ホーム > 特許ランキング > 雪印メグミルク株式会社
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】特許公報(B2)
(11)【特許番号】
(24)【登録日】2022-05-26
(45)【発行日】2022-06-03
(54)【発明の名称】ＩＡＬＤ産生促進剤
(51)【国際特許分類】
A61K 35/745 20150101AFI20220527BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20220527BHJP
C12N 1/20 20060101ALN20220527BHJP
【ＦＩ】
A61K35/745
A61P43/00 111
C12N1/20 E
【請求項の数】
1
(21)【出願番号】P 2020195018
(22)【出願日】2020-11-25
(62)【分割の表示】P 2019101049の分割
【原出願日】2015-03-31
(65)【公開番号】P2021035992
(43)【公開日】2021-03-04
【審査請求日】2020-12-02
【微生物の受託番号】IPOD FREM P-10657
(73)【特許権者】
【識別番号】711002926
【氏名又は名称】雪印メグミルク株式会社
(72)【発明者】
【氏名】新井利信
(72)【発明者】
【氏名】瀬戸泰幸
【審査官】柴原 直司
(56)【参考文献】
【文献】特許第６６６６０５３（ＪＰ，Ｂ２）
【文献】国際公開第２００７／０２０８８４（ＷＯ，Ａ１）
【文献】Gastroenterology, (2013), 144, [5], Suppl.1, p.S-894-S-895(Tu1974)
(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)
Ａ６１Ｋ ３５／００－３５／７６８
ＣＡｐｌｕｓ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ）
ＪＳＴＰｌｕｓ／ＪＭＥＤＰｌｕｓ／ＪＳＴ７５８０（ＪＤｒｅａｍＩＩＩ）
(57)【特許請求の範囲】
【請求項1】
ビフィドバクテリウム・ロンガムの菌を有効成分とするＩＡＬＤ産生促進剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、ビフィドバクテリウム属の菌（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ属）、特に
ビフィドバクテリウム・ロンガム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｌｏｎｇｕｍ）の
菌を有効成分とする、ＩＡＬＤ（Ｉｎｄｏｌｅ－３－ａｌｄｅｈｙｄｅ）の産生促進剤に
関する。
ビフィドバクテリウム・ロンガム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｌｏｎｇｕｍ）の
菌を有効成分とする、ＩＡＬＤ（Ｉｎｄｏｌｅ－３－ａｌｄｅｈｙｄｅ）の産生促進剤に
関する。
【背景技術】
【0002】
トリプトファンから分解合成されるＩＡＬＤはＡｈＲレセプターを介してＩＬ－２２の
産生を促進することが知られている。ＩＬ－２２は抗菌ペプチドやムチンの産生を促進す
るので、有益なサイトカインである。
産生を促進することが知られている。ＩＬ－２２は抗菌ペプチドやムチンの産生を促進す
るので、有益なサイトカインである。
【0003】
ラクトバチルス・ロイテリ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｒｅｕｔｅｒｉ）がトリプ
トファンからＩＡＬＤ（Ｉｎｄｏｌｅ－３－ａｌｄｅｈｙｄｅ）の合成を促進する事が報
告されている（非特許文献１）。
トファンからＩＡＬＤ（Ｉｎｄｏｌｅ－３－ａｌｄｅｈｙｄｅ）の合成を促進する事が報
告されている（非特許文献１）。
【0004】
芳香族炭化水素レセプター（ＡｈＲ）活性化能を有する乳酸菌、ビフィドバクテリウム
属の菌およびプロピオン酸菌からなる群が示されているが、ＩＡＬＤに関する記載も示唆
もされていない（特許文献１）。
属の菌およびプロピオン酸菌からなる群が示されているが、ＩＡＬＤに関する記載も示唆
もされていない（特許文献１）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【0005】
【文献】再公表特許ＷＯ２０１２／０３３１５１
【非特許文献】
【0006】
【文献】Ｚｅｌａｎｔｅ Ｔ， Ｉａｎｎｉｔｔｉ ＲＧ， Ｃｕｎｈａ Ｃ， Ｄｅ Ｌｕｃａ Ａ， Ｇｉｏｖａｎｎｉｎｉ Ｇ， Ｐｉｅｒａｃｃｉｎｉ Ｇ， Ｚｅｃｃｈｉ Ｒ， Ｄ’Ａｎｇｅｌｏ Ｃ， Ｍａｓｓｉ－Ｂｅｎｅｄｅｔｔｉ Ｃ， Ｆａｌｌａｒｉｎｏ Ｆ， Ｃａｒｖａｌｈｏ Ａ， Ｐｕｃｃｅｔｔｉ Ｐ， Ｒｏｍａｎｉ Ｌ． Ｔｒｙｐｔｏｐｈａｎ ｃａｔａｂｏｌｉｔｅｓ ｆｒｏｍ ｍｉｃｒｏｂｉｏｔａ ｅｎｇａｇｅ ａｒｙｌ ｈｙｄｒｏｃａｒｂｏｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ａｎｄ ｂａｌａｎｃｅ ｍｕｃｏｓａｌ ｒｅａｃｔｉｖｉｔｙ ｖｉａ ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－２２． Ｉｍｍｕｎｉｔｙ． ２０１３ Ａｕｇ ２２；３９（２）：３７２－８５．
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0007】
上記のようにＩＡＬＤの産生促進によって、ＩＬ－２２の産生が促進され、抗菌ペプチ
ドやムチンを産生する事が確認されている。そこで、本発明は効率的にＩＡＬＤの産生を
促進し得る剤の提供を課題とする。
ドやムチンを産生する事が確認されている。そこで、本発明は効率的にＩＡＬＤの産生を
促進し得る剤の提供を課題とする。
【課題を解決するための手段】
【0008】
本発明者らは、数多くの乳酸菌を試験に供し、ビフィドバクテリウム属の菌、特にビフ
ィドバクテリウム・ロンガムの菌がＩＡＬＤを産生する機能が非常に高いことを見出し、
本発明を完成させるに至った。
すなわち、本発明は以下の構成からなる。
（１）ビフィドバクテリウム属の菌を有効成分とする、ＩＡＬＤ産生促進剤。
（２）ビフィドバクテリウム属の菌がビフィドバクテリウム・ロンガムの菌である、上記
（１）に記載のＩＡＬＤ産生促進剤。
（３）ビフィドバクテリウム属の菌がＳＢＴ－２９２８（ＦＥＲＭ Ｐ－１０６５７）で
ある、上記（１）に記載のＩＡＬＤ産生促進剤。
ィドバクテリウム・ロンガムの菌がＩＡＬＤを産生する機能が非常に高いことを見出し、
本発明を完成させるに至った。
すなわち、本発明は以下の構成からなる。
（１）ビフィドバクテリウム属の菌を有効成分とする、ＩＡＬＤ産生促進剤。
（２）ビフィドバクテリウム属の菌がビフィドバクテリウム・ロンガムの菌である、上記
（１）に記載のＩＡＬＤ産生促進剤。
（３）ビフィドバクテリウム属の菌がＳＢＴ－２９２８（ＦＥＲＭ Ｐ－１０６５７）で
ある、上記（１）に記載のＩＡＬＤ産生促進剤。
【発明の効果】
【0009】
本発明のビフィドバクテリウム属を有効成分とする、ＩＡＬＤ産生促進剤によれば、効
率的にＩＡＬＤの産生を増加でき、これによってＩＬ－２２の産生を促進することにより
、抗菌ペプチドやムチンの産生を増強する事ができる。
率的にＩＡＬＤの産生を増加でき、これによってＩＬ－２２の産生を促進することにより
、抗菌ペプチドやムチンの産生を増強する事ができる。
【図面の簡単な説明】
【0010】
【発明を実施するための形態】
【0011】
本発明において、「ＩＡＬＤ産生促進剤」とは、ＩＡＬＤ（Ｉｎｄｏｌｅ－３－ａｌｄ
ｅｈｙｄｅ）の産生を促進するための剤のことをいい、ビフィドバクテリウム属の菌を有
効成分とする剤のことをいう。この剤は、有効成分であるビフィドバクテリウム属の菌の
みからなる剤であってもよく、ＩＡＬＤの産生を抑制しないその他の物質を含む剤であっ
てもよい。
ｅｈｙｄｅ）の産生を促進するための剤のことをいい、ビフィドバクテリウム属の菌を有
効成分とする剤のことをいう。この剤は、有効成分であるビフィドバクテリウム属の菌の
みからなる剤であってもよく、ＩＡＬＤの産生を抑制しないその他の物質を含む剤であっ
てもよい。
【0012】
本発明において、「ＩＡＬＤ」とは、インドール－３－アルデヒド（Ｉｎｄｏｌｅ－３
－ａｌｄｅｈｙｄｅ）のことをいう。
－ａｌｄｅｈｙｄｅ）のことをいう。
【0013】
本発明の「ＩＡＬＤ産生促進剤」の有効成分であるビフィドバクテリウム属の菌として
、ビフィドバクテリウム・アドレセンティス（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ａｄｏ
ｌｅｓｃｅｎｔｉｓ）、ビフィドバクテリウム・ロンガム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉ
ｕｍ ｌｏｎｇｕｍ）、ビフィドバクテリウム・インファンティス（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃ
ｔｅｒｉｕｍ ｉｎｆａｎｔｉｓ）、ビフィドバクテリウム・シュードロンガム（Ｂｉｆ
ｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｐｓｅｕｄｏｌｏｎｇｕｍ）、ビフィドバクテリウム・ビフ
ィダム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｉｆｉｄｕｍ）、ビフィドバクテリウム・
ブレイブ（Ｂｉｆｏｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｒｅｖｅ）、ビフィドバクテリウム・シ
ュードカテニュラタム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｐｓｅｕｄｏｃａｔｅｎｕｌ
ａｔｕｍ）、ビフィドバクテリウム・カテニュラタム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ
ｃａｔｅｎｕｌａｔｕｍ）、ビフィドバクテリウム・アングラタム（Ｂｉｆｉｄｏｂａ
ｃｔｅｒｉｕｍ ａｎｇｕｌａｔｕｍ）またはビフィドバクテリウム・アニマリス（Ｂｉ
ｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ａｎｉｍａｌｉｓ）等の菌が挙げられ、これらを一種以上
または二種以上組み合わせて含むものであっても良い。このうち、ビフィドバクテリウム
・ロンガムの菌を有効成分とすることが好ましい。ビフィドバクテリウム・ロンガムの菌
として、特にＳＢＴ－２９２８（ＦＥＲＭ Ｐ－１０６５７）を有効成分として含むこと
が好ましい。
、ビフィドバクテリウム・アドレセンティス（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ａｄｏ
ｌｅｓｃｅｎｔｉｓ）、ビフィドバクテリウム・ロンガム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉ
ｕｍ ｌｏｎｇｕｍ）、ビフィドバクテリウム・インファンティス（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃ
ｔｅｒｉｕｍ ｉｎｆａｎｔｉｓ）、ビフィドバクテリウム・シュードロンガム（Ｂｉｆ
ｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｐｓｅｕｄｏｌｏｎｇｕｍ）、ビフィドバクテリウム・ビフ
ィダム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｉｆｉｄｕｍ）、ビフィドバクテリウム・
ブレイブ（Ｂｉｆｏｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｒｅｖｅ）、ビフィドバクテリウム・シ
ュードカテニュラタム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｐｓｅｕｄｏｃａｔｅｎｕｌ
ａｔｕｍ）、ビフィドバクテリウム・カテニュラタム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ
ｃａｔｅｎｕｌａｔｕｍ）、ビフィドバクテリウム・アングラタム（Ｂｉｆｉｄｏｂａ
ｃｔｅｒｉｕｍ ａｎｇｕｌａｔｕｍ）またはビフィドバクテリウム・アニマリス（Ｂｉ
ｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ａｎｉｍａｌｉｓ）等の菌が挙げられ、これらを一種以上
または二種以上組み合わせて含むものであっても良い。このうち、ビフィドバクテリウム
・ロンガムの菌を有効成分とすることが好ましい。ビフィドバクテリウム・ロンガムの菌
として、特にＳＢＴ－２９２８（ＦＥＲＭ Ｐ－１０６５７）を有効成分として含むこと
が好ましい。
【実施例】
【0014】
以下に、本発明の実施例をあげて本発明をさらに詳細に説明するが、本発明はこれらに
限定されるものではない。
限定されるものではない。
【0015】
〔実施例１〕
１．１．菌体の準備
表１に示した乳酸菌１１株及びビフィドバクテリウム属の菌１２株を供試菌として使用
した。乳酸菌はＭＲＳ液体培地にて、ビフィドバクテリウム属の菌はＧＡＭ液体培地にて
３７℃，１６時間静置培養した。各菌体を遠心分離（１，９１２×ｇ，４℃，１０ｍｉｎ
）にて回収し、１ｍＭ ＭｇＳＯ４を含有する１００ｍＭ リン酸カリウム緩衝液（ｐＨ
７、以下、緩衝液と呼ぶ）を用いて３回洗浄した。
１．１．菌体の準備
表１に示した乳酸菌１１株及びビフィドバクテリウム属の菌１２株を供試菌として使用
した。乳酸菌はＭＲＳ液体培地にて、ビフィドバクテリウム属の菌はＧＡＭ液体培地にて
３７℃，１６時間静置培養した。各菌体を遠心分離（１，９１２×ｇ，４℃，１０ｍｉｎ
）にて回収し、１ｍＭ ＭｇＳＯ４を含有する１００ｍＭ リン酸カリウム緩衝液（ｐＨ
７、以下、緩衝液と呼ぶ）を用いて３回洗浄した。
【0016】
【表1】
【0017】
１．２．反応条件
反応は休止菌体系にて実施した。表１に示したように、菌体懸濁液を供試菌によってＯ
．Ｄ．６００＝３．７～７．９に調整して、次のＡ、Ｂの２つの反応液組成にて３７℃で
１８時間、反応を行った。
反応液組成Ａ：２０ｍＭ トリプトファン
反応液組成Ｂ：２０ｍＭ トリプトファン ａｎｄ ２０ｍＭ α－ケトグルタル酸
反応は休止菌体系にて実施した。表１に示したように、菌体懸濁液を供試菌によってＯ
．Ｄ．６００＝３．７～７．９に調整して、次のＡ、Ｂの２つの反応液組成にて３７℃で
１８時間、反応を行った。
反応液組成Ａ：２０ｍＭ トリプトファン
反応液組成Ｂ：２０ｍＭ トリプトファン ａｎｄ ２０ｍＭ α－ケトグルタル酸
【0018】
１．３．反応産物の定量
反応液は遠心分離後（９，１００×ｇ，４℃，１０ｍｉｎ）、上清を回収し、フィルタ
ー（０．２２μｍ）にて不溶物を除去したものをＨＰＬＣ分析サンプルとした。分析はＡ
ｇｉｌｅｎｔ社の１２００シリーズを使用した。溶離液Ａ（９５％ Ｍｉｌｌｉ－Ｑ ｗ
ａｔｅｒ，５％ Ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ（ＡＣＮ），０．０５％ Ｔｒｉｆｌｕｏｒ
ｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ（ＴＦＡ））で平衡化したＯＤＳカラム（Ｈｙｄｒｏｓｐｈｅ
ｒｅ Ｃ１８ 粒子径（μｍ）Ｓ－５，細孔径 ４．６Ｘ２５０，品番 ＨＳ１２Ｓ０５
－２５４６ＷＴ，メーカー ＹＭＣ）に分析サンプルを１０μｌインジェクトし、流速１
ｍｌ／ｍｉｎとして溶離液Ｂ（５％ Ｍｉｌｌｉ－Ｑ ｗａｔｅｒ，９５％ ＡＣＮ，０
．０５％ ＴＦＡ）の濃度勾配（％Ｂ（ｔｉｍｅ）：１０（０）→５０（１６）→５０（
１６）→１００（１６．１）→１００（２０）→１０（２０．１）→１０（２６））によ
り行った。カラムオーブンは４０℃とした。分光光度計にてＩＡＬＤの吸収波長の試験を
行った結果、ＩＡＬＤの検出は３００ｎｍにおける吸収を利用した。ここで、合成活性（
Ｓｙｎｔｈｅｓｉｚｉｎｇ ａｃｔｉｖｉｔｙ）を、反応により生成したＩＡＬＤ合成量
（Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ． ｐｐｍ）を供試菌のＯ．Ｄ．６００の値で割った値と
定義する（式１）。
反応液は遠心分離後（９，１００×ｇ，４℃，１０ｍｉｎ）、上清を回収し、フィルタ
ー（０．２２μｍ）にて不溶物を除去したものをＨＰＬＣ分析サンプルとした。分析はＡ
ｇｉｌｅｎｔ社の１２００シリーズを使用した。溶離液Ａ（９５％ Ｍｉｌｌｉ－Ｑ ｗ
ａｔｅｒ，５％ Ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ（ＡＣＮ），０．０５％ Ｔｒｉｆｌｕｏｒ
ｏａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ（ＴＦＡ））で平衡化したＯＤＳカラム（Ｈｙｄｒｏｓｐｈｅ
ｒｅ Ｃ１８ 粒子径（μｍ）Ｓ－５，細孔径 ４．６Ｘ２５０，品番 ＨＳ１２Ｓ０５
－２５４６ＷＴ，メーカー ＹＭＣ）に分析サンプルを１０μｌインジェクトし、流速１
ｍｌ／ｍｉｎとして溶離液Ｂ（５％ Ｍｉｌｌｉ－Ｑ ｗａｔｅｒ，９５％ ＡＣＮ，０
．０５％ ＴＦＡ）の濃度勾配（％Ｂ（ｔｉｍｅ）：１０（０）→５０（１６）→５０（
１６）→１００（１６．１）→１００（２０）→１０（２０．１）→１０（２６））によ
り行った。カラムオーブンは４０℃とした。分光光度計にてＩＡＬＤの吸収波長の試験を
行った結果、ＩＡＬＤの検出は３００ｎｍにおける吸収を利用した。ここで、合成活性（
Ｓｙｎｔｈｅｓｉｚｉｎｇ ａｃｔｉｖｉｔｙ）を、反応により生成したＩＡＬＤ合成量
（Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ． ｐｐｍ）を供試菌のＯ．Ｄ．６００の値で割った値と
定義する（式１）。
【0019】
[式１]
【0020】
結果を図１（反応液組成Ａ）、図２（反応液組成Ｂ）に示した。
図１、図２より、α－ケトグルタル酸の有無に関わらず、ラクトバチルス属（Ｌａｃｔ
ｏｂａｃｉｌｌｕｓ）と比較して、ビフィドバクテリウム属の菌（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔ
ｅｒｉｕｍ属）、特にビフィドバクテリウム・ロンガム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕ
ｍ ｌｏｎｇｕｍ）のＩＡＬＤ産生能が優れていることが確認できた。また、その中でも
特にＳＢＴ－２９２８（ＦＥＲＭ Ｐ－１０６５７）の効果が大きい事が確認できた。従
って、これらのビフィドバクテリウム属の菌を有効成分として、ＩＡＬＤ産生促進剤が提
供できることが示された。
図１、図２より、α－ケトグルタル酸の有無に関わらず、ラクトバチルス属（Ｌａｃｔ
ｏｂａｃｉｌｌｕｓ）と比較して、ビフィドバクテリウム属の菌（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔ
ｅｒｉｕｍ属）、特にビフィドバクテリウム・ロンガム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕ
ｍ ｌｏｎｇｕｍ）のＩＡＬＤ産生能が優れていることが確認できた。また、その中でも
特にＳＢＴ－２９２８（ＦＥＲＭ Ｐ－１０６５７）の効果が大きい事が確認できた。従
って、これらのビフィドバクテリウム属の菌を有効成分として、ＩＡＬＤ産生促進剤が提
供できることが示された。
【産業上の利用可能性】
【0021】
本発明のビフィドバクテリウム属の有効成分とする、ＩＡＬＤ産生促進剤によれば、効
率的にＩＡＬＤの産生を増加でき、これによってＩＬ－２２の産生を促進することにより
、抗菌ペプチドやムチンの産生を増強する事ができる。
率的にＩＡＬＤの産生を増加でき、これによってＩＬ－２２の産生を促進することにより
、抗菌ペプチドやムチンの産生を増強する事ができる。
【図1】
【図2】