特許 7296569 サンプル貯留装置

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】

(24)【登録日】2023-06-15

(45)【発行日】2023-06-23

(54)【発明の名称】サンプル貯留装置

(51)【国際特許分類】

   C12M 3/00 20060101AFI20230616BHJP

   C12M 1/26 20060101ALI20230616BHJP

【ＦＩ】

C12M3/00 Z

C12M1/26

【請求項の数】 15

(21)【出願番号】P 2018199369

(22)【出願日】2018-10-23

(65)【公開番号】P2020065470

(43)【公開日】2020-04-30

【審査請求日】2021-08-24

【国等の委託研究の成果に係る記載事項】（出願人による申告）平成２８年度、国立研究開発法人日本医療研究開発機構、「再生医療の産業化に向けた評価基盤技術開発事業」「再生医療の産業化に向けた細胞製造・加工システムの開発／ヒト多能性幹細胞由来の再生医療製品製造システムの開発（網膜色素上皮・肝細胞）」委託研究開発、産業技術力強化法第１９条の適用を受ける特許出願

(73)【特許権者】

【識別番号】000230962

【氏名又は名称】日本光電工業株式会社

(73)【特許権者】

【識別番号】504176911

【氏名又は名称】国立大学法人大阪大学

(74)【代理人】

【識別番号】100099759

【弁理士】

【氏名又は名称】青木 篤

(74)【代理人】

【識別番号】100123582

【弁理士】

【氏名又は名称】三橋 真二

(74)【代理人】

【識別番号】100117019

【弁理士】

【氏名又は名称】渡辺 陽一

(74)【代理人】

【識別番号】100141977

【弁理士】

【氏名又は名称】中島 勝

(74)【代理人】

【識別番号】100150810

【弁理士】

【氏名又は名称】武居 良太郎

(74)【代理人】

【識別番号】100197169

【弁理士】

【氏名又は名称】柴田 潤二

(72)【発明者】

【氏名】牧野 穂高

(72)【発明者】

【氏名】久保 寛嗣

(72)【発明者】

【氏名】小川 徹也

(72)【発明者】

【氏名】紀ノ岡 正博

【審査官】斉藤 貴子

(56)【参考文献】

【文献】特開２０１８－１１３９５１（ＪＰ，Ａ）

【文献】特開２０１２－２００２３９（ＪＰ，Ａ）

【文献】特開２０１９－１３６００５（ＪＰ，Ａ）

【文献】特開２０１９－１３８８５３（ＪＰ，Ａ）

(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)

Ｃ１２Ｍ

ＪＳＴＰｌｕｓ／ＪＭＥＤＰｌｕｓ／ＪＳＴ７５８０（ＪＤｒｅａｍＩＩＩ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

蓋体と；
前記蓋体によって密閉可能なサンプル貯留容器と；
前記サンプル貯留容器の側部または前記蓋体に設けられた第１流体吸入部と；
前記サンプル貯留容器の側部または前記蓋体に設けられた第２流体吸入部と；
前記サンプル貯留容器の底部に設けられた第１流体排出部と；
前記サンプル貯留容器の側部または前記蓋体に設けられた第２流体排出部と；
前記第１流体吸入部に接続された第１流路であって、ここで前記第１流路は、サンプリング部と接続され、前記サンプリング部と流体連通している、前記第１流路と；
前記第２流体吸入部に接続された第２流路であって、ここで前記第２流路は、前記サンプル貯留容器の外部と連通している、前記第２流路と；
前記第１流体排出部に接続された第３流路であって、ここで前記第３流路は、その下流に第１流体排出手段が設けられている、前記第３流路と；
前記第２流体排出部に接続された第４流路であって、ここで前記第４流路は、その下流に第２流体排出手段が設けられている、前記第４流路と；
前記第１流路の流体を識別するための、第１流体識別センサと；
を備え、
ここで前記サンプリング部は、前記第１流路に流体を導入するための排出口を有し、
ここで、前記第１流路が第１開閉機構を有し；前記第２流路が第２開閉機構を有し；前記第３流路が第３開閉機構を有し；そして前記第４流路が第４開閉機構を有し、
ここで、前記第１開閉機構が開く場合は前記第２開閉機構が閉じ、または、前記第２開閉機構が開く場合は前記第１開閉機構が閉じるよう作動し、
ここで、前記第３開閉機構が開く場合は前記第４開閉機構が閉じ、または、前記第４開閉機構が開く場合は前記第３開閉機構が閉じるよう作動することを特徴とする、
サンプル貯留装置。

【請求項2】

前記サンプル貯留容器の外側において、前記第２流体排出部の配置よりも低い位置に、第２流体識別センサをさらに備える、請求項１に記載のサンプル貯留装置。

【請求項3】

前記第３流路の流体を識別するための、第３流体識別センサをさらに備える、請求項１又は２に記載のサンプル貯留装置。

【請求項4】

前記第１流体排出部の周辺の流体を識別するための、第４流体識別センサをさらに備える、請求項１～３のいずれか１項に記載のサンプル貯留装置。

【請求項5】

前記第１流体排出手段および前記第２流体排出手段が、チューブポンプ又はピエゾポンプである、請求項１～４のいずれか１項に記載のサンプル貯留装置。

【請求項6】

前記第３流路と前記第４流路の下流部が、結合して一体となった第５流路を有し、
ここで前記第１流体排出手段は前記第２流体排出手段と同一のものであって、かつ、前記第１流体排出手段が前記第５流路に設けられていることを特徴とする、請求項１～５のいずれか１項に記載のサンプル貯留装置。

【請求項7】

前記第１流路の途中から分岐した第６流路と；
前記第６流路に設けられた第３流体排出手段と；
前記第６流路に設けられた第５開閉機構と；
前記第１流路に設けられた第６開閉機構と
をさらに備え、
ここで前記第５開閉機構が開く場合は前記第６開閉機構が閉じ、または、前記第６開閉機構が開く場合は前記第５開閉機構が閉じるよう作動することを特徴とする、請求項１～６のいずれか１項に記載のサンプル貯留装置。

【請求項8】

前記第１流体識別センサと、前記第１開閉機構と、前記第２開閉機構と、前記第３開閉機構と、前記第４開閉機構と、前記第１流体排出手段と、前記第２流体排出手段とを制御するための制御部をさらに備える、請求項１～７のいずれか１項に記載のサンプル貯留装置。

【請求項9】

前記第１流体識別センサと、前記第１開閉機構と、前記第２開閉機構と、前記第３開閉機構と、前記第４開閉機構と、前記第１流体排出手段と、前記第２流体排出手段と、前記第３流体排出手段と、前記第５開閉機構と、前記第６開閉機構とを制御するための制御部をさらに備える、請求項７に記載のサンプル貯留装置。

【請求項10】

前記蓋体が、サンプル回収手段を挿入可能な挿入部を有する、請求項１～９のいずれか１項に記載のサンプル貯留装置。

【請求項11】

前記サンプリング部がアイソレータの内部に設けられ、前記第１流路が前記アイソレータに設けられた液送ポートを介して、前記アイソレータの外部と繋がっていることを特徴とする、請求項１～１０のいずれか１項に記載のサンプル貯留装置。

【請求項12】

前記サンプリング部にサンプルを供給するためのサンプル供給手段、をさらに備える、請求項１～１１のいずれか１項に記載のサンプル貯留装置。

【請求項13】

前記サンプリング部と連通した第７流路と；
前記第７流路に緩衝液を供給するための緩衝液供給部と；
前記第７流路に設けられた第４流体排出手段と、
をさらに備える、請求項１～１２のいずれか１項に記載のサンプル貯留装置。

【請求項14】

前記第１流路が、前記第１流路内を通過する流体の移動を、前記サンプリング部から前記サンプル貯留容器の方向へ限定するための一方向弁を少なくとも１つ備える、請求項１～１３のいずれか１項に記載のサンプル貯留装置。

【請求項15】

前記第１流路が、無菌接続継手を有する、請求項１～１４のいずれか１項に記載のサンプル貯留装置。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、サンプル貯留装置に関する。

【背景技術】

【0002】

再生医療など、細胞を培養する必要がある技術分野において、無菌状態を維持したまま、長期間培養する装置が開発されている。そのような装置において培養された細胞の状態を調べるためには、培養を行う空間の無菌性は維持したまま、培養液などを非無菌空間に搬出する必要がある。従来、細胞培養器内の培養液のサンプリングを行う場合、無菌空間であるインキュベータに隣接して設けられたパスボックスなどにインキュベータ内のサンプルを一旦搬出してから外部に取り出す必要があり、サンプリングに手間と時間がかかっていた。

【0003】

このような課題に対し、無菌状態に保たれたインキュベータ内に複数の細胞培養器を収容可能なアイソレータ方式のサンプリングシステムが提案されている（例えば、特許文献１）。当該システムには、無菌空間を保つために培養液の流れを無菌空間の内部から外部に限定する一方向弁が設けられており、それにより、アイソレータ内部の無菌性を維持している。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0004】

【文献】特開２０１２－２００２３９号公報

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0005】

従来のサンプリングシステムは、チューブポンプにより生じた圧力を利用してサンプルを無菌空間から非無菌空間へ送出するものであった。しかしながら、サンプルを測定部で一定量貯留する必要がある分析装置を用いる場合、測定部に確実に基準量のサンプルを自動で貯留することが困難であった。特に分析装置の流路長が長くなると、流路の途中にサンプルが残存し、所望の量のサンプルを貯留することが困難であった。本発明は、流路の長短に関わらず、所望の量のサンプルを回収可能とする、新規のサンプル貯留装置を提供する。

【課題を解決するための手段】

【0006】

上記課題に対し、本発明者らは鋭意検討を行った。その結果、サンプル貯留容器に接続した流路に流体識別センサを設けることによって、サンプル貯留容器に導入される流体（例えば、サンプル、空気、緩衝液など）を識別し、その識別情報を基に、サンプル貯留容器に導入される流体の量を制御し、所望の量のサンプルを貯留することが可能なサンプル貯留装置を開発するに至った。すわなち、本発明は、以下を含む。

【0007】

[１] 蓋体と；
前記蓋体によって密閉可能なサンプル貯留容器と；
前記サンプル貯留容器の側部または前記蓋体に設けられた第１流体吸入部と；
前記サンプル貯留容器の側部または前記蓋体に設けられた第２流体吸入部と；
前記サンプル貯留容器の底部に設けられた第１流体排出部と；
前記サンプル貯留容器の側部または前記蓋体に設けられた第２流体排出部と；
前記第１流体吸入部に接続された第１流路であって、ここで前記第１流路は、サンプリング部と接続するために用いられる、前記第１流路と；
前記第２流体吸入部に接続された第２流路であって、ここで前記第２流路は、前記サンプル貯留容器の外部と連通している、前記第２流路と；
前記第１流体排出部に接続された第３流路であって、ここで前記第３流路は、第１流体排出手段が設けられている、前記第３流路と；
前記第２流体排出部に接続された第４流路であって、ここで前記第４流路は、第２流体排出手段が設けられている、前記第４流路と；
前記第１流路の流体を識別するための、第１流体識別センサと；
を備え、
ここで、第１流体吸入部または前記第１流路が第１開閉機構を有し；第２流体吸入部または前記第２流路が第２開閉機構を有し；第１流体排出部または前記第３流路が第３開閉機構を有し；そして第２流体排出部または前記第４流路が第４開閉機構を有し、
ここで、前記第１開閉機構が開く場合は前記第２開閉機構が閉じ、または、前記第２開閉機構が開く場合は前記第１開閉機構が閉じるよう作動し、
ここで、前記第３開閉機構が開く場合は前記第４開閉機構が閉じ、または、前記第４開閉機構が開く場合は前記第３開閉機構が閉じるよう作動することを特徴とする、
サンプル貯留装置。
[２] 前記サンプル貯留容器の外側において、前記第２流体排出部の配置よりも低い位置に、第２流体識別センサをさらに備える、[１]に記載のサンプル貯留装置。
[３] 前記第３流路の流体を識別するための、第３流体識別センサをさらに備える、[１]又は[２]に記載のサンプル貯留装置。
[４] 前記第１流体排出部の周辺の流体を検出するための、第４流体識別センサをさらに備える、[１]～[３]のいずれか１項に記載のサンプル貯留装置。
[５] 前記第１流体排出手段および前記第２流体排出手段が、チューブポンプ又はピエゾポンプである、[１]～[４]のいずれか１項に記載のサンプル貯留装置。
[６] 前記第３流路と前記第４流路の下流部が、結合して一体となった第５流路を有し、
ここで前記第１流体排出手段は前記第２流体排出手段と同一のものであって、かつ、前記第１流体排出手段が前記第５流路に設けられていることを特徴とする、[１]～[５]のいずれか１項に記載のサンプル貯留装置。
[７] 前記第１流路の途中から分岐した第６流路と；
前記第６流路に設けられた第３流体排出手段と；
前記第６流路に設けられた第５開閉機構と；
前記第１流路に設けられた第６開閉機構と
をさらに備え、
ここで前記第５開閉機構が開く場合は前記第６開閉機構が閉じ、または、前記第６開閉機構が開く場合は前記第５開閉機構が閉じるよう作動することを特徴とする、[１]～[６]のいずれか１項に記載のサンプル貯留装置。
[８] 第１流体識別センサと、前記第１開閉機構と、前記第２開閉機構と、前記第３開閉機構と、前記第４開閉機構と、前記第１流体排出手段と、前記第２流体排出手段とを制御するための制御部をさらに備える、[１]～[７]のいずれか１項に記載のサンプル貯留装置。
[９] 第１流体識別センサと、前記第１開閉機構と、前記第２開閉機構と、前記第３開閉機構と、前記第４開閉機構と、前記第１流体排出手段と、前記第２流体排出手段と、前記第３流体排出手段と、前記第５開閉機構と、前記第６開閉機構とを制御するための制御部をさらに備える、[７]に記載のサンプル貯留装置。
[１０] 前記蓋体が、サンプル回収手段を挿入可能な挿入部を有する、[１]～[９]のいずれか１項に記載のサンプル貯留装置。
[１１] 前記第１流路の上流部が、サンプリング部と接続されていることを特徴とする、[１]～[１０]のいずれか１項に記載のサンプル貯留装置。

【0008】

[１２] 前記サンプリング部がアイソレータの内部に設けられ、前記第１流路が前記アイソレータに設けられた液送ポートを介して、前記アイソレータの外部と繋がっていることを特徴とする、[１１]に記載のサンプル貯留装置。
[１３] 前記サンプリング部にサンプルを供給するためのサンプル供給手段、をさらに備える、[１１]又は[１２]に記載のサンプル貯留装置。

【0009】

[１４] 前記サンプリング部と連通した第７流路と；
前記第７流路に緩衝液を供給するための緩衝液供給部と；
前記第７流路に設けられた第４流体排出手段と、
をさらに備える、[１１]～[１３]のいずれか１項に記載のサンプル貯留装置。
[１５] 前記第１流路が、前記第１流路内を通過する流体の移動を、前記サンプリング部から前記サンプル貯留容器の方向へ限定するための一方向弁を少なくとも１つ備える、[１]～[１４]のいずれか１項に記載のサンプル貯留装置。
[１６] 前記第１流路において、無菌接続継手を有する、[１]～[１５]のいずれか１項に記載のサンプル貯留装置。

【発明の効果】

【0010】

本発明によれば、サンプリングシステムの流路長に関わらず、確実に所望の量のサンプルを回収することが可能となり、また、流路及びサンプル貯留容器内の洗浄も確実に履行できるようになる。これにより、例えば無菌的にサンプリングする必要があるサンプルを、自動で回収可能なサンプリングシステムを構築することが可能となる。

【図面の簡単な説明】

【0011】

【図1】一実施形態のサンプル貯留装置の概略構成図である。

【図2】一実施形態のサンプル貯留装置に接続された流路内部を示す概略構成図である。

【図3】一実施形態のサンプル貯留装置の概略構成図である。

【図4】一実施形態のサンプル貯留装置に使用されるアイソレータ及びその内部の概略構成図である。

【図5-1】一実施形態のサンプル貯留装置に使用される無菌サンプリング流路キットの使用手順を示す概略図である。

【図5-2】一実施形態のサンプル貯留装置に使用される無菌サンプリング流路キットの使用手順を示す概略図である。

【図6-1】一実施形態のサンプル貯留装置の使用態様を示す図である。

【図6-2】一実施形態のサンプル貯留装置の使用態様を示す図である。

【図6-3】一実施形態のサンプル貯留装置の使用態様を示す図である。

【図6-4】一実施形態のサンプル貯留装置の使用態様を示す図である。

【図6-5】一実施形態のサンプル貯留装置の使用態様を示す図である。

【図6-6】一実施形態のサンプル貯留装置の使用態様を示す図である。

【発明を実施するための形態】

【0012】

以下、発明の実施の形態を通じて本発明を説明するが、以下の実施形態は特許請求の範囲にかかる発明を限定するものではなく、また実施形態の中で説明されている特徴の組み合わせの全てが発明の解決手段に必須であるとは限らない。

【0013】

１－１．サンプル貯留装置（第１態様）
図１は、本発明の一実施形態に係るサンプル貯留装置１の概略構成図である。一実施形態において、サンプル貯留装置１は、
蓋体１０と；
前記蓋体１０によって密閉可能なサンプル貯留容器１１と；
前記サンプル貯留容器１１の側部１１０に設けられた第１流体吸入部１２と；
前記サンプル貯留容器１１の側部１１０に設けられた第２流体吸入部１３と；
前記サンプル貯留容器１１の底部１１１に設けられた第１流体排出部１４と；
前記サンプル貯留容器１１の側部１１０に設けられた第２流体排出部１５と；
前記第１流体吸入部１２に接続された第１流路１６であって、ここで前記第１流路１６は、サンプリング部５０３と接続するために用いられる、前記第１流路１６と；
前記第２流体吸入部１３に接続された第２流路１７であって、ここで前記第２流路１７は、前記サンプル貯留容器１１の外部と連通している、前記第２流路１７と；
前記第１流体排出部１４に接続された第３流路１８であって、ここで前記第３流路１８は、第１流体排出手段３０が設けられている、前記第３流路１８と；
前記第２流体排出部１５に接続された第４流路１９であって、前記第４流路１９は、第２流体排出手段３００が設けられている、前記第４流路１９と；
前記第１流路１６の流体を識別するための、第１流体識別センサ２１と；
を備え、
ここで、前記第１流路１６が第１開閉機構２４を有し；前記第２流路１７が第２開閉機構２５を有し；前記第３流路１８が第３開閉機構２７を有し；そして前記第４流路１９が第４開閉機構２８を有している。

【0014】

図１において、蓋体１０及びサンプル貯留容器１１は、その断面図を示している。サンプル貯留容器１１の開口部に蓋体１０を脱着させ、サンプル貯留容器１１の内部空間を密閉及び開放することができる。蓋体１０は、サンプル貯留容器１１を密閉することができればよく、例えば、嵌合や、螺着によって脱着するものであってもよい。蓋体１０は、例えば、金属（例えば、ステンレス鋼）、コルク、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリカーボネート、ポリスチレン、ポリ塩化ビニル、ナイロン、ポリウレタン、ポリウレア、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、ポリビニルアルコール、ポリ酢酸ビニル、ポリ（メタ）アクリル酸、ポリ（メタ）アクリル酸誘導体、ポリアクリロニトリル、ポリ（メタ）アクリルアミド、ポリ（メタ）アクリルアミド誘導体、ポリスルホン、ポリカーボネート、セルロース、セルロース誘導体、ガラス、セラミックであってもよく、可撓性材料（例えば、ゴム栓（例えば、天然ゴム、合成ゴム、フッ素ゴム、シリコーンゴムなど））であってもよい。

【0015】

サンプル貯留容器１１は、所望の量のサンプルを十分に収容することができる。サンプル貯留容器１１は、例えば、金属（例えば、ステンレス鋼）、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリカーボネート、ポリスチレン、ポリ塩化ビニル、ナイロン、ポリウレタン、ポリウレア、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、ポリビニルアルコール、ポリ酢酸ビニル、ポリ（メタ）アクリル酸、ポリ（メタ）アクリル酸誘導体、ポリアクリロニトリル、ポリ（メタ）アクリルアミド、ポリ（メタ）アクリルアミド誘導体、ポリスルホン、ポリカーボネート、セルロース、セルロース誘導体、ガラス、セラミックなどであってもよいが、後述の第２流体識別センサ２２によって、サンプル貯留容器１１内部の流体を検出できるように、透明または半透明の材質が好ましい。

【0016】

一実施形態において、サンプル貯留容器１１の側部１１０は、第１流体吸入部１２と、第２流体吸入部１３と、第２流体排出部１５とを備えている。第１流体吸入部１２、第２流体吸入部１３、第２流体排出部１５は、それぞれ、サンプル貯留容器１１の内外を貫通する開口部を有している。第１流体吸入部１２、第２流体吸入部１３および第２流体排出部１５は、所望のサンプル量がサンプル貯留容器１１に収容された場合の液面より高い位置に設けられている。第１流体吸入部１２、第２流体吸入部１３および第２流体排出部１５は、それぞれが略水平となる位置に設けられても良く、略垂直となる位置に設けられても良く、ランダムな位置に設けられても良く、サンプリングシステム全体の構成によって適宜変更することが可能である。他の実施態様において、第１流体吸入部１２、第２流体吸入部１３または第２流体排出部１５は、例えばサンプル貯留容器１１の開口部に取り付けられる蓋体１０に設けられてもよい。

【0017】

サンプル貯留容器１１の底部１１１は、第１流体排出部１４を備えている。サンプル貯留容器１１の底部１１１は、貯留されたサンプル等が貯留容器１１から流出しやすく、第１流体排出部１４と連結した箇所に位置しており、例えばサンプル貯流容器１１の下端や、下端から側部へと傾斜した箇所であっても良い。第１流体排出部１４は、サンプル貯留容器１１の内外を貫通する開口部を有している。サンプル貯留容器１１に貯留されたサンプルや緩衝液は、第１流体排出部１４から排出される。図１において、第１流体排出部１４は、サンプル貯留容器１１の側部１１０に設けられているが、サンプル貯留容器１１の底面に設けられても良い。第１流体排出部１４は、サンプリングシステム全体の構成によって適宜変更することが可能である。

【0018】

第１流体吸入部１２には、第１流路１６が接続されている。第１流路１６は、サンプルが供給されるサンプリング部５０３と流体接続される。第１流路１６には、第１流路１６を通過する流体を識別するための、第１流体識別センサ２１を備えている。第１流体識別センサ２１により、第１流路１６内を流れている流体の種類、例えば、サンプルを含む培地、緩衝液、または気体（例えば空気）を識別することができる。第１流体識別センサ２１は、公知のセンサ、例えば光学式センサや近接センサを用いることができる（後述の第２流体識別センサ２２、第３流体識別センサ２３および第４流体識別センサ２３０にも適用される）。例えば、光学式センサを用いる場合、所定の波長の光を第１流路１６に垂直に照射し、反射光または透過光を検出することによって、流体の種類を識別することができる。特に、第１流路１６内を流れる流体の種類が変わる場合（例えば、緩衝液から空気に変わる場合など）、検出される信号が大きく変化するので、流体の種類が変わったことを識別することが可能となる。

【0019】

第２流体吸入部１３には、第２流路１７がその一端部において接続されている。第２流路１７の他端部には通気フィルタ４１０が接続されており、第２流路１７は、通気フィルタ４１０を介して、サンプル貯留容器１１の外部と連通している。通気フィルタ４１０は、サンプル貯留容器１１の内部が汚染されることを防止し、なおかつ、サンプル貯留容器１１の外部から流体（特に空気）を吸入することを妨げないものであればよく、市販のフィルタを用いることができる。

【0020】

一実施態様において、第１流体排出部１４には、第３流路１８が接続されている。また、第３流路１８には、流体を排出するための第１流体排出手段３０が設けられている。第１流体排出手段３０が作動することにより、サンプル貯留容器１１に貯留された流体（例えば、サンプル、緩衝液または空気など）を排出することができる。

【0021】

一実施態様において、第２流体排出部１５には、第４流路１９が接続されている。また、第４流路１９には、流体を排出するための第２流体排出手段３００が設けられている。第２流体排出手段３００が作動することにより、サンプル貯留容器１１内の流体、特に気体（空気など）を排出することができる。

【0022】

図１に示される一実施態様において、第３流路１８と第４流路１９の下流部は、結合して一体となった第５流路２０を形成している。この場合、第１流体排出手段３０と第２流体排出手段３００は同一のものであり、第５流路２０に設けられる。

【0023】

第１流体排出手段３０および／または第２流体排出手段３００は、例えば、チューブポンプ（ペリスタポンプ）であってもよく、ピエゾポンプであってもよく、流体を送り出すことができるポンプであれば使用することができる。

【0024】

一実施形態において、第１流体排出手段３０より下流の第３流路１８（図１の態様の場合は、第５流路２０）には、廃液槽４０が接続されている。廃液槽４０には、通気チューブ４１が接続され、さらに通気チューブ４１に通気フィルタ４１０が接続されている。図１の第５流路２０を有さない場合は、第２流体排出手段３００より下流の第４流路１９は通気フィルタ４１０が接続されている。

【0025】

サンプル貯留装置１は、第１流路１６は第１開閉機構２４を有し；第２流路１７は第２開閉機構２５を有し；第３流路１８は第３開閉機構２７を有し；そして第４流路１９は第４開閉機構２８を有している。第１開閉機構２４、第２開閉機構２５、第３開閉機構２７および第４開閉機構２８は、流路を開閉する機構であればよく、例えば、開閉弁、好ましくはピンチバルブである。ピンチバルブであれば、流路を挟むことで、流路内の流体の流れを遮断することができる。一実施態様において、第１開閉機構２４、第２開閉機構２５、第３開閉機構２７および第４開閉機構２８が、ピンチバルブである場合、流路（第１流路１６、第２流路１７、第３流路１８および第４流路１９）は、滅菌可能であり、可撓性を有するチューブを用いることが好ましく、例えば、医療用チューブを採用することができる（例えば、シリコーンゴムチューブ、ポリエチレンチューブ、ポリイミドチューブ、フッ素系樹脂チューブなど）。

【0026】

サンプル貯留装置１において、第１開閉機構２４が開く場合は第２開閉機構２５が閉じ、または、第２開閉機構２５が開く場合は第１開閉機構２４が閉じるように作動する。一実施態様において、第１開閉機構２４および第２開閉機構２５は、第１開閉切り替え装置２６によって、交互に開閉する。

【0027】

サンプル貯留装置１において、第３開閉機構２７が開く場合は第４開閉機構２８が閉じ、または、第４開閉機構２８が開く場合は第３開閉機構２７が閉じるよう作動する。一実施態様において、第３開閉機構２７および第４開閉機構２８は、第２開閉切り替え装置２９によって、交互に開閉する。

【0028】

一実施態様において、第１開閉切り替え装置２６および第２開閉切り替え装置２９は、例えば、ピンチバルブ切り替え装置である。

【0029】

一実施態様において、サンプル貯留装置１は、サンプル貯留容器１１の外側において、第１流体吸入部１２、第２流体吸入部１３及び第２流体排出部１５の配置よりも低い位置に、第２流体識別センサ２２をさらに備えている。第２流体識別センサ２２により、必要サンプル量ライン２２０（例えば、図６－１参照）まで、サンプルや緩衝液が、サンプル貯留容器１１を貯留できたかどうかを判定することができる。また、必要以上にサンプル貯留容器１１に流体が流入することを防止することができる。なお、第２流体識別センサ２２は、第２流体排出部１５の配置よりも低い位置に備えられていればよく、第１流体吸入部１２、及び第２流体吸入部１３よりも高い位置に備えられたものであってもよい。

【0030】

一実施態様において、サンプル貯留装置１は、第３流路１８の流体を識別するための、第３流体識別センサ２３をさらに備えている。第３流体識別センサ２３により、サンプル貯留容器１１に貯留された流体（例えば、サンプル、緩衝液など）が確実に排出されたことを確認することができる。

【0031】

一実施態様において、サンプル貯留装置１は、第１流体排出部１４の周辺の流体を識別するための、第４流体識別センサ２３０をさらに備えている。第４流体識別センサ２３０により、サンプル貯留容器１１の第１流体排出部１４の周辺に貯留された流体（例えば、サンプル、緩衝液など）の有無を確認することができる。

【0032】

本発明にかかるサンプル貯留装置１は、例えば、公知のインキュベータ内、安全キャビネット内、アイソレータ内または任意の場所に設置することができる。好ましくは、サンプル貯留装置１は、アイソレータ６を使用する無菌サンプリング装置とともに使用される。

【0033】

図示されないが、一実施態様において、サンプル貯留装置１は、第１流体識別センサ２１と、第１開閉機構２４と、第２開閉機構２５と、第３開閉機構２７と、第４開閉機構２８と、第１流体排出手段３０と、第２流体排出手段３００とを制御するための制御部（例えば、ＣＰＵユニット）を備えても良い。当該制御部によって、サンプル貯留装置１を適切に制御し、確実にサンプリングすることができる。当該制御部は、さらに第２流体識別センサ２２、第３流体識別センサ２３、第４流体識別センサ２３０を制御するものであってもよい。

【0034】

一実施態様において、蓋体１０は、サンプル回収手段３１を挿入可能な挿入部（図示しない）を有する。例えば、蓋体１０が可撓性材料（例えば、ゴム栓（例えば、天然ゴム、合成ゴム、フッ素ゴム、シリコーンゴムなど））からなる蓋体１０である場合、サンプル回収手段３１の先端が鋭利であれば（例えば、図６－４参照）、蓋体１０を貫通して、サンプル貯留容器１１の内部にサンプル回収手段３１を挿入することができる。また、可撓性材料の復元力により、サンプル回収手段３１を抜去後に貫通孔が塞がり、サンプル貯留容器１１の内部空間を再び密封状態に保つことが出来る。挿入部は可撓性材料であることが好ましく、蓋体１０の少なくとも一部が可撓性材料であることが好ましい。また、挿入部は、サンプル回収手段３１の直径よりも小さい貫通孔を有していてもよい。

【0035】

一実施態様において、第１流路１６の上流部は、サンプリング部５０３と接続されている。サンプリング部５０３は、第１流路１６と直接または間接的に流体連通しており、サンプルを導入するための開口部を有している。サンプリング部５０３は、第７流路５０６を介して、緩衝液供給部５０１と流体接続されている。第７流路５０６は、第４流体排出手段５０８を備えており、第４流体排出手段５０８が作動することにより、緩衝液５０２がサンプリング部５０３へと供給される。サンプリング部５０３の底部の排出口５０３aには、サンプル供給手段５１０の先端部が挿入される。第４流体排出手段５０８は、例えば、チューブポンプ（ペリスタポンプ）であってもよく、ピエゾポンプであってもよく、流体を送り出すことができるポンプであれば使用することができる。緩衝液５０２としては、サンプルＳＰに含まれる物質の性質を変化させないように、ｐＨの変動を最小限に抑える性質を有する溶液を使用することができ、例えば、細胞の培養に用いられる液体培地（例えば、ＤＭＥＭ、ＲＰＭＩ－１６４０等）の他、リン酸緩衝液、トリス緩衝液、ＨＥＰＥＳ緩衝液、ＨＥＰＰＳ緩衝液、クエン酸緩衝液、ホウ酸緩衝液などを用いることができる。緩衝液５０２は、回収するサンプルＳＰの種類や目的に応じて適宜選択することができる。また、緩衝液５０２の代わりに、水や生理食塩水を用いてもよい。

【0036】

サンプル供給手段５１０は、内部の気圧を陰圧又は陽圧に変化させることにより、流体の吸入及び排出を行うことができるものであり、例えば、ピペットやチューブなどを採用することができる（例えば、図３および図４を参照）。サンプル供給手段５１０がピペットである場合、その先端部は交換可能なディスポーザブルタイプのピペットチップであることが好ましい。ディスポーザブルタイプのピペットチップであれば、サンプル毎に容易にチップを交換することが可能であり、サンプル間のクロスコンタミネーションを防止することができる。ディスポーザブルのピペットチップは、市販のものを使用することができ、取り扱うサンプル量や用途に応じて、例えば、１μＬ、１０μＬ、２０μＬ、１００μＬ、２００μＬ、２５０μＬ、３００μＬ、５００μＬ、１０００μＬ、１２００μＬ、２０００μＬ、またはそれ以上の容量用のピペットチップを用いることができる。サンプル供給手段５１０は、サンプル間のクロスコンタミネーションを防止するためにフィルタを有するものであってもよい。

【0037】

他の実施態様において、図示しないが、サンプリング部５０３の排出流路５０３ｂの一部は、サンプル供給手段５１０から供給される流体が漏れることを防止するためのシール部材（例えば、Ｏリングやパッキン、内部に気体や液体などを注入することで膨張する中空のシール部材など）を備えてもよい。この場合、サンプリング部５０３に接続されている流路の一部は、大気と連通可能な流路を有しており（例えば、開閉機構を備えている）、例えば図３に示される第３流体排出手段３６を備えていない。シール部材により、サンプル供給手段５１０を排出流路５０３ｂに直接挿入した場合に、サンプル供給手段５１０から供給されるサンプルＳＰおよび緩衝液５０２などの液体、ならびに気体などの流体に圧力を加えながら、第１流路１６へと送り出すことが可能となる。

【0038】

また、さらに他の実施態様において、サンプル供給手段５１０の先端部は、サンプリング部５０３の排出口５０３ａを覆うフランジ部を有していてもよい（図示しない）。この場合、フランジ部又は排出口５０３ａの周辺部には、流体が漏れることを防止するためのシール部材（例えば、パッキン又はＯリング）が設けられている。

【0039】

一実施態様において、サンプル供給手段５１０は気体供給手段５１１を備えている（図４を参照）。気体供給手段５１１は、気体Ｇをサンプル供給手段５１０に送り出す機構を有する。気体供給手段５１１は、圧縮した気体Ｇを送り出す機構を有するものであればよく、例えば、シリンジや、圧縮した気体を含むボンベなどを用いることができる。好ましくは、気体を吸入及び排出できる機能を有するものであり、例えば、シリンジを採用することができる。気体供給手段５１１がシリンジであれば、ピストン５１１ａ（図４参照）を引くことにより、サンプル供給手段５１０内を陰圧にすることができ、サンプル供給手段５１０内に流体を吸入することができる。また、ピストン５１１ａを押すことにより、圧縮した気体Ｇをサンプル供給手段５１０内へと供給することができる。流体の吸入及び排出のいずれも実施することができる点により、気体供給手段５１１はシリンジが好ましい。

【0040】

図２は、サンプリング部５０３から導入されたサンプルＳＰ、緩衝液５０２および気体（Ｇ１及びＧ２）が第１流路１６内を移動する様子を模式的に示した図である。緩衝液５０２により洗浄された第１流路１６において、緩衝液５０２が存在する領域の後に第１気体Ｇ１が存在する領域を設けることにより、サンプルＳＰと緩衝液５０２とが混合することを防止することができる。第１気体Ｇ１が存在する領域は、第１流路１６の下流に設けられた任意の流体排出手段を駆動させることにより供給されても良く、サンプル供給手段５１０によって気体Ｇ１が供給されてもよい。

【0041】

第１気体Ｇ１が存在するが第１流路１６において、第１気体Ｇ１の後にサンプルＳＰをサンプル供給手段５１０によって供給する（工程（１））。その後、が第１流路１６内のサンプルＳＰの後に、サンプル供給手段５１０によって第２気体Ｇ２を供給し、サンプルＳＰを第１流路１６の下流へと送達させる（工程（２））。第１気体Ｇ１の体積量は、緩衝液５０２とサンプルＳＰとが混合されない量であればよく、限定されない。また、気体Ｇ２の体積量は、サンプルＳＰを第１流路１６またはその下流の部材の所定の位置に移動させることができる量であればよく、適宜変更することができる。なお第１気体Ｇ１と第２気体Ｇ２は、サンプルＳＰを挟み込むために用いられるものであればいかなるものであってもよく、同一種類の気体であってもよく、別種類の気体であってもよい。

【0042】

１－２．サンプル貯留装置（第２態様）
図３は、他の実施態様のサンプル貯留装置１ａを示す概略構成図である。基本的な構成は、図１のサンプル貯留装置１と同じであり、サンプル貯留装置１と同一の参照番号を有する部材は、サンプル貯留装置１の各部材と同一の機能を発揮するため、ここでは省略する。

【0043】

サンプル貯留装置１ａは、サンプル貯留装置１の構成に加え、さらに、
第１流路１６の途中から分岐した第６流路３２と；
前記第６流路３２に設けられた第３流体排出手段３６と；
前記第６流路３２に設けられた第５開閉機構３３と；
前記第１流路１６に設けられた第６開閉機構３４と、備えている。

【0044】

第５開閉機構３３および第６開閉機構３４は、流路を開閉する機構であればよく、例えば、開閉弁、好ましくはピンチバルブである。ピンチバルブであれば、流路を挟むことで、流路内の流体の流れを遮断することができる。一実施態様において、第５開閉機構３３および第６開閉機構３４が、ピンチバルブである場合、流路（第１流路１６および第６流路３２）は、滅菌可能であり、可撓性を有するチューブを用いることが好ましく、例えば、医療用チューブを採用することができる（例えば、シリコーンゴムチューブ、ポリエチレンチューブ、ポリイミドチューブ、フッ素系樹脂チューブなど）。

【0045】

サンプル貯留装置１ａにおいて、第５開閉機構３３が開く場合は第６開閉機構３４が閉じ、または、第６開閉機構３４が開く場合は第５開閉機構３３が閉じるよう作動する。一実施態様において、第５開閉機構３３および第６開閉機構３４は、第３開閉切り替え装置３５によって、交互に開閉する。

【0046】

第３流体排出手段３６は、例えば、チューブポンプ（ペリスタポンプ）であってもよく、ピエゾポンプであってもよく、流体を送り出すことができるポンプであれば使用することができる。

【0047】

サンプル貯留装置１ａに、第１流路１６の途中から分岐した第６流路３２を有することにより、例えば、サンプル貯留容器１１に貯留されたサンプルを、サンプル回収手段３１によって回収している間であっても、サンプリング部５０３へ緩衝液５０２を流し続けることが可能となり、後述するアイソレータ６の内部空間の無菌性を維持することが可能となる。

【0048】

図示されないが、一実施態様において、サンプル貯留装置１ａは、第１流体識別センサ２１と、第１開閉機構２４と、第２開閉機構２５と、第３開閉機構２７と、第４開閉機構２８と、第１流体排出手段３０と、第２流体排出手段３００と、第３流体排出手段３６と、第５開閉機構３３と、第６開閉機構３４とを制御するための制御部（例えば、ＣＰＵユニット）を備えても良い。当該制御部によって、サンプル貯留装置１ａを適切に制御し、確実にサンプリングすることができる。

【0049】

一実施態様において、サンプル貯留装置１ａは、サンプリング部５０３がアイソレータ６の内部に設けられ、第１流路１６がアイソレータ６に設けられた液送ポート６３を介して、アイソレータ６の外部と繋がっている。

【0050】

アイソレータ６とは、環境及び従事者の直接介入から物理的に完全に隔離された無菌操作区域を有する装置であって、除染した後にＨＥＰＡフィルタ又はＵＬＰＡフィルタ等により、ろ過した空気を供給し、外部環境からの汚染の危険性を防ぎながら連続して使用することができる装置をいう。図３（又は図４を参照）のアイソレータ６は、無菌チャンバ６１によって、外部空間と隔離されており、図示されないが、ＨＥＰＡフィルタ又はＵＬＰＡフィルタを備えている。さらに、アイソレータ６は、図示されないが、アイソレータ内部空間Ｓを除染するための除染手段を備えている。「除染」とは、再現性のある方法によって生存微生物を除去し、または予め指定されたレベルまで減少させることをいう。除染手段とは、「除染」を実現するために用いられる手段であり、例えば、除染剤を用いる手段、プラズマ処理を行う手段、ガンマ線を用いる手段、紫外線を用いる手段等を採用することができるが、これに限定されない。好ましくは、除染剤を用いる手段である。除染剤の例としては、例えば、過酸化水素又は過酢酸のミスト若しくは蒸気、オゾンガス、二酸化塩素ガス、エチレンオキサイドガスなどが挙げられる。これらの除染手段を用いることにより、アイソレータ内部空間Ｓを除染することができる。

【0051】

アイソレータ６の内外を隔離する無菌チャンバ６１には、液送ポート本体６３ｃが設けられている。液送ポート本体６３ｃは、円筒状であってもよく、中空の直方体状であってもよく、限定されない。液送ポート本体６３ｃにより無菌チャンバ６１の内外が連通される。液送ポート本体６３ｃの液送ポート開口部６３１及び液送ポート開口部６３０には、液送ポート内蓋６３ａ及び液送ポート外蓋６３ｂをそれぞれ嵌めることができ、液送ポート開口部６３１及び液送ポート開口部６３０を密閉することができる。液送ポート６３は、少なくとも液送ポート内蓋６３ａ、液送ポート外蓋６３ｂ及び液送ポート本体６３ｃを含んでいる。液送ポート内蓋６３ａは、第８流路５０４が貫通しており、液送ポート内蓋６３ａの第８流路５０４が貫通している部分はシール部材等により流体が漏れないようシールされている。

【0052】

第８流路５０４は、サンプリング部５０３の排出流路５０３ｂと連通している。サンプリング部５０３に供給されたサンプル又は緩衝液５０２は、サンプリング部５０３の排出流路５０３ｂと連通した第８流路５０４を通ってアイソレータ６の外部へと排出され、さらに第８流路５０４と流体連結された第１流路１６へと送り出される。

【0053】

一実施形態において、第８流路５０４は、第８流路５０４内の流体の移動を、サンプリング部５０３から液送ポート６３の方向へ限定するための、少なくとも１つの一方向弁５０５が備えられている。これにより、アイソレータ６の内部方向へ、流体が逆流することを防止することができる。

【0054】

本発明に用いられる全ての流路（第１～第８流路）の内壁は、液体の濡れ性が低い、すなわち疎水性であることが好ましい。これにより、少量のサンプルＳＰであっても、流路の内壁にサンプルＳＰが付着することを防止することができ、サンプルＳＰを効率的にアイソレータ６の外部へと送達することが可能となる。本発明に用いられる流路としては、滅菌可能であり、可撓性を有するチューブを用いることができ、例えば、医療用チューブを採用することができる（例えば、シリコーンゴムチューブ、ポリエチレンチューブ、ポリイミドチューブ、フッ素系樹脂チューブなど）。

【0055】

一実施態様において、第８流路５０４は、その流路の途中に無菌接続継手５０７を備えてもよい。無菌接続継手５０７は、無菌接続継手（オス型）５０７ａ及び無菌接続継手（メス型）５０７ｂを組み合わせ、無菌接続継手（オス型）５０７ａ及び無菌接続継手（メス型）５０７ｂの開口をそれぞれ密閉するメンブレンストリップ５０７０を引っ張って剥がし、無菌接続継手（オス型）５０７ａ及び無菌接続継手（メス型）５０７ｂをロックすることにより、無菌的に連結することができる。無菌接続継手５０７は市販されているものを利用することができ、例えば、ポール社（米国）やザルトリウス社（ドイツ）やコールダー・プロダクツ・カンパニー社（米国）などから入手することができる。無菌接続継手（オス型）５０７ａ及び無菌接続継手（メス型）５０７ｂは、入れ替えて利用することができる。第８流路５０４の途中であって、液送ポート内蓋６３aの下流に無菌接続継手（オス型）５０７ａ（又は無菌接続継手（メス型）５０７ｂ）を備えることにより、アイソレータの内外を無菌的に接続する流路を最小限化することができる。また、無菌接続継手５０７により、無菌接続継手５０７の下流の流路を自由に設計することが可能となる。

【0056】

２．サンプル貯留装置に使用される無菌サンプリング流路キットの使用手順
一実施態様における、サンプル貯留装置１ａを使用可能な状態に準備するための手順について説明する（図５）。

【0057】

本発明のサンプル貯留装置１ａは、無菌サンプリング流路キット５０を用いることができる。一実施態様において、無菌サンプリング流路キット５０は：
サンプリング部５０３と；
前記サンプリング部５０３と連通した第８流路５０４と；
前記第８流路５０４に設けられ、前記第８流路５０４内の流体の移動を、前記サンプリング部５０３から前記液送ポート６３の方向へ限定するための、少なくとも１つの一方向弁５０５と；を備えている。

【0058】

他の実施態様において、無菌サンプリング流路キット５０は、図５－１（Ａ）に示す様に、サンプリング部５０３と連通した第７流路５０６と、第７流路５０６に流体を供給するための緩衝液供給部５０１と、第７流路５０６に設けられた第４流体排出手段５０８と、をさらに備えてもよい。また、他の実施形態において、無菌サンプリング流路キット５０は、さらに第８流路５０４の下流端には無菌接続継手を有していてもよい。無菌サンプリング流路キット５０に含まれる上記の各部材は、個別の滅菌バッグ５００に封入されていてもよく、図５－１（Ａ）に示す様に、同一の滅菌バッグ５００に封入されていてもよい。滅菌バッグ５００に封入された無菌サンプリング流路キット５０の各部材は、例えば、ガンマ線又は電子線によって予め滅菌されている。

【0059】

上述の無菌サンプリング流路キット５０は、アイソレータ６の液送ポート本体６３ｃの開口、又は、アイソレータ６に別途設けられた除染パスボックス（図示しない）からアイソレータ６の内部へ搬入される（図５－１（Ａ））。その後、外側の液送ポート開口部６３０を液送ポート外蓋６３ｂで密閉し、アイソレータ６の内部及び無菌サンプリング流路キット５０を除染する（図５－１（Ｂ））。液送ポート内蓋６３ａは、図５－１のように滅菌バッグ５００に封入された状態で提供されてもよく、滅菌バッグ５００とは別にアイソレータ６内に提供されてもよい。

【0060】

除染完了後、アイソレータ６に設けられた、アイソレータ６の外部から操作者の腕を挿入可能なグローブ６２を用いて、滅菌バッグ５００を開封し、各部材を組み立てる。第８流路５０４、一方向弁５０５及び無菌接続継手（オス型）５０７ａを液送ポート本体６３ｃの内部に入れ、第８流路５０４が貫通している液送ポート内蓋６３ａにより密閉する（図５－２（Ｃ））。アイソレータ６の外部から、液送ポート外蓋６３ｂを外し、第８流路５０４、一方向弁５０５及び無菌接続継手（オス型）５０７ａを液送ポート本体６３ｃより取り出す。その後、無菌接続継手（メス型）５０７ｂを一端に有する第１流路１６と無菌接続継手５０７によって無菌的に連結させる。以上により、本発明の無菌サンプリング流路キットを用いたサンプル貯留装置１ａが使用可能となる。

【0061】

３．サンプル貯留装置を使用したサンプルの貯留方法
図６（図６－１～図６－４）では、一実施態様のサンプル貯留装置１ａの動作を示す模式図である。

【0062】

上記２．に従って、アイソレータ６の内部に設置したサンプリング部５０３と接続したサンプル貯留装置１ａを使用したサンプルの貯留方法を図および以下の表を参照しながら説明する。

【0063】

【表1】

【0064】

表１において、「作動対象部材」とは、各工程で作動させるサンプル貯留装置１ａの各部材をいい、表１では略称として示している。各部材の参照部材番号は、「作動対象部材」の下に記載された番号に相当し、上記で説明した参照部材番号と一致する。

【0065】

表１において、「緩衝液用ポンプ」、「ポンプ（１）」および「ポンプ（２）」は、それぞれ、「第４流体排出手段５０８」、「第３流体排出手段３６」および「第１流体排出手段３０」を示す。「ON」は、対象のポンプが作動中であることを示す。「OFF」は、対象のポンプが停止中であることを示す。

【0066】

表１において、「バルブ（１）」、「バルブ（２）」および「バルブ（３）」は、それぞれ「第３開閉切り替え装置３５」、「第１開閉切り替え装置２６」および「第２開閉切り替え装置２９」に相当する。表１の「上」および「下」の記載は、図６の配管図において開放されている開閉機構の位置を示す。例えば、「バルブ（１）」が「上」であれば、第５開閉機構３３が「開」で、第６開閉機構３４が「閉」の状態であることを示す。

【0067】

表１において、「センサ（１）」、「センサ（２）」および「センサ（３）」は、それぞれ、「第１流体識別センサ２１」、「第２流体識別センサ２２」および「第３流体識別センサ２３」に相当する。「センサ（１）」は、緩衝液、空気またはサンプルを判別する。センサ（２）は、必要サンプル量ラインまで所望の液体が貯留できたかどうかを判別する。センサ（３）は、サンプル貯留容器１１から液体が排出されたかどうかを判別する。表１の「Ｌ」は「液体」が検出されることを示し、「Ａ」は「空気」が検出されたことを示す。

【0068】

工程を、上記の工程１～１３に分けて説明する。

【0069】

工程１．緩衝液（の灌流）：
本工程によって、緩衝液５０２を、継続的にサンプリング部５０３へと供給し、第６流路３２を通って、廃液槽４０へと排出する（図６－１参照）。アイソレータ６内で培養細胞を培養中、本工程が実施することで、アイソレータ６の内部が汚染されることを防止する。

【0070】

工程２．空気層（の導入）：
緩衝液用ポンプを停止し、ポンプ（１）の作用により、アイソレータ６の内部の空気を、サンプリング部５０３を介して、第８流路５０４へと導入する。

【0071】

工程３．サンプル注入：
工程２によって所望の量の空気を第８流路５０４へと導入した後、工程３を実施する。サンプル供給手段５１０に含まれるサンプルをサンプリング部５０３へ吐出し、サンプルを注入する（図６－２参照）。

【0072】

工程４．空気層の検知：
工程２で導入した空気層を、センサ（１）によって検出する。

【0073】

工程５．サンプルの検知：
工程３で導入したサンプルを、センサ（１）によって検出する。

【0074】

工程６．サンプルの引込：
工程５の後、バルブ（１）、バルブ（２）およびバルブ（３）を切り替え、サンプルを、第１流路１６を介してサンプル貯留容器１１へと導入する。

【0075】

工程７. サンプルの貯留：
センサ（１）によって空気層を検出することでサンプルの最後尾を検出する。その後、緩衝液用ポンプを作動させ、緩衝液５０２をサンプリング部５０３へと導入する。本工程は、センサ（２）によって、サンプルが必要サンプル量ラインまで貯留されたことを確認するまで継続する（図６－３参照）。

【0076】

工程８.サンプル計測：
サンプル回収手段３１を、蓋体１０の挿入部から挿入し、サンプルを回収する（必要に応じて、サンプルの所望の性質を計測する）。この時、緩衝液５０２を、継続的にサンプリング部５０３へと供給し、第６流路３２を通って、廃液槽４０へと排出させ、アイソレータ６の内部の無菌性を保つ（図６－４）。

【0077】

工程９．サンプル排出：
工程８の終了後、残存したサンプルは、サンプル貯留容器１１の第１流体排出部１４から排出させる。

【0078】

工程１０．サンプル排出完了：
センサ（３）が、空気層を検出したら、サンプルの排出は完了する。

【0079】

工程１１．緩衝液の貯留（洗浄）
サンプル貯留容器１１に緩衝液５０２を貯留させる。センサ（２）によって緩衝液５０２が必要サンプル量ラインまで貯留されたことを確認するまで継続する（図６－５参照）。

【0080】

工程１２．緩衝液の排出（洗浄）
緩衝液５０２をサンプル貯留容器１１の第１流体排出部１４から排出させる。センサ（３）が空気層を検出したら、本工程は終了する（図６－６参照）。

【0081】

工程１３．緩衝液（の灌流）：
基本的には、上記工程１と同様の工程である。

【0082】

工程１～１３を実施することにより、アイソレータ６の内部の無菌性は担保しつつ、所望のサンプルを所望の時期に回収することができる。上記工程１～１３は、任意の工程を繰り返してもよく、例えば、工程１１及び１２を所望の回数繰り返すことにより、サンプル貯留容器１１の内部に残存したサンプルを十分に洗い流すことができるようになる。

【0083】

上記工程１～１３は、上述の制御部によって制御することができ、自動でサンプリングを可能とする自動サンプリング装置を具現化することができるようになる。

【0084】

以上、本発明を実施の形態を用いて説明したが、本発明の技術的範囲は上記実施の形態に記載の範囲には限定されない。上記実施の形態に、多様な変更または改良を加えることができることは当業者に明らかである。

【符号の説明】

【0085】

１、１ａ サンプル貯留装置
１０ 蓋体
１１ サンプル貯留容器
１１０ 側部
１１１ 底部
１２ 第１流体吸入部
１３ 第２流体吸入部
１４ 第１流体排出部
１５ 第２流体排出部
１６ 第１流路
１７ 第２流路
１８ 第３流路
１９ 第４流路
２０ 第５流路
２１ 第１流体識別センサ
２２ 第２流体識別センサ
２２０ 必要サンプル量ライン
２３ 第３流体識別センサ
２３０ 第４流体識別センサ
２４ 第１開閉機構
２５ 第２開閉機構
２６ 第１開閉切り替え装置
２７ 第３開閉機構
２８ 第４開閉機構
２９ 第２開閉切り替え装置
３０ 第１流体排出手段
３００ 第２流体排出手段
３１ サンプル回収手段
３２ 第６流路
３３ 第５開閉機構
３４ 第６開閉機構
３５ 第３開閉切り替え装置
３６ 第３流体排出手段
４０ 廃液槽
４００ 廃液
４１ 通気チューブ
４１０ 通気フィルタ
５０ 無菌サンプリング流路キット
５００ 滅菌バッグ
５０１ 緩衝液供給部
５０２ 緩衝液
５０３ サンプリング部
５０３ａ 排出口
５０３ｂ 排出流路
５０４、５０４ａ、５０４ｂ 第８流路
５０５ 一方向弁
５０６ 第７流路
５０７ 無菌接続継手
５０７ａ 無菌接続継手（オス型）
５０７ｂ 無菌接続継手（メス型）
５０７０ メンブレンストリップ
５０８ 第４流体排出手段
５０９ 細胞培養部
５１０ サンプル供給手段
５１１ 気体供給手段
５１１ａ ピストン
５１２ 吸引チューブ
６ アイソレータ
６１ 無菌チャンバ
６２ グローブ
６３ 液送ポート
６３ａ 液送ポート内蓋
６３ｂ 液送ポート外蓋
６３ｃ 液送ポート本体
６３０、６３１ 液送ポート開口部
Ｓ アイソレータ内部空間
ＳＰ サンプル
ＣＬ 培養細胞
Ｇ 気体
Ｇ１ 第１気体
Ｇ２ 第２気体

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5-1】

【図5-2】

【図6-1】

【図6-2】

【図6-3】

【図6-4】

【図6-5】

【図6-6】