特表 2023-526546 コロナウイルス疾患の合併症の治療及び診断のための、ＡＤＡＭＴＳ１３組成物及び方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2023-06-21

(54)【発明の名称】コロナウイルス疾患の合併症の治療及び診断のための、ＡＤＡＭＴＳ１３組成物及び方法

(51)【国際特許分類】

   A61K 38/48 20060101AFI20230614BHJP

   A61P 9/12 20060101ALI20230614BHJP

   A61P 7/02 20060101ALI20230614BHJP

   A61P 9/00 20060101ALI20230614BHJP

   A61P 11/00 20060101ALI20230614BHJP

   A61P 11/06 20060101ALI20230614BHJP

   A61P 13/12 20060101ALI20230614BHJP

   A61P 31/00 20060101ALI20230614BHJP

   A61P 31/14 20060101ALI20230614BHJP

   C12N 9/50 20060101ALI20230614BHJP

【ＦＩ】

A61K38/48 ZNA

A61P9/12

A61P7/02

A61P9/00

A61P11/00

A61P11/06

A61P13/12

A61P31/00

A61P31/14

C12N9/50

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2022571804

(86)(22)【出願日】2021-05-21

(85)【翻訳文提出日】2023-01-19

(86)【国際出願番号】 IB2021000348

(87)【国際公開番号】W WO2021234458

(87)【国際公開日】2021-11-25

(31)【優先権主張番号】63/078,555

(32)【優先日】2020-09-15

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(31)【優先権主張番号】63/029,144

(32)【優先日】2020-05-22

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(31)【優先権主張番号】63/050,645

(32)【優先日】2020-07-10

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(81)【指定国・地域】

【公序良俗違反の表示】

（特許庁注：以下のものは登録商標）

１．ＴＷＥＥＮ

２．ＰＬＵＲＯＮＩＣ

(71)【出願人】

【識別番号】000002934

【氏名又は名称】武田薬品工業株式会社

(74)【代理人】

【識別番号】100139723

【弁理士】

【氏名又は名称】樋口 洋

(74)【代理人】

【識別番号】100116540

【弁理士】

【氏名又は名称】河野 香

(72)【発明者】

【氏名】トゥレチェク，ペーター

(72)【発明者】

【氏名】メルガルド，ビョルン

(72)【発明者】

【氏名】イーウェンスタイン，ブルース

(72)【発明者】

【氏名】ジェイン，ニーシャ

(72)【発明者】

【氏名】エルトレンブルッフ，ヴォルフハルト ヴェルナー

【テーマコード（参考）】

4B050

4C084

【Ｆターム（参考）】

4B050CC03

4B050DD11

4B050LL01

4C084AA02

4C084BA01

4C084BA08

4C084BA20

4C084BA22

4C084BA44

4C084DA35

4C084DC09

4C084MA02

4C084NA14

4C084ZA36

4C084ZA42

4C084ZA54

4C084ZA59

4C084ZA62

4C084ZA81

4C084ZB11

4C084ZB31

4C084ZB33

(57)【要約】

本明細書で提供されるのは、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染した又はＣＯＶＩＤ－１９の１つ又は複数の兆候若しくは症状を有する対象といった、病原性コロナウイルスに感染した対象において、コロナウイルス疾患、及び特にその合併症を治療するための、方法及び組成物である。組成物は、治療有効量の、単離又は組換えＡＤＡＭＴＳ１３（ｄｉｓｉｎｔｅｇｒｉｎ ａｎｄ ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ ｗｉｔｈ ｔｈｒｏｍｂｏｓｐｏｎｄｉｎ ｔｙｐｅ １ ｍｏｔｉｆ：トロンボスポンジン１型モチーフを有するディスインテグリン及びメタロプロテイナーゼ）タンパク質を含む。本開示は更に、コロナウイルス疾患、特にＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染した対象、又はＣＯＶＩＤ－１９の１つ又は複数の兆候若しくは症状を有する対象において、凝固障害を診断するための方法に関する。その方法は、ＶＷＦのレベルの上昇、ＡＤＡＭＴＳ１３のレベルの低下、及びＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体の存在に関する試験を行うステップを含む。これらの因子は複合的に、凝固障害の存在を示す。

【特許請求の範囲】

【請求項1】

重症急性呼吸器症候群コロナウイルス２（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２）に感染した又はコロナウイルス疾患２０１９（ＣＯＶＩＤ－１９）に罹患した対象における、少なくとも１つの状態又は合併症を治療又は防止する方法であって、前記方法は、それを必要とする対象に、トロンボスポンジン１型モチーフを有するディスインテグリン及びメタロプロテイナーゼ（ＡＤＡＭＴＳ１３）を含む治療有効量の組成物を投与することを含む、方法。

【請求項2】

重症急性呼吸器症候群コロナウイルス２（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２）感染又はコロナウイルス疾患２０１９（ＣＯＶＩＤ－１９）に関連する少なくとも１つの状態又は合併症の発症のリスクを有する対象を治療する方法であって、前記方法は、それを必要とする対象に、トロンボスポンジン１型モチーフを有するディスインテグリン及びメタロプロテイナーゼ（ＡＤＡＭＴＳ１３）を含む治療有効量の組成物を投与することを含む、方法。

【請求項3】

重症急性呼吸器症候群コロナウイルス２（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２）に感染した又はコロナウイルス疾患２０１９（ＣＯＶＩＤ－１９）に罹患した対象における、少なくとも１つの状態又は合併症を治療又は防止する方法であって、前記方法は、
ａ）それを必要とする対象に、組換えＡＤＡＭＴＳ１３（トロンボスポンジン１型モチーフを有するディスインテグリン及びメタロプロテイナーゼ メンバー１３）を含む治療有効量の医薬組成物を投与するステップであって、前記治療有効量は：
ｉ）循環超高分子量（ＵＨＭＷ）フォン・ヴィレブランド因子（ＶＷＦ）多量体を、投与前の前記対象の血中のＶＷＦの測定レベルと比較して少なくとも約５％、少なくとも約１０％、又は少なくとも約２０％低下したレベルまで減少させるため；
ｉｉ）循環ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体を、正常ＶＷＦベースライン値よりも約５％以下、約１０％以下、又は約２０％以下だけ高いレベルまで減少させるため；
ｉｉｉ）循環ＶＷＦを、投与前の前記対象の血中のＶＷＦの測定レベルと比較して少なくとも約５％、少なくとも約１０％、又は少なくとも約２０％低下したレベルまで減少させるため；
ｉｖ）循環ＶＷＦを、正常ＶＷＦベースライン値よりも約５％以下、約１０％以下、又は約２０％以下だけ高いレベルまで減少させるため；
ｖ）ＶＷＦ活性レベルを、投与前の前記対象の血中のＶＷＦ活性の測定レベルと比較して少なくとも約５％、少なくとも約１０％、又は少なくとも約２０％低下したレベルまで低下させるため；
ｖｉ）ＶＷＦ活性レベルを、正常ＶＷＦ活性ベースライン値よりも約５％以下、約１０％以下、又は約２０％以下だけ高いレベルまで低下させるため；
ｖｉｉ）循環ＡＤＡＭＴＳ１３レベルを、正常ＡＤＡＭＴＳ１３ベースライン値よりも約１００％～約１５０％上昇させるため；あるいは
ｖｉｉｉ）ｉ）～ｖｉｉ）の組み合わせのため
に十分なものである、ステップ；並びに
ｂ）循環ＶＷＦ、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体又はこれらの組み合わせの前記低下したレベルを維持するために、投与される量を周期的に監視及び調整するステップ
を含む、方法。

【請求項4】

前記対象は、前記状態又は合併症が存在する前に、ＡＤＡＭＴＳ１３を含む前記組成物を投与される、請求項１～３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項5】

前記対象は、前記状態又は合併症が存在した後に、ＡＤＡＭＴＳ１３を含む前記組成物を投与される、請求項１～４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項6】

前記状態又は合併症は、凝固障害、血液凝固障害、梗塞、血栓症、塞栓症、卒中、静脈閉塞性障害、血栓形成促進状態、敗血症、腎不全、呼吸不全、急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、血栓性微小血管症（ＴＭＡ）、肺炎、喘息、高血圧症、ＶＷＦ及び／若しくはその多量体（特に超大型多量体（ＵＨＭＷ））の血漿レベルの上昇、血漿ＶＷＦ活性レベルの上昇、内因性ＡＤＡＭＴＳ１３の血漿レベルの低下、炎症、サイトカインレベルの上昇、又はこれらの組み合わせである、請求項１～５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項7】

前記血栓症は深部静脈血栓症（ＤＶＴ）である、請求項６に記載の方法。

【請求項8】

前記塞栓症は肺塞栓症（ＰＥ）である、請求項６に記載の方法。

【請求項9】

前記合併症は、ＶＷＦの血漿レベルの上昇、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体の血漿レベルの上昇、及び／又は内因性ＡＤＡＭＴＳ１３の血漿レベルの低下である、請求項６に記載の方法。

【請求項10】

前記対象は６５歳以上である、請求項１～９のいずれか一項に記載の方法。

【請求項11】

前記対象は危険因子を示す、請求項１～１０のいずれか一項に記載の方法。

【請求項12】

前記危険因子は、ＶＷＦの血漿レベルの上昇、超大型多量体（ＵＨＭＷ）ＶＷＦ多量体の血漿レベルの上昇、血漿ＶＷＦ活性レベルの上昇、内因性ＡＤＡＭＴＳ１３の血漿レベルの低下、内因性ＡＤＡＭＴＳ１３の活性の低下した活性、サイトカインレベルの上昇、凝固障害、血液凝固障害、静脈閉塞性障害、血栓形成促進状態、遺伝性血栓性血小板減少性紫斑病（ＴＴＰ）、後天性ＴＴＰ、播種性血管内凝固症候群（ＤＩＣ）、敗血症、鎌状赤血球症、呼吸不全、急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、血栓性微小血管症（ＴＭＡ）、肺炎、喘息、妊娠高血圧症候群、閉経期高血圧、閉経周辺期高血圧、肺高血圧症、血栓症、塞栓症、心筋梗塞、卒中、咳、息切れ、肺浸潤、呼吸不全、血漿フィブロゲン（ｆｉｂｒｏｇｅｎ）の上昇、止血経路の活性化、集中治療室（ＩＣＵ）への入院、又はこれらの組み合わせである、請求項１１に記載の方法。

【請求項13】

前記危険因子は、ＶＷＦの血漿レベルの上昇、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体の血漿レベルの上昇、及び／又は内因性ＡＤＡＭＴＳ１３の血漿レベルの低下である、請求項１２に記載の方法。

【請求項14】

前記危険因子は血栓形成促進状態である、請求項１２に記載の方法。

【請求項15】

ＡＤＡＭＴＳ１３を含む前記組成物を前記対象に投与することが、
ａ）ＡＤＡＭＴＳ１３を含む前記組成物を投与されていない対象と比較して、前記状態又は合併症の持続時間、重症度、又は発生の頻度を低減させる、
ｂ）健康な個体における正常ベースライン範囲と比較して、ＶＷＦタンパク質の血漿レベル、ＶＷＦ多量体の血漿レベル、ＶＷＦ活性、血漿中のＡＤＡＭＴＳ１３に対するＶＷＦの比率（ＶＷＦ：Ａ１３）、血小板凝集、血液凝固、血栓症、塞栓症、梗塞、静脈閉塞、卒中、炎症、血漿サイトカインレベル、又はこれらの組み合わせを低減させる、
ｃ）ＶＷＦタンパク質の血漿レベル、ＶＷＦ多量体の血漿レベル、ＶＷＦ活性、血漿ＶＷＦ：Ａ１３、又はこれらの組み合わせを低減させる、
ｄ）血小板凝集、血液凝固、血栓症、塞栓症、梗塞、静脈閉塞、卒中、又はこれらの組み合わせを低減させる、
ｅ）ＡＤＡＭＴＳ１３の血漿レベル、血漿ＡＤＡＭＴＳ１３活性、又はこれらの組み合わせを、健康な個体の正常ベースラインまで上昇させる、あるいは
ｆ）ａ）～ｅ）の組み合わせである、請求項１～１４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項16】

前記ＶＷＦ多量体はＵＨＭＷ多量体である、請求項１５に記載の方法。

【請求項17】

ＡＤＡＭＴＳ１３を含む前記組成物を前記対象に投与することが、ＡＤＡＭＴＳ１３の血漿レベル、血漿ＡＤＡＭＴＳ１３活性、又はこれらの組み合わせを、ＡＤＡＭＴＳ１３血漿レベル又はＡＤＡＭＴＳ１３活性レベルの正常ベースライン範囲又は正常ベースライン値よりも約２０～１００％上昇させる、請求項１～１６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項18】

ＡＤＡＭＴＳ１３を含む前記組成物を前記対象に投与することが、ＡＤＡＭＴＳ１３の血漿レベル、血漿ＡＤＡＭＴＳ１３活性、又はこれらの組み合わせを、ＡＤＡＭＴＳ１３血漿レベル又はＡＤＡＭＴＳ１３活性レベルの正常ベースライン値と比較して約１００～１５０％上昇させる、請求項１～１７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項19】

前記ＡＤＡＭＴＳ１３の治療有効量は、健康な対象のＶＷＦレベルの所定の正常範囲の上限に相当するベースラインよりも約５％を超えて高いＶＷＦレベルを有する対象について、約１０～４００ＩＵ／ｋｇである、請求項１～１８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項20】

前記ＡＤＡＭＴＳ１３の治療有効量は、健康な対象の正常ベースラインＶＷＦレベルよりも少なくとも約２倍高いＶＷＦレベルを有する対象について、約１０～４００ＩＵ／ｋｇ、又は約４０～４００ＩＵ／ｋｇである、請求項１～１９のいずれか一項に記載の方法。

【請求項21】

前記ＡＤＡＭＴＳ１３の治療有効量は、健康な対象の正常ベースラインＶＷＦレベルよりも少なくとも約３倍高いＶＷＦレベルを有する対象について、約１０～４００ＩＵ／ｋｇ、又は約４０～４００ＩＵ／ｋｇである、請求項１～１８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項22】

前記ＡＤＡＭＴＳ１３の治療有効量は、健康な対象の正常ＡＤＡＭＴＳ１３ベースライン活性及び／又はレベルの約３０～７０％のＡＤＡＭＴＳ１３活性及び／又はレベルを有する対象について、約１０～４００ＩＵ／ｋｇである、請求項１～１８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項23】

前記ＡＤＡＭＴＳ１３の治療有効量は、健康な対象の正常ＡＤＡＭＴＳ１３ベースライン活性及び／又はレベルの約２０％未満のＡＤＡＭＴＳ１３活性及び／又はレベルを有する対象について、約１０～４００ＩＵ／ｋｇ、又は約４０～４００ＩＵ／ｋｇである、請求項１～１８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項24】

前記ＡＤＡＭＴＳ１３の治療有効量は、健康な対象の正常ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体ベースラインレベルの約１００～１３０％の超高分子量（ＵＨＭＷ）ＶＷＦ多量体レベルを有する対象について、約１０～４００ＩＵ／ｋｇ、又は約４０～４００ＩＵ／ｋｇである、請求項１～１８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項25】

前記ＡＤＡＭＴＳ１３の治療有効量は、健康な対象の正常ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体ベースラインレベルの少なくとも約１０１％、少なくとも約１０５％、又は少なくとも約１０７％の超高分子量（ＵＨＭＷ）ＶＷＦ多量体レベルを有する対象について、約１０～４００ＩＵ／ｋｇである、請求項１～１８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項26】

前記ＡＤＡＭＴＳ１３の治療有効量は、約１０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約１０～３００ＩＵ／ｋｇ、約１０～２００ＩＵ／ｋｇ、約１０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約１０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約１０～８０ＩＵ／ｋｇ、約１０～６０ＩＵ／ｋｇ、約１０～４０ＩＵ／ｋｇ、約１０～２０ＩＵ／ｋｇ、約２０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約２０～３００ＩＵ／ｋｇ、約２０～２００ＩＵ／ｋｇ、約２０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約２０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約２０～８０ＩＵ／ｋｇ、約２０～６０ＩＵ／ｋｇ、約２０～４０ＩＵ／ｋｇ、又は約２０～３０ＩＵ／ｋｇ、約３０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約３０～３００ＩＵ／ｋｇ、約３０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約３０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約３０～６０ＩＵ／ｋｇ、約４０～４００ＩＵ／ｋｇ、約４０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約４０～３００ＩＵ／ｋｇ、約４０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約４０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約４０～８０ＩＵ／ｋｇ、又は約４０～６０ＩＵ／ｋｇである、請求項１～２５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項27】

前記ＡＤＡＭＴＳ１３の治療有効量は、約１０～４０ＩＵ／ｋｇ、約１０～２０ＩＵ／ｋｇ、約４０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約４０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約４０～８０ＩＵ／ｋｇ、又は約４０～６０ＩＵ／ｋｇである、請求項１～２５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項28】

ＡＤＡＭＴＳ１３を含む前記組成物が、毎月、２週間毎、毎週、週２回、週３回、隔日、毎日、１２時間毎、８時間毎、６時間毎、４時間毎、２時間毎、又は１時間毎に投与される、請求項１～２７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項29】

ＡＤＡＭＴＳ１３を含む前記組成物が、静脈内に、皮下に、静脈内ボーラスにより、又は静脈内注入により投与される、請求項１～２７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項30】

ＡＤＡＭＴＳ１３を含む前記組成物が、血漿由来のヒトＡＤＡＭＴＳ１３を含む、請求項１～２９のいずれか一項に記載の方法。

【請求項31】

ＡＤＡＭＴＳ１３を含む前記組成物が組換えＡＤＡＭＴＳ１３を含む、請求項１～２９のいずれか一項に記載の方法。

【請求項32】

前記対象のＶＷＦレベルを周期的に測定するステップ；及び
前記対象のＶＷＦレベルが健康な個体の所定のベースライン範囲内である場合に、前記治療有効量を約１０～１００ＩＵ／ｋｇに低減するステップ
を更に含む、請求項１～３１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項33】

ＶＷＦレベルに関する正常ベースライン範囲は、確立された又は所定の平均ベースラインの約５０～２００％、又は約４２～１３６％の範囲である、請求項１５～３２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項34】

ＡＤＡＭＴＳ１３レベルに関する正常ベースライン範囲は、確立された又は所定の平均ベースラインの約４０～１６０％、又は約８７～１１３％の範囲である、請求項１５～３３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項35】

ＣＯＶＩＤ－１９と診断された対象の血栓性凝固障害のリスクが増大しているかどうかを決定する方法であって、前記方法は：
ａ）血漿試料において、
ｉ）ＶＷＦタンパク質の血漿レベル；
ｉｉ）血漿試料中のＶＷＦの活性レベル；
ｉｉｉ）ＵＨＭＷ ＶＷＦタンパク質多量体の血漿レベル；
ｉｖ）ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の血漿レベル；又は
ｖ）血漿試料中のＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の活性レベル
のうちの１つ又は複数を測定するステップ；
ｂ）ステップａ）で測定された１つ又は複数の血漿レベル又は活性レベルを、同じ血漿レベル又は活性レベルに関するベースライン範囲又はベースライン値と比較するステップ；及び
ｃ）同じ血漿レベル又は活性レベルに関するベースライン範囲又はベースライン値と比較して、
ｉ）ＶＷＦタンパク質の血漿レベルが上昇していること；
ｉｉ）ＶＷＦの活性レベルが上昇していること；
ｉｉｉ）血漿ＵＨＭＷ ＶＷＦタンパク質多量体が検出される、若しくはＵＨＭＷ ＶＷＦタンパク質多量体の血漿レベルが上昇していること；
ｉｖ）ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の血漿レベルが低下していること；又は
ｖ）ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の活性レベルが低下していること
のうちの少なくとも１つが満たされた場合に、前記対象が血栓性凝固障害のリスクを有すると特定するステップ
を含む、方法。

【請求項36】

前記血栓性凝固障害が、血小板凝集、血液凝固、血栓症、血栓性微小血管症、塞栓症、梗塞、静脈閉塞、卒中、血栓症由来の腎不全、又はこれらの組み合わせを含む、請求項３５に記載の方法。

【請求項37】

前記対象は、ＶＷＦタンパク質の血漿レベルが、ＶＷＦタンパク質の血漿レベルに関するベースライン値の約１２０％～約３００％である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する、請求項３５又は３６に記載の方法。

【請求項38】

前記対象は、ＶＷＦタンパク質の血漿レベルが、ＶＷＦタンパク質の血漿レベルに関するベースライン値の約３００％以上である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する、請求項３５～３７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項39】

前記対象は、血漿試料中のＶＷＦの活性レベルが、ＶＷＦ活性レベルに関するベースライン値の約１２０％～約３００％である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する、請求項３５～３８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項40】

前記対象は、血漿試料中のＶＷＦの活性レベルが、ＶＷＦ活性レベルに関するベースライン値の約３００％以上である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する、請求項３５～３９のいずれか一項に記載の方法。

【請求項41】

前記対象は、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の血漿レベルが、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質血漿レベルに関するベースライン値の約７０％～約１００％である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する、請求項３５～４０のいずれか一項に記載の方法。

【請求項42】

前記対象は、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の血漿レベルが、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質血漿レベルに関するベースライン値の７０％以下である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する、請求項３５～４１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項43】

前記対象は、血漿試料中のＡＤＡＭＴＳ１３の活性レベルが、ＡＤＡＭＴＳ１３活性レベルに関するベースライン値の約７０％～約１００％である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する、請求項３５～４２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項44】

前記対象は、血漿試料中のＡＤＡＭＴＳ１３の活性レベルが、ＡＤＡＭＴＳ１３活性レベルに関するベースライン値の７０％以下である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する、請求項３５～４３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項45】

前記対象は、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体の血漿レベルが、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体血漿レベルに関するベースライン値の約１００％～約１１０％である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する、請求項３５～４４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項46】

前記対象は、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体の血漿レベルが、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体血漿レベルに関するベースライン値の１１０％以上である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する、請求項３５～４５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項47】

前記対象は、血漿試料中のＶＷＦレベル：Ａ１３レベルの比率が３以下である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する、請求項３５～４６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項48】

前記対象は、血漿試料中のＶＷＦレベル：Ａ１３レベルの比率が３を超える場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する、請求項３５～４７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項49】

前記ベースライン値は、正常な対照集団に基づく所定値である、請求項３５～４８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項50】

前記ベースライン値は、正常な対照集団の所定の範囲の平均である、請求項３５～４９のいずれか一項に記載の方法。

【請求項51】

ＣＯＶＩＤ－１９と診断された対象が血栓性凝固障害のリスクを有するかどうかを決定する方法であって、前記方法は：
ａ）血漿試料において、
ｉ）ＶＷＦタンパク質の血漿レベル；
ｉｉ）血漿試料中のＶＷＦの活性レベル；
ｉｉｉ）ＵＨＭＷ ＶＷＦタンパク質多量体の血漿レベル；
ｉｖ）ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の血漿レベル；又は
ｖ）血漿試料中のＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の活性レベル
のうちの１つ又は複数を測定するステップ；及び
ｂ）
ｉ）ＶＷＦタンパク質の血漿レベルが少なくとも約１．２ＩＵ／ｍｌであること；
ｉｉ）ＶＷＦ活性レベルが少なくとも約１．２ＩＵ／ｍｌ若しくは１．８ＩＵ／ｍｌであること；
ｉｉｉ）血漿ＵＨＭＷ ＶＷＦタンパク質多量体が検出されること；
ｉｖ）ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の血漿レベルが約０．７ＩＵ／ｍｌ以下であること；又は
ｖ）ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の活性レベルが約０．８若しくは約０．９ＩＵ／ｍｌ以下であること
のうちの少なくとも１つが満たされた場合に、前記対象が血栓性凝固障害のリスクを有すると特定するステップ
を含む、方法。

【請求項52】

ステップｂ）において：
ｉ）ＶＷＦタンパク質の血漿レベルが少なくとも約４．５ＩＵ／ｍｌであること；
ｉｉ）ＶＷＦ活性レベルが少なくとも約３．３ＩＵ／ｍｌ若しくは４．４ＩＵ／ｍｌであること；
ｉｉｉ）ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の血漿レベルが約０．４ＩＵ／ｍｌ以下であること；又は
ｉｖ）ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の活性レベルが約０．４若しくは約０．５ＩＵ／ｍｌ以下であること
のうちの少なくとも１つが満たされた場合に、前記対象は血栓性凝固障害の高いリスクを有する、請求項５１に記載の方法。

【請求項53】

治療有効量のＡＤＡＭＴＳ１３を含む組成物を前記対象に投与することを更に含む、請求項３５～５２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項54】

前記ＡＤＡＭＴＳ１３の治療有効量は、約１０～４００ＩＵ／ｋｇ、約１０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約１０～３００ＩＵ／ｋｇ、約１０～２００ＩＵ／ｋｇ、約１０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約１０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約１０～８０ＩＵ／ｋｇ、約１０～６０ＩＵ／ｋｇ、約１０～４０ＩＵ／ｋｇ、約１０～２０ＩＵ／ｋｇ、約２０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約２０～３００ＩＵ／ｋｇ、約２０～２００ＩＵ／ｋｇ、約２０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約２０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約２０～８０ＩＵ／ｋｇ、約２０～６０ＩＵ／ｋｇ、約２０～４０ＩＵ／ｋｇ、約２０～３０ＩＵ／ｋｇ、約３０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約３０～３００ＩＵ／ｋｇ、約３０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約３０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約３０～６０ＩＵ／ｋｇ、約４０～４００ＩＵ／ｋｇ、約４０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約４０～３００ＩＵ／ｋｇ、約４０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約４０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約４０～８０ＩＵ／ｋｇ、又は約４０～６０ＩＵ／ｋｇである、請求項５３に記載の方法。

【請求項55】

治療有効量のＡＤＡＭＴＳ１３を含む組成物を前記対象に投与することを更に含み、前記ＡＤＡＭＴＳ１３の治療有効量は、約１０～４０ＩＵ／ｋｇ、約１０～３０ＩＵ／ｋｇ、約１０～２０ＩＵ／ｋｇ、約２０～４０ＩＵ／ｋｇ、又は約２０～３０ＩＵ／ｋｇである、請求項３７、３９、４１、４３、４５、４７、又は５１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項56】

前記ＡＤＡＭＴＳ１３の治療有効量は、約１０ＩＵ／ｋｇ、約２０ＩＵ／ｋｇ、約３０ＩＵ／ｋｇ、又は約４０ＩＵ／ｋｇである、請求項５５に記載の方法。

【請求項57】

治療有効量のＡＤＡＭＴＳ１３を含む組成物を前記対象に投与することを更に含み、前記ＡＤＡＭＴＳ１３の治療有効量は、約４０～４００ＩＵ／ｋｇ、約４０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約４０～３００ＩＵ／ｋｇ、約４０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約４０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約４０～８０ＩＵ／ｋｇ、又は約４０～６０ＩＵ／ｋｇである、請求項３８、４０、４２、４４、４６、４８、又は５２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項58】

前記ＡＤＡＭＴＳ１３の治療有効量は、約４０ＩＵ／ｋｇ、約６０ＩＵ／ｋｇ、約８０ＩＵ／ｋｇ、又は約１６０ＩＵ／ｋｇである、請求項５７に記載の方法。

【請求項59】

ＣＯＶＩＤ－１９と診断された対象が血栓性凝固障害のリスクを有するかどうかを決定するためのキットであって、（ｉ）ＶＷＦタンパク質の血漿レベル、ＶＷＦの活性レベル、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体の血漿レベル、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の血漿レベル、ＡＤＡＭＴＳ１３の活性レベルのうちの１つ又は複数を決定するための１つ又は複数の試薬；（ｉｉ）任意選択で、包装及び／又は使用説明書；並びに（ｉｉｉ）任意選択で、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２を検出するため又はＣＯＶＩＤ－１９を診断するための１つ又は複数の試薬を含む、キット。

【発明の詳細な説明】

【関連案件の相互参照】

【0001】

本特許出願は、２０２０年９月１５日出願の米国仮特許出願第６３／０７８，５５５号、２０２０年７月１０日出願の米国仮特許出願第６３／０５０６４５号、及び２０２０年５月２２日出願の米国仮特許出願第６３／０２９，１４４号に対する優先権を主張するものであり、これらの仮特許出願それぞれの開示は、その全体が参照により本出願に援用される。

【技術分野】

【0002】

本明細書で提供されるのは、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染した又はＣＯＶＩＤ－１９の１つ又は複数の兆候若しくは症状を有する対象といった、病原性コロナウイルスに感染した対象において、コロナウイルス疾患又はコロナウイルス疾患に関連する状態、特にその合併症を治療及び／又は診断するための、方法及び組成物である。組成物は、治療有効量の、単離又は組換えＡＤＡＭＴＳ１３（Ａ Ｄｉｓｉｎｔｅｇｒｉｎ－ｌｉｋｅ Ａｎｄ Ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅａｓｅ ｗｉｔｈ Ｔｈｒｏｍｂｏｓｐｏｎｄｉｎ ｔｙｐｅ Ｉ ｍｏｔｉｆ Ｎｏ． １３：トロンボスポンジンＩ型モチーフ第１３番を有するディスインテグリン様及びメタロプロテアーゼ）タンパク質を含む。治療の方法は、対象に、治療有効量の単離又は組換えＡＤＡＭＴＳ１３を、コロナウイルス感染又は疾患、例えばＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２又はＣＯＶＩＤ－１９の、１つ又は複数の状態、症状、リスク、又は合併症を防止又は低減するために十分な回数及び投薬量で、投与することを含む。これらの状態としては例えば、限定するものではないが、フォン・ヴィレブランド因子（ｖｏｎ Ｗｉｌｌｅｂｒａｎｄ ｆａｃｔｏｒ：ＶＷＦ）及び／又はその多量体（特に超大型多量体）のレベルの上昇、内因性ＡＤＡＭＴＳ１３のレベルの低下、サイトカインレベルの上昇、凝固障害（ｃｏａｇｕｌｏｐａｔｈｙ）、血液凝固障害（ｂｌｏｏｄ－ｃｌｏｔｔｉｎｇ ｄｉｓｏｒｄｅｒ）、静脈閉塞障害（ｖｅｎｏ－ｏｃｃｌｕｓｉｖｅ ｄｉｓｏｒｄｅｒ）、血栓形成促進状態、ＡＲＤＳ、ＣＯＰＤ、肺炎、喘息、高血圧症（例えば肺高血圧症）、血栓症（例えばＤＶＴ）、気道の血栓性微小血管症（ｔｈｒｏｍｂｏｔｉｃ ｍｉｃｒｏａｎｇｉｏｐａｔｈｙ：ＴＭＡ）を含むＴＭＡ、塞栓症（例えばＰＥ）、心筋梗塞、並びに卒中（例えば虚血性脳卒中又は脳卒中）が挙げられる。診断方法は、ＶＷＦ及び／若しくはその多量体（特に超大型多量体）のレベルの上昇、内因性ＡＤＡＭＴＳ１３のレベルの低下、又はこれらの組み合わせについて、対象又は患者を評価することを含む。

【0003】

ＡＤＡＭＴＳ１３の投与は有利なことに、コロナウイルス対象、特にＣＯＶＩＤ－１９対象、特に：過剰な超大型ＶＷＦ多量体；過剰なサイトカインレベル；望ましくない凝固、梗塞、血栓症、若しくは塞栓症を伴う血液障害；又は他の危険因子を呈する対象を、感染、特にＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染の有害な結果について治療し、保護し、救済し、支援し、又は回復を維持する。

【背景技術】

【0004】

ＣＯＶＩＤ－１９は、重症急性呼吸器症候群コロナウイルス２（ｓｅｖｅｒｅ ａｃｕｔｅ ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ ｓｙｎｄｒｏｍｅ ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ ２：ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２）によって引き起こされる感染症である。このウイルスに感染した対象は、症状を発症することもしないこともある。ＣＯＶＩＤ－１９の症状が存在する場合、これは中等症から極めて重症にまで及ぶ可能性があり、この疾患は対象のかなりの部分ないし人数にとって致命的である。世界保健機関は、ＣＯＶＩＤ－１９が、１８７の国及び地域にわたる数百万の症例及び数千の死者を伴う世界的なパンデミックであると宣言している。ＣＯＶＩＤ－１９の一般的な症状としては、発熱、咳、疲労、息切れ、並びに嗅覚及び味覚の喪失が挙げられる。ウイルス性肺炎、サイトカインストーム、及び多臓器不全を含む症状が進行し、生命を脅かすものとなる可能性がある。ＣＯＶＩＤ－１９の重症例の５０％超、及び略全ての致命的な症例に、凝固障害（出血性障害）がある。血栓症（ＤＶＴ）及び肺塞栓症（ＰＥ）がこの疾患の特に後期段階における重大な合併症となり得るという報告を含む、凝血障害（ｃｌｏｔｔｉｎｇ ｄｉｓｏｒｄｅｒ）を示す症例も記述されている。患者は生命を脅かす合併症を発症し、防止的抗凝固剤（ヘパリン）の投与にもかかわらず相当な人数の患者が死亡した。非特許文献１を参照。

【0005】

急性肺塞栓症（ｐｕｌｍｏｎａｒｙ ｅｍｂｏｌｉｓｍ：ＰＥ）又は深部静脈血栓症（ｄｅｅｐ ｖｅｉｎ ｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ：ＤＶＴ）が、ＣＯＶＩＤ－１９肺炎の症例において報告されており、これには、サイトカインストーム後に、またＤＶＴ防止（エノキサパリン）にもかかわらず、ＰＥを発症した患者が含まれる。非特許文献２を参照。ＣＯＶＩＤ－１９における血栓症の病態生理学は未知であるが、過剰に高いＶＷＦ及びＦＶＩＩＩレベルが感染患者で報告されている。ダルテパリン及びヘパリンのうちの１つ又は複数を特に高い用量で投与することが記述されている。非特許文献３を参照。このような高レベルのＶＷＦ及びＦＶＩＩＩについての可能な説明は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２が内皮細胞に直接感染して内皮炎を引き起こす、というものである。非特許文献４を参照。理論的には、感染した細胞は、そのワイベル・パラーデ小体等の貯蔵顆粒からタンパク質を放出することになるが、貯蔵顆粒は高分子量形態及び超大型形態のＶＷＦを含有しており、これを放出することになる。ある態様では、免疫性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）にも罹患しているＣＯＶＩＤ－１９患者を研究したが、研究者はＶＷＦの関与を全く探求及び測定しなかった。非特許文献５を参照。

【0006】

ＶＷＦのレベルの増大は、ＣＯＶＩＤ－１９感染の急性期の重要な構成要素であると考えられている、ＩＬ－８、腫瘍壊死因子α（ｔｕｍｏｒ ｎｅｃｒｏｓｉｓ ｆａｃｔｏｒ ａｌｐｈａ：ＴＮＦ－α）、及びＩＬ－６といった炎症性サイトカインのレベルの上昇にも起因し得る。これらのサイトカインは、超高分子量形態のＶＷＦ（即ち多量体）の放出を誘発し、ＡＤＡＭＴＳ１３によるＶＷＦの切断を阻害することが実証されている。非特許文献６を参照。

【0007】

ＣＯＶＩＤ－１９対象の体内の、特に超大型形態の過剰なＶＷＦは、梗塞（貧血性又は出血性）に寄与するか又はその主因となり得、これは発生時に血栓症又は塞栓症につながる。梗塞は、十分な血液の供給の喪失によって引き起こされる、肉眼で見える面積の臓器の壊死組織をもたらすプロセスであり、これは深刻で、場合によっては致命的なものとなる場合があり、また不可逆的である。本発明によると、有効量のＡＤＡＭＴＳ１３の投与は、過剰なＶＷＦ、特にその超大型形態が低減又は防止され、またこれはＣＯＶＩＤ－１９に関連する凝血障害、梗塞、血栓症、塞栓症、並びに関連する障害及び合併症の治療として役立つ。

【0008】

ＣＯＶＩＤ－１９対象は、多数の状態又は合併症、例えばＶＷＦ及び／又はその多量体（特に超大型多量体）のレベルの上昇、内因性ＡＤＡＭＴＳ１３のレベルの低下、サイトカインレベルの上昇、凝固障害、血液凝固障害、静脈閉塞性障害、血栓形成促進状態、ＡＲＤＳ、ＣＯＰＤ、肺炎、喘息、高血圧症（例えば肺高血圧症）、血栓症（例えばＤＶＴ）、気道の血栓性微小血管症（ＴＭＡ）を含むＴＭＡ、塞栓症（例えばＰＥ）、心筋梗塞、並びに卒中（例えば虚血性脳卒中又は脳卒中）、あるいはこれらの症状又は合併症（「危険因子（ｒｉｓｋ ｆａｃｔｏｒ）」又は「合併症（ｃｏｍｐｌｉｃａｔｉｏｎ）」と総称）に対する感受性が特に高いか、又はこれらの影響を受けやすい場合がある。これらのうちのいずれの１つ又は複数は、ＣＯＶＩＤ－１９の重症度に寄与する可能性があり、また生命を脅かすものとなる可能性がある。

【0009】

ＣＯＶＩＤ－１９パンデミックの初期の経験から、感受性の高い個体において、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染が、有害な臨床転帰の頻繁な原因となる血栓性凝固障害をもたらすことが示されている。非特許文献７、８を参照。凝固障害は主に、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に対する過剰な宿主炎症応答によって引き起こされる、又は内皮細胞内でのウイルス複製の直接的な影響からの、血管内皮の機能障害の結果であることが提示されている。非特許文献８、９を参照。重症のＣＯＶＩＤ－１９では、これは、小肺血管に血小板及びフィブリンに富む血栓の沈着、また場合によっては大きな末梢静脈又は動脈の血栓症をもたらす。非特許文献１０、１１、１２を参照。

【0010】

この病因モデルと一致するように、内皮活性化の血漿マーカーは重症のＣＯＶＩＤ－１９で一貫して上昇し、これは有害な転帰と相関している（非特許文献８）。血漿マーカーとしては、正常な止血応答における循環血小板と損傷した血管壁との間の接着相互作用の重要な仲介因子である、フォン・ヴィレブランド因子（ＶＷＦ）が挙げられる。非特許文献１３を参照。ＶＷＦは合成され、ワイベル・パラーデ小体に貯蔵され、高い生物活性を有する超高分子量（ｕｌｔｒａ－ｈｉｇｈ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｗｅｉｇｈｔ：ＵＨＭＷ）多量体として内皮細胞によって放出される。これらのＵＨＭＷは、他の血小板への、及び血管損傷時に露出した内皮下構造への、血小板の接着の、極めて効果的な仲介因子である。しかしながら、通常の状況下では、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体は、ＡＤＡＭＴＳ１３（トロンボスポンジン１型モチーフを有するディスインテグリン及びメタロプロテアーゼ メンバー１３）によって、血栓形成の可能性が低い、接着力が弱い小さな多量体へと切断される。非特許文献１４を参照。ＡＤＡＭＴＳ１３活性の重度の自己免疫仲介性又は遺伝性欠損が存在する血栓性血小板減少性紫斑病（ｔｈｒｏｍｂｏｔｉｃ ｔｈｒｏｍｂｏｃｙｔｏｐｅｎｉｃ ｐｕｒｐｕｒａ：ＴＴＰ）等の障害は、循環ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体の持続をもたらす。これは、小動脈における血小板に富む異常な血栓の形成として現れ、生命を脅かす微小血管閉塞症及び虚血性組織損傷につながることが多い。非特許文献１５を参照。

【0011】

ＴＴＰ等の障害の微小閉塞性脈管障害や、ＳＡＲ－ＣｏＶ－２感染の症状と、ある程度の類似性があるため、ＶＷＦによって仲介される血小板と内皮細胞との間の異常な相互作用も、重症のＣＯＶＩＤ－１９における血栓症に寄与する可能性があることが提示されている。非特許文献１６、１７を参照。小さな患者コホートでの最近の症例報告及び調査によって、重症のＣＯＶＩＤ－１９が、循環ＶＷＦレベルの顕著な上昇と関連していることが立証されており、これは大半の報告ではＡＤＡＭＴＳ１３の減少を伴う。非特許文献８、１８、１９、２０を参照。ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染が、ＣＯＶＩＤ－１９の内皮細胞活性化及び関連する血管内凝固障害を引き起こす、考えられるメカニズムについては、仮説が立てられているものの依然として最終的な調査は行われていない。非特許文献８、１６、２１を参照。

【先行技術文献】

【非特許文献】

【0012】

【非特許文献1】Lodigiani et al., Venous and arterial thromboembolic complications in COVID-19 patients admitted to an academic hospital in Milan, Italy, Thromb. Res. 2020 Apr 23; 191:9-14

【非特許文献2】Griffin, et al., Pulmonary Embolism and Increased Levels of d-Dimer in Patients with Coronavirus Disease, Emerg. Infect. Dis. 2020 Apr 29;26(8)

【非特許文献3】Escher et al., Severe COVID-19 infection associated with endothelial activation, Thromb. Res. 2020 Apr 15; 190:62 (Escher 190:62)

【非特許文献4】Varga, et al., Lancet. 2020 Apr 20. pii: S0140-6736(20)30937-5

【非特許文献5】Zulfiqar, et al., Immune Thrombocytopenic Purpura in a Patient with Covid-19, N. Engl. J. Med. 2020 Apr 30; 382(18):e43

【非特許文献6】Bernado et al., Effects of inflammatory cytokines on the release and cleavage of the endothelial cell-derived ultralarge von Willebrand factor multimers under flow, Blood 2004 Jul 1; 104(1):100-6

【非特許文献7】Tang N, Li D, Wang X, Sun Z. Abnormal coagulation parameters are associated with poor prognosis in patients with novel coronavirus pneumonia. J Thromb Haemost 2020; 18:844-7

【非特許文献8】Goshua G, Pine AB, Meizlish ML, et al. Endotheliopathy in COVID-19-associated coagulopathy: evidence from a single-centre, cross-sectional study. Lancet Haematol. 2020;7(8): e575-e582

【非特許文献9】Varga, A.J. et al., Lancet 395 (10234) (2020) 1417-1418

【非特許文献10】Wichmann D et al., Ann Intern Med 2020

【非特許文献11】Cui S et al., J Thromb Haemost 2020;18:1421-4

【非特許文献12】Varatharaj A, Thomas N, Ellul MA, et al. Neurological and neuropsychiatric complications of COVID-19 in 153 patients: a UK-wide surveillance study. Lancet Psychiatry 2020

【非特許文献13】South K et al., J Thromb Haemost 2018; 16:6-18

【非特許文献14】Dong JF et al., Blood 2002; 100:4033-9

【非特許文献15】Scully M, Yarranton H, Liesner R, et al. Regional UK TTP registry: correlation with laboratory ADAMTS 13 analysis and clinical features. Br J Haematol 2008; 142:819-26

【非特許文献16】Morici N et al., Haemost 2020; O'Sullivan JM, Gonagle DM, Ward SE, Preston RJS, O'Donnell JS. Endothelial cells orchestrate COVID-19 coagulopathy. Lancet Haematol 2020, 7(8):e553-e555

【非特許文献17】Escher R, Breakey N, Lammle B. ADAMTS13 activity, von Willebrand factor, factor VIII and D-dimers in COVID-19 inpatients. Thromb Res 2020; 192:174-5 (Escher 192:174)

【非特許文献18】Blasi A, von Meijenfeldt FA, Adelmeijer J, et al. In vitro hypercoagulability and ongoing in vivo activation of coagulation and fibrinolysis in COVID-19 patients on anticoagulation［出版に先立って２０２０年８月６日にオンラインで公開］. J Thromb Haemost. 2020;10.1111/jth.15043. doi:10.1111/jth.15043

【非特許文献19】Martinelli N, Montagnana M, Pizzolo F, et al. A relative ADAMTS13 deficiency supports the presence of a secondary microangiopathy in COVID 19［出版に先立って２０２０年７月１８日にオンラインで公開］. Thromb Res. 2020;193:170-172. doi:10.1016/j.thromres.2020.07.034

【非特許文献20】Makatsariya AD, Slukhanchuk EV, Bitsadze VO, et al. Thrombotic microangiopathy, DIC-syndrome and COVID-19: link with pregnancy prothrombotic state［出版に先立って２０２０年７月６日にオンラインで公開］. J Matern Fetal Neonatal Med. 2020;1-9. doi:10.1080/14767058.2020.1786811

【非特許文献21】Huertas A et al., Eur Respir J. 2020;56(1):2001634

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0013】

ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染及びＣＯＶＩＤ－１９の重篤度や、合併症、特に血液凝固、梗塞、血栓症、又は塞栓症、特にＤＶＴ又はＰＥの生命に関わるリスクを考えると；また治療の選択肢がないことを考えると、罹患した対象の治療（防止を含む）に対して緊急の需要が存在する。本発明によると、有効量の単離又は組換えＡＤＡＭＴＳ１３の投与が、実行可能な治療の選択肢となる。

【課題を解決するための手段】

【0014】

本明細書で提供されるのは、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染した又はＣＯＶＩＤ－１９の１つ又は複数の兆候若しくは症状を有する対象といった、病原性コロナウイルスに感染した対象において、コロナウイルス疾患又はコロナウイルス疾患に関連する状態、特にその合併症を治療及び／又は診断するための、方法及び組成物である。本発明は、コロナウイルス関連疾患（例えばＣＯＶＩＤ－１９）、並びにこれらに関連する血液障害、例えば：凝固障害（例えば血栓性凝固障害）又は凝血障害；超高分子量（ＵＨＭＷ）ＶＷＦ多量体等のＶＷＦのレベルの上昇；ＤＶＴ等の血栓症；肺塞栓症、及び腎不全をもたらす腎塞栓症等の塞栓症を治療するための、組成物及び方法を提供する。組成物は、治療有効量の単離又は組換えＡＤＡＭＴＳ１３を含む。方法は、コロナウイルス（例えばＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２）に感染した、又はコロナウイルス関連疾患（例えばＣＯＶＩＤ－１９）と診断された及び／若しくはコロナウイルス関連疾患（例えばＣＯＶＩＤ－１９）を示す対象に、治療有効量の単離又は組換えＡＤＡＭＴＳ１３を含む組成物を投与することを含む。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３は、コロナウイルス（例えばＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２）感染の検出又はコロナウイルス関連疾患（例えばＣＯＶＩＤ－１９）の診断後に、特定の投薬量及び回数で投与される。投薬量及び投与のタイミングは、例えば：診断又はＡＤＡＭＴＳ１３治療時点におけるコロナウイルス関連疾患（例えばＣＯＶＩＤ－１９）の重篤度又は進行；対象の年齢；対象の性別；対象の既存の状態；及びコロナウイルス関連疾患（例えばＣＯＶＩＤ－１９）に関連する１つ又は複数の症状、合併症、又は危険因子に対する対象の素因、リスク、又は脆弱性を含む、１つ又は複数の因子に依存する。

【0015】

特定の態様では、本発明は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染した又はＣＯＶＩＤ－１９に罹患した対象において、少なくとも１つの状態又は合併症を治療又は防止する方法を提供し、その方法は、単離又は組換えＡＤＡＭＴＳ１３を含む組成物を投与することを含む。特定の実施形態では、対象は、状態又は合併症が存在する前に、単離又は組換えＡＤＡＭＴＳ１３を含む組成物を投与される。特定の実施形態では、対象は、状態又は合併症が存在した後に、単離又は組換えＡＤＡＭＴＳ１３を含む組成物を投与される。

【0016】

特定の態様では、本発明は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染又はＣＯＶＩＤ－１９に関連する少なくとも１つの状態又は合併症の発症のリスクを有する対象を治療する方法を提供し、その方法は、単離又は組換えＡＤＡＭＴＳ１３を含む組成物を投与することを含む。特定の実施形態では、対象は、状態又は合併症が存在する前に、単離又は組換えＡＤＡＭＴＳ１３を含む組成物を投与される。特定の実施形態では、対象は、状態又は合併症が存在した後に、単離又は組換えＡＤＡＭＴＳ１３を含む組成物を投与される。

【0017】

特定の態様では、本発明は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染した又はＣＯＶＩＤ－１９に罹患した対象において、少なくとも１つの状態又は合併症を治療又は防止する方法を提供し、その方法は：ａ）それを必要とする対象に、治療有効量のＡＤＡＭＴＳ１３を投与するステップであって、治療有効量は：ｉ）循環超高分子量（ＵＨＭＷ）フォン・ヴィレブランド因子（ＶＷＦ）多量体を、投与前の対象の血中のＶＷＦの測定レベルと比較して少なくとも約５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、又は１００％低下したレベルまで減少させるため；ｉｉ）循環ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体を、正常ＶＷＦベースライン値よりも約５％以下、１０％以下、１５％以下、２０％以下、２５％以下、３０％以下、３５％以下、４０％以下、４５％以下、５０％以下、５５％以下、６０％以下、６５％以下、７０％以下、７５％以下、８０％以下、８５％以下、９０％以下、９５％以下、又は１００％以下だけ高いレベルまで減少させるため；ｉｉｉ）循環ＶＷＦを、投与前の対象の血中のＶＷＦの測定レベルと比較して少なくとも約５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、又は１００％低下したレベルまで減少させるため；ｉｖ）循環ＶＷＦを、正常ＶＷＦベースライン値よりも約５％以下、１０％以下、１５％以下、２０％以下、２５％以下、３０％以下、３５％以下、４０％以下、４５％以下、５０％以下、５５％以下、６０％以下、６５％以下、７０％以下、７５％以下、８０％以下、８５％以下、９０％以下、９５％以下、又は１００％以下だけ高いレベルまで減少させるため；ｖ）ＶＷＦ活性レベルを、投与前の対象の血中のＶＷＦ活性の測定レベルと比較して少なくとも約５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、又は１００％低下したレベルまで減少させるため；ｖｉ）ＶＷＦ活性レベルを、正常ＶＷＦ活性ベースライン値よりも約５％以下、１０％以下、１５％以下、２０％以下、２５％以下、３０％以下、３５％以下、４０％以下、４５％以下、５０％以下、５５％以下、６０％以下、６５％以下、７０％以下、７５％以下、８０％以下、８５％以下、９０％以下、９５％以下、又は１００％以下だけ高いレベルまで減少させるため；ｖｉｉ）循環ＡＤＡＭＴＳ１３レベルを、正常ＡＤＡＭＴＳ１３ベースライン値よりも約１００％～約１５０％高いレベルまで上昇させるため；あるいはｖｉｉｉ）ｉ）～ｖｉｉ）の組み合わせのために、十分なものである、ステップを含む。特定の実施形態では、方法は更に、循環ＶＷＦ、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体、又はこれらの組み合わせのレベルの低減を維持するために、投与される量を周期的に監視及び調整するステップを含む。

【0018】

特定の実施形態では、単離又は組換えＡＤＡＭＴＳ１３の治療有効量又は用量は、対象の体重１ｋｇあたりの、投与されることになるＡＤＡＭＴＳ１３活性の国際単位（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｕｎｉｔ：ＩＵ）の数（ＩＵ／ｋｇ）として表現される。特定の実施形態では、治療有効量又は用量は、約１０～４００ＩＵ／ｋｇ、約１０～２００ＩＵ／ｋｇ、好ましくは約１０～１６０ＩＵ／ｋｇ、又は２０～１６０ＩＵ／ｋｇの範囲内となる。

【0019】

用量に関して、特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３の治療有効量は、約１０～４００ＩＵ／ｋｇ、約１０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約１０～３００ＩＵ／ｋｇ、約１０～２００ＩＵ／ｋｇ、約１０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約１０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約２０～４００ＩＵ／ｋｇ、約２０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約２０～３００ＩＵ／ｋｇ、約２０～２００ＩＵ／ｋｇ、約２０～１８０ＩＵ／ｋｇ、又は約２０～１６０ＩＵ／ｋｇである。更なる実施形態では、用量は、約１０～１００ＩＵ／ｋｇ、約１０～８０ＩＵ／ｋｇ、約１０～６０ＩＵ／ｋｇ、約１０～４０ＩＵ／ｋｇ、約１０～３０ＩＵ／ｋｇ、約１０～２０ＩＵ／ｋｇ、約２０～１００ＩＵ／ｋｇ、約２０～８０ＩＵ／ｋｇ、約２０～６０ＩＵ／ｋｇ、又は約２０～４０ＩＵ／ｋｇである。更に他の実施形態では、用量は、約３０～４００ＩＵ／ｋｇ、約３０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約３０～３００ＩＵ／ｋｇ、３０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約３０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約３０～１５０ＩＵ／ｋｇ、約３０～８０ＩＵ／ｋｇ、約３０～６０ＩＵ／ｋｇ、約３０～４０ＩＵ／ｋｇ、約４０～４００ＩＵ／ｋｇ、約４０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約４０～３００ＩＵ／ｋｇ、約４０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約４０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約４０～１５０ＩＵ／ｋｇ、約４０～８０ＩＵ／ｋｇ、又は約４０～６０ＩＵ／ｋｇである。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３の治療有効量は、約１０～６０ＩＵ／ｋｇ、約１０～４０ＩＵ／ｋｇ、又は約１０～２０ＩＵ／ｋｇである。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３の治療有効量は、約４０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約４０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約４０～８０ＩＵ／ｋｇ、又は約４０～６０ＩＵ／ｋｇである。治療有効量又は用量は、単回用量、複数回用量、又は分割用量として投与できる。特定の実施形態では、治療有効量又は用量は、毎月、２週間毎、毎週、週２回、週３回、隔日、毎日、１２時間毎、８時間毎、６時間毎、４時間毎、２時間毎、又は１時間毎に投与される。特定の実施形態では、治療有効量又は用量は、１日１回、１日２回、又は隔日で投与される。特定の実施形態では、治療有効量又は用量は、静脈内投与されるか、皮下投与されるか、静脈内ボーラスによって投与されるか、又は静脈内注入によって投与される。

【0020】

特定のＣＯＶＩＤ－１９対象は６５歳を超えていてよく、及び／又はＣＯＶＩＤ－１９に関連する１つ又は複数の合併症若しくは危険因子の病歴、兆候、若しくは症状、若しくはこれらに対する素因若しくは感受性を示してよい。これらは例えば、限定するものではないが、ＶＷＦ及び／又はその多量体（特に超大型多量体（ＵＨＭＷ））の血漿レベルの上昇、血漿ＶＷＦ活性レベルの上昇、内因性ＡＤＡＭＴＳ１３の血漿レベルの低下、内因性ＡＤＡＭＴＳ１３の活性の低下、凝固障害、血液凝固障害、静脈閉塞障害、血栓形成促進状態、遺伝性血栓性血小板減少性紫斑病（ＴＴＰ）、後天性ＴＴＰ、播種性血管内凝固症候群（ｄｉｓｓｅｍｉｎａｔｅｄ ｉｎｔｒａｖａｓｃｕｌａｒ ｃｏａｇｕｌａｔｉｏｎ：ＤＩＣ）、敗血症、鎌状赤血球症、腎不全、呼吸不全、急性呼吸窮迫症候群（ａｃｕｔｅ ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ ｄｉｓｔｒｅｓｓ ｓｙｎｄｒｏｍｅ：ＡＲＤＳ）、慢性閉塞性肺疾患（ｃｈｒｏｎｉｃ ｏｂｓｔｒｕｃｔｉｖｅ ｐｕｌｍｏｎａｒｙ ｄｉｓｅａｓｅ：ＣＯＰＤ）、肺炎、喘息、妊娠高血圧症候群、閉経期高血圧、閉経周辺期高血圧、高血圧症（例えば肺高血圧症）、血栓症（例えばＤＶＴ）、気道の血栓性微小血管症（ＴＭＡ）を含むＴＭＡ、塞栓症（例えばＰＥ）、心筋梗塞、並びに卒中（例えば虚血性脳卒中又は脳卒中）、咳、息切れ、肺浸潤、呼吸不全、血漿フィブロゲン（ｆｉｂｒｏｇｅｎ）の上昇、止血経路の活性化、集中治療室（ｉｎｔｅｎｓｉｖｅ ｃａｒｅ ｕｎｉｔ：ＩＣＵ）への入院、あるいはこれらの症状又は合併症を含む。これらの状態は「危険因子」と呼ばれ、このような対象は「危険な（ａｔ ｒｉｓｋ）」対象又は患者と呼ばれる。

【0021】

特定の「危険な」ＣＯＶＩＤ－１９対象は、ＣＯＶＩＤ－１９症状の有無にかかわらず、疾患の初期段階に、例えばＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染について対象を試験する際に、現れる場合がある。これらの対象は、ＶＷＦ及び／又はその多量体のレベルの上昇を示す場合も示さない場合もあり、それらレベルが正常であるか又はわずかしか上昇していないように見える場合もある。本発明によると、このような「危険な初期段階の（ａｔ ｒｉｓｋ ｅａｒｌｉｅｒ ｓｔａｇｅ）」対象、例えば危険因子に対する素因又は感受性を示す対象を、治療有効量の単離又は組換えＡＤＡＭＴＳ１３を含む組成物を投与することによって治療できる。特定の実施形態では、治療有効量は、約１０～１００ＩＵ／ｋｇ、約１０～８０ＩＵ／ｋｇ、約１０～６０ＩＵ／ｋｇ、約１０～４０ＩＵ／ｋｇ、約１０～３０ＩＵ／ｋｇ、約１０～２０ＩＵ／ｋｇ、約２０～１００ＩＵ／ｋｇ、約２０～８０ＩＵ／ｋｇ、約２０～６０ＩＵ／ｋｇ、約２０～４０ＩＵ／ｋｇ、約２０～３０ＩＵ／ｋｇ、約３０～１００ＩＵ／ｋｇ、約３０～８０ＩＵ／ｋｇ、約３０～６０ＩＵ／ｋｇ、約３０～４０ＩＵ／ｋｇ、約４０～１００ＩＵ／ｋｇ、約４０～８０ＩＵ／ｋｇ、又は約４０～６０ＩＵ／ｋｇとなる。特定の実施形態では、投薬は、対象の循環ＡＤＡＭＴＳ１３レベルを、所定の正常ベースライン範囲と比較して（例えば正常範囲より上に）又は所定の正常ベースライン値と比較して（例えば正常値若しくは基準より上に）約２０～１００％だけ上昇させるように、決定及び／又は監視される。ＡＤＡＭＴＳ１３に関する正常範囲は、ＡＤＡＭＴＳ１３レベル又は活性の測定に使用される方法に依存する。特定の実施形態では、所定のベースラインは、検証された／選択された測定方法を用いた試験所（testing laboratory）における正常な対照集団に基づくものである。特定の実施形態では、健康な個体における正常範囲又はベースライン範囲は、所定のベースライン値の約４０～１６０％となる。Peyvandi et al., ADAMTS13 assays in thrombotic thrombocytopenic purpura, J Thromb Haemost. 2010 Apr; 8(4):631-40を参照。特定の実施形態では、健康な個体における正常範囲又はベースライン範囲は、所定のベースライン値の８７～１１３％となる。Mancini et al., J Thromb Haemost. 2021 Feb;19(2):513-521を参照。特定の実施形態では、組成物は、「危険な初期段階の」対象に、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の検出、ＣＯＶＩＤ－１９の診断、若しくは入院の直後に、又はＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の検出、ＣＯＶＩＤ－１９の診断、若しくは入院の２４時間若しくは４８時間以内に、投与される。特定の実施形態では、治療有効量又は用量は、毎月、２週間毎、毎週、週２回、週３回、隔日、毎日、１２時間毎、８時間毎、６時間毎、４時間毎、２時間毎、又は１時間毎に投与される。特定の実施形態では、治療有効量又は用量は、１日１回、１日２回、又は隔日で、好ましくは隔日で投与される。本発明によると、本明細書に記載の治療は、特に本明細書に記載の様々な血液障害及び血栓性状態若しくは血栓形成促進状態、並びに合併症に関して、１つ又は複数のＣＯＶＩＤ－１９合併症の重篤な進行を治療、阻害、抑制、防止、軽減、若しくは緩和し、回復を促進し、又はより健康な状態を維持する。

【0022】

特定の「危険な」ＣＯＶＩＤ－１９患者は、疾患の後期段階に現れる場合があり、及び／又はＶＷＦ若しくはその多量体（例えばＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体）のレベルの上昇を示す場合がある。特定の実施形態では、治療を指示する上昇したＶＷＦ又は多量体（例えばＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体）レベルは、所定の正常ベースライン値又は所定のベースライン範囲よりも少なくとも約５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、２００％、３００％、４００％、５００％、６００％、７００％、８００％、９００％高いか、又は更に高いレベルとなる。ＶＷＦは急性期タンパク質であり、年齢と共に増加する傾向も有する。ＶＷＦの様々な機能を測定する様々なアッセイも存在する。特定の実施形態では、所定の正常ベースラインは、検証された／選択された測定方法を用いた試験所における正常な対照集団に基づくものである。特定の実施形態では、典型的な正常ベースライン範囲は、確立された若しくは所定の正常基準、又は１００％に設定された所定のベースラインと比較して、約５０～２００％の範囲である。Swystun LL, Lillicrap D. J Thromb Haemost. 2018 Dec;16(12):2375-2390を参照。特定の実施形態では、ＶＷＦレベルの正常ベースラインは、約４２～１３６％のＶＷＦ：抗原の範囲、又は約４２～１６８％のＶＷＦ：活性のうちの一方である。特定の実施形態では、治療は特に、ＶＷＦ及び／又は多量体レベルが正常ベースラインと比較して２倍若しくは３倍高い、又は更に高い場合に指示される。本発明によると、「危険な後期段階の（ａｔ ｒｉｓｋ ｌａｔｅｒ ｓｔａｇｅ）」対象を、治療有効量の単離又は組換えＡＤＡＭＴＳ１３を含む組成物を投与することによって治療できる。特定の実施形態では、治療有効量は、約３０～２００ＩＵ／ｋｇ、約３０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約３０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約３０～８０ＩＵ／ｋｇ、約３０～６０ＩＵ／ｋｇ、約３０～４０ＩＵ／ｋｇ、約４０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約４０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約４０～８０ＩＵ／ｋｇ、又は約４０～６０ＩＵ／ｋｇとなる。特定の実施形態では、投薬は、正常範囲内であるか又はベースラインに近いＶＷＦ及び／又はその多量体のレベルの低下を提供するように、決定及び／又は監視される。特定の実施形態では、超大型ＶＷＦ多量体がもはや観察されなくなる。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３組成物は、「危険な後期段階の」対象に、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の検出、ＣＯＶＩＤ－１９の診断、若しくは入院の直後に、又はＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の検出、ＣＯＶＩＤ－１９の診断、若しくは入院の２４時間若しくは４８時間以内に、投与される。特定の実施形態では、治療有効量又は用量は、毎月、２週間毎、毎週、週２回、週３回、隔日、毎日、１２時間毎、８時間毎、６時間毎、４時間毎、２時間毎、又は１時間毎に投与される。特定の実施形態では、治療有効量又は用量は、毎日又は隔日で、好ましくは毎日、投与される。本発明によると、本明細書に記載の治療は、特に本明細書に記載の様々な血液障害及び血栓性状態若しくは血栓形成促進状態、並びに合併症に関して、１つ又は複数のＣＯＶＩＤ－１９合併症の重篤な進行を治療、阻害、抑制、防止、軽減、若しくは緩和し、回復を促進し、又はより健康な状態を維持する。

【0023】

特定の実施形態では、所定の正常ベースライン又は確立されたベースラインは、検証された／選択された測定方法を用いた試験所における正常な対照集団に基づくものである。

【0024】

いかなる理論によっても束縛されることを望むものではないが、「危険な後期段階の」ＣＯＶＩＤ－１９対象は、「危険な初期段階の」ＣＯＶＩＤ－１９対象に投与される用量と比較して、より高頻度で投与される、より高用量のＡＤＡＭＴＳ１３の投与から、利益を受ける傾向があると考えられる。「危険な初期段階の」患者の一連の治療は、「危険な後期段階の」患者の一連の治療と比較して長期化し得る。結果及び予後に応じて、これらの治療を交互に実施する場合があり、又は一方の治療を他方の治療に切り替える場合がある。

【0025】

特定の実施形態では、本発明による医薬組成物は：（ａ）０．０５ｍｇ／ｍｌ～１０．０ｍｇ／ｍｌのＡＤＡＭＴＳ１３；（ｂ）０ｍＭ～２００ｍＭの薬学的に許容可能な塩；（ｃ）０．５ｍＭ～２０ｍＭのカルシウム；（ｄ）糖及び／又は糖アルコール；（ｅ）非イオン界面活性剤；並びに（ｆ）ｐＨを６．０～８．０に維持するための緩衝剤を含む、ＡＤＡＭＴＳ１３（Ａ１３）の安定化済み製剤である。関連する実施形態では、これは液体製剤である。更なる実施形態では、この液体製剤は凍結乾燥される。

【0026】

本発明の組成物及び方法は、ＣＯＶＩＤ－１９と診断された対象を、初期段階において（例えば防止的に）及び後期段階において（例えばレスキュー治療として）治療するために、有用である。本発明は様々な態様において有用であり、態様の例は本明細書に記載されている。特定の態様では、本発明は：（ａ）少なくとも６５歳の対象；（ｂ）ＶＷＦ及び／又はその多量体のレベルが上昇した、異常に高い、又は極めて異常に高い対象；（ｃ）１つ又は複数のサイトカイン（例えばＩＬ－８、ＴＮＦ－α、及びＩＬ－６）のレベルが上昇した、異常に高い、又は極めて異常に高い対象；（ｄ）１つ又は複数のＣＯＶＩＤ－１９合併症、特に凝固障害、血液凝固障害、静脈閉塞障害、血栓形成促進状態、遺伝性血栓性血小板減少性紫斑病（ＴＴＰ）、後天性ＴＴＰ、播種性血管内凝固症候群（ＤＩＣ）、敗血症、鎌状赤血球症、腎不全、呼吸不全、急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、肺炎、喘息、妊娠高血圧症候群、閉経期高血圧、閉経周辺期高血圧、高血圧症（例えば肺高血圧症）、血栓症（例えばＤＶＴ）、気道の血栓性微小血管症（ＴＭＡ）を含むＴＭＡ、塞栓症（例えばＰＥ）、心筋梗塞、及び卒中（例えば虚血性脳卒中又は脳卒中）、咳、息切れ、肺浸潤、呼吸不全、血漿フィブロゲン（ｆｉｂｒｏｇｅｎ）の上昇、止血経路の活性化、集中治療室（ＩＣＵ）への入院を示すか又はそのリスクを有する対象；並びに（ｅ）これらのいずれの組み合わせに対して、特に有利である。

【0027】

特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３、ＶＷＦ、及びサイトカインのレベル及び／又は活性はそれぞれ、当業者に公知の好適な臨床検査に従って決定される。

【0028】

ＡＤＡＭＴＳ１３活性は例えば、Kokame et al., FRETS-VWF73, a first fluorogenic substrate for ADAMTS13 assay, Br J Haematol 2005; 129: 93-100; Tripodi, et al., Measurement of von Willebrand factor cleaving protease (ADAMTS13): results of an international collaborative study involving 11 methods testing the same set of coded plasmas, J.Thromb Haemost 2004 v2 p1601-9; Tripodi, et. al., Second international collaborative study evaluating performance characteristics of methods measuring the von Willebrand factor cleaving protease (ADAMTS13), J Thromb Haemost. 2008 September; 6(9): 1534-1541に従って決定でき、これらはそれぞれ、あらゆる目的のために、その全体が本出願に援用される。

【0029】

ＶＷＦレベルは例えば、Turecek et al., Comparative Study on Collagen-Binding Enzyme- Linked lmmunosorbent Assay and Ristocetin Cofactor Activity Assays for Detection of Functional Activity of von Willebrand Factor, Seminars In Thrombosis and Hemostasis, 2002 Vol. 28, No. 2, 149-160; Turecek, et al., A Recombinant Von Willebrand Factor Drug Candidate, Seminars In Thrombosis and Hemostasis, 2010 Vol. 36, No. 5, 510-521に従って決定でき、これらはそれぞれ、あらゆる目的のために、その全体が本出願に援用される。

【0030】

サイトカインレベルは当該技術分野で公知の方法に従って決定できる。

【0031】

特定の態様では、本明細書で提供されるのは、（ａ）内因性ＶＷＦの異常に高いレベル若しくは過正常のレベル（例えばリストセチン補因子活性アッセイで測定されるものの約２００％超）；（ｂ）内因性ＡＤＡＭＴＳ１３の異常に低いレベル若しくは超低レベル（例えば約５０％未満）、又は（ｃ）内因性ＶＷＦ：ＡＤＡＭＴＳ１３の異常な比率若しくはバランス（例えば≧４：１、又は≧３：１、若しくは＞３：１）のうちの少なくとも１つを示すＣＯＶＩＤ－１９対象の体内の、超大型ＶＷＦ多量体のレベルを低下させることによって、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染した又はＣＯＶＩＤ－１９と診断された対象（「ＣＯＶＩＤ－１９対象（ＣＯＶＩＤ－１９ ｓｕｂｊｅｃｔ）」と総称）を治療するための組成物及び方法である。その方法は、対象に治療有効量の単離又は組換えＡＤＡＭＴＳ１３を含む組成物を投与することによって、例えばＶＷＦ及び／若しくはＡＤＡＭＴＳ１３の正常な若しくは有益なレベル、又はＶＷＦ：ＡＤＡＭＴＳ１３の正常な若しくは有益な比率を提供することを含む。

【0032】

特定の態様では、本発明は、梗塞、血栓症若しくは塞栓症の兆候若しくは症状を示すか又はこれらのリスクを有するＣＯＶＩＤ－１９対象を治療するための、組成物及び方法を提供する。その方法は、対象に、治療有効量の単離又は組換えＡＤＡＭＴＳ１３を含む組成物を投与することによって、梗塞、血栓症、又は塞栓症の兆候又は症状を阻害又は抑制することを含み、これは、ＶＷＦ活性、ＶＷＦ：ＡＤＡＭＴＳ１３活性、又はいずれの特定されている兆候若しくは症状のうちの少なくとも１つが（例えば所定のベースライン、閾値、又は所望の統計的尺度を参照して）有意に低減された場合に達成され、また当業者が決定できる対照に対するものである。一般に、阻害又は抑制は、ＶＷＦ若しくはＶＷＦ：ＡＤＡＭＴＳ１３活性の、又は兆候若しくは症状の評価の、対象と比較して約８０％、７０％、６０％、５０％、又は２５～１％の低減によって示される。

【0033】

特定の態様では、本発明は、凝固障害若しくは血液凝固障害を示す又はこれらのリスクを有するＣＯＶＩＤ－１９対象を治療するための、組成物及び方法を提供する。その方法は、対象に、治療有効量の単離又は組換えＡＤＡＭＴＳ１３を含む組成物を投与することによって、動脈及び／若しくは静脈の変則的若しくは異常な血餅、並びに／又はその症状若しくは合併症を、防止する、軽減する、又は反転させることにより、障害を防止又は治療することを含む。

【0034】

特定の態様では、本発明は、動脈血栓症若しくは静脈血栓症を示す又はこれらのリスクを有するＣＯＶＩＤ－１９対象を治療するための、組成物及び方法を提供する。その方法は、対象に、治療有効量の単離又は組換えＡＤＡＭＴＳ１３を含む組成物を投与することによって、例えば血栓症及び／又はその症状若しくは合併症を治療する、防止する、又は反転させることを含む。特定の実施形態では、血栓症は深部静脈血栓症（ＤＶＴ）である。

【0035】

特定の態様では、本発明は、塞栓症を示す又はそのリスクを有するＣＯＶＩＤ－１９対象を治療するための、組成物及び方法を提供する。その方法は、対象に、治療有効量の単離又は組換えＡＤＡＭＴＳ１３を含む組成物を投与することによって、例えば塞栓症及び／又はその症状若しくは合併症を治療する、防止する、又は反転させることを含む。特定の実施形態では、塞栓症は肺塞栓症である。特定の実施形態では、塞栓症は腎不全につながる。

【0036】

特定の態様では、本発明は、急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、肺炎、喘息、高血圧症（例えば肺高血圧症）、心筋梗塞、及び卒中（例えば虚血性脳卒中若しくは脳卒中）といった静脈閉塞障害若しくは血栓形成促進状態を示す又はそのリスクを有するＣＯＶＩＤ－１９対象を治療するための、組成物及び方法を提供する。その方法は、対象に、治療有効量のＡＤＡＭＴＳ１３を含む組成物を投与することによって、例えば静脈閉塞障害、血栓形成促進状態、又はその症状若しくは合併症を治療する、防止する、軽減する、又は反転させることを含む。

【0037】

特定の態様では、本発明は、少なくとも約６５歳であるヒトＣＯＶＩＤ－１９対象を治療するための組成物及び方法を提供する。その方法は、対象に、治療有効量のＡＤＡＭＴＳ１３を含む組成物を投与することによって、例えば、ＣＯＶＩＤ－１９に関するいずれの症状、合併症、又は危険因子、例えば凝固障害、血液凝固障害、静脈閉塞障害、血栓形成促進状態、ＡＲＤＳ、ＣＯＰＤ、肺炎、喘息、閉経期高血圧、高血圧症（例えば肺高血圧症）、血栓症（例えばＤＶＴ）、気道の血栓性微小血管症（ＴＭＡ）を含むＴＭＡ、塞栓症（例えばＰＥ）、心筋梗塞、及び卒中（例えば虚血性脳卒中若しくは脳卒中）、又はその症状若しくは合併症を治療する、防止する、軽減する、又は反転させることを含む。

【0038】

特定の態様では、本発明は、サイトカインレベルの上昇を示すＣＯＶＩＤ－１９対象を治療するための組成物及び方法を提供する。その方法は、対象に、治療有効量のＡＤＡＭＴＳ１３を含む組成物を投与することによって、例えば対象のＶＷＦ又はＶＷＦ多量体のレベルを低下させることを含む。特定の実施形態では、サイトカインレベルは、ＩＬ－８、ＴＮＦ－α、及びＩＬ－６のうちの１つ又は複数を測定することによって決定される。いかなる理論によっても束縛されることを望むものではないが：（ａ）ＡＤＡＭＴＳ１３は、ＶＷＦ多量体を切断することによって、サイトカインレベル増大時に超大型ＶＷＦが増加する傾向に対抗できると考えられ；（ｂ）ＩＬ－８及びＴＮＦ－αのレベルの上昇は、ワイベル・パラーデ小体からの超大型ＶＷＦの放出につながる可能性があり；並びに／又は（ｃ）ＩＬ－６は、ＡＤＡＭＴＳ１３による超大型ＶＷＦの切断に干渉する可能性がある。特定の実施形態では、治療を指示するサイトカインレベルの上昇は、所定の正常ベースラインよりも少なくとも約１０％、２５％、５０％、１００％、２００％、若しくは３００％高い、又は更に高いレベルを含む。特定の実施形態では、サイトカインレベルの上昇は、正常なレベルの少なくとも約２又は３倍高い。

【0039】

特定の態様では、本発明は、少なくとも約６５歳であり、ＶＷＦタンパク質、ＶＷＦ多量体、又はＡＤＡＭＴＳ１３に対するＶＷＦの比率（ＶＷＦ：Ａ１３）のレベルの上昇、異常に高いレベル若しくは過正常のレベルを示すヒトＣＯＶＩＤ－１９対象を治療するための組成物及び方法を提供する。その方法は、対象に、治療有効量のＡＤＡＭＴＳ１３を含む組成物を投与することによって、例えば、対象のＶＷＦ若しくはＶＷＦ多量体のレベルを低下させる、又はＣＯＶＩＤ－１９に関するいずれの症状、合併症、若しくは危険因子、例えば凝固障害、血液凝固障害、静脈閉塞障害、血栓形成促進状態、ＡＲＤＳ、ＣＯＰＤ、肺炎、喘息、閉経期高血圧、高血圧症（例えば肺高血圧症）、血栓症（例えばＤＶＴ）、気道の血栓性微小血管症（ＴＭＡ）を含むＴＭＡ、塞栓症（例えばＰＥ）、心筋梗塞、及び卒中（例えば虚血性脳卒中若しくは脳卒中）、若しくはその症状若しくは合併症を治療する、防止する、軽減する、又は反転させることを含む。

【0040】

特定の態様では、本発明は：（ａ）少なくとも約６５歳であり；（ｂ）ＣＯＶＩＤ－１９に関するいずれの症状、合併症、若しくは危険因子、例えば凝固障害、血液凝固障害、静脈閉塞障害、血栓形成促進状態、ＡＲＤＳ、ＣＯＰＤ、肺炎、喘息、妊娠高血圧症候群、閉経期高血圧、閉経周辺期高血圧、高血圧症（例えば肺高血圧症）、血栓症（例えばＤＶＴ）、気道の血栓性微小血管症（ＴＭＡ）を含むＴＭＡ、塞栓症（例えばＰＥ）、心筋梗塞、及び卒中（例えば虚血性脳卒中若しくは脳卒中）、若しくはその症状若しくは合併症を示すか、又はこれらのリスクを有し；（ｃ）ＶＷＦタンパク質、ＶＷＦ多量体、又はＡＤＡＭＴＳ１３に対するＶＷＦの比率（ＶＷＦ：Ａ１３）のレベルの上昇、異常に高いレベル、又は過正常のレベルを示すヒトＣＯＶＩＤ－１９対象を治療するための組成物及び方法を提供する。その方法は、対象に、治療有効量のＡＤＡＭＴＳ１３を含む組成物を投与することによって、例えば、対象のＶＷＦ若しくはＶＷＦ多量体のレベルを低下させる、又はＣＯＶＩＤ－１９に関するいずれの症状、合併症、若しくは危険因子、例えば凝固障害、血液凝固障害、静脈閉塞障害、血栓形成促進状態、ＡＲＤＳ、ＣＯＰＤ、肺炎、喘息、閉経期高血圧、高血圧症（例えば肺高血圧症）、血栓症（例えばＤＶＴ）、気道の血栓性微小血管症（ＴＭＡ）を含むＴＭＡ、塞栓症（例えばＰＥ）、心筋梗塞、及び卒中（例えば虚血性脳卒中若しくは脳卒中）、若しくはその症状若しくは合併症を治療する、防止する、軽減する、又は反転させることを含む。

【0041】

特定の態様では、本発明は、ＣＯＶＩＤ－１９と診断された対象の血栓性凝固障害のリスクが増大しているかどうかを決定する方法を提供し、その方法は：ａ）血漿試料において、ｉ）ＶＷＦタンパク質の血漿レベル；ｉｉ）血漿試料中のＶＷＦの活性レベル；ｉｉｉ）ＵＨＭＷ ＶＷＦタンパク質多量体の血漿レベル；ｉｖ）ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の血漿レベル；又はｖ）血漿試料中のＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の活性レベルのうちの１つ又は複数を測定するステップ；ｂ）ステップａ）で測定された１つ又は複数の血漿レベル又は活性レベルを、同じ１つ又は複数の血漿レベル又は活性レベルに関するベースライン範囲又はベースライン値と比較するステップ；及びｃ）ｉ）ＶＷＦタンパク質の血漿レベルが上昇していること；ｉｉ）ＶＷＦの活性レベルが上昇していること；ｉｉｉ）血漿ＵＨＭＷ ＶＷＦタンパク質多量体が検出される、若しくはＵＨＭＷ ＶＷＦタンパク質多量体の血漿レベルが上昇していること；ｉｖ）ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の血漿レベルが低下していること；又はｖ）ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の活性レベルが低下していること、のうちの少なくとも１つが満たされた場合に、対象が血栓性凝固障害のリスクを有すると特定するステップを含む。

【0042】

特定の実施形態では、少なくともＶＷＦタンパク質の血漿レベルが上昇している。特定の実施形態では、少なくともＶＷＦの活性レベルが上昇している。特定の実施形態では、少なくともＵＨＭＷ ＶＷＦタンパク質多量体が検出されるか、又はＵＨＭＷ ＶＷＦタンパク質多量体の血漿レベルが上昇している。特定の実施形態では、少なくともＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の血漿レベルが低下している。特定の実施形態では、少なくともＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の活性レベルが低下している。

【0043】

特定の実施形態では、血栓性凝固障害としては、限定するものではないが、血小板凝集、血液凝固、血栓症、血栓性微小血管症、塞栓症、梗塞、静脈閉塞、卒中、血栓症由来の腎不全、又はこれらの組み合わせが挙げられる。特定の実施形態では、血栓症は深部静脈血栓症（ＤＶＴ）である。特定の実施形態では、塞栓症は肺塞栓症（ＰＥ）である。特定の実施形態では、血栓性凝固障害は、血栓症由来の腎不全である。

【0044】

特定の実施形態では、対象は、ＶＷＦタンパク質の血漿レベルが、ＶＷＦタンパク質血漿レベルに関するベースライン値の約１２０％～約３００％である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＶＷＦタンパク質の血漿レベルが、ＶＷＦタンパク質血漿レベルに関するベースライン値の約３００％以上である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、血漿試料中のＶＷＦの活性レベルが、ＶＷＦ活性レベルに関するベースライン値の約１２０％～約３００％である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、血漿試料中のＶＷＦの活性レベルが、ＶＷＦ活性レベルに関するベースライン値の約３００％以上である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の血漿レベルが、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質血漿レベルに関するベースライン値の約７０％～約１００％である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の血漿レベルが、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質血漿レベルに関するベースライン値の約７０％以下である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、血漿試料中のＡＤＡＭＴＳ１３の活性レベルが、ＡＤＡＭＴＳ１３活性レベルに関するベースライン値の約７０％～約１００％である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、血漿試料中のＡＤＡＭＴＳ１３の活性レベルが、ＡＤＡＭＴＳ１３活性レベルに関するベースライン値の７０％以下である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体の血漿レベルが、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体血漿レベルに関するベースライン値の約１００％～約１１０％である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体の血漿レベルが、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体血漿レベルに関するベースライン値の約１１０％以上である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、血漿試料中のＶＷＦレベル：Ａ１３レベルの比率が約３以下である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、血漿試料中のＶＷＦレベル：Ａ１３レベルの比率が約３を超える場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。

【0045】

特定の態様では、本発明は、ＣＯＶＩＤ－１９と診断された対象が血栓性凝固障害のリスクを有するかどうかを決定する方法を提供し、その方法は：ａ）血漿試料において、ｉ）ＶＷＦタンパク質の血漿レベル；ｉｉ）血漿試料中のＶＷＦの活性レベル；ｉｉｉ）ＵＨＭＷ ＶＷＦタンパク質多量体の血漿レベル；ｉｖ）ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の血漿レベル；又はｖ）血漿試料中のＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の活性レベルのうちの１つ又は複数を測定するステップ；及びｂ）以下：ｉ）ＶＷＦタンパク質の血漿レベルが少なくとも約１．２ＩＵ／ｍｌであること；ｉｉ）ＶＷＦ活性レベルが少なくとも約１．２ＩＵ／ｍｌ若しくは１．８ＩＵ／ｍｌであること；ｉｉｉ）血漿ＵＨＭＷ ＶＷＦタンパク質多量体が検出されること；ｉｖ）ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の血漿レベルが約０．７ＩＵ／ｍｌ以下であること；又はｖ）ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の活性レベルが約０．８若しくは約０．９ＩＵ／ｍｌ以下であること、のうちの少なくとも１つが満たされた場合に、対象が血栓性凝固障害のリスクを有すると特定するステップを含む。特定の実施形態では、その方法は更に、ＡＤＡＭＴＳ１３を投与するステップを含む。特定の実施形態では、その方法は更に、ＡＤＡＭＴＳ１３の治療有効量が、約１０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約１０～３００ＩＵ／ｋｇ、約１０～２００ＩＵ／ｋｇ、約１０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約１０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約１０～８０ＩＵ／ｋｇ、約１０～６０ＩＵ／ｋｇ、約１０～４０ＩＵ／ｋｇ、約１０～２０ＩＵ／ｋｇ、約２０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約２０～３００ＩＵ／ｋｇ、約２０～２００ＩＵ／ｋｇ、約２０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約２０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約２０～８０ＩＵ／ｋｇ、約２０～６０ＩＵ／ｋｇ、約２０～４０ＩＵ／ｋｇ、又は約２０～３０ＩＵ／ｋｇであることを含む。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３の治療有効量は、約１０～４０ＩＵ／ｋｇ、約１０～３０ＩＵ／ｋｇ、約１０～２０ＩＵ／ｋｇ、約２０～４０ＩＵ／ｋｇ、又は約２０～３０ＩＵ／ｋｇである。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３の治療有効量は、約１０ＩＵ／ｋｇ、約２０ＩＵ／ｋｇ、約３０ＩＵ／ｋｇ、又は約４０ＩＵ／ｋｇである。

【0046】

特定の態様では、本発明は、ＣＯＶＩＤ－１９と診断された対象が血栓性凝固障害の高いリスクを有するかどうかを決定する方法を提供し、その方法は：ａ）血漿試料において、ｉ）ＶＷＦタンパク質の血漿レベル；ｉｉ）血漿試料中のＶＷＦの活性レベル；ｉｉｉ）ＵＨＭＷ ＶＷＦタンパク質多量体の血漿レベル；ｉｖ）ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の血漿レベル；又はｖ）血漿試料中のＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の活性レベルのうちの１つ又は複数を測定するステップ；及びｂ）以下：ｉ）ＶＷＦタンパク質の血漿レベルが少なくとも約４．５ＩＵ／ｍｌであること；ｉｉ）ＶＷＦ活性レベルが少なくとも約３．３ＩＵ／ｍｌ若しくは４．４ＩＵ／ｍｌであること；ｉｉｉ）ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の血漿レベルが約０．４ＩＵ／ｍｌ以下であること；又はｉｖ）ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の活性レベルが約０．４若しくは約０．５ＩＵ／ｍｌ以下であること、のうちの少なくとも１つが満たされた場合に、対象が血栓性凝固障害の高いリスクを有すると特定するステップを含む。特定の実施形態では、その方法は更に、ＡＤＡＭＴＳ１３を投与するステップを含む。特定の実施形態では、その方法は更に、ＡＤＡＭＴＳ１３の治療有効量が、約３０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約３０～３００ＩＵ／ｋｇ、約３０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約３０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約３０～６０ＩＵ／ｋｇ、約４０～４００ＩＵ／ｋｇ、約４０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約４０～３００ＩＵ／ｋｇ、約４０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約４０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約４０～８０ＩＵ／ｋｇ、又は約４０～６０ＩＵ／ｋｇであることを含む。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３の治療有効量は、約４０～４００ＩＵ／ｋｇ、約４０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約４０～３００ＩＵ／ｋｇ、約４０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約４０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約４０～８０ＩＵ／ｋｇ、又は約４０～６０ＩＵ／ｋｇである。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３の治療有効量は、約４０ＩＵ／ｋｇ、約６０ＩＵ／ｋｇ、約８０ＩＵ／ｋｇ、又は約１６０ＩＵ／ｋｇである。

【0047】

特定の実施形態では、ベースライン値は、正常な対照集団に基づく所定値である。特定の実施形態では、ベースライン値は、正常な対照集団の所定の範囲の平均である。

【0048】

特定の実施形態では、ＶＷＦ活性レベルは、ＶＷＦリストセチン補因子活性によって測定される。特定の実施形態では、ＶＷＦ活性レベルは、ＶＷＦコラーゲン結合活性によって測定される。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３活性レベルはＥＬＩＳＡによって測定される。特定の実施形態では、ＶＷＦ活性レベルはＦＲＥＴＳによって測定される。

【0049】

特定の実施形態では、対象は、対象から採取された血液又は鼻粘膜試料から、ＰＣＲによってＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ ＲＮＡを検出することにより、ＣＯＶＩＤであると診断される。特定の実施形態では、対象は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のセロコンバージョン（ｓｅｒｏｃｏｎｖｅｒｓｉｏｎ）によって、ＣＯＶＩＤであると診断される。特定の実施形態では、対象は、対象の血漿においてＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２抗体を検出することによって、ＣＯＶＩＤであると診断される。

【0050】

特定の実施形態では、血液試料は抗凝固剤によって処置される。特定の実施形態では、抗凝固剤はＥＤＴＡ、クエン酸ナトリウム、又はヘパリンである。

【0051】

特定の態様では、本発明は、ＣＯＶＩＤ－１９と診断された対象が血栓性凝固障害のリスクを有するかどうかを決定するための、キットを提供し、キットは：（ｉ）ＶＷＦタンパク質の血漿レベル、ＶＷＦの活性レベル、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体の血漿レベル、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の血漿レベル、ＡＤＡＭＴＳ１３の活性レベルのうちの１つ又は複数を決定するための、１つ又は複数の試薬；（ｉｉ）任意選択で、包装及び／又は使用説明書；並びに（ｉｉｉ）任意選択で、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２を検出するため又はＣＯＶＩＤ－１９を診断するための１つ又は複数の試薬を含む。

【図面の簡単な説明】

【0052】

【図1A】図１Ａ～１Ｃは、野生型ＡＤＡＭＴＳ１３（配列番号１）とＡＤＡＭＴＳ１３ Ｑ９７Ｒバリアント（配列番号２）との間のアラインメントを示す。

【図1B】図１Ａの続きである。

【図1C】図１Ｂの続きである。

【図2A】図２Ａは：ＶＷＦ：ＵＨＭＶＷ；ＶＷＦ：Ａｇ；ＶＷＦ：ＣＢ；及びＶＷＦ：ＲＣｏとして測定された、ＣＯＶＩＤ－１９患者からの血漿試料中のＶＷＦのレベルを示す。全ての患者の試料及び対照から得られたアッセイ。ＣＯＶＩＤ－１９患者試料（丸）；急性期ＴＴＰ対照（三角）；正常血漿対照（四角）；灰色のボックスは、過去の健康な対照集団から得られた基準範囲（reference interval）を表す。

【図2B】図２Ｂは、ＥＬＩＳＡ、ＦＲＥＴＳ、及び抗原含有量によって測定された、同じ患者のＡＤＡＭＴＳ１３のレベルを示す。全ての患者の試料及び対照から得られたアッセイ。ＣＯＶＩＤ－１９患者試料（丸）；急性期ＴＴＰ対照（三角）；正常血漿対照（四角）；灰色のボックスは、過去の健康な対照集団から得られた基準範囲を表す。

【図3】図３は、重症のＣＯＶＩＤ－１９の患者からのＶＷＦ多量体の電気泳動分析を示す。ＣＯＶＩＤ－１９の血漿試料（Ｂ１７～Ｂ２５）を、１％のアガロースゲルでの電気泳動によって分離させた。ＶＷＦ多量体を抗ＶＷＦ一次抗体で免疫染色し、続いて二次ヤギ抗ウサギＡＬＰコンジュゲートで免疫染色した後、可視化した。正常対照１－熱処理によるウイルス不活化後の、プールされていた正常な血漿；正常対照２－熱不活化されていない、プールされていた正常な血漿；正常対照３－健康な志願者であるドナーから提供された対照血漿；急性ＴＴＰ対照－急性自己免疫ＴＴＰの患者からの試料。実線は、ＶＷＦ二量体に対応する、各レーンの最も速く移動するバンドを示す。破線は、最も大きなＶＷＦ多量体を示す、各レーンの染色可能な部分の上限を示す。

【図4A】図４Ａ～４Ｃは、０．５Ｕ／ｍｌ又は１．０Ｕ／ｍｌのｒＡＤＡＭＴＳ１３とＣＯＶＩＤ－１９患者からの血漿とのインキュベーションを、未処置の対象と比較して示す。図４Ａにグラフで示されているデータについて、代表的な重症のＣＯＶＩＤ－１９患者Ｓ１２からの血漿（ＶＷＦ／ＡＤＡＭＴＳ１３比７．４）を、０．５ＩＵ／ｍＬ（三角）若しくは１ＩＵ／ｍＬ（四角）のｒＡＤＡＭＴＳ１３と共に、又はＡＤＡＭＴＳ１３を用いずに（ひし形）、インキュベートした。ｒＡＤＡＭＴＳ１３の添加直後、並びに２時間及び５時間後に小口試料を採取し、コラーゲン結合アッセイでＶＷＦ活性に関して分析した。

【図4B】図４Ｂは、図４Ａのようにラベリングされた１０人の重症のＣＯＶＩＤ－１９患者からの血漿試料からの、プールＶＷＦ：ＣＢの絶対値の結果を示す。

【図4C】図４Ｃは、図４ＡのようにラベリングされたプールＶＷＦ：ＣＢＡ値を示すが、値は０時間の時点の値のパーセンテージとして表されている。両方のプールデータについて、ポイントは平均であり、エラーバーは標準偏差である。５時間のインキュベーション後、ＶＷＦ：ＣＢＡはベースライン値と比較して大幅に低下した（Ｐ＜０．００１；ｔ値－７．０４）。

【図5A】図５Ａ～５Ｃは、０．５Ｕ／ｍｌ又は１．０Ｕ／ｍｌのｒＡＤＡＭＴＳ１３と別のＣＯＶＩＤ－１９患者からの血漿とのインキュベーションを、未処置の対象と比較して示す。重症のＣＯＶＩＤ－１９患者Ｂ１からの血漿（ＶＷＦ／ＡＤＡＭＴＳ１３比１３．４）を、１．０ＩＵ／ｍＬ（三角）若しくは１０．０ＩＵ／ｍＬ（四角）のｒＡＤＡＭＴＳ１３と共に、又はＡＤＡＭＴＳ１３を用いずに（ひし形）、インキュベートした。ｒＡＤＡＭＴＳ１３の添加直後、並びに２時間及び５時間後に試料を採取した。図５Ａは、コラーゲン結合アッセイによるＶＷＦ活性を示す。

【図5B】図５Ｂは、この患者におけるＶＷＦ多量体のゲルパターンを示す。図５Ｂは、半自動電気泳動ゲルシステム（Ｓｅｂｉａ）を用いて可視化された多量体組成物を示す。

【図5C】図５Ｃは対応するデンシトグラム（ｄｅｎｓｉｔｏｇｒａｍ）を示し、ＶＷＦ二量体のピークは矢印で示され、高分子量ＶＷＦ多量体は各トレースの右側に示されている。縦軸はゲル染色の強度を任意単位で表す。対照試料は、正常なヒトの血漿、試薬の添加及びインキュベーションを伴わないＢ１血漿、並びにｒＡＤＡＭＴＳ１３を添加しないことを除いて同一条件下でインキュベートされたＢ１血漿である。

【図6】図６は、電気泳動を用いた、患者の血液試料中のＶＷＦ多量体のサイズの代表的な定量的決定を示す。患者からの血漿試料を調整して１ＩＵ／ｍＬ ＶＷＦ：Ａｇとし、１％のアガロースゲル上で分離させた後、免疫染色してデンシトメトリー（ｄｅｎｓｉｔｏｍｅｔｒｙ）に供した。分離ウェルの最上部と、分子量が最も小さい多量体のバンド（ＶＷＦ二量体）との間の距離に、１．０の移動値を割り当てた。この例では、最大のＶＷＦ多量体の相対移動距離（Ｒｆ）は、分子量が最も小さい多量体のバンドの０．１９２倍であった。従って、より大きなＶＷＦ多量体によって占められるＶＷＦ二量体のバンドの総移動距離の割合は１－Ｒｆであり、この例では１．０００－０．１９２＝０．８０８として算出される。同一のゲル上で分離される正常な血漿の１－Ｒｆの値は、０．７２９であった（図示せず）。従って、ＶＷＦ多量体を含む患者試料レーンの割合（ＵＨＭＷ多量体の定量パラメータ）は、レーンの最上部付近のＵＨＭＷ多量体を反映した対照の１１１％（０．８０８／０．７２９＊１００＝１１１％）である。

【図7】図７は、ＣＯＶＩＤ－１９患者（Ｂ２４）、急性自己免疫性ＴＴＰの患者、プールされていた正常血漿試料に関する、試料レーンの代表的なデンシトメトリー走査を示す。ＣＯＶＩＤ－１９患者は、正常な対照より大きいものの急性ＴＴＰの患者より小さな多量体を有していた。ｘ軸は、分離ゲルの上端（０．０と指定）から、１．０と指定されている、ＶＷＦ二量体に対応する最低分子量のバンドまでの距離を、任意単位で表す。ｙ軸は光学密度である。

【図8A】図８Ａ～８Ｂは、重症のＣＯＶＩＤ－１９の患者からのＶＷＦ多量体の電気泳動パターンを示す。図８Ａは、半自動電気泳動システムを示す。９人のＣＯＶＩＤ－１９の患者の血漿試料を、ＨＹＤＲＡＧＥＬフォン・ヴィレブランド因子多量体キット及びＨＹＤＲＡＳＹＳ ２機器を用いた半自動電気泳動によって、分離させた。各試料を調整して１ｍＬあたり１ＩＵ ＶＷＦ：Ａｇとし、分離させて、複数の多量体について並行して染色した。急性ＴＴＰの患者及び健康な志願者からの対照試料を、同じゲルにアプライした。破線は、正常ヒト血漿対照の、最も大きな染色可能部分を示す。サイズが異なる超高分子量多量体の移動距離は、ホームキャスト低解像度ゲルの場合ほど顕著ではなかった。これにより、デンシトメトリーによる再現性のある定量化は妨げられたものの、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体は点線より上の異常な免疫染色材料として明確に現れていた。

【図8B】図８Ｂは、ホームキャスト低解像度ゲルを示す。患者試料及び対照を、ホームキャスト低解像度１％アガロースゲル上で分離させ、デンシトメトリーで定量化して、「方法」のセクションで説明されているように、正常な血漿と比較したＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体の含有量を決定した。ここで示されている電気泳動レーンは、全ての試料を同じゲル上で分離させたＡとは対照的に、異なるゲル上で実施されているため、直接比較することはできない。垂直線は、どの試料が互いに隣り合った状態で分離されたかを示す。調整されて１ｍＬあたり１ＩＵ ＶＷＦ：ＡｇとなったＣＯＶＩＤ－１９患者の血漿を分離させ、急性ＴＴＰ対照及び正常対照と並行して、多量体について染色した。

【図9A】図９Ａは、低解像度ゲルを用いた、ＡＤＡＭＴＳ１３と重症ＣＯＶＩＤ－１９血漿のインキュベーション時の電気泳動ＶＷＦ多量体パターンを示す。

【図9B】図９Ｂは、高解像度ゲルを用いた、ＡＤＡＭＴＳ１３と重症ＣＯＶＩＤ－１９血漿とのインキュベーション時の電気泳動ＶＷＦ多量体パターンを示す。

【図10A】図１０Ａは、ＣＯＶＩＤ－１９試料における、フォン・ヴィレブランド因子の検査パラメータとＡＤＡＭＴＳ１３との関係を示す。図１０Ａは、ピアソン試験を用いた相関分析からの最適な当てはめの線を示す検査パラメータとの間の関係のグラフを示す。相関は、強（ｒ：０．７～１．０）、中程度（ｒ：０．５～０．７）、弱い（ｒ：０．３～０．５）、又は相関なし（０～０．３）として分類された。

【図10B】図１０Ｂは、ＣＯＶＩＤ－１９試料における、フォン・ヴィレブランド因子の検査パラメータとＡＤＡＭＴＳ１３との関係を示す。図１０Ｂは、ピアソン試験を用いた相関分析からの最適な当てはめの線を示す検査パラメータとの間の関係のグラフを示す。相関は、強（ｒ：０．７～１．０）、中程度（ｒ：０．５～０．７）、弱い（ｒ：０．３～０．５）、又は相関なし（０～０．３）として分類された。

【図10C】図１０Ｃは、ＣＯＶＩＤ－１９試料における、フォン・ヴィレブランド因子の検査パラメータとＡＤＡＭＴＳ１３との関係を示す。図１０Ｃは、ピアソン試験を用いた相関分析からの最適な当てはめの線を示す検査パラメータとの間の関係のグラフを示す。相関は、強（ｒ：０．７～１．０）、中程度（ｒ：０．５～０．７）、弱い（ｒ：０．３～０．５）、又は相関なし（０～０．３）として分類された。

【図10D】図１０Ｄは、ＣＯＶＩＤ－１９試料における、フォン・ヴィレブランド因子の検査パラメータとＡＤＡＭＴＳ１３との関係を示す。図１０Ｄは、ピアソン試験を用いた相関分析からの最適な当てはめの線を示す検査パラメータとの間の関係のグラフを示す。相関は、強（ｒ：０．７～１．０）、中程度（ｒ：０．５～０．７）、弱い（ｒ：０．３～０．５）、又は相関なし（０～０．３）として分類された。

【図11A】図１１Ａは、コラーゲン結合アッセイによって決定された、２つの異なる濃度のｒＡＤＡＭＴＳ１３と１０個の重症ＣＯＶＩＤ－１９血漿試料それぞれとのインキュベーション（二重）を、未処理の対照と比較して、インキュベーション時間（時間）にわたって示す。血漿を、０．５ＩＵ／ｍＬ（三角）若しくは１ＩＵ／ｍＬ（四角）のｒＡＤＡＭＴＳ１３と共に、又はＡＤＡＭＴＳ１３を用いずに（ひし形）、インキュベートした。

【図11B】図１１Ｂは、コラーゲン結合アッセイによって決定された、２つの異なる濃度のｒＡＤＡＭＴＳ１３と１０個の重症ＣＯＶＩＤ－１９血漿試料それぞれとのインキュベーション（二重）を、未処理の対照と比較して、インキュベーション時間（時間）にわたって示す。血漿を、０．５ＩＵ／ｍＬ（三角）若しくは１ＩＵ／ｍＬ（四角）のｒＡＤＡＭＴＳ１３と共に、又はＡＤＡＭＴＳ１３を用いずに（ひし形）、インキュベートした。

【図11C】図１１Ｃは、コラーゲン結合アッセイによって決定された、２つの異なる濃度のｒＡＤＡＭＴＳ１３と１０個の重症ＣＯＶＩＤ－１９血漿試料それぞれとのインキュベーション（二重）を、未処理の対照と比較して、インキュベーション時間（時間）にわたって示す。血漿を、０．５ＩＵ／ｍＬ（三角）若しくは１ＩＵ／ｍＬ（四角）のｒＡＤＡＭＴＳ１３と共に、又はＡＤＡＭＴＳ１３を用いずに（ひし形）、インキュベートした。

【図11D】図１１Ｄは、コラーゲン結合アッセイによって決定された、２つの異なる濃度のｒＡＤＡＭＴＳ１３と１０個の重症ＣＯＶＩＤ－１９血漿試料それぞれとのインキュベーション（二重）を、未処理の対照と比較して、インキュベーション時間（時間）にわたって示す。血漿を、０．５ＩＵ／ｍＬ（三角）若しくは１ＩＵ／ｍＬ（四角）のｒＡＤＡＭＴＳ１３と共に、又はＡＤＡＭＴＳ１３を用いずに（ひし形）、インキュベートした。

【図11E】図１１Ｅは、コラーゲン結合アッセイによって決定された、２つの異なる濃度のｒＡＤＡＭＴＳ１３と１０個の重症ＣＯＶＩＤ－１９血漿試料それぞれとのインキュベーション（二重）を、未処理の対照と比較して、インキュベーション時間（時間）にわたって示す。血漿を、０．５ＩＵ／ｍＬ（三角）若しくは１ＩＵ／ｍＬ（四角）のｒＡＤＡＭＴＳ１３と共に、又はＡＤＡＭＴＳ１３を用いずに（ひし形）、インキュベートした。

【図11F】図１１Ｆは、コラーゲン結合アッセイによって決定された、２つの異なる濃度のｒＡＤＡＭＴＳ１３と１０個の重症ＣＯＶＩＤ－１９血漿試料それぞれとのインキュベーション（二重）を、未処理の対照と比較して、インキュベーション時間（時間）にわたって示す。血漿を、０．５ＩＵ／ｍＬ（三角）若しくは１ＩＵ／ｍＬ（四角）のｒＡＤＡＭＴＳ１３と共に、又はＡＤＡＭＴＳ１３を用いずに（ひし形）、インキュベートした。

【図11G】図１１Ｇは、コラーゲン結合アッセイによって決定された、２つの異なる濃度のｒＡＤＡＭＴＳ１３と１０個の重症ＣＯＶＩＤ－１９血漿試料それぞれとのインキュベーション（二重）を、未処理の対照と比較して、インキュベーション時間（時間）にわたって示す。血漿を、０．５ＩＵ／ｍＬ（三角）若しくは１ＩＵ／ｍＬ（四角）のｒＡＤＡＭＴＳ１３と共に、又はＡＤＡＭＴＳ１３を用いずに（ひし形）、インキュベートした。

【図11H】図１１Ｈは、コラーゲン結合アッセイによって決定された、２つの異なる濃度のｒＡＤＡＭＴＳ１３と１０個の重症ＣＯＶＩＤ－１９血漿試料それぞれとのインキュベーション（二重）を、未処理の対照と比較して、インキュベーション時間（時間）にわたって示す。血漿を、０．５ＩＵ／ｍＬ（三角）若しくは１ＩＵ／ｍＬ（四角）のｒＡＤＡＭＴＳ１３と共に、又はＡＤＡＭＴＳ１３を用いずに（ひし形）、インキュベートした。

【図11I】図１１Ｉは、コラーゲン結合アッセイによって決定された、２つの異なる濃度のｒＡＤＡＭＴＳ１３と１０個の重症ＣＯＶＩＤ－１９血漿試料それぞれとのインキュベーション（二重）を、未処理の対照と比較して、インキュベーション時間（時間）にわたって示す。血漿を、０．５ＩＵ／ｍＬ（三角）若しくは１ＩＵ／ｍＬ（四角）のｒＡＤＡＭＴＳ１３と共に、又はＡＤＡＭＴＳ１３を用いずに（ひし形）、インキュベートした。

【図11J】図１１Ｊは、コラーゲン結合アッセイによって決定された、２つの異なる濃度のｒＡＤＡＭＴＳ１３と１０個の重症ＣＯＶＩＤ－１９血漿試料それぞれとのインキュベーション（二重）を、未処理の対照と比較して、インキュベーション時間（時間）にわたって示す。血漿を、０．５ＩＵ／ｍＬ（三角）若しくは１ＩＵ／ｍＬ（四角）のｒＡＤＡＭＴＳ１３と共に、又はＡＤＡＭＴＳ１３を用いずに（ひし形）、インキュベートした。

【図12A】図１２Ａは、１ＩＵ／ｍＬのＡＤＡＭＴＳ１３と共に０時間及び５時間インキュベートした後の、８個の重症ＣＯＶＩＤ－１９血漿試料の電気泳動ＶＷＦ多量体分析を示す。

【図12B】図１２Ｂは、１ＩＵ／ｍＬのＡＤＡＭＴＳ１３と共に０時間及び５時間インキュベートした後の、８個の重症ＣＯＶＩＤ－１９血漿試料の電気泳動ＶＷＦ多量体分析を示す。

【図12C】図１２Ｃは、１ＩＵ／ｍＬのＡＤＡＭＴＳ１３と共に０時間、２時間、及び５時間インキュベートした後の、８個の重症ＣＯＶＩＤ－１９血漿試料の電気泳動ＶＷＦ多量体分析を示す。

【図13A】図１３Ａ～１３Ｃは、野生型ＡＤＡＭＴＳ１３（配列番号１）と野生型ゴリラＡＤＡＭＴＳ１３（配列番号３）との間のアラインメントを示す。

【図13B】図１３Ａの続きである。

【図13C】図１３Ｂの続きである。

【発明を実施するための形態】

【0053】

本明細書で提供されるのは、コロナウイルス感染に冒された対象、例えばＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスに感染して、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ２感染又はＣＯＶＩＤ－１９の１つ又は複数の兆候又は症状を示す対象を治療するための方法である。より詳細には、本発明者らは、治療有効量のＡＤＡＭＴＳ１３（Ａ Ｄｉｓｉｎｔｅｇｒｉｎ－ｌｉｋｅ Ａｎｄ Ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅａｓｅ ｗｉｔｈ Ｔｈｒｏｍｂｏｓｐｏｎｄｉｎ ｔｙｐｅ Ｉ ｍｏｔｉｆ Ｎｏ． １３：トロンボスポンジンＩ型モチーフ第１３番を有するディスインテグリン様及びメタロプロテアーゼ）が、ＣＯＶＩＤ－１９の１つ又は複数の症状、リスク、又は合併症の治療として有用であることを発見した。これらは、限定するものではないが例えば、貧血性若しくは出血性梗塞、静脈若しくは動脈血栓症、凝血障害、肺塞栓症、深部静脈血栓症（ＤＶＴ）、高レベルのフォン・ヴィレブランド因子（ＶＷＦ）、サイトカインストーム、又は本明細書に記載の合併症若しくは危険因子を含む。ＡＤＡＭＴＳ１３は有利なことに、その効果を用量依存的に発揮する。組成物は、治療有効量の単離又は組換え（ＡＤＡＭＴＳ１３）タンパク質を含む。方法は、治療有効量の単離又は組換えＡＤＡＭＴＳ１３を対象に投与するステップを含み、特定の時点に特定の投薬量を提供する実施形態を含む。

【0054】

ＡＤＡＭＴＳ１３は、ＡＤＡＭＴＳタンパク質ファミリーのメンバーであり、これには、亜鉛依存性触媒ドメイン、システインリッチドメイン、ディスインテグリン様ドメイン、及び少なくとも１つ、ほとんどの場合複数の、トロンボスポンジンＩ型リピートを含む、多数の保存ドメインを含有するメタロプロテイナーゼが含まれる。Nicholson et al., BMC Evol Biol. 2005 Feb 4;5(1):11を参照。これらのタンパク質は、メタロプロテイナーゼのＡＤＡＭ及びＭＭＰファミリーに進化的に関連している（Jones GC, Curr Pharm Biotechnol. 2006 Feb;7(1):25-31）。これらは、血栓性血小板減少性紫斑病（ＴＴＰ）（Moake JL, Semin Hematol. 2004 Jan;41(1):4-14）、結合組織障害、癌、炎症（Nicholson et al.）、及び重症熱帯熱マラリア原虫（Larkin et al., PLoS Pathog. 2009 Mar;5(3):e1000349）を含む、多数の疾患又は状態に関連する分泌酵素である。このような関連から、ＡＤＡＭＴＳ酵素は多数の病状の潜在的な治療標的として認識されてきた（Jones GC, Curr Pharm Biotechnol. 2006 Feb;7(1):25-31）。ＡＤＡＭＴＳ１３活性の喪失は、ＴＴＰ（Moake JL, Semin Hematol. 2004 Jan;41(1):4-14）、急性及び慢性炎症（Chauhan et al., J Exp Med. 2008 Sep 1;205(9):2065-74）、並びに重症熱帯熱マラリア原虫（Larkin et al., PLoS Pathog. 2009 Mar;5(3):e1000349）といった、多数の状態に関連している。

【0055】

ＡＤＡＭＴＳ１３プロテアーゼは、主に肝臓で産生される１９０ｋＤａのグリコシル化タンパク質である（Levy G G, et al., Nature. 2001; 413:488-494; Fujikawa K, et al., Blood. 2001; 98:1662-1666; Zheng X, et al., J Biol Chem. 2001; 276:41059-41063; Soejima K, et al., J Biochem (Tokyo). 2001; 130:475-480; Gerritsen H E et al., Blood. 2001; 98:1654-1661、各文献は、あらゆる目的のために、その全体が参照により本出願に援用される）。ＡＤＡＭＴＳ１３は、Ｎ末端プロペプチドを有する前駆体として発現される。成熟ＡＤＡＭＴＳ１３は、メタロプロテアーゼ（Ｍ）ドメイン、ディスインテグリン様（Ｄ）ドメイン、トロンボスポンジン１型（Ｔ）リピート、システインリッチ（Ｃ）ドメイン、及びスペーサー（Ｓ）ドメインを含み、その後に、図４に示されているように７個の連続したＴＳＰ１リピート（Ｔ２～Ｔ８）及び２個のＣＵＢドメインが続く。様々なドメインの構造情報がＡＤＡＭＴＳファミリータンパク質について報告されており、これにはヒトＡＤＡＭＴＳ１３ ＤＴＣＳ（残基２８７～６８５）の構造（Akiyama M., Takeda S., Kokame K., Takagi J., Miyata T. 2009 Crystal structures of the noncatalytic domains of ADAMTS13 reveal multiple discontinuous exosites for von Willebrand factor, Proceedings of the National Academy of Sciences 106: 19274-19279、これら文献は、あらゆる目的のために、その全体が参照により本出願に援用される）が含まれる。構造分析により、ＡＤＡＭＴＳファミリーのメンバーが、ＭＤＴＣＳドメインの配列保存及び構造的類似性を共有していることが示されている（Akiyama et al., 2009 supra; Mosyak L., Georgiadis K., Shane T., Svenson K. et al. 2008 Crystal structures of the two major aggrecan degrading enzymes, ADAMTS4 and ADAMTS5, Protein Science 17: 16-21、各文献は、あらゆる目的のために、その全体が参照により本出願に援用される）。

【0056】

巨核球及び内皮細胞で合成されたＶＷＦは、それぞれ血小板顆粒及びワイベル・パラーデ小体中に、超大型ＶＷＦ多量体（ＵＨＭＷ、又はＵＬ－ｖＷＦ）として保存される。Moake et al., N Engl J Med. 1982; 307:1432-1435; Wagner et al., J Cell Biol. 1982; 95:355-360; Wagner et al., Mayo Clin Proc. 1991; 66:621-627; Sporn et al., Blood. 1987; 69:1531-1534; Tsai et al., Biochem Biophys Res Commun. 1989; 158:980-985; Tsai et al., Blood. 1989; 73:2074-2076を参照。これらのＵＬ－ｖＷＦ多量体は、内皮細胞から分泌されると、循環中のＡＤＡＭＴＳ１３によって、ｖＷＦ分子内の特定の切断部位において、より小さな一連の多量体へと切断される。Tsai et al., Biochem Biophys Res Commun. 1989; 158:980-985; Dent et al., J Clin Invest, 1991; 88:774-782; Furlan et al., Proc Natl Acad Sci USA. 1993; 90:7503-7507を参照。

【0057】

ＡＤＡＭＴＳ１３は、成熟ｖＷＦサブユニットの中央のＡ２ドメインのＴｙｒ８４２－Ｍｅｔ８４３結合を切断し、活性のために亜鉛又はカルシウムを必要とする。Dent et al., Proc Natl Acad Sci USA, 1990; 87:6306-6310を参照。ＡＤＡＭＴＳ１３のＶＷＦタンパク質分解活性は、２価カチオンに強く依存し、これは、このＡＤＡＭＴＳファミリーの他のメタロプロテアーゼドメインでも観察されている（Zheng et al., 2001 supra; Gardner M.D., Chion C.K., de Groot R., Shah A., Crawley J.T. et al. 2009 A functional calcium-binding site in the metalloprotease domain of ADAMTS13, Blood 113: 1149-1157、これら文献は、あらゆる目的のために、その全体が参照により本出願に援用される）。更にＡＤＡＭＴＳ１３活性は、ＶＷＦへの結合、及びＮ末端ＭＤＴＣＳとＣ末端ＣＵＢドメインとの間の相互作用による、アロステリック調節を受ける（Muia J., Zhu J., Gupta G., Haberichter S.L., Friedman K.D. et al. 2014 Allosteric activation of ADAMTS13 by von Willebrand factor, Proceedings of the National Academy of Sciences 111: 18584-18589; South K., Luken B.M., Crawley J.T.B., Phillips R., Thomas M., et al. 2014 Conformational activation of ADAMTS13, Proceedings of the National Academy of Sciences 111: 18578-18583、各文献は、あらゆる目的のために、その全体が参照により本出願に援用される）。

【0058】

ＣＯＶＩＤ－１９によって誘発される、超生理学的レベルのＶＷＦの発生は、基質過負荷によってＡＤＡＭＴＳ１３を消費する可能性があり、その結果、天然循環ＡＤＡＭＴＳ１３の活性レベルが臨海閾値未満に低下する可能性がある。外因性単離又は組換えＡＤＡＭＴＳ１３の投与はこの力学に対抗して、ＡＤＡＭＴＳ１３とＶＷＦとのバランスを回復させ、ＶＷＦ、特に超大型ＶＷＦタンパク質のレベル又は濃度を治療的に低下させることができる。このようにして、ＡＤＡＭＴＳ１３は血小板に対するＶＷＦの粘着性を低下させ、血小板血栓の形成を回避若しくは低減するか、又は形成される可能性がある若しくは形成されている可能性がある血栓の溶解、除去若しくは緩和に寄与する。治療有効量のＡＤＡＭＴＳ１３の投与は、ＣＯＶＩＤ－１９対象の凝血障害、血栓症、塞栓症、並びに他の合併症及び危険因子を低減又は排除できる。特定の実施形態では、障害は、血流中のＶＷＦのレベルの上昇を特徴とする。特定の実施形態では、血栓症は深部静脈血栓症（ＤＶＴ）である。特定の実施形態では、塞栓症は肺塞栓症である。特定の実施形態では、本発明によるＡＤＡＭＴＳ１３療法は、危篤状態の患者の治療を含む、重症又は後期段階のＣＯＶＩＤ－１９の症例に好適である。更にＡＤＡＭＴＳ１３の投与は忍容性が高く、副作用のリスクがほとんどない。

【0059】

Ｉ．定義
本明細書中で使用される場合、「ＡＤＡＭＴＳ１３」又は「Ａ１３」は、ＡＤＡＭＴＳ（トロンボスポンジンＩ型モチーフを有するディスインテグリン及びメタロプロテイナーゼ）ファミリーのメタロプロテアーゼ、即ち１３番を指し、これは、残基Ｔｙｒ１６０５と残基Ｍｅｔ１６０６との間のフォン・ヴィレブランド因子（ＶＷＦ）を切断する。本発明の文脈では、ＡＤＡＭＴＳ１３は、いずれのＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質、例えば霊長類、ヒト（ＮＰ＿６２０５９４）、サル、ウサギ、ブタ、ウシ（ＸＰ＿６１０７８４）、げっ歯類、マウス（ＮＰ＿００１００１３２２）、ラット（ＸＰ＿３４２３９６）、ハムスター、アレチネズミ、イヌ、ネコといった哺乳類、カエル（ＮＰ＿００１０８３３３１）、ニワトリ（ＸＰ＿４１５４３５）からのＡＤＡＭＴＳ１３、及び生物学的に活性を有するその誘導体又は断片を包含する。本明細書中で使用される場合、「ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質（ＡＤＡＭＴＳ１３ ｐｒｏｔｅｉｎ）」は、組換え及び単離若しくは血漿由来ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質、バリアント、又はその誘導体若しくは断片を指す。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３は、米国特許出願公開第２０１２／０２２９４５５号に記載されているような野生型ヒトＡＤＡＭＴＳ１３（ｈＡＤＡＭＴＳ１３）又はその断片であり、その文献は、あらゆる目的のために参照により本出願に援用される。特定の実施形態では、ｈＡＤＡＭＴＳ１３のアミノ酸配列は、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号ＮＰ＿６２０５９４のものである。特定の実施形態では、ｈＡＤＡＭＴＳ１３は、配列番号１、配列番号２、又はこれらの組み合わせ若しくは混合である。活性を有する変異体及びバリアントＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質も、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の機能性断片及び融合タンパク質と同様に包含される。更に本発明のＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質は、精製、検出、又はこれら両方を促進するタグを含んでよい。本明細書に記載のＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質は更に、治療用部分、又はインビトロ若しくはインビボでの撮像に好適な部分で修飾されていてよい。

【0060】

用語「ＡＤＡＭＴＳ１３バリアント（ＡＤＡＭＴＳ１３ ｖａｒｉａｎｔ）」は、場合によって程度は様々であるものの、野生型分子（例えば配列番号１）と構造が略同様であり、かつ同一の生物活性を有する、ポリペプチドを指す。バリアントは、バリアントが由来する野生型ポリペプチドと比較して、そのアミノ酸配列の組成が異なっており、これは（ｉ）ポリペプチド（上述の断片を含む）の１つ又は複数の末端及び／若しくは野生型ポリペプチド配列の１つ又は複数の内部領域における、１つ又は複数のアミノ酸残基の欠失、（ｉｉ）ポリペプチドの１つ又は複数の末端（典型的には「付加」バリアント）及び／若しくは野生型ポリペプチド配列の１つ又は複数の内部領域（典型的には「挿入」バリアント）における、１つ又は複数のアミノ酸の挿入若しくは付加、又は（ｉｉｉ）野生型ポリペプチド配列中の１つ又は複数のアミノ酸の、他のアミノ酸による置換を伴う、１つ又は複数の変異に基づく。置換は、置き換えられるアミノ酸と、このアミノ酸を置き換えるアミノ酸との、物理化学的又は機能的関連性に基づいて、保存的又は非保存的である。バリアントは、ペプチド配列内の１つ又は複数のアミノ酸の、１つ又は複数の類似若しくは相同アミノ酸又は１つ又は複数の非類似アミノ酸による置き換えを含む。アミノ酸を類似又は相同アミノ酸としてランク付けできる尺度は多数存在する（あらゆる目的のために、参照により本出願に援用される、Gunnar von Heijne, Sequence Analysis in Molecular Biology, p. 123-39, Academic Press, New York, N.Y. 1987）。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３バリアントは配列番号２である。用語「バリアント（ｖａｒｉａｎｔ）」は、態様によっては用語「変異体（ｍｕｔａｎｔ）」と交換可能なものとして使用される。

【0061】

ヒトＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質としては、限定するものではないが、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号ＮＰ６２０５９４のアミノ酸を含むポリペプチド、又はその加工済みポリペプチド、例えばシグナルペプチド（アミノ酸１～２９）及び／若しくはプロペプチド（アミノ酸３０～７４）が除去されたポリペプチドが挙げられる。ヒトＡＤＡＭＴＳ１３の多数の天然バリアントが当該技術分野で公知であり、これは本発明の組成物によって包含され、その一部としては、Ｒ^７Ｗ、Ｖ^８８Ｍ、Ｈ^９６Ｄ、Ｒ^１０２Ｃ、Ｒ^１９３Ｗ、Ｔ^１９６Ｉ、Ｈ^２３４Ｑ、Ａ^２５０Ｖ、Ｒ^２６８Ｐ、Ｗ^３９０Ｃ、Ｒ^３９８Ｈ、Ｑ^４４８Ｅ、Ｑ^４５６Ｈ、Ｐ^４５７Ｌ、Ｐ^４７５Ｓ、Ｃ^５０８Ｙ、Ｒ^５２８Ｇ、Ｐ^６１８Ａ、Ｒ^６２５Ｈ、Ｉ^６７３Ｆ、Ｒ^６９２Ｃ、Ａ^７３２Ｖ、Ｅ^７４０Ｋ、Ａ^９００Ｖ、Ｓ^９０３Ｌ、Ｃ^９０８Ｙ、Ｃ^９５１Ｇ、Ｇ^９８２Ｒ、Ｃ^１０２４Ｇ、Ａ^１０３３Ｔ、Ｒ^１０９５Ｗ、Ｒ^１０９５Ｗ、Ｒ^１１２３Ｃ、Ｃ^１２１３Ｙ、Ｔ^１２２６１、Ｇ^１２３９Ｖ、及びＲ^１３３６Ｗから選択される変異が挙げられる。更に、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質としては、例えば非必須アミノ酸における１つ又は複数の保存的変異によって変異した、天然タンパク質及び組換えタンパク質が挙げられる。好ましくは、ＡＤＡＭＴＳ１３の酵素活性に必須のアミノ酸は変異させない。アミノ酸としては例えば、残基８３、１７３、２２４、２２８、２３４、２８１、及び２８４といった、金属結合に必須であることが知られているか必須であると推定される残基、並びに酵素の活性部位に見られる残基、例えば残基２２５が挙げられる。同様に、本発明の文脈では、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質は別のアイソフォーム、例えば全長ヒトタンパク質のアミノ酸２７５～３０５及び／又は１１３５～１１９０を欠いたアイソフォームを含む。

【0062】

ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質は、例えば翻訳後修飾（例えばヒト残基１４２、１４６、５５２、５７９、６１４、６６７、７０７、８２８、１２３５、１３５４から選択される１つ又は複数のアミノ酸、若しくは他のいずれの天然の若しくは改変された修飾部位におけるグリコシル化）によって、又はグリコシル化、水溶性ポリマーによる修飾（例えばＰＥＧ化、シアリル化、ＨＥＳ化等）、タグ付与等を含むがこれらに限定されないエクスビボでの化学的若しくは酵素的修飾によって、更に修飾されていてよい。

【0063】

本明細書中で使用される場合、用語「グリコシル化された（ｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｅｄ）」又は「ＡＤＡＭＴＳ１３のグリコシル化形態（ｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｅｄ ｆｏｒｍｓ ｏｆ ＡＤＡＭＴＳ１３）」は、炭水化物又はグリカン残基の付加によって翻訳後に修飾されたＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質を指す。２個以上のグリコシル化部位を有するＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質は、各グリコシル化部位に同一のグリカン残基を付着させることができ、又は異なるグリコシル化部位に異なるグリカン残基を付着させることができる。このようにして、異なるパターンのグリカン付着によって、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の異なるグリコフォームを得ることができる。グリコシル化ＡＤＡＭＴＳ１３に見られる主要な糖は、グルコース（Ｇｌｃ）、ガラクトース（Ｇａｌ）、マンノース（Ｍａｎ）、フコース（Ｆｕｃ）、Ｎ－アセチルガラクトサミン（ＧａｌＮＡｃ）、Ｎ－アセチルグルコサミン（ＧｌｃＮＡｃ）、及びシアリル酸（例えばＮ－アセチル－ノイラミン酸（ＮｅｕＡｃ又はＮＡＮＡ））である。ヘキソース（Ｈｅｘ）及びＨｅｘＮＡｃは、それぞれＭａｎ、Ｇｌｃ、及びＧａｌ残基、並びにＧｌｃＮＡｃ及びＧａｌＮＡｃ残基といった単糖の分類を表す総称である。

【0064】

用語「グリコシル化（ｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｉｏｎ）」はＡＤＡＭＴＳ１３糖タンパク質の形成を含み、ここではグリカン残基が、タンパク質のアスパラギン（Ａｓｎ）残基の側鎖に付着する（即ちＮ結合）か、又はセリン（Ｓｅｒ）若しくはトレオニン（Ｔｈｒ）残基の側鎖に付着する（即ちＯ結合）か、又はトリプトファン（Ｔｒｐ）残基の側鎖に付着する（即ちＣ結合及び／若しくはＣ－マンノシル化）。

【0065】

用語「Ｎ－グリコシル化部位（Ｎ－ｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｉｏｎ ｓｉｔｅ）」は、例えばアスパラギン残基のアミド窒素である窒素原子を有するアミノ酸残基を含む、いずれのアミノ酸配列を指す。糖タンパク質に付着するＮ－グリカンは、「トリマンノース」（Ｍａｎ_３）成分及び「キオビトース」（ＧｌｃＮＡｃ_２）成分を含有する一般的なコア五糖類：Ｍａｎ_３ＧｌｃＮＡｃ_２に付加される周囲の糖（例えばＧｌｃＮＡｃ、Ｇａｌ、Ｆｕｃ、及びＮｅｕＡｃ）で構成される分岐（アンテナ）の数に関して、異なっている。Ｎ－グリカンは一般に、その分岐構成要素に応じて分類される（例えば高マンノース型、混成型、又は複合型）。「高マンノース（ｈｉｇｈ－ｍａｎｎｏｓｅ）」型Ｎ－グリカンは、非置換末端マンノース糖を含有する。これらのグリカンは典型的には、キオビトースコアに付着した５～９個のマンノース残基を含有する。「混成（ｈｙｂｒｉｄ）」型Ｎ－グリカンは、ＧｌｃＮＡｃ結合を伴う、非置換末端マンノース残基及び置換マンノース残基の両方を含有できる。「複合（ｃｏｍｐｌｅｘ）」型Ｎ－グリカンは典型的には、トリマンノースコアのα１，３マンノースアームに付着した少なくとも１つのＧｌｃＮＡｃ、及びα１，６マンノースアームに付着した少なくとも１つのＧｌｃＮＡｃを有する。複合型Ｎ－グリカンは、任意選択でＮｅｕＡｃ残基で修飾された、Ｇａｌ又はＧａｌＮＡｃ糖残基を有する場合もある。複合型Ｎ－グリカンはまた、「二等分（ｂｉｓｅｃｔｉｎｇ）」ＧｌｃＮＡｃ及びコアＦｕｃ残基を含む、鎖内置換を有してもよい。複合型Ｎ－グリカンはまた、トリマンノースコア上に複数のアンテナを有してもよく、これは「多アンテナグリカン（ｍｕｌｔｉｐｌｅ ａｎｔｅｎｎａｒｙ ｇｌｙｃａｎ）」と呼ばれることが多い。

【0066】

「Ｏ－結合グリコシル化（Ｏ－ｌｉｎｋｅｄ ｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｉｏｎ）」は、炭水化物残基（例えばＧａｌＮＡｃ、Ｇａｌ）がヒドロキシルアミノ酸、例えばセリン又はトレオニンに付加される、グリコシル化の形態を指す。Ｏ－結合グリカンは一般にＯ－フコシル化を含み、これは二糖類Ｆｕｃ－Ｇｌｃ、又はＨｅｘＮＡｃ－Ｈｅｘ－ＮｅｕＡｃ_０－２を含有するムチン型構造を有する。用語「Ｏ－グリコシル化部位（Ｏ－ｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｉｏｎ ｓｉｔｅ）」は、ヒドロキシル基を有するアミノ酸残基（例えばセリン、トレオニン、又はチロシン側鎖）を含むいずれのアミノ酸配列を指す。

【0067】

「Ｃ－結合グリコシル化（Ｃ－ｌｉｎｋｅｄ ｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｉｏｎ）」は、炭水化物残基（例えばＭａｎ）がトリプトファン側鎖の炭素に付加される、グリコシル化の形態を指す。用語「Ｃ－グリコシル化部位（Ｃ－ｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｉｏｎ ｓｉｔｅ）」又は「Ｃ－マンノシル化部位（Ｃ－ｍａｎｎｏｓｙｌａｔｉｏｎ ｓｉｔｅ）」は、炭素原子、例えばトリプトファン側鎖上の炭素原子を有するアミノ酸残基を含む、いずれのアミノ酸配列を指す。

【0068】

本明細書中で使用される場合、用語「糖類似度指数（ｇｌｙｃｏｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ ｉｎｄｅｘ）」、又は「グリカン指数（ｇｌｙｃａｎ ｉｎｄｅｘ）」、又は「Ｎ－グリカン指数（Ｎ－ｇｌｙｃａｎ ｉｎｄｅｘ）」は、所与の標的プロファイルと比較した、参照グリコシル化プロファイルの適合度を指す。

【0069】

本明細書中で使用される場合、ＡＤＡＭＴＳ１３の「生物活性を有する誘導体（ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｌｙ ａｃｔｉｖｅ ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅ）」又は「生物活性を有するバリアント（ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｌｙ ａｃｔｉｖｅ ｖａｒｉａｎｔ）」は、ＡＤＡＭＴＳ１３と略同一の生物学的機能を有するいずれのポリペプチドを指す。生物活性を有する誘導体のポリペプチド配列は、１つ又は複数のアミノ酸の、欠失、付加、及び／又は置換を含んでよいが、ここで各場合について、１つ又は複数のアミノ酸は、その不在、存在、及び／又は置換がポリペプチドの生物活性に悪影響を実質的に全く与えないものである。ポリペプチドの生物活性は例えば、内皮への血小板の付着の減少若しくは遅延、血小板凝集の減少若しくは遅延、血小板ストリングの形成の減少若しくは遅延、血栓の形成の減少若しくは遅延、血栓の成長の減少若しくは遅延、血管閉塞の減少若しくは遅延、ＶＷＦのタンパク質分解的な切断、血栓の分解、又は例えばＦＲＥＴＳ－ＶＷＦ７３ペプチドであるペプチド基質の切断によって、測定できる。Kokame et al., Br J Haematol. 2005 Apr;129(1):93－100)、又はそのいずれのバリアントを参照。Tripodi, et al., J.Thromb Haemost 2004 v2 p1601-9; Tripodi, et. al., J Thromb Haemost. 2008 September; 6(9): 1534-1541（各文献は、あらゆる目的のために参照により援用される）も参照。

【0070】

更に、用語「ＡＤＡＭＴＳ１３」、並びにその「生物活性を有するバリアント」及び「生物活性を有する誘導体」は、組換えＤＮＡ技術によって得られるポリペプチドを含む。組換えＡＤＡＭＴＳ１３（「ｒＡＤＡＭＴＳ１３」）、例えば組換えヒトＡＤＡＭＴＳ１３（「ｒ－ｈｕ－ＡＤＡＭＴＳ１３」）は、当該技術分野で公知のいずれかの方法で製造できる。１つの具体例が国際公開第０２／４２４４１号で開示されており、この文献は、組換えＡＤＡＭＴＳ１３の製造方法に関して、参照により本出願に援用される。これは：（ｉ）遺伝子改変による、例えばＲＮＡの逆転写及び／又はＤＮＡの増幅による、組換えＤＮＡの製造；（ｉｉ）トランスフェクションによる、即ち電気穿孔又はマイクロインジェクションによる、原核細胞又は真核細胞への組換えＤＮＡの導入；（ｉｉｉ）例えば連続的な様式又はバッチ方式での、形質転換細胞の培養；（ｉｖ）例えば構成的な又は誘導路の、ＡＤＡＭＴＳ１３の発現；並びに（ｖ）例えば培養培地からの、又は形質転換細胞の採取による、ＡＤＡＭＴＳ１３の単離、そして以上による（ｖｉ）例えば陰イオン交換クロマトグラフィ又はアフィニティクロマトグラフィによる、実質的に精製された組換えＡＤＡＭＴＳ１３の取得のための、当該技術分野で公知のいずれの方法を含んでよい。

【0071】

また、ＡＤＡＭＴＳ１３活性と、例えば野生型ＡＤＡＭＴＳ１３配列、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号ＮＰ＿６２０５９４の配列、又は配列番号１若しくは配列番号２の配列を含む参照ＡＤＡＭＴＳ１３配列に対して少なくとも８０％の同一性、好ましくは８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％の同一性を有するアミノ酸配列とを有する、タンパク質も含まれる。

【0072】

また、例えば特にヒトである哺乳類の循環系におけるＡＤＡＭＴＳ１３の半減期といった生物学的／薬理学的特性の改善のために、免疫グロブリン（Ｉｇ）、例えば抗体又はその一部分と組み合わされる、例えばＡＤＡＭＴＳ１３（又はその生物活性を有する誘導体）等のキメラ分子も含まれる。Ｉｇは、任意選択で変異したものであるＦｃ受容体への結合部位も有してよい。

【0073】

本明細書中で使用される場合、「ＡＤＡＭＴＳ１３活性（ＡＤＡＭＴＳ１３ ａｃｔｉｖｉｔｙ）」は、全長ＶＷＦ、ＶＷＦ断片、又はＶＷＦ基質（例えばＦＲＥＴＳ－ＶＷＦ７３基質（Kokame et al.、Br J Haematol. 2005 April ;129(1):93－100)）の切断を含む。「ＡＤＡＭＴＳ１３活性」は、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質（例えば野生型若しくはバリアント）又は複数のＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の組み合わせの活性を指すことができる。特定の実施形態では、組成物が１つ又は複数のＡＤＡＭＴＳ１３バリアント及び／又はＡＤＡＭＴＳ１３（例えば野生型）の混合物である場合、「ＡＤＡＭＴＳ１３活性」は、組成物中の総ＡＤＡＭＴＳ１３の活性を指す。

【0074】

本明細書中で使用される場合、「１単位のＡＤＡＭＴＳ１３活性（ｏｎｅ ｕｎｉｔ ｏｆ ＡＤＡＭＴＳ１３ ａｃｔｉｖｉｔｙ）」は、使用されるアッセイにかかわらず、プールされていた正常ヒト血漿１ｍｌ中の活性の量として定義される。例えば、１単位のＡＤＡＭＴＳ１３ ＦＲＥＴＳ－ＶＷＦ７３活性とは、プールされていた正常ヒト血漿（参照又はベースライン試料）１ｍｌによって切断される量と同一の量のＦＲＥＴＳ－ＶＷＦ７３基質を切断するために必要な、活性の量である。Kokame et al., Br J Haematol. 2005 Apr;129(1):93－100)、又はそのいずれのバリアントを参照。Tripodi, et al., J.Thromb Haemost 2004 v2 p1601-9; Tripodi, et. al., J Thromb Haemost. 2008 September; 6(9): 1534-1541（各文献は、あらゆる目的のために参照により援用される）も参照。例えば、全長ＶＷＦ分子又はＶＷＦ断片の切断を検出するために、ＳＤＳアガロースゲル電気泳動を用いて直接的なＡＤＡＭＴＳ１３活性アッセイを実施でき、またコラーゲン結合アッセイによって、間接的なＡＤＡＭＴＳ１３活性の検出を実施できる。用語「１単位のＡＤＡＭＴＳ１３活性」は、「活性単位（Ａｃｔｉｖｉｔｙ ｕｎｉｔ）」、「Ｕ」、「国際単位（ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ ｕｎｉｔ）」、「ＩＵ」、又は「ＵＦＶ７３」と交換可能なものとして使用できる。特定の実施形態では、国際単位は、ＶＷＦ ＦＲＥＴＳアッセイを用いて血漿に対して較正されたＷＨＯ標準の使用に基づく（即ち「ＵＦＶ７３」又は「ＩＵ」）。

【0075】

本明細書中で使用される場合、用語「治療する（ｔｒｅａｔ）」及び「防止する（ｐｒｅｖｅｎｔ）」は、絶対的な用語であることを意図したものではない。治療は、発症のいずれの遅延、対象又は患者の生存率の改善、頻度又は重症度の低減等を指すことができる。治療は、対象の状態又は病態（そのいずれの兆候、症状、又は合併症を含む）のいずれの改善も包含し、これは治療が状態又は疾患の基礎となる原因又は病因に直接的又は間接的に影響を及ぼすかどうかにかかわらない。用語「防止する」は、予防及び防止を含む。治療の効果は、対照、例えば治療を受けていない対象若しくは対象のプール、同一の患者の体内の未処置の組織、又は治療前の同一の対象と比較できる。

【0076】

本明細書中で使用される場合、「対象（ｓｕｂｊｅｃｔ）」又は「患者（ｐａｔｉｅｎｔ）」は、状態若しくは疾患又はそのいずれの兆候、症状若しくは合併症を示すか、あるいはこれらのリスクを有する、ヒト対象を含むいずれの哺乳類を意味する。「ＣＯＶＩＤ－１９対象（ＣＯＶＩＤ－１９ ｓｕｂｊｅｃｔ）」又は「ＣＯＶＩＤ－１９患者（ＣＯＶＩＤ－１９ ｐａｔｉｅｎｔ）」は、ＣＯＶＩＤ－１９の兆候若しくは症状を示す、ＣＯＶＩＤ－１９と診断された、又は例えば臨床試験若しくは臨床検査においてＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２について陽性であるかどうかを試験することによって、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の感染を示す、ヒト対象を含むいずれの哺乳類を意味する。

【0077】

本明細書中で使用される場合、「治療有効量又は用量（ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃａｌｌｙ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ａｍｏｕｎｔ ｏｒ ｄｏｓｅ）」、あるいは「十分な量又は用量（ｓｕｆｆｉｃｉｅｎｔ ａｍｏｕｎｔ ｏｒ ｄｏｓｅ）」は、投与の目的である効果を生成する用量を指す。正確な用量は治療の目的に依存することになり、また既知の技法を用いて当業者が確認できる。例えばLieberman, Pharmaceutical Dosage Forms (vols. 1-3, 1992); Lloyd, The Art, Science and Technology of Pharmaceutical Compounding (1999)；Pickar, Dosage Calculations (1999)；及びRemington: The Science and Practice of Pharmacy, 20th Edition, 2003, Gennaro, Ed., Lippincott, Williams & Wilkinsを参照。

【0078】

用語「遺伝子（ｇｅｎｅ）」は、ポリペプチド鎖の生成に関与するＤＮＡのセグメント（核酸又はポリペプチド）を意味する。これは、コーディング領域の前及び後ろの領域（リーダー及びトレーラー）、並びに対象のコーディングセグメント（エクソン）間の介在配列（イントロン）を含むことができる。

【0079】

用語「核酸（ｎｕｃｌｅｉｃ ａｃｉｄ）」又は「ポリヌクレオチド（ｐｏｌｙｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ）」は、デオキシリボ核酸（ＤＮＡ）又はリボ核酸（ＲＮＡ）、及びその一本鎖又は二本鎖形態のポリマーを指す。特段の指定がない限り、上記用語は、参照核酸と同等の結合特性を有し、また天然のヌクレオチドと同様に代謝される、天然ヌクレオチドの既知の類似体を含有する核酸を包含する。特段の指示がない限り、ある特定の核酸配列は、保存的に修飾されたそのバリアント（例えば縮退コドン置換）、対立遺伝子、オルソログ、ＳＮＰ、及び相補配列も暗黙的に包含し、また明示的に指示された配列も包含する。具体的には、縮退コドン置換は、１つ又は複数の選択された（又は全ての）コドンの第３位が混合塩基及び／又はデオキシイノシン残基で置換された配列を生成することによって、達成できる。Batzer et al., Nucleic Acid Res. 19:5081 (1991)；Ohtsuka et al., J. Biol. Chem. 260:2605-2608 (1985)；及びRossolini et al., Mol. Cell. Probes 8:91-98 (1994)を参照。用語「核酸」は、遺伝子、ｃＤＮＡ、及び遺伝子によってコードされるｍＲＮＡを包含する。

【0080】

用語「アミノ酸（ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ）」は、天然及び合成アミノ酸、並びに天然アミノ酸と同様に機能するアミノ酸類似体及びアミノ酸ミメティックを指す。天然アミノ酸は、遺伝暗号によってコードされるもの、並びに後で修飾されるアミノ酸、例えばヒドロキシプロリン、γ－カルボキシグルタミン酸、及びＯ－ホスホセリンである。アミノ酸類似体は、天然アミノ酸と同一の基本化学構造、即ち水素に結合するα炭素、カルボキシル基、アミノ基、及びＲ基を有する化合物、例えばホモセリン、ノルロイシン、メチオニンスルホキシド、メチオニンメチルスルホニウムを指す。このような類似体は、修飾されたＲ基（例えばノルロイシン）又は修飾されたペプチド骨格を有するが、天然アミノ酸と同一の基本化学構造を保持している。「アミノ酸ミメティック（ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ ｍｉｍｅｔｉｃ）」は、あるアミノ酸の一般化学構造とは異なる構造を有するものの、天然アミノ酸と同様に機能する、化学化合物を指す。非天然アミノ酸誘導体又は類似体をポリペプチド鎖に部位特異的に組み込むことを可能にする多様な既知の方法が、当該技術分野には存在している。例えば国際公開第０２／０８６０７５号を参照。

【0081】

「保存的に修飾されたバリアント（ｃｏｎｓｅｒｖａｔｉｖｅｌｙ ｍｏｄｉｆｉｅｄ ｖａｒｉａｎｔ）」は、アミノ酸配列及び核酸配列の両方に適用される。特定の核酸配列に関して、保存的に修飾された核酸は、同一の若しくは本質的に同一のアミノ酸配列をコードする核酸、又は核酸がアミノ酸配列をコードしない場合には本質的に同一の配列を指す。遺伝暗号の縮退により、機能的に同一である多数の核酸が、いずれの所与のタンパク質をコードする。例えばコドンＧＣＡ、ＧＣＣ、ＧＣＧ及びＧＣＵはいずれも、アミノ酸アラニンをコードする。よって、アラニンがコドンによって特定されるあらゆる位置において、コードされるポリペプチドを変更することなく、コドンを、上述の対応するコドンのうちのいずれかに変更できる。このような核酸の変異は「サイレント変異（ｓｉｌｅｎｔ ｖａｒｉａｔｉｏｎ）」であり、これらは保存的に修飾されたバリアントの一種である。ポリペプチドをコードする、本明細書中の全ての核酸配列は、該核酸の、可能性のある全てのサイレント変異も記述する。当業者であれば、核酸中の各コドン（メチオニンの唯一のコドンであるＡＵＧ、及びトリプトファンの唯一のコドンであるＴＧＧを除く）を修飾することによって、機能的に同一の分子を得ることができることを認識するだろう。従って、ポリペプチドをコードする核酸の各サイレント変異は、記載された各配列において暗黙的に含まれる。

【0082】

アミノ酸配列に関して、「保存的に修飾されたバリアント」は、核酸、ペプチド、ポリペプチド、又はタンパク質配列に対する置換、欠失、又は付加を指し、これは、コードされる配列中の単一のアミノ酸又はわずかなパーセンテージのアミノ酸の変更、付加、又は欠失を発生させ、化学的に類似したアミノ酸によるアミノ酸の置換をもたらす。機能的に類似したアミノ酸を提供する保存的置換テーブルは、当該技術分野において公知である。このように保存的に修飾されたバリアントは、本発明の多型バリアント、種間同族体、及び対立遺伝子に追加されるものであり、これらを排除するものではない。以下の８個の基はそれぞれ、互いの保存的置換の例であるアミノ酸を含む：（１）アラニン（Ａ）、グリシン（Ｇ）；（２）アスパラギン酸（Ｄ）、グルタミン酸（Ｅ）；（３）アスパラギン（Ｎ）、グルタミン（Ｑ）；（４）アルギニン（Ｒ）、リシン（Ｋ）；（５）イソロイシン（Ｉ）、ロイシン（Ｌ）、メチオニン（Ｍ）、バリン（Ｖ）；（６）フェニルアラニン（Ｆ）、チロシン（Ｙ）、トリプトファン（Ｗ）；（７）セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）；及び（８）システイン（Ｃ）、メチオニン（Ｍ）。例えばCreighton, Proteins, W. H. Freeman and Co., N. Y. (1984)を参照。

【0083】

本明細書中で使用される場合、「同等の位置（ｅｑｕｉｖａｌｅｎｔ ｐｏｓｉｔｉｏｎ）」（例えば「同等のアミノ酸位置（ｅｑｕｉｖａｌｅｎｔ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ ｐｏｓｉｔｉｏｎ）」又は「同等の残基位置（ｅｑｕｉｖａｌｅｎｔ ｒｅｓｉｄｕｅ ｐｏｓｉｔｉｏｎ）」）は、ここでは、アラインメントアルゴリズム（例えばＣｌｕｓｔａｌ Ｎｅｅｄｌｅｍａｎ－Ｗｕｎｓｃｈ ａｌｇｏｒｉｔｈｍ、Ｖｅｃｔｏｒ ＮＴＩ）を用いて、参照アミノ酸配列（例えば配列番号１）の対応する位置と整列させた、アミノ酸配列の位置（アミノ酸位置又は残基位置等）として定義される。アミノ酸配列の同等のアミノ酸位置は参照アミノ酸配列の対応する位置と同一の位置番号を有する必要はない。一例として図１３は、ゴリラ野生型ＡＤＡＭＴＳ１３（配列番号３）と整列されたヒト野生型ＡＤＡＭＴＳ１３の配列（配列番号１）を示す。この例では、配列番号１のアミノ酸番号９７が配列番号３のアミノ酸番号１０１と整列されているため、配列番号１のアミノ酸位置番号９７は、配列番号３のアミノ酸位置番号１０１のアミノ酸位置と同等のアミノ酸位置である（すなわち「同等である（ｅｑｕｉｖａｌｅｎｔ ｔｏ）」）とみなされる。換言すれば、配列番号１のアミノ酸位置９７は、配列番号３のアミノ酸位置１０１に対応する。

【0084】

「ポリペプチド」、「ペプチド」、及び「タンパク質」は、アミノ酸残基のポリマーを指すために、交換可能なものとして使用される。これら３つの用語は全て、１つ又は複数のアミノ酸残基が対応する天然アミノ酸の人工の化学的なミメティックであるアミノ酸ポリマー、並びに天然アミノ酸ポリマー及び天然には生じないアミノ酸ポリマーに適用される。本明細書中で使用される場合、これらの用語は、全長タンパク質を含むいずれの長さのアミノ酸鎖を包含し、ここでアミノ酸残基は、ペプチド共有結合によって結合される。本出願では、ポリペプチド、ペプチド、又はタンパク質のアミノ酸残基は、例えば未修飾野生型ポリペプチド配列を参照することにより、番号１が付された最も左側の残基からの相対的な位置に従って、番号付与される。

【0085】

本明細書中で使用される場合、ポリペプチドの「断片（ｆｒａｇｍｅｎｔ）」は、全長ポリペプチド又はタンパク質発現産物よりも小さい、ポリペプチドのいずれの部分を指す。断片は典型的には、全長ポリペプチドの欠失類似体であり、ここでは１つ又は複数のアミノ酸残基が、全長ポリペプチドのアミノ末端及び／又はカルボキシ末端から除去されている。従って「（複数の）断片（ｆｒａｇｍｅｎｔｓ）」は、以下に記載の欠失類似体のサブセットである。

【0086】

用語「組換え（ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ）」又は「組換え発現系（ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｓｙｓｔｅｍ）」は、例えば細胞に言及して使用される場合、この細胞が、異種核酸若しくはタンパク質の導入、又は天然核酸若しくはタンパク質の変更によって、修飾されていること、あるいはこの細胞が、上述のように修飾された細胞に由来することを示す。従って例えば、組換え細胞は、該細胞の天然（非組換え）形態の中には見られない遺伝子を発現するか、又は異常に発現される、発現が不足する、若しくは全く発現されない天然遺伝子を発現する。またこの用語は、組換え遺伝要素、又は遺伝子発現を調節する役割を有する要素、例えばプロモーター若しくはエンハンサーを安定的に組み込んだ、宿主細胞も意味する。本明細書で定義されるような組換え発現系は、発現されることになる内因性ＤＮＡセグメント又は遺伝子に結合する調節要素の誘導時に、細胞にとって内因性であるポリペプチド又はタンパク質を発現することになる。細胞は、原核細胞又は真核細胞であってよい。

【0087】

本明細書中で使用される場合、２つ以上のポリヌクレオチド又はアミノ酸配列を説明する文脈における、用語「同一の（ｉｄｅｎｔｉｃａｌ）」、又はパーセントの「同一性（ｉｄｅｎｔｉｔｙ）」は、後述の配列比較アルゴリズムのうちの１つを用いて又は手動でのアラインメント及び目視検査によって測定される、比較ウインドウ又は指定された領域にわたって、一致が最大となるように比較及び整列が行われた場合に、同一であるか、又は指定されたパーセンテージ（例えば、参照配列、例えば配列番号１若しくは配列番号２に対して、少なくとも８０％の同一性、好ましくは８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％の同一性）の同一のアミノ酸残基若しくはヌクレオチドを有する、２つ以上の配列又は部分配列を指す。このような配列は、「実質的に同一（ｓｕｂｓｔａｎｔｉａｌｌｙ ｉｄｅｎｔｉｃａｌ）」であると表現される。ポリヌクレオチド配列に関して、この定義は、試験用配列の補体も指す。好ましくは、同一性は、少なくとも約５０アミノ酸若しくはヌクレオチドの長さの領域にわたって、又は更に好ましくは７５～１００アミノ酸若しくはヌクレオチドの長さの領域にわたって、存在する。

【0088】

配列の比較のために、典型的には１つの配列が参照配列として機能し、これと試験用配列とが比較される。配列比較アルゴリズムを用いる場合、試験用配列及び参照配列をコンピュータに入力し、必要に応じて部分配列座標を指定し、配列アルゴリズムプログラムパラメータを指定する。デフォルトのプログラムパラメータを使用してよく、又は別のパラメータを指定してもよい。次に配列比較アルゴリズムは、プログラムパラメータに基づいて、参照配列に対する試験用配列のパーセント配列同一性を計算する。核酸及びタンパク質の配列比較には、ＢＬＡＳＴ及びＢＬＡＳＴ２．０アルゴリズム、並びにデフォルトのパラメータを使用してよい。

【0089】

２つの核酸配列又はポリペプチドが実質的に同一であるという指標は、以下で説明されるように、第１の核酸によってコードされるポリペプチドが、第２の核酸によってコードされるポリペプチドに対して産生された抗体と免疫学的に交差反応することである。よってあるポリペプチドと第２のポリペプチドとは、典型的には、例えばこれら２つのペプチドが保存的置換によってのみ異なる場合に、実質的に同一である。２つの核酸配列が実質的に同一であることの別の指標は、以下で説明されるように、これら２つの分子又はその補体が、ストリンジェントな条件下で互いにハイブリダイズすることである。２つの核酸配列が実質的に同一であることの更に別の指標は、同一のプライマーを用いて配列を増幅できることである。

【0090】

本明細書中で使用される場合、組成物中の「ＡＤＡＭＴＳ１３の総量（ｔｏｔａｌ ａｍｏｕｎｔ ｏｆ ＡＤＡＭＴＳ１３）」又は「総ＡＤＡＭＴＳ１３（ｔｏｔａｌ ＡＤＡＭＴＳ１３）」という句は、該組成物中の全てのＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質（例えば野生型及び１つ又は複数のバリアント）の合計を含む。例えば、ある組成物がＡＤＡＭＴＳ１３野生型及びＱ^９７Ｒ ＡＤＡＭＴＳ１３バリアントを含む場合、「ＡＤＡＭＴＳ１３の総量」又は「総ＡＤＡＭＴＳ１３」は、該組成物中のＡＤＡＭＴＳ１３野生型とＱ^９７Ｒ ＡＤＡＭＴＳ１３との合計となる。同様に、ある組成物がＱ^９７Ｒ ＡＤＡＭＴＳ１３しか含まない場合、ＡＤＡＭＴＳ１３の総量又は総ＡＤＡＭＴＳ１３は、該組成物中のＱ^９７Ｒ ＡＤＡＭＴＳ１３の合計となる。

【0091】

「生体試料（ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｓａｍｐｌｅ）」は、対象若しくは患者から例えば生検によって；動物モデル等の動物から；又は培養細胞、例えば観察のために患者から取り出して培養で成長させた細胞株若しくは細胞から、得ることができる。生体試料としては、結腸直腸組織等の組織、又は血液、血液画分、リンパ液、唾液、尿、糞便等の体液が挙げられる。

【0092】

本明細書中で使用される場合、塩の「生理学的濃度（ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ）」は、薬学的に許容可能な塩の、約１００ｍＭ～約２００ｍＭの塩濃度を指す。薬学的に許容可能な塩の非限定的な例としては、限定するものではないが、塩化ナトリウム及びカリウム、酢酸ナトリウム及びカリウム、クエン酸ナトリウム及びカリウム、並びにリン酸ナトリウム及びカリウムが挙げられる。

【0093】

本明細書中で使用される場合、塩の「準生理学的濃度（ｓｕｂ－ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ）」は、薬学的に許容可能な塩の、約１００ｍＭ未満の塩濃度を指す。好ましい実施形態では、塩の準生理学的濃度は、薬学的に許容可能な塩の、約８０ｍＭ未満である。別の好ましい実施形態では、塩の準生理学的濃度は、薬学的に許容可能な塩の、約６０ｍＭ未満である。

【0094】

本明細書中で使用される場合、用語「約（ａｂｏｕｔ）」は、当業者が判断する、特定の変数又は値の許容可能な偏差又は誤差範囲内であることを意味し、これは、文脈、及び該変数又は値の測定又は決定の方法（例えば測定システムの限界）に左右される。例えば「約」は、当該技術分野の慣例に従って、許容可能な標準偏差内であることを意味してよい。あるいは「約」は、これもまた当該技術分野の慣例に従って、所与の変数又は値は、最大±２０％、好ましくは±１０％、より好ましくは最大±５％、更に好ましくは最大±１％の範囲を意味してよい。例えば、薬物又は医薬組成物に関して言及されている又は示されている用量又は投薬量範囲は実際には、当業者には理解されるような許容可能な範囲又は限界内で変動し得る。また、範囲、数値のリスト、又は範囲のリストの前に「約」がある場合、用語「約」は該リスト又は範囲内の各数値の前にあるものと解釈されるものとする。

【0095】

本開示の態様が、ある特徴「を含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」、又はその変化形（例えば「を含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」）として記述されている場合、実施形態もその特徴「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｏｆ）」又はその特徴「から本質的になる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ ｏｆ）」として理解される。

【0096】

また、本明細書に記載のいずれの数値は、下限値から上限値までの全ての値を含む、即ち列挙された最小値と最大値との間の数値のあらゆる可能な組み合わせが本出願中で明示的に記載されているとみなされることも、特に理解される。例えば、濃度範囲が約１％～５０％と記載されている場合、２％～４０％、１０％～３０％、又は１％～３％等の値も本明細書中に明示的に列挙されることが意図されている。上述の値は、具体的に意図されているものの単なる例に過ぎない。

【0097】

ＩＩ．組成物及び方法
Ａ．組換えＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質
本明細書中で提供される主題である方法は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ２に感染した又はＣＯＶＩＤ－１９と診断された対象に、治療有効量の単離又は組換えＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質を含む医薬組成物を投与するステップを含む。

【0098】

ヒトＡＤＡＭＴＳ１３遺伝子は、２９個のエクソンを含み、染色体９ｑ３４上のおよそ３７ｋｂに及ぶ。４．７ｋｂの転写産物が主に肝星細胞で合成されるが、血管内皮細胞及び血小板でも合成され、１４２７のアミノ酸残基の１次翻訳産物をコードする。前駆体ＡＤＡＭＴＳ１３ポリペプチドは、シグナルペプチドと、Ｃ末端が切断のための潜在的なフリン部位で終端し、その後に成熟ＶＷＦ切断プロテアーゼの配列が続く、プロペプチドとからなる。成熟ＡＤＡＭＴＳ１３ポリペプチド（１３５３アミノ酸残基）は、全てのＡＤＡＭＴＳファミリーのメンバーに特徴的な、以下の構造的特徴：レプロリシン様メタロプロテアーゼドメイン、ディスインテグリン様ドメイン、中央のトロンボスポンジン１型（ＴＳＰ１）リピート、インテグリン相互作用にとって重要と思われるＲＧＤモチーフを含むシステインリッチドメイン、及びスペーサードメインを備え、その後に７個の連続したＴＳＰ１リピート（ＴＳＰ１／＃２～８）及び２個のＣＵＢドメインの独自の組み合わせが続く。

【0099】

成熟ＡＤＡＭＴＳ１３の分子質量は約１４５ｋＤａと計算されるが、精製された血漿由来のＡＤＡＭＴＳ１３の見かけの分子質量は約１８０ｋＤａである。これはおそらく、存在する１０個の潜在的なＮ－グリコシル化部位、並びにＴＳＰ１リピート内のいくつかのＯ－グリコシル化部位及び１個のＣ－マンノシル化部位と両立する翻訳後修飾が原因である。ＡＤＡＭＴＳ１３のＶＷＦタンパク質分解活性は、２価カチオンに強く依存する。メタロプロテアーゼドメインの活性部位モチーフは、触媒Ｚｎ２＋イオンに配位する３つのヒスチジン残基を含む、高度に保存されたHEXXHXXGXXHDモチーフと、Ｇｌｕ８３、Ａｓｐ１７３、Ｃｙｓ２８１及びＡｓｐ２８４が配位することが提唱されている、予想カルシウム結合部位とを含有する。ＡＤＡＭＴＳ１３ドメインの機能的役割は主にインビトロアッセイ系を用いて研究されており、これにより、メタロプロテアーゼからスペーサードメインまでのＮ末端領域がＶＷＦ切断に重要であることが示されている。Ｃ末端ＴＳＰ１リピート及びＣＵＢドメインは、ＶＷＦ基質の認識、及び内皮細胞上のＣＤ３６のような潜在的な表面受容体との結合にとって重要であると思われる。

【0100】

ＡＤＡＭＴＳ１３は、全長の、短縮された、又は修飾された、単離又は組換えＡＤＡＭＴＳ１３であってよい。特定の実施形態では、組換えＡＤＡＭＴＳ１３（ｒＡＤＡＭＴＳ１３）が好ましい。ｒＡＤＡＭＴＳ１３は、例えばげっ歯類（例えばマウス）若しくはヒトを含むいずれの哺乳類の天然ＡＤＡＭＴＳ１３配列に対応するものであってもよく、又は天然ＡＤＡＭＴＳ１３に由来するものであってもよい。特定の実施形態では、ヒトｒＡＤＡＭＴＳ１３配列が好ましい。

【0101】

本明細書で提供される製剤の特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３は、当該技術分野において説明されている方法によって得られるｒＡＤＡＭＴＳ１３である。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３は、ヒトＡＤＡＭＴＳ１３（ｈＡ１３）、組換えヒトＡＤＡＭＴＳ１３（ｒｈＡ１３）、又は生物活性を有するその誘導体若しくは断片である。特定の実施形態では、ｈＡ１３のアミノ酸配列は、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号ＮＰ＿６２０５９４のものである。他の実施形態では、ｈＡ１３のアミノ酸配列は、ＮＰ＿６２０５９４のアミノ酸７５～１４２７、その天然若しくは保存的バリアント、又は生物活性を有するその断片を含む。これらの配列は、組換えヒトＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の生成に用いられる場合がある。

【0102】

いくつかの実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３は、配列番号１に記載のアミノ酸配列、又は配列番号１と少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、若しくは少なくとも９９％の配列同一性を有する配列を含む。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３をコードするヌクレオチド配列は、配列番号１のアミノ酸配列、又は配列番号１と少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、若しくは少なくとも９９％の配列同一性を有する配列を、コードするヌクレオチド配列を含む。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３は配列番号１に記載のアミノ酸配列を含む。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３は配列番号１に記載のアミノ酸配列からなる。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３は配列番号１に記載のアミノ酸配列から本質的になる。

【0103】

特定の実施形態では、本開示はＡＤＡＭＴＳ１３のバリアントを提供する。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３バリアントは、天然／野生型ＡＤＡＭＴＳ１３（例えば配列番号１）と比較して、１つ又は複数のアミノ酸置換、欠失、挿入、及び／又はフレームシフトを含むことができ、天然の対立遺伝子性バリアント、又は選択的スプライシング性バリアントを含む。例えばＡＤＡＭＴＳ１３バリアントは、野生型ＡＤＡＭＴＳ１３と比較して、少なくとも１つの単一のアミノ酸置換を含むことができる。１つ又は複数のアミノ酸置換が、触媒ドメイン、ディスインテグリンドメイン、並びに／又は最初のトロンボスポンジン１型ドメイン（Ｃ１及びＣ２）内にあってよい。

【0104】

特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３バリアントは、野生型アミノ酸（例えば配列番号１）と比較して、少なくとも１つの単一のアミノ酸置換を含むことができる。特定の実施形態では、単一のアミノ酸置換が、ＡＤＡＭＴＳ１３の触媒ドメイン（例えば配列番号１のアミノ酸８０～２８６）内にある。特定の実施形態では、単一のアミノ酸置換は、配列番号１に示されているＩ^７９Ｍ、Ｖ^８８Ｍ、Ｈ^９６Ｄ、Ｑ^９７Ｒ、Ｒ^１０２Ｃ、Ｓ^１１９Ｆ、Ｉ^１７８Ｔ、Ｒ^１９３Ｗ、Ｔ^１９６Ｉ、Ｓ^２０３Ｐ、Ｌ^２３２Ｑ、Ｈ^２３４Ｑ、Ｄ^２３５Ｈ、Ａ^２５０Ｖ、Ｓ^２６３Ｃ、及び／若しくはＲ^２６８Ｐのうちの少なくとも１つ、又はＡＤＡＭＴＳ１３中の同等のアミノ酸位置である。特定の実施形態では、単一のアミノ酸置換は、配列番号１に示されているＩ^７９Ｍ、Ｖ^８８Ｍ、Ｈ^９６Ｄ、Ｒ^１０２Ｃ、Ｓ^１１９Ｆ、Ｉ^１７８Ｔ、Ｒ^１９３Ｗ、Ｔ^１９６Ｉ、Ｓ^２０３Ｐ、Ｌ^２３２Ｑ、Ｈ^２３４Ｑ、Ｄ^２３５Ｈ、Ａ^２５０Ｖ、Ｓ^２６３Ｃ、及び／若しくはＲ^２６８Ｐ、又はＡＤＡＭＴＳ１３中の同等のアミノ酸位置ではない。

【0105】

特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３バリアントは、配列番号１に示されているＱ^９７、又はＡＤＡＭＴＳ１３中の同等のアミノ酸位置における、単一のアミノ酸置換を含む。特定の実施形態では、このアミノ酸の変化は、ＱからＤ、Ｅ、Ｋ、Ｈ、Ｌ、Ｎ、Ｐ、又はＲへのものである。特定の実施形態では、このアミノ酸の変化は、ＱからＲへのものである。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３バリアントは、ＡＤＡＭＴＳ１３ Ｑ^９７Ｒ（配列番号２、又はＲ^９７を維持しながらこれと少なくとも８０％の配列同一性を有するアミノ酸配列）である。いくつかの実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３バリアントは、配列番号２に記載のアミノ酸配列、又はＲ^９７を維持しながら配列番号２と少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、若しくは少なくとも９９％の配列同一性を有するそのバリアントを含む。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３バリアントをコードするヌクレオチド配列は、配列番号２のアミノ酸配列、又はＲ^９７を維持しながら配列番号２と少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、若しくは少なくとも９９％の配列同一性を有するそのバリアントを、コードするヌクレオチド配列を含む、特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３バリアントは配列番号２に記載のアミノ酸配列を含む。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３バリアントは配列番号２に記載のアミノ酸配列からなる。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３バリアントは配列番号２に記載のアミノ酸配列から本質的になる。

【0106】

特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３バリアントは、Ｒ^７Ｗ、Ｑ^４４Ｘ、Ｔ^１６７Ｍ、Ｙ^３０４Ｃ、Ｃ^３１１Ｙ、Ｔ^３３９Ｒ、Ｐ^３４１Ｌ、Ｃ^３４７Ｓ、Ｒ^３４９Ｃ、Ｐ^３５３Ｌ、Ｗ^３９０Ｘ、Ｗ^３９０Ｃ、Ｒ^３９８Ｈ、Ｑ^４４８Ｅ、Ｑ^４４９Ｘ、Ｑ^４５６Ｈ、Ｐ^４５７Ｌ、Ｐ^４７５Ｓ、Ｒ^５０７Ｑ、Ｃ^５０８Ｙ、Ｇ^５２５Ｄ、Ｒ^５２８Ｇ、Ａ^５９６Ｖ、Ａ^６０６Ｐ、Ｐ^６１８Ａ、Ｒ^６２５Ｈ、Ｐ^６７１Ｌ、Ｉ^６７３Ｆ、Ｒ^６９２Ｃ、Ｑ^７２３Ｋ、Ａ^７３２Ｖ、Ｅ^７４０Ｋ、Ｃ^７５８Ｒ、Ｖ^８３２Ｍ、Ａ^９００Ｖ、Ｓ^９０３Ｌ、Ｃ^９０８Ｓ、Ｃ^９０８Ｙ、Ｒ^９１０Ｘ、Ｑ^９２９Ｘ、Ｃ^９５１Ｇ、Ｇ^９８２Ｒ、Ａ^１０３３Ｔ、Ｗ^１０１６Ｘ、Ｃ^１０２４Ｇ、Ａ^１０３３Ｔ、Ｒ^１０３４Ｘ、Ｓ^１０３６Ｘ、Ｒ^１０６０Ｗ、Ｒ^１１２３Ｃ、Ｒ^１１４９Ｗ、Ｒ^１２０６Ｘ、Ｃ^１２１３Ｙ、Ｉ^１２１７Ｔ、Ｒ^１２１９Ｗ、Ｔ^１２２６Ｉ、Ｇ^１２３９Ｖ、Ｗ^１２４５Ｘ、Ｑ^１３０２Ｘ、Ｓ^１３１４Ｌ、及び／若しくはＲ^１３３６Ｗ、又はＡＤＡＭＴＳ１３中の同等のアミノ酸位置である。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３バリアントは、配列番号１に示されているＲ^７Ｗ、Ｑ^４４Ｘ、Ｔ^１６７Ｍ、Ｙ^３０４Ｃ、Ｃ^３１１Ｙ、Ｔ^３３９Ｒ、Ｐ^３４１Ｌ、Ｃ^３４７Ｓ、Ｒ^３４９Ｃ、Ｐ^３５３Ｌ、Ｗ^３９０Ｘ、Ｗ^３９０Ｃ、Ｒ^３９８Ｈ、Ｑ^４４８Ｅ、Ｑ^４４９Ｘ、Ｑ^４５６Ｈ、Ｐ^４５７Ｌ、Ｐ^４７５Ｓ、Ｒ^５０７Ｑ、Ｃ^５０８Ｙ、Ｇ^５２５Ｄ、Ｒ^５２８Ｇ、Ａ^５９６Ｖ、Ａ^６０６Ｐ、Ｐ^６１８Ａ、Ｒ^６２５Ｈ、Ｐ^６７１Ｌ、Ｉ^６７３Ｆ、Ｒ^６９２Ｃ、Ｑ^７２３Ｋ、Ａ^７３２Ｖ、Ｅ^７４０Ｋ、Ｃ^７５８Ｒ、Ｖ^８３２Ｍ、Ａ^９００Ｖ、Ｓ^９０３Ｌ、Ｃ^９０８Ｓ、Ｃ^９０８Ｙ、Ｒ^９１０Ｘ、Ｑ^９２９Ｘ、Ｃ^９５１Ｇ、Ｇ^９８２Ｒ、Ａ^１０３３Ｔ、Ｗ^１０１６Ｘ、Ｃ^１０２４Ｇ、Ａ^１０３３Ｔ、Ｒ^１０３４Ｘ、Ｓ^１０３６Ｘ、Ｒ^１０６０Ｗ、Ｒ^１１２３Ｃ、Ｒ^１１４９Ｗ、Ｒ^１２０６Ｘ、Ｃ^１２１３Ｙ、Ｉ^１２１７Ｔ、Ｒ^１２１９Ｗ、Ｔ^１２２６Ｉ、Ｇ^１２３９Ｖ、Ｗ^１２４５Ｘ、Ｑ^１３０２Ｘ、Ｓ^１３１４Ｌ、及び／若しくはＲ^１３３６Ｗ、又はＡＤＡＭＴＳ１３中の同等のアミノ酸位置ではない。

【0107】

特定の実施形態では、本明細書で提供されるＡＤＡＭＴＳ１３バリアントは、相当なＡＤＡＭＴＳ１３活性を保持する。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３バリアントは、野生型ＡＤＡＭＴＳ１３と同等のＡＤＡＭＴＳ１３活性を提供した。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３バリアントは野生型ＡＤＡＭＴＳ１３自体より高いＡＤＡＭＴＳ１３活性を提供した。

【0108】

特定の実施形態では、本発明は、米国特許出願公開第２０１１／０２２９４５５号及び／又は米国特許出願公開第２０１４／０２７１６１１号（各文献は、その全体が参照により、あらゆる目的のために本出願に援用される）に記載された成分を含む組成物等の、１つ又は複数のＡＤＡＭＴＳ１３バリアントの組成物を提供する。他の態様では、本発明は、血漿由来ＡＤＡＭＴＳ１３及び／又は組換えＡＤＡＭＴＳ１３（ｒＡＤＡＭＴＳ１３）タンパク質と組み合わされた１つ又は複数のＡＤＡＭＴＳ１３バリアントの組成物を提供する。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３は、米国特許出願公開第２０１１／０２２９４５５号及び／又は米国特許出願公開第２０１４／０２７１６１１号（各文献は、その全体が参照により、あらゆる目的のために本出願に援用される）に記載されているような、ヒトＡＤＡＭＴＳ１３、又は生物活性を有するその誘導体若しくは断片である。一実施形態では、ｈＡ１３のアミノ酸配列はＧｅｎＢａｎｋ受託番号ＮＰ＿６２０５９４のものである。特定の実施形態では、ｈＡＤＡＭＴＳ１３のアミノ酸配列は、配列番号１、又はこれと少なくとも８０％の配列同一性を有するアミノ酸配列である。別の実施形態では、ｈＡ１３のアミノ酸配列は、ＮＰ＿６２０５９４のアミノ酸７５～１４２７、その天然若しくは保存的バリアント、又は生物活性を有するその断片を含む。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３バリアントは、ＡＤＡＭＴＳ１３ Ｑ^９７Ｒ（配列番号２）、又はＲ^９７を維持しながらこれと少なくとも８０％の配列同一性を有するアミノ酸配列である。

【0109】

特定の実施形態では、医薬組成物は、少なくとも１つのＡＤＡＭＴＳ１３バリアントとＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質（例えば野生型）との組み合わせを含む。特定の実施形態では、組成物中のＡＤＡＭＴＳ１３の総量（即ち全てのＡＤＡＭＴＳ１３バリアント及び野生型を含む）の中に存在するＡＤＡＭＴＳ１３バリアントの相対的な豊富度（例えばパーセンテージ）は、約５％～約９５％、約１０％～約９０％、約１５％～約８５％、約２０％～約８０％、約２５％～約７５％、約３０％～約７０％、約３５％～約６５％、約４０％～約６０％、又は約４５％～約５５％である。特定の実施形態では、組成物中のＡＤＡＭＴＳ１３の総量の中に存在するＡＤＡＭＴＳ１３バリアントのパーセンテージは、約４０％～約９０％、約４０％～約８０％、約４５％～約７５％、約５０％～約８０％、約５０％～約７０％、又は約５５％～約６５％である。特定の実施形態では、組成物中のＡＤＡＭＴＳ１３の総量の中に存在するＡＤＡＭＴＳ１３バリアントのパーセンテージは、約５０％～約７５％、約５２％～約７２％、約５５％～約７０％、約５９％～約７２％である。特定の実施形態では、組成物中のＡＤＡＭＴＳ１３の総量の中に存在するＡＤＡＭＴＳ１３バリアントのパーセンテージは、約４５％～約８５％、又は約４７％～約８４％である。特定の実施形態では、組成物中のＡＤＡＭＴＳ１３の総量の中に存在するＡＤＡＭＴＳ１３バリアントのパーセンテージは、約４７％～約８４％である。特定の実施形態では、組成物中のＡＤＡＭＴＳ１３の総量の中に存在するＡＤＡＭＴＳ１３バリアントのパーセンテージは、約４０％、約４１％、約４２％、約４３％、約４４％、約４５％、約４６％、約４７％、約４８％、約４９％、約５０％、約５１％、約５２％、約５３％、約５４％、約５５％、約５６％、約５７％、約５８％、約５９％、約６０％、約６１％、約６２％、約６３％、約６４％、約６５％、約６６％、約６７％、約６８％、約６９％、約７０％、約７１％、約７２％、約７３％、約７４％、約７５％、約７６％、約７７％、約７８％、約７９％、約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、又は約９９％である。特定の実施形態では、組成物中のＡＤＡＭＴＳ１３の総量の中に存在するＡＤＡＭＴＳ１３バリアントのパーセンテージは、約５２％、約６０％、約６１％、約６２％、約６３％、約６４％、約６５％、約６６％、又は約７２％である。特定の実施形態では、組成物中のＡＤＡＭＴＳ１３の総量の中に存在するＡＤＡＭＴＳ１３バリアントのパーセンテージは、約５２％、約６５％、又は約７２％である。

【0110】

特定の実施形態では、医薬組成物は、少なくとも１つのＡＤＡＭＴＳ１３バリアントとＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質（例えば野生型）との組み合わせを含む。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３バリアントとＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質との比は、約４：１～約１：４、約３：１～約１：３、約２：１～約１：２である。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３バリアントとＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質との比は、約３：１～約１：３、約２：１～約１：２、又は約２：１～約１：３、又は約１：１～約１：３、又は約１：１．１～約１：２．９、又は約１：１．２～約１：２．８、又は約１：１．３～約１：２．７、又は約１：１．４～約１：２．６、又は約１：１．５～約１：２．５、又は約１：１．６～約１：２．４、又は約１：１．７～約１：２．３、又は約１：１．８～約１：２．２、又は約１：１．９～約１：２．１である。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３バリアントとＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質との比は、約１．１：１～約２．９：１、又は約１．２：１～約２．８：１、又は約１．３：１～約２．７：１、又は約１．４：１～約２．６：１、又は約１．５：１～約２．５：１、又は約１．６：１～約２．４：１、又は約１．７：１～約２．３：１、又は約１．８：１～約２．２：１、又は約１．９：１～約２．１：１である。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３バリアントとＡＤＡＭＴＳ１３野生型との比は、約１：１～約１：３である。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３バリアントとＡＤＡＭＴＳ１３野生型との比は、約３：１～約１：１である。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３バリアントとＡＤＡＭＴＳ１３野生型との比は、約１：１．１～約１：２．５である。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３バリアントとＡＤＡＭＴＳ１３野生型との比は、約４：１、約４：１．５、約４：２、約４：２．５、約４：３、約４：３．５、約３：１、約３：１．５、約３：２、約３：２．５、約２：１、又は約２：１．５である。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３バリアントとＡＤＡＭＴＳ１３野生型との比は、約１：１．５、約１：２、約１：２．５、約１：３、約１：３．５、約１：４、約２：２．５、約２：３、約２：３．５、約２：４、約３：３．５、又は約３：４である。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３バリアントとＡＤＡＭＴＳ１３野生型との比は、約１：３である。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３バリアントとＡＤＡＭＴＳ１３野生型との比は、約３：１である。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３バリアントとＡＤＡＭＴＳ１３野生型との比は、約２：１である。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３バリアントとＡＤＡＭＴＳ１３野生型との比は、約１：２である。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３バリアントとＡＤＡＭＴＳ１３野生型との比は、約１：１である。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３バリアントとＡＤＡＭＴＳ１３野生型との比は、約３：２である。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３バリアントは、配列番号１に示されているＱ９７又はＡＤＡＭＴＳ１３中の同等のアミノ酸における単一のアミノ酸置換を含む。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３バリアントはＡＤＡＭＴＳ１３ Ｑ９７Ｒ（配列番号２）である。特定の実施形態では、野生型ＡＤＡＭＴＳ１３は、米国特許出願公開第２０１１／０２２９４５５号に記載されているようなヒトＡＤＡＭＴＳ１３又は生物活性を有するその誘導体若しくは断片であり、この文献は、あらゆる目的のために、参照により本出願に援用される。一実施形態では、ｈＡＤＡＭＴＳ１３のアミノ酸配列はＧｅｎＢａｎｋ受託番号ＮＰ＿６２０５９４のものである。特定の実施形態では、ｈＡＤＡＭＴＳ１３は配列番号１である。

【0111】

例示的実施形態では、単離若しくは組換えＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質又は誘導体は、グリコシル化されている。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質又は誘導体は、少なくとも１時間、例えば２時間、３時間、４時間、５時間、６時間、又はそれを超える血漿半減期を有する。

【0112】

ｒＡＤＡＭＴＳ１３は、薬理学的に有効なＡＤＡＭＴＳ１３分子の産生を特徴とする好適な原核又は真核細胞宿主系での発現によって、生成できる。真核細胞の例は、ＣＨＯ、ＣＯＳ、ＨＥＫ２９３、ＢＨＫ、ＳＫ－Ｈｅｐ、及びＨｅｐＧ２といった哺乳類細胞である。グリコシル化は例えば、宿主細胞によって生成されるパターンに対応していてよい。いくつかの実施形態では、ＨＥＫ２９３細胞が好ましい。他の実施形態では、ＣＨＯ細胞が好ましい。本発明によるＡＤＡＭＴＳ１３の生成、単離、又は精製に使用される試薬又は条件には、特定の制限はなく、当該技術分野で公知の又は市販のいずれのシステムを採用できる。

【0113】

ｒＡＤＡＭＴＳ１３の調製には多様なベクターを使用でき、これらは真核及び原核細胞発現ベクターから選択できる。原核細胞発現のためのベクターの例としては、ｐＲＳＥＴ、ｐＥＴ、ｐＢＡＤ等のプラスミドが挙げられ、原核細胞発現ベクターで使用されるプロモーターとしては、ｌａｃ、ｔｒｃ、ｔｒｐ、ｒｅｃＡ、ａｒａＢＡＤ等が挙げられる。真核細胞発現のためのベクターの例としては：（ｉ）酵母中での発現について、ＡＯＸ１、ＧＡＰ、ＧＡＬ１、ＡＵＧ１等のプロモーターを使用する、ｐＡＯ、ｐＰＩＣ、ｐＹＥＳ、ｐＭＥＴ等のベクター；（ｉｉ）昆虫細胞中での発現について、ＰＨ、ｐ１０、ＭＴ、Ａｃ５、ＯｐＩＥ２、ｇｐ６４、ｐｏｌｈ等のプロモーターを使用する、ｐＭＴ、ｐＡｃ５、ｐＩＢ、ｐＭＩＢ、ｐＢＡＣ等のベクター；並びに（ｉｉｉ）哺乳類細胞中での発現について、ＣＭＶ、ＳＶ４０、ＥＦ－１、ＵｂＣ、ＲＳＶ、ＡＤＶ、ＢＰＶ、及びβ－アクチン等のプロモーターを使用する、ｐＳＶＬ、ｐＣＭＶ、ｐＲｃ／ＲＳＶ、ｐｃＤＮＡ３、ｐＢＰＶ等のベクター、及びワクシニアウイルス、アデノ関連ウイルス、ヘルペスウイルス、レトロウイルス等のウイルス系に由来するベクターが挙げられる。

【0114】

特定の実施形態では、本明細書で提供される製剤に使用されるＡＤＡＭＴＳ１３は、例えば米国特許第６，９２６，８９４号、米国特許出願公開第２００５／０２６６５２８号（米国特許第７，５０１，１１７号）、米国特許出願公開第２００７／００１５７０３号、米国特許出願公開第１２／４３７，３８４号、米国特許出願公開第１２／８４７，９９９号（米国特許第８，３１３，９２６号）、国際公開第２００２／４２４４１号、米国特許第９，４５８，２２２号、及び米国特許第１０，２３８，７２０号（各文献は参照により援用される）で既に開示されている方法に従って、発現させることができ、製造でき、又は精製できる。

【0115】

特定の実施形態では、純度が比較的高いＡＤＡＭＴＳ１３製剤の濃度は、分光法（即ちＡ２８０で測定される総タンパク質）、又は他のバルク判定（例えばＢｒａｄｆｏｒｄアッセイ、銀染色、凍結乾燥粉末の重量等）によって決定できる。他の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３の濃度は、ＡＤＡＭＴＳ１３ ＥＬＩＳＡアッセイによって決定できる（例えばｍｇ／ｍＬ抗原）。

【0116】

Ｂ．組成物及び製剤
本明細書で提供されるのは、ＣＯＶＩＤ－１９対象の治療、例えばＶＷＦの異常に高いレベル、及び／又はそれに起因する深部静脈血栓症若しくは肺塞栓症等の合併症を治療するために使用できる、医薬組成物である。このような組成物は、有効量の、ＡＤＡＭＴＳ１３又は生物活性を有するその誘導体若しくはバリアントを含む。

【0117】

医薬組成物は、１つ又は複数の薬学的に許容可能なキャリア及び／又は希釈剤を含むことができる。医薬組成物は、治療される患者／対象によるＡＤＡＭＴＳ１３の産生若しくは分泌を刺激する作用剤；ＡＤＡＭＴＳ１３の分解を阻害することによってその（若しくはＡＤＡＭＴＳ１３のグリコシル化バリアントの）半減期を延長する作用剤；（例えばＡＤＡＭＴＳ１３に結合することで、活性化性のコンフォメーション変化を誘発することにより）ＡＤＡＭＴＳ１３活性を強化する作用剤；又は循環からのＡＤＡＭＴＳ１３のクリアランスを阻害することによって、その血漿濃度を上昇させる作用剤といった、１つ又は複数の追加の活性成分も含むことができる。

【0118】

組成物又は医薬組成物の製剤は、選択される投与経路に応じて変化する（例えば溶液又は乳液）。投与対象の組成物を含む適切な組成物を、生理学的に許容可能なビヒクル又はキャリア中で調製する。溶液又は乳液について、好適なキャリアとしては、例えば水溶液若しくはアルコール／水溶液、乳液又は懸濁液が挙げられ、生理食塩水及び緩衝媒体が含まれる。特定の実施形態では、非経口ビヒクルとしては、塩化ナトリウム溶液、リンゲルブドウ糖液、ブドウ糖及び塩化ナトリウム、乳酸リンゲル液、又は不揮発性油が挙げられる。特定の態様では、静脈内ビヒクルとしては、様々な添加剤、防腐剤、又は流体、栄養素、又は電解質補充剤が挙げられる。

【0119】

少なくとも１つのＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質（例えば野生型及び／又はバリアント）を活性成分として含有する、本開示の化合物及び方法で使用できる組成物又は医薬組成物は、様々な態様において、投与経路に応じて薬学的に許容可能なキャリア又は添加剤を含有する。このようなキャリア又は添加剤の例としては、水、薬学的に許容可能な有機溶媒、コラーゲン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、カルボキシビニルポリマー、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリアクリル酸ナトリウム、アルギン酸ナトリウム、水溶性デキストラン、カルボキシメチルスターチナトリウム、ペクチン、メチルセルロース、エチルセルロース、キサンタンガム、アラビアガム、カゼイン、ゼラチン、寒天、ジグリセリン、グリセリン、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、ワセリン、パラフィン、ステアリルアルコール、ステアリン酸、ヒト血清アルブミン（ｈｕｍａｎ ｓｅｒｕｍ ａｌｂｕｍｉｎ：ＨＳＡ）、マンニトール、ソルビトール、ラクトース、薬学的に許容可能な界面活性剤等が挙げられる。使用される添加剤は、限定するものではないが以上のもの又はこれらの組み合わせから、剤形に応じて適宜選択される。

【0120】

多様な水性キャリア、例えば水、緩衝水、０．４％生理食塩水、０．３％グリシン、又は水性懸濁液は、様々な態様において、水性懸濁液の製造に好適な賦形剤と混合された活性化合物を含有する。このような賦形剤は、懸濁剤、例えばカルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、トラガントガム、及びアラビアガムであり、いくつかの例では、分散剤又は湿潤剤は、天然ホスファチド、例えばレシチン、又は脂肪酸を含む酸化アルキレンの濃縮産物、例えばステアリン酸ポリオキシエチレン、又は長鎖脂肪族アルコールを含む酸化エチレンの濃縮産物、例えばヘプタデカエチル－エンオキシセタノール、又は脂肪酸及びヘキシトール由来の部分エステルを含む酸化エチレンの濃縮産物、例えばモノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビトール、又は脂肪酸及びヘキシトール無水物由来の部分エステルを含む酸化エチレンの濃縮産物、例えばモノオレイン酸ポリエチレンソルビタンである。特定の実施形態では、水性懸濁液は、１つ又は複数の防腐剤、例えばエチル、又はｎ－プロピル、ｐ－ヒドロキシベンゾエートを含有する。

【0121】

いくつかの特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３組成物は貯蔵のために凍結乾燥され、使用前に好適なキャリアで再構成される。当該技術分野で公知のいずれの好適な凍結乾燥技法及び再構成技法が採用される。凍結乾燥及び再構成が、様々な程度のタンパク質活性の喪失につながること、及び補償のために使用レベルが調整されることが多いことは、当業者には理解される。

【0122】

水の添加による水性懸濁液の調製に好適な分散性粉末及び顆粒は、分散剤又は湿潤剤、懸濁剤、及び１つ又は複数の防腐剤と混合された活性化合物を提供する。好適な分散剤又は湿潤剤、及び懸濁剤は、上述のものによって既に例示されている。

【0123】

特定の実施形態では、本明細書で提供されるＡＤＡＭＴＳ１３組成物は更に、米国特許出願公開第２０１１０２２９４５５号及び／又は米国特許出願公開第２０１４／０２７１６１１号（各文献は、あらゆる目的のためにその全体が参照により本出願に援用される）に記載されているような、１つ又は複数の薬学的に許容可能な賦形剤、キャリア、及び／又は希釈剤を含んでよい。

【0124】

特定の実施形態では、本明細書で提供されるＡＤＡＭＴＳ１３組成物は、米国特許出願公開第２０１１／０２２９４５５号及び／又は米国特許出願公開第２０１４／０２７１６１１号（各文献は、あらゆる目的のためにその全体が参照により本出願に援用される）に記載されているような範囲の等張性を有する。

【0125】

いくつかの実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３又は生物活性を有するそのバリアントは、治療される患者／対象によるＡＤＡＭＴＳ１３の産生若しくは分泌を刺激する作用剤；ＡＤＡＭＴＳ１３の分解を阻害することによってその半減期を延長する作用剤；（例えばＡＤＡＭＴＳ１３に結合することで、活性化性のコンフォメーション変化を誘発することにより）ＡＤＡＭＴＳ１３活性を強化する作用剤；又は循環からのＡＤＡＭＴＳ１３のクリアランスを阻害することによって、その血漿濃度を上昇させる作用剤といった、１つ又は複数の追加の活性成分と共に投与される。同時投与できる別の成分としては、血液希釈剤（例えばアスピリン）、抗血小板剤、及び組織プラスミノーゲン活性化因子（ｔｉｓｓｕｅ ｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎ ａｃｔｉｖａｔｏｒ：ｔＰＡ）、プラスミンを活性化してフィブリンを切断する血栓溶解セリンプロテアーゼが挙げられる。

【0126】

ある態様では、本発明はＡＤＡＭＴＳ１３（Ａ１３）及びｒＡＤＡＭＴＳ１３（ｒＡ１３）タンパク質の安定化済み製剤を提供する。一実施形態では、本発明の製剤は、少なくとも約４０℃までの温度で少なくとも約６か月間保管した場合に安定している。他の実施形態では、本明細書で提供される製剤は、長期間にわたって保管した場合に、相当なＡＤＡＭＴＳ１３活性を保持する。更に他の実施形態では、本発明の製剤は、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の二量体化、オリゴマー化、及び／又は凝集を低減又は遅延させる。一実施形態では、本発明は、治療有効量又は用量のＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質、準生理学的濃度から生理学的濃度までの薬学的に許容可能な塩、安定化濃度の１つ又は複数の糖及び／又は糖アルコール、非イオン界面活性剤、製剤に中性ｐＨを提供する緩衝剤、並びに任意選択でカルシウム及び／又は亜鉛塩を含む、ＡＤＡＭＴＳ１３の製剤を提供する。一般に、本明細書で提供される安定化済みＡＤＡＭＴＳ１３製剤は、薬学的投与に好適である。ある好ましい実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質は、ヒトＡＤＡＭＴＳ１３、又は生物活性を有するその誘導体若しくは断片である。

【0127】

一実施形態では、本発明は、それを必要とする対象に：（ａ）１ｍｇのＡＤＡＭＴＳ１３につき少なくとも１００単位のＡＤＡＭＴＳ１３活性（即ちＦＲＥＴＳ－ｖＷＦ７３活性）；（ｂ）０ｍＭ～２００ｍＭ、又は０ｍＭ～１００ｍＭの薬学的に許容可能な塩；（ｃ）０．５ｍＭ～２０ｍＭのカルシウム；（ｄ）糖及び／又は糖アルコール；（ｅ）非イオン界面活性剤；並びに（ｆ）ｐＨを６．０～８．０に維持するための緩衝剤を含む、ＡＤＡＭＴＳ１３製剤を投与するステップを含む、方法を提供する。一実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３の安定化済み製剤は、１ｍｇのＡＤＡＭＴＳ１３につき少なくとも２００単位のＡ１３活性を有する。別の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３の安定化済み製剤は、１ｍｇのＡＤＡＭＴＳ１３につき少なくとも４００単位のＡ１３活性を有する。ある好ましい実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３の安定化済み製剤は、１ｍｇのＡＤＡＭＴＳ１３につき少なくとも６００単位のＡ１３活性を有する。より好ましい実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３の安定化済み製剤は、１ｍｇのＡＤＡＭＴＳ１３につき少なくとも８００単位のＡ１３活性を有する。更に別の好ましい実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３の安定化済み製剤は、１ｍｇのＡＤＡＭＴＳ１３につき少なくとも１０００単位のＡ１３活性を有する。一実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３の安定化済み製剤は、１ｍｇのＡＤＡＭＴＳ１３につき約１００単位～約２０００単位のＡＤＡＭＴＳ１３活性を有する。ある具体的実施形態では、本発明は：（ａ）１ｍｇのＡＤＡＭＴＳ１３につき少なくとも１００単位のＡＤＡＭＴＳ１３活性；（ｂ）０～２００ｍＭ又は０ｍＭ～１００ｍＭのＮａＣｌ；（ｃ）２ｍＭ～４ｍＭのカルシウム；（ｄ）２％～４％のマンニトール；（ｅ）０．５％～２％のスクロース；（ｆ）０．０２５～０．１％のポリソルベート８０；及び（ｇ）１０ｍＭ～５０ｍＭのヒスチジン（ｐＨ７．０±０．２）を含む、ＡＤＡＭＴＳ１３（Ａ１３）の安定化済み製剤を提供する。特定の実施形態では、組成物は、１ｍｇ又は１ｍｌあたり、少なくとも約２００単位、約２００～約４００単位、約２００～約３００単位、約３００単位、又は約２９４単位のＡＤＡＭＴＳ１３活性を有する。

【0128】

Ｃ．治療の方法
特定の態様では、本発明は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染した又はＣＯＶＩＤ－１９に罹患した対象において、少なくとも１つの状態又は合併症を治療又は防止する方法を提供し、その方法は、単離又は組換えＡＤＡＭＴＳ１３を含む組成物を投与することを含む。特定の実施形態では、対象は、状態又は合併症が存在する前に、単離又は組換えＡＤＡＭＴＳ１３を含む組成物を投与される。特定の実施形態では、対象は、状態又は合併症が存在した後に、単離又は組換えＡＤＡＭＴＳ１３を含む組成物を投与される。

【0129】

特定の態様では、本発明は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染又はＣＯＶＩＤ－１９に関連する少なくとも１つの状態又は合併症の発症のリスクを有する対象を治療する方法を提供し、その方法は、単離又は組換えＡＤＡＭＴＳ１３を含む組成物を投与することを含む。特定の実施形態では、対象は、状態又は合併症が存在する前に、単離又は組換えＡＤＡＭＴＳ１３を含む組成物を投与される。特定の実施形態では、対象は、状態又は合併症が存在した後に、単離又は組換えＡＤＡＭＴＳ１３を含む組成物を投与される。

【0130】

本明細書で提供されるのは、ＣＯＶＩＤ－１９対象の治療、例えばＣＯＶＩＤ－１９に起因する異常に高いＶＷＦのレベル及び／又は合併症若しくは危険因子、特に深部静脈血栓症又は肺塞栓症を治療するために使用できる、医薬組成物及び方法である。このような組成物は、有効量の、単離又は組換えＡＤＡＭＴＳ１３又は生物活性を有するその誘導体若しくはバリアントを含む。特定の実施形態では、組成物はｒＡＤＡＭＴＳ１３を含む。特定の実施形態では、組成物は、ｈｒＡＤＡＭＴＳ１３（参照配列、例えば配列番号１に対して、例えば少なくとも８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％の同一性を有する）を含む。特定の実施形態では、組成物は、ＡＤＡＭＴＳ１３のバリアント（参照配列、例えば配列番号２に対して、例えば少なくとも８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％の同一性を有する）を含む。

【0131】

ＡＤＡＭＴＳ１３は、予防及び／又は治療目的で、哺乳類、特にヒトに投与できる。いくつかの実施形態では、本発明を用いて、コロナウイルス関連血液凝固障害、血管閉塞、又は梗塞、例えばＤＶＴ若しくは肺塞栓症の有害な影響を、出血の可能性の上昇又は抹消免疫系の無効化を伴わずに低減させる。いくつかの実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３は、例えばコロナウイルス関連血液凝固障害又は血管閉塞のリスクを有する対象に、予防的に投与される。本発明に従って治療できる対象の例としては、上述のような障害、血栓症、若しくは塞栓症に罹患した、又は罹患している対象が挙げられる。これは、状態が重症である場合、又はＡＤＡＭＴＳ１３をＣＯＶＩＤ－１９の診断及びいずれの関連障害、病歴、若しくは危険因子の診断の直後に投与できる場合に当てはまる。

【0132】

ＡＤＡＭＴＳ１３は、フォン・ヴィレブランド因子（ＶＷＦ）の調節及び分解に寄与する。ＶＷＦタンパク質は、血漿中に存在し、血液凝固において主要な役割を果たす、大型の多量体糖タンパク質である。ＶＷＦは、血小板α顆粒及び内皮細胞のワイベル－パラーデ小体中に、超大型形態５（ＵＬ－ＶＷＦ、＞２０００万Ｄａ）で貯蔵され、傷害又は炎症中にそこから放出される。血小板接着のためにすぐに消費されない場合、ＵＬ－ＶＷＦは、ＡＤＡＭＴＳ１３によって、血漿中を循環する、より小さく接着性の低い多量体へと切断される。血栓溶解後に生じるもの等の虚血は、ワイベル－パラーデ小体の分泌の強力な誘発因子であり、従って梗塞領域の血栓形成性を高める。基本的なＶＷＦモノマーは、特定の機能を有する特定のドメイン：（１）ＶＩＩＩ因子に結合するＤ’／Ｄ３ドメイン；（２）血小板ＧＰｌｂ受容体、ヘパリン、及び場合によってはコラーゲンに結合する、Ａｌドメイン；（３）コラーゲンに結合するＡ３ドメイン；（４）活性化時にＲ－Ｇ－Ｄモチーフが血小板インテグリンαＩＩｂβ３に結合する、Ｃｌドメイン；並びに（５）ＶＷＦが血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）、形質転換増殖因子β（ＴＧＦβ）、及びβヒト絨毛性ゴナドトロピン（βＨＣＧ）と共有するＣ末端に位置する、「システインノット（ｃｙｓｔｅｉｎｅ ｋｎｏｔ）」ドメインを含む、２０５０アミノ酸のタンパク質である。ＶＷＦの多量体は、分子量が２０，０００ｋＤａを超える８０個超のモノマーからなる、極めて大きなものであり得る。これらの大型のＶＷＦ多量体は、生物学的に極めて機能が高く、血管の傷害部位に対する血小板の接着を仲介でき、また凝固促進タンパク質であるＶＩＩＩ因子に結合してこれを安定化させることができる。ＶＷＦの欠乏又はＶＷＦの変化は、様々な出血性障害を引き起こすことが知られている。

【0133】

本発明によると、単離又は組換えＡＤＡＭＴＳ１３、好ましくはｒＡＤＡＭＴＳ１３の投与は、初期段階及び後期段階のＣＯＶＩＤ－１９対象、特に年齢（例えば少なくとも約６５歳）を理由として、及び／又はＣＯＶＩＤ－１９に関連する１つ又は複数の合併症若しくは危険因子を理由として、「危険な」状態を呈している対象を、治療する。これらには、例えば、限定するものではないが、ＶＷＦ及び／又はその多量体（特に超大型多量体（ＵＨＭＷ））のレベルの上昇、ＶＷＦの活性レベルの上昇、内因性ＡＤＡＭＴＳ１３の血漿レベルの低下、内因性ＡＤＡＭＴＳ１３の活性の低下、サイトカインレベルの上昇、凝固障害、血液凝固障害、静脈閉塞性障害、血栓形成促進状態、遺伝性血栓性血小板減少性紫斑病（ＴＴＰ）、後天性ＴＴＰ、播種性血管内凝固症候群（ＤＩＣ）、敗血症、鎌状赤血球症、腎不全、呼吸不全、急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、肺炎、喘息、妊娠高血圧症候群、閉経期高血圧、閉経周辺期高血圧、高血圧症（例えば肺高血圧症）、血栓症（例えばＤＶＴ）、気道の血栓性微小血管症（ＴＭＡ）を含むＴＭＡ、塞栓症（例えばＰＥ）、心筋梗塞、並びに卒中（例えば虚血性脳卒中又は脳卒中）、又はこれらの症状若しくは合併症（「危険因子」若しくは「合併症」と総称）が含まれる。

【0134】

いかなる理論によっても束縛されることを望むものではないが、ＡＤＡＭＴＳ１３は、少なくとも以下の理由から、初期段階の患者の治療又は予防、並びに後期段階の及び危険な状態の患者の治療又はレスキュー療法を含む、「危険な」ＣＯＶＩＤ－１９対象にとって安全かつ効果的である：（１）ＡＤＡＭＴＳ１３は、ＶＷＦの分子サイズの低減（特に超大型多量体の喪失）を伴って、ＶＷＦを迅速に切断でき；（２）ＶＷＦのＡＤＡＭＴＳ１３仲介型切断は、血小板及び血管タンパク質へのＶＷＦの接着性を低下させ、従って血小板血栓の形成を低減し；（３）超生理学的レベルのＶＷＦの発生は、基質過負荷によってＡＤＡＭＴＳ１３を消費して、循環ＡＤＡＭＴＳ１３の活性レベルを有効又は臨界閾値未満に低下させる可能性があり；（４）ＡＤＡＭＴＳ１３は選択性が強いタンパク質分解酵素であり、唯一知られている機能はＶＷＦの切断である。ＶＷＦ及びＡＤＡＭＴＳ１３は互いを消費せず、互いに結合したときに沈殿物を形成しない。インビボでは、ＶＷＦタンパク質構造の一部を伸長させてＶＷＦにアクセスできるようにするために、せん断力が必要であると考えられる。これにより、ＶＷＦとＡＤＡＭＴＳ１３との平衡及びバランスの更なる調整が提供され、更に過剰摂取に対する感度が低減される。ＡＤＡＭＴＳ１３は忍容性が良好となり、副作用があったとしてもほとんど無く、有害な出血がないという利点も含まれる。現在、ＣＯＶＩＤ－１９患者にはヘパリン等の抗凝固剤が投与されることが多く、これは深刻な出血の問題を引き起こす場合がある。

【0135】

特定の実施形態では、治療有効量のＡＤＡＭＴＳ１３を含む医薬組成物は、コロナウイルス感染、例えばＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染の発見若しくは診断、又はコロナウイルス疾患、例えばＣＯＶＩＤ－１９の診断時に投与される。特定の実施形態では、感染及び／又は疾患の診断は、好適な臨床検査（laboratory test）に基づくものである。特定の実施形態では、組成物は、コロナウイルス対象、例えばＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染した患者又はＣＯＶＩＤ－１９患者に対して、対象が凝固障害、凝血障害、梗塞、血栓症、又は塞栓症の兆候又は症状を示すことが発見された又は診断されたときに投与される。特定の実施形態では、血栓症は深部静脈血栓症（ＤＶＴ）である。特定の実施形態では、塞栓症は肺塞栓症（ＰＥ）である。

【0136】

特定の実施形態では、組成物は、コロナウイルス感染対象、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染対象、又はＣＯＶＩＤ－１９対象に対して、異常に高いＶＷＦタンパク質又はＶＷＦ多量体（例えばＵＨＭＷ）のレベルが発見されるか又は診断されたときに、投与される。この判断は、Turecek et al., Seminars In Thrombosis and Hemostasis, 2002 Vol. 28, No. 2, 149-160；Turecek, et al., Seminars In Thrombosis and Hemostasis, 2010 Vol. 36, No. 5, 510-521（各文献は、あらゆる目的のために、参照によりその全体が援用される）に記載されている材料及び方法を用いたＥＬＩＳＡアッセイ等の、好適な臨床検査を用いて行うことができる。

【0137】

特定の実施形態では、異常に高いＶＷＦ又はその多量体（例えばＵＨＭＷ）のレベルは、レベルが、ａ）所定のベースライン値の約５０～２００％若しくは所定のベースライン値の約４２～１３６％である正常なＶＷＦ：抗原の範囲、又はｂ）所定のベースライン値の約４２～１６８％である正常なＶＷＦ：活性のうちの一方又は両方を、少なくとも約５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、又は１００％だけ有意に超過した場合に、示される。例えば前述のSwystun、及び前述のEscher 190:62（各文献は、あらゆる目的のために、その全体が参照により援用される）を参照。（各文献は、あらゆる目的のために、その全体が参照により援用される）。特定の実施形態では、ＶＷＦ又はその多量体（例えばＵＨＭＷ）のレベルは、ａ）正常なＶＷＦ：抗原の所定のベースライン範囲若しくは値、又はｂ）正常なＶＷＦ：活性の所定のベースライン範囲若しくは値のうちの一方又は両方を、少なくとも約５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、又は１００％超過する。特定の実施形態では、ＶＷＦ又はその多量体（例えばＵＨＭＷ）のレベルは、ａ）正常なＶＷＦ：抗原の所定のベースライン範囲若しくは値、又はｂ）正常なＶＷＦ：活性の所定のベースライン範囲若しくは値のうちの一方又は両方を、少なくとも約５％、１０％、又は２０％超過する。

【0138】

特定の実施形態では、組成物は、異常に低いＡＤＡＭＴＳ１３のレベルが発見されるか又は診断されたときに投与される。この判断は、好適な臨床検査を用いて行うことができる。好適な方法は、Kokame et al., Br J Haematol 2005; 129: 93-100; Tripodi, J Thromb Haemost 2004 v2 p1601-9; Tripodi, et. al., J Thromb Haemost. 2008 September; 6(9): 1534-1541（各文献は、あらゆる目的のために、その全体が参照により援用される）に記載されている。特定の実施形態では、健康な個体のＡＤＡＭＴＳ１３レベルの正常な又はベースライン範囲は、所定のベースライン値の４０～１６０％又は８７～１１３％である。例えば前述のPeyvandi、及び前述のMancini（各文献は、あらゆる目的のために、その全体が参照により援用される）を参照。

【0139】

特定の実施形態では、異常に低いＡＤＡＭＴＳ１３のレベルは、ＡＤＡＭＴＳ１３レベル及び／又は活性が正常範囲の２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、又は９０％であるときに示される。特定の実施形態では、異常に低いＡＤＡＭＴＳ１３のレベルは、ＡＤＡＭＴＳ１３レベル及び／又は活性が正常ベースラインの２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、又は７０％であるときに示される。特定の実施形態では、組成物は、これらの発見又は診断のうちのいずれの１つから２４時間以内に投与される。他の実施形態では、組成物は、これらの発見又は診断のうちのいずれの１つから１２時間以内に投与される。他の実施形態では、組成物は、これらの発見又は診断のうちのいずれの１つから８、６、４、又は２時間以内に投与される。他の実施形態では、組成物は、これらの発見又は診断のうちのいずれの１つから１時間以内に投与される。

【0140】

特定の実施形態では、所定の正常ベースラインは、検証／選択された測定方法を用いる試験所内の正常対照集団に基づく。特定の実施形態では、あるベースライン範囲が提供されている場合、対象の試料は、正常対照に対する増加を評価する際にはその範囲の上限と比較される。特定の実施形態では、あるベースライン範囲が提供されている場合、対象の試料は、正常対照に対する減少を評価する際にはその範囲の上限と比較される。特定の実施形態では、あるベースライン範囲が提供されている場合、対象の試料は、その所定のベースライン範囲の平均、中央値、又は最頻値と比較される。特定の実施形態では、あるベースライン範囲が提供されている場合、対象の試料は、その所定のベースライン範囲の平均と比較される。

【0141】

投与経路には具体的な制限はなく、例えば皮下、静脈内、又は静脈内とすることができる。ＡＤＡＭＴＳ１３の経口投与も可能である。特定の実施形態では、静脈内投与が好ましい。特定の実施形態では、皮下投与が好ましい。例えば、好適な液体、凍結乾燥製剤から再構成された液体が提供されている場合には、ｒＡＤＡＭＴＳ１３組成物は静脈内投与してよい。ＣＯＶＩＤ－１９に対する静脈内Ａ１３用量は、ＩＵ／ｋｇとして示すことができる。ＣＯＶＩＤ－１９に対する皮下Ａ１３用量は、ＩＵ／ｋｇとして示すことができる。

【0142】

Ｄ．対象がリスクを有することを判断する方法
特定の態様では、本発明は、ＣＯＶＩＤ－１９と診断された対象の血栓性凝固障害のリスクが増大しているかどうかを決定する方法を提供し、その方法は：ａ）血漿試料において、ｉ）ＶＷＦタンパク質の血漿レベル；ｉｉ）血漿試料中のＶＷＦの活性レベル；ｉｉｉ）ＵＨＭＷ ＶＷＦタンパク質多量体の血漿レベル；ｉｖ）ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の血漿レベル；又はｖ）血漿試料中のＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の活性レベルのうちの１つ又は複数を測定するステップ；ｂ）ステップａ）で測定された１つ又は複数の血漿レベル又は活性レベルを、同じ１つ又は複数の血漿レベル又は活性レベルに関するベースライン範囲又はベースライン値と比較するステップ；及びｃ）以下：ｉ）ＶＷＦタンパク質の血漿レベルが上昇していること；ｉｉ）ＶＷＦの活性レベルが上昇していること；ｉｉｉ）血漿ＵＨＭＷ ＶＷＦタンパク質多量体が検出される、若しくはＵＨＭＷ ＶＷＦタンパク質多量体の血漿レベルが上昇していること；ｉｖ）ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の血漿レベルが低下していること；又はｖ）ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の活性レベルが低下していること、のうちの少なくとも１つが満たされた場合に、対象が血栓性凝固障害のリスクを有すると特定するステップを含む。

【0143】

特定の実施形態では、血栓性凝固障害としては、限定するものではないが、血小板凝集、血液凝固、血栓症、血栓性微小血管症、塞栓症、梗塞、静脈閉塞、卒中、血栓症由来の腎不全、又はこれらの組み合わせが挙げられる。特定の実施形態では、血栓症は深部静脈血栓症（ＤＶＴ）である。特定の実施形態では、塞栓症は肺塞栓症（ＰＥ）である。特定の実施形態では、血栓性凝固障害は、血栓症由来の腎不全である。

【0144】

特定の実施形態では、少なくともＶＷＦタンパク質の血漿レベルが上昇している。特定の実施形態では、少なくともＶＷＦの活性レベルが上昇している。特定の実施形態では、少なくともＵＨＭＷ ＶＷＦタンパク質多量体が検出される。特定の実施形態では、少なくともＵＨＭＷ ＶＷＦタンパク質多量体の血漿レベルが上昇している。特定の実施形態では、少なくともＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の血漿レベルが低下している。特定の実施形態では、少なくともＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の活性レベルが低下している。

【0145】

特定の実施形態では、血栓性凝固障害としては、限定するものではないが、血小板凝集、血液凝固、血栓症、血栓性微小血管症、塞栓症、梗塞、静脈閉塞、卒中、血栓症由来の腎不全、又はこれらの組み合わせが挙げられる。特定の実施形態では、血栓症は深部静脈血栓症（ＤＶＴ）である。特定の実施形態では、塞栓症は肺塞栓症（ＰＥ）である。特定の実施形態では、血栓性凝固障害は、血栓症由来の腎不全である。

【0146】

特定の実施形態では、対象は、ＶＷＦタンパク質の血漿レベル及び／又はＶＷＦ活性が、個々に、ＶＷＦタンパク質の血漿レベル及び／又はＶＷＦ活性に関するベースライン値の約１００～６００％、約１００～５００％、約１００～４００％、約１００～３００％、約１００～２５０％、約１００～２００％、約１１０～６００％、約１１０～５００％、約１１０～４００％、約１１０～３００％、約１１０～２５０％、約１１０～２００％、約１１５～６００％、約１１５～５００％、約１１５～４００％、約１１５～３００％、約１１５～２５０％、約１１５～２００％、約１２０～６００％、約１２０～５００％、約１２０～４００％、約１２０～３００％、約１２０～２５０％、又は約１２０～２００％である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＶＷＦタンパク質の血漿レベル及び／又はＶＷＦ活性が、個々に、ＶＷＦタンパク質の血漿レベル及び／又はＶＷＦ活性に関するベースライン値の約１００～４００％、約１１０～３５０％、約１２０～３００％、約１３０～２５０％、又は約１４０～２００％である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、このリスクを有する対象には、低用量（例えば約１０～４０ＩＵ／ｋｇ）のＡＤＡＭＴＳ１３が投与される。特定の実施形態では、このリスクを有する対象には、高用量（例えば約４０～４００ＩＵ／ｋｇ） のＡＤＡＭＴＳ１３が投与される。

【0147】

特定の実施形態では、対象は、ＶＷＦタンパク質の血漿レベル及び／又はＶＷＦ活性が、個々に、ＶＷＦタンパク質の血漿レベル及び／又はＶＷＦ活性に関するベースライン値の約１００～４００％、約１００～３５０％、約１００～３００％、約１００～２５０％、約１００～２００％、約１００～１４０％、約１００～１３０％、約１００～１２０％、又は約１００～１１０％である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＶＷＦタンパク質の血漿レベル及び／又はＶＷＦ活性が、個々に、ＶＷＦタンパク質の血漿レベル及び／又はＶＷＦ活性に関するベースライン値の約１１０～４００％、約１１０～３５０％、約１１０～３００％、約１１０～２５０％、約１１０～２００％、約１１０～１４０％、約１１０～１３０％、又は約１１０～１２０％である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＶＷＦタンパク質の血漿レベル及び／又はＶＷＦ活性が、個々に、ＶＷＦタンパク質の血漿レベル及び／又はＶＷＦ活性に関するベースライン値の約１２０～４００％、約１２０～３５０％、約１２０～３００％、約１２０～２５０％、約１２０～２００％、約１２０～１４０％、又は約１２０～１３０％である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＶＷＦタンパク質の血漿レベル及び／又はＶＷＦ活性が、個々に、ＶＷＦタンパク質の血漿レベル及び／又はＶＷＦ活性に関するベースライン値の約１３０～４００％、約１３０～３５０％、約１３０～３００％、約１３０～２５０％、約１３０～２００％、又は約１３０～１４０％である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＶＷＦタンパク質の血漿レベル及び／又はＶＷＦ活性が、個々に、ＶＷＦタンパク質の血漿レベル及び／又はＶＷＦ活性に関するベースライン値の約１４０～４００％、約１４０～３５０％、約１４０～３００％、約１４０～２５０％、又は約１４０～２００％である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＶＷＦタンパク質の血漿レベル及び／又はＶＷＦ活性が、個々に、ＶＷＦタンパク質の血漿レベル及び／又はＶＷＦ活性に関するベースライン値の約２００～４００％、約２００～３５０％、約２００～３００％、又は約２００～２５０％である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＶＷＦタンパク質の血漿レベル及び／又はＶＷＦ活性が、個々に、ＶＷＦタンパク質の血漿レベル及び／又はＶＷＦ活性に関するベースライン値の約２５０～４００％、約２５０～３５０％、又は約２５０～３００％である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＶＷＦタンパク質の血漿レベル及び／又はＶＷＦ活性が、個々に、ＶＷＦタンパク質の血漿レベル及び／又はＶＷＦ活性に関するベースライン値の約３００～４００％、約３００～３５０％、又は約３５０～４００％である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、このリスクを有する対象には、低用量（例えば約１０～４０ＩＵ／ｋｇ）のＡＤＡＭＴＳ１３が投与される。特定の実施形態では、このリスクを有する対象には、高用量（例えば約４０～４００ＩＵ／ｋｇ）のＡＤＡＭＴＳ１３が投与される。

【0148】

特定の実施形態では、対象は、ＶＷＦタンパク質の血漿レベル及び／又はＶＷＦ活性が、個々に、ＶＷＦタンパク質の血漿レベル及び／又はＶＷＦ活性に関するベースライン値の約又は少なくとも約１００％、１０５％、１１０％、１１５％、１２０％、１２５％、１３０％、１３５％、１４０％、１４５％、１５０％、１５５％、１６０％、１６５％、１７０％、１７５％、１８０％、１８５％、１９０％、２００％、２２５％、２５０％、２７５％、３００％、３２５％、３５０％、３７５％、４００％、４２５％、４５０％、４７５％、５００％、５２５％、５５０％、５７５％、又は６００％である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＶＷＦタンパク質の血漿レベル及び／又はＶＷＦ活性が、個々に、ＶＷＦタンパク質の血漿レベル及び／又はＶＷＦ活性に関するベースライン値の少なくとも約１００％、少なくとも約１２０％、少なくとも約２００％、少なくとも約３００％、又は更に高いレベルである場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、このリスクを有する対象には、低用量（例えば約１０～４０ＩＵ／ｋｇ）のＡＤＡＭＴＳ１３が投与される。特定の実施形態では、このリスクを有する対象には、高用量（例えば約４０～４００ＩＵ／ｋｇ）のＡＤＡＭＴＳ１３が投与される。

【0149】

特定の実施形態では、対象は、ＶＷＦタンパク質の血漿レベル及び／又はＶＷＦ活性が、個々に、ＶＷＦタンパク質の血漿レベル及び／又はＶＷＦ活性に関するベースライン値の約１００～４００％、約１１０～３５０％、約１２０～３００％、約１３０～２５０％、又は約１４０～２００％である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＶＷＦタンパク質の血漿レベル及び／又はＶＷＦ活性が、個々に、ＶＷＦタンパク質の血漿レベル及び／又はＶＷＦ活性に関するベースライン値の約１００～３００％、約１１０～３００％、約１２０～３００％、約１３０～３００％、又は約１４０～３００％である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＶＷＦタンパク質の血漿レベル及び／又はＶＷＦ活性が、個々に、ＶＷＦタンパク質の血漿レベル及び／又はＶＷＦ活性に関するベースライン値の約１００～２５０％、約１１０～２５０％、約１２０～２５０％、約１３０～２５０％、又は約１４０～２５０％である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＶＷＦタンパク質の血漿レベル及び／又はＶＷＦ活性が、個々に、ＶＷＦタンパク質の血漿レベル及び／又はＶＷＦ活性に関するベースライン値の約１００～２００％、約１１０～２００％、約１２０～２００％、約１３０～２００％、又は約１４０～２００％である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＶＷＦタンパク質の血漿レベル及び／又はＶＷＦ活性が、個々に、ＶＷＦタンパク質の血漿レベル及び／又はＶＷＦ活性に関するベースライン値の約２００～２２０％、約２２０～２４０％、約２４０～２６０％、約２６０～２８０％、又は約２８０～３００％である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＶＷＦタンパク質の血漿レベル及び／又はＶＷＦ活性が、個々に、ＶＷＦタンパク質の血漿レベル及び／又はＶＷＦ活性に関するベースライン値の約１２０～３００％である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、このリスクを有する対象には、低用量（例えば約１０～４０ＩＵ／ｋｇ）のＡＤＡＭＴＳ１３が投与される。

【0150】

特定の実施形態では、対象は、ＶＷＦタンパク質の血漿レベル及び／又はＶＷＦ活性が、個々に、ＶＷＦタンパク質の血漿レベル及び／又はＶＷＦ活性に関するベースライン値の約又は少なくとも約１００％、１０５％、１１０％、１１５％、１２０％、１２５％、１３０％、１３５％、１４０％、１４５％、１５０％、１５５％、１６０％、１６５％、１７０％、１７５％、１８０％、１８５％、１９０％、２００％、２２５％、２５０％、２７５％、３００％である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＶＷＦタンパク質の血漿レベル及び／又はＶＷＦ活性が、個々に、ＶＷＦタンパク質の血漿レベル及び／又はＶＷＦ活性に関するベースライン値の約１００～１２０％、約１２０～１４０％、約１４０～１６０％、約１６０～１８０％、約１８０～２００％、約２００～２２０％、約２２０～２４０％、約２４０～２６０％、約２６０～２８０％、又は約２８０～３００％である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、このリスクを有する対象には、低用量（例えば約１０～４０ＩＵ／ｋｇ）のＡＤＡＭＴＳ１３が投与される。

【0151】

特定の実施形態では、対象は、ＶＷＦタンパク質の血漿レベル及び／又はＶＷＦ活性が、個々に、ＶＷＦタンパク質の血漿レベル及び／又はＶＷＦ活性に関するベースライン値の約又は少なくとも約３００％、３２５％、３５０％、３７５％、４００％、４２５％、４５０％、４７５％、５００％、５２５％、５５０％、５７５％、６００％、又は更に高いレベルである場合に、血栓性凝固障害の発症の高いリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＶＷＦタンパク質の血漿レベル及び／又はＶＷＦ活性が、個々に、ＶＷＦタンパク質の血漿レベル及び／又はＶＷＦ活性に関するベースライン値の少なくとも約２５０、２７５、３００、３２５、又は３５０％である場合に、血栓性凝固障害の発症の高いリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＶＷＦタンパク質の血漿レベル及び／又はＶＷＦ活性が、個々に、ＶＷＦタンパク質の血漿レベル及び／又はＶＷＦ活性に関するベースライン値の少なくとも約３００％である場合に、血栓性凝固障害の発症の高いリスクを有する。特定の実施形態では、このリスクを有する対象には、高用量（例えば約４０～４００ＩＵ／ｋｇ）のＡＤＡＭＴＳ１３が投与される。

【0152】

特定の実施形態では、対象は、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の血漿レベル、及び／又はＡＤＡＭＴＳ１３活性が、個々に、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質血漿レベルに関するベースライン値及び／又はＡＤＡＭＴＳ１３活性の約５０～１００％、約５５～１００％、約６０～１００％、約６５～１００％、約７０～１００％、約７５～１００％、約８０～１００％、約８５～１００％、又は約９０～１００％である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の血漿レベル、及び／又はＡＤＡＭＴＳ１３活性が、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質血漿レベルに関するベースライン値及び／又はＡＤＡＭＴＳ１３活性の約７０～１００％である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の血漿レベル、及び／又はＡＤＡＭＴＳ１３活性が、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質血漿レベルに関するベースライン値及び／又はＡＤＡＭＴＳ１３活性の約６０、６５、７０、又は７５％以下である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の血漿レベル、及び／又はＡＤＡＭＴＳ１３活性が、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質血漿レベルに関するベースライン値及び／又はＡＤＡＭＴＳ１３活性の約７０％以下である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、このリスクを有する対象には、低用量（例えば約１０～４０ＩＵ／ｋｇ）のＡＤＡＭＴＳ１３が投与される。特定の実施形態では、このリスクを有する対象には、高用量（例えば約４０～４００ＩＵ／ｋｇ）のＡＤＡＭＴＳ１３が投与される。

【0153】

特定の実施形態では、対象は、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の血漿レベル、及び／又はＡＤＡＭＴＳ１３活性が、個々に、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質血漿レベルに関するベースライン値及び／又はＡＤＡＭＴＳ１３活性の約１００％、約９５％、約９０％、約８５％、約８０％、約７５％、約７０％、約６５％、約６０％、約５５％、約５０％、約４５％、約４０％、約３５％、約３０％、約２５％、又は約２０％である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、このリスクを有する対象には、低用量（例えば約１０～４０ＩＵ／ｋｇ）のＡＤＡＭＴＳ１３が投与される。特定の実施形態では、このリスクを有する対象には、高用量（例えば約４０～４００ＩＵ／ｋｇ）のＡＤＡＭＴＳ１３が投与される。

【0154】

特定の実施形態では、対象は、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の血漿レベル、及び／又はＡＤＡＭＴＳ１３活性が、個々に、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質血漿レベルに関するベースライン値及び／又はＡＤＡＭＴＳ１３活性の約１００％以下、約９５％以下、約９０％以下、約８５％以下、約８０％以下、約７５％以下、約７０％以下、約６５％以下、約６０％以下、約５５％以下、約５０％以下、約４５％以下、約４０％以下、約３５％以下、約３０％以下、約２５％以下、約２０％以下、又は更に低いレベルである場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、このリスクを有する対象には、低用量（例えば約１０～４０ＩＵ／ｋｇ）のＡＤＡＭＴＳ１３が投与される。特定の実施形態では、このリスクを有する対象には、高用量（例えば約４０～４００ＩＵ／ｋｇ）のＡＤＡＭＴＳ１３が投与される。

【0155】

特定の実施形態では、対象は、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の血漿レベル、及び／又はＡＤＡＭＴＳ１３活性が、個々に、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質血漿レベルに関するベースライン値及び／又はＡＤＡＭＴＳ１３活性の約６５～１００％、約７０～１００％、約７５～１００％、約８０～１００％、約８５～１００％、又は約９０～１００％である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の血漿レベル、及び／又はＡＤＡＭＴＳ１３活性が、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質血漿レベルに関するベースライン値及び／又はＡＤＡＭＴＳ１３活性の約７０～１００％である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、このリスクを有する対象には、低用量（例えば約１０～４０ＩＵ／ｋｇ）のＡＤＡＭＴＳ１３が投与される。

【0156】

特定の実施形態では、対象は、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の血漿レベル、及び／又はＡＤＡＭＴＳ１３活性が、個々に、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質血漿レベルに関するベースライン値及び／又はＡＤＡＭＴＳ１３活性の約７０％以下、約６５％以下、約６０％以下、約５５％以下、約５０％以下、約４５％以下、約４０％以下、約３５％以下、約３０％以下、約２５％以下、約２０％以下、又は更に低いレベルである場合に、血栓性凝固障害の発症の高いリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の血漿レベル、及び／又はＡＤＡＭＴＳ１３活性が、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質血漿レベルに関するベースライン値及び／又はＡＤＡＭＴＳ１３活性の約６０％以下、６５％以下、７０％以下、７５％以下、又は更に低いレベルである場合に、血栓性凝固障害の発症の高いリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の血漿レベル、及び／又はＡＤＡＭＴＳ１３活性が、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質血漿レベルに関するベースライン値及び／又はＡＤＡＭＴＳ１３活性の約７０％以下である場合に、血栓性凝固障害の発症の高いリスクを有する。特定の実施形態では、このリスクを有する対象には、低用量（例えば約４０～４００ＩＵ／ｋｇ）のＡＤＡＭＴＳ１３が投与される。

【0157】

特定の実施形態では、対象は、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体の血漿レベルが、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体血漿レベルに関するベースライン値の約１００～２００％、約１００～１９０％、約１００～１８０％、約１００～１７０％、約１００～１６０％、約１００～１５０％、約１００～１４０％、約１００～１３０％、約１００～１２０％、約１００～１１５％、約１００～１１４％、約１００～１１３％、約１００～１１２％、約１００～１１１％、約１００～１１０％、約１００～１０９％、約１００～１０８％、約１００～１０９％、約１００～１０６％、約１００～１０５％、約１００～１０４％、約１００～１０３％、約１００～１０２％、又は約１００～１０１％である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体の血漿レベルが、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体血漿レベルに関するベースライン値の約１００～１０２％、約１００～１０５％、約１００～１１０％、約１００～１１５％、又は約１００～１２０％である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体の血漿レベルが、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体血漿レベルに関するベースライン値の約１００～１１０％である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体の血漿レベルが、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体血漿レベルに関するベースライン値の少なくとも１１０％である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、このリスクを有する対象には、低用量（例えば約１０～４０ＩＵ／ｋｇ）のＡＤＡＭＴＳ１３が投与される。特定の実施形態では、このリスクを有する対象には、高用量（例えば約４０～４００ＩＵ／ｋｇ）のＡＤＡＭＴＳ１３が投与される。

【0158】

特定の実施形態では、対象は、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体の血漿レベルが、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体血漿レベルに関するベースライン値の約１００％、約１０１％、約１０２％、約１０３％、約１０４％、約１０５％、約１０６％、約１０７％、約１０８％、約１０９％、約１１０％、約１１１％、約１１２％、約１１３％、約１１４％、約１１５％、約１１６％、約１１７％、約１１８％、約１１９％、約１２０％、約１３０％、約１４０％、約１５０％、約１６０％、約１７０％、約１８０％、約１９０％、約２００％、約２５０％、約３００％、約３５０％、約４００％、又は更に高いレベルである場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体の血漿レベルが、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体血漿レベルに関するベースライン値の約１１０％以上である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、このリスクを有する対象には、低用量（例えば約１０～４０ＩＵ／ｋｇ）のＡＤＡＭＴＳ１３が投与される。特定の実施形態では、このリスクを有する対象には、高用量（例えば約４０～４００ＩＵ／ｋｇ）のＡＤＡＭＴＳ１３が投与される。

【0159】

特定の実施形態では、対象は、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体の血漿レベルが、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体血漿レベルに関するベースライン値の約１００％、約１０１％、約１０２％、約１０３％、約１０４％、約１０５％、約１０６％、約１０７％、約１０８％、約１０９％、約１１０％、約１１１％、約１１２％、約１１３％、約１１４％、又は約１１５％である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体の血漿レベルが、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体血漿レベルに関するベースライン値の少なくとも約１００％、約１０１％、約１０２％、約１０３％、約１０４％、約１０５％、約１０６％、約１０７％、約１０８％、約１０９％、約１１０％、約１１１％、約１１２％、約１１３％、約１１４％、又は約１１５％である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体の血漿レベルが、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体血漿レベルに関するベースライン値の約１００～１２０％、約１００～１１５％、約１００～１１４％、約１００～１１３％、約１００～１１２％、約１００～１１１％、約１００～１１０％、約１００～１０９％、約１００～１０８％、約１００～１０９％、約１００～１０６％、約１００～１０５％、約１００～１０４％、約１００～１０３％、約１００～１０２％、又は約１００～１０１％である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体の血漿レベルが、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体血漿レベルに関するベースライン値の約１００～１０２％、約１００～１０５％、約１００～１１０％、又は約１００～１１５％である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体の血漿レベルが、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体血漿レベルに関するベースライン値の約１００～１１０％である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、このリスクを有する対象には、低用量（例えば約１０～４０ＩＵ／ｋｇ）のＡＤＡＭＴＳ１３が投与される。

【0160】

特定の実施形態では、対象は、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体の血漿レベルが、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体血漿レベルに関するベースライン値の少なくとも約１１０％、約１１１％、約１１２％、約１１３％、約１１４％、約１１５％、約１１６％、約１１７％、約１１８％、約１１９％、約１２０％、約１３０％、約１４０％、約１５０％、約１６０％、約１７０％、約１８０％、約１９０％、約２００％、約２５０％、約３００％、約３５０％、約４００％、又は更に高いレベルである場合に、血栓性凝固障害の発症の高いリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体の血漿レベルが、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体血漿レベルに関するベースライン値の約１０５、１１０、若しくは１１５％、又は更に高いレベルである場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体の血漿レベルが、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体血漿レベルに関するベースライン値の約１１０％以上である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、このリスクを有する対象には、高用量（例えば約４０～４００ＩＵ／ｋｇ）のＡＤＡＭＴＳ１３が投与される。

【0161】

特定の実施形態では、対象は、血漿試料中のＡＤＡＭＴＳ１３に対するＶＷＦの比率（ＶＷＦ：Ａ１３）が、約５．０、４．７５、４．５、４．２５、４．０、３．７５、３．５、３．２５、３．０、２．７５、２．５、２．２５、２．０、１．７５、１．５、１．２５、１．０、又は更に小さい比率である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、血漿試料中のＡＤＡＭＴＳ１３に対するＶＷＦの比率（ＶＷＦ：Ａ１３）が、約２．０、３．０、４．０、又は更に小さい比率である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、血漿試料中のＡＤＡＭＴＳ１３に対するＶＷＦの比率（ＶＷＦ：Ａ１３）が、約３．０以下である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、血漿試料中のＡＤＡＭＴＳ１３に対するＶＷＦの比率（ＶＷＦ：Ａ１３）が、約２．０、３．０、又は４．０超である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、血漿試料中のＡＤＡＭＴＳ１３に対するＶＷＦの比率（ＶＷＦ：Ａ１３）が、約３．０超である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、このリスクを有する対象には、低用量（例えば約１０～４０ＩＵ／ｋｇ）のＡＤＡＭＴＳ１３が投与される。特定の実施形態では、このリスクを有する対象には、高用量（例えば約４０～４００ＩＵ／ｋｇ）のＡＤＡＭＴＳ１３が投与される。

【0162】

特定の実施形態では、対象は、血漿試料中のＡＤＡＭＴＳ１３に対するＶＷＦの比率（ＶＷＦ：Ａ１３）が、約３．５以下、３．２５以下、３．０以下、２．７５以下、２．５以下、２．２５以下、２．０以下、１．７５以下、１．５以下、１．２５以下、１．０以下、又は更に小さい比率である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、血漿試料中のＡＤＡＭＴＳ１３に対するＶＷＦの比率（ＶＷＦ：Ａ１３）が、約３．０以下、約２．０以下、又は約１．０以下である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、血漿試料中のＡＤＡＭＴＳ１３に対するＶＷＦの比率（ＶＷＦ：Ａ１３）が、約３．０以下である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、このリスクを有する対象には、低用量（例えば約１０～４０ＩＵ／ｋｇ）のＡＤＡＭＴＳ１３が投与される。

【0163】

特定の実施形態では、対象は、血漿試料中のＶＷＦレベル：Ａ１３レベルの比率が、約２．０超、２．２５超、２．５超、２．７５超、３．０超、３．２５超、３．５超、３．７５超、４．０超、４．２５超、４．５超、４．７５超、５．０超、５．２５超、５．５超、５．７５超、６．０超、６．２５超、６．５超、６．７５超、７．０超、７．２５超、７．５超、７．７５超、８．０超、８．２５超、８．５超、８．７５超、９．０超、９．２５超、９．５超、９．７５超、又は１０．０超である場合に、血栓性凝固障害の発症の高いリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、血漿試料中のＶＷＦレベル：Ａ１３レベルの比率が約４．０超である場合に、血栓性凝固障害の発症の高いリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、血漿試料中のＶＷＦレベル：Ａ１３レベルの比率が約３．０超である場合に、血栓性凝固障害の発症の高いリスクを有する。特定の実施形態では、このリスクを有する対象には、高用量（例えば約４０～４００ＩＵ／ｋｇ）のＡＤＡＭＴＳ１３が投与される。

【0164】

特定の実施形態では、ベースライン値は、正常な対照集団に基づく所定値である。特定の実施形態では、ベースライン値は、正常な対照集団の所定の範囲の平均である。

【0165】

特定の実施形態では、ＶＷＦ活性レベルは、ＶＷＦリストセチン補因子活性によって測定される。特定の実施形態では、ＶＷＦ活性レベルは、ＶＷＦコラーゲン結合活性によって測定される。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３活性レベルは、ＥＬＩＳＡによって測定される。特定の実施形態では、ＶＷＦ活性レベルは、ＦＲＥＴＳによって測定される。

【0166】

特定の態様では、本発明は、ＣＯＶＩＤ－１９と診断された対象が血栓性凝固障害のリスクを有するかどうかを決定する方法を提供し、その方法は：ａ）血漿試料において、ｉ）ＶＷＦタンパク質の血漿レベル；ｉｉ）血漿試料中のＶＷＦの活性レベル；ｉｉｉ）ＵＨＭＷ ＶＷＦタンパク質多量体の血漿レベル；ｉｖ）ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の血漿レベル；又はｖ）血漿試料中のＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の活性レベルのうちの１つ又は複数を測定するステップを含む。

【0167】

特定の実施形態では、上記方法は、ＶＷＦタンパク質の血漿レベルが、少なくとも約１．０、１．１、１．２、１．３、１．４、１．５、１．６、１．７、１．８、１．９、２．０、２．１、２．２、２．３、２．４、２．５、２．６、２．７、２．８、２．９、３．０、３．１、３．２、３．３、３．４、３．５、３．６、３．７、３．８、３．９、４．０、５．０、６．０、７．０、８．０、９．０、又は１０．０ＩＵ／ｍｌである場合に、対象が血栓性凝固障害のリスクを有すると特定することを含む。特定の実施形態では、上記方法は、ＶＷＦタンパク質の血漿レベルが、少なくとも約１．２、１．４、１．６、１．８、２．０、２．２、２．４、２．６、２．８、３．０、３．２、３．４、３．６、３．８、４．０、６．０、８．０、９．０、又は１０．０ＩＵ／ｍｌである場合に、対象が血栓性凝固障害のリスクを有すると特定することを含む。特定の実施形態では、上記方法は、ＶＷＦタンパク質の血漿レベルが、少なくとも約１．２、４．０、４．５、６．０、１０．０、又は１０．３ＩＵ／ｍｌである場合に、対象が血栓性凝固障害のリスクを有すると特定することを含む。特定の実施形態では、このリスクを有する対象には、低用量（例えば約１０～４０ＩＵ／ｋｇ）のＡＤＡＭＴＳ１３が投与される。特定の実施形態では、このリスクを有する対象には、高用量（例えば約４０～４００ＩＵ／ｋｇ）のＡＤＡＭＴＳ１３が投与される。

【0168】

特定の実施形態では、上記方法は、ＶＷＦタンパク質の血漿レベルが、約１．０ＩＵ／ｍｌ～約１．２ＩＵ／ｍｌ、約１．０ＩＵ／ｍｌ～約２．０ＩＵ／ｍｌ、約１．０ＩＵ／ｍｌ～約４．０ＩＵ／ｍｌ、約１．０ＩＵ／ｍｌ～約４．５ＩＵ／ｍｌ、約１．０ＩＵ／ｍｌ～約１０．３ＩＵ／ｍｌ、約１．０ＩＵ／ｍｌ～約１０．０ＩＵ／ｍｌ、約１．２ＩＵ／ｍｌ～約２．０ＩＵ／ｍｌ、約１．２ＩＵ／ｍｌ～約４．０ＩＵ／ｍｌ、約１．２ＩＵ／ｍｌ～約４．５ＩＵ／ｍｌ、約１．２ＩＵ／ｍｌ～約１０．３ＩＵ／ｍｌ、約１．２ＩＵ／ｍｌ～約１０．０ＩＵ／ｍｌ、約１．４ＩＵ／ｍｌ～約２．０ＩＵ／ｍｌ、約１．４ＩＵ／ｍｌ～約４．０ＩＵ／ｍｌ、約１．４ＩＵ／ｍｌ～約４．５ＩＵ／ｍｌ、約１．４ＩＵ／ｍｌ～約１０．３ＩＵ／ｍｌ、又は約１．４ＩＵ／ｍｌ～約１０ＩＵ／ｍｌ、約１．６ＩＵ／ｍｌ～約２．０ＩＵ／ｍｌ、約１．６ＩＵ／ｍｌ～約４．０ＩＵ／ｍｌ、約１．６ＩＵ／ｍｌ～約４．５ＩＵ／ｍｌ、約１．６ＩＵ／ｍｌ～約１０．３ＩＵ／ｍｌ、又は約１．６ＩＵ／ｍｌ～約１０ＩＵ／ｍｌである場合に、対象が血栓性凝固障害のリスクを有すると特定することを含む。特定の実施形態では、このリスクを有する対象には、低用量（例えば約１０～４０ＩＵ／ｋｇ）のＡＤＡＭＴＳ１３が投与される。特定の実施形態では、このリスクを有する対象には、高用量（例えば約４０～４００ＩＵ／ｋｇ）のＡＤＡＭＴＳ１３が投与される。

【0169】

特定の実施形態では、上記方法は、ＶＷＦタンパク質の血漿レベルが、少なくとも約１．０、１．１、１．２、１．３、１．４、１．５、１．６、１．７、１．８、１．９、２．０、２．１、２．２、２．３、２．４、２．５、２．６、２．７、２．８、２．９、３．０、３．１、３．２、３．３、３．４、３．５、３．６、３．７、３．８、３．９、４．０、４．１、４．２、４．３、４．４、又は４．５ＩＵ／ｍｌである場合に、対象が血栓性凝固障害のリスクを有すると特定することを含む。特定の実施形態では、上記方法は、ＶＷＦタンパク質の血漿レベルが、少なくとも約１．２、１．４、１．６、１．８、２．０、２．２、２．４、２．６、２．８、３．０、３．２、３．４、３．６、３．８、４．０、４．２、又は４．４ＩＵ／ｍｌである場合に、対象が血栓性凝固障害のリスクを有すると特定することを含む。特定の実施形態では、上記方法は、ＶＷＦタンパク質の血漿レベルが、約１．０ＩＵ／ｍｌ～約５．５ＩＵ／ｍｌ、約１．０ＩＵ／ｍｌ～約５．０ＩＵ／ｍｌ、約１．０ＩＵ／ｍｌ～約４．５ＩＵ／ｍｌ、約１．０ＩＵ／ｍｌ～約４．０ＩＵ／ｍｌ、又は約１．０ＩＵ／ｍｌ～約３．５ＩＵ／ｍｌである場合に、対象が血栓性凝固障害のリスクを有すると特定することを含む。特定の実施形態では、上記方法は、ＶＷＦタンパク質の血漿レベルが、約１．１ＩＵ／ｍｌ～約５．５ＩＵ／ｍｌ、約１．１ＩＵ／ｍｌ～約５．０ＩＵ／ｍｌ、約１．１ＩＵ／ｍｌ～約４．５ＩＵ／ｍｌ、約１．１ＩＵ／ｍｌ～約４．０ＩＵ／ｍｌ、又は約１．１ＩＵ／ｍｌ～約３．５ＩＵ／ｍｌである場合に、対象が血栓性凝固障害のリスクを有すると特定することを含む。特定の実施形態では、上記方法は、ＶＷＦタンパク質の血漿レベルが、約１．２ＩＵ／ｍｌ～約５．５ＩＵ／ｍｌ、約１．２ＩＵ／ｍｌ～約５．０ＩＵ／ｍｌ、約１．２ＩＵ／ｍｌ～約４．５ＩＵ／ｍｌ、約１．２ＩＵ／ｍｌ～約４．０ＩＵ／ｍｌ、又は約１．２ＩＵ／ｍｌ～約３．５ＩＵ／ｍｌである場合に、対象が血栓性凝固障害のリスクを有すると特定することを含む。特定の実施形態では、上記方法は、ＶＷＦタンパク質の血漿レベルが、約１．３ＩＵ／ｍｌ～約５．５ＩＵ／ｍｌ、約１．３ＩＵ／ｍｌ～約５．０ＩＵ／ｍｌ、約１．３ＩＵ／ｍｌ～約４．５ＩＵ／ｍｌ、約１．３ＩＵ／ｍｌ～約４．０ＩＵ／ｍｌ、又は約１．３ＩＵ／ｍｌ～約３．５ＩＵ／ｍｌである場合に、対象が血栓性凝固障害のリスクを有すると特定することを含む。特定の実施形態では、上記方法は、ＶＷＦタンパク質の血漿レベルが、約１．４ＩＵ／ｍｌ～約５．５ＩＵ／ｍｌ、約１．４ＩＵ／ｍｌ～約５．０ＩＵ／ｍｌ、約１．４ＩＵ／ｍｌ～約４．５ＩＵ／ｍｌ、約１．４ＩＵ／ｍｌ～約４．０ＩＵ／ｍｌ、又は約１．４ＩＵ／ｍｌ～約３．５ＩＵ／ｍｌである場合に、対象が血栓性凝固障害のリスクを有すると特定することを含む。特定の実施形態では、上記方法は、ＶＷＦタンパク質の血漿レベルが、少なくとも約１．０、１．１、１．２、１．３、１．４、１．５、１．６、１．７、又は１．８ＩＵ／ｍｌである場合に、対象が血栓性凝固障害のリスクを有すると特定することを含む。特定の実施形態では、上記方法は、ＶＷＦタンパク質の血漿レベルが、少なくとも約１．２ＩＵ／ｍｌである場合に、対象が血栓性凝固障害のリスクを有すると特定することを含む。特定の実施形態では、このリスクを有する対象には、低用量（例えば約１０～４０ＩＵ／ｋｇ）のＡＤＡＭＴＳ１３が投与される。

【0170】

特定の実施形態では、対象は、ＶＷＦタンパク質の血漿レベルが、少なくとも約２．０、２．５、３．０、３．５、４．０、４．５、５．０、５．５、６．０、６．５、７．０、７．５、８．０、８．５、９．０、９．５、又は１０．０ＩＵ／ｍｌである場合に、血栓性凝固障害の高いリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＶＷＦタンパク質の血漿レベルが、少なくとも約４．０、４．１、４．２、４．３、４．４、４．５、４．６、４．７、４．８、４．９、又は５．０ＩＵ／ｍｌである場合に、血栓性凝固障害の高いリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＶＷＦタンパク質の血漿レベルが、少なくとも約３．５、４．０、４．５、又は５．０ＩＵ／ｍｌである場合に、血栓性凝固障害の高いリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＶＷＦタンパク質の血漿レベルが、少なくとも約４．５ＩＵ／ｍｌである場合に、血栓性凝固障害の高いリスクを有する。特定の実施形態では、このリスクを有する対象には、高用量（例えば約４０～４００ＩＵ／ｋｇ）のＡＤＡＭＴＳ１３が投与される。

【0171】

特定の実施形態では、上記方法は、ＶＷＦタンパク質の血漿レベルが、少なくとも約４．０、５．０、６．０、７．０、８．０、９．０、又は１０．０ＩＵ／ｍｌである場合に、対象が血栓性凝固障害の高いリスクを有すると特定することを含む。特定の実施形態では、上記方法は、ＶＷＦタンパク質の血漿レベルが、少なくとも約４．０、６．０、８．０、９．０、又は１０．０ＩＵ／ｍｌである場合に、対象が血栓性凝固障害の高いリスクを有すると特定することを含む。特定の実施形態では、上記方法は、ＶＷＦタンパク質の血漿レベルが、少なくとも約４．０、４．５、６．０、１０．０、又は１０．３ＩＵ／ｍｌである場合に、対象が血栓性凝固障害の高いリスクを有すると特定することを含む。特定の実施形態では、上記方法は、ＶＷＦタンパク質の血漿レベルが、少なくとも約４．０、４．５、又は５．０ＩＵ／ｍｌである場合に、対象が血栓性凝固障害の高いリスクを有すると特定することを含む。特定の実施形態では、上記方法は、ＶＷＦタンパク質の血漿レベルが、少なくとも約４．５ＩＵ／ｍｌである場合に、対象が血栓性凝固障害の高いリスクを有すると特定することを含む。特定の実施形態では、上記方法は、ＶＷＦタンパク質の血漿レベルが、少なくとも約１０．０ＩＵ／ｍｌである場合に、対象が血栓性凝固障害の高いリスクを有すると特定することを含む。特定の実施形態では、上記方法は、ＶＷＦタンパク質の血漿レベルが、少なくとも約１０．３ＩＵ／ｍｌである場合に、対象が血栓性凝固障害の高いリスクを有すると特定することを含む。特定の実施形態では、このリスクを有する対象には、高用量（例えば約４０～４００ＩＵ／ｋｇ）のＡＤＡＭＴＳ１３が投与される。

【0172】

特定の実施形態では、上記方法は、ＶＷＦ活性レベルが、少なくとも約１．０、１．１、１．２、１．３、１．４、１．５、１．６、１．７、１．８、１．９、２．０、２．１、２．２、２．３、２．４、２．５、２．６、２．７、２．８、２．９、３．０、３．１、３．２、３．３、３．４、３．５、３．６、３．７、３．８、３．９、４．０、５．０、６．０、７．０、８．０、９．０、又は１０．０ＩＵ／ｍｌである場合に、対象が血栓性凝固障害のリスクを有すると特定することを含む。特定の実施形態では、上記方法は、ＶＷＦ活性レベルが、少なくとも約１．２、１．４、１．６、１．８、２．０、２．２、２．４、２．６、２．８、３．０、３．２、３．４、３．６、３．８、４．０、６．０、８．０、９．０、又は１０．０ＩＵ／ｍｌである場合に、対象が血栓性凝固障害のリスクを有すると特定することを含む。特定の実施形態では、このリスクを有する対象には、低用量（例えば約１０～４０ＩＵ／ｋｇ）のＡＤＡＭＴＳ１３が投与される。特定の実施形態では、このリスクを有する対象には、高用量（例えば約４０～４００ＩＵ／ｋｇ）のＡＤＡＭＴＳ１３が投与される。

【0173】

特定の実施形態では、上記方法は、ＶＷＦ活性レベルが、約１．０ＩＵ／ｍｌ～約９．０ＩＵ／ｍｌ、約１．０ＩＵ／ｍｌ～約４．０ＩＵ／ｍｌ、約１．０ＩＵ／ｍｌ～約３．０ＩＵ／ｍｌ、約１．２ＩＵ／ｍｌ～約９．０ＩＵ／ｍｌ、約１．２ＩＵ／ｍｌ～約４．０ＩＵ／ｍｌ、約１．２ＩＵ／ｍｌ～約３．０ＩＵ／ｍｌ、約１．３ＩＵ／ｍｌ～約９．０ＩＵ／ｍｌ、約１．３ＩＵ／ｍｌ～約４．０ＩＵ／ｍｌ、約１．３ＩＵ／ｍｌ～約３．０ＩＵ／ｍｌ、約１．５ＩＵ／ｍｌ～約９．０ＩＵ／ｍｌ、約１．５ＩＵ／ｍｌ～約４．０ＩＵ／ｍｌ、約１．５ＩＵ／ｍｌ～約３．０ＩＵ／ｍｌ、約１．８ＩＵ／ｍｌ～約９．０ＩＵ／ｍｌ、約１．８ＩＵ／ｍｌ～約４．０ＩＵ／ｍｌ、又は約１．８ＩＵ／ｍｌ～約３．０ＩＵ／ｍｌである場合に、対象が血栓性凝固障害のリスクを有すると特定することを含む。特定の実施形態では、このリスクを有する対象には、低用量（例えば約１０～４０ＩＵ／ｋｇ）のＡＤＡＭＴＳ１３が投与される。特定の実施形態では、このリスクを有する対象には、高用量（例えば約４０～４００ＩＵ／ｋｇ）のＡＤＡＭＴＳ１３が投与される。

【0174】

特定の実施形態では、上記方法は、ＶＷＦ活性レベルが、約１．０ＩＵ／ｍｌ～約４．４ＩＵ／ｍｌ、約１．０ＩＵ／ｍｌ～約４．０ＩＵ／ｍｌ、約１．０ＩＵ／ｍｌ～約３．３ＩＵ／ｍｌ、約１．０ＩＵ／ｍｌ～約３．０ＩＵ／ｍｌ、約１．２ＩＵ／ｍｌ～約４．４ＩＵ／ｍｌ、約１．２ＩＵ／ｍｌ～約４．０ＩＵ／ｍｌ、約１．２ＩＵ／ｍｌ～約３．３ＩＵ／ｍｌ、約１．２ＩＵ／ｍｌ～約３．０ＩＵ／ｍｌ、約１．３ＩＵ／ｍｌ～約４．４ＩＵ／ｍｌ、約１．３ＩＵ／ｍｌ～約４．０ＩＵ／ｍｌ、約１．３ＩＵ／ｍｌ～約３．３ＩＵ／ｍｌ、約１．３ＩＵ／ｍｌ～約３．０ＩＵ／ｍｌ、約１．５ＩＵ／ｍｌ～約４．４ＩＵ／ｍｌ、約１．５ＩＵ／ｍｌ～約４．０ＩＵ／ｍｌ、約１．５ＩＵ／ｍｌ～約３．３ＩＵ／ｍｌ、約１．５ＩＵ／ｍｌ～約３．０ＩＵ／ｍｌ、約１．８ＩＵ／ｍｌ～約４．４ＩＵ／ｍｌ、約１．８ＩＵ／ｍｌ～約４．０ＩＵ／ｍｌ、約１．８ＩＵ／ｍｌ～約３．３ＩＵ／ｍｌ、又は約１．８ＩＵ／ｍｌ～約３．０ＩＵ／ｍｌである場合に、対象が血栓性凝固障害のリスクを有すると特定することを含む。特定の実施形態では、上記方法は、ＶＷＦ活性レベルが、約１．０ＩＵ／ｍｌ～約４．０ＩＵ／ｍｌ、１．０ＩＵ／ｍｌ～約３．０ＩＵ／ｍｌ、約１．２ＩＵ／ｍｌ～約４．０ＩＵ／ｍｌ、約１．２ＩＵ／ｍｌ～約３．０ＩＵ／ｍｌ、約１．３ＩＵ／ｍｌ～約４．０ＩＵ／ｍｌ、約１．３ＩＵ／ｍｌ～約３．０ＩＵ／ｍｌ、約１．８ＩＵ／ｍｌ～約４．０ＩＵ／ｍｌ、又は約１．８ＩＵ／ｍｌ～約３．０ＩＵ／ｍｌ／ｍｌである場合に、対象が血栓性凝固障害のリスクを有すると特定することを含む。特定の実施形態では、このリスクを有する対象には、低用量（例えば約１０～４０ＩＵ／ｋｇ）のＡＤＡＭＴＳ１３が投与される。

【0175】

特定の実施形態では、対象は、ＶＷＦ活性レベルが、少なくとも約２．０、２．５、３．０、３．５、４．０、４．５、５．０、５．５、６．０、６．５、７．０、７．５、８．０、８．５、９．０、９．５、又は１０．０ＩＵ／ｍｌである場合に、血栓性凝固障害の高いリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＶＷＦ活性レベルが、少なくとも約３．０、３．１、３．２、３．３、３．４、３．５、３．６、３．７、３．８、３．９、４．０、４．０、４．２、４．２、４．４、４．５、４．６、４．７、４．８、４．９、又は５．０ＩＵ／ｍｌである場合に、血栓性凝固障害の高いリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＶＷＦ活性レベルが、少なくとも約２．０、３．０、３．３、４．０、４．４、４．５、又は５ＩＵ／ｍｌである場合に、血栓性凝固障害の高いリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＶＷＦ活性レベルが、少なくとも約３．３ＩＵ／ｍｌ、又は約４．４ＩＵ／ｍｌである場合に、血栓性凝固障害の高いリスクを有する。特定の実施形態では、このリスクを有する対象には、高用量（例えば約４０～４００ＩＵ／ｋｇ）のＡＤＡＭＴＳ１３が投与される。

【0176】

特定の実施形態では、上記方法は、ＶＷＦ活性レベルが、少なくとも約２．５、２．６、２．７、２．８、２．９、３．０、３．１、３．２、３．３、３．４、３．５、３．６、３．７、３．８、３．９、４．０、５．０、６．０、７．０、８．０、９．０、又は１０．０ＩＵ／ｍｌである場合に、対象が血栓性凝固障害の高いリスクを有すると特定することを含む。特定の実施形態では、上記方法は、ＶＷＦ活性レベルが、少なくとも約２．６、２．８、３．０、３．２、３．４、３．６、３．８、４．０、６．０、８．０、９．０、又は１０．０ＩＵ／ｍｌである場合に、対象が血栓性凝固障害の高いリスクを有すると特定することを含む。特定の実施形態では、上記方法は、ＶＷＦ活性レベルが、少なくとも約３．０、３．３、４．０、４．４、９．０、９．２、９．４、又は１０ＩＵ／ｍｌである場合に、対象が血栓性凝固障害の高いリスクを有すると特定することを含む。特定の実施形態では、上記方法は、ＶＷＦ活性レベルが、少なくとも約３．３、４．４、９．２、又は９．４ＩＵ／ｍｌである場合に、対象が血栓性凝固障害の高いリスクを有すると特定することを含む。特定の実施形態では、このリスクを有する対象には、高用量（例えば約４０～４００ＩＵ／ｋｇ）のＡＤＡＭＴＳ１３が投与される。

【0177】

特定の実施形態では、上記方法は、血漿ＵＨＭＷ ＶＷＦタンパク質多量体が検出された場合に、対象が血栓性凝固障害のリスクを有すると特定することを含む。特定の実施形態では、このリスクを有する対象には、低用量（例えば約１０～４０ＩＵ／ｋｇ）のＡＤＡＭＴＳ１３が投与される。特定の実施形態では、このリスクを有する対象には、高用量（例えば約４０～４００ＩＵ／ｋｇ）のＡＤＡＭＴＳ１３が投与される。

【0178】

特定の実施形態では、対象は、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体の血漿レベルが、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体血漿レベルに関するベースライン値の約１００％、約１０１％、約１０２％、約１０３％、約１０４％、約１０５％、約１０６％、約１０７％、約１０８％、約１０９％、約１１０％、約１１１％、約１１２％、約１１３％、約１１４％、約１１５％、約１１６％、約１１７％、約１１８％、約１１９％、約１２０％、約１２１％、約１２２％、約１２３％、約１２４％、約１２５％、約１２６％、約１２７％、約１２８％、又は約１２９％である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体の血漿レベルが、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体血漿レベルに関するベースライン値の少なくとも約１００％、約１０１％、約１０２％、約１０３％、約１０４％、約１０５％、約１０６％、約１０７％、約１０８％、約１０９％、約１１０％、約１１１％、約１１２％、約１１３％、約１１４％、約１１５％、約１１６％、約１１７％、約１１８％、約１１９％、約１２０％、約１２１％、約１２２％、約１２３％、約１２４％、約１２５％、約１２６％、約１２７％、約１２８％、又は約１２９％である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体の血漿レベルが、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体血漿レベルに関するベースライン値の約１００～１２６％、約１００～１２４％、約１００～１２２％、約１００～１２０％、約１００～１１５％、約１００～１１４％、約１００～１１３％、約１００～１１２％、約１００～１１１％、約１００～１１０％、約１００～１０９％、約１００～１０８％、約１００～１０９％、約１００～１０６％、約１００～１０５％、約１００～１０４％、約１００～１０３％、約１００～１０２％、又は約１００～１０１％である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体の血漿レベルが、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体血漿レベルに関するベースライン値の約１００～１０２％、約１００～１０５％、約１００～１１０％、約１００～１１５％、約１００～１２０％、又は約１００～１２２％である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体の血漿レベルが、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体血漿レベルに関するベースライン値の約１００～１１０％である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体の血漿レベルが、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体血漿レベルに関するベースライン値の約１００～１１５％である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体の血漿レベルが、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体血漿レベルに関するベースライン値の約１００～１２０％である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体の血漿レベルが、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体血漿レベルに関するベースライン値の約１００～１２２％である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、このリスクを有する対象には、低用量（例えば約１０～４０ＩＵ／ｋｇ）のＡＤＡＭＴＳ１３が投与される。特定の実施形態では、このリスクを有する対象には、高用量（例えば約４０～４００ＩＵ／ｋｇ）のＡＤＡＭＴＳ１３が投与される。

【0179】

特定の実施形態では、対象は、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体の血漿レベルが、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体血漿レベルに関するベースライン値の約１００％、約１０１％、約１０２％、約１０３％、約１０４％、約１０５％、約１０６％、約１０７％、約１０８％、約１０９％、約１１０％、約１１１％、約１１２％、約１１３％、約１１４％、約１１５％、約１１６％、約１１７％、約１１８％、約１１９％、約１２０％、約１３０％、約１４０％、約１５０％、約１６０％、約１７０％、約１８０％、約１９０％、約２００％、約２５０％、約３００％、約３５０％、約４００％、又は更に高いレベルである場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体の血漿レベルが、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体血漿レベルに関するベースライン値の少なくとも約１００％、約１０１％、約１０２％、約１０３％、約１０４％、約１０５％、約１０６％、約１０７％、約１０８％、約１０９％、約１１０％、約１１１％、約１１２％、約１１３％、約１１４％、約１１５％、約１１６％、約１１７％、約１１８％、約１１９％、約１２０％、約１３０％、約１４０％、約１５０％、約１６０％、約１７０％、約１８０％、約１９０％、約２００％、約２５０％、約３００％、約３５０％、約４００％、又は更に高いレベルである場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体の血漿レベルが、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体血漿レベルに関するベースライン値の約１１０％以上である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、このリスクを有する対象には、低用量（例えば約１０～４０ＩＵ／ｋｇ）のＡＤＡＭＴＳ１３が投与される。特定の実施形態では、このリスクを有する対象には、高用量（例えば約４０～４００ＩＵ／ｋｇ）のＡＤＡＭＴＳ１３が投与される。

【0180】

特定の実施形態では、対象は、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体の血漿レベルが、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体血漿レベルに関するベースライン値の少なくとも約１１０％、約１１１％、約１１２％、約１１３％、約１１４％、約１１５％、約１１６％、約１１７％、約１１８％、約１１９％、約１２０％、又は約１３０％である場合に、血栓性凝固障害の発症の高いリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体の血漿レベルが、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体血漿レベルに関するベースライン値の約１１０％以上である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、このリスクを有する対象には、高用量（例えば約４０～４００ＩＵ／ｋｇ）のＡＤＡＭＴＳ１３が投与される。

【0181】

特定の実施形態では、対象は、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体の血漿レベルが、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体血漿レベルに関するベースライン値の約１００％、約１０１％、約１０２％、約１０３％、約１０４％、約１０５％、約１０６％、約１０７％、約１０８％、約１０９％、約１１０％、約１１１％、約１１２％、約１１３％、約１１４％、又は約１１５％である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体の血漿レベルが、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体血漿レベルに関するベースライン値の約１００～１０２％、約１００～１０５％、約１００～１１０％、又は約１００～１１５％である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体の血漿レベルが、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体血漿レベルに関するベースライン値の約１１０％以上である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する。特定の実施形態では、このリスクを有する対象には、低用量（例えば約１０～４０ＩＵ／ｋｇ）のＡＤＡＭＴＳ１３が投与される。

【0182】

特定の実施形態では、対象は、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体の血漿レベルが、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体血漿レベルに関するベースライン値の少なくとも約１１５％、約１１６％、約１１７％、約１１８％、約１１９％、約１２０％、約１３０％、約１４０％、約１５０％、約１６０％、約１７０％、約１８０％、約１９０％、約２００％、約２５０％、約３００％、約３５０％、約４００％、又は更に高いレベルである場合に、血栓性凝固障害の発症の高いリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体の血漿レベルが、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体血漿レベルに関するベースライン値の約１１５～１２０％、又は約１１５～１２２％である場合に、血栓性凝固障害の発症の高いリスクを有する。特定の実施形態では、このリスクを有する対象には、高用量（例えば約４０～４００ＩＵ／ｋｇ）のＡＤＡＭＴＳ１３が投与される。

【0183】

特定の実施形態では、上記方法は、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の血漿レベルが、約０．０１ＩＵ／ｍｌ以下、０．０２ＩＵ／ｍｌ以下、０．０３ＩＵ／ｍｌ以下、０．０４ＩＵ／ｍｌ以下、０．０５ＩＵ／ｍｌ以下、０．０６ＩＵ／ｍｌ以下、０．０７ＩＵ／ｍｌ以下、０．０８ＩＵ／ｍｌ以下、０．０９ＩＵ／ｍｌ以下、０．１ＩＵ／ｍｌ以下、０．１１ＩＵ／ｍｌ以下、０．１２ＩＵ／ｍｌ以下、０．１３ＩＵ／ｍｌ以下、０．１４ＩＵ／ｍｌ以下、０．１５ＩＵ／ｍｌ以下、０．１６ＩＵ／ｍｌ以下、０．１７ＩＵ／ｍｌ以下、０．１８ＩＵ／ｍｌ以下、０．１９ＩＵ／ｍｌ以下、０．２０ＩＵ／ｍｌ以下、０．２１ＩＵ／ｍｌ以下、０．２２ＩＵ／ｍｌ以下、０．２３ＩＵ／ｍｌ以下、０．２４ＩＵ／ｍｌ以下、０．２５ＩＵ／ｍｌ以下、０．２６ＩＵ／ｍｌ以下、０．２７ＩＵ／ｍｌ以下、０．２８ＩＵ／ｍｌ以下、０．２９ＩＵ／ｍｌ以下、０．３０ＩＵ／ｍｌ以下、０．３１ＩＵ／ｍｌ以下、０．３２ＩＵ／ｍｌ以下、０．３３ＩＵ／ｍｌ以下、０．３４ＩＵ／ｍｌ以下、０．３５ＩＵ／ｍｌ以下、０．３６ＩＵ／ｍｌ以下、０．３７ＩＵ／ｍｌ以下、０．３８ＩＵ／ｍｌ以下、０．３９ＩＵ／ｍｌ以下、０．４０ＩＵ／ｍｌ以下、０．４１ＩＵ／ｍｌ以下、０．４２ＩＵ／ｍｌ以下、０．４３ＩＵ／ｍｌ以下、０．４４ＩＵ／ｍｌ以下、０．４５ＩＵ／ｍｌ以下、０．４６ＩＵ／ｍｌ以下、０．４７ＩＵ／ｍｌ以下、０．４８ＩＵ／ｍｌ以下、０．４９ＩＵ／ｍｌ以下、０．５０ＩＵ／ｍｌ以下、０．５１ＩＵ／ｍｌ以下、０．５２ＩＵ／ｍｌ以下、０．５３ＩＵ／ｍｌ以下、０．５４ＩＵ／ｍｌ以下、０．５５ＩＵ／ｍｌ以下、０．５６ＩＵ／ｍｌ以下、０．５７ＩＵ／ｍｌ以下、０．５８ＩＵ／ｍｌ以下、０．５９ＩＵ／ｍｌ以下、０．６０ＩＵ／ｍｌ以下、０．６１ＩＵ／ｍｌ以下、０．６２ＩＵ／ｍｌ以下、０．６３ＩＵ／ｍｌ以下、０．６４ＩＵ／ｍｌ以下、０．６５ＩＵ／ｍｌ以下、０．６６ＩＵ／ｍｌ以下、０．６７ＩＵ／ｍｌ以下、０．６８ＩＵ／ｍｌ以下、０．６８ＩＵ／ｍｌ以下、０．７０ＩＵ／ｍｌ以下、０．７１ＩＵ／ｍｌ以下、０．７２ＩＵ／ｍｌ以下、０．７３ＩＵ／ｍｌ以下、０．７４ＩＵ／ｍｌ以下、０．７５ＩＵ／ｍｌ以下、０．７６ＩＵ／ｍｌ以下、０．７７ＩＵ／ｍｌ以下、０．７８ＩＵ／ｍｌ以下、０．７９ＩＵ／ｍｌ以下、０．８０ＩＵ／ｍｌ以下、０．８１ＩＵ／ｍｌ以下、０．８２ＩＵ／ｍｌ以下、０．８３ＩＵ／ｍｌ以下、０．８４ＩＵ／ｍｌ以下、０．８５ＩＵ／ｍｌ以下、０．８６ＩＵ／ｍｌ以下、０．８７ＩＵ／ｍｌ以下、０．８８ＩＵ／ｍｌ以下、０．８９ＩＵ／ｍｌ以下、０．９ＩＵ／ｍｌ以下、０．９１ＩＵ／ｍｌ以下、０．９２ＩＵ／ｍｌ以下、０．９３ＩＵ／ｍｌ以下、０．９４ＩＵ／ｍｌ以下、０．９５ＩＵ／ｍｌ以下、０．９６ＩＵ／ｍｌ以下、０．９７ＩＵ／ｍｌ以下、０．９８ＩＵ／ｍｌ以下、０．９９ＩＵ／ｍｌ以下、１．０ＩＵ／ｍｌ以下、１．１ＩＵ／ｍｌ以下、１．２ＩＵ／ｍｌ以下、１．３ＩＵ／ｍｌ以下、１．４ＩＵ／ｍｌ以下、１．５ＩＵ／ｍｌ以下、又は１．６ＩＵ／ｍｌ以下である場合に、対象が血栓性凝固障害のリスクを有すると特定することを含む。特定の実施形態では、上記方法は、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の血漿レベルが、約０．０１ＩＵ／ｍｌ未満、０．０２ＩＵ／ｍｌ未満、０．０３ＩＵ／ｍｌ未満、０．０４ＩＵ／ｍｌ未満、０．０５ＩＵ／ｍｌ未満、０．０６ＩＵ／ｍｌ未満、０．０７ＩＵ／ｍｌ未満、０．０８ＩＵ／ｍｌ未満、０．０９ＩＵ／ｍｌ未満、０．１ＩＵ／ｍｌ未満、０．１１ＩＵ／ｍｌ未満、０．１２ＩＵ／ｍｌ未満、０．１３ＩＵ／ｍｌ未満、０．１４ＩＵ／ｍｌ未満、０．１５ＩＵ／ｍｌ未満、０．１６ＩＵ／ｍｌ未満、０．１７ＩＵ／ｍｌ未満、０．１８ＩＵ／ｍｌ未満、０．１９ＩＵ／ｍｌ未満、０．２０ＩＵ／ｍｌ未満、０．２１ＩＵ／ｍｌ未満、０．２２ＩＵ／ｍｌ未満、０．２３ＩＵ／ｍｌ未満、０．２４ＩＵ／ｍｌ未満、０．２５ＩＵ／ｍｌ未満、０．２６ＩＵ／ｍｌ未満、０．２７ＩＵ／ｍｌ未満、０．２８ＩＵ／ｍｌ未満、０．２９ＩＵ／ｍｌ未満、０．３０ＩＵ／ｍｌ未満、０．３１ＩＵ／ｍｌ未満、０．３２ＩＵ／ｍｌ未満、０．３３ＩＵ／ｍｌ未満、０．３４ＩＵ／ｍｌ未満、０．３５ＩＵ／ｍｌ未満、０．３６ＩＵ／ｍｌ未満、０．３７ＩＵ／ｍｌ未満、０．３８ＩＵ／ｍｌ未満、０．３９ＩＵ／ｍｌ未満、０．４０ＩＵ／ｍｌ未満、０．４１ＩＵ／ｍｌ未満、０．４２ＩＵ／ｍｌ未満、０．４３ＩＵ／ｍｌ未満、０．４４ＩＵ／ｍｌ未満、０．４５ＩＵ／ｍｌ未満、０．４６ＩＵ／ｍｌ未満、０．４７ＩＵ／ｍｌ未満、０．４８ＩＵ／ｍｌ未満、０．４９ＩＵ／ｍｌ未満、０．５０ＩＵ／ｍｌ未満、０．５１ＩＵ／ｍｌ未満、０．５２ＩＵ／ｍｌ未満、０．５３ＩＵ／ｍｌ未満、０．５４ＩＵ／ｍｌ未満、０．５５ＩＵ／ｍｌ未満、０．５６ＩＵ／ｍｌ未満、０．５７ＩＵ／ｍｌ未満、０．５８ＩＵ／ｍｌ未満、０．５９ＩＵ／ｍｌ未満、０．６０ＩＵ／ｍｌ未満、０．６１ＩＵ／ｍｌ未満、０．６２ＩＵ／ｍｌ未満、０．６３ＩＵ／ｍｌ未満、０．６４ＩＵ／ｍｌ未満、０．６５ＩＵ／ｍｌ未満、０．６６ＩＵ／ｍｌ未満、０．６７ＩＵ／ｍｌ未満、０．６８ＩＵ／ｍｌ未満、０．６８ＩＵ／ｍｌ未満、０．７０ＩＵ／ｍｌ未満、０．７１ＩＵ／ｍｌ未満、０．７２ＩＵ／ｍｌ未満、０．７３ＩＵ／ｍｌ未満、０．７４ＩＵ／ｍｌ未満、０．７５ＩＵ／ｍｌ未満、０．７６ＩＵ／ｍｌ未満、０．７７ＩＵ／ｍｌ未満、０．７８ＩＵ／ｍｌ未満、０．７９ＩＵ／ｍｌ未満、０．８０ＩＵ／ｍｌ未満、０．８１ＩＵ／ｍｌ未満、０．８２ＩＵ／ｍｌ未満、０．８３ＩＵ／ｍｌ未満、０．８４ＩＵ／ｍｌ未満、０．８５ＩＵ／ｍｌ未満、０．８６ＩＵ／ｍｌ未満、０．８７ＩＵ／ｍｌ未満、０．８８ＩＵ／ｍｌ未満、０．８９ＩＵ／ｍｌ未満、０．９ＩＵ／ｍｌ未満、０．９１ＩＵ／ｍｌ未満、０．９２ＩＵ／ｍｌ未満、０．９３ＩＵ／ｍｌ未満、０．９４ＩＵ／ｍｌ未満、０．９５ＩＵ／ｍｌ未満、０．９６ＩＵ／ｍｌ未満、０．９７ＩＵ／ｍｌ未満、０．９８ＩＵ／ｍｌ未満、０．９９ＩＵ／ｍｌ未満、１．０ＩＵ／ｍｌ未満、１．１ＩＵ／ｍｌ未満、１．２ＩＵ／ｍｌ未満、１．３ＩＵ／ｍｌ未満、１．４ＩＵ／ｍｌ未満、１．５ＩＵ／ｍｌ未満、又は１．６ＩＵ／ｍｌ未満である場合に、対象が血栓性凝固障害のリスクを有すると特定することを含む。特定の実施形態では、このリスクを有する対象には、低用量（例えば約１０～４０ＩＵ／ｋｇ）のＡＤＡＭＴＳ１３が投与される。特定の実施形態では、このリスクを有する対象には、高用量（例えば約４０～４００ＩＵ／ｋｇ）のＡＤＡＭＴＳ１３が投与される。

【0184】

特定の実施形態では、上記方法は、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の血漿レベルが、約０．０６ＩＵ／ｍｌ～約０．８ＩＵ／ｍｌ、約０．０６ＩＵ／ｍｌ～約０．７ＩＵ／ｍｌ、約０．０６ＩＵ／ｍｌ～約０．６ＩＵ／ｍｌ、約０．０６ＩＵ／ｍｌ～約０．５ＩＵ／ｍｌ、約０．０６ＩＵ／ｍｌ～約０．４ＩＵ／ｍｌ、約０．０６ＩＵ／ｍｌ～約０．３ＩＵ／ｍｌ、約０．０７ＩＵ／ｍｌ～約０．８ＩＵ／ｍｌ、約０．０７ＩＵ／ｍｌ～約０．７ＩＵ／ｍｌ、約０．０７ＩＵ／ｍｌ～約０．６ＩＵ／ｍｌ、約０．０７ＩＵ／ｍｌ～約０．５ＩＵ／ｍｌ、約０．０７ＩＵ／ｍｌ～約０．４ＩＵ／ｍｌ、約０．０７ＩＵ／ｍｌ～約０．３ＩＵ／ｍｌ、約０．０８ＩＵ／ｍｌ～約０．８ＩＵ／ｍｌ、約０．０８ＩＵ／ｍｌ～約０．７ＩＵ／ｍｌ、約０．０８ＩＵ／ｍｌ～約０．６ＩＵ／ｍｌ、約０．０８ＩＵ／ｍｌ～約０．５ＩＵ／ｍｌ、約０．０８ＩＵ／ｍｌ～約０．４ＩＵ／ｍｌ、約０．０８ＩＵ／ｍｌ～約０．３ＩＵ／ｍｌ、約０．１ＩＵ／ｍｌ～約０．８ＩＵ／ｍｌ、約０．１ＩＵ／ｍｌ～約０．７ＩＵ／ｍｌ、約０．１ＩＵ／ｍｌ～約０．６ＩＵ／ｍｌ、約０．１ＩＵ／ｍｌ～約０．５ＩＵ／ｍｌ、約０．１ＩＵ／ｍｌ～約０．４ＩＵ／ｍｌ、約０．４０ＩＵ／ｍｌ～約０．８ＩＵ／ｍｌ、約０．４０ＩＵ／ｍｌ～約０．７ＩＵ／ｍｌ、又は約０．４０ＩＵ／ｍｌ～約０．６ＩＵ／ｍｌである場合に、対象が血栓性凝固障害のリスクを有すると特定することを含む。特定の実施形態では、上記方法は、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の血漿レベルが、約０．０８ＩＵ／ｍｌ～約０．７ＩＵ／ｍｌ、約０．０８ＩＵ／ｍｌ～約０．４０ＩＵ／ｍｌ、又は約０．４０ＩＵ／ｍｌ～約０．７ＩＵ／ｍｌである場合に、対象が血栓性凝固障害のリスクを有すると特定することを含む。特定の実施形態では、このリスクを有する対象には、低用量（例えば約１０～４０ＩＵ／ｋｇ）のＡＤＡＭＴＳ１３が投与される。特定の実施形態では、このリスクを有する対象には、高用量（例えば約４０～４００ＩＵ／ｋｇ）のＡＤＡＭＴＳ１３が投与される。

【0185】

特定の実施形態では、上記方法は、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の血漿レベルが、約０．４０ＩＵ／ｍｌ未満、０．４１ＩＵ／ｍｌ未満、０．４２ＩＵ／ｍｌ未満、０．４３ＩＵ／ｍｌ未満、０．４４ＩＵ／ｍｌ未満、０．４５ＩＵ／ｍｌ未満、０．４６ＩＵ／ｍｌ未満、０．４７ＩＵ／ｍｌ未満、０．４８ＩＵ／ｍｌ未満、０．４９ＩＵ／ｍｌ未満、０．５０ＩＵ／ｍｌ未満、０．５１ＩＵ／ｍｌ未満、０．５２ＩＵ／ｍｌ未満、０．５３ＩＵ／ｍｌ未満、０．５４ＩＵ／ｍｌ未満、０．５５ＩＵ／ｍｌ未満、０．５６ＩＵ／ｍｌ未満、０．５７ＩＵ／ｍｌ未満、０．５８ＩＵ／ｍｌ未満、０．５９ＩＵ／ｍｌ未満、０．６０ＩＵ／ｍｌ未満、０．６１ＩＵ／ｍｌ未満、０．６２ＩＵ／ｍｌ未満、０．６３ＩＵ／ｍｌ未満、０．６４ＩＵ／ｍｌ未満、０．６５ＩＵ／ｍｌ未満、０．６６ＩＵ／ｍｌ未満、０．６７ＩＵ／ｍｌ未満、０．６８ＩＵ／ｍｌ未満、０．６８ＩＵ／ｍｌ未満、０．７０ＩＵ／ｍｌ未満、０．７１ＩＵ／ｍｌ未満、０．７２ＩＵ／ｍｌ未満、０．７３ＩＵ／ｍｌ未満、０．７４ＩＵ／ｍｌ未満、０．７５ＩＵ／ｍｌ未満、０．７６ＩＵ／ｍｌ未満、０．７７ＩＵ／ｍｌ未満、０．７８ＩＵ／ｍｌ未満、０．７９ＩＵ／ｍｌ未満、０．８０ＩＵ／ｍｌ未満、０．８１ＩＵ／ｍｌ未満、０．８２ＩＵ／ｍｌ未満、０．８３ＩＵ／ｍｌ未満、０．８４ＩＵ／ｍｌ未満、０．８５ＩＵ／ｍｌ未満、０．８６ＩＵ／ｍｌ未満、０．８７ＩＵ／ｍｌ未満、０．８８ＩＵ／ｍｌ未満、０．８９ＩＵ／ｍｌ未満、０．９ＩＵ／ｍｌ未満、０．９１ＩＵ／ｍｌ未満、０．９２ＩＵ／ｍｌ未満、０．９３ＩＵ／ｍｌ未満、０．９４ＩＵ／ｍｌ未満、０．９５ＩＵ／ｍｌ未満、０．９６ＩＵ／ｍｌ未満、０．９７ＩＵ／ｍｌ未満、０．９８ＩＵ／ｍｌ未満、０．９９ＩＵ／ｍｌ未満、１．０ＩＵ／ｍｌ未満、１．１ＩＵ／ｍｌ未満、１．２ＩＵ／ｍｌ未満、１．３ＩＵ／ｍｌ未満、１．４ＩＵ／ｍｌ未満、１．５ＩＵ／ｍｌ未満、又は１．６ＩＵ／ｍｌ未満である場合に、対象が血栓性凝固障害のリスクを有すると特定することを含む。特定の実施形態では、上記方法は、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の血漿レベルが、約０．４０ＩＵ／ｍｌ以下、０．４１ＩＵ／ｍｌ以下、０．４２ＩＵ／ｍｌ以下、０．４３ＩＵ／ｍｌ以下、０．４４ＩＵ／ｍｌ以下、０．４５ＩＵ／ｍｌ以下、０．４６ＩＵ／ｍｌ以下、０．４７ＩＵ／ｍｌ以下、０．４８ＩＵ／ｍｌ以下、０．４９ＩＵ／ｍｌ以下、０．５０ＩＵ／ｍｌ以下、０．５１ＩＵ／ｍｌ以下、０．５２ＩＵ／ｍｌ以下、０．５３ＩＵ／ｍｌ以下、０．５４ＩＵ／ｍｌ以下、０．５５ＩＵ／ｍｌ以下、０．５６ＩＵ／ｍｌ以下、０．５７ＩＵ／ｍｌ以下、０．５８ＩＵ／ｍｌ以下、０．５９ＩＵ／ｍｌ以下、０．６０ＩＵ／ｍｌ以下、０．６１ＩＵ／ｍｌ以下、０．６２ＩＵ／ｍｌ以下、０．６３ＩＵ／ｍｌ以下、０．６４ＩＵ／ｍｌ以下、０．６５ＩＵ／ｍｌ以下、０．６６ＩＵ／ｍｌ以下、０．６７ＩＵ／ｍｌ以下、０．６８ＩＵ／ｍｌ以下、０．６８ＩＵ／ｍｌ以下、０．７０ＩＵ／ｍｌ以下、０．７１ＩＵ／ｍｌ以下、０．７２ＩＵ／ｍｌ以下、０．７３ＩＵ／ｍｌ以下、０．７４ＩＵ／ｍｌ以下、０．７５ＩＵ／ｍｌ以下、０．７６ＩＵ／ｍｌ以下、０．７７ＩＵ／ｍｌ以下、０．７８ＩＵ／ｍｌ以下、０．７９ＩＵ／ｍｌ以下、０．８０ＩＵ／ｍｌ以下、０．８１ＩＵ／ｍｌ以下、０．８２ＩＵ／ｍｌ以下、０．８３ＩＵ／ｍｌ以下、０．８４ＩＵ／ｍｌ以下、０．８５ＩＵ／ｍｌ以下、０．８６ＩＵ／ｍｌ以下、０．８７ＩＵ／ｍｌ以下、０．８８ＩＵ／ｍｌ以下、０．８９ＩＵ／ｍｌ以下、０．９ＩＵ／ｍｌ以下、０．９１ＩＵ／ｍｌ以下、０．９２ＩＵ／ｍｌ以下、０．９３ＩＵ／ｍｌ以下、０．９４ＩＵ／ｍｌ以下、０．９５ＩＵ／ｍｌ以下、０．９６ＩＵ／ｍｌ以下、０．９７ＩＵ／ｍｌ以下、０．９８ＩＵ／ｍｌ以下、０．９９ＩＵ／ｍｌ以下、１．０ＩＵ／ｍｌ以下、１．１ＩＵ／ｍｌ以下、１．２ＩＵ／ｍｌ以下、１．３ＩＵ／ｍｌ以下、１．４ＩＵ／ｍｌ以下、１．５ＩＵ／ｍｌ以下、又は１．６ＩＵ／ｍｌ以下である場合に、対象が血栓性凝固障害のリスクを有すると特定することを含む。特定の実施形態では、上記方法は、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の血漿レベルが、約０．４０ＩＵ／ｍｌ～約０．７ＩＵ／ｍｌ、約０．５ＩＵ／ｋｇ～約０．７ＩＵ／ｍｌ、約０．６ＩＵ／ｋｇ～約０．７０ＩＵ／ｋｇである場合に、対象が血栓性凝固障害のリスクを有すると特定することを含む。特定の実施形態では、このリスクを有する対象には、低用量（例えば約１０～４０ＩＵ／ｋｇ）のＡＤＡＭＴＳ１３が投与される。

【0186】

特定の実施形態では、対象は、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の血漿レベルが、約０．０１ＩＵ／ｍｌ以下、０．０２ＩＵ／ｍｌ以下、０．０３ＩＵ／ｍｌ以下、０．０４ＩＵ／ｍｌ以下、０．０５ＩＵ／ｍｌ以下、０．０６ＩＵ／ｍｌ以下、０．０７ＩＵ／ｍｌ以下、０．０８ＩＵ／ｍｌ以下、０．０９ＩＵ／ｍｌ以下、０．１ＩＵ／ｍｌ以下、０．１１ＩＵ／ｍｌ以下、０．１２ＩＵ／ｍｌ以下、０．１３ＩＵ／ｍｌ以下、０．１４ＩＵ／ｍｌ以下、０．１５ＩＵ／ｍｌ以下、０．１６ＩＵ／ｍｌ以下、０．１７ＩＵ／ｍｌ以下、０．１８ＩＵ／ｍｌ以下、０．１９ＩＵ／ｍｌ以下、０．２０ＩＵ／ｍｌ以下、０．２１ＩＵ／ｍｌ以下、０．２２ＩＵ／ｍｌ以下、０．２３ＩＵ／ｍｌ以下、０．２４ＩＵ／ｍｌ以下、０．２５ＩＵ／ｍｌ以下、０．２６ＩＵ／ｍｌ以下、０．２７ＩＵ／ｍｌ以下、０．２８ＩＵ／ｍｌ以下、０．２９ＩＵ／ｍｌ以下、０．３０ＩＵ／ｍｌ以下、０．３１ＩＵ／ｍｌ以下、０．３２ＩＵ／ｍｌ以下、０．３３ＩＵ／ｍｌ以下、０．３４ＩＵ／ｍｌ以下、０．３５ＩＵ／ｍｌ以下、０．３６ＩＵ／ｍｌ以下、０．３７ＩＵ／ｍｌ以下、０．３８ＩＵ／ｍｌ以下、０．３９ＩＵ／ｍｌ以下、０．４０ＩＵ／ｍｌ以下、０．４１ＩＵ／ｍｌ以下、０．４２ＩＵ／ｍｌ以下、０．４３ＩＵ／ｍｌ以下、０．４４ＩＵ／ｍｌ以下、０．４５ＩＵ／ｍｌ以下、０．４６ＩＵ／ｍｌ以下、０．４７ＩＵ／ｍｌ以下、０．４８ＩＵ／ｍｌ以下、０．４９ＩＵ／ｍｌ以下、又は０．５０ＩＵ／ｍｌ以下である場合に、血栓性凝固障害の高いリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の血漿レベルが、約０．０１ＩＵ／ｍｌ未満、０．０２ＩＵ／ｍｌ未満、０．０３ＩＵ／ｍｌ未満、０．０４ＩＵ／ｍｌ未満、０．０５ＩＵ／ｍｌ未満、０．０６ＩＵ／ｍｌ未満、０．０７ＩＵ／ｍｌ未満、０．０８ＩＵ／ｍｌ未満、０．０９ＩＵ／ｍｌ未満、０．１ＩＵ／ｍｌ未満、０．１１ＩＵ／ｍｌ未満、０．１２ＩＵ／ｍｌ未満、０．１３ＩＵ／ｍｌ未満、０．１４ＩＵ／ｍｌ未満、０．１５ＩＵ／ｍｌ未満、０．１６ＩＵ／ｍｌ未満、０．１７ＩＵ／ｍｌ未満、０．１８ＩＵ／ｍｌ未満、０．１９ＩＵ／ｍｌ未満、０．２０ＩＵ／ｍｌ未満、０．２１ＩＵ／ｍｌ未満、０．２２ＩＵ／ｍｌ未満、０．２３ＩＵ／ｍｌ未満、０．２４ＩＵ／ｍｌ未満、０．２５ＩＵ／ｍｌ未満、０．２６ＩＵ／ｍｌ未満、０．２７ＩＵ／ｍｌ未満、０．２８ＩＵ／ｍｌ未満、０．２９ＩＵ／ｍｌ未満、０．３０ＩＵ／ｍｌ未満、０．３１ＩＵ／ｍｌ未満、０．３２ＩＵ／ｍｌ未満、０．３３ＩＵ／ｍｌ未満、０．３４ＩＵ／ｍｌ未満、０．３５ＩＵ／ｍｌ未満、０．３６ＩＵ／ｍｌ未満、０．３７ＩＵ／ｍｌ未満、０．３８ＩＵ／ｍｌ未満、０．３９ＩＵ／ｍｌ未満、０．４０ＩＵ／ｍｌ未満、０．４１ＩＵ／ｍｌ未満、０．４２ＩＵ／ｍｌ未満、０．４３ＩＵ／ｍｌ未満、０．４４ＩＵ／ｍｌ未満、０．４５ＩＵ／ｍｌ未満、０．４６ＩＵ／ｍｌ未満、０．４７ＩＵ／ｍｌ未満、０．４８ＩＵ／ｍｌ未満、０．４９ＩＵ／ｍｌ未満、又は０．５０ＩＵ／ｍｌ未満である場合に、血栓性凝固障害の高いリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の血漿レベルが、約０．０８ＩＵ／ｍｌ以下、０．０９ＩＵ／ｍｌ以下、０．１ＩＵ／ｍｌ以下、０．１１ＩＵ／ｍｌ以下、０．１２ＩＵ／ｍｌ以下、０．１３ＩＵ／ｍｌ以下、０．１４ＩＵ／ｍｌ以下、０．１５ＩＵ／ｍｌ以下、０．１６ＩＵ／ｍｌ以下、０．１７ＩＵ／ｍｌ以下、０．１８ＩＵ／ｍｌ以下、０．１９ＩＵ／ｍｌ以下、０．２０ＩＵ／ｍｌ以下、０．２１ＩＵ／ｍｌ以下、０．２２ＩＵ／ｍｌ以下、０．２３ＩＵ／ｍｌ以下、０．２４ＩＵ／ｍｌ以下、０．２５ＩＵ／ｍｌ以下、０．２６ＩＵ／ｍｌ以下、０．２７ＩＵ／ｍｌ以下、０．２８ＩＵ／ｍｌ以下、０．２９ＩＵ／ｍｌ以下、０．３０ＩＵ／ｍｌ以下、０．３１ＩＵ／ｍｌ以下、０．３２ＩＵ／ｍｌ以下、０．３３ＩＵ／ｍｌ以下、０．３４ＩＵ／ｍｌ以下、０．３５ＩＵ／ｍｌ以下、０．３６ＩＵ／ｍｌ以下、０．３７ＩＵ／ｍｌ以下、０．３８ＩＵ／ｍｌ以下、０．３９ＩＵ／ｍｌ以下、又は０．４０ＩＵ／ｍｌ以下である場合に、血栓性凝固障害の高いリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の血漿レベルが、約０．３ＩＵ／ｍｌ以下、０．４ＩＵ／ｍｌ以下、又は約０．５ＩＵ／ｍｌ以下である場合に、血栓性凝固障害の高いリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の血漿レベルが、約０．４ＩＵ／ｍｌ以下である場合に、血栓性凝固障害の高いリスクを有する。特定の実施形態では、このリスクを有する対象には、高用量（例えば約４０～４００ＩＵ／ｋｇ）のＡＤＡＭＴＳ１３が投与される。

【0187】

特定の実施形態では、上記方法は、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の活性レベルが、約０．１ＩＵ／ｍｌ以下、０．１１ＩＵ／ｍｌ以下、０．１２ＩＵ／ｍｌ以下、０．１３ＩＵ／ｍｌ以下、０．１４ＩＵ／ｍｌ以下、０．１５ＩＵ／ｍｌ以下、０．１６ＩＵ／ｍｌ以下、０．１７ＩＵ／ｍｌ以下、０．１８ＩＵ／ｍｌ以下、０．１９ＩＵ／ｍｌ以下、０．２０ＩＵ／ｍｌ以下、０．２１ＩＵ／ｍｌ以下、０．２２ＩＵ／ｍｌ以下、０．２３ＩＵ／ｍｌ以下、０．２４ＩＵ／ｍｌ以下、０．２５ＩＵ／ｍｌ以下、０．２６ＩＵ／ｍｌ以下、０．２７ＩＵ／ｍｌ以下、０．２８ＩＵ／ｍｌ以下、０．２９ＩＵ／ｍｌ以下、０．３０ＩＵ／ｍｌ以下、０．３１ＩＵ／ｍｌ以下、０．３２ＩＵ／ｍｌ以下、０．３３ＩＵ／ｍｌ以下、０．３４ＩＵ／ｍｌ以下、０．３５ＩＵ／ｍｌ以下、０．３６ＩＵ／ｍｌ以下、０．３７ＩＵ／ｍｌ以下、０．３８ＩＵ／ｍｌ以下、０．３９ＩＵ／ｍｌ以下、０．４０ＩＵ／ｍｌ以下、０．４１ＩＵ／ｍｌ以下、０．４２ＩＵ／ｍｌ以下、０．４３ＩＵ／ｍｌ以下、０．４４ＩＵ／ｍｌ以下、０．４５ＩＵ／ｍｌ以下、０．４６ＩＵ／ｍｌ以下、０．４７ＩＵ／ｍｌ以下、０．４８ＩＵ／ｍｌ以下、０．４９ＩＵ／ｍｌ以下、０．５０ＩＵ／ｍｌ以下、０．５１ＩＵ／ｍｌ以下、０．５２ＩＵ／ｍｌ以下、０．５３ＩＵ／ｍｌ以下、０．５４ＩＵ／ｍｌ以下、０．５５ＩＵ／ｍｌ以下、０．５６ＩＵ／ｍｌ以下、０．５７ＩＵ／ｍｌ以下、０．５８ＩＵ／ｍｌ以下、０．５９ＩＵ／ｍｌ以下、０．６０ＩＵ／ｍｌ以下、０．６１ＩＵ／ｍｌ以下、０．６２ＩＵ／ｍｌ以下、０．６３ＩＵ／ｍｌ以下、０．６４ＩＵ／ｍｌ以下、０．６５ＩＵ／ｍｌ以下、０．６６ＩＵ／ｍｌ以下、０．６７ＩＵ／ｍｌ以下、０．６８ＩＵ／ｍｌ以下、０．６８ＩＵ／ｍｌ以下、０．７０ＩＵ／ｍｌ以下、０．７１ＩＵ／ｍｌ以下、０．７２ＩＵ／ｍｌ以下、０．７３ＩＵ／ｍｌ以下、０．７４ＩＵ／ｍｌ以下、０．７５ＩＵ／ｍｌ以下、０．７６ＩＵ／ｍｌ以下、０．７７ＩＵ／ｍｌ以下、０．７８ＩＵ／ｍｌ以下、０．７９ＩＵ／ｍｌ以下、０．８０ＩＵ／ｍｌ以下、０．８１ＩＵ／ｍｌ以下、０．８２ＩＵ／ｍｌ以下、０．８３ＩＵ／ｍｌ以下、０．８４ＩＵ／ｍｌ以下、０．８５ＩＵ／ｍｌ以下、０．８６ＩＵ／ｍｌ以下、０．８７ＩＵ／ｍｌ以下、０．８８ＩＵ／ｍｌ以下、０．８９ＩＵ／ｍｌ以下、０．９ＩＵ／ｍｌ以下、０．９１ＩＵ／ｍｌ以下、０．９２ＩＵ／ｍｌ以下、０．９３ＩＵ／ｍｌ以下、０．９４ＩＵ／ｍｌ以下、０．９５ＩＵ／ｍｌ以下、０．９６ＩＵ／ｍｌ以下、０．９７ＩＵ／ｍｌ以下、０．９８ＩＵ／ｍｌ以下、０．９９ＩＵ／ｍｌ以下、１ＩＵ／ｍｌ以下、１．１ＩＵ／ｍｌ以下、１．２ＩＵ／ｍｌ以下、１．３ＩＵ／ｍｌ以下、１．４ＩＵ／ｍｌ以下、１．５ＩＵ／ｍｌ以下、１．６ＩＵ／ｍｌ以下、１．７ＩＵ／ｍｌ以下、１．８ＩＵ／ｍｌ以下、１．９ＩＵ／ｍｌ以下、又は２ＩＵ／ｍｌ以下である場合に、対象が血栓性凝固障害のリスクを有すると特定することを含む。特定の実施形態では、上記方法は、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の活性レベルが、約０．１ＩＵ／ｍｌ未満、０．１１ＩＵ／ｍｌ未満、０．１２ＩＵ／ｍｌ未満、０．１３ＩＵ／ｍｌ未満、０．１４ＩＵ／ｍｌ未満、０．１５ＩＵ／ｍｌ未満、０．１６ＩＵ／ｍｌ未満、０．１７ＩＵ／ｍｌ未満、０．１８ＩＵ／ｍｌ未満、０．１９ＩＵ／ｍｌ未満、０．２０ＩＵ／ｍｌ未満、０．２１ＩＵ／ｍｌ未満、０．２２ＩＵ／ｍｌ未満、０．２３ＩＵ／ｍｌ未満、０．２４ＩＵ／ｍｌ未満、０．２５ＩＵ／ｍｌ未満、０．２６ＩＵ／ｍｌ未満、０．２７ＩＵ／ｍｌ未満、０．２８ＩＵ／ｍｌ未満、０．２９ＩＵ／ｍｌ未満、０．３０ＩＵ／ｍｌ未満、０．３１ＩＵ／ｍｌ未満、０．３２ＩＵ／ｍｌ未満、０．３３ＩＵ／ｍｌ未満、０．３４ＩＵ／ｍｌ未満、０．３５ＩＵ／ｍｌ未満、０．３６ＩＵ／ｍｌ未満、０．３７ＩＵ／ｍｌ未満、０．３８ＩＵ／ｍｌ未満、０．３９ＩＵ／ｍｌ未満、０．４０ＩＵ／ｍｌ未満、０．４１ＩＵ／ｍｌ未満、０．４２ＩＵ／ｍｌ未満、０．４３ＩＵ／ｍｌ未満、０．４４ＩＵ／ｍｌ未満、０．４５ＩＵ／ｍｌ未満、０．４６ＩＵ／ｍｌ未満、０．４７ＩＵ／ｍｌ未満、０．４８ＩＵ／ｍｌ未満、０．４９ＩＵ／ｍｌ未満、０．５０ＩＵ／ｍｌ未満、０．５１ＩＵ／ｍｌ未満、０．５２ＩＵ／ｍｌ未満、０．５３ＩＵ／ｍｌ未満、０．５４ＩＵ／ｍｌ未満、０．５５ＩＵ／ｍｌ未満、０．５６ＩＵ／ｍｌ未満、０．５７ＩＵ／ｍｌ未満、０．５８ＩＵ／ｍｌ未満、０．５９ＩＵ／ｍｌ未満、０．６０ＩＵ／ｍｌ未満、０．６１ＩＵ／ｍｌ未満、０．６２ＩＵ／ｍｌ未満、０．６３ＩＵ／ｍｌ未満、０．６４ＩＵ／ｍｌ未満、０．６５ＩＵ／ｍｌ未満、０．６６ＩＵ／ｍｌ未満、０．６７ＩＵ／ｍｌ未満、０．６８ＩＵ／ｍｌ未満、０．６８ＩＵ／ｍｌ未満、０．７０ＩＵ／ｍｌ未満、０．７１ＩＵ／ｍｌ未満、０．７２ＩＵ／ｍｌ未満、０．７３ＩＵ／ｍｌ未満、０．７４ＩＵ／ｍｌ未満、０．７５ＩＵ／ｍｌ未満、０．７６ＩＵ／ｍｌ未満、０．７７ＩＵ／ｍｌ未満、０．７８ＩＵ／ｍｌ未満、０．７９ＩＵ／ｍｌ未満、０．８０ＩＵ／ｍｌ未満、０．８１ＩＵ／ｍｌ未満、０．８２ＩＵ／ｍｌ未満、０．８３ＩＵ／ｍｌ未満、０．８４ＩＵ／ｍｌ未満、０．８５ＩＵ／ｍｌ未満、０．８６ＩＵ／ｍｌ未満、０．８７ＩＵ／ｍｌ未満、０．８８ＩＵ／ｍｌ未満、０．８９ＩＵ／ｍｌ未満、０．９ＩＵ／ｍｌ未満、０．９１ＩＵ／ｍｌ未満、０．９２ＩＵ／ｍｌ未満、０．９３ＩＵ／ｍｌ未満、０．９４ＩＵ／ｍｌ未満、０．９５ＩＵ／ｍｌ未満、０．９６ＩＵ／ｍｌ未満、０．９７ＩＵ／ｍｌ未満、０．９８ＩＵ／ｍｌ未満、０．９９ＩＵ／ｍｌ未満、１ＩＵ／ｍｌ未満、１．１ＩＵ／ｍｌ未満、１．２ＩＵ／ｍｌ未満、１．３ＩＵ／ｍｌ未満、１．４ＩＵ／ｍｌ未満、１．５ＩＵ／ｍｌ未満、１．６ＩＵ／ｍｌ未満、１．７ＩＵ／ｍｌ未満、１．８ＩＵ／ｍｌ未満、１．９ＩＵ／ｍｌ未満、又は２ＩＵ／ｍｌ未満である場合に、対象が血栓性凝固障害のリスクを有すると特定することを含む。特定の実施形態では、このリスクを有する対象には、低用量（例えば約１０～４０ＩＵ／ｋｇ）のＡＤＡＭＴＳ１３が投与される。特定の実施形態では、このリスクを有する対象には、高用量（例えば約４０～４００ＩＵ／ｋｇ）のＡＤＡＭＴＳ１３が投与される。

【0188】

特定の実施形態では、上記方法は、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の活性レベルが、約０．４０ＩＵ／ｍｌ以下、０．４１ＩＵ／ｍｌ以下、０．４２ＩＵ／ｍｌ以下、０．４３ＩＵ／ｍｌ以下、０．４４ＩＵ／ｍｌ以下、０．４５ＩＵ／ｍｌ以下、０．４６ＩＵ／ｍｌ以下、０．４７ＩＵ／ｍｌ以下、０．４８ＩＵ／ｍｌ以下、０．４９ＩＵ／ｍｌ以下、０．５０ＩＵ／ｍｌ以下、０．５１ＩＵ／ｍｌ以下、０．５２ＩＵ／ｍｌ以下、０．５３ＩＵ／ｍｌ以下、０．５４ＩＵ／ｍｌ以下、０．５５ＩＵ／ｍｌ以下、０．５６ＩＵ／ｍｌ以下、０．５７ＩＵ／ｍｌ以下、０．５８ＩＵ／ｍｌ以下、０．５９ＩＵ／ｍｌ以下、０．６０ＩＵ／ｍｌ以下、０．６１ＩＵ／ｍｌ以下、０．６２ＩＵ／ｍｌ以下、０．６３ＩＵ／ｍｌ以下、０．６４ＩＵ／ｍｌ以下、０．６５ＩＵ／ｍｌ以下、０．６６ＩＵ／ｍｌ以下、０．６７ＩＵ／ｍｌ以下、０．６８ＩＵ／ｍｌ以下、０．６８ＩＵ／ｍｌ以下、０．７０ＩＵ／ｍｌ以下、０．７１ＩＵ／ｍｌ以下、０．７２ＩＵ／ｍｌ以下、０．７３ＩＵ／ｍｌ以下、０．７４ＩＵ／ｍｌ以下、０．７５ＩＵ／ｍｌ以下、０．７６ＩＵ／ｍｌ以下、０．７７ＩＵ／ｍｌ以下、０．７８ＩＵ／ｍｌ以下、０．７９ＩＵ／ｍｌ以下、０．８０ＩＵ／ｍｌ以下、０．８１ＩＵ／ｍｌ以下、０．８２ＩＵ／ｍｌ以下、０．８３ＩＵ／ｍｌ以下、０．８４ＩＵ／ｍｌ以下、０．８５ＩＵ／ｍｌ以下、０．８６ＩＵ／ｍｌ以下、０．８７ＩＵ／ｍｌ以下、０．８８ＩＵ／ｍｌ以下、０．８９ＩＵ／ｍｌ以下、０．９ＩＵ／ｍｌ以下、０．９１ＩＵ／ｍｌ以下、０．９２ＩＵ／ｍｌ以下、０．９３ＩＵ／ｍｌ以下、０．９４ＩＵ／ｍｌ以下、０．９５ＩＵ／ｍｌ以下、０．９６ＩＵ／ｍｌ以下、０．９７ＩＵ／ｍｌ以下、０．９８ＩＵ／ｍｌ以下、０．９９ＩＵ／ｍｌ以下、又は１ＩＵ／ｍｌ以下である場合に、対象が血栓性凝固障害のリスクを有すると特定することを含む。特定の実施形態では、上記方法は、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の活性レベルが、約０．４０ＩＵ／ｍｌ未満、０．４１ＩＵ／ｍｌ未満、０．４２ＩＵ／ｍｌ未満、０．４３ＩＵ／ｍｌ未満、０．４４ＩＵ／ｍｌ未満、０．４５ＩＵ／ｍｌ未満、０．４６ＩＵ／ｍｌ未満、０．４７ＩＵ／ｍｌ未満、０．４８ＩＵ／ｍｌ未満、０．４９ＩＵ／ｍｌ未満、０．５０ＩＵ／ｍｌ未満、０．５１ＩＵ／ｍｌ未満、０．５２ＩＵ／ｍｌ未満、０．５３ＩＵ／ｍｌ未満、０．５４ＩＵ／ｍｌ未満、０．５５ＩＵ／ｍｌ未満、０．５６ＩＵ／ｍｌ未満、０．５７ＩＵ／ｍｌ未満、０．５８ＩＵ／ｍｌ未満、０．５９ＩＵ／ｍｌ未満、０．６０ＩＵ／ｍｌ未満、０．６１ＩＵ／ｍｌ未満、０．６２ＩＵ／ｍｌ未満、０．６３ＩＵ／ｍｌ未満、０．６４ＩＵ／ｍｌ未満、０．６５ＩＵ／ｍｌ未満、０．６６ＩＵ／ｍｌ未満、０．６７ＩＵ／ｍｌ未満、０．６８ＩＵ／ｍｌ未満、０．６８ＩＵ／ｍｌ未満、０．７０ＩＵ／ｍｌ未満、０．７１ＩＵ／ｍｌ未満、０．７２ＩＵ／ｍｌ未満、０．７３ＩＵ／ｍｌ未満、０．７４ＩＵ／ｍｌ未満、０．７５ＩＵ／ｍｌ未満、０．７６ＩＵ／ｍｌ未満、０．７７ＩＵ／ｍｌ未満、０．７８ＩＵ／ｍｌ未満、０．７９ＩＵ／ｍｌ未満、０．８０ＩＵ／ｍｌ未満、０．８１ＩＵ／ｍｌ未満、０．８２ＩＵ／ｍｌ未満、０．８３ＩＵ／ｍｌ未満、０．８４ＩＵ／ｍｌ未満、０．８５ＩＵ／ｍｌ未満、０．８６ＩＵ／ｍｌ未満、０．８７ＩＵ／ｍｌ未満、０．８８ＩＵ／ｍｌ未満、０．８９ＩＵ／ｍｌ未満、０．９ＩＵ／ｍｌ未満、０．９１ＩＵ／ｍｌ未満、０．９２ＩＵ／ｍｌ未満、０．９３ＩＵ／ｍｌ未満、０．９４ＩＵ／ｍｌ未満、０．９５ＩＵ／ｍｌ未満、０．９６ＩＵ／ｍｌ未満、０．９７ＩＵ／ｍｌ未満、０．９８ＩＵ／ｍｌ未満、０．９９ＩＵ／ｍｌ未満、又は１ＩＵ／ｍｌ未満である場合に、対象が血栓性凝固障害のリスクを有すると特定することを含む。特定の実施形態では、上記方法は、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の活性レベルが、約０．７０ＩＵ／ｍｌ以下である場合に、対象が血栓性凝固障害のリスクを有すると特定することを含む。特定の実施形態では、このリスクを有する対象には、低用量（例えば約１０～４０ＩＵ／ｋｇ）のＡＤＡＭＴＳ１３が投与される。特定の実施形態では、このリスクを有する対象には、高用量（例えば約４０～４００ＩＵ／ｋｇ）のＡＤＡＭＴＳ１３が投与される。

【0189】

特定の実施形態では、上記方法は、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の活性レベルが、約０．２ＩＵ／ｍｌ～約０．９ＩＵ／ｍｌ以下、約０．２ＩＵ／ｍｌ～約０．８ＩＵ／ｍｌ以下、約０．２ＩＵ／ｍｌ～約０．５ＩＵ／ｍｌ以下、約０．２ＩＵ／ｍｌ～約０．４ＩＵ／ｍｌ以下、約０．４ＩＵ／ｍｌ～約０．９ＩＵ／ｍｌ以下、約０．４ＩＵ／ｍｌ～約０．８ＩＵ／ｍｌ以下、約０．４ＩＵ／ｍｌ～約０．５ＩＵ／ｍｌ以下、約０．５ＩＵ／ｍｌ～約０．９ＩＵ／ｍｌ以下、又は約０．５ＩＵ／ｍｌ～約０．８ＩＵ／ｍｌ以下である場合に、対象が血栓性凝固障害のリスクを有すると特定することを含む。特定の実施形態では、このリスクを有する対象には、低用量（例えば約１０～４０ＩＵ／ｋｇ）のＡＤＡＭＴＳ１３が投与される。特定の実施形態では、このリスクを有する対象には、高用量（例えば約４０～４００ＩＵ／ｋｇ）のＡＤＡＭＴＳ１３が投与される。

【0190】

特定の実施形態では、上記方法は、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の活性レベルが、約０．４０ＩＵ／ｍｌ以下、０．４１ＩＵ／ｍｌ以下、０．４２ＩＵ／ｍｌ以下、０．４３ＩＵ／ｍｌ以下、０．４４ＩＵ／ｍｌ以下、０．４５ＩＵ／ｍｌ以下、０．４６ＩＵ／ｍｌ以下、０．４７ＩＵ／ｍｌ以下、０．４８ＩＵ／ｍｌ以下、０．４９ＩＵ／ｍｌ以下、０．５０ＩＵ／ｍｌ以下、０．５１ＩＵ／ｍｌ以下、０．５２ＩＵ／ｍｌ以下、０．５３ＩＵ／ｍｌ以下、０．５４ＩＵ／ｍｌ以下、０．５５ＩＵ／ｍｌ以下、０．５６ＩＵ／ｍｌ以下、０．５７ＩＵ／ｍｌ以下、０．５８ＩＵ／ｍｌ以下、０．５９ＩＵ／ｍｌ以下、０．６０ＩＵ／ｍｌ以下、０．６１ＩＵ／ｍｌ以下、０．６２ＩＵ／ｍｌ以下、０．６３ＩＵ／ｍｌ以下、０．６４ＩＵ／ｍｌ以下、０．６５ＩＵ／ｍｌ以下、０．６６ＩＵ／ｍｌ以下、０．６７ＩＵ／ｍｌ以下、０．６８ＩＵ／ｍｌ以下、０．６８ＩＵ／ｍｌ以下、０．７０ＩＵ／ｍｌ以下、０．７１ＩＵ／ｍｌ以下、０．７２ＩＵ／ｍｌ以下、０．７３ＩＵ／ｍｌ以下、０．７４ＩＵ／ｍｌ以下、０．７５ＩＵ／ｍｌ以下、０．７６ＩＵ／ｍｌ以下、０．７７ＩＵ／ｍｌ以下、０．７８ＩＵ／ｍｌ以下、０．７９ＩＵ／ｍｌ以下、０．８０ＩＵ／ｍｌ以下、０．８１ＩＵ／ｍｌ以下、０．８２ＩＵ／ｍｌ以下、０．８３ＩＵ／ｍｌ以下、０．８４ＩＵ／ｍｌ以下、０．８５ＩＵ／ｍｌ以下、０．８６ＩＵ／ｍｌ以下、０．８７ＩＵ／ｍｌ以下、０．８８ＩＵ／ｍｌ以下、０．８９ＩＵ／ｍｌ以下、０．９ＩＵ／ｍｌ以下、０．９１ＩＵ／ｍｌ以下、０．９２ＩＵ／ｍｌ以下、０．９３ＩＵ／ｍｌ以下、０．９４ＩＵ／ｍｌ以下、０．９５ＩＵ／ｍｌ以下、０．９６ＩＵ／ｍｌ以下、０．９７ＩＵ／ｍｌ以下、０．９８ＩＵ／ｍｌ以下、０．９９ＩＵ／ｍｌ以下、又は１ＩＵ／ｍｌ以下である場合に、対象が血栓性凝固障害のリスクを有すると特定することを含む。特定の実施形態では、上記方法は、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の活性レベルが、約０．４０ＩＵ／ｍｌ未満、０．４１ＩＵ／ｍｌ未満、０．４２ＩＵ／ｍｌ未満、０．４３ＩＵ／ｍｌ未満、０．４４ＩＵ／ｍｌ未満、０．４５ＩＵ／ｍｌ未満、０．４６ＩＵ／ｍｌ未満、０．４７ＩＵ／ｍｌ未満、０．４８ＩＵ／ｍｌ未満、０．４９ＩＵ／ｍｌ未満、０．５０ＩＵ／ｍｌ未満、０．５１ＩＵ／ｍｌ未満、０．５２ＩＵ／ｍｌ未満、０．５３ＩＵ／ｍｌ未満、０．５４ＩＵ／ｍｌ未満、０．５５ＩＵ／ｍｌ未満、０．５６ＩＵ／ｍｌ未満、０．５７ＩＵ／ｍｌ未満、０．５８ＩＵ／ｍｌ未満、０．５９ＩＵ／ｍｌ未満、０．６０ＩＵ／ｍｌ未満、０．６１ＩＵ／ｍｌ未満、０．６２ＩＵ／ｍｌ未満、０．６３ＩＵ／ｍｌ未満、０．６４ＩＵ／ｍｌ未満、０．６５ＩＵ／ｍｌ未満、０．６６ＩＵ／ｍｌ未満、０．６７ＩＵ／ｍｌ未満、０．６８ＩＵ／ｍｌ未満、０．６８ＩＵ／ｍｌ未満、０．７０ＩＵ／ｍｌ未満、０．７１ＩＵ／ｍｌ未満、０．７２ＩＵ／ｍｌ未満、０．７３ＩＵ／ｍｌ未満、０．７４ＩＵ／ｍｌ未満、０．７５ＩＵ／ｍｌ未満、０．７６ＩＵ／ｍｌ未満、０．７７ＩＵ／ｍｌ未満、０．７８ＩＵ／ｍｌ未満、０．７９ＩＵ／ｍｌ未満、０．８０ＩＵ／ｍｌ未満、０．８１ＩＵ／ｍｌ未満、０．８２ＩＵ／ｍｌ未満、０．８３ＩＵ／ｍｌ未満、０．８４ＩＵ／ｍｌ未満、０．８５ＩＵ／ｍｌ未満、０．８６ＩＵ／ｍｌ未満、０．８７ＩＵ／ｍｌ未満、０．８８ＩＵ／ｍｌ未満、０．８９ＩＵ／ｍｌ未満、０．９ＩＵ／ｍｌ未満、０．９１ＩＵ／ｍｌ未満、０．９２ＩＵ／ｍｌ未満、０．９３ＩＵ／ｍｌ未満、０．９４ＩＵ／ｍｌ未満、０．９５ＩＵ／ｍｌ未満、０．９６ＩＵ／ｍｌ未満、０．９７ＩＵ／ｍｌ未満、０．９８ＩＵ／ｍｌ未満、０．９９ＩＵ／ｍｌ未満、又は１ＩＵ／ｍｌ未満である場合に、対象が血栓性凝固障害のリスクを有すると特定することを含む。特定の実施形態では、上記方法は、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の活性レベルが、約０．８０ＩＵ／ｍｌ以下、０．８１ＩＵ／ｍｌ以下、０．８２ＩＵ／ｍｌ以下、０．８３ＩＵ／ｍｌ以下、０．８４ＩＵ／ｍｌ以下、０．８５ＩＵ／ｍｌ以下、０．８６ＩＵ／ｍｌ以下、０．８７ＩＵ／ｍｌ以下、０．８８ＩＵ／ｍｌ以下、０．８９ＩＵ／ｍｌ以下、又は０．９ＩＵ／ｍｌ以下である場合に、対象が血栓性凝固障害のリスクを有すると特定することを含む。特定の実施形態では、上記方法は、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の活性レベルが、約０．８０ＩＵ／ｍｌ以下又は０．９ＩＵ／ｍｌ以下である場合に、対象が血栓性凝固障害のリスクを有すると特定することを含む。特定の実施形態では、このリスクを有する対象には、低用量（例えば約１０～４０ＩＵ／ｋｇ）のＡＤＡＭＴＳ１３が投与される。

【0191】

特定の実施形態では、対象は、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の活性レベルが、約０．２０ＩＵ／ｍｌ以下、０．２１ＩＵ／ｍｌ以下、０．２２ＩＵ／ｍｌ以下、０．２３ＩＵ／ｍｌ以下、０．２４ＩＵ／ｍｌ以下、０．２５ＩＵ／ｍｌ以下、０．２６ＩＵ／ｍｌ以下、０．２７ＩＵ／ｍｌ以下、０．２８ＩＵ／ｍｌ以下、０．２９ＩＵ／ｍｌ以下、０．３０ＩＵ／ｍｌ以下、０．３１ＩＵ／ｍｌ以下、０．３２ＩＵ／ｍｌ以下、０．３３ＩＵ／ｍｌ以下、０．３４ＩＵ／ｍｌ以下、０．３５ＩＵ／ｍｌ以下、０．３６ＩＵ／ｍｌ以下、０．３７ＩＵ／ｍｌ以下、０．３８ＩＵ／ｍｌ以下、０．３９ＩＵ／ｍｌ以下、０．４０ＩＵ／ｍｌ以下、０．４１ＩＵ／ｍｌ以下、０．４２ＩＵ／ｍｌ以下、０．４３ＩＵ／ｍｌ以下、０．４４ＩＵ／ｍｌ以下、０．４５ＩＵ／ｍｌ以下、０．４６ＩＵ／ｍｌ以下、０．４７ＩＵ／ｍｌ以下、０．４８ＩＵ／ｍｌ以下、０．４９ＩＵ／ｍｌ以下、又は０．５０ＩＵ／ｍｌ以下である場合に、血栓性凝固障害の高いリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の活性レベルが、約０．２０ＩＵ／ｍｌ未満、０．２１ＩＵ／ｍｌ未満、０．２２ＩＵ／ｍｌ未満、０．２３ＩＵ／ｍｌ未満、０．２４ＩＵ／ｍｌ未満、０．２５ＩＵ／ｍｌ未満、０．２６ＩＵ／ｍｌ未満、０．２７ＩＵ／ｍｌ未満、０．２８ＩＵ／ｍｌ未満、０．２９ＩＵ／ｍｌ未満、０．３０ＩＵ／ｍｌ未満、０．３１ＩＵ／ｍｌ未満、０．３２ＩＵ／ｍｌ未満、０．３３ＩＵ／ｍｌ未満、０．３４ＩＵ／ｍｌ未満、０．３５ＩＵ／ｍｌ未満、０．３６ＩＵ／ｍｌ未満、０．３７ＩＵ／ｍｌ未満、０．３８ＩＵ／ｍｌ未満、０．３９ＩＵ／ｍｌ未満、０．４０ＩＵ／ｍｌ未満、０．４１ＩＵ／ｍｌ未満、０．４２ＩＵ／ｍｌ未満、０．４３ＩＵ／ｍｌ未満、０．４４ＩＵ／ｍｌ未満、０．４５ＩＵ／ｍｌ未満、０．４６ＩＵ／ｍｌ未満、０．４７ＩＵ／ｍｌ未満、０．４８ＩＵ／ｍｌ未満、０．４９ＩＵ／ｍｌ未満、又は０．５０ＩＵ／ｍｌ未満である場合に、血栓性凝固障害の高いリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の活性レベルが、約０．３ＩＵ／ｍｌ以下、０．４ＩＵ／ｍｌ以下、約０．５ＩＵ／ｍｌ以下、又は約０．６ＩＵ／ｍｌ以下である場合に、血栓性凝固障害の高いリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の活性レベルが、約０．３ＩＵ／ｍｌ未満、０．４ＩＵ／ｍｌ未満、約０．５ＩＵ／ｍｌ未満、又は約０．６ＩＵ／ｍｌ未満である場合に、血栓性凝固障害の高いリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の活性レベルが、約０．４ＩＵ／ｍｌ以下、又は約０．５ＩＵ／ｍｌ以下である場合に、血栓性凝固障害の高いリスクを有する。特定の実施形態では、対象は、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の活性レベルが、約０．４ＩＵ／ｍｌ未満、又は約０．５ＩＵ／ｍｌ未満である場合に、血栓性凝固障害の高いリスクを有する。特定の実施形態では、このリスクを有する対象には、高用量（例えば約４０～４００ＩＵ／ｋｇ）のＡＤＡＭＴＳ１３が投与される。

【0192】

特定の実施形態では、所定の正常ベースラインは、検証／選択された測定方法を用いる試験所内の正常対照集団に基づく。特定の実施形態では、あるベースライン範囲が提供されている場合、対象の試料は、正常対照に対する増加を評価する際にはその範囲の上限と比較される。特定の実施形態では、あるベースライン範囲が提供されている場合、対象の試料は、正常対照に対する減少を評価する際にはその範囲の上限と比較される。特定の実施形態では、あるベースライン範囲が提供されている場合、対象の試料は、その所定のベースライン範囲の平均、中央値、又は最頻値と比較される。特定の実施形態では、あるベースライン範囲が提供されている場合、対象の試料は、その所定のベースライン範囲の平均と比較される。

【0193】

特定の実施形態では、対象は、対象から採取された血液又は鼻汁試料からＰＣＲでＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ ＲＮＡを検出することによって、ＣＯＶＩＤであると診断される。特定の実施形態では、対象は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のセロコンバージョンによって、ＣＯＶＩＤであると診断される。特定の実施形態では、対象は、対象の血漿中のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２抗体の検出によって、ＣＯＶＩＤであると診断される。

【0194】

特定の実施形態では、血液試料は抗凝固剤で処理される。特定の実施形態では、抗凝固剤は、ＥＤＴＡ、クエン酸ナトリウム、又はヘパリンである。

【0195】

特定の態様では、本発明は、ＣＯＶＩＤ－１９と診断された対象が血栓性凝固障害のリスクを有するかどうかを決定するための、キットを提供し、キットは：（ｉ）ＶＷＦタンパク質の血漿レベル、ＶＷＦの活性レベル、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体の血漿レベル、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の血漿レベル、ＡＤＡＭＴＳ１３の活性レベルのうちの１つ又は複数を決定するための、１つ又は複数の試薬；（ｉｉ）任意選択で、包装及び／又は使用説明書；並びに（ｉｉｉ）任意選択で、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２を検出するため又はＣＯＶＩＤ－１９を診断するための１つ又は複数の試薬を含む。

【0196】

Ｅ．投薬量
特定の実施形態では、単離又は組換えＡＤＡＭＴＳ１３の治療有効量又は用量は、対象の体重１ｋｇあたりの、投与されることになるＡＤＡＭＴＳ１３活性の国際単位（ＩＵ）の数（ＩＵ／ｋｇ）として表現される。ＡＤＡＭＴＳ１３活性のＩＵを決定するためのいずれの好適な方法が本発明の範囲内であり、その方法は公知であり、例えば上述されているようなＦＲＥＴＳ－ＶＷＦ７３活性を含む。

【0197】

（１）ＩＵ／ｋｇを単位とするＡＤＡＭＴＳ１３の投薬
特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３の治療有効量又は用量は、約１０～４００ＩＵ／ｋｇである。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３の治療有効量又は用量は、約１０～３２０ＩＵ／ｋｇである。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３の治療有効量又は用量は、約１０～３００ＩＵ／ｋｇである。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３の治療有効量又は用量は、約１０～２００ＩＵ／ｋｇである。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３の治療有効量又は用量は、約１０～１６０ＩＵ／ｋｇである。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３の治療有効量又は用量は、約２０～４００ＩＵ／ｋｇである。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３の治療有効量又は用量は、約２０～３２０ＩＵ／ｋｇである。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３の治療有効量又は用量は、約２０～３００ＩＵ／ｋｇである。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３の治療有効量又は用量は、約２０～２００ＩＵ／ｋｇである。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３の治療有効量又は用量は、約２０～１６０ＩＵ／ｋｇである。他の実施形態では、用量は、約１０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約１０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約２０～４００ＩＵ／ｋｇ、約２０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約２０～３００ＩＵ／ｋｇ、約２０～２００ＩＵ／ｋｇ、約２０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約２０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約４０～４００ＩＵ／ｋｇ、約４０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約４０～３００ＩＵ／ｋｇ、約４０～２００ＩＵ／ｋｇ、約４０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約４０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約５０～４００ＩＵ／ｋｇ、約５０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約５０～３００ＩＵ／ｋｇ、約５０～２００ＩＵ／ｋｇ、約５０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約５０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約６０～４００ＩＵ／ｋｇ、約６０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約６０～３００ＩＵ／ｋｇ、約６０～２００ＩＵ／ｋｇ、約６０～１８０ＩＵ／ｋｇ、又は約６０～１６０ＩＵ／ｋｇである。更なる実施形態では、用量は、約１０～１００ＩＵ／ｋｇ、約１０～８０ＩＵ／ｋｇ、約１０～６０ＩＵ／ｋｇ、約１０～４０ＩＵ／ｋｇ、約２０～１００ＩＵ／ｋｇ、約２０～８０ＩＵ／ｋｇ、約２０～６０ＩＵ／ｋｇ、又は約２０～４０ＩＵ／ｋｇである。更に他の実施形態では、用量は、約３０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約３０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約３０～１５０ＩＵ／ｋｇ、約４０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約４０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約４０～１５０ＩＵ／ｋｇ、約５０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約５０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約５０～１５０ＩＵ／ｋｇ、約６０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約６０～１６０ＩＵ／ｋｇ、又は約６０～１５０ＩＵ／ｋｇである。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３の治療有効量又は用量は、約１０ＩＵ／ｋｇ、約２０ＩＵ／ｋｇ、約３０ＩＵ／ｋｇ、約４０ＩＵ／ｋｇ、約５０ＩＵ／ｋｇ、約６０ＩＵ／ｋｇ、約８０ＩＵ／ｋｇ、約１００ＩＵ／ｋｇ、約１２０ＩＵ／ｋｇ、約１４０ＩＵ／ｋｇ、約１６０ＩＵ／ｋｇ、約２００ＩＵ／ｋｇ、約３００ＩＵ／ｋｇ、約３２０ＩＵ／ｋｇ、又は約４００ＩＵ／ｋｇである。特定の実施形態では、治療有効量又は用量は、約１０ＩＵ／ｋｇ、約２０ＩＵ／ｋｇ、約４０ＩＵ／ｋｇ、又は約６０ＩＵ／ｋｇである。治療有効量又は用量は、単回用量、複数回用量、又は分割用量として投与できる。例えば、治療有効量又は用量は、状態の治療又は防止に有効な総ＡＤＡＭＴＳ１３の循環レベルを維持するために、単回用量又は複数回用量で投与できる。このような態様では、治療有効量又は用量は、毎月、２週間毎、毎週、週２回、週３回、隔日、毎日、１２時間毎、８時間毎、６時間毎、４時間毎、２時間毎、又は１時間毎に投与される。特定の実施形態では、治療有効量又は用量は、毎日、又は隔日で投与される。

【0198】

特定の実施形態では、治療有効量又は用量は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染の検出若しくはＣＯＶＩＤ－１９の診断後すぐに、又はＣＯＶＩＤ－１９に関連する１つ又は複数の症状、合併症、若しくは危険因子のリスク若しくは脆弱性の決定後すぐに、例えば５分、１０分、１５分、２０分、２５分、３０分、３５分、４０分、４５分、５０分、５５分、６０分、９０分、１１０分、１２０分、３時間、４時間、５時間、６時間、７時間、８時間、９時間、１０時間、１１時間、１２時間、１３時間、１４時間、１５時間、１６時間、１７時間、１８時間、１９時間、２０時間、２１時間、２２時間、２３時間、２４時間、又は２５時間以上以内に、あるいはこれらのいずれの組み合わせで、投与される。

【0199】

特定のＣＯＶＩＤ－１９対象は６５歳を超えていてよく、及び／又はＣＯＶＩＤ－１９に関連する１つ又は複数の合併症若しくは危険因子の病歴、兆候、若しくは症状、若しくはこれらに対する素因若しくは感受性を示してよい。これらは例えば、限定するものではないが、ＶＷＦ及び／又はその多量体（特に超大型多量体（ＵＨＭＷ））のレベルの上昇、ＶＷＦの活性レベルの上昇、内因性ＡＤＡＭＴＳ１３の血漿レベルの低下、サイトカインレベルの上昇、内因性ＡＤＡＭＴＳ１３の活性の低下、凝固障害、血液凝固障害、静脈閉塞障害、血栓形成促進状態、遺伝性血栓性血小板減少性紫斑病（ＴＴＰ）、後天性ＴＴＰ、播種性血管内凝固症候群（ＤＩＣ）、敗血症、鎌状赤血球症、腎不全、呼吸不全、急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、肺炎、喘息、妊娠高血圧症候群、閉経期高血圧、閉経周辺期高血圧、高血圧症（例えば肺高血圧症）、血栓症（例えばＤＶＴ）、気道の血栓性微小血管症（ＴＭＡ）を含むＴＭＡ、塞栓症（例えばＰＥ）、心筋梗塞、並びに卒中（例えば虚血性脳卒中又は脳卒中）、あるいはこれらの症状又は合併症を含む。これらの対象は、本明細書では「危険な」対象又は患者と呼ばれる。

【0200】

特定の「危険な」ＣＯＶＩＤ－１９対象は、ＣＯＶＩＤ－１９症状の有無にかかわらず、疾患の初期段階に、例えばＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染について対象を試験する際に、現れる場合がある。これらの対象は、ＶＷＦ及び／又はその多量体（例えばＵＨＭＷ）のレベルの上昇を示す場合も示さない場合もあり、それらのレベルが正常であるか又はわずかしか上昇していないように見える場合もある。本発明によると、このような「危険な初期段階の対象を、治療有効量の単離又は組換えＡＤＡＭＴＳ１３を含む組成物を投与することによって治療できる。特定の実施形態では、治療有効量は、約１０～１００ＩＵ／ｋｇ、約１０～８０ＩＵ／ｋｇ、約２０～１００ＩＵ／ｋｇ、約２０～８０ＩＵ／ｋｇ、約３０～１００ＩＵ／ｋｇ、約３０～８０ＩＵ／ｋｇ、約４０～１００ＩＵ／ｋｇ、約４０～８０ＩＵ／ｋｇ、約５０～１００ＩＵ／ｋｇ、約５０～８０ＩＵ／ｋｇ、約６０～１００ＩＵ／ｋｇ、又は約６０～８０ＩＵ／ｋｇとなる。特定の実施形態では、治療有効量は約１０～６０ＩＵ／ｋｇとなる。特定の実施形態では、治療有効量は約１０～４０ＩＵ／ｋｇとなる。特定の実施形態では、治療有効量は約１０～２０ＩＵ／ｋｇとなる。特定の実施形態では、治療有効量は約２０～６０ＩＵ／ｋｇとなる。特定の実施形態では、治療有効量は約２０～４０ＩＵ／ｋｇとなる。特定の実施形態では、治療有効量は約２０～３０ＩＵ／ｋｇとなる。特定の実施形態では、治療有効量又は用量は、約１０ＩＵ／ｋｇ、約２０ＩＵ／ｋｇ、約３０ＩＵ／ｋｇ、約４０ＩＵ／ｋｇ、約５０ＩＵ／ｋｇ、又は約６０ＩＵ／ｋｇである。特定の実施形態では、治療有効量又は用量は、約１０ＩＵ／ｋｇ、約２０ＩＵ／ｋｇ、約３０ＩＵ／ｋｇ、又は約４０ＩＵ／ｋｇである。特定の実施形態では、投薬は、対象の循環ＡＤＡＭＴＳ１３レベルを、正常ベースライン値と比較して（例えば所定の正常ベースライン値）と比較して約２０～１００％だけ上昇させるように、決定及び／又は監視される。特定の実施形態では、投薬は、対象の循環ＡＤＡＭＴＳ１３レベルを、所定の正常ベースライン値と比較して約１００～１５０％だけ上昇させるように、決定及び／又は監視される。特定の実施形態では、投薬は、対象の循環ＡＤＡＭＴＳ１３レベルを、所定の正常ベースライン値と比較して約１００％、約１１０％、約１２０％、約１２５％、約１３０％、約１４０％、又は約１５０％だけ上昇させるように、決定及び／又は監視される。特定の実施形態では、投薬は、対象の循環ＡＤＡＭＴＳ１３レベルを、所定の正常ベースライン値と比較して約１００％、約１１０％、約１２０％、約１２５％、約１３０％、約１４０％、又は約１５０％だけ上昇させるように、決定及び／又は監視される。特定の実施形態では、組成物は、「危険な初期段階の」対象に、ＣＯＶＩＤ－１９の診断若しくは入院の直後に、又はＣＯＶＩＤ－１９の診断若しくは入院の２４時間若しくは４８時間以内に、投与される。特定の実施形態では、「危険な初期段階」の対象では、ＶＷＦ及び／若しくはその多量体（例えばＵＨＭＷ）のレベル、ＶＷＦ及び／若しくはその多量体（例えばＵＨＭＷ）の活性、ＡＤＡＭＴＳ１３レベル、並びに／又はＡＤＡＭＴＳ１３活性は、ＡＤＡＭＴＳ１３の投与前に評価されていない。このような態様では、治療有効量又は用量は、毎月、２週間毎、毎週、週２回、週３回、隔日、毎日、１２時間毎、８時間毎、６時間毎、４時間毎、２時間毎、又は１時間毎に投与される。特定の実施形態では、治療有効量又は用量は、毎日、又は隔日で投与される。本発明によると、本明細書に記載の治療は、１つ又は複数のＣＯＶＩＤ－１９合併症、特に本明細書に記載の様々な血栓性状態又は血栓形成促進状態、及び合併症の、重篤な進行を治療、阻害、抑制、防止、軽減、若しくは緩和する。

【0201】

特定の「危険な」ＣＯＶＩＤ－１９患者は、疾患の後期段階に現れる場合があり、及び／又はＶＷＦ若しくはその多量体（例えばＵＨＭＷ）のレベルの上昇を示す場合がある。特定の実施形態では、治療を指示する上昇したＶＷＦ又は多量体のレベルは、所定の正常ベースライン値より少なくとも約５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、２００％、３００％、４００％、５００％、６００％、７００％、８００％、９００％高いレベルとなる。特定の実施形態では、治療は、ＶＷＦ及び／又は多量体レベルが所定の正常ベースライン値と比較して２倍若しくは３倍高い、又は更に高い場合に指示される。特定の実施形態では、「危険な後期段階の」ＣＯＶＩＤ－１９患者は、集中治療室（「ＩＣＵ］）に入院した患者である。特定の実施形態では、「危険な後期段階」のＣＯＶＩＤ－１９患者は、挿管された患者である。本発明によると、このような「危険な後期段階の」対象を、治療有効量の単離又は組換えＡＤＡＭＴＳ１３を含む組成物を投与することによって治療できる。

【0202】

特定の実施形態では、所定の正常ベースラインは、検証された／選択された測定方法を用いた試験所における正常な対照集団に基づくものである。

【0203】

特定の実施形態では、「後期段階」のＣＯＶＩＤ－１９対象に対する治療有効量は、約２０～４００ＩＵ／ｋｇ、約３２０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約２０～３００ＩＵ／ｋｇ、約２０～２００ＩＵ／ｋｇ、約２０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約２０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約２０～８０ＩＵ／ｋｇ、約２０～６０ＩＵ／ｋｇ、約２０～４０ＩＵ／ｋｇ、約３０～４００ＩＵ／ｋｇ、約３０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約３０～３００ＩＵ／ｋｇ、約３０～２００ＩＵ／ｋｇ、約３０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約３０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約３０～８０ＩＵ／ｋｇ、約３０～６０ＩＵ／ｋｇ、約３０～４０ＩＵ／ｋｇ、約４０～４００ＩＵ／ｋｇ、約４０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約４０～３００ＩＵ／ｋｇ、約４０～２００ＩＵ／ｋｇ、約４０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約４０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約４０～８０ＩＵ／ｋｇ、約４０～６０ＩＵ／ｋｇ、約５０～４００ＩＵ／ｋｇ、約５０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約５０～３００ＩＵ／ｋｇ、約５０～２００ＩＵ／ｋｇ、約５０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約５０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約５０～８０ＩＵ／ｋｇ、約５０～６０ＩＵ／ｋｇ、約６０～４００ＩＵ／ｋｇ、約６０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約６０～３００ＩＵ／ｋｇ、約６０～２００ＩＵ／ｋｇ、約６０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約６０～１６０ＩＵ／ｋｇ、又は約６０～８０ＩＵ／ｋｇとなる。特定の実施形態では、治療有効量は約３０～３２０ＩＵ／ｋｇとなる。特定の実施形態では、治療有効量は約３０～１６０ＩＵ／ｋｇとなる。特定の実施形態では、治療有効量は約３０～８０ＩＵ／ｋｇとなる。特定の実施形態では、治療有効量は約３０～６０ＩＵ／ｋｇとなる。特定の実施形態では、治療有効量は約４０～３２０ＩＵ／ｋｇとなる。特定の実施形態では、治療有効量は約４０～１６０ＩＵ／ｋｇとなる。特定の実施形態では、治療有効量は約４０～８０ＩＵ／ｋｇとなる。特定の実施形態では、治療有効量は約４０～６０ＩＵ／ｋｇとなる。特定の実施形態では、治療有効量又は用量は、約２０ＩＵ／ｋｇ、約３０ＩＵ／ｋｇ、約４０ＩＵ／ｋｇ、約６０ＩＵ／ｋｇ、約８０ＩＵ／ｋｇ、又は約１６０ＩＵ／ｋｇである。特定の実施形態では、治療有効量又は用量は、約４０ＩＵ／ｋｇ、約８０ＩＵ／ｋｇ、又は約１６０ＩＵ／ｋｇである。特定の実施形態では、投薬は、所定の正常範囲内であるか又は所定のベースライン値に近いＶＷＦ及び／又はその多量体（例えばＵＨＭＷ）のレベルの低下を提供するように、決定及び／又は監視される。特定の実施形態では、超大型ＶＷＦ多量体がもはや観察されなくなる。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３組成物は、「危険な後期段階の」対象に、ＣＯＶＩＤ－１９の診断若しくは入院の直後に、又はＣＯＶＩＤ－１９の診断若しくは入院の２４時間若しくは４８時間以内に、投与される。特定の実施形態では、「危険な初期段階」の対象では、ＶＷＦ及び／若しくはその多量体（例えばＵＨＭＷ）のレベル、ＶＷＦ及び／若しくはその多量体（例えばＵＨＭＷ）の活性、ＡＤＡＭＴＳ１３レベル、並びに／又はＡＤＡＭＴＳ１３活性は、ＡＤＡＭＴＳ１３の投与前に評価されていない。このような態様では、治療有効量又は用量は、毎月、２週間毎、毎週、週２回、週３回、隔日、毎日、１２時間毎、８時間毎、６時間毎、４時間毎、２時間毎、又は１時間毎に投与される。特定の実施形態では、治療有効量又は用量は、毎日、又は隔日で投与される。本発明によると、本明細書に記載の治療は、１つ又は複数のＣＯＶＩＤ－１９合併症、特に本明細書に記載の様々な血栓性状態又は血栓形成促進状態、及び合併症の、重篤な進行を治療、阻害、抑制、防止、軽減、若しくは緩和する。

【0204】

いかなる理論によっても束縛されることを望むものではないが、「危険な後期段階の」ＣＯＶＩＤ－１９対象は、「危険な初期段階の」ＣＯＶＩＤ－１９対象に投与される用量と比較して、より高頻度で投与される、より高用量のＡＤＡＭＴＳ１３の投与から、利益を受ける傾向があると考えられる。

【0205】

特定の実施形態では、用量は約１０～４００ＩＵ／ｋｇである。特定の実施形態では、用量は約１０～３２０ＩＵ／ｋｇである。特定の実施形態では、用量は約１０～３００ＩＵ／ｋｇである。特定の実施形態では、用量は約１０～２００ＩＵ／ｋｇである。特定の実施形態では、用量は約１０～３００ＩＵ／ｋｇである。特定の実施形態では、用量は約１０～１６０ＩＵ／ｋｇである。特定の実施形態では、用量は約１０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約１０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約２０～４００ＩＵ／ｋｇ、約２０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約２０～３００ＩＵ／ｋｇ、約２０～２００ＩＵ／ｋｇ、約２０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約２０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約４０～４００ＩＵ／ｋｇ、約４０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約４０～３００ＩＵ／ｋｇ、約４０～２００ＩＵ／ｋｇ、約４０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約４０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約５０～４００ＩＵ／ｋｇ、約５０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約５０～３００ＩＵ／ｋｇ、約５０～２００ＩＵ／ｋｇ、約５０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約５０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約６０～４００ＩＵ／ｋｇ、約６０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約６０～３００ＩＵ／ｋｇ、約６０～２００ＩＵ／ｋｇ、約６０～１８０ＩＵ／ｋｇ、又は約６０～１６０ＩＵ／ｋｇである。特定の実施形態では、用量は約１０～１００ＩＵ／ｋｇ、約１０～８０ＩＵ／ｋｇ、約１０～６０ＩＵ／ｋｇ、１０～６０ＩＵ／ｋｇ、約２０～１００ＩＵ／ｋｇ、約２０～８０ＩＵ／ｋｇ、約２０～６０ＩＵ／ｋｇ、又は約２０～４０ＩＵ／ｋｇである。特定の実施形態では、用量は約３０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約３０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約３０～１５０ＩＵ／ｋｇ、約４０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約４０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約４０～１５０ＩＵ／ｋｇ、約５０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約５０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約５０～１５０ＩＵ／ｋｇ、約６０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約６０～１６０ＩＵ／ｋｇ、又は約６０～１５０ＩＵ／ｋｇである。特定の実施形態では、用量は約１０ＩＵ／ｋｇ、約２０ＩＵ／ｋｇ、約３０ＩＵ／ｋｇ、約４０ＩＵ／ｋｇ、約５０ＩＵ／ｋｇ、約６０ＩＵ／ｋｇ、約８０ＩＵ／ｋｇ、約１００ＩＵ／ｋｇ、約１２０ＩＵ／ｋｇ、約１４０ＩＵ／ｋｇ、約１６０ＩＵ／ｋｇ、約２００ＩＵ／ｋｇ、約３００ＩＵ／ｋｇ、約３２０ＩＵ／ｋｇ、又は約４００ＩＵ／ｋｇである。特定の実施形態では、治療有効量又は用量は、約１０ＩＵ／ｋｇ、約２０ＩＵ／ｋｇ、約４０ＩＵ／ｋｇ、約６０ＩＵ／ｋｇ、約８０ＩＵ／ｋｇ、又は約１６０ＩＵ／ｋｇである。

【0206】

特定の実施形態では、治療有効量又は用量は、少なくとも約１０ＩＵ／ｋｇ、少なくとも約２０ＩＵ／ｋｇ、少なくとも約３０ＩＵ／ｋｇ、少なくとも約４０ＩＵ／ｋｇ、少なくとも約５０ＩＵ／ｋｇ、少なくとも約６０ＩＵ／ｋｇ、少なくとも約７０ＩＵ／ｋｇ、少なくとも約８０ＩＵ／ｋｇ、少なくとも約９０ＩＵ／ｋｇ、少なくとも約１００ＩＵ／ｋｇ、少なくとも約１１０ＩＵ／ｋｇ、少なくとも約１２０ＩＵ／ｋｇ、少なくとも約１３０ＩＵ／ｋｇ、少なくとも約１４０ＩＵ／ｋｇ、少なくとも約１５０ＩＵ／ｋｇ、又は少なくとも約１６０ＩＵ／ｋｇである。特定の実施形態では、治療有効量又は用量は、少なくとも約１０ＩＵ／ｋｇ、少なくとも約２０ＩＵ／ｋｇ、少なくとも約４０ＩＵ／ｋｇ、又は少なくとも約６０ＩＵ／ｋｇである。特定の実施形態では、用量は約１０～２００ＩＵ／ｋｇである。特定の実施形態では、用量は約１０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約１０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約２０～２００ＩＵ／ｋｇ、約２０～１８０ＩＵ／ｋｇ、又は約２０～１６０ＩＵ／ｋｇである。特定の実施形態では、用量は約１０～１００ＩＵ／ｋｇ、約１０～８０ＩＵ／ｋｇ、約１０～６０ＩＵ／ｋｇ、約１０～４０ＩＵ／ｋｇ、約２０～１００ＩＵ／ｋｇ、約２０～８０ＩＵ／ｋｇ、約２０～６０ＩＵ／ｋｇ、又は約２０～４０ＩＵ／ｋｇである。特定の実施形態では、用量は約３０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約３０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約３０～１５０ＩＵ／ｋｇ、約４０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約４０～１６０ＩＵ／ｋｇ、又は約４０～１５０ＩＵ／ｋｇである。

【0207】

特定の実施形態では、治療有効量又は用量は、約１０～４００ＩＵ／ｋｇ、約１０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約１０～３００ＩＵ／ｋｇ、約１０～２００ＩＵ／ｋｇ、約１０～１９０ＩＵ／ｋｇ、約１０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約１０～１７０ＩＵ／ｋｇ、約１０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約１０～１５０ＩＵ／ｋｇ、約１０～１４０ＩＵ／ｋｇ、約１０～１３０ＩＵ／ｋｇ、約１０～１２０ＩＵ／ｋｇ、約１０～１１０ＩＵ／ｋｇ、約１０～１００ＩＵ／ｋｇ、約１０～９０ＩＵ／ｋｇ、約１０～８０ＩＵ／ｋｇ、約１０～７０ＩＵ／ｋｇ、約１０～６０ＩＵ／ｋｇ、約１０～５０ＩＵ／ｋｇ、約１０～４０ＩＵ／ｋｇ、約１０～３０ＩＵ／ｋｇ、又は約１０～２０ＩＵ／ｋｇである。特定の実施形態では、治療有効量又は用量は、約１０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約１０～１６０ＩＵ／ｋｇ、１０～８０ＩＵ／ｋｇ、約１０～６０ＩＵ／ｋｇ、約１０～４０ＩＵ／ｋｇ、又は約１０～２０ＩＵ／ｋｇである。

【0208】

特定の実施形態では、治療有効量又は用量は、約２０～４００ＩＵ／ｋｇ、約２０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約２０～３００ＩＵ／ｋｇ、約２０～２００ＩＵ／ｋｇ、約２０～１９０ＩＵ／ｋｇ、約２０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約２０～１７０ＩＵ／ｋｇ、約２０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約２０～１５０ＩＵ／ｋｇ、約２０～１４０ＩＵ／ｋｇ、約２０～１３０ＩＵ／ｋｇ、約２０～１２０ＩＵ／ｋｇ、約２０～１１０ＩＵ／ｋｇ、約２０～１００ＩＵ／ｋｇ、約２０～９０ＩＵ／ｋｇ、約２０～８０ＩＵ／ｋｇ、約２０～７０ＩＵ／ｋｇ、約２０～６０ＩＵ／ｋｇ、約２０～５０ＩＵ／ｋｇ、約２０～４０ＩＵ／ｋｇ、又は約２０～３０ＩＵ／ｋｇである。特定の実施形態では、治療有効量又は用量は、約２０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約２０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約２０～８０ＩＵ／ｋｇ、約２０～６０ＩＵ／ｋｇ、又は約２０～４０ＩＵ／ｋｇである。

【0209】

特定の実施形態では、治療有効量又は用量は、約３０～４００ＩＵ／ｋｇ、約３０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約３０～３００ＩＵ／ｋｇ、約３０～２００ＩＵ／ｋｇ、約３０～１９０ＩＵ／ｋｇ、約３０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約３０～１７０ＩＵ／ｋｇ、約３０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約３０～１５０ＩＵ／ｋｇ、約３０～１４０ＩＵ／ｋｇ、約３０～１３０ＩＵ／ｋｇ、約３０～１２０ＩＵ／ｋｇ、約３０～１１０ＩＵ／ｋｇ、約３０～１００ＩＵ／ｋｇ、約３０～９０ＩＵ／ｋｇ、約３０～８０ＩＵ／ｋｇ、約３０～７０ＩＵ／ｋｇ、約３０～６０ＩＵ／ｋｇ、約３０～５０ＩＵ／ｋｇ、又は約３０～４０ＩＵ／ｋｇである。特定の実施形態では、治療有効量又は用量は、約３０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約３０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約３０～８０ＩＵ／ｋｇ、約３０～６０ＩＵ／ｋｇ、又は約３０～４０ＩＵ／ｋｇである。

【0210】

特定の実施形態では、治療有効量又は用量は、約４０～４００ＩＵ／ｋｇ、約４０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約４０～３００ＩＵ／ｋｇ、約４０～２００ＩＵ／ｋｇ、約４０～１９０ＩＵ／ｋｇ、約４０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約４０～１７０ＩＵ／ｋｇ、約４０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約４０～１５０ＩＵ／ｋｇ、約４０～１４０ＩＵ／ｋｇ、約４０～１３０ＩＵ／ｋｇ、約４０～１２０ＩＵ／ｋｇ、約４０～１１０ＩＵ／ｋｇ、約４０～１００ＩＵ／ｋｇ、約４０～９０ＩＵ／ｋｇ、約４０～８０ＩＵ／ｋｇ、約４０～７０ＩＵ／ｋｇ、約４０～６０ＩＵ／ｋｇ、又は約４０～５０ＩＵ／ｋｇである。特定の実施形態では、治療有効量又は用量は、約４０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約４０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約４０～８０ＩＵ／ｋｇ、又は約４０～６０ＩＵ／ｋｇである。

【0211】

特定の実施形態では、治療有効量又は用量は、約５０～４００ＩＵ／ｋｇ、約５０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約５０～３００ＩＵ／ｋｇ、約５０～２００ＩＵ／ｋｇ、約５０～１９０ＩＵ／ｋｇ、約５０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約５０～１７０ＩＵ／ｋｇ、約５０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約５０～１５０ＩＵ／ｋｇ、約５０～１４０ＩＵ／ｋｇ、約５０～１３０ＩＵ／ｋｇ、約５０～１２０ＩＵ／ｋｇ、約５０～１１０ＩＵ／ｋｇ、約５０～１００ＩＵ／ｋｇ、約５０～９０ＩＵ／ｋｇ、約５０～８０ＩＵ／ｋｇ、約５０～７０ＩＵ／ｋｇ、又は約５０～６０ＩＵ／ｋｇである。特定の実施形態では、治療有効量又は用量は、約５０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約５０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約５０～８０ＩＵ／ｋｇ、又は約５０～６０ＩＵ／ｋｇである。

【0212】

特定の実施形態では、治療有効量又は用量は、約６０～４００ＩＵ／ｋｇ、約６０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約６０～３００ＩＵ／ｋｇ、約６０～２００ＩＵ／ｋｇ、約６０～１９０ＩＵ／ｋｇ、約６０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約６０～１７０ＩＵ／ｋｇ、約６０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約６０～１５０ＩＵ／ｋｇ、約６０～１４０ＩＵ／ｋｇ、約６０～１３０ＩＵ／ｋｇ、約６０～１２０ＩＵ／ｋｇ、約６０～１１０ＩＵ／ｋｇ、約６０～１００ＩＵ／ｋｇ、約６０～９０ＩＵ／ｋｇ、約６０～８０ＩＵ／ｋｇ、又は約６０～７０ＩＵ／ｋｇである。特定の実施形態では、治療有効量又は用量は、約６０～４００ＩＵ／ｋｇ、約６０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約６０～１６０ＩＵ／ｋｇ、又は約６０～８０ＩＵ／ｋｇである。

【0213】

特定の実施形態では、治療有効量又は用量は、約７０～４００ＩＵ／ｋｇ、約７０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約７０～３００ＩＵ／ｋｇ、約７０～２００ＩＵ／ｋｇ、約７０～１９０ＩＵ／ｋｇ、約７０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約７０～１７０ＩＵ／ｋｇ、約７０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約７０～１５０ＩＵ／ｋｇ、約７０～１４０ＩＵ／ｋｇ、約７０～１３０ＩＵ／ｋｇ、約７０～１２０ＩＵ／ｋｇ、約７０～１１０ＩＵ／ｋｇ、約７０～１００ＩＵ／ｋｇ、約７０～９０ＩＵ／ｋｇ、又は約７０～８０ＩＵ／ｋｇである。特定の実施形態では、治療有効量又は用量は、約７０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約７０～１６０ＩＵ／ｋｇ、又は約７０～８０ＩＵ／ｋｇである。

【0214】

特定の実施形態では、治療有効量又は用量は、約８０～４００ＩＵ／ｋｇ、約８０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約８０～３００ＩＵ／ｋｇ、約８０～２００ＩＵ／ｋｇ、約８０～１９０ＩＵ／ｋｇ、約８０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約８０～１７０ＩＵ／ｋｇ、約８０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約８０～１５０ＩＵ／ｋｇ、約８０～１４０ＩＵ／ｋｇ、約８０～１３０ＩＵ／ｋｇ、約８０～１２０ＩＵ／ｋｇ、約８０～１１０ＩＵ／ｋｇ、約８０～１００ＩＵ／ｋｇ、又は約８０～９０ＩＵ／ｋｇである。特定の実施形態では、治療有効量又は用量は、約８０～３２０ＩＵ／ｋｇ、又は約８０～１６０ＩＵ／ｋｇである。

【0215】

特定の実施形態では、治療有効量又は用量は、約９０～４００ＩＵ／ｋｇ、約９０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約９０～３００ＩＵ／ｋｇ、約９０～２００ＩＵ／ｋｇ、約９０～１９０ＩＵ／ｋｇ、約９０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約９０～１７０ＩＵ／ｋｇ、約９０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約９０～１５０ＩＵ／ｋｇ、約９０～１４０ＩＵ／ｋｇ、約９０～１３０ＩＵ／ｋｇ、約９０～１２０ＩＵ／ｋｇ、約９０～１１０ＩＵ／ｋｇ、又は約９０～１００ＩＵ／ｋｇである。特定の実施形態では、治療有効量又は用量は、約９０～３２０ＩＵ／ｋｇ、又は約９０～１６０ＩＵ／ｋｇである。

【0216】

特定の実施形態では、治療有効量又は用量は、約１００～４００ＩＵ／ｋｇ、約１００～３２０ＩＵ／ｋｇ、約１００～３００ＩＵ／ｋｇ、約１００～２００ＩＵ／ｋｇ、約１００～１９０ＩＵ／ｋｇ、約１００～１８０ＩＵ／ｋｇ、約１００～１７０ＩＵ／ｋｇ、約１００～１６０ＩＵ／ｋｇ、約１００～１５０ＩＵ／ｋｇ、約１００～１４０ＩＵ／ｋｇ、約１００～１３０ＩＵ／ｋｇ、約１００～１２０ＩＵ／ｋｇ、又は約１００～１１０ＩＵ／ｋｇである。特定の実施形態では、治療有効量又は用量は、約１００～４００ＩＵ／ｋｇ、約１００～３２０ＩＵ／ｋｇ、又は約１００～１６０ＩＵ／ｋｇである。

【0217】

特定の実施形態では、治療有効量又は用量は、約１１０～４００ＩＵ／ｋｇ、約１１０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約１１０～３００ＩＵ／ｋｇ、約１１０～２００ＩＵ／ｋｇ、約１１０～１９０ＩＵ／ｋｇ、約１１０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約１１０～１７０ＩＵ／ｋｇ、約１１０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約１１０～１５０ＩＵ／ｋｇ、約１１０～１４０ＩＵ／ｋｇ、約１１０～１３０ＩＵ／ｋｇ、又は約１１０～１２０ＩＵ／ｋｇである。更なる実施形態は、約１２０～４００ＩＵ／ｋｇ、約１２０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約１２０～３００ＩＵ／ｋｇ、約１２０～２００ＩＵ／ｋｇ、約１２０～１９０ＩＵ／ｋｇ、約１２０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約１２０～１７０ＩＵ／ｋｇ、約１２０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約１２０～１５０ＩＵ／ｋｇ、約１２０～１４０ＩＵ／ｋｇ、又は約１２０～１３０ＩＵ／ｋｇの用量を提供する。

【0218】

特定の実施形態では、治療有効量又は用量は、約１３０～４００ＩＵ／ｋｇ、約１３０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約１３０～３００ＩＵ／ｋｇ、約１３０～２００ＩＵ／ｋｇ、約１３０～１９０ＩＵ／ｋｇ、約１３０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約１３０～１７０ＩＵ／ｋｇ、約１３０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約１３０～１５０ＩＵ／ｋｇ、又は約１３０～１４０ＩＵ／ｋｇである。更なる実施形態は、約１４０～４００ＩＵ／ｋｇ、約１４０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約１４０～３００ＩＵ／ｋｇ、約１４０～２００ＩＵ／ｋｇ、約１４０～１９０ＩＵ／ｋｇ、約１４０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約１４０～１７０ＩＵ／ｋｇ、約１４０～１６０ＩＵ／ｋｇ、又は約１４０～１５０ＩＵ／ｋｇの用量を提供する。

【0219】

特定の実施形態では、治療有効量又は用量は、約１５０～４００ＩＵ／ｋｇ、約１５０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約１５０～３００ＩＵ／ｋｇ、約１５０～２００ＩＵ／ｋｇ、約１５０～１９０ＩＵ／ｋｇ、約１５０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約１５０～１７０ＩＵ／ｋｇ、又は約１５０～１６０ＩＵ／ｋｇである。更なる実施形態は、約１６０～４００ＩＵ／ｋｇ、約１６０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約１６０～３００ＩＵ／ｋｇ、約１６０～２００ＩＵ／ｋｇ、約１６０～１９０ＩＵ／ｋｇ、約１６０～１８０ＩＵ／ｋｇ、又は約１６０～１７０ＩＵ／ｋｇの用量を提供する。また更なる実施形態は、約１７０～４００ＩＵ／ｋｇ、約１７０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約１７０～３００ＩＵ／ｋｇ、約１７０～２００ＩＵ／ｋｇ、約１７０～１９０ＩＵ／ｋｇ、又は約１７０～１８０ＩＵ／ｋｇの用量を提供する。他の実施形態では、用量は約１８０～２００ＩＵ／ｋｇ、又は約１８０～１９０ＩＵ／ｋｇである。別の実施形態は、約１９０～２００ＩＵ／ｋｇの用量を提供する。

【0220】

対象の状態が改善された後、必要に応じて維持用量が投与される場合がある。従って、投薬量又は投与頻度又はこれら両方を、症状の関数として、改善された状態が保持されるレベルまで低減できる。しかしながら対象は、疾患の症状の再発時に長期にわたる断続的な治療を必要とする場合がある。特定の実施形態では、維持用量は、約１０～６０ＩＵ／ｋｇ、約１０～４０ＩＵ／ｋｇ、約１０～３０ＩＵ／ｋｇ、又は約１０～２０ＩＵ／ｋｇとなる。特定の実施形態では、維持用量は、約１０～２０ＩＵ／ｋｇとなる。特定の実施形態では、維持用量は、少なくとも約１０ＩＵ／ｋｇ、少なくとも約２０ＩＵ／ｋｇ、少なくとも約３０ＩＵ／ｋｇ、少なくとも約４０ＩＵ／ｋｇ、少なくとも約５０ＩＵ／ｋｇ、又は少なくとも約６０ＩＵ／ｋｇである。特定の実施形態では、維持用量は、約１０ＩＵ／ｋｇ、約２０ＩＵ／ｋｇ、約３０ＩＵ／ｋｇ、約４０ＩＵ／ｋｇ、約５０ＩＵ／ｋｇ、又は約６０ＩＵ／ｋｇである。特定の実施形態では、維持用量は、約１０ＩＵ／ｋｇ、又は約２０ＩＵ／ｋｇである。特定の実施形態では、維持用量は、月１回、２週間毎、週１回、週２回、週３回、隔日、毎日、１２時間毎、８時間毎、６時間毎、４時間毎、２時間毎、又は１時間毎に投与される。特定の実施形態では、維持用量は毎日、又は隔日で投与される。

【0221】

（２）ｍｇ／ｍＬを単位とするＡＤＡＭＴＳ１３の投薬
特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３は、約０．０５ｍｇ／ｍＬ～約１０ｍｇ／ｍＬの治療有効用量で提供される。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３は、約０．０５ｍｇ／ｍＬ～約１０ｍｇ／ｍＬの治療有効用量で提供される。他の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３は、約０．１ｍｇ／ｍＬ～約１０ｍｇ／ｍＬの濃度で存在する。更に他の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３は約０．１ｍｇ／ｍＬ～約５ｍｇ／ｍＬの濃度で存在する。別の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３は約０．１ｍｇ／ｍＬ～約２ｍｇ／ｍＬの濃度で存在する。更に他の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３は、約０．０１ｍｇ／ｍＬ、又は約０．０２ｍｇ／ｍＬ、０．０３ｍｇ／ｍＬ、０．０４ｍｇ／ｍＬ、０．０５ｍｇ／ｍＬ、０．０６ｍｇ／ｍＬ、０．０７ｍｇ／ｍＬ、０．０８ｍｇ／ｍＬ、０．０９ｍｇ／ｍＬ、０．１ｍｇ／ｍＬ、０．２ｍｇ／ｍＬ、０．３ｍｇ／ｍＬ、０．４ｍｇ／ｍＬ、０．５ｍｇ／ｍＬ、０．６ｍｇ／ｍＬ、０．７ｍｇ／ｍＬ、０．８ｍｇ／ｍＬ、０．９ｍｇ／ｍＬ、１．０ｍｇ／ｍＬ、１．１ｍｇ／ｍＬ、１．２ｍｇ／ｍＬ、１．３ｍｇ／ｍＬ、１．４ｍｇ／ｍＬ、１．５ｍｇ／ｍＬ、１．６ｍｇ／ｍＬ、１．７ｍｇ／ｍＬ、１．８ｍｇ／ｍＬ、１．９ｍｇ／ｍＬ、２．０ｍｇ／ｍＬ、２．５ｍｇ／ｍＬ、３．０ｍｇ／ｍＬ、３．５ｍｇ／ｍＬ、４．０ｍｇ／ｍＬ、４．５ｍｇ／ｍＬ、５．０ｍｇ／ｍＬ、５．５ｍｇ／ｍＬ、６．０ｍｇ／ｍＬ、６．５ｍｇ／ｍＬ、７．０ｍｇ／ｍＬ、７．５ｍｇ／ｍＬ、８．０ｍｇ／ｍＬ、８．５ｍｇ／ｍＬ、９．０ｍｇ／ｍＬ、９．５ｍｇ／ｍＬ、１０．０ｍｇ／ｍＬ、及びこれらの範囲のおおよその濃度で存在してよい。他の実施形態では、濃度は１０ｍｇ／ｍＬを超える。

【0222】

（３）ＩＵ／ｍＬを単位とするＡＤＡＭＴＳ１３の投薬
同様に、特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３の濃度は、単位体積あたりの酵素活性、例えば１ｍＬあたりのＡ１３酵素単位（ＩＵ／ｍＬ）として表現できる。例えば一実施形態では、製剤は約０．０１ＩＵ／ｍＬ～約１０，０００ＩＵ／ｍＬを含有してよい。別の実施形態では、製剤は約０．１ＩＵ／ｍＬ～約１０，０００ＩＵ／ｍＬを含有してよい。別の実施形態では、製剤は約１ＩＵ／ｍＬ～約１０，０００ＩＵ／ｍＬを含有してよい。別の実施形態では、製剤は約１０ＩＵ／ｍＬ～約１０，０００ＩＵ／ｍＬを含有してよい。他の実施形態では、製剤は約２０ＩＵ／ｍＬ～約８，０００ＩＵ／ｍＬ、又は約３０ＩＵ／ｍＬ～約６，０００ＩＵ／ｍＬ、又は約４０ＩＵ／ｍＬ～約４，０００ＩＵ／ｍＬ、又は約５０ＩＵ／ｍＬ～約３，０００ＩＵ／ｍＬ、又は約７５ＩＵ／ｍＬ～約２，５００ＩＵ／ｍＬ、又は約１００ＩＵ／ｍＬ～約２，０００ＩＵ／ｍＬ、又は約２００ＩＵ／ｍＬ～約１，５００ＩＵ／ｍＬ、又は以上の範囲内の他のおおよその範囲を含有してよい。ある好ましい実施形態では、本明細書で提供されるＡＤＡＭＴＳ１３製剤は、約１５０ＩＵ／ｍＬ～約６００ＩＵ／ｍＬを含有する。別の好ましい実施形態では、本明細書で提供されるＡＤＡＭＴＳ１３製剤は、約１００ＩＵ／ｍＬ～約１，０００ＩＵ／ｍＬを含有する。特定の実施形態では、製剤は、約０．０１ＩＵ／ｍＬ、又は約０．０２、０．０３、０．０４、０．０５、０．０６、０．０７、０．０８、０．０９、０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９、１、２、３、４、５、６、７、８、９ＩＵ／ｍＬを含有する。特定の実施形態では、製剤は、約１０ＩＵ／ｍＬ、又は約２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１５０、２００、２５０、３００、３５０、４００、４５０、５００、６００、７００、８００、９００、１，０００、１，１００、１，２００、１，３００、１，４００、１，５００、１，６００、１，７００、１，８００、１，９００、２，０００、２，１００、２，２００、２，３００、２，４００、２，５００、２，６００、２，７００、２，８００、２，９００、３，０００、３，１００、３，２００、３，３００、３，４００、３，５００、３，６００、３，７００、３，８００、３，９００、４，０００、４，１００、４，２００、４，３００、４，４００、４，５００、４，６００、４，７００、４，８００、４，９００、５，０００、５，１００、５，２００、５，３００、５，４００、５，５００、５，６００、５，７００、５，８００、５，９００、６，０００、６，１００、６，２００、６，３００、６，４００、６，５００、６，６００、６，７００、６，８００、６，９００、７，０００、７，１００、７，２００、７，３００、７，４００、７，５００、７，６００、７，７００、７，８００、７，９００、８，０００、８，１００、８，２００、８，３００、８，４００、８，５００、８，６００、８，７００、８，８００、８，９００、９，０００、９，１００、９，２００、９，３００、９，４００、９，５００、９，６００、９，７００、９，８００、９，９００、１０，０００ＩＵ／ｍＬ、又は更に高い濃度を含有する。

【0223】

（４）ＦＲＥＴＳ－ＶＷＦ７３活性の単位でのＡＤＡＭＴＳ１３の投薬
更に他の実施形態では、本発明によって提供される製剤中のＡＤＡＭＴＳ１３の濃度は、酵素活性のレベルとして表現できる。例えば一実施形態ではＡＤＡＭＴＳ１３製剤は、約０．０１単位のＦＲＥＴＳ－ＶＷＦ７３活性～約１０，０００単位のＦＲＥＴＳ－ＶＷＦ７３活性、又は他の好適なＡＤＡＭＴＳ酵素単位（ＩＵ）を含有してよい。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３製剤は、約１０単位のＦＲＥＴＳ－ＶＷＦ７３活性～約１０，０００単位のＦＲＥＴＳ－ＶＷＦ７３活性、又は他の好適なＡＤＡＭＴＳ酵素単位（ＩＵ）を含有してよい。他の実施形態では、製剤は、約２０単位のＦＲＥＴＳ－ＶＷＦ７３（Ｕ_ＦＶ７３）活性～約８，０００単位のＦＲＥＴＳ－ＶＷＦ７３活性、又は約３０Ｕ_ＦＶ７３～約６，０００Ｕ_ＦＶ７３、又は約４０Ｕ_ＦＶ７３～約４，０００Ｕ_ＦＶ７３、又は約５０Ｕ_ＦＶ７３～約３，０００Ｕ_ＦＶ７３、又は約７５Ｕ_ＦＶ７３～約２，５００Ｕ_ＦＶ７３、又は約１００Ｕ_ＦＶ７３～約２，０００Ｕ_ＦＶ７３、又は約２００Ｕ_ＦＶ７３～約１，５００Ｕ_ＦＶ７３、又はこれらの中の他のおおよその範囲を含有してよい。ある好ましい実施形態では、本明細書で提供されるＡＤＡＭＴＳ１３製剤は、約１５０～約６００Ｕ_ＦＶ７３を含有する。特定の実施形態では、製剤は、約０．０１単位のＦＲＥＴＳ－ＶＷＦ７３活性、又は約０．０２、０．０３、０．０４、０．０５、０．０６、０．０７、０．０８、０．０９、０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９、１、２、３、４、５、６、７、８、９単位のＦＲＥＴＳ－ＶＷＦ７３活性を含有する。特定の実施形態では、製剤は、約１０単位のＦＲＥＴＳ－ＶＷＦ７３活性、又は約２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１５０、２００、２５０、３００、３５０、４００、４５０、５００、６００、７００、８００、９００、１，０００、１，１００、１，２００、１，３００、１，４００、１，５００、１，６００、１，７００、１，８００、１，９００、２，０００、２，１００、２，２００、２，３００、２，４００、２，５００、２，６００、２，７００、２，８００、２，９００、３，０００、３，１００、３，２００、３，３００、３，４００、３，５００、３，６００、３，７００、３，８００、３，９００、４，０００、４，１００、４，２００、４，３００、４，４００、４，５００、４，６００、４，７００、４，８００、４，９００、５，０００、５，１００、５，２００、５，３００、５，４００、５，５００、５，６００、５，７００、５，８００、５，９００、６，０００、６，１００、６，２００、６，３００、６，４００、６，５００、６，６００、６，７００、６，８００、６，９００、７，０００、７，１００、７，２００、７，３００、７，４００、７，５００、７，６００、７，７００、７，８００、７，９００、８，０００、８，１００、８，２００、８，３００、８，４００、８，５００、８，６００、８，７００、８，８００、８，９００、９，０００、９，１００、９，２００、９，３００、９，４００、９，５００、９，６００、９，７００、９，８００、９，９００、１０，０００又は更に高い単位のＦＲＥＴＳ－ＶＷＦ７３活性を含有する。

【0224】

（５）投薬に関する他の考慮事項
他の態様及び実施形態では、治療有効量の単離又は組換えＡＤＡＭＴＳ１３は、ＣＯＶＩＤ－１９対象に対して、対象がＶＷＦ又は超大型ＶＷＦ多量体の異常に高い又は過正常のレベルを示すと評価されたときに投与される。他の態様及び実施形態では、治療有効量の単離又は組換えＡＤＡＭＴＳ１３は、ＣＯＶＩＤ－１９対象に対して、対象がＶＷＦ又は超大型ＶＷＦ多量体の異常に高い又は過正常のレベルを示すと評価されたときに投与される。更なる態様及び実施形態は、治療有効量の単離又は組換えＡＤＡＭＴＳ１３をＣＯＶＩＤ－１９対象に、対象がＡＤＡＭＴＳ１３の異常に低いレベル又は超低レベルを示すと評価されたときに提供する。

【0225】

特定の実施形態では、対象に投与されるＡＤＡＭＴＳ１３の量は、対照（例えば投与前の対象の体内のＡＤＡＭＴＳ１３の量）と比較した場合の、対象の体内でのＡＤＡＭＴＳ１３の量の増大として測定される。いくつかの実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３は、対象の体内のＡＤＡＭＴＳ１３のレベルを、投与前の対象の体内のＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質のレベルと比較して１．１、１．２、１．３、１．４、１．５、１．６、１．７、１．８、１．９、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、又は２０倍増大させる量で、対象に投与される。いくつかの実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質は、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質のレベルを、投与前の対象の体内のＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質のレベルと比較して少なくとも５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、又は９９％増大させる量で、対象に投与される。

【0226】

特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３、又はＡＤＡＭＴＳ１３を含む組成物は、隔日で、毎日、１２時間毎、８時間毎、６時間毎、４時間毎、２時間毎、又は１時間に１回、単一のボーラスの注入で投与される。

【0227】

特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３、又はＡＤＡＭＴＳ１３を含む組成物は、静脈内又は皮下投与される。

【0228】

特定の実施形態では、皮下投与後のＡＤＡＭＴＳ１３のバイオアベイラビリティは、同一用量に関して正規化された静脈内投与と比較して、少なくとも約４０％、又は少なくとも約４５％、又は少なくとも約５０％、又は少なくとも約５１％、又は少なくとも約５２％、又は少なくとも約５３％、又は少なくとも約５４％、又は少なくとも約５５％、又は少なくとも約５６％、又は少なくとも約５７％、又は少なくとも約５８％、又は少なくとも約５９％、又は少なくとも約６０％、又は少なくとも約６１％、又は少なくとも約６２％、又は少なくとも約６３％、又は少なくとも約６４％、又は少なくとも約６５％、又は少なくとも約６６％、又は少なくとも約６７％、又は少なくとも約６８％、又は少なくとも約６９％、又は少なくとも約７０％、又は少なくとも約７１％、又は少なくとも約７２％、又は少なくとも約７３％、又は少なくとも約７４％、又は少なくとも約７５％、又は少なくとも約７６％、又は少なくとも約７７％、又は少なくとも約７８％、又は少なくとも約７９％、又は少なくとも約８０％、又は少なくとも約８１％、又は少なくとも約８２％、又は少なくとも約８３％、又は少なくとも約８４％、又は少なくとも約８５％である。

【0229】

特定の実施形態では、皮下投与後のＡＤＡＭＴＳ１３のバイオアベイラビリティは、同一用量に関して正規化された静脈内投与と比較して、約３０％～約９０％、又は約８０％、又は約５０％である。特定の実施形態では、皮下投与後のＡＤＡＭＴＳ１３のバイオアベイラビリティは、同一用量に関して正規化された静脈内投与と比較して、約６０％～約８０％である。特定の実施形態では、皮下投与後のＡＤＡＭＴＳ１３のバイオアベイラビリティは、同一用量に関して正規化された静脈内投与と比較して、約５０％～約７０％である。特定の実施形態では、皮下投与後のＡＤＡＭＴＳ１３のバイオアベイラビリティは、同一用量に関して正規化された静脈内投与と比較して、約５５％～約７０％である。特定の実施形態では、皮下投与後のＡＤＡＭＴＳ１３のバイオアベイラビリティは、同一用量に関して正規化された静脈内投与と比較して、約５５％～約６５％である。特定の実施形態では、皮下投与後のＡＤＡＭＴＳ１３のバイオアベイラビリティは、同一用量に関して正規化された静脈内投与と比較して、約６５％である。

【0230】

特定の実施形態では、皮下投与後のＡＤＡＭＴＳ１３のバイオアベイラビリティは、同一用量に関して正規化された静脈内投与と比較して、約６５％である。よって特定の実施形態では、静脈内投与によって、総ＡＤＡＭＴＳ１３がの治療有効量が体重１キログラムあたり少なくとも２０－１６０国際単位（ＩＵ／ｋｇ）を含み、バイオアベイラビリティが６５％である（ただし±１５％のばらつきが適用される）場合、皮下投与した場合にはバイオアベイラビリティは４０～８０％であり、２５～４００の範囲の国際単位が得られる。

【0231】

用量は、ＡＤＡＭＴＳ１３が予防的に（例えば反復用量で）投与されるか、又は医療上の緊急事態に対応して、梗塞の有害な影響を即座に低減するために投与されるかに基づいて決定することもできる。

【0232】

本発明の組成物及び方法は、重篤な疾患状態、即ち生命を脅かす又はその可能性のある状況で使用できることに留意しなければならない。そのような場合、副作用（例えば出血、免疫系への影響）がないことから、本発明の医薬組成物をかなり過剰に投与することが可能であり、これは治療を実施する医師にとって望ましいと感じられる可能性がある。

【0233】

Ｆ．液体及び凍結乾燥製剤、並びに剤形
ある態様では、本発明はＡＤＡＭＴＳ１３の安定化済み製剤を提供する。特定の実施形態では、本発明の製剤は、少なくとも約４０℃までの温度で少なくとも約６か月間保管した場合に安定している。特定の実施形態では、少なくとも４℃までの温度で最大６、１２、又は２４か月保管した場合に安定している。他の実施形態では、本明細書で提供される製剤は、長期間にわたって保管した場合に、相当なＡＤＡＭＴＳ１３活性を保持する。更に他の実施形態では、本発明の製剤は、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の二量体化、オリゴマー化、及び／又は凝集を低減又は遅延させる。

【0234】

一実施形態では、本発明は、治療有効量又は用量のＡＤＡＭＴＳ１３、準生理学的濃度から生理学的濃度までの薬学的に許容可能な塩、安定化濃度の１つ又は複数の糖及び／又は糖アルコール、非イオン界面活性剤、製剤に中性ｐＨを提供する緩衝剤、並びに任意選択でカルシウム及び／又は亜鉛塩を含む、ＡＤＡＭＴＳ１３の製剤を提供する。一般に、本明細書で提供される安定化済みＡＤＡＭＴＳ１３製剤は、薬学的投与に好適である。ある好ましい実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３は、ヒトＡＤＡＭＴＳ１３、又は生物活性を有するその誘導体若しくは断片である。例えば、本発明によって提供される安定化済みＡＤＡＭＴＳ１３製剤は、準生理学的塩濃度から生理学的塩濃度まで、例えば０ｍＭ～約２００ｍＭの、薬学的に許容可能な塩を含有することになる。一実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３製剤は、生理学的濃度の塩、例えば約１００ｍＭ～約２００ｍＭの薬学的に許容可能な塩を含有することになる。他の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３製剤は、約０ｍＭ、又は約５ｍＭ、１０ｍＭ、１５ｍＭ、２０ｍＭ、２５ｍＭ、３０ｍＭ、３５ｍＭ、４０ｍＭ、４５ｍＭ、５０ｍＭ、５５ｍＭ、６０ｍＭ、６５ｍＭ、７０ｍＭ、７５ｍＭ、８０ｍＭ、８５ｍＭ、９０ｍＭ、９５ｍＭ、１００ｍＭ、１１０ｍＭ、１２０ｍＭ、１３０ｍＭ、１４０ｍＭ、１５０ｍＭ、１６０ｍＭ、１７０ｍＭ、１８０ｍＭ、１９０ｍＭ、２００ｍＭ、若しくは更に多量の、薬学的に許容可能な塩を含有することになる。ある好ましい実施形態では、塩は、塩化ナトリウム又はカリウムである。

【0235】

特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３製剤は液体製剤である。他の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３製剤は、当該技術分野で公知の方法に従って、液体製剤から凍結乾燥される。

【0236】

準生理学的濃度の薬学的に許容可能な塩を含有するＡＤＡＭＴＳ１３製剤は、平滑な表面を有するコンパクトな凍結乾燥ケーキ（ｌｙｏｃａｋｅ）を形成する。更に、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の、低塩含有量凍結乾燥製剤は、生理学的濃度の塩を用いて調製された製剤と比較してタンパク質の凝集を低減することがわかった。従って、ある好ましい実施形態では、特に凍結乾燥に関して、本発明は、準生理学的濃度の薬学的に許容可能な塩、例えば約１００ｍＭ未満の薬学的に許容可能な塩を含有する、ＡＤＡＭＴＳ１３の低塩含有量製剤を提供する。塩含有量が低い他の実施形態では、特に凍結乾燥に関して、製剤は、約８０ｍＭ未満、約６０ｍＭ未満、及び約３０～６０ｍＭの薬学的に許容可能な塩を含有する。

【0237】

特定の実施形態では、製剤は、凍結乾燥時に平滑な表面を有するコンパクトな凍結乾燥ケーキの調製を支援し、ＡＤＡＭＴＳ１３の安定化を補助するために、中程度のレベル（即ち約２％～約６％）の、１つ又は複数の糖及び／又は糖アルコールを含む。従って一実施形態では、本発明は、約２％～約６％の１つ又は複数の糖及び／又は糖アルコールを含有するＡＤＡＭＴＳ１３製剤を提供する。単糖類、二糖類、若しくは多糖類、又は例えばフルクトース、グルコース、マンノース、ソルボース、キシロース、マルトース、ラクトース、スクロース、デキストラン、トレハロース、プルラン、デキストリン、シクロデキストリン、可溶性デンプン、ヒドロキシエチルスターチ、及びカルボキシメチルセルロースを含む水溶性グルカンといった、いずれの糖を使用してよい。ある特定の実施形態では、スクロース又はトレハロースを糖添加物として使用する。糖アルコールは、約４～約８個の炭素原子とヒドロキシル基とを有する炭化水素として定義される。本明細書で提供されるＡＤＡＭＴＳ１３製剤で使用できる糖アルコールの非限定的な例としては、マンニトール、ソルビトール、イノシトール、ガラクチトール、ズルシトール、キシリトール、及びアラビトールが挙げられる。一実施形態では、マンニトールが糖アルコール添加物として使用される。ある好ましい実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３製剤は、糖及び糖アルコール添加物の両方を含有する。

【0238】

糖及び糖アルコールは、個別に又は組み合わせて使用できる。いくつかの実施形態では、糖、糖アルコール、又はこれらの組み合わせは、製剤中に、約０．５％～約７％の濃度で存在することになる。一実施形態では、製剤中の糖及び／又は糖アルコール含有率は、約０．５％～約５％となる。特定の実施形態では、糖、糖アルコール、又はこれらの組み合わせは、約１％～約５％の濃度で存在することになる。ある好ましい実施形態では、糖、糖アルコール、又はこれらの組み合わせは、約２％～約６％の濃度で存在することになる。別の好ましい実施形態では、糖、糖アルコール、又はこれらの組み合わせは、約３％～約５％の濃度で存在することになる。特定の実施形態では、最終濃度は、約０．５％、１％、１．５％、２％、２．５％、３％、３．５％、４％、４．５％、５％、５．５％、６．０％、６．５％、又は７．０％の糖、糖アルコール、又はこれらの組み合わせであってよい。特定の実施形態では、本明細書で提供される製剤は、約０．５％～約５．０％の濃度の糖、及び約０．５％～約５．０％の濃度の糖アルコールを含んでよい。糖の濃度と糖アルコールの濃度とのいずれの組み合わせ、例えば約０．５％、１％、１．５％、２％、２．５％、３％、３．５％、４％、４．５％、５％、５．５％、６．０％、６．５％、又は７．０％の濃度で存在する糖と、約０．５％、１％、１．５％、２％、２．５％、３％、３．５％、４％、４．５％、５％、５．５％、６．０％、６．５％、又は７．０％の濃度で存在する糖とを、使用してよい。

【0239】

一実施形態では、安定化濃度の非イオン界面活性剤を含有するＡＤＡＭＴＳ１３製剤が提供される。本発明の製剤で使用できる、薬学的に許容可能な非イオン界面活性剤は、薬学の分野において公知であり、限定するものではないが、ポリソルベート８０（Ｔｗｅｅｎ ８０）、ポリソルベート２０（Ｔｗｅｅｎ ２０）、並びにＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８及びＢＲＩＪ（登録商標）３５を含む様々なポロキサマー若しくはプルロニック（登録商標）、又はこれらの混合物が含まれる。ある好ましい実施形態では、本発明の医薬製剤で使用される非イオン界面活性剤は、ポリソルベート８０である。特定の実施形態では、界面活性剤は、本明細書で提供される製剤中で、約０．００１％～約０．２％の濃度で使用できる。ある好ましい実施形態では、界面活性剤は、約０．０１％～約０．１％の濃度で使用される。別の好ましい実施形態では、界面活性剤は約０．０５％の濃度で使用される。例えば特定の実施形態では、製剤は、約０．００１％、０．００５％、０．０１％、０．０２％、０．０３％、０．０４％、０．０５％、０．０６％、０．０７％、０．０８％、０．０９％、０．１％、０．１２５％、０．１５％、０．１７５％、０．２％等の濃度の非イオン界面活性剤を含んでよい。

【0240】

更に、ＡＤＡＭＴＳ１３製剤は、約６．５～約７．５の中性ｐＨで製剤した場合に安定化されることがわかった。従って特定の実施形態では、製剤を中性ｐＨに維持するために好適な緩衝剤を含有する、ＡＤＡＭＴＳ１３製剤が提供される。薬学的に許容可能な緩衝剤は当該技術分野において公知であり、限定するものではないが、リン酸緩衝剤、ヒスチジン、クエン酸ナトリウム、ＨＥＰＥＳ、トリス、ビシン、グリシン、Ｎ－グリシルグリシン、酢酸ナトリウム、炭酸ナトリウム、グリシルグリシン、リシン、アルギニン、リン酸ナトリウム、及びこれらの混合物が含まれる。好ましい実施形態では、緩衝剤は、ヒスチジン、リン酸緩衝剤、ＨＥＰＥＳ、及びクエン酸ナトリウムから選択される。ある好ましい実施形態では、緩衝剤はヒスチジン又はＨＥＰＥＳである。ある具体的実施形態では、緩衝剤はヒスチジンである。別の具体的実施形態では、緩衝剤はＨＥＰＥＳである。一実施形態では、本明細書で提供される製剤のｐＨは、約６．５～約９．０である。特定の実施形態では、製剤のｐＨは、約６．５、又は約６．６、６．７、６．８、６．９、７．０、７．１、７．２、７．３、７．４、７．５、７．６、７．７、７．８、７．９、８．０、８．１、８．２、８．３、８．４、８．５、８．６、８．７、８．８、８．９、若しくは９．０である。ある好ましい実施形態では、Ａ１３製剤のｐＨは、約６．０～約８．０である。より好ましい実施形態では、Ａ１３製剤のｐＨは、約６．５～約７．５である。別の実施形態では、ｐＨは約７．５である。ある特定の実施形態では、Ａ１３製剤のｐＨは約７．０である。別の特定の実施形態では、Ａ１３製剤のｐＨは７．０±０．２である。

【0241】

いずれの好適な形態のカルシウムを、例えば約０．５ｍＭ～約１０ｍＭの濃度で含めることによっても、製剤を安定させることができる。別の実施形態では、カルシウムはＡＤＡＭＴＳ１３製剤中に、約２ｍＭ～約５ｍＭの濃度で存在する。ある好ましい実施形態では、カルシウムはＡＤＡＭＴＳ１３製剤中に、約２ｍＭ～約４ｍＭの濃度で存在する。特定の実施形態では、カルシウムの濃度は、約０．５ｍＭ、又は約１ｍＭ、２ｍＭ、３ｍＭ、４ｍＭ、５ｍＭ、６ｍＭ、７ｍＭ、８ｍＭ、９ｍＭ、１０ｍＭ、１１ｍＭ、１２ｍＭ、１３ｍＭ、１４ｍＭ、１５ｍＭ、１６ｍＭ、１７ｍＭ、１８ｍＭ、１９ｍＭ、若しくは２０ｍＭである。ある特定の実施形態では、カルシウムの濃度は約２ｍＭである。別の好ましい実施形態では、カルシウムの濃度は約３ｍＭである。更に別の好ましい実施形態では、カルシウムの濃度は約４ｍＭである。

【0242】

いずれの好適な形態の亜鉛を、例えば約２μＭ～約１０μＭの濃度で含めることによっても、製剤を安定させることができる。いくつかの実施形態では、亜鉛は本発明のＡＤＡＭＴＳ１３製剤中に、約０．５μＭ～約２０．０μＭの濃度で存在する。ある好ましい実施形態では、亜鉛はＡＤＡＭＴＳ１３製剤中に、約０．５μＭ～約１０．０μＭの濃度で提供される。特定の実施形態では、亜鉛の濃度は、約０．５μＭ、又は約１μＭ、２μＭ、３μＭ、４μＭ、５μＭ、６μＭ、７μＭ、８μＭ、９μＭ、又は１０μＭである。

【0243】

特定の実施形態では、本明細書で提供されるＡＤＡＭＴＳ１３製剤は、約２００ｍＯｓｍｏｌ／Ｌ～約４００ｍＯｓｍｏｌ／Ｌの範囲内、又は約２５０～約３５０ｍＯｓｍｏｌ／Ｌの範囲内の、等張性を有することになる。特定の実施形態では、本明細書で提供されるＡＤＡＭＴＳ１３製剤は、例えば約２００ｍＯｓｍｏｌ／Ｌ、又は約２１０ｍＯｓｍｏｌ／Ｌ、２２０ｍＯｓｍｏｌ／Ｌ、２３０ｍＯｓｍｏｌ／Ｌ、２４０ｍＯｓｍｏｌ／Ｌ、２５０ｍＯｓｍｏｌ／Ｌ、２６０ｍＯｓｍｏｌ／Ｌ、２７０ｍＯｓｍｏｌ／Ｌ、２８０ｍＯｓｍｏｌ／Ｌ、２９０ｍＯｓｍｏｌ／Ｌ、３００ｍＯｓｍｏｌ／Ｌ、３１０ｍＯｓｍｏｌ／Ｌ、３２０ｍＯｓｍｏｌ／Ｌ、３３０ｍＯｓｍｏｌ／Ｌ、３４０ｍＯｓｍｏｌ／Ｌ、３５０ｍＯｓｍｏｌ／Ｌ、３６０ｍＯｓｍｏｌ／Ｌ、３７０ｍＯｓｍｏｌ／Ｌ、３８０ｍＯｓｍｏｌ／Ｌ、３９０ｍＯｓｍｏｌ／Ｌ、若しくは４００ｍＯｓｍｏｌ／Ｌの、等張性を有することになる。

【0244】

本明細書で提供される製剤で使用できる等張化剤の例としては、限定するものではないが、塩化ナトリウム、デキストロース、スクロース、キシリトール、フルクトース、グリセロール、ソルビトール、マンニトール、トレハロース、塩化カリウム、マンノース、塩化カルシウム、塩化マグネシウム、他の無機塩、他の糖、他の糖アルコール、及びこれらの組み合わせが挙げられる。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３製剤は、少なくとも１つの等張化剤、又は少なくとも２つ、３つ、４つ、５つ、若しくは６つ以上の等張化剤を含んでよい。いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるＡＤＡＭＴＳ１３製剤は更に、１つ又は複数の薬学的に許容可能な賦形剤、キャリア、及び／又は希釈剤を含んでよい。特定の実施形態では、本明細書で提供されるＡＤＡＭＴＳ１３組成物（ＡＤＡＭＴＳ１３を含む組成物）は、米国特許出願公開第２０１１／０２２９４５５号及び／又は米国特許出願公開第２０１４／０２７１６１１号（各文献は、あらゆる目的のためにその全体が参照により本出願に援用される）に記載されている範囲の等張性を有することになる。

【0245】

更に、本明細書で提供される製剤は、他の薬剤、キャリア、アジュバント、希釈剤、組織透過促進剤、可溶化剤等を含んでよい。薬学的投与のための組成物及び製剤の調製方法は、当業者には公知である。例えばREMINGTON'S PHARMACEUTICAL SCIENCES, 18TH ED., Mack Publishing Co., Easton, Pa. (1990)を参照。

【0246】

特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３製剤はヒト組換えＡＤＡＭＴＳ１３（ｈｒＡＤＡＭＴＳ１３、又はｈｒＡ１３）タンパク質を含み、これは例えば本明細書に記載されている方法に従って得ることができる。特定の実施形態では、アミノ酸配列はＧｅｎＢａｎｋ受託番号ＮＰ＿６２０５９４のものである。他の実施形態では、アミノ酸配列は、ＮＰ＿６２０５９４のアミノ酸７５～１４２７、その天然若しくは保存的バリアント、又は生物活性を有するその断片を含む。特定の実施形態では、ｈｒＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質には、変異若しくはバリアント、例えば「ミスセンス（ｍｉｓｓｅｎｓｅ）」変異若しくはバリアントが含まれるか、又はこれらが組み込まれる。例えばある好適なバリアントは、Ｑ^９７Ｒ変異を含む。特定の実施形態では、製剤又は医薬組成物は、複数のこのようなｒｈＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の組み合わせ、例えば野生型配列及び１つ又は複数のバリアントを含む混合物、又は２つ以上のバリアントを含む混合物を含む。混合物を含む特定の実施形態では、タンパク質のうちの１つが優勢であってよく、例えばバリアントが野生型よりも優勢であってよい。

【0247】

一実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３製剤は、凍結乾燥に好適な液体組成物を含み、例えば米国特許第１０，２３８，７２０号に記載されているように、使用のために再構成される。特定の実施形態では、組成物は、液体又は凍結乾燥組成物である。他の実施形態では、凍結乾燥組成物は、米国特許出願公開第２０１１／０２２９４５５号、及び／又は米国特許出願公開第２０１４／０２７１６１１号（各文献は、その全体があらゆる目的のために参照により本出願に援用される）に記載されているように、液体組成物から凍結乾燥される。

【0248】

本明細書で提供されるＡＤＡＭＴＳ１３製剤は、例えばボーラスとしての静脈内投与、又は筋肉内、腹腔内、脳脊髄内、皮下、関節内、関節滑液包内、髄腔内、経口、表面局部、若しくは吸入経路による、ある期間にわたる連続注入といった、公知の方法による投与のために、製剤できる。特定の実施形態では、本明細書で提供されるＡＤＡＭＴＳ１３製剤は、全身投与又は局所投与できる。全身投与としては、限定するものではないが、経口、真皮下、腹腔内、皮下、経鼻、舌下、又は直腸投与経路が挙げられる。局所投与としては、限定するものではないが、表面局部、皮下、筋肉内、及び腹腔内投与経路が挙げられる。特定の実施形態では、静脈内投与が好ましい。特定の実施形態では、皮下投与が好ましい。

【0249】

本発明の組成物及び方法は、以下の実施例で更に説明されるが、以下の実施例に限定されない。

【0250】

Ｇ．ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の混合物
特定の実施形態では、医薬組成物は、少なくとも１つのＡＤＡＭＴＳ１３バリアントとＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質（例えば野生型）との組み合わせを含む。特定の実施形態では、組成物中のＡＤＡＭＴＳ１３の総量（即ち全てのＡＤＡＭＴＳ１３バリアント及び野生型を含む）の中に存在するＡＤＡＭＴＳ１３バリアントの相対的な豊富度（例えばパーセンテージ）は、約５％～約９５％、約１０％～約９０％、約１５％～約８５％、約２０％～約８０％、約２５％～約７５％、約３０％～約７０％、約３５％～約６５％、約４０％～約６０％、又は約４５％～約５５％である。特定の実施形態では、組成物中のＡＤＡＭＴＳ１３の総量の中に存在するＡＤＡＭＴＳ１３バリアントのパーセンテージは、約４０％～約９０％、約４０％～約８０％、約４５％～約７５％、約５０％～約８０％、約５０％～約７０％、又は約５５％～約６５％である。特定の実施形態では、組成物中のＡＤＡＭＴＳ１３の総量の中に存在するＡＤＡＭＴＳ１３バリアントのパーセンテージは、約５０％～約７５％、約５２％～約７２％、約５５％～約７０％、約５９％～約７２％である。特定の実施形態では、組成物中のＡＤＡＭＴＳ１３の総量の中に存在するＡＤＡＭＴＳ１３バリアントのパーセンテージは、約４５％～約８５％、又は約４７％～約８４％である。特定の実施形態では、組成物中のＡＤＡＭＴＳ１３の総量の中に存在するＡＤＡＭＴＳ１３バリアントのパーセンテージは、約４７％～約８４％である。特定の実施形態では、組成物中のＡＤＡＭＴＳ１３の総量の中に存在するＡＤＡＭＴＳ１３バリアントのパーセンテージは、約４０％、約４１％、約４２％、約４３％、約４４％、約４５％、約４６％、約４７％、約４８％、約４９％、約５０％、約５１％、約５２％、約５３％、約５４％、約５５％、約５６％、約５７％、約５８％、約５９％、約６０％、約６１％、約６２％、約６３％、約６４％、約６５％、約６６％、約６７％、約６８％、約６９％、約７０％、約７１％、約７２％、約７３％、約７４％、約７５％、約７６％、約７７％、約７８％、約７９％、約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、又は約９９％である。特定の実施形態では、組成物中のＡＤＡＭＴＳ１３の総量の中に存在するＡＤＡＭＴＳ１３バリアントのパーセンテージは、約５２％、約６０％、約６１％、約６２％、約６３％、約６４％、約６５％、約６６％、又は約７２％である。特定の実施形態では、組成物中のＡＤＡＭＴＳ１３の総量の中に存在するＡＤＡＭＴＳ１３バリアントのパーセンテージは、約５２％、約６５％、又は約７２％である。

【0251】

特定の実施形態では、医薬組成物は、少なくとも１つのＡＤＡＭＴＳ１３バリアントとＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質（例えば野生型）との組み合わせを含む。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３バリアントとＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質との比は、約４：１～約１：４、約３：１～約１：３、約２：１～約１：２である。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３バリアントとＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質との比は、約３：１～約１：３、約２：１～約１：２、又は約２：１～約１：３、又は約１：１～約１：３、又は約１：１．１～約１：２．９、又は約１：１．２～約１：２．８、又は約１：１．３～約１：２．７、又は約１：１．４～約１：２．６、又は約１：１．５～約１：２．５、又は約１：１．６～約１：２．４、又は約１：１．７～約１：２．３、又は約１：１．８～約１：２．２、又は約１：１．９～約１：２．１である。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３バリアントとＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質との比は、約１．１：１～約２．９：１、又は約１．２：１～約２．８：１、又は約１．３：１～約２．７：１、又は約１．４：１～約２．６：１、又は約１．５：１～約２．５：１、又は約１．６：１～約２．４：１、又は約１．７：１～約２．３：１、又は約１．８：１～約２．２：１、又は約１．９：１～約２．１：１である。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３バリアントとＡＤＡＭＴＳ１３野生型との比は、約１：１～約１：３である。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３バリアントとＡＤＡＭＴＳ１３野生型との比は、約３：１～約１：１である。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３バリアントとＡＤＡＭＴＳ１３野生型との比は、約１：１．１～約１：２．５である。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３バリアントとＡＤＡＭＴＳ１３野生型との比は、約４：１、約４：１．５、約４：２、約４：２．５、約４：３、約４：３．５、約３：１、約３：１．５、約３：２、約３：２．５、約２：１、又は約２：１．５である。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３バリアントとＡＤＡＭＴＳ１３野生型との比は、約１：１．５、約１：２、約１：２．５、約１：３、約１：３．５、約１：４、約２：２．５、約２：３、約２：３．５、約２：４、約３：３．５、又は約３：４である。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３バリアントとＡＤＡＭＴＳ１３野生型との比は、約１：３である。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３バリアントとＡＤＡＭＴＳ１３野生型との比は、約３：１である。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３バリアントとＡＤＡＭＴＳ１３野生型との比は、約２：１である。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３バリアントとＡＤＡＭＴＳ１３野生型との比は、約１：２である。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３バリアントとＡＤＡＭＴＳ１３野生型との比は、約１：１である。特定の実施形態では、ＡＤＡＭＴＳ１３バリアントとＡＤＡＭＴＳ１３野生型との比は、約３：２である。

【0252】

特定の実施形態では、相対的な豊富度、パーセンテージ、及び／又は比は、ペプチドマッピング法によって決定される。特定の実施形態では、相対的な豊富度、パーセンテージ、及び／又は比は、実施例３に記載のペプチドマッピング法によって決定される。特定の実施形態では、相対的な豊富度、パーセンテージ、及び／又は比は、液体クロマトグラフィによって分離されたトリプシンペプチドのＨＰＬＣ分析と、これに続く質量分析とによって決定される。特定の実施形態では、相対的な豊富度、パーセンテージ、及び／又は比は、抽出されたイオンクロマトグラムの強度に基づく。特定の実施形態では、相対的な豊富度、パーセンテージ、及び／又は比は、組成物中の全てのＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質及びバリアント（例えばＱ^９７Ｒ ＡＤＡＭＴＳ１３バリアント及びＱ^９７ ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の合計）のピーク面積の合計に対する、ＡＤＡＭＴＳ１３バリアント（例えばＱ^９７Ｒ ＡＤＡＭＴＳ１３バリアント）のトリプシンペプチドのピーク面積に基づいて決定される。特定の実施形態では、測定される組成物中の全てのＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質及びバリアントのトリプシンペプチドは、組成物中の他の全てのＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質及びバリアントと比較した場合に、ＡＤＡＭＴＳ１３バリアントとの間の少なくとも１つのアミノ酸の差異に対して特異的である。例えば、ペプチドＱ^９７Ｒ ＡＤＡＭＴＳ１３バリアントについて測定可能な１つ又は複数のトリプシンペプチドは、ＡＡＧＧＩＬＨＬＥＬＬＶＡＶＧＰＤＶＦＱＡＨＲ（配列番号５）、又はＡＡＧＧＩＬＨＬＥＬＬＶＡＶＧＰＤＶＦＱＡＨＲ（配列番号５）とＥＤＴＥＲ（配列番号６）との組み合わせであり得、Ｑ^９７ ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質について測定されるトリプシンペプチドは、ＡＡＧＧＩＬＨＬＥＬＬＶＡＶＧＰＤＶＦＱＡＨＱＥＤＴＥＲ（配列番号７）であり得る。

【0253】

特定の実施形態では、相対的な豊富度、パーセンテージ、及び／又は比は、組成物中のすべてのＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質及びバリアントの合計重量に対する、ＡＤＡＭＴＳ１３バリアントの総重量に基づいて決定される。

【0254】

Ｈ．更なる組成物及び薬学的賦形剤
少なくとも１つのＡＤＡＭＴＳ１３を活性成分として含有する、本開示の化合物及び方法で使用できる組成物又は医薬組成物は、様々な態様において、投与経路に応じて薬学的に許容可能なキャリア又は添加剤を含有する。このようなキャリア又は添加剤の例としては、水、薬学的に許容可能な有機溶媒、コラーゲン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、カルボキシビニルポリマー、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリアクリル酸ナトリウム、アルギン酸ナトリウム、水溶性デキストラン、カルボキシメチルスターチナトリウム、ペクチン、メチルセルロース、エチルセルロース、キサンタンガム、アラビアガム、カゼイン、ゼラチン、寒天、ジグリセリン、グリセリン、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、ワセリン、パラフィン、ステアリルアルコール、ステアリン酸、ヒト血清アルブミン（ｈｕｍａｎ ｓｅｒｕｍ ａｌｂｕｍｉｎ：ＨＳＡ）、マンニトール、ソルビトール、ラクトース、薬学的に許容可能な界面活性剤等が挙げられる。使用される添加剤は、限定するものではないが以上のもの又はこれらの組み合わせから、剤形に応じて適宜選択される。

【0255】

多様な水性キャリア、例えば水、緩衝水、０．４％生理食塩水、０．３％グリシン、又は水性懸濁液は、様々な態様において、水性懸濁液の製造に好適な賦形剤と混合された活性化合物を含有する。このような賦形剤は、懸濁剤、例えばカルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、トラガントガム、及びアラビアガムであり、いくつかの例では、分散剤又は湿潤剤は、天然ホスファチド、例えばレシチン、又は脂肪酸を含む酸化アルキレンの濃縮産物、例えばステアリン酸ポリオキシエチレン、又は長鎖脂肪族アルコールを含む酸化エチレンの濃縮産物、例えばヘプタデカエチル－エンオキシセタノール、又は脂肪酸及びヘキシトール由来の部分エステルを含む酸化エチレンの濃縮産物、例えばモノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビトール、又は脂肪酸及びヘキシトール無水物由来の部分エステルを含む酸化エチレンの濃縮産物、例えばモノオレイン酸ポリエチレンソルビタンである。特定の実施形態では、水性懸濁液は、１つ又は複数の防腐剤、例えばエチル、又はｎ－プロピル、ｐ－ヒドロキシベンゾエートを含有する。

【0256】

特定の実施形態では、本明細書で提供されるＡＤＡＭＴＳ１３組成物は更に、米国特許出願公開第２０１１０２２９４５５号及び／又は米国特許出願公開第２０１４／０２７１６１１号（各文献は、あらゆる目的のためにその全体が参照により本出願に援用される）に記載されているような、１つ又は複数の薬学的に許容可能な賦形剤、キャリア、及び／又は希釈剤を含んでよい。

【0257】

例示的実施形態
１．重症急性呼吸器症候群コロナウイルス２（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２）に感染した又はコロナウイルス疾患２０１９（ＣＯＶＩＤ－１９）に罹患した対象における、少なくとも１つの状態又は合併症を治療又は防止する方法であって、その方法は、それを必要とする対象に、トロンボスポンジン１型モチーフを有するディスインテグリン及びメタロプロテイナーゼ（ＡＤＡＭＴＳ１３）を含む治療有効量の組成物を投与することを含む、方法。

【0258】

２．重症急性呼吸器症候群コロナウイルス２（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２）感染又はコロナウイルス疾患２０１９（ＣＯＶＩＤ－１９）に関連する少なくとも１つの状態又は合併症の発症のリスクを有する対象を治療する方法であって、その方法は、それを必要とする対象に、トロンボスポンジン１型モチーフを有するディスインテグリン及びメタロプロテイナーゼ（ＡＤＡＭＴＳ１３）を含む治療有効量の組成物を投与することを含む、方法。

【0259】

３．重症急性呼吸器症候群コロナウイルス２（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２）に感染した又はコロナウイルス疾患２０１９（ＣＯＶＩＤ－１９）に罹患した対象における、少なくとも１つの状態又は合併症を治療又は防止する方法であって、その方法は：
ａ）それを必要とする対象に、組換えＡＤＡＭＴＳ１３（トロンボスポンジン１型モチーフを有するディスインテグリン及びメタロプロテイナーゼ メンバー１３）を含む治療有効量の医薬組成物を投与するステップであって、治療有効量は：
ｉ）循環超高分子量（ＵＨＭＷ）フォン・ヴィレブランド因子（ＶＷＦ）多量体を、投与前の対象の血中のＶＷＦの測定レベルと比較して少なくとも約５％、少なくとも約１０％、又は少なくとも約２０％低下したレベルまで減少させるため；
ｉｉ）循環ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体を、正常ＶＷＦベースライン値より約５％以下、約１０％以下、又は約２０％以下だけ高いレベルまで減少させるため；
ｉｉｉ）循環ＶＷＦを、投与前の対象の血中のＶＷＦの測定レベルと比較して少なくとも約５％、少なくとも約１０％、又は少なくとも約２０％低下したレベルまで減少させるため；
ｉｖ）循環ＶＷＦを、正常ＶＷＦベースライン値より約５％以下、約１０％以下、又は約２０％以下だけ高いレベルまで減少させるため；
ｖ）ＶＷＦ活性レベルを、投与前の対象の血中のＶＷＦ活性の測定レベルと比較して少なくとも約５％、少なくとも約１０％、又は少なくとも約２０％低下したレベルまで低下させるため；
ｖｉ）ＶＷＦ活性レベルを、正常ＶＷＦ活性ベースライン値より約５％以下、約１０％以下、又は約２０％以下だけ高いレベルまで低下させるため；
ｖｉｉ）循環ＡＤＡＭＴＳ１３レベルを、正常ＡＤＡＭＴＳ１３ベースライン値より約１００％～約１５０％上に上昇させるため；あるいは
ｖｉｉｉ）ｉ）～ｖｉｉ）の組み合わせのため
に十分なものである、ステップ；並びに
ｂ）循環ＶＷＦ、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体、又はこれらの組み合わせの低下したレベルを維持するために、投与される量を周期的に監視及び調整するステップ
を含む、方法。

【0260】

４．対象は、状態又は合併症が存在する前に、ＡＤＡＭＴＳ１３を含む組成物を投与される、実施形態１～３のいずれか１つに記載の方法。

【0261】

５．対象は、状態又は合併症が存在した後に、ＡＤＡＭＴＳ１３を含む組成物を投与される、実施形態１～４のいずれか１つに記載の方法。

【0262】

６．状態又は合併症は、凝固障害、血液凝固障害、梗塞、血栓症、塞栓症、卒中、静脈閉塞性障害、血栓形成促進状態、敗血症、腎不全、呼吸不全、急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、血栓性微小血管症（ＴＭＡ）、肺炎、喘息、高血圧症、ＶＷＦ及び／若しくはその多量体（特に超大型多量体（ＵＨＭＷ））の血漿レベルの上昇、血漿ＶＷＦ活性レベルの上昇、内因性ＡＤＡＭＴＳ１３の血漿レベルの低下、炎症、サイトカインレベルの上昇、又はこれらの組み合わせである、実施形態１～５のいずれか１つに記載の方法。

【0263】

７．血栓症は深部静脈血栓症（ＤＶＴ）である、実施形態６に記載の方法。

【0264】

８．塞栓症は肺塞栓症（ＰＥ）である、実施形態６に記載の方法。

【0265】

９．合併症は、ＶＷＦの血漿レベルの上昇、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体の血漿レベルの上昇、及び／又は内因性ＡＤＡＭＴＳ１３の血漿レベルの低下である、実施形態６に記載の方法。

【0266】

１０．合併症はサイトカインレベルの上昇である、実施形態６に記載の方法。

【0267】

１１．ＣＯＶＩＤ－１９合併症は、ＡＲＤＳ、ＣＯＰＤ、ＴＭＡ、肺炎、喘息、肺高血圧症、深部静脈血栓症、肺塞栓症、又はこれらの組み合わせである、実施形態６に記載の方法。

【0268】

１２．対象は６５歳以上である、実施形態１～１１のいずれか１つに記載の方法。

【0269】

１３．対象は危険因子を示す、実施形態１～１２のいずれか１つに記載の方法。

【0270】

１４．危険因子は、ＶＷＦの血漿レベルの上昇、超大型多量体（ＵＨＭＷ）ＶＷＦ多量体の血漿レベルの上昇、血漿ＶＷＦ活性レベルの上昇、内因性ＡＤＡＭＴＳ１３の血漿レベルの低下、内因性ＡＤＡＭＴＳ１３の活性の低下活性、サイトカインレベルの上昇、凝固障害、血液凝固障害、静脈閉塞性障害、血栓形成促進状態、遺伝性血栓性血小板減少性紫斑病（ＴＴＰ）、後天性ＴＴＰ、播種性血管内凝固症候群（ＤＩＣ）、敗血症、鎌状赤血球症、呼吸不全、急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、血栓性微小血管症（ＴＭＡ）、肺炎、喘息、妊娠高血圧症候群、閉経期高血圧、閉経周辺期高血圧、肺高血圧症、血栓症、塞栓症、心筋梗塞、卒中、咳、息切れ、肺浸潤、呼吸不全、血漿フィブロゲン（ｆｉｂｒｏｇｅｎ）の上昇、止血経路の活性化、集中治療室（ＩＣＵ）への入院、又はこれらの組み合わせである、実施形態１３に記載の方法。

【0271】

１５．危険因子は、ＶＷＦの血漿レベルの上昇、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体の血漿レベルの上昇、及び／又は内因性ＡＤＡＭＴＳ１３の血漿レベルの低下である、実施形態１４に記載の方法。

【0272】

１６．危険因子はサイトカインレベルの上昇である、実施形態１４に記載の方法。

【0273】

１７．危険因子は血栓形成促進状態である、実施形態１４に記載の方法。

【0274】

１８．危険因子は、ＡＲＤＳ、ＣＯＰＤ、ＴＭＡ、肺炎、喘息、妊娠高血圧症候群、閉経期高血圧、閉経周辺期高血圧、肺高血圧症、深部静脈血栓症、又は肺塞栓症のうちの１つである、実施形態１４に記載の方法。

【0275】

１９．ＡＤＡＭＴＳ１３を含む組成物を対象に投与することが、状態又は合併症の持続時間、重症度、又は発生の頻度を、ＡＤＡＭＴＳ１３を含む組成物を投与されていない対象と比較して低減させる、実施形態１～１８のいずれか１つに記載の方法。

【0276】

２０．ＡＤＡＭＴＳ１３を含む組成物を対象に投与することが、ＶＷＦタンパク質の血漿レベル、ＶＷＦ多量体の血漿レベル、ＶＷＦ活性、血漿中のＡＤＡＭＴＳ１３に対するＶＷＦの比率（ＶＷＦ：Ａ１３）、血小板凝集、血液凝固、血栓症、塞栓症、梗塞、静脈閉塞、卒中、炎症、血漿サイトカインレベル、又はこれらの組み合わせを、健康な個体における正常ベースライン範囲と比較して低減させる、実施形態１～１９のいずれか１つに記載の方法。

【0277】

２１．ＶＷＦ多量体はＵＨＭＷ多量体である、実施形態２０に記載の方法。

【0278】

２２．ＡＤＡＭＴＳ１３を含む組成物を対象に投与することが、ＶＷＦタンパク質の血漿レベル、ＶＷＦ多量体の血漿レベル、ＶＷＦ活性、血漿ＶＷＦ：Ａ１３、又はこれらの組み合わせを低減させる、実施形態２０に記載の方法。

【0279】

２３．ＡＤＡＭＴＳ１３を含む組成物を対象に投与することが、血小板凝集、血液凝固、血栓症、塞栓症、梗塞、静脈閉塞、卒中、又はこれらの組み合わせを低減させる、実施形態２０に記載の方法。

【0280】

２４．ＡＤＡＭＴＳ１３を含む組成物を対象に投与することが、ＡＤＡＭＴＳ１３の血漿レベル、血漿ＡＤＡＭＴＳ１３活性、又はこれらの組み合わせを、健康な個体の正常ベースラインまで上昇させる、実施形態１～２３のいずれか１つに記載の方法。

【0281】

２５．ＡＤＡＭＴＳ１３を含む組成物を対象に投与することが、ＡＤＡＭＴＳ１３の血漿レベル、血漿ＡＤＡＭＴＳ１３活性、又はこれらの組み合わせを、ＡＤＡＭＴＳ１３血漿レベル又はＡＤＡＭＴＳ１３活性レベルの正常ベースライン範囲又は正常ベースライン値よりも、約２０～１００％上昇させる、実施形態１～２３のいずれか１つに記載の方法。

【0282】

２６．ＡＤＡＭＴＳ１３を含む組成物を対象に投与することが、ＡＤＡＭＴＳ１３の血漿レベル、血漿ＡＤＡＭＴＳ１３活性、又はこれらの組み合わせを、ＡＤＡＭＴＳ１３血漿レベル又はＡＤＡＭＴＳ１３活性レベルの正常ベースライン値と比較して約１００～１５０％上昇させる、実施形態１～２３のいずれか１つに記載の方法。

【0283】

２７．ＡＤＡＭＴＳ１３の治療有効量は、健康な対象のＶＷＦレベルの所定の正常範囲の上限に相当するベースラインよりも約５％を超えて高いＶＷＦレベルを有する対象について、約１０～４００ＩＵ／ｋｇである、実施形態１～２６のいずれか１つに記載の方法。

【0284】

２８．ＡＤＡＭＴＳ１３の治療有効量は、健康な対象の正常ベースラインＶＷＦレベルよりも少なくとも約２倍高いＶＷＦレベルを有する対象について、約１０～４００ＩＵ／ｋｇ、又は約４０～４００ＩＵ／ｋｇである、実施形態１～２６のいずれか１つに記載の方法。

【0285】

２９．ＡＤＡＭＴＳ１３の治療有効量は、健康な対象の正常ベースラインＶＷＦレベルよりも少なくとも約３倍高いＶＷＦレベルを有する対象について、約１０～４００ＩＵ／ｋｇ、又は約４０～４００ＩＵ／ｋｇである、実施形態１～２６のいずれか１つに記載の方法。

【0286】

３０．ＡＤＡＭＴＳ１３の治療有効量は、健康な対象の正常ＡＤＡＭＴＳ１３ベースライン活性及び／又はレベルの約３０～７０％のＡＤＡＭＴＳ１３活性及び／又はレベルを有する対象について、約１０～４００ＩＵ／ｋｇである、実施形態１～２６のいずれか１つに記載の方法。

【0287】

３１．ＡＤＡＭＴＳ１３の治療有効量は、健康な対象の正常ＡＤＡＭＴＳ１３ベースライン活性及び／又はレベルの約２０％未満のＡＤＡＭＴＳ１３活性及び／又はレベルを有する対象について、約１０～４００ＩＵ／ｋｇ、又は約４０～４００ＩＵ／ｋｇである、実施形態１～２６のいずれか１つに記載の方法。

【0288】

３２．ＡＤＡＭＴＳ１３の治療有効量は、健康な対象の正常ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体ベースラインレベルの約１００～１３０％の超高分子量（ＵＨＭＷ）ＶＷＦ多量体レベルを有する対象について、約１０～４００ＩＵ／ｋｇ、又は約４０～４００ＩＵ／ｋｇである、実施形態１～２６のいずれか１つに記載の方法。

【0289】

３３．ＡＤＡＭＴＳ１３の治療有効量は、健康な対象の正常ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体ベースラインレベルの少なくとも約１０１％、少なくとも約１０５％、又は少なくとも約１０７％の超高分子量（ＵＨＭＷ）ＶＷＦ多量体レベルを有する対象について、約１０～４００ＩＵ／ｋｇである、実施形態１～２６のいずれか１つに記載の方法。

【0290】

３４．ＡＤＡＭＴＳ１３の治療有効量は、約１０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約１０～３００ＩＵ／ｋｇ、約１０～２００ＩＵ／ｋｇ、約１０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約１０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約１０～８０ＩＵ／ｋｇ、約１０～６０ＩＵ／ｋｇ、約１０～４０ＩＵ／ｋｇ、約１０～２０ＩＵ／ｋｇ、約２０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約２０～３００ＩＵ／ｋｇ、約２０～２００ＩＵ／ｋｇ、約２０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約２０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約２０～８０ＩＵ／ｋｇ、約２０～６０ＩＵ／ｋｇ、約２０～４０ＩＵ／ｋｇ、又は約２０～３０ＩＵ／ｋｇである、実施形態１～３３のいずれか１つに記載の方法。

【0291】

３５．ＡＤＡＭＴＳ１３の治療有効量は、約３０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約３０～３００ＩＵ／ｋｇ、約３０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約３０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約３０～６０ＩＵ／ｋｇ、約４０～４００ＩＵ／ｋｇ、約４０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約４０～３００ＩＵ／ｋｇ、約４０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約４０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約４０～８０ＩＵ／ｋｇ、又は約４０～６０ＩＵ／ｋｇである、実施形態１～３３のいずれか１つに記載の方法。

【0292】

３６．ＡＤＡＭＴＳ１３の治療有効量は約１０～６０ＩＵ／ｋｇである、実施形態１～３３のいずれか１つに記載の方法。

【0293】

３７．ＡＤＡＭＴＳ１３の治療有効量は約１０～４０ＩＵ／ｋｇである、実施形態１～３３のいずれか１つに記載の方法。

【0294】

３８．ＡＤＡＭＴＳ１３の治療有効量は約１０～２０ＩＵ／ｋｇである、実施形態１～３３のいずれか１つに記載の方法。

【0295】

３９．ＡＤＡＭＴＳ１３の治療有効量は約４０～３２０ＩＵ／ｋｇである、実施形態１～３３のいずれか１つに記載の方法。

【0296】

４０．ＡＤＡＭＴＳ１３の治療有効量は約４０～１６０ＩＵ／ｋｇである、実施形態１～３３のいずれか１つに記載の方法。

【0297】

４１．ＡＤＡＭＴＳ１３の治療有効量は約４０～８０ＩＵ／ｋｇである、実施形態１～３３のいずれか１つに記載の方法。

【0298】

４２．ＡＤＡＭＴＳ１３の治療有効量は約４０～６０ＩＵ／ｋｇである、実施形態１～３３のいずれか１つに記載の方法。

【0299】

４３．ＡＤＡＭＴＳ１３を含む組成物は、毎月、２週間毎、毎週、週２回、週３回、隔日、毎日、１２時間毎、８時間毎、６時間毎、４時間毎、２時間毎、又は１時間毎に投与される、実施形態１～４２のいずれか１つに記載の方法。

【0300】

４４．ＡＤＡＭＴＳ１３を含む組成物は、１日１回、又は１日２回投与される、実施形態１～４２のいずれか１つに記載の方法。

【0301】

４５．ＡＤＡＭＴＳ１３を含む組成物は、対象のＶＷＦタンパク質のレベル及び／若しくは活性、並びに／又は対象のＡＤＡＭＴＳ１３のレベル及び／若しくは活性の測定の２４時間以内に投与される、実施形態１～４２のいずれか１つに記載の方法。

【0302】

４６．ＡＤＡＭＴＳ１３を含む組成物は静脈内投与される、実施形態１～４５のいずれか１つに記載の方法。

【0303】

４７．ＡＤＡＭＴＳ１３を含む組成物は皮下投与される、実施形態１～４５のいずれか１つに記載の方法。

【0304】

４８．上記投与は、ＡＤＡＭＴＳ１３を含む組成物の静脈内ボーラスを送達することを含む、実施形態１～４５のいずれか１つに記載の方法。

【0305】

４９．上記投与は、ＡＤＡＭＴＳ１３を含む組成物の静脈内注入を送達することを含む、実施形態１～４５のいずれか１つに記載の方法。

【0306】

５０．ＡＤＡＭＴＳ１３を含む組成物は、血漿由来のヒトＡＤＡＭＴＳ１３を含む、実施形態１～４９のいずれか１つに記載の方法。

【0307】

５１．ＡＤＡＭＴＳ１３を含む組成物は組換えＡＤＡＭＴＳ１３を含む、実施形態１～４９のいずれか１つに記載の方法。

【0308】

５２．組換えＡＤＡＭＴＳ１３はヒトＡＤＡＭＴＳ１３である、実施形態５１に記載の方法。

【0309】

５３．ＡＤＡＭＴＳ１３は、ＡＤＡＭＴＳ１３バリアントと野生型ＡＤＡＭＴＳ１３との混合物である、実施形態１～４９、５１、又は５２のいずれか１つに記載の方法。

【0310】

５４．ＡＤＡＭＴＳ１３バリアントと野生型ＡＤＡＭＴＳ１３との比率は、約１：１～約３：１、約１：１、又は約３：２である、実施形態５３に記載の方法。

【0311】

５５．ＡＤＡＭＴＳ１３バリアントは、組成物中の総ＡＤＡＭＴＳ１３の約５２％～約７２％又は約４７％～約８４％を構成する、実施形態５３に記載の方法。

【0312】

５６．上記比率、又はパーセンテージは、ａ）ペプチドマッピングによって、ｂ）液体クロマトグラフィによって分離されたトリプシンペプチドのＨＰＬＣ分析及びこれに続く質量分析によって、又はｃ）抽出されたイオンクロマトグラムの強度に基づいて、決定される、実施形態５４又は実施形態５５に記載の方法。

【0313】

５７．組換えＡＤＡＭＴＳ１３又は野生型ＡＤＡＭＴＳ１３は、配列番号１のアミノ酸配列、又は配列番号１のアミノ酸配列と少なくとも８０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する、実施形態５１～５６のいずれか１つに記載の方法。

【0314】

５８．組換えＡＤＡＭＴＳ１３又は野生型ＡＤＡＭＴＳ１３は、配列番号１のアミノ酸配列から本質的になる、実施形態５７に記載の方法。

【0315】

５９．組換えＡＤＡＭＴＳ１３又は野生型ＡＤＡＭＴＳ１３は、配列番号１のアミノ酸配列からなる、実施形態５７に記載の方法。

【0316】

６０．組換えＡＤＡＭＴＳ１３又はＡＤＡＭＴＳ１３バリアントは、配列番号１に示されているアミノ酸Ｑ９７における又はＡＤＡＭＴＳ１３中の同等のアミノ酸位置における単一のアミノ酸置換を含むＡＤＡＭＴＳ１３バリアントである、実施形態５１～５９のいずれか１つに記載の方法。

【0317】

６１．単一のアミノ酸の変更は、ＱからＤ、Ｅ、Ｋ、Ｈ、Ｌ、Ｎ、Ｐ、又はＲへの変更である、実施形態６０に記載の方法。

【0318】

６２．単一のアミノ酸の変更は、ＱからＲへの変更である、実施形態６０に記載の方法。

【0319】

６３．ＡＤＡＭＴＳ１３バリアントは、配列番号２のアミノ酸配列、又は配列番号２のアミノ酸配列と少なくとも８０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する、実施形態６０に記載の方法。

【0320】

６４．ＡＤＡＭＴＳ１３バリアントは、配列番号２のアミノ酸配列から本質的になる、実施形態６０に記載の方法。

【0321】

６５．ＡＤＡＭＴＳ１３バリアントは、配列番号２のアミノ酸配列からなる、実施形態６０に記載の方法。

【0322】

６６．組成物は、凍結乾燥製剤から再構成された水溶液を含む、実施形態１～６５のいずれか１つに記載の方法。

【0323】

６７．凍結乾燥製剤は、少なくとも約２００ＦＲＥＴ－Ｕ／ｍｌのＡＤＡＭＴＳ１３を含む液体製剤から凍結乾燥される、実施形態６６に記載の方法。

【0324】

６８．液体製剤のｐＨは約７．０～７．５である、実施形態６７に記載の方法。

【0325】

６９．凍結乾燥される液体製剤は更に、ヒスチジン、塩化ナトリウム、スクロース、トレハロース、マンニトール、塩化カルシウム、ポリソルベート８０、及びこれらの組み合わせのうちの少なくとも１つを含む、実施形態６７に記載の方法。

【0326】

７０．凍結乾燥される液体製剤は更に、約２０ｍＭのヒスチジン、約３０～６０ｍＭの塩化ナトリウム、約１～２％のスクロース、約３％のマンニトール、約４ｍＭの塩化カルシウム、及び約０．０５％のポリソルベート８０を含む、実施形態６９に記載の方法。

【0327】

７１．以下の更なるステップ：
対象のＶＷＦレベルを周期的に測定するステップ；及び
対象のＶＷＦレベルが、健康な個体の所定のベースライン範囲内である場合に、治療有効量を約１０～１００ＩＵ／ｋｇまで低減するステップ
を含む、実施形態１～７０のいずれか１つに記載の方法。

【0328】

７２．ＶＷＦレベルに関する正常ベースライン範囲は、確立された又は所定の平均ベースラインの約５０～２００％、又は約４２～１３６％の範囲である、実施形態２０～７１のいずれか１つに記載の方法。

【0329】

７３．ＡＤＡＭＴＳ１３レベルに関する正常ベースライン範囲は、確立された又は所定の平均ベースラインの約４０～１６０％、又は約８７～１１３％の範囲である、実施形態２０～７２のいずれか１つに記載の方法。

【0330】

７４．ＣＯＶＩＤ－１９と診断された対象の血栓性凝固障害のリスクが増大しているかどうかを決定する方法であって、その方法は：
ａ）血漿試料において、
ｉ）ＶＷＦタンパク質の血漿レベル；
ｉｉ）血漿試料中のＶＷＦの活性レベル；
ｉｉｉ）ＵＨＭＷ ＶＷＦタンパク質多量体の血漿レベル；
ｉｖ）ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の血漿レベル；又は
ｖ）血漿試料中のＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の活性レベル
のうちの１つ又は複数を測定するステップ；
ｂ）ステップａ）で測定された１つ又は複数の血漿レベル又は活性レベルを、同じ１つ又は複数の血漿レベル又は活性レベルに関するベースライン範囲又はベースライン値と比較するステップ；及び
ｃ）
ｉ）ＶＷＦタンパク質の血漿レベルが上昇していること；
ｉｉ）ＶＷＦの活性レベルが上昇していること；
ｉｉｉ）血漿ＵＨＭＷ ＶＷＦタンパク質多量体が検出される、若しくはＵＨＭＷ ＶＷＦタンパク質多量体の血漿レベルが上昇していること；
ｉｖ）ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の血漿レベルが低下していること；又は
ｖ）ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の活性レベルが低下していること
のうちの少なくとも１つが満たされた場合に、対象が血栓性凝固障害のリスクを有すると特定するステップ
を含む、方法。

【0331】

７５．少なくともＶＷＦタンパク質の血漿レベルが上昇している、実施形態７４に記載の方法。

【0332】

７６．少なくともＶＷＦの活性レベルが上昇している、実施形態７４又は実施形態７５に記載の方法。

【0333】

７７．少なくともＵＨＭＷ ＶＷＦタンパク質多量体が検出されるか、又はＵＨＭＷ ＶＷＦタンパク質多量体の血漿レベルが上昇している、実施形態７４～７６のいずれか１つに記載の方法。

【0334】

７８．少なくともＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の血漿レベルが低下している、実施形態７４～７７のいずれか１つに記載の方法。

【0335】

７９．少なくともＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の活性レベルが低下している、実施形態７４～７８のいずれか１つに記載の方法。

【0336】

８０．血栓性凝固障害は、血小板凝集、血液凝固、血栓症、血栓性微小血管症、塞栓症、梗塞、静脈閉塞、卒中、血栓症由来の腎不全、又はこれらの組み合わせである、実施形態７４～７９のいずれか１つに記載の方法。

【0337】

８１．血栓症は深部静脈血栓症（ＤＶＴ）である、実施形態８０に記載の方法。

【0338】

８２．塞栓症は肺塞栓症（ＰＥ）である、実施形態８０に記載の方法。

【0339】

８３．血栓性凝固障害は、血栓症由来の腎不全である、実施形態８０に記載の方法。

【0340】

８４．対象は、ＶＷＦタンパク質の血漿レベルが、ＶＷＦタンパク質血漿レベルに関するベースライン値の約１２０％～約３００％である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する、実施形態７４～８３のいずれか１つに記載の方法。

【0341】

８５．対象は、ＶＷＦタンパク質の血漿レベルが、ＶＷＦタンパク質血漿レベルに関するベースライン値の約３００％以上である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する、実施形態７４～８４のいずれか１つに記載の方法。

【0342】

８６．対象は、血漿試料中のＶＷＦの活性レベルが、ＶＷＦ活性レベルに関するベースライン値の約１２０％～約３００％である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する、実施形態７４～８５のいずれか１つに記載の方法。

【0343】

８７．対象は、血漿試料中のＶＷＦの活性レベルが、ＶＷＦ活性レベルに関するベースライン値の約３００％以上である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する、実施形態７４～８６のいずれか１つに記載の方法。

【0344】

８８．対象は、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の血漿レベルが、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質血漿レベルに関するベースライン値の約７０％～約１００％である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する、実施形態７４～８７のいずれか１つに記載の方法。

【0345】

８９．対象は、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の血漿レベルが、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質血漿レベルに関するベースライン値の７０％以下である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する、実施形態７４～８８のいずれか１つに記載の方法。

【0346】

９０．対象は、血漿試料中のＡＤＡＭＴＳ１３の活性レベルが、ＡＤＡＭＴＳ１３活性レベルに関するベースライン値の約７０％～約１００％である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する、実施形態７４～８９のいずれか１つに記載の方法。

【0347】

９１．対象は、血漿試料中のＡＤＡＭＴＳ１３の活性レベルが、ＡＤＡＭＴＳ１３活性レベルに関するベースライン値の７０％以下である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する、実施形態７４～９０のいずれか１つに記載の方法。

【0348】

９２．対象は、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体の血漿レベルが、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体血漿レベルに関するベースライン値の約１００％～約１１０％である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する、実施形態７４～９１のいずれか１つに記載の方法。

【0349】

９３．対象は、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体の血漿レベルが、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体血漿レベルに関するベースライン値の１１０％以上である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する、実施形態７４～９２のいずれか１つに記載の方法。

【0350】

９４．対象は、血漿試料中のＶＷＦレベル：Ａ１３レベルの比率が３以下である場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する、実施形態７４～９３のいずれか１つに記載の方法。

【0351】

９５．対象は、血漿試料中のＶＷＦレベル：Ａ１３レベルの比率が３を超える場合に、血栓性凝固障害の発症のリスクを有する、実施形態７４～９４のいずれか１つに記載の方法。

【0352】

９６．ベースライン値は、正常な対照集団に基づく所定値である、実施形態７４～９５のいずれか１つに記載の方法。

【0353】

９７．ベースライン値は、正常な対照集団の所定の範囲の平均である、実施形態７４～９６のいずれか１つに記載の方法。

【0354】

９８．ＣＯＶＩＤ－１９と診断された対象が血栓性凝固障害のリスクを有するかどうかを決定する方法であって、その方法は：
ａ）血漿試料において、
ｉ）ＶＷＦタンパク質の血漿レベル；
ｉｉ）血漿試料中のＶＷＦの活性レベル；
ｉｉｉ）ＵＨＭＷ ＶＷＦタンパク質多量体の血漿レベル；
ｉｖ）ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の血漿レベル；及び／又は
ｖ）血漿試料中のＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の活性レベル
のうちの１つ又は複数を測定するステップ；及び
ｂ）以下：
ｉ）ＶＷＦタンパク質の血漿レベルが少なくとも約１．２ＩＵ／ｍｌであること；
ｉｉ）ＶＷＦ活性レベルが少なくとも約１．２ＩＵ／ｍｌ若しくは約１．８ＩＵ／ｍｌであること；
ｉｉｉ）血漿ＵＨＭＷ ＶＷＦタンパク質多量体が検出されること；
ｉｖ）ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の血漿レベルが約０．７ＩＵ／ｍｌ以下であること；及び／又は
ｖ）ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の活性レベルが約０．８若しくは約０．９ＩＵ／ｍｌ以下であること
のうちの少なくとも１つが満たされた場合に、対象が血栓性凝固障害のリスクを有すると特定するステップ
を含む、方法。

【0355】

９９．ステップｂ）において：
ｉ）ＶＷＦタンパク質の血漿レベルが少なくとも約４．５ＩＵ／ｍｌであること；
ｉｉ）ＶＷＦ活性レベルが少なくとも約３．３ＩＵ／ｍｌ若しくは約４．４ＩＵ／ｍｌであること；
ｉｉｉ）ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の血漿レベルが約０．４ＩＵ／ｍｌ以下であること；及び／又は
ｉｖ）ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の活性レベルが約０．４若しくは約０．５ＩＵ／ｍｌ以下であること
のうちの少なくとも１つが満たされた場合に、対象は血栓性凝固障害の高いリスクを有する、実施形態９８に記載の方法。

【0356】

１００．ＶＷＦ活性レベルは、ＶＷＦリストセチン補因子活性によって測定される、実施形態７４～９９のいずれか１つに記載の方法。

【0357】

１０１．ＶＷＦ活性レベルは、ＶＷＦコラーゲン結合活性によって測定される、実施形態７４～９９のいずれか１つに記載の方法。

【0358】

１０２．ＡＤＡＭＴＳ１３活性レベルはＥＬＩＳＡによって測定される、実施形態７４～９９のいずれか１つに記載の方法。

【0359】

１０３．ＶＷＦ活性レベルはＦＲＥＴＳによって測定される、実施形態７４～９９のいずれか１つに記載の方法。

【0360】

１０４．対象は、対象から採取された血液又は鼻粘膜試料から、ＰＣＲによってＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ ＲＮＡを検出することにより、ＣＯＶＩＤであると診断される、実施形態７４～１０３のいずれか１つに記載の方法。

【0361】

１０５．対象は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のセロコンバージョンによって、ＣＯＶＩＤであると診断される、実施形態７４～１０４のいずれか１つに記載の方法。

【0362】

１０６．対象は、対象の血漿においてＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２抗体を検出することによって、ＣＯＶＩＤであると診断される、実施形態７４～１０５のいずれか１つに記載の方法。

【0363】

１０７．対象から血液試料を得ることを更に含む、実施形態７４～１０６のいずれか１つに記載の方法。

【0364】

１０８．血液試料は抗凝固剤によって処置される、実施形態１０７に記載の方法。

【0365】

１０９．抗凝固剤はＥＤＴＡ、クエン酸ナトリウム、又はヘパリンである、実施形態１０８に記載の方法。

【0366】

１１０．上記方法は、対象に、治療有効量のＡＤＡＭＴＳ１３を含む組成物を投与することを更に含む、実施形態７４～１０９のいずれか１つに記載の方法。

【0367】

１１１．ＡＤＡＭＴＳ１３の治療有効量は、約１０～４００ＩＵ／ｋｇである、実施形態１１０に記載の方法。

【0368】

１１２．ＡＤＡＭＴＳ１３の治療有効量は、約１０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約１０～３００ＩＵ／ｋｇ、約１０～２００ＩＵ／ｋｇ、約１０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約１０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約１０～８０ＩＵ／ｋｇ、約１０～６０ＩＵ／ｋｇ、約１０～４０ＩＵ／ｋｇ、約１０～２０ＩＵ／ｋｇ、約２０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約２０～３００ＩＵ／ｋｇ、約２０～２００ＩＵ／ｋｇ、約２０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約２０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約２０～８０ＩＵ／ｋｇ、約２０～６０ＩＵ／ｋｇ、約２０～４０ＩＵ／ｋｇ、又は約２０～３０ＩＵ／ｋｇである、実施形態１１０又は実施形態１１１に記載の方法。

【0369】

１１３．ＡＤＡＭＴＳ１３の治療有効量は、約３０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約３０～３００ＩＵ／ｋｇ、約３０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約３０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約３０～６０ＩＵ／ｋｇ、約４０～４００ＩＵ／ｋｇ、約４０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約４０～３００ＩＵ／ｋｇ、約４０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約４０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約４０～８０ＩＵ／ｋｇ、又は約４０～６０ＩＵ／ｋｇである、実施形態１１０又は実施形態１１１に記載の方法。

【0370】

１１４．上記方法は、対象に、治療有効量のＡＤＡＭＴＳ１３を含む組成物を投与することを更に含み、ＡＤＡＭＴＳ１３の治療有効量は、約１０～４０ＩＵ／ｋｇ、約１０～３０ＩＵ／ｋｇ、約１０～２０ＩＵ／ｋｇ、約２０～４０ＩＵ／ｋｇ、又は約２０～３０ＩＵ／ｋｇである、実施形態８４、８６、８８、９０、９２、９４、又は９８のいずれか１つに記載の方法。

【0371】

１１５．ＡＤＡＭＴＳ１３の治療有効量は、約１０ＩＵ／ｋｇ、約２０ＩＵ／ｋｇ、約３０ＩＵ／ｋｇ、又は約４０ＩＵ／ｋｇである、実施形態１１４に記載の方法。

【0372】

１１６．上記方法は、対象に、治療有効量のＡＤＡＭＴＳ１３を含む組成物を投与することを更に含み、ＡＤＡＭＴＳ１３の治療有効量は、約４０～４００ＩＵ／ｋｇ、約４０～３２０ＩＵ／ｋｇ、約４０～３００ＩＵ／ｋｇ、約４０～１８０ＩＵ／ｋｇ、約４０～１６０ＩＵ／ｋｇ、約４０～８０ＩＵ／ｋｇ、又は約４０～６０ＩＵ／ｋｇである、実施形態８５、８７、８９、９１、９３、９５、又は９９のいずれか１つに記載の方法。

【0373】

１１７．ＡＤＡＭＴＳ１３の治療有効量は、約４０ＩＵ／ｋｇ、約６０ＩＵ／ｋｇ、約８０ＩＵ／ｋｇ、又は約１６０ＩＵ／ｋｇである、実施形態１１６に記載の方法。

【0374】

１１８．ＣＯＶＩＤ－１９と診断された対象が血栓性凝固障害のリスクを有するかどうかを決定するための、キットであって、キットは：（ｉ）ＶＷＦタンパク質の血漿レベル、ＶＷＦの活性レベル、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体の血漿レベル、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の血漿レベル、ＡＤＡＭＴＳ１３の活性レベルのうちの１つ又は複数を決定するための、１つ又は複数の試薬；（ｉｉ）任意選択で、包装及び／又は使用説明書；並びに（ｉｉｉ）任意選択で、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２を検出するため又はＣＯＶＩＤ－１９を診断するための１つ又は複数の試薬を含む、キット。

【実施例】

【0375】

実施例１：組換えＡＤＡＭＴＳ１３（ｒＡ１３）の発現
ヒトＡＤＡＭＴＳ１３を発現する組換えＣＨＯ細胞株のケモスタット細胞培養物を追加の亜鉛及びビタミンＢ３が補充された、既知組成のＢＡＣＤ－Ａ１３培地中で成長させた。１０Ｌの培養物を５３日間保持し、ｒＡ１３タンパク質及び活性の産生を経時的に監視した。

【0376】

ヒトＡＤＡＭＴＳ１３を発現する組換えＣＨＯ細胞を、既知組成の専用培地（ＢＣＳ培地）に適応させた。ＤＷＣＢを解凍し、細胞摂取物をＢＣＳ培地中で調製した。ｒＡ１３発現クローン＃６４０－２から増殖させた細胞を、Ｒｕｓｈｔｏｎ型インペラーを備えた１０Ｌバイオリアクターに移し、専用のＢＡＣＤ－Ａ１３培地を用いて、７．１５～７．２０のインライン制御されたｐＨ、３７℃、空気の２０％の飽和溶存酸素濃度という条件下で、バッチ培養を繰り返して培養した。２バッチ分の培養物を最終作業体積１０Ｌまで成長させた後、５日目にバイオリアクターを連続培地供給に切り替え、ケモスタットモードで更に４８時間動作させた。

【0377】

バイオリアクターからの上清の試料を毎週採取して、ＥＬＩＳＡによってｒＡ１３タンパク質産生を分析し、またＦＲＥＴＳ－ＶＷＦ７３アッセイによってｒＡ１３活性を分析した。細胞の個数を、Ｎｕｃｌｅｏｃｏｕｎｔｅｒ技術によって決定した。希釈率を測定し、これを、成長速度及び体積的生産性の計算に使用した。

【0378】

亜鉛及びニコチンアミドを、１．４３２ｍｇ／ＬのＺｎＳＯ_４７Ｈ_２Ｏ及び７．０２ｍｇ／Ｌのニコチンアミドという最終濃度で補充した、既知組成のＢＡＣＤ－Ａ１３培地を用いての、連続培養条件下において、０．９～１．３ｍｇ／Ｌ／Ｄという高いレベルのｒＡ１３タンパク質産生、及び約８００～１１００ｍＵ／μｇ ｒＡ１３という高いレベルの比活性が達成された（表１）。特に、体積的生産性及び細胞特異的な生産性は、長期培養において経時的に上昇した。これはおそらく、成長速度及び希釈率が経時的に上昇するためである。発現されたｒＡ１３の高い比活性は、培養物をケモスタット条件下で成長させる少なくとも７週間の全体にわたって、一定の高いレベルに少なくとも維持できた。実際には、培養物中で産生されたｒＡ１３の比活性は、２週目の約８００ｍＵ／μｇ Ａ１３から７週目の約１１００ｍＵ／μｇ Ａ１３へと上昇した。

【0379】

【表1】

【0380】

この実施例による発現のための好適なｒＡＤＡＭＴＳ１３は、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号ＮＰ＿６２０５９４のアミノ酸配列を有するヒトＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質である。

【0381】

実施例２：組換えヒトＡＤＡＭＴＳ１３の発現及び精製
組換えＡＤＡＭＴＳ１３は、懸濁培養での発酵プロセスにおいて、組換えチャイニーズハムスター卵巣（Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｈａｍｓｔｅｒ Ｏｖａｒｙ：ＣＨＯ）細胞クローンによって生成される。成長培地は、ヒト又は動物由来の物質及び組換えタンパク質をいずれも含まない。ＡＤＡＭＴＳ１３の発現に使用できるこれらのタイプの成長培地の例は、例えば米国特許第８，３１３，９２６号で確認できる。製造プロセスは、連続（ケモスタット）細胞培養法を利用する。精製プロセスは、ろ過による最初の細胞除去ステップで始まる。その後の４日目までの細胞非含有産物を組み合わせて、１つの下流バッチを生成する。プールされてろ過された回収物を、限外ろ過／ダイアフィルトレーションによって濃縮した後、溶媒界面活性剤ウイルス不活化プロセスに供する。更なる精製には、クロマトグラフィによる捕捉ステップ（アニオン交換）、ナノろ過ステップ（第２のウイルス削減ステップ）、ネガティブクロマトグラフィステップ（ハイドロキシアパタイト）とこれに続く混合モードクロマトグラフィ（Ｃａｐｔｏ ＭＭＣ）、及び最終的なクロマトグラフィ濃縮・予備製剤ステップ（カチオン交換）が含まれる。予備製剤されたバルク原薬（ｂｕｌｋ ｄｒｕｇ ｓｕｂｓｔａｎｃｅ：ＢＤＳ）を、温度制御された冷凍庫内において－６０℃で冷凍する。

【0382】

この実施例による発現のための好適なｒＡＤＡＭＴＳ１３は、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号ＮＰ＿６２０５９４のアミノ酸配列を有するヒトＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質である。いずれのこのようなｒＡＤＡＭＴＳ１３配列の、例えばＱ^９７Ｒバリアントを含む「ミスセンス」バリアントも、好適なものとなる。これらのうちのいずれの組み合わせも使用できる。

【0383】

実施例３：ＡＤＡＭＴＳ１３活性に関するＦＲＥＴＳ－ＶＷＦ７３アッセイ
ＡＤＡＭＴＳ１３のタンパク質分解活性を、消光性蛍光基質（ＦＲＥＴＳ－ＶＷＦ７３、株式会社ペプチド研究所、日本、大阪）に対して、製造元のアッセイの説明に従って測定する。簡潔に述べると、ｒＡＤＡＭＴＳ１３試料を、５ｍＭのビス－トリス、２５ｍＭのＣａＣｌ_２、及び０．００５％のＴｗｅｅｎ２０を含有するバッファ中で（総体積１００μＬで）希釈して、黒色のマイクロタイタープレートに移す。試料を、希釈されたヒト血漿試料（８０～５ｍＵ／ｍＬ血漿）の参照曲線に対して測定する。反応は基質（１００μＬ、ＦＲＥＴＳ－ＶＷＦ７３；最終濃度２μＭ）の添加によって開始され、蛍光を、ｌｅｘ＝３６０ｎｍ及びｌｅｍ＝４６０、３０℃で、蛍光分光光度計で４５分間にわたって２分毎に測定する（ＦＬｘ８００、Ｂｉｏ Ｔｅｋ）。活性の結果をヒト血漿の参照曲線から読み取る。データは、単位／ｍＬを単位として表される。Kokame et al., FRETS-VWF73, a first fluorogenic substrate for ADAMTS13 assay, Br J Haematol 2005; 129: 93-100も参照。試料を、１Ｕ／ｍＬのＡＤＡＭＴＳ１３活性濃度が割り当てられた、プールされていた正常ヒト血漿（Ｇｅｏｒｇｅ Ｋｉｎｇ Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ、米国カンザス州オーバーランドパーク）の連続希釈で得られた参照曲線に対して測定する。正常ヒト血漿を１単位／ｍＬとみなした。

【0384】

ＡＤＡＭＴＳ１３の範囲の正常範囲は、活性の測定方法に左右される。当該技術分野で認識されているあらゆる方法が、本発明の範囲内である。特定の実施形態では、健康な個体の正常範囲は、所定の正常ベースライン値の４０～１６０％である。Peyvandi et al., ADAMTS13 assays in thrombotic thrombocytopenic purpura. J Thromb Haemost. 2010 Apr;8(4):631-40を参照。特定の実施形態では、健康な個体の正常範囲又はベースライン範囲は、所定の正常ベースライン値の８７～１１３％である。Mancini et al., J Thromb Haemost. 2021 Feb;19(2):513-521を参照。

【0385】

実施例４：精製済み組換えＡＤＡＭＴＳ１３（ｒＡ１３）の製剤
組換えＡＤＡＭＴＳ１３を組換えＣＨＯ細胞中で発現させ、アニオン交換クロマトグラフィによって精製した。精製済みのｒＡ１３は、およそ７５０μｇ／ｍｌの最終濃度、及びおよそ８５０ｍＵ／μｇの比活性を有していた。ｒＡ１３を、１５０ｍＭのＮａＣｌ、２％のスクロース、０．０５％のポリソルベート８０を含有する緩衝液中で、ｐＨ７．０で、（１）ヒスチジン、（２）リン酸緩衝剤、又は（３）クエン酸ナトリウムから選択された２０ｍＭの緩衝剤を用いて製剤した。次に試料を均等に分割し、試料の半分を凍結乾燥した。

【0386】

凍結乾燥試料を、凍結乾燥前の製剤と同一の最終体積となるように、滅菌水で再構成した。次に、液体製剤及び凍結乾燥製剤それぞれの単一のアリコートを、試料をＳｕｐｅｒｏｓｅ ６ ＧＬカラム（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）に装入することによるゲルろ過によって、特性決定した。全ての製剤でＡＤＡＭＴＳ１３試料が得られ、これらは、ゲルろ過による単量体ｒＡ１３タンパク質に対応する単一のピークとして実行された。

【0387】

特定の実施形態では、ヒスチジン緩衝液が好ましい。好適なｐＨは約６．０～約８．０、好ましくは約６．５～約８．５、最も好ましくは約７．０又は７．５である。特定の実施形態では、ＨＥＰＥＳ緩衝液を使用してよい（例えば２０ｍＭ）。任意選択で、好適な製剤はＥＤＴＡ及び／又は亜鉛（例えばＺｎＣｌ_２）を含んでよい。特定の実施形態では、凍結乾燥に好適なｒＡ１３の液体製剤は、緩衝液に加えて、例えばスクロース若しくはトレハロース（例えば最大約２％）、マンニトール（例えば最大約３％）、及び／又はカルシウム（例えば２ｍＭのＣａＣｌ_２）である１つ又は複数の安定剤を含有する場合もある。特定の実施形態では、製剤は、約１％のスクロース及び約３％のマンニトールを含む。

【0388】

特定の実施形態では、凍結乾燥に好適なｒＡ１３の液体製剤は、約２０ｍＭのヒスチジン；約３％のマンニトール；約０．０５％のポリソルベート８０；約３０又は約６０ｍＭのＮａＣｌ；約２又は約４ｍＭのＣａＣｌ_２；及び約１％又は約２％の糖（例えばスクロース又はトレハロース）を含む。この組成物は更に、例えば０．０５０％のＴｗｅｅｎ ８０を含んでよい。特定の実施形態では、約２％のスクロースの存在下で約０ｍＭ～約６０ｍＭの塩化ナトリウムを含有する製剤は、好適な凍結乾燥ケーキを形成する。

【0389】

特定の実施形態では、ｒＡ１３の液体製剤又は再構成された凍結乾燥製剤は：１０ｍＭ～５０ｍＭのヒスチジン；２％～４％のマンニトール；０．０２５％～０．１％のポリソルベート８０；０ｍＭ～１００ｍＭのＮａＣｌ；２ｍＭ～４ｍＭの塩化カルシウム；及び０．５％～２％のスクロースを含む。特定の実施形態では、製剤は更に、０．５μＭ～２０μＭの亜鉛を含む。

【0390】

特定の実施形態では、ｒＡ１３の液体製剤又は再構成された凍結乾燥製剤は：１０ｍＭ～５０ｍＭのヒスチジン；２％～４％のマンニトール；０．０２５％～０．１％のポリソルベート８０；０ｍＭ～６０ｍＭのＮａＣｌ；２ｍＭ～４ｍＭの塩化カルシウム；及び０．５％～２％スのクロースを含む。特定の実施形態では、製剤は更に、０．５μＭ～２０μＭの亜鉛を含む。

【0391】

液体製剤及び凍結乾燥製剤は、例えば室温（約３７～４０℃）又は冷蔵（約２～８℃）で、例えば３７℃又は４℃で保管できる。特定の実施形態では、４℃での保管が好ましい。特定の実施形態では、製剤は最長で６、１２、２４、又は３６か月保管される。特定の実施形態では、凍結乾燥製剤が好ましい。特定の実施形態では、ナトリウム含有量が少ない例えば最大で約１００ｍＭのＮａＣｌ、最大で約６０ｍＭ、又は最大で約３０ｍＭのＮａＣｌを含む、凍結乾燥用の製剤が好ましい。

【0392】

実施例５：治療に使用するためのｒＡＤＡＭＴＳ１３製剤
本明細書に記載の実施例で使用するための医薬組成物は、約２９４ＦＲＥＴＳ－Ｕ／ｍｌの活性を有する、ｒＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質を含む、凍結乾燥された液体製剤である。このタンパク質の好適なアミノ酸配列は：ＧｅｎＢａｎｋ受託番号ＮＰ＿６２０５９４等のヒト由来の組換えＡＤＡＭＴＳ１３；ＧｅｎＢａｎｋ受託番号ＮＰ＿６２０５９４のアミノ酸配列と少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列；アミノ酸１～２９を含むシグナルペプチドが除去された、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号ＮＰ＿６２０５９４のアミノ酸配列の切断物；及びアミノ酸３０～７４を含む配列が除去された、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号ＮＰ＿６２０５９４のアミノ酸配列の切断物である。また、例えばＱ^９７Ｒバリアントを含む、いずれの上述のｒＡＤＡＭＴＳ１３配列の「ミスセンス」バリアントも好適である。これらのうちのいずれの組み合わせも使用できる。

【0393】

他の成分は、ポリソルベート８０（約０．０５％）、スクロース（約１～２％）、マンニトール（約３～４％）、カルシウム（約２～４ｍＭのＣａＣｌ_２）、ナトリウム（約３０～６０ｍＭのＮａＣｌ）、及びヒスチジン（約２０～２５ｍＭ）である。ｐＨは約７．０～７．５、例えば約７．０±０．２である。この組成物は、注射のために５ｍＬの滅菌水中で再構成して使用する準備ができるまで、約２～８℃で保管される。ＣＯＶＩＤ－１９対象への投与は、ＩＵ／ｋｇに基づく本明細書に記載の用量の単回静脈内ボーラスとして行われる。

【0394】

実施例６：ＡＤＡＭＴＳ１３治療に関するＣＯＶＩＤ－１９対象の評価
この実施例によると、ＣＯＶＩＤ－１９対象が、以下の基準のうちの１つ又は複数に基づいて、ＡＤＡＭＴＳ１３治療に関して評価される：
（ａ）対象が６５歳以上であるかどうか；
（ｂ）好適な臨床検査に従って、対象の血流中の内因性ＶＷＦのレベルが、所定の正常ベースライン値と比較して上昇しているかどうか；
（ｃ）好適な臨床検査に従って、患者の血流中の１つ又は複数のサイトカイン、例えばＩＬ－８、ＴＮＦ－α、及び／又はＩＬ－６のレベルが、所定の正常ベースライン値と比較して上昇しているかどうか；
（ｄ）対象がＩＣＵに入院しているかどうか；
（ｅ）対象が、凝固障害、血液凝固障害、静脈閉塞障害、血栓形成促進状態、ＡＲＤＳ、ＣＯＰＤ、肺炎、喘息、高血圧症（例えば肺高血圧症）、血栓症（例えばＤＶＴ）、塞栓症（例えばＰＥ）、心筋梗塞、及び卒中（例えば虚血性脳卒中又は脳卒中）のうちの１つ又は複数に罹患している、あるいはこれらの兆候又は症状を示すかどうか；並びに
（ｆ）対象が、凝固障害、血液凝固障害、静脈閉塞障害、血栓形成促進状態、ＡＲＤＳ、ＣＯＰＤ、肺炎、喘息、妊娠高血圧症候群、閉経期高血圧、閉経周辺期高血圧、高血圧症（例えば肺高血圧症）、血栓症（例えばＤＶＴ）、気道の血栓性微小血管症（ＴＭＡ）を含むＴＭＡ、塞栓症（例えばＰＥ）、心筋梗塞、及び卒中（例えば虚血性脳卒中又は脳卒中）の病歴、素因、又はリスクを有するかどうか。

【0395】

特定の実施形態では、ＣＯＶＩＤ－１９対象は、複数の上述の基準に基づいて、ＡＤＡＭＴＳ１３治療に関して評価される。

【0396】

ＶＷＦのレベルは、本明細書に記載の好適な臨床検査に従って決定される。

【0397】

これらの基準に応じて、ＣＯＶＩＤ－１９対象を、本明細書では（１）「初期段階」若しくは「維持」群；又は（２）「後期段階」若しくは「レスキュー」群と呼ばれる２つの治療群のうちの一方に分類できる。

【0398】

「初期段階」又は「維持」Ａ１３治療群の選択基準は：
（ｉ）凝固障害、血液凝固障害、静脈閉塞障害、血栓形成促進状態、ＡＲＤＳ、ＣＯＰＤ、肺炎、喘息、妊娠高血圧症候群、閉経期高血圧、閉経周辺期高血圧、高血圧症（例えば肺高血圧症）、血栓症（例えばＤＶＴ）、気道の血栓性微小血管症（ＴＭＡ）を含むＴＭＡ、塞栓症（例えばＰＥ）、心筋梗塞、及び卒中（例えば虚血性脳卒中又は脳卒中）の病歴、素因、又はリスク；
（ｉｉ）正常ベースラインよりも約５０％以下だけ高いＶＷＦレベル；並びに
（ｉｉｉ）正常ベースラインよりも約５０％以下だけ高いサイトカインレベル
である。

【0399】

６５歳以上で上述の基準を満たす対象は、特に治療を指示される。

【0400】

「後期段階」又は「レスキュー」Ａ１３治療群の選択基準は：
（ｉ）活動性の凝固障害、血液凝固障害、静脈閉塞障害、血栓形成促進状態、ＡＲＤＳ、ＣＯＰＤ、肺炎、喘息、妊娠高血圧症候群、閉経期高血圧、閉経周辺期高血圧、高血圧症（例えば肺高血圧症）、血栓症（例えばＤＶＴ）、気道の血栓性微小血管症（ＴＭＡ）を含むＴＭＡ、塞栓症（例えばＰＥ）、心筋梗塞、及び卒中（例えば虚血性脳卒中又は脳卒中）の診断；
（ｉｉ）正常ベースラインよりも約５０％を超えて高いＶＷＦレベル；並びに
（ｉｉｉ）正常ベースラインよりも約５０％以下だけ高いサイトカインレベル
のうちのいずれか１つ又は複数である。

【0401】

６５歳以上で上述の基準を満たす対象は、特に治療を指示される。ＩＣＵに入院している対象は、特に治療を指示される。正常ベースラインの少なくとも２倍のＶＷＦレベルを有する対象は、特に治療を指示される。正常ベースラインの少なくとも２倍のサイトカインレベルを有する対象は、特に治療を指示される。

【0402】

この実施例では、ＶＷＦレベルの正常ベースラインは、約４２～１３６％のＶＷＦ：抗原の範囲、又は約４２～１６８％のＶＷＦ：活性の範囲のうちの一方である。これは、例えば本明細書に記載されているような、当該技術分野で公知の材料及び方法を用いる、臨床検査で決定される。サイトカインレベルの正常ベースライン、及び対象のサイトカインレベルは、当該技術分野で公知の方法に従って決定できる。これは、ＩＬ－８、ＴＮＦ－α、及びＩＬ－６のうちの１つ又は複数の試験を含む。正常ＶＷＦ及びサイトカインレベル、又はベースラインＶＷＦ及びサイトカインレベルは、健康な対象において大きくばらつく可能性がある。正常Ａ１３レベルも、健康な対象の間でばらつく可能性がある。ある特定の対象に関するベースラインが分かっていない場合、これらの正常範囲のうちの１つ又は複数の平均又は上端若しくは下端を、ベースラインとして用いる。ある特定の対象に関するベースラインが、例えば病歴から分かっている場合、これを、治療群の選択のためのベースラインとして役立てることができる。

【0403】

実施例７：ＣＯＶＩＤ－１９対象の「初期段階」又は「維持」治療
「初期段階」又は「維持」治療が指示された対象には、実施例５のｒＡＤＡＭＴＳ製剤が、１０ＩＵ／ｋｇ～８０ＩＵ／ｋｇ（体重）のｒＡＤＡＭＴＳ１３活性を有する用量で、隔日で静脈内投与される。用量及び／又はタイミングを調整して、ベースライン内因性ＶＷＦレベル又はベースライン内因性ＡＤＡＭＴＳ１３レベルのうちの少なくとも一方に対して対象を正規化できる。ＡＤＡＭＴＳ１３レベルを測定する場合、用量を調整して、ＡＤＡＭＴＳ１３レベルを平均正常レベルの約２０～１００％だけ上昇させることができる。ＡＤＡＭＴＳ１３レベルは、実施例３に記載されているもののような材料及び方法を用いる臨床検査によって、決定される。正常ＡＤＡＭＴＳ１３ベースラインは、１００～１５０％となり；正常平均ベースラインは、１００％、又は確立された基準となる。投薬量は性別によって異なる場合があり、女性は、より高い正常ベースラインに合わせるために、比較的高い、例えば約５～１０％高いＡ１３用量を投与される。

【0404】

「初期段階」又は「維持」療法を受ける対象は、適切な選択基準が満たされた場合に「後期段階」又は「レスキュー」療法に切り替えられる場合がある。

【0405】

実施例８：ＣＯＶＩＤ－１９対象の「後期段階」又は「レスキュー」治療
「後期段階」又は「レスキュー」治療が指示された対象には、実施例５のｒＡＤＡＭＴＳ製剤が、４０ＩＵ／ｋｇ～１６０ＩＵ／ｋｇ（体重）のｒＡＤＡＭＴＳ１３活性を有する用量で、１日１回静脈内投与される。用量及び／又はタイミングを調整して、ベースライン内因性ＶＷＦレベル又は循環ＶＷＦ超大型多量体の不在のうちの少なくとも一方に対して対象を正規化できる。投薬量は性別によって異なる場合があり、女性は比較的高い、例えば約５～１０％高いＡ１３用量を投与される。

【0406】

「後期段階」又は「レスキュー」療法を受ける対象は、「後期段階」若しくは「レスキュー」療法の経過からの改善によって正当であるとされた場合、又は適切な選択基準が満たされた場合に、「初期段階」又は「維持」療法に切り替えられる場合がある。

【0407】

実施例９：ＣＯＶＩＤ－１９対象の体内でのＶＷＦ／ＡＤＡＭＴＳ１３の不均衡
肺及び全身の血管系に影響を及ぼす血栓症は、重症のＣＯＶＩＤ－１９では一般的であり、有害な転帰をもたらす。血栓症は血管細胞の炎症性活性化に起因する可能性が高いものの、血栓症の直接的な仲介因子は未確認である。重症のＣＯＶＩＤ－１９患者の交差コホートでは、フォン・ヴィレブランド因子（ＶＷＦ）レベルが顕著に増大すると共に、ＶＷＦ調節プロテアーゼＡＤＡＭＴＳ１３が部分的に減少した。このＶＷＦ／ＡＤＡＭＴＳ１３の不均衡は、全ての患者における、高い血栓形成性を有する循環性超高分子量（ＵＨＭＷ）ＶＷＦ多量体の持続性に関連しているようである。これらの結果は、重症のＣＯＶＩＤ－１９の病因にＶＷＦ／ＡＤＡＭＴＳ１３の調節不全が関連することを示しており、新たな治療標的を示唆する。重症のＣＯＶＩＤ－１９に罹患した患者からの血漿を、インビトロで組換えＡＤＡＭＴＳ１３（ｒＡＤＡＭＴＳ１３）で置換すると、ＶＷＦ活性を、時間依存的かつ濃度依存的に有意に減少させることができ、これは多量体のサイズの縮小、及びＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体の枯渇によって確認できる。これらのデータは、ｒＡＤＡＭＴＳ１３での置換によるＡＤＡＭＴＳ１３の血漿レベルの上昇により、ＣＯＶＩＤ－１９におけるＶＷＦとＡＤＡＭＴＳ１３とのバランスを回復させることができることを示している。

【0408】

この実施例では、重症のＣＯＶＩＤ－１９患者からの血漿を、ＡＤＡＭＴＳ１３によるＶＷＦの切断をシミュレートした条件（切断部位を露出させるための、例えば尿素による部分ＶＷＦ変性）下で、ｒＡＤＡＭＴＳ１３と共にインキュベートした。ＶＷＦ活性、ＶＷＦ多量体、及びＡＤＡＭＴＳ１３活性を、正常血漿対照、及び血栓性血小板減少性紫斑病（ＴＴＰ）患者の血漿と比較した。以下に記載されている結果は、ＶＷＦレベル、特にＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体の低減には、少量（μｌ）のＡＤＡＭＴＳ１３で十分であることを示している。血漿ＶＷＦレベルは、（例えばＶＷＦ：ＣＢとして測定した場合に）ＡＤＡＭＴＳ１３の濃度の上昇に比例して、かつ時間依存的に、低下する。

【0409】

方法
患者及び試料の収集。患者は、２つの病院（ｎ＝２４）又は（ｎ＝１２）のＣＯＶＩＤ－１９専用の集中治療室（ＩＣＵ）に７週間にわたって入院している１８歳以上の成人である場合に、適格とされ、重度の呼吸不全のために人工呼吸を受けていた。可能であれば、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染を、ＰＣＲ試験によって、又は以下に記載の特定の抗体試験を用いたセロコンバージョンの検出によって、確認した。

【0410】

血漿試料は、症例の臨床的特徴の知識なしに、ＣＯＶＩＤ－１９用ＩＣＵから標準治療の凝固試験のために提出された新たな血液試料のおよそ１／３を選択することにより、病理検査質のスタッフによって特定された。従って研究コホートは、人工呼吸及び重症ケア（ｈｉｇｈ ｄｅｐｅｎｄｅｎｃｙ ｃａｒｅ）を必要とするＣＯＶＩＤ－１９の可能性が高い患者の、他の方法では選択されていない交差コホートを表す。臨床データはＩＣＵの電子記録から遡って取得され、症例報告フォームに匿名化された形式で記録された。民族データは、２００１年の英国の国勢調査（ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ｏｎｓ．ｇｏｖ．ｕｋ／ｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｙ／ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎｓａｎｄｓｔａｎｄａｒｄｓ／ｍｅａｓｕｒｉｎｇｅｑｕａｌｉｔｙ／ｅｔｈｎｉｃｇｒｏｕｐｎａｔｉｏｎａｌｉｄｅｎｔｉｔｙａｎｄｒｅｌｉｇｉｏｎ）で使用されている標準化された項に従って分類した。急性呼吸窮迫症候群の存在は、ベルリン基準を用いて評価した。Force et al., JAMA 307 (23) (2012) 2526-2533を参照。追加の細菌性敗血症のエビデンスは、同時期の臨床症例記録、及び血液培養又は細菌性敗血症バイオマーカーの結果といった病理学的記録の検査によって、検出された。分析は、標準的なケアの診断試験を実施した後に残った、匿名化された予備の血漿に対して実施した。試料分析、及び臨床データへのリンクは、サービス評価プロジェクトとして登録され、英国ＮＨＳ健康研究機関のガイダンス（Ｎ．Ｈ．Ｒ．（ＮＨＳ Ｈｅａｌｔｈ Ｒｅｓｅａｒｃｈ）Ａｕｔｈｏｒｉｔｙ、ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ｈｒａ．ｎｈｓ．ｕｋ／；２０２０年９月７日にアクセス）に従って、ホスト組織により、研究倫理委員会の承認及び患者の同意から免除された。データ収集及び実験室分析は、ホスト機関でのサービス評価演習として登録され、これにより、研究倫理委員会の承認及び患者の同意が放棄されていることが確認された。

【0411】

ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の検出。ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ ＲＮＡは、Ｈｏｌｏｇｉｃ Ｐａｎｔｈｅｒ ＳｙｓｔｅｍでのＡｐｔｉｍａ ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２アッセイ（Ｈｏｌｏｇｉｃ社、米国マサチューセッツ州マールボロ）を用いたＰＣＲによって、鼻咽頭スワブから検出された。ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２セロコンバージョンは、近年報告された新規の血清学的アッセイ（Goshua et al.、上述）を用いて検出された。試験システムは、いずれも患者のセロコンバージョンを示すために必要な、５Ｕ／ｍＬを超える２つの独立したＥＬＩＳＡ抗体力価からなる。特定のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２患者の抗体は、固定化された組換えＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ ＲＢＤを用いて、ＴＥＣＨＮＯＺＹＭ ａｎｔｉ ＳＡＲＳ ＣｏＶ ２ ＲＢＤ ＩｇＧ ＥＬＩＳＡ（Ｔｅｃｈｎｏｃｌｏｎｅ、オーストリア、ウィーン）に、及び固定化された組換え核ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２タンパク質を用いて、ＴＥＣＨＮＯＺＹＭ ａｎｔｉ ＳＡＲＳ ＣｏＶ ２ ＮＰ ＩｇＧ ＥＬＩＳＡ（Ｔｅｃｈｎｏｃｌｏｎｅ）に、結合させる。いずれのＥＬＩＳＡでも、捕捉された患者の抗体は、抗ヒトＩｇＧ ＨＲＰ標識ポリクローナル抗体を用いて検出され、ＲＢＤに特異的なモノクローナル抗体（ＣＲ３０２２）に対して標準化されたＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２陽性血清を用いて定量化される。

【0412】

凝固タンパク質の分析。日常的な臨床ケアの一環として３．２％のクエン酸三ナトリウム中に収集された血液試料を、２４００ｇで１０分間遠心分離することにより、血漿アリコートを得た。試料は、－８０℃で、又は温度が監視されているドライアイス中で、バッチ分析まで保管された。プロトロンビン時間、活性化部分トロンボプラスチン時間、Ｃｌａｕｓｓフィブリノゲン、及びＤ二量体が、ＣＳ－２５００シリーズアナライザ（シスメックス株式会社、日本、神戸）とＳｉｅｍｅｎｓ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅの試薬（ドイツ、マールブルク）とを製造元の説明書に従って使用して、測定された。第ＶＩＩＩ因子活性は、Ｓｉｅｍｅｎｓ ＨｅａｌｔｈｃａｒｅのＡｃｔｉｎ ＦＳアクチベータ及びＦＶＩＩＩ欠乏血漿を用いた１ステージ活性アッセイを用いて決定された。

【0413】

血小板数。血小板数は、ＸＮシリーズアナライザ（シスメックス）を用いて、ＥＤＴＡ血液試料で測定された。ＡＢＯ血液型は、ＩＨ－１０００機器（Ｂｉｏ－Ｒａｄ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、英国、ワトフォード）を用いて、ＥＤＴＡ抗凝固処理済み血液試料から決定された。中心的な血液学的試験及び凝固試験は、Ｓｙｓｍｅｘ ＸＮ及びＣＳ－２５００アナライザ（シスメックス株式会社、日本、神戸）を用いて実施された。

【0414】

フォン・ヴィレブランド因子のアッセイ。ＶＷＦ：Ａｇは、患者の血漿の８つの異なる希釈物から、Ａｓｓｅｒａｃｈｒｏｍ ＶＷＦ：Ａｇ試験キット（Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃａ Ｓｔａｇｏ、フランス、アニエール＝シュル＝セーヌ）を用いて決定され、ヒトの正常な血漿をアッセイの参照標準として用いた。ＶＷＦリストセチン補因子活性（ＶＷＦ：ＲＣｏ）は、ＢＣＳ凝固システムアナライザ（Ｂｅｈｒｉｎｇ Ｃｏａｇｕｌａｔｉｏｎ Ｓｙｓｔｅｍ、ＢＣＳ、Ｓｉｅｍｅｎｓ、ドイツ）、及びＷＨＯ標準に対して較正された参照血漿を用いて測定された。ＶＷＦコラーゲン結合（ＶＷＦ：ＣＢＡ）は、ＴＥＣＨＮＯＺＹＭ ＶＷＦ：ＣＢＡ試験キット（Ｔｅｃｈｎｏｃｌｏｎｅ、オーストリア、ウィーン）を用いて、又はＺｙｍｕｔｅｓｔ試験キット（ＨＹＰＨＥＮ ＢｉｏＭｅｄ ＳＡＳ、フランス、ヌーヴィル＝シュル＝オワーズ）を用いて、ＷＨＯ標準を元とするアッセイキャリブレータを使用して決定された。

【0415】

ＡＤＡＭＴＳ１３のアッセイ。全てがＴｅｃｈｎｏｃｌｏｎｅ（オーストリア、ウィーン）から得られた３つの相補的なアッセイ、ＴＥＣＨＮＯＺＹＭ ＡＤＡＭＴＳ１３ Ａｃｔｉｖｉｔｙ ＥＬＩＳＡ、ＴＥＣＨＮＯＦＬＯＵＲ ＡＤＡＭＴＳ１３ Ａｃｔｉｖｉｔｙ、及びＴＥＣＨＮＯＺＹＭ ＡＤＡＭＴＳ１３ Ａｎｔｉｇｅｎを用いて、ＡＤＡＭＴＳ１３の活性を決定した（実施例１０を参照）。血漿ＡＤＡＭＴＳ１３活性は、ＥＬＩＳＡ法及びＦＲＥＴＳ法の両方を用いて決定された。ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質レベルはＥＬＩＳＡで決定された。ＶＷＦ及びＡＤＡＭＴＳ１３アッセイは、可能な限り国際保険機関の参照調製物に対して較正された、ヒト血漿参照を使用した。ＣＯＶＩＤ－１９患者試料は、急性期自己免疫ＴＴＰに罹患した４８歳の男性からの対照血漿試料（判明しているＡＤＡＭＴＳ１３レベル＜０．０１ＩＵ／ｍＬ）、及び高スピン正常プール血漿試料（０．９～１．０ＩＵ／ｍＬの正常なＡＤＡＭＴＳ１３；Ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ ＢｉｏＬｏｇｉｃ、カナダ、ノバスコシア州ダートマス）と共に、分析された。

【0416】

ＶＷＦ多量体。ＶＷＦ多量体組成物の分析は、半自動電気泳動ゲルと、ホームキャスト低解像度１％及び高解像度２．５％ＳＤＳアガロースゲルとの両方を用いて実施された。これらの相補的な電気泳動法は、電気泳動分析に共通する実験の偏りを低減するために選択された。後者の方法は、２０ＭＤａ以上にもなる最大分子サイズの多量体であっても分離するように最適化されており、正常ヒト参照血漿中に存在するものよりも大きな多量体の定量的測定を可能にした。

【0417】

多量体組成物。ＶＷＦ多量体組成物は、ホームキャスト低解像度ＳＤＳアガロース電気泳動ゲルで測定され、続いて過去に記述されている（Ｓｏｕｔｈ、上述）ように、市販のポリクローナル抗ＶＷＦ抗体による免疫検出が実施された。試料が格納された状態で保持されるアナライザベースの方法とは対照的に、電気泳動は開放された系である。よって、感染性を低減するために、試料を分析前に、トリス／ＥＤＴＡ／ＳＤＳ／アガロース中で６０℃で１時間にわたって熱不活化した。試料スロットへのピペッティング前に、患者の血漿をその抗原レベルに応じて希釈することにより、各レーンに、１ＩＵ ＶＷＦ：Ａｇ／ｍＬという同一濃度の試料が適用された。これにより、ゲルの変則的な染色を回避できるため、試料レーンの直接的な視覚的比較及び定量的濃度測定走査が可能となる。低分離状態及び高分離状態は、１％及び２．５％のＳｅａＫｅｍアガロース（Ｌｏｎｚａ、スイス、バーゼル）を使用した。多量体バンドを、抗ＶＷＦ抗体（ＤＡＫＯ、Ｇｌｏｓｔｒｕｐ、デンマーク）と、それに続くヤギ抗ウサギＡＬＰコンジュゲート（Ｊａｃｋｓｏｎ、米国ペンシルベニア州ウエストグローブ）とによる、ゲル内２段階免疫染色によって検出した。バンドを、ＡＰコンジュゲート基質キット（Ｂｉｏ Ｒａｄ、オーストリア、ウィーン）で可視化した。

【0418】

多量体の可視化。多量体パターンは、デンシトメトリー（ＧＳ－９００、ＢｉｏＲａｄ、米国カリフォルニア州）によって視覚的及び定量的に評価された。最も大きな多量体について、試料アプリケーションからの移動距離を測定し、相対移動度（Ｒ_ｆ）を算出した。ＶＷＦ二量体のＲ_ｆには、移動値１．０が割り当てられた。最も大きな多量体に類似した、各レーンの最も高い染色部分のＲ_ｆを算出して差し引いた（１－Ｒ_ｆ）。各ゲルに対照として適用された正常ヒト血漿の１－Ｒ_ｆ値が、参照として使用され、これは１００％、の多量体を含有するものとして定義された。各試料レーンで検出された、１－Ｒ_ｆとして測定されたＶＷＦ多量体の最大サイズは、各ゲルの正常ヒト血漿レーンと比較して定量化された。この方法により、異なる電気泳動の実行において異なるアガロースゲル上で分離された試料の定量的比較が可能となる。異なる電気泳動ゲルでの実行の間の比較を可能とするために、この値を、同じゲル上で分離された正常血漿試料に対する１－Ｒ_ｆ値のパーセンテージとして報告した（これ以降、ＵＨＭＷ多量体定量化パラメータと呼ぶ）。パーセンテージ値の増大は、試験試料中のＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体を示す。

【0419】

ホームキャストゲル電気泳動からの知見を、ＨＹＤＲＡＧＥＬ ｖｏｎ ＷＩＬＬＥＢＲＡＮＤ ＭＵＬＴＩＭＥＲＳキット、及びＨＹＤＲＡＳＹＳ ２ ＳＣＡＮ機器（Ｓｅｂｉａ、フランス、リス）を用いた半自動電気泳動ゲル法を用いて検証した。この方法は、高分子量のものから超大型のものまでの範囲のＶＷＦ多量体を、ホームキャスト１％アガロースゲルよりは不十分に分離するものであるが、ゲル間のより良好な再現性を示す。

【0420】

デンシトメトリー。調査対象の患者のうちの１人の試料が適用されたアガロースゲル上での多量体の定量的測定の図を、図６に示す（患者Ｂ４）。１ＩＵ／ｍＬ ＶＷＦ：Ａｇの濃度に調整された患者の血漿を、１％アガロースゲル上で分離した。免疫染色デンシトメトリーの後、最も大きな多量体の相対移動（Ｒ_ｆ）は０．１９２と算出され、これはデンシトグラムでの吸光度に従って定義されたものである（方法Ｓ８を参照）。分子量が最も小さい多量体（＝二量体）のＲ_ｆは、１．０と定義された。１－Ｒ_ｆは０．８０８（＝１．０００－０．１９２）と算出された。同じゲル上で分離された正常ヒト血漿参照の１－Ｒ_ｆは、０．７２９と算出された（グラフには示されていない）。試料Ｂ２４の相対多量体サイズは、１１１％（０．８０８／０．７２９＊１００＝１１１％）と算出された。図７は、急性ＴＴＰ対照、及び正常ヒト血漿プールと直接比較された、ＣＯＶＩＤ－１９患者のデンシトメトリー走査の別の例を示す。ＣＯＶＩＤ－１９患者Ｂ２４の試料、急性ＴＴＰ試料、及び正常ヒト血漿プールのデンシトメトリー走査のこのオーバーレイでは、ＣＯＶＩＤ－１９患者は、正常対照より大きいものの急性ＴＴＰの患者よりは小さな多量体を有する。

【0421】

視覚的確認。ＨＹＤＲＡＧＥＬ ｖｏｎ ＷＩＬＬＥＢＲＡＮＤ ＭＵＬＴＩＭＥＲＳキット（Ｓｅｂｉａ、フランス、リス）を用いて、ホームキャストアガロースゲルで得られた結果を確認した。ＨＹＤＲＡＳＹＳ ２機器を用いた、半自動電気泳動システムとこれに続く免疫固定とによって、ＶＷＦ多量体の全サイズ分布の視覚的評価が可能となる。分析は、製造元の説明書に従って実施された。この代替的なアガロースゲル電気泳動法は、高分子量のものから超大型のものまでの範囲のＶＷＦ多量体を、ホームキャスト１％アガロースゲルと同等の解像度で分離するものではないが、ゲル間のより良好な再現性を示すため、ホームキャストゲルを用いて得られた結果が検証される。図８Ａは、それぞれ１ＩＵ ＶＷＦ：Ａｇ／ｍＬに調整されたＣＯＶＩＤ－１９患者の血漿が分離され、急性ＴＴＰ及び正常対照と並行して多量体について染色された例を示す。９人のＣＯＶＩＤ－１９の患者の血漿試料を、半自動電気泳動によって分離した。各試料を１ＩＵ ＶＷＦ：Ａｇ／ｍＬに調整し、分離し、並行して多量体について染色した。急性ＴＴＰ血漿及び正常対照の試料は、同一のゲルに適用された。図８Ａの破線は、正常ヒト血漿対照の最大の染色可能部分を示す。

【0422】

ｒＡＤＡＭＴＳ１３。チャイニーズハムスター卵巣細胞株由来の精製済み組換えヒトＡＤＡＭＴＳ１３（ｒＡＤＡＭＴＳ１３、Ｔａｋｅｄａ、オーストリア、ウィーン）については、過去に記述されている。Plaimauer et al., Blood. 2002;100(10):3626-3632; Rottensteiner et al., J Thromb Haemost. 2019;17(12):2099-2109; Scully et al., Blood. 2017;130(19):2055-2063を参照。本研究で使用されるｒＡＤＡＭＴＳ１３製品は、遺伝性血栓性血小板減少性紫斑病の患者に関する臨床試験（ＣｌｉｎｉｃａｌＴｒｉａｌｓ．ｇｏｖ識別番号：ＮＣＴ０２２１６０８４）及び鎌状赤血球症の患者に関する臨床試験（ＣｌｉｎｉｃａｌＴｒｉａｌｓ．ｇｏｖ識別番号：ＮＣＴ０３９９７７６０）で使用されるものと同一の材料であった。

【0423】

ＶＷＦの切断の研究。ｒＡＤＡＭＴＳ１３によるＶＷＦの分解は、ＶＷＦが、切断モチーフをプロテアーゼにとってアクセス可能にするように部分的に変性する条件下で実施された。ｒＡＤＡＭＴＳ１３（Ｔａｋｅｄａ、オーストリア、ウィーン）を、１０～１００ＩＵ／ｍＬのＦＲＥＴＳ－ＶＷＦ７３活性（最終濃度０．５～１０ＩＵ／ｍＬ）まで予備希釈し、５ｍＭのトリス及び１．５Ｍの尿素の存在下で、ｐＨ８．０、３７℃で３０分間にわたり、ＢａＣｌ_２で活性化した。活性化されたｒＡＤＡＭＴＳ１３を、患者の血漿試料と１＋９で混合し、タンパク質分解の前に、更に３７℃で２～５時間インキュベートした。時点の数、及びｒＡＤＡＭＴＳ１３の濃度は、患者から得られる血漿の体積によって制限された。反応は、Ｎａ_２ＳＯ_４（最終濃度８．２５ｍＭ）の添加によって停止された。血漿の内因性ＡＤＡＭＴＳ１３の効果を測定するために、患者の試料をｒＡＤＡＭＴＳ１３の代わりに緩衝液で希釈して、ｒＡＤＡＭＴＳ１３の場合と同一の手順に従った。試料を２５００×ｇで５分間遠心分離し、上清中のＶＷＦを、ＶＷＦ：ＣＢアッセイを用いて、またＳｅｂｉａ Ｐｈｏｒｅｓｉｓ ｒｅｌ． ９．２．０ソフトウェアで実施される半自動電気泳動ゲルの定量的デンシトメトリーによって、分析することにより、デンシトメトリー曲線の下の面積から決定される、ＶＷＦの総量に対するＶＷＦ二量体レベルの相対的上昇を算出した。ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体は上述のようにホームキャストゲルから定量化された。

【0424】

統計的分析。記述統計及びピアソン相関分析を実施して、異なる複数の試験方法で測定されたＡＤＡＭＴＳ１３とＶＷＦレベルと間の相関（ｒ）を決定した。エクスビボＶＷＦ切断実験でｒＡＤＡＭＴＳ１３によるＶＷＦの分解の程度を調査するために、対応のあるｔ検定を用いて、ＶＷＦ：ＣＢアッセイデータ（１０個の試料）、及び半自動電気泳動ゲルからの相対ＶＷＦ二量体含有量（８個の試料）を、ベースライン時点と、１ＩＵ／ｍＬのｒＡＤＡＭＴＳ１３とのインキュベーションの５時間後とで比較した。全ての統計的分析は、Ｍｉｎｉｔａｂ ｖｅｒｓｉｏｎ １８．１を用いて実施された。

【0425】

結果
調査に登録された３６人の患者全員が、重症のＣＯＶＩＤ－１９の特徴である重度の呼吸不全に進行する、咳、息切れ、及び肺浸潤を伴う急速に進行する熱性疾患を示した。更に、３４人の患者がＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ ＰＣＲ試験で陽性であり、そのうち３０人が特異的なＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２抗体を示した。１人の患者はＰＣＲ試験で陰性であったが、感染と一致する高レベルのＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２抗体を示した。陽性検出試験は、ＰＣＲでの確認を実施できないうちに、急速に進行するＣＯＶＩＤ－１９によって死亡した１人の患者については、陽性検出試験は得られなかった。患者コホートは、中央値で１６日間をＩＣＵで過ごした後、退院して低依存病棟へと移るか死亡した。実験室分析用の血液試料は、ＩＣＵへの入院の、中央値で１０日後（範囲：０～５７日後）に収集された。２人を除く全ての患者は、血液試料採取時点で、予防又は治療用量の非経口抗凝固剤を投与されていた。注目すべきことに、全ての患者が、止血経路の深刻な活性化と一致する、血漿フィブリノゲン、Ｄ－二量体レベル、及び第ＶＩＩＩ因子活性の大幅な上昇を示していた。ＩＳＴＨ基準による播種性血管内凝固症候群の検査的特徴（laboratory feature）を有する患者はいなかった。Suzuki et al., J Thromb Haemost 2018 Jul;16(7):1442-1444を参照。研究用コホートの臨床的特徴及び重要な検査的特徴が表２で報告されている。臨床データは数（％）である。検査データは、健康な対照からの基準範囲と共に報告される中央値（範囲）である。ＩＣＵ＝集中治療室；ＬＭＷＨ＝低分子量ヘパリン；ＵＦＨ＝未分画ヘパリン；ＰＴ＝プロトロンビン時間；ＡＰＴＴ＝活性化部分トロンボプラスチン時間である。^ａはベルリンＡＲＤＳ基準に従って分類されている。Force et al., J Thromb Haemost. 2018 Jul;16(7):1442-1444を参照。^ｂは英国の献血者登録の予想頻度である。

【0426】

【表2】

【0427】

全てのＣＯＶＩＤ－１９患者が、健康な志願者の血漿試料に由来する実験室基準範囲の上限よりも高い、血漿ＶＷＦタンパク質レベル（ＶＷＦ：Ａｇ）を有していた。症例の１／３において、ＶＷＦレベルが平均正常レベルの５倍より高く、また２件の症例では１０倍より高かった（表３、及び図２Ａ）。これに対応して、ＶＷＦ：ＲＣｏアッセイ及びＶＷＦ：ＣＢアッセイの両方を用いて決定される血漿ＶＷＦ活性が劇的に上昇した。

【0428】

対照的に、いずれもＥＬＩＳＡアッセイ及びＦＲＥＴＳアッセイで決定された、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質（ＡＤＡＭＴＳ抗原）及び活性の両方のレベルは、ほとんどの患者において、平均正常レベルの３０～７０パーセントにまで低下した（表３、及び図２Ｂ）。平均正常レベルの２０パーセント未満のＡＤＡＭＴＳ１３活性レベルを示したＣＯＶＩＤ－１９患者はおらず、これにより、ＣＯＶＩＤ－１９患者は、いずれのアッセイでもＡＤＡＭＴＳ１３活性を検出できない自己免疫ＴＴＰ対照から区別される。

【0429】

表３は、３６人のＣＯＶＩＤ－１９患者の、ＶＷＦ及びＡＤＡＭＴＳ１３の検査パラメータを示す。統計の概要を、健康な志願者の試料の分析から得られた基準範囲と共に、中央値及び範囲として提示する。ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体定量化パラメータは、各試料レーンの全てのＶＷＦ多量体によって占められたＶＷＦ二量体の移動距離の比率であり、これは、同じゲルからの健康な対照の血漿のレーンにおけるもののパーセンテージ値として表現される。ＶＷＦ－フォン・ヴィレブランド因子；ＵＨＭＷ－超高分子量；ＡＤＡＭＴＳ１３－トロンボスポンジン１型モチーフを有するディスインテグリン及びメタロプロテアーゼ メンバー１３；ｎ．ａ．－該当なし。＊正常ヒト血漿試料は、処理により、検出可能なＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体を含まず、提供される範囲は通常のばらつきを考慮したものである。＊＊は基準範囲の平均である。

【0430】

【表3】

【0431】

活性抗原試験を用いて決定されたＶＷＦレベルは、ＡＤＡＭＴＳ１３レベルと負の相関を示した（表４、及び図１０Ａ～１０Ｄ）。表４は、推定される相関を、ｒ値及び関連するｐ値として示す。相関は、強（ｒ：０．７～１．０）、中程度（ｒ：０．５～０．７）、弱（ｒ：０．３～０．５）、又は相関なし（ｒ：０～０．３）として分類された。

【0432】

【表4】

【0433】

免疫染色された低解像度アガロースゲルの目視検査により、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体が、３６人のＣＯＶＩＤ－１９患者全員、及び自己免疫ＴＴＰの対照患者には存在するものの、対照であるプールされていたヒト参照血漿中には存在しないことが示された（図３）。これは、電気泳動ゲル上で、最も速く移動するＶＷＦバンド（ＶＷＦ二量体に対応）と最も遅く移動するバンド（存在する最大の多量体サイズ）との距離を測定することによって定量化される（図６、及び本明細書で開示されるＶＦＷ法）。ＣＯＶＩＤ－１９試料では、最高バンドと最低バンドとの間の距離は、追加のＵＨＭＷＭバンドにより、対照血漿のものの１０７～１２２パーセントとなった（図２Ａ）。ＣＯＶＩＤ－１９試料における最高の上昇は、自己免疫ＴＴＰの対照のものに近づいた（１２６パーセント）。例示的な症例Ｂ２６からのＵＨＭＷ多量体の定量化のための方法論も図６に示されている。ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体の存在は、ＡＤＡＭＴＳ１３レベルと相関しておらず（表４、及び図１０Ａ～１０Ｄ）、これは、ゲル電気泳動を用いたＵＨＭＷ ＶＷＦ形態の定量化が、個々の試料内ではロバストであるものの、異なる試料間の値の比較がゲルレーン間の染色強度の固有のばらつきによって制限されることを反映している。

【0434】

異常なＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体の発見は、ホームキャストゲルの定量的デンシトメトリー分析によって、及び独立した半自動電気泳動アッセイの目視検査によって、確認された（図８Ａ及び８Ｂ）。半自動システムは、比較的低分子量のＶＷＦ多量体の解像度を改善するものであり、後続のｒＡＤＡＭＴＳ１３インキュベーション実験においてＶＷＦ二量体を定量化するために使用された。この高解像度システムは、およそ２０ＭＤａの分子量を有するＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体の分離にはあまり好適でない。しかしながら、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体の定量化に好適でないものの、半自動ゲルは、全てのＣＯＶＩＤ－１９患者の試料でのＵＨＭＷ多量体の視覚的確認を可能とするには十分なものであった。ＣＯＶＩＤ－１９試料の半自動電気泳動と、対応するホームキャストゲルから決定された、定量化されたＵＨＭＷ多量体との代表例が、それぞれ図８Ａ及び８Ｂに示されている。

【0435】

患者の試料における、ＶＷＦに対する低いＡＤＡＭＴＳ１３レベルの回復の効果を調査するために、高いＶＷＦレベル及び極めて高いＶＷＦレベルを有する異なるＣＯＶＩＤ－１９患者からの１０個の血漿試料を、異なる複数の濃度のｒＡＤＡＭＴＳ１３と共にインキュベートし、ＶＷＦ活性及び多量体構造を経時的に監視した。図４Ａは、４．３６ＩＵ／ｍＬのＶＷＦ：Ａｇレベル、０．５９ＩＵ／ｍＬのＡＤＡＭＴＳ１３活性、及びＶＷＦ／ＡＤＡＭＴＳ１３比７．４を有する患者における、ＶＷＦ活性の時間依存的な低下を示す。内因性ＡＤＡＭＴＳ１３活性の存在により、外因性ｒＡＤＡＭＴＳ１３を補充しなくても、多少の分解は観察された。具体的には、２時間及び５時間の時点でＶＷＦ活性がわずかに低下し、これは内因性ＡＤＡＭＴＳ１３の存在と整合するものである。

【0436】

ＡＤＡＭＴＳ１３レベルを平均正常値（およそ１ＩＵ／ｍＬ＝１００％）まで増大させると、ＶＷＦ活性の更なる低下がもたらされ、これは約１５０％まで補充することで更に低下させることができた。血漿ＡＤＡＭＴＳ１３を平均正常レベルのおよそ１００％（１ＩＵ／ｍＬ）及び１５０％（１．５ＩＵ／ｍＬ）まで回復させると予想される０．５又は１ＩＵ／ｍＬのｒＡＤＡＭＴＳ１３の補充後、ＶＷＦ活性の低下が用量依存的かつ時間依存的に加速された（図４Ａ）。

【0437】

１ＩＵ／ｍＬのｒＡＤＡＭＴＳ１３を用いた５時間のインキュベーションの後、試験された１０人の患者全員からの試料のＶＷＦ：ＣＢの平均値は、３．０１（ＳＤ：１．３７；ＳＥＭ：０．４３４）ＩＵ／ｍＬから１．６４（ＳＤ：０．８９；ＳＥＭ０．２８）ＩＵ／ｍＬへと低下した（ｐ＜０．００１；ｔ値７．１８；図４Ｂ及び４Ｃ、並びに表５）。これらのデータの個別のグラフを、１０人の患者それぞれに対して生成し（図１１Ａ～１１Ｊ）、また、定量的多量体分析を８人の患者のサブセットに対して実施した（図１２Ａ～１２Ｂ）。

【0438】

１ＩＵ／ｍＬのｒＡＤＡＭＴＳ１３を用いたインキュベーションの後に観察されたＶＷＦ活性の低下は、表５に例示されているように、デンシトメトリーによって測定されたＶＷＦ二量体の統計的に有意な増大（Ｐ＜０．００１；ｔ値－７．０４）を伴っていた。ｎ．ｄ．は測定なし（ｎｏｔ ｄｏｎｅ）を表し、ｎ．ａ．は該当なし（ｎｏｔ ａｐｐｌｉｃａｂｌｅ）を表す。

【0439】

【表5】

【0440】

ＡＤＡＭＴＳ１３を補充して更に高いレベルとすることの効果を、ＶＷＦ／ＡＤＡＭＴＳ１３のミスマッチがより大きい患者（ＶＷＦ：Ａｇ ５．７６ＩＵ／ｍＬ；ＡＤＡＭＴＳ１３ ０．４３ＩＵ／ｍＬ；比率１３．４）からの血漿を用いて試験した。これらの実験からの結果が、図５Ａ～５Ｃ及び図９Ａ～９Ｂに示されている。１０ＩＵ／ｍＬのｒＡＤＡＭＴＳ１３を用いたインキュベーションは、ＶＷＦ活性の経時的な漸減をもたらし、５時間の時点で６０％を超える低下（図５Ａ）、及び半自動電気泳動法を用いて可視化される異常なＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体全ての消失（図５Ｂ）を達成する。１ＩＵ／ｍＬのｒＡＤＡＭＴＳ１３の効果は、２時間以内にＶＷＦ活性の低下及びＵＨＭＷ ＶＷＦの目視での枯渇、そして５時間以内にＶＦＷ活性の約３０％の低下を引き起こすために十分なものであった。ＵＨＭＷ ＶＷＦの消失は、低分子量多量体及び二量体の顕著な増加を伴い、またサテライトバンドのより顕著な出現も伴っていた（図５Ｃ）。これらの知見はホームキャストゲルの場合にも存在し、これは、１２４％という上昇したＵＨＭＷ多量体の定量化パラメータが、１ＩＵ／ｍＬのｒＡＤＡＭＴＳ１３を用いたインキュベーションの５時間後に１６％、１０ＩＵ／ｍＬのｒＡＤＡＭＴＳ１３の場合に３６％だけ、対照血漿で観察されるもの（８８％）よりも低いレベルまで低下することを示した。ＶＷＦをｒＡＤＡＭＴＳ１３に曝露すると、サイズがより小さな多量体がより多量に出現し、これはＶＷＦのタンパク質分解性切断の指標である染色可能なサテライトバンドの増大を伴っていた。ある関連する実験では、５．７６ＩＵ／ｍＬのＶＷＦ：Ａｇを含む患者の血漿を、１及び１０ＩＵ／ｍＬのｒＡＤＡＭＴＳ１３と共にインキュベートし、低解像度（図９Ａ）及び高解像度（図９Ｂ）の２つの異なる電気泳動ゲルで、ＶＷＦ多量体分布について分析した。対照は、正常ヒト血漿、いかなる試薬も添加されていない患者の血漿、及び同一条件下であるもののｒＡＤＡＭＴＳ１３が添加されていない患者の血漿であった。ＶＷＦをｒＡＤＡＭＴＳ１３に曝露する時間が長くなると、タンパク質分解断片の増加の出現、及び分子量がより低い形態のＶＷＦのより強い染色によって可視化される、ＶＷＦのより顕著なタンパク質分解がもたらされる（図９Ｂ）。

【0441】

この探索的研究では、ＶＷＦ／ＡＤＡＭＴＳ１３軸が、重症のＣＯＶＩＤ－１９を理由とする人工呼吸のために２つの病院に入院している成人において評価された。選択基準により、初期重症ＣＯＶＩＤ－１９の患者、及び長期の人工呼吸を必要とする確立された疾患の患者の交差コホートの登録が可能であった。コホートは、複数の併存疾患を有する年配の男性を多く含み、黒人及び少数民族群の患者、並びに非Ｏ型血液型の患者が大きな比率を占めていた。これらの特徴、及び有害な転帰の頻度は、既に報告されている重症のＣＯＶＩＤ－１９のコホートと同様のものである。Docherty et al. BMJ 2020;369:m1985; Petrilli CM et al. BMJ 2020;369:m1966を参照。この臨床的に異質なコホートにおける驚くべき発見は、ＶＷＦの循環レベルが全ての患者で有意に上昇し、場合によっては正常レベルの１０倍も高くなったことであった。本開示によると、この重症ＣＯＶＩＤ－１９コホートにおけるＶＷＦの調節不全の程度は、過去に報告されたどの炎症性疾患よりも大きい。これは、重症のＣＯＶＩＤ－１９患者における他の観察と整合しており、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染後の内皮炎症によって、ＶＷＦの顆粒状貯蔵物、特にＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体が、調節不全によって循環へと放出されるという仮説を裏付ける。Goshua, 上述；Morici, 上述；Escher, 上述；Varga, 上述；Bernardo et al., Blood 2004; 104:100-6を参照。

【0442】

重症のＣＯＶＩＤ－１９のほとんどの患者は、ＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質の循環レベル、及びＡＤＡＭＴＳ１３タンパク質分解活性も、正常レベルの３０～７０％に低下し、これにより異常なＶＷＦ／ＡＤＡＭＴＳ１３比率がもたらされていた。これらのデータは、ＡＤＡＭＴＳ１３活性の低下又はＶＷＦ／ＡＤＡＭＴＳ１３比率の顕著な上昇というＣＯＶＩＤ－１９の一連の症例からの観察と一致している。Morici, 上述；Blasi 上述；Martinelli, 上述を参照。しかしながら、他の患者のコホートでは、ＣＯＶＩＤ－１９ではＡＤＡＭＴＳ１３レベルの有意な低下は観察されないものの、全ての研究は、対照群のいずれにおけるものよりもＣＯＶＩＤ－１９において有意に高いＶＷＦ／ＡＤＡＭＴＳ１３比率を共有していた。Escher 192:174, 上述；Doevelaar AAN et al. medRxiv 2020を参照。しかしながら、包括的な止血試験を入院期間にわたってＣＯＶＩＤ－１９患者に縦断的に実施した、更に小規模な症例シリーズでは、ＡＤＡＭＴＳ１３の減少は一貫性のない所見であった。M. Hardy, et al., Thromb. Res. 197 (2020) 20-23を参照。３つの独立した研究で、低いADAMTS13 血漿レベルによってCOVID－１９患者の死亡率が予測されたことは、注目に値する。Tiscia et al., TH Open 4 (3) (2020) e203-e206; Bazzan et al., Internal and Emergency Med. 15 (5) (2020) 861-863; Sweeney, et al., Evidence for Secondary Thrombotic Microangiopathy in COVID-19, MedRxiv, 2020を参照。

【0443】

ＡＤＡＭＴＳ１３レベルの低下の考えられる説明の１つは、多量体の切断をもたらさない低親和性相互作用による、高レベルの循環高分子量ＶＷＦ多量体によるＡＤＡＭＴＳ１３の隔離であり（Feys et. al., J Thromb Haemost 2009; 7:2088-95を参照）、これはデスモプレシン治療後の突然のＶＷＦの放出に続くＡＤＡＭＴＳ１３の一時的減少と同様である。Reiter RA et al., Blood 2003; 101:946-8を参照。培養されたヒト細胞株からの正常ＡＤＡＭＴＳ１３の合成は、ＩＦＮ－γ、ＩＬ－４、及びＴＮＦ－α等の炎症性サイトカインによって阻害される。Cao WJ et al., J Thromb Haemost 2008; 6:1233-5を参照。炎症性サイトカインはまた、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体のＡＤＡＭＴＳ１３仲介型切断も阻害できる。Bernardo, 上述を参照。これは、重症のＣＯＶＩＤ－１９に付随するサイトカインストーム中に、ＡＤＡＭＴＳ１３の合成の減少及びＡＤＡＭＴＳ１３の機能の阻害の両方が生じ得る可能性を上昇させる。

【0444】

これらのデータは、全てのＣＯＶＩＤ－１９患者において、ＶＷＦ及びＡＤＡＭＴＳ１３の血漿レベルの相互的な変化が、健康な対照には全く存在しない異常な循環ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体を伴っていたことも示す。循環ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体は外傷、敗血症関連の播種性血管内凝固症候群、重症のマラリアで、及び健康な志願者へのエンドトキシン注入後に、観察されており（Dyer et al., Transfusion. 2020 Jun;60(6):1308-131; Kremer et al., J Thromb Haemost 2007; 5:2284-90; Larkin et al., PLoS Pathog 2009;5: e1000349; Reiter RA et al., Thromb Haemost 2005; 93:554-8を参照）、これは、ＡＤＡＭＴＳ１３と比較して基質ＶＷＦが過剰であることにより、ＶＷＦの切断が不完全になった結果である可能性が最も高い。特に、本開示の患者のおよそ半数が、特に血管内に局在化された細菌感染のエビデンスを有していたが、播種性血管内凝固症候群（ＤＩＣ）、又は過去に認識されているＶＷＦ／ＡＤＡＭＴＳ１３ミスマッチの他のいずれの原因を示した患者はいなかった。ミスマッチの程度も他の炎症状況において報告されているものよりもはるかに高く、その結果、血栓形成性ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体のレベルが高くなった。

【0445】

本研究は、全ての患者でＡＤＡＭＴＳ１３が減少し、一部の患者では参照レベルの２０％までレベルが低下したことを示した。従ってこの研究結果は、ＣＯＶＩＤ－１９が、これに関連するＡＤＡＭＴＳ１３の減少を実際に伴うという仮説を裏付ける。基質としての極めて高いＶＷＦがその酵素を消費する可能性があるため、これが一次欠乏であるか二次欠乏であるかについては未解決のままである。しかしながら、極めて高いＶＷＦと比較的低いＡＤＡＭＴＳ１３との間には、相関は観察されなかった。

【0446】

これらの観察は、ＣＯＶＩＤ－１９に続く凝固障害が、強力な炎症反応によって引き起こされ、これによって、凝固及び線維素溶解経路、並びに血小板－内皮相互作用を含む、多数の止血の構成要素の調節障害が発生するという、最近提案された仮説を、そのまま裏付けるものである。Morici, 上述；Fogarty et al. Br J Haematol 2020; 89:1060-1を参照。同様に、本明細書で開示される知見は、血栓症の病因における、ＶＷＦの顆粒状貯蔵物の異常な放出、及び調節不全によるＶＷＦのタンパク質分解を、具体的に暗示している。Varga, Lancet 395 (10234) (2020) 1417-1418; Bernardo et al. 上述；R. Escher 190:62, 上述；Goshua, 上述；Morici, 上述を参照。

【0447】

本発明における調査は、ＶＷＦ／ＡＤＡＭＴＳ１３ミスマッチの結果が、ＣＯＶＩＤ－１９血漿試料中のＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体の存在であることを直接可視化した、初めてのものである。一部のＣＯＶＩＤ－１９患者のＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体レベルは、急性ＴＴＰ対照のものに近づいていた。しかしながら、微小血管閉塞はＣＯＶＩＤ－１９及び急性ＴＴＰの両方の特徴であるとはいえ、ＣＯＶＩＤ－１９の凝固障害は、重度の血小板減少症、循環赤血球分裂赤血球、及びＡＤＡＭＴＳ１３レベルの深刻な低下といったＴＴＰの特徴が存在しないため、明確である。従って本開示の知見は、ＶＷＦ調節不全がＣＯＶＩＤ－１９の凝固障害の重要な要素である一方で、他の止血経路の機能不全も寄与しているモデルに、最もよく適合する。T. Iba et al., Inflamm Res 69 (12) (2020) 1181-1189を参照。

【0448】

観察は、調節不全のＶＷＦ／ＡＤＡＭＴＳ１３から生じる循環ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体が、重症のＣＯＶＩＤ－１９における臨床知見の一部を説明する、この凝固障害の重要な要素である可能性が高いことを示唆している。抗凝固療法は、ＣＯＶＩＤ－１９入院患者の死亡率及び挿管率の低下と関連してはいたものの、凝固経路を標的とするヘパリン等の抗血栓薬は、重症ＣＯＶＩＤ－１９における血栓症の予防効果が、他の炎症性疾患におけるものよりも低い可能性があることは重要である。Nadkarni GN, et al., J Am Coll Cardiol. 2020年８月２６日電子公開、DOI:10.1016/j.jacc.2020.08.041; Cattaneo M, Bertinato EM, Birocchi S, et al. Pulmonary Embolism or Pulmonary Thrombosis in COVID-19? Is the Recommendation to Use High-Dose Heparin for Thromboprophylaxis Justified? Thromb Haemost 2020を参照。

【0449】

ｒＡＤＡＭＴＳ１３と重症ＣＯＶＩＤ－１９血漿とのインビトロでのインキュベーションによって得られた研究結果は、ＡＤＡＭＴＳ１３のレベルの上昇によってＶＷＦ活性が低下し、極めて重要なことに、タンパク質分解的にＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体が分解されることを、明確に示している。ＵＨＭＷ ＶＷＦは、ＴＴＰと同様にＣＯＶＩＤ－１９患者で観察される血小板血栓の形成を引き起こす、ＶＷＦの最も粘着性のある形態であると考えられている。Albiol N et al., Ann Hematol. 2020;99(7):1673-1674; Capecchi M et al., Haematologica 105(10) 2020; haematol.2020.262345; Doevelaar AAN, 上述を参照。ＶＷＦ－ＡＤＡＭＴＳ１３軸は、ＡＤＡＭＴＳ１３の置換等の介入に容易に対応する。Scully M et al., Blood 2017; 130:2055-63を参照。これは、凝固経路と並ぶ追加の治療標的とみなすべきものである。複数のインビトロ研究、動物モデル、及び臨床研究は、ヒトＶＷＦを切断してＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体を分解し、これによってＴＴＰ及び類似の病状に見られる調節不全のタンパク質パターンを回復させる、ｒＡＤＡＭＴＳの有効性を実証している。Plaimauer B et al., J Thromb Haemost. 2011;9(5):936-944; Crescente M et al., Thromb Haemost. 2012;108(3):527-532; Kopic A et al., J Thromb Haemost. 2016; 14(7):1410-1419を参照。

【0450】

ＣＯＶＩＤ－１９患者における従来の抗凝固療法は、肺及び他の臓器の細動脈における微小血栓症の理想的な治療である可能性は低い。この実施例のデータは、ＣＯＶＩＤ－１９患者におけるｒＡＤＡＭＴＳの有用性を実証している。というのは、ｒＡＤＡＭＴＳ１３治療は、ＡＤＡＭＴＳ１３活性の上昇によってＶＷＦとＡＤＡＭＴＳ１３との間のバランスを回復させ、これにより上方制御されたＶＷＦ活性を低下させることを、より明確に目的としているためである。

【0451】

本明細書で開示される知見は、ＣＯＶＩＤ－１９の患者の管理に重要である。というのは、ＶＷＦ－ＡＤＡＭＴＳ１３軸は治療上アクセス可能な標的であるためである。この実施例のデータは、ｒＡＤＡＭＴＳ１３と患者試料とのインキュベーションによって、ＶＷＦとＡＤＡＭＴＳ１３との間のミスマッチが最も深刻な試料においてさえも時間依存的かつ濃度依存的なＶＷＦ活性の低下がもたらされることを示すことにより、ＡＤＡＭＴＳ１３置換の有用性の初期段階のエビデンスを実証している。更に、異常に高いＶＷＦ活性のこのような相関は、ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体の消失と、エクスビボでのタンパク質分解を示す更に強力なサテライトバンドを伴う低分子量多量体の時間依存的な増加とを伴うことが示されている。ＡＤＡＭＴＳ１３置換のこのような薬力学的効果は、重度の先天性ＴＴＰを原因とするＶＷＦ／ＡＤＡＭＴＳ１３ミスマッチを有する患者、及び自己免疫ＴＴＰの患者からの血漿試料を含む、ｒＡＤＡＭＴＳ１３が初期段階の臨床試験で評価された他の凝固障害で観察されたものと同様である。Scully et al., Blood 130 (19) (2017) 2055-2063; Plaimauer et al., J. Thromb. Haemost. 9 (5) (2011) 936-944を参照。ｒＡＤＡＭＴＳ１３は、フローチャンバモデル、及びＶＷＦ／ＡＤＡＭＴＳ１３ミスマッチの小動物モデルにおいても、血栓の溶解をもたらす。Haemost et al., 上述； Shenkman, et. al, Thromb Haemost 96 (2) (2006) 160-166; Crescente et al., Thromb. Haemost. 108 (3) (2012) 527-532を参照。本研究では、ＣＯＶＩＤ－１９血漿試料のエクスビボタンパク質分解活性が、ＡＤＡＭＴＳ１３レベルを１．０～１．５ＩＵ／ｍＬに補正した後でも観察された。上記レベルは、４０ＩＵ／ｋｇのｒＡＤＡＭＴＳ１３（これは忍容性が高く、重大な有害事象とは関連しない）の注入後の第１相先天性ＴＴＰの研究で達成される範囲内である。Scully, 上述を参照。しかしながら、静的モデルで異常なＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体を切断するために必要なＡＤＡＭＴＳ１３活性が、流動状態より低い可能性があることも、注目に値する。Dong, J. Whitelock, A. Bernardo et al., 上述を参照。

【0452】

本出願における観察は、調節不全のＶＷＦ／ＡＤＡＭＴＳ１３から生じる循環ＵＨＭＷ ＶＷＦ多量体が、重症のＣＯＶＩＤ－１９における臨床知見の一部を説明する、この凝固障害の重要な要素である可能性が高いことを示唆している。抗凝固療法は、ＣＯＶＩＤ－１９入院患者の死亡率の低下と関連してはいたものの、凝固経路を標的とするヘパリン等の抗血栓薬は、重症ＣＯＶＩＤ－１９における血栓症の予防効果が、他の炎症性疾患におけるものよりも低い可能性があることは重要である。G.N. Nadkarni et al., J Am Coll Cardiol 76 (16) (2020) 1815-1826; M. Cattaneo et al., Thromb. Haemost. 120 (8) (2020) 1230-1232を参照。この実施例で実証されたＶＷＦ－ＡＤＡＭＴＳ１３軸の劇的な異常は、これに対して考えられる説明を提供する。ＡＤＡＭＴＳ１３置換がＣＯＶＩＤ－１９血漿試料のＶＷＦホメオスタシスを回復されるという実証は、精製済みｒＡＤＡＭＴＳ１３を、他の抗血栓療法と並んでＣＯＶＩＤ－１９凝固障害に対して考えられる治療介入とみなすべきであることを示唆する。

【0453】

実施例１０－ＶＷＦ、ＡＤＡＭＴＳ１３、及び他のアッセイ
以下の材料及び方法を、実施例９と関連して使用した。

【0454】

ＶＷＦ抗原（ＶＷＦ：Ａｇ）の決定。ＶＷＦ：Ａｇは、Ａｓｓｅｒａｃｈｒｏｍ ＶＷＦ：Ａｇ試験キット（Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃａ Ｓｔａｇｏ、フランス、アニエール＝シュル＝セーヌ）を用いて決定された。患者の血漿を、８つの異なる希釈率で試験した。ＶＷＦを、マイクロプレートウェルの内壁上にコーティングされたウサギ抗ヒトＦ（ａｂ’）２断片によって捕捉した。洗浄ステップの後、結合したＶＷＦを、ペルオキシダーゼと結合したポリクローナル抗ヒトＶＷＦ抗体を添加することによって検出した。ペルオキシダーゼ活性を、テトラメチルベンジジン（ｔｅｔｒａｍｅｔｈｙｌ－ｂｅｎｚｉｄｉｎｅ：ＴＭＢ）を基質として使用して検出した。マイクロプレートリーダーを用いて、４５０ｎｍで吸光度を読み取った。ＶＷＦ：Ａｇを、アッセイ参照標準（ヒト正常血漿）に対して算出した。

【0455】

ＶＷＦリストセチン補因子活性（ＶＷＦ：ＲＣｏ）の決定。ＶＷＦ：ＲＣｏ活性は、ＢＣＳ凝固システムアナライザ（Ｂｅｈｒｉｎｇ Ｃｏａｇｕｌａｔｉｏｎ Ｓｙｓｔｅｍ、ＢＣＳ、Ｓｉｅｍｅｎｓ、ドイツ）を用いて測定された。患者の血漿のＶＷＦは、リストセチンの存在下で、安定化された血小板の凝集を引き起こす。これらはいずれも「フォン・ヴィレブランド試薬」（Ｂｅｈｒｉｎｇ Ｃｏａｇｕｌａｔｉｏｎ Ｓｙｓｔｅｍ、ＢＣＳ、Ｓｉｅｍｅｎｓ、ドイツ）に含まれている。この凝集により、試薬調製物の濁度が低下し、光学密度の変化が機器によって測定される。ＶＷＦ：ＲＣｏ活性を、ＷＨＯ基準に対して較正された、様々な希釈率の参照血漿によって構築された参照曲線から算出した。

【0456】

ＶＷＦコラーゲン結合（ＶＷＦ：ＣＢＡ）の決定。ＶＷＦ：ＣＢＡは、ＴＥＣＨＮＯＣＨＲＯＭ ＶＷＦ：ＣＢＡ試験キット（Ｔｅｃｈｎｏｃｌｏｎｅ、オーストリア、ウィーン）を用いて決定された。患者の血漿を複数の希釈率で試験した。ＶＷＦは、マイクロプレートウェルの内壁上にコーティングされたヒトＩＩＩ型コラーゲンに結合する。洗浄ステップの後、結合したＶＷＦを、ペルオキシダーゼと結合したポリクローナル抗ヒトＶＷＦ抗体を添加することによって検出した。ペルオキシダーゼ活性を、テトラメチルベンジジン（ＴＭＢ）を基質として使用して検出した。マイクロプレートリーダーを用いて、４５０ｎｍで吸光度を読み取った。あるいはＶＷＦ：ＣＢＡは、Ｚｙｍｕｔｅｓｔ試験キット（ＨＹＰＨＥＮ ＢｉｏＭｅｄ ＳＡＳ、フランス、ヌーヴィル＝シュル＝オワーズ）で決定された。ＶＷＦ：ＣＢＡを、ＷＨＯ標準を元とするアッセイキャリブレータを使用して算出した。

【0457】

ＡＤＡＭＴＳ１３のアッセイ。全てがＴｅｃｈｎｏｃｌｏｎｅ（オーストリア、ウィーン）から得られた３つの相補的なアッセイを用いて、ＡＤＡＭＴＳ１３の活性を決定した。
ＴＥＣＨＮＯＺＹＭ ＡＤＡＭＴＳ１３ Ａｃｔｉｖｉｔｙ ＥＬＩＳＡは、ＡＤＡＭＴＳ１３によって切断されるＧＳＴ－ＶＷＦ７３を用いた、発色アッセイである。切断されたエピトープを認識する、ＨＲＰ標識された特異的モノクローナル抗体は、切断されたペプチドに結合する。Kato S, Matsumoto M, Matsuyama T, Isonishi A, Hiura H, Fujimura Y. Novel monoclonal antibody-based enzyme immunoassay for determining plasma levels of ADAMTS13 activity. Transfusion 2006; 46:1444-52; Kokame K, Matsumoto M, Fujimura Y, Miyata T. VWF73, a region from D1596 to R1668 of von Willebrand factor, provides a minimal substrate for ADAMTS13. Blood 2004; 103:607-12を参照。ＴＥＣＨＮＯＦＬＯＵＲ ＡＤＡＭＴＳ１３ Ａｃｔｉｖｉｔｙは、Ｃｅｖｅｒｏｎ ｓ１００機器用の自動アッセイである。ＶＷＦ７３ペプチドをベースとしたＦＲＥＴ基質は、試料由来のＡＤＡＭＴＳ１３によって切断され、これによって蛍光シグナルが生じる。放出されるシグナルは、試料のＡＤＡＭＴＳ１３活性レベルに比例する。Ee, Kokame K, Nobe Y, Kokubo Y, Okayama A, Miyata T. FRETS-VWF73, a first fluorogenic substrate for ADAMTS13 assay. Br J Haematol 2005; 129:93-100を参照。ＴＥＣＨＮＯＺＹＭ ＡＤＡＭＴＳ１３ Ａｎｔｉｇｅｎ ＥＬＩＳＡは、ＣＵＢドメインに対する抗ＡＤＡＭＴＳ１３抗原と、ＨＲＰ標識抗ＡＤＡＭＴＳ１３ポリクローナル抗体とを使用する、サンドイッチＥＬＩＳＡである。Rieger M, Ferrari S, Kremer Hovinga JA, et al. Relation between ADAMTS13 activity and ADAMTS13 antigen levels in healthy donors and patients with thrombotic microangiopathies (TMA). Thromb Haemost 2006; 95:212-20を参照。全てのＡＤＡＭＴＳ１３パラメータは、ＷＨＯ標準に対して較正されたアッセイ専用の参照血漿を用いて算出された。表３に示されているような、これらのアッセイに関する正常基準範囲は、健康な血液ドナーからの１００個を超えるのＣＯＶＩＤ前試料を試験することによって確立された。

【0458】

ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ ＰＣＲとＥＬＩＳＡとの間の不一致。研究に含まれていた３６人の患者のうち６人の患者は、鼻咽頭スワブから陽性のＰＣＲで陽性が確認されなかった。ＲＴ－ＰＣＲの様々な実施方法の中で、咽頭又は鼻スワブは、特異性が極めて高いにもかかわらず、中程度の感度しか示さないことが示されている。最も正確なＲＴ－ＰＣＲ診断には、気管支肺胞洗浄が好適であるものの、全ての患者に対して実施するのは非現実的である。従って、ＳＡＲＳ－Ｃｏｖ－２ ＲＮＡについて陰性の１人の患者は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ ＮＰ又はＲＢＤタンパク質に対する高力価の抗体を示し、これが患者のＣＯＶＩＤ－１９診断を明確に裏付けた。ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ ＰＣＲ陰性かつ抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ ＩｇＧ陰性である残りの５人の患者は、依然としてＣＯＶＩＤ－１９患者である可能性があった。最初の感染からＩｇＧ仲介型免疫応答の発生までの時間は、患者毎に異なる可能性があり、患者の一般的な体質、更には患者の治療計画に左右される。免疫学的アッセイとＲＴ－ＰＣＲとの正の一致は、感染の報告から５日以内の患者における６～１５％から、最初の感染後５～１０日の患者において３４～４６％、１５日超の患者において１００％まで、様々であった。

【0459】

略語
ＡＤＡＭＴＳ１３ トロンボスポンジン１型モチーフを有するディスインテグリン及びメタロプロテアーゼ メンバー１３
ＣＯＶＩＤ－１９ コロナウイルス疾患２０１９
ＥＬＩＳＡ 酵素結合免疫吸着測定法
ＦＲＥＴＳ 蛍光共鳴エネルギー移動
ＰＣＲ ポリメラーゼ連鎖反応
ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ 重症急性呼吸器症候群コロナウイルス２
ＴＴＰ 血栓性血小板減少性紫斑病
ＵＨＭＷ 超高分子量
ＶＷＦ フォン・ヴィレブランド因子
ＶＷＦ：Ａｇ フォン・ヴィレブランド因子抗原
ＶＷＦ：ＣＢ フォン・ヴィレブランド因子コラーゲン結合活性
ＶＷＦ：ＲＣｏ フォン・ヴィレブランド因子リストセチン補因子活性
ＡＤＡＭＴＳ１３：Ａｇ ＡＤＡＭＴＳ１３抗原
ＡＤＡＭＴＳ１３：ＥＬＩＳＡ ＥＬＩＳＡで測定されたＡＤＡＭＴＳ１３活性
ＡＤＡＭＴＳ１３：ＦＲＥＴＳ ＦＲＥＴＳで測定されたＡＤＡＭＴＳ１３活性

【0460】

本発明は、本明細書に記載されている具体的実施形態によって、その範囲を限定されないものとする。実際には、本明細書に記載されているものに加えて、本発明の様々な修正形態も、以上の説明及び添付の図面から、当業者には明らかであろう。このような修正形態は、添付の特許請求の範囲内となることが意図されている。更に、全ての値はおおよそのものであり、説明のために提供されているものであることを理解されたい。

【0461】

本出願全体を通して、特許、特許出願、刊行物、製品の説明、及びプロトコルが引用されているが、これらの開示はあらゆる目的のために、参照によりその全体が本出願に援用される。

【図1A】

【図1B】

【図1C】

【図2A】

【図2B】

【図3】

【図4A】

【図4B】

【図4C】

【図5A】

【図5B】

【図5C】

【図6】

【図7】

【図8A】

【図8B】

【図9A】

【図9B】

【図10A】

【図10B】

【図10C】

【図10D】

【図11A】

【図11C】

【図11D】

【図11E】

【図11F】

【図11G】

【図11H】

【図11I】

【図11J】

【図12A】

【図12B】

【図12C】

【図13A】

【図13B】

【図13C】

【配列表】

2023526546000001.app

【国際調査報告】