特表 2024-509587 ＪＡＫ媒介性障害の治療に使用するためのＬＯＲＰＵＣＩＴＩＮＩＢ

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2024-03-04

(54)【発明の名称】ＪＡＫ媒介性障害の治療に使用するためのＬＯＲＰＵＣＩＴＩＮＩＢ

(51)【国際特許分類】

   A61K 31/437 20060101AFI20240226BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20240226BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20240226BHJP

   A61P 1/00 20060101ALI20240226BHJP

   A61K 45/00 20060101ALI20240226BHJP

   A61K 39/395 20060101ALI20240226BHJP

   G01N 33/50 20060101ALI20240226BHJP

   G01N 33/68 20060101ALI20240226BHJP

【ＦＩ】

A61K31/437

A61P35/00

A61P43/00 111

A61P1/00

A61K45/00

A61K39/395 P

G01N33/50 P

G01N33/68

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2023555261

(86)(22)【出願日】2022-03-09

(85)【翻訳文提出日】2023-11-08

(86)【国際出願番号】 EP2022056018

(87)【国際公開番号】W WO2022189496

(87)【国際公開日】2022-09-15

(31)【優先権主張番号】63/159,726

(32)【優先日】2021-03-11

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(31)【優先権主張番号】63/167,287

(32)【優先日】2021-03-29

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(31)【優先権主張番号】63/232,356

(32)【優先日】2021-08-12

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】397060175

【氏名又は名称】ヤンセン ファーマシューティカ エヌ．ベー．

(74)【代理人】

【識別番号】100092783

【弁理士】

【氏名又は名称】小林 浩

(74)【代理人】

【識別番号】100095360

【弁理士】

【氏名又は名称】片山 英二

(74)【代理人】

【識別番号】100093676

【弁理士】

【氏名又は名称】小林 純子

(74)【代理人】

【識別番号】100120134

【弁理士】

【氏名又は名称】大森 規雄

(74)【代理人】

【識別番号】100186897

【弁理士】

【氏名又は名称】平川 さやか

(72)【発明者】

【氏名】アティエ，エドワード エフ

(72)【発明者】

【氏名】バックマン，カーチス イー

(72)【発明者】

【氏名】チャウ，ジェラルド シー

(72)【発明者】

【氏名】コウドリアコバ，タチアナ

(72)【発明者】

【氏名】ポリドリ，デイヴィッド シー．

(72)【発明者】

【氏名】ボルツィロ，ゲイリー ブイ．

【テーマコード（参考）】

2G045

4C084

4C085

4C086

【Ｆターム（参考）】

2G045AA26

2G045DA13

2G045DA14

2G045DA36

4C084AA19

4C084NA05

4C084ZA661

4C084ZA662

4C084ZB261

4C084ZB262

4C084ZC201

4C084ZC202

4C085AA14

4C085BB22

4C086AA01

4C086AA02

4C086AA03

4C086CB05

4C086MA01

4C086MA04

4C086NA14

4C086ZA66

4C086ZB26

4C086ZC20

(57)【要約】

全身毒性の低いＪＡＫ阻害剤が、本明細書に開示される。いくつかの態様では、本開示は、大腸がん及び家族性腺腫性ポリポーシスを含む胃腸系がんなどのＪＡＫによって媒介される疾患状態、障害、及び状態を治療するための方法を含む。

【特許請求の範囲】

【請求項1】

家族性腺腫性ポリポーシスに罹患している対象を治療又は予防する方法であって、治療有効量の式Ｉの化合物、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、多形を含む組成物を前記対象に投与することを含む、方法。

【請求項2】

胃腸系がんに罹患している対象を治療又は予防する方法であって、治療有効量の式Ｉの化合物、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、多形を含む組成物を前記対象に投与することを含む、方法。

【請求項3】

大腸がんに罹患している対象を治療又は予防する方法であって、治療有効量の式Ｉの化合物、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、多形を含む組成物を前記対象に投与することを含む、方法。

【請求項4】

高リスク群にある対象における家族性腺腫性ポリポーシス又は大腸がんを予防する方法であって、治療有効量の式Ｉの化合物、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、多形を含む組成物を前記対象に投与することを含む、方法。

【請求項5】

対象における大腸がん又は家族性腺腫性ポリポーシスを治療する方法であって、
（ａ）ＫＲＡＳ、ＴＰ５３、ＥＧＦＲ、ＳＴＫ１１（ＬＫＢ１）、ＰＴＥＮ、ＢＭＰＲ１Ａ、ＳＭＡＤ４（ＭＡＤＨ／ＤＰＣ４）、ＭＬＨ１、ＭＳＨ２、ＭＳＨ６、ＰＭＳ２、ＥＰＣＡＭ、ＭＵＴＹＨ（ＭＹＨ）、ＰＯＬＤ１、ＰＯＬＥ、及びＡＰＣから選択される１つ以上の遺伝子における変異を決定することと、
（ｂ）治療有効用量の式Ｉの化合物を投与することと、
を含む、方法。

【請求項6】

対象において、該対象が大腸がん又は家族性腺腫性ポリポーシスを発症するリスクが高いかどうかを診断する方法であって、（ａ）ＫＲＡＳ、ＥＧＦＲ、ＳＴＫ１１（ＬＫＢ１）、ＰＴＥＮ、ＢＭＰＲ１Ａ、ＳＭＡＤ４（ＭＡＤＨ／ＤＰＣ４）、ＭＬＨ１、ＭＳＨ２、ＭＳＨ６、ＰＭＳ２、ＥＰＣＡＭ、ＭＵＴＹＨ（ＭＹＨ）、ＰＯＬＤ１、ＰＯＬＥ、ＴＰ５３、及びＡＰＣから選択される１つ以上の遺伝子における変異を決定することと、
（ｂ）治療有効用量の式Ｉの化合物を投与することと、
を含む、方法。

【請求項7】

治療を必要とする対象におけるＪＡＫの阻害によって影響を受ける障害又は状態を予防する方法であって、式Ｉの化合物、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、多形を投与することを含む、方法。

【請求項8】

前記治療有効量の式Ｉの化合物が、約１０ｍｇ～約１０００ｍｇである、請求項１～７のいずれか一項に記載の方法、

【請求項9】

前記治療有効量の式Ｉの化合物が、約１ｍｇ～約１００ｍｇである、請求項１～８のいずれか一項に記載の方法、

【請求項10】

前記式Ｉの化合物が、１日１回投与される、請求項１～９のいずれか一項に記載の方法。

【請求項11】

前記式Ｉの化合物が、１日２回投与される、請求項１～９のいずれか一項に記載の方法。

【請求項12】

前記対象が、以前に療法を受けているか、又は現在療法を受けている、請求項１～１１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項13】

前記療法が、手術、放射線療法、化学療法。ＮＳＡＩＤ、Ｃｏｘ－２阻害剤、ＥＧＦＲ阻害剤、ＶＥＧＦ阻害剤、及びチェックポイント阻害剤であり得る、請求項１～１２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項14】

前記式Ｉの化合物と組み合わせて第２の活性薬剤を投与することを更に含み、前記第２の活性薬剤が、ＮＳＡＩＤ、Ｃｏｘ－２阻害剤、セツキシマブ（cetuximab）、パニツムマブ（panitumumab）、ベバシズマブ（bevacizumab）、Ｚｉｖ－アフリベルセプト（Ziv-aflibercept）、レゴラフェニブ（regorafenib）、ラムシルマブ（ramucirumab）、イピリムマブ（ipilimumab）、ニボルマブ（nivolumab）、及びペムブロリズマブ（pembrolizumab）から選択される、請求項１～１３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項15】

式Ｉの化合物に対する応答の予測を、それを必要とする対象において行う方法であって、
（ａ）式Ｉの化合物に曝露されていない対象の対照サンプル中のｐＳＴＡＴ－３のレベルを測定することと、
（ｂ）式の化合物に曝露されている対象の試験サンプル中のｐＳＴＡＴ－３のレベルを測定することと、
（ｃ）（ａ）における前記ｐＳＴＡＴ－３のレベルを（ｂ）と比較することと、
を含み、
（ｂ）における前記ｐＳＴＡＴ－３のレベルの減少が、前記対象における前記式Ｉの化合物に対する応答を予測する、
方法。

【請求項16】

進行中のＪＡＫ阻害剤療法の有効性のモニタリングを、それを必要とする対象において行う方法であって、
（ａ）式Ｉの化合物に曝露されていない対象の対照サンプル中のｐＳＴＡＴ－３のレベルを測定することと、
（ｂ）式の化合物に曝露されている対象の試験サンプル中のｐＳＴＡＴ－３のレベルを測定することと、
（ｃ）（ａ）における前記ｐＳＴＡＴ－３のレベルを（ｂ）と比較することと、
を含み、
（ｂ）における前記ｐＳＴＡＴ－３のレベルの減少が、前記対象における式Ｉの化合物の有効性を示す、
方法。

【請求項17】

請求項１～１６のいずれか一項に記載の方法において使用するための、式Ｉの化合物。

【請求項18】

請求項１～１６のいずれか一項に記載の方法のための医薬品を製造するための、式Ｉの化合物の使用。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

（関連出願の相互参照）
本出願は、２０２１年３月１１日に出願された米国特許仮出願第６３／１５９，７２６号、２０２１年３月２９日に出願された米国特許仮出願第６３／１６７，２８７号、及び２０２１年８月１２日に出願された米国特許仮出願第６３／２３２，３５６号に対する優先権を主張するものであり、これらの各々は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。

【0002】

（発明の分野）
本発明は、ＪＡＫ阻害剤の使用方法及びかかる阻害剤を含む薬学的組成物に関する。この化合物及び薬学的組成物は、ＪＡＫによって媒介される疾患状態、障害、及び状態を予防又は治療するために有用であると想定される。

【背景技術】

【0003】

報告によれば、女性の約３人に１人、男性の約２人に１人が、がんと診断され、約４人に１人が、がんで死亡する。Ａ．Ａｌｂｉｎｉ，ｅｔ ａｌ．，Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．２２（１７），４３２２－２７（２０１６）「Ｃａｎｃｅｒ ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ ａｎｄ ｉｎｔｅｒｃｅｐｔｉｏｎ：Ａ ｎｅｗ ｅｒａ ｆｏｒ ｃｈｅｍｏｐｒｅｖｅｎｔｉｖｅ ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ」を参照されたい。胃腸管の以下の臓器において、かなりの数のがんが発生する：胃、小腸、結腸、直腸、及び肛門。胃がん（stomach cancer）又は胃がん（gastric cancer）は、最も一般的ながんのランキングにおいて４番目であり、世界的ながん死亡率のランキングにおいて２番目であると報告されている。Ｇ．Ｂｊｅｌａｋｏｖｉｃ，ｅｔ ａｌ．，Ｔｈｅ Ｃｏｃｈｒａｎｅ Ｄａｔａｂａｓｅ ｏｆ Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ Ｒｅｖｉｅｗｓ（３）：ＣＤ００４１８３（２００８）「Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｓ ｆｏｒ ｐｒｅｖｅｎｔｉｎｇ ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｃａｎｃｅｒｓ」。報告によれば、小腸がんは、米国において年間９，０００人が罹患している。報告によると、米国では、年間２２，０００件を超える胃がんが診断されている。報告によると、米国では、年間約１４５，０００例の結腸がん症例が診断されている。報告によると、米国では、年間４０，０００件を超える直腸がんが診断されている。これらのがんのうち、大腸がん（colorectal cancer、「ＣＲＣ」）として知られる結腸又は直腸に影響を及ぼすがんは、米国において年間１８０，０００件を超える症例を占める。米国がん協会（American Cancer Society）によれば、２０１８年に米国で１４０，２５０件の大腸がんによる新たな症例が診断されると予想され、２０１８年に米国で５０，６００件の大腸がんによる死亡が起こると予想される。胃、小腸、及び大腸（後者は、大腸、直腸、及び肛門を含む）は、本明細書では胃腸系（stomacho-intestinal system、「ＳＩＳ」）と総称され、そのような器官のいずれかにおけるがんは、胃腸系がん（stomacho-intestinal system cancer、「ＳＩＳＣ」）と称される。ＳＩＳＣの発症（特に、ＣＲＣの発症）を予防することは、その初発時に関してであれ、再発段階であれ、医学ニーズが満たされていない。この予防措置は、本明細書において、大腸がんの阻止に言及する場合、ＳＩＳＣ阻止又はＣＲＣ阻止と称される。

【0004】

ＦＡＰは、最も一般的な腺腫性ポリポーシス症候群である。これは、結腸全体にわたる数百から数千の腺腫性ポリープの早期発症を特徴とする常染色体優性遺伝性障害である。治療せずに放置すると、この症候群を有するほぼ全ての患者が３５～４０歳までに結腸がんを発症する。予防的結腸切除が標準治療であるが、患者は依然として十二指腸及び直腸ポリープの悪性形質転換のリスクがある。非選択的及び選択的シクロオキシゲナーゼ阻害剤（例えば、スリンダク又はセレコキシブ）の両方を用いた複数の研究により、抗炎症剤が大腸腺腫性ポリープの形成を阻害できることが示されている。（Ｒ．Ｋ．Ｓ．Ｐｈｉｌｌｉｐｓ，ｅｔ ａｌ．Ｇｕｔ５０，８５７－８６０（２００２）「Ａ ｒａｎｄｏｍｉｚｅｄ，ｄｏｕｂｌｅ ｂｌｉｎｄ，ｐｌａｃｅｂｏ ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ ｓｔｕｄｙ ｏｆ ｃｅｌｅｃｏｘｉｂ，ａ ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ｃｙｃｌｏｏｘｙｇｅｎａｓｅ２ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ，ｏｎ ｄｕｏｄｅｎａｌ ｐｏｌｙｐｏｓｉｓ ｉｎ ｆａｍｉｌｉａｌ ａｄｅｎｏｍａｔｏｕｓ ｐｏｌｙｐｏｓｉｓ」、Ｐ．Ｒｉｃｅ，ｅｔ ａｌ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．６３，６１６－６２０（２００３）「Ｓｕｌｉｎｄａｃ ｓｕｌｆｉｄｅ ｉｎｈｉｂｉｔｓ ｅｐｉｄｅｒｍａｌ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ－ｒｅｇｕｌａｔｅｄ ｋｉｎａｓｅ １／２ ａｎｄ Ｂａｄ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｃｏｌｏｎ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ」）。これらの薬剤に関連する毒性は、それらの更なる開発を妨げてきた。ＦＡＰを有する個体において、ポリープ負荷を低減し、結腸切除の必要性を遅延又は排除し、腺がんの発症を阻止するための新たな治療選択肢に対する高いニーズが満たされていない。ＦＡＰを有する患者由来のポリープ並びに散発性ＣＲＣをもたらすポリープは、インターロイキン（interleukin、ＩＬ）－２３／ＩＬ－１７／ヤヌスキナーゼ（Janus kinase、ＪＡＫ）／転写ＳＴＡＴ３経路のシグナル伝達因子及び活性化因子に関連する炎症を示す。正常に見える隣接する非腺腫性上皮及びその周囲の免疫と比較して、腺腫の上皮は、著しく増加した免疫浸潤を伴う。この浸潤は、ＩＬ－１７及びｐ－ＳＴＡＴ３発現によって示されるＳＴＡＴ３経路の活性化を特徴とする。加えて、腺腫性上皮自体が局所的に活性化され得る。高度の異形成を伴う腺腫は、より多くの活性化されたＩＬ－１７及びｐ－ＳＴＡＴ３免疫浸潤、並びにより広く分布した上皮ｐ－ＳＴＡＴ３の発現を示す場合がある。これらの知見は、この炎症経路が更なる変異誘発及び腫瘍発生をもたらすことを示唆する。免疫及び上皮ＳＴＡＴ３の活性化の両方が、マウスモデルにおいて腫瘍形成に寄与することも報告されている。Ｅ．Ｃ．Ｗｉｃｋ，ｅｔ ａｌ．，Ｉｎｆｌａｍｍ．Ｂｏｗｅｌ Ｄｉｓ．２０（５），８２１－３４（２０１４）「Ｓｔａｔ３ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｉｎ ｍｕｒｉｎｅ ｃｏｌｉｔｉｓ ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｙ ｅｎｔｅｒｏｔｏｘｉｇｅｎｉｃ Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ ｆｒａｇｉｌｉｓ」。具体的には、ＩＬ－２３は、ＣＲＣにおける腫瘍の増殖及び進行に関連しており、高度の異形成を伴う腺腫は、ＩＬ－１７Ａ及びリン酸化ＳＴＡＴ３のレベルの上昇を示した。（Ｊ．Ｌ．Ｌａｎｇｏｗｓｋｉ，ｅｔ ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ４４２（７１０１），４６１－４６５（２００６）「ＩＬ－２３ ｐｒｏｍｏｔｅｓ ｔｕｍｏｕｒ ｉｎｃｉｄｅｎｃｅ ａｎｄ ｇｒｏｗｔｈ」）。胃腸管における過剰な炎症応答は、腫瘍壊死因子（tumor necrosis factor、ＴＮＦ）、インターフェロン－ガンマ（interferon-gamma、ＩＦＮγ）、ＩＬ－１、ＩＬ－６、ＩＬ－１２、ＩＬ－２１、及びＩＬ－２３などの炎症性サイトカインによって媒介され、これらは、Ｔリンパ球及びＢリンパ球、上皮細胞、マクロファージ、及び樹状細胞（dendritic cell、ＤＣ）を含む自然免疫系及び適応免疫系の細胞に対してそれらの効果を発揮する（上で引用したＭ．Ｃｏｓｋｕｎ，ｅｔ ａｌ．，Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ７６，１－８（２０１３）、Ｓ．Ｄａｎｅｓｅ，ｅｔ ａｌ．Ａｍ Ｊ Ｐｈｙｓｉｏｌ Ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔ Ｌｉｖｅｒ Ｐｈｙｓｉｏｌ．３１０，Ｇ１５５－１６２（２０１６）「ＪＡＫ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｕｓｉｎｇ ｔｏｆａｃｉｔｉｎｉｂ ｆｏｒ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｂｏｗｅｌ ｄｉｓｅａｓｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ：ａ ｈｕｂ ｆｏｒ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ」、Ｎｅｕｒａｔｈ Ｍ．Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４，３２９－３４２（２０１４）「Ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ ｉｎ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｂｏｗｅｌ ｄｉｓｅａｓｅ」、Ｓ．Ｖｅｒｍｅｉｒｅ，ｅｔ ａｌ．．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ１５０，Ｓ１２６７（２０１６）「Ｆｉｌｇｏｔｉｎｉｂ（ＧＬＰＧ０６３４），ａｎ Ｏｒａｌ ＪＡＫ１ Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ，Ｉｎｄｕｃｅｓ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｒｅｍｉｓｓｉｏｎ ｉｎ Ｐａｔｉｅｎｔｓ Ｗｉｔｈ Ｍｏｄｅｒａｔｅ－ｔｏ－Ｓｅｖｅｒｅ Ｃｒｏｈｎ’ｓ Ｄｉｓｅａｓｅ：Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｆｒｏｍ ｔｈｅ Ｐｈａｓｅ２ ＦＩＴＺＲＯＹ Ｓｔｕｄｙ Ｉｎｔｅｒｉｍ Ａｎａｌｙｓｉｓ［ＤＤＷ ａｂｓｔｒａｃｔ８１２ｃ］」）。ＪＡＫファミリーであるＪＡＫ１、ＪＡＫ２、ＪＡＫ３、及びＴｙｋ２は、多くのそのようなサイトカインに対する応答において中心的な役割を果たす非受容体チロシンキナーゼである（Ｊ．Ｏ’Ｓｈｅａ，Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３６８，１６１－１７０（２０１３）「ＪＡＫｓ ａｎｄ ＳＴＡＴｓ ｉｎ ｉｍｍｕｎｉｔｙ，ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ，ａｎｄ ｃａｎｃｅｒ」）。受容体ライゲーションに続いて、会合したＪＡＫホモ又はヘテロ二量体は、リン酸化及び活性化され、その後のＳＴＡＴファミリーの転写因子の動員、リン酸化、及び活性化を可能にする。リン酸化されたＳＴＡＴは、核に移行し、ＦＡＰの病因に関与するいくつかのケモカイン、サイトカイン、及びプロテアーゼの遺伝子転写を誘導する（上で引用したＭ．Ｃｏｓｋｕｎ，ｅｔ ａｌ．，Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ７６，１－８（２０１３））。このＪＡＫ－ＳＴＡＴ経路は、ＧＩがんの病因において役割を果たす多くのサイトカインのシグナル伝達機構である。（Ｍ．Ｌｉ，ｅｔ ａｌ．ＰＬｏＳ Ｏｎｅ１０（５），ｅ０１２７３５６（２０１５）「Ｐｒｏｇｎｏｓｔｉｃ ｒｏｌｅ ｏｆ ｐｈｏｓｐｈｏ－ＳＴＡＴ３ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｃａｎｃｅｒｓ ｏｆ ｔｈｅ ｄｉｇｅｓｔｉｖｅ ｓｙｓｔｅｍ：ａ ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ ｒｅｖｉｅｗ ａｎｄ ｍｅｔａ－ａｎａｌｙｓｉｓ」）。ＪＡＫ－ＳＴＡＴ経路は、複数の炎症性サイトカイン応答に共通であり、したがって、それは、ＦＡＰに関連する過剰な炎症応答及び散発性ＣＲＣに関連する腺腫を予防するための、並びにＧＩ管における腺がんの発症を阻止しようと試みるために粘膜恒常性を回復させるための魅力的な治療標的を提供する。研究用及び市販の経口投与された全身的に生体利用可能な汎ＪＡＫ阻害剤は、上昇した脂質（低密度及び高密度リポタンパク質）及び血球減少（好中球減少、リンパ球減少、及び貧血症を含む）、並びに上昇した肝酵素などの、高い（より高い）用量を明らかに制限する様々なオフターゲット効果を有する。したがって、腸管に限定された曝露を伴うＪＡＫの治療的阻害は、ＦＡＰ、ＳＩＳＣ、及びＣＲＣを含む腸管のＪＡＫ駆動性疾患において有効性を達成する機会を提供する。

【0005】

図１を参照すると、経口投与された薬剤は、原則として、口から食道（１）へ、胃（２）へ、十二指腸（３）を通って空腸（４）へ、次に回腸（５）へ、そして次に結腸（６）へ、胃腸管を追うことができる。このような様々な部分の相対的な吸収面積は、空腸（４）で約６０％、回腸（５）で約２６％、及び結腸（６）で約１３％である。これら様々な胃腸管領域を通す吸収は、全身性分布の開始をもたらし得、それにより望ましくない副作用をもたらし得る。胃腸管は、非常に大きな表面積を有する。例えば、Ｈ．Ｆ．Ｈｅｌａｎｄｅｒ，ｅｔ ａｌ．，Ｓｕｒｆａｃｅ ａｒｅａ ｏｆ ｔｈｅ ｄｉｇｅｓｔｉｖｅ ｔｒａｃｔ－ｒｅｖｉｓｉｔｅｄ，Ｓｃａｎｄｉｎａｖｉａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ４９（６），６８１－８９（２０１４）、及びＫ．Ｊ．Ｆｉｌｉｐｓｋｉ，ｅｔ ａｌ．，Ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ｏｆ Ｄｒｕｇｓ：Ｒａｔｉｏｎａｌ Ｄｅｓｉｇｎ Ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ ａｎｄ Ｃｈａｌｌｅｎｇｅｓ Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｔｏｐｉｃｓ ｉｎ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ１３，７７６－８０２（２０１３）。そのような広範な吸収表面積は、腸管の様々な部分の壁を通って血流内に入ることができる物質の全身性分布に有利であり、ひいては全身に分布した物質の望ましくない副作用をもたらす可能性がある。全身性分布は、簡略化した図解目的用の結腸壁を貫通するものとして、図１の破線矢印により示されるが、このような分布は結腸壁に限定されず、図１に示す胃腸管の他の部分の壁、例えば小腸の壁を通じて生じることもまた、可能である。このような全身性分布は、胃腸路生理学を参照して発生することが知られており、また、このような破線矢印は単に、このような全身性分布を概略的に図示するように参照することが知られているため、図１の破線矢印は、胃腸路を超えての全身性分布を表すこともまた、理解される。例えば、腸組織の記述、腸組織における輸送、及び代謝についての記載に関しては、上で引用したＣｕｒｒｅｎｔ Ｔｏｐｉｃｓ ｉｎ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ１３，７７７－８０（２０１３）を参照されたい。

【発明の概要】

【0006】

既知のＪＡＫ阻害剤の中には、全身的な効果に関連する副作用を有するものも存在するため、ＦＡＰ、ＳＩＳＣ、及びＣＲＣを含む腸管の疾患の治療及び予防のための活性物質としての新しいＪＡＫ阻害剤を発見することが望ましい。

【0007】

全身毒性の低いＪＡＫ阻害剤が、本明細書に開示される。いくつかの態様では、本発明は、式Ｉの化合物によって表されるＪＡＫ阻害剤：
２－（１－（（１ｒ，４ｒ）－４－（シアノメチル）シクロヘキシル）－１，６－ジヒドロイミダゾ［４，５－ｄ］ピロロ［２，３－ｂ］ピリジン－２－イル）－Ｎ－（２－ヒドロキシ－２－メチルプロピル）アセトアミド、

【0008】

【化1】

又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、及び多形、並びにＪＡＫによって媒介される疾患状態、障害、及び状態の治療において式Ｉの化合物を使用する方法を含む。「式Ｉの化合物」という用語は、式Ｉの化合物若しくはその薬学的に許容される塩、又は式Ｉの化合物の溶媒和物若しくはその薬学的に許容される塩、又は溶媒を含まない形態、又は本明細書で説明される水和形態及び／若しくは溶媒和形態のうちのいずれか１つである前述のいずれかの多形若しくは共結晶（以降、「式Ｉの化合物、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、及び多形」）を包含することが意図される。式Ｉの化合物は、「活性薬剤（複数可）」とも称される。

【0009】

本発明の態様は、式Ｉの化合物、それを含有する薬学的組成物、それらをＪＡＫ阻害剤として使用する方法、及びＪＡＫによって媒介される疾患状態、障害、状態の治療にそれらを使用する方法に関する。

【0010】

いくつかの態様では、胃腸系がん（ＳＩＳＣ）の発症（特に、大腸がん（ＣＲＣ）の発症）を治療又は予防する方法は、治療有効量の式Ｉの化合物、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、及び多形を含む組成物を対象に投与することを含む。

【0011】

いくつかの態様では、家族性腺腫性ポリポーシス（familial adenomatous polyposis、「ＦＡＰ」）に罹患している対象を治療又は予防する方法は、治療有効量の式Ｉの化合物、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、及び多形を含む組成物を対象に投与することを含む。

【0012】

本発明の態様は、局所ＧＩ効果、及び低い又は無視可能な全身的な効果を有する、汎ＪＡＫ阻害効果を示す。更に、このような特徴を有する本発明の態様を、経口投与することができる。

【0013】

以下の「発明を実施するための形態」から、及び本発明の実施を通して、本発明の追加の態様、特徴、及び利点が明らかになるであろう。

【図面の簡単な説明】

【0014】

【図1】ヒトの胃腸管の一部の概略図を示す（縮尺どおりではない引き伸ばされたレンダリングとして示されている）。十二指腸（３）、空腸（４）、及び回腸（５）（全て概略的に表示）は、胃（２）及び食道（１）の後の小腸を形成する。大腸は結腸（６）を含み、それにより、盲腸（７）及び虫垂（図示せず）、上行結腸、横行結腸、下行結腸、Ｓ状結腸（環状、同様に図示せず）、並びに直腸（１１）を含む。横行結腸は、右結腸曲（８）及び左結腸曲（９）の間に含まれる部分であり、上行結腸は盲腸（７）から右結腸曲（８）に延び、下行結腸は左結腸曲（９）から直腸（１１）に延びる。便宜上、様々な分布パターンが結腸を参照にして図示されるが、これらはまた、胃腸管の他の部分も参照することができる。全身性分布は、簡略化した図解目的用の結腸壁を貫通するものとして、図１の破線矢印により示されるが、このような分布は結腸壁に限定されず、図１に示す胃腸管の他の部分の壁、例えば小腸の壁を通じて生じることもまた、可能である。他のいくつかの浸透による分布は、簡略化した図解目的のための結腸組織に透過するものとして、図１に実線矢印により示されるが、図１に示す胃腸管の他の部分の組織、例えば小腸組織でもまた生じることができるため、このような浸透は結腸組織に限定されない。本発明に従ったＪＡＫ阻害剤の実施形態の効果は、別様においては、炎症性腸疾患（inflammatory bowel disease、「ＩＢＤ」）又は大腸がんに関連する炎症などのＪＡＫによって媒介される傷害をもたらすであろうＪＡＫ／ＳＴＡＴシグナル伝達経路を破壊するものとして例示的に示される。

【図2】式Ｉの化合物の実施形態の調製／相互変換を示す概略図である。

【図3】式Ｉの化合物の以下の実施形態に関するハイスループットＸ線粉末回折（high throughput X-ray powder diffraction、ＨＴ－ＸＲＰＤ）パターンのオーバーレイ：下から上に、１ｓ、２（１，４－ジオキサン中、室温で平衡により入手）、３ｂ（シクロヘキサノン中、熱サイクリングにより入手）、１ｂ＋４（メタノール／水（５０／５０、ｖ／ｖ）中、μＬスケールで冷却結晶化により入手）、５（クロロホルム中、熱サイクリングにより入手）、６（アセトニトリル中、ｍＬスケールで冷却結晶化により入手）、７（１ｓ＋７を入手、それにより、ヘプタン中、溶媒平衡により入手）、７（１ｓ＋７の脱溶媒和により入手、それにより、ヘプタン中、溶媒平衡により入手）、８（サイクリング示差走査熱量測定により、実施形態５の脱溶媒和により入手）、及び９（サイクリング示差走査熱量測定により、実施形態２の脱溶媒和により入手）。

【図4】式Ｉの化合物の以下の実施形態に関するハイスループットＸ線粉末回折（ＨＴ－ＸＲＰＤ）パターンのオーバーレイ：１ｓ（出発物質）、１ａ（実施形態１ｓのサンプルのいくつかの形態を、加速エージング条件（accelerated aging condition、ＡＡＣ）（４０℃及び７０％相対湿度）に曝露した後で入手）、１ｂ（トルエン中、室温での溶媒平衡により入手）、１ｃ（酢酸エチル／１，４－ジオキサン（５０／５０、ｖ／ｖ）中、μＬスケールで冷却結晶化により入手）、１ｄ（アセトニトリル／クロロホルム（５０／５０、ｖ／ｖ）中、μＬスケールで冷却結晶化により入手）、１ｅ（酢酸エチル／１，４－ジオキサン（５０／５０、ｖ／ｖ）中、μＬスケールで冷却結晶化により入手）、１ｆ（ｐ－キシレン中、室温での溶媒平衡により入手）、１ｇ（アニソール中、５０℃での溶媒平衡により入手）、１ｈ（ｐ－キシレン中、μＬスケールで冷却結晶化により入手）。

【図5】式Ｉの化合物の以下の実施形態に関するハイスループットＸ線粉末回折（ＨＴ－ＸＲＰＤ）パターンのオーバーレイ：下から上に、１ｓ、３ｂ（シクロヘキサノン中、熱サイクリングにより入手）、３ｃ（１，４－ジオキサン中、μＬスケールで冷却結晶化により入手）、３ｄ（テトラヒドロフラン中、μＬのスクリーンで冷却結晶化により入手）、及び３ｅ（イソブタノール中、熱サイクリングにより入手）。

【図6】初期形態（「１ｓ」）、４０℃及び７０％相対湿度に４日間曝露した後（「１ｓ ７０ＲＨ」）、並びに２５℃及び１００％相対湿度に４日間曝露した後（「１０」）における、実施形態１ｓのＨＲ－ＸＲＰＤのディフラクトグラム。

【図7A】実施形態１１（Ａ）、実施形態１２（Ｂ）、実施形態１３（Ｃ）、実施形態１４（Ｄ）、及び実施形態１１ｂ（Ｅ）のＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）パターン。

【図7B】実施形態１１（Ａ）、実施形態１２（Ｂ）、実施形態１３（Ｃ）、実施形態１４（Ｄ）、及び実施形態１１ｂ（Ｅ）のＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）パターン。

【図7C】実施形態１１（Ａ）、実施形態１２（Ｂ）、実施形態１３（Ｃ）、実施形態１４（Ｄ）、及び実施形態１１ｂ（Ｅ）のＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）パターン。

【図7D】実施形態１１（Ａ）、実施形態１２（Ｂ）、実施形態１３（Ｃ）、実施形態１４（Ｄ）、及び実施形態１１ｂ（Ｅ）のＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）パターン。

【図7E】実施形態１１（Ａ）、実施形態１２（Ｂ）、実施形態１３（Ｃ）、実施形態１４（Ｄ）、及び実施形態１１ｂ（Ｅ）のＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）パターン。

【図8】式Ｉの化合物の以下の実施形態に関するＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）パターンのオーバーレイ：下から上に、実施形態１７、実施形態１８、実施形態１５、及び実施形態１６。

【図9】１１５度でガラス転移点（Ｔｇ）を示す、実施形態１９に関する変調ＤＳＣ（modulated DSC、「ｍＤＳＣ」）プロファイル。３℃（縦軸のラベルで「Ｒｅｖ」は「可逆（reversible）」を指す）。

【図10A】（Ａ）３０℃～１７０℃で６．５％ｗ／ｗの損失を示す、実施形態１８のＴＧＡ（thermogravimeteric analysis：熱重量分析）。（Ｂ）４５℃～９０℃で５２．８Ｊ／ｇの吸熱、１４０．６℃で３１．０Ｊ／ｇの吸熱、１６８．８℃で２４．３Ｊ／ｇの発熱、及び２００．０℃で３１．３Ｊ／ｇの吸熱を示す、実施形態１８のＤＳＣ（differential scanning calorimetry：示差走査熱量測定）。

【図10B】（Ａ）３０℃～１７０℃で６．５％ｗ／ｗの損失を示す、実施形態１８のＴＧＡ（thermogravimeteric analysis：熱重量分析）。（Ｂ）４５℃～９０℃で５２．８Ｊ／ｇの吸熱、１４０．６℃で３１．０Ｊ／ｇの吸熱、１６８．８℃で２４．３Ｊ／ｇの発熱、及び２００．０℃で３１．３Ｊ／ｇの吸熱を示す、実施形態１８のＤＳＣ（differential scanning calorimetry：示差走査熱量測定）。

【図11】式Ｉの化合物の以下の実施形態に関するＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）パターンのオーバーレイ：下から上に、実施形態２０及び実施形態２１。

【図12A】（Ａ）３０℃～１００℃で４．２％ｗ／ｗの喪失を示す、実施形態１７のＴＧＡ。（Ｂ）４５℃～１００℃で９０．３Ｊ／ｇの吸熱、１４３．８℃で３５．５Ｊ／ｇの吸熱、１６８．３℃で１．６Ｊ／ｇの吸熱、１７８℃で３．８Ｊ／ｇの発熱、及び２００．０℃で９．２Ｊ／ｇの吸熱を示す、実施形態１７のＤＳＣ。

【図12B】（Ａ）３０℃～１００℃で４．２％ｗ／ｗの喪失を示す、実施形態１７のＴＧＡ。（Ｂ）４５℃～１００℃で９０．３Ｊ／ｇの吸熱、１４３．８℃で３５．５Ｊ／ｇの吸熱、１６８．３℃で１．６Ｊ／ｇの吸熱、１７８℃で３．８Ｊ／ｇの発熱、及び２００．０℃で９．２Ｊ／ｇの吸熱を示す、実施形態１７のＤＳＣ。

【図13】式Ｉの化合物の以下の実施形態に関するＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）パターンのオーバーレイ：下から上に、実施形態３１、実施形態３０、実施形態１７、実施形態２９、実施形態１６、実施形態２６、実施形態２５、実施形態１８、実施形態２４、実施形態２３、実施形態２７、及び実施形態２２。

【図14】式Ｉの化合物の以下の実施形態に関するＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）パターンのオーバーレイ：下から上に、実施形態３２、実施形態３３、実施形態２３、実施形態３４、実施形態３５、実施形態３６、実施形態２５、実施形態３８、実施形態１７、実施形態３９、及び実施形態２８。

【図15】式Ｉの化合物の以下の実施形態に関するＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）パターンのオーバーレイ：下から上に、実施形態４６、実施形態４５、実施形態４４、実施形態４３、実施形態４２、実施形態４１、実施形態４０、及び実施形態３７。

【図16】式Ｉの化合物の実施形態に関するＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）パターンのオーバーレイ：下から上に、実施形態５３、実施形態５２、実施形態５１、実施形態５０、実施形態４９、実施形態４８、及び実施形態４７。

【図17A】（Ａ）１５５℃～１８５℃で４．７％ｗ／ｗの喪失を示す、実施形態１１のＴＧＡ。（Ｂ）溶媒喪失により１６７．８℃で５７．８Ｊ／ｇの第１の吸熱を示し、サンプル溶融により１９４．５℃で９０．８Ｊ／ｇの第２の吸熱を示す、実施形態１１のＤＳＣ。

【図17B】（Ａ）１５５℃～１８５℃で４．７％ｗ／ｗの喪失を示す、実施形態１１のＴＧＡ。（Ｂ）溶媒喪失により１６７．８℃で５７．８Ｊ／ｇの第１の吸熱を示し、サンプル溶融により１９４．５℃で９０．８Ｊ／ｇの第２の吸熱を示す、実施形態１１のＤＳＣ。

【図18】０～９０％ＲＨで０．６６％の質量変化を示す、実施形態１１の重量測定による蒸気収着（Gravimetric Vapor Sorption、ＧＶＳ）等温線プロット。縦軸の質量変化は、出発サンプルの質量を基準にする。

【図19A】（Ａ）２６０℃を超える温度での重量喪失を示す、実施形態６のＴＧＡ。この重量喪失は、サンプル分解に関連するものと解釈される。（Ｂ）サンプル溶融により１９４．４℃で９５．８Ｊ／ｇの吸熱を示す、実施形態６のＤＳＣ。

【図19B】（Ａ）２６０℃を超える温度での重量喪失を示す、実施形態６のＴＧＡ。この重量喪失は、サンプル分解に関連するものと解釈される。（Ｂ）サンプル溶融により１９４．４℃で９５．８Ｊ／ｇの吸熱を示す、実施形態６のＤＳＣ。

【図20A】（Ａ）４０℃～２４０℃で１．４％ｗ／ｗの喪失（０．０７モルの１，４－ジオキサンの喪失に相当する）を示す、実施形態８のＴＧＡ。（Ｂ）サンプル溶融により１９９．７℃で５８．６Ｊ／ｇの吸熱を示す、実施形態８のＤＳＣ。

【図20B】（Ａ）４０℃～２４０℃で１．４％ｗ／ｗの喪失（０．０７モルの１，４－ジオキサンの喪失に相当する）を示す、実施形態８のＴＧＡ。（Ｂ）サンプル溶融により１９９．７℃で５８．６Ｊ／ｇの吸熱を示す、実施形態８のＤＳＣ。

【図21A】（Ａ）７５℃～１１０℃で７．４％ｗ／ｗの喪失、１１０℃～１３０℃で１１．９％ｗ／ｗ損失、１３０℃～１６５℃で２．０％ｗ／ｗの喪失、及び１６５℃～２１０℃で２．５％ｗ／ｗの喪失を示す、実施形態２のＴＧＡ。（Ｂ）９２．８℃で８６．２Ｊ／ｇの吸熱、１１１．５℃で１１．１Ｊ／ｇの吸熱、１４９．０℃で４５．５Ｊ／ｇの吸熱、１６５．２℃で２０．６Ｊ／ｇの発熱、１７７．１℃で３．７Ｊ／ｇの吸熱、２００．２℃で４３．０Ｊ／ｇの吸熱、２２０．６℃で２９．３Ｊ／ｇの吸熱を示す、実施形態２のＤＳＣ。

【図21B】（Ａ）７５℃～１１０℃で７．４％ｗ／ｗの喪失、１１０℃～１３０℃で１１．９％ｗ／ｗ損失、１３０℃～１６５℃で２．０％ｗ／ｗの喪失、及び１６５℃～２１０℃で２．５％ｗ／ｗの喪失を示す、実施形態２のＴＧＡ。（Ｂ）９２．８℃で８６．２Ｊ／ｇの吸熱、１１１．５℃で１１．１Ｊ／ｇの吸熱、１４９．０℃で４５．５Ｊ／ｇの吸熱、１６５．２℃で２０．６Ｊ／ｇの発熱、１７７．１℃で３．７Ｊ／ｇの吸熱、２００．２℃で４３．０Ｊ／ｇの吸熱、２２０．６℃で２９．３Ｊ／ｇの吸熱を示す、実施形態２のＤＳＣ。

【図22A】（Ａ）実施形態９のＴＧＡ。（Ｂ）２２１．８℃で１０４．４Ｊ／ｇの吸熱を示す、実施形態９のＤＳＣ。

【図22B】（Ａ）実施形態９のＴＧＡ。（Ｂ）２２１．８℃で１０４．４Ｊ／ｇの吸熱を示す、実施形態９のＤＳＣ。

【図23A】（Ａ）３０℃～１０５℃で５．２％ｗ／ｗの喪失を示す、実施形態１６のＴＧＡ。（Ｂ）３５℃～９０℃で４８．４Ｊ／ｇの吸熱、１４７．０℃で４１．８Ｊ／ｇの吸熱、１６６．６℃で１．０Ｊ／ｇの吸熱、１８０．７℃で４．４Ｊ／ｇの発熱、及び２０１．１℃で７．７Ｊ／ｇの吸熱を示す、実施形態１６のＤＳＣ。

【図23B】（Ａ）３０℃～１０５℃で５．２％ｗ／ｗの喪失を示す、実施形態１６のＴＧＡ。（Ｂ）３５℃～９０℃で４８．４Ｊ／ｇの吸熱、１４７．０℃で４１．８Ｊ／ｇの吸熱、１６６．６℃で１．０Ｊ／ｇの吸熱、１８０．７℃で４．４Ｊ／ｇの発熱、及び２０１．１℃で７．７Ｊ／ｇの吸熱を示す、実施形態１６のＤＳＣ。

【図24】実施形態１１のＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）（「１１」と表示）、及び可変温度（variable temperature、ＶＴ）－ＸＲＰＤ実験後の実施形態１１のＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）（「１１ＶＴ後」と表示）、及び実施形態６のＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）。

【図25】形態１ｓの式Ｉの化合物のＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）パターン。

【発明を実施するための形態】

【0015】

本明細書で使用される場合、「包含する」、「含有する」、及び「含む」という用語は、幅広い非限定的な意味で用いられる。

【0016】

本明細書で与えられるいかなる式も、その構造式によって描写される構造を有する化合物に加えて、特定の変種又は形態も表すことを意図する。特定の構造は、互変異性体として存在し得る。加えて、本発明のこのような化合物の非晶質形態、水和物、溶媒和物、多形、及び擬多形、並びにこれらの混合物もまた、本発明の一部として想定される。本発明の態様は、無溶媒形態、又は本明細書に例示されるような水和及び／若しくは溶媒和形態のうちのいずれか１つである。

【0017】

本明細書で使用される「約」という用語は、数値の直前にある場合、本開示の文脈が別段指示しない限り、又はそのような解釈と矛盾しない限り、その値のプラス又はマイナス１０％の範囲を意味する（例えば、「約５０」は４５～５５を意味し、「約２５，０００」は２２，５００～２７，５００を意味するなど）。

【0018】

「投与する」又は「投与される」又は「投与すること」という用語は、本開示を考慮して、当業者に周知の任意の方法（例えば、筋肉内、皮下、経口、静脈内、皮膚、粘膜内（例えば、腸内）、鼻腔内、又は腹腔内の投与経路）によって、式Ｉの化合物又はその医薬組成物を対象に投与することを指す。特定の態様では、本発明の医薬組成物は、対象に経口投与される。

【0019】

「対象」という用語は、本発明の実施形態による方法によって治療されるか、又は治療されている任意の動物、具体的には哺乳動物、最も具体的にはヒトを意味する。本明細書で使用される場合、「哺乳動物」という用語は、あらゆる哺乳動物を包含する。哺乳動物の例としては、これらに限定されるものではないが、ウシ、ウマ、ヒツジ、ブタ、ネコ、イヌ、マウス、ラット、ウサギ、モルモット、サル又は類人猿などの非ヒト霊長類（non-human primate、ＮＨＰ）、より具体的にはヒトが挙げられる。

【0020】

「阻害剤」（複数可）という用語は、ＪＡＫの発現又は活性を低減、防止、不活性化、脱感作、又は下方制御する化合物を指す。

【0021】

「治療有効量」という用語は、酵素若しくはタンパク質の減少若しくは阻害、若しくは症状の改善、疾患の緩和、疾患進行の遅延若しくは遅れ、又は疾患の予防を含む、研究者、獣医、医師、又は他の臨床専門家が得ようとする生物学的又は薬学的応答を組織系、動物又はヒトにおいて誘発する、本発明の結晶形態を含む活性化合物又は医薬品の量を指す。

【0022】

本明細書で使用される場合、任意の疾患、状態、症候群、又は障害を「治療する」、「治療すること」、又は「治療」という用語は、一実施形態では、疾患、状態、症候群、又は障害を改善すること（すなわち、疾患又はその臨床症状のうちの少なくとも１つの発症を遅らせるか又は抑えるか又は低減すること）を指す。別の実施形態では、「治療する」、「治療すること」、又は「治療」は、患者によって認識可能でない場合がある身体的パラメータを含む、少なくとも１つの身体的パラメータを緩和又は改善することを指す。更なる実施形態では、「治療する」、「治療すること」、又は「治療」は、身体的（例えば、認識可能な症状の安定化）、生理学的（例えば、身体的パラメータの安定化）、又はこれらの両方において、疾患、状態、症候群、又は障害を調節することを指す。更に別の実施形態では、「治療する」、「治療すること」、又は「治療」は、疾患、状態、症候群、又は障害の発現又は発症又は進行を予防する又は遅延させることを指す。

【0023】

「薬学的に許容される塩」は、無毒性であり、生物学的に耐容性であり、かつ別の方法で対象への投与に生物学的に適している、化合物の塩である。全般的には、Ｓ．Ｍ．Ｂｅｒｇｅ，ｅｔ ａｌ．，「Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓａｌｔｓ」，Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．６６，１－１９（１９７７）、及びＨａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓａｌｔｓ，Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ，ａｎｄ Ｕｓｅ，Ｓｔａｈｌ ａｎｄ Ｗｅｒｍｕｔｈ，Ｅｄｓ．，Ｗｉｌｅｙ－ＶＣＨ ａｎｄ ＶＨＣＡ，Ｚｕｒｉｃｈ，２００２を参照されたい。式（Ｉ）の化合物は、十分に酸性の基、十分に塩基性の基、又は両方の種類の官能基を有し得ることから、多くの無機又は有機塩基、並びに無機及び有機酸と反応して薬学的に許容される塩を生成し得る。薬学的に許容される塩の例としては、硫酸塩、ピロ硫酸塩、重硫酸塩、亜硫酸塩、重亜硫酸塩、リン酸塩、リン酸一水素塩、リン酸二水素塩、メタリン酸塩、ピロリン酸塩、塩化物、臭化物、ヨウ化物、酢酸塩、プロピオン酸塩、デカン酸塩、カプリル酸塩、アクリル酸塩、ギ酸塩、イソ酪酸塩、カプロン酸塩、ヘプタン酸塩、プロピオール酸塩、シュウ酸塩、マロン酸塩、コハク酸塩、スベリン酸塩、セバシン酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、ブチン－１，４－二酸塩、ヘキシン－１，６－二酸塩、安息香酸塩、クロロ安息香酸塩、メチル安息香酸塩、ジニトロ安息香酸塩、ヒドロキシ安息香酸塩、メトキシ安息香酸、フタル酸塩、スルホン酸塩、キシレンスルホン酸塩、フェニル酢酸塩、フェニルプロピオン酸塩、フェニル酪酸塩、クエン酸塩、乳酸塩、γ－ヒドロキシ酪酸塩、グリコール酸塩、酒石酸塩、メタン－スルホン酸塩、プロパンスルホン酸塩、ナフタレン－１－スルホン酸塩、ナフタレン－２－スルホン酸塩、及びマンデル酸塩が挙げられる。

【0024】

本明細書において、式Ｉの化合物の組成物、並びにＪＡＫファミリーのチロシンキナーゼのうちの１つ以上によって媒介される疾患状態、障害、及び状態の治療においてそれらを使用する方法が開示される。いくつかの態様では、本方法は、有効量の式Ｉの構造を有する化合物：２－（１－（（１ｒ，４ｒ）－４－（シアノメチル）シクロヘキシル）－１，６－ジヒドロイミダゾ［４，５－ｄ］ピロロ［２，３－ｂ］ピリジン－２－イル）－Ｎ－（２－ヒドロキシ２－メチルプロピル）アセトアミド、

【0025】

【化2】

又はその薬学的に許容される塩、又は溶媒和物、及び多形を含む組成物を対象に投与することを含む。

【0026】

本明細書において、胃腸系がん又は大腸がんに罹患している対象を治療又は予防する方法も開示される。本方法は、治療有効量の式Ｉの化合物、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、及び多形を含む組成物を対象に投与することを含む。胃、小腸、及び大腸（後者は、大腸、直腸、及び肛門を含む）は、本明細書では胃腸系（「ＳＩＳ」）と総称され、そのような器官のいずれかにおけるがんは、胃腸系がん（「ＳＩＳＣ」）と称される。大腸のいずれかにおけるがんは、大腸がん（「ＣＲＣ」）と称される。

【0027】

本明細書において、対象における前悪性状態を治療又は予防する方法も開示され、本方法は、治療有効量の式Ｉの化合物、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、及び多形を含む組成物を対象に投与することを含む。ＳＩＳＣに先行する前悪性状態は、胃腸管（特に、結腸及び／又は直腸）の複数の領域のうちのいずれか１つに存在し得る。時折、このような状態は、ポリープの形態で現れる。これは、その散発性の発症におけるように少数で存在し得るか、家族性腺腫性ポリポーシス（「ＦＡＰ」）におけるように多数で存在し得るか、又はリンチ症候群としても知られる遺伝性非ポリポーシス大腸がんの特定の形態におけるように全く存在し得ない。

【0028】

本明細書において、家族性腺腫性ポリポーシス（「ＦＡＰ」）などの任意のＳＩＳＣ関連がん素因症候群に罹患している対象における疾患の任意の徴候を治療、遅延、又は予防する方法も開示される。本方法は、将来の大腸がんの発症のリスクを低減するために、結腸を予防的に除去する結腸切除などの外科的処置の必要性を遅らせることを含む。本方法は、治療有効量の式Ｉの化合物、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、及び多形を含む組成物を対象に投与することを含む。ＦＡＰという用語は、本明細書において、軽症型家族性腺腫性ポリポーシス（attenuated familial adenomatous polyposis、「ＡＦＡＰ」）などの、ＦＡＰのサブタイプと称されることもあるものを包含するために使用される。別段の指示がない限り、又は任意の特定のサブタイプとして明示的に言及されない限り、ＦＡＰという用語は、ＡＦＡＰなどのサブタイプを含む。

【0029】

いくつかの態様では、対象におけるポリープの数又はポリープ負荷（後者は、ポリープの数及び個々のサイズの両方を考慮することによって定義される）を減少させる方法は、治療有効量の式Ｉの化合物、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、及び多形を含む組成物を対象に投与することを含む。いくつかの態様ではポリープの数を減少させることは、式Ｉの化合物の投与後の結腸、直腸、術後Ｊ型嚢、及び／又は十二指腸におけるポリープの数を減少させることを含む。いくつかの態様では、結腸、直腸、術後Ｊ型嚢、及び十二指腸における直径が≧２ｍｍであるポリープの数が減少する。いくつかの態様では、結腸、直腸、術後Ｊ型嚢、及び／又は十二指腸における直径が≧５ｍｍであるポリープの数が減少する。ある特定の実施形態では、投与後のポリープの数の減少は、約５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、９９．９％、若しくはそれ以上、又はそれらの間の任意の範囲である。

【0030】

また、本明細書において、疾患進行の任意のステージでのＳＩＳＣの発症（特に、ＣＲＣの発症）を治療又は予防する方法が開示され、本方法は、治療有効量の式Ｉの化合物、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、及び多形を含む組成物を対象に投与することを含む。

【0031】

本開示において、対象の胃腸系における任意の慢性又は急性炎症性障害を治療又は予防する方法も開示され、本方法は、治療有効量の式Ｉの化合物、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、及び多形を含む組成物を対象に投与することを含む。

【0032】

本発明の更なる態様は、散発性胃腸ポリープ形成、ＦＡＰ（又は他の遺伝性ポリポーシス症候群）、及びリンチ症候群（又は他の遺伝性非ポリポーシス症候群）のうちの少なくとも１つを有するか又は有していた対象に投与するための式Ｉの化合物の使用に関する。

【0033】

本発明の更なる態様は、治療有効量の式Ｉの化合物、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、及び多形を含む組成物を投与することによって、胃がん、小腸がん、大腸がん、及び肛門がんのうちの少なくとも１つを含む少なくとも１つの形態の限局性又は転移性ＳＩＳＣに罹患しているか又はそれと診断された対象を治療する方法である。

【0034】

本発明の更なる態様は、対象におけるＳＩＳＣ阻止の方法を含み、本方法は、治療有効量の式Ｉの化合物、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、及び多形を含む組成物を投与することを含む。更なる態様は、ＳＩＳＣ阻止がＦＡＰ ＳＩＳＣ阻止である、前述のいずれか１つによって与えられる。更なる態様は、ＳＩＳＣ阻止がリンチ症候群ＳＩＳＣ阻止である、前述の態様のいずれか１つによって与えられる。更なる態様は、ＳＩＳＣ阻止が散発性ポリープ阻止である、前述の態様のいずれか１つによって与えられる。更なる態様は、ＳＩＳＣ阻止が胃がん阻止である、前述の態様のいずれか１つによって与えられる。更なる態様は、ＳＩＳＣ阻止が小腸がん阻止である、前述の態様のいずれか１つによって与えられる。更なる態様は、ＳＩＳＣ阻止が肛門がん阻止である、前述の態様のいずれか１つによって与えられる。

【0035】

いくつかのＳＩＳＣ阻止のシナリオでは、腸管の全体又は大部分に沿った薬物送達が望ましい場合がある。他のシナリオでは、胃腸管の任意の所与の部分で局所濃度を増加させることが望ましい場合がある。更に他のシナリオでは、腸管における異なる部位でのこれらの２つの送達形態の組み合わせが望ましい場合がある。

【0036】

式Ｉの化合物の治療有効用量は、約１ｍｇ～約１０００ｍｇ、１０ｍｇ～約１０００ｍｇ、又はその中の任意の特定の量若しくは範囲、特に、約１ｍｇ～約１００ｍｇ、１０ｍｇ～約１００ｍｇ、又はその中の任意の特定の量若しくは範囲の用量範囲を含む。本発明のいくつかの態様では、用量範囲は、約１ｍｇ～約５ｍｇである。本発明のいくつかの態様では、用量範囲は、約５ｍｇ～約１０ｍｇである。本発明のいくつかの態様では、用量範囲は、約１０ｍｇ～約１５ｍｇである。本発明のいくつかの態様では、用量範囲は、約１５ｍｇ～約２０ｍｇである。本発明のいくつかの態様では、用量範囲は、約２０ｍｇ～約２５ｍｇである。本発明のいくつかの態様では、用量範囲は、約２５ｍｇ～約３０ｍｇである。本発明のいくつかの態様では、用量範囲は、約３５ｍｇ～約４０ｍｇである。本発明のいくつかの態様では、用量範囲は、約４５ｍｇ～約５０ｍｇである。本発明のいくつかの態様では、用量範囲は、約５５ｍｇ～約６０ｍｇである。本発明のいくつかの態様では、用量範囲は、約６５ｍｇ～約７０ｍｇである。本発明のいくつかの態様では、用量範囲は、約７５ｍｇ～約８０ｍｇである。本発明のいくつかの態様では、用量範囲は、約８５ｍｇ～約９０ｍｇである。本発明のいくつかの態様では、用量範囲は、約９５ｍｇ～約１００ｍｇである。本発明のいくつかの態様では、用量範囲は、約３０ｍｇ～約１６２０ｍｇである。本発明のいくつかの態様では、用量範囲は、約５０ｍｇ～約９０ｍｇである。本発明のいくつかの態様では、用量範囲は、約５０ｍｇ～約８０ｍｇである。本発明のいくつかの態様では、用量は、約５０ｍｇである。本発明のいくつかの態様では、用量は、約５５ｍｇである。本発明のいくつかの態様では、用量は、約６０ｍｇである。本発明のいくつかの態様では、用量は、約６５ｍｇである。本発明のいくつかの態様では、用量は、約７０ｍｇである。本発明のいくつかの態様では、用量は、約７５ｍｇである。本発明のいくつかの態様では、用量は、約８０ｍｇである。本発明のいくつかの態様では、用量は、約８５ｍｇである。本発明のいくつかの態様では、用量は、約９０ｍｇである。本発明のいくつかの態様では、用量は、約９５ｍｇである。本発明のいくつかの態様では、用量は、約１００ｍｇである。本発明のいくつかの態様では、投薬量の各々は、１日用量である。本発明のいくつかの態様では、投薬量は、１日２回又は１日３回のような１日当たり複数回の投与を必要とする。例えば、１００ｍｇの投与は、１日２回５０ｍｇの投薬量を投与することによって達成される。１３０ｍｇの投与は、１日２回６５ｍｇの投薬量を投与することによって達成される。１５０ｍｇの投与は、１日２回７５ｍｇの投薬量を投与することによって達成される。２００ｍｇの投与は、１日２回１００ｍｇの投薬量を投与することによって達成される。３００ｍｇの投与は、１日２回１５０ｍｇの投薬量を投与することによって達成される。４００ｍｇの投与は、１日２回２００ｍｇの投薬量を投与することによって達成される。また、６００ｍｇの投与は、１日２回３００ｍｇの投薬量を投与することによって達成される。

【0037】

いくつかの態様では、式Ｉの化合物は、形態１ｓ、１ａ、１ｂ、１ｃ、１ｄ、１ｅ、１ｆ、１ｇ、１ｈ、２、３ｂ、３ｃ、３ｄ、３ｅ、５、６、７、８、９、１０、１１、１１ｂ、１２、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、及び５３から選択される結晶形態である。

【0038】

いくつかの態様では、家族性腺腫性ポリポーシス（「ＦＡＰ」）に罹患することから対象を治療又は予防する方法は、約１ｍｇ～約１００ｍｇの有効用量の式Ｉの化合物を対象に投与することを含む。いくつかの態様では、投与は、１日１回又は１日２回である。いくつかの態様では、ＦＡＰを治療することは、当該対象におけるポリープ負荷を低減することを含む。いくつかの態様では、ポリープ負荷を低減することは、ポリープの数の減少及び／又はポリープのサイズの減少を含む。

【0039】

いくつかの態様では、以前にＦＡＰの療法を受けている対象又は現在ＦＡＰの療法を受けている対象におけるＦＡＰを治療又は予防する方法は、約１ｍｇ～約１００ｍｇの治療有効用量の式Ｉの化合物を対象に投与することを含む。いくつかの態様では、療法は、手術、放射線療法、Ｃｏｘ－２阻害剤、非ステロイド性抗炎症薬（non-steroidal anti-inflammatory drug、ＮＳＡＩＤ）、又は化学療法であり得る。

【0040】

いくつかの態様では、ＳＩＳＣに罹患することから対象を治療又は予防する方法は、約１ｍｇ～約１００ｍｇの治療有効用量の式Ｉの化合物を対象に投与することを含む。いくつかの態様では、投与は、１日１回又は１日２回である。いくつかの態様では、ＳＩＳＣを治療又は予防することは、当該対象におけるポリープ負荷を低減することを含む。いくつかの態様では、ポリープ負荷を低減することは、ポリープの数の減少及び／又はポリープのサイズの減少を含む。

【0041】

いくつかの態様では、以前に療法を受けている対象又は現在療法を受けている対象におけるＳＩＳＣを治療又は予防する方法は、約１ｍｇ～約１００ｍｇの治療有効用量の式Ｉの化合物を対象に投与することを含む。いくつかの態様では、療法は、手術、放射線療法、又は化学療法。ＥＧＦＲ阻害剤、ＶＥＧＦ阻害剤、及びチェックポイント阻害剤であり得る。

【0042】

いくつかの態様では、以前に療法を受けている対象又は現在療法を受けている対象におけるＣＲＣを治療又は予防する方法は、約１ｍｇ～約１００ｍｇの治療有効用量の式Ｉの化合物を対象に投与することを含む。いくつかの態様では、療法は、手術、放射線療法、化学療法。ＥＧＦＲ阻害剤、ＶＥＧＦ阻害剤、及びチェックポイント阻害剤であり得る。

【0043】

いくつかの態様では、ＣＲＣに罹患することから対象を治療又は予防する方法は、約１ｍｇ～約１００ｍｇの治療有効用量の式Ｉの化合物を対象に投与することを含む。いくつかの態様では、投与は、１日１回又は１日２回である。いくつかの態様では、ＣＲＣを治療又は予防することは、当該対象におけるＣＲＣ悪性腫瘍及び／又は関連するポリープ負荷を低減することを含む。いくつかの態様では、ポリープ負荷を低減することは、ポリープの数の減少及びポリープのサイズの減少を含む。いくつかの態様では、ポリープパラメータの低減は、ポリープの数の減少又はポリープのサイズの減少を含む。

【0044】

いくつかの態様では、対象におけるＣＲＣの再発を予防する方法は、約１ｍｇ～約１００ｍｇの治療有効用量の式Ｉの化合物を対象に投与することを含む。

【0045】

［６７］いくつかの態様では、対象におけるＦＡＰ関連ポリポーシスの再発を予防する方法は、約１ｍｇ～約１００ｍｇの治療有効用量の式Ｉの化合物を対象に投与することを含む。

【0046】

いくつかの態様では、対象におけるＦＡＰの症状の進行を予防する方法は、約１ｍｇ～約１００ｍｇの治療有効用量の式Ｉの化合物を対象に投与することを含む。

【0047】

いくつかの態様では、対象におけるＦＡＰの症状の進行を遅延させる方法は、約１ｍｇ～約１００ｍｇの治療有効用量の式Ｉの化合物を対象に投与することを含む。

【0048】

いくつかの態様では、過敏性腸疾患（ＩＢＤ）と診断されている対象におけるＳＩＳＣを予防する方法は、約１ｍｇ～約１００ｍｇの治療有効用量の式Ｉの化合物を対象に投与することを含む。いくつかの態様では、ＩＢＤは、潰瘍性大腸炎又はクローン病であり得る。

【0049】

いくつかの態様では、以前にがんと診断されている対象におけるＳＩＳＣを予防する方法は、約１ｍｇ～約１００ｍｇの治療有効用量の式Ｉの化合物を対象に投与することを含む。いくつかの態様では、がんは、乳がん、卵巣がん、子宮がん、又は腹部がんであり得る。

【0050】

いくつかの態様では、式Ｉの化合物は、ＣＲＣ、ＳＩＳＣ、又はＦＡＰを発症するリスクが高い対象を治療するために、予防措置として又は阻止として投与される。高リスクは、過敏性腸症候群、特定の腸内マイクロバイオーム成分の存在、大腸がんの家族歴、大腸がんの既往歴、結腸鏡検査中のポリープ若しくは前悪性病変の所見などの要因、又はＫＲＡＳ、ＴＰ５３、ＥＧＦＲ、ＳＴＫ１１（ＬＫＢ１）、ＰＴＥＮ、ＢＭＰＲ１Ａ、ＳＭＡＤ４（ＭＡＤＨ／ＤＰＣ４）、ＭＬＨ１、ＭＳＨ２、ＭＳＨ６、ＰＭＳ２、ＥＰＣＡＭ、ＭＵＴＹＨ（ＭＹＨ）、ＰＯＬＤ１、ＰＯＬＥ、及び／若しくはＡＰＣ遺伝子における変異などの他の遺伝的要因に起因し得る。

【0051】

いくつかの態様では、高リスク群にある対象におけるＦＡＰ又はＣＲＣを予防する方法は、約１ｍｇ～約１００ｍｇの治療有効用量の式Ｉの化合物を対象に投与することを含む。

【0052】

いくつかの態様では、前悪性状態が悪性状態になることを予防する方法は、約１ｍｇ～約１００ｍｇの治療有効用量の式Ｉの化合物を対象に投与することを含む。状態は、腺腫性ポリープの存在であり得る。いくつかの態様では、前悪性状態はリンチ症候群であり得る。いくつかの態様では、前悪性状態は、初期ＣＲＣ及び腺腫であり得る。

【0053】

いくつかの態様では、腸管における過剰な炎症応答を治療する方法は、約１ｍｇ～約１００ｍｇの治療有効用量の式Ｉの化合物を対象に投与することを含む。

【0054】

いくつかの態様では、大腸がんに罹患することから対象を治療又は予防する方法は、約５０ｍｇ～約１００ｍｇの治療有効用量の式Ｉの化合物（結晶形態１ｓ）を対象に投与することを含む。いくつかの態様では、投与は、１日１回又は１日２回である。

【0055】

いくつかの態様では、大腸がんに罹患することから対象を治療又は予防する方法は、約１０ｍｇ～約５０ｍｇの治療有効用量の式Ｉの化合物（結晶形態１ｓ）を対象に投与することを含む。いくつかの態様では、投与は、１日１回又は１日２回である。

【0056】

いくつかの態様では、大腸がんに罹患することから対象を治療又は予防する方法は、約３０ｍｇ～約５０ｍｇの治療有効用量の式Ｉの化合物（結晶形態１ｓ）を対象に投与することを含む。いくつかの態様では、投与は、１日１回又は１日２回である。

【0057】

いくつかの態様では、大腸がんに罹患することから対象を治療又は予防する方法は、約５０ｍｇ～約１００ｍｇの治療有効用量の式Ｉの化合物（結晶形態１１）を対象に投与することを含む。いくつかの態様では、投与は、１日１回又は１日２回である。

【0058】

いくつかの態様では、治療を必要とする対象におけるＪＡＫチロシンキナーゼ活性の阻害によって影響を受ける障害又は状態を治療する方法は、式Ｉの化合物、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、又は多形を、結腸組織において約２０ｎｇ／ｇ～約２０，０００ｎｇ／ｇの濃度を達成するのに十分な量で投与することを含む。いくつかの態様では、投与は、約２０ｎｇ／ｇ～約１５，０００ｎｇ／ｇ、約２０ｎｇ／ｇ～約１０，０００ｎｇ／ｇ、約２０ｎｇ／ｇ～約８，０００ｎｇ／ｇ、約２０ｎｇ／ｇ～約６，０００ｎｇ／ｇ、約２０ｎｇ／ｇ～約４，０００ｎｇ／ｇ、又は約２０ｎｇ／ｇ～約１，０００ｎｇ／ｇの組織濃度を達成する。いくつかの態様では、障害又は状態は、大腸がん又はＦＡＰである。

【0059】

いくつかの態様では、治療を必要とする対象におけるＪＡＫの阻害によって影響を受ける障害又は状態を治療する方法は、式Ｉの化合物、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、又は多形を、直腸組織において約２０ｎｇ／ｇ～約２０，０００ｎｇ／ｇの濃度を達成するのに十分な量で投与することを含む。いくつかの態様では、投与は、約２０ｎｇ／ｇ～約１５，０００ｎｇ／ｇ、約２０ｎｇ／ｇ～約１０，０００ｎｇ／ｇ、約２０ｎｇ／ｇ～約８，０００ｎｇ／ｇ、約２０ｎｇ／ｇ～約６，０００ｎｇ／ｇ、約２０ｎｇ／ｇ～約４，０００ｎｇ／ｇ、又は約２０ｎｇ／ｇ～約１，０００ｎｇ／ｇの組織濃度を達成する。いくつかの態様では、障害又は状態は、大腸がん又はＦＡＰである。

【0060】

また、本明細書において、治療を必要とする対象におけるＪＡＫ阻害剤に対する応答を決定又は予測する方法も開示される。一態様では、式Ｉの化合物に対する応答の予測を、それを必要とする対象において行う方法は、
（ａ）式Ｉの化合物に曝露されていない対象の対照サンプル中のｐＳＴＡＴ－３のレベルを測定することと、
（ｂ）式の化合物に曝露されている対象の試験サンプル中のｐＳＴＡＴ－３のレベルを測定することと、
（ｃ）（ａ）におけるｐＳＴＡＴ－３のレベルを（ｂ）と比較することと、を含み、（ｂ）におけるｐＳＴＡＴ－３のレベルの減少が、対象における式Ｉの化合物に対する応答を予測する。

【0061】

別の態様では、進行中のＪＡＫ阻害剤療法の有効性のモニタリングを、それを必要とする対象において行う方法は、
（ａ）式Ｉの化合物に曝露されていない対象の対照サンプル中のｐＳＴＡＴ－３のレベルを測定することと、
（ｂ）式の化合物に曝露されている対象の試験サンプル中のｐＳＴＡＴ－３のレベルを測定することと、
（ｃ）（ａ）におけるｐＳＴＡＴ－３のレベルを（ｂ）と比較することと、を含み、（ｂ）におけるｐＳＴＡＴ－３のレベルの減少が、対象における式Ｉの化合物の有効性を示す。

【0062】

別の態様では、家族性腺腫性ポリポーシス、がん、又はＪＡＫ媒介性疾患を治療するための薬剤レジメンの設計を、それを必要とする対象において行う方法は、
（ａ）式Ｉの化合物に曝露されていない対象の対照サンプル中のｐＳＴＡＴ－３のレベルを測定することと、
（ｂ）式の化合物に曝露されている対象の試験サンプル中のｐＳＴＡＴ－３のレベルを測定することと、
（ｃ）（ａ）におけるｐＳＴＡＴ－３のレベルを（ｂ）と比較することと、
（ｄ）対照サンプルと比較したとき、試験サンプル中のｐＳＴＡＴ－３のレベルが高い場合、より高い用量の式Ｉの化合物を投与することと、を含む。

【0063】

ＦＡＰ、がん、又はＪＡＫ媒介性疾患に罹患している対象におけるＪＡＫ阻害剤の用量及び／又は投薬頻度を変更する方法は、
（ａ）式Ｉの化合物に曝露されていない対象の対照サンプル中のｐＳＴＡＴ－３のレベルを測定することと、
（ｂ）式の化合物に曝露されている対象の試験サンプル中のｐＳＴＡＴ－３のレベルを測定することと、
（ｃ）（ａ）におけるｐＳＴＡＴ－３のレベルを（ｂ）と比較することと、
（ｄ）対照サンプルと比較したとき、試験サンプル中のｐＳＴＡＴ－３のレベルがより高い、等しい、又はわずかに減少している場合、式Ｉの化合物の用量を増加させること、及び対照サンプルと比較したとき、試験サンプル中のｐＳＴＡＴ－３のレベルがより低い場合、式Ｉの化合物の用量を減少させることと、を含む。

【0064】

いくつかの態様では、試験サンプル及び対照サンプルは、同じ対象に由来する。いくつかの態様では、対照サンプルは、式Ｉの化合物の投与前の対象からのものであり得る。いくつかの態様では、対照サンプルは、式Ｉの化合物の対象への投与前の対象サンプルのプールからのものであり得る。

【0065】

いくつかの態様では、対象のサンプル（対照又は試験サンプル）は、血液を含む任意の細胞又は組織であり得る。いくつかの態様では、対象のサンプルは、正常細胞、正常組織、腫瘍細胞、腫瘍組織、又は任意の悪性細胞であり得る。いくつかの態様では、対象のサンプルは、結腸、直腸、術後Ｊ型嚢、及び十二指腸などの腸管の異なる部位からの組織であり得る。

【0066】

対象の対照サンプル又は試験サンプルが得られたら、フローサイトメトリー、好ましくはイメージングフローサイトメトリー（imaging flow cytometry、ＩＦＣ）、発光分析、化学発光分析、免疫組織化学、蛍光顕微鏡などのアッセイを使用して、対象のサンプル中のｐＳＴＡＴ－３のレベルを測定することができる。

【0067】

いくつかの態様では、対照サンプル及び試験サンプル中のｐＳＴＡＴ－３のレベルを比較することにより、対象におけるＪＡＫ阻害剤の有効性に関する情報が提供され得る。例えば、対照サンプルと比較した場合の試験サンプルのｐＳＴＡＴ－３レベルの減少は、式Ｉの化合物が対象において有効であることを示し得る。ある特定の態様では、対照サンプルと比較した場合の試験サンプル中のｐＳＴＡＴ－３レベルの減少は、約５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、９９．９％、若しくはそれ以上、又はそれらの間の任意の範囲である。

【0068】

いくつかの態様では、対象におけるＣＲＣ又はＦＡＰを治療する方法は、（ａ）ＫＲＡＳ、ＴＰ５３、ＥＧＦＲ、ＳＴＫ１１（ＬＫＢ１）、ＰＴＥＮ、ＢＭＰＲ１Ａ、ＳＭＡＤ４（ＭＡＤＨ／ＤＰＣ４）、ＭＬＨ１、ＭＳＨ２、ＭＳＨ６、ＰＭＳ２、ＥＰＣＡＭ、ＭＵＴＹＨ（ＭＹＨ）、ＰＯＬＤ１、ＰＯＬＥ、及びＡＰＣから選択される１つ以上の遺伝子における変異を決定することと、（ｂ）治療有効用量の式Ｉの化合物を投与することと、を含む。

【0069】

いくつかの態様では、対象において、当該対象がＣＲＣ又はＦＡＰを発症するリスクが高いかどうかを診断する方法は、（ａ）ＫＲＡＳ、ＴＰ５３、ＥＧＦＲ、ＳＴＫ１１（ＬＫＢ１）、ＰＴＥＮ、ＢＭＰＲ１Ａ、ＳＭＡＤ４（ＭＡＤＨ／ＤＰＣ４）、ＭＬＨ１、ＭＳＨ２、ＭＳＨ６、ＰＭＳ２、ＥＰＣＡＭ、ＭＵＴＹＨ（ＭＹＨ）、ＰＯＬＤ１、ＰＯＬＥ、及びＡＰＣから選択される１つ以上の遺伝子における変異を決定することと、（ｂ）治療有効用量の式Ｉの化合物を投与することと、を含む。

【0070】

いくつかの態様では、式Ｉの化合物の投与は、循環中のｐＳＴＡＴ－３レベルの変化によって定義される、局所ＧＩ効果及び低い又は無視できる全身効果を伴う汎ＪＡＫキナーゼ阻害効果を示す。更に、このような特徴を有する本発明の態様を、経口投与することができる。いくつかの態様では、式Ｉの化合物は、過剰な炎症応答の予防及び／又は制御のために使用されてもよく、その全身効果は、排除又は低減される。いくつかの態様では、式Ｉの化合物は、全身効果を引き起こすことなく、又はかかる全身効果を許容範囲内に低減しながら、状態（例えば、限定されないがＩＢＤ）の治療のために胃腸組織に対して局所効果を示す。

【0071】

患者の疾患、障害、又は状態の改善が生じたら、予防的治療又は維持的治療のために、用量を調節してもよい。例えば、投薬量若しくは投与頻度、又はこれらの両方を、症状の関数として、所望の治療又は予防効果が維持されるレベルまで低減してもよい。当然のことながら、症状が適切なレベルまで緩和されている場合は、治療を停止してもよい。しかしながら、症状が再発した場合、患者は、長期的な断続的治療を必要とすることがある。

【0072】

加えて、式Ｉの化合物は、本明細書で論じられる状態の治療において、単独で、１つ以上の他の活性薬剤と組み合わせて、又は追加の活性成分と組み合わせて使用することが想定される。式Ｉの化合物と組み合わせることができる活性薬剤の非限定的な例としては、ＮＳＡＩＤ、Ｃｏｘ－２阻害剤、抗ＥＧＦＲ剤（例えば、セツキシマブ（cetuximab）及びパニツムマブ（panitumumab））、抗ＶＥＧＦ／ＶＥＧＦＲ剤（例えば、ベバシズマブ（bevacizumab））、Ｚｉｖ－アフリベルセプト（Ziv-aflibercept）、レゴラフェニブ（regorafenib）、ラムシルマブ（ramucirumab）、及び免疫チェックポイント阻害剤（例えば、イピリムマブ（ipilimumab）、ニボルマブ（nivolumab）、及びペムブロリズマブ（pembrolizumab））が挙げられる。追加の活性成分は、式Ｉの１つの化合物とともに別々に同時投与することができ、又は本発明による単一の医薬組成物に含めてもよい。例示的実施形態では、追加の活性成分は、ＪＡＫ活性により媒介される状態、障害、又は疾患の治療に有効であることが知られている、又は発見されているもの、例えば、特定の状態、障害、又は疾患に関連する別の標的に対して活性な、別のＪＡＫ阻害剤又は化合物である。組み合わせは、有効性を増大させる（例えば、活性薬剤の効力又は有効性を高める化合物を組み合わせて含めることにより）、１つ以上の副作用を減少させる、又は活性薬剤の必要用量を低減するのに役立つ場合がある。

【0073】

いくつかの態様では、式Ｉの化合物の組成物は、薬学的に許容される賦形剤を含む。医薬組成物で一般に使用される薬学的に許容される賦形剤は、薬理学的組成物に添加されるか、又はそうでなければビヒクル、担体、若しくは希釈剤として使用されて、薬剤の投与を容易にし、かつ薬剤と適合性のある、無毒性で生物学的に忍容性であり、及び別の理由で対象への投与に生物学的に好適である物質、例えば、不活性物質である。そのような賦形剤の例としては、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、様々な糖類及び様々な種類のデンプン、セルロース誘導体、ゼラチン、植物油、並びにポリエチレングリコールが挙げられる。

【0074】

１つ以上の投薬量単位の式Ｉの化合物を含有する医薬組成物の送達形態は、薬学的に許容される賦形剤及び当業者に既知であるか又は利用可能になっている配合技術を使用して調製することができる。この組成物は、本発明の方法において、好適な送達経路、例えば、経口、非経口、直腸内、局所、若しくは眼経路によって、又は吸入によって投与され得る。

【0075】

調製物は、錠剤、カプセル剤、サッシェ剤、糖衣錠、粉剤、顆粒剤、トローチ剤、再構成用粉剤、液体調製物、又は座薬の形態であり得る。組成物は、複数の投与経路のうちの任意の１つ、例えば静脈内注射、皮下注射、局所投与、又は経口投与用に製剤化され得る。好ましくは、組成物は、経口投与用に製剤化され得る。

【0076】

経口投与の場合、活性薬剤を錠剤、カプセル、若しくはビーズの形態で、又は溶液、エマルション、若しくは懸濁液として、提供することができる。経口用組成物を調製するために、活性薬剤は、例示的な範囲として単回投薬量単位又は複数回投薬量単位で、例えば、７０ｋｇのヒトに対して約１～１０００ｍｇ／日の投薬量をもたらすように製剤化され得る。

【0077】

経口錠剤は、適合性の薬学的に許容される賦形剤、例えば希釈剤、崩壊剤、結合剤、潤滑剤、甘味剤、香味剤、着色剤及び防腐剤と混合された活性成分を含み得る。好適な不活性充填剤としては、炭酸ナトリウム及び炭酸カルシウム、リン酸ナトリウム及びリン酸カルシウム、ラクトース、デンプン、糖、グルコース、メチルセルロース、ステアリン酸マグネシウム、マンニトール、ソルビトールなどが挙げられる。例示的な経口用液体賦形剤としては、エタノール、グリセロール、水などが挙げられる。デンプン、ポリビニルピロリドン（polyvinyl-pyrrolidone、ＰＶＰ）、デンプングリコール酸ナトリウム、微結晶性セルロース及びアルギン酸が例示的な崩壊剤である。結合剤としては、デンプン及びゼラチンを挙げることができる。潤滑剤は、存在する場合、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸又はタルクであり得る。必要に応じて、錠剤をモノステアリン酸グリセリル又はジステアリン酸グリセリルなどの物質でコーティングして、消化管内での吸収を遅延させてもよく、又は腸溶コーティングでコーティングしてもよい。使用可能な追加のコーティングとしては、時間、ｐＨ、又は細菌含量の関数として、化合物又は活性薬剤を放出するように設計されたコーティングを挙げてよい。

【0078】

経口投与用カプセルとしては、硬質及び軟質ゼラチン、又は（ヒドロキシプロピル）メチルセルロースカプセルが挙げられる。硬質ゼラチン製カプセルを調製するために、活性成分を固体状、半固体状又は液状の希釈剤と混合してもよい。ソフトゼラチンカプセルは、活性成分を、落花生油又はオリーブ油などの油、液状パラフィン、短鎖脂肪酸のモノ及びジ－グリセリドの混合物、ポリエチレングリコール４００、又はプロピレングリコールと混合することで調製することができる。経口投与用の液体は、懸濁液、溶液、乳剤、又はシロップ剤の形態であってもよく、あるいは使用前に水若しくは他の好適なビヒクルで再構成するために、凍結乾燥させてもよく、又は乾燥製品として提示してもよい。そのような液体組成物は、任意選択的に、薬学的に許容される賦形剤、例えば、懸濁剤（例えば、ソルビトール、メチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ゼラチン、ヒドロキシエチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ステアリン酸アルミニウムゲルなど）；非水性ビヒクル、例えば、油（例えば、アーモンド油又は分留ヤシ油）、プロピレングリコール、エチルアルコール又は水；保存剤（例えば、ｐ－ヒドロキシ安息香酸メチル若しくはｐ－ヒドロキシ安息香酸プロピル、又はソルビン酸）；レシチンなどの湿潤剤；及び必要に応じて、着香剤又は着色剤を含有し得る。

【0079】

式Ｉの化合物の組成物はまた、非経口経路によって投与され得る。例えば、組成物は、直腸内投与用に座剤として製剤化され得る。静脈内、筋肉内、腹腔内又は皮下経路を含む非経口用途の場合、本開示の化合物は、適切なｐＨ及び等張性に緩衝された滅菌水溶液若しくは懸濁液、又は非経口的に許容される油中で提供されてもよい。好適な水性ビヒクルとしては、リンガー液及び等張性塩化ナトリウムが挙げられる。そのような形態は、アンプル若しくは使い捨て注射デバイスなどの単位用量形態、適切な用量を引き抜き得るバイアルなどの多用量形態、又は注射可能な製剤を調製するために使用することができる固体形態若しくは予備濃縮物で提示されることになる。具体的な注入用量は、数分間から数日間の範囲の期間にわたる、薬学的担体と混合した化合物の約１～１０００μｇ／ｋｇ／分の範囲であり得る。

【0080】

治療するための方法に関する本明細書に記載される全ての態様は、治療における使用にも適用可能である。

【0081】

障害又は状態を治療するための方法に関する本明細書に記載される全ての態様は、当該障害又は状態の治療における使用にも適用可能である。

【0082】

障害又は状態の治療における使用に関する本明細書に記載される全ての態様は、当該障害又は状態を治療するための方法にも適用可能である。

【0083】

障害又は状態を治療するための方法に関する本明細書に記載される全ての態様は、当該障害又は状態を治療するための方法における使用にも適用可能である。

【0084】

障害又は状態を治療するための方法における使用に関する本明細書に記載される全ての態様は、当該障害又は状態を治療するための方法にも適用可能である。

【0085】

本発明及び様々な態様を更に説明するために、以下の具体的な実施例を提供する。

【0086】

以下の実施例に記述する化合物及び対応する分析データを得る際、特に指示しない限り、以下の実験及び分析プロトコルに従った。

【0087】

特に明記しない限り、反応混合物は、室温（room temperature、ｒｔ）で磁気的に撹拌された。溶液が「乾燥」される場合、それらは一般に、Ｎａ_２ＳＯ_４又はＭｇＳＯ_４などの乾燥剤上で乾燥される。混合物、溶液、及び抽出物が「濃縮」された場合、それらは典型的には、減圧下で、ロータリーエバポレーターで濃縮された。

【0088】

薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）は、Ｍｅｒｃｋシリカゲル６０Ｆ_２５４（２．５ｃｍ×７．５ｃｍ、２５０μｍ又は５．０ｃｍ×１０．０ｃｍ、２５０μｍのシリカゲルでプレコーティングされたプレート）を用いて実施した。

【0089】

順相フラッシュカラムクロマトグラフィー（flash column chromatography、ＦＣＣ）は、特に明記しない限り、シリカゲル（ＳｉＯ_２）上でＭｅＯＨ／ＤＣＭ中の２Ｍ ＮＨ_３で溶出させることで実施した。

【0090】

質量スペクトル（Mass spectra、ＭＳ）は、特に指示しない限り、ポジティブモードのエレクトロスプレーイオン化（electrospray ionization、ＥＳＩ）を使用してＡｇｉｌｅｎｔシリーズ１１００ ＭＳＤで得た。質量の計算値（ｃａｌｃｄ．）は、正確な質量に相当する。

【0091】

核磁気共鳴（nuclear magnetic resonance、ＮＭＲ）スペクトルは、Ｂｒｕｋｅｒ製のＤＲＸ型スペクトル計で得た。以下に示す^１Ｈ ＮＭＲデータのフォーマットは、テトラメチルシランを基準物質とした低磁場のケミカルシフト（ｐｐｍ）（多重度、結合定数Ｊ（Ｈｚ）、積分値）である。

【0092】

化学名は、ＣｈｅｍＤｒａｗ（ＣａｍｂｒｉｄｇｅＳｏｆｔ、Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，ＭＡ）又はＡＣＤ／Ｎａｍｅ Ｖｅｒｓｉｏｎ９（Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ、Ｔｏｒｏｎｔｏ，Ｏｎｔａｒｉｏ，Ｃａｎａｄａ）のいずれかによって生成された。例として、表記（１ｒ，４ｒ）は、Ｃｈｅｍｄｒａｗ Ｕｌｔｒａ Ｐｒｏ１４．０の命名機能を使用して生成される、シクロヘキシル環の周囲のトランス配置を意味する。

【0093】

収率を百分率として示される場合にはいつでも、そのような収率は、特定の化学量論的条件下で得ることが可能な同一の実体の最大量に対する収率が示される実体の質量を指す。パーセントとして示す試薬濃度は、別途指定のない限り、質量比を指す。

【0094】

本明細書で使用される略称及び頭字語としては、以下に示すものが挙げられる：定義された略称及び頭字語

【0095】

【表1】

【0096】

【表2】

【0097】

【表3】

【0098】

実施例１
２－（１－（（１ｒ，４ｒ）－４－（シアノメチル）シクロヘキシル）－１，６－ジヒドロイミダゾ［４，５－ｄ］ピロロ［２，３－ｂ］ピリジン－２－イル）－Ｎ－（２－ヒドロキシ－２－メチルプロピル）アセトアミド

【0099】

【化3】

【0100】

工程Ａ：２－（１－（（１ｒ，４ｒ）－４－（シアノメチル）シクロヘキシル）－６－（フェニルスルホニル）－１，６－ジヒドロイミダゾ［４，５－ｄ］ピロロ［２，３－ｂ］ピリジン－２－イル）－Ｎ－（２－ヒドロキシ－２－メチルプロピル）アセトアミド。乾燥出発物質を確保するために、エチル２－（１－（（１ｒ，４ｒ）－４－（シアノメチル）シクロヘキシル）－６－（フェニルスルホニル）－１，６－ジヒドロイミダゾ［４，５－ｄ］ピロロ［２，３－ｂ］ピリジン－２－イル）アセテート（中間体３）を、反応前に５０℃で１８時間、真空下で加熱した。１Ｌフラスコで、エチル２－（１－（（１ｒ，４ｒ）－４－（シアノメチル）シクロヘキシル）－６－（フェニルスルホニル）－１，６－ジヒドロイミダゾ［４，５－ｄ］ピロロ［２，３－ｂ］ピリジン－２－イル）アセテート（中間体３、５２．５８５ｇ、１０４．０１ｍｍｏｌ）をＤＭＡ（５０ｍＬ）に懸濁した。１－アミノ－２－メチルプロパン－２－オール（５０ｍＬ）を添加し、反応物を１１０℃まで４５分間加熱し、次いで、１２５℃まで５時間加熱した。反応物を室温まで冷却し、ＥｔＯＡｃ（８００ｍＬ）で希釈した。有機層を水／食塩水の溶液で３回抽出した（溶液は１Ｌの水と５０ｍＬの食塩水で構成された）。水層をＥｔＯＡｃで逆抽出した（２×６００ｍＬ）。合わせた有機層を、無水ＭｇＳＯ_４上で乾燥させ、濃縮乾固し、次いで、真空下で３日間乾燥させて、標題化合物を黄色の泡として得た（６５．９ｇ、収率９８％）。生成物を、更に精製することなく次段階に用いた。ＭＳ（ＥＳＩ）：質量計算値Ｃ_２８Ｈ_３２Ｎ_６Ｏ_４Ｓ，５４８．２２；Ｍ／ｚ実測値，５４９．２［Ｍ＋Ｈ］^＋．^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ８．７６（ｓ，１Ｈ），８．２６－８．１９（ｍ，２Ｈ），７．８４（ｄ，Ｊ＝４．１Ｈｚ，１Ｈ），７．６０－７．５３（ｍ，１Ｈ），７．５０－７．４４（ｍ，２Ｈ），６．８４（ｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ，１Ｈ），４．７６－４．６１（ｍ，１Ｈ），３．９７（ｓ，２Ｈ），３．４５（ｓ，１Ｈ），３．２７（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，２Ｈ），２．４１（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２Ｈ），２．３８－２．２５（ｍ，２Ｈ），２．２３－２．１２（ｍ，２Ｈ），２．０９－１．９４（ｍ，４Ｈ），１．４８（ｑｄ，Ｊ＝１３．６，４．０Ｈｚ，２Ｈ），１．２１（ｓ，６Ｈ）。

【0101】

工程Ｂ：２－（１－（（１ｒ，４ｒ）－４－（シアノメチル）シクロヘキシル）－１，６－ジヒドロイミダゾ［４，５－ｄ］ピロロ［２，３－ｂ］ピリジン－２－イル）－Ｎ－（２－ヒドロキシ－２－メチルプロピル）アセトアミド。２－（１－（（１ｒ，４ｒ）－４－（シアノメチル）シクロヘキシル）－６－（フェニルスルホニル）－１，６－ジヒドロイミダゾ［４，５－ｄ］ピロロ［２，３－ｂ］ピリジン－２－イル）－Ｎ－（２－ヒドロキシ－２－メチルプロピル）アセトアミド（６５．９０ｇ、１０２．１ｍｍｏｌ）を、撹拌棒を含有する１Ｌフラスコに添加した。１，４－ジオキサン（３００ｍＬ）を添加し、続いてＫＯＨ水溶液（３Ｍ、１５０ｍＬ）を添加した。反応物を８０℃で２時間加熱した。反応物を室温まで冷却し、ロータリーエバポレーター上で、溶媒体積を約２００ｍＬまで減少させた。残留物を水／ブライン（１００ｍＬ／１００ｍＬ）の溶液で処理し、次いで、ＣＨ_２Ｃｌ_２（２×１Ｌ）中の１０％ＭｅＯＨで抽出した。有機層を合わせ、無水ＭｇＳＯ_４上で乾燥させ、濃縮乾固して黄色の固形物を得た。固形物を、ＣＨ_２Ｃｌ_２（２００ｍＬ）中に懸濁し、３０分間激しく撹拌し、濾過により収集した。固形物を、ＣＨ_２Ｃｌ_２（１００ｍＬ）で洗い流し、フィルターを通して空気を吸引することによって乾燥させ、次いで、真空下、室温で１６時間更に乾燥させて、標題化合物を白色の固形物として得た（４１．５９ｇ、収率８９％）。ＭＳ（ＥＳＩ）：質量計算値Ｃ_２２Ｈ_２８Ｎ_６Ｏ_２，４０８．２３；ｍ／ｚ実測値、４０９．２［Ｍ＋Ｈ］^＋．^１Ｈ ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）：δ１１．８５（ｓ，１Ｈ），８．５０（ｓ，１Ｈ），８．２１－８．１０（ｍ，１Ｈ），７．４９－７．４３（ｍ，１Ｈ），６．７４－６．６５（ｍ，１Ｈ），４．５３－４．４２（ｍ，２Ｈ），４．０７（ｓ，２Ｈ），３．０８（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ），２．５８（ｄ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，２Ｈ），２．４１－２．２８（ｍ，２Ｈ），２．０９－１．９２（ｍ，５Ｈ），１．４２－１．３１（ｍ，２Ｈ），１．０９（ｓ，６Ｈ）．本発明の態様の各々の、合成及び活性化合物の特徴付け（特定）は、実施例の形態で本明細書において提供される。本発明のいくつかの態様の結晶構造により、任意のかかる化合物の特定の形態を更に特徴付けるために、多形スクリーニングを行うことができる。これは、多形スクリーニングの見出しの下の例によって、式Ｉの化合物について非限定的な様式で示される。

【0102】

以下の化合物を、前述の合成を参照して調製した。

【0103】

中間体１
２－（（１ｒ，４ｒ）－４－（（５－ニトロ－１－（フェニルスルホニル）－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｂ］ピリジン－４－イル）アミノ）シクロヘキシル）アセトニトリル

【0104】

【化4】

【0105】

工程Ａ：ｔｅｒｔ－ブチルＮ－［（１ｒ，４ｒ）－４－（ヒドロキシメチル）シクロヘキシル］カルバメート。窒素の不活性雰囲気でパージ及び維持された２０Ｌの４つ口丸底フラスコに、（１ｒ，４ｒ）－４－［［（ｔｅｒｔ－ブトキシ）カルボニル］アミノ］シクロヘキサン－１－カルボン酸（１０６６ｇ、４．３８ｍｏｌ、１．００当量）及びＴＨＦ（１０Ｌ）を入れた。これに続いて、ＢＨ_３－Ｍｅ_２Ｓ（１０Ｍ、６６０ｍＬ）を、－１０℃で１時間かけて滴加した。得られた溶液を、１５℃で３時間撹拌した。この反応を並行して３回実施し、反応混合物を合わせた。次いで、メタノール（２Ｌ）の添加によって反応を停止させた。得られた混合物を、真空下で濃縮した。これにより、ｔｅｒｔ－ブチルＮ－［（１ｒ，４ｒ）－４－（ヒドロキシメチル）シクロヘキシル］カルバメート（３０００ｇ、９９．６％）を白色の固形物として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）：質量計算値Ｃ_１２Ｈ_２３ＮＯ_３，２２９．３２；ｍ／ｚ実測値，２１５．２［Ｍ－ｔＢｕ＋ＭｅＣＮ＋Ｈ］^＋；^１Ｈ ＮＭＲ：（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ４．４０（ｓ，１Ｈ），３．４５（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，２Ｈ），３．３８（ｓ，１Ｈ），２．０５－２．０２（ｍ，２Ｈ），１．８４－１．８１（ｍ，２Ｈ），１．４４（ｓ，１１Ｈ），１．１７－１．０１（ｍ，４Ｈ）。

【0106】

工程Ｂ：ｔｅｒｔ－ブチルＮ－［（１ｒ，４ｒ）－４－［（メタンスルホニルオキシ）メチル］シクロヘキシル］カルバメート。窒素の不活性雰囲気でパージ及び維持された２０Ｌの４つ口丸底フラスコに、ｔｅｒｔ－ブチルＮ－［（１ｒ，４ｒ）－４－（ヒドロキシメチル）シクロヘキシル］カルバメート（１０００ｇ、４．３６ｍｏｌ、１．００当量）、ジクロロメタン（１０Ｌ）、ピリジン（１３８０ｇ、１７．５ｍｏｌ、４．００当量）を入れた。これに続いて、ＭｓＣｌ（１０００ｇ、８．７３ｍｏｌ、２．００当量）を、－１５℃で滴加した。得られた溶液を、２５℃で一晩撹拌した。この反応を並行して３回実施し、反応混合物を組み合わせた。次に２Ｌの水を加えて反応を停止した。水相を酢酸エチルで抽出した（１×９Ｌ）。有機層を分離し、１ＭのＨＣｌ（３×１０Ｌ）、ＮａＨＣＯ_３（飽和水溶液）（２×１０Ｌ）、水（１×１０Ｌ）、及びブライン（１×１０Ｌ）で洗浄した。混合物を無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、真空下で濾過及び濃縮した。これにより、ｔｅｒｔ－ブチルＮ－［（１ｒ，４ｒ）－４－［（メタンスルホニルオキシ）メチル］シクロヘキシル］カルバメート（３３００ｇ、８２％）を白色の固形物として得た。ＬＣ－ＭＳ：ＭＳ（ＥＳＩ）：質量計算値Ｃ_１３Ｈ_２５ＮＯ_５Ｓ，３０７．１５；ｍ／ｚ実測値２９２．１，［Ｍ－ｔＢｕ＋ＭｅＣＮ＋Ｈ］^＋；^１Ｈ ＮＭＲ：（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ４．０３（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ），３．３８（ｓ，１Ｈ），３．００（ｓ，３Ｈ），２．０７－２．０５（ｍ，２Ｈ），１．８７－１．８４（ｍ，２Ｈ），１．７２－１．６９（ｍ，１Ｈ），１．４４（ｓ，９Ｈ），１．１９－１．０４（ｍ，４Ｈ）。

【0107】

工程Ｃ：ｔｅｒｔ－ブチルＮ－［（１ｒ，４ｒ）－４－（シアノメチル）シクロヘキシル］カルバメート。１０Ｌの４つ口丸底フラスコに、ｔｅｒｔ－ブチルＮ－［（１ｒ，４ｒ）－４－［（メタンスルホニルオキシ）メチル］シクロヘキシル］カルバメート（１１００ｇ、３．５８ｍｏｌ、１．００当量）、ＤＭＳＯ（５５００ｍＬ）、及びＮａＣＮ（４０６ｇ、８．２９ｍｏｌ、２．３０当量）を入れた。得られた混合物を、９０℃で５時間撹拌した。この反応を並行して３回実施し、反応混合物を組み合わせた。次いで、１５Ｌの水／氷を添加することによって反応を停止した。固体を濾過により回収した。固体を水（３×１０Ｌ）で洗浄した。これにより、ｔｅｒｔ－ブチルＮ－［（１ｒ，４ｒ）－４－（シアノメチル）シクロヘキシル］カルバメート（２４８０ｇ、９７％）を白色の固形物として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）：質量計算値Ｃ_１３Ｈ_２２Ｎ_２Ｏ_２，２３８．１７；ｍ／ｚ実測値２２４［Ｍ－ｔＢｕ＋ＭｅＣＮ＋Ｈ］^＋；^１Ｈ ＮＭＲ：（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ４．３９（ｓ，１Ｈ），３．３８（ｓ，１Ｈ），２．２６（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ），２．０８－２．０４（ｍ，２Ｈ），１．９２－１．８８（ｍ，２Ｈ），１．６７－１．６１（ｍ，１Ｈ），１．４４（ｓ，９Ｈ），１．２６－１．０６（ｍ，４Ｈ）。

【0108】

工程Ｄ：２－［（１ｒ，４ｒ）－４－アミノシクロヘキシル］アセトニトリル塩酸塩。１０Ｌの丸底フラスコに、ｔｅｒｔ－ブチルＮ－［（１ｒ，４ｒ）－４－（シアノメチル）シクロヘキシル］カルバメート（６２０ｇ、２．６０モル、１．００当量）及び１，４－ジオキサン（２Ｌ）を入れた。この後、１０℃で撹拌しながら、１，４－ジオキサン中のＨＣｌ溶液（５Ｌ、４Ｍ）を滴加した。得られた溶液を、２５℃で一晩撹拌した。この反応を４回実施し、反応混合物を組み合わせた。固体を濾過により回収した。固体を１，４－ジオキサン（３×３Ｌ）、酢酸エチル（３×３Ｌ）、及びヘキサン（３×３Ｌ）で洗浄した。これにより、２－［（１ｒ，４ｒ）－４－アミノシクロヘキシル］アセトニトリル塩酸塩（１７５３ｇ、９６％）を白色の固形物として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）：質量計算値Ｃ_８Ｈ_１４Ｎ_２，１３８．１２；ｍ／ｚ実測値１３９．２５，［Ｍ＋Ｈ］^＋；^１Ｈ ＮＭＲ：（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６：δ８．１４（ｓ，３Ｈ），２．９６－２．８４（ｍ，１Ｈ），２．４６（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，２Ｈ），１．９８（ｄ，Ｊ＝１１．１Ｈｚ，２Ｈ），１．７９（ｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ，２Ｈ），１．６４－１．４９（ｍ，１Ｈ），１．４２－１．２９（ｍ，２Ｈ），１．１８－１．０４（ｍ，２Ｈ）。

【0109】

工程Ｅ：２－（（１ｒ，４ｒ）－４－（（５－ニトロ－１－（フェニルスルホニル）－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｂ］ピリジン－４－イル）アミノ）シクロヘキシル）アセトニトリル。２－［（１ｒ，４ｒ）－４－アミノシクロヘキシル］アセトニトリル塩酸塩（２９．１０ｇ、１６６．６ｍｍｏｌ）を含有する１０００ｍＬの丸底フラスコに、ＤＭＡを添加した（４００ｍＬ）。得られた懸濁液を、４－クロロ－５－ニトロ－１－（フェニルスルホニル）－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｂ］ピリジン（５１．５３ｇ、１５２．６ｍｍｏｌ）、続いて、ＤＩＰＥＡ（６３．０ｍＬ、３６６ｍｍｏｌ）で処理した。反応混合物を、Ｎ_２下に置き、８０℃で４時間加熱した。粗反応混合物を、室温まで冷却し、１．６Ｌの水を含有する２Ｌフラスコ内にゆっくり注ぎ、激しく撹拌した。得られた懸濁液を、１５分間室温で撹拌し、次いで濾過し、真空オーブン中で７０℃で加熱しながら１６時間乾燥させて、標題化合物（６３．３７ｇ、９５％）を黄色の固形物として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）：質量計算値Ｃ_２１Ｈ_２１Ｎ_５Ｏ_４Ｓ，４３９．１；ｍ／ｚ実測値，４４０．１［Ｍ＋Ｈ］^＋．^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ９．１０（ｓ，１Ｈ），８．９９（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），８．２３－８．１５（ｍ，２Ｈ），７．６６－７．５９（ｍ，２Ｈ），７．５６－７．４９（ｍ，２Ｈ），６．６７（ｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ，１Ｈ），３．９５－３．７９（ｍ，１Ｈ），２．３８（ｄ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，２Ｈ），２．３２－２．２１（ｍ，２Ｈ），２．０８－１．９８（ｍ，２Ｈ），１．８８－１．７６（ｍ，１Ｈ），１．６０－１．３２（ｍ，４Ｈ）。

【0110】

中間体２
２－（（１ｒ，４ｒ）－４－（（５－アミノ－１－（フェニルスルホニル）－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｂ］ピリジン－４－イル）アミノ）シクロヘキシル）アセトニトリル

【0111】

【化5】

【0112】

２－（（１ｒ，４ｒ）－４－（（５－ニトロ－１－（フェニルスルホニル）－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｂ］ピリジン－４－イル）アミノ）シクロヘキシル）アセトニトリル（中間体１、５８．６０ｇ、１３３．３ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ／ＭｅＯＨ（１：１、４８００ｍＬ）に溶解した。混合物を、Ｔｈａｌｅｓ Ｎａｎｏ Ｈ－Ｃｕｂｅ（登録商標）などの連続流水素添加反応器（１０％ Ｐｄ／Ｃ）に、１０ｍＬ／分で１００％水素（大気圧、８０℃）に通し、その後溶液を濃縮して、生成物を紫色の固形物として得た。固体をＥｔＯＡｃ（４００ｍＬ）で粉砕し、次いでＭｅＯＨ（２００ｍＬ）で再び粉砕し、その後真空で濾過及び乾燥させ、標題化合物を得た（５０．２ｇ、収率９１．９％）。

【0113】

ＭＳ（ＥＳＩ）：質量計算値Ｃ_２１Ｈ_２３Ｎ_５Ｏ_２Ｓ，４０９．２；ｍ／ｚ実測値，４１０．２［Ｍ＋Ｈ］^＋．^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ８．１０－８．０３（ｍ，２Ｈ），７．７６（ｓ，１Ｈ），７．５１－７．４３（ｍ，１Ｈ），７．４３－７．３４（ｍ，３Ｈ），６．４４（ｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ，１Ｈ），４．６１（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ），３．６５－３．５１（ｍ，１Ｈ），２．７４（ｓ，２Ｈ），２．２６（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ），２．１９－２．０５（ｍ，２Ｈ），１．９７－１．８６（ｍ，２Ｈ），１．７６－１．５９（ｍ，１Ｈ），１．３３－１．１２（ｍ，４Ｈ）。

【0114】

中間体３
エチル２－（１－（（１ｒ，４ｒ）－４－（シアノメチル）シクロヘキシル）－６－（フェニルスルホニル）－１，６－ジヒドロイミダゾ［４，５－ｄ］ピロロ［２，３－ｂ］ピリジン－２－イル）アセテート

【0115】

【化6】

【0116】

撹拌棒及び２－（（１ｒ，４ｒ）－４－（（５－アミノ－１－（フェニルスルホニル）－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｂ］ピリジン－４－イル）アミノ）シクロヘキシル）アセトニトリル（中間体２、５８．３１ｇ、１４２．４ｍｍｏｌ）を含有する１Ｌの丸底フラスコに、エチル３－エトキシ－３－イミノプロパノエート（６０．５１ｇ、３０９．３ｍｍｏｌ）を添加し、続いて、ＥｔＯＨ（６００ｍＬ、３Åのモレキュラーシーブで４８時間乾燥）を添加した。還流冷却器を反応フラスコに取り付け、反応物をＮ_２でパージし、９０℃で９時間加熱した。反応混合物を、室温まで冷却し、３０時間静置すると、生成物が茶色の針状に結晶化した。固体をスパチュラで粉砕し、反応混合物を２Ｌフラスコに移した。激しく撹拌しながら、水（１．４Ｌ）を分液漏斗を介してゆっくりと添加した。水の添加が完了した後、懸濁液を３０分間撹拌した。茶色の針状のものを濾過によって分離し、フィルターを通して空気を１時間引き込むことにより乾燥させた。生成物を５００ｍＬフラスコに移し、ＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）で処理した。少量の種結晶を添加し、白色固体沈殿物の形成を誘導した。懸濁液を３０分間室温で撹拌し、濾過し、ＥｔＯＡｃ（２５ｍＬ）で洗い流し、真空下にて乾燥させて、白色固体として生成物を得た（４８．６５ｇ、収率６８％）。ＭＳ（ＥＳＩ）：質量計算値Ｃ_２６Ｈ_２７Ｎ_５Ｏ_４Ｓ，５０５．２；ｍ／ｚ実測値，５０６．２［Ｍ＋Ｈ］^＋．^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ８．８５（ｓ，１Ｈ），８．２８－８．１９（ｍ，２Ｈ），７．８４（ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ，１Ｈ），７．６１－７．５３（ｍ，１Ｈ），７．５２－７．４３（ｍ，２Ｈ），６．８４（ｄ，Ｊ＝４．１Ｈｚ，１Ｈ），４．３２（ｓ，１Ｈ），４．２０（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ），４．０９（ｓ，２Ｈ），２．４４（ｄ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，２Ｈ），２．４０－２．２７（ｍ，２Ｈ），２．１６（ｄ，Ｊ＝１３．３Ｈｚ，２Ｈ），２．１２－１．９６（ｍ，３Ｈ），１．５４－１．３８（ｍ，２Ｈ），１．２７（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，３Ｈ）。

【0117】

多形スクリーニング実施例
遊離塩基としての、式Ｉの化合物のいくつかの実施形態は、複雑な固体状態の挙動を有する複数の結晶構造を示し、これらのうちのいくつかは次に、異なる量の組み込まれた溶媒のために、これらの間で著しい特徴を示すことができる。式Ｉの化合物のいくつかの実施形態は、擬多形の形態であり、同じ化合物の実施形態である。これらは、結晶格子自体の中にある異なる量の溶媒のために、結晶格子の組成の違いを示す。加えて、チャネル溶媒和は、式Ｉの化合物のいくつかの結晶実施形態において存在することができる。これらにおいて、溶媒は、結晶格子に存在するチャネル又はボイド内に組み込まれる。例えば、式Ｉの化合物について、表２に与えられる様々な結晶配置が見出された。これらの特徴のため、表２に示されるように、非化学量論的溶媒和物がしばしば観察された。更に、本発明に従ったいくつかの実施形態の結晶構造に、このようなチャネル又はボイドが存在することにより、様々な程度の結合強度を有して結晶構造内に保持される水及び／又は溶媒分子が存在することができる。したがって、具体的な周囲条件の変化により、本発明に従ったいくつかの実施形態では、水分子及び／又は溶媒分子のある程度の喪失又は増加を速やかにもたらすことができる。表２に記載する実施形態のそれぞれにおいて、「溶媒和」（表２の３番目の縦列）は公式化可能な溶媒和であり、化学量論数（表２の４番目の縦列）としての、その実際の測定は、実験により測定される場合、実際の周囲条件に応じて、公式化可能な溶媒和とはわずかに異なる場合があると理解されている。例えば、一実施形態では、水分子の約半分が、結晶格子内で活性化合物に結合した水素として存在し得る一方で、水分子の約もう半分が結晶格子のチャネル又はボイドに存在し得る場合、周囲条件の変化により、ボイド又はチャネル内にそのように緩やかに含有される水分子の量が変化し得、それにより、例えば単結晶回折に従って割り当てられ、公式化可能な溶媒和と、例えば、質量分析と一体となった熱重量分析により決定される化学量論とに、わずかな差が生じる。

【0118】

【表4】

【0119】

実施例１に記載のとおりに入手した化合物を、４０℃で４時間撹拌し、更に１４時間２５℃で撹拌したＤＣＭ（１：３、例えば３０ｍＬ ＤＣＭ中に１０ｇの化合物）中のスラリーを調製することによって更に結晶化させ、次いで、ヘプタンを２５℃でゆっくり添加し（１：２、例えば、化合物／ＤＣＭスラリー／溶液中にヘプタンを２０ｍＬ）、４０℃で４時間撹拌し、２５℃まで冷却し、更に１４時間２５℃で撹拌した。その後濾過することにより、オフホワイト固形物の形態の式Ｉの化合物が得られ、これは一水和物と同定された（１ｓ実施形態）。

【0120】

表２及び図２の実施形態１～１０は結晶性である。実施形態１ｓ及び１ａ～１ｈは、同形構造である。実施形態１ｓは、点対称な三斜晶空間群Ｐ－１で結晶化する。用語「実施形態１」はまとめて、１ｈを通した同形構造の実施形態１ｓ及び１ａを意味する。１ｈの実施形態を通した、このような１ｓ及び１ａのいずれか１つは場合により、実施形態１の同形構造要素であると、又は単に、実施形態１の要素であると称される。実施形態３ｂ、３ｃ、３ｄ、及び３ｅは同形構造であり、一斜晶形の空間群Ｃ ２／ｃで結晶化する。用語「実施形態３」はまとめて、同形構造の実施形態３ｂ、３ｃ、３ｄ、及び３ｅを意味する。このような３ｂ、３ｃ、３ｄ、及び３ｅの実施形態のいずれか１つは場合により、実施形態３の同形構造要素であると、又は単に、実施形態３の要素であると称される。同形構造の実施形態とは、異なる化学的組成（すなわち、結晶格子に組み込まれた異なる溶媒及び／又は水分子）を有しながらも、類似の結晶構造特性（同じ対称性、並びに類似の単位格子パラメータ及び結晶充填）を有するというものである。異なる組成（結晶構造に組み込まれた溶媒又は水）故に、同形構造の実施形態における単位格子パラメータは、わずかに異なる場合がある。表２を参照する実施形態を、図２に概略的に示すように、そして以下のスクリーニング技術でより詳細に記載するとおりに、調製及び／又は相互転換した。

【0121】

スクリーニングとしては、純溶媒での溶媒平衡、蒸発結晶化、熱時濾過による冷却結晶化、貧溶媒による破砕結晶化、及び熱サイクリングによる結晶化などの結晶化手順が挙げられた。固体をＨＴ－ＸＲＰＤにより分析した。適用可能な場合、母液を完全に蒸発させ、残りの固形物もまた、ＨＴ－ＸＲＰＤにより分析した。同定された主な固体形態は、一水和物としての出発物質実施形態１ｓであった。

【0122】

２５℃及び５０℃での溶媒平衡
２０種類の純溶媒に化合物実施形態１ｓを懸濁することにより、長期スラリー実験を実施し、室温で２週間、及び５０℃で１週間撹拌した。平衡時間の終了時に、残留固体を母液から分離した。周囲条件下にて固体を乾燥させ、真空下（５ｍＢａｒ）にて乾燥させた後、ＨＴ－ＸＲＰＤにより分析した。その後、固体を加速エージング条件（４０℃／７０％の相対湿度）に２日間曝露し、再びＨＴ－ＸＲＰＤにより分析した。

【0123】

結晶化溶媒の大部分から、実施形態１ｓとしての出発物質が得られた。いくつかの結晶化溶媒から、ＨＴ－ＸＲＰＤパターンは、最初の実施形態１ｓのパターンに類似していることが判明した。これらの回折パターンの大部分において、ピークシフト、及び／又は更なるピークが同定された。これらのパターンのそれぞれは、１ｈを経由した１ａの１つとして標識された実施形態と対応し、このような実施形態のＨＴ－ＸＲＰＤ回折パターンの類似性に基づくと、これらは、実施形態１の同形構造要素である実施形態として提示される。４０℃及び７５％ＲＨに２日間曝露した後、実施形態１の全ての同形構造要素は実施形態１ａに転換した。

【0124】

２５℃で１００％ＲＨに曝露したときに、実施形態１ｓは水和した実施形態１０に転換した。それにもかかわらず、実施形態１０は、周囲条件で物理的に安定ではなかった。実施形態１ｓは、三斜晶系である空間群Ｐ－１に結晶化したものの、実施形態１０は、単斜晶系である空間群Ｃ ２／ｃに結晶化したことが判明した。実施形態１０は、周囲条件下にて限定的な物理的安定性を有し、１ｓ又は１ａなどの、別の実施形態に転換した。この挙動は、全ての水和／溶媒和分子の不均一に強力な結合に起因する。この場合、実施形態１０は、周囲条件下にて失われる、さほど強力には結合していない、第２の水分子を有する。より正確には、そのような実施形態の２０ｍｇのサンプルを、４０℃及び７０％相対湿度に４日間曝露することにより、実施形態１ｓの物理的安定性が気候チャンバ内で調査し、同一実施形態の別の２０ｍｇのサンプルもまた、４日間２５℃及び１００％相対湿度に曝露した。４日後、様々な固体サンプルをＨＲ－ＸＲＰＤにより分析し、結晶格子パラメータを測定し、回折図をインデックスした。回折図を図６に示す。下から上に、図６の最初の回折図は、出発物質としての実施形態１ｓに対応し、２番目は、４０℃及び７０％相対湿度に４日間曝露した後の同一形態に対応し、同じ図で「１ｓ ７０ＲＨ」と記載される。この分析により、恐らく、高い含水量を有する別の水和した実施形態であった、第２の結晶形態を少量有したものの、初期の実施形態１ｓが回収されていたことが明らかとなった。このような形態をインデックスすることは、存在したものが少量であったために不可能であった。３番目の回折図は、２５℃及び１００％相対湿度に４日間曝露した後の実施形態１ｓに対応し、同じ図で「１０」と記載した。これらの条件により、初期実施形態１ｓの少量のコンタミネーションがあり、表２に特徴付けられた溶媒和を有する、実施形態１ｓの実施形態１０への転換がもたらされた。脱水時に、実施形態１ｓ及び１０はともに、１４８℃の融点を有する無水形態に再結晶した。

【0125】

室温での溶媒平衡により、結晶化溶媒としてのトルエンが含まれない実施形態１ｂ、及び、結晶化溶媒としてのｐ－キシレンが含まれない実施形態１ｆが得られた。

【0126】

３つの更なる固体実施形態を同定し、実施形態２、３、及び７として示した。そのＴＧＡ及びＤＳＣをそれぞれ図２１Ａ及び図２１Ｂに示す実施形態２は、１，４－ジオキサン中室温で実施した溶媒平衡実験から同定したが、実施形態７は、ヘプタンからの５０℃における単一溶媒平衡実験で、実施形態１ｓを含む混合物として見出された。実施形態３の同形構造要素である、実施形態３ｂ、３ｃ、３ｄ、及び３ｅとしてグルーピングされた、複数の同一ではないが類似の回折図が、同定された。実施形態３の同形構造要素は、実施形態１の要素と混ざっていることが発見された。実施形態３の要素を含有する混合物は、場合によっては実施形態１ａに、又は実施形態１ａと３ｅの混合物に転換した。実施形態７は物理的に安定であるようだったが、実施形態２は、ＡＡＣに２日間曝露した後、実施形態３ｅに転換した。

【0127】

蒸発結晶化
室温にて実施した溶媒平衡実験で保存した母液を、低速の蒸発結晶化実験に使用した。母液を濾過してあらゆる粒子状物質を除去し、周囲条件下にてゆっくりと蒸発させた。得られた固体をＨＴ－ＸＲＰＤにより分析し、ＡＡＣに２日間曝露した後に再び分析した。

【0128】

溶媒のうちのいくつかにおいて式Ｉの化合物の溶解度が不十分であったことから、このような溶媒を使用した際に固形物は回収されなかった。固体が沈殿した実験においては、実施形態１又は３の非晶質残留物又は同形構造要素が回収された。安定性試験の間、実施形態１の異なる要素が実施形態１ａに転換したが、実施形態３のサンプルは物理的に安定であるようであった。場合によっては、非晶質固体は安定性試験の後で非晶質のままであり、溶解性となった、又はいくつかの結晶性の兆候を示した。

【0129】

冷却結晶化
５０℃で実施した溶媒平衡実験の母液を５０℃で濾過し、あらゆる粒子状物質を除去した。０．２μｍのＰＴＦＥフィルターを使用して、５０℃で懸濁液を濾過し、溶液を５℃で配置し、７２時間エージングした。エージングの間に固体が沈殿したとき、これらの固体を液体から分離し、周囲条件下及び真空下にて乾燥させ、ＨＴ－ＸＲＰＤにより分析した。残りの母液をゆっくりと蒸発させ、残りの固体をＨＴ－ＸＲＰＤにより分析した。沈殿が生じなかったサンプルを真空下に配置し、乾燥した固体をＨＴ－ＸＲＰＤにより分析した。次に、固体を全てＡＡＣ（４０℃／７０％ＲＨにて２日）に曝露し、ＨＴ－ＸＲＰＤにより再び分析した。

【0130】

溶液のいくつかを冷却する際に固体は沈殿せず、これらの場合においては、溶液は周囲条件下にて蒸発した。いくつかの溶媒においては式Ｉの化合物の溶解度が低かったことから、いくつかの溶液からは固形物が得られなかった。

【0131】

４種類の溶媒（２－プロパノール、２－ブタノン、アセトニトリル、及びメタノール）から、沈殿が生じた。ｍＬスケールで、８００μＬのアセトニトリル、２５ｍｇ／ｍＬの濃度にて一度の冷却結晶化実験の蒸発後、実施形態６を同定した。実施形態６は２日のＡＡＣ後、安定した固体状態のようであり、非溶媒和実施形態として現れた。

【0132】

μＬスケールでの冷却／蒸発結晶化
１２種類の純溶媒、及び１２種類の溶媒混合液を使用し、４つの温度プロファイルを適用して、９６ウェルプレートにて、μＬスケールで冷却／蒸発結晶化実験を実施した。各ウェルにおいて、４ｍｇの実施形態１ｓを固体で投薬した。その後、結晶化溶媒（８０μＬ）及び溶媒混合液を添加して５０ｍｇ／ｍＬの濃度に到達させ、各ウェルを個別に密閉したプレートをその後、４つの温度プロファイルの１つに通した。温度プロファイルの完了時に、溶媒を低周囲気圧にて蒸発させ（２４時間）、ＡＡＣ（４０℃／７０％ＲＨ）に２日間曝露する前後で、残りの固形物をＨＴ－ＸＲＰＤにより分析した。

【0133】

実施形態１及び３の要素が、大部分の溶媒系及び温度プロファイルから発見された。しかしながら、固体状態と温度プロファイルの特定の傾向が観察された。実施形態１ｂは主に、短い温度プロファイル（３時間のエージング）から同定された。それにもかかわらず、長いエージング時間の同一溶媒系は、実施形態１ｆ、実施形態３の要素、又は実施形態１及び３の要素の混合物の同定につながった。実施形態３ｃは、結晶化溶媒としての１，４－ジオキサン、及び初期温度として５０℃の温度特性から、６０分保持し、１℃／ｈ（最終温度２０℃）の速度で冷却して４８時間保持することで得られた。実施形態３ｄは、結晶化溶媒としてテトラヒドロフラン、及び実施形態３ｃと同じ温度プロファイルにより得られた。

【0134】

実施形態４は、短いエージング条件を適用した際に、メタノール／水（５０／５０、ｖ／ｖ）、ＴＨＦ、及びＤＣＭ／ＩＰＡ（５０／５０、ｖ／ｖ）で実施した実験にて同定された。実施形態１ｓを水及びメタノールの混合物（５０／５０）、及び初期温度として５０℃の温度プロファイルで処理し、６０分保持し、２０℃／ｈ（最終温度５℃）の速度で冷却して３時間保持することにより、実施形態４を得た（実施形態１ｂとともに実施形態４を得た）。１ｓを水及びメタノールの混合物（５０／５０）、及び初期温度として５０℃の温度プロファイルで処理し、６０分保持し、２０℃／ｈ（最終温度２０℃）の速度で冷却して３時間保持することによってもまた、実施形態１ｂとともに実施形態４が得られた。実施形態４は、周囲条件下にて物理的に安定ではないようであった。結晶化溶媒として酢酸エチル／１，４－ジオキサン（５０／５０、ｖ／ｖ）及び初期温度として５０℃の温度プロファイルから、６０分保持し、１℃／ｈ（最終温度５℃）の速度で冷却して４８時間保持することにより、冷却結晶化実験により実施形態１ｃが得られた。結晶化溶媒としてアセトニトリル／クロロホルム（５０／５０、ｖ／ｖ）、及び初期温度として５０℃の温度プロファイルから、６０分保持し、１℃／ｈ（最終温度５℃）の速度で冷却して４８時間保持することにより、実施形態１ｄが得られた。また、結晶化溶媒として酢酸エチル／１，４－ジオキサン（５０／５０、ｖ／ｖ）、初期温度として５０℃の温度プロファイルから、６０分保持し、１℃／ｈ（最終温度２０℃）の速度で冷却して４８時間保持することにより、実施形態１ｅが得られた。

【0135】

結晶化溶媒としてクロロホルム、及び初期温度として５０℃の温度プロファイルにて実施し、６０分保持し、１℃／ｈ（最終温度２０℃）の速度で冷却し、４８時間保持した実験で、実施形態５が同定された。

【0136】

他の結晶化方法で以前に観察された安定性試験の間に、同様の転換が見られた。ほとんどの場合、全ての固体形態が実施形態１ａ、又は実施形態１ａを含有する混合物に転換した。

【0137】

固体混合物からの蒸発結晶化
溶媒／貧溶媒混合液を用いる蒸発結晶化において、化合物の透明溶液を、最初に溶媒が蒸発するもの（高い蒸気圧）から調製し、化合物をある程度結晶形態で沈殿させた。次いで、これらの結晶は、貧溶媒（低い蒸気圧）が蒸発する際に種として作用する。

【0138】

式Ｉの化合物は、溶媒系の各々に完全には溶解しなかった。この理由のため、全ての実験には、蒸発前に濾過を含んだ。

【0139】

ＨＴ－ＸＲＰＤ分析の結果は、溶媒混合物の蒸発の際に、式Ｉの化合物が主に実施形態１ｓとして結晶化されることを示した。これは、以下の溶媒／貧溶媒系で観察された：テトラヒドロフラン／水、アセトニトリル／水、クロロホルム／エタノール、メタノール／酢酸エチル、２－ブタノン／イソプロパノール、及びヘプタン／アセトン。２つの系（アセトン／クメン、及び１，４－ジオキサン／ギ酸エチル）から、同形構造の実施形態３ｂ及び３ｅが同定され、これらはＡＡＣ後、それぞれ実施形態１ａと３ｄ、及び１ｓと３ｅの、異なる混合物に転換した。

【0140】

貧溶媒結晶化
式Ｉの化合物の飽和溶液を未希釈溶媒中で調製した。貧溶媒の添加を、順添加及び逆添加で行った。順添加では、貧溶媒を３つのアリコートで化合物溶液に添加した。ある体積の化合物溶液を、非常に過剰な貧溶媒（２０ｍＬ）に添加することにより、逆添加を実施した。

【0141】

沈殿後、固体を液体から分離し、周囲条件下にて乾燥させ、真空下（５ｍｂａｒ）にて乾燥させてから、ＨＴ－ＸＲＰＤにより分析した。貧溶媒添加時に沈殿が生じなかった実験を５℃で４８時間保管し、沈殿を誘発した。沈殿した固体をその後分離して、ＨＴ－ＸＲＰＤにより分析した。固体が得られなかった場合、穏やかな条件下で固体を蒸発させ、残留固体をＨＴ－ＸＲＰＤにより分析した。全ての固体をＡＡＣ（４０℃／７０％ＲＨにて２日）に曝露し、ＨＴ－ＸＲＰＤにより再び分析した。

【0142】

順貧溶媒結晶化は、全ての場合において沈殿を示した。全ての固体を、実施形態１の同形構造要素（１ｓ、１ｂ、１ｊ、１ｆ）、又は実施形態３の同形構造要素（３ｂ、３ｄ、３ｆ）として分類することが可能であった。ＡＡＣへの曝露後、実施形態１ａ及び３ｅの混合物に転換したものを除いて、全ての固体サンプルが実施形態１ａに転換した。

【0143】

溶媒としてのＤＭＳＯで実施した、逆貧溶媒結晶化実験では、使用した貧溶媒に応じて異なる固体形態が得られた。ジクロロメタン又はｐ－キシレンを用いると、実施形態１の同形構造要素（１ｓ及び１ｂ）が同定されたが、ＭＴＢＥを用いると、非晶質残留物が得られた。貧溶媒としてヘプタン及び水を用い、貧溶媒の添加時に沈殿がなかった２つの溶液を蒸発させると、油が得られた。ＡＡＣ後に実施形態１ａの転換が観察され、非晶質残留物は結晶性となった。

【0144】

高温濾過実験
異なる溶媒混合液中において５０℃で調製した式Ｉの化合物の過飽和溶液から、高温濾過を伴う冷却結晶化実験を行った。熱時濾過溶液を、４８時間の冷却プロファイルに通した。温度プロファイル後に沈殿した固体があるバイアル瓶を遠心分離にかけ、液体から固体を分離し、（真空下にて乾燥後）ＨＴ－ＸＲＰＤにより分析した。固体が沈殿しなかった場合、溶液を真空下にて蒸発させ、固体をＨＴ－ＸＲＰＤにより分析した。固体を全てＡＡＣ（４０℃／７０％ＲＨにて２日）に曝露し、ＨＴ－ＸＲＰＤにより再び分析した。高温濾過実験の半分では沈殿が生じず、これらの溶媒系への式Ｉの化合物の溶解度が不十分であることから、溶媒の蒸発時に十分な固形物が回収されなかった。３つの実験において、非晶質残留物を転換し、ＡＡＣ後に結晶化して、実施形態１（１ｓ又は１ａ）及び３（３ｅ）の要素の混合物となった、あるいは溶解性となった。実施形態５は、アセトン／クロロホルム（５０／５０、ｖ／ｖ）の実験から同定した。実施形態１ａへの転換がＡＡＣ後に観察されたため、本実施形態は物理的に不安定であるようであった。

【0145】

熱サイクル実験
１０種類の溶媒で、室温にて約６ｍｇの実施形態１ｓの懸濁液を調製した。懸濁液を５℃～５０℃でサイクルした。熱サイクルの完了時に、固体を遠心分離により分離し、周囲条件下及び真空下（５ｍｂａｒ）にて乾燥させた後、ＨＴ－ＸＲＰＤにより分析した。続いて、全ての固体をＡＡＣに２日間曝露し、ＨＴ－ＸＲＰＤにより再び分析した。熱サイクル実験は通常、より安定な多型形態の形成を容易にする。シクロヘキサノンで実施した実験を除いて、全てのバイアル瓶は、熱プロファイル後に固体を含有した。シクロヘキサノン溶液を、中真空下にてゆっくりと蒸発させた。実施形態１、３、又はこれらの混合物の要素は、主に湿った固体で同定された。これらの固体の乾燥時に、実施形態１ｓへの転換が観察された。実施形態３ｂ及び３ｅを、５１ｍｇ／ｍＬの濃度の、３００μＬのシクロヘキサノンの熱サイクル（３ｂ）、及び３７．３ｍｇ／ｍＬの濃度の、４００μＬのイソブタノール（３ｅ）の熱サイクルから得た。１８．６ｍｇ／ｍＬの濃度の、８００μＬのクロロホルムの熱サイクルにより、実施形態５を得た。

【0146】

図３、図４、及び図５は、表２に記載し、上述のスクリーニングでも参照した実施形態の、ＨＴ－ＸＲＰＤパターンのオーバーレイを示す。

【0147】

実施形態１ｓは、結晶化実験の大部分から転換された。これは、周囲条件に応じて、多数の水分子及び／又は他の溶媒が組み込まれた、チャネル水和物である。実施形態１ａへの転換が観察された。この形態は、わずかに多い水（１．３分子の水）を含有した。４０℃及び７５％ＲＨに２日間曝露した後、実施形態１の全ての同形構造要素は実施形態１ａに転換した。実施形態１の要素に対するＸＲＰＤパターンのいくつかの回折ピークのシフトは、結晶格子に組み込まれた異なる溶媒又は水分子が原因である可能性がある。図４は、実施形態１の要素のＨＴ－ＸＲＰＤパターンのオーバーレイを示す。ディフラクトグラム１ｓは、実施形態１ｓの形態の出発物質としての式Ｉの化合物に対応する。回折図１ａは、いくつかの実施形態１ｓのサンプルをＡＡＣに曝露した後に得られた実施形態１ａに対応する。回折図１ｂは、トルエンでの室温における溶媒平衡実験から得られた実施形態１ｂに対応する。ディフラクトグラム１ｃは、μＬスケールでの、酢酸エチル／１，４－ジオキサン（５０／５０、ｖ／ｖ）での冷却結晶化実験から得られた実施形態１ｃに対応する。回折図１ｃは、μＬスケールでの、アセトニトリル／クロロホルム（５０／５０、ｖ／ｖ）での冷却結晶化実験から得られた実施形態１ｄに対応する。ディフラクトグラム１ｅは、μＬスケールでの、酢酸エチル／１，４－ジオキサン（５０／５０、ｖ／ｖ）での冷却結晶化実験から得られた実施形態１ｅに対応する。回折図１ｆは、ｐ－キシレンでの室温における溶媒平衡実験から得られた実施形態１ｆに対応する。回折図１ｇは、アニソールでの５０℃における溶媒平衡実験から得られた実施形態１ｇに対応する。回折図１ｈは、μＬスケールでの、ｐ－キシレンでの冷却結晶化実験から得られた実施形態１ｈに対応する。

【0148】

実施形態３の要素についての回折図を、図５に示す。異なるＨＴ－ＸＲＰＤパターンで観察されたシフトは大部分が、結晶格子に組み込まれた異なる溶媒分子が原因である可能性がある。実施形態２を４０℃に、７０％ＲＨで４日間加熱することにより、実施形態３を得た。実施形態３ｂ～３ｅは、結晶構造に組み込まれた溶媒に応じて変化する、非理論量の溶媒（０．３～０．７分子）を含有する溶媒和形態である。実施形態３の要素を含有する混合物は、ＡＡＣへの曝露時に不安定であり、これらは場合によっては、実施形態１ａ、又は実施形態１ａと３ｅの混合物に転換した。実施形態１ａへの転換は、高い相対湿度への曝露時における、水分子による溶媒分子の交換、及び、水和した実施形態１ａへの再結晶が原因である。

【0149】

実施形態２を約２００℃の温度まで加熱し、続いて２５℃まで冷却すること、及びまた、ＤＳＣ２５－２００－２５－３００℃のサイクルにより、実施形態９を得た。

【0150】

実施形態９は、更なる手順によっても得られた。このような手順の１つは、２段階手順であった：実施形態１ｓ（１．５ｇ）を、ＲＴにおいて１，４－ジオキサン（１０体積）で処理した。実施形態２のシード（５ｍｇ）を添加し、サンプルをＲＴで２４時間撹拌した。得られた懸濁液を濾過し、サンプルを１．５時間風乾した。ＸＲＰＤによって、このサンプルは実施形態２であると決定された。この２段階手順の第２の段階では、実施形態２を１０℃／分で２１０℃に加熱し、２１０℃で３０分間保持した。次いで、サンプルをＲＴまで放冷した。ＸＲＰＤ分析によって、得られた固形物は実施形態９であると決定された。別のこのような手順も、実施形態９を得るための２段階手順であった。この手順では、実施形態１ｓ（１．５ｇ）を１，４－ジオキサン（１０体積）で処理した。実施形態２のシード（５ｍｇ）を添加し、サンプルをＲＴで２４時間撹拌した。得られた懸濁液を濾過し、サンプルを１．５時間風乾した。ＸＲＰＤによって、このサンプルは実施形態２であると決定された。この手順の第２の段階では、実施形態２を１０℃／分で１５０℃に加熱した後、２℃／分で１７０℃に更に加熱した。次いで、サンプルをＲＴまで放冷した。ＸＲＰＤ分析によって、得られた固形物は実施形態９であると決定された。実施形態９のＴＧＡ及びＤＳＣを、それぞれ図２２Ａ及び図２２Ｂに示す。

【0151】

実施形態１ｓは、実施形態９を５０℃で６日間以下の溶媒中でスラリーにすることによって得られた：２－ブタノン、アセトン／水（９０／１０、ｖ／ｖ）及びアセトニトリル／水（９０／１０、ｖ／ｖ）。実施形態１ｓは、同じ実験を室温で実施した場合にも得られた。

【0152】

実施形態５を約１７５℃の温度に加熱することにより、実施形態８が得られた。実施形態８は、更なる手順によっても得られた。このような手順の１つは、２段階手順であった：実施形態１ｓ（１．５ｇ）を１，４－ジオキサン（１０体積）で処理し、ＲＴで７２時間撹拌した。得られた懸濁液を濾過し、得られた固形物を真空オーブン内においてＲＴで１６時間乾燥させた。この第１の段階から得られた固形物は、ＸＲＰＤによって実施形態３ｃであると決定された。第２の段階では、実施形態３ｃ（１００ｍｇ）を１０℃／分で１５０℃に加熱した後、２℃／分のより遅い速度で１８０℃まで加熱した。次いで、サンプルを放冷しＲＴまで戻した。得られた固形物は、ＸＲＰＤによって実施形態８であると決定された。別のこのような手順も、実施形態８を得るための２段階手順であった。この手順では、実施形態１９（３００ｍｇ）を、１，４－ジオキサン（３体積）で処理し、６０℃で２４時間振盪した。得られた懸濁液を濾過し、この第１の段階から得られた固形物は、ＸＲＰＤによって実施形態３ｃであると決定された。第２の段階では、実施形態３ｃ（３００ｍｇ）を１０℃／分で１８０℃に加熱した。次いで、サンプルを放冷しＲＴまで戻した。得られた固形物は、ＸＲＰＤによって実施形態８であると決定された。実施形態８のＴＧＡ及びＤＳＣを、それぞれ図２０Ａ及び図２０Ｂに示す。

【0153】

上記の実施形態６の調製に加えて、この実施形態は、周囲温度から１８５℃まで１０℃／分で熱重量分析することにより、実施形態１１（８０～１００ｍｇ）（その調製については以下に記載する）を加熱することによって得られ、これを３分間等温保持した。次いで、サンプルをＲＴまで放冷した。実施形態６は、スラリー実験に供することによって実施形態１１からも得られた。スラリー実験は以下のように実施した：溶媒を実施形態１１（５０ｍｇ）に添加し、混合物を指定温度で０．５時間撹拌した。形態９のシード結晶（５ｍｇ）を添加し、混合物を指定温度で一晩撹拌した。固形物を遠心分離により単離し、３０℃及び５０℃の両方で酢酸イソプロピル（０．５ｍＬ）を使用してＸＲＰＤにより分析した。実施形態６の生成をＸＲＰＤにより確認した。実施形態６のＴＧＡ及びＤＳＣを、それぞれ図１９Ａ及び図１９Ｂに示す。

【0154】

式Ｉの化合物の更なる実施形態は、下記のように得られた。

【0155】

実施例５をスラリー実験に供することによって実施例９に変換した。スラリー実験は、特定された温度で様々な溶媒を使用して、以下のように実施した：実施形態５（５０ｍｇ）に溶媒を添加し、混合物を指定温度で０．５時間撹拌した。形態９のシード結晶（５ｍｇ）を添加し、混合物を指定温度で一晩撹拌した。固形物を遠心分離により単離し、ＸＲＰＤにより分析した。以下の溶媒を使用して、５０℃でのスラリー実験を実施した：ＴＢＭＥ（０．７５ｍＬ）及び酢酸イソプロピル：ヘプタンの３３：６７混合物（０．５ｍＬ）。以下の溶媒を使用して、７５℃でのスラリー実験を実施した：酢酸イソプロピル（０．５ｍＬ）及びメチルエチルケトン（０．５ｍＬ）。

【0156】

実施形態１１は、以下のように得られた：５０℃のエタノール（絶対、含水量＜０．１％、３００ｍＬ）中実施形態１ｓ（４５ｇ）の懸濁液を、１６．５時間撹拌した。次いで、懸濁液を０．２５℃／分で５℃に冷却した。その後、溶液を５℃で３時間撹拌した。次いで、固形物を濾別し、冷（５℃）エタノール（絶対、含水量＜０．１％、９０ｍＬ）で洗浄し、４０℃で、１７時間真空下で乾燥させて、約３９ｇの実施形態１１を得た。実施形態１１のＴＧＡ及びＤＳＣを、それぞれ図１７Ａ及び図１７Ｂに示す。

【0157】

実施形態１１はまた、以下のとおり得られた：絶対エタノール（１７０ｍＬ）を実施形態１ｓ（１９ｇ）に添加し、溶媒の沸点付近まで加熱した。少量の固形物（５％）は溶解せず、熱濾過により除去した。濾別された固形物は実施形態１ｓであると決定された。そのため、固形物を濾液に戻し入れ、全ての固形物が溶解するまでこの混合物を加熱した。この高温溶液に、分液漏斗を介してヘプタン（５３５ｍＬ）を滴加した。ヘプタンの滴加中、高温溶液を激しく撹拌した。ヘプタンの添加が完了した後、高温溶液／ヘプタン混合物を入れたフラスコを氷水浴に浸し、１時間激しく撹拌した。次いで、濾過によって固形物を回収し、１５分間にわたって空気を引くことによって白色固形物の濾過ケーキを乾燥させた。これを高真空下において７０℃で１６時間加熱することによって更に乾燥させた後、８０℃で１８時間加熱して、１６．３ｇの実施形態１１を得た。実施形態１１のディフラクトグラムを図７に示す。

【0158】

実施形態１１の吸湿性試験では、ほんのわずかに吸湿性であることが見出され、図１８に示すＧＶＳ分析において０～９０％ＲＨの間の質量変化は０．６６％であった。ＧＶＳ分析後のＸＲＰＤ分析は、物質が物理的に安定であることを示した。加熱時の実施形態１１の安定性を評価するために、可変温度（ＶＴ）－ＸＲＰＤを実施した。約１７５℃の温度に曝露されたとき、ＸＲＰＤ分析によって示されるように物質は変化しないままであったが、１８０℃を超えると、サンプルは実施形態６に変換された。実施形態６のディフラクトグラムとともに、ＶＴ－ＸＲＰＤ実験の前後の実施形態１１のディフラクトグラムを図２４に示す。実施形態１１をまた、４０℃／７５％ＲＨで最大４８日間静的保存分析に供した。２日、５日、及び４８日後に、ＸＲＰＤ及びカールフィッシャー（Karl Fisher、ＫＦ）によってサンプルを分析した。ＸＲＰＤ分析によって示されるように実施形態１１は変化しないままであり、４８日後の合計水取り込み率は１．２％であった。４８日間の静的保存後、物質の^１Ｈ－ＮＭＲは、物質が０．３６モル当量のエタノールを保持していることを示した。実験期間にわたって周囲条件下で保存した実施形態１１は、^１Ｈ－ＮＭＲにより０．４６モル当量のエタノールを含有することが示された。

【0159】

実施形態１１ｂは、以下のとおり実施形態１ｓから得られた：１０ｍＬの乾燥メタノールを、３．３ｇの実施形態１ｓに添加した。この混合物を以下の温度サイクリングに供した：混合物を４０℃で１時間加熱した後、２時間かけて温度を６０℃に上昇させた。次いで、混合物を６０℃で１時間撹拌した。次いで、２時間にわたって温度を４０℃に低下させた。この温度サイクリングレジームを合計約２０時間にわたって繰り返した。この時点で、混合物を２時間かけて５℃に冷却した。固形物を真空濾過によって５℃で単離し、次いで、周囲温度において真空下で約６６時間乾燥させた。あるいは、実施形態１１ｂは、実施形態１ｓから以下の手順を用いて得られた：１ｍＬの乾燥メタノールを、３３０ｍｇの実施形態１ｓに添加した。この混合物を以下の温度サイクリングに供した：混合物を４０℃で１時間加熱した後、２時間かけて温度を６０℃に上昇させた。次いで、混合物を６０℃で１時間撹拌した。次いで、２時間にわたって温度を４０℃に低下させた。この温度サイクリングレジームを、合計約１８時間にわたって繰り返した。この時点で、固形物を遠心分離により単離し、次いで、周囲温度において真空下で約３３時間乾燥させた。モレキュラーシーブ（３Å、１００℃、真空下で少なくとも２４時間活性化）を使用して、上記実験のためのメタノールを乾燥させた。実施形態１１ｂのディフラクトグラムを図７Ｅに示す。

【0160】

実施形態１２は、実施形態１ｓから得られ、これを２５℃で１０％ＲＨ未満の湿度条件に曝露して、実施形態１２を提供した。実施形態１２のディフラクトグラムを図７Ｂに示す。

【0161】

実施形態１３は、以下のように得られた：２５±５℃の２５０ｍＬの４つ口フラスコに、実施形態１ｓのサンプルを添加した。次いで、フラスコにＭｅＯＨ（４．０Ｖ、４０ｍＬ）及び精製水（１０ｍＬ、１．０Ｖ）を仕込み、全ての固形物が溶解するまで撹拌した。Ｎ_２を混合物中に１時間通気し、次いで、混合物を０～５℃に冷却した。０℃でＮ_２下、１００ｍＬの４つ口フラスコに充填した精製水（４０ｍＬ）を用いて、０．２２５ｍＬの体積のＮａＢＨ_４／水（０．００６当量、２．５％ｗ／ｗ）の冷却溶液（０～５℃）を調製し、続いて、ＮａＢＨ_４（１．０ｇ）を添加した。全てのＮａＢＨ_４が溶解するまで、混合物を０℃で撹拌した。かかるＮａＢＨ_４溶液を、２５０ｍＬのフラスコに添加し、冷却し（０～５℃）し、０～５℃で撹拌した。反応混合物の色が黄色に変化した。精製水（４０ｍＬ、４．０Ｖ、使用前にＮ_２で脱気）を０～５℃で１時間かけて滴加した。反応物を、Ｎ_２下、０～５℃で４時間撹拌した。追加の精製水（３０ｍＬ、３．０Ｖ、脱気）を０～５℃で１時間かけて滴加し、反応混合物を、Ｎ_２下、０～５℃で更に１６時間撹拌した。次いで、反応物を濾過し、得られた固形物を、Ｎ_２下、グローブボックス環境（Ｏ_２含有量は２００ｐｐｍである）において、精製水（２０ｍＬ、２Ｖ、使用前にＮ_２で脱気）で洗浄した。固形物を、３５±５℃で加湿窒素を用いて真空下で乾燥させて、実施形態１３をオフホワイト固形物として得た。実施形態１３のディフラクトグラムを図７Ｃに示す。

【0162】

実施例１４は、以下のように調製した：２－（１－（（１ｒ，４ｒ）－４－（シアノメチル）シクロヘキシル）－６－（フェニルスルホニル）－１，６－ジヒドロイミダゾ［４，５－ｄ］ピロロ［２，３－ｂ］ピリジン－２－イル）－Ｎ－（２－ヒドロキシ－２－メチルプロピル）アセトアミド（４８．１５ｋｇ、実施例２で調整、工程Ｂ）、ＥｔＯＨ（テクニカルグレード、４８１Ｌ）、及びＫＯＨ（６．６１３ｋｇ）を、１０～２０℃で９時間撹拌した。次いで、温度を１０～２０℃に維持しながら、反応物を酢酸（６．７４Ｌ）でクエンチした。アセトニトリル（２４０Ｌ）を添加し、溶媒を約２４０Ｌの体積になるまで減圧下で蒸発させた。このアセトニトリルの添加及び蒸発を更に２回繰り返した。得られた混合物を５時間にわたって６０～７０℃に加熱した後、それを１０～１５℃に冷却し、２時間撹拌した。この混合物中の固形物を濾別し、アセトニトリル（４８Ｌ）で２回洗浄した。次いで、固形物を水（２４０Ｌ）に添加し、反応混合物を３～５時間にわたって４５～５０℃に加熱した後、４時間にわたって１５～２０℃に冷却した。残った固形物を濾別し、濾過ケーキを水（９６Ｌ、２回）で洗浄した。この濾過ケーキを４５℃で乾燥させて、実施形態１４（２６．２８ｋｇ）を得た。実施形態１４のディフラクトグラムを図７Ｄに示す。

【0163】

式Ｉの化合物の更なる実施形態は、下記のように得られた。

【0164】

溶解性の評価
物質が完全に溶解するまで、又は最大１００ｍＬの溶媒が添加されるまで、実施形態１ｓ（１５ｍｇ）を漸増体積の溶媒で処理した。溶媒を、５ｍＬ、１０ｍＬ、２０ｍＬ、３０ｍＬ、４０ｍＬ、５０ｍＬ、７０ｍＬ及び１００ｍＬの増分で添加した。溶媒の各添加後、系を穏やかに撹拌しながら５０℃で５分間保持し、固形物の存在について目視評価した。合計１００ｍＬの溶媒が添加されるまで、このプロセスを継続した。固形物が残っていなかった場合、追加の溶媒は添加しなかった。評価が完了した後、溶液を５０℃で１時間保持し、次いで、撹拌しながら５０℃から５℃まで０．１℃／分で冷却した。固形物が存在していた場合、混合物を真空下で９６ウェルプレートを用いて濾過し、ＸＲＰＤにより分析した。透明な溶液が得られた場合、溶液を放置してＲＴで蒸発させた。５℃及び５０℃の温度の以下の溶媒（溶媒の直後の括弧内に添加した総量を記載）をこの手順に従って使用（各温度の後の括弧内に溶解の程度を記載）して、記載する実施形態を得た：５℃（懸濁液）及び５０℃（懸濁液）の水（１００ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図５に示す実施形態１ｓが得られ；５℃（懸濁液）及び５０℃（溶液）のメタノール（１０ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図５に示す実施形態１ｓが得られ；５℃（懸濁液）及び５０℃（溶液）のエタノール（３０ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図５に示す実施形態１ｓが得られ；５℃（懸濁液）及び５０℃（溶液）の２－プロパノール（３０ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図５に示す実施形態１ｓが得られ；５℃（懸濁液）及び５０℃（溶液）の１－プロパノール（３０ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図５に示す実施形態１ｓが得られ；５℃（懸濁液）及び５０℃（溶液）のアセトン（１００ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図５に示す実施形態１ｓが得られ；５℃（懸濁液）及び５０℃（濁り）の酢酸エチル（１００ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図５に示す実施形態１ｓが得られ；５℃（懸濁液）及び５０℃（溶液）のアセトニトリル（１００ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図３に示す実施形態６が得られ；５℃（部分的に溶解）及び５０℃（濁り）のトルエン（１００ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図５に示す実施形態１ｓが得られ；５℃（懸濁液）及び５０℃（濁り）の酢酸イソプロピル（１００ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図５に示す実施形態１ｓが得られ；５℃（懸濁液）及び５０℃（懸濁液）のメチルｔ－ブチルエーテル（１００ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図５に示す実施形態１ｓが得られ；５℃（懸濁液）及び５０℃（溶液）の２－ブタノン（１００ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図５に示す実施形態１ｓが得られ；５℃（部分的に溶解）及び５０℃（溶液）のＴＨＦ（７０ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図５に示す実施形態１ｓが得られ；５℃（溶液、サンプルを冷凍し、放置してＲＴで蒸発させた）及び５０℃（溶液）のＤＭＳＯ（５ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図５に示す実施形態１ｓが得られ；５℃（溶液、放置してＲＴで蒸発させた）及び５０℃（溶液）のＮ－メチルピロリジノン（５ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図５に示す実施形態１ｓが得られ；５℃（懸濁液）及び５０℃（懸濁液）のジエチルエーテル（１００ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図５に示す実施形態１ｓが得られ；５℃（懸濁液）及び５０℃（懸濁液）のメチルイソブチルケトン（１００ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図５に示す実施形態１ｓが得られ；５℃（懸濁液）及び５０℃（懸濁液）のＤＣＭ（１００ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図５に示す実施形態１ｓが得られ；５℃（懸濁液）及び５０℃（懸濁液）のヘプタン（１００ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図８に示す実施形態１８が得られ；５℃（部分的に溶解、サンプルを冷凍し、放置してＲＴで蒸発させた）及び５０℃（懸濁液）の１，４－ジオキサン（１００ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図５に示す乾燥形態の実施形態３ｃが得られ；５℃（懸濁液）及び５０℃（懸濁液）のニトロメタン（１００ｍＬ）では、結晶性の低い実施形態（ディフラクトグラムは示さず）が得られ；５℃（溶液）及び５０℃（溶液）の１－メトキシ－２－プロパノール（２０ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図１１に示す乾燥形態の実施形態２０が得られ；５℃（懸濁液）及び５０℃（懸濁液）の２－メチル－ＴＨＦ（１００ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図８に示し、ＴＧＡ及びＤＳＣをそれぞれ図１０Ａ及び図１０Ｂに示す実施形態１８が得られ；５℃（懸濁液）及び５０℃（濁り）のテトラリン（１００ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図３に示す実施形態４及び実施形態１ｂの混合物が得られ；５℃（懸濁液）及び５０℃（溶液）の３－メチル－１－ブタノール（１００ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図８に示し、ＴＧＡ及びＤＳＣをそれぞれ図１２Ａ及び図１２Ｂに示す実施形態１７が得られ；５℃（懸濁液）及び５０℃（濁り）のアニソール（１００ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図３に示す実施形態４及び実施形態１ｂの混合物が得られ；５℃（溶液）及び５０℃（溶液）でのｔ－ブタノール／水（１：１、１０ｍＬ）では、変調ＤＳＣを図９に示す乾燥形態の実施形態１９が得られ；５℃（懸濁液）及び５０℃（濁り）の１，２－ジメトキシエタン（１００ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図３に示す実施形態４及び実施形態１ｂの混合物が得られ；５℃（懸濁液）及び５０℃（濁り）のクメン（１００ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図３に示す実施形態４及び実施形態１ｂの混合物が得られ；５℃（懸濁液）及び５０℃（懸濁液）のジイソプロピルエーテル（１００ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図８に示す実施形態１８が得られ；５℃（懸濁液）及び５０℃（溶液）のモルホリン（５ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図１１に示す乾燥形態の実施形態２１が得られ；５℃（懸濁液）及び５０℃（溶液）のエタノール：水（９５：５、１０ｍＬ）では、結晶性の低い実施形態が得られ（ディフラクトグラムは示さず）；５℃（溶液）及び５０℃（溶液）のエタノール：水（９：１、５ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図５に示す乾燥形態の実施形態１ｓが得られ；５℃（懸濁液）及び５０℃（溶液）のアセトニトリル：水（９５：５、３０ｍＬ）では、結晶性の低い実施形態が得られ（ディフラクトグラムは示さず）。

【0165】

５℃でのインキュベーション
実施形態１ｓ（３０ｍｇ）を各溶媒で処理することによって、５℃でのインキュベーションのいくつかの実験を実施し、混合物を５℃で４８時間スラリーにした。アリコートを採取し、ＸＲＰＤにより直ちに分析した。各アリコートを１６時間乾燥させ、ＸＲＰＤにより再分析した。次いで、風乾させたサンプルを真空オーブン（ＲＴ）に２４時間入れた後、ＸＲＰＤにより更に分析した。以下の溶媒（溶媒の直後の括弧内に添加した総溶媒量、続いて溶解の程度を記載）をこの手順に従って使用して、記載する実施形態を得た：水（３０ｍＬ、懸濁液）では、ディフラクトグラムを図５に示す実施形態１ｓが得られ；メタノール（５ｍＬ、懸濁液）では、ディフラクトグラムを図５に示す実施形態１ｓが得られ；エタノール（３０ｍＬ、懸濁液）では、ディフラクトグラムを図５に示す実施形態１ｓが得られ；２－プロパノール（３０ｍＬ、懸濁液）では、ディフラクトグラムを図５に示す実施形態１ｓが得られ；１－プロパノール（３０ｍＬ、懸濁液）では、ディフラクトグラムを図５に示す実施形態１ｓが得られ；アセトン（３０ｍＬ、懸濁液）では、ディフラクトグラムを図５に示す実施形態１ｓが得られ；酢酸エチル（３０ｍＬ、懸濁液）では、ディフラクトグラムを図５に示す実施形態１ｓが得られ；アセトニトリル（３０ｍＬ、懸濁液）では、結晶性の低い実施形態（ディフラクトグラムは示さず）が得られ；トルエン（３０ｍＬ、懸濁液）では、ディフラクトグラムを図８に示す実施形態１５が得られ；酢酸イソプロピル（３０ｍＬ、懸濁液）では、ディフラクトグラムを図８に示す実施形態１７が得られ；メチルｔ－ブチルエーテル（３０ｍＬ、懸濁液）では、ディフラクトグラムを図８に示す実施形態１８が得られ；２－ブタノン（３０ｍＬ、懸濁液）では、ディフラクトグラムを図５に示す実施形態１ｓが得られ；ＴＨＦ（３０ｍＬ、懸濁液）では、ディフラクトグラムを図８に示す実施形態１７が得られ；ジエチルエーテル（３０ｍＬ、懸濁液）では、ディフラクトグラムを図５に示す実施形態１ｓが得られ；メチルイソブチルケトン（３０ｍＬ、懸濁液）では、ディフラクトグラムを図８に示す実施形態１７が得られ；ＤＣＭ（３０ｍＬ、懸濁液）では、ディフラクトグラムを図５に示す実施形態１ｓが得られ；ヘプタン（３０ｍＬ、懸濁液）では、ディフラクトグラムを図５に示す実施形態１ｓが得られ；１，４－ジオキサン（３０ｍＬ、懸濁液）では、この実験からのディフラクトグラムを図５に示す実施形態３ｃが得られ；ニトロメタン（３０ｍＬ、懸濁液）では、結晶性の低い形態の実施形態１ｓが得られ（ディフラクトグラムは示さず）；プロピレングリコール（３０ｍＬ、懸濁液）では、結晶性の低い実施形態（ディフラクトグラムは示さず）が得られ；２－メチル－テトラヒドロフラン（３０ｍＬ、懸濁液）では、ディフラクトグラムを図８に示す実施形態１８が得られ；テトラリン（３０ｍＬ、懸濁液）では、結晶性の低い実施形態１ｓが得られ（ディフラクトグラムは示さず）；３－メチル－１－ブタノール（３０ｍＬ、懸濁液）では、ディフラクトグラムを図８に示す実施形態１８が得られ；アニソール（３０ｍＬ、懸濁液）では、実施形態１ｓが得られ、そのディフラクトグラムは、いくつかの追加のピークを示すことを除いて、（図５に示す）実施形態１ｓと類似しており；１，２－ジメトキシエタン（３０ｍＬ、懸濁液）では、実施形態１ｓが得られ、そのディフラクトグラムは、いくつかの追加のピークを示すことを除いて、（図５に示す）実施形態１ｓと類似しており；クメン（３０ｍＬ、懸濁液）では、実施形態１ｓが得られ、そのディフラクトグラムは、いくつかの追加のピークを示すことを除いて、（図５に示す）実施形態１ｓと類似しており；ジイソプロピルエーテル（３０ｍＬ、懸濁液）では、ディフラクトグラムを図８に示す実施形態１７が得られ；エタノール：水（９５：５、３０ｍＬ、懸濁液）では、ディフラクトグラムを図５に示す実施形態１ｓが得られ；アセトニトリル：水（９５：５、３０ｍＬ、懸濁液）では、結晶性の低い実施形態が得られ（ディフラクトグラムは示さず）；ポリエチレングリコール（３０ｍＬ、懸濁液）では、結晶性の低い実施形態（ディフラクトグラムは示さず）が得られた。

【0166】

熱／冷却成熟
各溶媒中の実施形態１ｓ（３０ｍｇ）の懸濁液を、プラットフォームシェーカーインキュベーターに入れ、２４時間にわたって周囲温度から約５０℃まで一連の熱冷却サイクルに供した。これは、４時間毎に加熱のスイッチを切り替えることによって達成した。全体にわたって振盪を維持した。各サンプルからアリコートを採取し、２時間風乾させた。風乾した固形物をＸＲＰＤにより分析した後、真空オーブン（ＲＴ、２４時間）を使用して真空乾燥させ、ＸＲＰＤにより再分析した。この実験で得られた各サンプルを真空乾燥し、真空乾燥後、各サンプルを高温でＸＲＰＤインキュベーションにより分析した。以下の溶媒（溶媒の直後の括弧内に添加した総溶媒量を記載）をこの手順に従って使用して、記載する実施形態を得た：水（２０ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図５に示す実施形態１ｓが得られ；メタノール（５ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図１３に示す実施形態２２が得られ；エタノール（５ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図５に示す実施形態１ｓが得られ；２－プロパノール（１０ｍＬ）では、この実験についてのディフラクトグラムを図１３に示す実施形態２７が得られ；１－プロパノール（１０ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図１３に示す実施形態２３が得られ；アセトン（２０ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図５に示す実施形態１ｓが得られ；酢酸エチル（２０ｍＬ）では、実施形態１ｓの低結晶性形態が得られ（ディフラクトグラムは示さず）；アセトニトリル（２０ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図１３に示す結晶性の低い実施形態２４が得られ；トルエン（２０ｍＬ）では、結晶性の低い実施形態１ｓが得られ（ディフラクトグラムは示さず）；酢酸イソプロピル（２０ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図１３に示す実施形態１８が得られ；メチルｔ－ブチルエーテル（２０ｍＬ）では、結晶性の低い実施形態１ｓが得られ（ディフラクトグラムは示さず）；２－ブタノン（２０ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図１３に示す実施形態２６が得られ；ＴＨＦ（２０ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図１３に示す実施形態１８が得られ；ジエチルエーテル（２０ｍＬ）では、結晶性の低い実施形態１ｓが得られ（ディフラクトグラムは示さず）；メチルイソブチルケトン（２０ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図１３に示す実施形態２５が得られ；ＤＣＭ（２０ｍＬ）では、結晶性の低い形態の実施形態１ｓが得られ（ディフラクトグラムは示さず）；ヘプタン（２０ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図５に示す実施形態１ｓが得られ；１，４－ジオキサン（２０ｍＬ）では、この実験についてのディフラクトグラムを図１３に示す実施形態２７が得られ；キシレン（２０ｍＬ）では、低結晶性の実施形態１ｓが得られ（ディフラクトグラムは示さず）；プロピレングリコール（５ｍＬ）では、低結晶性の実施形態が得られ（ディフラクトグラムは示さず）；２－メチル－テトラヒドロフラン（２０ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図１３に示す実施形態１８が得られ；テトラリン（２０ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図５に示す実施形態１ｓが得られ；３－メチル－ブタノール（２０ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図１３に示す実施形態１８が得られ；アニソール（２０ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図１３に示し、ＴＧＡ及びＤＳＣをそれぞれ図２３Ａ及び図２３Ｂに示す実施形態１６が得られ；１，２－ジメトキシエタン（２０ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図１３に示す実施形態２９が得られ；クメン（２０ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図５に示す実施形態１ｓが得られ；ジイソプロピルエーテル（２０ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図１３に示す実施形態１７が得られ；エタノール：水（９５：５、２０ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図１３に示す実施形態３０が得られ；アセトニトリル：水（９５：５、２０ｍＬ）では、実施形態１ｓの結晶性の低い形態が得られ（ディフラクトグラムは示さず）；ポリエチレングリコール（５ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図１３に示す実施形態３１が得られた。

【0167】

６０℃における実施形態１ｓのインキュベーション
実施形態１ｓ（３０ｍｇ）を溶媒で処理し、６０℃で２４時間振盪した。アリコートを取り出し、１６時間風乾させた。次いで、乾燥したサンプルをＸＲＰＤにより分析した。以下の溶媒（溶媒の直後の括弧内に添加した総溶媒量を記載）をこの手順に従って使用して、記載する実施形態を得た：水（１０ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図５に示す実施形態１ｓが得られ；エタノール（１０ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図１４に示す実施形態３２が得られ；２－プロパノール（１０ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図１４に示す実施形態３３が得られ；１－プロパノール（１０ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図１４に示す実施形態２３が得られ；アセトン（１０ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図５に示す実施形態１ｓが得られ；酢酸エチル（１０ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図１４に示す実施形態３４が得られ；アセトニトリル（１０ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図１４に示す実施形態３５が得られ；トルエン（１０ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図１４に示す実施形態３６が得られ；酢酸イソプロピル（１０ｍＬ）では、この実験についてのディフラクトグラムを図１４に示す実施形態２５が得られ；メチルｔ－ブチルエーテル（１０ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図１４に示す実施形態３５が得られ；２－ブタノン（１０ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図１４に示す実施形態３８が得られ；ＴＨＦ（１０ｍＬ）では、この実験についてのディフラクトグラムを図１４に示す実施形態３３が得られ；ジエチルエーテル（１０ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図５に示す実施形態１ｓが得られ；メチルイソブチルケトン（１０ｍＬ）では、この実験についてのディフラクトグラムを図１４に示す実施形態２５が得られ；ＤＣＭ（１０ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図５に示す実施形態１ｓが得られ；ヘプタン（１０ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図５に示す実施形態１ｓが得られ；１－４－ジオキサン（１０ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図１４に示す実施形態３３が得られ；ニトロメタン（１０ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図５に示す実施形態１ｓが得られ；プロピレングリコール（１０ｍＬ）では、この実験についてのディフラクトグラムを図１４に示す実施形態２８が得られ；２－メチル－テトラヒドロフラン（１０ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図１４に示す実施形態３３が得られ；テトラリン（１０ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図５に示す実施形態１ｓ及び変調ＤＳＣプロファイルを図９に示す実施形態１９の混合物（混合物のディフラクトグラムは図示しない）が得られ；３－メチル－１－ブタノール（１０ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図１４に示す実施形態３３が得られ；アニソール（１０ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図１４に示す実施形態３６が得られ；１，２－ジメトキシエタン（１０ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図１４に示す実施形態３４が得られ；クメン（１０ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図５に示す実施形態１ｓが得られ；ジイソプロピルエーテル（１０ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図８に示す実施形態１７が得られ；水（９５：５、１０ｍＬ）では、ディフラクトグラムを図１４に示す実施形態２８が得られ、ポリエチレングリコール（５ｍＬ）では、この実験のディフラクトグラムを図１４に示す実施形態３９が得られた。

【0168】

高温成熟
複数の実施形態１９（２５ｍｇ）のサンプルのそれぞれを、以下に指定する量の溶媒で処理し、順に複数のサンプルが得られ、それぞれ６０℃で２４時間撹拌した。各サンプルから固形物を単離し、１６時間風乾し、ＸＲＰＤにより分析した。以下の溶媒（溶媒の直後の括弧内に添加した総溶媒量、続いて溶解の程度を記載）をこの手順に従って使用して、記載する実施形態を得た：水（１２５μＬ、懸濁液）では、ディフラクトグラムを図５に示す実施形態１ｓが得られ；メタノール（１２５μＬ、懸濁液）では、実施形態１ｓが得られ、そのディフラクトグラムは、いくつかの追加のピークを示すことを除いて、図５に示す実施形態１ｓのディフラクトグラムと類似しており；エタノール（１２５μＬ、懸濁液）では、ディフラクトグラムを図５に示す実施形態１ｓが得られ；２－プロパノール（７５μＬ、懸濁液）では、ディフラクトグラムを図１５に示す実施形態３７が得られ；１－プロパノール（７５μＬ、懸濁液）では、ディフラクトグラムを図１５に示す実施形態４０が得られ；アセトン（７５μＬ、懸濁液）では、ディフラクトグラムを図５に示す実施形態１ｓが得られ；酢酸エチル（７５μＬ、懸濁液）では、ディフラクトグラムを図５に示す実施形態１ｓが得られ；アセトニトリル（７５μＬ、懸濁液）では、ディフラクトグラムを図５に示す実施形態１ｓが得られ；トルエン（７５μＬ、懸濁液）では、ディフラクトグラムを図５に示す実施形態１ｓが得られ；酢酸イソプロピル（７５μＬ、懸濁液）では、ディフラクトグラムを図１５に示す実施形態３７が得られ；メチルｔ－ブチルエーテル（７５μＬ、懸濁液）では、ディフラクトグラムを図１４に示す実施形態３３が得られ；２－ブタノン（７５μＬ、懸濁液）では、ディフラクトグラムを図５に示す実施形態１ｓが得られ；ＴＨＦ（７５μＬ、懸濁液）では、ディフラクトグラムを図１５に示す実施形態３７が得られ；ジエチルエーテル（１５０μＬ、懸濁液）では、ディフラクトグラムを図５に示す実施形態１ｓが得られ；メチルイソブチルケトン（１５０μＬ、懸濁液）では、ディフラクトグラムを図１４に示す実施形態３３が得られ；ＤＣＭ（７５μＬ、懸濁液）では、ディフラクトグラムを図５に示す実施形態１ｓが得られ；ヘプタン（１５０μＬ、懸濁液）では、ディフラクトグラムを図１５に示す実施形態４１が得られ；１．４－ブタノン（７５μＬ、懸濁液）では、ディフラクトグラムを図５に示す実施形態３ｃが得られ；ニトロメタン（７５μＬ、懸濁液）では、ディフラクトグラムを図１５に示す実施形態４２が得られ；プロピレングリコール（７５μＬ、懸濁液）では、ディフラクトグラムを図１５に示す実施形態４３が得られ；２－メチル－テトラヒドロフラン（１５０μＬ、懸濁液）では、ディフラクトグラムを図１４に示す実施形態３３が得られ；テトラリン（１５０μＬ、懸濁液）では、ディフラクトグラムを図１４に示す実施形態３３が得られ；３－メチル－１－ブタノール（７５μＬ、懸濁液）では、ディフラクトグラムを図１４に示す実施形態３３が得られ；アニソール（１５０μＬ、懸濁液）では、ディフラクトグラムを図５に示す実施形態１ｓが得られ；１，２－ジメトキシエタン（７５μＬ、懸濁液）では、ディフラクトグラムを図５に示す実施形態１ｓが得られ；クメン（１５０μＬ、懸濁液）では、ディフラクトグラムを図１５に示す実施形態４４が得られ；ジイソプロピルエーテル（１５０μＬ、懸濁液）では、ディフラクトグラムを図１４に示す実施形態３３が得られ；エタノール：水（９５：５、７５μＬ、懸濁液）では、ディフラクトグラムを図１５に示す実施形態４５が得られ；アセトニトリル：水（９５：５、７５μＬ、懸濁液）では、図５に示すディフラクトグラムと比較して、ディフラクトグラムが細胞増殖を示す実施形態１ｓが得られ；ポリエチレングリコール（７５μＬ、懸濁液）では、ディフラクトグラムを図１５に示す実施形態４６が得られた。

【0169】

熱サイクリング
複数の実施形態１９（２５ｍｇ）のサンプルのそれぞれを、以下に指定する量の溶媒で処理し、順に複数のサンプルが得られ、各サンプルを２４時間熱サイクリング（４０～６０℃、４時間サイクル）によって成熟させた。固形物を単離し、１６時間風乾し、ＸＲＰＤにより分析した。以下の溶媒（溶媒の直後の括弧内に添加した総溶媒量、続いて、２４時間目に観察された外観）をこの手順に従って使用して、記載する実施形態を得た：水（１２５μＬ、帯緑色の固形物）では、ディフラクトグラムを図５に示す実施形態１ｓが得られ；メタノール（７５μＬ、透明な固形物）では、ディフラクトグラムが、図７のディフラクトグラムと比較して、高角度でシフトしたピークを示した実施形態１１が得られ；エタノール（１００μＬ、帯緑色の固形物）では、ディフラクトグラムを図５に示す実施形態１ｓが得られ；２－プロパノール（７５μＬ、帯黄色の固形物）では、ディフラクトグラムを図１４に示す実施形態３３が得られ；１－プロパノール（７５μＬ、白色の懸濁液）では、ディフラクトグラムを図１４に示す実施形態３３が得られ；アセトン（７５μＬ、帯緑色の固形物）では、ディフラクトグラムを図１６に示す実施形態４７が得られ；酢酸エチル（７５μＬ、白色の懸濁液）では、ディフラクトグラムを図１４に示す実施形態３３が得られ；アセトニトリル（７５μＬ、白色の懸濁液）では、ディフラクトグラムを図３に示す結晶性の低い実施形態６が得られ；トルエン（７５μＬ、透明な固形物）では、ディフラクトグラムを図１４に示す実施形態３６が得られ；酢酸イソプロピル（７５μＬ、白色の固形物）では、ディフラクトグラムを図１４に示す実施形態３３が得られ；メチルｔ－ブチルエーテル（７５μＬ、白色の懸濁液）では、ディフラクトグラムを図３に示す実施形態６が得られ；２－ブタノン（７５μＬ、オフホワイトの固形物）では、ディフラクトグラムを図１４に示す実施形態３３が得られ；ＴＨＦ（７５μＬ、オフホワイトの固形物）では、ディフラクトグラムを図１６に示す実施形態４８が得られ；ジエチルエーテル（１５０μＬ、オフホワイトの固形物）では、ディフラクトグラムを図１６に示す実施形態４９が得られ；メチルイソブチルケトン（１５０μＬ、オフホワイトの固形物）では、ディフラクトグラムが図１３に示す実施形態２５のディフラクトグラムと非常に類似している実施形態２５が得られ；ＤＣＭ（１２５μＬ、懸濁液）では、ディフラクトグラムを図５に示す実施形態１ｓが得られ；ヘプタン（１５０μＬ、白色の固形物）では、変調ＤＳＣプロファイルを図９に示す実施形態１９が得られ；１，４－ジオキサン（７５μＬ、白色の固形物）では、ディフラクトグラムを図５に示す実施形態３ｃが得られ；ニトロメタン（７５μＬ、白色の懸濁液）では、ディフラクトグラムを図１６に示す実施形態５０が得られ；プロピレングリコール（７５μＬ、クリーム色の懸濁液）では、ディフラクトグラムが非晶質ハロを示すことを除いて、（図１６に示す）実施形態１０のディフラクトグラムと非常に類似している実施形態１０が得られ；２－メチル－テトラヒドロフラン（１５０μＬ、白色の固形物）では、ディフラクトグラムを図１６に示す実施形態４８が得られ；テトラリン（１５０μＬ、白色の固形物）では、結晶性の低い実施形態が得られ（ディフラクトグラムは示さず）；３－メチル－１－ブタノール（７５μＬ、白色の懸濁液）では、ディフラクトグラムを図１３に示す実施形態２５が得られ；アニソール（１５０μＬ、白色の懸濁液）では、ディフラクトグラムを図１６に示す実施形態５１が得られ；１，２－ジメトキシエタン（７５μＬ、白色の懸濁液）では、ディフラクトグラムを図１６に示す実施形態５２が得られ；クメン（１５０μＬ、白色の固形物）では、結晶性の低い実施形態が得られ（ディフラクトグラムは示さず）；ジイソプロピルエーテル（１５０μＬ、白色の固形物）では、ディフラクトグラムを図３に示す実施形態６が得られ；エタノール：水（９５：５、７５μＬ、透明な固形物）では、ディフラクトグラムを図７に示す実施形態１１が得られ；アセトニトリル：水（９５：５、７５μＬ、透明な固形物）では、ディフラクトグラムが図１６に示す実施形態５３が得られ；ポリエチレングリコール（７５μＬ、淡いピンク色の懸濁液）では、ディフラクトグラムが非晶質ハロを示すことを除いて、（図１３に示す）実施形態３１のディフラクトグラムと非常に類似している実施形態３１が得られる。

【0170】

式Ｉの化合物の実施形態１１、１１ｂ、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、及び５３のうちのいずれか１つ並びにそれらの任意の組み合わせは、本発明による化合物の実施形態である。本発明による化合物の更なる他の実施形態は、非吸湿性溶媒和物としての式Ｉの化合物（例えば、式Ｉの化合物の実施形態１１）を含む。本発明による化合物の更なる他の実施形態は、非晶質形態の式Ｉの化合物（例えば、式Ｉの化合物の実施形態１９）を含む。式Ｉの化合物の実施形態１１、１６、１７、及び１８のうちのいずれか１つ並びにそれらの任意の組み合わせは、本発明による化合物の実施形態である。本発明の更なる実施形態は、薬学的に許容される共結晶の形態の本発明による化合物を含む。本発明の追加の実施形態は、薬学的に許容される塩の形態の本発明による化合物を含む。

【0171】

本発明の実施形態は、形態１ｓ、１ａ、１ｂ、１ｃ、１ｄ、１ｅ、１ｆ、１ｇ、１ｈ、２、３ｂ、３ｃ、３ｄ、３ｅ、５、６、７、８、９、及び１０のうちの少なくとも１つの式Ｉの化合物を含む。本発明の実施形態は、薬学的に許容される共結晶の形態の式Ｉの化合物を含む。

【0172】

本発明の実施形態は、形態１ｓ、１ａ、１ｂ、１ｃ、１ｄ、１ｅ、１ｆ、１ｇ、１ｈ、２、３ｂ、３ｃ、３ｄ、３ｅ、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、及び５３のうちの少なくとも１つの式Ｉの化合物を含む。本発明の実施形態は、薬学的に許容される共結晶の形態の式Ｉの化合物を含む。

【0173】

形態１ｓの式Ｉの化合物のＸＲＰＤを、図２５に示す。主要なピークのリストは、６．１３±０．２、９．８８±０．２、１０．２６±０．２、１３．３９±０．２、１４．５２±０．２、１６．６４±０．２、１８．２４±０．２、１９．９８±０．２、２０．５８±０．２、及び２２．０１±０．２の２θ値のピークを含む。

【0174】

式Ｉの化合物を、酵素アッセイ及び細胞アッセイで試験した。酵素アッセイの結果及びその説明は、「酵素阻害アッセイの結果」と題する表４、及び２０１９年５月２１日に発行された米国特許第１０，２９４，２２６号（その全体が参照により本明細書に組み込まれる）の第５１～５４欄に示されている。この化合物をまた、３つの細胞アッセイ：ＩＬ－２ ｐＳＴＡＴ５（ＪＡＫ１／ＪＡＫ３）、ＩＦＮα ｐＳＴＡＴ－４（ＪＡＫ１／ＴＹＫ２）、及びＧＭ－ＣＳＦ ｐＳＴＡＴ５（ＪＡＫ２／ＪＡＫ２）において試験し、結果及びアッセイの説明は、「細胞ベースのアッセイデータ」と題する表５、及び米国特許第１０，２９４，２２６号（その全体が参照により本明細書に組み込まれる）の第５３～５５欄に示されている。

【0175】

式Ｉの化合物を溶解度及び透過性アッセイで試験した。溶解度アッセイの結果は、「溶解度アッセイのデータ」と題する表６に示され、透過性アッセイの結果は、「ＭＤＣＫ－ＭＤＲ１透過性データ」と題する表７、及び米国特許第１０，２９４，２２６号（その全体が参照により本明細書に組み込まれる）の第５５～５８欄に示されている。

【0176】

式Ｉの化合物を、米国特許第１０，２９４，２２６号（その全体が参照により本明細書に組み込まれる）の第２１～２２欄及び第５８～５９欄並びに表１ａに記載のプロトコルに従って試験した。

【0177】

式Ｉの化合物は、表８、米国特許第１０，２９４，２２６号（その全体が参照により本明細書に組み込まれる）の第５９欄に記載及び与えられ、物理化学的特性によって更に特徴付けられた。

【0178】

式Ｉの化合物は、２０２０年５月２８日に公開された米国特許出願第２０２０／０１６５２５０号（参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）の図７Ａ、図７Ｂ、図７Ｃ、図７Ｄ、図７Ｅ、及び図８～図２３、並びに段落［０３２８］～［０３４８］に記載され、与えられているように、実施形態１１、１１ｂ、１２、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、及び５３の記載によって更に特徴付けられた。

【0179】

以下の実施例におけるｍｇ単位の量は、式Ｉの化合物の形態の活性薬剤の量を指す。投与されるものが薬学的に許容される塩などの別の形態の活性薬剤である場合、適切な補正が行われるべきである。

【0180】

実施例２：インビボ試験
式Ｉの化合物は、マウスにおいて高い結腸曝露及び組織標的結合を示し、結腸組織におけるＩＬ－１２／ＩＬ－１８誘導ＳＴＡＴ３リン酸化アッセイにおいて、及びエクスビボサイトカイン刺激結腸外植片研究において、経口投与後に低い全身曝露を示した。マウスにおける式Ｉの化合物の経口投与は、インターフェロン－アルファ（ＩＦＮα）又はＩＬ－２１のいずれかによるエクスビボ全血刺激によって決定されるように、最小の全身曝露及び血液における一貫した用量依存的薬力学的応答の欠如をもたらした。

【0181】

式Ｉの化合物は、経口投与後、低レベルの全身曝露を示す。ヒト研究における全身曝露と標的結合との間の関係を理解するために、ヒト全血におけるサイトカイン誘導性ｐＳＴＡＴ－３の阻害を、かかる化合物を用いて測定した。ヒト全血において、式Ｉの化合物は、濃度依存的な様式で、ＪＡＫ１、ＪＡＫ２、ＪＡＫ３、並びにＩＦＮα（ＪＡＫ１／Ｔｙｋ２）、トロンボポエチン（ＴＰＯ）（ＪＡＫ２／ＪＡＫ２）、及びＩＬ－２１（ＪＡＫ１／ＪＡＫ３）シグナル伝達の下流のＴｙｋ２ホモ及びヘテロ二量体を阻害した。式Ｉの化合物によるＩＦＮα、ＴＰＯ、及びＩＬ－２１媒介性ＳＴＡＴ３リン酸化の平均ＩＣ５０値は、表３に示すように、それぞれ１０５．３ｎＭ、４９０．４ｎＭ、及び５７９．２ｎＭであった。表３において、式Ｉの化合物についての結果が報告されている。

【0182】

【表5】

^（ａ）ＣＩ、信頼区間；^（ｂ）ＩＦＮα、インターフェロンアルファ；^（ｃ）ｎ、試行回数；^（ｄ）ＮＤ、未決定、収束しない；^（ｅ）ＴＰＯ、トロンボポエチン。

【0183】

マウス全血ＩＣ_５０値もまた、マウスモデルにおける全身曝露と標的結合との間の関係を理解するために生成した。マウス全血において、マウス全血におけるＩＦＮα－（ＪＡＫ１／Ｔｙｋ２）、ＩＬ－２１－（ＪＡＫ１／３）、及びＩＬ－１２－（ＪＡＫ２／Ｔｙｋ２）誘導性ｐＳＴＡＴ応答の阻害における式Ｉの化合物のインビトロ活性を測定した。表３に示す結果は、式Ｉの化合物が、ＩＦＮα及びＩＬ－２１応答を、それぞれ２９８．６ｎＭ及び４１５．１ｎＭのＩＣ５０値で阻害することを実証した。マウス全血におけるＩＬ－１２誘導性ｐＳＴＡＴ－４の阻害については、信頼できるＩＣ_５０を報告することができなかった。

【0184】

局所腸選択的ＪＡＫ阻害剤が結腸組織におけるＳＴＡＴシグナル伝達を阻害する可能性を理解するために、２つの薬物動態学的／薬力学的（pharmacokinetic/pharmacodynamic、ＰＫ／ＰＤ）研究を開発した。第１は、マウスにおけるＩＬ－１２及びＩＬ－１８の併用腹腔内投与を伴い、結腸組織においてＪＡＫ／ＳＴＡＴ経路の活性化をもたらす全身性炎症応答を誘導する。これは、チャレンジの３時間後のＳＴＡＴ３の強固なリン酸化によってモニタリングすることができる。第２のＰＫ／ＰＤモデルは、サイトカイン（ＩＬ－２２、ＩＬ－６、及びＩＦＮα）のカクテルによるマウス結腸組織のエクスビボ刺激を伴い、式Ｉの化合物の経口投与後のＳＴＡＴ３リン酸化の阻害を測定する。

【0185】

ＩＬ－１２及びＩＬ－１８の併用腹腔内投与は、マウスにおいて結腸の炎症を誘導する（Ｃｈｉｋａｎｏ Ｓ，ｅｔ ａｌ．Ｇｕｔ４７（６），７７９－７８６（２０００）「ＩＬ－１８ ａｎｄ ＩＬ－１２ ｉｎｄｕｃｅ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ ａｎｄ ｆａｔｔｙ ｌｉｖｅｒ ｉｎ ｍｉｃｅ ｉｎ ａｎ ＩＦＮ－ｇａｍｍａ ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｍａｎｎｅｒ」、Ｎｏｌｄ－Ｐｅｔｒｙ Ｃ，ｅｔ ａｌ．Ｆｒｏｎｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ．８，１５３１（２０１７）「Ｇｐ９６ Ａｎｔａｇｏｎｉｓｔ Ｐｒｏｔｅｃｔｓ ｉｎ Ｍｕｒｉｎｅ－Ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ－Ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ」）。結腸組織における炎症応答は、ＩＬ－１２／ＩＬ－１８によるチャレンジの３時間後のＳＴＡＴ３の強いリン酸化によってモニタリングすることができる。この非ＧＬＰ試験において、経口投与された式Ｉの化合物の効果を、ＩＬ－１２及びＩＬ－１８の両方の全身投与によって誘導されたマウス結腸組織におけるＳＴＡＴ３応答に対して評価した。

【0186】

Ｃ５７ＢＬ／６マウス（６～８週齢）を体重によって無作為化し、２つの研究の各々ついて様々な処置群に割り当てた。マウスを、ＩＬ－１２（２５０ｎｇ）及びＩＬ－１８（１μｇ）の組み合わせで腹腔内チャレンジした。ＩＬ－１２／ＩＬ－１８誘導性ｐＳＴＡＴ－３応答に対する式Ｉの化合物の効果を調べるために、マウスの群に、ＩＬ－１２／ＩＬ－１８チャレンジの１時間前に式Ｉの化合物を経口投与した。ＩＬ－１２／ＩＬ－１８チャレンジの３時間後、マウスをＣＯ２窒息で安楽死させ、ＰＫ分析のために血液を心臓穿刺によって採取し、ｐＳＴＡＴ－３応答及び薬物レベルを測定するために大腸組織を採取した。２０％の２－ヒドロキシプロピル－β－シクロデキストリン（ＨＰ－β－ＣＤ）を経口投与したマウスを、ビヒクル対照として使用した。マウスにおけるＩＬ－１２／ＩＬ－１８誘導性結腸ｐＳＴＡＴ－３応答に対する式Ｉの化合物の効果を調べるために、２つの独立した研究（Ｓ－１及びＳ－２）を行った。両方の研究において、ＩＬ－１２／ＩＬ－１８チャレンジ後、結腸ｐＳＴＡＴ－３の有意な増加が見られた。両方の実験において、式Ｉの化合物は、ｐＳＴＡＴ－３応答の用量関連阻害について明確な傾向を示した：１０ｍｇ／ｋｇで３．９％及び３３．１％阻害；２５ｍｇ／ｋｇで２５．８％及び６１．２％阻害；並びに５０ｍｇ／ｋｇで４９．７％及び６６．１％阻害（表４）。統計分析により、Ｓ－１では阻害の有意性の欠如が示されたが、Ｓ－２では、２５ｍｇ／ｋｇ及び５０ｍｇ／ｋｇ用量で有意な阻害が達成された。投薬後３０分及び４時間（終末）で、血清レベルを測定した。以下の表５及び６に示すように、式Ｉの化合物は、３０分で、全ての試験用量で低い全身曝露を示した（ｎＭ、平均±ＳＥＭ；１０ｍｇ／ｋｇで７．４±１．４及び７．０±０．７；２５ｍｇ／ｋｇで２１．８±５．５ｍｇ／ｋｇ及び７０．５±６０．４；５０ｍｇ／ｋｇ用量で１２１．７±８７．２ｍｇ／ｋｇ及び３８．８±７．４）。式Ｉの化合物の観察された血清曝露は、表３に示すように、ＩＬ－２１誘導性ｐＳＴＡＴ－３、ＩＦＮα誘導性ｐＳＴＡＴ－３、及びｐＳＴＡＴ－４についてのマウス全血ＩＣ５０よりも有意に低かった。結腸の薬物レベルを、投与の４時間後に測定した。血清と比較して、高い薬物レベルが、式Ｉの化合物で処置されたマウスの結腸サンプルにおいて観察された（表５及び６）。式１の化合物の結腸曝露は、用量依存的に増加した。２５ｍｇ／ｋｇ用量では、式Ｉの化合物の結腸曝露は、３０８１４．５±５５５２．５ｎｇ／ｇ組織及び１８２５６．５±４１１８．８ｎｇ／ｇ組織であった。まとめると、血清及び結腸曝露データは、式Ｉの化合物の薬理学的応答が、主に薬物の組織曝露によって駆動されるようであることを示唆する。式Ｉの化合物は、高い結腸曝露及び低い全身曝露を伴う、結腸におけるＩＬ－１２／ＩＬ－１８誘導性ｐＳＴＡＴ－３の阻害を介してインビボでの標的結合を実証する。マウスにおける式Ｉの化合物の経口投与は、他の研究において示されるように、最小の全身曝露及び血液における一貫した用量依存的な薬力学的応答の欠如をもたらした。

【0187】

【表6】

結腸ｐＳＴＡＴ－３の阻害の割合（％）を、外れ値を除去した後、対数変換データを使用して決定した。

【0188】

【表7】

データは、平均±ＳＥＭとして提示されている；Ｎ＝３～７／群。ＢＬＯＱ、定量限界未満；ｍｉｎ、分；ｈ、時間。

【0189】

【表8】

データは、平均±ＳＥＭとして提示されている；Ｎ＝３～７／群。ＢＬＯＱ、定量限界未満；ｍｉｎ、分；ｈ、時間。

【0190】

上記のＩＬ－１２／ＩＬ－１８モデルに加えて、式Ｉの化合物の局所有効性を、マウスサイトカイン混合物（ＩＬ－２２／ＩＬ－６／ＩＦＮα）結腸外植片モデルにおいて更に確立した。ＩＬ－２２、ＩＬ－６、及びＩＦＮαの組み合わせは、チャレンジの１時間後、エクスビボでマウス結腸外植片において迅速かつ強固なｐＳＴＡＴ－３応答を誘導した。この研究は、エクスビボでマウス結腸外植片モデルにおけるＩＬ２２／ＩＬ６／ＩＦＮα誘導性ｐＳＴＡＴ－３応答に対する式Ｉの化合物の用量応答及び作用の持続時間を調べることを目的とした。

【0191】

Ｃ５７ＢＬ／６マウス（６～８週齢）を体重によって無作為化し、各研究について様々な処置群に割り当てた。マウスに、示された用量の式Ｉの化合物を経口投与した。試験終了時、心臓穿刺を介して採血し、ＰＫ分析のために血清及び洗浄した近位結腸を調製した。

【0192】

遠位結腸外植片（約３ｍｍ^２）は、未処理、又はサイトカイン（各々１００ｎｇ／ｍＬのＩＬ－６、ＩＬ－２２、ＩＦＮα）で処理した。１時間刺激した後、組織をホモジナイズ用に急速凍結し、ｐＳＴＡＴ－３についてアッセイした。２つの独立した実験において、ＳＳ－１及びＳＳ－２、式Ｉの化合物は、結腸ｐＳＴＡＴ－３を用量依存的に阻害した。ＳＳ－１において、式Ｉの化合物は、基底ｐＳＴＡＴ－３応答を、０．５、２．５、５、及び２５ｍｇ／ｋｇで、それぞれ５４．３、７４．４、７８．６、及び８９．５％阻害した。ＩＬ－２２／ＩＬ－６／ＩＦＮα刺激ｐＳＴＡＴ－３応答は、同様に、０．５、２．５、５、及び２５ｍｇ／ｋｇの式Ｉの化合物で、それぞれ４２．７、７４．９、８３．８、及び９３．８％阻害された。ＳＳ－２では、基底ｐＳＴＡＴ－３は、０．５、２．５、５、及び２５ｍｇ／ｋｇ用量の式Ｉの化合物で、それぞれ３６．７、６６．２、７１．３、及び８３．８％阻害された。ＩＬ－２２／ＩＬ－６／ＩＦＮαで刺激されたｐＳＴＡＴ－３は、式Ｉの化合物により、０．５、２．５、５、及び２５ｍｇ／ｋｇで、それぞれ５．５、６２．０、６８．１、及び８９．８％阻害された。したがって、式Ｉの化合物は、ＩＬ－２２／ＩＬ－６／ＩＦＮα誘導性ｐＳＴＡＴ－３応答の阻害を介して、エクスビボで結腸組織における強固な標的結合を実証した。

【0193】

表７及び８に示されるように、式Ｉの化合物の効果は、式Ｉの化合物の低い全身（血清）曝露（≦１０．３±６．９ｎＭ）及び高い結腸曝露を伴った（２５ｍｇ／ｋｇで、ＳＳ－１及びＳＳ－２において、それぞれ２７４８８．１±６１２８．６ｎｇ／ｇ及び２２９２９．６±４１４６．６ｎｇ／ｇ）。式Ｉの化合物について観察された高い結腸曝露及び低い全身曝露は、観察された薬理学の重要な駆動因子としての結腸薬物レベルの役割を意味する。式Ｉの化合物は、経口投与の４時間後、結腸組織の標的結合を示した。

【0194】

【表9】

データは、平均±ＳＥＭとして提示されている；Ｎ＝５／群。ＢＬＯＱ、定量限界未満。

【0195】

【表10】

データは、平均±ＳＥＭとして提示されている；Ｎ＝５／群。ＢＬＯＱ、定量限界未満。

【0196】

２０％のＨＰ－β－ＣＤ中の溶液として製剤化された１０ｍｇ／ｋｇの用量での式１の化合物の経口投与の０．５、１、２、３、５、７、及び２４時間後、雌Ｃ５７Ｂｌ／６マウス（Ｎ＝３／時点）において、限定された組織（肝臓、腸）分布研究を行った。血漿及び以下の組織を、化合物濃度分析のために採取した：肝臓、全回腸、及び全結腸。ホモジナイズの前に、回腸及び結腸を生理食塩水で洗い流した。糞便を２４時間にわたって採取した。全ての組織（血漿を除く）を滅菌水中でホモジナイズし、式Ｉの化合物の濃度をＬＣ－ＭＳ／ＭＳを使用して決定した。この研究の結果は、最も高い組織濃度が回腸（＞結腸＞肝臓＞血漿）で見られることを実証した。（表９参照）。糞便中の式Ｉの化合物の濃度は、投与２４時間後で１２５．６μｇであった。

【0197】

【表11】

^ａ 値は平均±ＳＤである（Ｎ＝３動物）。
^ｂ ＢＬＯＱ（１ｎｇ／ｍＬ）
^ｃ Ｎ＝２（ＳＤは計算せず）
ＢＬＯＱ＝定量限界未満；Ｎ＝動物の数；ＰＯ＝経口投与；ＳＤ＝標準偏差。

【0198】

予備的な組織分布研究を、雄Ｓｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙラット（Ｎ＝３／時点）において、２５ｍｇ／ｋｇの用量での式Ｉの化合物の経口投与の０．５、１、２、３、５、７、及び２４時間後に行った。以下の組織を化合物濃度分析のために採取した：肝臓、腎臓、脳、筋肉、精巣上体脂肪、十二指腸、空腸、回腸、結腸（管腔内容物及び組織の両方）、及び血漿。様々な組織における化合物濃度を表１０及び１１に示す。この研究の結果は、低い全身曝露及び高い局所濃度（腸管）を示した。

【0199】

【表12】

^ａＢＬＯＱは、定量限界（０．５ｎｇ／ｍＬの組織ホモジネート）未満である。
^ｂＮＣ＝３サンプルのうち２つがＢＬＯＱであった場合、平均を計算しなかった。濃度＜ＢＬＯＱを、平均の計算のために０に設定する。
^ｃＮＡ＝適用不可／利用不可

【0200】

【表13】

^（ａ）ＮＣ、３サンプルのうち２つがＢＬＯＱ（０．５ｎｇ／ｍＬの組織ホモジネート）であった場合、平均を計算しなかった。
ＢＬＯＱ＝定量限界未満；Ｄｕｏｄ＝十二指腸；Ｎ＝動物の数；ＮＣ＝計算せず；ＰＯ＝経口投与；ＳＤ＝標準偏差。

【0201】

実施例３：家族性腺腫性ポリポーシスの参加者におけるヤヌスキナーゼ（ＪＡＫ）阻害剤である式Ｉの化合物の有効性及び安全性を評価するための第１ｂ相試験。
式Ｉの化合物は、透過性及び溶解性に基づく好ましい腸選択的特性を有する経口小分子の強力な汎ヤヌスキナーゼ（ＪＡＫ）阻害剤である。細胞質チロシンキナーゼのこの群の阻害は、シグナル伝達及び転写活性化因子（Signal Transducer and Activator of Transcription、ＳＴＡＴ）タンパク質のリン酸化を妨げる。リン酸化ＳＴＡＴ（ｐＳＴＡＴ）は核に移行し、リウマチ性関節炎、炎症性大腸炎、家族性腺腫性ポリポーシス（ＦＡＰ）、及び他の炎症性疾患の病因に関与するいくつかのケモカイン、サイトカイン、及びプロテアーゼの遺伝子転写を誘導する。

【0202】

目的及び評価項目
この試験の主な目的は、ＦＡＰを有する参加者における大腸ポリープ負荷（ポリープ負荷の合計）に対する式Ｉの化合物の効果を決定することである。主要な第２の目的は、安全性、有効性の他の尺度、局所及び全身薬物動態（ＰＫ）、並びにポリープにおける薬力学（ＰＤ）を評価することである。

【0203】

全体的な計画
これは、ＦＡＰを有する成人参加者における式Ｉの化合物の有効性及び安全性を評価するための第１ｂ相多施設試験である。この試験は、式Ｉの化合物が、２４週間にわたるポリープの数の減少及びポリープにおけるＪＡＫシグナル伝達の減少によって評価されるように、大腸及び十二指腸において臨床活性を有するかどうかを決定するように設計されている。参加者は、結腸切除前又は結腸切除後のいずれかであり得るが、全ての参加者が結腸ポリープ又は直腸ポリープを有している必要がある。全ての参加者は、大腸の疾患を有する、古典的なＦＡＰ（すなわち、大腸腺腫（adenomatous polyposis coli、ＡＰＣ））生殖系列変異又は絶対保因者（obligate carrier）の遺伝子診断を受けることが要求される。軽症型ＦＡＰを有する参加者は、適格ではない。

【0204】

参加者数
この研究では、約４０人の参加者（結腸切除後及び結腸切除前の各々約２０人）が登録することになる。

【0205】

処置群及び継続期間
全ての参加者は、式Ｉの化合物７５ｍｇを１日２回投与される。各参加者についての試験参加の総期間は、スクリーニング（３０日間）、処置（２４週間）、及びフォローアップ来院（試験薬物の最後の投与後約３０日間）からなる約３２週間である。
式Ｉの化合物は、７５ｍｇの錠剤としてスポンサーの責任の下で製造され、提供される。

【0206】

有効性評価
全ての参加者は、２４週目に有効性評価を受ける。評価は、下部ＧＩポリープ負荷、十二指腸ポリープ負荷、及び疾患応答を含み、これらは、治験責任医師によって実施される。

【0207】

薬物動態評価
静脈血液サンプル及び下部ＧＩ管からの組織サンプル（腸粘膜及びポリープ切除）を、活動スケジュールに示された時点で式Ｉの化合物の血漿中濃度及び組織中濃度の測定のために採取する。

【0208】

薬力学的及びバイオマーカー評価
バイオマーカーは、ＦＡＰ患者から採取された血液、組織生検、及び糞便サンプル中のＪＡＫ／ＳＴＡＴ経路の分子及び細胞エフェクターに対する式Ｉの化合物の効果を評価するために使用される。次いで、用量レジメン、ＰＫ、バイオマーカー変化、及び有効性の間の関係が評価され、更なる用量が評価される場合、用量最適化を導く。

【0209】

安全性の評価
評価は、有害事象（adverse event、ＡＥ）、重篤な有害事象（serious adverse event、ＳＡＥ）、結核（tuberculosis、ＴＢ）を含む感染の事象、臨床検査室での血液検査（全血球数及び血清化学）、バイタルサイン、内視鏡検査、及び併用薬レビューの評価を含む。局所検査に加えて、中枢コレステロール検査を行う。

【0210】

統計的方法
この試験において公式な統計的仮説検定は実施しない。統計解析計画には、統計的方法の具体的な詳細が提供される。
結腸切除後の参加者のコホートについての約２０のサンプルサイズは、ポリープ負荷が、ベースラインから２４週目までに平均で少なくとも２５％減少すると仮定することによって計算された。ドロップアウト率は２０％と仮定した。３０パーセンテージポイントの標準偏差を、ベースラインからの２４週目までのポリープ負荷のパーセント変化について仮定した。これらの仮定を用いると、ベースラインからの２４週目までのポリープ量の変化率についての９５％信頼区間は、その上限が０％未満である確率が約９０％以上であり、それによって、式Ｉの化合物による処置が平均してポリープ負荷を減少させるという証拠を提供する。約２０のサンプルサイズを、結腸切除前患者のコホートについて同様に決定した。

【0211】

【表14】

【0212】

態様：
態様１：治療有効量の式Ｉの化合物を対象に投与することを含む、対象における家族性腺腫性ポリポーシスの治療又は予防に使用するための、式Ｉの化合物、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、多形。

【0213】

態様２：治療有効量の式Ｉの化合物を対象に投与することを含む、対象における胃腸系がんの治療又は予防に使用するための、式Ｉの化合物、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、及び多形。

【0214】

態様３：治療有効量の式Ｉの化合物を対象に投与することを含む、対象における大腸がんの治療又は予防に使用するための、式Ｉの化合物、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、及び多形。

【0215】

態様４：治療有効量の式Ｉの化合物を対象に投与することを含む、高リスク群にある対象における家族性腺腫性ポリポーシス又は大腸がんの治療又は予防に使用するための、式Ｉの化合物、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、及び多形。

【0216】

態様５：（ａ）ＫＲＡＳ、ＴＰ５３、ＥＧＦＲ、ＳＴＫ１１（ＬＫＢ１）、ＰＴＥＮ、ＢＭＰＲ１Ａ、ＳＭＡＤ４（ＭＡＤＨ／ＤＰＣ４）、ＭＬＨ１、ＭＳＨ２、ＭＳＨ６、ＰＭＳ２、ＥＰＣＡＭ、ＭＵＴＹＨ（ＭＹＨ）、ＰＯＬＤ１、ＰＯＬＥ、及びＡＰＣから選択される１つ以上の遺伝子における変異を決定することと、（ｂ）治療有効用量の式Ｉの化合物を投与することと、を含む、対象における家族性腺腫性ポリポーシス又は大腸がんの対象の治療又は予防に使用するための、式Ｉの化合物、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、及び多形。

【0217】

態様６：（ａ）ＫＲＡＳ、ＴＰ５３、ＥＧＦＲ、ＳＴＫ１１（ＬＫＢ１）、ＰＴＥＮ、ＢＭＰＲ１Ａ、ＳＭＡＤ４（ＭＡＤＨ／ＤＰＣ４）、ＭＬＨ１、ＭＳＨ２、ＭＳＨ６、ＰＭＳ２、ＥＰＣＡＭ、ＭＵＴＹＨ（ＭＹＨ）、ＰＯＬＤ１、ＰＯＬＥ、及びＡＰＣから選択される１つ以上の遺伝子における変異を決定することと、（ｂ）治療有効用量の式Ｉの化合物を投与することと、を含む、対象が大腸がん又は家族性腺腫性ポリポーシスを発症するリスクが高いかどうかの診断に使用するための、式Ｉの化合物、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、及び多形。

【0218】

態様７：治療有効量の式Ｉの化合物を対象に投与することを含む、対象におけるＪＡＫの阻害によって影響を受ける障害又は状態の治療又は予防に使用するための、式Ｉの化合物、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、及び多形。

【0219】

態様８：治療有効量の式Ｉの化合物を対象に投与することを含む、対象におけるＣＲＣの再発の治療又は予防に使用するための式Ｉの化合物、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、及び多形。

【0220】

態様９：治療有効量の式Ｉの化合物を対象に投与することを含む、対象におけるＦＡＰの再発の治療又は予防に使用するための式Ｉの化合物、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、及び多形。

【0221】

態様１０：治療有効量の式Ｉの化合物を対象に投与することを含む、過敏性腸疾患（irritable bowel disease、ＩＢＤ）と診断されている対象におけるＳＩＳＣの治療又は予防に使用するための、式Ｉの化合物、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、及び多形。

【0222】

態様１１：治療有効量の式Ｉの化合物を対象に投与することを含む、対象における前悪性状態が悪性状態になるのを予防するのに使用するための、式Ｉの化合物、又はその薬学的に許容される塩、溶媒和物、及び多形。

【0223】

態様１２：治療有効量の式Ｉの化合物が、約１０ｍｇ～約１０００ｍｇである、態様１～１１のいずれか一項に記載の使用、

【0224】

態様１３：治療有効量の式Ｉの化合物が、約１ｍｇ～約１００ｍｇである、態様１～１２のいずれか一項に記載の使用、

【0225】

態様１４：式Ｉの化合物が、１日１回投与される、態様１～１３のいずれか一項に記載の使用。

【0226】

態様１５：式Ｉの化合物が、１日２回投与される、態様１～１４のいずれか一項に記載の使用。

【0227】

態様１６：対象が、以前に療法を受けているか、又は現在療法を受けている、態様１～１５のいずれか一項に記載の使用。

【0228】

態様１７：療法が、手術、放射線療法、化学療法。ＮＳＡＩＤ、Ｃｏｘ－２阻害剤、ＥＧＦＲ阻害剤、ＶＥＧＦ阻害剤、及びチェックポイント阻害剤であり得る、態様１～１６のいずれか一項に記載の使用。

【0229】

態様１８：ＦＡＰを治療することが、対象におけるポリ負荷を低減することを含む、態様１～１７のいずれか一項に記載の使用。

【0230】

態様１９：ポリープ負荷を低減することが、ポリープの数の減少及びポリープのサイズの減少を含む、態様１～１８のいずれか一項に記載の使用。

【0231】

態様２０：高リスク群の対象が、過敏性腸症候群、腸内マイクロバイオームの存在、大腸がんの家族歴、大腸がんの既往歴、結腸鏡検査中のポリープ若しくは前がん病変の所見、又はＫＲＡＳ、ＴＰ５３、ＥＧＦＲ、ＳＴＫ１１（ＬＫＢ１）、ＰＴＥＮ、ＢＭＰＲ１Ａ、ＳＭＡＤ４（ＭＡＤＨ／ＤＰＣ４）、ＭＬＨ１、ＭＳＨ２、ＭＳＨ６、ＰＭＳ２、ＥＰＣＡＭ、ＭＵＴＹＨ（ＭＹＨ）、ＰＯＬＤ１、ＰＯＬＥ、及びＡＰＣ遺伝子における変異などの他の遺伝的要因を有する対象を含む、態様１～１９のいずれか一項に記載の使用。

【0232】

態様２１：式Ｉの化合物と組み合わせて第２の活性薬剤を投与することを更に含み、第２の活性薬剤が、ＮＳＡＩＤ、Ｃｏｘ－２阻害剤、セツキシマブ（cetuximab）、パニツムマブ（panitumumab）、ベバシズマブ（bevacizumab）、Ｚｉｖ－アフリベルセプト（Ziv-aflibercept）、レゴラフェニブ（regorafenib）、ラムシルマブ（ramucirumab）、イピリムマブ（ipilimumab）、ニボルマブ（nivolumab）、及びペムブロリズマブ（pembrolizumab）から選択される、態様１～２０のいずれか一項に記載の使用。

【0233】

態様２２：式Ｉの化合物に対する応答の予測を、それを必要とする対象において行う方法であって、
（ａ）式Ｉの化合物に曝露されていない対象の対照サンプル中のｐＳＴＡＴ－３のレベルを測定することと、
（ｂ）式の化合物に曝露されている対象の試験サンプル中のｐＳＴＡＴ－３のレベルを測定することと、
（ｃ）（ａ）におけるｐＳＴＡＴ－３のレベルを（ｂ）と比較することと、を含み、（ｂ）におけるｐＳＴＡＴ－３のレベルの減少が、対象における式Ｉの化合物に対する応答を予測する、方法。

【0234】

態様２３．進行中のＪＡＫ阻害剤療法の有効性のモニタリングを、それを必要とする対象において行う方法であって、
（ａ）式Ｉの化合物に曝露されていない対象の対照サンプル中のｐＳＴＡＴ－３のレベルを測定することと、
（ｂ）式の化合物に曝露されている対象の試験サンプル中のｐＳＴＡＴ－３のレベルを測定することと、
（ｃ）（ａ）におけるｐＳＴＡＴ－３のレベルを（ｂ）と比較することと、を含み、（ｂ）におけるｐＳＴＡＴ－３のレベルの減少が、対象における式Ｉの化合物の有効性を示す、方法。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7A】

【図7B】

【図7C】

【図7D】

【図7E】

【図8】

【図9】

【図10A】

【図10B】

【図11】

【図12A】

【図12B】

【図13】

【図14】

【図15】

【図16】

【図17A】

【図17B】

【図18】

【図19A】

【図19B】

【図20A】

【図20B】

【図21A】

【図21B】

【図22A】

【図22B】

【図23A】

【図23B】

【図24】

【図25】

【国際調査報告】