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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公開特許公報(A)
(11)【公開番号】P2025154162
(43)【公開日】2025-10-10
(54)【発明の名称】軽度不調のバイオマーカー
(51)【国際特許分類】
C12N 15/113 20100101AFI20251002BHJP
【ＦＩ】
C12N15/113 Z
【審査請求】未請求
【請求項の数】2
【出願形態】ＯＬ
(21)【出願番号】P 2024057019
(22)【出願日】2024-03-29
【国等の委託研究の成果に係る記載事項】（出願人による申告）国立研究開発法人農業・食品産業技術総合研究機構、戦略的イノベーション創造プログラム（ＳＩＰ）「スマートバイオ産業・農業基盤技術」委託研究、産業技術力強化法第１７条の適用を受ける特許出願
(71)【出願人】
【識別番号】504145342
【氏名又は名称】国立大学法人九州大学
(71)【出願人】
【識別番号】501203344
【氏名又は名称】国立研究開発法人農業・食品産業技術総合研究機構
(74)【代理人】
【識別番号】100114292
【弁理士】
【氏名又は名称】来間 清志
(72)【発明者】
【氏名】立花 宏文
(72)【発明者】
【氏名】藤村 由紀
(72)【発明者】
【氏名】西平 順
(72)【発明者】
【氏名】山本 万里
(57)【要約】
【課題】本発明の課題は、生産性を低下させ得るような軽度不調のバイオマーカーを提供することである。
【解決手段】本発明は、ｈｓａ－ｍｉＲ－２６ｂ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１３０ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－９２ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４２３－５ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－１８２－５ｐ、及びｈｓａ－ｌｅｔ－７ｅ－５ｐの組み合わせを含む、軽度不調のバイオマーカーを提供する。
【選択図】なし
【解決手段】本発明は、ｈｓａ－ｍｉＲ－２６ｂ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－１３０ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－９２ａ－３ｐ、ｈｓａ－ｍｉＲ－４２３－５ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－１８２－５ｐ、及びｈｓａ－ｌｅｔ－７ｅ－５ｐの組み合わせを含む、軽度不調のバイオマーカーを提供する。
【選択図】なし
【特許請求の範囲】
【請求項1】
ｈｓａ－ｍｉＲ－２６ｂ－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－１３０ａ－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－９２ａ－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－４２３－５ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－１８２－５ｐ、及び
ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｅ－５ｐ
の組み合わせを含む、軽度不調のバイオマーカー。
ｈｓａ－ｍｉＲ－１３０ａ－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－９２ａ－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－４２３－５ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－１８２－５ｐ、及び
ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｅ－５ｐ
の組み合わせを含む、軽度不調のバイオマーカー。
【請求項2】
ｈｓａ－ｍｉＲ－２６ｂ－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－１３０ａ－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－９２ａ－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－３６１５、
ｈｓａ－ｍｉＲ－４７３２－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－２７ｂ－５ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－１４８ａ－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－８７４－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－６８４２－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－１２７－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－４５４－５ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－３７４ａ－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－１３０１－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－４３１－５ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－４４４６－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－１９４－５ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－８８５－５ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－９２ｂ－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－６５１１ａ－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－１３０７－５ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－１１８０－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－３７４ｂ－５ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－５ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－１６－５ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－２０ｂ－５ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－３７８ａ－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－９９ｂ－５ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－１８ａ－５ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－６７４１－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－３０１ｂ－３ｐ、及び
ｈｓａ－ｍｉＲ－７４４－５ｐ
からなる群から選択される１種以上を含む、軽度不調のバイオマーカー。
ｈｓａ－ｍｉＲ－１３０ａ－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－９２ａ－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－３６１５、
ｈｓａ－ｍｉＲ－４７３２－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－２７ｂ－５ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－１４８ａ－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－８７４－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－６８４２－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－１２７－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－４５４－５ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－３７４ａ－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－１３０１－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－４３１－５ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－４４４６－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－１９４－５ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－８８５－５ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－９２ｂ－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－６５１１ａ－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－１３０７－５ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－１１８０－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－３７４ｂ－５ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－５ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－１６－５ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－２０ｂ－５ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－３７８ａ－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－９９ｂ－５ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－１８ａ－５ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－６７４１－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－３０１ｂ－３ｐ、及び
ｈｓａ－ｍｉＲ－７４４－５ｐ
からなる群から選択される１種以上を含む、軽度不調のバイオマーカー。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、軽度不調のバイオマーカーに関する。
【背景技術】
【0002】
近年、健康長寿社会の実現に向け、疾患の治療や予防だけではなく、疾患に至る前の段階での不調の早期発見やケアが重要視されている。
【0003】
疾患に至る前の段階の不調を改善するための組成物等については、各種提案されている（例えば、特許文献１）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【0004】
【特許文献1】特開２００７－３０２５７７号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0005】
他方で、本発明者らは、疾患に至る前の段階のうち、生産性を低下させ得るような、個人が主観的に感ずる軽度な心身不調を「軽度不調」として定義を整理した。
しかし、このような軽度不調に関するバイオマーカーは確立されていない。
しかし、このような軽度不調に関するバイオマーカーは確立されていない。
【0006】
本発明は以上の実情に鑑みてなされたものであり、生産性を低下させ得るような軽度不調のバイオマーカーの提供を課題とする。
【課題を解決するための手段】
【0007】
本発明者らは、特定のｍｉＲＮＡをマーカーとすることで上記課題を解決できる点を見出し、本発明を完成させた。具体的に、本発明は以下を提供する。
【0008】
（１）
ｈｓａ－ｍｉＲ－２６ｂ－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－１３０ａ－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－９２ａ－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－４２３－５ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－１８２－５ｐ、及び
ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｅ－５ｐ
の組み合わせを含む、軽度不調のバイオマーカー。
ｈｓａ－ｍｉＲ－２６ｂ－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－１３０ａ－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－９２ａ－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－４２３－５ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－１８２－５ｐ、及び
ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｅ－５ｐ
の組み合わせを含む、軽度不調のバイオマーカー。
【0009】
（２）
ｈｓａ－ｍｉＲ－２６ｂ－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－１３０ａ－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－９２ａ－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－３６１５、
ｈｓａ－ｍｉＲ－４７３２－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－２７ｂ－５ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－１４８ａ－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－８７４－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－６８４２－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－１２７－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－４５４－５ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－３７４ａ－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－１３０１－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－４３１－５ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－４４４６－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－１９４－５ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－８８５－５ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－９２ｂ－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－６５１１ａ－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－１３０７－５ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－１１８０－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－３７４ｂ－５ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－５ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－１６－５ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－２０ｂ－５ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－３７８ａ－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－９９ｂ－５ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－１８ａ－５ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－６７４１－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－３０１ｂ－３ｐ、及び
ｈｓａ－ｍｉＲ－７４４－５ｐ
からなる群から選択される１種以上を含む、軽度不調のバイオマーカー。
ｈｓａ－ｍｉＲ－２６ｂ－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－１３０ａ－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－９２ａ－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－３６１５、
ｈｓａ－ｍｉＲ－４７３２－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－２７ｂ－５ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－１４８ａ－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－８７４－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－６８４２－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－１２７－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－４５４－５ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－３７４ａ－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－１３０１－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－４３１－５ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－４４４６－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－１９４－５ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－８８５－５ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－９２ｂ－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－６５１１ａ－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－１３０７－５ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－１１８０－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－３７４ｂ－５ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－５ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－１６－５ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－２０ｂ－５ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－３７８ａ－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－９９ｂ－５ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－１８ａ－５ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－６７４１－３ｐ、
ｈｓａ－ｍｉＲ－３０１ｂ－３ｐ、及び
ｈｓａ－ｍｉＲ－７４４－５ｐ
からなる群から選択される１種以上を含む、軽度不調のバイオマーカー。
【発明の効果】
【0010】
本発明によれば、生産性を低下させ得るような軽度不調のバイオマーカーが提供される。
【発明を実施するための形態】
【0011】
以下に、本発明の実施形態を詳細に説明するが、本発明はこれに特に限定されない。
【0012】
（１）軽度不調のバイオマーカー
本発明に係る軽度不調のバイオマーカーは、後述のとおり、２態様のバイオマーカー群を包含する。以下、これらのバイオマーカー群を、まとめて「本発明のバイオマーカー」ともいう。
２態様のバイオマーカー群は、いずれも、ｍｉＲＮＡバイオマーカーから構成され、軽度不調に関連するマーカー群として、本発明者らが新規に見出したものである。
本発明に係る軽度不調のバイオマーカーは、後述のとおり、２態様のバイオマーカー群を包含する。以下、これらのバイオマーカー群を、まとめて「本発明のバイオマーカー」ともいう。
２態様のバイオマーカー群は、いずれも、ｍｉＲＮＡバイオマーカーから構成され、軽度不調に関連するマーカー群として、本発明者らが新規に見出したものである。
【0013】
本発明において「軽度不調」とは、疾患に至る前の段階のうち、個人が主観的に感ずる軽度な心身不調の一態様である。
このような軽度不調は、日常生活や労働の遂行に要する気力や集中等を損ない、生産性（日常生活や労働による成果量等）を低下させ得る。
このような軽度不調は、日常生活や労働の遂行に要する気力や集中等を損ない、生産性（日常生活や労働による成果量等）を低下させ得る。
【0014】
「軽度不調」とは、より具体的には、ストレスの程度が低度～中度であるものの高度には至っていない状態や、その状態から派生する各種症状（心理的ストレス反応、イライラ感、抑うつ感、疲労感、身体愁訴、活気の低下等）のうち１つ以上を有する状態を包含する。
【0015】
軽度不調の有無や程度は、「職業性ストレス簡易調査票」（加藤正明、労働省、平成１１年度「作業関連疾患の予防に関する研究」、労働の場におけるストレス及びその健康影響に関する研究報告書、２０００）によって特定され得る。
例えば、該調査票に規定する主観的ストレス評価である「領域Ｂ」の２９項目に対する被験者の回答に基づき判定できる。
例えば、該調査票に規定する主観的ストレス評価である「領域Ｂ」の２９項目に対する被験者の回答に基づき判定できる。
【0016】
軽度不調の有無や程度の具体的評価方法としては、実施例に示した方法を採用できる。
【0017】
本発明において、「マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）」とは、ｍＲＮＡの翻訳抑制に関与する１５～２５塩基の非コーディングＲＮＡを包含する。
ｍｉＲＮＡは、通常、ヘアピン様構造のＲＮＡ前駆体として転写され、ＲＮａｓｅ ＩＩＩ切断活性を有するｄｓＲＮＡ切断酵素により切断された後、ＲＮＡ誘導サイレンシング複合体（ＲＩＳＣ）に取り込まれることで生成される。
ｍｉＲＮＡは、通常、ヘアピン様構造のＲＮＡ前駆体として転写され、ＲＮａｓｅ ＩＩＩ切断活性を有するｄｓＲＮＡ切断酵素により切断された後、ＲＮＡ誘導サイレンシング複合体（ＲＩＳＣ）に取り込まれることで生成される。
【0018】
（１－１）第１の態様に係るバイオマーカー群
第１の態様に係るバイオマーカー群は、以下の６種類のバイオマーカーの組み合わせを全て含む。
ｈｓａ－ｍｉＲ－２６ｂ－３ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－１３０ａ－３ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－９２ａ－３ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－４２３－５ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－１８２－５ｐ
ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｅ－５ｐ
第１の態様に係るバイオマーカー群は、以下の６種類のバイオマーカーの組み合わせを全て含む。
ｈｓａ－ｍｉＲ－２６ｂ－３ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－１３０ａ－３ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－９２ａ－３ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－４２３－５ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－１８２－５ｐ
ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｅ－５ｐ
【0019】
本発明者らは、上記６種類のバイオマーカー全てを検出対象とすることで、個体の軽度不調の有無や進行度を精度高く判定できることを見出した。
軽度不調の症状は、例えば、うつの症状と類似している部分もあるものの、第１の態様に係るバイオマーカー群によれば、軽度不調とうつとの判別を実現し得る。
軽度不調の症状は、例えば、うつの症状と類似している部分もあるものの、第１の態様に係るバイオマーカー群によれば、軽度不調とうつとの判別を実現し得る。
【0020】
第１の態様に係るバイオマーカー群を使用する本発明の一態様において、バイオマーカーの組み合わせは、上記６種類のバイオマーカーを全て含んでいれば特に限定されず、上記６種類以外のバイオマーカーをさらに組み合わせてもよく、組み合わせなくてもよい。
上記６種類以外のバイオマーカーとしては、例えば、後述する第２の態様に係るバイオマーカー群に含まれる１種以上のバイオマーカーが挙げられる。
上記６種類以外のバイオマーカーとしては、例えば、後述する第２の態様に係るバイオマーカー群に含まれる１種以上のバイオマーカーが挙げられる。
【0021】
（１－２）第２の態様に係るバイオマーカー群
第２の態様に係るバイオマーカー群は、以下の３２種類のバイオマーカーからなる群から選択される１種以上を含む。下記バイオマーカーは、１種単独で用いてもよく、２種以上を組み合わせて用いてもよい。
ｈｓａ－ｍｉＲ－２６ｂ－３ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－１３０ａ－３ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－９２ａ－３ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－３６１５
ｈｓａ－ｍｉＲ－４７３２－３ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－２７ｂ－５ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－１４８ａ－３ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－８７４－３ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－６８４２－３ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－３ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－１２７－３ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－４５４－５ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－３７４ａ－３ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－１３０１－３ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－４３１－５ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－４４４６－３ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－１９４－５ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－８８５－５ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－９２ｂ－３ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－６５１１ａ－３ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－１３０７－５ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－１１８０－３ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－３７４ｂ－５ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－５ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－１６－５ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－２０ｂ－５ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－３７８ａ－３ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－９９ｂ－５ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－１８ａ－５ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－６７４１－３ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－３０１ｂ－３ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－７４４－５ｐ
第２の態様に係るバイオマーカー群は、以下の３２種類のバイオマーカーからなる群から選択される１種以上を含む。下記バイオマーカーは、１種単独で用いてもよく、２種以上を組み合わせて用いてもよい。
ｈｓａ－ｍｉＲ－２６ｂ－３ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－１３０ａ－３ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－９２ａ－３ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－３６１５
ｈｓａ－ｍｉＲ－４７３２－３ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－２７ｂ－５ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－１４８ａ－３ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－８７４－３ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－６８４２－３ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－３ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－１２７－３ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－４５４－５ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－３７４ａ－３ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－１３０１－３ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－４３１－５ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－４４４６－３ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－１９４－５ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－８８５－５ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－９２ｂ－３ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－６５１１ａ－３ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－１３０７－５ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－１１８０－３ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－３７４ｂ－５ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－５ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－１６－５ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－２０ｂ－５ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－３７８ａ－３ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－９９ｂ－５ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－１８ａ－５ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－６７４１－３ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－３０１ｂ－３ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－７４４－５ｐ
【0022】
本発明者らは、上記３２種類のバイオマーカーのいずれか１種以上を検出対象とすることで、個体の軽度不調を精度高く判定できることを見出した。
上記バイオマーカーは、いずれも、気分障害（うつ等）との関連が報告されていない。そのため、第２の態様に係るバイオマーカー群によれば、軽度不調と、軽度不調に症状が類似した気分障害（うつ等）との判別を実現し得る。
上記バイオマーカーは、いずれも、気分障害（うつ等）との関連が報告されていない。そのため、第２の態様に係るバイオマーカー群によれば、軽度不調と、軽度不調に症状が類似した気分障害（うつ等）との判別を実現し得る。
【0023】
第２の態様に係るバイオマーカー群を使用する本発明の一態様において、上記３２種類のバイオマーカーのいずれか１種以上を使用すれば特に限定されず、上記３２種類以外のバイオマーカーをさらに組み合わせてもよく、組み合わせなくてもよい。
【0024】
（２）バイオマーカーの検出
任意の検体において、本発明のバイオマーカーを検出することで、該検体が由来する個体における軽度不調の有無や進行度を精度高く判定できる。
任意の検体において、本発明のバイオマーカーを検出することで、該検体が由来する個体における軽度不調の有無や進行度を精度高く判定できる。
【0025】
本発明において、「バイオマーカーの検出」とは、バイオマーカーの発現量（例えば、経時的発現量）の変動（増加、減少）や、バイオマーカーの発現の有無を検出することを包含する。
【0026】
検体において、第１の態様に係るバイオマーカー群（６種類のバイオマーカー）が全て検出されれば、該検体が由来する個体は軽度不調であると判定できる。
【0027】
検体において、第２の態様に係るバイオマーカー群（３２種類のバイオマーカー）のうち１種以上が検出されれば、該検体が由来する個体は軽度不調であると判定できる。
【0028】
本発明において、「検体」とは、任意の生体に由来する試料やその抽出物を包含する。
試料としては、例えば、体液（血液、血清、血漿、尿、唾液、汗、脳脊髄液、組織浸出液等）、組織（脳組織、神経組織、皮膚組織等）、細胞（脳細胞、神経細胞等）、便、毛髪等が挙げられる。
試料の抽出物としては、例えば、核酸（ＲＮＡ、ＤＮＡ等）が挙げられる。
上記のうち、調製や扱いの容易性から、血液が好ましく、血漿がより好ましい。
試料としては、例えば、体液（血液、血清、血漿、尿、唾液、汗、脳脊髄液、組織浸出液等）、組織（脳組織、神経組織、皮膚組織等）、細胞（脳細胞、神経細胞等）、便、毛髪等が挙げられる。
試料の抽出物としては、例えば、核酸（ＲＮＡ、ＤＮＡ等）が挙げられる。
上記のうち、調製や扱いの容易性から、血液が好ましく、血漿がより好ましい。
【0029】
本発明において、「検体が由来する個体」とは、検体を採取した対象である任意の生物を包含する。
具体的な生物としては、ヒト、ヒト以外の哺乳類（サル、イヌ、ネコ、ウシ、ウマ、ヒツジ、ヤギ）、げっ歯類（マウス、ラット等）等が挙げられる。
具体的な生物としては、ヒト、ヒト以外の哺乳類（サル、イヌ、ネコ、ウシ、ウマ、ヒツジ、ヤギ）、げっ歯類（マウス、ラット等）等が挙げられる。
【0030】
バイオマーカーの検出方法としては特に限定されず、検体中に本発明のバイオマーカーが存在するかどうかや、存在する場合にはその発現量を特定できる任意の方法を包含する。
具体的な方法としては、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）法やマイクロアレイ法等が挙げられる。
具体的な方法としては、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）法やマイクロアレイ法等が挙げられる。
【0031】
検体における本発明のバイオマーカーの発現の有無やその発現量等について、例えば、該検体における結果と、対照（例えば、健常者の検体）における結果と、を比較することで、検体が由来する個体の軽度不調の有無や進行度を判定できる。
【0032】
（３）本発明のバイオマーカーの応用
本発明のバイオマーカーは、軽度不調のバイオマーカーとして機能するため、その検出による個体の軽度不調の判定だけではなく、以下の用途にも応用できる。
本発明のバイオマーカーは、軽度不調のバイオマーカーとして機能するため、その検出による個体の軽度不調の判定だけではなく、以下の用途にも応用できる。
【0033】
（３－１）個体の軽度不調を診断する方法
本発明は、個体から採取した検体における本発明のバイオマーカーを検出する工程と、その結果に基づき個体の軽度不調を診断する工程とを含む、軽度不調を診断する方法を包含する。
本発明は、個体から採取した検体における本発明のバイオマーカーを検出する工程と、その結果に基づき個体の軽度不調を診断する工程とを含む、軽度不調を診断する方法を包含する。
【0034】
（３－２）軽度不調の治療物質のスクリーニング方法
本発明は、任意の候補物質を動物に投与する工程と、該投与による本発明のバイオマーカー量の変化を指標として、候補物質を選抜する工程と、を有する軽度不調の治療物質のスクリーニング方法を包含する。
本発明は、任意の候補物質を動物に投与する工程と、該投与による本発明のバイオマーカー量の変化を指標として、候補物質を選抜する工程と、を有する軽度不調の治療物質のスクリーニング方法を包含する。
【0035】
例えば、軽度不調に対して負（又は正）に相関するバイオマーカーについて、該バイオマーカー量が増加（又は低下）する候補物質を、軽度不調の治療物質として選抜し得る。
【0036】
スクリーニング方法において用いられる動物は、ヒト以外であれば特に限定されない。
【実施例0037】
以下に、実施例により本発明をさらに詳しく説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
【0038】
以下の方法で、被験者への介入試験を行い、その前後におけるｍｉＲＮＡの発現量に基づき、軽度不調と強く関連するｍｉＲＮＡを見出した。
【0039】
（１）「職業性ストレス簡易調査票」による軽度不調の評価
本例の被験者に対し、後述する介入試験の前後の各時点で、「職業性簡易ストレス調査票」を用いた軽度不調の評価を行った。その方法の詳細は以下のとおりである。
本例の被験者に対し、後述する介入試験の前後の各時点で、「職業性簡易ストレス調査票」を用いた軽度不調の評価を行った。その方法の詳細は以下のとおりである。
【0040】
「職業性ストレス簡易調査票」は、日本国労働省の平成１１年度「作業関連疾患の予防に関する研究班」ストレス測定研究班によるグループが作成した調査票である（加藤正明、労働省、平成１１年度「作業関連疾患の予防に関する研究」、労働の場におけるストレス及びその健康影響に関する研究報告書、２０００）。
本例では、「職業性ストレス簡易調査票」の「領域Ｂ」の質問票を抜粋して用いた。この質問票には、メンタルヘルス等に関連する２９個の設問が含まれ、その回答から、各評価項目がスコア化される。
本例では、「職業性ストレス簡易調査票」の「領域Ｂ」の質問票を抜粋して用いた。この質問票には、メンタルヘルス等に関連する２９個の設問が含まれ、その回答から、各評価項目がスコア化される。
【0041】
調査票を用いた評価項目は下記のとおりである。
活気：調査票のＮｏ．１～３
イライラ感：調査票のＮｏ．４～６
疲労感：調査票のＮｏ．７～９
不安感：調査票のＮｏ．１０～１２
抑うつ感：調査票のＮｏ．１３～１８
身体愁訴：調査票のＮｏ．１９～２９
活気：調査票のＮｏ．１～３
イライラ感：調査票のＮｏ．４～６
疲労感：調査票のＮｏ．７～９
不安感：調査票のＮｏ．１０～１２
抑うつ感：調査票のＮｏ．１３～１８
身体愁訴：調査票のＮｏ．１９～２９
【0042】
なお、Ｎｏ．１～３における「１」及び「２」、並びに、Ｎｏ．４～１８における「３」及び「４」の回答数を「心理的ストレス」として扱った。
Ｎｏ．１９～２９における「３」及び「４」の回答数を「身体的ストレス」として扱った。
Ｎｏ．１９～２９における「３」及び「４」の回答数を「身体的ストレス」として扱った。
【0043】
本例では、調査票における質問に対する回答の点数を足し合わせたものを、各評価項目のスコアとしてデータ解析に供した。
【0044】
（２）介入試験
各種果汁や野菜エキスに含まれる機能性成分には、軽度不調を和らげる効果が期待されている。そのため、該機能性成分の摂取前後のバイオマーカー発現量と、軽度不調の各症状との相関を特定することで、軽度不調に関連するバイオマーカーを特定できる可能性がある。
そこで、各種果汁や野菜エキスを用いた３種の介入試験を行い、介入前後の各時点で被験者（全６３名）から試料を採取し、データ解析を行った。
各種果汁や野菜エキスに含まれる機能性成分には、軽度不調を和らげる効果が期待されている。そのため、該機能性成分の摂取前後のバイオマーカー発現量と、軽度不調の各症状との相関を特定することで、軽度不調に関連するバイオマーカーを特定できる可能性がある。
そこで、各種果汁や野菜エキスを用いた３種の介入試験を行い、介入前後の各時点で被験者（全６３名）から試料を採取し、データ解析を行った。
【0045】
なお、被験者は、無作為にプラセボ群（果汁や野菜エキスを含まない試料の投与群）、試験群（果汁や野菜エキスを含む試料の投与群）の２群に分け、各試料を１２週間継続摂取させた。
【0046】
介入試験開始前後の各時点で、被験者から血漿を採取し、市販のキットを用いてｍｉＲＮＡを抽出した。
各介入試験で取得したｍｉＲＮＡを用いて、「Ｔｒｕｓｅｑ Ｓｍａｌｌ ＲＮＡ ｋｉｔ」（Ｉｌｌｕｍｉｎａ、Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ、ＵＳＡ）によりＰＣＲを行った。得られたＰＣＲ産物について電気泳動によるサイズ選別後、ライブラリーを取得した。
次いで、「ＭｉｎｉＳｅｑ」（Ｉｌｌｕｍｉｎａ、Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ、ＵＳＡ）による次世代シーケンシングを行い、得られた各サンプルの生リード数をＤＥＳｅｑ法にて解析した後、各サンプルの総リード数を全て１００万になるように補正した。
上記操作によって得られたデータセットを、以下の各データ解析に供した。
各介入試験で取得したｍｉＲＮＡを用いて、「Ｔｒｕｓｅｑ Ｓｍａｌｌ ＲＮＡ ｋｉｔ」（Ｉｌｌｕｍｉｎａ、Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ、ＵＳＡ）によりＰＣＲを行った。得られたＰＣＲ産物について電気泳動によるサイズ選別後、ライブラリーを取得した。
次いで、「ＭｉｎｉＳｅｑ」（Ｉｌｌｕｍｉｎａ、Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ、ＵＳＡ）による次世代シーケンシングを行い、得られた各サンプルの生リード数をＤＥＳｅｑ法にて解析した後、各サンプルの総リード数を全て１００万になるように補正した。
上記操作によって得られたデータセットを、以下の各データ解析に供した。
【0047】
（３）データ解析－１：単相関解析
軽度不調の各評価項目（活気、イライラ感、疲労感、不安感、抑うつ感、心理的ストレス、身体愁訴、又は身体的ストレス）のスコアと、介入前後で半数以上の試料で検知された７１種類の血中ｍｉＲＮＡの発現レベル（１００万リード数あたりの各種ｍｉＲＮＡのリード数）との相関関係をピアソン積率相関係数の算出によって評価した。
軽度不調の各評価項目（活気、イライラ感、疲労感、不安感、抑うつ感、心理的ストレス、身体愁訴、又は身体的ストレス）のスコアと、介入前後で半数以上の試料で検知された７１種類の血中ｍｉＲＮＡの発現レベル（１００万リード数あたりの各種ｍｉＲＮＡのリード数）との相関関係をピアソン積率相関係数の算出によって評価した。
【0048】
評価結果に基づき、相関係数が｜０．２００｜以上であるｍｉＲＮＡを以下の３０種類を選択した。
ｈｓａ－ｍｉＲ－９２ａ－３ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－４８４
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ｈｓａ－ｍｉＲ－３７８ａ－３ｐ
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ｈｓａ－ｍｉＲ－１８２－５ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－１５１ａ－５ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－１２７－３ｐ
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ｈｓａ－ｍｉＲ－８８５－５ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－４５４－５ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－４３１－５ｐ
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ｈｓａ－ｍｉＲ－１２８－３ｐ
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ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｄ－３ｐ
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ｈｓａ－ｍｉＲ－６７４１－３ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－３０１ｂ－３ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－１８ａ－５ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－７４４－５ｐ
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ｈｓａ－ｍｉＲ－３２０ａ
ｈｓａ－ｍｉＲ－１３０１－３ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－４４３３ｂ－５ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－１９４－５ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－１４４－５ｐ
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【0049】
上記の３０種類のｍｉＲＮＡについて、下記を全て満たす１７種類のｍｉＲＮＡを選別した（表１、数値は相関係数を示す。）。
・評価項目のうち「不安感」及び「抑うつ感」以外で統計的差異が認められた。
・うつに関連するｍｉＲＮＡとしての報告例が見出せなかった。
・評価項目のうち「不安感」及び「抑うつ感」以外で統計的差異が認められた。
・うつに関連するｍｉＲＮＡとしての報告例が見出せなかった。
【0050】
上記１７種類のｍｉＲＮＡは以下のとおりである。
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【0051】
【表1】
【0052】
（４）データ解析－２：多変量回帰分析及びＭａｎｎ－ＷｈｉｔｎｅｙのＵ検定による統合解析
以下の方法で、多変量回帰分析を行い、その結果に基づくＭａｎｎ－ＷｈｉｔｎｅｙのＵ検定を行った。
以下の方法で、多変量回帰分析を行い、その結果に基づくＭａｎｎ－ＷｈｉｔｎｅｙのＵ検定を行った。
【0053】
（４－１）多変量回帰分析
まず、軽度不調の各評価項目（活気、イライラ感、疲労感、不安感、抑うつ感、及び身体愁訴）のスコアを目的変数として設定した。
介入前において半数以上の試料で検出された１９３種類のｍｉＲＮＡの発現量（リード数）を説明変数として設定した。
上記の目的変数及び説明変数に基づき、多変量解析ソフトウェアＳＩＭＣＡ（Ｕｍｅｔｒｉｃｓ， Ｕｍｅａ， Ｓｗｅｄｅｎ）を用いて、直行型部分最小二乗法回帰分析（ＯＰＬＳ－Ｒ解析：Ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ Ｐａｒｔｉａｌ Ｌｅａｓｔ Ｓｑｕａｒｅｓ－Ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎ）を行った。なお、回帰モデルの統計的有意性が認められ、かつ、決定係数であるＲ２値が０．５以上であるモデルを、各種評価項目を予測可能なモデルとして設定した。
その結果、評価項目のうち「不安感」及び「抑うつ感」のモデル構築に成功し、その構築に大きく寄与していることを示すＶＩＰ（Ｖａｒｉａｂｌｅ Ｉｍｐｏｒｔａｎｃｅ ｏｆ Ｐｒｏｊｅｃｔｉｏｎ）の値が１．０以上であるｍｉＲＮＡを複数選択した。
まず、軽度不調の各評価項目（活気、イライラ感、疲労感、不安感、抑うつ感、及び身体愁訴）のスコアを目的変数として設定した。
介入前において半数以上の試料で検出された１９３種類のｍｉＲＮＡの発現量（リード数）を説明変数として設定した。
上記の目的変数及び説明変数に基づき、多変量解析ソフトウェアＳＩＭＣＡ（Ｕｍｅｔｒｉｃｓ， Ｕｍｅａ， Ｓｗｅｄｅｎ）を用いて、直行型部分最小二乗法回帰分析（ＯＰＬＳ－Ｒ解析：Ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ Ｐａｒｔｉａｌ Ｌｅａｓｔ Ｓｑｕａｒｅｓ－Ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎ）を行った。なお、回帰モデルの統計的有意性が認められ、かつ、決定係数であるＲ２値が０．５以上であるモデルを、各種評価項目を予測可能なモデルとして設定した。
その結果、評価項目のうち「不安感」及び「抑うつ感」のモデル構築に成功し、その構築に大きく寄与していることを示すＶＩＰ（Ｖａｒｉａｂｌｅ Ｉｍｐｏｒｔａｎｃｅ ｏｆ Ｐｒｏｊｅｃｔｉｏｎ）の値が１．０以上であるｍｉＲＮＡを複数選択した。
【0054】
次いで、選択したｍｉＲＮＡのうち、「不安感」及び「抑うつ感」のスコアが低い群と高い群との間の統計的差異を評価するために、スコアに基づき、集団を３分位法で分割した。具体的には、下位（Ｌｏｗ）群及び上位（Ｈｉｇｈ）群のｎ数が、全体（ｎ＝６３）の３分の１（ｎ＝２１）以上となるように調整した。
あわせて、同じ集団について、２分位法での分割も行い、Ｌｏｗ群及びＨｉｇｈ群に調整した。
あわせて、同じ集団について、２分位法での分割も行い、Ｌｏｗ群及びＨｉｇｈ群に調整した。
【0055】
（４－２）Ｍａｎｎ－ＷｈｉｔｎｅｙのＵ検定
各評価項目について、各ｍｉＲＮＡの発現量（リード数）に対する、Ｌｏｗ群とＨｉｇｈ群との間の統計的差異を、Ｍａｎｎ－ＷｈｉｔｎｅｙのＵ検定（ＧｒａｐｈＰａｄ， Ｉｎｃ．， Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ， ＣＡ， ＵＳＡ）により評価した。
３分位法のＬｏｗ群とＨｉｇｈ群との間で統計的差異が認められたｍｉＲＮＡ、及び、２分位法のＬｏｗ群とＨｉｇｈ群との間で統計的差異が認められたｍｉＲＮＡを特定し、３分位法で分割した群、及び２分位法で分割した群の両方で差異が認められたｍｉＲＮＡを、「不安感」及び「抑うつ感」のそれぞれについて複数選択した。
各評価項目について、各ｍｉＲＮＡの発現量（リード数）に対する、Ｌｏｗ群とＨｉｇｈ群との間の統計的差異を、Ｍａｎｎ－ＷｈｉｔｎｅｙのＵ検定（ＧｒａｐｈＰａｄ， Ｉｎｃ．， Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ， ＣＡ， ＵＳＡ）により評価した。
３分位法のＬｏｗ群とＨｉｇｈ群との間で統計的差異が認められたｍｉＲＮＡ、及び、２分位法のＬｏｗ群とＨｉｇｈ群との間で統計的差異が認められたｍｉＲＮＡを特定し、３分位法で分割した群、及び２分位法で分割した群の両方で差異が認められたｍｉＲＮＡを、「不安感」及び「抑うつ感」のそれぞれについて複数選択した。
【0056】
上記ｍｉＲＮＡから、「不安感」及び「抑うつ感」の両者で重複する、１１種類のｍｉＲＮＡを選択した（表２、括弧内の数値はＰ値を示す。－：Ｐ≧０．０５、＊：Ｐ＜０．０５、＊＊：Ｐ＜０．０１、＊＊＊：Ｐ＜０．００１）。
【0057】
上記１１種類のｍｉＲＮＡは以下のとおりである。
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【0058】
上記の１１種類のｍｉＲＮＡには、一部、うつとの関連が報告されたｍｉＲＮＡが含まれていることがわかった。
軽度不調の症状は、うつの症状と類似している部分もあるものの、本例では、軽度不調とうつとの判別を目指すべく、うつとの関連が報告されていない下記６種のｍｉＲＮＡを、有力な軽度不調マーカーとして着目した（表２中、ｍｉＲＮＡの名称の末尾に星印が付いたもの）。
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軽度不調の症状は、うつの症状と類似している部分もあるものの、本例では、軽度不調とうつとの判別を目指すべく、うつとの関連が報告されていない下記６種のｍｉＲＮＡを、有力な軽度不調マーカーとして着目した（表２中、ｍｉＲＮＡの名称の末尾に星印が付いたもの）。
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【0059】
【表2】
【0060】
（５）データ解析－３：Ｍａｎｎ－ＷｈｉｔｎｅｙのＵ検定
上記「データ解析－２」と同様の介入前試料を用いて、以下の方法により、「不安感」及び「抑うつ感」以外の評価項目においても統計的差異を示すかどうかを検討した。
上記「データ解析－２」と同様の介入前試料を用いて、以下の方法により、「不安感」及び「抑うつ感」以外の評価項目においても統計的差異を示すかどうかを検討した。
【0061】
多変量回帰分析（ＯＰＬＳ－Ｒ解析）を行わずに、各評価項目（活気、イライラ感、疲労感、不安感、抑うつ感、身体愁訴）ごとに、３分位法又は２分位法により、スコアに基づき下位（Ｌｏｗ）群及び上位（Ｈｉｇｈ）群に分けた。
次いで、１９３種類のｍｉＲＮＡの発現量（リード数）に対する両群間の統計的差異をＭａｎｎ－ＷｈｉｔｎｅｙのＵ検定により評価した。
次いで、１９３種類のｍｉＲＮＡの発現量（リード数）に対する両群間の統計的差異をＭａｎｎ－ＷｈｉｔｎｅｙのＵ検定により評価した。
【0062】
評価項目ごとに、３分位法で分割した群、及び２分位法で分割した群の両方で差異が認められた以下の３８種類のｍｉＲＮＡを選択した。
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ｈｓａ－ｍｉＲ－３７４ｂ－５ｐ
【0063】
上記の３８種類のｍｉＲＮＡについて、下記を全て満たす１４種類のｍｉＲＮＡを選別した。
・評価項目のうち「不安感」及び「抑うつ感」以外で統計的差異が認められた。
・うつに関連するｍｉＲＮＡとしての報告例が見出せなかった。
・評価項目のうち「不安感」及び「抑うつ感」以外で統計的差異が認められた。
・うつに関連するｍｉＲＮＡとしての報告例が見出せなかった。
【0064】
上記１４種類のｍｉＲＮＡは以下のとおりである。
ｈｓａ－ｍｉＲ－１１８０－３ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－２７ｂ－５ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－３６１５
ｈｓａ－ｍｉＲ－８７４－３ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－３ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－１４８ａ－３ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－４７３２－３ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－６７４１－３ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－６８４２－３ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－１３０７－５ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－５ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－１６－５ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－２０ｂ－５ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－３７４ｂ－５ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－１１８０－３ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－２７ｂ－５ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－３６１５
ｈｓａ－ｍｉＲ－８７４－３ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－３ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－１４８ａ－３ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－４７３２－３ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－６７４１－３ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－６８４２－３ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－１３０７－５ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－１４２－５ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－１６－５ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－２０ｂ－５ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－３７４ｂ－５ｐ
【0065】
（６）データ解析－４：バイオマーカー候補ｍｉＲＮＡの特定、及びそれらの組み合わせ解析
以下の方法により、上記「データ解析－１」乃至「データ解析－３」の結果に基づき、軽度不調のバイオマーカーの候補となるｍｉＲＮＡを特定すると共に、組み合わせ解析を行った。
以下の方法により、上記「データ解析－１」乃至「データ解析－３」の結果に基づき、軽度不調のバイオマーカーの候補となるｍｉＲＮＡを特定すると共に、組み合わせ解析を行った。
【0066】
まず、上記「データ解析－１」乃至「データ解析－３」の結果に基づき、「選別前のｍｉＲＮＡ（データ解析－１：３０種、データ解析－２：１１種、データ解析－３：３８種）」のうち、全ての解析結果で重複する６種類のｍｉＲＮＡを軽度不調のバイオマーカーの候補とした。
上記６種類のｍｉＲＮＡは以下のとおりである。
ｈｓａ－ｍｉＲ－９２ａ－３ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－２６ｂ－３ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－１８２－５ｐ
ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｅ－５ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－４２３－５ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－１３０ａ－３ｐ
上記６種類のｍｉＲＮＡは以下のとおりである。
ｈｓａ－ｍｉＲ－９２ａ－３ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－２６ｂ－３ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－１８２－５ｐ
ｈｓａ－ｌｅｔ－７ｅ－５ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－４２３－５ｐ
ｈｓａ－ｍｉＲ－１３０ａ－３ｐ
【0067】
上記６種類のｍｉＲＮＡについて、６種類全てを組み合わせた場合に、軽度不調の有無を判定できるかを検証した。
具体的には、「ＳＰＳＳ Ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ ２９．０．２」（ＩＢＭ Ｊａｐａｎ， Ｔｏｋｙｏ， Ｊａｐａｎ）を用いて、「感度」（真陽性率）と「１－特異度」（偽陽性率）との関連を表す、「ＲＯＣ（Ｒｅｃｅｉｖｅｒ Ｏｐｅｒａｔｉｎｇ Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ）」曲線の「ＡＵＣ（Ａｒｅａ Ｕｎｄｅｒ Ｃｕｒｖｅ：曲線下面積）」値を算出した。
なお、各ｍｉＲＮＡ（組み合わせを含む）について、ロジスティック回帰分析を行った後、各評価項目のスコア（Ｌｏｗ群及びＨｉｇｈ群の２分位に分けたもの）に対するＲＯＣ曲線を作成した。
具体的には、「ＳＰＳＳ Ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ ２９．０．２」（ＩＢＭ Ｊａｐａｎ， Ｔｏｋｙｏ， Ｊａｐａｎ）を用いて、「感度」（真陽性率）と「１－特異度」（偽陽性率）との関連を表す、「ＲＯＣ（Ｒｅｃｅｉｖｅｒ Ｏｐｅｒａｔｉｎｇ Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ）」曲線の「ＡＵＣ（Ａｒｅａ Ｕｎｄｅｒ Ｃｕｒｖｅ：曲線下面積）」値を算出した。
なお、各ｍｉＲＮＡ（組み合わせを含む）について、ロジスティック回帰分析を行った後、各評価項目のスコア（Ｌｏｗ群及びＨｉｇｈ群の２分位に分けたもの）に対するＲＯＣ曲線を作成した。
【0068】
その結果を表３（数値はＡＵＣ値を示す。）に示す。ＡＵＣ値が高いほど、軽度不調の有無を判定できる精度が高いことを意味する。
表３に示されるとおり、６種類のｍｉＲＮＡを全て組み合わせた場合、いずれの評価項目においても、各ｍｉＲＮＡ単独の時と比べて、ＡＵＣ値が高かった。特に、４種類の評価項目（イライラ感、疲労感、不安感、抑うつ感）でＡＵＣ値が０．７以上であり、精度の高い軽度不調バイオマーカーとなることがわかった。
表３に示されるとおり、６種類のｍｉＲＮＡを全て組み合わせた場合、いずれの評価項目においても、各ｍｉＲＮＡ単独の時と比べて、ＡＵＣ値が高かった。特に、４種類の評価項目（イライラ感、疲労感、不安感、抑うつ感）でＡＵＣ値が０．７以上であり、精度の高い軽度不調バイオマーカーとなることがわかった。
【0069】
【表3】