特許 6995042 ペプチド化合物

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】

(24)【登録日】2021-12-16

(45)【発行日】2022-02-04

(54)【発明の名称】ペプチド化合物

(51)【国際特許分類】

   C07K 14/575 20060101AFI20220128BHJP

   C12N 15/16 20060101ALI20220128BHJP

   A61K 38/16 20060101ALI20220128BHJP

   A61K 38/22 20060101ALI20220128BHJP

   A61P 3/04 20060101ALI20220128BHJP

   A61P 3/10 20060101ALI20220128BHJP

【ＦＩ】

C07K14/575

C12N15/16 ZNA

A61K38/16

A61K38/22

A61P3/04

A61P3/10

【請求項の数】 15

(21)【出願番号】P 2018519562

(86)(22)【出願日】2017-05-23

(86)【国際出願番号】 JP2017019220

(87)【国際公開番号】W WO2017204219

(87)【国際公開日】2017-11-30

【審査請求日】2020-04-07

(31)【優先権主張番号】P 2016103011

(32)【優先日】2016-05-24

(33)【優先権主張国・地域又は機関】JP

(73)【特許権者】

【識別番号】000002934

【氏名又は名称】武田薬品工業株式会社

(74)【代理人】

【識別番号】230104019

【弁護士】

【氏名又は名称】大野 聖二

(74)【代理人】

【識別番号】100119183

【弁理士】

【氏名又は名称】松任谷 優子

(74)【代理人】

【識別番号】100149076

【弁理士】

【氏名又は名称】梅田 慎介

(74)【代理人】

【識別番号】100162503

【弁理士】

【氏名又は名称】今野 智介

(74)【代理人】

【識別番号】100144794

【弁理士】

【氏名又は名称】大木 信人

(72)【発明者】

【氏名】浅見 泰司

(72)【発明者】

【氏名】新居田 歩

【審査官】上村 直子

(56)【参考文献】

【文献】国際公開第２０１５／０６７７１６（ＷＯ，Ａ１）

【文献】特表２０１６－５０３７７２（ＪＰ，Ａ）

【文献】特表２０１６－５０６４０１（ＪＰ，Ａ）

【文献】国際公開第２０１５／１５５１３９（ＷＯ，Ａ１）

【文献】国際公開第２０１４／１９２２８４（ＷＯ，Ａ１）

【文献】特表２０１６－５１２２１３（ＪＰ，Ａ）

【文献】特表２０１５－５１７４５９（ＪＰ，Ａ）

【文献】中国特許出願公開第１０４２６２４８１（ＣＮ，Ａ）

(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)

Ｃ０７Ｋ １４／５７５

Ｃ１２Ｎ １５／１６

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ）

ＵｎｉＰｒｏｔ／ＧｅｎｅＳｅｑ

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

式（Ｉ）：
Ｐ¹－Ｔｙｒ－Ａｉｂ－Ｇｌｕ－Ｇｌｙ－Ｔｈｒ－α-ＭｅＰｈｅ－Ｔｈｒ－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｌｙｓ（－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｒ^A10）－Ａ１１－Ａ１２－Ａｉｂ－Ｌｅｕ－Ａ１５－Ｌｙｓ－Ｇｌｎ－Ａ１８－Ｇｌｎ－Ｉｖａ－Ｇｌｕ－Ｐｈｅ－Ｖａｌ－Ａｒｇ－Ｈｉｓ－Ｌｅｕ－Ｌｅｕ－Ａｓｎ－Ｌｙｓ－Ａｉｂ－Ｔｈｒ－Ａｒｇ－Ｇｌｎ－Ａｒｇ－Ａ３５－ＮＨ₂
［式中、
Ｐ¹は、式：
－Ｒ^A1、
－ＣＯ－Ｒ^A1、
－ＣＯ－ＯＲ^A1、
－ＣＯ－ＣＯＲ^A1、
－ＳＯ－Ｒ^A1、
－ＳＯ₂－Ｒ^A1、
－ＳＯ₂－ＯＲ^A1、
－ＣＯ－ＮＲ^A2Ｒ^A3、
－ＳＯ₂－ＮＲ^A2Ｒ^A3、または
－Ｃ(＝ＮＲ^A1)－ＮＲ^A2Ｒ^A3
（式中、Ｒ^A1、Ｒ^A2及びＲ^A3は、独立して、水素原子、置換されていてもよい炭化水素基、又は置換されていてもよい複素環基を示す。）で表される基を示し；
Ｒ^A10は、ＰａｌまたはＯｄａを示し；
Ａ１１は、Ａｉｂ、ＡｌａまたはＳｅｒを示し；
Ａ１２は、ＩｌｅまたはＬｙｓを示し；
Ａ１５は、ＡｓｐまたはＧｌｕを示し；
Ａ１８は、ＡｌａまたはＡｒｇを示し；
Ａ３５は、ＴｙｒまたはＰｈｅ（２－Ｆ）を示す]
で表されるペプチドまたはその塩。

【請求項2】

Ｐ１が、水素原子又はメチル基である、請求項１記載のペプチドまたはその塩。

【請求項3】

Ｒ ^A10 が、Ｐａｌである、請求項１記載のペプチドまたはその塩。

【請求項4】

Ａ１２が、Ｉｌｅである、請求項１記載のペプチドまたはその塩。

【請求項5】

Ａ１５が、Ｇｌｕである、請求項１記載のペプチドまたはその塩。

【請求項6】

Ａ１８が、Ａｒｇである、請求項１記載のペプチドまたはその塩。

【請求項7】

Ａ３５が、Ｔｙｒである、請求項１記載のペプチドまたはその塩。

【請求項8】

Ｈ－Ｔｙｒ－Ａｉｂ－Ｇｌｕ－Ｇｌｙ－Ｔｈｒ－αＭｅＰｈｅ－Ｔｈｒ－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｌｙｓ（－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｐａｌ）－Ａｉｂ－Ｉｌｅ－Ａｉｂ－Ｌｅｕ－Ｇｌｕ－Ｌｙｓ－Ｇｌｎ－Ａｒｇ－Ｇｌｎ－Ｉｖａ－Ｇｌｕ－Ｐｈｅ－Ｖａｌ－Ａｒｇ－Ｈｉｓ－Ｌｅｕ－Ｌｅｕ－Ａｓｎ－Ｌｙｓ－Ａｉｂ－Ｔｈｒ－Ａｒｇ－Ｇｌｎ－Ａｒｇ－Ｔｙｒ－ＮＨ₂またはその塩。

【請求項9】

Ｈ－Ｔｙｒ－Ａｉｂ－Ｇｌｕ－Ｇｌｙ－Ｔｈｒ－αＭｅＰｈｅ－Ｔｈｒ－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｌｙｓ（－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｐａｌ）－Ａｌａ－Ｉｌｅ－Ａｉｂ－Ｌｅｕ－Ｇｌｕ－Ｌｙｓ－Ｇｌｎ－Ａｒｇ－Ｇｌｎ－Ｉｖａ－Ｇｌｕ－Ｐｈｅ－Ｖａｌ－Ａｒｇ－Ｈｉｓ－Ｌｅｕ－Ｌｅｕ－Ａｓｎ－Ｌｙｓ－Ａｉｂ－Ｔｈｒ－Ａｒｇ－Ｇｌｎ－Ａｒｇ－Ｔｙｒ－ＮＨ₂またはその塩。

【請求項10】

Ｍｅ－Ｔｙｒ－Ａｉｂ－Ｇｌｕ－Ｇｌｙ－Ｔｈｒ－αＭｅＰｈｅ－Ｔｈｒ－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｌｙｓ（－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｐａｌ）－Ｓｅｒ－Ｉｌｅ－Ａｉｂ－Ｌｅｕ－Ｇｌｕ－Ｌｙｓ－Ｇｌｎ－Ａｒｇ－Ｇｌｎ－Ｉｖａ－Ｇｌｕ－Ｐｈｅ－Ｖａｌ－Ａｒｇ－Ｈｉｓ－Ｌｅｕ－Ｌｅｕ－Ａｓｎ－Ｌｙｓ－Ａｉｂ－Ｔｈｒ－Ａｒｇ－Ｇｌｎ－Ａｒｇ－Ｔｙｒ－ＮＨ₂またはその塩。

【請求項11】

請求項１記載のペプチドまたはその塩を含有する医薬。

【請求項12】

Ｙ２受容体、ＧＬＰ－１受容体およびＧＩＰ受容体の活性化剤である、請求項１１記載の医薬。

【請求項13】

肥満症または糖尿病の予防・治療剤である、請求項１１記載の医薬。

【請求項14】

肥満症または糖尿病の予防・治療剤を製造するための、請求項１記載のペプチドまたはその塩の使用。

【請求項15】

肥満症または糖尿病の予防・治療に使用するための、請求項１記載のペプチドまたはその塩。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

［関連出願］
本明細書は、本願の優先権の基礎である特願２０１６－１０３０１１号（２０１６年５月２４日出願）の明細書に記載された内容を包含する。
［技術分野］
本発明は、Y2受容体、GLP-1受容体およびGIP受容体活性化作用に基づき、肥満症、糖尿病等の治療または予防に有用であり得るペプチド化合物に関する。

【0002】

［発明の背景］
ペプチドYY（PYY）はブタ上部小腸から単離された36個のアミノ酸残基からなるペプチドである。PYYは、ブタ脳から単離されたニューロペプチドY（NPY）とともに膵ポリペプチド（pancreatic polypeptide; PP）ファミリーに属する（特許文献１及び２）。

【0003】

PYYは、食事摂取に伴い消化管内分泌細胞（L細胞）から分泌され、Y2受容体を介して摂食抑制作用を示すことが知られている。この作用経路として、視床下部弓状核NPY/AgRP発現神経細胞のY2受容体を介した腸管・視床下部経路、迷走神経末端のY2受容体を介した迷走神経求心路が報告されている。

【0004】

また、食行動の破綻した神経性食思不振症（AN; Anorexia Nervosa）の患者では脳脊髄中のPYY濃度が高いこと、神経性大食症（BN; Bulimia Nervosa）の患者では食後の血中PYY濃度の上昇が健常人と比べ極めて鈍いことが報告されている。さらに、肥満症患者の血中PYY濃度が、健常人のPYY濃度と比較して低いことが知られている。

【0005】

グルカゴン様ペプチド-1（GLP-1）とグルコース依存性インスリン分泌刺激ポリペプチド（GIP）は共にインクレチンと呼ばれるペプチドである。GLP-1とGIPはそれぞれ小腸のL細胞およびK細胞より分泌される。GLP-1はGLP-1受容体を介して作用し、糖依存性インスリン分泌促進作用および摂食抑制作用を持つことが知られている。一方、GIPはGIP受容体を介して糖依存性インスリン分泌促進作用を持つことは知られているが、摂食に与える影響は明確ではない。

【0006】

GLP-1受容体/GIP受容体共作動ペプチドはGLP-1受容体作動薬単独よりも強い血糖低下作用および体重低下作用を示すことが報告されている(特許文献３）。また、天然のグルカゴン、GIPあるいはGLP-1の構造を基に、GLP-1受容体/GIP受容体コアゴニスト活性を有するペプチドの探索や、その抗肥満薬、糖尿病治療薬としての開発も試みられている（特許文献３～６）。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0007】

【文献】WO2006/049681

【文献】WO2011/002066

【文献】WO2010/011439

【文献】WO2013/164483

【文献】WO2014/192284

【文献】WO2016/084826

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0008】

本発明は、Y2受容体、GLP-1受容体およびGIP受容体活性化作用を有し、肥満症および糖尿病などの予防・治療剤として有用なペプチド化合物を提供することを目的とする。

【課題を解決するための手段】

【0009】

発明者らは、Y2受容体、GLP-1受容体およびGIP受容体活性化作用に基づき、肥満症および糖尿病などの予防・治療剤として有用であり得るペプチド化合物について鋭意検討した結果、後記式（Ｉ）で表される配列を有するペプチド化合物が、Y2受容体、GLP-1受容体およびGIP受容体活性化作用に基づき、肥満症または糖尿病の予防・治療に有用であり得ることを見出し、本発明を完成するに至った。

【0010】

すなわち、本発明は、以下の〔１〕～〔１７〕に関する。
〔１〕式（Ｉ）：
Ｐ^１－Ｔｙｒ－Ａｉｂ－Ｇｌｕ－Ｇｌｙ－Ｔｈｒ－α-ＭｅＰｈｅ－Ｔｈｒ－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｌｙｓ（－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｒ^Ａ１０）－Ａ１１－Ａ１２－Ａｉｂ－Ｌｅｕ－Ａ１５－Ｌｙｓ－Ｇｌｎ－Ａ１８－Ｇｌｎ－Ｉｖａ－Ｇｌｕ－Ｐｈｅ－Ｖａｌ－Ａｒｇ－Ｈｉｓ－Ｌｅｕ－Ｌｅｕ－Ａｓｎ－Ｌｙｓ－Ａｉｂ－Ｔｈｒ－Ａｒｇ－Ｇｌｎ－Ａｒｇ－Ａ３５－ＮＨ_２（配列番号１）
［式中、
Ｐ^１は、式：
－Ｒ^Ａ１、
－ＣＯ－Ｒ^Ａ１、
－ＣＯ－ＯＲ^Ａ１、
－ＣＯ－ＣＯＲ^Ａ１、
－ＳＯ－Ｒ^Ａ１、
－ＳＯ_２－Ｒ^Ａ１、
－ＳＯ_２－ＯＲ^Ａ１、
－ＣＯ－ＮＲ^Ａ２Ｒ^Ａ３、
－ＳＯ_２－ＮＲ^Ａ２Ｒ^Ａ３、または
－Ｃ(＝ＮＲ^Ａ１)－ＮＲ^Ａ２Ｒ^Ａ３
（式中、Ｒ^Ａ１、Ｒ^Ａ２及びＲ^Ａ３は、独立して、水素原子、置換されていてもよい炭化水素基、又は置換されていてもよい複素環基を示す。）で表される基を示し；
Ｒ^Ａ１０は、ＰａｌまたはＯｄａを示し；
Ａ１１は、Ａｉｂ、ＡｌａまたはＳｅｒを示し（Ａ１１は、好ましくはＡｉｂであるが、別の態様では、好ましくはＡｌａであり、別の態様では、好ましくはＳｅｒである）；
Ａ１２は、ＩｌｅまたはＬｙｓを示し；
Ａ１５は、ＡｓｐまたはＧｌｕを示し；
Ａ１８は、ＡｌａまたはＡｒｇを示し；
Ａ３５は、ＴｙｒまたはＰｈｅ（２－Ｆ）を示す]
で表されるペプチドまたはその塩（以下、化合物（Ｉ）と略記することがある。）。
〔２〕Ｐ１が、水素原子又はメチル基である、上記〔１〕記載のペプチドまたはその塩。
〔３〕ＲＡ１０が、Ｐａｌである、上記〔１〕記載のペプチドまたはその塩。
〔４〕Ａ１２が、Ｉｌｅである、上記〔１〕記載のペプチドまたはその塩。
〔５〕Ａ１５が、Ｇｌｕである、上記〔１〕記載のペプチドまたはその塩。
〔６〕Ａ１８が、Ａｒｇである、上記〔１〕記載のペプチドまたはその塩。
〔７〕Ａ３５が、Ｔｙｒである、上記〔１〕記載のペプチドまたはその塩。
〔８〕Ｈ－Ｔｙｒ－Ａｉｂ－Ｇｌｕ－Ｇｌｙ－Ｔｈｒ－αＭｅＰｈｅ－Ｔｈｒ－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｌｙｓ（－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｐａｌ）－Ａｉｂ－Ｉｌｅ－Ａｉｂ－Ｌｅｕ－Ｇｌｕ－Ｌｙｓ－Ｇｌｎ－Ａｒｇ－Ｇｌｎ－Ｉｖａ－Ｇｌｕ－Ｐｈｅ－Ｖａｌ－Ａｒｇ－Ｈｉｓ－Ｌｅｕ－Ｌｅｕ－Ａｓｎ－Ｌｙｓ－Ａｉｂ－Ｔｈｒ－Ａｒｇ－Ｇｌｎ－Ａｒｇ－Ｔｙｒ－ＮＨ_２またはその塩。
〔９〕Ｈ－Ｔｙｒ－Ａｉｂ－Ｇｌｕ－Ｇｌｙ－Ｔｈｒ－αＭｅＰｈｅ－Ｔｈｒ－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｌｙｓ（－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｐａｌ）－Ａｌａ－Ｉｌｅ－Ａｉｂ－Ｌｅｕ－Ｇｌｕ－Ｌｙｓ－Ｇｌｎ－Ａｒｇ－Ｇｌｎ－Ｉｖａ－Ｇｌｕ－Ｐｈｅ－Ｖａｌ－Ａｒｇ－Ｈｉｓ－Ｌｅｕ－Ｌｅｕ－Ａｓｎ－Ｌｙｓ－Ａｉｂ－Ｔｈｒ－Ａｒｇ－Ｇｌｎ－Ａｒｇ－Ｔｙｒ－ＮＨ_２またはその塩。
〔１０〕Ｍｅ－Ｔｙｒ－Ａｉｂ－Ｇｌｕ－Ｇｌｙ－Ｔｈｒ－αＭｅＰｈｅ－Ｔｈｒ－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｌｙｓ（－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｐａｌ）－Ｓｅｒ－Ｉｌｅ－Ａｉｂ－Ｌｅｕ－Ｇｌｕ－Ｌｙｓ－Ｇｌｎ－Ａｒｇ－Ｇｌｎ－Ｉｖａ－Ｇｌｕ－Ｐｈｅ－Ｖａｌ－Ａｒｇ－Ｈｉｓ－Ｌｅｕ－Ｌｅｕ－Ａｓｎ－Ｌｙｓ－Ａｉｂ－Ｔｈｒ－Ａｒｇ－Ｇｌｎ－Ａｒｇ－Ｔｙｒ－ＮＨ_２またはその塩。
〔１１〕上記〔１〕記載のペプチドまたはその塩を含有する医薬。
〔１２〕Ｙ２受容体、ＧＬＰ－１受容体およびＧＩＰ受容体の活性化剤である、上記〔１１〕記載の医薬。
〔１３〕肥満症または糖尿病の予防・治療剤である、上記〔１１〕記載の医薬。
〔１４〕哺乳動物に対して上記〔１〕記載のペプチドまたはその塩の有効量を投与することを特徴とする、該哺乳動物における肥満症または糖尿病の予防・治療方法。
〔１５〕哺乳動物に対して上記〔１〕記載のペプチドまたはその塩の有効量を投与することを特徴とする、該哺乳動物におけるY2受容体、GLP-1受容体およびGIP受容体を活性化する方法。
〔１６〕肥満症または糖尿病の予防・治療剤を製造するための、上記〔１〕記載のペプチドまたはその塩の使用。
〔１７〕肥満症または糖尿病の予防・治療に使用するための、上記〔１〕記載のペプチドまたはその塩。

【発明の効果】

【0011】

化合物（Ｉ）は、Y2受容体、GLP-1受容体およびGIP受容体活性化作用に基づき、in vivoで摂食抑制作用と体重減少作用を有し得る。そのため、化合物（Ｉ）は、肥満症や糖尿病の予防及び／又は治療剤として有用であり得る。

【図面の簡単な説明】

【0012】

【図1】図１は、DIOマウスにおける実施例４１の化合物（Ｐ４１）の抗肥満作用を示す。各化合物は4週間毎日1回マウスに皮下投与した。(a)体重の継日変化、(b)累積食餌摂取量の％阻害率、(c) EcoMRIで測定した体脂肪量、ならびに(d)体除脂肪量、(e)脂肪組織（fat pad）重量、(f)肝臓組織重量、(g)肝臓内TG含量、(h)肝臓切片のヘマトキシ－エオジン染色 、(i) 各遺伝子の発現。* p < 0.025, ** p < 0.005, *** p < 0.0005 vs. ビークル（Shirley-Williams test）、# p < 0.025, ## p < 0.005, ### p < 0.0005 vs. ビークル（Williams' test）、データは平均± SD (N=6)を示す。

【図2】図２は、ob/obマウスにおけるＰ４１の抗肥満、抗糖尿病作用を示す。各化合物は4週間毎日1回マウスに皮下投与した。(a)GHb、(b)血漿グルコース、(c)血漿インスリン、(d) 体重の継日変化、(e) 累積食餌摂取量の％阻害率、(f)組織重量、及び(g)肝臓内TG含量。# p < 0.025, ## p < 0.005, ### p < 0.0005 vs. ビークル（Shirley-Williams test））、データは平均± SD (N=5-7)を示す。なお、ビークル投与群はN=5、Ｐ４１投与群はN=7である。

【図3】図３は、雄性KKA^yマウスにおけるＰ４１の抗肥満、抗糖尿病作用を示す。各化合物は4週間毎日1回マウスに皮下投与した(a) 体重の継日変化、(b) 累積食餌摂取量の％阻害率、(c) ΔGHb、(d)血漿グルコース、(e)血漿インスリン、(f)肝臓組織重量、(g) 肝臓内TG含量、及び (h) 白色脂肪重量。* p < 0.025, ** p < 0.005, ***p < 0.0005 vs ビークル（Williams' test）、# p < 0.025, ## p < 0.005, ### p < 0.0005 vs ビークル（Shirley-Williams test）。データは平均± SD (N=7)を示す。

【図4】図４は、味覚嫌悪試験に対するＰ４１の作用を示す。マウスは1週間に2回化合物と共に0.1%サッカリンを与えられた。2回目のコンディショニング後2日目に、0.1％サッカリンナトリウム及び水道水の両方をマウスに3時間与え、各液体の摂水量を測定し、サッカリン嗜好率を算出した。 *** p < 0.001 vs. ビークル（Dunnett's test）。データは平均± SD (N=7)を示す。

【図5】図５はカニクイザルにおけるＰ４１の摂食抑制効果を示す。投与後約8時間後に通常の食餌を与えた。投与後24時間の期間にに嘔吐は観察されなかった。N=2（雄：1、雌：1）。

【0013】

［発明の詳細な説明］
以下、本明細書中で用いられる各置換基の定義について詳述する。特記しない限り各置換基は以下の定義を有する。
本明細書中、「ハロゲン原子」としては、例えば、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素が挙げられる。

【0014】

本明細書中、「Ｃ_１－６アルキル基」としては、例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ－ブチル、ｔｅｒｔ－ブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、１－エチルプロピル、ヘキシル、イソヘキシル、１，１－ジメチルブチル、２，２－ジメチルブチル、３，３－ジメチルブチル、２－エチルブチルが挙げられる。

【0015】

本明細書中、「ハロゲン化されていてもよいＣ_１－６アルキル基」としては、例えば、１ないし７個、好ましくは１ないし５個のハロゲン原子を有していてもよいＣ_１－６アルキル基が挙げられる。具体例としては、メチル、クロロメチル、ジフルオロメチル、トリクロロメチル、トリフルオロメチル、エチル、２－ブロモエチル、２，２，２－トリフルオロエチル、テトラフルオロエチル、ペンタフルオロエチル、プロピル、２，２―ジフルオロプロピル、３，３，３－トリフルオロプロピル、イソプロピル、ブチル、４，４，４－トリフルオロブチル、イソブチル、ｓｅｃ－ブチル、ｔｅｒｔ－ブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、５，５，５－トリフルオロペンチル、ヘキシル、６，６，６－トリフルオロヘキシルが挙げられる。

【0016】

本明細書中、「Ｃ_２－６アルケニル基」としては、例えば、エテニル、１－プロペニル、２－プロペニル、２－メチル－１－プロペニル、１－ブテニル、２－ブテニル、３－ブテニル、３－メチル－２－ブテニル、１－ペンテニル、２－ペンテニル、３－ペンテニル、４－ペンテニル、４－メチル－３－ペンテニル、１－ヘキセニル、３－ヘキセニル、５－ヘキセニルが挙げられる。

【0017】

本明細書中、「Ｃ_２－６アルキニル基」としては、例えば、エチニル、１－プロピニル、２－プロピニル、１－ブチニル、２－ブチニル、３－ブチニル、１－ペンチニル、２－ペンチニル、３－ペンチニル、４－ペンチニル、１－ヘキシニル、２－ヘキシニル、３－ヘキシニル、４－ヘキシニル、５－ヘキシニル、４－メチル－２－ペンチニルが挙げられる。

【0018】

本明細書中、「Ｃ_３－１０シクロアルキル基」としては、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチル、ビシクロ［２．２．１］ヘプチル、ビシクロ［２．２．２］オクチル、ビシクロ［３．２．１］オクチル、アダマンチルが挙げられる。

【0019】

本明細書中、「ハロゲン化されていてもよいＣ_３－１０シクロアルキル基」としては、例えば、１ないし７個、好ましくは１ないし５個のハロゲン原子を有していてもよいＣ_３－１０シクロアルキル基が挙げられる。具体例としては、シクロプロピル、２，２－ジフルオロシクロプロピル、２，３－ジフルオロシクロプロピル、シクロブチル、ジフルオロシクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチルが挙げられる。

【0020】

本明細書中、「Ｃ_３－１０シクロアルケニル基」としては、例えば、シクロプロペニル、シクロブテニル、シクロペンテニル、シクロヘキセニル、シクロヘプテニル、シクロオクテニルが挙げられる。

【0021】

本明細書中、「Ｃ_６－１４アリール基」としては、例えば、フェニル、１－ナフチル、２－ナフチル、１－アントリル、２－アントリル、９－アントリルが挙げられる。

【0022】

本明細書中、「Ｃ_７－１６アラルキル基」としては、例えば、ベンジル、フェネチル、ナフチルメチル、フェニルプロピルが挙げられる。

【0023】

本明細書中、「Ｃ_１－６アルコキシ基」としては、例えば、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシ、イソブトキシ、ｓｅｃ－ブトキシ、ｔｅｒｔ－ブトキシ、ペンチルオキシ、ヘキシルオキシが挙げられる。

【0024】

本明細書中、「ハロゲン化されていてもよいＣ_１－６アルコキシ基」としては、例えば、１ないし７個、好ましくは１ないし５個のハロゲン原子を有していてもよいＣ_１－６アルコキシ基が挙げられる。具体例としては、メトキシ、ジフルオロメトキシ、トリフルオロメトキシ、エトキシ、２，２，２－トリフルオロエトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシ、４，４，４－トリフルオロブトキシ、イソブトキシ、ｓｅｃ－ブトキシ、ペンチルオキシ、ヘキシルオキシが挙げられる。

【0025】

本明細書中、「Ｃ_３－１０シクロアルキルオキシ基」としては、例えば、シクロプロピルオキシ、シクロブチルオキシ、シクロペンチルオキシ、シクロヘキシルオキシ、シクロヘプチルオキシ、シクロオクチルオキシが挙げられる。

【0026】

本明細書中、「Ｃ_１－６アルキルチオ基」としては、例えば、メチルチオ、エチルチオ、プロピルチオ、イソプロピルチオ、ブチルチオ、ｓｅｃ－ブチルチオ、ｔｅｒｔ－ブチルチオ、ペンチルチオ、ヘキシルチオが挙げられる。

【0027】

本明細書中、「ハロゲン化されていてもよいＣ_１－６アルキルチオ基」としては、例えば、１ないし７個、好ましくは１ないし５個のハロゲン原子を有していてもよいＣ_１－６アルキルチオ基が挙げられる。具体例としては、メチルチオ、ジフルオロメチルチオ、トリフルオロメチルチオ、エチルチオ、プロピルチオ、イソプロピルチオ、ブチルチオ、４，４，４－トリフルオロブチルチオ、ペンチルチオ、ヘキシルチオが挙げられる。

【0028】

本明細書中、「Ｃ_１－６アルキル－カルボニル基」としては、例えば、アセチル、プロパノイル、ブタノイル、２－メチルプロパノイル、ペンタノイル、３－メチルブタノイル、２－メチルブタノイル、２，２－ジメチルプロパノイル、ヘキサノイル、ヘプタノイルが挙げられる。

【0029】

本明細書中、「ハロゲン化されていてもよいＣ_１－６アルキル－カルボニル基」としては、例えば、１ないし７個、好ましくは１ないし５個のハロゲン原子を有していてもよいＣ_１－６アルキル－カルボニル基が挙げられる。具体例としては、アセチル、クロロアセチル、トリフルオロアセチル、トリクロロアセチル、プロパノイル、ブタノイル、ペンタノイル、ヘキサノイルが挙げられる。

【0030】

本明細書中、「Ｃ_１－６アルコキシ－カルボニル基」としては、例えば、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、プロポキシカルボニル、イソプロポキシカルボニル、ブトキシカルボニル、イソブトキシカルボニル、ｓｅｃ－ブトキシカルボニル、ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル、ペンチルオキシカルボニル、ヘキシルオキシカルボニルが挙げられる。

【0031】

本明細書中、「Ｃ_６－１４アリール－カルボニル基」としては、例えば、ベンゾイル、１－ナフトイル、２－ナフトイルが挙げられる。

【0032】

本明細書中、「Ｃ_７－１６アラルキル－カルボニル基」としては、例えば、フェニルアセチル、フェニルプロピオニルが挙げられる。

【0033】

本明細書中、「５ないし１４員芳香族複素環カルボニル基」としては、例えば、ニコチノイル、イソニコチノイル、テノイル、フロイルが挙げられる。

【0034】

本明細書中、「３ないし１４員非芳香族複素環カルボニル基」としては、例えば、モルホリニルカルボニル、ピペリジニルカルボニル、ピロリジニルカルボニルが挙げられる。

【0035】

本明細書中、「モノ－またはジ－Ｃ_１－６アルキル－カルバモイル基」としては、例えば、メチルカルバモイル、エチルカルバモイル、ジメチルカルバモイル、ジエチルカルバモイル、Ｎ－エチル－Ｎ－メチルカルバモイルが挙げられる。

【0036】

本明細書中、「モノ－またはジ－Ｃ_７－１６アラルキル－カルバモイル基」としては、例えば、ベンジルカルバモイル、フェネチルカルバモイルが挙げられる。

【0037】

本明細書中、「Ｃ_１－６アルキルスルホニル基」としては、例えば、メチルスルホニル、エチルスルホニル、プロピルスルホニル、イソプロピルスルホニル、ブチルスルホニル、ｓｅｃ－ブチルスルホニル、ｔｅｒｔ－ブチルスルホニルが挙げられる。

【0038】

本明細書中、「ハロゲン化されていてもよいＣ_１－６アルキルスルホニル基」としては、例えば、１ないし７個、好ましくは１ないし５個のハロゲン原子を有していてもよいＣ_１－６アルキルスルホニル基が挙げられる。具体例としては、メチルスルホニル、ジフルオロメチルスルホニル、トリフルオロメチルスルホニル、エチルスルホニル、プロピルスルホニル、イソプロピルスルホニル、ブチルスルホニル、４，４，４－トリフルオロブチルスルホニル、ペンチルスルホニル、ヘキシルスルホニルが挙げられる。

【0039】

本明細書中、「Ｃ_６－１４アリールスルホニル基」としては、例えば、フェニルスルホニル、１－ナフチルスルホニル、２－ナフチルスルホニルが挙げられる。

【0040】

本明細書中、「置換基」としては、例えば、ハロゲン原子、シアノ基、ニトロ基、置換されていてもよい炭化水素基、置換されていてもよい複素環基、アシル基、置換されていてもよいアミノ基、置換されていてもよいカルバモイル基、置換されていてもよいチオカルバモイル基、置換されていてもよいスルファモイル基、置換されていてもよいヒドロキシ基、置換されていてもよいスルファニル（ＳＨ）基、置換されていてもよいシリル基が挙げられる。

【0041】

本明細書中、「炭化水素基」（「置換されていてもよい炭化水素基」における「炭化水素基」を含む）としては、例えば、Ｃ_１－６アルキル基、Ｃ_２－６アルケニル基、Ｃ_２－６アルキニル基、Ｃ_３－１０シクロアルキル基、Ｃ_３－１０シクロアルケニル基、Ｃ_６－１４アリール基、Ｃ_７－１６アラルキル基が挙げられる。

【0042】

本明細書中、「置換されていてもよい炭化水素基」としては、例えば、下記の置換基群Ａから選ばれる置換基を有していてもよい炭化水素基が挙げられる。
［置換基群Ａ］
（１）ハロゲン原子、
（２）ニトロ基、
（３）シアノ基、
（４）オキソ基、
（５）ヒドロキシ基、
（６）ハロゲン化されていてもよいＣ_１－６アルコキシ基、
（７）Ｃ_６－１４アリールオキシ基（例、フェノキシ、ナフトキシ）、
（８）Ｃ_７－１６アラルキルオキシ基（例、ベンジルオキシ）、
（９）５ないし１４員芳香族複素環オキシ基（例、ピリジルオキシ）、
（１０）３ないし１４員非芳香族複素環オキシ基（例、モルホリニルオキシ、ピペリジニルオキシ）、
（１１）Ｃ_１－６アルキル－カルボニルオキシ基（例、アセトキシ、プロパノイルオキシ）、
（１２）Ｃ_６－１４アリール－カルボニルオキシ基（例、ベンゾイルオキシ、１－ナフトイルオキシ、２－ナフトイルオキシ）、
（１３）Ｃ_１－６アルコキシ－カルボニルオキシ基（例、メトキシカルボニルオキシ、エトキシカルボニルオキシ、プロポキシカルボニルオキシ、ブトキシカルボニルオキシ）、
（１４）モノ－またはジ－Ｃ_１－６アルキル－カルバモイルオキシ基（例、メチルカルバモイルオキシ、エチルカルバモイルオキシ、ジメチルカルバモイルオキシ、ジエチルカルバモイルオキシ）、
（１５）Ｃ_６－１４アリール－カルバモイルオキシ基（例、フェニルカルバモイルオキシ、ナフチルカルバモイルオキシ）、
（１６）５ないし１４員芳香族複素環カルボニルオキシ基（例、ニコチノイルオキシ）、
（１７）３ないし１４員非芳香族複素環カルボニルオキシ基（例、モルホリニルカルボニルオキシ、ピペリジニルカルボニルオキシ）、
（１８）ハロゲン化されていてもよいＣ_１－６アルキルスルホニルオキシ基（例、メチルスルホニルオキシ、トリフルオロメチルスルホニルオキシ）、
（１９）Ｃ_１－６アルキル基で置換されていてもよいＣ_６－１４アリールスルホニルオキシ基（例、フェニルスルホニルオキシ、トルエンスルホニルオキシ）、
（２０）ハロゲン化されていてもよいＣ_１－６アルキルチオ基、
（２１）５ないし１４員芳香族複素環基 、
（２２）３ないし１４員非芳香族複素環基 、
（２３）ホルミル基、
（２４）カルボキシ基、
（２５）ハロゲン化されていてもよいＣ_１－６アルキル－カルボニル基、
（２６）Ｃ_６－１４アリール－カルボニル基、
（２７）５ないし１４員芳香族複素環カルボニル基、
（２８）３ないし１４員非芳香族複素環カルボニル基、
（２９）Ｃ_１－６アルコキシ－カルボニル基、
（３０）Ｃ_６－１４アリールオキシ－カルボニル基（例、フェニルオキシカルボニル、１－ナフチルオキシカルボニル、２－ナフチルオキシカルボニル）、
（３１）Ｃ_７－１６アラルキルオキシ－カルボニル基（例、ベンジルオキシカルボニル、フェネチルオキシカルボニル）、
（３２）カルバモイル基、
（３３）チオカルバモイル基、
（３４）モノ－またはジ－Ｃ_１－６アルキル－カルバモイル基、
（３５）Ｃ_６－１４アリール－カルバモイル基（例、フェニルカルバモイル）、
（３６）５ないし１４員芳香族複素環カルバモイル基（例、ピリジルカルバモイル、チエニルカルバモイル）、
（３７）３ないし１４員非芳香族複素環カルバモイル基（例、モルホリニルカルバモイル、ピペリジニルカルバモイル）、
（３８）ハロゲン化されていてもよいＣ_１－６アルキルスルホニル基、
（３９）Ｃ_６－１４アリールスルホニル基、
（４０）５ないし１４員芳香族複素環スルホニル基（例、ピリジルスルホニル、チエニルスルホニル）、
（４１）ハロゲン化されていてもよいＣ_１－６アルキルスルフィニル基、
（４２）Ｃ_６－１４アリールスルフィニル基（例、フェニルスルフィニル、１－ナフチルスルフィニル、２－ナフチルスルフィニル）、
（４３）５ないし１４員芳香族複素環スルフィニル基（例、ピリジルスルフィニル、チエニルスルフィニル）、
（４４）アミノ基、
（４５）モノ－またはジ－Ｃ_１－６アルキルアミノ基（例、メチルアミノ、エチルアミノ、プロピルアミノ、イソプロピルアミノ、ブチルアミノ、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、ジプロピルアミノ、ジブチルアミノ、Ｎ－エチル－Ｎ－メチルアミノ）、
（４６）モノ－またはジ－Ｃ_６－１４アリールアミノ基（例、フェニルアミノ）、
（４７）５ないし１４員芳香族複素環アミノ基（例、ピリジルアミノ）、
（４８）Ｃ_７－１６アラルキルアミノ基（例、ベンジルアミノ）、
（４９）ホルミルアミノ基、
（５０）Ｃ_１－６アルキル－カルボニルアミノ基（例、アセチルアミノ、プロパノイルアミノ、ブタノイルアミノ）、
（５１）（Ｃ_１－６アルキル）（Ｃ_１－６アルキル－カルボニル）アミノ基（例、Ｎ－アセチル－Ｎ－メチルアミノ）、
（５２）Ｃ_６－１４アリール－カルボニルアミノ基（例、フェニルカルボニルアミノ、ナフチルカルボニルアミノ）、
（５３）Ｃ_１－６アルコキシ－カルボニルアミノ基（例、メトキシカルボニルアミノ、エトキシカルボニルアミノ、プロポキシカルボニルアミノ、ブトキシカルボニルアミノ、ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）、
（５４）Ｃ_７－１６アラルキルオキシ－カルボニルアミノ基（例、ベンジルオキシカルボニルアミノ）、
（５５）Ｃ_１－６アルキルスルホニルアミノ基（例、メチルスルホニルアミノ、エチルスルホニルアミノ）、
（５６）Ｃ_１－６アルキル基で置換されていてもよいＣ_６－１４アリールスルホニルアミノ基（例、フェニルスルホニルアミノ、トルエンスルホニルアミノ）、
（５７）ハロゲン化されていてもよいＣ_１－６アルキル基、
（５８）Ｃ_２－６アルケニル基、
（５９）Ｃ_２－６アルキニル基、
（６０）Ｃ_３－１０シクロアルキル基、
（６１）Ｃ_３－１０シクロアルケニル基、及び
（６２）Ｃ_６－１４アリール基。

【0043】

「置換されていてもよい炭化水素基」における上記置換基の数は、例えば、１ないし５個、好ましくは１ないし３個である。置換基数が２個以上の場合、各置換基は同一であっても異なっていてもよい。

【0044】

本明細書中、「複素環基」（「置換されていてもよい複素環基」における「複素環基」を含む）としては、例えば、環構成原子として炭素原子以外に窒素原子、硫黄原子および酸素原子から選ばれる１ないし４個のヘテロ原子をそれぞれ含有する、(i)芳香族複素環基、(ii)非芳香族複素環基および(iii)７ないし１０員複素架橋環基が挙げられる。

【0045】

本明細書中、「芳香族複素環基」（「５ないし１４員芳香族複素環基」を含む）としては、例えば、環構成原子として炭素原子以外に窒素原子、硫黄原子および酸素原子から選ばれる１ないし４個のヘテロ原子を含有する５ないし１４員（好ましくは５ないし１０員）の芳香族複素環基が挙げられる。

【0046】

該「芳香族複素環基」の好適な例としては、チエニル、フリル、ピロリル、イミダゾリル、ピラゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、ピリジル、ピラジニル、ピリミジニル、ピリダジニル、１，２，４－オキサジアゾリル、１，３，４－オキサジアゾリル、１，２，４－チアジアゾリル、１，３，４－チアジアゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、トリアジニルなどの５ないし６員単環式芳香族複素環基；
ベンゾチオフェニル、ベンゾフラニル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾイソオキサゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾイソチアゾリル、ベンゾトリアゾリル、イミダゾピリジニル、チエノピリジニル、フロピリジニル、ピロロピリジニル、ピラゾロピリジニル、オキサゾロピリジニル、チアゾロピリジニル、イミダゾピラジニル、イミダゾピリミジニル、チエノピリミジニル、フロピリミジニル、ピロロピリミジニル、ピラゾロピリミジニル、オキサゾロピリミジニル、チアゾロピリミジニル、ピラゾロトリアジニル、ナフト［２，３－ｂ］チエニル、フェノキサチイニル、インドリル、イソインドリル、１Ｈ－インダゾリル、プリニル、イソキノリル、キノリル、フタラジニル、ナフチリジニル、キノキサリニル、キナゾリニル、シンノリニル、カルバゾリル、β－カルボリニル、フェナントリジニル、アクリジニル、フェナジニル、フェノチアジニル、フェノキサジニルなどの８ないし１４員縮合多環式（好ましくは２または３環式）芳香族複素環基が挙げられる。

【0047】

本明細書中、「非芳香族複素環基」（「３ないし１４員非芳香族複素環基」を含む）としては、例えば、環構成原子として炭素原子以外に窒素原子、硫黄原子および酸素原子から選ばれる１ないし４個のヘテロ原子を含有する３ないし１４員（好ましくは４ないし１０員）の非芳香族複素環基が挙げられる。

【0048】

該「非芳香族複素環基」の好適な例としては、アジリジニル、オキシラニル、チイラニル、アゼチジニル、オキセタニル、チエタニル、テトラヒドロチエニル、テトラヒドロフラニル、ピロリニル、ピロリジニル、イミダゾリニル、イミダゾリジニル、オキサゾリニル、オキサゾリジニル、ピラゾリニル、ピラゾリジニル、チアゾリニル、チアゾリジニル、テトラヒドロイソチアゾリル、テトラヒドロオキサゾリル、テトラヒドロイソオキサゾリル、ピペリジニル、ピペラジニル、テトラヒドロピリジニル、ジヒドロピリジニル、ジヒドロチオピラニル、テトラヒドロピリミジニル、テトラヒドロピリダジニル、ジヒドロピラニル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロチオピラニル、モルホリニル、チオモルホリニル、アゼパニル、ジアゼパニル、アゼピニル、オキセパニル、アゾカニル、ジアゾカニルなどの３ないし８員単環式非芳香族複素環基；
ジヒドロベンゾフラニル、ジヒドロベンゾイミダゾリル、ジヒドロベンゾオキサゾリル、ジヒドロベンゾチアゾリル、ジヒドロベンゾイソチアゾリル、ジヒドロナフト［２，３－ｂ］チエニル、テトラヒドロイソキノリル、テトラヒドロキノリル、４Ｈ－キノリジニル、インドリニル、イソインドリニル、テトラヒドロチエノ［２，３－ｃ］ピリジニル、テトラヒドロベンゾアゼピニル、テトラヒドロキノキサリニル、テトラヒドロフェナントリジニル、ヘキサヒドロフェノチアジニル、ヘキサヒドロフェノキサジニル、テトラヒドロフタラジニル、テトラヒドロナフチリジニル、テトラヒドロキナゾリニル、テトラヒドロシンノリニル、テトラヒドロカルバゾリル、テトラヒドロ－β－カルボリニル、テトラヒドロアクリジニル、テトラヒドロフェナジニル、テトラヒドロチオキサンテニル、オクタヒドロイソキノリルなどの９ないし１４員縮合多環式（好ましくは２または３環式）非芳香族複素環基が挙げられる。

【0049】

本明細書中、「７ないし１０員複素架橋環基」の好適な例としては、キヌクリジニル、７－アザビシクロ［２．２．１］ヘプタニルが挙げられる。

【0050】

本明細書中、「含窒素複素環基」としては、「複素環基」のうち、環構成原子として少なくとも１個以上の窒素原子を含有するものが挙げられる。

【0051】

本明細書中、「置換されていてもよい複素環基」としては、例えば、前記した置換基群Ａから選ばれる置換基を有していてもよい複素環基が挙げられる。

【0052】

「置換されていてもよい複素環基」における置換基の数は、例えば、１ないし３個である。置換基数が２個以上の場合、各置換基は同一であっても異なっていてもよい。

【0053】

本明細書中、「アシル基」としては、例えば、「ハロゲン原子、ハロゲン化されていてもよいＣ_１－６アルコキシ基、ヒドロキシ基、ニトロ基、シアノ基、アミノ基およびカルバモイル基から選ばれる１ないし３個の置換基をそれぞれ有していてもよい、Ｃ_１－６アルキル基、Ｃ_２－６アルケニル基、Ｃ_３－１０シクロアルキル基、Ｃ_３－１０シクロアルケニル基、Ｃ_６－１４アリール基、Ｃ_７－１６アラルキル基、５ないし１４員芳香族複素環基および３ないし１４員非芳香族複素環基から選ばれる１または２個の置換基」をそれぞれ有していてもよい、ホルミル基、カルボキシ基、カルバモイル基、チオカルバモイル基、スルフィノ基、スルホ基、スルファモイル基、ホスホノ基が挙げられる。

【0054】

また、「アシル基」としては、炭化水素－スルホニル基、複素環－スルホニル基、炭化水素－スルフィニル基、複素環－スルフィニル基も挙げられる。

【0055】

ここで、炭化水素－スルホニル基とは、炭化水素基が結合したスルホニル基を、複素環－スルホニル基とは、複素環基が結合したスルホニル基を、炭化水素－スルフィニル基とは、炭化水素基が結合したスルフィニル基を、複素環－スルフィニル基とは、複素環基が結合したスルフィニル基を、それぞれ意味する。

【0056】

「アシル基」の好適な例としては、ホルミル基、カルボキシ基、Ｃ_１－６アルキル－カルボニル基、Ｃ_２－６アルケニル－カルボニル基（例、クロトノイル）、Ｃ_３－１０シクロアルキル－カルボニル基（例、シクロブタンカルボニル、シクロペンタンカルボニル、シクロヘキサンカルボニル、シクロヘプタンカルボニル）、Ｃ_３－１０シクロアルケニル－カルボニル基（例、２－シクロヘキセンカルボニル）、Ｃ_６－１４アリール－カルボニル基、Ｃ_７－１６アラルキル－カルボニル基、５ないし１４員芳香族複素環カルボニル基、３ないし１４員非芳香族複素環カルボニル基、Ｃ_１－６アルコキシ－カルボニル基、Ｃ_６－１４アリールオキシ－カルボニル基（例、フェニルオキシカルボニル、ナフチルオキシカルボニル）、Ｃ_７－１６アラルキルオキシ－カルボニル基（例、ベンジルオキシカルボニル、フェネチルオキシカルボニル）、カルバモイル基、モノ－またはジ－Ｃ_１－６アルキル－カルバモイル基、モノ－またはジ－Ｃ_２－６アルケニル－カルバモイル基（例、ジアリルカルバモイル）、モノ－またはジ－Ｃ_３－１０シクロアルキル－カルバモイル基（例、シクロプロピルカルバモイル）、モノ－またはジ－Ｃ_６－１４アリール－カルバモイル基（例、フェニルカルバモイル）、モノ－またはジ－Ｃ_７－１６アラルキル－カルバモイル基、５ないし１４員芳香族複素環カルバモイル基（例、ピリジルカルバモイル）、チオカルバモイル基、モノ－またはジ－Ｃ_１－６アルキル－チオカルバモイル基（例、メチルチオカルバモイル、Ｎ－エチル－Ｎ－メチルチオカルバモイル）、モノ－またはジ－Ｃ_２－６アルケニル－チオカルバモイル基（例、ジアリルチオカルバモイル）、モノ－またはジ－Ｃ_３－１０シクロアルキル－チオカルバモイル基（例、シクロプロピルチオカルバモイル、シクロヘキシルチオカルバモイル）、モノ－またはジ－Ｃ_６－１４アリール－チオカルバモイル基（例、フェニルチオカルバモイル）、モノ－またはジ－Ｃ_７－１６アラルキル－チオカルバモイル基（例、ベンジルチオカルバモイル、フェネチルチオカルバモイル）、５ないし１４員芳香族複素環チオカルバモイル基（例、ピリジルチオカルバモイル）、スルフィノ基、Ｃ_１－６アルキルスルフィニル基（例、メチルスルフィニル、エチルスルフィニル）、スルホ基、Ｃ_１－６アルキルスルホニル基、Ｃ_６－１４アリールスルホニル基、ホスホノ基、モノ－またはジ－Ｃ_１－６アルキルホスホノ基（例、ジメチルホスホノ、ジエチルホスホノ、ジイソプロピルホスホノ、ジブチルホスホノ）が挙げられる。

【0057】

本明細書中、「置換されていてもよいアミノ基」としては、例えば、置換基群Ａから選ばれる１ないし３個の置換基をそれぞれ有していてもよい、Ｃ_１－６アルキル基、Ｃ_２－６アルケニル基、Ｃ_３－１０シクロアルキル基、Ｃ_６－１４アリール基、Ｃ_７－１６アラルキル基、Ｃ_１－６アルキル－カルボニル基、Ｃ_６－１４アリール－カルボニル基、Ｃ_７－１６アラルキル－カルボニル基、５ないし１４員芳香族複素環カルボニル基、３ないし１４員非芳香族複素環カルボニル基、Ｃ_１－６アルコキシ－カルボニル基、５ないし１４員芳香族複素環基、カルバモイル基、モノ－またはジ－Ｃ_１－６アルキル－カルバモイル基、モノ－またはジ－Ｃ_７－１６アラルキル－カルバモイル基、Ｃ_１－６アルキルスルホニル基およびＣ_６－１４アリールスルホニル基から選ばれる１または２個の置換基」を有していてもよいアミノ基が挙げられる。

【0058】

置換されていてもよいアミノ基の好適な例としては、アミノ基、モノ－またはジ－（ハロゲン化されていてもよいＣ_１－６アルキル）アミノ基（例、メチルアミノ、トリフルオロメチルアミノ、ジメチルアミノ、エチルアミノ、ジエチルアミノ、プロピルアミノ、ジブチルアミノ）、モノ－またはジ－Ｃ_２－６アルケニルアミノ基（例、ジアリルアミノ）、モノ－またはジ－Ｃ_３－１０シクロアルキルアミノ基（例、シクロプロピルアミノ、シクロヘキシルアミノ）、モノ－またはジ－Ｃ_６－１４アリールアミノ基（例、フェニルアミノ）、モノ－またはジ－Ｃ_７－１６アラルキルアミノ基（例、ベンジルアミノ、ジベンジルアミノ）、モノ－またはジ－（ハロゲン化されていてもよいＣ_１－６アルキル）－カルボニルアミノ基（例、アセチルアミノ、プロピオニルアミノ）、モノ－またはジ－Ｃ_６－１４アリール－カルボニルアミノ基（例、ベンゾイルアミノ）、モノ－またはジ－Ｃ_７－１６アラルキル－カルボニルアミノ基（例、ベンジルカルボニルアミノ）、モノ－またはジ－５ないし１４員芳香族複素環カルボニルアミノ基（例、ニコチノイルアミノ、イソニコチノイルアミノ）、モノ－またはジ－３ないし１４員非芳香族複素環カルボニルアミノ基（例、ピペリジニルカルボニルアミノ）、モノ－またはジ－Ｃ_１－６アルコキシ－カルボニルアミノ基（例、ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）、５ないし１４員芳香族複素環アミノ基（例、ピリジルアミノ）、カルバモイルアミノ基、（モノ－またはジ－Ｃ_１－６アルキル－カルバモイル）アミノ基（例、メチルカルバモイルアミノ）、（モノ－またはジ－Ｃ_７－１６アラルキル－カルバモイル）アミノ基（例、ベンジルカルバモイルアミノ）、Ｃ_１－６アルキルスルホニルアミノ基（例、メチルスルホニルアミノ、エチルスルホニルアミノ）、Ｃ_６－１４アリールスルホニルアミノ基（例、フェニルスルホニルアミノ）、（Ｃ_１－６アルキル）（Ｃ_１－６アルキル－カルボニル）アミノ基（例、Ｎ－アセチル－Ｎ－メチルアミノ）、（Ｃ_１－６アルキル）（Ｃ_６－１４アリール－カルボニル）アミノ基（例、Ｎ－ベンゾイル－Ｎ－メチルアミノ）が挙げられる。

【0059】

本明細書中、「置換されていてもよいカルバモイル基」としては、例えば、「置換基群Ａから選ばれる１ないし３個の置換基をそれぞれ有していてもよい、Ｃ_１－６アルキル基、Ｃ_２－６アルケニル基、Ｃ_３－１０シクロアルキル基、Ｃ_６－１４アリール基、Ｃ_７－１６アラルキル基、Ｃ_１－６アルキル－カルボニル基、Ｃ_６－１４アリール－カルボニル基、Ｃ_７－１６アラルキル－カルボニル基、５ないし１４員芳香族複素環カルボニル基、３ないし１４員非芳香族複素環カルボニル基、Ｃ_１－６アルコキシ－カルボニル基、５ないし１４員芳香族複素環基、カルバモイル基、モノ－またはジ－Ｃ_１－６アルキル－カルバモイル基およびモノ－またはジ－Ｃ_７－１６アラルキル－カルバモイル基から選ばれる１または２個の置換基」を有していてもよいカルバモイル基が挙げられる。

【0060】

置換されていてもよいカルバモイル基の好適な例としては、カルバモイル基、モノ－またはジ－Ｃ_１－６アルキル－カルバモイル基、モノ－またはジ－Ｃ_２－６アルケニル－カルバモイル基（例、ジアリルカルバモイル）、モノ－またはジ－Ｃ_３－１０シクロアルキル－カルバモイル基（例、シクロプロピルカルバモイル、シクロヘキシルカルバモイル）、モノ－またはジ－Ｃ_６－１４アリール－カルバモイル基（例、フェニルカルバモイル）、モノ－またはジ－Ｃ_７－１６アラルキル－カルバモイル基、モノ－またはジ－Ｃ_１－６アルキル－カルボニル－カルバモイル基（例、アセチルカルバモイル、プロピオニルカルバモイル）、モノ－またはジ－Ｃ_６－１４アリール－カルボニル－カルバモイル基（例、ベンゾイルカルバモイル）、５ないし１４員芳香族複素環カルバモイル基（例、ピリジルカルバモイル）が挙げられる。

【0061】

本明細書中、「置換されていてもよいチオカルバモイル基」としては、例えば、「置換基群Ａから選ばれる１ないし３個の置換基をそれぞれ有していてもよい、Ｃ_１－６アルキル基、Ｃ_２－６アルケニル基、Ｃ_３－１０シクロアルキル基、Ｃ_６－１４アリール基、Ｃ_７－１６アラルキル基、Ｃ_１－６アルキル－カルボニル基、Ｃ_６－１４アリール－カルボニル基、Ｃ_７－１６アラルキル－カルボニル基、５ないし１４員芳香族複素環カルボニル基、３ないし１４員非芳香族複素環カルボニル基、Ｃ_１－６アルコキシ－カルボニル基、５ないし１４員芳香族複素環基、カルバモイル基、モノ－またはジ－Ｃ_１－６アルキル－カルバモイル基およびモノ－またはジ－Ｃ_７－１６アラルキル－カルバモイル基から選ばれる１または２個の置換基」を有していてもよいチオカルバモイル基が挙げられる。

【0062】

置換されていてもよいチオカルバモイル基の好適な例としては、チオカルバモイル基、モノ－またはジ－Ｃ_１－６アルキル－チオカルバモイル基（例、メチルチオカルバモイル、エチルチオカルバモイル、ジメチルチオカルバモイル、ジエチルチオカルバモイル、Ｎ－エチル－Ｎ－メチルチオカルバモイル）、モノ－またはジ－Ｃ_２－６アルケニル－チオカルバモイル基（例、ジアリルチオカルバモイル）、モノ－またはジ－Ｃ_３－１０シクロアルキル－チオカルバモイル基（例、シクロプロピルチオカルバモイル、シクロヘキシルチオカルバモイル）、モノ－またはジ－Ｃ_６－１４アリール－チオカルバモイル基（例、フェニルチオカルバモイル）、モノ－またはジ－Ｃ_７－１６アラルキル－チオカルバモイル基（例、ベンジルチオカルバモイル、フェネチルチオカルバモイル）、モノ－またはジ－Ｃ_１－６アルキル－カルボニル－チオカルバモイル基（例、アセチルチオカルバモイル、プロピオニルチオカルバモイル）、モノ－またはジ－Ｃ_６－１４アリール－カルボニル－チオカルバモイル基（例、ベンゾイルチオカルバモイル）、５ないし１４員芳香族複素環チオカルバモイル基（例、ピリジルチオカルバモイル）が挙げられる。

【0063】

本明細書中、「置換されていてもよいスルファモイル基」としては、例えば、「置換基群Ａから選ばれる１ないし３個の置換基をそれぞれ有していてもよい、Ｃ_１－６アルキル基、Ｃ_２－６アルケニル基、Ｃ_３－１０シクロアルキル基、Ｃ_６－１４アリール基、Ｃ_７－１６アラルキル基、Ｃ_１－６アルキル－カルボニル基、Ｃ_６－１４アリール－カルボニル基、Ｃ_７－１６アラルキル－カルボニル基、５ないし１４員芳香族複素環カルボニル基、３ないし１４員非芳香族複素環カルボニル基、Ｃ_１－６アルコキシ－カルボニル基、５ないし１４員芳香族複素環基、カルバモイル基、モノ－またはジ－Ｃ_１－６アルキル－カルバモイル基およびモノ－またはジ－Ｃ_７－１６アラルキル－カルバモイル基から選ばれる１または２個の置換基」を有していてもよいスルファモイル基が挙げられる。

【0064】

置換されていてもよいスルファモイル基の好適な例としては、スルファモイル基、モノ－またはジ－Ｃ_１－６アルキル－スルファモイル基（例、メチルスルファモイル、エチルスルファモイル、ジメチルスルファモイル、ジエチルスルファモイル、Ｎ－エチル－Ｎ－メチルスルファモイル）、モノ－またはジ－Ｃ_２－６アルケニル－スルファモイル基（例、ジアリルスルファモイル）、モノ－またはジ－Ｃ_３－１０シクロアルキル－スルファモイル基（例、シクロプロピルスルファモイル、シクロヘキシルスルファモイル）、モノ－またはジ－Ｃ_６－１４アリール－スルファモイル基（例、フェニルスルファモイル）、モノ－またはジ－Ｃ_７－１６アラルキル－スルファモイル基（例、ベンジルスルファモイル、フェネチルスルファモイル）、モノ－またはジ－Ｃ_１－６アルキル－カルボニル－スルファモイル基（例、アセチルスルファモイル、プロピオニルスルファモイル）、モノ－またはジ－Ｃ_６－１４アリール－カルボニル－スルファモイル基（例、ベンゾイルスルファモイル）、５ないし１４員芳香族複素環スルファモイル基（例、ピリジルスルファモイル）が挙げられる。

【0065】

本明細書中、「置換されていてもよいヒドロキシ基」としては、例えば、「置換基群Ａから選ばれる１ないし３個の置換基をそれぞれ有していてもよい、Ｃ_１－６アルキル基、Ｃ_２－６アルケニル基、Ｃ_３－１０シクロアルキル基、Ｃ_６－１４アリール基、Ｃ_７－１６アラルキル基、Ｃ_１－６アルキル－カルボニル基、Ｃ_６－１４アリール－カルボニル基、Ｃ_７－１６アラルキル－カルボニル基、５ないし１４員芳香族複素環カルボニル基、３ないし１４員非芳香族複素環カルボニル基、Ｃ_１－６アルコキシ－カルボニル基、５ないし１４員芳香族複素環基、カルバモイル基、モノ－またはジ－Ｃ_１－６アルキル－カルバモイル基、モノ－またはジ－Ｃ_７－１６アラルキル－カルバモイル基、Ｃ_１－６アルキルスルホニル基およびＣ_６－１４アリールスルホニル基から選ばれる置換基」を有していてもよいヒドロキシ基が挙げられる。

【0066】

置換されていてもよいヒドロキシ基の好適な例としては、ヒドロキシ基、Ｃ_１－６アルコキシ基、Ｃ_２－６アルケニルオキシ基（例、アリルオキシ、２－ブテニルオキシ、２－ペンテニルオキシ、３－ヘキセニルオキシ）、Ｃ_３－１０シクロアルキルオキシ基（例、シクロヘキシルオキシ）、Ｃ_６－１４アリールオキシ基（例、フェノキシ、ナフチルオキシ）、Ｃ_７－１６アラルキルオキシ基（例、ベンジルオキシ、フェネチルオキシ）、Ｃ_１－６アルキル－カルボニルオキシ基（例、アセチルオキシ、プロピオニルオキシ、ブチリルオキシ、イソブチリルオキシ、ピバロイルオキシ）、Ｃ_６－１４アリール－カルボニルオキシ基（例、ベンゾイルオキシ）、Ｃ_７－１６アラルキル－カルボニルオキシ基（例、ベンジルカルボニルオキシ）、５ないし１４員芳香族複素環カルボニルオキシ基（例、ニコチノイルオキシ）、３ないし１４員非芳香族複素環カルボニルオキシ基（例、ピペリジニルカルボニルオキシ）、Ｃ_１－６アルコキシ－カルボニルオキシ基（例、ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルオキシ）、５ないし１４員芳香族複素環オキシ基（例、ピリジルオキシ）、カルバモイルオキシ基、Ｃ_１－６アルキル－カルバモイルオキシ基（例、メチルカルバモイルオキシ）、Ｃ_７－１６アラルキル－カルバモイルオキシ基（例、ベンジルカルバモイルオキシ）、Ｃ_１－６アルキルスルホニルオキシ基（例、メチルスルホニルオキシ、エチルスルホニルオキシ）、Ｃ_６－１４アリールスルホニルオキシ基（例、フェニルスルホニルオキシ）が挙げられる。

【0067】

本明細書中、「置換されていてもよいスルファニル基」としては、例えば、「置換基群Ａから選ばれる１ないし３個の置換基をそれぞれ有していてもよい、Ｃ_１－６アルキル基、Ｃ_２－６アルケニル基、Ｃ_３－１０シクロアルキル基、Ｃ_６－１４アリール基、Ｃ_７－１６アラルキル基、Ｃ_１－６アルキル－カルボニル基、Ｃ_６－１４アリール－カルボニル基および５ないし１４員芳香族複素環基から選ばれる置換基」を有していてもよいスルファニル基、ハロゲン化されたスルファニル基が挙げられる。

【0068】

置換されていてもよいスルファニル基の好適な例としては、スルファニル（－ＳＨ）基、Ｃ_１－６アルキルチオ基、Ｃ_２－６アルケニルチオ基（例、アリルチオ、２－ブテニルチオ、２－ペンテニルチオ、３－ヘキセニルチオ）、Ｃ_３－１０シクロアルキルチオ基（例、シクロヘキシルチオ）、Ｃ_６－１４アリールチオ基（例、フェニルチオ、ナフチルチオ）、Ｃ_７－１６アラルキルチオ基（例、ベンジルチオ、フェネチルチオ）、Ｃ_１－６アルキル－カルボニルチオ基（例、アセチルチオ、プロピオニルチオ、ブチリルチオ、イソブチリルチオ、ピバロイルチオ）、Ｃ_６－１４アリール－カルボニルチオ基（例、ベンゾイルチオ）、５ないし１４員芳香族複素環チオ基（例、ピリジルチオ）、ハロゲン化チオ基（例、ペンタフルオロチオ）が挙げられる。

【0069】

本明細書中、「置換されていてもよいシリル基」としては、例えば、「置換基群Ａから選ばれる１ないし３個の置換基をそれぞれ有していてもよい、Ｃ_１－６アルキル基、Ｃ_２－６アルケニル基、Ｃ_３－１０シクロアルキル基、Ｃ_６－１４アリール基およびＣ_７－１６アラルキル基から選ばれる１ないし３個の置換基」を有していてもよいシリル基が挙げられる。

【0070】

置換されていてもよいシリル基の好適な例としては、トリ－Ｃ_１－６アルキルシリル基（例、トリメチルシリル、tert-ブチル（ジメチル）シリル）が挙げられる。

【0071】

以下、式（Ｉ）における各記号の定義について詳述する。
Ｐ^１は、式：
－Ｒ^Ａ１、
－ＣＯ－Ｒ^Ａ１、
－ＣＯ－ＯＲ^Ａ１、
－ＣＯ－ＣＯＲ^Ａ１、
－ＳＯ－Ｒ^Ａ１、
－ＳＯ_２－Ｒ^Ａ１、
－ＳＯ_２－ＯＲ^Ａ１、
－ＣＯ－ＮＲ^Ａ２Ｒ^Ａ３、
－ＳＯ_２－ＮＲ^Ａ２Ｒ^Ａ３、または
－Ｃ(＝ＮＲ^Ａ１)－ＮＲ^Ａ２Ｒ^Ａ３
（式中、Ｒ^Ａ１、Ｒ^Ａ２及びＲ^Ａ３は、独立して、水素原子、置換されていてもよい炭化水素基、又は置換されていてもよい複素環基を示す。）で表される基を示す。

【0072】

Ｐ^１は、好ましくは、水素原子またはメチル基である。

【0073】

１０番目のＬｙｓにおいて、（－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｒ^Ａ１０）で示されるリンカー・アルキル鎖部分はＬｙｓのε－アミノ基に結合し、以下の構造をとる。

【化1】

このリンカー・アルキル鎖の存在により、化合物（Ｉ）の作用の持続性が実現され得る。

【0074】

Ｒ^Ａ１０は、ＰａｌまたはＯｄａを示す。
Ｒ^Ａ１０は、好ましくはＰａｌである。

【0075】

Ａ１１は、Ａｉｂ、ＡｌａまたはＳｅｒを示す。
Ａ１１は、好ましくはＡｉｂである。
別の態様では、Ａ１１は、好ましくはＡｌａである。
別の態様では、Ａ１１は、好ましくはＳｅｒである。

【0076】

Ａ１２は、ＩｌｅまたはＬｙｓを示す。
Ａ１２は、好ましくはＩｌｅである。

【0077】

Ａ１５は、ＡｓｐまたはＧｌｕを示す。
Ａ１５は、好ましくはＧｌｕである。

【0078】

Ａ１８は、ＡｌａまたはＡｒｇを示す。
Ａ１８は、好ましくはＡｒｇである。

【0079】

Ａ３５は、ＴｙｒまたはＰｈｅ（２－Ｆ）を示す。
Ａ３５は、好ましくはＴｙｒである。

【0080】

化合物（Ｉ）の好ましい例としては、以下のペプチドまたはその塩が挙げられる。
［化合物Ａ］
Ｐ^１が、メチルであり、
Ｒ^Ａ１０は、ＰａｌまたはＯｄａを示し；
Ａ１１は、Ａｉｂ、ＡｌａまたはＳｅｒを示し（好ましくはＡｉｂであるが、別の態様では、好ましくはＡｌａであり、別の態様では、好ましくはＳｅｒである）；
Ａ１２は、Ｉｌｅを示し；
Ａ１５は、Ｇｌｕを示し；
Ａ１８は、Ａｒｇを示し；
Ａ３５は、Ｔｙｒを示す]
で表されるペプチドまたはその塩である、化合物（Ｉ）。

【0081】

［化合物Ｂ］
実施例３１に記載されるペプチド（配列番号４０）またはその塩である、化合物（Ｉ）。
実施例３５に記載されるペプチド（配列番号４４）またはその塩である、化合物（Ｉ）。
実施例４１に記載されるペプチド（配列番号５０）またはその塩である、化合物（Ｉ）。

【0082】

化合物（Ｉ）は、自体公知のペプチドの合成法に従って製造することができる。ペプチドの合成法としては、例えば固相合成法、液相合成法のいずれによっても良い。すなわち、化合物（Ｉ）を構成し得る部分ペプチドもしくはアミノ酸と残余部分（２個以上のアミノ酸により構成されていてもよい）とを所望配列通りに縮合させることを繰り返し、目的のペプチドを製造することができる。所望配列を有する生成物が保護基を有する場合は保護基を脱離することにより目的のペプチドを製造することができる。公知の縮合方法や保護基の脱離法としてはたとえば、以下の（１）～（５）に記載された方法が挙げられる。
（１）M. Bodanszky 及び M.A. Ondetti、ペプチド シンセシス (Peptide Synthesis),Interscience Publishers, New York (1966年)
（２）Schroeder及びLuebke、ザ ペプチド(The Peptide), Academic Press, New York (1965年)
（３）泉屋信夫他、ペプチド合成の基礎と実験、 丸善(株) （1975年）
（４）矢島治明 及び榊原俊平、生化学実験講座 1、タンパク質の化学IV、 205、(1977年)
（５）矢島治明監修、続医薬品の開発 第14巻 ペプチド合成 広川書店

【0083】

また、反応後は通常の精製法、たとえば、溶媒抽出・蒸留・カラムクロマトグラフィー・液体クロマトグラフィー・再結晶等を組み合わせて化合物（Ｉ）を精製単離することができる。上記方法で得られるペプチドが遊離体である場合は公知の方法によって適当な塩に変換することができるし、逆に塩で得られた場合は、公知の方法によって遊離体に変換することができる。

【0084】

なお、原料化合物は塩であってもよく、このような塩としては、後述する化合物（Ｉ）の塩として例示するものが挙げられる。

【0085】

保護されたアミノ酸又はペプチドの縮合に関しては、ペプチド合成に使用できる各種活性化試薬を用いることができるが、特に、トリスフォスフォニウム塩類、テトラメチルウロニウム塩類、カルボジイミド類等がよい。トリスフォスフォニウム塩類としてはベンゾトリアゾール－１－イルオキシトリス（ピロリジノ）フォスフォニウムヘキサフルオロフォスフェイト(PyBOP)、ブロモトリス（ピロリジノ）フォスフォニウムヘキサフルオロフォスフェイト(PyBroP)、7-アザベンゾトリアゾール-１-イルオキシトリス（ピロリジノ）フォスフォニウムヘキサフルオロフォスフェイト(PyAOP)、テトラメチルウロニウム塩類としては2-(1H-ベンゾトリアゾル-1-イル)-1,1,3,3-テトラメチルウロニウムヘキサフルオロフォスフェイト(HBTU)、2-(7-アザベンゾトリアゾール-1-イル)-1,1,3,3-テトラメチルウロニウムヘキサフルオロフォスフェイト(HATU)、2-(1H-ベンゾトリアゾル-1-イル)-1,1,3,3-テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレイト(TBTU)、2-(5-ノルボルネン-2,3-ジカルボキシイミド)-1,1,3,3-テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレイト(TNTU)、O-(N-スクシミジル)-1,1,3,3-テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレイト(TSTU)、カルボジイミド類としてはDCC、N,N'-ジイソプロピルカルボジイミド(DIPCDI)、N-エチル-N'-(3-ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド塩酸塩(EDCI・HCl)等が挙げられる。これらによる縮合にはラセミ化抑制剤（例えば、HONB, HOBt, HOAt, HOOBt等）の添加が好ましい。縮合に用いられる溶媒としては、ペプチド縮合反応に使用しうることが知られている溶媒から適宜選択されうる。たとえば無水又は含水のＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド、Ｎ－メチルピロリドン等の酸アミド類、塩化メチレン、クロロホルム等のハロゲン化炭化水素類、トリフルオロエタノール、フェノール等のアルコール類、ジメチルスルホキシド等のスルホキシド類、ピリジン等の三級アミン類、ジオキサン、テトラヒドロフラン等のエーテル類、アセトニトリル、プロピオニトリル等のニトリル類、酢酸メチル、酢酸エチル等のエステル類あるいはこれらの適宜の混合物等が用いられる。反応温度はペプチド結合形成反応に使用され得ることが知られている範囲から適宜選択され、通常約－２０℃～５０℃の範囲から適宜選択される。活性化されたアミノ酸誘導体は通常１．５から６倍過剰で用いられる。固相合成の場合にはニンヒドリン反応を用いたテストの結果、縮合が不十分な場合には保護基の脱離を行うことなく縮合反応を繰り返すことにより十分な縮合を行うことができる。反応を繰り返しても十分な縮合が得られないときには、無水酢酸又はアセチルイミダゾール等を用いて未反応アミノ酸をアシル化して、後の反応に影響を及ぼさないようにすることができる。

【0086】

原料アミノ酸のアミノ基の保護基としては、例えば、Ｚ、Boc、tert-ペンチルオキシカルボニル、イソボルニルオキシカルボニル、４－メトキシベンジルオキシカルボニル、Cl-Z、Br-Z、アダマンチルオキシカルボニル、トリフルオロアセチル、フタロイル、ホルミル、２－ニトロフェニルスルフェニル、ジフェニルホスフィノチオイル、Fmoc、トリチル等が挙げられる。

【0087】

原料アミノ酸のカルボキシル基の保護基としては、例えば、上記したＣ_１－６アルキル基、Ｃ_３－１０シクロアルキル基、Ｃ_７－１４アラルキル基の他、アリール、２－アダマンチル、４－ニトロベンジル、４－メトキシベンジル、４－クロロベンジル、フェナシル及びベンジルオキシカルボニルヒドラジド、tert-ブトキシカルボニルヒドラジド、トリチルヒドラジド等が挙げられる。

【0088】

セリン及びスレオニンの水酸基は、例えばエステル化又はエーテル化によって保護することができる。このエステル化に適する基としては、例えばアセチル基等の低級（Ｃ_２－４）アルカノイル基、ベンゾイル基等のアロイル基等、及び有機酸から誘導される基等が挙げられる。また、エーテル化に適する基としては、例えばベンジル、テトラヒドロピラニル、tert-ブチル（Bu^t）、トリチル（Trt）等である。

【0089】

チロシンのフェノール性水酸基の保護基としては、例えばBzl、2,6-ジクロルベンジル、２－ニトロベンジル、Br-Z、tert-ブチル等が挙げられる。

【0090】

ヒスチジンのイミダゾールの保護基としては、例えばTos、４-メトキシ-2,3,6-トリメチルベンゼンスルホニル(Mtr)、DNP、Bom、Bum、Boc、Trt、Fmoc等が挙げられる。

【0091】

アルギニンのグアニジノ基の保護基としては、例えばTos、Z、4-メトキシ-2,3,6-トリメチルベンゼンスルフォニル(Mtr)、p-メトキシベンゼンスルフォニル(MBS)、2,2,5,7,8-ペンタメチルクロマン-6-スルフォニル(Pmc)、メシチレン-2-スルフォニル(Mts)、2,2,4,6,7-ペンタメチルジヒドロベンゾフラン-5-スルホニル(Pbf)、Boc、Z、NO₂等が挙げられる。

【0092】

リジンの側鎖アミノ基の保護基としては、例えばZ、Cl-Z、トリフルオロアセチル、Boc、Fmoc、Trt、Mtr、4,4-ジメチル-2,6-ジオキソサイクロヘキシリデンエイル（Dde）等が挙げられる。

【0093】

トリプトファンのインドリル保護基としては、例えばホルミル(For)、Z、Boc、Mts、Mtr等が挙げられる。

【0094】

アスパラギン、グルタミンの保護基としては、例えばTrt、キサンチル(Xan)、4,4'-ジメトキシベンズヒドリル(Mbh)、2,4,6-トリメトキシベンジル(Tmob)等が挙げられる。

【0095】

原料のカルボキシル基の活性化されたものとしては、例えば対応する酸無水物、アジド、活性エステル［アルコール（たとえば、ペンタクロロフェノール、2,4,5-トリクロロフェノール、2,4-ジニトロフェノール、シアノメチルアルコール、パラニトロフェノール、HONB、N-ヒドロキシスクシミド、１－ヒドロキシベンゾトリアゾール（HOBt）、１－ヒドロキシ-7-アザベンゾトリアゾール（HOAt）とのエステル）等が挙げられる。原料のアミノ基の活性化されたものとしては、たとえば対応する亜リン酸アミドが挙げられる。

【0096】

保護基の除去（脱離）方法としては、例えばPd黒あるいはPd炭素等の触媒の存在下での水素気流中での接触還元や、また、無水フッ化水素、メタンスルホン酸、トリフルオロメタンスルホン酸、トリフルオロ酢酸、臭化トリメシルシラン（TMSBr）、トリメチルシリルトリフルオロメタンスルホネート、テトラフルオロホウ酸、トリス(トリフルオロ)ホウ素、三臭化ホウ素あるいはこれらの混合液等による酸処理や、ジイソプロピルエチルアミン、トリエチルアミン、ピペリジン、ピペラジン等による塩基処理、また液体アンモニア中ナトリウムによる還元等も挙げられる。上記酸処理による脱離反応は一般に－２０℃～４０℃の温度で行われるが、酸処理においてはアニソール、フェノール、チオアニソール、メタクレゾール、パラクレゾールのようなカチオン捕捉剤や、ジメチルスルフィド、1,4-ブタンジチオール、1,2-エタンジチオール等の添加が有効である。また、ヒスチジンのイミダゾール保護基として用いられる2,4-ジニトロフェニル基はチオフェノール処理により除去され、トリプトファンのインドール保護基として用いられるホルミル基は上記の1,2-エタンジチオール、1,4-ブタンジチオール等の存在下の酸処理による脱保護以外に、希水酸化ナトリウム、希アンモニア等によるアルカリ処理によっても除去される。
原料の反応に関与すべきでない官能基の保護及び保護基、ならびにその保護基の脱離、反応に関与する官能基の活性化等は公知の保護基あるいは公知の手段から適宜選択しうる。

【0097】

ペプチドのアミド体を得る方法としては、アミド体合成用樹脂を用いて固相合成するか又はカルボキシル末端アミノ酸のα－カルボキシル基をアミド化した後、アミノ基側にペプチド鎖を所望の鎖長まで延ばした後、該ペプチド鎖のＮ末端のα－アミノ基の保護基のみを除いたペプチドとＣ末端のカルボキシル基の保護基のみを除いたペプチド（又はアミノ酸）とを製造し、この両ペプチドを上記したような混合溶媒中で縮合させる。縮合反応の詳細については上記と同様である。縮合により得られた保護ペプチドを精製した後、上記方法によりすべての保護基を除去し、所望の粗ポリペプチドを得ることができる。この粗ペプチドは既知の各種精製手段を駆使して精製し、主要画分を凍結乾燥することで所望のペプチドのアミド体を得ることができる。

【0098】

化合物（Ｉ）は、例えば以下の方法により製造することができる。まず、化合物（Ｉ）のＬｙｓ（－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｒ^Ａ１０）部分がＬｙｓである、化合物（ＩＩ）を自体公知のペプチドの合成方法で製造する。化合物（ＩＩ）は樹脂に担持されていてもよい。ここで、化合物（ＩＩ）を構成するアミノ酸およびＰ^１は、化合物（Ｉ）の製造に悪影響を及ぼさないように、適当な保護基により保護されていることが好ましい。ここで保護基としては、後述の参考例および実施例において用いられる保護基が挙げられる。また、前記化合物（ＩＩ）のＬｙｓは、その側鎖アミノ基がオルソゴナル保護基（例えば、ivDde。本明細書中、（1-(4,4-dimethyl-2,6-dioxocyclohex-1-ylidene)-3-methylbutyl）をivDdeと略記することがある。）により保護されている。次いで、化合物（ＩＩ）のＬｙｓのオルソゴナル保護基を選択的な条件で除去し、（－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｈ）に対応するアミノ酸をそれぞれ自体公知の方法により順次縮合することにより化合物（ＩＩＩ）を得る。化合物（ＩＩＩ）は樹脂に担持されていてもよい。
Ｐ^１－Ｔｙｒ－Ａｉｂ－Ｇｌｕ－Ｇｌｙ－Ｔｈｒ－α-ＭｅＰｈｅ－Ｔｈｒ－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｙｒ－Ａｉｂ－Ｌｙｓ－Ａｉｂ－Ｌｅｕ－Ａｓｐ－Ａ１６－Ａ１７－Ａｌａ－Ａ１９－Ａｌａ－Ｇｌｕ－Ｐｈｅ－Ｖａｌ－Ａ２４－Ｔｒｐ－Ｌｅｕ－Ｌｅｕ－Ａ２８－Ｇｌｙ
（ＩＩ）（配列番号１）
[式中の記号は前記と同意義を示す。]
Ｐ^１－Ｔｙｒ－Ａｉｂ－Ｇｌｕ－Ｇｌｙ－Ｔｈｒ－α-ＭｅＰｈｅ－Ｔｈｒ－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｔｙｒ－Ａｉｂ－Ｌｙｓ（－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｈ）－Ａｉｂ－Ｌｅｕ－Ａｓｐ－Ａ１６－Ａ１７－Ａｌａ－Ａ１９－Ａｌａ－Ｇｌｕ－Ｐｈｅ－Ｖａｌ－Ａ２４－Ｔｒｐ－Ｌｅｕ－Ｌｅｕ－Ａ２８－Ｇｌｙ （ＩＩＩ）（配列番号１）
[式中の記号は前記と同意義を示す。]

【0099】

化合物（ＩＩＩ）を構成するアミノ酸およびＰ^１は、化合物（ＩＩ）の場合と同様に、適当な保護基により保護されていることが好ましい。

【0100】

化合物（ＩＩＩ）に、化合物（ＩＶ）を自体公知の方法により縮合し、全ての保護基を除去することにより、場合によっては樹脂から切断することにより化合物（Ｉ）が得られる。化合物（ＩＶ）を構成するＲ^Ａ１０は、化合物（ＩＩ）、（ＩＩＩ）の場合と同様に、適当な保護基（以下、Ｐと略記することがある。）により保護されていることが好ましい。
ＨＯ－Ｒ^Ａ１０ （ＩＶ）
[式中、Ｒ^Ａ１０はＯｄａまたはＰａｌを示す。]

【0101】

Ｐで示される保護基としては、例えば前記したカルボキシル基の保護基（好ましくはｔｅｒｔ－ブチル）が挙げられる。化合物（ＩＶ）としては、例えば市販品を用いることができる。

【0102】

化合物（Ｉ）は、上述の方法と同様の方法により製造されるフラグメントペプチドを自体公知の方法により順次縮合することによっても製造することができる。
フラグメントペプチドを構成するアミノ酸およびＰ^１は化合物（ＩＩ）の場合と同様に、適当な保護基により保護されていてもよい。また、樹脂に担持されていてもよい。

【0103】

化合物（Ｉ）が、エナンチオマー、ジアステレオマー等のコンフィギュレーショナル アイソマー（配置異性体）、コンフォーマー（配座異性体）等として存在する場合には、これらも化合物（Ｉ）として含有されると共に、所望により、自体公知の手段、前記の分離、精製手段によりそれぞれを単離することができる。また、化合物（Ｉ）がラセミ体である場合には、通常の光学分割手段によりＳ体及びＲ体に分離することができる。
化合物（Ｉ）に立体異性体が存在する場合には、この異性体が単独の場合及びそれらの混合物の場合も化合物（Ｉ）に含まれる。

【0104】

化合物（Ｉ）は、自体公知の方法に従って、ポリエチレングリコールを用いて化学修飾することができる。例えば、化合物（Ｉ）のＣｙｓ残基、Ａｓｐ残基、Ｇｌｕ残基、Ｌｙｓ残基等にポリエチレングリコールを共役的に結合させることにより化合物（Ｉ）の化学修飾体を製造することができる。また、化合物（Ｉ）とポリエチレングリコールの間にリンカー構造を有していてもよい。

【0105】

化合物（Ｉ）を、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）で修飾することにより、治療上及び診断上重要なペプチドの生物活性を増強し、血液循環時間を延長し、免疫原性を低下させ、溶解性を高め、代謝抵抗性を高める効果等が得られ得る。

【0106】

ＰＥＧの分子量は特に限定されないが、通常約１Ｋ～約１０００Ｋダルトン、好ましくは約１０Ｋ～約１００Ｋダルトン、より好ましくは約２０Ｋ～約６０Ｋダルトンである。

【0107】

化合物（Ｉ）をＰＥＧで修飾する方法として、当該分野で周知の方法を用いることができ、例えば以下の方法を利用できる。
（１）化合物（Ｉ）のアミノ基に、活性エステルを有するＰＥＧ化試薬（例、ＳＵＮＢＲＩＧＨＴ ＭＥＧＣ－３０ＴＳ（商品名）、日本油脂）を結合させる。
（２）化合物（Ｉ）のアミノ基に、アルデヒドを有するＰＥＧ化試薬（例、ＳＵＮＢＲＩＧＨＴ ＭＥ－３００ＡＬ（商品名）、日本油脂）を結合させる。
（３）化合物（Ｉ）に二価性架橋試薬（例、ＧＭＢＳ（同仁化学）、ＥＭＣＳ（同仁化学）、ＫＭＵＳ（同仁化学）、ＳＭＣＣ（Ｐｉｅｒｃｅ））を結合させ、ついで、チオール基を有するＰＥＧ化試薬（例、ＳＵＮＢＲＩＧＨＴ ＭＥ－３００－ＳＨ（商品名）、日本油脂）を結合させる。
（４）化合物（Ｉ）に、ＳＨ導入剤（例、Ｄ－システイン残基、Ｌ－システイン残基、Ｔｒａｕｔ’ｓ 試薬）でチオール基を導入し、このチオール基に、マレイミド基を有するＰＥＧ化試薬（例、ＳＵＮＢＲＩＧＨＴ ＭＥ－３００ＭＡ（商品名）、日本油脂）を反応させる。
（５）化合物（Ｉ）に、ＳＨ導入剤（例、Ｄ－システイン残基、Ｌ－システイン残基、Ｔｒａｕｔ’ｓ 試薬）でチオール基を導入し、このチオール基に、ヨードアセトアミド基を有するＰＥＧ化試薬（例、ＳＵＮＢＲＩＧＨＴ ＭＥ－３００ＩＡ（商品名）、日本油脂）を反応させる。
（６）化合物（Ｉ）のＮ末端アミノ基に、ω－アミノカルボン酸、α－アミノ酸などをリンカーとして導入し、このリンカーに由来するアミノ基に、活性エステルを有するＰＥＧ化試薬（例、ＳＵＮＢＲＩＧＨＴ ＭＥＧＣ－３０ＴＳ（商品名）、日本油脂）を反応させる。
（７）化合物（Ｉ）のＮ末端アミノ基に、ω－アミノカルボン酸、α－アミノ酸などをリンカーとして導入し、このリンカーに由来するアミノ基に、アルデヒド基を有するＰＥＧ化試薬（例、ＳＵＮＢＲＩＧＨＴ ＭＥ－３００ＡＬ（商品名）、日本油脂）を反応させる。

【0108】

また、化合物（Ｉ）は、溶媒和物（例、水和物）又は無溶媒和物（例、非水和物）であってもよい。

【0109】

化合物（Ｉ）は、同位元素（例、^３Ｈ、^１４Ｃ、^３５Ｓ、^１２５Ｉ）等で標識されていてもよい。

【0110】

さらに、化合物（Ｉ）は、^１Ｈを^２Ｈ（Ｄ）に変換した重水素変換体であってもよい。

【0111】

同位元素で標識または置換された化合物（Ｉ）は、例えば、陽電子断層法（Positron Emission Tomography：PET）において使用するトレーサー（PETトレーサー）として用いることができ、医療診断などの分野において有用であり得る。

【0112】

本明細書におけるペプチドはペプチド標記の慣例に従って左端がＮ末端（アミノ末端）、右端がＣ末端（カルボキシル末端）である。ペプチドのＣ末端は、アミド（－ＣＯＮＨ_２）、カルボキシル基（－ＣＯＯＨ）、カルボキシレート（－ＣＯＯ^－）、アルキルアミド（－ＣＯＮＨＲ^ａ）又はエステル（－ＣＯＯＲ^ａ）であってもよいが、特にアミド（－ＣＯＮＨ_２）が好ましい。

【0113】

化合物（Ｉ）は塩の形態であってもよい。このような塩としては、例えば、金属塩、アンモニウム塩、有機塩基との塩、無機酸との塩、有機酸との塩、塩基性または酸性アミノ酸との塩などが挙げられる。

【0114】

金属塩の好適な例としては、ナトリウム塩、カリウム塩などのアルカリ金属塩；カルシウム塩、マグネシウム塩、バリウム塩などのアルカリ土類金属塩；アルミニウム塩などが挙げられる。

【0115】

有機塩基との塩の好適な例としては、トリメチルアミン、トリエチルアミン、ピリジン、ピコリン、２，６－ルチジン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、シクロヘキシルアミン、ジシクロヘキシルアミン、Ｎ，Ｎ'－ジベンジルエチレンジアミンなどとの塩が挙げられる。

【0116】

無機酸との塩の好適な例としては、塩酸、臭化水素酸、硝酸、硫酸、リン酸などとの塩が挙げられる。

【0117】

有機酸との塩の好適な例としては、ギ酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、フタル酸、フマル酸、シュウ酸、酒石酸、マレイン酸、クエン酸、コハク酸、リンゴ酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ－トルエンスルホン酸などとの塩が挙げられる。

【0118】

塩基性アミノ酸との塩の好適な例としては、アルギニン、リジン、オルニチンなどとの塩が挙げられ、酸性アミノ酸との塩の好適な例としては、アスパラギン酸、グルタミン酸などとの塩が挙げられる。

【0119】

上記した塩のなかでも、薬学的に許容し得る塩が好ましい。例えば、化合物内に酸性官能基を有する場合にはアルカリ金属塩（例、ナトリウム塩、カリウム塩等）、アルカリ土類金属塩（例、カルシウム塩、マグネシウム塩、バリウム塩等）等の無機塩、アンモニウム塩等が、また、化合物内に塩基性官能基を有する場合には、例えば塩酸、臭化水素酸、硝酸、硫酸、リン酸を伴う無機酸との塩、又は酢酸、フタル酸、フマル酸、シュウ酸、酒石酸、マレイン酸、クエン酸、コハク酸、メタンスルホン酸、ｐ－トルエンスルホン酸等の有機酸との塩が好ましい。

【0120】

化合物（Ｉ）はプロドラッグであってもよい。
プロドラッグは、生体内における生理条件下で酵素や胃酸などによる反応により化合物（Ｉ）に変換される化合物、すなわち酵素的に酸化、還元、加水分解などを起こして化合物（Ｉ）に変化する化合物、胃酸などにより加水分解などを起こして化合物（Ｉ）に変化する化合物をいう。

【0121】

化合物（Ｉ）のプロドラッグとしては、化合物（Ｉ）のアミノがアシル化、アルキル化またはリン酸化された化合物（例えば、化合物（Ｉ）のアミノがエイコサノイル化、アラニル化、ペンチルアミノカルボニル化、（５－メチル－２－オキソ－１，３－ジオキソレン－４－イル）メトキシカルボニル化、テトラヒドロフラニル化、ピロリジルメチル化、ピバロイルオキシメチル化またはｔｅｒｔ－ブチル化された化合物）；化合物（Ｉ）のヒドロキシがアシル化、アルキル化、リン酸化またはホウ酸化された化合物（例えば、化合物（Ｉ）のヒドロキシがアセチル化、パルミトイル化、プロパノイル化、ピバロイル化、スクシニル化、フマリル化、アラニル化またはジメチルアミノメチルカルボニル化された化合物）；化合物（Ｉ）のカルボキシがエステル化またはアミド化された化合物（例えば、化合物（Ｉ）のカルボキシがＣ_１－６アルキルエステル化、フェニルエステル化、カルボキシメチルエステル化、ジメチルアミノメチルエステル化、ピバロイルオキシメチルエステル化、エトキシカルボニルオキシエチルエステル化、フタリジルエステル化、（５－メチル－２－オキソ－１，３－ジオキソレン－４－イル）メチルエステル化、シクロヘキシルオキシカルボニルエチルエステル化またはメチルアミド化された化合物）；などが挙げられ、なかでも化合物（Ｉ）のカルボキシがメチル、エチル、ｔｅｒｔ－ブチルなどのＣ_１－６アルキルでエステル化された化合物が好ましく用いられる。これらの化合物は自体公知の方法によって化合物（Ｉ）から製造することができる。

【0122】

また、化合物（Ｉ）のプロドラッグは、広川書店１９９０年刊「医薬品の開発」第７巻分子設計１６３頁から１９８頁に記載されているような生理的条件で化合物（Ｉ）に変化するものであってもよい。

【0123】

本明細書において、プロドラッグは塩を形成していてもよく、かかる塩としては、化合物（Ｉ）の塩として例示したものが挙げられる。

【0124】

化合物（Ｉ）は、結晶であってもよく、結晶形が単一であっても結晶形混合物であっても化合物（Ｉ）に包含される。結晶は、自体公知の結晶化法を適用して、結晶化することによって製造することができる。

【0125】

さらに、化合物（Ｉ）は、薬学的に許容され得る共結晶または共結晶塩であってもよい。ここで、共結晶または共結晶塩とは、各々が異なる物理的特性（例えば、構造、融点、融解熱、吸湿性、溶解性および安定性等）を持つ、室温で二種またはそれ以上の独特な固体から構成される結晶性物質を意味する。共結晶または共結晶塩は、自体公知の共結晶化法に従い製造することができる。

【0126】

化合物（Ｉ）の結晶は、物理化学的性質（例、融点、溶解度、安定性）および生物学的性質（例、体内動態（吸収性、分布、代謝、排泄）、薬効発現）に優れ、医薬として極めて有用であり得る。

【0127】

化合物（Ｉ）及びそのプロドラッグ（以下、本発明化合物と略記することがある）は、Y2受容体、GLP-1受容体およびGIP受容体の活性化作用を有し得る。

【0128】

本発明化合物は、特にin vivoで高いY2受容体、GLP-1受容体およびGIP受容体の活性化作用を有し得る。

【0129】

Y2受容体は摂食抑制作用を有するため、Y2受容体活性化作用を有するペプチドは、肥満症および糖尿病をはじめ、摂食障害に関連した症状の予防や治療に有用であり得る。また、GLP-1及びGIPはインクレチンと呼ばれる消化管ホルモンで、膵臓からのインスリン分泌を促進する作用を有する。インクレチンは、糖代謝に密接に関連するため、GLP-1受容体およびGIP受容体活性化作用を有する化合物は、糖尿病および肥満症をはじめ、糖代謝異常に関連した症状の予防や治療に有用であり得る。
したがって、本発明化合物は、摂食抑制作用、体重低下作用等を有し得る。

【0130】

本発明化合物は生物学的、化学的安定性が高く、かつ、in vivoでの効果の持続性が期待し得る。

【0131】

GLP-1受容体アゴニストは臨床で悪心・催吐の副作用を有することが知られているが、本発明化合物はそのような催吐作用がGLP-1受容体アゴニストに比較して軽減され得る。

【0132】

本発明化合物は、Y2受容体、GLP-1受容体およびGIP受容体の活性化剤として用い得る。

【0133】

本発明において、Y2受容体、GLP-1受容体およびGIP受容体の活性化剤とは、Y2受容体活性化作用（Y2受容体アゴニスト作用）、GLP-1受容体活性化作用（GLP-1受容体アゴニスト作用）及びGIP受容体活性化作用（GIP受容体アゴニスト作用）を有する薬剤を意味する。

【0134】

本発明化合物は、毒性（例、急性毒性、慢性毒性、遺伝毒性、生殖毒性、心毒性、癌原性）が低く、副作用も少なく、哺乳動物（例えば、ヒト、ウシ、ウマ、イヌ、ネコ、サル、マウス、ラット）に対し、後述する各種疾患の予防・治療剤等として安全に投与される。

【0135】

本発明化合物は、上記GLP-1受容体およびGIP受容体の活性化作用により、糖尿病および肥満症をはじめとする各種疾患の治療または予防剤として使用し得る。本発明化合物は、例えば、症候性肥満、単純性肥満に基づく肥満症、肥満に伴う病態又は疾患、摂食障害、糖尿病（例、１型糖尿病、２型糖尿病、妊娠糖尿病、肥満型糖尿病）、高脂血症（例、高トリグリセリド血症、高コレステロール血症、高ＬＤＬコレステロール血症、低ＨＤＬコレステロール血症、食後高脂血症）、高血圧症、心不全、糖尿病性合併症［例、神経障害、腎症、網膜症、糖尿病性心筋症、白内障、大血管障害、骨減少症、糖尿病性高浸透圧昏睡、感染症（例、呼吸器感染症、尿路感染症、消化器感染症、皮膚軟部組織感染症、下肢感染症）、糖尿病性壊疽、口腔乾燥症、聴覚の低下、脳血管障害、末梢血行障害］、メタボリックシンドローム（高トリグリセライド（ＴＧ）血症、低ＨＤＬコレステロール（ＨＤＬ－Ｃ）血症、高血圧症、腹部肥満および耐糖能不全から選ばれる３つ以上を保有する病態）、筋肉減少症等の予防又は治療剤として使用し得る。

【0136】

症候性肥満としては、内分泌性肥満（例えば、Cushing症候群、甲状腺機能低下症、インスリノーマ、肥満II型糖尿病、偽性副甲状腺機能低下症、性腺機能低下症）、中枢性肥満（たとえば、視床下部性肥満、前頭葉症候群、Kleine-Levin症候群）、遺伝性肥満（たとえば、Prader-Willi症候群、Laurence-Moon-Biedl症候群）、薬剤性肥満（たとえば、ステロイド剤、フェノチアジン、インスリン、スルホニルウレア（SU）剤、β－ブロッカーによる肥満）等が挙げられる。

【0137】

肥満に伴う病態又は疾患としては、例えば、耐糖能障害、糖尿病（特に2型糖尿病、肥満型糖尿病）、脂質代謝異常（前記した高脂血症と同意義）、高血圧症、心不全、高尿酸血症・痛風、脂肪肝（non-alchoholic steato-hepatitisを含む）、冠動脈疾患（心筋梗塞、狭心症）、脳梗塞（脳血栓症、一過性脳虚血発作）、骨・関節疾患（変形性膝関節症、変形性股関節症、変形性脊椎症、腰痛症）、睡眠時無呼吸症候群・Pickwick症候群、月経異常（月経周期の異常、月経量と周期の異常、無月経、月経随伴症状の異常）、メタボリックシンドローム等が挙げられる。

【0138】

糖尿病の判定基準については、１９９９年に日本糖尿病学会から新たな判定基準が報告されている。

【0139】

この報告によれば、糖尿病とは、空腹時血糖値（静脈血漿におけるグルコース濃度）が１２６ｍｇ／ｄｌ以上、７５ｇ経口ブドウ糖負荷試験（７５ｇＯＧＴＴ）２時間値（静脈血漿におけるグルコース濃度）が２００ｍｇ／ｄｌ以上、随時血糖値（静脈血漿におけるグルコース濃度）が２００ｍｇ／ｄｌ以上のいずれかを示す状態である。また、上記糖尿病に該当せず、かつ、「空腹時血糖値（静脈血漿におけるグルコース濃度）が１１０ｍｇ／ｄｌ未満または７５ｇ経口ブドウ糖負荷試験（７５ｇＯＧＴＴ）２時間値（静脈血漿におけるグルコース濃度）が１４０ｍｇ／ｄｌ未満を示す状態」（正常型）でない状態を、「境界型」と呼ぶ。

【0140】

また、糖尿病の判定基準については、１９９７年にＡＤＡ（米国糖尿病学会）から、１９９８年にＷＨＯ（世界保健機構）から、新たな判定基準が報告されている。

【0141】

これらの報告によれば、糖尿病とは、空腹時血糖値（静脈血漿におけるグルコース濃度）が１２６ｍｇ／ｄｌ以上であり、かつ、７５ｇ経口ブドウ糖負荷試験２時間値（静脈血漿におけるグルコース濃度）が２００ｍｇ／ｄｌ以上を示す状態である。

【0142】

また、上記報告によれば、耐糖能不全とは、空腹時血糖値（静脈血漿におけるグルコース濃度）が１２６ｍｇ／ｄｌ未満であり、かつ、７５ｇ経口ブドウ糖負荷試験２時間値（静脈血漿におけるグルコース濃度）が１４０ｍｇ／ｄｌ以上２００ｍｇ／ｄｌ未満を示す状態である。さらに、ＡＤＡの報告によれば、空腹時血糖値（静脈血漿におけるグルコース濃度）が１１０ｍｇ／ｄｌ以上１２６ｍｇ／ｄｌ未満の状態をＩＦＧ（Impaired Fasting Glucose）と呼ぶ。一方、ＷＨＯの報告によれば、該ＩＦＧ（Impaired Fasting Glucose）のうち、７５ｇ経口ブドウ糖負荷試験２時間値（静脈血漿におけるグルコース濃度）が１４０ｍｇ／ｄｌ未満である状態をＩＦＧ（Impaired Fasting Glycemia）と呼ぶ。

【0143】

本発明化合物は、上記した新たな判定基準により決定される糖尿病、境界型、耐糖能不全、ＩＦＧ（Impaired Fasting Glucose）およびＩＦＧ（Impaired Fasting Glycemia）の予防・治療剤としても使用し得る。さらに、本発明化合物は、境界型、耐糖能不全、ＩＦＧ（Impaired Fasting Glucose）またはＩＦＧ（Impaired Fasting Glycemia）から糖尿病への進展を防止し得る。

【0144】

本発明化合物は体重低下作用に基づき、哺乳動物に対し体重低下剤として使用し得る。適用対象の哺乳動物は体重を低下したい哺乳動物であればよく、遺伝的に過体重のリスクを有している哺乳動物であってもよいし、糖尿病、高血圧症および／または高脂血症等の生活習慣病を患っている哺乳動物であってもよい。過体重は食事摂取の過多または栄養バランスを欠いた食生活に起因するものであってもよいし、併用薬剤（例えば、トログリタゾン、ロシグリタゾン、エングリタゾン、シグリタゾン、ピオグリタゾン等のＰＰＡＲγアゴニスト様作用を有するインスリン抵抗性改善剤等）に由来する過体重であってもよい。また、過体重は肥満症に至る前の過体重であってもよいし、肥満患者の過体重であってもよい。ここで、肥満症とは、日本人ではＢＭＩ（ボディー・マス・インデックス：体重（ｋｇ）÷［身長（ｍ）］^２）が２５以上（日本肥満学会の基準による）、欧米人ではＢＭＩが３０以上（WHOの基準による）と定義される。

【0145】

本発明化合物は、代謝症候群（メタボリックシンドローム）の予防・治療剤としても有用であり得る。代謝症候群の患者では、単一の生活習慣病を発症している患者に比べて心血管系疾患を発症する率が著しく高いことから、代謝症候群を予防・治療することは心血管系疾患を予防するために極めて重要である。
代謝症候群の判定基準が、1999年にWHOから、2001年にNCEPから発表されている。WHOの判定基準によれば、高インスリン血症または耐糖能異常を基本条件に、内臓肥満、異常脂質血症（高ＴＧまたは低ＨＤＬ）、高血圧のうち２つ以上を持つ場合に代謝症候群と診断される（World Health Organization: Definition, Diagnosis and Classification of Diabetes Mellitus and Its Complications. Part I: Diagnosis and Classification of Diabetes Mellitus, World Health Organization, Geneva, 1999)。米国の虚血性心疾患の管理指標であるNational Cholesterol Education Program のAdult Treatment Panel IIIの判定基準によれば、内臓肥満、高中性脂肪血症、低HDLコレステロール血症、高血圧、耐糖能異常のうち３つ以上を持つ場合に代謝症候群と診断される（National Cholesterol Education Program: Executive Summary of the Third Report of National Cholesterol Education Program (NCEP) Expert Panel on Detection, Evaluation, and Treatment of High Blood Cholesterol in Adults (Adults Treatment Panel III). The Journal of the American Medical Association, Vol. 285, 2486-2497, 2001）。

【0146】

本発明化合物は、例えば、骨粗鬆症、悪液質（例、癌性悪液質、結核性悪液質、糖尿病性悪液質、血液疾患性悪液質、内分泌疾患性悪液質、感染症性悪液質または後天性免疫不全症候群による悪液質）、脂肪肝、多嚢胞性卵巣症候群、腎臓疾患（例、慢性腎不全、糖尿病性ネフロパシー、糸球体腎炎、糸球体硬化症、ネフローゼ症候群、高血圧性腎硬化症、末期腎臓疾患）、筋ジストロフィー、心筋梗塞、狭心症、脳血管障害（例、脳梗塞、脳卒中）、アルツハイマー病、パーキンソン病、不安症、痴呆症、インスリン抵抗性症候群、シンドロームＸ、高インスリン血症、高インスリン血症における知覚障害、急性または慢性下痢、炎症性疾患（例、慢性関節リウマチ、変形性脊椎炎、変形性関節炎、腰痛、痛風、手術または外傷後の炎症、腫脹、神経痛、咽喉頭炎、膀胱炎、肝炎（非アルコール性脂肪性肝炎を含む）、肺炎、膵炎、腸炎、炎症性腸疾患（炎症性大腸疾患を含む）、潰瘍性大腸炎、胃粘膜損傷（アスピリンにより引き起こされた胃粘膜損傷を含む））、小腸粘膜損傷、吸収不良、精巣機能障害、内臓肥満症候群、筋肉減少症の予防・治療剤としても使用し得る。

【0147】

更に、本発明化合物は、種々の癌（なかでも乳癌（例えば、浸潤性乳管癌、非浸潤性乳管癌、炎症性乳癌等）、前立腺癌（例えば、ホルモン依存性前立腺癌、ホルモン非依存性前立腺癌等）、膵癌（例えば、膵管癌等）、胃癌（例えば、乳頭腺癌、粘液性腺癌、腺扁平上皮癌等）、肺癌（例えば、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、悪性中皮腫等）、結腸癌（例えば、消化管間質腫瘍等）、直腸癌（例えば、消化管間質腫瘍等）、大腸癌（例えば、家族性大腸癌、遺伝性非ポリポーシス大腸癌、消化管間質腫瘍等）、小腸癌（例えば、非ホジキンリンパ腫、消化管間質腫瘍等）、食道癌、十二指腸癌、舌癌、咽頭癌（例えば、上咽頭癌、中咽頭癌、下咽頭癌等）、唾液腺癌、脳腫瘍（例えば、松果体星細胞腫瘍、毛様細胞性星細胞腫、びまん性星細胞腫、退形成性星細胞腫等）、神経鞘腫、肝臓癌（例えば、原発性肝癌、肝外胆管癌等）、腎臓癌（例えば、腎細胞癌、腎盂と尿管の移行上皮癌等）、胆管癌、子宮内膜癌、子宮頸癌、卵巣癌（例えば、上皮性卵巣癌、性腺外胚細胞腫瘍、卵巣性胚細胞腫瘍、卵巣低悪性度腫瘍等）、膀胱癌、尿道癌、皮膚癌（例えば、眼内（眼）黒色腫、メルケル細胞癌等）、血管腫、悪性リンパ腫、悪性黒色腫、甲状腺癌（例えば、甲状腺髄様癌等）、副甲状腺癌、鼻腔癌、副鼻腔癌、骨腫瘍（例えば、骨肉腫、ユーイング腫瘍、子宮肉腫、軟部組織肉腫等）、血管線維腫、網膜肉腫、陰茎癌、精巣腫瘍、小児固形癌（例えば、ウィルムス腫瘍、小児腎腫瘍等）、カポジ肉腫、ＡＩＤＳに起因するカポジ肉腫、上顎洞腫瘍、線維性組織球腫、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、白血病（例えば、急性骨髄性白血病、急性リンパ芽球性白血病等）等）の予防・治療剤としても使用し得る。

【0148】

本発明化合物は、上記した各種疾患（例、心筋梗塞等の心血管イベント）の２次予防及び進展抑制にも使用し得る。また、本発明化合物は、摂食抑制剤、体重低下剤としても有用であり得る。本発明化合物は、食事療法（例、糖尿病の食事療法）、運動療法と併用し得る。

【0149】

本発明化合物を含有する医薬は、毒性が低く、医薬製剤の製造法として一般的に用いられている自体公知の手段（例えば、日本薬局方に記載の方法）に従って、本発明化合物をそのままあるいは薬理学的に許容される担体と混合して、例えば、錠剤（糖衣錠、フィルムコーティング錠、舌下錠、口腔内崩壊錠を含む）、散剤、顆粒剤、カプセル剤（ソフトカプセル、マイクロカプセルを含む）、液剤、トローチ剤、シロップ剤、乳剤、懸濁剤、注射剤（例、皮下注射剤、静脈内注射剤、筋肉内注射剤、腹腔内注射剤等）、外用剤（例、経鼻投与製剤、経皮製剤、軟膏剤）坐剤（例、直腸坐剤、膣坐剤）、ペレット、経鼻剤、経肺剤（吸入剤）、点滴剤等の医薬製剤とすることにより、経口的又は非経口的（例、局所、直腸、静脈投与等）に安全に投与し得る。
これらの製剤は、速放性製剤又は徐放性製剤等の放出制御製剤（例、徐放性マイクロカプセル）であってもよい。
なお、医薬製剤中の本発明化合物の含有量は、製剤全体の約０.０１ないし約１００重量％である。

【0150】

上記した薬理学的に許容される担体としては、製剤素材として慣用の各種有機あるいは無機担体物質が挙げられ、例えば固形製剤における賦形剤、滑沢剤、結合剤及び崩壊剤、あるいは液状製剤における溶剤、溶解補助剤、懸濁化剤、等張化剤、緩衝剤及び無痛化剤等が挙げられる。更に必要に応じ、通常の防腐剤、抗酸化剤、着色剤、甘味剤、吸着剤、湿潤剤等の添加物を適宜、適量用い得る。

【0151】

賦形剤としては、例えば乳糖、白糖、Ｄ－マンニトール、デンプン、コーンスターチ、結晶セルロース、軽質無水ケイ酸等が挙げられる。

【0152】

滑沢剤としては、例えばステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、タルク、コロイドシリカ等が挙げられる。

【0153】

結合剤としては、例えば結晶セルロース、白糖、Ｄ－マンニトール、デキストリン、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニルピロリドン、デンプン、ショ糖、ゼラチン、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム等が挙げられる。

【0154】

崩壊剤としては、例えばデンプン、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム、カルボキシメチルスターチナトリウム、Ｌ－ヒドロキシプロピルセルロース等が挙げられる。

【0155】

溶剤としては、例えば注射用水、アルコール、プロピレングリコール、マクロゴール、ゴマ油、トウモロコシ油、オリーブ油等が挙げられる。

【0156】

溶解補助剤としては、例えばポリエチレングリコール、プロピレングリコール、Ｄ－マンニトール、安息香酸ベンジル、エタノール、トリスアミノメタン、コレステロール、トリエタノールアミン、炭酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム等が挙げられる。

【0157】

懸濁化剤としては、例えばステアリルトリエタノールアミン、ラウリル硫酸ナトリウム、ラウリルアミノプロピオン酸、レシチン、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、モノステアリン酸グリセリン、等の界面活性剤；例えばポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース等の親水性高分子等が挙げられる。

【0158】

等張化剤としては、例えばブドウ糖、Ｄ－ソルビトール、塩化ナトリウム、グリセリン、Ｄ－マンニトール等が挙げられる。

【0159】

緩衝剤としては、例えばリン酸塩、酢酸塩、炭酸塩、クエン酸塩等の緩衝液等が挙げられる。

【0160】

無痛化剤としては、例えばベンジルアルコール等が挙げられる。

【0161】

防腐剤としては、例えばパラヒドロキシ安息香酸エステル類、クロロブタノール、ベンジルアルコール、フェネチルアルコール、デヒドロ酢酸、ソルビン酸等が挙げられる。

【0162】

抗酸化剤としては、例えば亜硫酸塩、アスコルビン酸、α－トコフェロール等が挙げられる。

【0163】

着色剤としては、例えば水溶性食用タール色素（例、食用赤色２号及び３号、食用黄色４号及び５号、食用青色１号及び２号等の食用色素）、水不溶性レーキ色素（例、前記水溶性食用タール色素のアルミニウム塩）、天然色素（例、β－カロチン、クロロフィル、ベンガラ）等が挙げられる。

【0164】

甘味剤としては、例えばサッカリンナトリウム、グリチルリチン酸二カリウム、アスパルテーム、ステビア等が挙げられる。

【0165】

吸着剤としては、例えば有孔デンプン、ケイ酸カルシウム（商品名：フローライトＲＥ）、メタケイ酸アルミン酸マグネシウム（商品名：ノイシリン）、軽質無水ケイ酸（商品名：サイリシア）が挙げられる。

【0166】

湿潤剤としては、例えばプロピレングリコールモノステアレート、ソルビタンモノオレエート、ジエチレングリコールモノラウレート、ポリオキシエチレンラウリルエーテルが挙げられる。

【0167】

経口剤を製造する際には、必要により、味のマスキング、腸溶性あるいは持続性を目的として、コーティングを行ってもよい。

【0168】

コーティングに用いられるコーティング基剤としては、例えば、糖衣基剤、水溶性フィルムコーティング基剤、腸溶性フィルムコーティング基剤、徐放性フィルムコーティング基剤が挙げられる。

【0169】

糖衣基剤としては、白糖が用いられ、さらに、タルク、沈降炭酸カルシウム、ゼラチン、アラビアゴム、プルラン、カルナバロウ等から選ばれる１種又は２種以上を併用してもよい。

【0170】

水溶性フィルムコーティング基剤としては、例えば、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、メチルヒドロキシエチルセルロース等のセルロース系高分子；ポリビニルアセタールジエチルアミノアセテート、アミノアルキルメタアクリレートコポリマーＥ〔オイドラギットＥ（商品名）〕、ポリビニルピロリドン等の合成高分子；プルラン等の多糖類が挙げられる。

【0171】

腸溶性フィルムコーティング基剤としては、例えば、ヒドロキシプロピルメチルセルロース フタレート、ヒドロキシプロピルメチルセルロース アセテートサクシネート、カルボキシメチルエチルセルロース、酢酸フタル酸セルロース等のセルロース系高分子；メタアクリル酸コポリマーＬ〔オイドラギットＬ（商品名）〕、メタアクリル酸コポリマーＬＤ〔オイドラギットＬ－３０Ｄ５５（商品名）〕、メタアクリル酸コポリマーＳ〔オイドラギットＳ（商品名）〕等のアクリル酸系高分子；セラック等の天然物が挙げられる。

【0172】

徐放性フィルムコーティング基剤としては、例えば、エチルセルロース等のセルロース系高分子；アミノアルキルメタアクリレートコポリマーＲＳ〔オイドラギットＲＳ（商品名）〕、アクリル酸エチル－メタクリル酸メチル共重合体懸濁液〔オイドラギットＮＥ（商品名）〕等のアクリル酸系高分子が挙げられる。

【0173】

上記したコーティング基剤は、その２種以上を適宜の割合で混合して用いてもよい。また、コーティングの際に、例えば、酸化チタン、三二酸化鉄等のような遮光剤を用いてもよい。

【0174】

本発明化合物の投与量は、投与対象、症状、投与方法等により適宜選択される。例えば、本発明化合物を肥満症または糖尿病患者（体重６０ｋｇとして）に経口投与する場合、本発明化合物の投与量は、一日につき約０.１～１００ｍｇ、好ましくは約１．０～５０ｍｇ、より好ましくは約１．０～２０ｍｇである。本発明化合物を肥満症または糖尿病患者（体重６０ｋｇとして）に非経口的に投与する場合、本発明化合物の投与量は、一日につき約０．００１～３０ｍｇ、好ましくは約０．０１～２０ｍｇ、より好ましくは約０．１～１０ｍｇである。これらの量を１日１～数回に分けて投与し得る。
本発明化合物は、例えば２日毎に１回、３日毎に１回、４日毎に１回、５日毎に１回、６日毎に１回、毎週、１週間に２回、隔週、３週間毎に１回、毎月１回、２ヶ月に１回、３ヶ月に１回、４ヶ月に１回、５ヶ月に１回または６ヶ月に１回投与し得る。

【0175】

本発明化合物は、例えば、本発明化合物の作用（肥満症、糖尿病等の治療効果）の増強、本発明化合物の使用量の低減等を目的として、本発明化合物に悪影響を及ぼさない他の薬剤と併用し得る。
本発明化合物と併用し得る薬剤（以下、併用薬剤と略記する場合がある）としては、例えば、抗肥満剤、糖尿病治療剤、糖尿病性合併症治療剤、高脂血症治療剤、降圧剤、利尿剤、化学療法剤、免疫療法剤、抗炎症薬、抗血栓剤、骨粗鬆症治療剤、ビタミン薬、抗痴呆薬、勃起不全改善薬、頻尿・尿失禁治療薬、排尿困難治療剤などが挙げられる。具体的には、以下のものが挙げられる。

【0176】

抗肥満剤としては、モノアミン取り込み阻害薬（例、フェンテルミン、シブトラミン、マジンドール、フロキセチン、テソフェンシン）、セロトニン2C受容体作動薬(例、ロルカセリン)、セロトニン6受容体拮抗薬、ヒスタミンH3受容体調節薬、GABA調節薬（例、トピラメイト）、ニューロペプチドＹ拮抗薬（例、ベルネペリット）、カンナビノイド受容体拮抗薬（例、リモナバン、タラナバン）、グレリン拮抗薬、グレリン受容体拮抗薬、グレリンアシル化酵素阻害薬、オピオイド受容体拮抗薬（例、GSK-1521498）、オレキシン受容体拮抗薬、メラノコルチン4受容体作動薬、11β-ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害薬（例、AZD-4017）、膵リパーゼ阻害薬（例、オルリスタット、セティリスタット（cetilistat））、β3アゴニスト（例、N-5984）、ジアシルグリセロールアシルトランスフェラーゼ1（DGAT1）阻害薬、アセチルCoAカルボキシラーゼ（ACC）阻害薬、ステアリン酸CoA脱飽和酵素阻害薬、ミクロソームトリグリセリド転送蛋白阻害薬（例、R-256918）、Na-グルコース共輸送担体阻害薬（例、ＪNJ-28431754、レモグリフロジン）、NFκ阻害薬（例、HE-3286）、PPARアゴニスト（例、GFT-505、DRF-11605）、ホスホチロシンホスファターゼ阻害剤（例、バナジン酸ナトリウム、トロダスケミン（Trodusquemin））、GPR119作動薬（例、PSN821、MBX-2982、APD597）、グルコキナーゼ活性化薬（例、AZD-1656）、レプチン、レプチン誘導体（例、メトレレプチン）、CNTF（毛様体神経栄養因子）、BDNF（脳由来神経栄養因子）、コレシストキニンアゴニスト、アミリン製剤（例、プラムリンタイド、AC-2307）、ニューロペプチドYアゴニスト（例、PYY3-36、PYY3-36の誘導体、オビネプタイド、TM-30339、TM-30335）、オキシントモジュリン製剤：FGF21製剤（例、ウシ、ブタの膵臓から抽出された動物FGF21製剤；大腸菌、イーストを用い遺伝子工学的に合成したヒトFGF21製剤；FGF21のフラグメントまたは誘導体）、摂食抑制薬（例、P-57）等が挙げられる。

【0177】

糖尿病治療剤としては、インスリン製剤（例、ウシ、ブタの膵臓から抽出された動物インスリン製剤；大腸菌、イーストを用い遺伝子工学的に合成したヒトインスリン製剤；インスリン亜鉛；プロタミンインスリン亜鉛；インスリンのフラグメントまたは誘導体（例、INS-1）、経口インスリン製剤）、インスリン抵抗性改善剤（例、ピオグリタゾンまたはその塩（好ましくは、塩酸塩）、ロシグリタゾンまたはその塩（好ましくは、マレイン酸塩）、メタグリダセン（Metaglidasen）、AMG-131、バラグリタゾン（Balaglitazone）、MBX-2044、リボグリタゾン（Rivoglitazone）、アレグリタザール（Aleglitazar）、チグリタザール（Chiglitazar）、ロベグリタゾン（Lobeglitazone）、PLX-204、PN-2034、GFT-505、THR-0921、WO2007/013694、WO2007/018314、WO2008/093639またはWO2008/099794記載の化合物）、α－グルコシダーゼ阻害剤（例、ボグリボース、アカルボース、ミグリトール、エミグリテート）、ビグアナイド剤（例、メトホルミン、ブホルミンまたはそれらの塩（例、塩酸塩、フマル酸塩、コハク酸塩））、インスリン分泌促進剤（例、スルホニルウレア剤（例、トルブタミド、グリベンクラミド、グリクラジド、クロルプロパミド、トラザミド、アセトヘキサミド、グリクロピラミド、グリメピリド、グリピザイド、グリブゾール）、レパグリニド、ナテグリニド、ミチグリニドまたはそのカルシウム塩水和物）、ジペプチジルペプチダーゼＩＶ阻害剤（例、アログリプチン（Alogliptin）またはその塩（好ましくは、安息香酸塩）、ヴィルダグリプチン（Vildagliptin）、シタグリプチン（Sitagliptin）、サクサグリプチン（Saxagliptin）、BI1356、GRC8200、MP-513、PF-00734200、PHX1149、SK-0403、ALS2-0426、TA-6666、TS-021、KRP-104、トレラグリプチン（Trelagliptin）またはその塩（好ましくはコハク酸塩)）、β３アゴニスト（例、N-5984）、GPR40アゴニスト（例、ファシグリファム（Fasiglifam）またはその水和物、WO2004/041266、WO2004/106276、WO2005/063729、WO2005/063725、WO2005/087710、WO2005/095338、WO2007/013689またはWO2008/001931記載の化合物）、SGLT2（sodium-glucose cotransporter 2）阻害剤（例、ダパグリフロジン(Dapagliflozin)、AVE2268、TS-033、YM543、TA-7284、レモグリフロジン(Remogliflozin)、ASP1941）、SGLT1阻害薬、11β-ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害薬（例、BVT-3498、INCB-13739）、アジポネクチンまたはその作動薬、IKK阻害薬（例、AS-2868）、レプチン抵抗性改善薬、ソマトスタチン受容体作動薬、グルコキナーゼ活性化薬（例、ピラグリアチン(Piragliatin)、AZD1656、AZD6370、TTP-355、WO2006/112549、WO2007/028135、WO2008/047821、WO2008/050821、WO2008/136428またはWO2008/156757記載の化合物）、GPR119アゴニスト（例、PSN821、MBX-2982、APD597）、FGF21、FGFアナログ、ACC2阻害剤等が挙げられる。

【0178】

糖尿病性合併症治療剤としては、アルドース還元酵素阻害剤（例、トルレスタット、エパルレスタット、ゾポルレスタット、フィダレスタット、CT-112、ラニレスタット（AS-3201）、リドレスタット）、神経栄養因子およびその増加薬（例、NGF、NT-3、BDNF、WO01/14372に記載のニューロトロフィン産生・分泌促進剤（例、4-(4-クロロフェニル)-2-(2-メチル-1-イミダゾリル)-5-[3-(2-メチルフェノキシ)プロピル]オキサゾール）、WO2004/039365記載の化合物）、PKC阻害剤（例、ルボキシスタウリン メシレート（ruboxistaurin mesylate））、AGE阻害剤（例、ALT946、N-フェナシルチアゾリウム ブロマイド（ALT766）、EXO-226、ピリドリン（Pyridorin）、ピリドキサミン）、GABA受容体作動薬（例、ギャバペンチン、プレギャバリン）、セロトニン・ノルアドレナリン再取込み阻害薬（例、デュロキセチン）、ナトリウムチャンネル阻害薬（例、ラコサミド）、活性酸素消去薬（例、チオクト酸）、脳血管拡張剤（例、チアプリド、メキシレチン）、ソマトスタチン受容体作動薬（例、BIM23190）、アポトーシスシグナルレギュレーティングキナーゼ－１（ASK-1）阻害薬等が挙げられる。

【0179】

高脂血症治療剤としては、HMG-CoA還元酵素阻害剤（例、プラバスタチン、シンバスタチン、ロバスタチン、アトルバスタチン、フルバスタチン、ロスバスタチン、ピタバスタチンまたはそれらの塩（例、ナトリウム塩、カルシウム塩））、スクアレン合成酵素阻害剤（例、WO97/10224号パンフレットに記載の化合物、例えば、N-[[(3R,5S)-1-(3-アセトキシ-2,2-ジメチルプロピル)-7-クロロ-5-(2，3-ジメトキシフェニル)-2-オキソ-1,2,3,5-テトラヒドロ-4,1-ベンゾオキサゼピン-3-イル]アセチル]ピペリジン-4-酢酸）、フィブラート系化合物（例、ベザフィブラート、クロフィブラート、シムフィブラート、クリノフィブラート）、陰イオン交換樹脂（例、コレスチラミン）、プロブコール、ニコチン酸系薬剤（例、ニコモール（nicomol）、ニセリトロール（niceritrol）、ナイアスパン（niaspan））、イコサペント酸エチル、植物ステロール（例、ソイステロール（soysterol）、ガンマオリザノール（γ-oryzanol））、コレステロール吸収阻害剤(例、ゼチア)、CETP阻害剤(例、ダルセトラピブ（dalcetrapib）、アナセトラピブ（anacetrapib））、ω-3脂肪酸製剤（例、ω－３－脂肪酸エチルエステル９０(ω-3-acid ethyl esters 90)）等が挙げられる。

【0180】

降圧剤としては、例えば、アンジオテンシン変換酵素阻害剤（例、カプトプリル、エナラプリル、デラプリルなど）、アンジオテンシンII拮抗剤（例、カンデサルタン シレキセチル、カンデサルタン、ロサルタン、ロサルタン カリウム、エプロサルタン、バルサルタン、テルミサルタン、イルベサルタン、タソサルタン、オルメサルタン、オルメサルタン メドキソミル、アジルサルタン、アジルサルタン メドキソミルなど）、カルシウム拮抗剤（例、マニジピン、ニフェジピン、アムロジピン、エホニジピン、ニカルジピン、シルニジピンなど）、βブロッカー（例、メトプロロール、アテノロール、プロプラノロール、カルベジロール、ピンドロールなど）、クロニジン等が挙げられる。

【0181】

利尿剤としては、例えば、キサンチン誘導体（例、サリチル酸ナトリウムテオブロミン、サリチル酸カルシウムテオブロミンなど）、チアジド系製剤（例、エチアジド、シクロペンチアジド、トリクロルメチアジド、ヒドロクロロチアジド、ヒドロフルメチアジド、ベンチルヒドロクロロチアジド、ペンフルチアジド、ポリ５チアジド、メチクロチアジドなど）、抗アルドステロン製剤（例、スピロノラクトン、トリアムテレンなど）、炭酸脱水酵素阻害剤（例、アセタゾラミドなど）、クロルベンゼンスルホンアミド系製剤（例、クロルタリドン、メフルシド、インダパミドなど）、アゾセミド、イソソルビド、エタクリン酸、ピレタニド、ブメタニド、フロセミドなどが挙げられる。

【0182】

化学療法剤としては、例えば、アルキル化剤（例、サイクロフォスファミド、イフォスファミド）、代謝拮抗剤（例、メソトレキセート、５－フルオロウラシル）、抗癌性抗生物質（例、マイトマイシン、アドリアマイシン）、植物由来抗癌剤（例、ビンクリスチン、ビンデシン、タキソール）、シスプラチン、カルボプラチン、エトポシドなどが挙げられる。なかでも５－フルオロウラシル誘導体であるフルツロンあるいはネオフルツロンなどが好ましい。

【0183】

免疫療法剤としては、例えば、微生物または細菌成分（例、ムラミルジペプチド誘導体、ピシバニール）、免疫増強活性のある多糖類（例、レンチナン、シゾフィラン、クレスチン）、遺伝子工学的手法で得られるサイトカイン（例、インターフェロン、インターロイキン（ＩＬ））、コロニー刺激因子（例、顆粒球コロニー刺激因子、エリスロポエチン）などが挙げられ、なかでもＩＬ－１、ＩＬ－２、ＩＬ－１２などのインターロイキン類が好ましい。

【0184】

抗炎症薬としては、例えば、アスピリン、アセトアミノフェン、インドメタシンなどの非ステロイド抗炎症薬などが挙げられる。

【0185】

抗血栓剤としては、ヘパリン（例、ヘパリンナトリウム、ヘパリンカルシウム、エノキサパリンナトリウム(enoxaparin sodium)、ダルテパリンナトリウム(dalteparin sodium)）、ワルファリン（例、ワルファリンカリウム）、抗トロンビン薬（例、アルガトロバン(aragatroban)、ダビガトラン(dabigatran)）、FXa阻害薬（例、リバロキサバン(rivaroxaban)、アピキサバン(apixaban)、エドキサバン(edoxaban)、YM150、WO02/06234、WO2004/048363、WO2005/030740、WO2005/058823またはWO2005/113504記載の化合物）、血栓溶解薬（例、ウロキナーゼ(urokinase)、チソキナーゼ(tisokinase)、アルテプラーゼ(alteplase)、ナテプラーゼ(nateplase)、モンテプラーゼ(monteplase)、パミテプラーゼ(pamiteplase)）、血小板凝集抑制薬（例、塩酸チクロピジン(ticlopidine hydrochloride)、クロピドグレル、プラスグレル、E5555、SHC530348、シロスタゾール(cilostazol)、イコサペント酸エチル、ベラプロストナトリウム(beraprost sodium)、塩酸サルポグレラート(sarpogrelate hydrochloride)）等が挙げられる。

【0186】

骨粗鬆症治療剤としては、例えば、アルファカルシドール(alfacalcidol)、カルシトリオール(calcitriol)、エルカトニン(elcatonin)、サケカルシトニン(calcitonin salmon)、エストリオール(estriol)、イプリフラボン(ipriflavone)、パミドロン酸二ナトリウム(pamidronate disodium)、アレンドロン酸ナトリウム水和物(alendronate sodium hydrate)、インカドロン酸二ナトリウム(incadronate disodium)、リセドロン酸二ナトリウム(risedronate disodium)などが挙げられる。

【0187】

ビタミン薬としては、例えば、ビタミンＢ_１、ビタミンＢ_１２などが挙げられる。

【0188】

抗痴呆薬としては、例えば、タクリン(tacrine)、ドネペジル(donepezil)、リバスチグミン(rivastigmine)、ガランタミン(galanthamine)などが挙げられる。

【0189】

勃起不全改善薬としては、例えば、アポモルフィン（apomorphine）、クエン酸シルデナフィル（sildenafil citrate）等が挙げられる。

【0190】

頻尿・尿失禁治療薬としては、例えば、塩酸フラボキサート(flavoxate hydrochloride)、塩酸オキシブチニン(oxybutynin hydrochloride)、塩酸プロピベリン(propiverine hydrochloride)などが挙げられる。

【0191】

排尿困難治療剤としては、アセチルコリンエステラーゼ阻害薬（例、ジスチグミン）などが挙げられる。

【0192】

さらに、動物モデルや臨床で悪液質改善作用が認められている薬剤、すなわち、シクロオキシゲナーゼ阻害剤（例、インドメタシン）、プロゲステロン誘導体（例、メゲストロールアセテート）、糖質ステロイド（例、デキサメサゾン）、メトクロプラミド系薬剤、テトラヒドロカンナビノール系薬剤、脂肪代謝改善剤（例、エイコサペンタエン酸）、成長ホルモン、ＩＧＦ－１、あるいは悪液質を誘導する因子であるＴＮＦ－α、ＬＩＦ、ＩＬ－６、オンコスタチンＭに対する抗体なども本発明化合物と併用し得る。

【0193】

さらに、糖化阻害剤(例、ＡＬＴ－７１１)、神経再生促進薬(例、Ｙ－１２８、ＶＸ８５３、prosaptide)、抗うつ薬(例、デシプラミン、アミトリプチリン、イミプラミン)、抗てんかん薬（例、ラモトリジン、トリレプタル(Trileptal)、ケプラ(Keppra)、ゾネグラン(Zonegran)、プレギャバリン(Pregabalin)、ハーコセライド(Harkoseride)、カルバマゼピン）、抗不整脈薬（例、メキシレチン）、アセチルコリン受容体リガンド（例、ＡＢＴ－５９４）、エンドセリン受容体拮抗薬（例、ＡＢＴ－６２７）、モノアミン取り込み阻害薬（例、トラマドル）、麻薬性鎮痛薬（例、モルヒネ）、ＧＡＢＡ受容体作動薬（例、ギャバペンチン、ギャバペンチンＭＲ剤）、α２受容体作動薬（例、クロニジン）、局所鎮痛薬（例、カプサイシン）、抗不安薬（例、ベンゾチアゼピン）、ホスホジエステラーゼ阻害薬（例、シルデナフィル）、ドーパミン受容体作動薬（例、アポモルフィン）、ミダゾラム、ケトコナゾールなども本発明化合物と併用し得る。

【0194】

本発明化合物及び併用薬剤の投与時期は限定されず、これらを投与対象に対し、同時に投与してもよいし、時間差をおいて投与してもよい。

【0195】

投与形態としては、例えば、（１）本発明化合物と併用薬剤とを同時に製剤化して得られる単一の製剤の投与、（２）本発明化合物と併用薬剤とを別々に製剤化して得られる２種の製剤の同一投与経路での同時投与、（３）本発明化合物と併用薬剤とを別々に製剤化して得られる２種の製剤の同一投与経路での時間差をおいての投与、（４）本発明化合物と併用薬剤とを別々に製剤化して得られる２種の製剤の異なる投与経路での同時投与、（５）本発明化合物と併用薬剤とを別々に製剤化して得られる２種の製剤の異なる投与経路での時間差をおいての投与（例、本発明化合物及び併用薬剤の順序での投与、あるいは逆の順序での投与）等が挙げられる。

【0196】

併用薬剤の投与量は、臨床上用いられている用量を基準として適宜選択することができる。また、本発明化合物と併用薬剤の配合比は、投与対象、症状、投与方法、対象疾患、組み合わせ等により適宜選択することができる。例えば、投与対象がヒトである場合、本発明化合物１重量部に対し、併用薬剤を０．０１～１００重量部用いればよい。

【0197】

本発明化合物と併用薬剤とを組み合わせることにより、
（１）本発明化合物又は併用薬剤を単独で投与する場合に比べて、その投与量を軽減し得る、
（２）患者の症状（軽症、重症等）に応じて、本発明化合物と併用する薬剤を選択し得る、
（３）本発明化合物と作用機序が異なる併用薬剤を選択することにより、治療期間を長く設定し得る、
（４）本発明化合物と作用機序が異なる併用薬剤を選択することにより、治療効果の持続を図り得る、
（５）本発明化合物と併用薬剤とを併用することにより、相乗効果等の効果を得られ得る。

【実施例】

【0198】

本明細書中で用いられている略号は下記（表１－１、表１－２、及び表１－３）の意味を示す。本明細書中のα-ＭｅＰｈｅ等に含まれるハイフンは省略されていてもよく、省略されている場合も同じ意味を示す。
本明細書中で用いられているアミノ酸配列は、左末端がＮ末端で、右末端がＣ末端を示す。

【0199】

【表1-1】

【表1-2】

【表1-3】

【0200】

本明細書において、塩基やアミノ酸等を略号で表示する場合、ＩＵＰＡＣ－ＩＵＢ Commision on Biochemical Nomenclature による略号あるいは当該分野における慣用略号に基づくものであり、その例を下記する。またアミノ酸に関し光学異性体があり得る場合は、特記しない限り、明示しなければL体を示すものとする（例えば、「Ala」はL体のAla）。また、「D-」と示される場合はD体を示し（例えば、「D-Ala」はD体のAla）、「DL-」と示される場合はD体及びL体のラセミ体を示すものとする(例えば、「DL-Ala」はD体のAla及びL体のAlaのラセミ体)。
ＴＦＡ ：トリフルオロ酢酸
Ｇｌｙ又はＧ ：グリシン
Ａｌａ又はＡ ：アラニン
Ｖａｌ又はＶ ：バリン
Ｌｅｕ又はＬ ：ロイシン
Ｉｌｅ又はＩ ：イソロイシン
Ｓｅｒ又はＳ ：セリン
Ｔｈｒ又はＴ ：トレオニン
Ｃｙｓ又はＣ ：システイン
Ｍｅｔ又はＭ ：メチオニン
Ｇｌｕ又はＥ ：グルタミン酸
Ａｓｐ又はＤ ：アスパラギン酸
Ｌｙｓ又はＫ ：リシン
Ａｒｇ又はＲ ：アルギニン
Ｈｉｓ又はＨ ：ヒスチジン
Ｐｈｅ又はＦ ：フェニルアラニン
Ｔｙｒ又はＹ ：チロシン
Ｔｒｐ又はＷ ：トリプトファン
Ｐｒｏ又はＰ ：プロリン
Ａｓｎ又はＮ ：アスパラギン
Ｇｌｎ又はＱ ：グルタミン
ｐＧｌｕ ：ピログルタミン酸
α-ＭｅＴｙｒ ：α-メチルチロシン

【0201】

本発明は、更に以下の参考例、実施例、試験例および製剤例によって詳しく説明されるが、これらの例は単なる実施であって、本発明を限定するものではなく、また本発明の範囲を逸脱しない範囲で変化させてもよい。
以下の実施例中の「室温」は通常約１０℃ないし約３５℃を示す。％は、収率はmol/mol％を、クロマトグラフィーで用いられる溶媒は体積％を、その他は重量％を示す。

【0202】

ＴＨＦ: テトラヒドロフラン
ＤＭＦ: Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド
ＷＳＣ: 1-(3-ジメチルアミノプロピル)-3-エチルカルボジイミド塩酸塩
ＨＯＢｔ: 1-ヒドロキシベンゾトリアゾール一水和物

【0203】

参考例１
H-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Boc)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Phe(2-F)-Sieber amide resin（配列番号２）の合成
Sieber amide resin (0.71 meq/g、352 mg) を反応管に加え、ペプチド合成機にセットした。Fmoc/DCC/HOBt protocolにより順次アミノ酸を縮合した。29位のLys(Boc)を導入する際はダブルカップリングを行った。最終工程でN末端のFmoc基を除去した。縮合終了後樹脂をMeOHで洗浄し、減圧乾燥した。目的の保護ペプチド樹脂を1384 mg (0.181 meq/g) 取得した。

【0204】

参考例２
H-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(ivDde)-Aib-Ile-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Boc)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Phe(2-F)-Sieber amide resin（配列番号３）の合成
参考例１で調製したH-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Boc)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Phe(2-F)-Sieber amide resin (0.181 meq/g、276 mg) を反応管に加え、ペプチド合成機にセットした。Fmoc/DIPCDI/OxymaPure protocolにより順次アミノ酸を縮合した。19位のGln(Trt)、18位のAla、12位のIleおよび5位のThr(tBu)を導入する際はダブルカップリングを行った。最終工程でN末端のFmoc基を除去した。縮合終了後樹脂をMeOHで洗浄し、減圧乾燥した。目的の保護ペプチド樹脂を389 mg (0.129 meq/g) 取得した。

【0205】

参考例３
H-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Mtt)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Phe(2-F)-Rink amide AM resin（配列番号４）の合成
Rink amide AM resin (0.29 meq/g、862 mg) を反応管に加え、ペプチド合成機にセットした。Fmoc/DCC/HOBt protocolにより順次アミノ酸を縮合した。29位のLys(Mtt)を導入する際はダブルカップリングを行った。最終工程でN末端のFmoc基を除去した。縮合終了後樹脂をMeOHで洗浄し、減圧乾燥した。目的の保護ペプチド樹脂を1788 mg (0.140 meq/g) 取得した。

【0206】

参考例４
H-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(ivDde)-Aib-Ile-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Mtt)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Phe(2-F)-Rink amide AM resin（配列番号５）の合成
参考例３で調製したH-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Mtt)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Phe(2-F)-Rink amide AM resin (0.140 meq/g、357 mg) を反応管に加え、ペプチド合成機にセットした。Fmoc/DIPCDI/OxymaPure protocolにより順次アミノ酸を縮合した。19位のGln(Trt)、18位のArg(Pbf)、12位のIleおよび5位のThr(tBu)を導入する際はダブルカップリングを行った。最終工程でN末端のFmoc基を除去した。縮合終了後樹脂をMeOHで洗浄し、減圧乾燥した。目的の保護ペプチド樹脂を452 mg (0.111 meq/g) 取得した。

【0207】

参考例５
H-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Mtt)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Rink amide AM resin（配列番号６）の合成
Rink amide AM resin (0.29 meq/g、690 mg) を反応管に加え、ペプチド合成機にセットした。Fmoc/DCC/HOBt protocolにより順次アミノ酸を縮合した。29位のLys(Mtt)を導入する際はダブルカップリングを行った。最終工程でN末端のFmoc基を除去した。縮合終了後樹脂をMeOHで洗浄し、減圧乾燥した。目的の保護ペプチド樹脂を1449 mg (0.138 meq/g) 取得した。

【0208】

参考例６
H-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(ivDde)-Aib-Ile-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Mtt)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Rink amide AM resin（配列番号７）の合成
参考例５で調製したH-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Mtt)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Rink amide AM resin (0.138 meq/g、290 mg) を反応管に加え、ペプチド合成機にセットした。Fmoc/DIPCDI/OxymaPure protocolにより順次アミノ酸を縮合した。19位のGln(Trt)、18位のArg(Pbf)、12位のIleおよび5位のThr(tBu)を導入する際はダブルカップリングを行った。最終工程でN末端のFmoc基を除去した。縮合終了後樹脂をMeOHで洗浄し、減圧乾燥した。目的の保護ペプチド樹脂を417 mg (0.096 meq/g) 取得した。

【0209】

参考例７
H-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Boc)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Sieber amide resin（配列番号８）の合成
Sieber amide resin (0.71 meq/g、352 mg) を反応管に加え、ペプチド合成機にセットした。Fmoc/DCC/HOBt protocolにより順次アミノ酸を縮合した。29位のLys(Boc)を導入する際はダブルカップリングを行った。最終工程でN末端のFmoc基を除去した。縮合終了後樹脂をMeOHで洗浄し、減圧乾燥した。目的の保護ペプチド樹脂を1373 mg (0.182 meq/g) 取得した。

【0210】

参考例８
H-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(ivDde)-Aib-Ile-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Boc)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Sieber amide resin（配列番号９）の合成
参考例７で調製したH-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Boc)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Sieber amide resin (0.182 meq/g、275 mg) を反応管に加え、ペプチド合成機にセットした。Fmoc/DIPCDI/OxymaPure protocolにより順次アミノ酸を縮合した。19位のGln(Trt)、18位のAla、12位のIleおよび5位のThr(tBu)を導入する際はダブルカップリングを行った。最終工程でN末端のFmoc基を除去した。縮合終了後樹脂をMeOHで洗浄し、減圧乾燥した。目的の保護ペプチド樹脂を409 mg (0.122 meq/g) 取得した。

【0211】

実施例１
H-Tyr-Aib-Glu-Gly-Thr-αMePhe-Thr-Ser-Asp-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Pal)-Aib-Ile-Aib-Leu-Asp-Lys-Gln-Ala-Gln-Iva-Glu-Phe-Val-Arg-His-Leu-Leu-Asn-Lys-Aib-Thr-Arg-Gln-Arg-Phe(2-F)-NH₂（配列番号１０）
参考例２で調製したH-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(ivDde)-Aib-Ile-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Boc)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Phe(2-F)-Sieber amide resin (0.129 meq/g, 97 mg) を反応管に量りとりNMPで膨潤した。NMPをろ過で除いた後に、樹脂に対してBoc-Tyr(tBu)-OH (33.7 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、得られた樹脂に2%ヒドラジンのNMP溶液を加え3時間振とうした。溶液をろ去後、2%ヒドラジンのNMP溶液を再び加えて終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。得られた樹脂に対してFmoc-Gly-OH (29.7 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、20%ピペリジンのNMP溶液を加えて1分間振とうした。溶液をろ去後、20%ピペリジンのNMP溶液を再び加えて20分間振とうした。溶液をろ去後、樹脂をNMPで10回洗浄した。得られた樹脂に対してFmoc-Gly-Gly-Gly-OH (41.1 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、20%ピペリジンのNMP溶液を加えて1分間振とうした。溶液をろ去後、20%ピペリジンのNMP溶液を再び加えて20分間振とうした。溶液をろ去後、樹脂をNMPで10回洗浄した。得られた樹脂に対してPal-OSu (35.4 mg)およびDIPEA (17.4 μL) のNMP溶液（200 μL）加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、樹脂をMeOHで洗浄し、減圧乾燥することで、Boc-Tyr(tBu)-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Pal)-Aib-Ile-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Boc)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Phe(2-F)-Sieber amide resinを101.3 mg得た。

【0212】

得られた樹脂101.3 mgにTFA:m-cresol:thioanisole:ethandithiol:H₂O:triisopropylsilane (80:5:5:5:2.5:2.5)を1 mL加え、1.5時間攪拌した。反応溶液にジエチルエーテルを加え沈殿を得、遠心分離後、上清を除く操作を3度繰り返し、沈殿を洗浄した。残渣を50%酢酸水溶液で抽出、ろ過により樹脂を除いた後、YMC-Actus Triart Prep C8 S-10μm 20 nm column (250 × 20 mm I.D.) を用いた分取HPLCで、A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルによる流量8 mL/分、A/B: 56/44-46/54への直線型濃度勾配溶出 (60分) を行い、目的物を含む分画を集め凍結乾燥し23.1 mgの白色粉末を得た。
質量分析による (M+H)⁺ 4606.1 (計算値4605.5)
HPLC溶出時間：17.4分
溶出条件：
カラムYMC Triart C8 (100 × 4.6 mm I.D.)
溶離液：A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルを用い、A/B: 80/20～30/70へ。直線型濃度勾配溶出 (25分)。
流速：1.0 mL/分

【0213】

実施例２
H-Tyr-Aib-Glu-Gly-Thr-αMePhe-Thr-Ser-Asp-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Oda)-Aib-Ile-Aib-Leu-Asp-Lys-Gln-Ala-Gln-Iva-Glu-Phe-Val-Arg-His-Leu-Leu-Asn-Lys-Aib-Thr-Arg-Gln-Arg-Phe(2-F)-NH₂（配列番号１１）
参考例２で調製したH-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(ivDde)-Aib-Ile-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Boc)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Phe(2-F)-Sieber amide resin (0.129 meq/g, 97 mg) を反応管に量りとりNMPで膨潤した。NMPをろ過で除いた後に、樹脂に対してBoc-Tyr(tBu)-OH (33.7 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、得られた樹脂に2%ヒドラジンのNMP溶液を加え3時間振とうした。溶液をろ去後、2%ヒドラジンのNMP溶液を再び加えて終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。得られた樹脂に対してFmoc-Gly-OH (29.7 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、20%ピペリジンのNMP溶液を加えて1分間振とうした。溶液をろ去後、20%ピペリジンのNMP溶液を再び加えて20分間振とうした。溶液をろ去後、樹脂をNMPで10回洗浄した。このFmocアミノ酸の縮合－Fmoc脱保護のサイクルを繰り返すことで、Gly-Gly-Gly、Oda(OtBu)を順次縮合した。樹脂をMeOHで洗浄し、減圧乾燥することで、Boc-Tyr(tBu)-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Oda(tBu))-Aib-Ile-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Boc)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Phe(2-F)-Sieber amide resinを94.6 mg得た。

【0214】

得られた樹脂94.6 mgにTFA:m-cresol:thioanisole:ethandithiol:H₂O:triisopropylsilane (80:5:5:5:2.5:2.5)を1 mL加え、1.5時間攪拌した。反応溶液にジエチルエーテルを加え沈殿を得、遠心分離後、上清を除く操作を3度繰り返し、沈殿を洗浄した。残渣を50%酢酸水溶液で抽出、ろ過により樹脂を除いた後、YMC-Actus Triart Prep C8 S-10μm 20 nm column (250 × 20 mm I.D.) を用いた分取HPLCで、A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルによる流量8 mL/分、A/B: 60/40-50/50への直線型濃度勾配溶出 (60分) を行い、目的物を含む分画を集め凍結乾燥し21.4 mgの白色粉末を得た。
質量分析による (M+H)⁺ 4664.4 (計算値4663.6)
HPLC溶出時間：15.4分
溶出条件：
カラムYMC Triart C8 (100 × 4.6 mm I.D.)
溶離液：A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルを用い、A/B: 80/20～30/70へ。直線型濃度勾配溶出 (25分)。
流速：1.0 mL/分

【0215】

実施例３
H-Tyr-Aib-Glu-Gly-Thr-αMePhe-Thr-Ser-Asp-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Pal)-Aib-Ile-Aib-Leu-Asp-Lys-Gln-Arg-Gln-Iva-Glu-Phe-Val-Arg-His-Leu-Leu-Asn-Lys-Aib-Thr-Arg-Gln-Arg-Phe(2-F)-NH₂（配列番号１２）
参考例４で調製したH-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(ivDde)-Aib-Ile-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Mtt)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Phe(2-F)-Rink amide AM resin (0.111 meq/g, 89.3 mg) を反応管に量りとりNMPで膨潤した。NMPをろ過で除いた後に、樹脂に対してBoc-Tyr(tBu)-OH (33.7 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、得られた樹脂に2%ヒドラジンのNMP溶液を加え3時間振とうした。溶液をろ去後、2%ヒドラジンのNMP溶液を再び加えて終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。得られた樹脂に対してFmoc-Gly-OH (29.7 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、20%ピペリジンのNMP溶液を加えて1分間振とうした。溶液をろ去後、20%ピペリジンのNMP溶液を再び加えて20分間振とうした。溶液をろ去後、樹脂をNMPで10回洗浄した。得られた樹脂に対してFmoc-Gly-Gly-Gly-OH (41.1 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、20%ピペリジンのNMP溶液を加えて1分間振とうした。溶液をろ去後、20%ピペリジンのNMP溶液を再び加えて20分間振とうした。溶液をろ去後、樹脂をNMPで10回洗浄した。得られた樹脂に対してPal-OSu (35.4 mg)およびDIPEA (17.4 μL) のNMP溶液（200 μL）加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、樹脂をMeOHで洗浄し、減圧乾燥することで、Boc-Tyr(tBu)- Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Pal)-Aib-Ile-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Mtt)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Phe(2-F)-Rink amide AM resinを110.2 mg得た。

【0216】

得られた樹脂110.2 mgにTFA:m-cresol:thioanisole:ethandithiol:H₂O:triisopropylsilane (80:5:5:5:2.5:2.5)を1 mL加え、1.5時間攪拌した。反応溶液にジエチルエーテルを加え沈殿を得、遠心分離後、上清を除く操作を3度繰り返し、沈殿を洗浄した。残渣を50%酢酸水溶液で抽出、ろ過により樹脂を除いた後、YMC-Actus Triart Prep C8 S-10μm 20 nm column (250 × 20 mm I.D.) を用いた分取HPLCで、A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルによる流量8 mL/分、A/B: 58/42-48/52への直線型濃度勾配溶出 (60分) を行い、目的物を含む分画を集め凍結乾燥し9.3 mgの白色粉末を得た。
質量分析による (M+H)⁺ 4691.1 (計算値4690.6)
HPLC溶出時間：16.9分
溶出条件：
カラムYMC Triart C8 (100 × 4.6 mm I.D.)
溶離液：A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルを用い、A/B: 80/20～30/70へ。直線型濃度勾配溶出 (25分)。
流速：1.0 mL/分

【0217】

実施例４
H-Tyr-Aib-Glu-Gly-Thr-αMePhe-Thr-Ser-Asp-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Oda)-Aib-Ile-Aib-Leu-Asp-Lys-Gln-Arg-Gln-Iva-Glu-Phe-Val-Arg-His-Leu-Leu-Asn-Lys-Aib-Thr-Arg-Gln-Arg-Phe(2-F)-NH₂（配列番号１３）
参考例４で調製したH-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(ivDde)-Aib-Ile-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Mtt)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Phe(2-F)-Rink amide AM resin (0.111 meq/g, 89.3 mg) を反応管に量りとりNMPで膨潤した。NMPをろ過で除いた後に、樹脂に対してBoc-Tyr(tBu)-OH (33.7 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、得られた樹脂に2%ヒドラジンのNMP溶液を加え3時間振とうした。溶液をろ去後、2%ヒドラジンのNMP溶液を再び加えて終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。得られた樹脂に対してFmoc-Gly-OH (29.7 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、20%ピペリジンのNMP溶液を加えて1分間振とうした。溶液をろ去後、20%ピペリジンのNMP溶液を再び加えて20分間振とうした。溶液をろ去後、樹脂をNMPで10回洗浄した。このFmocアミノ酸の縮合－Fmoc脱保護のサイクルを繰り返すことで、Gly-Gly-Gly、Oda(OtBu)を順次縮合した。樹脂をMeOHで洗浄後、減圧乾燥することで、Boc-Tyr(tBu)- Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Oda(OtBu))-Aib-Ile-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Mtt)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Phe(2-F)-Rink amide AM resinを109.6 mg得た。

【0218】

得られた樹脂109.6 mgにTFA:m-cresol:thioanisole:ethandithiol:H₂O:triisopropylsilane (80:5:5:5:2.5:2.5)を1 mL加え、1.5時間攪拌した。反応溶液にジエチルエーテルを加え沈殿を得、遠心分離後、上清を除く操作を3度繰り返し、沈殿を洗浄した。残渣を50%酢酸水溶液で抽出、ろ過により樹脂を除いた後、YMC-Actus Triart Prep C8 S-10μm 20 nm column (250 × 20 mm I.D.) を用いた分取HPLCで、A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルによる流量8 mL/分、A/B: 61/39-51/49への直線型濃度勾配溶出 (60分) を行い、目的物を含む分画を集め凍結乾燥し9.5 mgの白色粉末を得た。
質量分析による (M+H)⁺ 4749.1 (計算値4748.6)
HPLC溶出時間：14.9分
溶出条件：
カラムYMC Triart C8 (100 × 4.6 mm I.D.)
溶離液：A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルを用い、A/B: 80/20～30/70へ。直線型濃度勾配溶出 (25分)。
流速：1.0 mL/分

【0219】

実施例５
Me-Tyr-Aib-Glu-Gly-Thr-αMePhe-Thr-Ser-Asp-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Pal)-Aib-Ile-Aib-Leu-Asp-Lys-Gln-Arg-Gln-Iva-Glu-Phe-Val-Arg-His-Leu-Leu-Asn-Lys-Aib-Thr-Arg-Gln-Arg-Phe(2-F)-NH₂（配列番号１４）
参考例４で調製したH-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(ivDde)-Aib-Ile-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Mtt)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Phe(2-F)-Rink amide AM resin (0.111 meq/g, 89.3 mg) を反応管に量りとりNMPで膨潤した。NMPをろ過で除いた後に、樹脂に対してBoc-NMeTyr(tBu)-OH (35.1 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、得られた樹脂に2%ヒドラジンのNMP溶液を加え3時間振とうした。溶液をろ去後、2%ヒドラジンのNMP溶液を再び加えて終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。得られた樹脂に対してFmoc-Gly-OH (29.7 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、20%ピペリジンのNMP溶液を加えて1分間振とうした。溶液をろ去後、20%ピペリジンのNMP溶液を再び加えて20分間振とうした。溶液をろ去後、樹脂をNMPで10回洗浄した。得られた樹脂に対してFmoc-Gly-Gly-Gly-OH (41.1 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、20%ピペリジンのNMP溶液を加えて1分間振とうした。溶液をろ去後、20%ピペリジンのNMP溶液を再び加えて20分間振とうした。溶液をろ去後、樹脂をNMPで10回洗浄した。得られた樹脂に対してPal-OSu (35.4 mg)およびDIPEA (17.4 μL) のNMP溶液（200 μL）加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、樹脂をMeOHで洗浄し、減圧乾燥することで、Boc-NMeTyr(tBu)- Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Pal)-Aib-Ile-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Mtt)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Phe(2-F)-Rink amide AM resinを135.1 mg得た。

【0220】

得られた樹脂135.1 mgにTFA:m-cresol:thioanisole:ethandithiol:H₂O:triisopropylsilane (80:5:5:5:2.5:2.5)を1 mL加え、1.5時間攪拌した。反応溶液にジエチルエーテルを加え沈殿を得、遠心分離後、上清を除く操作を3度繰り返し、沈殿を洗浄した。残渣を50%酢酸水溶液で抽出、ろ過により樹脂を除いた後、YMC-Actus Triart Prep C8 S-10μm 20 nm column (250 × 20 mm I.D.) を用いた分取HPLCで、A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルによる流量8 mL/分、A/B: 57/43-47/53への直線型濃度勾配溶出 (60分) を行い、目的物を含む分画を集め凍結乾燥し10.8 mgの白色粉末を得た。
質量分析による (M+H)⁺ 4705.1 (計算値4704.6)
HPLC溶出時間：16.9分
溶出条件：
カラムYMC Triart C8 (100 × 4.6 mm I.D.)
溶離液：A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルを用い、A/B: 80/20～30/70へ。直線型濃度勾配溶出 (25分)。
流速：1.0 mL/分

【0221】

実施例６
Me-Tyr-Aib-Glu-Gly-Thr-αMePhe-Thr-Ser-Asp-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Oda)-Aib-Ile-Aib-Leu-Asp-Lys-Gln-Arg-Gln-Iva-Glu-Phe-Val-Arg-His-Leu-Leu-Asn-Lys-Aib-Thr-Arg-Gln-Arg-Phe(2-F)-NH₂（配列番号１５）
参考例４で調製したH-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(ivDde)-Aib-Ile-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Mtt)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Phe(2-F)-Rink amide AM resin (0.111 meq/g, 89.3 mg) を反応管に量りとりNMPで膨潤した。NMPをろ過で除いた後に、樹脂に対してBoc-NMeTyr(tBu)-OH (35.1 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、得られた樹脂に2%ヒドラジンのNMP溶液を加え3時間振とうした。溶液をろ去後、2%ヒドラジンのNMP溶液を再び加えて終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。得られた樹脂に対してFmoc-Gly-OH (29.7 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、20%ピペリジンのNMP溶液を加えて1分間振とうした。溶液をろ去後、20%ピペリジンのNMP溶液を再び加えて20分間振とうした。溶液をろ去後、樹脂をNMPで10回洗浄した。このFmocアミノ酸の縮合－Fmoc脱保護のサイクルを繰り返すことで、Gly-Gly-Gly、Oda(OtBu)を順次縮合した。樹脂をMeOHで洗浄後、減圧乾燥することで、Boc-NMeTyr(tBu)- Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Oda(OtBu))-Aib-Ile-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Mtt)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Phe(2-F)-Rink amide AM resinを121.2 mg得た。

【0222】

得られた樹脂121.2 mgにTFA:m-cresol:thioanisole:ethandithiol:H₂O:triisopropylsilane (80:5:5:5:2.5:2.5)を1 mL加え、1.5時間攪拌した。反応溶液にジエチルエーテルを加え沈殿を得、遠心分離後、上清を除く操作を3度繰り返し、沈殿を洗浄した。残渣を50%酢酸水溶液で抽出、ろ過により樹脂を除いた後、YMC-Actus Triart Prep C8 S-10μm 20 nm column (250 × 20 mm I.D.) を用いた分取HPLCで、A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルによる流量8 mL/分、A/B: 61/39-51/49への直線型濃度勾配溶出 (60分) を行い、目的物を含む分画を集め凍結乾燥し9.1 mgの白色粉末を得た。
質量分析による (M+H)⁺ 4763.3 (計算値4762.6)
HPLC溶出時間：14.9分
溶出条件：
カラムYMC Triart C8 (100 × 4.6 mm I.D.)
溶離液：A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルを用い、A/B: 80/20～30/70へ。直線型濃度勾配溶出 (25分)。
流速：1.0 mL/分

【0223】

実施例７
H-Tyr-Aib-Glu-Gly-Thr-αMePhe-Thr-Ser-Asp-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Pal)-Aib-Ile-Aib-Leu-Asp-Lys-Gln-Arg-Gln-Iva-Glu-Phe-Val-Arg-His-Leu-Leu-Asn-Lys-Aib-Thr-Arg-Gln-Arg-Tyr-NH₂（配列番号１６）
参考例６で調製したH-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(ivDde)-Aib-Ile-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Mtt)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Rink amide AM resin (0.096 meq/g, 104 mg) を反応管に量りとりNMPで膨潤した。NMPをろ過で除いた後に、樹脂に対してBoc-Tyr(tBu)-OH (33.7 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、得られた樹脂に2%ヒドラジンのNMP溶液を加え3時間振とうした。溶液をろ去後、2%ヒドラジンのNMP溶液を再び加えて終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。得られた樹脂に対してFmoc-Gly-OH (29.7 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、20%ピペリジンのNMP溶液を加えて1分間振とうした。溶液をろ去後、20%ピペリジンのNMP溶液を再び加えて20分間振とうした。溶液をろ去後、樹脂をNMPで10回洗浄した。得られた樹脂に対してFmoc-Gly-Gly-Gly-OH (41.1 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、20%ピペリジンのNMP溶液を加えて1分間振とうした。溶液をろ去後、20%ピペリジンのNMP溶液を再び加えて20分間振とうした。溶液をろ去後、樹脂をNMPで10回洗浄した。得られた樹脂に対してPal-OSu (35.4 mg)およびDIPEA (17.4 μL) のNMP溶液（200 μL）加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、樹脂をMeOHで洗浄し、減圧乾燥することで、Boc-Tyr(tBu)- Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Pal)-Aib-Ile-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Mtt)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Rink amide AM resinを109.1 mg得た。

【0224】

得られた樹脂109.1 mgにTFA:m-cresol:thioanisole:ethandithiol:H₂O:triisopropylsilane (80:5:5:5:2.5:2.5)を1 mL加え、1.5時間攪拌した。反応溶液にジエチルエーテルを加え沈殿を得、遠心分離後、上清を除く操作を3度繰り返し、沈殿を洗浄した。残渣を50%酢酸水溶液で抽出、ろ過により樹脂を除いた後、YMC-Actus Triart Prep C8 S-10μm 20 nm column (250 × 20 mm I.D.) を用いた分取HPLCで、A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルによる流量8 mL/分、A/B: 57/43-47/53への直線型濃度勾配溶出 (60分) を行い、目的物を含む分画を集め凍結乾燥し7.9 mgの白色粉末を得た。
質量分析による (M+H)⁺ 4689.4 (計算値4688.6)
HPLC溶出時間：16.6分
溶出条件：
カラムYMC Triart C8 (100 × 4.6 mm I.D.)
溶離液：A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルを用い、A/B: 80/20～30/70へ。直線型濃度勾配溶出 (25分)。
流速：1.0 mL/分

【0225】

実施例８
H-Tyr-Aib-Glu-Gly-Thr-αMePhe-Thr-Ser-Asp-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Oda)-Aib-Ile-Aib-Leu-Asp-Lys-Gln-Arg-Gln-Iva-Glu-Phe-Val-Arg-His-Leu-Leu-Asn-Lys-Aib-Thr-Arg-Gln-Arg-Tyr-NH₂（配列番号１７）
参考例６で調製したH-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(ivDde)-Aib-Ile-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Mtt)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Rink amide AM resin (0.096 meq/g, 104 mg) を反応管に量りとりNMPで膨潤した。NMPをろ過で除いた後に、樹脂に対してBoc-Tyr(tBu)-OH (33.7 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、得られた樹脂に2%ヒドラジンのNMP溶液を加え3時間振とうした。溶液をろ去後、2%ヒドラジンのNMP溶液を再び加えて終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。得られた樹脂に対してFmoc-Gly-OH (29.7 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、20%ピペリジンのNMP溶液を加えて1分間振とうした。溶液をろ去後、20%ピペリジンのNMP溶液を再び加えて20分間振とうした。溶液をろ去後、樹脂をNMPで10回洗浄した。このFmocアミノ酸の縮合－Fmoc脱保護のサイクルを繰り返すことで、Gly-Gly-Gly、Oda(OtBu)を順次縮合した。樹脂をMeOHで洗浄後、減圧乾燥することで、Boc-Tyr(tBu)- Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Oda(OtBu))-Aib-Ile-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Mtt)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Rink amide AM resinを104.1 mg得た。

【0226】

得られた樹脂104.1 mgにTFA:m-cresol:thioanisole:ethandithiol:H₂O:triisopropylsilane (80:5:5:5:2.5:2.5)を1 mL加え、1.5時間攪拌した。反応溶液にジエチルエーテルを加え沈殿を得、遠心分離後、上清を除く操作を3度繰り返し、沈殿を洗浄した。残渣を50%酢酸水溶液で抽出、ろ過により樹脂を除いた後、YMC-Actus Triart Prep C8 S-10μm 20 nm column (250 × 20 mm I.D.) を用いた分取HPLCで、A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルによる流量8 mL/分、A/B: 61/39-51/49への直線型濃度勾配溶出 (60分) を行い、目的物を含む分画を集め凍結乾燥し7.7 mgの白色粉末を得た。
質量分析による (M+H)⁺ 4747.5 (計算値4746.6)
HPLC溶出時間：14.6分
溶出条件：
カラムYMC Triart C8 (100 × 4.6 mm I.D.)
溶離液：A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルを用い、A/B: 80/20～30/70へ。直線型濃度勾配溶出 (25分)。
流速：1.0 mL/分

【0227】

実施例９
Me-Tyr-Aib-Glu-Gly-Thr-αMePhe-Thr-Ser-Asp-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Pal)-Aib-Ile-Aib-Leu-Asp-Lys-Gln-Arg-Gln-Iva-Glu-Phe-Val-Arg-His-Leu-Leu-Asn-Lys-Aib-Thr-Arg-Gln-Arg-Tyr-NH₂（配列番号１８）
参考例６で調製したH-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(ivDde)-Aib-Ile-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Mtt)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Rink amide AM resin (0.096 meq/g, 104 mg) を反応管に量りとりNMPで膨潤した。NMPをろ過で除いた後に、樹脂に対してBoc-NMeTyr(tBu)-OH (35.1 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、得られた樹脂に2%ヒドラジンのNMP溶液を加え3時間振とうした。溶液をろ去後、2%ヒドラジンのNMP溶液を再び加えて終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。得られた樹脂に対してFmoc-Gly-OH (29.7 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、20%ピペリジンのNMP溶液を加えて1分間振とうした。溶液をろ去後、20%ピペリジンのNMP溶液を再び加えて20分間振とうした。溶液をろ去後、樹脂をNMPで10回洗浄した。得られた樹脂に対してFmoc-Gly-Gly-Gly-OH (41.1 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、20%ピペリジンのNMP溶液を加えて1分間振とうした。溶液をろ去後、20%ピペリジンのNMP溶液を再び加えて20分間振とうした。溶液をろ去後、樹脂をNMPで10回洗浄した。得られた樹脂に対してPal-OSu (35.4 mg)およびDIPEA (17.4 μL) のNMP溶液（200 μL）加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、樹脂をMeOHで洗浄し、減圧乾燥することで、Boc-NMeTyr(tBu)- Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Pal)-Aib-Ile-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Mtt)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Rink amide AM resinを99.6 mg得た。

【0228】

得られた樹脂99.6 mgにTFA:m-cresol:thioanisole:ethandithiol:H₂O:triisopropylsilane (80:5:5:5:2.5:2.5)を1 mL加え、1.5時間攪拌した。反応溶液にジエチルエーテルを加え沈殿を得、遠心分離後、上清を除く操作を3度繰り返し、沈殿を洗浄した。残渣を50%酢酸水溶液で抽出、ろ過により樹脂を除いた後、YMC-Actus Triart Prep C8 S-10μm 20 nm column (250 × 20 mm I.D.) を用いた分取HPLCで、A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルによる流量8 mL/分、A/B: 57/43-47/53への直線型濃度勾配溶出 (60分) を行い、目的物を含む分画を集め凍結乾燥し8.3 mgの白色粉末を得た。
質量分析による (M+H)⁺ 4703.5 (計算値4702.6)
HPLC溶出時間：16.6分
溶出条件：
カラムYMC Triart C8 (100 × 4.6 mm I.D.)
溶離液：A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルを用い、A/B: 80/20～30/70へ。直線型濃度勾配溶出 (25分)。
流速：1.0 mL/分

【0229】

実施例１０
Me-Tyr-Aib-Glu-Gly-Thr-αMePhe-Thr-Ser-Asp-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Oda)-Aib-Ile-Aib-Leu-Asp-Lys-Gln-Arg-Gln-Iva-Glu-Phe-Val-Arg-His-Leu-Leu-Asn-Lys-Aib-Thr-Arg-Gln-Arg-Tyr-NH₂（配列番号１９）
参考例６で調製したH-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(ivDde)-Aib-Ile-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Mtt)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Rink amide AM resin (0.096 meq/g, 104 mg) を反応管に量りとりNMPで膨潤した。NMPをろ過で除いた後に、樹脂に対してBoc-NMeTyr(tBu)-OH (35.1 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、得られた樹脂に2%ヒドラジンのNMP溶液を加え3時間振とうした。溶液をろ去後、2%ヒドラジンのNMP溶液を再び加えて終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。得られた樹脂に対してFmoc-Gly-OH (29.7 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、20%ピペリジンのNMP溶液を加えて1分間振とうした。溶液をろ去後、20%ピペリジンのNMP溶液を再び加えて20分間振とうした。溶液をろ去後、樹脂をNMPで10回洗浄した。このFmocアミノ酸の縮合－Fmoc脱保護のサイクルを繰り返すことで、Gly-Gly-Gly、Oda(OtBu)を順次縮合した。樹脂をMeOHで洗浄後、減圧乾燥することで、Boc-NMeTyr(tBu)- Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Oda(OtBu))-Aib-Ile-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Mtt)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Rink amide AM resinを110.6 mg得た。

【0230】

得られた樹脂110.6 mgにTFA:m-cresol:thioanisole:ethandithiol:H₂O:triisopropylsilane (80:5:5:5:2.5:2.5)を1 mL加え、1.5時間攪拌した。反応溶液にジエチルエーテルを加え沈殿を得、遠心分離後、上清を除く操作を3度繰り返し、沈殿を洗浄した。残渣を50%酢酸水溶液で抽出、ろ過により樹脂を除いた後、YMC-Actus Triart Prep C8 S-10μm 20 nm column (250 × 20 mm I.D.) を用いた分取HPLCで、A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルによる流量8 mL/分、A/B: 61/39-51/49への直線型濃度勾配溶出 (60分) を行い、目的物を含む分画を集め凍結乾燥し7.9 mgの白色粉末を得た。
質量分析による (M+H)⁺ 4761.5 (計算値4760.6)
HPLC溶出時間：14.6分
溶出条件：
カラムYMC Triart C8 (100 × 4.6 mm I.D.)
溶離液：A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルを用い、A/B: 80/20～30/70へ。直線型濃度勾配溶出 (25分)。
流速：1.0 mL/分

【0231】

実施例１１
H-Tyr-Aib-Glu-Gly-Thr-αMePhe-Thr-Ser-Asp-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Pal)-Ala-Ile-Aib-Leu-Asp-Lys-Gln-Arg-Gln-Iva-Glu-Phe-Val-Arg-His-Leu-Leu-Asn-Lys-Aib-Thr-Arg-Gln-Arg-Tyr-NH₂（配列番号２０）
参考例６と同様の手法で調製したH-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(ivDde)-Ala-Ile-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Mtt)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Rink amide AM resin (0.089 meq/g, 112 mg) を反応管に量りとりNMPで膨潤した。NMPをろ過で除いた後に、樹脂に対してBoc-Tyr(tBu)-OH (33.7 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、得られた樹脂に2%ヒドラジンのNMP溶液を加え3時間振とうした。溶液をろ去後、2%ヒドラジンのNMP溶液を再び加えて終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。得られた樹脂に対してFmoc-Gly-OH (29.7 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、20%ピペリジンのNMP溶液を加えて1分間振とうした。溶液をろ去後、20%ピペリジンのNMP溶液を再び加えて20分間振とうした。溶液をろ去後、樹脂をNMPで10回洗浄した。得られた樹脂に対してFmoc-Gly-Gly-Gly-OH (41.1 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、20%ピペリジンのNMP溶液を加えて1分間振とうした。溶液をろ去後、20%ピペリジンのNMP溶液を再び加えて20分間振とうした。溶液をろ去後、樹脂をNMPで10回洗浄した。得られた樹脂に対してPal-OSu (35.4 mg)およびDIPEA (17.4 μL) のNMP溶液（200 μL）加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、樹脂をMeOHで洗浄し、減圧乾燥することで、Boc-Tyr(tBu)- Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Pal)-Ala-Ile-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Mtt)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Rink amide AM resinを103.9 mg得た。

【0232】

得られた樹脂103.9 mgにTFA:m-cresol:thioanisole:ethandithiol:H₂O:triisopropylsilane (80:5:5:5:2.5:2.5)を1 mL加え、1.5時間攪拌した。反応溶液にジエチルエーテルを加え沈殿を得、遠心分離後、上清を除く操作を3度繰り返し、沈殿を洗浄した。残渣を50%酢酸水溶液で抽出、ろ過により樹脂を除いた後、YMC-Actus Triart Prep C8 S-10μm 20 nm column (250 × 20 mm I.D.) を用いた分取HPLCで、A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルによる流量8 mL/分、A/B: 56/44-46/54への直線型濃度勾配溶出 (60分) を行い、目的物を含む分画を集め凍結乾燥し8.8 mgの白色粉末を得た。
質量分析による (M+H)⁺ 4675.5 (計算値4674.6)
HPLC溶出時間：16.6分
溶出条件：
カラムYMC Triart C8 (100 × 4.6 mm I.D.)
溶離液：A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルを用い、A/B: 80/20～30/70へ。直線型濃度勾配溶出 (25分)。
流速：1.0 mL/分

【0233】

実施例１２
H-Tyr-Aib-Glu-Gly-Thr-αMePhe-Thr-Ser-Asp-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Oda)-Ala-Ile-Aib-Leu-Asp-Lys-Gln-Arg-Gln-Iva-Glu-Phe-Val-Arg-His-Leu-Leu-Asn-Lys-Aib-Thr-Arg-Gln-Arg-Tyr-NH₂（配列番号２１）
参考例６と同様の手法で調製したH-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(ivDde)-Ala-Ile-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Mtt)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Rink amide AM resin (0.089 meq/g, 112 mg) を反応管に量りとりNMPで膨潤した。NMPをろ過で除いた後に、樹脂に対してBoc-Tyr(tBu)-OH (33.7 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、得られた樹脂に2%ヒドラジンのNMP溶液を加え3時間振とうした。溶液をろ去後、2%ヒドラジンのNMP溶液を再び加えて終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。得られた樹脂に対してFmoc-Gly-OH (29.7 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、20%ピペリジンのNMP溶液を加えて1分間振とうした。溶液をろ去後、20%ピペリジンのNMP溶液を再び加えて20分間振とうした。溶液をろ去後、樹脂をNMPで10回洗浄した。このFmocアミノ酸の縮合－Fmoc脱保護のサイクルを繰り返すことで、Gly-Gly-Gly、Oda(OtBu)を順次縮合した。樹脂をMeOHで洗浄後、減圧乾燥することで、Boc-Tyr(tBu)- Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Oda(OtBu))-Ala-Ile-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Mtt)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Rink amide AM resinを103.2 mg得た。

【0234】

得られた樹脂103.2 mgにTFA:m-cresol:thioanisole:ethandithiol:H₂O:triisopropylsilane (80:5:5:5:2.5:2.5)を1 mL加え、1.5時間攪拌した。反応溶液にジエチルエーテルを加え沈殿を得、遠心分離後、上清を除く操作を3度繰り返し、沈殿を洗浄した。残渣を50%酢酸水溶液で抽出、ろ過により樹脂を除いた後、YMC-Actus Triart Prep C8 S-10μm 20 nm column (250 × 20 mm I.D.) を用いた分取HPLCで、A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルによる流量8 mL/分、A/B: 60/40-50/50への直線型濃度勾配溶出 (60分) を行い、目的物を含む分画を集め凍結乾燥し8.5 mgの白色粉末を得た。
質量分析による (M+H)⁺ 4732.1 (計算値4732.6)
HPLC溶出時間：14.5分
溶出条件：
カラムYMC Triart C8 (100 × 4.6 mm I.D.)
溶離液：A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルを用い、A/B: 80/20～30/70へ。直線型濃度勾配溶出 (25分)。
流速：1.0 mL/分

【0235】

実施例１３
Me-Tyr-Aib-Glu-Gly-Thr-αMePhe-Thr-Ser-Asp-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Pal)-Ala-Ile-Aib-Leu-Asp-Lys-Gln-Arg-Gln-Iva-Glu-Phe-Val-Arg-His-Leu-Leu-Asn-Lys-Aib-Thr-Arg-Gln-Arg-Tyr-NH₂（配列番号２２）
参考例６と同様の手法で調製したH-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(ivDde)-Ala-Ile-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Mtt)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Rink amide AM resin (0.089 meq/g, 112 mg) を反応管に量りとりNMPで膨潤した。NMPをろ過で除いた後に、樹脂に対してBoc-NMeTyr(tBu)-OH (35.1 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、得られた樹脂に2%ヒドラジンのNMP溶液を加え3時間振とうした。溶液をろ去後、2%ヒドラジンのNMP溶液を再び加えて終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。得られた樹脂に対してFmoc-Gly-OH (29.7 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、20%ピペリジンのNMP溶液を加えて1分間振とうした。溶液をろ去後、20%ピペリジンのNMP溶液を再び加えて20分間振とうした。溶液をろ去後、樹脂をNMPで10回洗浄した。得られた樹脂に対してFmoc-Gly-Gly-Gly-OH (41.1 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、20%ピペリジンのNMP溶液を加えて1分間振とうした。溶液をろ去後、20%ピペリジンのNMP溶液を再び加えて20分間振とうした。溶液をろ去後、樹脂をNMPで10回洗浄した。得られた樹脂に対してPal-OSu (35.4 mg)およびDIPEA (17.4 μL) のNMP溶液（200 μL）加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、樹脂をMeOHで洗浄し、減圧乾燥することで、Boc-NMeTyr(tBu)- Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Pal)-Ala-Ile-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Mtt)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Rink amide AM resinを99.9 mg得た。

【0236】

得られた樹脂99.9 mgにTFA:m-cresol:thioanisole:ethandithiol:H₂O:triisopropylsilane (80:5:5:5:2.5:2.5)を1 mL加え、1.5時間攪拌した。反応溶液にジエチルエーテルを加え沈殿を得、遠心分離後、上清を除く操作を3度繰り返し、沈殿を洗浄した。残渣を50%酢酸水溶液で抽出、ろ過により樹脂を除いた後、YMC-Actus Triart Prep C8 S-10μm 20 nm column (250 × 20 mm I.D.) を用いた分取HPLCで、A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルによる流量8 mL/分、A/B: 56/44-46/54への直線型濃度勾配溶出 (60分) を行い、目的物を含む分画を集め凍結乾燥し8.8 mgの白色粉末を得た。
質量分析による (M+H)⁺ 4688.4 (計算値4688.6)
HPLC溶出時間：16.6分
溶出条件：
カラムYMC Triart C8 (100 × 4.6 mm I.D.)
溶離液：A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルを用い、A/B: 80/20～30/70へ。直線型濃度勾配溶出 (25分)。
流速：1.0 mL/分

【0237】

実施例１４
Me-Tyr-Aib-Glu-Gly-Thr-αMePhe-Thr-Ser-Asp-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Oda)-Ala-Ile-Aib-Leu-Asp-Lys-Gln-Arg-Gln-Iva-Glu-Phe-Val-Arg-His-Leu-Leu-Asn-Lys-Aib-Thr-Arg-Gln-Arg-Tyr-NH₂（配列番号２３）
参考例６と同様の手法で調製したH-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(ivDde)-Ala-Ile-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Mtt)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Rink amide AM resin (0.089 meq/g, 112 mg) を反応管に量りとりNMPで膨潤した。NMPをろ過で除いた後に、樹脂に対してBoc-NMeTyr(tBu)-OH (35.1 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、得られた樹脂に2%ヒドラジンのNMP溶液を加え3時間振とうした。溶液をろ去後、2%ヒドラジンのNMP溶液を再び加えて終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。得られた樹脂に対してFmoc-Gly-OH (29.7 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、20%ピペリジンのNMP溶液を加えて1分間振とうした。溶液をろ去後、20%ピペリジンのNMP溶液を再び加えて20分間振とうした。溶液をろ去後、樹脂をNMPで10回洗浄した。このFmocアミノ酸の縮合－Fmoc脱保護のサイクルを繰り返すことで、Gly-Gly-Gly、Oda(OtBu)を順次縮合した。樹脂をMeOHで洗浄後、減圧乾燥することで、Boc-NMeTyr(tBu)- Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Oda(OtBu))-Ala-Ile-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Mtt)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Rink amide AM resinを111.4 mg得た。

【0238】

得られた樹脂111.4 mgにTFA:m-cresol:thioanisole:ethandithiol:H₂O:triisopropylsilane (80:5:5:5:2.5:2.5)を1 mL加え、1.5時間攪拌した。反応溶液にジエチルエーテルを加え沈殿を得、遠心分離後、上清を除く操作を3度繰り返し、沈殿を洗浄した。残渣を50%酢酸水溶液で抽出、ろ過により樹脂を除いた後、YMC-Actus Triart Prep C8 S-10μm 20 nm column (250 × 20 mm I.D.) を用いた分取HPLCで、A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルによる流量8 mL/分、A/B: 60/40-50/50への直線型濃度勾配溶出 (60分) を行い、目的物を含む分画を集め凍結乾燥し7.0 mgの白色粉末を得た。
質量分析による (M+H)⁺ 4746.2 (計算値4746.6)
HPLC溶出時間：14.5分
溶出条件：
カラムYMC Triart C8 (100 × 4.6 mm I.D.)
溶離液：A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルを用い、A/B: 80/20～30/70へ。直線型濃度勾配溶出 (25分)。
流速：1.0 mL/分

【0239】

実施例１５
H-Tyr-Aib-Glu-Gly-Thr-αMePhe-Thr-Ser-Asp-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Pal)-Ser-Ile-Aib-Leu-Asp-Lys-Gln-Arg-Gln-Iva-Glu-Phe-Val-Arg-His-Leu-Leu-Asn-Lys-Aib-Thr-Arg-Gln-Arg-Tyr-NH₂（配列番号２４）
参考例６と同様の手法で調製したH-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(ivDde)-Ser(tBu)-Ile-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Mtt)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Rink amide AM resin (0.088 meq/g, 113 mg) を反応管に量りとりNMPで膨潤した。NMPをろ過で除いた後に、樹脂に対してBoc-Tyr(tBu)-OH (33.7 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、得られた樹脂に2%ヒドラジンのNMP溶液を加え3時間振とうした。溶液をろ去後、2%ヒドラジンのNMP溶液を再び加えて終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。得られた樹脂に対してFmoc-Gly-OH (29.7 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、20%ピペリジンのNMP溶液を加えて1分間振とうした。溶液をろ去後、20%ピペリジンのNMP溶液を再び加えて20分間振とうした。溶液をろ去後、樹脂をNMPで10回洗浄した。得られた樹脂に対してFmoc-Gly-Gly-Gly-OH (41.1 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、20%ピペリジンのNMP溶液を加えて1分間振とうした。溶液をろ去後、20%ピペリジンのNMP溶液を再び加えて20分間振とうした。溶液をろ去後、樹脂をNMPで10回洗浄した。得られた樹脂に対してPal-OSu (35.4 mg)およびDIPEA (17.4 μL) のNMP溶液（200 μL）加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、樹脂をMeOHで洗浄し、減圧乾燥することで、Boc-Tyr(tBu)- Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Pal)-Ser(tBu)-Ile-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Mtt)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Rink amide AM resinを100.5 mg得た。

【0240】

得られた樹脂100.5 mgにTFA:m-cresol:thioanisole:ethandithiol:H₂O:triisopropylsilane (80:5:5:5:2.5:2.5)を1 mL加え、1.5時間攪拌した。反応溶液にジエチルエーテルを加え沈殿を得、遠心分離後、上清を除く操作を3度繰り返し、沈殿を洗浄した。残渣を50%酢酸水溶液で抽出、ろ過により樹脂を除いた後、YMC-Actus Triart Prep C8 S-10μm 20 nm column (250 × 20 mm I.D.) を用いた分取HPLCで、A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルによる流量8 mL/分、A/B: 56/44-46/54への直線型濃度勾配溶出 (60分) を行い、目的物を含む分画を集め凍結乾燥し7.8 mgの白色粉末を得た。
質量分析による (M+H)⁺ 4690.3 (計算値4690.6)
HPLC溶出時間：16.6分
溶出条件：
カラムYMC Triart C8 (100 × 4.6 mm I.D.)
溶離液：A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルを用い、A/B: 80/20～30/70へ。直線型濃度勾配溶出 (25分)。
流速：1.0 mL/分

【0241】

実施例１６
H-Tyr-Aib-Glu-Gly-Thr-αMePhe-Thr-Ser-Asp-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Oda)-Ser-Ile-Aib-Leu-Asp-Lys-Gln-Arg-Gln-Iva-Glu-Phe-Val-Arg-His-Leu-Leu-Asn-Lys-Aib-Thr-Arg-Gln-Arg-Tyr-NH₂（配列番号２５）
参考例６と同様の手法で調製したH-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(ivDde)-Ser(tBu)-Ile-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Mtt)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Rink amide AM resin (0.088 meq/g, 113 mg) を反応管に量りとりNMPで膨潤した。NMPをろ過で除いた後に、樹脂に対してBoc-Tyr(tBu)-OH (33.7 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、得られた樹脂に2%ヒドラジンのNMP溶液を加え3時間振とうした。溶液をろ去後、2%ヒドラジンのNMP溶液を再び加えて終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。得られた樹脂に対してFmoc-Gly-OH (29.7 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、20%ピペリジンのNMP溶液を加えて1分間振とうした。溶液をろ去後、20%ピペリジンのNMP溶液を再び加えて20分間振とうした。溶液をろ去後、樹脂をNMPで10回洗浄した。このFmocアミノ酸の縮合－Fmoc脱保護のサイクルを繰り返すことで、Gly-Gly-Gly、Oda(OtBu)を順次縮合した。樹脂をMeOHで洗浄後、減圧乾燥することで、Boc-Tyr(tBu)- Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Oda(OtBu))-Ser(tBu)-Ile-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Mtt)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Rink amide AM resinを96.8 mg得た。

【0242】

得られた樹脂96.8 mgにTFA:m-cresol:thioanisole:ethandithiol:H₂O:triisopropylsilane (80:5:5:5:2.5:2.5)を1 mL加え、1.5時間攪拌した。反応溶液にジエチルエーテルを加え沈殿を得、遠心分離後、上清を除く操作を3度繰り返し、沈殿を洗浄した。残渣を50%酢酸水溶液で抽出、ろ過により樹脂を除いた後、YMC-Actus Triart Prep C8 S-10μm 20 nm column (250 × 20 mm I.D.) を用いた分取HPLCで、A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルによる流量8 mL/分、A/B: 60/40-50/50への直線型濃度勾配溶出 (60分) を行い、目的物を含む分画を集め凍結乾燥し7.5 mgの白色粉末を得た。
質量分析による (M+H)⁺ 4748.5 (計算値4748.6)
HPLC溶出時間：14.5分
溶出条件：
カラムYMC Triart C8 (100 × 4.6 mm I.D.)
溶離液：A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルを用い、A/B: 80/20～30/70へ。直線型濃度勾配溶出 (25分)。
流速：1.0 mL/分

【0243】

実施例１７
Me-Tyr-Aib-Glu-Gly-Thr-αMePhe-Thr-Ser-Asp-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Pal)-Ser-Ile-Aib-Leu-Asp-Lys-Gln-Arg-Gln-Iva-Glu-Phe-Val-Arg-His-Leu-Leu-Asn-Lys-Aib-Thr-Arg-Gln-Arg-Tyr-NH₂（配列番号２６）
参考例６と同様の手法で調製したH-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(ivDde)-Ser(tBu)-Ile-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Mtt)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Rink amide AM resin (0.088 meq/g, 113 mg) を反応管に量りとりNMPで膨潤した。NMPをろ過で除いた後に、樹脂に対してBoc-NMeTyr(tBu)-OH (35.1 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、得られた樹脂に2%ヒドラジンのNMP溶液を加え3時間振とうした。溶液をろ去後、2%ヒドラジンのNMP溶液を再び加えて終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。得られた樹脂に対してFmoc-Gly-OH (29.7 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、20%ピペリジンのNMP溶液を加えて1分間振とうした。溶液をろ去後、20%ピペリジンのNMP溶液を再び加えて20分間振とうした。溶液をろ去後、樹脂をNMPで10回洗浄した。得られた樹脂に対してFmoc-Gly-Gly-Gly-OH (41.1 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、20%ピペリジンのNMP溶液を加えて1分間振とうした。溶液をろ去後、20%ピペリジンのNMP溶液を再び加えて20分間振とうした。溶液をろ去後、樹脂をNMPで10回洗浄した。得られた樹脂に対してPal-OSu (35.4 mg)およびDIPEA (17.4 μL) のNMP溶液（200 μL）加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、樹脂をMeOHで洗浄し、減圧乾燥することで、Boc-NMeTyr(tBu)- Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Pal)-Ser(tBu)-Ile-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Mtt)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Rink amide AM resinを96.4 mg得た。

【0244】

得られた樹脂96.4 mgにTFA:m-cresol:thioanisole:ethandithiol:H₂O:triisopropylsilane (80:5:5:5:2.5:2.5)を1 mL加え、1.5時間攪拌した。反応溶液にジエチルエーテルを加え沈殿を得、遠心分離後、上清を除く操作を3度繰り返し、沈殿を洗浄した。残渣を50%酢酸水溶液で抽出、ろ過により樹脂を除いた後、YMC-Actus Triart Prep C8 S-10μm 20 nm column (250 × 20 mm I.D.) を用いた分取HPLCで、A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルによる流量8 mL/分、A/B: 56/44-46/54への直線型濃度勾配溶出 (60分) を行い、目的物を含む分画を集め凍結乾燥し7.9 mgの白色粉末を得た。
質量分析による (M+H)⁺ 4704.3 (計算値4704.6)
HPLC溶出時間：16.6分
溶出条件：
カラムYMC Triart C8 (100 × 4.6 mm I.D.)
溶離液：A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルを用い、A/B: 80/20～30/70へ。直線型濃度勾配溶出 (25分)。
流速：1.0 mL/分

【0245】

実施例１８
Me-Tyr-Aib-Glu-Gly-Thr-αMePhe-Thr-Ser-Asp-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Oda)-Ser-Ile-Aib-Leu-Asp-Lys-Gln-Arg-Gln-Iva-Glu-Phe-Val-Arg-His-Leu-Leu-Asn-Lys-Aib-Thr-Arg-Gln-Arg-Tyr-NH₂（配列番号２７）
参考例６と同様の手法で調製したH-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(ivDde)-Ser(tBu)-Ile-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Mtt)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Rink amide AM resin (0.088 meq/g, 113 mg) を反応管に量りとりNMPで膨潤した。NMPをろ過で除いた後に、樹脂に対してBoc-NMeTyr(tBu)-OH (35.1 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、得られた樹脂に2%ヒドラジンのNMP溶液を加え3時間振とうした。溶液をろ去後、2%ヒドラジンのNMP溶液を再び加えて終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。得られた樹脂に対してFmoc-Gly-OH (29.7 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、20%ピペリジンのNMP溶液を加えて1分間振とうした。溶液をろ去後、20%ピペリジンのNMP溶液を再び加えて20分間振とうした。溶液をろ去後、樹脂をNMPで10回洗浄した。このFmocアミノ酸の縮合－Fmoc脱保護のサイクルを繰り返すことで、Gly-Gly-Gly、Oda(OtBu)を順次縮合した。樹脂をMeOHで洗浄後、減圧乾燥することで、Boc-NMeTyr(tBu)- Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Oda(OtBu))-Ser(tBu)-Ile-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Mtt)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Rink amide AM resinを115.1 mg得た。

【0246】

得られた樹脂115.1 mgにTFA:m-cresol:thioanisole:ethandithiol:H₂O:triisopropylsilane (80:5:5:5:2.5:2.5)を1 mL加え、1.5時間攪拌した。反応溶液にジエチルエーテルを加え沈殿を得、遠心分離後、上清を除く操作を3度繰り返し、沈殿を洗浄した。残渣を50%酢酸水溶液で抽出、ろ過により樹脂を除いた後、YMC-Actus Triart Prep C8 S-10μm 20 nm column (250 × 20 mm I.D.) を用いた分取HPLCで、A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルによる流量8 mL/分、A/B: 60/40-50/50への直線型濃度勾配溶出 (60分) を行い、目的物を含む分画を集め凍結乾燥し7.0 mgの白色粉末を得た。
質量分析による (M+H)⁺ 4762.7 (計算値4762.6)
HPLC溶出時間：14.5分
溶出条件：
カラムYMC Triart C8 (100 × 4.6 mm I.D.)
溶離液：A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルを用い、A/B: 80/20～30/70へ。直線型濃度勾配溶出 (25分)。
流速：1.0 mL/分

【0247】

実施例１９
H-Tyr-Aib-Glu-Gly-Thr-αMePhe-Thr-Ser-Asp-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Pal)-Aib-Lys-Aib-Leu-Asp-Lys-Gln-Arg-Gln-Iva-Glu-Phe-Val-Arg-His-Leu-Leu-Asn-Lys-Aib-Thr-Arg-Gln-Arg-Tyr-NH₂（配列番号２８）
参考例６と同様の手法で調製したH-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(ivDde)-Aib-Lys(Boc)-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Mtt)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Rink amide AM resin (0.093 meq/g, 108 mg) を反応管に量りとりNMPで膨潤した。NMPをろ過で除いた後に、樹脂に対してBoc-Tyr(tBu)-OH (33.7 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、得られた樹脂に2%ヒドラジンのNMP溶液を加え3時間振とうした。溶液をろ去後、2%ヒドラジンのNMP溶液を再び加えて終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。得られた樹脂に対してFmoc-Gly-OH (29.7 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、20%ピペリジンのNMP溶液を加えて1分間振とうした。溶液をろ去後、20%ピペリジンのNMP溶液を再び加えて20分間振とうした。溶液をろ去後、樹脂をNMPで10回洗浄した。得られた樹脂に対してFmoc-Gly-Gly-Gly-OH (41.1 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、20%ピペリジンのNMP溶液を加えて1分間振とうした。溶液をろ去後、20%ピペリジンのNMP溶液を再び加えて20分間振とうした。溶液をろ去後、樹脂をNMPで10回洗浄した。得られた樹脂に対してPal-OSu (35.4 mg)およびDIPEA (17.4 μL) のNMP溶液（200 μL）加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、樹脂をMeOHで洗浄し、減圧乾燥することで、Boc-Tyr(tBu)- Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Pal)-Aib-Lys(Boc)-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Mtt)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Rink amide AM resinを105.4 mg得た。

【0248】

得られた樹脂105.4 mgにTFA:m-cresol:thioanisole:ethandithiol:H₂O:triisopropylsilane (80:5:5:5:2.5:2.5)を1 mL加え、1.5時間攪拌した。反応溶液にジエチルエーテルを加え沈殿を得、遠心分離後、上清を除く操作を3度繰り返し、沈殿を洗浄した。残渣を50%酢酸水溶液で抽出、ろ過により樹脂を除いた後、YMC-Actus Triart Prep C8 S-10μm 20 nm column (250 × 20 mm I.D.) を用いた分取HPLCで、A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルによる流量8 mL/分、A/B: 57/43-47/53への直線型濃度勾配溶出 (60分) を行い、目的物を含む分画を集め凍結乾燥し10.0 mgの白色粉末を得た。
質量分析による (M+H)⁺ 4703.5 (計算値4703.6)
HPLC溶出時間：16.0分
溶出条件：
カラムYMC Triart C8 (100 × 4.6 mm I.D.)
溶離液：A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルを用い、A/B: 80/20～30/70へ。直線型濃度勾配溶出 (25分)。
流速：1.0 mL/分

【0249】

実施例２０
H-Tyr-Aib-Glu-Gly-Thr-αMePhe-Thr-Ser-Asp-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Oda)-Aib-Lys-Aib-Leu-Asp-Lys-Gln-Arg-Gln-Iva-Glu-Phe-Val-Arg-His-Leu-Leu-Asn-Lys-Aib-Thr-Arg-Gln-Arg-Tyr-NH₂（配列番号２９）
参考例６と同様の手法で調製したH-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(ivDde)-Aib-Lys(Boc)-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Mtt)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Rink amide AM resin (0.093 meq/g, 108 mg) を反応管に量りとりNMPで膨潤した。NMPをろ過で除いた後に、樹脂に対してBoc-Tyr(tBu)-OH (33.7 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、得られた樹脂に2%ヒドラジンのNMP溶液を加え3時間振とうした。溶液をろ去後、2%ヒドラジンのNMP溶液を再び加えて終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。得られた樹脂に対してFmoc-Gly-OH (29.7 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、20%ピペリジンのNMP溶液を加えて1分間振とうした。溶液をろ去後、20%ピペリジンのNMP溶液を再び加えて20分間振とうした。溶液をろ去後、樹脂をNMPで10回洗浄した。このFmocアミノ酸の縮合－Fmoc脱保護のサイクルを繰り返すことで、Gly-Gly-Gly、Oda(OtBu)を順次縮合した。樹脂をMeOHで洗浄後、減圧乾燥することで、Boc-Tyr(tBu)- Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Oda(OtBu))-Aib-Lys(Boc)-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Mtt)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Rink amide AM resinを101.6 mg得た。

【0250】

得られた樹脂101.6 mgにTFA:m-cresol:thioanisole:ethandithiol:H₂O:triisopropylsilane (80:5:5:5:2.5:2.5)を1 mL加え、1.5時間攪拌した。反応溶液にジエチルエーテルを加え沈殿を得、遠心分離後、上清を除く操作を3度繰り返し、沈殿を洗浄した。残渣を50%酢酸水溶液で抽出、ろ過により樹脂を除いた後、YMC-Actus Triart Prep C8 S-10μm 20 nm column (250 × 20 mm I.D.) を用いた分取HPLCで、A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルによる流量8 mL/分、A/B: 61/39-51/49への直線型濃度勾配溶出 (60分) を行い、目的物を含む分画を集め凍結乾燥し8.9 mgの白色粉末を得た。
質量分析による (M+H)⁺ 4761.3 (計算値4761.6)
HPLC溶出時間：13.9分
溶出条件：
カラムYMC Triart C8 (100 × 4.6 mm I.D.)
溶離液：A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルを用い、A/B: 80/20～30/70へ。直線型濃度勾配溶出 (25分)。
流速：1.0 mL/分

【0251】

実施例２１
Me-Tyr-Aib-Glu-Gly-Thr-αMePhe-Thr-Ser-Asp-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Pal)-Aib-Lys-Aib-Leu-Asp-Lys-Gln-Arg-Gln-Iva-Glu-Phe-Val-Arg-His-Leu-Leu-Asn-Lys-Aib-Thr-Arg-Gln-Arg-Tyr-NH₂（配列番号３０）
参考例６と同様の手法で調製したH-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(ivDde)-Aib-Lys(Boc)-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Mtt)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Rink amide AM resin (0.093 meq/g, 108 mg) を反応管に量りとりNMPで膨潤した。NMPをろ過で除いた後に、樹脂に対してBoc-NMeTyr(tBu)-OH (35.1 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、得られた樹脂に2%ヒドラジンのNMP溶液を加え3時間振とうした。溶液をろ去後、2%ヒドラジンのNMP溶液を再び加えて終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。得られた樹脂に対してFmoc-Gly-OH (29.7 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、20%ピペリジンのNMP溶液を加えて1分間振とうした。溶液をろ去後、20%ピペリジンのNMP溶液を再び加えて20分間振とうした。溶液をろ去後、樹脂をNMPで10回洗浄した。得られた樹脂に対してFmoc-Gly-Gly-Gly-OH (41.1 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、20%ピペリジンのNMP溶液を加えて1分間振とうした。溶液をろ去後、20%ピペリジンのNMP溶液を再び加えて20分間振とうした。溶液をろ去後、樹脂をNMPで10回洗浄した。得られた樹脂に対してPal-OSu (35.4 mg)およびDIPEA (17.4 μL) のNMP溶液（200 μL）加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、樹脂をMeOHで洗浄し、減圧乾燥することで、Boc-NMeTyr(tBu)- Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Pal)-Aib-Lys(Boc)-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Mtt)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Rink amide AM resinを106 mg得た。

【0252】

得られた樹脂106 mgにTFA:m-cresol:thioanisole:ethandithiol:H₂O:triisopropylsilane (80:5:5:5:2.5:2.5)を1 mL加え、1.5時間攪拌した。反応溶液にジエチルエーテルを加え沈殿を得、遠心分離後、上清を除く操作を3度繰り返し、沈殿を洗浄した。残渣を50%酢酸水溶液で抽出、ろ過により樹脂を除いた後、YMC-Actus Triart Prep C8 S-10μm 20 nm column (250 × 20 mm I.D.) を用いた分取HPLCで、A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルによる流量8 mL/分、A/B: 57/43-47/53への直線型濃度勾配溶出 (60分) を行い、目的物を含む分画を集め凍結乾燥し9.9 mgの白色粉末を得た。
質量分析による (M+H)⁺ 4717.2 (計算値4717.6)
HPLC溶出時間：16.0分
溶出条件：
カラムYMC Triart C8 (100 × 4.6 mm I.D.)
溶離液：A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルを用い、A/B: 80/20～30/70へ。直線型濃度勾配溶出 (25分)。
流速：1.0 mL/分

【0253】

実施例２２
Me-Tyr-Aib-Glu-Gly-Thr-αMePhe-Thr-Ser-Asp-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Oda)-Aib-Lys-Aib-Leu-Asp-Lys-Gln-Arg-Gln-Iva-Glu-Phe-Val-Arg-His-Leu-Leu-Asn-Lys-Aib-Thr-Arg-Gln-Arg-Tyr-NH₂（配列番号３１）
参考例６と同様の手法で調製したH-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(ivDde)-Aib-Lys(Boc)-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Mtt)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Rink amide AM resin (0.093 meq/g, 108 mg) を反応管に量りとりNMPで膨潤した。NMPをろ過で除いた後に、樹脂に対してBoc-NMeTyr(tBu)-OH (35.1 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、得られた樹脂に2%ヒドラジンのNMP溶液を加え3時間振とうした。溶液をろ去後、2%ヒドラジンのNMP溶液を再び加えて終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。得られた樹脂に対してFmoc-Gly-OH (29.7 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、20%ピペリジンのNMP溶液を加えて1分間振とうした。溶液をろ去後、20%ピペリジンのNMP溶液を再び加えて20分間振とうした。溶液をろ去後、樹脂をNMPで10回洗浄した。このFmocアミノ酸の縮合－Fmoc脱保護のサイクルを繰り返すことで、Gly-Gly-Gly、Oda(OtBu)を順次縮合した。樹脂をMeOHで洗浄後、減圧乾燥することで、Boc-NMeTyr(tBu)- Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Oda(OtBu))-Aib-Lys(Boc)-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Mtt)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Rink amide AM resinを98.4 mg得た。

【0254】

得られた樹脂98.4 mgにTFA:m-cresol:thioanisole:ethandithiol:H₂O:triisopropylsilane (80:5:5:5:2.5:2.5)を1 mL加え、1.5時間攪拌した。反応溶液にジエチルエーテルを加え沈殿を得、遠心分離後、上清を除く操作を3度繰り返し、沈殿を洗浄した。残渣を50%酢酸水溶液で抽出、ろ過により樹脂を除いた後、YMC-Actus Triart Prep C8 S-10μm 20 nm column (250 × 20 mm I.D.) を用いた分取HPLCで、A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルによる流量8 mL/分、A/B: 61/39-51/49への直線型濃度勾配溶出 (60分) を行い、目的物を含む分画を集め凍結乾燥し8.8 mgの白色粉末を得た。
質量分析による (M+H)⁺ 4775.5 (計算値4775.6)
HPLC溶出時間：13.9分
溶出条件：
カラムYMC Triart C8 (100 × 4.6 mm I.D.)
溶離液：A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルを用い、A/B: 80/20～30/70へ。直線型濃度勾配溶出 (25分)。
流速：1.0 mL/分

【0255】

実施例２３
H-Tyr-Aib-Glu-Gly-Thr-αMePhe-Thr-Ser-Asp-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Pal)-Ser-Lys-Aib-Leu-Asp-Lys-Gln-Arg-Gln-Iva-Glu-Phe-Val-Arg-His-Leu-Leu-Asn-Lys-Aib-Thr-Arg-Gln-Arg-Tyr-NH₂（配列番号３２）
参考例６と同様の手法で調製したH-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(ivDde)-Ser(tBu)-Lys(Boc)-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Mtt)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Rink amide AM resin (0.084 meq/g, 119 mg) を反応管に量りとりNMPで膨潤した。NMPをろ過で除いた後に、樹脂に対してBoc-Tyr(tBu)-OH (33.7 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、得られた樹脂に2%ヒドラジンのNMP溶液を加え3時間振とうした。溶液をろ去後、2%ヒドラジンのNMP溶液を再び加えて終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。得られた樹脂に対してFmoc-Gly-OH (29.7 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、20%ピペリジンのNMP溶液を加えて1分間振とうした。溶液をろ去後、20%ピペリジンのNMP溶液を再び加えて20分間振とうした。溶液をろ去後、樹脂をNMPで10回洗浄した。得られた樹脂に対してFmoc-Gly-Gly-Gly-OH (41.1 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、20%ピペリジンのNMP溶液を加えて1分間振とうした。溶液をろ去後、20%ピペリジンのNMP溶液を再び加えて20分間振とうした。溶液をろ去後、樹脂をNMPで10回洗浄した。得られた樹脂に対してPal-OSu (35.4 mg)およびDIPEA (17.4 μL) のNMP溶液（200 μL）加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、樹脂をMeOHで洗浄し、減圧乾燥することで、Boc-Tyr(tBu)- Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Pal)-Ser(tBu)-Lys(Boc)-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Mtt)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Rink amide AM resinを111.3 mg得た。

【0256】

得られた樹脂111.3 mgにTFA:m-cresol:thioanisole:ethandithiol:H₂O:triisopropylsilane (80:5:5:5:2.5:2.5)を1 mL加え、1.5時間攪拌した。反応溶液にジエチルエーテルを加え沈殿を得、遠心分離後、上清を除く操作を3度繰り返し、沈殿を洗浄した。残渣を50%酢酸水溶液で抽出、ろ過により樹脂を除いた後、YMC-Actus Triart Prep C8 S-10μm 20 nm column (250 × 20 mm I.D.) を用いた分取HPLCで、A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルによる流量8 mL/分、A/B: 57/43-47/53への直線型濃度勾配溶出 (60分) を行い、目的物を含む分画を集め凍結乾燥し9.3 mgの白色粉末を得た。
質量分析による (M+H)⁺ 4705.3 (計算値4705.6)
HPLC溶出時間：16.0分
溶出条件：
カラムYMC Triart C8 (100 × 4.6 mm I.D.)
溶離液：A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルを用い、A/B: 80/20～30/70へ。直線型濃度勾配溶出 (25分)。
流速：1.0 mL/分

【0257】

実施例２４
H-Tyr-Aib-Glu-Gly-Thr-αMePhe-Thr-Ser-Asp-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Oda)-Ser-Lys-Aib-Leu-Asp-Lys-Gln-Arg-Gln-Iva-Glu-Phe-Val-Arg-His-Leu-Leu-Asn-Lys-Aib-Thr-Arg-Gln-Arg-Tyr-NH₂（配列番号３３）
参考例６と同様の手法で調製したH-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(ivDde)-Ser(tBu)-Lys(Boc)-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Mtt)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Rink amide AM resin (0.084 meq/g, 119 mg) を反応管に量りとりNMPで膨潤した。NMPをろ過で除いた後に、樹脂に対してBoc-Tyr(tBu)-OH (33.7 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、得られた樹脂に2%ヒドラジンのNMP溶液を加え3時間振とうした。溶液をろ去後、2%ヒドラジンのNMP溶液を再び加えて終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。得られた樹脂に対してFmoc-Gly-OH (29.7 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、20%ピペリジンのNMP溶液を加えて1分間振とうした。溶液をろ去後、20%ピペリジンのNMP溶液を再び加えて20分間振とうした。溶液をろ去後、樹脂をNMPで10回洗浄した。このFmocアミノ酸の縮合－Fmoc脱保護のサイクルを繰り返すことで、Gly-Gly-Gly、Oda(OtBu)を順次縮合した。樹脂をMeOHで洗浄後、減圧乾燥することで、Boc-Tyr(tBu)- Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Oda(OtBu))-Ser(tBu)-Lys(Boc)-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Mtt)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Rink amide AM resinを101.8 mg得た。

【0258】

得られた樹脂101.8 mgにTFA:m-cresol:thioanisole:ethandithiol:H₂O:triisopropylsilane (80:5:5:5:2.5:2.5)を1 mL加え、1.5時間攪拌した。反応溶液にジエチルエーテルを加え沈殿を得、遠心分離後、上清を除く操作を3度繰り返し、沈殿を洗浄した。残渣を50%酢酸水溶液で抽出、ろ過により樹脂を除いた後、YMC-Actus Triart Prep C8 S-10μm 20 nm column (250 × 20 mm I.D.) を用いた分取HPLCで、A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルによる流量8 mL/分、A/B: 61/39-51/49への直線型濃度勾配溶出 (60分) を行い、目的物を含む分画を集め凍結乾燥し8.5 mgの白色粉末を得た。
質量分析による (M+H)⁺ 4763.4 (計算値4763.6)
HPLC溶出時間：13.9分
溶出条件：
カラムYMC Triart C8 (100 × 4.6 mm I.D.)
溶離液：A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルを用い、A/B: 80/20～30/70へ。直線型濃度勾配溶出 (25分)。
流速：1.0 mL/分

【0259】

実施例２５
Me-Tyr-Aib-Glu-Gly-Thr-αMePhe-Thr-Ser-Asp-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Pal)-Ser-Lys-Aib-Leu-Asp-Lys-Gln-Arg-Gln-Iva-Glu-Phe-Val-Arg-His-Leu-Leu-Asn-Lys-Aib-Thr-Arg-Gln-Arg-Tyr-NH₂（配列番号３４）
参考例６と同様の手法で調製したH-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(ivDde)-Ser(tBu)-Lys(Boc)-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Mtt)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Rink amide AM resin (0.084 meq/g, 119 mg) を反応管に量りとりNMPで膨潤した。NMPをろ過で除いた後に、樹脂に対してBoc-NMeTyr(tBu)-OH (35.1 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、得られた樹脂に2%ヒドラジンのNMP溶液を加え3時間振とうした。溶液をろ去後、2%ヒドラジンのNMP溶液を再び加えて終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。得られた樹脂に対してFmoc-Gly-OH (29.7 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、20%ピペリジンのNMP溶液を加えて1分間振とうした。溶液をろ去後、20%ピペリジンのNMP溶液を再び加えて20分間振とうした。溶液をろ去後、樹脂をNMPで10回洗浄した。得られた樹脂に対してFmoc-Gly-Gly-Gly-OH (41.1 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、20%ピペリジンのNMP溶液を加えて1分間振とうした。溶液をろ去後、20%ピペリジンのNMP溶液を再び加えて20分間振とうした。溶液をろ去後、樹脂をNMPで10回洗浄した。得られた樹脂に対してPal-OSu (35.4 mg)およびDIPEA (17.4 μL) のNMP溶液（200 μL）加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、樹脂をMeOHで洗浄し、減圧乾燥することで、Boc-NMeTyr(tBu)- Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Pal)-Ser(tBu)-Lys(Boc)-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Mtt)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Rink amide AM resinを104.3 mg得た。

【0260】

得られた樹脂104.3 mgにTFA:m-cresol:thioanisole:ethandithiol:H₂O:triisopropylsilane (80:5:5:5:2.5:2.5)を1 mL加え、1.5時間攪拌した。反応溶液にジエチルエーテルを加え沈殿を得、遠心分離後、上清を除く操作を3度繰り返し、沈殿を洗浄した。残渣を50%酢酸水溶液で抽出、ろ過により樹脂を除いた後、YMC-Actus Triart Prep C8 S-10μm 20 nm column (250 × 20 mm I.D.) を用いた分取HPLCで、A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルによる流量8 mL/分、A/B: 57/43-47/53への直線型濃度勾配溶出 (60分) を行い、目的物を含む分画を集め凍結乾燥し8.2 mgの白色粉末を得た。
質量分析による (M+H)⁺ 4719.7 (計算値4719.6)
HPLC溶出時間：16.0分
溶出条件：
カラムYMC Triart C8 (100 × 4.6 mm I.D.)
溶離液：A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルを用い、A/B: 80/20～30/70へ。直線型濃度勾配溶出 (25分)。
流速：1.0 mL/分

【0261】

実施例２６
Me-Tyr-Aib-Glu-Gly-Thr-αMePhe-Thr-Ser-Asp-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Oda)-Ser-Lys-Aib-Leu-Asp-Lys-Gln-Arg-Gln-Iva-Glu-Phe-Val-Arg-His-Leu-Leu-Asn-Lys-Aib-Thr-Arg-Gln-Arg-Tyr-NH₂（配列番号３５）
参考例６と同様の手法で調製したH-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(ivDde)-Ser(tBu)-Lys(Boc)-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Mtt)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Rink amide AM resin (0.084 meq/g, 119 mg) を反応管に量りとりNMPで膨潤した。NMPをろ過で除いた後に、樹脂に対してBoc-NMeTyr(tBu)-OH (35.1 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、得られた樹脂に2%ヒドラジンのNMP溶液を加え3時間振とうした。溶液をろ去後、2%ヒドラジンのNMP溶液を再び加えて終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。得られた樹脂に対してFmoc-Gly-OH (29.7 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、20%ピペリジンのNMP溶液を加えて1分間振とうした。溶液をろ去後、20%ピペリジンのNMP溶液を再び加えて20分間振とうした。溶液をろ去後、樹脂をNMPで10回洗浄した。このFmocアミノ酸の縮合－Fmoc脱保護のサイクルを繰り返すことで、Gly-Gly-Gly、Oda(OtBu)を順次縮合した。樹脂をMeOHで洗浄後、減圧乾燥することで、Boc-NMeTyr(tBu)- Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Oda(OtBu))-Ser(tBu)-Lys(Boc)-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Mtt)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Rink amide AM resinを125.9 mg得た。

【0262】

得られた樹脂125.9 mgにTFA:m-cresol:thioanisole:ethandithiol:H₂O:triisopropylsilane (80:5:5:5:2.5:2.5)を1 mL加え、1.5時間攪拌した。反応溶液にジエチルエーテルを加え沈殿を得、遠心分離後、上清を除く操作を3度繰り返し、沈殿を洗浄した。残渣を50%酢酸水溶液で抽出、ろ過により樹脂を除いた後、YMC-Actus Triart Prep C8 S-10μm 20 nm column (250 × 20 mm I.D.) を用いた分取HPLCで、A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルによる流量8 mL/分、A/B: 61/39-51/49への直線型濃度勾配溶出 (60分) を行い、目的物を含む分画を集め凍結乾燥し10.6 mgの白色粉末を得た。
質量分析による (M+H)⁺ 4777.5 (計算値4777.6)
HPLC溶出時間：13.9分
溶出条件：
カラムYMC Triart C8 (100 × 4.6 mm I.D.)
溶離液：A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルを用い、A/B: 80/20～30/70へ。直線型濃度勾配溶出 (25分)。
流速：1.0 mL/分

【0263】

実施例２７
H-Tyr-Aib-Glu-Gly-Thr-αMePhe-Thr-Ser-Asp-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Pal)-Aib-Ile-Aib-Leu-Asp-Lys-Gln-Ala-Gln-Iva-Glu-Phe-Val-Arg-His-Leu-Leu-Asn-Lys-Aib-Thr-Arg-Gln-Arg-Tyr-NH₂（配列番号３６）
参考例８で調製したH-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(ivDde)-Aib-Ile-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Boc)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Sieber amide resin (0.122 meq/g, 102.3 mg) を反応管に量りとりNMPで膨潤した。NMPをろ過で除いた後に、樹脂に対してBoc-Tyr(tBu)-OH (33.7 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、得られた樹脂に2%ヒドラジンのNMP溶液を加え3時間振とうした。溶液をろ去後、2%ヒドラジンのNMP溶液を再び加えて終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。得られた樹脂に対してFmoc-Gly-OH (29.7 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、20%ピペリジンのNMP溶液を加えて1分間振とうした。溶液をろ去後、20%ピペリジンのNMP溶液を再び加えて20分間振とうした。溶液をろ去後、樹脂をNMPで10回洗浄した。得られた樹脂に対してFmoc-Gly-Gly-Gly-OH (41.1 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、20%ピペリジンのNMP溶液を加えて1分間振とうした。溶液をろ去後、20%ピペリジンのNMP溶液を再び加えて20分間振とうした。溶液をろ去後、樹脂をNMPで10回洗浄した。得られた樹脂に対してPal-OSu (35.4 mg)およびDIPEA (17.4 μL) のNMP溶液（200 μL）加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、樹脂をMeOHで洗浄し、減圧乾燥することで、Boc-Tyr(tBu)- Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Pal)-Aib-Ile-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Boc)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Sieber amide resinを104.5 mg得た。

【0264】

得られた樹脂104.5 mgにTFA:m-cresol:thioanisole:ethandithiol:H₂O:triisopropylsilane (80:5:5:5:2.5:2.5)を1 mL加え、1.5時間攪拌した。反応溶液にジエチルエーテルを加え沈殿を得、遠心分離後、上清を除く操作を3度繰り返し、沈殿を洗浄した。残渣を50%酢酸水溶液で抽出、ろ過により樹脂を除いた後、YMC-Actus Triart Prep C8 S-10μm 20 nm column (250 × 20 mm I.D.) を用いた分取HPLCで、A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルによる流量8 mL/分、A/B: 57/43-47/53への直線型濃度勾配溶出 (60分) を行い、目的物を含む分画を集め凍結乾燥し13.3 mgの白色粉末を得た。
質量分析による (M+H)⁺ 4604.3 (計算値4603.6)
HPLC溶出時間：17.1分
溶出条件：
カラムYMC Triart C8 (100 × 4.6 mm I.D.)
溶離液：A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルを用い、A/B: 80/20～30/70へ。直線型濃度勾配溶出 (25分)。
流速：1.0 mL/分

【0265】

実施例２８
H-Tyr-Aib-Glu-Gly-Thr-αMePhe-Thr-Ser-Asp-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Oda)-Aib-Ile-Aib-Leu-Asp-Lys-Gln-Ala-Gln-Iva-Glu-Phe-Val-Arg-His-Leu-Leu-Asn-Lys-Aib-Thr-Arg-Gln-Arg-Tyr-NH₂（配列番号３７）
参考例８で調製したH-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(ivDde)-Aib-Ile-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Boc)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Sieber amide resin (0.122 meq/g, 102.3 mg) を反応管に量りとりNMPで膨潤した。NMPをろ過で除いた後に、樹脂に対してBoc-Tyr(tBu)-OH (33.7 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、得られた樹脂に2%ヒドラジンのNMP溶液を加え3時間振とうした。溶液をろ去後、2%ヒドラジンのNMP溶液を再び加えて終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。得られた樹脂に対してFmoc-Gly-OH (29.7 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、20%ピペリジンのNMP溶液を加えて1分間振とうした。溶液をろ去後、20%ピペリジンのNMP溶液を再び加えて20分間振とうした。溶液をろ去後、樹脂をNMPで10回洗浄した。このFmocアミノ酸の縮合－Fmoc脱保護のサイクルを繰り返すことで、Gly-Gly-Gly、Oda(OtBu)を順次縮合した。樹脂をMeOHで洗浄後、減圧乾燥することで、Boc-Tyr(tBu)- Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Oda(OtBu))-Aib-Ile-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Boc)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Sieber amide resinを109.1 mg得た。

【0266】

得られた樹脂109.1 mgにTFA:m-cresol:thioanisole:ethandithiol:H₂O:triisopropylsilane (80:5:5:5:2.5:2.5)を1 mL加え、1.5時間攪拌した。反応溶液にジエチルエーテルを加え沈殿を得、遠心分離後、上清を除く操作を3度繰り返し、沈殿を洗浄した。残渣を50%酢酸水溶液で抽出、ろ過により樹脂を除いた後、YMC-Actus Triart Prep C8 S-10μm 20 nm column (250 × 20 mm I.D.) を用いた分取HPLCで、A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルによる流量8 mL/分、A/B: 60/40-50/50への直線型濃度勾配溶出 (60分) を行い、目的物を含む分画を集め凍結乾燥し12.4 mgの白色粉末を得た。
質量分析による (M+H)⁺ 4662.3 (計算値4661.6)
HPLC溶出時間：15.1分
溶出条件：
カラムYMC Triart C8 (100 × 4.6 mm I.D.)
溶離液：A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルを用い、A/B: 80/20～30/70へ。直線型濃度勾配溶出 (25分)。
流速：1.0 mL/分

【0267】

実施例２９
Me-Tyr-Aib-Glu-Gly-Thr-αMePhe-Thr-Ser-Asp-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Pal)-Aib-Ile-Aib-Leu-Asp-Lys-Gln-Ala-Gln-Iva-Glu-Phe-Val-Arg-His-Leu-Leu-Asn-Lys-Aib-Thr-Arg-Gln-Arg-Tyr-NH₂（配列番号３８）
参考例８で調製したH-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(ivDde)-Aib-Ile-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Boc)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Sieber amide resin (0.122 meq/g, 102.3 mg) を反応管に量りとりNMPで膨潤した。NMPをろ過で除いた後に、樹脂に対してBoc-NMeTyr(tBu)-OH (35.1 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、得られた樹脂に2%ヒドラジンのNMP溶液を加え3時間振とうした。溶液をろ去後、2%ヒドラジンのNMP溶液を再び加えて終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。得られた樹脂に対してFmoc-Gly-OH (29.7 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、20%ピペリジンのNMP溶液を加えて1分間振とうした。溶液をろ去後、20%ピペリジンのNMP溶液を再び加えて20分間振とうした。溶液をろ去後、樹脂をNMPで10回洗浄した。得られた樹脂に対してFmoc-Gly-Gly-Gly-OH (41.1 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、20%ピペリジンのNMP溶液を加えて1分間振とうした。溶液をろ去後、20%ピペリジンのNMP溶液を再び加えて20分間振とうした。溶液をろ去後、樹脂をNMPで10回洗浄した。得られた樹脂に対してPal-OSu (35.4 mg)およびDIPEA (17.4 μL) のNMP溶液（200 μL）加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、樹脂をMeOHで洗浄し、減圧乾燥することで、Boc-NMeTyr(tBu)- Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Pal)-Aib-Ile-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Boc)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Sieber amide resinを105.8 mg得た。

【0268】

得られた樹脂105.8 mgにTFA:m-cresol:thioanisole:ethandithiol:H₂O:triisopropylsilane (80:5:5:5:2.5:2.5)を1 mL加え、1.5時間攪拌した。反応溶液にジエチルエーテルを加え沈殿を得、遠心分離後、上清を除く操作を3度繰り返し、沈殿を洗浄した。残渣を50%酢酸水溶液で抽出、ろ過により樹脂を除いた後、YMC-Actus Triart Prep C8 S-10μm 20 nm column (250 × 20 mm I.D.) を用いた分取HPLCで、A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルによる流量8 mL/分、A/B: 56/44-46/54への直線型濃度勾配溶出 (60分) を行い、目的物を含む分画を集め凍結乾燥し14.3 mgの白色粉末を得た。
質量分析による (M+H)⁺ 4618.2 (計算値4617.6)
HPLC溶出時間：17.1分
溶出条件：
カラムYMC Triart C8 (100 × 4.6 mm I.D.)
溶離液：A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルを用い、A/B: 80/20～30/70へ。直線型濃度勾配溶出 (25分)。
流速：1.0 mL/分

【0269】

実施例３０
Me-Tyr-Aib-Glu-Gly-Thr-αMePhe-Thr-Ser-Asp-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Oda)-Aib-Ile-Aib-Leu-Asp-Lys-Gln-Ala-Gln-Iva-Glu-Phe-Val-Arg-His-Leu-Leu-Asn-Lys-Aib-Thr-Arg-Gln-Arg-Tyr-NH₂（配列番号３９）
参考例８で調製したH-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(ivDde)-Aib-Ile-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Boc)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Sieber amide resin (0.122 meq/g, 102.3 mg) を反応管に量りとりNMPで膨潤した。NMPをろ過で除いた後に、樹脂に対してBoc-NMeTyr(tBu)-OH (35.1 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、得られた樹脂に2%ヒドラジンのNMP溶液を加え3時間振とうした。溶液をろ去後、2%ヒドラジンのNMP溶液を再び加えて終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。得られた樹脂に対してFmoc-Gly-OH (29.7 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、20%ピペリジンのNMP溶液を加えて1分間振とうした。溶液をろ去後、20%ピペリジンのNMP溶液を再び加えて20分間振とうした。溶液をろ去後、樹脂をNMPで10回洗浄した。このFmocアミノ酸の縮合－Fmoc脱保護のサイクルを繰り返すことで、Gly-Gly-Gly、Oda(OtBu)を順次縮合した。樹脂をMeOHで洗浄後、減圧乾燥することで、Boc-NMeTyr(tBu)- Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Oda(OtBu))-Aib-Ile-Aib-Leu-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Ala-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Boc)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Sieber amide resinを118 mg得た。

【0270】

得られた樹脂118 mgにTFA:m-cresol:thioanisole:ethandithiol:H₂O:triisopropylsilane (80:5:5:5:2.5:2.5)を1 mL加え、1.5時間攪拌した。反応溶液にジエチルエーテルを加え沈殿を得、遠心分離後、上清を除く操作を3度繰り返し、沈殿を洗浄した。残渣を50%酢酸水溶液で抽出、ろ過により樹脂を除いた後、YMC-Actus Triart Prep C8 S-10μm 20 nm column (250 × 20 mm I.D.) を用いた分取HPLCで、A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルによる流量8 mL/分、A/B: 60/40-50/50への直線型濃度勾配溶出 (60分) を行い、目的物を含む分画を集め凍結乾燥し12.1 mgの白色粉末を得た。
質量分析による (M+H)⁺ 4676.2 (計算値4675.6)
HPLC溶出時間：15.1分
溶出条件：
カラムYMC Triart C8 (100 × 4.6 mm I.D.)
溶離液：A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルを用い、A/B: 80/20～30/70へ。直線型濃度勾配溶出 (25分)。
流速：1.0 mL/分

【0271】

実施例３１
H-Tyr-Aib-Glu-Gly-Thr-αMePhe-Thr-Ser-Asp-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Pal)-Aib-Ile-Aib-Leu-Glu-Lys-Gln-Arg-Gln-Iva-Glu-Phe-Val-Arg-His-Leu-Leu-Asn-Lys-Aib-Thr-Arg-Gln-Arg-Tyr-NH₂（配列番号４０）
参考例８と同様の手法で調製したH-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(ivDde)-Aib-Ile-Aib-Leu-Glu(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Boc)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Sieber amide resin (0.115 meq/g, 108.3 mg) を反応管に量りとりNMPで膨潤した。NMPをろ過で除いた後に、樹脂に対してBoc-Tyr(tBu)-OH (33.7 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、得られた樹脂に2%ヒドラジンのNMP溶液を加え3時間振とうした。溶液をろ去後、2%ヒドラジンのNMP溶液を再び加えて終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。得られた樹脂に対してFmoc-Gly-OH (29.7 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、20%ピペリジンのNMP溶液を加えて1分間振とうした。溶液をろ去後、20%ピペリジンのNMP溶液を再び加えて20分間振とうした。溶液をろ去後、樹脂をNMPで10回洗浄した。得られた樹脂に対してFmoc-Gly-Gly-Gly-OH (41.1 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、20%ピペリジンのNMP溶液を加えて1分間振とうした。溶液をろ去後、20%ピペリジンのNMP溶液を再び加えて20分間振とうした。溶液をろ去後、樹脂をNMPで10回洗浄した。得られた樹脂に対してPal-OSu (35.4 mg)およびDIPEA (17.4 μL) のNMP溶液（200 μL）加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、樹脂をMeOHで洗浄し、減圧乾燥することで、Boc-Tyr(tBu)- Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Pal)-Aib-Ile-Aib-Leu-Glu(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Boc)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Sieber amide resinを131.4 mg得た。

【0272】

得られた樹脂131.4 mgにTFA:m-cresol:thioanisole:ethandithiol:H₂O:triisopropylsilane (80:5:5:5:2.5:2.5)を1 mL加え、1.5時間攪拌した。反応溶液にジエチルエーテルを加え沈殿を得、遠心分離後、上清を除く操作を3度繰り返し、沈殿を洗浄した。残渣を50%酢酸水溶液で抽出、ろ過により樹脂を除いた後、YMC-Actus Triart Prep C8 S-10μm 20 nm column (250 × 20 mm I.D.) を用いた分取HPLCで、A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルによる流量8 mL/分、A/B: 57/43-47/53への直線型濃度勾配溶出 (60分) を行い、目的物を含む分画を集め凍結乾燥し12.4 mgの白色粉末を得た。
質量分析による (M+H)⁺ 4703.2 (計算値4702.6)
HPLC溶出時間：16.5分
溶出条件：
カラムYMC Triart C8 (100 × 4.6 mm I.D.)
溶離液：A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルを用い、A/B: 80/20～30/70へ。直線型濃度勾配溶出 (25分)。
流速：1.0 mL/分

【0273】

実施例３２
H-Tyr-Aib-Glu-Gly-Thr-αMePhe-Thr-Ser-Asp-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Oda)-Aib-Ile-Aib-Leu-Glu-Lys-Gln-Arg-Gln-Iva-Glu-Phe-Val-Arg-His-Leu-Leu-Asn-Lys-Aib-Thr-Arg-Gln-Arg-Tyr-NH₂（配列番号４１）
参考例８と同様の手法で調製したH-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(ivDde)-Aib-Ile-Aib-Leu-Glu(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Boc)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Sieber amide resin (0.115 meq/g, 108.3 mg) を反応管に量りとりNMPで膨潤した。NMPをろ過で除いた後に、樹脂に対してBoc-Tyr(tBu)-OH (33.7 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、得られた樹脂に2%ヒドラジンのNMP溶液を加え3時間振とうした。溶液をろ去後、2%ヒドラジンのNMP溶液を再び加えて終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。得られた樹脂に対してFmoc-Gly-OH (29.7 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、20%ピペリジンのNMP溶液を加えて1分間振とうした。溶液をろ去後、20%ピペリジンのNMP溶液を再び加えて20分間振とうした。溶液をろ去後、樹脂をNMPで10回洗浄した。このFmocアミノ酸の縮合－Fmoc脱保護のサイクルを繰り返すことで、Gly-Gly-Gly、Oda(OtBu)を順次縮合した。樹脂をMeOHで洗浄後、減圧乾燥することで、Boc-Tyr(tBu)- Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Oda(OtBu))-Aib-Ile-Aib-Leu-Glu(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Boc)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Sieber amide resinを104.3 mg得た。

【0274】

得られた樹脂104.3 mgにTFA:m-cresol:thioanisole:ethandithiol:H₂O:triisopropylsilane (80:5:5:5:2.5:2.5)を1 mL加え、1.5時間攪拌した。反応溶液にジエチルエーテルを加え沈殿を得、遠心分離後、上清を除く操作を3度繰り返し、沈殿を洗浄した。残渣を50%酢酸水溶液で抽出、ろ過により樹脂を除いた後、YMC-Actus Triart Prep C8 S-10μm 20 nm column (250 × 20 mm I.D.) を用いた分取HPLCで、A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルによる流量8 mL/分、A/B: 61/39-51/49への直線型濃度勾配溶出 (60分) を行い、目的物を含む分画を集め凍結乾燥し12.0 mgの白色粉末を得た。
質量分析による (M+H)⁺ 4761.3 (計算値4760.6)
HPLC溶出時間：14.5分
溶出条件：
カラムYMC Triart C8 (100 × 4.6 mm I.D.)
溶離液：A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルを用い、A/B: 80/20～30/70へ。直線型濃度勾配溶出 (25分)。
流速：1.0 mL/分

【0275】

実施例３３
Me-Tyr-Aib-Glu-Gly-Thr-αMePhe-Thr-Ser-Asp-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Pal)-Aib-Ile-Aib-Leu-Glu-Lys-Gln-Arg-Gln-Iva-Glu-Phe-Val-Arg-His-Leu-Leu-Asn-Lys-Aib-Thr-Arg-Gln-Arg-Tyr-NH₂（配列番号４２）
参考例８と同様の手法で調製したH-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(ivDde)-Aib-Ile-Aib-Leu-Glu(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Boc)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Sieber amide resin (0.115 meq/g, 108.3 mg) を反応管に量りとりNMPで膨潤した。NMPをろ過で除いた後に、樹脂に対してBoc-NMeTyr(tBu)-OH (35.1 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、得られた樹脂に2%ヒドラジンのNMP溶液を加え3時間振とうした。溶液をろ去後、2%ヒドラジンのNMP溶液を再び加えて終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。得られた樹脂に対してFmoc-Gly-OH (29.7 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、20%ピペリジンのNMP溶液を加えて1分間振とうした。溶液をろ去後、20%ピペリジンのNMP溶液を再び加えて20分間振とうした。溶液をろ去後、樹脂をNMPで10回洗浄した。得られた樹脂に対してFmoc-Gly-Gly-Gly-OH (41.1 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、20%ピペリジンのNMP溶液を加えて1分間振とうした。溶液をろ去後、20%ピペリジンのNMP溶液を再び加えて20分間振とうした。溶液をろ去後、樹脂をNMPで10回洗浄した。得られた樹脂に対してPal-OSu (35.4 mg)およびDIPEA (17.4 μL) のNMP溶液（200 μL）加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、樹脂をMeOHで洗浄し、減圧乾燥することで、Boc-NMeTyr(tBu)- Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Pal)-Aib-Ile-Aib-Leu-Glu(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Boc)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Sieber amide resinを108.5 mg得た。

【0276】

得られた樹脂108.5 mgにTFA:m-cresol:thioanisole:ethandithiol:H₂O:triisopropylsilane (80:5:5:5:2.5:2.5)を1 mL加え、1.5時間攪拌した。反応溶液にジエチルエーテルを加え沈殿を得、遠心分離後、上清を除く操作を3度繰り返し、沈殿を洗浄した。残渣を50%酢酸水溶液で抽出、ろ過により樹脂を除いた後、YMC-Actus Triart Prep C8 S-10μm 20 nm column (250 × 20 mm I.D.) を用いた分取HPLCで、A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルによる流量8 mL/分、A/B: 57/43-47/53への直線型濃度勾配溶出 (60分) を行い、目的物を含む分画を集め凍結乾燥し12.0 mgの白色粉末を得た。
質量分析による (M+H)⁺ 4717.4 (計算値4716.6)
HPLC溶出時間：16.6分
溶出条件：
カラムYMC Triart C8 (100 × 4.6 mm I.D.)
溶離液：A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルを用い、A/B: 80/20～30/70へ。直線型濃度勾配溶出 (25分)。
流速：1.0 mL/分

【0277】

実施例３４
Me-Tyr-Aib-Glu-Gly-Thr-αMePhe-Thr-Ser-Asp-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Oda)-Aib-Ile-Aib-Leu-Glu-Lys-Gln-Arg-Gln-Iva-Glu-Phe-Val-Arg-His-Leu-Leu-Asn-Lys-Aib-Thr-Arg-Gln-Arg-Tyr-NH₂（配列番号４３）
参考例８と同様の手法で調製したH-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(ivDde)-Aib-Ile-Aib-Leu-Glu(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Boc)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Sieber amide resin (0.115 meq/g, 108.3 mg) を反応管に量りとりNMPで膨潤した。NMPをろ過で除いた後に、樹脂に対してBoc-NMeTyr(tBu)-OH (35.1 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、得られた樹脂に2%ヒドラジンのNMP溶液を加え3時間振とうした。溶液をろ去後、2%ヒドラジンのNMP溶液を再び加えて終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。得られた樹脂に対してFmoc-Gly-OH (29.7 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、20%ピペリジンのNMP溶液を加えて1分間振とうした。溶液をろ去後、20%ピペリジンのNMP溶液を再び加えて20分間振とうした。溶液をろ去後、樹脂をNMPで10回洗浄した。このFmocアミノ酸の縮合－Fmoc脱保護のサイクルを繰り返すことで、Gly-Gly-Gly、Oda(OtBu)を順次縮合した。樹脂をMeOHで洗浄後、減圧乾燥することで、Boc-NMeTyr(tBu)- Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Oda(OtBu))-Aib-Ile-Aib-Leu-Glu(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Boc)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Sieber amide resinを117.9 mg得た。

【0278】

得られた樹脂117.9 mgにTFA:m-cresol:thioanisole:ethandithiol:H₂O:triisopropylsilane (80:5:5:5:2.5:2.5)を1 mL加え、1.5時間攪拌した。反応溶液にジエチルエーテルを加え沈殿を得、遠心分離後、上清を除く操作を3度繰り返し、沈殿を洗浄した。残渣を50%酢酸水溶液で抽出、ろ過により樹脂を除いた後、YMC-Actus Triart Prep C8 S-10μm 20 nm column (250 × 20 mm I.D.) を用いた分取HPLCで、A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルによる流量8 mL/分、A/B: 61/39-51/49への直線型濃度勾配溶出 (60分) を行い、目的物を含む分画を集め凍結乾燥し8.6 mgの白色粉末を得た。
質量分析による (M+H)⁺ 4775.3 (計算値4774.7)
HPLC溶出時間：14.5分
溶出条件：
カラムYMC Triart C8 (100 × 4.6 mm I.D.)
溶離液：A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルを用い、A/B: 80/20～30/70へ。直線型濃度勾配溶出 (25分)。
流速：1.0 mL/分

【0279】

実施例３５
H-Tyr-Aib-Glu-Gly-Thr-αMePhe-Thr-Ser-Asp-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Pal)-Ala-Ile-Aib-Leu-Glu-Lys-Gln-Arg-Gln-Iva-Glu-Phe-Val-Arg-His-Leu-Leu-Asn-Lys-Aib-Thr-Arg-Gln-Arg-Tyr-NH₂（配列番号４４）
参考例８と同様の手法で調製したH-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(ivDde)-Ala-Ile-Aib-Leu-Glu(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Boc)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Sieber amide resin (0.116 meq/g, 108.1 mg) を反応管に量りとりNMPで膨潤した。NMPをろ過で除いた後に、樹脂に対してBoc-Tyr(tBu)-OH (33.7 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、得られた樹脂に2%ヒドラジンのNMP溶液を加え3時間振とうした。溶液をろ去後、2%ヒドラジンのNMP溶液を再び加えて終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。得られた樹脂に対してFmoc-Gly-OH (29.7 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、20%ピペリジンのNMP溶液を加えて1分間振とうした。溶液をろ去後、20%ピペリジンのNMP溶液を再び加えて20分間振とうした。溶液をろ去後、樹脂をNMPで10回洗浄した。得られた樹脂に対してFmoc-Gly-Gly-Gly-OH (41.1 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、20%ピペリジンのNMP溶液を加えて1分間振とうした。溶液をろ去後、20%ピペリジンのNMP溶液を再び加えて20分間振とうした。溶液をろ去後、樹脂をNMPで10回洗浄した。得られた樹脂に対してPal-OSu (35.4 mg)およびDIPEA (17.4 μL) のNMP溶液（200 μL）加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、樹脂をMeOHで洗浄し、減圧乾燥することで、Boc-Tyr(tBu)- Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Pal)-Ala-Ile-Aib-Leu-Glu(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Boc)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Sieber amide resinを120.1 mg得た。

【0280】

得られた樹脂120.1 mgにTFA:m-cresol:thioanisole:ethandithiol:H₂O:triisopropylsilane (80:5:5:5:2.5:2.5)を1 mL加え、1.5時間攪拌した。反応溶液にジエチルエーテルを加え沈殿を得、遠心分離後、上清を除く操作を3度繰り返し、沈殿を洗浄した。残渣を50%酢酸水溶液で抽出、ろ過により樹脂を除いた後、YMC-Actus Triart Prep C8 S-10μm 20 nm column (250 × 20 mm I.D.) を用いた分取HPLCで、A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルによる流量8 mL/分、A/B: 57/43-47/53への直線型濃度勾配溶出 (60分) を行い、目的物を含む分画を集め凍結乾燥し10.9 mgの白色粉末を得た。
質量分析による (M+H)⁺ 4689.1 (計算値4688.6)
HPLC溶出時間：16.5分
溶出条件：
カラムYMC Triart C8 (100 × 4.6 mm I.D.)
溶離液：A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルを用い、A/B: 80/20～30/70へ。直線型濃度勾配溶出 (25分)。
流速：1.0 mL/分

【0281】

実施例３６
H-Tyr-Aib-Glu-Gly-Thr-αMePhe-Thr-Ser-Asp-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Oda)-Ala-Ile-Aib-Leu-Glu-Lys-Gln-Arg-Gln-Iva-Glu-Phe-Val-Arg-His-Leu-Leu-Asn-Lys-Aib-Thr-Arg-Gln-Arg-Tyr-NH₂（配列番号４５）
参考例８と同様の手法で調製したH-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(ivDde)-Ala-Ile-Aib-Leu-Glu(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Boc)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Sieber amide resin (0.116 meq/g, 108.1 mg) を反応管に量りとりNMPで膨潤した。NMPをろ過で除いた後に、樹脂に対してBoc-Tyr(tBu)-OH (33.7 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、得られた樹脂に2%ヒドラジンのNMP溶液を加え3時間振とうした。溶液をろ去後、2%ヒドラジンのNMP溶液を再び加えて終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。得られた樹脂に対してFmoc-Gly-OH (29.7 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、20%ピペリジンのNMP溶液を加えて1分間振とうした。溶液をろ去後、20%ピペリジンのNMP溶液を再び加えて20分間振とうした。溶液をろ去後、樹脂をNMPで10回洗浄した。このFmocアミノ酸の縮合－Fmoc脱保護のサイクルを繰り返すことで、Gly-Gly-Gly、Oda(OtBu)を順次縮合した。樹脂をMeOHで洗浄後、減圧乾燥することで、Boc-Tyr(tBu)- Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Oda(OtBu))-Ala-Ile-Aib-Leu-Glu(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Boc)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Sieber amide resinを107.9 mg得た。

【0282】

得られた樹脂107.9 mgにTFA:m-cresol:thioanisole:ethandithiol:H₂O:triisopropylsilane (80:5:5:5:2.5:2.5)を1 mL加え、1.5時間攪拌した。反応溶液にジエチルエーテルを加え沈殿を得、遠心分離後、上清を除く操作を3度繰り返し、沈殿を洗浄した。残渣を50%酢酸水溶液で抽出、ろ過により樹脂を除いた後、YMC-Actus Triart Prep C8 S-10μm 20 nm column (250 × 20 mm I.D.) を用いた分取HPLCで、A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルによる流量8 mL/分、A/B: 61/39-51/49への直線型濃度勾配溶出 (60分) を行い、目的物を含む分画を集め凍結乾燥し9.2 mgの白色粉末を得た。
質量分析による (M+H)⁺ 4747.3 (計算値4746.6)
HPLC溶出時間：14.5分
溶出条件：
カラムYMC Triart C8 (100 × 4.6 mm I.D.)
溶離液：A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルを用い、A/B: 80/20～30/70へ。直線型濃度勾配溶出 (25分)。
流速：1.0 mL/分

【0283】

実施例３７
Me-Tyr-Aib-Glu-Gly-Thr-αMePhe-Thr-Ser-Asp-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Pal)-Ala-Ile-Aib-Leu-Glu-Lys-Gln-Arg-Gln-Iva-Glu-Phe-Val-Arg-His-Leu-Leu-Asn-Lys-Aib-Thr-Arg-Gln-Arg-Tyr-NH₂（配列番号４６）
参考例８と同様の手法で調製したH-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(ivDde)-Ala-Ile-Aib-Leu-Glu(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Boc)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Sieber amide resin (0.116 meq/g, 108.1 mg) を反応管に量りとりNMPで膨潤した。NMPをろ過で除いた後に、樹脂に対してBoc-NMeTyr(tBu)-OH (35.1 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、得られた樹脂に2%ヒドラジンのNMP溶液を加え3時間振とうした。溶液をろ去後、2%ヒドラジンのNMP溶液を再び加えて終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。得られた樹脂に対してFmoc-Gly-OH (29.7 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、20%ピペリジンのNMP溶液を加えて1分間振とうした。溶液をろ去後、20%ピペリジンのNMP溶液を再び加えて20分間振とうした。溶液をろ去後、樹脂をNMPで10回洗浄した。得られた樹脂に対してFmoc-Gly-Gly-Gly-OH (41.1 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、20%ピペリジンのNMP溶液を加えて1分間振とうした。溶液をろ去後、20%ピペリジンのNMP溶液を再び加えて20分間振とうした。溶液をろ去後、樹脂をNMPで10回洗浄した。得られた樹脂に対してPal-OSu (35.4 mg)およびDIPEA (17.4 μL) のNMP溶液（200 μL）加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、樹脂をMeOHで洗浄し、減圧乾燥することで、Boc-NMeTyr(tBu)- Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Pal)-Ala-Ile-Aib-Leu-Glu(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Boc)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Sieber amide resinを117.8 mg得た。

【0284】

得られた樹脂117.8 mgにTFA:m-cresol:thioanisole:ethandithiol:H₂O:triisopropylsilane (80:5:5:5:2.5:2.5)を1 mL加え、1.5時間攪拌した。反応溶液にジエチルエーテルを加え沈殿を得、遠心分離後、上清を除く操作を3度繰り返し、沈殿を洗浄した。残渣を50%酢酸水溶液で抽出、ろ過により樹脂を除いた後、YMC-Actus Triart Prep C8 S-10μm 20 nm column (250 × 20 mm I.D.) を用いた分取HPLCで、A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルによる流量8 mL/分、A/B: 57/43-47/53への直線型濃度勾配溶出 (60分) を行い、目的物を含む分画を集め凍結乾燥し11.4 mgの白色粉末を得た。
質量分析による (M+H)⁺ 4703.3 (計算値4702.6)
HPLC溶出時間：16.5分
溶出条件：
カラムYMC Triart C8 (100 × 4.6 mm I.D.)
溶離液：A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルを用い、A/B: 80/20～30/70へ。直線型濃度勾配溶出 (25分)。
流速：1.0 mL/分

【0285】

実施例３８
Me-Tyr-Aib-Glu-Gly-Thr-αMePhe-Thr-Ser-Asp-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Oda)-Ala-Ile-Aib-Leu-Glu-Lys-Gln-Arg-Gln-Iva-Glu-Phe-Val-Arg-His-Leu-Leu-Asn-Lys-Aib-Thr-Arg-Gln-Arg-Tyr-NH₂（配列番号４７）
参考例８と同様の手法で調製したH-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(ivDde)-Ala-Ile-Aib-Leu-Glu(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Boc)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Sieber amide resin (0.116 meq/g, 108.1 mg) を反応管に量りとりNMPで膨潤した。NMPをろ過で除いた後に、樹脂に対してBoc-NMeTyr(tBu)-OH (35.1 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、得られた樹脂に2%ヒドラジンのNMP溶液を加え3時間振とうした。溶液をろ去後、2%ヒドラジンのNMP溶液を再び加えて終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。得られた樹脂に対してFmoc-Gly-OH (29.7 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、20%ピペリジンのNMP溶液を加えて1分間振とうした。溶液をろ去後、20%ピペリジンのNMP溶液を再び加えて20分間振とうした。溶液をろ去後、樹脂をNMPで10回洗浄した。このFmocアミノ酸の縮合－Fmoc脱保護のサイクルを繰り返すことで、Gly-Gly-Gly、Oda(OtBu)を順次縮合した。樹脂をMeOHで洗浄後、減圧乾燥することで、Boc-NMeTyr(tBu)- Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Oda(OtBu))-Ala-Ile-Aib-Leu-Glu(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Boc)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Sieber amide resinを116 mg得た。

【0286】

得られた樹脂116 mgにTFA:m-cresol:thioanisole:ethandithiol:H₂O:triisopropylsilane (80:5:5:5:2.5:2.5)を1 mL加え、1.5時間攪拌した。反応溶液にジエチルエーテルを加え沈殿を得、遠心分離後、上清を除く操作を3度繰り返し、沈殿を洗浄した。残渣を50%酢酸水溶液で抽出、ろ過により樹脂を除いた後、YMC-Actus Triart Prep C8 S-10μm 20 nm column (250 × 20 mm I.D.) を用いた分取HPLCで、A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルによる流量8 mL/分、A/B: 61/39-51/49への直線型濃度勾配溶出 (60分) を行い、目的物を含む分画を集め凍結乾燥し11.0 mgの白色粉末を得た。
質量分析による (M+H)⁺ 4761.2 (計算値4760.6)
HPLC溶出時間：14.5分
溶出条件：
カラムYMC Triart C8 (100 × 4.6 mm I.D.)
溶離液：A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルを用い、A/B: 80/20～30/70へ。直線型濃度勾配溶出 (25分)。
流速：1.0 mL/分

【0287】

実施例３９
H-Tyr-Aib-Glu-Gly-Thr-αMePhe-Thr-Ser-Asp-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Pal)-Ser-Ile-Aib-Leu-Glu-Lys-Gln-Arg-Gln-Iva-Glu-Phe-Val-Arg-His-Leu-Leu-Asn-Lys-Aib-Thr-Arg-Gln-Arg-Tyr-NH₂（配列番号４８）
参考例８と同様の手法で調製したH-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(ivDde)-Ser(tBu)-Ile-Aib-Leu-Glu(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Boc)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Sieber amide resin (0.116 meq/g, 107.5 mg) を反応管に量りとりNMPで膨潤した。NMPをろ過で除いた後に、樹脂に対してBoc-Tyr(tBu)-OH (33.7 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、得られた樹脂に2%ヒドラジンのNMP溶液を加え3時間振とうした。溶液をろ去後、2%ヒドラジンのNMP溶液を再び加えて終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。得られた樹脂に対してFmoc-Gly-OH (29.7 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、20%ピペリジンのNMP溶液を加えて1分間振とうした。溶液をろ去後、20%ピペリジンのNMP溶液を再び加えて20分間振とうした。溶液をろ去後、樹脂をNMPで10回洗浄した。得られた樹脂に対してFmoc-Gly-Gly-Gly-OH (41.1 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、20%ピペリジンのNMP溶液を加えて1分間振とうした。溶液をろ去後、20%ピペリジンのNMP溶液を再び加えて20分間振とうした。溶液をろ去後、樹脂をNMPで10回洗浄した。得られた樹脂に対してPal-OSu (35.4 mg)およびDIPEA (17.4 μL) のNMP溶液（200 μL）加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、樹脂をMeOHで洗浄し、減圧乾燥することで、Boc-Tyr(tBu)- Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Pal)-Ser(tBu)-Ile-Aib-Leu-Glu(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Boc)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Sieber amide resinを124 mg得た。

【0288】

得られた樹脂124 mgにTFA:m-cresol:thioanisole:ethandithiol:H₂O:triisopropylsilane (80:5:5:5:2.5:2.5)を1 mL加え、1.5時間攪拌した。反応溶液にジエチルエーテルを加え沈殿を得、遠心分離後、上清を除く操作を3度繰り返し、沈殿を洗浄した。残渣を50%酢酸水溶液で抽出、ろ過により樹脂を除いた後、YMC-Actus Triart Prep C8 S-10μm 20 nm column (250 × 20 mm I.D.) を用いた分取HPLCで、A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルによる流量8 mL/分、A/B: 57/43-47/53への直線型濃度勾配溶出 (60分) を行い、目的物を含む分画を集め凍結乾燥し8.9 mgの白色粉末を得た。
質量分析による (M+H)⁺ 4705.1 (計算値4704.6)
HPLC溶出時間：16.6分
溶出条件：
カラムYMC Triart C8 (100 × 4.6 mm I.D.)
溶離液：A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルを用い、A/B: 80/20～30/70へ。直線型濃度勾配溶出 (25分)。
流速：1.0 mL/分

【0289】

実施例４０
H-Tyr-Aib-Glu-Gly-Thr-αMePhe-Thr-Ser-Asp-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Oda)-Ser-Ile-Aib-Leu-Glu-Lys-Gln-Arg-Gln-Iva-Glu-Phe-Val-Arg-His-Leu-Leu-Asn-Lys-Aib-Thr-Arg-Gln-Arg-Tyr-NH₂（配列番号４９）
参考例８と同様の手法で調製したH-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(ivDde)-Ser(tBu)-Ile-Aib-Leu-Glu(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Boc)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Sieber amide resin (0.116 meq/g, 107.5 mg) を反応管に量りとりNMPで膨潤した。NMPをろ過で除いた後に、樹脂に対してBoc-Tyr(tBu)-OH (33.7 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、得られた樹脂に2%ヒドラジンのNMP溶液を加え3時間振とうした。溶液をろ去後、2%ヒドラジンのNMP溶液を再び加えて終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。得られた樹脂に対してFmoc-Gly-OH (29.7 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、20%ピペリジンのNMP溶液を加えて1分間振とうした。溶液をろ去後、20%ピペリジンのNMP溶液を再び加えて20分間振とうした。溶液をろ去後、樹脂をNMPで10回洗浄した。このFmocアミノ酸の縮合－Fmoc脱保護のサイクルを繰り返すことで、Gly-Gly-Gly、Oda(OtBu)を順次縮合した。樹脂をMeOHで洗浄後、減圧乾燥することで、Boc-Tyr(tBu)- Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Oda(OtBu))-Ser(tBu)-Ile-Aib-Leu-Glu(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Boc)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Sieber amide resinを116.8 mg得た。

【0290】

得られた樹脂116.8 mgにTFA:m-cresol:thioanisole:ethandithiol:H₂O:triisopropylsilane (80:5:5:5:2.5:2.5)を1 mL加え、1.5時間攪拌した。反応溶液にジエチルエーテルを加え沈殿を得、遠心分離後、上清を除く操作を3度繰り返し、沈殿を洗浄した。残渣を50%酢酸水溶液で抽出、ろ過により樹脂を除いた後、YMC-Actus Triart Prep C8 S-10μm 20 nm column (250 × 20 mm I.D.) を用いた分取HPLCで、A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルによる流量8 mL/分、A/B: 61/39-51/49への直線型濃度勾配溶出 (60分) を行い、目的物を含む分画を集め凍結乾燥し13.1 mgの白色粉末を得た。
質量分析による (M+H)⁺ 4763.0 (計算値4762.6)
HPLC溶出時間：14.5分
溶出条件：
カラムYMC Triart C8 (100 × 4.6 mm I.D.)
溶離液：A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルを用い、A/B: 80/20～30/70へ。直線型濃度勾配溶出 (25分)。
流速：1.0 mL/分

【0291】

実施例４１
Me-Tyr-Aib-Glu-Gly-Thr-αMePhe-Thr-Ser-Asp-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Pal)-Ser-Ile-Aib-Leu-Glu-Lys-Gln-Arg-Gln-Iva-Glu-Phe-Val-Arg-His-Leu-Leu-Asn-Lys-Aib-Thr-Arg-Gln-Arg-Tyr-NH₂（配列番号５０）
参考例８と同様の手法で調製したH-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(ivDde)-Ser(tBu)-Ile-Aib-Leu-Glu(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Boc)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Sieber amide resin (0.116 meq/g, 107.5 mg) を反応管に量りとりNMPで膨潤した。NMPをろ過で除いた後に、樹脂に対してBoc-NMeTyr(tBu)-OH (35.1 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、得られた樹脂に2%ヒドラジンのNMP溶液を加え3時間振とうした。溶液をろ去後、2%ヒドラジンのNMP溶液を再び加えて終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。得られた樹脂に対してFmoc-Gly-OH (29.7 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、20%ピペリジンのNMP溶液を加えて1分間振とうした。溶液をろ去後、20%ピペリジンのNMP溶液を再び加えて20分間振とうした。溶液をろ去後、樹脂をNMPで10回洗浄した。得られた樹脂に対してFmoc-Gly-Gly-Gly-OH (41.1 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、20%ピペリジンのNMP溶液を加えて1分間振とうした。溶液をろ去後、20%ピペリジンのNMP溶液を再び加えて20分間振とうした。溶液をろ去後、樹脂をNMPで10回洗浄した。得られた樹脂に対してPal-OSu (35.4 mg)およびDIPEA (17.4 μL) のNMP溶液（200 μL）加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、樹脂をMeOHで洗浄し、減圧乾燥することで、Boc-NMeTyr(tBu)- Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Pal)- Ser(tBu)-Ile-Aib-Leu-Glu(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Boc)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Sieber amide resinを104.3 mg得た。

【0292】

得られた樹脂104.3 mgにTFA:m-cresol:thioanisole:ethandithiol:H₂O:triisopropylsilane (80:5:5:5:2.5:2.5)を1 mL加え、1.5時間攪拌した。反応溶液にジエチルエーテルを加え沈殿を得、遠心分離後、上清を除く操作を3度繰り返し、沈殿を洗浄した。残渣を50%酢酸水溶液で抽出、ろ過により樹脂を除いた後、YMC-Actus Triart Prep C8 S-10μm 20 nm column (250 × 20 mm I.D.) を用いた分取HPLCで、A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルによる流量8 mL/分、A/B: 57/43-47/53への直線型濃度勾配溶出 (60分) を行い、目的物を含む分画を集め凍結乾燥し11.3 mgの白色粉末を得た。
質量分析による (M+H)⁺ 4719.3 (計算値4718.6)
HPLC溶出時間：16.6分
溶出条件：
カラムYMC Triart C8 (100 × 4.6 mm I.D.)
溶離液：A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルを用い、A/B: 80/20～30/70へ。直線型濃度勾配溶出 (25分)。
流速：1.0 mL/分

【0293】

実施例４２
Me-Tyr-Aib-Glu-Gly-Thr-αMePhe-Thr-Ser-Asp-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Oda)-Ser-Ile-Aib-Leu-Glu-Lys-Gln-Arg-Gln-Iva-Glu-Phe-Val-Arg-His-Leu-Leu-Asn-Lys-Aib-Thr-Arg-Gln-Arg-Tyr-NH₂（配列番号５１）
参考例８と同様の手法で調製したH-Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(ivDde)-Ser(tBu)-Ile-Aib-Leu-Glu(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Boc)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Sieber amide resin (0.116 meq/g, 107.5 mg) を反応管に量りとりNMPで膨潤した。NMPをろ過で除いた後に、樹脂に対してBoc-NMeTyr(tBu)-OH (35.1 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、得られた樹脂に2%ヒドラジンのNMP溶液を加え3時間振とうした。溶液をろ去後、2%ヒドラジンのNMP溶液を再び加えて終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。得られた樹脂に対してFmoc-Gly-OH (29.7 mg)、0.5 M OxymaPure in NMP (200μL) およびdiisopropylcarbodiimide (15.9μL) を順次加えた後、終夜振とうした。反応液をろ去後、樹脂をNMPで6回洗浄した。Kaiser testが陰性であることを確認した後、20%ピペリジンのNMP溶液を加えて1分間振とうした。溶液をろ去後、20%ピペリジンのNMP溶液を再び加えて20分間振とうした。溶液をろ去後、樹脂をNMPで10回洗浄した。このFmocアミノ酸の縮合－Fmoc脱保護のサイクルを繰り返すことで、Gly-Gly-Gly、Oda(OtBu)を順次縮合した。樹脂をMeOHで洗浄後、減圧乾燥することで、Boc-NMeTyr(tBu)- Aib-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-αMePhe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(-Gly-Gly-Gly-Gly-Oda(OtBu))-Ser(tBu)-Ile-Aib-Leu-Glu(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Iva-Glu(OtBu)-Phe-Val-Arg(Pbf)-His(Trt)-Leu-Leu-Asn(Trt)-Lys(Boc)-Aib-Thr(tBu)-Arg(Pbf)-Gln(Trt)-Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-Sieber amide resinを109.1 mg得た。

【0294】

得られた樹脂109.1 mgにTFA:m-cresol:thioanisole:ethandithiol:H₂O:triisopropylsilane (80:5:5:5:2.5:2.5)を1 mL加え、1.5時間攪拌した。反応溶液にジエチルエーテルを加え沈殿を得、遠心分離後、上清を除く操作を3度繰り返し、沈殿を洗浄した。残渣を50%酢酸水溶液で抽出、ろ過により樹脂を除いた後、YMC-Actus Triart Prep C8 S-10μm 20 nm column (250 × 20 mm I.D.) を用いた分取HPLCで、A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルによる流量8 mL/分、A/B: 61/39-51/49への直線型濃度勾配溶出 (60分) を行い、目的物を含む分画を集め凍結乾燥し10.5 mgの白色粉末を得た。
質量分析による (M+H)⁺ 4777.2 (計算値4776.6)
HPLC溶出時間：14.5分
溶出条件：
カラムYMC Triart C8 (100 × 4.6 mm I.D.)
溶離液：A液: 0.1%TFA-水、B液: 0.1%TFA含有アセトニトリルを用い、A/B: 80/20～30/70へ。直線型濃度勾配溶出 (25分)。
流速：1.0 mL/分

【0295】

試験例１
細胞内ｃＡＭＰ濃度変動を指標にした、ヒトＮＰＹ２Ｒ、ヒトＧＩＰＲ、およびヒトＧＬＰ－１Ｒに対するアゴニスト活性の評価
（１）ヒトＮＰＹ２Ｒ遺伝子の発現細胞の構築
ＧｅｎｅｂａｎｋのＡｃｃｅｓｓｉｏｎ Ｎｏ．ＡＣ１０４４０７と同一の配列を有するヒトＮＰＹ２Ｒ遺伝子をｐＡＫＫＯ１１１４ベクターにクローニングし、ｈＮＰＹ２Ｒ／ｐＡＫＫＯ１１１４を作製した。次に、ｐＧＬ４．２９（プロメガ）をＣＨＯ―Ｋ１細胞に導入して、Ｈｙｇｒｏｍｙｃｉｎで選抜し、Ｃｒｅ－ｌｕｃレポーター細胞を構築した。この細胞にｈＮＰＹ２Ｒ／ｐＡＫＫＯ１１１４とｐｃＤＮＡ３．１（ライフテクノロジーズ）をコトランスフェクションして、Ｇｅｎｅｔｉｃｉｎで細胞を選抜した。次に、得られた形質転換体からヒトＰＹＹ (３－３６)の添加により、ルシフェラーゼが発現誘導される株、ｐＡＫＫＯ１１１４／ｈＮＰＹ２Ｒ＃４８１ Ｎｏ．８８細胞を選択した。

【0296】

（２）ヒトＧＩＰ遺伝子の発現細胞の構築
ＧｅｎｅｂａｎｋのＡｃｃｅｓｓｉｏｎ Ｎｏ．Ｕ３９２３１と同一の配列を有するヒトＧＩＰＲ遺伝子をｐＭＳＲα－ｎｅｏベクターにクローニングし、ｈＧＩＰＲ／ｐＭＳＲα－ｎｅｏを作製した。このベクターを（１）で得られたＣｒｅ－ｌｕｃレポーター細胞に導入することにより形質転換体を得た。次に、得られた形質転換体からＧＩＰの添加により、ルシフェラーゼが発現誘導される株、ｈＧＩＰＲ／ＣＨＯ－Ｋ１細胞を選択した。

【0297】

（３）ヒトＧＬＰ－１Ｒ遺伝子の発現細胞の構築
ＧｅｎｅｂａｎｋのＡｃｃｅｓｓｉｏｎ Ｎｏ．ＮＭ＿００２０６２と同一の配列を有するヒトＧＬＰ－１Ｒ遺伝子をｐＩＲＥＳｎｅｏ３ベクター（クロンテック）にクローニングし、ｈＧＬＰ－１／ｐＩＲＥＳｎｅｏ３を作製した。このベクターを（１）で得られたＣｒｅ－ｌｕｃレポーター細胞に導入することにより形質転換体を得た。次に、得られた形質転換体からヒトＧＬＰ－１（７－３７）ペプチドの添加により、ルシフェラーゼが発現誘導される株、ｈＧＬＰ－１Ｒ／Ｃｒｅｌ細胞を選択した。

【0298】

（４）ヒトＮＰＹ２Ｒ遺伝子のレポーターアッセイ
ｐＡＫＫＯ１１１４／ｈＮＰＹ２Ｒ＃４８１ Ｎｏ．８８細胞を３８４ウェル白色プレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ、３５７０）に５,０００ ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌとなるように２５μＬずつ播種し、１０％ウシ胎児血清、１００Ｕ／ｍＬペニシリン、１００μｇ／ｍＬストレプトマイシンを含むＨａｍＦ１２培地中で３７℃のＣＯ_２インキュベーター内で一晩培養した。翌日培地を除き、最終１．２μＭフォルスコリンになるようにしたアッセイ培地（０．１％ ＢＳＡ、１００Ｕ／ｍＬペニシリン、１００μｇ／ｍＬストレプトマイシンを含むＨａｍＦ１２培地）を２５μＬずつ添加した。次に被検化合物を含むアッセイ培地５μＬを添加して、最終１μＭ濃度で３７℃のＣＯ_２インキュベーター内で４時間インキュベーションした。ステディーグロー（プロメガ）を３０μＬずつ添加し、遮光下で２０分間静置した。プレートリーダーＥｎｖｉｓｉｏｎ（パーキンエルマー）を用いてルシフェラーゼ活性を測定した。ＤＭＳＯを添加した場合のルシフェラーゼ活性を１００％、被検化合物の代わりに１μＭ ヒトＰＹＹ（３－３６）を添加した場合のルシフェラーゼ活性を０％として、細胞内ｃＡＭＰ濃度下降を指標にＮＰＹ２Ｒアゴニスト活性を算出した。結果を表１に示す。

【0299】

（５）ヒトＧＩＰＲおよびＧＬＰ－１Ｒ遺伝子のレポーターアッセイ
ｈＧＩＰＲ／ＣＨＯ－Ｋ１細胞あるいはｈＧＬＰ－１Ｒ／Ｃｒｅｌ細胞を３８４ウェル白色プレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ、３５７０）に５,０００ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌとなるように２５μＬずつ播種し、１０％ウシ胎児血清、１００Ｕ／ｍＬペニシリン、１００μｇ／ｍＬストレプトマイシンを含むＨａｍＦ１２培地中で３７℃のＣＯ_２インキュベーター内で一晩培養した。翌日、細胞に被検化合物を含む培地５μＬを添加して、最終１μＭ濃度で３７℃のＣＯ_２インキュベーター内で４時間インキュベーションした。ステディーグロー（プロメガ）を３０μＬずつ添加し、遮光下で振盪した。３０分後、プレートリーダーＥｎｖｉｓｉｏｎ（パーキンエルマー）を用いてルシフェラーゼ活性を測定した。ＧＩＰアゴニスト活性の場合は、１０μＭのＧＩＰ存在下におけるルシフェラーゼ活性を１００％、被検化合物の代わりにＤＭＳＯを添加した場合のルシフェラーゼ活性を０％として、細胞内ｃＡＭＰ濃度上昇を指標にＧＩＲＲアゴニスト活性を算出した。結果を表１に示す。

【0300】

ＧＬＰ－１Ｒアゴニスト活性の場合は、ｈＧＬＰ－１Ｒ／Ｃｒｅｌ細胞を用いて、上記と同様のアッセイを行った。１０μＭのＧＬＰ－１存在下におけるルシフェラーゼ活性を１００％、被検化合物の代わりにＤＭＳＯを添加した場合のルシフェラーゼ活性を０％として、細胞内ｃＡＭＰ濃度上昇を指標にＧＬＰ－１Ｒアゴニスト活性を算出した。結果を表２に示す。

【0301】

【表2】

【0302】

試験例２
単回投与後の摂食抑制作用評価
被検化合物の摂食抑制活性は以下の方法で調べた。
被検化合物を30 もしくは100 nmol/2 mLの濃度で溶媒（10% DMSO含有生理食塩水）に溶解した。8-9週齢の雄性C57BL/6Jマウス（20-26℃、餌と水は自由摂取、12時間明期－12時間暗期で飼育）の背部に被検化合物溶液を2 mL/kgの容量で皮下投与した。投与は1日1回3日間行った。投与後飼育ケージにて個別飼育とし、予め秤量した餌を与え、投与開始から3日間の摂餌量を測定した。摂餌量は投与開始日に与えた餌の重量から餌残量を差し引くことで算出した。各被検化合物の摂食抑制活性は、溶媒のみを投与した対照群の摂餌量を抑制率0％とし、投与開始から3日間の累積の摂餌量で評価した。被検化合物の摂食抑制率（%）は（対照群の摂餌量－被検化合物投与群の摂餌量）／対照群の摂餌量×100と定義した。

【0303】

表３に示されるように本発明化合物は摂食抑制作用を有する。

【0304】

【表3】

【0305】

試験例３
DIO（diet-induced obese)マウスにおける反復投与試験
反復投与試験
雄性DIO C57BL/6Jマウス（40週齢）を体重、摂食、および血漿指標に基づき群分けした。ビークル、または実施例41の化合物（Ｐ４１）を1日1回、4週間、皮下投与した。試験中、体重、食餌摂取量を測定した。化合物は10% DMSO/salineに溶解させた。試験後、血液を採取し、血漿指標を測定した。29日目に、体組成をEchoMRI（Hitachi Aloka Medical, Ltd., Japan）により測定した。動物を屠殺した後、4週間薬物投与した後のDIOマウスから肝臓を単離し、ヘマトキシリンエオジン（HE）染色を実施した。肝臓は4%パラホルムアルデヒドで固定、パラフィン包埋、切片化して、HEで染色した。処置後、光学顕微鏡（NanoZoomer, Hamamatsu Photonics）で切片を検査した。

【0306】

定量的リアルタイムPCR
全RNAはQIAzol 試薬（Quiagen, Tokyo, Japan）を用いて肝臓から単離し、cDNAはHigh-Capacity cDNA Reverse Transcription Kit（Applied Biosystems, CA, USA）を用いて合成した。定量的RT-PCRはABI Prism 7900 Sequence Detection System with EXPRESS qPCR Super Mix（Thermo Fisher Scientific Inc. MA. USA）を用いて実施した。プライマー混合物及びプローブ（Applied Biosystems）を用いてmRNAを定量した（表４）。発現レベルはβアクチンとペプチジルイソメラーゼの発現レベルで標準化した。

【0307】

【表4】

【0308】

測定方法
血漿グルコース、トリグリセリド（TG）、全コレステロール（TC）、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ（AST）、アラニンアミノトランスフェラーゼ（ALT）はAutoanalyzer 7180（Hitachi High-Technologies Corporation, Japan）で分析した。血中グリコヘモグロビン（GHb）は自動GHb分析計（HLC-723G8, Tosoh, Tokyo, Japan）で測定した。肝臓トリグリセリド含量は次のようにして測定した。組織片を生理食塩水でホモジナイズし、ヘキサン：イソプロパノール（3:2）溶液を加えて脂質を抽出した。脂質層を回収し、乾燥したのちイソプロパノールに溶解した。トリグリセリドの濃度はTriglyceride E-test （Wako Pure Chemical Industries, Ltd, Japan）により測定し、1 gあたりのトリグリセリドの量を算出した。血漿インスリンはELISA Assay kit（Shibayagi Co. Ltd., Japan）で測定した。

【0309】

DIOマウスにおけるＰ４１の抗肥満作用
DIOマウスにおける4週間反復投与を実施し、Ｐ４１の抗肥満作用を評価した。 3, 10および30nmol / kgの用量でＰ４１を毎日投与することで、体重はそれぞれ14.6％、30.0％および37.1％減少した（図1a）。累積食餌摂取量の同様の低下が、Ｐ４１処置群において用量依存的に観察された（図1b）。EchoMRIを用いた体組成分析では、Ｐ４１投与群では、除脂肪量のわずかな減少とは対照的に、脂肪量の大幅な減少が用量依存的に観察された（図1c、d）。この結果に相関して、Ｐ４１は、用量依存的に鼠径部、腸間膜及び副睾丸脂肪体重を有意に減少させた（図1e）。生化学的指標測定において、血漿TCおよびインスリンレベルは、Ｐ４１処置群すべてにおいて、有意かつ用量依存的に改善された。脂肪肝への影響については、肝臓重量（図1f）、肝臓内TG含量（図1g）、血漿AST及びALT（表５）が用量依存的にＰ４１によって劇的に減少した。肝臓切片のHE染色により、肝臓の脂質滴の減少が観察された（図1h）。肝臓の遺伝子発現解析により、メタロペプチダーゼ阻害剤1（Timp1）、I型コラーゲンα1（Col1a）のような線維症に関連する遺伝子、およびCCモチーフケモカインリガンド2（CCl2）のような炎症に関連する遺伝子が減少し、マトリックスメタロペプチダーゼ2（MMP2）のような線維阻害因子は増加する傾向があった（図1i）。総じて、Ｐ４１のDIOマウスへの4週間の処置により、強力な抗肥満作用とともに、脂肪肝の改善作用が認められた。

【0310】

【表5】

【0311】

試験例４
ob/obマウスにおける反復投与試験

【0312】

雄性ob/obマウス（9週齢）は、体重、食物摂取量、および血漿指標の値に基づき群分けした。ビークルまたはＰ４１を1日1回、4週間、皮下投与した。試験中、体重及び食餌摂取量を測定した。化合物は10％ DMSO/salineに溶解した。 試験後に血液を採取し、血漿指標を測定した。 29日目に、動物を屠殺した。

【0313】

測定方法
血漿グルコース、トリグリセリド（TG）、全コレステロール（TC）、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ（AST）、アラニンアミノトランスフェラーゼ（ALT）はAutoanalyzer 7180（Hitachi High-Technologies Corporation, Japan）で分析した。血中グリコヘモグロビン（GHb）は自動GHb分析計（HLC-723G8, Tosoh, Tokyo, Japan）で測定した。肝臓トリグリセリド含量は次のようにして測定した。組織片を生理食塩水でホモジナイズし、ヘキサン：イソプロパノール（3:2）溶液を加えて脂質を抽出した。脂質層を回収し、乾燥したのちイソプロパノールに溶解した。トリグリセリドの濃度はTriglyceride E-test （Wako Pure Chemical Industries, Ltd, Japan）により測定し、1 gあたりのトリグリセリドの量を算出した。血漿インスリンはELISA Assay kit（Shibayagi Co. Ltd., Japan）で測定した。

【0314】

ob/obマウスにおけるＰ４１の抗肥満及び抗糖尿病作用
次に、ob/obマウスにおけるＰ４１の抗肥満及び抗糖尿病作用を評価した。 10, 30および100nmol/kgの用量で4週間 Ｐ４１を投与した結果、GHb（図2a）、および血漿グルコースレベルの有意な低下を示した（図2b）。血漿インスリンレベルの用量依存的な減少も、Ｐ４１処置群で観察された（図2c）。抗肥満作用に関して、Ｐ４１は、ビークルと比較して強力かつ用量依存的な体重及び累積食餌摂取量の減少を示した（図2d、e）。Ｐ４１は、体重減少と同様に、肝臓および腸間膜、精巣上体ならびに鼠径部の各脂肪組織重量、および肝臓内TG含量を用量依存的に減少させた（図2f、g）。生化学的指標では、血漿TC、TG、ASTおよびALTが、Ｐ４１処置群において有意かつ用量依存的に改善した（表６）。

【0315】

【表6】

【0316】

試験例５
KKA^yマウスにおけるＰ４１の反復投与
雄性KKA^yマウス（10週齢）は、体重、摂食量、糖化ヘモグロビン（GHb）、および血漿指標の値に基づき群分けした。Ｐ４１は1日1回4週間皮下投与した。化合物は10％DMSO/salineに溶解した。試験中、体重、および食餌摂取量を測定した。試験後、血液を採取し、GHbおよび血漿指標を測定した。動物を屠殺し、肝臓及び脂肪組織を単離し、重量を測定した。肝組織片から脂質を抽出し、肝臓内トリグリセリド（TG）含量を測定した。

【0317】

測定方法
血漿グルコースおよびTGは、Autoanalyzer 7180（Hitachi High-Technologies Corporation、Japan）で測定した。血中GHbは自動GHb分析計（HLC-723G8、Tosoh、Tokyo、Japan）を用いて測定した。血漿インスリンはELISA Assayキット（Shibayagi Co.、Ltd.、Japan）を用いて測定した。肝臓内TG含量は以下のように測定した。組織片を生理食塩水中でホモジナイズし、ヘキサン：イソプロパノール（3：2）溶液を添加して脂質を抽出した。脂質相を回収し、乾燥し、次いでイソプロパノールに溶解した。TG濃度はTriglyceride E-test（Wako Pure Chemical Industries）で測定し、肝臓1gあたりのTG含量を算出した。

【0318】

雄性KKA^yマウスにおけるＰ４１の4W反復投与試験
Ｐ４１の抗肥満および抗糖尿病作用を評価するために、KKA^yマウスにおける4週間反復投与試験を実施した。10、30、および100nmol/kgの用量でＰ４１を毎日皮下注射すると、ビークル群に比べて体重がそれぞれ4.2、9.8、および30.1％減少した（図3a）。同様の用量依存的な累積食餌摂取量の減少が、Ｐ４１処置群で観察された（図3b）。抗糖尿病効果に関して、Ｐ４１は、GHb、血漿グルコース、および血漿インスリンレベルの用量依存的かつ有意な減少を示した（図3c～e）。体重減少と一致して、Ｐ４１処置群において肝臓組織重量の減少が観察された（図3f）。

【0319】

【表7】

【0320】

試験例６
味覚嫌悪（Conditioned taste aversion：CTA）試験
雄性C57BL/6J（9週齢）マウスを時間制限ボトル給水（2-3時間/日）、および生理食塩水の皮下注射に1週間馴化した。このマウスを、体重および摂水量の値に基づいて群分けした。 CTA試験は以下のプロトコールに従って行った。最初のコンディショニングのために1日目は、マウスに0.1％サッカリンナトリウム溶液を3時間与えた。サッカリン溶液供給10分後にビークル、リラグルチドまたはＰ４１を皮下投与した。なお、リラグルチドはＧＬＰ－１受容体活性化作用を有する。2日目は、マウスに水道水を3時間与え、給水後に生理食塩水を皮下注射した。3日目は、2度目のコンディショニングを、1日目と同じ手順で行った。4日目は、マウスに皮下注射をせずに3時間水道水を与えた。5日目は、マウスに皮下注射せずに水道水及びサッカリン溶液の両方を3時間与え、各液体の摂取量を測定した。サッカリン嗜好率（％）は、{（サッカリン摂取量）/（サッカリン摂取量+摂取量）}×100で算出した。

【0321】

マウスにおける味覚嫌悪試験
マウスで嘔吐作用を評価するためにCTA試験を実施した。10 nmol/kgの用量のリラグルチドはサッカリンの嗜好率を有意に低下させ、CTA誘導を示したのに対し、Ｐ４１は3 nmol/kgでもCTAを誘導しなかった。この投与量は、DIOマウスにおいてリラグルチドよりも強力な抗肥満効果を示す投与量である（図4）。

【0322】

【表8】

【0323】

試験例７
カニクイザルにおける試験
雄1匹と雌1匹のカニクイザル（4歳、体重：雄性3.9kg、雌性2.7kg）を使用した。サルは、22～27℃で12時間：12時間明暗スケジュールでそれぞれのケージで飼育し、100gのペレット食（Oriental Yeast Co. Ltd）を1日1回与えた。食餌は、投薬日に、投与8時間後の臨床観察終了後に与えられた。実験期間中の他の日には、検査終了後に毎日食餌を供給し、翌朝、残りの食餌を撤去した。Ｐ４１は0.5w/v％マンニトール溶液に溶解した。0.05mg/kgの化合物を1日目に皮下投与し、次いで0.15mg/kgを4日目に皮下投与した。体重は、投薬前期間及び1日目、4日目、8日目、11日目、および15日目に1回測定した。食餌摂取量は実験期間中毎日測定した。

【0324】

Ｐ４１はカニクイザルにおいて嘔吐を示すことなく摂餌量を低下させた。
Ｐ４１の食物摂取量に対する影響をカニクイザルで調べ、霊長類に対する有効性および嘔吐抑制効果を確認した。Ｐ４１を漸増用量（0.05および0.15 mg/kg;約10および30 nmol/kg）で皮下投与した。Ｐ４１は、両方の用量で、投薬後に雄及び雌における食餌消費をほぼ完全に消失させた。食餌消費の抑制効果は、少なくとも2日間持続した（図5）。Ｐ４１は、実験期間を通じて嘔吐を誘発せず、マウスで観察されたＰ４１の強力な摂食抑制、およびCTAに対する作用は非ヒト霊長類にも外挿できることが示された。

【0325】

製剤例１
(1)実施例１の化合物 １０.０mg
(2)乳糖 ７０.０mg
(3)コーンスターチ ５０.０mg
(4)可溶性デンプン ７.０mg
(5)ステアリン酸マグネシウム ３.０mg
実施例１の化合物１０.０mgとステアリン酸マグネシウム３.０mgを可溶性デンプンの水溶液０.０７mL（可溶性デンプンとして７.０mg）で顆粒化した後、乾燥し、乳糖７０.０mg及びコーンスターチ５０.０mgと混合する。混合物を圧縮して錠剤を得る。

【0326】

製剤例２
(1)実施例１の化合物 ５.０mg
(2)食塩 ２０.０mg
(3)蒸留水 全量２mLとする
実施例１の化合物５.０mg及び食塩２０.０mgを蒸留水に溶解させ、水を加えて全量２.０mLとする。溶液をろ過し、無菌条件下に２mLのアンプルに充填する。アンプルを滅菌した後、密封し注射用溶液を得る。

【産業上の利用可能性】

【0327】

本発明化合物は、Y2受容体、GLP-1受容体及びGIP受容体活性化作用を有し、Y2受容体、GLP-1受容体及びGIP受容体に関連した各種疾患、例えば、肥満症や糖尿病等の予防・治療薬として有用であり得る。

【0328】

本明細書中で引用した全ての刊行物、特許及び特許出願をそのまま参考として本明細書中にとり入れるものとする。

【配列表フリーテキスト】

【0329】

配列番号１：人工配列（合成ペプチド（式(I)、式(II）または式（III）））
配列番号２：人工配列（合成ペプチド（参考例１））
配列番号３：人工配列（合成ペプチド（参考例２））
配列番号４：人工配列（合成ペプチド（参考例３））
配列番号５：人工配列（合成ペプチド（参考例４））
配列番号６：人工配列（合成ペプチド（参考例５））
配列番号７：人工配列（合成ペプチド（参考例６））
配列番号８：人工配列（合成ペプチド（参考例７））
配列番号９：人工配列（合成ペプチド（参考例８））
配列番号１０：人工配列（合成ペプチド（実施例１））
配列番号１１：人工配列（合成ペプチド（実施例２））
配列番号１２：人工配列（合成ペプチド（実施例３））
配列番号１３：人工配列（合成ペプチド（実施例４））
配列番号１４：人工配列（合成ペプチド（実施例５））
配列番号１５：人工配列（合成ペプチド（実施例６））
配列番号１６：人工配列（合成ペプチド（実施例７））
配列番号１７：人工配列（合成ペプチド（実施例８））
配列番号１８：人工配列（合成ペプチド（実施例９））
配列番号１９：人工配列（合成ペプチド（実施例１０））
配列番号２０：人工配列（合成ペプチド（実施例１１））
配列番号２１：人工配列（合成ペプチド（実施例１２））
配列番号２２：人工配列（合成ペプチド（実施例１３））
配列番号２３：人工配列（合成ペプチド（実施例１４））
配列番号２４：人工配列（合成ペプチド（実施例１５））
配列番号２５：人工配列（合成ペプチド（実施例１６））
配列番号２６：人工配列（合成ペプチド（実施例１７））
配列番号２７：人工配列（合成ペプチド（実施例１８））
配列番号２８：人工配列（合成ペプチド（実施例１９））
配列番号２９：人工配列（合成ペプチド（実施例２０））
配列番号３０：人工配列（合成ペプチド（実施例２１））
配列番号３１：人工配列（合成ペプチド（実施例２２））
配列番号３２：人工配列（合成ペプチド（実施例２３））
配列番号３３：人工配列（合成ペプチド（実施例２４））
配列番号３４：人工配列（合成ペプチド（実施例２５））
配列番号３５：人工配列（合成ペプチド（実施例２６））
配列番号３６：人工配列（合成ペプチド（実施例２７））
配列番号３７：人工配列（合成ペプチド（実施例２８））
配列番号３８：人工配列（合成ペプチド（実施例２９））
配列番号３９：人工配列（合成ペプチド（実施例３０））
配列番号４０：人工配列（合成ペプチド（実施例３１））
配列番号４１：人工配列（合成ペプチド（実施例３２））
配列番号４２：人工配列（合成ペプチド（実施例３３））
配列番号４３：人工配列（合成ペプチド（実施例３４））
配列番号４４：人工配列（合成ペプチド（実施例３５））
配列番号４５：人工配列（合成ペプチド（実施例３６））
配列番号４６：人工配列（合成ペプチド（実施例３７））
配列番号４７：人工配列（合成ペプチド（実施例３８））
配列番号４８：人工配列（合成ペプチド（実施例３９））
配列番号４９：人工配列（合成ペプチド（実施例４０））
配列番号５０：人工配列（合成ペプチド（実施例４１））
配列番号５１：人工配列（合成ペプチド（実施例４２））

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【配列表】

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