特許 5876498 多能性幹細胞からの巨核球及び／又は血小板の製造方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】5876498

(24)【登録日】2016年1月29日

(45)【発行日】2016年3月2日

(54)【発明の名称】多能性幹細胞からの巨核球及び／又は血小板の製造方法

(51)【国際特許分類】

   C12N 5/0789 20100101AFI20160218BHJP

   C12N 5/0735 20100101ALI20160218BHJP

   C12N 5/10 20060101ALI20160218BHJP

   C12N 5/078 20100101ALI20160218BHJP

   A61K 35/14 20150101ALI20160218BHJP

   A61P 7/04 20060101ALI20160218BHJP

   C07D 333/38 20060101ALN20160218BHJP

   C07D 409/14 20060101ALN20160218BHJP

【ＦＩ】

   C12N5/0789

   C12N5/0735

   C12N5/10

   C12N5/078

   A61K35/14 Z

   A61P7/04

   !C07D333/38

   !C07D409/14

【請求項の数】5

【全頁数】78

(21)【出願番号】特願2013-537539(P2013-537539)

(86)(22)【出願日】2012年10月3日

(86)【国際出願番号】JP2012075705

(87)【国際公開番号】WO2013051625

(87)【国際公開日】20130411

【審査請求日】2015年8月7日

(31)【優先権主張番号】特願2011-219545(P2011-219545)

(32)【優先日】2011年10月3日

(33)【優先権主張国】JP

【早期審査対象出願】

(73)【特許権者】

【識別番号】000003986

【氏名又は名称】日産化学工業株式会社

(73)【特許権者】

【識別番号】504137912

【氏名又は名称】国立大学法人 東京大学

(74)【代理人】

【識別番号】100090918

【弁理士】

【氏名又は名称】泉名 謙治

(74)【代理人】

【識別番号】100082887

【弁理士】

【氏名又は名称】小川 利春

(72)【発明者】

【氏名】西野 泰斗

(72)【発明者】

【氏名】中村 隆典

(72)【発明者】

【氏名】岩本 俊介

(72)【発明者】

【氏名】江藤 浩之

(72)【発明者】

【氏名】中内 啓光

(72)【発明者】

【氏名】辻 嘉代子

【審査官】 山本 匡子

(56)【参考文献】

【文献】 国際公開第２００９／１２２７４７（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 国際公開第２００８／０４１３７０（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 国際公開第２０１０／１４０６８５（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 国際公開第２００６／０６４９５７（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 国際公開第２０１１／０４９２１３（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 特表２００９−５０１１３１（ＪＰ，Ａ）

【文献】 国際公開第２０１１／０３４０７３（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 特表２００７−５０７２０６（ＪＰ，Ａ）

【文献】 Fuhrken PG.et al.，Tumor suppressor protein p53 regulates megakaryocytic polyploidization and apoptosis.，J Biol Chem. ，２００８年 ６月 ６日，283(23)，p.15589-600.

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ｃ１２Ｎ ５／００−０２８

Ａ６１Ｋ ３５／１４

Ａ６１Ｐ ７／０４

ＪＳＴＰｌｕｓ／ＪＭＥＤＰｌｕｓ／ＪＳＴ７５８０（ＪＤｒｅａｍＩＩＩ）

ＷＰＩＤＳ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

（Ｅ）−５−（２−｛１−［５−（４−ブロモフェニル）−４−ヒドロキシチオフェン−３−イル］エチリデン｝ヒドラジンカルボニル）−Ｎ−［４−（２−ヒドロキシエチルカルバモイル）ベンジル］チオフェン−２−カルボキサミド、該化合物の互変異性体、プロドラッグ、それらの医薬的に許容され得る塩又はそれら化合物の溶媒和物の存在下、多能性幹細胞に由来する造血前駆細胞を生体外で培養して巨核球及び／又は血小板に分化させることを特徴とする巨核球及び／又は血小板の製造方法。

【請求項2】

多能性幹細胞が、ＥＳ細胞又はｉＰＳ細胞である、請求項１に記載の製造方法。

【請求項3】

多能性幹細胞に由来する造血前駆細胞が、多能性幹細胞を造血前駆細胞に分化させることにより形成されたネット様構造物から得られた造血前駆細胞である、請求項１又は２に記載の製造方法。

【請求項4】

多能性幹細胞に由来する造血前駆細胞が、癌遺伝子、ポリコーム遺伝子、アポトーシス抑制遺伝子及び癌抑制遺伝子の発現を抑制する遺伝子から選ばれる少なくとも１種の遺伝子を導入し、導入した遺伝子の発現量を調節することにより細胞増殖能及び／又は分化能を高めた造血前駆細胞である、請求項１乃至３のいずれか１項に記載の製造方法。

【請求項5】

多能性幹細胞に由来する造血前駆細胞が、ＭＹＣファミリー遺伝子、Ｂｍｉ１遺伝子、ＢＣＬ２ファミリー遺伝子及びｐ５３遺伝子の発現を抑制する遺伝子から選ばれる少なくとも１種の遺伝子を導入し、導入した遺伝子の発現量を調節することにより細胞増殖能及び／又は分化能を高めた造血前駆細胞である、請求項１乃至４のいずれか１項に記載の製造方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、多能性幹細胞から巨核球及び／又は血小板を製造する方法に関する。さらに詳しくは、血小板の増幅作用を有する化合物の存在下にて、ｉＰＳ細胞（ｉｎｄｕｃｅｄ ｐｌｕｒｉｐｏｔｅｎｔ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ）又はＥＳ細胞（Ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ）から誘導した造血前駆細胞を培養して巨核球及び／又は血小板を効率的に製造する方法に関する。

【背景技術】

【0002】

白血病に代表される血液関連疾患の治療に対し、治療に必要な量の血球細胞を安定に増幅し、供給することは極めて重要なことである。血球細胞のなかでも血小板は血栓の形成や止血に必須の細胞であるため、白血病、骨髄移植、血小板減少症、抗癌治療などにおいて、血小板の需要は極めて高い。これまでに、血小板は、ドナーからの献血により採取する方法を用いて供給されてきた。しかし、ドナーからの献血により採取する方法では、ウイルスの感染リスク、慢性的なドナー不足、採取した血小板を長期に保存することができないことなどから、安定的に患者に血小板を供給することが困難な場合がある。また、ドナーからの献血により採取する方法以外に、Ｔｈｒｏｍｂｏｐｏｉｅｔｉｎ（ＴＰＯ）を患者に投与する方法、臍帯血又は骨髄細胞から巨核球を分化させる方法などが試みられたが、ＴＰＯを患者に投与する方法は、ＴＰＯの投与後ＴＰＯに対する無力化抗体が産生されてしまうため、この方法は、実用化には至っていない。近年、造血幹細胞及び造血前駆細胞を体外で培養することで血小板を産生・取得し、これを生体内に戻す輸血代替療法、すなわち生体外血小板産生技術が検討されている。当該技術の進展により血小板を生体外で大量生産できれば、現在の献血システムは不要となり、血小板製剤不足やウィルスリスクの問題がほぼ解決されることが期待されている。造血幹細胞及び造血前駆細胞の採取源としては、骨髄、臍帯血、末梢血などが知られているが、これらの採取源からは巨核球や血小板を作り出す造血幹細胞及び造血前駆細胞を極めて少数しか得ることができないため、大量かつ安定的に血小板を生産し、提供することは困難である。

【0003】

近年、血小板を生体外で調製する方法として、ＥＳ細胞（Ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ）から誘導した造血幹細胞及び造血前駆細胞を効率的に巨核球及び血小板へ分化させる方法が報告されている。Ｅｔｏらは、マウスＥＳ細胞をＯＰ９ストローマ細胞と共培養することで巨核球へ分化誘導することを明らかにした（非特許文献１）。Ｆｕｊｉｍｏｔｏらは、Ｅｔｏらと同様の方法を用いて血小板の誘導を確認したとの報告を行っている（非特許文献２）。また、サルのＥＳ細胞から巨核球の分化誘導に成功したとの報告（非特許文献３）、ヒトのＥＳ細胞から血小板の分化誘導に成功したとの報告（非特許文献４）もある。しかし、ＥＳ細胞からの血小板の取得方法が、臨床的上利用し得る程度に確立した場合であっても、ＥＳ細胞から誘導した血小板を輸血により患者に適用する場合（特に初回輸血では問題視されないが、同一患者が、頻回に輸血を受けるような場合には）、ヒト白血球型抗原（ＨＬＡ）の適合性の問題は依然として残ることになる。

【0004】

ｉＰＳ細胞（ｉｎｄｕｃｅｄ ｐｌｕｒｉｐｏｔｅｎｔ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ）は、人工多能性幹細胞若しくは誘導多能性幹細胞とも称され、線維芽細胞などの体細胞へ数種類の転写因子遺伝子を導入することにより、ＥＳ細胞と同等の分化多能性を獲得した細胞である。マウスのｉＰＳ細胞は、Ｙａｍａｎａｋａらによって、分化万能性の維持に重要なＮａｎｏｇ遺伝子の発現を指標にし、マウス線維芽細胞へＯｃｔ３／４、Ｓｏｘ２、Ｋｌｆ４、ｃ−Ｍｙｃの４つの遺伝子を導入することにより、初めて樹立された（非特許文献５）。その後も同様の方法によるマウスｉＰＳ細胞の樹立が報告されている（非特許文献６、非特許文献７）。さらに、ｉＰＳ細胞の癌化の問題を克服するために、ｃ−Ｍｙｃ遺伝子以外の３つの遺伝子（Ｏｃｔ３／４、Ｓｏｘ２、Ｋｌｆ４）のみでも、ｉＰＳ細胞の樹立が可能であることが報告された（非特許文献８）。一方、ヒトのｉＰＳ細胞に関しては、Ｔｈｏｍｓｏｎらが、ヒトの線維芽細胞にＯＣＴ３／４、ＳＯＸ２、ＮＡＮＯＧ、ＬＩＮ２８を導入してヒトｉＰＳ細胞を樹立した（非特許文献９）。また、Ｙａｍａｎａｋａらは、ＯＣＴ３／４、ＳＯＸ２、ＫＬＦ４、ｃ−ＭＹＣをヒトの線維芽細胞に導入して、同じくヒトｉＰＳ細胞を樹立した（非特許文献１０）。ｉＰＳ細胞は、血小板を生体外で調製する方法において、骨髄、臍帯血を用いる際の造血幹細胞及び造血前駆細胞の量的な不足問題、またＥＳ細胞を用いる際の倫理的問題や拒絶反応の問題を解決するものとして期待されている。このような観点に基づいた検討例としては、ヒトのｉＰＳ細胞から血小板の分化誘導に成功したとの報告がなされている（特許文献１）。本報告において巨核球及び血小板を分化誘導する際、ＴＰＯなどの蛋白質の添加が有効であることが示されている。

【0005】

また近年、有機化学的手法により合成される低分子化合物が、血小板減少症の治療薬として有効であるという報告（特許文献２及び３）や、生体外における造血幹細胞の増幅に有効であるという報告（特許文献４，５，６，７及び８）がなされている。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0006】

【特許文献1】国際公開第２００９／１２２７４７号

【特許文献2】国際公開第２００４／１０８６８３号

【特許文献3】国際公開第２００７／０１０９５４号

【特許文献4】国際公開第２００９／０７２６２４号

【特許文献5】国際公開第２００９／０７２６２５号

【特許文献6】国際公開第２００９／０７２６２６号

【特許文献7】国際公開第２００９／０７２６３５号

【特許文献8】国際公開第２０１０／１４０６８５号

【非特許文献】

【0007】

【非特許文献1】Ｅｔｏら，Ｐｒｏｃ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ２００２，９９：１２８１９−１２８２４．

【非特許文献2】Ｆｕｊｉｍｏｔｏら，Ｂｌｏｏｄ ２００３，１０２：４０４４−４０５１．

【非特許文献3】Ｈｉｒｏｙａｍａら，Ｅｘｐ．Ｈｅｍａｔｏｌ． ２００６，３４：７６０−７６９．

【非特許文献4】Ｔａｋａｙａｍａら，Ｂｌｏｏｄ ２００８，１１１：５２９８−５３０６．

【非特許文献5】Ｏｋｉｔａら，Ｎａｔｕｒｅ ２００７，４４８：３１３−３１７．

【非特許文献6】Ｗｅｒｎｉｇら，Ｎａｔｕｒｅ ２００７，４４８：３１８−３２４．

【非特許文献7】Ｍａｈｅｒａｌｉら，Ｃｅｌｌ Ｓｔｅｍ Ｃｅｌｌ ２００７，１：５５−７０．

【非特許文献8】Ｎａｋａｇａｗａら，Ｎａｔ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ ２００８，２６：１０１−１０６．

【非特許文献9】Ｙｕら，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２００７，３１８：１９１７−１９２０．

【非特許文献10】Ｔａｋａｈａｓｈｉら，Ｃｅｌｌ ２００７，１３１：８６１−８７２．

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0008】

本発明の課題は、多能性幹細胞から巨核球及び血小板を取得する方法を確立することであり、さらには、巨核球及び血小板の取得効率を安定化し得る方法を確立することである。

【課題を解決するための手段】

【0009】

本発明者らは、上記課題を解決するために鋭意研究を重ね、多能性幹細胞から巨核球及び血小板を誘導する活性をもつ化合物について探索を行ったところ、（Ｅ）−５−（２−｛１−［５−（４−ブロモフェニル）−４−ヒドロキシチオフェン−３−イル］エチリデン｝ヒドラジンカルボニル）−Ｎ−［４−（２−ヒドロキシエチルカルバモイル）ベンジル］チオフェン−２−カルボキサミドがＴＰＯの非存在下においても優れた巨核球及び血小板の誘導活性を有し、当該化合物の使用により巨核球及び／又は血小板を生体外において安定的かつ効率よく製造できることを見出し、本発明を完成した。

【0010】

すなわち、本発明は、下記〔１〕乃至〔５〕記載の製造方法に関するものである。

【0011】

〔１〕
（Ｅ）−５−（２−｛１−［５−（４−ブロモフェニル）−４−ヒドロキシチオフェン−３−イル］エチリデン｝ヒドラジンカルボニル）−Ｎ−［４−（２−ヒドロキシエチルカルバモイル）ベンジル］チオフェン−２−カルボキサミド、該化合物の互変異性体、プロドラッグ、それらの医薬的に許容され得る塩又はそれら化合物の溶媒和物の存在下、多能性幹細胞に由来する造血前駆細胞を生体外で培養して巨核球及び／又は血小板に分化させることを特徴とする巨核球及び／又は血小板の製造方法。

【0012】

〔２〕
多能性幹細胞が、ＥＳ細胞又はｉＰＳ細胞である、上記〔１〕に記載の製造方法。
〔３〕
多能性幹細胞に由来する造血前駆細胞が、多能性幹細胞を造血前駆細胞に分化させることにより形成されたネット様構造物から得られた造血前駆細胞である、上記〔１〕又は〔２〕に記載の製造方法。
〔４〕
多能性幹細胞に由来する造血前駆細胞が、癌遺伝子、ポリコーム遺伝子、アポトーシス抑制遺伝子及び癌抑制遺伝子の発現を抑制する遺伝子から選ばれる少なくとも１種の遺伝子を導入し、導入した遺伝子の発現量を調節することにより細胞増殖能及び／又は分化能を高めた造血前駆細胞である、上記〔１〕乃至〔３〕のいずれかに記載の製造方法。
〔５〕
多能性幹細胞に由来する造血前駆細胞が、ＭＹＣファミリー遺伝子、Ｂｍｉ１遺伝子、ＢＣＬ２ファミリー遺伝子及びｐ５３遺伝子の発現を抑制する遺伝子から選ばれる少なくとも１種の遺伝子を導入し、導入した遺伝子の発現量を調節することにより細胞増殖能及び／又は分化能を高めた造血前駆細胞である、上記〔１〕乃至〔４〕のいずれかに記載の製造方法。

【発明の効果】

【0013】

本発明は、前記（Ｅ）−５−（２−｛１−［５−（４−ブロモフェニル）−４−ヒドロキシチオフェン−３−イル］エチリデン｝ヒドラジンカルボニル）−Ｎ−［４−（２−ヒドロキシエチルカルバモイル）ベンジル］チオフェン−２−カルボキサミド、該化合物の互変異性体、プロドラッグ、それらの医薬的に許容され得る塩又はそれら化合物の溶媒和物（以下、これらを総称して特定化合物ともいう。）の使用により、多能性幹細胞（特に、ヒトｉＰＳ細胞又はヒトＥＳ細胞）由来の造血前駆細胞から巨核球及び血小板を誘導することができる。多能性幹細胞由来の造血前駆細胞を培養して巨核球及び血小板を誘導する際に前記特定化合物を使用することで、ＴＰＯなどの蛋白質を使用した場合よりも、安定的かつ効率的に巨核球及び血小板を誘導することが可能となる。すなわち、本発明の方法を用いると、血小板を有効成分とする血液製剤の安定的な供給を実現することができる。

【0014】

前記特定化合物は、通常の有機合成プロセスにより製造できる低分子化合物である。このため、製造時に微生物などの細胞が生存しえない条件で行うことが容易である。それ故に、遺伝子組み換え技術により製造されるサイトカインや増殖因子などの蛋白質を用いる従来の血小板の調製法に比較して、前記特定化合物を用いる方法は未知の病原菌及びヒト以外の動物の生体物質の混入を防ぐことが容易となる。すなわち、本発明の方法により製造された血小板は、感染や外来遺伝子の混入、外来蛋白質による免疫反応を避けることができる。また、サイトカインや増殖因子は蛋白質であるため保存時や使用時でのｐＨや熱、イオン強度に対する最適域が狭いが、特定化合物は比較的広い条件で使用及び保存することが可能となる。さらに、特定化合物は、蛋白質に比べてより廉価かつ継続的に製造することが可能であり、最終的な治療コストを下げることができる。

【図面の簡単な説明】

【0015】

【図1】特定化合物（Ｎｏ．２）等を添加した条件でｉＰＳ細胞由来の造血前駆細胞を培養したところ、巨核球（ＣＤ４１ａ陽性ＣＤ４２ｂ陽性細胞）がＴＰＯ添加条件に比べて顕著に増幅されたことを示すグラフ。なお、グラフの縦軸は無添加時の巨核球（ＣＤ４１ａ陽性ＣＤ４２ｂ陽性細胞）数を１としたときの倍率を表す。

【図2】特定化合物（Ｎｏ．２）以外の実施例で使用した化合物を添加した条件でｉＰＳ細胞由来の造血前駆細胞を培養したところ、巨核球（ＣＤ４１ａ陽性ＣＤ４２ｂ陽性細胞）がＴＰＯ添加条件に比べて顕著に増幅されたことを示すグラフ。なお、グラフの縦軸はＴＰＯ添加時の巨核球（ＣＤ４１ａ陽性ＣＤ４２ｂ陽性細胞）数を１としたときの倍率を表す。

【図3】特定化合物（Ｎｏ．２）等を添加した条件でｉＰＳ細胞由来の造血前駆細胞を培養したところ、血小板（ＣＤ４１ａ陽性ＣＤ４２ｂ陽性細胞）がＴＰＯ添加条件に比べて顕著に増幅されたことを示すグラフ。なお、グラフの縦軸は無添加時の血小板（ＣＤ４１ａ陽性ＣＤ４２ｂ陽性細胞）数を１としたときの倍率を表す。

【図4】特定化合物（Ｎｏ．２）以外の実施例で使用した化合物を添加した条件でｉＰＳ細胞由来の造血前駆細胞を培養したところ、血小板（ＣＤ４１ａ陽性ＣＤ４２ｂ陽性細胞）がＴＰＯ添加条件に比べて顕著に増幅されたことを示すグラフ。なお、グラフの縦軸はＴＰＯ添加時の血小板（ＣＤ４１ａ陽性ＣＤ４２ｂ陽性細胞）数を１としたときの倍率を表す。

【図5】特定化合物（Ｎｏ．２）等を添加した条件でｉＰＳ細胞から調整された血小板（ＣＤ４１ａ陽性ＣＤ４２ｂ陽性細胞）がＡＤＰによりインテグリンの活性化（ＰＡＣ−１結合血小板の増加）を受けたことを示すグラフ。なお、グラフの縦軸は抹消血由来の血小板のＰＡＣ−１結合量を１としたときの倍率を表す。

【図6】特定化合物（Ｎｏ．２）以外の実施例で使用した化合物を添加した条件でＥＳ細胞由来の造血前駆細胞を培養したところ、血小板（ＣＤ４１ａ陽性ＣＤ４２ｂ陽性細胞）がＴＰＯ添加条件に比べて顕著に増幅されたことを示すグラフ。なお、グラフの縦軸は無添加時の血小板（ＣＤ４１ａ陽性ＣＤ４２ｂ陽性細胞）数を１としたときの倍率を表す。

【図7】特定化合物（Ｎｏ．２）等を添加した条件で、遺伝子操作を施すことにより細胞増殖能及び分化能を高めた造血前駆細胞を培養したところ、血小板（ＣＤ４１ａ陽性ＣＤ４２ｂ陽性細胞）がＴＰＯ添加条件に比べて顕著に増幅されたことを示すグラフ。なお、グラフの縦軸はＴＰＯ添加時の血小板（ＣＤ４１ａ陽性ＣＤ４２ｂ陽性細胞）数を１としたときの倍率を表す。

【発明を実施するための形態】

【0016】

以下、更に詳細に本発明を説明する。
本明細書において用いる用語につき、以下の通り定義する。
多能性幹細胞とは、内胚葉（例えば、内部胃壁、消化管、肺）、中胚葉（例えば、筋肉、骨、血液、泌尿生殖器）または外胚葉（例えば、表皮組織または神経系）系の細胞など、生体を構成する多種類の細胞に分化できる分化多能性（ｐｌｕｒｉｐｏｔｅｎｃｙ）と、分裂増殖を経ても分化多能性を維持できる自己複製能を併せ持つ細胞である。その例としては、ＥＳ細胞、ｉＰＳ細胞、胚性生殖幹細胞（ＥＧ細胞）、Ｍｕｓｅ細胞などが挙げられる。ＥＳ細胞とは、動物の発生初期段階である胚盤胞期の胚に由来する多能性幹細胞をいう。ｉＰＳ細胞とは、人工多能性幹細胞若しくは誘導多能性幹細胞とも称され、線維芽細胞などの体細胞へ数種類の転写因子遺伝子を導入することにより、ＥＳ細胞と同等の分化多能性と自己複製能を獲得した細胞である。ＥＧ細胞とは、精原細胞に由来する多能性幹細胞である（参考文献：Ｎａｔｕｒｅ．２００８，４５６，３４４−４９）。Ｍｕｓｅ細胞とは、間葉系細胞から分離される多能性幹細胞である（参考文献：Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ Ｕ Ｓ Ａ. ２０１０、１０７、８６３９−４３）。
造血幹細胞とは、血球の全ての血液細胞分化系列に分化し得る分化多能性を有する細胞であり、かつ、その分化多能性を維持したまま自己複製することが可能な細胞である。多能性造血前駆細胞とは、全てではないが複数の血液細胞分化系列に分化できる細胞である。単能性造血前駆細胞とは、単一の血液細胞分化系列に分化できる細胞である。
造血前駆細胞とは、多能性造血前駆細胞と単能性造血前駆細胞の両者を含む細胞群である。例えば本発明における造血前駆細胞には、顆粒球・マクロファージコロニー形成細胞（ＣＦＵ−ＧＭ）、好酸球コロニー形成細胞（ＥＯ−ＣＦＣ）、赤芽球系前駆細胞である赤芽球バースト形成細胞（ＢＦＵ−Ｅ）、巨核球コロニー形成細胞（ＣＦＵ−ＭＥＧ）、巨核球前駆細胞、巨核芽球、前巨核球、巨核球・赤血球系前駆細胞（ＭＥＰ細胞）及び骨髄系幹細胞（混合コロニー形成細胞、ＣＦＵ−ＧＥＭＭ）などが含まれる。この内、巨核球コロニー形成細胞（ＣＦＵ−ＭＥＧ）、巨核球前駆細胞、巨核芽球、前巨核球、巨核球・赤血球系前駆細胞（ＭＥＰ細胞）及び骨髄系前駆細胞（混合コロニー形成細胞、ＣＦＵ−ＧＥＭＭ）は、巨核球及び血小板に分化する造血前駆細胞である。
巨核球とは、骨髄系前駆細胞、ＭＥＰ細胞、巨核球前駆細胞、巨核芽球、前巨核球を経由して、多核化及び分離膜形成や顆粒形成などの細胞質成熟により大型化した分化細胞であり、胞体突起形成の過程を経て血小板を産生する能力を有する細胞である。
血小板とは、巨核球から産生される無核の細胞であり、血液凝固に重要な役割を果たす細胞である。

【0017】

ＣＤ４１ａ陽性とは、ＣＤ（ｃｌｕｓｔｅｒ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ）４１ａ抗原を細胞表面上に発現していることを意味する。同様に、ＣＤ４２ｂ陽性とは４２ｂ抗原を細胞表面上に発現していることを意味する。これらの抗原は巨核球及び血小板のマーカーである。ＣＤ４１ａ陽性ＣＤ４２ｂ陽性細胞は巨核球及び血小板を豊富に含む細胞集団である。

【0018】

本発明において造血前駆細胞の分化とは、造血前駆細胞が特有の機能を有する分化した細胞、すなわち赤血球、白血球、巨核球、血小板などの成熟血球細胞に変換していくことをいう。

【0019】

本発明で用いる特定化合物は、多能性幹細胞に由来する造血前駆細胞に作用し、生体外で当該造血前駆細胞と共に培養したときに、その巨核球及び血小板への誘導を促進する活性を示すものである。造血前駆細胞から巨核球及び血小板を効率よく製造できない場合でも、当該化合物を利用することで多能性幹細胞から調製した造血前駆細胞を生体外で培養し、巨核球及び血小板を効率よく製造することが可能である。具体的には、当該化合物を含む培地で造血前駆細胞を培養することで、巨核球及び血小板を製造することが可能である。その際に、培地中に種々のサイトカインや増殖因子を更に添加したり、フィーダー細胞と共培養したり、造血前駆細胞に作用するその他の低分子化合物を更に添加したりすることによって巨核球及び血小板をより効率的に製造することも可能である。

【0020】

本発明で用いる多能性幹細胞は、分化多能性（ｐｌｕｒｉｐｏｔｅｎｃｙ）と自己複製能を併せ持ち、血小板に分化できる多能性幹細胞であれば何でもよい。多能性幹細胞の好ましい例としては、ＥＳ細胞、ｉＰＳ細胞、胚性生殖幹細胞（ＥＧ細胞）、Ｍｕｓｅ細胞などが挙げられ、より好ましくはＥＳ細胞及びｉＰＳ細胞が挙げられる。ここで、ｉＰＳ細胞を樹立する際、分化多能性の獲得に必要な転写因子遺伝子としては、例えば、Ｎａｎｏｇ、Ｏｃｔ３／４、Ｓｏｘ２、Ｋｌｆ４、ｃ−Ｍｙｃ、Ｌｉｎ２８などが知られている。これらの遺伝子のうち、例えば、Ｏｃｔ３／４、Ｓｏｘ２、Ｋｌｆ４、ｃ−Ｍｙｃの組合せ、Ｏｃｔ３／４、Ｓｏｘ２、Ｎａｎｏｇ、Ｌｉｎ２８の組合せ、Ｏｃｔ３／４、Ｓｏｘ２、Ｋｌｆ４の組合せで、選択した遺伝子を線維芽細胞などの体細胞に導入することにより、ｉＰＳ細胞の樹立が可能となる。本発明で使用するｉＰＳ細胞は、その樹立の手法は問わず、上記の遺伝子を導入する手法で樹立された細胞以外にも、上記と異なる遺伝子の導入による樹立方法、タンパク質や低分子化合物などを用いた樹立方法によるｉＰＳ細胞であってもよい。

【0021】

多能性幹細胞の培養及び継代には、多能性幹細胞を維持するために用いられる通常の培地を用いることができる。例えば、イスコフ改変ダルベッコ培地（ＩＭＤＭ）、ダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ）、ハムＦ−１２培地、Ｘ−ＶＩＶＯ １０（ロンザ社製）、Ｘ−ＶＩＶＯ １５（ロンザ社製）、ｍＴｅＳＲ（ステムセルテクノロジー社製）、ＴｅＳＲ２（ステムセルテクノロジー社製）、ＳｔｅｍＰｒｏｈＥＳＣ ＳＦＭ（インヴィトロジェン社製）などが挙げられる。培養の際、培地に塩基性線維芽細胞成長因子（ｂＦＧＦ)、インシュリン、形質転換増殖因子−β(ＴＧＦ−β)などの蛋白質、血清、ＫｎｏｃｋＯｕｔ ＳＲ（インヴィトロジェン社製）、グルタミンなどのアミノ酸、２−メルカプトエタノールなどを添加してもよく、培養容器をラミニン−１乃至１２、コラーゲン、フィブロネクチン、ヴィトロネクチン、マトリゲル（ベクトンディッキンソン社製）、Ｇｅｌｔｒｅｘ（インヴィトロジェン社製）などの細胞外マトリックスでコーティングしてもよい。また、多能性幹細胞は、フィーダー細胞と共培養することもできる。フィーダー細胞としては、多能性幹細胞の増殖、維持に寄与する細胞であればいずれも使用可能であり、例えば、Ｃ３Ｈ１０Ｔ１／２細胞株、ＯＰ９細胞、ＮＩＨ３Ｔ３細胞、ＳＴ２細胞、ＰＡ６細胞、好ましくは、マウス胚線維芽細胞（ＭＥＦ細胞）、ＳＬ１０細胞などを用いることができる。フィーダー細胞を用いるときには、例えば、マイトマイシンＣ処理或いは放射線照射などにより、細胞の増殖を抑止しておくのがよい。

【0022】

多能性幹細胞を培養する際の温度は、通常２５乃至３９℃、好ましくは３３乃至３９℃である。ＣＯ_２濃度は、通常、培養の雰囲気中、４乃至１０体積％であり、４乃至６体積％が好ましい。

【0023】

本発明の方法における造血前駆細胞の採取源としては、例えば、ｉＰＳ細胞又はＥＳ細胞を造血系細胞の分化誘導に適した条件で培養して得られる胚様体（Ｅｍｂｒｙｏｉｄ ｂｏｄｙ）、又はネット様構造物などが挙げられ、より好ましくはネット様構造物が挙げられる。ここで「胚様体」とは、ｉＰＳ細胞又はＥＳ細胞の未分化性を維持する因子やフィーダー細胞を除去し、ｉＰＳ細胞又はＥＳ細胞を浮遊培養することで得られる嚢胞性の構造を有する細胞塊である(参考文献：Ｂｌｏｏｄ、２００３，１０２，９０６−９１５)。また、「ネット様構造物」とは、ｉＰＳ細胞又はＥＳ細胞由来の立体的な嚢状（内部に空間を伴うもの）構造体で、内皮細胞集団などで形成され、内部に血液前駆細胞を含むもののことである。ネット様構造物の詳細については、例えば、ＴＡＫＡＹＡＭＡら，ＢＬＯＯＤ ２００８，１１１：５２９８−５３０６、を参照のこと。

【0024】

ｉＰＳ細胞又はＥＳ細胞からネット様構造物（以下、ｉＰＳ−Ｓａｃ又はＥＳ−Ｓａｃとも記載する。）を調製する際、その調製に適した培養条件を選択することができる。この培養条件は、用いるｉＰＳ細胞又はＥＳ細胞の生物種によって異なる。一例を挙げるならば、ヒト由来のｉＰＳ細胞又はＥＳ細胞の場合、培地としては、最終濃度１５％の牛胎児血清（ＦＢＳ）を添加したＩＭＤＭを用い、その他、適宜インシュリン、トランスフェリン、ラクトフェリン、コレステロール、エタノールアミン、亜セレン酸ナトリウム、α−モノチオグリセロール、２−メルカプトエタノール、ウシ血清アルブミン、ピルビン酸ナトリウム、アスコルビン酸、ポリエチレングリコール、各種ビタミン、各種アミノ酸、各種抗生物質などのサプリメントを加えたものを使用することができる。さらに、ヒト由来のｉＰＳ細胞又はＥＳ細胞からネット様構造物を効率的に形成させる因子としては、例えば、血管内皮細胞増殖因子（ＶＥＧＦ）、胎盤成長因子（ＰＩＧＦ）が挙げられ、より好ましくはＶＥＧＦが挙げられる。ＶＥＧＦは、１０ｎｇ／ｍＬ乃至１００ｎｇ／ｍＬ程度、より好ましくは、２０ｎｇ／ｍＬ程度加えるのがよい。また、培養の環境としては、用いるヒトｉＰＳ細胞又はＥＳ細胞によって異なるが、例えば、５％ＣＯ_２、３６乃至３８℃、好ましくは３７℃の条件を用いることができる。更に、ヒトｉＰＳ細胞又はＥＳ細胞をフィーダー細胞と共培養することによりネット様構造物をより効率的に調製することができる。フィーダー細胞としては、多能性幹細胞から造血前駆細胞への分化誘導に寄与する細胞であればいずれも使用可能であり、例えば、マウス胚線維芽細胞（ＭＥＦ細胞）、ＳＬ１０細胞、好ましくは、Ｃ３Ｈ１０Ｔ１／２細胞株、ＯＰ９細胞、ＳＴ２細胞、ＮＩＨ３Ｔ３細胞、ＰＡ６細胞、Ｍ１５細胞など、より好ましくはＣ３Ｈ１０Ｔ１／２細胞株、ＯＰ９細胞を用いることができる。フィーダー細胞を用いるときには、例えば、マイトマイシンＣ処理或いは放射線照射などにより、細胞の増殖を抑止しておくのがよい。ネット様構造物が形成されるまでの培養期間は、用いるヒトｉＰＳ細胞又はＥＳ細胞によって異なるが、例えば、フィーダー細胞上に播いてから、１４乃至１７日後くらいにその存在を確認することができる。

【0025】

形成されたネット様構造物は、濾胞状構造になっており、中胚葉細胞のマーカーの一つであるＦｌｋ１（ｆｅｔａｌ ｌｉｖｅｒ ｋｉｎａｓｅ １）、ＣＤ３１、ＣＤ３４、又はＵＥＡ−Ｉレクチン（Ｕｌｅｘ ｅｕｒｏｐａｅｕｓ．ａｇｇｌｕｔｉｎｉｎ−１）陽性細胞によって隔壁が構成されている。このネット様構造物の内部には、造血前駆細胞が濃縮された状態で存在している。ネット様構造物の内部に存在する造血前駆細胞から各種血球細胞を分化誘導する場合には、隔壁を構成している細胞などから造血前駆細胞を分離する必要がある。この分離は、物理的な手段により行うことができる。例えば、ネット様構造物をピペットやスポイトなどを用いて破壊した後、滅菌済みの篩状器具（例えば、セルストレイナーなど）に通すことにより、隔壁細胞と造血前駆細胞を分離することができる。

【0026】

本発明では、上記ネット様構造物などから分離した造血前駆細胞を巨核球及び／又は血小板に分化させる。造血前駆細胞から血小板に分化させるとは、造血前駆細胞を巨核球に分化させ、その巨核球に血小板を産生させることを意味する。具体的には、多能性幹細胞より得られた造血前駆細胞を巨核球及び／又は血小板への分化誘導に適した条件で培養を行う。造血前駆細胞から巨核球及び／又は血小板に分化させる際には、血球細胞を培養するために用いられる通常の培地を用いることができる。例えば、イスコフ改変ダルベッコ培地（ＩＭＤＭ）、ダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ）、Ｆ−１２培地、Ｘ−ＶＩＶＯ １０（ロンザ社製）、Ｘ−ＶＩＶＯ １５（ロンザ社製）、マッコイ５Ａ培地、イーグルＭＥＭ培地、αＭＥＭ培地、ＲＰＭＩ１６４０培地、ＳｔｅｍＰｒｏ３４（インビトロジェン社製）、ＳｔｅｍＳｐａｎ Ｈ３０００（ステムセルテクノロジー社製）、ＳｔｅｍＳｐａｎＳＦＥＭ（ステムセルテクノロジー社製）、ＳｔｅｍｌｉｎｅＩＩ（シグマアルドリッチ社製）又はＱＢＳＦ−６０（クオリティバイオロジカル社製）などが挙げられる。また、培地に添加される成分としては、ウシ胎児血清、ヒト血清、ウマ血清、インシュリン、トランスフェリン、ラクトフェリン、コレステロール、エタノールアミン、亜セレン酸ナトリウム、α―モノチオグリセロール、２−メルカプトエタノール、ウシ血清アルブミン、ピルビン酸ナトリウム、アスコルビン酸、ポリエチレングリコール、各種ビタミン、各種アミノ酸、各種抗生物質、寒天、アガロース、コラーゲン、メチルセルロースなどが挙げられる。

【0027】

ここで「特定化合物の存在下で培養する」とは、本発明における特定化合物を含む培地で培養することを意味する。例えば、本発明における特定化合物のみ、又は該特定化合物と他の分化誘導因子などとが共存した培地での培養を挙げることができる。他の分化誘導因子としては、インターロイキン−１α（ＩＬ−１α）、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−９、ＩＬ−１１、エリスロポイエチン（ＥＰＯ）、顆粒球−マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）、幹細胞因子（ＳＣＦ）、顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）、ｆｌｋ２／ｆｌｔ３リガンド（ＦＬ）、Ｈｅｐａｒｉｎなどのいずれか又はこれらのうちの２つ以上の組合せを挙げることができる。例えば、本発明における特定化合物（１ｎｇ／ｍＬ乃至１０００ｎｇ／ｍＬ、好ましくは１０ｎｇ／ｍＬ乃至２００ｎｇ／ｍＬ、更に好ましくは２０ｎｇ／ｍＬ乃至１００ｎｇ／ｍＬ）存在下で、７乃至１５日間程度培養することにより巨核球及び血小板を分化誘導できる。この際、ＳＣＦ（１０乃至２００ｎｇ／ｍＬ、好ましくは５０ｎｇ／ｍＬ程度）及びＨｅｐａｒｉｎ（１０乃至１００Ｕ／ｍＬ、好ましくは２５Ｕ／ｍＬ程度)を同時に添加してもよい。ここで、本発明における特定化合物を培地に添加する場合には、培地に直接添加するか、もしくは適切な溶媒にて特定化合物を用時溶解した後、特定化合物を培地中に添加しても良い。適切な溶媒の例としては、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、各種アルコールなどが挙げられるが、これらに限られるわけではない。また、特定化合物を培養の際の基板や担体表面上に固定化して使用することもできる。
特定化合物は、提供時あるいは保存時に任意の形状であり得る。特定化合物は、錠剤、丸剤、カプセル剤、顆粒剤のような製剤化された固体、適切な溶媒並びに溶解剤にて溶解した溶液あるいは懸濁液のような液体、又は基板や単体に結合させた状態であり得る。製剤化される際の添加物としては、ｐ−ヒドロキシ安息香酸エステル類等の防腐剤；乳糖、ブドウ糖、ショ糖、マンニット等の賦形剤；ステアリン酸マグネシウム、タルク等の滑沢剤；ポリビニールアルコール、ヒドロキシプロピルセルロース、ゼラチン等の結合剤；脂肪酸エステル等の界面活性剤；グリセリン等の可塑剤等が挙げられる。これらの添加物は上記のものに限定されることはなく、当業者が利用可能であれば自由に選択することができる。

【0028】

さらに、造血前駆細胞から血小板の分化に有効とされている化学物質を一種類以上組み合わせて培地中に添加することができる（参考文献：Ｓｃｈｗｅｉｎｆｕｒｔｈら，Ｐｌａｔｅｌｅｔｓ，２１：６４８−６５７ ２０１０、Ｌｏｒｄｉｅｒら，Ｂｌｏｏｄ，１１２：３１６４−３１７４ ２００９）。その様な例としては、オールトランスレチノイン酸に代表されるレチノイン酸受容体リガンド、バルプロ酸、トリコスタチンＡ、ＳＡＨＡ（スベロイルアニリドヒドロキサム酸）、ＡＰＨＡ（アロイルピロリルヒドロキシアミド）に代表されるヒストン脱アセチル化酵素阻害剤、（Ｒ）−（＋）−トランス−Ｎ−（４−ピリジル）−４−（１−アミノエチル）−シクロヘキサンカルボキサミド・２ＨＣｌ・Ｈ２Ｏ（Ｙ２７６３２）に代表されるＲＯＣＫ（Ｒｈｏ−ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｃｏｉｌｅｄ−ｃｏｉｌ ｆｏｒｍｉｎｇ ｋｉｎａｓｅ／Ｒｈｏ結合キナーゼ）阻害剤、ブレビスタチンに代表されるミオシン重鎖ＩＩＡＴＰａｓｅ阻害剤、ＭＬ７に代表されるミオシン軽鎖キナーゼ阻害剤、プロスタグランジンＥ２などが挙げられるが、これらに限られるわけではない。これらの化学物質等で細胞を処理する場合の至適濃度などは、当業者であれば、予備的な実験によって予め決定することができる。また、処理する期間や方法なども、当業者において適宜選択することができる。例えば、ミオシン重鎖ＩＩＡＴＰａｓｅ阻害剤であるブレビスタチン処理の場合、０．３〜１５μｇ／ｍＬ、あるいは、１〜１０μｇ／ｍＬ程度を培養液中に添加し、培養期間としては、例えば、３〜１０日間程度、特に、４〜７日間程度が好ましい。また、ＲＯＣＫ阻害剤であるＹ−２７６３２は、５〜１５μＭ、あるいは、８〜１２μＭ、好ましくは１０μＭ程度で使用し、ＨＤＡＣ阻害剤であるバルプロ酸は、０．１〜１ｍＭ、あるいは、０．２〜０．７ｍＭ、好ましくは０．５ｍＭ程度で使用することができる。Ｙ−２７６３２、バルプロ酸の処理時間としては、３〜２１日間、好ましくは７〜１４日間程度である。

【0029】

造血前駆細胞を培養する際の温度は、通常２５乃至３９℃、好ましくは３３乃至３９℃である。ＣＯ_２濃度は、通常、培養の雰囲気中、４乃至１０体積％であり、４乃至６体積％が好ましい。また、造血前駆細胞をフィーダー細胞と共培養することにより巨核球及び血小板を誘導することができる。フィーダー細胞としては、造血前駆細胞から巨核球又は血小板への分化誘導に寄与する細胞であればいずれも使用可能であり、例えば、マウス胚線維芽細胞（ＭＥＦ細胞）、ＳＬ１０細胞、好ましくは、Ｃ３Ｈ１０Ｔ１／２細胞株、ＯＰ９細胞、ＳＴ２細胞、ＮＩＨ３Ｔ３細胞、ＰＡ６細胞、Ｍ１５細胞など、より好ましくはＣ３Ｈ１０Ｔ１／２細胞株、ＯＰ９細胞を用いることができる。フィーダー細胞を用いるときには、例えば、マイトマイシンＣ処理或いは放射線照射などにより、細胞の増殖を抑止しておくのがよい。

【0030】

造血前駆細胞を培養する際には、動物細胞の培養に一般的に用いられるシャーレ、フラスコ、プラスチックバック、テフロン（登録商標）バックなどを用いて培養することが可能である。これらの培養器材に対しては、予め細胞外マトリックスや細胞接着分子などをコーティングしてもよい。このようなコーティング材料としては、コラーゲンＩ乃至ＸＩＸ、フィブロネクチン、ヴィトロネクチン、ラミニン−１乃至１２、ニトジェン、テネイシン，トロンボスポンジン，フォンビルブランド（ｖｏｎ Ｗｉｌｌｅｂｒａｎｄ）因子、オステオポンチン、フィブリノーゲン、各種エラスチン、各種プロテオグリカン、各種カドヘリン、デスモコリン、デスモグレイン、各種インテグリン、Ｅ−セレクチン、Ｐ−セレクチン、Ｌ−セレクチン、免疫グロブリンスーパーファミリー、マトリゲル、ポリ−Ｄ−リジン、ポリ−Ｌ−リジン、キチン、キトサン、セファロース、アルギン酸ゲル、ハイドロゲル、さらにこれらの切断断片などが挙げられる。これらのコーティング材料は、遺伝子組換え技術によりアミノ酸配列を人為的に改変させたものも使用することできる。また、造血前駆細胞の培養は、培地組成、ｐＨなどを機械的に制御し、高密度での培養が可能なバイオリアクターによって行うこともできる（Ｓｃｈｗａｒｔｚ ＲＭ， Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．，８８：６７６０，１９９１； Ｋｏｌｌｅｒ， ＭＲ， Ｂｏｎｅ Ｍａｒｒｏｗ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ， ２１：６５３， １９９８； Ｋｏｌｌｅｒ， ＭＲ，Ｂｌｏｏｄ， ８２： ３７８， １９９３； Ａｓｔｏｒｉ Ｇ， Ｂｏｎｅ Ｍａｒｒｏｗ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ， ３５： １１０１， ２００５）。

【0031】

ヒト由来のｉＰＳ細胞又はＥＳ細胞から巨核球、血小板を産生させる場合、上記ネット様構造物の産生効率がｉＰＳ細胞又はＥＳ細胞のクローンによって異なるため、ネット様構造物の産生効率の高いｉＰＳ細胞又はＥＳ細胞クローンを予め選択し、該ｉＰＳ細胞又はＥＳ細胞クローンの産生するネット様構造物から、巨核球や血小板を産生することで、より効率的に多くの巨核球や血小板を製造することができる。ここで、ネット様構造物の産生効率の「高い」ｉＰＳ細胞又はＥＳ細胞クローンとして、ネット様構造物の形成数が、例えば、１×１０^５細胞あたり１０以上、好ましくは１５以上のクローンを選択することができる。

【0032】

また、多能性幹細胞より調製された造血前駆細胞は、癌遺伝子などを導入することによりその細胞増殖能をより高めることができる（参考文献：ＷＯ/２０１１/０３４０７３）。癌遺伝子の例としては、ＭＹＣファミリー遺伝子（例えば、ｃ−Ｍｙｃ、ｎ−ｍｙｃ、ｌ−ｍｙｃ遺伝子）、ＳＲＣファミリー遺伝子、ＲＡＳファミリー遺伝子、ＲＡＦファミリー遺伝子、ｃ−ｋｉｔ遺伝子、Ａｂｌ遺伝子などが挙げられ、より好ましくはＭｙｃファミリー遺伝子が、更に好ましくはｃ−Ｍｙｃ遺伝子が挙げられる。癌遺伝子の導入により細胞老化が誘導される際には、例えばポリコーム遺伝子などを同時に細胞に導入することにより細胞老化を抑制することができる。ポリコーム遺伝子の例としては、Ｂｍｉ1遺伝子、Ｍｅｌ１８遺伝子、Ｒｉｎｇ１ａ／ｂ遺伝子、Ｐｈｃ１／２／３、Ｃｂｘ２／４／６／７／８遺伝子、Ｅｅｄ遺伝子、Ｅｚｈ２遺伝子、Ｓｕｚ１２遺伝子などが挙げられるが、より好ましくはＢｍｉ1遺伝子が挙げられる。また、アポトーシスを抑制する遺伝子、例えば、ＢＣＬ２ファミリー遺伝子であるＢＣＬ２（Ｂ−ｃｅｌｌ ｌｙｍｐｈｏｍａ ２）遺伝子やＢＣＬＸＬ（Ｂ−ｃｅｌｌ ｌｙｍｐｈｏｍａ−ｅｘｔｒａ ｌａｒｇｅ）遺伝子、あるいはＳｕｒｖｉｖｉｎ、ＭＣＬ１（ｍｙｅｌｏｉｄ ｃｅｌｌ ｌｅｕｋｅｍｉａ１）など、より好ましくはＢＣＬ２遺伝子、ＢＣＬＸＬ遺伝子を造血前駆細胞に導入して細胞死を抑制することができる。また、造血前駆細胞において癌抑制遺伝子であるｐ５３遺伝子の発現を抑制することも巨核球分化には有効である（参考文献：Ｆｕｈｒｋｅｎら，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２８３：１５５８９−１５６００ ２００８）。この様な癌抑制遺伝子の例としては、ｐ５３遺伝子、ｐ１６遺伝子、ｐ７３遺伝子、Ｒｂ遺伝子、ＢＲＣＡ１（ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ ｇｅｎｅ １）遺伝子、ＢＲＣＡ２遺伝子、ＷＴ１遺伝子などが挙げられるが、好ましくはｐ５３遺伝子が挙げられる。その他、血小板への分化を促進するＲＮＡ遺伝子も目的の遺伝子として有効である。その例としては、アンチセンスＲＮＡ、ｓｍａｌｌ ｉｎｔｅｒｆｅｒｉｎｇ（ｓｉ）ＲＮＡ、ｓｈｏｒｔ ｈａｉｒｐｉｎ（ｓｈ）ＲＮＡ、デコイＲＮＡ、リボザイムなどが挙げられる。これらの遺伝子やＲＮＡは、すでにその塩基配列が公開されている遺伝子やＲＮＡは勿論のこと、これら公知の配列の相同性に基づいて従来技術により改変されるホモログも含まれる。以下、細胞増殖能をより高める目的で造血前駆細胞に導入する遺伝子を目的遺伝子ともいう。

【0033】

目的の遺伝子を導入する細胞は、多能性幹細胞から巨核球に分化する段階のいずれの細胞でもよく、例えば、多能性幹細胞、多能性幹細胞から分化した中胚葉系細胞、造血幹細胞及び造血前駆細胞などが挙げられる。これらの細胞に目的の遺伝子を導入するには、通常動物細胞の遺伝子導入に用いられる方法、例えば、マウス幹細胞ウイルス（ＭＳＣＶ）、モロニーマウス白血病ウイルス（ＭｍｏＬＶ）等のレトロウイルスベクター、アデノウイルスベクター、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクター、単純ヘルペスウイルスベクター、レンチウイルスベクター、センダイウイルス等のウイルス由来の遺伝子治療に用いられる動物細胞用ベクター（遺伝子治療用ベクターについては、Ｖｅｒｍａ、 Ｉ．Ｍ．， Ｎａｔｕｒｅ， ３８９：２３９， １９９７参照）を用いる方法、リン酸カルシウム共沈法、ＤＥＡＥ−デキストラン法、エレクトロポレーション法、リポソーム法、リポフェクション法、マイクロインジェクション法等を用いることができる。これらの中では、標的細胞の染色体ＤＮＡに組み込まれて恒久的に遺伝子の発現が期待できることが好ましく、ウイルスを使う場合は、レトロウイルスベクター、アデノ随伴ウイルスベクター又はレンチウイルスベクターが好ましい。

【0034】

例えば、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターは、次のようにして作製することができる。まず、野生型アデノ随伴ウイルスＤＮＡの両端のＩＴＲ（ｉｎｖｅｒｔｅｄ ｔｅｒｍｉｎａｌ ｒｅｐｅａｔ）の間に治療用遺伝子を挿入したベクタープラスミドと、ウイルスタンパク質を補うためのヘルパープラスミドを２９３細胞にトランスフェクションする。続いてヘルパーウイルスのアデノウイルスを感染させると、ＡＡＶベクターを含むウイルス粒子が産生される。あるいは、アデノウイルスの代わりに、ヘルパー機能を担うアデノウイルス遺伝子を発現するプラスミドをトランスフェクションしてもよい。次に、得られるウイルス粒子を造血前駆細胞に感染させる。ベクターＤＮＡ中において、目的遺伝子の上流には、適当なプロモーター、エンハンサー、インシュレーター等を挿入し、これらによって遺伝子の発現を調節することが好ましい。さらに、目的遺伝子に加えて薬剤耐性遺伝子等のマーカー遺伝子を導入すると、目的遺伝子が導入された細胞の選択が容易となる。目的遺伝子は、センス遺伝子であってもアンチセンス遺伝子であってもよい。

【0035】

導入した目的遺伝子の発現を行う場合、適当なプロモーターの下流に目的とする遺伝子を作用可能に連結し、これを哺乳動物発現用ベクターもしくはウイルスべクターに挿入して、細胞内に導入して目的遺伝子を発現させてもよい。例えば、ＣＭＶプロモーター、ＥＦプロモーター、ＳＶ４０プロモーターなどを使用して恒常的に目的遺伝子を発現してもよい。また、分化段階に応じて発現が誘導される内在性のエンハンサー／プロモーターを使用して、例えばグリコプロテインＩＩｂ／ＩＩＩａエンハンサー／プロモーター（参考文献：Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈ ２６，２０９−２１１（２００８））の下流に目的遺伝子を作用可能に連結することで、巨核球への分化段階で発現を誘導してもよい。あるいは、薬剤応答エレメントなどのトランス因子によって活性制御されるエレメン卜の支配下に、適当なプロモーターを配置し、薬剤添加などの制御により目的遺伝子を誘導的に発現させたり、もしくは発現を抑制することもできる。薬剤により活性制御されるエレメン卜としては、例えばｔｅｔオペレータエレメント（参考文献：Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８９，５５４７−５５５１（１９９２））、ＧＡＬ４結合エレメント（参考文献：Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９１，８１８０−８１８４（１９９２））、Ｌａｃオペレータエレメント（Ｅｎｖｉｒｏｎ．Ｍｏｌ．Ｍｕｔａｇｅｎ．２８，４４７−４５８（１９９６））あるいはＬｅｘＡオペレータエレメント（参考文献：ｔｈｅ ＥＭＢＯ ｊｏｕｒｎａｌ ７，３９７５−３９８２（１９８８））などが挙げられる。また、テトラサイクリン、デキサメタゾン、タモキシフェン、エストラジオール、ドキシサイクリンあるいはイソプロプル−β−チオガラクトピラノシド（ＩＰＴＧ）などの薬剤に応答する適切なリガンド結合領域およびＤＮＡ結合領域および転写活性もしくは転写抑制活性を有する転写調節領域を有する薬剤応答遺伝子を導入することで、薬剤によりエレメン卜下流の目的遺伝子の発現調節が可能である。あるいは、ＤＮＡ結合領域と転写調節領域を二量体化したリガンドを用いて結合させることで転写調節を行っても良く、また特願２００９−２０１５０４に記載のようにそれら二量体化結合に抗体可変化領域を利用して任意な薬剤に応答可能としてもよい。これら目的遺伝子の発現調節には、例えば、インビトロジェン社のＧｅｎｅＳｗｉｔｃｈ^ＴＭシステム、アジレントテクノロジー社のＬａｃＳｗｉｔｃｈ ＩＩ Ｉｎｄｕｃｉｂｌｅ Ｍａｍｍａｌｉａｎ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎシステム、クローンテック社のｉＤｉｍｅｒｉｚｅ^ＴＭシステム、Ｔｅｔ−ｏｎ^ＴＭシステム、Ｔｅｔ−ｏｆｆ^ＴＭシステムなどを利用することもできる。また、導入する目的遺伝子に変異型ＦＫ５０６結合蛋白質（ＦＫＢＰ）の不安定化ドメインを融合し、薬剤応答性に目的遺伝子の蛋白量を調整してもよく、例えば、クローンテック社のＰｒｏｔｏＴｕｎｅｒ^ＴＭシステムなどが利用できる。さらに、ホモロガスリコンビネーションの手法（参考文献：Ｎａｔｕｒｅ ３１７，２３０−２３４（１９８５））を用いてゲノム上の適切な位置に遺伝子を導入することもできる。また、Ｍａｍｍａｌｉａｎ Ｇｅｎｏｍｅ １５，６７７−６８５（２００４）に記載されるように、例えばＣｒｅ／ＬｏｘシステムあるいはＦＬＰ／ｆｒｔシステムなどを単独もしくは組み合わせにより使用することで、導入した目的遺伝子あるいはゲノム上の目的の癌抑制遺伝子を、ゲノムから除去することが可能であり、それらの発現を抑制的に制御することもできる。また、目的の遺伝子の除去には、任意の分化段階において直接的にＣｒｅ蛋白やＦＬＰ蛋白を導入してもよく、あるいはそれら蛋白遺伝子をコードする遺伝子を導入してもよい。さらに、Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ ２４４，３０５−３１８（２００２）に記載されるようなＣｒｅ−ＥＲシステムなどの例にあるように、Ｃｒｅ蛋白やＦＬＰ蛋白発現を薬剤調節エレメントの支配下におくことにより、予め遺伝子を導入してある細胞において、任意の分化段階において誘導的にゲノム上から目的の遺伝子の除去を行うこともできる。

【0036】

これらのように遺伝子操作により目的遺伝子の発現量を調節して細胞増殖能及び／又は分化能を高めた造血前駆細胞を用いても、本発明の方法により巨核球及び血小板を製造することができる。

【0037】

さらに、本発明の実施形態には、血小板を製造するためのキットが含まれる。当該キットには、細胞培養のための培地、血清、本発明における特定化合物、増殖因子などのサプリメント（例えば、ＴＰＯ、ＳＣＦ、Ｈｅｐａｒｉｎ、ＩＬ−６、ＩＬ−１１など）、抗生物質などが含まれる。その他、例えば、ヒト由来の血小板の製造用に、ネット様構造物に存在するマーカーを確認するための抗体（例えば、Ｆｌｋ１、ＣＤ３１、ＣＤ３４、ＵＥＡ−Ｉレクチンなどに対する抗体）なども含まれる。キット中に含まれる試薬、抗体等は、構成成分が活性を長期間有効に持続し、容器の材質によって吸着されず、変質を受けないような何れかの種類の容器中に供給される。例えば、封着されたガラスアンプルは、窒素ガスのような中性で不反応性ガスの下において包装されたバッファーを含む。アンプルは、ガラス、ポリカーボネート、ポリスチレンなどの有機ポリマー、セラミック、金属、又は試薬を保持するために通常用いられる他の何れかの適切な材料などから構成される。

【0038】

血小板は、白血病、骨髄移植、抗ガン剤治療の際の血小板減少の予防又は改善に有効であるため、本発明により得られたヒト血小板を製剤の形態で安定的に供給することも可能である。本発明の方法によって産生される血小板は、巨核球から放出されて血小板が豊富に存在する培養液の画分（例えば、ヒト由来の血小板の場合、ｉＰＳ細胞又はＥＳ細胞の培養後２２乃至２８日目程度）を回収し、白血球除去フィルター（例えば、テルモ社、旭化成メディカル社などから購入可能）などを使用して巨核球、その他の血液細胞の除外を行うことにより、血小板以外の成分を除去して、製造することができる。また、１００乃至１５０ｇ、１０乃至１５分遠心分離を行なうことにより血小板以外の成分を沈降させて除去し、血小板を製造することができる。血液製剤を製造するにあたっては、血小板が保存に対して不安定であることなどを考慮して、血小板の安定化に資する他の成分を含有せしめることもできる。血小板を安定化させる条件は、当該技術分野の専門家において周知の方法を選択することが可能である。より具体的には、取得した血小板（例えばヒトｉＰＳ細胞又はＥＳ細胞由来洗浄血小板）は、例えば、以下の方法により製剤化することができる。
ＡＣＤ−Ａ液：ＦＦＰ（ｆｒｅｓｈ ｆｒｏｚｅｎ ｐｌａｓｍａ；献血で得られた全血液から調整したもの、アルブミン、凝固因子など血液成分以外のものをすべて含む）を１：１０の比率で調整し、１５−５０Ｇｙの放射線照射後に２０−２４℃にて振とうしながら保存する。ＡＣＤ−Ａ液はクエン酸ナトリウム２２ｇ／クエン酸８ｇ／ブドウ糖２２ｇを注射用水で全体を１Ｌとするように調整する。

【0039】

以上の方法を使用する場合、血小板の濃度としては、例えば、１×１０^９血小板／ｍＬ程度が望ましい。
また、ＧＭ６００１（ａ ｂｒｏａｄ−ｒａｎｇｅ ｈｙｄｒｏｘａｍｉｃ ａｃｉｄ−ｂａｓｅｄ ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ） （Ｃａｌｂｉｏｃｈｅｍ社、Ｌａ Ｊｏｌｌａ，ＣＡ，ＵＳＡ）を添加しておくと、冷凍保存および室温保存中に起きる血小板機能分子ＧＰＩｂ−Ｖ−ＩＸやＧＰＶＩの切断に伴う不活化を予防できる。本発明者らは、この方法により、マウスＥＳ細胞由来血小板に関し不活性化の予防が可能であることを確認している。なお、ヒト血小板を使用したこの血小板不活性化に関する機序の参考論文として、Ｂｅｒｇｍｅｉｅｒ，Ｗ ｅｔ ａｌ．，Ｃｉｒ Ｒｅｓ ９５：６７７−６８３，２００４及び Ｇａｒｄｉｎｅｒ，ＥＥ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ ａｎｄ Ｈａｅｍｏｓｔａｓｉｓ，５：１５３０−１５３７，２００７を参照のこと。
なお、血小板を含む製剤を収納する容器は、ガラスのように血小板を活性化する材質のものを避けるのが好ましい。

【0040】

本発明の方法により製造された血小板は、血小板減少を伴う疾患に対する治療に用いられる他、種々の疾患の治療に有効である。
具体的な例としては、Ｇａｕｃｈｅｒ病、ムコ多糖症等のリソゾーム蓄積症、副腎白質変性症、各種の癌又は腫瘍とくに急性又は慢性白血病等の血液癌、Ｆａｎｃｏｎｉ症候群、再生不良性貧血、顆粒球減少症、リンパ球減少症、血小板減少症、突発性血小板減少性紫斑病、血栓性血小板減少性紫斑病、Ｋａｓａｂａｃｈ−Ｍｅｒｒｉｔｔ症候群、悪性リンパ腫、ホジキン病、多発性骨髄腫、慢性肝障害、腎不全、手術時あるいは保存血の大量輸血患者、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、重症感染症、全身エリテマトーデス、関節リウマチ、シェーグレン症候群、全身性硬化症、多発性筋炎、皮膚筋炎、混合性組織結合病、結節性多発動脈炎、橋本病、バセドー氏病、重症筋無力症、自己免疫性溶血性貧血、蛇咬症、溶血性尿毒症症候群、脾機能亢進症、出血、Ｂｅｒｎａｒｄ−Ｓｏｕｌｉｅｒ症候群、Ｇｌａｎｚｍａｎｎ’ｓ血小板無力症、尿毒症、骨髄異形成症候群、真性多血症、赤血球増多症、骨髄増殖性疾患等が挙げられる。

【0041】

本発明における（Ｅ）−５−（２−｛１−［５−（４−ブロモフェニル）−４−ヒドロキシチオフェン−３−イル］エチリデン｝ヒドラジンカルボニル）−Ｎ−［４−（２−ヒドロキシエチルカルバモイル）ベンジル］チオフェン−２−カルボキサミドは、下記式（Ｉ）で表される化合物の１種である。

【0042】

〔１〕
式（Ｉ）；

【化1】

［式中、Ｗは、式（Ｉａ）：

【化2】

表される置換基又はカルボキシ基を意味し、
Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３及びＲ^４は、それぞれ独立に１つ以上のハロゲン原子で置換されてもよいＣ_１−１０アルキル基又は水素原子を意味し、
ｎは、０、１、２又は３の整数を表し、
Ｒ^５は、Ｖ^１でそれぞれ独立に表される１つ以上の置換基で置換されてもよいＣ_２−１４アリール基を意味し、但しｎが２のとき、Ｒ^５は無置換ピリジル基ではなく、
Ｒ^６は、１つ以上のハロゲン原子で置換されてもよいＣ_１−１０アルキル基又は水素原子を意味し、
Ｒ^７は、Ｖ^２でそれぞれ独立に表される１つ以上の置換基で置換されてもよいＣ_２−１４アリール基を意味し
Ａｒ^１は、Ｖ^３でそれぞれ独立に表される１つ以上の置換基で置換されてもよいＣ_２−１４アリーレン基を意味し、
Ｘは、−ＯＲ^２０を意味し、
Ｙ及びＺは、それぞれ独立に酸素原子又は硫黄原子を意味し、
Ｖ^１は、−（ＣＨ_２）ｍ_１Ｍ^１ＮＲ^８Ｒ^９、−（ＣＨ_２）ｍ_６ＮＲ^１６Ｒ^１７、−Ｍ^２ＮＲ^１８（ＣＨ_２）ｍ_７Ｒ^１９又は−Ｃ（＝Ｏ）−（ピペラジン−１，４−ジイル）−Ｕを意味し、
Ｖ^２、Ｖ^３及びＶ^４は、それぞれ独立に水酸基、保護された水酸基、アミノ基、保護されたアミノ基、チオール基、保護されたチオール基、ニトロ基、シアノ基、ハロゲン原子、カルボキシ基、カルバモイル基、スルファモイル基、スルホ基、ホルミル基、１つ以上のハロゲン原子で置換されてもよいＣ_１−３アルコキシ基、１つ以上のハロゲン原子で置換されてもよいＣ_１−１０アルキル基、Ｃ_２−６アルケニル基、Ｃ_２−６アルキニル基、Ｃ_１−１０アルキルカルボニルオキシ基、Ｃ_１−１０アルコキシカルボニル基、Ｃ_１−１０アルコキシ基、Ｃ_１−１０アルキルカルボニル基、Ｃ_１−１０アルキルカルボニルアミノ基、モノ若しくはジＣ_１−１０アルキルアミノ基、Ｃ_１−１０アルキルスルホニル基、Ｃ_１−１０アルキルアミノスルホニル基、Ｃ_１−１０アルキルアミノカルボニル基、Ｃ_１−１０アルキルスルホニルアミノ基又はＣ_１−１０チオアルキル基を意味し、
Ｍ^１及びＭ^２は、それぞれ独立に−（Ｃ＝Ｏ）−又は−（ＳＯ_２）−を意味し、
ｍ_１は、０，１又は２の整数を表し、
ｍ_２、ｍ_３、ｍ_４、ｍ_５、ｍ_６及びｍ_７は、それぞれ独立に１又は２の整数を表し、
Ｒ^８は、水素原子又はＣ_１−３アルキル基を意味し、
Ｒ^９及びＵは、それぞれ独立に−（ＣＨ_２）ｍ_２ＯＲ^１０又は−（ＣＨ_２）ｍ_４ＮＲ^１１Ｒ^１２を意味し、但しｍ_１が１又は２のときは、Ｒ^９は上記に加えて水素原子でも良く、
Ｒ^１０は、水素原子、Ｃ_１−３アルキル基又は−（ＣＨ_２）ｍ_３Ｔを意味し、
Ｒ^１１及びＲ^１２は、それぞれ独立に水素原子、−（ＣＨ_２）ｍ_５Ｑを意味するか、又はＮ，Ｒ^１１及びＲ^１２が一緒になって式（ＩＩ）：

【化3】

で表される置換基又は式（ＩＩＩ）：

【化4】

で表される置換基を意味し、
Ｔは、水酸基、Ｃ_１−６アルコキシ基又はＣ_１−６アルキル基を意味し、
Ｑは、水酸基、Ｃ_１−３アルコキシ基、−ＮＲ^１３Ｒ^１４を意味し、
Ｒ^１３及びＲ^１４は、それぞれ独立に水素原子又はＣ_１−３アルキル基を意味し、
Ｒ^１５は、水素原子、Ｃ_１−３アルキル基又はアミノ基の保護基を意味し、
Ｒ^１６及びＲ^１７は、それぞれ独立に水素原子、Ｃ_１−３アルキルカルボニル基又はＣ_１−３アルキルスルホニル基を意味し、
Ｒ^１８は、水素原子又はＣ_１−３アルキル基を意味し、
Ｒ^１9は、Ｃ_２−９ヘテロシクリル基又はＣ_２−１４アリール基を意味し、
Ｒ^２０は、水素原子、Ｖ^４でそれぞれ独立に表される１つ以上の置換基で置換されてもよいＣ_１−１０アルキル基又はＶ^４でそれぞれ独立に表される１つ以上の置換基で置換されてもよいＣ_１−１０アルキルカルボニル基を意味する。］。

【0043】

〔２〕
上記〔１〕において、Ｗが、式（Ｉａ）：

【化5】

で表される置換基であることが好ましい。

【0044】

〔３〕
上記〔２〕において、Ｒ^１が、水素原子又は１つ以上のハロゲン原子で置換されてもよいＣ_１−６アルキル基であり、
Ｒ^２，Ｒ^３，Ｒ^４及びＲ^６が、それぞれ独立に水素原子又はＣ_１−３アルキル基であり、
ｎが、１又は２の整数であり、
Ａｒ^１が、式（ＩＶ）：

【化6】

であり、
Ｒ^７が、１つ以上のハロゲン原子で置換されてもよいＣ_１−１０アルキル基、Ｃ_１−１０アルコキシ基、１つ以上のハロゲン原子で置換されているＣ_１−３アルコキシ基及びハロゲン原子から選ばれる１つ以上の置換基で置換されてもよいフェニル基であり、
Ｘが、−ＯＨであり、
Ｙ及びＺが、いずれも酸素原子である、ことが好ましい。

【0045】

〔４〕
上記〔３〕において、Ｒ^２，Ｒ^３，Ｒ^４及びＲ^６が、いずれも水素原子であることが好ましい。

【0046】

〔５〕
上記〔２〕乃至〔４〕において、Ｒ^５が、Ｖ^１でそれぞれ独立に表される１つ以上の置換基で置換されてもよいフェニル基であることが好ましい。

【0047】

〔６〕
上記〔２〕乃至〔４〕において、Ｒ^５が、Ｖ^１でそれぞれ独立に表される１つ以上の置換基で置換されてもよいＣ_２−９ヘテロアリール基であることが好ましい。

【0048】

〔７〕
上記〔６〕において、Ｃ_２−９ヘテロアリール基がＣ_２−９含窒素ヘテロアリール基であることが好ましい。

【0049】

〔８〕
上記〔７〕において、Ｃ_２−９含窒素ヘテロアリール基が、２−ピリジル基、３−ピリジル基、４−ピリジル基、３−ピリダジニル基、４−ピリダジニル基、２−ピリミジニル基、４−ピリミジニル基、５−ピリミジニル基及び２−ピラジニル基から選ばれる基であることが好ましい。

【0050】

〔９〕
上記〔７〕において、Ｃ_２−９含窒素ヘテロアリール基が、４−ピリジル基であることが好ましい。

【0051】

〔１０〕
上記〔２〕乃至〔９〕において、Ｖ^１が、式（Ｖ）乃至式（ＸＸＩＩ）：

【化7】

【化8】

の何れかで表される置換基であることが好ましい。

【0052】

〔１１〕
上記〔３〕又は〔４〕において、Ｒ^５が、式（ＶＩＩＩ）：

【化9】

で表される置換基で置換されているフェニル基であることが好ましい。
〔１２〕
上記〔３〕又は〔４〕において、Ｒ^５が、４−ピリジル基であることが好ましい。

【0053】

〔１３〕
上記〔２〕乃至〔１２〕において、ｎが、１の整数であることが好ましい。

【0054】

〔１４〕
上記〔２〕乃至〔１３〕において、Ｒ^７が、メチル基、ｔ−ブチル基、ハロゲン原子、メトキシ基、トリフルオロメチル基又はトリフルオロメトキシ基から選ばれる１つ以上の置換基で置換されているフェニル基であることが好ましい。

【0055】

〔１５〕
上記〔２〕乃至〔１３〕において、Ｒ^７が、１つ又は２つのハロゲン原子で置換されてもよいフェニル基であることが好ましい。
〔１６〕
上記〔２〕乃至〔１５〕において、Ｒ^１が、メチル基であることが好ましい。

【0056】

〔１７〕
上記〔２〕において、式（Ｉ）で表される化合物が、（Ｅ）−５−（２−｛１−［５−（３，４−ジクロロフェニル）−４−ヒドロキシチオフェン−３−イル］エチリデン｝ヒドラジンカルボニル）−Ｎ−［４−（２−ヒドロキシエチルカルバモイル）ベンジル］チオフェン−２−カルボキサミド、（Ｅ）−５−（２−｛１−［５−（４−ブロモフェニル）−４−ヒドロキシチオフェン−３−イル］エチリデン｝ヒドラジンカルボニル）−Ｎ−［４−（２−ヒドロキシエチルカルバモイル）ベンジル］チオフェン−２−カルボキサミド又は（Ｅ）−５−（２−｛１−［５−（３，４−ジクロロフェニル）−４−ヒドロキシチオフェン−３−イル］エチリデン｝ヒドラジンカルボニル）−Ｎ−（ピリジン−４−イルメチル）チオフェン−２−カルボキサミドであることが好ましい。

【0057】

〔１８〕
上記〔１〕において、Ｗが、カルボキシ基であることが好ましい。
〔１９〕
上記〔１８〕において、Ｒ^１が、水素原子又は１つ以上のハロゲン原子で置換されてもよいＣ_１−６アルキル基であり、
Ｒ^６が、水素原子又は１つ以上のハロゲン原子で置換されてもよいＣ_１−３アルキル基であり、
Ｒ^７が、Ｃ_２−１４アリール基であり、
Ｘが、−ＯＨであり、
Ｙが、酸素原子又は硫黄原子であり、
Ａｒ^１が、式（ＩＶ）：

【化10】

である、ことが好ましい。

【0058】

〔２０〕
上記〔１９〕において、Ｒ^１が、水素原子又はＣ_１−６アルキル基であり、
Ｒ^６が、水素原子であり、
Ｒ^７が、式（Ａ０１）乃至（Ａ１５）：

【化11】

のいずれかで表される置換基であり、
Ｙが、酸素原子である、ことが好ましい。

【0059】

〔２１〕
上記〔２０〕において、Ｒ^１が、Ｃ_１−６アルキル基であり、
Ｒ^７が、式（Ａ１１）：

【化12】

で表される置換基である、ことが好ましい。

【0060】

〔２２〕
上記〔１〕において、一般式（Ｉ）で表される化合物が、（Ｅ）−５−（２−{１−[５−（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−５−イル）−４−ヒドロキシチオフェン−３−イル]エチリデン}ヒドラジンカルボニル）チオフェン−２−カルボン酸であることが好ましい。

【0061】

〔２３〕
上記〔１〕において、Ｒ^１が、水素原子又は１つ以上のハロゲン原子で置換されてもよいＣ_１−６アルキル基であり、
Ｒ^２，Ｒ^３，Ｒ^４及びＲ^６が、それぞれ独立に水素原子又はＣ_１−３アルキル基であり、
ｎが、１又は２の整数であり、
Ｒ^５が、Ｖ^１でそれぞれ独立に表される１つ以上の置換基で置換されてもよいフェニル基又はＣ_２−９ヘテロアリール基であり、
Ｒ^７が、１つ以上のハロゲン原子で置換されてもよいＣ_１−１０アルキル基、Ｃ_１−１０アルコキシ基、１つ以上のハロゲン原子で置換されているＣ_１−３アルコキシ基及びハロゲン原子から選ばれる１つ以上の置換基で置換されてもよいフェニル基又は、式（Ａ０１）乃至（Ａ１５）：

【化13】

の何れかで表される置換基であり、
Ａｒ^１が、式（ＩＶ）：

【化14】

であり、
Ｘが、−ＯＨであり、
Ｙ及びＺが、それぞれ独立に酸素原子又は硫黄原子である、ことが好ましい。

【0062】

〔２４〕
上記〔２３〕において、Ｒ^１が、水素原子又はＣ_１−６アルキル基であり、
Ｒ^２，Ｒ^３，Ｒ^４及びＲ^６が、いずれも水素原子であり、
ｎが、１の整数であり、
Ｒ^５が、ピリジル基、ピラジニル基又は、式（ＶＩＩ）、（ＶＩＩＩ），（ＸＩ）若しくは（ＸＩＩ）：

【化15】

で表される置換基で置換されているフェニル基であり、
Ｒ^７が、１つ若しくは２つのハロゲン原子若しくはＣ_１−１０アルキル基で置換されてもよいフェニル基又は、式（Ａ１１）、（Ａ１３）若しくは（Ａ１５）：

【化16】

の何れかで表される置換基であり、
Ｙ及びＺが、いずれも酸素原子である、ことが好ましい。

【0063】

〔２５〕
上記〔２４〕において、Ｒ^１が、Ｃ_１−６アルキル基であり、
Ｒ^７が、式（Ａ１１）：

【化17】

で表される置換基である、ことが好ましい。

【0064】

〔２６〕
上記〔１〕において、一般式（Ｉ）で表される化合物が、（Ｅ）−５−（２−｛１−［５−（３，４−ジクロロフェニル）−４−ヒドロキシチオフェン−３−イル］エチリデン｝ヒドラジンカルボニル）−Ｎ−［４−（２−ヒドロキシエチルカルバモイル）ベンジル］チオフェン−２−カルボキサミド、（Ｅ）−５−（２−｛１−［５−（４−ブロモフェニル）−４−ヒドロキシチオフェン−３−イル］エチリデン｝ヒドラジンカルボニル）−Ｎ−［４−（２−ヒドロキシエチルカルバモイル）ベンジル］チオフェン−２−カルボキサミド、（Ｅ）−５−（２−｛１−［５−（３，４−ジクロロフェニル）−４−ヒドロキシチオフェン−３−イル］エチリデン｝ヒドラジンカルボニル）−Ｎ−（ピリジン−４−イルメチル）チオフェン−２−カルボキサミド、（Ｅ）−５−（２−{１−[５−（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−５−イル）−４−ヒドロキシチオフェン−３−イル]エチリデン}ヒドラジンカルボニル）チオフェン−２−カルボン酸、カリウム （Ｅ）−２−（３，４−ジクロロフェニル）−４−［１−（２−｛５−［（ピラジン−２−イルメチル）カルバモイル］チオフェン−２−カルボニル｝ヒドラゾノ）エチル］チオフェン−３−オラート、（Ｅ）−５−（２−｛１−［５−（４−ブロモフェニル）−４−ヒドロキシチオフェン−３−イル］エチリデン｝ヒドラジンカルボニル）−Ｎ−｛４−［２−（ピペラジン−１−イル）エチルカルバモイル］ベンジル｝チオフェン−２−カルボキサミド、（Ｅ）−Ｎ−［４−（２−アミノ−２−オキソエチル）ベンジル］−５−（２−｛１−［５−（３，４−ジクロロフェニル）−４−ヒドロキシチオフェン−３−イル］エチリデン｝ヒドラジンカルボニル）チオフェン−２−カルボキサミド又は（Ｅ）−Ｎ−（４−｛２−［ビス（２−ヒドロキシエチル）アミノ］エチルカルバモイル｝ベンジル）−５−（２−｛１−［５−（４−ｔ−ブチルフェニル）−４−ヒドロキシチオフェン−３−イル］エチリデン｝ヒドラジンカルボニル）チオフェン−２−カルボキサミドであることが好ましい。

【0065】

以下、上記式（Ｉ）で表される化合物について使用される用語の定義及び最良の形態について説明する。
上記式（Ｉ）で表される化合物中、「ｎ」はノルマルを、「ｉ」はイソを、「ｓ」はセカンダリーを、「ｔ」はターシャリーを、「ｃ」はシクロを、「ｏ」はオルトを、「ｍ」はメタを、「ｐ」はパラを意味する。

【0066】

まず、置換基Ｒ^１からＲ^２０及びＶ^１からＶ^４など本明細書に記載の各置換基における語句について説明する。
ハロゲン原子としては、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素が挙げられる。

【0067】

Ｃ_１−３アルキル基としては、直鎖、分枝若しくはＣ_３シクロアルキル基を含んでいてもよく、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉ−プロピル、ｃ−プロピル等が挙げられる。
Ｃ_１−６アルキル基としては、直鎖、分枝若しくはＣ_３−６シクロアルキル基を含んでいてもよい。その具体例としては、上記の例示に加え、ｎ−ブチル、ｉ−ブチル、ｓ−ブチル、ｔ−ブチル、ｃ−ブチル、１−メチル−ｃ−プロピル、２−メチル−ｃ−プロピル、ｎ−ペンチル、１−メチル−ｎ−ブチル、２−メチル−ｎ−ブチル、３−メチル−ｎ−ブチル、１，１−ジメチル−ｎ−プロピル、１，２−ジメチル−ｎ−プロピル、２，２−ジメチル−ｎ−プロピル、１−エチル−ｎ−プロピル、ｃ−ペンチル、１−メチル−ｃ−ブチル、２−メチル−ｃ−ブチル、３−メチル−ｃ−ブチル、１，２−ジメチル−ｃ−プロピル、２，３−ジメチル−ｃ−プロピル、１−エチル−ｃ−プロピル、２−エチル−ｃ−プロピル、ｎ−ヘキシル、１−メチル−ｎ−ペンチル、２−メチル−ｎ−ペンチル、３−メチル−ｎ−ペンチル、４−メチル−ｎ−ペンチル、１，１−ジメチル−ｎ−ブチル、１，２−ジメチル−ｎ−ブチル、１，３−ジメチル−ｎ−ブチル、２，２−ジメチル−ｎ−ブチル、２，３−ジメチル−ｎ−ブチル、３，３−ジメチル−ｎ−ブチル、１−エチル−ｎ−ブチル、２−エチル−ｎ−ブチル、１，１，２−トリメチル−ｎ−プロピル、１，２，２−トリメチル−ｎ−プロピル、１−エチル−１−メチル−ｎ−プロピル、１−エチル−２−メチル−ｎ−プロピル、ｃ−ヘキシル、１−メチル−ｃ−ペンチル、２−メチル−ｃ−ペンチル、３−メチル−ｃ−ペンチル、１−エチル−ｃ−ブチル、２−エチル−ｃ−ブチル、３−エチル−ｃ−ブチル、１，２−ジメチル−ｃ−ブチル、１，３−ジメチル−ｃ−ブチル、２，２−ジメチル−ｃ−ブチル、２，３−ジメチル−ｃ−ブチル、２，４−ジメチル−ｃ−ブチル、３，３−ジメチル−ｃ−ブチル、１−ｎ−プロピル−ｃ−プロピル、２−ｎ−プロピル−ｃ−プロピル、１−ｉ−プロピル−ｃ−プロピル、２−ｉ−プロピル−ｃ−プロピル、１，２，２−トリメチル−ｃ−プロピル、１，２，３−トリメチル−ｃ−プロピル、２，２，３−トリメチル−ｃ−プロピル、１−エチル−２−メチル−ｃ−プロピル、２−エチル−１−メチル−ｃ−プロピル、２−エチル−２−メチル−ｃ−プロピル、２−エチル−３−メチル−ｃ−プロピル等が挙げられる。

【0068】

Ｃ_１−１０アルキル基としては直鎖、分枝若しくはＣ_３−１０シクロアルキル基を含んでいてもよい。その具体例としては、上記の例示に加え、１−メチル−１−エチル−ｎ−ペンチル、１−ヘプチル、２−ヘプチル、１−エチル−１，２−ジメチル−ｎ−プロピル、１−エチル−２，２−ジメチル−ｎ−プロピル、１−オクチル、３−オクチル、４−メチル−３−ｎ−ヘプチル、６−メチル−２−ｎ−ヘプチル、２−プロピル−１−ｎ−ヘプチル、２，４，４−トリメチル−１−ｎ−ペンチル、１−ノニル、２−ノニル、２，６−ジメチル−４−ｎ−ヘプチル、３−エチル−２，２−ジメチル−３−ｎ−ペンチル、３，５，５−トリメチル−１−ｎ−へキシル、１−デシル、２−デシル、４−デシル、３，７−ジメチル−１−ｎ−オクチル、３，７−ジメチル−３−ｎ−オクチル等が挙げられる。

【0069】

Ｃ_２−６アルケニル基としては、直鎖、分枝若しくはＣ_３−６シクロアルケニル基を含んでいてもよい。その具体例としては、エテニル、１−プロペニル、２−プロペニル、１−メチル−１−エテニル、１−ブテニル、２−ブテニル、３−ブテニル、２−メチル−１−プロペニル、２−メチル−２−プロペニル、１−エチルエテニル、１−メチル−１−プロペニル、１−メチル−２−プロペニル、１−ペンテニル、２−ペンテニル、３−ペンテニル、４−ペンテニル、１−ｎ−プロピルエテニル、１−メチル−１−ブテニル、１−メチル−２−ブテニル、１−メチル−３−ブテニル、２−エチル−２−プロペニル、２−メチル−１−ブテニル、２−メチル−２−ブテニル、２−メチル−３−ブテニル、３−メチル−１−ブテニル、３−メチル−２−ブテニル、３−メチル−３−ブテニル、１，１−ジメチル−２−プロペニル、１−ｉ−プロピルエテニル、１，２−ジメチル−１−プロペニル、１，２−ジメチル−２−プロペニル、１−ｃ−ペンテニル、２−ｃ−ペンテニル、３−ｃ−ペンテニル、１−ヘキセニル、２−ヘキセニル、３−ヘキセニル、４−ヘキセニル、５−ヘキセニル、１−メチル−１−ペンテニル、１−メチル−２−ペンテニル、１−メチル−３−ペンテニル、１−メチル−４−ペンテニル、１−ｎ−ブチルエテニル、２−メチル−１−ペンテニル、２−メチル−２−ペンテニル、２−メチル−３−ペンテニル、２−メチル−４−ペンテニル、２−ｎ−プロピル−２−プロペニル、３−メチル−１−ペンテニル、３−メチル−２−ペンテニル、３−メチル−３−ペンテニル、３−メチル−４−ペンテニル、３−エチル−３−ブテニル、４−メチル−１−ペンテニル、４−メチル−２−ペンテニル、４−メチル−３−ペンテニル、４−メチル−４−ペンテニル、１，１−ジメチル−２−ブテニル、１，１−ジメチル−３−ブテニル、１，２−ジメチル−１−ブテニル、１，２−ジメチル−２−ブテニル、１，２−ジメチル−３−ブテニル、１−メチル−２−エチル−２−プロペニル、１−ｓ−ブチルエテニル、１，３−ジメチル−１−ブテニル、１，３−ジメチル−２−ブテニル、１，３−ジメチル−３−ブテニル、１−ｉ−ブチルエテニル、２，２−ジメチル−３−ブテニル、２，３−ジメチル−１−ブテニル、２，３−ジメチル−２−ブテニル、２，３−ジメチル−３−ブテニル、２−ｉ−プロピル−２−プロペニル、３，３−ジメチル−１−ブテニル、１−エチル−１−ブテニル、１−エチル−２−ブテニル、１−エチル−３−ブテニル、１−ｎ−プロピル−１−プロペニル、１−ｎ−プロピル−２−プロペニル、２−エチル−１−ブテニル、２−エチル−２−ブテニル、２−エチル−３−ブテニル、１，１，２−トリメチル−２−プロペニル、１−ｔ−ブチルエテニル、１−メチル−１−エチル−２−プロペニル、１−エチル−２−メチル−１−プロペニル、１−エチル−２−メチル−２−プロペニル、１−ｉ−プロピル−１−プロペニル、１−ｉ−プロピル−２−プロペニル、１−メチル−２−ｃ−ペンテニル、１−メチル−３−ｃ−ペンテニル、２−メチル−１−ｃ−ペンテニル、２−メチル−２−ｃ−ペンテニル、２−メチル−３−ｃ−ペンテニル、２−メチル−４−ｃ−ペンテニル、２−メチル−５−ｃ−ペンテニル、２−メチレン−ｃ−ペンチル、３−メチル−１−ｃ−ペンテニル、３−メチル−２−ｃ−ペンテニル、３−メチル−３−ｃ−ペンテニル、３−メチル−４−ｃ−ペンテニル、３−メチル−５−ｃ−ペンテニル、３−メチレン−ｃ−ペンチル、１−ｃ−ヘキセニル、２−ｃ−ヘキセニル、３−ｃ−ヘキセニル等が挙げられる。

【0070】

Ｃ_２−６アルキニル基としては、エチニル、１−プロピニル、２−プロピニル、１−ブチニル、２−ブチニル、３−ブチニル、１−メチル−２−プロピニル、１−ペンチニル、２−ペンチニル、３−ペンチニル、４−ペンチニル、１−メチル−２−ブチニル、１−メチル−３−ブチニル、２−メチル−３−ブチニル、３−メチル−１−ブチニル、１，１−ジメチル−２−プロピニル、１−ヘキシニル、２−ヘキシニル、３−ヘキシニル、４−ヘキシニル、５−ヘキシニル、１−メチル−２−ペンチニル、１−メチル−３−ペンチニル、１−メチル−４−ペンチニル、２−メチル−３−ペンチニル、２−メチル−４−ペンチニル、３−メチル−１−ペンチニル、３−メチル−４−ペンチニル、４−メチル−１−ペンチニル、４−メチル−２−ペンチニル、１，１−ジメチル−２−ブチニル、１，１−ジメチル−３−ブチニル、１，２−ジメチル−３−ブチニル、２，２−ジメチル−３−ブチニル、３，３−ジメチル−１−ブチニル、１−エチル−２−ブチニル、１−エチル−３−ブチニル、１−ｎ−プロピル−２−プロピニル、２−エチル−３−ブチニル、１−メチル−１−エチル−２−プロピニル、１−ｉ−プロピル−２−プロピニル等が挙げられる。

【0071】

Ｃ_２−１４アリール基には、環構成原子としてヘテロ原子を含まないＣ_６−１４アリール基、Ｃ_２−９ヘテロアリール基及びＣ_２−１４縮合多環式基が含まれる。

【0072】

ヘテロ原子を含まないＣ_６−１４アリール基としては、フェニル基、１−インデニル基、２−インデニル基、３−インデニル基、４−インデニル基、５−インデニル基、６−インデニル基、７−インデニル基、α−ナフチル基、β−ナフチル基、ｏ−ビフェニリル基、ｍ−ビフェニリル基、ｐ−ビフェニリル基、１−アントリル基、２−アントリル基、９−アントリル基、１−フェナントリル基、２−フェナントリル基、３−フェナントリル基、４−フェナントリル基、９−フェナントリル基及び

【化18】

等が挙げられる。

【0073】

Ｃ_２−９ヘテロアリール基とは、酸素原子、窒素原子、硫黄原子が１乃至３原子単独もしくは組み合わせて含むことができる５乃至７員環までのＣ_２−６単環式複素環基及び構成原子数が８乃至１０までのＣ_５−９縮合二環式複素環基を意味する。

【0074】

５乃至７員環までのＣ_２−６単環式複素環基としては、２−チエニル基、３−チエニル基、２−フリル基、３−フリル基、２−ピラニル基、３−ピラニル基、４−ピラニル基、１−ピロリル基、２−ピロリル基、３−ピロリル基、１−イミダゾリル基、２−イミダゾリル基、４−イミダゾリル基、１−ピラゾリル基、３−ピラゾリル基、４−ピラゾリル基、２−チアゾリル基、４−チアゾリル基、５−チアゾリル基、３−イソチアゾリル基、４−イソチアゾリル基、５−イソチアゾリル基、１−１，２，４−トリアゾール基、３−１，２，４−トリアゾール基、５−１，２，４−トリアゾール基、１−１，２，３−トリアゾール基、４−１，２，３−トリアゾール基、５−１，２，３−トリアゾール基、２−オキサゾリル基、４−オキサゾリル基、５−オキサゾリル基、３−イソオキサゾリル基、４−イソオキサゾリル基、５−イソオキサゾリル基、２−ピリジル基、３−ピリジル基、４−ピリジル基、２−ピラジニル基、２−ピリミジニル基、４−ピリミジニル基、５−ピリミジニル基、３−ピリダジニル基、４−ピリダジニル基、２−１，３，４−オキサジアゾリル基、２−１，３，４−チアジアゾリル基、３−１，２，４−オキサジアゾリル基、５−１，２，４−オキサジアゾリル基、３−１，２，４−チアジアゾリル基、５−１，２，４−チアジアゾリル基、３−１，２，５−オキサジアゾリル基、３−１，２，５−チアジアゾリル基等が挙げられる。

【0075】

構成原子数が８乃至１０までのＣ_５−９縮合二環式複素環基としては、２−ベンゾフラニル基、３−ベンゾフラニル基、４−ベンゾフラニル基、５−ベンゾフラニル基、６−ベンゾフラニル基、７−ベンゾフラニル基、１−イソベンゾフラニル基、４−イソベンゾフラニル基、５−イソベンゾフラニル基、２−ベンゾチエニル基、３−ベンゾチエニル基、４−ベンゾチエニル基、５−ベンゾチエニル基、６−ベンゾチエニル基、７−ベンゾチエニル基、１−イソベンゾチエニル基、４−イソベンゾチエニル基、５−イソベンゾチエニル基、２−クロメニル基、３−クロメニル基、４−クロメニル基、５−クロメニル基、６−クロメニル基、７−クロメニル基、８−クロメニル基、１−インドリジニル基、２−インドリジニル基、３−インドリジニル基、５−インドリジニル基、６−インドリジニル基、７−インドリジニル基、８−インドリジニル基、１−イソインドリル基、２−イソインドリル基、４−イソインドリル基、５−イソインドリル基、１−インドリル基、２−インドリル基、３−インドリル基、４−インドリル基、５−インドリル基、６−インドリル基、７−インドリル基、１−インダゾリル基、２−インダゾリル基、３−インダゾリル基、４−インダゾリル基、５−インダゾリル基、６−インダゾリル基、７−インダゾリル基、１−プリニル基、２−プリニル基、３−プリニル基、６−プリニル基、７−プリニル基、８−プリニル基、２−キノリル基、３−キノリル基、４−キノリル基、５−キノリル基、６−キノリル基、７−キノリル基、８−キノリル基、１−イソキノリル基、３−イソキノリル基、４−イソキノリル基、５−イソキノリル基、６−イソキノリル基、７−イソキノリル基、８−イソキノリル基、１−フタラジニル基、５−フタラジニル基、６−フタラジニル基、１−２、７−ナフチリジニル基、３−２，７−ナフチリジニル基、４−２，７−ナフチリジニル基、１−２，６−ナフチリジニル基、３−２，６−ナフチリジニル基、４−２，６−ナフチリジニル基、２−１，８−ナフチリジニル基、３−１，８−ナフチリジニル基、４−１，８−ナフチリジニル基、２−１，７−ナフチリジニル基、３−１，７−ナフチリジニル基、４−１，７−ナフチリジニル基、５−１，７−ナフチリジニル基、６−１，７−ナフチリジニル基、８−１，７−ナフチリジニル基、２−１，６−ナフチリジニル基、３−１，６−ナフチリジニル基、４−１，６−ナフチリジニル基、５−１，６−ナフチリジニル基、７−１，６−ナフチリジニル基、８−１，６−ナフチリジニル基、２−１，５−ナフチリジニル基、３−１，５−ナフチリジニル基、４−１，５−ナフチリジニル基、６−１，５−ナフチリジニル基、７−１，５−ナフチリジニル基、８−１，５−ナフチリジニル基、２−キノキサリニル基、５−キノキサリニル基、６−キノキサリニル基、２−キナゾリニル基、４−キナゾリニル基、５−キナゾリニル基、６−キナゾリニル基、７−キナゾリニル基、８−キナゾリニル基、３−シンノリニル基、４−シンノリニル基、５−シンノリニル基、６−シンノリニル基、７−シンノリニル基、８−シンノリニル基、２−プテリジニル基、４−プテリジニル基、６−プテリジニル基、７−プテリジニル基等が挙げられる。

【0076】

Ｃ_２−９含窒素ヘテロアリール基とは、１乃至３原子の窒素原子を含むＣ_２−９ヘテロアリール基を意味する。

【0077】

Ｃ_２−１４縮合多環式基とは、上述のヘテロ原子を含まないＣ_６−１４アリール基のうち構成炭素数が１２個以下の基又はＣ_２−９ヘテロアリール基にＣ_２−９ヘテロシクリル基が縮環した縮合二環式基或いは縮合三環式基であり、具体的には、

【0078】

【化19】

が挙げられる。

【0079】

Ｃ_１−１０チオアルキル基としては直鎖、分枝若しくはＣ_３−１０シクロチオアルキル基を含んでいてもよい。その具体例としては、メチルチオ、エチルチオ、ｎ−プロピルチオ、ｉ−プロピルチオ、ｃ−プロピルチオ、ｎ−ブチルチオ、ｉ−ブチルチオ、ｓ−ブチルチオ、ｔ−ブチルチオ、ｃ−ブチルチオ、１−メチル−ｃ−プロピルチオ、２−メチル−ｃ−プロピルチオ、ｎ−ペンチルチオ、１−メチル−ｎ−ブチルチオ、２−メチル−ｎ−ブチルチオ、３−メチル−ｎ−ブチルチオ、１，１−ジメチル−ｎ−プロピルチオ、１，２−ジメチル−ｎ−プロピルチオ、２，２−ジメチル−ｎ−プロピルチオ、１−エチル−ｎ−プロピルチオ、ｃ−ペンチルチオ、１−メチル−ｃ−ブチルチオ、２−メチル−ｃ−ブチルチオ、３−メチル−ｃ−ブチルチオ、１，２−ジメチル−ｃ−プロピルチオ、２，３−ジメチル−ｃ−プロピルチオ、１−エチル−ｃ−プロピルチオ、２−エチル−ｃ−プロピルチオ、ｎ−ヘキシルチオ、１−メチル−ｎ−ペンチルチオ、２−メチル−ｎ−ペンチルチオ、３−メチル−ｎ−ペンチルチオ、４−メチル−ｎ−ペンチルチオ、１，１−ジメチル−ｎ−ブチルチオ、１，２−ジメチル−ｎ−ブチルチオ、１，３−ジメチル−ｎ−ブチルチオ、２，２−ジメチル−ｎ−ブチルチオ、２，３−ジメチル−ｎ−ブチルチオ、３，３−ジメチル−ｎ−ブチルチオ、１−エチル−ｎ−ブチルチオ、２−エチル−ｎ−ブチルチオ、１，１，２−トリメチル−ｎ−プロピルチオ、１，２，２−トリメチル−ｎ−プロピルチオ、１−エチル−１−メチル−ｎ−プロピルチオ、１−エチル−２−メチル−ｎ−プロピルチオ、ｃ−ヘキシルチオ、１−メチル−ｃ−ペンチルチオ、２−メチル−ｃ−ペンチルチオ、３−メチル−ｃ−ペンチルチオ、１−エチル−ｃ−ブチルチオ、２−エチル−ｃ−ブチルチオ、３−エチル−ｃ−ブチルチオ、１，２−ジメチル−ｃ−ブチルチオ、１，３−ジメチル−ｃ−ブチルチオ、２，２−ジメチル−ｃ−ブチルチオ、２，３−ジメチル−ｃ−ブチルチオ、２，４−ジメチル−ｃ−ブチルチオ、３，３−ジメチル−ｃ−ブチルチオ、１−ｎ−プロピル−ｃ−プロピルチオ、２−ｎ−プロピル−ｃ−プロピルチオ、１−ｉ−プロピル−ｃ−プロピルチオ、２−ｉ−プロピル−ｃ−プロピルチオ、１，２，２−トリメチル−ｃ−プロピルチオ、１，２，３−トリメチル−ｃ−プロピルチオ、２，２，３−トリメチル−ｃ−プロピルチオ、１−エチル−２−メチル−ｃ−プロピルチオ、２−エチル−１−メチル−ｃ−プロピルチオ、２−エチル−２−メチル−ｃ−プロピルチオ、２−エチル−３−メチル−ｃ−プロピルチオ、１−メチル−１−エチル−ｎ−ペンチルチオ、１−ヘプチルチオ、２−ヘプチルチオ、１−エチル−１，２−ジメチル−ｎ−プロピルチオ、１−エチル−２，２−ジメチル−ｎ−プロピルチオ、１−オクチルチオ、３−オクチルチオ、４−メチル−３−ｎ−ヘプチルチオ、６−メチル−２−ｎ−ヘプチルチオ、２−プロピル−１−ｎ−ヘプチルチオ、２，４，４−トリメチル−１−ｎ−ペンチルチオ、１−ノニルチオ、２−ノニルチオ、２，６−ジメチル−４−ｎ−ヘプチルチオ、３−エチル−２，２−ジメチル−３−ｎ−ペンチルチオ、３，５，５−トリメチル−１−ｎ−へキシルチオ、１−デシルチオ、２−デシルチオ、４−デシルチオ、３，７−ジメチル−１−ｎ−オクチルチオ、３，７−ジメチル−３−ｎ−オクチルチオ等が挙げられる。

【0080】

Ｃ_１−３アルキルスルホニル基としては、直鎖、分枝若しくはＣ_３シクロアルキルスルホニル基を含んでいてもよい。その具体例としては、メチルスルホニル、エチルスルホニル、ｎ−プロピルスルホニル、ｉ−プロピルスルホニル、ｃ−プロピルスルホニル等が挙げられる。

【0081】

Ｃ_１−１０アルキルスルホニル基としては直鎖、分枝若しくはＣ_３−１０シクロアルキルスルホニル基を含んでいてもよい。その具体例としては、上記の例示に加え、ｎ−ブチルスルホニル、ｉ−ブチルスルホニル、ｓ−ブチルスルホニル、ｔ−ブチルスルホニル、ｃ−ブチルスルホニル、１−メチル−ｃ−プロピルスルホニル、２−メチル−ｃ−プロピルスルホニル、ｎ−ペンチルスルホニル、１−メチル−ｎ−ブチルスルホニル、２−メチル−ｎ−ブチルスルホニル、３−メチル−ｎ−ブチルスルホニル、１，１−ジメチル−ｎ−プロピルスルホニル、１，２−ジメチル−ｎ−プロピルスルホニル、２，２−ジメチル−ｎ−プロピルスルホニル、１−エチル−ｎ−プロピルスルホニル、ｃ−ペンチルスルホニル、１−メチル−ｃ−ブチルスルホニル、２−メチル−ｃ−ブチルスルホニル、３−メチル−ｃ−ブチルスルホニル、１，２−ジメチル−ｃ−プロピルスルホニル、２，３−ジメチル−ｃ−プロピルスルホニル、１−エチル−ｃ−プロピルスルホニル、２−エチル−ｃ−プロピルスルホニル、ｎ−ヘキシルスルホニル、１−メチル−ｎ−ペンチルスルホニル、２−メチル−ｎ−ペンチルスルホニル、３−メチル−ｎ−ペンチルスルホニル、４−メチル−ｎ−ペンチルスルホニル、１，１−ジメチル−ｎ−ブチルスルホニル、１，２−ジメチル−ｎ−ブチルスルホニル、１，３−ジメチル−ｎ−ブチルスルホニル、２，２−ジメチル−ｎ−ブチルスルホニル、２，３−ジメチル−ｎ−ブチルスルホニル、３，３−ジメチル−ｎ−ブチルスルホニル、１−エチル−ｎ−ブチルスルホニル、２−エチル−ｎ−ブチルスルホニル、１，１，２−トリメチル−ｎ−プロピルスルホニル、１，２，２−トリメチル−ｎ−プロピルスルホニル、１−エチル−１−メチル−ｎ−プロピルスルホニル、１−エチル−２−メチル−ｎ−プロピルスルホニル、ｃ−ヘキシルスルホニル、１−メチル−ｃ−ペンチルスルホニル、２−メチル−ｃ−ペンチルスルホニル、３−メチル−ｃ−ペンチルスルホニル、１−エチル−ｃ−ブチルスルホニル、２−エチル−ｃ−ブチルスルホニル、３−エチル−ｃ−ブチルスルホニル、１，２−ジメチル−ｃ−ブチルスルホニル、１，３−ジメチル−ｃ−ブチルスルホニル、２，２−ジメチル−ｃ−ブチルスルホニル、２，３−ジメチル−ｃ−ブチルスルホニル、２，４−ジメチル−ｃ−ブチルスルホニル、３，３−ジメチル−ｃ−ブチルスルホニル、１−ｎ−プロピル−ｃ−プロピルスルホニル、２−ｎ−プロピル−ｃ−プロピルスルホニル、１−ｉ−プロピル−ｃ−プロピルスルホニル、２−ｉ−プロピル−ｃ−プロピルスルホニル、１，２，２−トリメチル−ｃ−プロピルスルホニル、１，２，３−トリメチル−ｃ−プロピルスルホニル、２，２，３−トリメチル−ｃ−プロピルスルホニル、１−エチル−２−メチル−ｃ−プロピルスルホニル、２−エチル−１−メチル−ｃ−プロピルスルホニル、２−エチル−２−メチル−ｃ−プロピルスルホニル、２−エチル−３−メチル−ｃ−プロピルスルホニル、１−メチル−１−エチル−ｎ−ペンチルスルホニル、１−ヘプチルスルホニル、２−ヘプチルスルホニル、１−エチル−１，２−ジメチル−ｎ−プロピルスルホニル、１−エチル−２，２−ジメチル−ｎ−プロピルスルホニル、１−オクチルスルホニル、３−オクチルスルホニル、４−メチル−３−ｎ−ヘプチルスルホニル、６−メチル−２−ｎ−ヘプチルスルホニル、２−プロピル−１−ｎ−ヘプチルスルホニル、２，４，４−トリメチル−１−ｎ−ペンチルスルホニル、１−ノニルスルホニル、２−ノニルスルホニル、２，６−ジメチル−４−ｎ−ヘプチルスルホニル、３−エチル−２，２−ジメチル−３−ｎ−ペンチルスルホニル、３，５，５−トリメチル−１−ｎ−へキシルスルホニル、１−デシルスルホニル、２−デシルスルホニル、４−デシルスルホニル、３，７−ジメチル−１−ｎ−オクチルスルホニル、３，７−ジメチル−３−ｎ−オクチルスルホニル等が挙げられる。

【0082】

Ｃ_１−１０アルキルスルホニルアミノ基としては、直鎖、分枝若しくはＣ_３−１０シクロアルキルスルホニルアミノ基を含んでいてもよい。その具体例としては、メチルスルホニルアミノ、エチルスルホニルアミノ、ｎ−プロピルスルホニルアミノ、ｉ−プロピルスルホニルアミノ、ｃ−プロピルスルホニルアミノ、ｎ−ブチルスルホニルアミノ、ｉ−ブチルスルホニルアミノ、ｓ−ブチルスルホニルアミノ、ｔ−ブチルスルホニルアミノ、ｃ−ブチルスルホニルアミノ、１−メチル−ｃ−プロピルスルホニルアミノ、２−メチル−ｃ−プロピルスルホニルアミノ、ｎ−ペンチルスルホニルアミノ、１−メチル−ｎ−ブチルスルホニルアミノ、２−メチル−ｎ−ブチルスルホニルアミノ、３−メチル−ｎ−ブチルスルホニルアミノ、１，１−ジメチル−ｎ−プロピルスルホニルアミノ、１，２−ジメチル−ｎ−プロピルスルホニルアミノ、２，２−ジメチル−ｎ−プロピルスルホニルアミノ、１−エチル−ｎ−プロピルスルホニルアミノ、ｃ−ペンチルスルホニルアミノ、１−メチル−ｃ−ブチルスルホニルアミノ、２−メチル−ｃ−ブチルスルホニルアミノ、３−メチル−ｃ−ブチルスルホニルアミノ、１，２−ジメチル−ｃ−プロピルスルホニルアミノ、２，３−ジメチル−ｃ−プロピルスルホニルアミノ、１−エチル−ｃ−プロピルスルホニルアミノ、２−エチル−ｃ−プロピルスルホニルアミノ、ｎ−ヘキシルスルホニルアミノ、１−メチル−ｎ−ペンチルスルホニルアミノ、２−メチル−ｎ−ペンチルスルホニルアミノ、３−メチル−ｎ−ペンチルスルホニルアミノ、４−メチル−ｎ−ペンチルスルホニルアミノ、１，１−ジメチル−ｎ−ブチルスルホニルアミノ、１，２−ジメチル−ｎ−ブチルスルホニルアミノ、１，３−ジメチル−ｎ−ブチルスルホニルアミノ、２，２−ジメチル−ｎ−ブチルスルホニルアミノ、２，３−ジメチル−ｎ−ブチルスルホニルアミノ、３，３−ジメチル−ｎ−ブチルスルホニルアミノ、１−エチル−ｎ−ブチルスルホニルアミノ、２−エチル−ｎ−ブチルスルホニルアミノ、１，１，２−トリメチル−ｎ−プロピルスルホニルアミノ、１，２，２−トリメチル−ｎ−プロピルスルホニルアミノ、１−エチル−１−メチル−ｎ−プロピルスルホニルアミノ、１−エチル−２−メチル−ｎ−プロピルスルホニルアミノ、ｃ−ヘキシルスルホニルアミノ、１−メチル−ｃ−ペンチルスルホニルアミノ、２−メチル−ｃ−ペンチルスルホニルアミノ、３−メチル−ｃ−ペンチルスルホニルアミノ、１−エチル−ｃ−ブチルスルホニルアミノ、２−エチル−ｃ−ブチルスルホニルアミノ、３−エチル−ｃ−ブチルスルホニルアミノ、１，２−ジメチル−ｃ−ブチルスルホニルアミノ、１，３−ジメチル−ｃ−ブチルスルホニルアミノ、２，２−ジメチル−ｃ−ブチルスルホニルアミノ、２，３−ジメチル−ｃ−ブチルスルホニルアミノ、２，４−ジメチル−ｃ−ブチルスルホニルアミノ、３，３−ジメチル−ｃ−ブチルスルホニルアミノ、１−ｎ−プロピル−ｃ−プロピルスルホニルアミノ、２−ｎ−プロピル−ｃ−プロピルスルホニルアミノ、１−ｉ−プロピル−ｃ−プロピルスルホニルアミノ、２−ｉ−プロピル−ｃ−プロピルスルホニルアミノ、１，２，２−トリメチル−ｃ−プロピルスルホニルアミノ、１，２，３−トリメチル−ｃ−プロピルスルホニルアミノ、２，２，３−トリメチル−ｃ−プロピルスルホニルアミノ、１−エチル−２−メチル−ｃ−プロピルスルホニルアミノ、２−エチル−１−メチル−ｃ−プロピルスルホニルアミノ、２−エチル−２−メチル−ｃ−プロピルスルホニルアミノ、２−エチル−３−メチル−ｃ−プロピルスルホニルアミノ、１−メチル−１−エチル−ｎ−ペンチルスルホニルアミノ、１−ヘプチルスルホニルアミノ、２−ヘプチルスルホニルアミノ、１−エチル−１，２−ジメチル−ｎ−プロピルスルホニルアミノ、１−エチル−２，２−ジメチル−ｎ−プロピルスルホニルアミノ、１−オクチルスルホニルアミノ、３−オクチルスルホニルアミノ、４−メチル−３−ｎ−ヘプチルスルホニルアミノ、６−メチル−２−ｎ−ヘプチルスルホニルアミノ、２−プロピル−１−ｎ−ヘプチルスルホニルアミノ、２，４，４−トリメチル−１−ｎ−ペンチルスルホニルアミノ、１−ノニルスルホニルアミノ、２−ノニルスルホニルアミノ、２，６−ジメチル−４−ｎ−ヘプチルスルホニルアミノ、３−エチル−２，２−ジメチル−３−ｎ−ペンチルスルホニルアミノ、３，５，５−トリメチル−１−ｎ−へキシルスルホニルアミノ、１−デシルスルホニルアミノ、２−デシルスルホニルアミノ、４−デシルスルホニルアミノ、３，７−ジメチル−１−ｎ−オクチルスルホニルアミノ、３，７−ジメチル−３−ｎ−オクチルスルホニルアミノ、ｃ−ヘプチルスルホニルアミノ、ｃ−オクチルスルホニルアミノ、１−メチル−ｃ−ヘキシルスルホニルアミノ、２−メチル−ｃ−ヘキシルスルホニルアミノ、３−メチル−ｃ−ヘキシルスルホニルアミノ、１，２−ジメチル−ｃ−ヘキシルスルホニルアミノ、１−エチル−ｃ−ヘキシルスルホニルアミノ、１−メチル−ｃ−ペンチルスルホニルアミノ、２−メチル−ｃ−ペンチルスルホニルアミノ、３−メチル−ｃ−ペンチルスルホニルアミノ等が挙げられる。

【0083】

Ｃ_１−３アルコキシ基としては、直鎖、分枝若しくはＣ_３シクロアルコキシ基を含んでいてもよい。その具体例としては、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、ｉ−プロポキシ、ｃ−プロポキシ等が挙げられる。

【0084】

Ｃ_１−６アルコキシ基としては、直鎖、分枝若しくはＣ_３−６シクロアルコキシ基を含んでいてもよい。その具体例としては、上記の例示に加え、ｎ−ブトキシ、ｉ−ブトキシ、ｓ−ブトキシ、ｔ−ブトキシ、ｃ−ブトキシ、１−メチル−ｃ−プロポキシ、２−メチル−ｃ−プロポキシ、ｎ−ペンチルオキシ、１−メチル−ｎ−ブトキシ、２−メチル−ｎ−ブトキシ、３−メチル−ｎ−ブトキシ、１，１−ジメチル−ｎ−プロポキシ、１，２−ジメチル−ｎ−プロポキシ、２，２−ジメチル−ｎ−プロポキシ、１−エチル−ｎ−プロポキシ、ｃ−ペンチルオキシ、１−メチル−ｃ−ブトキシ、２−メチル−ｃ−ブトキシ、３−メチル−ｃ−ブトキシ、１，２−ジメチル−ｃ−プロポキシ、２，３−ジメチル−ｃ−プロポキシ、１−エチル−ｃ−プロポキシ、２−エチル−ｃ−プロポキシ、ｎ−ヘキシルオキシ、１−メチル−ｎ−ペンチルオキシ、２−メチル−ｎ−ペンチルオキシ、３−メチル−ｎ−ペンチルオキシ、４−メチル−ｎ−ペンチルオキシ、１，１−ジメチル−ｎ−ブトキシ、１，２−ジメチル−ｎ−ブトキシ、１，３−ジメチル−ｎ−ブトキシ、２，２−ジメチル−ｎ−ブトキシ、２，３−ジメチル−ｎ−ブトキシ、３，３−ジメチル−ｎ−ブトキシ、１−エチル−ｎ−ブトキシ、２−エチル−ｎ−ブトキシ、１，１，２−トリメチル−ｎ−プロポキシ、１，２，２−トリメチル−ｎ−プロポキシ、１−エチル−１−メチル−ｎ−プロポキシ、１−エチル−２−メチル−ｎ−プロポキシ、ｃ−ヘキシルオキシ、１−メチル−ｃ−ペンチルオキシ、２−メチル−ｃ−ペンチルオキシ、３−メチル−ｃ−ペンチルオキシ、１−エチル−ｃ−ブトキシ、２−エチル−ｃ−ブトキシ、３−エチル−ｃ−ブトキシ、１，２−ジメチル−ｃ−ブトキシ、１，３−ジメチル−ｃ−ブトキシ、２，２−ジメチル−ｃ−ブトキシ、２，３−ジメチル−ｃ−ブトキシ、２，４−ジメチル−ｃ−ブトキシ、３，３−ジメチル−ｃ−ブトキシ、１−ｎ−プロピル−ｃ−プロポキシ、２−ｎ−プロピル−ｃ−プロポキシ、１−ｉ−プロピル−ｃ−プロポキシ、２−ｉ−プロピル−ｃ−プロポキシ、１，２，２−トリメチル−ｃ−プロポキシ、１，２，３−トリメチル−ｃ−プロポキシ、２，２，３−トリメチル−ｃ−プロポキシ、１−エチル−２−メチル−ｃ−プロポキシ、２−エチル−１−メチル−ｃ−プロポキシ、２−エチル−２−メチル−ｃ−プロポキシ、２−エチル−３−メチル−ｃ−プロポキシ等が挙げられる。

【0085】

Ｃ_１−１０アルコキシ基としては直鎖、分枝若しくはＣ_３−１０シクロアルコキシ基を含んでいてもよい。その具体例としては、上記の例示に加え、
１−メチル−１−エチル−ｎ−ペンチルオキシ、１−ヘプチルオキシ、２−ヘプチルオキシ、１−エチル−１，２−ジメチル−ｎ−プロピルオキシ、１−エチル−２，２−ジメチル−ｎ−プロピルオキシ、１−オクチルオキシ、３−オクチルオキシ、４−メチル−３−ｎ−ヘプチルオキシ、６−メチル−２−ｎ−ヘプチルオキシ、２−プロピル−１−ｎ−ヘプチルオキシ、２，４，４−トリメチル−１−ｎ−ペンチルオキシ、１−ノニルオキシ、２−ノニルオキシ、２，６−ジメチル−４−ｎ−ヘプチルオキシ、３−エチル−２，２−ジメチル−３−ｎ−ペンチルオキシ、３，５，５−トリメチル−１−ｎ−へキシルオキシ、１−デシルオキシ、２−デシルオキシ、４−デシルオキシ、３，７−ジメチル−１−ｎ−オクチルオキシ、３，７−ジメチル−３−ｎ−オクチルオキシ等が挙げられる。

【0086】

Ｃ_１−１０アルコキシカルボニル基としては、直鎖、分枝若しくはＣ_３−１０シクロアルコキシカルボニル基を含んでいてもよい。その具体例としては、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、ｎ−プロポキシカルボニル、ｉ−プロポキシカルボニル、ｃ−プロポキシカルボニル、ｎ−ブトキシカルボニル、ｉ−ブトキシカルボニル、ｓ−ブトキシカルボニル、ｔ−ブトキシカルボニル、ｃ−ブトキシカルボニル、１−メチル−ｃ−プロポキシカルボニル、２−メチル−ｃ−プロポキシカルボニル、ｎ−ペンチルオキシカルボニル、１−メチル−ｎ−ブトキシカルボニル、２−メチル−ｎ−ブトキシカルボニル、３−メチル−ｎ−ブトキシカルボニル、１，１−ジメチル−ｎ−プロポキシカルボニル、１，２−ジメチル−ｎ−プロポキシカルボニル、２，２−ジメチル−ｎ−プロポキシカルボニル、１−エチル−ｎ−プロポキシカルボニル、ｃ−ペンチルオキシカルボニル、１−メチル−ｃ−ブトキシカルボニル、２−メチル−ｃ−ブトキシカルボニル、３−メチル−ｃ−ブトキシカルボニル、１，２−ジメチル−ｃ−プロポキシカルボニル、２，３−ジメチル−ｃ−プロポキシカルボニル、１−エチル−ｃ−プロポキシカルボニル、２−エチル−ｃ−プロポキシカルボニル、ｎ−ヘキシルオキシカルボニル、１−メチル−ｎ−ペンチルオキシカルボニル、２−メチル−ｎ−ペンチルオキシカルボニル、３−メチル−ｎ−ペンチルオキシカルボニル、４−メチル−ｎ−ペンチルオキシカルボニル、１，１−ジメチル−ｎ−ブトキシカルボニル、１，２−ジメチル−ｎ−ブトキシカルボニル、１，３−ジメチル−ｎ−ブトキシカルボニル、２，２−ジメチル−ｎ−ブトキシカルボニル、２，３−ジメチル−ｎ−ブトキシカルボニル、３，３−ジメチル−ｎ−ブトキシカルボニル、１−エチル−ｎ−ブトキシカルボニル、２−エチル−ｎ−ブトキシカルボニル、１，１，２−トリメチル−ｎ−プロポキシカルボニル、１，２，２−トリメチル−ｎ−プロポキシカルボニル、１−エチル−１−メチル−ｎ−プロポキシカルボニル、１−エチル−２−メチル−ｎ−プロポキシカルボニル、ｃ−ヘキシルオキシカルボニル、１−メチル−ｃ−ペンチルオキシカルボニル、２−メチル−ｃ−ペンチルオキシカルボニル、３−メチル−ｃ−ペンチルオキシカルボニル、１−エチル−ｃ−ブトキシカルボニル、２−エチル−ｃ−ブトキシカルボニル、３−エチル−ｃ−ブトキシカルボニル、１，２−ジメチル−ｃ−ブトキシカルボニル、１，３−ジメチル−ｃ−ブトキシカルボニル、２，２−ジメチル−ｃ−ブトキシカルボニル、２，３−ジメチル−ｃ−ブトキシカルボニル、２，４−ジメチル−ｃ−ブトキシカルボニル、３，３−ジメチル−ｃ−ブトキシカルボニル、１−ｎ−プロピル−ｃ−プロポキシカルボニル、２−ｎ−プロピル−ｃ−プロポキシカルボニル、１−ｉ−プロピル−ｃ−プロポキシカルボニル、２−ｉ−プロピル−ｃ−プロポキシカルボニル、１，２，２−トリメチル−ｃ−プロポキシカルボニル、１，２，３−トリメチル−ｃ−プロポキシカルボニル、２，２，３−トリメチル−ｃ−プロポキシカルボニル、１−エチル−２−メチル−ｃ−プロポキシカルボニル、２−エチル−１−メチル−ｃ−プロポキシカルボニル、２−エチル−２−メチル−ｃ−プロポキシカルボニル、２−エチル−３−メチル−ｃ−プロポキシカルボニル、１−メチル−１−エチル−ｎ−ペンチルオキシカルボニル、１−ヘプチルオキシカルボニル、２−ヘプチルオキシカルボニル、１−エチル−１，２−ジメチル−ｎ−プロピルオキシカルボニル、１−エチル−２，２−ジメチル−ｎ−プロピルオキシカルボニル、１−オクチルオキシカルボニル、３−オクチルオキシカルボニル、４−メチル−３−ｎ−ヘプチルオキシカルボニル、６−メチル−２−ｎ−ヘプチルオキシカルボニル、２−プロピル−１−ｎ−ヘプチルオキシカルボニル、２，４，４−トリメチル−１−ｎ−ペンチルオキシカルボニル、１−ノニルオキシカルボニル、２−ノニルオキシカルボニル、２，６−ジメチル−４−ｎ−ヘプチルオキシカルボニル、３−エチル−２，２−ジメチル−３−ｎ−ペンチルオキシカルボニル、３，５，５−トリメチル−１−ｎ−へキシルオキシカルボニル、１−デシルオキシカルボニル、２−デシルオキシカルボニル、４−デシルオキシカルボニル、３，７−ジメチル−１−ｎ−オクチルオキシカルボニル、３，７−ジメチル−３−ｎ−オクチルオキシカルボニル等が挙げられる。

【0087】

Ｃ_１−３アルキルカルボニル基としては、直鎖、分枝若しくはＣ_３シクロアルキルカルボニル基を含んでいてもよい。その具体例としては、メチルカルボニル、エチルスカルボニル、ｎ−プロピルカルボニル、ｉ−プロピルカルボニル、ｃ−プロピルカルボニル等が挙げられる。

【0088】

Ｃ_１−１０アルキルカルボニル基としては、直鎖、分枝若しくはＣ_３−１０シクロアルキルカルボニル基を含んでいてもよい。その具体例としては、上記に加えてｎ−ブチルカルボニル、ｉ−ブチルカルボニル、ｓ−ブチルカルボニル、ｔ−ブチルカルボニル、ｃ−ブチルカルボニル、１−メチル−ｃ−プロピルカルボニル、２−メチル−ｃ−プロピルカルボニル、ｎ−ペンチルカルボニル、１−メチル−ｎ−ブチルカルボニル、２−メチル−ｎ−ブチルカルボニル、３−メチル−ｎ−ブチルカルボニル、１，１−ジメチル−ｎ−プロピルカルボニル、１，２−ジメチル−ｎ−プロピルカルボニル、２，２−ジメチル−ｎ−プロピルカルボニル、１−エチル−ｎ−プロピルカルボニル、ｃ−ペンチルカルボニル、１−メチル−ｃ−ブチルカルボニル、２−メチル−ｃ−ブチルカルボニル、３−メチル−ｃ−ブチルカルボニル、１，２−ジメチル−ｃ−プロピルカルボニル、２，３−ジメチル−ｃ−プロピルカルボニル、１−エチル−ｃ−プロピルカルボニル、２−エチル−ｃ−プロピルカルボニル、ｎ−ヘキシルカルボニル、１−メチル−ｎ−ペンチルカルボニル、２−メチル−ｎ−ペンチルカルボニル、３−メチル−ｎ−ペンチルカルボニル、４−メチル−ｎ−ペンチルカルボニル、１，１−ジメチル−ｎ−ブチルカルボニル、１，２−ジメチル−ｎ−ブチルカルボニル、１，３−ジメチル−ｎ−ブチルカルボニル、２，２−ジメチル−ｎ−ブチルカルボニル、２，３−ジメチル−ｎ−ブチルカルボニル、３，３−ジメチル−ｎ−ブチルカルボニル、１−エチル−ｎ−ブチルカルボニル、２−エチル−ｎ−ブチルカルボニル、１，１，２−トリメチル−ｎ−プロピルカルボニル、１，２，２−トリメチル−ｎ−プロピルカルボニル、１−エチル−１−メチル−ｎ−プロピルカルボニル、１−エチル−２−メチル−ｎ−プロピルカルボニル、ｃ−ヘキシルカルボニル、１−メチル−ｃ−ペンチルカルボニル、２−メチル−ｃ−ペンチルカルボニル、３−メチル−ｃ−ペンチルカルボニル、１−エチル−ｃ−ブチルカルボニル、２−エチル−ｃ−ブチルカルボニル、３−エチル−ｃ−ブチルカルボニル、１，２−ジメチル−ｃ−ブチルカルボニル、１，３−ジメチル−ｃ−ブチルカルボニル、２，２−ジメチル−ｃ−ブチルカルボニル、２，３−ジメチル−ｃ−ブチルカルボニル、２，４−ジメチル−ｃ−ブチルカルボニル、３，３−ジメチル−ｃ−ブチルカルボニル、１−ｎ−プロピル−ｃ−プロピルカルボニル、２−ｎ−プロピル−ｃ−プロピルカルボニル、１−ｉ−プロピル−ｃ−プロピルカルボニル、２−ｉ−プロピル−ｃ−プロピルカルボニル、１，２，２−トリメチル−ｃ−プロピルカルボニル、１，２，３−トリメチル−ｃ−プロピルカルボニル、２，２，３−トリメチル−ｃ−プロピルカルボニル、１−エチル−２−メチル−ｃ−プロピルカルボニル、２−エチル−１−メチル−ｃ−プロピルカルボニル、２−エチル−２−メチル−ｃ−プロピルカルボニル、２−エチル−３−メチル−ｃ−プロピルカルボニル、１−メチル−１−エチル−ｎ−ペンチルカルボニル、１−ヘプチルカルボニル、２−ヘプチルカルボニル、１−エチル−１，２−ジメチル−ｎ−プロピルカルボニル、１−エチル−２，２−ジメチル−ｎ−プロピルカルボニル、１−オクチルカルボニル、３−オクチルカルボニル、４−メチル−３−ｎ−ヘプチルカルボニル、６−メチル−２−ｎ−ヘプチルカルボニル、２−プロピル−１−ｎ−ヘプチルカルボニル、２，４，４−トリメチル−１−ｎ−ペンチルカルボニル、１−ノニルカルボニル、２−ノニルカルボニル、２，６−ジメチル−４−ｎ−ヘプチルカルボニル、３−エチル−２，２−ジメチル−３−ｎ−ペンチルカルボニル、３，５，５−トリメチル−１−ｎ−へキシルカルボニル、１−デシルカルボニル、２−デシルカルボニル、４−デシルカルボニル、３，７−ジメチル−１−ｎ−オクチルカルボニル、３，７−ジメチル−３−ｎ−オクチルカルボニル等が挙げられる。

【0089】

Ｃ_１−１０アルキルカルボニルオキシ基としては、直鎖、分枝若しくはＣ_３−１０シクロアルキルカルボニルオキシ基を含んでいてもよい。その具体例としては、上記の例示に加え、ｎ−ブチルカルボニルオキシ、ｉ−ブチルカルボニルオキシ、ｓ−ブチルカルボニルオキシ、ｔ−ブチルカルボニルオキシ、ｃ−ブチルカルボニルオキシ、１−メチル−ｃ−プロピルカルボニルオキシ、２−メチル−ｃ−プロピルカルボニルオキシ、ｎ−ペンチルカルボニルオキシ、１−メチル−ｎ−ブチルカルボニルオキシ、２−メチル−ｎ−ブチルカルボニルオキシ、３−メチル−ｎ−ブチルカルボニルオキシ、１，１−ジメチル−ｎ−プロピルカルボニルオキシ、１，２−ジメチル−ｎ−プロピルカルボニルオキシ、２，２−ジメチル−ｎ−プロピルカルボニルオキシ、１−エチル−ｎ−プロピルカルボニルオキシ、ｃ−ペンチルカルボニルオキシ、１−メチル−ｃ−ブチルカルボニルオキシ、２−メチル−ｃ−ブチルカルボニルオキシ、３−メチル−ｃ−ブチルカルボニルオキシ、１，２−ジメチル−ｃ−プロピルカルボニルオキシ、２，３−ジメチル−ｃ−プロピルカルボニルオキシ、１−エチル−ｃ−プロピルカルボニルオキシ、２−エチル−ｃ−プロピルカルボニルオキシ、ｎ−ヘキシルカルボニルオキシ、１−メチル−ｎ−ペンチルカルボニルオキシ、２−メチル−ｎ−ペンチルカルボニルオキシ、３−メチル−ｎ−ペンチルカルボニルオキシ、４−メチル−ｎ−ペンチルカルボニルオキシ、１，１−ジメチル−ｎ−ブチルカルボニルオキシ、１，２−ジメチル−ｎ−ブチルカルボニルオキシ、１，３−ジメチル−ｎ−ブチルカルボニルオキシ、２，２−ジメチル−ｎ−ブチルカルボニルオキシ、２，３−ジメチル−ｎ−ブチルカルボニルオキシ、３，３−ジメチル−ｎ−ブチルカルボニルオキシ、１−エチル−ｎ−ブチルカルボニルオキシ、２−エチル−ｎ−ブチルカルボニルオキシ、１，１，２−トリメチル−ｎ−プロピルカルボニルオキシ、１，２，２−トリメチル−ｎ−プロピルカルボニルオキシ、１−エチル−１−メチル−ｎ−プロピルカルボニルオキシ、１−エチル−２−メチル−ｎ−プロピルカルボニルオキシ、ｃ−ヘキシルカルボニルオキシ、１−メチル−ｃ−ペンチルカルボニルオキシ、２−メチル−ｃ−ペンチルカルボニルオキシ、３−メチル−ｃ−ペンチルカルボニルオキシ、１−エチル−ｃ−ブチルカルボニルオキシ、２−エチル−ｃ−ブチルカルボニルオキシ、３−エチル−ｃ−ブチルカルボニルオキシ、１，２−ジメチル−ｃ−ブチルカルボニルオキシ、１，３−ジメチル−ｃ−ブチルカルボニルオキシ、２，２−ジメチル−ｃ−ブチルカルボニルオキシ、２，３−ジメチル−ｃ−ブチルカルボニルオキシ、２，４−ジメチル−ｃ−ブチルカルボニルオキシ、３，３−ジメチル−ｃ−ブチルカルボニルオキシ、１−ｎ−プロピル−ｃ−プロピルカルボニルオキシ、２−ｎ−プロピル−ｃ−プロピルカルボニルオキシ、１−ｉ−プロピル−ｃ−プロピルカルボニルオキシ、２−ｉ−プロピル−ｃ−プロピルカルボニルオキシ、１，２，２−トリメチル−ｃ−プロピルカルボニルオキシ、１，２，３−トリメチル−ｃ−プロピルカルボニルオキシ、２，２，３−トリメチル−ｃ−プロピルカルボニルオキシ、１−エチル−２−メチル−ｃ−プロピルカルボニルオキシ、２−エチル−１−メチル−ｃ−プロピルカルボニルオキシ、２−エチル−２−メチル−ｃ−プロピルカルボニルオキシ、２−エチル−３−メチル−ｃ−プロピルカルボニルオキシ、１−メチル−１−エチル−ｎ−ペンチルカルボニルオキシ、１−ヘプチルカルボニルオキシ、２−ヘプチルカルボニルオキシ、１−エチル−１，２−ジメチル−ｎ−プロピルカルボニルオキシ、１−エチル−２，２−ジメチル−ｎ−プロピルカルボニルオキシ、１−オクチルカルボニルオキシ、３−オクチルカルボニルオキシ、４−メチル−３−ｎ−ヘプチルカルボニルオキシ、６−メチル−２−ｎ−ヘプチルカルボニルオキシ、２−プロピル−１−ｎ−ヘプチルカルボニルオキシ、２，４，４−トリメチル−１−ｎ−ペンチルカルボニルオキシ、１−ノニルカルボニルオキシ、２−ノニルカルボニルオキシ、２，６−ジメチル−４−ｎ−ヘプチルカルボニルオキシ、３−エチル−２，２−ジメチル−３−ｎ−ペンチルカルボニルオキシ、３，５，５−トリメチル−１−ｎ−へキシルカルボニルオキシ、１−デシルカルボニルオキシ、２−デシルカルボニルオキシ、４−デシルカルボニルオキシ、３，７−ジメチル−１−ｎ−オクチルカルボニルオキシ、３，７−ジメチル−３−ｎ−オクチルカルボニルオキシ等が挙げられる。

【0090】

Ｃ_１−１０アルキルカルボニルアミノ基としては、直鎖、分枝若しくはＣ_３−１０シクロアルキルカルボニルアミノ基を含んでいてもよい。その具体例としては、メチルカルボニルアミノ、エチルカルボニルアミノ、ｎ−プロピルカルボニルアミノ、ｉ−プロピルカルボニルアミノ、ｃ−プロピルカルボニルアミノ、ｎ−ブチルカルボニルアミノ、ｉ−ブチルカルボニルアミノ、ｓ−ブチルカルボニルアミノ、ｔ−ブチルカルボニルアミノ、ｃ−ブチルカルボニルアミノ、１−メチル−ｃ−プロピルカルボニルアミノ、２−メチル−ｃ−プロピルカルボニルアミノ、ｎ−ペンチルカルボニルアミノ、１−メチル−ｎ−ブチルカルボニルアミノ、２−メチル−ｎ−ブチルカルボニルアミノ、３−メチル−ｎ−ブチルカルボニルアミノ、１，１−ジメチル−ｎ−プロピルカルボニルアミノ、１，２−ジメチル−ｎ−プロピルカルボニルアミノ、２，２−ジメチル−ｎ−プロピルカルボニルアミノ、１−エチル−ｎ−プロピルカルボニルアミノ、ｃ−ペンチルカルボニルアミノ、１−メチル−ｃ−ブチルカルボニルアミノ、２−メチル−ｃ−ブチルカルボニルアミノ、３−メチル−ｃ−ブチルカルボニルアミノ、１，２−ジメチル−ｃ−プロピルカルボニルアミノ、２，３−ジメチル−ｃ−プロピルカルボニルアミノ、１−エチル−ｃ−プロピルカルボニルアミノ、２−エチル−ｃ−プロピルカルボニルアミノ、ｎ−ヘキシルカルボニルアミノ、１−メチル−ｎ−ペンチルカルボニルアミノ、２−メチル−ｎ−ペンチルカルボニルアミノ、３−メチル−ｎ−ペンチルカルボニルアミノ、４−メチル−ｎ−ペンチルカルボニルアミノ、１，１−ジメチル−ｎ−ブチルカルボニルアミノ、１，２−ジメチル−ｎ−ブチルカルボニルアミノ、１，３−ジメチル−ｎ−ブチルカルボニルアミノ、２，２−ジメチル−ｎ−ブチルカルボニルアミノ、２，３−ジメチル−ｎ−ブチルカルボニルアミノ、３，３−ジメチル−ｎ−ブチルカルボニルアミノ、１−エチル−ｎ−ブチルカルボニルアミノ、２−エチル−ｎ−ブチルカルボニルアミノ、１，１，２−トリメチル−ｎ−プロピルカルボニルアミノ、１，２，２−トリメチル−ｎ−プロピルカルボニルアミノ、１−エチル−１−メチル−ｎ−プロピルカルボニルアミノ、１−エチル−２−メチル−ｎ−プロピルカルボニルアミノ、ｃ−ヘキシルカルボニルアミノ、１−メチル−ｃ−ペンチルカルボニルアミノ、２−メチル−ｃ−ペンチルカルボニルアミノ、３−メチル−ｃ−ペンチルカルボニルアミノ、１−エチル−ｃ−ブチルカルボニルアミノ、２−エチル−ｃ−ブチルカルボニルアミノ、３−エチル−ｃ−ブチルカルボニルアミノ、１，２−ジメチル−ｃ−ブチルカルボニルアミノ、１，３−ジメチル−ｃ−ブチルカルボニルアミノ、２，２−ジメチル−ｃ−ブチルカルボニルアミノ、２，３−ジメチル−ｃ−ブチルカルボニルアミノ、２，４−ジメチル−ｃ−ブチルカルボニルアミノ、３，３−ジメチル−ｃ−ブチルカルボニルアミノ、１−ｎ−プロピル−ｃ−プロピルカルボニルアミノ、２−ｎ−プロピル−ｃ−プロピルカルボニルアミノ、１−ｉ−プロピル−ｃ−プロピルカルボニルアミノ、２−ｉ−プロピル−ｃ−プロピルカルボニルアミノ、１，２，２−トリメチル−ｃ−プロピルカルボニルアミノ、１，２，３−トリメチル−ｃ−プロピルカルボニルアミノ、２，２，３−トリメチル−ｃ−プロピルカルボニルアミノ、１−エチル−２−メチル−ｃ−プロピルカルボニルアミノ、２−エチル−１−メチル−ｃ−プロピルカルボニルアミノ、２−エチル−２−メチル−ｃ−プロピルカルボニルアミノ、２−エチル−３−メチル−ｃ−プロピルカルボニルアミノ、１−メチル−１−エチル−ｎ−ペンチルカルボニルアミノ、１−ヘプチルカルボニルアミノ、２−ヘプチルカルボニルアミノ、１−エチル−１，２−ジメチル−ｎ−プロピルカルボニルアミノ、１−エチル−２，２−ジメチル−ｎ−プロピルカルボニルアミノ、１−オクチルカルボニルアミノ、３−オクチルカルボニルアミノ、４−メチル−３−ｎ−ヘプチルカルボニルアミノ、６−メチル−２−ｎ−ヘプチルカルボニルアミノ、２−プロピル−１−ｎ−ヘプチルカルボニルアミノ、２，４，４−トリメチル−１−ｎ−ペンチルカルボニルアミノ、１−ノニルカルボニルアミノ、２−ノニルカルボニルアミノ、２，６−ジメチル−４−ｎ−ヘプチルカルボニルアミノ、３−エチル−２，２−ジメチル−３−ｎ−ペンチルカルボニルアミノ、３，５，５−トリメチル−１−ｎ−へキシルカルボニルアミノ、１−デシルカルボニルアミノ、２−デシルカルボニルアミノ、４−デシルカルボニルアミノ、３，７−ジメチル−１−ｎ−オクチルカルボニルアミノ、３，７−ジメチル−３−ｎ−オクチルカルボニルアミノ等が挙げられる。

【0091】

モノＣ_１−１０アルキルアミノ基としては、直鎖、分枝若しくはＣ_３−１０シクロアルキルアミノ基を含んでいてもよい。その具体例としては、メチルアミノ、エチルアミノ、ｎ−プロピルアミノ、ｉ−プロピルアミノ、ｃ−プロピルアミノ、ｎ−ブチルアミノ、ｉ−ブチルアミノ、ｓ−ブチルアミノ、ｔ−ブチルアミノ、ｃ−ブチルアミノ、１−メチル−ｃ−プロピルアミノ、２−メチル−ｃ−プロピルアミノ、ｎ−ペンチルアミノ、１−メチル−ｎ−ブチルアミノ、２−メチル−ｎ−ブチルアミノ、３−メチル−ｎ−ブチルアミノ、１，１−ジメチル−ｎ−プロピルアミノ、１，２−ジメチル−ｎ−プロピルアミノ、２，２−ジメチル−ｎ−プロピルアミノ、１−エチル−ｎ−プロピルアミノ、ｃ−ペンチルアミノ、１−メチル−ｃ−ブチルアミノ、２−メチル−ｃ−ブチルアミノ、３−メチル−ｃ−ブチルアミノ、１，２−ジメチル−ｃ−プロピルアミノ、２，３−ジメチル−ｃ−プロピルアミノ、１−エチル−ｃ−プロピルアミノ、２−エチル−ｃ−プロピルアミノ、ｎ−ヘキシルアミノ、１−メチル−ｎ−ペンチルアミノ、２−メチル−ｎ−ペンチルアミノ、３−メチル−ｎ−ペンチルアミノ、４−メチル−ｎ−ペンチルアミノ、１，１−ジメチル−ｎ−ブチルアミノ、１，２−ジメチル−ｎ−ブチルアミノ、１，３−ジメチル−ｎ−ブチルアミノ、２，２−ジメチル−ｎ−ブチルアミノ、２，３−ジメチル−ｎ−ブチルアミノ、３，３−ジメチル−ｎ−ブチルアミノ、１−エチル−ｎ−ブチルアミノ、２−エチル−ｎ−ブチルアミノ、１，１，２−トリメチル−ｎ−プロピルアミノ、１，２，２−トリメチル−ｎ−プロピルアミノ、１−エチル−１−メチル−ｎ−プロピルアミノ、１−エチル−２−メチル−ｎ−プロピルアミノ、ｃ−ヘキシルアミノ、１−メチル−ｃ−ペンチルアミノ、２−メチル−ｃ−ペンチルアミノ、３−メチル−ｃ−ペンチルアミノ、１−エチル−ｃ−ブチルアミノ、２−エチル−ｃ−ブチルアミノ、３−エチル−ｃ−ブチルアミノ、１，２−ジメチル−ｃ−ブチルアミノ、１，３−ジメチル−ｃ−ブチルアミノ、２，２−ジメチル−ｃ−ブチルアミノ、２，３−ジメチル−ｃ−ブチルアミノ、２，４−ジメチル−ｃ−ブチルアミノ、３，３−ジメチル−ｃ−ブチルアミノ、１−ｎ−プロピル−ｃ−プロピルアミノ、２−ｎ−プロピル−ｃ−プロピルアミノ、１−ｉ−プロピル−ｃ−プロピルアミノ、２−ｉ−プロピル−ｃ−プロピルアミノ、１，２，２−トリメチル−ｃ−プロピルアミノ、１，２，３−トリメチル−ｃ−プロピルアミノ、２，２，３−トリメチル−ｃ−プロピルアミノ、１−エチル−２−メチル−ｃ−プロピルアミノ、２−エチル−１−メチル−ｃ−プロピルアミノ、２−エチル−２−メチル−ｃ−プロピルアミノ、２−エチル−３−メチル−ｃ−プロピルアミノ、１−メチル−１−エチル−ｎ−ペンチルアミノ、１−ヘプチルアミノ、２−ヘプチルアミノ、１−エチル−１，２−ジメチル−ｎ−プロピルアミノ、１−エチル−２，２−ジメチル−ｎ−プロピルアミノ、１−オクチルアミノ、３−オクチルアミノ、４−メチル−３−ｎ−ヘプチルアミノ、６−メチル−２−ｎ−ヘプチルアミノ、２−プロピル−１−ｎ−ヘプチルアミノ、２，４，４−トリメチル−１−ｎ−ペンチルアミノ、１−ノニルアミノ、２−ノニルアミノ、２，６−ジメチル−４−ｎ−ヘプチルアミノ、３−エチル−２，２−ジメチル−３−ｎ−ペンチルアミノ、３，５，５−トリメチル−１−ｎ−へキシルアミノ、１−デシルアミノ、２−デシルアミノ、４−デシルアミノ、３，７−ジメチル−１−ｎ−オクチルアミノ、３，７−ジメチル−３−ｎ−オクチルアミノ等が挙げられる。

【0092】

ジＣ_１−１０アルキルアミノ基としては、対称及び非対称を含んでいてもよい。対称ジＣ_１−１０アルキルアミノ基としては、直鎖、分枝若しくはＣ_３−１０シクロアルキルアミノ基を含んでいてもよい。その具体例としては、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、ジ−ｎ−プロピルアミノ、ジ−ｉ−プロピルアミノ、ジ−ｃ−プロピルアミノ、ジ−ｎ−ブチルアミノ、ジ−ｉ−ブチルアミノ、ジ−ｓ−ブチルアミノ、ジ−ｔ−ブチルアミノ、ジ−ｃ−ブチルアミノ、ジ−（１−メチル−ｃ−プロピル）アミノ、ジ−（２−メチル−ｃ−プロピル）アミノ、ジ−ｎ−ペンチルアミノ、ジ−（１−メチル−ｎ−ブチル）アミノ、ジ−（２−メチル−ｎ−ブチル）アミノ、ジ−（３−メチル−ｎ−ブチル）アミノ、ジ−（１，１−ジメチル−ｎ−プロピル）アミノ、ジ−（１，２−ジメチル−ｎ−プロピル）アミノ、ジ−（２，２−ジメチル−ｎ−プロピル）アミノ、ジ−（１−エチル−ｎ−プロピル）アミノ、ジ−ｃ−ペンチルアミノ、ジ−（１−メチル−ｃ−ブチル）アミノ、ジ−（２−メチル−ｃ−ブチル）アミノ、ジ−（３−メチル−ｃ−ブチル）アミノ、ジ−（１，２−ジメチル−ｃ−プロピル）アミノ、ジ−（２，３−ジメチル−ｃ−プロピル）アミノ、ジ−（１−エチル−ｃ−プロピル）アミノ、ジ−（２−エチル−ｃ−プロピル）アミノ、ジ−ｎ−ヘキシルアミノ、ジ−（１−メチル−ｎ−ペンチル）アミノ、ジ−（２−メチル−ｎ−ペンチル）アミノ、ジ−（３−メチル−ｎ−ペンチル）アミノ、ジ−（４−メチル−ｎ−ペンチル）アミノ、ジ−（１，１−ジメチル−ｎ−ブチル）アミノ、ジ−（１，２−ジメチル−ｎ−ブチル）アミノ、ジ−（１，３−ジメチル−ｎ−ブチル）アミノ、ジ−（２，２−ジメチル−ｎ−ブチル）アミノ、ジ−（２，３−ジメチル−ｎ−ブチル）アミノ、ジ−（３，３−ジメチル−ｎ−ブチル）アミノ、ジ−（１−エチル−ｎ−ブチル）アミノ、ジ−（２−エチル−ｎ−ブチル）アミノ、ジ−（１，１，２−トリメチル−ｎ−プロピル）アミノ、ジ−（１，２，２−トリメチル−ｎ−プロピル）アミノ、ジ−（１−エチル−１−メチル−ｎ−プロピル）アミノ、ジ−（１−エチル−２−メチル−ｎ−プロピル）アミノ、ジ−ｃ−ヘキシルアミノ、ジ−（１−メチル−ｃ−ペンチル）アミノ、ジ−（２−メチル−ｃ−ペンチル）アミノ、ジ−（３−メチル−ｃ−ペンチル）アミノ、ジ−（１−エチル−ｃ−ブチル）アミノ、ジ−（２−エチル−ｃ−ブチル）アミノ、ジ−（３−エチル−ｃ−ブチル）アミノ、ジ−（１，２−ジメチル−ｃ−ブチル）アミノ、ジ−（１，３−ジメチル−ｃ−ブチル）アミノ、ジ−（２，２−ジメチル−ｃ−ブチル）アミノ、ジ−（２，３−ジメチル−ｃ−ブチル）アミノ、ジ−（２，４−ジメチル−ｃ−ブチル）アミノ、ジ−（３，３−ジメチル−ｃ−ブチル）アミノ、ジ−（１−ｎ−プロピル−ｃ−プロピル）アミノ、ジ−（２−ｎ−プロピル−ｃ−プロピル）アミノ、ジ−（１−ｉ−プロピル−ｃ−プロピル）アミノ、ジ−（２−ｉ−プロピル−ｃ−プロピル）アミノ、ジ−（１，２，２−トリメチル−ｃ−プロピル）アミノ、ジ−（１，２，３−トリメチル−ｃ−プロピル）アミノ、ジ−（２，２，３−トリメチル−ｃ−プロピル）アミノ、ジ−（１−エチル−２−メチル−ｃ−プロピル）アミノ、ジ−（２−エチル−１−メチル−ｃ−プロピル）アミノ、ジ−（２−エチル−２−メチル−ｃ−プロピル）アミノ、ジ−（２−エチル−３−メチル−ｃ−プロピル）アミノ、ジ−（１−メチル−１−エチル−ｎ−ペンチル）アミノ、ジ−（１−ヘプチル）アミノ、ジ−（２−ヘプチル）アミノ、ジ−（１−エチル−１，２−ジメチル−ｎ−プロピル）アミノ、ジ−（１−エチル−２，２−ジメチル−ｎ−プロピル）アミノ、ジ−（１−オクチル）アミノ、ジ−（３−オクチル）アミノ、ジ−（４−メチル−３−ｎ−ヘプチル）アミノ、ジ−（６−メチル−２−ｎ−ヘプチル）アミノ、ジ−（２−プロピル−１−ｎ−ヘプチル）アミノ、ジ−（２，４，４−トリメチル−１−ｎ−ペンチル）アミノ、ジ−（１−ノニル）アミノ、ジ−（２−ノニル）アミノ、ジ−（２，６−ジメチル−４−ｎ−ヘプチル）アミノ、ジ−（３−エチル−２，２−ジメチル−３−ｎ−ペンチル）アミノ、ジ−（３，５，５−トリメチル−１−ｎ−へキシル）アミノ、ジ−（１−デシル）アミノ、ジ−（２−デシル）アミノ、ジ−（４−デシル）アミノ、ジ−（３，７−ジメチル−１−ｎ−オクチル）アミノ、ジ−（３，７−ジメチル−３−ｎ−オクチル）アミノ等が挙げられる。

【0093】

非対称ジＣ_１−１０アルキルアミノ基としては、直鎖、分枝若しくはＣ_３−１０シクロアルキルアミノ基を含んでいてもよい。その具体例としては、（メチル、エチル）アミノ、（メチル、ｎ−プロピル）アミノ、（メチル、ｉ−プロピル）アミノ、（メチル、ｃ−プロピル）アミノ、（メチル、ｎ−ブチル）アミノ、（メチル、ｉ−ブチル）アミノ、（メチル、ｓ−ブチル）アミノ、（メチル、ｔ−ブチル）アミノ、（メチル、ｎ−ペンチル）アミノ、（メチル、ｃ−ペンチル）アミノ、（メチル、ｎ−ヘキシル）アミノ、（メチル、ｃ−ヘキシル）アミノ、（エチル、ｎ−プロピル）アミノ、（エチル、ｉ−プロピル）アミノ、（エチル、ｃ−プロピル）アミノ、（エチル、ｎ−ブチル）アミノ、（エチル、ｉ−ブチル）アミノ、（エチル、ｓ−ブチル）アミノ、（エチル、ｔ−ブチル）アミノ、（エチル、ｎ−ペンチル）アミノ、（エチル、ｃ−ペンチル）アミノ、（エチル、ｎ−ヘキシル）アミノ、（エチル、ｃ−ヘキシル）アミノ、（ｎ−プロピル、ｉ−プロピル）アミノ、（ｎ−プロピル、ｃ−プロピル）アミノ、（ｎ−プロピル、ｎ−ブチル）アミノ、（ｎ−プロピル、ｉ−ブチル）アミノ、（ｎ−プロピル、ｓ−ブチル）アミノ、（ｎ−プロピル、ｔ−ブチル）アミノ、（ｎ−プロピル、ｎ−ペンチル）アミノ、（ｎ−プロピル、ｃ−ペンチル）アミノ、（ｎ−プロピル、ｎ−ヘキシル）アミノ、（ｎ−プロピル、ｃ−ヘキシル）アミノ、（ｉ−プロピル、ｃ−プロピル）アミノ、（ｉ−プロピル、ｎ−ブチル）アミノ、（ｉ−プロピル、ｉ−ブチル）アミノ、（ｉ−プロピル、ｓ−ブチル）アミノ、（ｉ−プロピル、ｔ−ブチル）アミノ、（ｉ−プロピル、ｎ−ペンチル）アミノ、（ｉ−プロピル、ｃ−ペンチル）アミノ、（ｉ−プロピル、ｎ−ヘキシル）アミノ、（ｉ−プロピル、ｃ−ヘキシル）アミノ、（ｃ−プロピル、ｎ−ブチル）アミノ、（ｃ−プロピル、ｉ−ブチル）アミノ、（ｃ−プロピル、ｓ−ブチル）アミノ、（ｃ−プロピル、ｔ−ブチル）アミノ、（ｃ−プロピル、ｎ−ペンチル）アミノ、（ｃ−プロピル、ｃ−ペンチル）アミノ、（ｃ−プロピル、ｎ−ヘキシル）アミノ、（ｃ−プロピル、ｃ−ヘキシル）アミノ、（ｎ−ブチル、ｉ−ブチル）アミノ、（ｎ−ブチル、ｓ−ブチル）アミノ、（ｎ−ブチル、ｔ−ブチル）アミノ、（ｎ−ブチル、ｎ−ペンチル）アミノ、（ｎ−ブチル、ｃ−ペンチル）アミノ、（ｎ−ブチル、ｎ−ヘキシル）アミノ、（ｎ−ブチル、ｃ−ヘキシル）アミノ、（ｉ−ブチル、ｓ−ブチル）アミノ、（ｉ−ブチル、ｔ−ブチル）アミノ、（ｉ−ブチル、ｎ−ペンチル）アミノ、（ｉ−ブチル、ｃ−ペンチル）アミノ、（ｉ−ブチル、ｎ−ヘキシル）アミノ、（ｉ−ブチル、ｃ−ヘキシル）アミノ、（ｓ−ブチル、ｔ−ブチル）アミノ、（ｓ−ブチル、ｎ−ペンチル）アミノ、（ｓ−ブチル、ｃ−ペンチル）アミノ、（ｓ−ブチル、ｎ−ヘキシル）アミノ、（ｓ−ブチル、ｃ−ヘキシル）アミノ、（ｔ−ブチル、ｎ−ペンチル）アミノ、（ｔ−ブチル、ｃ−ペンチル）アミノ、（ｔ−ブチル、ｎ−ヘキシル）アミノ、（ｔ−ブチル、ｃ−ヘキシル）アミノ、（ｎ−ペンチル、ｃ−ペンチル）アミノ、（ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル）アミノ、（ｎ−ペンチル、ｃ−ヘキシル）アミノ、（ｃ−ペンチル、ｎ−ヘキシル）アミノ、（ｃ−ペンチル、ｃ−ヘキシル）アミノ、（ｎ−ヘキシル、ｃ−ヘキシル）アミノ、（メチル、ｎ−ヘプチル）アミノ、（メチル、ｎ−オクチル）アミノ、（メチル、ｎ−ノナニル）アミノ、（メチル、ｎ−デシル）アミノ、（エチル、ｎ−ヘプチル）アミノ、（エチル、ｎ−オクチル）アミノ、（エチル、ｎ−ノナニル）アミノ、（エチル、ｎ−デシル）アミノ等が挙げられる。

【0094】

Ｃ_１−１０アルキルアミノカルボニル基としては、直鎖、分枝若しくはＣ_３−１０シクロアルキルアミノカルボニル基及びジＣ_１−１０アルキルアミノカルボニル基を含んでいてもよい。その具体例としては、メチルアミノカルボニル、エチルアミノカルボニル、ｎ−プロピルアミノカルボニル、ｉ−プロピルアミノカルボニル、ｃ−プロピルアミノカルボニル、ｎ−ブチルアミノカルボニル、ｉ−ブチルアミノカルボニル、ｓ−ブチルアミノカルボニル、ｔ−ブチルアミノカルボニル、ｃ−ブチルアミノカルボニル、１−メチル−ｃ−プロピルアミノカルボニル、２−メチル−ｃ−プロピルアミノカルボニル、ｎ−ペンチルアミノカルボニル、１−メチル−ｎ−ブチルアミノカルボニル、２−メチル−ｎ−ブチルアミノカルボニル、３−メチル−ｎ−ブチルアミノカルボニル、１，１−ジメチル−ｎ−プロピルアミノカルボニル、１，２−ジメチル−ｎ−プロピルアミノカルボニル、２，２−ジメチル−ｎ−プロピルアミノカルボニル、１−エチル−ｎ−プロピルアミノカルボニル、ｃ−ペンチルアミノカルボニル、１−メチル−ｃ−ブチルアミノカルボニル、２−メチル−ｃ−ブチルアミノカルボニル、３−メチル−ｃ−ブチルアミノカルボニル、１，２−ジメチル−ｃ−プロピルアミノカルボニル、２，３−ジメチル−ｃ−プロピルアミノカルボニル、１−エチル−ｃ−プロピルアミノカルボニル、２−エチル−ｃ−プロピルアミノカルボニル、ｎ−ヘキシルアミノカルボニル、１−メチル−ｎ−ペンチルアミノカルボニル、２−メチル−ｎ−ペンチルアミノカルボニル、３−メチル−ｎ−ペンチルアミノカルボニル、４−メチル−ｎ−ペンチルアミノカルボニル、１，１−ジメチル−ｎ−ブチルアミノカルボニル、１，２−ジメチル−ｎ−ブチルアミノカルボニル、１，３−ジメチル−ｎ−ブチルアミノカルボニル、２，２−ジメチル−ｎ−ブチルアミノカルボニル、２，３−ジメチル−ｎ−ブチルアミノカルボニル、３，３−ジメチル−ｎ−ブチルアミノカルボニル、１−エチル−ｎ−ブチルアミノカルボニル、２−エチル−ｎ−ブチルアミノカルボニル、１，１，２−トリメチル−ｎ−プロピルアミノカルボニル、１，２，２−トリメチル−ｎ−プロピルアミノカルボニル、１−エチル−１−メチル−ｎ−プロピルアミノカルボニル、１−エチル−２−メチル−ｎ−プロピルアミノカルボニル、ｃ−ヘキシルアミノカルボニル、１−メチル−ｃ−ペンチルアミノカルボニル、２−メチル−ｃ−ペンチルアミノカルボニル、３−メチル−ｃ−ペンチルアミノカルボニル、１−エチル−ｃ−ブチルアミノカルボニル、２−エチル−ｃ−ブチルアミノカルボニル、３−エチル−ｃ−ブチルアミノカルボニル、１，２−ジメチル−ｃ−ブチルアミノカルボニル、１，３−ジメチル−ｃ−ブチルアミノカルボニル、２，２−ジメチル−ｃ−ブチルアミノカルボニル、２，３−ジメチル−ｃ−ブチルアミノカルボニル、２，４−ジメチル−ｃ−ブチルアミノカルボニル、３，３−ジメチル−ｃ−ブチルアミノカルボニル、１−ｎ−プロピル−ｃ−プロピルアミノカルボニル、２−ｎ−プロピル−ｃ−プロピルアミノカルボニル、１−ｉ−プロピル−ｃ−プロピルアミノカルボニル、２−ｉ−プロピル−ｃ−プロピルアミノカルボニル、１，２，２−トリメチル−ｃ−プロピルアミノカルボニル、１，２，３−トリメチル−ｃ−プロピルアミノカルボニル、２，２，３−トリメチル−ｃ−プロピルアミノカルボニル、１−エチル−２−メチル−ｃ−プロピルアミノカルボニル、２−エチル−１−メチル−ｃ−プロピルアミノカルボニル、２−エチル−２−メチル−ｃ−プロピルアミノカルボニル、２−エチル−３−メチル−ｃ−プロピルアミノカルボニル、１−メチル−１−エチル−ｎ−ペンチルアミノカルボニル、１−ヘプチルアミノカルボニル、２−ヘプチルアミノカルボニル、１−エチル−１，２−ジメチル−ｎ−プロピルアミノカルボニル、１−エチル−２，２−ジメチル−ｎ−プロピルアミノカルボニル、１−オクチルアミノカルボニル、３−オクチルアミノカルボニル、４−メチル−３−ｎ−ヘプチルアミノカルボニル、６−メチル−２−ｎ−ヘプチルアミノカルボニル、２−プロピル−１−ｎ−ヘプチルアミノカルボニル、２，４，４−トリメチル−１−ｎ−ペンチルアミノカルボニル、１−ノニルアミノカルボニル、２−ノニルアミノカルボニル、２，６−ジメチル−４−ｎ−ヘプチルアミノカルボニル、３−エチル−２，２−ジメチル−３−ｎ−ペンチルアミノカルボニル、３，５，５−トリメチル−１−ｎ−へキシルアミノカルボニル、１−デシルアミノカルボニル、２−デシルアミノカルボニル、４−デシルアミノカルボニル、３，７−ジメチル−１−ｎ−オクチルアミノカルボニル、３，７−ジメチル−３−ｎ−オクチルアミノカルボニル等が挙げられる。

【0095】

ジＣ_１−１０アルキルアミノカルボニル基としては、対称及び非対称を含んでいてもよい。対称Ｃ_１−１０ジアルキルアミノカルボニル基としては、直鎖、分枝若しくはＣ_３−１０シクロアルキルアミノカルボニル基を含んでいてもよく、その具体例としては、ジメチルアミノカルボニル、ジエチルアミノカルボニル、ジ−ｎ−プロピルアミノカルボニル、ジ−ｉ−プロピルアミノカルボニル、ジ−ｃ−プロピルアミノカルボニル、ジ−ｎ−ブチルアミノカルボニル、ジ−ｉ−ブチルアミノカルボニル、ジ−ｓ−ブチルアミノカルボニル、ジ−ｔ−ブチルアミノカルボニル、ジ−ｃ−ブチルアミノカルボニル、ジ−（１−メチル−ｃ−プロピル）アミノカルボニル、ジ−（２−メチル−ｃ−プロピル）アミノカルボニル、ジ−ｎ−ペンチルアミノカルボニル、ジ−（１−メチル−ｎ−ブチル）アミノカルボニル、ジ−（２−メチル−ｎ−ブチル）アミノカルボニル、ジ−（３−メチル−ｎ−ブチル）アミノカルボニル、ジ−（１，１−ジメチル−ｎ−プロピル）アミノカルボニル、ジ−（１，２−ジメチル−ｎ−プロピル）アミノカルボニル、ジ−（２，２−ジメチル−ｎ−プロピル）アミノカルボニル、ジ−（１−エチル−ｎ−プロピル）アミノカルボニル、ジ−ｃ−ペンチルアミノカルボニル、ジ−（１−メチル−ｃ−ブチル）アミノカルボニル、ジ−（２−メチル−ｃ−ブチル）アミノカルボニル、ジ−（３−メチル−ｃ−ブチル）アミノカルボニル、ジ−（１，２−ジメチル−ｃ−プロピル）アミノカルボニル、ジ−（２，３−ジメチル−ｃ−プロピル）アミノカルボニル、ジ−（１−エチル−ｃ−プロピル）アミノカルボニル、ジ−（２−エチル−ｃ−プロピル）アミノカルボニル、ジ−ｎ−ヘキシルアミノカルボニル、ジ−（１−メチル−ｎ−ペンチル）アミノカルボニル、ジ−（２−メチル−ｎ−ペンチル）アミノカルボニル、ジ−（３−メチル−ｎ−ペンチル）アミノカルボニル、ジ−（４−メチル−ｎ−ペンチル）アミノカルボニル、ジ−（１，１−ジメチル−ｎ−ブチル）アミノカルボニル、ジ−（１，２−ジメチル−ｎ−ブチル）アミノカルボニル、ジ−（１，３−ジメチル−ｎ−ブチル）アミノカルボニル、ジ−（２，２−ジメチル−ｎ−ブチル）アミノカルボニル、ジ−（２，３−ジメチル−ｎ−ブチル）アミノカルボニル、ジ−（３，３−ジメチル−ｎ−ブチル）アミノカルボニル、ジ−（１−エチル−ｎ−ブチル）アミノカルボニル、ジ−（２−エチル−ｎ−ブチル）アミノカルボニル、ジ−（１，１，２−トリメチル−ｎ−プロピル）アミノカルボニル、ジ−（１，２，２−トリメチル−ｎ−プロピル）アミノカルボニル、ジ−（１−エチル−１−メチル−ｎ−プロピル）アミノカルボニル、ジ−（１−エチル−２−メチル−ｎ−プロピル）アミノカルボニル、ジ−ｃ−ヘキシルアミノカルボニル、ジ−（１−メチル−ｃ−ペンチル）アミノカルボニル、ジ−（２−メチル−ｃ−ペンチル）アミノカルボニル、ジ−（３−メチル−ｃ−ペンチル）アミノカルボニル、ジ−（１−エチル−ｃ−ブチル）アミノカルボニル、ジ−（２−エチル−ｃ−ブチル）アミノカルボニル、ジ−（３−エチル−ｃ−ブチル）アミノカルボニル、ジ−（１，２−ジメチル−ｃ−ブチル）アミノカルボニル、ジ−（１，３−ジメチル−ｃ−ブチル）アミノカルボニル、ジ−（２，２−ジメチル−ｃ−ブチル）アミノカルボニル、ジ−（２，３−ジメチル−ｃ−ブチル）アミノカルボニル、ジ−（２，４−ジメチル−ｃ−ブチル）アミノカルボニル、ジ−（３，３−ジメチル−ｃ−ブチル）アミノカルボニル、ジ−（１−ｎ−プロピル−ｃ−プロピル）アミノカルボニル、ジ−（２−ｎ−プロピル−ｃ−プロピル）アミノカルボニル、ジ−（１−ｉ−プロピル−ｃ−プロピル）アミノカルボニル、ジ−（２−ｉ−プロピル−ｃ−プロピル）アミノカルボニル、ジ−（１，２，２−トリメチル−ｃ−プロピル）アミノカルボニル、ジ−（１，２，３−トリメチル−ｃ−プロピル）アミノカルボニル、ジ−（２，２，３−トリメチル−ｃ−プロピル）アミノカルボニル、ジ−（１−エチル−２−メチル−ｃ−プロピル）アミノカルボニル、ジ−（２−エチル−１−メチル−ｃ−プロピル）アミノカルボニル、ジ−（２−エチル−２−メチル−ｃ−プロピル）アミノカルボニル、ジ−（２−エチル−３−メチル−ｃ−プロピル）アミノカルボニル、ジ−（１−メチル−１−エチル−ｎ−ペンチル）アミノカルボニル、ジ−（１−ヘプチル）アミノカルボニル、ジ−（２−ヘプチル）アミノカルボニル、ジ−（１−エチル−１，２−ジメチル−ｎ−プロピル）アミノカルボニル、ジ−（１−エチル−２，２−ジメチル−ｎ−プロピル）アミノカルボニル、ジ−（１−オクチル）アミノカルボニル、ジ−（３−オクチル）アミノカルボニル、ジ−（４−メチル−３−ｎ−ヘプチル）アミノカルボニル、ジ−（６−メチル−２−ｎ−ヘプチル）アミノカルボニル、ジ−（２−プロピル−１−ｎ−ヘプチル）アミノカルボニル、ジ−（２，４，４−トリメチル−１−ｎ−ペンチル）アミノカルボニル、ジ−（１−ノニル）アミノカルボニル、ジ−（２−ノニル）アミノカルボニル、ジ−（２，６−ジメチル−４−ｎ−ヘプチル）アミノカルボニル、ジ−（３−エチル−２，２−ジメチル−３−ｎ−ペンチル）アミノカルボニル、ジ−（３，５，５−トリメチル−１−ｎ−へキシル）アミノカルボニル、ジ−（１−デシル）アミノカルボニル、ジ−（２−デシル）アミノカルボニル、ジ−（４−デシル）アミノカルボニル、ジ−（３，７−ジメチル−１−ｎ−オクチル）アミノカルボニル、ジ−（３，７−ジメチル−３−ｎ−オクチル）アミノカルボニル等が挙げられる。

【0096】

非対称Ｃ_１−１０ジアルキルアミノカルボニル基としては、直鎖、分枝若しくはＣ_３−１０シクロアルキルアミノカルボニル基を含んでいてもよく、その具体例としては、（メチル、エチル）アミノカルボニル、（メチル、ｎ−プロピル）アミノカルボニル、（メチル、ｉ−プロピル）アミノカルボニル、（メチル、ｃ−プロピル）アミノカルボニル、（メチル、ｎ−ブチル）アミノカルボニル、（メチル、ｉ−ブチル）アミノカルボニル、（メチル、ｓ−ブチル）アミノカルボニル、（メチル、ｔ−ブチル）アミノカルボニル、（メチル、ｎ−ペンチル）アミノカルボニル、（メチル、ｃ−ペンチル）アミノカルボニル、（メチル、ｎ−ヘキシル）アミノカルボニル、（メチル、ｃ−ヘキシル）アミノカルボニル、（エチル、ｎ−プロピル）アミノカルボニル、（エチル、ｉ−プロピル）アミノカルボニル、（エチル、ｃ−プロピル）アミノカルボニル、（エチル、ｎ−ブチル）アミノカルボニル、（エチル、ｉ−ブチル）アミノカルボニル、（エチル、ｓ−ブチル）アミノカルボニル、（エチル、ｔ−ブチル）アミノカルボニル、（エチル、ｎ−ペンチル）アミノカルボニル、（エチル、ｃ−ペンチル）アミノカルボニル、（エチル、ｎ−ヘキシル）アミノカルボニル、（エチル、ｃ−ヘキシル）アミノカルボニル、（ｎ−プロピル、ｉ−プロピル）アミノカルボニル、（ｎ−プロピル、ｃ−プロピル）アミノカルボニル、（ｎ−プロピル、ｎ−ブチル）アミノカルボニル、（ｎ−プロピル、ｉ−ブチル）アミノカルボニル、（ｎ−プロピル、ｓ−ブチル）アミノカルボニル、（ｎ−プロピル、ｔ−ブチル）アミノカルボニル、（ｎ−プロピル、ｎ−ペンチル）アミノカルボニル、（ｎ−プロピル、ｃ−ペンチル）アミノカルボニル、（ｎ−プロピル、ｎ−ヘキシル）アミノカルボニル、（ｎ−プロピル、ｃ−ヘキシル）アミノカルボニル、（ｉ−プロピル、ｃ−プロピル）アミノカルボニル、（ｉ−プロピル、ｎ−ブチル）アミノカルボニル、（ｉ−プロピル、ｉ−ブチル）アミノカルボニル、（ｉ−プロピル、ｓ−ブチル）アミノカルボニル、（ｉ−プロピル、ｔ−ブチル）アミノカルボニル、（ｉ−プロピル、ｎ−ペンチル）アミノカルボニル、（ｉ−プロピル、ｃ−ペンチル）アミノカルボニル、（ｉ−プロピル、ｎ−ヘキシル）アミノカルボニル、（ｉ−プロピル、ｃ−ヘキシル）アミノカルボニル、（ｃ−プロピル、ｎ−ブチル）アミノカルボニル、（ｃ−プロピル、ｉ−ブチル）アミノカルボニル、（ｃ−プロピル、ｓ−ブチル）アミノカルボニル、（ｃ−プロピル、ｔ−ブチル）アミノカルボニル、（ｃ−プロピル、ｎ−ペンチル）アミノカルボニル、（ｃ−プロピル、ｃ−ペンチル）アミノカルボニル、（ｃ−プロピル、ｎ−ヘキシル）アミノカルボニル、（ｃ−プロピル、ｃ−ヘキシル）アミノカルボニル、（ｎ−ブチル、ｉ−ブチル）アミノカルボニル、（ｎ−ブチル、ｓ−ブチル）アミノカルボニル、（ｎ−ブチル、ｔ−ブチル）アミノカルボニル、（ｎ−ブチル、ｎ−ペンチル）アミノカルボニル、（ｎ−ブチル、ｃ−ペンチル）アミノカルボニル、（ｎ−ブチル、ｎ−ヘキシル）アミノカルボニル、（ｎ−ブチル、ｃ−ヘキシル）アミノカルボニル、（ｉ−ブチル、ｓ−ブチル）アミノカルボニル、（ｉ−ブチル、ｔ−ブチル）アミノカルボニル、（ｉ−ブチル、ｎ−ペンチル）アミノカルボニル、（ｉ−ブチル、ｃ−ペンチル）アミノカルボニル、（ｉ−ブチル、ｎ−ヘキシル）アミノカルボニル、（ｉ−ブチル、ｃ−ヘキシル）アミノカルボニル、（ｓ−ブチル、ｔ−ブチル）アミノカルボニル、（ｓ−ブチル、ｎ−ペンチル）アミノカルボニル、（ｓ−ブチル、ｃ−ペンチル）アミノカルボニル、（ｓ−ブチル、ｎ−ヘキシル）アミノカルボニル、（ｓ−ブチル、ｃ−ヘキシル）アミノカルボニル、（ｔ−ブチル、ｎ−ペンチル）アミノカルボニル、（ｔ−ブチル、ｃ−ペンチル）アミノカルボニル、（ｔ−ブチル、ｎ−ヘキシル）アミノカルボニル、（ｔ−ブチル、ｃ−ヘキシル）アミノカルボニル、（ｎ−ペンチル、ｃ−ペンチル）アミノカルボニル、（ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル）アミノカルボニル、（ｎ−ペンチル、ｃ−ヘキシル）アミノカルボニル、（ｃ−ペンチル、ｎ−ヘキシル）アミノカルボニル、（ｃ−ペンチル、ｃ−ヘキシル）アミノカルボニル、（ｎ−ヘキシル、ｃ−ヘキシル）アミノカルボニル、（メチル、ｎ−ヘプチル）アミノカルボニル、（メチル、ｎ−オクチル）アミノカルボニル、（メチル、ｎ−ノナニル）アミノカルボニル、（メチル、ｎ−デシル）アミノカルボニル、（エチル、ｎ−ヘプチル）アミノカルボニル、（エチル、ｎ−オクチル）アミノカルボニル、（エチル、ｎ−ノナニル）アミノカルボニル、（エチル、ｎ−デシル）アミノカルボニル等が挙げられる。

【0097】

Ｃ_１−１０アルキルアミノスルホニル基としては、直鎖、分枝若しくはＣ_３−１０シクロアルキルアミノスルホニル基及びジＣ_１−１０アルキルアミノスルホニル基を含んでいてもよい。その具体例としては、メチルアミノスルホニル、エチルアミノスルホニル、ｎ−プロピルアミノスルホニル、ｉ−プロピルアミノスルホニル、ｃ−プロピルアミノスルホニル、ｎ−ブチルアミノスルホニル、ｉ−ブチルアミノスルホニル、ｓ−ブチルアミノスルホニル、ｔ−ブチルアミノスルホニル、ｃ−ブチルアミノスルホニル、１−メチル−ｃ−プロピルアミノスルホニル、２−メチル−ｃ−プロピルアミノスルホニル、ｎ−ペンチルアミノスルホニル、１−メチル−ｎ−ブチルアミノスルホニル、２−メチル−ｎ−ブチルアミノスルホニル、３−メチル−ｎ−ブチルアミノスルホニル、１，１−ジメチル−ｎ−プロピルアミノスルホニル、１，２−ジメチル−ｎ−プロピルアミノスルホニル、２，２−ジメチル−ｎ−プロピルアミノスルホニル、１−エチル−ｎ−プロピルアミノスルホニル、ｃ−ペンチルアミノスルホニル、１−メチル−ｃ−ブチルアミノスルホニル、２−メチル−ｃ−ブチルアミノスルホニル、３−メチル−ｃ−ブチルアミノスルホニル、１，２−ジメチル−ｃ−プロピルアミノスルホニル、２，３−ジメチル−ｃ−プロピルアミノスルホニル、１−エチル−ｃ−プロピルアミノスルホニル、２−エチル−ｃ−プロピルアミノスルホニル、ｎ−ヘキシルアミノスルホニル、１−メチル−ｎ−ペンチルアミノスルホニル、２−メチル−ｎ−ペンチルアミノスルホニル、３−メチル−ｎ−ペンチルアミノスルホニル、４−メチル−ｎ−ペンチルアミノスルホニル、１，１−ジメチル−ｎ−ブチルアミノスルホニル、１，２−ジメチル−ｎ−ブチルアミノスルホニル、１，３−ジメチル−ｎ−ブチルアミノスルホニル、２，２−ジメチル−ｎ−ブチルアミノスルホニル、２，３−ジメチル−ｎ−ブチルアミノスルホニル、３，３−ジメチル−ｎ−ブチルアミノスルホニル、１−エチル−ｎ−ブチルアミノスルホニル、２−エチル−ｎ−ブチルアミノスルホニル、１，１，２−トリメチル−ｎ−プロピルアミノスルホニル、１，２，２−トリメチル−ｎ−プロピルアミノスルホニル、１−エチル−１−メチル−ｎ−プロピルアミノスルホニル、１−エチル−２−メチル−ｎ−プロピルアミノスルホニル、ｃ−ヘキシルアミノスルホニル、１−メチル−ｃ−ペンチルアミノスルホニル、２−メチル−ｃ−ペンチルアミノスルホニル、３−メチル−ｃ−ペンチルアミノスルホニル、１−エチル−ｃ−ブチルアミノスルホニル、２−エチル−ｃ−ブチルアミノスルホニル、３−エチル−ｃ−ブチルアミノスルホニル、１，２−ジメチル−ｃ−ブチルアミノスルホニル、１，３−ジメチル−ｃ−ブチルアミノスルホニル、２，２−ジメチル−ｃ−ブチルアミノスルホニル、２，３−ジメチル−ｃ−ブチルアミノスルホニル、２，４−ジメチル−ｃ−ブチルアミノスルホニル、３，３−ジメチル−ｃ−ブチルアミノスルホニル、１−ｎ−プロピル−ｃ−プロピルアミノスルホニル、２−ｎ−プロピル−ｃ−プロピルアミノスルホニル、１−ｉ−プロピル−ｃ−プロピルアミノスルホニル、２−ｉ−プロピル−ｃ−プロピルアミノスルホニル、１，２，２−トリメチル−ｃ−プロピルアミノスルホニル、１，２，３−トリメチル−ｃ−プロピルアミノスルホニル、２，２，３−トリメチル−ｃ−プロピルアミノスルホニル、１−エチル−２−メチル−ｃ−プロピルアミノスルホニル、２−エチル−１−メチル−ｃ−プロピルアミノスルホニル、２−エチル−２−メチル−ｃ−プロピルアミノスルホニル、１−メチル−１−エチル−ｎ−ペンチルアミノスルホニル、１−ヘプチルアミノスルホニル、２−ヘプチルアミノスルホニル、１−エチル−１，２−ジメチル−ｎ−プロピルアミノスルホニル、１−エチル−２，２−ジメチル−ｎ−プロピルアミノスルホニル、１−オクチルアミノスルホニル、３−オクチルアミノスルホニル、４−メチル−３−ｎ−ヘプチルアミノスルホニル、６−メチル−２−ｎ−ヘプチルアミノスルホニル、２−プロピル−１−ｎ−ヘプチルアミノスルホニル、２，４，４−トリメチル−１−ｎ−ペンチルアミノスルホニル、１−ノニルアミノスルホニル、２−ノニルアミノスルホニル、２，６−ジメチル−４−ｎ−ヘプチルアミノスルホニル、３−エチル−２，２−ジメチル−３−ｎ−ペンチルアミノスルホニル、３，５，５−トリメチル−１−ｎ−へキシルアミノスルホニル、１−デシルアミノスルホニル、２−デシルアミノスルホニル、４−デシルアミノスルホニル、３，７−ジメチル−１−ｎ−オクチルアミノスルホニル、３，７−ジメチル−３−ｎ−オクチルアミノスルホニル、ｃ−ヘプチルアミノスルホニル、ｃ−オクチルアミノスルホニル、１−メチル−ｃ−ヘキシルアミノスルホニル、２−メチル−ｃ−ヘキシルアミノスルホニル、３−メチル−ｃ−ヘキシルアミノスルホニル、１，２−ジメチル−ｃ−ヘキシルアミノスルホニル、１−エチル−ｃ−ヘキシルアミノスルホニル、１−メチル−ｃ−ペンチルアミノスルホニル、２−メチル−ｃ−ペンチルアミノスルホニル、３−メチル−ｃ−ペンチルアミノスルホニル等が挙げられる。

【0098】

ジＣ_１−１０アルキルアミノスルホニル基としては、対称及び非対称を含んでいてもよい。対称Ｃ_１−１０ジアルキルアミノスルホニル基としては、直鎖、分枝若しくはＣ_３−１０シクロアルキルアミノスルホニル基を含んでいてもよく、その具体例としては、ジメチルアミノスルホニル、ジエチルアミノスルホニル、ジ−ｎ−プロピルアミノスルホニル、ジ−ｉ−プロピルアミノスルホニル、ジ−ｃ−プロピルアミノスルホニル、ジ−ｎ−ブチルアミノスルホニル、ジ−ｉ−ブチルアミノスルホニル、ジ−ｓ−ブチルアミノスルホニル、ジ−ｔ−ブチルアミノスルホニル、ジ−ｃ−ブチルアミノスルホニル、ジ−（１−メチル−ｃ−プロピル）アミノスルホニル、ジ−（２−メチル−ｃ−プロピル）アミノスルホニル、ジ−ｎ−ペンチルアミノスルホニル、ジ−（１−メチル−ｎ−ブチル）アミノスルホニル、ジ−（２−メチル−ｎ−ブチル）アミノスルホニル、ジ−（３−メチル−ｎ−ブチル）アミノスルホニル、ジ−（１，１−ジメチル−ｎ−プロピル）アミノスルホニル、ジ−（１，２−ジメチル−ｎ−プロピル）アミノスルホニル、ジ−（２，２−ジメチル−ｎ−プロピル）アミノスルホニル、ジ−（１−エチル−ｎ−プロピル）アミノスルホニル、ジ−ｃ−ペンチルアミノスルホニル、ジ−（１−メチル−ｃ−ブチル）アミノスルホニル、ジ−（２−メチル−ｃ−ブチル）アミノスルホニル、ジ−（３−メチル−ｃ−ブチル）アミノスルホニル、ジ−（１，２−ジメチル−ｃ−プロピル）アミノスルホニル、ジ−（２，３−ジメチル−ｃ−プロピル）アミノスルホニル、ジ−（１−エチル−ｃ−プロピル）アミノスルホニル、ジ−（２−エチル−ｃ−プロピル）アミノスルホニル、ジ−ｎ−ヘキシルアミノスルホニル、ジ−（１−メチル−ｎ−ペンチル）アミノスルホニル、ジ−（２−メチル−ｎ−ペンチル）アミノスルホニル、ジ−（３−メチル−ｎ−ペンチル）アミノスルホニル、ジ−（４−メチル−ｎ−ペンチル）アミノスルホニル、ジ−（１，１−ジメチル−ｎ−ブチル）アミノスルホニル、ジ−（１，２−ジメチル−ｎ−ブチル）アミノスルホニル、ジ−（１，３−ジメチル−ｎ−ブチル）アミノスルホニル、ジ−（２，２−ジメチル−ｎ−ブチル）アミノスルホニル、ジ−（２，３−ジメチル−ｎ−ブチル）アミノスルホニル、ジ−（３，３−ジメチル−ｎ−ブチル）アミノスルホニル、ジ−（１−エチル−ｎ−ブチル）アミノスルホニル、ジ−（２−エチル−ｎ−ブチル）アミノスルホニル、ジ−（１，１，２−トリメチル−ｎ−プロピル）アミノスルホニル、ジ−（１，２，２−トリメチル−ｎ−プロピル）アミノスルホニル、ジ−（１−エチル−１−メチル−ｎ−プロピル）アミノスルホニル、ジ−（１−エチル−２−メチル−ｎ−プロピル）アミノスルホニル、ジ−ｃ−ヘキシルアミノスルホニル、ジ−（１−メチル−ｃ−ペンチル）アミノスルホニル、ジ−（２−メチル−ｃ−ペンチル）アミノスルホニル、ジ−（３−メチル−ｃ−ペンチル）アミノスルホニル、ジ−（１−エチル−ｃ−ブチル）アミノスルホニル、ジ−（２−エチル−ｃ−ブチル）アミノスルホニル、ジ−（３−エチル−ｃ−ブチル）アミノスルホニル、ジ−（１，２−ジメチル−ｃ−ブチル）アミノスルホニル、ジ−（１，３−ジメチル−ｃ−ブチル）アミノスルホニル、ジ−（２，２−ジメチル−ｃ−ブチル）アミノスルホニル、ジ−（２，３−ジメチル−ｃ−ブチル）アミノスルホニル、ジ−（２，４−ジメチル−ｃ−ブチル）アミノスルホニル、ジ−（３，３−ジメチル−ｃ−ブチル）アミノスルホニル、ジ−（１−ｎ−プロピル−ｃ−プロピル）アミノスルホニル、ジ−（２−ｎ−プロピル−ｃ−プロピル）アミノスルホニル、ジ−（１−ｉ−プロピル−ｃ−プロピル）アミノスルホニル、ジ−（２−ｉ−プロピル−ｃ−プロピル）アミノスルホニル、ジ−（１，２，２−トリメチル−ｃ−プロピル）アミノスルホニル、ジ−（１，２，３−トリメチル−ｃ−プロピル）アミノスルホニル、ジ−（２，２，３−トリメチル−ｃ−プロピル）アミノスルホニル、ジ−（１−エチル−２−メチル−ｃ−プロピル）アミノスルホニル、ジ−（２−エチル−１−メチル−ｃ−プロピル）アミノスルホニル、ジ−（２−エチル−２−メチル−ｃ−プロピル）アミノスルホニル、ジ−（２−エチル−３−メチル−ｃ−プロピル）アミノスルホニル、ジ−（１−メチル−１−エチル−ｎ−ペンチル）アミノスルホニル、ジ−（１−ヘプチル）アミノスルホニル、ジ−（２−ヘプチル）アミノスルホニル、ジ−（１−エチル−１，２−ジメチル−ｎ−プロピル）アミノスルホニル、ジ−（１−エチル−２，２−ジメチル−ｎ−プロピル）アミノスルホニル、ジ−（１−オクチル）アミノスルホニル、ジ−（３−オクチル）アミノスルホニル、ジ−（４−メチル−３−ｎ−ヘプチル）アミノスルホニル、ジ−（６−メチル−２−ｎ−ヘプチル）アミノスルホニル、ジ−（２−プロピル−１−ｎ−ヘプチル）アミノスルホニル、ジ−（２，４，４−トリメチル−１−ｎ−ペンチル）アミノスルホニル、ジ−（１−ノニル）アミノスルホニル、ジ−（２−ノニル）アミノスルホニル、ジ−（２，６−ジメチル−４−ｎ−ヘプチル）アミノスルホニル、ジ−（３−エチル−２，２−ジメチル−３−ｎ−ペンチル）アミノスルホニル、ジ−（３，５，５−トリメチル−１−ｎ−へキシル）アミノスルホニル、ジ−（１−デシル）アミノスルホニル、ジ−（２−デシル）アミノスルホニル、ジ−（４−デシル）アミノスルホニル、ジ−（３，７−ジメチル−１−ｎ−オクチル）アミノスルホニル、ジ−（３，７−ジメチル−３−ｎ−オクチル）アミノスルホニル等が挙げられる。

【0099】

非対称Ｃ_１−１０ジアルキルアミノスルホニル基としては、直鎖、分枝若しくはＣ_３−１０シクロアルキルアミノスルホニル基を含んでいてもよく、その具体例としては、（メチル、エチル）アミノスルホニル、（メチル、ｎ−プロピル）アミノスルホニル、（メチル、ｉ−プロピル）アミノスルホニル、（メチル、ｃ−プロピル）アミノスルホニル、（メチル、ｎ−ブチル）アミノスルホニル、（メチル、ｉ−ブチル）アミノスルホニル、（メチル、ｓ−ブチル）アミノスルホニル、（メチル、ｔ−ブチル）アミノスルホニル、（メチル、ｎ−ペンチル）アミノスルホニル、（メチル、ｃ−ペンチル）アミノスルホニル、（メチル、ｎ−ヘキシル）アミノスルホニル、（メチル、ｃ−ヘキシル）アミノスルホニル、（エチル、ｎ−プロピル）アミノスルホニル、（エチル、ｉ−プロピル）アミノスルホニル、（エチル、ｃ−プロピル）アミノスルホニル、（エチル、ｎ−ブチル）アミノスルホニル、（エチル、ｉ−ブチル）アミノスルホニル、（エチル、ｓ−ブチル）アミノスルホニル、（エチル、ｔ−ブチル）アミノスルホニル、（エチル、ｎ−ペンチル）アミノスルホニル、（エチル、ｃ−ペンチル）アミノスルホニル、（エチル、ｎ−ヘキシル）アミノスルホニル、（エチル、ｃ−ヘキシル）アミノスルホニル、（ｎ−プロピル、ｉ−プロピル）アミノスルホニル、（ｎ−プロピル、ｃ−プロピル）アミノスルホニル、（ｎ−プロピル、ｎ−ブチル）アミノスルホニル、（ｎ−プロピル、ｉ−ブチル）アミノスルホニル、（ｎ−プロピル、ｓ−ブチル）アミノスルホニル、（ｎ−プロピル、ｔ−ブチル）アミノスルホニル、（ｎ−プロピル、ｎ−ペンチル）アミノスルホニル、（ｎ−プロピル、ｃ−ペンチル）アミノスルホニル、（ｎ−プロピル、ｎ−ヘキシル）アミノスルホニル、（ｎ−プロピル、ｃ−ヘキシル）アミノスルホニル、（ｉ−プロピル、ｃ−プロピル）アミノスルホニル、（ｉ−プロピル、ｎ−ブチル）アミノスルホニル、（ｉ−プロピル、ｉ−ブチル）アミノスルホニル、（ｉ−プロピル、ｓ−ブチル）アミノスルホニル、（ｉ−プロピル、ｔ−ブチル）アミノスルホニル、（ｉ−プロピル、ｎ−ペンチル）アミノスルホニル、（ｉ−プロピル、ｃ−ペンチル）アミノスルホニル、（ｉ−プロピル、ｎ−ヘキシル）アミノスルホニル、（ｉ−プロピル、ｃ−ヘキシル）アミノスルホニル、（ｃ−プロピル、ｎ−ブチル）アミノスルホニル、（ｃ−プロピル、ｉ−ブチル）アミノスルホニル、（ｃ−プロピル、ｓ−ブチル）アミノスルホニル、（ｃ−プロピル、ｔ−ブチル）アミノスルホニル、（ｃ−プロピル、ｎ−ペンチル）アミノスルホニル、（ｃ−プロピル、ｃ−ペンチル）アミノスルホニル、（ｃ−プロピル、ｎ−ヘキシル）アミノスルホニル、（ｃ−プロピル、ｃ−ヘキシル）アミノスルホニル、（ｎ−ブチル、ｉ−ブチル）アミノスルホニル、（ｎ−ブチル、ｓ−ブチル）アミノスルホニル、（ｎ−ブチル、ｔ−ブチル）アミノスルホニル、（ｎ−ブチル、ｎ−ペンチル）アミノスルホニル、（ｎ−ブチル、ｃ−ペンチル）アミノスルホニル、（ｎ−ブチル、ｎ−ヘキシル）アミノスルホニル、（ｎ−ブチル、ｃ−ヘキシル）アミノスルホニル、（ｉ−ブチル、ｓ−ブチル）アミノスルホニル、（ｉ−ブチル、ｔ−ブチル）アミノスルホニル、（ｉ−ブチル、ｎ−ペンチル）アミノスルホニル、（ｉ−ブチル、ｃ−ペンチル）アミノスルホニル、（ｉ−ブチル、ｎ−ヘキシル）アミノスルホニル、（ｉ−ブチル、ｃ−ヘキシル）アミノスルホニル、（ｓ−ブチル、ｔ−ブチル）アミノスルホニル、（ｓ−ブチル、ｎ−ペンチル）アミノスルホニル、（ｓ−ブチル、ｃ−ペンチル）アミノスルホニル、（ｓ−ブチル、ｎ−ヘキシル）アミノスルホニル、（ｓ−ブチル、ｃ−ヘキシル）アミノスルホニル、（ｔ−ブチル、ｎ−ペンチル）アミノスルホニル、（ｔ−ブチル、ｃ−ペンチル）アミノスルホニル、（ｔ−ブチル、ｎ−ヘキシル）アミノスルホニル、（ｔ−ブチル、ｃ−ヘキシル）アミノスルホニル、（ｎ−ペンチル、ｃ−ペンチル）アミノスルホニル、（ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル）アミノスルホニル、（ｎ−ペンチル、ｃ−ヘキシル）アミノスルホニル、（ｃ−ペンチル、ｎ−ヘキシル）アミノスルホニル、（ｃ−ペンチル、ｃ−ヘキシル）アミノスルホニル、（ｎ−ヘキシル、ｃ−ヘキシル）アミノスルホニル、（メチル、ｎ−ヘプチル）アミノスルホニル、（メチル、ｎ−オクチル）アミノスルホニル、（メチル、ｎ−ノナニル）アミノスルホニル、（メチル、ｎ−デシル）アミノスルホニル、（エチル、ｎ−ヘプチル）アミノスルホニル、（エチル、ｎ−オクチル）アミノスルホニル、（エチル、ｎ−ノナニル）アミノスルホニル、（エチル、ｎ−デシル）アミノスルホニル等が挙げられる。

【0100】

Ｃ_２−１４アリーレン基とは、Ｃ_２−１４アリール基の１個の環原子から水素原子１個を除去することによって生成される２価基を意味する。その具体例としては

【化20】

【0101】

【化21】

【0102】

【化22】

【0103】

【化23】

【0104】

【化24】

【0105】

【化25】

【0106】

【化26】

【0107】

【化27】

【0108】

【化28】

等が挙げられる。

【0109】

Ｃ_２−９ヘテロシクリル基としては、窒素原子、酸素原子及び硫黄原子の中から自由に選ばれる１つ以上の原子と２つ乃至９つの炭素原子からなる単環又は縮環二環性の複素環基が挙げられ、具体的には、

【化29】

などが挙げられる。

【0110】

保護された水酸基、保護されたアミノ基、保護されたチオール基及びアミノ基の保護基における保護基としては、Ｃ_１−４アルコキシメチル基（例えばＭＯＭ：メトキシメチル、ＭＥＭ：２−メトキシエトキシメチル、エトキシメチル、ｎ−プロポキシメチル、ｉ−プロポキシメチル、ｎ−ブトキシメチル、ｉＢＭ：イソブチルオキシメチル、ＢＵＭ：ｔ−ブトキシメチル、ＰＯＭ：ピバロイルオキシメチル、ＳＥＭ：トリメチルシリルエトキシメチル等が挙げられ、好ましくはＣ_１−２アルコキシメチル基等が挙げられる）、アリールオキシメチル基（例えばＢＯＭ：ベンジルオキシメチル、ＰＭＢＭ：ｐ−メトキシベンジルオキシメチル、ｐ−ＡＯＭ：Ｐ−アニシルオキシメチル等が挙げられ、好ましくはベンジルオキシメチル等が挙げられる）、Ｃ_１−４アルキルアミノメチル基（例えばジメチルアミノメチル）、置換アセタミドメチル基（例えばＡｃｍ：アセタミドメチル、Ｔａｃｍ：トリメチルアセタミドメチル等が挙げられる）、置換チオメチル基（例えばＭＴＭ：メチルチオメチル、ＰＴＭ：フェニルチオメチル、Ｂｔｍ：ベンジルチオメチル等が挙げられる）、カルボキシ基、Ｃ_１−７アシル基（例えばホルミル、アセチル、フルオロアセチル、ジフルオロアセチル、トリフルオロアセチル、クロロアセチル、ジクロロアセチル、トリクロロアセチル、プロピオニル、Ｐｖ：ピバロイル、チグロイル等が挙げられる）、アリールカルボニル基（例えばベンゾイル、ｐ−ブロモベンゾイル、ｐ−ニトロベンゾイル、２，４−ジニトロベンゾイル、ベンゾイルホルミル、ベンゾイルプロピオニル、フェニルプロピオニル等が挙げられる）、Ｃ_１−４アルコキシカルボニル基（例えばメトキシカルボニル、エトキシカルボニル、ｎ−プロポキシカルボニル、ｉ−プロポキシカルボニル、ｎ−ブトキシカルボニル、ｉ−ブトキシカルボニル、ＢＯＣ：ｔ−ブトキシカルボニル、ＡＯＣ：ｔ−アミルオキシカルボニル、ＶＯＣ：ビニルオキシカルボニル、ＡＯＣ：アリルオキシカルボニル、Ｔｅｏｃ：２−（トリメチルシリル）エトキシカルボニル、Ｔｒｏｃ：２，２，２−トリクロロエトキシカルボニル等が挙げられ、好ましくはＢＯＣ等が挙げられる）、アリールオキシカルボニル基（例えばＺ：ベンジルオキシカルボニル、ｐ−ニトロベンジルオキシカルボニル、ＭＯＺ：ｐ−メトキシベンジルオキシカルボニル等が挙げられる）、Ｃ_１−４アルキルアミノカルボニル基（例えばメチルカルバモイル、Ｅｃ：エチルカルバモイル、ｎ−プロピルカルバモイル等が挙げられる）、アリールアミノカルボニル基（例えばフェニルカルバモイル等が挙げられる）、トリアルキルシリル基（例えばＴＭＳ：トリメチルシリル、ＴＥＳ：トリエチルシリル、ＴＩＰＳ：トリイソプロピルシリル、ＤＥＩＰＳ：ジエチルイソプロピルシリル、ＤＭＩＰＳ：ジメチルイソプロピルシリル、ＤＴＢＭＳ：ジ−ｔ−ブチルメチルシリル、ＩＰＤＭＳ：イソプロピルジメチルシリル、ＴＢＤＭＳ：ｔ−ブチルジメチルシリル、ＴＤＳ：テキシルジメチルシリル、等が挙げられ、好ましくはｔ−ブチルジメチルシリル等が挙げられる）、トリアルキルアリールシリル基（例えばＤＰＭＳ：ジフェニルメチルシリル、ＴＢＤＰＳ：ｔ−ブチルジフェニルシリル、ＴＢＭＰＳ：ｔ−ブチルジメトキシフェニルシリル、ＴＰＳ：トリフェニルシリル等が挙げられる）、アルキルスルホニル基（例えばＭｓ：メタンスルホニル、エタンスルホニル等が挙げられる）、アリールスルホニル基（例えばベンゼンスルホニル、Ｔｓ：ｐ−トルエンスルホニル、ｐ−クロロベンゼンスルホニル、ＭＢＳ：ｐ−メトキシベンゼンスルホニル、ｍ−ニトロベンゼンスルホニル、ｏ−ニトロベンゼンスルホニル、ｐ−ニトロベンゼンスルホニル、２，４−ニトロベンゼンスルホニル、ｉＭｄｓ：２，６−ジメトキシ−４−メチルベンゼンスルホニル、Ｍｄｓ：２，６−ジメチル−４−メトキシベンゼンスルホニル、Ｍｔｂ：２，４，６−トリメトキシベンゼンスルホニル、Ｍｔｅ：２，３，５，６−テトラメチル−４−メトキシベンゼンスルホニル、Ｍｔｒ：２，３，６−トリメチル−４−メトキシベンゼンスルホニル、Ｍｔｓ：２，４，６−トリメチルベンゼンスルホニル、Ｐｍｅ：ペンタメチルベンゼンスルホニル、等が挙げられる）等が挙げられる。

【0111】

また、その他に、１−メチル−１−メトキシエチル基、１−エトキシエチル基、２，２，２−トリクロロエチル基、２−トリメチルシリルエトキシ基、ｔ−ブチル基、アリル基、ベンジル基、ｐ−メトキシベンジル基、２，４−ジニトロフェニル基、ｐ−クロロフェニル基、ｐ−メトキシフェニル基、テトラヒドロピラニル基、テトラヒドロフラニル基等が挙げられる。

【0112】

本明細書における「置換されてもよい」という表記は、基の置換可能な位置の各々で置換基を有していてもよく、各置換は互いに独立していることを表している。
例えば、「１つ以上のハロゲン原子で置換されてもよいＣ_１−３アルコキシ基」という表記は、無置換のＣ_１−３アルコキシ基を表すか、又はアルコキシ基を構成している１乃至３個の炭素原子からなるアルキル基上の水素原子がハロゲン原子によって任意に置換された基を表している。ハロゲン原子が２個以上存在する場合には、互いに同一でも、又は互いに異なっていてもよい。具体的には、トリフルオロメトキシ基、２，２，２−トリフルオロエトキシ基、１，１−ジフルオロエトキシ基等が挙げられる。
また、置換基の記載における「波線」は、「結合位置」を表す。

【0113】

前記式（Ｉ）で表される化合物の置換基として好ましい例を以下に挙げる。
Ｒ^１の好ましい例としては水素原子、１つ以上のハロゲン原子で置換されてもよいＣ_１−６アルキル基が挙げられ、より好ましい例としては、水素原子、Ｃ_１−３アルキル基が挙げられ、特に好ましい例としてはメチル基が挙げられる。

【0114】

Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４及びＲ^６の好ましい例としては、水素原子、Ｃ_１−３アルキル基（該Ｃ_１−３アルキル基は無置換であるか又は１つ以上のハロゲン原子で置換されている。）が挙げられ、より好ましい例としては水素原子、Ｃ_１−３アルキル基（該Ｃ_１−３アルキル基は無置換である。）が挙げられ、特に好ましい例としては水素原子が挙げられる。

【0115】

Ｒ^５は、Ｖ^１でそれぞれ独立に表される１つ以上の置換基で置換されてもよいフェニル基とＶ^１でそれぞれ独立に表される１つ以上の置換基で置換されてもよいＣ_２−９ヘテロアリール基が好ましく、さらに該Ｃ_２−９ヘテロアリール基としてはＣ_２−９含窒素ヘテロアリール基が好ましい。具体的なＣ_２−９ヘテロアリール基部分としては、２−チエニル基、３−チエニル基、２−フリル基、３−フリル基、２−ピラニル基、３−ピラニル基、４−ピラニル基、１−ピロリル基、２−ピロリル基、３−ピロリル基、１−イミダゾリル基、２−イミダゾリル基、４−イミダゾリル基、１−ピラゾリル基、３−ピラゾリル基、４−ピラゾリル基、２−チアゾリル基、４−チアゾリル基、５−チアゾリル基、３−イソチアゾリル基、４−イソチアゾリル基、５−イソチアゾリル基、１−１，２，４−トリアゾール基、３−１，２，４−トリアゾール基、５−１，２，４−トリアゾール基、１−１，２，３−トリアゾール基、４−１，２，３−トリアゾール基、５−１，２，３−トリアゾール基、２−オキサゾリル基、４−オキサゾリル基、５−オキサゾリル基、３−イソオキサゾリル基、４−イソオキサゾリル基、５−イソオキサゾリル基、２−ピリジル基、３−ピリジル基、４−ピリジル基、２−ピラジニル基、２−ピリミジニル基、４−ピリミジニル基、５−ピリミジニル基、３−ピリダジニル基、４−ピリダジニル基、２−１，３，４−オキサジアゾリル基、２−１，３，４−チアジアゾリル基、３−１，２，４−オキサジアゾリル基、５−１，２，４−オキサジアゾリル基、３−１，２，４−チアジアゾリル基、５−１，２，４−チアジアゾリル基、３−１，２，５−オキサジアゾリル基及び３−１，２，５−チアジアゾリル基が挙げられる。
Ｖ^１としては、前記式（Ｖ）、（ＶＩ）、（ＶＩＩ）、（ＶＩＩＩ）、（ＩＸ）、（Ｘ）、（ＸＩ）、（ＸＩＩ）、（ＸＩＩＩ）、（ＸＩＶ）、（ＸＶ）、（ＸＶＩ）、（ＸＶＩＩ）、（ＸＶＩＩＩ）、（ＸＩＸ）、（ＸＸ）、（ＸＸＩ）及び（ＸＸＩＩ）が挙げられる。

【0116】

Ｒ^５のより好ましい例としては、フェニル基、２−チエニル基、３−チエニル基、２−ピリジル基、３−ピリジル基、４−ピリジル基、２−ピラジニル基、２−ピリミジニル基、４−ピリミジニル基、５−ピリミジニル基、３−ピリダジニル基又は４−ピリダジニル基、並びにそれらが前記式（Ｖ）、（ＶＩ）、（ＶＩＩ）、（ＶＩＩＩ）、（ＩＸ）、（Ｘ）、（ＸＩ）、（ＸＩＩ）、（ＸＩＩＩ）、（ＸＩＶ）、（ＸＶ）、（ＸＶＩ）、（ＸＶＩＩ）、（ＸＶＩＩＩ）、（ＸＩＸ）、（ＸＸ）、（ＸＸＩ）及び（ＸＸＩＩ）から選ばれる１つ以上の置換基で置換された基が挙げられる。
Ｒ^５の更に好ましい例としては、フェニル基、２−ピリジル基、３−ピリジル基、４−ピリジル基、３−ピリダジニル基、４−ピリダジニル基、２−ピリミジニル基、４−ピリミジニル基、５−ピリミジニル基、２−ピラジニル基、並びにそれらが前記式（Ｖ）、（ＶＩ）、（ＶＩＩ）、（ＶＩＩＩ）、（ＩＸ）、（Ｘ）、（ＸＩ）、（ＸＩＩ）、（ＸＩＩＩ）、（ＸＩＶ）、（ＸＶ）、（ＸＶＩ）、（ＸＶＩＩ）、（ＸＶＩＩＩ）、（ＸＩＸ）、（ＸＸ）、（ＸＸＩ）及び（ＸＸＩＩ）から選ばれる１つ以上の置換基で置換された基が挙げられる。

【0117】

Ｒ^５の特に好ましい例としては、４−ピリジル基、フェニル基(該フェニル基は無置換であるか又は前記式（Ｖ）、（ＶＩ）、（ＶＩＩ）、（ＶＩＩＩ）、（ＩＸ）、（Ｘ）、（ＸＩ）、（ＸＩＩ）、（ＸＩＩＩ）、（ＸＩＶ）、（ＸＶ）、（ＸＶＩ）、（ＸＶＩＩ）、（ＸＶＩＩＩ）、（ＸＩＸ）、（ＸＸ）、（ＸＸＩ）及び（ＸＸＩＩ）から選ばれる１つ以上の置換基で置換されている。）などが挙げられる。
Ｒ^５の最も好ましい例としては、４−ピリジル基及び前記式（ＶＩＩ）、（ＶＩＩＩ）、（ＸＩ）及び（ＸＩＩ）から選ばれる置換基で置換されているフェニル基が挙げられる。

【0118】

Ｒ^７の好ましい例としては、Ｃ_２−１４アリール基（該Ｃ_２−１４アリール基は、無置換であるか又はＣ_１−１０アルキル基（該Ｃ_１−１０アルキル基は無置換であるか又は１つ以上のハロゲン原子で置換されている。）、ハロゲン原子、Ｃ_１−１０アルコキシ基又はＣ_１−３アルコキシ基（該Ｃ_１−３アルコキシ基は１つ以上のハロゲン原子で置換されている。）から選ばれる１つ以上の置換基で置換されている。）が挙げられる。
Ｒ^７のより好ましい例としては、フェニル基（該フェニル基は、Ｃ_１−１０アルキル基（該Ｃ_１−１０アルキル基は無置換であるか又は１つ以上のハロゲン原子で置換されている。）、ハロゲン原子、Ｃ_１−１０アルコキシ基又はＣ_１−３アルコキシ基（該Ｃ_１−３アルコキシ基は１つ以上のハロゲン原子で置換されている。）、前記式（Ａ０１）、（Ａ０２）、（Ａ０３）、（Ａ０４）、（Ａ０５）、（Ａ０６）、（Ａ０７）、（Ａ０８）、（Ａ０９）、（Ａ１０）、（Ａ１１）、（Ａ１２）、（Ａ１３）、（Ａ１４）及び（Ａ１５）から選ばれる１つ以上の置換基で置換されている。）が挙げられる。
Ｒ^７の特に好ましい例としては、フェニル基（該フェニル基は、Ｃ_１−６アルキル基、Ｃ_１−３アルキル基（該Ｃ_１−３アルキル基は１つ以上のハロゲン原子で置換されている。）、ハロゲン原子、Ｃ_１−３アルコキシ基又はＣ_１−３アルコキシ基（該Ｃ_１−３アルコキシ基は１つ以上のハロゲン原子で置換されている。）から選ばれる１つ以上の置換基で置換されている。）、前記式（Ａ０５）、（Ａ０６）、（Ａ０８）、（Ａ０９）、（Ａ１０）、（Ａ１１）、（Ａ１２）、（Ａ１３）、（Ａ１４）及び（Ａ１５）が挙げられる。
より具体的に特に好ましい例を挙げれば、フェニル基（該フェニル基はメチル基、t-ブチル基、ハロゲン原子、メトキシ基、トリフルオロメチル基又はトリフルオロメトキシ基から選ばれる１つ以上の置換基で置換されている。）、前記式（Ａ１１）、（Ａ１３）及び（Ａ１５）が挙げられる。

【0119】

Ａｒ^１の好ましい例としては前記式（ＩＶ）で表される構造が挙げられる。
Ｘの好ましい例としてはＯＨが挙げられる。
Ｙの好ましい例としては、酸素原子が挙げられる。
Ｚの好ましい例としては、酸素原子が挙げられる。
ｎの好ましい例としては、１又は２の整数が挙げられる。より好ましくは、１の整数が挙げられる。ｎが１の場合、Ｒ^５が４−ピリジル基又は前記式（ＶＩＩ）、（ＶＩＩＩ）、（ＸＩ）及び（ＸＩＩ）から選ばれる置換基で置換されているフェニル基であることが特に好ましい。

【0120】

前記式（Ｉ）で表される化合物における好ましい化合物としては、Ｒａ、Ａ及びＱが以下に示す第１表乃至第１３表に記載の組み合わせからなる化合物、該化合物の互変異性体、プロドラック若しくはその医薬的に許容され得る塩又はそれらの溶媒和物が挙げられる。なお第１表乃至第１３表における記号は以下の置換基を示す。

【化30】

【0121】

【化31】

【0122】

【化32】

【0123】

【化33】

【0124】

［第１表］

【表1】

【0125】

［第２表］

【表2】

【0126】

［第３表］

【表3】

【0127】

［第４表］

【表4】

［第５表］

【表5】

［第６表］

【表6】

［第７表］

【表7】

［第８表］

【表8】

［第９表］

【表9】

［第１０表］

【表10】

［第１１表］

【表11】

［第１２表］

【表12】

［第１３表］

【表13】

【0128】

式（Ｉ）で表される化合物は、必要に応じて製薬上許容される塩に変換することも、又は生成した塩から遊離させることもできる。本発明における製薬上許容される塩としては、例えば、アルカリ金属（リチウム、ナトリウム、カリウムなど）、アルカリ土類金属（マグネシウム、カルシウムなど）、アンモニウム、有機塩基及びアミノ酸との塩などが挙げられる。また無機酸（塩酸、臭化水素酸、リン酸、硫酸など）及び有機酸（酢酸、クエン酸、マレイン酸、フマル酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸など）との塩も可能である。式（Ｉ）で表される化合物或いはその製薬上許容される塩は、製造条件により任意の結晶形として存在することができ、任意の水和物として存在することができるが、これら結晶形や水和物及びそれらの混合物も本発明の範囲に含有される。またアセトン、エタノール、テトラヒドロフランなどの有機溶媒を含む溶媒和物として存在することもあるが、これらの形態はいずれも本発明の範囲に含有される。

【0129】

式（Ｉ）で表される化合物は、環内或いは環外異性化により生成する互変異性体、幾何異性体、互変異性体若しくは幾何異性体の混合物、又はそれらの混合物の形で存在しもよい。式（Ｉ）で表される化合物は、異性化により生じるか否かに拘わらず、不斉中心を有する場合は、分割された光学異性体或いはそれらを任意の比率で含む混合物の形で存在してよい。

【0130】

プロドラッグとして利用できる化合物は、加溶媒分解によりまたは生理的条件下のインビボにおいて薬理学的に活性な化合物を生成する、化学的または代謝的に分解できる基を有する誘導体である。適当なプロドラッグを選択する方法および製造する方法は、例えばＤｅｓｉｇｎ ｏｆ Ｐｒｏｄｒｕｇｓ（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，Ａｍｓｔｅｒｄａｍ １９８５）に記載されている。水酸基を有する化合物である場合は、該化合物と適当なアシルハライドまたは適当な酸無水物とを反応させることによって得られるアシルオキシ誘導体がプロドラッグとして例示される。プロドラッグとして特に好ましいアシルオキシとしては−ＯＣＯＣ_２Ｈ_５、−ＯＣＯ（ｔ−Ｂｕ）、−ＯＣＯＣ_１５Ｈ_３１、−ＯＣＯ（ｍ−ＣＯ_２Ｎａ−Ｐｈ）、−ＯＣＯＣＨ_２ＣＨ_２ＣＯ_２Ｎａ、−ＯＣＯＣＨ（ＮＨ_２）ＣＨ_３、−ＯＣＯＣＨ_２Ｎ（ＣＨ_３）_２などがあげられる。式（Ｉ）で表される化合物がアミノ基を有する場合は、アミノ基を有する化合物と適当な酸ハロゲン化物または適当な混合酸無水物とを反応させることにより製造されるアミド誘導体がプロドラッグとして例示される。プロドラッグとして特に好ましいアミドとしては、−ＮＨＣＯ（ＣＨ_２）_２０ＯＣＨ_３、−ＮＨＣＯＣＨ（ＮＨ_２）ＣＨ_３等があげられる。

【0131】

本発明の方法で用いられる特定化合物の調製手段は特に問われないが、特許文献ＷＯ２００４／１０８６８３、ＷＯ２００６／０６４９５７、ＷＯ２００７／０１０９５４、ＷＯ２０１０／１４０６８５などに記載の方法を参考にして特定化合物の化学合成ができる。

【実施例】

【0132】

以下に実施例を示し、本発明を更に詳細に説明するが、本発明はこれら実施例に限定されるものではない。
なお、ＣＯ_２インキュベーターにおけるＣＯ_２の濃度（％）は、雰囲気中のＣＯ_２の体積％で示した。またＰＢＳはリン酸緩衝生理食塩水（シグマアルドリッチジャパン社製）を意味し、ＦＢＳは牛胎児血清を意味する。

【0133】

（試験例１：ヒトｉＰＳ細胞からのネット様構造物（ｉＰＳ−Ｓａｃｓ）の調製）
本実施例で使用したｉＰＳ細胞株としては、ＴｋＤＡ３−４株（東京大学で新しく樹立した株で皮膚細胞にＯｃｔ３／４，Ｋｌｆ４，Ｓｏｘ２及びｃ−Ｍｙｃを導入したもの。参考文献：ＷＯ２００９１２２７４７）を使用した。また、フィーダー細胞は、マウス胎児由来細胞、Ｃ３Ｈ１０Ｔ１／２細胞株をつくば理研ＢｉｏＲｅｓｏｕｒｃｅ ｃｅｎｔｅｒより供与を受けて使用した。分化実験を行う前日に、Ｃ３Ｈ１０Ｔ１／２細胞の増殖を止めるため５０Ｇｙの放射線照射を行い、０．１％ ゼラチンコート化ディッシュにＣ３Ｈ１０Ｔ１／２細胞を６乃至８×１０^５／１０ｃｍ ディッシュの密度となるように播き、フィーダー細胞として用いた。

【0134】

ヒトｉＰＳ細胞は、１５％ ＦＢＳ（ＪＲＨ ＢＩＯＳＣＩＥＮＣＥＳ社、米国）、２ｍＭ Ｌ−グルタミン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社）、１００ Ｕｎｉｔ／ｍＬ Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎ−１００μg／ｍＬ Ｓｔｒｅｐｔｍｙｃｉｎ（Ｓｉｇｍａ社）、ＩＴＳサプリメント（１０μｇ／ｍＬ インスリン、５．５ｍｇ／ｍＬ トランスフェリン、５ｎｇ／ｍＬ 亜セレン酸ナトリウム）（Ｓｉｇｍａ社）、５０μｇ／ｍＬ アスコルビン酸（Ｓｉｇｍａ社）、０．４５ｍＭ ＭＴＧ（Ｓｉｇｍａ社）、２０ｎｇ／ｍＬ ＶＥＧＦ（Ｒ＆Ｄ ｓｙｓｔｅｍｓ社）を添加したＩＭＤＭ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ／ＧＩＢＣＯ社）中、Ｃ３Ｈ１０Ｔ１／２細胞上に播いて５％ＣＯ_２、３７℃にて培養した。
培養後、１４乃至１５日前後に内部に血球様細胞を含んだネット様構造物（ｉＰＳ−Ｓａｃ）が多数確認された。

【0135】

（試験例２：ネット様構造物（ｉＰＳ−Ｓａｃｓ）からの巨核球／血小板の誘導）
次に、１０ｍＬディスポーザブルピペットを用いて、ネット様構造物を物理的に破砕し、７０μｍ セルストレイナーを用いて、造血前駆細胞とネット様構造物を分離した。新たに、６ウェルプレートに用意した放射線照射済みのＣ３Ｈ１０Ｔ１／２細胞（６〜８×１０^５個／６ウェルプレート１枚）上に造血前駆細胞を３×１０^４個／ウェルで播き、１５％のＦＢＳ（ＪＲＨ ＢＩＯＳＣＩＥＮＣＥＳ社、米国）、２ｍＭのＬ−グルタミン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社）、１００ Ｕｎｉｔ／ｍＬ Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎ−１００μg／ｍＬ Ｓｔｒｅｐｔｍｙｓｉｎ（Ｓｉｇｍａ社）、ＩＴＳサプリメント（１０μｇ／ｍＬのインスリン、５．５ｍｇ／ｍＬのトランスフェリン、５ｎｇ／ｍＬの亜セレン酸ナトリウム）（Ｓｉｇｍａ社）、５０μｇ／ｍＬのアスコルビン酸（Ｓｉｇｍａ社）、０．４５ｍＭのモノチオグリセロール（ＭＴＧ、Ｓｉｇｍａ社）、１００ｎｇ／ｍＬのヒトＴＰＯ（Ｐｅｐｒｏｔｅｃ社）或いは下記の特定化合物（１００ｎｇ／ｍＬのＮｏ．１、３０ｎｇ／ｍＬのＮｏ．２、５０ｎｇ／ｍＬのＮｏ．３、１０００ｎｇ／ｍＬのＮｏ．４、１００ｎｇ／ｍＬのＮｏ．５、１００ｎｇ／ｍＬのＮｏ．６、３００ｎｇ／ｍＬのＮｏ．７、３００ｎｇ／ｍＬのＮｏ．８）を添加したＩＭＤＭ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ／ＧＩＢＣＯ社）中でさらに培養し、巨核球／血小板を誘導した。

【0136】

実施例に使用した式（Ｉ）で表される化合物の化合物名とその構造式を以下に示す。下記化合物Ｎｏ．２が本発明における特定化合物である。
化合物Ｎｏ．１：（Ｅ）−５−（２−｛１−［５−（３，４−ジクロロフェニル）−４−ヒドロキシチオフェン−３−イル］エチリデン｝ヒドラジンカルボニル）−Ｎ−［４−（２−ヒドロキシエチルカルバモイル）ベンジル］チオフェン−２−カルボキサミド。
化合物Ｎｏ．２：（Ｅ）−５−（２−｛１−［５−（４−ブロモフェニル）−４−ヒドロキシチオフェン−３−イル］エチリデン｝ヒドラジンカルボニル）−Ｎ−［４−（２−ヒドロキシエチルカルバモイル）ベンジル］チオフェン−２−カルボキサミド。
化合物Ｎｏ．３：（Ｅ）−５−（２−｛１−［５−（３，４−ジクロロフェニル）−４−ヒドロキシチオフェン−３−イル］エチリデン｝ヒドラジンカルボニル）−Ｎ−（ピリジン−４−イルメチル）チオフェン−２−カルボキサミド。
化合物Ｎｏ．４：（Ｅ）−５−（２−{１−[５−（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−５−イル）−４−ヒドロキシチオフェン−３−イル]エチリデン}ヒドラジンカルボニル）チオフェン−２−カルボン酸。
化合物Ｎｏ．５：カリウム （Ｅ）−２−（３，４−ジクロロフェニル）−４−［１−（２−｛５−［（ピラジン−２−イルメチル）カルバモイル］チオフェン−２−カルボニル｝ヒドラゾノ）エチル］チオフェン−３−オラート。
化合物Ｎｏ．６：（Ｅ）−５−（２−｛１−［５−（４−ブロモフェニル）−４−ヒドロキシチオフェン−３−イル］エチリデン｝ヒドラジンカルボニル）−Ｎ−｛４−［２−（ピペラジン−１−イル）エチルカルバモイル］ベンジル｝チオフェン−２−カルボキサミド。
化合物Ｎｏ．７：（Ｅ）−Ｎ−［４−（２−アミノ−２−オキソエチル）ベンジル］−５−（２−｛１−［５−（３，４−ジクロロフェニル）−４−ヒドロキシチオフェン−３−イル］エチリデン｝ヒドラジンカルボニル）チオフェン−２−カルボキサミド。
化合物Ｎｏ．８：（Ｅ）−Ｎ−（４−｛２−［ビス（２−ヒドロキシエチル）アミノ］エチルカルバモイル｝ベンジル）−５−（２−｛１−［５−（４−ｔ−ブチルフェニル）−４−ヒドロキシチオフェン−３−イル］エチリデン｝ヒドラジンカルボニル）チオフェン−２−カルボキサミド。

【化34】

これらの化合物は、ＷＯ２００７／０１０９５４、ＷＯ２０１０／１４０６８５、ＷＯ２０１１／０４９２１３など既知の方法によって合成した。

【0137】

（試験例３：培養した細胞における巨核球／血小板数の測定）
ＴｋＤＡ３−４細胞株の培養後２３乃至２４日目の浮遊細胞成分について、最終濃度８．５ｍＭのクエン酸ナトリウム（Ｓｉｇｍａ社）、６．５ｍＭのクエン酸（Ｓｉｇｍａ社）、１０．４ｍＭのグルコース（Ｓｉｇｍａ社）、ヒトＣＤ４１ａ抗体（ベクトンディッキンソン社）、ヒトＣＤ４２ｂ抗体（バイオレジェンド社）を添加した後、フローサイトメーター（ベクトンディッキンソン社、ＢＤＦＡＣＳＡｒｉａ）で細胞表面抗原の特徴を解析した。なお、血小板はフローサイトメトーター上でその大きさにより分離し、ＢＤ Ｔｒｕｃｏｕｎｔチューブ（ベクトンディッキンソン社）を用い血小板数を算出した。巨核球については、巨核球と血小板を遠心処理（３１０ｇ、５分間）並びにフローサイトメトーター上でその大きさにより分離し、血球計算板にて巨核球数を算出した。その結果、巨核球、血小板特異的な表面分子抗原であるヒトＣＤ４１ａ（ｉｎｔｅｇｒｉｎ αＩＩｂ）及びヒトＣＤ４２ｂ（ＧＰＩｂα）陽性細胞が観察された（図１及び２；巨核球、図３及び４；血小板）。この際、本発明の特定化合物はＴＰＯよりも優れた巨核球並びに血小板誘導効果を示していた。

【0138】

（試験例４：製造した血小板の機能解析）
次に、血小板活性化物質によるインテグリンの活性化について検討した。ＴｋＤＡ３−４細胞株の培養後２３乃至２４日目の浮遊細胞成分から有核細胞を除去した後、遠心処理（４００ｇ、１０分間）により血小板を分離した。更に、ヒトＣＤ４２ｂ抗体（バイオレジェンド社）、ＦＩＴＣ標識されたＰＡＣ−１（ベクトンディッキンソン社）及び血小板活性化物質であるアデノシン二リン酸（ＡＤＰ、シグマ社）を５００μＭ添加して１５分後、血小板活性化マーカーであるＰＡＣ−１の血小板への結合をフローサイトメーターにて解析し、その結合量をＭｅａｎ Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ Ｉｎｔｅｎｓｉｔｙ（ＭＦＩ）として算出した。その結果、本発明の特定化合物を用いて製造されたヒトｉＰＳ細胞由来の血小板は、末梢血由来の血小板と同程度のインテグリンの活性化（ＰＡＣ−１結合血小板の増加）を認めた（図５）。この結果から、本発明の特定化合物を用いてｉＰＳ細胞から製造された血小板は、末梢血由来の血小板と同等の機能性を発揮することが明らかとなった。

【0139】

（試験例５：ヒトＥＳ細胞からのネット様構造物（ＥＳ−Ｓａｃｓ）の調製）
本実施例で使用したＥＳ細胞株としては、ＫｈＥＳ−３株（京都大学にて樹立した株。参考文献：Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ｒｅｓ Ｃｏｍｍｕｎ．２００６．３４５：９２６−９３２）を使用した。また、フィーダー細胞は、マウス胎児由来細胞、Ｃ３Ｈ１０Ｔ１／２細胞株をつくば理研ＢｉｏＲｅｓｏｕｒｃｅ ｃｅｎｔｅｒより供与を受けて使用した。分化実験を行う前日に、Ｃ３Ｈ１０Ｔ１／２細胞の増殖を止めるため５０Ｇｙの放射線照射を行い、０．１％ ゼラチンコート化ディッシュにＣ３Ｈ１０Ｔ１／２細胞を６乃至８×１０^５／１０ｃｍ ディッシュの密度となるように播き、フィーダー細胞として用いた。

【0140】

ヒトＥＳ細胞は、１５％ ＦＢＳ（ＪＲＨ ＢＩＯＳＣＩＥＮＣＥＳ社、米国）、２ｍＭ Ｌ−グルタミン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社）、１００ Ｕｎｉｔ／ｍＬ Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎ−１００μg／ｍＬ Ｓｔｒｅｐｔｍｙｃｉｎ（Ｓｉｇｍａ社）、ＩＴＳサプリメント（１０μｇ／ｍＬ インスリン、５．５ｍｇ／ｍＬ トランスフェリン、５ｎｇ／ｍＬ 亜セレン酸ナトリウム）（Ｓｉｇｍａ社）、５０μｇ／ｍＬ アスコルビン酸（Ｓｉｇｍａ社）、０．４５ｍＭ ＭＴＧ（Ｓｉｇｍａ社）、２０ｎｇ／ｍＬ ＶＥＧＦ（Ｒ＆Ｄ ｓｙｓｔｅｍｓ社）を添加したＩＭＤＭ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ／ＧＩＢＣＯ社）中、Ｃ３Ｈ１０Ｔ１／２細胞上に播いて５％ＣＯ_２、３７℃にて培養した。
培養後、１４乃至１５日前後に内部に血球様細胞を含んだネット様構造物（ＥＳ−Ｓａｃ）が多数確認された。

【0141】

（試験例６：ネット様構造物（ＥＳ−Ｓａｃｓ）からの巨核球／血小板の誘導）
次に、１０ｍＬディスポーザブルピペットを用いて、ネット様構造物を物理的に破砕し、７０μｍ セルストレイナーを用いて、造血前駆細胞とネット様構造物を分離した。新たに、６ウェルプレートに用意した放射線照射済みのＣ３Ｈ１０Ｔ１／２細胞（６〜８×１０^５個／６ウェルプレート１枚）上に造血前駆細胞を３×１０^４個／ウェルで播き、１５％のＦＢＳ（ＪＲＨ ＢＩＯＳＣＩＥＮＣＥＳ社、米国）、２ｍＭのＬ−グルタミン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社）、１００ Ｕｎｉｔ／ｍＬ Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎ−１００μg／ｍＬ Ｓｔｒｅｐｔｍｙｓｉｎ（Ｓｉｇｍａ社）、ＩＴＳサプリメント（１０μｇ／ｍＬのインスリン、５．５ｍｇ／ｍＬのトランスフェリン、５ｎｇ／ｍＬの亜セレン酸ナトリウム）（Ｓｉｇｍａ社）、５０μｇ／ｍＬのアスコルビン酸（Ｓｉｇｍａ社）、０．４５ｍＭのモノチオグリセロール（ＭＴＧ、Ｓｉｇｍａ社）、１００ｎｇ／ｍＬのヒトＴＰＯ（Ｐｅｐｒｏｔｅｃ社）或いは試験例２に記載の化合物（５０ｎｇ／ｍＬのＮｏ．３）を添加したＩＭＤＭ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ／ＧＩＢＣＯ社）中でさらに培養し、巨核球／血小板を誘導した。

【0142】

（試験例７：培養した細胞における巨核球／血小板数の測定）
ＫｈＥＳ−３細胞株の培養後２３乃至２４日目の浮遊細胞成分について、最終濃度８．５ｍＭのクエン酸ナトリウム（Ｓｉｇｍａ社）、６．５ｍＭのクエン酸（Ｓｉｇｍａ社）、１０．４ｍＭのグルコース（Ｓｉｇｍａ社）、ヒトＣＤ４１ａ抗体（ベクトンディッキンソン社）、ヒトＣＤ４２ｂ抗体（バイオレジェンド社）を添加した後、フローサイトメーター（ベクトンディッキンソン社、ＢＤＦＡＣＳＡｒｉａ）で細胞表面抗原の特徴を解析した。なお、血小板はフローサイトメトーター上でその大きさにより分離し、ＢＤ Ｔｒｕｃｏｕｎｔチューブ（ベクトンディッキンソン社）を用い血小板数を算出した。その結果、血小板特異的な表面分子抗原であるヒトＣＤ４１ａ（ｉｎｔｅｇｒｉｎ αＩＩｂ）及びヒトＣＤ４２ｂ（ＧＰＩｂα）陽性細胞が観察された（図６；血小板数）。この際、本発明の特定化合物はＴＰＯよりも優れた血小板誘導効果を示していた。

【0143】

（試験例８：遺伝子操作した造血前駆細胞の調製）
試験例５及び６に記載ようにＫｈＥＳ−３細胞株由来のネット様構造物から造血前駆細胞を調整し、ＷＯ ２０１１／０３４０７３に記載される方法を用いて、ｐＭＸ ｔｅｔ ｏｆｆ発現調節ベクターシステムの下、エストラジオール存在下で癌遺伝子であるc−Ｍｙｃ遺伝子及びポリコーム遺伝子であるＢｍｉ１遺伝子の発現が亢進し、増殖能が高まる細胞（Ｍｙｃ−Ｂｍｉ細胞株）を取得した。Ｍｙｃ−Ｂｍｉ細胞はエストラジオール非存在下、ドキシサイクリン存在下によりc−Ｍｙｃ遺伝子及びＢｍｉ−１遺伝子の発現が抑制されて、機能を有した血小板を産生する一方で、増殖維持が困難となる。このＭｙｃ−Ｂｍｉ細胞株から、Ａｉ−Ｌｖ ｔｅｔ ｏｎ発現調節ベクターシステム（クローンテック社）の下、エストラジオール非存在下、ドキシサイクリン存在下でアポトーシス抑制遺伝子であるＢＣＬＸＬ遺伝子の発現が亢進して、エストラジオール非存在下、ドキシサイクリン存在下においても増殖維持が可能な細胞（Ｍｙｃ−Ｂｍｉ−ＢＣＬＸＬ細胞株）を取得した。さらに、巨核球の分化成熟過程の１つである多核化を促進するため、ショートヘアピン（ｓｈ）ＲＮＡ干渉手法によりｐ５３遺伝子の発現抑制を行った。すなわち、Ｍｙｃ−Ｂｍｉ−ＢＣＬＸＬ細胞株に、ｓｈｐ５３を導入したｌｅｎｔｉ ｖｉｒｕｓ ＦＧ１２ベクターを用いてレンチウイルス感染によりｐ５３遺伝子発現が抑制されたＭｙｃ−Ｂｍｉ−ＢＣＬＸＬ細胞株（ｐ５３ＫＤ−Ｍｙｃ−Ｂｍｉ−ＢＣＬＸＬ細胞株）を取得した。ｐ５３ＫＤ−Ｍｙｃ−Ｂｍｉ−ＢＣＬＸＬ細胞株の維持培養は、１０μg／ｍＬ マイトマイシンＣ（和光純薬）の０．５〜２．５時間処理により増殖が止められたＣ３Ｈ１０Ｔ１／２細胞上にて、１５％のＦＢＳ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ／ＧＩＢＣＯ社）、２ｍＭ Ｌ−グルタミン−１００ Ｕｎｉｔ／ｍＬ Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎ−１００μg／ｍＬ Ｓｔｒｅｐｔｍｙｓｉｎ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ／ＧＩＢＣＯ社）、ＩＴＳサプリメント（１０μｇ／ｍＬのインスリン、５．５ｍｇ／ｍＬのトランスフェリン、５ｎｇ／ｍＬの亜セレン酸ナトリウム）（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ／ＧＩＢＣＯ社）、５０μｇ／ｍＬのアスコルビン酸（Ｓｉｇｍａ社）、０．４５ｍＭのモノチオグリセロール（ＭＴＧ、Ｓｉｇｍａ社）、１０μg／ｍＬ ドキシサイクリン（クローンテック社）、５０ｎｇ／ｍＬ ＳＣＦ（Ｒ＆Ｄ ｓｙｓｔｅｍ社）、及び１００ｎｇ／ｍＬヒトＴＰＯ（Ｒ＆Ｄ ｓｙｓｔｅｍ社）を添加したＩＭＤＭ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ／ＧＩＢＣＯ社）中で、５％ＣＯ_２、３９℃にて行った。

【0144】

（試験例９：遺伝子操作した造血前駆細胞からの巨核球／血小板の誘導）
６ウェルプレートに用意した１０μg／ｍＬ マイトマイシンＣ（和光純薬）の０．５〜２．５時間処理により増殖が止められたＣ３Ｈ１０Ｔ１／２細胞（６〜８×１０^５個／６ウェルプレート１枚）上にｐ５３ＫＤ−Ｍｙｃ−Ｂｍｉ−ＢＣＬＸＬ細胞株を1×１０⁶個／ウェルで播き、１５％のＦＢＳ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ／ＧＩＢＣＯ社）、２ｍＭ Ｌ−グルタミン−１００ Ｕｎｉｔ／ｍＬ Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎ−１００μg／ｍＬ Ｓｔｒｅｐｔｍｙｓｉｎ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ／ＧＩＢＣＯ社）、ＩＴＳサプリメント（１０μｇ／ｍＬのインスリン、５．５ｍｇ／ｍＬのトランスフェリン、５ｎｇ／ｍＬの亜セレン酸ナトリウム）（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ／ＧＩＢＣＯ社）、５０μｇ／ｍＬのアスコルビン酸（Ｓｉｇｍａ社）、０．４５ｍＭのモノチオグリセロール（ＭＴＧ、Ｓｉｇｍａ社）、１０μg／ｍＬ ドキシサイクリン（クローンテック社）、０．５ｍＭ バルプロ酸（Ｓｉｇｍａ社）、１０μＭ Ｙ―２７６３２（和光純薬）、５μＭ （Ｓ）（−／−）−Ｂｌｅｂｂｉｓｔａｔｉｎ（Ｔｏｒｏｎｔｏ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ社）、５０ｎｇ／ｍＬ ＳＣＦ（Ｒ＆Ｄ ｓｙｓｔｅｍ社）、及び１００ｎｇ／ｍＬのヒトＴＰＯ（Ｒ＆Ｄ ｓｙｓｔｅｍ社）或いは試験例２に記載の化合物（１００ｎｇ／ｍＬのＮｏ．２或いは５０ｎｇ／ｍＬのＮｏ．３）を添加したＩＭＤＭ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ／ＧＩＢＣＯ社）中で、５％ＣＯ_２、３９℃にて７日間培養し、巨核球の成熟及び血小板を誘導した。培養後７日目の浮遊細胞成分について、最終濃度８．５ｍＭのクエン酸ナトリウム（Ｓｉｇｍａ社）、６．５ｍＭのクエン酸（Ｓｉｇｍａ社）、１０．４ｍＭのグルコース（Ｓｉｇｍａ社）、ヒトＣＤ４１ａ抗体（ベクトンディッキンソン社）、ヒトＣＤ４２ｂ抗体（バイオレジェンド社）を添加した後、フローサイトメーター（ベクトンディッキンソン社、ＢＤＦＡＣＳＡｒｉａ）で細胞表面抗原の特徴を解析した。血小板はフローサイトメトーター上でその大きさにより分離し、ＢＤ Ｔｒｕｃｏｕｎｔチューブ（ベクトンディッキンソン社）を用い血小板数を算出した。その結果、血小板特異的な表面分子抗原であるヒトＣＤ４１ａ（ｉｎｔｅｇｒｉｎ αＩＩｂ）及びヒトＣＤ４２ｂ（ＧＰＩｂα）陽性細胞が観察された（図７；血小板数）。この際、本発明の特定化合物はＴＰＯよりも優れた血小板誘導効果を示していた。

【0145】

以上の結果から、本発明の方法により、本発明の特定化合物を用いてヒトｉＰＳ細胞及びＥＳ細胞から巨核球及び血小板を効率的に誘導できることが明らかとなった。

【産業上の利用可能性】

【0146】

本発明における特定化合物は、培養時の有効成分として用いることにより、ヒト多能性幹細胞から巨核球及び血小板を無添加或いはＴＰＯ添加時に比べてより効率的に増幅できる。本化合物を利用して製造された血小板は、造血機能不全、腫瘍などの血小板減少を伴う疾患に対して有用であるため、輸血治療への応用が期待できる。また、本発明によれば、ＨＬＡ適合性の問題を克服可能な血小板を提供することができる。従って、輸血が必要な患者専用の血小板の供給が可能となることから、抗血小板抗体の産生による血小板の破壊などの問題も解決することができる。
なお、２０１１年１０月３日に出願された日本特許出願２０１１−２１９５４５号の明細書、特許請求の範囲、図面および要約書の全内容をここに引用し、本発明の開示として取り入れるものである。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】