特表 2024-514112 ベルバラフェニブおよびコビメチニブを用いた併用療法、またはベルバラフェニブ、コビメチニブおよびアテゾリズマブを用いた併用療法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2024-03-28

(54)【発明の名称】ベルバラフェニブおよびコビメチニブを用いた併用療法、またはベルバラフェニブ、コビメチニブおよびアテゾリズマブを用いた併用療法

(51)【国際特許分類】

   A61K 31/519 20060101AFI20240321BHJP

   A61K 39/395 20060101ALI20240321BHJP

   A61K 31/4523 20060101ALI20240321BHJP

   A61P 17/00 20060101ALI20240321BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20240321BHJP

   A61P 35/04 20060101ALI20240321BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20240321BHJP

【ＦＩ】

A61K31/519

A61K39/395 L

A61K31/4523

A61P17/00

A61P35/00

A61P35/04

A61P43/00 121

A61K39/395 T

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2023561181

(86)(22)【出願日】2022-04-05

(85)【翻訳文提出日】2023-12-01

(86)【国際出願番号】 US2022023496

(87)【国際公開番号】W WO2022216719

(87)【国際公開日】2022-10-13

(31)【優先権主張番号】63/171,461

(32)【優先日】2021-04-06

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】509012625

【氏名又は名称】ジェネンテック， インコーポレイテッド

(71)【出願人】

【識別番号】515182071

【氏名又は名称】ハンミ ファーム．カンパニー リミテッド

【氏名又は名称原語表記】ＨＡＮＭＩ ＰＨＡＲＭ．ＣＯ．，ＬＴＤ．

(71)【出願人】

【識別番号】514099673

【氏名又は名称】エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト

(74)【代理人】

【識別番号】110002077

【氏名又は名称】園田・小林弁理士法人

(72)【発明者】

【氏名】アンダーソン， マリア スハディ

(72)【発明者】

【氏名】ドルトン， マイケル ジョン

(72)【発明者】

【氏名】マレク， シヴァ

(72)【発明者】

【氏名】セガール， エフド

(72)【発明者】

【氏名】マルヒ， ヴィクラム

(72)【発明者】

【氏名】オン－ウォン， ジェニファー

(72)【発明者】

【氏名】ヤン， イビン

(72)【発明者】

【氏名】イェン， イヴァナ イェン イェン

(72)【発明者】

【氏名】ペク， スンジェ

【テーマコード（参考）】

4C085

4C086

【Ｆターム（参考）】

4C085AA14

4C085DD62

4C085EE03

4C085GG01

4C085GG08

4C086AA01

4C086AA02

4C086BC21

4C086CB26

4C086GA07

4C086GA16

4C086MA02

4C086MA04

4C086NA05

4C086NA14

4C086ZA89

4C086ZB26

4C086ZC75

(57)【要約】

ベルバラフェニブおよびコビメチニブを含む併用療法、ならびにベルバラフェニブ、コビメチニブおよびアテゾリズマブを含む併用療法が、ＮＲＡＳ変異を有するメラノーマの処置のために提供される。
【選択図】図１

【特許請求の範囲】

【請求項1】

ＮＲＡＳ変異メラノーマを有する対象を処置する方法であって、（ｉ）前記対象に、（ｉｉ）治療有効量のベルバラフェニブまたはその薬学的に許容され得る塩、および（ｉｉｉ）治療有効量のコビメチニブまたはその薬学的に許容され得る塩から本質的になる療法を投与することを含む、方法。

【請求項2】

前記メラノーマが、ＮＲＡＳ^Ｑ６１Ｋ変異、ＮＲＡＳ^Ｑ６１Ｒ変異、ＮＲＡＳ^Ｇ１２Ｃ変異、ＮＲＡＳ^Ｑ６１Ｌ変異、ＮＲＡＳ^Ｇ１３Ｄ変異、またはそれらの任意の組合せを有する、請求項１に記載の方法。

【請求項3】

前記メラノーマが、ＮＲＡＳ^Ｇ１２Ｄ変異、ＮＲＡＳ^Ｇ１２Ｃ変異、またはそれらの組合せを有する、請求項１に記載の方法。

【請求項4】

前記メラノーマが転移性であるか、または切除不能である、請求項１～３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項5】

前記対象が、１日当たり約２００ｍｇ～約１３００ｍｇ、約４００ｍｇ～約１２００ｍｇ、約６００ｍｇ～約１２００ｍｇ、または約８００ｍｇ～約１０００ｍｇのベルバラフェニブまたはその薬学的に許容され得る塩を投与される、請求項１～４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項6】

前記対象が、１日当たり約２００ｍｇ、約２５０ｍｇ、約３００ｍｇ、約３５０ｍｇ、約４００ｍｇ、約４５０ｍｇ、約５００ｍｇ、約５５０ｍｇ、約６００ｍｇ、約６５０ｍｇ、約７００ｍｇ、約７５０ｍｇ、約８００ｍｇ、約８５０ｍｇ、約９００ｍｇ、約９５０ｍｇ、約１０００ｍｇ、約１０５０ｍｇ、約１１００ｍｇ、約１１５０ｍｇ、約１２００ｍｇ、約１２５０ｍｇ、または約１３００ｍｇのベルバラフェニブまたはその薬学的に許容され得る塩を投与される、請求項１～５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項7】

前記対象が、約２５０ｍｇ、約３００ｍｇ、約３５０ｍｇ、約４００ｍｇ、約４５０ｍｇ、または約５００ｍｇのベルバラフェニブまたはその薬学的に許容され得る塩を１日に２回投与される、請求項６に記載の方法。

【請求項8】

前記対象が、約３００ｍｇまたは約４００ｍｇのベルバラフェニブまたはその薬学的に許容され得る塩を１日に２回投与される、請求項７に記載の方法。

【請求項9】

ベルバラフェニブまたはその薬学的に許容され得る塩が、２８日間の処置サイクルの２８日間連続して毎日投与される、請求項１～８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項10】

ベルバラフェニブまたはその薬学的に許容され得る塩が食物と共に投与される、請求項１～９のいずれか一項に記載の方法。

【請求項11】

前記対象が、１日当たり約２０ｍｇ～約１００ｍｇのコビメチニブまたはその薬学的に許容され得る塩を投与される、請求項１～１０のいずれか一項に記載の方法。

【請求項12】

前記対象が、１日当たり約２０ｍｇ、約４０ｍｇまたは約６０ｍｇのコビメチニブまたはその薬学的に許容され得る塩を投与される、請求項１１に記載の方法。

【請求項13】

コビメチニブまたはその薬学的に許容され得る塩が、２８日間の処置サイクルの２１日間連続して毎日投与される、請求項１～１２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項14】

コビメチニブまたはその薬学的に許容され得る塩が、２８日間の処置サイクルの１～２１日目に投与される、請求項１３に記載の方法。

【請求項15】

コビメチニブまたはその薬学的に許容され得る塩が、２８日間の処置サイクルの３～２３日目に投与される、請求項１３に記載の方法。

【請求項16】

前記対象が、抗ＰＤ－１薬または抗ＰＤ－Ｌ１薬による一連の処置を以前に投与されていた、請求項１～１５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項17】

前記対象が、免疫療法、ＢＲＡＦ Ｖ６００Ｅ療法、または免疫療法とＢＲＡＦ Ｖ６００Ｅ療法との併用による処置後に疾患の進行を経験した、請求項１～１６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項18】

がんを処置するための前記方法が、ヒト対象における扁平上皮癌腫の発生の非存在を特徴とする、請求項１～１７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項19】

ＮＲＡＳ変異メラノーマを有する対象を処置する方法であって、（ｉ）前記対象に、（ｉｉ）治療有効量のベルバラフェニブまたはその薬学的に許容され得る塩、（ｉｉｉ）治療有効量のコビメチニブまたはその薬学的に許容され得る塩、および（ｉｖ）治療有効量のアテゾリズマブから本質的になる療法を投与することを含む、方法。

【請求項20】

前記メラノーマが、ＮＲＡＳ^Ｑ６１Ｋ変異、ＮＲＡＳ^Ｑ６１Ｒ変異、ＮＲＡＳ^Ｇ１２Ｃ変異、ＮＲＡＳ^Ｑ６１Ｌ変異、ＮＲＡＳ^Ｇ１３Ｄ変異、またはそれらの任意の組合せを有する、請求項１９に記載の方法。

【請求項21】

前記メラノーマが、ＮＲＡＳ^Ｇ１２Ｄ変異、ＮＲＡＳ^Ｇ１２Ｃ変異、またはそれらの組合せを有する、請求項１９に記載の方法。

【請求項22】

前記メラノーマが、転移性であるか、または切除不能である、請求項１９～２１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項23】

前記対象が、１日当たり約２００ｍｇ～約１３００ｍｇ、約４００ｍｇ～約１２００ｍｇ、約６００ｍｇ～約１２００ｍｇ、または約８００ｍｇ～約１０００ｍｇのベルバラフェニブまたはその薬学的に許容され得る塩を投与される、請求項１９～２２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項24】

前記対象が、１日当たり約２００ｍｇ、約２５０ｍｇ、約３００ｍｇ、約３５０ｍｇ、約４００ｍｇ、約４５０ｍｇ、約５００ｍｇ、約５５０ｍｇ、約６００ｍｇ、約６５０ｍｇ、約７００ｍｇ、約７５０ｍｇ、約８００ｍｇ、約８５０ｍｇ、約９００ｍｇ、約９５０ｍｇ、約１０００ｍｇ、約１０５０ｍｇ、約１１００ｍｇ、約１１５０ｍｇ、約１２００ｍｇ、約１２５０ｍｇ、または約１３００ｍｇのベルバラフェニブまたはその薬学的に許容され得る塩を投与される、請求項１９～２３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項25】

前記対象が、約２５０ｍｇ、約３００ｍｇ、約３５０ｍｇ、約４００ｍｇ、約４５０ｍｇ、または約５００ｍｇのベルバラフェニブまたはその薬学的に許容され得る塩を１日に２回投与される、請求項２４に記載の方法。

【請求項26】

前記対象が、約３００ｍｇまたは約４００ｍｇのベルバラフェニブまたはその薬学的に許容され得る塩を１日に２回投与される、請求項２５に記載の方法。

【請求項27】

ベルバラフェニブまたはその薬学的に許容され得る塩が、２８日間の処置サイクルの２８日間連続して毎日投与される、請求項１９～２６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項28】

ベルバラフェニブまたはその薬学的に許容され得る塩が食物と共に投与される、請求項１９～２７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項29】

前記対象が、１日当たり約２０ｍｇ～約１００ｍｇのコビメチニブまたはその薬学的に許容され得る塩を投与される、請求項１９～２８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項30】

前記対象が、１日当たり約２０ｍｇ、約４０ｍｇまたは約６０ｍｇのコビメチニブまたはその薬学的に許容され得る塩を投与される、請求項２９に記載の方法。

【請求項31】

前記対象が、１日当たり約６０ｍｇのコビメチニブまたはその薬学的に許容され得る塩を投与される、請求項３０に記載の方法。

【請求項32】

コビメチニブまたはその薬学的に許容され得る塩が、２８日間の処置サイクルの２１日間連続して毎日投与される、請求項１９～３１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項33】

コビメチニブまたはその薬学的に許容され得る塩が、２８日間の処置サイクルの１～２１日目に投与される、請求項３２に記載の方法。

【請求項34】

コビメチニブまたはその薬学的に許容され得る塩が、２８日間の処置サイクルの３～２３日目に投与される、請求項３２に記載の方法。

【請求項35】

前記対象が、約５００ｍｇ～約２０００ｍｇ、約５００ｍｇ～約１０００ｍｇ、約７５０ｍｇ～約１０００ｍｇ、約７５０ｍｇ～約２０００ｍｇ、約１０００ｍｇ～約２０００ｍｇ、約１５００ｍｇ～約１７５０ｍｇのアテゾリズマブを投与される、請求項１９～３４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項36】

前記対象が、約８４０ｍｇのアテゾリズマブを投与される、請求項３５に記載の方法。

【請求項37】

前記対象が、約１６８０ｍｇのアテゾリズマブを投与される、請求項３５に記載の方法。

【請求項38】

前記対象が、２８日間の処置サイクルの１４日間ごとにアテゾリズマブを投与される、請求項１９～３７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項39】

前記対象が、２８日間の処置サイクルの１日目および１５日目にアテゾリズマブを投与される、請求項１９～３７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項40】

前記対象が、２８日間の処置サイクルの４週間ごとにアテゾリズマブを投与される、請求項１９～３７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項41】

前記対象が、２８日間の処置サイクルの１日目にアテゾリズマブを投与される、請求項４０に記載の方法。

【請求項42】

前記対象が、２８日間の処置サイクルの１日目に約１６８０ｍｇのアテゾリズマブを投与される、請求項１９～３７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項43】

前記対象が、抗ＰＤ－１薬または抗ＰＤ－Ｌ１薬による一連の処置を以前に投与されていた、請求項１９～４２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項44】

前記対象が、免疫療法、ＢＲＡＦ Ｖ６００Ｅ療法、または免疫療法とＢＲＡＦ Ｖ６００Ｅ療法との併用による処置後に疾患の進行を経験した、請求項１９～４３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項45】

がんを処置するための前記方法が、ヒト対象における扁平上皮癌腫の発生の非存在を特徴とする、請求項１９～４４のいずれか一項に記載の方法。

【発明の詳細な説明】

【関連出願の相互参照】

【0001】

本出願は、２０２１年４月６日に出願された米国仮出願第６３／１７１，４６１号の優先権を主張する。その仮出願の全文は、参照により本出願に組み入れられる。

【技術分野】

【0002】

本発明の分野は、概してＮＲＡＳ変異型メラノーマを処置するための、ベルバラフェニブおよびコビメチニブの組み合わせ、ならびにベルバラフェニブ、コビメチニブおよびアテゾリズマブの組み合わせを用いたがん治療に関する。

【背景技術】

【0003】

メラノーマは、メラノサイトに由来する命に関わる危険性がある形態の皮膚がんである。早期に診断された表在性腫瘍の転帰は良好であるが、転移性メラノーマは、高い死亡率および疾患関連罹患率を伴う。

【0004】

ＲＡＳ／ＲＡＦ／ＭＥＫ／ＥＲＫマイトジェン活性化プロテインキナーゼ（ＭＡＰＫ）シグナル伝達カスケードは、細胞外環境から細胞核への複数のシグナルを伝達して、細胞の増殖および分化を活性化する重要な細胞内シグナル伝達ネットワークである（Ｊｏｈｎｓｏｎ ＧＬ，Ｌａｐａｄａｔ Ｒ．Ｍｉｔｏｇｅｎ－ａｃｔｉｖａｔｅｄ ｐｒｏｔｅｉｎ ｋｉｎａｓｅ ｐａｔｈｗａｙｓ ｍｅｄｉａｔｅｄ ｂｙ ＥＲＫ，ＪＮＫ，ａｎｄ ｐ３８ ｐｒｏｔｅｉｎ ｋｉｎａｓｅｓ．Ｓｃｉｅｎｃｅ ２００２；２９８：１９１１－２；Ｒｏｂｅｒｔｓ ＰＪ，Ｄｅｒ ＣＪ．Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ｔｈｅ Ｒａｆ－ＭＥＫ－ＥＲＫ ｍｉｔｏｇｅｎ－ａｃｔｉｖａｔｅｄ ｐｒｏｔｅｉｎ ｋｉｎａｓｅ ｃａｓｃａｄｅ ｆｏｒ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｃａｎｃｅｒ．Ｏｎｃｏｇｅｎｅ ２００７；２６：３２９１－３１０）。この経路は、メラノーマの発症機序に大きく関与している。メラノーマの約４０％～５０％が、ＢＲＡＦにおける活性化変異を有し（Ｄａｖｉｅｓ Ｈ，Ｂｉｇｎｅｌｌ ＧＲ，Ｃｏｘ Ｃ，ら．Ｍｕｔａｔｉｏｎｓ ｏｆ ｔｈｅ ＢＲＡＦ ｇｅｎｅ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｃａｎｃｅｒ．Ｎａｔｕｒｅ ２００２，４１７：９４９－５４；Ｃｕｒｔｉｎ ＪＡ，Ｆｒｉｄｙｌａｎｄ Ｊ，Ｋａｇｅｓｈｉｔａ Ｔ，ら．Ｄｉｓｔｉｎｃｔ ｓｅｔｓ ｏｆ ｇｅｎｅｔｉｃ ａｌｔｅｒａｔｉｏｎｓ ｉｎ ｍｅｌａｎｏｍａ．Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ ２００５，３５３：２１３５－４７；Ｊａｋｏｂ ＪＡ，Ｂａｓｓｅｔｔ Ｊｒ ＲＬ，Ｎｇ ＣＳ，ら．ＮＲＡＳ ｍｕｔａｔｉｏｎ ｓｔａｔｕｓ ｉｓ ａｎ ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｐｒｏｇｎｏｓｔｉｃ ｆａｃｔｏｒ ｉｎ ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ ｍｅｌａｎｏｍａ．Ｃａｎｃｅｒ ２０１２，１１８：４０１４－２３）、メラノーマの２９％が、ＮＲＡＳにおける変異を有している（Ｍｏｏｒｅ ＡＲ，Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ ＳＣ，ＭｃＣｏｒｍｉｃｋ Ｆ，ら．ＲＡＳ－ｔａｒｇｅｔｅｄ ｔｈｅｒａｐｉｅｓ：ｉｓ ｔｈｅ ｕｎｄｒｕｇｇａｂｌｅ ｄｒｕｇｇｅｄ？Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖ ２０２０；１９：５３３－５２）。

【0005】

メラノーマ細胞は免疫原性が高く、したがって免疫療法の適切な標的である（Ｚｈｕ Ｆ．，Ｌｉａｎｇ Ｙｕ，Ｃｈｅｎ Ｄ，ら．Ｍｅｌａｎｏｍａ ａｎｔｉｇｅｎ ｇｅｎｅ ｆａｍｉｌｙ ｉｎ ｔｈｅ ｃａｎｃｅｒ ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ．Ｃａｎｃｅｒ Ｔｒａｎｓｌ Ｍｅｄ ２０１６；２：８５－９．）。免疫療法の出現により、メラノーマ患者の転帰は劇的に変化した。過去１０年間で、進行期メラノーマ患者の全生存期間（ＯＳ）は、免疫療法剤の効果により９ヶ月から５年以上に改善されている。いくつかの第ＩＩＩ相試験では、単剤抗ＰＤ－１阻害剤を抗ＣＴＬＡ４阻害剤または化学療法と比較しており、客観的奏効率（ＯＲＲ）、無増悪生存期間（ＰＦＳ）およびＯＳの改善が示されており、ＯＳは約３年であり、ＰＦＳ率は４～７ヶ月の範囲であった（Ｒｏｂｅｒｔ Ｃ，Ｓｃｈａｃｈｔｅｒ Ｊ，Ｌｏｎｇ Ｇ，ら．Ｐｅｍｂｒｏｌｉｚｕｍａｂ ｖｅｒｓｕｓ Ｉｐｉｌｉｍｕｍａｂ ｉｎ Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｍｅｌａｎｏｍａ．Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ ２０１５，３７２：２５２１－３２；Ｓｃｈａｃｈｔｅｒ Ｊ，Ｒｉｂａｓ Ａ，Ｌｏｎｇ ＧＶ．Ｐｅｍｂｒｏｌｉｚｕｍａｂ ｖｅｒｓｕｓ ｉｐｉｌｉｍｕｍａｂ ｆｏｒ ａｄｖａｎｃｅｄ ｍｅｌａｎｏｍａ：ｆｉｎａｌ ｏｖｅｒａｌｌ ｓｕｒｖｉｖａｌ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ａ ｍｕｌｔｉｃｅｎｔｒｅ，ｒａｎｄｏｍｉｓｅｄ，ｏｐｅｎ－ｌａｂｅｌ ｐｈａｓｅ ３ ｓｔｕｄｙ．Ｌａｎｃｅｔ ２０１７，３９０，１８５３－６２）。併用免疫療法は、さらに強固な利益をもたらす。１２９６人の患者を対象とした第ＩＩＩ相試験では、ニボルマブおよびイピリムマブに無作為化された患者は、ニボルマブ単独の患者と比較してＰＦＳおよびＯＳの両方が増加した。ＰＦＳは、ニボルマブ＋イピリムマブ群では１１．５カ月であり、ニボルマブ単剤療法群では６．９カ月であり、ハザード比（ＨＲ）は０．４２（９５％ＣＩ：０．３５～０．５１）であった。５年間の最短追跡調査時に、ＯＳ中央値は達成されておらず、ニボルマブ＋イピリムマブで６０．０カ月超（９５％ ＣＩ：３８．２～「未到達」）であり、ニボルマブ単独では３６．９カ月（９５％ ＣＩ：２８．２～ら５８．７）であり、ＨＲは０．０５２（９５％ ＣＩ：０．４２～０．６４）である（Ｌａｒｋｉｎ Ｊ，Ｃｈｉａｒｉｏｎ－Ｓｉｌｅｎｉ Ｖ，Ｇｏｎｚａｌｅｚ Ｒ，らＦｉｖｅ－ｙｅａｒ ｓｕｒｖｉｖａｌ ｗｉｔｈ ｃｏｍｂｉｎｅｄ ｎｉｖｏｌｕｍａｂ ａｎｄ ｉｐｉｌｉｍｕｍａｂ ｉｎ ａｄｖａｎｃｅｄ ｍｅｌａｎｏｍａ．Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ ２０１９；３８１：１５３５－４６）。注目すべきことに、患者の５０％超がニボルマブ＋イピリムマブでグレード３以上の有害事象を経験し、治療の完了は困難であり、患者の３６．４％は有害事象のために治療を中止した。

【0006】

抗ＰＤ－１剤による処置後に疾患が進行した患者のみを対象とする第ＩＩＩ相試験は実施されていない。メラノーマにおけるＰＤ－１抗体での進行直後にペンブロリズマブと共に低用量イピリムマブを投与された患者は、第ＩＩ相試験において有意な抗腫瘍活性を示した。以前に抗ＰＤ－１治療を受けたことのある患者では、免疫療法の反復使用による奏効率は、イピリムマブにおける約１５％（Ｒｏｂｅｒｔ Ｃ，Ｒｉｂａｓ Ａ，Ｓｃｈａｃｈｔｅｒ Ｊ，ら．Ｐｅｍｂｒｏｌｉｚｕｍａｂ ｖｅｒｓｕｓ ｉｐｉｌｉｍｕｍａｂ ｉｎ ａｄｖａｎｃｅｄ ｍｅｌａｎｏｍａ（ＫＥＹＮＯＴＥ－００６）：ｐｏｓｔ－ｈｏｃ ５－ｙｅａｒ ｒｅｓｕｌｔｓ ｆｒｏｍ ａｎ ｏｐｅｎ－ｌａｂｅｌ，ｍｕｌｔｉｃｅｎｔｒｅ，ｒａｎｄｏｍｉｓｅｄ，ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ，ｐｈａｓｅ ３ ｓｔｕｄｙ．Ｌａｎｃｅｔ Ｏｎｃｏｌ ２０１９；２０：１２３９－５１）～ペンブロリズマブおよびイピリムマブの併用における２７％（免疫関連奏効基準）の範囲であり、ＰＦＳは５ヶ月である（Ｏｌｓｏｎ Ｄ，Ｌｕｋｅ Ｊ，Ｐｏｋｌｅｐｏｖｉｃ ＡＳ，ら．Ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ａｎｔｉｔｕｍｏｒ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｆｏｒ ｌｏｗ－ｄｏｓｅ ｉｐｉｌｉｍｕｍａｂ（ＩＰＩ）ｗｉｔｈ ｐｅｍｂｒｏｌｉｚｕｍａｂ（ＰＥＭＢＲＯ）ｉｍｍｅｄｉａｔｅｌｙ ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ ｏｎ ＰＤ１ Ａｂ ｉｎ ｍｅｌａｎｏｍａ（ＭＥＬ）ｉｎ ａ ｐｈａｓｅ ＩＩ ｔｒｉａｌ．Ｊ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ ２０２０；３８：１０００４）。

【0007】

メラノーマを有する患者が、ＢＲＡＦ^Ｖ６００における変異によってさらに適切な治療について特定される。ＢＲＡＦ変異を有しない患者は、まとめてＢＲＡＦ野生型（ＷＴ）と呼ばれる。これらのがんには、ＮＲＡＳ変異を有するメラノーマ、ＮＦ１変異を有するメラノーマ、および同定された変異または「三重ＷＴ」のないメラノーマが含まれ得る。ＢＲＡＦ ＷＴメラノーマを有する患者に対して承認された処置としては、免疫療法剤、化学療法剤およびＴ－ＶＥＣが挙げられる。ＢＲＡＦ ＷＴメラノーマを有する患者に対する標的療法は特定されていない。ＢＲＡＦ変異型メラノーマを有する患者の承認された治療法としては、標的療法（ＢＲＡＦ阻害剤単独またはＭＥＫ阻害剤との併用）、免疫療法、および化学療法が挙げられる。ＢＲＡＦ変異型腫瘍を有する患者に対する最適な処置シーケンシング（すなわち、標的療法とそれに続く免疫療法またはその逆）は知られていない。

【0008】

ＢＲＡＦ ＷＴサブセット内では、メラノーマの全患者の約２９％に発生するＮＲＡＳ変異を含むいくつかの一般的な変異が記載されている（Ｍｏｏｒｅら、２０２０）。ＮＲＡＳの変異は、グリシン１２（Ｇ１２）、グリシン１３（Ｇ１３）、またはグルタミン６１（Ｑ６１）のいずれかの残基で起こる。ＮＲＡＳ変異型メラノーマの約８５％が、ＮＲＡＳ Ｑ６１（Ｑ６１Ｒ、Ｑ６１Ｋ、Ｑ６１Ｌ、Ｑ６１Ｈに富む）に変異を有しており（Ｍｏｏｒｅら、２０２０）、はるかに少ない割合のメラノーマが、ＮＲＡＳ Ｇ１２またはＧ１３に変異を有している。最も一般的なＮＲＡＳの非Ｑ６１変異は、ＮＲＡＳのＧ１２Ｄ、Ｇ１３ＲおよびＧ１３Ｄである（Ｌｉ Ｓ，Ｂａｌｍａｉｎ Ａ，Ｃｏｕｎｔｅｒ ＣＭ．Ａ ｍｏｄｅｌ ｆｏｒ ＲＡＳ ｍｕｔａｔｉｏｎ ｐａｔｔｅｒｎｓ ｉｎ ｃａｎｃｅｒｓ：ｆｉｎｄｉｎｇ ｔｈｅ ｓｗｅｅｔ ｓｐｏｔ．Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｃａｎｃｅｒ ２０１８；１８：７６７－７）。メラノーマの組織特異的なコンディショナルノックインマウスモデルでは、ＮＲＡＳ Ｑ６１Ｒの発現がメラノーマの形成を推進することが示されており、機構的研究により、ＮＲＡＳ Ｑ６１Ｒ変異が明確なヌクレオチド結合能、安定性およびＧＴＰアーゼ耐性を示し、これがメラノーマ形成特性を推進する可能性が高いことが実証されている（Ｂｕｒｄ ＣＥ，Ｌｉｕ Ｗ，Ｈｕｙｎｈ ＭＶ，ら．Ｍｕｔａｔｉｏｎ－ｓｐｅｃｉｆｉｃ ＲＡＳ ｏｎｃｏｇｅｎｉｃｉｔｙ ｅｘｐｌａｉｎｓ ＮＲＡＳ ｃｏｄｏｎ ６１ ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ ｉｎ ｍｅｌａｎｏｍａ．Ｃａｎｃｅｒ Ｄｉｓｃｏｖ ２０１４；４：１４１８－２９）。ＮＲＡＳ変異型メラノーマにおけるＭＡＰＫシグナル伝達、具体的には、ＲＡＳの下流のＢＲＡＦキナーゼおよびＣＲＡＦキナーゼの重要性はまた、ＮＲＡＳ ^Ｑ６１Ｋ誘導性メラノーママウスモデルにおいても確認されており、このモデルでは、ＢＲＡＦ遺伝子およびＣＲＡＦ遺伝子の条件的消失が腫瘍成長の完全な遮断をもたらした（Ｄｏｒａｒｄ Ｃ，Ｅｓｔｒａｄａ Ｃ，Ｂａｒｂｏｔｉｎ Ｃ，ら．ＲＡＦ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｅｘｅｒｔ ｂｏｔｈ ｓｐｅｃｉｆｉｃ ａｎｄ ｃｏｍｐｅｎｓａｔｏｒｙ ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ ｄｕｒｉｎｇ ｔｕｍｏｕｒ ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＮＲＡＳ－ｄｒｉｖｅｎ ｍｅｌａｎｏｍａ．Ｎａｔ Ｃｏｍｍｕｎ ２０１７；８：１－１３）。

【0009】

ＮＲＡＳ変異の有病率および結果として生じる疾患の重症度にもかかわらず、利用可能な処置選択肢はほとんどない。

【0010】

抗ＰＤ－１剤による処置中または処置後に疾患進行した患者におけるＮＲＡＳ変異型メラノーマの処置は、重大な満たされていない医学的必要性を表す。特定された活性化ＭＡＰＫ経路変異を有するこれらの患者には、新しい標的処置アプローチが必要である。

【発明の概要】

【0011】

本開示は、ＮＲＡＳ変異型メラノーマを有する対象を処置する方法を提供する。

【0012】

いくつかの態様では、当該方法は、（ｉ）当該対象に、（ｉｉ）治療有効量のベルバラフェニブまたはその薬学的に許容され得る塩、および（ｉｉｉ）治療有効量のコビメチニブまたはその薬学的に許容され得る塩から本質的になる療法を投与することを含む。

【0013】

いくつかの態様では、対象は、（ｉ）１日当たり約２００ｍｇ～約１３００ｍｇ、約４００ｍｇ～約１２００ｍｇ、約６００ｍｇ～約１２００ｍｇ、もしくは約８００ｍｇ～約１０００ｍｇのベルバラフェニブまたはその薬学的に許容され得る塩、および（ｉｉ）１日当たり約２０ｍｇ～約１００ｍｇのコビメチニブまたはその薬学的に許容され得る塩を投与される。

【0014】

いくつかの態様では、本方法は、（ｉ）対象に、（ｉｉ）治療有効量のベルバラフェニブまたはその薬学的に許容され得る塩、（ｉｉｉ）治療有効量のコビメチニブまたはその薬学的に許容され得る塩、および（ｉｖ）治療有効量のアテゾリズマブから本質的になる療法を投与することを含む。

【0015】

いくつかの態様では、対象は、（ｉ）１日当たり約２００ｍｇ～約１３００ｍｇ、約４００ｍｇ～約１２００ｍｇ、約６００ｍｇ～約１２００ｍｇ、もしくは約８００ｍｇ～約１０００ｍｇのベルバラフェニブまたはその薬学的に許容され得る塩；（ｉｉ）１日当たり約２０ｍｇ～約１００ｍｇのコビメチニブまたはその薬学的に許容され得る塩；および（ｉｉｉ）約５００ｍｇ～約２０００ｍｇ、約５００ｍｇ～約１０００ｍｇ、約７５０ｍｇ～約１０００ｍｇ、約７５０ｍｇ～約２０００ｍｇ、約１０００ｍｇ～約２０００ｍｇ、約１５００ｍｇ～約１７５０ｍｇのアテゾリズマブを投与される。

【図面の簡単な説明】

【0016】

【図1】図１は、（ｉ）ベルバラフェニブおよびコビメチニブの組み合わせ、ならびに（ｉｉ）ベルバラフェニブ、コビメチニブ、およびアテゾリズマブの組み合わせによるＮＲＡＳ変異型メラノーマの処置に関する本開示の態様のための設計検討研究の略図である。図１において：Ａはアテゾリズマブ；Ｂはベルバラフェニブ；ＢＩＤは１日２回投与；Ｃは、コビメチニブ２８日間のうち２１日投与；ＤＬＴは、用量制限毒性；ＱＤは毎日；Ｑ４Ｗは４週間ごと；ｘは決定される用量（およびスケジュール）を指す。点線はデエスカレーショングループを示す。さらに、^ａは、第１サイクルの第１日目の約６週間後、および疾患の進行時（安全と考えられる場合）に、強制的な連続生検に同意する５名の患者を含めることを示す。さらに、^ｂは、ベルバラフェニブおよびコビメチニブを同用量で投与する群２に最大２５名の患者が登録されることを示す。

【0017】

【図2A】図２Ａは、ＳＫ－ＭＥＬ－３０（ＮＲＡＳ^Ｑ６１Ｋ）変異型メラノーマ細胞株における、ベルバラフェニブ（Ｂｅｌｖ）、コビメチニブ（Ｃｏｂｉ）またはそれらの組み合わせによるインビトロにおけるＭＥＫ／ＥＲＫ／ＲＳＫシグナル伝達経路阻害についてのウエスタンブロットの図である。

【0018】

【図2B】図２Ｂは、ＩＰＣ－２９８（ＮＲＡＳ^Ｑ６１Ｌ）変異型メラノーマ細胞株における、ベルバラフェニブ（Ｂｅｌｖ）、コビメチニブ（Ｃｏｂｉ）またはそれらの組み合わせによるインビトロにおけるＭＥＫ／ＥＲＫ／ＲＳＫシグナル伝達経路阻害についてのウエスタンブロットの図である。

【0019】

【図3】図３ は、ベルバラフェニブ、コビメチニブ、またはそれらの組み合わせで処理したＩＰＣ－２９８（ＮＲＡＳ^Ｑ６１Ｌ）メラノーマ細胞株におけるコロニー形成アッセイの結果の図である。

【0020】

【図4】図４は、ベルバラフェニブ、コビメチニブ、またはそれらの組み合わせで処理したＭｅｌ－Ｊｕｓｏ（ＮＲＡＳ^Ｑ６１Ｌ）メラノーマ細胞株におけるコロニー形成アッセイの結果を示す図である。

【0021】

【図5】図５は、ベルバラフェニブ、コビメチニブ、またはそれらの組み合わせで処理したＳＫ－ＭＥＬ－３０（ＮＲＡＳ^Ｑ６１Ｋ）メラノーマ細胞株におけるコロニー形成アッセイの結果を示す図である。

【0022】

【図6】図６は、ＳＫ－ＭＥＬ－３０メラノーマがん細胞株を異種移植したマウスにおいて薬物を１４日間経口投与するレジメンについて、１、４、８、１１および１５日目に測定した、ベルバラフェニブ（ＨＭ９５５７３と命名）またはコビメチニブ単独およびそれらの組合せのインビボにおける腫瘍体積抗腫瘍活性の図である。

【0023】

【図7】図７は、ＳＫ－ＭＥＬ－３０メラノーマがん細胞株を異種移植したマウスにおいて薬物を１４日間経口投与するレジメンについて、１、４、８、１１および１５日目に測定した、ベルバラフェニブ（ＨＭ９５５７３と命名）またはコビメチニブ単独およびそれらの組合せのインビボにおける腫瘍体積抗腫瘍活性の評価におけるマウスの体重変化の図である。

【0024】

【図8】図８は、ＳＫ－ＭＥＬ－３０メラノーマがん細胞株を異種移植したマウスにおいて薬物を２１日間経口投与するレジメンについて、１、４、７、１１、１４、１８および２１日目に測定した、ベルバラフェニブ（ＨＭ９５５７３と命名）またはビニメチニブ（ＭＥＫ１６２と命名）単独およびそれらの組合せの抗腫瘍活性の図である。

【0025】

【図9】図９は、ＳＫ－ＭＥＬ－３０メラノーマがん細胞株を異種移植したマウスにおいて薬物を２１日間経口投与するレジメンについて、１、４、７、１１、１４、１８および２１日目に測定した、ベルバラフェニブ（ＨＭ９５５７３と命名）またはビニメチニブ（ＭＥＫ１６２と命名）単独およびそれらの組み合わせに関連する体重変化の図である。

【0026】

【図10】ｃａｌｕ－６非小細胞肺がん細胞株を異種移植したマウスにおいて１７日間経口投与されたベルバラフェニブ（ＨＭ９５５７３と命名）またはセルメチニブ（ＡＺＤ６２４４と命名）単独またはそれらの組み合わせのいずれかによって誘導されたインビボにおける抗腫瘍活性の図である。

【0027】

【図11】図１１は、ｃａｌｕ－６非小細胞肺がん細胞株を異種移植したマウスにおいて１７日間経口投与されたベルバラフェニブ（ＨＭ９５５７３と命名）またはセルメチニブ（ＡＺＤ６２４４と命名）の単独またはそれらの組み合わせのいずれかによって誘導された体重変化の図である。

【発明を実施するための形態】

【0028】

一態様では、本開示は、ベルバラフェニブおよびコビメチニブの組み合わせ投与によるＮＲＡＳ変異型メラノーマがんの処置に関する。

【0029】

一態様では、本開示は、ベルバラフェニブ、コビメチニブ、およびアテゾリズマブの組み合わせ投与によるＮＲＡＳ変異型メラノーマがんの処置に関する。
定義

【0030】

本明細書で使用される場合、「ＮＲＡＳ変異」は、ＤＮＡ配列の変化（変異）を有するＮＲＡＳ（ＮＲＡＳ癌原遺伝子ＧＴＰアーゼ）癌遺伝子を指す。ＮＲＡＳ遺伝子は、細胞分裂の調節に関与するＮ－Ｒａｓタンパク質の合成をコードする。いかなる特定の理論にも束縛されるものではないが、ＮＲＡＳ変異は、上流ＲＴＫ活性化とは無関係に、ＧＴＰアーゼ活性の障害およびその活性化（ＧＴＰ結合）状態へのＮＲＡＳのロックをもたらすと考えられる（Ｎｏｒｍａｎｎｏ，Ｎ．，ＯｎｃｏｌｏｇｙＰＲＯ，２０１５を参照されたい）。メラノーマにおけるＮＲＡＳ変異は、侵攻性疾患および予後不良に関連している。主にコドン６１で変異したＮＲＡＳは、全メラノーマの最大３０％に関与していると考えられている。ＮＲＡＳ癌遺伝子変異はまた、コドン１２および１３に存在すると考えられている。

【0031】

本明細書で使用される場合、「患者」および「対象」という用語は、限定するものではないが、霊長類（例えば、ヒト）、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ウマ、イヌ、ネコ、ウサギ、ラット、マウスなどを含む哺乳動物などの動物を指す。特定の態様では、患者または対象はヒトである。

【0032】

本明細書で使用される場合、「処置」という用語は、臨床病理学の経過中に処置される個体または細胞の自然経過を変えるように設計された臨床的介入を指す。処置の望ましい効果としては、疾患進行速度の低減、疾患状態の回復または緩和および寛解または予後の改善が挙げられる。例えば、個体は、がん性細胞の増殖の低減（もしくは破壊）、疾患に起因する症状の軽減、疾患に罹患している者の生活の質の向上、疾患の処置に必要な他の薬剤の用量の低減、および／または個体の生存期間の延長を含むが、これらに限定されない、がんに関連する１つ以上の症状が軽減または排除された場合、「処置」に成功する。

【0033】

本明細書で使用される場合、「治療有効量」という語句は、（ｉ）特定の疾患、状態、もしくは障害を処置もしくは予防し、（ｉｉ）特定の疾患、状態、もしくは障害の１つ以上の症状を減弱、改善、もしくは排除し、または（ｉｉｉ）本明細書に記載の特定の疾患、状態、もしくは障害の１つ以上の症状の発症を予防もしくは遅延させる１つ以上の薬物化合物の量を指す。がんの場合、治療有効量の薬物は、がん細胞の数を低下、腫瘍サイズを低下、末梢器官へのがん細胞浸潤を阻害（すなわち、ある程度の減速および好ましくは停止）、腫瘍転移を阻害（すなわち、ある程度の減速および好ましくは停止）、腫瘍増殖をある程度阻害、および／またはがんに関連する症状のうちの１つ以上をある程度軽減し得る。既存のがん細胞の成長を防止する、および／またはそれらを死滅させ得る程度まで、薬物は、細胞増殖抑制性および／または細胞傷害性であり得る。がん治療の場合、有効性は、例えば、全奏効率（ＯＲＲ）を評定することによって測定し得る。本明細書における治療有効量は、疾患状態、患者の年齢、性別および体重、ならびに個体において所望の応答を誘発する薬剤の能力などの要因に従って変化し得る。治療有効量はまた、処置の毒性または有害な影響が治療上有益な効果を上回る量である。予防的使用の場合、有益なまたは所望の結果としては、疾患の生化学的、組織学的、および／または挙動的症候、その合併症、ならびに疾患の発症中に現れる中間病理学的表現型を含む、疾患のリスクの排除または低減、疾患の重症度の軽減、または疾患の発生の遅延等の結果が挙げられる。治療的使用の場合、有益なまたは所望の結果には、疾患に起因する１つまたは複数の症状の減少、疾患に罹患している者の生活の質の向上、疾患の治療に必要な他の薬剤の用量の減少、別の薬剤の効果の増強（例えば、標的による）、疾患の進行の遅延、および／または生存期間の延長などの臨床結果が含まれる。がんまたは腫瘍の場合、治療有効量の薬物は、がん細胞の数を低減させ、腫瘍サイズを低減させ、がん細胞の末梢器官への浸潤を阻害し（すなわち、ある程度遅らせるか、または望ましくは停止させ）、腫瘍転移を阻害し（すなわち、ある程度遅らせるか、または望ましくは停止させ）、腫瘍成長をある程度阻害し、かつ／または障害に関連する症状のうちの１つまたは複数をある程度軽減する効果を有し得る。治療有効量は、１回以上の投与で投与し得る。本発明の目的のために、治療有効量の薬物、化合物、医薬組成物、または医薬製剤は、予防的または治療的処置を直接的または間接的に達成するのに十分な量である。臨床的文脈で理解されるように、治療有効量の薬物、化合物、または医薬組成物は、別の薬物、化合物、または医薬組成物との併用で達成される場合も、達成されない場合もある。したがって、治療有効量は、１種以上の治療剤を投与する状況で考慮され得、単一の薬剤は、１種以上の他の薬剤と組み合わせて、望ましい結果が達成され得るかまたは達成される場合、治療有効量で与えられると考えられ得る。

【0034】

本明細書で使用される場合、「と組み合わせて」は、別の処置様式に加えて１つの処置様式を投与することを指す。それ故、「と組み合わせて」は、個体への他の処置様式の投与前、投与中、または投与後の１つの処置様式の投与を指す。

【0035】

本明細書で使用される場合、「医薬製剤」という用語は、有効成分の生物学的活性が有効であることを可能にするような形態であり、その製剤が投与される対象に対して許容できないほど毒性である追加の成分を含まない調製物を指す。そのような製剤は無菌である。「薬学的に許容され得る」賦形剤（ビヒクル、添加剤）は、使用される有効成分の有効量を提供するために対象に合理的に投与し得るものである。

【0036】

本明細書で使用される場合、最大、最小、または他の判定基準に関する「Ｃ」は、血漿中の薬物濃度を指す。

【0037】

本明細書で使用される場合、「濃度曲線下面積」（ＡＵＣ）は、適合した血漿中濃度対時間曲線下面積を指す。ＡＵＣ_０－∞は、曲線下面積ベースライン－無限大を指す。ＡＵＣ_０－Ｔは総曝露量である。

【0038】

本明細書で使用される場合、「阻害する」は、阻害剤の非存在下でのその酵素（またはタンパク質）の活性と比較して、標的酵素または他のタンパク質の活性が低下することを指す。いくつかの態様では、「阻害する」という用語は、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％の活性の低下を意味する。他の態様では、阻害するとは、約５％～約２５％、約２５％～約５０％、約５０％～約７５％または約７５％～約１００％の活性の低下を意味する。いくつかの態様では、阻害するとは、約９５％～約１００％の活性の低下、例えば、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または１００％の活性の低下を意味する。このような減少は、当業者により認識可能であろう様々な技術を使用して測定され得る。

【0039】

本明細書で使用される場合、「無増悪生存期間」（ＰＦＳ）は、疾患の処置から疾患の進行または再発の最初の発生までの時間を指す。

【0040】

本明細書で使用される場合、「部分奏効」（ＰＲ）は、ベースラインの病変の径の和を基準として、標的病変の径の和が少なくとも３０％減少することを指す。

【0041】

本明細書で使用される場合、「完全奏効」（ＣＲ）とは、すべての標的病変が消失することを指す。

【0042】

本明細書で使用される場合、「進行性疾患」（ＰＤ）は、ベースラインを含む試験中の最小病変径（最下点）を基準として、標的病変の径の和が少なくとも２０％増加し、絶対値は少なくとも５ｍｍ増加することを指す。１つ以上の新しい病変の出現も進行とみなされる。

【0043】

本明細書で使用される場合、「全奏効率」（ＯＲＲ）とは、ＲＥＣＩＳＴｖ１．１を使用して治験責任医師によって決定された、ランダム化後に生じ、２８日以上後に確認されたＰＲまたはＣＲの率のことを指す。

【0044】

本明細書で使用される場合、「奏効期間」（ＤＯＲ）は、ＲＥＣＩＳＴｖ１．１または試験中の任意の原因による死亡を使用して治験責任医師が決定した、実証された客観的奏効の最初の発生から再発までの時間のうち、いずれか早く発生する時間を指す。

【0045】

本明細書で使用される場合、「ＲＡＦ阻害剤」という用語は、ＲＡＳの下流のＭＡＰＫシグナル伝達経路において３つの受容体サブタイプ（Ａ－ＲＡＦ、Ｂ－ＲＡＦ、Ｃ－ＲＡＦ）のうちの少なくとも１つを阻害する分子のことを指す。

【0046】

本明細書で使用される場合、「ＭＡＰＫ」という用語は、マイトジェン活性化プロテインキナーゼ経路またはシグナル伝達経路を指す。Ｒａｓ－Ｒａｆ－ＭＥＫ－ＥＲＫ経路とも呼ばれるＭＡＰＫ経路は、細胞の表面上の受容体からのシグナルを細胞の核内のＤＮＡに伝達する細胞内のタンパク質の鎖または経路である。ＭＡＰＫ経路において、活性化ＲＡＳはＲＡＦキナーゼのプロテインキナーゼ活性を活性化し、ＲＡＦキナーゼはＭＥＫ（ＭＥＫ１およびＭＥＫ２）をリン酸化して活性化し、ＭＥＫはマイトジェン活性化プロテインキナーゼ（ＭＡＰＫ）ＥＲＫ１およびＥＲＫ２（ＭＡＰＫ３およびＭＡＰＫ１）をリン酸化して活性化する。ＭＡＰＫはリボソームタンパク質Ｓ６キナーゼ（ＲＰＳ６ＫＡ１；ＲＳＫ）をリン酸化する。

【0047】

本明細書で使用される場合、「ＰＤ－１軸阻害剤」という用語は、ＰＤ－１シグナル伝達軸上のシグナル伝達に起因するＴ細胞機能障害を除去するように、ＰＤ－１軸結合パートナーとその結合パートナーの１つ以上との相互作用を阻害する分子を指し、その結果、Ｔ細胞機能を回復または増強する（例えば、増殖、サイトカイン産生、標的細胞殺傷）。本明細書で使用される場合、ＰＤ－１軸阻害剤としては、ＰＤ－１阻害剤、ＰＤ－Ｌ１阻害剤、およびＰＤ－Ｌ２阻害剤が挙げられる。

【0048】

本明細書で使用される場合、「ＰＤ－１阻害剤」という用語は、ＰＤ－１と、その結合パートナー（ＰＤ－Ｌ１およびＰＤ－Ｌ２など）の１つ以上との相互作用から生じるシグナル伝達を減少、遮断、阻害、抑止または干渉する分子を指す。いくつかの実施形態では、ＰＤ－１阻害剤は、その結合パートナーの１つ以上へのＰＤ－１の結合を阻害する分子である。特定の態様では、ＰＤ－１阻害剤は、ＰＤ－１のＰＤ－Ｌ１および／またはＰＤ－Ｌ２への結合を阻害する。例えば、ＰＤ－１阻害剤としては、抗ＰＤ－１抗体、その抗原結合断片、イムノアドヘシン、融合タンパク質、オリゴペプチド、ならびにＰＤ－１とＰＤ－Ｌ１および／またはＰＤ－Ｌ２との相互作用から生じるシグナル伝達を減少、遮断、阻害、抑止または干渉する他の分子が挙げられる。一実施形態では、ＰＤ－１阻害剤は、ＰＤ－１を介したシグナル伝達によって媒介されるＴリンパ球上に発現される細胞表面タンパク質によって媒介されるまたはそれを介して媒介される負の共刺激シグナルを減少させて、機能不全Ｔ細胞を機能不全を軽減する（例えば、抗原認識に対するエフェクター応答の増強）。いくつかの実施形態では、ＰＤ－１阻害剤は抗ＰＤ－１抗体である。

【0049】

本明細書で使用される場合、「ＰＤ－Ｌ１阻害剤」という用語は、ＰＤ－Ｌ１とその結合パートナー、例えばＰＤ－１、Ｂ７－１のいずれか１つ以上との相互作用から生じるシグナル伝達を減少、遮断、阻害、抑止または干渉する分子を指す。いくつかの実施形態では、ＰＤ－Ｌ１阻害剤は、ＰＤ－Ｌ１のその結合パートナーへの結合を阻害する分子である。特定の態様では、ＰＤ－Ｌ１阻害剤は、ＰＤ－Ｌ１のＰＤ－１および／またはＢ７－１への結合を阻害する。いくつかの実施形態では、ＰＤ－Ｌ１阻害剤としては、抗ＰＤ－Ｌ１抗体、その抗原結合断片、イムノアドヘシン、融合タンパク質、オリゴペプチド、およびＰＤ－Ｌ１とその結合パートナー（ＰＤ－１、Ｂ７－１など）の１つ以上との相互作用から生じるシグナル伝達を減少、遮断、阻害、抑止または干渉する他の分子が挙げられる。一実施形態では、ＰＤ－Ｌ１結合アンタゴニストは、ＰＤ－Ｌ１を介するシグナル伝達を媒介したＴリンパ球上で発現された細胞表面タンパク質によってまたはそれを介して媒介される負の共刺激シグナルを低減し、機能不全のＴ細胞の機能不全状態を軽減する（例えば、抗原認識へのエフェクター応答を増強する）。いくつかの態様では、ＰＤ－Ｌ１阻害剤は抗ＰＤ－Ｌ１抗体である。

【0050】

本明細書で使用される場合、「ＰＤ－Ｌ２阻害剤」という用語は、ＰＤ－Ｌ２とその結合パートナー（ＰＤ－１など）のいずれか１つ以上との相互作用から生じるシグナル伝達を減少、遮断、阻害、抑止または干渉する分子を指す。いくつかの実施形態では、ＰＤ－Ｌ２阻害剤は、その結合パートナーの１つ以上へのＰＤ－Ｌ２の結合を阻害する分子である。特定の態様では、ＰＤ－Ｌ２阻害剤は、ＰＤ－Ｌ２のＰＤ－１への結合を阻害する。いくつかの実施形態では、ＰＤ－Ｌ２阻害剤としては、抗ＰＤ－Ｌ２抗体、その抗原結合断片、イムノアドヘシン、融合タンパク質、オリゴペプチド、およびＰＤ－Ｌ２とその結合パートナー（ＰＤ－１など）のいずれか１つ以上との相互作用から生じるシグナル伝達を減少、遮断、阻害、抑止または干渉する他の分子が挙げられる。一実施形態では、ＰＤ－Ｌ２阻害剤は、ＰＤ－Ｌ２を介したシグナル伝達によって媒介されるＴリンパ球上に発現される細胞表面タンパク質によって媒介される、またはそれを介して媒介される負の共刺激シグナルを減少させて、機能不全Ｔ細胞の機能不全をより低減する（例えば、抗原認識に対するエフェクター応答の増強）。いくつかの実施形態では、ＰＤ－Ｌ２阻害剤はイムノアドヘシンである。

【0051】

「薬学的に許容され得る塩」という用語は、生物学的にまたは他の点で望ましくないものではない塩を意味する。薬学的に許容され得る塩には、酸付加塩および塩基付加塩の両方が含まれる。「薬学的に許容され得る」という語句は、物質または組成物が、製剤を含む他の成分および／またはそれで処置される対象と化学的および／または毒性学的に適合性であることを示す。酸付加塩は、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、炭酸、リン酸などの無機酸、ならびに有機酸の脂肪族、脂環式、芳香族、芳香脂肪族、複素環式、カルボン酸およびスルホン酸クラス、例えばギ酸、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、グルコン酸、乳酸、ピルビン酸、シュウ酸、リンゴ酸、マレイン酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、アスパラギン酸、アスコルビン酸、グルタミン酸、アントラニル酸、安息香酸、桂皮酸、マンデル酸、エンボン酸、フェニル酢酸、メタンスルホン酸「メシラート」、エタンスルホン酸、ｐ－トルエンスルホン酸、およびサリチル酸から選択される有機酸を用いて形成される。塩基付加塩は、有機塩基または無機塩基を用いて形成される。許容され得る無機塩基の例としては、ナトリウム塩、カリウム塩、アンモニウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩、鉄塩、亜鉛塩、銅塩、マンガン塩、およびアルミニウム塩が挙げられる。薬学的に許容され得る有機非毒性塩基に由来する塩としては、天然の置換アミン、環状アミン、および塩基性イオン交換樹脂、例えば、イソプロピルアミン、トリメチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、トリプロピルアミン、エタノールアミン、２－ジエチルアミノエタノール、トリメタミン、ジシクロヘキシルアミン、リジン、アルギニン、ヒスチジン、カフェイン、プロカイン、ヒドラバミン、コリン、ベタイン、エチレンジアミン、グルコサミン、メチルグルカミン、テオブロミン、プリン類、ピペラジン、ピペリジン、Ｎ－エチルピペリジン、およびポリアミン樹脂を含む、第一級、第二級、および第三級アミン、置換アミンの塩が挙げられる。

【0052】

本明細書における「抗体」という用語は、最も広い意味で使用され、具体的には、それらが所望の生物学的活性を示す限り、モノクローナル抗体（全長モノクローナル抗体等）、ポリクローナル抗体、多重特異性抗体（例えば、二重特異性抗体）、および抗体断片を包含する。

【0053】

「検出」という用語は、直接的および間接的検出を含む、任意の検出手段を含む。
治療薬

【0054】

一態様では、本開示は、ＮＲＡＳ変異型メラノーマを処置するためのベルバラフェニブまたはその薬学的に許容され得る塩とコビメチニブまたはその薬学的に許容され得る塩との組み合わせに関する。

【0055】

一態様では、本開示は、ＮＲＡＳ変異型メラノーマを処置するための、ベルバラフェニブまたはその薬学的に許容され得る塩、コビメチニブまたはその薬学的に許容され得る塩、およびアテゾリズマブの組み合わせに関する。

【0056】

本明細書に開示されている化合物は、当技術分野において公知の任意の適切な様式で投与され得る。いくつかの態様では、化合物は、静脈内投与、筋肉内投与、皮下投与、局所投与、経口投与、経皮投与、腹腔内投与、眼窩内投与、埋め込みによる投与、吸入による投与、髄腔内投与、脳室内投与、腫瘍内投与または鼻腔内投与によって投与される場合がある。

【0057】

活性化合物の適切な用量は、当業者の知識内のいくつかの要因に依存することが理解される。活性化合物の用量は、例えば、被験体の年齢、体重、全般的な健康、性別および食事、投与の時点、投与の経路、排泄の速度および任意の薬物の組み合わせに応じて変動するであろうことが理解される。

【0058】

処置に使用される本開示の化合物またはその薬学的に許容され得る塩、プロドラッグ、代謝産物もしくは誘導体の有効投与量は、特定の処置の経過にわたって増加または減少し得ることも理解されよう。投薬量の変化は、診断アッセイの結果から生じ、明らかとなり得る。

【0059】

ベルバラフェニブ

【0060】

ベルバラフェニブは、ＰＣＴ出願国際公開第２０１３／１００６３２号に開示されており、化学名４－アミノ－Ｎ－（１－（（３－クロロ－２－フルオロフェニル）アミノ）－６－メチルイソキノリン－５－イル）チエノ［３，２－ｄ］ピリミジン－７－カルボキサミド（本明細書では式（Ｉ）と呼ばれる）を有し、以下の化学構造を有する。
式（Ｉ）

【0061】

ベルバラフェニブは、ＢＲＡＦおよびＣＲＡＦアイソフォームの選択的阻害を提供する高度に強力かつ選択的なＩＩ型ＲＡＦ二量体阻害剤（汎ＲＡＦ阻害剤）である。ＢＲＡＦ^Ｖ６００選択的モノマー阻害剤とは対照的に、ベルバラフェニブは、非ＢＲＡＦＶ６００変異細胞ではＭＡＰＫ経路を活性化せず、代わりに、ＢＲＡＦおよびＣＲＡＦ二量体を阻害することによってＭＡＰＫシグナル伝達の抑制を維持し、ＢＲＡＦ^Ｖ６００およびＲＡＳ変異型腫瘍の両方で細胞増殖が減少し、抗腫瘍活性が増大した。

【0062】

ベルバラフェニブは、ＢＲＡＦまたはＲＡＳ変異型メラノーマ、ＮＳＣＬＣおよびＣＲＣ細胞株中のＭＡＰＫ経路におけるＭＥＫおよびＥＲＫのリン酸化を阻害する。ベルバラフェニブは、ＢＲＡＦまたはＲＡＳ変異型メラノーマ、ＮＳＣＬＣ、ＣＲＣおよび甲状腺がん細胞株の増殖をインビトロで阻害することが実証されている。

【0063】

ベルバラフェニブは、インビトロで、ＢＲＡＦ Ｖ６００Ｅ変異型（ＩＣ_５０＝７ｎＭ）、ＢＲＡＦ野生型（ＩＣ_５０＝４１ｎＭ）、およびＷＴ ＲＡＦ－１（ＣＲＡＦ）（ＩＣ_５０＝２ｎＭ）を含むＲＡＦキナーゼの強力かつ選択的な阻害剤である。ベルバラフェニブはまた、活性化ＲＡＳ変異の下流にシグナル伝達を伝播するＢＲＡＦ／ＣＲＡＦヘテロ二量体を阻害し得る。１８９のキナーゼアッセイのパネルで試験された場合、ベルバラフェニブは、７つの他の受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）（コロニー刺激因子１受容体（ＣＳＦ１Ｒ）、以前のマクドナフネコ肉腫（ＦＭＳ）ホモログ、ジスコイジンドメイン受容体チロシンキナーゼ１（ＤＤＲ１）、ジスコイジンドメイン受容体チロシンキナーゼ２（ＤＤＲ２）、ＥＰＨＡ２、ＥＰＨＡ７、ＥＰＨＡ８およびＥＰＨＢ２）に対して、１μＭで９０％を超える阻害を有する阻害活性を示した。

【0064】

ベルバラフェニブは、ＢＲＡＦまたはＫＲＡＳ変異型非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）、結腸直腸がん（ＣＲＣ）、および甲状腺がん細胞株、ならびにＮＲＡＳまたはＢＲＡＦ変異型メラノーマ細胞株のパネルにわたって腫瘍細胞増殖の有意な阻害を示した。ベルバラフェニブは、ＢＲＡＦ変異型メラノーマおよびＮＲＡＳ変異型メラノーマにおける細胞生存率に対する阻害効果を示しており、半数阻害濃度（ＩＣ_５０）の中央値は、それぞれ３４０ｎＭおよび８２ｎＭであった。ベルバラフェニブは、ＮＲＡＳ変異型メラノーマ異種移植モデルＳＫ－ＭＥＬ－３０（ＮＲＡＳ^Ｑ６１Ｋ変異）において、単剤として最大８０％、コビメチニブとの組み合わせで最大８９．８％の腫瘍増殖抑制（ＴＧＩ）を示した。

【0065】

本開示の実験的証拠に基づいて、ベルバラフェニブは、以下のようにＮＲＡＳ変異型メラノーマ患者由来異種移植片モデルのパネルにおいて１３０％の最大ＴＧＩを示すことがわかった。患者１のＮＲＡＳ^Ｑ６１Ｋ変異型メラノーマ細胞のマウス由来異種移植片では、最大ＴＧＩは８５％であった。患者２のＮＲＡＳ^Ｑ６１Ｒ変異型メラノーマ細胞のマウス由来異種移植片では、最大ＴＧＩは１０７％であった。患者３のＮＲＡＳ^Ｇ１２Ｃ変異型メラノーマ細胞のマウス由来異種移植片では、最大ＴＧＩは９０％であった。患者４のＮＲＡＳ^Ｑ６１Ｒ変異型メラノーマ細胞のマウス由来異種移植片では、最大ＴＧＩは１２７％であった。患者５のＮＲＡＳ^Ｑ６１Ｒ変異型メラノーマ細胞のマウス由来異種移植片では、最大ＴＧＩは１３０％であった。患者６のＮＲＡＳ^Ｑ６１Ｋ変異型メラノーマ細胞のマウス由来異種移植片では、最大ＴＧＩは１１０％であった。患者７のＮＲＡＳ^Ｑ６１Ｒ変異型メラノーマ細胞のマウス由来異種移植片では、最大ＴＧＩは１２４％であった。患者８のＮＲＡＳ^Ｑ６１Ｒ変異型メラノーマ細胞のマウス由来異種移植片では、最大ＴＧＩは１１５％であった。患者９のＮＲＡＳ^Ｑ６１Ｋ変異型メラノーマ細胞のマウス由来異種移植片では、最大ＴＧＩは１２５％であった。

【0066】

ベルバラフェニブのインビトロ抗腫瘍効果は、様々なマウス異種移植モデルにおける有効性に移行した。ベルバラフェニブは、ＢＲＡＦおよびＮＲＡＳ変異型メラノーマに対する、ＫＲＡＳ変異非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）に対する、ならびにＢＲＡＦ変異型結腸直腸がん（ＣＲＣ）マウス異種移植モデルに対する単剤療法として、マウス異種移植モデルにおいて腫瘍増殖の用量依存的阻害を示す。

【0067】

ベルバラフェニブは、いくつかのがんに対して安全かつ有効な治療を提供することが臨床試験で示されている。例えば、完了した非盲検の第Ｉａ相用量漸増試験では、ＢＲＡＦ、ＫＲＡＳ、またはＮＲＡＳ遺伝子に変異を有する固形腫瘍を有する患者におけるベルバラフェニブのいくつかの用量およびスケジュールが調査された（臨床試験ＮＣＴ０２４０５０６５）。少なくとも１回のベースライン後の腫瘍評価を受けた７２名の対象のうち６７名について、有効性を分析した。最良全奏効率（ＢＯＲＲ）は８．９６％（６／６７の対象）であり、客観的奏効率（ＯＲＲ）は４．４８％（３／６７の対象）であり、確認された最良全奏効としての部分奏効（ＰＲ）であった（メラノーマを有する２名の対象および消化管間質腫瘍を有する１名の対象）。ベルバラフェニブ１００ｍｇ１日１回用量レベルまたはそれを上回るレベルで治療された対象の５０．５７％（３４／６７）において疾患制御が観察された。５９名（８８．０６％）の対象が事象（疾患の進行または死亡）を発症し、その全てが進行性疾患（ＰＤ）として報告された。さらに、無増悪生存期間の中央値は１１．５３週であり、中央値の９５％信頼区間は［７．１２週、１３．３８週）であった。更新された結果では、ＢＯＲＲは１０．４５％（７／６７対象）であり、９５％正確信頼区間は［４．３０％、２０．３５％］であった。ＯＲＲは４．４８％のままである（３／６７対象）。さらに、ＢＲＡＦ変異型メラノーマ対象に対するサブグループ再分析は、７．６９％（１／１３の対象）のＢＯＲＲを示し、ＤＣＲ、ＰＦＳの中央値および進行までの時間は全対象において変化しなかった。ＤＯＲ中央値は、８００ｍｇ１日２回群では３０．１８週に上昇し、１００．２９週である対象のＤＯＲを含む合計群では２３．９９週に上昇した。

【0068】

別の非盲検第Ｉｂ相用量拡大試験では、ＢＲＡＦ、ＫＲＡＳまたはＮＲＡＳ遺伝子中に変異を保有する固形腫瘍を有する患者において、ベルバラフェニブを４５０ｍｇ１日２回の用量で評価した。登録後に少なくとも１用量のベルバラフェニブを服用し、ベースライン後に少なくとも１回の腫瘍評価を受けた６３名の対象のうち５９名について有効性を分析した。ＢＯＲＲは１１．８６％（７／５９対象）であり、ＯＲＲは６．７８％（４／５９対象）であり、確認された最良全奏効としてのＰＲであった（メラノーマを有する３名の対象およびＣＲＣを有する１名の対象）。対象の３５．５９％（２１／５９）において、疾患制御が観察された。５９名の対象のうち５０名（８４．７５％）が事象（疾患の進行または死亡）を発症し、１名の死亡例を除いてそのすべてがＰＤとして報告された。さらに、無増悪生存期間（ＰＦＳ）の中央値は７．８３週間であり、中央値の９５％信頼区間は［７．２６週間、８．２６週間］であった。この研究における全奏効の奏効中央期間（ＤＯＲ）は、奏効者７名からの１５．６６週間であった。彼らのうち、２名のＢＲＡＦ変異型メラノーマ応答者は、２２．４９週間のＤＯＲ中央値を示した。

【0069】

健康な対象における別の第Ｉ相、単回投与、無作為化、クロスオーバー相対バイオアベイラビリティおよび食効試験では、ベルバラフェニブ曝露に対する第Ｉ相から第ＩＩ相錠剤への製剤変更の影響を評価した（臨床試験ＧＰ４１３４８）。合計１８名の健康な対象が試験に登録され、以下の無作為化された治療を受けた：摂食状態で１５０ｍｇおよび５０ｍｇの第Ｉ相錠剤を一錠ずつ、摂食状態で１００ｍｇの第ＩＩ相錠剤を２錠、または絶食状態で１００ｍｇの第ＩＩ相錠剤を２錠投与し、処置間の１８日間の休薬期間を伴う。絶食状態と比較して摂食状態では、ベルバラフェニブ曝露に対する食物のプラスの効果が存在した。ベルバラフェニブ曝露、Ｃ_ｍａｘおよびＡＵＣ_{０－ｉｎｆ}は、２００ｍｇの単回用量で健康な対象にベルバラフェニブを摂食状態で投与した場合、絶食状態と比較して、それぞれ約２．２倍および２．８倍増加された。この試験では、重篤な有害事象、特別な関心のある有害事象または死亡は報告されなかった。

【0070】

ベルバラフェニブまたはその薬学的に許容され得る塩は、有効成分ベースで１日当たり約２００ｍｇ～約１３００ｍｇ、約４００ｍｇ～約１２００ｍｇ、約６００ｍｇ～約１２００ｍｇ、または約８００ｍｇ～約１０００ｍｇで適切に投与される。いくつかのそのような態様では、対象は、１日当たり約２００ｍｇ、約２５０ｍｇ、約３００ｍｇ、約３５０ｍｇ、約４００ｍｇ、約４５０ｍｇ、約５００ｍｇ、約５５０ｍｇ、約６００ｍｇ、約６５０ｍｇ、約７００ｍｇ、約７５０ｍｇ、約８００ｍｇ、約８５０ｍｇ、約９００ｍｇ、約９５０ｍｇ、約１０００ｍｇ、約１０５０ｍｇ、約１１００ｍｇ、約１１５０ｍｇ、約１２００ｍｇ、約１２５０ｍｇもしくは約１３００ｍｇのベルバラフェニブまたはその薬学的に許容され得る塩を投与される。いくつかの他のこのような態様では、対象は、約２５０ｍｇ、約３００ｍｇ、約３５０ｍｇ、約４００ｍｇ、約４５０ｍｇもしくは約５００ｍｇのベルバラフェニブまたはその薬学的に許容され得る塩を１日に２回投与される（「ＢＩＤ」）。いくつかの他のこのような態様では、対象は、約３００ｍｇもしくは約４００ｍｇのベルバラフェニブまたはその薬学的に許容され得る塩を１日に２回投与される。他の投与レジメンを使用して、１日３回または１日４回などの１日の総用量を達成し得る。１日２回、３回または４回などの任意のそのような投薬レジメンでは、各用量はほぼ等しくするのが適切である。例えば、１日用量が９００ｍｇである場合、それぞれ４５０ｍｇの１日２回用量またはそれぞれ３００ｍｇの１日３回用量を使用し得る。

【0071】

いくつかの態様では、ベルバラフェニブは、２８日間のサイクルの第１～２１日目に投与されてもよい。いくつかの態様では、ベルバラフェニブは、２８日間のサイクルの第１～２８日目に投与されてもよい。
コビメチニブ

【0072】

コビメチニブは、化学名（Ｓ）－［３，４－ジフルオロ－２－（２－フルオロ－４－ヨードフェニルアミノ）フェニル］［３－ヒドロキシ－３－（ピペリジン－２－イル）アゼチジン－１－イル］メタノンを有し、以下の構造（ＩＩ）を有する。

【0073】

Ｃｏｔｅｌｌｉｃ（登録商標）は、コビメチニブのフマル酸塩である。コビメチニブは、米国特許第７，８０３，８３９号および同第８，３６２，００２号に記載されており、これらの各々は、参照によりその全体が組み入れられる。コビメチニブは、ＭＥＫ１およびＭＥＫ２（ＲＡＳ／ＲＡＦ／ＭＥＫ／ＥＲＫ（ＭＡＰＫ）の中心成分）経路の可逆的で強力かつ高度に選択的な阻害剤であり、複数のヒトがんモデルにおいて単剤抗腫瘍活性を有する。

【0074】

コビメチニブは、正常な細胞増殖を促進するためにＥＲＫを介して下流にシグナル伝達するＭＡＰＫ経路の中心成分であるＭＥＫ１およびＭＥＫ２の強力かつ高度に選択的な阻害剤である。経路のアップレギュレーションは、構成的シグナル伝達および悪性形質転換をもたらし、しばしばＲＡＳおよびＢＲＡＦにおける発癌性活性化変異に起因して、腫瘍の大部分で起こる（Ｂａｍｆｏｒｄ Ｓ，Ｄａｗｓｏｎ Ｅ，Ｆｏｒｂｅｓ Ｓ，ら．Ｔｈｅ ＣＯＳＭＩＣ（Ｃａｔａｌｏｇｕｅ ｏｆ Ｓｏｍａｔｉｃ Ｍｕｔａｔｉｏｎｓ ｉｎ Ｃａｎｃｅｒ）ｄａｔａｂａｓｅ ａｎｄ ｗｅｂｓｉｔｅ．Ｂｒ Ｊ Ｃａｎｃｅｒ ２００４；９１：３５５－８）。ＢＲＡＦ^Ｖ６００によって形質転換されたがん細胞は、インビトロでＭＥＫ阻害に対して例外的に感受性である。アロステリックＭＥＫ阻害剤は、メラノーマ細胞においてＧ１期増殖停止をもたらし得る（Ｓｏｌｉｔ ＤＢ，Ｇａｒｒａｗａｙ Ｌ，Ｐｒａｔｉｌａｓ Ｃ，ら．ＢＲＡＦ ｍｕｔａｔｉｏｎ ｐｒｅｄｉｃｔｓ ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ ｔｏ ＭＥＫ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ．Ｎａｔｕｒｅ ２００６，４３９：３５８－６２；Ｈａａｓｓ ＮＫ，Ｓｐｒｏｅｓｓｅｒ Ｋ，Ｎｇｕｙｅｎ ＴＫ，ら．Ｔｈｅ ｍｉｔｏｇｅｎ－ａｃｔｉｖａｔｅｄ ｐｒｏｔｅｉｎ／ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ ｓｉｇｎａｌ－ｒｅｇｕｌａｔｅｄ ｋｉｎａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ＡＺＤ６２４４（ＡＲＲＹ－１４２８８６）ｉｎｄｕｃｅｓ ｇｒｏｗｔｈ ａｒｒｅｓｔ ｉｎ ｍｅｌａｎｏｍａ ｃｅｌｌｓ ａｎｄ ｔｕｍｏｒ ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎ ｗｈｅｎ ｃｏｍｂｉｎｅｄ ｗｉｔｈ ｄｏｃｅｔａｘｅｌ．Ｃｌｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ２００８，１４：２３０－９）。

【0075】

インビトロでは、ＭＥＫ阻害剤は、ＢＲＡＦ^Ｖ６００変異型陽性メラノーマ細胞の細胞増殖、軟寒天コロニー形成およびマトリゲル浸潤を減少させ、ＢＲＡＦ^Ｖ６００変異型陽性メラノーマ異種移植片に対しても有効である（Ｓｏｌｉｔら、２００６）。ＮＲＡＳ変異型メラノーマはＭＡＰＫ経路シグナル伝達に高度に依存しており、ＭＡＰＫシグナル伝達はＮＲＡＳ変異型メラノーママウスモデルにおける腫瘍の進行に必要である（Ｄｏｒａｒｄ Ｃ，Ｅｓｔｒａｄａ Ｃ，Ｂａｒｂｏｔｉｎ Ｃ，ら．ＲＡＦ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｅｘｅｒｔ ｂｏｔｈ ｓｐｅｃｉｆｉｃ ａｎｄ ｃｏｍｐｅｎｓａｔｏｒｙ ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ ｄｕｒｉｎｇ ｔｕｍｏｕｒ ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＮＲＡＳ－ｄｒｉｖｅｎ ｍｅｌａｎｏｍａ．Ｎａｔ Ｃｏｍｍｕｎ ２０１７；８：１－１３）。非臨床試験において、ＣＩ－１０４０（ＭＥＫ阻害剤）は、ＳＫ－ＭＥＬ－１３０（ＮＲＡＳ^Ｑ６１Ｒ変異型）メラノーマ細胞の細胞生存率および経路シグナル伝達を低下させ（Ｓｏｌｉｔら、２００６）、ビニメチニブ（ＭＥＫ阻害剤）は、ＢＲＡＦ変異型メラノーマ細胞株およびＮＲＡＳ変異型メラノーマ細胞株の細胞増殖を阻害した（Ｗｉｎｓｋｉ Ｌ，Ａｎｄｅｒｓｏｎ Ｄ，Ｂｏｕｈａｎａ Ｋ，らＭＥＫ１６２（ＡＲＲＹ－１６２），ａ ｎｏｖｅｌ ＭＥＫ１／２ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ，ｉｎｈｉｂｉｔｓ ｔｕｍｏｒ ｇｒｏｗｔｈ ｒｅｇａｒｄｌｅｓｓ ｏｆ ＫＲａｓ／Ｒａｆ ｐａｔｈｗａｙ ｍｕｔａｔｉｏｎｓ．ＥＯＲＴＣ－ＮＣＩ－ＡＡＣＲ，Ｂｅｒｌｉｎ ［ｐｏｓｔｅｒ］．２０１０）。

【0076】

単剤として投与されたコビメチニブの薬物動態（ＰＫ）は、ＢＲＡＦ、ＮＲＡＳ、またはＫＲＡＳ変異を有する患者における１日当たり６０ｍｇのコビメチニブ用量の評価を含む第Ｉａ相用量漸増試験ＭＥＫ４５９２ｇにおける単回および複数回投与後の経口投与後のがん患者において特徴付けられている。全体で６名の患者（その全員がメラノーマを有していた；６．２％）が確認された部分奏効（ＰＲ）を有し、２８名の患者（２８．９％）が安定疾患（ＳＤ）を有し、４０名の患者（４１．２％）が進行性疾患を有していた。１４名の結腸直腸がん（ＣＲＣ）患者のうち、すべての患者が進行性疾患（ＰＤ）を経験した。Ｓｔｕｄｙ ＭＥＫ４５９２ｇのステージＩＩＩでは、１８名の患者が登録され、１８名の患者のうち１４名に対して最良全奏効が評定された。４名の患者（２２．２％）が最良全奏効としてＳＤを有し、２名の患者（１１．１％）が未確認の腫瘍応答を有した。

【0077】

コビメチニブは、中程度の吸収速度（最大濃度までの時間［ｔ_ｍａｘ］の中央値が１～３時間）および４８．８時間の平均終末相半減期（ｔ１／２）（２３．１～８０時間の範囲）を有する。コビメチニブは、濃度非依存的に血漿タンパク質に結合する（９５％）。コビメチニブは、０．０５ｍｇ／ｋｇ（７０ｋｇの成人に対して約３．５ｍｇ／ｋｇ）～８０ｍｇの用量範囲で線形薬物動態を示し、健康な対象での試験ＭＥＫ４９５２ｇにおいて、絶対バイオアベイラビリティは、４５．９％（９０％ ＣＩ：３９．７４％、５３．０６％）であると決定された。コビメチニブの薬物動態は、健康な対象における絶食状態での投与と比較して、摂食状態で投与された場合に変化しない。食物はコビメチニブの薬物動態を変化させないので、コビメチニブは食物とともに、または食物なしで投与され得る。プロトンポンプ阻害剤であるラベプラゾールは、絶食状態でのコビメチニブ単独投与と比較して、高脂肪食の存在下または非存在下で投与されたかどうかにかかわらず、コビメチニブの薬物動態に対して最小限の効果を有するようである。したがって、胃内ｐＨの増加はコビメチニブの薬物動態に影響を与えず、胃内ｐＨの変化に対して感受性がないことを示している。

【0078】

コビメチニブ塩、結晶形態およびプロドラッグは、本開示の範囲内である。コビメチニブ、分取方法および治療的使用は、国際公開番号ＷＯ２００７／０４４５１５、ＷＯ２０１４／０２７０５６およびＷＯ２０１４／０５９４２２に開示されており、これらの各々は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。例えば、本開示のいくつかの態様では、ＭＥＫ阻害剤は、結晶性ヘミフマル酸コビメチニブ多形Ａ形である。

【0079】

コビメチニブまたはその薬学的に許容され得る塩の本開示の範囲内の用量は、有効成分ベースで１日当たり約２０ｍｇ～約１００ｍｇ、約４０ｍｇ～約８０ｍｇまたは約６０ｍｇである。いくつかの態様では、コビメチニブの用量は、約６０ｍｇ、約４０ｍｇ、または約２０ｍｇである。

【0080】

コビメチニブは、好適には１日１回投与される。いくつかの態様では、コビメチニブは、２８日間の処置サイクルの２１日間連続して１日１回投与される。いくつかの態様では、コビメチニブは、２８日間の処置サイクルの１～２１日目に１日１回投与される。いくつかの態様では、コビメチニブは、２８日間の処置サイクルの３～２３日目に１日１回投与される。
アテゾリズマブ

【0081】

アテゾリズマブは、ＭＰＤＬ３２８０Ａ（ＣＡＳ登録番号：１３８０７２３－４４－３）としても知られている。アテゾリズマブは、ＰＤ－Ｌ１を標的とし、ＰＤ－Ｌ１と、その受容体であるＰＤ－１およびＢ７－１（ＣＤ８０としても知られる。両方ともＴ細胞上に発現される阻害性受容体として機能する）との間の相互作用を阻害するヒト化ＩｇＧ１モノクローナル抗体である。アテゾリズマブによるＰＤ－Ｌ１結合の治療的遮断（Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｂｌｏｃｋａｄｅ）は、腫瘍特異的Ｔ細胞応答の大きさおよび質を増強し、抗腫瘍活性の改善をもたらすことが示されている（Ｆｅｈｒｅｎｂａｃｈｅｒ Ｌ，Ｓｐｉｒａ Ａ，Ｂａｌｌｉｎｇｅｒ Ｍ，ら．Ａｔｅｚｏｌｉｚｕｍａｂ ｖｅｒｓｕｓ ｄｏｃｅｔａｘｅｌ ｆｏｒ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｐｒｅｖｉｏｕｓｌｙ ｔｒｅａｔｅｄ ｎｏｎ－ｓｍａｌｌ－ｃｅｌｌ ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ（ＰＯＰＬＡＲ）：ａ ｍｕｌｔｉｃｅｎｔｒｅ，ｏｐｅｎ ｌａｂｅｌ，ｐｈａｓｅ ２ ｒａｎｄｏｍｉｓｅｄ ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ ｔｒｉａｌ．Ｌａｎｃｅｔ ２０１６，３８７：１８３７－４６；Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ ＪＥ，Ｈｏｆｆｍａｎ－Ｃｅｎｓｉｔｓ Ｊ，Ｐｏｗｌｅｓ Ｔ，らＡｔｅｚｏｌｉｚｕｍａｂ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｌｏｃａｌｌｙ ａｄｖａｎｃｅｄ ａｎｄ ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ ｕｒｏｔｈｅｌｉａｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｗｈｏ ｈａｖｅ ｐｒｏｇｒｅｓｓｅｄ ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｗｉｔｈ ｐｌａｔｉｎｕｍ－ｂａｓｅｄ ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ：ａ ｓｉｎｇｌｅ－ａｒｍ，ｍｕｌｔｉｃｅｎｔｒｅ，ｐｈａｓｅ ２ ｔｒｉａｌ．Ｌａｎｃｅｔ ２０１６，３８７：１９０９－２０）。アテゾリズマブは、Ｆｃ受容体への結合が最小限であり、したがって、検出可能なＦｃエフェクター機能および活性化エフェクターＴ細胞の関連する抗体－媒介性クリアランスを排除する。

【0082】

単剤として投与されたアテゾリズマブの薬物動態は、試験ＰＣＤ４９８９ｇの臨床データに基づいて特徴付けられており、ＴＮＢＣの一次処置における現在進行中の第ＩＩＩ相試験ＷＯ２９５２２と一致している。アテゾリズマブ抗腫瘍活性は、１～２０ｍｇ／ｋｇの用量にわたって観察されている。全体として、アテゾリズマブは、３週間ごとに（ｑ３ｗ）１ｍｇ／ｋｇ以上の用量について、線形であり、典型的なＩｇＧ１抗体と一致する薬物動態を示す。薬物動態データ（その全体が参照により本明細書に組み込まれる、Ｂａｉ Ｓ，Ｊｏｒｇａ Ｋ，Ｘｉｎ Ｙ，ら，Ａ ｇｕｉｄｅ ｔｏ ｒａｔｉｏｎａｌ ｄｏｓｉｎｇ ｏｆ ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，Ｃｌｉｎ Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔ ２０１２；５１：１１９－３５）は、固定用量または体重に対して調整された用量での曝露における臨床的に有意な差がないことを示唆している。アテゾリズマブは、ｑ３ｗおよびｑ２ｗの投与スケジュールで試験した。２週間ごと（ｑ２ｗ）の８００ｍｇのアテゾリズマブの固定用量（１０ｍｇ／ｋｇｑ２ｗの体重ベースの用量に相当）は、３週間毎（ｑ３ｗ）に投与される１２００ｍｇの第ＩＩＩ相用量と同等の曝露となる。ｑ３ｗスケジュールは、複数の腫瘍型にわたるアテゾリズマブ単独療法の複数の第ＩＩＩ相試験で使用されており、ｑ２ｗは主に化学療法レジメンと組み合わせて使用される。試験ＰＣＤ４９８９ｇでは、Ｋａｐｌａｎ－Ｍｅｉｅｒ推定による全２４週間無増悪生存率（ＰＦＳ）は３３％（９５％ＣＩ：１２％、５３％）であった。

【0083】

本開示のアテゾリズマブ用量は、適切には約５００ｍｇ～約２０００ｍｇ、約５００ｍｇ～約１０００ｍｇ、約７５０ｍｇ～約１０００ｍｇ、約７５０ｍｇ～約２０００ｍｇ、約１０００ｍｇ～約２０００ｍｇ、約１５００ｍｇ～約１７５０ｍｇである。いくつかのそのような態様では、対象は約８４０ｍｇのアテゾリズマブを投与される。いくつかのそのような態様では、対象は約１６８０ｍｇのアテゾリズマブを投与される。いくつかのそのような態様では、対象は、２８日間の処置サイクルの１４日間ごとにアテゾリズマブを投与される。いくつかの他の態様では、対象は、２８日間の処置サイクルの１日目および１５日目にアテゾリズマブを投与される。他の態様では、対象は、２８日間の処置サイクルの４週間ごとにアテゾリズマブを投与される。他の態様では、対象は、２８日間の処置サイクルの１日目にアテゾリズマブを投与される。一態様では、対象は、２８日間の処置サイクルの１日目に約１６８０ｍｇのアテゾリズマブを投与される。
メラノーマ

【0084】

本開示の範囲内にあるメラノーマは、ＮＲＡＳ変異を有する。いくつかの態様では、メラノーマは、ＮＲＡＳ活性化変異を有する、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｊｏｉｎｔ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ ｏｎ Ｃａｎｃｅｒ、第８改訂版（Ａｍｉｎ ＭＢ，Ｅｄｇｅ Ｓ，Ｇｒｅｅｎｅ Ｆ，ら（編）．ＡＪＣＣ Ｃａｎｃｅｒ Ｓｔａｇｉｎｇ Ｍａｎｕａｌ（第８版）．Ｓｐｒｉｎｇｅｒ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ：Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｊｏｉｎｔ Ｃｏｍｍｉｓｓｉｏｎ ｏｎ Ｃａｎｃｅｒ；２０１７）によって定義されるように進行する。ＮＲＡＳ変異陽性状態の決定は、例えば、限定されないが、米国食品医薬品局、米国病理学者協会、またはＥＵ諸国でのインビトロ診断でＣＥマークされた（欧州適合性）などの、国家保健局によって承認された臨床変異試験を使用することによって実施し得る。いくつかの態様では、ＮＲＡＳ変異陽性状態は、エクソン２のＮＲＡＳ遺伝子コドン１２、１３およびエクソン３のコドン６１において生じる変異として定義される。

【0085】

いくつかの態様では、メラノーマは、ＮＲＡＳ^Ｑ６１Ｋ変異、ＮＲＡＳ^Ｑ６１Ｒ変異、ＮＲＡＳ^Ｇ１２Ｃ変異、ＮＲＡＳ^Ｑ６１Ｌ変異、ＮＲＡＳ^Ｇ１３Ｄ変異、またはそれらの任意の組み合わせを有する。いくつかの他の態様では、メラノーマは、ＮＲＡＳ^Ｇ１２Ｄ変異、ＮＲＡＳ^Ｇ１２Ｃ変異、またはそれらの組合せを有する。

【0086】

いくつかの態様では、メラノーマは転移性であるか、または切除不能である。

【0087】

いくつかの態様では、メラノーマは、免疫療法、ＢＲＡＦ Ｖ６００Ｅ療法、または免疫療法とＢＲＡＦ Ｖ６００Ｅ療法との組み合わせによる処置後に対象において進行し続けた。

【0088】

いくつかの態様では、メラノーマは、抗ＰＤ－１薬物または抗ＰＤ－Ｌ１薬物による一連の処置が以前に投与されたことがある対象において進行し続ける。
併用療法

【0089】

（ｉ）ベルバラフェニブおよびコビメチニブ、ならびに（ｉｉ）ベルバラフェニブ、コビメチニブおよびアテゾリズマブの併用療法は、図１に示され、本明細書に記載されるプロトコルに従って評価される。

【0090】

このプロトコルは、抗ＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１療法を含む最大２種類の全身抗がん療法を受けたＮＲＡＳ変異型の転移性または切除不能な局所進行性皮膚メラノーマの患者における、コビメチニブまたはコビメチニブ＋アテゾリズマブのいずれかと組み合わせた、単剤としてのベルバラフェニブの安全性、薬物動態および予備的抗腫瘍活性を評価するための第Ｉｂ相非盲検多施設試験に関する。患者は、アジュバント療法において抗ＰＤ－１または抗ＰＤ－Ｌ１で処置されていてもよい。

【0091】

この試験は、以下の３つの処置レジメンをそれぞれの群において評価する；最大１５名の患者のベルバラフェニブ単剤療法群（Ｂｅｌｖａ群）；最大約４３名の患者のベルバラフェニブ＋コビメチニブ群で、初期用量設定段階（９～２４名の患者）を登録し、それに続いて選択された用量を最大２５名の患者にまで拡大：合計患者約２５名のベルバラフェニブ＋コビメチニブ＋アテゾリズマブ群：およびおよそ２５名の合計患者のベルバラフェニブ＋コビメチニブ＋アテゾリズマブ群、安全導入段階（１０名の患者）とそれに続く拡大期。

【0092】

いくつかの態様では、ベルバラフェニブは、食物とともに投与される。

【0093】

いくつかの態様では、本開示の併用療法は、ヒト対象における扁平上皮細胞癌腫の発生がないことを特徴とする。

【0094】

ベルバラフェニブ単剤療法群

【0095】

最大１５名の患者がＢｅｌｖａ群に登録され、各２８日間サイクルの１～２８日目に錠剤形態で４００ｍｇのベルバラフェニブをＢＩＤで投与される。

【0096】

ベルバラフェニブのＰＫ特性評価のための血漿サンプルを、表１に概説されるように収集する。３群全てのサンプリングスケジュールは、非コンパートメント分析および／または集団ＰＫ（ｐｏｐＰＫ）手法を用いたベルバラフェニブ薬物動態の特性評価が可能になるように設計されている。（ベルバラフェニブがコビメチニブまたはコビメチニブ＋アテゾリズマブのいずれかと同時投与される）併用群からのベルバラフェニブＰＫデータを、ベルバラフェニブ単独療法群または以前の第Ｉ相試験における単剤ベバラフェニブと比較して、ベルバラフェニブ曝露が変化しているかどうかを評価する。表１において：「Ｃ」はサイクルを指し、「Ｄ」は日を指し；「ＰＢＭＣ」は、末梢血単核細胞を指し、「ＰＫ」は薬物動態を指す。

【0097】

【表1】

【0098】

ベルバラフェニブおよびコビメチニブ群

【0099】

患者は、以下の２つの段階でＢｅｌｖａ＋Ｃｏｂｉ群に登録される：最初の用量設定段階と、それに続く拡大段階。

【0100】

ベルバラフェニブおよびとコビメチニブの組み合わせは、ＭＥＫ阻害剤の単剤またはＲＡＦ阻害剤と比較して、ＭＡＰＫ経路依存性を示す腫瘍（例えば、ＫＲＡＳ、ＮＲＡＳ、またはＢＲＡＦ変異）においてＥＲＫ産生をより深く抑制し、ＴＧＩをより大きくすると考えられる。ＲＡＦ阻害剤およびＭＥＫ阻害剤の間の相乗効果は、ＭＥＫ阻害剤の存在下でのＲＡＦキナーゼシグナル伝達に対するＲＡＳ変異腫瘍の依存性の増加に起因し得るとさらに考えられる。

【0101】

用量設定段階の目的は、組み合わせて使用される場合のベルバラフェニブおよびコビメチニブの推奨用量を特定することである。およそ９～２４名の患者がこの段階に登録される。３～６名の患者からなる投与群をそれぞれ処置レジメンに従って処置し、各２８日間サイクルの１～２８日目に３００または４００ｍｇのベルバラフェニブをＢＩＤで、各処置サイクルの１～２１日目に２０、４０または６０ｍｇのコビメチニブとＱＤで組み合わせて投与する。用量設定段階は、２８日間の用量制限毒性（ＤＬＴ）評定ウィンドウ（１サイクル）を有する従来の３×３スキーマからなる。ベルバラフェニブは強力なＲＡＦ阻害剤であり、コビメチニブは強力なＭＥＫ阻害剤であるので、ベルバラフェニブ＋コビメチニブ群におけるＤＬＴ基準を用いた用量設定は、ＭＡＰＫ経路阻害の潜在的な複合効果を特徴付けるために実施される。

【0102】

ＤＬＴは、そのような事象が治験責任医師によって別の明確に特定可能な原因（例えば、文書化された疾患進行、併用薬または既存の投薬、または併発疾患）に起因すると考えられない限り、転帰に関係なく、おそらくベルバラフェニブおよび／またはコビメチニブに関連すると治験責任医師によって決定された以下の有害事象のいずれか１つとして定義される。事象は以下の通りである。３日以上持続する最大の支持療法薬にもかかわらず。グレード３以上の悪心、嘔吐または下痢がある。グレード３以上の出血。１４日以内にベースラインまで回復しないグレード２以上の視覚障害（機器の日常生活動作の制限）。安静時ＬＶＥＦが３９％～２０％、またはＬＶＥＦが４０％～４９％で、ベースラインから１０ポイント以上低下と定義される、グレード３以上の左室駆出率（ＬＶＥＦ）の低下。グレード４以上の貧血７日を超えて続く、グレード４の好中球減少症または血小板減少症。臨床的に有意な出血を伴うグレード３の血小板減少症。以下のように定義される重度の肝毒性：以下の例外を除き、７日を超えて続く、グレード３以上の総ビリルビンまたはＡＬＴ／ＡＳＴ、またはＡＬＰの上昇：転移の結果としてベースライン時にグレード２の肝トランスアミナーゼまたはＡＬＰを有する患者については、肝トランスアミナーゼまたは１０×ＵＬＮのＡＬＰをＤＬＴとみなし；肝トランスアミナーゼ（ＡＬＴまたはＡＳＴ）がベースラインの３倍を超え、かつ直接ビリルビンが正常値上限の２倍を超えるか、臨床的黄疸を伴う場合、胆汁うっ滞やその他の要因がない場合（例えば、転移性疾患の悪化、既知の肝毒性物質への同時曝露、または実証された感染性病因）（Ｈｙの法則による）。Ｆｒｉｄｅｒｉｃｉａの方法を使用して補正されたＱＴｃ間隔（ＱＴｃＦ）は、ベースライン（投与前）と比較して６０ｍｓを超えて増加し、および／または絶対ＱＴｃＦ値が５００ｍｓを超える（反復測定によって確認）。以下を除き、その他の３以上のグレードの非血液学的／非肝臓主要臓器有害事象：適切な支持療法で７日以内にグレード２以下に回復するグレード３の発疹；７日以内にグレード２以下に回復するグレード３以上の疲労；２４時間以下のグレード３の発熱（４０℃を超えると定義）；無症候性であり、治験責任医師によって臨床的に重要でないとみなされるグレード３の検査所見の異常；任意のグレードの脱毛症。基礎疾患または外因によるものでないことが明確な死亡。

【0103】

ベルバラフェニブおよびコビメチニブの組み合わせの用量設定段階では、ベルバラフェニブの開始用量は、最初のコホートでは３００ｍｇ ＰＯ ＢＩＤとなる。その後のコホートでは、ベルバラフェニブの用量を４００ｍｇ ＢＩＤに増加させる。ベルバラフェニブと組み合わせたコビメチニブの開始用量は、用量設定段階の最初の２つのコホートにおける各２８日サイクルの最初の２１日間、１日２０ｍｇとする。コビメチニブの用量は、各２８日間サイクルの最初の２１日間または安全閾値が観察されるまで、毎日最大用量６０ｍｇまで２０ｍｇずつ増加させる。ベルバラフェニブおよびコビメチニブの用量が用量設定段階で選択された後、これらの用量は、拡大段階中にベルバラフェニブ＋コビメチニブ群に登録された最大２５名の患者においてさらに評価される。

【0104】

用量の決定は、ＤＬＴウィンドウの持続時間に関係なく、以下の規則に従って行われる。各用量設定コホートでは、最低３名の患者が最初に登録される。最初の３名のＤＬＴ評価可能患者のいずれもがＤＬＴを経験しない場合、次の最高用量レベルでの次のコホートの登録が進められる。最初の３名のＤＬＴ評価可能な患者のうち１名がＤＬＴを経験する場合、コホートは最低６名の患者に拡大される。最初の６名のＤＬＴ評価可能患者においてさらなるＤＬＴがない場合、次の最高用量レベルでの次のコホートの登録が進められる。コホート内の最初の６名のＤＬＴ評価可能な患者のうち２名以上がＤＬＴを経験する場合、ＭＴＤを超えており、用量漸増を停止する。先のコホートはまた、６名の患者がその用量レベルで既に評価されていない限り、最低６名の患者に拡大される。任意の用量レベルでＭＴＤを超える場合、最初の６名のＤＬＴ評価可能な患者（すなわち、３３％未満）のうち２名未満がＤＬＴを経験する最高用量がＭＴＤとする。いずれの用量レベルにおいてもＭＴＤを超えない場合、この試験において投与されるベルバラフェニブおよびコビメチニブの用量の最も高い組合せを、最大投与用量（ＭＡＤ）とする。任意の用量レベルは、治験依頼者および治験責任医師による非ＤＬＴ有害事象の評価に基づいて正当化される場合、ＤＬＴの非存在下で拡大され得る。

【0105】

最初の用量設定コホートの最初の６名の患者に２つのＤＬＴが存在する場合（３００ｍｇのベルバラフェニブ ＢＩＤ＋２０ｍｇのコビメチニブ ＱＤを２８日間の各サイクルの最初の２１日間毎投与）、コビメチニブについてＱＤ投与から投与ＴＩＷまでの段階的縮小が起こる。各２８日間のサイクルのうちの最初の２１日間について、４００ｍｇのベルバラフェニブ ＢＩＤに増量し、２０ｍｇＴＩＷへのコビメチニブの用量減少を伴うデエスカレーションコホートが登録のために開始される（図４を参照されたい）。

【0106】

デエスカレーションコホート（４００ｍｇのベルバラフェニブＢＩＤ＋２０ｍｇのコビメチニブＴＩＷ）の最初の６名の患者に２つのＤＬＴが存在する場合、各２８日間のサイクルのうちの最初の２１日間、３００ｍｇのベルバラフェニブ ＢＩＤ＋２０ｍｇのコビメチニブ ＴＩＷでの新しいコホートにおいて、ベルバラフェニブの用量減少が許容される。その点を超える検討のために、さらなる用量減少コホートを開始することはない。

【0107】

ＤＬＴ以外の理由で２８日間のＤＬＴ評価ウィンドウを完了しない用量設定段階の患者は、ＤＬＴ評価のために評価不可能であるとみなされ、同じ用量レベルで追加の患者と置き換えられ得る。さらに、ＤＬＴを経験していないが、２０ｍｇのＱＤスケジュールで１４回超のベルバラフェニブ、５回超のコビメチニブ、および／または２０ｍｇのＴＩＷスケジュールで超のコビメチニブを投与しなかった患者は、逃した用量の連続性にかかわらず、ＤＬＴ評価において評価不可能であるとみなされ、同じ用量レベルで追加の患者によって置き換えられ得る。ベルバラフェニブおよび／またはコビメチニブの用量および／または頻度は、医療モニターと相談してＤＬＴを管理するためのＤＬＴ評価ウィンドウの間に減少させ得る。ＤＬＴを経験しておらず、ＤＬＴの評価を混乱させるＤＬＴ評価ウィンドウの間に支持療法を受けている患者は、ＤＬＴ評価のために評価不可能であるとみなされ、医療モニターの裁量で置き換えられ得る。

【0108】

コビメチニブのＰＫ特性評価のための血漿サンプルを、表２および表３に概説されるように収集する。ベルバラフェニブ＋コビメチニブ群における用量設定のためのサンプリングスケジュールは、非コンパートメント分析および／またはｐｏｐＰＫ手法を用いたコビメチニブ薬物動態の特性評価を可能にするように設計されている。サンプリングスケジュールは、ベルバラフェニブ＋コビメチニブ拡大群およびベルバラフェニブ＋コビメチニブ＋アテゾリズマブ群では、まばらなサンプリングスケジュールに移行し、ｐｏｐＰＫ法を用いて重要なコビメチニブＰＫパラメータの推定を可能にするように設計される。ベルバラフェニブ＋コビメチニブ群およびベルバラフェニブ＋コビメチニブ＋アテゾリズマブ群からのコビメチニブＰＫデータを単剤コビメチニブと比較して、コビメチニブ曝露が変化しているかどうかを評価する。表２および表３において：「Ｃ」はサイクルを指し、「Ｄ」は日を指し；「ＰＢＭＣ」は、末梢血単核細胞を指し、「ＰＫ」は薬物動態を指す。

【0109】

【表2】

【0110】

【表3】

【0111】

ベルバラフェニブ、コビメチニブ、およびアテゾリズマブ群

【0112】

患者は、ベルバラフェニブ＋コビメチニブ＋アテゾリズマブ群では、２つの段階：最初の安全導入段階とそれに続く拡大段階に登録される。

【0113】

ベルバラフェニブ、コビメチニブ、およびアテゾリズマブの組み合わせは、単剤療法と比較して抗腫瘍活性が増大していると考えられる。より具体的には、ベルバラフェニブおよびアテゾリズマブの組み合わせは、ＲＡＦアイソフォームおよびＰＤ－１経路の同時阻害をもたらし、ＲＡＳおよびＲＡＦにおける変異を有する腫瘍における有効性が改善されると考えられる。

【0114】

ベルバラフェニブおよびコビメチニブの推奨用量が決定された後、約１０名の患者が安全導入段階に登録される。群は、用量決定が行われ、ベルバラフェニブ＋コビメチニブ用量設定群からの対応する安全性データの評定が完了し、全ての関連データが検討された後にのみ作動する。

【0115】

安全導入段階の全ての患者を２８日間追跡した後、治験依頼者安全委員会は安全性データを検討して、拡大段階を開始すべきかどうかを判断する。安全性導入段階の患者の８０％未満が２８日間の安全性導入期間中にグレード３以上の有害事象を経験した場合、拡大段階への登録が開始される。

【0116】

拡大段階が登録されている間、最初の１０名の患者が少なくとも９０日間の試験処置を受けた後、治験依頼者安全委員会は安全性データを再評定し、これにより、時間経過、遅発性事象、および可逆性を含む毒性の徹底的な評価が可能になる。拡張段階には最大２５名の患者が登録される。

【0117】

各２８日間のサイクルにおいて、患者は、４週間ごとに（Ｑ４Ｗ）、ＩＶ注入によって、１～２８日目に推奨用量ＢＩＤのベルバラフェニブ、１～２１日目に推奨用量のコビメチニブ、および１６８０ｍｇのアテゾリズマブを投与される。

【0118】

アテゾリズマブのＰＫ特性評価のための血清サンプルは、表４に概説されるように収集される。ベルバラフェニブ＋コビメチニブ＋アテゾリズマブ群におけるサンプリングスケジュールは、ｐｏｐＰＫ手法を使用して重要なアテゾリズマブＰＫパラメータの推定を可能にするように設計されている。ベバラフェニブ＋コビメチニブ＋アテゾリズマブ群からのアテゾリズマブＰＫデータをアテゾリズマブ単剤と比較して、アテゾリズマブ曝露が変化しているかどうかを評価する。表４において：「Ｃ」はサイクルを指し、「Ｄ」は日を指し；「ＰＢＭＣ」は、末梢血単核細胞を指し、「ＰＫ」は薬物動態を指す。アテゾリズマブ抗薬物抗体（ＡＤＡ）の評定のためのサンプリングスケジュールは、ベルバラフェニブおよびコビメチニブと組み合わせて投与された場合のＱ４Ｗスケジュールで与えられるアテゾリズマブの免疫原性の評価を可能にすべきであると考えられる。

【0119】

【表4】

【0120】

ＰＫおよびバイオマーカー評価

【0121】

ベルバラフェニブの濃度は、上記のように様々な時点で収集されたサンプルから分析される。ベルバラフェニブ群およびベルバラフェニブ＋コビメチニブ群については、サイクル１、１日目および定常状態に適切な場合、非コンパートメント法を使用して、投与からの時間に対するベルバラフェニブの血漿中濃度から以下のＰＫパラメータを計算する。Ｃ_ｍａｘ、ｔ_ｍａｘ、公称時間０から時間ｔまでの濃度－時間曲線下面積（ＡＵＣ）（ＡＵＣ_０－ｔ）。さらに、ベルバラフェニブの血漿中濃度は、全ての群について個々の値として報告され、適切な場合にはデータが許す限り、処置群別およびサイクル別に要約される。個々のおよび平均のベルバラフェニブ濃度を処置群および日ごとにプロットする。ベルバラフェニブ濃度データを、確立された集団ＰＫモデルを使用して他の試験からのデータと共にプールして、データによって保証されるクリアランス、分布容積およびＡＵＣ等のＰＫパラメータを導出し得る。関連するＰＫパラメータと用量、安全性、有効性またはバイオマーカーの結果との潜在的な相関関係を調べ得る。

【0122】

上記のように、様々な時点で採取したサンプルからコビメチニブ濃度を分析することになる。ベルバラフェニブ＋コビメチニブ群については、サイクル１の１日目および定常状態に適切な場合、非コンパートメント法を用いてコビメチニブの血漿中濃度から以下のＰＫパラメータ：Ｃ_ｍａｘ、ｔ_ｍａｘ、およびＡＵＣ_０－ｔを導出する。ベルバラフェニブ＋コビメチニブ群およびベルバラフェニブ＋コビメチニブ＋アテゾリズマブ群については、コビメチニブの血漿中濃度が個々の値として報告され、適切な場合およびデータが許す場合、処置群およびサイクルによって要約される。個々のコビメチニブ濃度および平均コビメチニブの平均濃度を処置群および日ごとにプロットする。コビメチニブ濃度のデータは、データによって保証されるように、クリアランス、分布容積およびＡＵＣなどのＰＫパラメータを導出するために、確立された集団ＰＫモデルを使用して他の研究からのデータと共にプールされ得る。関連するＰＫパラメータと用量、安全性、有効性またはバイオマーカーの結果との潜在的な相関関係を調べ得る。

【0123】

上記で概説したように、アテゾリズマブ濃度を測定する。アテゾリズマブの血清中濃度は、個々の値として報告され、適切な場合およびデータが許す場合、処置群別およびサイクル別に要約される（平均、標準偏差、変動係数、中央値、範囲、幾何平均、および幾何平均変動係数）。個々の血清アテゾリズマブ濃度および血清アテゾリズマブ濃度の中央値を処置群および日ごとにプロットする。アテゾリズマブ濃度データは、データによって正当化されるように、クリアランス、分布容積およびＡＵＣなどのＰＫパラメータを導出するために、確立された集団ＰＫモデルを使用して他の研究からのデータと共にプールされ得る。関連するＰＫパラメータと用量、安全性、有効性またはバイオマーカーの結果との潜在的な相関関係を調べ得る。

【0124】

ＡＤＡ分析は、ベルバラフェニブ＋コビメチニブ＋アテゾリズマブ群に登録された患者の免疫原性分析集団に対して行われる。免疫原性分析には、アテゾリズマブについて少なくとも１つのＡＤＡ評価を受けた全ての患者が含まれる。ベースライン時（ベースライン時有病率）および薬物投与後（ベースライン発生後）のＡＤＡ陽性患者およびＡＤＡ陰性患者の数および割合を処置群ごとに要約する。ベースライン時有病率の要約は、少なくとも１回の評価可能なベースラインＡＤＡ評価を受けた患者に基づき、ベースライン後の発生率の要約は、少なくとも１つの評価可能なベースライン後のＡＤＡ評価による処置患者に基づく。ベースライン後の発生率を決定するとき、患者は、ＡＤＡ陰性であるか、またはベースラインでデータが欠落しているが、試験薬物曝露後にＡＤＡ応答を発症する場合（処置誘発性ＡＤＡ応答）、または患者がベースラインでＡＤＡ陽性であり、１つ以上のベースライン後のサンプルの力価がベースラインサンプルの力価よりも少なくとも０．６０力価単位大きい場合（処置増強ＡＤＡ応答）、ＡＤＡ陽性であるとみなされる。患者がＡＤＡ陰性であるかもしくはベースラインでデータが欠落しており、全てのベースライン後のサンプルが陰性である場合、または患者がベースラインでＡＤＡ陽性であるが、ベースライン試料の力価よりも少なくとも０．６０力価単位大きい力価を有するベースライン後のサンプルを有さない（処置は影響を受けない）場合、患者はＡＤＡ陰性であるとみなされる。ＡＤＡの状態と安全性、活性、ＰＫ、およびバイオマーカー評価項目の間の関係は、記述統計によって分析および報告され得る。

【0125】

バイオマーカー評価は、単一薬剤としてのベルバラフェニブおよびコビメチニブおよび／またはアテゾリズマブと組み合わせたベルバラフェニブの作用機序を理解し、疾患進行および処置に対する応答を評価するための予後および予測バイオマーカーを同定するために行われる。

【0126】

ベースライン時および試験中に血液サンプルを収集し、Ｔ細胞活性化およびリンパ球亜集団に関連するバイオマーカーなどのバイオマーカーの変化を評価する。

【0127】

将来の試験のためのベルバラフェニブ、コビメチニブ、およびアテゾリズマブの最適な用量の組み合わせを確認するために、循環腫瘍ＤＮＡ（ｃｔＤＮＡ）の調節を評価して処置の有効性をモニターする。がんを有する患者の血液標本から得られた無細胞ＤＮＡが、腫瘍内の細胞のＤＮＡおよび変異状態を表すｃｔＤＮＡを含むという証拠が増えつつある（Ｄｉｅｈｌら．２００８；Ｍａｈｅｓｗａｒａｎら．２００８）。ベースライン時および試験中に血液サンプルを収集し、処置効果またはベルバラフェニブ併用に対する耐性の出現の指標としてｃｔＤＮＡにおける腫瘍突然変異状態の変化を評価する。処置前、処置中の様々な時点、および試験が進行した後に患者から収集されたｃｔＤＮＡの分析は、ベルバラフェニブに対する応答および獲得耐性の機構を特定するのに役立ち得る。

【0128】

バイオマーカーおよび有効性評価項目の間の相関を調査して、どの患者が本開示の薬物の組合せから恩恵を受ける可能性がより高いかを予測し得る血液ベースのバイオマーカーを同定する。

【0129】

ＲＮＡシーケンシング分析およびＤＮＡ抽出のための組織および血液サンプルを収集し、全ゲノムシーケンシング（ＷＧＳ）または全エクソームシーケンシング（ＷＥＳ）を可能にして、試験薬物に対する応答を予測する、研究薬物に対する獲得耐性に関連する、または疾患生物学の知識および理解を高め、応答に対する免疫系の寄与を理解し得るバリアントを同定する。ＷＧＳおよびＷＥＳは、それぞれゲノムおよびエクソームの包括的な特性評価を提供する。この試験で収集された臨床データと共に、ＷＧＳおよびＷＥＳは、有効性および安全性を監視するため、またはどの患者が薬物に反応するかもしくは有害事象を発症する可能性がより高いかを予測するための新しい治療アプローチまたは新しい方法を開発する機会を増加する可能性がある。

【0130】

患者間の腫瘍の不均一性および臨床応答に対するその関係を特性評価するために、ベースライン時（保管組織または処置前生検）、処置中、および疾患進行時（進行の最初の証拠または進行の確認のいずれか、試験治療投与の最終日に最も近いもので行われる新鮮生検）に腫瘍組織を収集する。腫瘍組織は、ＰＤ－Ｌ１発現などの腫瘍免疫状況、および腫瘍免疫の他の成分について評価される。さらに、ＤＮＡおよび／またはＲＮＡをこれらの腫瘍サンプルから抽出して、ＤＮＡおよび／またはＲＮＡの次世代シーケンシング（ＮＧＳ）を可能にする。これらの分子特性解析は、処置からより利益を得る可能性が高い患者を特定するために臨床応答に関連して分析される。これらのバイオマーカーも予後値を有し得るので、疾患進行とのそれらの潜在的な関連性も調査される。

【0131】

保存された腫瘍組織または新鮮な腫瘍生検をベースライン時に収集し、試験中のその後の薬物処置の耐性、疾患進行、および臨床的利益に関連する腫瘍組織バイオマーカーの分析を可能にする患者間の腫瘍の不均一性および臨床応答に対するその関係を特性評価するために、ベースライン時（保管組織または処置前生検）、処置中、および疾患進行時（進行の最初の証拠または進行の確認のいずれか、試験治療投与の最終日に最も近いもので行われる新鮮生検）に腫瘍組織を収集する。腫瘍組織は、ＰＤ－Ｌ１発現などの腫瘍免疫状況、および腫瘍免疫の他の成分について評価される。さらに、ＤＮＡおよび／またはＲＮＡをこれらの腫瘍サンプルから抽出して、ＤＮＡおよび／またはＲＮＡの次世代シーケンシング（ＮＧＳ）を可能にする。これらの分子特性解析は、処置からより利益を得る可能性が高い患者を特定するために臨床応答に関連して分析される。これらのバイオマーカーはまた、本開示の薬物の組合せに対する応答および耐性の予測などの予後値を有し得るので、疾患進行とのそれらの潜在的な関連性もまた調査される。処置前に取得された組織と進行時に取得された組織との間のバイオマーカーとの比較は、この組み合わせに対する獲得耐性の潜在的な機構をさらに解明するであろう。疾患進行時に採取された生検からの詳細な変異および免疫プロファイルはまた、その後の治療選択肢を考慮するためのデータを提供し得る。

【0132】

標的化ＮＧＳおよび全エクソーム、ゲノムまたは単一核ＲＮＡ配列決定などのＤＮＡおよびＲＮＡ配列決定技術は、単独で、ならびにコビメチニブおよび／またはアテゾリズマブと組み合わせて投与された場合、ベルバラフェニブに対する応答および／または耐性のバイオマーカーを同定するための独特の機会を提供する可能性がある。がん関連遺伝子の配列決定は、ベルバラフェニブに対する耐性のデノボおよび獲得機構の同定をもたらし得る。ＮＧＳ技術は大量の配列決定データを生成し得る。腫瘍ＤＮＡは、腫瘍形成プロセスのために、報告された染色体変化、および報告されていない染色体変化の両方を含み得る。以前に報告されていないゲノム変化における配列決定コールの制御を助けるために、投薬前の血液試料を採取して、変化が体細胞性であるかどうかを決定する。ＮＧＳはまた、疾患生物学の理解を助けるための腫瘍特異的体細胞変異に加えて、免疫および間質シグネチャならびにＴ細胞受容体のクローン性を同定するために腫瘍組織サンプルに対して実施されるであろう。
実施例

【0133】

Ｈａｎｍｉ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｅｎｔｅｒの動物実験委員会は、実施例の動物実験プロトコルを承認した。

【0134】

実施例１

【0135】

ＮＣＴ０３２８４５０２は、ＲＡＳまたはＲＡＦ変異を有する局所進行性または転移性固形腫瘍を有する患者において種々の用量レベルでコビメチニブと組み合わせたベルバラフェニブを調査する第１ａ／ｂ相試験である。合計６７名の対象がこの試験に登録されており、以下が含まれる。２８日間のサイクルの１～２８日目に２００ｍｇのベルバラフェニブをＢＩＤで投与し、２８日間のサイクルの２１日間にわたって４０ｍｇのコビメチニブをＱＤで投与する７名の対象；２８日間のサイクルの１～２８日目に１００ｍｇのベルバラフェニブをＢＩＤで投与し、２８日間のサイクルの２１日間にわたって２０ｍｇのコビメチニブをＱＤで投与する４名の対象；２８日間のサイクルの１～２８日目に２００ｍｇのベルバラフェニブをＢＩＤで投与し、２８日間のサイクルの２１日間にわたって２０ｍｇのコビメチニブをＱＤで投与する２７名の対象；２８日間のサイクルの１～２８日目に３００ｍｇのベルバラフェニブをＢＩＤで投与し、２８日間のサイクルの２１日間にわたって２０ｍｇのコビメチニブをＱＤで投与する５名の対象；および２８日間のサイクルの１～２８日目に３００ｍｇのベルバラフェニブをＢＩＤで投与し、２８日間のサイクルの３週間にわたって２０ｍｇのコビメチニブをＱＯＤで（週に３回）投与する２４名の対象。

【0136】

用量制限毒性（ＤＬＴ）（グレード３の大腸炎、グレード３の下痢およびグレード３の悪心を含む）が、２００ｍｇのベルバラフェニブＢＩＤ＋４０ｍｇのコビメチニブＱＤの用量で処置されたＤＬＴ評価可能な３名の対象のうちの２名において報告された。他の用量レベルではＤＬＴは報告されなかった。

【0137】

６７名の対象のうち６１名（９１％）が、治験責任医師の因果関係評価（ＴＥＡＥ）に関係なく有害事象を経験した。対象の１０％以上に生じるＴＥＡＥは、ざ瘡様皮膚炎（２６名の対象；３８．８％）、下痢（２４名の対象；３５．８％）、発疹（２２名の対象；３２．８％）、血中ＣＰＫ上昇（１８名の対象；２６．９％）、食欲不振（１５名の対象；２２．４％）、発熱（１４名の対象；２０．９％）、便秘（１３名の対象；１９．４％）、貧血（１１名の対象；１６．４％）、疲労（１０名の対象；１４．９％）、無力症（８名の対象；１１．９％）、および網脈絡膜症（７名の対象；１０．４％）であった。ＴＥＡＥの大部分はグレード１（５名の対象；７．５％）またはグレード２（３１名の対象；４６．３％）の重症度であった。グレード３以上のＴＥＡＥが２５名の対象（３７．３％）から報告され、１３名の対象で報告された事象は、治験責任医師によってベルバラフェニブおよびコビメチニブの両方に関連すると考えられた。ベルバラフェニブおよびコビメチニブの両方に関連する最も一般的なグレード３以上の治療関連有害事象（ＴＲＡＥ）は、血中ＣＰＫ上昇、疲労（各３名の対象、４．５％）および下痢（２名の対象、３．０％）であった。試験期間中、２名の対象（３．０％）が、心停止および長期の食欲不振のグレード５の事象のために死亡した。グレード５の心停止が、２００ｍｇのベルバラフェニブ ＢＩＤ＋４０ｍｇのコビメチニブＱＤで処置された対象において生じた。この事象は、治療医によってベルバラフェニブおよびコビメチニブの両方に関連すると考えられた。３００ｍｇのベバラフェニブ ＢＩＤ＋２０ｍｇのコビメチニブＱＤで処置された対象においてグレード５の長期食欲不振の事象が発生した；その事象は、処置している医師による試験処置とは無関係であると考えられた。

【0138】

薬物動態分析により、ベルバラフェニブが、コビメチニブと組み合わせて、２００ｍｇおよび３００ｍｇの用量のベルバラフェニブ ＢＩＤで重複する定常状態曝露（ＡＵＣ_０－２４）が示された。ベルバラフェニブ曝露量は単一薬剤曝露の範囲内であり、ベルバラフェニブ曝露に影響を及ぼすコビメチニブとの明らかな薬物－薬物相互作用は示されなかった。コビメチニブの定常状態曝露量は、用量正規化定常状態単剤コビメチニブ曝露と一致し、コビメチニブ曝露に影響を及ぼすベルバラフェニブとの明らかな薬物－薬物相互作用はないことが示された。

【0139】

実施例２

【0140】

実施例２では、ＮＲＡＳ変異型メラノーマ細胞におけるベルバラフェニブ、コビメチニブおよびそれらの組み合わせのインビトロシグナル伝達を評価した。ＳＫ－ＭＥＬ－３０（ＮＲＡＳ^Ｑ６１Ｋ）およびＩＰＣ－２９８（ＮＲＡＳ^Ｑ６１Ｌ）メラノーマ細胞を、１ｕＭのベルバラフェニブ（Ｂｅｌｖａ）、２５０ｎＭのコビメチニブ（Ｃｏｂｉ）、または両方の化合物の組み合わせ（Ｂｅｌｖａ＋Ｃｏｂｉ）で処置し、０、３、６、２４、および４８時間で評価した。細胞を、ウエスタンブロットによってＭＡＰＫシグナル伝達マーカー（リン酸化ＭＥＫ、ＥＲＫおよびＲＳＫ）について分析した。ＳＫ－ＭＥＬ－３０（ＮＲＡＳ^Ｑ６１Ｋ）についての結果を図２Ａに示し、ＩＰＣ－２９８（ＮＲＡＳ^Ｑ６１Ｌ）についての結果を図２Ｂに示す。結果は、ベルバラフェニブおよびコビメチニブの組み合わせが、ＮＲＡＳ変異細胞株におけるＭＡＰＫ経路シグナル伝達を阻害することを示す。

【0141】

実施例３

【0142】

実施例３では、メラノーマ細胞におけるベルバラフェニブ、コビメチニブ、またはそれらの組み合わせのインビトロコロニー形成成長試験を評価した。以下の組み合わせを評価した：１０ｎＭのｃｏｂｉ＋ビヒクル；５０ｎＭのｃｏｂｉ＋ビヒクル；１００ｎＭのｃｏｂｉ＋ビヒクル；２５０ｎＭのｃｏｂｉ＋ビヒクル；１０ｎＭのｂｅｌｖ＋ビヒクル；１００ｎＭのｂｅｌｖ＋ビヒクル；１０００ｎＭのｂｅｌｖ＋ビヒクル；１０，０００ｎＭのｂｅｌｖ＋ビヒクル；１０ｎＭのｃｏｂｉ＋１０ｎＭのｂｅｌｖ；１０ｎＭのｃｏｂｉ＋１００ｎＭのｂｅｌｖ；１０ｎＭのｃｏｂｉ＋１０００ｎＭのｂｅｌｖ；１０ｎＭのｃｏｂｉ＋１０，０００ｎＭのｂｅｌｖ；５０ｎＭのｃｏｂｉ＋１０ｎＭのｂｅｌｖ；５０ｎＭのｃｏｂｉ＋１００ｎＭのｂｅｌｖ；５０ｎＭのｃｏｂｉ＋１０００ｎＭのｂｅｌｖ；５０ｎＭのｃｏｂｉ＋１０，０００ｎＭのｂｅｌｖ；１００ｎＭのｃｏｂｉ＋１０ｎＭのｂｅｌｖ；１００ｎＭのｃｏｂｉ＋１００ｎＭのｂｅｌｖ；１００ｎＭのｃｏｂｉ＋１０００ｎＭのｂｅｌｖ；１００ｎＭのｃｏｂｉ＋１０，０００ｎＭのｂｅｌｖ；２５０ｎＭのｃｏｂｉ＋１０ｎＭのｂｅｌｖ；２５０ｎＭのｃｏｂｉ＋１００ｎＭのｂｅｌｖ；２５０ｎＭのｃｏｂｉ＋１０００ｎＭのｂｅｌｖ；２５０ｎＭのｃｏｂｉ＋１０，０００ｎＭのｂｅｌｖ。以下の細胞株を評価した。
ＩＰＣ－２９８（ＮＲＡＳ^Ｑ６１Ｌ）メラノーマ細胞株；ベルバラフェニブ、コビメチニブ、またはそれらの組み合わせで処置されたＭｅｌ－Ｊｕｓｏ（ＮＲＡＳ^Ｑ６１Ｌ）メラノーマ細胞株；およびＳＫ－ＭＥＬ－３０（ＮＲＡＳ^Ｑ６１Ｋ）メラノーマ細胞株。細胞を表示濃度のベルバラフェニブおよび／またはコビメチニブで８日間処理し、続いてクリスタルバイオレットで染色した。結果を図３～図５に示す。結果は、ベルバラフェニブおよびコビメチニブの組み合わせがＮＲＡＳ変異細胞株における細胞コロニー形成を阻害することを示している。

【0143】

実施例４

【0144】

ＫＲＡＳ変異ＣＲＣ細胞株ＨＣＴ１１６（ＫＲＡＳ^Ｇ１３Ｄ）およびＬｏｖｏ（ＫＲＡＳ^Ｇ１３Ｄ）ならびにＮＳＣＬＣ細胞株Ｃａｌｕ－６（ＫＲＡＳ^Ｑ６１Ｋ）において、ｐａｎ ＲＡＦ阻害剤ベルバラフェニブのインビトロシグナル伝達を、ＢＲＡＦ阻害剤ベムラフェニブおよびダブラフェニブに対して評価した。ｎＭ単位でＩＣ_５０を決定するために、細胞株をベルバラフェニブ、ベムラフェニブおよびダブラフェニブに濃度範囲にわたって曝露し、曝露の２時間後に評価した。

【0145】

結果を以下の表５に示す。表５に示すように、ベムラフェニブおよびダブラフェニブではなく、ベルバラフェニブは、ＨＣＴ１１６、ＬｏｖｏおよびＣａｌｕ－６細胞株においてＭＥＫおよびＥＲＫのリン酸化に対する阻害効果を示した。ＭＥＫおよびＥＲＫリン酸化に対するベルバラフェニブのインビトロ細胞ＩＣ_５０値は、ＨＣＴ１１６においてそれぞれ２，６９８ｎＭおよび２５３ｎＭであり；Ｌｏｖｏで１０μＭ超（１０μＭで３７％阻害）および２６７ｎＭであり；Ｃａｌｕ－６細胞株でそれぞれ３６７ｎＭおよび５９０ｎＭであった。ベムラフェニブおよびダブラフェニブの対応するＩＣ_５０値は、ＨＣＴ１１６、Ｌｏｖｏ、およびＣａｌｕ－６細胞株において１０μＭ超であった。

【0146】

【表5】

【0147】

実施例５

【0148】

以下において、ベルバラフェニブによるＢＲＡＦまたはＫＲＡＳ変異ＣＲＣおよびＫＲＡＳ変異ＮＳＣＬＣ細胞株のインビトロ細胞増殖阻害を、ＢＲＡＦ阻害剤ベムラフェニブおよびダブラフェニブに対して評価した：ＢＲＡＦ変異ＣＲＣ細胞株ＨＴ－２９およびＣｏｌｏ－２０５（両方とも^{Ｖ６００Ｅ}）；ＫＲＡＳ変異ＣＲＣ細胞株ＬＳ１７４Ｔ（ＫＲＡＳ^Ｇ１２Ｄ）、ＬＳ５１３（ＫＲＡＳ^Ｇ１２Ｄ）、ＨＣＴ１１６（ＫＲＡＳ^Ｇ１３Ｄ）およびＬｏｖｏ（ＫＲＡＳ^Ｇ１３Ｄ）；およびＫＲＡＳ変異ＮＳＣＬＣ細胞株Ｃａｌｕ－６（ＫＲＡＳ^Ｑ６１Ｋ）およびＣａｌｕ－１（ＫＲＡＳ^Ｇ１２Ｃ）。

【0149】

結果を以下の表６および表７に示す。ベルバラフェニブおよびベムラフェニブは、ＢＲＡＦ変異型ＣＲＣ細胞株ＨＴ－２９およびＣｏｌｏ－２０５（ＧＩ_５０範囲＝４７～１１８ｎＭ）において細胞増殖阻害に対して同等の活性を示したが、ダブラフェニブは、０．１ｎＭ未満のＧＩ_５０でそれらの細胞において最も強力な細胞増殖阻害効果を示した。ベルバラフェニブは、ＬＳ１７４Ｔ、ＬＳ５１３、ＨＣＴ１１６およびＬｏｖｏを含むインビトロで試験した全てのＫＲＡＳ変異型ＣＲＣ細胞株においてＧＩ_５０値がそれぞれ２５８、６２、１７７および５１ｎＭで細胞増殖を阻害した（表６）。ＫＲＡＳ変異ＮＳＣＬＣ細胞株の細胞増殖阻害に対するベルバラフェニブの活性も、Ｃａｌｕ－６およびＣａｌｕ－１で観察された（それぞれ、１７９および７４９ｎＭのＧＩ_５０）（表７）。ダブラフェニブはまた、Ｌｏｖｏ（ＫＲＡＳ変異型、ＣＲＣ）細胞株（ＧＩ_５０＝２１４ｎＭ）ならびにＣａｌｕ－６およびＣａｌｕ－１（ＫＲＡＳ変異型、ＮＳＣＬＣ）細胞株（それぞれ、６１８および９０４ｎＭのＧＩ_５０）において、インビトロでの細胞増殖阻害を示した。しかしながら、ダブラフェニブの活性は、Ｃａｌｕ－１細胞を除いて、ベルバラフェニブよりも約３～４倍弱かった。ベムラフェニブは、ＫＲＡＳ変異型細胞における増殖の阻害に対して活性を示さなかった。

【0150】

【表6】

【0151】

【表7】

【0152】

実施例６

【0153】

ＢＲＡＦまたはＫＲＡＳ変異細胞株に対するベルバラフェニブ対他のＢＲＡＦ阻害剤、ベムラフェニブおよびダブラフェニブのインビトロ細胞増殖阻害活性を、ＢＲＡＦ変異型甲状腺細胞株：ＳＮＵ７９０、ＦＲＯ、Ｂ－ＣＰＡＰ、ＮＰＡ、８５０５Ｃ、ＡＲＯ（全てＢＲＡＦ^{Ｖ６００Ｅ}）、およびＳＮＵ８０（ＢＲＡＦ^{Ｇ４６８Ｒ}）；ならびにＫＲＡＳ変異型甲状腺がん細胞株、ＣＡＬ－６２（ＫＲＡＳ^Ｇ１２Ｒ）で更に調査した。結果を表８に要約する。

【0154】

ベルバラフェニブおよびダブラフェニブは、７つ全てのＢＲＡＦ変異型甲状腺がん細胞株において細胞増殖阻害に対する活性を示した（１μＭ未満のＧＩ_５０、）。ベムラフェニブは、ＳＮＵ７９０、Ｂ－ＣＰＡＰおよびＮＰＡ、ＢＲＡＦ変異型甲状腺がん細胞株において、１μＭ未満のＧＩ_５０値で細胞増殖阻害効果を示した。さらに、ベムラフェニブまたはダブラフェニブではなく、ベルバラフェニブのみが、ＣＡＬ－６２（ＫＲＡＳ^Ｇ１２Ｒ）甲状腺がん細胞における細胞増殖阻害に対して活性を示し、ＧＩ_５０値は４７９ｎＭであった。

【0155】

【表8】

【0156】

実施例７

【0157】

ＮＲＡＳ^Ｑ６１Ｋ変異を有するＳＫ－ＭＥＬ－３０ヒトメラノーマ細胞株を異種移植したマウスモデルにおける併用療法としてのベルバラフェニブおよびコビメチニブの組み合わせのインビボ抗腫瘍活性を調べた。ビヒクル（対照）、ベルバラフェニブ単独を、１０または３０ｍｇ／ｋｇの用量で１日１回、コビメチニブ単独を、１０ｍｇ／ｋｇの用量で１日１回、およびそれらの併用療法を最大１４日目まで経口胃管栄養法により、群あたり５匹の動物を処置した。腫瘍体積（ｍｍ^３）および体重変化を１、４、９および１５日目に測定した。

【0158】

図６および図７ならびに表９に示されるように、ベルバラフェニブの経口投与は、用量依存的な抗腫瘍活性をもたらし、１０および３０ｍｇ／ｋｇ ｑ．ｄ．投与による最大阻害率は、それぞれ７０．３％（１５日目）および８０．０％（１５日目）であった。最大阻害率（ｍａｘ ｉｎｈｉｂ（％））を、（１－（処置群の平均相対腫瘍重量／対照群の平均相対腫瘍重量））＊１００によって決定した。コビメチニブを単独で１０ｍｇ／ｋｇ、ｑ．ｄ．投与することで、最大阻害率５４．３％（１５日目）が示された。ベルバラフェニブおよびコビメチニブによる処置の両方が、体重減少がなく、忍容性は良好であり；ベルバラフェニブ処置群では、背部の発毛の臨床徴候が観察された。ベルバラフェニブ１０または３０ｍｇ／ｋｇ ｑ．ｄ．、およびコビメチニブ１０ｍｇ／ｋｇの併用療法は、それぞれ８９．８％（１５日目）または８９．１％（１５日目）の最大阻害率で相加的な抗腫瘍活性を示した。死亡率または著しい体重減少（１０％超）も観察された。ベルバラフェニブ１０または３０ｍｇ／ｋｇ ｑ．ｄ．，およびコビメチニブ１０ｍｇ／ｋｇの併用療法は、それぞれ８９．８％（１５日目）または８９．１％（１５日目）の最大阻害率で相加的な抗腫瘍活性を示した。死亡率または著しい体重減少（１０％超）も観察された。

【0159】

【表9】

【0160】

実施例８

【0161】

ＮＲＡＳ変異患者由来異種移植片（ＰＤＸ）を有するマウスにおけるベルバラフェニブのインビボ抗腫瘍活性を調べた。群あたり１０匹の動物を、ビヒクル（対照）または２０ｍｇ／ｋｇＱＤの用量のベルバラフェニブで処置した。腫瘍体積および体重変化を３～４日ごとに測定した。表１０～１２Ｃに示されるように、ベルバラフェニブの経口投与により、強力な抗腫瘍活性がもたらされ、ベルバラフェニブ処置は、有意な（１０％超）体重減少を伴うことなく良好な忍容性を示した。表１１Ａ～１２Ｃのデータを、＋／－１０％（例えば、表１１Ａ～１１Ｃについては＋／－２０ｍｍ３）の推定誤差でグラフ形式から変換した。

【0162】

実施例８の全体的な結果を以下の表１０に示す。

【0163】

【表10】

【0164】

表１１Ａ－１１Ｃ：ＮＲＡＳ ＰＤＸメラノーマモデルの有効性試験の腫瘍体積の結果。各ＰＤＸモデルについて、ベルバラフェニブの用量は２０ｍｇ／ｋｇ ＱＤであった。

【0165】

【表11A】

【0166】

【表11B】

【0167】

【表11C】

【0168】

表１２Ａ－１２Ｃ：ＮＲＡＳ ＰＤＸメラノーマモデルの有効性試験の体重変化（％）の結果。各ＰＤＸモデルについて、ベルバラフェニブの用量は２０ｍｇ／ｋｇ ＱＤであった。

【0169】

【表12A】

【0170】

【表12B】

【0171】

【表12C】

【0172】

実施例９

【0173】

ＳＫ－ＭＥＬ－３０異種移植片モデルにおけるベルバラフェニブおよびＭＥＫ阻害剤ＭＥＫ１６２（ビニメチニブ）のインビボ併用試験。

【0174】

単独療法としてのＭＥＫ阻害剤は、ＢＲＡＦ阻害剤で以前に処置された患者において最小限の利益しかもたらさないようである。ＮＲＡＳ変異腫瘍におけるＢＲＡＦ阻害剤およびＭＥＫ阻害剤併用は、単剤療法に対する耐性を予防または克服し、単剤療法の安全性プロファイルを改善する可能性がある。この点において、ＮＲＡＳ^Ｑ６１Ｋ変異を有するＳＫ－ＭＥＬ－３０メラノーマ細胞株を異種移植したマウスモデルを用いて、ＭＥＫ１／２の選択的ＡＴＰ非競合的阻害剤であるビニメチニブとの併用療法としてのベルバラフェニブのインビボ抗腫瘍活性を調べた。群あたり５匹の動物を、ビヒクル（対照）、ベルバラフェニブ単独を、１０または３０ｍｇ／ｋｇの用量で１日１回、ビニメチニブ単独を、１０または３０ｍｇ／ｋｇの用量で１日１回、またはそれらの組合せ（ベルバラフェニブ１０ｍｇ／ｋｇ＋ビニメチニブ１０ｍｇ／ｋｇまたはベルバラフェニブ３０ｍｇ／ｋｇ＋ビニメチニブ３０ｍｇ／ｋｇ）を１日１回で、経口胃管栄養法によって２１日間処置した。

【0175】

図８および図９ならびに表１３に示されるように、ベルバラフェニブの経口投与は、用量依存的な抗腫瘍活性をもたらし、１０および３０ｍｇ／ｋｇｑ．ｄ．投与による最大阻害率は、それぞれ３６．７％（２１日目）および７４．６％（２１日目）であった。また、ビニメチニブを１０および３０ｍｇ／ｋｇｑ．ｄ．で投与し、この腫瘍モデルに対して抗腫瘍活性が示され、最大阻害率はそれぞれ１３．６％（２１日目）および２７．１％（２１日目）であった。ベルバラフェニブおよびビニメチニブによる処置は、いずれも、顕著な体重減が少なく、良好な忍容性を示した；ベルバラフェニブ処置群では、１０ｍｇ／ｋｇ用量以上で背部、腹部および顔面領域の発毛の臨床徴候が観察された。

【0176】

ベルバラフェニブ１０ｍｇ／ｋｇ ｑ．ｄ．およびビニメチニブ１０ｍｇ／ｋｇの併用療法は、２１日目に７４．２％の最大阻害率で増強された抗腫瘍活性および顔面の浮腫または紅斑の毒性を示したが、これらは、いずれの処置単独では観察されなかった。ベルバラフェニブ３０ｍｇ／ｋｇ ｑ．ｄ．およびビニメチニブ３０ｍｇ／ｋｇ ｑ．ｄ．を併用投与し、腫瘍の収縮が誘発された（２１日目に７７．７％）が、忍容性は低かった；１０日目に２／５の動物が死亡していることが分かり、他の生存動物は、試験期間中にいずれかの処置単独では観察されなかった顔面の浮腫または紅斑などの臨床徴候を示した。

【0177】

【表13】

【0178】

実施例１０

【0179】

Ｃａｌｕ－６異種移植片モデルを用いた、ベルバラフェニブおよびＡＺＤ６２４４のインビボ併用試験

【0180】

ＫＲＡＳ^Ｑ６１Ｋ変異を有するＣａｌｕ－６ＮＳＣＬＣ細胞株を異種移植したマウスモデルを用いて、ＭＥＫ１／２の選択的ＡＴＰ非競合的阻害剤であるセルメチニブ（ＡＺＤ６２４４）との併用療法としてのベルバラフェニブのインビボ抗腫瘍活性を調べた。群あたり５匹の動物を、ビヒクル（対照）、ベルバラフェニブ単独で、３、１０もしくは３０ｍｇ／ｋｇの用量を１日に１回、セルメチニブを単独で、５ｍｇ／ｋｇの用量で１日に２回、またはそれらの併用療法（ベルバラフェニブ３もしくは１０ｍｇ／ｋｇを１日に１回＋セルメチニブ５ｍｇ／ｋｇを１日に２回）を、強制経口投与により１７日間処置した。

【0181】

図１０および図１１ならびに表１４に示されるように、ベルバラフェニブの経口投与により、用量依存的な抗腫瘍活性がもたらされ、最大阻害率は、３、１０および３０ｍｇ／ｋｇｑ．ｄ．でそれぞれ、５３．５％（１８日目）、７９．３％（１５日目）および８６．３％（１２日目）であった。また、セルメチニブを５ｍｇ／ｋｇ ｂ．ｉ．ｄ．で投与し、この腫瘍モデルに対して有意な抗腫瘍活性を示し、１８日目に最大阻害率は５９．０％であった。ベルバラフェニブまたはセルメチニブによる処置は、最小の体重減少の有無にかかわらず、忍容性が良好であり、ベルバラフェニブ処置群では、１０ｍｇ／ｋｇ以上の用量で、背部、腹部および顔面領域の発毛の臨床徴候が観察された。ベルバラフェニブおよびセルメチニブの併用療法は、どちらの処置単独でもさらなる毒性は観察されず、抗腫瘍活性の増強がもたらされた。ベルバラフェニブ３または１０ｍｇ／ｋｇ ｑ．ｄ．およびセルメチニブ５ｍｇ／ｋｇ ｂ．ｉ．ｄ．の最大阻害率は、それぞれ７１．８％（１８日目）および８５．５％（１２日目）であった。

【0182】

【表14】

実施例１１

【0183】

（ｉ）ベルバラフェニブおよびコビメチニブの併用療法、ならびに（ｉｉ）ベルバラフェニブ、コビメチニブおよびアテゾリズマブの併用療法は、図１に示され、上記に記載されたプロトコルに従って臨床試験において評価される。

【0184】

本明細書は、本発明を開示するために実施例を使用する。本発明の特許取得の対象となる範囲は、特許請求の範囲によって定義され、当業者に想起される他の実施例を含み得る。そのような他の実施例は、それらが特許請求の範囲の文言と異ならない構造的要素を有する場合、またはそれらが特許請求の範囲の文言と実質的でない差異を有する同等の構造的要素を含む場合、特許請求の範囲内であることが意図される。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9】

【図10】

【図11】

【国際調査報告】