。化合物の物性値は以下のとおりである。
【0101】
２－クロロタンザワ酸Ｂ：
１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ ７．７０－７．４０（ｍ，１Ｈ，Ｈ－３），６．５５－６．２５（ｍ，２Ｈ，Ｈ－４，Ｈ－５），５．６５－５．５０（ｍ，１Ｈ，Ｈ－４’），５．５０－５．３５（ｍ，１Ｈ，Ｈ－３’），２．６０－２．４０（ｍ，１Ｈ，Ｈ－１’），２．３０－２．０８（ｍ，１Ｈ，Ｈ－２’），１．９０－１．７２（ｍ，１Ｈ，Ｈ－４’ａ），１．７７－１．５５（ｍ，２Ｈ，Ｈ－５’，Ｈ－７’），１．６２－１．４４（ｍ，１Ｈ，Ｈ－８’ａ），１．４４－１．２３（ｍ，２Ｈ，Ｈ－５’，Ｈ－７’），０．９４（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ，２’－Ｍｅ），０．８９（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，３Ｈ，６’－Ｍｅ），０．８８（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，３Ｈ，８’－Ｍｅ），０．８４－０．６９（ｍ，２Ｈ，Ｈ－６’，Ｈ－８’）．
１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ ７．７０－７．４０（ｍ，１Ｈ，Ｈ－３），６．５５－６．２５（ｍ，２Ｈ，Ｈ－４，Ｈ－５），５．６５－５．５０（ｍ，１Ｈ，Ｈ－４’），５．５０－５．３５（ｍ，１Ｈ，Ｈ－３’），２．６０－２．４０（ｍ，１Ｈ，Ｈ－１’），２．３０－２．０８（ｍ，１Ｈ，Ｈ－２’），１．９０－１．７２（ｍ，１Ｈ，Ｈ－４’ａ），１．７７－１．５５（ｍ，２Ｈ，Ｈ－５’，Ｈ－７’），１．６２－１．４４（ｍ，１Ｈ，Ｈ－８’ａ），１．４４－１．２３（ｍ，２Ｈ，Ｈ－５’，Ｈ－７’），０．９４（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ，２’－Ｍｅ），０．８９（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，３Ｈ，６’－Ｍｅ），０．８８（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，３Ｈ，８’－Ｍｅ），０．８４－０．６９（ｍ，２Ｈ，Ｈ－６’，Ｈ－８’）．
【0102】
＜合成例２：２－ブロモタンザワ酸Ｂの合成＞
【化32】
【0103】
ホーナー・ワズワース・エモンス反応において、ジエチルホスホノクロロ酢酸エチルの代わりにジエチルホスホノブロモ酢酸エチルを用いたほかは合成例１と同様にして、２－ブロモタンザワ酸Ｂを合成した。化合物の物性値は以下のとおりである。
【0104】
２－ブロモタンザワ酸Ｂ：
１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ ７．７９（ｄ，Ｊ＝１０．５Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－３），６．５４（ｄｄ，Ｊ＝１５．０，１０．５Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－４），６．４２（ｄｄ，Ｊ＝１５．０，１０．５Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－５），５．５７（ｄｄｄ，Ｊ＝９．５，４．０，２．０Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－４’），５．４５（ｄｄｄ，Ｊ＝９．５，２．０，２．０Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－３’），２．５４（ｄｄｄ，Ｊ＝１０．５，１０．０，５．５Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－１’），２．３０－２．１６（ｍ，１Ｈ，Ｈ－２’），１．９０－１．７６（ｍ，１Ｈ，Ｈ－４’ａ），１．７９－１．６７（ｍ，Ｈ，Ｈ－５’），１．６２－１．４６（ｍ，１Ｈ，Ｈ－８’ａ），１．４７－１．３３（ｍ，２Ｈ，Ｈ－５’，Ｈ－７’），０．９６（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ，２’－Ｍｅ），０．９０（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，３Ｈ，６’－Ｍｅ），０．８８（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，３Ｈ，８’－Ｍｅ），０．８５－０．７０（ｍ，２Ｈ，Ｈ－６’，Ｈ－８’）．
１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ ７．７９（ｄ，Ｊ＝１０．５Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－３），６．５４（ｄｄ，Ｊ＝１５．０，１０．５Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－４），６．４２（ｄｄ，Ｊ＝１５．０，１０．５Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－５），５．５７（ｄｄｄ，Ｊ＝９．５，４．０，２．０Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－４’），５．４５（ｄｄｄ，Ｊ＝９．５，２．０，２．０Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－３’），２．５４（ｄｄｄ，Ｊ＝１０．５，１０．０，５．５Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－１’），２．３０－２．１６（ｍ，１Ｈ，Ｈ－２’），１．９０－１．７６（ｍ，１Ｈ，Ｈ－４’ａ），１．７９－１．６７（ｍ，Ｈ，Ｈ－５’），１．６２－１．４６（ｍ，１Ｈ，Ｈ－８’ａ），１．４７－１．３３（ｍ，２Ｈ，Ｈ－５’，Ｈ－７’），０．９６（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ，２’－Ｍｅ），０．９０（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，３Ｈ，６’－Ｍｅ），０．８８（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，３Ｈ，８’－Ｍｅ），０．８５－０．７０（ｍ，２Ｈ，Ｈ－６’，Ｈ－８’）．
【0105】
＜合成例３：２－メチルタンザワ酸Ｂの合成＞
【化33】
【0106】
ホーナー・ワズワース・エモンス反応において、ジエチルホスホノクロロ酢酸エチルの代わりに２－ホスホノプロピオン酸トリエチルを用いたほかは合成例１と同様にして、２－メチルタンザワ酸Ｂを合成した。化合物の物性値は以下のとおりである。
【0107】
２－メチルタンザワ酸Ｂ：
１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ ７．３１（ｄ，Ｊ＝９．５Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－３），６．３４－６．１８（ｍ，２Ｈ，Ｈ－４，Ｈ－５），５．５７（ｄｄｄ，Ｊ＝１０．０，４．０，３．０Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－４’），５．４４（ｄｄｄ，Ｊ＝１０．０，１．５，１．５Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－３’），２．４６（ｄｄｄ，Ｊ＝９．５，９．５，４．０Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－１’），２．２４－２．１３（ｍ，１Ｈ，Ｈ－２’），１．８６－１．７７（ｍ，１Ｈ，Ｈ－４’ａ），１．７４－１．６８（ｍ，１Ｈ，Ｈ－５’），１．６８－１．５９（ｍ，１Ｈ，Ｈ－７’），１．５８－１．４６（ｍ，１Ｈ，Ｈ－８’ａ），１．４３－１．３１（ｍ，２Ｈ，Ｈ－５’，Ｈ－７’），０．９５（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，３Ｈ，２’－Ｍｅ），０．９１（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，３Ｈ，６’－Ｍｅ），０．８８（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，３Ｈ，８’－Ｍｅ），０．８４－０．７０（ｍ，２Ｈ，Ｈ－６’，Ｈ－８’）．
１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ ７．３１（ｄ，Ｊ＝９．５Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－３），６．３４－６．１８（ｍ，２Ｈ，Ｈ－４，Ｈ－５），５．５７（ｄｄｄ，Ｊ＝１０．０，４．０，３．０Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－４’），５．４４（ｄｄｄ，Ｊ＝１０．０，１．５，１．５Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－３’），２．４６（ｄｄｄ，Ｊ＝９．５，９．５，４．０Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－１’），２．２４－２．１３（ｍ，１Ｈ，Ｈ－２’），１．８６－１．７７（ｍ，１Ｈ，Ｈ－４’ａ），１．７４－１．６８（ｍ，１Ｈ，Ｈ－５’），１．６８－１．５９（ｍ，１Ｈ，Ｈ－７’），１．５８－１．４６（ｍ，１Ｈ，Ｈ－８’ａ），１．４３－１．３１（ｍ，２Ｈ，Ｈ－５’，Ｈ－７’），０．９５（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，３Ｈ，２’－Ｍｅ），０．９１（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，３Ｈ，６’－Ｍｅ），０．８８（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，３Ｈ，８’－Ｍｅ），０．８４－０．７０（ｍ，２Ｈ，Ｈ－６’，Ｈ－８’）．
【0108】
＜合成例４：タンザワ酸Ｂの合成＞
【化34】
【0109】
ホーナー・ワズワース・エモンス反応において、ジエチルホスホノクロロ酢酸エチルの代わりにジエチルホスホノ酢酸メチルを用いたほかは合成例１と同様にして、タンザワ酸Ｂを合成した。化合物の物性値は以下のとおりである。
【0110】
タンザワ酸Ｂ：
１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ ７．３６（ｄｄ，Ｊ＝１５．０，１１．０Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－３），６．２７（ｄｄ，Ｊ＝１４．５，１１．０Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－４），６．１２（ｄｄ，Ｊ＝１４．５，１０．５Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－５），５．７８（ｄ，Ｊ＝１５．０Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－２），５．６３－５．４９（ｍ，１Ｈ，Ｈ－４’），５．４９－５．３６（ｍ，１Ｈ，Ｈ－３’），２．４２（ｄｄｄ，Ｊ＝１０．５，１０．５，５．５Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－１’），２．２６－２．１０（ｍ，１Ｈ，Ｈ－２’），１．８６－１．７５（ｍ，１Ｈ，Ｈ－４’ａ），１．７７－１．６６（ｍ，１Ｈ，Ｈ－５’），１．６９－１．５６（ｍ，１Ｈ，Ｈ－７’），１．５９－１．４４（ｍ，１Ｈ，Ｈ－８’ａ），１．４４－１．３０（ｍ，２Ｈ，Ｈ－５’，Ｈ－７’），０．９４（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ，２’－Ｍｅ），０．８９（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，３Ｈ，６’－Ｍｅ），０．８７（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ，８’－Ｍｅ），０．８４－０．６８（ｍ，２Ｈ，Ｈ－６’，Ｈ－８’）．
１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ ７．３６（ｄｄ，Ｊ＝１５．０，１１．０Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－３），６．２７（ｄｄ，Ｊ＝１４．５，１１．０Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－４），６．１２（ｄｄ，Ｊ＝１４．５，１０．５Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－５），５．７８（ｄ，Ｊ＝１５．０Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－２），５．６３－５．４９（ｍ，１Ｈ，Ｈ－４’），５．４９－５．３６（ｍ，１Ｈ，Ｈ－３’），２．４２（ｄｄｄ，Ｊ＝１０．５，１０．５，５．５Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－１’），２．２６－２．１０（ｍ，１Ｈ，Ｈ－２’），１．８６－１．７５（ｍ，１Ｈ，Ｈ－４’ａ），１．７７－１．６６（ｍ，１Ｈ，Ｈ－５’），１．６９－１．５６（ｍ，１Ｈ，Ｈ－７’），１．５９－１．４４（ｍ，１Ｈ，Ｈ－８’ａ），１．４４－１．３０（ｍ，２Ｈ，Ｈ－５’，Ｈ－７’），０．９４（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ，２’－Ｍｅ），０．８９（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，３Ｈ，６’－Ｍｅ），０．８７（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ，８’－Ｍｅ），０．８４－０．６８（ｍ，２Ｈ，Ｈ－６’，Ｈ－８’）．
【0111】
＜試験例１：抗菌作用試験＞
合成例１～４で製造した化合物を試験化合物とし、各試験化合物の抗菌活性を、寒天培地を用いた寒天培地希釈法における最小発育阻止濃度（ＭＩＣ，μｇ／ｍＬ）を求めることにより評価した。試験菌、使用培地、及び試験方法は以下のとおりである。
合成例１～４で製造した化合物を試験化合物とし、各試験化合物の抗菌活性を、寒天培地を用いた寒天培地希釈法における最小発育阻止濃度（ＭＩＣ，μｇ／ｍＬ）を求めることにより評価した。試験菌、使用培地、及び試験方法は以下のとおりである。
【0112】
１．試験菌
試験菌１：Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ ｓｕｂｓｐ． ａｕｒｅｕｓ ＮＲＢＣ１２７３２
試験菌２：Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ（ＭＲＳＡ） ＩＩＤ１６７７
試験菌３：Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ（ＭＲＳＡ） ＡＴＣＣ４３３００
試験菌４：Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ ＡＴＣＣ２９２１２
試験菌５：Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ（ＶＲＥ） ＡＴＣＣ５１５７５
試験菌６：Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ ＮＲＢＣ３１３４
試験菌１：Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ ｓｕｂｓｐ． ａｕｒｅｕｓ ＮＲＢＣ１２７３２
試験菌２：Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ（ＭＲＳＡ） ＩＩＤ１６７７
試験菌３：Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ（ＭＲＳＡ） ＡＴＣＣ４３３００
試験菌４：Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ ＡＴＣＣ２９２１２
試験菌５：Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ（ＶＲＥ） ＡＴＣＣ５１５７５
試験菌６：Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ ＮＲＢＣ３１３４
【0113】
２．使用培地
ＳＣＤ寒天培地（富士フイルム和光純薬（株））
陽イオン調整ミュラー・ヒントンブロス（ＢＤ社、以下、「ＣＡＭＨＢ」と記す）（試験菌１～３、６用の感受性測定用培地）
ヘモサプリ添加ＣＡＭＨＢ（ＣＡＭＨＢにストレプト・ヘモサプリメント（栄研化学（株））を添加したもの）（試験菌４、５用の感受性測定用培地）
ＳＣＤ寒天培地（富士フイルム和光純薬（株））
陽イオン調整ミュラー・ヒントンブロス（ＢＤ社、以下、「ＣＡＭＨＢ」と記す）（試験菌１～３、６用の感受性測定用培地）
ヘモサプリ添加ＣＡＭＨＢ（ＣＡＭＨＢにストレプト・ヘモサプリメント（栄研化学（株））を添加したもの）（試験菌４、５用の感受性測定用培地）
【0114】
３．試験方法
（１）試験菌液の調製
凍結保存された菌株をＳＣＤ寒天培地に塗布し、３５±１℃で１８～２４時間培養した。さらに、同培地に接種して一夜培養した後、発育したコロニーをかき取り、滅菌生理食塩水に懸濁して約１０６～１０７ＣＦＵ／ｍＬに調整し、試験菌液とした。
（２）試験液の調製
各試験化合物を１ｍＬの５０％エタノール（２－メチルタンザワ酸Ｂのみ約７０％エタノール）に溶解した。この溶液をＣＡＭＨＢで１０倍希釈し、さらにＣＡＭＨＢ又はヘモサプリ添加ＣＡＭＨＢで３倍希釈し、３３３μｇ／ｍＬの試験液を調製した。以降は、各感受性測定用培地で２倍段階希釈し、希釈列の試験化合物濃度をそれぞれ３３３，１６７，８３，４２，２１，１０，５．２，２．６，１．３，０．７μｇ／ｍＬとした。
（３）ＭＩＣ測定
作製した各希釈列をＵ字型マイクロプレートに１００μＬずつ分注した。次いで、マイクロプレートの各ウェルに試験菌液５μＬを滴下し、３５±１℃で１８～２４時間培養した。培養後、菌発育の有無を肉眼で判定し、菌発育の見られない最小濃度をＭＩＣとした。
（１）試験菌液の調製
凍結保存された菌株をＳＣＤ寒天培地に塗布し、３５±１℃で１８～２４時間培養した。さらに、同培地に接種して一夜培養した後、発育したコロニーをかき取り、滅菌生理食塩水に懸濁して約１０６～１０７ＣＦＵ／ｍＬに調整し、試験菌液とした。
（２）試験液の調製
各試験化合物を１ｍＬの５０％エタノール（２－メチルタンザワ酸Ｂのみ約７０％エタノール）に溶解した。この溶液をＣＡＭＨＢで１０倍希釈し、さらにＣＡＭＨＢ又はヘモサプリ添加ＣＡＭＨＢで３倍希釈し、３３３μｇ／ｍＬの試験液を調製した。以降は、各感受性測定用培地で２倍段階希釈し、希釈列の試験化合物濃度をそれぞれ３３３，１６７，８３，４２，２１，１０，５．２，２．６，１．３，０．７μｇ／ｍＬとした。
（３）ＭＩＣ測定
作製した各希釈列をＵ字型マイクロプレートに１００μＬずつ分注した。次いで、マイクロプレートの各ウェルに試験菌液５μＬを滴下し、３５±１℃で１８～２４時間培養した。培養後、菌発育の有無を肉眼で判定し、菌発育の見られない最小濃度をＭＩＣとした。
【0115】
各試験化合物の試験菌に対するＭＩＣ測定結果を下記表１に示す。
【0116】
【表1】
【0117】
表１に示すとおり、２－クロロタンザワ酸Ｂ、２－ブロモタンザワ酸Ｂ、及び２－メチルタンザワ酸Ｂは、タンザワ酸Ｂに比べて、黄色ブドウ球菌、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌（ＭＲＳＡ）、腸球菌、バンコマイシン耐性腸球菌（ＶＲＥ）、及び枯草菌に対するＭＩＣが顕著に小さく、優れた抗菌活性を有していた。
【0118】
＜合成例５：タンザワ酸Ｂ ３－ピコリルアミドの合成＞
【化35】
【0119】
タンザワ酸Ｂを原料とし、２－メチル－６－ニトロ安息香酸無水物、Ｎ，Ｎ－ジメチルアミノピリジン、及び３－ピコリルアミンを用いてアミド化することで、タンザワ酸Ｂ ３－ピコリルアミドを合成した。化合物の物性値は以下のとおりである。
【0120】
タンザワ酸Ｂ ３－ピコリルアミド：
１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＣＯＣＤ３）：δ ８．５８（ｄ，Ｊ＝１．５Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－２’’），８．４８（ｄｄ，Ｊ＝４．５，１．０Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－６’’），７．７５－７．６８（ｂｒｔ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，１Ｈ，ＮＨ），７．７４（ｄｄｄ，Ｊ＝８．０，２．０，１．０Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－４’’），７．３３（ｄｄ，Ｊ＝８．０，４．５Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－５’’），７．２６（ｄｄ，Ｊ＝１５．０，１０．５Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－３），６．２８（ｄｄ，Ｊ＝１４．５，１０．５Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－４），６．１９（ｄｄ，Ｊ＝１４．５，１０．０Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－５），６．０５（ｄ，Ｊ＝１５．０Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－２），５．６２（ｄｄｄ，Ｊ＝１０．０，４．５，２．５Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－４’），５．４７（ｄｄｄ，Ｊ＝１０．０，２．０，１．５Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－３’），４．５２（ｄ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，２Ｈ，ＣＨ２Ａｒ），２．４７（ｄｄｄ，Ｊ＝１０．０，９．５，６．０Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－１’），２．２６－２．１５（ｍ，１Ｈ，Ｈ－２’），１．９２－１．８３（ｍ，１Ｈ，Ｈ－４’ａ），１．７８－１．７２（ｍ，１Ｈ，Ｈ－５’），１．７１－１．６３（ｍ，１Ｈ，Ｈ－７’），１．６３－１．５２（ｍ，１Ｈ，Ｈ－８’ａ），１．５０－１．３１（ｍ，２Ｈ，Ｈ－５’，Ｈ－７’），１．００（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ，２’－Ｍｅ），０．９８（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，３Ｈ，６’－Ｍｅ），０．９１（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，３Ｈ，８’－Ｍｅ），０．８７－０．７６（ｍ，２Ｈ，Ｈ－６’，Ｈ－８’）．
１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＣＯＣＤ３）：δ ８．５８（ｄ，Ｊ＝１．５Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－２’’），８．４８（ｄｄ，Ｊ＝４．５，１．０Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－６’’），７．７５－７．６８（ｂｒｔ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，１Ｈ，ＮＨ），７．７４（ｄｄｄ，Ｊ＝８．０，２．０，１．０Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－４’’），７．３３（ｄｄ，Ｊ＝８．０，４．５Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－５’’），７．２６（ｄｄ，Ｊ＝１５．０，１０．５Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－３），６．２８（ｄｄ，Ｊ＝１４．５，１０．５Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－４），６．１９（ｄｄ，Ｊ＝１４．５，１０．０Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－５），６．０５（ｄ，Ｊ＝１５．０Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－２），５．６２（ｄｄｄ，Ｊ＝１０．０，４．５，２．５Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－４’），５．４７（ｄｄｄ，Ｊ＝１０．０，２．０，１．５Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－３’），４．５２（ｄ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，２Ｈ，ＣＨ２Ａｒ），２．４７（ｄｄｄ，Ｊ＝１０．０，９．５，６．０Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－１’），２．２６－２．１５（ｍ，１Ｈ，Ｈ－２’），１．９２－１．８３（ｍ，１Ｈ，Ｈ－４’ａ），１．７８－１．７２（ｍ，１Ｈ，Ｈ－５’），１．７１－１．６３（ｍ，１Ｈ，Ｈ－７’），１．６３－１．５２（ｍ，１Ｈ，Ｈ－８’ａ），１．５０－１．３１（ｍ，２Ｈ，Ｈ－５’，Ｈ－７’），１．００（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ，２’－Ｍｅ），０．９８（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，３Ｈ，６’－Ｍｅ），０．９１（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，３Ｈ，８’－Ｍｅ），０．８７－０．７６（ｍ，２Ｈ，Ｈ－６’，Ｈ－８’）．
【0121】
＜合成例６：２－メチル－７’－メトキシメチルタンザワ酸Ｂの合成＞
【化36】
【0122】
ホーナー・ワズワース・エモンス反応において、合成例１のジエチルホスホノクロロ酢酸エチルの代わりに２－ホスホノプロピオン酸トリエチルを用いて増炭した後に、ジイソプロピルエチルアミン及びメトキシメチルクロリドを用いた水酸基のメトキシメチル化、続く加水分解によって、２－メチル－７’－メトキシメチルタンザワ酸Ｂを合成した。化合物の物性値は以下のとおりである。
【0123】
２－メチル－７’－メトキシメチルタンザワ酸Ｂ：
１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ ７．０９（ｄ，Ｊ＝１０．８Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－３），６．２６（ｄｄ，Ｊ＝１４．７，１０．８Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－４），６．０４（ｄｄ，Ｊ＝１４．７，９．６Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－５），５．５２（ｄｄｄ，Ｊ＝９．３，３．６，３．３Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－４’），５．４０（ｄ，Ｊ＝９．３Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－３’），４．６０（ｓ，２Ｈ，ＣＨ２ＯＭｅ），３．３０（ｓ，３Ｈ，ＯＭｅ），２．６１（ｄｄ，Ｊ＝９．９，９．９Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－７’），２．４４（ｄｄｄ，Ｊ＝９．６，９．６，５．４Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－１’），２．２２－２．０４（ｍ，１Ｈ，Ｈ－２’），１．８４－１．７２（ｍ，１Ｈ，Ｈ－４’ａ），１．８２（ｓ，３Ｈ，２－Ｍｅ），１．７５－１．６３（ｍ，１Ｈ，Ｈ－５’），１．６０－１．４３（ｍ，１Ｈ，Ｈ－５’），１．４３－１．２６（ｍ，１Ｈ，Ｈ－８’ａ），１．４３－１．２６（ｍ，２Ｈ，Ｈ－８’ａ），０．９８（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ，２’－Ｍｅ），０．９６－０．８０（ｍ，２Ｈ，Ｈ－６’，Ｈ－８’），０．９４（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，３Ｈ，８’－Ｍｅ），０．８９（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，３Ｈ，６’－Ｍｅ）．
１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ ７．０９（ｄ，Ｊ＝１０．８Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－３），６．２６（ｄｄ，Ｊ＝１４．７，１０．８Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－４），６．０４（ｄｄ，Ｊ＝１４．７，９．６Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－５），５．５２（ｄｄｄ，Ｊ＝９．３，３．６，３．３Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－４’），５．４０（ｄ，Ｊ＝９．３Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－３’），４．６０（ｓ，２Ｈ，ＣＨ２ＯＭｅ），３．３０（ｓ，３Ｈ，ＯＭｅ），２．６１（ｄｄ，Ｊ＝９．９，９．９Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－７’），２．４４（ｄｄｄ，Ｊ＝９．６，９．６，５．４Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－１’），２．２２－２．０４（ｍ，１Ｈ，Ｈ－２’），１．８４－１．７２（ｍ，１Ｈ，Ｈ－４’ａ），１．８２（ｓ，３Ｈ，２－Ｍｅ），１．７５－１．６３（ｍ，１Ｈ，Ｈ－５’），１．６０－１．４３（ｍ，１Ｈ，Ｈ－５’），１．４３－１．２６（ｍ，１Ｈ，Ｈ－８’ａ），１．４３－１．２６（ｍ，２Ｈ，Ｈ－８’ａ），０．９８（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ，２’－Ｍｅ），０．９６－０．８０（ｍ，２Ｈ，Ｈ－６’，Ｈ－８’），０．９４（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，３Ｈ，８’－Ｍｅ），０．８９（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，３Ｈ，６’－Ｍｅ）．
【0124】
＜試験例２：抗菌作用試験＞
合成例５、６で製造した化合物、及び市販の抗菌薬であるエリスロマイシン（富士フイルム和光純薬（株））を試験化合物とし、各試験化合物の抗菌活性を、寒天培地を用いた寒天培地希釈法における最小発育阻止濃度（ＭＩＣ，μｇ／ｍＬ）を求めることにより評価した。試験菌、使用培地、及び試験方法は以下のとおりである。
合成例５、６で製造した化合物、及び市販の抗菌薬であるエリスロマイシン（富士フイルム和光純薬（株））を試験化合物とし、各試験化合物の抗菌活性を、寒天培地を用いた寒天培地希釈法における最小発育阻止濃度（ＭＩＣ，μｇ／ｍＬ）を求めることにより評価した。試験菌、使用培地、及び試験方法は以下のとおりである。
【0125】
１．試験菌
試験菌１：Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ（ＭＲＳＡ） ＩＩＤ１６７７
試験菌２：Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ（ＭＲＳＡ） ＡＴＣＣ４３３００
試験菌３：Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ（ＶＲＥ） ＡＴＣＣ５１５７５
試験菌１：Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ（ＭＲＳＡ） ＩＩＤ１６７７
試験菌２：Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ（ＭＲＳＡ） ＡＴＣＣ４３３００
試験菌３：Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ（ＶＲＥ） ＡＴＣＣ５１５７５
【0126】
２．使用培地
Ｔｒｙｐｔｉｃ Ｓｏｙ Ａｇａｒ（ＢＤ社、以下、「ＴＳＡ」と記す）
陽イオン調整ミュラー・ヒントンブロス（ＢＤ社、以下、「ＣＡＭＨＢ」と記す）（試験菌１、２用の感受性測定用培地）
ヘモサプリ添加ＣＡＭＨＢ（ＣＡＭＨＢにストレプト・ヘモサプリメント（栄研化学（株））を添加したもの）（試験菌３用の感受性測定用培地）
Ｔｒｙｐｔｉｃ Ｓｏｙ Ａｇａｒ（ＢＤ社、以下、「ＴＳＡ」と記す）
陽イオン調整ミュラー・ヒントンブロス（ＢＤ社、以下、「ＣＡＭＨＢ」と記す）（試験菌１、２用の感受性測定用培地）
ヘモサプリ添加ＣＡＭＨＢ（ＣＡＭＨＢにストレプト・ヘモサプリメント（栄研化学（株））を添加したもの）（試験菌３用の感受性測定用培地）
【0127】
３．試験方法
（１）試験菌液の調製
凍結保存された菌株をＴＳＡに塗布し、３５±１℃で１８～２４時間培養した。さらに、同培地に接種して一夜培養した後、発育したコロニーをかき取り、滅菌生理食塩水に懸濁後、脱脂綿で濾過し、禁数を約１０６～１０７ＣＦＵ／ｍＬに調整し、試験菌液とした。調製した試験菌液は、滅菌生理食塩水で１０倍段階希釈し、３５±１℃で４５時間培養して菌数を測定した。
（２）試験液の調製
各試験化合物を１ｍＬの８０～９９．５％エタノールに溶解した。この溶液をＣＡＭＨＢで希釈し、試験液原液（１０００μｇ／ｍＬ）とした後、さらにＣＡＭＨＢ又はヘモサプリ添加ＣＡＭＨＢで３倍希釈し、３３３μｇ／ｍＬの試験液を調製した。以降は、各感受性測定用培地で２倍段階希釈し、希釈列の試験化合物濃度をそれぞれ３３３，１６７，８３，４２，２１，１０，５．２，２．６，１．３，０．７μｇ／ｍＬとした。
（３）ＭＩＣ測定
作製した各希釈列をＵ字型マイクロプレートに１００μＬずつ分注した。次いで、マイクロプレートの各ウェルに試験菌液５μＬを滴下し、３５±１℃で２３時間培養した。培養後、菌発育の有無を肉眼で判定し、菌発育の見られない最小濃度をＭＩＣとした。なお、試験化合物不含有の感受性測定用培地に試験液を同様に添加したものをコントロールとした。
（１）試験菌液の調製
凍結保存された菌株をＴＳＡに塗布し、３５±１℃で１８～２４時間培養した。さらに、同培地に接種して一夜培養した後、発育したコロニーをかき取り、滅菌生理食塩水に懸濁後、脱脂綿で濾過し、禁数を約１０６～１０７ＣＦＵ／ｍＬに調整し、試験菌液とした。調製した試験菌液は、滅菌生理食塩水で１０倍段階希釈し、３５±１℃で４５時間培養して菌数を測定した。
（２）試験液の調製
各試験化合物を１ｍＬの８０～９９．５％エタノールに溶解した。この溶液をＣＡＭＨＢで希釈し、試験液原液（１０００μｇ／ｍＬ）とした後、さらにＣＡＭＨＢ又はヘモサプリ添加ＣＡＭＨＢで３倍希釈し、３３３μｇ／ｍＬの試験液を調製した。以降は、各感受性測定用培地で２倍段階希釈し、希釈列の試験化合物濃度をそれぞれ３３３，１６７，８３，４２，２１，１０，５．２，２．６，１．３，０．７μｇ／ｍＬとした。
（３）ＭＩＣ測定
作製した各希釈列をＵ字型マイクロプレートに１００μＬずつ分注した。次いで、マイクロプレートの各ウェルに試験菌液５μＬを滴下し、３５±１℃で２３時間培養した。培養後、菌発育の有無を肉眼で判定し、菌発育の見られない最小濃度をＭＩＣとした。なお、試験化合物不含有の感受性測定用培地に試験液を同様に添加したものをコントロールとした。
【0128】
各試験化合物の試験菌に対するＭＩＣ測定結果を下記表２に示す。
【0129】
【表2】
【0130】
表２に示すとおり、タンザワ酸Ｂ ３－ピコリルアミド及び２－メチル－７’－メトキシメチルタンザワ酸Ｂは、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌（ＭＲＳＡ）及びバンコマイシン耐性腸球菌（ＶＲＥ）に対して抗菌作用を示したが、エリスロマイシンは、これらの薬剤耐性菌に対して抗菌作用を示さなかった。