(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】特許公報(B2)
(11)【特許番号】
(24)【登録日】2024-09-17
(45)【発行日】2024-09-26
(54)【発明の名称】がん細胞増殖抑制剤及びがん細胞増殖抑制用組成物
(51)【国際特許分類】
A61K 31/7034 20060101AFI20240918BHJP
A61P 35/00 20060101ALI20240918BHJP
A61K 31/355 20060101ALI20240918BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20240918BHJP
【ＦＩ】
A61K31/7034
A61P35/00
A61K31/355
A61P43/00 121
【請求項の数】
11
(21)【出願番号】P 2021519415
(86)(22)【出願日】2020-05-08
(86)【国際出願番号】 JP2020018733
(87)【国際公開番号】W WO2020230741
(87)【国際公開日】2020-11-19
【審査請求日】2022-12-20
(31)【優先権主張番号】P 2019090846
(32)【優先日】2019-05-13
(33)【優先権主張国・地域又は機関】JP
(73)【特許権者】
【識別番号】000004455
【氏名又は名称】株式会社レゾナック
(74)【代理人】
【識別番号】100141139
【弁理士】
【氏名又は名称】及川 周
(74)【代理人】
【識別番号】100163496
【弁理士】
【氏名又は名称】荒 則彦
(74)【代理人】
【識別番号】100134359
【弁理士】
【氏名又は名称】勝俣 智夫
(74)【代理人】
【識別番号】100137017
【弁理士】
【氏名又は名称】眞島 竜一郎
(72)【発明者】
【氏名】中上 夕子
(72)【発明者】
【氏名】深田 豪
(72)【発明者】
【氏名】加藤 詠子
【審査官】参鍋 祐子
(56)【参考文献】
【文献】国際公開第２０１８／２２５７１８（ＷＯ，Ａ１）
【文献】特表２０１０－５１４７０１（ＪＰ，Ａ）
【文献】特表２０１１－５２０９４６（ＪＰ，Ａ）
【文献】ONCOLOGY LETTERS，2018年，Vol.15，pp.7506-7514
【文献】INTERNATIONAL JOURNAL OF MOLECULAR MEDICINE，2017年，Vol.40，pp.1029-1036
【文献】Mutat. Res. Gen. Tox. En.，2018年12月12日，Vol.839，pp.40-48
【文献】Respiratory Research，2019年04月16日，Vol.20:76，pp.1-9，https://doi.org/10.1186/s12931-019-1045-7
(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)
Ａ６１Ｋ ３１／００
ＪＳＴＰｌｕｓ／ＪＭＥＤＰｌｕｓ／ＪＳＴ７５８０（ＪＤｒｅａｍＩＩＩ）
ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ）
(57)【特許請求の範囲】
【請求項1】
イノシトールに糖のみが結合したイノシトール誘導体を有効成分として含有し、前記糖がグルコース又はグルコースを構成単位として含むオリゴ糖である、
大気汚染物質に含まれる多環芳香族炭化水素により亢進するがん細胞の細胞増殖を抑制するための、がん細胞増殖抑制剤。
【請求項2】
前記イノシトールがｍｙｏ－イノシトールである、請求項１に記載のがん細胞増殖抑制剤。
【請求項3】
ＣＹＰ１Ａ１遺伝子及びＣＹＰ１Ｂ１遺伝子の発現を抑制する、請求項１又は２に記載のがん細胞増殖抑制剤。
【請求項4】
ＡＲＮＴ遺伝子の発現を抑制する、請求項１～３のいずれか一項に記載のがん細胞増殖抑制剤。
【請求項5】
活性酸素の産生を抑制する、請求項１～４のいずれか一項に記載のがん細胞増殖抑制剤。
【請求項6】
請求項１～５のいずれか一項に記載のがん細胞増殖抑制剤及び薬学的に許容される担体を含有する、大気汚染物質に含まれる多環芳香族炭化水素により亢進するがん細胞の細胞増殖を抑制するための、がん細胞増殖抑制用組成物。
【請求項7】
前記イノシトール誘導体の合計含有量が０．１～２質量％である、請求項６に記載のがん細胞増殖抑制用組成物。
【請求項8】
さらにトコフェロールリン酸エステル又はその塩を含有する、請求項６又は７に記載のがん細胞増殖抑制用組成物。
【請求項9】
前記トコフェロールリン酸エステルが、α－トコフェロールリン酸エステルである、請求項８に記載のがん細胞増殖抑制用組成物。
【請求項10】
前記トコフェロールリン酸エステルの塩が、トコフェロールリン酸エステルのナトリウム塩である、請求項８又は９に記載のがん細胞増殖抑制用組成物。
【請求項11】
前記トコフェロールリン酸エステル又はその塩の合計含有量が、０．１～２質量％である、請求項８～１０のいずれか一項に記載のがん細胞増殖抑制用組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、がん細胞増殖抑制剤及びがん細胞増殖抑制用組成物に関する。
本願は、２０１９年５月１３日に、日本に出願された特願２０１９－０９０８４６号に基づき優先権を主張し、その内容をここに援用する。
本願は、２０１９年５月１３日に、日本に出願された特願２０１９－０９０８４６号に基づき優先権を主張し、その内容をここに援用する。
【背景技術】
【0002】
大気中には、ダイオキシン及びＰＣＢ等の芳香族炭化水素類、多環芳香族炭化水素（ＰＡＨ）などの化学物質、並びにこれらの化学物質が紫外線等の作用により酸化された酸化物質等が存在している。これらの物質は人体に様々な影響を及ぼす。これらの有害物質を呼気により人体内へ吸引したり粘膜から吸収したりすることで、肺などの呼吸器、皮膚粘膜、及び内臓において様々な炎症が起こり、ひいては細胞のがん化を引き起こすことが知られている。この大気粉塵に含まれるＰＡＨ及びその酸化物等の有害物質による発がんのメカニズムとして、細胞に存在する芳香族炭化水素受容体（ＡｈＲ）にこれらの有害物質が結合し、これが細胞核内に移行することでＣＹＰ１Ａ１遺伝子やＣＹＰ１Ｂ１遺伝子の発現が誘導され、細胞内に活性酸素（Ｒｅａｃｔｉｖｅ Ｏｘｙｇｅｎ Ｓｐｅｃｉｅｓ：ＲＯＳ）を産生する結果、炎症や細胞のがん化及びがん細胞の浸潤が引き起こされることが報告されている（非特許文献１、２）。
【0003】
大気汚染物質からの防御剤、保護剤、及び大気汚染に関連する症状の抑制剤としては、細胞内で産生されるＲＯＳを抑制する目的で、抗酸化効果のある物質、及び植物由来の抽出物等が報告されている（特許文献１～３）。また、ＡｈＲに競合的に結合して有害物質の影響を抑制する物質等が報告されている（非特許文献３）。しかしながら、その効果はまだ不十分である。
また、大気汚染物質を物理的に寄せ付けないための保護剤として、油性の被膜剤を配合して体表面を被覆する製剤、大気汚染物質に含まれる刺激原因物質を捕捉する剤、及び酸化作用を抑制する剤等が提案されている。しかしながら、これらの保護剤は、刺激物質を寄せ付けないという意味では有効であるが、引き起こされうる生体内での発がん作用から細胞を保護できるものではない。
また、大気汚染物質を物理的に寄せ付けないための保護剤として、油性の被膜剤を配合して体表面を被覆する製剤、大気汚染物質に含まれる刺激原因物質を捕捉する剤、及び酸化作用を抑制する剤等が提案されている。しかしながら、これらの保護剤は、刺激物質を寄せ付けないという意味では有効であるが、引き起こされうる生体内での発がん作用から細胞を保護できるものではない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【0004】
【文献】特開２０１６－８８９２８号公報
【文献】特開２０１７－１８６２７６号公報
【文献】特許第６４５６８１５号公報
【非特許文献】
【0005】
【文献】Moorthy B et al., Polycyclic aromatic hydrocarbons: from metabolism to lung cancer. Toxicol Sci. 2015 May; 145(1):5-15.
【文献】Nebert DW et al., Role of aryl hydrocarbon receptor-mediated induction of the CYP1 enzymes in environmental toxicity and cancer. J Biol Chem. 2004 Jun 4; 279(23):23847-50.
【文献】Furue M et al., Antioxidative Phytochemicals Accelerate Epidermal Terminal Differentiation via the AHR-OVOL1 Pathway: Implications for Atopic Dermatitis. Acta Derm Venereol. 2018 Nov 5; 98(10):918-923.
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0006】
上記のように、大気中のＰＡＨ及びその酸化物質は、発がんに関与していると考えられ、これらの大気汚染物質の作用を抑制可能な薬剤が求められている。しかしながら、特許文献１～３、及び非特許文献３に記載の物質は、それらの大気汚染物質により生じるがん細胞の増殖抑制効果が確認されていない。
【0007】
そこで、本発明は、大気汚染物質により亢進するがん細胞の増殖及び浸潤を抑制することができる、がん細胞増殖抑制剤、及び前記がん細胞増殖抑制剤を含有するがん細胞増殖抑制用組成物を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【0008】
本発明は以下の態様を含む。
（１）イノシトールに糖が結合したイノシトール誘導体を有効成分として含有する、がん細胞増殖抑制剤。
（２）前記糖がグルコース又はグルコースを構成単位として含むオリゴ糖である、（１）に記載のがん細胞増殖抑制剤。
（３）前記イノシトールがｍｙｏ－イノシトールである、（１）又は（２）に記載のがん細胞増殖抑制剤。
（４）ＣＹＰ１Ａ１遺伝子及びＣＹＰ１Ｂ１遺伝子の発現を抑制する、（１）～（３）のいずれか一つに記載のがん細胞増殖抑制剤。
（５）ＡＲＮＴ遺伝子の発現を抑制する、（１）～（４）のいずれか一つに記載のがん細胞増殖抑制剤。
（６）活性酸素の産生を抑制する、（１）～（５）のいずれか一つに記載のがん細胞増殖抑制剤。
（７）（１）～（６）のいずれか一つに記載のがん細胞増殖抑制剤及び薬学的に許容される担体を含有する、がん細胞増殖抑制用組成物。
（８）前記イノシトール誘導体の合計含有量が０．１～２質量％である、（７）に記載のがん細胞増殖抑制用組成物。
（９）さらにトコフェロールリン酸エステル又はその塩を含有する、（７）又は（８）に記載のがん細胞増殖抑制用組成物。
（１０）前記トコフェロールリン酸エステルが、α－トコフェロールリン酸エステルである、（９）に記載のがん細胞増殖抑制用組成物。
（１１）前記トコフェロールリン酸エステルの塩が、トコフェロールリン酸エステルのナトリウム塩である、（９）又は（１０）に記載のがん細胞増殖抑制用組成物。
（１２）前記トコフェロールリン酸エステル又はその塩の合計含有量が、０．１～２質量％である、（９）～（１１）のいずれか一つに記載のがん細胞増殖抑制用組成物。
（１）イノシトールに糖が結合したイノシトール誘導体を有効成分として含有する、がん細胞増殖抑制剤。
（２）前記糖がグルコース又はグルコースを構成単位として含むオリゴ糖である、（１）に記載のがん細胞増殖抑制剤。
（３）前記イノシトールがｍｙｏ－イノシトールである、（１）又は（２）に記載のがん細胞増殖抑制剤。
（４）ＣＹＰ１Ａ１遺伝子及びＣＹＰ１Ｂ１遺伝子の発現を抑制する、（１）～（３）のいずれか一つに記載のがん細胞増殖抑制剤。
（５）ＡＲＮＴ遺伝子の発現を抑制する、（１）～（４）のいずれか一つに記載のがん細胞増殖抑制剤。
（６）活性酸素の産生を抑制する、（１）～（５）のいずれか一つに記載のがん細胞増殖抑制剤。
（７）（１）～（６）のいずれか一つに記載のがん細胞増殖抑制剤及び薬学的に許容される担体を含有する、がん細胞増殖抑制用組成物。
（８）前記イノシトール誘導体の合計含有量が０．１～２質量％である、（７）に記載のがん細胞増殖抑制用組成物。
（９）さらにトコフェロールリン酸エステル又はその塩を含有する、（７）又は（８）に記載のがん細胞増殖抑制用組成物。
（１０）前記トコフェロールリン酸エステルが、α－トコフェロールリン酸エステルである、（９）に記載のがん細胞増殖抑制用組成物。
（１１）前記トコフェロールリン酸エステルの塩が、トコフェロールリン酸エステルのナトリウム塩である、（９）又は（１０）に記載のがん細胞増殖抑制用組成物。
（１２）前記トコフェロールリン酸エステル又はその塩の合計含有量が、０．１～２質量％である、（９）～（１１）のいずれか一つに記載のがん細胞増殖抑制用組成物。
【発明の効果】
【0009】
本発明により、大気汚染物質により亢進するがん細胞の増殖及び浸潤を抑制することができる、がん細胞増殖抑制剤、及び前記がん細胞増殖抑制剤を含有するがん細胞増殖抑制用組成物を提供することができる。
【発明を実施するための形態】
【0010】
［がん細胞増殖抑制剤］
一実施形態において、本発明は、イノシトールに糖が結合したイノシトール誘導体を有効成分として含有する、がん細胞増殖抑制剤を提供する。
一実施形態において、本発明は、イノシトールに糖が結合したイノシトール誘導体を有効成分として含有する、がん細胞増殖抑制剤を提供する。
【0011】
本実施形態のがん細胞増殖抑制剤は、大気汚染物質により亢進するがん細胞の細胞増殖を抑制するために好適に用いることができる。本明細書において、「大気汚染物質」とは、大気中に存在し、人体に有害な作用を及ぼす物質であって、特に、がんの発生、進展等に関与する物質を意味する。大気汚染物質が有する有害作用としては、例えば、発がん作用、がん細胞増殖促進作用、及びがん細胞浸潤促進作用等が挙げられる。
【0012】
大気汚染物質としては、例えば、アメリカ国立標準技術研究所（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｓｔａｎｄａｒｄｓ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ：ＮＩＳＴ）が供給するＳｔａｎｄａｒｄ Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ Ｍａｔｅｒｉａｌ １６４８ａに含まれる物質が挙げられる。具体的には、多環芳香族炭化水素類（ＰＡＨｓ）、ニトロ多環芳香族炭化水素類（ニトロＰＡＨｓ）、ポリ塩化ビフェニル類（ＰＣＢｓ）、塩素系殺虫剤等が挙げられる。
多環芳香族炭化水素類としては、例えば、ナフタレン、アセナフテン、フェナントレン、メチルフェナントレン、アントラセン、ベンゾアントラセン、ジベンゾアントラセン、フルオランテン、ベンゾフルオランテン、ジベンゾフルオランテン、ピレン、ベンゾピレン、ジベンゾピレン、ペリレン、ベンゾペリレン、インデノペリレン、クリセン、ベンゾクリセン、トリフェニレン、ピセン、コロネン、ビフェニル等が挙げられるが、これらに限定されない。
ニトロ多環芳香族炭化水素類としては、例えば、前記例示した多環芳香族炭化水素類の水素原子の一部がニトロ基で置換された化合物が挙げられる。具体的には、１－ニトロナフタレン、２－ニトロナフタレン、３－ニトロアセナフテン、４－ニトロフェナントレン、９－ニトロフェナントレン、９－ニトロアントラセン、１－ニトロピレン、２－ニトロピレン、４－ニトロピレン、２－ニトロフルオランテン、３－ニトロフルオランテン、８－ニトロフルオランテン、７－ニトロベンゾアントラセン、６－ニトロクリセン、等が挙げられるが、これらに限定されない。
ポリ塩化ビフェニル類としては、例えば、ジクロロビフェニル、トリクロロビフェニル、テトラクロロビフェニル、ペンタクロロビフェニル、ヘキサクロロビフェニル、ヘプタクロロビフェニル、オクタクロロビフェニル、ノナクロロビフェニル、デカクロロビフェニル、等が挙げられるが、これらに限定されない。
塩素系殺虫剤としては、例えば、ベンゼンヘキサクロリド、ヘキサクロロベンゼン、クロルデン、マイレックス、ジクロロジフェニルトリクロロエタン（ＤＤＴ）等が挙げられるが、これらに限定されない。
多環芳香族炭化水素類としては、例えば、ナフタレン、アセナフテン、フェナントレン、メチルフェナントレン、アントラセン、ベンゾアントラセン、ジベンゾアントラセン、フルオランテン、ベンゾフルオランテン、ジベンゾフルオランテン、ピレン、ベンゾピレン、ジベンゾピレン、ペリレン、ベンゾペリレン、インデノペリレン、クリセン、ベンゾクリセン、トリフェニレン、ピセン、コロネン、ビフェニル等が挙げられるが、これらに限定されない。
ニトロ多環芳香族炭化水素類としては、例えば、前記例示した多環芳香族炭化水素類の水素原子の一部がニトロ基で置換された化合物が挙げられる。具体的には、１－ニトロナフタレン、２－ニトロナフタレン、３－ニトロアセナフテン、４－ニトロフェナントレン、９－ニトロフェナントレン、９－ニトロアントラセン、１－ニトロピレン、２－ニトロピレン、４－ニトロピレン、２－ニトロフルオランテン、３－ニトロフルオランテン、８－ニトロフルオランテン、７－ニトロベンゾアントラセン、６－ニトロクリセン、等が挙げられるが、これらに限定されない。
ポリ塩化ビフェニル類としては、例えば、ジクロロビフェニル、トリクロロビフェニル、テトラクロロビフェニル、ペンタクロロビフェニル、ヘキサクロロビフェニル、ヘプタクロロビフェニル、オクタクロロビフェニル、ノナクロロビフェニル、デカクロロビフェニル、等が挙げられるが、これらに限定されない。
塩素系殺虫剤としては、例えば、ベンゼンヘキサクロリド、ヘキサクロロベンゼン、クロルデン、マイレックス、ジクロロジフェニルトリクロロエタン（ＤＤＴ）等が挙げられるが、これらに限定されない。
【0013】
大気汚染物質は、単独で有害作用（発がん、がん増殖、がん浸潤等）を有するものに限定されず、複数の物質が複合的に作用して有害作用を発現するものであってもよい。
【0014】
後述する実施例で示すように、大気汚染物質が存在すると、がん細胞の細胞増殖が促進される。本実施形態のがん細胞増殖抑制剤は、そのような大気汚染物質により促進されるがん細胞の細胞増殖を効果的に抑制することができる。すなわち、本実施形態のがん細胞増殖抑制剤は、大気汚染物質の存在下において、前記がん細胞増殖抑制剤を投与しなかった場合と比較して、がん細胞の細胞増殖を抑制することができる。
【0015】
多環芳香族炭化水素は、細胞内に侵入すると、ＡｈＲに結合し、ＡＲＮＴ（Ａｒｙｌ Ｈｙｄｒｏｃａｒｂｏｎ Ｒｅｃｅｐｔｏｒ Ｎｕｃｌｅａｒ Ｔｒａｎｓｌｏｃａｔｏｒ）により核内に輸送され、ＣＹＰ１Ａ１、及びＣＹＰ１Ｂ１等の薬物代謝遺伝子の発現を誘導する。ＣＹＰ１Ａ１、及びＣＹＰ１Ｂ１等による薬物代謝により、ＲＯＳが細胞内に生成される。ＲＯＳがＤＮＡ変異及び／又は遺伝子発現プロファイルの攪乱を惹起することにより、がん化を誘発することが報告されている（Moorthy B et al., Toxicol Sci. 2015 May; 145(1):5-15.；Nebert DW et al., J Biol Chem. 2004 Jun 4; 279(23):23847-50.）。
【0016】
後述する実施例で示すように、本実施形態のがん細胞増殖抑制剤は、大気汚染物質により誘導されるＣＹＰ１Ａ１遺伝子及びＣＹＰ１Ｂ１遺伝子の発現を抑制することができる。したがって、本実施形態のがん細胞増殖抑制剤は、ＣＹＰ１Ａ１遺伝子及びＣＹＰ１Ｂ１遺伝子の発現抑制剤である、ということもできる。すなわち、本実施形態のがん細胞増殖抑制剤は、大気汚染物質の存在下において、前記がん細胞増殖抑制剤を投与しなかった場合と比較して、ＣＹＰ１Ａ１遺伝子及びＣＹＰ１Ｂ１遺伝子の発現を抑制することができる。
【0017】
ＣＹＰ１Ａ１（ＮＣＢＩ Ｇｅｎｅ ＩＤ：１５４３）は、薬物代謝に関与する反応を触媒するモノオキシゲナーゼである、シトクロームＰ４５０スーパーファミリー酵素の１種である。ＣＹＰ１Ａ１は、小胞体に局在化し、多環芳香族炭化水素により発現が誘導され、多環芳香族炭化水素を代謝して発がん性物質を生成する。ヒトＣＹＰ１Ａ１遺伝子の塩基配列としては、例えば、ＮＣＢＩ Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ Ｓｅｑｕｅｎｃｅデータベースに登録されている、ＮＭ＿０００４９９．５、ＮＭ＿００１３１９２１６．２、ＮＭ＿００１３１９２１７．２等が例示される。ＣＹＰ１Ａ１遺伝子は、前記配列を有するものに限定されず、それらのホモログを包含する。
【0018】
ＣＹＰ１Ｂ１（ＮＣＢＩ Ｇｅｎｅ ＩＤ：１５４５）は、薬物代謝に関与する反応を触媒するモノオキシゲナーゼである、シトクロームＰ４５０スーパーファミリー酵素の１種である。ＣＹＰ１Ｂ１は、小胞体に局在化し、多環芳香族炭化水素により発現が誘導され、多環芳香族炭化水素を代謝して発がん性物質を生成する。ヒトＣＹＰ１Ｂ１遺伝子の塩基配列としては、例えば、ＮＣＢＩ Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ Ｓｅｑｕｅｎｃｅデータベースに登録されている、ＮＭ＿０００１０４．３等が例示される。ＣＹＰ１Ｂ１遺伝子は、前記配列を有するものに限定されず、それらのホモログを包含する。
【0019】
後述する実施例で示すように、本実施形態のがん細胞増殖抑制剤は、大気汚染物質により誘導されるＡＲＮＴ遺伝子の発現を抑制することができる。したがって、本実施形態のがん細胞増殖抑制剤は、ＡＲＮＴ遺伝子の発現抑制剤である、ということもできる。すなわち、本実施形態のがん細胞増殖抑制剤は、大気汚染物質の存在下において、前記がん細胞増殖抑制剤を投与しなかった場合と比較して、ＡＲＮＴ遺伝子の発現を抑制することができる。
ＡＲＮＴ（ＮＣＢＩ Ｇｅｎｅ ＩＤ：４０５）は、多環芳香族炭化水素等のリガンドが結合したＡｈＲに結合し、前記リガンド－ＡｈＲ複合体を核に輸送するタンパク質である。ヒトＡＲＮＴ遺伝子の塩基配列としては、例えば、ＮＣＢＩ Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ Ｓｅｑｕｅｎｃｅデータベースに登録されている、ＮＭ＿００１１９７３２５．１、２．ＮＭ＿００１２８６０３５．１、３．ＮＭ＿００１２８６０３６．１、４．ＮＭ＿００１３５０２２４．１、５．ＮＭ＿００１３５０２２５．１、６．ＮＭ＿００１３５０２２６．１、７．ＮＭ＿００１６６８．４、８．ＮＭ＿１７８４２７．２等が例示される。ＡＲＮＴ遺伝子は、前記配列を有するものに限定されず、それらのホモログを包含する。
ＡＲＮＴ（ＮＣＢＩ Ｇｅｎｅ ＩＤ：４０５）は、多環芳香族炭化水素等のリガンドが結合したＡｈＲに結合し、前記リガンド－ＡｈＲ複合体を核に輸送するタンパク質である。ヒトＡＲＮＴ遺伝子の塩基配列としては、例えば、ＮＣＢＩ Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ Ｓｅｑｕｅｎｃｅデータベースに登録されている、ＮＭ＿００１１９７３２５．１、２．ＮＭ＿００１２８６０３５．１、３．ＮＭ＿００１２８６０３６．１、４．ＮＭ＿００１３５０２２４．１、５．ＮＭ＿００１３５０２２５．１、６．ＮＭ＿００１３５０２２６．１、７．ＮＭ＿００１６６８．４、８．ＮＭ＿１７８４２７．２等が例示される。ＡＲＮＴ遺伝子は、前記配列を有するものに限定されず、それらのホモログを包含する。
【0020】
後述する実施例で示すように、本実施形態のがん細胞増殖抑制剤は、大気汚染物質により誘導されるＲＯＳの産生を抑制することができる。したがって、本実施形態のがん細胞増殖抑制剤は、ＲＯＳの産生抑制剤である、ということもできる。すなわち、本実施形態のがん細胞増殖抑制剤は、大気汚染物質の存在下において、前記がん細胞増殖抑制剤を投与しなかった場合と比較して、ＲＯＳの産生を抑制することができる。
【0021】
後述する実施例で示すように、本実施形態のがん細胞増殖抑制剤は、大気汚染物質により促進されるがん細胞の浸潤を抑制することができる。したがって、本実施形態のがん細胞増殖抑制剤は、がん細胞の浸潤抑制剤である、ということもできる。すなわち、本実施形態のがん細胞増殖抑制剤は、大気汚染物質の存在下において、前記がん細胞増殖抑制剤を投与しなかった場合と比較して、がん細胞の浸潤を抑制することができる。
【0022】
（イノシトール誘導体）
本実施形態のがん細胞増殖抑制剤は、イノシトールに糖が結合したイノシトール誘導体を有効成分とする。
本実施形態のがん細胞増殖抑制剤は、イノシトールに糖が結合したイノシトール誘導体を有効成分とする。
【0023】
イノシトールとは、Ｃ６Ｈ６（ＯＨ）６で表される環状六価アルコールである。イノシトールには、ｃｉｓ－イノシトール、ｅｐｉ－イノシトール、ａｌｌｏ－イノシトール、ｍｙｏ－イノシトール、ｍｕｃｏ－イノシトール、ｎｅｏ－イノシトール、ｃｈｉｒｏ－イノシトール（Ｄ体及びＬ体が存在する。）、ｓｃｙｌｌｏ－イノシトールの、９つの立体異性体が存在する。
【0024】
本実施形態のがん細胞増殖抑制剤において、イノシトール誘導体を構成するイノシトールは、上記の異性体のうち、生理活性を有するｍｙｏ－イノシトールであることが好ましい。イノシトールは、米糠から抽出する方法、化学合成法、及び発酵法等により合成することができる。
【0025】
本実施形態のがん細胞増殖抑制剤において、イノシトール誘導体は、イノシトールの水酸基に糖が結合した化合物である。糖は、イノシトール分子内に６つ存在する水酸基のいずれか１つに結合していてもよく、いずれか２つ以上に結合していてもよい。
【0026】
イノシトールに結合する糖は、単糖であってもよく、オリゴ糖であってもよい。例えば、１分子のイノシトールに１又は複数の単糖が結合していてもよく、１分子のイノシトールに１又は複数のオリゴ糖が結合していてもよく、１分子のイノシトールに１又は複数の単糖及び１又は複数のオリゴ糖が結合していてもよい。イノシトール誘導体において、１分子のイノシトールに結合した単糖又はオリゴ糖の合計は、単糖単位に換算して１以上であり、例えば２以上であってもよく、例えば３以上であってもよく、例えば４以上であってもよい。
【0027】
本明細書において、単糖とは、それ以上加水分解されない糖類を意味し、多糖を形成する際の構成要素となる化合物を意味する。単糖は、糖類の最小構成単位であるということもできる。本明細書において、「単糖単位」とは、単糖に相当する化学構造を意味する。「単糖単位」は、単糖に由来する化学構造であるということもできる。例えば、二糖を単糖単位に換算すると２であり、三糖を単糖単位に換算すると３である。より具体的には、例えば、マンニトール、ソルビトール、キシリトール、エリスリトール、ペンタエリスリトール、グルコース、果糖、キシロース等を単糖単位に換算すると１である。マルチトール、ショ糖、乳糖、マルトース、トレハロース等を単糖単位に換算すると２である。例えば、α－シクロデキストリンを単糖単位に換算すると６であり、β－シクロデキストリンを単糖単位に換算すると７であり、γ－シクロデキストリンを単糖単位に換算すると８である。
【0028】
イノシトール誘導体は、単糖単位に換算して異なる数の糖が結合したイノシトール誘導体の混合物であってもよい。例えば、イノシトール誘導体は、イノシトール１分子あたり、１の単糖単位の糖が結合したものと、２の単糖単位の糖が結合したものと、３の単糖単位の糖が結合したものと、４の単糖単位の糖が結合したものと、５以上の単糖単位の糖が結合したものと、の混合物であってもよい。例えば、イノシトール誘導体は、イノシトール１分子あたり２以上の単糖単位の糖が結合したものを、イノシトール誘導体全質量（１００質量％）に対して、１０～１００質量％含むものであってもよい。イノシトール誘導体全質量（１００質量％）に対する、イノシトール１分子あたり２以上の単糖単位の糖が結合したものの割合としては、例えば、２０質量％以上、３０質量％以上、４０質量％以上、５０質量％以上、６０質量％以上、７０質量％以上、又は８０質量％以上とすることができる。
【0029】
イノシトール誘導体を構成する糖としては、特に制限はなく、例えば、マンニトール、ソルビトール、キシリトール、マルチトール、エリスリトール、ペンタエリスリトール、グルコース、ショ糖、果糖、乳糖、マルトース、キシロース、トレハロース、α－シクロデキストリン、β－シクロデキストリン、γ－シクロデキストリン等が挙げられる。
【0030】
イノシトール誘導体を構成する糖は、グルコースであってもよく、グルコースを構成単位として含むオリゴ糖であってもよい。前記オリゴ糖は、グルコースのみを構成単位として含んでいてもよい。あるいは、前記オリゴ糖は、少なくとも１分子のグルコースと、グルコース以外の糖を構成単位として含んでいてもよい。前記オリゴ糖の分子量は、例えば、３００～３０００程度であってもよい。より具体的なオリゴ糖としては、スクロース、ラクトース、マルトース、トレハロース、セロビオース等の二糖類、ラフィノース、メレジトース、マルトトリオース等の三糖類、スタキオース等の四糖類等が挙げられる。
【0031】
イノシトール誘導体は、糖が単糖であるイノシトール誘導体と、糖がオリゴ糖であるイノシトール誘導体の混合物であってもよい。また、イノシトール誘導体は、異なる種類の糖が結合したイノシトール誘導体の混合物であってもよい。
【0032】
高い精製度のイノシトール誘導体を得やすくなる観点から、イノシトール誘導体の原料として、工業的に安価で安定供給可能なβ－シクロデキストリンを用いることが好ましい。この場合、イノシトール誘導体を構成する糖はグルコースを構成単位として含むことになる。一方、イノシトール誘導体の原料として、より安価なデンプン等を使うと、イノシトール誘導体の合成時に様々な糖が様々な場所に転移されるため、得られるイノシトール誘導体の精製度が安定しない傾向がある。
【0033】
イノシトール誘導体は、薬学的に許容可能な塩の形態であってもよい。本明細書において、「薬学的に許容可能な塩」とは、イノシトール誘導体の大気汚染物質に起因するがん細胞増殖抑制効果を阻害しない塩の形態を意味する。イノシトール誘導体の薬学的に許容可能な塩としては、特に制限されず、例えば、アルカリ金属（ナトリウム、カリウムなど）との塩；アルカリ土類金属（マグネシウム、カルシウムなど）との塩；有機塩基（ピリジン、トリエチルアミンなど）との塩、アミンとの塩、有機酸（酢酸、ギ酸、プロピオン酸、フマル酸、マレイン酸、コハク酸、酒石酸、クエン酸、リンゴ酸、シュウ酸、安息香酸、メタンスルホン酸など）との塩、及び無機酸（塩酸、リン酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸など）との塩等が挙げられる。
【0034】
イノシトール誘導体は、溶媒和物の形態であってもよい。イノシトール誘導体は、イノシトール誘導体の塩の溶媒和物の形態であってもよい。溶媒和物としては、特に制限されず、例えば、水和物、エタノール溶媒和物等を挙げることができる。
【0035】
（イノシトール誘導体の合成方法）
イノシトール誘導体の合成方法としては、特に制限はなく、従来知られている方法で適宜合成することができる。例えば、イノシトール及びオリゴ糖の１種であるシクロデキストリンを、シクロデキストリングルカノトランスフェラーゼの存在下で反応させて、イノシトール誘導体を合成してもよい（例えば、特開昭６３－１９６５９６号公報を参照）。あるいは、グルコシル亜リン酸エステルを糖供与体として用い、グルコシル体を得る方法により、イノシトール誘導体を合成してもよい（例えば、特開平６－２９８７８３号公報を参照）。
イノシトール誘導体の合成方法としては、特に制限はなく、従来知られている方法で適宜合成することができる。例えば、イノシトール及びオリゴ糖の１種であるシクロデキストリンを、シクロデキストリングルカノトランスフェラーゼの存在下で反応させて、イノシトール誘導体を合成してもよい（例えば、特開昭６３－１９６５９６号公報を参照）。あるいは、グルコシル亜リン酸エステルを糖供与体として用い、グルコシル体を得る方法により、イノシトール誘導体を合成してもよい（例えば、特開平６－２９８７８３号公報を参照）。
【0036】
本実施形態のがん細胞増殖抑制剤は、イノシトール誘導体として、上述したイノシトール誘導体、イノシトール誘導体の塩、及びそれらの溶媒和物からなる群より選択される化合物の１種を単独で含有してもよく、２種以上を組み合わせて含有してもよい。
【0037】
本実施形態のがん細胞増殖抑制剤は、大気汚染物質により誘導されるがん細胞増殖を抑制する目的で、それ自体を患者に投与して使用することができる。本実施形態のがん細胞増殖抑制剤は、大気汚染物質により誘導されるがん細胞増殖を抑制する機能を付与する目的で、医薬品又は化粧品に配合して使用することもできる。本実施形態のがん細胞増殖抑制剤は、後述するがん細胞増殖抑制用組成物に配合して使用してもよい。
【0038】
本実施形態のがん細胞増殖抑制剤は、がんを発症する前に患者に投与し、がん化した細胞が増殖してがんを発症することを予防するために使用してもよい。本実施形態のがん細胞増殖抑制剤は、がん患者に投与し、大気汚染物質により誘導されるがん細胞増殖を抑制するために使用してもよい。
【0039】
本実施形態のがん細胞増殖抑制剤を適用するがん細胞としては、例えば、肺がん、膵臓がん、胃がん、頭頸部がん、中皮腫、神経芽腫、肝臓がん、悪性黒色腫、子宮がん、膀胱がん、胆道がん、食道がん、骨肉腫、精巣腫瘍、甲状腺がん、急性骨髄性白血病、脳腫瘍、前立腺がん、頭頸部扁平上皮がん、大腸がん、腎がん、卵巣がん、及び乳がん等のがん細胞が挙げられるが、これらに限定されない。本実施形態のがん細胞増殖抑制剤は、肺がん細胞の細胞増殖抑制に好適に使用される。
【0040】
本実施形態のがん細胞増殖抑制剤は、後述するがん細胞増殖抑制用組成物と同様の方法で患者に投与することができ、経皮的に投与することが好ましい。
【0041】
［がん細胞増殖抑制用組成物］
一実施形態において、本発明は、上述したがん細胞増殖抑制剤及び薬学的に許容される担体を含有する、がん細胞増殖抑制用組成物を提供する。
一実施形態において、本発明は、上述したがん細胞増殖抑制剤及び薬学的に許容される担体を含有する、がん細胞増殖抑制用組成物を提供する。
【0042】
本実施形態のがん細胞増殖抑制用組成物は、常法（例えば、日本薬局方記載の方法）に従って、上述したがん細胞増殖抑制剤、薬学的に許容される担体、及び場合により他の成分を混合して製剤化することにより製造することができる。
【0043】
本明細書において、「薬学的に許容される担体」とは、有効成分の生理活性を阻害せず、且つ、その投与対象に対して実質的な毒性を示さない担体を意味する。「実質的な毒性を示さない」とは、その成分が通常使用される投与量において、投与対象に対して毒性を示さないことを意味する。薬学的に許容される担体としては、特に制限されず、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、乳化剤、安定剤、希釈剤、注射剤用溶剤、油性基剤、保湿剤、感触向上剤、界面活性剤、高分子、増粘剤、ゲル化剤、溶剤、噴射剤、酸化防止剤、還元剤、酸化剤、キレート剤、酸、アルカリ、粉体、無機塩、水、金属含有化合物、不飽和単量体、多価アルコール、高分子添加剤、補助剤、湿潤剤、粘着付与物質、油性原料、液状マトリックス、脂溶性物質、高分子カルボン酸塩等を挙げることができる。これらの成分の具体例としては、例えば、国際公開公報第２０１６／０７６３１０号に記載のもの等が挙げられる。高分子、増粘剤及びゲル化剤の具体例としては、メタクロイルオキシエチルホスホリルコリン、メタクリル酸ブチル、又はこれらの重合体等が挙げられる。薬学的に許容される担体は、１種を単独で用いてもよく、２種以上を併用してもよい。
【0044】
他の成分としては、特に制限されず、防腐剤、抗菌剤、紫外線吸収剤、美白剤、ビタミン類及びその誘導体類、消炎剤、抗炎症剤、育毛用薬剤、血行促進剤、刺激剤、ホルモン類、抗しわ剤、抗老化剤、ひきしめ剤、冷感剤、温感剤、創傷治癒促進剤、刺激緩和剤、鎮痛剤、細胞賦活剤、植物エキス、動物エキス、微生物エキス、種子油、鎮痒剤、角質剥離・溶解剤、制汗剤、清涼剤、収れん剤、酵素、核酸、香料、色素、着色剤、染料、顔料、消炎鎮痛剤、抗真菌剤、抗ヒスタミン剤、催眠鎮静剤、精神安定剤、抗高血圧剤、降圧利尿剤、抗生物質、麻酔剤、抗菌性物質、抗てんかん剤、冠血管拡張剤、生薬、止痒剤、角質軟化剥離剤、紫外線遮断剤、防腐殺菌剤、抗酸化物質、ｐＨ調整剤、添加剤、金属セッケン等を挙げることができる。これらの成分の具体例としては、例えば、国際公開公報第２０１６／０７６３１０号に記載のもの等が挙げられる。植物エキスエキスの具体例としては、ラプサナコムニス花／葉／茎、チャ葉等が挙げられる。種子油の具体例としては、ワサビノキ種子油が挙げられる。香料の具体例としては、ペリルアルデヒドが挙げられる。他の成分は、１種を単独で用いてもよく、２種以上を併用してもよい。
【0045】
本実施形態のがん細胞増殖抑制用組成物は、前記がん細胞増殖抑制剤を治療的有効量含有することができる。「治療的有効量」とは、患者の疾患の治療又は予防のために有効な薬剤の量を意味する。治療的有効量は、投与対象の疾患の状態、年齢、性別、及び体重等によって変動し得る。本実施形態のがん細胞増殖抑制用組成物において、上記のがん細胞増殖抑制剤の治療的有効量は、がん細胞増殖抑制剤中のイノシトール誘導体が大気汚染物質により促進されるがん細胞増殖を抑制し得る量であり得る。例えば、本実施形態のがん細胞増殖抑制用組成物における前記がん細胞増殖抑制剤の治療的有効量は、イノシトール誘導体の組成物中の合計含有量として、例えば０．０１～２０質量％であってもよく、例えば０．１～１０質量％であってもよく、例えば０．１～５質量％であってもよく、例えば０．１～３質量％であってもよく、例えば０．１～２質量％であってもよく、例えば０．３～２質量％であってもよく、例えば０．６～１．５質量％であってもよい。
【0046】
前記がん細胞増殖抑制用組成物中のイノシトール誘導体の含有量は、１種のイノシトール誘導体を単独で含有する場合にはその化合物の含有量を意味し、イノシトール誘導体を２種以上組み合わせて含有する場合には、これらの化合物の合計の含有量を意味する。
【0047】
（トコフェロールリン酸エステル）
本実施形態のがん細胞増殖抑制用組成物は、他の成分として、トコフェロールリン酸エステル又はその塩を含有していてもよい。
イノシトール誘導体は、ＡｈＲを介したＣＹＰ１Ａ１遺伝子、ＣＹＰ１Ｂ１遺伝子、及びＡＲＮＴ遺伝子の発現を抑制する。トコフェロールリン酸エステルは、その抗酸化効果により、大気汚染物質により誘導されるＲＯＳの産生を抑制する。イノシトール誘導体とトコフェロールリン酸エステルとは、それぞれがん化のプロセスの異なる部分を阻害する。そのため、これらを組み合わせて用いることにより、がん化抑制効果が相乗的に向上すると推測される。
後述する実施例で示すように、イノシトール誘導体を、トコフェロールリン酸エステル又はその塩と組み合わせて用いることにより、大気汚染物質により誘導されるがん細胞増殖が、相乗的に抑制される。そのため、好ましい態様において、本実施形態のがん細胞増殖抑制用組成物は、イノシトール誘導体とトコフェロールリン酸エステル又はその塩とを含む。
本実施形態のがん細胞増殖抑制用組成物は、他の成分として、トコフェロールリン酸エステル又はその塩を含有していてもよい。
イノシトール誘導体は、ＡｈＲを介したＣＹＰ１Ａ１遺伝子、ＣＹＰ１Ｂ１遺伝子、及びＡＲＮＴ遺伝子の発現を抑制する。トコフェロールリン酸エステルは、その抗酸化効果により、大気汚染物質により誘導されるＲＯＳの産生を抑制する。イノシトール誘導体とトコフェロールリン酸エステルとは、それぞれがん化のプロセスの異なる部分を阻害する。そのため、これらを組み合わせて用いることにより、がん化抑制効果が相乗的に向上すると推測される。
後述する実施例で示すように、イノシトール誘導体を、トコフェロールリン酸エステル又はその塩と組み合わせて用いることにより、大気汚染物質により誘導されるがん細胞増殖が、相乗的に抑制される。そのため、好ましい態様において、本実施形態のがん細胞増殖抑制用組成物は、イノシトール誘導体とトコフェロールリン酸エステル又はその塩とを含む。
【0048】
後述する実施例に示すように、イノシトール誘導体を、トコフェロールリン酸エステル又はその塩と組み合わせて用いることにより、大気汚染物質により誘導されるＲＯＳ産生が、相乗的に抑制される。そのため、本実施形態のがん細胞増殖抑制用組成物は、イノシトール誘導体とトコフェロールリン酸エステル又はその塩とを含む、ＲＯＳ産生抑制用組成物である、ということもできる。
【0049】
トコフェロールリン酸エステルとしては、下記一般式（１）で表される化合物が挙げられる。
【0050】
【化1】
【0051】
トコフェロールリン酸エステルには、上記一般式（１）中のＲ１、Ｒ２及びＲ３の種類によって、α－トコフェロールリン酸エステル（Ｒ１，Ｒ２，Ｒ３＝ＣＨ３）、β－トコフェロールリン酸エステル（Ｒ１，Ｒ３＝ＣＨ３、Ｒ２＝Ｈ）、γ－トコフェロールリン酸エステル（Ｒ１，Ｒ２＝ＣＨ３、Ｒ３＝Ｈ）、δ－トコフェロールリン酸エステル（Ｒ１＝ＣＨ３、Ｒ２，Ｒ３＝Ｈ）、ζ２－トコフェロールリン酸エステル（Ｒ２，Ｒ３＝ＣＨ３、Ｒ１＝Ｈ）、及びη－トコフェロールリン酸エステル（Ｒ２＝ＣＨ３、Ｒ１，Ｒ３＝Ｈ）等が存在する。
トコフェロールリン酸エステルは、特に限定されず、これらのトコフェロールリン酸エステルのいずれであってもよい。これらの中でも、α－トコフェロールリン酸エステル及びγ－トコフェロールリン酸エステルが好ましく、α－トコフェロールリン酸エステルがより好ましい。
トコフェロールリン酸エステルは、特に限定されず、これらのトコフェロールリン酸エステルのいずれであってもよい。これらの中でも、α－トコフェロールリン酸エステル及びγ－トコフェロールリン酸エステルが好ましく、α－トコフェロールリン酸エステルがより好ましい。
【0052】
上記一般式（１）で表される化合物は、クロマン環の２位に不斉炭素原子を有するため、ｄ体及びｌ体の立体異性体、並びにｄｌ体が存在する。トコフェロールリン酸エステルは、これらの立体異性体のいずれであってもよいが、ｄｌ体が好ましい。
【0053】
上記の中でも、トコフェロールリン酸エステルとしては、ｄｌ－α－トコフェロールリン酸エステル及びｄｌ－γ－トコフェロールリン酸エステルが好ましく、ｄｌ－α－トコフェロールリン酸エステルがより好ましい。
【0054】
トコフェロールリン酸エステルの塩は、特に限定されないが、例えば、無機塩基との塩、及び有機塩基との塩等が挙げられる。
【0055】
無機塩基との塩としては、例えば、ナトリウム塩、カリウム塩等のアルカリ金属塩；カルシウム塩、マグネシウム塩等のアルカリ土類金属塩；アルミニウム塩；アンモニウム塩；亜鉛塩等が挙げられる。
有機塩基との塩としては、例えば、アルキルアンモニウム塩、塩基性アミノ酸との塩等が挙げられる。
有機塩基との塩としては、例えば、アルキルアンモニウム塩、塩基性アミノ酸との塩等が挙げられる。
【0056】
上記の中でも、トコフェロールリン酸エステルの塩としては、アルカリ金属塩が好ましく、ナトリウム塩がより好ましい。トコフェロールリン酸エステルのアルカリ金属塩、特にナトリウム塩は、水への溶解性が高く、また性状が粉末となるため取り扱いが容易になるという利点を有している。
【0057】
トコフェロールリン酸エステルの好ましい態様としては、上記一般式（１）で表される化合物のアルカリ金属塩（例、ナトリウム塩）、α－トコフェロールリン酸エステルのアルカリ金属塩（例、ナトリウム塩）、γ－トコフェロールリン酸エステルのアルカリ金属塩（例、ナトリウム塩）、ｄｌ－α－トコフェロールリン酸エステルのアルカリ金属塩（例、ナトリウム塩）、ｄｌ－γ－トコフェロールリン酸エステルのアルカリ金属塩（例、ナトリウム塩）等が挙げられる。
ｄｌ－α－トコフェロールリン酸エステルのナトリウム塩は、ＴＰＮａ（登録商標）（表示名称：トコフェリルリン酸Ｎａ）の製品名で昭和電工より市販されている。前記ＴＰＮａは、トコフェロールリン酸エステルの好ましい例として例示される。
ｄｌ－α－トコフェロールリン酸エステルのナトリウム塩は、ＴＰＮａ（登録商標）（表示名称：トコフェリルリン酸Ｎａ）の製品名で昭和電工より市販されている。前記ＴＰＮａは、トコフェロールリン酸エステルの好ましい例として例示される。
【0058】
本実施形態のがん細胞増殖抑制用組成物は、トコフェロールリン酸エステル及びその塩から選択される１種を単独で用いてもよく、２種以上を併用してもよい。本実施形態のがん細胞増殖抑制用組成物は、トコフェロールリン酸エステルの塩を含むことが好ましく、トコフェロールリン酸エステルのアルカリ金属塩（例、ナトリウム塩）を単独で用いることがより好ましい。
【0059】
トコフェロールリン酸エステル又はその塩は、公知の製造方法、例えば特開昭５９－４４３７５号公報、ＷＯ９７／１４７０５号等に記載の方法により製造することができる。例えば、溶媒中に溶解したトコフェロールにオキシ塩化リン等のリン酸化剤を作用させ、反応終了後に適宜精製することにより、トコフェロールリン酸エステルを得ることができる。さらに、得られたトコフェロールリン酸エステルを、酸化マグネシウム等の金属酸化物、水酸化ナトリウム等の金属水酸化物、又は、水酸化アンモニウムや水酸化アルキルアンモニウム等で中和することにより、トコフェロールリン酸エステルの塩を得ることができる。
【0060】
本実施形態のがん細胞増殖抑制用組成物が、トコフェロールリン酸エステル又はその塩を含む場合、トコフェロールリン酸エステル又はその塩の含有量は特に限定されない。本実施形態のがん細胞増殖抑制用組成物中のトコフェロールリン酸エステル又はその塩の含有量は、イノシトール誘導体と組み合わせて用いたときに、がん細胞増殖に対する抑制効果を相乗的に発揮し得る量であることが好ましい。例えば、本実施形態のがん細胞増殖抑制用組成物は、トコフェロールリン酸エステル又はその塩を治療的有効量含有することができる。本実施形態のがん細胞増殖抑制用組成物におけるトコフェロールリン酸エステル又はその塩の治療的有効量は、トコフェロールリン酸エステル又はその塩の組成物中の合計含有量として、例えば０．０１～２０質量％であってもよく、例えば０．１～１０質量％であってもよく、例えば０．１～５質量％であってもよく、例えば０．１～３質量％であってもよく、例えば０．１～２質量％であってもよく、例えば０．３～２質量％であってもよく、例えば０．６～１．５質量％であってもよい。
【0061】
前記がん細胞増殖抑制用組成物中のトコフェロールリン酸エステル又はその塩の含有量は、１種のトコフェロールリン酸エステル又はその塩を単独で含有する場合にはその化合物の含有量を意味し、トコフェロールリン酸エステル又はその塩を２種以上組み合わせて含有する場合には、これらの化合物の合計の含有量を意味する。
【0062】
本実施形態のがん細胞増殖抑制用組成物におけるイノシトール誘導体とトコフェロールリン酸エステル又はその塩との比は、特に限定されないが、例えば、イノシトール誘導体：トコフェロールリン酸エステル又はその塩＝１：１０～１０：１（質量比）とすることができ、１：５～５：１（質量比）が好ましく、１：３～３：１（質量比）がより好ましい。
【0063】
本実施形態のがん細胞増殖抑制用組成物は、医薬組成物であってもよく、化粧料であってもよい。
【0064】
（医薬組成物）
一実施形態において、本発明は、上述したがん細胞増殖抑制剤及び薬学的に許容される担体を含有する、がん細胞増殖を抑制するための医薬組成物を提供する。
一実施形態において、本発明は、上述したがん細胞増殖抑制剤及び薬学的に許容される担体を含有する、がん細胞増殖を抑制するための医薬組成物を提供する。
【0065】
本実施形態の医薬組成物において、薬学的に許容される担体としては、特に制限されず、上記に挙げたもののほか医薬品に一般的に使用される担体を使用することができる。例えば、日本薬局方、日本薬局方外医薬品規格、医薬品添加物規格２０１３（薬事日報社、２０１３年）、医薬品添加物辞典２０１６（日本医薬品添加剤協会編、薬事日報社、２０１６年）、Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ，７ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ（Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｐｒｅｓｓ、２０１２年）等に記載されている一般的な原料を使用することができる。薬学的に許容される担体は、１種を単独で用いてもよく、２種以上を併用してもよい。
【0066】
本実施形態の医薬組成物は、前記がん細胞増殖抑制剤及び薬学的に許容される担体に加えて、他の成分を含有していてもよい。他の成分としては、特に制限されず、一般的な医薬品添加物を使用することができる。また、他の成分として、上述したがん細胞増殖抑制剤以外の活性成分を使用することもできる。他の成分としての医薬品添加物及び活性成分としては、上記に挙げたもののほか、例えば、日本薬局方、日本薬局方外医薬品規格、医薬品添加物規格２０１３（薬事日報社、２０１３年）、医薬品添加物辞典２０１６（日本医薬品添加剤協会編、薬事日報社、２０１６年）、Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ，７ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ（Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｐｒｅｓｓ、２０１２年）等に記載されている一般的な原料を使用することができる。他の成分は、１種を単独で用いてもよく、２種以上を併用してもよい。他の成分としては、トコフェロールリン酸エステル又はその塩が好ましく例示される。
【0067】
本実施形態の医薬組成物の剤型としては、特に制限されず、医薬品製剤として一般的に用いられる剤型とすることができる。例えば、錠剤、被覆錠剤、丸剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤、液剤、懸濁剤、乳剤等の経口的に投与する剤型；及び、注射剤、坐剤、皮膚外用剤、点鼻薬等の非経口的に投与する剤型等が挙げられる。これらの剤型の医薬組成物は、定法（例えば、日本薬局方記載の方法）に従って、製剤化することができる。
【0068】
本実施形態の医薬組成物としては、皮膚外用剤、又は点鼻薬が好ましい。皮膚外用剤としては、より具体的には、クリーム剤、ローション剤、パック剤、フォーム剤、皮膚洗浄剤、エキス剤、硬膏剤、軟膏剤、酒精剤、懸濁剤、チンキ剤、テープ剤、パップ剤、リニメント剤、エアゾール剤、スプレー剤、ゲル剤等の剤型が挙げられる。
【0069】
本実施形態の医薬組成物の投与方法は、特に制限されず、医薬品の投与方法として一般的に用いられる方法で投与することができる。例えば、錠剤、被覆錠剤、丸剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤、液剤、懸濁剤、乳剤等として経口投与してもよく、注射剤、輸液製剤等として、単独で、又はブドウ糖液、リンゲル液等の一般的な輸液と混合して、静脈内、動脈内、筋肉内、皮内、皮下、腹腔内等に投与してもよく、坐剤として直腸内投与してもよく、皮膚外用剤として皮膚に投与してもよく、点鼻薬として鼻腔中に投与してもよい。好ましい態様において、本実施形態の医薬組成物は、皮膚外用剤として、患部に塗布、貼付又はスプレーされる。あるいは、点鼻薬として、鼻腔中に投与される。
【0070】
本実施形態の医薬組成物の投与量は、治療的有効量とすることができる。治療的有効量は、患者の症状、体重、年齢、及び性別等、並びに医薬組成物の剤型、及び投与方法等によって適宜決定すればよい。例えば、本実施形態の医薬組成物の投与量は、経口投与の場合には、イノシトール誘導体として投与単位形態あたり０．０１～５００ｍｇ、注射剤の場合には、イノシトール誘導体として投与単位形態あたり０．０２～２５０ｍｇ、坐剤の場合には、イノシトール誘導体として投与単位形態あたり０．０１～５００ｍｇ等を例示することができる。本実施形態の医薬組成物の投与量は、皮膚外用剤又は点鼻薬の場合には、例えば、イノシトール誘導体として投与単位形態あたり０．１５～５００ｍｇを例示することができ、例えば０．１５～３００ｍｇであってもよく、例えば０．１５～２００ｍｇであってもよく、例えば０．２～１００ｍｇであってもよい。
【0071】
本実施形態の医薬組成物の投与間隔は、患者の症状、体重、年齢、及び性別等、並びに医薬組成物の剤型、及び投与方法等によって適宜決定すればよい。例えば、１日１回又は１日２～３回程度等とすることができる。
【0072】
本実施形態の医薬組成物は、例えば、がん患者に投与して、がん細胞増殖を抑制するために用いることができる。また、本実施形態の医薬組成物は、がん患者に投与して、がん細胞の浸潤・転移を抑制するために用いることができる。
都市部においては、がん患者は、日常的に大気汚染物質に接触しており、大気汚染物質によりがん細胞増殖が促進されるリスクに晒されている。そのため、本実施形態の医薬組成物をがん患者に投与することにより、大気汚染物質によるがん細胞増殖促進のリスクを軽減することができる。
都市部においては、がん患者は、日常的に大気汚染物質に接触しており、大気汚染物質によりがん細胞増殖が促進されるリスクに晒されている。そのため、本実施形態の医薬組成物をがん患者に投与することにより、大気汚染物質によるがん細胞増殖促進のリスクを軽減することができる。
【0073】
あるいは、本実施形態の医薬組成物は、大気汚染物質が存在する地域において、予防的に患者に投与して、がん化した細胞の増殖を抑制し、がんの発症を予防するために用いることもできる。
【0074】
（化粧料）
一実施形態において、本発明は、上述したがん細胞増殖抑制剤及び薬学的に許容される担体を含有する、がん細胞増殖を抑制するための化粧料を提供する。
一実施形態において、本発明は、上述したがん細胞増殖抑制剤及び薬学的に許容される担体を含有する、がん細胞増殖を抑制するための化粧料を提供する。
【0075】
本実施形態の化粧料において、薬学的に許容される担体としては、特に制限されず、上記に挙げたもののほか化粧料に一般的に使用される担体を使用することができる。例えば、化粧品原料基準第二版注解（日本公定書協会編、薬事日報社、１９８４年）、化粧品原料基準外成分規格（厚生省薬務局審査課監修、薬事日報社、１９９３年）、化粧品原料基準外成分規格追補（厚生省薬務局審査課監修、薬事日報社、１９９３年）、化粧品種別許可基準（厚生省薬務局審査課監修、薬事日報社、１９９３年）、化粧品原料辞典（日光ケミカルズ社、平成３年）、Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｓｍｅｔｉｃ Ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔ Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ ａｎｄ Ｈａｎｄｂｏｏｋ ２００２ Ｎｉｎｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ Ｖｏｌ．１～４，ｂｙ ＣＴＦＡ等に記載されている一般的な原料を使用することができる。薬学的に許容される担体は、１種を単独で用いてもよく、２種以上を併用してもよい。
【0076】
本実施形態の化粧料は、がん細胞増殖抑制剤及び薬学的に許容される担体に加えて、他の成分を含有していてもよい。他の成分としては、特に制限されず、一般的な化粧品添加物を使用することができる。また、他の成分として、上述したがん細胞増殖抑制剤以外の活性成分を使用することもできる。他の成分としての化粧品添加物及び活性成分としては、上記に挙げたもののほか、例えば、化粧品原料基準第二版注解（日本公定書協会編、薬事日報社、１９８４年）、化粧品原料基準外成分規格（厚生省薬務局審査課監修、薬事日報社、１９９３年）、化粧品原料基準外成分規格追補（厚生省薬務局審査課監修、薬事日報社、１９９３年）、化粧品種別許可基準（厚生省薬務局審査課監修、薬事日報社、１９９３年）、化粧品原料辞典（日光ケミカルズ社、平成３年）、Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｓｍｅｔｉｃ Ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔ Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ ａｎｄ Ｈａｎｄｂｏｏｋ ２００２ Ｎｉｎｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ Ｖｏｌ．１～４，ｂｙ ＣＴＦＡ等に記載されている一般的な原料を使用することができる。他の成分は、１種を単独で用いてもよく、２種以上を併用してもよい。他の成分としては、トコフェロールリン酸エステル又はその塩が好ましく例示される。
【0077】
本実施形態の化粧料の形態としては、特に制限されず、化粧料として一般的に用いられる形態とすることができる。例えば、シャンプー、リンス、整髪剤などの毛髪用化粧料；洗顔料、クレンジング剤、化粧水、乳液、ローション、クリーム、ジェル、サンスクリーン剤、パック、マスク、美容液などの基礎化粧料；ファンデーション類、化粧下地、口紅類、リップグロス、頬紅類などのメーキャップ化粧料；ボディ洗浄料、ボディーパウダー、防臭化粧料などのボディ化粧料等が挙げられる。これらの化粧料は、定法に従って製造することができる。これらの中でも、本実施形態の化粧料は、皮膚外用剤として、皮膚に塗布又は貼付等する形態の化粧料であることが好ましい。例えば、化粧水、乳液、ローション、クリーム、ジェル、サンスクリーン剤、パック、マスク、美容液、ファンデーション類、化粧下地等が好適な例として挙げられる。
【0078】
本実施形態の化粧料の剤型としては、特に制限されず、例えば、水中油（Ｏ／Ｗ）型、油中水（Ｗ／Ｏ）型、Ｗ／Ｏ／Ｗ型、Ｏ／Ｗ／Ｏ型等の乳化型、乳化高分子型、油性、固形、液状、練状、スティック状、揮発性油型、粉状、ゼリー状、ジェル状、ペースト状、クリーム状、シート状、フィルム状、ミスト状、スプレー型、多層状、泡状、フレーク状等が挙げられる。
【0079】
本実施形態の化粧料の使用量は、特に制限されないが、大気汚染物質に起因するがん細胞増殖を抑制するために有効な量とすることができる。例えば、本実施形態の化粧料の使用量は、イノシトール誘導体の量として１回の使用あたり０．１５～５００ｍｇを例示することができ、例えば０．１５～３００ｍｇであってもよく、例えば０．１５～２００ｍｇであってもよく、例えば０．２～１００ｍｇであってもよい。
【0080】
本実施形態の化粧料の使用間隔は、特に制限されないが、例えば、１日１回又は１日２～３回程度等とすることができる。
【0081】
本実施形態の化粧料は、例えば、大気汚染物質の濃度が高い都市部などで、大気汚染物質によるがん細胞増殖の促進リスクを低減するために、がん患者により使用されてもよい。あるいは、大気汚染物質の分布濃度が高い地域又は季節において、がん化した細胞の増殖を抑制し、がんの発症を予防するために、日常的なスキンケアやメーキャップに使用されてもよい。
【0082】
［その他の実施形態］
一実施形態において、本発明は、イノシトールに糖（単糖又はオリゴ糖）が結合したイノシトール誘導体を哺乳動物に投与する工程を含む、がん細胞増殖の抑制方法を提供する。前記がん細胞増殖は、大気汚染物質により促進されるがん細胞増殖であることが好ましい。
一実施形態において、本発明は、イノシトールに糖（単糖又はオリゴ糖）が結合したイノシトール誘導体を哺乳動物に投与する工程を含む、がん細胞増殖の抑制方法を提供する。前記がん細胞増殖は、大気汚染物質により促進されるがん細胞増殖であることが好ましい。
【0083】
一実施形態において、本発明は、イノシトールに糖（単糖又はオリゴ糖）が結合したイノシトール誘導体を哺乳動物に投与する工程を含む、がん細胞浸潤の抑制方法を提供する。前記がん細胞浸潤は、大気汚染物質により促進されるがん細胞浸潤であることが好ましい。
【0084】
一実施形態において、本発明は、イノシトールに糖（単糖又はオリゴ糖）が結合したイノシトール誘導体を哺乳動物に投与する工程を含む、ＣＹＰ１Ａ１遺伝子、ＣＹＰ１Ｂ１遺伝子、及びＡＲＮＴ遺伝子からなる群より選択される少なくとも１個の遺伝子の発現を抑制する方法を提供する。前記遺伝子発現は、大気汚染物質により促進される遺伝子発現であることが好ましい。
【0085】
一実施形態において、本発明は、イノシトールに糖（単糖又はオリゴ糖）が結合したイノシトール誘導体を哺乳動物に投与する工程を含む、ＲＯＳ産生を抑制する方法を提供する。前記ＲＯＳ産生は、大気汚染物質により促進されるＲＯＳ産生であることが好ましい。
【0086】
一実施形態において、本発明は、がん細胞増殖を抑制するための、イノシトールに糖（単糖又はオリゴ糖）が結合したイノシトール誘導体を提供する。前記がん細胞増殖は、大気汚染物質により促進されるがん細胞増殖であることが好ましい。
【0087】
一実施形態において、本発明は、がん細胞浸潤を抑制するための、イノシトールに糖（単糖又はオリゴ糖）が結合したイノシトール誘導体を提供する。前記がん細胞浸潤は、大気汚染物質により促進されるがん細胞浸潤であることが好ましい。
【0088】
一実施形態において、本発明は、ＣＹＰ１Ａ１遺伝子、ＣＹＰ１Ｂ１遺伝子、及びＡＲＮＴ遺伝子からなる群より選択される少なくとも１個の遺伝子の発現を抑制するための、イノシトールに糖（単糖又はオリゴ糖）が結合したイノシトール誘導体を提供する。前記遺伝子発現は、大気汚染物質により促進される遺伝子発現であることが好ましい。
【0089】
一実施形態において、本発明は、ＲＯＳ産生を抑制するための、イノシトールに糖（単糖又はオリゴ糖）が結合したイノシトール誘導体を提供する。前記ＲＯＳ産生は、大気汚染物質により促進されるＲＯＳ産生であることが好ましい。
【0090】
一実施形態において、本発明は、がん細胞増殖抑制剤を製造するための、イノシトールに糖（単糖又はオリゴ糖）が結合したイノシトール誘導体の使用を提供する。前記がん細胞増殖抑制剤は、大気汚染物質により促進されるがん細胞増殖を抑制することが好ましい。
【0091】
一実施形態において、本発明は、がん細胞浸潤抑制剤を製造するための、イノシトールに糖（単糖又はオリゴ糖）が結合したイノシトール誘導体の使用を提供する。前記がん細胞浸潤抑制剤は、大気汚染物質により促進されるがん細胞浸潤を抑制することが好ましい。
【0092】
一実施形態において、本発明は、ＣＹＰ１Ａ１遺伝子、ＣＹＰ１Ｂ１遺伝子、及びＡＲＮＴ遺伝子からなる群より選択される少なくとも１個の遺伝子の発現抑制剤を製造するための、イノシトールに糖（単糖又はオリゴ糖）が結合したイノシトール誘導体の使用を提供する。前記遺伝子発現抑制剤は、大気汚染物質により促進される遺伝子発現を抑制することが好ましい。
【0093】
一実施形態において、本発明は、ＲＯＳ産生抑制剤を製造するための、イノシトールに糖（単糖又はオリゴ糖）が結合したイノシトール誘導体の使用を提供する。前記ＲＯＳ産生抑制剤は、大気汚染物質により促進されるＲＯＳ産生を抑制することが好ましい。
【0094】
一実施形態において、本発明は、がん細胞増殖抑制用組成物を製造するための、イノシトールに糖（単糖又はオリゴ糖）が結合したイノシトール誘導体の使用を提供する。前記がん細胞増殖抑制用組成物は、大気汚染物質により促進されるがん細胞増殖を抑制することが好ましい。
【0095】
一実施形態において、本発明は、がん細胞浸潤抑制用組成物を製造するための、イノシトールに糖（単糖又はオリゴ糖）が結合したイノシトール誘導体の使用を提供する。前記がん細胞浸潤抑制用組成物は、大気汚染物質により促進されるがん細胞浸潤を抑制することが好ましい。
【0096】
一実施形態において、本発明は、ＣＹＰ１Ａ１遺伝子、ＣＹＰ１Ｂ１遺伝子、及びＡＲＮＴ遺伝子からなる群より選択される少なくとも１個の遺伝子の発現抑制用組成物を製造するための、イノシトールに糖（単糖又はオリゴ糖）が結合したイノシトール誘導体の使用を提供する。前記遺伝子発現抑制用組成物は、大気汚染物質により促進される遺伝子発現を抑制することが好ましい。
【0097】
一実施形態において、本発明は、ＲＯＳ産生抑制用組成物を製造するための、イノシトールに糖（単糖又はオリゴ糖）が結合したイノシトール誘導体の使用を提供する。前記ＲＯＳ産生抑制用組成物は、大気汚染物質により促進されるＲＯＳ産生を抑制することが好ましい。
【0098】
一実施形態において、本発明は、イノシトールに糖（単糖又はオリゴ糖）が結合したイノシトール誘導体及びトコフェロールリン酸エステル若しくはその塩を哺乳動物に投与する工程を含む、がん細胞増殖の抑制方法を提供する。前記がん細胞増殖は、大気汚染物質により促進されるがん細胞増殖であることが好ましい。
【0099】
一実施形態において、本発明は、イノシトールに糖（単糖又はオリゴ糖）が結合したイノシトール誘導体及びトコフェロールリン酸エステル若しくはその塩を哺乳動物に投与する工程を含む、がん細胞浸潤の抑制方法を提供する。前記がん細胞浸潤は、大気汚染物質により促進されるがん細胞浸潤であることが好ましい。
【0100】
一実施形態において、本発明は、イノシトールに糖（単糖又はオリゴ糖）が結合したイノシトール誘導体及びトコフェロールリン酸エステル若しくはその塩を哺乳動物に投与する工程を含む、ＣＹＰ１Ａ１遺伝子、ＣＹＰ１Ｂ１遺伝子、及びＡＲＮＴ遺伝子からなる群より選択される少なくとも１個の遺伝子の発現を抑制する方法を提供する。前記遺伝子発現は、大気汚染物質により促進される遺伝子発現であることが好ましい。
【0101】
一実施形態において、本発明は、イノシトールに糖（単糖又はオリゴ糖）が結合したイノシトール誘導体及びトコフェロールリン酸エステル若しくはその塩を哺乳動物に投与する工程を含む、ＲＯＳ産生を抑制する方法を提供する。前記ＲＯＳ産生は、大気汚染物質により促進されるＲＯＳ産生であることが好ましい。
【0102】
一実施形態において、本発明は、がん細胞増殖を抑制するための、イノシトールに糖（単糖又はオリゴ糖）が結合したイノシトール誘導体及びトコフェロールリン酸エステル若しくはその塩の組み合わせを提供する。前記がん細胞増殖は、大気汚染物質により促進されるがん細胞増殖であることが好ましい。
【0103】
一実施形態において、本発明は、がん細胞浸潤を抑制するための、イノシトールに糖（単糖又はオリゴ糖）が結合したイノシトール誘導体及びトコフェロールリン酸エステル若しくはその塩の組み合わせを提供する。前記がん細胞浸潤は、大気汚染物質により促進されるがん細胞浸潤であることが好ましい。
【0104】
一実施形態において、本発明は、ＣＹＰ１Ａ１遺伝子、ＣＹＰ１Ｂ１遺伝子、及びＡＲＮＴ遺伝子からなる群より選択される少なくとも１個の遺伝子の発現を抑制するための、イノシトールに糖（単糖又はオリゴ糖）が結合したイノシトール誘導体及びトコフェロールリン酸エステル若しくはその塩の組み合わせを提供する。前記遺伝子発現は、大気汚染物質により促進される遺伝子発現であることが好ましい。
【0105】
一実施形態において、本発明は、ＲＯＳ産生を抑制するための、イノシトールに糖（単糖又はオリゴ糖）が結合したイノシトール誘導体及びトコフェロールリン酸エステル若しくはその塩の組み合わせを提供する。前記ＲＯＳ産生は、大気汚染物質により促進されるＲＯＳ産生であることが好ましい。
【0106】
一実施形態において、本発明は、がん細胞増殖抑制剤を製造するための、イノシトールに糖（単糖又はオリゴ糖）が結合したイノシトール誘導体及びトコフェロールリン酸エステル若しくはその塩の組み合わせの使用を提供する。前記がん細胞増殖抑制剤は、大気汚染物質により促進されるがん細胞増殖を抑制することが好ましい。
【0107】
一実施形態において、本発明は、がん細胞浸潤抑制剤を製造するための、イノシトールに糖（単糖又はオリゴ糖）が結合したイノシトール誘導体及びトコフェロールリン酸エステル若しくはその塩の組み合わせの使用を提供する。前記がん細胞浸潤抑制剤は、大気汚染物質により促進されるがん細胞浸潤を抑制することが好ましい。
【0108】
一実施形態において、本発明は、ＣＹＰ１Ａ１遺伝子、ＣＹＰ１Ｂ１遺伝子、及びＡＲＮＴ遺伝子からなる群より選択される少なくとも１個の遺伝子の発現抑制剤を製造するための、イノシトールに糖（単糖又はオリゴ糖）が結合したイノシトール誘導体及びトコフェロールリン酸エステル若しくはその塩の組み合わせの使用を提供する。前記遺伝子発現抑制剤は、大気汚染物質により促進される遺伝子発現を抑制することが好ましい。
【0109】
一実施形態において、本発明は、ＲＯＳ産生抑制剤を製造するための、イノシトールに糖（単糖又はオリゴ糖）が結合したイノシトール誘導体及びトコフェロールリン酸エステル若しくはその塩の組み合わせの使用を提供する。前記ＲＯＳ産生抑制剤は、大気汚染物質により促進されるＲＯＳ産生を抑制することが好ましい。
【0110】
一実施形態において、本発明は、がん細胞増殖抑制用組成物を製造するための、イノシトールに糖（単糖又はオリゴ糖）が結合したイノシトール誘導体及びトコフェロールリン酸エステル若しくはその塩の組み合わせの使用を提供する。前記がん細胞増殖抑制用組成物は、大気汚染物質により促進されるがん細胞増殖を抑制することが好ましい。
【0111】
一実施形態において、本発明は、がん細胞浸潤抑制用組成物を製造するための、イノシトールに糖（単糖又はオリゴ糖）が結合したイノシトール誘導体及びトコフェロールリン酸エステル若しくはその塩の組み合わせの使用を提供する。前記がん細胞浸潤抑制用組成物は、大気汚染物質により促進されるがん細胞浸潤を抑制することが好ましい。
【0112】
一実施形態において、本発明は、ＣＹＰ１Ａ１遺伝子、ＣＹＰ１Ｂ１遺伝子、及びＡＲＮＴ遺伝子からなる群より選択される少なくとも１個の遺伝子の発現抑制用組成物を製造するための、イノシトールに糖（単糖又はオリゴ糖）が結合したイノシトール誘導体及びトコフェロールリン酸エステル若しくはその塩の組み合わせの使用を提供する。前記遺伝子発現抑制用組成物は、大気汚染物質により促進される遺伝子発現を抑制することが好ましい。
【0113】
一実施形態において、本発明は、ＲＯＳ産生抑制用組成物を製造するための、イノシトールに糖（単糖又はオリゴ糖）が結合したイノシトール誘導体及びトコフェロールリン酸エステル若しくはその塩の組み合わせの使用を提供する。前記ＲＯＳ産生抑制用組成物は、大気汚染物質により促進されるＲＯＳ産生を抑制することが好ましい。
【実施例】
【0114】
以下、実施例により本発明を説明するが、本発明は以下の実施例に限定されるものではない。
【0115】
［イノシトール誘導体の製造例］
ｍｙｏ－イノシトールとβ－シクロデキストリンとをシクロデキストリングルカノトランスフェラーゼの存在下で反応させ、ｍｙｏ－イノシトールにグルコース又はグルコースを単糖単位とするオリゴ糖が結合したイノシトール誘導体を作製した。作製したイノシトール誘導体を液体クロマトグラフィー質量分析法（ＬＣ－ＭＳ）で分析した結果、ｍｙｏ－イノシトールに結合したグルコース鎖のグルコース数が１個である分子の割合は１２質量％、２個である分子の割合は３０質量％、３個である分子の割合は９質量％、４個である分子の割合は１２質量％、５個である分子の割合は２質量％であった。
ｍｙｏ－イノシトールとβ－シクロデキストリンとをシクロデキストリングルカノトランスフェラーゼの存在下で反応させ、ｍｙｏ－イノシトールにグルコース又はグルコースを単糖単位とするオリゴ糖が結合したイノシトール誘導体を作製した。作製したイノシトール誘導体を液体クロマトグラフィー質量分析法（ＬＣ－ＭＳ）で分析した結果、ｍｙｏ－イノシトールに結合したグルコース鎖のグルコース数が１個である分子の割合は１２質量％、２個である分子の割合は３０質量％、３個である分子の割合は９質量％、４個である分子の割合は１２質量％、５個である分子の割合は２質量％であった。
【0116】
以下の実験例では、本製造例により製造したイノシトール誘導体を用いた。
【0117】
［実験例１］
（ＣＹＰ１Ａ１遺伝子及びＣＹＰ１Ｂ１遺伝子の発現抑制効果）
イノシトール誘導体による、ヒト正常表皮細胞（ＮＨＥＫ、クラボウ社製）におけるＣＹＰ１Ａ１遺伝子及びＣＹＰ１Ｂ１遺伝子の発現抑制効果を下記条件にて測定した。
ＮＨＥＫ細胞を、１００００個／ｃｍ２の播種密度で、クラボウ社製のＨｕＭｅｄｉａ ＫＧ２培地に播種し、２４時間、３７℃、５％ＣＯ２の条件下で培養した。次いで、イノシトール誘導体若しくはｍｙｏ－イノシトールの終濃度が０．００１質量％となるように、イノシトール誘導体の水溶液、若しくはｍｙｏ－イノシトールの水溶液を培養培地に添加して、又は水（純水）を培養培地に添加して、さらに２４時間培養した。その後、大気粉塵（ＮＩＳＴ １６４８ａ）のＤＭＳＯ溶液を培養培地１００ｍＬあたり０．１ｍＬ添加して、大気粉塵の培養培地中の終濃度が５００μｇ／ｍＬとなるようにし、さらに４８時間培養した。その後、ＮＨＥＫ細胞を回収し、ＮｕｃｌｅｏｓｐｉｎＴＭ ＲＸ（タカラバイオ社）を用いて、総ＲＮＡを抽出した。得られたＲＮＡから、ＰｒｉｍｅＳｃｒｉｐｔ（登録商標）ＲＴ Ｍａｓｔｅｒ Ｍｉｘ（タカラバイオ社）を用いて、ｃＤＮＡを合成した。このｃＤＮＡをテンプレートとして、定量リアルタイムＰＣＲにより、ＣＹＰ１Ａ１遺伝子及びＣＹＰ１Ｂ１遺伝子に特異的なプライマー（ＱｕａｎｔｉＴｅｃｔ Ｐｒｉｍｅｒ Ａｓｓａｙｓ、キアゲン社製）を用いて、ＣＹＰ１Ａ１遺伝子及びＣＹＰ１Ｂ１遺伝子の発現量を定量した。内部標準遺伝子として、大気粉塵添加による発現変動がみられないハウスキーピング遺伝子のＧＡＰＤＨ遺伝子（使用プライマー：Ｐｅｒｆｅｃｔ Ｒｅａｌ Ｔｉｍｅ Ｐｒｉｍｅｒ、タカラ社製）の発現量を定量し、ＧＡＰＤＨの発現量を基準としてＣＹＰ１Ａ１遺伝子及びＣＹＰ１Ｂ１遺伝子の発現量を標準化した。大気粉塵を添加していないものをコントロールとした。
（ＣＹＰ１Ａ１遺伝子及びＣＹＰ１Ｂ１遺伝子の発現抑制効果）
イノシトール誘導体による、ヒト正常表皮細胞（ＮＨＥＫ、クラボウ社製）におけるＣＹＰ１Ａ１遺伝子及びＣＹＰ１Ｂ１遺伝子の発現抑制効果を下記条件にて測定した。
ＮＨＥＫ細胞を、１００００個／ｃｍ２の播種密度で、クラボウ社製のＨｕＭｅｄｉａ ＫＧ２培地に播種し、２４時間、３７℃、５％ＣＯ２の条件下で培養した。次いで、イノシトール誘導体若しくはｍｙｏ－イノシトールの終濃度が０．００１質量％となるように、イノシトール誘導体の水溶液、若しくはｍｙｏ－イノシトールの水溶液を培養培地に添加して、又は水（純水）を培養培地に添加して、さらに２４時間培養した。その後、大気粉塵（ＮＩＳＴ １６４８ａ）のＤＭＳＯ溶液を培養培地１００ｍＬあたり０．１ｍＬ添加して、大気粉塵の培養培地中の終濃度が５００μｇ／ｍＬとなるようにし、さらに４８時間培養した。その後、ＮＨＥＫ細胞を回収し、ＮｕｃｌｅｏｓｐｉｎＴＭ ＲＸ（タカラバイオ社）を用いて、総ＲＮＡを抽出した。得られたＲＮＡから、ＰｒｉｍｅＳｃｒｉｐｔ（登録商標）ＲＴ Ｍａｓｔｅｒ Ｍｉｘ（タカラバイオ社）を用いて、ｃＤＮＡを合成した。このｃＤＮＡをテンプレートとして、定量リアルタイムＰＣＲにより、ＣＹＰ１Ａ１遺伝子及びＣＹＰ１Ｂ１遺伝子に特異的なプライマー（ＱｕａｎｔｉＴｅｃｔ Ｐｒｉｍｅｒ Ａｓｓａｙｓ、キアゲン社製）を用いて、ＣＹＰ１Ａ１遺伝子及びＣＹＰ１Ｂ１遺伝子の発現量を定量した。内部標準遺伝子として、大気粉塵添加による発現変動がみられないハウスキーピング遺伝子のＧＡＰＤＨ遺伝子（使用プライマー：Ｐｅｒｆｅｃｔ Ｒｅａｌ Ｔｉｍｅ Ｐｒｉｍｅｒ、タカラ社製）の発現量を定量し、ＧＡＰＤＨの発現量を基準としてＣＹＰ１Ａ１遺伝子及びＣＹＰ１Ｂ１遺伝子の発現量を標準化した。大気粉塵を添加していないものをコントロールとした。
【0118】
結果を表１に示す。表１では、大気粉塵を添加していないコントロールにおける各遺伝子発現量を１としたときの相対発現量として、大気粉塵添加群における各遺伝子の発現量を示した。イノシトール誘導体添加群では、水添加群及びｍｙｏ－イノシトール添加群に比べ、ＣＹＰ１Ａ１遺伝子及びＣＹＰ１Ｂ１遺伝子のいずれの遺伝子の発現量も抑制されていた。この結果から、イノシトール誘導体は、大気粉塵により誘導されるＣＹＰ１Ａ１遺伝子及びＣＹＰ１Ｂ１遺伝子の発現に対して、高い抑制効果を有することが確認された。
【0119】
【表1】
【0120】
［実験例２］
（ＡＲＮＴ遺伝子の発現抑制効果）
イノシトール誘導体による、ヒト正常表皮細胞（ＮＨＥＫ、クラボウ社製）におけるＡＲＮＴ遺伝子の発現抑制効果を下記条件にて測定した。
ＮＨＥＫ細胞を、１００００個／ｃｍ２の播種密度で、クラボウ社製のＨｕＭｅｄｉａ ＫＧ２培地に播種し、２４時間、３７℃、５％ＣＯ２の条件下で培養した。次いで、イノシトール誘導体若しくはｍｙｏ－イノシトールの終濃度が０．００１質量％となるように、イノシトール誘導体の水溶液、若しくはｍｙｏ－イノシトールの水溶液を培養培地に添加して、又は水（純水）を培養培地に添加して、さらに２４時間培養した。その後、大気粉塵（ＮＩＳＴ １６４８ａ）のＤＭＳＯ溶液を培養培地１００ｍＬあたり０．１ｍＬ添加して、大気粉塵の培養培地中の終濃度が５００μｇ／ｍＬとなるようにし、さらに４８時間培養した。その後、ＮＨＥＫ細胞を回収し、ＮｕｃｌｅｏｓｐｉｎＴＭ ＲＸ（タカラバイオ社）を用いて、総ＲＮＡを抽出した。得られたＲＮＡから、ＰｒｉｍｅＳｃｒｉｐｔ（登録商標）ＲＴ Ｍａｓｔｅｒ Ｍｉｘ（タカラバイオ社）を用いて、ｃＤＮＡを合成した。このｃＤＮＡをテンプレートとして、定量リアルタイムＰＣＲにより、ＡＲＮＴ遺伝子に特異的なプライマー（Ｐｅｒｆｅｃｔ Ｒｅａｌ Ｔｉｍｅ Ｐｒｉｍｅｒ、タカラ社製）を用い、ＡＲＮＴ遺伝子の発現量を定量した。内部標準遺伝子として、ＧＡＰＤＨ（使用プライマー：Ｐｅｒｆｅｃｔ Ｒｅａｌ Ｔｉｍｅ Ｐｒｉｍｅｒ、タカラ社製）の発現量を定量し、ＧＡＰＤＨの発現量を基準としてＡＲＮＴ遺伝子の発現量を標準化した。大気粉塵を添加していないものをコントロールとした。
（ＡＲＮＴ遺伝子の発現抑制効果）
イノシトール誘導体による、ヒト正常表皮細胞（ＮＨＥＫ、クラボウ社製）におけるＡＲＮＴ遺伝子の発現抑制効果を下記条件にて測定した。
ＮＨＥＫ細胞を、１００００個／ｃｍ２の播種密度で、クラボウ社製のＨｕＭｅｄｉａ ＫＧ２培地に播種し、２４時間、３７℃、５％ＣＯ２の条件下で培養した。次いで、イノシトール誘導体若しくはｍｙｏ－イノシトールの終濃度が０．００１質量％となるように、イノシトール誘導体の水溶液、若しくはｍｙｏ－イノシトールの水溶液を培養培地に添加して、又は水（純水）を培養培地に添加して、さらに２４時間培養した。その後、大気粉塵（ＮＩＳＴ １６４８ａ）のＤＭＳＯ溶液を培養培地１００ｍＬあたり０．１ｍＬ添加して、大気粉塵の培養培地中の終濃度が５００μｇ／ｍＬとなるようにし、さらに４８時間培養した。その後、ＮＨＥＫ細胞を回収し、ＮｕｃｌｅｏｓｐｉｎＴＭ ＲＸ（タカラバイオ社）を用いて、総ＲＮＡを抽出した。得られたＲＮＡから、ＰｒｉｍｅＳｃｒｉｐｔ（登録商標）ＲＴ Ｍａｓｔｅｒ Ｍｉｘ（タカラバイオ社）を用いて、ｃＤＮＡを合成した。このｃＤＮＡをテンプレートとして、定量リアルタイムＰＣＲにより、ＡＲＮＴ遺伝子に特異的なプライマー（Ｐｅｒｆｅｃｔ Ｒｅａｌ Ｔｉｍｅ Ｐｒｉｍｅｒ、タカラ社製）を用い、ＡＲＮＴ遺伝子の発現量を定量した。内部標準遺伝子として、ＧＡＰＤＨ（使用プライマー：Ｐｅｒｆｅｃｔ Ｒｅａｌ Ｔｉｍｅ Ｐｒｉｍｅｒ、タカラ社製）の発現量を定量し、ＧＡＰＤＨの発現量を基準としてＡＲＮＴ遺伝子の発現量を標準化した。大気粉塵を添加していないものをコントロールとした。
【0121】
結果を表２に示す。表２では、大気粉塵を添加していないコントロールにおけるＡＲＮＴ遺伝子発現量を１としたときの相対発現量として、大気粉塵添加群におけるＡＲＮＴ遺伝子の発現量を示した。イノシトール誘導体添加群では、水添加群及びｍｙｏ－イノシトール添加群に比べ、ＡＲＮＴ遺伝子の発現量が抑制されていた。この結果から、イノシトール誘導体は、大気粉塵により誘導されるＡＲＮＴ遺伝子の発現に対して、高い抑制効果を有することが確認された。
【0122】
【表2】
【0123】
［実験例３］
（ＲＯＳの産生抑制効果（１））
イノシトール誘導体による、ヒト正常表皮細胞（ＮＨＥＫ、クラボウ社製）におけるＲＯＳ産生抑制効果を下記条件にて測定した。
ＮＨＥＫ細胞を、１００００個／ｃｍ２の播種密度で、クラボウ社製のＨｕＭｅｄｉａ ＫＧ２培地に播種し、２４時間、３７℃、５％ＣＯ２の条件下で培養した。次いで、イノシトール誘導体若しくはｍｙｏ－イノシトールの終濃度が０．００１質量％となるように、イノシトール誘導体の水溶液、若しくはｍｙｏ－イノシトールの水溶液を培養培地に添加して、又は水（純水）を培養培地に添加して、さらに２４時間培養した。その後、大気粉塵（ＮＩＳＴ １６４８ａ）のＤＭＳＯ溶液を培養培地１００ｍＬあたり０．１ｍＬ添加して、大気粉塵の培養培地中の終濃度が５００μｇ／ｍＬとなるようにし、さらに４８時間、上記と同様の条件下で培養した。その後、ＲＯＳアッセイキット（ＯＺ ＢＩＯＳＣＩＥＮＣＥＳ社製）を用いてＲＯＳ産生量を測定した。培養培地を取り除いた細胞をリン酸緩衝液（ＰＢＳ、和光純薬社製）で洗浄後、ＲＯＳアッセイキットに添付のジクロロフルオレセインジアセテートを、各群の細胞に１００μＬずつ添加し、３７℃、遮光下で３０分間静置した。再度、細胞をＰＢＳで洗浄後、１００μＬのＰＢＳを添加し、マイクロプレートリーダｉ－Ｃｏｎｔｒｏｌ（テカン社製）にて、励起波長４８５ｎｍ／吸収波長５３５ｎｍでの蛍光強度を測定した。大気粉塵を添加していないものをコントロールとした。
（ＲＯＳの産生抑制効果（１））
イノシトール誘導体による、ヒト正常表皮細胞（ＮＨＥＫ、クラボウ社製）におけるＲＯＳ産生抑制効果を下記条件にて測定した。
ＮＨＥＫ細胞を、１００００個／ｃｍ２の播種密度で、クラボウ社製のＨｕＭｅｄｉａ ＫＧ２培地に播種し、２４時間、３７℃、５％ＣＯ２の条件下で培養した。次いで、イノシトール誘導体若しくはｍｙｏ－イノシトールの終濃度が０．００１質量％となるように、イノシトール誘導体の水溶液、若しくはｍｙｏ－イノシトールの水溶液を培養培地に添加して、又は水（純水）を培養培地に添加して、さらに２４時間培養した。その後、大気粉塵（ＮＩＳＴ １６４８ａ）のＤＭＳＯ溶液を培養培地１００ｍＬあたり０．１ｍＬ添加して、大気粉塵の培養培地中の終濃度が５００μｇ／ｍＬとなるようにし、さらに４８時間、上記と同様の条件下で培養した。その後、ＲＯＳアッセイキット（ＯＺ ＢＩＯＳＣＩＥＮＣＥＳ社製）を用いてＲＯＳ産生量を測定した。培養培地を取り除いた細胞をリン酸緩衝液（ＰＢＳ、和光純薬社製）で洗浄後、ＲＯＳアッセイキットに添付のジクロロフルオレセインジアセテートを、各群の細胞に１００μＬずつ添加し、３７℃、遮光下で３０分間静置した。再度、細胞をＰＢＳで洗浄後、１００μＬのＰＢＳを添加し、マイクロプレートリーダｉ－Ｃｏｎｔｒｏｌ（テカン社製）にて、励起波長４８５ｎｍ／吸収波長５３５ｎｍでの蛍光強度を測定した。大気粉塵を添加していないものをコントロールとした。
【0124】
結果を表３に示す。表３では、大気粉塵を添加していないコントロールにおける蛍光強度を１としたときの相対量として、大気粉塵添加群におけるＲＯＳ産生量を示した。イノシトール誘導体添加群では、水添加群及びｍｙｏ－イノシトール添加群に比べ、ＲＯＳ産生量が抑制されていた。この結果から、イノシトール誘導体は、大気粉塵により誘導されるＲＯＳ産生に対して、高い抑制効果を有することが確認された。一方、ｍｙｏ－イノシトール添加群では、水添加群と比較して、ＲＯＳ産生の抑制効果は認められなかった。
【0125】
【表3】
【0126】
［実験例４］
（がん細胞の増殖抑制効果（１））
イノシトール誘導体による、ルイス肺がん由来細胞株（ＬＬＣ、ＪＣＲＢ細胞バンク）における細胞増殖抑制効果を下記条件にて測定した。
ＬＬＣ細胞を、５００００個／ｃｍ２の播種密度で、ＨａｍＦ１０培地とＬ１５培地（いずれもＳｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ社製）を３：７（体積比）で混合した培養培地に播種し、２４時間、３７℃、５％ＣＯ２の条件下で培養した。次いで、イノシトール誘導体若しくはｍｙｏ－イノシトールの終濃度が０．００１質量％となるように、イノシトール誘導体の水溶液、若しくはｍｙｏ－イノシトールの水溶液を培養培地に添加して、又は水（純水）を培養培地に添加して、さらに２４時間培養した。その後、大気粉塵（ＮＩＳＴ １６４８ａ）のＤＭＳＯ溶液を培養培地１００ｍＬあたり０．１ｍＬ添加して、大気粉塵の培養培地中の終濃度が５００μｇ／ｍＬとなるようにし、上記と同様の条件下でさらに４８時間培養した。その後、培養培地を、ナカライ社のＷＳＴ－８を１０％（Ｖ／Ｖ）含有した培地に交換し、さらに、３時間培養した後、マイクロプレートリーダｉ－Ｃｏｎｔｒｏｌ（テカン社製）にて４５０ｎｍの波長での吸光度を測定した。大気粉塵を添加していないものをコントロールとした。
（がん細胞の増殖抑制効果（１））
イノシトール誘導体による、ルイス肺がん由来細胞株（ＬＬＣ、ＪＣＲＢ細胞バンク）における細胞増殖抑制効果を下記条件にて測定した。
ＬＬＣ細胞を、５００００個／ｃｍ２の播種密度で、ＨａｍＦ１０培地とＬ１５培地（いずれもＳｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ社製）を３：７（体積比）で混合した培養培地に播種し、２４時間、３７℃、５％ＣＯ２の条件下で培養した。次いで、イノシトール誘導体若しくはｍｙｏ－イノシトールの終濃度が０．００１質量％となるように、イノシトール誘導体の水溶液、若しくはｍｙｏ－イノシトールの水溶液を培養培地に添加して、又は水（純水）を培養培地に添加して、さらに２４時間培養した。その後、大気粉塵（ＮＩＳＴ １６４８ａ）のＤＭＳＯ溶液を培養培地１００ｍＬあたり０．１ｍＬ添加して、大気粉塵の培養培地中の終濃度が５００μｇ／ｍＬとなるようにし、上記と同様の条件下でさらに４８時間培養した。その後、培養培地を、ナカライ社のＷＳＴ－８を１０％（Ｖ／Ｖ）含有した培地に交換し、さらに、３時間培養した後、マイクロプレートリーダｉ－Ｃｏｎｔｒｏｌ（テカン社製）にて４５０ｎｍの波長での吸光度を測定した。大気粉塵を添加していないものをコントロールとした。
【0127】
結果を表４に示す。表４では、大気粉塵を添加していないコントロールにおける吸光度を１としたときの相対量として、大気粉塵添加群における細胞増殖量を示した。イノシトール誘導体添加群では、水添加群及びｍｙｏ－イノシトール添加群に比べ、がん細胞の細胞増殖量が抑制されていた。この結果から、イノシトール誘導体は、大気粉塵により亢進するがん細胞の細胞増殖に対して、高い抑制効果を有することが確認された。
【0128】
【表4】
【0129】
［実験例５］
（がん細胞の浸潤抑制効果）
イノシトール誘導体による、ルイス肺がん由来細胞株（ＬＬＣ、ＪＣＲＢ細胞バンク）における細胞浸潤抑制効果を下記条件にて測定した。試験にはＣＥＬＬＢＩＯＬＡＢＳ，ＩＮＣ社製のＣｙｔｏＳｅｌｅｃｔ浸潤アッセイキットを用いた。
ＬＬＣ細胞を、１０００００個／ｍＬとなるように、ＨａｍＦ１０培地とＬ１５培地（いずれもＳｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ社製）を３：７（体積比）で混合した培養培地を用いて、前述の浸潤アッセイキット付属の浸潤試験用のチャンバープレートに播種して、２４時間、３７℃、５％ＣＯ２の条件下で培養した。次いで、イノシトール誘導体若しくはｍｙｏ－イノシトールの終濃度が０．００１質量％となるように、イノシトール誘導体の水溶液、若しくはｍｙｏ－イノシトールの水溶液を培養培地に添加して、又は水（純水）を培養培地に添加して、さらに２４時間培養した。その後、大気粉塵（ＮＩＳＴ １６４８ａ）のＤＭＳＯ溶液を培養培地１００ｍＬあたり０．１ｍＬ添加して、大気粉塵の培養培地中の終濃度が５００μｇ／ｍＬとなるようにし、さらに６時間培養した。次いで、大気粉塵を含む培地を除去し、新しい培地に交換して、大気粉塵（ＮＩＳＴ １６４８ａ）のＤＭＳＯ溶液を培養培地１００ｍＬあたり０．１ｍＬ添加し、大気粉塵の培養培地中の終濃度が５００μｇ／ｍＬとなるようにし、さらに１８時間培養した。その後、前述の浸潤アッセイキットを用いて、細胞を染色し、マイクロプレートリーダｉ－Ｃｏｎｔｒｏｌ（テカン社製）にて、励起波長４８０ｎｍ／吸収波長５７０ｎｍでの蛍光強度を測定した。大気粉塵を添加していないものをコントロールとした。
（がん細胞の浸潤抑制効果）
イノシトール誘導体による、ルイス肺がん由来細胞株（ＬＬＣ、ＪＣＲＢ細胞バンク）における細胞浸潤抑制効果を下記条件にて測定した。試験にはＣＥＬＬＢＩＯＬＡＢＳ，ＩＮＣ社製のＣｙｔｏＳｅｌｅｃｔ浸潤アッセイキットを用いた。
ＬＬＣ細胞を、１０００００個／ｍＬとなるように、ＨａｍＦ１０培地とＬ１５培地（いずれもＳｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ社製）を３：７（体積比）で混合した培養培地を用いて、前述の浸潤アッセイキット付属の浸潤試験用のチャンバープレートに播種して、２４時間、３７℃、５％ＣＯ２の条件下で培養した。次いで、イノシトール誘導体若しくはｍｙｏ－イノシトールの終濃度が０．００１質量％となるように、イノシトール誘導体の水溶液、若しくはｍｙｏ－イノシトールの水溶液を培養培地に添加して、又は水（純水）を培養培地に添加して、さらに２４時間培養した。その後、大気粉塵（ＮＩＳＴ １６４８ａ）のＤＭＳＯ溶液を培養培地１００ｍＬあたり０．１ｍＬ添加して、大気粉塵の培養培地中の終濃度が５００μｇ／ｍＬとなるようにし、さらに６時間培養した。次いで、大気粉塵を含む培地を除去し、新しい培地に交換して、大気粉塵（ＮＩＳＴ １６４８ａ）のＤＭＳＯ溶液を培養培地１００ｍＬあたり０．１ｍＬ添加し、大気粉塵の培養培地中の終濃度が５００μｇ／ｍＬとなるようにし、さらに１８時間培養した。その後、前述の浸潤アッセイキットを用いて、細胞を染色し、マイクロプレートリーダｉ－Ｃｏｎｔｒｏｌ（テカン社製）にて、励起波長４８０ｎｍ／吸収波長５７０ｎｍでの蛍光強度を測定した。大気粉塵を添加していないものをコントロールとした。
【0130】
結果を表５に示す。表５では、大気粉塵を添加していないコントロールにおける蛍光強度を１としたときの相対量として、大気粉塵添加群における細胞浸潤を示した。イノシトール誘導体添加群では、水添加群及びｍｙｏ－イノシトール添加群に比べ、がん細胞の細胞浸潤が抑制されていた。この結果から、イノシトール誘導体は、大気粉塵により亢進するがん細胞の細胞浸潤を抑制することが確認された。
【0131】
【表5】
【0132】
［実験例６］
（ＲＯＳの産生抑制効果（２））
イノシトール誘導体及びトコフェロールリン酸Ｎａによる、ヒト正常表皮細胞（ＮＨＥＫ、クラボウ社製）におけるＲＯＳ産生抑制効果を下記条件にて測定した。下記のトコフェロールリン酸Ｎａは、ｄｌ－α－トコフェリルリン酸ナトリウムであるＴＰＮａ（登録商標）（昭和電工製）を用いた。
ＮＨＥＫ細胞を、１００００個／ｃｍ２の播種密度で、クラボウ社製のＨｕＭｅｄｉａ ＫＧ２培地に播種し、２４時間、３７℃、５％ＣＯ２の条件下で培養した。次いで、トコフェロールリン酸Ｎａ単独（培養培地中の終濃度１０μＭ）、イノシトール誘導体単独（培養培地中の終濃度０．００１質量％）、またはトコフェロールリン酸Ｎａ（培養培地中の終濃度１０μＭ）及びイノシトール誘導体（培養培地中の終濃度０．００１質量％）の組み合わせを、培養培地に添加した。トコフェロールリン酸Ｎａ及びイノシトール誘導体は、０．０５％（Ｖ／Ｖ）エタノール水溶液に溶解し、前記の終濃度となるように培養培地に添加した。また、０．０５％（Ｖ／Ｖ）エタノール水溶液を培養培地に添加したものも用意した。その後、２４時間、３７℃、５％ＣＯ２の条件下で培養した。その後、大気粉塵（ＮＩＳＴ １６４８ａ）のＤＭＳＯ溶液を培養培地１００ｍＬあたり０．１ｍＬ添加して、大気粉塵の培養培地中の終濃度が５００μｇ／ｍＬとなるようにし、さらに４８時間培養した。その後、ＲＯＳアッセイキット（ＯＺ ＢＩＯＳＣＩＥＮＣＥＳ社製）を用いてＲＯＳ産生量を測定した。培養培地を取り除いた細胞をリン酸緩衝液（ＰＢＳ、和光純薬社製）で洗浄後、ＲＯＳアッセイキットに添付のジクロロフルオレセインジアセテートを、各群の細胞に１００μＬずつ添加し、３７℃、遮光下で３０分間静置した。再度、細胞をＰＢＳで洗浄後、１００μＬのＰＢＳを添加し、マイクロプレートリーダｉ－Ｃｏｎｔｒｏｌ（テカン社製）にて、励起波長４８５ｎｍ／吸収波長５３５ｎｍでの蛍光強度を測定した。大気粉塵を添加していないものをコントロールとした。
（ＲＯＳの産生抑制効果（２））
イノシトール誘導体及びトコフェロールリン酸Ｎａによる、ヒト正常表皮細胞（ＮＨＥＫ、クラボウ社製）におけるＲＯＳ産生抑制効果を下記条件にて測定した。下記のトコフェロールリン酸Ｎａは、ｄｌ－α－トコフェリルリン酸ナトリウムであるＴＰＮａ（登録商標）（昭和電工製）を用いた。
ＮＨＥＫ細胞を、１００００個／ｃｍ２の播種密度で、クラボウ社製のＨｕＭｅｄｉａ ＫＧ２培地に播種し、２４時間、３７℃、５％ＣＯ２の条件下で培養した。次いで、トコフェロールリン酸Ｎａ単独（培養培地中の終濃度１０μＭ）、イノシトール誘導体単独（培養培地中の終濃度０．００１質量％）、またはトコフェロールリン酸Ｎａ（培養培地中の終濃度１０μＭ）及びイノシトール誘導体（培養培地中の終濃度０．００１質量％）の組み合わせを、培養培地に添加した。トコフェロールリン酸Ｎａ及びイノシトール誘導体は、０．０５％（Ｖ／Ｖ）エタノール水溶液に溶解し、前記の終濃度となるように培養培地に添加した。また、０．０５％（Ｖ／Ｖ）エタノール水溶液を培養培地に添加したものも用意した。その後、２４時間、３７℃、５％ＣＯ２の条件下で培養した。その後、大気粉塵（ＮＩＳＴ １６４８ａ）のＤＭＳＯ溶液を培養培地１００ｍＬあたり０．１ｍＬ添加して、大気粉塵の培養培地中の終濃度が５００μｇ／ｍＬとなるようにし、さらに４８時間培養した。その後、ＲＯＳアッセイキット（ＯＺ ＢＩＯＳＣＩＥＮＣＥＳ社製）を用いてＲＯＳ産生量を測定した。培養培地を取り除いた細胞をリン酸緩衝液（ＰＢＳ、和光純薬社製）で洗浄後、ＲＯＳアッセイキットに添付のジクロロフルオレセインジアセテートを、各群の細胞に１００μＬずつ添加し、３７℃、遮光下で３０分間静置した。再度、細胞をＰＢＳで洗浄後、１００μＬのＰＢＳを添加し、マイクロプレートリーダｉ－Ｃｏｎｔｒｏｌ（テカン社製）にて、励起波長４８５ｎｍ／吸収波長５３５ｎｍでの蛍光強度を測定した。大気粉塵を添加していないものをコントロールとした。
【0133】
結果を表６に示す。表６では、大気粉塵を添加していないコントロールにおける蛍光強度を１としたときの相対量として、大気粉塵添加群におけるＲＯＳ産生量を示した。イノシトール誘導体単独添加群、トコフェロールリン酸Ｎａ単独添加群、並びにイノシトール誘導体＋トコフェロールリン酸Ｎａ添加群のいずれも、０．０５％エタノール添加群と比べ、ＲＯＳ産生量が抑制されていた。イノシトール誘導体＋トコフェロールリン酸Ｎａ添加群では、イノシトール誘導体単独添加群、及びトコフェロールリン酸Ｎａ単独添加群よりも、ＲＯＳの産生が抑制されていた。この結果から、イノシトール誘導体は、トコフェロールリン酸Ｎａとともに用いることにより、大気粉塵により誘導されるＲＯＳ産生に対して、相乗的な抑制効果が得られることが確認された。
【0134】
【表6】
【0135】
［実験例７］
（がん細胞増殖抑制効果（２））
イノシトール誘導体及びトコフェロールリン酸Ｎａによる、ルイス肺がん由来細胞株（ＬＬＣ、ＪＣＲＢ細胞バンク）における細胞増殖抑制効果を下記条件にて測定した。下記のトコフェロールリン酸Ｎａは、ｄｌ－α－トコフェリルリン酸ナトリウムであるＴＰＮａ（登録商標）（昭和電工製）を用いた。
ＬＬＣ細胞を、５００００個／ｃｍ２の播種密度で、ＨａｍＦ１０培地とＬ１５培地（いずれもＳｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ社製）を３：７（体積比）で混合した培養培地に播種し、２４時間、３７℃、５％ＣＯ２の条件下で培養した。次いで、トコフェロールリン酸Ｎａ単独（培養培地中の終濃度１０μＭ）、イノシトール誘導体単独（培養培地中の終濃度０．００１質量％）、またはトコフェロールリン酸Ｎａ（培養培地中の終濃度１０μＭ）及びイノシトール誘導体（培養培地中の終濃度０．００１質量％）の組み合わせを、培養培地に添加した。トコフェロールリン酸Ｎａ及びイノシトール誘導体は、０．０５％（Ｖ／Ｖ）エタノール水溶液に溶解し、前記の終濃度となるように培養培地に添加した。また、０．０５％（Ｖ／Ｖ）エタノール水溶液を培養培地に添加したものも用意した。その後、２４時間、３７℃、５％ＣＯ２の条件下で培養した。その後、大気粉塵（ＮＩＳＴ １６４８ａ）のＤＭＳＯ溶液を培養培地１００ｍＬあたり０．１ｍＬ添加して、大気粉塵の培養培地中の終濃度が５００μｇ／ｍＬとなるようにし、さらに４８時間培養した。その後、培養培地を、ナカライ社のＷＳＴ－８を１０％（Ｖ／Ｖ）含有した培地に交換し、さらに、３時間培養した後、マイクロプレートリーダｉ－Ｃｏｎｔｒｏｌ（テカン社製）にて４５０ｎｍの波長での吸光度を測定した。大気粉塵を添加していないものをコントロールとした。
（がん細胞増殖抑制効果（２））
イノシトール誘導体及びトコフェロールリン酸Ｎａによる、ルイス肺がん由来細胞株（ＬＬＣ、ＪＣＲＢ細胞バンク）における細胞増殖抑制効果を下記条件にて測定した。下記のトコフェロールリン酸Ｎａは、ｄｌ－α－トコフェリルリン酸ナトリウムであるＴＰＮａ（登録商標）（昭和電工製）を用いた。
ＬＬＣ細胞を、５００００個／ｃｍ２の播種密度で、ＨａｍＦ１０培地とＬ１５培地（いずれもＳｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ社製）を３：７（体積比）で混合した培養培地に播種し、２４時間、３７℃、５％ＣＯ２の条件下で培養した。次いで、トコフェロールリン酸Ｎａ単独（培養培地中の終濃度１０μＭ）、イノシトール誘導体単独（培養培地中の終濃度０．００１質量％）、またはトコフェロールリン酸Ｎａ（培養培地中の終濃度１０μＭ）及びイノシトール誘導体（培養培地中の終濃度０．００１質量％）の組み合わせを、培養培地に添加した。トコフェロールリン酸Ｎａ及びイノシトール誘導体は、０．０５％（Ｖ／Ｖ）エタノール水溶液に溶解し、前記の終濃度となるように培養培地に添加した。また、０．０５％（Ｖ／Ｖ）エタノール水溶液を培養培地に添加したものも用意した。その後、２４時間、３７℃、５％ＣＯ２の条件下で培養した。その後、大気粉塵（ＮＩＳＴ １６４８ａ）のＤＭＳＯ溶液を培養培地１００ｍＬあたり０．１ｍＬ添加して、大気粉塵の培養培地中の終濃度が５００μｇ／ｍＬとなるようにし、さらに４８時間培養した。その後、培養培地を、ナカライ社のＷＳＴ－８を１０％（Ｖ／Ｖ）含有した培地に交換し、さらに、３時間培養した後、マイクロプレートリーダｉ－Ｃｏｎｔｒｏｌ（テカン社製）にて４５０ｎｍの波長での吸光度を測定した。大気粉塵を添加していないものをコントロールとした。
【0136】
結果を表７に示す。表７では、大気粉塵を添加していないコントロールにおける吸光度を１としたときの相対量として、大気粉塵添加群における細胞増殖量を示した。イノシトール誘導体単独添加群、トコフェロールリン酸Ｎａ単独添加群、並びにイノシトール誘導体＋トコフェロールリン酸Ｎａ添加群のいずれも、０．０５％エタノール添加群と比べ、細胞増殖量が抑制されていた。イノシトール誘導体＋トコフェロールリン酸Ｎａ添加群では、イノシトール誘導体単独添加群、及びトコフェロールリン酸Ｎａ単独添加群よりも、細胞増殖量が抑制されていた。この結果から、イノシトール誘導体は、トコフェロールリン酸Ｎａとともに用いることにより、大気粉塵により亢進するがん細胞の細胞増殖を相乗的に抑制することが確認された。
【0137】
【表7】
【0138】
［処方例］
がん細胞増殖抑制用組成物の処方例を以下に示す。以下の処方例におけるイノシトール誘導体としては、［イノシトール誘導体の製造例］で製造したものが例示される。また、トコフェロールリン酸Ｎａとしては、ｄｌ－α－トコフェリルリン酸ナトリウムであるＴＰＮａ（登録商標）（昭和電工製）が例示される。
がん細胞増殖抑制用組成物の処方例を以下に示す。以下の処方例におけるイノシトール誘導体としては、［イノシトール誘導体の製造例］で製造したものが例示される。また、トコフェロールリン酸Ｎａとしては、ｄｌ－α－トコフェリルリン酸ナトリウムであるＴＰＮａ（登録商標）（昭和電工製）が例示される。
【0139】
（処方例１）
散布剤（スプレー）の処方例を表８に示す。
散布剤（スプレー）の処方例を表８に示す。
【0140】
【表8】
【0141】
（処方例２）
散布剤（エアゾール）の処方例を表９に示す。
散布剤（エアゾール）の処方例を表９に示す。
【0142】
【表9】
【0143】
（処方例３）
散布剤（肌用スプレー）の処方例を表１０に示す。
散布剤（肌用スプレー）の処方例を表１０に示す。
【0144】
【表10】
【0145】
（処方例４）
点鼻薬の処方例を表１１に示す。
点鼻薬の処方例を表１１に示す。
【0146】
【表11】
【産業上の利用可能性】
【0147】
本発明により、大気汚染物質により亢進するがん細胞の増殖を抑制することができる、がん細胞増殖抑制剤、及び前記がん細胞増殖抑制剤を含有するがん細胞増殖抑制用組成物が提供される。