特許 7156627 オキアミ成分含有組成物の製造方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】

(24)【登録日】2022-10-11

(45)【発行日】2022-10-19

(54)【発明の名称】オキアミ成分含有組成物の製造方法

(51)【国際特許分類】

   A61K 35/612 20150101AFI20221012BHJP

   C12P 1/00 20060101ALI20221012BHJP

【ＦＩ】

A61K35/612

C12P1/00 A

【請求項の数】 3

(21)【出願番号】P 2018070235

(22)【出願日】2018-03-30

(65)【公開番号】P2019178127

(43)【公開日】2019-10-17

【審査請求日】2021-03-18

(73)【特許権者】

【識別番号】390025793

【氏名又は名称】岩手県

(73)【特許権者】

【識別番号】000000387

【氏名又は名称】株式会社ＡＤＥＫＡ

(74)【代理人】

【識別番号】100106611

【弁理士】

【氏名又は名称】辻田 幸史

(74)【代理人】

【識別番号】100087745

【弁理士】

【氏名又は名称】清水 善廣

(74)【代理人】

【識別番号】100098545

【弁理士】

【氏名又は名称】阿部 伸一

(72)【発明者】

【氏名】山田 秀俊

(72)【発明者】

【氏名】白石 朗子

(72)【発明者】

【氏名】箱崎 真友佳

(72)【発明者】

【氏名】長洞 希

(72)【発明者】

【氏名】矢野 明

(72)【発明者】

【氏名】山▲崎▼ 裕也

(72)【発明者】

【氏名】小池 誠治

【審査官】柴原 直司

(56)【参考文献】

【文献】特開２００５－０８７０１７（ＪＰ，Ａ）

【文献】特開２０１５－１６３６０７（ＪＰ，Ａ）

【文献】特開２０１７－１２２０６７（ＪＰ，Ａ）

【文献】特表２０１４－５０９３３９（ＪＰ，Ａ）

【文献】米国特許出願公開第２０１３／０２７４４９６（ＵＳ，Ａ１）

【文献】中国特許出願公開第１０５５４２９３６（ＣＮ，Ａ）

(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)

Ａ６１Ｋ ３５／６１２

ＣＡｐｌｕｓ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ）

ＪＳＴＰｌｕｓ／ＪＭＥＤＰｌｕｓ／ＪＳＴ７５８０（ＪＤｒｅａｍＩＩＩ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

水中に懸濁したオキアミの破砕物を、ｐＨ３～４の条件下で麹菌由来のプロテアーゼを用いて酵素処理することによって得られる処理液を、オイル画分を含む液分と固形分に分離した後、得られたオイル画分を含む液分をオイル画分と水画分に分離し、得られたオイル画分を乾燥することによる、オキアミ成分含有組成物の製造方法。

【請求項2】

ｐＨの調整を有機酸および／または炭酸を用いて行うことによる、請求項１記載の製造方法。

【請求項3】

有機酸がクエン酸である、請求項２記載の製造方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、医薬品素材や食品素材などとして用いることができるオキアミ成分含有組成物の製造方法に関する。

【背景技術】

【0002】

オキアミ（Ｅｕｐｈａｕｓｉａｃｅａ）は、養殖魚のエサや釣りのエサなどとして利用されている海洋生物であることは周知の通りである。また、オキアミの一種であるツノナシオキアミ（Ｅｕｐｈａｕｓｉａ ｐａｃｉｆｉｃａ）は、三陸地方ではイサダと呼ばれ、食用として馴染み深い。

【0003】

近年、オキアミには、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）やドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）などのω－３系脂肪酸、１－アルキルエーテル型リン脂質をはじめとする様々な生理活性成分が含まれていることが知られるに至り、オキアミ由来の医薬品素材や食品素材の研究開発が精力的に行われている（例えば特許文献１や特許文献２）。しかしながら、オキアミに含まれている生理活性成分を医薬品素材や食品素材として提供するためのさらなる方法の探索は、今なお意義深い状況にある。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0004】

【文献】特開２０１７－１２２０６７号公報

【文献】特開２０１７－１５５０２５号公報

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0005】

そこで本発明は、医薬品素材や食品素材などとして用いることができるオキアミ成分含有組成物の製造方法を提供することを目的とする。

【課題を解決するための手段】

【0006】

本発明者らは上記の点に鑑みて鋭意検討を行った結果、水中に懸濁したオキアミの破砕物を、所定の酸性条件下で麹菌由来のプロテアーゼを用いて酵素処理することにより、医薬品素材や食品素材などとして用いることができるオキアミ成分含有組成物を製造することができることを見出した。

【0007】

上記の知見に基づいてなされた本発明のオキアミ成分含有組成物の製造方法は、請求項１記載の通り、水中に懸濁したオキアミの破砕物を、ｐＨ３～４の条件下で麹菌由来のプロテアーゼを用いて酵素処理することによって得られる処理液を、オイル画分を含む液分と固形分に分離した後、得られたオイル画分を含む液分をオイル画分と水画分に分離し、得られたオイル画分を乾燥することによる。
また、請求項２記載の製造方法は、請求項１記載の製造方法において、ｐＨの調整を有機酸および／または炭酸を用いて行うことによる。
また、請求項３記載の製造方法は、請求項２記載の製造方法において、有機酸がクエン酸である。

【発明の効果】

【0008】

本発明によれば、医薬品素材や食品素材などとして用いることができるオキアミ成分含有組成物の製造方法を提供することができる。

【発明を実施するための最良の形態】

【0009】

本発明のオキアミ成分含有組成物の製造方法は、水中に懸濁したオキアミの破砕物を、ｐＨ３～４の条件下で麹菌由来のプロテアーゼを用いて酵素処理することによって得られるオイル画分を乾燥することによるものである。

【0010】

本発明において原料として用いるオキアミは、特に限定されるものではなく、三陸地方でイサダと呼ばれているツノナシオキアミの他、ナンキョクオキアミ（Ｅｕｐｈａｕｓｉａ ｓｕｐｅｒｂａ）などであってもよい。オキアミは生のものを用いてもよいし、凍結したもの（例えば無加水や加水の冷凍ブロックであって－５０℃以下で保存したもの）を用いてもよい。

【0011】

オキアミの破砕は、例えば、室温環境下において、－１０～－３℃に維持したオキアミを（凍結したオキアミはこの温度域まで解凍してから）、ミートチョッパーを用いて粗く行った後、マスコロイダーを用いてペースト状になるまで行うことが、優れた品質のオキアミ成分含有組成物を製造することができる点において望ましい。

【0012】

こうして得られたオキアミの破砕物を、水中に懸濁し、ｐＨ３～４の条件下で麹菌（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｏｒｙｚａｅ）由来のプロテアーゼを用いて酵素処理する。オキアミの破砕物の水中への懸濁は、例えばオキアミの破砕物１重量部に０．３～０．７重量部の水を加えて撹拌することで行えばよい。麹菌由来のプロテアーゼは、麹菌由来の酸性プロテアーゼ、中性プロテアーゼ、アルカリ性プロテアーゼから選択される少なくとも１種であってよく、市販のものでは、これらの混合製剤であるコクラーゼＰ顆粒（三菱ケミカルフーズ社製）、中性プロテアーゼ製剤であるオリエンターゼＯＰ（エイチビィアイ社製）やスミチームＦＰ（新日本化学工業社製）などを用いることができる。麹菌由来のプロテアーゼは、例えばオキアミの破砕物１重量部に対して０．００１～０．０３重量部用い、その至適温度でオキアミの破砕物を酵素処理する。麹菌由来のプロテアーゼとしてコクラーゼＰ顆粒を用いる場合の至適温度は、５０～５５℃である。処理時間は、例えば３０分間～３時間であってよい。麹菌由来のプロテアーゼを用いたオキアミの破砕物の酵素処理を、ｐＨ３～４の条件下で行うのは、オキアミの破砕物を酵素処理することによって得られるオイル画分に含まれる脂質が、オキアミ自身が持つ脂質分解酵素によって分解されてしまうことを防ぐためである。なお、ｐＨの調整は、クエン酸、乳酸、酢酸、グルクロン酸、アスコルビン酸などの有機酸や、炭酸を用いて行えばよいが、中でもクエン酸を用いてｐＨの調整を行うことが、医薬品素材や食品素材などを製造するための安全性を確保する点で望ましい。クエン酸は、例えばオキアミの破砕物の水懸濁液１重量部に対して０．００１～０．０３重量部用いればよい。

【0013】

オキアミの破砕物を酵素処理した後、例えば処理液を７０～７５℃に加温して１０分間～１時間インキュベートすることでプロテアーゼの失活を行ってから、処理液に含まれるオイル画分を回収する。処理液からのオイル画分の回収は、例えば、室温環境下において、脱水型デカンタを用いて処理液を遠心分離することによってオイル画分を含む液分と固形分に分離した後、得られたオイル画分を含む液分を濃縮型デカンタを用いて遠心分離することによってオイル画分と水画分に分離することで行えばよい。

【0014】

最後に水画分から分離したオイル画分を乾燥することで、目的物であるオキアミ成分含有組成物を得る。オイル画分の乾燥は、例えばフリーズドライ法によって行えばよいが、スプレードライ法や熱風乾燥法などによって行うこともできる。目的物であるオキアミ成分含有組成物が固形物として得られた場合、顆粒状や粉末状に粉砕してもよい。

【0015】

以上の方法によって製造される本発明のオキアミ成分含有組成物は、例えば、タンパク質を３０～６０重量％の割合で、脂質を２５～５０重量％の割合で、水分を１～１５重量％の割合で含むものであり、とりわけ、脂質として哺乳動物において細胞の機能保持などのために重要な役割を果たしているとされるプラズマローゲン（ｐｌａｓｍａｌｏｇｅｎ）に生体内で変換されることが知られている１－アルキルエーテル型リン脂質を多く含む（本発明のオキアミ成分含有組成物の１～５重量％の割合）点が特筆に値する。従って、本発明のオキアミ成分含有組成物は、医薬品素材や食品素材などとして健康の維持や増強のために用いることができる。

【実施例】

【0016】

以下、本発明を実施例によって詳細に説明するが、本発明は以下の記載に限定して解釈されるものではない。

【0017】

実施例１：
三陸地方で漁獲されたイサダ（ツノナシオキアミ）の無加水冷凍ブロック（－５０℃保存のもの）１０ｔを－５℃で解凍し、市販のミートチョッパーを用いて粗く破砕した後、市販のマスコロイダーを用いてペースト状になるまで破砕した。得られたオキアミの破砕物１０ｔに５ｔの純水を加えて撹拌することで調製したオキアミの破砕物の水懸濁液１５ｔに、麹菌由来のプロテアーゼであるコクラーゼＰ顆粒（三菱ケミカルフーズ社製）５０ｋｇを加え、さらにクエン酸１５０ｋｇを加えることで液のｐＨを３～４に調整し、５０℃で酵素処理した。１時間後、処理液を７０℃に加温して３０分間インキュベートすることでプロテアーゼの失活を行った。処理液を室温まで冷却してから、市販の脱水型デカンタを用いて処理液を遠心分離することで、オイル画分を含む液分１３ｔを固形分から分離した。次に、得られたオイル画分を含む液分を市販の濃縮型デカンタを用いて遠心分離することで、オイル画分１．７ｔを水画分から分離した。得られたオイル画分（赤色ないし桃色のオイル状物）をフリーズドライした後、得られた固形物を粉砕することで、目的物である茶褐色の粉末状イサダ成分含有組成物３７４ｇを得た。こうして得られたイサダ成分含有組成物は、タンパク質を４４重量％の割合で、脂質を２８重量％の割合で、水分を１０重量％の割合で含むものであり（残部は炭化水素や灰分）、脂質の内訳は、中性脂質１６．４重量％、フォスファチジルエタノールアミン６．８重量％、フォスファチジルコリン４０．８重量％、ジアシルグリセロール１２．６重量％、遊離脂肪酸１６．７重量％、その他６．７重量％であって、イサダ成分含有組成物中に占める１－アルキルエーテル型リン脂質の割合は２．７重量％であった。なお、イサダ成分含有組成物に含まれる脂質の分析は、Ｂｌｉｇｈ－Ｄｙｅｒ法によって試料（イサダ成分含有組成物）０．２ｇから脂質を抽出して行った。抽出された脂質中の中性脂質、フォスファチジルエタノールアミン、フォスファチジルコリン、ジアシルグリセロール、遊離脂肪酸の割合は、１０ｍｇ／ｍＬの濃度でクロロホルムに溶解した脂質を１μＬ薄層クロマトグラフ－水素炎イオン化検出器（イアトロスキャン：ＬＳＩメディエンス社製）に供して測定した。薄層クロマトグラフは、クロロホルム／メタノール／水（４２：２４：２．５）で１次展開した後、ヘキサン／ジエチルエーテル（５０：３０）で２次展開することで、それぞれの脂質を分離した。１－アルキルエーテル型リン脂質は、抽出された脂質中の含量を高速液体クロマトグラフ（ＨＰＬＣ）を用いて定量し、試料中に占める割合を算出した。高速液体クロマトグラフは、０．３ｍｇ／ｍＬの濃度でクロロホルム／メタノール（２：１）に溶解した脂質の溶液３０μＬを分析サンプルとし、カラムはＬｉｃｈｒｏｓｐｈｅｒ １００ Ｄｉｏｌ ２５０ｘ４（Ａｇｉｌｅｎｔ社製）を用い、溶出液Ａとしてヘキサン／２－プロパノール／酢酸（８２：１７：１）０．０８％トリエチルアミン、溶出液Ｂとして２－プロパノール／水／酢酸（８５：１４：１）０．０８％トリエチルアミンを、溶出液Ａ９５％／溶出液Ｂ５％（２３分間グラジエント）溶出液Ａ６０％／溶出液Ｂ４０％（４分間グラジエント）溶出液Ａ１５％／溶出液Ｂ８５％（１分間ホールドの後に４分間グラジエント）溶出液Ａ９５％／溶出液Ｂ５％（１０分間ホールド）の条件で送液することによって行い、１－アルキルエーテル型リン脂質を分離し、分離した１－アルキルエーテル型リン脂質を光散乱検出器（ＳＯＦＴＡ社製）を用いて検出した。定量のための検量線作成には１－アルキルエーテル型リン脂質の標準品である１－ｈｅｘａｄｅｃｅｎｏｙｌ－２－ｏｌｅｏｙｌ－ｓｎ－ｇｌｙｃｅｒｏ－３－ｐｈｏｓｐｈｏｃｏｌｉｎｅ（フナコシ社製）を用いた。また、タンパク質はケルダール法、含水量は加熱乾燥法によってそれぞれ分析した。

【0018】

実施例２：
麹菌由来のプロテアーゼとしてコクラーゼＰ顆粒（三菱ケミカルフーズ社製）のかわりにオリエンターゼＯＰ（エイチビィアイ社製）を用い、クエン酸のかわりに炭酸を用いてｐＨの調整を行うこと以外は実施例１と同様にして、目的物である粉末状イサダ成分含有組成物を得た。

【0019】

製剤例１：錠剤
以下の成分組成からなるオキアミ成分含有組成物を含む錠剤を自体公知の方法で製造した。
実施例１で得たイサダ成分含有組成物 １
乳糖 ８０
ステアリン酸マグネシウム １９（単位：重量％）

【0020】

製剤例２：ビスケット
以下の成分組成からなるオキアミ成分含有組成物を含むビスケットを自体公知の方法で製造した。
実施例１で得たイサダ成分含有組成物 １
薄力粉 ３２
全卵 １６
バター １６
砂糖 ２４
水 １０
ベーキングパウダー １（単位：重量％）

【産業上の利用可能性】

【0021】

本発明は、医薬品素材や食品素材などとして用いることができるオキアミ成分含有組成物の製造方法を提供することができる点において産業上の利用可能性を有する。