特許7932106IP Force 特許公報全文掲載

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細胞構造体及び細胞構造体の製造方法、特に、細胞間に血管網を有する細胞構造体及び細胞間に血管網を有する細胞構造体の製造方法

発明が解決しようとする課題[発明の詳細な説明]から抜粋

上述の三次元組織体の製造方法によれば、厚みのある三次元組織体を作製することができる。しかしながら、生体組織のように血管網が細胞間に形成されている脂肪組織を作製する方法については知られていなかった。

課題を解決するための手段[発明の詳細な説明]から抜粋

すなわち、本発明は、例えば以下の各発明に関する。 〔１〕 断片化された細胞外マトリックス成分及び細胞を含み、 細胞間に血管網を有する細胞構造体であって、 細胞が、少なくとも脂肪細胞及び血管内皮細胞を含む、細胞構造体。 〔２〕 血管網が、脂肪細胞間に形成されている〔１〕に記載の細胞構造体。 〔３〕 脂肪細胞が、成熟脂肪細胞を含む、〔１〕又は〔２〕に記載の細胞構造体・・・　続きを知財ポータルサイト IP Force にログインして見る

発明の効果[発明の詳細な説明]から抜粋

本発明によれば、細胞間に血管網を有する細胞構造体を簡便に製造することができる。

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この特許公報に記載されている図面[図面の簡単な説明]から抜粋

【図1】 ペリリピン染色及びＣＤ３１染色による、（ａ）生体組織及び（ｂ）試験例２の細胞構造体の観察結果を示す写真である。
【図2】 試験例２の細胞構造体における血管の分岐の数を生体組織における血管の分岐の数と比較したグラフである。
【図3】 ペリリピン染色及びＣＤ３１染色による、試験例３の細胞構造体の観察結果を示す写真である。
【図4】 ＣＤ３１染色による、試験例４の細胞構造体の観察結果を示す写真である。
【図5】 ＣＤ３１染色による、試験例５の細胞構造体の観察結果を示す写真である。
【図6】 ペリリピン染色及びＣＤ３１染色による、試験例６の細胞構造体の観察結果を示す写真である。
【図7】 試験例７の概要を示す図である。左の液滴中の円は成熟脂肪細胞を、白い菱形はＡＤＳＣを、グレーの短棒はＨＵＶＥＣをそれぞれ示す。
【図8】 ナイルレッド染色及びＣＤ３１染色による、試験例７の血管網を有する細胞ボールの蛍光観察結果を示す写真である。（ｂ）は、（ａ）の細胞ボールの一つをさらに拡大したものである。
【図9】 ＣＤ３１染色による、血管網を有する細胞ボールの観察結果を示す写真である。
【図10】 試験例７の方法で作製した細胞ボールについて、７日間培養した後の平均直径（ｎ＝１２ 細胞ボール／量）を示すグラフである。
【図11】 ナイルレッド染色及びＣＤ３１染色による、試験例８の方法で作製した細胞組織の蛍光観察結果を示す写真（（ａ）、（ｂ）は一部拡大写真）及びプレート上の凝集した細胞ボールを明視野で観察した写真である（ｃ）。
【図12】 ペリリピン染色及びＤＡＰＩ染色による、試験例９の移植箇所から３０日後に採取した組織の蛍光観察結果を示す写真である。Ａ：ＳＦＴはヒトの太もも（生体組織）から脂肪吸引により得られた脂肪組織を移植した箇所から採取した組織、Ｃ：３ＤＶＦＴは試験例９の（１）の細胞ボールを移植した箇所から採取した組織をそれぞれ示す。図１２の上段は明視野で観察した結果、中央段はペリリピン染色による結果、下段はＤＡＰＩ染色の結果を示す。
【図13】 ＣＤ３１染色及びＤＡＰＩ染色による、試験例９の移植箇所から９０日後に採取した組織の蛍光観察結果を示す写真である。Ａ：ＳＦＴはヒトの太もも（生体組織）から脂肪吸引により得られた脂肪組織を移植した箇所から採取した組織、Ｃ：３ＤＶＦＴは試験例９の（１）の細胞ボールを移植した箇所から採取した組織をそれぞれ示す。図１３の上段は明視野で観察した結果、中央段はＣＤ３１染色による結果、下段はＤＡＰＩ染色の結果を示す。
【図14】 インキュベート後１０分、３０分、６０分、１２０分、１５０分の時点における細胞構造体の蛍光観察結果を示す写真である。
【図15】 形成７日目及び１４日目の血管内皮細胞を含む細胞構造体（ｂ）及び血管内皮細胞を含まない組織体（ａ）における６０分後の蛍光強度の比較を示す。Ｃｏｌ ＩはコラーゲンＩ型を用いて作製されたｓＣＭＦを使用したことを意味し、Ｃｏｌ Ｉ＋ＩＩＩはコラーゲンＩ型及びＩＩＩ型の混合物を用いて作製されたｓＣＭＦを使用したことを意味する。
【図16】 血管内皮細胞を含まない組織体をインキュベートしてから２０分、４５分、７０分、９０分、１３５分の時点における蛍光強度の比較を示す。
【図17】 （ａ）のグラフは、試験例１１における、血管内皮細胞を含まない組織体をインキュベートしてから２０分、４５分、７０分及び９０分の時点における蛍光強度（グルコース取り込み量）の比較を示す。（ｂ）のグラフは本試験例１２における、血管内皮細胞を含まない組織体をインキュベートしてから５分、３０分及び６０分の時点における蛍光強度（脂肪酸取り込み量）の比較を示す。
【図18】 血管内皮細胞を含む細胞構造体（ｂ）及び血管内皮細胞を含まない組織体（ａ）をそれぞれインキュベートしてから０分、５分、３０分、６０分の時点における蛍光強度の比較を示す。
【図19】 ２度目のインキュベート後のグルコースの放出量（ａ）、及び脂肪酸の放出量（ｂ）の比較を示す。

代表図 図1本件の代表的な図

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