特開 2025-42873 ルテカルピンをアデノシンＡ２Ａ受容体活性化作用の有効成分として含有する組成物

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公開特許公報(A)

(11)【公開番号】P2025042873

(43)【公開日】2025-03-28

(54)【発明の名称】ルテカルピンをアデノシンＡ２Ａ受容体活性化作用の有効成分として含有する組成物

(51)【国際特許分類】

   A23L 33/105 20160101AFI20250321BHJP

   A61K 31/519 20060101ALI20250321BHJP

   A61P 25/20 20060101ALI20250321BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20250321BHJP

   A23L 33/10 20160101ALI20250321BHJP

   A23L 2/52 20060101ALI20250321BHJP

【ＦＩ】

A23L33/105

A61K31/519

A61P25/20

A61P43/00 111

A23L33/10

A23L2/00 F

A23L2/52

【審査請求】未請求

【請求項の数】2

【出願形態】ＯＬ

(21)【出願番号】P 2023150053

(22)【出願日】2023-09-15

(71)【出願人】

【識別番号】000231637

【氏名又は名称】株式会社ニップン

(74)【代理人】

【識別番号】100130661

【弁理士】

【氏名又は名称】田所 義嗣

(72)【発明者】

【氏名】鈴木 千尋

【テーマコード（参考）】

4B018

4B117

4C086

【Ｆターム（参考）】

4B018LB01

4B018LB02

4B018LB08

4B018MD18

4B018ME14

4B018MF01

4B117LC04

4B117LG18

4B117LK06

4B117LK12

4B117LL01

4B117LL06

4B117LP01

4C086AA01

4C086AA02

4C086CB09

4C086MA01

4C086MA04

4C086NA14

4C086ZA05

4C086ZC41

(57)【要約】

【課題】ルテカルピンをアデノシンＡ２Ａ受容体活性化作用の有効成分として含有する組成物を提供すること。
【解決手段】ルテカルピンをアデノシンＡ２Ａ受容体活性化作用の有効成分として含有する組成物である。
また、これを使用した、睡眠の質を改善することを目的とする機能性表示食品、サプリメント、特定保健用食品である。
【選択図】なし

【特許請求の範囲】

【請求項1】

ルテカルピンをアデノシンＡ２Ａ受容体活性化作用の有効成分として含有する組成物。

【請求項2】

請求項１に記載のルテカルピンをアデノシンＡ２Ａ受容体活性化作用の有効成分として含有する組成物を使用した、睡眠の質を改善することを目的とする機能性表示食品、サプリメント、特定保健用食品。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、ルテカルピンをアデノシンＡ２Ａ受容体活性化作用の有効成分として含有する組成物に関する。

【背景技術】

【0002】

アデノシンＡ２Ａ受容体は全身に分布しているＧタンパク質共役型の受容体で脳内の睡眠中枢において睡眠の制御に深く関わっていることが知られている。
このアデノシンＡ２Ａ受容体を活性化すれば深い睡眠であるノンレム睡眠を誘導し睡眠の質を改善することができる。
例えば、アデノシンＡ２Ａ受容体アゴニストであるＣＧＳ２１６８０は動物への投与によりノンレム睡眠を増加させることが知られている （例えば非特許文献１、２参照）。
アデノシンＡ２Ａ受容体を活性化させる天然成分としては、これまでに清酒酵母がアデノシンＡ２Ａ受容体の活性化を介してヒトのノンレム睡眠を増やし睡眠の質を改善することが報告されている（例えば特許文献１、非特許文献３、４参照）。

【0003】

ルテカルピンは、シクロオキシゲナーゼ１（ＣＯＸ－１）、シクロオキシゲナーゼ２（ＣＯＸ－２）を阻害することが知られている（例えば特許文献２参照）。また、ＴＲＰＶ１を介した心血管系保護等の強心作用が知られている（例えば非特許文献５参照）。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0004】

【特許文献1】特開２０１３－８２６４１号公報

【特許文献2】特表２０２２－５０５８５７号公報

【非特許文献】

【0005】

【非特許文献1】Satoh S, et al. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 1996 Jun 11;93(12):5980-4. ＤＯＩ：10.1073/pnas.93.12.5980.

【非特許文献2】Korkutata M, et al. Neuropharmacology. 2019 Jan;144:122-132. ＤＯＩ：10.1016/ j.neuropharm.2018.10.022.

【非特許文献3】Nakamura Y, et al. Journal of sleep research. 2016 Dec;25(6):746-753. ＤＯＩ：10.1111/jsr.12434.

【非特許文献4】Monoi N, et al. Journal of sleep research. 2016 Feb;25(1):116-23. ＤＯＩ：10.1111/jsr.12336.

【非特許文献5】Sujie Jia, et al. Molecules. 2010 Mar 15;15(3):1873-81. ＤＯＩ：10.3390/molecules15031873.

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0006】

本発明の目的は、アデノシンＡ２Ａ受容体を活性化する物質、及び、これを使用した、睡眠の質を改善することを目的とする機能性表示食品、サプリメント、特定保健用食品を提供することである。

【課題を解決するための手段】

【0007】

本発明者は前記の目的を達成するために鋭意研究を重ねた結果、ルテカルピンがアデノシンＡ２Ａ受容体を活性化し、これにより睡眠の質を改善することができることを見出し、本発明を完成するに至った。
従って、本発明は、ルテカルピンをアデノシンＡ２Ａ受容体活性化作用の有効成分として含有する組成物である。
また、これを使用した、睡眠の質を改善することを目的とする機能性表示食品、サプリメント、特定保健用食品である。

【発明の効果】

【0008】

本発明のルテカルピンをアデノシンＡ２Ａ受容体活性化作用の有効成分として含有する組成物は、ルテカルピンを本発明品における摂取量とする場合、有害事象の報告はなく安全であると考えられる。
本発明によりノンレム睡眠を増加させ睡眠の質を改善することができる。

【発明を実施するための形態】

【0009】

以下、本発明を詳細に説明する。
本発明のルテカルピンは、化学式１で示され、中国原産のミカン科植物であるゴシュユや一部のサンショウ属等に含まれる。ゴシュユは頭痛や腹痛などに対して用いられる漢方の原料であり、ルテカルピンには強心作用や血管拡張作用、抗炎症作用が知られている。
経口摂取されたルテカルピンは体内に吸収され血中に移行し、全身を循環する。

【0010】

【化1】

【0011】

＜ルテカルピンの入手方法＞
ルテカルピンは、前記のとおり、ミカン科植物ゴシュユの果実や一部のサンショウ属に含まれており、エタノール、メタノール、酢酸エチル、アセトン等を使用した溶媒抽出等の方法で抽出した後に加水分解し、カラムクロマトグラフィー等で精製して得ることができる。
また、ルテカルピンは市販されており本発明では市販されているルテカルピンも使用することができる。

【0012】

＜ルテカルピンの使用方法＞
ルテカルピンの使用方法は、従来のルテカルピンと同様であり特に限定はない。
例えば、機能性表示食品、サプリメント、特定保健用食品に配合することができる。
機能性表示食品や特定保健用食品とする場合の食品の例として、麺類、飯類、パン類、洋菓子類、和菓子類、ガム類、ジュース、酒類等を挙げることができる。
本発明のルテカルピンをアデノシンＡ２Ａ受容体活性化作用の有効成分として含有する組成物の経口投与量は１日あたりのヒトのルテカルピン摂取量として、通常１ｍｇ～１０００ｍｇ／日であり、好ましくは１ｍｇ～５００ｍｇ／日であり、更に好ましくは１ｍｇ～１００ｍｇである。

【実施例0013】

以下本発明を実施例により具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
＜アデノシンＡ２Ａ受容体活性評価系の構築＞
アデノシンＡ２Ａ受容体活性評価のため以下のレポーターアッセイを構築した。
アデノシンＡ２Ａ受容体は活性化すると細胞内Ｇｓタンパク質と相互作用し、アデニル酸シクラーゼを活性化させることでｃＡＭＰを産生する。
ｃＡＭＰシグナルを検出することでアデノシンＡ２Ａ受容体の活性化を評価することができる。
ｃＡＭＰシグナルの検出は、以下のとおり ホタルルシフェラーゼおよびウミシイタケルシフェラーゼの発光量を測定して行うことができる。
（１）ＨＥＫ２９３細胞中に、ＣＲＥ（ｃＡＭＰ－ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｅｌｅｍｅｎｔ）の下流にホタルルシフェラーゼをコードするプラスミド（商品名：ｐＧＬ４．２９ プロメガ株式会社製）およびウミシイタケルシフェラーゼ発現ベクター（商品名：ｐＦ９Ａ ＣＭＶ ｈＲｌｕｃ－ｎｅｏ Ｆｌｅｘｉ（登録商標） Ｖｅｃｔｏｒ プロメガ株式会社製）、Ｂａｒｎａｓｅの配列を除去）を導入した。
遺伝子の導入にはトランスフェクション試薬（商品名：ＦｕＧＥＮＥ（登録商標） ＨＤ Ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ Ｒｅａｇｅｎｔ プロメガ株式会社製）を使用した。
（２）９６ｗｅｌｌｐｌａｔｅに前記（１）で得られた細胞をＤＭＥＭ培地に５×１０^４個／ｗｅｌｌ播種した。
（３）２３時間後にＤＭＳＯに溶解したＺＭ２４１３８５を下記試料１～試料４に示す濃度になるよう添加した。
（４）前記（３）の１時間後、前記（２）の培地を除去し１０％ＦＢＳ含有ＤＭＥＭ培地に交換しＤＭＳＯに溶解させたＮＥＣＡを下記試料１～試料４に示す濃度になるよう添加した。
（５）前記（４）の培地交換から５時間後に培地を除去し、Ｄｕａｌ－Ｇｌｏ（登録商標） Ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ Ａｓｓａｙ Ｓｙｓｔｅｍ（プロメガ株式会社）を用いてホタルルシフェラーゼおよびウミシイタケルシフェラーゼの発光強度を測定した。
（６）ウミシイタケルシフェラーゼの発光強度を基準として、これに対するホタルの発光強度を比較し比率を求めた。
（７）前記（６）で得られた比率を何も添加しない場合（試料１）の比率が１となるように換算し相対発光量を求めた。

【0014】

＊ＮＥＣＡ（５’－Ｎ－Ｅｔｈｙｌｃａｒｂｏｘａｍｉｄｏａｄｅｎｏｓｉｎｅ ）は、アデノシン受容体全般のアゴニストであり、アデノシンＡ２Ａ受容体に高い親和性を示す。
＊ＺＭ２４１３８５は、アデノシンＡ２Ａ受容体の選択的アンタゴニストである。

【0015】

試料１は、ＮＥＣＡ及びＺＭ２４１３８５をともに添加しなかった。
試料２は、ＮＥＣＡを培地中１００ｎＭの濃度になるように添加しＺＭ２４１３８５を添加しなかった。
試料３は、ＮＥＣＡを添加せず、ＺＭ２４１３８５を培地中１０μＭの濃度になるように添加した。
試料４は、ＮＥＣＡを培地中１００ｎＭの濃度になるように添加しＺＭ２４１３８５を培地中１０μＭの濃度になるように添加した。

【0016】

その結果、試料１の相対発光量は、１．００、試料２の相対発光量は、１２．１７、試料３の相対発光量は１．０３、試料４の相対発光量は、１．１４となった。
アデノシンＡ２Ａ受容体のアゴニストであるＮＥＣＡはｃＡＭＰシグナルを活性化し、またアデノシンＡ２Ａ受容体に選択的なアンタゴニストＺＭ２４１３８５によりｃＡＭＰシグナルの活性化が抑制されており本評価系でアデノシンＡ２Ａ受容体の活性化を評価できることが確認できた。

【0017】

＜ルテカルピンのアデノシンＡ２Ａ受容体活性評価＞
前記レポーターアッセイにおいて、ＮＥＣＡ培地中濃度１００ｎＭをルテカルピン培地中濃度１０μＭに変更した以外は、同様にしてレポーターアッセイを行った。
試料５は、ルテカルピン及びＺＭ２４１３８５をともに添加しなかった。
試料６は、ルテカルピンを培地中１０μＭの濃度になるように添加しＺＭ２４１３８５を添加しなかった。
試料７は、ルテカルピンを培地中１０μＭの濃度になるように添加しＺＭ２４１３８５を培地中１０μＭの濃度で添加した。

【0018】

その結果、資料５の相対発光量は、１．００、試料６の相対発光量は、２．０５、試料７の相対発光量は１．１９となり、ルテカルピンがアデノシンＡ２Ａ受容体を活性化していることが確認できた。

【0019】

［実施例１ 飲料］
果糖ブドウ糖液糖３０ｇ、乳化剤０．５ｇ、ルテカルピンを１質量％含むゴシュユ由来の抽出物１ｇ、香料適量、精製水６０ｇをミキサーによって常法により混合し、飲料を製造した。