特許 7594274 難聴の予防および／または治療用医薬組成物

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】

(24)【登録日】2024-11-26

(45)【発行日】2024-12-04

(54)【発明の名称】難聴の予防および／または治療用医薬組成物

(51)【国際特許分類】

   A61K 31/454 20060101AFI20241127BHJP

   A61P 27/16 20060101ALI20241127BHJP

【ＦＩ】

A61K31/454

A61P27/16

【請求項の数】 4

(21)【出願番号】P 2020177736

(22)【出願日】2020-10-23

(65)【公開番号】P2021070688

(43)【公開日】2021-05-06

【審査請求日】2023-09-15

(31)【優先権主張番号】P 2019193880

(32)【優先日】2019-10-24

(33)【優先権主張国・地域又は機関】JP

(73)【特許権者】

【識別番号】504176911

【氏名又は名称】国立大学法人大阪大学

(74)【代理人】

【識別番号】110000796

【氏名又は名称】弁理士法人三枝国際特許事務所

(72)【発明者】

【氏名】永田 龍

(72)【発明者】

【氏名】日比野 浩

(72)【発明者】

【氏名】澤村 晴志朗

(72)【発明者】

【氏名】任 書晃

(72)【発明者】

【氏名】森 泰生

【審査官】長部 喜幸

(56)【参考文献】

【文献】特表平０８－５０６０９４（ＪＰ，Ａ）

【文献】国際公開第１９／２１５２６８（ＷＯ，Ａ１）

【文献】国際公開第１９／２０８８１２（ＷＯ，Ａ１）

【文献】米国特許出願公開第２０１９／０１６９１６８（ＵＳ，Ａ１）

【文献】米国特許出願公開第２００９／０２７０４１３（ＵＳ，Ａ１）

【文献】SEXTON, Jane E. et al.，The contribution of TRPC1, TRPC3, TRPC5 and TRPC6 to touch and hearing，Neuroscience Letters，2016年，Vol.610，pp.36-42

【文献】GOBIS, Katarzyna et al.，Synthesis and antibacterial activity of novel pyridine and pyrazine derivatives obtained from amidoximes，Journal of Heterocyclic Chemistry，2009年，Vol.46，No.6，pp.1271-1279

【文献】KIYONAKA, Shigeki et al.，Selective and direct inhibition of TRPC3 channels underlies biological activities of a pyrazole compound，Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America，2009年，Vol.106, No.13，pp.5400-5405

【文献】MUKHERJEA, Debashree et al.，Short interfering RNA against transient receptor potential vanilloid 1 attenuates cisplatin-induced Hearing Loss in the Rat，Journal of Neuroscience，2008年，Vol.28, No.49，pp.13056-13065

【文献】WAISSBLUTH, Sofia et al.，Cisplatin-induced ototoxicity: Transporters playing a role in cisplatin toxicity，Hearing Research，2013年，Vol.299，pp.37-45

(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)

Ａ６１Ｋ９／００－３３／４４

Ａ６１Ｋ４７／００－４７／６９

ＪＳＴＰｌｕｓ／ＪＭＥＤＰｌｕｓ／ＪＳＴ７５８０（ＪＤｒｅａｍＩＩＩ）

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

５－クロロ－６－（４－（４－（トリフルオロメチル）ベンゾ[ｄ]イソオキサゾール－３－イル）ピペラジン－１－イル）ニコチン酸またはその塩を含有する難聴の予防および／または治療用医薬組成物。

【請求項2】

経口投与用である請求項１に記載の医薬組成物。

【請求項3】

難聴が感音難聴である請求項１又は２に記載の医薬組成物。

【請求項4】

難聴が白金製剤に起因する難聴である請求項１～３のいずれかに記載の医薬組成物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、難聴の予防および／または治療用医薬組成物に関する。

【背景技術】

【0002】

聴覚は、外耳－中耳－内耳蝸牛－脳神経系から構成される一連の感覚知覚システムによって成り立っている。空気の振動である音は、外耳道を通って鼓膜を揺らし、中耳骨による機械的増幅を受けて内耳蝸牛に到達する。蝸牛では、音の振動という機械的信号が感覚細胞である有毛細胞によって電気信号に変換され、神経伝達を介して最終的に脳の聴覚野へと情報が伝えられる。この経路の構成要素が障害されると、音に対する知覚能力の低下、つまり難聴が引き起こされる。難聴は、内耳及び外耳伝達系の障害による伝音難聴と、内耳蝸牛から脳神経系の障害による感音難聴とに分類される。
難聴は、強大な音への暴露、遺伝、加齢などにより引き起こされるだけでなく、抗がん剤、特に白金製剤（シスプラチン、カルボプラチン、ネダプラチン、オキサリプラチン等）による副作用、抗生物質の副作用などによっても引き起こされる。
シスプラチン（CDDP；シス-ジアミンジクロロ白金(II)）は、がん、特に小児がんの治療に用いられるが、その副作用により難聴が生じることが知られている。一般的に、難聴の治療薬としては、ステロイドホルモン、ビタミンB12、ATP、血管拡張剤といった薬剤が使われるが、その効果について十分なエビデンスはなく、未だ議論の余地が残されている。そのため、効果的な治療薬の開発が待ち望まれている。

【0003】

TRP（Transient receptor potential）遺伝子は、１９８９年にショウジョウバエの光受容体応答変異株の原因遺伝子として同定された。その後の研究により、TRP遺伝子にコードされるタンパク質と相同性をもつタンパク質は哺乳類でも多く見出され、基本的に細胞膜において陽イオンチャネルとして機能する。TRPチャネルは莫大な機能的多様性を持つスーパーファミリーを形成しており、TRPA、TRPV、TRPM、TRPCなどのグループに分類される。TRPC（TRP classicまたはTRP canonical）グループはさらにTRPC1～C7のサブグループに分類される。

【0004】

TRPC3欠損マウスは圧負荷誘発性の心臓線維化に対して抵抗性を示すこと、およびTRPC3チャネル阻害剤であるPyr3投与によってマウスの圧負荷誘発性心臓線維化を強力に抑制することが知られている（非特許文献１、２）。また、TRPC6欠損マウスはブレオマイシン誘発肺線維化および片側尿管閉塞による腎間質線維化に対して抵抗性を示し（非特許文献３、４）、TRPC3およびTRPC6チャネルの阻害剤であるPyr2（BTP2）の投与により、マウス片側尿管閉塞による腎間質線維化を抑制する。

【0005】

TRPC3阻害作用および／またはTRPC6阻害作用を示す化合物としては、Pyr2（BTP2)、Pyr3、Pyr4、GSK2332255B、GSK2833503A、SAR7334、BI-749327等が報告されている（非特許文献５～１１）。また、US2019/0169168（特許文献１）にはTRPC6チャネルを阻害する作用を示す化合物が記載され、WO2019/215268（特許文献２）にはTRPC3チャネルおよびTRPC6チャネルを阻害する作用を示す化合物が記載されている。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0006】

【文献】US2019/0169168A1

【文献】WO2019/215268A1

【非特許文献】

【0007】

【文献】Numaga-Tomita, T. et al. TRPC3-GEF-H1 axis mediates pressure overload-induced cardiac fibrosis. Sci. Rep. 6, 39383; doi: 10.1038/srep39383 (2016).

【文献】Kitajima, N. et al. TRPC3 positively regulates reactive oxygen species driving maladaptive cardiac remodeling. Sci. Rep. 6, 37001 (2016).

【文献】Y.-L. Wu et al., Inhibition of TRPC6 channels ameliorates renal fibrosis and contributes to renal protection by soluble klotho,, Kidney Int. 2017 Apr;91(4):830-841.

【文献】K. Hofmann et al., Classical transient receptor potential 6 (TRPC6) channels support myofibroblast differentiation and development of experimental pulmonary fibrosis, Biochimica et Biophysica Acta, 2017; 1863: 560-568.

【文献】S. Kiyonaka et al., Selective and direct inhibition of TRPC3 channels underlies biological activities of a pyrazole compound, Proc. Nat. Acad. Sci., 2009; 106: 5400-5405.

【文献】T. Maier et al., Discovery and pharmacological characterization of a novel potent inhibitor of diacylglycerol-sensitive TRPC cation channels, Br. J. Pharmacol., 2015; 172: 3650-3660.

【文献】D. G. Washburn et al., The discovery of potent blockers of the canonical transient receptor channels, TRPC3 and TRPC6, based on an anilino-thiazole pharmacophore, Bioorg. Med. Chem. Lett., 2013; 23: 4979-4984.

【文献】C. Qu et al., Pyrazolopyrimidines as Potent Stimulators for Transient Receptor Potential Canonical 3/6/7 Channels, J. Med. Chem., 2017; 60: 4680-4692.

【文献】G. Guedes et al., Intensified Microwave-Assisted N-Acylation Procedure - Synthesis and Activity Evaluation of TRPC3 Channel Agonists with a 1,3-Dihydro-2H-benzo[d]imidazol-2-one Core, Synlett. 2017; 28: 695-700.

【文献】S. Sawamura et al., Screening of Transient Receptor Potential Canonical Channel Activators Identifies Novel Neurotrophic Piperazine Compounds, Mol Pharmacol., 2016; 89: 348-363.

【文献】B. L. Lin et al., In vivo selective inhibition of TRPC6 by antagonist BI 749327 ameliorates fibrosis and dysfunction in cardiac and renal disease, Proceedings of the National Academy of Sciences, May 2019; 116 (20): 10156-10161.

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0008】

難聴の予防および／または治療用医薬組成物の提供を課題とする。

【課題を解決するための手段】

【0009】

本発明者らは、上記課題を解決すべく、鋭意検討した結果、TRPC3チャネルおよびTRPC6チャネルからなる群から選択される少なくとも１種のTRPCチャネルの阻害活性を有する物質（本明細書中、「TRPC3/6チャネル阻害物質」と称することがある。）、例えば後述の、一般式（１）で表わされる化合物、（２）で表される化合物、Pyr2、Pyr3、Pyr4、GSK2332255B、GSK2833503A、SAR7334、BI-749327、US2019/0169168に開示された化合物（例えば化合物AA01～AA95等）、WO2019/215268に開示された化合物（例えば化合物BB01～BB32等）等、その塩、あるいはそれらのプロドラッグが難聴の予防および／または治療に有用であることを見出し、本発明を完成した。代表的な本発明は以下の通りである。

【0010】

項１．
一般式（１）

【化1】

【0011】

［式中、
Ａは、置換されていてもよいベンゼン環である。
Ｂは、置換されていてもよいアリールまたは置換されていてもよいヘテロアリールである。
Ｘは、酸素原子または硫黄原子である。
Ｙは、窒素原子または炭素原子である。

【化2】

Ｒ^１は、互いに独立して低級アルキルであるか、２個のＲ^１が互いに結合して、スピロ環または架橋構造を形成していてもよい、あるいは２個のＲ^１が互いに結合して、Ｙを含む環を構成する炭素原子および窒素原子と共に飽和縮合複素環を形成していてもよい。
ｐは、０、１、または２である。
あるいは、（Ｒ^１）_ｐはオキソである。］
で表される化合物、その塩、またはそのプロドラッグを含有する難聴の予防および／または治療用医薬組成物。

【0012】

項２．
一般式（１）において、Ｂが、置換されていてもよい単環のアリールあるいは置換されていてもよい単環または二環の含窒素ヘテロアリールである、項１に記載の医薬組成物。

【0013】

項３．
一般式（１）において、Ａが、下記Ａ－１）～Ａ－１６）：
Ａ－１）ハロゲン、
Ａ－２）水酸基、
Ａ－３）ニトロ、
Ａ－４）シアノ、
Ａ－５）カルボキシル、
Ａ－６）置換されていてもよいアミノ、
Ａ－７）置換されていてもよい環状アミノ、
Ａ－８）置換されていてもよい低級アルキル、
Ａ－９）置換されていてもよい低級アルコキシ、
Ａ－１０）低級アルコキシカルボニル、
Ａ－１１）低級アルキルスルホニル、
Ａ－１２）低級アルキルまたは低級アルキルスルホニルで置換されていてもよいカルバモイル、
Ａ－１３）置換されていてもよい環状アミノカルボニル、
Ａ－１４）低級アルキルで置換されていてもよいスルファモイル、
Ａ－１５）置換されていてもよい環状アミノスルホニル、および
Ａ－１６）テトラゾリル
からなる群より選択される少なくとも１種の基で置換されていてもよいベンゼン環である、項１または２に記載の医薬組成物。

【0014】

項４．
一般式（１）において、Ｂが、単環のアリールあるいは単環または二環のヘテロアリールであり、単環のアリールは下記Ｂ－１）～Ｂ－１６）からなる群より選択される少なくとも１種の基で置換されていてもよく、単環または二環のヘテロアリールは下記Ｂ－１）～Ｂ－１７）からなる群より選択される少なくとも１種の基で置換されていてもよい、項１～３のいずれかに記載の医薬組成物：
Ｂ－１）ハロゲン、
Ｂ－２）水酸基、
Ｂ－３）ニトロ、
Ｂ－４）シアノ、
Ｂ－５）カルボキシル
Ｂ－６）置換されていてもよいアミノ、
Ｂ－７）置換されていてもよい環状アミノ、
Ｂ－８）置換されていてもよい低級アルキル、
Ｂ－９）置換されていてもよい低級アルコキシ、
Ｂ－１０）低級アルコキシカルボニル、
Ｂ－１１）低級アルキルスルホニル、
Ｂ－１２）低級アルキルまたは低級アルキルスルホニルで置換されていてもよいカルバモイル、
Ｂ－１３）置換されていてもよい環状アミノカルボニル、
Ｂ－１４）低級アルキルで置換されていてもよいスルファモイル、
Ｂ－１５）置換されていてもよい環状アミノスルホニル、
Ｂ－１６）テトラゾリル、および
Ｂ－１７）オキソ。

【0015】

項５．
一般式（１）において、ベンゾイソオキサゾールまたはベンゾイソチアゾール骨格の４位が置換された、項１～４のいずれかに記載の医薬組成物。

【0016】

項６．
一般式（１）において、
Ｂが、置換されたピリジルまたは置換されたフェニルであって、Ｙと結合しているピリジンまたはベンゼン環上の炭素原子に対して少なくともオルト位の炭素原子が置換されている、
項１～３のいずれかに記載の医薬組成物。

【0017】

項７．
一般式（１）において、
Ａが、ハロゲン、低級アルコキシ、およびハロゲンで置換されていてもよい低級アルキル、からなる群より選択される少なくとも１種の基で置換されていてもよい、ベンゼン環であり、
Ｂが、ピリジルまたはフェニルであり、それぞれ下記Ｂ－１）、Ｂ－５）、Ｂ－８）、Ｂ－１０）、Ｂ－１２）、およびＢ－１３）：
Ｂ－１）ハロゲン、
Ｂ－５）カルボキシル、
Ｂ－８）置換されていてもよい低級アルキル、
Ｂ－１０）低級アルコキシカルボニル、
Ｂ－１２）低級アルキルまたは低級アルキルスルホニルで置換されていてもよいカルバモイル、および
Ｂ－１３）置換されていてもよい環状アミノカルボニル、
からなる群より選択される少なくとも１種の基で置換されていてもよく、
Ｒ^１は、互いに独立してＣ１～Ｃ３アルキルであるか、あるいは２個のＲ^１が互いに結合して、メチレン基、ジメチレン基、またはトリメチレン基であり、
あるいは、（Ｒ^１）_ｐはオキソである、
項１～４のいずれかに記載の医薬組成物。

【0018】

項８．
一般式（１）で表される化合物が、一般式（１Ａ）

【化3】

【0019】

［式中、
Ｚは、窒素原子またはＣＨである。
Ｙは、窒素原子または炭素原子である。

【化4】

Ｒ^１１は、互いに独立して、メチルまたはエチルであるか、あるいは２個のＲ^１１が互いに結合して、メチレン、ジメチレン、またはトリメチレンによる架橋構造を形成していてもよい。
ｐは、０、１、または２である。
あるいは、（Ｒ^１１）_ｐはオキソである。
Ｒ^２１、Ｒ^２２、およびＲ^２３は、互いに独立して、水素原子、ハロゲン、カルバモイル、またはトリフルオロメチルである。
Ｒ^３１、Ｒ^３２、およびＲ^３３は、互いに独立して、水素原子、ハロゲン、ハロゲンで置換された低級アルキル、メチル、カルボキシル、低級アルコキシカルボニル、モノメチルアミノカルボニル、またはジメチルアミノカルボニルである。］
で表される化合物である、
項１～４および７のいずれかに記載の医薬組成物。

【0020】

項９．
一般式（１Ａ）において、
Ｒ^２１が、塩素原子またはトリフルオロメチルであり、
Ｒ^２２およびＲ^２３が、水素原子であり、
Ｒ^３１が、塩素原子であり、
Ｒ^３２が、水素原子であり、
Ｒ^３３が、水素原子、カルボキシル、または低級アルコキシカルボニルである、
項８に記載の医薬組成物。

【0021】

項１０．
化合物が、化合物０１１、化合物０２１、化合物０３１、化合物０４１、化合物０６１、化合物０７１、化合物０８１、化合物０９１、化合物１０１、化合物１１１、化合物１２１、化合物１３１、化合物１４１、化合物１５１、化合物１６１、化合物１７１、化合物１９１、化合物２２１、化合物２８１、化合物３１１、化合物３２１、化合物３３１、化合物３４１、化合物３５１、化合物３６１、化合物３７１、化合物３８１、化合物３９１、化合物４０１、または化合物４３１である、項１～４のいずれかに記載の医薬組成物。

【0022】

項１１．
一般式（２）

【化5】

【0023】

［式中、
Ａは、置換されていてもよいベンゼン環である。
Ｂは、置換されていてもよいアリールまたは置換されていてもよいヘテロアリールである。
Ｙは、窒素原子または炭素原子である。

【化6】

Ｒ^１は、互いに独立して低級アルキルであるか、２個のＲ^１が互いに結合して、スピロ環または架橋構造を形成していてもよい、あるいは２個のＲ^１が互いに結合して、Ｙを含む環を構成する炭素原子および窒素原子と共に飽和縮合複素環を形成していてもよい。
ｐは、０、１、または２である。
あるいは、（Ｒ^１）_ｐはオキソである。］
で表される化合物、その塩、またはそのプロドラッグを含有する難聴の予防および／または治療用医薬組成物。

【0024】

項１２．
TRPC3チャネルおよびTRPC6チャネルからなる群から選択される少なくとも１種のTRPCチャネルの阻害活性を有する物質、その塩、またはそのプロドラッグを含有する難聴の予防および／または治療用医薬組成物。

【0025】

項１３．
TRPC3チャネルおよびTRPC6チャネルからなる群から選択される少なくとも１種のTRPCチャネルの阻害活性を有する物質が、一般式（１）で表される化合物、一般式（２）で表わされる化合物、Pyr2、Pyr3、Pyr4、GSK2332255B、GSK2833503A、SAR7334、BI-749327、下に列挙された化合物AA01～AA95、および下に列挙された化合物BB01～BB32からなる群から選択される少なくとも１種の化合物である、項１２に記載の医薬組成物。
化合物AA01：
（4-（6-アミノ-4-メトキシ-ピリジン-3-イル）-ピペラジン-1-イル）-（5-（4-フルオロ-フェノキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA02：
（6-アミノ-4-メチル-3',4',5',6'-テトラヒドロ-2'H-（3,4'）ビピリジニル-1'-イル）-（5-（4-フルオロ-フェノキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA03：
（6-アミノ-3',4',5',6'-テトラヒドロ-2'H-（3,4'）ビピリジニル-1'-イル）-（4-メトキシ-5-フェノキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA04：
（6-アミノ-4-メトキシ-3',4',5',6'-テトラヒドロ-2'H-（3,4'）ビピリジニル-1'-イル）-（5-（4-フルオロ-フェノキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA05：
（4-（6-アミノ-4-メトキシ-ピリジン-3-イル）-ピペラジン-1-イル）-（4-メトキシ-5-フェノキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA06：
（4-（6-アミノ-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル）-（5-（4-イソプロポキシ-フェノキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA07：
（（R）-4-（6-アミノ-4-メチル-ピリジン-3-イル）-2-ヒドロキシメチル-ピペラジン-1-イル）-（5-（4-フルオロ-フェノキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA08：
（7-（6-アミノ-4-メトキシ-ピリジン-3-イル）-4,7-ジアザ-スピロ（2.5）オクト-4-イル）-（4-メトキシ-5-フェノキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA09：
（7-（6-アミノ-4-メトキシ-ピリジン-3-イル）-4,7-ジアザ-スピロ（2.5）オクト-4-イル）-（5-（4-フルオロ-フェノキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA10：
（6-アミノ-4-メチル-3',4',5',6'-テトラヒドロ-2'H-（3,4'）ビピリジニル-1'-イル）-（4-メトキシ-5-フェノキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA11：
（4-（6-アミノ-5-メトキシ-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル）-（5-（4-フルオロ-フェノキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA12：
（4-（6-アミノ-ピリジン-3-イル）-ピペラジン-1-イル）-（4-メトキシ-5-（4-メトキシ-フェノキシ）-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA13：
（4-（6-アミノ-ピリジン-3-イル）-ピペラジン-1-イル）-（5-（4-フルオロ-フェノキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA14：
（6-アミノ-3',4',5',6'-テトラヒドロ-2'H-（3,4'）ビピリジニル-1'-イル）-（5-（4-フルオロ-フェノキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA15：
（4-（6-アミノ-ピリジン-3-イル）-ピペラジン-1-イル）-（4-メトキシ-5-フェノキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA16：
（4-（6-アミノ-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル）-（4-メトキシ-5-フェノキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA17：
（4-（6-アミノ-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル）-（5-（4-フルオロ-フェノキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA18：
（（R）-4-（6-アミノ-4-メチル-ピリジン-3-イル）-2-ヒドロキシメチル-ピペラジン-1-イル）-（4-メトキシ-5-フェノキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA19：
（6-アミノ-4-メトキシ-3',4',5',6'-テトラヒドロ-2'H-（3,4'）ビピリジニル-1'-イル）-（5-（2-フルオロ-ベンジルオキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA20：
（（R）-4-（6-アミノ-ピリジン-3-イル）-2-ヒドロキシメチル-ピペラジン-1-イル）-（5-（4-フルオロ-フェノキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA21：
（4-（6-アミノ-5-メトキシ-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル）-（4-メトキシ-5-フェノキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA22：
（6-アミノ-3',4',5',6'-テトラヒドロ-2'H-（3,4'）ビピリジニル-1'-イル）-（4-メトキシ-5-（4-メトキシ-フェノキシ）-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA23：
（6-アミノ-4-メトキシ-3',4',5',6'-テトラヒドロ-2'H-（3,4'）ビピリジニル-1'-イル）-（4-メトキシ-5-フェノキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA24：
（6-アミノ-4-メトキシ-3',4',5',6'-テトラヒドロ-2'H-（3,4'）ビピリジニル-1'-イル）-（4-メトキシ-5-（4-トリフルオロメチル-フェノキシ）-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA25：
（4-（6-アミノ-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル）-（5-シクロブチルメトキシ-4-メトキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA26：
（6-アミノ-4-メトキシ-3',4',5',6'-テトラヒドロ-2'H-（3,4'）ビピリジニル-1'-イル）-（4-メトキシ-5-（1-メチル-シクロプロピルメトキシ）-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA27：
（（R）-4-（6-アミノ-4-メトキシ-ピリジン-3-イル）-2-メトキシメチル-ピペラジン-1-イル）-（4-メトキシ-5-フェノキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA28：
（6-アミノ-4-メトキシ-3',4',5',6'-テトラヒドロ-2'H-（3,4'）ビピリジニル-1'-イル）-（4-メトキシ-5-（4-メトキシ-フェノキシ）-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA29：
（4-（6-アミノ-4-メチル-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル）-（5-（4-フルオロ-フェノキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA30：
（6-アミノ-4-メトキシ-3',4',5',6'-テトラヒドロ-2'H-（3,4'）ビピリジニル-1'-イル）-（5-シクロヘキシルオキシ-4-メトキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA31：
（4-（6-アミノ-4-メチル-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル）-（4-メトキシ-5-フェノキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA32：
（6-アミノ-4-メトキシ-3',4',5',6'-テトラヒドロ-2'H-（3,4'）ビピリジニル-1'-イル）-（5-（4-フルオロ-ベンジルオキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA33：
（4-（6-アミノ-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル）-（4-メトキシ-5-（4-トリフルオロメチル-フェノキシ）-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA34：
（4-（6-アミノ-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル）-（5-（4-クロロ-フェノキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA35：
（6-アミノ-4-メトキシ-3,4,5,6'-テトラヒドロ-2'H-（3,4'）ビピリジニル-1'-イル）-（5-シクロペンチルオキシ-4-メトキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA36：
（4-（6-アミノ-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル）-（5-イソブトキシ-4-メトキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA37：
（6-アミノ-4-メトキシ-3',4',5',6'-テトラヒドロ-2'H-（3,4'）ビピリジニル-1'-イル）-（5-シクロプロピルメトキシ-4-メトキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA38：
（3-（6-アミノ-4-メトキシ-ピリジン-3-イル）-3,8-ジアザ-ビシクロ（3.2.1）オクト-8-イル）-（5-（4-フルオロ-フェノキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA39：
（6-アミノ-4-メトキシ-3',4',5',6'-テトラヒドロ-2'H-（3,4'）ビピリジニル-1'-イル）-（5-イソブトキシ-4-メトキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA40：
（4-（6-アミノ-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル）-（5-（4-シクロプロポキシ-フェノキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA41：
（4-（6-アミノ-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル）-（5-（4-フルオロ-ベンジルオキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA42：
（（R）-4-（6-アミノ-4-メトキシ-ピリジン-3-イル）-2-ヒドロキシメチル-ピペラジン-1-イル）-（5-（4-フルオロ-フェノキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA43：
（6-アミノ-4-メトキシ-3',4',5',6'-テトラヒドロ-2'H-（3,4'）ビピリジニル-1'-イル）-（5-ベンジルオキシ-4-メトキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA44：
（4-（6-アミノ-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル）-（4-メトキシ-5-（4-メトキシ-フェノキシ）-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA45：
（6-アミノ-4-メトキシ-3',4',5',6'-テトラヒドロ-2'H-（3,4'）ビピリジニル-1'-イル）-（5-（3,3-ジフルオロ-シクロブチルメトキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA46：
（6-アミノ-4-メトキシ-3',4',5',6'-テトラヒドロ-2'H-（3,4'）ビピリジニル-1'-イル）-（4-メトキシ-5-プロポキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA47：
（4-（6-アミノ-4-メトキシ-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル）-（4-メトキシ-5-フェノキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA48：
（6-アミノ-4-メトキシ-3',4',5',6'-テトラヒドロ-2'H-（3,4'）ビピリジニル-1'-イル）-（5-（2-シクロプロピル-エトキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA49：
（4-（6-アミノ-4-メトキシ-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル）-（5-（4-フルオロ-フェノキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA50：
（1R）-1-（（2R）-4-（6-アミノ-4-メトキシピリジン-3-イル）-1-（5-フェノキシピリジン-2-カルボニル）ピペラジン-2-イル）エタン-1-オール、
化合物AA51：
（3-（6-アミノ-4-メトキシ-ピリジン-3-イル）-3,8-ジアザ-ビシクロ（3.2.1）オクト-8-イル）-（4-メトキシ-5-フェノキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA52：
（6-アミノ-4-メトキシ-3',4',5',6'-テトラヒドロ-2'H-（3,4'）ビピリジニル-1'-イル）-（4-メトキシ-5-フェネチルオキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA53：
（6-アミノ-4-メトキシ-3',4',5',6'-テトラヒドロ-2'H-（3,4'）ビピリジニル-1'-イル）-（5-シクロブチルメトキシ-4-メトキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA54：
（4-（6-アミノ-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル）-（5-（4-ジフルオロメトキシ-フェノキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA55：
（（R）-4-（6-アミノ-4-メトキシ-ピリジン-3-イル）-2-メトキシメチル-ピペラジン-1-イル）-（5-（4-フルオロ-フェノキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA56：
（4-（6-アミノ-4-メトキシ-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル）-（4-メトキシ-5-（4-トリフルオロメチル-フェノキシ）-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA57：
（4-（6-アミノ-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル）-（5-（2-フルオロ-ベンジルオキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA58：
（1S）-1-（（2R）-4-（6-アミノ-4-メトキシピリジン-3-イル）-1-（5-フェノキシピリジン-2-カルボニル）ピペラジン-2-イル）エタン-1-オール、
化合物AA59：
（6-アミノ-4-メトキシ-3',4',5',6'-テトラヒドロ-2'H-（3,4'）ビピリジニル-1'-イル）-（5-（2,2-ジメチル-プロポキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA60：
（4-（6-アミノ-5-メトキシ-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル）-（4-メトキシ-5-（4-メトキシ-フェノキシ）-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA61：
（4-（6-アミノ-4-メトキシ-ピリジン-3-イル）-ピペラジン-1-イル）-（5-シクロプロピルメトキシ-4-メトキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA62：
（4-（6-アミノ-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル）-（5-シクロヘキシルオキシ-4-メトキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA63：
（（S）-4-（6-アミノ-4-メトキシ-ピリジン-3-イル）-2-ヒドロキシメチル-ピペラジン-1-イル）-（5-（4-フルオロ-フェノキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA64：
（6-アミノ-4-メトキシ-3',4',5',6'-テトラヒドロ-2'H-（3,4'）ビピリジニル-1'-イル）-（5-（1-フルオロメチル-シクロプロピルメトキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA65：
（6-アミノ-4-メトキシ-3',4',5',6'-テトラヒドロ-2'H-（3,4'）ビピリジニル-1'-イル）-（5-エトキシ-4-メトキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA66：
（4-（6-アミノ-4-メトキシ-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル）-（4-メトキシ-5-（4-メトキシ-フェノキシ）-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA67：
（4-（6-アミノ-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル）-（5-（2-シクロプロピル-エトキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA68：
（7-（6-アミノ-4-メトキシ-ピリジン-3-イル）-3-オキサ-9-アザ-ビシクロ（3.3.1）ノン-9-イル）-（4-メトキシ-5-フェノキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA69：
（（R）-4-（6-アミノ-4-メトキシ-ピリジン-3-イル）-2-ヒドロキシメチル-ピペラジン-1-イル）-（4-メトキシ-5-フェノキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA70：
（6-アミノ-4-メトキシ-3',4',5',6'-テトラヒドロ-2'H-（3,4'）ビピリジニル-1'-イル）-（5-（（S）-1-シクロプロピル-エトキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA71：
（（S）-4-（6-アミノ-4-メトキシ-ピリジン-3-イル）-2-ヒドロキシメチル-ピペラジン-1-イル）-（4-メトキシ-5-フェノキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA72：
（6-アミノ-4-メトキシ-3',4',5',6'-テトラヒドロ-2'H-（3,4'）ビピリジニル-1'-イル）-（5-イソプロポキシ-4-メトキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA73：
（4-（6-アミノ-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル）-（4-メトキシ-5-フェネチルオキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA74：
（4-（6-アミノ-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル）-（5-（2,2-ジメチル-プロポキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA75：
（4-（6-アミノ-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル）-（4-メトキシ-5-（1-メチル-シクロプロピルメトキシ）-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA76：
（4-（6-アミノ-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル）-（4-メトキシ-5-プロポキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA77：
（6-アミノ-4-メトキシ-3',4',5',6'-テトラヒドロ-2'H-（3,4'）ビピリジニル-1'-イル）-（5-（（R）-1-シクロプロピル-エトキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA78：
（4-（6-アミノ-4-メチル-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル）-（5-シクロプロピルメトキシ-4-メトキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA79：
（4-（6-アミノ-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル）-（5-（（S）-1-シクロプロピル-エトキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA80：
（4-（6-アミノ-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル）-（4-メトキシ-5-（4-トリフルオロメトキシ-フェノキシ）-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA81：
（（R）-4-（6-アミノ-ピリジン-3-イル）-2-ヒドロキシメチル-ピペラジン-1-イル）-（4-メトキシ-5-フェノキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA82：
（（R）-4-（6-アミノ-ピリジン-3-イル）-2-ヒドロキシメチル-ピペラジン-1-イル）-（4-メトキシ-5-（4-メトキシ-フェノキシ）-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA83：
（4-（6-アミノ-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル）-（5-（フェノキシ）-4-エトキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA84：
（6-アミノ-4-シクロプロポキシ-3',4',5',6'-テトラヒドロ-2'H-（3,4'）ビピリジニル-1'-イル）-（5-（フェノキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA85：
（4-（6-アミノ-4-エトキシ-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル）-（4-メトキシ-5-（フェノキシ）-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA86：
（6-アミノ-4-プロポキシ-3',4',5',6'-テトラヒドロ-2'H-（3,4'）ビピリジニル-1'-イル）-（5-（フェノキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA87：
（6-アミノ-4-エトキシ-3',4',5',6'-テトラヒドロ-2'H-（3,4'）ビピリジニル-1'-イル）-（5-（4-トリフルオロメチル-フェノキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA88：
（4-（6-アミノ-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル）-（5-（4-フルオロ-フェノキシ）-4-エトキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA89：
（3-（6-アミノ-ピリダジン-3-イル）-8-アザ-ビシクロ（3.2.1）オクト-8-イル）-（4-エトキシ-5-（4-フルオロ-フェノキシ）-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA90：
6-{1-{4-メトキシ-5-（4-（トリフルオロメチル）フェノキシ）ピリジン-2-カルボニル}ピペリジン-4-イル）-5-メチルピリダジン-3-アミン、
化合物AA91：
5-メトキシ-6-（1-{5-（4-（トリフルオロメチル）-フェノキシ）-ピリジン-2-カルボニル}ピペリジン-4-イル）-ピリダジン-3-アミン、
化合物AA92：
4-メトキシ-5-（1-（4-メトキシ-5-{（トランス-3-（トリフルオロメチル）シクロブチル）-メトキシ}ピリジン-2-カルボニル）-ピペリジン-4-イル）ピリジン-2-アミン、
化合物AA93：
4-メトキシ-5-（1-（4-メトキシ-5-{（（シス-3-（トリフルオロメチル）-シクロブチル）メトキシ}-ピリジン-2-カルボニル）ピペリジン-4-イル）ピリジン-2-アミン、
化合物AA94：
4-メトキシ-5-（1-{4-メトキシ-5-（（2）-3,3,3-トリフルオロ-2-メチルプロポキシ）-ピリジン-2-カルボニル}ピペリジン-4-イル）ピリジン-2-アミン、
化合物AA95：
5-{1-{5-（（2,2-ジフルオロシクロブチル）-メトキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-カルボニル}-ピペリジン-4-イル）-4-メトキシピリジン-2-アミン、
化合物BB01：
1-（4-(4-フルオロフェニル)-2-(トリアゾール-2-イル)シクロペンチル）ピペリジン-3-アミン、
化合物BB02：
1-（2-(3-アミノ-1-ピペリジル)-4-(4-フルオロフェニル)シクロペンチル）ピラゾール-4-カルボニトリル、
化合物BB03：
1-（2-(3-アミノ-1-ピペリジル)-4-(4-フルオロフェニル)シクロペンチル）ピラゾール-3-カルボニトリル、
化合物BB04：
1-（2-(3-アミノ-1-ピペリジル)-4-(4-フルオロフェニル)シクロペンチル）ピロール-3-カルボニトリル、
化合物BB05：
1-（2-(3-アミノ-1-ピペリジル)-4-(4-フルオロフェニル)シクロペンチル）トリアゾール-4-カルボニトリル、
化合物BB06：
1-（2-(3-アミノ-5-フルオロ-1-ピペリジル)-4-(4-フルオロフェニル)シクロペンチル）ピラゾール-4-カルボニトリル、
化合物BB07：
1-（2-(3-アミノ-4,4-ジフルオロ-1-ピペリジル)-4-(4-フルオロフェニル)シクロペンチル）ピラゾール-4-カルボニトリル、
化合物BB08：
1-（4-(4-フルオロフェニル)-2-ピラゾール-1-イル-シクロペンチル）ピペリジン-3-アミン、
化合物BB09：
5-フルオロ-1-（4-(4-フルオロフェニル)-2-ピラゾール-1-イル-シクロペンチル）ピペリジン-3-アミン、
化合物BB10：
5-フルオロ-1-（4-(4-フルオロフェニル)-2-(1,2,4-トリアゾール-1-イル)シクロペンチル）ピペリジン-3-アミン、
化合物BB11：
5-フルオロ-1-（4-(4-フルオロフェニル)-2-(テトラゾール-2-イル)シクロペンチル）ピペリジン-3-アミン、
化合物BB12：
1-（4-(4-フルオロフェニル)-2-(テトラゾール-2-イル)シクロペンチル）ピペリジン-3-アミン、
化合物BB13：
1-（2-(3-アミノ-1-ピペリジル)-4-(4-フルオロフェニル)シクロペンチル）-1,2,4-トリアゾール-3-カルボニトリル、
化合物BB14：
4-（2-(3-アミノ-1-ピペリジル)-4-(4-フルオロ-3-ヒドロキシ-フェニル)シクロペントキシ）ベンゾニトリル、
化合物BB15：
4-（2-(3-アミノ-1-ピペリジル)-4-(4-フルオロ-3-メトキシ-フェニル)シクロペントキシ）ベンゾニトリル、
化合物BB16：
4-（2-(3-アミノ-1-ピペリジル)-4-(3-フルオロフェニル)シクロペントキシ）-3-クロロ-ベンゾニトリル、
化合物BB17：
4-（2-(3-アミノ-4,4-ジフルオロ-1-ピペリジル)-4-(4-フルオロフェニル)シクロペントキシ）ベンゾニトリル、
化合物BB18：
4-（2-(5-アミノ-3,3-ジフルオロ-1-ピペリジル)-4-(4-フルオロフェニル)シクロペントキシ）ベンゾニトリル、
化合物BB19：
4-（2-(3-アミノ-1-ピペリジル)-4-(4-フルオロフェニル)シクロペントキシ）-2-フルオロ-ベンゾニトリル、
化合物BB20：
2-（2-(3-アミノ-1-ピペリジル)-4-フェニル-シクロペントキシ）ベンゾニトリル、
化合物BB21：
4-（2-(3-アミノ-1-ピペリジル)-4-フェニル-シクロペントキシ）-3-クロロ-ベンゾニトリル、
化合物BB22：
6-（2-(3-アミノ-5-フルオロ-1-ピペリジル)-4-(4-フルオロフェニル)シクロペントキシ）-5-メチル-ピリダジン-3-カルボニトリル、
化合物BB23：
1-（2-(4-クロロピリダジン-3-イル)オキシ-4-(4-フルオロフェニル)シクロペンチル）ピペリジン-3-アミン、
化合物BB24：
6-（2-(3-アミノ-5-フルオロ-1-ピペリジル)-4-(4-フルオロフェニル)シクロペントキシ）ピリダジン-3-カルボニトリル、
化合物BB25：
1-（4-(4-フルオロフェニル)-2-(5-フルオロピリダジン-3-イル)オキシ-シクロペンチル）ピペリジン-3-アミン、
化合物BB26：
6-(2-((R)-3-アミノピペリジン-1-イル)-4-(4-フルオロフェニル)シクロペンチルオキシ)ニコチノニトリル、
化合物BB27：
6-（2-(3-アミノ-1-ピペリジル)-4-(4-フルオロフェニル)シクロペントキシ）ピリジン-3-カルボニトリル、
化合物BB28：
1-（4-(4-フルオロフェニル)-2-ピリダジン-3-イルオキシ-シクロペンチル）ピペリジン-3-アミン、
化合物BB29：
5-フルオロ-1-（4-(4-フルオロフェニル)-ピリミジン-4-イルオキシ-シクロペンチル）ピペリジン-3-アミン、
化合物BB30：
2-（2-(3-アミノ-1-ピペリジル)-4-(4-フルオロフェニル)シクロペントキシ）ピリミジン-5-カルボニトリル、
化合物BB31：
5-（2-(3-アミノ-1-ピペリジル)-4-(4-フルオロフェニル)シクロペントキシ）ピラジン-2-カルボニトリル、
化合物BB32：
5-（2-(3-アミノ-1-ピペリジル)-4-(4-フルオロフェニル)シクロペントキシ）ピリミジン-2-カルボニトリル。

【0026】

項１４．
経口投与用である項１～１３のいずれかに記載の医薬組成物。

【0027】

項１５．
難聴が感音難聴である項１～１４のいずれかに記載の医薬組成物。

【0028】

項１６．
難聴が薬剤に起因する難聴である項１～１５のいずれかに記載の医薬組成物。

【発明の効果】

【0029】

本発明で開示される医薬組成物は、TRPC3チャネルおよびTRPC6チャネルからなる群から選択される少なくとも１種のTRPCチャネルの阻害活性を有する物質（例えば一般式（１）で表される化合物、一般式（２）で表される化合物、Pyr2、Pyr3、Pyr4、GSK2332255B、GSK2833503A、SAR7334、BI-749327、US2019/0169168に開示された化合物、WO2019/215268に開示された化合物等）、その塩、あるいはそれらのプロドラッグを含有することにより難聴の予防又は治療作用を有する。
TRPC3/6チャネル阻害物質、例えば一般式（１）または（２）で表される化合物等は、TRPCチャネル、例えばTRPC3および／またはTRPC6チャネル、好ましくはTRPC6チャネルの活性を阻害する活性を有し、そのため、TRPC関連疾患、例えばTRPC3チャネルの活性に起因する疾患、TRPC6チャネルの活性に起因する疾患、またはTRPC3チャネルの活性とTRPC6チャネルの活性の両方に起因する疾患（本明細書において、これらを総称して「TRPC3および／またはTRPC6関連疾患」と称することがある。）、特に難聴の予防および／または治療に有用である。

【図面の簡単な説明】

【0030】

【図1】図１は試験例１において得られた、TRPC6発現細胞内におけるカルシウムイオン濃度変化の測定結果を示すグラフである。横軸は時間（秒）、縦軸は細胞内カルシウムイオン濃度（［Ca^２＋］i（nM））である。

【図2】図２は試験例１において得られた、TRPC3発現細胞内におけるカルシウムイオン濃度変化の測定結果を示すグラフである。横軸は時間（秒）、縦軸は細胞内カルシウムイオン濃度（［Ca^２＋］i（nM））である。

【図3】図３は試験例２において得られた、TRPC6発現細胞内におけるカルシウムイオン増加量を示すグラフである。縦軸の単位は「％」である。

【図4】図４は試験例３において得られた、TRPC6発現細胞内におけるカルシウムイオン増加量を示すグラフである。縦軸の単位は「％」である。

【図5】図５は試験例４において得られた、TRPC6発現細胞の電気生理的評価を示すグラフである。本図中、左側のグラフの縦軸は電流（nA）であり横軸は時間（秒）である。また、右側のグラフ中のａ、ｂは、各々、左側のグラフ中のａ、ｂの時点の電流－電圧特性カーブを示す。

【図6】図６は試験例５のウエスタンブロットの結果を表す写真である。

【図7】図７は試験例６において皮膚線維芽細胞を用いて得られた免疫蛍光染色法によるα-SMA発現を表すグラフである。グラフの縦軸は蛍光強度（／ピクセル）である。

【図8】図８は試験例６において心線維芽細胞を用いて得られた免疫蛍光染色法によるα-SMA発現を表すグラフである。グラフの縦軸は蛍光強度（／ピクセル）である。

【図9】図９は試験例７において測定された聴覚閾値を表すグラフである。

【図10】図１０は試験例７において測定された各波長（Ｈｚ）における聴覚閾値の変動量（ｄＢ）を表すグラフである。

【図11】図１１は試験例８において測定された血漿白金濃度（ng/ml）を表わすグラフである。

【図12】図１２は試験例９において測定されたゼブラフィッシュのニューロマスト数を表わすグラフである。

【発明を実施するための形態】

【0031】

本発明の一実施形態は、下記一般式（１）で表される化合物、その塩、またはそのプロドラッグを含有する難聴の予防および／または治療用医薬組成物である。

【0032】

一般式（１）

【化7】

【0033】

［式中、
Ａは、置換されていてもよいベンゼン環である。
Ｂは、置換されていてもよいアリールまたは置換されていてもよいヘテロアリールである。
Ｘは、酸素原子または硫黄原子である。
Ｙは、窒素原子または炭素原子である。

【化8】

Ｒ^１は、互いに独立して低級アルキルであるか、２個のＲ^１が互いに結合して、スピロ環または架橋構造を形成していてもよい、あるいは２個のＲ^１が互いに結合して、Ｙを含む環を構成する炭素原子および窒素原子と共に飽和縮合複素環を形成していてもよい。
ｐは、０、１、または２である。
あるいは、
（Ｒ^１）_ｐはオキソである。］

【0034】

本発明において、「置換されていてもよいベンゼン環」の置換基としては、例えばハロゲン；水酸基；ニトロ；シアノ；カルボキシル；置換されていてもよいアミノ；置換されていてもよい環状アミノ；置換されていてもよい低級アルキル；置換されていてもよい低級アルコキシ；低級アルコキシカルボニル；低級アルキルスルホニル；低級アルキルまたは低級アルキルスルホニルで置換されていてもよいカルバモイル；置換されていてもよい環状アミノカルボニル；低級アルキルで置換されていてもよいスルファモイル；置換されていてもよい環状アミノスルホニル；テトラゾリル等が挙げられる。置換基は、１種単独でも２種以上でもよい。

【0035】

本発明において、「アリール」としては、例えば、単環または二環のアリールが挙げられ、具体的には、フェニル、ナフチル等が挙げられる。

【0036】

本発明において、「置換されていてもよいアリール」におけるアリールは上記で定義したとおりである。置換されていてもよいアリールの置換基としては、例えばハロゲン；水酸基；ニトロ；シアノ；カルボキシル；置換されていてもよいアミノ；置換されていてもよい環状アミノ；置換されていてもよい低級アルキル；置換されていてもよい低級アルコキシ；低級アルコキシカルボニル；低級アルキルスルホニル；低級アルキルまたは低級アルキルスルホニルで置換されていてもよいカルバモイル；置換されていてもよい環状アミノカルボニル；低級アルキルで置換されていてもよいスルファモイル；置換されていてもよい環状アミノスルホニル；テトラゾリル；オキソ等が挙げられる。置換基は１種単独でも２種以上でもよい。

【0037】

本発明において、「オキソ」は「＝Ｏ」で表される基である。

【0038】

本発明において、「ヘテロアリール」としては、例えば、単環または二環の含窒素ヘテロアリールが挙げられ、具体的には、１個以上（例えば１～３個、１または２個、１個）の窒素原子を環上に含み、さらに他のヘテロ原子として硫黄原子または酸素原子を１個以上（例えば１～３個、１または２個、１個）含んでいてもよい、単環または二環の含窒素ヘテロアリールが挙げられる。具体的なヘテロアリールとしては、ピロリル、イミダゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、ピラゾリル、ピリジル、ピラジニル、ピリミジニル、ピリダジニル、フリル、チエニル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、フラザニル、オキサジアゾリル、チアジアゾリル、インドリル、イソインドリル、ベンゾフラニル、イソベンゾフラニル、ベンゾチエニル、イソベンゾチエニル、インダゾリル、キノリル、イソキノリル、プリニル、フタラジニル、プテリジル、ナフチリジニル、キノキサリニル、キナゾリニル、シンノリニル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾフラザニル、ベンゾチアジアゾリル、ベンゾトリアゾリル、イソオキサゾロ［４，５－ｄ］ピリダジル、ベンゾイソオキサゾリル、ベンゾイソチアゾリル等がげられる。好ましくは、単環の含窒素ヘテロアリールまたはベンゾイミダゾリルである。

【0039】

本発明において、「置換されていてもよいヘテロアリール」におけるヘテロアリールは上記で定義したとおりである。置換されていてもよいヘテロアリールの置換基としては、例えばハロゲン；水酸基；ニトロ；シアノ；カルボキシル；置換されていてもよいアミノ；置換されていてもよい環状アミノ；置換されていてもよい低級アルキル；置換されていてもよい低級アルコキシ；低級アルコキシカルボニル；低級アルキルスルホニル；低級アルキルまたは低級アルキルスルホニルで置換されていてもよいカルバモイル；置換されていてもよい環状アミノカルボニル；低級アルキルで置換されていてもよいスルファモイル；置換されていてもよい環状アミノスルホニル；テトラゾリル；オキソ等が挙げられる。置換基は１種単独でも２種以上でもよい。

【0040】

本発明において、「低級アルキル」としては、例えば、直鎖状、分枝状、または環状構造を含む、Ｃ１～Ｃ８アルキルが挙げられ、好ましくはＣ１～Ｃ６アルキル、より好ましくはＣ１～Ｃ４アルキル、特に好ましくはＣ１～Ｃ３アルキルである。具体的には、直鎖状または分枝状の低級アルキルとしては、メチル、エチル、１－プロピル、２－プロピル、１－ブチル、２－ブチル、イソブチル、ｔ－ブチル、ｎ－ペンチル、ネオペンチル、ｎ－ヘキシル、イソヘキシル、３－メチルペンチル等が挙げられ、環状構造を含む低級アルキルとしては、シクロプロピル、シクロプロピルメチル、シクロブチル、シクロブチルメチル、シクロペンチル、シクロペンチルメチル、シクロヘキシル、シクロヘキシルメチル、シクロヘキシルエチル等が挙げられる。好ましくは、メチル、エチル、２－プロピル、ｔ－ブチル、シクロプロピル等が挙げられる。

【0041】

本発明において、「ハロゲン」としては、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子等が挙げられ、好ましくはフッ素原子、塩素原子が挙げられる。

【0042】

本発明において、「置換されていてもよいアミノ」は置換されていてもよい非環状アミノをいい、その置換基としては、低級アルキル（例えばメチル、エチル、プロピル等）、Ｃ１～Ｃ８アシル（例えばアセチル、プロピオニル等）、アリール（例えば、フェニル等）、またはヘテロアリールが挙げられる。置換基は１種単独でも２種以上でもよい。好ましい置換されていてもよいアミノとしては、例えば、アミノ、メチルアミノ、ジメチルアミノ、エチルアミノ、ジエチルアミノ、シクロヘキシルアミノ、アセチルアミノ、ベンゾイルアミノ、フェニルアミノ等が挙げられる。

【0043】

本発明において、「環状アミノ」は、例えば、環構成原子として窒素原子を有し、さらに酸素原子を１個以上（例えば１～３個、１または２個、１個）含んでいてもよい５～７員の環状アミノであり、例えば、ピロリジノ、ピペリジノ、ピペラジノ、モルホリノ等が挙げられ、好ましくは、ピロリジノ、モルホリノ等が挙げられる。

【0044】

本発明において、「置換されていてもよい環状アミノ」における環状アミノは、上記で定義したとおりである。環状アミノの置換基としては、例えば、低級アルキル、低級アルコキシ、アミノ、水酸基、ニトロ、シアノ、カルボキシル、オキソ等が挙げられる。環状アミノは上記置換基からなる群より選択される少なくとも１種の基で置換されていてもよい。置換基の数としては、例えば０、１個、２個、３個があげられ、好ましくは０、１個、２個である。置換されていてもよい環状アミノとしては、具体的には、ピロリジノ、ピペリジノ、ピペラジノ、４－メチルピペリジノ、モルホリノ、２－ピロリドニル等が挙げられ、好ましくは、ピロリジノ、モルホリノ等が挙げられる。

【0045】

本発明において、「置換されていてもよい低級アルキル」における低級アルキルは上記で定義したとおりである。低級アルキルの置換基としては、例えば、水酸基；アミノ；Ｃ１～Ｃ８アルキルアミノ（例えばメチルアミノ、エチルアミノ、プロピルアミノ、ｔ－ブチルアミノ等）；Ｃ１～Ｃ８アルコキシ（例えばメトキシ、エトキシ、１－プロピルオキシ、２－プロピルオキシ、ｔ－ブチルオキシ等）；ハロゲン（例えばフッ素原子、塩素原子、臭素原子等）；ハロＣ１～Ｃ８アルコキシ（例えばトリフルオロメトキシ等）；脂肪族複素環基（例えばモルホリノ、ピペリジニル、ピロリジニル、４－メチル－１－ピペラジノ等）；アリール（例えばフェニル、１－ナフチル等）；ヘテロアリール（例えばピリジル、チエニル、フラニル等）；カルボキシル；Ｃ１～Ｃ８アルコキシカルボニル（例えばメトキシカルボニル、エトキシカルボニル、１－プロポキシカルボニル、２－プロポキシカルボニル、ｔ－ブトキシカルボニル等）；低級アルキルで置換されていてもよいカルバモイル（例えばカルバモイル、メチルアミノカルボニル、ジメチルアミノカルボニル、ジエチルアミノカルボニル等）；環状アミノカルボニル（例えばピロリジノカルボニル、ピペリジノカルボニル、モルホリノカルボニル等）等が挙げられる。好ましい置換基としてはメチルアミノ、エチルアミノ、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、メトキシ、エトキシ、２－プロピルオキシ、ｔ－ブトキシカルボニル、水酸基、フッ素原子、塩素原子、トリクロロメチル、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、モルホリノ、ピペリジノ、ピロリジノ、カルボキシル、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、モルホリノカルボニル、フェニル、ピリジル等が挙げられる。置換されていてもよい低級アルキルは、上記置換基からなる群より選択される少なくとも１種の基で置換されていてもよく、置換基の数としては、例えば０、１個、２個、３個が挙げられ、好ましくは０、１個、２個である。

【0046】

本発明において、「ハロゲンで置換された低級アルキル」はアルキルの水素が全てハロゲンで置換されたものをいう。ハロゲンで置換された低級アルキルにおけるハロゲンおよび低級アルキルは上記で定義したとおりである。アルキルを置換するハロゲンは同一であることが好ましい。ハロゲンで置換された低級アルキルとしては、トリクロロメチルまたはトリフルオロメチルが好ましく、トリフルオロメチルが好ましい。

【0047】

本発明において、「低級アルコキシ」としては、例えば、直鎖状、分枝状、または環状構造を含む、Ｃ１～Ｃ８アルコキシが挙げられ、好ましくはＣ１～Ｃ６アルコキシ、より好ましくはＣ１～Ｃ４アルコキシ、特に好ましくはＣ１～Ｃ３アルコキシである。具体的には、直鎖状または分枝状のアルコキシとしては、メトキシ、エトキシ、１－プロポキシ、２－プロポキシ、１－ブトキシ 、２－ブトキシ、イソブトキシ、ｔ－ブトキシ、ｎ－ペンチルオキシ、ネオペンチルオキシ、ｎ－ヘキシルオキシ、イソヘキシルオキシ、３－メチルペンチルオキシ等が挙げられる。環状構造を含むアルコキシとしては、シクロプロポキシ、シクロプロピルメトキシ、シクロブチロキシ、シクロブチルメトキシ、シクロペンチロキシ、シクロペンチルメトキシ、シクロヘキシロキシ、シクロヘキシルメトキシ、シクロヘキシルエトキシ等が挙げられる。好ましくは、メトキシ、エトキシ、２－プロポキシ、ｔ－ブトキシ、シクロプロポキシ等が挙げられる。

【0048】

本発明において、「置換されていてもよい低級アルコキシ」における低級アルコキシは上記で定義したとおりである。低級アルコキシの置換基としては、例えば、水酸基；アミノ；Ｃ１～Ｃ８アルキルアミノ（例えばメチルアミノ、エチルアミノ、プロピルアミノ、ｔ－ブチルアミノ等）；Ｃ１～Ｃ８アルコキシ（例えばメトキシ、エトキシ、１－プロピルオキシ、２－プロピルオキシ、ｔ－ブトキシ等）；ハロゲン（例えばフッ素原子、塩素原子、臭素原子等）；ハロＣ１～Ｃ８アルコキシ（例えばトリフルオロメトキシ等）；脂肪族複素環基（例えばモルホリノ、ピペリジニル、ピロリジニル、４－メチル－１－ピペラジノ等）；アリール（例えばフェニル、１－ナフチル等）；ヘテロアリール（例えばピリジル、チエニル、フラニル等）；カルボキシル；Ｃ１～Ｃ８アルコキシカルボニル（例えばメトキシカルボニル、エトキシカルボニル、１－プロピルオキシカルボニル、２－プロピルオキシカルボニル、ｔ－ブトキシカルボニル等）；低級アルキルで置換されていてもよいカルバモイル（例えばカルバモイル、メチルアミノカルボニル、ジメチルアミノカルボニル、ジエチルアミノカルボニル等）；環状アミノカルボニル（例えばピロリジノカルボニル、ピペリジノカルボニル、モルホリノカルボニル等）等が挙げられる。好ましい置換基としては、メチルアミノ、エチルアミノ、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、メトキシ、エトキシ、２－プロピルオキシ、ｔ－ブトキシカルボニル、水酸基、フッ素原子、塩素原子、トリフルオロ、モルホリノ、ピペリジノ、ピロリジノ、カルボキシル、メトキシカルボニル、モルホリノカルボニル、フェニル、ピリジル等が挙げられる。置換されていてもよい低級アルコキシは、上記置換基からなる群より選択される少なくとも１種の基で置換されていてもよく、置換基の数としては、例えば０、１個、２個、３個があげられ、好ましくは０、１個、２個である。

【0049】

本発明において、「低級アルコキシカルボニル」における低級アルコキシは上記で定義したとおりである。低級アルコキシカルボニルはカルボニルに上記の低級アルコキシが結合した基である。低級アルコキシカルボニルとしては、例えば、直鎖状、分枝状、または環状構造を含むＣ１～Ｃ８アルコキシカルボニルが挙げられる。具体的には、直鎖状または分枝状のアルコキシカルボニルとしては、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、１－プロポキシカルボニル、２－プロポキシカルボニル、１－ブトキシカルボニル、２－ブトキシカルボニル、イソブトキシカルボニル、ｔ－ブトキシカルボニル等が挙げられる。環状構造を含むＣ１～Ｃ８アルコキシカルボニルとしては、シクロプロポキシカルボニル、シクロプロピルメトキシカルボニル、シクロブチロキシカルボニル、シクロブチルメトキシカルボニル、シクロペンチロキシカルボニル、シクロペンチルメトキシカルボニル、シクロヘキシロキシカルボニル、シクロヘキシルメトキシカルボニル、シクロヘキシルエトキシカルボニル等が挙げられる。好ましい低級アルコキシカルボニルとしては、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、２－プロポキシカルボニル、シクロプロポキシカルボニル等が挙げられる。

【0050】

本発明において、「低級アルキルスルホニル」における低級アルキルは上記で定義したとおりである。低級アルキルスルホニルはスルホニルに上記の低級アルキルが結合した基である。低級アルキルスルホニルとしては、例えば、直鎖状、分枝状、または環状構造を含むＣ１～Ｃ８アルキルスルホニル等が挙げられ、具体的には、直鎖状または分枝状のアルキルスルホニルとしては、メタンスルホニル、エタンスルホニル、１－プロピルスルホニル、２－プロピルスルホニル、１－ブチルスルホニル、２－ブチルスルホニル、イソブチルスルホニル、ｔ－ブチルスルホニル等が挙げられる。環状構造を含むＣ１～Ｃ８アルキルスルホニルとしては、シクロプロピルスルホニル、シクロプロピルメチルスルホニル、シクロブチルスルホニル、シクロブチルメチルスルホニル、シクロペンチルスルホニル、シクロペンチルメチルスルホニル、シクロヘキシルスルホニル、シクロヘキシルメチルスルホニル、シクロヘキシルエチルスルホニル等が挙げられる。好ましくは、メタンスルホニル、エタンスルホニル、２－プロパンスルホニル、シクロプロパンスルホニル等が挙げられる。

【0051】

本発明において、「低級アルキルまたは低級アルキルスルホニルで置換されていてもよいカルバモイル」において、低級アルキルおよび低級アルキルスルホニルは上記で定義したとおりである。低級アルキルまたは低級アルキルスルホニルで置換されていてもよいカルバモイルは、「低級アルキルで置換されていてもよいカルバモイル」と「低級アルキルスルホニルで置換されていてもよいカルバモイル」を含む。

【0052】

「低級アルキルで置換されていてもよいカルバモイル」は、カルバモイルに上記の低級アルキルが１または２個結合してもよい基である。低級アルキルが２個結合する場合、当該低級アルキルは同一であっても異なっていてもよい。低級アルキルで置換されていてもよいカルバモイルとしては、例えばカルバモイル、あるいは直鎖状、分枝状、または環状構造を含む、Ｃ１～Ｃ８アルキルで置換されたアミノカルボニル等が挙げられる。低級アルキルで置換されていてもよいカルバモイルとしては、具体的には、カルバモイル、メチルアミノカルボニル、エチルアミノカルボニル、プロピルアミノカルボニル、２－プロピルアミノカルボニル、ジメチルアミノカルボニル、ジエチルアミノカルボニル、エチルメチルアミノカルボニル、メチルプロピルアミノカルボニル、ジシクロヘキシルアミノカルボニル等が挙げられる。

【0053】

「低級アルキルスルホニルで置換されていてもよいカルバモイル」は、カルバモイルに上記の低級アルキルスルホニルが１または２個結合してもよい基である。低級アルキルスルホニルが２個結合する場合、当該低級アルキルスルホニルは同一であっても異なっていてもよい。低級アルキルスルホニルで置換されていてもよいカルバモイルとしては、例えば、カルバモイル、あるいは直鎖状、分枝状、または環状構造を含む、Ｃ１～Ｃ８アルキルスルホニルで置換されたアミノカルボニル等が挙げられる。直鎖状または分枝状のＣ１～Ｃ８アルキルスルホニルアミノカルボニルとしては、例えば、メタンスルホニルアミノカルボニル、エタンスルホニルアミノカルボニル、１－プロピルスルホニルアミノカルボニル、２－プロピルスルホニルアミノカルボニル、１－ブチルスルホニルアミノカルボニル、２－ブチルスルホニルアミノカルボニル、イソブチルスルホニルアミノカルボニル、ｔ－ブチルスルホニルアミノカルボニル等が挙げられる。環状構造を含むＣ１～Ｃ８アルキルスルホニルアミノカルボニルとしては、例えば、シクロプロピルスルホニルアミノカルボニル、シクロプロピルメチルスルホニルアミノカルボニル、シクロブチルスルホニルアミノカルボニル、シクロブチルメチルスルホニルアミノカルボニル、シクロペンチルスルホニルアミノカルボニル、シクロペンチルメチルスルホニルアミノカルボニル、シクロヘキシルスルホニルアミノカルボニル、シクロヘキシルメチルスルホニルアミノカルボニル、シクロヘキシルエチルスルホニルアミノカルボニル等が挙げられる。好ましい低級アルキルスルホニルで置換されていてもよいカルバモイルとしては、カルバモイル、メタンスルホニルアミノカルボニル、エタンスルホニルアミノカルボニル、２－プロピルスルホニルアミノカルボニル、シクロプロピルスルホニルアミノカルボニル等が挙げられる。

【0054】

本発明において、「置換されていてもよい環状アミノカルボニル」における置換されていてもよい環状アミノは上記で定義したとおりである。置換されていてもよい環状アミノカルボニルはカルボニルに上記の置換されていてもよい環状アミノが結合した基である。置換されていてもよい環状アミノカルボニルとしては、具体的には、ピロリジノカルボニル、ピペリジノカルボニル、ピペラジノカルボニル、４－メチルピペリジノ、モルホリノカルボニル、２－ピロリドニルカルボニル等が挙げられ、好ましくは、ピロリジノカルボニル、モルホリノカルボニル等が挙げられる。

【0055】

本発明において、「低級アルキルで置換されていてもよいスルファモイル」における低級アルキルは上記で定義したとおりである。低級アルキルで置換されていてもよいスルファモイルは、スルファモイルに上記の低級アルキルが１または２個結合してもよい基である。低級アルキルが２個結合する場合、当該低級アルキルは同一であっても異なっていてもよい。低級アルキルで置換されていてもよいスルファモイルとしては、例えば、スルファモイル；直鎖状、分枝状、または環状構造を含むＣ１～Ｃ８アルキルで置換されたアミノスルホニル等が挙げられ、具体的には、スルファモイル、メチルアミノスルホニル、エチルアミノスルホニル、プロピルアミノスルホニル、２－プロピルアミノスルホニル、ジメチルアミノホニル、ジエチルアミノスルホニル、エチルメチルアミノスルホニル、メチルプロピルアミノスルホニル、ジシクロヘキシルアミノスルホニル等が挙げられる。

【0056】

本発明において、「置換されていてもよい環状アミノスルホニル」における置換されていてもよい環状アミノは上記で定義したとおりである。置換されていてもよい環状アミノスルホニルはスルホニルに上記の置換されていてもよい環状アミノが結合した基である。置換されていてもよい環状アミノスルホニルとしては、具体的には、ピロリジノスルホニル、ピペリジノスルホニル、ピペラジノスルホニル、４－メチルピペリジノスルホニル、モルホリノスルホニル、４－ピぺリドニルスルホニル等が挙げられ、好ましくは、ピロリジノスルホニル、モルホリノスルホニル等が挙げられる。

【0057】

【化9】

【0058】

一般式（１）で表される化合物において、Ａは、置換されていてもよいベンゼン環である。Ａの置換基には、例えば、下記のＡ－１）～Ａ－１６）からなる群より選択される少なくとも１種が含まれ、置換基が複数存在する場合は、互いに同一でも異なっていてもよい。
Ａ－１）ハロゲン、
Ａ－２）水酸基、
Ａ－３）ニトロ、
Ａ－４）シアノ、
Ａ－５）カルボキシル、
Ａ－６）置換されていてもよいアミノ、
Ａ－７）置換されていてもよい環状アミノ、
Ａ－８）置換されていてもよい低級アルキル、
Ａ－９）置換されていてもよい低級アルコキシ、
Ａ－１０）低級アルコキシカルボニル、
Ａ－１１）低級アルキルスルホニル、
Ａ－１２）低級アルキルまたは低級アルキルスルホニルで置換されていてもよいカルバモイル、
Ａ－１３）置換されていてもよい環状アミノカルボニル、
Ａ－１４）低級アルキルで置換されていてもよいスルファモイル、
Ａ－１５）置換されていてもよい環状アミノスルホニル、
Ａ－１６）テトラゾリル。

【0059】

Ａにおける置換基の数は、例えば、０～５個、０～４個、０～３個、好ましくは０、１または２個、より好ましくは０または１個である。置換基が複数存在する場合は、互いに同一でも異なっていてもよい。

【0060】

Ａの置換基の他の例としては、上記のＡ－１およびＡ－３～Ａ－１６からなる群より選択される少なくとも１種、上記のＡ－１およびＡ－３～Ａ－１６からなる群からメトキシを除いた群より選択される少なくとも１種等が挙げられる。

【0061】

好ましいＡの置換基は、ハロゲン；低級アルコキシ；低級アルキルまたは低級アルキルスルホニルで置換されていてもよいカルバモイル；およびハロゲンで置換されていてもよい低級アルキルからなる群より選択される少なくとも１種であり、より好ましいＡの置換基は、ハロゲン；低級アルコキシ；カルバモイル；およびハロゲンで置換されていてもよい低級アルキルからなる群より選択される少なくとも１種であり、より一層好ましいＡの置換基は、ハロゲン、メトキシ、エトキシ、カルバモイル、フルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、フルオロエチル、ジフルオロエチル、およびトリフルオロエチルからなる群より選択される少なくとも１種であり、より好ましくはハロゲン、メトキシ、エトキシ、カルバモイル、フルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、フルオロエチル、ジフルオロエチル、およびトリフルオロエチルからなる群より選択される少なくとも１種であり、特に好ましくは、塩素原子、フッ素原子、およびトリフルオロメチルからなる群より選択される少なくとも１種である。

【0062】

一般式（１）で表される化合物において、Ａの置換基は、ベンゾイソオキサゾールまたはベンゾイソチアゾール骨格の４位、５位、６位、および７位のいずれの炭素原子に結合していてもよいが、好ましくは４位、５位および６位の炭素原子の少なくとも１個、より好ましくは４位および／または５位の炭素原子、特に好ましくは４位の炭素原子に結合する。なお、本発明において、ベンゾイソオキサゾールまたはベンゾイソチアゾール骨格を構成する原子の位置番号は次のとおりである。

【化10】

【0063】

［式中、ＡおよびＸは前記と同じ。］。

【0064】

一般式（１）で表される化合物において、特に好ましいＡは、ベンゾイソオキサゾールまたはベンゾイソチアゾール骨格の４位の炭素原子に、ハロゲン、低級アルコキシ、またはハロゲンで置換されていてもよい低級アルキルが結合し、５、６、および７位の炭素原子が置換されていないベンゼン環である。

【0065】

一般式（１）で表される化合物において、Ｂは、置換されていてもよいアリールまたは置換されていてもよいヘテロアリールである。置換されていてもよいアリールまたは置換されていてもよいヘテロアリールは上記の定義のとおりである。アリールとしては、例えばフェニルまたはナフチルが挙げられ、フェニルが好ましい。ヘテロアリールとしては、環構成原子として他のヘテロ原子を含まない単環の含窒素ヘテロアリール、またはベンゾイミダゾリルが好ましい。環構成原子として他のヘテロ原子を含まない単環の含窒素ヘテロアリールとしては、環構成ヘテロ原子として１個の窒素原子を含む５員または６員のヘテロアリールが好ましく、例えば、ピロリル、ピリジルが挙げられ、ピリジルが好ましく、２－ピリジルがより一層好ましい。ベンゾイミダゾリルとしては、ベンゾイミダゾール－３－イルが好ましい。

【0066】

Ｂが単環のアリールの場合、Ｂは、下記のＢ－１）～Ｂ－１６）からなる群より選択される少なくとも１種の基で置換されていてもよい。Ｂが単環または二環のヘテロアリールである場合、Ｂは下記のＢ－１)～Ｂ－１７）からなる群より選択される少なくとも１種の基で置換されていてもよい。
Ｂ－１）ハロゲン、
Ｂ－２）水酸基、
Ｂ－３）ニトロ、
Ｂ－４）シアノ、
Ｂ－５）カルボキシル
Ｂ－６）置換されていてもよいアミノ、
Ｂ－７）置換されていてもよい環状アミノ、
Ｂ－８）置換されていてもよい低級アルキル、
Ｂ－９）置換されていてもよい低級アルコキシ、
Ｂ－１０）低級アルコキシカルボニル、
Ｂ－１１）低級アルキルスルホニル、
Ｂ－１２）低級アルキルまたは低級アルキルスルホニルで置換されていてもよいカルバモイル、
Ｂ－１３）置換されていてもよい環状アミノカルボニル、
Ｂ－１４）低級アルキルで置換されていてもよいスルファモイル、
Ｂ－１５）置換されていてもよい環状アミノスルホニル、
Ｂ－１６）テトラゾリル、
Ｂ－１７）オキソ。

【0067】

Ｂにおける置換基の数は、例えば、０もしくは少なくとも１個、０～５個、０～４個、好ましくは０～３個、より好ましくは０、１または２個である。置換基が複数存在する場合は、互いに同一でも異なっていてもよい。

【0068】

Ｂの置換基として好ましくは、ハロゲン；カルボキシル、置換されていてもよい低級アルキル；低級アルコキシカルボニル；低級アルキルまたは低級アルキルスルホニルで置換されていてもよいカルバモイル；および置換されていてもよい環状アミノカルボニルからなる群より選択される少なくとも１種が挙げられ、具体的には、ハロゲン、カルボキシル、メチル、エチル、１－プロピル、２－プロピル、ヒドロキシメチル、カルボキシメチル、トリクロロメチル、トリフルオロメチル、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、ｔ－ブトキシカルボニル、メチルアミノカルボニル、ジメチルアミノカルボニル、エチルメチルアミノカルボニル、メタンスルホニルアミノカルボニル、ピロリジノカルボニル、およびモルホリノカルボニルからなる群より選択される少なくとも１種が挙げられる。

【0069】

Ｂの置換基としてより好ましくは、ハロゲン；カルボキシル；低級アルキル；ハロゲンで置換された低級アルキル；低級アルコキシカルボニル；および低級アルキルで置換されていてもよいカルバモイルからなる群より選択される少なくとも１種が挙げられ、具体的には、ハロゲン、カルボキシル、メチル、エチル、トリクロロメチル、トリフルオロメチル、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、ｎ－プロポキシカルボニル、イソプロポキシカルボニル、モノメチルアミノカルボニル、およびジメチルアミノカルボニルからなる群より選択される少なくとも１種が挙げられる。

【0070】

Ｂの置換基として特に好ましくは、塩素原子、フッ素原子、メチル、カルボキシル、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、メチルアミノカルボニル、およびジメチルアミノカルボニルからなる群より選択される少なくとも１種が挙げられる。

【0071】

一般式（１）で表される化合物において、Ｙが窒素原子の場合、Ｂは置換されていてもよいフェニルまたは置換されていてもよいピリジルが好ましく、Ｙが炭素原子の場合、Ｂは置換されていてもよいフェニル、置換されていてもよいピリジル、または２－オキソベンゾイミダゾール－３－イルが好ましく、置換されていてもよいフェニル又は置換されていてもよいピリジルがより好ましい。

【0072】

一般式（１）で表される化合物において、Ｂが置換されたピリジルまたは置換されたフェニルである場合、Ｙと結合しているピリジンまたはベンゼン環上の炭素原子に対してオルト位の炭素原子の１または２個、好ましくは１個が置換されていることが好ましい。当該オルト位の炭素原子に結合する置換基は上記されたＢの置換基であればよいが、好ましくはハロゲンであり、より好ましくは塩素原子またはフッ素原子であり、より一層好ましくは塩素原子である。

【0073】

また、一般式（１）で表される化合物において、Ｂが置換されたピリジルまたは置換されたフェニルである場合、Ｙと結合しているピリジンまたはベンゼン環上の炭素原子に対してパラ位の炭素原子が置換されていないかまたはカルボキシルで置換されていることが好ましい。

【0074】

また、一般式（１）で表される化合物において、Ｂが置換されたピリジルまたは置換されたフェニルである場合、Ｙと結合しているピリジンまたはベンゼン環上の炭素原子に対してメタ位の炭素原子の全てが置換されていないことが好ましい。

【0075】

一般式（１）で表される化合物において、Ｂが置換されたピリジルまたは置換されたフェニルである場合、Ｙと結合しているピリジンまたはベンゼン環上の炭素原子に対してオルト位の炭素原子の１または２個、好ましくは１個が塩素原子またはフッ素原子で置換され、メタ位の炭素原子が置換されておらず、パラ位の炭素原子が置換されていないか、あるいはカルボキシル、メトキシカルボニル、またはエトキシカルボニルで置換されていることがより好ましい。
Ｙが窒素原子であり、かつＢが置換された２－ピリジルである場合は、Ｙと結合しているピリジン環上の炭素原子に対してオルト位の炭素原子が塩素原子またはフッ素原子で置換され、メタ位の炭素原子の全てが置換されておらず、パラ位の炭素原子が置換されていないかまたはカルボキシルで置換されていることが特に好ましい。
Ｙが窒素原子であり、かつＢが置換されたフェニルである場合は、Ｙと結合しているベンゼン環上の炭素原子に対してオルト位の２個の炭素原子のうちの１個が塩素原子またはフッ素原子で置換され、該フェニルを構成する他の全ての炭素原子が置換されていないことが特に好ましい。
Ｙが炭素原子であり、かつＢが置換された２－ピリジルである場合は、Ｙと結合しているピリジン環上の炭素原子に対してオルト位の炭素原子が塩素原子またはフッ素原子で置換され、メタ位の炭素原子の全てが置換されておらず、パラ位の炭素原子が置換されていないかあるいはカルボキシル、メトキシカルボニルまたはエトキシカルボニルで置換されていることが特に好ましい。
Ｙが炭素原子であり、かつＢが置換されたフェニルである場合は、Ｙと結合しているベンゼン環上の炭素原子に対してオルト位の２個の炭素原子のうちの１個が塩素原子またはフッ素原子で置換され、もう一方のオルト位の炭素原子が置換されておらず、メタ位の炭素原子の全てが置換されておらず、パラ位の炭素原子が置換されていないかあるいはカルボキシル、メトキシカルボニルまたはエトキシカルボニルで置換されていることが特に好ましい。

【0076】

一般式（１）で表される化合物において、Ｘは、酸素原子または硫黄原子であり、好ましくは酸素原子である。

【0077】

一般式（１）で表される化合物において、Ｙは、窒素原子または炭素原子であり、好ましくは窒素原子である。

【0078】

一般式（１）で表される化合物において、Ｙは、窒素原子または炭素原子であり、好ましくは窒素原子である。

【0079】

【化11】

【0080】

一般式（１）で表される化合物において、Ｒ^１は、互いに独立して低級アルキルであるか、２個のＲ^１が互いに結合して、スピロ環または架橋構造を形成していてもよい、あるいは２個のＲ^１が互いに結合して、Ｙを含む環を構成する炭素原子および窒素原子と共に飽和縮合複素環を形成していてもよい。

【0081】

Ｒ^１が低級アルキルの場合、好ましいＲ^１としては、例えば直鎖状または分枝状のＣ１～Ｃ３アルキルが挙げられ、より好ましくはメチル、エチル、より一層好ましくはメチルである。

【0082】

２個のＲ^１が互いに結合して、スピロ環または架橋構造を形成している場合において、スピロ環を形成するとは、一般式（１）中のＹを含む環を構成する炭素原子のうちの１つに２個のＲ^１が結合し、当該Ｒ^１同士が互いに結合して当該炭素原子とともに環を形成する場合をいう。

【0083】

２個のＲ^１が互いに結合して、スピロ環または架橋構造を形成している場合において、架橋構造を形成するとは、一般式（１）中のＹを含む環を構成する炭素原子のうちの２つに各々１個のＲ^１が結合し、当該Ｒ^１同士が互いに結合する場合をいう。

【0084】

２個のＲ^１が互いに結合して、スピロ環または架橋構造を形成している場合としては、例えば、２個のＲ^１が互いに結合して、メチレン、ジメチレン、トリメチレン、またはテトラメチレンとなることで架橋構造を形成する場合、あるいはジメチレンまたはトリメチレンとなることでスピロ環を形成する場合が挙げられ、好ましくは２個のＲ^１が互いに結合して、メチレン、ジメチレン、またはトリメチレンとなることで架橋構造を形成する場合である。特に好ましくは下記構造式で示されるジメチレンにより形成される架橋構造である。

【化12】

【0085】

２個のＲ^１が互いに結合して、Ｙを含む環を構成する炭素原子および窒素原子と共に飽和縮合複素環を形成するとは、一般式（１）中のＹを含む環を構成する炭素原子のうちの隣接する２つに各々１個のＲ^１が結合し、当該Ｒ^１同士が互いに結合してＹを含む環を構成する炭素原子および窒素原子と共に飽和縮合複素環を形成する場合をいう。ここでいう飽和縮合複素環は、Ｙを含む複素環（ピラジン環またはピペリジン環）とＲ^１を含む飽和炭素環との縮合２環を意味する。

【0086】

飽和縮合複素環としては、例えばピラジン環またはピペリジン環とシクロペンタン環又はシクロヘキサン環との縮合環が挙げられる。飽和縮合複素環の具体例としては、オクタヒドロシクロペンタピリジン、オクタヒドロシクロペンタピラジン、デカヒドロキノリン、デカヒドロキノキサリンなどが挙げられる。

【0087】

好ましいＲ^１は、Ｃ１～Ｃ３アルキルまたはジメチレンにより形成された架橋構造であり、より好ましいＲ^１は、メチル、エチルまたは上記構造式で示されるジメチレンにより形成される架橋構造である。

【0088】

一般式（１）で表される化合物において、ｐは、０、１、または２である。

【0089】

一般式（１）で表される化合物において、（Ｒ^１）ｐはオキソであってよい。

【0090】

一般式（１）で表される化合物、その塩、またはそのプロドラッグのうち、下記一般式（１Ａ）で表される化合物、その塩、またはそのプロドラッグが好ましい。下記一般式（１Ａ）で表される化合物、その塩、またはそのプロドラッグを含有する難聴の予防および／または治療用医薬組成物も本発明に包含される。

【化13】

【0091】

［式中、
Ｚは、窒素原子またはＣＨである。
Ｙは、窒素原子または炭素原子である。

【化14】

Ｒ^１１は、互いに独立して、メチルまたはエチルであるか、あるいは２個のＲ^１１が互いに結合して、メチレン、ジメチレン、またはトリメチレンによる架橋構造を形成していてもよい。
ｐは、０、１、または２である。
あるいは、（Ｒ^１１）_ｐはオキソである。
Ｒ^２１、Ｒ^２２、およびＲ^２３は、互いに独立して、水素原子、ハロゲン、カルバモイル、またはトリフルオロメチルである。
Ｒ^３１、Ｒ^３２、およびＲ^３３は、互いに独立して、水素原子、ハロゲン、ハロゲンで置換された低級アルキル、メチル、カルボキシル、低級アルコキシカルボニル、モノメチルアミノカルボニル、またはジメチルアミノカルボニルである。］。

【0092】

一般式（１Ａ）で表される化合物において、Ｚは、窒素原子またはＣＨである。Ｚは、Ｙが窒素原子の場合、窒素原子が好ましい。

【0093】

一般式（１Ａ）で表される化合物において、Ｙは、窒素原子または炭素原子である。

【0094】

一般式（１Ａ）で表される化合物において、Ｒ^１１は、互いに独立して、メチルまたはエチルであるか、あるいは２個のＲ^１１が互いに結合して、メチレン、ジメチレン、またはトリメチレンによる架橋構造を形成していてもよい。

【0095】

Ｒ^１１として好ましくは、メチルまたはエチル、あるいはジメチレンまたはトリメチレンからなる架橋構造であり、より好ましくはメチル、またはジエチレンからなる架橋構造である。

【0096】

２個のＲ^１１が互いに結合して、メチレン、ジメチレン、またはトリメチレンによる架橋構造を形成している場合は、一般式（１Ａ）中のＹを含む環を構成する炭素原子のうちの２つに各々１個のＲ^１１が結合し、当該Ｒ^１１同士が互いに結合してメチレン、ジメチレン、またはトリメチレンをなし、ピペラジン環に架橋構造が形成される場合をいう。

【0097】

一般式（１Ａ）中のＹを含む環がＲ^１１で置換された場合に好ましいのは（Ｒ^１１）_ｐがオキソであるか、あるいは下記構造式中で示されるものである。

【化15】

【0098】

［式中、＊は、イソベンゾオキサゾールの３位の炭素原子に結合する側を表し、Ｒ^１１１は、Ｃ１～Ｃ３アルキルを表す。］。
Ｒ^１１１として好ましいのはメチルまたはエチル、より好ましいのはメチルである。

【0099】

一般式（１Ａ）において（Ｒ^１１）_ｐはオキソであってもよい。

【0100】

一般式（１Ａ）で表される化合物において、Ｒ^２１、Ｒ^２２、およびＲ^２３は、互いに独立して、水素原子、ハロゲン、カルバモイル、またはトリフルオロメチルであり、Ｒ^２１、Ｒ^２２、およびＲ^２３の少なくとも１つがハロゲン、カルバモイル、またはトリフルオロメチルであることが好ましい。Ｒ^２１として好ましくは、塩素原子、フッ素原子、カルバモイル、またはトリフルオロメチルであり、より好ましくは塩素原子またはトリフルオロメチルである。Ｒ^２２として好ましくは、水素原子、塩素原子またはトリフルオロメチルであり、より好ましくは水素原子である。Ｒ^２３として好ましくは、水素原子、塩素原子、またはトリフルオロメチルであり、より好ましくは水素原子である。Ｒ^２１がハロゲン（好ましくは塩素原子またはフッ素原子）またはトリフルオロメチルであり、かつＲ^２２およびＲ^２３がともに水素原子であることが特に好ましい。

【0101】

一般式（１Ａ）で表される化合物において、Ｒ^３１、Ｒ^３２、およびＲ^３３は、互いに独立して、水素原子、ハロゲン、ハロゲンで置換された低級アルキル、メチル、カルボキシル、低級アルコキシカルボニル、モノメチルアミノカルボニル、またはジメチルアミノカルボニルである。Ｒ^３１として好ましくは、水素原子、ハロゲン、トリクロロメチル、トリフルオロメチル、またはメチルであり、より好ましくは、ハロゲン、トリクロロメチル、トリフルオロメチル、またはメチルであり、特に好ましくは、塩素原子である。Ｒ^３２として好ましくは、水素原子、ハロゲンまたはメチルであり、より好ましくは水素原子である。Ｒ^３３として好ましくは、水素原子、ハロゲン、カルボキシル、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、モノメチルアミノカルボニル、またはジメチルアミノカルボニルであり、より好ましくは水素原子、カルボキシル、メトキシカルボニルまたはエトキシカルボニルであり、特に好ましくは水素原子またはカルボキシルである。

【0102】

Ｒ^３１、Ｒ^３２、およびＲ^３３の好ましい例は、Ｒ^３１がハロゲン（好ましくは塩素原子またはフッ素原子）であり、かつＲ^３２が水素原子であり、かつＲ^３３が水素原子またはカルボキシルである。Ｒ^２１がハロゲン（好ましくは塩素原子）の場合には、Ｒ^３１がハロゲン（好ましくは塩素原子またはフッ素原子）であり、かつＲ^３２が水素原子であり、かつＲ^３３が水素原子であることが好ましい。Ｒ^２１がトリハロメチル（好ましくはトリフルオロメチル）の場合には、Ｒ^３１がハロゲン（好ましくは塩素原子またはフッ素原子）であり、かつＲ^３２が水素原子であり、かつＲ^３３が水素原子、カルボキシル、メトキシカルボニル、またはエトキシカルボニルであることが好ましい。Ｒ^２１がカルバモイルの場合には、Ｒ^３１がハロゲン（好ましくは塩素原子またはフッ素原子、より好ましくは塩素原子）であり、かつＲ^３２が水素原子であり、かつＲ^３３が水素原子であることが好ましい。また、Ｒ^２１が塩素原子またはトリフルオロメチルであり、Ｒ^２２およびＲ^２３が水素原子であり、Ｒ^３１が塩素原子であり、Ｒ^３２が水素原子であり、Ｒ^３３が水素原子またはカルボキシルであることが好ましい。

【0103】

一般式（１）で表される化合物、その塩、またはそのプロドラッグの具体的な例には、例えば、化合物０１１、化合物０２１、化合物０３１、化合物０４１、化合物０５１、化合物０６１、化合物０７１、化合物０８１、化合物０９１、化合物１０１、化合物１１１、化合物１２１、化合物１３１、化合物１４１、化合物１５１、化合物１６１、化合物１７１、化合物１８１、化合物１９１、化合物２０１、化合物２１１、化合物２２１、化合物２３１、化合物２４１、化合物２５１、化合物２６１、化合物２７１、化合物２８１、化合物２９１、化合物３０１、化合物３１１、化合物３２１、化合物３３１、化合物３４１、化合物３５１、化合物３６１、化合物３７１、化合物３８１、化合物３９１、化合物４０１、化合物４１１、化合物４２１、または化合物４３１が含まれ、好ましくは、下記の化合物、その塩、またはそのプロドラッグが含まれる。

【0104】

【化16】

【0105】

【化17】

【0106】

一般式（１）で表される化合物、その塩、またはそのプロドラッグとしてより好ましくは、化合物０１１、化合物０２１、化合物０３１、化合物０４１、化合物０６１、化合物０７１、化合物０８１、化合物０９１、化合物１０１、化合物１１１、化合物１２１、化合物１３１、化合物１４１、化合物１５１、化合物１６１、化合物１７１、化合物１９１、化合物２２１、化合物２８１、化合物３１１、化合物３２１、化合物３３１、化合物３４１、化合物３５１、化合物３６１、化合物３７１、化合物３８１、化合物３９１、化合物４０１、または化合物４３１、その塩、あるいはそのプロドラッグであり、さらに好ましくは、化合物０１１、化合物０２１、化合物０３１、化合物０４１、化合物０６１、化合物０７１、化合物０８１、化合物０９１、化合物１０１、化合物１１１、化合物１２１、化合物１３１、化合物１４１、化合物１５１、化合物１６１、化合物１７１、化合物１９１、化合物３２１、化合物３５１、化合物３６１、化合物３７１、化合物３８１、化合物４０１、または化合物４３１、その塩、あるいはそのプロドラッグであり、さらに一層好ましくは、化合物０１１、化合物０３１、化合物０４１、化合物０６１、化合物０７１、または化合物１９１、化合物３６１、化合物３７１、化合物３８１、化合物４０１、または化合物４３１、その塩、あるいはそのプロドラッグであり、特に好ましくは、化合物０１１、化合物０３１、化合物０４１、化合物０６１、化合物０７１、または化合物１９１、化合物３６１、化合物３７１、化合物３８１、または化合物４０１、その塩、あるいはそのプロドラッグである。

【0107】

本発明は、下記一般式（２）で表される化合物、その塩、またはそれらのプロドラッグを含有する難聴の予防および／または治療用医薬組成物を含む。該化合物、その塩、またはそのプロドラッグは、難聴の予防および／または治療効果を有しうる。また、該化合物、その塩、またはそのプロドラッグは、TRPCチャネル、例えばTRPC3および／またはTRPC6チャネル、好ましくはTRPC6チャネルの活性を調節または阻害する活性を有しうる。また、該化合物またはその塩は、一般式（１）で表される化合物の中間体化合物にもなりうる。

【0108】

【化18】

【0109】

【化19】

【0110】

【化20】

【0111】

一般式（２）において、オキシム構造を構成する炭素原子と結合したＡ環（ベンゼン環）の炭素原子に対しオルト位の炭素原子が置換基を有することが好ましい。当該置換基は、特に断りのない限り、一般式（１）におけるＡ環（ベンゼン環）における置換基と同じである。したがって、当該置換基は、例えば、上記Ａ－１）～Ａ－１６）からなる群より選択される少なくとも１種の基であってよい。
また、一般式（２）において窒素原子と水酸基との間の結合が波線、即ち以下で表される線、で表されることにより、一般式（２）で表される化合物が、その部分構造である「＞Ｃ＝Ｎ－ＯＨ」に起因して存在する幾何異性体のＥ体、Ｚ体、およびそれらの混合物のいずれでもよいことを示す。このことは、波線で表された、一般式（２）以外の化合物についても同様である。

【化21】

【0112】

一般式（２）で表される化合物、その塩、またはそのプロドラッグのうち、下記一般式（２Ａ）で表される化合物、その塩、またはそのプロドラッグが好ましい。

【化22】

【0113】

【化23】

【0114】

一般式（２）で表される化合物、その塩、またはそのプロドラッグのうち、下記一般式（２Ｂ）で表される化合物、その塩、またはそのプロドラッグが好ましい。また、下記一般式（２Ｂ）で表される化合物またはその塩は、一般式（１）で表される化合物の製造における中間体化合物として好ましい。

【化24】

【0115】

【化25】

Ｇ^１は、ハロゲン、ハロゲンで置換されていてもよい低級アルキルスルホニル、あるいは低級アルキルまたはニトロで置換されていてもよいベンゼンスルホニルである。］。

【0116】

【化26】

は上記のとおりである。また、一般式（２Ｂ）で表される化合物またはその塩としては、その部分構造である「＞Ｃ＝Ｎ－ＯＨ」に起因して存在する幾何異性体のＥ体とＺ体とが存在するが、一般式（２Ｂ）で表される化合物またはその塩を一般式（１）で表される化合物の製造における中間体化合物とする場合には該Ｅ体が好ましい。

【0117】

Ｇ^１で示されるハロゲンとしては、例えば、塩素原子、フッ素原子、臭素原子、ヨウ素原子を挙げることができる。

【0118】

Ｇ^１で示されるハロゲンで置換されていてもよい低級アルキルスルホニルにおける低級アルキルスルホニルは上記で定義したとおりである。また、低級アルキルスルホニルはスルホニルに低級アルキルが結合した基であり、低級アルキルはハロゲンで置換されていてもよい。ハロゲンで置換されていてもよい低級アルキルスルホニルとしては、例えば、１～３個のハロゲンで置換されていてもよい直鎖状または分枝状のＣ１～Ｃ６アルキル（好ましくはＣ１～Ｃ４アルキル、より好ましくはＣ１～Ｃ３アルキル）スルホニルが挙げられ、具体的には、メタンスルホニル、エタンスルホニル、トリフルオロメタンスルホニル等を挙げることができる。

【0119】

Ｇ^１で示される低級アルキルで置換されていてもよいベンゼンスルホニルとしては、例えば、１～３個（好ましくは１または２個、より好ましくは１個）の直鎖状または分枝状のＣ１～Ｃ６アルキル（好ましくはＣ１～Ｃ４アルキル、より好ましくはＣ１～Ｃ３アルキル）で置換されていてもよいベンゼンスルホニルが挙げられ、具体的には、ｐ－トルエンスルホニル等を挙げることができる。

【0120】

Ｇ^１で示されるニトロで置換されていてもよいベンゼンスルホニルとしては、例えば、１～３個（好ましくは１個）のニトロで置換されていてもよいベンゼンスルホニルが挙げられ、具体的には、ｏ－ニトロベンゼンスルホニル、ｐ－ニトロベンゼンスルホニル等を挙げることができる。

【0121】

好ましいＧ^１は、塩素原子、フッ素原子、臭素原子、メタンスルホニル、エタンスルホニル、トリフルオロメタンスルホニル、ｐ－トルエンスルホニル、またはｐ－ニトロベンゼンスルホニルである。より好ましいＧ^１は、塩素原子または臭素原子である。

【0122】

一般式（２）で表される化合物、その塩、またはそのプロドラッグには、例えば下記の化合物、その塩、またはそのプロドラッグが含まれる。

【化27】

【0123】

一般式（２）で表される化合物、その塩、またはそのプロドラッグとして好ましくは、化合物０６２、化合物２０２、化合物３６２、または化合物３７２、その塩、あるいはそのプロドラッグであり、より好ましくは化合物２０２の（Ｅ）異性体、化合物３６２の（Ｅ）異性体、化合物３６２の（Ｚ）異性体、または化合物３７２の（Ｚ）異性体、その塩、またはそのプロドラッグである。

【0124】

上記化合物等は、例えば以下に詳述する製造法１～３、これに準ずる方法、公知の方法等を適宜変更、組み合わせること等によって製造することができる。原料化合物として用いられる化合物は、それぞれ塩として用いてもよい。なお、以下に示す方法は単なる例示であり、有機合成に習熟している者の知識に基づき、適宜、他の方法で製造することもできる。また、市販品でない、１，２－ベンゾイソチアゾールまたはその誘導体あるいは１，２－ベンゾイソオキサゾールまたはその誘導体を原料化合物として用いる場合は以下の刊行物に記載の方法を参考にして製造し、調達することができる。
Advances in heterocyclic chemistry, Heterocyclic Chemistry in the 21st Century: A Tribute to Alan Katritzky, Elsevier, Cambridge (2017)。R. A. Shastri, Review on Synthesis of 3-Substituted 1,2-Benzisoxazole Derivatives, Chem. Sci. Trans., 2016: 5; 8-20。

【0125】

製造における各反応において、必要に応じて、官能基を保護することができる。保護基並びにその保護および脱保護の技術は、公知の方法、例えば、T.W.Greene and P.G.M.Wuts,“Protective Groups in Organic Synthesis”,3rd Ed.,John Wiley and Sons,inc.,New York(1999)に記載の方法を適宜適用できる。

【0126】

［製造法１］
一実施形態において、一般式（１）で表される化合物は、下記の反応工程式－１で示される合成スキームで製造することができる。すなわち、一般式（１）で表される化合物は、一般式（３）で表される化合物と一般式（４）で表される化合物から製造することができる。

【0127】

【化28】

【0128】

【化29】

Ｇ^２は、ハロゲン、ハロゲンで置換されていてもよい低級アルキルスルホニル、あるいは低級アルキルまたはニトロで置換されていてもよいベンゼンスルホニルである。］。

【0129】

【化30】

【0130】

Ｇ^２で示されるハロゲンとしては、例えば、塩素原子、フッ素原子、臭素原子、ヨウ素原子を挙げることができる。

【0131】

Ｇ^２で示されるハロゲンで置換されていてもよい低級アルキルスルホニルにおける低級アルキルは上記で定義したとおりである。また、低級アルキルスルホニルはスルホニルに低級アルキルが結合した基であり、低級アルキルはハロゲンで置換されていてもよい。ハロゲンで置換されていてもよい低級アルキルスルホニルとしては、例えば、１～３個のハロゲンで置換されていてもよい直鎖状または分枝状のＣ１～Ｃ６アルキル（好ましくはＣ１～Ｃ４アルキル、より好ましくはＣ１～Ｃ３アルキル）スルホニルが挙げられ、具体的には、メタンスルホニル、エタンスルホニル、トリフルオロメタンスルホニル等を挙げることができる。

【0132】

Ｇ^２で示される低級アルキルで置換されていてもよいベンゼンスルホニルとしては、例えば、１～３個の直鎖状または分枝状のＣ１～Ｃ６アルキル（好ましくはＣ１～Ｃ４アルキル、より好ましくはＣ１～Ｃ３アルキル）で置換されていてもよいベンゼンスルホニルが挙げられ、具体的には、ｐ－トルエンスルホニル等を挙げることができる。

【0133】

Ｇ^２で示されるニトロで置換されていてもよいベンゼンスルホニルとしては、例えば、１～３個（好ましくは１個）のニトロで置換されていてもよいベンゼンスルホニルが挙げられ、具体的には、ｏ－ニトロベンゼンスルホニル、ｐ－ニトロベンゼンスルホニル等を挙げることができる。

【0134】

好ましいＧ^２は、塩素原子、フッ素原子、臭素原子、メタンスルホニル、エタンスルホニル、トリフルオロメタンスルホニル、ｐ－トルエンスルホニル、またはｐ－ニトロベンゼンスルホニルである。

【0135】

一般式（３）で表される化合物と一般式（４）で表される化合物との反応は、例えば不活性溶媒中、塩基の存在下または非存在下で行うことができる。必要に応じ、さらに活性化剤を反応系内に添加してもよい。一般式（３）で表される化合物および一般式（４）で表される化合物は公知の化合物であり、公知の方法で製造できる。

【0136】

不活性溶媒としては、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、ジオキサン、ジメトキシメタン等のエーテル系溶媒、トルエン、ベンゼン、キシレン等の芳香族炭化水素系溶媒、ジクロロメタン、クロロホルム、ジクロロエタン、四塩化炭素等のハロゲン化炭化水素系溶媒、アセトン等のケトン系溶媒、ジメチルスルホキシド、Ｎ、Ｎ－ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、アセトニトリル等の非プロトン溶媒、ピリジン等が挙げられる。これらの溶媒は、２種類以上を適宜の割合で混合して用いてもよい。

【0137】

塩基としては、例えば水素化ナトリウム、水素化カリウム等の金属ヒドリド、水酸化カリウム、水酸化ナトリウム等の金属水酸化物、炭酸カリウム、炭酸水素カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸セシウム等の金属炭酸塩、トリエチルアミン、エチルジイソプロピルアミン等のアルキルアミン類、ナトリウムメトキシド、カリウムｔ－ブトキシド等の金属アルコキシドが挙げられる。

【0138】

塩基の使用量は、一般式（４）で表される化合物１モルに対して、通常１モル以上、好ましくは１～５モル、より好ましくは１～２モルである。

【0139】

一般式（３）で表される化合物の使用量は、一般式（４）で表される化合物１モルに対して、通常、０．２モル以上、好ましくは０．２～２モル、より好ましくは０．２～１．５モルである。

【0140】

反応温度は、通常－５０℃～１８０℃、好ましくは－３０℃～１８０℃、より好ましくは－１０℃～１８０℃である。反応を促進するためにマイクロウェーブを用いてもよく、その場合の反応温度としては、例えば８０℃～１８０℃、好ましくは１００℃～１８０℃である。反応時間は、通常１０分～４８時間、好ましくは１０分～２４時間である。

【0141】

［製造法２］
一実施形態において、一般式（１Ｂ）で表される化合物は、下記の反応工程式－２で示される合成スキームで製造することができる。すなわち、一般式（１Ｂ）で表される化合物は、一般式（５）で表される化合物と一般式（６）で表される化合物から製造することができる。

【0142】

【化31】

【0143】

［式中、Ａ、Ｂ、Ｘ、Ｒ^１、およびｐは前記に同じ。Ｇ^３は、ハロゲン、ハロゲンで置換されていてもよい低級アルキルスルホニル、あるいは低級アルキルまたはニトロで置換されていてもよいベンゼンスルホニルである。］。

【0144】

反応工程式－２において、Ａ、Ｂ、Ｘ、Ｒ^１、およびｐは上記のとおりである。

【0145】

Ｇ^３で示されるハロゲンとしては、例えば、塩素原子、フッ素原子、臭素原子、ヨウ素原子を挙げることができる。

【0146】

Ｇ^３で示されるハロゲンで置換されていてもよい低級アルキルスルホニルにおける低級アルキルは上記で定義したとおりである。また、低級アルキルスルホニルはスルホニルに低級アルキルが結合した基であり、低級アルキルはハロゲンで置換されていてもよい。ハロゲンで置換されていてもよい低級アルキルスルホニルとしては、例えば、１～３個のハロゲンで置換されていてもよい直鎖状または分枝状のＣ１～Ｃ６アルキル（好ましくはＣ１～Ｃ４アルキル、より好ましくはＣ１～Ｃ３アルキル）スルホニルが挙げられ、具体的には、メタンスルホニル、エタンスルホニル、トリフルオロメタンスルホニル等を挙げることができる。

【0147】

Ｇ^３で示される低級アルキルで置換されていてもよいベンゼンスルホニルとしては、例えば、１～３個の直鎖状または分枝状のＣ１～Ｃ６アルキル（好ましくはＣ１～Ｃ４アルキル、より好ましくはＣ１～Ｃ３アルキル）で置換されていてもよいベンゼンスルホニルが挙げられ、具体的には、ｐ－トルエンスルホニル等を挙げることができる。

【0148】

Ｇ^３で示されるニトロで置換されていてもよいベンゼンスルホニルとしては、例えば、１～３個（好ましくは１個）のニトロで置換されていてもよいベンゼンスルホニルが挙げられ、具体的には、ｏ－ニトロベンゼンスルホニル、ｐ－ニトロベンゼンスルホニル等を挙げることができる。

【0149】

好ましいＧ^３は、塩素原子、フッ素原子、臭素原子、メタンスルホニル、エタンスルホニル、トリフルオロメタンスルホニル、ｐ－トルエンスルホニル、またはｐ－ニトロベンゼンスルホニルである。

【0150】

一般式（５）で表される化合物と一般式（６）で表される化合物とをカップリングすることで一般式（１Ｂ）で表される化合物を得ることができる。一般式（５）で表される化合物および一般式（６）で表される化合物は公知の化合物であり、公知の方法で製造できる。

【0151】

この反応は、例えば不活性溶媒中、塩基の存在下で行うことができる。

【0152】

不活性溶媒としては、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、ジオキサン、ジメトキシメタン等のエーテル系溶媒、トルエン、ベンゼン、キシレン等の芳香族炭化水素系溶媒、ジクロロメタン、クロロホルム、ジクロロエタン、四塩化炭素等のハロゲン化炭化水素系溶媒、アセトン等のケトン系溶媒、ジメチルスルホキシド、Ｎ、Ｎ－ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、アセトニトリル等の非プロトン溶媒、ピリジン等が挙げられる。これらの溶媒は、２種類以上を適宜の割合で混合して用いてもよい。

【0153】

塩基としては、例えば水素化ナトリウム、水素化カリウム等の金属ヒドリド、水酸化カリウム、水酸化ナトリウム等の金属水酸化物、炭酸カリウム、炭酸水素カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸セシウム等の金属炭酸塩、トリエチルアミン、エチルジイソプロピルアミン等のアルキルアミン類、ナトリウムメトキシド、カリウムｔ－ブトキシド等の金属アルコキシドが挙げられる。

【0154】

一般式（６）で表される化合物の使用量は、一般式（５）で表される化合物１モルに対して、通常、０．５モル以上、さらに１モル以上、好ましくは０．９～２モル、より好ましくは０．９～１．５モルである。

【0155】

塩基の使用量は、一般式（５）で表される化合物１モルに対して、通常１モル以上、好ましくは１～５モル、より好ましくは１～２モルである。

【0156】

反応温度は、通常３０℃～溶媒の沸点より１０℃高い温度であり、好ましくは８０℃～溶媒の沸点より１０℃高い温度が挙げられる。反応を促進するためにマイクロウェーブを用いてもよく、その場合の反応温度としては、例えば８０℃～１８０℃、好ましくは１００℃～１８０℃である。反応時間は、通常１０分～４８時間、好ましくは１０分～２４時間である。

【0157】

さらに、一般式（５）で表される化合物と一般式（６）で表される化合物との反応は、Buchward反応を利用して行うこともでき、例えば、パラジウム触媒、ホスフィン配位子、塩基の存在下、溶媒中で一般式（５）で表される化合物と一般式（６）で表される化合物を反応させる。

【0158】

パラジウム触媒としては、例えばPd(OAc)₂、PdCl₂、アリルパラジウム(II)クロリド（ダイマー）、ビス(アセトニトリル)パラジウム(II)ジクロリド、ビス(ベンゾニトリル)パラジウム(II)ジクロリド等の２価パラジウム触媒、Pd_２(dba)_３（トリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(0)）、ビス(ジベンジリデンアセトン)パラジウム(0)、パラジウム炭素（Pd/C）等の０価パラジウム触媒等が挙げられる。

【0159】

ホスフィン配位子としては、例えばBINAP（（２，２‘-ビス（ジフェニルホスファニル）-１、１’-ビスナフタレン）、Xphos（2-ジシクロヘキシルホスフィノ-2',4',6'-トリイソプロピルビフェニル）等の２座ホスフィン配位子が挙げられる。

【0160】

塩基としては、ｔ－BuONa（tert-ブトキシナトリウム）等の強塩基が挙げられる。

【0161】

この反応において、一般式（６）で表される化合物の使用量は、一般式（５）で表される化合物１モルに対して、通常、０．５モル以上、さらに１モル以上、好ましくは０．９～２モル、より好ましくは１～１．５モルである。

【0162】

パラジウム触媒の使用量は、一般式（５）で表される化合物１モルに対して、通常、０．００５～１モル、好ましくは０．０１～０．２モルである。

【0163】

ホスフィン配位子の使用量は、パラジウム触媒１モルに対して、通常０．５～５モル、好ましくは１～２モルである。

【0164】

塩基の使用量は、一般式（５）で表される化合物１モルに対して、通常、０．５モル以上、さらに１モル以上、好ましくは１～２モルである。

【0165】

反応温度は、通常４０℃～１５０℃、好ましくは８０℃～１１０℃、反応時間は、通常１～２４時間、好ましくは３～１２時間である。

【0166】

［製造法３］
一実施形態において、一般式（１）または（２）で表される化合物は、下記の反応工程式－３で示される合成スキームで製造することができる。すなわち、一般式（１Ｃ）で表される化合物は、一般式（７）で表される化合物を一般式（８）で表される化合物へ変換し、一般式（４）で表される化合物と反応させて一般式（２Ｂ）で表されるオキシム化合物を製造し、これを閉環することで製造することができる。なお、当業者であれば、反応工程式－３で示される反応において一般式（７）または（８）で表される化合物に代えて、適切な対応する、置換されていてもよいベンゼン環Ａを有する化合物を使用することにより、一般式（２）で表される化合物を製造できることを理解できる。また、一般式（７）で表される化合物は公知の化合物であり、公知の方法で製造できる。

【0167】

【化32】

【0168】

【化33】

【0169】

【化34】

【0170】

Ｇ^４で示されるハロゲンとしては、例えば、塩素原子、フッ素原子、臭素原子、ヨウ素原子が挙げられる。

【0171】

工程１、すなわち一般式（７）で表される化合物を一般式（８）で表される化合物へ変換する工程は、例えば不活性溶媒中、一般式（７）で表される化合物にハロゲン化剤を反応させることにより可能である。

【0172】

この反応における不活性溶媒としては、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、ジオキサン、ジメトキシメタン等のエーテル系溶媒、トルエン、ベンゼン、キシレン等の芳香族炭化水素系溶媒、ジクロロメタン、クロロホルム、ジクロロエタン、四塩化炭素等のハロゲン化炭化水素系溶媒、アセトン等のケトン系溶媒、ジメチルスルホキシド、Ｎ、Ｎ－ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、アセトニトリル等の非プロトン溶媒、ピリジン等が挙げられる。これらの溶媒は、２種類以上を適宜の割合で混合して用いてもよい。

【0173】

ハロゲン化剤としては、例えば、Ｎ－ブロモスクシンイミド、Ｎ－クロロスクシンイミドなどの一般的なハロゲン化剤が挙げられる。

【0174】

ハロゲン化剤の使用量は、一般式（７）で表される化合物に対して、通常等モル～過剰モル、好ましくは１～５倍モル、より好ましくは１～２倍モルである。

【0175】

反応温度は、通常－３０～１５０℃、好ましくは－１０～１００℃、より好ましくは－１０～４０℃である。反応時間は、通常１０分～４８時間、好ましくは１０分～２４時間、より好ましくは３０分～１８時間である。

【0176】

工程２、すなわち一般式（８）で表される化合物と一般式（４）で表される化合物を反応させて一般式（２Ｂ）で表される化合物を合成する工程は、例えば不活性溶媒中、塩基の存在下で行うことができる。

【0177】

この反応における、不活性溶媒としては、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、ジオキサン、ジメトキシメタン等のエーテル系溶媒、トルエン、ベンゼン、キシレン等の芳香族炭化水素系溶媒、ジクロロメタン、クロロホルム、ジクロロエタン、四塩化炭素等のハロゲン化炭化水素系溶媒、アセトン等のケトン系溶媒、ジメチルスルホキシド、Ｎ、Ｎ－ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、アセトニトリル等の非プロトン溶媒、ピリジン等が挙げられる。これらの溶媒は、２種類以上を適宜の割合で混合して用いてもよい。

【0178】

塩基としては、例えば水素化ナトリウム、水素化カリウム等の金属ヒドリド、水酸化カリウム、水酸化ナトリウム等の金属水酸化物、炭酸カリウム、炭酸水素カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸セシウム等の金属炭酸塩、トリエチルアミン、エチルジイソプロピルアミン等のアルキルアミン類、ナトリウムメトキシド、カリウムｔ－ブトキシド等の金属アルコキシドが挙げられる。

【0179】

一般式（８）で表される化合物の使用量は、一般式（４）で表される化合物１モルに対して、通常、０．５モル以上、０．８モル以上、好ましくは０．９～２モル、より好ましくは０．９～１．５モルである。

【0180】

塩基の使用量は、一般式（４）で表される化合物１モルに対して、通常１モル以上、好ましくは１～５倍モル、より好ましくは１～２倍モルである。

【0181】

反応温度は、通常－２０℃～溶媒の沸点より１０℃高い温度、好ましくは０℃～４０℃℃である。反応時間は、通常１０分～４８時間、好ましくは１０分～２４時間、より好ましくは３０分～１８時間である。

【0182】

工程３、すなわち一般式（２Ｂ）で表される化合物を閉環させて一般式（１）で表される化合物へと変換する工程は、例えば不活性溶媒中、塩基の存在下で行うことができる。

【0183】

一般式（２Ｂ）で表される化合物には幾何異性体である（Ｅ）体と（Ｚ）体とが存在するが、閉環反応に際しての加熱が少なくすむことから、（Ｅ）体が好ましい。

【0184】

この反応における、不活性溶媒としては、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、ジオキサン、ジメトキシメタン等のエーテル系溶媒、トルエン、ベンゼン、キシレン等の芳香族炭化水素系溶媒、ジクロロメタン、クロロホルム、ジクロロエタン、四塩化炭素等のハロゲン化炭化水素系溶媒、アセトン等のケトン系溶媒、ジメチルスルホキシド、Ｎ、Ｎ－ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、アセトニトリル等の非プロトン溶媒、ピリジン等が挙げられる。これらの溶媒は、２種類以上を適宜の割合で混合して用いてもよい。

【0185】

塩基としては、例えば水素化ナトリウム、水素化カリウム等の金属ヒドリド、水酸化カリウム、水酸化ナトリウム等の金属水酸化物、炭酸カリウム、炭酸水素カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸セシウム等の金属炭酸塩、トリエチルアミン、エチルジイソプロピルアミン等のアルキルアミン類、ナトリウムメトキシド、カリウムｔ－ブトキシド等の金属アルコキシドが挙げられる。

【0186】

塩基の使用量は、一般式（２Ｂ）で表される化合物１モルに対して、通常１モル以上、好ましくは１～５倍モル、より好ましくは１～２倍モルである。

【0187】

反応温度は、通常５０℃～溶媒の沸点より１０℃高い温度、好ましくは８０℃～溶媒の沸点より１０℃高い温度である。反応を促進するためにマイクロウェーブを用いてもよく、その場合の反応温度としては、例えば８０℃～１８０℃、好ましくは１００℃～１８０℃である。反応時間は、通常１０分～８時間、好ましくは１０分～２時間である。

【0188】

本発明による一般式（１）または（２）で表される化合物、その中間体化合物およびその出発原料化合物は、上記の合成方法により製造することができ、また、本明細書の実施例に記載された合成方法に基づき本出願時に既知または公知の技術（例えば、B. R. Kiran et al., SYNTHESIS, EVALUATION OF ANALGESIC AND ANTI-INFLAMMATORY ACTIVITIES OF SUBSTITUTED 1,2-BENZOXAZOLONE AND 3-CHLORO-1,2-BENZOXAZOLE DERIVATIVES, International Journal of Pharmaceutical Sciences and Research, 2015; 6: 2918-2925.）を参酌して製造することもできる。

【0189】

上記反応式のそれぞれに示された出発原料化合物および中間体化合物は、反応に供する前に、必要に応じて、公知の方法を用いて官能基を適当な保護基で保護し、反応終了後、公知の方法で当該保護基を脱保護することができる。

【0190】

上記の反応式に従って得られる目的化合物のそれぞれを単離および精製することができる。例えば、反応混合物を冷却した後に、粗反応生成物を分離するために濾過、濃縮、抽出等の単離手順を行い、その後粗反応生成物を、カラムクロマトグラフィー、再結晶化等の一般的な精製手順に供することにより、反応混合物から単離および精製することができる。

【0191】

上記反応式のそれぞれに示された出発原料化合物および一般式（１）または（２）で表される化合物には、溶媒が付加した溶媒和物（例えば、水和物、エタノール和物等）の形態である化合物が含まれる。

【0192】

本発明は、TRPC3チャネル及びTRPC6チャネルからなる群から選択される少なくとも１種のTRPCチャネルを阻害する活性（本明細書中、「TRPC3/6チャネル阻害活性」と称することがある。）を有する物質（TRPC3/6チャネル阻害物質）、その塩、またはそれらのプロドラッグを含有する難聴の予防および／または治療用医薬組成物を包含する。

【0193】

TRPC3/6チャネル阻害物質としては、TRPC6チャネルを阻害する活性（本明細書中、「TRPC6チャネル阻害活性」と称することがある。）を有する物質（本明細書中、「TRPC6チャネル阻害物質」と称することがある。）が好適である。

【0194】

TRPC3/6チャネル阻害物質としては、例えば一般式（１）で表される化合物、一般式（２）で表わされる化合物、Pyr2（「BTP2」とも称される)、Pyr3、Pyr4、GSK2332255B、GSK2833503A、SAR7334、BI-749327、US2019/0169168に開示された化合物、WO2019/215268に開示された化合物等が挙げられ、好ましくは一般式（１）で表される化合物、一般式（２）で表わされる化合物、Pyr2、Pyr3、Pyr4、GSK2332255B、GSK2833503A、SAR7334、BI-749327、化合物AA01～化合物AA95、化合物BB01～化合物BB32等であり、より好ましくは一般式（１）で表される化合物、一般式（２）で表わされる化合物、Pyr2、Pyr3、Pyr4、GSK2332255B、GSK2833503A、SAR7334、BI-749327等であり、さらに好ましくは一般式（１）で表される化合物、一般式（２）で表わされる化合物、Pyr4等である。

【0195】

TRPC3チャネルを阻害する活性（本明細書中、「TRPC3チャネル阻害活性」と称することがある。）を有する物質（本明細書中、「TRPC3チャネル阻害物質」と称することがある。）としては、例えば一般式（１）で表される化合物、一般式（２）で表わされる化合物、Pyr2、Pyr3、Pyr4、GSK2332255B、GSK2833503A、WO2019/215268に開示された化合物等が挙げられ、好ましくは一般式（１）で表される化合物、一般式（２）で表わされる化合物、Pyr2、Pyr3、Pyr4、GSK2332255B、GSK2833503A、化合物BB01～化合物BB32等であり、より好ましくは一般式（１）で表される化合物、一般式（２）で表わされる化合物、Pyr2、Pyr3、Pyr4、GSK2332255B、GSK2833503A等であり、さらに好ましくは一般式（１）で表される化合物、一般式（２）で表わされる化合物、Pyr4等である。

【0196】

TRPC6チャネル阻害物質としては、例えば一般式（１）で表される化合物、一般式（２）で表わされる化合物、Pyr2、Pyr4、GSK2332255B、GSK2833503A、SAR7334、BI-749327、US2019/0169168に開示された化合物、WO2019/215268に開示された化合物等が挙げられ、好ましくは一般式（１）で表される化合物、一般式（２）で表わされる化合物、Pyr2、Pyr4、GSK2332255B、GSK2833503A、SAR7334、BI-749327、化合物AA01～化合物AA95、化合物BB01～化合物BB32等であり、より好ましくは一般式（１）で表される化合物、一般式（２）で表わされる化合物、Pyr2、Pyr4、GSK2332255B、GSK2833503A、SAR7334、BI-749327等であり、さらに好ましくは一般式（１）で表される化合物、一般式（２）で表わされる化合物、Pyr4等である。

【0197】

Pyr2は、BTP2とも称され、CAS No.223499-30-7が付されている。
Pyr3は、CAS No.1160541-60-2が付されている。
Pyr4は、CAS No.223499-35-2が付されている。
GSK2332255Bは、CAS No.1366233-41-1が付されている。
GSK2833503Aは、CAS No.1333207-63-8が付されている。
SAR7334は、CAS No.1333210-07-3が付されている。
BI-749327は、CAS No.2361241-23-6が付されている。

【化35】

【0198】

US2019/0169168の請求項1に記載された化合物としては、例えば、
化合物AA01：
[4-（6-アミノ-4-メトキシ-ピリジン-3-イル）-ピペラジン-1-イル]-[5-（4-フルオロ-フェノキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル]-メタノン、
化合物AA02：
（6-アミノ-4-メチル-3',4',5',6'-テトラヒドロ-2'H-[3,4']ビピリジニル-1'-イル）-[5-（4-フルオロ-フェノキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル]-メタノン、
化合物AA03：
（6-アミノ-3',4',5',6'-テトラヒドロ-2'H-[3,4']ビピリジニル-1'-イル）-（4-メトキシ-5-フェノキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA04：
（6-アミノ-4-メトキシ-3',4',5',6'-テトラヒドロ-2'H-[3,4']ビピリジニル-1'-イル）-[5-（4-フルオロ-フェノキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル]-メタノン、
化合物AA05：
[4-（6-アミノ-4-メトキシ-ピリジン-3-イル）-ピペラジン-1-イル]-（4-メトキシ-5-フェノキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA06：
[4-（6-アミノ-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル]-[5-（4-イソプロポキシ-フェノキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル]-メタノン、
化合物AA07：
[（R）-4-（6-アミノ-4-メチル-ピリジン-3-イル）-2-ヒドロキシメチル-ピペラジン-1-イル]-[5-（4-フルオロ-フェノキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル]-メタノン、
化合物AA08：
[7-（6-アミノ-4-メトキシ-ピリジン-3-イル）-4,7-ジアザ-スピロ[2.5]オクト-4-イル]-（4-メトキシ-5-フェノキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA09：
[7-（6-アミノ-4-メトキシ-ピリジン-3-イル）-4,7-ジアザ-スピロ[2.5]オクト-4-イル]-[5-（4-フルオロ-フェノキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル]-メタノン、
化合物AA10：
（6-アミノ-4-メチル-3',4',5',6'-テトラヒドロ-2'H-[3,4']ビピリジニル-1'-イル）-（4-メトキシ-5-フェノキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA11：
[4-（6-アミノ-5-メトキシ-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル]-[5-（4-フルオロ-フェノキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル]-メタノン、
化合物AA12：
[4-（6-アミノ-ピリジン-3-イル）-ピペラジン-1-イル]-[4-メトキシ-5-（4-メトキシ-フェノキシ）-ピリジン-2-イル]-メタノン、
化合物AA13：
[4-（6-アミノ-ピリジン-3-イル）-ピペラジン-1-イル]-[5-（4-フルオロ-フェノキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル]-メタノン、
化合物AA14：
（6-アミノ-3',4',5',6'-テトラヒドロ-2'H-[3,4']ビピリジニル-1'-イル）-[5-（4-フルオロ-フェノキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル]-メタノン、
化合物AA15：
[4-（6-アミノ-ピリジン-3-イル）-ピペラジン-1-イル]-（4-メトキシ-5-フェノキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA16：
[4-（6-アミノ-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル]-（4-メトキシ-5-フェノキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA17：
[4-（6-アミノ-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル]-[5-（4-フルオロ-フェノキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル]-メタノン、
化合物AA18：
[（R）-4-（6-アミノ-4-メチル-ピリジン-3-イル）-2-ヒドロキシメチル-ピペラジン-1-イル]-（4-メトキシ-5-フェノキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA19：
（6-アミノ-4-メトキシ-3',4',5',6'-テトラヒドロ-2'H-[3,4']ビピリジニル-1'-イル）-[5-（2-フルオロ-ベンジルオキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル]-メタノン、
化合物AA20：
[（R）-4-（6-アミノ-ピリジン-3-イル）-2-ヒドロキシメチル-ピペラジン-1-イル]-[5-（4-フルオロ-フェノキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル]-メタノン、
化合物AA21：
[4-（6-アミノ-5-メトキシ-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル]-（4-メトキシ-5-フェノキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA22：
（6-アミノ-3',4',5',6'-テトラヒドロ-2'H-[3,4']ビピリジニル-1'-イル）-[4-メトキシ-5-（4-メトキシ-フェノキシ）-ピリジン-2-イル]-メタノン、
化合物AA23：
（6-アミノ-4-メトキシ-3',4',5',6'-テトラヒドロ-2'H-[3,4']ビピリジニル-1'-イル）-（4-メトキシ-5-フェノキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA24：
（6-アミノ-4-メトキシ-3',4',5',6'-テトラヒドロ-2'H-[3,4']ビピリジニル-1'-イル）-[4-メトキシ-5-（4-トリフルオロメチル-フェノキシ）-ピリジン-2-イル]-メタノン、
化合物AA25：
[4-（6-アミノ-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル]-（5-シクロブチルメトキシ-4-メトキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA26：
（6-アミノ-4-メトキシ-3',4',5',6'-テトラヒドロ-2'H-[3,4']ビピリジニル-1'-イル）-[4-メトキシ-5-（1-メチル-シクロプロピルメトキシ）-ピリジン-2-イル]-メタノン、
化合物AA27：
[（R）-4-（6-アミノ-4-メトキシ-ピリジン-3-イル）-2-メトキシメチル-ピペラジン-1-イル]-（4-メトキシ-5-フェノキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA28：
（6-アミノ-4-メトキシ-3',4',5',6'-テトラヒドロ-2'H-[3,4']ビピリジニル-1'-イル）-[4-メトキシ-5-（4-メトキシ-フェノキシ）-ピリジン-2-イル]-メタノン、
化合物AA29：
[4-（6-アミノ-4-メチル-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル]-[5-（4-フルオロ-フェノキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル]-メタノン、
化合物AA30：
（6-アミノ-4-メトキシ-3',4',5',6'-テトラヒドロ-2'H-[3,4']ビピリジニル-1'-イル）-（5-シクロヘキシルオキシ-4-メトキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA31：
[4-（6-アミノ-4-メチル-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル]-（4-メトキシ-5-フェノキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA32：
（6-アミノ-4-メトキシ-3',4',5',6'-テトラヒドロ-2'H-[3,4']ビピリジニル-1'-イル）-[5-（4-フルオロ-ベンジルオキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル]-メタノン、
化合物AA33：
[4-（6-アミノ-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル]-[4-メトキシ-5-（4-トリフルオロメチル-フェノキシ）-ピリジン-2-イル]-メタノン、
化合物AA34：
[4-（6-アミノ-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル]-[5-（4-クロロ-フェノキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル]-メタノン、
化合物AA35：
（6-アミノ-4-メトキシ-3,4,5,6'-テトラヒドロ-2'H-[3,4']ビピリジニル-1'-イル）-（5-シクロペンチルオキシ-4-メトキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA36：
[4-（6-アミノ-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル]-（5-イソブトキシ-4-メトキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA37：
（6-アミノ-4-メトキシ-3',4',5',6'-テトラヒドロ-2'H-[3,4']ビピリジニル-1'-イル）-（5-シクロプロピルメトキシ-4-メトキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA38：
[3-（6-アミノ-4-メトキシ-ピリジン-3-イル）-3,8-ジアザ-ビシクロ[3.2.1]オクト-8-イル]-[5-（4-フルオロ-フェノキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル]-メタノン、
化合物AA39：
（6-アミノ-4-メトキシ-3',4',5',6'-テトラヒドロ-2'H-[3,4']ビピリジニル-1'-イル）-（5-イソブトキシ-4-メトキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA40：
[4-（6-アミノ-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル]-[5-（4-シクロプロポキシ-フェノキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル]-メタノン、
化合物AA41：
[4-（6-アミノ-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル]-[5-（4-フルオロ-ベンジルオキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル]-メタノン、
化合物AA42：
[（R）-4-（6-アミノ-4-メトキシ-ピリジン-3-イル）-2-ヒドロキシメチル-ピペラジン-1-イル]-[5-（4-フルオロ-フェノキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル]-メタノン、
化合物AA43：
（6-アミノ-4-メトキシ-3',4',5',6'-テトラヒドロ-2'H-[3,4']ビピリジニル-1'-イル）-（5-ベンジルオキシ-4-メトキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA44：
[4-（6-アミノ-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル]-[4-メトキシ-5-（4-メトキシ-フェノキシ）-ピリジン-2-イル]-メタノン、
化合物AA45：
（6-アミノ-4-メトキシ-3',4',5',6'-テトラヒドロ-2'H-[3,4']ビピリジニル-1'-イル）-[5-（3,3-ジフルオロ-シクロブチルメトキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル]-メタノン、
化合物AA46：
（6-アミノ-4-メトキシ-3',4',5',6'-テトラヒドロ-2'H-[3,4']ビピリジニル-1'-イル）-（4-メトキシ-5-プロポキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA47：
[4-（6-アミノ-4-メトキシ-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル]-（4-メトキシ-5-フェノキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA48：
（6-アミノ-4-メトキシ-3',4',5',6'-テトラヒドロ-2'H-[3,4']ビピリジニル-1'-イル）-[5-（2-シクロプロピル-エトキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル]-メタノン、
化合物AA49：
[4-（6-アミノ-4-メトキシ-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル]-[5-（4-フルオロ-フェノキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル]-メタノン、
化合物AA50：
（1R）-1-[（2R）-4-（6-アミノ-4-メトキシピリジン-3-イル）-1-（5-フェノキシピリジン-2-カルボニル）ピペラジン-2-イル]エタン-1-オール、
化合物AA51：
[3-（6-アミノ-4-メトキシ-ピリジン-3-イル）-3,8-ジアザ-ビシクロ[3.2.1]オクト-8-イル]-（4-メトキシ-5-フェノキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA52：
（6-アミノ-4-メトキシ-3',4',5',6'-テトラヒドロ-2'H-[3,4']ビピリジニル-1'-イル）-（4-メトキシ-5-フェネチルオキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA53：
（6-アミノ-4-メトキシ-3',4',5',6'-テトラヒドロ-2'H-[3,4']ビピリジニル-1'-イル）-（5-シクロブチルメトキシ-4-メトキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA54：
[4-（6-アミノ-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル]-[5-（4-ジフルオロメトキシ-フェノキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル]-メタノン、
化合物AA55：
[（R）-4-（6-アミノ-4-メトキシ-ピリジン-3-イル）-2-メトキシメチル-ピペラジン-1-イル]-[5-（4-フルオロ-フェノキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル]-メタノン、
化合物AA56：
[4-（6-アミノ-4-メトキシ-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル]-[4-メトキシ-5-（4-トリフルオロメチル-フェノキシ）-ピリジン-2-イル]-メタノン、
化合物AA57：
[4-（6-アミノ-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル]-[5-（2-フルオロ-ベンジルオキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル]-メタノン、
化合物AA58：
（1S）-1-[（2R）-4-（6-アミノ-4-メトキシピリジン-3-イル）-1-（5-フェノキシピリジン-2-カルボニル）ピペラジン-2-イル]エタン-1-オール、
化合物AA59：
（6-アミノ-4-メトキシ-3',4',5',6'-テトラヒドロ-2'H-[3,4']ビピリジニル-1'-イル）-[5-（2,2-ジメチル-プロポキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル]-メタノン、
化合物AA60：
[4-（6-アミノ-5-メトキシ-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル]-[4-メトキシ-5-（4-メトキシ-フェノキシ）-ピリジン-2-イル]-メタノン、
化合物AA61：
[4-（6-アミノ-4-メトキシ-ピリジン-3-イル）-ピペラジン-1-イル]-（5-シクロプロピルメトキシ-4-メトキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA62：
[4-（6-アミノ-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル]-（5-シクロヘキシルオキシ-4-メトキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA63：
[（S）-4-（6-アミノ-4-メトキシ-ピリジン-3-イル）-2-ヒドロキシメチル-ピペラジン-1-イル]-[5-（4-フルオロ-フェノキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル]-メタノン、
化合物AA64：
（6-アミノ-4-メトキシ-3',4',5',6'-テトラヒドロ-2'H-[3,4']ビピリジニル-1'-イル）-[5-（1-フルオロメチル-シクロプロピルメトキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル]-メタノン、
化合物AA65：
（6-アミノ-4-メトキシ-3',4',5',6'-テトラヒドロ-2'H-[3,4']ビピリジニル-1'-イル）-（5-エトキシ-4-メトキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA66：
[4-（6-アミノ-4-メトキシ-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル]-[4-メトキシ-5-（4-メトキシ-フェノキシ）-ピリジン-2-イル]-メタノン、
化合物AA67：
[4-（6-アミノ-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル]-[5-（2-シクロプロピル-エトキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル]-メタノン、
化合物AA68：
[7-（6-アミノ-4-メトキシ-ピリジン-3-イル）-3-オキサ-9-アザ-ビシクロ[3.3.1]ノン-9-イル]-（4-メトキシ-5-フェノキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA69：
[（R）-4-（6-アミノ-4-メトキシ-ピリジン-3-イル）-2-ヒドロキシメチル-ピペラジン-1-イル]-（4-メトキシ-5-フェノキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA70：
（6-アミノ-4-メトキシ-3',4',5',6'-テトラヒドロ-2'H-[3,4']ビピリジニル-1'-イル）-[5-（（S）-1-シクロプロピル-エトキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル]-メタノン、
化合物AA71：
[（S）-4-（6-アミノ-4-メトキシ-ピリジン-3-イル）-2-ヒドロキシメチル-ピペラジン-1-イル]-（4-メトキシ-5-フェノキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA72：
（6-アミノ-4-メトキシ-3',4',5',6'-テトラヒドロ-2'H-[3,4']ビピリジニル-1'-イル）-（5-イソプロポキシ-4-メトキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA73：
[4-（6-アミノ-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル]-（4-メトキシ-5-フェネチルオキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA74：
[4-（6-アミノ-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル]-[5-（2,2-ジメチル-プロポキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル]-メタノン、
化合物AA75：
[4-（6-アミノ-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル]-[4-メトキシ-5-（1-メチル-シクロプロピルメトキシ）-ピリジン-2-イル]-メタノン、
化合物AA76：
[4-（6-アミノ-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル]-（4-メトキシ-5-プロポキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA77：
（6-アミノ-4-メトキシ-3',4',5',6'-テトラヒドロ-2'H-[3,4']ビピリジニル-1'-イル）-[5-（（R）-1-シクロプロピル-エトキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル]-メタノン、
化合物AA78：
[4-（6-アミノ-4-メチル-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル]-（5-シクロプロピルメトキシ-4-メトキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA79：
[4-（6-アミノ-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル]-[5-（（S）-1-シクロプロピル-エトキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル]-メタノン、
化合物AA80：
[4-（6-アミノ-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル]-[4-メトキシ-5-（4-トリフルオロメトキシ-フェノキシ）-ピリジン-2-イル]-メタノン、
化合物AA81：
[（R）-4-（6-アミノ-ピリジン-3-イル）-2-ヒドロキシメチル-ピペラジン-1-イル]-（4-メトキシ-5-フェノキシ-ピリジン-2-イル）-メタノン、
化合物AA82：
[（R）-4-（6-アミノ-ピリジン-3-イル）-2-ヒドロキシメチル-ピペラジン-1-イル]-[4-メトキシ-5-（4-メトキシ-フェノキシ）-ピリジン-2-イル]-メタノン、
化合物AA83：
[4-（6-アミノ-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル]-[5-（フェノキシ）-4-エトキシ-ピリジン-2-イル]-メタノン、
化合物AA84：
（6-アミノ-4-シクロプロポキシ-3',4',5',6'-テトラヒドロ-2'H-[3,4']ビピリジニル-1'-イル）-[5-（フェノキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル]-メタノン、
化合物AA85：
[4-（6-アミノ-4-エトキシ-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル]-[4-メトキシ-5-（フェノキシ）-ピリジン-2-イル]-メタノン、
化合物AA86：
（6-アミノ-4-プロポキシ-3',4',5',6'-テトラヒドロ-2'H-[3,4']ビピリジニル-1'-イル）-[5-（フェノキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル]-メタノン、
化合物AA87：
（6-アミノ-4-エトキシ-3',4',5',6'-テトラヒドロ-2'H-[3,4']ビピリジニル-1'-イル）-[5-（4-トリフルオロメチル-フェノキシ）-4-メトキシ-ピリジン-2-イル]-メタノン、
化合物AA88：
[4-（6-アミノ-ピリダジン-3-イル）-ピペリジン-1-イル]-[5-（4-フルオロ-フェノキシ）-4-エトキシ-ピリジン-2-イル]-メタノン、
化合物AA89：
[3-（6-アミノ-ピリダジン-3-イル）-8-アザ-ビシクロ[3.2.1]オクト-8-イル]-[4-エトキシ-5-（4-フルオロ-フェノキシ）-ピリジン-2-イル]-メタノン、
化合物AA90：
6-{1-{4-メトキシ-5-[4-（トリフルオロメチル）フェノキシ]ピリジン-2-カルボニル}ピペリジン-4-イル）-5-メチルピリダジン-3-アミン、
化合物AA91：
5-メトキシ-6-（1-{5-[4-（トリフルオロメチル）-フェノキシ]-ピリジン-2-カルボニル}ピペリジン-4-イル）-ピリダジン-3-アミン、
化合物AA92：
4-メトキシ-5-[1-（4-メトキシ-5-{[トランス-3-（トリフルオロメチル）シクロブチル]-メトキシ}ピリジン-2-カルボニル）-ピペリジン-4-イル]ピリジン-2-アミン、
化合物AA93：
4-メトキシ-5-[1-（4-メトキシ-5-{[（シス-3-（トリフルオロメチル）-シクロブチル]メトキシ}-ピリジン-2-カルボニル）ピペリジン-4-イル]ピリジン-2-アミン、
化合物AA94：
4-メトキシ-5-（1-{4-メトキシ-5-[（2）-3,3,3-トリフルオロ-2-メチルプロポキシ]-ピリジン-2-カルボニル}ピペリジン-4-イル）ピリジン-2-アミン、
化合物AA95：
5-{1-{5-[（2,2-ジフルオロシクロブチル）-メトキシ]-4-メトキシ-ピリジン-2-カルボニル}-ピペリジン-4-イル）-4-メトキシピリジン-2-アミン
等が挙げられ、
好ましくは、化合物AA29、化合物AA31、化合物AA49、化合物AA56、化合物AA66、化合物AA85、化合物AA87、化合物AA90等が挙げられる。

【0199】

WO2019/215268に記載された化合物としては、例えば、
化合物BB01：
1-[4-(4-フルオロフェニル)-2-(トリアゾール-2-イル)シクロペンチル]ピペリジン-3-アミン、
化合物BB02：
1-[2-(3-アミノ-1-ピペリジル)-4-(4-フルオロフェニル)シクロペンチル]ピラゾール-4-カルボニトリル、
化合物BB03：
1-[2-(3-アミノ-1-ピペリジル)-4-(4-フルオロフェニル)シクロペンチル]ピラゾール-3-カルボニトリル、
化合物BB04：
1-[2-(3-アミノ-1-ピペリジル)-4-(4-フルオロフェニル)シクロペンチル]ピロール-3-カルボニトリル、
化合物BB05：
1-[2-(3-アミノ-1-ピペリジル)-4-(4-フルオロフェニル)シクロペンチル]トリアゾール-4-カルボニトリル、
化合物BB06：
1-[2-(3-アミノ-5-フルオロ-1-ピペリジル)-4-(4-フルオロフェニル)シクロペンチル]ピラゾール-4-カルボニトリル、
化合物BB07：
1-[2-(3-アミノ-4,4-ジフルオロ-1-ピペリジル)-4-(4-フルオロフェニル)シクロペンチル]ピラゾール-4-カルボニトリル、
化合物BB08：
1-[4-(4-フルオロフェニル)-2-ピラゾール-1-イル-シクロペンチル]ピペリジン-3-アミン、
化合物BB09：
5-フルオロ-1-[4-(4-フルオロフェニル)-2-ピラゾール-1-イル-シクロペンチル]ピペリジン-3-アミン、
化合物BB10：
5-フルオロ-1-[4-(4-フルオロフェニル)-2-(1,2,4-トリアゾール-1-イル)シクロペンチル]ピペリジン-3-アミン、
化合物BB11：
5-フルオロ-1-[4-(4-フルオロフェニル)-2-(テトラゾール-2-イル)シクロペンチル]ピペリジン-3-アミン、
化合物BB12：
1-[4-(4-フルオロフェニル)-2-(テトラゾール-2-イル)シクロペンチル]ピペリジン-3-アミン、
化合物BB13：
1-[2-(3-アミノ-1-ピペリジル)-4-(4-フルオロフェニル)シクロペンチル]-1,2,4-トリアゾール-3-カルボニトリル、
化合物BB14：
4-[2-(3-アミノ-1-ピペリジル)-4-(4-フルオロ-3-ヒドロキシ-フェニル)シクロペントキシ]ベンゾニトリル、
化合物BB15：
4-[2-(3-アミノ-1-ピペリジル)-4-(4-フルオロ-3-メトキシ-フェニル)シクロペントキシ]ベンゾニトリル、
化合物BB16：
4-[2-(3-アミノ-1-ピペリジル)-4-(3-フルオロフェニル)シクロペントキシ]-3-クロロ-ベンゾニトリル、
化合物BB17：
4-[2-(3-アミノ-4,4-ジフルオロ-1-ピペリジル)-4-(4-フルオロフェニル)シクロペントキシ]ベンゾニトリル、
化合物BB18：
4-[2-(5-アミノ-3,3-ジフルオロ-1-ピペリジル)-4-(4-フルオロフェニル)シクロペントキシ]ベンゾニトリル、
化合物BB19：
4-[2-(3-アミノ-1-ピペリジル)-4-(4-フルオロフェニル)シクロペントキシ]-2-フルオロ-ベンゾニトリル、
化合物BB20：
2-[2-(3-アミノ-1-ピペリジル)-4-フェニル-シクロペントキシ]ベンゾニトリル、
化合物BB21：
4-[2-(3-アミノ-1-ピペリジル)-4-フェニル-シクロペントキシ]-3-クロロ-ベンゾニトリル、
化合物BB22：
6-[2-(3-アミノ-5-フルオロ-1-ピペリジル)-4-(4-フルオロフェニル)シクロペントキシ]-5-メチル-ピリダジン-3-カルボニトリル、
化合物BB23：
1-[2-(4-クロロピリダジン-3-イル)オキシ-4-(4-フルオロフェニル)シクロペンチル]ピペリジン-3-アミン、
化合物BB24：
6-[2-(3-アミノ-5-フルオロ-1-ピペリジル)-4-(4-フルオロフェニル)シクロペントキシ]ピリダジン-3-カルボニトリル、
化合物BB25：
1-[4-(4-フルオロフェニル)-2-(5-フルオロピリダジン-3-イル)オキシ-シクロペンチル]ピペリジン-3-アミン、
化合物BB26：
6-(2-((R)-3-アミノピペリジン-1-イル)-4-(4-フルオロフェニル)シクロペンチルオキシ)ニコチノニトリル、
化合物BB27：
6-[2-(3-アミノ-1-ピペリジル)-4-(4-フルオロフェニル)シクロペントキシ]ピリジン-3-カルボニトリル、
化合物BB28：
1-[4-(4-フルオロフェニル)-2-ピリダジン-3-イルオキシ-シクロペンチル]ピペリジン-3-アミン、
化合物BB29：
5-フルオロ-1-[4-(4-フルオロフェニル)-ピリミジン-4-イルオキシ-シクロペンチル]ピペリジン-3-アミン、
化合物BB30：
2-[2-(3-アミノ-1-ピペリジル)-4-(4-フルオロフェニル)シクロペントキシ]ピリミジン-5-カルボニトリル、
化合物BB31：
5-[2-(3-アミノ-1-ピペリジル)-4-(4-フルオロフェニル)シクロペントキシ]ピラジン-2-カルボニトリル、
化合物BB32：
5-[2-(3-アミノ-1-ピペリジル)-4-(4-フルオロフェニル)シクロペントキシ]ピリミジン-2-カルボニトリル
等が挙げられる。

【0200】

TRPC3/6チャネル阻害物質、一般式（１）または（２）で表される化合物、上記各反応式において得られる中間体化合物、および出発原料化合物に、二重結合、環、縮合環における異性体（Ｅ、Ｚ、シス、トランス体）、不斉炭素の存在等による異性体（Ｒ、Ｓ体、α、β体、エナンチオマー、ジアステレオマー）、旋光性を有する光学活性体（Ｄ、Ｌ、ｄ、ｌ体）、クロマトグラフ分離による極性体（高極性体、低極性体）、平衡化合物、回転異性体、これらの任意の割合の混合物、ラセミ混合物は幾何異性体、立体異性体、光学異性体などの異性体が存在する場合には、全ての異性体が包含される。例えば、光学異性体は、公知の各種の分割法（例えば、結晶化による光学分割、クロマトグラフィーによる直接光学分割する方法等）を利用して分離することができる。

【0201】

TRPC3/6チャネル阻害物質（例えば、一般式（１）または（２）で表される化合物等）の塩には薬学的に許容されるものがすべて含まれる。薬学的に許容される塩は、特に制限されず、例えば、ナトリウム塩、カリウム塩等のアルカリ金属塩；カルシウム塩、マグネシウム塩等のアルカリ土類金属塩；亜鉛塩等の無機金属塩；トリエチルアミン、トリエタノールアミン、トリヒドロキシメチルアミノメタン、アミノ酸等の有機塩基塩；塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、リン酸塩、硝酸塩等の無機酸塩；酢酸塩、炭酸塩、プロピオン酸塩、コハク酸塩、乳酸塩、リンゴ酸塩、酒石酸塩、クエン酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、メタンスルホン酸塩、ｐ－トルエンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、アスコルビン酸塩等の有機酸塩等が挙げられる。これらの塩は常法に従って製造することができる。

【0202】

各種の異性体は公知の分離法により単離できる。例えば、ラセミ化合物は一般的な光学分割法（例えば、結晶化による光学分割、クロマトグラフィーによる直接光学分割する方法等）により、立体的に純粋な異性体に導くことができる。また、光学活性な化合物は適当な光学活性な原料を用いることにより製造することもできる。

【0203】

上記反応式のそれぞれに表される出発原料化合物、中間体化合物、および目的化合物を適切な塩形態で使用することができる。

【0204】

本発明においてTRPC3/6チャネル阻害物質（例えば、一般式（１）または（２）で表される化合物等）、その塩、またはそのプロドラッグでは、１つまたは複数の原子を１つまたは複数の同位体原子で置換することができる。同位体原子の例としては重水素（２Ｈ）、三重水素（３Ｈ）、１３Ｃ、１４Ｎ、１８Ｏ等が挙げられる。

【0205】

本発明には、TRPC3/6チャネル阻害物質（例えば、一般式（１）または（２）で表される化合物等）、その塩、またはそれらのプロドラッグを含有する難聴の予防および／または治療用医薬組成物が含まれる。本発明の医薬組成物は、TRPC3/6チャネル阻害物質、その塩、またはそのプロドラッグを通常の医薬組成物の形態に製剤したものであってよく、当該化合物、その塩、またはそのプロドラッグと薬学的に許容可能な担体とを用いて調製されてよい。当該担体としては、通常使用される充填剤、増量剤、結合剤、付湿剤、崩壊剤、表面活性剤、滑沢剤等の希釈剤あるいは賦形剤が挙げられる。

【0206】

本発明においてプロドラッグは、生体内における反応（例えば酵素反応、胃酸による反応）によってTRPC3/6チャネル阻害物質（例えば、一般式（１）または（２）で表される化合物等）に変換される化合物をいう。例えば、TRPC3/6チャネル阻害物質（例えば、一般式（１）または（２）で表される化合物等）がカルボキシルを有する場合、該カルボキシルがエステルに変換された化合物である。該エステルとしては、メチルエステル、エチルエステル、１－プロピルエステル、２－プロピルエステル、ピバロイルオキシメチルエステル、アセチルオキシメチルエステル、シクロヘキシルアセチルオキシメチルエステル、１－メチルシクロヘキシルカルボニルオキシメチルエステル、エチルオキシカルボニルオキシ－１－エチルエステル、シクロヘキシルオキシカルボニルオキシ－１－エチルエステルなどが挙げられる。

【0207】

本発明の医薬組成物としては、治療目的に応じて種々の形態の中から選択でき、その代表的なものとして錠剤、丸剤、散剤、液剤、懸濁剤、乳剤、顆粒剤、カプセル剤、坐剤、注射剤（液剤、懸濁剤等）、軟膏剤、吸入剤、点耳剤等が挙げられる。これらの中でも経口投与用の製剤、局所（好ましくは耳内）投与用の製剤および注射剤が好ましく、経口投与用の製剤がより好ましい。

【0208】

錠剤の成形に使用する担体としては、公知のものを広く使用でき、例えば、乳糖、白糖、塩化ナトリウム、ブドウ糖、尿素、デンプン、炭酸カルシウム、カオリン、結晶セルロース等の賦形剤、水、エタノール、プロパノール、単シロップ、ブドウ糖液、デンプン液、ゼラチン溶液、メチルセルロース、リン酸カリウム、ポリビニルピロリドン、カルボキシメチルセルロース、セラック等の結合剤、アルギン酸ナトリウム、乾燥デンプン、寒天末、ラミナラン末、炭酸カルシウム、炭酸水素ナトリウム、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル類、ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリン酸モノグリセリド、デンプン、乳糖等の崩壊剤、第４級アンモニウム塩基、ラウリル硫酸ナトリウム等の吸収促進剤、ステアリン、カカオバター、水素添加油等の崩壊抑制剤、グリセリン、デンプン等の保湿剤、デンプン、乳糖、カオリン、ベントナイト、コロイド状ケイ酸等の吸着剤、精製タルク、ステアリン酸塩、ホウ酸末、ポリエチレングリコール等の滑沢剤等が挙げられる。

【0209】

さらに、錠剤は、必要に応じて通常の錠皮を施した錠剤、例えば、糖衣剤、ゼラチン被包錠、腸溶被錠、フィルムコーティング錠あるいは二重錠、多層錠とすることができる。

【0210】

丸剤の成形に使用する担体としては、公知のものを広く使用でき、例えば、ブドウ糖、乳糖、デンプン、カカオ脂、硬化植物油、カオリン、タルク等の賦形剤、アラビアゴム末、トラガント末、ゼラチン、エタノール等の結合剤、ラミナラン、寒天等の崩壊剤等が挙げられる。

【0211】

坐剤の成形に使用する担体としては、公知のものを広く使用でき、例えば、ポリエチレングリコール、カカオ脂、高級アルコール、高級アルコールのエステル類、ゼラチン、半合成グリセライド等が挙げられる。

【0212】

注射剤として調製される場合は、液剤、乳剤および懸濁剤は殺菌され、かつ血液と等張であるのが好ましい。これらの液剤、乳剤および懸濁剤の調製の際に使用する希釈剤としては、公知のものを広く使用することができ、例えば、水、エタノール、プロピレングリコール、ポリオキシ化イソステアリルアルコール、エトキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル類等が挙げられる。なお、注射剤の場合、等張性の溶液を調製するのに十分な量の食塩、グリセリン、ブドウ糖等を医薬製剤中に含有させることができ、また通常の溶解補助剤、緩衝剤、無痛化剤等を含有させることができ、更に必要に応じて着色剤、保存剤、香料、風味剤、甘味剤等や他の医薬品を含有させることができる。

【0213】

軟膏剤は、ペースト、クリーム、またはゲルなどの形態があり、これらの形態に調製するに際しては、希釈剤として、例えば、白色ワセリン、パラフィン、グリセリン、セルロース誘導体、ポリエチレングリコール、シリコーン、ベントナイト等を使用できる。

【0214】

吸入剤は、有効成分をエアゾールとして吸入させることにより、気管支または肺に適用することを目的とした製剤であり、粉末吸入剤、吸入液剤、吸入エアゾール剤等が含まれる。粉末吸入剤は、粉末状固体粒子のエアゾールとして吸入する製剤をいい、通常、有効成分を微細な粒子とし、必要に応じて乳糖等の添加剤と混和して均質とすることにより製造することができる。吸入液剤は、ネブライザ等により適用する液状の吸入剤をいい、通常、有効成分に溶剤および適切な等張化剤、ｐＨ調節剤等を加え、混和することにより製造できる。吸入エアゾール剤は、容器に充填した噴射剤と共に、一定量の有効成分を噴霧する定量噴霧式吸入剤である。吸入エアゾール剤は、通常、有効成分に溶剤および適切な分散剤、安定化剤等を加えて、溶液または懸濁液とし、液状の噴射剤と共に耐圧性の容器に充填し、定量バルブを装着することにより製造することができる。

【0215】

本発明の医薬組成物は、必要に応じて着色剤、保存剤、香料、風味剤、甘味剤などや他の医薬品を含有してもよい。

【0216】

本発明の医薬組成物中に含有されるTRPC3/6チャネル阻害物質（例えば、一般式（１）または（２）で表される化合物等）、その塩、またはそれらのプロドラッグの量は、特に限定されず広い範囲内から適宜選択することができるが、医薬組成物中に、通常、０．５～９０重量％、１～８５重量％、好ましくは１～８０重量％である。

【0217】

本発明の医薬組成物の投与方法は特に制限されず、各種製剤形態、患者の年齢、性別、疾患の状態、その他の条件に応じた方法で投与される。例えば、錠剤、丸剤、液剤、懸濁剤、乳剤、顆粒剤およびカプセル剤の場合には経口投与される。また、注射剤の場合には、単独であるいはブドウ糖、アミノ酸等の通常の補液と混合して静脈内に投与したり、更には必要に応じて単独で筋肉内、皮内、皮下、腹腔内等に投与することができる。坐剤の場合には、直腸内に投与される。吸入剤の場合には経鼻投与される。点耳剤の場合は経耳投与される。好ましい投与方法は、経口投与、注射投与（皮下投与、筋肉内投与、静脈内投与、および髄腔内投与を含む）、経耳投与であり、より好ましくは経口投与である。

【0218】

本発明の医薬組成物の投与量は、用法、患者の年齢、性別、疾患の程度、その他の条件を考慮して選択すればよく、有効成分であるTRPC3/6チャネル阻害物質（例えば、一般式（１）または（２）で表される化合物等）、その塩、またはそのプロドラッグが、通常、１日あたり体重１ｋｇに対して０．０１～１００ｍｇ、好ましくは０．１～５０ｍｇとなる量で、１日あたり１回～数回に分けて、あるいは２日、３日、４日、５日、６日、１週間、２週間または４週間に１回の間隔で投与される。投与量は、種々の条件で変動するので、上記範囲より少ない投与量で充分な場合もあるし、また上記範囲を超えた投与量が必要な場合もある。

【0219】

また、本発明の医薬組成物は、他の薬剤と組み合わせた併用剤とすることもできる。

【0220】

本発明は、難聴の予防および／または治療を必要とする患者にTRPC3/6チャネル阻害物質（例えば、一般式（１）または（２）で表される化合物等）、その薬学的に許容される塩、またはそのプロドラッグの有効量を投与することを含む、難聴の予防および／または治療方法を包含しうる。

【0221】

TRPC3/6チャネル阻害物質（例えば、一般式（１）または（２）で表される化合物等）、その塩、またはそれらのプロドラッグは、難聴を予防および／または治療する作用を有する。
難聴は、感音難聴、伝音難聴、混合難聴、非器質性難聴などを包含し、好ましくは感音難聴、混合難聴、より好ましくは感音難聴である。
また、難聴は、軽度難聴、中等度難聴、高度難聴、重度難聴のいずれも包含し、好ましくは軽度難聴、中等度難聴、高度難聴、より好ましくは軽度難聴、中等度難聴である。 さらにまた、難聴は、好ましくは薬剤性難聴、つまり薬剤に起因する難聴（例：薬剤によって惹起される難聴）である。
薬剤としては白金製剤、抗菌剤、サリチル酸剤、利尿剤などが上げられる。白金製剤としてはシスプラチン、カルボプラチン、ネダプラチン、オキサリプラチン等が挙げられる。抗菌剤としてはアミノグリコシド系抗菌剤、例えばストレプトマイシン、カナマイシン、アミカシン、ゲンタマイシン、ベカナマイシン、リボスタマイシン、ジベカシン、トブラマイシン、イセパマイシン、アルベカシン、ハベカシン等が挙げられる。サリチル酸剤としてはアスピリン、サリチル酸ナトリウム等が挙げられる。利尿剤としてはフロセミド、トラセミド、ブメタニド、アゾセミド、ピレタニド等が挙げられる。
薬剤性難聴としては、白金製剤に起因する難聴、抗菌剤に起因する難聴、サリチル酸剤に起因する難聴が好ましく、白金製剤に起因する難聴、抗菌剤に起因する難聴がより好ましく、白金製剤に起因する難聴が特に好ましい。

【0222】

TRPC3/6チャネル阻害物質（例えば、一般式（１）または（２）で表される化合物等）、その塩、またはそれらのプロドラッグは、TRPC3チャネルの活性を調節する作用、TRPC6チャネルの活性を調節する作用、またはTRPC3チャネルとTRPC6チャネルの両方の活性を調節する作用を有してよい。また、本発明の化合物、その塩、またはそのプロドラッグは、TRPC3/6チャネル阻害活性を有する。したがって、TRPC3/6チャネル阻害物質（例えば、一般式（１）または（２）で表される化合物等）、その塩、またはそのプロドラッグは、TRPC3および／またはTRPC6調節剤またはTRPC3および／またはTRPC6阻害剤として、あるいはTRPC3および／またはTRPC6関連疾患の予防または治療に、有効である。TRPC3および／またはTRPC6チャネルは、細胞膜に存在し、カチオンイオンの細胞内への流入制御するチャネルである。TRPC3および／またはTRPC6チャネルの阻害は、筋線維芽細胞において、Ca_２ ^＋流入を介した、TGF-βの下流のリン酸化シグナルに対して抑制的に働き、コラーゲンＩ、平滑筋型アクチン（α－ＳＭＡ；α-Smooth Muscle Actin）等の産生に対して抑制的に働く（例えば、Inflammatory Bowel Diseases, 2015, Mar, 21(3), 496-506）。TRPC3および／またはTRPC6関連疾患は、TRPC3および／またはTRPC6チャネルの過剰な活性化（チャネルが開口しカチオンイオンが細胞内へ過剰に流入する）が観察される疾患である。

【0223】

本発明の医薬組成物は、TRPC3および／またはTRPC6関連疾患の予防または治療剤としても有用である。TRPC3および／またはTRPC6関連疾患は、例えばTRPC3チャネルおよび／またはTRPC6チャネルの過剰な活性化または過剰な不活性化に起因する疾患であれば特に制限されないが、TRPC6チャネルの過剰な活性化または過剰な不活性化に起因する疾患が好ましい。TRPC3および／またはTRPC6関連疾患としては、例えば、線維症（例えば、肺線維症、腎線維症、線維化に起因する肝硬変）、神経変性疾患（例えば、筋委縮性性側索硬化症（ALS）、アルツハイマー病等）、筋変性疾患（例えば、筋ジストロフィー等）、炎症性疾患（例えば、クローン病、潰瘍性大腸炎、非アルコール性脂肪肝炎（NASH）等）、ウィリアムズ症候群、慢性腎症、心肥大、肺高血圧症等が挙げられる。好ましい疾患は、例えば線維症である。

【0224】

また、一般式（１）または（２）で表される化合物等は、肝臓で代謝を受けにくい。さらに、PBS溶解性が高く、したがって製剤化に有利であり、加えて、膜透過性が高く、したがってバイオアベイラビリティの点で有利である。これらのことから、一般式（１）または（２）で表される化合物等は、薬物動態の面で優れている。このため、従来のTRPC3および／またはTRPC6阻害剤と比較して、或いは、従来の難聴の予防および／または治療剤と比較して、少量で長期間、阻害活性、或いは、難聴の予防および／または治療活性を発揮しうる。

【0225】

また、一般式（１）または（２）で表される化合物等は、TRPC3およびTRPC6チャネルを除いた他のTRPチャネル（例えば、TRPC1、TRPC2、TRPC5、TRPC7、TRPM2、TRPV1、TRPV6）、あるいは他のCa^２＋チャネル、N^＋チャネル、K^＋チャネルに対する作用が小さいことが予想され、したがってTRPC6およびTRPC3チャネルに対する選択性が高く、副作用が小さいことが期待される。

【0226】

本発明は、TRPC3および／またはTRPC6阻害処理を必要とする患者に一般式（１）または（２）で表される化合物、その薬学的に許容される塩、またはそのプロドラッグの有効量を投与することを含むTRPC3および／またはTRPC6阻害方法を包含しうる。

【0227】

本発明は、TRPC3および／またはTRPC6関連疾患の予防または治療を必要とする患者にTRPC3/6チャネル阻害物質（例えば、一般式（１）または（２）で表される化合物等）、その薬学的に許容される塩、またはそのプロドラッグの有効量を投与することを含むTRPC3および／またはTRPC6関連疾患の予防または治療方法を包含しうる。

【0228】

本発明は、線維症の予防または治療を必要とする患者にTRPC3/6チャネル阻害物質（例えば、一般式（１）または（２）で表される化合物等）、その薬学的に許容される塩、またはそのプロドラッグの有効量を投与することを含む線維症の予防または治療方法を包含しうる。

【0229】

本発明は、TRPC3および／またはTRPC6関連疾患の予防または治療剤の製造のためのTRPC3/6チャネル阻害物質（例えば、一般式（１）または（２）で表される化合物等）、その薬学的に許容される塩、またはそのプロドラッグの使用を包含しうる。

【0230】

本発明は、線維症の予防または治療剤の製造のためのTRPC3/6チャネル阻害物質（例えば、一般式（１）または（２）で表される化合物等）、その薬学的に許容される塩、またはそのプロドラッグの使用を包含しうる。

【実施例】

【0231】

以下、参考例および実施例を参照して本発明を具体的に説明するが、本発明はこれらに限定されない。なお、化合物のＬＣ／ＭＳ分析には以下の条件を用いた。
［ＬＣ／ＭＳ分析条件］
ＬＣ／ＭＳシステム：Waters ACQUITY UPLC H-Class/QDa Sample Manager - FTN Quaternary Solvent Manager
Column Heater A
PDAeλ Detector
QDa Detector
カラム：ACQUITY UPLC BEH C18 1.7 μm (2.1×50mm)流速：0.5 mL/min溶出条件：移動相Ａ；アセトニトリル、移動相Ｂ；０．１％ぎ酸水溶液

【0232】

【表1】

【0233】

［実施例１］
５－クロロ－６－（４－（４－（トリフルオロメチル）ベンゾ[ｄ]イソオキサゾール－３－イル）ピペラジン－１－イル）ニコチン酸（化合物０１１）の合成

【化36】

【0234】

ステップ１－１
２－フルオロ－６－（トリフルオロメチル）ベンズアルデヒド（２ｇ、１０．４１mmol）とヒドロキシアミン塩酸塩（０．８６８ｇ、１２．４９mmol）のエタノール（１０mL）の溶液に１N水酸化ナトリウム水溶液（１２．５mL、１２．５mmol）を加え、室温で３時間撹拌した。反応液を減圧濃縮し、酢酸エチルにて抽出した。有機層を水、飽和食塩水にて洗浄後、硫酸マグネシウムで乾燥、溶媒を減圧留去し、２－フルオロ－６－（トリフルオロメチル）ベンズアルデヒド オキシム（２．１２６ｇ）を得た。

【0235】

ステップ１－２
２－フルオロ－６－（トリフルオロメチル）ベンズアルデヒド オキシム（２．１２ｇ、１０．２４mmol）のDMF（１０mL）の溶液にNCS（N-クロロスクシンイミド）（１．４３５ｇ、１０．７５mmol）を０℃で加え、室温で終夜撹拌した。LC/MSはオキシムが１００％塩化物に変換したことを示した。２－フルオロ－Ｎ－ヒドロキシ－６－（トリフルオロメチル）ベンズイミドイル クロリドの溶液は精製することなしに次の反応に用いた。

【0236】

ステップ１－３
５－クロロ－６－（ピペラジン－１－イル）ニコチン酸塩酸塩（１８３６ｍｇ、６．６mmol）とトリエチルアミン（２．９３ｍL、２１mmol）のジクロロメタン（１０ｍL）の溶液に、ステップ１－２の２－フルオロ－Ｎ－ヒドロキシ－６－（トリフルオロメチル）ベンズイミドイル クロリドのＤＭＦ溶液（６ｍＬ、約６mmol）を室温で加え、終夜撹拌した。反応溶液に１０％ＫＨＳＯ_４水溶液を加え、酢酸エチルにて抽出した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥、溶媒を減圧留去し、残渣を分取用シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／メタノール）で精製し、（Ｅ）－５－クロロ－６－（４－((２－フルオロ－６－（トリフルオロメチル）フェニル)（ヒドロキシイミノ）メチル)ピペラジン－１－イル）ニコチン酸（化合物０１２（Ｅ）；１２５８ｍｇ；LC-MS: r.t. 2.45 min., m/z 447 (M+1)）とそのＺ異性体（化合物０１２（Ｚ）；９３ｍｇ；LC-MS: r.t. 2.26 min., m/z 447 (M+1)）を得た。

【0237】

ステップ１－４
（Ｅ）－５－クロロ－６－（４－((２－フルオロ－６－（トリフルオロメチル）フェニル)（ヒドロキシイミノ）メチル)ピペラジン－１－イル）ニコチン酸（１０２６ｍｇ）の２Ｎ水酸化カリウム水溶液（６ｍＬ）とジオキサン（１８ｍＬ）との混合溶液を１０５℃で３時間撹拌加熱した。ＬＣ／ＭＳ分析では変換率は１００％を示した。溶液を減圧濃縮し２Ｎ塩酸水溶液で中和し、得られた個体を濾取した。これを乾燥し８７６ｍｇの表題化合物を得た。
(Rf = 0.5, ethyl acetate)
^１H NMR (DMSO, 400 MHz)δ8.68 (d, 1 H, J = 1.6 Hz), 8.06 - 8.11 (m, 2 H), 7.83 - 7.88 (m, 2 H), 3.59 - 3.64 (m, 4 H), 3.33 - 3.38 (m, 4H), LC-MS: r.t. 3.23 min., m/z 427 (M+1)。

【0238】

［実施例２］
５－クロロ－Ｎ－メチル－６－（４－（４－（トリフルオロメチル）ベンゾ[ｄ]イソオキサゾール－３－イル）ピペラジン－１－イル）ニコチンアミド（化合物０２１）の合成

【化37】

【0239】

５－クロロ－６－（４－（４－（トリフルオロメチル）ベンゾ[ｄ]イソオキサゾール－３－イル）ピペラジン－１－イル）ニコチン酸（実施例１の化合物、２２．５ｍｇ、０．０５３mmol）、トリエチルアミン（２９．４μＬ、０．２１１mmol）、１‐［ジメチルアミノ（ジメチルイミニオ）メチル］‐１Ｈ‐１，２，３‐トリアゾロ［４，５‐ｂ］ピリジン３‐オキシド・ヘキサフルオロホスファート（以下、ＨＡＴＵと称することがある）（４０．１ｍｇ、０．１０５mmol）とメチルアミン（０．２mmol）のＴＨＦ（０．５ｍＬ）溶液を室温で終夜撹拌した。溶液を濃縮し、残渣を分取用液体シリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル）で精製し２０．８ｍｇの表題化合物を得た。
（Rf = 0.5, 1 : 2 hexane/ethyl acetate）
^１H NMR (CDCl_３, 400 MHz)δ8.52 (d, 1 H, J = 2.0 Hz), 8.04 (d, 1 H, J = 2.0 Hz), 7.73 (d, 1 H, J = 7.2 Hz), 7.63 (dd, 1 H, J = 7.6, 8.8 Hz), 7.64 (bs, 1 H), 6.10 (br, 1 H), 3.67 - 3.72 (m, 4 H), 3.44 - 3.48 (m, 4H), 3.02 (d, 3 H, J = 6.8 Hz), LC-MS: r.t. 2.84 min., m/z 440 (M+1)。

【0240】

［実施例３］
（Ｓ）－５－クロロ－６－（３－メチル－４－（４－（トリフルオロメチル）ベンゾ[ｄ]イソオキサゾール－３－イル）ピペラジン－１－イル）ニコチン酸（化合物０３１）の合成

【化38】

【0241】

（Ｓ）－２－メチルピペラジン（１．００２ｇ、１０mmol）、５，６－ジクロロニコチン酸（１．９２ｇ、１０mmol）とＮ－エチル－Ｎ－イソプロピルプロパン－２－アミン（３．４８mＬ、２０mmol）のＤＭＦ（２０ｍＬ）の溶液を９０℃で１０時間加熱撹拌した。精製水で希釈後１０％ＫＨＳＯ_４で中和してpHを約６にし、生成した固体を濾取、減圧乾燥し、４２９ｍｇの粗（Ｓ）－５－クロロ－６－（３－メチルピペラジン－１－イル）ニコチン酸を得た。これを精製することなしに次のステップに用いた。

【0242】

５－クロロ－６－（ピペラジン－１－イル）ニコチン酸塩酸塩に代えて、得られた粗（Ｓ）－５－クロロ－６－（３－メチルピペラジン－１－イル）ニコチン酸を用いた以外は、実施例１のステップ１－３およびステップ１－４の方法に従って、表題化合物を得た。(Rf = 0.25, 2 : 1 ethyl acetate/hexane).^１H NMR (DMSO, 400 MHz)δ8.70 (d, 1 H, J = 2.4 Hz), 8.11 (d, 1 H, J = 2.4 Hz), 8.10 (d, 1 H, J = 7.6 Hz), 7.85 (d, 1 H, J = 7.6 Hz), 7.83 (d, 1 H, J = 7.6 Hz), 3.64 - 3.90 (m, 3 H), 3.04 - 3.52 (m, 4H), 1.08 (d, 3 H, J = 6.0 Hz), LC-MS: r.t. 3.03 min., m/z 441 (M+1)。

【0243】

［実施例４］
（Ｒ）－５－クロロ－６－（３－メチル－４－（４－（トリフルオロメチル）ベンゾ[ｄ]イソオキサゾール－３－イル）ピペラジン－１－イル）ニコチン酸（化合物０４１）の合成

【化39】

【0244】

（Ｓ）－２－メチルピペラジンに代えて（Ｒ）－２－メチルピペラジンを用いた以外は、実施例３の方法に従って、表題化合物を得た。
^１H NMR (DMSO, 400 MHz)δ8.70 (d, 1 H, J = 2.4 Hz), 8.11 (d, 1 H, J = 2.4 Hz), 8.10 (d, 1 H, J = 7.6 Hz), 7.85 (d, 1 H, J = 7.6 Hz), 7.83 (d, 1 H, J = 7.6 Hz), 3.64 - 3.90 (m, 3 H), 3.04 - 3.52 (m, 4H), 1.08 (d, 3 H, J = 6.0 Hz), LC-MS: r.t. 3.03 min., m/z 441 (M+1)。

【0245】

［実施例５］
５－クロロ－６－（４－（４－（メトキシ）ベンゾ[ｄ]イソオキサゾール－３－イル）ピペラジン－１－イル）ニコチン酸（化合物０５１）の合成

【化40】

【0246】

２－フルオロ－６－（トリフルオロメチル）ベンズアルデヒドに代えて２－フルオロ－６－（メトキシ）ベンズアルデヒドを用いた以外は、実施例１の方法に従って、表題化合物を得た。
Rf = 0.2, 10%methanol/ethyl acetate
^１H NMR (DMSO, 400 MHz)δ8.69 (d, 1 H, J = 1.6 Hz), 8.11 (d, 1 H, J = 1.6 Hz), 7.54 (t, 1 H, J = 8.4 Hz), 7.16 (d, 1 H, J = 8.4 Hz), 6.84 (d, 1 H, J = 8.4 Hz), 3.96 (s, 3H), 3.77 (7et, 1 H, J = 5.6 Hz), 3.63 - 3.67 (m, 4 H), 3.52 - 3.56 (m, 4H), 1.03 (d, 6H, J = 5.6 Hz), LC-MS: r.t. 2.60 min., m/z 389 (M+1)。なお、合成の過程において、５－クロロ－６－（４－（（２－フルオロ－６－メトキシフェニル（ヒドロキシイミノ）メチル）ピペラジン－１－イル）ニコチン酸（化合物０５２）が得られた（LC-MS: r.t. 2.11 min., m/z 409 (M+1)）。

【0247】

［実施例６］
４－クロロ－３－（４－（２－クロロフェニル）ピペラジン－１－イル）ベンゾ[ｄ]イソオキサゾール（化合物０６１）の合成

【化41】

【0248】

ステップ６－１
２－フルオロ－６－（トリフルオロメチル）ベンズアルデヒドに代えて２，６－ジクロロベンズアルデヒドを用いた以外は、実施例１のステップ１－１および１－２の方法に従って、２，６－ジクロロ－Ｎ－ヒドロキシ－６－ベンズイミドイル クロリドのＤＭＦ溶液を得た。

【0249】

ステップ６－２
１－（２－クロロフェニル）ピペラジン（１１８ｍｇ、０．６mmol）とトリエチルアミン（８３μL、０．６mmol）のジクロロメタン（２ｍL）の溶液に、ステップ６－１の２，６－ジクロロ－Ｎ－ヒドロキシ－６－ベンズイミドイル クロリドのＤＭＦ溶液（０．５ｍＬ、約０．５mmol）を室温で加え、３時間撹拌した。反応溶液に飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、酢酸エチルにて抽出した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥、溶媒を減圧留去し、残渣を分取用シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／メタノール）で精製し、（Ｅ）－（４－(２－クロロフェニル)ピペラジン－１－イル）(２，６－ジクロロフェニル)メタノン オキシム（５８．７ｍｇ）とＺ異性体（５０ｍｇ）を得た。

【0250】

（Ｅ）－（４－(２－クロロフェニル)ピペラジン－１－イル）(２，６－ジクロロフェニル)メタノン オキシム（化合物０６２（Ｅ））：
Rf: 0.5, 3 : 1 hexane/ethyl acetate,
^１H NMR (CDCl_３, 400 MHz)δ7.41 (d, 1 H, J = 1.6 Hz), 7.39 (s, 1 H), 7.36 (dd, 1 H, J =1.6, 8.0 Hz), 7.30 (dd, 1 H, J =7.2, 8.8 Hz), 7.21 (dd, 1H, J =1.2, 7.2 Hz), 7.03 (dd, 1H, J = 2.0, 8.0 Hz), 6.98 (dt, 1 H, J =1.2, 8.0 Hz), 5.72 (br, 1 H), 3.35 - 3.40 (m, 4 H), 3.04 - 3.09 (m, 4H), LC-MS: r.t. 3.03 min., m/z 384 (M+1)。
（Ｚ）－（４－(２－クロロフェニル)ピペラジン－１－イル）(２，６－ジクロロフェニル)メタノン オキシム（化合物０６２（Ｚ））：
Rf: 0.3, 3 : 1 hexane/ethyl acetate
^１H NMR (CDCl_３, 400 MHz)δ7.36 (dd, 1 H, J = 1.2, 7.2 Hz), 7.35 (d, 1 H, J = 1.2, 8.0 Hz), 7.26 (dd, 1 H, J = 1.2, 8.0 Hz), 7.28 (dd, 1 H, J = 2.0, 8.0 Hz), 7.22 (dt, 1H, J = 1.2, 7.2 Hz), 7.04 (dd, 1H, J = 8.0 Hz), 6.97 (dt, 1 H, J = 1.2, 8.0 Hz), 6.46 (br, 1 H), 3.53 - 3.57 (m, 4 H), 3.09 - 3.13 (m, 4H), LC-MS : r.t. 3.03 min., m/z 384 (M+1)。

【0251】

ステップ６－３
（Ｅ）－（４－(２－クロロフェニル)ピペラジン－１－イル）(２，６－ジクロロフェニル)メタノン オキシム（５８．７ｍｇ、０．１５２mmol）の２Ｎ水酸化カリウム水溶液（１ｍＬ）とジオキサン（３ｍＬ）との混合溶液を１２０℃で２５時間撹拌加熱した。溶液を減圧濃縮し２Ｎ塩酸水溶液で中和し、酢酸エチルにて抽出した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥、溶媒を減圧留去し、残渣を分取用シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／メタノール）で精製し６．９ｍｇの表題化合物を得た。
^１H NMR (CDCl_３, 400 MHz)δ7.42 (t, J = 8.0 Hz), 7.37 - 7.41 (m, 2 H), 7.44-7.52 (m, 2H), 7.21 - 7.27 (m, 2H), 7.11 (dd, 1 H, J = 1.6, 8.0 Hz), 7.00 (dt, 1 H, J = 1.6, 8.0 Hz), 3.60 - 3.67 (m, 4 H), 3.26 - 3.30 (m, 4H), LC-MS: r.t. 3.01 min., m/z 384 (M+1)。

【0252】

［実施例７］
４－クロロ－３－（４－（３－クロロピリジン－２－イル）ピペラジン－１－イル）ベンゾ[ｄ]イソオキサゾール（化合物０７１）の合成

【化42】

【0253】

ステップ７－１
１－（２－クロロフェニル）ピペラジンに代えて１－（３－クロロピリジン－２－イル）ピペラジン塩酸塩を用いたこと以外は、実施例６のステップ６－２の方法に従って、（Ｅ）－（４－(３－クロロピリジン－２－イル)ピペラジン－１－イル）(２，６－ジクロロフェニル)メタノン オキシムとＺ異性体を得た。
（Ｅ）－（４－(３－クロロピリジン－２－イル)ピペラジン－１－イル）(２，６－ジクロロフェニル)メタノン オキシム（化合物０７２（Ｅ））：
^１H NMR (CDCl_３, 400 MHz)δ8.17 (dd, 1 H, J = 1.6, 4.8 Hz), 7.58 (dd, 1 H, J = 1.2, 7.6 Hz), 7.39 (dd, 1 H, J =1.2, 7.6 Hz), 7.33 (s, 1 H), 7.28 (dd, 1H, J = 7.6, 9.2 Hz), 7.06 (br, 1H), 6.85 (dd, 1 H, J =4.8, 8.0 Hz), 5.72 (br, 1 H), 3.25 - 3.34 (m, 8 H), LC-MS: r.t. 3.03 min., m/z 384 (M+1)。（Ｚ）－（４－(３－クロロピリジン－２－イル)ピペラジン－１－イル）(２，６－ジクロロフェニル)メタノン オキシム（化合物０７２（Ｚ））：
^１H NMR (CDCl_３, 400 MHz)δ8.18 (d, 1 H, J = 3.6 Hz), 7.57 (d, 1 H, J = 7.6 Hz), 7.38 (t, 1 H, J =8.0 Hz), 7.34 (d, 1 H, J = 7.6 Hz), 7.26 (t, 1H, J = 8.0 Hz), 7.08 (br, 1H), 6.84 (dd, 1 H, J =4.8, 8.0 Hz), 5.72 (br, 1 H), 3.52 - 3.58 (m, 3 H), 3.40 - 3.44 (m, 3 H), 3.35 - 3.38 (m, 2 H), LC-MS: r.t. 2.70 min., m/z 385 (M+1)。

【0254】

ステップ７－２
（Ｅ）－（４－(３－クロロピリジン－２－イル)ピペラジン－１－イル）(２，６－ジクロロフェニル)メタノン オキシム（１９２ｍｇ、０．４９８mmol）の２Ｎ水酸化カリウム水溶液（２ｍＬ）とジオキサン（６ｍＬ）との混合溶液をマイクロウェーブにて１２０℃で１時間撹拌加熱した。ＬＣ／ＭＳ分析では変換率は約５０％を示した。溶液を１Ｎ塩酸水溶液と飽和塩化アンモニウム水溶液で中和し、酢酸エチルにて抽出した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥、溶媒を減圧留去し、残渣を分取用シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／メタノール）で精製し７０．６ｍｇの表題化合物と７９ｍｇの出発物質を得た。
^１H NMR (CDCl_３, 400 MHz)δ7.42 (t, 1 H, J = 8.0 Hz), 7.37 - 7.41 (m, 2 H), 7.44-7.52 (m, 2H), 7.21 - 7.27 (m, 2H), 7.11 (dd, 1 H, J = 1.6, 8.0 Hz), 7.00 (dt, 1 H, J = 1.6, 8.0 Hz), 3.60 - 3.67 (m, 4 H), 3.26 - 3.30 (m, 4H), LC-MS: r.t. 3.01 min., m/z 384 (M+1)。

【0255】

［実施例８］
５－クロロ－６－（４－（４－クロロベンゾ[ｄ]イソオキサゾール－３－イル）ピペラジン－１－イル）ニコチン酸（化合物０８１）の合成

【化43】

【0256】

ステップ８－１
１－（２－クロロフェニル）ピペラジンに代えて５－クロロ－６－（ピペラジン－１－イル）ニコチン酸トリフルオロ酢酸塩を用いたこと以外は、実施例６のステップ６－２の方法に従って、５－クロロ－６－（４－((２，６－ジクロロフェニル)（ヒドロキシイミノ）メチル)ピペラジン－１－イル）ニコチン酸（化合物０８２）を得た。

【0257】

ステップ８－２
５－クロロ－６－（４－((２，６－ジクロロフェニル)（ヒドロキシイミノ）メチル)ピペラジン－１－イル）ニコチン酸（２１５ｍｇ、０．５mmol）の２Ｎ水酸化カリウム水溶液（２ｍＬ）とジオキサン（６ｍＬ）との混合溶液をマイクロウェーブにて１４０℃で１時間撹拌加熱した。ＬＣ／ＭＳ分析では変換率は約９０％を示した。溶液を１Ｎ塩酸水溶液と１０％ＫＨＳＯ_４水溶液で中和し、酢酸エチルにて抽出した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥、溶媒を減圧留去し、残渣を分取用シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／メタノール）で精製し７５ｍｇの表題化合物を得た。
^１H NMR (DMSO, 400 MHz)δ8.66 (d, 1 H, J = 2.0 Hz), 8.08 (d, 1 H, J = 2.0 Hz), 7.63 (d, 1 H, J = 8.0 Hz), 7.60 (t, 1 H, J = 8.0 Hz), 7.42 (d, 1 H, J = 8.0 Hz), 3.63 - 3.67 (m, 4 H), 3.43 - 3.47 (m, 4H), LC-MS: r.t. 2.87 min., m/z 393 (M+1)。

【0258】

［実施例９］
５－クロロ－６－（４－（４－クロロベンゾ[ｄ]イソオキサゾール－３－イル）ピペラジン－１－イル）Ｎ，Ｎ－ジメチルニコチンアミド（化合物０９１）の合成

【化44】

【0259】

ステップ９－１
６－（４－（tert－ブトキシカルボニル）ピペラジン－１－イル）－５－クロロニコンチン酸（１７１ｍｇ、０．５mmol）、ジメチルアミン（０．７５mmol）、トリエチルアミン（２０９μＬ、１．５mmol）とＨＡＴＵ（２８５ｍｇ、０．７５mmol）のＤＭＦ（３ｍＬ）溶液を室温で３時間撹拌し、飽和食塩水を加え酢酸エチルで抽出した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥、溶媒を減圧留去し、残渣を分取用シリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し１５３．２ｍｇのtert－ブチル ４－（３－クロロ－５－（ジメチルカルバモイル）ピリジン－２－イル）ピペラジン－１－カルボキシラートを得た(Rf = 0.45, 1 : 3 hexane/ethyl acetate)。
この化合物を過剰のトリフルオロ酢酸で処理し５－クロロ－Ｎ，Ｎ－ジメチル－６－（ピペラジン－１－イル）ニコチンアミド トリフルオロ酢酸塩を得た。

【0260】

ステップ９－２
５－クロロ－Ｎ，Ｎ－ジメチル－６－（ピペラジン－１－イル）ニコチンアミド（１５９ｍｇ、０．４１５mmol）とトリエチルアミン（２８９μL、２．０７５mmol）のＤＭＦ（２ｍL）の溶液に、実施例６のステップ６－１の２，６－ジクロロ－Ｎ－ヒドロキシ－６－ベンズイミドイル クロリドのＤＭＦ溶液（０．５ｍＬ、約０．５mmol）を室温で加え、３時間撹拌した。反応溶液に飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、酢酸エチルにて抽出した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥、溶媒を減圧留去し、残渣を分取用シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／メタノール）で精製し、（Ｅ）－５－クロロ－６－（４－((２，６－ジクロロフェニル)（ヒドロキシイミノ）メチル)ピペラジン－１－イル）－Ｎ，Ｎ－ジメチルニコチンアミド（化合物０９２（Ｅ）；７７．２ｍｇ；LC-MS: r.t. 2.27 min., m/z 456 (M+1)）とＺ異性体（３０ｍｇ）を得た。（Ｚ）－５－クロロ－６－（４－((２，６－ジクロロフェニル)（ヒドロキシイミノ）メチル)ピペラジン－１－イル）－Ｎ，Ｎ－ジメチルニコチンアミド（化合物０９２（Ｚ））：
^１H NMR (CDCl_３, 400 MHz)δ8.24 (d, 1 H, J = 2.0 Hz), 7.72 (d, 1 H, J = 2.4 Hz), 7.39 (dd, 1 H, J = 0.8, 8.0 Hz), 7.38 (s, 1 H), 7.30 (dd, 1H, J = 4.8, 8.8 Hz), 6.20 (br, 1 H), 3.43 - 3.47 (m, 4 H), 3.32 - 3.36 (m, 4 H), 3.08 (s, 6 H), LC-MS: r.t. 2.08 min., m/z 456 (M+1)。

【0261】

ステップ９－３
（Ｅ）－５－クロロ－６－（４－((２，６－ジクロロフェニル)（ヒドロキシイミノ）メチル)ピペラジン－１－イル）－Ｎ，Ｎ－ジメチルニコチンアミド（７７．２ｍｇ、０．０４８ｍｇ）の２Ｎ水酸化カリウム水溶液（２ｍＬ）とジオキサン（６ｍＬ）との混合溶液をマイクロウェーブにて１４０℃で１時間撹拌加熱した。ＬＣ／ＭＳ分析では変換率は約７０％を示した。溶液に１０％ＫＨＳＯ_４水溶液を加え、酢酸エチルにて抽出した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥、溶媒を減圧留去し、得られた個体をイソプロパノールから再結晶し２０．２ｍｇの表題化合物を得た。
^１H NMR (CDCl_３, 400 MHz)δ8.28 (d, 1 H, J = 2.4 Hz), 7.74 (d, 1 H, J = 2.4 Hz), 7.42 (dd, 1 H, J = 6.8, 8.8 Hz), 7.39 (dd, 1 H, J = 1.2, 8.8 Hz), 7.26 (dd, 1 H, J = 1.2, 6.8 Hz), 3.64 - 3.68 (m, 4 H), 3.58 - 3.61 (m, 4H), LC-MS: r.t. 2.89 min., m/z 420 (M+1)。

【0262】

［実施例１０］
３－クロロ－４－（４－（４－クロロベンゾ[ｄ]イソオキサゾール－３－イル）ピペラジン－１－イル）安息香酸（化合物１０１）の合成

【化45】

【0263】

ステップ１０－１
１－（２－クロロフェニル）ピペラジンに代えて３－クロロ－４－（ピペラジン－１－イル）安息香酸メチルエステルを用いた以外は、実施例６のステップ６－２の方法に従って、３－クロロ－４－（４－((２，６－ジクロロフェニル)（ヒドロキシイミノ）メチル)ピペラジン－１－イル）安息香酸メチルエステル（化合物１０２）を得た（LC-MS: r.t. 2.97 min., m/z 442 (M+1)）。

【0264】

ステップ１０－２
５－クロロ－６－（４－((２、６－ジクロロフェニル)（ヒドロキシイミノ）メチル)ピペラジン－１－イル）ニコチン酸に代えて３－クロロ－４－（４－((２，６－ジクロロフェニル)（ヒドロキシイミノ）メチル)ピペラジン－１－イル）安息香酸メチルエステルを用いたこと以外は、実施例８のステップ８－２の方法に従って、表題化合物を得た。
^１H NMR (DMSO, 400 MHz)δ7.85 (d, 1 H, J = 1.6 Hz), 7.79 (dd, 1 H, J = 1.6, 8.4 Hz), 7.67 (dd, 1 H, J = 1.6, 8.4 Hz), 7.63 (dd, 1 H, J = 7.2, 8.8 Hz), 7.45 (dd, 1 H, J = 1.2, 8.0 Hz), 7.22 (bd, 1 H, J = 8.0 Hz), 3.48 - 3.53 (m, 4 H), 3.24 - 3.28 (m, 4H), LC-MS: r.t. 2.94 min., m/z 392 (M-1)。

【0265】

［実施例１１］
５－クロロ－３－（４－（３－クロロピリジン－２－イル）ピペラジン－１－イル）ベンゾ[ｄ]イソオキサゾール（化合物１１１）の合成

【化46】

【0266】

ステップ１１－１
２－フルオロ－６－（トリフルオロメチル）ベンズアルデヒドに代えて２，５－ジクロロベンズアルデヒドを用いたこと以外は、実施例１のステップ１－１および１－２の方法に従って２，５－ジクロロ－Ｎ－ヒドロキシ－６－ベンズイミドイル クロリドのＤＭＦ溶液を得た。

【0267】

ステップ１１－２
１－（２－クロロフェニル）ピペラジンに代えて１－（３－クロロピリジン－２－イル）ピペラジン塩酸塩を用いたこと、および２，６－ジクロロ－Ｎ－ヒドロキシ－６－ベンズイミドイル クロリドのＤＭＦ溶液に代えて２，５－ジクロロ－Ｎ－ヒドロキシ－６－ベンズイミドイル クロリドのＤＭＦ溶液を用いたこと以外は、実施例６のステップ６－２の方法に従って、（Ｅ）－４－(３－クロロピリジン－２－イル)ピペラジン－１－イル）(２，５－ジクロロフェニル)メタノン オキシム、そのＺ異性体とＥ，Ｚ混合物を得た。
（Ｅ）－４－(３－クロロピリジン－２－イル)ピペラジン－１－イル）(２，５－ジクロロフェニル)メタノン オキシム（化合物１１２（Ｅ））：
^１H NMR (CDCl_３, 400 MHz)δ8.18 (dd, 1 H, J = 1.2, 4.8 Hz), 7.59 (dd, 1 H, J = 2.0. 8.0 Hz), 7.40 (d, 1 H, J = 8.0 Hz), 7.33 (dd, 1H, J = 4.8, 8.0 Hz), 5.83 (br, 1 H), 3.29 - 3.37 (m, 6 H), 3.18 - 3.25 (m, 2 H), LC-MS: r.t. 2.83 min., m/z 385 (M+1)。
（Ｚ）－４－(３－クロロピリジン－２－イル)ピペラジン－１－イル）(２，５－ジクロロフェニル)メタノン オキシム（化合物１１２（Ｚ））：
^１H NMR (CDCl_３, 400 MHz)δ8.40 (br, 1 H), 8.17 (dd, 1 H, J = 1.6, 4.8 Hz), 7.57 (dd, 1 H, J = 2.0. 7.6 Hz), 7.41 (d, 1 H, J =2.0 Hz), 7.32 (s, 1 H), 7.31 (d, 1H, J = 2.4 Hz), 6.83 (dd, 1 H, J = 4.8, 8.0 Hz), 3.47 - 3.52 (m, 4 H), 3.36 - 3.41 (m, 4 H), LC-MS: r.t. 2.83 min., m/z 385 (M+1)。

【0268】

ステップ１１－３
（Ｅ）－（４－(３－クロロピリジン－２－イル)ピペラジン－１－イル）(２，５－ジクロロフェニル)メタノン オキシム（２６．８ｍｇ、０．０６９mmol）の２Ｎ水酸化カリウム水溶液（１ｍＬ）とジオキサン（３ｍＬ）との混合溶液をマイクロウェーブにて１２０℃で０．５時間続いて１４０℃で１時間撹拌加熱した。溶液を１Ｎ塩酸水溶液と飽和塩化アンモニウム水溶液で中和し、酢酸エチルにて抽出した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥、溶媒を減圧留去し、残渣を分取用シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル）で精製し１７．６ｍｇの表題化合物を得た。
^１H NMR (CDCl_３, 400 MHz)δ8.2 (dd, 1 H, J = 1.6, 4.8 Hz), 7.71 (d, 1 H, J = 1.6 Hz), 7.63 (dd, 1 H, J = 1.2, 8.0 Hz), 7.46 (dd, 1 H, J = 2.0, 8.4 Hz), 7.40 (d, 1 H, 8.4 Hz), 6.90 (dd, 1 H, J = 4.8, 8.0 Hz), 3.68 - 3.72 (m, 4 H), 3.55 - 3.59 (m, 4H), LC-MS: r.t. 3.18 min., m/z 349 (M+1)。

【0269】

［実施例１２］
５－クロロ－６－（４－（５－クロロベンゾ[ｄ]イソオキサゾール－３－イル）ピペラジン－１－イル）ニコチン酸（化合物１２１）の合成

【化47】

【0270】

ステップ１２－１
１－（２－クロロフェニル）ピペラジンに代えて５－クロロ－６－（ピペラジン－１－イル）ニコチン酸塩酸塩を用いたこと、および２，６－ジクロロ－Ｎ－ヒドロキシ－６－ベンズイミドイル クロリドのＤＭＦ溶液に代えて２，５－ジクロロ－Ｎ－ヒドロキシ－６－ベンズイミドイル クロリドのＤＭＦ溶液を用いたこと以外は、実施例６のステップ６－２の方法に従って、５－クロロ－６－（４－((２，５－ジクロロフェニル)（ヒドロキシイミノ）メチル)ピペラジン－１－イル）ニコチン酸（化合物１２２）を得た（LC-MS: r.t. 2.46 min., m/z 429 (M+1)）。

【0271】

ステップ１２－２
５－クロロ－６－（４－((２，５－ジクロロフェニル)（ヒドロキシイミノ）メチル)ピペラジン－１－イル）ニコチン酸（１１５．１ｍｇ、０．５mmol）の２Ｎ水酸化カリウム水溶液（２ｍＬ）とジオキサン（６ｍＬ）との混合溶液をマイクロウェーブにて１４０℃で２時間撹拌加熱した。ＬＣ／ＭＳ分析では変換率は約１００％を示した。溶液を１Ｎ塩酸水溶液と１０％ＫＨＳＯ_４水溶液で中和し、酢酸エチルにて抽出した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥、溶媒を減圧留去し、残渣をイソプロパノールから再結晶し２６．８ｍｇの表題化合物を得た。
^１H NMR (DMSO, 400 MHz)δ8.65 (d, 1 H, J = 2.0 Hz), 8.17 (bs, 1 H), 8.08 (d, 1 H, J = 1.6 Hz), 7.60 - 7.61 (m, 2 H), 3.59 - 3.61 (m, 4 H), 3.25 - 3.35 (m, 4H), LC-MS: r.t. 2.83 min., m/z 393 (M+1)。

【0272】

［実施例１３］
５－クロロ－６－（４－（５－（トリフルオロメチル）ベンゾ[ｄ]イソオキサゾール－３－イル）ピペラジン－１－イル）ニコチン酸（化合物１３１）の合成

【化48】

【0273】

ステップ１３－１
２－クロロ－５－（トリフルオロメチル）ベンズアルデヒド（５ｇ、２３．９７mmol）とヒドロキシアミン塩酸塩（２ｇ、２８．８mmol）のエタノール（２０mL）の溶液に１N水酸化ナトリウム水溶液（２８．８mL、２８．８mmol）を加え、室温で３時間撹拌した。反応液を減圧濃縮し、酢酸エチルにて抽出した。有機層を水、飽和食塩水にて洗浄後、硫酸マグネシウムで乾燥、溶媒を減圧留去し、２－クロロ－５－（トリフルオロメチル）ベンズアルデヒド オキシム（４．７７ｇ）をＺとＥの異性体の混合物として得た。

【0274】

ステップ１３－２
２－クロロ－５－（トリフルオロメチル）ベンズアルデヒドオキシム（４．７７ｇ、２１．３３mmol）のDMF（１０mL）の溶液にNCS（N-クロロスクシンイミド）（２．９９ｇ、２２．４mmol）を０℃で加え、室温で終夜撹拌した。LC/MSはオキシムが１００％塩化物に変換したことを示した。２－クロロ－Ｎ－ヒドロキシ－６－（トリフルオロメチル）ベンズイミドイル クロリドの溶液は精製することなしに次の反応に用いた。

【0275】

ステップ１３－３
５－クロロ－６－（ピペラジン－１－イル）ニコチン酸塩酸塩（７０ｍｇ、０．２５２mmol）とトリエチルアミン（１４０μL、１．０mmol）のジクロロメタン（１ｍL）の溶液に、ステップ１３－２の２－クロロ－Ｎ－ヒドロキシ－５－（トリフルオロメチル）ベンズイミドイル クロリドのＤＭＦ溶液（０．２５２ｍＬ、約０．２５２mmol）を室温で加え、３時間撹拌した。反応溶液に１０％ＫＨＳＯ_４水溶液を加え、不溶物を濾別後濾液を酢酸エチルにて抽出した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥、溶媒を減圧留去し、粗５－クロロ－６－（４－((2－クロロ－５－（トリフルオロメチル）フェニル)（ヒドロキシイミノ）メチル)ピペラジン－１－イル）ニコチン酸（化合物１３２）を得た（LC-MS: r.t. 2.59 min., m/z 463 (M+1)）。この化合物は精製することなしに次のステップに用いた。

【0276】

ステップ１３－４
５－クロロ－６－（４－((２－クロロ－６－（トリフルオロメチル）フェニル)（ヒドロキシイミノ）メチル)ピペラジン－１－イル）ニコチン酸（１１７ｍｇ、０．２５３mmol）の２Ｎ水酸化カリウム水溶液（１ｍＬ、２mmol）とジオキサン（５ｍＬ）との混合溶液をマイクロウェーブにて１６０℃で１時間撹拌加熱した。ＬＣ／ＭＳ分析では変換率は１００％を示した。溶液を１０％ＫＨＳＯ_４水溶液で中和し、、酢酸エチルにて抽出した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥、溶媒を減圧留去し、残渣を分取用シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル）で精製し４２ｍｇの粗表題化合物を得た。これをさらに加温したアセトニトリルで洗浄し２９．９ｍｇの表題化合物を得た。
^１H NMR (DMSO, 400 MHz)δ8.70 (d, 1 H, J = 2.4 Hz), 8.50 (bs, 1 H), 8.13 (d, 1 H, J = 1.6 Hz), 7.95 (dd, 1 H, 1.6, 8.4 Hz), 7.84 (d, 1 H, J = 8.4 Hz), 3.68 - 3.71 (m, 4 H), 3.31 - 3.34 (m, 4H), LC-MS: r.t. 2.92 min., m/z 427 (M+1)。

【0277】

［実施例１４］
３－（４－（ピリジン－２－イル）ピペラジン－１－イル）ベンゾ[ｄ]イソオキサゾール（化合物１４１）の合成

【化49】

【0278】

３－クロロベンゾ[ｄ]イソオキサゾール（１００ｍｇ、０．６５１mmol）と１－（ピリジン－２－イル）ピペラジン（３１９ｍｇ、１．９５４mmol）のピリジン（１ｍＬ）の溶液をマイクロウェーブにて１５０℃で１時間撹拌加熱した。溶媒を減圧留去し、残渣を分取用シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル）で精製し６１．１ｍｇの表題化合物を得た。
^１H NMR (CDCl_３, 400 MHz)δ8.31 (dd, 1H, J = 4.0, 1.6 Hz), 7.72 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 7.45-7.56 (m, 3H), 7.25 (dt, 1H, J = 1.2, 6.4 Hz), 6.72 (d, 1H, J = 8.8 Hz), 6.68 (dd, 1H, J = 4.8, 7.2 Hz) , 3.74 - 3.78 (m, 4 H), 3.67 - 3.71 (m, 4H), LC-MS: r.t. 1.52 min., m/z 281 (M+1)。

【0279】

［実施例１５］
３－（４－（２－クロロフェニル）ピペラジン－１－イル）ベンゾ[ｄ]イソオキサゾール（化合物１５１）の合成

【化50】

【0280】

３－クロロベンゾ[ｄ]イソオキサゾール（７７．５ｍｇ、０．５０５mmol）と１－（２－クロロフェニル）ピペラジン（８４μＬ、０．５０５mmol）のピリジン（１ｍＬ）の溶液をマイクロウェーブにて１８０℃で４０分撹拌加熱した。溶媒を減圧留去し、残渣を分取用シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製し８．７ｍｇの表題化合物を得た。
Rf: 0.5 (10 : 1 hexane/ethyl acetate)
^１H NMR (CDCl_３, 400 MHz)δ7.74 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 7.45-7.52 (m, 2H), 7.39 (dd, 1H, J = 1.6, 8.4 Hz), 7.20 - 7.28 (m, 3H), 7.10 (d, 1 H, J = 7.2 Hz), 7.02 (dd, 1H, J = 1.6, 7.2 Hz) , 3.74 - 3.78 (m, 4 H), 3.24 - 3.28 (m, 4H), LC-MS: r.t. 3.15 min., m/z 314 (M+1)。

【0281】

［実施例１６］
３－（４－（２，３－ジメチルフェニル）ピペラジン－１－イル）ベンゾ[ｄ]イソオキサゾール（化合物１６１）の合成

【化51】

【0282】

３－クロロベンゾ[ｄ]イソオキサゾール（５０ｍｇ、０．３２６mmol）と１－（２、３－ジメチルフェニル）ピペラジン（６２mg、０．３２６mmol）のピリジン（１ｍＬ）の溶液をマイクロウェーブにて１８０℃で３０分撹拌加熱した。溶媒を減圧留去し、残渣を分取用シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製し２.４ｍｇの表題化合物を得た。
Rf: 0.8 (5 : 1 hexane/ethyl acetate),
^１H NMR (CDCl_３, 400 MHz)δ7.73 (d, 1H, J = 8.0 Hz), 7.44-7.52 (m, 2H), 7.22 (dd, 1H, J = 1.6, 8.0 Hz), 7.10 (d, 1 H, J = 8.0 Hz), 6.92 - 6.97 (m, 2H), 3.64 - 3.81 (m, 4 H), 3.05 - 3.12 (m, 4H), 2.28 (s, 3 H), 2.27 (S, 3 H), LC-MS: r.t. 3.34 min., m/z 308 (M+1)。

【0283】

［実施例１７］
３－（４－（２，４－ジクロロフェニル）ピペラジン－１－イル）ベンゾ[ｄ]イソオキサゾール（化合物１７１）の合成

【化52】

【0284】

３－クロロベンゾ[ｄ]イソオキサゾール（５５ｍｇ、０．３５８mmol）と１－（２，４－ジクロロフェニル）ピペラジン（１９０mg、０．８２２mmol）のジメトキシエタン（０.５ｍＬ）の溶液をマイクロウェーブにて１６０℃で１２０分撹拌加熱した。溶媒を減圧留去し、残渣を分取用シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製し１３.３ｍｇの表題化合物を得た。
^１H NMR (CDCl_３, 400 MHz)δ7.71 (d, 1 H, J = 8.4 Hz), 7.49 (t, 1 H, J = 8.0 Hz), 7.46 (d, 1 H, J = 8.0 Hz), 7.39 (d, 2H, J = 2.4 Hz), 7.19 - 7.24 (m, 2H), 7.00 (d, 1 H, J = 8.4 Hz), 3.72 - 3.77 (m, 4 H), 3.19 - 3.23 (m, 4H), LC-MS: r.t. 3.40 min., m/z 348 (M+1)。

【0285】

［実施例１８］
３－（４－（３－クロロピリジン－２－イル）ピペラジン－１－イル）ベンゾ[ｄ]イソチアゾール（化合物１８１）の合成

【化53】

【0286】

２-ブロモ－３-クロロピリジン（９６mg、０.５mmol）、３-（ピペラジン－１－イル）ベンゾ[ｄ]イソチアゾール（１１０mg、０.５mmol）、Pd_２（dba）_３（トリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(0)、４６.８mg、０.０５mmol）、tert-ブトキシナトリウム（５７．７ｍｇ、０．６mmol）と（２，２‘-ビス（ジフェニルホスファニル）-１、１’-ビスナフタレン（６２.３mg、０.１mmol）のジオキサン（１０mL）溶液を９０℃で９時間撹拌加熱した。混合物を酢酸エチルで抽出し、有機層を硫酸マグネシウムで乾燥、溶媒を減圧留去し、残渣を分取用シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製し４２ｍｇの粗表題化合物を得た。これをさらに加温したアセトニトリルで洗浄し４４．６ｍｇの表題化合物を得た。
Rf = 0.75,（2 : 1 hexane/ethyl acetate）
^１H NMR (CDCl_３, 400 MHz)δ8.22 (d, 1 H, J = 4.8 Hz), 7.96 (d, 1 H, J = 8.0 Hz), 7.83 (d, 1 H, J = 8.0 Hz), 7.62 (d, 1 H, J = 8.0 Hz), 7.48 (t, 1H, J = 8.0 Hz), 7.38 (t, 1 H, J = 8.0 Hz), 6.88 (dd, 1 H, J = 4.8, 8.0 Hz), 3.69 - 3.73 (m, 4 H), 3.58 - 3.62 (m, 4H), LC-MS: r.t. 2.86 min., m/z 331 (M+1)。

【0287】

［実施例１９］
５－クロロ－６－（８－（４－（トリフルオロメチル）ベンゾ[ｄ]イソオキサゾール－３－イル）－３，８－ジアザビシクロ[３，２，１]オクタン－３－イル）ニコチン酸（化合物１９１）の合成

【化54】

【0288】

ステップ１９－１
Tert-ブチル（１Ｒ，５Ｓ）－３，８－ジアザビシクロ[３，２，１]オクタン－８－カルボキシレート（０．５ｇ、２．３５５mmol）、５，６－ジクロロニコチン酸（０．４５２ｇ、２．３５５mmol）のピリジン（５ｍＬ）の溶液を９０℃で１０時間加熱撹拌した。精製水で希釈後１０％ＫＨＳＯ_４で中和してpHを約６にし、生成した固体を濾取、精製水で洗浄、減圧乾燥し、２４８ｍｇの粗６－（８－（Tert-ブトキシカルボニル）－３，８－ジアザビシクロ[３，２，１]オクタン－３－イル）－５－クロロニコチン酸を得た。これは精製することなしに次のステップに用いた。

【0289】

ステップ１９－２
上記の粗６－（８－（Tert-ブトキシカルボニル）－３，８－ジアザビシクロ[３，２，１]オクタン－３－イル）－５－クロロニコチン酸（２２７mg、０．６１７mmol）のメタノール（５mL）の溶液に過剰のチオニルクロリドを室温で加え一夜放置した。反応混合物を濃縮乾固し２０８．２mgの粗６－（３，８－ジアザビシクロ[３，２，１]オクタン－３－イル）－５－クロロニコチン酸塩酸塩を得た。これは精製することなしに次のステップに用いた。

【0290】

ステップ１９－３
上記の粗６－（３，８－ジアザビシクロ[３，２，１]オクタン－３－イル）－５－クロロニコチン酸塩酸塩（１５２mg、０．５mmol）とトリエチルアミン（２７９μＬ、２．０mmol）のＤＭＦ（１．５mL）の溶液に約１Ｎの２－フルオロ－Ｎ－ヒドロキシ－６－（トリフルオロメチル）ベンズイミドイル クロリドのＤＭＦ液（０．５mL）を室温で加え、終夜撹拌した。精製水で希釈後１０％ＫＨＳＯ_４で中和してpHを約６にし、混合物を酢酸エチルで抽出し、有機層を硫酸マグネシウムで乾燥、溶媒を減圧留去し、残渣を分取用シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製し１３６．４ｍｇの５－クロロ－６－（８－（（２－フルオロ－６－（トリフルオロメチル）フェニル（ヒドロキシイミノ）メチル）－３，８－ジアザビシクロ[３，２，１]オクタン－３－イル）ニコチン酸（化合物１９２）を得た（LC-MS: r.t. 2.54 min., m/z 473 (M+1)）。(Rf = 0.1, 2 : 1 ethyl acetate/hexane)。

【0291】

ステップ１９－４
５－クロロ－６－（８－（（２－フルオロ－６－（トリフルオロメチル）フェニル（ヒドロキシイミノ）メチル）－３，８－ジアザビシクロ[３，２，１]オクタン－３－イル）ニコチン酸（９０ｍｇ）の２Ｎ水酸化カリウム水溶液（０．６ｍＬ）とジオキサン（１．８ｍＬ）との混合溶液を１００℃で１０時間撹拌加熱した。ＬＣ／ＭＳ分析では変換率は約９５％を示した。反応溶液を精製水で希釈後１Ｎ塩酸と１０％ＫＨＳＯ_４で中和してpHを約６とし、酢酸エチルで抽出、有機層を硫酸マグネシウムで乾燥、溶媒を減圧留去し、残渣を分取用シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製して、得られた個体を濾取し、温イソプロパノールで洗浄した。これを乾燥し１６．３ｍｇの表題化合物を得た。
Rf = 0.25（2 : 1 ethyl acetate/hexane）
^１H NMR (DMSO, 400 MHz)δ8.63 (dd, 1 H, J =0.8, 1.6 Hz), 8.07 - 8.11 (m, 2 H), 7.83 - 7.87 (m, 2 H), 4.85 - 4.88 (br, 2 H), 3.33 - 3.38 (m, 6H), 2.13 (dd, 2 H. J = 12.8, 6.0 Hz), 1.91 - 1.99 (m, 2 H), LC-MS: r.t. 3.21 min., m/z 453 (M+1)。

【0292】

［実施例２０］
７－クロロ－３－（４－（２－クロロフェニル）ピペラジン－１－イル）ベンゾ[ｄ]イソオキサゾール（化合物２０１）の合成

【化55】

【0293】

２，６－ジクロロベンズアルデヒドに代えて２，３－ジクロロベンズアルデヒドを用いた以外は、実施例６のステップ６－１、６－２の方法に従って、（Ｅ）－（４－(２－クロロフェニル)ピペラジン－１－イル）(２，３－ジクロロフェニル)メタノン オキシムとそのＺ異性体を得た。
（Ｅ）－（４－(２－クロロフェニル)ピペラジン－１－イル）(２，３－ジクロロフェニル)メタノン オキシム（化合物２０２（Ｅ））：
Rf: 0.5, 3 : 1 hexane/ethyl acetate,
^１H NMR (CDCl_３, 400 MHz)δ7.52 (dd, 1 H, J = 1.2, 8.0 Hz), 7.36 (dd, 1 H, J = 1.2, 8.0 Hz), 7.32 (dd, 1 H, J =2.0, 8.0 Hz), 7.25 (dd, 1 H, J =2.0, 8.0 Hz), 7.21 (dd, 1H, J =2.0, 8.0 Hz), 7.04 (dd, 1H, J = 2.0, 8.0 Hz), 6.98 (dt, 1 H, J =1.2, 8.0 Hz), 3.50 - 3.54 (m, 4 H), 3.07 - 3.11 (m, 4H), LC-MS: r.t. 3.08 min., m/z 384 (M+1)
（Ｚ）－（４－(２－クロロフェニル)ピペラジン－１－イル）(２，３－ジクロロフェニル)メタノン オキシム（化合物２０２（Ｚ））：
Rf: 0.3, 3 : 1 hexane/ethyl acetate
1H NMR (CDCl3, 400 MHz)δ7.52 (dd, 1 H, J = 1.2, 8.0 Hz), 7.36 (d, 1 H, J = 8.0 Hz), 7.31 (t, 1 H, J = 8.0 Hz), 7.25 (d, 1 H, J = 8.0 Hz), 7.21 (d, 1H, J = 8.0 Hz), 7.02 (d, 1H, J = 8.0 Hz), 6.99 (t, 1 H, J = 8.0 Hz), 5.77 - 5.89 (br, 1 H), 3.21 - 3.40 (m, 4 H), 3.03 - 3.07 (m, 4H), LC-MS: r.t. 3.08 min., m/z 384 (M+1)。

【0294】

（Ｅ）－（４－(２－クロロフェニル)ピペラジン－１－イル）(２，６－ジクロロフェニル)メタノン オキシムに代えて（Ｅ）－（４－(２－クロロフェニル)ピペラジン－１－イル）(２，３－ジクロロフェニル)メタノン オキシムを用いた以外は、実施例６のステップ６－３の方法に従って表題化合物を得た。
^１H NMR (CDCl_３, 400 MHz)δ7.63 (d, 1 H, J = 8.8 Hz), 7.50 (d, 1 H, J = 7.6 Hz), 7.42 (dd, 1 H, J =1.2, 7.6 Hz), 7.26 (dt, 1 H, J = 1.2, 7.6 Hz), 7.20 (t, 1 H, J = 7.6 Hz), 7.08 (dd, 1 H, J = 1.2, 7.6 Hz),7.02 (dt, 1 H, J = 1.2, 7.6 Hz), 3.74 - 3.78 (m, 4 H), 3.23 - 3.28 (m, 4H), LC-MS: r.t. 3.38 min., m/z 384 (M+1)。

【0295】

［実施例２１］
６－クロロ－３－（４－（２－クロロフェニル）ピペラジン－１－イル）ベンゾ[ｄ]イソオキサゾール（化合物２１１）の合成

【化56】

【0296】

２，６－ジクロロベンズアルデヒドに代えて２，４－ジクロロベンズアルデヒドを用いた以外は、実施例６のステップ６－１、６－２の方法に従って、（Ｅ）－（４－(２－クロロフェニル)ピペラジン－１－イル）(２，４－ジクロロフェニル)メタノン オキシムとそのＺ異性体を得た。
（Ｅ）－（４－(２－クロロフェニル)ピペラジン－１－イル）(２，４－ジクロロフェニル)メタノン オキシム（化合物２１２（Ｅ））：
Rf: 0.5 (3 : 1 hexane/ethyl acetate)
^１H NMR (CDCl_３, 400 MHz)δ7.41 (d, 1 H, J = 1.6 Hz), 7.39 (s, 1 H), 7.36 (dd, 1 H, J =1.6, 8.0 Hz), 7.30 (dd, 1 H, J =7.2, 8.8 Hz), 7.21 (dd, 1H, J =1.2, 7.2 Hz), 7.03 (dd, 1H, J = 2.0, 8.0 Hz), 6.98 (dt, 1 H, J =1.2, 8.0 Hz), 5.72 (br, 1 H), 3.35 - 3.40 (m, 4 H), 3.04 - 3.09 (m, 4H), LC-MS: r.t. 3.03 min., m/z 384 (M+1)。
（Ｚ）－（４－(２－クロロフェニル)ピペラジン－１－イル）(２，４－ジクロロフェニル)メタノン オキシム（化合物２１２（Ｚ））：
Rf: 0.3 (3 : 1 hexane/ethyl acetate)
^１H NMR (CDCl_３, 400 MHz)δ7.36 (dd, 1 H, J = 1.2, 7.2 Hz), 7.35 (d, 1 H, J = 1.2, 8.0 Hz), 7.26 (dd, 1 H, J = 1.2, 8.0 Hz), 7.28 (dd, 1 H, J = 2.0, 8.0 Hz), 7.22 (dt, 1H, J = 1.2, 7.2 Hz), 7.04 (dd, 1H, J = 8.0 Hz), 6.97 (dt, 1 H, J = 1.2, 8.0 Hz), 6.46 (br, 1 H), 3.53 - 3.57 (m, 4 H), 3.09 - 3.13 (m, 4H), LC-MS: r.t. 3.03 min., m/z 384 (M+1)。

【0297】

（Ｅ）－（４－(２－クロロフェニル)ピペラジン－１－イル）(２，６－ジクロロフェニル)メタノン オキシムに代えて（Ｅ）－（４－(２－クロロフェニル)ピペラジン－１－イル）(２，４－ジクロロフェニル)メタノン オキシムを用いた以外は、実施例６のステップ６－３の方法に従って表題化合物を得た。
^１H NMR (CDCl_３, 400 MHz)δ7.64 (d, 1 H, J = 8.8 Hz), 7.49 (d, 1 H, J = 2.0 Hz), 7.40 (dd, 1 H, J =1.6, 8.0 Hz), 7.26 (dt, 1 H, J = 1.2, 7.6 Hz), 7.22 (dd, 1 H, J = 2.0, 8.8 Hz), 7.08 (dd, 1 H, J = 1.6, 8.0 Hz),7.02 (dt, 1 H, J = 1.2, 7.6 Hz), 3.72 - 3.76 (m, 4 H), 3.23 - 3.27 (m, 4H), LC-MS: r.t. 3.42 min., m/z 384 (M+1)。

【0298】

［実施例２２］
５－クロロ－６－（４－（４－クロロベンゾ[ｄ]イソオキサゾール－３－イル）ピペラジン－１－イル）ピリジン－３－イル）（モルホリノ）メタノン（化合物２２１）の合成

【化57】

【0299】

５－クロロ－６－（４－（４－（トリフルオロメチル）ベンゾ[ｄ]イソオキサゾール－３－イル）ピペラジン－１－イル）ニコチン酸を５－クロロ－６－（４－（４－クロロベンゾ[ｄ]イソオキサゾール－３－イル）ピペラジン－１－イル）ニコチン酸（化合物０８１）に代え、メチルアミンをモルホリンに代えた以外は、実施例２の方法に従って、表題化合物を得た。
^１H NMR (CDCl_３, 400 MHz)δ8.34 (d, 1 H, J = 2.0 Hz), 8.25 (d, 1 H, J = 1.6 Hz), 7.73 (d, 1 H, J = 1.6 Hz), 7.43 (dd, 1 H, J = 7.2, 8.4 Hz), 7.40 (dd, 1 H, J = 1.6, 8.4 Hz), 7.26 (dd, 1 H, J = 1.2, 6.8 Hz), 3.57 - 3.85 (m, 12 H), LC-MS: r.t. 2.80 min., m/z 413 (M+1)。

【0300】

［実施例２３］
５－クロロ－６－（４－（４－クロロベンゾ[ｄ]イソオキサゾール－３－イル）ピペラジン－１－イル）－Ｎ－（メチルスルフォニル）ニコチンアミド（化合物２３１）の合成

【化58】

【0301】

５－クロロ－６－（４－（４－クロロベンゾ[ｄ]イソオキサゾール－３－イル）ピペラジン－１－イル）ニコチン酸（化合物０８１、７９ｍｇ、０．２mmol）、メタンスルホンアミド（２８．５ｍｇ、０．３mmol）、ＤＭＡＰ（4-ジメチルアミノピリジン、３６．７mg、０．３mmol）とＥＤＣ（N-(3-ジメチルアミノプロピル)-N’-エチルカルボジイミド 塩酸塩、５７．５ｍｇ、０．３mmol）のジクロロメタン（１ｍＬ）の溶液を室温で終夜撹拌した。反応混合物を１０％ＫＨＳＯ_４と飽和炭酸水素ナトリウム水溶液でｐＨを約３に合わせたのち、酢酸エチルで抽出し、有機層を硫酸マグネシウムで乾燥、溶媒を減圧留去し、残渣を分取用シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製し４０．１ｍｇの表題化合物を得た。
Rf = 0.3, 5% methanol/ethyl acetate
^１H NMR (DMSO, 400 MHz)δ8.67 (s, 1 H), 8.12 (s, 1 H), 7.67 (d, 1 H, J = 8 Hz), 7.63 (t, 1 H, J = 8 Hz), 7.45 (d, 1 H, J = 7.2 Hz), 3.53 - 3.58 (m, 4 H) , 3.47 - 3.52 (m, 4 H), LC-MS: r.t. 2.78 min., m/z 470 (M+1)。

【0302】

［実施例２４］
５－クロロ－６－（４－（４－（トリフルオロメチル）ベンゾ[ｄ]イソオキサゾール－３－イル）ピペラジン－１－イル）ニコチン酸 メチル（化合物２４１）の合成

【化59】

【0303】

５－クロロ－６－（４－（４－（トリフルオロメチル）ベンゾ[ｄ]イソオキサゾール－３－イル）ピペラジン－１－イル）ニコチン酸（化合物０１１、１１０ｍｇ）の１Ｎ塩化水素メタノール溶液（１２ｍＬ）を２４時間６８℃で加熱撹拌した。ＬＣ／ＭＳによる解析では約９０％の変換率を示した。反応混合物を濃縮後精製水で希釈し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で中和して酢酸エチルで抽出した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥、溶媒を減圧留去し、残渣を分取用シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製し８４．９ｍｇの表題化合物を得た。
(Rf = 0.5, 2 : 1 hexane/ethyl acetate). ^１H NMR (CDCl_３, 400 MHz)δ8.77 (d, 1 H, J = 2.0 Hz), 8.16 (d, 1 H, J = 2.0 Hz), 7.74 (dd, 1 H, J = 1.2, 7.2 Hz), 7.66 (dd, 1 H, J = 1.2, 8.0 Hz), 7.63 (t, 1 H, J = 6.8 Hz), 3.92 (s, 3 H), 3.75 - 3.78 (m, 4 H), 3.44 - 3.48 (m, 4H), LC-MS: r.t. 2.21 min., m/z 423 (M+1)。

【0304】

［実施例２５］
（５－クロロ－６－（４－（４－（トリフルオロメチル）ベンゾ[ｄ]イソオキサゾール－３－イル）ピペラジン－１－イル）ピリジン－３－イル）メタノール（化合物２５１）の合成

【化60】

【0305】

５－クロロ－６－（４－（４－（トリフルオロメチル）ベンゾ[ｄ]イソオキサゾール－３－イル）ピペラジン－１－イル）ニコチン酸 メチル（化合物２４１、２４ｍｇ）と水素化ホウ素ナトリウム（４ｍｇ）のＴＨＦ溶液にイソプロパノール（０．０８ｍＬ）を加え、６５℃で４時間加熱撹拌した。反応混合物にメタノールを加えて濃縮し、残渣を分取用シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製し４．７ｍｇの表題化合物を得た。
Rf = 0.27, 1 : 1 hexane/ethyl acetate
^１H NMR (CDCl_３, 400 MHz)δ8.18 (d, 1 H, J = 2.0 Hz), 7,73 (dd, 1 H, J = 1.2, 8 Hz), 7.69 (d, 1 H, J = 2.0 Hz), 7.65 (d, 1 H, J = 8 Hz), 7.62 (t, 1 H, J = 8 Hz), 4.66 (d, 2 H, J = 4.8 Hz), 3.55 - 3.59 (m, 4 H), 3.45 - 3.49 (m, 4H), LC-MS: r.t. 3.23 min., m/z 413 (M+1)。

【0306】

［実施例２６］
３－（４－（３－メチルピリジン－２－イル）ピペラジン－１－イル）－４－（トリフルオロメチル）ベンゾ[ｄ]イソオキサゾール（化合物２６１）の合成

【化61】

【0307】

５－クロロ－６－（ピペラジン－１－イル）ニコチン酸塩酸塩に代えて１－（３－メチルピリジン－２－イル）ピペラジンを用いた以外は、実施例１のステップ１－３および１－４の方法に従って、表題化合物を得た。
^１H NMR (CDCl_３, 400 MHz)δ8.20 (dd, 1 H, J = 2.0, 5.2 Hz), 7,73 (dd, 1 H, J = 1.2, 8 Hz), 7.65 (d, 1 H, J = 8 Hz), 7.61 (t, 1 H, J = 8 Hz), 7.44 (d, 1 H, J = 7.2 Hz), 6.89 (dd, 1 H, J = 5.2, 7.2 Hz), 3.45 - 3.49 (m, 4H), 3.34 - 3.38 (m, 4 H), 2.33 (s, 3 H), LC-MS: r.t. 2.42 min., m/z 363 (M+1)。

【0308】

［実施例２７］
４－メトキシ－３－（４－（２－クロロフェニル）ピペラジン－１－イル）ベンゾ[ｄ]イソオキサゾール（化合物２７１）の合成

【化62】

【0309】

２－フルオロ－６－（トリフルオロメチル）ベンズアルデヒドに代えて２－フルオロ－６－（メトキシ）ベンズアルデヒドを用いた以外は、実施例１の方法に従って表題化合物を得た。
Rf: 0.6 (2 : 1 hexane/ethyl acetate),
^１H NMR (CDCl_３, 400 MHz)δ7.43 (t, 1H, J = 8.0 Hz), 7.39 (dd, 1H, J = 1.2, 8.0 Hz), 7.25 (dt, 1 H, J = 1.2, 8.4 Hz), 7.11 (dd, 1H, J = 1.2, 8.4 Hz), 7.00 (dt, 1H, J = 1.6, 8.0 Hz), 6.62 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 3.97 (s, 3 H), 3.68 - 3.73 (m, 4 H), 3.24 - 3.28 (m, 4H), LC-MS: r.t. 3.21 min., m/z 344 (M+1)。

【0310】

［実施例２８］
１－（１－（４－（トリフルオロメチル）ベンゾ[ｄ]イソオキサゾール－３－イル）ピペリジン－４－イル）－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ[ｄ]イミダゾール－２－オン（化合物２８１）の合成

【化63】

【0311】

５－クロロ－６－（ピペラジン－１－イル）ニコチン酸塩酸塩に代えて１－（ピペリジン－４－イル）－１、３－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ[ｄ]イミダゾール－２－オンを用いた以外は、実施例１のステップ１－３および１－４の方法に従って表題化合物を得た。
^１H NMR (CDCl_３, 400 MHz)δ7.88 (br, 1 H), 7.74 (d, 1 H, J = 8 Hz), 7.67 (d, 1 H, J = 6.4 Hz), 7.63 (t, 1H, J = 8 Hz), 7.30 (d, 1H, J = 7.6 Hz), 7.05 - 7.16 (m, 3 H), 4.65 (tt, 1 H, J = 12, 4.8 Hz), 3.79 (d, 2 H, J = 10.4 Hz), 3.16 (t, 2 H, J = 11.6 Hz), 2.69 (dq, 2 H, J = 4, 12 Hz), 1.96 (d, 2 H, J = 12 Hz), LC-MS: r.t. 2.68 min., m/z 403 (M+1)。
なお、合成の過程のステップ１－３において、１－（１－（（２－フルオロ－６－（トリフルオロメチル）フェニル（ヒドロキシイミノ）メチル）ピペリジン－４－イル）－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ[ｄ]イミダゾール－２－オンが得られた（化合物２８２；LC-MS: r.t. 2.20 min., m/z 423 (M+1)）。

【0312】

［実施例２９］
２－（２－オキソ－３－（１－（４－（トリフルオロメチル）ベンゾ[ｄ]イソオキサゾール－３－イル）ピペリジン－４－イル）－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ[ｄ]イミダゾール－１－イル）酢酸tert－ブチルエステル（化合物２９１）の合成

【化64】

【0313】

１－（１－（４－（トリフルオロメチル）ベンゾ[ｄ]イソオキサゾール－３－イル）ピペリジン－４－イル）－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ[ｄ]イミダゾール－２－オン（化合物２８１、６７ｍｇ、０．１７１mmol）、ブロモ酢酸tert－ブチルエステル（５０ｍｇ、０．２５６mmol）と６０％水素化ナトリウム（１０．４ｍｇ、０．２５６mmol）のＤＭＦ（１ｍＬ）の溶液を室温で２時間撹拌し、飽和食塩水を加え酢酸エチルで抽出した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥、ろ過、濃縮し、残渣を分取用液体シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル）で精製し、表題化合物（８６．６ｍｇ）を得た。
^１H NMR (CDCl_３, 400 MHz)δ7.55 (d, 1 H, J = 8 Hz), 7.67 (d, 1 H, J = 6.4 Hz), 7.43 (t, 1H, J = 8 Hz), 7.31 (d, 1H, J = 7.6 Hz), 7.13 (t, 1 H, J = 7.2 Hz), 7.10 (t, 1 H, J = 7.2 Hz), 6.90 (d, 1 H, J = 7.2 Hz), 4.65 (tt, 1 H, J = 12, 4.8 Hz), 4.55 (s, 2 H), 3.77 (d, 2 H, J = 10.4 Hz), 3.15 (t, 2 H, J = 11.6 Hz), 2.70 (dq, 2 H, J = 4, 12 Hz), 1.96 (d, 2 H, J = 12 Hz), 1.46 (s, 9 H), LC-MS: r.t. 3.25 min., m/z 517 (M+1)。

【0314】

［実施例３０］
２－（２－オキソ－３－（１－（４－（トリフルオロメチル）ベンゾ[ｄ]イソオキサゾール－３－イル）ピペリジン－４－イル）－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ[ｄ]イミダゾール－１－イル）酢酸（化合物３０１）の合成

【化65】

【0315】

２－（２－オキソ－３－（１－（４－（トリフルオロメチル）ベンゾ[ｄ]イソオキサゾール－３－イル）ピペリジン－４－イル）－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ[ｄ]イミダゾール－１－イル）酢酸tert－ブチルエステル（化合物２９１、７８．３ｍｇ）をＤＭＥ（ジメチルエーテル、５ｍＬ）に溶かし、１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（２ｍＬ）を加え、室温で２時間撹拌した。１Ｎ塩酸で中和し、析出した結晶を濾取し精製水で洗浄、乾燥し表題化合物（５０．８ｍｇ）を得た。
^１H NMR (DMSO, 400 MHz)δ8.06 - 8.11 (m, 1 H), 7.87 (d, 1 H, J = 7.6 Hz), 7.84 (t, 1H, J = 3.6 Hz), 7.31 (d, 1H, J = 7.2 Hz), 7.17 (t, 1 H, J = 7.2 Hz), 7.10 (dt, 1 H, J = 1.2, 7.2 Hz), 7.06 (dt, 1 H, J = 1.2, 7.2 Hz), 4.60 (s, 2 H), 4.50 (tt, 1 H, J = 12, 4 Hz), 3.12 (t, 2 H, J = 12 Hz), 2.55 - 2.68 (m, 2 H), 1.84 (d, 2 H, J = 12 Hz), LC-MS: r.t. 2.65 min., m/z 461 (M+1)。

【0316】

［実施例３１］
３－（４－（２－クロロピリジン－３－イル）ピペラジン－１－イル）ベンゾ[ｄ]イソオキサゾール（化合物３１１）の合成

【化66】

【0317】

１－（ピリジン－２－イル）ピペラジンに代えて１－（２－クロロピリジン－３－イル）ピペラジンを用いた以外は、実施例１４の方法に従って表題化合物を得た。
LC-MS: r.t. 2.60 min., m/z 315 (M+1)。

【0318】

［実施例３２］
３－（４－（３－クロロピリジン－２－イル）ピペラジン－１－イル）ベンゾ[ｄ]イソオキサゾール（化合物３２１）の合成

【化67】

【0319】

１－（ピリジン－２－イル）ピペラジンに代えて１－（３－クロロピリジン－２－イル）ピペラジンを用いた以外は、実施例１４の方法に従って表題化合物を得た。
LC-MS: r.t. 2.89 min., m/z 315 (M+1)。

【0320】

［実施例３３］
３－（４－（３，５－ジクロロフェニル）ピペラジン－１－イル）ベンゾ[ｄ]イソオキサゾール（化合物３３１）の合成

【化68】

【0321】

１－（２，４－ジクロロフェニル）ピペラジンに代えて１－（３，５－ジクロロフェニル）ピペラジンを用いた以外は、実施例１７の方法に従って表題化合物を得た。
LC-MS: r.t. 3.40 min., m/z 348 (M+1)

【0322】

［実施例３４］
５－クロロ－６－（１－（４－（トリフルオロメチル）ベンゾ[ｄ]イソオキサゾール－３－イル）ピペリジン－４－イル）ニコチン酸メチル（化合物３４１）の合成

【化69】

【0323】

ステップ３４－１
４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）－３，６－ジヒドロピリジン－１（２H）－カルボン酸tert－ブチル（６１８mg、２mmol）、５，６－ジクロロニコチン酸（３８４mg、２mmol）および炭酸カリウム（６９１mg、 5 mmol）、ビストリフェニルホスフィン２塩化パラジウム（140 mg、0.2 mmol）をジメトキシエタン：エタノール：水（容積比１：１：１）の混合液（１２mL）に加え、窒素雰囲気下９０℃で２時間加熱した。反応溶液に１０％硫酸水素カリウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、溶媒を減圧留去し、残渣を分取用ジオールシリカゲルカラムクロマトグラフィー（５％メタノール／酢酸エチル）で精製し、696 mgの１’－（tert－ブトキシカルボニル）－３－クロロ－１’，２’，３’，６’－テトラヒドロ－[２，４’－ビピリジン]－５－カルボン酸を得た（収率103％）。^１H NMR (DMSO, 400 MHz)δ8.95 (d, 1 H, J = 1.6 Hz), 8.27 (d, 1 H, J = 1.6 Hz), 6.25 - 6.33 (m, 1 H), 4.02 - 4.08 (m, 2 H), 3.51 - 3.57 (m, 2 H), 3.3 (m, 2 H), 1.44 (s, 9 H)
LC-MS: r.t. 2.78 min., m/z 284 (M+1-C4H8)。

【0324】

ステップ３４－２
１’－（tert－ブトキシカルボニル）－３－クロロ－１’，２’，３’，６’－テトラヒドロ－[２，４’－ビピリジン]－５－カルボン酸（696 mg, 2 mmol）をメタノール（5 mL）に加え、次いで過剰の塩化チオニルを加え、４５℃で３時間加熱した。溶媒を濃縮し、３－クロロ－１’，２’，３’，６’－テトラヒドロ－[２，４’－ビピリジン]－５－カルボン酸メチル 塩酸塩を得、精製すること無しに次のステップに用いた。
LC-MS: r.t. 1.55 min., m/z 253 (M+1)。

【0325】

ステップ３４－３
３－クロロ－１’，２’，３’，６’－テトラヒドロ－[２，４’－ビピリジン]－５－カルボン酸メチル 塩酸塩（322 mg, 1.114 mmol）をメタノール（5 mL）に溶かし、Pd/C（53 mg）を加え水素雰囲気下室温で１時間撹拌した。LC/MSにより、５－クロロ－６－（ピペリジン－４－イル）ニコチン酸メチル 塩酸塩（1.114 mmol）の生成を反応液中に確認した。反応物をセライトで濾過してPd/Cを除去し、濾液を濃縮し次の反応に用いた。LC-MS: r.t. 1.57 min., m/z 255 (M+1)。

【0326】

ステップ３４－４
５－クロロ－６－（ピペリジン－４－イル）ニコチン酸メチル 塩酸塩（1.114 mmol）を含む濃縮物とトリエチルアミン（0.621 mL, 4.46 mmol）をDMF（3 mL）に加えて第１液を作製した。1.114 mmolの２－フルオロ－Ｎ－ヒドロキシ－６－（トリフルオロメチル）ベンズイミドイル クロリドをDMFに加えて第２液（0.88235 mmol/mL in DMF)を作製した。第１液全量に第２液全量を室温で加え、終夜撹拌した。反応溶液に飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、酢酸エチルにて抽出した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥、溶媒を減圧留去し、残渣を分取用シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製し、１２mgの５－クロロ－６－（１－((２－フルオロ－６－（トリフルオロメチル）フェニル)（ヒドロキシイミノ）メチル)ピペリジン－４－イル）ニコチン酸メチル（化合物３４２）をE/Z混合物として得た。
^１H NMR (DMSO, 400 MHz)δ9.48 (s, 1 H), 8.99 (d, 1 H, J = 1.6 Hz), 8.27 (d, 1 H, J = 1.6 Hz), 7.59 - 7.73 (m, 3 H), 3.89 (s, 3 H), 3.54 (bd, 1 H, J = 14.8 Hz), 3.37 - 3.49 (m, 2 H), 2.75 - 2.89 (m, 2 H), 1.65 - 1.85 (m, 4 H).LC-MS: r.t. 3.49 min., m/z 460 (M+1)。

【0327】

ステップ３４－５
５－クロロ－６－（１－((２－フルオロ－６－（トリフルオロメチル）フェニル)（ヒドロキシイミノ）メチル)ピペリジン－４－イル）ニコチン酸メチル（１２mg）とp-トルエンスルホン酸（1 mg）をDMSO（1 mL）に加え８０℃で１時間加熱した。これにDBU（ジアザビシクロウンデセン；100 μL）を加え、１００℃で９０分間加熱した。反応溶液に飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、酢酸エチルにて抽出した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、溶媒を減圧留去し、残渣を分取用シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製し、7.7 mgの表題化合物を得た。
^１H NMR (DMSO, 400 MHz)δ9.04 (d, 1 H, J = 1.6 Hz), 8.31 (d, 1 H, J = 1.6 Hz), 8.06 (dd, 1 H, J = 2.8, 6.4 Hz), 7.80 - 7.86 (m, 2 H), 3.89 (s, 3 H), 3.64 (bd, 2 H, J = 12.4 Hz), 3.44 - 3.52 (m, 1 H), 3.06 (bt, 2 H, J = 11.2 Hz), 2.04 (dq, 2 H, J = 3.2, 11.6 Hz), 1.91 (bd, 2 H, J = 10.4 Hz).LC-MS: r.t. 4.08 min., m/z 440 (M+1)。

【0328】

［実施例３５］
５－クロロ－６－（１－（４－（トリフルオロメチル）ベンゾ[ｄ]イソオキサゾール－３－イル）ピペリジン－４－イル）ニコチン酸（化合物３５１）の合成

【化70】

【0329】

５－クロロ－６－（１－（４－（トリフルオロメチル）ベンゾ[ｄ]イソオキサゾール－３－イル）ピペリジン－４－イル）ニコチン酸メチル（化合物３４１；7.7 mg）をDME（ジメチルエーテル；1 mL）に加え、次いで1 N水酸化ナトリウム水溶液（0.2 mL）を加え、室温で終夜撹拌した。生成液を減圧濃縮し、1 N塩酸（0.2 mL）を加え中和した。生成した粉末を濾取し、減圧乾燥して3.1 mgの表題化合物を得た。^１H NMR (DMSO, 400 MHz)δ8.94 (d, 1 H, J = 1.6 Hz), 8.18 (d, 1 H, J = 1.6 Hz), 8.03 (dd, 1 H, J = 2.8, 6.4 Hz), 7.77 - 7.83 (m, 2 H), 3.60 (bd, 2 H, J = 12.4 Hz), 3.37 - 3.48 (m, 1 H), 3.02 (bt, 2 H, J = 11.6 Hz), 2.02 (dq, 2 H, J = 3.2, 12.4 Hz), 1.86 (bd, 2 H, J = 11.2 Hz).
LC-MS: r.t. 3.66 min., m/z 426 (M+1)。

【0330】

［実施例３６］
３－（４－（２－クロロフェニル）－３，６－ジヒドロピリジン－１（２Ｈ）－イル）－４－（トリフルオロメチル）ベンゾ[ｄ]イソオキサゾール（化合物３６１）の合成

【化71】

【0331】

ステップ３６－１
４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）－３，６－ジヒドロピリジン－１（２H）－カルボン酸tert－ブチル（309 mg, 1 mmol）、１－クロロ－２－ヨードベンゼン（238 mg, 1 mmol）および炭酸カリウム（207 mg, 1.5 mmol）、ビストリフェニルホスフィン２塩化パラジウム（70.2 mg, 0.1 mmol）をジメトキシエタン：水（容積比２：１）の混合液（12mL）に加え、窒素雰囲気下９０℃で１時間加熱した。反応溶液に１０％硫酸水素カリウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、溶媒を減圧留去し、残渣を分取用シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル）で精製し、287.2 mgの４－(２－クロロフェニル)－３，６－ジヒドロピリジン－１（２H）－カルボン酸tert－ブチルを得た（収率98％）。
^１H NMR (CDCl3, 400 MHz)δ7.34 - 7.37 (m, 1 H), 7.19 - 7.23 (m, 2 H), 7.15 - 7.18 (m, 1 H), 5.62 - 5.72 (br, 1 H), 4.02 - 4.08 (br, 2 H), 3.60 - 3.66 (bt, 2 H, J = 5.4 Hz), 2.41 - 2.48 (br, 2 H), 1.50 (s, 9 H).LC-MS: r.t. 3.77 min., m/z 238 (M+1-C4H8)。

【0332】

ステップ３６－２
４－(２－クロロフェニル)－３，６－ジヒドロピリジン－１（２Ｈ）－カルボン酸tert－ブチル（280.5 mg）を4 N塩酸／酢酸エチル（5 mL）に加え室温で一晩放置した。溶媒を濃縮し、４－(２－クロロフェニル)－１，２，３，６－テトラヒドロピリジン塩酸塩を得、精製すること無く次のステップに用いた。
LC-MS: r.t. 1.75 min., m/z 194 (M+1)。

【0333】

ステップ３６－３
４－(２－クロロフェニル)－１，２，３，６－テトラヒドロピリジン塩酸塩（115 mg, 0.5 mmol）とトリエチルアミン（0.209 mL, 1.5 mmol）をDMF（3 mL）に加えて第１液を作製した。0.5 mmolの２－フルオロ－Ｎ－ヒドロキシ－６－（トリフルオロメチル）ベンズイミドイル クロリドをDMFに加えて第２液（0.88235 mmol/mL in DMF)を作製した。第１液全量に第２液全量を室温で加え、１時間撹拌した。反応溶液に飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、酢酸エチルにて抽出した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、溶媒を減圧留去し158.5 mgのＥ－（４－（２－クロロフェニル）－３、６－ジヒドロピリジン－１（２H）－イル）(2－フルオロ－６－（トリフルオロメチル）フェニル)メタノン オキシム（化合物３６２）をE/Z混合物として得た。そのうち80 mgを次の反応に用いるために分離し、残りを分取用シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製し、Ｅ－（４－（２－クロロフェニル）－３、６－ジヒドロピリジン－１（２H）－イル）(2－フルオロ－６－（トリフルオロメチル）フェニル)メタノン オキシム（化合物３６２（Ｅ））とそのＺ異性体（化合物３６２（Ｚ））を得た。
（Ｅ）－（４－（２－クロロフェニル）－３、６－ジヒドロピリジン－１（２H）－イル）(2－フルオロ－６－（トリフルオロメチル）フェニル)メタノン オキシム（27.6 mg、Rf = 0.56）
^１H NMR (CDCl_３, 400 MHz)δ 7.52 - 7.61 (m, 2 H), 7.32 - 7.41 (m, 2 H), 7.16 - 7.25 (m, 3 H), 6.25 (brs, 1 H), 5.69 (brm, 1 H), 3.84 - 3.99 (m, 2 H), 3.17 - 3.31 (m, 2 H), 2.33 - 2.49 (m, 2 H).
LC-MS: r.t. 3.41 min., m/z 399 (M+1)。
（Ｚ）－（４－（２－クロロフェニル）－３、６－ジヒドロピリジン－１（２H）－イル）(2－フルオロ－６－（トリフルオロメチル）フェニル)メタノン オキシム（17.1 mg、Rf = 0.34）
^１H NMR (CDCl_３, 400 MHz)δ 7.51 - 7.59 (m, 2 H), 7.31 - 7.39 (m, 2 H), 7.15 - 7.23 (m, 3 H), 6.25 (brs, 1 H), 5.62 (brm, 1 H), 3.91 - 4.15 (m, 2 H), 3.50 - 3.58 (m, 2 H), 2.45 - 2.51 (m, 2 H).
LC-MS: r.t. 3.49 min., m/z 399 (M+1)。

【0334】

ステップ３６－４
（４－（２－クロロフェニル）－３、６－ジヒドロピリジン－１（２H）－イル）(2－フルオロ－６－（トリフルオロメチル）フェニル)メタノン オキシム（化合物３６２、E異性体とZ異性体の混合物；80 mg, 0,2 mmol）とp-トルエンスルホン酸（2 mg）をDMSO（1 mL）に加え８０℃で３０分間加熱した。これにDBU (100 μL）を加え、１００℃で９０分間加熱した。反応溶液に飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、酢酸エチルにて抽出した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、溶媒を減圧留去し、残渣を分取用シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製し、67.6 mgの表題化合物を得た（収率89％）。
^１H NMR (CDCl_３, 400 MHz)δ 7.73 (d, 1 H, J = 8.0 Hz), 7.59 - 7.67 (m, 2 H), 7.38 (dd, 1 H, J = 7.2, 2.0 Hz), 7.19 - 7.28 (m, 3 H), 5.79 - 5.83 (m, 1 H), 4.05 (dd, 2 H, J = 6, 2.8 Hz), 3.53 (t, 2 H, J = 7.6 Hz), 2.67 - 2.72 (m, 2 H).LC-MS: r.t. 4.22 min., m/z 379 (M+1)。

【0335】

［実施例３７］
５－クロロ－６－（２－オキソ－４－（４－（トリフルオロメチル）ベンゾ[ｄ]イソオキサゾール－３－イル）ピペラジン－１－イル）ニコチン酸エチルの合成（化合物３７１）の合成

【化72】

【0336】

ステップ３７－１
３－オキソピペラジン－１－カルボン酸tert－ブチル（2.0 g, 9.99 mmol）、５，６－ジクロロニコチン酸エチル（2.3 g, 10.45 mmol）、炭酸セシウム（6.51 g, 19.98 mmol）、ザントフォス（578 mg, 0.999 mmol）およびPd_２(dba)_３（457 mg, 0.499 mmol）をトルエン（20 mL）に加え窒素雰囲気下１２０℃で３時間加熱した。反応溶液をシリカゲルパッドに通し、濾液を濃縮した。残渣を分取用シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル）で精製し、2.67 g の４－（３－クロロ－５－（エトキシカルボニル）ピリジン－２－イル）－３－オキソピペラジン－１－カルボン酸tert－ブチルを得た（収率70％）。
^１H NMR (CDCl_３, 400 MHz)δ 9.05 (d, 1 H, J = 1.6 Hz), 8.40 (d, 1 H, J = 1.6 Hz), 4.43 (q, 2 H, J = 7.2 Hz), 4.20 - 4.35 (m, 2 H), 4.05 (brm, 1 H), 3.84 (brm, 2 H), 3.61 (brm, 1 H), 1.50 (s, 9 H), 1.41 (t, 3 H, J = 7.2 Hz).LC-MS: r.t. 2.82 min., m/z 328 (M+1)。

【0337】

ステップ３７－２
４－（３－クロロ－５－（エトキシカルボニル）ピリジン－２－イル）－３－オキソピペラジン－１－カルボン酸tert－ブチル（369 mg, 0.961 mmol）を4 N塩酸／酢酸エチル混合液（5 mL）に加え室温で一晩撹拌し、溶媒を濃縮乾固し、５－クロロ－６－（２－オキソピペラジン－１－イル）ニコチン酸エチル塩酸塩を得た。残渣は精製することなく次のステップに用いた。
^１H NMR (DMSO, 400 MHz)δ 8.21 (br, 1 H), 7.08 (br, 1 H), 4.06 (br, 2 H), 3.63 (q, 2 H, J = 7.2 Hz), 2.89 - 3.42 (brm, 4 H), 0.61 (t, 3 H, J = 7.2 Hz).LC-MS: r.t. 1.37 min., m/z 284 (M+1)。

【0338】

ステップ３７－３
５－クロロ－６－（２－オキソピペラジン－１－イル）ニコチン酸エチル塩酸塩（296 mg, 0.925 mmol）とトリエチルアミン（0.515 mL, 3.7 mmol）をDMF（6 mL）に加えて第１液を作製した。0.925 mmolの２－フルオロ－Ｎ－ヒドロキシ－６－（トリフルオロメチル）ベンズイミドイル クロリドをDMFに加えて第２液を作製した（0.88235 mmol/mL in DMF)。第１液に第２液を室温で加え、一晩撹拌した。反応溶液に10％ＫＨＳＯ_４水溶液を加え、酢酸エチルにて抽出した。有機層をＮａＨＣＯ_３水溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、溶媒を減圧留去し、残渣を分取用シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製し、（Ｚ）－５－クロロ－６－（４－（（２－フルオロ－６－（トリフルオロメチル）フェニル）（ヒドロキシイミノ）メチル）－２－オキソピペラジン－１－イル）ニコチン酸エチル（化合物３７２（Ｚ））（262.3 mg, Rf = 0.4, １：１ヘキサン／酢酸エチル）を得た。収率58％。
^１H NMR (CDCl_３, 400 MHz)δ 9.00 (d, 1 H, J = 1.6 Hz), 8.38 (d, 1 H, J = 1.6 Hz), 8.17 (br, 0.5 H), 7.54 - 7.58 (m, 2 H), 7.32 - 7.40 (m, 1 H), 4.42 (q, 2 H, J = 7.2 Hz), 3.58 - 4.30 (br, 4.5 H), 1.40 (t, 3 H, J = 7.2 Hz).LC-MS: r.t. 2.61 min., m/z 489 (M+1)。

【0339】

ステップ３７－４
（Ｚ）－５－クロロ－６－（４－（（２－フルオロ－６－（トリフルオロメチル）フェニル）（ヒドロキシイミノ）メチル）－２－オキソピペラジン－１－イル）ニコチン酸エチル（化合物３７２（Ｚ）；128.8 mg）とp-トルエンスルホ酸（10 mg）をDMSO（2 mL）に加え８０℃で１時間加熱した。これにDBU (910 μL）を加え、１２０℃で３０分間加熱した。反応溶液に飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、酢酸エチルにて抽出した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、溶媒を減圧留去し、残渣を分取用シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン）で精製し、表題化合物を得た(50 mg、Rf = 0.4, １：1ヘキサン／酢酸エチル）。
^１H NMR (CDCl_３, 400 MHz)δ 9.04 (d, 1 H, J = 1.6 Hz), 8.43 (d, 1 H, J = 1.6 Hz), 7.79 (dd, 1 H, J = 1.6, 7.2 Hz), 7.65 - 7.71 (m, 2 H), 4.44 (q, 2 H, J = 7.2 Hz), 4.15 -4.35 (brm, 3 H), 3.72 - 3.82 (m, 3 H), 1.43 (t, 3 H, J = 7.2 Hz).LC-MS: r.t. 2.66 min., m/z 441 (M+1)。

【0340】

［実施例３８］
５－クロロ－６－（２－オキソ－４－（４－（トリフルオロメチル）ベンゾ[ｄ]イソオキサゾール－３－イル）ピペラジン－１－イル）ニコチン酸（化合物３８１）の合成

【化73】

【0341】

５－クロロ－６－（２－オキソ－４－（４－（トリフルオロメチル）ベンゾ[ｄ]イソオキサゾール－３－イル）ピペラジン－１－イル）ニコチン酸エチル（化合物３７１；45 mg）をDME（2 mL）に加え、さらに2 N水酸化ナトリウム水溶液（1 mL）を加え、室温で一晩撹拌した。溶液を減圧濃縮し1 N塩酸（2 mL）を加え中和した。生成した粉末を濾取し、減圧乾燥し、18.3 mgの表題化合物を得た。
^１H NMR (DMSO, 400 MHz)δ 8.96 (d, 1 H, J = 1.6 Hz), 8.42 (d, 1 H, J = 1.6 Hz), 8.10 - 8.16 (m, 1 H), 7.86 - 7.89 (m, 2 H), 4.02 - 4.15 (m, 3 H), 3.62 - 3.75 (m, 3 H).
LC-MS: r.t. 2.66 min., m/z 441 (M+1)。

【0342】

［実施例３９］
３－クロロ－４－（１－（４－（トリフルオロメチル）ベンゾ［ｄ］イソオキサゾール－３－イル）－１，２，３，６－テトラヒドロピリジン－４－イル）安息香酸メチル（化合物３９１）の合成

【化74】

【0343】

１－クロロ－２－ヨードベンゼンに代えて４－ブロモ－３－クロロ安息香酸メチルを用いた以外は、実施例３６の方法に従って表題化合物を得た。
^１H NMR (CDCl_３, 400 MHz)δ8.05 (d, 1 H, J = 1.2 Hz), 7.92 (dd, 1 H, J = 1.2, 8.4 Hz), 7.76 (d, 1 H, J = 7.2 Hz), 7.62 - 7.68 (m, 2 H), 7.57 (d, 1 H, J = 8.4 Hz), 5.83 (m, 1 H, J = 7.6 Hz), 4.87 (dd, 1 H, J = 3.6, 8.0 Hz), 4.10 - 4.16 (m, 1 H), 3.92 (s, 3 H), 3.64 - 3.71 (m, 1 H), 3.51 - 3.58 (m, 1 H), 2.36 - 2.46 (m, 1 H), 1.86 - 1.95 (m, 1 H).
LC-MS: r.t. 3.72 min., m/z 437 (M+1)。

【0344】

［実施例４０］
３－クロロ－４－（１－（４－（トリフルオロメチル）ベンゾ［ｄ］イソオキサゾール－３－イル）－１，２，３，６－テトラヒドロピリジン－４－イル）安息香酸メチル（化合物４０１）の合成

【化75】

【0345】

化合物３７１に代えて３－クロロ－４－（１－（４－（トリフルオロメチル）ベンゾ［ｄ］イソオキサゾール－３－イル）－１，２，３，６－テトラヒドロピリジン－４－イル）安息香酸メチル（化合物３９１）を用いた以外は、実施例３８の方法に従って表題化合物を得た。
^１H NMR (CDCl_３, 400 MHz)δ8.13 (d, 1 H, J = 2 Hz), 7.97 (dd, 1 H, J = 2, 7.6 Hz), 7.74 (d, 1 H, J = 7.6 Hz), 7.62 - 7.68 (m, 2 H), 7.39 (d, 1 H, J = 8 Hz), 5.87 - 5.91 (m, 1 H), 4.05 - 4.09 (m, 2 H), 3.54 (t, 2 H, J = 6.8 Hz), 2.68 - 2.73 (m, 2 H).
LC-MS: r.t. 3.40 min., m/z 423 (M+1)。

【0346】

［実施例４１］
３－（４－（２－クロロフェニル）ピぺラジン－１－イル）－４－ヨードベンゾ［ｄ］イソオキサゾール（化合物４１１）の合成

【化76】

【0347】

ステップ４１－１
２－フルオロ－６－ヨードベンズアルデヒド（２．５ｇ、１０mmol）のエタノール（１５mL）の溶液に、ヒドロキシアミン塩酸塩（０．７９０ｇ、１１mmol）の２N水酸化ナトリウム水溶液（５．５mL、１１mmol）を加え、室温で終夜撹拌した。反応液に水を加え、析出した結晶をろ取し水で洗浄、減圧乾燥して、２－フルオロ－６－ヨードベンズアルデヒド オキシム（２．５０５ｇ）を得た。

【0348】

ステップ４１－２
２－フルオロ－６－ヨードベンズアルデヒド オキシム（０．５３０ｇ、２mmol）のDMF（１０mL）の溶液にNCS（N-クロロスクシンイミド）（０．２７６ｇ、２mmol）を加え、室温で終夜撹拌した。LC/MSはオキシムが１００％塩化物に変換したことを示した。２－フルオロ－Ｎ－ヒドロキシ－６－ヨードベンズイミドイル クロリドの溶液は精製することなしに次の反応に用いた。

【0349】

ステップ４１－３
１－（２－クロロフェニル）ピペラジン（１７６μL、１mmol）とトリエチルアミン（１６８μL、１．２mmol）のＤＭＦ（１ｍL）の溶液に、ステップ４１－２の２－フルオロ－Ｎ－ヒドロキシ－６－ヨードベンズイミドイル クロリドのＤＭＦ溶液（５ｍＬ、約１mmol）を室温で加え、終夜撹拌した。反応溶液に飽和塩化アンモニウム水溶液と水を加え、酢酸エチルにて抽出した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥、溶媒を減圧留去し、（Ｅ）－（４－（２－クロロフェニル）ピペラジン－１－イル）(２－フルオロ－６－ヨードフェニル)メタノンオキシム（化合物４１２（Ｅ））とそのＺ異性体（化合物４１２（Ｚ））をE/Z混合物（６５７．８ｍｇ）として得た。

【0350】

ステップ４１－４
（４－（２－クロロフェニル）ピペラジン－１－イル）(２－フルオロ－６－ヨードフェニル)メタノンオキシム（６５７ｍｇ、１mmol）とp-トルエンスルホン酸（約1０mg）をDMSO（５mL）に加え８０℃で２時間加熱した。これにDBU（ジアザビシクロウンデセン；２３８μL）を加え、１２０℃で６０分間加熱した。反応溶液に飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、酢酸エチルにて抽出した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧留去して、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン＝１０：１～３：１）で精製し、２９５．８ｍｇの表題化合物を得た。
^１H NMR (CDCl_３, 400 MHz)δ7.47 (t, 0.5 H, J = 7.6 Hz), 7.46 (t, 0.5 H, J = 7.6 Hz), 7.39 (dd, 1 H, J = 1.2, 8.0 Hz), 7.28 (d, 1 H, 8.0 Hz), 7.25 (dt, 1 H, J = 1.2, 7.6 Hz), 7.10 (dd, 1 H, J = 1.2, 6.8 Hz), 7.01 (dt, 1 H, J = 1.2, 7.6 Hz), 6.93 (d, 0.5 H, J = 8.0 Hz), 6.91 (d, 0.5 H, J = 8.0 Hz), 3.67 - 3.72 (m, 4 H), 3.23 - 3.28 (m, 4 H), LC-MS: r.t. 4.18 min., m/z 440 (M+1)。

【0351】

［実施例４２］
３－（４－（２－クロロフェニル）ピぺラジン－１－イル）－４－シアノベンゾ［ｄ］イソオキサゾール（化合物４２１）の合成

【化77】

【0352】

３－（４－（２－クロロフェニル）ピぺラジン－１－イル）－４－ヨードベンゾ［ｄ］イソオキサゾール（実施例４１の化合物、１８３mg、０．４２mmol）、シアン化亜鉛（７３mg、０．６２mmol）、およびテトラキストリフェニルホスフィンパラジウム（４８mg、０．０４２mmol）をDMF（５mL）に加え、窒素下80℃で７時間加熱撹拌した。反応混合物に塩化アンモニウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧留去して、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン＝１０：１～３：１）で精製し、１１９mgの表題化合物を得た。
^１H NMR (CDCl_３, 400 MHz)δ7.76 (d, 1 H, J = 8.0 Hz), 7.68 (d, 1 H, J = 6.4 Hz), 7.62 (dd, 1 H, J = 8.0 Hz), 7.39 (dd, 1 H, J = 1.2, 7.6 Hz), 7.25 (dt, 1 H, J = 1.2, 8.0 Hz), 7.15 (dd, 1 H, J = 2.0, 8.0 Hz), 7.01 (dt, 1 H, J = 1.6, 8.0 Hz), 3.64 - 3.69 (m, 4 H), 3.32 - 3.36 (m, 4 H), LC-MS: r.t. 3.73 min., m/z 339 (M+1)。

【0353】

［実施例４３］
３－（４－（２－クロロフェニル）ピペラジン－１－イル）ベンゾ［ｄ］イソオキサゾール－４－カルボキシアミド（化合物４３１）の合成

【化78】

【0354】

３－（４－（２－クロロフェニル）ピぺラジン－１－イル）－４－シアノベンゾ［ｄ］イソオキサゾール（実施例４２の化合物、３７.８mg、０．１１mmol）を１，４－ジオキサン（２mL）とエタノール（２mL）の混合溶液に溶解させ、飽和水酸化リチウム水溶液（１mL）を加え、マイクロウェーブ反応器にて150℃で2時間反応させた。混合物を塩酸水溶液で中和し酢酸エチルで抽出した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧留去して、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて１００％酢酸エチルで留出させ、続いて５％メタノール／酢酸エチルで留出させることにより精製し、表題化合物を含む混合物を得た。混合物を酢酸エチルに溶解させ、飽和重曹水で3回洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧留去して、表題化合物(２７.９mg)を得た。
^１H NMR (CDCl_３, 400 MHz)δ8.27(bs, 1 H,), 8.04 (dd, 1 H, J = 0.8, 7.6 Hz), 7.69 (dd, 1 H, J =1.2, 8.4 Hz), 7.64 (dd, 1 H, J = 7.2, 8.4 Hz), 7.38 (dd, 1 H, J = 1.2, 7.6 Hz), 7.25 (dt, 1 H, J = 1.6, 7.6 Hz), 7.08 (dd, 1 H, J = 1.2, 7.6 Hz), 7.02 (dt, 1 H, J = 1.2, 7.6 Hz), 6.17 (bs, 1 H)3.52 - 3.57 (m, 4 H), 3.23 - 3.29 (m, 4 H), LC-MS: r.t. 3.00 min., m/z 357 (M+1)。(L-0003)

【0355】

［試験例１］
TRPCチャネルを一過的に発現したHEK293細胞を用いたカルシウムアッセイ１．TRPCチャネルの細胞への導入および発現
HEK293細胞（ヒト胎児腎由来細胞）にTRPC6遺伝子をリポフェクション法で導入し、細胞膜にTRPC6チャネルを発現させた。具体的には、TRPC6のプラスミドDNA（pCI-neo (promega社)）をリポフェクション剤を用いてHEK293細胞へ導入後、37℃で24～48時間培養し細胞膜にTRPC6チャネルを発現させた。同様にして、TRPC3遺伝子を導入したHEK293細胞を培養し細胞膜にTRPC3チャネルを発現させた。

【0356】

２．TRPC発現細胞内におけるカルシウムイオン濃度変化の測定
培養細胞をトリプシンで剥がし、カバーガラスに撒き直したのち、再び37℃で3時間培養した。培地にカルシウム指示薬Fura-2 AMを加え30分間37℃で培養し細胞に取り込ませた。細胞外溶液にはCa^２＋含有溶液およびCa^２＋フリー溶液を用意した。

【0357】

Ca^２＋含有溶液：(2 mM CaCl₂, 132 mM NaCl, 4 mM KCl, 1mM MgCl₂, 5 mMグルコース, 5 mM HEPES (pH7.4))
Ca^２＋フリー溶液：(132 mM NaCl, 4 mM KCl, 1mM MgCl₂, 5 mMグルコース, 5 mM HEPES (pH7.4))

【0358】

Ca²⁺含有溶液に細胞を入れた後、室温で、Fura-2の蛍光強度（510 nm）をARGUS CA-20（Hamamatsu Photonics社）で経時的に測定しつつ以下の操作を行った。

【0359】

０分：Ca^２＋含有溶液を入れた測定用チャンバーにTRPC3発現細胞またはTRPC6発現細胞を入れる
３０秒後：Ca^２＋含有溶液をCa²⁺フリー溶液に置き換える
１分後：Ca^２＋フリー溶液に所定量の試験化合物を添加する
３分後：Ca^２＋フリー溶液にカルバコール（100μM）を添加する
７分後：Ca^２＋フリー溶液を試験化合物およびカルバコール（100μM）を含むCa^２＋含有溶液に置き換える
１５分後：測定終了

【0360】

試験化合物には化合物０１１を使用し、その添加量は、0.01、0.1、0.5、1.0、5.0、10、または50μMである。また、試験化合物に代えて0.1％のDMSOを使用しコントロールとした。なお、カルバコール（cch）は、TRPCチャネル活性化剤であり、これを細胞に適用すると、TRPCチャネルが開口し、細胞外溶液中のCa^２＋が細胞内に多量に流入する。また、Fura-2 AMは、AM基（アセトキシメチル基）の存在により細胞膜透過性が高く、細胞内に容易に取り込まれ、細胞内でAM基が加水分解を受けることでFura-2となる結果、Ca^２＋とキレート形成が可能となるとともに、AM基を失ったことで細胞外へ漏れ出しにくくなる。

【0361】

TRPC6発現細胞およびTRPC3発現細胞での測定結果をカルシウムイメージングでそれぞれ図１および２に示す。細胞内Ca^２＋濃度は、カルバコール（cch）添加によって、コントロール（DMSO）では100nM程度から280nM程度（TRPC6、図１）または100nM程度から350nM程度（TRPC3、図２）まで上昇したが、試験化合物（化合物０１１）では100nM程度から140nM程度（TRPC6、図１）または100nM程度から180nM程度（TRPC3、図２）までの上昇であり、TRPC6およびTRPC3チャネルの活性化の抑制が確認された。また、測定結果から濃度－応答曲線を作成したところTRPC6およびTRPC3チャネルの阻害のIC_５０は、4.6μM（TRPC6）および0.7μM（TRPC3）であった。

【0362】

［試験例２］
TRPC6チャネルを一過的に発現したHEK293細胞を用いたカルシウムアッセイ 試験例１と同様にして調製したTRPC6発現細胞を用い、10μMのPyr 4、ならびに試験化合物として10μMの化合物０１１、０３１、０４１、および１９１を使用した以外は、試験例１と同様にして、測定開始７分後以降（つまりCa^２＋含有溶液置換後）における最大カルシウムイオン濃度値を計測した。この最大カルシウムイオン濃度値から、測定開始後３０秒までのカルシウムイオン濃度の平均の値（カルシウムイオン濃度の初期値）を控除して算出した値をカルシウムイオン増加量とした。結果を図３に示す。図３では、カルシウムイオン増加量を、コントロール（DMSO）でのカルシウムイオン増加量を100％とした相対値として表した。試験化合物の添加によって細胞内に流入するカルシウムイオンが減少したことから、TRPC6チャネルの活性化の抑制が確認された。

【0363】

［試験例２－１］
TRPC6チャネルを一過的に発現したHEK293細胞を用いたカルシウムアッセイ 試験化合物として10μMの化合物０１１、３６１、３６２（Ｅ）、３６２（Ｚ）、３７１、３７２（Ｚ）、３８１、および４０１を使用し、Pyr 4を使用しないこと以外は、試験例２と同様にしてカルシウムイオン濃度を測定し、カルシウムイオン増加量を求めた。 各試験化合物のカルシウムイオン増加量を、コントロール（DMSO）でのカルシウムイオン増加量を100％とした相対値として表２に示す。

【表2】

【0364】

試験化合物の添加によって細胞内に流入するカルシウムイオンが減少したことから、TRPC6チャネルの活性化の抑制が確認された。

【0365】

［試験例３］
TRPC6チャネルを一過的に発現したHEK293細胞を用いたカルシウムアッセイ 10μMのPyr 4、ならびに試験化合物として10μMの化合物２０２（Ｅ）、０６１、および０７１を用い、TRPCチャネル活性化剤としてカルバコールに代えてATPを使用した以外は、試験例２と同様にしてカルシウムイオン濃度を測定し、カルシウムイオン増加量を求めた。結果を図４に示す。図４では、カルシウムイオン増加量を、コントロール（DMSO）でのカルシウムイオン増加量を100％とした相対値として表した。試験化合物の添加によって細胞内に流入するカルシウムイオンが減少したことから、TRPC6チャネルの活性化の抑制が確認された。

【0366】

［試験例４］
TRPC6チャネルを一過的に発現したHEK293細胞を用いた電気生理的評価
試験例１と同様の処置を施して培養したTRPC6発現細胞を用いて評価を行った。トランスフェクションされた細胞を顕微鏡に設置したチャンバー内に置き、パッチガラス電極（5～10 MΩ）にてホールセル（全細胞）モードにてTRPC6電流を測定した。ここで用いた、細胞外溶液および細胞内溶液は以下のとおりである。

【0367】

細胞外溶液：(140 mM NaCl, 5 mM KCl, 1 mM CaCl₂, 1.2 mM MgCl₂, 10 mM Glucose, 10 mM HEPES (pH7.4))
細胞内溶液：(120 mM CsOH, 120 mM Aspartate, 20 mM CsCl, 2mM MgCl₂, 1.5 mM CaCl₂, 5 mM EGTA, 10 mM Glucose, 10 mM HEPES, 2 mM ATP-Na, 0.1 mM GTP (pH7.4))

【0368】

保持電位は-50mVに固定した。細胞にカルバコール（100 μＭ）を添加することでTRPC電流を惹起させた。カルバコール添加の２０秒後に30μMの試験化合物（化合物０１１）を細胞に３０秒間添加することで得られる電流変化を評価した。

【0369】

試験例４の結果（カルバコール：cchで惹起したTRPC6電流における化合物０１１の効果）を図５に示す。図５の左図は-50mVのトレースを示す。図５の右図は、左図のa, b の二つの時点で約１秒間のランプ波(-100～＋100 mVの直線的電圧)を加え測定した電流－電圧特性カーブを示す。試験化合物添加後に電流量の顕著な減少が見られたことから、試験化合物の添加によりTRPC6チャネル活性化の抑制効果が観察された。

【0370】

［試験例５］
線維化阻害評価実験１（ウエスタンブロット法と細胞形態観察）
線維芽細胞におけるα-smooth muscle actin (α-SMA)の発現をウエスタンブロットで評価した。生後1-3日齢マウスから皮膚線維芽細胞を単離し、2.5x10^５個の細胞を12ウェルプレートに播種した。24時間後に牛胎児血清を除いた培地に交換し、さらに24時間培養しその後、10 ng/mlのtransforming growth factor β1 (TGFβ1)を添加し48時間培養した。なお、TGFβ1添加と同時に、所定濃度（0.1μM、1μM、10μM）の試験化合物（化合物０１１）、10μMのPyr 2またはDMSO（溶媒コントロール）も添加した。培養後の細胞の形態観察はオールインワン蛍光顕微鏡（Keyence BZ-X700）を使用して行った（倍率20倍）。培養後の細胞をlysis buffer (140 mM NaCl, 20 mM Tris-HCl pH7.8, 1% Triton-X100, 0.05% sodium deoxycholate, 0.1% SDS, 2 mM EDTA, proteinase inhibitor cocktail)により溶解し、SDS-PAGEにより分離後、１次抗体として抗α-SMA抗体（Sigma）、２次抗体としてhorse radish peroxidaseの融合した抗マウスIgG抗体(Cell signaling)を用いてα-SMAを検出した。

【0371】

ウエスタンブロットの結果を図６に示す。図６では、試験化合物（特に10μM）とPyr 2は、コントロール（DMSOのTGFβ1＋）と比較して、α-SMA抗体の発色が薄くなっていることが示されており、試験化合物がTGFβ1によって誘導されるα-SMAの発現を強く阻害したことが確認された。

【0372】

また、顕微鏡観察の結果、Pyr 2添加により細胞の伸長が観察されたのに対し、試験化合物添加では細胞形態の変化および細胞障害性は見られなかった。

【0373】

［試験例６］
線維化阻害評価実験２（免疫蛍光染色法）
試験例５と同様にしてマウスから皮膚線維芽細胞を単離し、滅菌処理をした直径12 mmのカバーガラスを12ウェルプレートに入れ、2.5x10⁵個の細胞を播種し、カバーガラス上にて生育させた。24時間後に牛胎児血清を除いた培地に交換し、さらに24時間培養した。また、別途、生後1-2日齢ラットから心線維芽細胞を単離し、皮膚線維芽細胞の場合と同様の処置を加えた。その後、皮膚線維芽細胞については10 ng/mlのTGFβ1を、心線維芽細胞については2 ng/mlのTGFβ2を添加し48時間培養した。なお、TGFβ添加と同時に、10μMの試験化合物（化合物０１１）、10μMのPyr 2（従来の阻害剤）またはDMSO（溶媒コントロール）も添加した。別途、培養細胞にTGFβ無添加のリン酸緩衝生理食塩水（PBS）を添加した細胞も用意した。培養後、細胞を４％パラホルムアルデヒドにより固定化後、0.5% Triton-X100を含むTris buffered saline pH7.4 (TBS)により透過処理を行った。1% bovine serum albuminによりブロック後、１次抗体として抗α-SMA抗体（Sigma）、２次抗体としてAlexa488を融合した抗マウスIgG抗体(Molecular probe) を用いてα-SMAを検出し、蛍光顕微鏡 (Keyence)により20倍対物レンズを用いて画像を取得した。細胞面積当たりの平均蛍光輝度（Fluorescence intensity/pixel）をImage Jソフトウエアを用いて算出し解析した。

【0374】

蛍光染色の結果を図７（皮膚線維芽細胞）および図８（心線維芽細胞）に示す。両細胞において、TGFβ処置は線維状のα-SMAの発現を亢進させた。化合物０１１は、Pyr2とほぼ同様に、TGFβにより誘導されるα-SMAの発現をほぼ完全に抑制した。

【0375】

［試験例７］
薬剤性難聴モデル動物の作成
日本エスエルシー株式会社から購入した5-8週齢の雄性CBA/Nマウスに、シスプラチン注射液（日医工、0.5mg/ml）を12mg/kgで腹腔投与し、7日後及び14日後にマウスの聴力レベルを聴性脳幹反応（ABR）測定にて試験した。シスプラチン（CDDP）の腹腔投与により5-36kHzの広い周波数帯において聴力レベルが低下したことを確認した。

【0376】

聴性脳幹反応（ABR）測定
マウスに三種混合麻酔（塩酸メデトミジン 0.3mg/kg, ミダゾラム4mg/kg, 酒石酸ブトルファノール 5mg/kg）を腹腔投与し、十分に麻酔が効いていることをtoe pinchまたはcorneal reflexで確認した。まず、脳波測定用のステンレス針電極（テルモ26ゲージ）を頭頂、耳介後部および背中の皮下に挿入し、マウスの左外耳道にスピーカー（TD-250D; Fostex, Japan）の出力口を挿入した。音刺激として、5, 10, 16, 24, 36 kHzの5種の周波数について、0.5 msの上昇および下降相と2msの定常相からなるトーンバースト音を与えた。この刺激音によって惹起される聴覚伝導路の神経細胞の電位変化を、信号増幅器（EX-1 Differential amplifier; Dagan Corporation, MN, USA）によって5000倍に増幅した上で、0.3-2 kHzのバンドパスフィルターをかけ、ABRデータとして取得した。各データは、800回刺激分を積算及び平均化し、解析に用いた。各周波数の聴覚閾値は、10 dB刻みで音圧を変化させた際に、ABRのII波およびIII波が明瞭に確認される最低音圧レベルとして決定した。スピーカーの電圧－音圧特性はマイクロフォン（Sokolich G-II Ultrasonic Probe Microphone System; WGS/Associates, CA, USA）によって事前に校正しておき、それに従って各周波数の刺激音を生成した。測定後、マウスはアンチセダン0.3 mg/kgの腹腔投与によって速やかに覚醒させた。

【0377】

サンプル（化合物０１１）の評価
化合物０１１をPBS（Fujifilm, Japan；リン酸緩衝液）に2mg/mlで懸濁した液をサンプルとした。このサンプルを5-8週齢の雄性CBA/Nマウスに、シスプラチン投与前日からシスプラチン投与の14日後まで1日1回10mg/kgで経口投与し、化合物０１１の難聴に対する抑制効果を評価した。測定に用いたマウスは以下の３群に分けた。
第1群：シスプラチンの腹腔投与およびPBS（コントロール）の経口投与を受ける群(n=12)第2群：シスプラチンの腹腔投与および化合物０１１の経口投与を受ける群 (n=12)
第3群：シスプラチン投与のコントロールとして生理食塩水の腹腔投与および化合物０１１の経口投与を受ける群(n=10)
それぞれの群について、聴性脳幹反応（ABR）測定によって、シスプラチン投与直前、投与7日後および14日の聴力レベルを決定した。結果を図９および１０に示す。
第１群の結果は、シスプラチン投与が聴覚閾値の上昇を引き起こしたことを示す。
第２群の結果は、化合物０１１投与が聴覚閾値の上昇を有意に抑制したことを示す。
第３群の結果は、化合物０１１投与は通常状態のマウスの聴覚閾値をほぼ変動させないことを示す。
以上より、化合物０１１は、投与が簡便な経口投与により難聴を抑制できることが確認された。

【0378】

［試験例８］
化合物０１１腹腔投与による血漿シスプラチン動態への影響
日本エスエルシー株式会社から購入した5～8週齢の雄性CBA/Nマウスにシスプラチン注射液（日医工、0.5 mg/ml）を12 mg/kgで腹腔投与し、1日後及び2日後に尾静脈から血液を採取した。この血液を4℃、1000 gで5分間遠心し、上清を血漿サンプルとした。この血漿サンプルを島津テクノリサーチの高周波誘導結合プラズマ（ICP）質量分析で解析し、血漿シスプラチン濃度を反映する血漿白金（血漿Pt）濃度を評価した。なお、PBS（Fujifilm, Japan；リン酸緩衝液）、あるいは化合物０１１をPBSに2 mg/mlで懸濁した液を、シスプラチン投与前日からシスプラチン投与の二日後まで1日1回10 mg/kgで経口投与し、それぞれ対照群（n=5）、化合物投与群（n=5）とした。
ICP質量分析の前処理として、血漿サンプルに硝酸 0.5 mlを加え、容器を密閉した後、180℃で5分間マイクロウェーブ分解（ETHOS-TC、マイルストーンゼネラル）にかけた。放冷し、塩酸0.5 mlを加え、水で5 mlに容量調節した後、Agilent 7700x ICP-MS（Agilent technologies, CA, USA）によるICP質量分析にかけた（PF出力 1550W、プラズマガス 15.0 L/min、補助ガス 0.90 L/min、キャリアガス 1.0 L/min、サンプリング深さ 10 mm）。積分時間１秒、スイープ回数100回の条件で、各サンプル３回ずつ測定した。測定質量数は、分析対象であるPtを195、内部標準であるRhを103として解析した。結果を図１１に示した。

【0379】

シスプラチン投与の一日後、二日後ともに化合物０１１の有無による血漿Pt濃度の有意な変化は見られなかった。つまり、化合物０１１の投与はシスプラチンの血中動態に影響しないことを示唆した。シスプラチン誘導性難聴モデルを用いた聴力検査の結果（試験例７）と合わせて考えると、化合物０１１の聴力保護効果は、単にシスプラチンの体内濃度を下げているのではなく、聴覚に関わる細胞をシスプラチンの毒性から保護した結果であることが示唆された。

【0380】

［試験例９］
１－（４－（４－メチル－１，２，３－チアジアゾール－５－カルボキサミド）－５－（トリフルオロメチル）－１Ｈ－ピラゾール－４－カルボン酸エチル（Pyr4）による内耳保護作用（ゼブラフィッシュのニューロマストを使用した有毛細胞死の評価）

【0381】

Pyr4はTRPC3阻害作用およびTRPC6阻害作用を有することが知られている。

【0382】

有毛細胞死は、様々な環境因子（過度の騒音、薬物（アミノグリコシド系抗生物質やシスプラチンなどの化学療法剤、老化等）等）による進行性の聴覚障害に共通の要因として知られている。そして、難聴治療薬の開発には有毛細胞死を基準としたスクリーニング評価が利用されている。このスクリーニングにはゼブラフィッシュのニューロマストが利用される（C. Ton and C. Parng, The use of zebrafish for assessing ototoxic and otoprotective agents. Hearing research, 208, 79-88 (2005)）。ゼブラフィッシュは、体表面に有毛細胞によって構成されるニューロマストからなる側線をもち、その有毛細胞は哺乳動物の内耳の有毛細胞と形態学的および機能的に類似しているため、哺乳動物の有毛細胞死の評価にニューロマストが有用である。ニューロマストは、ゼブラフィッシュの頭と体に沿った決まった位置で発生するため、蛍光イメージングを使用することによって、薬剤サンプル適用による有毛細胞の脱落、有毛細胞死を容易に判別することができ、薬剤サンプルの有毛細胞に与える効果を定量化することができる。

【0383】

各試験に10個の胚（ゼブラフィッシュの稚魚、2つのウェルにウェルあたり5つの胚）を用いた。試験には被験物質として1.5μMおよび3μMのPyr4を用いた。
ビークルコントロール群として、飼育培地（0.16 mM MgSO₄, 0.4 mM CaCl₂, 0.17 mM KCl, 5 mM NaCl、10 mM Hepes (pH 7.2 - 7.6) + 0.5％DMSO)中、未処置の胚を用いた。
陽性コントロール群として飼育培地中、1000μMのD-メチオニンで処置した胚を用いた。
聴覚毒性誘導群（シスプラチン処置群）として飼育培地中、20μMのシスプラチンで処置した胚を用いた。
胚（受精後5日目の稚魚）は、それぞれ被験物質、D-メチオニン、またはビークルコントロールで28.5℃で1時間、前処置した後、シスプラチンに暴露した。その後、それぞれ、28.5℃で24時間飼育した後、以下のように染色した。
培地を0.01％DASPEI (2-(4-(dimethylamino)styryl)-N-ethylpyridinium iodide) に交換し、プレートを暗所で15分間室温インキュベートし、その後、飼育培地で5分間の洗浄を3回行った。
染色後、胚を0.003％のトリカインで麻酔して、メチルセルロースに側面を向けておき、LeicaステレオスコープとLAS AFソフトウェアを用いて画像を取得した。画像を使用して、各胚の側線に存在するニューロマストの数を定量化した。
これに加えて、胚をニューロマストの蛍光強度に基づいて3つの異なるカテゴリー（i：明るい（bright）、ii：薄暗い（dim）、iii：検出されない、またはほとんど検出されない（barely or no detect））に分類した。胚の各カテゴリーに属する割合は、各実験グループごとに決定した。すべての写真を撮った後、胚を安楽死させた。

【0384】

ニューロマストの数を図１２に示し、蛍光強度に基づいた各カテゴリーの割合を表３にす。表３中、CISP及びCISPLはシスプラチンを、Metはメチオニンを意味する。

【表3】

【0385】

未処置の対照群における未変化胚の割合が80％を超えていたため、実験は有効と見なした。さらに、シスプラチン処置群の胚のニューロマストの数はビークルコントロール群よりも統計的に有意に低値であった。D-メチオニンのみの暴露により、ニューロマストの数がわずかに減少したが、おそらく染色の通常の変動によるものであり、特定の効果とは無関係であろう。D-メチオニンはシスプラチン処置によるニューロマスト数の低下を抑制した。Pyr4による処置は、評価されたいずれの濃度でもニューロマストの生存率に影響を与えず、シスプラチン処置によって誘発されたニューロマスト喪失を抑制した。1.5および3μMのいずれの濃度でも同程度の効果が見られ、プラトーに達したことを示している可能性がある。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9】

【図10】

【図11】

【図12】