(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2023-12-25
(54)【発明の名称】胞子組成物、その生成及び使用
(51)【国際特許分類】
C12N 1/20 20060101AFI20231218BHJP
A01N 47/44 20060101ALI20231218BHJP
A01N 63/25 20200101ALI20231218BHJP
A01N 63/20 20200101ALI20231218BHJP
A01P 3/00 20060101ALI20231218BHJP
C07K 14/195 20060101ALN20231218BHJP
【ＦＩ】
C12N1/20 A
A01N47/44
A01N63/25
A01N63/20
A01P3/00
C07K14/195
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2023536931
(86)(22)【出願日】2021-12-10
(85)【翻訳文提出日】2023-06-16
(86)【国際出願番号】 EP2021085278
(87)【国際公開番号】W WO2022128812
(87)【国際公開日】2022-06-23
(31)【優先権主張番号】20215121.3
(32)【優先日】2020-12-17
(33)【優先権主張国・地域又は機関】EP
(81)【指定国・地域】
【公序良俗違反の表示】
（特許庁注：以下のものは登録商標）
１．ＴＷＥＥＮ
(71)【出願人】
【識別番号】508020155
【氏名又は名称】ビーエーエスエフ ソシエタス・ヨーロピア
【氏名又は名称原語表記】ＢＡＳＦ ＳＥ
【住所又は居所原語表記】Ｃａｒｌ－Ｂｏｓｃｈ－Ｓｔｒａｓｓｅ ３８， ６７０５６ Ｌｕｄｗｉｇｓｈａｆｅｎ ａｍ Ｒｈｅｉｎ， Ｇｅｒｍａｎｙ
(74)【代理人】
【識別番号】110002572
【氏名又は名称】弁理士法人平木国際特許事務所
(72)【発明者】
【氏名】メイ，トビアス
(72)【発明者】
【氏名】シュティール，ラインハルト
(72)【発明者】
【氏名】チャン，シュアン
(72)【発明者】
【氏名】ハインリッヒ，ダニエル クリストフ
(72)【発明者】
【氏名】ハース，イヴァンジェリン プリヤ
(72)【発明者】
【氏名】ヘロルト，アンドレア
【テーマコード（参考）】
4B065
4H011
4H045
【Ｆターム（参考）】
4B065AA01X
4B065AC13
4B065AC14
4B065CA10
4B065CA24
4B065CA47
4H011AA01
4H011BB11
4H011BB21
4H045AA10
4H045AA20
4H045AA30
4H045BA31
4H045CA11
4H045EA06
(57)【要約】
本発明は、胞子組成物及びそのような組成物を生成する方法を提供することに関する。本発明は、植物保護製品及びそのような胞子組成物から利益を得ること並びに植物の利益、近傍領域への病原体放出の低減及び動物又はヒトの利益のためのそのような組成物の使用にも関する。更に、本発明は、効率的な発酵方法に関する。
【選択図】なし
【選択図】なし
【特許請求の範囲】
【請求項1】
原核微生物の精製胞子を含む胞子組成物であって、ａ）前記胞子は、コロニー形成に適した培地上にプレーティングされた場合にコロニーを形成し、プレーティング後、好気性培養について７２時間以内及び嫌気性培養について９６時間以内に形成された全ての前記コロニーの少なくとも４０％、より好ましくは４０～９０％、より好ましくは少なくとも５０％、より好ましくは５０～９０％、より好ましくは少なくとも６０％、より好ましくは６０～９０％、より好ましくは少なくとも７０％、より好ましくは７０～９０％は、４８時間以内に形成され、及び／又は
ｂ）胞子の少なくとも４０％、より好ましくは少なくとも５０％、より好ましくは少なくとも５５％、より好ましくは少なくとも６０％、より好ましくは少なくとも７０％、より好ましくは少なくとも８０％は、第１の胞子形成期中に回収された発酵物から得ることができるか又は得られ、及び／又は
ｃ）１胞子あたりのジピコリン酸の平均含有量は、定常期まで好適な培地で発酵された胞子のジピコリン酸の平均含有量の最大で８０％、より好ましくは２０～８０％、更により好ましくは２２～７０％、更により好ましくは３０～６５％である、胞子組成物。
【請求項2】
前記微生物は、ファーミキューテス（Ｆｉｒｍｉｃｕｔｅｓ）門、バチルス（Ｂａｃｉｌｌｉ）綱、クロストリジウム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉａ）綱又はネガティウィクテス（Ｎｅｇａｔｉｖｉｃｕｔｅｓ）綱、より好ましくはバチルス（Ｂａｃｉｌｌａｌｅｓ）目、クロストリジウム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉａｌｅｓ）目、サーモアナエロバクター（Ｔｈｅｒｍｏａｎａｅｒｏｂａｃｔｅｒａｌｅｓ）目、サーモセディミニバクター（Ｔｈｅｒｍｏｓｅｄｉｍｉｎｉｂａｃｔｅｒａｌｅｓ）目又はセレノモナス（Ｓｅｌｅｎｏｍｏｎａｄａｌｅｓ）目、より好ましくはバチルス（Ｂａｃｉｌｌａｃｅａｅ）科、パエニバチルス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌａｃｅａｅ）科、パスツリア（Ｐａｓｔｅｕｒｉａｃｅａｅ）科、クロストリジウム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉａｃｅａｅ）科、ペプトコッカス（Ｐｅｐｔｏｃｏｃｃａｃｅａｅ）科、ヘリオバクテリウム（Ｈｅｌｉｏｂａｃｔｅｒｉａｃｅａｅ）科、シントロフォモナス（Ｓｙｎｔｒｏｐｈｏｍｏｎａｄａｃｅａｅ）科、サーモアナエロバクター（Ｔｈｅｒｍｏａｎａｅｒｏｂａｃｔｅｒａｃｅａｅ）科、テピダナエロバクター（Ｔｅｐｉｄａｎａｅｒｏｂａｃｔｅｒａｃｅａｅ）科又はスポロミュサ（Ｓｐｏｒｏｍｕｓａｃｅａｅ）科、より好ましくはアルカリバチルス（Ａｌｋａｌｉｂａｃｉｌｌｕｓ）属、バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）属、ゲオバチルス（Ｇｅｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属、ハロバチルス（Ｈａｌｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属、リシニバチルス（Ｌｙｓｉｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ）属、ピシバチルス（Ｐｉｓｃｉｂａｃｉｌｌｕｓ）属、テリバチルス（Ｔｅｒｒｉｂａｃｉｌｌｕｓ）属、ブレビバチルス（Ｂｒｅｖｉｂａｃｉｌｌｕｓ）属、パエニバチルス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ）属、サーモバチルス（Ｔｈｅｒｍｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属、パスツリア（Ｐａｓｔｅｕｒｉａ）属、クロストリジウム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ）属、デスルホトマクルム（Ｄｅｓｕｌｆｏｔｏｍａｃｕｌｕｍ）属、ヘリオバクテリウム（Ｈｅｌｉｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属、ペロスポラ（Ｐｅｌｏｓｐｏｒａ）属、ペロトマクルム（Ｐｅｌｏｔｏｍａｃｕｌｕｍ）属、カルダナエロバクター（Ｃａｌｄａｎａｅｒｏｂａｃｔｅｒ）属、ムーレラ（Ｍｏｏｒｅｌｌａ）属、サーモアナエロバクター（Ｔｈｅｒｍｏａｎａｅｒｏｂａｃｔｅｒ）属、テピダナエロバクター（Ｔｅｐｉｄａｎａｅｒｏｂａｃｔｅｒ）属、プロピオニスポラ（Ｐｒｏｐｉｏｎｉｓｐｏｒａ）属又はスポロミュサ（Ｓｐｏｒｏｍｕｓａ）属、より好ましくはバチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）属、パエニバチルス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ）属又はクロストリジウム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ）属の分類学的階級から選択される、請求項１に記載の組成物。
【請求項3】
ａ）生存細胞及び胞子を最大で４：１、より好ましくは３：１～０．２：１の比率で含み、及び／又はｂ）前記胞子に加えて、
ｉ）殺真菌活性、殺細菌活性、殺ウイルス活性及び／又は植物防御活性化剤活性を有する１種以上の微生物殺有害生物剤、
ｉｉ）殺真菌活性、殺細菌活性、殺ウイルス活性及び／又は植物防御活性化剤活性を有する１種以上の生化学的殺有害生物剤、
ｉｉｉ）殺虫活性、殺ダニ活性、殺軟体動物活性及び／又は殺線虫活性を有する１種以上の微生物殺有害生物剤、
ｉｖ）殺虫活性、殺ダニ活性、殺軟体動物活性、フェロモン活性及び／又は殺線虫活性を有する１種以上の生化学的殺有害生物剤、
ｖ）呼吸阻害剤、ステロール生合成阻害剤、核酸合成阻害剤、細胞分裂及び細胞骨格の形成又は機能の阻害剤、アミノ酸及びタンパク質合成の阻害剤、シグナル伝達阻害剤、脂質及び膜合成阻害剤、多部位作用性阻害剤、細胞壁合成阻害剤、植物防御誘導剤並びに作用機序が不明である殺真菌剤から選択される１種以上の殺真菌剤
からなる群から好ましくは選択される少なくとも１種の有害生物防除剤を含み、及び／又は
ｃ）少なくとも１種のフサリシジン、パエニセリン又はパエニプロリキシン、好ましくは少なくとも２種以上のフサリシジン、パエニセリン又はパエニプロキシリン、より好ましくは３～８０種のフサリシジンを含み、前記１種以上のフサリシジンは、フサリシジンＡ、Ｂ若しくはＤのいずれか、及び／又はサーファクチン、及び／又はイツリンを含み、及び／又は
ｄ）前記組成物は、安定剤（好ましくはグリセロール）、増量剤、溶媒、界面活性剤、自生促進剤、固体担体、液体担体、乳化剤、分散剤、フィルム形成剤、防霜剤、増粘剤、植物成長調節剤、無機リン酸塩、肥料、補助剤、胞子発芽剤、脂肪酸及びフィブリル、ミクロフィブリル又はナノフィブリル構造化剤からなる群から選択される少なくとも１種の助剤を含む、請求項１又は２に記載の組成物。
【請求項4】
植物有害生物防除組成物であり、且つ／或いは植物、その部分若しくは繁殖材料又は前記植物が成長する基材に適用された場合、植物病原性真菌性若しくは細菌性病害を予防するか、制限するか若しくは低減させ、且つ／又は前記植物の健康を改善若しくは促進し、且つ／又は前記植物の収量を増加させるか若しくは促進する、請求項１～３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項5】
少なくとも１０＾４ｃｆｕ／ｍｌ、より好ましくは１０＾４～１０＾１７ｃｆｕ／ｍｌ、より好ましくは１０＾７～１０＾１５ｃｆｕ／ｍｌの前記胞子を含む、請求項１～４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項6】
前記胞子の少なくとも一部分は、ペイロードドメインを含むタンパク質をそれらの表面に含み、前記タンパク質は、前記ペイロードドメインを前記胞子の前記表面に送達するための標的ドメインも含む、請求項１～５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項7】
請求項１～６のいずれか一項に記載の組成物又は請求項１３～１５のいずれか一項に記載の方法によって得ることができるか若しくは得られる組成物でコーティングされるか又はそれを注入された植物栽培基材を含む植物保護製品。
【請求項8】
植物、植物の部分又は植物繁殖材料であって、前記材料は、請求項１～６のいずれか一項に記載の組成物又は請求項１３～１５のいずれか一項に記載の方法によって得ることができるか若しくは得られる組成物をその表面に含むか又はその中に注入されている、植物、植物の部分又は植物繁殖材料。
【請求項9】
請求項８に記載の植物、植物の部分若しくは植物繁殖材料又は請求項７に記載の植物栽培基材を含む栽培場、好ましくは圃場又は温室苗床。
【請求項10】
請求項１～６のいずれか一項に記載の組成物又は請求項１３～１５のいずれか一項に記載の方法によって得ることができるか若しくは得られる組成物を含む清浄製品であって、好ましくは洗浄剤を含み、且つ界面活性剤、ビルダー及びハイドロトロープ剤から選択される少なくとも１つの成分は、清浄性能に有効な量又は前記洗浄剤の物理的特徴を維持するのに有効な量で存在し、前記清浄製品は、好ましくは、皮膚清浄製品、毛髪清浄製品、洗濯製品、食器洗浄製品、パイプ脱脂剤又はアレルゲン除去製品からなる群から選択される、清浄製品。
【請求項11】
請求項１～６のいずれか一項に記載の組成物又は請求項１３～１５のいずれか一項に記載の方法によって得ることができるか若しくは得られる組成物を含む食品製品、飼料製品又は化粧品、好ましくはプロバイオティクス若しくはプレバイオティクス食品製品、プロバイオティクス若しくはプレバイオティクス飼料製品又はプロバイオティクス若しくはプレバイオティクス化粧品。
【請求項12】
本発明による組成物、好ましくは鉱物表面の処理のための塗料組成物、コーティング組成物又は含浸組成物、コンクリート又は硬化コンクリートの調製のためのセメント配合物、添加剤を含む建築製品。
【請求項13】
原核微生物の胞子を含む組成物を生成する方法であって、１）胞子形成を導く培地中で前記微生物を発酵させる工程、
２）前記胞子を精製して前記組成物を得る工程
を含み、
ａ）精製は、前記発酵工程１）で得ることができる最大胞子濃度の８５％に達するときに最後に実施され、より好ましくは、精製は、前記最大値に対して１～７５％の範囲の濃度に達するとき、より好ましくは前記最大値に対して１０～７５％の範囲の濃度に達するとき、より好ましくは前記最大値に対して２０～７０％の範囲の濃度に達するとき、より好ましくは前記最大値に対して３０～６８％の範囲の濃度に達するときに実施され、及び／又は
ｂ）精製は、前記精製胞子が、コロニー形成に適した培地上にプレーティングされた場合にコロニーを形成し、プレーティング後、好気性培養について７２時間以内及び嫌気性培養について９６時間以内に形成された全ての前記コロニーの少なくとも４０％、より好ましくは４０～９０％、より好ましくは少なくとも５０％、より好ましくは５０～９０％、より好ましくは少なくとも６０％、より好ましくは６０～９０％、より好ましくは少なくとも７０％、より好ましくは７０～９０％が４８時間以内に形成されるように実施され、及び／又は
ｃ）精製は、前記精製胞子の少なくとも４０％、より好ましくは少なくとも５０％、より好ましくは少なくとも５５％、より好ましくは少なくとも６０％、より好ましくは少なくとも７０％、より好ましくは少なくとも８０％が、第１の胞子形成期中に回収された発酵物から得ることができるか又は得られるように実施され、及び／又は
ｄ）精製は、１胞子あたりのジピコリン酸の平均含有量が、前記発酵工程１）で最大胞子濃度に達するときに生成される胞子のジピコリン酸の平均含有量の最大で８０％である場合、より好ましくはジピコリン酸の平均含有量が２０～８０％の範囲、更により好ましくは２２～７０％の範囲、更により好ましくは３０～６５％の範囲である場合に実施される、方法。
【請求項14】
前記微生物は、ファーミキューテス（Ｆｉｒｍｉｃｕｔｅｓ）門、バチルス（Ｂａｃｉｌｌｉ）綱、クロストリジウム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉａ）綱又はネガティウィクテス（Ｎｅｇａｔｉｖｉｃｕｔｅｓ）綱、より好ましくはバチルス（Ｂａｃｉｌｌａｌｅｓ）目、クロストリジウム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉａｌｅｓ）目、サーモアナエロバクター（Ｔｈｅｒｍｏａｎａｅｒｏｂａｃｔｅｒａｌｅｓ）目、サーモセディミニバクター（Ｔｈｅｒｍｏｓｅｄｉｍｉｎｉｂａｃｔｅｒａｌｅｓ）目又はセレノモナス（Ｓｅｌｅｎｏｍｏｎａｄａｌｅｓ）目、より好ましくはバチルス（Ｂａｃｉｌｌａｃｅａｅ）科、パエニバチルス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌａｃｅａｅ）科、パスツリア（Ｐａｓｔｅｕｒｉａｃｅａｅ）科、クロストリジウム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉａｃｅａｅ）科、ペプトコッカス（Ｐｅｐｔｏｃｏｃｃａｃｅａｅ）科、ヘリオバクテリウム（Ｈｅｌｉｏｂａｃｔｅｒｉａｃｅａｅ）科、シントロフォモナス（Ｓｙｎｔｒｏｐｈｏｍｏｎａｄａｃｅａｅ）科、サーモアナエロバクター（Ｔｈｅｒｍｏａｎａｅｒｏｂａｃｔｅｒａｃｅａｅ）科、テピダナエロバクター（Ｔｅｐｉｄａｎａｅｒｏｂａｃｔｅｒａｃｅａｅ）科又はスポロミュサ（Ｓｐｏｒｏｍｕｓａｃｅａｅ）科、より好ましくはアルカリバチルス（Ａｌｋａｌｉｂａｃｉｌｌｕｓ）属、バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）属、ゲオバチルス（Ｇｅｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属、ハロバチルス（Ｈａｌｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属、リシニバチルス（Ｌｙｓｉｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ）属、ピシバチルス（Ｐｉｓｃｉｂａｃｉｌｌｕｓ）属、テリバチルス（Ｔｅｒｒｉｂａｃｉｌｌｕｓ）属、ブレビバチルス（Ｂｒｅｖｉｂａｃｉｌｌｕｓ）属、パエニバチルス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ）属、サーモバチルス（Ｔｈｅｒｍｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属、パスツリア（Ｐａｓｔｅｕｒｉａ）属、クロストリジウム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ）属、デスルホトマクルム（Ｄｅｓｕｌｆｏｔｏｍａｃｕｌｕｍ）属、ヘリオバクテリウム（Ｈｅｌｉｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属、ペロスポラ（Ｐｅｌｏｓｐｏｒａ）属、ペロトマクルム（Ｐｅｌｏｔｏｍａｃｕｌｕｍ）属、カルダナエロバクター（Ｃａｌｄａｎａｅｒｏｂａｃｔｅｒ）属、ムーレラ（Ｍｏｏｒｅｌｌａ）属、サーモアナエロバクター（Ｔｈｅｒｍｏａｎａｅｒｏｂａｃｔｅｒ）属、テピダナエロバクター（Ｔｅｐｉｄａｎａｅｒｏｂａｃｔｅｒ）属、プロピオニスポラ（Ｐｒｏｐｉｏｎｉｓｐｏｒａ）属又はスポロミュサ（Ｓｐｏｒｏｍｕｓａ）属、より好ましくはバチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）属、パエニバチルス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ）属又はクロストリジウム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ）属の分類学的階級から選択される、請求項１３に記載の方法。
【請求項15】
ａ）前記精製工程２）は、－ 胞子の脱水、凍結乾燥、均質化、抽出、濾過、遠心分離、沈降又は濃縮の工程を含み、及び／又は
－ 前記組成物の含水量を、
ａ）乾燥、粉末又は顆粒状組成物の場合、前記組成物の１～１０重量％、好ましくは前記組成物の２～８重量％に調整すること、
ｂ）液体又はペースト状組成物の場合、前記組成物の１０～９８重量％、前記組成物の最大で９７重量％、より好ましくは前記組成物の８０～９５重量％に調整すること
を含み、及び／又は
－ 前記組成物の炭素源含有量を、胞子回収時のその含有量と比較して前記組成物の最大で５０重量％、より好ましくは前記組成物の５～３０重量％に調整することを含み、
－ 前記組成物における胞子発芽の抑制又は低減をもたらし、及び／又は
ｂ）前記方法は、
ｉ）殺真菌活性、殺細菌活性、殺ウイルス活性及び／又は植物防御活性化剤活性を有する１種以上の微生物殺有害生物剤、
ｉｉ）殺真菌活性、殺細菌活性、殺ウイルス活性及び／又は植物防御活性化剤活性を有する１種以上の生化学的殺有害生物剤、
ｉｉｉ）殺虫活性、殺ダニ活性、殺軟体動物活性及び／又は殺線虫活性を有する１種以上の微生物殺有害生物剤、
ｉｖ）殺虫活性、殺ダニ活性、殺軟体動物活性、フェロモン活性及び／又は殺線虫活性を有する１種以上の生化学的殺有害生物剤、
ｖ）呼吸阻害剤、ステロール生合成阻害剤、核酸合成阻害剤、細胞分裂及び細胞骨格の形成又は機能の阻害剤、アミノ酸及びタンパク質合成の阻害剤、シグナル伝達阻害剤、脂質及び膜合成阻害剤、多部位作用性阻害剤、細胞壁合成阻害剤、植物防御誘導剤並びに作用機序が不明である殺真菌剤から選択される１種以上の殺真菌剤
からなる群から好ましくは選択される少なくとも１種の有害生物防除剤の添加を更に含み、及び／又は
ｃ）前記方法は、少なくとも１種のフサリシジン、パエニセリン又はパエニプロリキシン、好ましくは少なくとも２種以上のフサリシジン、パエニセリン又はパエニプロキシリン、より好ましくは３～８０種のフサリシジンの添加を更に含み、前記１種以上のフサリシジンは、フサリシジンＡ、Ｂ若しくはＤのいずれか、及び／又はサーファクチン、及び／又はイツリンを含み、及び／又は
ｄ）前記方法は、安定剤（好ましくはグリセロール）、増量剤、溶媒、界面活性剤、自生促進剤、固体担体、液体担体、乳化剤、分散剤、フィルム形成剤、防霜剤、増粘剤、植物成長調節剤、無機リン酸塩、肥料、補助剤、胞子発芽剤、脂肪酸及びフィブリル、ミクロフィブリル又はナノフィブリル構造化剤からなる群から選択される少なくとも１種の助剤の添加を更に含む、請求項１３又は１４に記載の方法。
【請求項16】
好適な発酵培地を含む発酵槽に、請求項１～６のいずれか一項に記載の組成物又は請求項１３～１５のいずれか一項に記載の方法によって得ることができるか若しくは得られる組成物を接種する工程を含む発酵方法。
【請求項17】
胞子形成原核微生物の発酵において、誘導期の持続時間及び／又は対数期の終了に達するまでの時間を制御する方法であって、好適な発酵培地に、請求項１～６のいずれか一項に記載の組成物又は請求項１３～１５のいずれか一項に記載の方法によって得ることができるか若しくは得られる組成物を接種し、且つ前記接種された培地を発酵させることを含み、前記誘導期のより短い持続時間及び／又は対数期のより速い終了のために、第１の胞子形成期に回収される胞子の割合がより高い組成物が使用され、及び誘導期のより長い持続時間又は対数期のより遅い終了のために、第２の胞子形成期に回収される胞子の割合がより高い組成物が使用される、方法。
【請求項18】
発酵のための接種物試料を提供するコンピュータ実装方法であって、ｉ）目標である誘導期の持続期間及び／又は対数期の終了を得る工程、
ｉｉ）第１の胞子形成期及び／又は第２の胞子形成期中に回収される胞子の必要な割合を算出する工程、及び
ｉｉｉ）反応であって、
（１）算出された比率に最もよく適合するワーキング細胞バンク試料コレクションの接種物試料の識別子の発信、
（２）算出された比率に最もよく適合するワーキング細胞バンク試料コレクションの接種物試料の取得、
（３）算出された比率に最もよく適合するワーキング細胞バンク試料コレクションの接種物試料の発酵槽への供給、又は
（４）初期胞子群集濃縮ストック及び後期胞子群集濃縮ストックからそれぞれ引き出すことによって初期及び後期胞子群集の割合を調整することによる新たなワーキング細胞バンク試料の混合並びに任意選択で前記混合物の前記発酵槽への供給
の１つ以上から選択される、工程２における前記算出に基づく反応を実施する工程
を含むコンピュータ実装方法。
【請求項19】
胞子形成原核微生物の胞子発芽及び／又は栄養増殖を促進する方法であって、請求項１３～１５のいずれか一項に記載の方法における第１の胞子形成期中に回収された胞子を提供することを含み、好ましくは、無機リン酸塩は、前記胞子と一緒に又は逐次的に提供される、方法。
【請求項20】
請求項１～６のいずれか一項に記載の組成物又は請求項１３～１５のいずれか一項に記載の方法によって得ることができるか若しくは得られる組成物の、ａ）発酵物に接種すること、又は
ｂ）有害生物防除、及び／又は植物病原性真菌性若しくは細菌性病害の予防、遅延、制限若しくはその強度の低減、及び／又は植物の健康の改善、及び／又は植物の収量の増加、及び／又は植物栽培領域からの植物病原性真菌物質若しくは細菌物質の放出の予防、遅延、制限若しくは低減、又は
ｃ）植物保護製品の調製、又は
ｄ）プロバイオティクス食品配合物、飼料配合物又は化粧用配合物の調製、又は
ｅ）好ましくは清浄製品の抗細菌又は抗真菌効果を付与するか、増大させるか又は延長するための清浄製品の調製、
ｅ）コンクリートの調製
のための使用。
【請求項21】
有害生物による被害から保護する必要がある植物又はその部分を保護する方法であって、前記有害生物、植物、その部分若しくは繁殖材料又は前記植物が成長する基材を、好ましくは植付け前若しくは後、出芽前若しくは後又は好ましくは微粒子、粉末、懸濁液若しくは溶液として、有効量の、請求項１～６のいずれか一項に記載の組成物又は請求項１３～１５のいずれか一項に記載の方法によって得ることができるか若しくは得られる組成物と接触させることを含む方法。
【請求項22】
タンパク質ペイロードを植物、植物の部分、種子又は成長基材に送達する方法であって、請求項１～６のいずれか一項に記載の組成物又は請求項１３～１５のいずれか一項に記載の方法によって得ることができるか若しくは得られる組成物を前記植物、植物の部分、種子又は基材に適用することを含み、前記胞子は、ペイロードドメインと、前記ペイロードドメインを前記胞子の表面に送達するための標的ドメインとを含むタンパク質を発現する微生物のものである、方法。
【請求項23】
ｉ）前記真菌性病害は、白発疹、べと病、ウドンコ病、根こぶ病、菌核病、フザリウム（ｆｕｓａｒｉｕｍ）立枯病及び腐敗病、灰色かび病、炭疽病、リゾクトニア（ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａ）腐敗病、腰折れ病、キャビティスポット、塊茎病害、さび病、黒根病、輪紋病、アファノミセス（ａｐｈａｎｏｍｙｃｅｓ）根腐病、アスコキタ（ａｓｃｏｃｈｙｔａ）襟腐病、つる枯病、アルテルナリア（ａｌｔｅｒｎａｒｉａ）斑点病、黒脚病、輪斑病、斑点病、セルコスポラ（ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ）葉枯病、セプトリア（ｓｅｐｔｏｒｉａ）斑点病、葉枯病又はそれらの組み合わせから選択され、及び／又はｉｉ）前記真菌性病害は、分類学的階級：
－ フンタマカビ（Ｓｏｒｄａｒｉｏｍｙｃｅｔｅｓ）綱、より好ましくはヒポクレア（Ｈｙｐｏｃｒｅａｌｅｓ）目のもの、より好ましくはベニアワツブタケ（Ｎｅｃｔｒｉａｃｅａｅ）科のもの、より好ましくはフザリウム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）属のもの；
－ フンタマカビ（Ｓｏｒｄａｒｉｏｍｙｃｅｔｅｓ）綱、より好ましくはグロメレラ（Ｇｌｏｍｅｒｅｌｌａｌｅｓ）目のもの、より好ましくはグロメレラ（Ｇｌｏｍｅｒｅｌｌａｃｅａｅ）科のもの、より好ましくはコレトトリカム（Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ）属のもの；
－ レオチノマイセテス（Ｌｅｏｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｓ）綱、より好ましくはビョウタケ（Ｈｅｌｏｔｉａｌｅｓ）目のもの、より好ましくは菌核病菌（Ｓｃｌｅｒｏｔｉｎｉａｃｅａｅ）科のもの、より好ましくはボトリチス（Ｂｏｔｒｙｔｉｓ）属のもの；
－ クロイボタケ（Ｄｏｔｈｉｄｅｏｍｙｃｅｔｅｓ）綱、より好ましくはプレオスポラ（Ｐｌｅｏｓｐｏｒａｌｅｓ）目のもの、より好ましくはプレオスポラ（Ｐｌｅｏｓｐｏｒａｃｅａｅ）科のもの、より好ましくはアルテルナリア（Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ）属のもの；
－ クロイボタケ（Ｄｏｔｈｉｄｅｏｍｙｃｅｔｅｓ）綱、より好ましくはプレオスポラ（Ｐｌｅｏｓｐｏｒａｌｅｓ）目のもの、より好ましくはファエオスファエリア（Ｐｈａｅｏｓｐｈａｅｒｉａｃｅａｅ）科のもの、より好ましくはファエオスファエリア（Ｐｈａｅｏｓｐｈａｅｒｉａ）属のもの；
－ クロイボタケ（Ｄｏｔｈｉｄｅｏｍｙｃｅｔｅｓ）綱、より好ましくはボトリオスファエリア（Ｂｏｔｒｙｏｓｐｈａｅｒｉａｌｅｓ）目のもの、より好ましくはボトリオスファエリア（Ｂｏｔｒｙｏｓｐｈａｅｒｉａｃｅａｅ）科のもの、より好ましくはマクロフォミナ（Ｍａｃｒｏｐｈｏｍｉｎａ）属のもの；
－ クロイボタケ（Ｄｏｔｈｉｄｅｏｍｙｃｅｔｅｓ）綱、より好ましくはカプノディウム（Ｃａｐｎｏｄｉａｌｅｓ）目のもの、より好ましくはコタマカビ（Ｍｙｃｏｓｐｈａｅｒｅｌｌａｃｅａｅ）科のもの、より好ましくはジモセプトリア（Ｚｙｍｏｓｅｐｔｏｒｉａ）属のもの；
－ ハラタケ（Ａｇｒａｒｉｃｏｍｙｃｅｔｅｓ）綱、より好ましくはアンズタケ（Ｃａｎｔｈａｒｅｌｌａｌｅｓ）目のもの、より好ましくはツノタンシキン（Ｃｅｒａｔｏｂａｓｉｄｉａｃｅａｅ）科のもの、より好ましくはリゾクトニア（Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａ）属又はタナテフォルス（Ｔｈａｎａｔｅｐｈｏｒｕｓ）属のもの；
－ サビキン（Ｐｕｃｃｉｎｉｏｍｙｃｅｔｅｓ）綱、より好ましくはサビキン（Ｐｕｃｃｉｎｉａｌｅｓ）目のもの、より好ましくはサビキン（Ｐｕｃｃｉｎｉａｃｅａｅ）科のもの、より好ましくはウロマイセス（Ｕｒｏｍｙｃｅｓ）属又はサビキン（Ｐｕｃｃｉｎｉａ）属のもの；
－ クロボキン（Ｕｓｔｉｌａｇｉｎｏｍｙｃｅｔｅｓ）綱、より好ましくはクロボキン（Ｕｓｔｉｌａｇｉｎａｌｅｓ）目のもの、より好ましくはクロボキン（Ｕｓｔｉｌａｇｉｎａｃｅａｅ）科のもの、より好ましくはクロボキン（Ｕｓｔｉｌａｇｏ）属のもの；
－ 卵菌（Ｏｏｍｙｃｏｔａ）綱、より好ましくはフハイカビ（Ｐｙｔｈｉａｌｅｓ）目のもの、より好ましくはフハイカビ（Ｐｙｔｈｉａｃｅａｅ）科のもの、より好ましくはフハイカビ（Ｐｙｔｈｉｕｍ）属のもの；
－ 卵菌（Ｏｏｍｙｃｏｔａ）綱、より好ましくはツユカビ（Ｐｅｒｏｎｏｓｐｏｒａｌｅｓ）目のもの、より好ましくはツユカビ（Ｐｅｒｏｎｏｓｐｏｒａｃｅａｅ）科のもの、より好ましくは疫病菌（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ）属、プラスモパラ（Ｐｌａｓｍｏｐａｒａ）属又はシュードペロノスポラ（Ｐｓｅｕｄｏｐｅｒｏｎｏｓｐｏｒａ）属のもの
から選択される微生物によって引き起こされるか又は悪化する、請求項２０に記載の使用又は請求項２１に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、胞子組成物及びそのような組成物を生成する方法を提供することに関する。本発明は、植物保護製品及びそのような胞子組成物から利益を得ること並びに植物の利益、近傍領域への病原体放出の低減及び動物又はヒトの利益のためのそのような組成物の使用にも関する。更に、本発明は、効率的な発酵方法に関する。
【背景技術】
【0002】
内生胞子の形成は、いくつかの原核微生物の生活環における一段階である。内生胞子の重要性に関する主な属性は、これらが、典型的には熱処理（典型的には７０℃、１０２４ｈＰａで少なくとも５分）及び活発に増殖する微生物に不利である他の環境条件（乾燥状態、紫外放射及び化学消毒剤など）に対する休眠細胞の耐性を付与する休眠生活段階をもたらすことである。したがって、胞子形成微生物は、有害な状態に長期間耐えることができる。再び好ましい状態になると、胞子形成細胞は、発芽し、活発に増殖する生活段階に変化する。したがって、内生胞子は、微生物の保存及び急速な回復に関する特定の用途を有する。特に、内生胞子は、製品保存が容易であること、液体窒素などの緻密な保存条件なしで貯蔵寿命が長いこと及び微生物が急速且つ確実に復活することが必要とされる農学製品及びバイオテクノロジー製品で使用される。例えば、農学製品では、植物の健康に利する微生物が望まれる。ヒトの栄養及び健康管理では、胃の低ｐＨに耐えることができる胞子の形態のプロバイオティクス生物を適用することにより、腸内で対象を絞って成長させて、消化障害を予防することができる。しかしながら、そのような製品の保存は、保存条件に左右されない必要があり、好ましくは３７～４５℃の温暖な温度であるか又はそれほど好ましくはないが日光に曝露されても、製品を保存可能である必要がある。微生物は、製品の適用直後に迅速且つ確実に繁殖して、その有益な特性を発揮する必要がある。他の製品では、微生物の生存能は、必要とされない。しかしながら、内生胞子は、所望の代謝産物、例えば生化学的殺有害生物剤を区画化し、内生胞子の表面に付着させることができる。そのような製品の利点は、従来の殺有害生物剤の過剰使用及びそのような過剰使用に付随する欠点（例えば、土壌酸性化）を回避できることである。バイオテクノロジー製品では、通常、確実な発酵が必要とされる。発酵は、好適な増殖培地を含む発酵槽に微生物のアリコートを接種し、微生物が発酵中に繁殖して所望の化合物及び胞子を生成するようにすることによって開始される。確実な接種を実現するために、接種物のアリコートを、それらの繁殖能及び代謝能が必要に応じて維持されるように長期にわたって保存する必要がある。
【0003】
細菌胞子の主要な用途の１つは、抗生物質の削減及び代替を含めた、ヒト及び動物の健康のためのプロバイオティクス製品における使用である。例えば、クロストリジウム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ）種は、ヒト及び動物が消化不能な幅広い栄養素を利用することができる。一例として、腸管に存在するクロストリジウム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉａ）は、難消化性多糖類を変換して短鎖脂肪酸（ＳＣＦＡ）を生成することができ、ＳＣＦＡは、宿主の腸管に容易に吸収されるため、腸管ホメオスタシスにおいて重要な役割を果たす（Ｐｉｎｇｔｉｎｇ Ｇｕｏ，Ｋｅ Ｚｈａｎｇ，Ｘｉ Ｍａ ａｎｄ Ｐｉｎｇｌｉ Ｈｅ，Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｓｐｅｃｉｅｓ ａｓ ｐｒｏｂｉｏｔｉｃｓ：ｐｏｔｅｎｔｉａｌｓ ａｎｄ ｃｈａｌｌｅｎｇｅｓ，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｎｉｍａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ（２０２０）ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１１８６／ｓ４０１０４－０１９－０４０２）。酪酸塩などのＳＣＦＡは、多数の生理学的機能を全体として調整して、管腔環境を最適化し、腸管の健康状態を維持する。クロストリジウム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉａ）を使用した健康管理用途に関するいくつかの有益な特質が知られており、それらには、例えば、抗炎症作用及び腸免疫寛容の改善を誘導する、クロストリジウム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ）種と腸管免疫系との間のクロストークがある。一例として、クロストリジウム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉａ）がマウスの大腸炎及びアレルギー性下痢を軽減させることが判明した。他の種との間でも、一部のクロストリジウム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉａ）は、胆汁酸を生成して、毒素産生性Ｃ．ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）による警戒すべき感染を予防することが知られている。タンパク質又はアミノ酸発酵性クロストリジウム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉａ）を適用することで、腸管上皮細胞を直接的及び間接的に損傷させ得るアンモニアの過剰蓄積を予防することができる。クロストリジウム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉａ）のプロバイオティクス及びプレバイオティクスでの使用に関する有益な特質は、食物栄養学及び畜産業での生育改善でも知られていた。クロストリジウム・エステルセティカム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｅｓｔｅｒｔｈｅｔｉｃｕｍ）などの特定の株は、保護培養物として、生の獣肉及び鶏肉、魚類及び海産物に適用された（Ｊｏｎｅｓ Ｒ，Ｚａｇｏｒｅｃ Ｍ，Ｂｒｉｇｈｔｗｅｌｌ Ｇ，Ｔａｇｇ ＪＲ（２００９）Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｂｙ Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｓａｋｅｉ ｏｆ ｏｔｈｅｒ ｓｐｅｃｉｅｓ ｉｎ ｔｈｅ ｆｌｏｒａ ｏｆ ｖａｃｕｕｍ ｐａｃｋａｇｅｄ ｒａｗ ｍｅａｔｓ ｄｕｒｉｎｇ ｐｒｏｌｏｎｇｅｄ ｓｔｏｒａｇｅ．Ｆｏｏｄ ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ ２５：８７６－８８１）。
【0004】
農業では、細菌胞子は、植物病原性真菌性又は細菌性病害を低減させるか又は予防する植物有害生物防除組成物に使用された。胞子生物製剤は、生物的及び非生物的ストレスに対する植物の耐性を改善し、植物の成長を加速させ、且つ植物、果実又はマメ科植物の収穫時の収量を増加させるためにも適用される。胞子製品は、葉、シュート、果実、根又は植物繁殖材料及び植物が成長する基材に適用された（Ｔｏｙｏｔａ Ｋ．Ｂａｃｉｌｌｕｓ－ｒｅｌａｔｅｄ Ｓｐｏｒｅ Ｆｏｒｍｅｒｓ：Ａｔｔｒａｃｔｉｖｅ Ａｇｅｎｔｓ ｆｏｒ Ｐｌａｎｔ Ｇｒｏｗｔｈ Ｐｒｏｍｏｔｉｏｎ．Ｍｉｃｒｏｂｅｓ Ｅｎｖｉｒｏｎ．２０１５；３０（３）：２０５－２０７．ｄｏｉ：１０．１２６４／ｊｓｍｅ２．ｍｅ３００３ｒｈ）。Ｂｏｃｈｏｗ，Ｈ．，ｅｔ ａｌ．“Ｕｓｅ ｏｆ Ｂａｃｉｌｌｕｓ Ｓｕｂｔｉｌｉｓ ａｓ Ｂｉｏｃｏｎｔｒｏｌ Ａｇｅｎｔ．ＩＶ．Ｓａｌｔ－Ｓｔｒｅｓｓ Ｔｏｌｅｒａｎｃｅ Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｂｙ Ｂａｃｉｌｌｕｓ Ｓｕｂｔｉｌｉｓ ＦＺＢ２４ Ｓｅｅｄ Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｉｎ Ｔｒｏｐｉｃａｌ Ｖｅｇｅｔａｂｌｅ Ｆｉｅｌｄ Ｃｒｏｐｓ，ａｎｄ Ｉｔｓ Ｍｏｄｅ ｏｆ Ａｃｔｉｏｎ／Ｄｉｅ Ｖｅｒｗｅｎｄｕｎｇ ｖｏｎ Ｂａｃｉｌｌｕｓ Ｓｕｂｔｉｌｉｓ ｚｕｒ ｂｉｏｌｏｇｉｓｃｈｅｎ Ｂｅｋａｅｍｐｆｕｎｇ．ＩＶ．Ｉｎｄｕｋｔｉｏｎ ｅｉｎｅｒ Ｓａｌｚｓｔｒｅｓｓ－Ｔｏｌｅｒａｎｚ ｄｕｒｃｈ Ａｐｐｌｉｋａｔｉｏｎ ｖｏｎ Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ ＦＺＢ２４ ｂｅｉ ｔｒｏｐｉｓｃｈｅｍ Ｆｅｌｄｇｅｍｕｅｓｅ ｕｎｄ ｓｅｉｎ Ｗｉｒｋｕｎｇｓｍｅｃｈａｎｉｓｍｕｓ．”Ｚｅｉｔｓｃｈｒｉｆｔ ｆｕｅｒ Ｐｆｌａｎｚｅｎｋｒａｎｋｈｅｉｔｅｎ ｕｎｄ Ｐｆｌａｎｚｅｎｓｃｈｕｔｚ／Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｌａｎｔ Ｄｉｓｅａｓｅｓ ａｎｄ Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ，ｖｏｌ．１０８，ｎｏ．１，２００１，ｐｐ．２１－３０．ＪＳＴＯＲ，ｗｗｗ．ｊｓｔｏｒ．ｏｒｇ／ｓｔａｂｌｅ／４３２１５３７８．Ａｃｃｅｓｓｅｄ １４ Ｄｅｃ．２０２０。）（Ｈａｓｈｅｍ，Ａｂｅｅｒ＆Ｔａｂａｓｓｕｍ，Ｂ．＆Ａｂｄ＿Ａｌｌａｈ，Ｅｌｓａｙｅｄ．（２０１９）．Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ：Ａ ｐｌａｎｔ－ｇｒｏｗｔｈ ｐｒｏｍｏｔｉｎｇ ｒｈｉｚｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｈａｔ ａｌｓｏ ｉｍｐａｃｔｓ ｂｉｏｔｉｃ ｓｔｒｅｓｓ．Ｓａｕｄｉ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ．２６．１０．１０１６／ｊ．ｓｊｂｓ．２０１９．０５．００４）。
【0005】
更に、細菌胞子は、ナノバイオテクノロジー及び建築化学の領域において、例えば自己修復コンクリート（亀裂の修復）、モルタルの安定性及び透水性の低減のために適用された［Ｊ．Ｙ．Ｗａｎｇ，Ｈ．Ｓｏｅｎｓ，Ｗ．Ｖｅｒｓｔｒａｅｔｅ，Ｎ．Ｄｅ Ｂｅｌｉｅ，Ｓｅｌｆ－ｈｅａｌｉｎｇ ｃｏｎｃｒｅｔｅ ｂｙ ｕｓｅ ｏｆ ｍｉｃｒｏｅｎｃａｐｓｕｌａｔｅｄ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｓｐｏｒｅｓ，Ｃｅｍｅｎｔ ａｎｄ Ｃｏｎｃｒｅｔｅ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，Ｖｏｌｕｍｅ ５６，２０１４，１３９－１５２，ＩＳＳＮ ０００８－８８４６，ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１０１６／ｊ．ｃｅｍｃｏｎｒｅｓ．２０１３．１１．００９］［Ｒｉｃｃａ Ｅ，Ｃｕｔｔｉｎｇ ＳＭ．Ｅｍｅｒｇｉｎｇ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｏｆ Ｂａｃｔｅｒｉａｌ Ｓｐｏｒｅｓ ｉｎ Ｎａｎｏｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ．Ｊ Ｎａｎｏｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ．２００３；１（１）：６．Ｐｕｂｌｉｓｈｅｄ ２００３ Ｄｅｃ １５．ｄｏｉ：１０．１１８６／１４７７－３１５５－１－６］。
【0006】
加えて、細菌胞子は、臨床環境及び家庭環境における洗濯物、硬質表面、衛生設備の清浄用及び臭気抑制用などの清浄製品の領域に適用された（Ｃａｓｅｌｌｉ Ｅ．Ｈｙｇｉｅｎｅ：ｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ ｔｏ ｒｅｄｕｃｅ ｐａｔｈｏｇｅｎｓ ａｎｄ ｄｒｕｇ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｉｎ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｓｅｔｔｉｎｇｓ．Ｍｉｃｒｏｂ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．２０１７ Ｓｅｐ；１０（５）：１０７９－１０８３．ｄｏｉ：１０．１１１１／１７５１－７９１５．１２７５５．Ｅｐｕｂ ２０１７ Ｊｕｌ ５）。一例として、胞子は、化粧品組成物、例えば皮膚清浄製品（米国特許出願公開第２００７００４８２４４号明細書）、食器洗浄剤（国際公開第２０１４／１０７１１１号パンフレット）、パイプ脱脂剤（独国特許第１９８５００１２号明細書）、洗濯物の悪臭抑制（国際公開第２０１７／１５７７７８号パンフレット及び欧州特許第３４３０１１３号明細書）又はアレルゲンの除去（米国特許出願公開第２００２０１８２１８４号明細書）に使用された。胞子は、その後のその分解を触媒するために、非生物起源のマトリックスに埋め込むこともできる。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0007】
このように、内生胞子の形成は、活発な研究領域である。しかしながら、胞子形成の根底にあるメカニズムは、微生物間で異なる。バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）では、Ｓｐｏ０Ａは、オーファンヒスチジンキナーゼ（ＨＫ）、特にＫｉｎＡ及びＫｉｎＢによって開始されるリン酸リレー系によってリン酸化される（Ｓｐｏ０Ａ＿Ｐ）。続いて、Ｓｐｏ０Ａ＿Ｐは、下流の４つのシグマ因子（σＦ、σＥ、σＧ及びσＫ）が関与する胞子形成シグマ因子カスケードを開始させる。対照的に、リン酸基を直接Ｓｐｏ０Ａに転移させることによりそれを活性化させるクロストリジウム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉａ）には、リン酸リレー系が存在しない。結果として、バチルス（Ｂａｃｉｌｌｉ）及び多くのパエニバチルス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｉ）に見られる、予備的胞子形成である段階０の調節因子（例えば、Ｓｐｏ０Ｂ）は、クロストリジウム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉａ）に存在しない。
【0008】
更に、バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）モデルの最後のシグマ因子σＫは、クロストリジウム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ）において二重の役割（１つは、初期のＳｐｏ０Ａの上流であり、もう１つは、後期のσＧの下流である）を果たすことが確認されており、これは、バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）でのその役割と類似している［Ａｌ－Ｈｉｎａｉ ＭＡ，Ｊｏｎｅｓ ＳＷ，Ｐａｐｏｕｔｓａｋｉｓ ＥＴ．Ｔｈｅ Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｓｐｏｒｕｌａｔｉｏｎ ｐｒｏｇｒａｍｓ：ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ａｎｄ ｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎ ｏｆ ｅｎｄｏｓｐｏｒｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ Ｒｅｖ．２０１５ Ｍａｒ；７９（１）：１９－３７．ｄｏｉ：１０．１１２８／ＭＭＢＲ．０００２５－１４］［Ｔｏｊｏ Ｓ，Ｈｉｒｏｏｋａ Ｋ，Ｆｕｊｉｔａ Ｙ．Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｋｉｎＡ ａｎｄ ｋｉｎＢ ｏｆ Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ，Ｎｅｃｅｓｓａｒｙ ｆｏｒ Ｓｐｏｒｕｌａｔｉｏｎ Ｉｎｉｔｉａｔｉｏｎ，Ｉｓ ｕｎｄｅｒ Ｐｏｓｉｔｉｖｅ Ｓｔｒｉｎｇｅｎｔ Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ Ｃｏｎｔｒｏｌ，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ Ｍａｒ ２０１３，１９５（８）１６５６－１６６５；ＤＯＩ：１０．１１２８／ＪＢ．０２１３１－１２］。
【0009】
他方で、一例として、Ｂ．サブティリス（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）の胞子形成への移行は、ＲａｐＡの制御下にある。このホスファターゼは、全ての内生胞子形成因子のマスター転写調節因子であるＳｐｏ０Ａの転写を調節しているため、直接的リプレッサーとして作用することができる［Ｐｅｒｅｇｏ Ｍ，Ｈａｎｓｔｅｉｎ Ｃ，Ｗｅｌｓｈ Ｃ．Ｍ．，Ｄｊａｖａｋｈｉｓｈｖｉｌｉ Ｔ．，Ｇｌａｓｅｒ Ｐ．，Ｈｏｃｈ Ｊ．Ａ．Ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｐｒｏｔｅｉｎ－ａｓｐａｒｔａｔｅ ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅｓ ｐｒｏｖｉｄｅ ａ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｆｏｒ ｔｈｅ ｉｎｔｅｇｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｄｉｖｅｒｓｅ ｓｉｇｎａｌｓ ｉｎ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｏｆ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｉｎ Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ．Ｃｅｌｌ ７９，１０４７－１０５５（１９９４）］。バチルス（Ｂａｃｉｌｌｉ）とは対照的に、パエニバチルス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ）種は、単細胞レベルで異時性胞子形成を全体として調整する突出した遺伝子としての胞子形成リプレッサーＲａｐＡを欠いている。
【0010】
更に、栄養飢餓下では、ＣｏｄＹは、バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）の多数の遺伝子の発現を調節し、迅速な指数関数的増殖から静止期及び胞子形成への移行を調整する。（Ｒａｔｎａｙａｋｅ－Ｌｅｃａｍｗａｓａｍ Ｍ，Ｓｅｒｒｏｒ Ｐ，Ｗｏｎｇ ＫＷ，Ｓｏｎｅｎｓｈｅｉｎ ＡＬ．Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ ＣｏｄＹ ｒｅｐｒｅｓｓｅｓ ｅａｒｌｙ－ｓｔａｔｉｏｎａｒｙ－ｐｈａｓｅ ｇｅｎｅｓ ｂｙ ｓｅｎｓｉｎｇ ＧＴＰ ｌｅｖｅｌｓ．Ｇｅｎｅｓ Ｄｅｖ．２００１；１５（９）：１０９３－１１０３．ｄｏｉ：１０．１１０１／ｇａｄ．８７４２０１）。これは、培養中の種間のコミュニケーション、分化又は同期を調整するＣｏｍＡのクオラムセンシング活性によって裏付けることができる（Ｓｃｈｕｌｔｚ Ｄ，Ｗｏｌｙｎｅｓ ＰＧ，Ｂｅｎ Ｊａｃｏｂ Ｅ，Ｏｎｕｃｈｉｃ ＪＮ．Ｄｅｃｉｄｉｎｇ ｆａｔｅ ｉｎ ａｄｖｅｒｓｅ ｔｉｍｅｓ：ｓｐｏｒｕｌａｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｏｍｐｅｔｅｎｃｅ ｉｎ Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ．Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ．２００９ Ｄｅｃ １５；１０６（５０）：２１０２７－３４．ｄｏｉ：１０．１０７３／ｐｎａｓ．０９１２１８５１０６．Ｅｐｕｂ ２００９ Ｄｅｃ ７）。ここでも、バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）とは対照的に、大半のパエニバチルス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ）種においてＣｏｄＹ及びＣｏｍＡが見られなかったことから、パエニバチルス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ）の胞子形成への移行は、異なるメカニズムに依存する。
【0011】
長期にわたり研究対象であったにもかかわらず、バチルス・サブティリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）の内生胞子には、２つの種類（即ちいわゆる初期胞子及び後期胞子）があることが最近判明したばかりである。刊行物Ｍｕｔｌｕ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ Ｃｏｍｍ．２０１８，６９の著者らは、アガロースプレート上でバチルス・サブティリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）のコロニーの胞子形成及び発芽をモニタリングした。この著者らは、形成された各胞子について、栄養素をダウンシフトさせた後の胞子形成に必要な時間を記録した。４日間の飢餓状態後、胞子形成及び胞子嚢からの胞子放出が完了した。アガロースプレートに栄養素のアップシフトを適用した。次に、著者らは、各胞子の発芽及び成長に必要な時間を相関させた。胞子形成と発芽時間とを相関させたとき、著者らは、初期胞子が後期胞子の２倍速く発芽し、復活頻度が全体として高いことを認めた。著者らは、初期胞子とは対照的に、後期胞子が、成長に不適切な栄養素濃度で発芽を誘導することにより、成長を防止され得ることも認識した。
【0012】
本発明は、更なる観察結果に依拠する。本発明者らは、驚くべきことに、内生胞子形成微生物の全ての試験種について、異なる内生胞子群集のタイプ、即ち発芽頻度及び発芽時間が異なる内生胞子群集が胞子形成時間に従って生成されることを認識した。Ｍｕｔｌｕ ｅｔ ａｌ．による前述の刊行物は、ＲａｐＡ遺伝子（これは、例えば、パエニバチルス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ）種に存在しない）の機能的発現に依拠していたことから、これは、特に驚くべきことであった。そのため、バチルス・サブティリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）において確立された特定の胞子形成メカニズムが他の属にも存在することは、予想外であった。更に、本発明者らは、内生胞子群集のタイプ間の相違がアガロースプレート上での胞子形成に限定されず、撹拌発酵でも生じることを認識した。撹拌発酵では、化学シグナル及び栄養素の細胞間コミュニケーションの勾配を形成することができないため、これは、特に驚くべきことであった。加えて、制御された撹拌条件下では、局所的な栄養素の競合、好ましくないｐＨ変化及び局所的な老廃物の蓄積は、不可能である。最適な撹拌条件下では、全ての細胞がほぼ同じ培地組成に曝露される。発芽頻度が高く、発芽時間が短い内生胞子群集は、－８０℃～４５℃の温度などの通常の保存条件下において、活性を大幅に喪失せずに幅広く保存可能であることも本発明者らにとって驚くべきことであった。これは、本発明者らが、胞子安定化に必要な化合物であるジピコリン酸が主に液相撹拌発酵中の後期に生成されることも見出したため、特に驚くべきことであった。したがって、発酵中の初期に形成された内生胞子は、低含量のジピコリン酸を含有する。本発明者らは、驚くべきことに、液体撹拌発酵における誘導期の長さ及び対数期のバイオマス生成の終了に到達するのに必要な時間が、前培養に接種するための種菌として使用した内生胞子群集のタイプに左右され、本培養段階での増殖及び生成能にも正の影響を及ぼしたことも観察した。撹拌液相発酵中の後期に回収された内生胞子群集は、発酵中の初期に形成された全ての胞子を含むため、これは、驚くべきことであった。したがって、後期に回収された内生胞子群集は、発酵中の初期に回収された内生胞子群集に少なくとも劣らないことが予想された。この予想は、完全に胞子形成したバチルス・サブティリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）のコロニー（これは、撹拌液相発酵中の全ての栄養細胞が完全に胞子形成した後に回収された内生胞子群集に実質的に対応する）の発芽時間の相違について記載しているＭｕｔｌｕ ｅｔ ａｌ．による上記の刊行物によって実証された。また、本発明者らは、驚くべきことに、初期胞子のみを培養の接種のための種菌として使用した場合、植物に有益なバイオ殺有害生物剤（最も注目すべきはフサリシジンＡ、Ｂ及びＤ）の含有量が、発酵中の初期に生成された内生胞子群集において最も高いことを見出した。
【0013】
したがって、本発明の目的は、早期発芽及び発芽した微生物の迅速な増殖を促進する内生胞子含有組成物を提供することであった。胞子の迅速な成長は、製品であって、その性能が、生物の所望の特性及び特質を適時且つ継続的な方法で得るために、胞子の急速且つ確実な成長と強く関連付けられる製品に特に関連する。更に、組成物は、通常の保存条件下で安定であるべきである。好ましくは、組成物は、微生物の有益な特性（例えば、ヒト、動物若しくは植物の健康上の利益又は所望の代謝産物の生成）を維持又は改善する必要がある。更に、本発明は、対応する生成方法、製品及びそれらの使用を提供するべきである。
【課題を解決するための手段】
【0014】
これに対応して、本発明は、原核微生物の精製胞子を含む胞子組成物を提供し、
ａ）前記胞子は、コロニー形成に適した培地上にプレーティングされた場合にコロニーを形成し、プレーティング後、好気性培養について７２時間以内及び嫌気性培養について９６時間以内に形成された全てのそのようなコロニーの少なくとも４０％、より好ましくは４０～９０％、より好ましくは少なくとも５０％、より好ましくは５０～９０％、より好ましくは少なくとも６０％、より好ましくは６０～９０％、より好ましくは少なくとも７０％、より好ましくは７０～９０％は、４８時間以内に形成され、及び／又は
ｂ）胞子の少なくとも４０％、より好ましくは少なくとも５０％、より好ましくは少なくとも５５％、より好ましくは少なくとも６０％、より好ましくは少なくとも７０％、より好ましくは少なくとも８０％は、第１の胞子形成期中に回収された発酵物から得ることができるか又は得られ、及び／又は
ｃ）１胞子あたりのジピコリン酸の平均含有量は、定常期まで好適な培地で発酵された胞子のジピコリン酸の平均含有量の最大で８０％、より好ましくは２０～８０％、更により好ましくは２２～７０％、更により好ましくは３０～６５％である。
ａ）前記胞子は、コロニー形成に適した培地上にプレーティングされた場合にコロニーを形成し、プレーティング後、好気性培養について７２時間以内及び嫌気性培養について９６時間以内に形成された全てのそのようなコロニーの少なくとも４０％、より好ましくは４０～９０％、より好ましくは少なくとも５０％、より好ましくは５０～９０％、より好ましくは少なくとも６０％、より好ましくは６０～９０％、より好ましくは少なくとも７０％、より好ましくは７０～９０％は、４８時間以内に形成され、及び／又は
ｂ）胞子の少なくとも４０％、より好ましくは少なくとも５０％、より好ましくは少なくとも５５％、より好ましくは少なくとも６０％、より好ましくは少なくとも７０％、より好ましくは少なくとも８０％は、第１の胞子形成期中に回収された発酵物から得ることができるか又は得られ、及び／又は
ｃ）１胞子あたりのジピコリン酸の平均含有量は、定常期まで好適な培地で発酵された胞子のジピコリン酸の平均含有量の最大で８０％、より好ましくは２０～８０％、更により好ましくは２２～７０％、更により好ましくは３０～６５％である。
【0015】
本発明は、本発明の組成物又は本発明による方法によって得ることができるか又若しくは得られる組成物でコーティングされるか又はそれを注入された植物栽培基材を含む植物保護製品も提供する。
【0016】
植物、植物の部分又は植物繁殖材料も提供され、この材料は、本発明による組成物又は本発明による方法によって得ることができるか若しくは得られる組成物をその表面に含むか又はその中に注入されている。
【0017】
更に、本発明は、本発明の植物、植物の部分若しくは植物繁殖材料又は本発明の植物栽培基材を含む栽培場、好ましくは圃場又は温室苗床を提供する。
【0018】
本発明は、本発明の組成物を含む食品製品又は飼料製品又は化粧品、好ましくはプロバイオティクス若しくはプレバイオティクス食品製品、プロバイオティクス、若しくはプレバイオティクス、若しくは飼料製品又はプロバイオティクス若しくはプレバイオティクス化粧品も提供する。
【0019】
また、本発明は、本発明による組成物、好ましくは鉱物表面の処理のための塗料組成物、コーティング組成物又は含浸組成物、コンクリート又は硬化コンクリートの調製のためのセメント配合物、添加剤を含む建築製品を提供する。
【0020】
更に、本発明は、原核微生物の胞子を含む組成物を生成する方法であって、
１）胞子形成を導く培地中で微生物を発酵させる工程、
２）胞子を精製して組成物を得る工程
を含み、
ａ）精製は、発酵工程１）で得ることができる最大胞子濃度の８５％に達するときに最後に実施され、より好ましくは、精製は、前記最大値に対して１～７５％の範囲の濃度に達するとき、より好ましくは前記最大値に対して１０～７５％の範囲の濃度に達するとき、より好ましくは前記最大値に対して２０～７０％の範囲の濃度に達するとき、より好ましくは前記最大値に対して３０～６８％の範囲の濃度に達するときに実施され、及び／又は
ｂ）精製は、前記精製胞子が、コロニー形成に適した培地上にプレーティングされた場合にコロニーを形成し、プレーティング後、好気性培養について７２時間以内及び嫌気性培養について９６時間以内に形成された全てのそのようなコロニーの少なくとも４０％、より好ましくは４０～９０％、より好ましくは少なくとも５０％、より好ましくは５０～９０％、より好ましくは少なくとも６０％、より好ましくは６０～９０％、より好ましくは少なくとも７０％、より好ましくは７０～９０％は、４８時間以内に形成されるように実施され、及び／又は
ｃ）精製は、前記精製胞子の少なくとも４０％、より好ましくは少なくとも５０％、より好ましくは少なくとも５５％、より好ましくは少なくとも６０％、より好ましくは少なくとも７０％、より好ましくは少なくとも８０％が、第１の胞子形成期中に回収された発酵物から得ることができるか又は得られるように実施され、及び／又は
ｄ）精製は、１胞子あたりのジピコリン酸の平均含有量が、発酵工程１）で最大胞子濃度に達するときに生成される胞子のジピコリン酸の平均含有量の最大で８０％である場合、より好ましくはジピコリン酸の平均含有量が２０～８０％の範囲、更により好ましくは２２～７０％の範囲、更により好ましくは３０～６５％の範囲である場合に実施される、方法を提供する。
１）胞子形成を導く培地中で微生物を発酵させる工程、
２）胞子を精製して組成物を得る工程
を含み、
ａ）精製は、発酵工程１）で得ることができる最大胞子濃度の８５％に達するときに最後に実施され、より好ましくは、精製は、前記最大値に対して１～７５％の範囲の濃度に達するとき、より好ましくは前記最大値に対して１０～７５％の範囲の濃度に達するとき、より好ましくは前記最大値に対して２０～７０％の範囲の濃度に達するとき、より好ましくは前記最大値に対して３０～６８％の範囲の濃度に達するときに実施され、及び／又は
ｂ）精製は、前記精製胞子が、コロニー形成に適した培地上にプレーティングされた場合にコロニーを形成し、プレーティング後、好気性培養について７２時間以内及び嫌気性培養について９６時間以内に形成された全てのそのようなコロニーの少なくとも４０％、より好ましくは４０～９０％、より好ましくは少なくとも５０％、より好ましくは５０～９０％、より好ましくは少なくとも６０％、より好ましくは６０～９０％、より好ましくは少なくとも７０％、より好ましくは７０～９０％は、４８時間以内に形成されるように実施され、及び／又は
ｃ）精製は、前記精製胞子の少なくとも４０％、より好ましくは少なくとも５０％、より好ましくは少なくとも５５％、より好ましくは少なくとも６０％、より好ましくは少なくとも７０％、より好ましくは少なくとも８０％が、第１の胞子形成期中に回収された発酵物から得ることができるか又は得られるように実施され、及び／又は
ｄ）精製は、１胞子あたりのジピコリン酸の平均含有量が、発酵工程１）で最大胞子濃度に達するときに生成される胞子のジピコリン酸の平均含有量の最大で８０％である場合、より好ましくはジピコリン酸の平均含有量が２０～８０％の範囲、更により好ましくは２２～７０％の範囲、更により好ましくは３０～６５％の範囲である場合に実施される、方法を提供する。
【0021】
これに対応して、本発明は、好適な発酵培地を含む発酵槽に、本発明の組成物又は本発明による方法によって得ることができるか若しくは得られる組成物を接種する工程を含む発酵方法を提供する。
【0022】
本発明は、胞子形成原核微生物の発酵において、誘導期の持続時間及び／又は対数期の終了に達するまでの時間を制御する方法であって、好適な発酵培地に、本発明の組成物又は本発明による方法によって得ることができるか若しくは得られる組成物を接種し、且つ接種された培地を発酵させることを含み、誘導期のより短い持続時間及び／又は対数期のより速い終了のために、第１の胞子形成期に回収される胞子の割合がより高い組成物が使用され、及び誘導期のより長い持続時間又は対数期のより遅い終了のために、第２の胞子形成期に回収される胞子の割合がより高い組成物が使用される、方法を更に提供する。
【0023】
また、本発明は、発酵のための接種物試料を提供するコンピュータ実装方法であって、
ｉ）目標である誘導期の持続期間及び／又は対数期の終了を得る工程、
ｉｉ）第１の胞子形成期及び／又は第２の胞子形成期中に回収される胞子の必要な割合を算出する工程、及び
ｉｉｉ）反応であって、
（１）算出された比率に最もよく適合するワーキング細胞バンク試料コレクションの接種物試料の識別子の発信、
（２）算出された比率に最もよく適合するワーキング細胞バンク試料コレクションの接種物試料の取得、
（３）算出された比率に最もよく適合するワーキング細胞バンク試料コレクションの接種物試料の発酵槽への供給、又は
（４）初期胞子群集濃縮ストック及び後期胞子群集濃縮ストックからそれぞれ引き出すことによって初期及び後期胞子群集の割合を調整することによる新たなワーキング細胞バンク試料の混合並びに任意選択で前記混合物の発酵槽への供給
の１つ以上から選択される、工程２における算出に基づく反応を実施する工程
を含むコンピュータ実装方法を提供する。
ｉ）目標である誘導期の持続期間及び／又は対数期の終了を得る工程、
ｉｉ）第１の胞子形成期及び／又は第２の胞子形成期中に回収される胞子の必要な割合を算出する工程、及び
ｉｉｉ）反応であって、
（１）算出された比率に最もよく適合するワーキング細胞バンク試料コレクションの接種物試料の識別子の発信、
（２）算出された比率に最もよく適合するワーキング細胞バンク試料コレクションの接種物試料の取得、
（３）算出された比率に最もよく適合するワーキング細胞バンク試料コレクションの接種物試料の発酵槽への供給、又は
（４）初期胞子群集濃縮ストック及び後期胞子群集濃縮ストックからそれぞれ引き出すことによって初期及び後期胞子群集の割合を調整することによる新たなワーキング細胞バンク試料の混合並びに任意選択で前記混合物の発酵槽への供給
の１つ以上から選択される、工程２における算出に基づく反応を実施する工程
を含むコンピュータ実装方法を提供する。
【0024】
更に、胞子形成原核微生物の胞子発芽及び／又は栄養増殖を促進する方法であって、本発明による方法における第１の胞子形成期中に回収された胞子を提供することを含み、好ましくは、無機リン酸塩は、胞子と一緒に又は逐次的に提供される、方法が本発明により提供される。
【0025】
本発明は、
ａ）発酵物に接種すること、又は
ｂ）有害生物防除、及び／又は植物病原性真菌性若しくは細菌性病害の予防、遅延、制限若しくはその強度の低減、及び／又は植物の健康の改善、及び／又は植物の収量の増加、及び／又は植物栽培領域からの植物病原性真菌物質若しくは細菌物質の放出の予防、遅延、制限若しくは低減、又は
ｃ）植物保護製品の調製、又は
ｄ）プロバイオティクス食品配合物、飼料配合物又は化粧用配合物の調製、又は
ｅ）好ましくは清浄製品の抗細菌又は抗真菌効果を付与するか、増大させるか又は延長するための清浄製品の調製、
ｅ）コンクリートの調製又は鉱物表面の塗装、コーティング若しくは含浸
のための、本発明の組成物又は本発明による方法によって得ることができるか若しくは得られる組成物の使用も教示する。
ａ）発酵物に接種すること、又は
ｂ）有害生物防除、及び／又は植物病原性真菌性若しくは細菌性病害の予防、遅延、制限若しくはその強度の低減、及び／又は植物の健康の改善、及び／又は植物の収量の増加、及び／又は植物栽培領域からの植物病原性真菌物質若しくは細菌物質の放出の予防、遅延、制限若しくは低減、又は
ｃ）植物保護製品の調製、又は
ｄ）プロバイオティクス食品配合物、飼料配合物又は化粧用配合物の調製、又は
ｅ）好ましくは清浄製品の抗細菌又は抗真菌効果を付与するか、増大させるか又は延長するための清浄製品の調製、
ｅ）コンクリートの調製又は鉱物表面の塗装、コーティング若しくは含浸
のための、本発明の組成物又は本発明による方法によって得ることができるか若しくは得られる組成物の使用も教示する。
【0026】
本発明によれば、有害生物による被害から保護する必要がある植物又はその部分を保護する方法であって、有害生物、植物、その部分若しくは繁殖材料又は植物が成長する基材を、好ましくは植付け前若しくは後、出芽前若しくは後又は好ましくは微粒子、粉末、懸濁液若しくは溶液として、有効量の、本発明の組成物又は本発明による方法によって得ることができるか若しくは得られる組成物と接触させることを含む方法も提供される。
【0027】
更に、本発明は、タンパク質ペイロードを植物、植物の部分、種子又は成長基材に送達する方法であって、本発明の組成物又は本発明による方法によって得ることができるか若しくは得られる組成物を植物、植物の部分、種子又は基材に適用することを含み、胞子は、ペイロードドメインと、ペイロードドメインを前記胞子の表面に送達するための標的ドメインとを含むタンパク質を発現する微生物のものである、方法を提供する。
【0028】
また、本発明は、本発明による特定の使用又は方法であって、
ｉ）真菌性病害は、白発疹（ｗｈｉｔｅ ｂｌｉｓｔｅｒ）、べと病、ウドンコ病、根こぶ病、菌核病、フザリウム（ｆｕｓａｒｉｕｍ）立枯病及び腐敗病、灰色かび病、炭疽病、リゾクトニア（ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａ）腐敗病、腰折れ病、キャビティスポット、塊茎病害、さび病、黒根病、輪紋病、アファノミセス（ａｐｈａｎｏｍｙｃｅｓ）根腐病、アスコキタ（ａｓｃｏｃｈｙｔａ）襟腐病、つる枯病、アルテルナリア（ａｌｔｅｒｎａｒｉａ）斑点病、黒脚病、輪斑病、斑点病、セルコスポラ（ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ）葉枯病、セプトリア（ｓｅｐｔｏｒｉａ）斑点病、葉枯病又はそれらの組み合わせから選択され、及び／又は
ｉｉ）真菌性病害は、分類学的階級：
－ フンタマカビ（Ｓｏｒｄａｒｉｏｍｙｃｅｔｅｓ）綱、より好ましくはヒポクレア（Ｈｙｐｏｃｒｅａｌｅｓ）目のもの、より好ましくはベニアワツブタケ（Ｎｅｃｔｒｉａｃｅａｅ）科のもの、より好ましくはフザリウム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）属のもの；
－ フンタマカビ（Ｓｏｒｄａｒｉｏｍｙｃｅｔｅｓ）綱、より好ましくはグロメレラ（Ｇｌｏｍｅｒｅｌｌａｌｅｓ）目のもの、より好ましくはグロメレラ（Ｇｌｏｍｅｒｅｌｌａｃｅａｅ）科のもの、より好ましくはコレトトリカム（Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ）属のもの；
－ レオチノマイセテス（Ｌｅｏｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｓ）綱、より好ましくはビョウタケ（Ｈｅｌｏｔｉａｌｅｓ）目のもの、より好ましくは菌核病菌（Ｓｃｌｅｒｏｔｉｎｉａｃｅａｅ）科のもの、より好ましくはボトリチス（Ｂｏｔｒｙｔｉｓ）属のもの；
－ クロイボタケ（Ｄｏｔｈｉｄｅｏｍｙｃｅｔｅｓ）綱、より好ましくはプレオスポラ（Ｐｌｅｏｓｐｏｒａｌｅｓ）目のもの、より好ましくはプレオスポラ（Ｐｌｅｏｓｐｏｒａｃｅａｅ）科のもの、より好ましくはアルテルナリア（Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ）属のもの；
－ クロイボタケ（Ｄｏｔｈｉｄｅｏｍｙｃｅｔｅｓ）綱、より好ましくはプレオスポラ（Ｐｌｅｏｓｐｏｒａｌｅｓ）目のもの、より好ましくはファエオスファエリア（Ｐｈａｅｏｓｐｈａｅｒｉａｃｅａｅ）科のもの、より好ましくはファエオスファエリア（Ｐｈａｅｏｓｐｈａｅｒｉａ）属のもの；
－ クロイボタケ（Ｄｏｔｈｉｄｅｏｍｙｃｅｔｅｓ）綱、より好ましくはボトリオスファエリア（Ｂｏｔｒｙｏｓｐｈａｅｒｉａｌｅｓ）目のもの、より好ましくはボトリオスファエリア（Ｂｏｔｒｙｏｓｐｈａｅｒｉａｃｅａｅ）科のもの、より好ましくはマクロフォミナ（Ｍａｃｒｏｐｈｏｍｉｎａ）属のもの；
－ クロイボタケ（Ｄｏｔｈｉｄｅｏｍｙｃｅｔｅｓ）綱、より好ましくはカプノディウム（Ｃａｐｎｏｄｉａｌｅｓ）目のもの、より好ましくはコタマカビ（Ｍｙｃｏｓｐｈａｅｒｅｌｌａｃｅａｅ）科のもの、より好ましくはジモセプトリア（Ｚｙｍｏｓｅｐｔｏｒｉａ）属のもの；
－ ハラタケ（Ａｇｒａｒｉｃｏｍｙｃｅｔｅｓ）綱、より好ましくはアンズタケ（Ｃａｎｔｈａｒｅｌｌａｌｅｓ）目のもの、より好ましくはツノタンシキン（Ｃｅｒａｔｏｂａｓｉｄｉａｃｅａｅ）科のもの、より好ましくはリゾクトニア（Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａ）属又はタナテフォルス（Ｔｈａｎａｔｅｐｈｏｒｕｓ）属のもの；
－ サビキン（Ｐｕｃｃｉｎｉｏｍｙｃｅｔｅｓ）綱、より好ましくはサビキン（Ｐｕｃｃｉｎｉａｌｅｓ）目のもの、より好ましくはサビキン（Ｐｕｃｃｉｎｉａｃｅａｅ）科のもの、より好ましくはウロマイセス（Ｕｒｏｍｙｃｅｓ）属又はサビキン（Ｐｕｃｃｉｎｉａ）属のもの；
－ クロボキン（Ｕｓｔｉｌａｇｉｎｏｍｙｃｅｔｅｓ）綱、より好ましくはクロボキン（Ｕｓｔｉｌａｇｉｎａｌｅｓ）目のもの、より好ましくはクロボキン（Ｕｓｔｉｌａｇｉｎａｃｅａｅ）科のもの、より好ましくはクロボキン（Ｕｓｔｉｌａｇｏ）属のもの；
－ 卵菌（Ｏｏｍｙｃｏｔａ）綱、より好ましくはフハイカビ（Ｐｙｔｈｉａｌｅｓ）目のもの、より好ましくはフハイカビ（Ｐｙｔｈｉａｃｅａｅ）科のもの、より好ましくはフハイカビ（Ｐｙｔｈｉｕｍ）属のもの；
－ 卵菌（Ｏｏｍｙｃｏｔａ）綱、より好ましくはツユカビ（Ｐｅｒｏｎｏｓｐｏｒａｌｅｓ）目のもの、より好ましくはツユカビ（Ｐｅｒｏｎｏｓｐｏｒａｃｅａｅ）科のもの、より好ましくは疫病菌（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ）属、プラスモパラ（Ｐｌａｓｍｏｐａｒａ）属又はシュードペロノスポラ（Ｐｓｅｕｄｏｐｅｒｏｎｏｓｐｏｒａ）属のもの
から選択される微生物によって引き起こされるか又は悪化する、使用又は方法を提供する。
ｉ）真菌性病害は、白発疹（ｗｈｉｔｅ ｂｌｉｓｔｅｒ）、べと病、ウドンコ病、根こぶ病、菌核病、フザリウム（ｆｕｓａｒｉｕｍ）立枯病及び腐敗病、灰色かび病、炭疽病、リゾクトニア（ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａ）腐敗病、腰折れ病、キャビティスポット、塊茎病害、さび病、黒根病、輪紋病、アファノミセス（ａｐｈａｎｏｍｙｃｅｓ）根腐病、アスコキタ（ａｓｃｏｃｈｙｔａ）襟腐病、つる枯病、アルテルナリア（ａｌｔｅｒｎａｒｉａ）斑点病、黒脚病、輪斑病、斑点病、セルコスポラ（ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ）葉枯病、セプトリア（ｓｅｐｔｏｒｉａ）斑点病、葉枯病又はそれらの組み合わせから選択され、及び／又は
ｉｉ）真菌性病害は、分類学的階級：
－ フンタマカビ（Ｓｏｒｄａｒｉｏｍｙｃｅｔｅｓ）綱、より好ましくはヒポクレア（Ｈｙｐｏｃｒｅａｌｅｓ）目のもの、より好ましくはベニアワツブタケ（Ｎｅｃｔｒｉａｃｅａｅ）科のもの、より好ましくはフザリウム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）属のもの；
－ フンタマカビ（Ｓｏｒｄａｒｉｏｍｙｃｅｔｅｓ）綱、より好ましくはグロメレラ（Ｇｌｏｍｅｒｅｌｌａｌｅｓ）目のもの、より好ましくはグロメレラ（Ｇｌｏｍｅｒｅｌｌａｃｅａｅ）科のもの、より好ましくはコレトトリカム（Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ）属のもの；
－ レオチノマイセテス（Ｌｅｏｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｓ）綱、より好ましくはビョウタケ（Ｈｅｌｏｔｉａｌｅｓ）目のもの、より好ましくは菌核病菌（Ｓｃｌｅｒｏｔｉｎｉａｃｅａｅ）科のもの、より好ましくはボトリチス（Ｂｏｔｒｙｔｉｓ）属のもの；
－ クロイボタケ（Ｄｏｔｈｉｄｅｏｍｙｃｅｔｅｓ）綱、より好ましくはプレオスポラ（Ｐｌｅｏｓｐｏｒａｌｅｓ）目のもの、より好ましくはプレオスポラ（Ｐｌｅｏｓｐｏｒａｃｅａｅ）科のもの、より好ましくはアルテルナリア（Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ）属のもの；
－ クロイボタケ（Ｄｏｔｈｉｄｅｏｍｙｃｅｔｅｓ）綱、より好ましくはプレオスポラ（Ｐｌｅｏｓｐｏｒａｌｅｓ）目のもの、より好ましくはファエオスファエリア（Ｐｈａｅｏｓｐｈａｅｒｉａｃｅａｅ）科のもの、より好ましくはファエオスファエリア（Ｐｈａｅｏｓｐｈａｅｒｉａ）属のもの；
－ クロイボタケ（Ｄｏｔｈｉｄｅｏｍｙｃｅｔｅｓ）綱、より好ましくはボトリオスファエリア（Ｂｏｔｒｙｏｓｐｈａｅｒｉａｌｅｓ）目のもの、より好ましくはボトリオスファエリア（Ｂｏｔｒｙｏｓｐｈａｅｒｉａｃｅａｅ）科のもの、より好ましくはマクロフォミナ（Ｍａｃｒｏｐｈｏｍｉｎａ）属のもの；
－ クロイボタケ（Ｄｏｔｈｉｄｅｏｍｙｃｅｔｅｓ）綱、より好ましくはカプノディウム（Ｃａｐｎｏｄｉａｌｅｓ）目のもの、より好ましくはコタマカビ（Ｍｙｃｏｓｐｈａｅｒｅｌｌａｃｅａｅ）科のもの、より好ましくはジモセプトリア（Ｚｙｍｏｓｅｐｔｏｒｉａ）属のもの；
－ ハラタケ（Ａｇｒａｒｉｃｏｍｙｃｅｔｅｓ）綱、より好ましくはアンズタケ（Ｃａｎｔｈａｒｅｌｌａｌｅｓ）目のもの、より好ましくはツノタンシキン（Ｃｅｒａｔｏｂａｓｉｄｉａｃｅａｅ）科のもの、より好ましくはリゾクトニア（Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａ）属又はタナテフォルス（Ｔｈａｎａｔｅｐｈｏｒｕｓ）属のもの；
－ サビキン（Ｐｕｃｃｉｎｉｏｍｙｃｅｔｅｓ）綱、より好ましくはサビキン（Ｐｕｃｃｉｎｉａｌｅｓ）目のもの、より好ましくはサビキン（Ｐｕｃｃｉｎｉａｃｅａｅ）科のもの、より好ましくはウロマイセス（Ｕｒｏｍｙｃｅｓ）属又はサビキン（Ｐｕｃｃｉｎｉａ）属のもの；
－ クロボキン（Ｕｓｔｉｌａｇｉｎｏｍｙｃｅｔｅｓ）綱、より好ましくはクロボキン（Ｕｓｔｉｌａｇｉｎａｌｅｓ）目のもの、より好ましくはクロボキン（Ｕｓｔｉｌａｇｉｎａｃｅａｅ）科のもの、より好ましくはクロボキン（Ｕｓｔｉｌａｇｏ）属のもの；
－ 卵菌（Ｏｏｍｙｃｏｔａ）綱、より好ましくはフハイカビ（Ｐｙｔｈｉａｌｅｓ）目のもの、より好ましくはフハイカビ（Ｐｙｔｈｉａｃｅａｅ）科のもの、より好ましくはフハイカビ（Ｐｙｔｈｉｕｍ）属のもの；
－ 卵菌（Ｏｏｍｙｃｏｔａ）綱、より好ましくはツユカビ（Ｐｅｒｏｎｏｓｐｏｒａｌｅｓ）目のもの、より好ましくはツユカビ（Ｐｅｒｏｎｏｓｐｏｒａｃｅａｅ）科のもの、より好ましくは疫病菌（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ）属、プラスモパラ（Ｐｌａｓｍｏｐａｒａ）属又はシュードペロノスポラ（Ｐｓｅｕｄｏｐｅｒｏｎｏｓｐｏｒａ）属のもの
から選択される微生物によって引き起こされるか又は悪化する、使用又は方法を提供する。
【図面の簡単な説明】
【0029】
【図1】ＰＸ－１４１培地中でパエニバチルス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ）株ＳＴＲＡＩＮ ３２を使用した、実施例１に記載されている発酵過程にわたる胞子の１ｍｌあたりの濃度を示す。胞子数は、ディスポーザブル計数チャンバを使用して位相差顕微鏡法によって評価した。胞子濃度は、０からおよそ３．５×１０＾９まで概ねＳ字状に増加する。濃度曲線の傾斜によって示されるように、胞子形成は、接種後２４～３０時間及び３６～４２時間の期間で最速であり、３０～３６時間の期間ではそれより遅くなる。
【図2】実施例１に記載の発酵において時間間隔ごとに生成された胞子の数を示す。棒の高さは、特定の時点で生成された胞子の数を示す。各試料の胞子の正味生成量を、以下の式：ＮＰｔ＝Ｎｔ－Ｎｔ－１（ＮＰ＝胞子の正味生成量、Ｎ＝胞子の数、ｔ＝時点）によって決定した。この図により、胞子形成が接種後２４～３０時間及び３６～４２時間の期間で最速であり、３０～３６時間の期間でそれより遅くなるという図１の結論が実証される。
【図3】同一培地中での先の発酵において３０、３６、４８又は７２時間の発酵時間でそれぞれ回収した１０＾６個の胞子を接種した発酵中のバイオマス形成の進展を（光学密度により測定した任意単位で）示す。全ての発酵のバイオマス進展は、概ね同様であり、バイオマス進展曲線は、初期誘導期の長さによって互いに相殺されている。接種材料の回収時間が遅いほど、誘導期が長くなり、且つ接種後の対数期増殖の終了が遅くなる。
【図4】図３の発酵が、３０、３６、４８又は７２時間の発酵時間でそれぞれ回収した１０Ｅ＋６個の胞子の接種材料を使用してＡＵ１以上のバイオマスに達するのに必要な時間を示す。図４に示す時間は、誘導期の長さを示す。接種材料の回収時間が遅いほど、誘導期が長くなる。
【図5】１０Ｅ＋６胞子／ｍｌを最初の接種材料として使用して４８時間培養した後のフサリシジンＡ、Ｂ及びＤの総濃度を示す。接種材料に使用した胞子試料は、実施例１の１２ｌスケールの発酵中の様々な時点後に採取した。４８時間の発酵後のフサリシジンＡ、Ｂ及びＤの総濃度は、２４時間後に回収した胞子群集を接種した発酵で最も高く（１４０％、およそ３．５ｇ／ｌ）、接種材料の回収時間が長くなるにつれて、４８時間で回収した胞子群集を接種した発酵での１００％までほぼ直線的に低下した。４８時間以降に回収した胞子群集を接種した発酵では、フサリシジン総濃度の低下が依然として測定可能であったが、その低下は、これより前の時点ほど急激ではなかった。
【図6】３６時間及び５６時間の発酵時間後に回収した胞子の胞子成長タイミングを示す。ＩＳＰ２寒天プレート上での４８時間及び７２時間の培養時間後、コロニー形成単位を評価した。発酵ブロス試料中の栄養細胞を６０℃／３０分間での熱処理により死滅させてから、１００μｌの試料を寒天プレートにプレーティングした。３６時間で回収した胞子の場合、寒天プレート培養の７２時間以内に観察された全コロニーのおよそ７７％が培養の４８時間時点で既に明確であった。５６時間で回収した胞子の場合、培養の７２時間以内に観察された全コロニーのおよそ４９％が培養の４８時間時点で既に明確であった。
【図7】生存胞子力価及び総ジピコリン酸レベル／発酵ブロス（ｍｌ）を示す。実施例４で行った発酵の過程にわたって試料を採取した。およそ４０時間の発酵後、ジピコリン酸の濃度は、胞子形成速度よりも著しく速く増加する。
【図8】胞子計数に対して正規化したジピコリン酸形成の進展を示す。実施例４の発酵における１単一胞子あたりのＤＰＡの比率をＤＰＡ［μｍｏｌ／発酵ブロス（ｍｌ）］／胞子計数［数／発酵ブロス（ｍｌ）］として算出した。ＤＰＡの１胞子あたりの濃度は、接種後４０～４８時間で最も速く増加し、発酵の５６時間時点で１胞子あたりのＤＰＡの最高濃度に達した。
【図9】ＴＳＢブロス中でのＣ．テタノモーファム（Ｃ．ｔｅｔａｎｏｍｏｒｐｈｕｍ）ＤＳＭ５２８及びＣ．チロブチリカム（Ｃ．ｔｙｒｏｂｕｔｙｒｉｃｕｍ）ＤＳＭ１４６０の実施例９の７日間培養から維持した胞子の成長タイミングを示す。１００μｌの液体培養試料をＴＳＢ寒天にプレーティングし、４８時間及び９６時間の培養時間後に目視で計数することにより、コロニー形成単位を評価した。９６時間での合計ＣＦＵ計数に関連する４８時間及び９６時間の培養時間後に判明したＣＦＵの比率を示す。
【発明を実施するための形態】
【0030】
本発明の技術的教示は、言語手段を使用して、特に科学用語及び技術用語を使用することにより、本明細書で表される。しかしながら、当業者は、言語手段が、それが詳細且つ正確であり得るとしても、教示を表現する複数の方法があり、その各々が全ての概念上のつながりを完全に表現することは、表現の各々が必然的に完結しなければならないことから必然的に不可能である、ということのみが理由であるとしても、技術的教示の完全な内容に近似するものに過ぎない可能性があることを理解している。これを念頭において、当業者は、本発明の主題が、本明細書で示されるか又は本明細書の本質的な制約によって必然的にパルス・プロ・トト方式で表現される個々の技術的概念の総和であることを理解する。特に、当業者は、個々の技術的概念の表明が、本明細書において、技術的に実用的である限り概念の各々の考えられる組み合わせを詳細に述べたものの略記としてなされ、その結果、例えば、３つの概念又は実施形態の開示であるＡ、Ｂ及びＣは、概念Ａ＋Ｂ、Ａ＋Ｃ、Ｂ＋Ｃ、Ａ＋Ｂ＋Ｃの省略表記であることを理解するであろう。特に、特徴に関する代替案は、代替例又は具体例を集約するリストに関して本明細書で記載される。別途記述されない限り、本明細書に記載の本発明は、そのような代替例の任意の組み合わせを含む。そのようなリストから幾分好ましい要素を選択することは、本発明の一部であり、またそれぞれの特徴によって伝えられる利点を最小程度に現実化させるための当業者の優先性によるものである。このような複数の組み合わされた具体例は、本発明の適切に好ましい形態を表す。
【0031】
本明細書で使用される場合、文脈上明らかに別途示されている場合を除き、単数の用語並びに「１つの（ａ）」、「１つの（ａｎ）」及び「その」などの単数形には、複数の指示対象が含まれる。したがって、例えば、「核酸」という用語の使用は、実際に、その核酸分子の多くのコピーを任意選択で含む。同様に、「プローブ」という用語は、任意選択で（且つ典型的には）多くの類似又は同一のプローブ分子を包含する。本明細書で使用される場合、「含んでいる」という語又は「含む」若しくは「含んでいる」などの変形形態は、記載された要素、整数若しくは工程又は要素、整数若しくは工程の群を含むが、いかなる他の要素、整数若しくは工程又は要素、整数若しくは工程の群を排除するものではないことも理解される。
【0032】
本明細書で使用される場合、「及び／又は」という用語は、関連する列挙された項目の１つ以上のあらゆる全ての可能な組み合わせ並びに二者択一（「又は」）で解釈される場合の組み合わせの欠如を指し、且つ包含する。「含む」という用語は、「からなる」という用語も包含する。
【0033】
「約」という用語は、測定可能な値、例えば質量、用量、時間、温度、配列同一性などの大きさに関して使用される場合、特定の値の±０．１％、０．２５％、０．５％、０．７５％、１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１５％又は更に２０％の変動値及びその特定の値を指す。したがって、所与の組成物が「約５０％のＸ」を含むと記載されている場合、いくつかの実施形態では、組成物は５０％のＸを含む一方、他の実施形態では、組成物は、４０％～６０％のＸ（即ち５０％±１０％）を含み得ることを理解されたい。
【0034】
「植物」という用語は、それが有機物質に属することから、本明細書ではその最も広い意味で使用され、分類学上の植物界のメンバーである真核生物を包含することを意図しており、その例としては、単子葉植物及び双子葉植物、維管束植物、野菜、穀類、花、樹木、草本、灌木、イネ科草本、つる、シダ、コケ、真菌類、藻類など、並びに無性生殖に使用されるクローン、側枝及び植物の一部（例えば、切穂、管状体、シュート、根茎、地下茎、群生株、樹冠、球根、球茎、塊茎、根茎、組織培養で生成された植物／組織など）が挙げられるが、これらに限定されない。別途記述されない限り、「植物」という用語は、植物全体、その任意の部分又は植物に由来する細胞若しくは組織培養物を指し、植物全体、植物の構成要素若しくは器官（例えば、葉、茎、根など）、植物組織、種子、植物細胞及び／又はそれらの後代のいずれかを含む。植物細胞は、植物から採取されるか、又は植物から採取された細胞の培養を通して得られた植物の生物学的細胞である。
【0035】
本発明の方法において特に有用である植物には、カエデ属種（Ａｃｅｒ ｓｐｐ．）、マタタビ属種（Ａｃｔｉｎｉｄｉａ ｓｐｐ．）、トロロアオイ属種（Ａｂｅｌｍｏｓｃｈｕｓ ｓｐｐ．）、サイザルアサ（Ａｇａｖｅ ｓｉｓａｌａｎａ）、カモジグサ属種（Ａｇｒｏｐｙｒｏｎ ｓｐｐ．）、ハイコヌカグサ（Ａｇｒｏｓｔｉｓ ｓｔｏｌｏｎｉｆｅｒａ）、アリウム属種（Ａｌｌｉｕｍ ｓｐｐ．）、ヒユ属種（Ａｍａｒａｎｔｈｕｓ ｓｐｐ．）、アンモフィラ・アレナリア（Ａｍｍｏｐｈｉｌａ ａｒｅｎａｒｉａ）、パイナップル（Ａｎａｎａｓ ｃｏｍｏｓｕｓ）、バンレイシ属種（Ａｎｎｏｎａ ｓｐｐ．）、セロリ（Ａｐｉｕｍ ｇｒａｖｅｏｌｅｎｓ）、ラッカセイ属種（Ａｒａｃｈｉｓ ｓｐｐ．）、パンノキ属種（Ａｒｔｏｃａｒｐｕｓ ｓｐｐ．）、アスパラガス（Ａｓｐａｒａｇｕｓ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ）、カラスムギ属種（Ａｖｅｎａ ｓｐｐ．）（例えば、アベナ・サティバ（Ａｖｅｎａ ｓａｔｉｖａ）、アベナ・ファツア（Ａｖｅｎａ ｆａｔｕａ）、アベナ・ビザンチナ（Ａｖｅｎａ ｂｙｚａｎｔｉｎａ）、アベナ・ファツア変種サティバ（Ａｖｅｎａ ｆａｔｕａ ｖａｒ．ｓａｔｉｖａ）、アベナ・ハイブリダ（Ａｖｅｎａ ｈｙｂｒｉｄａ））、スターフルーツ（Ａｖｅｒｒｈｏａ ｃａｒａｍｂｏｌａ）、ホウライチク属種（Ｂａｍｂｕｓａ ｓｐ．）、トウガン（Ｂｅｎｉｎｃａｓａ ｈｉｓｐｉｄａ）、ブラジルナッツ（Ｂｅｒｔｈｏｌｌｅｔｉａ ｅｘｃｅｌｓｅａ）、サトウダイコン（Ｂｅｔａ ｖｕｌｇａｒｉｓ）、アブラナ属種（Ｂｒａｓｓｉｃａ ｓｐｐ．）（例えば、セイヨウアブラナ（Ｂｒａｓｓｉｃａ ｎａｐｕｓ）、ブラッシカ・ラパ亜種（Ｂｒａｓｓｉｃａ ｒａｐａ ｓｓｐ．）［キャノーラ、ナタネ、カブラナ（ｔｕｒｎｉｐ ｒａｐｅ）］）、カダバ・ファリノーサ（Ｃａｄａｂａ ｆａｒｉｎｏｓａ）、チャノキ（Ｃａｍｅｌｌｉａ ｓｉｎｅｎｓｉｓ）、ダンドク（Ｃａｎｎａ ｉｎｄｉｃａ）、大麻（Ｃａｎｎａｂｉｓ ｓａｔｉｖａ）、トウガラシ属種（Ｃａｐｓｉｃｕｍ ｓｐｐ．）、カレックス・エラータ（Ｃａｒｅｘ ｅｌａｔａ）、パパイヤ（Ｃａｒｉｃａ ｐａｐａｙａ）、オオバナカリッサ（Ｃａｒｉｓｓａ ｍａｃｒｏｃａｒｐａ）、ペカン属種（Ｃａｒｙａ ｓｐｐ．）、ベニバナ（Ｃａｒｔｈａｍｕｓ ｔｉｎｃｔｏｒｉｕｓ）、クリ属種（Ｃａｓｔａｎｅａ ｓｐｐ．）、カポック（Ｃｅｉｂａ ｐｅｎｔａｎｄｒａ）、エンダイブ（Ｃｉｃｈｏｒｉｕｍ ｅｎｄｉｖｉａ）、ニッケイ属種（Ｃｉｎｎａｍｏｍｕｍ ｓｐｐ．）、スイカ（Ｃｉｔｒｕｌｌｕｓ ｌａｎａｔｕｓ）、ミカン属種（Ｃｉｔｒｕｓ ｓｐｐ．）、ココヤシ属種（Ｃｏｃｏｓ ｓｐｐ．）、コーヒーノキ属種（Ｃｏｆｆｅａ ｓｐｐ．）、サトイモ（Ｃｏｌｏｃａｓｉａ ｅｓｃｕｌｅｎｔａ）、コーラ属種（Ｃｏｌａ ｓｐｐ．）、ツナソ属種（Ｃｏｒｃｈｏｒｕｓ ｓｐ．）、コリアンダー（Ｃｏｒｉａｎｄｒｕｍ ｓａｔｉｖｕｍ）、ハシバミ属種（Ｃｏｒｙｌｕｓ ｓｐｐ．）、サンザシ属種（Ｃｒａｔａｅｇｕｓ ｓｐｐ．）、サフラン（Ｃｒｏｃｕｓ ｓａｔｉｖｕｓ）、カボチャ属種（Ｃｕｃｕｒｂｉｔａ ｓｐｐ．）、キュウリ属種（Ｃｕｃｕｍｉｓ ｓｐｐ．）、チョウセンアザミ属種（Ｃｙｎａｒａ ｓｐｐ．）、ノラニンジン（Ｄａｕｃｕｓ ｃａｒｏｔａ）、ヌスビトハギ属種（Ｄｅｓｍｏｄｉｕｍ ｓｐｐ．）、リュウガン（Ｄｉｍｏｃａｒｐｕｓ ｌｏｎｇａｎ）、ヤマノイモ属種（Ｄｉｏｓｃｏｒｅａ ｓｐｐ．）、カキノキ属種（Ｄｉｏｓｐｙｒｏｓ ｓｐｐ．）、ヒエ属種（Ｅｃｈｉｎｏｃｈｌｏａ ｓｐｐ．）、アブラヤシ属（Ｅｌａｅｉｓ）（例えば、ギニアアブラヤシ（Ｅｌａｅｉｓ ｇｕｉｎｅｅｎｓｉｓ）、アメリカアブラヤシ（Ｅｌａｅｉｓ ｏｌｅｉｆｅｒａ））、シコクビエ（Ｅｌｅｕｓｉｎｅ ｃｏｒａｃａｎａ）、テフ（Ｅｒａｇｒｏｓｔｉｓ ｔｅｆ）、エリアンサス属種（Ｅｒｉａｎｔｈｕｓ ｓｐ．）、ビワ（Ｅｒｉｏｂｏｔｒｙａ ｊａｐｏｎｉｃａ）、ユーカリ属種（Ｅｕｃａｌｙｐｔｕｓ ｓｐ．）、ピタンガ（Ｅｕｇｅｎｉａ ｕｎｉｆｌｏｒａ）、ソバ属種（Ｆａｇｏｐｙｒｕｍ ｓｐｐ．）、ブナ属種（Ｆａｇｕｓ ｓｐｐ．）、オニウシノケグサ（Ｆｅｓｔｕｃａ ａｒｕｎｄｉｎａｃｅａ）、イチジク（Ｆｉｃｕｓ ｃａｒｉｃａ）、キンカン属種（Ｆｏｒｔｕｎｅｌｌａ ｓｐｐ．）、フラガリア属種（Ｆｒａｇａｒｉａ ｓｐｐ．）、イチョウ（Ｇｉｎｋｇｏ ｂｉｌｏｂａ）、ダイズ属種（Ｇｌｙｃｉｎｅ ｓｐｐ．）（例えば、ダイズ（Ｇｌｙｃｉｎｅ ｍａｘ）、ソヤ・ヒスピダ（Ｓｏｊａ ｈｉｓｐｉｄａ）又はソヤ・マックス（Ｓｏｊａ ｍａｘ））、ワタ（Ｇｏｓｓｙｐｉｕｍ ｈｉｒｓｕｔｕｍ）、ヒマワリ属種（Ｈｅｌｉａｎｔｈｕｓ ｓｐｐ．）（例えば、ヒマワリ（Ｈｅｌｉａｎｔｈｕｓ ａｎｎｕｕｓ）、ノカンゾウ（Ｈｅｍｅｒｏｃａｌｌｉｓ ｆｕｌｖａ））、フヨウ属種（Ｈｉｂｉｓｃｕｓ ｓｐｐ．）、オオムギ属種（Ｈｏｒｄｅｕｍ ｓｐｐ．）（例えば、オオムギ（Ｈｏｒｄｅｕｍ ｖｕｌｇａｒｅ））、サツマイモ（Ｉｐｏｍｏｅａ ｂａｔａｔａｓ）、クルミ属種（Ｊｕｇｌａｎｓ ｓｐｐ．）、レタス（Ｌａｃｔｕｃａ ｓａｔｉｖａ）、レンリソウ属種（Ｌａｔｈｙｒｕｓ ｓｐｐ．）、レンズマメ（Ｌｅｎｓ ｃｕｌｉｎａｒｉｓ）、アマ（Ｌｉｎｕｍ ｕｓｉｔａｔｉｓｓｉｍｕｍ）、レイシ（Ｌｉｔｃｈｉ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ）、ハス属種（Ｌｏｔｕｓ ｓｐｐ．）、トカドヘチマ（Ｌｕｆｆａ ａｃｕｔａｎｇｕｌａ）、ルピナス属種（Ｌｕｐｉｎｕｓ ｓｐｐ．）、ルズラ・シルバチカ（Ｌｕｚｕｌａ ｓｙｌｖａｔｉｃａ）、トマト属種（Ｌｙｃｏｐｅｒｓｉｃｏｎ ｓｐｐ．）（例えば、トマト（Ｌｙｃｏｐｅｒｓｉｃｏｎ ｅｓｃｕｌｅｎｔｕｍ）、リコペルシコン・リコペルシクム（Ｌｙｃｏｐｅｒｓｉｃｏｎ ｌｙｃｏｐｅｒｓｉｃｕｍ）、リコペルシコン・ピリフォルメ（Ｌｙｃｏｐｅｒｓｉｃｏｎ ｐｙｒｉｆｏｒｍｅ））、マクロチロマ属種（Ｍａｃｒｏｔｙｌｏｍａ ｓｐｐ．）、リンゴ属種（Ｍａｌｕｓ ｓｐｐ．）、アセロラ（Ｍａｌｐｉｇｈｉａ ｅｍａｒｇｉｎａｔａ）、マメイアップル（Ｍａｍｍｅａ ａｍｅｒｉｃａｎａ）、マンゴー（Ｍａｎｇｉｆｅｒａ ｉｎｄｉｃａ）、キャッサバ属種（Ｍａｎｉｈｏｔ ｓｐｐ．）、サポジラ（Ｍａｎｉｌｋａｒａ ｚａｐｏｔａ）、ムラサキウマゴヤシ（Ｍｅｄｉｃａｇｏ ｓａｔｉｖａ）、シナガワハギ属種（Ｍｅｌｉｌｏｔｕｓ ｓｐｐ．）、ハッカ属種（Ｍｅｎｔｈａ ｓｐｐ．）、ススキ（Ｍｉｓｃａｎｔｈｕｓ ｓｉｎｅｎｓｉｓ）、ツルレイシ属種（Ｍｏｍｏｒｄｉｃａ ｓｐｐ．）、クロミグワ（Ｍｏｒｕｓ ｎｉｇｒａ）、バショウ属種（Ｍｕｓａ ｓｐｐ．）、タバコ属種（Ｎｉｃｏｔｉａｎａ ｓｐｐ．）、オリーブ属種（Ｏｌｅａ ｓｐｐ．）、オプンティア属種（Ｏｐｕｎｔｉａ ｓｐｐ．）、オルニソプス種（Ｏｒｎｉｔｈｏｐｕｓ ｓｐｐ．）、イネ属種（Ｏｒｙｚａ ｓｐｐ．）（例えば、イネ（Ｏｒｙｚａ ｓａｔｉｖａ）、オリザ・ラティフォリア（Ｏｒｙｚａ ｌａｔｉｆｏｌｉａ））、キビ（Ｐａｎｉｃｕｍ ｍｉｌｉａｃｅｕｍ）、パニクム・ヴィルガツム（Ｐａｎｉｃｕｍ ｖｉｒｇａｔｕｍ）、クダモノトケイソウ（Ｐａｓｓｉｆｌｏｒａ ｅｄｕｌｉｓ）、パースニップ（Ｐａｓｔｉｎａｃａ ｓａｔｉｖａ）、チカラシバ属種（Ｐｅｎｎｉｓｅｔｕｍ ｓｐ．）、ワニナシ属種（Ｐｅｒｓｅａ ｓｐｐ．）、パセリ（Ｐｅｔｒｏｓｅｌｉｎｕｍ ｃｒｉｓｐｕｍ）、クサヨシ（Ｐｈａｌａｒｉｓ ａｒｕｎｄｉｎａｃｅａ）、インゲンマメ属種（Ｐｈａｓｅｏｌｕｓ ｓｐｐ．）、オオアワガエリ（Ｐｈｌｅｕｍ ｐｒａｔｅｎｓｅ）、ナツメヤシ属種（Ｐｈｏｅｎｉｘ ｓｐｐ．）、ヨシ（Ｐｈｒａｇｍｉｔｅｓ ａｕｓｔｒａｌｉｓ）、ホオズキ属種（Ｐｈｙｓａｌｉｓ ｓｐｐ．）、マツ属種（Ｐｉｎｕｓ ｓｐｐ．）、ピスタチオ（Ｐｉｓｔａｃｉａ ｖｅｒａ）、エンドウ属種（Ｐｉｓｕｍ ｓｐｐ．）、イチゴツナギ属種（Ｐｏａ ｓｐｐ．）、ヤマナラシ属種（Ｐｏｐｕｌｕｓ ｓｐｐ．）、プロソピス属種（Ｐｒｏｓｏｐｉｓ ｓｐｐ．）、サクラ属種（Ｐｒｕｎｕｓ ｓｐｐ．）、パンジロウ属種（Ｐｓｉｄｉｕｍ ｓｐｐ．）、ザクロ（Ｐｕｎｉｃａ ｇｒａｎａｔｕｍ）、セイヨウナシ（Ｐｙｒｕｓ ｃｏｍｍｕｎｉｓ）、コナラ属種（Ｑｕｅｒｃｕｓ ｓｐｐ．）、ダイコン（Ｒａｐｈａｎｕｓ ｓａｔｉｖｕｓ）、カラダイオウ（Ｒｈｅｕｍ ｒｈａｂａｒｂａｒｕｍ）、スグリ属種（Ｒｉｂｅｓ ｓｐｐ．）、トウゴマ（Ｒｉｃｉｎｕｓ ｃｏｍｍｕｎｉｓ）、キイチゴ属種（Ｒｕｂｕｓ ｓｐｐ．）、サトウキビ属種（Ｓａｃｃｈａｒｕｍ ｓｐｐ．）、ヤナギ属種（Ｓａｌｉｘ ｓｐ．）、ニワトコ属種（Ｓａｍｂｕｃｕｓ ｓｐｐ．）、ライムギ（Ｓｅｃａｌｅ ｃｅｒｅａｌｅ）、ゴマ属種（Ｓｅｓａｍｕｍ ｓｐｐ．）、シナピス属種（Ｓｉｎａｐｉｓ ｓｐ．）、ナス属種（Ｓｏｌａｎｕｍ ｓｐｐ．）（例えば、ジャガイモ（Ｓｏｌａｎｕｍ ｔｕｂｅｒｏｓｕｍ）、ヒラナス（Ｓｏｌａｎｕｍ ｉｎｔｅｇｒｉｆｏｌｉｕｍ）又はトマト（Ｓｏｌａｎｕｍ ｌｙｃｏｐｅｒｓｉｃｕｍ））、モロコシ（Ｓｏｒｇｈｕｍ ｂｉｃｏｌｏｒ）、ホウレンソウ属種（Ｓｐｉｎａｃｉａ ｓｐｐ．）、フトモモ属種（Ｓｙｚｙｇｉｕｍ ｓｐｐ．）、センジュギク属種（Ｔａｇｅｔｅｓ ｓｐｐ．）、タマリンド（Ｔａｍａｒｉｎｄｕｓ ｉｎｄｉｃａ）、カカオ（Ｔｈｅｏｂｒｏｍａ ｃａｃａｏ）、シャジクソウ属種（Ｔｒｉｆｏｌｉｕｍ ｓｐｐ．）、ガマグラス（Ｔｒｉｐｓａｃｕｍ ｄａｃｔｙｌｏｉｄｅｓ）、トリチコセケル・リンパウイ（Ｔｒｉｔｉｃｏｓｅｃａｌｅ ｒｉｍｐａｕｉ）、コムギ属種（Ｔｒｉｔｉｃｕｍ ｓｐｐ．）（例えば、コムギ（Ｔｒｉｔｉｃｕｍ ａｅｓｔｉｖｕｍ）、デュラムコムギ（Ｔｒｉｔｉｃｕｍ ｄｕｒｕｍ）、リベットコムギ（Ｔｒｉｔｉｃｕｍ ｔｕｒｇｉｄｕｍ）、トリチカム・ハイベルナム（Ｔｒｉｔｉｃｕｍ ｈｙｂｅｒｎｕｍ）、マッハコムギ（Ｔｒｉｔｉｃｕｍ ｍａｃｈａ）、トリチカム・サチバム（Ｔｒｉｔｉｃｕｍ ｓａｔｉｖｕｍ）、ヒトツブコムギ（Ｔｒｉｔｉｃｕｍ ｍｏｎｏｃｏｃｃｕｍ）又はトリチカム・ブルガレ（Ｔｒｉｔｉｃｕｍ ｖｕｌｇａｒｅ））、ヒメキンレンカ（Ｔｒｏｐａｅｏｌｕｍ ｍｉｎｕｓ）、キンレンカ（Ｔｒｏｐａｅｏｌｕｍ ｍａｊｕｓ）、スノキ属種（Ｖａｃｃｉｎｉｕｍ ｓｐｐ．）、ソラマメ属種（Ｖｉｃｉａ ｓｐｐ．）、ササゲ属種（Ｖｉｇｎａ ｓｐｐ．）、ニオイスミレ（Ｖｉｏｌａ ｏｄｏｒａｔａ）、ブドウ属種（Ｖｉｔｉｓ ｓｐｐ．）、トウモロコシ（Ｚｅａ ｍａｙｓ）、ワイルドライス（Ｚｉｚａｎｉａ ｐａｌｕｓｔｒｉｓ）、ナツメ属種（Ｚｉｚｉｐｈｕｓ ｓｐｐ．）、アマランス、アーティチョーク、アスパラガス、ブロッコリー、メキャベツ、キャベツ、キャノーラ、ニンジン、カリフラワー、セロリ、カラードグリーン、アマ、ケール、レンズマメ、ナタネ、オクラ、タマネギ、ジャガイモ、イネ、ダイズ、イチゴ、テンサイ、サトウキビ、ヒマワリ、トマト、カボチャ、茶及び藻類をとりわけ含む一覧から選択される、緑色植物亜界の上科、特に飼葉用又は飼料用マメ科植物を含む単子葉及び双子葉植物、観葉植物、食用穀物、樹木又は低木に属する全ての植物が含まれる。本発明の好ましい実施形態によれば、植物は、作物である。作物の例には、とりわけ、ダイズ、ヒマワリ、キャノーラ、アルファルファ、ナタネ、ワタ、トマト、ジャガイモ又はタバコが含まれる。
【0036】
本発明によれば、植物は、植物材料を得るために栽培される。栽培条件は、植物を考慮して選択され、例えば、温室での生育、畑での生育、ハイドロカルチャーでの生育及び水耕による生育のいずれかが含まれ得る。植物及び植物の部分、例えば、種子及び細胞は遺伝子改変されたものであり得る。特に、植物及びその部分、好ましくは種子及び細胞は、組換えされたもの、好ましくはトランスジェニック又はシスジェニックで組換えされたものであり得る。
【0037】
本発明は、胞子組成物を提供する。本発明によれば、「胞子」及び「内生胞子」という用語は、互換的に使用される。この用語には、発芽可能な胞子と発芽不可能な胞子の両方、即ち生存可能な微生物物質を含有しないか、又は更なる発芽若しくは成長を妨げる遺伝子改変を含有しない胞子体が含まれる。胞子体は外層を含み、この外層は、典型的には環境に対する半透過性バリアとして機能し、環境の化学シグナルを胞子内の細胞物質に（例えば発芽を誘発するために）中継する。外層は、典型的には、外膜及び殻に更に分けられる。したがって、胞子外層は、それ自体が研究対象であり、バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）、クロストリジウム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ）（Ａｂｈｙａｎｋａｒ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｐｒｏｔｅｏｍｅ Ｒｅｓ．２０１３，４５０７－４５２１）及びパエニバチルス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ）（国際公開第２０２０２３２３１６号パンフレット）について広く分析されている。胞子のコアは、胞子の乾燥重量の最大４～１５％を占めるカルシウム－ジピコリン酸（ＤＰＡ）の複合体を含む（Ｃｈｕｒｃｈ，Ｂ．，Ｈａｌｖｏｒｓｏｎ，Ｈ．Ｄｅｐｅｎｄｅｎｃｅ ｏｆ ｔｈｅ Ｈｅａｔ Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｏｆ Ｂａｃｔｅｒｉａｌ Ｅｎｄｏｓｐｏｒｅｓ ｏｎ ｔｈｅｉｒ Ｄｉｐｉｃｏｌｉｎｉｃ Ａｃｉｄ Ｃｏｎｔｅｎｔ．Ｎａｔｕｒｅ １８３，１２４－１２５（１９５９）．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１０３８／１８３１２４ａ０）。ジピコリン酸は、遊離水分子と結合して胞子の脱水を生じさせることにより、コア内の高分子の耐熱性を改善することが判明している（Ｉ．Ｓｍｉｔｈ，Ｒ．Ｓｌｅｐｅｃｋｙ，Ｐ．Ｓｅｔｌｏｗ，Ｇｅｒｈａｒｄｔ，Ｐ．，１９８９ Ｓｐｏｒｅ ｔｈｅｒｍｏｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ．Ｉｎ Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ Ｐｒｏｃａｒｙｏｔｉｃ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，ｅｄｉｔｅｄ ｂｙ Ｉ．Ｓｍｉｔｈ，Ｒ．Ｓｌｅｐｅｃｋｙ，ａｎｄ Ｐ．Ｓｅｔｌｏｗ，ｐｐ．１７－３７，Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｓｏｃｉｅｔｙ ｆｏｒ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｄ．Ｃ）。加えて、カルシウム－ジピコリン酸複合体は、核酸塩基間に複合体自体を挿入することによりＤＮＡを熱変性から保護し、それによりＤＮＡの安定性を増大させる（Ｍｏｅｌｌｅｒ，Ｒ．，Ｍ．Ｒａｇｕｓｅ，Ｇ．Ｒｅｉｔｚ，Ｒ．Ｏｋａｙａｓｕ，Ｚ．Ｌｉ，ｅｔ ａｌ．，２０１４ Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｏｆ ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ ｓｐｏｒｅ ｄｎａ ｔｏ ｌｅｔｈａｌ ｉｏｎｉｚｉｎｇ ｒａｄｉａｔｉｏｎ ｄａｍａｇｅ ｒｅｌｉｅｓ ｐｒｉｍａｒｉｌｙ ｏｎ ｓｐｏｒｅ ｃｏｒｅ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ ａｎｄ ｄｎａ ｒｅｐａｉｒ，ｗｉｔｈ ｍｉｎｏｒ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｏｘｙｇｅｎ ｒａｄｉｃａｌ ｄｅｔｏｘｉｆｉｃａｔｉｏｎ．Ａｐｐｌｉｅｄ ａｎｄ Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ ８０：１０４－１０９）。好ましくは、胞子という用語は、生存可能、即ち発芽可能な内生胞子を示す。
【0038】
胞子組成物の胞子は、原核微生物の胞子である。したがって、本発明は、真菌胞子に関係しない。原核微生物の好ましい分類群は、本明細書で後述される。
【0039】
組成物は、いくつかの微生物種の胞子を含み得、少なくとも１つの種の胞子は、十分な含有量の本明細書に記載の初期胞子群集を含み、より好ましくは２つの種の胞子、最も好ましくは原核微生物の全ての胞子は、十分な含有量の本明細書に記載の初期胞子群集をそれぞれ含む。これに対応して、本発明は、胞子組成物中の十分な含有量の初期胞子群集を特性決定するための特徴を記載する。
【0040】
好ましくは、十分な含有量の初期胞子群集は、コロニー形成に適した条件下で好適な培地にプレーティングした場合、組成物の胞子がコロニーを形成するという観察結果によって検出することができる。そのような増殖条件及び固形培地は、当業者の一般的知識の一部である。例えば、バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）培養のための周知の培地は、Ｍ９最少培地（Ｈａｒｗｏｏｄ ｅｔ ａｌ．，１９９０，Ｃｈｅｍｉｃａｌｌｙ ｄｅｆｉｎｅｄ ｇｒｏｗｔｈ ｍｅｄｉａ ａｎｄ ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｓ，ｐ．５４８．Ｉｎ Ｃ．Ｒ．Ｈａｒｗｏｏｄ ａｎｄ Ｓ．Ｍ．Ｃｕｔｔｉｎｇ（ｅｄ．），Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｍｅｔｈｏｄｓ ｆｏｒ Ｂａｃｉｌｌｕｓ．Ｗｉｌｅｙ，Ｃｈｉｃｈｅｓｔｅｒ，Ｕｎｉｔｅｄ Ｋｉｎｇｄｏｍ）及びペプトン肉エキス（Ｎａｅｖｅｋｅ ｅｔ ａｌ．，Ｅｉｎｆｕｅｈｒｕｎｇ ｉｎ ｄｉｅ ｍｉｋｒｏｂｉｏｌｏｇｉｓｃｈｅｎ Ｍｅｔｈｏｄｅｎ，Ｔｅｃｈｎｉｓｃｈｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔａｅｔ Ｂｒａｕｎｓｃｈｗｅｉｇ １９８２）、トリプシン大豆ブロス（ＴＳＢ）及びルリア－ベルターニ（ＬＢ）（Ｐａｒｋ，Ｃ．Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ Ｔｒｙｐｔｉｃ Ｓｏｙ Ｂｒｏｔｈ（ＴＳＢ）ａｎｄ Ｌｕｒｉａ－Ｂｅｒｔａｎｉ（ＬＢ）Ｍｅｄｉｕｍ ｏｎ Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｓｕｂｔｉｌｉｓｉｎ ＣＰ－１ ｆｒｏｍ Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ．ＣＰ－１ ａｎｄ Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ Ｓｕｂｔｉｌｉｓｉｎ ＣＰ－１．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ（２０１２），２２（６），１０．５３５２／ＪＬＳ．２０１２．２２．６．８２３）である。プレーティングした後、コロニーは、様々な時点で形成される。本発明によれば、株をプレーティングした後、好気性培養（３０～３７℃）では７２時間、嫌気性培養（２８～３５℃）では９６時間、コロニー形成をモニタリングする。本発明による組成物について、それぞれ７２時間又は９６時間以内に観察された全コロニーの少なくとも４０％が４８時間以内に形成された。好ましくは、全コロニーの最大２０％、より好ましくは最大１０％が４８時間後に形成される。したがって、好ましくは、７２時間又は９６時間以内に肉眼で観察される全コロニーの４０～９０％が、適宜、培養後４８時間以内に形成される。より好ましくは、コロニーの少なくとも５０％、より好ましくは５０～９０％が４８時間以内に形成される。更により好ましくは、コロニーの少なくとも６０％、より好ましくは６０～９０％が４８時間以内に形成される。更により好ましくは、コロニーの少なくとも７０％、より好ましくは７０～９０％が４８時間以内に形成される。当業者は、発芽速度が大いに種特異的であるという事実を認識している。したがって、７２時間／９６時間のインキュベーション後でもコロニーが形成される場合がある。しかしながら、検出の目的には、初期発芽胞子の後期発芽胞子に対する比率が実際に前者の胞子群集に有利にシフトしていることを示すことで十分である。例えば、実施例１０及び図１０に示されるように、クロストリジウム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ）属の異なる株は、例えばパエニバチルス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ）株より増殖速度が生得的に低い。
【0041】
本発明による組成物は、好ましくは、発酵（好ましくは撹拌液相発酵）からの精製によって得ることができるか又は得られる。好ましくは、本発明による胞子組成物中の胞子の少なくとも４０％、より好ましくは少なくとも５０％、より好ましくは少なくとも５５％、より好ましくは少なくとも６０％、より好ましくは少なくとも７０％、より好ましくは少なくとも８０％は、第１の胞子形成期中の精製によって得ることができるか又は得られる。好ましい精製方法は以下に記載される。第１の胞子形成期の終了は、通常、胞子形成速度の低下によって検出可能である。次いで、第１の胞子形成期は、より遅い胞子形成期間の中間地点で終了すると定義される。但し、一部の発酵培地では、第１の胞子形成期の終了は、胞子形成速度のみに基づいて識別できない場合がある。そのような場合、当業者は較正発酵を実施し、いくつかの時点で試料を採取し、上述のようにコロニー形成速度の比率及び／又は１胞子あたりのジピコリン酸の含有量を決定する。
【0042】
本発明による組成物は、好ましくは、ジピコリン酸を、１胞子あたりのジピコリン酸の平均含有量が、定常期まで適切な培地で発酵された胞子のジピコリン酸の平均含有量の最大で８０％、より好ましくは２０～８０％、更により好ましくは２２～７０％、更により好ましくは３０～６５％であるように含む。以下により詳細に記載されるように、１胞子あたりのジピコリン酸含有量の含有量は、較正発酵並びに発酵中の様々な時点での胞子中のジピコリン酸含有量及び生存胞子計数の測定によって決定することが望まれる。１胞子あたりのジピコリン酸の最大比率に達するとき、所望の１胞子あたりのジピコリン酸含有量に達する発酵時間を算出することは容易である。
【0043】
本明細書に記載されるように、本発明の組成物はいくつかの利点を提供する。特に、本組成物により、生存胞子を一貫して迅速に発芽及び成長させることができる。更に、本発明により、活性がより高い胞子組成物を調製するための発酵時間を短縮させることが可能となる。生成時間の短縮によって時間あたりの生成能力が増大するため、これは、農業製品、プロバイオティクス製品及び清浄製品のための胞子組成物の工業生成において特に興味深いことである。本発明の組成物の更なる利点は、前記組成物中の胞子が、それらの大部分が初期胞子群集に属しているにもかかわらず、－８０℃～３７℃の温度などの通常の保存条件下で、活性を大幅に喪失することなく幅広い保存の間に尚も安定であることである。パエニバチルス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ）の胞子を含む本発明の胞子組成物が、液相発酵の接種に使用される場合、フサリシジンの非常に高い生成能をもたらすことも予想外であった。本発明の更なる利益及び利点は、以下の実施例にも記載されている。
【0044】
本発明による胞子組成物の胞子は、精製される。以下で更に詳細に記載されるように、精製は、組成物自体における胞子発芽の抑制又は低減をもたらす。一般に、胞子の精製は、それぞれの微生物の培養に使用した発酵培地からの胞子の分離を必要とする。
【0045】
好ましくは、組成物は、容易に発酵可能な炭素源を最大でも低含有量のみ含む。特に、組成物の可溶性炭素源含有量は、組成物の最大７重量％、より好ましくは組成物の０．１～４重量％であることが好ましい。
【0046】
更に、組成物の含水量は、好ましくは液体配合物中の組成物の最大９８重量％、より好ましくは組成物の８０～９５重量％に調整される。乾燥配合物では、組成物の含水量は、好ましくは液体配合物中の組成物の最大１０重量％、より好ましくは組成物の２～８重量％に調整される。好ましくは、精製は、胞子の濃縮を含み、好ましくは、脱水、凍結乾燥、均質化、抽出、タンジェンシャルフロー濾過、デプス濾過、遠心分離又は沈降の工程を含む。このような後処理プロセスの方法は、一般に当業者に公知であり、標準的な工業設備を使用し、当技術分野で公知の方法を最小限に改変させて使用して実施することができる。したがって、本発明の組成物を低コストで容易に生成できるということは、本発明の特定の利点である。
【0047】
これに対応して、本発明の胞子組成物は、好ましくは、生存細胞と胞子を最大で４：１、より好ましくは３：１～０．２：１の比率で含む。特定の用途では、発芽に必要な外部誘発なしで迅速な増殖を可能にする生存細胞と、長期的な有効性及び製品の安定性を可能にする胞子との組み合わせが有益な場合がある。しかしながら、本明細書に記載されるように、本発明は主に、組成物中に胞子を提供することに関しており、そのため本発明によれば、生存細胞の存在は許容されるが必須ではない。更に、いわゆる無細胞調製物は、細胞除去に使用される手法（例えば、遠心分離の速度）に応じて、細胞を完全に欠如しているわけではない場合があり、大部分が無細胞であるか又は実質的に無細胞であることがしばしば観察されている。得られた無細胞調製物は、乾燥させることができ、且つ／又は植物若しくは植物生育培地への適用を補助する成分とともに配合することができる。組成物が、組成物の胞子を生成した原核微生物の細胞を含めた細胞の存在を許容できることは、本発明の利点である。他方で、本発明の胞子組成物は、生存細胞を含まない組成物であり得る。
【0048】
本発明の胞子組成物は、好ましくは、前記胞子に加えて、
ｉ）殺真菌活性、殺細菌活性、殺ウイルス活性及び／又は植物防御活性化剤活性を有する１種以上の微生物殺有害生物剤、
ｉｉ）殺真菌活性、殺細菌活性、殺ウイルス活性及び／又は植物防御活性化剤活性を有する１種以上の生化学的殺有害生物剤、
ｉｉｉ）殺虫活性、殺ダニ活性、殺軟体動物活性及び／又は殺線虫活性を有する１種以上の微生物殺有害生物剤、
ｉｖ）殺虫活性、殺ダニ活性、殺軟体動物活性、フェロモン活性及び／又は殺線虫活性を有する１種以上の生化学的殺有害生物剤、
ｖ）呼吸阻害剤、ステロール生合成阻害剤、核酸合成阻害剤、細胞分裂及び細胞骨格の形成又は機能の阻害剤、アミノ酸及びタンパク質合成の阻害剤、シグナル伝達阻害剤、脂質及び膜合成阻害剤、多部位作用性阻害剤、細胞壁合成阻害剤、植物防御誘導剤並びに作用機序が不明である殺真菌剤から選択される１種以上の殺真菌剤
からなる群から好ましくは選択される少なくとも１種の有害生物防除剤を含む。
ｉ）殺真菌活性、殺細菌活性、殺ウイルス活性及び／又は植物防御活性化剤活性を有する１種以上の微生物殺有害生物剤、
ｉｉ）殺真菌活性、殺細菌活性、殺ウイルス活性及び／又は植物防御活性化剤活性を有する１種以上の生化学的殺有害生物剤、
ｉｉｉ）殺虫活性、殺ダニ活性、殺軟体動物活性及び／又は殺線虫活性を有する１種以上の微生物殺有害生物剤、
ｉｖ）殺虫活性、殺ダニ活性、殺軟体動物活性、フェロモン活性及び／又は殺線虫活性を有する１種以上の生化学的殺有害生物剤、
ｖ）呼吸阻害剤、ステロール生合成阻害剤、核酸合成阻害剤、細胞分裂及び細胞骨格の形成又は機能の阻害剤、アミノ酸及びタンパク質合成の阻害剤、シグナル伝達阻害剤、脂質及び膜合成阻害剤、多部位作用性阻害剤、細胞壁合成阻害剤、植物防御誘導剤並びに作用機序が不明である殺真菌剤から選択される１種以上の殺真菌剤
からなる群から好ましくは選択される少なくとも１種の有害生物防除剤を含む。
【0049】
バイオ殺有害生物剤は、微生物殺有害生物剤と生化学的殺有害生物剤という２つの主要なクラスに分けられる。微生物殺有害生物剤は、細菌、真菌又はウイルスからなり、多くの場合、細菌及び真菌が生成する代謝産物を含む。昆虫病原性線虫も多細胞性であるが、微生物殺有害生物剤に分類される。生化学的殺有害生物剤は、天然に存在する物質であるか、又は天然に存在する物質と構造的に類似し機能的に同一であり且つ生物源からの抽出物であり、この生物源は、有害生物を防除するか又は以下に定義される他の作物防御用途を提供するが、非毒性の作用機序（例えば、成長又は発生の調節、誘引物質、忌避物質又は防御活性化因子（例えば、誘導耐性）を有しており、哺乳動物に対して比較的非毒性である。作物病害に対して使用するためのバイオ殺有害生物剤は、既に様々な作物で確立されている。例えば、バイオ殺有害生物剤は、既にべと病病害の防除に重要な役割を果たしている。それらの利点としては、収穫前間隔が０日であること、中程度～重度の病害圧下で使用可能であること及び他の登録済み殺有害生物剤と混合して又はそれらとのローテーションプログラムで使用可能であることが挙げられる。いくつかのバイオ殺有害生物剤が胞子形成原核微生物によって生成されることは、本発明の特定の利点である。したがって、本発明の組成物及び対応する方法は、そのようなバイオ殺有害生物剤の迅速な生成を可能にするのみならず、本組成物は、有利なことに、例えば胞子の外層に付着した殺真菌活性、殺細菌活性、殺ウイルス活性及び／若しくは植物防御活性化剤活性を有する殺有害生物剤（フサリシジンはその一例である）を有することによってそれ自体でバイオ殺有害生物性である胞子又は発芽後にそのようなバイオ殺有害生物剤を生成する胞子のいずれかの急速且つ順調な発芽をも補助する。したがって、本発明の組成物は、原核微生物のバイオ殺有害生物性胞子を含む農業用製品の調製を特に補助する。
【0050】
したがって、本発明の胞子組成物は、好ましくは、バイオ殺有害生物性胞子及び任意選択で更なるバイオ殺有害生物剤を含む。多くのバイオ殺有害生物剤は、本明細書中で言及される寄託番号で寄託されており（ＡＴＣＣ又はＤＳＭなどの接頭語は、各カルチャーコレクションの頭字語を指し、詳細については、例えばｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｗｆｃｃ．ｉｎｆｏ／ｃｃｉｎｆｏ／ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ／ｂｙ＿ａｃｒｏｎｙｍ／を参照されたい）、文献中で言及されており、登録されており且つ／又は市販されている：Ｋｏｎｓｔａｎｚ，Ｇｅｒｍａｎｙで１９８９年に単離されたオーレオバシディウム・プルランス（Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍ ｐｕｌｌｕｌａｎｓ）ＤＳＭ １４９４０及びＤＳＭ １４９４１の混合物（例えばｂｉｏ－ｆｅｒｍ ＧｍｂＨ，ＡｕｓｔｒｉａのＢｌｏｓｓｏｍＰｒｏｔｅｃｔ（登録商標）中の分芽胞子）、元来、Ｓｏｕｔｈ Ｂｒａｚｉｌの小麦地帯（Ｐａｓｓｏ Ｆｕｎｄｏ）で少なくとも１９８０年より前に単離されたアゾスピリルム・ブラジレンス（Ａｚｏｓｐｉｒｉｌｌｕｍ ｂｒａｓｉｌｅｎｓｅ）Ｓｐ２４５（ＢＲ１１００５；例えば、ＢＡＳＦ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｐｅｃｉａｌｔｉｅｓ Ｌｔｄ．，ＢｒａｚｉｌのＧＥＬＦＩＸ（登録商標）Ｇｒａｍｉｎｅａｓ）、Ａ．ブラジレンス（Ａ．ｂｒａｓｉｌｅｎｓｅ）株Ａｂ－Ｖ５及びＡｂ－Ｖ６（例えば、Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ ＢｉｏＡｇ Ｐｒｏｄｕｔｏｓ ｐａｐｒａ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａ Ｌｔｄａ．，Ｑｕａｔｔｒｏ Ｂａｒｒａｓ，ＢｒａｚｉｌのＡｚｏＭａｘ又はＳｉｍｂｉｏｓｅ－Ａｇｒｏ，ＢｒａｚｉｌのＳｉｍｂｉｏｓｅ－Ｍａｉｚ（登録商標）中のもの；Ｐｌａｎｔ Ｓｏｉｌ ３３１，４１３－４２５，２０１０）、バチルス・アミロリクエファシエンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）株ＡＰ－１８８（ＮＲＲＬ Ｂ－５０６１５及びＢ－５０３３１；米国特許第８，４４５，２５５号明細書）；日本菊川市の空気中から単離されたＢ．アミロリクエファシエンス属種プランタルム（Ｂ．ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ ｓｐｐ．ｐｌａｎｔａｒｕｍ）Ｄ７４７（米国特許出願第２０１３０２３６５２２Ａ１号明細書；ＦＥＲＭ ＢＰ ８２３４；例えば、Ｃｅｒｔｉｓ ＬＬＣ，ＵＳＡのＤｏｕｂｌｅ Ｎｉｃｋｅｌ（商標）５５ ＷＤＧ）、Ｂｒａｎｄｅｎｂｕｒｇ，Ｇｅｒｍａｎｙの土壌から単離されたＢ．アミロリクエファシエンス属種プランタルム（Ｂ．ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ ｓｐｐ．ｐｌａｎｔａｒｕｍ）ＦＺＢ２４（ＳＢ３６１５とも呼ばれる；ＤＳＭ９６－２；Ｊ．Ｐｌａｎｔ Ｄｉｓ．Ｐｒｏｔ．１０５，１８１－１９７，１９９８；例えば、Ｎｏｖｏｚｙｍｅ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．，ＵＳＡのＴａｅｇｒｏ（登録商標））、Ｂｒａｎｄｅｎｂｕｒｇ，Ｇｅｒｍａｎｙの土壌から単離されたＢ．アミロリクエファシエンス亜種プランタルム（Ｂ．ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ ｓｓｐ．ｐｌａｎｔａｒｕｍ）ＦＺＢ４２（ＤＳＭ２３１１７；Ｊ．Ｐｌａｎｔ Ｄｉｓ．Ｐｒｏｔ．１０５，１８１－１９７，１９９８；例えば、ＡｂｉＴＥＰ ＧｍｂＨ，ＧｅｒｍａｎｙのＲｈｉｚｏＶｉｔａｌ（登録商標）４２）、Ｓｕｔｔｏｎ Ｂｏｎｉｎｇｔｏｎ，Ｎｏｔｔｉｎｇｈａｍｓｈｉｒｅ，Ｕ．Ｋ．のソラマメから少なくとも１９８８年より前に単離されたＢ．アミロリクエファシエンス亜種プランタルム（Ｂ．ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ ｓｓｐ．ｐｌａｎｔａｒｕｍ）ＭＢＩ６００（１４３０とも呼ばれる；ＮＲＲＬ Ｂ ５０５９５；米国特許出願公開第２０１２／０１４９５７１Ａ１号明細書；例えば、ＢＡＳＦ Ｃｏｒｐ．，ＵＳＡのＩｎｔｅｇｒａｌ（登録商標））、Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ，Ｕ．Ｓ．Ａ．で１９９５年にモモ果樹園から単離されたＢ．アミロリクエファシエンス亜種プランタルム（Ｂ．ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ ｓｓｐ．ｐｌａｎｔａｒｕｍ）ＱＳＴ－７１３（ＮＲＲＬ Ｂ ２１６６１；例えば、Ｂａｙｅｒ Ｃｒｏｐ Ｓｃｉｅｎｃｅ ＬＰ，ＵＳＡのＳｅｒｅｎａｄｅ（登録商標）ＭＡＸ）、Ｓｏｕｔｈ Ｄａｋｏｄａ，Ｕ．Ｓ．Ａ．で１９９２年に単離されたＢ．アミロリクエファシエンス属種プランタルム（Ｂ．ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ ｓｐｐ．ｐｌａｎｔａｒｕｍ）ＴＪ１０００（１ＢＥとも呼ばれる；ＡＴＣＣ ＢＡＡ－３９０；カナダ国特許出願公開第２４７１５５５Ａ１号明細書；例えば、ＴＪ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｗａｔｅｒｔｏｗｎ，ＳＤ，ＵＳＡのＱｕｉｃｋＲｏｏｔｓ（商標））、Ｂ．ファーマス（Ｂ．ｆｉｒｍｕｓ）ＣＮＣＭ Ｉ－１５８２（Ｉｓｒａｅｌの中央平原地帯の土壌から単離された親株ＥＩＰ－Ｎ１（ＣＮＣＭ Ｉ－１５５６）の変異株）（国際公開第２００９／１２６４７３号パンフレット、米国特許第６，４０６，６９０号明細書；例えばＢａｙｅｒ ＣｒｏｐＳｃｉｅｎｃｅ ＬＰ，ＵＳＡのＶｏｔｉｖｏ（登録商標））、Ｍｅｘｉｃｏでリンゴ樹木の根圏から単離されたＢ．プミルス（Ｂ．ｐｕｍｉｌｕｓ）ＧＨＡ １８０（ＩＤＡＣ ２６０７０７－０１；例えば、Ｐｒｅｍｉｅｒ Ｈｏｒｔｉｃｕｌｔｕｒｅ，Ｑｕｅｂｅｃ，ＣａｎａｄａのＰＲＯ－ＭＩＸ（登録商標）ＢＸ）、エルウィニア・トラケイフィラ（Ｅｒｗｉｎｉａ ｔｒａｃｈｅｉｐｈｉｌａ）に侵入されたキュウリから少なくとも１９９３年より前に単離されたＢ．プミルス（Ｂ．ｐｕｍｉｌｕｓ）ＩＮＲ－７（ＢＵ Ｆ２２及びＢＵ－Ｆ３３と別途称される）（ＮＲＲＬ Ｂ－５０１８５、ＮＲＲＬ Ｂ－５０１５３；米国特許第８，４４５，２５５号明細書）、（ＮＲＲＬ Ｂ－５０７５４；国際公開第２０１４／０２９６９７号パンフレット；Ｂ．プミルス（Ｂ．ｐｕｍｉｌｕｓ）ＱＳＴ ２８０８は、１９９８年にＰｏｈｎｐｅｉ，Ｆｅｄｅｒａｔｅｄ Ｓｔａｔｅｓ ｏｆ Ｍｉｃｒｏｎｅｓｉａで収集された土壌から単離された（ＮＲＲＬ Ｂ・３００８７；例えば、Ｂａｙｅｒ Ｃｒｏｐ Ｓｃｉｅｎｃｅ ＬＰ，ＵＳＡのＳｏｎａｔａ（登録商標）又はＢａｌｌａｄ（登録商標）Ｐｌｕｓ）、Ｂ．シンプレックス（Ｂ．ｓｉｍｐｌｅｘ）ＡＢＵ ２８８（ＮＲＲＬ Ｂ－５０３０４；米国特許第８，４４５，２５５号明細書）、Ｎｏｒｔｈ Ａｍｅｒｉｃａでレッドビートの根から単離されたＢ．サブティリス（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）ＦＢ１７（ＵＤ １０２２又はＵＤ １０－２２とも呼ばれる）（ＡＴＣＣ ＰＴＡ－１１８５７；Ｓｙｓｔｅｍ．Ａｐｐｌ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．２７，３７２－３７９，２００４；米国特許出願公開第２０１０／０２６０７３５号明細書；国際公開第２０１１／１０９３９５号パンフレット）；１９８７年にＥｐｈｒａｉｍ，Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ，Ｕ．Ｓ．Ａ．の芝生から採取された土壌から単離されたＢ．チューリンゲンシス亜種アイザワイ（Ｂ．ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ ｓｓｐ．ａｉｚａｗａｉ）ＡＢＴＳ－１８５７（ＡＢＧ ６３４６とも呼ばれる；ＡＴＣＣ ＳＤ－１３７２；例えば、ＢｉｏＦａ ＡＧ，Ｍｕｅｎｓｉｎｇｅｎ，ＧｅｒｍａｎｙのＸｅｎＴａｒｉ（登録商標））、Ｂｒｏｗｎｓｖｉｌｌｅ，Ｔｅｘａｓ，Ｕ．Ｓ．Ａ．で罹患したワタキバガの黒色幼虫から１９６７年に単離されたＨＤ－１と同一のＢ．ｔ．亜種クルスタキ（Ｂ．ｔ．ｓｓｐ．ｋｕｒｓｔａｋｉ）ＡＢＴＳ－３５１（ＡＴＣＣ ＳＤ－１２７５；例えば、Ｖａｌｅｎｔ ＢｉｏＳｃｉｅｎｃｅｓ，ＩＬ，ＵＳＡのＤｉｐｅｌ（登録商標）ＤＦ）、Ｅ．サッカリナ（Ｅ．ｓａｃｃｈａｒｉｎａ）の幼虫の死骸から単離されたＢ．ｔ．亜種クルスタキ（Ｂ．ｔ．ｓｓｐ．ｋｕｒｓｔａｋｉ）ＳＢ４（ＮＲＲＬ Ｂ－５０７５３；Ｂ．ｔ．亜種テネブリオニス（Ｂ．ｔ．ｓｓｐ．ｔｅｎｅｂｒｉｏｎｉｓ）ＮＢ－１７６－１（甲虫チャイロコメノゴミムシダマシ（Ｔｅｎｅｂｒｉｏ ｍｏｌｉｔｏｒ）の死んだ蛹から１９８２年に単離された野生型株であるＮＢ－１２５株の突然変異株）（ＤＳＭ ５４８０；欧州特許第５８５２１５Ｂ１号明細書；例えば、Ｖａｌｅｎｔ ＢｉｏＳｃｉｅｎｃｅｓ，ＳｗｉｔｚｅｒｌａｎｄのＮｏｖｏｄｏｒ（登録商標））、ボーベリア・バッシアーナ（Ｂｅａｕｖｅｒｉａ ｂａｓｓｉａｎａ）ＧＨＡ（ＡＴＣＣ ７４２５０；例えば、Ｌａｖｅｒｌａｍ Ｉｎｔ．Ｃｏｒｐ．，ＵＳＡのＢｏｔａｎｉＧａｒｄ（登録商標）２２ＷＧＰ）、Ｂ．バッシアーナ（Ｂ．ｂａｓｓｉａｎａ）ＪＷ－１（ＡＴＣＣ ７４０４０；例えば、ＣＢＣ（Ｅｕｒｏｐｅ）Ｓ．ｒ．ｌ．，ＩｔａｌｙのＮａｔｕｒａｌｉｓ（登録商標））、カメノコハムシであるコンキロクテニア・プンクタータ（Ｃｏｎｃｈｙｌｏｃｔｅｎｉａ ｐｕｎｃｔａｔａ）の幼虫から単離されたＢ．バッシアーナ（Ｂ．ｂａｓｓｉａｎａ）ＰＰＲＩ ５３３９（ＮＲＲＬ ５０７５７）、Ｒｉｏ ｄｅ Ｊａｎｅｉｒｏ，Ｂｒａｚｉｌで単離されたブラディリゾビウム・エルカニ（Ｂｒａｄｙｒｈｉｚｏｂｉｕｍ ｅｌｋａｎｉｉ）株ＳＥＭＩＡ ５０１９（２９Ｗとも呼ばれる）及び１９６７年にＲｉｏ Ｇｒａｎｄｅ ｄｏ Ｓｕｌ州で北米単離株が以前接種された地域から単離されており、１９６８年から市販の接種物中で使用されているＳＥＭＩＡ ５８７（Ａｐｐｌ．Ｅｎｖｉｒｏｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．７３（８），２６３５，２００７；例えば、ＢＡＳＦ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｐｅｃｉａｌｔｉｅｓ Ｌｔｄ．，ＢｒａｚｉｌのＧＥＬＦＩＸ ５）、Ｕ．Ｓ．Ａ．でＷｉｓｃｏｎｓｉｎの圃場から単離されたＢ．ジャポニクム（Ｂ．ｊａｐｏｎｉｃｕｍ）５３２ｃ（Ｎｉｔｒａｇｉｎ ６１Ａ１５２；Ｃａｎ．Ｊ．Ｐｌａｎｔ．Ｓｃｉ．７０，６６１－６６６，１９９０；例えば、ＢＡＳＦ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｐｅｃｉａｌｔｉｅｓ Ｌｔｄ．，ＣａｎａｄａのＲｈｉｚｏｆｌｏ（登録商標）、Ｈｉｓｔｉｃｋ（登録商標）、Ｈｉｃｏａｔ（登録商標）Ｓｕｐｅｒ中のもの）、ＵＳＤＡ １３８株のＢ．ジャポニクム（Ｂ．ｊａｐｏｎｉｃｕｍ）Ｅ－１０９変異株（ＩＮＴＡ Ｅ１０９、ＳＥＭＩＡ ５０８５；Ｅｕｒ．Ｊ．Ｓｏｉｌ Ｂｉｏｌ．４５，２８－３５，２００９；Ｂｉｏｌ．Ｆｅｒｔｉｌ．Ｓｏｉｌｓ ４７，８１－８９，２０１１）；ＳＥＭＩＡに寄託され、Ａｐｐｌ．Ｅｎｖｉｒｏｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．７３（８），２６３５，２００７により公知のＢ．ジャポニクム（Ｂ．ｊａｐｏｎｉｃｕｍ）株：Ｅｍｂｒａｐａ－ＣｅｒｒａｄｏｓによりＢｒａｚｉｌのＣｅｒｒａｄｏｓ地方の土壌から単離されており、１９９２年から市販の接種物中で使用されているＳＥＭＩＡ ５０７９（ＣＰＡＣ １５；例えば、ＢＡＳＦ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｐｅｃｉａｌｔｉｅｓ Ｌｔｄ．，ＢｒａｚｉｌのＧＥＬＦＩＸ ５又はＡＤＨＥＲＥ ６０）、ＢｒａｚｉｌでＥｍｂｒａｐａ－Ｃｅｒｒａｄｏｓにより実験室条件下で得られ、１９９２年から市販の接種物中で使用されており、元来Ｕ．Ｓ．Ａ．で単離されたＳＥＭＩＡ ５８６（ＣＢ１８０９）の天然変異株である、Ｂ．ジャポニクム（Ｂ．ｊａｐｏｎｉｃｕｍ）ＳＥＭＩＡ ５０８０（ＣＰＡＣ７；例えば、ＢＡＳＦ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｐｅｃｉａｌｔｉｅｓ Ｌｔｄ．，ＢｒａｚｉｌのＧＥＬＦＩＸ ５又はＡＤ－ＨＥＲＥ ６０）；２００８年に日本の日光の土壌から単離されたバークホルデリア属種（Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ ｓｐ．）Ａ３９６（ＮＲＲＬ Ｂ－５０３１９；国際公開第２０１３／０３２６９３号パンフレット；Ｍａｒｒｏｎｅ Ｂｉｏ Ｉｎｎｏｖａｔｉｏｎｓ，Ｉｎｃ．，ＵＳＡ）、ナタネから単離されたコニオチリウム・ミニタンス（Ｃｏｎｉｏｔｈｙｒｉｕｍ ｍｉｎｉｔａｎｓ）ＣＯＮ／Ｍ／９１－０８（国際公開第１９９６／０２１３５８号パンフレット；ＤＳＭ ９６６０；例えば、Ｂａｙｅｒ ＣｒｏｐＳｃｉｅｎｃｅ ＡＧ，ＧｅｒｍａｎｙのＣｏｎｔａｎｓ（登録商標）ＷＧ、Ｉｎｔｅｒｃｅｐｔ（登録商標）ＷＧ）、ハーピン（アルファ－ベータ）タンパク質（Ｓｃｉｅｎｃｅ ２５７，８５－８８，
１９９２；例えば、Ｐｌａｎｔ Ｈｅａｌｔｈ Ｃａｒｅ ｐｌｃ，Ｕ．Ｋ．のＭｅｓｓｅｎｇｅｒ（商標）又はＨＡＲＰ－Ｎ Ｔｅｋ）、オオタバコガ（Ｈｅｌｉｃｏｖｅｒｐａ ａｒｍｉｇｅｒａ）核多角体病ウイルス（ＨｅａｒＮＰＶ）（Ｊ．Ｉｎｖｅｒｔｅｂｒａｔｅ Ｐａｔｈｏｌ．１０７，１１２－１２６，２０１１；例えば、Ａｄｅｒｍａｔｔ Ｂｉｏｃｏｎｔｒｏｌ，ＳｗｉｔｚｅｒｌａｎｄのＨｅｌｉｃｏｖｅｘ（登録商標）；Ｋｏｐｐｅｒｔ，ＢｒａｚｉｌのＤｉｐｌｏｍａｔａ（登録商標）；ＡｇＢｉＴｅｃｈ Ｐｔｙ Ｌｔｄ．，Ｑｕｅｅｎｓｌａｎｄ，ＡｕｓｔｒａｌｉａのＶｉｖｕｓ（登録商標）Ｍａｘ）、アメリカタバコガ（Ｈｅｌｉｃｏｖｅｒｐａ ｚｅａ）単一カプシド核多角体病ウイルス（ＨｚＳＮＰＶ）（例えば、Ｃｅｒｔｉｓ ＬＬＣ，ＵＳＡのＧｅｍｓｔａｒ（登録商標））、アメリカタバコガ（Ｈｅｌｉｃｏｖｅｒｐａ ｚｅａ）核多角体病ウイルスＡＢＡ－ＮＰＶ－Ｕ（例えば、ＡｇＢｉＴｅｃｈ Ｐｔｙ Ｌｔｄ．，Ｑｕｅｅｎｓｌａｎｄ，ＡｕｓｔｒａｌｉａのＨｅｌｉｇｅｎ（登録商標））、ヘテロラブディティス・バクテリオフォラ（Ｈｅｔｅｒｏｒｈａｂｄｉｔｉｓ ｂａｃｔｅｒｉｏｐｈｏｒａ）（例えば、ＢＡＳＦ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｐｅｃｉａｌｉｔｉｅｓ Ｌｉｍｉｔｅｄ，ＵＫのＮｅｍａｓｙｓ（登録商標）Ｇ）、Ａｐｏｐｋａ，Ｆｌｏｒｉｄａ，Ｕ．Ｓ．Ａ．でサンシチソウ（ｇｙｎｕｒａ）上のコナカイガラムシから単離されたイサリア・フモソロセア（Ｉｓａｒｉａ ｆｕｍｏｓｏｒｏｓｅａ）Ａｐｏｐｋａ－９７（ＡＴＣＣ ２０８７４；Ｂｉｏｃｏｎｔｒｏｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｔｅｃｈｎｏｌ．２２（７），７４７－７６１，２０１２；例えば、Ｃｅｒｔｉｓ ＬＬＣ，ＵＳＡのＰＦＲ－９７（商標）又はＰｒｅＦｅＲａｌ（登録商標））、Ａｕｓｔｒｉａでコドリンガから単離されたメタリジウム・アニソプリエ変種アニソプリエ（Ｍｅｔａｒｈｉｚｉｕｍ ａｎｉｓｏｐｌｉａｅ ｖａｒ．ａｎｉｓｏｐｌｉａｅ）Ｆ５２（２７５又はＶ２７５とも呼ばれる）（ＤＳＭ ３８８４、ＡＴＣＣ ９０４４８；例えば、Ｍｅｔ５２（登録商標）Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ Ｂｉｏ－Ａｇ Ｇｒｏｕｐ，Ｃａｎａｄａ）、Ｉｓｒａｅｌの中央部のブドウから単離されたメッシュニコウィア・フルクチコラ（Ｍｅｔｓｃｈｎｉｋｏｗｉａ ｆｒｕｃｔｉｃｏｌａ）２７７（米国特許第６，９９４，８４９号明細書；ＮＲＲＬ Ｙ－３０７５２；例えば、かつてのＡｇｒｏｇｒｅｅｎ，ＩｓｒａｅｌのＳｈｅｍｅｒ（登録商標））、Ｐｈｉｌｉｐｐｉｎｅｓで感染した線虫の卵から単離されたペシロマイセス・イラシヌス（Ｐａｅｃｉｌｏｍｙｃｅｓ ｉｌａｃｉｎｕｓ）２５１（ＡＧＡＬ ８９／０３０５５０；国際公開第１９９１／０２０５１号パンフレット；Ｃｒｏｐ Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ ２７，３５２－３６１，２００８；例えば、Ｂａｙｅｒ ＣｒｏｐＳｃｉｅｎｃｅ ＡＧ，ＧｅｒｍａｎｙのＢｉｏＡｃｔ（登録商標）及びＣｅｒｔｉｓ，ＵＳＡのＭｅｌｏＣｏｎ（登録商標））、Ｉｌｌｉｎｏｉｓ，Ｕ．Ｓ．Ａで２０００年代半ばにダイズ圃場から単離されたパスツリア・ニシザワエ（Ｐａｓｔｅｕｒｉａ ｎｉｓｈｉｚａｗａｅ）Ｐｎ１（ＡＴＣＣ ＳＤ ５８３３；Ｆｅｄｅｒａｌ Ｒｅｇｉｓｔｅｒ ７６（２２），５８０８，Ｆｅｂｒｕａｒｙ ２，２０１１；例えば、Ｓｙｎｇｅｎｔａ Ｃｒｏｐ Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ，ＬＬＣ，ＵＳＡのＣｌａｒｉｖａ（商標）ＰＮ）、Ａｌｂｅｒｔａ，Ｃａｎａｄａの土壌から元来単離されたペニシリウム・ビライアエ（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ ｂｉｌａｉａｅ）（Ｐ．ビライ（Ｐ．ｂｉｌａｉｉ）とも呼ばれる）株ＡＴＣＣ １８３０９（＝ＡＴＣＣ ７４３１９）、ＡＴＣＣ ２０８５１及び／又はＡＴＣＣ ２２３４８（＝ＡＴＣＣ ７４３１８）（Ｆｅｒｔｉｌｉｚｅｒ Ｒｅｓ．３９，９７－１０３，１９９４；Ｃａｎ．Ｊ．Ｐｌａｎｔ Ｓｃｉ．７８（１），９１－１０２，１９９８；米国特許第５，０２６，４１７号明細書、国際公開第１９９５／０１７８０６号パンフレット；例えば、Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ ＢｉｏＡｇ Ｇｒｏｕｐ，ＣａｎａｄａのＪｕｍｐＳｔａｒｔ（登録商標）、Ｐｒｏｖｉｄｅ（登録商標））、オオイタドリ（Ｒｅｙｎｏｕｔｒｉａ ｓａｃｈａｌｉｎｅｎｓｉｓ）抽出物（欧州特許第０３０７５１０Ｂ１号明細書；例えば、Ｍａｒｒｏｎｅ ＢｉｏＩｎｎｏｖａｔｉｏｎｓ，Ｄａｖｉｓ，ＣＡ，ＵＳＡのＲｅｇａｌｉａ（登録商標）ＳＣ又はＢｉｏＦａ ＡＧ，ＧｅｒｍａｎｙのＭｉｌｓａｎａ（登録商標））、ステイネルネマ・カルポカプサエ（Ｓｔｅｉｎｅｒｎｅｍａ ｃａｒｐｏｃａｐｓａｅ）（例えば、ＢＡＳＦ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｐｅｃｉａｌｉｔｉｅｓ Ｌｉｍｉｔｅｄ，ＵＫのＭｉｌｌｅｎｉｕｍ（登録商標））、Ｓ．フェルティアエ（Ｓ．ｆｅｌｔｉａｅ）（例えば、ＢｉｏＷｏｒｋｓ，Ｉｎｃ．，ＵＳＡのＮｅｍａｓｈｉｅｌｄ（登録商標）；ＢＡＳＦ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｐｅｃｉａｌｉｔｉｅｓ Ｌｉｍｉｔｅｄ，ＵＫのＮｅｍａｓｙｓ（登録商標））、ストレプトマイセス・ミクロフラブス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｍｉｃｒｏｆｌａｖｕｓ）ＮＲＲＬ Ｂ－５０５５０（国際公開第２０１４／１２４３６９号パンフレット；Ｂａｙｅｒ ＣｒｏｐＳｃｉｅｎｃｅ，Ｇｅｒｍａｎｙ）、Ｔ．ハルジアナム（Ｔ．ｈａｒｚｉａｎｕｍ）Ｔ－２２（ＫＲＬ－ＡＧ２とも呼ばれる）（ＡＴＣＣ ２０８４７；Ｂｉｏ－Ｃｏｎｔｒｏｌ ５７，６８７－６９６，２０１２；例えば、ＢｉｏＷｏｒｋｓ Ｉｎｃ．，ＵＳＡのＰｌａｎｔｓｈｉｅｌｄ（登録商標）又はＡｄｖａｎｃｅｄ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｍａｒｋｅｔｉｎｇ Ｉｎｃ．，Ｖａｎ Ｗｅｒｔ，ＯＨ，ＵＳＡのＳａｂｒＥｘ（商標））。
１９９２；例えば、Ｐｌａｎｔ Ｈｅａｌｔｈ Ｃａｒｅ ｐｌｃ，Ｕ．Ｋ．のＭｅｓｓｅｎｇｅｒ（商標）又はＨＡＲＰ－Ｎ Ｔｅｋ）、オオタバコガ（Ｈｅｌｉｃｏｖｅｒｐａ ａｒｍｉｇｅｒａ）核多角体病ウイルス（ＨｅａｒＮＰＶ）（Ｊ．Ｉｎｖｅｒｔｅｂｒａｔｅ Ｐａｔｈｏｌ．１０７，１１２－１２６，２０１１；例えば、Ａｄｅｒｍａｔｔ Ｂｉｏｃｏｎｔｒｏｌ，ＳｗｉｔｚｅｒｌａｎｄのＨｅｌｉｃｏｖｅｘ（登録商標）；Ｋｏｐｐｅｒｔ，ＢｒａｚｉｌのＤｉｐｌｏｍａｔａ（登録商標）；ＡｇＢｉＴｅｃｈ Ｐｔｙ Ｌｔｄ．，Ｑｕｅｅｎｓｌａｎｄ，ＡｕｓｔｒａｌｉａのＶｉｖｕｓ（登録商標）Ｍａｘ）、アメリカタバコガ（Ｈｅｌｉｃｏｖｅｒｐａ ｚｅａ）単一カプシド核多角体病ウイルス（ＨｚＳＮＰＶ）（例えば、Ｃｅｒｔｉｓ ＬＬＣ，ＵＳＡのＧｅｍｓｔａｒ（登録商標））、アメリカタバコガ（Ｈｅｌｉｃｏｖｅｒｐａ ｚｅａ）核多角体病ウイルスＡＢＡ－ＮＰＶ－Ｕ（例えば、ＡｇＢｉＴｅｃｈ Ｐｔｙ Ｌｔｄ．，Ｑｕｅｅｎｓｌａｎｄ，ＡｕｓｔｒａｌｉａのＨｅｌｉｇｅｎ（登録商標））、ヘテロラブディティス・バクテリオフォラ（Ｈｅｔｅｒｏｒｈａｂｄｉｔｉｓ ｂａｃｔｅｒｉｏｐｈｏｒａ）（例えば、ＢＡＳＦ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｐｅｃｉａｌｉｔｉｅｓ Ｌｉｍｉｔｅｄ，ＵＫのＮｅｍａｓｙｓ（登録商標）Ｇ）、Ａｐｏｐｋａ，Ｆｌｏｒｉｄａ，Ｕ．Ｓ．Ａ．でサンシチソウ（ｇｙｎｕｒａ）上のコナカイガラムシから単離されたイサリア・フモソロセア（Ｉｓａｒｉａ ｆｕｍｏｓｏｒｏｓｅａ）Ａｐｏｐｋａ－９７（ＡＴＣＣ ２０８７４；Ｂｉｏｃｏｎｔｒｏｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｔｅｃｈｎｏｌ．２２（７），７４７－７６１，２０１２；例えば、Ｃｅｒｔｉｓ ＬＬＣ，ＵＳＡのＰＦＲ－９７（商標）又はＰｒｅＦｅＲａｌ（登録商標））、Ａｕｓｔｒｉａでコドリンガから単離されたメタリジウム・アニソプリエ変種アニソプリエ（Ｍｅｔａｒｈｉｚｉｕｍ ａｎｉｓｏｐｌｉａｅ ｖａｒ．ａｎｉｓｏｐｌｉａｅ）Ｆ５２（２７５又はＶ２７５とも呼ばれる）（ＤＳＭ ３８８４、ＡＴＣＣ ９０４４８；例えば、Ｍｅｔ５２（登録商標）Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ Ｂｉｏ－Ａｇ Ｇｒｏｕｐ，Ｃａｎａｄａ）、Ｉｓｒａｅｌの中央部のブドウから単離されたメッシュニコウィア・フルクチコラ（Ｍｅｔｓｃｈｎｉｋｏｗｉａ ｆｒｕｃｔｉｃｏｌａ）２７７（米国特許第６，９９４，８４９号明細書；ＮＲＲＬ Ｙ－３０７５２；例えば、かつてのＡｇｒｏｇｒｅｅｎ，ＩｓｒａｅｌのＳｈｅｍｅｒ（登録商標））、Ｐｈｉｌｉｐｐｉｎｅｓで感染した線虫の卵から単離されたペシロマイセス・イラシヌス（Ｐａｅｃｉｌｏｍｙｃｅｓ ｉｌａｃｉｎｕｓ）２５１（ＡＧＡＬ ８９／０３０５５０；国際公開第１９９１／０２０５１号パンフレット；Ｃｒｏｐ Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ ２７，３５２－３６１，２００８；例えば、Ｂａｙｅｒ ＣｒｏｐＳｃｉｅｎｃｅ ＡＧ，ＧｅｒｍａｎｙのＢｉｏＡｃｔ（登録商標）及びＣｅｒｔｉｓ，ＵＳＡのＭｅｌｏＣｏｎ（登録商標））、Ｉｌｌｉｎｏｉｓ，Ｕ．Ｓ．Ａで２０００年代半ばにダイズ圃場から単離されたパスツリア・ニシザワエ（Ｐａｓｔｅｕｒｉａ ｎｉｓｈｉｚａｗａｅ）Ｐｎ１（ＡＴＣＣ ＳＤ ５８３３；Ｆｅｄｅｒａｌ Ｒｅｇｉｓｔｅｒ ７６（２２），５８０８，Ｆｅｂｒｕａｒｙ ２，２０１１；例えば、Ｓｙｎｇｅｎｔａ Ｃｒｏｐ Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ，ＬＬＣ，ＵＳＡのＣｌａｒｉｖａ（商標）ＰＮ）、Ａｌｂｅｒｔａ，Ｃａｎａｄａの土壌から元来単離されたペニシリウム・ビライアエ（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ ｂｉｌａｉａｅ）（Ｐ．ビライ（Ｐ．ｂｉｌａｉｉ）とも呼ばれる）株ＡＴＣＣ １８３０９（＝ＡＴＣＣ ７４３１９）、ＡＴＣＣ ２０８５１及び／又はＡＴＣＣ ２２３４８（＝ＡＴＣＣ ７４３１８）（Ｆｅｒｔｉｌｉｚｅｒ Ｒｅｓ．３９，９７－１０３，１９９４；Ｃａｎ．Ｊ．Ｐｌａｎｔ Ｓｃｉ．７８（１），９１－１０２，１９９８；米国特許第５，０２６，４１７号明細書、国際公開第１９９５／０１７８０６号パンフレット；例えば、Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ ＢｉｏＡｇ Ｇｒｏｕｐ，ＣａｎａｄａのＪｕｍｐＳｔａｒｔ（登録商標）、Ｐｒｏｖｉｄｅ（登録商標））、オオイタドリ（Ｒｅｙｎｏｕｔｒｉａ ｓａｃｈａｌｉｎｅｎｓｉｓ）抽出物（欧州特許第０３０７５１０Ｂ１号明細書；例えば、Ｍａｒｒｏｎｅ ＢｉｏＩｎｎｏｖａｔｉｏｎｓ，Ｄａｖｉｓ，ＣＡ，ＵＳＡのＲｅｇａｌｉａ（登録商標）ＳＣ又はＢｉｏＦａ ＡＧ，ＧｅｒｍａｎｙのＭｉｌｓａｎａ（登録商標））、ステイネルネマ・カルポカプサエ（Ｓｔｅｉｎｅｒｎｅｍａ ｃａｒｐｏｃａｐｓａｅ）（例えば、ＢＡＳＦ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｐｅｃｉａｌｉｔｉｅｓ Ｌｉｍｉｔｅｄ，ＵＫのＭｉｌｌｅｎｉｕｍ（登録商標））、Ｓ．フェルティアエ（Ｓ．ｆｅｌｔｉａｅ）（例えば、ＢｉｏＷｏｒｋｓ，Ｉｎｃ．，ＵＳＡのＮｅｍａｓｈｉｅｌｄ（登録商標）；ＢＡＳＦ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｐｅｃｉａｌｉｔｉｅｓ Ｌｉｍｉｔｅｄ，ＵＫのＮｅｍａｓｙｓ（登録商標））、ストレプトマイセス・ミクロフラブス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｍｉｃｒｏｆｌａｖｕｓ）ＮＲＲＬ Ｂ－５０５５０（国際公開第２０１４／１２４３６９号パンフレット；Ｂａｙｅｒ ＣｒｏｐＳｃｉｅｎｃｅ，Ｇｅｒｍａｎｙ）、Ｔ．ハルジアナム（Ｔ．ｈａｒｚｉａｎｕｍ）Ｔ－２２（ＫＲＬ－ＡＧ２とも呼ばれる）（ＡＴＣＣ ２０８４７；Ｂｉｏ－Ｃｏｎｔｒｏｌ ５７，６８７－６９６，２０１２；例えば、ＢｉｏＷｏｒｋｓ Ｉｎｃ．，ＵＳＡのＰｌａｎｔｓｈｉｅｌｄ（登録商標）又はＡｄｖａｎｃｅｄ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｍａｒｋｅｔｉｎｇ Ｉｎｃ．，Ｖａｎ Ｗｅｒｔ，ＯＨ，ＵＳＡのＳａｂｒＥｘ（商標））。
【0051】
本発明による胞子形成微生物は、好ましくは、ファーミキューテス（Ｆｉｒｍｉｃｕｔｅｓ）門、バチルス（Ｂａｃｉｌｌｉ）綱、クロストリジウム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉａ）綱又はネガティウィクテス（Ｎｅｇａｔｉｖｉｃｕｔｅｓ）綱、より好ましくはバチルス（Ｂａｃｉｌｌａｌｅｓ）目、クロストリジウム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉａｌｅｓ）目、サーモアナエロバクター（Ｔｈｅｒｍｏａｎａｅｒｏｂａｃｔｅｒａｌｅｓ）目、サーモセディミニバクター（Ｔｈｅｒｍｏｓｅｄｉｍｉｎｉｂａｃｔｅｒａｌｅｓ）目又はセレノモナス（Ｓｅｌｅｎｏｍｏｎａｄａｌｅｓ）目、より好ましくはバチルス（Ｂａｃｉｌｌａｃｅａｅ）科、パエニバチルス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌａｃｅａｅ）科、パスツリア（Ｐａｓｔｅｕｒｉａｃｅａｅ）科、クロストリジウム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉａｃｅａｅ）科、ペプトコッカス（Ｐｅｐｔｏｃｏｃｃａｃｅａｅ）科、ヘリオバクテリウム（Ｈｅｌｉｏｂａｃｔｅｒｉａｃｅａｅ）科、シントロフォモナス（Ｓｙｎｔｒｏｐｈｏｍｏｎａｄａｃｅａｅ）科、サーモアナエロバクター（Ｔｈｅｒｍｏａｎａｅｒｏｂａｃｔｅｒａｃｅａｅ）科、テピダナエロバクター（Ｔｅｐｉｄａｎａｅｒｏｂａｃｔｅｒａｃｅａｅ）科又はスポロミュサ（Ｓｐｏｒｏｍｕｓａｃｅａｅ）科、より好ましくはアルカリバチルス（Ａｌｋａｌｉｂａｃｉｌｌｕｓ）属、バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）属、ゲオバチルス（Ｇｅｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属、ハロバチルス（Ｈａｌｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属、リシニバチルス（Ｌｙｓｉｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ）属、ピシバチルス（Ｐｉｓｃｉｂａｃｉｌｌｕｓ）属、テリバチルス（Ｔｅｒｒｉｂａｃｉｌｌｕｓ）属、ブレビバチルス（Ｂｒｅｖｉｂａｃｉｌｌｕｓ）属、パエニバチルス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ）属、サーモバチルス（Ｔｈｅｒｍｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属、パスツリア（Ｐａｓｔｅｕｒｉａ）属、クロストリジウム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ）属、デスルホトマクルム（Ｄｅｓｕｌｆｏｔｏｍａｃｕｌｕｍ）属、ヘリオバクテリウム（Ｈｅｌｉｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属、ペロスポラ（Ｐｅｌｏｓｐｏｒａ）属、ペロトマクルム（Ｐｅｌｏｔｏｍａｃｕｌｕｍ）属、カルダナエロバクター（Ｃａｌｄａｎａｅｒｏｂａｃｔｅｒ）属、ムーレラ（Ｍｏｏｒｅｌｌａ）属、サーモアナエロバクター（Ｔｈｅｒｍｏａｎａｅｒｏｂａｃｔｅｒ）属、テピダナエロバクター（Ｔｅｐｉｄａｎａｅｒｏｂａｃｔｅｒ）属、プロピオニスポラ（Ｐｒｏｐｉｏｎｉｓｐｏｒａ）属又はスポロミュサ（Ｓｐｏｒｏｍｕｓａ）属、より好ましくはバチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）属、パエニバチルス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ）属又はクロストリジウム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ）属の分類学的階級から選択される。これらの分類群の微生物は当業者に公知であり、それらの培養方法は利用可能であり、当業者の日常作業の一部を構成する。前述の微生物の多くが、例えば関連する農業用組成物又はプロバイオティクスを生成するために、工業的に適切であることは有利である。特に、バチルス（Ｂａｃｉｌｌａｃｅａｅ）科、パエニバチルス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌａｃｅａｅ）科及びクロストリジウム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉａｃｅａｅ）科の微生物が適切であり、殺真菌及び／又は殺細菌効果を発揮することが公知である。
【0052】
本発明の組成物内では、特に以下の種の胞子が好ましい。
【0053】
パエニバチルス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ）種：Ｐ．アベカワエンシス（Ｐ．ａｂｅｋａｗａｅｎｓｉｓ）、Ｐ．アビシ（Ｐ．ａｂｙｓｓｉ）、Ｐ．アセリス（Ｐ．ａｃｅｒｉｓ）、Ｐ．アセチ（Ｐ．ａｃｅｔｉ）、Ｐ．アエスツアリイ（Ｐ．ａｅｓｔｕａｒｉｉ）、Ｐ．アガレクセデンス（Ｐ．ａｇａｒｅｘｅｄｅｎｓ）、Ｐ．アガリデボランス（Ｐ．ａｇａｒｉｄｅｖｏｒａｎｓ）、Ｐ．アルバ（Ｐ．ａｌｂａ）、Ｐ．アルビダス（Ｐ．ａｌｂｉｄｕｓ）、Ｐ．アルブス（Ｐ．ａｌｂｕｓ）、Ｐ．アルギノリチカス（Ｐ．ａｌｇｉｎｏｌｙｔｉｃｕｓ）、Ｐ．アルゴリフォンティコラ（Ｐ．ａｌｇｏｒｉｆｏｎｔｉｃｏｌａ）、Ｐ．アルカリテラエ（Ｐ．ａｌｋａｌｉｔｅｒｒａｅ）、Ｐ．アルベイ（Ｐ．ａｌｖｅｉ）、Ｐ．アミロリティカス（Ｐ．ａｍｙｌｏｌｙｔｉｃｕｓ）、Ｐ．アナエリカヌス（Ｐ．ａｎａｅｒｉｃａｎｕｓ）、Ｐ．アンタルクティカス（Ｐ．ａｎｔａｒｃｔｉｃｕｓ）、Ｐ．アンチバイオチコフィラ（Ｐ．ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｏｐｈｉｌａ）、Ｐ．アントリ（Ｐ．ａｎｔｒｉ）、Ｐ．アピアリーズ（Ｐ．ａｐｉａｒｉｅｓ）、Ｐ．アピアリウス（Ｐ．ａｐｉａｒｉｕｓ）、Ｐ．アピス（Ｐ．ａｐｉｓ）、Ｐ．アクイスタグニ（Ｐ．ａｑｕｉｓｔａｇｎｉ）、Ｐ．アラキジス（Ｐ．ａｒａｃｈｉｄｉｓ）、Ｐ．アークティカス（Ｐ．ａｒｃｔｉｃｕｓ）、Ｐ．アサメンシス（Ｐ．ａｓｓａｍｅｎｓｉｓ）、Ｐ．アウランティアクス（Ｐ．ａｕｒａｎｔｉａｃｕｓ）、Ｐ．アゾレデュセンス（Ｐ．ａｚｏｒｅｄｕｃｅｎｓ）、Ｐ．アゾティフィゲンス（Ｐ．ａｚｏｔｉｆｉｇｅｎｓ）、Ｐ．ベクロクダミソリ（Ｐ．ｂａｅｋｒｏｋｄａｍｉｓｏｌｉ）、Ｐ．バルキノネンシス（Ｐ．ｂａｒｃｉｎｏｎｅｎｓｉｓ）、Ｐ．バレンゴルトジ（Ｐ．ｂａｒｅｎｇｏｌｔｚｉｉ）、Ｐ．ベイジンゲンシス（Ｐ．ｂｅｉｊｉｎｇｅｎｓｉｓ）、Ｐ．ボレアリス（Ｐ．ｂｏｒｅａｌｉｓ）、Ｐ．ボウチェスデュルホネンシス（Ｐ．ｂｏｕｃｈｅｓｄｕｒｈｏｎｅｎｓｉｓ）、Ｐ．ボビス（Ｐ．ｂｏｖｉｓ）、Ｐ．ブラジレンシス（Ｐ．ｂｒａｓｉｌｅｎｓｉｓ）、Ｐ．ブラシカエ（Ｐ．ｂｒａｓｓｉｃａｅ）、Ｐ．ブリョフィラム（Ｐ．ｂｒｙｏｐｈｙｌｌｕｍ）、Ｐ．カエスピティス（Ｐ．ｃａｅｓｐｉｔｉｓ）、Ｐ．カメリアエ（Ｐ．ｃａｍｅｌｌｉａｅ）、Ｐ．カメロウネンシス（Ｐ．ｃａｍｅｒｏｕｎｅｎｓｉｓ）、Ｐ．キャンピナセンシス（Ｐ．ｃａｍｐｉｎａｓｅｎｓｉｓ）、Ｐ．カスタネアエ（Ｐ．ｃａｓｔａｎｅａｅ）、Ｐ．カタルパエ（Ｐ．ｃａｔａｌｐａｅ）、Ｐ．カトルミ（Ｐ．ｃａｔｈｏｒｍｉｉ）、Ｐ．カベルナエ（Ｐ．ｃａｖｅｒｎａｅ）、Ｐ．セルロシリティカス（Ｐ．ｃｅｌｌｕｌｏｓｉｌｙｔｉｃｕｓ）、Ｐ．セルロシトロフィカス（Ｐ．ｃｅｌｌｕｌｏｓｉｔｒｏｐｈｉｃｕｓ）、Ｐ．チャータリウス（Ｐ．ｃｈａｒｔａｒｉｕｓ）、Ｐ．チベンシス（Ｐ．ｃｈｉｂｅｎｓｉｓ）、Ｐ．チネンシス（Ｐ．ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ）、Ｐ．チンジュエンシス（Ｐ．ｃｈｉｎｊｕｅｎｓｉｓ）、Ｐ．キチノリティカス（Ｐ．ｃｈｉｔｉｎｏｌｙｔｉｃｕｓ）、Ｐ．コンドロイティヌス（Ｐ．ｃｈｏｎｄｒｏｉｔｉｎｕｓ）、Ｐ．チュンガゲンシス（Ｐ．ｃｈｕｎｇａｎｇｅｎｓｉｓ）、Ｐ．シネリス（Ｐ．ｃｉｎｅｒｉｓ）、Ｐ．シスオロケンシス（Ｐ．ｃｉｓｏｌｏｋｅｎｓｉｓ）、Ｐ．コンタミナンス（Ｐ．ｃｏｎｔａｍｉｎａｎｓ）、Ｐ．クッキイ（Ｐ．ｃｏｏｋｉｉ）、Ｐ．クラソストレアエ（Ｐ．ｃｒａｓｓｏｓｔｒｅａｅ）、Ｐ．ククミス（Ｐ．ｃｕｃｕｍｉｓ）、Ｐ．カードラノリティカス（Ｐ．ｃｕｒｄｌａｎｏｌｙｔｉｃｕｓ）、Ｐ．テジョネンシス（Ｐ．ｄａｅｊｅｏｎｅｎｓｉｓ）、Ｐ．ダカレンシス（Ｐ．ｄａｋａｒｅｎｓｉｓ）、Ｐ．ダランシエンシス（Ｐ．ｄａｒａｎｇｓｈｉｅｎｓｉｓ）、Ｐ．ダーウィニアヌス（Ｐ．ｄａｒｗｉｎｉａｎｕｓ）、Ｐ．ダウチ（Ｐ．ｄａｕｃｉ）、Ｐ．デンドリティフォルミス（Ｐ．ｄｅｎｄｒｉｔｉｆｏｒｍｉｓ）、Ｐ．ドンドネンシス（Ｐ．ｄｏｎｇｄｏｎｅｎｓｉｓ）、Ｐ．ドンハエンシス（Ｐ．ｄｏｎｇｈａｅｎｓｉｓ）、Ｐ．ドゥーサネンシス（Ｐ．ｄｏｏｓａｎｅｎｓｉｓ）、Ｐ．ダラス（Ｐ．ｄｕｒｕｓ）、Ｐ．エダフィカス（Ｐ．ｅｄａｐｈｉｃｕｓ）、Ｐ．エヒメンシス（Ｐ．ｅｈｉｍｅｎｓｉｓ）、Ｐ．エルギイ（Ｐ．ｅｌｇｉｉ）、Ｐ．エリミ（Ｐ．ｅｌｙｍｉ）、Ｐ．エンドフィティカス（Ｐ．ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃｕｓ）、Ｐ．エンシディス（Ｐ．ｅｎｓｈｉｄｉｓ）、Ｐ．エステリソルベンス（Ｐ．ｅｓｔｅｒｉｓｏｌｖｅｎｓ）、Ｐ．エテリ（Ｐ．ｅｔｈｅｒｉ）、Ｐ．エウコムミアエ（Ｐ．ｅｕｃｏｍｍｉａｅ）、Ｐ．ファエシス（Ｐ．ｆａｅｃｉｓ）、Ｐ．ファビスポラス（Ｐ．ｆａｖｉｓｐｏｒｕｓ）、Ｐ．フェラリウス（Ｐ．ｆｅｒｒａｒｉｕｓ）、Ｐ．フィリシス（Ｐ．ｆｉｌｉｃｉｓ）、Ｐ．フラゲラータス（Ｐ．ｆｌａｇｅｌｌａｔｕｓ）、Ｐ．フォンティコーラ（Ｐ．ｆｏｎｔｉｃｏｌａ）、Ｐ．フォルシチアエ（Ｐ．ｆｏｒｓｙｔｈｉａｅ）、Ｐ．フリゴリレシステンス（Ｐ．ｆｒｉｇｏｒｉｒｅｓｉｓｔｅｎｓ）、Ｐ．フジエンシス（Ｐ．ｆｕｊｉｅｎｓｉｓ）、Ｐ．フクイネンシス（Ｐ．ｆｕｋｕｉｎｅｎｓｉｓ）、Ｐ．ガンスエンシス（Ｐ．ｇａｎｓｕｅｎｓｉｓ）、Ｐ．ゼラチンリティカス（Ｐ．ｇｅｌａｔｉｎｉｌｙｔｉｃｕｓ）、Ｐ．ジンセンアグリ（Ｐ．ｇｉｎｓｅｎｇａｇｒｉ）、Ｐ．ジンセンアルビ（Ｐ．ｇｉｎｓｅｎｇａｒｖｉ）、Ｐ．ジンセンイフミ（Ｐ．ｇｉｎｓｅｎｇｉｈｕｍｉ）、Ｐ．ジンセンイテラエ（Ｐ．ｇｉｎｓｅｎｇｉｔｅｒｒａｅ）、Ｐ．グラシアリス（Ｐ．ｇｌａｃｉａｌｉｓ）、Ｐ．グレバエ（Ｐ．ｇｌｅｂａｅ）、Ｐ．グルカノリティカス（Ｐ．ｇｌｕｃａｎｏｌｙｔｉｃｕｓ）、Ｐ．グリカニリティカス（Ｐ．ｇｌｙｃａｎｉｌｙｔｉｃｕｓ）、Ｐ．ゴリラエ（Ｐ．ｇｏｒｉｌｌａｅ）、Ｐ．グラミニス（Ｐ．ｇｒａｍｉｎｉｓ）、Ｐ．グラニボランス（Ｐ．ｇｒａｎｉｖｏｒａｎｓ）、Ｐ．グアンゾウエンシス（Ｐ．ｇｕａｎｇｚｈｏｕｅｎｓｉｓ）、Ｐ．ハレナエ（Ｐ．ｈａｒｅｎａｅ）、Ｐ．ヘリアンティ（Ｐ．ｈｅｌｉａｎｔｈｉ）、Ｐ．ヘメロカリコラ（Ｐ．ｈｅｍｅｒｏｃａｌｌｉｃｏｌａ）、Ｐ．ヘルベルティ（Ｐ．ｈｅｒｂｅｒｔｉ）、Ｐ．ヒスパニカス（Ｐ．ｈｉｓｐａｎｉｃｕｓ）、Ｐ．ホドガイエンシス（Ｐ．ｈｏｄｏｇａｙｅｎｓｉｓ）、Ｐ．ホルデイ（Ｐ．ｈｏｒｄｅｉ）、Ｐ．ホルティ（Ｐ．ｈｏｒｔｉ）、Ｐ．フミカス（Ｐ．ｈｕｍｉｃｕｓ）、Ｐ．フナンエンシス（Ｐ．ｈｕｎａｎｅｎｓｉｓ）、Ｐ．イベタエ（Ｐ．ｉｈｂｅｔａｅ）、Ｐ．イフアエ（Ｐ．ｉｈｕａｅ）、Ｐ．イフミ（Ｐ．ｉｈｕｍｉｉ）、Ｐ．イリノイセンシス（Ｐ．ｉｌｌｉｎｏｉｓｅｎｓｉｓ）、Ｐ．インスラエ（Ｐ．ｉｎｓｕｌａｅ）、Ｐ．インテスティニ（Ｐ．ｉｎｔｅｓｔｉｎｉ）、Ｐ．ジャミラエ（Ｐ．ｊａｍｉｌａｅ）、Ｐ．ジルンリ（Ｐ．ｊｉｌｕｎｌｉｉ）、Ｐ．コベンシス（Ｐ．ｋｏｂｅｎｓｉｓ）、Ｐ．コレオボランス（Ｐ．ｋｏｌｅｏｖｏｒａｎｓ）、Ｐ．コンクケンシス（Ｐ．ｋｏｎｋｕｋｅｎｓｉｓ）、Ｐ．コンシデンシス（Ｐ．ｋｏｎｓｉｄｅｎｓｉｓ）、Ｐ．コーリエンシス（Ｐ．ｋｏｒｅｅｎｓｉｓ）、Ｐ．クリベンシス（Ｐ．ｋｒｉｂｂｅｎｓｉｓ）、Ｐ．キュンヘンシス（Ｐ．ｋｙｕｎｇｈｅｅｎｓｉｓ）、Ｐ．ラクティス（Ｐ．ｌａｃｔｉｓ）、Ｐ．ラクス（Ｐ．ｌａｃｕｓ）、Ｐ．ラルバエ（Ｐ．ｌａｒｖａｅ）、Ｐ．ロータス（Ｐ．ｌａｕｔｕｓ）、Ｐ．レムナエ（Ｐ．ｌｅｍｎａｅ）、Ｐ．レンティモルブス（Ｐ．ｌｅｎｔｉｍｏｒｂｕｓ）、Ｐ．レンタス（Ｐ．ｌｅｎｔｕｓ）、Ｐ．リャオニンエンシス（Ｐ．ｌｉａｏｎｉｎｇｅｎｓｉｓ）、Ｐ．リミコーラ（Ｐ．ｌｉｍｉｃｏｌａ）、Ｐ．ルピニー（Ｐ．ｌｕｐｉｎｉ）、Ｐ．ルテウス（Ｐ．ｌｕｔｅｕｓ）、Ｐ．ルチミネラリス（Ｐ．ｌｕｔｉｍｉｎｅｒａｌｉｓ）、Ｐ．マセランス（Ｐ．ｍａｃｅｒａｎｓ）、Ｐ．マッカリエンシス（Ｐ．ｍａｃｑｕａｒｉｅｎｓｉｓ）、Ｐ．マーチャンチオフィトルム（Ｐ．ｍａｒｃｈａｎｔｉｏｐｈｙｔｏｒｕｍ）、Ｐ．マリニセディミニス（Ｐ．ｍａｒｉｎｉｓｅｄｉｍｉｎｉｓ）、Ｐ．マリヌム（Ｐ．ｍａｒｉｎｕｍ）、Ｐ．マシリエンシス（Ｐ．ｍａｓｓｉｌｉｅｎｓｉｓ）、Ｐ．マイシエンシス（Ｐ．ｍａｙｓｉｅｎｓｉｓ）、Ｐ．メディカジニス（Ｐ．ｍｅｄｉｃａｇｉｎｉｓ）、Ｐ．メンデリイ（Ｐ．ｍｅｎｄｅｌｉｉ）、Ｐ．メソフィルス（Ｐ．ｍｅｓｏｐｈｉｌｕｓ）、Ｐ．メタノリカス（Ｐ．ｍｅｔｈａｎｏｌｉｃｕｓ）、Ｐ．モビリス（Ｐ．ｍｏｂｉｌｉｓ）、Ｐ．モンタニソリ（Ｐ．ｍｏｎｔａｎｉｓｏｌｉ）、Ｐ．モンタニテラエ（Ｐ．ｍｏｎｔａｎｉｔｅｒｒａｅ）、Ｐ．モトブエンシス（Ｐ．ｍｏｔｏｂｕｅｎｓｉｓ）、Ｐ．ムシラギノサス（Ｐ．ｍｕｃｉｌａｇｉｎｏｓｕｓ）、Ｐ．ナネンシス（Ｐ．ｎａｎｅｎｓｉｓ）、Ｐ．ナフタレノボランス（Ｐ．ｎａｐｈｔｈａｌｅｎｏｖｏｒａｎｓ）、Ｐ．ナスチテルミチス（Ｐ．ｎａｓｕｔｉｔｅｒｍｉｔｉｓ）、Ｐ．ネブラスケンシス（Ｐ．ｎｅｂｒａｓｋｅｎｓｉｓ）、Ｐ．ネマトフィルス（Ｐ．ｎｅｍａｔｏｐｈｉｌｕｓ）、Ｐ．ニコチアナエ（Ｐ．ｎｉｃｏｔｉａｎａｅ）、Ｐ．ヌルキ（Ｐ．ｎｕｒｕｋｉ）、Ｐ．オセアニセディミニス（Ｐ．ｏｃｅａｎｉｓｅｄｉｍｉｎｉｓ）、Ｐ．オドリファー（Ｐ．ｏｄｏｒｉｆｅｒ）、Ｐ．オエノセラエ（Ｐ．ｏｅｎｏｔｈｅｒａｅ）、Ｐ．オラリス（Ｐ．ｏｒａｌｉｓ）、Ｐ．オリゼー（Ｐ．ｏｒｙｚａｅ）、Ｐ．オリジソリ（Ｐ．ｏｒｙｚｉｓｏｌｉ）、Ｐ．オットウィー（Ｐ．ｏｔｔｏｗｉｉ）、Ｐ．オウロフィネンシス（Ｐ．ｏｕｒｏｆｉｎｅｎｓｉｓ）、Ｐ．パブリ（Ｐ．ｐａｂｕｌｉ）、Ｐ．パエオニアエ（Ｐ．ｐａｅｏｎｉａｅ）、Ｐ．パナチフミ（Ｐ．ｐａｎａｃｉｈｕｍｉ）、Ｐ．パナチソリ（Ｐ．ｐａｎａｃｉｓｏｌｉ）、Ｐ．パナチテラエ（Ｐ．ｐａｎａｃｉｔｅｒｒａｅ）、Ｐ．パリディス（Ｐ．ｐａｒｉｄｉｓ）、Ｐ．パサデネンシス（Ｐ．ｐａｓａｄｅｎｅｎｓｉｓ）、Ｐ．ペクチニリティクス（Ｐ．ｐｅｃｔｉｎｉｌｙｔｉｃｕｓ）、Ｐ．ペオリアエ（Ｐ．ｐｅｏｒｉａｅ）、Ｐ．ペリアンドラエ（Ｐ．ｐｅｒｉａｎｄｒａｅ）、Ｐ．フォカエンシス（Ｐ．ｐｈｏｃａｅｎｓｉｓ）、Ｐ．フェニシス（Ｐ．ｐｈｏｅｎｉｃｉｓ）、Ｐ．フィルロスファエラエ（Ｐ．ｐｈｙｌｌｏｓｐｈａｅｒａｅ）、Ｐ．フィスコミトレラエ（Ｐ．ｐｈｙｓｃｏｍｉｔｒｅｌｌａｅ）、Ｐ．ピニ（Ｐ．ｐｉｎｉ）、Ｐ．ピニフミ（Ｐ．ｐｉｎｉｈｕｍｉ）、Ｐ．ピニソリ（Ｐ．ｐｉｎｉｓｏｌｉ）、Ｐ．ピニストラメンティ（Ｐ．ｐｉｎｉｓｔｒａｍｅｎｔｉ）、Ｐ．ポケオネンシス（Ｐ．ｐｏｃｈｅｏｎｅｎｓｉｓ）、Ｐ．ポリミクサ（Ｐ．ｐｏｌｙｍｙｘａ）、Ｐ．ポリサッカロリティクス（Ｐ．ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｏｌｙｔｉｃｕｓ）、Ｐ．ポピリアエ（Ｐ．ｐｏｐｉｌｌｉａｅ）、Ｐ．ポプリ（Ｐ．ｐｏｐｕｌｉ）、Ｐ．プロフンダス（Ｐ．ｐｒｏｆｕｎｄｕｓ）、Ｐ．プロソピディス（Ｐ．ｐｒｏｓｏｐｉｄｉｓ）、Ｐ．プロタエチアエ（Ｐ．ｐｒｏｔａｅｔｉａｅ）、Ｐ．プロベンセンシス（Ｐ．ｐｒｏｖｅｎｃｅｎｓｉｓ）、Ｐ．サイコロレジステンス（Ｐ．ｐｓｙｃｈｒｏｒｅｓｉｓｔｅｎｓ）、Ｐ．プエリ（Ｐ．ｐｕｅｒｉ）、Ｐ．プエルニーセ（Ｐ．ｐｕｅｒｎｅｓｅ）、Ｐ．プルデウンゲンシス（Ｐ．ｐｕｌｄｅｕｎｇｅｎｓｉｓ）、Ｐ．プリスパティ（Ｐ．ｐｕｒｉｓｐａｔｉｉ）、Ｐ．チンシェンイー（Ｐ．ｑｉｎｇｓｈｅｎｇｉｉ）、Ｐ．チンリンエンシス（Ｐ．ｑｉｎｌｉｎｇｅｎｓｉｓ）、Ｐ．クエルカス（Ｐ．ｑｕｅｒｃｕｓ）、Ｐ．ラジシス（Ｐ．ｒａｄｉｃｉｓ）、Ｐ．レリクチセサミ（Ｐ．ｒｅｌｉｃｔｉｓｅｓａｍｉ）、Ｐ．レシジュイ（Ｐ．ｒｅｓｉｄｕｉ）、Ｐ．リゾプラナエ（Ｐ．ｒｈｉｚｏｐｌａｎａｅ）、Ｐ．リゾリザエ（Ｐ．ｒｈｉｚｏｒｙｚａｅ）、Ｐ．リゾスファエラエ（Ｐ．ｒｈｉｚｏｓｐｈａｅｒａｅ）、Ｐ．リグイ（Ｐ．ｒｉｇｕｉ）、Ｐ．リパエ（Ｐ．ｒｉｐａｅ）、Ｐ．ルビンファンティス（Ｐ．ｒｕｂｉｎｆａｎｔｉｓ）、Ｐ．ルミノコラ（Ｐ．ｒｕｍｉｎｏｃｏｌａ）、
Ｐ．サビナエ（Ｐ．ｓａｂｉｎａｅ）、Ｐ．サチョネンシス（Ｐ．ｓａｃｈｅｏｎｅｎｓｉｓ）、Ｐ．サリニカエニ（Ｐ．ｓａｌｉｎｉｃａｅｎｉ）、Ｐ．サングイニス（Ｐ．ｓａｎｇｕｉｎｉｓ）、Ｐ．セディミニス（Ｐ．ｓｅｄｉｍｉｎｉｓ）、Ｐ．セゲティス（Ｐ．ｓｅｇｅｔｉｓ）、Ｐ．セレニー（Ｐ．ｓｅｌｅｎｉｉ）、Ｐ．セレニティレデュセンス（Ｐ．ｓｅｌｅｎｉｔｉｒｅｄｕｃｅｎｓ）、Ｐ．セネガレンシス（Ｐ．ｓｅｎｅｇａｌｅｎｓｉｓ）、Ｐ．セネガリマシリエンシス（Ｐ．ｓｅｎｅｇａｌｉｍａｓｓｉｌｉｅｎｓｉｓ）、Ｐ．セオドネンシス（Ｐ．ｓｅｏｄｏｎｅｎｓｉｓ）、Ｐ．セプテントリオナリス（Ｐ．ｓｅｐｔｅｎｔｒｉｏｎａｌｉｓ）、Ｐ．セプルクリ（Ｐ．ｓｅｐｕｌｃｒｉ）、Ｐ．シェンヤンエンシス（Ｐ．ｓｈｅｎｙａｎｇｅｎｓｉｓ）、Ｐ．シラカミエンシス（Ｐ．ｓｈｉｒａｋａｍｉｅｎｓｉｓ）、Ｐ．シュンペンギイ（Ｐ．ｓｈｕｎｐｅｎｇｉｉ）、Ｐ．シアメンシス（Ｐ．ｓｉａｍｅｎｓｉｓ）、Ｐ．シラゲイ（Ｐ．ｓｉｌａｇｅｉ）、Ｐ．シルバエ（Ｐ．ｓｉｌｖａｅ）、Ｐ．シノポドフィリー（Ｐ．ｓｉｎｏｐｏｄｏｐｈｙｌｌｉ）、Ｐ．ソラナセアルム（Ｐ．ｓｏｌａｎａｃｅａｒｕｍ）、Ｐ．ソラニ（Ｐ．ｓｏｌａｎｉ）、Ｐ．ソリ（Ｐ．ｓｏｌｉ）、Ｐ．ソンチ群（Ｐ．ｓｏｎｃｈｉ ｇｒｏｕｐ）、Ｐ．ソフォラエ（Ｐ．ｓｏｐｈｏｒａｅ）、Ｐ．スピリタス（Ｐ．ｓｐｉｒｉｔｕｓ）、Ｐ．スプチ（Ｐ．ｓｐｕｔｉ）、Ｐ．ステリファー（Ｐ．ｓｔｅｌｌｉｆｅｒ）、Ｐ．スーソンエンシス（Ｐ．ｓｕｓｏｎｇｅｎｓｉｓ）、Ｐ．スウェンシス（Ｐ．ｓｗｕｅｎｓｉｓ）、Ｐ．タイチュンエンシス（Ｐ．ｔａｉｃｈｕｎｇｅｎｓｉｓ）、Ｐ．タイヒュエンシス（Ｐ．ｔａｉｈｕｅｎｓｉｓ）、Ｐ．タイワンエンシス（Ｐ．ｔａｉｗａｎｅｎｓｉｓ）、Ｐ．タオファシャネンセ（Ｐ．ｔａｏｈｕａｓｈａｎｅｎｓｅ）、Ｐ．タリメンシス（Ｐ．ｔａｒｉｍｅｎｓｉｓ）、Ｐ．テルリス（Ｐ．ｔｅｌｌｕｒｉｓ）、Ｐ．テピディフィラス（Ｐ．ｔｅｐｉｄｉｐｈｉｌｕｓ）、Ｐ．テラエ（Ｐ．ｔｅｒｒａｅ）、Ｐ．テレウス（Ｐ．ｔｅｒｒｅｕｓ）、Ｐ．テリゲナ（Ｐ．ｔｅｒｒｉｇｅｎａ）、Ｐ．テズプレンシス（Ｐ．ｔｅｚｐｕｒｅｎｓｉｓ）、Ｐ．タイランデンシス（Ｐ．ｔｈａｉｌａｎｄｅｎｓｉｓ）、Ｐ．サーモアエロフィルス（Ｐ．ｔｈｅｒｍｏａｅｒｏｐｈｉｌｕｓ）、Ｐ．サーモフィルス（Ｐ．ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）、Ｐ．チアミノリティカス（Ｐ．ｔｈｉａｍｉｎｏｌｙｔｉｃｕｓ）、Ｐ．チアンムエンシス（Ｐ．ｔｉａｎｍｕｅｎｓｉｓ）、Ｐ．チベテンシス（Ｐ．ｔｉｂｅｔｅｎｓｉｓ）、Ｐ．チモネンシス（Ｐ．ｔｉｍｏｎｅｎｓｉｓ）、Ｐ．トランスルーセンス（Ｐ．ｔｒａｎｓｌｕｃｅｎｓ）、Ｐ．トリティシ（Ｐ．ｔｒｉｔｉｃｉ）、Ｐ．トリティシソリ（Ｐ．ｔｒｉｔｉｃｉｓｏｌｉ）、Ｐ．トゥアレギ（Ｐ．ｔｕａｒｅｇｉ）、Ｐ．トゥンバエ（Ｐ．ｔｕｍｂａｅ）、Ｐ．ツンドラエ（Ｐ．ｔｕｎｄｒａｅ）、Ｐ．ツリセンシス（Ｐ．ｔｕｒｉｃｅｎｓｉｓ）、Ｐ．チロピリ（Ｐ．ｔｙｌｏｐｉｌｉ）、Ｐ．チファエ（Ｐ．ｔｙｐｈａｅ）、Ｐ．チルフィス（Ｐ．ｔｙｒｆｉｓ）、Ｐ．ウリギニス（Ｐ．ｕｌｉｇｉｎｉｓ）、Ｐ．ウリナリス（Ｐ．ｕｒｉｎａｌｉｓ）、Ｐ．バリダス（Ｐ．ｖａｌｉｄｕｓ）、Ｐ．ベラエイ（Ｐ．ｖｅｌａｅｉ）、Ｐ．ヴィニー（Ｐ．ｖｉｎｉ）、Ｐ．ボルテックス（Ｐ．ｖｏｒｔｅｘ）、Ｐ．ボルチカリス（Ｐ．ｖｏｒｔｉｃａｌｉｓ）、Ｐ．ブルネリス（Ｐ．ｖｕｌｎｅｒｉｓ）、Ｐ．ウェンシーニアエ（Ｐ．ｗｅｎｘｉｎｉａｅ）、Ｐ．ウイットソニアエ（Ｐ．ｗｈｉｔｓｏｎｉａｅ）、Ｐ．ウーポネンシス（Ｐ．ｗｏｏｐｏｎｅｎｓｉｓ）、Ｐ．ウーソンゲンシス（Ｐ．ｗｏｏｓｏｎｇｅｎｓｉｓ）、Ｐ．ウルムチエンシス（Ｐ．ｗｕｌｕｍｕｑｉｅｎｓｉｓ）、Ｐ．ウィニイ（Ｐ．ｗｙｎｎｉｉ）、Ｐ．キサンタニリティカス（Ｐ．ｘａｎｔｈａｎｉｌｙｔｉｃｕｓ）、Ｐ．キサンチニリティカス（Ｐ．ｘａｎｔｈｉｎｉｌｙｔｉｃｕｓ）、Ｐ．キセロサーモデュランス（Ｐ．ｘｅｒｏｔｈｅｒｍｏｄｕｒａｎｓ）、Ｐ．シンジャンゲンシス（Ｐ．ｘｉｎｊｉａｎｇｅｎｓｉｓ）、Ｐ．キシラネクセデンス（Ｐ．ｘｙｌａｎｅｘｅｄｅｎｓ）、Ｐ．キシラニクラスティカス（Ｐ．ｘｙｌａｎｉｃｌａｓｔｉｃｕｓ）、Ｐ．キシラニリティカス（Ｐ．ｘｙｌａｎｉｌｙｔｉｃｕｓ）、Ｐ．キシラニソルベンス（Ｐ．ｘｙｌａｎｉｓｏｌｖｅｎｓ）、Ｐ．ヤンチェンゲンシス（Ｐ．ｙａｎｃｈｅｎｇｅｎｓｉｓ）、Ｐ．ヨンギネンシス（Ｐ．ｙｏｎｇｉｎｅｎｓｉｓ）、Ｐ．ユンナネンシス（Ｐ．ｙｕｎｎａｎｅｎｓｉｓ）、Ｐ．ザントキシリ（Ｐ．ｚａｎｔｈｏｘｙｌｉ）、Ｐ．ジアエ（Ｐ．ｚｅａｅ）、好ましくはＰ．アガレクセデンス（Ｐ．ａｇａｒｅｘｅｄｅｎｓ）、Ｐ．アガリデボランス（Ｐ．ａｇａｒｉｄｅｖｏｒａｎｓ）、Ｐ．アルギノリチカス（Ｐ．ａｌｇｉｎｏｌｙｔｉｃｕｓ）、Ｐ．アルカリテラエ（Ｐ．ａｌｋａｌｉｔｅｒｒａｅ）、Ｐ．アルベイ（Ｐ．ａｌｖｅｉ）、Ｐ．アミロリティカス（Ｐ．ａｍｙｌｏｌｙｔｉｃｕｓ）、Ｐ．アナエリカヌス（Ｐ．ａｎａｅｒｉｃａｎｕｓ）、Ｐ．アンタルクティカス（Ｐ．ａｎｔａｒｃｔｉｃｕｓ）、Ｐ．アサメンシス（Ｐ．ａｓｓａｍｅｎｓｉｓ）、Ｐ．アゾレデュセンス（Ｐ．ａｚｏｒｅｄｕｃｅｎｓ）、Ｐ．バルキノネンシス（Ｐ．ｂａｒｃｉｎｏｎｅｎｓｉｓ）、Ｐ．ボレアリス（Ｐ．ｂｏｒｅａｌｉｓ）、Ｐ．ブラシカエ（Ｐ．ｂｒａｓｓｉｃａｅ）、Ｐ．キャンピナセンシス（Ｐ．ｃａｍｐｉｎａｓｅｎｓｉｓ）、Ｐ．チンジュエンシス（Ｐ．ｃｈｉｎｊｕｅｎｓｉｓ）、Ｐ．キチノリティカス（Ｐ．ｃｈｉｔｉｎｏｌｙｔｉｃｕｓ）、Ｐ．コンドロイティヌス（Ｐ．ｃｈｏｎｄｒｏｉｔｉｎｕｓ）、Ｐ．シネリス（Ｐ．ｃｉｎｅｒｉｓ）、Ｐ．カードラノリティカス（Ｐ．ｃｕｒｄｌａｎｏｌｙｔｉｃｕｓ）、Ｐ．テジョネンシス（Ｐ．ｄａｅｊｅｏｎｅｎｓｉｓ）、Ｐ．デンドリティフォルミス（Ｐ．ｄｅｎｄｒｉｔｉｆｏｒｍｉｓ）、Ｐ．エヒメンシス（Ｐ．ｅｈｉｍｅｎｓｉｓ）、Ｐ．エルギイ（Ｐ．ｅｌｇｉｉ）、Ｐ．ファビスポラス（Ｐ．ｆａｖｉｓｐｏｒｕｓ）、Ｐ．グルカノリティカス（Ｐ．ｇｌｕｃａｎｏｌｙｔｉｃｕｓ）、Ｐ．グリカニリティカス（Ｐ．ｇｌｙｃａｎｉｌｙｔｉｃｕｓ）、Ｐ．グラミニス（Ｐ．ｇｒａｍｉｎｉｓ）、Ｐ．グラニボランス（Ｐ．ｇｒａｎｉｖｏｒａｎｓ）、Ｐ．ホドガイエンシス（Ｐ．ｈｏｄｏｇａｙｅｎｓｉｓ）、Ｐ．イリノイセンシス（Ｐ．ｉｌｌｉｎｏｉｓｅｎｓｉｓ）、Ｐ．ジャミラエ（Ｐ．ｊａｍｉｌａｅ）、Ｐ．コベンシス（Ｐ．ｋｏｂｅｎｓｉｓ）、Ｐ．コレオボランス（Ｐ．ｋｏｌｅｏｖｏｒａｎｓ）、Ｐ．コーリエンシス（Ｐ．ｋｏｒｅｅｎｓｉｓ）、Ｐ．クリベンシス（Ｐ．ｋｒｉｂｂｅｎｓｉｓ）、Ｐ．ラクティス（Ｐ．ｌａｃｔｉｓ）、Ｐ．ラルバエ（Ｐ．ｌａｒｖａｅ）、Ｐ．ロータス（Ｐ．ｌａｕｔｕｓ）、Ｐ．レンティモルブス（Ｐ．ｌｅｎｔｉｍｏｒｂｕｓ）、Ｐ．マセランス（Ｐ．ｍａｃｅｒａｎｓ）、Ｐ．マッカリエンシス（Ｐ．ｍａｃｑｕａｒｉｅｎｓｉｓ）、Ｐ．マシリエンシス（Ｐ．ｍａｓｓｉｌｉｅｎｓｉｓ）、Ｐ．メンデリイ（Ｐ．ｍｅｎｄｅｌｉｉ）、Ｐ．モトブエンシス（Ｐ．ｍｏｔｏｂｕｅｎｓｉｓ）、Ｐ．ナフタレノボランス（Ｐ．ｎａｐｈｔｈａｌｅｎｏｖｏｒａｎｓ）、Ｐ．ネマトフィルス（Ｐ．ｎｅｍａｔｏｐｈｉｌｕｓ）、Ｐ．オドリファー（Ｐ．ｏｄｏｒｉｆｅｒ）、Ｐ．パブリ（Ｐ．ｐａｂｕｌｉ）、Ｐ．ペオリアエ（Ｐ．ｐｅｏｒｉａｅ）、Ｐ．フェニシス（Ｐ．ｐｈｏｅｎｉｃｉｓ）、Ｐ．フィルロスファエラエ（Ｐ．ｐｈｙｌｌｏｓｐｈａｅｒａｅ）、Ｐ．ポリミクサ（Ｐ．ｐｏｌｙｍｙｘａ）、Ｐ．ポピリアエ（Ｐ．ｐｏｐｉｌｌｉａｅ）、Ｐ．リゾスファエラエ（Ｐ．ｒｈｉｚｏｓｐｈａｅｒａｅ）、Ｐ．サングイニス（Ｐ．ｓａｎｇｕｉｎｉｓ）、Ｐ．ステリファー（Ｐ．ｓｔｅｌｌｉｆｅｒ）、Ｐ．タイチュンエンシス（Ｐ．ｔａｉｃｈｕｎｇｅｎｓｉｓ）、Ｐ．テラエ（Ｐ．ｔｅｒｒａｅ）、Ｐ．チアミノリティカス（Ｐ．ｔｈｉａｍｉｎｏｌｙｔｉｃｕｓ）、Ｐ．チモネンシス（Ｐ．ｔｉｍｏｎｅｎｓｉｓ）、Ｐ．チロピリ（Ｐ．ｔｙｌｏｐｉｌｉ）、Ｐ．ツリセンシス（Ｐ．ｔｕｒｉｃｅｎｓｉｓ）、Ｐ．バリダス（Ｐ．ｖａｌｉｄｕｓ）、Ｐ．ボルテックス（Ｐ．ｖｏｒｔｅｘ）、Ｐ．ブルネリス（Ｐ．ｖｕｌｎｅｒｉｓ）、Ｐ．ウィニイ（Ｐ．ｗｙｎｎｉｉ）、Ｐ．キシラニリティカス（Ｐ．ｘｙｌａｎｉｌｙｔｉｃｕｓ）、特に好ましくはパエニバチルス・コーリエンシス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｋｏｒｅｅｎｓｉｓ）、パエニバチルス・リゾスファエラエ（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｒｈｉｚｏｓｐｈａｅｒａｅ）、パエニバチルス・ポリミクサ（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｏｌｙｍｙｘａ）、パエニバチルス・アミロリティカス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ａｍｙｌｏｌｙｔｉｃｕｓ）、パエニバチルス・テラエ（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｅｒｒａｅ）、パエニバチルス・ポリミクサ・ポリミクサ（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｏｌｙｍｙｘａ ｐｏｌｙｍｙｘａ）、パエニバチルス・ポリミクサ・プランタルム（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｏｌｙｍｙｘａ ｐｌａｎｔａｒｕｍ）、パエニバチルス新種エピフィチカス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｎｏｖ．ｓｐｅｃ ｅｐｉｐｈｙｔｉｃｕｓ）、パエニバチルス・テラエ（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｅｒｒａｅ）、パエニバチルス・マセランス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｍａｃｅｒａｎｓ）、パエニバチルス・アルベイ（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ａｌｖｅｉ）、より好ましいのは、パエニバチルス・ポリミクサ（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｏｌｙｍｙｘａ）、パエニバチルス・ポリミクサ・ポリミクサ（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｏｌｙｍｙｘａ ｐｏｌｙｍｙｘａ）、パエニバチルス・ポリミクサ・プランタルム（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｏｌｙｍｙｘａ ｐｌａｎｔａｒｕｍ）、パエニバチルス新種エピフィチカス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｎｏｖ．ｓｐｅｃ ｅｐｉｐｈｙｔｉｃｕｓ）、パエニバチルス・テラエ（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｅｒｒａｅ）、パエニバチルス・マセランス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｍａｃｅｒａｎｓ）、パエニバチルス・アルベイ（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ａｌｖｅｉ）、更により好ましくはパエニバチルス・ポリミクサ（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｏｌｙｍｙｘａ）、パエニバチルス・ポリミクサ・ポリミクサ（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｏｌｙｍｙｘａ ｐｏｌｙｍｙｘａ）、パエニバチルス・ポリミクサ・プランタルム（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｏｌｙｍｙｘａ ｐｌａｎｔａｒｕｍ）及びパエニバチルス・テラエ（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｅｒｒａｅ）。
Ｐ．サビナエ（Ｐ．ｓａｂｉｎａｅ）、Ｐ．サチョネンシス（Ｐ．ｓａｃｈｅｏｎｅｎｓｉｓ）、Ｐ．サリニカエニ（Ｐ．ｓａｌｉｎｉｃａｅｎｉ）、Ｐ．サングイニス（Ｐ．ｓａｎｇｕｉｎｉｓ）、Ｐ．セディミニス（Ｐ．ｓｅｄｉｍｉｎｉｓ）、Ｐ．セゲティス（Ｐ．ｓｅｇｅｔｉｓ）、Ｐ．セレニー（Ｐ．ｓｅｌｅｎｉｉ）、Ｐ．セレニティレデュセンス（Ｐ．ｓｅｌｅｎｉｔｉｒｅｄｕｃｅｎｓ）、Ｐ．セネガレンシス（Ｐ．ｓｅｎｅｇａｌｅｎｓｉｓ）、Ｐ．セネガリマシリエンシス（Ｐ．ｓｅｎｅｇａｌｉｍａｓｓｉｌｉｅｎｓｉｓ）、Ｐ．セオドネンシス（Ｐ．ｓｅｏｄｏｎｅｎｓｉｓ）、Ｐ．セプテントリオナリス（Ｐ．ｓｅｐｔｅｎｔｒｉｏｎａｌｉｓ）、Ｐ．セプルクリ（Ｐ．ｓｅｐｕｌｃｒｉ）、Ｐ．シェンヤンエンシス（Ｐ．ｓｈｅｎｙａｎｇｅｎｓｉｓ）、Ｐ．シラカミエンシス（Ｐ．ｓｈｉｒａｋａｍｉｅｎｓｉｓ）、Ｐ．シュンペンギイ（Ｐ．ｓｈｕｎｐｅｎｇｉｉ）、Ｐ．シアメンシス（Ｐ．ｓｉａｍｅｎｓｉｓ）、Ｐ．シラゲイ（Ｐ．ｓｉｌａｇｅｉ）、Ｐ．シルバエ（Ｐ．ｓｉｌｖａｅ）、Ｐ．シノポドフィリー（Ｐ．ｓｉｎｏｐｏｄｏｐｈｙｌｌｉ）、Ｐ．ソラナセアルム（Ｐ．ｓｏｌａｎａｃｅａｒｕｍ）、Ｐ．ソラニ（Ｐ．ｓｏｌａｎｉ）、Ｐ．ソリ（Ｐ．ｓｏｌｉ）、Ｐ．ソンチ群（Ｐ．ｓｏｎｃｈｉ ｇｒｏｕｐ）、Ｐ．ソフォラエ（Ｐ．ｓｏｐｈｏｒａｅ）、Ｐ．スピリタス（Ｐ．ｓｐｉｒｉｔｕｓ）、Ｐ．スプチ（Ｐ．ｓｐｕｔｉ）、Ｐ．ステリファー（Ｐ．ｓｔｅｌｌｉｆｅｒ）、Ｐ．スーソンエンシス（Ｐ．ｓｕｓｏｎｇｅｎｓｉｓ）、Ｐ．スウェンシス（Ｐ．ｓｗｕｅｎｓｉｓ）、Ｐ．タイチュンエンシス（Ｐ．ｔａｉｃｈｕｎｇｅｎｓｉｓ）、Ｐ．タイヒュエンシス（Ｐ．ｔａｉｈｕｅｎｓｉｓ）、Ｐ．タイワンエンシス（Ｐ．ｔａｉｗａｎｅｎｓｉｓ）、Ｐ．タオファシャネンセ（Ｐ．ｔａｏｈｕａｓｈａｎｅｎｓｅ）、Ｐ．タリメンシス（Ｐ．ｔａｒｉｍｅｎｓｉｓ）、Ｐ．テルリス（Ｐ．ｔｅｌｌｕｒｉｓ）、Ｐ．テピディフィラス（Ｐ．ｔｅｐｉｄｉｐｈｉｌｕｓ）、Ｐ．テラエ（Ｐ．ｔｅｒｒａｅ）、Ｐ．テレウス（Ｐ．ｔｅｒｒｅｕｓ）、Ｐ．テリゲナ（Ｐ．ｔｅｒｒｉｇｅｎａ）、Ｐ．テズプレンシス（Ｐ．ｔｅｚｐｕｒｅｎｓｉｓ）、Ｐ．タイランデンシス（Ｐ．ｔｈａｉｌａｎｄｅｎｓｉｓ）、Ｐ．サーモアエロフィルス（Ｐ．ｔｈｅｒｍｏａｅｒｏｐｈｉｌｕｓ）、Ｐ．サーモフィルス（Ｐ．ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）、Ｐ．チアミノリティカス（Ｐ．ｔｈｉａｍｉｎｏｌｙｔｉｃｕｓ）、Ｐ．チアンムエンシス（Ｐ．ｔｉａｎｍｕｅｎｓｉｓ）、Ｐ．チベテンシス（Ｐ．ｔｉｂｅｔｅｎｓｉｓ）、Ｐ．チモネンシス（Ｐ．ｔｉｍｏｎｅｎｓｉｓ）、Ｐ．トランスルーセンス（Ｐ．ｔｒａｎｓｌｕｃｅｎｓ）、Ｐ．トリティシ（Ｐ．ｔｒｉｔｉｃｉ）、Ｐ．トリティシソリ（Ｐ．ｔｒｉｔｉｃｉｓｏｌｉ）、Ｐ．トゥアレギ（Ｐ．ｔｕａｒｅｇｉ）、Ｐ．トゥンバエ（Ｐ．ｔｕｍｂａｅ）、Ｐ．ツンドラエ（Ｐ．ｔｕｎｄｒａｅ）、Ｐ．ツリセンシス（Ｐ．ｔｕｒｉｃｅｎｓｉｓ）、Ｐ．チロピリ（Ｐ．ｔｙｌｏｐｉｌｉ）、Ｐ．チファエ（Ｐ．ｔｙｐｈａｅ）、Ｐ．チルフィス（Ｐ．ｔｙｒｆｉｓ）、Ｐ．ウリギニス（Ｐ．ｕｌｉｇｉｎｉｓ）、Ｐ．ウリナリス（Ｐ．ｕｒｉｎａｌｉｓ）、Ｐ．バリダス（Ｐ．ｖａｌｉｄｕｓ）、Ｐ．ベラエイ（Ｐ．ｖｅｌａｅｉ）、Ｐ．ヴィニー（Ｐ．ｖｉｎｉ）、Ｐ．ボルテックス（Ｐ．ｖｏｒｔｅｘ）、Ｐ．ボルチカリス（Ｐ．ｖｏｒｔｉｃａｌｉｓ）、Ｐ．ブルネリス（Ｐ．ｖｕｌｎｅｒｉｓ）、Ｐ．ウェンシーニアエ（Ｐ．ｗｅｎｘｉｎｉａｅ）、Ｐ．ウイットソニアエ（Ｐ．ｗｈｉｔｓｏｎｉａｅ）、Ｐ．ウーポネンシス（Ｐ．ｗｏｏｐｏｎｅｎｓｉｓ）、Ｐ．ウーソンゲンシス（Ｐ．ｗｏｏｓｏｎｇｅｎｓｉｓ）、Ｐ．ウルムチエンシス（Ｐ．ｗｕｌｕｍｕｑｉｅｎｓｉｓ）、Ｐ．ウィニイ（Ｐ．ｗｙｎｎｉｉ）、Ｐ．キサンタニリティカス（Ｐ．ｘａｎｔｈａｎｉｌｙｔｉｃｕｓ）、Ｐ．キサンチニリティカス（Ｐ．ｘａｎｔｈｉｎｉｌｙｔｉｃｕｓ）、Ｐ．キセロサーモデュランス（Ｐ．ｘｅｒｏｔｈｅｒｍｏｄｕｒａｎｓ）、Ｐ．シンジャンゲンシス（Ｐ．ｘｉｎｊｉａｎｇｅｎｓｉｓ）、Ｐ．キシラネクセデンス（Ｐ．ｘｙｌａｎｅｘｅｄｅｎｓ）、Ｐ．キシラニクラスティカス（Ｐ．ｘｙｌａｎｉｃｌａｓｔｉｃｕｓ）、Ｐ．キシラニリティカス（Ｐ．ｘｙｌａｎｉｌｙｔｉｃｕｓ）、Ｐ．キシラニソルベンス（Ｐ．ｘｙｌａｎｉｓｏｌｖｅｎｓ）、Ｐ．ヤンチェンゲンシス（Ｐ．ｙａｎｃｈｅｎｇｅｎｓｉｓ）、Ｐ．ヨンギネンシス（Ｐ．ｙｏｎｇｉｎｅｎｓｉｓ）、Ｐ．ユンナネンシス（Ｐ．ｙｕｎｎａｎｅｎｓｉｓ）、Ｐ．ザントキシリ（Ｐ．ｚａｎｔｈｏｘｙｌｉ）、Ｐ．ジアエ（Ｐ．ｚｅａｅ）、好ましくはＰ．アガレクセデンス（Ｐ．ａｇａｒｅｘｅｄｅｎｓ）、Ｐ．アガリデボランス（Ｐ．ａｇａｒｉｄｅｖｏｒａｎｓ）、Ｐ．アルギノリチカス（Ｐ．ａｌｇｉｎｏｌｙｔｉｃｕｓ）、Ｐ．アルカリテラエ（Ｐ．ａｌｋａｌｉｔｅｒｒａｅ）、Ｐ．アルベイ（Ｐ．ａｌｖｅｉ）、Ｐ．アミロリティカス（Ｐ．ａｍｙｌｏｌｙｔｉｃｕｓ）、Ｐ．アナエリカヌス（Ｐ．ａｎａｅｒｉｃａｎｕｓ）、Ｐ．アンタルクティカス（Ｐ．ａｎｔａｒｃｔｉｃｕｓ）、Ｐ．アサメンシス（Ｐ．ａｓｓａｍｅｎｓｉｓ）、Ｐ．アゾレデュセンス（Ｐ．ａｚｏｒｅｄｕｃｅｎｓ）、Ｐ．バルキノネンシス（Ｐ．ｂａｒｃｉｎｏｎｅｎｓｉｓ）、Ｐ．ボレアリス（Ｐ．ｂｏｒｅａｌｉｓ）、Ｐ．ブラシカエ（Ｐ．ｂｒａｓｓｉｃａｅ）、Ｐ．キャンピナセンシス（Ｐ．ｃａｍｐｉｎａｓｅｎｓｉｓ）、Ｐ．チンジュエンシス（Ｐ．ｃｈｉｎｊｕｅｎｓｉｓ）、Ｐ．キチノリティカス（Ｐ．ｃｈｉｔｉｎｏｌｙｔｉｃｕｓ）、Ｐ．コンドロイティヌス（Ｐ．ｃｈｏｎｄｒｏｉｔｉｎｕｓ）、Ｐ．シネリス（Ｐ．ｃｉｎｅｒｉｓ）、Ｐ．カードラノリティカス（Ｐ．ｃｕｒｄｌａｎｏｌｙｔｉｃｕｓ）、Ｐ．テジョネンシス（Ｐ．ｄａｅｊｅｏｎｅｎｓｉｓ）、Ｐ．デンドリティフォルミス（Ｐ．ｄｅｎｄｒｉｔｉｆｏｒｍｉｓ）、Ｐ．エヒメンシス（Ｐ．ｅｈｉｍｅｎｓｉｓ）、Ｐ．エルギイ（Ｐ．ｅｌｇｉｉ）、Ｐ．ファビスポラス（Ｐ．ｆａｖｉｓｐｏｒｕｓ）、Ｐ．グルカノリティカス（Ｐ．ｇｌｕｃａｎｏｌｙｔｉｃｕｓ）、Ｐ．グリカニリティカス（Ｐ．ｇｌｙｃａｎｉｌｙｔｉｃｕｓ）、Ｐ．グラミニス（Ｐ．ｇｒａｍｉｎｉｓ）、Ｐ．グラニボランス（Ｐ．ｇｒａｎｉｖｏｒａｎｓ）、Ｐ．ホドガイエンシス（Ｐ．ｈｏｄｏｇａｙｅｎｓｉｓ）、Ｐ．イリノイセンシス（Ｐ．ｉｌｌｉｎｏｉｓｅｎｓｉｓ）、Ｐ．ジャミラエ（Ｐ．ｊａｍｉｌａｅ）、Ｐ．コベンシス（Ｐ．ｋｏｂｅｎｓｉｓ）、Ｐ．コレオボランス（Ｐ．ｋｏｌｅｏｖｏｒａｎｓ）、Ｐ．コーリエンシス（Ｐ．ｋｏｒｅｅｎｓｉｓ）、Ｐ．クリベンシス（Ｐ．ｋｒｉｂｂｅｎｓｉｓ）、Ｐ．ラクティス（Ｐ．ｌａｃｔｉｓ）、Ｐ．ラルバエ（Ｐ．ｌａｒｖａｅ）、Ｐ．ロータス（Ｐ．ｌａｕｔｕｓ）、Ｐ．レンティモルブス（Ｐ．ｌｅｎｔｉｍｏｒｂｕｓ）、Ｐ．マセランス（Ｐ．ｍａｃｅｒａｎｓ）、Ｐ．マッカリエンシス（Ｐ．ｍａｃｑｕａｒｉｅｎｓｉｓ）、Ｐ．マシリエンシス（Ｐ．ｍａｓｓｉｌｉｅｎｓｉｓ）、Ｐ．メンデリイ（Ｐ．ｍｅｎｄｅｌｉｉ）、Ｐ．モトブエンシス（Ｐ．ｍｏｔｏｂｕｅｎｓｉｓ）、Ｐ．ナフタレノボランス（Ｐ．ｎａｐｈｔｈａｌｅｎｏｖｏｒａｎｓ）、Ｐ．ネマトフィルス（Ｐ．ｎｅｍａｔｏｐｈｉｌｕｓ）、Ｐ．オドリファー（Ｐ．ｏｄｏｒｉｆｅｒ）、Ｐ．パブリ（Ｐ．ｐａｂｕｌｉ）、Ｐ．ペオリアエ（Ｐ．ｐｅｏｒｉａｅ）、Ｐ．フェニシス（Ｐ．ｐｈｏｅｎｉｃｉｓ）、Ｐ．フィルロスファエラエ（Ｐ．ｐｈｙｌｌｏｓｐｈａｅｒａｅ）、Ｐ．ポリミクサ（Ｐ．ｐｏｌｙｍｙｘａ）、Ｐ．ポピリアエ（Ｐ．ｐｏｐｉｌｌｉａｅ）、Ｐ．リゾスファエラエ（Ｐ．ｒｈｉｚｏｓｐｈａｅｒａｅ）、Ｐ．サングイニス（Ｐ．ｓａｎｇｕｉｎｉｓ）、Ｐ．ステリファー（Ｐ．ｓｔｅｌｌｉｆｅｒ）、Ｐ．タイチュンエンシス（Ｐ．ｔａｉｃｈｕｎｇｅｎｓｉｓ）、Ｐ．テラエ（Ｐ．ｔｅｒｒａｅ）、Ｐ．チアミノリティカス（Ｐ．ｔｈｉａｍｉｎｏｌｙｔｉｃｕｓ）、Ｐ．チモネンシス（Ｐ．ｔｉｍｏｎｅｎｓｉｓ）、Ｐ．チロピリ（Ｐ．ｔｙｌｏｐｉｌｉ）、Ｐ．ツリセンシス（Ｐ．ｔｕｒｉｃｅｎｓｉｓ）、Ｐ．バリダス（Ｐ．ｖａｌｉｄｕｓ）、Ｐ．ボルテックス（Ｐ．ｖｏｒｔｅｘ）、Ｐ．ブルネリス（Ｐ．ｖｕｌｎｅｒｉｓ）、Ｐ．ウィニイ（Ｐ．ｗｙｎｎｉｉ）、Ｐ．キシラニリティカス（Ｐ．ｘｙｌａｎｉｌｙｔｉｃｕｓ）、特に好ましくはパエニバチルス・コーリエンシス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｋｏｒｅｅｎｓｉｓ）、パエニバチルス・リゾスファエラエ（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｒｈｉｚｏｓｐｈａｅｒａｅ）、パエニバチルス・ポリミクサ（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｏｌｙｍｙｘａ）、パエニバチルス・アミロリティカス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ａｍｙｌｏｌｙｔｉｃｕｓ）、パエニバチルス・テラエ（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｅｒｒａｅ）、パエニバチルス・ポリミクサ・ポリミクサ（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｏｌｙｍｙｘａ ｐｏｌｙｍｙｘａ）、パエニバチルス・ポリミクサ・プランタルム（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｏｌｙｍｙｘａ ｐｌａｎｔａｒｕｍ）、パエニバチルス新種エピフィチカス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｎｏｖ．ｓｐｅｃ ｅｐｉｐｈｙｔｉｃｕｓ）、パエニバチルス・テラエ（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｅｒｒａｅ）、パエニバチルス・マセランス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｍａｃｅｒａｎｓ）、パエニバチルス・アルベイ（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ａｌｖｅｉ）、より好ましいのは、パエニバチルス・ポリミクサ（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｏｌｙｍｙｘａ）、パエニバチルス・ポリミクサ・ポリミクサ（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｏｌｙｍｙｘａ ｐｏｌｙｍｙｘａ）、パエニバチルス・ポリミクサ・プランタルム（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｏｌｙｍｙｘａ ｐｌａｎｔａｒｕｍ）、パエニバチルス新種エピフィチカス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｎｏｖ．ｓｐｅｃ ｅｐｉｐｈｙｔｉｃｕｓ）、パエニバチルス・テラエ（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｅｒｒａｅ）、パエニバチルス・マセランス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｍａｃｅｒａｎｓ）、パエニバチルス・アルベイ（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ａｌｖｅｉ）、更により好ましくはパエニバチルス・ポリミクサ（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｏｌｙｍｙｘａ）、パエニバチルス・ポリミクサ・ポリミクサ（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｏｌｙｍｙｘａ ｐｏｌｙｍｙｘａ）、パエニバチルス・ポリミクサ・プランタルム（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｏｌｙｍｙｘａ ｐｌａｎｔａｒｕｍ）及びパエニバチルス・テラエ（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｅｒｒａｅ）。
【0054】
バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）種：Ｂ．アビッサリス（Ｂ．ａｂｙｓｓａｌｉｓ）、Ｂ．アカンティ（Ｂ．ａｃａｎｔｈｉ）、Ｂ．アシディセラー（Ｂ．ａｃｉｄｉｃｅｌｅｒ）、Ｂ．アシディコーラ（Ｂ．ａｃｉｄｉｃｏｌａ）、Ｂ．アシディプロデュセンス（Ｂ．ａｃｉｄｉｐｒｏｄｕｃｅｎｓ）、Ｂ．アシディトレランス（Ｂ．ａｃｉｄｉｔｏｌｅｒａｎｓ）、Ｂ．アシドプルリチカス（Ｂ．ａｃｉｄｏｐｕｌｌｕｌｙｔｉｃｕｓ）、Ｂ．アシドボランス（Ｂ．ａｃｉｄｏｖｏｒａｎｓ）、Ｂ．アエオリウス（Ｂ．ａｅｏｌｉｕｓ）、Ｂ．エクオロリス（Ｂ．ａｅｑｕｏｒｏｒｉｓ）、Ｂ．アエリス（Ｂ．ａｅｒｉｓ）、Ｂ．アエリウス（Ｂ．ａｅｒｉｕｓ）、Ｂ．アエロラクティカス（Ｂ．ａｅｒｏｌａｃｔｉｃｕｓ）、Ｂ．アエスツアリイ（Ｂ．ａｅｓｔｕａｒｉｉ）、Ｂ．アイディンゲンシス（Ｂ．ａｉｄｉｎｇｅｎｓｉｓ）、Ｂ．アキバイ（Ｂ．ａｋｉｂａｉ）、Ｂ．アルカリイヌリヌス（Ｂ．ａｌｃａｌｉｉｎｕｌｉｎｕｓ）、Ｂ．アルカロフィルス（Ｂ．ａｌｃａｌｏｐｈｉｌｕｓ）、Ｂ．アルギコーラ（Ｂ．ａｌｇｉｃｏｌａ）、Ｂ．アルカリコーラ（Ｂ．ａｌｋａｌｉｃｏｌａ）、Ｂ．アルカリラクス（Ｂ．ａｌｋａｌｉｌａｃｕｓ）、Ｂ．アルカリニトリリクス（Ｂ．ａｌｋａｌｉｎｉｔｒｉｌｉｃｕｓ）、Ｂ．アルカリセディミニス（Ｂ．ａｌｋａｌｉｓｅｄｉｍｉｎｉｓ）、Ｂ．アルカリテルリス（Ｂ．ａｌｋａｌｉｔｅｌｌｕｒｉｓ）、Ｂ．アルカリトレランス（Ｂ．ａｌｋａｌｉｔｏｌｅｒａｎｓ）、Ｂ．アルカロガヤ（Ｂ．ａｌｋａｌｏｇａｙａ）、Ｂ．アルティテュディニス（Ｂ．ａｌｔｉｔｕｄｉｎｉｓ）、Ｂ．アルベアユエンシス（Ｂ．ａｌｖｅａｙｕｅｎｓｉｓ）、Ｂ．アミリエンシス（Ｂ．ａｍｉｌｉｅｎｓｉｓ）、Ｂ．アンドレエセニ（Ｂ．ａｎｄｒｅｅｓｅｎｉｉ）、Ｂ．アンドレラオウルティ（Ｂ．ａｎｄｒｅｒａｏｕｌｔｉｉ）、Ｂ．アポロエウス（Ｂ．ａｐｏｒｒｈｏｅｕｓ）、Ｂ．アクイマリス（Ｂ．ａｑｕｉｍａｒｉｓ）、Ｂ．アルブチニボランス（Ｂ．ａｒｂｕｔｉｎｉｖｏｒａｎｓ）、Ｂ．アリアブハッタイ（Ｂ．ａｒｙａｂｈａｔｔａｉ）、Ｂ．アサヒイ（Ｂ．ａｓａｈｉｉ）、Ｐ．アウランティアクス（Ｐ．ａｕｒａｎｔｉａｃｕｓ）、Ｂ．オーストラリマリス（Ｂ．ａｕｓｔｒａｌｉｍａｒｉｓ）、Ｂ．アゾトフォルマンス（Ｂ．ａｚｏｔｏｆｏｒｍａｎｓ）、Ｂ．バクテリウム（Ｂ．ｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、Ｂ．バディウス（Ｂ．ｂａｄｉｕｓ）、Ｂ．ベキュリュンゲンシス（Ｂ．ｂａｅｋｒｙｕｎｇｅｎｓｉｓ）、Ｂ．バタビエンシス（Ｂ．ｂａｔａｖｉｅｎｓｉｓ）、Ｂ．ベンゾエボランス（Ｂ．ｂｅｎｚｏｅｖｏｒａｎｓ）、Ｂ．ベリンゲンシス（Ｂ．ｂｅｒｉｎｇｅｎｓｉｓ）、Ｂ．ベルケレイ（Ｂ．ｂｅｒｋｅｌｅｙｉ）、Ｂ．ベベリッジイ（Ｂ．ｂｅｖｅｒｉｄｇｅｉ）、Ｂ．ビンマヨンゲンシス（Ｂ．ｂｉｎｇｍａｙｏｎｇｅｎｓｉｓ）、Ｂ．ボゴリエンシス（Ｂ．ｂｏｇｏｒｉｅｎｓｉｓ）、Ｂ．ボルボリ（Ｂ．ｂｏｒｂｏｒｉ）、Ｂ．ボロニフィルス（Ｂ．ｂｏｒｏｎｉｐｈｉｌｕｓ）、Ｂ．ブタノリボランス（Ｂ．ｂｕｔａｎｏｌｉｖｏｒａｎｓ）、Ｂ．カブリアレシイ（Ｂ．ｃａｂｒｉａｌｅｓｉｉ）、Ｂ．カカエ（Ｂ．ｃａｃｃａｅ）、Ｂ．カメリアエ（Ｂ．ｃａｍｅｌｌｉａｅ）、Ｂ．カンピサリス（Ｂ．ｃａｍｐｉｓａｌｉｓ）、Ｂ．カナベラリウス（Ｂ．ｃａｎａｖｅｒａｌｉｕｓ）、Ｂ．カパリディス（Ｂ．ｃａｐｐａｒｉｄｉｓ）、Ｂ．カルボニフィルス（Ｂ．ｃａｒｂｏｎｉｐｈｉｌｕｓ）、Ｂ．カサマンセンシス（Ｂ．ｃａｓａｍａｎｃｅｎｓｉｓ）、Ｂ．カゼイニリティクス（Ｂ．ｃａｓｅｉｎｉｌｙｔｉｃｕｓ）、Ｂ．カテヌラツス（Ｂ．ｃａｔｅｎｕｌａｔｕｓ）、Ｂ．カベルナエ（Ｂ．ｃａｖｅｒｎａｅ）、Ｂ．セセムベンシス（Ｂ．ｃｅｃｅｍｂｅｎｓｉｓ）、Ｂ．セルロシリティカス（Ｂ．ｃｅｌｌｕｌｏｓｉｌｙｔｉｃｕｓ）、Ｂ．チャガンノレンシス（Ｂ．ｃｈａｇａｎｎｏｒｅｎｓｉｓ）、Ｂ．チャンディーガルヘンシス（Ｂ．ｃｈａｎｄｉｇａｒｈｅｎｓｉｓ）、Ｂ．チョナネンシス（Ｂ．ｃｈｅｏｎａｎｅｎｓｉｓ）、Ｂ．チュンガゲンシス（Ｂ．ｃｈｕｎｇａｎｇｅｎｓｉｓ）、Ｂ．シセンシス（Ｂ．ｃｉｃｃｅｎｓｉｓ）、Ｂ．シフエンシス（Ｂ．ｃｉｈｕｅｎｓｉｓ）、Ｂ．サークランス（Ｂ．ｃｉｒｃｕｌａｎｓ）、Ｂ．クラウシイ（Ｂ．ｃｌａｕｓｉｉ）、Ｂ．コアグランス（Ｂ．ｃｏａｇｕｌａｎｓ）、Ｂ．コアウィレンシス（Ｂ．ｃｏａｈｕｉｌｅｎｓｉｓ）、Ｂ．コーニイ（Ｂ．ｃｏｈｎｉｉ）、Ｂ．コンポスティ（Ｂ．ｃｏｍｐｏｓｔｉ）、Ｂ．コニフェルム（Ｂ．ｃｏｎｉｆｅｒｕｍ）、Ｂ．コレアエンシス（Ｂ．ｃｏｒｅａｅｎｓｉｓ）、Ｂ．クラソストレアエ（Ｂ．ｃｒａｓｓｏｓｔｒｅａｅ）、Ｂ．クレッセンス（Ｂ．ｃｒｅｓｃｅｎｓ）、Ｂ．ククミス（Ｂ．ｃｕｃｕｍｉｓ）、Ｂ．ダカレンシス（Ｂ．ｄａｋａｒｅｎｓｉｓ）、Ｂ．ダリエンシス（Ｂ．ｄａｌｉｅｎｓｉｓ）、Ｂ．ダナンゲンシス（Ｂ．ｄａｎａｎｇｅｎｓｉｓ）、Ｂ．ダキンゲンシス（Ｂ．ｄａｑｉｎｇｅｎｓｉｓ）、Ｂ．デシシフロンディス（Ｂ．ｄｅｃｉｓｉｆｒｏｎｄｉｓ）、Ｂ．デコロラティオニス（Ｂ．ｄｅｃｏｌｏｒａｔｉｏｎｉｓ）、Ｂ．デプレサス（Ｂ．ｄｅｐｒｅｓｓｕｓ）、Ｂ．デラミフィカンス（Ｂ．ｄｅｒａｍｉｆｉｃａｎｓ）、Ｂ．デザーティ（Ｂ．ｄｅｓｅｒｔｉ）、Ｂ．ディエルモエンシス（Ｂ．ｄｉｅｌｍｏｅｎｓｉｓ）、Ｂ．ジベロレンシス（Ｂ．ｄｊｉｂｅｌｏｒｅｎｓｉｓ）、Ｂ．ドレンテンシス（Ｂ．ｄｒｅｎｔｅｎｓｉｓ）、Ｂ．エクトイニフォルマンス（Ｂ．ｅｃｔｏｉｎｉｆｏｒｍａｎｓ）、Ｂ．エイセニアエ（Ｂ．ｅｉｓｅｎｉａｅ）、Ｂ．エンクレンシス（Ｂ．ｅｎｃｌｅｎｓｉｓ）、Ｂ．エンドリチカス（Ｂ．ｅｎｄｏｌｉｔｈｉｃｕｓ）、Ｂ．エンドフィティカス（Ｂ．ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃｕｓ）、Ｂ．エンドラディシス（Ｂ．ｅｎｄｏｒａｄｉｃｉｓ）、Ｂ．エンドザントキシリカス（Ｂ．ｅｎｄｏｚａｎｔｈｏｘｙｌｉｃｕｓ）、Ｂ．ファラギニス（Ｂ．ｆａｒｒａｇｉｎｉｓ）、Ｂ．ファスティディオサス（Ｂ．ｆａｓｔｉｄｉｏｓｕｓ）、Ｂ．フェンキウエンシス（Ｂ．ｆｅｎｇｑｉｕｅｎｓｉｓ）、Ｂ．フェルメンティ（Ｂ．ｆｅｒｍｅｎｔｉ）、Ｂ．フェラリアラム（Ｂ．ｆｅｒｒａｒｉａｒｕｍ）、Ｂ．フィラメントスス（Ｂ．ｆｉｌａｍｅｎｔｏｓｕｓ）、Ｂ．フィルミス（Ｂ．ｆｉｒｍｉｓ）、Ｂ．ファーマス（Ｂ．ｆｉｒｍｕｓ）、Ｂ．フラボカルダリウス（Ｂ．ｆｌａｖｏｃａｌｄａｒｉｕｓ）、Ｂ．フレクス（Ｂ．ｆｌｅｘｕｓ）、Ｂ．ホラミニス（Ｂ．ｆｏｒａｍｉｎｉｓ）、Ｂ．フォルディ（Ｂ．ｆｏｒｄｉｉ）、Ｂ．フォルモセンシス（Ｂ．ｆｏｒｍｏｓｅｎｓｉｓ）、Ｂ．フォルティス（Ｂ．ｆｏｒｔｉｓ）、Ｂ．フリューデンレイッヒイ（Ｂ．ｆｒｅｕｄｅｎｒｅｉｃｈｉｉ）、Ｂ．フコシボランス（Ｂ．ｆｕｃｏｓｉｖｏｒａｎｓ）、Ｂ．フマリオリ（Ｂ．ｆｕｍａｒｉｏｌｉ）、Ｂ．フニクルス（Ｂ．ｆｕｎｉｃｕｌｕｓ）、Ｂ．ガラクトシディリティカス（Ｂ．ｇａｌａｃｔｏｓｉｄｉｌｙｔｉｃｕｓ）、Ｂ．ガリシエンシス（Ｂ．ｇａｌｌｉｃｉｅｎｓｉｓ）、Ｂ．ギブソニイ（Ｂ．ｇｉｂｓｏｎｉｉ）、Ｂ．ジンセンギソリ（Ｂ．ｇｉｎｓｅｎｇｇｉｓｏｌｉ）、Ｂ．ジンセンイフミ（Ｂ．ｇｉｎｓｅｎｇｉｈｕｍｉ）、Ｂ．ジンセンイソリ（Ｂ．ｇｉｎｓｅｎｇｉｓｏｌｉ）、Ｂ．グレンニー（Ｂ．ｇｌｅｎｎｉｉ）、Ｂ．グリシニフェルメンタンス（Ｂ．ｇｌｙｃｉｎｉｆｅｒｍｅｎｔａｎｓ）、Ｂ．ゴビエンシス（Ｂ．ｇｏｂｉｅｎｓｉｓ）、Ｂ．ゴシッピー（Ｂ．ｇｏｓｓｙｐｉｉ）、Ｂ．ゴッテイリイ（Ｂ．ｇｏｔｔｈｅｉｌｉｉ）、Ｂ．グラミニス（Ｂ．ｇｒａｍｉｎｉｓ）、Ｂ．グラナデンシス（Ｂ．ｇｒａｎａｄｅｎｓｉｓ）、Ｂ．ハッケンサッキイ（Ｂ．ｈａｃｋｅｎｓａｃｋｉｉ）、Ｂ．ハイコウエンシス（Ｂ．ｈａｉｋｏｕｅｎｓｉｓ）、Ｂ．ハルマパルス（Ｂ．ｈａｌｍａｐａｌｕｓ）、Ｂ．ハロデュランス（Ｂ．ｈａｌｏｄｕｒａｎｓ）、Ｂ．ハロサッカロボランス（Ｂ．ｈａｌｏｓａｃｃｈａｒｏｖｏｒａｎｓ）、Ｂ．ハイネシイ（Ｂ．ｈａｙｎｅｓｉｉ）、Ｂ．ヘミセルロシリティカス（Ｂ．ｈｅｍｉｃｅｌｌｕｌｏｓｉｌｙｔｉｃｕｓ）、Ｂ．ヘミセントロティ（Ｂ．ｈｅｍｉｃｅｎｔｒｏｔｉ）、Ｂ．ハーバーステイネンシス（Ｂ．ｈｅｒｂｅｒｓｔｅｉｎｅｎｓｉｓ）、Ｂ．ヒサシイ（Ｂ．ｈｉｓａｓｈｉｉ）、Ｂ．ホリコシイ（Ｂ．ｈｏｒｉｋｏｓｈｉｉ）、Ｂ．ホルネキアエ（Ｂ．ｈｏｒｎｅｃｋｉａｅ）、Ｂ．ホルティ（Ｂ．ｈｏｒｔｉ）、Ｂ．フイジョウエンシス（Ｂ．ｈｕｉｚｈｏｕｅｎｓｉｓ）、Ｂ．ヒュミ（Ｂ．ｈｕｍｉ）、Ｂ．フナンエンシス（Ｂ．ｈｕｎａｎｅｎｓｉｓ）、Ｂ．ヒュワジンポエンシス（Ｂ．ｈｗａｊｉｎｐｏｅｎｓｉｓ）、Ｂ．イドリエンシス（Ｂ．ｉｄｒｉｅｎｓｉｓ）、Ｂ．インディカス（Ｂ．ｉｎｄｉｃｕｓ）、Ｂ．インファンティス（Ｂ．ｉｎｆａｎｔｉｓ）、Ｂ．インフェルナス（Ｂ．ｉｎｆｅｒｎｕｓ）、Ｂ．インターメディウス（Ｂ．ｉｎｔｅｒｍｅｄｉｕｓ）、Ｂ．インテスティナリス（Ｂ．ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｉｓ）、Ｂ．イオカサエ（Ｂ．ｉｏｃａｓａｅ）、Ｂ．イサベリアエ（Ｂ．ｉｓａｂｅｌｉａｅ）、Ｂ．イスラエリ（Ｂ．ｉｓｒａｅｌｉ）、Ｂ．ジェダヘンシス（Ｂ．ｊｅｄｄａｈｅｎｓｉｓ）、Ｂ．ジェトガリ（Ｂ．ｊｅｏｔｇａｌｉ）、Ｂ．ケクスエアエ（Ｂ．ｋｅｘｕｅａｅ）、Ｂ．キスクンサゲンシス（Ｂ．ｋｉｓｋｕｎｓａｇｅｎｓｉｓ）、Ｂ．コッチイ（Ｂ．ｋｏｃｈｉｉ）、Ｂ．コケシフォルミス（Ｂ．ｋｏｋｅｓｈｉｉｆｏｒｍｉｓ）、Ｂ．コーリエンシス（Ｂ．ｋｏｒｅｅｎｓｉｓ）、Ｂ．コルレンシス（Ｂ．ｋｏｒｌｅｎｓｉｓ）、Ｂ．クリベンシス（Ｂ．ｋｒｉｂｂｅｎｓｉｓ）、Ｂ．クルウィチアエ（Ｂ．ｋｒｕｌｗｉｃｈｉａｅ）、Ｂ．クワシオルコリ（Ｂ．ｋｗａｓｈｉｏｒｋｏｒｉ）、Ｂ．キョンギエンシス（Ｂ．ｋｙｏｎｇｇｉｅｎｓｉｓ）、Ｂ．ラシサルシー（Ｂ．ｌａｃｉｓａｌｓｉ）、Ｂ．ラクス（Ｂ．ｌａｃｕｓ）、Ｂ．レヘンシス（Ｂ．ｌｅｈｅｎｓｉｓ）、Ｂ．レンタス（Ｂ．ｌｅｎｔｕｓ）、Ｂ．リグニニフィルス（Ｂ．ｌｉｇｎｉｎｉｐｈｉｌｕｓ）、Ｂ．リンディアネンシス（Ｂ．ｌｉｎｄｉａｎｅｎｓｉｓ）、Ｂ．リトラリース（Ｂ．ｌｉｔｏｒａｌｉｓ）、Ｂ．ロイセレウリアエ（Ｂ．ｌｏｉｓｅｌｅｕｒｉａｅ）、Ｂ．ロナレンシス（Ｂ．ｌｏｎａｒｅｎｓｉｓ）、Ｂ．ロンギクアエシトゥム（Ｂ．ｌｏｎｇｉｑｕａｅｓｉｔｕｍ）、
Ｂ．ロンギスポルス（Ｂ．ｌｏｎｇｉｓｐｏｒｕｓ）、Ｂ．ルシフェレンシス（Ｂ．ｌｕｃｉｆｅｒｅｎｓｉｓ）、Ｂ．ルテオルス（Ｂ．ｌｕｔｅｏｌｕｓ）、Ｂ．ルテウス（Ｂ．ｌｕｔｅｕｓ）、Ｂ．リコペルシシ（Ｂ．ｌｙｃｏｐｅｒｓｉｃｉ）、Ｂ．マガテリウム（Ｂ．ｍａｇａｔｅｒｉｕｍ）、Ｂ．マリキイ（Ｂ．ｍａｌｉｋｉｉ）、Ｂ．マングロベンシス（Ｂ．ｍａｎｇｒｏｖｅｎｓｉｓ）、Ｂ．マングロビ（Ｂ．ｍａｎｇｒｏｖｉ）、Ｂ．マンナニライティカス（Ｂ．ｍａｎｎａｎｉｌｙｔｉｃｕｓ）、Ｂ．マヌセンシス（Ｂ．ｍａｎｕｓｅｎｓｉｓ）、Ｂ．マラスミ（Ｂ．ｍａｒａｓｍｉ）、Ｂ．マルコレスチンクタム（Ｂ．ｍａｒｃｏｒｅｓｔｉｎｃｔｕｍ）、Ｂ．マリニセディメントーラム（Ｂ．ｍａｒｉｎｉｓｅｄｉｍｅｎｔｏｒｕｍ）、Ｂ．マリスフラビ（Ｂ．ｍａｒｉｓｆｌａｖｉ）、Ｂ．マリティムス（Ｂ．ｍａｒｉｔｉｍｕｓ）、Ｂ．マルマレンシス（Ｂ．ｍａｒｍａｒｅｎｓｉｓ）、Ｂ．マッシリグラシエイ（Ｂ．ｍａｓｓｉｌｉｇｌａｃｉｅｉ）、Ｂ．マッシリオアノレクシウス（Ｂ．ｍａｓｓｉｌｉｏａｎｏｒｅｘｉｕｓ）、Ｂ．マッシリオガボネンシス（Ｂ．ｍａｓｓｉｌｉｏｇａｂｏｎｅｎｓｉｓ）、Ｂ．マッシリオゴリラエ（Ｂ．ｍａｓｓｉｌｉｏｇｏｒｉｌｌａｅ）、Ｂ．マッシリオニゲリエンシス（Ｂ．ｍａｓｓｉｌｉｏｎｉｇｅｒｉｅｎｓｉｓ）、Ｂ．マッシリオセネガレンシス（Ｂ．ｍａｓｓｉｌｉｏｓｅｎｅｇａｌｅｎｓｉｓ）、Ｂ．メディテラネエンシス（Ｂ．ｍｅｄｉｔｅｒｒａｎｅｅｎｓｉｓ）、Ｂ．メガテリウム（Ｂ．ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ）、Ｂ．メソナエ（Ｂ．ｍｅｓｏｎａｅ）、Ｂ．メソフィラム（Ｂ．ｍｅｓｏｐｈｉｌｕｍ）、Ｂ．メソフィルス（Ｂ．ｍｅｓｏｐｈｉｌｕｓ）、Ｂ．メタノリカス（Ｂ．ｍｅｔｈａｎｏｌｉｃｕｓ）、Ｂ．ミスカンティ（Ｂ．ｍｉｓｃａｎｔｈｉ）、Ｂ．ムラリス（Ｂ．ｍｕｒａｌｉｓ）、Ｂ．ムリマルティニ（Ｂ．ｍｕｒｉｍａｒｔｉｎｉ）、Ｂ．ナカムライ（Ｂ．ｎａｋａｍｕｒａｉ）、Ｂ．ナンハイイセディミニス（Ｂ．ｎａｎｈａｉｉｓｅｄｉｍｉｎｉｓ）、Ｂ．ナトロノフィルス（Ｂ．ｎａｔｒｏｎｏｐｈｉｌｕｓ）、Ｂ．ンディオピクス（Ｂ．ｎｄｉｏｐｉｃｕｓ）、Ｂ．ネアルソニイ（Ｂ．ｎｅａｌｓｏｎｉｉ）、Ｂ．ネマトシダ（Ｂ．ｎｅｍａｔｏｃｉｄａ）、Ｂ．ナイアベンシス（Ｂ．ｎｉａｂｅｎｓｉｓ）、Ｂ．ナイアシニ（Ｂ．ｎｉａｃｉｎｉ）、Ｂ．ナイアメイエンシス（Ｂ．ｎｉａｍｅｙｅｎｓｉｓ）、Ｂ．ニトリトフィルス（Ｂ．ｎｉｔｒｉｔｏｐｈｉｌｕｓ）、Ｂ．ノトジンセンイソリ（Ｂ．ｎｏｔｏｇｉｎｓｅｎｇｉｓｏｌｉ）、Ｂ．ノバリス（Ｂ．ｎｏｖａｌｉｓ）、Ｂ．オブストラクティブス（Ｂ．ｏｂｓｔｒｕｃｔｉｖｕｓ）、Ｂ．オセアニ（Ｂ．ｏｃｅａｎｉ）、Ｂ．オセアニセディミニス（Ｂ．ｏｃｅａｎｉｓｅｄｉｍｉｎｉｓ）、Ｂ．オーベンシス（Ｂ．ｏｈｂｅｎｓｉｓ）、Ｂ．オケンシス（Ｂ．ｏｋｈｅｎｓｉｓ）、Ｂ．オクヒデンシス（Ｂ．ｏｋｕｈｉｄｅｎｓｉｓ）、Ｂ．オレイボランス（Ｂ．ｏｌｅｉｖｏｒａｎｓ）、Ｂ．オレロニウス（Ｂ．ｏｌｅｒｏｎｉｕｓ）、Ｂ．オリバエ（Ｂ．ｏｌｉｖａｅ）、Ｂ．オヌベンシス（Ｂ．ｏｎｕｂｅｎｓｉｓ）、Ｂ．オリゼー（Ｂ．ｏｒｙｚａｅ）、Ｂ．オリゼーコルチシス（Ｂ．ｏｒｙｚａｅｃｏｒｔｉｃｉｓ）、Ｂ．オリジソリ（Ｂ．ｏｒｙｚｉｓｏｌｉ）、Ｂ．オリジテラエ（Ｂ．ｏｒｙｚｉｔｅｒｒａｅ）、Ｂ．オシメンシス（Ｂ．ｏｓｈｉｍｅｎｓｉｓ）、Ｂ．パキスタネンシス（Ｂ．ｐａｋｉｓｔａｎｅｎｓｉｓ）、Ｂ．パナチソリ（Ｂ．ｐａｎａｃｉｓｏｌｉ）、Ｂ．パナチテラエ（Ｂ．ｐａｎａｃｉｔｅｒｒａｅ）、Ｂ．パラフレクサス（Ｂ．ｐａｒａｆｌｅｘｕｓ）、Ｂ．パタゴニエンシス（Ｂ．ｐａｔａｇｏｎｉｅｎｓｉｓ）、Ｂ．ペルシクス（Ｂ．ｐｅｒｓｉｃｕｓ）、Ｂ．ペルバガス（Ｂ．ｐｅｒｖａｇｕｓ）、Ｂ．フォカエエンシス（Ｂ．ｐｈｏｃａｅｅｎｓｉｓ）、Ｂ．ピチノチイ（Ｂ．ｐｉｃｈｉｎｏｔｙｉ）、Ｂ．ピスシコーラ（Ｂ．ｐｉｓｃｉｃｏｌａ）、Ｂ．ピスシス（Ｂ．ｐｉｓｃｉｓ）、Ｂ．プラコルチディス（Ｂ．ｐｌａｋｏｒｔｉｄｉｓ）、Ｂ．ポケオネンシス（Ｂ．ｐｏｃｈｅｏｎｅｎｓｉｓ）、Ｂ．ポリゴニ（Ｂ．ｐｏｌｙｇｏｎｉ）、Ｂ．ポリマチュス（Ｂ．ｐｏｌｙｍａｃｈｕｓ）、Ｂ．ポプリ（Ｂ．ｐｏｐｕｌｉ）、Ｂ．プラエディー（Ｂ．ｐｒａｅｄｉｉ）、Ｂ．シュードアルカリフィルス（Ｂ．ｐｓｅｕｄａｌｃａｌｉｐｈｉｌｕｓ）、Ｂ．シュードファーマス（Ｂ．ｐｓｅｕｄｏｆｉｒｍｕｓ）、Ｂ．シュードフレクス（Ｂ．ｐｓｅｕｄｏｆｌｅｘｕｓ）、Ｂ．シュードメガテリウム（Ｂ．ｐｓｅｕｄｏｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ）、Ｂ．サイクロサッカロリティカス（Ｂ．ｐｓｙｃｈｒｏｓａｃｃｈａｒｏｌｙｔｉｃｕｓ）、Ｂ．プミルス（Ｂ．ｐｕｍｉｌｕｓ）、Ｂ．プルガチオニレジステンス（Ｂ．ｐｕｒｇａｔｉｏｎｉｒｅｓｉｓｔｅｎｓ）、Ｂ．チンシェンイー（Ｂ．ｑｉｎｇｓｈｅｎｇｉｉ）、Ｂ．ラセミラクティカス（Ｂ．ｒａｃｅｍｉｌａｃｔｉｃｕｓ）、Ｂ．リゾスファエラエ（Ｂ．ｒｈｉｚｏｓｐｈａｅｒａｅ）、Ｂ．リジリプロフンディ（Ｂ．ｒｉｇｉｌｉｐｒｏｆｕｎｄｉ）、Ｂ．ルビインファンティス（Ｂ．ｒｕｂｉｉｎｆａｎｔｉｓ）、Ｂ．ルリス（Ｂ．ｒｕｒｉｓ）、Ｂ．サフェンシス（Ｂ．ｓａｆｅｎｓｉｓ）、Ｂ．サガニー（Ｂ．ｓａｇａｎｉｉ）、Ｂ．サラセティス（Ｂ．ｓａｌａｃｅｔｉｓ）、Ｂ．サラリウス（Ｂ．ｓａｌａｒｉｕｓ）、Ｂ．サリデュランス（Ｂ．ｓａｌｉｄｕｒａｎｓ）、Ｂ．サリス（Ｂ．ｓａｌｉｓ）、Ｂ．サリトレランス（Ｂ．ｓａｌｉｔｏｌｅｒａｎｓ）、Ｂ．サルマラヤ（Ｂ．ｓａｌｍａｌａｙａ）、Ｂ．サルサス（Ｂ．ｓａｌｓｕｓ）、Ｂ．セディミニス（Ｂ．ｓｅｄｉｍｉｎｉｓ）、Ｂ．セレナタルセナティス（Ｂ．ｓｅｌｅｎａｔａｒｓｅｎａｔｉｓ）、Ｂ．セネガレンシス（Ｂ．ｓｅｎｅｇａｌｅｎｓｉｓ）、Ｂ．セオヘアネンシス（Ｂ．ｓｅｏｈａｅａｎｅｎｓｉｓ）、Ｂ．シャチェエンシス（Ｂ．ｓｈａｃｈｅｅｎｓｉｓ）、Ｂ．シャクレトニイ（Ｂ．ｓｈａｃｋｌｅｔｏｎｉｉ）、Ｂ．シャントゥンゲンシス（Ｂ．ｓｈａｎｄｏｎｇｅｎｓｉｓ）、Ｂ．シバジ（Ｂ．ｓｈｉｖａｊｉｉ）、Ｂ．シミリス（Ｂ．ｓｉｍｉｌｉｓ）、Ｂ．シンプレックス（Ｂ．ｓｉｍｐｌｅｘ）、Ｂ．シネサロウムエンシス（Ｂ．ｓｉｎｅｓａｌｏｕｍｅｎｓｉｓ）、Ｂ．シラリス（Ｂ．ｓｉｒａｌｉｓ）、Ｂ．スミシイ（Ｂ．ｓｍｉｔｈｉｉ）、Ｂ．ソラニ（Ｂ．ｓｏｌａｎｉ）、Ｂ．ソリ（Ｂ．ｓｏｌｉ）、Ｂ．ソリマングロビ（Ｂ．ｓｏｌｉｍａｎｇｒｏｖｉ）、Ｂ．ソリシルバエ（Ｂ．ｓｏｌｉｓｉｌｖａｅ）、Ｂ．ソングクレンシス（Ｂ．ｓｏｎｇｋｌｅｎｓｉｓ）、Ｂ．スポンギアエ（Ｂ．ｓｐｏｎｇｉａｅ）、Ｂ．スポロサーモデュランス（Ｂ．ｓｐｏｒｏｔｈｅｒｍｏｄｕｒａｎｓ）、Ｂ．スタムシ（Ｂ．ｓｔａｍｓｉｉ）、Ｂ．サブテラネウス（Ｂ．ｓｕｂｔｅｒｒａｎｅｕｓ）、Ｂ．スウェゼイ（Ｂ．ｓｗｅｚｅｙｉ）、Ｂ．タエアネンシス（Ｂ．ｔａｅａｎｅｎｓｉｓ）、Ｂ．タイワンエンシス（Ｂ．ｔａｉｗａｎｅｎｓｉｓ）、Ｂ．タマリシス（Ｂ．ｔａｍａｒｉｃｉｓ）、Ｂ．タクシ（Ｂ．ｔａｘｉ）、Ｂ．テラエ（Ｂ．ｔｅｒｒａｅ）、Ｂ．テスティス（Ｂ．ｔｅｓｔｉｓ）、Ｂ．タオンヒエンシス（Ｂ．ｔｈａｏｎｈｉｅｎｓｉｓ）、Ｂ．サーモアルカロフィルス（Ｂ．ｔｈｅｒｍｏａｌｋａｌｏｐｈｉｌｕｓ）、Ｂ．サーモアミロリケファシエンス（Ｂ．ｔｈｅｒｍｏａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）、Ｂ．サーモアミロボランス（Ｂ．ｔｈｅｒｍｏａｍｙｌｏｖｏｒａｎｓ）、Ｂ．サーモコプリアエ（Ｂ．ｔｈｅｒｍｏｃｏｐｒｉａｅ）、Ｂ．サーモラクティス（Ｂ．ｔｈｅｒｍｏｌａｃｔｉｓ）、Ｂ．サーモフィルス（Ｂ．ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）、Ｂ．サーモプロテオリティカス（Ｂ．ｔｈｅｒｍｏｐｒｏｔｅｏｌｙｔｉｃｕｓ）、Ｂ．サーモテレストリス（Ｂ．ｔｈｅｒｍｏｔｅｒｒｅｓｔｒｉｓ）、Ｂ．サーモゼアマイゼ（Ｂ．ｔｈｅｒｍｏｚｅａｍａｉｚｅ）、Ｂ．チオパランス（Ｂ．ｔｈｉｏｐａｒａｎｓ）、Ｂ．チアンムエンシス（Ｂ．ｔｉａｎｍｕｅｎｓｉｓ）、Ｂ．ティエンシェンイー（Ｂ．ｔｉａｎｓｈｅｎｉｉ）、Ｂ．チモネンシス（Ｂ．ｔｉｍｏｎｅｎｓｉｓ）、Ｂ．チプキラリス（Ｂ．ｔｉｐｃｈｉｒａｌｉｓ）、Ｂ．トリポキシリコーラ（Ｂ．ｔｒｙｐｏｘｙｌｉｃｏｌａ）、Ｂ．トゥアレギ（Ｂ．ｔｕａｒｅｇｉ）、Ｂ．ウルムチエンシス（Ｂ．ｕｒｕｍｑｉｅｎｓｉｓ）、Ｂ．ベトナメンシス（Ｂ．ｖｉｅｔｎａｍｅｎｓｉｓ）、Ｂ．ヴィニー（Ｂ．ｖｉｎｉ）、Ｂ．ビレティ（Ｂ．ｖｉｒｅｔｉ）、Ｂ．ビスコーサス（Ｂ．ｖｉｓｃｏｓｕｓ）、Ｂ．ビテリヌス（Ｂ．ｖｉｔｅｌｌｉｎｕｓ）、Ｂ．ワコーエンシス（Ｂ．ｗａｋｏｅｎｓｉｓ）、Ｂ．ウェイハイエンシス（Ｂ．ｗｅｉｈａｉｅｎｓｉｓ）、Ｂ．ウーターリエンチーエンシス（Ｂ．ｗｕｄａｌｉａｎｃｈｉｅｎｓｉｓ）、Ｂ．ウーイーシャンエンシス（Ｂ．ｗｕｙｉｓｈａｎｅｎｓｉｓ）、Ｂ．シアメンエンシス（Ｂ．ｘｉａｍｅｎｅｎｓｉｓ）、
Ｂ．シャオシエンシス（Ｂ．ｘｉａｏｘｉｅｎｓｉｓ）、Ｂ．ザントキシリ（Ｂ．ｚａｎｔｈｏｘｙｌｉ）、Ｂ．ジアエ（Ｂ．ｚｅａｅ）、Ｂ．チャンチョウエンシス（Ｂ．ｚｈａｎｇｚｈｏｕｅｎｓｉｓ）、Ｂ．チャンチヤンエンシス（Ｂ．ｚｈａｎｊｉａｎｇｅｎｓｉｓ）、好ましくはバチルス・リケニホルミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）、Ｂ．メガテリウム（Ｂ．ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ）、Ｂ．サブティリス（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）、Ｂ．プミルス（Ｂ．ｐｕｍｉｌｕｓ）、Ｂ．ファーマス（Ｂ．ｆｉｒｍｕｓ）、Ｂ．チューリンゲンシス（Ｂ．ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）、Ｂ．ベレゼンシス（Ｂ．ｖｅｌｅｚｅｎｓｉｓ）、Ｂ．リネンス（Ｂ．ｌｉｎｅｎｓ）、Ｂ．アトロファエウス（Ｂ．ａｔｒｏｐｈａｅｕｓ）、Ｂ．アミロリクエファシエンス（Ｂ．ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）、Ｂ．アリアブハッタイ（Ｂ．ａｒｙａｂｈａｔｔａｉ）、Ｂ．セレウス（Ｂ．ｃｅｒｅｕｓ）、Ｂ．アクアティリス（Ｂ．ａｑｕａｔｉｌｉｓ）、Ｂ．サークランス（Ｂ．ｃｉｒｃｕｌａｎｓ）、Ｂ．クラウシイ（Ｂ．ｃｌａｕｓｉｉ）、Ｂ．スファエリカス（Ｂ．ｓｐｈａｅｒｉｃｕｓ）、Ｂ．チアミノリティカス（Ｂ．ｔｈｉａｍｉｎｏｌｙｔｉｃｕｓ）、Ｂ．モジャベンシス（Ｂ．ｍｏｊａｖｅｎｓｉｓ）、Ｂ．バリスモルティス（Ｂ．ｖａｌｌｉｓｍｏｒｔｉｓ）、Ｂ．コアグランス（Ｂ．ｃｏａｇｕｌａｎｓ）、Ｂ．ソノレンシス（Ｂ．ｓｏｎｏｒｅｎｓｉｓ）、Ｂ．ハロデュランス（Ｂ．ｈａｌｏｄｕｒａｎｓ）、Ｂ．ポケオネンシス（Ｂ．ｐｏｃｈｅｏｎｅｎｓｉｓ）、Ｂ．ギブソニイ（Ｂ．ｇｉｂｓｏｎｉｉ）、Ｂ．アシディセラー（Ｂ．ａｃｉｄｉｃｅｌｅｒ）、Ｂ．フレクス（Ｂ．ｆｌｅｘｕｓ）、Ｂ．フナンエンシス（Ｂ．ｈｕｎａｎｅｎｓｉｓ）、Ｂ．シュードマイコイデス（Ｂ．ｐｓｅｕｄｏｍｙｃｏｉｄｅｓ）、Ｂ．シンプレックス（Ｂ．ｓｉｍｐｌｅｘ）、Ｂ．サフェンシス（Ｂ．ｓａｆｅｎｓｉｓ）、Ｂ．マイコイデス（Ｂ．ｍｙｃｏｉｄｅｓ）、特に好ましくはＢ．アミロリクエファシエンス（Ｂ．ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）、Ｂ．リケニホルミス（Ｂ．ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）、Ｂ．チューリンゲンシス（Ｂ．ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）、Ｂ．ベレゼンシス（Ｂ．ｖｅｌｅｚｅｎｓｉｓ）、Ｂ．サブティリス（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）及びＢ．メガテリウム（Ｂ．ｍｅｇａｔｈｅｒｉｕｍ）、更により好ましくはＢ．アミロリクエファシエンス（Ｂ．ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）、Ｂ．チューリンゲンシス（Ｂ．ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）、Ｂ．ベレゼンシス（Ｂ．ｖｅｌｅｚｅｎｓｉｓ）及びＢ．メガテリウム（Ｂ．ｍｅｇａｔｈｅｒｉｕｍ）。本発明がバチルス・サブティリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）胞子のみを考慮せずに組成物及びそれらの生成方法を教示することは、本発明の特定の利点である。特に、本発明は、本明細書に記載の組成物、製品、方法及び使用であって、胞子は、バチルス・サブティリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）胞子を含まないが、他のバチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）、パエニバチルス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ）及び／又はクロストリジウム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ）胞子を含む、組成物、製品、方法及び使用も提供する。
Ｂ．ロンギスポルス（Ｂ．ｌｏｎｇｉｓｐｏｒｕｓ）、Ｂ．ルシフェレンシス（Ｂ．ｌｕｃｉｆｅｒｅｎｓｉｓ）、Ｂ．ルテオルス（Ｂ．ｌｕｔｅｏｌｕｓ）、Ｂ．ルテウス（Ｂ．ｌｕｔｅｕｓ）、Ｂ．リコペルシシ（Ｂ．ｌｙｃｏｐｅｒｓｉｃｉ）、Ｂ．マガテリウム（Ｂ．ｍａｇａｔｅｒｉｕｍ）、Ｂ．マリキイ（Ｂ．ｍａｌｉｋｉｉ）、Ｂ．マングロベンシス（Ｂ．ｍａｎｇｒｏｖｅｎｓｉｓ）、Ｂ．マングロビ（Ｂ．ｍａｎｇｒｏｖｉ）、Ｂ．マンナニライティカス（Ｂ．ｍａｎｎａｎｉｌｙｔｉｃｕｓ）、Ｂ．マヌセンシス（Ｂ．ｍａｎｕｓｅｎｓｉｓ）、Ｂ．マラスミ（Ｂ．ｍａｒａｓｍｉ）、Ｂ．マルコレスチンクタム（Ｂ．ｍａｒｃｏｒｅｓｔｉｎｃｔｕｍ）、Ｂ．マリニセディメントーラム（Ｂ．ｍａｒｉｎｉｓｅｄｉｍｅｎｔｏｒｕｍ）、Ｂ．マリスフラビ（Ｂ．ｍａｒｉｓｆｌａｖｉ）、Ｂ．マリティムス（Ｂ．ｍａｒｉｔｉｍｕｓ）、Ｂ．マルマレンシス（Ｂ．ｍａｒｍａｒｅｎｓｉｓ）、Ｂ．マッシリグラシエイ（Ｂ．ｍａｓｓｉｌｉｇｌａｃｉｅｉ）、Ｂ．マッシリオアノレクシウス（Ｂ．ｍａｓｓｉｌｉｏａｎｏｒｅｘｉｕｓ）、Ｂ．マッシリオガボネンシス（Ｂ．ｍａｓｓｉｌｉｏｇａｂｏｎｅｎｓｉｓ）、Ｂ．マッシリオゴリラエ（Ｂ．ｍａｓｓｉｌｉｏｇｏｒｉｌｌａｅ）、Ｂ．マッシリオニゲリエンシス（Ｂ．ｍａｓｓｉｌｉｏｎｉｇｅｒｉｅｎｓｉｓ）、Ｂ．マッシリオセネガレンシス（Ｂ．ｍａｓｓｉｌｉｏｓｅｎｅｇａｌｅｎｓｉｓ）、Ｂ．メディテラネエンシス（Ｂ．ｍｅｄｉｔｅｒｒａｎｅｅｎｓｉｓ）、Ｂ．メガテリウム（Ｂ．ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ）、Ｂ．メソナエ（Ｂ．ｍｅｓｏｎａｅ）、Ｂ．メソフィラム（Ｂ．ｍｅｓｏｐｈｉｌｕｍ）、Ｂ．メソフィルス（Ｂ．ｍｅｓｏｐｈｉｌｕｓ）、Ｂ．メタノリカス（Ｂ．ｍｅｔｈａｎｏｌｉｃｕｓ）、Ｂ．ミスカンティ（Ｂ．ｍｉｓｃａｎｔｈｉ）、Ｂ．ムラリス（Ｂ．ｍｕｒａｌｉｓ）、Ｂ．ムリマルティニ（Ｂ．ｍｕｒｉｍａｒｔｉｎｉ）、Ｂ．ナカムライ（Ｂ．ｎａｋａｍｕｒａｉ）、Ｂ．ナンハイイセディミニス（Ｂ．ｎａｎｈａｉｉｓｅｄｉｍｉｎｉｓ）、Ｂ．ナトロノフィルス（Ｂ．ｎａｔｒｏｎｏｐｈｉｌｕｓ）、Ｂ．ンディオピクス（Ｂ．ｎｄｉｏｐｉｃｕｓ）、Ｂ．ネアルソニイ（Ｂ．ｎｅａｌｓｏｎｉｉ）、Ｂ．ネマトシダ（Ｂ．ｎｅｍａｔｏｃｉｄａ）、Ｂ．ナイアベンシス（Ｂ．ｎｉａｂｅｎｓｉｓ）、Ｂ．ナイアシニ（Ｂ．ｎｉａｃｉｎｉ）、Ｂ．ナイアメイエンシス（Ｂ．ｎｉａｍｅｙｅｎｓｉｓ）、Ｂ．ニトリトフィルス（Ｂ．ｎｉｔｒｉｔｏｐｈｉｌｕｓ）、Ｂ．ノトジンセンイソリ（Ｂ．ｎｏｔｏｇｉｎｓｅｎｇｉｓｏｌｉ）、Ｂ．ノバリス（Ｂ．ｎｏｖａｌｉｓ）、Ｂ．オブストラクティブス（Ｂ．ｏｂｓｔｒｕｃｔｉｖｕｓ）、Ｂ．オセアニ（Ｂ．ｏｃｅａｎｉ）、Ｂ．オセアニセディミニス（Ｂ．ｏｃｅａｎｉｓｅｄｉｍｉｎｉｓ）、Ｂ．オーベンシス（Ｂ．ｏｈｂｅｎｓｉｓ）、Ｂ．オケンシス（Ｂ．ｏｋｈｅｎｓｉｓ）、Ｂ．オクヒデンシス（Ｂ．ｏｋｕｈｉｄｅｎｓｉｓ）、Ｂ．オレイボランス（Ｂ．ｏｌｅｉｖｏｒａｎｓ）、Ｂ．オレロニウス（Ｂ．ｏｌｅｒｏｎｉｕｓ）、Ｂ．オリバエ（Ｂ．ｏｌｉｖａｅ）、Ｂ．オヌベンシス（Ｂ．ｏｎｕｂｅｎｓｉｓ）、Ｂ．オリゼー（Ｂ．ｏｒｙｚａｅ）、Ｂ．オリゼーコルチシス（Ｂ．ｏｒｙｚａｅｃｏｒｔｉｃｉｓ）、Ｂ．オリジソリ（Ｂ．ｏｒｙｚｉｓｏｌｉ）、Ｂ．オリジテラエ（Ｂ．ｏｒｙｚｉｔｅｒｒａｅ）、Ｂ．オシメンシス（Ｂ．ｏｓｈｉｍｅｎｓｉｓ）、Ｂ．パキスタネンシス（Ｂ．ｐａｋｉｓｔａｎｅｎｓｉｓ）、Ｂ．パナチソリ（Ｂ．ｐａｎａｃｉｓｏｌｉ）、Ｂ．パナチテラエ（Ｂ．ｐａｎａｃｉｔｅｒｒａｅ）、Ｂ．パラフレクサス（Ｂ．ｐａｒａｆｌｅｘｕｓ）、Ｂ．パタゴニエンシス（Ｂ．ｐａｔａｇｏｎｉｅｎｓｉｓ）、Ｂ．ペルシクス（Ｂ．ｐｅｒｓｉｃｕｓ）、Ｂ．ペルバガス（Ｂ．ｐｅｒｖａｇｕｓ）、Ｂ．フォカエエンシス（Ｂ．ｐｈｏｃａｅｅｎｓｉｓ）、Ｂ．ピチノチイ（Ｂ．ｐｉｃｈｉｎｏｔｙｉ）、Ｂ．ピスシコーラ（Ｂ．ｐｉｓｃｉｃｏｌａ）、Ｂ．ピスシス（Ｂ．ｐｉｓｃｉｓ）、Ｂ．プラコルチディス（Ｂ．ｐｌａｋｏｒｔｉｄｉｓ）、Ｂ．ポケオネンシス（Ｂ．ｐｏｃｈｅｏｎｅｎｓｉｓ）、Ｂ．ポリゴニ（Ｂ．ｐｏｌｙｇｏｎｉ）、Ｂ．ポリマチュス（Ｂ．ｐｏｌｙｍａｃｈｕｓ）、Ｂ．ポプリ（Ｂ．ｐｏｐｕｌｉ）、Ｂ．プラエディー（Ｂ．ｐｒａｅｄｉｉ）、Ｂ．シュードアルカリフィルス（Ｂ．ｐｓｅｕｄａｌｃａｌｉｐｈｉｌｕｓ）、Ｂ．シュードファーマス（Ｂ．ｐｓｅｕｄｏｆｉｒｍｕｓ）、Ｂ．シュードフレクス（Ｂ．ｐｓｅｕｄｏｆｌｅｘｕｓ）、Ｂ．シュードメガテリウム（Ｂ．ｐｓｅｕｄｏｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ）、Ｂ．サイクロサッカロリティカス（Ｂ．ｐｓｙｃｈｒｏｓａｃｃｈａｒｏｌｙｔｉｃｕｓ）、Ｂ．プミルス（Ｂ．ｐｕｍｉｌｕｓ）、Ｂ．プルガチオニレジステンス（Ｂ．ｐｕｒｇａｔｉｏｎｉｒｅｓｉｓｔｅｎｓ）、Ｂ．チンシェンイー（Ｂ．ｑｉｎｇｓｈｅｎｇｉｉ）、Ｂ．ラセミラクティカス（Ｂ．ｒａｃｅｍｉｌａｃｔｉｃｕｓ）、Ｂ．リゾスファエラエ（Ｂ．ｒｈｉｚｏｓｐｈａｅｒａｅ）、Ｂ．リジリプロフンディ（Ｂ．ｒｉｇｉｌｉｐｒｏｆｕｎｄｉ）、Ｂ．ルビインファンティス（Ｂ．ｒｕｂｉｉｎｆａｎｔｉｓ）、Ｂ．ルリス（Ｂ．ｒｕｒｉｓ）、Ｂ．サフェンシス（Ｂ．ｓａｆｅｎｓｉｓ）、Ｂ．サガニー（Ｂ．ｓａｇａｎｉｉ）、Ｂ．サラセティス（Ｂ．ｓａｌａｃｅｔｉｓ）、Ｂ．サラリウス（Ｂ．ｓａｌａｒｉｕｓ）、Ｂ．サリデュランス（Ｂ．ｓａｌｉｄｕｒａｎｓ）、Ｂ．サリス（Ｂ．ｓａｌｉｓ）、Ｂ．サリトレランス（Ｂ．ｓａｌｉｔｏｌｅｒａｎｓ）、Ｂ．サルマラヤ（Ｂ．ｓａｌｍａｌａｙａ）、Ｂ．サルサス（Ｂ．ｓａｌｓｕｓ）、Ｂ．セディミニス（Ｂ．ｓｅｄｉｍｉｎｉｓ）、Ｂ．セレナタルセナティス（Ｂ．ｓｅｌｅｎａｔａｒｓｅｎａｔｉｓ）、Ｂ．セネガレンシス（Ｂ．ｓｅｎｅｇａｌｅｎｓｉｓ）、Ｂ．セオヘアネンシス（Ｂ．ｓｅｏｈａｅａｎｅｎｓｉｓ）、Ｂ．シャチェエンシス（Ｂ．ｓｈａｃｈｅｅｎｓｉｓ）、Ｂ．シャクレトニイ（Ｂ．ｓｈａｃｋｌｅｔｏｎｉｉ）、Ｂ．シャントゥンゲンシス（Ｂ．ｓｈａｎｄｏｎｇｅｎｓｉｓ）、Ｂ．シバジ（Ｂ．ｓｈｉｖａｊｉｉ）、Ｂ．シミリス（Ｂ．ｓｉｍｉｌｉｓ）、Ｂ．シンプレックス（Ｂ．ｓｉｍｐｌｅｘ）、Ｂ．シネサロウムエンシス（Ｂ．ｓｉｎｅｓａｌｏｕｍｅｎｓｉｓ）、Ｂ．シラリス（Ｂ．ｓｉｒａｌｉｓ）、Ｂ．スミシイ（Ｂ．ｓｍｉｔｈｉｉ）、Ｂ．ソラニ（Ｂ．ｓｏｌａｎｉ）、Ｂ．ソリ（Ｂ．ｓｏｌｉ）、Ｂ．ソリマングロビ（Ｂ．ｓｏｌｉｍａｎｇｒｏｖｉ）、Ｂ．ソリシルバエ（Ｂ．ｓｏｌｉｓｉｌｖａｅ）、Ｂ．ソングクレンシス（Ｂ．ｓｏｎｇｋｌｅｎｓｉｓ）、Ｂ．スポンギアエ（Ｂ．ｓｐｏｎｇｉａｅ）、Ｂ．スポロサーモデュランス（Ｂ．ｓｐｏｒｏｔｈｅｒｍｏｄｕｒａｎｓ）、Ｂ．スタムシ（Ｂ．ｓｔａｍｓｉｉ）、Ｂ．サブテラネウス（Ｂ．ｓｕｂｔｅｒｒａｎｅｕｓ）、Ｂ．スウェゼイ（Ｂ．ｓｗｅｚｅｙｉ）、Ｂ．タエアネンシス（Ｂ．ｔａｅａｎｅｎｓｉｓ）、Ｂ．タイワンエンシス（Ｂ．ｔａｉｗａｎｅｎｓｉｓ）、Ｂ．タマリシス（Ｂ．ｔａｍａｒｉｃｉｓ）、Ｂ．タクシ（Ｂ．ｔａｘｉ）、Ｂ．テラエ（Ｂ．ｔｅｒｒａｅ）、Ｂ．テスティス（Ｂ．ｔｅｓｔｉｓ）、Ｂ．タオンヒエンシス（Ｂ．ｔｈａｏｎｈｉｅｎｓｉｓ）、Ｂ．サーモアルカロフィルス（Ｂ．ｔｈｅｒｍｏａｌｋａｌｏｐｈｉｌｕｓ）、Ｂ．サーモアミロリケファシエンス（Ｂ．ｔｈｅｒｍｏａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）、Ｂ．サーモアミロボランス（Ｂ．ｔｈｅｒｍｏａｍｙｌｏｖｏｒａｎｓ）、Ｂ．サーモコプリアエ（Ｂ．ｔｈｅｒｍｏｃｏｐｒｉａｅ）、Ｂ．サーモラクティス（Ｂ．ｔｈｅｒｍｏｌａｃｔｉｓ）、Ｂ．サーモフィルス（Ｂ．ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）、Ｂ．サーモプロテオリティカス（Ｂ．ｔｈｅｒｍｏｐｒｏｔｅｏｌｙｔｉｃｕｓ）、Ｂ．サーモテレストリス（Ｂ．ｔｈｅｒｍｏｔｅｒｒｅｓｔｒｉｓ）、Ｂ．サーモゼアマイゼ（Ｂ．ｔｈｅｒｍｏｚｅａｍａｉｚｅ）、Ｂ．チオパランス（Ｂ．ｔｈｉｏｐａｒａｎｓ）、Ｂ．チアンムエンシス（Ｂ．ｔｉａｎｍｕｅｎｓｉｓ）、Ｂ．ティエンシェンイー（Ｂ．ｔｉａｎｓｈｅｎｉｉ）、Ｂ．チモネンシス（Ｂ．ｔｉｍｏｎｅｎｓｉｓ）、Ｂ．チプキラリス（Ｂ．ｔｉｐｃｈｉｒａｌｉｓ）、Ｂ．トリポキシリコーラ（Ｂ．ｔｒｙｐｏｘｙｌｉｃｏｌａ）、Ｂ．トゥアレギ（Ｂ．ｔｕａｒｅｇｉ）、Ｂ．ウルムチエンシス（Ｂ．ｕｒｕｍｑｉｅｎｓｉｓ）、Ｂ．ベトナメンシス（Ｂ．ｖｉｅｔｎａｍｅｎｓｉｓ）、Ｂ．ヴィニー（Ｂ．ｖｉｎｉ）、Ｂ．ビレティ（Ｂ．ｖｉｒｅｔｉ）、Ｂ．ビスコーサス（Ｂ．ｖｉｓｃｏｓｕｓ）、Ｂ．ビテリヌス（Ｂ．ｖｉｔｅｌｌｉｎｕｓ）、Ｂ．ワコーエンシス（Ｂ．ｗａｋｏｅｎｓｉｓ）、Ｂ．ウェイハイエンシス（Ｂ．ｗｅｉｈａｉｅｎｓｉｓ）、Ｂ．ウーターリエンチーエンシス（Ｂ．ｗｕｄａｌｉａｎｃｈｉｅｎｓｉｓ）、Ｂ．ウーイーシャンエンシス（Ｂ．ｗｕｙｉｓｈａｎｅｎｓｉｓ）、Ｂ．シアメンエンシス（Ｂ．ｘｉａｍｅｎｅｎｓｉｓ）、
Ｂ．シャオシエンシス（Ｂ．ｘｉａｏｘｉｅｎｓｉｓ）、Ｂ．ザントキシリ（Ｂ．ｚａｎｔｈｏｘｙｌｉ）、Ｂ．ジアエ（Ｂ．ｚｅａｅ）、Ｂ．チャンチョウエンシス（Ｂ．ｚｈａｎｇｚｈｏｕｅｎｓｉｓ）、Ｂ．チャンチヤンエンシス（Ｂ．ｚｈａｎｊｉａｎｇｅｎｓｉｓ）、好ましくはバチルス・リケニホルミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）、Ｂ．メガテリウム（Ｂ．ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ）、Ｂ．サブティリス（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）、Ｂ．プミルス（Ｂ．ｐｕｍｉｌｕｓ）、Ｂ．ファーマス（Ｂ．ｆｉｒｍｕｓ）、Ｂ．チューリンゲンシス（Ｂ．ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）、Ｂ．ベレゼンシス（Ｂ．ｖｅｌｅｚｅｎｓｉｓ）、Ｂ．リネンス（Ｂ．ｌｉｎｅｎｓ）、Ｂ．アトロファエウス（Ｂ．ａｔｒｏｐｈａｅｕｓ）、Ｂ．アミロリクエファシエンス（Ｂ．ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）、Ｂ．アリアブハッタイ（Ｂ．ａｒｙａｂｈａｔｔａｉ）、Ｂ．セレウス（Ｂ．ｃｅｒｅｕｓ）、Ｂ．アクアティリス（Ｂ．ａｑｕａｔｉｌｉｓ）、Ｂ．サークランス（Ｂ．ｃｉｒｃｕｌａｎｓ）、Ｂ．クラウシイ（Ｂ．ｃｌａｕｓｉｉ）、Ｂ．スファエリカス（Ｂ．ｓｐｈａｅｒｉｃｕｓ）、Ｂ．チアミノリティカス（Ｂ．ｔｈｉａｍｉｎｏｌｙｔｉｃｕｓ）、Ｂ．モジャベンシス（Ｂ．ｍｏｊａｖｅｎｓｉｓ）、Ｂ．バリスモルティス（Ｂ．ｖａｌｌｉｓｍｏｒｔｉｓ）、Ｂ．コアグランス（Ｂ．ｃｏａｇｕｌａｎｓ）、Ｂ．ソノレンシス（Ｂ．ｓｏｎｏｒｅｎｓｉｓ）、Ｂ．ハロデュランス（Ｂ．ｈａｌｏｄｕｒａｎｓ）、Ｂ．ポケオネンシス（Ｂ．ｐｏｃｈｅｏｎｅｎｓｉｓ）、Ｂ．ギブソニイ（Ｂ．ｇｉｂｓｏｎｉｉ）、Ｂ．アシディセラー（Ｂ．ａｃｉｄｉｃｅｌｅｒ）、Ｂ．フレクス（Ｂ．ｆｌｅｘｕｓ）、Ｂ．フナンエンシス（Ｂ．ｈｕｎａｎｅｎｓｉｓ）、Ｂ．シュードマイコイデス（Ｂ．ｐｓｅｕｄｏｍｙｃｏｉｄｅｓ）、Ｂ．シンプレックス（Ｂ．ｓｉｍｐｌｅｘ）、Ｂ．サフェンシス（Ｂ．ｓａｆｅｎｓｉｓ）、Ｂ．マイコイデス（Ｂ．ｍｙｃｏｉｄｅｓ）、特に好ましくはＢ．アミロリクエファシエンス（Ｂ．ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）、Ｂ．リケニホルミス（Ｂ．ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）、Ｂ．チューリンゲンシス（Ｂ．ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）、Ｂ．ベレゼンシス（Ｂ．ｖｅｌｅｚｅｎｓｉｓ）、Ｂ．サブティリス（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）及びＢ．メガテリウム（Ｂ．ｍｅｇａｔｈｅｒｉｕｍ）、更により好ましくはＢ．アミロリクエファシエンス（Ｂ．ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）、Ｂ．チューリンゲンシス（Ｂ．ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）、Ｂ．ベレゼンシス（Ｂ．ｖｅｌｅｚｅｎｓｉｓ）及びＢ．メガテリウム（Ｂ．ｍｅｇａｔｈｅｒｉｕｍ）。本発明がバチルス・サブティリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）胞子のみを考慮せずに組成物及びそれらの生成方法を教示することは、本発明の特定の利点である。特に、本発明は、本明細書に記載の組成物、製品、方法及び使用であって、胞子は、バチルス・サブティリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）胞子を含まないが、他のバチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）、パエニバチルス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ）及び／又はクロストリジウム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ）胞子を含む、組成物、製品、方法及び使用も提供する。
【0055】
クロストリジウム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ）種：Ｃ．オートエタノゲナム（Ｃ．ａｕｔｏｅｔｈａｎｏｇｅｎｕｍ）、Ｃ．ベイジェリンキ（Ｃ．ｂｅｉｊｅｒｉｎｃｋｉｉ）、Ｃ．ブチリカム（Ｃ．ｂｕｔｙｒｉｃｕｍ）、Ｃ．カルボキシディボランス（Ｃ．ｃａｒｂｏｘｉｄｉｖｏｒａｎｓ）、Ｃ．ディスポリカム（Ｃ．ｄｉｓｐｏｒｉｃｕｍ）、Ｃ．ドラケイ（Ｃ．ｄｒａｋｅｉ）、Ｃ．リュングダリイ（Ｃ．ｌｊｕｎｇｄａｈｌｉｉ）、Ｃ．クルイベリ（Ｃ．ｋｌｕｙｖｅｒｉ）、Ｃ．パステリアヌム（Ｃ．ｐａｓｔｅｕｒｉａｎｕｍ）、Ｃ．プロピオニカム（Ｃ．ｐｒｏｐｉｏｎｉｃｕｍ）、Ｃ．サッカロブチリカム（Ｃ．ｓａｃｃｈａｒｏｂｕｔｙｌｉｃｕｍ）、Ｃ．サッカロパーブチルアセトニカム（Ｃ．ｓａｃｃｈａｒｏｐｅｒｂｕｔｙｌａｃｅｔｏｎｉｃｕｍ）、Ｃ．スカトロゲネス（Ｃ．ｓｃａｔｏｌｏｇｅｎｅｓ）、Ｃ．チロブチリカム（Ｃ．ｔｙｒｏｂｕｔｙｒｉｃｕｍ）、好ましくは、Ｃ．ブチリカム（Ｃ．ｂｕｔｙｒｉｃｕｍ）、Ｃ．パステリアヌム（Ｃ．ｐａｓｔｅｕｒｉａｎｕｍ）及び／又はＣ．チロブチリカム（Ｃ．ｔｙｒｏｂｕｔｙｒｉｃｕｍ）、Ｃ．アエロトレランス（Ｃ．ａｅｒｏｔｏｌｅｒａｎｓ）、Ｃ．アミノフィルム（Ｃ．ａｍｉｎｏｐｈｉｌｕｍ）、Ｃ．アミンバレリカム（Ｃ．ａｍｉｎｖａｌｅｒｉｃｕｍ）、Ｃ．セレレクレッセンス（Ｃ．ｃｅｌｅｒｅｃｒｅｓｃｅｎｓ）、Ｃ．アスパラグフォルメ（Ｃ．ａｓｐａｒａｇｆｏｒｍｅ）、Ｃ．ボルテアエ（Ｃ．ｂｏｌｔｅａｅ）、Ｃ．クロストリディオフォルメ（Ｃ．ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｏｆｏｒｍｅ）、Ｃ．グリチリジニリチカム（Ｃ．ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚｉｎｉｌｙｔｉｃｕｍ）、Ｃ．（フンガテラ）ハセワイ（Ｃ．（Ｈｕｎｇａｔｅｌａ）ｈａｔｈｅｗａｙｉ）、Ｃ．ヒストリティカム（Ｃ．ｈｉｓｔｏｌｙｔｉｃｕｍ）、Ｃ．インドーリス（Ｃ．ｉｎｄｏｌｉｓ）、Ｃ．レプツム（Ｃ．ｌｅｐｔｕｍ）、Ｃ．（ティゼレラ）ネキシレ（Ｃ．（Ｔｙｚｚｅｒｅｌｌａ）ｎｅｘｉｌｅ）、Ｃ．パーフリンジェンス（Ｃ．ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ）、Ｃ．（エリシペラトクロストリジウム）ラモーサム（Ｃ．（Ｅｒｙｓｉｐｅｌａｔｏｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ）ｒａｍｏｓｕｍ）、Ｃ．シンデンス（Ｃ．ｓｃｉｎｄｅｎｓ）、Ｃ．シンビオサム（Ｃ．ｓｙｍｂｉｏｓｕｍ）、クロストリジウム・サッカログミア（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｓａｃｃｈａｒｏｇｕｍｉａ）、クロストリジウム・ソルデリイ（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｓｏｒｄｅｌｌｉ）、クロストリジウム・クロストリディオフォルメ（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｏｆｏｒｍｅ）、Ｃ．メチルペントサム（Ｃ．ｍｅｔｈｙｌｐｅｎｔｏｓｕｍ）、Ｃ．イスランジクム（Ｃ．ｉｓｌａｎｄｉｃｕｍ）並びにクロストリジウム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉａ）クラスターＩＶ、ＸＩＶａ及びＸＶＩＩＩの全てのメンバー、特に好ましいのは、Ｃ．ブチリカム（Ｃ．ｂｕｔｙｒｉｃｕｍ）。
【0056】
いくつかの好適なバチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）株及びパエニバチルス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ）株は、以下の国際特許出願に記載され寄託されている。そのような微生物の胞子又はそれらの任意の殺有害生物活性を有する変異株は、本発明による組成物の胞子として組み込まれ得る：国際公開第２０２０２００９５９号パンフレット：ＮＲＲＬアクセッション番号Ｂ－２１６６１で寄託されたバチルス・サブティリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）又はバチルス・アミロリクエファシエンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）ＱＳＴ７１３又はその殺真菌性突然変異株。バチルス・サブティリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）ＱＳＴ７１３、その突然変異株、その上清及びそのリポペプチド代謝産物並びに植物病原体及び昆虫を防除するためのそれらの使用方法は、米国特許第６０６００５１号明細書、同第６１０３２２８号明細書、同第６２９１４２６号明細書、同第６４１７１６３号明細書及び同第６６３８９１０号明細書に十分に記載されている。これらの特許において、株はＱＳＴ７１３と同義のＡＱ７１３と称される；国際公開第２０２０１０２５９２号パンフレット：バチルス・チューリンゲンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）株ＮＲＲＬ Ｂ－６７６８５、ＮＲＲＬ Ｂ－６７６８７及びＮＲＲＬ Ｂ－６７６８８；国際公開第２０１９１３５９７２号パンフレット：寄託アクセッション番号ＮＲＲＬ Ｂ－６７５３３又はＮＲＲＬ Ｂ－６７５３４を有するバチルス・メガテリウム（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｅｇａｔｈｅｒｉｕｍ）；国際公開第２０１９０３５８８１号パンフレット：パエニバチルス属種（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ．）ＮＲＲＬ Ｂ－５０９７２、パエニバチルス属種（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ．）ＮＲＲＬ Ｂ－６７１２９、パエニバチルス属種（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ．）ＮＲＲＬ Ｂ－６７３０４、パエニバチルス属種（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ．）ＮＲＲＬ Ｂ－６７６１５、アクセッション番号ＮＲＲＬ Ｂ－５０４２１で寄託されたバチルス・サブティリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）株ＱＳＴ３０００２及びバチルス・サブティリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）株ＮＲＲＬ Ｂ－５０４５５；国際公開第２０１８０８１５４３号パンフレット：ＡＴＣＣアクセッション番号ＰＴ Ａ－１２３７２０又はＰＴ Ａ－１２４２４６で寄託されたバチルス・サイクロサッカロリティカス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｓｙｃｈｒｏｓａｃｃｈａｒｏｌｙｔｉｃｕｓ）株；国際公開第２０１７１５１７４２号パンフレット：アクセッション番号ＮＲＲＬ Ｂ－２１６６１を割り当てられたバチルス・サブティリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）；国際公開第２０１６１０６０６３号パンフレット：バチルス・プミルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｕｍｉｌｕｓ）ＮＲＬＬ Ｂ－３００８７；国際公開第２０１３１５２３５３号パンフレット：ＣＮＭＣ １－１５８２として寄託されたバチルス属種（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ．）；国際公開第２０１３０１６３６１号パンフレット：ＮＲＲＬ Ｂ－５０７６０として寄託されたバチルス属種（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ．）株ＳＧＩ－０１５－Ｆ０３、ＮＲＲＬ Ｂ－５０７６１として寄託されたバチルス属種（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ．）株ＳＧＩ－０１５－Ｈ０６；国際公開第２０２０１８１０５３号パンフレット：パエニバチルス属種（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ．）ＮＲＲＬ Ｂ－６７７２１、パエニバチルス属種（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ．）ＮＲＲＬ Ｂ－６７７２３、パエニバチルス属種（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ．）ＮＲＲＬ Ｂ－６７７２４、パエニバチルス属種（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ．）ＮＲＲＬ Ｂ－５０３７４；国際公開第２０２００６１１４０号パンフレット：パエニバチルス属種（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ．）ＮＲＲＬ Ｂ－６７３０６。
【0057】
本発明によれば、胞子は、野生型微生物又は遺伝子改変微生物に由来し得る。野生型微生物試料は、好ましくはカルチャーコレクションに基準株として記録されている。遺伝子改変は、ランダム変異導入、例えばＮＴＧ化学的変異導入、ＵＶ照射若しくはトランスポゾン変異導入又は特異的変異導入、例えば異種プラスミドの組み込み若しくは異種核酸を用いた相同組換え及び／或いは部位特異的変異導入、例えばメガヌクレアーゼ、ＴＡＬＥＮ又はＣＲＩＳＰＲ型の変異導入の使用によって行われ得る。例えば、バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）及びパエニバチルス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ）の変異導入の好ましい方法は、国際公開第２０１７１１７３９５号パンフレットに記載されており、その全体が本明細書に組み込まれる。
【0058】
上述のように、本組成物は、好ましくは１種以上のパエニバチルス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ）種の本発明による胞子、より好ましくはパエニバチルス・アルベイ（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ａｌｖｅｉ）、パエニバチルス・マセランス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｍａｃｅｒａｎｓ）、パエニバチルス新種エピフィチカス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｎｏｖ．ｓｐｅｃ ｅｐｉｐｈｙｔｉｃｕｓ）、パエニバチルス・ポリミクサ（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｏｌｙｍｙｘａ）、パエニバチルス・ポリミクサ亜種ポリミクサ（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｏｌｙｍｙｘａ ｓｓｐ．ｐｏｌｙｍｙｘａ）、パエニバチルス・ポリミクサ亜種プランタルム（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｏｌｙｍｙｘａ ｓｓｐ．ｐｌａｎｔａｒｕｍ）又はパエニバチルス・テラエ（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｅｒｒａｅ）のいずれかの本発明による胞子を含み、パエニバチルス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ）種は、最も好ましくはフサリシジン生成株である。このようなパエニバチルス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ）種は、広く研究されており、例えば、粘液の形成を低減させ、それに応じて液相発酵の粘度を低下させるために変異導入されている。したがって、好ましいパエニバチルス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ）株及びその製造方法は、国際公開第２０２０１８１０５３号パンフレット、国際公開第２０１９２２１９８８号パンフレット、国際公開第２０１６１５４２９７号パンフレット、国際公開第２０１７１３７３５１号パンフレット、国際公開第２０１７１３７３５３号パンフレット及び国際公開第２０１６０２０３７１号パンフレットのいずれかに更に記載されている。
【0059】
上記のように、本発明の胞子組成物は、好ましくは、胞子の形態であるか胞子に吸着若しくは付着している、１種以上のバイオ殺有害生物剤を含むか、又は胞子に加えて１種以上のバイオ殺有害生物剤を含む。そのようなバイオ殺有害生物剤は、好ましくは以下から選択される：
Ｌ１）殺真菌活性、殺細菌活性、殺ウイルス活性及び／又は植物防御活性化剤活性を有する微生物殺有害生物剤：アンペロマイセス・クイスクアリス（Ａｍｐｅｌｏｍｙｃｅｓ ｑｕｉｓｑｕａｌｉｓ）、アスペルギルス・フラバス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｆｌａｖｕｓ）、オーレオバシディウム・プルランス（Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍ ｐｕｌｌｕｌａｎｓ）、バチルス・アルティテュディニス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ａｌｔｉｔｕｄｉｎｉｓ）、バチルス・アミロリクエファシエンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）、バチルス・リケニホルミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）、バチルス・メガテリウム（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ）、バチルス・モジャベンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｏｊａｖｅｎｓｉｓ）、バチルス・マイコイデス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｙｃｏｉｄｅｓ）、バチルス・プミルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｕｍｉｌｕｓ）、バチルス・シンプレックス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｉｍｐｌｅｘ）、バチルス・ソリサルシ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｏｌｉｓａｌｓｉ）、バチルス・サブティリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）、バチルス・サブティリス変種アミロリクエファシエンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ ｖａｒ．ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）、カンジダ・オレオフィラ（Ｃａｎｄｉｄａ ｏｌｅｏｐｈｉｌａ）、カンジダ・サイトアナ（Ｃａｎｄｉｄａ ｓａｉｔｏａｎａ）、クラビバクター・ミシガンエンシス（Ｃｌａｖｉｂａｃｔｅｒ ｍｉｃｈｉｇａｎｅｎｓｉｓ）（バクテリオファージ）、コニオチリウム・ミニタンス（Ｃｏｎｉｏｔｈｙｒｉｕｍ ｍｉｎｉｔａｎｓ）、クリフォネクトリア・パラシティカ（Ｃｒｙｐｈｏｎｅｃｔｒｉａ ｐａｒａｓｉｔｉｃａ）、クリプトコックス・アルビダス（Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ａｌｂｉｄｕｓ）、ジロホスホラ・アロペクリ（Ｄｉｌｏｐｈｏｓｐｈｏｒａ ａｌｏｐｅｃｕｒｉ）、フサリウム・オキシスポラム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ）、クロノスタキス・ロゼア品種カテヌラタ（Ｃｌｏｎｏｓｔａｃｈｙｓ ｒｏｓｅａ ｆ．ｃａｔｅｎｕｌａｔａ）（グリオクラディウム・カテヌラタム（Ｇｌｉｏｃｌａｄｉｕｍ ｃａｔｅｎｕｌａｔｕｍ）とも命名されている）、グリオクラディウム・ロゼウム（Ｇｌｉｏｃｌａｄｉｕｍ ｒｏｓｅｕｍ）、ライソバクター・アンティビオティカス（Ｌｙｓｏｂａｃｔｅｒ ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｕｓ）、ライソバクター・エンザイモゲネス（Ｌｙｓｏｂａｃｔｅｒ ｅｎｚｙｍｏｇｅｎｅｓ）、メッシュニコウィア・フルクチコラ（Ｍｅｔｓｃｈｎｉｋｏｗｉａ ｆｒｕｃｔｉｃｏｌａ）、ミクロドキウム・ジメルム（Ｍｉｃｒｏｄｏｃｈｉｕｍ ｄｉｍｅｒｕｍ）、ミクロスフェロプシス・オクラセア（Ｍｉｃｒｏｓｐｈａｅｒｏｐｓｉｓ ｏｃｈｒａｃｅａ）、ムスコドル・アルブス（Ｍｕｓｃｏｄｏｒ ａｌｂｕｓ）、パエニバチルス・アルベイ（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ａｌｖｅｉ）、パエニバチルス・エピフィチカス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｅｐｉｐｈｙｔｉｃｕｓ）、パエニバチルス・ポリミクサ（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｏｌｙｍｙｘａ）、パエニバチルス・アグロメランス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ａｇｇｌｏｍｅｒａｎｓ）、パントエア・バガンス（Ｐａｎｔｏｅａ ｖａｇａｎｓ）、ペニシリウム・ビライアエ（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ ｂｉｌａｉａｅ）、フレビオプシス・ギガンテア（Ｐｈｌｅｂｉｏｐｓｉｓ ｇｉｇａｎｔｅａ）、シュードモナス・クロロラフィス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｃｈｌｏｒｏｒａｐｈｉｓ）、シュードモナス・フルオレッセンス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ）、シュードモナス・プチダ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｐｕｔｉｄａ）、シュードザイマ・フロキュロサ（Ｐｓｅｕｄｏｚｙｍａ ｆｌｏｃｃｕｌｏｓａ）、ピキア・アノマラ（Ｐｉｃｈｉａ ａｎｏｍａｌａ）、フィチウム・オリガンドラム（Ｐｙｔｈｉｕｍ ｏｌｉｇａｎｄｒｕｍ）、スフェロデス・ミコパラシチカ（Ｓｐｈａｅｒｏｄｅｓ ｍｙｃｏｐａｒａｓｉｔｉｃａ）、ストレプトマイセス・グリセオビリディス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｇｒｉｓｅｏｖｉｒｉｄｉｓ）、ストレプトマイセス・ライディカス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｌｙｄｉｃｕｓ）、ストレプトマイセス・バイオラセウスニガー（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｖｉｏｌａｃｅｕｓｎｉｇｅｒ）、タラロマイセス・フラバス（Ｔａｌａｒｏｍｙｃｅｓ ｆｌａｖｕｓ）、トリコデルマ・アスペレルム（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ ａｓｐｅｒｅｌｌｕｍ）、トリコデルマ・アトロビリデ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ ａｔｒｏｖｉｒｉｄｅ）、トリコデルマ・アスペレロイデス（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ ａｓｐｅｒｅｌｌｏｉｄｅｓ）、トリコデルマ・フェルティレ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ ｆｅｒｔｉｌｅ）、トリコデルマ・ガムシー（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ ｇａｍｓｉｉ）、トリコデルマ・ハルマツム（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ ｈａｒｍａｔｕｍ）、トリコデルマ・ハルジアナム（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ ｈａｒｚｉａｎｕｍ）、トリコデルマ・ポリスポルム（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ ｐｏｌｙｓｐｏｒｕｍ）、トリコデルマ・ストロマチカム（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ ｓｔｒｏｍａｔｉｃｕｍ）、トリコデルマ・ビレンス（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ ｖｉｒｅｎｓ）、トリコデルマ・ビリデ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ ｖｉｒｉｄｅ）、チフラ・ファコリーザ（Ｔｙｐｈｕｌａ ｐｈａｃｏｒｒｈｉｚａ）、ウロクラディウム・オウデマンシ（Ｕｌｏｃｌａｄｉｕｍ ｏｕｄｅｍａｎｓｉｉ）、バーティシリウム・ダリア（Ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ ｄａｈｌｉａ）、ズッキーニ黄色モザイクウイルス（無毒株）；
Ｌ２）殺真菌活性、殺細菌活性、殺ウイルス活性及び／又は植物防御活性化剤活性を有する生化学的殺有害生物剤：キトサン（加水分解物）、フサリシジン、パエニセリン（ｐａｅｎｉｓｅｒｉｎｅ）、パエニプロリキシン（ｐａｅｎｉｐｒｏｌｉｘｉｎｅ）、ハーピンタンパク質、ラミナリン、メンハーデン魚油、ナタマイシン、プラムポックスウイルスコートタンパク質、重炭酸カリウム又は重炭酸ナトリウム、オオイタドリ（Ｒｅｙｎｏｕｔｒｉａ ｓａｃｈａｌｉｎｅｎｓｉｓ）抽出物、サリチル酸、ティーツリー油（メラレウカ・アルテルニフォリア（Ｍｅｌａｌｅｕｃａ ａｌｔｅｒｎｉｆｏｌｉａ）抽出物）；
Ｌ３）殺虫活性、殺ダニ活性、殺軟体動物活性及び／又は殺線虫活性を有する微生物殺有害生物剤：アグロバクテリウム・ラジオバクター（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｒａｄｉｏｂａｃｔｅｒ）、バチルス・セレウス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓ）、バチルス・ファーマス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｉｒｍｕｓ）、バチルス・サブティリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）、バチルス・リケニホルミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）、バチルス・チューリンゲンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）、バチルス・チューリンゲンシス亜種アイザワイ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ ｓｓｐ．ａｉｚａｗａｉ）、バチルス・チューリンゲンシス亜種イスラエレンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ ｓｓｐ．ｉｓｒａｅｌｅｎｓｉｓ）、バチルス・チューリンゲンシス亜種ガレリアエ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ ｓｓｐ．ｇａｌｌｅｒｉａｅ）、バチルス・チューリンゲンシス亜種クルスタキ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ ｓｓｐ．ｋｕｒｓｔａｋｉ）、バチルス・チューリンゲンシス亜種テネブリオニス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ ｓｓｐ．ｔｅｎｅｂｒｉｏｎｉｓ）、ボーベリア・バッシアーナ（Ｂｅａｕｖｅｒｉａ ｂａｓｓｉａｎａ）、ボーベリア・ブロングニアルティ（Ｂｅａｕｖｅｒｉａ ｂｒｏｎｇｎｉａｒｔｉｉ）、バークホルデリア・リノジェンシス（Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ ｒｉｎｏｊｅｎｓｉｓ）、クロモバクテリウム・サブツガエ（Ｃｈｒｏｍｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｓｕｂｔｓｕｇａｅ）、シディア・ポモネラ（Ｃｙｄｉａ ｐｏｍｏｎｅｌｌａ）顆粒ウイルス（ＣｐＧＶ）、クリプトフレビア・ロイコトレタ（Ｃｒｙｐｔｏｐｈｌｅｂｉａ ｌｅｕｃｏｔｒｅｔａ）顆粒ウイルス（ＣｒｌｅＧＶ）、フラボバクテリウム属種（Ｆｌａｖｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｓｐｐ．）、オオタバコガ（Ｈｅｌｉｃｏｖｅｒｐａ ａｒｍｉｇｅｒａ）核多角体病ウイルス（ＨｅａｒＮＰＶ）、ヘテロラブディティス・バクテリオフォラ（Ｈｅｔｅｒｏｒｈａｂｄｉｔｉｓ ｂａｃｔｅｒｉｏｐｈｏｒａ）、イサリア・フモソロセア（Ｉｓａｒｉａ ｆｕｍｏｓｏｒｏｓｅａ）、レカニシリウム・ロンギスポルム（Ｌｅｃａｎｉｃｉｌｌｉｕｍ ｌｏｎｇｉｓｐｏｒｕｍ）、レカニシリウム・ムスカリウム（Ｌｅｃａｎｉｃｉｌｌｉｕｍ ｍｕｓｃａｒｉｕｍ）、メタリジウム・アニソプリエ（Ｍｅｔａｒｈｉｚｉｕｍ ａｎｉｓｏｐｌｉａｅ）、メタリジウム・アニソプリエ変種アニソプリエ（Ｍｅｔａｒｈｉｚｉｕｍ ａｎｉｓｏｐｌｉａｅ ｖａｒ．ａｎｉｓｏｐｌｉａｅ）、メタリジウム・アニソプリエ変種アクリダム（Ｍｅｔａｒｈｉｚｉｕｍ ａｎｉｓｏｐｌｉａｅ ｖａｒ．ａｃｒｉｄｕｍ）、ノムラエア・リレイ（Ｎｏｍｕｒａｅａ ｒｉｌｅｙｉ）、ペシロマイセス・リラシヌス（Ｐａｅｃｉｌｏｍｙｃｅｓ ｌｉｌａｃｉｎｕｓ）、パエニバチルス・ポピリアエ（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｏｐｉｌｌｉａｅ）、パスツリア・ニシザワエ（Ｐａｓｔｅｕｒｉａ ｎｉｓｈｉｚａｗａｅ）、パスツリア・ペネトランス（Ｐａｓｔｅｕｒｉａ ｐｅｎｅｔｒａｎｓ）、パスツリア・ラモサ（Ｐａｓｔｅｕｒｉａ ｒａｍｏｓａ）、パスツリア・トルネア（Ｐａｓｔｅｕｒｉａ ｔｈｏｒｎｅａ）、パスツリア・ウスガエ（Ｐａｓｔｅｕｒｉａ ｕｓｇａｅ）、ファスマラブディティス・ヘルマフロディータ（Ｐｈａｓｍａｒｈａｂｄｉｔｉｓ ｈｅｒｍａｐｈｒｏｄｉｔａ）、シュードモナス・フルオレッセンス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ）、スポドプテラ・リトラリス（Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ ｌｉｔｔｏｒａｌｉｓ）核多角体病ウイルス（ＳｐｌｉＮＰＶ）、ステイネルネマ・カルポカプサエ（Ｓｔｅｉｎｅｒｎｅｍａ ｃａｒｐｏｃａｐｓａｅ）、ステイネルネマ・フェルティアエ（Ｓｔｅｉｎｅｒｎｅｍａ ｆｅｌｔｉａｅ）、ステイネルネマ・クラウセイ（Ｓｔｅｉｎｅｒｎｅｍａ ｋｒａｕｓｓｅｉ）、ステイネルネマ・リオブラベ（Ｓｔｅｉｎｅｒｎｅｍａ ｒｉｏｂｒａｖｅ）、ストレプトマイセス・ガルブス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｇａｌｂｕｓ）、ストレプトマイセス・ミクロフラブス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｍｉｃｒｏｆｌａｖｕｓ）、ペシロマイセス・リラシヌス（Ｐａｅｃｉｌｏｍｙｃｅｓ ｌｉｌａｃｉｎｕｓ）；
Ｌ４）殺虫活性、殺ダニ活性、殺軟体動物活性、フェロモン活性及び／又は殺線虫活性を有する生化学的殺有害生物剤；Ｌ－カルボン、シトラール、（Ｅ，Ｚ）－７，９－ドデカジエン－１－イルアセテート、ギ酸エチル、（Ｅ，Ｚ）－２，４－エチルデカジエノエート（ペアーエステル）、（Ｚ，Ｚ，Ｅ）－７，１１，１３－ヘキサデカトリエナール、酪酸ヘプチル、ミリスチン酸イソプロピル、ラバニュリルセネシオエート（ｌａｖａｎｕｌｙｌ ｓｅｎｅｃｉｏａｔｅ）、ｃｉｓ－ジャスモン、２－メチル１－ブタノール、メチルオイゲノール、ジャスモン酸メチル、（Ｅ，Ｚ）－２，１３－オクタデカジエン－１－オール、（Ｅ，Ｚ）－２，１３－オクタデカジエン－１－オールアセテート、（Ｅ，Ｚ）－３，１３－オクタデカジエン－１－オール、Ｒ－１－オクテン－３－オール、ペンタテルマノン（ｐｅｎｔａｔｅｒｍａｎｏｎｅ）、ケイ酸カリウム、ソルビトールアクタノエート（ｓｏｒｂｉｔｏｌ ａｃｔａｎｏａｔｅ）、（Ｅ，Ｚ，Ｚ）－３，８，１１－テトラデカトリエニルアセテート、（Ｚ，Ｅ）－９，１２－テトラデカジエン－１－イルアセテート、Ｚ－７－テトラデセン－２－オン、Ｚ－９－テトラデセン－１－イルアセテート、Ｚ－１１－テトラデセナール、Ｚ－１１－テトラデセン－１－オール、アカシア・ネグラ（Ａｃａｃｉａ ｎｅｇｒａ）抽出物、グレープフルーツの種子及び果肉の抽出物、アリタソウ（Ｃｈｅｎｏｐｏｄｉｕｍ ａｍｂｒｏｓｉｏｉｄｅｓ）抽出物、イヌハッカ油、ニーム油、キラヤ（Ｑｕｉｌｌａｙ）抽出物、タゲテス（Ｔａｇｅｔｅｓ）油；
Ｌ５）植物ストレス低減活性、植物成長調節剤活性、植物成長促進活性及び／又は収量増大活性を有する微生物殺有害生物剤：アゾスピリルム・アマゾネンス（Ａｚｏｓｐｉｒｉｌｌｕｍ ａｍａｚｏｎｅｎｓｅ）、アゾスピリルム・ブラジレンス（Ａｚｏｓｐｉｒｉｌｌｕｍ ｂｒａｓｉｌｅｎｓｅ）、アゾスピリルム・リポフェルム（Ａｚｏｓｐｉｒｉｌｌｕｍ ｌｉｐｏｆｅｒｕｍ）、アゾスピリルム・イラケンス（Ａｚｏｓｐｉｒｉｌｌｕｍ ｉｒａｋｅｎｓｅ）、アゾスピリルム・ハロプラエフェレンス（Ａｚｏｓｐｉｒｉｌｌｕｍ ｈａｌｏｐｒａｅｆｅｒｅｎｓ）、ブラディリゾビウム・エルカニ（Ｂｒａｄｙｒｈｉｚｏｂｉｕｍ ｅｌｋａｎｉｉ）、ブラディリゾビウム・ジャポニクム（Ｂｒａｄｙｒｈｉｚｏｂｉｕｍ ｊａｐｏｎｉｃｕｍ）、ブラディリゾビウム属種（Ｂｒａｄｙｒｈｉｚｏｂｉｕｍ ｓｐｐ．）、ブラディリゾビウム・リアオニンゲンス（Ｂｒａｄｙｒｈｉｚｏｂｉｕｍ ｌｉａｏｎｉｎｇｅｎｓｅ）、ブラディリゾビウム・ルピニー（Ｂｒａｄｙｒｈｉｚｏｂｉｕｍ ｌｕｐｉｎｉ）、デルフチア・アシドボランス（Ｄｅｌｆｔｉａ ａｃｉｄｏｖｏｒａｎｓ）、グロムス・イントララディセス（Ｇｌｏｍｕｓ ｉｎｔｒａｒａｄｉｃｅｓ）、メソリゾビウム属種（Ｍｅｓｏｒｈｉｚｏｂｉｕｍ ｓｐｐ．）、メソリゾビウム・シセリ（Ｍｅｓｏｒｈｉｚｏｂｉｕｍ ｃｉｃｅｒｉ）、リゾビウム・レグミノサーラム次亜種ファセオリ（Ｒｈｉｚｏｂｉｕｍ ｌｅｇｕｍｉｎｏｓａｒｕｍ ｂｖ．ｐｈａｓｅｏｌｉ）、リゾビウム・レグミノサーラム次亜種トリフォリ（Ｒｈｉｚｏｂｉｕｍ ｌｅｇｕｍｉｎｏｓａｒｕｍ ｂｖ．ｔｒｉｆｏｌｉｉ）、リゾビウム・レグミノサーラム次亜種ビシアエ（Ｒｈｉｚｏｂｉｕｍ ｌｅｇｕｍｉｎｏｓａｒｕｍ ｂｖ．ｖｉｃｉａｅ）、リゾビウム・トロピシ（Ｒｈｉｚｏｂｉｕｍ ｔｒｏｐｉｃｉ）、シノリゾビウム・メリロッティ（Ｓｉｎｏｒｈｉｚｏｂｉｕｍ ｍｅｌｉｌｏｔｉ）、シノリゾビウム・メディカエ（Ｓｉｎｏｒｈｉｚｏｂｉｕｍ ｍｅｄｉｃａｅ）；
Ｌ６）植物ストレス低減活性、植物成長調節剤活性及び／又は植物収量増大活性を有する生化学的殺有害生物剤：アブシジン酸、ケイ酸アルミニウム（カオリン）、３－デセン－２－オン、ホルモノネクチン（ｆｏｒｍｏｎｏｎｅｃｔｉｎ）、ゲニステイン、ヘスペレチン、ホモブラッシノリド、フミン酸塩、ジャスモン酸メチル、ｃｉｓ－ジャスモン、リゾホスファチジルエタンラミン（ｌｙｓｏｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌ ｅｔｈａｎｌａｍｉｎｅ）、ナリンゲニン、高分子ポリヒドロキシ酸、サリチル酸、アスコフィルム・ノドサム（Ａｓｃｏｐｈｙｌｌｕｍ ｎｏｄｏｓｕｍ）（ノルウェーケルプ、ブラウンケルプ）抽出物及びエクロニア・マキシマ（Ｅｃｋｌｏｎｉａ ｍａｘｉｍａ）（ケルプ）抽出物、ゼオライト（アルミノケイ酸塩）、ブドウ種子抽出物。
Ｌ１）殺真菌活性、殺細菌活性、殺ウイルス活性及び／又は植物防御活性化剤活性を有する微生物殺有害生物剤：アンペロマイセス・クイスクアリス（Ａｍｐｅｌｏｍｙｃｅｓ ｑｕｉｓｑｕａｌｉｓ）、アスペルギルス・フラバス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｆｌａｖｕｓ）、オーレオバシディウム・プルランス（Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍ ｐｕｌｌｕｌａｎｓ）、バチルス・アルティテュディニス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ａｌｔｉｔｕｄｉｎｉｓ）、バチルス・アミロリクエファシエンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）、バチルス・リケニホルミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）、バチルス・メガテリウム（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ）、バチルス・モジャベンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｏｊａｖｅｎｓｉｓ）、バチルス・マイコイデス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｙｃｏｉｄｅｓ）、バチルス・プミルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｕｍｉｌｕｓ）、バチルス・シンプレックス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｉｍｐｌｅｘ）、バチルス・ソリサルシ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｏｌｉｓａｌｓｉ）、バチルス・サブティリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）、バチルス・サブティリス変種アミロリクエファシエンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ ｖａｒ．ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）、カンジダ・オレオフィラ（Ｃａｎｄｉｄａ ｏｌｅｏｐｈｉｌａ）、カンジダ・サイトアナ（Ｃａｎｄｉｄａ ｓａｉｔｏａｎａ）、クラビバクター・ミシガンエンシス（Ｃｌａｖｉｂａｃｔｅｒ ｍｉｃｈｉｇａｎｅｎｓｉｓ）（バクテリオファージ）、コニオチリウム・ミニタンス（Ｃｏｎｉｏｔｈｙｒｉｕｍ ｍｉｎｉｔａｎｓ）、クリフォネクトリア・パラシティカ（Ｃｒｙｐｈｏｎｅｃｔｒｉａ ｐａｒａｓｉｔｉｃａ）、クリプトコックス・アルビダス（Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ａｌｂｉｄｕｓ）、ジロホスホラ・アロペクリ（Ｄｉｌｏｐｈｏｓｐｈｏｒａ ａｌｏｐｅｃｕｒｉ）、フサリウム・オキシスポラム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ）、クロノスタキス・ロゼア品種カテヌラタ（Ｃｌｏｎｏｓｔａｃｈｙｓ ｒｏｓｅａ ｆ．ｃａｔｅｎｕｌａｔａ）（グリオクラディウム・カテヌラタム（Ｇｌｉｏｃｌａｄｉｕｍ ｃａｔｅｎｕｌａｔｕｍ）とも命名されている）、グリオクラディウム・ロゼウム（Ｇｌｉｏｃｌａｄｉｕｍ ｒｏｓｅｕｍ）、ライソバクター・アンティビオティカス（Ｌｙｓｏｂａｃｔｅｒ ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｕｓ）、ライソバクター・エンザイモゲネス（Ｌｙｓｏｂａｃｔｅｒ ｅｎｚｙｍｏｇｅｎｅｓ）、メッシュニコウィア・フルクチコラ（Ｍｅｔｓｃｈｎｉｋｏｗｉａ ｆｒｕｃｔｉｃｏｌａ）、ミクロドキウム・ジメルム（Ｍｉｃｒｏｄｏｃｈｉｕｍ ｄｉｍｅｒｕｍ）、ミクロスフェロプシス・オクラセア（Ｍｉｃｒｏｓｐｈａｅｒｏｐｓｉｓ ｏｃｈｒａｃｅａ）、ムスコドル・アルブス（Ｍｕｓｃｏｄｏｒ ａｌｂｕｓ）、パエニバチルス・アルベイ（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ａｌｖｅｉ）、パエニバチルス・エピフィチカス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｅｐｉｐｈｙｔｉｃｕｓ）、パエニバチルス・ポリミクサ（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｏｌｙｍｙｘａ）、パエニバチルス・アグロメランス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ａｇｇｌｏｍｅｒａｎｓ）、パントエア・バガンス（Ｐａｎｔｏｅａ ｖａｇａｎｓ）、ペニシリウム・ビライアエ（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ ｂｉｌａｉａｅ）、フレビオプシス・ギガンテア（Ｐｈｌｅｂｉｏｐｓｉｓ ｇｉｇａｎｔｅａ）、シュードモナス・クロロラフィス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｃｈｌｏｒｏｒａｐｈｉｓ）、シュードモナス・フルオレッセンス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ）、シュードモナス・プチダ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｐｕｔｉｄａ）、シュードザイマ・フロキュロサ（Ｐｓｅｕｄｏｚｙｍａ ｆｌｏｃｃｕｌｏｓａ）、ピキア・アノマラ（Ｐｉｃｈｉａ ａｎｏｍａｌａ）、フィチウム・オリガンドラム（Ｐｙｔｈｉｕｍ ｏｌｉｇａｎｄｒｕｍ）、スフェロデス・ミコパラシチカ（Ｓｐｈａｅｒｏｄｅｓ ｍｙｃｏｐａｒａｓｉｔｉｃａ）、ストレプトマイセス・グリセオビリディス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｇｒｉｓｅｏｖｉｒｉｄｉｓ）、ストレプトマイセス・ライディカス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｌｙｄｉｃｕｓ）、ストレプトマイセス・バイオラセウスニガー（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｖｉｏｌａｃｅｕｓｎｉｇｅｒ）、タラロマイセス・フラバス（Ｔａｌａｒｏｍｙｃｅｓ ｆｌａｖｕｓ）、トリコデルマ・アスペレルム（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ ａｓｐｅｒｅｌｌｕｍ）、トリコデルマ・アトロビリデ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ ａｔｒｏｖｉｒｉｄｅ）、トリコデルマ・アスペレロイデス（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ ａｓｐｅｒｅｌｌｏｉｄｅｓ）、トリコデルマ・フェルティレ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ ｆｅｒｔｉｌｅ）、トリコデルマ・ガムシー（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ ｇａｍｓｉｉ）、トリコデルマ・ハルマツム（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ ｈａｒｍａｔｕｍ）、トリコデルマ・ハルジアナム（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ ｈａｒｚｉａｎｕｍ）、トリコデルマ・ポリスポルム（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ ｐｏｌｙｓｐｏｒｕｍ）、トリコデルマ・ストロマチカム（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ ｓｔｒｏｍａｔｉｃｕｍ）、トリコデルマ・ビレンス（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ ｖｉｒｅｎｓ）、トリコデルマ・ビリデ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ ｖｉｒｉｄｅ）、チフラ・ファコリーザ（Ｔｙｐｈｕｌａ ｐｈａｃｏｒｒｈｉｚａ）、ウロクラディウム・オウデマンシ（Ｕｌｏｃｌａｄｉｕｍ ｏｕｄｅｍａｎｓｉｉ）、バーティシリウム・ダリア（Ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ ｄａｈｌｉａ）、ズッキーニ黄色モザイクウイルス（無毒株）；
Ｌ２）殺真菌活性、殺細菌活性、殺ウイルス活性及び／又は植物防御活性化剤活性を有する生化学的殺有害生物剤：キトサン（加水分解物）、フサリシジン、パエニセリン（ｐａｅｎｉｓｅｒｉｎｅ）、パエニプロリキシン（ｐａｅｎｉｐｒｏｌｉｘｉｎｅ）、ハーピンタンパク質、ラミナリン、メンハーデン魚油、ナタマイシン、プラムポックスウイルスコートタンパク質、重炭酸カリウム又は重炭酸ナトリウム、オオイタドリ（Ｒｅｙｎｏｕｔｒｉａ ｓａｃｈａｌｉｎｅｎｓｉｓ）抽出物、サリチル酸、ティーツリー油（メラレウカ・アルテルニフォリア（Ｍｅｌａｌｅｕｃａ ａｌｔｅｒｎｉｆｏｌｉａ）抽出物）；
Ｌ３）殺虫活性、殺ダニ活性、殺軟体動物活性及び／又は殺線虫活性を有する微生物殺有害生物剤：アグロバクテリウム・ラジオバクター（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｒａｄｉｏｂａｃｔｅｒ）、バチルス・セレウス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓ）、バチルス・ファーマス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｉｒｍｕｓ）、バチルス・サブティリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）、バチルス・リケニホルミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）、バチルス・チューリンゲンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）、バチルス・チューリンゲンシス亜種アイザワイ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ ｓｓｐ．ａｉｚａｗａｉ）、バチルス・チューリンゲンシス亜種イスラエレンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ ｓｓｐ．ｉｓｒａｅｌｅｎｓｉｓ）、バチルス・チューリンゲンシス亜種ガレリアエ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ ｓｓｐ．ｇａｌｌｅｒｉａｅ）、バチルス・チューリンゲンシス亜種クルスタキ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ ｓｓｐ．ｋｕｒｓｔａｋｉ）、バチルス・チューリンゲンシス亜種テネブリオニス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ ｓｓｐ．ｔｅｎｅｂｒｉｏｎｉｓ）、ボーベリア・バッシアーナ（Ｂｅａｕｖｅｒｉａ ｂａｓｓｉａｎａ）、ボーベリア・ブロングニアルティ（Ｂｅａｕｖｅｒｉａ ｂｒｏｎｇｎｉａｒｔｉｉ）、バークホルデリア・リノジェンシス（Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ ｒｉｎｏｊｅｎｓｉｓ）、クロモバクテリウム・サブツガエ（Ｃｈｒｏｍｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｓｕｂｔｓｕｇａｅ）、シディア・ポモネラ（Ｃｙｄｉａ ｐｏｍｏｎｅｌｌａ）顆粒ウイルス（ＣｐＧＶ）、クリプトフレビア・ロイコトレタ（Ｃｒｙｐｔｏｐｈｌｅｂｉａ ｌｅｕｃｏｔｒｅｔａ）顆粒ウイルス（ＣｒｌｅＧＶ）、フラボバクテリウム属種（Ｆｌａｖｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｓｐｐ．）、オオタバコガ（Ｈｅｌｉｃｏｖｅｒｐａ ａｒｍｉｇｅｒａ）核多角体病ウイルス（ＨｅａｒＮＰＶ）、ヘテロラブディティス・バクテリオフォラ（Ｈｅｔｅｒｏｒｈａｂｄｉｔｉｓ ｂａｃｔｅｒｉｏｐｈｏｒａ）、イサリア・フモソロセア（Ｉｓａｒｉａ ｆｕｍｏｓｏｒｏｓｅａ）、レカニシリウム・ロンギスポルム（Ｌｅｃａｎｉｃｉｌｌｉｕｍ ｌｏｎｇｉｓｐｏｒｕｍ）、レカニシリウム・ムスカリウム（Ｌｅｃａｎｉｃｉｌｌｉｕｍ ｍｕｓｃａｒｉｕｍ）、メタリジウム・アニソプリエ（Ｍｅｔａｒｈｉｚｉｕｍ ａｎｉｓｏｐｌｉａｅ）、メタリジウム・アニソプリエ変種アニソプリエ（Ｍｅｔａｒｈｉｚｉｕｍ ａｎｉｓｏｐｌｉａｅ ｖａｒ．ａｎｉｓｏｐｌｉａｅ）、メタリジウム・アニソプリエ変種アクリダム（Ｍｅｔａｒｈｉｚｉｕｍ ａｎｉｓｏｐｌｉａｅ ｖａｒ．ａｃｒｉｄｕｍ）、ノムラエア・リレイ（Ｎｏｍｕｒａｅａ ｒｉｌｅｙｉ）、ペシロマイセス・リラシヌス（Ｐａｅｃｉｌｏｍｙｃｅｓ ｌｉｌａｃｉｎｕｓ）、パエニバチルス・ポピリアエ（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｏｐｉｌｌｉａｅ）、パスツリア・ニシザワエ（Ｐａｓｔｅｕｒｉａ ｎｉｓｈｉｚａｗａｅ）、パスツリア・ペネトランス（Ｐａｓｔｅｕｒｉａ ｐｅｎｅｔｒａｎｓ）、パスツリア・ラモサ（Ｐａｓｔｅｕｒｉａ ｒａｍｏｓａ）、パスツリア・トルネア（Ｐａｓｔｅｕｒｉａ ｔｈｏｒｎｅａ）、パスツリア・ウスガエ（Ｐａｓｔｅｕｒｉａ ｕｓｇａｅ）、ファスマラブディティス・ヘルマフロディータ（Ｐｈａｓｍａｒｈａｂｄｉｔｉｓ ｈｅｒｍａｐｈｒｏｄｉｔａ）、シュードモナス・フルオレッセンス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ）、スポドプテラ・リトラリス（Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ ｌｉｔｔｏｒａｌｉｓ）核多角体病ウイルス（ＳｐｌｉＮＰＶ）、ステイネルネマ・カルポカプサエ（Ｓｔｅｉｎｅｒｎｅｍａ ｃａｒｐｏｃａｐｓａｅ）、ステイネルネマ・フェルティアエ（Ｓｔｅｉｎｅｒｎｅｍａ ｆｅｌｔｉａｅ）、ステイネルネマ・クラウセイ（Ｓｔｅｉｎｅｒｎｅｍａ ｋｒａｕｓｓｅｉ）、ステイネルネマ・リオブラベ（Ｓｔｅｉｎｅｒｎｅｍａ ｒｉｏｂｒａｖｅ）、ストレプトマイセス・ガルブス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｇａｌｂｕｓ）、ストレプトマイセス・ミクロフラブス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｍｉｃｒｏｆｌａｖｕｓ）、ペシロマイセス・リラシヌス（Ｐａｅｃｉｌｏｍｙｃｅｓ ｌｉｌａｃｉｎｕｓ）；
Ｌ４）殺虫活性、殺ダニ活性、殺軟体動物活性、フェロモン活性及び／又は殺線虫活性を有する生化学的殺有害生物剤；Ｌ－カルボン、シトラール、（Ｅ，Ｚ）－７，９－ドデカジエン－１－イルアセテート、ギ酸エチル、（Ｅ，Ｚ）－２，４－エチルデカジエノエート（ペアーエステル）、（Ｚ，Ｚ，Ｅ）－７，１１，１３－ヘキサデカトリエナール、酪酸ヘプチル、ミリスチン酸イソプロピル、ラバニュリルセネシオエート（ｌａｖａｎｕｌｙｌ ｓｅｎｅｃｉｏａｔｅ）、ｃｉｓ－ジャスモン、２－メチル１－ブタノール、メチルオイゲノール、ジャスモン酸メチル、（Ｅ，Ｚ）－２，１３－オクタデカジエン－１－オール、（Ｅ，Ｚ）－２，１３－オクタデカジエン－１－オールアセテート、（Ｅ，Ｚ）－３，１３－オクタデカジエン－１－オール、Ｒ－１－オクテン－３－オール、ペンタテルマノン（ｐｅｎｔａｔｅｒｍａｎｏｎｅ）、ケイ酸カリウム、ソルビトールアクタノエート（ｓｏｒｂｉｔｏｌ ａｃｔａｎｏａｔｅ）、（Ｅ，Ｚ，Ｚ）－３，８，１１－テトラデカトリエニルアセテート、（Ｚ，Ｅ）－９，１２－テトラデカジエン－１－イルアセテート、Ｚ－７－テトラデセン－２－オン、Ｚ－９－テトラデセン－１－イルアセテート、Ｚ－１１－テトラデセナール、Ｚ－１１－テトラデセン－１－オール、アカシア・ネグラ（Ａｃａｃｉａ ｎｅｇｒａ）抽出物、グレープフルーツの種子及び果肉の抽出物、アリタソウ（Ｃｈｅｎｏｐｏｄｉｕｍ ａｍｂｒｏｓｉｏｉｄｅｓ）抽出物、イヌハッカ油、ニーム油、キラヤ（Ｑｕｉｌｌａｙ）抽出物、タゲテス（Ｔａｇｅｔｅｓ）油；
Ｌ５）植物ストレス低減活性、植物成長調節剤活性、植物成長促進活性及び／又は収量増大活性を有する微生物殺有害生物剤：アゾスピリルム・アマゾネンス（Ａｚｏｓｐｉｒｉｌｌｕｍ ａｍａｚｏｎｅｎｓｅ）、アゾスピリルム・ブラジレンス（Ａｚｏｓｐｉｒｉｌｌｕｍ ｂｒａｓｉｌｅｎｓｅ）、アゾスピリルム・リポフェルム（Ａｚｏｓｐｉｒｉｌｌｕｍ ｌｉｐｏｆｅｒｕｍ）、アゾスピリルム・イラケンス（Ａｚｏｓｐｉｒｉｌｌｕｍ ｉｒａｋｅｎｓｅ）、アゾスピリルム・ハロプラエフェレンス（Ａｚｏｓｐｉｒｉｌｌｕｍ ｈａｌｏｐｒａｅｆｅｒｅｎｓ）、ブラディリゾビウム・エルカニ（Ｂｒａｄｙｒｈｉｚｏｂｉｕｍ ｅｌｋａｎｉｉ）、ブラディリゾビウム・ジャポニクム（Ｂｒａｄｙｒｈｉｚｏｂｉｕｍ ｊａｐｏｎｉｃｕｍ）、ブラディリゾビウム属種（Ｂｒａｄｙｒｈｉｚｏｂｉｕｍ ｓｐｐ．）、ブラディリゾビウム・リアオニンゲンス（Ｂｒａｄｙｒｈｉｚｏｂｉｕｍ ｌｉａｏｎｉｎｇｅｎｓｅ）、ブラディリゾビウム・ルピニー（Ｂｒａｄｙｒｈｉｚｏｂｉｕｍ ｌｕｐｉｎｉ）、デルフチア・アシドボランス（Ｄｅｌｆｔｉａ ａｃｉｄｏｖｏｒａｎｓ）、グロムス・イントララディセス（Ｇｌｏｍｕｓ ｉｎｔｒａｒａｄｉｃｅｓ）、メソリゾビウム属種（Ｍｅｓｏｒｈｉｚｏｂｉｕｍ ｓｐｐ．）、メソリゾビウム・シセリ（Ｍｅｓｏｒｈｉｚｏｂｉｕｍ ｃｉｃｅｒｉ）、リゾビウム・レグミノサーラム次亜種ファセオリ（Ｒｈｉｚｏｂｉｕｍ ｌｅｇｕｍｉｎｏｓａｒｕｍ ｂｖ．ｐｈａｓｅｏｌｉ）、リゾビウム・レグミノサーラム次亜種トリフォリ（Ｒｈｉｚｏｂｉｕｍ ｌｅｇｕｍｉｎｏｓａｒｕｍ ｂｖ．ｔｒｉｆｏｌｉｉ）、リゾビウム・レグミノサーラム次亜種ビシアエ（Ｒｈｉｚｏｂｉｕｍ ｌｅｇｕｍｉｎｏｓａｒｕｍ ｂｖ．ｖｉｃｉａｅ）、リゾビウム・トロピシ（Ｒｈｉｚｏｂｉｕｍ ｔｒｏｐｉｃｉ）、シノリゾビウム・メリロッティ（Ｓｉｎｏｒｈｉｚｏｂｉｕｍ ｍｅｌｉｌｏｔｉ）、シノリゾビウム・メディカエ（Ｓｉｎｏｒｈｉｚｏｂｉｕｍ ｍｅｄｉｃａｅ）；
Ｌ６）植物ストレス低減活性、植物成長調節剤活性及び／又は植物収量増大活性を有する生化学的殺有害生物剤：アブシジン酸、ケイ酸アルミニウム（カオリン）、３－デセン－２－オン、ホルモノネクチン（ｆｏｒｍｏｎｏｎｅｃｔｉｎ）、ゲニステイン、ヘスペレチン、ホモブラッシノリド、フミン酸塩、ジャスモン酸メチル、ｃｉｓ－ジャスモン、リゾホスファチジルエタンラミン（ｌｙｓｏｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌ ｅｔｈａｎｌａｍｉｎｅ）、ナリンゲニン、高分子ポリヒドロキシ酸、サリチル酸、アスコフィルム・ノドサム（Ａｓｃｏｐｈｙｌｌｕｍ ｎｏｄｏｓｕｍ）（ノルウェーケルプ、ブラウンケルプ）抽出物及びエクロニア・マキシマ（Ｅｃｋｌｏｎｉａ ｍａｘｉｍａ）（ケルプ）抽出物、ゼオライト（アルミノケイ酸塩）、ブドウ種子抽出物。
【0060】
少なくとも１種のパエニバチルス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ）株を含む農業に使用するための例示的な組成物は、国際公開第２０２００６４４８０号パンフレット、国際公開第２０１９０１２３７９号パンフレット、国際公開第２０１８２０２７３７号パンフレット、国際公開第２０１７１３７３５１号パンフレット、国際公開第２０１７１３７３５３号パンフレット、国際公開第２０１７０９３１６３号パンフレット、国際公開第２０１６２０２６５６号パンフレット、国際公開第２０１６１４２４５６号パンフレット、国際公開第２０１６１２８２３９号パンフレット、国際公開第２０１６０７１１６４号パンフレット、国際公開第２０１６０５９２４０号パンフレット、国際公開第２０１６０３４３５３号パンフレット、国際公開第２０１６０２０３７１号パンフレット、国際公開第２０１５１８０９８３号パンフレット、国際公開第２０１５１８０９８５号パンフレット、国際公開第２０１５１８１０３５号パンフレット、国際公開第２０１５１８０９８７号パンフレット、国際公開第２０１５１８１００８号パンフレット、国際公開第２０１５１８０９９９号パンフレット、国際公開第２０１５１８１００９号パンフレット、国際公開第２０１５１７７０２１号パンフレット、国際公開第２０１５１０４６９８号パンフレット、国際公開第２０１５０９１９６７号パンフレット、国際公開第２０１５０５５７５２号パンフレット、国際公開第２０１５０５５７５５号パンフレット、国際公開第２０１５０５５７５７号パンフレット、国際公開第２０１５０１１６１５号パンフレット、国際公開第２０１５００３９０８号パンフレット、国際公開第２０１４２０２４２１号パンフレット、国際公開第２０１４１４７５２８号パンフレット、国際公開第２０１４０９５９３２号パンフレット、国際公開第２０１４０９５９９４号パンフレット、国際公開第２０１４０８６８５０号パンフレット、国際公開第２０１４０８６８５１号パンフレット、国際公開第２０１４０８６８５３号パンフレット、国際公開第２０１４０８６８５４号パンフレット、国際公開第２０１４０８６８５６号パンフレット、国際公開第２０１４０８６８４８号パンフレット、国際公開第２０１４０７６６６３号パンフレット、国際公開第２０１４０５６７８０号パンフレット、国際公開第２０１４０５３４０４号パンフレット、国際公開第２０１４０５３４０５号パンフレット及び国際公開第２０１４０５３３９８号パンフレット、国際公開第２０２０１３１４１３号パンフレット、国際公開第２０２０１２６９８０号パンフレット、国際公開第２０２００９２０１７号パンフレット、国際公開第２０２００９２０２２号パンフレット、国際公開第２０２００６５０２５号パンフレット、国際公開第２０２００６１１４０号パンフレット、国際公開第２０２００５６０７０号パンフレット、国際公開第２０２００４３６５０号パンフレット、国際公開第２０１９２２２２５３号パンフレット、国際公開第２０１９１０４１７３号パンフレット、国際公開第２０１９０９４３６８号パンフレット、国際公開第２０１９０７６８９１号パンフレット、国際公開第２０１８０２６７７３号パンフレット、国際公開第２０１８０２６７７４号パンフレット、国際公開第２０１８０２６７７０号パンフレット、国際公開第２０１７１３２３３０号パンフレット、国際公開第２０１６０１８８８７号パンフレット、国際公開第２０１６００１１２５号パンフレット、国際公開第２０１５００４２６０号パンフレット、国際公開第２０１４２０１３２６号パンフレット、国際公開第２０１４２０１３２７号パンフレット、国際公開第２０１４１７０３６４号パンフレット、国際公開第２０１４１５２１３２号パンフレット、国際公開第２０１４１５２１１５号パンフレット、国際公開第２０１４１２７１９５号パンフレット、国際公開第２０１４０８６７５２号パンフレット、国際公開第２０１４０８３０３３号パンフレット、国際公開第２０１３１１０５９１号パンフレット、国際公開第２０１３１１０５９４号パンフレット及び国際公開第２０１２１４０２１２号パンフレットに記載されている。本発明は、それぞれのパエニバチルス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ）株の胞子を特に保存時に安定である形態で提供し、そのような胞子組成物の特に効率的且つ急速な生成を可能にする方法を使用することにより、これらの刊行物の教示を改善する。
【0061】
本発明による組成物は、少なくとも１種のフサリシジン、パエニセリン又はパエニプロリキシン、好ましくは少なくとも２種以上、より好ましくは３～４０種のフサリシジン、より好ましくは組成物の全フサリシジンの少なくとも５０ｍｏｌ％を構成する２～１０種のフサリシジン、より好ましくは組成物の全フサリシジンの少なくとも６０ｍｏｌ％を構成する２～１０種のフサリシジン、より好ましくは組成物の全フサリシジンの少なくとも７０ｍｏｌ％を構成する２～１０種のフサリシジン、より好ましくは組成物の全フサリシジンの少なくとも８０ｍｏｌ％を構成する２～１０種のフサリシジンを含むことが特に好ましい。いずれの場合にも、フサリシジンの１種以上がフサリシジンＡ、Ｂ又はＤのいずれかを含むことが特に好ましい。好ましくは、組成物は、少なくとも１種のフサリシジンに加えて又はその代わりに、サーファクチン及び／又はイツリンを含む。そのようなフサリシジン、サーファクチン及びイツリンは、殺細菌及び／又は殺真菌活性を有する特に有効なバイオ殺有害生物剤である。更に、本明細書に示されるように、本発明の組成物により、そのようなフサリシジンを高収量で生成し、それらを農業用製品へ組み込むことが可能になる。したがって、本発明の組成物は、バイオ殺有害生物剤としての使用並びに／又は抗真菌及び／若しくは抗細菌植物健康製品における使用に特に好適である。
【0062】
胞子は、通常、液相発酵中で生成され、発酵ブロスから（例えば濃縮によって）精製される。発酵ブロス又はブロス濃縮物は、噴霧乾燥、凍結乾燥、トレイ乾燥、流動床乾燥、ドラム乾燥又は蒸発などの従来の乾燥プロセス又は方法を使用して、担体を添加して又は添加せずに乾燥させることができる。得られた乾燥生成物を粉砕又は造粒などによって更に処理して、特定の粒径又は物理的形式を得ることができる。以下に記載する担体を、乾燥後に添加することもできる。
【0063】
本発明による胞子組成物は、好ましくは、安定剤（好ましくはグリセロール）、増量剤、溶媒、界面活性剤、自生促進剤（ｓｐｏｎｔａｎｅｉｔｙ ｐｒｏｍｏｔｅｒ）、固体担体、液体担体、乳化剤、分散剤、フィルム形成剤、防霜剤、発芽剤（ｇｅｒｍｉｎａｎｔ）、増粘剤、植物成長調節剤、無機リン酸塩、肥料、補助剤、脂肪酸及びフィブリル、糖、アミノ酸、ミクロフィブリル又はナノフィブリル構造化剤からなる群から選択される少なくとも１種の助剤を含む。
【0064】
担体は、好ましくは、十分な貯蔵寿命を有し、好ましくは、植物、植物の部分又は根系近傍の土量中に容易に分散又は溶解させることができる。好ましくは、担体は、良好な吸湿能を有し、処理が容易であり、塊を形成する物質を含まず、ほぼ無菌であるか又はオートクレーブ処理若しくは他の方法（例えば、ガンマ線照射）によって滅菌が容易であり、且つ／或いは良好なｐＨ緩衝能を有する。種子コーティングに使用される担体については、種子へ良好に付着することが好ましい。
【0065】
好適な溶媒及び液体担体は、水及び有機溶媒、例えば、中～高沸点の鉱油画分、例えば灯油、ディーゼル油；植物又は動物由来の油；脂肪族、環状及び芳香族炭化水素、例えば、トルエン、パラフィン、テトラヒドロナフタレン、アルキル化ナフタレン；アルコール類、例えば、エタノール、プロパノール、ブタノール、ベンジルアルコール、シクロヘキサノール；グリコール類；ＤＭＳＯ；ケトン類、例えば、シクロヘキサノン；エステル類、例えば、乳酸エステル、炭酸エステル、脂肪酸エステル、ガンマ－ブチロラクトン；脂肪酸類；ホスホネート類；アミン類；アミド類、例えば、Ｎ－メチルピロリドン、脂肪酸ジメチルアミド並びにそれらの混合物である。
【0066】
好適な固体担体又は充填剤は、鉱物土類、例えば、シリケート、シリカゲル、タルク、カオリン、石灰石、石灰、白亜、粘土、ドロマイト、珪藻土、ベントナイト、硫酸カルシウム、硫酸マグネシウム、酸化マグネシウム；多糖類、例えば、セルロース、デンプン；肥料、例えば、硫酸アンモニウム、リン酸アンモニウム、硝酸アンモニウム、尿素；植物由来の産物、例えば、ピート、穀類粉、樹皮粉、木粉、堅果殻粉及びそれらの混合物である。
【0067】
好適な界面活性剤は、アニオン性、非イオン性、カチオン性及び両性の界面活性剤、ブロックポリマー、高分子電解質並びにそれらの混合物などの界面活性化合物である。このような界面活性剤は、乳化剤、分散剤、可溶化剤、湿潤剤、浸透促進剤、保護コロイド又は補助剤として使用され得る。界面活性剤の例は、ＭｃＣｕｔｃｈｅｏｎ’ｓ，Ｖｏｌ．１：Ｅｍｕｌｓｉｆｉｅｒｓ＆Ｄｅｔｅｒｇｅｎｔｓ，ＭｃＣｕｔｃｈｅｏｎ’ｓ Ｄｉｒｅｃｔｏｒｉｅｓ，Ｇｌｅｎ Ｒｏｃｋ，ＵＳＡ，２００８（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｅｄ．ｏｒ Ｎｏｒｔｈ Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｅｄ．）に列挙されている。
【0068】
好適なアニオン性界面活性剤としては、スルホネート、スルフェート、ホスフェート、カルボキシレートのアルカリ、アルカリ土類又はアンモニウムの塩及びそれらの混合物が挙げられる。スルホネートの例は、アルキルアリールスルホネート、ジフェニルスルホネート、アルファ－オレフィンスルホネート、リグニンスルホネート、脂肪酸及び脂肪油のスルホネート、エトキシ化アルキルフェノールのスルホネート、アルコキシル化アリールフェノールのスルホネート、縮合ナフタレンのスルホネート、ドデシルベンゼン及びトリデシルベンゼンのスルホネート、ナフタレン及びアルキルナフタレンのスルホネート、スルホスクシネート又はスルホスクシナマートである。スルフェートの例は、脂肪酸及び油のスルフェート、エトキシ化アルキルフェノールのスルフェート、アルコールのスルフェート、エトキシ化アルコールのスルフェート又は脂肪酸エステルのスルフェートである。ホスフェートの例は、リン酸エステルである。カルボキシレートの例は、カルボン酸アルキル及びカルボキシル化アルコール又はアルキルフェノールエトキシレートである。
【0069】
好適な非イオン性界面活性剤としては、アルコキシレート、Ｎ－置換脂肪酸アミド、アミンオキシド、エステル、糖ベースの界面活性剤、高分子界面活性剤及びそれらの混合物が挙げられる。アルコキシレートの例は、１～５０個の同等物でアルコキシル化された、アルコール、アルキルフェノール、アミン、アミド、アリールフェノール、脂肪酸又は脂肪酸エステルなどの化合物である。例えば、エチレンオキシド及び／又はプロピレンオキシド、好ましくはエチレンオキシドが、アルコキシル化に用いられ得る。Ｎ－置換脂肪酸アミドの例は、脂肪酸グルカミド又は脂肪酸アルカノールアミドである。エステルの例は、脂肪酸エステル、グリセロールエステル又はモノグリセリドである。糖ベースの界面活性剤の例は、ソルビタン、エトキシ化ソルビタン、スクロースエステル及びグルコースエステル又はアルキルポリグルコシドである。高分子界面活性剤の例は、ビニルピロリドン、ビニルアルコール又は酢酸ビニルのホモポリマー又はコポリマーである。
【0070】
前記少なくとも１種の非イオン性界面活性剤は、好ましくは、少なくとも１種のポリアルキレンオキシドＰＡＯである。ポリアルキレンオキシドＰＡＯは、ポリエチレンオキシド（ＰＥＯ）のブロックをその末端位置に含む一方、エチレンオキシドとは異なるポリアルキレンオキシド（ポリプロピレンオキシド（ＰＰＯ）、ポリブチレンオキシド（ＰＢＯ）及びポリ－ＴＨＦ（ｐＴＨＦ）など）のブロックは、中央位置に含まれる。好ましいポリアルキレンオキシドＰＡＯは、ＰＥＯ－ＰＰＯ－ＰＥＯ、ＰＰＯ－ＰＥＯ－ＰＰＯ、ＰＥＯ－ＰＢＯ－ＰＥＯ又はＰＥＯ－ｐＴＨＦ－ＰＥＯという構造を有する。好適なポリアルキレンオキシドＰＡＯは、通常、数平均が１．１～１００のアルキレンオキシド単位、好ましくは５～５０単位を含む。
【0071】
好適なカチオン性界面活性剤としては、第四級界面活性剤、例えば、１つ若しくは２つの疎水性基を有する第四級アンモニウム化合物又は長鎖第一級アミンの塩が挙げられる。好適な両性界面活性剤は、アルキルベタイン及びイミダゾリンである。好適なブロックポリマーは、ポリエチレンオキシド及びポリプロピレンオキシドのブロックを含むＡ－Ｂ又はＡ－Ｂ－Ａタイプのブロックポリマー又はアルカノール、ポリエチレンオキシド及びポリプロピレンオキシドを含むＡ－Ｂ－Ｃタイプのブロックポリマーである。好適な高分子電解質は、ポリ酸又はポリ塩基である。ポリ酸の例は、ポリアクリル酸のアルカリ塩又はポリ酸櫛型ポリマーである。ポリ塩基の例は、ポリビニルアミン又はポリエチレンアミンである。
【0072】
好適な補助剤は、それ自体、ごくわずかな殺有害生物活性を有するか、又は殺有害生物活性を全く有さず、且つ胞子、胞子に付着している化合物又は標的上で細胞を発芽させることによって生成される化合物の生物学的性能を改善する化合物である。例は、界面活性剤、鉱油又は植物油及び他の助剤である。更なる例は、Ｋｎｏｗｌｅｓ，Ａｄｊｕｖａｎｔｓ ａｎｄ ａｄｄｉｔｉｖｅｓ，Ａｇｒｏｗ Ｒｅｐｏｒｔｓ ＤＳ２５６，Ｔ＆Ｆ Ｉｎｆｏｒｍａ ＵＫ，２００６，ｃｈａｐｔｅｒ ５によって列挙されている。
【0073】
本発明による組成物は、好ましくは０．０１～２重量％の有機又は無機増粘剤を含む。好適な増粘剤としては、多糖類（例えば、キサンタンガム、カルボキシメチルセルロース）、無機粘土（有機変性又は非変性）、ポリカルボキシレート及びシリケートが挙げられる。
【0074】
好適な増粘剤は、多糖類（例えば、キサンタンガム、カルボキシメチルセルロース）、無機性粘土（有機変性又は非変性）、ポリカルボキシレート及びシリケートである。本発明の組成物における好ましい増粘剤は、キサンタンガムである。好ましくは、キサンタンガムは、本発明による組成物中に、配合に基づいて０．０１～０．４重量％、好ましくは０．０５～０．１５重量％の量で含まれる。
【0075】
本発明による組成物は、好ましくは、増粘剤としてケイ酸マグネシウムアルミニウム（例えば、モンモリロナイト及び／若しくはサポナイト）、ベントナイト、アタパルジャイト又はシリカを含む。ケイ酸アルミニウムマグネシウム（例えば、モンモリロナイト及びサポナイト）、ベントナイト、アタパルジャイト又はシリカの含有量は、好ましくは全組成物の０．１～２重量％、好ましくは０．５～１．５重量％である。
【0076】
好適な消泡剤は、シリコーン、長鎖アルコール及び脂肪酸の塩である。好ましくは、本発明による組成物は、０．０１～１．０重量％の消泡剤、例えばシリコーン消泡剤を含有する。
【0077】
好適な着色剤（例えば、赤色、青色又は緑色）は、低水溶性色素及び水溶性染料である。例は、無機着色剤（例えば、酸化鉄、酸化チタン、ヘキサシアノ鉄酸鉄）並びに有機着色剤（例えば、アリザリンシアニン、アゾシアニン及びフタロシアニン着色剤）である。
【0078】
好適な殺菌剤は、ブロノポール及びイソチアゾリノン誘導体、例えば、アルキルイソ－チアゾリノン及びベンゾイソチアゾリノンである。好適な凍結防止剤は、エチレングリコール、プロピレングリコール、尿素及びグリセリンである。好適な消泡剤は、シリコーン、長鎖アルコール及び脂肪酸の塩である。好適な着色剤（例えば、赤色、青色又は緑色）は、低水溶性色素及び水溶性染料である。例は、無機着色剤（例えば、酸化鉄、酸化チタン、ヘキサシアノ鉄酸鉄）並びに有機着色剤（例えば、アリザリンシアニン、アゾシアニン及びフタロシアニン着色剤）である。好適な粘着付与剤又は結合剤は、ポリビニルピロリドン、ポリ酢酸ビニル、ポリビニルアルコール、ポリアクリレート、生物又は合成のワックス及びセルロースエーテルである。
【0079】
好適なフィブリル、ミクロフィブリル及びナノフィブリル助剤並びにそれらの農業用組成物への組み込みは、例えば、国際公開第２０１９０３５８８１号パンフレットに記載されている。
【0080】
好ましくは、組成物は、植物有害生物防除組成物であり、且つ／或いはそのような植物、その部分若しくは繁殖材料又は植物が成長する基材に適用された場合、植物病原性真菌性若しくは細菌性病害を予防するか、制限するか若しくは低減させ、且つ／又は植物の健康を改善若しくは促進し、且つ／又は植物の収量を増加させるか若しくは促進する。本明細書に記載されているように、後続の発酵における誘導期の持続時間が短く、且つ対数期増殖の終了が遅い胞子を組成物に組み込むことができることは、本発明の胞子組成物の利点である。したがって、胞子は、植物、植物の部分又は植物成長基材（例えば土壌）に拡散した後、迅速に発芽することができ、それによって植物に利する特性を発揮し、例えば、病原性微生物を低減させるか、又は植物若しくは植物の部分が利用可能な栄養素を作り出す。特に、本発明の組成物を使用して、例えば、迅速に成長する植物の根への有益な細菌及び他の農業用ペイロードの大幅に改善された輸送及び分散を促進することができる。
【0081】
組成物は、好ましくは、全組成物の１ｍｌあたり少なくとも１０＾４コロニー形成単位（ｃｆｕ）、より好ましくは１０＾４～１０＾１７ｃｆｕ／ｍｌ、より好ましくは１０＾７～１０＾１３ｃｆｕ／ｍｌの濃度で少なくとも前記胞子を含む。圃場又は必要とする患者若しくは動物への適用後により顕著な又は急速な効果を発揮するために、本発明の組成物は、少なくとも１０＾６ｃｆｕ／ｍｌ、より好ましくは１０＾７～１０＾１７ｃｆｕ／ｍｌ、より好ましくは１０＾８～１０＾１５ｃｆｕ／ｍｌの胞子を含むことが特に好ましい。
【0082】
更に、高い胞子濃度は、バイオテクノロジー培養プロセスにおいて、特にマスター又はワーキング「細胞」バンクを維持するために有利である。純粋な生存細胞の代わりに、胞子を含有するか又はそれからなるワーキング細胞バンクを使用することで、種菌の保存安定性が大幅に増大し、それにより発酵プロセスの再現性が改善されることが知られている。そのような細胞バンクでは、保存された微生物物質が、発芽及び成長活性を大幅に失うことなく、１年を超える長期、好ましくは１～５年にわたって生存可能であり続けることが必須である。本明細書に記載されるように、通常の保存条件下での長期保存に適したそのような組成物を提供することは、本発明の特定の利点である。本発明の組成物がそのような長期間の保存後であっても発芽頻度及び発芽速度の大幅な低減を受けないことは、更なる利点である。これは、本発明の胞子中のジピコリン酸の含有量が、後期に形成された胞子をより高い割合で含む組成物と比較して低いことを考慮すると、特に驚くべきことであった。
【0083】
したがって、本発明による好ましいマスター又はワーキング細胞バンク試料は、凍結保護に十分な分量の凍結保護剤、好ましくはグリセロールを含む、本発明による組成物である。凍結保護は、－１８０℃での保存に推奨されるが、－８０℃、－２０℃、最高０℃のより高い保存温度においても推奨される。加えて、乾燥胞子、例えば、少なくとも部分的に胞子形成した微生物培養物の凍結乾燥から得られる乾燥胞子は、ワーキング細胞バンクとして使用することができる。そのような組成物は、有利なことに、０℃未満の温度、特に－１８０℃～－２０℃においても、凍結保護剤、例えばグリセロールの添加を必要とせずに良好な保存安定性を示す。但し、本組成物中の胞子は、ジピコリン酸含有量が比較的低いにもかかわらず驚くほど強力な保存安定性を既に示していることから、凍結保護剤の量を、例えば、Ｆ．Ｓ．（１９９５）Ｆｒｅｅｚｅ－Ｄｒｙｉｎｇ ａｎｄ Ｃｒｙｏｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎ ｏｆ Ｂａｃｔｅｒｉａ．Ｉｎ：Ｄａｙ Ｊ．Ｇ．，Ｐｅｎｎｉｎｇｔｏｎ Ｍ．Ｗ．（ｅｄｓ）Ｃｒｙｏｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｆｒｅｅｚｅ－Ｄｒｙｉｎｇ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ（商標），ｖｏｌ ３８．Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ．ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１３８５／０－８９６０３－２９６－５：２１に記載されている標準的な細胞バンク試料組成物と比較して低減可能であることは、本発明の利点である。
【0084】
本発明の組成物は、好ましくは、４×１０＾－６～４×１０＾－５μｍｏｌ／胞子、より好ましくは５×１０＾－６～２×１０＾－５μｍｏｌ／胞子、より好ましくは７×１０＾－６～１×１０＾－５μｍｏｌ／胞子の最終含有量まで添加されたジピコリン酸を含むことが好ましい。ジピコリン酸を前述の濃度に達するように添加することにより、特に組成物の含水量が低い場合、例えば組成物が粉末若しくは顆粒の形態である場合又は組成物が高温、例えば４～４５℃での保存が意図されている場合、安定性、即ち胞子の発芽頻度及び発芽速度が更に改善される。
【0085】
上述のように、本組成物は、生存細胞及び／又は非生存細胞を含み得る。好ましくは、胞子の少なくとも一部分は、ペイロードドメインを含むタンパク質をそれらの表面に含み、前記タンパク質は、ペイロードドメインを前記胞子の表面に送達するための標的ドメインも含む。好ましいタンパク質、胞子及びそれらの生成方法の例は、国際公開第２０２０２３２３１６号パンフレット及び国際公開第２０１９０９９６３５号パンフレットに記載されている。
【0086】
本発明の組成物は、単独で製品として容易に使用することができる。しかしながら、本発明の組成物は、キットの一部でもあり得る。これは、有害な化学物質若しくは処理剤と一緒に、又はそれらに適時近接して適用することが望まれる状況において特に有用であり、その結果、本発明の組成物を有害である可能性のある更なるキット構成要素から離しておくことができるようになる。
【0087】
特に、本発明の組成物は、好ましくは、鉱物表面の処理及び／又はセメントの調製のための塗料組成物、コーティング組成物又は含浸組成物として使用されるか又はそれらに組み込まれる。上述のように、本発明の組成物に含まれるクロストリジウム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉａ）胞子は、長期間経過後であっても発芽することができ、代謝による石灰化プロセスをもたらし、亀裂の修復を改善することができる。
【0088】
更に、本発明は、本発明による組成物を含む食品製品又は飼料製品、好ましくは、プロバイオティクス又はプレバイオティクスの食品製品又は飼料製品を提供する。上述のように、好気性及び嫌気性微生物の様々な内生胞子は、価値あるプロバイオティクス剤である。それらの内生胞子は、プレバイオティクス物質も含有し得る。したがって、本発明は、プロバイオティクス及び／又はプレバイオティクス食品組成物及び飼料組成物を、初期胞子群集の後期胞子群集に対する所望の比率で有利に提供し、これらの胞子群集によって付与される利益を計画可能な方法で実現する。そのような組成物では、胞子は、プロバイオティクス又はプレバイオティクス種から選択される。そのような種は、適切な量で投与された場合、宿主に健康上の利益を付与する。好ましい種は、バチルス・アミロリクエファシエンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）、バチルス・アクイマリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ａｑｕｉｍａｒｉｓ）、バチルス・アリアブハッタイ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ａｒｙａｂｈａｔｔａｉ）、バチルス・セレウス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓ）、バチルス・クラウシイ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｌａｕｓｉｉ）、バチルス・コアグランス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｏａｇｕｌａｎｓ）、バチルス・フレクス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｌｅｘｕｓ）、バチルス・フシフォルミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｕｓｉｆｏｒｍｉｓ）、バチルス・インディカス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｉｎｄｉｃｕｓ）、バチルス・リケニホルミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）、バチリス・メガテリウム（Ｂａｃｉｌｌｉｓ ｍｅｇａｔｈｅｒｉｕｍ）、バチルス・ポリファーメンチカス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｏｌｙｆｅｒｍｅｎｔｉｃｕｓ）、バチルス・プミルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｕｍｉｌｕｓ）、バチルス・サブティリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）、バチルス・チューリンゲンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）、バチルス・ビレティ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｖｉｒｅｔｉ）、クロストリジウム・ブチリカム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｂｕｔｙｒｉｃｕｍ）、クロストリジウム・セルロシ（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｃｅｌｌｕｌｏｓｉ）、クロストリジウム・レプツム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｌｅｐｔｕｍ）、クロストリジウム・スポロスフェロイデス（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｓｐｏｒｏｓｐｈａｅｒｏｉｄｅｓ）、フィーカリバクテリウム・プラウスニッツィイ、パエニバチルス・エヒメンシス（Ｆａｅｃａｌｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｐｒａｕｓｎｉｔｚｉｉ Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｅｈｉｍｅｎｓｉｓ）、パエニバチルス・エルギイ（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｅｌｇｉｉ）、パエニバチルス・パブリ（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｐａｂｕｌｉ）及びパエニバチルス・ポリミクサ（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｏｌｙｍｙｘａ）である。
【0089】
本発明は、本発明による組成物又は本発明による方法によって得ることができるか若しくは得られる組成物でコーティングされるか又はそれを注入された植物栽培基材を含む植物保護製品を更に提供する。そのような製品は、本発明による組成物によって付与される利点を現実化する。特に、そのような製品は、バイオ殺有害生物性胞子及び胞子に付着した化合物を提供することができ、好ましくは、前記胞子は、本明細書に記載のように急速且つ確実に発芽する。したがって、本発明による植物栽培基材は、特に、植物の健康に利する微生物の前記胞子からの発芽及び成長を容易にする。好ましくは、植物保護製品は、前記発芽した微生物により、未処理の植物栽培基材と比較して１つ以上の植物健康指標を改善し、且つ／又は病原体圧を低減させる。
【0090】
本組成物の有益な効果は、好ましくは、以下の植物健康指標：早期且つ良好な発芽、結実植物数の損失を伴わない必要な種子の減少、出芽の早期化又は耐久性上昇、根形成の改善、根密度の増加、根長の増加、根の大きさの維持の改善、根の有効性の改善、栄養摂取（好ましくは窒素及び／又はリンの摂取）の改善、シュートの成長増大、植物の活力強化、植物の株立本数増加、草高の増大、葉身の大型化、枯れた根出葉の減少、分げつの増加、分げつの強化、分げつの発生増大、ストレスに対する耐容性の増大（例えば、干ばつ、熱、塩分、ＵＶ、水、寒さに対するもの）、肥料、殺有害生物剤及び／又は水の必要性の低減、エチレン生成の低減及び／又はエチレン受容の低減、光合成活性の増大、葉色の緑化、色素含有量の改善、開花の早期化、穀粒成熟の早期化、作物収量の増加、果実又は種子のタンパク質含有量の増加、果実又は種子の含油量の増加並びに果実又は種子のデンプン含有量の増加の１つ以上で観察される。本発明の好ましい組成物のバイオ殺有害生物性アクチンを考慮すると、最も好ましくは、胞子が、パエニバチルス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ）属の胞子、更により好ましくは、パエニバチルス・ポリミクサ（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｏｌｙｍｙｘａ）、パエニバチルス・ポリミクサ・ポリミクサ（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｏｌｙｍｙｘａ ｐｏｌｙｍｙｘａ）、パエニバチルス・ポリミクサ・プランタルム（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｏｌｙｍｙｘａ ｐｌａｎｔａｒｕｍ）及び／又はパエニバチルス・テラエ（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｅｒｒａｅ）の胞子を含むか又はそれらからなる組成物であり、そのような本発明の組成物は、植物、植物の部分又は植物成長基材の化学的殺有害生物剤による処理の必要性を低減させ得る。したがって、本発明の農業用組成物は、化学的殺有害生物剤に対する曝露の必要性の低減に役立つことにより、植物製品の安全性を有利に改善する。
【0091】
本発明は、植物、植物の部分又は植物繁殖材料も提供し、この材料は、本発明による組成物又は本発明による方法によって得ることができるか若しくは得られる組成物をその表面に含むか又はその中に注入されている。種子への注入の方法は、例えば国際公開第２０２０２１４８４３号パンフレットに記載されている。本明細書に記載されているように、本発明の組成物中の胞子は、特に確実且つ急速な発芽速度を有する。したがって、胞子は、種子、根、葉及び幹を含む植物材料の迅速なコロニー形成を補助し、それにより胞子及び／又は発芽した微生物によって与えられる有益な効果を発揮することにより、植物健康指標の１つ以上を促進する。
【0092】
更に、本発明は、上述の植物、植物の部分若しくは植物繁殖材料又は植物栽培基材を含む栽培場、好ましくは圃場又は温室苗床を提供する。上述のように、本発明の組成物の胞子及び／又は対応する発芽した微生物がバイオ殺有害生物性効果を発揮することは、本発明の利点である。したがって、本発明の組成物又は製品で処理された栽培場は、栽培場からの植物病原性真菌物質又は細菌物質の放出を、好ましくは組成物の胞子に由来する微生物の成長の増加及び／又は加速によって有利に予防するか、遅延させるか、制限するか又は低減させる。本発明の組成物又は製品を、植物栽培領域、例えば植物、植物材料及び／又はその土壌に適用することは、その領域の有害生物の低減を支援するのみに留まらない。有害生物は、好ましくはその領域では未処理領域ほど速く繁殖しないことから、前記領域から逃避し近隣領域に侵入する有害生物は少なくなる。したがって、本発明の製品又は組成物の適用は、有利なことに、現地での殺有害生物剤による処理回数を低減させるのみならず、隣接領域にそのような節約をもたらすこともできる。
【0093】
本発明は、本発明による組成物を含む清浄製品又は化粧品も提供する。上述のように、胞子は、清浄製品の特性、例えば皮膚清浄製品、毛髪清浄製品、洗濯製品、食器洗浄製品、パイプ脱脂剤、アレルゲン除去製品、より好ましくは、化粧用ファンデーション、口紅、クレンジング剤、角質剥離剤、チーク、アイライナー、アイシャドウ、ローション、クリーム、シャンプー、歯磨き粉、歯磨きジェル、洗口液、デンタルフロス、デンタルテープ又は爪楊枝の特性を有利に改善することができる。本明細書に記載されるように、そのような製品では、例えば、所望の程度の急速な胞子作用及び後期発芽胞子のより長期間持続する効果を達成するために、初期胞子群集の後期胞子群集に対する比率を定義することが有利である。好ましくは、清浄製品は、洗浄剤を含み、且つ界面活性剤、ビルダー及びハイドロトロープ剤から選択される少なくとも１つの成分は、清浄性能に有効な量又は洗浄剤の物理的特徴を維持するのに有効な量で存在する。そのような成分の例は、例えば、“ｃｏｍｐｌｅｔｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｂｏｏｋ ｏｎ Ｄｅｔｅｒｇｅｎｔｓ ｗｉｔｈ Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎｓ（Ｄｅｔｅｒｇｅｎｔ Ｃａｋｅ，Ｄｉｓｈｗａｓｈｉｎｇ Ｄｅｔｅｒｇｅｎｔｓ，Ｌｉｑｕｉｄ＆Ｐａｓｔｅ Ｄｅｔｅｒｇｅｎｔｓ，Ｅｎｚｙｍｅ Ｄｅｔｅｒｇｅｎｔｓ，Ｃｌｅａｎｉｎｇ Ｐｏｗｄｅｒ＆Ｓｐｒａｙ Ｄｒｉｅｄ Ｗａｓｈｉｎｇ Ｐｏｗｄｅｒ）”，Ｅｎｇｉｎｅｅｒｓ Ｉｎｄｉａ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ（ＥＩＲＩ），６ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ（２０１５）又は“Ｄｅｔｅｒｇｅｎｔ Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎｓ Ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ”，Ｓｏｌｖｅｒｃｈｅｍ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎｓに記載されている。
【0094】
これに対応して、本発明は、原核微生物の胞子を含む組成物を生成する方法であって、
１）胞子形成を導く培地中で微生物を発酵させる工程、
２）胞子を精製して組成物を得る工程
を含む方法も提供する。
１）胞子形成を導く培地中で微生物を発酵させる工程、
２）胞子を精製して組成物を得る工程
を含む方法も提供する。
【0095】
上述のように、本方法は、本発明の組成物を生成するための急速且つ確実な方法を提供する。本発明の方法が、対象の微生物について既に確立されているか、又は関連する工業的に適切な株から適応させることができる、標準的な工業設備及び日常的な発酵操作を使用して実施可能であることは、特に有利である。
【0096】
回収とも呼ばれる精製は、バッチ液相発酵の最後の工程である。精製の目的は一般に、本発明の組成物中での保存中に内生胞子を不安定化させる発酵培地成分を除去又は低減させることである。好ましい精製工程は本明細書に記載されており、好ましくは、精製は、胞子の濃縮を含み、好ましくは、脱水、凍結乾燥、均質化、抽出、タンジェンシャルフロー濾過、デプス濾過、遠心分離又は沈降の工程を含む。得られた濃縮胞子調製物、好ましくは生存細胞が枯渇した調製物、更により好ましくは無細胞調製物は、次いで乾燥され、且つ／又は本明細書に記載の更なる成分とともに配合され得る。
【0097】
好ましくは、精製は、発酵工程１）で得ることができる最大生存胞子濃度の８５％に達するときに最後に実施され、より好ましくは、精製は、１～７５％の範囲の濃度に達するとき、より好ましくは１０～７５％の範囲の濃度に達するとき、より好ましくは２０～７０％の範囲の濃度に達するとき、より好ましくは３０～６８％の範囲の濃度に達するときに実施される。この目的のために、選択された培地及び選択された発酵条件下で較正発酵が最初に実施される。較正発酵は、対数期後にバイオマスの更なる増加が観察されなくなるまで、好ましくはバイオマスの６時間あたりの増加が１％未満になるまで実施される。したがって、図１による発酵では、４８時間時点で決定された胞子濃度が最大胞子濃度と見なされる。指定の成熟度で胞子を回収することにより、初期胞子群集の胞子を高い割合で含む本発明の組成物を得ることができる。したがって、精製は、好ましくは、前記精製胞子が、コロニー形成に適した培地上にプレーティングされた場合にコロニーを形成し、プレーティング後、好気性培養について７２時間以内及び嫌気性培養について９６時間以内に形成された全てのそのようなコロニーの少なくとも４０％、より好ましくは４０～９０％、より好ましくは少なくとも５０％、より好ましくは５０～９０％、より好ましくは少なくとも６０％、より好ましくは６０～９０％、より好ましくは少なくとも７０％、より好ましくは７０～９０％が４８時間以内に形成されるように実施され、及び／又は前記精製胞子の少なくとも４０％、より好ましくは少なくとも５０％、より好ましくは少なくとも５５％、より好ましくは少なくとも６０％、より好ましくは少なくとも７０％、より好ましくは少なくとも８０％が、第１の胞子形成期中に回収された発酵物から得ることができるか又は得られるように実施される。
【0098】
液相発酵からの精製に適した時間を決定する別の好ましい方法は、１胞子あたりのジピコリン酸の平均含有量が、発酵工程１）で最大胞子濃度に達するとき（本明細書では定常期とも呼ばれる）に生成される胞子のジピコリン酸の平均含有量の最大で８０％である場合であり、より好ましくは、ジピコリン酸の平均含有量は、２０～８０％の範囲、更により好ましくは２２～７０％の範囲、更により好ましくは３０～６５％の範囲である。実施例に記載されるように、最初に較正発酵が実施され、胞子のジピコリン酸含有量及び生存胞子濃度の両方が測定される。次に、１生存胞子あたりのジピコリン酸の濃度が算出される。例えば図９に示すように、１胞子あたりのジピコリン酸の比率は横ばいになる。比率がもはや増加しないか、又は６時間あたりで少なくとも３％を超えてもはや増加しない場合、比率は１００％に達したことになり、ジピコリン酸の濃度は最大となる。次いで、全ての更なる割合をこれらの値に基づいて算出することができる。上記のように、指定のジピコリン酸含有量で胞子を回収することにより、初期胞子群集の胞子を高い構成比で含む本発明の組成物を得ることができる。
【0099】
実施例のセクションの次に記載されるように、本発明は、後期胞子群集を高い割合で含む組成物を生成する方法を提供し、且つその使用及び利点も更に提供する。
【0100】
好ましくは、組成物のジピコリン酸含有量は、精製後、例えば外部で生成されたジピコリン酸を添加することにより更に増加する。Ｄａｎｉｅｌ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９９３，４６８－４８３により、胞子へのジピコリン酸の添加が胞子の保存安定性を更に改善し得ることが記載されている。
【0101】
上記のように、精製工程２）は、好ましくは、組成物自体における胞子発芽の抑制又は低減をもたらす。これにより、－２０℃～４５℃の保存温度における本発明の組成物中の胞子の保存安定性及び生存率の更なる有利な改善がもたらされる。したがって、精製工程は、好ましくは、胞子の脱水、凍結乾燥、均質化、抽出、濾過、遠心分離、沈降又は濃縮の工程を含み、且つ／又は組成物の含水量をおよそ１～８％（ｗ／ｗ）、好ましくは乾燥組成物について組成物の３～５重量％、液体若しくはペースト状組成物について組成物の１０～９８重量％に調整することを含み、且つ／又は組成物の可溶性炭素源含有量を、胞子回収時のその含有量と比較して組成物の最大で５０重量％、より好ましくは組成物の５～３０重量％に調整することを含む。このような後処理プロセスの方法は、一般に当業者に公知であり、標準的な工業設備を使用し、当技術分野で公知の方法を最小限に改変させて使用して実施することができる。したがって、本発明の組成物を低コストで容易に生成できるということは、本発明の特定の利点である。
【0102】
更に、本方法は、
ｉ）殺真菌活性、殺細菌活性、殺ウイルス活性及び／又は植物防御活性化剤活性を有する１種以上の微生物殺有害生物剤、
ｉｉ）殺真菌活性、殺細菌活性、殺ウイルス活性及び／又は植物防御活性化剤活性を有する１種以上の生化学的殺有害生物剤、
ｉｉｉ）殺虫活性、殺ダニ活性、殺軟体動物活性及び／又は殺線虫活性を有する１種以上の微生物殺有害生物剤、
ｉｖ）殺虫活性、殺ダニ活性、殺軟体動物活性、フェロモン活性及び／又は殺線虫活性を有する１種以上の生化学的殺有害生物剤、
ｖ）呼吸阻害剤、ステロール生合成阻害剤、核酸合成阻害剤、細胞分裂及び細胞骨格の形成又は機能の阻害剤、アミノ酸及びタンパク質合成の阻害剤、シグナル伝達阻害剤、脂質及び膜合成阻害剤、多部位作用性阻害剤、細胞壁合成阻害剤、植物防御誘導剤並びに作用機序が不明である殺真菌剤から選択される１種以上の殺真菌剤
からなる群から好ましくは選択される少なくとも１種の有害生物防除剤の添加も含むことが好ましい。そのような追加の殺有害生物剤及び処理剤の利点は、上述されている。
ｉ）殺真菌活性、殺細菌活性、殺ウイルス活性及び／又は植物防御活性化剤活性を有する１種以上の微生物殺有害生物剤、
ｉｉ）殺真菌活性、殺細菌活性、殺ウイルス活性及び／又は植物防御活性化剤活性を有する１種以上の生化学的殺有害生物剤、
ｉｉｉ）殺虫活性、殺ダニ活性、殺軟体動物活性及び／又は殺線虫活性を有する１種以上の微生物殺有害生物剤、
ｉｖ）殺虫活性、殺ダニ活性、殺軟体動物活性、フェロモン活性及び／又は殺線虫活性を有する１種以上の生化学的殺有害生物剤、
ｖ）呼吸阻害剤、ステロール生合成阻害剤、核酸合成阻害剤、細胞分裂及び細胞骨格の形成又は機能の阻害剤、アミノ酸及びタンパク質合成の阻害剤、シグナル伝達阻害剤、脂質及び膜合成阻害剤、多部位作用性阻害剤、細胞壁合成阻害剤、植物防御誘導剤並びに作用機序が不明である殺真菌剤から選択される１種以上の殺真菌剤
からなる群から好ましくは選択される少なくとも１種の有害生物防除剤の添加も含むことが好ましい。そのような追加の殺有害生物剤及び処理剤の利点は、上述されている。
【0103】
本方法は、少なくとも１種のフサリシジン、好ましくは少なくとも２種以上のフサリシジン、パエニセリン又はパエニプロキシリン（ｐａｅｎｉｐｒｏｘｉｌｉｎ）、より好ましくは３～４０種のフサリシジン、より好ましくは組成物の全フサリシジンの少なくとも５０ｍｏｌ％を構成する２～１０種のフサリシジン、より好ましくは組成物の全フサリシジンの少なくとも６０ｍｏｌ％を構成する２～１０種のフサリシジン、より好ましくは組成物の全フサリシジンの少なくとも７０ｍｏｌ％を構成する２～１０種のフサリシジン、より好ましくは組成物の全フサリシジンの少なくとも８０ｍｏｌ％を構成する２～１０種のフサリシジンの添加を更に含むことも好ましい。いずれの場合にも、フサリシジンの１種以上がフサリシジンＡ、Ｂ又はＤのいずれかを含むことが特に好ましい。好ましくは、本方法は、少なくとも１種のフサリシジンの添加に加えて又はその代わりに、添加されたサーファクチン及び／若しくはイツリンを含み、且つ／又は安定剤（好ましくはグリセロール）、増量剤、溶媒、界面活性剤、自生促進剤、固体担体、液体担体、乳化剤、分散剤、フィルム形成剤、防霜剤、増粘剤、植物成長調節剤、無機リン酸塩、肥料、補助剤、脂肪酸及びフィブリル、ミクロフィブリル若しくはナノフィブリル構造化剤からなる群から選択される少なくとも１種の助剤の添加を更に含む。この場合にも、対応する得ることができる利点について上述されている。
【0104】
本発明は、好適な発酵培地を含む発酵槽に、本発明の組成物又は本発明による方法によって得ることができるか若しくは得られる組成物を接種する工程を含む発酵方法も提供する。上述のように、本発明による組成物中の胞子が保存後であっても急速な発芽挙動を示すことは、特に有利である。したがって、本発明の組成物は、迅速に使用可能なマスター又はワーキング細胞バンクの調製に有利に適している。
【0105】
これに対応して、本発明は、胞子形成原核微生物の発酵において、誘導期の持続時間及び／又は対数期の終了に達するまでの時間を制御する方法であって、好適な発酵培地に、本発明の組成物又は本発明のいずれかによる方法によって得ることができるか若しくは得られる組成物を接種し、且つ接種された培地を発酵させることを含み、誘導期のより短い持続時間及び／又は対数期のより速い終了のために、第１の胞子形成期に回収される胞子の割合がより高い組成物が使用され、及び誘導期のより長い持続時間又は対数期のより遅い終了のために、第２の胞子形成期に回収される胞子の割合がより高い組成物が使用される、方法を提供する。したがって、バッチ発酵を行う場合、当業者は、迅速に発芽する胞子の所望の含有量が得られる時点で、前記発酵反応から胞子を精製することが好都合である。特に、本発明は、工業用バッチ発酵の回収時間の計画及び調整を改善する。発酵バッチの完了時間については、本発明の組成物の含有量に従って確実に予測することができる。したがって、所定の発酵段階に達する時間は、接種のための本発明の適切な組成物を選択することによって調整することができる。本明細書に記載され、且つ本明細書において好ましいように、高含有量の第１の胞子形成期の胞子は、発酵工程１）で得ることができる最大胞子濃度の８５％に達するとき、より好ましくは１～７５％の範囲の濃度に達するとき、より好ましくは１０～７５％の範囲の濃度に達するとき、より好ましくは２０～７０％の範囲の濃度に達するとき、より好ましくは３０～６８％の範囲の濃度に達するときの最後に得ることができるか；又は高含有量の第１の胞子形成期の胞子は、１胞子あたりのジピコリン酸の平均含有量が、発酵工程１）で最大胞子濃度に達するときに生成される胞子のジピコリン酸の平均含有量の最大で８０％である場合に得ることができ、より好ましくは、ジピコリン酸の平均含有量は、２０～８０％の範囲、更により好ましくは２２～７０％の範囲、更により好ましくは３０～６５％の範囲である。
【0106】
好ましくは、胞子形成原核微生物の発酵において、誘導期の持続時間及び／又は対数期の終了に達するまでの時間を制御する方法は、コンピュータ実装方法であり、本方法は、（１）目標増殖シグナルを得る工程、及び（２）誘導期のより短い持続時間及び／又は対数期のより速い終了のために、第１の胞子形成期に回収される胞子の割合がより高い組成物が使用され、及び誘導期のより長い持続時間又は対数期のより遅い終了のために、第２の胞子形成期に回収される胞子の割合がより高い組成物が使用されるように、接種組成物の含有量を調整する工程を含む。特に、発酵リアクタは、好ましくは、本発明の組成物を含む接種試料保存庫、即ちワーキング細胞バンク試料のコレクションに接続される。各組成物について、初期胞子群集の含有量は、好ましくは、試料をプレーティングし、好気性培養について７２時間、嫌気性培養について９６時間のうちの４８時間の第１の観察期間内に形成されたコロニーの割合を記録するか、又は好ましくはまた胞子が組成物用に精製された時点での発酵の段階を記録することにより、本明細書に記載されているように記録され、例えば、胞子の割合は、第１の胞子形成期中に回収された発酵物、１胞子あたりのジピコリン酸の平均含有量又はそのような発酵で達成可能な最大胞子濃度の割合から得られる。接種試料保存庫は、上記のコンピュータ実装方法を実施するために備えられたコンピュータを含む。コンピュータは、所望の誘導期の持続時間又は対数期の終了を示すタイミングシグナルを受信すると、どのワーキング細胞バンク試料がタイミングシグナルに最もよく適合するかを決定する。好ましくは、コンピュータは、予想される誘導期の持続時間又は対数期の終了までを示すタイミング予測を発信し、ユーザがタイミングシグナルを再考し、場合によってはタイミングシグナルを修正できるようにする。コンピュータが最終的なタイミングシグナルを受信し、適切なワーキング細胞バンク試料が選択されると、コンピュータは、（１）選択された試料の識別子を発信し、発酵槽への接種のためにユーザがワーキング細胞バンク試料コレクションから試料を取得できるようにし、且つ／又は（２）ワーキング細胞バンク試料コレクションから選択された試料の取得を自動的に実施し、取得した試料を発酵槽への接種のためにユーザに引き渡すか、又は（３）ワーキング細胞バンク試料コレクションから選択された試料の発酵槽への供給を自動的に実施するか、又は（４）初期胞子群集濃縮ストック及び後期胞子群集濃縮ストックからそれぞれ引き出すことによって初期及び後期胞子群集の割合を調整することにより、新たなワーキング細胞バンク試料を自動的に混合する。
【0107】
本発明は、胞子形成原核微生物の胞子発芽及び／又は栄養増殖を促進する方法であって、本発明の方法における第１の胞子形成期中に回収された胞子を提供することを含み、好ましくは無機リン酸塩が胞子と一緒に又は逐次的に提供される、方法も提供する。無機リン酸塩は、好ましくは、リン酸、ポリリン酸、亜リン酸及び／又はＨ２ＰＯ４＾（－）、Ｈ２ＰＯ３＾（－）、ＨＰＯ４＾（２－）若しくはＰＯ４＾（３－）の塩から選択される。好ましくは、無機リン酸塩は、リン酸一アンモニウム、リン酸二アンモニウム、リン酸一カリウム、リン酸二カリウム、ポリリン酸アンモニウム、リン酸カルシウム、一塩基性リン酸カルシウム、二塩基性リン酸カルシウム、リン酸マグネシウム、リン酸亜鉛、リン酸マンガン、リン酸鉄、亜リン酸カリウム、リン酸銅、ＮＰＫ肥料、リン鉱石及びそれらの組み合わせからなる群から選択される。例えば国際公開第２０１８１４０５４２号パンフレットに記載されているように、植物の部分、種子又は植物の成長基材（好ましくは土壌）への０．２～２．７ｍｇ／ｍｌの無機リン酸塩、好ましくはリン酸カルシウムの適用により、バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）株又はパエニバチルス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ）株の胞子発芽及び／又は栄養増殖が促進される。
【0108】
更に、本発明は、
ａ）発酵物に接種すること、又は
ｂ）有害生物防除、及び／又は植物病原性真菌性若しくは細菌性病害の予防、遅延、制限若しくはその強度の低減及び／又は植物の健康の改善、及び／又は植物の収量の増加、及び／又は植物栽培領域からの植物病原性真菌物質若しくは細菌物質の放出の予防、遅延、制限若しくは低減
のための、本発明の組成物又は本発明による方法によって得ることができるか若しくは得られる組成物の使用を提供する。上述のように、そのような使用により、本発明の組成物又は生成方法によって付与される利点が現実化される。特に、植物病原性真菌又は細菌の侵入を予防するか、遅延させるか、制限するか、又はその強度を低減させることにより植物の健康が改善され、次に１つ以上の有利な効果：早期且つ良好な発芽、出芽の早期化又は耐久性上昇、作物収量の増加、タンパク質含有量の増加、含油量の増加、デンプン含有量の増加、より発達した根系、根の成長の改善、根の大きさの維持の改善、根の有効性の改善、ストレスに対する耐容性の増大（例えば、干ばつ、熱、塩分、ＵＶ、水、寒さに対するもの）、エチレン生成の低減及び／又はエチレン受容の低減、分げつの増加、草高の増大、葉身の大型化、枯れた根出葉の減少、分げつの強化、葉色の緑化、色素含有量、光合成活性の増大、肥料、殺有害生物剤及び／又は水の必要性の低減、必要な種子の減少、分げつの発生増大、開花の早期化、穀粒成熟の早期化、植物の倒れ（倒伏）減少、シュートの成長増大、植物の活力強化並びに植物の株立本数増加がもたらされ得る。
ａ）発酵物に接種すること、又は
ｂ）有害生物防除、及び／又は植物病原性真菌性若しくは細菌性病害の予防、遅延、制限若しくはその強度の低減及び／又は植物の健康の改善、及び／又は植物の収量の増加、及び／又は植物栽培領域からの植物病原性真菌物質若しくは細菌物質の放出の予防、遅延、制限若しくは低減
のための、本発明の組成物又は本発明による方法によって得ることができるか若しくは得られる組成物の使用を提供する。上述のように、そのような使用により、本発明の組成物又は生成方法によって付与される利点が現実化される。特に、植物病原性真菌又は細菌の侵入を予防するか、遅延させるか、制限するか、又はその強度を低減させることにより植物の健康が改善され、次に１つ以上の有利な効果：早期且つ良好な発芽、出芽の早期化又は耐久性上昇、作物収量の増加、タンパク質含有量の増加、含油量の増加、デンプン含有量の増加、より発達した根系、根の成長の改善、根の大きさの維持の改善、根の有効性の改善、ストレスに対する耐容性の増大（例えば、干ばつ、熱、塩分、ＵＶ、水、寒さに対するもの）、エチレン生成の低減及び／又はエチレン受容の低減、分げつの増加、草高の増大、葉身の大型化、枯れた根出葉の減少、分げつの強化、葉色の緑化、色素含有量、光合成活性の増大、肥料、殺有害生物剤及び／又は水の必要性の低減、必要な種子の減少、分げつの発生増大、開花の早期化、穀粒成熟の早期化、植物の倒れ（倒伏）減少、シュートの成長増大、植物の活力強化並びに植物の株立本数増加がもたらされ得る。
【0109】
本発明によれば、有害生物による被害から保護する必要がある植物又はその部分を保護する方法であって、有害生物、植物、その部分若しくは繁殖材料又は植物が成長する基材を、好ましくは植付け前若しくは後、出芽前若しくは後又は好ましくは微粒子、粉末、懸濁液若しくは溶液として、有効量の、本発明による組成物又は本発明による方法によって得ることができるか若しくは得られる組成物と接触させることを含む方法も提供される。好ましくは、組成物は、１ヘクタールあたり約１×１０＾１０～約１×１０＾１２コロニー形成単位（ｃｆｕ）の胞子、好ましくはバチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）又はパエニバチルス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ）の胞子、最も好ましくはパエニバチルス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ）の胞子又は１ヘクタールあたり約０．５ｋｇ～約５ｋｇの組成物固体で適用される。
【0110】
更に、タンパク質ペイロードを植物、植物の部分、種子又は成長基材に送達する方法であって、本発明による組成物又は本発明による方法によって得ることができるか若しくは得られる組成物を植物、植物の部分、種子又は基材に適用することを含み、胞子は、ペイロードドメインと、ペイロードドメインを前記胞子の表面に送達するための標的ドメインとを含むタンパク質を発現する微生物のものである、方法が本発明により提供される。上述のように、標的ドメインの送達に適したタンパク質及びパエニバチルス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ）株の遺伝子操作方法は、例えば国際公開第２０２０２３２３１６号パンフレット及び国際公開第２０１９０９９６３５号パンフレットに記載されている。
【0111】
本発明は、特に、本明細書に記載の使用又は方法であって、
ｉ）真菌性病害は、白発疹、べと病、ウドンコ病、根こぶ病、菌核病、フザリウム（ｆｕｓａｒｉｕｍ）立枯病及び腐敗病、灰色かび病、炭疽病、リゾクトニア（ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａ）腐敗病、腰折れ病、キャビティスポット、塊茎病害、さび病、黒根病、輪紋病、アファノミセス（ａｐｈａｎｏｍｙｃｅｓ）根腐病、アスコキタ襟腐病、つる枯病、アルテルナリア（ａｌｔｅｒｎａｒｉａ）斑点病、黒脚病、輪斑病、斑点病、セルコスポラ（ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ）葉枯病、セプトリア（ｓｅｐｔｏｒｉａ）斑点病、葉枯病又はそれらの組み合わせから選択され、及び／又は
ｉｉ）真菌性病害は、分類学的階級：
－ フンタマカビ（Ｓｏｒｄａｒｉｏｍｙｃｅｔｅｓ）綱、より好ましくはヒポクレア（Ｈｙｐｏｃｒｅａｌｅｓ）目のもの、より好ましくはベニアワツブタケ（Ｎｅｃｔｒｉａｃｅａｅ）科のもの、より好ましくはフザリウム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）属のもの；
－ フンタマカビ（Ｓｏｒｄａｒｉｏｍｙｃｅｔｅｓ）綱、より好ましくはグロメレラ（Ｇｌｏｍｅｒｅｌｌａｌｅｓ）目のもの、より好ましくはグロメレラ（Ｇｌｏｍｅｒｅｌｌａｃｅａｅ）科のもの、より好ましくはコレトトリカム（Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ）属のもの；
－ レオチノマイセテス（Ｌｅｏｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｓ）綱、より好ましくはビョウタケ（Ｈｅｌｏｔｉａｌｅｓ）目のもの、より好ましくは菌核病菌（Ｓｃｌｅｒｏｔｉｎｉａｃｅａｅ）科のもの、より好ましくはボトリチス（Ｂｏｔｒｙｔｉｓ）属のもの；
－ クロイボタケ（Ｄｏｔｈｉｄｅｏｍｙｃｅｔｅｓ）綱、より好ましくはプレオスポラ（Ｐｌｅｏｓｐｏｒａｌｅｓ）目のもの、より好ましくはプレオスポラ（Ｐｌｅｏｓｐｏｒａｃｅａｅ）科のもの、より好ましくはアルテルナリア（Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ）属のもの；
－ クロイボタケ（Ｄｏｔｈｉｄｅｏｍｙｃｅｔｅｓ）綱、より好ましくはプレオスポラ（Ｐｌｅｏｓｐｏｒａｌｅｓ）目のもの、より好ましくはファエオスファエリア（Ｐｈａｅｏｓｐｈａｅｒｉａｃｅａｅ）科のもの、より好ましくはファエオスファエリア（Ｐｈａｅｏｓｐｈａｅｒｉａ）属のもの；
－ クロイボタケ（Ｄｏｔｈｉｄｅｏｍｙｃｅｔｅｓ）綱、より好ましくはボトリオスファエリア（Ｂｏｔｒｙｏｓｐｈａｅｒｉａｌｅｓ）目のもの、より好ましくはボトリオスファエリア（Ｂｏｔｒｙｏｓｐｈａｅｒｉａｃｅａｅ）科のもの、より好ましくはマクロフォミナ（Ｍａｃｒｏｐｈｏｍｉｎａ）属のもの；
－ クロイボタケ（Ｄｏｔｈｉｄｅｏｍｙｃｅｔｅｓ）綱、より好ましくはカプノディウム（Ｃａｐｎｏｄｉａｌｅｓ）目のもの、より好ましくはコタマカビ（Ｍｙｃｏｓｐｈａｅｒｅｌｌａｃｅａｅ）科のもの、より好ましくはジモセプトリア（Ｚｙｍｏｓｅｐｔｏｒｉａ）属のもの；
－ ハラタケ（Ａｇｒａｒｉｃｏｍｙｃｅｔｅｓ）綱、より好ましくはアンズタケ（Ｃａｎｔｈａｒｅｌｌａｌｅｓ）目のもの、より好ましくはツノタンシキン（Ｃｅｒａｔｏｂａｓｉｄｉａｃｅａｅ）科のもの、より好ましくはリゾクトニア（Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａ）属又はタナテフォルス（Ｔｈａｎａｔｅｐｈｏｒｕｓ）属のもの；
－ サビキン（Ｐｕｃｃｉｎｉｏｍｙｃｅｔｅｓ）綱、より好ましくはサビキン（Ｐｕｃｃｉｎｉａｌｅｓ）目のもの、より好ましくはサビキン（Ｐｕｃｃｉｎｉａｃｅａｅ）科のもの、より好ましくはウロマイセス（Ｕｒｏｍｙｃｅｓ）属又はサビキン（Ｐｕｃｃｉｎｉａ）属のもの；
－ クロボキン（Ｕｓｔｉｌａｇｉｎｏｍｙｃｅｔｅｓ）綱、より好ましくはクロボキン（Ｕｓｔｉｌａｇｉｎａｌｅｓ）目のもの、より好ましくはクロボキン（Ｕｓｔｉｌａｇｉｎａｃｅａｅ）科のもの、より好ましくはクロボキン（Ｕｓｔｉｌａｇｏ）属のもの；
－ 卵菌（Ｏｏｍｙｃｏｔａ）綱、より好ましくはフハイカビ（Ｐｙｔｈｉａｌｅｓ）目のもの、より好ましくはフハイカビ（Ｐｙｔｈｉａｃｅａｅ）科のもの、より好ましくはフハイカビ（Ｐｙｔｈｉｕｍ）属のもの；
－ 卵菌（Ｏｏｍｙｃｏｔａ）綱、より好ましくはツユカビ（Ｐｅｒｏｎｏｓｐｏｒａｌｅｓ）目のもの、より好ましくはツユカビ（Ｐｅｒｏｎｏｓｐｏｒａｃｅａｅ）科のもの、より好ましくは疫病菌（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ）属、プラスモパラ（Ｐｌａｓｍｏｐａｒａ）属又はシュードペロノスポラ（Ｐｓｅｕｄｏｐｅｒｏｎｏｓｐｏｒａ）属のもの
から選択される微生物によって引き起こされるか又は悪化する、使用又は方法を提供する。
ｉ）真菌性病害は、白発疹、べと病、ウドンコ病、根こぶ病、菌核病、フザリウム（ｆｕｓａｒｉｕｍ）立枯病及び腐敗病、灰色かび病、炭疽病、リゾクトニア（ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａ）腐敗病、腰折れ病、キャビティスポット、塊茎病害、さび病、黒根病、輪紋病、アファノミセス（ａｐｈａｎｏｍｙｃｅｓ）根腐病、アスコキタ襟腐病、つる枯病、アルテルナリア（ａｌｔｅｒｎａｒｉａ）斑点病、黒脚病、輪斑病、斑点病、セルコスポラ（ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ）葉枯病、セプトリア（ｓｅｐｔｏｒｉａ）斑点病、葉枯病又はそれらの組み合わせから選択され、及び／又は
ｉｉ）真菌性病害は、分類学的階級：
－ フンタマカビ（Ｓｏｒｄａｒｉｏｍｙｃｅｔｅｓ）綱、より好ましくはヒポクレア（Ｈｙｐｏｃｒｅａｌｅｓ）目のもの、より好ましくはベニアワツブタケ（Ｎｅｃｔｒｉａｃｅａｅ）科のもの、より好ましくはフザリウム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）属のもの；
－ フンタマカビ（Ｓｏｒｄａｒｉｏｍｙｃｅｔｅｓ）綱、より好ましくはグロメレラ（Ｇｌｏｍｅｒｅｌｌａｌｅｓ）目のもの、より好ましくはグロメレラ（Ｇｌｏｍｅｒｅｌｌａｃｅａｅ）科のもの、より好ましくはコレトトリカム（Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ）属のもの；
－ レオチノマイセテス（Ｌｅｏｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｓ）綱、より好ましくはビョウタケ（Ｈｅｌｏｔｉａｌｅｓ）目のもの、より好ましくは菌核病菌（Ｓｃｌｅｒｏｔｉｎｉａｃｅａｅ）科のもの、より好ましくはボトリチス（Ｂｏｔｒｙｔｉｓ）属のもの；
－ クロイボタケ（Ｄｏｔｈｉｄｅｏｍｙｃｅｔｅｓ）綱、より好ましくはプレオスポラ（Ｐｌｅｏｓｐｏｒａｌｅｓ）目のもの、より好ましくはプレオスポラ（Ｐｌｅｏｓｐｏｒａｃｅａｅ）科のもの、より好ましくはアルテルナリア（Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ）属のもの；
－ クロイボタケ（Ｄｏｔｈｉｄｅｏｍｙｃｅｔｅｓ）綱、より好ましくはプレオスポラ（Ｐｌｅｏｓｐｏｒａｌｅｓ）目のもの、より好ましくはファエオスファエリア（Ｐｈａｅｏｓｐｈａｅｒｉａｃｅａｅ）科のもの、より好ましくはファエオスファエリア（Ｐｈａｅｏｓｐｈａｅｒｉａ）属のもの；
－ クロイボタケ（Ｄｏｔｈｉｄｅｏｍｙｃｅｔｅｓ）綱、より好ましくはボトリオスファエリア（Ｂｏｔｒｙｏｓｐｈａｅｒｉａｌｅｓ）目のもの、より好ましくはボトリオスファエリア（Ｂｏｔｒｙｏｓｐｈａｅｒｉａｃｅａｅ）科のもの、より好ましくはマクロフォミナ（Ｍａｃｒｏｐｈｏｍｉｎａ）属のもの；
－ クロイボタケ（Ｄｏｔｈｉｄｅｏｍｙｃｅｔｅｓ）綱、より好ましくはカプノディウム（Ｃａｐｎｏｄｉａｌｅｓ）目のもの、より好ましくはコタマカビ（Ｍｙｃｏｓｐｈａｅｒｅｌｌａｃｅａｅ）科のもの、より好ましくはジモセプトリア（Ｚｙｍｏｓｅｐｔｏｒｉａ）属のもの；
－ ハラタケ（Ａｇｒａｒｉｃｏｍｙｃｅｔｅｓ）綱、より好ましくはアンズタケ（Ｃａｎｔｈａｒｅｌｌａｌｅｓ）目のもの、より好ましくはツノタンシキン（Ｃｅｒａｔｏｂａｓｉｄｉａｃｅａｅ）科のもの、より好ましくはリゾクトニア（Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａ）属又はタナテフォルス（Ｔｈａｎａｔｅｐｈｏｒｕｓ）属のもの；
－ サビキン（Ｐｕｃｃｉｎｉｏｍｙｃｅｔｅｓ）綱、より好ましくはサビキン（Ｐｕｃｃｉｎｉａｌｅｓ）目のもの、より好ましくはサビキン（Ｐｕｃｃｉｎｉａｃｅａｅ）科のもの、より好ましくはウロマイセス（Ｕｒｏｍｙｃｅｓ）属又はサビキン（Ｐｕｃｃｉｎｉａ）属のもの；
－ クロボキン（Ｕｓｔｉｌａｇｉｎｏｍｙｃｅｔｅｓ）綱、より好ましくはクロボキン（Ｕｓｔｉｌａｇｉｎａｌｅｓ）目のもの、より好ましくはクロボキン（Ｕｓｔｉｌａｇｉｎａｃｅａｅ）科のもの、より好ましくはクロボキン（Ｕｓｔｉｌａｇｏ）属のもの；
－ 卵菌（Ｏｏｍｙｃｏｔａ）綱、より好ましくはフハイカビ（Ｐｙｔｈｉａｌｅｓ）目のもの、より好ましくはフハイカビ（Ｐｙｔｈｉａｃｅａｅ）科のもの、より好ましくはフハイカビ（Ｐｙｔｈｉｕｍ）属のもの；
－ 卵菌（Ｏｏｍｙｃｏｔａ）綱、より好ましくはツユカビ（Ｐｅｒｏｎｏｓｐｏｒａｌｅｓ）目のもの、より好ましくはツユカビ（Ｐｅｒｏｎｏｓｐｏｒａｃｅａｅ）科のもの、より好ましくは疫病菌（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ）属、プラスモパラ（Ｐｌａｓｍｏｐａｒａ）属又はシュードペロノスポラ（Ｐｓｅｕｄｏｐｅｒｏｎｏｓｐｏｒａ）属のもの
から選択される微生物によって引き起こされるか又は悪化する、使用又は方法を提供する。
【0112】
そのような真菌性有害生物は、広範な作物被害及び／又は収量低下の原因となっている。本発明の組成物が、上に列挙された植物病原性真菌による感染の予防、遅延、制限又はその強度の低減に好適であり、且つ適応していることは、特に有利である。そのような使用又は方法において、胞子は、好ましくはパエニバチルス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ）属、より好ましくは、パエニバチルス・コーリエンシス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｋｏｒｅｅｎｓｉｓ）、パエニバチルス・リゾスファエラエ（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｒｈｉｚｏｓｐｈａｅｒａｅ）、パエニバチルス・ポリミクサ（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｏｌｙｍｙｘａ）、パエニバチルス・アミロリティカス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ａｍｙｌｏｌｙｔｉｃｕｓ）、パエニバチルス・テラエ（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｅｒｒａｅ）、パエニバチルス・ポリミクサ・ポリミクサ（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｏｌｙｍｙｘａ ｐｏｌｙｍｙｘａ）、パエニバチルス・ポリミクサ・プランタルム（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｏｌｙｍｙｘａ ｐｌａｎｔａｒｕｍ）、パエニバチルス新種エピフィチカス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｎｏｖ．ｓｐｅｃ ｅｐｉｐｈｙｔｉｃｕｓ）、パエニバチルス・テラエ（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｅｒｒａｅ）、パエニバチルス・マセランス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｍａｃｅｒａｎｓ）、パエニバチルス・アルベイ（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ａｌｖｅｉ）、より好ましくは、パエニバチルス・ポリミクサ（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｏｌｙｍｙｘａ）、パエニバチルス・ポリミクサ・ポリミクサ（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｏｌｙｍｙｘａ ｐｏｌｙｍｙｘａ）、パエニバチルス・ポリミクサ・プランタルム（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｏｌｙｍｙｘａ ｐｌａｎｔａｒｕｍ）、パエニバチルス新種エピフィチカス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｎｏｖ．ｓｐｅｃ ｅｐｉｐｈｙｔｉｃｕｓ）、パエニバチルス・テラエ（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｅｒｒａｅ）、パエニバチルス・マセランス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｍａｃｅｒａｎｓ）、パエニバチルス・アルベイ（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ａｌｖｅｉ）、更により好ましいのは、パエニバチルス・ポリミクサ（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｏｌｙｍｙｘａ）、パエニバチルス・ポリミクサ・ポリミクサ（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｏｌｙｍｙｘａ ｐｏｌｙｍｙｘａ）、パエニバチルス・ポリミクサ・プランタルム（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｏｌｙｍｙｘａ ｐｌａｎｔａｒｕｍ）及びパエニバチルス・テラエ（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｅｒｒａｅ）、最も好ましくは、パエニバチルス・ポリミクサ（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｏｌｙｍｙｘａ）又はパエニバチルス・テラエ（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｅｒｒａｅ）の胞子である。
【0113】
本発明の上で発表したように、別の態様では、原核微生物の胞子を含む組成物を生成する方法であって、
１）バイオマスの４時間あたりの増加が細胞の１％未満になるまで、胞子形成を導く液体培地中で微生物を発酵させる工程、２）栄養素を発酵培地に添加して培地中で胞子の発芽を生じさせる工程、及び
３）培地から後期胞子を精製する工程
を含み、
精製は、
ａ）培地中の胞子濃度が１０％、より好ましくは２０％、より好ましくは３０％、より好ましくは４０％低減した後、及び／又は
ｂ）培地中の細胞数が２％、より好ましくは５％、より好ましくは１０％増加した後
に実施され、
精製は、生存細胞及び／又は胞子を形成のプロセスで好ましくはＵＶ処理及び／又はより好ましくは熱処理によって不活化する工程を含む、方法も提供される。
１）バイオマスの４時間あたりの増加が細胞の１％未満になるまで、胞子形成を導く液体培地中で微生物を発酵させる工程、２）栄養素を発酵培地に添加して培地中で胞子の発芽を生じさせる工程、及び
３）培地から後期胞子を精製する工程
を含み、
精製は、
ａ）培地中の胞子濃度が１０％、より好ましくは２０％、より好ましくは３０％、より好ましくは４０％低減した後、及び／又は
ｂ）培地中の細胞数が２％、より好ましくは５％、より好ましくは１０％増加した後
に実施され、
精製は、生存細胞及び／又は胞子を形成のプロセスで好ましくはＵＶ処理及び／又はより好ましくは熱処理によって不活化する工程を含む、方法も提供される。
【0114】
上述のように、完全に胞子形成した液相発酵は、初期胞子群集と後期胞子群集の両方を含有する。初期胞子及び後期胞子は表現型的にほとんど区別不能であることから、後期群集胞子の選択的濃縮は、分離法によって行うことはできない。しかしながら、初期胞子群集は迅速に発芽する傾向があるため、そのような初期胞子を発芽させ、それらを後期胞子の大部分が発芽する前に不活化させることができる。したがって、本発明は、後期群集胞子を濃縮した胞子組成物を提供するための、確実且つ急速であり複雑ではない方法を提供する。胞子が極めて耐久性が高く、長期にわたって緩徐ではあるが着実に胞子形成可能であることは、そのような組成物の利点である。したがって、農業用製品、清浄製品又はプロバイオティクス製品において、そのような組成物のそのような胞子が発芽し、生存細胞が最終的に失われた後であっても、そのような組成物は、初期胞子組成物によって得ることができる効果を延長するのに有利である。更に、初期胞子群集の胞子が枯渇しており後期胞子が濃縮されているそのような組成物は、例えば上述の発酵槽への接種のために、初期胞子群集が濃縮されている組成物と計画的に混合するのに有利である。
【0115】
好ましくは、本発明の組成物は２種の胞子を含み、一方の種の胞子は初期発芽胞子が濃縮されており、他方の種の胞子は後期発芽胞子が濃縮されている。より詳細には、本発明は、少なくとも２種の原核微生物の精製胞子を含む組成物を提供し、
ｉ）第１の種について、
ａ）前記胞子は、コロニー形成に適した培地上にプレーティングされた場合にコロニーを形成し、プレーティング後、好気性培養について７２時間以内及び嫌気性培養について９６時間以内に形成された全てのそのようなコロニーの少なくとも４０％、より好ましくは４０～９０％、より好ましくは少なくとも５０％、より好ましくは５０～９０％、より好ましくは少なくとも６０％、より好ましくは６０～９０％、より好ましくは少なくとも７０％、より好ましくは７０～９０％は、４８時間以内に形成され、及び／又は
ｂ）胞子の少なくとも４０％、より好ましくは少なくとも５０％、より好ましくは少なくとも５５％、より好ましくは少なくとも６０％、より好ましくは少なくとも７０％、より好ましくは少なくとも８０％は、第１の胞子形成期中に回収された発酵物から得ることができるか又は得られ、及び／又は
ｃ）１胞子あたりのジピコリン酸の平均含有量は、定常期まで好適な培地で発酵された胞子のジピコリン酸の平均含有量の最大で８０％、より好ましくは２０～８０％、更により好ましくは２２～７０％、更により好ましくは３０～６５％であり、及び
ｉｉ）第２の種について、
ａ）前記胞子は、コロニー形成に適した培地上にプレーティングされた場合にコロニーを形成し、プレーティング後、好気性培養について７２時間以内及び嫌気性培養について９６時間以内に形成された全てのそのようなコロニーの少なくとも３０％、より好ましくは４０～９０％、より好ましくは少なくとも５０％、より好ましくは５０～９０％、より好ましくは少なくとも６０％、より好ましくは６０～９０％、より好ましくは少なくとも７０％、より好ましくは７０～９０％は、４８時間後に形成され、及び／又は
ｂ）胞子の少なくとも４０％、より好ましくは少なくとも５０％、より好ましくは少なくとも５５％、より好ましくは少なくとも６０％、より好ましくは少なくとも７０％、より好ましくは少なくとも８０％は、第２の胞子形成期中に回収された発酵物から得ることができるか又は得られ、及び／又は
ｃ）１胞子あたりのジピコリン酸の平均含有量は、定常期まで好適な培地で発酵された胞子のジピコリン酸の平均含有量の少なくとも７０％、より好ましくは８０～１００％、より好ましくは８５～１００％、更により好ましくは９０～１００％である。
ｉ）第１の種について、
ａ）前記胞子は、コロニー形成に適した培地上にプレーティングされた場合にコロニーを形成し、プレーティング後、好気性培養について７２時間以内及び嫌気性培養について９６時間以内に形成された全てのそのようなコロニーの少なくとも４０％、より好ましくは４０～９０％、より好ましくは少なくとも５０％、より好ましくは５０～９０％、より好ましくは少なくとも６０％、より好ましくは６０～９０％、より好ましくは少なくとも７０％、より好ましくは７０～９０％は、４８時間以内に形成され、及び／又は
ｂ）胞子の少なくとも４０％、より好ましくは少なくとも５０％、より好ましくは少なくとも５５％、より好ましくは少なくとも６０％、より好ましくは少なくとも７０％、より好ましくは少なくとも８０％は、第１の胞子形成期中に回収された発酵物から得ることができるか又は得られ、及び／又は
ｃ）１胞子あたりのジピコリン酸の平均含有量は、定常期まで好適な培地で発酵された胞子のジピコリン酸の平均含有量の最大で８０％、より好ましくは２０～８０％、更により好ましくは２２～７０％、更により好ましくは３０～６５％であり、及び
ｉｉ）第２の種について、
ａ）前記胞子は、コロニー形成に適した培地上にプレーティングされた場合にコロニーを形成し、プレーティング後、好気性培養について７２時間以内及び嫌気性培養について９６時間以内に形成された全てのそのようなコロニーの少なくとも３０％、より好ましくは４０～９０％、より好ましくは少なくとも５０％、より好ましくは５０～９０％、より好ましくは少なくとも６０％、より好ましくは６０～９０％、より好ましくは少なくとも７０％、より好ましくは７０～９０％は、４８時間後に形成され、及び／又は
ｂ）胞子の少なくとも４０％、より好ましくは少なくとも５０％、より好ましくは少なくとも５５％、より好ましくは少なくとも６０％、より好ましくは少なくとも７０％、より好ましくは少なくとも８０％は、第２の胞子形成期中に回収された発酵物から得ることができるか又は得られ、及び／又は
ｃ）１胞子あたりのジピコリン酸の平均含有量は、定常期まで好適な培地で発酵された胞子のジピコリン酸の平均含有量の少なくとも７０％、より好ましくは８０～１００％、より好ましくは８５～１００％、更により好ましくは９０～１００％である。
【0116】
そのような組成物により、有益なことに、組成物の使用中、組成物を例えば植物、植物の部分又は植物成長基材に適用した後、第１の種の胞子を発芽させて急速に増殖させることができる一方、第２の種はより遅く、より長期にわたり発芽するため、対応する有益な効果がより長期にわたり一貫してもたらされる。
【0117】
以下では、本発明を下記の非限定的な実施例によって更に例証する。
【実施例】
【0118】
実施例１：１２Ｌスケールの発酵におけるパエニバチルス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ）ＳＴＲＡＩＮ ３２の胞子形成
発酵の過程にわたってパエニバチルス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ）株及びバチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）株の胞子形成をモニタリングするために、１２Ｌスケールの発酵を行った。ここから、例として、パエニバチルス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ）株ＳＴＲＡＩＮ ３２を使用したそのような発酵における胞子数／ｍｌを図１に示す。
発酵の過程にわたってパエニバチルス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ）株及びバチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）株の胞子形成をモニタリングするために、１２Ｌスケールの発酵を行った。ここから、例として、パエニバチルス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ）株ＳＴＲＡＩＮ ３２を使用したそのような発酵における胞子数／ｍｌを図１に示す。
【0119】
株ＳＴＲＡＩＮ ３２は、野生型分離株Ｐ．ポリミクサ（Ｐ．ｐｏｌｙｍｙｘａ）ＬＵ１７００７のポリミキシン不含の突然変異株であり、ランダム変異導入アプローチから得たものである。培養中の胞子形成を実証するためにこの株を例示的に選択したが、胞子形成の異時性を、野生型株Ｐ．ポリミクサ（Ｐ．ｐｏｌｙｍｙｘａ）ＬＵ１７００７並びにその更なる変異継承株（例えば、ＬＵ５４及びＬＵ５２）、Ｐ．ポリミクサ（Ｐ．ｐｏｌｙｍｙｘａ）ＤＭ３６５又はＰ．テラエ（Ｐ．ｔｅｒｒａｅ）ＤＳＭ１５８９１などの公開されているパエニバチルス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ）株並びにバイオ有害生物防除株バチルス・ベレンジエンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｖｅｌｅｎｚｉｅｎｓｉｓ）ＭＢＩ６００においても立証した（データは示さず）。
【0120】
パエニバチルス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ）ＳＴＲＡＩＮ ３２の胞子形成のタイミングを分析するための発酵条件。
前培養条件
ＰＸ－１２５の組成は、表１に記載されている。ストック溶液の成分を蒸留水に溶解させ、滅菌濾過又は１２１℃、１ｂａｒの過圧での６０分間のオートクレーブのいずれかを行った。滅菌溶液を室温又は４℃のいずれかで保存した。オートクレーブプロセスの開始直前に、消泡剤を主溶液に添加した。ストック溶液を混合した後、培地のｐＨを２５％（ｗ／ｗ）アンモニア溶液又は４０％（ｗ／ｗ）リン酸のいずれかで６．５に設定した。
前培養条件
ＰＸ－１２５の組成は、表１に記載されている。ストック溶液の成分を蒸留水に溶解させ、滅菌濾過又は１２１℃、１ｂａｒの過圧での６０分間のオートクレーブのいずれかを行った。滅菌溶液を室温又は４℃のいずれかで保存した。オートクレーブプロセスの開始直前に、消泡剤を主溶液に添加した。ストック溶液を混合した後、培地のｐＨを２５％（ｗ／ｗ）アンモニア溶液又は４０％（ｗ／ｗ）リン酸のいずれかで６．５に設定した。
【0121】
【表1】
【0122】
前培養を、１１０ｍｌの培養培地ＰＸ－１２５を含有する、通気性のあるシリコンプラグで密封したバッフル付きの１Ｌ振盪フラスコで行った。パエニバチルス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ）ＳＴＲＡＩＮ ３２の低温培養バイアルを使用して、培地に０．６％（ｖ／ｖ）を接種した。３３℃、１５０ｒｐｍ及び２５ｍｍの振盪周波数で、２４時間培養を実施した。
【0123】
本培養条件
前培養物の振盪フラスコをプールし、１２ｌのＰＸ－１４１培地（２％（ｖ／ｖ）で接種）を含有する２１ｌバイオリアクタに移した。本培養培地ＰＸ－１４１の配合表を表２に示す。
前培養物の振盪フラスコをプールし、１２ｌのＰＸ－１４１培地（２％（ｖ／ｖ）で接種）を含有する２１ｌバイオリアクタに移した。本培養培地ＰＸ－１４１の配合表を表２に示す。
【0124】
本培養培地：ＰＸ－１４１
【0125】
【表2】
【0126】
発酵を３３℃で７２時間行った。ｐＨを６．５に設定し、水酸化アンモニウム又はリン酸で調整した。撹拌器の速度（５００～１２００ｒｐｍ）及び通気（５～３０Ｌ／分）を調節することにより、溶存酸素を＞２０％に設定した。発酵培養試料を６時間ごとに採取し、４℃で保存した。
【0127】
胞子の定量
発酵試料中の胞子計数を、製造業者のマニュアルに従ってＣ－Ｃｈｉｐディスポーザブル計数チャンバ（Ｎｅｕｂａｕｅｒ／ＮａｎｏＥｎＴｅｋ）を使用して位相差顕微鏡法によって評価した。正確に計数するために、０．９％ＮａＣｌ滅菌溶液を使用して発酵試料を段階希釈した。希釈系列の作製及び胞子力価の計数を、各試料採取地点について三連で行った。
発酵試料中の胞子計数を、製造業者のマニュアルに従ってＣ－Ｃｈｉｐディスポーザブル計数チャンバ（Ｎｅｕｂａｕｅｒ／ＮａｎｏＥｎＴｅｋ）を使用して位相差顕微鏡法によって評価した。正確に計数するために、０．９％ＮａＣｌ滅菌溶液を使用して発酵試料を段階希釈した。希釈系列の作製及び胞子力価の計数を、各試料採取地点について三連で行った。
【0128】
発酵の時間間隔ごとの胞子の正味生成量を図２に示す。
【0129】
実施例２：発酵中の様々な時点で形成された胞子の成長タイミング
成長特性を観察するための精製胞子溶液の作製
発酵過程の様々な時点で形成された胞子の発芽タイミングを調査するために、精製胞子溶液を作製し、以下の手順に従って同じ胞子計数／ｍｌに調整した。
成長特性を観察するための精製胞子溶液の作製
発酵過程の様々な時点で形成された胞子の発芽タイミングを調査するために、精製胞子溶液を作製し、以下の手順に従って同じ胞子計数／ｍｌに調整した。
【0130】
最初に、実施例１の前述の発酵において２４、３０、３６、４２、４８、５４、６０、６６及び７２時間の培養時間で回収した２ｍｌの培養ブロス試料を６０℃で６０分間熱処理することにより、栄養細胞を死滅させた。
【0131】
続いて、胞子を４℃、３，０００ｇで遠心分離することにより洗浄して、５ｍｌの滅菌ｄｄＨ２Ｏで再懸濁させた。洗浄サイクルを少なくとも５回実施して、細胞デブリ及び培地残留物を除去した。その後、胞子を５ｍｌの滅菌ｄｄＨ２Ｏに再懸濁させ、４℃で一晩保存した。翌日、洗浄サイクルを再度、少なくとも５回行った。精製胞子ストックを１ｍｌの滅菌ｄｄＨ２Ｏに再懸濁させ、４℃で保存した。位相差顕微鏡法によって胞子の純度を評価したところ、顕微鏡写真のセクションにつき２００個以上の細胞（胞子）を計数した際、胞子が９９％以上であることが明らかとなった。
【0132】
次に、実施例１で前述したように、精製胞子濃度をＣ－Ｃｈｉｐでの計数によって決定し、ｄＨ２Ｏを用いて同数の胞子／試料に調整した。
【0133】
ＢｉｏＬｅｃｔｏｒ（ｍ２ｐ－ｌａｂｓ）培養装置を使用して、マイクロタイタープレート培養（４８ラウンドウェルＭＴＰ、ＭＴＰ－Ｒ４８－ＢＯＨ、ｍ２ｐ－ｌａｂｓ）中のバイオマスの増加をモニタリングすることにより、精製胞子試料の成長タイミングを評価した。
【0134】
このために、前述の手順で作製した１０Ｅ＋６個の精製胞子を、４８ラウンドウェルプレート（ＭＴＰ－Ｒ４８－ＢＯＨ、ｍ２ｐ－ｌａｂｓ）のＰＸ－１３１培地１．２ｍｌに接種した。
【0135】
マイクロタイタープレート培養に使用したＰＸ－１３１の培地配合表を表３に示す。
【0136】
【表3】
【0137】
蒸発を低減させるために、蒸発低減層を備えたガス透過性シーリングホイル（ｍ２ｐ－ｌａｂｓ）でプレートを密封した。
【0138】
４８ウェルプレートでの培養を、９００ｒｐｍ、振盪直径２．５ｍｍ、３３℃、湿度８５％で少なくとも７２時間行った。バイオマス（Ａ．Ｕ．）を、波長６２０ｎｍの散乱光を介して１５分ごとに測定した。
【0139】
実施例１の発酵過程中での様々な時点の経過後に回収した胞子試料（各々１０Ｅ＋６個の胞子）のＭＴＰスケール培養におけるバイオマス形成を、図３に示す。胞子成長のタイミングを、バイオマスが１ＡＵ以上に達することと定義した。これを図４に示す。
【0140】
実施例３：「初期」及び「後期」胞子試料のフサリシジン生成
フサリシジンの生成を、４８時間培養後の実施例２の発酵試料において評価した。このために、５０μｌの培養ブロスを、９５０μｌのアセトニトリル－水（１：１）混合物とともに抽出用に混合した。超音波浴において２０℃で３０分間、試料を処理した。次に、試料を１４０００ｒｐｍで５分間遠心分離し、測定用に上清をＨＰＬＣバイアル中に濾過した。表５、５及び表６に記載したように、フサリシジン濃度をＨＰＬＣ－ＵＶ－ＶＩＳによって決定した。
フサリシジンの生成を、４８時間培養後の実施例２の発酵試料において評価した。このために、５０μｌの培養ブロスを、９５０μｌのアセトニトリル－水（１：１）混合物とともに抽出用に混合した。超音波浴において２０℃で３０分間、試料を処理した。次に、試料を１４０００ｒｐｍで５分間遠心分離し、測定用に上清をＨＰＬＣバイアル中に濾過した。表５、５及び表６に記載したように、フサリシジン濃度をＨＰＬＣ－ＵＶ－ＶＩＳによって決定した。
【0141】
【表4】
【0142】
【表5】
【0143】
【表6】
【0144】
実施例２の培養におけるフサリシジンＡ、Ｂ及びＤの生成を図５に示す。
【0145】
実施例４：パイロットスケールの発酵における様々な時点での初期胞子と後期胞子との比率
様々な時点から胞子を収集するための発酵条件
前培養条件
パエニバチルス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ）ＳＴＲＡＩＮ ３２の前培養物の振盪フラスコを、ＰＸ－１２５培地を使用して、実施例１に記載したように取り扱った。マルトースのレベルのみ、３０ｇ／Ｌに低減させた。２１．５時間の培養時間後、振盪フラスコの前培養物を、表７に記載した１２ｌのＰＸ－１７２培地を充填した２１ｌバイオリアクタの接種（１．５ｖ／ｖ％）に使用した。
様々な時点から胞子を収集するための発酵条件
前培養条件
パエニバチルス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ）ＳＴＲＡＩＮ ３２の前培養物の振盪フラスコを、ＰＸ－１２５培地を使用して、実施例１に記載したように取り扱った。マルトースのレベルのみ、３０ｇ／Ｌに低減させた。２１．５時間の培養時間後、振盪フラスコの前培養物を、表７に記載した１２ｌのＰＸ－１７２培地を充填した２１ｌバイオリアクタの接種（１．５ｖ／ｖ％）に使用した。
【0146】
【表7】
【0147】
実施例１に記載のように３３℃で１８時間発酵を行い、次いで同じくＰＸ－１７２培地（１８０ｌ）を含有する３００Ｌの本培養発酵槽に移した。本発酵を３３℃で７２時間行った。ｐＨを６．５に設定し、水酸化アンモニウム又はリン酸で調整した。撹拌器の速度（３００～６００ｒｐｍ）及び通気（２．５～１２ｍ３／分）を調節することにより、溶存酸素を＞２０％に設定した。発酵培養試料を６時間ごとに採取し、４℃で保存した。
【0148】
発酵の様々な時点におけるパエニバチルス・ポリミクサ（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｏｌｙｍｙｘａ）ＳＴＲＡＩＮ ３２の発芽の速い胞子と遅い胞子との比率を明らかにするために、３６時間及び５６時間の培養時間後に上記の発酵から培養ブロス試料を採取した。
【0149】
このために、１００μＬの培養ブロスを、９００μＬの無菌０．９％ＮａＣｌ．９％ＮａＣｌ＋０．１ｇ／Ｌ Ｔｗｅｅｎ８０溶液で希釈した。２ｍｌチューブを使用し、混合物を、同じ希釈液を使用して１０Ｅ－９の最終希釈レベルまで１０段階で更に希釈した。
【0150】
次に、培養希釈段階の各々をサーモサイクラー内において６０℃で３０分間加熱して、栄養細胞を死滅させた。１００μｌの各アプローチをＩＳＰ２寒天プレートにプレーティングし、続いて３３℃で７２時間培養した。ＩＳＰ２寒天の配合表を表８に示す。
【0151】
【表8】
【0152】
寒天プレート上のコロニー形成単位（ＣＦＵ）を、培養の４８時間後及び７２時間後に計数することにより決定した。両方の評価時点後に判明したＣＦＵの比率を図６に示す。
【0153】
実施例５：発酵試料中のパエニバチルス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ）の初期胞子及び後期胞子のジピコリン酸（ＤＰＡ）レベル
以下の手順に従って、胞子からのＤＰＡ抽出を行った。
１．胞子ペレットの作製：１０ｍｌの発酵ブロスを１８，０００ｇで１０分間遠心分離する
２．上清を慎重に廃棄する
３．１０ｍｌの無菌ｄＨ２Ｏを添加し、ピペットで振盪及び反転させることによりペレットを溶解させ、胞子ペレットを洗浄する
４．洗浄した胞子溶液を１８，０００ｇで１０分間遠心分離し、上清を廃棄する
５．洗浄工程３～４を繰り返す
６．ペレットを５ｍｌのｄＨ２Ｏに再懸濁させ、ピペットで振盪及び反転させることによりペレットを溶解させる
７．アプローチ全体を耐圧性の３０ｍｌガラス製注入容器に移し、ブチルゴム栓で密封する。アルミニウムクリンプで密封する
８．試料を１２１℃で６０分間オートクレーブする
９．冷却後、ガラス製容器を開け、２ｍｌを２ｍｌのマイクロ遠心チューブに移す。１８，０００ｇで１０分間遠心分離を実施する
１０．上清をＨＰＬＣ分析バイアルに移し、濾過する
以下の手順に従って、胞子からのＤＰＡ抽出を行った。
１．胞子ペレットの作製：１０ｍｌの発酵ブロスを１８，０００ｇで１０分間遠心分離する
２．上清を慎重に廃棄する
３．１０ｍｌの無菌ｄＨ２Ｏを添加し、ピペットで振盪及び反転させることによりペレットを溶解させ、胞子ペレットを洗浄する
４．洗浄した胞子溶液を１８，０００ｇで１０分間遠心分離し、上清を廃棄する
５．洗浄工程３～４を繰り返す
６．ペレットを５ｍｌのｄＨ２Ｏに再懸濁させ、ピペットで振盪及び反転させることによりペレットを溶解させる
７．アプローチ全体を耐圧性の３０ｍｌガラス製注入容器に移し、ブチルゴム栓で密封する。アルミニウムクリンプで密封する
８．試料を１２１℃で６０分間オートクレーブする
９．冷却後、ガラス製容器を開け、２ｍｌを２ｍｌのマイクロ遠心チューブに移す。１８，０００ｇで１０分間遠心分離を実施する
１０．上清をＨＰＬＣ分析バイアルに移し、濾過する
【0154】
表９及び表１０に記載のパラメータに従って、ＤＰＡレベルをＨＰＬＣ ＵＶ－ＶＩＳによって定量した。
【0155】
【表9】
【0156】
【表10】
【0157】
０．１、０．５及び１ｍＭの９９％ジピコリン酸を使用して、検量線を定めた。ジピコリン酸は、保持時間５．７分で検出された。
【0158】
この方法を使用して、培養過程にわたって採取した実施例３で行った発酵の培養ブロス試料で、総ＤＰＡレベル／発酵ブロス（ｍｌ）を分析した。並行して、生存胞子の力価を、実施例４に記載したように希釈及びプレート計数によって評価した。結果を図７に示す。
【0159】
【0160】
実施例９：クロストリジウム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉａ）からの胞子の異時性成長
バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）及びパエニバチルス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ）以外の他の胞子形成細菌の胞子成長のタイミングを評価するために、クロストリジウム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ）属の２つの株、即ちＣ．テタノモーファム（Ｃ．ｔｅｔａｎｏｍｏｒｐｈｕｍ）ＤＳＭ５２８及びＣ．チロブチリカム（Ｃ．ｔｙｒｏｂｕｔｙｒｉｃｕｍ）ＤＳＭ１４６０を、更なる特性決定のために例示的に選択した。両方の株を、嫌気性条件下において２８℃、ＲＣＭ寒天上で５日間培養した。ＲＣＭ寒天の配合表を表１１に示す。この後、個々のコロニー５個を採取し、６ｍｌのＴＳＢブロスを含有する液体培養バイアルに移した。ＴＳＢブロス培地の配合表を表１２に示す。全ての工程を、嫌気性クローブボックスを使用して嫌気性条件下において生物学的三連で実施した。Ｃ．テタノモーファム（Ｃ．ｔｅｔａｎｏｍｏｒｐｈｕｍ）ＤＳＭ５２８及びＣ．チロブチリカム（Ｃ．ｔｙｒｏｂｕｔｙｒｉｃｕｍ）ＤＳＭ１４６０の液体培養物を、２８℃で７日間、胞子形成まで十分に培養した。胞子成長のタイミングを分析するために、１ｍｌの各液体培養物を６０℃で３０分間加熱して、残存栄養細胞を死滅させた。次に、１００μｌの各アプローチを、ＴＳＢ寒天（表１２）にプレーティングした。寒天培養物を、嫌気性条件下において２８℃で９６時間増殖させた。コロニー形成単位（ＣＦＵ）を、４８時間及び９６時間の培養後に計数した。９６時間での合計ＣＦＵ計数に関連する４８時間及び９６時間の培養時間後に判明したＣＦＵの比率を図９に示す。
バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）及びパエニバチルス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ）以外の他の胞子形成細菌の胞子成長のタイミングを評価するために、クロストリジウム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ）属の２つの株、即ちＣ．テタノモーファム（Ｃ．ｔｅｔａｎｏｍｏｒｐｈｕｍ）ＤＳＭ５２８及びＣ．チロブチリカム（Ｃ．ｔｙｒｏｂｕｔｙｒｉｃｕｍ）ＤＳＭ１４６０を、更なる特性決定のために例示的に選択した。両方の株を、嫌気性条件下において２８℃、ＲＣＭ寒天上で５日間培養した。ＲＣＭ寒天の配合表を表１１に示す。この後、個々のコロニー５個を採取し、６ｍｌのＴＳＢブロスを含有する液体培養バイアルに移した。ＴＳＢブロス培地の配合表を表１２に示す。全ての工程を、嫌気性クローブボックスを使用して嫌気性条件下において生物学的三連で実施した。Ｃ．テタノモーファム（Ｃ．ｔｅｔａｎｏｍｏｒｐｈｕｍ）ＤＳＭ５２８及びＣ．チロブチリカム（Ｃ．ｔｙｒｏｂｕｔｙｒｉｃｕｍ）ＤＳＭ１４６０の液体培養物を、２８℃で７日間、胞子形成まで十分に培養した。胞子成長のタイミングを分析するために、１ｍｌの各液体培養物を６０℃で３０分間加熱して、残存栄養細胞を死滅させた。次に、１００μｌの各アプローチを、ＴＳＢ寒天（表１２）にプレーティングした。寒天培養物を、嫌気性条件下において２８℃で９６時間増殖させた。コロニー形成単位（ＣＦＵ）を、４８時間及び９６時間の培養後に計数した。９６時間での合計ＣＦＵ計数に関連する４８時間及び９６時間の培養時間後に判明したＣＦＵの比率を図９に示す。
【0161】
【表11】
【0162】
【表12】
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】
【図7】
【図8】
【図9】
【国際調査報告】