▶ メルク パテント ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツングの特許一覧
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2023-12-08
(54)【発明の名称】がん処置のためのキナーゼインヒビター組み合わせ
(51)【国際特許分類】
A61K 31/517 20060101AFI20231201BHJP
A61K 45/00 20060101ALI20231201BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20231201BHJP
A61K 31/44 20060101ALI20231201BHJP
A61K 39/395 20060101ALI20231201BHJP
A61P 35/00 20060101ALI20231201BHJP
【ＦＩ】
A61K31/517
A61K45/00
A61P43/00 121
A61K31/44
A61K39/395 N
A61P35/00
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2023529009
(86)(22)【出願日】2021-11-15
(85)【翻訳文提出日】2023-07-14
(86)【国際出願番号】 EP2021081612
(87)【国際公開番号】W WO2022101459
(87)【国際公開日】2022-05-19
(31)【優先権主張番号】63/114,144
(32)【優先日】2020-11-16
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(31)【優先権主張番号】63/162,649
(32)【優先日】2021-03-18
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(81)【指定国・地域】
【公序良俗違反の表示】
（特許庁注：以下のものは登録商標）
１．ＴＷＥＥＮ
(71)【出願人】
【識別番号】591032596
【氏名又は名称】メルク パテント ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング
【氏名又は名称原語表記】Ｍｅｒｃｋ Ｐａｔｅｎｔ Ｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ ｍｉｔ ｂｅｓｃｈｒａｅｎｋｔｅｒ Ｈａｆｔｕｎｇ
【住所又は居所原語表記】Ｆｒａｎｋｆｕｒｔｅｒ Ｓｔｒ． ２５０，Ｄ－６４２９３ Ｄａｒｍｓｔａｄｔ，Ｆｅｄｅｒａｌ Ｒｅｐｕｂｌｉｃ ｏｆ Ｇｅｒｍａｎｙ
(74)【代理人】
【識別番号】110003971
【氏名又は名称】弁理士法人葛和国際特許事務所
(72)【発明者】
【氏名】クラーク，アンダーソン
(72)【発明者】
【氏名】マシェル，アンドレアス
(72)【発明者】
【氏名】ハック，ベイヤード
(72)【発明者】
【氏名】ヴィルケル，エリック
(72)【発明者】
【氏名】カレタ，レミギウス
【テーマコード（参考）】
4C084
4C085
4C086
【Ｆターム（参考）】
4C084AA19
4C084NA05
4C084NA14
4C084ZB26
4C084ZC75
4C085AA14
4C085CC23
4C085DD62
4C085EE03
4C085GG01
4C086AA01
4C086AA02
4C086BC17
4C086BC46
4C086MA02
4C086MA03
4C086MA04
4C086NA05
4C086NA14
4C086ZB26
4C086ZC75
(57)【要約】
本発明は、４－［（Ｓ）－２－アゼチジン－１－イル－１－（４－クロロ－３－トリフルオロメチル－フェニル）－エチルアミノ］－キナゾリン－８－カルボン酸アミドおよび／またはその生理学的に許容し得る塩ならびに溶媒和物と、ＭＥＫキナーゼのインヒビターと、任意の第３のインヒビターとしてのＥＧＦＲのインヒビターとを伴う組み合わせ、およびがんの処置のためのかかる組み合わせの使用、および４－［（Ｓ）－２－アゼチジン－１－イル－１－（４－クロロ－３－トリフルオロメチル－フェニル）－エチルアミノ］－キナゾリン－８－カルボン酸アミドおよび／またはその生理学的に許容し得る塩ならびに溶媒和物とＥＧＦＲのインヒビターとの組み合わせに関する。
【特許請求の範囲】
【請求項1】
４－［（Ｓ）－２－アゼチジン－１－イル－１－（４－クロロ－３－トリフルオロメチル－フェニル）－エチルアミノ］－キナゾリン－８－カルボン酸アミド、またはその生理学的に許容し得る塩、およびＭＥＫのインヒビター、またはその生理学的に許容し得る塩を含む化合物混合物。
【請求項2】
ＭＥＫインヒビターが、ピマセルチブである、請求項１に記載の化合物混合物。
【請求項3】
ＥＧＦＲインヒビターを、さらに含む、請求項１または２に記載の化合物混合物。
【請求項4】
請求項１～２のいずれか一項に記載の化合物混合物、および任意に、賦形剤および／またはアジュバントを含む、医薬組成物。
【請求項5】
（ａ）有効量の４－［（Ｓ）－２－アゼチジン－１－イル－１－（４－クロロ－３－トリフルオロメチル－フェニル）－エチルアミノ］－キナゾリン－８－カルボン酸アミドまたはその生理学的に許容し得る塩、および（ｂ）有効量のＭＥＫインヒビター、またはその生理学的に許容し得る塩
の別個のパックを含む、セット（キット）。
【請求項6】
（ｃ）有効量のＥＧＦＲインヒビターまたはその生理学的に許容し得る塩の別個のパックをさらに含む、請求項５に記載のセット（キット）。
【請求項7】
ＥＧＦＲインヒビターが、セツキシマブである、請求項６に記載のセット（キット）。
【請求項8】
４－［（Ｓ）－２－アゼチジン－１－イル－１－（４－クロロ－３－トリフルオロメチル－フェニル）－エチルアミノ］－キナゾリン－８－カルボン酸アミド、またはその生理学的に許容し得る塩、およびＭＥＫインヒビター、またはその生理学的に許容し得る塩を対象へ投与することを含む、がんの予防または処置のための方法。
【請求項9】
ＭＥＫインヒビターが、ピマセルチブである、請求項８に記載の方法。
【請求項10】
ＥＧＦＲインヒビター、またはその生理学的に許容し得る塩を対象へ投与することをさらに含む、請求項８または９に記載の方法。
【請求項11】
ＥＧＦＲインヒビターが、セツキシマブである、請求項９に記載の方法。
【請求項12】
４－［（Ｓ）－２－アゼチジン－１－イル－１－（４－クロロ－３－トリフルオロメチル－フェニル）－エチルアミノ］－キナゾリン－８－カルボン酸アミド、ＭＥＫインヒビター、および任意に、ＥＧＦＲインヒビターが、同時に投与される、請求項８～１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項13】
４－［（Ｓ）－２－アゼチジン－１－イル－１－（４－クロロ－３－トリフルオロメチル－フェニル）－エチルアミノ］－キナゾリン－８－カルボン酸アミド、ＭＥＫインヒビター、および任意に、ＥＧＦＲインヒビターが、連続して投与される、請求項８～１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項14】
４－［（Ｓ）－２－アゼチジン－１－イル－１－（４－クロロ－３－トリフルオロメチル－フェニル）－エチルアミノ］－キナゾリン－８－カルボン酸アミド、またはその生理学的に許容し得る塩、およびＥＧＦＲのインヒビターを含む、化合物混合物。
【請求項15】
ＥＧＦＲインヒビターが、セツキシマブである、請求項１４に記載の化合物混合物。
【請求項16】
（ａ）有効量の４－［（Ｓ）－２－アゼチジン－１－イル－１－（４－クロロ－３－トリフルオロメチル－フェニル）－エチルアミノ］－キナゾリン－８－カルボン酸アミドまたはその生理学的に許容し得る塩、および（ｂ）有効量のＥＧＦＲインヒビター
の別個のパックを含む、セット（キット）。
【請求項17】
ＥＧＦＲインヒビターが、セツキシマブである、請求項１６に記載のセット（キット）。
【請求項18】
４－［（Ｓ）－２－アゼチジン－１－イル－１－（４－クロロ－３－トリフルオロメチル－フェニル）－エチルアミノ］－キナゾリン－８－カルボン酸アミド、またはその生理学的に許容し得る塩、およびＥＧＦＲインヒビターを対象へ投与することを含む、がんの予防または処置のための方法。
【請求項19】
ＥＧＦＲインヒビターが、セツキシマブである請求項１８に記載の方法。
【請求項20】
４－［（Ｓ）－２－アゼチジン－１－イル－１－（４－クロロ－３－トリフルオロメチル－フェニル）－エチルアミノ］－キナゾリン－８－カルボン酸アミドおよびＥＧＦＲインヒビターが、同時に投与される、請求項１８または１９に記載の方法。
【請求項21】
４－［（Ｓ）－２－アゼチジン－１－イル－１－（４－クロロ－３－トリフルオロメチル－フェニル）－エチルアミノ］－キナゾリン－８－カルボン酸アミドおよびＥＧＦＲインヒビターが、連続して投与される、請求項１８または１９に記載の方法。
【請求項22】
がんが、大腸がん、乳がん、胆管癌、多形性膠芽腫、頭頚部の扁平上皮細胞癌、および非小細胞肺がんである、請求項８～１３および１８～２１のいずれか一項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、４－［（Ｓ）－２－アゼチジン－１－イル－１－（４－クロロ－３－トリフルオロメチル－フェニル）－エチルアミノ］－キナゾリン－８－カルボン酸アミド（下文にＭ２６９８と称される）および／またはその生理学的に許容し得る塩ならびに溶媒和物と、ＭＥＫキナーゼのインヒビターと、任意の第３のインヒビターとしてＥＧＦＲ（上皮成長因子受容体）としてもまた知られる受容体チロシンタンパク質キナーゼＥＲＢＢ－１のインヒビターとを伴う組み合わせ、およびがんの処置のためのかかる組み合わせの使用に関する。本発明はまた、Ｍ２６９８とＭＥＫキナーゼのインヒビターを伴わずに、ＥＧＦＲインヒビターを伴う組み合わせにも関する。
【背景技術】
【0002】
本発明の背景
Ｍ２６９８、その調製のためのプロセスおよびがんの処置のためのその使用は、ＷＯ２０１２／０６９１４６において開示される（化合物Ａと称される）。この化合物は、様々な細胞をベースとしたアッセイにおいて実証されるとおり、ｐ７０Ｓ６ＫおよびＡｋｔの選択的な、高度に強力な二重インヒビターである。Ｍ２６９８は、広いパネルのがん細胞株に対して強力な抗腫瘍活性を呈することが示された。乳がん細胞、多形性膠芽腫（ＧＢＭ）細胞、子宮内膜がん細胞および卵巣癌細胞は、特にＭ２６９８に対して感受性があることが見出されている。Ｍ２６９８は、ｉｎ ｖｉｖｏで血液脳関門を渡る。
Ｍ２６９８、その調製のためのプロセスおよびがんの処置のためのその使用は、ＷＯ２０１２／０６９１４６において開示される（化合物Ａと称される）。この化合物は、様々な細胞をベースとしたアッセイにおいて実証されるとおり、ｐ７０Ｓ６ＫおよびＡｋｔの選択的な、高度に強力な二重インヒビターである。Ｍ２６９８は、広いパネルのがん細胞株に対して強力な抗腫瘍活性を呈することが示された。乳がん細胞、多形性膠芽腫（ＧＢＭ）細胞、子宮内膜がん細胞および卵巣癌細胞は、特にＭ２６９８に対して感受性があることが見出されている。Ｍ２６９８は、ｉｎ ｖｉｖｏで血液脳関門を渡る。
【0003】
タンパク質キナーゼは、細胞内での多種多様なシグナル伝達プロセスの制御を担当している構造的に関係がある酵素の大きなファミリーを構成する（Hardie, G. and Hanks, S. (1995) The Protein Kinase Facts Book. I and II, Academic Press, San Diego, CA）。キナーゼは、それらがリン酸化する基質によって分類されてもよい（例として、タンパク質チロシン、タンパク質セリン／トレオニン、脂質、等）。配列モチーフは、これらのキナーゼファミリーの各々に一般に対応して同定されている（例として、Hanks, S.K., Hunter, T., FASEB J., 9:576-596 (1995); Knighton, et al., Science, 253:407-414 (1991); Hiles, et al., Cell, 70:419-429 (1992); Kunz, et al., Cell, 73:585-596 (1993); Garcia-Bustos, et al., EMBO J., 13:2352-2361 (1994)）。タンパク質キナーゼは、それらの調節機構によって特徴付けられてもよい。これらの機構は、例えば、自己リン酸化、他のキナーゼによるトランスリン酸化、タンパク質－タンパク質相互作用、タンパク質－脂質相互作用、およびタンパク質－ポリヌクレオチド相互作用を包含する。個々のタンパク質キナーゼは、１より多い機構によって調節されてもよい。キナーゼは、これらに限定されないが、標的タンパク質にホスファート基を添加することによって、増殖、分化、アポトーシス、運動性、転写、翻訳および他のシグナル伝達プロセスを包含する多くの種々の細胞プロセスを調節する。これらのリン酸化事象は、標的タンパク質の生物学的機能を調整または調節し得る分子オン／オフスイッチとして作用する。タンパク質のリン酸化は、様々な細胞外シグナル（ホルモン、神経伝達物質、成長および分化因子、等）、細胞周期事象、環境または栄養上のストレス、等に応じて生じる。適切なタンパク質キナーゼは、シグナル伝達経路において機能を果たし、例えば、代謝酵素、調節性タンパク質、受容体、細胞骨格タンパク質、イオンチャネルまたはポンプ、または転写因子を（直接的または間接的のいずれかで）活性化または不活性化する。タンパク質リン酸化の欠陥のある制御に起因した制御されていないシグナル伝達は、例えば、炎症、がん、アレルギー／喘息、免疫系の疾患および疾病、中枢神経系、および血管新生の疾患および疾病を包含する数多の疾患に関係している。
【0004】
Ｐ７０Ｓ６Ｋ阻害
タンパク質キナーゼ７０Ｓ６Ｋ、７０ｋＤａリボソームタンパク質キナーゼｐ７０Ｓ６Ｋ（ＳＫ６、ｐ７０／ｐ８５ Ｓ６キナーゼ、ｐ７０／ｐ８５リボソームＳ６キナーゼおよびｐｐ７０Ｓ６Ｋとしてもまた知られている）は、タンパク質キナーゼのＡＧＣサブファミリーの一員である。ｐ７０Ｓ６Ｋは、ホスファチジルイノシトール３キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）／ＡＫＴ経路の構成要素であるセリン－トレオニンキナーゼである。ｐ７０Ｓ６Ｋは、ＰＩ３Ｋの下流であり、および活性化は、無数のマイトジェン、ホルモンおよび成長因子に応じた数多の部位でのリン酸化を通して生じる。ラパマイシンが、ｐ７０Ｓ６Ｋ活性を阻害するように作用することから、ｐ７０Ｓ６Ｋ活性もまた、ｍＴＯＲを含有する複合体（ＴＯＲＣ１）の制御下にある。ｐ７０Ｓ６Ｋは、ＰＩ３Ｋの下流の標的であるＡｋｔおよびＰＫＣ によって調節される。Ａｋｔは、ＴＳＣ２を直接リン酸化して、不活性にし、それによってｍＴＯＲを活性化する。加えて、ウォルトマンニンによって阻害されるが、ラパマイシンによっては阻害されないｐ７０Ｓ６Ｋの突然変異アレルを用いた研究は、ｍＴＯＲ活性の調節とは無関係にｐ７０Ｓ６Ｋに対して効果を呈し得ることを示唆する。酵素ｐ７０Ｓ６Ｋは、Ｓ６リボソームタンパク質のリン酸化によってタンパク質合成を調整する。Ｓ６リン酸化は、その増大した発現が細胞成長および増殖のために不可欠である、リボソームタンパク質および翻訳伸長因子を包含する、翻訳装置の構成要素をコードするｍＲＮＡの増大した翻訳と相関する。これらのｍＲＮＡは、それらの５’転写開始でオリゴピリミジントラクト（５’ＴＯＰと呼ばれる）を含有しており、そのことは翻訳レベルでのそれらの調節のために不可欠であることが示されている。
タンパク質キナーゼ７０Ｓ６Ｋ、７０ｋＤａリボソームタンパク質キナーゼｐ７０Ｓ６Ｋ（ＳＫ６、ｐ７０／ｐ８５ Ｓ６キナーゼ、ｐ７０／ｐ８５リボソームＳ６キナーゼおよびｐｐ７０Ｓ６Ｋとしてもまた知られている）は、タンパク質キナーゼのＡＧＣサブファミリーの一員である。ｐ７０Ｓ６Ｋは、ホスファチジルイノシトール３キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）／ＡＫＴ経路の構成要素であるセリン－トレオニンキナーゼである。ｐ７０Ｓ６Ｋは、ＰＩ３Ｋの下流であり、および活性化は、無数のマイトジェン、ホルモンおよび成長因子に応じた数多の部位でのリン酸化を通して生じる。ラパマイシンが、ｐ７０Ｓ６Ｋ活性を阻害するように作用することから、ｐ７０Ｓ６Ｋ活性もまた、ｍＴＯＲを含有する複合体（ＴＯＲＣ１）の制御下にある。ｐ７０Ｓ６Ｋは、ＰＩ３Ｋの下流の標的であるＡｋｔおよびＰＫＣ によって調節される。Ａｋｔは、ＴＳＣ２を直接リン酸化して、不活性にし、それによってｍＴＯＲを活性化する。加えて、ウォルトマンニンによって阻害されるが、ラパマイシンによっては阻害されないｐ７０Ｓ６Ｋの突然変異アレルを用いた研究は、ｍＴＯＲ活性の調節とは無関係にｐ７０Ｓ６Ｋに対して効果を呈し得ることを示唆する。酵素ｐ７０Ｓ６Ｋは、Ｓ６リボソームタンパク質のリン酸化によってタンパク質合成を調整する。Ｓ６リン酸化は、その増大した発現が細胞成長および増殖のために不可欠である、リボソームタンパク質および翻訳伸長因子を包含する、翻訳装置の構成要素をコードするｍＲＮＡの増大した翻訳と相関する。これらのｍＲＮＡは、それらの５’転写開始でオリゴピリミジントラクト（５’ＴＯＰと呼ばれる）を含有しており、そのことは翻訳レベルでのそれらの調節のために不可欠であることが示されている。
【0005】
翻訳への関与に加えて、ｐ７０Ｓ６Ｋの活性化は、細胞周期の制御、ニューロンの細胞分化、細胞運動性の調節および腫瘍転移、免疫応答および組織の修復において重要である細胞応答にもまた関係している。ｐ７０Ｓ６Ｋに対する抗体は、ラット線維芽細胞のＳ期へのエントリーを駆動する分裂促進的な応答を消失させ、このことはｐ７０Ｓ６Ｋの機能が細胞周期においてＧ１期からＳ期までの進行のために不可欠であることを指し示す。さらにまた、ラパマイシンによる細胞周期のＧ１期からＳ期での細胞周期の増殖の阻害は、ｐ７０Ｓ６Ｋの高リン酸化された活性型の産生の阻害の結果として識別されている。
【0006】
腫瘍細胞の増殖および保護アポトーシスからの細胞の保護におけるｐ７０Ｓ６Ｋの役割は、腫瘍組織における成長因子受容体のシグナル伝達、過剰発現および活性化のその参加に基づき支持される。例えば、ノーザンおよびウエスタン分析は、ＰＳ６Ｋ遺伝子の増幅が夫々対応するｍＲＮＡおよびタンパク質の増大を伴うことを明らかにした（Cancer Res. (1999) 59: 1408-11-Localization of PS6K to Chromosomal Region 17q23 and Determination of Its Amplification in Breast Cancer）。
ｐ７０Ｓ６Ｋ活性化の臨床での阻害は、上流キナーゼｍＴＯＲのインヒビターであるＣＣＩ－７７９（ラパマイシンエステル）で処置された腎癌患者において観察された。疾患進行とｐ７０Ｓ６Ｋ活性の阻害との間の有意な線形の関連が報告された。
ｐ７０Ｓ６Ｋ活性化の臨床での阻害は、上流キナーゼｍＴＯＲのインヒビターであるＣＣＩ－７７９（ラパマイシンエステル）で処置された腎癌患者において観察された。疾患進行とｐ７０Ｓ６Ｋ活性の阻害との間の有意な線形の関連が報告された。
【0007】
エネルギーストレスに応じて、腫瘍サプレッサーＬＫＢ１は、ＴＳＣ１／２複合体をリン酸化するＡＭＰＫを活性化し、およびｍＴＯＲ／ｐ７０Ｓ６Ｋ経路を不活性化することを可能にする。ＬＫＢ１における突然変異は、ポイツ－イェガース症候群（ＰＪＳ）を引き起こし、ＰＳＪを有する患者は、一般的な集団よりも１５倍より多くがんを発症しそうである。加えて、肺腺癌の１／３は、ＬＫＢ１突然変異の不活性化を抱える。
ｐ７０Ｓ６Ｋ阻害に好適であるとして記載される化合物は、ＷＯ０３／０６４３９７、ＷＯ０４／０９２１５４、ＷＯ０５／０５４２３７、ＷＯ０５／０５６０１４、ＷＯ０５／０３３０８６、ＷＯ０５／１１７９０９、ＷＯ０５／０３９５０６、ＷＯ０６／１２０５７３、ＷＯ０６／１３６８２１、ＷＯ０６／０７１８１９、ＷＯ０６／１３１８３５、ＷＯ０８／１４０９４７、ＷＯ１０／０９３４１９、ＷＯ１２／０１３２８２およびＷＯ１２／０６９１４６に開示される。
ｐ７０Ｓ６Ｋ阻害に好適であるとして記載される化合物は、ＷＯ０３／０６４３９７、ＷＯ０４／０９２１５４、ＷＯ０５／０５４２３７、ＷＯ０５／０５６０１４、ＷＯ０５／０３３０８６、ＷＯ０５／１１７９０９、ＷＯ０５／０３９５０６、ＷＯ０６／１２０５７３、ＷＯ０６／１３６８２１、ＷＯ０６／０７１８１９、ＷＯ０６／１３１８３５、ＷＯ０８／１４０９４７、ＷＯ１０／０９３４１９、ＷＯ１２／０１３２８２およびＷＯ１２／０６９１４６に開示される。
【0008】
ｐ７０Ｓ６ＫだけでなくキナーゼＡｔｋ（ＰＩ３Ｋ経路においてｐ７０Ｓ６Ｋの上流）のアイソフォーム１および３をも阻害するＭ２６９８が、より効率的なＰＩ３Ｋ経路の活動停止を提供することが示され（Choo AY, Yoon SO, Kim SG, Roux PP, Blenis J. Proc. Natl Acad Sci U S A. 2008 Nov 11;105(45):17414-9.）、およびいずれかのＡｋｔフィードバックループの活性化の捕捉を可能にする（Tamburini et al. Blood 2008;111:379-82）。
ＰＩ３Ｋ／Ａｋｔ／ｍＴＯＲ経路（ＰＡＭ）の阻害は、これに続くＡｋｔフィードバックループの上方調節によって妨げられる（O'Reilly KE et al. Cancer Res. 2006; 66(3):1500-1508）。ｐ７０Ｓ６ＫおよびＡｋｔ１／３の選択的二重インヒビターである、Ｍ２６９８は、Ａｋｔフィードバックループのシグナル伝達の下流をブロックする；したがって、Ｍ２６９８は、ｍＴＯＲインヒビターなどのＰＡＭ経路の単一ノードインヒビターと比較して臨床的有効性を改善するかもしれない。Ｍ２６９８は、腫瘍成長を低減し、およびヒトＧＢＭの同所性移植モデルにおける生存を長くする（Machl A et al. Am J Cancer Res. 2016; 6(4):806-818）。
ＰＩ３Ｋ／Ａｋｔ／ｍＴＯＲ経路（ＰＡＭ）の阻害は、これに続くＡｋｔフィードバックループの上方調節によって妨げられる（O'Reilly KE et al. Cancer Res. 2006; 66(3):1500-1508）。ｐ７０Ｓ６ＫおよびＡｋｔ１／３の選択的二重インヒビターである、Ｍ２６９８は、Ａｋｔフィードバックループのシグナル伝達の下流をブロックする；したがって、Ｍ２６９８は、ｍＴＯＲインヒビターなどのＰＡＭ経路の単一ノードインヒビターと比較して臨床的有効性を改善するかもしれない。Ｍ２６９８は、腫瘍成長を低減し、およびヒトＧＢＭの同所性移植モデルにおける生存を長くする（Machl A et al. Am J Cancer Res. 2016; 6(4):806-818）。
【0009】
本発明は、Ｍ２６９８について医薬の実用性をさらに進めることを見出す方法という目標を有した。これに関連して、二重の組み合わせとして、Ｍ２６９８のＭＥＫキナーゼのインヒビターとの組み合わせおよび、三重の組み合わせとして、加えてＥＧＦＲのインヒビターとの組み合わせ、ならびに二重の組み合わせとして、Ｍ２６９８のＥＧＦＲのインヒビターとの組み合わせが、ｉｎ ｖｉｖｏで研究された。
【0010】
ＭＥＫ阻害
マイトジェン活性化タンパク質キナーゼ（ＭＡＰＫ）シグナル伝達経路は、細胞増殖、生存、分化、および運動性を包含する多様な細胞の活性の調節において重大な役割を担う（Karin L.C.M. Nature. 2001;410:37-40）。ＭＡＰＫ経路の調節異常は、すべての悪性腫瘍の１／３より多くで生じる。古典的なＭＡＰＫ経路は、Ｒａｓ（すべての動物細胞系列および器官において発現する関連タンパク質のファミリー）、Ｒａｆ（レトロウイルスのがん遺伝子に関連する３つのセリン／トレオニン特異的タンパク質キナーゼのファミリー）、ＭＥＫ（マイトジェン活性化タンパク質キナーゼキナーゼ）、およびＥＲＫ（細胞外シグナル調節キナーゼ）からなり、細胞表面受容体で生成される増殖性シグナルを細胞質シグナル伝達を通して核内に順次取り次ぐ。ＭＥＫインヒビターは、Ｒａｓ／Ｒａｆ／ＭＥＫ／ＥＲＫシグナル伝達経路を標的にして、細胞増殖を阻害し、およびアポトーシスを誘導する。ゆえに、がん処置、とくにＲＡＳ／ＲＡＦ機能障害によって誘発されるそれらのがんのための臨床使用において見込みがある（Leonard J.T. et al., J. Hematol. Oncol. 2016;9:31. doi: 10.1186/s13045-016-0258-1）。
マイトジェン活性化タンパク質キナーゼ（ＭＡＰＫ）シグナル伝達経路は、細胞増殖、生存、分化、および運動性を包含する多様な細胞の活性の調節において重大な役割を担う（Karin L.C.M. Nature. 2001;410:37-40）。ＭＡＰＫ経路の調節異常は、すべての悪性腫瘍の１／３より多くで生じる。古典的なＭＡＰＫ経路は、Ｒａｓ（すべての動物細胞系列および器官において発現する関連タンパク質のファミリー）、Ｒａｆ（レトロウイルスのがん遺伝子に関連する３つのセリン／トレオニン特異的タンパク質キナーゼのファミリー）、ＭＥＫ（マイトジェン活性化タンパク質キナーゼキナーゼ）、およびＥＲＫ（細胞外シグナル調節キナーゼ）からなり、細胞表面受容体で生成される増殖性シグナルを細胞質シグナル伝達を通して核内に順次取り次ぐ。ＭＥＫインヒビターは、Ｒａｓ／Ｒａｆ／ＭＥＫ／ＥＲＫシグナル伝達経路を標的にして、細胞増殖を阻害し、およびアポトーシスを誘導する。ゆえに、がん処置、とくにＲＡＳ／ＲＡＦ機能障害によって誘発されるそれらのがんのための臨床使用において見込みがある（Leonard J.T. et al., J. Hematol. Oncol. 2016;9:31. doi: 10.1186/s13045-016-0258-1）。
【0011】
無数の新生物におけるこの経路の広範囲の活性化のせいで、ＭＥＫインヒビターは、単剤治療または他の標的にされたものおよび細胞毒性薬との併用治療のタイプとして様々な臨床的状況における開発および研究の過程にある。最近になって、免疫チェックポイントインヒビターの使用との組み合わせがいくつかのがんについて効果的な処置として現れ、このクラスの剤の有効性を拡張する（Thompson N. et al., Curr. Opin. Pharmacol. 2005;5:350-356）。
臨床開発下および／または規制当局により承認されたＭＥＫインヒビターの例は、トラメチニブ、コビメチニブ、セルメチニブ、レファメチニブおよびピマセルチブを包含する。ピマセルチブは、Ｎ－（２，３－ジヒドロキシ－プロピル）－３－（２－フルオロ－４－ヨード－フェニルアミノ）－イソニコチンアミドであり、とりわけＷＯ２００６０４５５１４（例１１５）に記載されている。
驚くべきことに、本特許出願の発明者らによって、Ｍ２６９８がＭＥＫインヒビターと組み合わせたときに相乗的に作用することが見出された。
臨床開発下および／または規制当局により承認されたＭＥＫインヒビターの例は、トラメチニブ、コビメチニブ、セルメチニブ、レファメチニブおよびピマセルチブを包含する。ピマセルチブは、Ｎ－（２，３－ジヒドロキシ－プロピル）－３－（２－フルオロ－４－ヨード－フェニルアミノ）－イソニコチンアミドであり、とりわけＷＯ２００６０４５５１４（例１１５）に記載されている。
驚くべきことに、本特許出願の発明者らによって、Ｍ２６９８がＭＥＫインヒビターと組み合わせたときに相乗的に作用することが見出された。
【0012】
ＥＧＦＲ阻害
上皮成長因子受容体は、ＥｒｂＢファミリーの受容体のメンバーであって、密接に関わっている４つの受容体チロシンキナーゼのサブファミリー：ＥＧＦＲ（ＥｒｂＢ－１）、ＨＥＲ２／ｎｅｕ（ＥｒｂＢ－２）、Ｈｅｒ３（ＥｒｂＢ－３）およびＨｅｒ４（ＥｒｂＢ－４）である。多くのがんのタイプにおいて、ＥＧＦＲ発現または活性に影響を及ぼす突然変異が、がんをもたらし得る（Zhang H et al., The Journal of Clinical Investigation. 117 (8): 2051-8）。上皮成長因子およびその受容体は、バンダービルト大学のStanley Cohenによって発見された。Cohenは、Rita Levi-Montalciniと彼らの成長因子の発見について１９８６年のノーベル生理学・医学賞を共有した。ヒトにおけるＥＧＦＲおよび他の受容体チロシンキナーゼの欠損したシグナル伝達は、アルツハイマー病などの疾患に関連する一方で、過剰発現は多種多様の腫瘍の発生と関連する。受容体の細胞外ドメイン上のＥＧＦＲ結合部位をブロッキングするかまたは細胞内のチロシンキナーゼ活性を阻害するかのいずれかによる、ＥＧＦＲシグナル伝達の断絶は、ＥＧＦＲを発現する腫瘍の成長を妨げ得、および患者の状態を改善する。
上皮成長因子受容体は、ＥｒｂＢファミリーの受容体のメンバーであって、密接に関わっている４つの受容体チロシンキナーゼのサブファミリー：ＥＧＦＲ（ＥｒｂＢ－１）、ＨＥＲ２／ｎｅｕ（ＥｒｂＢ－２）、Ｈｅｒ３（ＥｒｂＢ－３）およびＨｅｒ４（ＥｒｂＢ－４）である。多くのがんのタイプにおいて、ＥＧＦＲ発現または活性に影響を及ぼす突然変異が、がんをもたらし得る（Zhang H et al., The Journal of Clinical Investigation. 117 (8): 2051-8）。上皮成長因子およびその受容体は、バンダービルト大学のStanley Cohenによって発見された。Cohenは、Rita Levi-Montalciniと彼らの成長因子の発見について１９８６年のノーベル生理学・医学賞を共有した。ヒトにおけるＥＧＦＲおよび他の受容体チロシンキナーゼの欠損したシグナル伝達は、アルツハイマー病などの疾患に関連する一方で、過剰発現は多種多様の腫瘍の発生と関連する。受容体の細胞外ドメイン上のＥＧＦＲ結合部位をブロッキングするかまたは細胞内のチロシンキナーゼ活性を阻害するかのいずれかによる、ＥＧＦＲシグナル伝達の断絶は、ＥＧＦＲを発現する腫瘍の成長を妨げ得、および患者の状態を改善する。
【0013】
臨床開発下および／または規制当局によって承認されたＥＧＦＲインヒビターの例は、ゲフィチニブ、エルロチニブ、アファチニブ、ブリガチニブ、イコチニブ、オシメルチニブおよびセツキシマブ（キメラ（マウス／ヒト）モノクローナル抗体、転移性大腸がんおよび頭頸部がんの処置のために使用される）を包含する。
驚くべきことに、本特許出願の発明者らによって、Ｍ２６９８が、ＭＥＫインヒビターと組み合わせたときに、および任意にＥＧＦＲインヒビターを加えて、またはＥＧＦＲインヒビター単独と組み合わせたときに相乗的に作用することが見出された。
驚くべきことに、本特許出願の発明者らによって、Ｍ２６９８が、ＭＥＫインヒビターと組み合わせたときに、および任意にＥＧＦＲインヒビターを加えて、またはＥＧＦＲインヒビター単独と組み合わせたときに相乗的に作用することが見出された。
【図面の簡単な説明】
【0014】
図
【0015】
【0016】
【0017】
【0018】
【0019】
【0020】
【0021】
本発明の詳細な記載
本発明は、Ｍ２６９８および／またはその生理学的に許容し得る塩ならびに溶媒和物、ＭＥＫインヒビターおよび、任意に、ＥＧＦＲインヒビターを対象へ投与することを含む、がんの予防および／または処置のための方法に関する。
Ｍ２６９８および／またはその生理学的に許容し得る塩ならびに溶媒和物、および他の活性成分（単数または複数）は、同時にまたは連続して投与され得る。同時に投与されるとき、Ｍ２６９８および／またはその生理学的に許容し得る塩ならびに溶媒和物、およびＭＥＫインヒビターは、１つの医薬組成物中の化合物混合物として、または別々の医薬組成物として投与されてもよい。
好ましい態様において、本発明に従う方法は、Ｍ２６９８および／またはその生理学的に許容し得る塩ならびに溶媒和物の使用を含み、ＭＥＫインヒビター、および任意に、ＥＧＦＲインヒビターが、連続して投与される。
本発明は、Ｍ２６９８および／またはその生理学的に許容し得る塩ならびに溶媒和物、ＭＥＫインヒビターおよび、任意に、ＥＧＦＲインヒビターを対象へ投与することを含む、がんの予防および／または処置のための方法に関する。
Ｍ２６９８および／またはその生理学的に許容し得る塩ならびに溶媒和物、および他の活性成分（単数または複数）は、同時にまたは連続して投与され得る。同時に投与されるとき、Ｍ２６９８および／またはその生理学的に許容し得る塩ならびに溶媒和物、およびＭＥＫインヒビターは、１つの医薬組成物中の化合物混合物として、または別々の医薬組成物として投与されてもよい。
好ましい態様において、本発明に従う方法は、Ｍ２６９８および／またはその生理学的に許容し得る塩ならびに溶媒和物の使用を含み、ＭＥＫインヒビター、および任意に、ＥＧＦＲインヒビターが、連続して投与される。
【0022】
本発明は、とりわけ、大腸がん、乳がん（とりわけ、Ｈｅｒ２＋／ＨＲ－タイプ）、胆管癌、ＧＢＭ、ＳＣＣＨＮ、およびＮＳＣＬＣから（とりわけ、ＮＳＣＬＣの脳転移から）なるグループから選択される腫瘍の予防および／または処置の方法に関する。
その上、本発明は、活性医薬成分（ＡＰＩ）Ｍ２６９８、およびその生理学的に許容し得る塩ならびに溶媒和物の化合物混合物、およびＭＥＫインヒビターおよび生理学的に許容し得る塩ならびに溶媒和物を含む医薬組成物に関する。
その上、本発明は、活性医薬成分（ＡＰＩ）Ｍ２６９８、およびその生理学的に許容し得る塩ならびに溶媒和物の化合物混合物、およびＭＥＫインヒビターおよび生理学的に許容し得る塩ならびに溶媒和物を含む医薬組成物に関する。
【0023】
好適な酸付加塩は、すべての生理学的にまたは薬理学的に許容し得る酸の無機または有機塩、例えば、ハロゲン化物、とりわけ塩酸塩または臭化水素酸塩、乳酸塩、硫酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、シュウ酸塩、酢酸塩、リン酸塩、スルホン酸塩、安息香酸塩またはｐ-トルエンスルホン酸塩である。
Ｍ２６９８およびＭＥＫインヒビターの溶媒和物は、それらの相互の引力のために形成される不活性な溶媒分子のＭ２６９８上への付加物を意味すると受け取られる。溶媒和物は、例えば、一水和物または二水和物などの水和物、またはアルコラート、すなわち、例えば、メタノールまたはエタノールなどのアルコールとの付加化合物である。
Ｍ２６９８の好ましい塩形態は、その遊離塩基である。また好ましいものは、その塩酸塩、二塩酸塩、メシル酸塩、コハク酸塩またはマロン酸塩である。
Ｍ２６９８およびＭＥＫインヒビターの溶媒和物は、それらの相互の引力のために形成される不活性な溶媒分子のＭ２６９８上への付加物を意味すると受け取られる。溶媒和物は、例えば、一水和物または二水和物などの水和物、またはアルコラート、すなわち、例えば、メタノールまたはエタノールなどのアルコールとの付加化合物である。
Ｍ２６９８の好ましい塩形態は、その遊離塩基である。また好ましいものは、その塩酸塩、二塩酸塩、メシル酸塩、コハク酸塩またはマロン酸塩である。
【0024】
「有効量」という表現は、例えば、研究者または医者によって探し求められ、または所望される生物学的または医学的な応答を組織、系、動物またはヒトにおいて引き起こす医薬または医薬活性成分の量を意味する。
加えて、「治療的に有効な量」という表現は、この量を受けていない相当する対象と比較して、以下の帰結を有する量を意味する：疾患、症候群、疾病、愁訴、障害の改善された処置、治癒、予防または除去もしくは副作用の予防またもしくは疾患、疾病または障害の進行における低減。用語「治療的に有効な量」はまた、正常な生理学的機能を増大させるために有効である量を網羅する。
加えて、「治療的に有効な量」という表現は、この量を受けていない相当する対象と比較して、以下の帰結を有する量を意味する：疾患、症候群、疾病、愁訴、障害の改善された処置、治癒、予防または除去もしくは副作用の予防またもしくは疾患、疾病または障害の進行における低減。用語「治療的に有効な量」はまた、正常な生理学的機能を増大させるために有効である量を網羅する。
【0025】
本発明に従う医薬組成物は、例えば、１：１、１：２、１：３、１：４、１：５、１：１０、１：１００または１：１０００の比率における２つのＡＰＩの混合物を含む。
医薬組成物は、さらにまた少なくとも１の固体、液体および／または半液体の賦形剤もしくはアジュバントを含む。したがって、本発明はまた、本発明に従う該ＡＰＩ混合物および該賦形剤および／またはアジュバントを含む医薬組成物に関する。
医薬組成物は、さらにまた少なくとも１の固体、液体および／または半液体の賦形剤もしくはアジュバントを含む。したがって、本発明はまた、本発明に従う該ＡＰＩ混合物および該賦形剤および／またはアジュバントを含む医薬組成物に関する。
【0026】
さらにまた、本発明は、がんの処置のための医薬の調製のための該医薬組成物の使用に関する。
本発明はまた、
（ａ）有効量のＭ２６９８を含む医薬組成物、
（ｂ）有効量のＭＥＫインヒビターを含む医薬組成物、および任意に、
（ｃ）有効量のＥＧＦＲインヒビターを含む医薬生物、
の別々のパックからなるセット（キット）に関する。
本発明はまた、
（ａ）有効量のＭ２６９８を含む医薬組成物、および
（ｂ）有効量のＥＧＦＲインヒビターを含む医薬組成物、
の別々のパックからなるセット（キット）に関する。
本発明はまた、
（ａ）有効量のＭ２６９８を含む医薬組成物、
（ｂ）有効量のＭＥＫインヒビターを含む医薬組成物、および任意に、
（ｃ）有効量のＥＧＦＲインヒビターを含む医薬生物、
の別々のパックからなるセット（キット）に関する。
本発明はまた、
（ａ）有効量のＭ２６９８を含む医薬組成物、および
（ｂ）有効量のＥＧＦＲインヒビターを含む医薬組成物、
の別々のパックからなるセット（キット）に関する。
【0027】
セットは、箱、個々の瓶、バッグまたはアンプルなどの好適な容器を含む。セットは、例えば、有効量のＭ２６９８および／または薬学的に用いることが出来るそれらの塩を含む医薬組成物、有効量のＭＥＫインヒビターおよび／または薬学的に用いることが出来るそれらの塩を含む医薬組成物、ならびに任意に、有効量のＥＧＦＲインヒビターを含む医薬組成物をそれぞれ溶解形態または凍結乾燥形態で含有する、別々のアンプルを含んでもよい。
Ｍ２６９８と組み合わせられるべき殊更好ましい脳浸透性のＭＥＫインヒビターは、ピマセルチブである。Ｍ２６９８と組み合わせられるべき殊更好ましいＥＧＦＲインヒビターは、ＭＥＫインヒビターの有無にかかわらず、セツキシマブである。殊更好ましい三重の組み合わせは、Ｍ２６９８＋ピマセルチブ＋セツキシマブである。
Ｍ２６９８と組み合わせられるべき殊更好ましい脳浸透性のＭＥＫインヒビターは、ピマセルチブである。Ｍ２６９８と組み合わせられるべき殊更好ましいＥＧＦＲインヒビターは、ＭＥＫインヒビターの有無にかかわらず、セツキシマブである。殊更好ましい三重の組み合わせは、Ｍ２６９８＋ピマセルチブ＋セツキシマブである。
【0028】
本発明に従う化合物および化合物混合物は、いずれか所望される好適な方法を介した、例えば、経口（口腔内または舌下を包含する）、直腸、経鼻、局所（口腔内、舌下または経皮を包含する）、膣内または非経口（皮下、筋肉内、静脈内または皮内を包含する）の方法による投与のために適合され得る。かかる医薬は、薬学分野において既知のあらゆるプロセスを使用して、例えば、活性成分を賦形剤（単数または複数）またはアジュバント（単数または複数）と組み合わせることによって、調製され得る。
経口投与のために適合された化合物および化合物混合物は、例えば、カプセルまたは錠剤；粉末または顆粒；溶液または水性または非水性の液体における懸濁液；食用泡または泡食品；または水中油液体エマルションまたは油中水液体エマルションなどの、別々のユニットとして投与され得る。
経口投与のために適合された化合物および化合物混合物は、例えば、カプセルまたは錠剤；粉末または顆粒；溶液または水性または非水性の液体における懸濁液；食用泡または泡食品；または水中油液体エマルションまたは油中水液体エマルションなどの、別々のユニットとして投与され得る。
【0029】
よって、例えば、錠剤またはカプセルの形態での経口投与のケースにおいて、化合物または化合物混合物は、例えば、エタノール、グリセロール、水などの経口、非毒性かつ薬学的に許容し得る不活性な賦形剤と組み合わせられ得る。粉末は、化合物を好適な微細なサイズに細かく砕き、およびそれを同様のやり方で細かく砕かれた医薬の賦形剤、例えば、デンプンまたはマンニトールなどの食用炭水化物などと混合することによって調製される。フレーバー、保存料、分散剤および色素も同じく存在していてもよい。
カプセルは、上に記載のとおり粉末混合物を調製し、およびそれを成形されたゼラチンシェルに充填することによって産生される。例えば、固体形態での高分散性ケイ酸、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウムまたはポリエチレングリコールなどの滑剤または潤滑剤は、充填操作の前に粉末混合物に添加さえ得る。例えば、寒天、炭酸カルシウムまたは炭酸ナトリウムなどの崩壊剤または可溶化剤もまた、カプセルが摂取されたあとの化合物または化合物混合物のアベイラビリティを改善するために、同じく添加されてもよい。
カプセルは、上に記載のとおり粉末混合物を調製し、およびそれを成形されたゼラチンシェルに充填することによって産生される。例えば、固体形態での高分散性ケイ酸、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウムまたはポリエチレングリコールなどの滑剤または潤滑剤は、充填操作の前に粉末混合物に添加さえ得る。例えば、寒天、炭酸カルシウムまたは炭酸ナトリウムなどの崩壊剤または可溶化剤もまた、カプセルが摂取されたあとの化合物または化合物混合物のアベイラビリティを改善するために、同じく添加されてもよい。
【0030】
加えて、所望されるかまたは必要である場合に、好適な結合剤、潤滑剤および崩壊剤ならびに色素もまた、同じく混合物に組み込まれ得る。好適な結合剤は、デンプン、ゼラチン、例えば、グルコースまたはベータ－ラクトースなどの天然糖、トウモロコシから作られた甘味料、例えば、アカシア、トラガカントまたはアルギン酸ナトリウムなどの天然および合成ゴム、カルボキシメチルセルロース、ポリエチレングリコール、蝋等を包含する。これらの剤形に使用される潤滑剤は、オレイン酸ナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウム等を包含する。崩壊剤は、それらに制限されることなく、デンプン、メチルセルロース、寒天、ベントナイト、キサンタンゴム等を包含する。錠剤は、例えば、粉末混合物を調製し、混合物を造粒または乾式プレスし、潤滑剤および崩壊剤を添加して、ならびに錠剤を与えるために混合物全体を圧縮することによって、製剤化される。粉末混合物は、好適なやり方で細かく砕かれた化合物を、上に記載のとおりの希釈剤または基剤と、および任意に、例えば、カルボキシメチルセルロース、アルギン酸、ゼラチンまたはポリビニルピロリドンなどの結合剤、例えば、パラフィンなどの溶解抑制剤、例えば、四級塩などの吸収促進剤、および／または、例えば、ベントナイト、カオリンまたは二リン酸カルシウムなどの吸収剤と混合することによって調製される。粉末混合物は、例えば、シロップ、デンプン糊、アカディア粘液（acadia mucilage）またはセルロースもしくはポリマー材料の溶液などの結合剤でそれを湿らせ、および篩を通してそれを圧縮することによって造粒され得る。造粒の代替手段として、粉末混合物は、打錠機にかけられて、不均一な形状の塊を与えて、それを粉砕して顆粒を形成し得る。顆粒は、錠剤鋳型にくっつくことを妨げるために、ステアリン酸、ステアリン酸塩、タルクまたは鉱油の添加によって潤滑され得る。潤滑された混合物は、次いで圧縮されて錠剤を与える。本発明に従う化合物および化合物混合物はまた、流動性の良い不活性な賦形剤を組み合わせられ得、および次いで造粒または乾式プレスステップを実行することなしに、直接圧縮されて錠剤を得られ得る。シェラックシール層、糖またはポリマー材料の層および蝋の光沢層からなる透明または不透明な保護層が存在してもよい。色素は、異なる投薬量ユニット間で区別することができるように、これらのコーティングに添加され得る。
【0031】
例えば、溶液、シロップおよびエリキシル剤などの経口の液体は、所与の分量が、事前に特定された量の化合物を含むように、投薬量ユニットの形態で調製され得る。シロップは、好適なフレーバーと共に水性溶液中に化合物および化合物混合物を溶解することによって調製され得る一方で、エリキシル剤は、非毒性のアルコール性のビヒクルを使用して調製される。懸濁液は、非毒性のビヒクル中への化合物の分散によって処方され得る。例えば、エトキシル化イソステアリールアルコールおよびポリオキシエチレンソルビトールエーテルなどの可溶化剤および乳化剤、保存料、例えば、ペパーミント油などのフレーバー添加剤、または天然の甘味料またはサッカリンまたは他の人工甘味料等もまた、同じく添加され得る。
経口投与のための投薬量ユニット製剤は、所望される場合は、マイクロカプセル中にカプセル化され得る。製剤はまた、例えば、ポリマー、蝋等中への微粒子材料のコーティングまたは埋め込みなどによって、放出が延長されるかまたは遅らせられるような方法で調製され得る。
経口投与のための投薬量ユニット製剤は、所望される場合は、マイクロカプセル中にカプセル化され得る。製剤はまた、例えば、ポリマー、蝋等中への微粒子材料のコーティングまたは埋め込みなどによって、放出が延長されるかまたは遅らせられるような方法で調製され得る。
【0032】
本発明に従う化合物および化合物混合物およびその塩ならびに溶媒和物はまた、例えば、小型単層ベシクル、大型単層ベシクルおよび多層ベシクルなどのリポソーム送達系の形態で投与され得る。リポソームは、例えば、コレステロール、ステアリルアミンまたはホスファチジルコリンなどの様々なリン脂質から形成され得る。
【0033】
本発明に従う化合物および化合物混合物はまた、化合物分子が結び付けられる個々の担体としてモノクローナル抗体を使用して送達され得る。化合物および化合物混合物はまた、標的にされた医薬担体として可溶性ポリマーに結び付けられ得る。かかるポリマーは、ポリビニルピロリドン、ピランコポリマー、ポリヒドロキシプロピルメタクリル－アミドフェノール、ポリヒドロキシエチルアスパルタミドフェノールまたはポリエチレンオキシドポリリシン、パルミトイルラジカルで置換されたものを網羅していてもよい。化合物は、さらにまた、医薬の制御放出を達成するのに好適である生分解性ポリマーの類、例えば、ポリ乳酸、ポリ－イプシロン－カプロラクトン、ポリヒドロキシ酪酸、ポリオルトエステル、ポリアセタール、ポリジヒドロキシピラン、ポリシアノアクリラートおよびハイドロゲルの架橋されたかまたは両親媒性のブロックコポリマーに結び付けられてもよい。
【0034】
経皮的な投与に適合される化合物および化合物混合物は、レシピエントの表皮と長期にわたり、密接に接触するための独立した硬膏剤として投与され得る。よって、例えば、活性成分は、Pharmaceutical Research, 3(6):318, 1986の一般項に記載されるとおり、イオン導入法によって硬膏剤から送達され得る。
局所投与に適合される化合物および化合物混合物は、軟膏、クリーム、懸濁液、ローション、粉末、溶液、ペースト、ゲル、スプレー、エアロゾルまたは油として処方され得る。
局所投与に適合される化合物および化合物混合物は、軟膏、クリーム、懸濁液、ローション、粉末、溶液、ペースト、ゲル、スプレー、エアロゾルまたは油として処方され得る。
【0035】
目または他の外部組織、例えば、口および皮膚の処置のために、製剤は、好ましくは、局所の軟膏またはクリームとして適用される。軟膏を与える製剤のケースにおいて、化合物または化合物混合物は、パラフィン系または水混和性のクリーム基剤のいずれかを用いて採用され得る。代替的に、化合物または化合物混合物は、水中油クリーム基剤または油中水基剤を用いてクリームを与えるよう処方され得る。
目への局所的用に適合される化合物および化合物混合物は、活性成分が、好適な担体、とりわけ水性溶媒に溶解されているかまたは懸濁されている、点眼薬を包含する。
目への局所的用に適合される化合物および化合物混合物は、活性成分が、好適な担体、とりわけ水性溶媒に溶解されているかまたは懸濁されている、点眼薬を包含する。
【0036】
口中の局所的用に適合される化合物および化合物混合物は、ロゼンジ、トローチおよびマウスウォッシュを網羅する。
直腸投与に適合する化合物および化合物混合物は、坐薬または浣腸の形態で投与され得る。
直腸投与に適合する化合物および化合物混合物は、坐薬または浣腸の形態で投与され得る。
【0037】
担体物質が固体である経鼻投与に適合される化合物および化合物混合物は、例えば、２０～５００ミクロンの範囲にある粒子サイズを有する粗粉末を含み、これはかぎたばこが摂取されるやり方、すなわち鼻に近接して保持された粉末を含有する容器から鼻道を介した迅速な吸入によって投与される。担体物質として液体を伴う鼻腔用スプレーまたは点鼻液としての投与のための好適な製剤は、水または油中の活性成分溶液を網羅する。
吸入による投与に適合された化合物および化合物混合物は、微細な微粒子粉末またはもやを網羅し、これは様々なタイプのエアロゾルを伴う加圧されたディスペンサ、ネブライザーまたは注入器によって生成され得る。
膣内投与に適合された化合物および化合物混合物は、ペッサリー、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト、泡またはスプレー製剤として投与され得る。
吸入による投与に適合された化合物および化合物混合物は、微細な微粒子粉末またはもやを網羅し、これは様々なタイプのエアロゾルを伴う加圧されたディスペンサ、ネブライザーまたは注入器によって生成され得る。
膣内投与に適合された化合物および化合物混合物は、ペッサリー、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト、泡またはスプレー製剤として投与され得る。
【0038】
非経口投与に適合された化合物および化合物混合物は、これを用いて製剤が処置されるべきレシピエントの血液と等張にされる、抗酸化剤、緩衝剤、静菌剤および溶質を含む水性および非水性の滅菌注射溶液；および懸濁媒体および増粘剤を含んでもよい、水性および非水性の滅菌懸濁液を包含する。製剤は、単一用量または多用量容器、例えば密封アンプルおよびバイアルで投与され得、および使用が必要となる直前に滅菌担体液体、例えば、注射用水の添加のみが意図されるようにフリーズドライされた（凍結乾燥された）状態で保管される。レシピに従って調製される注射溶液および懸濁液は、滅菌された粉末、顆粒および錠剤から調製され得る。
上で具体的に言及された構成物質に加えて、本発明に従う医薬はまた、具体的なタイプの医薬製剤に関して当該技術分野において通例である他の剤を含んでもよいことは言うまでもない；よって、例えば、経口投与に好適である化合物または化合物混合物は、フレーバーを含んでもよい。
上で具体的に言及された構成物質に加えて、本発明に従う医薬はまた、具体的なタイプの医薬製剤に関して当該技術分野において通例である他の剤を含んでもよいことは言うまでもない；よって、例えば、経口投与に好適である化合物または化合物混合物は、フレーバーを含んでもよい。
【0039】
本発明の化合物または化合物混合物の治療的に有効な量は、例えば、齢およびレシピエントの重量、処置を必要とする正確な状態、およびその重症度、製剤の性質および投与の方法を包含する数多の因子に依り、および最後には処置をする医師または獣医師によって決定される。しかしながら、本発明に従う疾患の処置のための有効量のＡＰＩは、一般に１日あたりレシピエント（哺乳動物）の体重の０．１から１００ｍｇ／ｋｇまでの範囲にあり、および殊更典型的には１日あたり体重の１から１０ｍｇ／ｋｇまでの範囲にある。よって、７０ｋｇの重量である成体哺乳動物についての１日あたりの実際の量は、大抵７０と７００ｍｇとの間であり、ここでこの量は、毎日の合計用量が、同じであるように、１日あたり個々の用量としてまたはより大抵は１日あたり一連の部分用量（例えば、２回、３回、４回、５回または６回など）において投与され得る。塩もしくは溶媒和物の、またはその生理学的機能的誘導体の誘導体の有効量は、本発明に従う化合物および化合物混合物それ自体の画分の有効量として決定され得る。
【0040】
本発明に従う医薬調製物は、ヒトにおける医薬および獣医学の薬として採用され得る。好適な賦形剤は、腸内（例えば、経口）、非経口または局所の投与に好適であり、および新規化合物と反応しない、有機または無機物質、例えば、水、植物油、ベンジルアルコール、ポリエチレングリコール、ゼラチン、ラクトースまたはデンプンなどの炭水化物、ステアリン酸マグネシウム、タルクまたはワセリンである。腸内投与に好適であるものは、とりわけ、錠剤、コーティング錠、カプセル、シロップ、果汁、点滴薬または坐薬であり、非経口投与に好適なものは、溶液、好ましくは、油をベースとしたものまたは水性溶液、さらにまたは懸濁液、エマルションまたは移植片であり、および局所適用に好適なものは、軟膏、クリームまたは粉末である。化合物および化合物混合物は、また凍結乾燥されていてもよく、および結果として生じる凍結乾燥物は、例えば、注射調製物の調製のために使用される。
【0041】
指し示される調製物は、滅菌されてもよく、および／または潤滑剤、保存料、安定剤および／または湿潤剤、乳化剤、浸透圧を変更するための塩、緩衝剤物質、色素、フレーバーおよび／または芳香物質などのアジュバントを含んでもよい。それらはまた、所望される場合には、１以上のさらなる活性成分、例えば、１以上のビタミンも含み得る。
【0042】
本発明はまた、がん、とくに頭頚部の扁平上皮細胞癌（ＳＣＣＨＮ）の予防および／または処置のための方法であって、Ｍ２６９８および／またはその生理学的に許容し得る塩ならびに溶媒和物、およびＥＧＦＲインヒビター、とくにセツキシマブ、ならびに本明細書の上に記載のとおりの対応する化合物混合物、医薬組成物、製剤および投与の方法を対象へ投与することを含むものに関する。
【0043】
ある態様において、本発明は以下に関する：
１．４－［（Ｓ）－２－アゼチジン－１－イル－１－（４－クロロ－３－トリフルオロメチル－フェニル）－エチルアミノ］－キナゾリン－８－カルボン酸アミド、またはその生理学的に許容し得る塩、およびＭＥＫのインヒビター、またはその生理学的に許容し得る塩を含む、化合物混合物。
２．ＭＥＫインヒビターが、ピマセルチブである、この態様の列挙において上に記載のとおりの化合物混合物。
３．ＥＧＦＲインヒビターを、さらに含む、この態様の列挙において上に記載のとおりの化合物混合物。
４．この態様の列挙において上に記載のとおりの化合物混合物、および任意に、賦形剤および／またはアジュバントを含む、医薬組成物。
１．４－［（Ｓ）－２－アゼチジン－１－イル－１－（４－クロロ－３－トリフルオロメチル－フェニル）－エチルアミノ］－キナゾリン－８－カルボン酸アミド、またはその生理学的に許容し得る塩、およびＭＥＫのインヒビター、またはその生理学的に許容し得る塩を含む、化合物混合物。
２．ＭＥＫインヒビターが、ピマセルチブである、この態様の列挙において上に記載のとおりの化合物混合物。
３．ＥＧＦＲインヒビターを、さらに含む、この態様の列挙において上に記載のとおりの化合物混合物。
４．この態様の列挙において上に記載のとおりの化合物混合物、および任意に、賦形剤および／またはアジュバントを含む、医薬組成物。
【0044】
５．（ａ）有効量の４－［（Ｓ）－２－アゼチジン－１－イル－１－（４－クロロ－３－トリフルオロメチル－フェニル）－エチルアミノ］－キナゾリン－８－カルボン酸アミドまたはその生理学的に許容し得る塩、および
（ｂ）有効量のＭＥＫインヒビター、またはその生理学的に許容し得る塩
の別個のパックを含む、セット（キット）。
６．（ｃ）有効量のＥＧＦＲインヒビターまたはその生理学的に許容し得る塩
の別個のパックをさらに含む、この態様の列挙において上に記載のとおりのセット（キット）。
７．ＥＧＦＲインヒビターが、セツキシマブである、この態様の列挙において上に記載のとおりのセット（キット）。
（ｂ）有効量のＭＥＫインヒビター、またはその生理学的に許容し得る塩
の別個のパックを含む、セット（キット）。
６．（ｃ）有効量のＥＧＦＲインヒビターまたはその生理学的に許容し得る塩
の別個のパックをさらに含む、この態様の列挙において上に記載のとおりのセット（キット）。
７．ＥＧＦＲインヒビターが、セツキシマブである、この態様の列挙において上に記載のとおりのセット（キット）。
【0045】
８．４－［（Ｓ）－２－アゼチジン－１－イル－１－（４－クロロ－３－トリフルオロメチル－フェニル）－エチルアミノ］－キナゾリン－８－カルボン酸アミド、またはその生理学的に許容し得る塩、およびＭＥＫインヒビター、またはその生理学的に許容し得る塩を対象へ投与することを含む、がんの予防または処置のための方法。
９．ＭＥＫインヒビターが、ピマセルチブである、この態様の列挙において上に記載されるとおりの方法。
１０．ＥＧＦＲインヒビター、またはその生理学的に許容し得る塩を対象へ投与することをさらに含む、この態様の列挙において上に記載のとおりの方法。
９．ＭＥＫインヒビターが、ピマセルチブである、この態様の列挙において上に記載されるとおりの方法。
１０．ＥＧＦＲインヒビター、またはその生理学的に許容し得る塩を対象へ投与することをさらに含む、この態様の列挙において上に記載のとおりの方法。
【0046】
１１．ＥＧＦＲインヒビターが、セツキシマブである、この態様の列挙において上に記載のとおりの方法。
１２．４－［（Ｓ）－２－アゼチジン－１－イル－１－（４－クロロ－３－トリフルオロメチル－フェニル）－エチルアミノ］－キナゾリン－８－カルボン酸アミド、ＭＥＫインヒビター、および任意に、ＥＧＦＲインヒビターが、同時に投与される、この態様の列挙において上に記載のとおりの方法。
１３．４－［（Ｓ）－２－アゼチジン－１－イル－１－（４－クロロ－３－トリフルオロメチル－フェニル）－エチルアミノ］－キナゾリン－８－カルボン酸アミド、ＭＥＫインヒビター、および任意に、ＥＧＦＲインヒビターが、連続して投与される、この態様の列挙において上に記載のとおりの方法。
１２．４－［（Ｓ）－２－アゼチジン－１－イル－１－（４－クロロ－３－トリフルオロメチル－フェニル）－エチルアミノ］－キナゾリン－８－カルボン酸アミド、ＭＥＫインヒビター、および任意に、ＥＧＦＲインヒビターが、同時に投与される、この態様の列挙において上に記載のとおりの方法。
１３．４－［（Ｓ）－２－アゼチジン－１－イル－１－（４－クロロ－３－トリフルオロメチル－フェニル）－エチルアミノ］－キナゾリン－８－カルボン酸アミド、ＭＥＫインヒビター、および任意に、ＥＧＦＲインヒビターが、連続して投与される、この態様の列挙において上に記載のとおりの方法。
【0047】
１４．４－［（Ｓ）－２－アゼチジン－１－イル－１－（４－クロロ－３－トリフルオロメチル－フェニル）－エチルアミノ］－キナゾリン－８－カルボン酸アミド、またはその生理学的に許容し得る塩、およびＥＧＦＲのインヒビター、好ましくはセツキシマブを含む、化合物混合物。
１５．（ａ）有効量の４－［（Ｓ）－２－アゼチジン－１－イル－１－（４－クロロ－３－トリフルオロメチル－フェニル）－エチルアミノ］－キナゾリン－８－カルボン酸アミドまたはその生理学的に許容し得る塩、および
（ｂ）有効量のＥＧＦＲインヒビター、好ましくはセツキシマブ
の別個のパックを含むセット（キット）。
１５．（ａ）有効量の４－［（Ｓ）－２－アゼチジン－１－イル－１－（４－クロロ－３－トリフルオロメチル－フェニル）－エチルアミノ］－キナゾリン－８－カルボン酸アミドまたはその生理学的に許容し得る塩、および
（ｂ）有効量のＥＧＦＲインヒビター、好ましくはセツキシマブ
の別個のパックを含むセット（キット）。
【0048】
１６．４－［（Ｓ）－２－アゼチジン－１－イル－１－（４－クロロ－３－トリフルオロメチル－フェニル）－エチルアミノ］－キナゾリン－８－カルボン酸アミド、またはその生理学的に許容し得る塩、およびＥＧＦＲインヒビター、好ましくはセツキシマブ、ここで２つの剤が、同時にまたは連続してのいずれかで投与されるを対象へ投与することを含む、がんの予防または処置のための方法。
１７．好ましい態様において、がんは、大腸がん、乳がん、胆管癌、多形性膠芽腫、頭頚部の扁平上皮細胞癌、および非小細胞肺がんである。
１７．好ましい態様において、がんは、大腸がん、乳がん、胆管癌、多形性膠芽腫、頭頚部の扁平上皮細胞癌、および非小細胞肺がんである。
【0049】
例
例１：膠芽腫（ＧＢＭ）の異種移植モデル（ＰＤＸ）由来の患者におけるＭ２６９８およびピマセルチブの組み合わせ
ＧＳＣ株：Ｉｎ ＶｉｔｒｏでのＭ２６９８およびピマセルチブへの感受性
いくつかのＧＢＭモデルにおけるＭ２６９８の効果が有意であるに関わらず、応答は相対的に穏やかであった。ＰＡＭおよびＭＡＰＫ経路の両方が、ＧＢＭに関与するため、１９ＧＳＣ（膠芽腫幹細胞）細胞／モデルにおいてｉｎ ｖｉｖｏおよびｉｎ ｖｉｔｒｏでＭ２６９８を脳浸透性のＭＥＫインヒビターであるピマセルチブと組み合わせた。
Ｉｎ ｖｉｔｒｏでのＩＣ５０データを、ｉｎ ｖｉｖｏ研究についてＧＳＣ株を選択するために使用した；ＩＣ５０値＜２μＭを高感度であるとみなし、および＞２μＭを抵抗性があるとみなした。すべてのＧＳＣ株は、Ａｋｔを発現した。ＧＳＣ２７２およびＧＳＣ２６７と比較して、ＧＳＣ１７、ＧＳＣ７－２、ＧＳＣ２３１、ＧＳＣ１１、ＧＳＣ２０、ＧＳＣ６－２７、およびＧＳＣ８－１１株における相対的に高いｐＡｋｔ発現（図１Ａ）。相対的により高いｐＡｋｔ発現を有する細胞株は、ＧＳＣ２０を除いてＭ２６９８に対して感受性があり、構成的なＡｋｔの活性化がＭ２６９８に細胞を増感させたことを示唆する（図１Ｂ）。少しの細胞株（ＧＳＣ１７、ＧＳＣ１１、およびＧＳＣ２３１）しかピマセルチブに対して感受性はなく（ＩＣ５０＜２μＭ）、ＧＳＣ２０、ＧＳＣ２７２、ＧＳＣ６－２７、およびＧＳＣ７－２には抵抗性があった（図１Ｃ）。
例１：膠芽腫（ＧＢＭ）の異種移植モデル（ＰＤＸ）由来の患者におけるＭ２６９８およびピマセルチブの組み合わせ
ＧＳＣ株：Ｉｎ ＶｉｔｒｏでのＭ２６９８およびピマセルチブへの感受性
いくつかのＧＢＭモデルにおけるＭ２６９８の効果が有意であるに関わらず、応答は相対的に穏やかであった。ＰＡＭおよびＭＡＰＫ経路の両方が、ＧＢＭに関与するため、１９ＧＳＣ（膠芽腫幹細胞）細胞／モデルにおいてｉｎ ｖｉｖｏおよびｉｎ ｖｉｔｒｏでＭ２６９８を脳浸透性のＭＥＫインヒビターであるピマセルチブと組み合わせた。
Ｉｎ ｖｉｔｒｏでのＩＣ５０データを、ｉｎ ｖｉｖｏ研究についてＧＳＣ株を選択するために使用した；ＩＣ５０値＜２μＭを高感度であるとみなし、および＞２μＭを抵抗性があるとみなした。すべてのＧＳＣ株は、Ａｋｔを発現した。ＧＳＣ２７２およびＧＳＣ２６７と比較して、ＧＳＣ１７、ＧＳＣ７－２、ＧＳＣ２３１、ＧＳＣ１１、ＧＳＣ２０、ＧＳＣ６－２７、およびＧＳＣ８－１１株における相対的に高いｐＡｋｔ発現（図１Ａ）。相対的により高いｐＡｋｔ発現を有する細胞株は、ＧＳＣ２０を除いてＭ２６９８に対して感受性があり、構成的なＡｋｔの活性化がＭ２６９８に細胞を増感させたことを示唆する（図１Ｂ）。少しの細胞株（ＧＳＣ１７、ＧＳＣ１１、およびＧＳＣ２３１）しかピマセルチブに対して感受性はなく（ＩＣ５０＜２μＭ）、ＧＳＣ２０、ＧＳＣ２７２、ＧＳＣ６－２７、およびＧＳＣ７－２には抵抗性があった（図１Ｃ）。
【0050】
Ｍ２６９８、ピマセルチブ、およびその組み合わせによるアポトーシスの誘導をｉｎ ｖｉｔｒｏでＭ２６９８に対して感受性のあった５つのＧＳＣ株のうち３つで測定した。それらのうち、ＧＳＣ１１がピマセルチブに対して最も感受性があり、ＧＳＣ１７が中程度に高感度であり、およびＧＳＣ７－２がピマセルチブに対して感受性がなかった。ＧＳＣ１１、ＧＳＣ１７、およびＧＳＣ７－２株に単剤治療として投与されたＭ２６９８およびピマセルチブの両方がアポトーシスを誘導したが、各化合物についてＩＣ５０（夫々、５６％、１１％、１３％）対２×ＩＣ５０（夫々、６２％、１２％、１７％）でのアポトーシスのパーセンテージにおいて見掛け上差異はなかった。Ｍ２６９８＋ピマセルチブは、単剤単独を用いた場合と比較して、アポトーシスの誘導において、相加作用（ＧＳＣ１１およびＧＳＣ７－２株）、または見掛けの相乗作用（ＧＳＣ１７株）のいずれかを有した（図１Ｄ）。
【0051】
同所性のＧＳＣ異種移植モデルにおけるＭ２６９８およびピマセルチブのｉｎ ｖｉｖｏでの有効性およびＰＤ効果
単独および組み合わせにおける、Ｍ２６９８およびピマセルチブのｉｎ ｖｉｖｏ効果を、マウス内への同所性の移植後に、ＧＳＣモデルにおいて査定した。処置期間および移植後の安楽死の時を、５～１０週とした。エンドポイントを、ＰＤマーカーであるｐＳ６およびｐＥＲＫ、増殖マーカーであるＫｉ６７の発現、腫瘍体積および生存によって測定されるとおりのアポトーシスとした。
７つのＧＳＣモデルのうち１つ（ＧＳＣ２０）以外のすべてが、腫瘍体積により測定されるとおりＭ２６９８単剤治療に対して感受性があった；Ｍ２６９８は、腫瘍成長を有意に阻害したか（ＧＳＣ１７、ＧＳＣ６－２７、ＧＳＣ７－２、ＧＳＣ２７２、ＧＳＣ２３１；すべてＰ＜０．０５；図２Ａ）、またはそうする傾向があった（ＧＳＣ１１、Ｐ＝０．１０）。６つのＭ２６９８感受性モデルのうち、５つがピマセルチブ単剤治療に応答し、有意な腫瘍成長阻害（ＧＳＣ６－２７、ＧＳＣ７－２、ＧＳＣ２７２；Ｐ＜０．０５）を有するか、または有意な応答に向けた傾向を有するか（ＧＳＣ２３１ Ｐ＝０．１０）のいずれかであった。ＧＳＣ１７の腫瘍成長は、ピマセルチブ単独では影響を受けなかった（ビヒクルと比較してＰ＝０．３４）。Ｍ２６９８＋ピマセルチブは、ビヒクルと比較して、すべてのＧＳＣモデルにおいて、腫瘍成長に関して単剤治療の処置に応答しなかった（Ｐ＞０．０５）、ＧＳＣ２０においてさえ、腫瘍成長を有意に阻害した（すべてＰ＜０．０５；図２Ａ）。
単独および組み合わせにおける、Ｍ２６９８およびピマセルチブのｉｎ ｖｉｖｏ効果を、マウス内への同所性の移植後に、ＧＳＣモデルにおいて査定した。処置期間および移植後の安楽死の時を、５～１０週とした。エンドポイントを、ＰＤマーカーであるｐＳ６およびｐＥＲＫ、増殖マーカーであるＫｉ６７の発現、腫瘍体積および生存によって測定されるとおりのアポトーシスとした。
７つのＧＳＣモデルのうち１つ（ＧＳＣ２０）以外のすべてが、腫瘍体積により測定されるとおりＭ２６９８単剤治療に対して感受性があった；Ｍ２６９８は、腫瘍成長を有意に阻害したか（ＧＳＣ１７、ＧＳＣ６－２７、ＧＳＣ７－２、ＧＳＣ２７２、ＧＳＣ２３１；すべてＰ＜０．０５；図２Ａ）、またはそうする傾向があった（ＧＳＣ１１、Ｐ＝０．１０）。６つのＭ２６９８感受性モデルのうち、５つがピマセルチブ単剤治療に応答し、有意な腫瘍成長阻害（ＧＳＣ６－２７、ＧＳＣ７－２、ＧＳＣ２７２；Ｐ＜０．０５）を有するか、または有意な応答に向けた傾向を有するか（ＧＳＣ２３１ Ｐ＝０．１０）のいずれかであった。ＧＳＣ１７の腫瘍成長は、ピマセルチブ単独では影響を受けなかった（ビヒクルと比較してＰ＝０．３４）。Ｍ２６９８＋ピマセルチブは、ビヒクルと比較して、すべてのＧＳＣモデルにおいて、腫瘍成長に関して単剤治療の処置に応答しなかった（Ｐ＞０．０５）、ＧＳＣ２０においてさえ、腫瘍成長を有意に阻害した（すべてＰ＜０．０５；図２Ａ）。
【0052】
ＧＳＣモデルの生存の中央値は、腫瘍体積データを完全に反映するものではなかった。（図１Ｂ）。Ｍ２６９８（ＧＳＣ２７２およびＧＳＣ２３１）および組み合わせ（ＧＳＣ１７およびＧＳＣ７－２）は、夫々ビヒクルと比較して、２つのモデルにおいてのみ生存を長くし（Ｐ＜０．０５）、およびピマセルチブは、モデルのいずれにおいても対照に対して生存に有意な効果を有さなかった（Ｐ＞０．０５）。ＧＳＣ６－２７において、ビヒクルで処置されたマウスは、未知の理由のために、処置グループからのマウスよりも有意に長い生存の中央値を有した（Ｐ＜０．０５）。対照的に、両方の単独治療は、いくつかのモデルにおいて腫瘍成長を有意に阻害し、および組み合わせは、すべてのモデルにおいて腫瘍成長を阻害した。
【0053】
腫瘍体積に対する有意な効果は、化合物が脳に侵入し、および同所性に成長する腫瘍に影響を与えたことを指し示す。ＢＢＢ浸透の追加の証拠は、腫瘍細胞における標的シグナル伝達経路のＰＤマーカーに対する効果を包含した。Ｍ２６９８は、ＧＳＣ２０を除くすべてのＧＳＣモデルの同所性の腫瘍におけるｐＳ６を有意に低減した（Ｐ＜０．０５；図３Ａ）。同様に、ピマセルチブ処置のｐＥＲＫタンパク質に対する有意な効果は、ＧＳＣ２０腫瘍においては見られなかった（Ｐ＝０．１８）一方で、ピマセルチブは、ピマセルチブ処置に続いて腫瘍体積の低減を経験しなかったＧＳＣ１７を包含する他のＧＳＣ腫瘍においてｐＥＲＫを有意に低減した（Ｐ＜０．０５；図３Ｂ）。Ｍ２６９８＋ピマセルチブの組み合わせは、ＧＳＣ２０を除くすべてのモデルにおいてｐＳ６およびｐＥＲＫを低減した（すべてＰ＜０．０５）。ＧＳＣ２０モデルのビヒクルで処置されたマウスにおける腫瘍成長、ｐＳ６およびｐＥＲＫにおける相対的に高いバリエーションは、これらのエンドポイントに対する生物学的に関係のある処置効果の統計学的有意性を隠した可能性がある。逆に言うと、有意な応答の欠如は、ｉｎ ｖｉｔｒｏでの両方の化合物へのＧＳＣ２０の非感受性によって予測された（図１Ｂおよび図１Ｃ）。
【0054】
ｐＥＲＫに対するピマセルチブの効果および同所性の脳モデルにおけるｐＳ６に対するＭ２６９８に対するＭ２６９８の効果に加えて、それぞれのＭ２６９８はまた、反対のＰＤマーカーに影響を与えることができた。ピマセルチブは、ＧＳＣ２７２およびＧＳＣ２３１モデルにおいてｐＳ６を有意に低減した。Ｍ２６９８は、ＧＳＣ２０を除くすべてのＧＳＣモデルにおいてｐＥＲＫを低減した（Ｐ＜０．０５；図３Ｂ）。
ＧＳＣ腫瘍のうちの３つを、ＰＤマーカーに関して１より多い時点で分析した。時間にわたる応答についての統計分析は実施されなかったが、異なるエンドポイントにおける傾向を評価した。ｐＳ６陽性細胞のパーセンテージは、ＧＳＣ７－２およびＧＳＣ２７２腫瘍において経時的に増大したが、ＧＳＣ２３１腫瘍では増大しなかった一方で、ｐＥＲＫは、ＧＳＣ７－２腫瘍においてのみ経時的に増大した（図３）。ＧＳＣ２７２およびＧＳＣ２３１モデルにおけるピマセルチブによるｐＳ６の交差経路の低減は、７．５～１０週まで少なくなり、およびｐＥＲＫ発現に対する単独または組み合わせでの化合物の活性は、ＧＳＣ２３１モデルにおいて７．５～１０週まで低減した。これらの傾向が、耐性の発症に関連するか否かは、追加の研究を要するが、それらは、モデルの不均一性を反映する。
ＧＳＣ腫瘍のうちの３つを、ＰＤマーカーに関して１より多い時点で分析した。時間にわたる応答についての統計分析は実施されなかったが、異なるエンドポイントにおける傾向を評価した。ｐＳ６陽性細胞のパーセンテージは、ＧＳＣ７－２およびＧＳＣ２７２腫瘍において経時的に増大したが、ＧＳＣ２３１腫瘍では増大しなかった一方で、ｐＥＲＫは、ＧＳＣ７－２腫瘍においてのみ経時的に増大した（図３）。ＧＳＣ２７２およびＧＳＣ２３１モデルにおけるピマセルチブによるｐＳ６の交差経路の低減は、７．５～１０週まで少なくなり、およびｐＥＲＫ発現に対する単独または組み合わせでの化合物の活性は、ＧＳＣ２３１モデルにおいて７．５～１０週まで低減した。これらの傾向が、耐性の発症に関連するか否かは、追加の研究を要するが、それらは、モデルの不均一性を反映する。
【0055】
Ｍ２６９８＋ピマセルチブの組み合わせが生存を有意に延ばした２つのモデルである、ＧＳＣ１７およびＧＳＣ７－２からの腫瘍の切片において、Ｋｉ６７を免疫組織化学により測定した（図３Ｃ）。ＧＳＣ１７モデルにおいて、３つすべての処置は、ＧＳＣ７－２モデルにおいてＭ２６９８単剤治療およびそのピマセルチブとの組み合わせを行ったように、ビヒクルと比較して、有意に増殖を低減した（すべてＰ＜０．０５）。
Ｍ２６９８、ピマセルチブ、および組み合わせ処置のいずれも、７．５週でのＧＳＣ７－２異種移植対対照においてアポトーシスに有意な影響を与えなかった。しかしながら１０週後には、ｉｎ ｖｉｔｒｏのデータと同様に、Ｍ２６９８＋ピマセルチブの組み合わせは、対照（８．５０±１．８０；Ｐ＝０．００２）、Ｍ２６９８単独（５２．１７±２５．２０；Ｐ＝０．０１）、およびピマセルチブ単独（６５．００±６０．８０；Ｐ＝０．０２）と比較して、アポトーシスの細胞数／フィールドを有意に増大させた（１７２．３３±６０．８０）。
Ｍ２６９８、ピマセルチブ、および組み合わせ処置のいずれも、７．５週でのＧＳＣ７－２異種移植対対照においてアポトーシスに有意な影響を与えなかった。しかしながら１０週後には、ｉｎ ｖｉｔｒｏのデータと同様に、Ｍ２６９８＋ピマセルチブの組み合わせは、対照（８．５０±１．８０；Ｐ＝０．００２）、Ｍ２６９８単独（５２．１７±２５．２０；Ｐ＝０．０１）、およびピマセルチブ単独（６５．００±６０．８０；Ｐ＝０．０２）と比較して、アポトーシスの細胞数／フィールドを有意に増大させた（１７２．３３±６０．８０）。
【0056】
例２：非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）脳転移の患者由来異種移植モデル（ＰＤＸ）におけるＭ２６９８およびピマセルチブの組み合わせ
図４に見られるように、Ｍ２６９８のピマセルチブとの組み合わせは、予想外にも、２６％の腫瘍制御率（ＴＣＲ）を示す一方で、単剤は、５％（Ｍ２６９８）および１６％（ピマセルチブ）を示す。
図４に見られるように、Ｍ２６９８のピマセルチブとの組み合わせは、予想外にも、２６％の腫瘍制御率（ＴＣＲ）を示す一方で、単剤は、５％（Ｍ２６９８）および１６％（ピマセルチブ）を示す。
【0057】
例３：Ｈｅｒ２＋／ＨＲ－乳がんの患者由来異種移植モデル（ＰＤＸ）におけるＭ２６９８およびピマセルチブの組み合わせ
図５に見られるように、Ｍ２６９８のピマセルチブとの組み合わせは、予想外にも、実験の期間にわたり腫瘍体積をほとんどゼロにまで低減する一方で、単剤は、ただ単に腫瘍体積の停滞を達成したに過ぎない。
図５に見られるように、Ｍ２６９８のピマセルチブとの組み合わせは、予想外にも、実験の期間にわたり腫瘍体積をほとんどゼロにまで低減する一方で、単剤は、ただ単に腫瘍体積の停滞を達成したに過ぎない。
【0058】
例４：胆管癌の患者由来異種移植モデル（ＰＤＸ）におけるＭ２６９８およびピマセルチブの組み合わせ
この実験の目標は、Ｍ２６９８単独およびピマセルチブと組み合わせての抗腫瘍活性を、免疫欠損マウスにおける中国人患者に由来するヒト胆管癌を表す１３の患者由来異種移植モデルにおいて評価することであった。モデルのＨｅｒ２ステータスを、免疫組織化学（ＩＨＣ）を介して得、および図６に表示する。
この実験の目標は、Ｍ２６９８単独およびピマセルチブと組み合わせての抗腫瘍活性を、免疫欠損マウスにおける中国人患者に由来するヒト胆管癌を表す１３の患者由来異種移植モデルにおいて評価することであった。モデルのＨｅｒ２ステータスを、免疫組織化学（ＩＨＣ）を介して得、および図６に表示する。
【0059】
研究設計
ビヒクル：Ｍｉｌｌｉ－Ｑ水中０．５％メトセル／０．２５％Ｔｗｅｅｎ２０。３匹の非処置マウスからの腫瘍を、腫瘍体積が３００～５００ｍｍ３の間に至ったときのサテライト試料として収集した。
【表1】
【0060】
図６から導き出され得るとおり、驚くべきことに、１２の腫瘍試料のうち１０において（８３％）、Ｍ２６９８およびピマセルチブで腫瘍停滞が達成されたが一方で、単剤は、１７％（２／１２、Ｍ２６９８）および８％（１／１２、ピマセルチブ）を示す。この実験において、いずれの処置においても、腫瘍成長応答も、退縮さえも観察されなかった。
【0061】
例５：７５の大腸がんの患者由来異種移植モデル（ＰＤＸ）におけるＭ２６９８、ピマセルチブおよびセツキシマブの組み合わせ
研究設計
７５のモデルのうち、２５が野生型であり、２５がＫＲａｓ突然変異体であり、および２５がＢＲａｆ突然変異体であった。
研究設計
【表2】
【0062】
結果
図７が示すとおり、単剤についての腫瘍制御率（ＴＣＲ）は、Ｍ２６９８について１５％（１１／７４）、ピマセルチブについて３２％（２４／７４）およびセツキシマブについて２１％（１５／７３）であった。
図８が示すとおり、二重の組み合わせについては、ピマセルチブ＋セツキシマブについて５９％（４４／７４）、およびＭ２６９８＋セツキシマブについて３５％（２６／７４）、および予想外にも、Ｍ２６９８＋ピマセルチブについて６３％（４５／７２）のＴＣＲであった。
図９が示す通り、三重の組み合わせについては、驚くべきことに、ＴＣＲは、二重の組み合わせのＴＣＲよりもさらに有意に高い、７８％（５８／７４）である。
図７が示すとおり、単剤についての腫瘍制御率（ＴＣＲ）は、Ｍ２６９８について１５％（１１／７４）、ピマセルチブについて３２％（２４／７４）およびセツキシマブについて２１％（１５／７３）であった。
図８が示すとおり、二重の組み合わせについては、ピマセルチブ＋セツキシマブについて５９％（４４／７４）、およびＭ２６９８＋セツキシマブについて３５％（２６／７４）、および予想外にも、Ｍ２６９８＋ピマセルチブについて６３％（４５／７２）のＴＣＲであった。
図９が示す通り、三重の組み合わせについては、驚くべきことに、ＴＣＲは、二重の組み合わせのＴＣＲよりもさらに有意に高い、７８％（５８／７４）である。
【0063】
例６：３８のＳＣＣＨＮの患者由来異種移植モデル（ＰＤＸ）におけるＭ２６９８およびセツキシマブの組み合わせ
４６のＳＣＣＨＮ ＰＤＸモデルについて、１＋１スキーム（処置グループあたり１匹のマウス）で実行した。モデルが成長し損なったため、８のモデルを取り消した。取り消されたものを調整して、３８のモデルを仕上げた。Ｍ２６９８を標準治療（ＳｏＣ）剤であるシスプラチンおよびセツキシマブと共に、すべての単剤治療および「１＋１」スクリーンでの組み合わせ、すなわちモデルあたり処置あたり１匹のマウスにおいて投与した。移植後、各モデルについて平均腫瘍体積が約２００ｍｍ３に至ったときに処置を開始した。すべての動物についてモデルを安楽死させるときである、対照の腫瘍が約１２００ｍｍ３に至るまで、各モデルについて腫瘍体積を測定した。
４６のＳＣＣＨＮ ＰＤＸモデルについて、１＋１スキーム（処置グループあたり１匹のマウス）で実行した。モデルが成長し損なったため、８のモデルを取り消した。取り消されたものを調整して、３８のモデルを仕上げた。Ｍ２６９８を標準治療（ＳｏＣ）剤であるシスプラチンおよびセツキシマブと共に、すべての単剤治療および「１＋１」スクリーンでの組み合わせ、すなわちモデルあたり処置あたり１匹のマウスにおいて投与した。移植後、各モデルについて平均腫瘍体積が約２００ｍｍ３に至ったときに処置を開始した。すべての動物についてモデルを安楽死させるときである、対照の腫瘍が約１２００ｍｍ３に至るまで、各モデルについて腫瘍体積を測定した。
【0064】
研究設計
【表3】
【0065】
【図1】
【図2-1】
【図2-2】
【図2-3】
【図2-4】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】
【図7-1】
【図7-2】
【図7-3】
【図8-1】
【図8-2】
【図8-3】
【図9-1】
【図9-2】
【図10】
【国際調査報告】