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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】特許公報(B2)
(11)【特許番号】
(24)【登録日】2024-10-15
(45)【発行日】2024-10-23
(54)【発明の名称】花卉の老化抑制剤
(51)【国際特許分類】
A01N 3/02 20060101AFI20241016BHJP
A01G 7/06 20060101ALI20241016BHJP
【ＦＩ】
A01N3/02
A01G7/06 A
【請求項の数】
2
(21)【出願番号】P 2021160245
(22)【出願日】2021-09-30
(65)【公開番号】P2023050233
(43)【公開日】2023-04-11
【審査請求日】2024-03-07
【国等の委託研究の成果に係る記載事項】（出願人による申告）平成３１年度、農林水産省、品質保持期間延長技術の開発委託事業、産業技術力強化法第１７条の適用を受ける特許出願
【早期審査対象出願】
(73)【特許権者】
【識別番号】501203344
【氏名又は名称】国立研究開発法人農業・食品産業技術総合研究機構
(74)【代理人】
【識別番号】100162396
【弁理士】
【氏名又は名称】山田 泰之
(74)【代理人】
【識別番号】100202430
【弁理士】
【氏名又は名称】太田 千香子
(72)【発明者】
【氏名】渋谷 健市
(72)【発明者】
【氏名】澤崎 達也
(72)【発明者】
【氏名】野澤 彰
【審査官】澤田 浩平
(56)【参考文献】
【文献】特開２０１４－０７９２１９（ＪＰ，Ａ）
【文献】国際公開第９８／００７４２１（ＷＯ，Ａ１）
【文献】特開平１０－１８２４５７（ＪＰ，Ａ）
【文献】化学と生物，55(10)，2017年，pp.699-705
(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)
Ａ０１Ｎ，Ａ０１Ｇ
ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ）
(57)【特許請求の範囲】
【請求項1】
下記一般式（１）で表されるテトラフルオロフタルイミド骨格を含む化合物またはその塩から選択される１種または２種以上の化合物を有効成分とする、花卉の老化抑制剤。【化1】
（式中、
Ｙ：単結合もしくは下記構造Ｙ－１～Ｙ－３の何れかを示し、
Ｑ：下記構造Ｑ－１～Ｑ－４の何れかを示す。）
【化2】
（式中、Ｒ１は、それぞれ独立して水素原子、炭素数１～３のアルキル基、ヒドロキシメチル基の何れかを示し、「＊」は一般式（１）中の窒素原子との結合位置を示し、「＊＊」はＱとの結合位置を示す。）
【化3】
（式中、Ｒ２は、それぞれ独立して炭素数１～１０のアルキル基、炭素数２～１０のアシルアミノ基、水酸基、ハロゲン原子、フェニル基の何れかを示し、「＊＊」は一般式（１）中のＹとの結合位置を示し、ｎは０、１、２、３を示す。）
【請求項2】
請求項１に記載の花卉の老化抑制剤を、花卉に適用する花卉の老化抑制方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、テトラフルオロフタルイミド骨格を含む化合物またはその塩を有効成分とする、花卉の老化抑制剤に関する。
【背景技術】
【0002】
花における花弁またはその類似器官（内花被および外花被）は、自ら積極的に老化する機構をもっている。この老化とは、一般に花弁またはその類似器官の萎凋や脱離を意味する。一般に、花弁またはその類似器官は昆虫などの送粉者を誘引するために発達した器官であり、受粉が成功すれば不要となるし、受粉しない花の花弁またはその類似器官もいずれは老化する。花弁またはその類似器官が老化するまでの期間は、植物種ごとに概ね決まっており、花弁またはその類似器官の老化はプログラムされた死の過程であると考えられている。
一方、商業上取引される花卉の「花持ち」は、最も重要な品質構成要素の１つであり、商品価値を失う最大の要因は花弁またはその類似器官の老化である。
一部の花の老化には、植物ホルモンのエチレンが関与していることが知られており、これまでに、エチレンの生合成及び受容・情報伝達に関わる遺伝子が数種の花卉で同定され、エチレン情報伝達系遺伝子に関する組換えにより、花の寿命を延長できることが知られている。
一方、商業上取引される花卉の「花持ち」は、最も重要な品質構成要素の１つであり、商品価値を失う最大の要因は花弁またはその類似器官の老化である。
一部の花の老化には、植物ホルモンのエチレンが関与していることが知られており、これまでに、エチレンの生合成及び受容・情報伝達に関わる遺伝子が数種の花卉で同定され、エチレン情報伝達系遺伝子に関する組換えにより、花の寿命を延長できることが知られている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【0003】
【文献】特許第６０４４９５２号公報
【非特許文献】
【0004】
【文献】Veen, H. and van de Geijn, S. C., 1978, Planta, Vol. 140, p.93-96
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0005】
カーネーション等の、老化がエチレンによって制御される花卉（エチレン依存性花卉）は、銀イオンを主成分とするエチレン阻害剤など老化を抑制する薬剤が多く開発され、また、広く普及している（例えば、非特許文献１等）。
これに対し、エチレンに依存しない老化を示す花（エチレン非依存性花卉）、例えば、ユリ、チューリップ、アイリス等の老化に関しては、その制御機構は未だ不明な点が多く、老化を抑制する薬剤は未だ開発されていない。
このような状況の中、本出願人はエチレン非依存的な老化を制御する鍵遺伝子（ＥＰＨ１）を見出している（特許文献１）。
そこで、本発明は、上記鍵遺伝子（ＥＰＨ１）を利用して、エチレン非依存性花卉における老化抑制剤を提供することを課題としている。
これに対し、エチレンに依存しない老化を示す花（エチレン非依存性花卉）、例えば、ユリ、チューリップ、アイリス等の老化に関しては、その制御機構は未だ不明な点が多く、老化を抑制する薬剤は未だ開発されていない。
このような状況の中、本出願人はエチレン非依存的な老化を制御する鍵遺伝子（ＥＰＨ１）を見出している（特許文献１）。
そこで、本発明は、上記鍵遺伝子（ＥＰＨ１）を利用して、エチレン非依存性花卉における老化抑制剤を提供することを課題としている。
【課題を解決するための手段】
【0006】
本発明者は上記課題を解決するために鋭意研究を重ねた結果、上記鍵遺伝子（ＥＰＨ１）の転写因子機能を阻害する物質を選抜できるシステムを構築することにより、花卉の老化抑制機能を有する化合物群を見出し、上記課題を解決するに至ったものである。
【0007】
本発明は、具体的には次の事項を要旨とする。
１．テトラフルオロフタルイミド骨格を含む化合物またはその塩から選択される１種または２種以上の化合物を有効成分とする、花卉の老化抑制剤。
２．前記テトラフルオロフタルイミド骨格を含む化合物が、下記一般式（１）で表される化合物であることを特徴とする、１．記載の花卉の老化抑制剤。
（式中、
Ｙ：単結合もしくは下記構造Ｙ－１～Ｙ－３の何れかを示し、
Ｑ：下記構造Ｑ－１～Ｑ－４の何れかを示す。）
（式中、Ｒ１は、それぞれ独立して水素原子、炭素数１～３のアルキル基、ヒドロキシメチル基の何れかを示し、「＊」は一般式（１）中の窒素原子との結合位置を示し、「＊＊」はＱとの結合位置を示す。）
（式中、Ｒ２は、それぞれ独立して炭素数１～１０のアルキル基、炭素数２～１０のアシルアミノ基、水酸基、ハロゲン原子、フェニル基の何れかを示し、「＊＊」は一般式（１）中のＹとの結合位置を示し、ｎは０、１、２、３を示す。）
３．１．又は２．に記載の花卉の老化抑制剤を、花卉に適用する花卉の老化抑制方法。
１．テトラフルオロフタルイミド骨格を含む化合物またはその塩から選択される１種または２種以上の化合物を有効成分とする、花卉の老化抑制剤。
２．前記テトラフルオロフタルイミド骨格を含む化合物が、下記一般式（１）で表される化合物であることを特徴とする、１．記載の花卉の老化抑制剤。
【化1】
Ｙ：単結合もしくは下記構造Ｙ－１～Ｙ－３の何れかを示し、
Ｑ：下記構造Ｑ－１～Ｑ－４の何れかを示す。）
【化2】
【化3】
３．１．又は２．に記載の花卉の老化抑制剤を、花卉に適用する花卉の老化抑制方法。
【発明の効果】
【0008】
本発明の花卉の老化抑制剤は、テトラフルオロフタルイミド骨格を含む化合物またはその塩を有効成分とし、花被の細胞死の進行を抑制し老化を遅延するため、エチレンに依存しない老化を示す花（エチレン非依存性花卉）を含む花卉全般において、「花持ち」を良好なものとし、鑑賞期間を延長することが出来るという効果を発揮するものである。
【図面の簡単な説明】
【0009】
【図1】実施例３の化合物処理した花弁切片の老化確認試験－１における、化合物を処理した花弁切片の様子を示す写真である。
【図2】実施例３の化合物処理した花弁切片の老化確認試験－１における、化合物を処理した花弁のタンパク質含量の変化を示すグラフである。
【図3】実施例４の化合物処理した花弁切片の老化確認試験－２における、化合物を処理した、開花２４時間後の花弁切片の様子を示す写真である。
【図4】実施例４の化合物処理した花弁切片の老化確認試験－２における、化合物を処理した開花２４時間後の花弁のタンパク質含量を示すグラフである。
【図5】実施例５の化合物処理した切り花の老化確認試験における、化合物を処理した、開花２４時間後の切り花の様子を示す写真である。
【発明を実施するための形態】
【0010】
本発明の花卉の老化抑制剤は、テトラフルオロフタルイミド骨格を含む化合物またはその塩から選択される１種または２種以上の化合物を有効成分とするものである。このテトラフルオロフタルイミド骨格を含む化合物とは、下記化学構造を有するＮ－置換－３，４，５，６－テトラフルオロフタルイミドを意味する。
本発明における塩とは、花卉に適用する上で許容し得る塩を意味し、例えば、塩酸塩、硫酸塩、硝酸塩、燐酸塩、臭化水素塩、ヨウ化水素塩等の無機酸塩類、酢酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、シュウ酸塩、メタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、パラトルエンスルホン酸塩等の有機酸塩類、ナトリウムイオン、カリウムイオン、カルシウムイオン、トリメチルアンモニウム等の無機または有機の塩基との塩を例示することができる。
【化4】
【0011】
本発明におけるテトラフルオロフタルイミド骨格を含む化合物の中でも、下記一般式（１）で表される化合物が好ましい。
（式中、
Ｙ：単結合もしくは下記構造Ｙ－１～Ｙ－３の何れかを示し、
Ｑ：下記構造Ｑ－１～Ｑ－４の何れかを示す。）
（式中、Ｒ１は、それぞれ独立して水素原子、炭素数１～３のアルキル基、ヒドロキシメチル基の何れかを示し、「＊」は一般式（１）中の窒素原子との結合位置を示し、「＊＊」はＱとの結合位置を示す。）
（式中、Ｒ２は、それぞれ独立して炭素数１～１０のアルキル基、炭素数２～１０のアシルアミノ基、水酸基、ハロゲン原子、フェニル基の何れかを示し、「＊＊」は一般式（１）中のＹとの結合位置を示し、ｎは０、１、２、３を示す。）
本発明における一般式（１）で表される化合物は、「Ｙ」がＹ－１、Ｙ－２、Ｙ－３であり、かつ、Ｒ１が炭素数１～３のアルキル基、ヒドロキシメチル基の何れかである場合は、Ｒ１が結合する炭素が不斉炭素となり、それに由来する光学活性体が存在するが、本発明のテトラフルオロフタルイミド骨格を含む化合物は、これらの光学活性体であってもよいし、これらの光学活性体をそれぞれ等量ずつ含むラセミ体であってもよいし、いずれかの光学活性体を過剰に含む化合物であってもよい。
【化5】
Ｙ：単結合もしくは下記構造Ｙ－１～Ｙ－３の何れかを示し、
Ｑ：下記構造Ｑ－１～Ｑ－４の何れかを示す。）
【化6】
【化7】
本発明における一般式（１）で表される化合物は、「Ｙ」がＹ－１、Ｙ－２、Ｙ－３であり、かつ、Ｒ１が炭素数１～３のアルキル基、ヒドロキシメチル基の何れかである場合は、Ｒ１が結合する炭素が不斉炭素となり、それに由来する光学活性体が存在するが、本発明のテトラフルオロフタルイミド骨格を含む化合物は、これらの光学活性体であってもよいし、これらの光学活性体をそれぞれ等量ずつ含むラセミ体であってもよいし、いずれかの光学活性体を過剰に含む化合物であってもよい。
【0012】
本発明におけるＲ１の炭素数１～３のアルキル基は、直鎖状、分岐鎖状または環状の炭素原子数１～３個のアルキル基を意味し、メチル基、エチル基、ノルマルプロピル基、イソプロピル基、シクロプロピル基が挙げられるが、中でも、メチル基、エチル基、ノルマルプロピル基、イソプロピル基が好ましく、特に、メチル基、エチル基が好ましい。
本発明におけるＲ２の炭素数１～１０のアルキル基は、直鎖状、分岐鎖状または環状の炭素原子数１～１０個のアルキル基を意味する。中でも、直鎖状、分岐鎖状または環状の炭素数１～６のアルキル基が好ましく、直鎖状、分岐鎖状または環状の炭素原子数１～３個のアルキル基、すなわち、メチル基、エチル基、ノルマルプロピル基、イソプロピル基、シクロプロピル基の何れかがより好ましい。
本発明におけるＲ２の炭素数２～１０のアシルアミノ基は、炭素数２～１０のアシル基により置換されているアミノ基を意味する。炭素数２～１０のアシル基とは、炭素数が１～９の（アルキル）－Ｃ（＝Ｏ）－基を示す。炭素数が１～９のアルキル基は、直鎖状、分岐鎖状、環状の何れかであってよい。中でも、炭素数２～６のアシルアミノ基が好ましく、炭素数２～５のアシルアミノ基がより好ましく、アセチルアミノ基、プロピオニルアミノ基、イソプロピオニルアミノ基、ブチリルアミノ基、イソブチリルアミノ基、バレリルアミノ基、イソバレリルアミノ基、ピバロイルアミノ基が特に好ましい。
本発明におけるＲ２のハロゲン原子は、フッ素原子、塩素原子、臭素原子又はヨウ素原子である。中でも、塩素原子が好ましい。
本発明の一般式（１）で表される化合物としては、一般式（１）中の「Ｙ」が、単結合、Ｙ－１、Ｙ－３である化合物が好ましい。Ｙ－１における「Ｒ１」は、メチル基またはエチル基であることが好ましく、Ｙ－２における「Ｒ１」は、メチル基であることが好ましい。
本発明におけるＲ２の炭素数１～１０のアルキル基は、直鎖状、分岐鎖状または環状の炭素原子数１～１０個のアルキル基を意味する。中でも、直鎖状、分岐鎖状または環状の炭素数１～６のアルキル基が好ましく、直鎖状、分岐鎖状または環状の炭素原子数１～３個のアルキル基、すなわち、メチル基、エチル基、ノルマルプロピル基、イソプロピル基、シクロプロピル基の何れかがより好ましい。
本発明におけるＲ２の炭素数２～１０のアシルアミノ基は、炭素数２～１０のアシル基により置換されているアミノ基を意味する。炭素数２～１０のアシル基とは、炭素数が１～９の（アルキル）－Ｃ（＝Ｏ）－基を示す。炭素数が１～９のアルキル基は、直鎖状、分岐鎖状、環状の何れかであってよい。中でも、炭素数２～６のアシルアミノ基が好ましく、炭素数２～５のアシルアミノ基がより好ましく、アセチルアミノ基、プロピオニルアミノ基、イソプロピオニルアミノ基、ブチリルアミノ基、イソブチリルアミノ基、バレリルアミノ基、イソバレリルアミノ基、ピバロイルアミノ基が特に好ましい。
本発明におけるＲ２のハロゲン原子は、フッ素原子、塩素原子、臭素原子又はヨウ素原子である。中でも、塩素原子が好ましい。
本発明の一般式（１）で表される化合物としては、一般式（１）中の「Ｙ」が、単結合、Ｙ－１、Ｙ－３である化合物が好ましい。Ｙ－１における「Ｒ１」は、メチル基またはエチル基であることが好ましく、Ｙ－２における「Ｒ１」は、メチル基であることが好ましい。
【0013】
本発明の一般式（１）で表される化合物として好適な化合物は、一般式（１ａ）～（１ｇ）で表される化合物である。
下記一般式（１ａ）で表される化合物は、一般式（１）中の「Ｙ」が単結合であり、「Ｑ」がＱ－１である化合物である。
（式中、Ｒ２とｎは、一般式（１）の定義と同じである。）
一般式（１ａ）で表される化合物としては、Ｒ２は、それぞれ独立して炭素数１～１０のアルキル基、水酸基、ハロゲン原子、フェニル基の何れかであり、ｎは０、１、２、３を示す化合物が好ましく、Ｒ２は、それぞれ独立して炭素数１～５のアルキル基、水酸基、フェニル基の何れかであり、ｎは０、１、２、３を示す化合物がより好ましい。
一般式（１ａ）で表される化合物として、中でも好適な化合物は、下記表１に示す化合物１ａ－１～１ａ－６である。表１中の「Ｍｅ」はメチル基を、「ＯＨ」は水酸基を、「Ｐｈ」はフェニル基を、「ｉＰｒ」はイソプロピル基を、「－」は無置換を示す。
下記一般式（１ａ）で表される化合物は、一般式（１）中の「Ｙ」が単結合であり、「Ｑ」がＱ－１である化合物である。
【化8】
一般式（１ａ）で表される化合物としては、Ｒ２は、それぞれ独立して炭素数１～１０のアルキル基、水酸基、ハロゲン原子、フェニル基の何れかであり、ｎは０、１、２、３を示す化合物が好ましく、Ｒ２は、それぞれ独立して炭素数１～５のアルキル基、水酸基、フェニル基の何れかであり、ｎは０、１、２、３を示す化合物がより好ましい。
一般式（１ａ）で表される化合物として、中でも好適な化合物は、下記表１に示す化合物１ａ－１～１ａ－６である。表１中の「Ｍｅ」はメチル基を、「ＯＨ」は水酸基を、「Ｐｈ」はフェニル基を、「ｉＰｒ」はイソプロピル基を、「－」は無置換を示す。
【表1】
【0014】
下記一般式（１ｂ）で表される化合物は、一般式（１）中の「Ｙ」がＹ－１であり、「Ｑ」がＱ－１である化合物である。
（式中、Ｒ１、Ｒ２およびｎは、一般式（１）の定義と同じである。）
一般式（１ｂ）で表される化合物としては、Ｒ１は、水素原子、炭素数１～３のアルキル基、ヒドロキシメチル基の何れかを示し、Ｒ２は、それぞれ独立して炭素数１～１０のアルキル基、炭素数２～１０のアシルアミノ基、ハロゲン原子であり、ｎは０、１、２、３を示す化合物が好ましく、Ｒ１は、炭素数１～３のアルキル基、ヒドロキシメチル基の何れかを示し、Ｒ２は、それぞれ独立して炭素数２～５のアシルアミノ基、ハロゲン原子であり、ｎは０、１、２を示す化合物がより好ましい。
一般式（１ｂ）で表される化合物として、中でも好適な化合物は、下記表２に示す化合物１ｂ－１～１ｂ－７である。表２中の「Ｍｅ」はメチル基を、「Ｅｔ」はエチル基を、「ｎＰｒ」はノルマルプロピル基を、「ｔＢｕ」はターシャリーブチル基を、「Ｈ」は水素原子を、「ＯＨ」は水酸基を、「ＮＨ」はアミノ基を、「Ｃ＝Ｏ」はカルボニル基を、「Ｃｌ」は塩素原子を、「－」は無置換を示す。
【化9】
一般式（１ｂ）で表される化合物としては、Ｒ１は、水素原子、炭素数１～３のアルキル基、ヒドロキシメチル基の何れかを示し、Ｒ２は、それぞれ独立して炭素数１～１０のアルキル基、炭素数２～１０のアシルアミノ基、ハロゲン原子であり、ｎは０、１、２、３を示す化合物が好ましく、Ｒ１は、炭素数１～３のアルキル基、ヒドロキシメチル基の何れかを示し、Ｒ２は、それぞれ独立して炭素数２～５のアシルアミノ基、ハロゲン原子であり、ｎは０、１、２を示す化合物がより好ましい。
一般式（１ｂ）で表される化合物として、中でも好適な化合物は、下記表２に示す化合物１ｂ－１～１ｂ－７である。表２中の「Ｍｅ」はメチル基を、「Ｅｔ」はエチル基を、「ｎＰｒ」はノルマルプロピル基を、「ｔＢｕ」はターシャリーブチル基を、「Ｈ」は水素原子を、「ＯＨ」は水酸基を、「ＮＨ」はアミノ基を、「Ｃ＝Ｏ」はカルボニル基を、「Ｃｌ」は塩素原子を、「－」は無置換を示す。
【表2】
【0015】
下記一般式（１ｃ）で表される化合物は、一般式（１）中の「Ｙ」がＹ－２であり、「Ｑ」がＱ－１である化合物である。
（式中、Ｒ１、Ｒ２およびｎは、一般式（１）の定義と同じである。）
一般式（１ｃ）で表される化合物としては、Ｒ１は、水素原子、炭素数１～３のアルキル基、ヒドロキシメチル基の何れかを示し、Ｒ２は、炭素数１～３のアルキル基、ハロゲン原子の何れかを示し、ｎは０、１を示す化合物が好ましく、Ｒ１は、水素原子、ヒドロキシメチル基の何れかを示し、Ｒ２は、炭素数１～３のアルキル基を示し、ｎは０、１を示す化合物がより好ましい。
一般式（１ｃ）で表される化合物として、中でも好適な化合物は、Ｒ１がヒドロキシメチル基であり、ｎ＝０である化合物１ｃ－１である。
【化10】
一般式（１ｃ）で表される化合物としては、Ｒ１は、水素原子、炭素数１～３のアルキル基、ヒドロキシメチル基の何れかを示し、Ｒ２は、炭素数１～３のアルキル基、ハロゲン原子の何れかを示し、ｎは０、１を示す化合物が好ましく、Ｒ１は、水素原子、ヒドロキシメチル基の何れかを示し、Ｒ２は、炭素数１～３のアルキル基を示し、ｎは０、１を示す化合物がより好ましい。
一般式（１ｃ）で表される化合物として、中でも好適な化合物は、Ｒ１がヒドロキシメチル基であり、ｎ＝０である化合物１ｃ－１である。
【0016】
下記一般式（１ｄ）で表される化合物は、一般式（１）中の「Ｙ」がＹ－３であり、「Ｑ」がＱ－１である化合物である。
（式中、Ｒ１、Ｒ２およびｎは、一般式（１）の定義と同じである。）
一般式（１ｄ）で表される化合物としては、Ｒ１は、水素原子、炭素数１～３のアルキル基、ヒドロキシメチル基の何れかを示し、Ｒ２は、炭素数１～５のアルキル基、ハロゲン原子の何れかを示し、ｎは０、１を示す化合物が好ましく、Ｒ１は、水素原子、ヒドロキシメチル基の何れかを示し、Ｒ２は、炭素数１～３のアルキル基を示し、ｎは０、１を示す化合物がより好ましい。
一般式（１ｄ）で表される化合物として、中でも好適な化合物は、Ｒ１がメチル基であり、ｎ＝０である化合物１ｄ－１である。
【化11】
一般式（１ｄ）で表される化合物としては、Ｒ１は、水素原子、炭素数１～３のアルキル基、ヒドロキシメチル基の何れかを示し、Ｒ２は、炭素数１～５のアルキル基、ハロゲン原子の何れかを示し、ｎは０、１を示す化合物が好ましく、Ｒ１は、水素原子、ヒドロキシメチル基の何れかを示し、Ｒ２は、炭素数１～３のアルキル基を示し、ｎは０、１を示す化合物がより好ましい。
一般式（１ｄ）で表される化合物として、中でも好適な化合物は、Ｒ１がメチル基であり、ｎ＝０である化合物１ｄ－１である。
【0017】
下記一般式（１ｅ）で表される化合物は、一般式（１）中の「Ｙ」が単結合であり、「Ｑ」がＱ－４である化合物である。
一般式（１ｅ）で表される化合物として、中でも好適な化合物は、下記化学構造を有する化合物１ｅ－１と化合物１ｅ－２である。
【化12】
【化13】
【0018】
下記一般式（１ｆ）で表される化合物は、一般式（１）中の「Ｙ」がＹ－１であり、「Ｑ」がＱ－２である化合物である。
（式中、Ｒ１は、一般式（１）の定義と同じである。）
一般式（１ｆ）で表される化合物としては、ナフタレン環との結合位置が下記化合物（１ｆ－１）と同じ１－位である化合物が好ましく、中でも、Ｒ１は、水素原子、炭素数１～３のアルキル基の何れかを示す化合物がより好ましく、Ｒ１は、水炭素数１～３のアルキル基の何れかを示す化合物がさらに好ましい。
一般式（１ｆ）で表される化合物として、特に好適な化合物は、下記化学構造を有する化合物１ｆ－１である。
【化14】
一般式（１ｆ）で表される化合物としては、ナフタレン環との結合位置が下記化合物（１ｆ－１）と同じ１－位である化合物が好ましく、中でも、Ｒ１は、水素原子、炭素数１～３のアルキル基の何れかを示す化合物がより好ましく、Ｒ１は、水炭素数１～３のアルキル基の何れかを示す化合物がさらに好ましい。
一般式（１ｆ）で表される化合物として、特に好適な化合物は、下記化学構造を有する化合物１ｆ－１である。
【化15】
【0019】
下記一般式（１ｇ）で表される化合物は、一般式（１）中の「Ｙ」がＹ－１であり、「Ｑ」がＱ－３である化合物である。
（式中、Ｒ１は、一般式（１）の定義と同じである。）
一般式（１ｇ）で表される化合物としては、Ｒ１は、水素原子、炭素数１～３のアルキル基の何れかを示す化合物が好ましく、Ｒ１は、炭素数１～３のアルキル基の何れかを示す化合物がより好ましい。
一般式（１ｇ）で表される化合物として、中でも好適な化合物は、Ｒ１がメチル基である化合物１ｇ－１である。
【化16】
一般式（１ｇ）で表される化合物としては、Ｒ１は、水素原子、炭素数１～３のアルキル基の何れかを示す化合物が好ましく、Ｒ１は、炭素数１～３のアルキル基の何れかを示す化合物がより好ましい。
一般式（１ｇ）で表される化合物として、中でも好適な化合物は、Ｒ１がメチル基である化合物１ｇ－１である。
【0020】
本発明における花卉とは、観賞用の植物全般を意味するものであり、本発明の花卉の老化抑制剤は、花卉に施用することにより、その植物体全体の老化を抑制するものである。花卉の中でも花の部分の老化抑制に、特に、花被の老化抑制に優れた効果を発揮するものである。
上述のとおり、カーネーション等の、老化がエチレンによって制御される花卉（エチレン依存性花卉）は、エチレン阻害剤など老化を抑制する薬剤が多く開発されているが、ユリ等のエチレンに依存しない老化を示す花（エチレン非依存性花卉）は、老化を抑制する薬剤は未だ開発されていない。
しかしながら、本発明の花卉の老化抑制剤は、エチレン非依存的な老化を制御する鍵遺伝子（ＥＰＨ１）の転写因子機能を阻害する物質を選抜するシステムにより、見出された化合物群を有効成分とするものである。よって、エチレン非依存性花卉はもとより、エチレン依存性花卉に対しても、優れた老化抑制機能を発揮する。
鍵遺伝子（ＥＰＨ１）がコードするタンパク質は転写因子であり、鍵遺伝子（ＥＰＨ１）タンパク質が標的遺伝子の発現制御領域中のＤＮＡ配列に結合することで、標的遺伝子の転写が誘導される。鍵遺伝子（ＥＰＨ１）タンパク質の標的遺伝子には、タンパク質分解酵素遺伝子などの細胞死関連遺伝子が含まれるため、鍵遺伝子（ＥＰＨ１）タンパク質が、細胞死関連遺伝子の発現制御領域中のＤＮＡ配列に結合し、これらの遺伝子の転写を活性化することで細胞死（老化）が促進される。
本発明の花卉の老化抑制剤は、鍵遺伝子（ＥＰＨ１）タンパク質に直接作用し、鍵遺伝子（ＥＰＨ１）タンパク質とＤＮＡ配列との結合を阻害し、その結果として、花被における細胞死の進行が抑制され、花被の老化抑制効果が発現しているものと推測される。鍵遺伝子（ＥＰＨ１）タンパク質と相同のタンパク質は被子植物一般に存在することから、その作用メカニズムに従えば、実施例に具体的に示すアサガオのみならず、花卉全般に対して本発明の効果は発現するものと考えられる。
本発明の花卉としては、エチレン非依存性花卉が好ましく、例えば、ヒルガオ科、バラ科、ユリ科、キク科、アヤメ科等の植物が挙げられ、中でも、アサガオ、バラ、ユリ、チューリップ、キク、ヒマワリ、ガーベラ、マーガレット、アイリス、ダリア、グラジオラス、ハナショウブ、アイリス、フリージア、サンダーソニア等の植物がより好ましい。
上述のとおり、カーネーション等の、老化がエチレンによって制御される花卉（エチレン依存性花卉）は、エチレン阻害剤など老化を抑制する薬剤が多く開発されているが、ユリ等のエチレンに依存しない老化を示す花（エチレン非依存性花卉）は、老化を抑制する薬剤は未だ開発されていない。
しかしながら、本発明の花卉の老化抑制剤は、エチレン非依存的な老化を制御する鍵遺伝子（ＥＰＨ１）の転写因子機能を阻害する物質を選抜するシステムにより、見出された化合物群を有効成分とするものである。よって、エチレン非依存性花卉はもとより、エチレン依存性花卉に対しても、優れた老化抑制機能を発揮する。
鍵遺伝子（ＥＰＨ１）がコードするタンパク質は転写因子であり、鍵遺伝子（ＥＰＨ１）タンパク質が標的遺伝子の発現制御領域中のＤＮＡ配列に結合することで、標的遺伝子の転写が誘導される。鍵遺伝子（ＥＰＨ１）タンパク質の標的遺伝子には、タンパク質分解酵素遺伝子などの細胞死関連遺伝子が含まれるため、鍵遺伝子（ＥＰＨ１）タンパク質が、細胞死関連遺伝子の発現制御領域中のＤＮＡ配列に結合し、これらの遺伝子の転写を活性化することで細胞死（老化）が促進される。
本発明の花卉の老化抑制剤は、鍵遺伝子（ＥＰＨ１）タンパク質に直接作用し、鍵遺伝子（ＥＰＨ１）タンパク質とＤＮＡ配列との結合を阻害し、その結果として、花被における細胞死の進行が抑制され、花被の老化抑制効果が発現しているものと推測される。鍵遺伝子（ＥＰＨ１）タンパク質と相同のタンパク質は被子植物一般に存在することから、その作用メカニズムに従えば、実施例に具体的に示すアサガオのみならず、花卉全般に対して本発明の効果は発現するものと考えられる。
本発明の花卉としては、エチレン非依存性花卉が好ましく、例えば、ヒルガオ科、バラ科、ユリ科、キク科、アヤメ科等の植物が挙げられ、中でも、アサガオ、バラ、ユリ、チューリップ、キク、ヒマワリ、ガーベラ、マーガレット、アイリス、ダリア、グラジオラス、ハナショウブ、アイリス、フリージア、サンダーソニア等の植物がより好ましい。
【0021】
本発明の花卉の老化抑制剤は、テトラフルオロフタルイミド骨格を含む化合物またはその塩から選択される有効成分を、水に溶解させて水溶剤とし、そのままで、または更に水で希釈して、対象となる花卉に施用される。花卉への施用の方法としては、例えば、花卉全体に散布する方法や、花卉全体を容器に密閉して燻蒸する方法などが挙げられ、中でも、切花を対象とする場合は、切花の生け水に添加する方法、花または切花全体に散布する方法、切花全体を浸漬する方法、切花を容器に密閉して燻蒸する方法等が挙げられる。
本発明の花卉の老化抑制剤を水溶剤として花卉に施用する際には、一般には、有効成分濃度が０．０１μＭ～１００ｍＭの範囲が好ましく、０．０５μＭ～５０ｍＭの範囲がより好ましく、０．１μＭ～１０ｍＭの範囲がさらに好ましく、０．１μＭ～５ｍＭの範囲が特に好ましい。
また、本発明の花卉の老化抑制剤は、通常、液体担体や固体担体等の不活性担体と混合し、製剤化して使用することが好ましく、水溶剤のほか、水和剤、フロアブル剤、マイクロカプセル剤、乳剤、粉剤、粒剤等に製剤化して使用することが出来る。
本発明の花卉の老化抑制剤を製剤化して使用する場合には、通常、テトラフルオロフタルイミド骨格を含む化合物またはその塩から選択される有効成分の濃度を、０．１～１００００ｐｐｍとなるように、好ましくは０．１～１００ｐｐｍとなるように、さらに好ましくは１～１０ｐｐｍとなるように水で希釈して施用し、粉剤、粒剤に製剤化されている場合はそのまま施用することが好ましい。
本発明の花卉の老化抑制剤を水溶剤として花卉に施用する際には、一般には、有効成分濃度が０．０１μＭ～１００ｍＭの範囲が好ましく、０．０５μＭ～５０ｍＭの範囲がより好ましく、０．１μＭ～１０ｍＭの範囲がさらに好ましく、０．１μＭ～５ｍＭの範囲が特に好ましい。
また、本発明の花卉の老化抑制剤は、通常、液体担体や固体担体等の不活性担体と混合し、製剤化して使用することが好ましく、水溶剤のほか、水和剤、フロアブル剤、マイクロカプセル剤、乳剤、粉剤、粒剤等に製剤化して使用することが出来る。
本発明の花卉の老化抑制剤を製剤化して使用する場合には、通常、テトラフルオロフタルイミド骨格を含む化合物またはその塩から選択される有効成分の濃度を、０．１～１００００ｐｐｍとなるように、好ましくは０．１～１００ｐｐｍとなるように、さらに好ましくは１～１０ｐｐｍとなるように水で希釈して施用し、粉剤、粒剤に製剤化されている場合はそのまま施用することが好ましい。
【0022】
液体担体としては、例えば水、アルコール類（メタノール、エタノール、イソプロピルアルコール、ブタノール、ヘキサノール、ベンジルアルコール、エチレングリコール、プロピレングリコール、フェノキシエタノール等）、ケトン類（アセトン、メチルエチルケトン、シクロヘキサノン等）、芳香族炭化水素類（トルエン、キシレン、エチルベンゼン、ドデシルベンゼン、フェニルキシリルエタン、メチルナフタレン等）、脂肪族炭化水素類（ヘキサン、シクロヘキサン、灯油、軽油等）、エステル類（酢酸エチル、酢酸ブチル、ミリスチン酸イソプロピル、オレイン酸エチル、アジピン酸ジイソプロピル、アジピン酸ジイソブチル、プロピレングリコールモノメチルエーテルアセテート等）、ニトリル類（アセトニトリル、イソブチロニトリル等）、エーテル類（ジイソプロピルエーテル、１，４－ジオキサン、エチレングリコールジメチルエーテル、ジエチレングリコールジメチルエーテル、ジエチレングリコールモノメチルエーテル、プロピレングリコールモノメチルエーテル、ジプロピレングリコールモノメチルエーテル、３－メトキシ－３－メチル－１－ブタノール等）、アミド類（Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（以下、「ＤＭＦ」という。）、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド等）、スルホキシド類（ジメチルスルホキシド（以下、「ＤＭＳＯ」という。）等）、炭酸プロピレン及び植物油（大豆油、綿実油等）が挙げられる。
固体担体としては、例えば粘土類（カオリンクレー、珪藻土、ベントナイト、フバサミクレー、酸性白土等）、合成含水酸化珪素、タルク、セラミック、その他の無機鉱物（セリサイト、石英、硫黄、活性炭、炭酸カルシウム、水和シリカ等）、化学肥料（硫安、燐安、硝安、尿素、塩安等）等の微粉末及び粒状物等、並びに合成樹脂（ポリプロピレン、ポリアクリロニトリル、ポリメタクリル酸メチル、ポリエチレンテレフタレート等のポリエステル樹脂、ナイロン－６、ナイロン－１１、ナイロン－６６等のナイロン樹脂、ポリアミド樹脂、ポリ塩化ビニル、ポリ塩化ビニリデン、塩化ビニル－プロピレン共重合体等）が挙げられる。
固体担体としては、例えば粘土類（カオリンクレー、珪藻土、ベントナイト、フバサミクレー、酸性白土等）、合成含水酸化珪素、タルク、セラミック、その他の無機鉱物（セリサイト、石英、硫黄、活性炭、炭酸カルシウム、水和シリカ等）、化学肥料（硫安、燐安、硝安、尿素、塩安等）等の微粉末及び粒状物等、並びに合成樹脂（ポリプロピレン、ポリアクリロニトリル、ポリメタクリル酸メチル、ポリエチレンテレフタレート等のポリエステル樹脂、ナイロン－６、ナイロン－１１、ナイロン－６６等のナイロン樹脂、ポリアミド樹脂、ポリ塩化ビニル、ポリ塩化ビニリデン、塩化ビニル－プロピレン共重合体等）が挙げられる。
【0023】
本発明の花卉の老化抑制剤の製剤化の際には、必要に応じてさらに界面活性剤やその他の製剤用補助剤を添加する。
界面活性剤としては、例えばポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンアルキルアリールエーテル、ポリエチレングリコール脂肪酸エステル等の非イオン界面活性剤、及びアルキルスルホン酸塩、アルキルベンゼンスルホン酸塩、アルキル硫酸塩等の陰イオン界面活性剤が挙げられる。
その他の製剤用補助剤としては、固着剤、分散剤、着色剤及び安定剤等、具体的には例えばカゼイン、ゼラチン、糖類（でんぷん、アラビアガム、セルロース誘導体、アルギン酸等）、リグニン誘導体、ベントナイト、合成水溶性高分子（ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ポリアクリル酸類等）、ＰＡＰ（酸性りん酸イソプロピル）、ＢＨＴ（２，６－ジ－ｔｅｒｔ－ブチル－４－メチルフェノール）、ＢＨＡ（２－ｔｅｒｔ－ブチル－４－メトキシフェノールと３－ｔｅｒｔ－ブチル－４－メトキシフェノールとの混合物）が挙げられる。
界面活性剤としては、例えばポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンアルキルアリールエーテル、ポリエチレングリコール脂肪酸エステル等の非イオン界面活性剤、及びアルキルスルホン酸塩、アルキルベンゼンスルホン酸塩、アルキル硫酸塩等の陰イオン界面活性剤が挙げられる。
その他の製剤用補助剤としては、固着剤、分散剤、着色剤及び安定剤等、具体的には例えばカゼイン、ゼラチン、糖類（でんぷん、アラビアガム、セルロース誘導体、アルギン酸等）、リグニン誘導体、ベントナイト、合成水溶性高分子（ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ポリアクリル酸類等）、ＰＡＰ（酸性りん酸イソプロピル）、ＢＨＴ（２，６－ジ－ｔｅｒｔ－ブチル－４－メチルフェノール）、ＢＨＡ（２－ｔｅｒｔ－ブチル－４－メトキシフェノールと３－ｔｅｒｔ－ブチル－４－メトキシフェノールとの混合物）が挙げられる。
【実施例】
【0024】
以下、実施例を挙げて本発明を説明するが、本発明の技術範囲はこれらにより限定されるものではない。
【0025】
＜実施例１＞花卉の老化抑制効果を有する化合物の選抜システムの構築
（概要） 花卉の老化抑制効果を有する化合物の選抜は、下記手順により構築したシステムに基づいて行った。
（１）ＥＰＨ１タンパク質と結合するＤＮＡ配列（ＥＰＨ１タンパク質の標的ＤＮＡ配列）を特定した。
（２）ＥＰＨ１タンパク質を無細胞タンパク質合成系により合成した。
（３）無細胞タンパク質合成系で合成したＥＰＨ１タンパク質と、特定した標的ＤＮＡ配列の相互作用の強さの程度を、試験管内で高速かつ高感度に検出するシステムを構築した。
（４）この検出システムを用いて、ＥＰＨ１タンパク質と標的ＤＮＡ配列の結合を阻害する化合物を探索した。
（概要） 花卉の老化抑制効果を有する化合物の選抜は、下記手順により構築したシステムに基づいて行った。
（１）ＥＰＨ１タンパク質と結合するＤＮＡ配列（ＥＰＨ１タンパク質の標的ＤＮＡ配列）を特定した。
（２）ＥＰＨ１タンパク質を無細胞タンパク質合成系により合成した。
（３）無細胞タンパク質合成系で合成したＥＰＨ１タンパク質と、特定した標的ＤＮＡ配列の相互作用の強さの程度を、試験管内で高速かつ高感度に検出するシステムを構築した。
（４）この検出システムを用いて、ＥＰＨ１タンパク質と標的ＤＮＡ配列の結合を阻害する化合物を探索した。
【0026】
（１）ＥＰＨ１タンパク質結合ＤＮＡ配列の特定
ＥＰＨ１タンパク質が結合するＤＮＡ配列はこれまでに明らかにされていなかったが、本発明において研究を重ねた結果、特定するに至った。
具体的には、ＥＰＨ１遺伝子と同様にアサガオ花弁の老化時に発現量が上昇する遺伝子群を、マイクロアレイ解析により、約２万種の遺伝子の中から選抜した。これらの選抜した遺伝子の発現制御領域のＤＮＡ配列を網羅的に解析した結果、タンパク質の分解に関与する液胞プロセシング酵素遺伝子（ＶＰＥ遺伝子）の発現制御領域中に、ＥＰＨ１タンパク質が結合すると推測されるＤＮＡ配列（ＶＰＥ１： ５’－ＡＴＴＴＧＴＣＴＴＧＴＴＧＣＧＴＡＴＡＴＧＡＴＴＧＡＧＧＴ－３’）を見出した。
ＥＰＨ１タンパク質と、ＶＰＥ１配列の相互作用を解析した結果、ＥＰＨ１タンパク質がＶＰＥ１配列に結合することが確認された。
（２）無細胞タンパク質合成系によるＥＰＨ１タンパク質の合成
ＥＰＨ１タンパク質が結合するＤＮＡ配列（ＶＰＥ１配列）が本発明において新たに特定されたことから、ＥＰＨ１タンパク質とＶＰＥ１配列を用いて、ＥＰＨ１タンパク質とＤＮＡ配列の相互作用をモニタリングできるシステムの構築を試みた。 化合物のスクリーニングでは、多数の化合物の阻害活性を解析する必要があり、再現性の高い結果を得るためには、高品質なタンパク質の大量合成と、高速かつ高感度の検出システムが必須である。一般的に、タンパク質を大量に合成するには、大腸菌などの生きた細胞が用いられる。しかし、原因は不明であるが、大腸菌を用いてＥＰＨ１タンパク質を大量に合成することは困難であった。そこで、ＡＧＩＡ標識を付加したＥＰＨ１タンパク質（ＥＰＨ１－ＡＧＩＡタンパク質）を、コムギ無細胞タンパク質合成系で大量に合成する系を開発した。具体的には、ＥＰＨ１全長を含むＤＮＡ配列の３’末にＡＧＩＡポリペプチドをコードするＤＮＡ配列を結合し、タンパク質合成用ベクターに組み込んだ。得られたタンパク質合成用ベクターｐＥＵ－ＥＰＨ１－ＡＧＩＡとＷＥＰＲＯ１２４０ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｋｉｔ （Ｃｅｌｌ－Ｆｒｅｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）を用いてＥＰＨ１－ＡＧＩＡタンパク質を合成した。
（３）阻害化合物選抜システムの構築
ＥＰＨ１タンパク質とＶＰＥ１配列との相互作用を検出するための、ＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎを用いた検出系を開発した。具体的には、ＥＰＨ１－ＡＧＩＡタンパク質、ビオチン標識を付加したＶＰＥ１配列（Ｂｉｏ－ＶＰＥ１配列）、および、ＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎ検出試薬を混合し、混合液から発生する発光シグナルを、ＥｎＶｉｓｉｏｎプレートリーダー（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）を用いて検出する系である。これにより、ＥＰＨ１タンパク質と、標的ＤＮＡ配列の相互作用の強さの程度を、試験管内で高速かつ高感度に検出することができるシステムを構築するに至った。
（４）阻害化合物の探索
上記モニタリングシステムを用いて、ＥＰＨ１タンパク質と標的ＤＮＡ配列の結合を阻害する化合物を探索した。
ＥＰＨ１タンパク質が結合するＤＮＡ配列はこれまでに明らかにされていなかったが、本発明において研究を重ねた結果、特定するに至った。
具体的には、ＥＰＨ１遺伝子と同様にアサガオ花弁の老化時に発現量が上昇する遺伝子群を、マイクロアレイ解析により、約２万種の遺伝子の中から選抜した。これらの選抜した遺伝子の発現制御領域のＤＮＡ配列を網羅的に解析した結果、タンパク質の分解に関与する液胞プロセシング酵素遺伝子（ＶＰＥ遺伝子）の発現制御領域中に、ＥＰＨ１タンパク質が結合すると推測されるＤＮＡ配列（ＶＰＥ１： ５’－ＡＴＴＴＧＴＣＴＴＧＴＴＧＣＧＴＡＴＡＴＧＡＴＴＧＡＧＧＴ－３’）を見出した。
ＥＰＨ１タンパク質と、ＶＰＥ１配列の相互作用を解析した結果、ＥＰＨ１タンパク質がＶＰＥ１配列に結合することが確認された。
（２）無細胞タンパク質合成系によるＥＰＨ１タンパク質の合成
ＥＰＨ１タンパク質が結合するＤＮＡ配列（ＶＰＥ１配列）が本発明において新たに特定されたことから、ＥＰＨ１タンパク質とＶＰＥ１配列を用いて、ＥＰＨ１タンパク質とＤＮＡ配列の相互作用をモニタリングできるシステムの構築を試みた。 化合物のスクリーニングでは、多数の化合物の阻害活性を解析する必要があり、再現性の高い結果を得るためには、高品質なタンパク質の大量合成と、高速かつ高感度の検出システムが必須である。一般的に、タンパク質を大量に合成するには、大腸菌などの生きた細胞が用いられる。しかし、原因は不明であるが、大腸菌を用いてＥＰＨ１タンパク質を大量に合成することは困難であった。そこで、ＡＧＩＡ標識を付加したＥＰＨ１タンパク質（ＥＰＨ１－ＡＧＩＡタンパク質）を、コムギ無細胞タンパク質合成系で大量に合成する系を開発した。具体的には、ＥＰＨ１全長を含むＤＮＡ配列の３’末にＡＧＩＡポリペプチドをコードするＤＮＡ配列を結合し、タンパク質合成用ベクターに組み込んだ。得られたタンパク質合成用ベクターｐＥＵ－ＥＰＨ１－ＡＧＩＡとＷＥＰＲＯ１２４０ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｋｉｔ （Ｃｅｌｌ－Ｆｒｅｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）を用いてＥＰＨ１－ＡＧＩＡタンパク質を合成した。
（３）阻害化合物選抜システムの構築
ＥＰＨ１タンパク質とＶＰＥ１配列との相互作用を検出するための、ＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎを用いた検出系を開発した。具体的には、ＥＰＨ１－ＡＧＩＡタンパク質、ビオチン標識を付加したＶＰＥ１配列（Ｂｉｏ－ＶＰＥ１配列）、および、ＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎ検出試薬を混合し、混合液から発生する発光シグナルを、ＥｎＶｉｓｉｏｎプレートリーダー（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）を用いて検出する系である。これにより、ＥＰＨ１タンパク質と、標的ＤＮＡ配列の相互作用の強さの程度を、試験管内で高速かつ高感度に検出することができるシステムを構築するに至った。
（４）阻害化合物の探索
上記モニタリングシステムを用いて、ＥＰＨ１タンパク質と標的ＤＮＡ配列の結合を阻害する化合物を探索した。
【0027】
＜実施例２―１＞阻害化合物選抜１次スクリーニング
東京大学創薬機構から提供を受けた９６００化合物を含むＣｏｒｅ Ｌｉｂｒａｒｙを用いて、上記阻害化合物選抜システムにより、阻害化合物の１次スクリーニングを行った。このＣｏｒｅ Ｌｉｂｒａｒｙは、化合物の構造多様性等を考慮して選抜された９６００サンプルを含む化合物ライブラリーである。
具体的には、ＤＭＳＯで溶解した化合物が分注されている３８４穴Ａｌｐｈａｐｌａｔｅに、ＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎ Ｂｕｆｆｅｒ（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）と、ＥＰＨ１－ＡＧＩＡタンパク質、Ｂｉｏ－ＶＰＥ１配列を添加し、２６℃で１時間静置した。その後、ＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎ ｄｏｎｅｒ ｂｅａｄｓとＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎ ａｃｃｅｐｔｏｒ ｂｅａｄｓ（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）を含む検出試薬を添加し、さらに２６℃で１時間静置した。化合物の最終濃度は１０μＭとした。ＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎの発光シグナルを、ＥｎＶｉｓｉｏｎプレートリーダー（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）により測定した。ＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎのシグナルの強弱から、それぞれの化合物における、ＥＰＨ１タンパク質とＶＰＥ１配列との相互作用の阻害率（％）を算出した。
この結果、７５％以上の阻害率を示し、テトラフルオロフタルイミド骨格を共通して含む化合物１ｅ－２と１ｂ－６を得た。
東京大学創薬機構から提供を受けた９６００化合物を含むＣｏｒｅ Ｌｉｂｒａｒｙを用いて、上記阻害化合物選抜システムにより、阻害化合物の１次スクリーニングを行った。このＣｏｒｅ Ｌｉｂｒａｒｙは、化合物の構造多様性等を考慮して選抜された９６００サンプルを含む化合物ライブラリーである。
具体的には、ＤＭＳＯで溶解した化合物が分注されている３８４穴Ａｌｐｈａｐｌａｔｅに、ＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎ Ｂｕｆｆｅｒ（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）と、ＥＰＨ１－ＡＧＩＡタンパク質、Ｂｉｏ－ＶＰＥ１配列を添加し、２６℃で１時間静置した。その後、ＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎ ｄｏｎｅｒ ｂｅａｄｓとＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎ ａｃｃｅｐｔｏｒ ｂｅａｄｓ（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）を含む検出試薬を添加し、さらに２６℃で１時間静置した。化合物の最終濃度は１０μＭとした。ＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎの発光シグナルを、ＥｎＶｉｓｉｏｎプレートリーダー（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）により測定した。ＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎのシグナルの強弱から、それぞれの化合物における、ＥＰＨ１タンパク質とＶＰＥ１配列との相互作用の阻害率（％）を算出した。
この結果、７５％以上の阻害率を示し、テトラフルオロフタルイミド骨格を共通して含む化合物１ｅ－２と１ｂ－６を得た。
【0028】
＜実施例２－２＞阻害化合物選抜スクリーニング
実施例２－１において選抜された化合物化合物１ｅ－２と１ｂ－６が共に、テトラフルオロフタルイミド骨格を持つ化合物であったことから、東京大学創薬機構の化合物データベースからコンピューター上で検索し２７種の化合物を選抜した。さらに、テトラフルオロフタルイミド骨格を持つ２種の化合物をＥｎａｍｉｎ社から購入した。
化合物１ｅ－２と１ｂ－６を含む計３１種の化合物について、上記実施例２の１次スクリーニングと同じ手法で、化合物毎の阻害率を解析した。化合物の最終濃度は５μＭとした。
３１種の化合物の阻害率を下記表３にまとめて示す。最終濃度が５μＭであることからも、このスクリーニングにより選抜された化合物は、花卉の老化抑制効果が極めて高い化合物群である。
実施例２－１において選抜された化合物化合物１ｅ－２と１ｂ－６が共に、テトラフルオロフタルイミド骨格を持つ化合物であったことから、東京大学創薬機構の化合物データベースからコンピューター上で検索し２７種の化合物を選抜した。さらに、テトラフルオロフタルイミド骨格を持つ２種の化合物をＥｎａｍｉｎ社から購入した。
化合物１ｅ－２と１ｂ－６を含む計３１種の化合物について、上記実施例２の１次スクリーニングと同じ手法で、化合物毎の阻害率を解析した。化合物の最終濃度は５μＭとした。
３１種の化合物の阻害率を下記表３にまとめて示す。最終濃度が５μＭであることからも、このスクリーニングにより選抜された化合物は、花卉の老化抑制効果が極めて高い化合物群である。
【表3】
【0029】
阻害率９０％以上１００％以下の化合物は、下記化学構造を有する１ｅ－１、１ｆ－１、１ａ－１、１ｄ－１ｂ、１ｂ－１、１ａ－２、１ｇ－１ａ、１ｂ－２、１ｄ－１ａ、１ａ－３、１ａ－４、１ｂ－３ａの１２化合物であった。
阻害率８０％以上９０％未満の化合物は、下記化学構造を有する１ｂ－４ｂ、１ｅ－２、１ｂ－３ｂ、１ｃ－１ａ、１ｂ－４ａ、１ｃ－１ｂ、１ｂ－５、１ｇ－１ｂの８化合物であった。
【化17】
【化18】
【0030】
阻害率７０％以上８０％未満の化合物は、下記化学構造を有する１ｂ－６、１ａ－５の２化合物であった。
阻害率６０％以上７０％未満の化合物は、下記化学構造を有する１ｂ－７ａ、１ｂ－７ｂの２化合物であった。
阻害率５０％以上６０％未満の化合物は無かった。
阻害率４０％以上５０％未満の化合物は、下記化学構造を有する１ａ－６の１化合物であった。
阻害率３０％以上４０％未満の化合物は、下記化学構造を有する１ｈ－１ａ、１ｈ－１ｂの２化合物であった。
阻害率２０％以上３０％未満の化合物は、下記化学構造を有する１ｈ－２、１ｈ－３の２化合物であった。
阻害率１０％以上２０％未満の化合物は、下記化学構造を有する１ｈ－４ａ、１ｈ－４ｂの２化合物であった。
上述のとおり、この実施例２－２に示すスクリーニングは、最終濃度を５μＭと設定しており、花卉の老化抑制効果が極めて高い化合物群を見出すためのものである。そのため、上記１ｈ－１～１ｈ－４の化合物は、このスクリーニングにおける阻害率は１０％以上４０％未満と低い数値であるものの、実用場面においては、良好な花卉の老化抑制効果を発揮する化合物群である。
【化19】
【化20】
阻害率４０％以上５０％未満の化合物は、下記化学構造を有する１ａ－６の１化合物であった。
【化21】
【化22】
【化23】
【化24】
【0031】
＜実施例３＞化合物処理した花弁切片の老化確認試験－１
（１）化合物処理が花弁老化に及ぼす影響
上記実施例２－１、実施例２－２において、高い阻害活性を示した化合物１ｅ－１、化合物１ｂ－２との２化合物を、アサガオの花弁切片に処理し、老化の進行に及ぼす影響を解析した。
アサガオの品種「紫」をインキュベータ（気温２４℃、相対湿度７０％、ＰＰＦＤ １００ μｍｏｌ・ｍ－２・ｓ－１、１２時間明期／暗期サイクル）で栽培した。明期の開始時間には、花はほぼ満開状態になっており、この時点を開花後０時間とした。
ＤＭＳＯに溶解した化合物１ｅ－１および化合物１ｂ－２（２０ｍＭ）を、最終濃度が１０μＭ、５μＭ、１μＭとなるように蒸留水で希釈した。希釈液５ｍＬを直径９ｃｍのペトリ皿に入れ、開花前４時間のアサガオ「紫」の蕾から調製した花弁切片を、花弁の向軸側が上になるように希釈液に浮かべた。ペトリ皿を気温２５℃、蛍光灯連続照明下（ＰＰＦＤ １５μｍｏｌ・ｍ－２・ｓ－１）に置き、花弁の老化の様子を観察した。最終濃度５μＭの化合物１ｅ－１および化合物１ｂ－２を処理した花弁切片の老化の様子を示す写真を、図１として示す。
図１に示すとおり、対照区では開花後１８時間から花弁の細胞死の進行による水浸状化（花弁が透けた状態）が認められ始めたのに対し、化合物を処理した花弁では、開花後３６時間でも明らかな水浸状化は認められなかった。
また、１０μＭおよび１μＭの化合物１ｅ－１および化合物１ｂ－２を処理した花弁切片でも同様の結果であった。
これらの結果から、本発明の花卉の老化抑制剤の具体例である化合物１ｅ－１および化合物１ｂ－２は、花弁老化の進行を抑制することが明らかとなった。
（１）化合物処理が花弁老化に及ぼす影響
上記実施例２－１、実施例２－２において、高い阻害活性を示した化合物１ｅ－１、化合物１ｂ－２との２化合物を、アサガオの花弁切片に処理し、老化の進行に及ぼす影響を解析した。
アサガオの品種「紫」をインキュベータ（気温２４℃、相対湿度７０％、ＰＰＦＤ １００ μｍｏｌ・ｍ－２・ｓ－１、１２時間明期／暗期サイクル）で栽培した。明期の開始時間には、花はほぼ満開状態になっており、この時点を開花後０時間とした。
ＤＭＳＯに溶解した化合物１ｅ－１および化合物１ｂ－２（２０ｍＭ）を、最終濃度が１０μＭ、５μＭ、１μＭとなるように蒸留水で希釈した。希釈液５ｍＬを直径９ｃｍのペトリ皿に入れ、開花前４時間のアサガオ「紫」の蕾から調製した花弁切片を、花弁の向軸側が上になるように希釈液に浮かべた。ペトリ皿を気温２５℃、蛍光灯連続照明下（ＰＰＦＤ １５μｍｏｌ・ｍ－２・ｓ－１）に置き、花弁の老化の様子を観察した。最終濃度５μＭの化合物１ｅ－１および化合物１ｂ－２を処理した花弁切片の老化の様子を示す写真を、図１として示す。
図１に示すとおり、対照区では開花後１８時間から花弁の細胞死の進行による水浸状化（花弁が透けた状態）が認められ始めたのに対し、化合物を処理した花弁では、開花後３６時間でも明らかな水浸状化は認められなかった。
また、１０μＭおよび１μＭの化合物１ｅ－１および化合物１ｂ－２を処理した花弁切片でも同様の結果であった。
これらの結果から、本発明の花卉の老化抑制剤の具体例である化合物１ｅ－１および化合物１ｂ－２は、花弁老化の進行を抑制することが明らかとなった。
【0032】
（２）タンパク質含量の変化
花弁の老化時にはタンパク質含量が低下することが知られていることから、化合物を処理した花弁においてタンパク質含量の変化を解析した。
ＤＭＳＯに溶解した化合物１ｅ－１および化合物１ｂ－２（２０ｍＭ）を、最終濃度が５μＭとなるように蒸留水で希釈した。希釈液５ｍＬを直径９ｃｍのペトリ皿に入れ、開花前４時間のアサガオ「紫」の蕾から調整した花弁切片を、花弁の向軸側が上になるように希釈液に浮かべた。ペトリ皿を２５℃、蛍光灯連続照明下（ＰＰＦＤ １５μｍｏｌ・ｍ－２・ｓ－１）に置き、８時間おきに花弁切片をサンプリングした。タンパク質含量は、ＴａＫａＲａ Ｂｒａｄｆｏｒｄ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａｓｓａｙ Ｋｉｔ（タカラバイオ株式会社製）を用いて測定した。その測定結果を、図２に示す。
図２のグラフに示すとおり、対照区（●）では開花後１６時間でタンパク質含量の急激な低下（開花後０時間のタンパク質含量の２８％に低下）が認められたのに対し、化合物１ｅ－１（□）および化合物１ｂ－２（△）を処理した花弁では、開花後２４時間でも開花後０時間のタンパク質含量の８８％、７０％をそれぞれ維持していた。
これらの結果から、化合物１ｅ－１および化合物１ｂ－２処理が、花弁のタンパク質含量の低下を抑制することが確認された。
これは本発明の花卉の老化抑制剤の具体例である化合物１ｅ－１および化合物１ｂ－２処理が、花弁の老化を抑制することを明確に示す結果である。
花弁の老化時にはタンパク質含量が低下することが知られていることから、化合物を処理した花弁においてタンパク質含量の変化を解析した。
ＤＭＳＯに溶解した化合物１ｅ－１および化合物１ｂ－２（２０ｍＭ）を、最終濃度が５μＭとなるように蒸留水で希釈した。希釈液５ｍＬを直径９ｃｍのペトリ皿に入れ、開花前４時間のアサガオ「紫」の蕾から調整した花弁切片を、花弁の向軸側が上になるように希釈液に浮かべた。ペトリ皿を２５℃、蛍光灯連続照明下（ＰＰＦＤ １５μｍｏｌ・ｍ－２・ｓ－１）に置き、８時間おきに花弁切片をサンプリングした。タンパク質含量は、ＴａＫａＲａ Ｂｒａｄｆｏｒｄ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａｓｓａｙ Ｋｉｔ（タカラバイオ株式会社製）を用いて測定した。その測定結果を、図２に示す。
図２のグラフに示すとおり、対照区（●）では開花後１６時間でタンパク質含量の急激な低下（開花後０時間のタンパク質含量の２８％に低下）が認められたのに対し、化合物１ｅ－１（□）および化合物１ｂ－２（△）を処理した花弁では、開花後２４時間でも開花後０時間のタンパク質含量の８８％、７０％をそれぞれ維持していた。
これらの結果から、化合物１ｅ－１および化合物１ｂ－２処理が、花弁のタンパク質含量の低下を抑制することが確認された。
これは本発明の花卉の老化抑制剤の具体例である化合物１ｅ－１および化合物１ｂ－２処理が、花弁の老化を抑制することを明確に示す結果である。
【0033】
＜実施例４＞化合物処理した花弁切片の老化確認試験－２
（１）化合物処理が花弁老化に及ぼす影響
上記実施例２－１、実施例２－２において、高い阻害活性を示した化合物１ｅ－２、１ａ－３、１ａ－５、１ａ－１、１ａ－４、１ｆ－１、１ｅ－１、１ｃ－１ａ、１ｂ－１、１ｂ－２、１ａ－６、１ａ－２の１２化合物を、アサガオ花弁切片の老化の進行に及ぼす影響を解析した。
アサガオの品種「紫」をインキュベータ（気温２４℃、相対湿度７０％、ＰＰＦＤ １００ μｍｏｌ・ｍ－２・ｓ－１、１２時間明期／暗期サイクル）で栽培した。明期の開始時間には、花はほぼ満開状態になっており、この時点を開花後０時間とした。
上記実施例３と同様に、１２化合物をそれぞれアサガオの花弁切片に処理し、老化の進行に及ぼす影響を解析した。
ＤＭＳＯに溶解した化合物（２０ｍＭ）を、最終濃度が５μＭとなるように蒸留水で希釈した。希釈液５ｍＬを直径９ｃｍのペトリ皿に入れ、開花前４時間のアサガオ「紫」の蕾から調整した花弁切片を、花弁の向軸側が上になるように希釈液に浮かべた。ペトリ皿を気温２５℃、蛍光灯連続照明下（ＰＰＦＤ １５μｍｏｌ・ｍ－２・ｓ－１）に置き、花弁の老化の様子を観察した。開花後２４時間後の花弁切片の老化の様子を示す写真を図３として示す。
図３に示すとおり、対照区では開花後２４時間には花弁の細胞死が進行し水浸状化が顕著になったのに対し、本発明の花卉の老化抑制剤の具体例である化合物を処理した花弁では、水浸状化は認められなかった。
これは本発明の花卉の老化抑制剤の具体例である１２化合物の処理が、花弁老化の進行を抑制することを明確に示す結果である。
（１）化合物処理が花弁老化に及ぼす影響
上記実施例２－１、実施例２－２において、高い阻害活性を示した化合物１ｅ－２、１ａ－３、１ａ－５、１ａ－１、１ａ－４、１ｆ－１、１ｅ－１、１ｃ－１ａ、１ｂ－１、１ｂ－２、１ａ－６、１ａ－２の１２化合物を、アサガオ花弁切片の老化の進行に及ぼす影響を解析した。
アサガオの品種「紫」をインキュベータ（気温２４℃、相対湿度７０％、ＰＰＦＤ １００ μｍｏｌ・ｍ－２・ｓ－１、１２時間明期／暗期サイクル）で栽培した。明期の開始時間には、花はほぼ満開状態になっており、この時点を開花後０時間とした。
上記実施例３と同様に、１２化合物をそれぞれアサガオの花弁切片に処理し、老化の進行に及ぼす影響を解析した。
ＤＭＳＯに溶解した化合物（２０ｍＭ）を、最終濃度が５μＭとなるように蒸留水で希釈した。希釈液５ｍＬを直径９ｃｍのペトリ皿に入れ、開花前４時間のアサガオ「紫」の蕾から調整した花弁切片を、花弁の向軸側が上になるように希釈液に浮かべた。ペトリ皿を気温２５℃、蛍光灯連続照明下（ＰＰＦＤ １５μｍｏｌ・ｍ－２・ｓ－１）に置き、花弁の老化の様子を観察した。開花後２４時間後の花弁切片の老化の様子を示す写真を図３として示す。
図３に示すとおり、対照区では開花後２４時間には花弁の細胞死が進行し水浸状化が顕著になったのに対し、本発明の花卉の老化抑制剤の具体例である化合物を処理した花弁では、水浸状化は認められなかった。
これは本発明の花卉の老化抑制剤の具体例である１２化合物の処理が、花弁老化の進行を抑制することを明確に示す結果である。
【0034】
（２）タンパク質含量の変化
上記実施例３と同様に、上記実施例２－１、実施例２－２において、高い阻害活性を示した化合物１ｅ－２、１ａ－３、１ａ－５、１ａ－１、１ａ－４、１ｆ－１、１ｅ－１、１ｃ－１ａ、１ｂ－１、１ｂ－２の１０化合物を処理した花弁におけるタンパク質含量の変化を解析した。
ＤＭＳＯに溶解した化合物（２０ｍＭ）を、最終濃度が５μＭとなるように蒸留水で希釈した。希釈液５ｍＬを直径９ｃｍのペトリ皿に入れ、開花前４時間のアサガオ「紫」の蕾から調整した花弁切片を、花弁の向軸側が上になるように希釈液に浮かべた。ペトリ皿を気温２５℃、蛍光灯連続照明下（ＰＰＦＤ １５μｍｏｌ・ｍ－２・ｓ－１）に置き、８時間おきに花弁切片をサンプリングした。タンパク質含量は、ＴａＫａＲａ Ｂｒａｄｆｏｒｄ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａｓｓａｙ Ｋｉｔ（タカラバイオ）を用いて測定した。その測定結果を、図４に示す。
図４に示すとおり、対照区では開花後２４時間のタンパク質含量は開花後０時間に比べ３６％まで低下したが、化合物を処理した花弁では、開花後２４時間でも開花後０時間のタンパク質含量の６５から１００％を維持していた。
これらの結果から、本発明の花卉の老化抑制剤の具体例である化合物処理が花弁のタンパク質含量の低下を抑制することが示された。
これは本発明の花卉の老化抑制剤の具体例である化合物処理が、花弁の老化を抑制することを明確に示す結果である。
上記実施例３と同様に、上記実施例２－１、実施例２－２において、高い阻害活性を示した化合物１ｅ－２、１ａ－３、１ａ－５、１ａ－１、１ａ－４、１ｆ－１、１ｅ－１、１ｃ－１ａ、１ｂ－１、１ｂ－２の１０化合物を処理した花弁におけるタンパク質含量の変化を解析した。
ＤＭＳＯに溶解した化合物（２０ｍＭ）を、最終濃度が５μＭとなるように蒸留水で希釈した。希釈液５ｍＬを直径９ｃｍのペトリ皿に入れ、開花前４時間のアサガオ「紫」の蕾から調整した花弁切片を、花弁の向軸側が上になるように希釈液に浮かべた。ペトリ皿を気温２５℃、蛍光灯連続照明下（ＰＰＦＤ １５μｍｏｌ・ｍ－２・ｓ－１）に置き、８時間おきに花弁切片をサンプリングした。タンパク質含量は、ＴａＫａＲａ Ｂｒａｄｆｏｒｄ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａｓｓａｙ Ｋｉｔ（タカラバイオ）を用いて測定した。その測定結果を、図４に示す。
図４に示すとおり、対照区では開花後２４時間のタンパク質含量は開花後０時間に比べ３６％まで低下したが、化合物を処理した花弁では、開花後２４時間でも開花後０時間のタンパク質含量の６５から１００％を維持していた。
これらの結果から、本発明の花卉の老化抑制剤の具体例である化合物処理が花弁のタンパク質含量の低下を抑制することが示された。
これは本発明の花卉の老化抑制剤の具体例である化合物処理が、花弁の老化を抑制することを明確に示す結果である。
【0035】
＜実施例５＞化合物処理した切り花の老化確認試験
化合物１ｅ－１、化合物１ｂ－２との２化合物を、アサガオの切り花に処理し、老化の進行に及ぼす影響を解析した。
ＤＭＳＯに溶解した化合物１ｅ－１および化合物１ｂ－２（２０ｍＭ）を、最終濃度が５μＭとなるように蒸留水で希釈した。希釈液４００ｍＬを容量５００ｍＬのビーカーに入れ、開花後０時間に植物体から切り取ったアサガオの切り花全体を希釈液に浸漬した。切り花は花弁の背軸側のみが処理液に接して浮いている状態になっている。切り花を入れたビーカーを気温２５℃、蛍光灯連続照明下（ＰＰＦＤ １５μｍｏｌ・ｍ－２・ｓ－１）に置き、花弁の老化の様子を観察した。開花２４時間後の花弁切片の老化の様子を示す写真を図５として示す。
図５に示すとおり、対照区では開花後２４時間には花弁の細胞死の進行による水浸状化（花弁が透けた状態）が顕著になり、処理液から取り出した切り花の花弁は完全に萎凋していた。これに対し、化合物１ｅ－１および化合物１ｂ－２を処理した切り花では、花弁の水浸状化は認められず、処理液から取り出した切り花の花弁も萎凋していなかった。
この結果により、本発明の花卉の老化抑制剤の具体例である化合物１ｅ－１および化合物１ｂ－２処理が、アサガオ切り花の老化の進行を抑制したことが示された。
化合物１ｅ－１、化合物１ｂ－２との２化合物を、アサガオの切り花に処理し、老化の進行に及ぼす影響を解析した。
ＤＭＳＯに溶解した化合物１ｅ－１および化合物１ｂ－２（２０ｍＭ）を、最終濃度が５μＭとなるように蒸留水で希釈した。希釈液４００ｍＬを容量５００ｍＬのビーカーに入れ、開花後０時間に植物体から切り取ったアサガオの切り花全体を希釈液に浸漬した。切り花は花弁の背軸側のみが処理液に接して浮いている状態になっている。切り花を入れたビーカーを気温２５℃、蛍光灯連続照明下（ＰＰＦＤ １５μｍｏｌ・ｍ－２・ｓ－１）に置き、花弁の老化の様子を観察した。開花２４時間後の花弁切片の老化の様子を示す写真を図５として示す。
図５に示すとおり、対照区では開花後２４時間には花弁の細胞死の進行による水浸状化（花弁が透けた状態）が顕著になり、処理液から取り出した切り花の花弁は完全に萎凋していた。これに対し、化合物１ｅ－１および化合物１ｂ－２を処理した切り花では、花弁の水浸状化は認められず、処理液から取り出した切り花の花弁も萎凋していなかった。
この結果により、本発明の花卉の老化抑制剤の具体例である化合物１ｅ－１および化合物１ｂ－２処理が、アサガオ切り花の老化の進行を抑制したことが示された。
【0036】
上述の実施例１～５は全てアサガオを用いた試験例であるが、その他のペチュニア等の花卉においても、同様の効果が得られることが別途確認された。
【産業上の利用可能性】
【0037】
本発明の花卉の老化抑制剤は、エチレン非依存的な老化を制御する鍵遺伝子（ＥＰＨ１）の転写因子機能を阻害する物質を選抜するシステムにより、見出された化合物群を有効成分とするものであり、当該有効成分は、テトラフルオロフタルイミド骨格を含む化合物またはその塩である。
本発明の花卉の老化抑制剤は、鍵遺伝子（ＥＰＨ１）がコードするタンパク質に直接作用し、鍵遺伝子（ＥＰＨ１）タンパク質と細胞死関連遺伝子の発現制御領域中のＤＮＡ配列との結合を阻害して、花被における細胞死の進行を抑制し、花卉の老化抑制効果を発揮するものと考えられるため、鍵遺伝子（ＥＰＨ１）タンパク質と相同するタンパク質を有する花卉全般に対しても、同様の老化抑制効果が発現するものといえる。
すなわち、本発明の花卉の老化抑制剤は、エチレンに依存しない老化を示す花（エチレン非依存性花卉）を含む花卉全般において、「花持ち」を良好なものとし、鑑賞期間を延長することが出来るという顕著な効果を発揮するものである。
本発明の花卉の老化抑制剤は、鍵遺伝子（ＥＰＨ１）がコードするタンパク質に直接作用し、鍵遺伝子（ＥＰＨ１）タンパク質と細胞死関連遺伝子の発現制御領域中のＤＮＡ配列との結合を阻害して、花被における細胞死の進行を抑制し、花卉の老化抑制効果を発揮するものと考えられるため、鍵遺伝子（ＥＰＨ１）タンパク質と相同するタンパク質を有する花卉全般に対しても、同様の老化抑制効果が発現するものといえる。
すなわち、本発明の花卉の老化抑制剤は、エチレンに依存しない老化を示す花（エチレン非依存性花卉）を含む花卉全般において、「花持ち」を良好なものとし、鑑賞期間を延長することが出来るという顕著な効果を発揮するものである。
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
